HU198086B - Process for producing immunostimulatn acyl-tripeptides - Google Patents
Process for producing immunostimulatn acyl-tripeptides Download PDFInfo
- Publication number
- HU198086B HU198086B HU851217A HU121785A HU198086B HU 198086 B HU198086 B HU 198086B HU 851217 A HU851217 A HU 851217A HU 121785 A HU121785 A HU 121785A HU 198086 B HU198086 B HU 198086B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- mmol
- solution
- acid
- stirred
- evaporated
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D207/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D207/36—Oxygen or sulfur atoms
- C07D207/40—2,5-Pyrrolidine-diones
- C07D207/404—2,5-Pyrrolidine-diones with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms directly attached to other ring carbon atoms, e.g. succinimide
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D313/00—Heterocyclic compounds containing rings of more than six members having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D313/16—Eight-membered rings
- C07D313/18—Eight-membered rings not condensed with other rings
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
A találmány tárgya eljárás ímmtmsíimtiláiis és anlibakteriális hatóanyagként használható új acil-tripeptidek és gyógyszerészetileg elfogadható savaddíciós sóik előállítására.
Az imniunfarniakológia viszonylag új területe, és annak különösen az innnuninodulációval kapcsolatos része gyors ütemben fejlődik. Számos természetes előfordulású vegyületet vizsgáltak, beleértve a tuftszin tetrapeptidet, mely az N2-íl-(N2-L-treonil-L-lizii)-Lprolil]-L-arginin kémiai néven ismert. Nagy figyelmet szenteltek szintetikus peptidoglikán-származékoknak, különösen a muramil-dipeptidekként ismerteknek. Az iinmunrnodulátor és különösen az immun stimuláns hatás szempontjából vizsgált vegyületek szeles köréről adó áttekintések közül felhívjuk a figyelmet a következő munkákra; Dukar és munkatársai, Annu. Rep. Med. Chem. 14, 146-167 (1979), Lederer, J. Med. Chem. 23. 819-825 (1980) és J. Kralovec, Dtugsof the Futurc A’r.615-.638 (1983).
Immunstimuláns , peptideket számos szabadalmi leírásban ismertettek:
L-Aknil-alfa-glutávsav-N-acii-dipeptideket a német szövetségi köztársaságbeli 3 024 355 számú szabadalmi leírásban (nyilvánosságra hozva 1981. január 15-én).
D-Alanil-L-glu tamil-részeket vagy L-alanil-D-glutamil-részeket tartalmazó tetra- és pentapeptideket a 2 053 231 számú brit szabadalmi leírásban (nyilvánosságra hozva 1981. február 4-én), illetve a 3 024 281 számú német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi leírásban (nyilvánosságra hozva 1981. január 8-án); és
N-acil-L- aJa nil-alfa- D-glu tamil -tripep tid -származékokat, melyekben a C-terminális aminosav lizin vagy diamino-pimelinsav, a 3 024 369 számú német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi leírásban (nyilvánosságra hozva 1981. január 15-én): és
Ν-laktü-alanil-, glutamil-, diamino-pimelil- és katboxi-metil-amino-komponensekből álló laktil-tetrapeptideket a 11 283 számú európai szabadalmi leírásban (nyilvánosságra hozva 1980. május 28-án) ismertetnek.
További immunstimuláns polipeptidek az A általános képié tű vegyületek — ahol R1 hidrogénatomot vagy acilcsoportot;
R2 többek között hidrogénatomot, kisszenatomS'/.ámú alkilcsoportot, hídroxi-metil-, benzilcsoporíot jelent;
R3 és R4 hidrogénatomot, karboxilcsoportot, —CONR7R8 általános képletü csoportot jelentenek, ahol
R7 hidrogénatomot, adott esetben hidroxilcsoporttal szubsztituált kisszénatomszámú alkilcsoportot és
R8 mono- vagy dikarboxi-(kisszénatoniszámú)alkil-csoportot jelent;
Rs jelentése hidrogénatom vagy karboxilcsoport, azzal a kikötéssel, hogy ha az R4 és Rs szubsztitucnsck közül az egyik hidrogénatomot jelent, akkor a másik karboxilcsoportot vagy -CONR7R8 általános képletü csoportot jelent;
m = 1, 2 vagy 3 és n = 0, 1 vagy 2 és e vegyületek származékai, melyekben a karboxil- és aminocsoportok védve vannak. Ilyen vegyületeket ír 2 ie a 4 3 I I 640 és 4 322 34! számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás; a 25 482; 50 856: 51812; 53 388; 55 846 és 57 419 számú európai szabadalmi leírás.
A fenti A általános képletben az R4 szubsztituens által elfoglalt helyzetben az ismert polipeptidek egyike sem tartalmaz bázikus aminosavat.
Kitaura és munkatársai (J. Med. Chem. 25, 335— 337 (1982) az N2-(gan!ma-D-glutamil)-inezo-2(L),2’(D)-diamino-pimelinsavat írják le az A általános képletü vegyületre jellemző biológiai válasz kiváltására képes minimális szerkezetként, ahol n = 1;
R' CII3C11(OII) CO- csoportot;
R2 -CHj csoportot;
R3 és R5 —COOH csoportot;
R4 —CONHCHjCOOH csoportot; és
R® hidrogénatomot jelent.
Ezen, A általános képletü vegyület FK—156 néven ismeretes.
Az I általános képletü új acil·tripeptidek és gyógyszeiés?.etilcg elfogadható sóik hatásos immunsísmu lánsok és imniunmodulátorok, valamint baktériumellenes szerek. Az I általános képletben
R° 3—6 szénatoinszámú alkilcsoportot jelent, és x= 1,2, 3 vagy 4.
Λζ I általános kcpletű vegyületek előállítására alkalmas egyes közbenső termékek is újak. A közbenső termékek II és 111 általános képletnek, ahol R° 1—6 szénatomszámú alkilcsoportot;
Y1, Y2 és Y4 mindegyike karboxil-védőcsoportot; Y3 karboxil-védőcsoportot vagy a általános képletü csoportot jelent, ahol x = 1,2.3 vagy 4 és Rs jelentése amino-védőcsoport.
Az I általános képletü vegyületet felépítő aininosavrészek konfigurációja jelentős a vegyületek farmakológiái aktivitása szempontjából. Leghatásosabbak azok a vegyületek, melyek az 1 általános képlet megadott sztereokémiájával rendelkeznek. A természetes aminosavéhoz viszonyított sztereokémiát D- vagy L-szimbólummal jelöljük.
Az I általános képletü acil-tripeptidek számos ismert eljárással clőálHíluitók. Az eljárások magukban foglalják az aminosavak közötti neptidkötések kialakítását, ami az amino- és karboxilcsoportok, valamint a gyakori egyéb funkciós csoportok jelenléte miatt szükségessé teszi e csoportok megvédését és/vagy aktiválását, különösen a karboxilesoportét, hogy bizonyos reakciókat végrehajthassunk vagy optimáljunk.
A teljes reakeiósort az 1. rcakeiővázlat mutatja be, ahol
Z = Cbz = benzil-ox.i-karbonií-csoport,
BSA = bisz.(trimetil-szÍlil)-aeetamid,
CMEC = l-ciklohexil-3-(2-morfolino-etil)-karbodiimid-inclo-p-toiuolszulfonát,
HOSuc = N-hidroxi-szukciniurid,
NMM = N-metil-morfolin,
R — 3—6 szénalomos-alkií-csoport,
DCC = dicikiohexíi-karbodiimid.
Amint az 1. reakcióvázlatból látható, az I általános képletü tripeptidet felépítő aminosavakat úgy állítjuk
198 086 elő, hogy az acilezett glutaminsavat a diamino-pimelinsav-Iizin (vagy bázikus aminosav) dipeptidrésszel kapcsoljuk össze. Magát a dipeptidrészt úgy hozzuk létre, hogy diamino-pimelinsavat lizinnel kötünk össze a fentiek szerint. A tripeptid előállításához az egyes aminosavak kapcsolási sorrendje lényegtelen.
Az alábbi példákban bizonyos védő és aktiváló csoportokat adunk meg. A szakember előtt azonban nyilvánvaló, hogy más védő és aktiváló csoportokat is alkalmazhattunk volna. Egy adott védőcsoport kiválasztása nagymértékben függ a szokásos reagens hozzáférhetőségétől, az utóbbinak a „megvédett” vegyület oldékonyságára gyakorolt hatásától, eltávolítható ságának egyszerűségétől és egyéb csoportok jelenlététől, melyeket alkalmazása befolyásolhatna; azaz a védőcsoport szelektivitásától és eltávolításától.
Például sok reakciónál szükséges vagy legalábbis kívánatos lehet megvédeni az aminocsoportokat és/vagy a karboxilcsoportokat. A tripeptid szintéziséhez kiválasztott eljárás szükségessé teheti az egyik vagy a másik, vagy' mindkét fenti védőcsoport eltávolítását abból a célból, hogy a regenerált amino- vagy karboxilcsoporton további reakciót lehessen végrehajtani; vagyis a használt védőcsoportok reverzibilisek, és — a legtöbb esetben - egymástól függetlenül eltávolíthatók. Ezenfelül egy adott aminocsoport számára a védőcsoport megválasztása függ az illető aminocsoportnak az egész reakciósorban betöltött szerepétől. Változó labilitási szintű, azaz változó könnyedséggel eltávolítható amino-védőcsoportokat alkalmazunk. Ugyanez vonatkozik a karboxil-védöcsoportokra. Az ilyen csoportok az irodalomból ismertek; felhívjuk a figyelmet a következő munkákra: Bodanskyés munkatársai, „Peptide Synthesis”, 2. kiadás, John Wiley and Sons, N. Y. (1976); Greene, „Protcctive Groups in Organic Synthesis ”, John Wiley and Sons, N. Y. (1981); McOmie, „Protective Groups in Organic Chemistry”, Plenum Press, N. Y. (1973); és Sheppard, „Comprehensive Organic Chemistry, The Synthesis and Reactions of Organic Compounds”, Pergamon Press, N. Y. (1979), szerkesztő: E. Hasiam, 23.6 rész, 321—339. oldal.
