HU193595B

HU193595B - Process for production of new 6-substituted guanin derivatives

Info

Publication number: HU193595B
Application number: HU84807A
Authority: HU
Inventors: Karl N Johansson; Bjoern G Lindborg; Jan O Noren
Original assignee: Astra Laekemedel Ab
Priority date: 1983-12-20
Filing date: 1984-12-13
Publication date: 1987-11-30
Also published as: US4798833A; IS2966A7; PT79714B; ES8609325A1; DK159683C; EP0165289B1; EP0146516A2; IE843261L; FI80885C; WO1985002845A1; DK362585A; PT79714A; KR850700136A; MY102565A; FI853171A0; EP0165289A1; AU586415B2; FI853171L; DK362585D0; JPS61500730A

Description

A találmány tárgya eljárás guanin új származékainak és hatóanyagként ezeket tartalmazó gyógyszerkészítményeknek az előállítására, melyek emberben és állatokban vírusok, például herpeszvírus által okozott betegségek ellen használhatók. Ilyen betegségek mind a szokásos fertőzések, mind a daganatos betegségek, például rák.

Vírusoknak testfunkciókra gyakorolt hatása a celluláris és subcelluláris szinteken végbemenő változások végeredménye. A patogén változások celluláris szinten vírusok és gazdasejtek különböző kombinációitól függően változók. Míg sok vírus bizonyos sejtek általános pusztulását (elhalás) okozza, mások daganatos állapotba hozhatnak sejteket.

A jelentősebb mindennapos vírusfertőzések herpes dermatitis (beleértve herpes labiálist), herpes keratitis, herpes genitalis, herpes zoster, herpes encephalitis, fertőző mononucleosis és cytomegalovírus fertőzések, amelyeket mind a herpeszvírus csoportba tartozó vírusok okoznak. Egyéb jelentős vírusbetegségek az influenza A és B, amelyeket az influenza A, illetve B vírus okoz. Másik jelentős elterjedt virusbetegség a vírus hepatitis, és különösen a hepatitis B vírusfertőzések széles körben elterjedtek. Hatásos és szelektív antivirális szerek szükségesek ezeknek a betegségeknek valamint vírusok által okozott más betegségek kezelésére.

Néhány különböző mind DNS,mind RNS típusú vírusról kimutatták, hogy állatokban tumorokat okoznak. Rákkeltő vegyszereknek állatokra való hatása látens tumor vírusok aktiválásában jelentkezhet. Lehetséges, hogy emberi tumorokban is vannak tumorvírusok. A legvalószínűbb ma ismert humán esetek leukémiák, szarkómák, emlő karcinómák, Burkitt limfómák, orr-garati karcinómák és méhnyakrákok, ahol RNS tumor vírusokat és herpes vírusokat mutattak ki. Ez teszi a tumorogén vírusok és működésük szelektív gátlására irányuló kutatást fontos vállalkozássá a rák kezelésére irányuló kísérletekben.

Guaninszármazékokat leírtak már a Synthetic Communications 2 (6),345—351 (1972), a 4 199 574 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás, 4 355 032 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás, 82401571.3 sz. nyilvánosságra hozott európai szabadalmi bejelentés (közzétételi szám 74 306) és a 81850250.2 sz. nyilvánosságra hozott európai szabadalmi bejelentés (közzétételi szám 55239) közleményekben; az utóbbi olyan la általános képletü vegyületeket közöl — amelyek képletében

R, és R₂ jelentése hidrogénatom, hidroxilcsoport vagy fluoratom.

A jelen találmány az I általános képletü vegyületek .....- amely képletben

A jelentése (Aa) vagy (Ab) általános képietű csoport, amelyekben m jelentése 1 vagy 2; n jelentése 1 vagy 2;

azzal a fenntartással, hogy m jelentése 1, ha n jelentése 2, és m jelentése 2, ha n jelentése 1;

Ra jelentése —(CH₂)_POH általános képletü csoport, vagy karboxilcsoport; p jelentése 1 -tői 4-ig terjedő egész szám;

R’í, és R”b jelentése hidrogénatom vagy R”₆-(CH₂)_pOH általános képietű csoport;

vagy R’* és R”* együtt egy további szén-szén kötést jelentenek, azaz hármas kötést alakítanak ki;

azzal a további fenntartással, hogy ha m jelentése 2 és n jelentése 1 és R’_a jelentése -(CH₂)_POH általános képletü csoport, akkor p jelentése 2-től 4-ig terjedő egész szám — vagy fiziológiásán elviselhető, savaddíciós sóik, geometriai izomereik előállításával foglalkozik.

\ találmány foglalkozik még az I általános képietű vegyületeket tartalmazó,új gyógyszeikészítmények előállításával.

felfedeztük, hogy a találmány szerinti vegyületek antivirális hatást fejtenek ki, és bizonyos virális funkciókat gátolnak, beleértve a tumorkeltő hatásokat és a vírusok szaporodását.

Felfedeztük azt is, hogy a találmány szerinti vegyületeknek különösen nagy az affinitásuk virális timidin-kinázhoz, ami nagyon fontos az antivirális hatás szempontjából, ha a vegyületeket magas timidintartalmú sejtekben használjuk.

A jelen találmány olyaan vegyületeket, ezek geometriai izomereit és fiziológiailag elfogadható savaddíciós sóit bocsátja rendelkezésünkre, ímely vegyületek vírusos betegségek gyógyászati és/vagy megelőző kezelésére használhatók, és amelyek hasznosak lehetnek vírusok által okozott rák gyógyászati és/vagy megelőző kezelésében.

Egy elviselhető mellékhatásokkal rendelkező, hatékony antivirális szernek szelektív gátló hatásának kell lennie a leküzdendő vírus valamilyen speciális vírusfunkciójára. Ennélfogva a jelen találmány egyik feladata az, hogy vírusfertőzések leküzdésére valamely olyan antivirális szert alkalmazó új módszert biztosítson, amely virusfunkciókra szelektív gátló hatást fejt ki, de csak elhanyagolható gátló hatása van a gazdasejt funkcióra.

A jelen taiálmány szerinti vegyületek részé-e különösen fontos alkalmazási terület a herpeszvírus fertőzések kezelése. A herpeszvírusok között említhető az 1. és 2. típusú Herpes simplex, a varicella (bárányhímlő, Herpes zoster), a rnononukleozis fertőzéseket okozó vírus (azaz Epstein-Barr vírus) és a citomegalovírus. Herpeszvírusok által okozott gyakori betegség a herpes dermatitis (beleértve herpes labiálist), herpes genitalis, herpes keratitis, herpes encephalitis és herpes zos’.er.

-2193595

A jelen találmány szerinti vegyületek részére másik lehetséges alkalmazási terület rák és tumorok, különösen a vírusok által okozott ilyen betegségek kezelésében van. Ez a hatás különböző utakon érhető el, például a vírus fertőzött sejtek daganatos állapotba való átalakulásának gátlásával, a vírusok fertőzött sejtekből más normál sejtekbe való szétszóródásának gátlásával és a vírusfertőzött sejtek növekedésének leállításával.

A jelen találmány szerinti vegyületek részére további alkalmazási terület a fertőzött sejtek gátlása az ezen sejtekben lévő timidin-kinázhoz hasonló speciális herpeszvírus enzimek jelenléte ellenére.

