HU199496B

HU199496B - Process for producing sialocyl glycerolipids

Info

Publication number: HU199496B
Application number: HU885764A
Authority: HU
Inventors: Shoji Yoshimura; Yuzi Matsuzaki; Mamoru Sugimoto; Masayoshi Ito; Yoshiyasu Shitori; Tomoya Ogawa
Original assignee: Kanto Ishi Pharma Co Ltd
Priority date: 1987-11-10
Filing date: 1988-11-10
Publication date: 1990-02-28
Also published as: US5057605A; NZ226888A; FI885154A0; IL88321A0; EP0315973A2; HUT48637A; NO885002L; JPH01125394A; AU612194B2; NO885002D0; NO170022C; EP0315973A3; FI885154A; KR890008157A; CN1033056A; NO170022B; AU2501288A

Description

lmas:

YOSHIMURA Shoji, Iruma-shi, MECT Corp., Tokió (JP)

MATSUZAK.I Yuzi, Tokorozawa-shi,

Saitama-ken,

SUGIMOTO Mamoru,

ITO Masayoshi,

SHITOR1 Yoshiyasu,

OGAWA Tomoya, Tokió (JP) (54) ELJÁRÁS SZIALOCIL-GLICEROLIPIDEK ELŐÁLLÍTÁSÁRA (57) KIVONAT

A találmány tárgya eljárás az (I) általános képletű új szialocil-glicerolipidek és alkálifémsóik előállítására.

A képletben

R¹ jelentése hidrogénatom vagy acetilcsoport, R² jelentése alkálifématom vagy rövid szénláncú alkilcsoport,

R³ jelentése hidrogénatom, vagy C„H_2n+i- általános képletű csoport, ahol n értéke 1-től 30-ig terjedő egész szám lehet, . R⁴ jelentése C_mH_2m+1- általános képletű csoport, ahol m értéke 1-től 30-ig terjedő egész szám lehet.

A vegyületek autoimmun betegségek kezelésére alkalmasak.

A leírás terjeledme: 15 oldat, 47 képlet

-1HU 199496 Β

A találmány tárgya eljárás az (I) általános képletű, új szialocil-glicerolipidek, azaz szialinsavat tartalmazó zsírszármazékok és alkálifémsói előállítására. Az (I) általános képletben

R’ jelentése hidrogénatom vagy acetilcsoport; R² jelentése alkálifématom vagy rövidszénláncú alkilcsoport;

R³ jelentése hidrogénatom vagy C_nH_2n+i- általános képletű csoport, ahol n értéke 1-től 30-ig terjedő egész szám lehet;

R⁴ jelentése CmHím+i- általános képletű csoport, ahol m értéke 1-től 30-ig terjedő egész szám lehet.

Általánosan elterjedt nézet, hogy az idegi eredetű betegségek kezelése és gyógyítása nehéz feladat, többek között azért is, mert a rendelkezésre álló gyógyászati készítmények száma meglehetősen csekély. Jelenleg klinikai kipróbálás alatt álló készítményként említhetjük például a Cronassial márkanéven forgalmazott, természetes eredetű gangliozidokat tartalmazó terméket (52-34 912 számú, nyilvánosságra hozott japán szabadalmi bejelentés), vagy a mekobalamint, amely tulajdonképpen egy vitamin. Ezek hatása azonban nem kielégítő, következésképpen szükség van további, a célnak megfelelőbb hatóanyagok kifejlesztésére.

Ismeretes, hogy bizonyos savanyú glikolipideknek, például a gangliozidoknak, valamint bizonyos savanyú foszfolipideknek,' például a foszfatidil-inozitnak és a foszfatidil-szerinnek, fontos szerepük van az állatok ingerületközvetítő rendszerében. Megállapítottuk, hogy gangliozidok keveréke, vagy akár egyetlen komponens is fokozza az elsődlegesen tenyésztett idegsejtek és az idegrendszeri daganatsejtek burjánzását, elősegíti a tengelyfonal kialakulását, valamint annak növekedését, és állatkísérletekben a mekobalaminéhoz hasonló hatást mutat. A feltalálók egyike korábban ilyen tárgyú szabadalmi bejelentést is tett (59—222 424 számú nyilvánosságra hozott japán szabadalmi bejelentés).

Amint azt már említettük, gangliozidok keverékét jelenleg gyógyszerként alkalmazzák perifériás idegi rendellenességek, valamint a központi idegrendszer betegségeinek kezelésére. Ezek a gangliozidok azonban természetes eredetű anyagok, amelyeket különböző állatok szervezetéből nyernek, következésképpen maguk a gangliozidok, vagy esetleg a szennyezések antigén reakciót válthatnak ki. Ezenfelül nagyon nehéz a gyógyszerkészítményeknél megszokott, szigorú szabvány előírásait alkalmazni ezekre a termékekre, mivel természetszerűen nem kellően stabilak és egységesek.

Ugyancsak megállapították, hogy a gangliozidokban is jelenlevő szialinsav megtalálható például a glikoproteinekben, vagy az állati, illetve baktériumsejtek felületén. A szialinsav-származékok, mint olyan anyagok, amelyek összefüggésbe hozhatók az immuni2 tással, a rákkal, a gyulladásokkal, különböző fertőzésekkel, a sejtdifferenciálódással, valamint a hormonreceptorokkal és hasonlókkal, újabban megukra vonták a farmakológusok figyelmét.

Az 59-164 798. számú japán közzétett szabadalmi bejelentésben leírják, hogy különböző szialinsav-származékok állíthatók elő úgy, hogy a szialinsavat ismert módon cukordonorrá alakítják, majd egy cukorakceptorral — amelyet ugyancsak ismert módon állítanak elő — reagáltatják.

Találmányunk célja, hogy új szialocil-glicerolipideket, nevezetesen szialinsavat tartalmazó zsírszármazékokat és alkálifémsóikat állítsuk elő, amelyek autoimmun betegségek, így reuma, izületi gyulladások és sclerosis multiplex kezelésére alkalmasak.

Az új szialocil-glicerolipidek az (I) általános képlettel ábrázolhatok, amelyben R¹, R², R³ és R⁴ a bevezetőben megadottal azonos jelentésűek.

Az eljárás szerint egy (IV) általános képletű vegyületet — Ac acetilcsoport és R² rövid szénláncú alkilcsoport — egy (V) általános képletű vegyülettel — R³ és R⁴ a fenti jelentésűek — reagáltatunk, majd kívánt esetben a kapott vegyületet alkálifém-vegyület vizes oldatával reagáltatjuk.

Kiváltképp előnyösek azok az (I) általános képletű vegyületek, amelyek képletében R² jelentése nátriumatom;

R³ jelentése C„H₂,,+i- általános képletű csoport, és π értéke 6, 10, 18 vagy 22,

R⁴ jelentése C_mH₂m+i- általános képletű csoport, és m értéke 6, 10, 18 vagy 22;

A (3) képletű vegyületek előállítására úgy járunk el, hogy az (1) képletű vegyületet — amelynek képletében Bn jelentése benzilcsoport — a megfelelő alkil-bromiddal reagáltatjuk, majd a keletkezett (2) képletű terméket debenzilezzük, amikor is a (3) képletű vegyületet kapjuk [Agric. Bioi. Chem., 46: 255 (1982); és Biochemistry, 2: 394 (1963)].

Kuhn eljárását alkalmazva [Chem. Bér., : 611 (1966)] szialinsavból (N-acetil-neuraminsav) előállítjuk a (4) képletű vegyületet, ahol Ac jelentése a korábban meghatározottal azonos.