A szokványos amino- és karboxil-védőcsoportokat a szakember ismeri. Jellemző aininosav-védőcsoportok például a következők: benzil-oxí-karbonilcsoport; szubsztituált vagy szubsztituálatlan aralkilcsoport, mint benzil-, tritil-, benzhidril- és 4-nitro-benzilcsoport; benzilidéncsoport; aril-tio-csoport, mint fcnil-tio-, nitro-fciiil-tio- és Iriklór-fenil-tiocsoport; foszforilszármazékok, mint dimetil-foszforil- és 0,0dibenzil-foszforil-csoport; trialkil-szililszármazékok, mint trimetil-szilil-csoport; és egyebek, amint a 4 322 341 számú, amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás leírás ismerteti őket és amelyeket itt hivatkozásképpen említünk. Az előnyben részesített aininovédőcsoport a benzil-oxi-karbónil-csoport. E csoport kialakítására szolgáló eljárások ismertek. Általában a megfelelő aminovegyületet benzil-oxi-karborül-kloríddal (benzü-klór-formiát) acilezzük közömbös oldószerben, mint vízben, metilén-kloridban, tetrahidrofuránban, bázis (savakccptor), például nátrium- vagy kálium-hidroxid jelenlétében, ha az oldószer víz; és — ha szerves oldószert használunk — tercier amin, mint Ci— C4-trialkil-aminok és piridin jelenlétében. Ha vizes oldószer-rendszert alkalmazunk, a reakcióelegy pH-ját 8—10, előnyösen 9 értéken tartjuk. 1’a a reagens (vagyis a vegyület. melynek aminoesopoitját meg kell védeni) bázikus csoportokat tartalma/, egyúttal savakceptorként is szolgálhat.
Az R—CO-acil-csoportot a glutaminsav reagensbe (az 1. reakeiővázlatban 2 vegyület) standard acilező eljárásokkal vezetjük be, így a glutaminsavat alkalmas savklcriddal vagy -bromiddal reagáltatva közömbös oldószerben. Előnyben részesítjük a vizes rendszereket, píldául vizes acetont, és pH 9,0-et; a pH-t alkalmas bázis, mint nátrium- vagy kálium-hidroxid hozzáadása’ al tartjuk 8,5-0,0 között. Nemvizes oldószerek is használhatók. Mégis ilyen esetekben szerves bázist, előny isen tercier amint, mint trietil-amint, N-metilmorftlint vagy piridint használunk bázisként.
A> acilezés természetesen nem alkalmas savanhidridde.’ (egyszerű vagy vegyes) is végrehajtható ismert eljárások szerint. Ha az acilező művelethez anhidridet használunk, előnyben részesítjük a vegyes anhidrideket, is különösen a vegyes karbonsav-szensav-anhidrideket.
Je lemző karboxil-védőcsoportok például a különböző észterek, mint szilii-észterek, beleértve trialkilszilil-ásztereket, trihalogén-szilil-észtereket éshalogénalkil- .zilil-észtereket; egyes hidrokarbil-észterek, mint Cj—C4-alkil-, különösen ícrc-butilészterek; benzil- és szubsztituált bcnzil-észterek, benzhidril- és tritilésztc ck; fcnacil- és ftáiímido-mctíl-ész.tcrck; egyes szubsztituált hidrokarbil-észterek, mini klór-iticíil-, 2,2,2-triklór-etil-, ciano-metil-észíer; tetrahidropiranilészter; metoxi-metil-észter; metil-tiometil-észter; védett karbazoil-észter, mint -CONH-NHR5 általános képletéi csoport, ahol Rs fentebb meghatározott amino-védőcsoportot, különösen bcnzil-oxi-karbonilcsoportot jelent; és egyebek, mint a 4 332 341 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban rnegí dottak, melyeket itt hivatkozásképpen említünk meg. Előnyben részesített karboxil-védőcsoport a —CCNH—NHR5 általános képletű csoport, álról Rs jelei tése benzil-oxi-karbonil-csoport; ezen előnyben részesített csoportot bcnzil-oxi-karbazidnak nevezzük. Különösen előnyben részesített karboxil-védőcsoport a benzilcsoport.
A védett amino- és karboxilcsoportokat ismert eljárásokkal szabad amino- és karboxilcsoport okká alakítji k át. A benzil-oxi-karbonil- és a benzilcsoportot, melyeket (a védett karboxilcsoport részeként) az, amino- és karboxilcsoport megvédésére előnyben részesítünk, palládium, főleg szénre leválasztott palládium felett katalitikus hidrogénezéssel távolítjuk el.
Λ mezo-diamino-dipimelinsav-dibenzil-oxi-karbonil-karbazidról (az alábbi 3. példa terméke) a benziloxi-karbonil-karbazid-védőcsoportot szelektíven célszerűen Icucin-anrinopeptidázzal (LAP) távolítjuk el. A reakciót vizes oldószerben, különösen víz és vízzel elegyedő oldószer (mint C]— C4-alkanol, tetrahidrofurtn, dioxán) elegyében, lúgos pH-nál, előnyösen pH 8—10 között, legelőnyösebben pH 8,5-nél hajtjuk vég c.
Λ karboxücsoport aktiválását - egy adott reakció elősegítésének eszközeként — ismert módon hajtjuk 3
198 086 végre. Λζ. 1. rcakciövá/.latban különösen előnyösen alkalmazhatók anhidridek, főleg ciklusos anhidridek; és aktivált észterek, mint például N-hidroxi-ftáliinidből és N-hidroxi-szukcinimidből származók, melyek a peptidszintézisekben használatosak.
Az 1. reakcióvázlatban a 2 és 6 képletű közbenső vegyületek alfa-szubsztituált glícinrészeket tartalmaznak és kényelmesen átalakíthatok 3, illetve 7 képletű 2,5-oxazolidindionszármazékokká (N-karboxi-anhidridek). Ezek az anhidridek megkönnyítik a 3 és 7 vegyületen végrehajtandó reakciókat. Előállításuk céljából a 2 és 6 képletű aminosav-prekurzorokat PC15 vagy SOCij reagenssel reagáltatjuk.
Az aktivált N-hidroxi-szukcinimid-észterek (például 10 képlet) aktivált észtercsoportján további reakciók segíthetők elő. A szakember előtt ismert módon más aktiváló csoportok is használhatók. Különösen fontos csoport az N-hidroxi-ftálimido-csoport, amely az N-hidroxi-szukcinimido-csoporttal azonos módon alkalmazható. Mindkét esetben dehídratáló kapcsoló reagenst használunk az aktív észter kialakítása céljából. Jellemző kapcsoló reagens az 1 -ciklohexil-3-(2morfolino-etil)-karbodiÍmid-nieío-p-tohiol -szulfonát, diciklohexil-karbodiimid, N.N’-karbonil-dümidazol, N-(3-dimetil-amino-propil)-N’-eti]-karbodiimid-hidroklorid, etoxi-acetilén, difenil-ketén és N-etii-5-fenilizoxazolidéii-3’-szulfonáÍ. A kapcsoló reagensek használatának reakciókörülménye; az irodalomból ismertek. Általában közömbös oldószert, és szobahőmérséklet és 100 °C közötti hőmérsékletet alkalmazunk. Előnyben részesítjük a fenti karbodiimid reagenseket, mivel környezeti hőmérséklet alkalmazását és a kívánt észterek kielégítő kitermelését teszik lehetővé.
A találmány szerinti termékek különféle kórokozó mikroorganizmusok, különösen Gram-ncgatív baktériumok okozta betegségek kezelésére használhatók emlősöknél, beleértve az embert. Immunstimulánsokként is használhatók fennálló, vagy klinikailag indukált immunszuppresszió következtében fertőzésekre fokozottan hajlamos egyéneknél.
A C3H/HeN törzsű Iliin egereket (Charles River Breeding Laboratory) alkalmazó kísérleti eljárás a következő: az egereket használat előtt 5 napig aklimatizáljuk, majd vagy szubkután (s.c.) vagy orálisan (p.o.) a vizsgálandó vegyület különböző hígításaival (10, 1 és 0,1 mg per kg) vagy placebóval (pirogénmentes sóoldat) kezeljük 0,2 ml térfogatban. A kezelési rend függ a használt fertőző organizmustól: -24 és 0 óra Klebsiella pneumoniae·, és -6, -5, -4 és —1 nap Escherichia coli vagy Pseudomonas aeruginosa alkalmazása előtt, A fertőző ágenst intramuszkulárisan (im.) adjuk be a csípőbe K. pneumoniae esetén, és intraperitoneálisan (ip.) E. coli és P. aeruginosa esetén. A fertőző anyagot 0,2 mi térfogatban adjuk be. A pusztulást K pneumoniae esetén 7 nap múlva, és a másik, két fertőző mikroorganizmus esetén 3 nap múlva regisztráljuk.
Tenyészet készítése:
K. pneumoniae: lefagyasztott vér-torz.stenyészctből agy-szív-infúziós agar (BH1) felszínére szélesztünk a tisztaság biztosítása céljából. Három telepet 4 kiemelünk a 18 órás icmczteuyészclbői, és 9 ml ΒΠ1 tápoldatba visszük át. A tápoldat-tenyészcíet 2 óráig 37 °C-on tenyésztjük forgó rázógépen, majd 0,2 ml-t több ΒΙΠ ferde agar felszínére szélesztünk. 18 óráig 37 °C-on inkubáljuk, utána a ferde agarakat BHI tápoldattal mossuk, a tenyészet sűrűségét ,,Spectronic 20” segítségével meghatározzuk és olyan alkalmas hígítást készítünk, amely 100% pusztulást idéz elő egérnél (L,DIU()), (körülbelül 250 CFU per állal/CFU = telepet képező egységek).
E. coli vagy P. aeruginosa: lefagyasztott vér-tőrzstenyészetből BHI agar felszínére szélesztünk a tisztaság biztosítása céljából. Éjszakai inkubálás után néhány telepet 250 ml-es Erlenmeyci lombikban levő 100 ml Difco tápagarba helyezünk át. „New Brunswick” forgó rázógépen 18 óráig 30°C-on inkubáljuk, majd 90 ml friss táptalajjal 1 :10 hígítást készítünk A kultúrát 30 °C-on (forgó rázógép, 200 fordulat per perc) 3 óráig inkubáljuk, a sűrűséget 78%-ra állítjuk be „Specíronic 20” segítségével és BHI tápoldatban olyan alkalmas hígítást készítünk, amely az egerek 90%-át elpusztítja (LD«jo) ip. injekció formájában.
Ha a találmány szerinti vegyületeket embernél baktériumellenes vagy immunstimuláns anyagként használjuk, úgy a vegyületeket orális, szubkután, intramuszkuláris, intravénás vagy intraperitoneális úton alkalmazzuk, általában készítmények formájában. E készítmények az alkalmazandó út, és a szokásos gyógyszerészeti gyakorlat alapján kiválasztott gyógyszerészeti vivőanyagot tartalmaznak. Például tabletták, pilulák, porok vagy szemcsék alakjában alkalmazhatók, melyek kötőanyagokat, mint például keményítőt, tejcukrot, bizonyos fajta agyagokat tartalmaznak. Alkalmazhatók például kapszulákban, a fenti vagy egyenértékű kötőanyagokkal elkeverve. Orális szuszpenziók, oldatok, emulziók, szirupok és elikszirek formájában is használhatók, melyek ízesítő és színező anyagokat tartalmazhatnak. A találmány szerinti hatóanyagok orális adagolásához körülbelül 50—500 mg-os tabletták vagy kapszulák a legtöbb esetben alkalmasak.