Rák kemoterápiája szempontjából a jelen találmány szerinti vegyületek részére lehetséges alkalmazási területek leukémiák, limfómák (beleértve Burkitt limfómákat és Hodgkin-betegséget), szarkómák, emlőkarcinóma, orr-garat karcinómák és méhnyakrákok kezelése, amelyekben vírusokat észleltek. Rák kemoterápiája szempontjából más lehetséges alkalmazási területek a jelen találmány szerinti vegyületek részére: többszörös mielóma és a tüdők (és hörgők), a gyomor, a máj, a vastagbél,.a hólyag, az ajkak, a csontok, a vesék, a petefészek, a prosztata, a hasnyálmirigy, a bőr (melanoma), a végbél, a nyálmirigyek, a száj, a nyelőcső, a here, az agy (és agyhártya), a pajzsmirigy, az epehólyag (és vezetékek), az orr, a gége, kötőszövetek, a penis, a vulva, a vagina, a méhtest és a nyelv rákjának kezelése.

A találmány szerint előállított vegyületek alkalmasak

a) vírusok által állatokban és emberben okozott betegségek kezelésére, amely abból áll, hogy az így fertőzött állatnak valamely I általános képletü vegyület vagy valamilyen fiziológiásán elviselhető sója terápiásán hatásos mennyiségét adjuk be;

b) vírus, különösen herpeszvírusok állatokban és emberben való szaporodásának meggátlására azzal, hogy állatnak ilyen kezelés szükségletének megfelelően valamely I általános képletü vegyület vagy valamilyen fiziológiásán elviselhető sója olyan mennyiségét adjuk be, amely elegendő a szaporodás meggátlására;

c) vírus által kiváltott daganatos betegségek kezelésére állatokban és emberben azzal, hogy a vírusmüködéseket kifejtő sejtek növekedését gátoljuk, amelyre az jellemző, hogy az így fertőzött állatnak valamely I általános képletü vegyület vagy valamely fiziológiásán elviselhető sója terápiásán hatásos mennyiségét adjuk be;

d) a vírustranszformált sejtek növekedésének gátlására állatokban és emberben, amelyre az jellemző, hogy az állatnak ilyen kezelés szükségletének megfelelően valamely I általános képletü vegyület vagy valamilyen fiziológiásán elviselhető sója olyan mennyiségét adjuk be, amely elegendő a növekedés meggátlására;

e) vírus által kiváltott daganatos betegségek kezelésére állatokban és emberben a tumorvírusok szaporodásának gátlásával, amelyre az jellemző, hogy az állatnak ilyen kezelés szükségletének megfelelően valamilyen I általános képletü vegyület vagy valamilyen fiziológiásán elviselhető sója olyan mennyiségét adjuk be, amely elegendő a szaporodás meggátlására;

f) daganatos betegségek kezelésére állatokban és emberben, amelyre az jellemző, hogy az állatnak valamely I általános képletü vegyület vagy valamilyen fiziológiásán elviselhető sója terápiásán hatásos mennyiségét adjuk be.

Amint az előbbiekben már meghatároztuk, a jelen találmány szerinti új vegyületek vagy II általános képletü vegyületek — amely képletben m jelentése 1 vagy 2; és n jelentése 1 vagy 2;

ahol m jelentése 1, ha n jelentése 2, és m jelentése 2, ha n jelentése 1;

R o jelentése (CH₂)_PÓH általános képletü csoport vagy karboxicsoport, és p jelentése 1-től 4-ig terjedő egész szám, azzal a további fenntartással, hogy ha m jelentése 2, és n jelentése 1, és R’a jelentése -(CH₂)_POH általános képletü csoport, akkor p jelentése 2-től 4-ig terjedő egész szám— vagy ezek valamilyen fiziológiásán savaddíciós elfogadható sói, vagy III általános képletü vegyületek — amely képletben

R’í, és R”í, jelentése hidrogénatom vagy -(CH₂)_pOH általános képletü csoport, ahol p jelentése 1-től 4-ig terjedő egész szám, vagy R’í, és R”/, együtt egy további szén - szén kötést jelentenek, azaz hármas kötést alakítanak ki— vagy ezek valamilyen fiziológiásán elfogadható savaddíciós sói vagy geometriai izomerei.

Az m, n és R’_u jelentésénél előbb említett fenntartás azt jelenti, hogy a következő speciális vegyületek, és savaddíciós sóik előállítási eljárásai tartoznak a jelen találmány oltalmi körébe:

olyan II általános képletü vegyületek— amelyek képletében m jelentése 2; n jelentése 1;

R’a jelentése karboxil-, 2-hidroxi-etil-, 3-hidroxi-propii-, 4-hid roxi-buti 1-cso-port — olyan II általános képletü vegyületek — amelyek képletében m jelentése 1; π jelentése 2;

R’a jelentése karboxil-, hidroxi-metil-, 2-hidroxí-etil-, 3-hidroxi-propil-, 4-hidroxi-butil-csoport.

A II általános képletü vegyületek egy aszimmetriacentrumot tartalmaznak, ha R’_aés -(CH₂)„OH jelentése különböző.

-3193595

Szintén a jelen találmány oltalmi körébe tartoznak az olyan III általános képletű vegyületek előállítása, amelyek képletében

R’í, jelentése hidrogénatom; és R”í, jelentése hidrogénatom, hidroxi-metil-,

2-hidroxi-etil-, 3-hidroxi-propil-, 4-hidroxi-butil-csoport— sóik és geometriai izomereik. Ha R”* jelentése hidroxi-metil-csoporttól eltérő, akkor két geometriai izomerként léteznek.

A jelen találmány oltalmi köre a következő vegyületek előállítására vonatkozik:

9- [4-hídroxi-2- (hidroxi-metil) -butil] -guanin,

9- (4-hídroxi-3-karboxi-butil) -guanin,

9- [5-hid roxi-3- (hidroxi-metil) -pentil] -guanin,

9- [6-hldroxi-3- (hidroxi-metil) -hexil] -guanin,

9- (4-hid roxi-2-ka rboxi-butil) -guanin,

9- [4-híd roxi-2- (2-hidroxi-etil) -butil] -guanin,

9- [5-hidroxi-2- (2-hidroxi-etil) -pentil] -guanin,

9- [6-hidroxi-2- (2-hidroxi-etil) -hexil] -guanin,

9- {4-hid roxi-3- (hidroxi-metil) -2-butenil] -guanin,

9-(4-hid roxi-2-butenil) -guanin, cisz-9- (4-hidroxi-2-butenil) -guanin,

9- (4-hid roxi-2-b u tinil) -guanin.

A találmány szerinti vegyületek egyik előnyös alcsoportját azon II általános képletű vegyületek képezik, amelyek képletében

R’a jelentése (CH₂)_POH általános képletű csoport, például hidroxi-metil- vagy hidroxi-etil-csoport.

A találmány szerinti további előnyös vegyületek a 9- [4-hidroxi-3- (hidroxi-metil)-2-butenil] -guanin és a cisz-9- (4-hidroxi-2-butenil) -guanin.

Az a III általános képletű vegyület — amelynek képletében

R’í, és R”<> egy további szén - szén kötést jelentenek — antivirális hatású, és a vegyület intermedierként szolgálhat olyan III általános képletű vegyületek előállításához — amelyek képletében

R’(, és R’’* hidrogénatomokat jelentenek.

A találmány szerinti vegyületek a következűkben felsorolt a) — d) eljárásváltozatok valamelyike szerint állíthatók elő:

a) Egy aciklikus oldalláncnak megfelelő V általános képletű vegyületet — amelyben a funkciós csoportok adott esetben védettek — kondenzálunk egy IVa általános képletű vegyülettel, így a 9-helyzetü nitrogénatomon a kívánt oldalláncot tartalmazó VI általános képletű guaninszármazékot kapjuk, amelyről ezt követően egy vagy több kémiai reakcióval eltávolítjuk a védőcsoportokat, és így olyan II általános képletű vegyületet kapunk — amely képletben m, n és R’a jelentése az előbb az I általános képletnél megadottakkal azonos.