A fenti módon kapott (3) és (4) képletű vegyületeket egymással reagáltatva az (5) (alfa-származék) és (6) (béta-származék) képletű vegyületek keletkeznek. Ezt követően az (5) képletű vegyületet elválasztjuk, dezacetilezzük és hidrolizáljuk, aminek eredményeképpen a (7) képletű vegyületet kapjuk. (ld. B reakcióvázlat).

A hidrolízist végezhetjük tetrahidrofuránban vagy alkoholokban, például metanolban vagy etanolban, célszerűen alkalikus körülmények között. Amennyiben a szintézis során más alkil-halogenideket alkalmazunk, a (13), (19) és (25) jelű, illetve azokhoz hasonló vegyületeket állíthatunk elő. Az eljárást részletesen a (B), (C), (D), (E) és (F) reakciósémákon mutatjuk be.

-2HU 199496 Β

A találmány szerinti eljárás lényeges eleme a (III) általános képletű, új szialocil-glicerolipidek — a képletben M alkálifématomot jelent', R^s és R⁴ pedig az (I) általános képlettel kapcsolatban meghatározott jelentésűek — előállítása, amely abból áll, hogy egy (II) általános képletű vegyületet — ahol R³ jelentése acetilcsoport, R® jelentése rövid szénláncú alkilcsoport, és R³, valamint R⁴ az előzőekben megadott jelentésűek — alkalikus vizes oldószer hatásának teszünk ki.

Az eljárást tekintve előnyös, ha M jelentése nátriumatom, R³ hidrogénatomot vagy CnH2n+i- általános képletű csoportot jelent, ahol n értéke 6, 10, 18 vagy 22, és R⁴ jelentése CmHím+i- általános képletű csoport, ahol m értéke 6, 10, 18 vagy 22. A hidrolízist, mint már említettük, célszerűen alkalikus körülmények között, tetrahidrofuránban végezzük.

A találmány szerinti eljárást részleteiben az alábbi példákon szemléltetjük, anélkül azonban, hogy azokra korlátoznánk. A példák bizonyítékot szolgáltatnak arra nézve, hogy a találmány szerinti eljárással új szialocil-glicerolipidek, nevezetesen szialinsavat tartalmazó zsírszármazékok nátriumsói állíthatók elő, továbbá, hogy a találmány szerinti eljárás alkalmazásával a szialocil-glicerolipidek egyszerűbben és jobb kitermeléssel állíthatók elő.

1. példa

a) 3-O-Benzil-l,2-di(O-hexil)-sn-glicerin (2) előállítása

11.3 g (62,1 mmól) 3-O-benzil-sn-glicerint (1) feloldunk 150 ml N,N-dimetil-formamidban, hozzáadunk 7,5 g (187,5 mmól) 60%-os nátrium-hidridet, miközben az elegyet metanolos jégfördővel hűtjük, majd ezt követően szobahőmérsékleten 20 percig keverjük. Beadagolunk 51,2 g hexil-bromidot, és a reakcióelegyet további 6 óra hosszat keverjük szobahőmérsékleten, majd celiten megszűrjük, és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot feloldjuk dietil-éterben, mossuk 0,1 N sósavval, és 2,5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk és újból szárazra pároljuk. A maradékot ezután kovasavgéllel töltött oszlopon (Kieselgéi 60, Merck) kromatografáljuk, amelynek során az eluálást hexán és etil-acetát 50:1 arányú elegyével végezzük. A tisztított termék tömege 26,3 g.

b) l,2-Di(O-hexil)-sn-glicerin (3) előállítása

26.3 g (2) jelű vegyületet feloldunk 400 ml etil-acetátban, hozzáadunk 2,6 g 10%-os palládium-csontszén katalizátort, és az elegyet 4 napon át, szobahőmérsékleten, hidrogén atmoszférában keverjük. Ezután a palládium-csontszenet kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, és a visszamaradó anyagot oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Az oszlop töltete kovasavgél (Kieselgéi 60; Merck), az eluens kloroform és metanol ele4 gye. Az így kapott (3) képletű vegyület tömege 12,86 g (49,38 mmól), és a két lépésre számított összesített kitermelés 79,5%.

A (3) képletű vegyület fizikai jellemzői: [a]o°=—17,1° (c=l,l; kloroform) 'H-NMR-spektrum (500 MHz; CDC1₃; TMS; Ő): 0,886 (3H, t, J=7,0 Hz, -CH₃j; 0,889 (3H, t, J=7,0 Hz, -CH₃); 1,271 — 1,370 (12H, m, -CH₂- x 6); 1,530—1,604 (4H, m/-0-CH₂-Ch₂- x 2); 3,405—3,746 (9H, m, -CH₂-CH(O-CHrj-CH^O-CH,-)).

c) Az (5) és (6) képletű vegyűletek előállítása

8,0 g elporított 4 nm molekulaszita, 2,87 g (11,4 mmól) higany (II)-cianid, 4,11 g (11,4 mmól) higany(II)-bromid, 100 ml kloroform, valamint a (3) képletű vegyület elegyét szobahőmérsékleten, argongáz alatt keverjük. Jeges hűtés közben hozzáadunk 8,0 g (15,6 mmól) (4) képletű vegyületet 30 ml kloroformban oldva, majd az elegyet további 3 napon át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután a reakcióelegyet szűrjük, a szűrőn maradt anyagot kloroformmal mossuk, majd szűrletet és a mosófolyadékot egyesítve bepároljuk. Az igy kapott maradékot Wacogel C-300 (Wako Chemicals) adszorbenssel töltött oszlopon kromatografálva tisztítjuk, amikor is eluensként dietil-éter-etanol és toluol-etil-acetát oldószerelegyeket használunk. Az (5) képletű vegyület (alfa-származék) tömege 2,6 g, a (6) képletű vegyülete (béta-származék) 1,51 g, továbbá 2,0 g keveréket kapunk, amely így összesen 6,11 g. A kitermelés 45,7%.

A 3-O- [metil- [5- (acetil-amino) -4,7,8,9-tetra (O-acetil) -3,5-didezoxi-alfa-D-glicero-D-galakto-2-nonulopirazonil] -onáto] -l,2-di(O-hexil)-sn-glicerin (5) fizikai jellemzői:

R/=0,48; Merck HPTLC rétegen, dietil-éter és etanol 50:1 arányú elegyével kifejlesztve a kromatogramot.

[a] j>°=—12,1° (c=l,0; CHC1₃) 'H-NMR-spektrum (500 MHz; CDCI₃; TMS; ö): 0,886 (6H, t, -CH₃ x 2); 1,330 (12H, m, -CH₂- x 6); 1,888 (3H, s, CH₃-COO-); 2,038 (3H, s, CH₃-COO-); 2,131 (3H, s, CH₃-COO-); 2,186 (3H, s, CH₃-COO-); 2,602 (IH, dd, J=4,4 és 12,8 Hz, H-3eq); 3,791 (3H, s, -COOCH₃); 4,298 (IH, dd, J=2,6 és 12,5 Hz, H-9);4,853 (IH, ddd, H-4); 5,100 (IH, d, -CONH); 5,321 (1H, dd, J= 1,5 és 8,4 Hz, H-7). 5,371 (IH, ddd, H-8).