Az orvos határozza meg az egyes betegek számára legmegfelelőbb dózist, amely függ a kortól, súlytól, az illető beteg reagálásától és az alkalmazási úttól. Mégis általában felnőtteknél a kezdeti dózis körülbelül 2—100 mg/kg per nap, egyedi vagy osztott dózisokban. Az előnyben részesített orális dózistartomány körülbelül 10 -300 mg/kg/nap. Az. előnyben részesített parenterális dózis körülbelül 1,0—100 mg/kg/nap; előnyben részesítjük a mintegy 0,1—20 mg/kg/nap tartományt.
Gyógyszerkészítményeket — beleértve egységdózis formákat — is előállíthatunk, melyek a találmány szerinti vegyületeknek a fenti célokra való felhasználására alkalmasak. Mint említettük, a dózisformát egyszeri vagy ismételt dózisokban adjuk be a kívánt hatás eléréséhez szükséges napi adag bevitele céljából.
1. példa
N,N'-DÍbenzil-oxi-karbonil-mezo-diamino-p;me!in· sav
Ί
198 086
209,4 g (1,1 mól) inczo-dimniito-pimclinsavat 2200 ml vízben oldunk, 2 n nátrium-hidroxid-oldattal pH 9;0-ig meglúgosítjuk, és jeges fürdőben 10 °C-ra lehűtjük, majd 30 perc alatt hozzáadunk 450,5 g (2,64 mól) benzil-klór-formiátot. A hozzáadás folyamán a plí-t 2n nátrium-hidroxid-oidattal 9,0 értéken tartjuk. 2,5 óra múlva az oldatot 3X1 liter etil-acetáttal extraháljuk. A vizes oldatot 10%-os sósavoldattal pH 1,5-ig megsavanyítjuk és kétszer 1 liter etil-acetáttal extraháljuk. A kivonatokat egyesítjük, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, szűrjük és bepároljuk, és a kapott olajat szobahőmérsékleten 920 ml kloroformból kristályosítva 170 g (34%) cím szerinti vegyületet kapunk.
Olvadáspont: 129—133 °C.
IR (infravörös spektrum) (KBr): 2700, 1720, 1600 cm-1.
NMR (mágneses magrezonancia spektrum) (D6-DMS0): delta 7,1-7,4 (ni, 1011), 5,2 (s, 411), 4,0- 4,2 (m, 2H), 1,2-1,6 (m, 6H).
[a]D = 0,0 (c= 1,2; MeOH).
2. példa mezo-Diamino-pimelinsav-di-N-karboxianhidrid
62,0 g (140 millimól) N,N-dibenzil-oxi-karbonilmezo-diainino-pimelinsav és 1240 ml vízmentes metilén-kloríd szuszpenzióját nitrogénatmoszféra alatt lehűtjük 10 °C-ra, és egy adagban 62,0 g (300 millimól) foszfor-pentakloridot adunk hozzá. A képződött sarga oldatot 1 óráig 10 °C-on, majd 20 óráig szobahőmérsékleten tartjuk. A szuszpenziót leszűrve, a terméket többször vízmentes metilén-kloriddal mosva, és nagyvákuumban megszárítva 29,9 g (91%) di-Nkarboxianhidridet kapunk.
Olvadáspont: 280 C.
IR (KBr): 3250, 1840, 1760 cm-1.
NMR (D6-DMS0): delta 4,2-4,4 (m, 2H), 1,22,0 (m, 611).
3. példa mező-Diamino-pimelmsav-dibenzil-oxi-karbonilkarbazid-diacetdt
1,4 g (8,5 millimól) benzil-karbazátot 4 ml jégecetben oldunk, keverés közben lehűtjük 10 °C-ra, és a képződött iszapos anyagot 1,0 g (4,1 millimól) mezo-diamirto-pimelinsav-di-N-karboxanhidriddel kezeljük. A reakcióelegyet 2 órán át lassan szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni, és a képződött olajat éterrel eldörzsölve 2,37 g (95%) cím szerinti vegyületet kapunk.
Olvadáspont. 158—161 °C.
IR (nujol): 2850, 1700 cm-1.
NMR (CD30D): delta 7,30 (s, 10H), 5,10 (s,4H),
3,30 (m,2H), 1,5-1,8 (m,6H).
4. példa mez j-Diamino-pimelinsav-(D)-mono-benzil-oxikarl rmil-karbazid
26,2 g (43 millimól) mc/.o-diamiiio-piinelinsavdibenzd-oxi-karbonil-karbazid-diacetát 325 ml metanollal és 750 ml vízzel készült oldatát pH 8,5-ig 2n nátrium-hidroxid-oldattal kezeljük. A kapott oldatot 2200 egység leucin-aminopeptidázzal kezeljük („Sign a Hog Kidney”, Type 111 suspension, Sigma Chemical Company, St. Louis, MO, USA) és szobahőmérsékleten 5 napig keverjük, miközben a plí-t 2n nátrium-liidroxid-oldattal 8,5 értéken tartjuk. A met mólt vákuumban eltávolítjuk, és a kapott vizes oldatot 2X200 ml etil-acetáttal mossuk. A vizes oldatot H?—21 gyantaoszlopra visszük fel (a HP—21 gyöngv formájú, makrorctikuláris térhálós sztirol/divinj)-b ίιζοΙ kopolimcr. Beszerzési helye: V. ('·. F. Corporation, 420 Lcxington Avenuc, New York, NY). Az oszlopot 2 liter vízzel mossuk, majd a terméket vizes netanollal (50:50) eluáljuk. Az eluátum bepárlás; után kapott terméket éterrel eldörzsölve, szűrve és szárítva 14,1 g (95%) cím szerinti vegyületet kapunk.
Oh álláspont: 204—210 °C (bomlás).
ÍR (nujol): 2200-3600, 1720, 1660, 1580 cm-1.
NJV R (CD3OD): delta 7,45 (s, 5H), 5,20 (s, 2H), 3,50 (n,2H), 1,4-2,1 (m,6H).
[a]D = —16,8 (c= l,0;AcOH).
5, példa
N,N -Dibenzil-oxi-karbouil-mezo-diammo-piinelinsai -mono-benzil-oxi-karbonil-karbazid
8 g (35 millimól) mezo-diainino-pimelinsav-(D)mono benzil-oxi-karbonil-karbazidot 270 ml vízmentes m Hilén-kloridban oldunk, 56.8 ml (280 millimól) bisz ( rimetil-szilil)-acetamiddal kezeljük, és szobahőmérsékleten, nitrogénatmoszféra alatt 18 óráig keverjük. az oldatot lehűtjük —15 °C-ra, és 5 percig 15,0 g (88 millimól) benzil-klór-rormiáltal kezeljük. Λ reakcióelegyet 1 óráig —15 °C-on keverjük, majd 18 órán át szobahőmérsékleten tartjuk. Az oldatot híg sósavoldat al megsavanyítva, 1 óráig keverve, majd leszűrve 13,6 ’ (64 %) cím szerinti terméket kapunk.
Olvadáspont: 141—145 °C.
IR (KBr): 3300, 1740, 1715, 1685, 1660 cm-1.
NMR (CD3OD): delta 7,30 (s, 15H), 5,10 (s, 611),
4,10 in, 2H), 1,40-2,00 (m, 611).
[ö]d = + 18,2 (c = 0,6; MeOH).
6. példa
Biiizil-oxi-karbonil-mezo-diamiiio-piinelinsai’m mo-benzil-oxi-karbonil-karbazid
130 ml tiszta tioinl-klorid-oldathoz az 5. példa szerint előállított vegyület 13,0 g-ját (21 millimól) adjuk. Az oldatot szobahőmérsékleten 2 óráig kever5
198 086 jük, bepároljuk és nagyvákuumban 1 óráig szárítjuk. A kapott terméket 130 ml ecetsavban oldjuk, 67 ml In sósavoldattal kezeljük és szobahőmérsékleten 18 óráig keverjük. Az elegyet bepároljuk, a kapott iszapos anyagot 100 ml vízben oldjuk és telíiett nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal semlegesítjük. A szuszpenziót 1 óráig keverjük, átszűrjük, vízzel mossuk és szántjuk. 9,7 g (93%) cím szerinti vegyületet kapunk.
Olvadáspont: 201-205 °C (bomlás).
IR (KBr): 3300, 1715, 1690, 1600 cm-1.
NMR (D6-DMS0): delta 7,2-7,4 (széles s, 10H)
5,25 (s, 2H), 5,20 (s, 2H), 4,40 (m 2H), 1,6-2,5 (m, 6H).
[a]D = 4-35,1 (c = 0,4; MeOH).
kapunk (14,0 g), melyet híg sósavoldatban keverünk, leszűrünk és etil-acetáttal mosunk. A vizes szűrletet kétszer etil-acetáttal extraháljuk, a szerves rétegeket egyesítjük, vízmentes magnézium-szulfát felett szárít iuk, átszűrjük és bepároljuk. A képződött olajat hexánnal eldörzsölvc 7,9 g (86%) cím szerinti észtert kapunk.
Olvadáspont: 76-79 °C.
ÍR (nujol): 3300, 2700-3100, 1730, 1700, 1645 cm-1.
NMR (CDCh): delta 7,35 (s, 511), 5,20 (s, 211), 4,70 (in, 111), 1,85-2,50 (ni, 611), 1,55-1,70 (m, 2H), 1,10-1,40 (ni, 6H), 0,75 (t, 3H), ja]D = 27,6 (c = 0,6; MeOH).
7. példa
N-Heptanoil-D-glutaminsav
75,0 g (510 millimól) D-glutaminsavat 1 liter vizes acetonban (50:50) oldunk, cs a pll-t 2n nátriumhidroxid-oldattal 9,0-rc állítjuk be. Az oldatot lehűtjük 10 °C-ra és 45 percig 114,2 g (770 millimól) heptanoil-kloriddal kezeljük, a pll-t 2n nátrium Hidroxid-oldattai 9,0 értéken tartva. A reakcióelegyet 3 órán át szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni. Az acetont vákuumban lepároljuk, és a kapott vizes oldatot híg sósavoldattal megsavanyítjuk és háromszor 700 ml etil-acetáttal éxtraháljuk. A kivonatokat egyesítjük, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, szűrjük és bepároljuk. A kapott olajat hexánnal eldörzsölve 109,8 g (83%) cím szerinti terméket kapunk.