Az előbbi képletekben X_Q és Y általában o'yan csoportokat jelentenek, amelyek képesek egymással reagálni a kondenzáció során adott esetben védett I általános képletű vegyület keletkezéséhez vezető reakcióban. X_a jelentése például klóratom, brómatom, jódatom vagy olyan -OSO₂R_7a általános képletű csoport, amelyben R_?u jelentése 1-8 szénatomot tartalmazó alkilcsoport, 1 -8 szénatomot tartalmazó fluorozott alkilcsoport, például trifluor-metilcsoport, aralkilcsoport, például benzilcsoport, vagy arilcsoport. Y jelentése például h drogénatom vagy valamilyen kvaterner amnóniumion, például tetrabutil-ammóniumion. R_3a jelentése hidrogénatom vagy valamely o'yan védőcsoport, amelyekből a szakterületen.járatosak előtt egy egész sor ismert (lásd például „Protective Groups in Organic Chemistry”, T.W.Greene, Wiley 1981; „Methoden dór organischen Chemie, Houben-Weyl VI/1B és „Comprehensive Organic Chemistry, B.H.R. Barton and W.D. Ollis kiadás, 1979, I. kötet, 623-629. old.).

Az R₃₀ csoportokra példaként alkilcsoportck, így acetil- vagy benzoilcsoport, alkoxi-karbonil- vagy ariloxi-karbonil-csoportok, szililcsoport, például (terc-butil-dimetil-szilil)-csoport, aril-alkil-csoportok, például bcnzilcsoport és triaril-metilcsoportok vagy olyan -SO₂R_7Ű csoportok említhetők, amelyekben R_7U jelentése az előbb megadottakkal azonos.

R₂a jelentése R_fl jelentésére az I általános képletnél megadottakkal azonos, vagy; lehet cianocsoport, -COOR_gű, -CH(OR_9a)₂> -CH(SR_9ű)₂, -NHCONHR_9C vagy -(CHJ/,, általános képletű csoport, amelyekben p jelentése az előbbiekben megadottal azonos, R_aűjelentése szubsztituált szililcsoport vagy az előbb R_7ű jelentésére megadott valamely csoport, és R₉„ jelentése az előbb R_3D jelentésére megadott valamely csoport, vagy R₈₀, R_9aaz R₃q csoporttal együtt olyan kétértékű csoportot alkothatnak, amely valamilyen gyűrűs Származék, például valamilyen lakton vagy más ciklikus észter, ortosav, acetál, éter vagy szililtípusú vegyület,

Rgű jelentése hidroxilcsoport, klóratom, brómatom, jódatom, merkapto-, 1-8 szénatomot tartalmazó alkiltio-csoport, az előbbiekben megadott -SO₂R_7a általános képletű csoport vagy valamilyen -OR_10fl általános képletű hidroxil-származék, amelyben R_10O jelentése alkil-, aril-alkil-, például benzilcsoport, szubs/tituált szililcsoport, dialkoxi-foszforil-csoport, foszfinotioil-csoport vagy olyan -SO₂R_7Oáltalános képletű csoport amelyben R_?a jelentése az előbb megadottakkal azonos. R_4aR_5ü azonosak vagy különbözők, és R_3a jelentése az előbb megadottal azonos.

A kondenzációt előnyösen valamilyen szerycs oldószerben, például dimetil-formamidbíin, etanolban, acetonitrilben vagy diklór-metánban hajtjuk végre 0°C és 100°C közötti hőmérsékleten 1 órától 3 napig terjedő ideig

-4193595 valamilyen bázis (ha Y jelentése hidrogénatom), például kálium-karbonát jelenlétében.

Kondenzáció után a vegyületeket 0—100°C on 1-24 óra hosszat hídról izá Íj uk savval vagy bázissal, például ecetsavval, 1—35%-os vizes sósavoldattal, 1—20%-os vizes nátrium-hidroxid oldattal, 1—25%-os vizes vagy metanolos ammóniaoldattal, vagy hidrogéngázzal hidrogénezzük valamilyen szerves oldószerben, például etanolban vagy dimetil-formamidban valamilyen fémkatalizátor jelenlétében 1—24 óra hosszáig 100—5000 kPa (1—50 atmoszféra) nyomáson.

b) Egy XI általános képletű vegyületben lévő karboxil-származékokat vagy aktiváll karboxilcsoportokat redukálunk vagy szelektive redukálunk, így XII általános képletű vegyületet kapunk, majd a védőcsoportokat ezt követően eltávolítjuk.

A fenti képletekben m, n, R_3Ű, R_4O, R_5Ű és R_6fl jelentése az előbb megadottakkal azonos, R,,_a jelentése azonos R_6Q előbb megadott jelentésével vagy (dimetil-imino)-metoxi-csoport valamilyen aktivált karbonsav-származékban, R_12fl jelentése azonos R_2Ű előbb megadott jelentésével vagy olyan -(CH₂)_P_|-COR,,₀általános képletű csoport, amelyben R_2Ű, R_liaés p jelentése az előbb megadottakkal azonos, és R_l3a jelentése R’_a vagy R_l2a előbb megadott jelentésével azonos.

A redukció végezhető hidrogéngázzal vagy in situ fejlesztett hidrogénnel, valamilyen fémkatalizátorral, vagy előnyösen valamilyen hidrid redukálószerrel valamilyen szerves oldószerben.

c) Egy aciklikus oldalláncnak megfelelő XVII általános képletű vegyületet — amelyben a funkciós csoportok adott esetben védettek — kondenzálunk egy IVb általános képletű vegyülettel a 9-helyzetű nitrogénatomon a kívánt oldalláncot tartalmazó XVIII általános képletű guaninszármazékká, majd ezt, követően a védőcsoportok egy vagy több kémiai reakcióval való eltávolítása után egy megfelelő III általános képletű vegyülethez jutunk.

A fenti képletekben RU és R”* az I általános képletnél előbb megadottakkal azonos. X* és Y olyan csoportokat jelentenek, amelyek képesek egymással reagálni egy megfelelően védett I általános képletű vegyület keletkezése közben. X/, jelentése például klóratom, brómatom, jódatom vagy olyan -OSÓ₂R₈& általános képletű csoport, amelyben R_8iI jelentése például valamilyen 1-8 szénatomot tartalmazó alkilcsoport, 1-8 szénatomot tartalmazó fluorozott alkilcsoport, például trifluor-metilcsoport, aralkil-, például benzil- vagy arilcsoport. Y jelentése például hidrogénatom vagy valamilyen kvaterner ammóniumion, például (tetrabutil-ammónium)-ion. R₃í, jelentése hidrogénatom vagy valamilyen hidroxil-védőcsoport, amilyen a szakterületen járatosak előtt egész sor ismert (lásd például „Protective Groups in Organic Chemistry, Houben-Weyl VI/lb; és „Comprehensive Organic Chemistry, D.H.R. Barton and W.D. Ollis eds., 1979, 1. kötet, 623—629. old.).

Az R₃6 csoportra példaként alkiicsoportok, például acetil- vagy benzoil-csoport, alkoxi-karbonil- vagy ariloxi-karbonil-csoportok, szililcsoportok, például (terc-butil-dimetil-szilil)-csoport, aril-alkil-csoportok, például benzilcsoport és triaril-metil-csoportok említhetők, vagy olyan -SO₂R₈í, általános képletű csoportok, amelyekben R₈& jelentése az előbb megadottakkal azonos.