A 3-O- [metil- [5- (acetil-amino) -4,7,8,9-tetra (O-acetil)-3,5-didezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonuIopirazonil] -onáto] -l,2-di(O-hexil)-sn-glicerin (6) fizikai jellemzői:

Rf=0,54; Merck HPTLC rétegen, dietil-éter és etanol 50:1 arányú elegyével kifejlesztve a kromatogramot.

[α] 3°=— 17,2° (c=0,95; CHC1₃).

'H-NMR-spektrum (500 MHz; CDC1₃; TMS; ő): 0,889 (3H, t, -CH₃); 0,902 (3H, t, -CH₃); 1,310 (12H, m, -CH₂- x 6); 1,882 (3H, s, CH₃CÓNH-); 1,900 (IH, t, J=12,8 Hz, H-3ax); 2,013 (3H, s, CH₃COO-); 2,023 (3H,

-3HU 199496 Β s, CHjCOO-); 2,064 (3H, s, CH₃COO-); 2,140 (3H, s, CHjCOO-); 2,454 (IH, dd, J=4,8 és

12,8 Hz, H-3eq); 3,794 (3H, s, -COOCH₃); 4,722 (IH, dd, J=2,6 és 12,5 Hz, H-9); 5,122 (IH, d, -CONH); 5,220—5,290 (2H, H-4, H-8); 5,378 (IH, dd, J=l,5 és 4,4 Hz, H-7).

d) 3-0- [Nátrium- [5-(acetil-amino)-3,5-didezoxi-alfa-D-glicero-D-galakto-2-nonulpirazonil] -onáto] -l,2-di(O-hexil)-sn-glicerin (7) előállítása

1,69 g (2,30 mmól) (5) képletű vegyületet feloldunk 3 ml tetrahidrofuránban, hozzáadunk 11 ml 1 N nátrium-hidroxid-oldatot és 7 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet ezután Amberlit IRC-50 kationcserélő gyantával (Rohm et Hass Co.) pH-7 értékre semlegesítjük, a gyantát kiszűrjük és mossuk vízzel, majd az egyesített szűrletet osziopkromatográfiával tisztítjuk. Az oszlop töltete 0,25—0,074 mm (60/200 mesh) szemcseméretű ODS 60Á (YAMAMURA CHEMICAL LABORATORIES) az eluens víz, illetve metanol. A metanolos frakciókat összegyűjtjük, bepároljuk és a maradékot liofilizáljuk, aminek eredményeképpen 986,8 mg (1,72 mmól) (7) képletű vegyületet kapunk fehér por formájában. A kitermelés 74,8%.

A (7) képletű vegyület fizikai jellemzői: R/=0,47; Merck HPTLC rétegen, kloroform, metanol és ecetsav 5:3:0,5 arányú elegyével kifejlesztve a kromatogramot.

[a]g°=—1,96° (c=l,0; tetrahidrofurán). 'H-NMR-spektrum (500 MHz; D₂O; TS; 6): 0,880 (6H, t, J=6,6 Hz, -CH₃ x 2); 1,340 (12H, s, -CH₂- x 6); 1,580 (4H, m,

-OCH₂CH₂- x 2); 1,691 (IH, t, J=12,5 Hz, H-3ax); 2,730 (IH, dd, J=4,8 és 12,5 Hz, H-3eq).

e) 3-O- [Nátrium- [5- (acetil-amino) -3,5-didezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonulopirazonil] -onáto] -l,2-di(O-hexil)-sn-glicerin (8) előállítása

1,15 g (1,56 mmól) (6) képletű vegyületet feloldunk 3 ml tetrahidrofuránban, hozzáadunk 10 ml 1 N nátrium-hidroxid-oldatot, és az elegyet 7 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután Amberlit IRC-50 kationcserélő gyantával az oldatot semlegesítjük, a gyantát kiszűrjük, majd mossuk vízzel, és az egyesített szűrletet oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Az oszlop töltete 0,25— 0,074 mm (60/200 mesh) szemcseméretű ODS 60A (YAMURAMA CHEMICAL LABORATORIES), az eluens víz, illetve metanol. A metanolos frakciókat összegyűjtjük, bepároljuk és a visszamaradó anyagot liofilizáljuk, aminek eredményeképpen fehér por formájában 748,0 mg (1,30 mmól) (8) képletű vegyületet kapunk. A kitermelés 83,8%.

A (8) képletű vegyület fizikai jellemzői: R/=0,54; a kromatogramot Merck HPTLC rétegen, kloroform metanol és ecetsav 5:3: :0,5 arányú elegyével fejlesztjük ki.

[a]p°=—32,4° (c=0,97; tetrahidrofurán).

‘H-NMR-spektrum (500 MHz; D₂O; TSP;. 4

6): 0,880 (6H, s, CH₃ x 2); 1,330 (12H. s, -CH₂- x 6); 1,660 (4H, s, -OCH₂CH₂- x 2);

l, 626 (1H, t, J=12,8 Hz, H-3ax); 2,057 (3H, s, CHjCONH); 2,408 (IH, dd, J=4,8és 12,8H^ H-3eq).

2. példa

a) 3-O-Benzil-l,2-di(O-decil)-sn-glicerin (9) előállítása

13,6 g (74,7 mmól) 3-0-benzil-sm-glicerint ((1) képletű vegyület) feloldunk 20 ml vízmentes N,N-dimetil-formamidban, az oldatot metanolos jégfűrdővel hűtve hozzáadunk

8,96 g (224,1 mmól) 60%-os nátrium-hidridet, majd 20 percig szobahőmérsékleten keverjük. Ezután beadagolunk 66,4 g decil-bromidot vagy 300,22 mmól decil-kloridot és az elegyet 6 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük. Az oldatot ezután celit rétegen szűrjük, mossuk dietil-éterrel, majd a szűrletet és a mosófolyadékot egyesítve, vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot újra feloldjuk dietil-éterben, mossuk 0,1 N sósavval és 2,5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A maradék tisztítását osziopkromatográfiával végezzük, adszorbensként kovasavgélt (Kieselgel 60; Merck), eluensként pedig hexán és etil-acetát 50:1 arányú elegyét alkalmazva. A kapott termék tömege 33,5 g, és a vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálatok szerint decil-bromidot tartalmaz. A terméket a következő reakciólépésben további tisztítás nélkül debenzilezzük.

b) l,2-Di(O-decil)-sn-glicerin (10) előállítása

33,5 g (9) képletű vegyületet, amely vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálatok szerint decil-bromidot is tartalmaz, feloldunk 450 ml etil-acetátban, hozzáadunk 3,5 g 10%-os csontszenes palládiumkatalizátort, és az elegyet 4 napon át hidrogéngáz áramban keverjük. Ezután a katalizátort kiszűrjük, az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagéllel (Kieselgél 60; Merck) töltött oszlopon, eluensként kloroformot alkalmazva kromatografáljuk. Az így kapott tisztított terméket petroléterből átkristályositjuk, aminek eredményeképpen 26,2 g (70,31 mmól) (10) képletű vegyületet kapunk. A két reakciólépésre számított összesített kitermelés 94,1%.