Olvadáspont: 92-96 °C.
IR (nujol): 3300, 2700-3250, 1720, 1625 cnf1.
NMR (D6-DMS0): delta 4,20 (rn, IH), 2,28 (t, 2H), 2 20 (t, 2H), 1,85-2,05 (m, IH), 1,65-1,85 (m, IH), 1,40-1,60 (m, 2H), 1,15-1,30 (ni, 6H), 0,75 (t, 3H).
[a]D = 4-9,6 (c = 1,0; MeOH).
8. példa
N-Heptanoil-D-glutaminsav-alfa-benzii-észter
108,8 g (420 millimól) N-heptanoil-D-glutaminsavat és 50,6 g (500 millimól) trietil-amint 135 ml dimetil-formamidban oldunk, az oldatot 85,7 g (500 millimól) benzil-bromiddal kezeljük, és nitrogénatmoszférában 60 óráífe keverjük. A reakciókeveréket 1 liter etil-acetátba öntjük és egymás után kétszer 500 ml híg sósavoldattal és vízzel mossuk. Az etilacetátos oldatot 500 ml In nátrium-hidroxid-oldattal mossuk. A vizes lúgos fázist híg savval megsavanyítjuk, és négyszer 500 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített etil-acetátos kivonatokat fölös mennyiségű diciklohexil-am innal kezeljük és 18 óráig keverjük. A szuszpenziót átszűrjük, friss etil-acctátbau (400 ml) szuszpendáljuk, 2 óráig állni hagyjuk és újra átszűrjük. Vákuumban megszárítva 49,1 g diciklohexil-amin-sót 6
9. példa
N-heptanoil-D-glulaininsav-alfa-benzil-gaimna(N-hidroxi-szuketnimidJ-diészter
7,68 g (22 millimól) N-heptanoíI-D-glutaminsavall'a-benzil-észtert és 6,1 g (51 millimól) N-hidroxiszukcinimidet 220 ml clil-acctátban oldunk, és 22,9 g (51 miilimól) l-ciklohexi!-3-(2-morfolino-elil)-karbodiinrid-nieto-p-toluolszulfonáttal kezeljük. Az oldatot 2 napig szobahőmérsékleten keverjük, majd 150 mi vízbe öntjük. A rétegeket szétválasztjuk és az etilacetátos részt egyszer vízzel, egyszer sóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, szűrjük cs bepároljuk. Éterre! eldörzsölve 8,0 g (82%) cím szerinti észtert kapunk.
Olvadáspont: 85—89 °C.
IR (nujol): 3350, 2800-3000, 1810, 1790, 1745, 1650 cm-1.
NMR (CDClj): delta 7,30 (s, 5ÍI), 5,20 (s, 211), 2.8 (széles s, 411), 2,0-2,7 (m, 6H), 1,50-1,70 (m, 2H), 1,10-1,5 (ni, 6H), 0,80 (t,3H).
10. példa
N-Iíeptanoil-ganvita-D-glutcjnil-íalfa-benzil-észter)bcnzil-oxi-karboiiil-Dj-inczo-diamino-pimelÍnsav(D)-benzil-oxi-karbomi-karbazid
A 6. példában előállított vegyület 4.22 g-ját (9millimói) és 0 9 g ( millimól) N nietil-morfolint 200 ml 20%-os vizes tetrahidrofuránban oldunk, és 4,0 g (9 millimól) N-heptanoil-D-glutanűnsav-alfa-benzilgamma-(N-hidroxí-szukcinimid)-diészterrel (a 9. példa terméke) kezeljük. Az elegyet szobahőmérsékleten 2 napig keverjük, bepároljuk, majd 60 mi 1 n sósavoldattal és 200 ml etil-acetáttal kezeljük. A szerves rétegeket egyesítjük, egyszer In sösavoldattal, egyszer sóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, átszűrjük és bepároljuk. Etil-aectátból kristályosítva 4,94 g (69%) cím szerinti vegyületet kapunk.
Olvadáspont: 139-141 °C.
ÍR (nujol): 3300 2550, 1680, 1640 cn .
NMR (Dft-OMSO): delta 7,30 (széles s, 15Í1),
5,12 (s, 2H), 5,08 (s, 2H), 5,00 (s, 2H), 4,25 (ni, Hl)
-611
198 086
4,15 (m, 1H), 4,00 (in, 1H), 2,25 (t, 2H), 2,10 (t, 2H), 1,20-2,00 (in, 1611), 0,80 (t, 3H).
[a]° = +22,4 (c = 0,3; McOH).
11. példa
N-Ileptanoil-gamma-D-glutamil-(alfa-be)izil-észter)beiizil-oxÍ-karbonil-(D)-niezo-diainiiio-pitnclinsav(D)4benzil-oxi-karbonil-karbazidj-L-(N-hidroxiszukcinimidfészter
A 10. példában előállított vegyület 3,70 g-ját (4,6 millimól) és 0,64 g(5,52 millimól) N-liidroxi-szukciniinidet 150 ml 50%-os vizes dioxánban oldunk, lehűtjük 10 °C-ra, és egy adagban 1,35 g (5,06 millimól) N.N'-diciklohexil-karbodiimíddel kezeljük. Az oldatot 2 óráig 10 °C-on keverjük, majd a keverést 18 óráig szobahőmérsékleten folytatjuk, ismét lehűtjük és átszűrjük, A szűrletet bepároljuk, etilacetátban újra feloldjuk, átszűrjük és bcpároljuk. A kapott sziláid anyagot éterrel cldörz.söive 3,50 g (85%) cím szerinti észtert kapunk.
Olvadáspont: 107—110 °C.
IR (KBr): 3600, 3100, 3000, 2950, 1810, 1740, 1710, 1645 cm-1,
NMR (D6-DMS0): delta 7,35 (széles s, 15H),
5,12 (s, 211), 5,10 (s, 2H), 5,00 (s, 2H), 4.50 (m, HÍ).
4,30 (in, III), 4,10 (in, 1H), 3,40 (széles s, 411), 1,20-2,40 (m, 20H), 0,85 (t, 3H).
12. példa
N-lleptanoil-gamma-D-glutainil-(alfa-bciizil-észter)benzil-oxi-karbonil-(D)-mczo-diamiiiO-pimclitisav(D)-(benzü-oxi-karbonil-karbazid)-(L}-N*-(alfabenzil-oxi-karbonil) -L-lizin
0,75 g (2,7 millimól) alfa-benzil-oxi-karbonil-Llizin és 30 ml vízmentes metilén-klorid szuszpenzióját
2,2 g (10,7 millimól) bisz(trimetil-szilil)-acetamiddal kezeljük és szobahőmérsékleten 18 órán át keverjük. Ezt az oldatot keverés közben, 5 °C-on all. példa szerint előállított észter 100 ml metilén-kloriddal, és 50 ml tetrahidrofuránnal készült oldatához adjuk. A képződött oldatot 1 óráig 5 °C-on keverjük és lassan szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni. Az oldatot bepároljuk, 300 ml 0,7 M sósavoldattal kezeljük, és háromszor etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített etil-acetátos fázisokat egymás után vízzel és sóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, szűrjük és bepároijuk. A maradékot minimális mennyiségű forró etil-acetátban oldjuk, lehűtjük, és szűrjük. 2,06 g (80%) cím szerinti vegyületet kapunk.
Olvadáspont: 154—157 °C.
IR (KBr): 3600-3100, 3000, 2900, 1740, 1690, 1640 cm1.
NMR (D6-DMSO): delta 7,30 (széles s, 20H), 5,14 (s, 2H), 5,09 (s, 211), 5,02 (s, 211), 4,98 (s, 211), 4,30 (m, 1H), 4,15 (m, III), 3,95 (m 211), 3,00 (in 211), 2,20 (t, 3H), 2,15 (t, 3H), 1,10-2,10 (m, 22H), 0,85 (t, 3H).
13. példa
N-Ilcptanoil-gainma-D-glutamil-L-mezo-diaminopimelinsav-Ne-L-liziii
A 12. példa szerint előállított védett tripeptid terméket 250 mg 10% Pd/C katalizátorral 100 ml 20%-os vizes ecetsavoldatban. 3,45 · 10s Pa hidrogéngáz nyomásnál 24 óráig hidrogénezünk. Az. oldatot
1θ gáztalanitjuk, átszűrjük és a szűrletet bepároljuk. A maradékot 80 ml 0,1 n kénsavoldatban oldjuk, lehűtjük 5 °C-ra és 0,44 g (2,06 millimól) nátriummetaperjodáttal kezeljük. A barna oldatot 1 óráig 5 °C-on keverjük, telített nátrium-hidrogén-szulfitoidatot csepegtetünk hozzá, amíg áttetsző nem lesz, majd HP—21 gyantaoszlopra visszük fel. Az oszlopot vízzel mossuk, majd a kívánt vegyületet 50%-os vizes metanollal eluáljuk. Az eluátumot be2θ párolva 0,45 g (88%) cím szerinti acil-tripeptidet kapunk.
Olvadáspont: 220 °C (bomlás).
IR (Klh ): 3650 2700, 1710, 1650, 1600 cin-1. NMR (t>2O): delta 4,38 (m, 111), 4,22 (m, Ili), 25 4,10 (m, 211), 3,25 (in, 2H), 2,45 (t, 2H), 2,35 (t,
2H), 1,2-2,25 (m, 22H), 0,85 (t, 3H).
[o]D = —18,8 (c = 0,5;H2O).
14. példa
N-Heptanoil-gamma-D-glutamil-{ alfa-benzil-ész ter)35 beiizil-oxi-karboml-fDJ-meso-diaimnn-pímclinsav(1))-( benzil-oxi-karbazidj-f L) -Nt-(N°í-acetil)L-lizin-metil-ószter
0,895 g (3,75 millimól) Ne-acetil-L-lizin-metil-ész40 ter-hidrokloridot, a 10. példa szerint előállított védett dipcplid termek 2,0 g-ját (2,50 millimól) és 0,38 g . (3,75 millimól) N-metil-morfolínt 200 ml tetrahidrofuránban oldunk, lehűtjük 0 °C-ra és 0,51 g (3,75 millimól) 1-hidroxi-benzotriazolt adunk hozzá. A kapott oldatot 10 percig keverjük és 2,12 g (5,0 millimól) l-ciklohexil-3-(2-morfolino-etií)-karbodiimid-meto-p-toluolszuifonáttal kezeljük. Az oldatot szobahőmérsékletre melegítjük fel és 72 óráig keverjük, A reakcióelegyet bepároljuk, a maradé59 kot 200 ml etil-acetátban oldjuk, és az oldatot 200 ml 2,5%-os vizes sósavoldattal mossuk. A képződött szuszpenziót a szerves és vizes fázis szétválasztása nélkül átszűrve fehér szilárd anyagot kar- púnk, melyet forró tetrahidrofurúnból és éterből ' 0 átkristályosítunk. 1,64 g (66%) cím szerinti vegyületet kapunk.