R₂í, jelentése R7, és R₇í, jelentése R”* előbb az I általános képletnél megadott jelentésével azonos, vagy mindkettő jelenthet olyan -(CH₂)_pOR_9í, általános képletű csoportot, amelyben p jelentése 1-től 4-ig terjedő egész szám, és R₉ö jelentése R₃& előbb megadott jelentésével azonos, és R₉í, és R₃/, lehetnek azonosak vagy különbözőek, és képezhetnek továbbá együtt valamilyen kétértékű csoportot, azaz valamilyen ciklikus származékot, például valamilyen karbonát-észtert, tiokarbonát-észtert vagy a megfelelő ortosav ciklikus származékokat vagy ciklikus acetál típusú vegyületeket. Rgí, jelentése hidroxilcsoport, klóratom, brómatom, jódatom, merkaptocsoport, 1-8 szénatomot tartalmazó alkiltio-csoport, -SO₂R₈í, általános képletű csoport, amelyben R_8Í1 jelentése az előbb megadottakkal azonos vagy valamilyen -OR_l0fc általános képletű hidroxilszármazék, amelyben R_l0z, jelentése alkil-, aril-alkil-, például benzil-, szubsztituált szilil-, dialkoxi-foszforil-, foszfinotioil-csoport vagy olyan -SO₂R₈6 általános képletű csoport, amelyben R₈í, jelentése az előbb megadottakkal azonos. R₅í, és R₆í, azonosak vagy különbözők, és jelentésük R_3ÍI előbb megadott jelentésével azonos.

A kondenzációt előnyösen valamilyen szerves oldószerben, például dimetil-formamidban, etanolban, acetonitrilben vagy diklór-metánban, 0°C és 100°C közötti hőmérsékleten, 1 órától 3 napig terjedő időtartamig végezzük valamilyen bázis (ha Y jelentése hidrogénatom), például kálium-karbonát jelenlétében.

Kondenzáció után a vegyületeket 0—100°C -on 1—24 óra hosszat hidrolizáljuk savval vagy bázissal, például ecetsavval, 1—35%-os vizes sósavoldattal, 1—20%-os vizes nátrium-hidroxid oldattal, 1—25%-os vizes vagy méta nolos ammóniaoldattal.

d) Egy telítetlen oldalláncnak megfelelő

XIX általános képletű vegyületet — amelyben a funkciós csoportok adott esetben védettek — kondenzálunk fémkatalfzis mellett egy Vllb általános képletű vegyülettel a 9-helyzetű nitrogénatomon a kívánt oldalláncot tartalmazó

XX általános képletű guaninszármazékká, majd ezt követően a védőcsoportokat egy vagy több kémiai reakcióval eltávolítva egy megfelelő 111 általános képletű vegyülethez jutunk.

A fenti képletekben R’„, R”_ft, R₂„, R₄„, R₅„, R₆í, és R₇í, jelentése az előbb megadottakkal azonos.

-5193595

A kondenzációt előnyösen valamilyen szerves oldószerben, például dimetil-formamidban, etanolban, acetonitrilben vagy diklór-metánban 0°C és 100°C közötti hőmérsékleten 1 órától 3 napig terjedő időtartamig végezzük valamilyen fémkatalizátor, például tetrakisz(trifenil-foszfin)-palládium(O) jelenlétében.

Az előbbiekben leírt c) — d) eljárásváltozatok geometriai izomerek elegyeinek előállítására használhatók, vagy megfelelő esetekben az egyik geometriai izomer előállítására. Az egyik geometriai izomer továbbá az izomerkeverékekből a szakterületen ismert módszerekkel is kinyerhető.

Az előbb leírt eljárásokban használt kiindulási anyagok vagy ismert vegyületek, vagy szakterületen járatosak által ismert módszerekkel előállíthatok.

Az új vegyületeknek ezek a csoportjai önmagában ismert módszerrel előállíthatok.

A találmány szerinti vegyületek fiziológiásán elviselhető savaddíciós sóit a szakterületen ismert módszerekkel állítjuk elő. Savval képzett sók a találmány szerinti valamely vegyület valamilyen savval, például sósavval, hidrogén-bromiddal, kénsavval vagy valamilyen szerves szulfonsavval való reagáltatásával állíthatók elő.

Szintén a jelen találmány oltalmi körébe tartoznak az I általános képletü vegyületeket előállító eljárása amely képletben

A jelentése (Aa) vagy (Ab) általános képletü csoport, amelyben m jelentése 1 vagy 2; n jelentése 1 vagy 2;

ahol m jelentése 1, ha n jelentése 2, és m jelentése 2, ha n jelentése 1;

R’„ jelentése (CH₂)_POH általános képletü csoport vagy karboxicsoport;

p jelentése 1-től 4-ig terjedő egész szám; R'_h és R”* jelentése hidrogénatom vagy R*-(CH₂)_POH általános képletü csoport, vagy R’i, és R’7 együtt egy további szén-szén kötést jelentenek, azaz alkinkötést képeznek— vagy fiziológiásán elviselhető savaddíciós sóikat, ezek geometriai izomereit valamilyen gyógyszerészetileg elfogadható hordozóval együtt tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására is.

A találmány szerinti vegyületek alkalmazhatók szisztemikusan vagy helyileg, és a klinikai gyakorlatban rendesen helyileg, szájon át, orron át, injekcióban, infúzióban vagy inhalációban adhatók be a hatóanyagot az eredeti vegyület vagy adott esetben annak valamilyen gyógyszerészetileg elfogadható sója formájában valamilyen gyógyszerészetileg elfogadható hordozóval, például valamilyen szilárd, félszilárd vagy folyékony hígítóval együtt tartalmazó gyógyszerkészítmény vagy emészthető kapszula formájában, és ezen készítmények szintén a jelen találmány oltalmi körébe tartoznak. A vegyületek hordozó anyag 6 nélkül is alkalmazhatók. Gyógyszerkészítményekre példaként tabletták, oldatok, cseppek, így orrcseppek, szemcseppek, helyi alkalmazásra szolgáló készítmények, így kenőcsök, zselék, krémek és szuszpenziók, inhaláció céljára szolgáló aerosolok, orrsprayk, liposzómak stb. említhetők. A hatóanyag általában a készítmény 0,1 és 99 súly%-a közötti mennyisége, például injekció céljaira szánt készítmények esetében 0,5 és 20% közötti, és szájon át való beadásra szánt készítmények esetében 0,1 és 50% közötti.

A készítmények előnyösen dózisegység-fcrmák. Továbbá előnyösen sterilizált formában készülnek.

A találmány szerinti valamely vegyületet taitalmazó, szájon át való beadásra szánt gyógyszerkészítmények egységdózis formában való elkészítése céljából a hatóanyagot valamilyen szilárd, elporított hordozóval, példán! laktózzal, szacharózzal, szorbittal, mannittal, valamilyen keményítővel, például burgonyakeményítővel, kukoricakeményítővel, amilopektinnel, laminaria porral vagy citruspu’p-porral, valamilyen cellulózszármazékka’ vagy zselatinnal keverjük, és hozzáadhatunk még sikosítószereket, például magnézium- vagy kalcium-sztearátot vagy valamilyen Carbowa^-ot vagy egyéb polietilénglikoi-viaszokat, és tablettákká vagy drazsémagokká préseljük. Ha drazsékat kívánunk készíteni, akkor a magokat például gumiarábikumot, talkumot és/vagy titán-dioxidot tartalmazó tömény cukoroldatokkal vonjuk be vagy valamilyen könnyen illő, szerves oldószerben vagy szerves oldószerek elegyében oldott filmképző szerrel. Ezekhez a bevonatokhoz színezőanyagok is adhatók, például a különböző hatóanyag-mennyiségek közti különbségtétel céljából. Zselatinból és például glicerinből és valamilyen lágyítóból álló,lágy zselatinkapszulák vagy hasonló kapszulák készítése esetén a hatóanyagot valamilyen Carbowa^®-szal vagy valamilyen alkalmas olajjal, például szézámolajjal, olívaolajjal vagy földimogyoró olajjal keverjük. Kemény zsclatinkapszulák a hatóanyag szilárd, elporított hordozókkal, például laktózzal, szacharózzal, szorbittal, mannittal, keményítőkkel (például burgonyakeményítővel, kukoricakeményítővel vagy amilopektinnel), cellulózszármazékokkal vagy zselatinnal készített granulátumát tartalmazhatják, és tartalmazha'nak még sikosítószerként magnézium-szte¹aratót vagy sztearinsavat.