A (10) képletű vegyület fizikai jellemzői: [α]ρ°=—11,7° (c=1,1; CHCIj) 'H-NMR-spektrum (500 MHz; CDCI₃; TMS; δ): 0,880 (3H, t, J=7,0 Hz, -CH₃); 0,884 (3H, t, J=7,0 Hz, -CH₃); 1,200—1,400 (28H, m, -CH₂- x 14); 1,500—1,600 (4H, m, -OCH₂CH₂- x 2); 3,400-3,750 (9H, m, -CH₂-CH(O-CH₂) -CH₂ (O-CH₂-)).

c) 3-0- [Metil- [5-(acetil-amino)-4,7,8,9-tetra(O-acetil)-3,5-didezoxi-alfa-D-glicero-D-galakto-2-nonulo-pirazonil] -onáto] -1,2-di(O-decil)-sn-glicerin (11) és a (12) képletű vegyület előállítása

4,0 g elporított 4 nm molekulaszita, 1,65 g (6,5 mmól) higany(II)-cianid és 2,35 g

-4HU 199496 Β (6,5 mmól) higany (II)-bromid elegyéhez 4,0 g (1-0,7 mmól), 80 ml kloroformban oldott (10) képletű vegyűletet adunk, és argongáz alatt, szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük. Ezután az elegyet jégfürdővel 0-és 5°C közötti hőmérsékletre hütjük, beadagoljuk 4,0 g (7,8 mmól) (4) képletü vegyület 20 ml kloroformmal készült oldatát, és a szobahőmérsékleten folytatjuk a keverést további 3 napon át. A reakcióelegyet szűrjük, a szűrőn maradt anyagot kloroformmal mossuk, majd a mosófolyadékot a szűrlettel egyesítve vákuumban bepároljuk. Az olajos maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk, amikor is adszorbensként Wacogel C-300 töltetet, eluensként pedig dietil-éter-etanol és toluol-etil-acetát oldószerrendszereket alkalmazunk. Ilyen módon 388,7 mg alfa-származékot (11),

469,5 mg béta-származékot (12), továbbá

2,23 g vegyes terméket, tehát összesen 3,09 g anyagot kapunk, amely 46,8%-os hozamnak felel meg.

A (11) képletű vegyület fizikai jellemzői: R/=0,54; a kromatogramot Merck HPTLC rétegen, dietil-éter és etanol 50:1 arányú elegyével fejlesztjük ki.

[a]§°=—9,9° (c=l; CHCI₃) 'H-NMR-spektrum (500 MHz; CDC1₃, TMS; ö): 0,878 (6H, t, J=7,0 Hz, -CH₃ x 2); 1,810 (28H, m, -CH₂- x 14); 1,881 (3H, s, CH₃CONH); 1,975 (ÍH, t, J=12,5 Hz, H-3ax); 2,025 (3H, s, CH₃COO-); 2,038 (3H, s, CH₃COO-); 2,131 (3H, s, CH₃COO-); 2,137 (3H, s, CH₃COO-); 2,602 (ÍH, dd, J=4,8 és 12,8 Hz, H-3eq); 3,791 (3H, s, -COOCH₃); 4,299 (ÍH, dd, J=2,6 és 12,5 Hz, H-9); 4,856 (ÍH, ddd, H-4); 5,102 (ÍH, d, -CONH-); 5,321 (ÍH, dd, H-7); 5,371 (ÍH, ddd, H-8).

A 3-O- [metil- [5-(acetil-amino)-4,7,8,9-tetra(O-acetil) -3,5-didezoxi-béta-D-gíicero-D-galakto-2-nonulopirazonil] -onáto] -1,2-di (O-decil)-sn;glicerin (12) fizikai jellemzői: Rf=0,68; Merck HPTLC rétegen, dietil-éter és etanol 50:1 arányú elegyével kifejlesztve a kromatogramot.

[α]έ°=—13,3° (c—1; CHC1₃) ‘H-NMR-spektrum (500 MHz; CDC1₃; TMS; ö): 0,881 (6H, t, -CH₃ x 2); 1,285 (28H, m, -CH₂- x 14); 1,882 (3H, s, CH₃CONH); 2,012 (3H, s, CHjCOO ); 2,023 (3H, s, CH₃COO-); 2,063 (3H, s, CH₃COO-); 2,141 (3H, s, CH₃COO-); 2,454 (ÍH, dd, J=4,9 és 13,2 Hz, H-3eq); 3,794 (3H, s, -COOCH₃); 4,723 (ÍH, dd, J=2,4 és 12,2 Hz, H-9); 5,138 (ÍH, d, -CONH-); 5,200—5,290 (2H, H-4, H-8); 5,376 (ÍH, H-7).

d) 3-O- [Nátrium- [5- (acetil-amino)-3,5-didezoxi-alfa-D-glicero-D-galakto-2-nonulopirazonil] -onáto] -1,2-di (O-decil) -sn-glicerin (13) előállítása

343,3 mg (0,41 mmól) (11) képletű vegyűletet feloldunk 1 ml tetrahidrofuránban, és 3 ml 1 N nátrium-hidroxid-oldat hozzáadása után 5 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet ezután Amberlit IRC-50 (Rohm et Haas Co.) kation8 cserélő gyantával semlegesre (pH=7) állítjuk, majd a gyantát kiszűrjük, desztillált vízzel mossuk, és a szűrlettel egyesítve a mosófolyadékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Az oszlop töltete (0,25—0,074 mm (60/200 mesh) szemcseméretű ODS 60A (YAMAMURA CHEMICAL LABORATORIES), az eluens víz, illetve metanol. A metanolos frakciókat összegyűjtjük, az oldószert ledesztilláljuk, majd a maradékot liofilizáljuk, aminek eredményeképpen 218,9 mg (0,32 mmól) (13) képletű terméket kapunk. A kitermelés 78,0%.

A (13) képletű vegyület fizikai jellemzői: Rf=0,54; a kromatogramot Merck HPTLC rétegen, kloroform, metanol és ecetsav 5:3: :0,5 arányú elegyével fejlesztjük ki.

[a]#°=—-2,25° (c=0,93; tetrahidrofurán) 'H-NMR-spektrum (500 MHz; D₂O; TSP; 6): 0,885 (6H, m, -CH₃ x 2); 1,310 (28H, s, -CH₂- x 14); 1,583 (4H, széles s,

-OCH₂CH₂ x 2); 1,700 (ÍH, t, J=12,5 Hz, H-3ax); 2,049 (3H, s, CH₃CONH-); 2,733 (ÍH, széles d, J=8,4 Hz, H-3eq).

e) 3-O- [Nátrium- [5- (acetil-amino) -3,5-didezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonulopirazonil] -onáto] -1,2-di (O-decil) -sn-glicerin (14) előállítása

397,0 mg (0,47 mmól) (12) képletű vegyűletet 1 ml tetrahidrofuránban feloldunk, hozzáadunk 3,5 ml 1 N nátrium-hidroxid-oldatot és szobahőmérsékleten 5 óra hoszszat keverjük az oldatot. Ezután Amberlit IRC-50 gyantával pH 7-re állítjuk az elegyet, a gyantát szűrjük és desztillált vízzel mossuk, majd a szűrletet és a mosófolyadékot egyesítve oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Az oszlop töltete 0,25—0,074 mm (60/200 mesh) szemcseméretű ODS 60Á (YAMAMURA CHEMICAL LABORATORIES), az eluens víz, illetve metanol. A metanolos frakciókat összegyűjtjük, az oldószert ledesztilláljuk, majd a maradékot liofilizáljuk, aminek eredményeképpen fehér por formájában 155,0 mg (0,23 mmól) (14) képletű terméket kapunk. A kitermelés 48,9%.

A (14) képletű vegyület fizikai jellemzői: R/=0,68; Merck HPTLC rétegen, kloroform-metanol-ecetsav 5:3:0,5 arányú eleggyel kromatografálva.