Olvadáspont: 174—176 °C.
ÍR (KBr): 3600-3100, 3000, 2950, 1740, 1690, eo 1660, 1640 cm-1.
NMR (D6-DMS0): delta 7,35 (széles s, 15H), 5,13 (s, 2IJ), 5.09 (s, 211), 5,00 (s, 211). 4,30 (m. Hí),
4,18 (m, 211), 4,00 (m. 111), 3,60 (s, 311), 3,05 (m, 2H), 2,22 (t, 2H), 2,15 (t, 2H), 1,10-2,10 (m, 22H),
1,85 (s, 3H), 0,85 (t, 3H).
-713
198 086
15. példa
N-Heptanoil-gamim-D-glutamil-L-mezo-diaminopimelinsav-ÁO-(Na-acetÍl-L-lizin-metil-észter)
A 14. példa szerint előállított védett tripeptid termék 1,0 g-ját (1,01 millimól) és 250 mg 10% Pd/C katalizátort 50 ml 20%-os ecetsavban oldva 3,45 · 10s Pa hidrogénnyomás alatt 1 óráig hidrogénezünk. Az oldatot gáztalanítjuk, szűrjük és bepároljuk. A maradékot 50 ml vízben, és 1 ml tetrahidrofuránban oldjuk, és kénsavval a pH-t 2,0 -re állítjuk be. Az oldatot lehűtjük 5 °C-ra és 475 mg (2,22 millimól) nátrium-mclapcrjodátot adunk hozzá, 1 óráig keverjük, majd telített nátrium-hidrogénszulfit oldat hozzácsepegtetése útján feltisztítjuk. Az oldatot HP-21 gyantaoszlopra visszük fel, vízzel mossuk és a terméket 1 liter 30%-os vizes metanollal eluáljuk. Az oldatot bepárolva, és a képzó'dött szilárd anyagot éterrel eldörzsölve 434 mg (70%) cím szerinti terméket kapunk.
Olvadáspont: 140 °C (bomlás).
IR (KBr): 3600-3100, 2950, 2850, 1740, 1640, 1620 cm ’.
NMR (D2O): delta 4,35 (m, 2H), 4,20 (m IH)
3,80 (m, IH), 3,80 (s, 311), 3,20 (m, 211), 2,45 (t, 211).
2,30 (t, 211), 1,20 -2,25 (m, 2211), 2,05 (s, 3Π), 0,85 (t,3H).
[a]^s = -22,2 (c = 0,5;H2O).
16. példa
N-Heptanoü-gamma-D-glutamil-(alfa-benzil-észter)benzil-oxi-karbonil-(D fmezo-diamvio-pimelinsav(D)-benzil-oxi-karbonil-L-Ne -(Na -acetil)-L -lizm
0,50 g (2,67 millimól) N-acetil-L-lizin és 2,45 g (12,0 millimól) bisz(trimetil-szijil)-aceta:nid 50 ml vízmentes metilén-kloriddal készült oldatát szobahőmérsékleten 18 óráig keverjük. Ezután fecskendővel a 10. példa szerint előállított termék vegyes anhidridjének —15 °C-ra lehűtött oldatához adjuk hozzá [az utóbbit úgy állítjuk elő, hogy 0,29 g (2,24 millimól izobutil-klór-formiátot adunk 1,78 g (2,2 mülimól) 11. példa szerint előállított termék és 0,24 g (2,2 millimól) N-metil-morfolin 100 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készült oldatához]. A reakcióelegyet 1 óráig —15 °C-on és 3 óráig szobahőmérsékleten keverjük, majd bepároljuk, 200 ml ctil-acetáíban oldjuk, és 200 ml 2,5%-os vizes sósavoldatlal mossuk. Az cíil-acetátos réteget elválasztva, és bepárolva fehér szilárd anyag képződik. Éterrel eldörzsölve 1,37 g (63%) cím szerinti terméket kapunk.
Olvadáspont: 170-175 °C.
ÍR (KBr): 3600-2850, 1740, 1680, 1750, 1750, 1600 cm l.
NMR (Dé-DMS0): delta %,35 (széles s, 15H),
5,12 (s, 2H), 5,08 (s, 2H), 5,02 (s, 2H), 4,30 (m IH),
4,15 (m, 2H), 4,0 (m, IH), 3,05 (m, 2H), 2,25 (m, 2H), 2,15 (t, 2H), 1,90 (s, 3H), 1,15-1,85 (m, 22H) 0,85 (t, 3H).
17. példa
N-Heptanoil-gamma-D-gliÍtamil-L-mezo-diaminopimelinsav-Ne-f'Na-acetil)-L-lizin
A 16. példa termékének 1,2 g-ját (1,23 millimól) 50 ml 20%-os vizes ecetsavoidatban 330 mg 10%-os Pd/C katalizátorral kezeljük, és 3,45 - 10s Pa hidrogéngáz-nyomáson 1 óráig hidrogénezzük. Az oldatot gáztalanítjuk, szűrjük és bepároljuk. A képződött olajat 50 ml vízben oldjuk, lehűtjük 5 °C-ra és kénsavval pH 1,5—2,0-ig megsavanyítjuk. A kapott oldatot ezután 0,58 g (2,7 millimól) nátrium-metaperjodáttai kezeljük, 1 óráig keveijük, majd áttetsző oldal képződéséig telített nátrium-hidrogén-szulfitoldatot adunk hozzá. Ezután HP—21 gyantaoszlopra visszük fel, és az oszlopot 250 ml vízzel mossuk. 250 ml 50%-os vizes metahollal eluálva, és az eluátumot bepárolva 0,55 g (74%) cím szerinti terméket kapunk.
Olvadáspont: 220 °C (bomlás).
IR (KBr): 3600-2900, 2850, 1720, 1640, 1540 cm-1.
NMR (D2O): delta 4,30 (széles m, 3H), 3,80 (t, IH), 3,25 (m, 2H), 2,45 (t, 2H), 2,35 (t, 2H), 1,22,3 (m, 22H), 2,05 (s, 3H), 0,85 (t, 3H).
[tt]D = -17,6 (c = 0 5; II2O).
18. példa
N-llcptanoil-gamita-D-glutamil-(alfa-bcnzi!-észter)L-mezo-diaminopimctinsav- [(D)-benzil-oxi-karbonil-(D)-benzil-oxi-karbonil-karbazid\-Na-alfa-bcn· zil-oxi-karbonil-L-ornitin
0,59 g (2,2 millimól) alfa-benzil-oxl-karbonií-L-ornitin és 80 ml vízmentes metilén-klorid szuszpenzióját
1,81 g (8,9 millimól) bisz(triinetil-szilil)-acetamiddal kezeljük, és szobahőmérsékleten 3 óráig keverjük. A képződött oldatot hozzáadjuk all. példa észter-termékének 70 ml tetrahidrofuránnal készült oldatához és szobahőmérsékleten 3 napig keverjük. A kapott oldatot bepároljuk és a maradék olajat 500 ml 0,7 n vizes sósavoldatía! és 350 ml etil-acetáttal kezeljük. A kétfázisú oldatot 1,5 óráig keverjük,a fázisokat szétválasztjuk, és a szerves réteget bepároljuk és éterrel eidörzsöljük, 1,95 g (84%) cím szerinti vegyületet kapunk.
Olvadáspont: 167—171 °C.
IR (KBr) 3600-3100,2950,1740,1695,1640 cm1
NMR (D6-DMS0) delta 7,40 (s, 20H), 5,12 (s, 2H),
5,10 (s, 211),5,05 (s, 211), 5,00 (s, 2H), 4,30 (m, IH),
1,18 (m, 111), 4,00 (m, 211), 3,10 (in, 211), 2,25 (t, 2H), 2 15 (t, 2H), 1,05-2,10 (m, 20H), 0,85 (t, 3H).
19. példa
N-IIeptanoil-gainma-D-ghitamil-L-inezo-diaminopi»ielinsav-Na-L-omitin
A 18, példa termekének 1,40 g-ját (1,33 millimól) és 400 mg 10% Pd/C katalizátort 150 ml 20%-os vizes ecetsavoidatban 3,103 - 105 Pa hidrogéngáznyomáson
-811
198 086
4,15 (ni, IH), 4,00 (m, IH), 2,25 (f, 2H), 2,10 (t, 2H), 1,20-2,00 (in, 16H), 0,80 (t, 3H).
[a]D = + 22,4 (c = 0,3; MeOH).
11. példa
N-Heptanoil-gamma-D-glutamilfalfa-benzil-észter)· bcnzil-oxi-karhoiiil-fDj-ntezo-tliainino-pimcUnsav(D)f benzil-oxi-karboi'.il-karbazid)-L-(N-hidroxiszukcinimidj-észter
A 10. példában előállított vegyület 3,70 g-ját (4,6 millimól) és 0,64 g (5,52 millimól) N-hidroxi-szukcinimidet 150 ml 50%-os vizes dioxánban oldunk, lehűtjük 10 °C-ra, és egy adagban 1,35 g (5,06 millimól) Ν,Ν'-diciklohexil karbodiitniddel kezeljük. Az oldatot 2 óráig 10 °C-on keverjük, majd a keverést 18 óráig szobahőmérsékleten folytatjuk, ismét lehűtjük és átszűrjük. A szűrletet bepároljuk, etilacetátban újra feloldjuk, átszűrjük és bepároljuk. A kapott szilárd anyagot éterre! eldörzsölve 3,50 g (85%) cím szerinti észtert kapunk.
Olvadáspont: 107-110 °C.
IR (KBr): 3600, 3100, 30C0, 2950, 1810, 1740, 1710, 1645 cm-1.
NMR (D6-DMS0): delta 7,35 (széles s, 1511),
5,12 (s, 211), 5,10 (s, 2H),5,00(s, 211), 4,50 (m, 111),
4,30 (in, IH), 4,10 (m, IH), 3,40 (széles s, 411), 1,20-2,40 (m, 20H), 0,85 (t, 3H).
12. példa
Ndlcptanoil-gamma-D-glutamil-(alfa-benzil-észtcr)benzil-oxi-karbonilfD}-mczo-diamino-pimeliiisav(D) ·( benzil-oxi-karbonil-karbazid)-(L)-Ne-(alfabenzil-oxi-karbonill-L-lizin
0,75 g (2,7 millimól) alfa-bcnzil-oxi-karbonil-Llizin és 30 ml vízmentes metilén-klorid szuszpenzióját 2,2 g (10,7 millimól) bisz(trimetil-szi!il)-acetamiddaí kezeljük és szobahőmérsékleten 18 órán át keverjük.