A hatóanyag egymástól lassan oldódó bevonatokkal elválasztott több rétegének alkalmazásával elnyújtott hatóanyag kibocsátású tablettákat kapunk. Elnyújtott hatóanyagkibocsátású tabletták készítésére másik módszer az, hogy a hatóanyag dózisát különböző vastagságú bevonatokkal ellátott granulákba osztjuk szét, és a granulákat a hordozóanyaggá’ együtt tablettákká préseljük. A hatóanyag például zsírból és viaszos anyagokból készült,

-6193595 lassan oldódó tablettákba is bedolgozható, vagy ugyancsak elosztható valamilyen oldhatatlan anyagból, például valamilyen fiziológiásán közömbös műanyagból készített tablettában is.

Szájon át való beadásra szánt folyékony készítmények készülhetnek elixírek, szirupok vagy szuszpenziók, például körülbelül 0,1 súly %-tót 20 súly %-ig terjedő mennyiségű hatóanyagot, cukrot és etanol, víz, glicerin, propilénglikol és adott esetben aroma, szacharin és/vagy (karboxi-metil)-cellulóz diszpergálószer elegyét tartalmazó oldatok formájában.

Parenterális úton való beadásra szánt injekciós készítmények a hatóanyag vagy valamilyen fiziológiásán elviselhető sója általában 0,05—10% koncentrációjú és adott esetben valamilyen stabilizálószerrel és/vagy pufferanyagokkal készített,vizes oldatát tartalmazzák. Az oldat dózisegységeit előnyösen ampullákba zárva szerelhetjük ki.

Helyileg való alkalmazás céljára, különösen bőrön, geniiáliákon és szájban és szemeken lévő herpeszvírus fertőzések kezelésére a készítmények alkalmasan valamilyen oldat, kenőcs, gél, szuszpenzió, krém vagy hason lók formájában készülnek. A hatóanyag menynyisége változhat, például 0,05 és 20 súly% között. Helyileg való alkalmazásra szolgáló ilyen készítmények ismert módon készíthetők a hatóanyag ismert hordozó anyagokkal, például izopropanollal, glicerinnel, paraffinnal, sztearil-alkohollal, polieti lén - gli kol la I, polipropilén-glikolla 1 stb.-vei való keverésével. A gyógyszerészetileg elfogadható,hordozó lehet valamilyen ismert, kémiai abszorpciót elősegítő anyag. Ilyen abszorpció promoter például dimetil-acetamid (lásd 3,472,931 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás), triklór-etanol vagy trifluor-etanol (lásd 3,891,757 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás), bizonyos alkoholok és ezek elegyei (lásd 1,001,949 sz. nagy-britanniai szabadalmi leírás). A készítmények tartalmazhatnak még detergenseket is a hatóanyag bőrbe való behatolásának elősegítésére.

A beadandó hatóanyag dózisa széles tartományon belül változhat, és különböző tényezőktől függ, például a fertőzés súlyosságától, a páciens korától stb., és egyedileg állapítandó meg. A találmány szerinti vegyületek naponta beadandó mennyiségére lehetséges tartományként körülbelül 0,1 mg-tól körülbelül 2000 mg-ig terjedő mennyiség említhető, előnyösen 1 mg-tól körülbelül 2000 mg-ig helyi alkalmazás esetén, 50 mg-tól 2000 mg-ig vagy 100 mg-tól körülbelül 1000 mg-ig szájon át való beadás esetén, és 10 mg-tól körülbelül 2000 mg-ig vagy 50-től körülbelül 500 mg-ig injekciós alkalmazás esetén.

Súlyos esetekben szükséges lehet ezeket a dózisokat 5-szörösre, 10-szeresre növelni. Kevésbé súlyos esetekben elegendő lehet 500 vagy 1000 mg-ig terjedő mennyiséget használni.

A hatóanyagokat tartalmazó gyógyszerkészítmények alkalmasan úgy formázandók, hogy ezen a tartományon belüli dózisokat biztosítsanak vagy egyszeri dózisegységekként vagy többszörös dózisegységekként.

Felfedeztük, hogy az I általános képletű vegyületek és ezek fiziológiásán elviselhető sói herpeszvírus szaporodásának gátlására használhatók. Az I általános képletű vegyületek és ezek fiziológiásán elviselhető sói ennélfogva vírusfertőzések gyógyászati és/vagy megelőző kezelésére használhatók.

A következő példák a jelen találmány szerinti vegyületek előállítását szemléltetik.

1. példa

9- [4-Hidroxi-2- (hidroxi-metil) -butil] -guanin (VSA 671) előállítása, (b) eljárás

135 mg (3,57 mmól) nátrium-bórhidrid és 220 mg (2,53 mmól) vízmentes lítium-bromid 4 ml desztillált vízmentes bisz(2-metoxi-etil)-éterrel (diglim) készített szuszpenzióját szobahőmérsékleten 30 percig keverjük. Ezután hozzáadunk 215 mg (0,656 mmól) 2- [(2-amino-6-klór-9-purinil) -metil] -borostyánkősav-dimetil-észtert és 3 csepp trimetil-borátot, majd az elegyet éjszakán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, és utána 5 óra hoszszat 100°C-on melegítjük. Az oldószert vákuumban eldesztilláljuk, és a maradékot 10 ml 70%-os vizes hangyasavoldatban oldjuk, és éjszakán keresztül 50°C-on melegítjük. Az elegyet vákuumban szárazra pároljuk, a maradékot vízben oldjuk, nátrium-hidrogén-karbonáttal semlegesítjük, és vákuumban ismét bepároljuk. Szilikagélen etil-acetát : metanol : víz (4:3:1) eleggyel végzett kromatografálás, és vízből való átkristályosítás után 99 mg 9-[4-hidroxi-2-(hidroxi-metil)-butil] -guanint kapunk. A vegyületet preparatív nagynyomású folyadék - kromatográfiával (Porasil C,₈ fordított fázisú oszlop; metanol :

: víz=20 : 80) tisztítva vízből végzett átkristályosítás után tiszta terméket nyerünk. Olvadáspont: 235°C.

Az ultraibolya spektrum adatai: k_max (nm): 0,01 mólos sósavoldatban 253 (277) vízben (pH 7) 252 (270 infl.) 0,01 mólos nátrium-hidroxid oldatban 268 (256 infl.)

A magmágneses rezonanciaspektrum adatai (DMSO-d_e): δ: 1,43 (m, 2H) CH₂CH₂OH; 2,09 (m, 1H) CH; 3,34 (d, 2H) CHCH₂OH;

3,47 (t, 2H) CH₂CH₂OH; 3,96 (ABX rendszer. 2H) NCH₂; 6,25 (széles s, 2H)NH₂; 7,59 (s, 1H) H8; 10,4 (széles s, 1H) NH.

A kiindulási vegyületként használt 2-[(2-amino-6-klór-9-purinil) -metil] -borostyánkősav-dimetil-észtert a következőképp állítjuk elő:

4,07 g (0,024 mól) 2-amino-6-klór-purin, 5,00 g (0,032 mól) dimetil-itakonát és 0,2 g 55%-os olajos nátrium-hidrid diszperzió 50 ml vízmentes dimetil-formamiddal készített elegyét szobahőmérsékleten 3 napig keverjük.