[α]£°=—47,7° (c=l; tetrahidrofurán) 'H-NMR-spektrum (500 MHz; D₂O; TSP; Ő): 0,897 (6H, m, -CH₃ x 2); 1,323 (28H, s, -CH₂- x 14); 1,602 (4H, széles s,

-OCH₂CH₂ x 2); 2,074 (3H, s, CH₃CONH-); 2,430 (ÍH, m, H-3eq).

3. példa

a) 3-O-Benzil-l,2-di(O-oktadecil)-sn-glicerin (15) előállítása

4,0 g (22,0 mmól) 3-O-benzil-sn-glicerint ((1) képletű vegyület) feloldunk 10 ml N.N-dimetil-formamidban, hozzáadunk 2,7 g (66,0 mmól) 60%-os nátrium-hidridet, és az elegyet 10 percen át szobahőmérsékleten ke5 verjük. Ezután hozzáadunk 25 g oktadecil-bromidot vagy 75,0 mmól oktadecil-kloridot, és folytatjuk a kevertetést szobahőmérsékleten további 6 óra hosszat. Az oldatot celit rétegen szűrjük, a szűrőt dietil-éterrel mossuk, és a szűrletet a mosófolyadékkal egyesítve vákuumban szárazra pároljuk. A bepárlási maradékot ismét feloldjuk dietil-éterben, az oldatot 0,1 N sósavval és 2,5%-os kálium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, 10 vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk, aminek eredményeképpen 16,0 g olajat kapunk. Ezt az olajat 550 g Wacogél C-300 adszorbenssel töltött oszlopon, eluensként toluol-dietil-éter elegyet használva kro- 15 matografáljuk, amikor is 9,25 g (13,46 mmól) tisztított (15) képletü vegyületet kapunk. A kitermelés 61,3%. A következő reakciólépéshez további tisztítás nélkül használjuk a terméket. 20

b) l,2-Di(0-oktadecil)-sn-glicerin (16) előállítása

8,8 g (13,0 mmól) (15) képletü vegyületet feloldunk 150 ml etil-acetátban, hozzáadunk 800 mg 10%-os palládium-csontszén 25 katalizátort, és az elegyet hidrogéngáz áramban 40 órán át, szobahőmérsékleten keverjük. Ezután a katalizátort kiszűrjük és az oldószert ledesztilláljuk, aminek eredményeképpen 6,21 g (10,4 mmól) (16) képletü vegyü- 30 letet kapunk. A kitermelés 79,8%.

A (16) képletü vegyület fizikai jellemzői: [a]p°=—7,5° (c=l; CHCI₃) 'H-NMR-spektrum (500 MHz; CDC1₃; TMS; ő): 0,880 (6H, t, J=7,0 Hz, -CH₃ x 2); 1,150- 35 l, 380 (60H, m, -CH₂- x 30); 1,540-1,590 (4H, m, -OCH₂CH₂- x 2); 3,400—3,750 (9H, m, -CH₂-CH(O-CH₂-)-CH₂(O-CH₂-)).

c) 3-O- [Metil- [5-(acetil-amino) -4,7,8,9-tetra (O-acetil)-3,5-didezoxi-alfa-D-glicero- 40

-D-galakto-2-nonulopiranozil] -onáto] -1,2-di(O-oktadecil)-sn-glicerin (17) és a (18) képletü vegyület előállítása 5,0 g, előzőleg vákuumban 180°C-on szárított, poralakú 4 nm molekulaszitát 50 ml tetrahidrofuránban szuszpendálunk, hozzá- ⁴⁵adunk 2,82 g (4,72 mmól) (16) képletü vegyületet, és az elegyet 30 percig szobahőmérsékleten keverjük. Ezután az oldatot metanolos jégfürdővel hűtjük, és argongáz alatt, 50 fénytől védve a reakcióelegyet beadagolunk

3,65 g (14,23 mmól) ezüst-(trifluor-metánszulfonát)-ot vagy megfelelő mennyiségű higany(ll)-cianátot és higany (II) -bromidot.

percnyi keverés után hozzáadjuk 4,83 g _5g(9,49 mmól) (4) képletü vegyület 20 ml tetrahidrofuránnal készült oldatát, és szobahőmérsékleten folytatjuk a keverést 3 órán át. Ezután szűrjük, a szűrőt kloroformmmal mossuk, és a mosófolyadékot egyesítve a szűrlettel, bepároljuk. A visszamaradó anyagot feloldjuk kló- θθ roformban, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk és az oldószert ledesztilláljuk. A bepárlási maradékot Wacogel C-300 tölte- 65 tü oszlopon kromatografáljuk, dietil-éter, to6 luol és etil-acetát elegyét eluálva, aminek eredményeképpen 640 mg alfa-származékot (17),221 mg béta-származékot (18) és 515 mg a két vegyület keverékéből álló terméket ka5 púnk. A (16) képletü vegyületre számított kitermelés 27,3%.

A (17) képletü vegyület fizikai jellemzői; R/=0,70; Merck HPTLC rétegen, dietil-éter és etanol 50:1 arányú elegyével kromatografálva.

[«]o°=—8,4° (c=l; CHCI₃) 'H-NMR-spektrum (500 MHz; CDC1₃; TMS; δ): 0,879 (6H, t, -CH₃ x 2); 1,315 (60H, m, -CH₂- x 30); 1,800 (3H, s, CH_SCONH);

l, 975 (IH, t, J=12,5 Hz, H-3ax); 2,025 (3H, s, CHjCOO-); 2,038 (3H, s, CH₃COO-); 2,132 (3H, s, CH₃COO-); 2,136 (3H, s, CH₃COO-); 2,603 (IH, dd, J=4,4 és 12,8 Hz, H-3eq); 3,789 (3H, s, -COOCH₃); 4,308 (IH, dd, J= =2,9 és 12,5 Hz, H-9); 4,856 (IH, ddd, H-4); 5,254 (IH, d, -CONH-); 5,328 (IH, dd, H-7); 5,371 (IH, ddd, H-8).

A 3-O- [metil- [5-(acetil-amino) -4,7,8,9-tetra (O-acetil) -3,5-didezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonulopirazoniI] -onáto] -1,2-di (O-oktadecil)-sn-glicerin (18) fizikai jellemzői; R/=0,80; Merck HPTLC rétegen, dietil-éter és etanol 50:1 arányú elegyével kromatografálva.

[a]g°=_ 10,8° (c=l, CHC1₃) 'H-NMR-spektrum (500 MHz; CDCI₃; TMS; Ö): 0,880 (6H, t, -CH₃ x 2); 1,250 (60H, m, -CH₂- x 30); 1,881 (3H, s, CH₃CONH-); 1,900 (IH, t, J=11,7 Hz, H-3ax); 2,011 (3H, s, CH3COO-); 2,022 (3H, s, CH₃COO-); 2,063 (3H, s, CH₃COO ); 2,140 (3H, s, CH₃COO-); 2,454 (IH, dd, J=4,8 és 12,8 Hz, H-3eq); 3,793 (3H, s, -COOCH₃1; 4,726 (IH, dd, J= =2,6 és 12,5 Hz, H-9); 5,138 (IH, d,-CONH-); 5,200—5,300 (2H, H-4, H-8); 5,376 (IH, H-7).

d) 3-O- [Nátrium- [5- (acetil-amino) -3,5-didezoxi-alfa-D-glicero-D-galakto-2-nonulopiranozil] -onáto]-l,2-di(O-oktadecil)-sn-glicerin (19) előállítása

520 mg (0,49 mmól) (17) képletü vegyületet feloldunk 3 ml tetrahidrofuránban, hozzáadunk 6 ml 1 N nátrium-hidroxid-oldatot és szobahőmérsékleten 5 óra hosszat keverjük az elegyet. Ezután Amberlit IRC-50 gyantával az oldatot semlegesítjük, majd a gyantát kiszűrjük, mossuk vízzel, és a szűrletet a mosófolyadékkal egyesítve oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Az oszlop töltete 0,074— 0,25 mm (60/200 mesh) szemcseméretű ODS 60A (YAMAMURA CHEMIAL LABORATORIES), az oldószer víz, illetve metanol. A metanolos frakciókat összegyűjtjük, ledesztilláljuk az oldószert, majd a maradékot liofilizálva 362 mg (0,40 mmól) (19) képletü vegyületet kapunk, amely egy fehér por. A kitermelés 81,6%.