Ezt az oldatot keverés közben, 5 °C-on all. példa szerint előállított észter 100 ml metilén-kloriddal, és 50 ml tetrahidrofuránnal készült oldatához adjuk.
A képződött oldatot 1 óráig 5 °C-on keverjük és lassan szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni. Az oldatot r, bepároljuk, 300 ml 0,7 M sósavoldattal kezeljük, és háromszor etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített etil-acetátos fázisokat egymás után vízzel és sóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, szűrjük és bepároljuk. A maradékot minimális 55 mennyiségű forró etil-acetátban oldjuk, lehűtjük, és szűrjük. 2,06 g (80%) cím szerinti vegyületet kapunk.
Olvadáspont: 154-157 °C.
IR (KBr): 3600-3100, 3000, 2900, 1740, 1690,
1640 cm-1. {0
NMR (D6-DMS0): delta 7,30 (széles s, 20H), 5,14 (s, 211), 5,09 (s, 211), 5,02 (s. 211),4,98 (s, 211),4,30 (m, ill), 4,15 (in, 111), 3,95 (m 211), 3,00 (in 211),
2,20 (t, 311), 2,15 (t, 3H), 1,10-2,10 (m, 22H),
0,85 (t, 3H). 35
13. példa
Ν-Ηΰριανιυΐ1^α<ηιηα-Ο^ΙιιίαιηΐΙ-1-ιηεζο-άϊαηιΰιο· pimelmsav-N'-L-lizin
A 12. példa szerint előállított védett tripeptid terméket 250 mg 10% Pd/C katalizátorral 100 ml .;0%-os vizes ecetsavoldatban, 3,45 10s Pa hidrogéngáz nyomásnál 24 óráig hidrogénezünk. Az oldatot gáztalanítjuk. átszűrjük és a szűrletet bepároljuk. A marade'kot 80 ml 0,1 n ke'nsavoídatban oldjuk, lehűtjük 5 °C-ra és 0,44 g (2,06 millimól) nátriummetapeijodáttal kezeljük. A barna oldatot 1 óráig 5 °C-on Levetjük, telített nátriuin-hidrogén-szulfítoldatot csepegtetünk hozzá, amíg áttetsző nem lesz, majd HP—21 gyantaoszlopra visszük fel. Az oszlopot vízzel mossuk, majd a kívánt vegyületet 50%-os vizes metanollal eluáljuk. Az eluátumot bepárolva 0,45 g (88%) cím szerinti acil-tripeptidet kapunk.
Olvadáspont: 220 °C (bomlás).
ÍR (KBi): 3650 -2700, 1710, 1650, 1600 cm“J.
NMR (DjO): delta 4,38 (in, 1Π), 4,22 (tn, 111),
4,10 (m, 2H), 3,25 (m, 211), 2,45 (t, 211), 2,35 (t, 2H), 1,2-2,25 (m, 22H), 0,85 (t, 3H).
[a]D = _i8,8 (c = 0,5;H2O).
14. példa
N-Heptanoil-gamma-D-glutaimlialfa-benzil-észter)benzil-oxi-karbonilfDj-meso-diaimno-pimelhisav(D)-(beiizil-oxi-karbazid) -( L)-Ne-(Na-acetil)L-lizin-ineiil-észtcr
0,895 g (3,75 millimól) N“-acetil-L-lizin-metil-észter-hidrokloridot, a 10. példa szerint előállított védett dipeptid tennék 2,0 g-ját (2,50 millimól) és 0,38 g (3,75 millimól) N-inetil-morfolint 200 ml tetrahidrofuránban oldunk, lehűtjük 0 °C-ra és 0,51 g (3,75 millimól) l-hidroxi-benzotriazolt adunk hozzá. A kapott oldatot 10 percig keverjük és 2,12 g (5,0 millimól) 1 - ciklohexil - 3 - (2- morfolino -etil) - karbodiimid-meto-p-toluoiszulfonáttal kezeljük. Az oldatot szobahőmérsékletre melegítjük fel és 72 óráig keveijük. A reakcióelegyet bepároljuk, a maradékot 200 ml etil-acetátban oldjuk, és az oldatot 200 ml 2,5%-os vizes sósavoJdattal mossuk, A képződött szuszpenziót a szerves és vizes fázis szétválasztása nélkül átszűrve fehér szilárd anyagot kapunk, melyet forró tctrabidrofuránból és éterből átkristályosítunk. 1,64 g (66%) cím szerinti vegyületet kapunk.
Olvadáspont: 174-176 °C.
ÍR (KBr): 3600-3100, 3000, 2950, 1740, 1690, 1660, 1640an1.
NMR (Dfi-DMS0): delta 7,35 (széles s, 15H), 5,13 (s, 211), 5,09 (s, 211), 5,00 (s, 211), 4,30 (in. Ili),
4,18 (m, 211), 4,00 (m. Hl), 3.60 (s, 311), 3,05 (m, 2H), 2,22 (t, 2H), 2,15 (t, 2H), 1,10-2,10 (m, 22H), 1,85 (s, 3H), 0,85 (t, 3H).
-913
198 086
75. példa
N-Heptanoü-gamma-D-glutamil-L-mezo-diaminopimelinsav-A*-{Na-acetü-L-lizin-metil-észter)
A 14. példa szerint előállított védett tripeptid termék 1,0 g-ját (1,01 millimól) és 250 mg 10% Pd/C katalizátort 50 ml 20%-os ecetsavban oldva 3,45-105 Pa hidrogénnyomás alatt 1 óráig hidrogénezünk. Az oldatot gáztalanítjuk, szűrjük és bepároljuk. A maradékot 50 ml vízben, és 1 ml tetrahidrofuránban oldjuk, és kénsawal a pH-t 2,0-re állítjuk be. Az oldatot lehűtjük 5 °C-ra és 475 mg (2,22 milliinól) nátrium-metaperjodátot adunk hozzá, 1 óráig keverjük, majd telített nátrium-hidrogénszulfit oldat hozzácsepegtetése útján feltisztítjuk. Az oldatot HP-21 gyantaoszlopra visszük fel, vízzel mossuk és a terméket 1 liter 30%-os vizes metanollal eluáljuk. Az oldatot bcpárolva, és a képződött szilárd anyagot éterrel eldörzsölve 434 mg (70%) cím szerinti terméket kapunk.
Olvadáspont; 140 °C (bomlás).
IR (KBr): 3600-3100, 2950, 2850, 1740, 1640, 1620 cm-1.
NMR (D2O); delta 4,35 (m, 2H), 4,20 (m IH) 3,80 (in, 111), 3,80 (s,3H), 3,20 (in, 211). 2,45 (t, 211».
2,30 (t, 211), 1,20—2,25 (m, 2211), 2,05 (s, 31J), 0,85 (t, 3H).
[α]θ5 = —22,2 (c = 0,5;H2O).
76. példa
N-Heptanoil-gamma-D-ghitamil-(alfa-benzil-észteijbenzil-oxi-karbonil-(D)-mezo-diamino-pimelinsav(Dj-benzil-oxi-karbonil-L-N^-ÍN* -acetil)-L -lizin
0,50 g (2,67 millimól) N“-acetil-L-lizin és 2,45 g (12,0 millimól) bisz(trimetil-szilil)-accíamjd 50 ml vízmentes metilén-kloriddal készült oldatát szobahőmérsékleten 18 óráig keverjük. Ezután fecskendővel a 10. példa szerint előállított termék vegyes anliídridjének —15 °C-ra lehűtött oldatához adjuk hozzá [az utóbbit, úgy állítjuk elő, hogy 0,29 g (2.24 millimól izobutil-klór-formiátot adunk 1,78 g (2,2 millimól) 11. példa szerint előállított termék és 0,24 g (2,2 millimól) N-metil-morfolin 100 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készült oldatához]. A reakcióelegyet 1 óráig —15 °C-on és 3 óráig szobahőmérsékleten keverjük, majd bepároljuk, 200 ml ctil-acetátban oldjuk, és 200 ml 2,5 %-os vizes sósavoldatlaí mossuk. Az etil-acetátos réteget elválasztva, és bepárolva fehér szilárd anyag képződik. Éterrel eldörzsölve 1,37 g (63%) cím szerinti terméket kapunk.
Olvadáspont: 170—175 °C.
IR (KBr): 3600-2850, 1740, 1680, 1750, 1750, 1600 cm ’.
NMR (D6-DMS0): delta %,35 (széles s. 15H),
5,12 (s, 2H), 5,08 (s, 2H), 5,02 (s, 2H), 4,30 (m IH),
4,15 (m, 2H), 4,0 (m, IH), 3,05 (m, 2H), 2,25 (m, 2H), 2,15 (t, 2H), 1,90 (s,3H), 1,15-1,85 (m, 22H) 0,85 (t, 3H).
7. példa
N-Heptanoil-garrmia-D-giutamil-L-mezo-diamincpimelinsav-Ne-(Na-acetil)-L-lizin
A 16. példa termékének 1,2 g-ját (1,23 milliinól) 50 ml 20%-os vizes eceísavoldatban 330 mg 10%-os Pd/C katalizátorral kezeljük, és 3,45 · 10s Pa hidrogéngáz-nyomáson 1 óráig hidrogénezzük. Az oldatot gáztalanítjuk, szűrjük és bepároljuk. A képződött olajat 50 ml vízben oldjuk, lehűtjük 5 °C-ra és kénsavval pH 1,5—2,0-ig megsavanyítjuk. A kapott oldatot ezután 0,58 g (2,7 millimól) nátniim-snetapecjodáttal kezeljük, I óráig keveijük, majd áttetsző oldat képződéséig telített nátrium-hidrogén-szulfitoldatot adunk hozzá. Ezután HP-21 gyantaoszlopra visszük fel, és az oszlopot 250 ml vízzel mossuk. 250 ml 50%-os vizes metahollal eluálva, és az eluátumot bepárolva 0,55 g (74%) cíin szerinti terméket kapunk.
Olvadáspont: 220 °C (bomlás).
ÍR (KBr): 3600-2900, 2850, 1720, 1640, 1540 cm1.
NMR (D2O): delta 4,30 (széles m, 3H), 3,80 (?, IH), 3,25 (m, 2H), 2,45 (t, 2H), 2,35 (t, 2H1, 1,22,3 (m, 22H), 2,05 (s, 3ÍI), 0,85 (t, 3H).
[a)n = —17,6 (c = 0 5;H2O).