-7193595

Utána hozzáadunk körülbelül 50 ml vizet, és az elegyet kétszer 50 ml hexánnal mossuk, és utána 2 x 50 ml diklór-metánnal extraháljuk. Az egyesített diklór-metános extraktumokat kétszer 20 ml vízzel mossuk, vízmentes 5 magnézium-szulfáttal szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. A maradékot dietil-éterrel kezelve és megszárítva fehér kristályos terméket kapunk. Szilikagélen kloroform : metanol (15:1) eleggyel végzett kromatográfia 10 5,54 g (71%) vagy metanol : víz elegyből végzett átkristályosítás 5,15 g (66,1%) 2-[(2-amino-6-klór-9-purinil)-metil] -borostyánkősav-dimetil-észtert eredményez.

Az ultraibolya spektrum adatai etanolban: ₁₅λ,,,,,, (nm): 310 (247).

A magmágneses rezonanciaspektrum adatai (CDCI3): δ 2,67 (dd, 2H) CH₂COO; 3,46 (m, 1H)CH;3,7O (2s, 2x3H) OCH₃; 4,42 (ABX rendszer, J(,c_ra=14 Hz, 2H) NCH₂; 5,35 (szé- 20 les s, 2H) NH₂; 7,79 (s, IH) H8.

2, példa

9- ]4-Hidroxi-3-/hidroxi-metil) - butil] - guanin (V1S 873) előállítása (a) eljárás 25

1,275 g (7,5 mmól) 2-amino-6-klór-purin és 0,69 g (5 mmól) kálium-karbonát 30 ml vízmentes dimetil-formamiddal készült elegyét 15 percig ultrahangkezelésnek vetjük alá, majd hozzáadunk 1,82 g (5 mmól) benzil- [2-(benziloxi-metil)-4-bróm-butiI] -étert, és az elegyet 4 óra hosszat ultrahanggal kezeljük, és utána éjszakán keresztül keverjük. Vákuumban végzett bepárlás után a maradékot háromszor 50 ml kloroformmal extrahál- gg juk, és az extraktumokat vákuumban szárazra pároljuk. Szilikagélen kloroform : metanol (20:1) eleggyel végzett kromatografálás 0,58 g (26%) tiszta [4-(2-amino-6-klór-9-puriniI)-2-(benziloxi-metil)-butil] -benzil-éter ered- 40 menyhez. Az illető vegyület kis mintája toluolból átkristályosítva 108,5—109,5°C olva dáspontú anyagot kapunk.

A magmágneses rezonanciaspektrum (CDC1₃) adatai: δ 1,96 (m, 3H) N-C-CH₂-CH;

3,48 (ABX rendszer, 4H) (CH/CH₂O); 4,13 ’ (t, 2H) NCH₂; 4,46 (s, 4H) OCH₂Ph; 5,49 (s,

2H) NH₂; 7,30 (m, IQH) fenil; 7,69 (s, IH) H8.

Védőcsoport-eltávolítás: 50

0,904 g (2 mmól) [4-(2-amino-6-klór-9purinil) -2- (ben zil oxi - metil) -butil ] - benzil -éter 25 ml 80%-os vizes hangyasavoldattal készített oldatát 1 óra hosszat 100°C-on tartjuk, hozzáadunk 0,40 g 10%-os palládiumos 55 szénkatalizátort, és az elegyet szobahőmérsékleten és atmoszférikus nyomáson hatásos keverés közben 45 percig hidrogénezzük. Vákuumban szárazra pároljuk, majd a maradékot 50 ml vízzel forrásig melegítjük, hoz- θθ záadunk I ml tömény, vizes ammónium-hidroxid oldatot, az oldatot rövid ideig élénken forraljuk, és utána szárazra pároljuk. Vízből végzett átkristályosítással 0,23 g (45%)

9- [4-hiclroxi-3- (hidroxi-metil) - butil] -guaninf kapunk. Olvadáspont : 252—262°C (bomlás, lassú melegítés) vagy 264—265°C (a kapilláris gyors bemerítésekor).

A magmágneses rezonanciaspektrum (DMSO-d₆) adatai: δ 1,51 (m, IH) CH; 1,76 (q, 2H) N-C-CH₂; 3,42 (ABX rendszer, 4H) 2 CH₂O; 4,02 (t, 2H) NCH₂; 6,29 (széles s, 2H) NH₂; 7,64 (s, IH) H8; 10,3 (széles s, IH) NH.

Az ultraibolya spektrum adatai: λ_Μί(ηπι) etanol 255 ε= 12300 (kb. 270 inil.) mólos sósavoldat 253 ε=1130 279 1 mólos nátrium-hidroxid oldat 268 (257 inil.)

A kiindulási vegyületként használt benzil- [2- (benziloxi-metil) -4-bróm-butil] -étért a következőképpen állítjuk elő:

a) (2,2-Dimetoxi-etil)-malonsav-dietil-észter előállítása:

168,18 g (1,05 mól) dietil-malonátot adunk

23,0 g (1,00 mól) fém-nátrium 500 ml,vízmentes etanolban való oldásával készített nátriuin-etoxid oldathoz 50°C-on 45 perc alatt. Utána ugyanazon a hőmérsékleten 45 perc ala t hozzáadunk 74,2 g (1,06 mól) bróm-acetilaidehid-dimetil-acetált, és az elegyet éjszakán át forraljuk visszafolyó hütő alatt. Az etanol vákuumban eldesztilláljuk, és a maradékot 200 ml vízben oldjuk, majd háromszor 300 ml dietil-éterrel extraháljuk. Az extraktumokat vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk. bepároljuk, és vákuumban ledesztillálva 115.0 g (46%) cím szerinti vegyületet kapunk. Forráspont: 97—101°C 80 Pa (0,6 mmHg) nyomáson.

\ magmágneses rezonanciaspektrum adatai (CDCI₃): δ 1,30 (t, J=7 Hz, 6H) 2C-CH₃; 2,20 (dd, J=5HZ és 7Hz, 2H) CH-CH₂; 3,35 (s, SH) 2 OCH₃; 3,44 (t, IH) COCHCO; 4,20 (q, )=7Hz, 4H) 2 OCH₃; 4,42 (t, J=5Hz, IH) O-CH-O.

5) 4,4-Dimetoxi-2- (hidroxi-metil)-butanol előállítása·

115,0 g (0,46 mól) (2,2-dimetoxi-etil)-malonsav-dietil-észtert adunk 38,0 g (1,00 mól) lítii m-alumínium-hidrid 400 ml vízmentes dietil-éterrel készült szuszpenziójához olyan ütemben, hogy az elegy visszafolyó hűtő alatt enyién forrjon. A beadagolás után 15 percig keverjük, majd 40 ml vizet, 40 ml 15%-os vizes nátrium-hidroxid oldatot és 120 ml vizet adunk hoz iá, és a keverést addig folytatjuk, amiig fehér szuszpenziót kapunk. A szervetlen sókat kiszűrjük, és néhányszor 200 ml tetrahidrofuránnal extraháljuk. Az egyesített,szerves extraktumokat bepároljuk, és vákuumban kétszer desztilláljuk, így 50,23 g (66,5%) cím szerinti vegyületet kapunk. Forráspont: 116— 125’C 2,7 Pa (0,02 mmHg) nyomáson.

A magmágneses rezonanciaspektrum adatai (CDC1₃): δ 1,6-2,1 (m, 3H) CH₂-CH; 3,35 (s, 6H) 2 OCH₃; 3,67 (d, 4H) 2 CH₂O;

4,48 (t, J=5 Hz, IH) O-CH-O.

e) Benzil-2-(benziloxi-metil)-4,4-dimetoxi-buril-éter előállítása.