A (19) képletü vegyület fizikai jellemzői: R/=0,60; Merck HPTLC rétegen, kloroform metanol és ecetsav 5:3:0,5 arányú elegyével kifejlesztve a kromatogramot.

-6HU 199496 Β ία]$°=—1,98 (c=0,96; tetrahidrofurán) ^fH-NMR-spektrum (500 MHz; DMSOd₆+D₂O; TMS; δ): 0,852 (6H, t, J=7,0 Hz, -CH₃ x 2);

1.100— 1,350 (60H, m, -CH₂- x 30); 1,400—

1.500 (4H. m, -OCH₂CH₂- x 2) 1,896 (3H, s, CH₃CONH-).

e) 3-0- [Nátrium- [5- (acetil-amino) -3,5-didezoxi-béta-D-glicero-D-galakto-2-nonulopirazonil] -onáto] -l,2-di(O-oktadecil)-sn-glicerin (20) előállítása

140 mg (0,13 mmól) (18) képletű vegyületet feloldunk 2 ml tetrahidrofuránban, hozzáadunk 4 ml 1 N nátrium-hidroxid-oldatot, és szobahőmérsékleten 6 órán át keverjük. Ezután Amberlit IRC-50 ioncserélő gyantával az oldatot semlegesre állítjuk (pH=7), majd a gyantát kiszűrjük, vízzel mossuk, és a szűr letet a mosófolyadékkal egyesítve oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Az oszlop töltete 0,074—0,25 mm (60/200 mesh) szemcseméretű ODS 60A (YAMAMURA CHEMICAL LABORATORIES), az eluense víz, illetve metanol. A metanolos frakciókat összegyűjtve bepároljuk, a maradékot liofilizáljuk, aminek eredményeképpen 50 mg (0,05 mmól) fehér por alakjában kapjuk a (20) képletű vegyületet. A kitermelés 38,5%.

A (20) képletű vegyület fizikai jellemzői: R,=0,70; Merck HPTLC rétegen, kloroform, metanol és ecetsav 5:3:0,5 arányú elegyével kifejlesztve a kromatogramot.

'H-NMR-spektrum (500 MHz; DMSOd₆+D₂O; TMS; δ): 0,853 (6H, t, J=7,3 Hz, -CH₃ x 2);

1.100— 1,360 (60H„ m, -CH₂- x 30); 1,400—

1.500 (4H, m, -CH₂CH₂ x 2); 1,882 (3H, s, CH₃CONH-); 2,122 (IH, m, H-3eq).

4. példa

a) A (21) képletű vegyület előállítása

5,8 g (32,0 mmól) (1) képletű vegyületet feloldunk 20 ml vízmentes N,N-dimetilformamidban, hozzáadunk 3,1 g (96,0 mmól) 60%-os nátrium-hidridet, és az elegyet 10 percen át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután beadagolunk 50,0 g (128,4 mmól) dokozil-bromidot, és folytatjuk a keverést szobahőmérsékleten további 6 óra hosszat: Az oldatot celit rétegen átszűrjük, a szűrőt dietil-éterrel mossuk, és a szűrletet a mosófolyadékkal egyesítve vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot ismét felvesszük .dietil-éterben, 0,1 N sósavval és 2,5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk és bepároljuk. A visszamaradó olajos terméket, amelynek tömege 28,3 g 800 g Wacogel C-300 adszorbensen, eluensként hexán és etil-acetát 50:1 arányú elegyét alkalmazva, kromatografáljuk. A dokozil-bromidot is tartalmazó termék tömege 17,3 g. Az így kapott (21) képletű vegyületet további tisztítás nélkül használjuk fel a következő reakciólépésben.

b) A (22) képletű vegyület előállítása

17,3 g (21) képletű vegyületet, amely dokozil-bromidot is tartalmaz, feloldunk 200 ml dietil-éter-etil-acetát-metanol 1:1:1 elegyben, hozzáadunk 1,7 g palládium-csontszén katalizátort, és az elegyet szobahőmérsékleten, hidrogéngáz áramban, 2 napon át keveredni hagyjuk. Ezután az oldatot megszűrjük, a szűrőt kloroformmal mossuk, majd a szűrletet a mosófolyadékkal egyesítve bepároljuk. A maradékot kovasavgéllel (Merck; Kieselgél 60) töltött oszlopon kromatografál10 juk, hexán és etil-acetát elegyét alkalmazva eluensként, amelynek összetételét 5:1 és 3:1 arányok között változtatjuk. A tiszta frakciókat bepárolva, és a maradékot hexán-dietil-éter elegyből átkristályosítva 14,5 g (20,4 mmól) (22) képletű vegyületet kapunk.

Az (1) képletű vegyületre számított összesített termelés 63,4%.

A (22) képletű vegyület fizikai jellemzői: ‘H-NMR-spektrum (500 MHz, CDC1₃; TMS;

δ): 0,880 (6H, t, J=7,0 Hz, -CH₃ x 2); 1,150— l, 450 (76H, m, -CH₂- x 38); 1,500—1,650 (4H, m, -OCH₂CH₂ x 2); 3,400—3,750 (9H, m, -CH₂-CH(O-CH₂-)-CH₂(O-CH₂-)).

c) A (23) és (24) képletű vegyületek elő25 állítása

7,1 g, előzőleg 180°C-on vákuumban szárított és elporított 4 nm molekulaszitát, 2,06 g (8,1 mmól) higany(II)-cianidot és 2,94 g (8,1 mmól) higany(II)-bromidot 60 ml klo₃₀ roformban szuszpendálunk, hozzáadunk 5,31 g (7,5 mmól) (22) képletű vegyületet, majd argongáz áramban, szobahőmérsékleten, 2 óra hosszat keverjük az elegyet. Ezután jeges hűtés mellett hozzáadunk 2,55 g (5,0 mmól) (4) képletű vegyületet, és szobahőmérsékleten további 24 órán át folytatjuk a keverést. A reakcióelegyet szűrjük, a szűrőn maradt anyagot kloroformmal mossuk, majd a szűrletet és a mosófolyadékot egyesítve bepároljuk. A maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk, amikor is adszorbensként Wacogel C-300 oszloptöltetet, eluensként pedig dietil-éter-etanol, illetve toluol-etil-acetát oldószerelegyeket használunk. Ilyen módon 1,95 g alfa-származékot (23), 1,38 g béta-szárma45 zékot (24), valamint 0,1 g, a kettő keverékéből álló, összesen 4,33 g terméket kapunk. A kitermelés 73,2%.

c_n A (23) képletű vegyület fizikai jellemzői: R/=0,68; Merck HPTLC rétegen, dietil-éter és etanol 24:1 arányú elegyével kromatografálva.