18. példa
N-ílcptanoil-gamnia-D-glutaw.iljalfa-hcnzií-észter)L-tnezo-diaminopiincUnsav-\(D)-bcnzil-oxi-karbonil-lD)-benzil-oxi-karbonil-karbazid]-Na-alfa-bcnzil-oxi-karbonil-L-ornitin
0,59g (2,2millimól) alfa-benzil-oxi-karbonil-L-ornitin és 80 ml vízmentes metilén-klorid szuszpenzióját
1,81 g (8,9 millimól) bisz(trimetií-szilil)-acetamiddal kezeljük, és szobahőmérsékleten 3 óráig keverjük. A képződött oldatot hozzáadjuk all. példa észter-termékének 70 ml tetrahidrofuránnal készült oldatához és szobahőmérsékleten 3 napig keverjük. A kapott oldatot bepároljuk és a maradék olajat 500 ml 0,7 n vizes sósavoldattal és 350 ml etil-acetáttal kezeljük. A •cétfázisú oldatot 1,5 óráig keverjük., a fázisokat szétválasztjuk, és a szerves réteget bepároljuk és éterrel eldörzsöljük, 1,95 g (84%) cím szerinti vegyületet kapunk.
Olvadáspont: 167 171 °C.
IR (KBr) 3600-3100,2950,1740,1695,1640 cm_í
NMR (D6-DMS0) delta 7,40 (s,20H), 5.12 (s, 2H),
5,10 (s, 211), 5,05 (s. 211), 5,00 (s, 2H), 4,30 (m, Ili),
4,18 (m, IH), 4,00 (in, 2H), 3,10 (m, 211). 2,25 (í, 7H), 2 15 (t, 2H), 1,05-2,10 (m, 20H), 0,85 (t, 3H).
19. példa . N-íleptanoil-gaiunia-D-glittamil-L-mezo-dianiinopimelinsav-Na-L-omitin
A 18. példa termekének 1,40 g-ját (1,33 millimól) és '>00 mg 10% Pd/C katalizátort 150 m! 20%-os vizes ecetsavoldaíban 3,103 1 05 Pa hidrogéngáznyomáson
-1015
198 086 percig hidrogénezzük. Az oldatot gáztalanítjuk, szűrjük, bepároljuk és a kapott olajat 50 ml vízben oldjuk, és tömény kénsavval pH 2,0-ig megsavanyítjuk. Az oldatot lehűtjük 5 °C-ra, és egy adagban 0,57 g (2,66 millimól) iiátriinn-mctapcrjodáttal kezeljük. A képződött barna oldatot 1,5 óráig keverjük, tiszta oldat keletkezéséig telített nátrium-hidrogén-szulfitoldatot adunk hozzá, majd HP—21 gyantaoszlopra visszük fel. Az oszlopot 750 ml vízzel mossuk és a kívánt terméket 400 ml 50 %-os vizes metanollal eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat bepárolva 0,52 g (71%) cím szerinti termeket kapunk.
Olvadáspont: 230 °C (bomlás).
IR (KBr): 3600-3100, 2950, 1640, 1590 cm5.
NMR (D6-DMS0): delta 4,30 (m, 2H), 3,95 (m, 2H), 3,15 (m, 2H), 2,30 (t, 2H), 2,22 (t, 2H). 1,2-2,20 (m, 20H), 0,95 (t, 3H).
Claims (2)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Eljárás (I) általános képletű vegyületek és gyógyszerészetileg elfogadható savaddíciós sóik előállítására, aholR° 3—6 szénatomsz.ámú aikilcsoportot jelent és x jelentése 3 vagy 4, azza’ jellemezve, hogy egy (IV) általános képletű vegyületet — ahol5 Bz. bcnzilcsoportot,Z benzilpxo-karbonil-csoportot jelent és R° és x jelentése a fenti szénre lecsapott palládium-katalizátor jelenlétében 10 katalitikusán hidrogénezünk; és kívánt esetben a terméket gyógyszerészetileg elfogadható savaddíciós sóv: alakítjuk át.7. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve. hogy a katalitikus hidrogénezést vizes ecetsav oldószerben hajtjuk végre.
- 3. A 2. igénypont szerinti eljárás olyan (I) általános kcpletű vegyületek előállítására, ahol R° jelentőst hcxilcsoport, és x jelentése 3 vagy 4, azznl jctle2Q me: ve, hogy olyan ^1V) általános képictö vegyületből ind dunk ki, ahol R és x jelentése a fenti, és Bz és Z az '. igénypontban megadott.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US06/595,169 US4565653A (en) | 1984-03-30 | 1984-03-30 | Acyltripeptide immunostimulants |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HUT37443A HUT37443A (en) | 1985-12-28 |
HU198086B true HU198086B (en) | 1989-07-28 |
Family
ID=24382038
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU851217A HU198086B (en) | 1984-03-30 | 1985-03-29 | Process for producing immunostimulatn acyl-tripeptides |
Country Status (20)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4565653A (hu) |
EP (1) | EP0157572A3 (hu) |
JP (1) | JPS60224699A (hu) |
KR (1) | KR870000372B1 (hu) |
AU (2) | AU552919B2 (hu) |
CA (1) | CA1270098A (hu) |
DD (1) | DD239406A5 (hu) |
DK (1) | DK142485A (hu) |
EG (1) | EG17928A (hu) |
ES (1) | ES8605821A1 (hu) |
FI (1) | FI851271L (hu) |
GR (1) | GR850783B (hu) |
HU (1) | HU198086B (hu) |
IL (1) | IL74758A (hu) |
NO (1) | NO851278L (hu) |
NZ (1) | NZ211634A (hu) |
PH (1) | PH21303A (hu) |
PL (1) | PL252659A1 (hu) |
PT (1) | PT80181B (hu) |
ZA (1) | ZA852335B (hu) |
Families Citing this family (59)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA1295784C (en) * | 1985-11-25 | 1992-02-11 | James Patrick Rizzi | Peptide immunostimulants |
JPH0718039B2 (ja) * | 1986-03-26 | 1995-03-01 | 株式会社豊田自動織機製作所 | 粉末付加亜鉛めっき鋼板の製造方法 |
WO1988001613A1 (en) * | 1986-08-27 | 1988-03-10 | Pfizer Inc. | Crystalline n-(s-3-methylheptanoyl)-d-gamma-glutamyl-glycyl-d-alanine, and processes and intermediates therefor |
WO1988001612A1 (en) * | 1986-08-27 | 1988-03-10 | Pfizer Inc. | Processes and intermediates for n-(s-3-alkyl-heptanoyl)-d-gamma-glutamyl-glycyl-d-alanine |
DE3700173A1 (de) * | 1987-01-05 | 1988-07-14 | Hoechst Ag | Verfahren zur herstellung von lipophilen aminosaeurederivaten sowie lipophile aminosaeurederivate |
DE3820528A1 (de) * | 1988-06-16 | 1989-12-21 | Bayer Ag | Mittel zur insekten- und milbenabwehr |
US5185464A (en) * | 1989-02-21 | 1993-02-09 | Pfizer Inc. | Crystalline N-(S-3-methylheptanoyl)-D-gamma-glutamyl-glycyl-D-alanine, and processes and intermediates therefor |
US5245079A (en) * | 1989-02-21 | 1993-09-14 | Pfizer Inc. | Processes and intermediates for N-(S-3-alkyl-heptanoyl)-D-gamma-glutamyl-glycyl-D-alanine |
US5248820A (en) * | 1989-02-21 | 1993-09-28 | Pfizer Inc. | Crystalline N-(S-3-methylheptanoyl)-D-gamma-glutamyl-glycyl-D-alanine, and processes and intermediates therefor |
US5136020A (en) * | 1989-02-21 | 1992-08-04 | Pfizer Inc. | Crystalline n-(s-3-methylheptanoyl)-D-gamma-glutamyl-glycyl-D-alanine, and processes and intermediates therefor |
US5134225A (en) * | 1989-02-21 | 1992-07-28 | Pfizer Inc. | Processes and intermediates for N-(S-3-alkyl-heptanoyl)-D-gamma-glutamyl-D-alanine |
EP0617009B1 (en) * | 1992-10-15 | 1999-09-08 | Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai | Novel amino acid derivative |
US5798387A (en) * | 1992-10-15 | 1998-08-25 | Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai | Amino acid derivatives |
US5545553A (en) * | 1994-09-26 | 1996-08-13 | The Rockefeller University | Glycosyltransferases for biosynthesis of oligosaccharides, and genes encoding them |
US7795210B2 (en) * | 2001-10-10 | 2010-09-14 | Novo Nordisk A/S | Protein remodeling methods and proteins/peptides produced by the methods |
US7696163B2 (en) | 2001-10-10 | 2010-04-13 | Novo Nordisk A/S | Erythropoietin: remodeling and glycoconjugation of erythropoietin |
US8008252B2 (en) * | 2001-10-10 | 2011-08-30 | Novo Nordisk A/S | Factor VII: remodeling and glycoconjugation of Factor VII |
US7214660B2 (en) | 2001-10-10 | 2007-05-08 | Neose Technologies, Inc. | Erythropoietin: remodeling and glycoconjugation of erythropoietin |
US7157277B2 (en) * | 2001-11-28 | 2007-01-02 | Neose Technologies, Inc. | Factor VIII remodeling and glycoconjugation of Factor VIII |
US7399613B2 (en) * | 2001-10-10 | 2008-07-15 | Neose Technologies, Inc. | Sialic acid nucleotide sugars |
US7173003B2 (en) * | 2001-10-10 | 2007-02-06 | Neose Technologies, Inc. | Granulocyte colony stimulating factor: remodeling and glycoconjugation of G-CSF |
WO2004099231A2 (en) * | 2003-04-09 | 2004-11-18 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylation methods and proteins/peptides produced by the methods |
MXPA04012496A (es) * | 2002-06-21 | 2005-09-12 | Novo Nordisk Healthcare Ag | Glicoformos del factor vii pegilados. |
CA2519092C (en) * | 2003-03-14 | 2014-08-05 | Neose Technologies, Inc. | Branched water-soluble polymers and their conjugates |
US8791070B2 (en) | 2003-04-09 | 2014-07-29 | Novo Nordisk A/S | Glycopegylated factor IX |
EP1613261A4 (en) * | 2003-04-09 | 2011-01-26 | Novo Nordisk As | INTRA-CELLULAR FORMATION OF PEPTIDE CONJUGATES |
AU2004240553A1 (en) | 2003-05-09 | 2004-12-02 | Neose Technologies, Inc. | Compositions and methods for the preparation of human growth hormone glycosylation mutants |
US9005625B2 (en) | 2003-07-25 | 2015-04-14 | Novo Nordisk A/S | Antibody toxin conjugates |
CA2547140A1 (en) * | 2003-11-24 | 2005-06-09 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated erythropoietin |