32,72 g (0,75 mól) 55%-os olajos nátrium-hidrid diszperziót hexánnal kétszer mosunk

-8193595 és 200 ml tetrahidrofuránban szuszpendáljuk. Hozzáadagolunk cseppenként 49,26 g (0,3 mól) 4,4-dimetoxi-2-(hidroxi-metil)-butanolt olyan ütemben, hogy gyenge hidrogénfejlődést tartsunk fenn. Utána 30 perc alatt hozzáadunk 94,94 g (0,45 mól) benzil-kloridot, és az elegyet éjszakán keresztül forraljuk viszszafolyó hűtő alatt, majd lehűtjük, 50 ml etanollal hígítjuk, és vákuumban bepároljuk. A maradékot körülbelül 200 ml vízben szuszpendáljuk, és háromszor 100 ml dietil-éterrel extraháljuk. Az egyesített, szerves extraktumokat magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban desztilláljuk. Ily módon 94,34 g (91%) cím szerinti vegyületet kapunk, amely 1,3 Pa (0,01 mmHg) nyomáson 197—200°C-on desztillál.

A magmágneses rezonanciaspektrum adatai (CDC1₃): δ 1,67 (diffúz t, 2H) CHCH₂CH; 2,02 (m, 1H) CH; 3,23 (s, 6H) 2 OCH₃; 3,46 (d, 4H) 2 CH₂O; 4,43 (s, 4H) 2 OCH₂Ph; 4,43 (t, 1H) O-CH-O; 7,27 (széles s, 10H) fenil.

d) 4-Benziloxi-3-(benziloxi-metil)-butanol előállítása:

51,62 g (0,15 mól) benzil-[2-(benziloxi-metil)-4,4-dímetoxi-butii] -éter, 70 ml ecetsav, 30 ml víz és 100 ml tetrahidrofurán elegyét 2 óra hosszat forraljuk visszafolyó hűtő alatt, és utána vákuumban bepároljuk. A maradékot dietil-éterben oldjuk, és az oldatot vizes kálium-karbonát oldattal és vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. A maradék, nyers 4-benziloxi-3- (benziloxi-metil) -butanolt (kvantitatív kitermelés) 100 ml tetrahidrofuránban oldjuk, és 30 perc alatt hozzáadjuk 7,6 g (0,20 mól) lítium-alumínium-hidrid 100 ml tetrahidrofuránnal készített szuszpenziójához. Utána 8 ml vizet, 8 ml 15%-os vizes nátrium-hidroxid oldatot és 24 ml vizet adunk az elegyhez, és addig keverjük, amíg fehér, homokszerű szuszpenziót kapunk. A szervetlen sókat kiszűrjük, és néhányszor mossuk tetrahidrofuránnal. Az egyesített extraktumokat vákuumban bepárolva 41,93 g (93%) cím szerinti vegyülethez jutunk.

A magmágneses rezonanciaspektrum adatai (CDC1₃): δ 1,66 (q, 2H) CH₂CH₂O; 2,05 (m, 1H) CH; 3,0 (t, 1H) OH; 3,46 (d, 4H) CH(CH₂O)₂; 3,64 (q, 2H) CH₂OH; 4,47 (s, 4H) 2 OCH₂Ph; 7,30 (m, 10H) fenil.

e) Benzil- [2-(benziioxi-metil)-4-bróm-butil] -éter előállítása:

41,75 g (139 mmól) 4-benziloxi-3-(benziloxi-metil)-butanol 150 ml vízmentes diklór-metánnal készített oldatát jeges,vízes fürdőben lehűtjük. Keverés közben hozzáadunk 42,0 g (160 mmól) trifenil-foszfint és utána 15 perc alatt apránként 26,0 g (146 mmól) N-bróm-szukcinimidet. Szobahőmérsékleten végzett 1 óra keverés után 400 ml dieti 1-étert adunk hozzá, és a kívánt triíenil-foszfin-oxidot kiszűrjük. Az oldatot vákuumban kis térfogatra bepároljuk, és sok étert adunk hozzá a terméknek a kiváló trifenil-foszfin-oxidból való kiextrahálására. Utána ezt az extrahálá16 si-kicsapási műveletet petroléterrel is megismételjük, így bepárlás után 33,55 g (66%) nyers cím szerinti vegyületet kapunk.

A magmágneses rezonanciaspektrum adatai (CDCl₃): δ 1,98 (q, 2H) Br-C-CH₂; 2,15 (m 1H) CH; 3,45 (t, 2H) BrCH₂; 3,47 (m, 4H) CH (CH₂O)₂; 4,47 (s, 4H) 2 OCH₂Ph; 7,30 (m, 10H) fenil.

3. példa

9- [4-Hidroxi-2- (hidroxi-metil) -butil] -guanin (VSA 671) előállítása (b) eljárás

8,00 g (0,0244 mól) 2- ](2-amino-6-klór-9-purinil) -metil] -borostyánkősav-dimetil-észtert oldunk 50°C-on 200 ml terc-butanolban, apránként hozzáadunk 2,66 g (0,122 mól) lítium-bórhidridet, és az elegyet 1 óra hosszat keverjük. Utána 100 ml vizet adunk hozzá, és a keverést éjszakán át folytatjuk, majd a szervetlen sókat kiszűrjük, és az oldatot vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot megvizsgálva azt találtuk, hogy az 78 mól% 2-amino-6-terc-butoxi-9- [4-hidroxi-2-(hidroxi-metil)-butil]-purint tartalmaz a 6-klór-vegyülettel együtt.

A protonmágneses rezonanciaspektrum adatai (DMSO-d₆): δ 1,10 (s, 9H) C(CH₃); 1,38 (m, 2H) CH₂CH₂OH; 2,14 (m, IH) CH; 3,34 (d, 2H) CHCH₂OH; 3,45 (diffúz t, 2H) CH₂CH₂OH; 4,06 (t. ABX rendszer. 2H) NCH₂4,5 (nagyon széles s) OH; 6,77 (s, 2H) NH₂, 8,08 (s, 1H) H8.

A ^l3C magmágneses rezonanciaspektrum adatai (DMSO-d₆); δ 31,41 C(CH₃)₃; 31,92 £H₂CH₂OH; 37,88, CH; 45,01, NCH₂; 58,72 és 61,3, 2 CH₂0H; 66,65, £(CH₃)₃; 123,59, C5;

143.91, C8; 149,53, C6; 154,59, C4; 159,87, C2.

Védőcsoport-el távolítás:

436 mg (1,41 mmól) nyers 2-amino-6-terc-butoxi-9- [4-hidroxi-2-(hidroxi-metil)-butil] -purin 6 ml 50%-os vizes hangyasavoldattal készített oldatát 3 óra hosszat 100°C-on tartjuk, majd vákuumban szárazra pároljuk, sok vizet adunk hozzá, és liofilizáljuk az elegyet. A maradékot 10 ml 2 mólos,vizes ammónium-hidroxid oldattal 2 óra hosszat 100°C-on mele gítjük. Az ammóniát nitrogéngáz-árammal eltávolítjuk, az oldatot forrásig melegítjük, a kevés,szilárd anyagot eltávolítjuk, és a szűrletet hűtőszekrényben lehűtjük, így 208 mg kristályos 9- [4-hidroxi-2- (hidroxi-metil) -butil] -guanint kapunk.

A ^l3C magmágneses rezonanciaspektrum adatai (DMSO-d₆): δ 31,80, CH₂CH₂OH; 38,17 CH; 44,35, NCH₂; 58,80 és 60,94, 2 CH₂OH; 116,64, C5; 138,05, C8; 151,57, C4; 153,57, C2;

156.92, C6.