‘H-NMR-spektrum (500 MHz; CDC1₃; TMS; δ): 0,880 (6H, t, J=7,0 Hz, -CH₃ x 2); 1,253 ^b5 (76H, m, -CH₂- x 38); 1,882 (3H, s, CH₃-CONH-); 1,976 (IH, t, J=12,5 Hz, H-3ax);

2,025 (3H, s, CH3COO-); 2,039 (3H, s,

CH₃COO-); 2,132 (3H, s, CH₃COO-); 2,137 (3H, s, CH₃COO-); 2,601 (IH, dd, J=4,8 és ⁶⁰ 12,8 Hz, H-3eq); 3,791 (3H, s, -COOCH₃);

4,298 (IH, dd, J=2,9 és 12,5 Hz, H-9); 4,852 (IH, ddd, H-4); 5,120 (IH, d, -CONH-);

5,322 (IH, dd, H-7); 5,371 (IH, ddd, H-8). A (24) képletű vegyület fizikai jellemzői:

R/=0,73; Merck HPTLC rétegen, dietil-éter 7

-7HU 199496 Β és etanol 24:1 arányú elegyével kromatografálva.

'H-NMR-spektrum (500 MHz; CDC1₃; TMS; δ): 0,880 (6H, t, -CH₃CONH-); 1,898 (IH, t, J= 11,7 Hz, H-3ax); 2,013 (3H, s, CH₃COO-)_;2,024 (3H, s, CH₃COO-), 2,064 (3H, s, CH₃COO-); 2,143 (3H, s, CH₃COO ); 2,455 (IH, dd, J=4,8 és 12,8 Hz, H-3eq); 3,794 (3H, s, -COOCH₃); 4,468 (IH, dd, J=2,6 és 12,5 Hz, H-9); 5,379 (IH, dd, H-7).

d) A (25) képletű vegyület előállítása

1,59 g (1,35 mmól) (23) képletű vegyületet feloldunk mintegy 30 ml tetrahidrofuránban, hozzáadunk 11 ml 1 N nátrium-hidroxid-oldatot és szobahőmérsékleten 7 órán át keverjük. Az oldatot ezután Amberlit IRC-50 ioncserélő gyantával 7-es pH-ra állítjuk, a gyantát kiszűrjük, desztillált vízzel mossuk, majd a szűrletet a mosófolyadékkal egyesítve átengedjük egy 0,074—0,25 mm (60/ /200 mesh) ODS 60A adszorbenssel (YAMAMURA CHEMICAL LABORATORIES) töltött oszlopon, és vízzel, illetve metanollal eluáljuk. A metanolos frakciókat összegyűjtve bepároljuk, majd a maradékot liofilizáljuk. 1,19 g (25) képletü vegyűletet kapunk, amely egy fehér por. A kitermelés 86,7%.

A (25) képletű vegyület fizikai jellemzői: 'H-NMR-spektrum (500 MHz; CDC1₃ és CD₃OD 1:1 arányú elegye; TMS; δ): 0,889 (6H, t, J=7,3 Hz, -CH₃ x 2); 1,150—1,400 (76H, m, CH₃- x 38); 1,500-1,700 (4H, m, -OCH₂CH₂- x 2); 2,030 (3H, s, CH₃CONH-).

e) A (26) képletű vegyület előállítása

1,04 g (0,88 mmól) (24) képletű vegyüIetet feloldunk mintegy 20 ml tetrahidrofuránban, hozzáadunk 5,3 ml 1 N nátrium-hidroxid-oldatot, és az elegyet szobahőmérsékleten 7 óra hosszat keverjük. Ezután a reakcióelegy pH-ját 7-re állítjuk Amberlit IRC-50 ioncserélő gyantával, majd a gyantát kiszűrjük, desztillált vízzel mossuk, és a szűrletet a mosófolyadékkal egyesítve oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Az oszlop töltete 0,074—0,25 mm (60/200 mesh) szemcseméretü ODS 60A (YAMAMURA CHEMICAL LABORATORIES), az eluens víz, illetve metanol. A metanolos frakciókat összegyűjtjük, bepároljuk és a maradékot liofilizáljuk, aminek eredményeképpen fehér porként 748 mg (26) képletű vegyűletet kapunk. A kitermelés 83,6%.

A (26) képletű vegyület fizikai jellemzői: 'H-NMR-spektrum (500 MHz; CDC1₃ és CD₃OD 1:1 arányú elegye; TMS; δ): 0,888 (6H, t, J=7,0 Hz; -CH₃ x 2); 1,100—1,450 (76H, m, -CH₂- x 38); 1,500—1,700 (4H, m, -OCH₂CH₂- x 2); 2,046 (3H, s, CH₃CONH-).

5. példa

a) A (28) és (29) képletű vegyületek előállítása

5,0 g elporított és vákuumban 180°C-on szárított 4 nm molekulaszitát, 2,09 g (5,8 mmól) higany(II)-bromidot és 1,46 g 8 (5,8 mmól) higany(II)-cíanidot, vagy megfelelő mennyiségű ezüst- (trifluor-metánszulfonát)-ot 50 ml vízmentes kloroformban, tetrahidrofuránban, vagy metilén-dikloridban szuszpendálunk, hozzáadunk 0,92 g (2,7 mmól) (S)-batil-alkoholt, és az elegyet argongáz áramban, szobahőmérsékleten, 2 órán át keverjük. Ezután jéggel hűtvé a reakcióelegyet beadagolunk 2,03 g (4,0 mmól) (4) képletű vegyűletet 15 ml vízmentes kloroformban oldva, és folytatjuk a keverést szobahőmérsékleten 3 napon át, majd szűrjük. A szűrőt kloroformmal mossuk, a szűrletet a mosófolyadékkal egyesítjük és bepároljuk. A párlási maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk, amelynek során Wacogel C-300 adszorbenst alkalmazunk, és az eluenst dietil-éter-etanol, illetve toluol-metanol oldószerelegyekkel végezzük. Az így kapott 1,2 tömegű (27) jelű termék egy keverék, amely alfa-, béta- és dehidroszármazékból áll.

A fenti (27) képletű vegyüiethez 30 ml ecetsavanhidridet, valamint 40 ml vízmentes piridint adunk, és szobahőmérsékleten 18 órán át kevertetjük. Vákuumban szárazra pároljuk, a maradékot feloldjuk etil-acetátban, mossuk telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és telített nátrium-klorid-oldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk, és végül az oldószert ledesztiláljuk, aminek eredményeképpen 1,6 g nyerstermék marad vissza. A nyersterméket kovasavgélen (Merck; Kieselgél 60) oszlopkromatográfiával tisztítjuk, amelynek során dietil-éter és metanol 60:1 arányú elegyével végezzük az elúciót, majd az anyagot átengedjük egy C típusú lobar (Merck) oszlopon, eluensként toluol-metanol 15:1 arányú elegyet használva. Ilyen módon 193,4 mg alfa-származékot (28), 171,3 mg béta-származékot (29), valamint 513,1 mg, a kettő keverékéből álló, összesen 877,8 mg terméket kapunk. A batil-alkoholra számított kitermelés 37,8%.

Az alfa-származék fizikai jellemzői: 'H-NMR-spektrum (500 MHz; CDC1₃; TMS; δ): 0,884 (3H, t, -CH₃); 1,888 (3H, s, -NH-COCH₃); 1,949 (IH, t, H-3ax); 2,586 (IH, dd, H-3eq); 3,817 (3H, s, -COOCH₃); 1,870 (1H, m, H-4).