US8633157B2 (en) * | 2003-11-24 | 2014-01-21 | Novo Nordisk A/S | Glycopegylated erythropoietin |
US7842661B2 (en) * | 2003-11-24 | 2010-11-30 | Novo Nordisk A/S | Glycopegylated erythropoietin formulations |
US20080305992A1 (en) | 2003-11-24 | 2008-12-11 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated erythropoietin |
US20080318850A1 (en) * | 2003-12-03 | 2008-12-25 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated Factor Ix |
US7956032B2 (en) * | 2003-12-03 | 2011-06-07 | Novo Nordisk A/S | Glycopegylated granulocyte colony stimulating factor |
US20060040856A1 (en) * | 2003-12-03 | 2006-02-23 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated factor IX |
US20070254836A1 (en) * | 2003-12-03 | 2007-11-01 | Defrees Shawn | Glycopegylated Granulocyte Colony Stimulating Factor |
NZ548123A (en) * | 2004-01-08 | 2010-05-28 | Novo Nordisk As | O-linked glycosylation of peptides |
EP1771066A2 (en) | 2004-07-13 | 2007-04-11 | Neose Technologies, Inc. | Branched peg remodeling and glycosylation of glucagon-like peptide-1 glp-1 |
EP1799249A2 (en) * | 2004-09-10 | 2007-06-27 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated interferon alpha |
US20080176790A1 (en) * | 2004-10-29 | 2008-07-24 | Defrees Shawn | Remodeling and Glycopegylation of Fibroblast Growth Factor (Fgf) |
WO2006074279A1 (en) * | 2005-01-06 | 2006-07-13 | Neose Technologies, Inc. | Glycoconjugation using saccharyl fragments |
US9029331B2 (en) * | 2005-01-10 | 2015-05-12 | Novo Nordisk A/S | Glycopegylated granulocyte colony stimulating factor |
EP1866427A4 (en) * | 2005-03-30 | 2010-09-01 | Novo Nordisk As | MANUFACTURING PROCESS FOR THE PRODUCTION OF CULTIVE PEPTIDES IN CELL LINES OF INSECTS |
EP1871795A4 (en) * | 2005-04-08 | 2010-03-31 | Biogenerix Ag | COMPOSITIONS AND METHOD FOR PRODUCING GLYCOSYLATION MUTANTS OF A PROTEASE-RESISTANT HUMAN GROWTH HORMONE |
JP5216580B2 (ja) * | 2005-05-25 | 2013-06-19 | ノヴォ ノルディスク アー/エス | グリコペグ化第ix因子 |
EP1937719A4 (en) * | 2005-08-19 | 2010-11-24 | Novo Nordisk As | GLYCOPEGYLATED FACTOR VII AND FACTOR VIIA |
US20070105755A1 (en) | 2005-10-26 | 2007-05-10 | Neose Technologies, Inc. | One pot desialylation and glycopegylation of therapeutic peptides |
WO2007056191A2 (en) | 2005-11-03 | 2007-05-18 | Neose Technologies, Inc. | Nucleotide sugar purification using membranes |
US20080242607A1 (en) * | 2006-07-21 | 2008-10-02 | Neose Technologies, Inc. | Glycosylation of peptides via o-linked glycosylation sequences |
US20100075375A1 (en) * | 2006-10-03 | 2010-03-25 | Novo Nordisk A/S | Methods for the purification of polypeptide conjugates |
JP5457185B2 (ja) * | 2006-10-04 | 2014-04-02 | ノヴォ ノルディスク アー/エス | グリセロール連結のpeg化された糖および糖ペプチド |
US20080207487A1 (en) * | 2006-11-02 | 2008-08-28 | Neose Technologies, Inc. | Manufacturing process for the production of polypeptides expressed in insect cell-lines |
DK2144923T3 (da) * | 2007-04-03 | 2013-05-13 | Biogenerix Ag | Behandlingsfremgangsmåder under anvendelse af glycopegyleret g-csf |
US20090053167A1 (en) * | 2007-05-14 | 2009-02-26 | Neose Technologies, Inc. | C-, S- and N-glycosylation of peptides |
WO2008151258A2 (en) * | 2007-06-04 | 2008-12-11 | Neose Technologies, Inc. | O-linked glycosylation using n-acetylglucosaminyl transferases |
WO2008154639A2 (en) * | 2007-06-12 | 2008-12-18 | Neose Technologies, Inc. | Improved process for the production of nucleotide sugars |
US8207112B2 (en) * | 2007-08-29 | 2012-06-26 | Biogenerix Ag | Liquid formulation of G-CSF conjugate |
JP5647899B2 (ja) * | 2008-01-08 | 2015-01-07 | ラツィオファルム ゲーエムベーハーratiopharm GmbH | オリゴサッカリルトランスフェラーゼを使用するポリペプチドの複合糖質化 |
CA2715465C (en) | 2008-02-27 | 2017-03-21 | Novo Nordisk A/S | Conjugated factor viii molecules |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4322341A (en) * | 1980-05-13 | 1982-03-30 | Fujisawa Pharmaceutical Co | Peptide, process for preparation thereof and use thereof |
DK156252C (da) * | 1979-07-31 | 1989-12-18 | Fujisawa Pharmaceutical Co | Analogifremgangsmaade til fremstilling af di-, tri- eller tetrapeptidderivater eller salte deraf |
DE3070278D1 (en) * | 1979-10-11 | 1985-04-18 | Fujisawa Pharmaceutical Co | Peptides, processes for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
GR81332B (hu) * | 1980-12-01 | 1984-12-11 | Fujisawa Pharmaceutical Co | |
US4493794A (en) * | 1980-12-31 | 1985-01-15 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Peptide, process for preparation thereof and use thereof |
-
1984
- 1984-03-30 US US06/595,169 patent/US4565653A/en not_active Expired - Fee Related
-
1985
- 1985-03-26 PH PH32046A patent/PH21303A/en unknown
- 1985-03-26 EP EP85302065A patent/EP0157572A3/en not_active Withdrawn
- 1985-03-27 ES ES541620A patent/ES8605821A1/es not_active Expired
- 1985-03-28 DD DD85274551A patent/DD239406A5/de not_active IP Right Cessation
- 1985-03-28 PT PT80181A patent/PT80181B/pt not_active IP Right Cessation
- 1985-03-28 EG EG201/85A patent/EG17928A/xx active
- 1985-03-28 CA CA000477796A patent/CA1270098A/en not_active Expired - Fee Related
- 1985-03-28 ZA ZA852335A patent/ZA852335B/xx unknown
- 1985-03-28 GR GR850783A patent/GR850783B/el unknown
- 1985-03-29 JP JP60066380A patent/JPS60224699A/ja active Pending
- 1985-03-29 IL IL74758A patent/IL74758A/xx unknown
- 1985-03-29 NZ NZ211634A patent/NZ211634A/xx unknown
- 1985-03-29 AU AU40523/85A patent/AU552919B2/en not_active Ceased
- 1985-03-29 DK DK142485A patent/DK142485A/da not_active Application Discontinuation
- 1985-03-29 PL PL25265985A patent/PL252659A1/xx unknown
- 1985-03-29 HU HU851217A patent/HU198086B/hu unknown
- 1985-03-29 FI FI851271A patent/FI851271L/fi not_active Application Discontinuation
- 1985-03-29 KR KR1019850002106A patent/KR870000372B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1985-03-29 NO NO851278A patent/NO851278L/no unknown
-
1986
- 1986-04-22 AU AU56476/86A patent/AU566460B2/en not_active Ceased
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR870000372B1 (ko) | 1987-03-06 |
PH21303A (en) | 1987-09-28 |
PT80181B (en) | 1987-03-20 |
CA1270098A (en) | 1990-06-05 |
DK142485A (da) | 1985-10-01 |
AU566460B2 (en) | 1987-10-22 |
FI851271A0 (fi) | 1985-03-29 |
GR850783B (hu) | 1985-11-25 |
NO851278L (no) | 1985-10-01 |
EP0157572A2 (en) | 1985-10-09 |
NZ211634A (en) | 1988-10-28 |
ZA852335B (en) | 1986-11-26 |
IL74758A0 (en) | 1985-06-30 |
ES8605821A1 (es) | 1986-04-01 |
EG17928A (en) | 1991-08-30 |
DD239406A5 (de) | 1986-09-24 |
PL252659A1 (en) | 1985-11-19 |
AU4052385A (en) | 1985-10-03 |
PT80181A (en) | 1985-04-01 |
US4565653A (en) | 1986-01-21 |
FI851271L (fi) | 1985-10-01 |
EP0157572A3 (en) | 1987-01-07 |
HUT37443A (en) | 1985-12-28 |
AU552919B2 (en) | 1986-06-26 |
KR850006939A (ko) | 1985-10-25 |
JPS60224699A (ja) | 1985-11-09 |
IL74758A (en) | 1988-06-30 |
ES541620A0 (es) | 1986-04-01 |
AU5647686A (en) | 1986-09-04 |
DK142485D0 (da) | 1985-03-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
HU198086B (en) | Process for producing immunostimulatn acyl-tripeptides | |
US5312831A (en) | Urethanes and ureas that induce cytokine production | |
US4816560A (en) | Partially retro-inverted tuftsin analogues, method for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them | |
KR870000810B1 (ko) | 펩타이드-치환된 헤테로사이클릭 화합물의 제조방법 | |
JPH0647599B2 (ja) | ヘプタノイル―Glu―Asp―Ala―アミノ酸系免疫賦活薬 | |
GB1582420A (en) | Phenylamino phenylacetic acid amide compounds and processes for their preparation | |
US5089476A (en) | Glutamic acid derivatives | |
US4767743A (en) | Peptide immunostimulants | |
EP0227306B1 (en) | Peptide immunostimulants | |
US6180759B1 (en) | Process for the preparation of azacycloalkylakanoyl pseudotetrapeptides | |
KR900004648B1 (ko) | 펩타이드 유도체의 제조방법 | |
US4497729A (en) | Peptide, process for preparation thereof and use thereof | |
HU188110B (en) | Process for producing new tripeptide-derivatives | |
EP0050856B1 (en) | New peptide, process for its preparation and pharmaceutical composition containing it | |
US5108990A (en) | Glutamic acid derivatives | |
HU185978B (en) | Process for preparing new tetrapeptide derivatives | |
JPH07119233B2 (ja) | 生理活性物質プロベスチンの合成法 | |
JPS62234092A (ja) | 新規グルコ−ス誘導体 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
HU90 | Patent valid on 900628 |