A béta-származék fizikai jellemzői: 'H-NMR-spektrum (500 MHz; CDC1₃; TMS; δ): 0,878 (3H, t, -CH₃); 1,885 (3H, s, -NHCOCH₃); 1,898 (IH, t, H-3ax); 2,465 (IH, dd, H-3eq); 3,800 (3H, s, -COOCH₃); 5,219 (IH, m, H-4).

b) A (30) képletű vegyület előállítása

163,4 mg (0,19 mmól) (28) képletü vegyülethez 1,14 ml 1 N nátrium-hidroxíd-oldatot adunk és szobahőmérsékleten 8 órán át kevertetjük. Ezt követően 1RC-50 kation-cserélő gyantával az oldatot semlegesítjük, a gyantát kiszűrjük, desztillált vízzel mossuk, majd a szűrletet és a mosófolyadékot egyesítve oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Az oszlop töltete 0,074—0,25 mm (60/ /200 mesh) szemcseméretű ODS 60A (YA-8HU 199496 Β

MAMURA CHEMICAL LABORATORIES), az eluens víz, illetve metanol. A metanolos frakciókat összegyűjtjük, az oldószert lepároljuk és a maradékot liofilizáljuk, aminek eredményeképpen fehér por formájában

112,3 mg (30) képletű terméket kapunk. A kitermelés 89,9%.

A (30) képletű vegyület fizikai jellemzői: ‘H-NMR-spektrum (500 MHz; C₅D₅N; TMS; 6): 0,883 (s, -CH₃); 2,066 (s, -NHCOCH₃); 2,349 (t, H-3ax); 3,737 (q, H-3eq).

c) A (31) képletű vegyület előállítása

147,6 mg (0,17 mmól) (29) képletű vegyületet feloldunk 1,02 ml 1 N nátrium-hidroxid-oldatban, és az oldatot szobahőmérsékleten 8 óra hosszat keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet IRC-50 kationcserélő gyantával semlegesítjük, a gyantát kiszűrjük és desztillált vízzel mossuk, majd a szűrletet a mosófolyadékkal egyesítve oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Az oszlop töltete 0,074— 0,25 mm (60/200 mesh) szemcseméretű ODS 60Á (YAMAMURA CHEMICAL LABORATORIES), az eluens víz, illetve metanol. A me16 tanolos frakciókat összegyűjtjük, bepároljuk, és maradékot liofilizáljuk. Az így kapott (31) képletű vegyület egy fehér por, amelynek tömege 90 mg. A kitermelés 79,5%.

A (31) képletű vegyület fizikai jellemzői:

'H-NMR-spektrum (500 MHz; C_SD₅N; TMS; 6); 0,892 (s, -CH₃); 2,010 (s, -NHCOCH₃); 2,400 (t, H-3ax); 3,079 (q, H-3eq). ‘

A találmány szerint előállított vegyületek autoimmun betegségek, így reuma, izületi gyulladások és sklerosis multiplex kezelésére alkalmazhatók.

Felnőttek napi adagja körülbelül 0,1 — ₁₅ 100 mg, amely egyszeri adagban, vagy előnyösen napi többszöri adagban, így 2—5 adagban adható be.

Az immunválaszra jellemző foszfolipáz A₂ és foszfolipáz C aktivitás legkisebb gát20 lási koncentrációját vizsgáltuk és ezek eredményét a következő táblázatban foglaljuk össze. (R‘ hidrogénatom, R^{1 2} nátriumatom, R³ és R⁴ azonosan a megadott szénatomszámú alkilcsoport).

Szénatomszám

Kötés helyzete

Foszfolipáz A₂juM

Foszfolipáz C juM alfa

1000

béta

1000

1,000 alfa

1000 béta

100

100 alfa

1000 béta

100

100 alfa

100 béta

100

Claims

SZABADALMI IGÉNYPONTOK sára, amelyek képletében R‘ és

1. Eljárás az (1) általános képletű szialocil-glicerolipidek — a képletben

R‘ jelentése hidrogénatom vagy acetilcsoport, R² jelentése alkálifématom vagy rövidszénláncú alkilcsoport,

R³ jelentése hidrogénatom, vagy C«H_2n+i- általános képletű csoport, ahol n értéke 1-től 30-ig terjedő egész szám lehet;

R⁴ jelentése C_mH2m+i- általános képletű csoport, ahol m értéke 1-től 30-ig terjedő egész szám lehet — és alkáliíémsóik előállítására, azzal jellemezve, hogy egy (IV) általános képletű vegyületet — a képletben Ac acetilcsoport és R²rövidszénláncú alkilcsoport — egy (V) általános képletű vegyülettel — a képletben R³ és R⁴ a fenti jelentésűek — reagáltatunk, majd kívánt esetben a kapott vegyületet alkálifém-vegyület vizes oldatával reagáltatjuk.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan (I) általános képletű vegyületek előállítá45 z 1. igénypontban meghatározott, R³ hidrogénatom, vagy CnH2n+i- általános képletű csoport, amelyben n értéke 6, 10, 18 vagy 22, és R⁴jelentése CmH_2m+i- általános képletű csoport, amelyben m értéke 6, 10, 18 vagy 22, azzal jellemezve, hogy megfelelő kiindulási vegyületeket reagáltatunk.
3. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan (I) általános képletű vegyületek előállítására, amelyek képletében R‘ hidrogénatom, R²nátriumatom, R³ és R⁴ az 1. igénypontban meghatározott, azzal jellemezve, hogy olyan kapott (I) általános képletű vegyületet, amelynek képletében R‘ acetilcsoport, R² metilcsoport, R³ és R⁴ a fenti jelentésű, nátriumvegyület vizes oldatával reagáltatunk.
4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a vizes alkálifémvegyülettel való reagáltatást tetrahidrofuránban, metanolban vagy etanolban végezzük.

lap rajz képletekkel

-9HU 199496 Β

Int.Clg C 07 Η 15/06, A 61 Κ 31/70

-10HU 199496 Β

Int.Clg C 07 Η 15/06, A 61 Κ 31/70

CD

CQ ro ro x~ χιό IO O O ro 52 x~ x to ra O O o o

P X X co jn

ÍN

X o

ro

X o

ro

GO

O

O ro ro

X X

IO a o o o

-11_HU 199496 Β

Int.Cls C

Η 15/θ⁶’

Λ 61 Κ ³¹/^7θ

S.

-12HU 199496 Β

I

Int.Clj C

H 15/06, A 61 K 31/70 θ' tn

X co θ’ o

οη

X co cT

O o

c ffl

QQ co co

Ó~ J

O O rtn

X co o

o tn

X oo

O o

CD

X o

'~rn x

o rtn

X

-13HU 199496 Β

Int.Clg C 07 Η 15/06, A 61 Κ 31/70

ÜJ o

c

CQ o

c

CQ

CM

CM in lo ri •4*

X

X

CN .Γ»

CM

CM in ri

X

ÍN

ÍN o

o in ri

X

ÍN

CN

O o

in ri

X

ÍN

ÍN o

o in ri

X

ÍN

ÍN

U

O ffl

CM ^CM

X u

'~rn

X o

-14HU 199496 Β

Int.Clj C 07 Η 15/06; A 61 K 31/70 ^C32^H60^NO11^{Na (Mw; 657}·δ0) (30)

Kiadja: Országos Találmányi Hivatal, Budapest A kiadásért felel: Himer Zoltán osztályvezető

Ns 1109. Nyomdaipari vállalat, Ungvár