4. példa

4- (2-Ami no- l,6-dihidro-6-oxo-9-purinil) -2- (hidroxi-metil)-vajsav előállítása (a) eljárás

3,37 g (19,9 mmól) 2-amino-6-kIór-purint,

4,49 g (19,9 mmól) 4-bróm-2-(hidroxi-metil)-vajsav-etil-észtert és 2,75 g (19,9 mmól) vízmentes kálium-karbonátot 50 ml dimetil-form9

-9193595 amiddal elegyítünk, és az elegyet szobahőmérsékleten 92 óra hosszat keverjük. Az elegyet utána megszűrjük, és a szürletet bepároljuk. A maradékot háromszor 50 ml kloroformmal extraháljuk, és az egyesített extraktumokat bepároljuk. Szilikagélen kloroform : metanol (10 : 1) eleggyel végzett flash-kromatográfiával és vízből való kétszeri átkristályosítással 0,995 g 4-(2-amino-6-klór-9-purinil)-2-(hidroxi-metil) -vajsav-etil-észtert kapunk.

A ^l3C magmágneses rezonanciaspektrum adatai (CDC1₃): δ 173,56; 159,40; 153,81; 151,16; 142,38; 124,89; 62,61; 61,11; 45,08; 41,91; 28,46 és 14,16 ppm.

Védőcsoport-eltávolítás:

0,80 g 4 - (2-amino -6-klór - 9-p u r in il) -2-(hidroxi-metil)-vajsav-etil-észtert 50ml 1 mólos sósavoldatban 3 óra hosszat forralunk visszafolyó hűtő alatt, és utána vákuumban bepároljuk, majd háromszor 10 ml vízzel ismételten bepároljuk, és a maradékot 5 ml vízben oldjuk. Utána a pH-t szilárd nátrium-hidrogén-karbonáttal 6-7 közé állítjuk. A kapott oldatot megszűrjük, és a pH-t ecetsavval 4-re állítjuk. A 0°C-ra való lehűtés után a csapadékot kiszűrjük, és vízzel mossuk. Vízből való átkristályosítás után 0,43 g 4-(2-amino-1,6-dihidro-6-oxo-9-purinil) - 2- (hidroxi-metil)-vaisavat kapunk.

A ¹³ C magmágneses rezonanciaspektrum (DMSO-d₆) adatai: 174,80 (C=O); 157,09 (C6); 153,64 (C2); 151,38 (C4); 137,49 (C8); 116,84 (C5); 62,15 (CH₂OH); 45,59 (CH); 41,33 (NCH₂) és 28,66 (N-CH₂-CH₂) ppm.

A kiindulási anyagként használt 4-bróm-2-(hidroxi-metil)-vajsav-etil-észtert a következőképp állítjuk elő:

3,0 g 2-(hidroxi-metil)-butirolaktont [G. Claesson et al. Arkiv för kérni 28, 173 (1967)] oldunk 20 ml etanolban, és az oldatot 0°C-on hidrogén-bromiddal telítjük. Az oldatot 0°C-on 0,5 óra hosszat hagyjuk állni, utána az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékot jeges vízzel elegyítjük, és az elegyet 10%-os vizes nátrium-karbonát oldattal semlegesítjük. Az elegyet utána néhányszor extraháljuk dietil-éterrel, és az egyesített dietil-éteres extraktumokat telített,vizes nátrium-klorid oldattal mossuk, és vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk. Az oldószer el desztill ál ása után a maradékot 25 ml kloroformban oldjuk, és megszűrjük. Az oldószer ledesztil Iá lásáva l 4,59 g 4-bróm-2-(hidroxi-metil)-vajsav-etil-észtert kapunk.

A ^l3C magmágneses rezonanciaspektrum adatai (CDClj: δ 174,14; 62,54; 61,08; 46,02; 31,45; 38,89 és 14,26 ppm.

5. példa

9- [4-Hid roxi-2-(hidroxi-metil) -butil] -guanin-hidroklorid előállítása mg 9-[4-hidroxi-2-(hidroxi-metil)-butil]-guanint (1. példa) oldunk 0,4 ml 1 mólos vizes sósavoldatban, és az oldatot 1,3 Pa (0,1 mmHg) nyomáson éjszakán át liofilizál10 juk. Az 53 mg maradékot (kvantitatív kitermelés) néhány csepp meleg etanolban oldjuk, és néhány térfogatnyi tetrahidrofuránnal kicsapva fehér, kristályos terméket kapunk. Olvadáspont: körülbelül 85°C (bomlás).

A protonmágneses rezonanciaspektrum adatai (D₂O): δ 1,61 (m, 2H) CH₂CH₂OH; 1,87 (m, IH); 2,31 (szeptett, IH) CH; 3,57 (d, 2H) CHCH₂OH; 3,72 (diffúz q) CH₂CH₂O 4,32 (m, 2H) NCH₂; 4,90 (s) HDO; 8,96 (s, IH) H8.

6. példa

9- [4-Hidroxi-3- (hidroxi-metil) -2-butenil] -guanin (VSA 668) előállítása (c) eljárás

1.42 g (3,16 mmól) nyers l-benziloxi-2- (benziloxi-metil) -2-hidroxi-3-butént adunk 10 ml diklór-metánban 0,71 g (6 mmól) tionil-k'orid és 2 csepp dimetil-formamid 10 ml diklór-metánnal készített oldatához, és az olda'ot 0,5 óra hosszat keverjük, majd vákuumban bepároljuk. Toluolt adunk hozzá, és az elegyet vákuumban ismét bepárolva nyers 1 - benziloxi-2- (benziloxi-metil) -4-klór-2-butént kapunk.

1,61 g (9,5 mmól) 2-amino-6-klór-purin és 1,31 g (9,5 mmól) finoman elporított,vízmentes kálium-karbonát 50 ml vízmentes dimetil-fo mamiddal készült elegyét 5 percig 100°C on tartjuk, majd lehűtjük. A nyers 1-benziloxi-2-(benziloxi-metil)-4-klór-2-butén 25 ml vízmentes dimetil-formamiddal készített oldatát adjuk hozzá keverés közben 10°C-on 4 óra alatt. Az elegyet 2 napi szobahőmérsékleten való állás után vákuumban bepároljuk, a maradékot kétszer 25 ml kloroformmal extraháljuk, és az extraktumot szárazra pároljuk. Szilifagéten kloroform : metanol (19:1) elegygyel végzett kromatografálás után 0,25 g (18%) 4-(2-amino-6-klór-9-purinil)-1-benziloxi-metil)-2-butént kapunk.

Vékonyréteg-kromatográfia szilikagélen, kloroform: metanol (13:1) elegyben, R/ 0,62.

A prtonmágneses rezonanciaspektrum adatai (CDC1₃-CD₃OD): δ 4,05 és 4,19 (2s, 2x x2H) = C(CH₂O)₂; 4,49 és 4,55 (2s, 2x2H) benzil CH₂; 4,70 (d, 2H) N-CH₂; 5,85 (t, IH) CH=; 6,2 (széles s, 2H) NH₂; 7,3 (széles s, 10H) fenil; 7,49 (s, IH) H8.

Védőcsoport-eltávolítás:

148 mg (0,329 mmól) 4-(2-amino-6-klór-9-purinil) -1 -benziloxi-2- (benziloxi-metil) -2-butén 1,8 ml trifluor-ecetsavval és 0,2 ml vízzel készített oldatát lezárt ampullában U0°Con 17 óra hosszat melegítjük. Lehűtés után az elegyet 2 ml vízzel hígítjuk, egy percig forraljuk, és utána vákuumban szárazra pároljuk, vízben oldjuk, és újból bepároljuk. Szilikagélen etil-acetát : metanol : víz (70:20:10) eleggyel végzett kromatográiia 34 mg (41%) 9- [4-hid.roxi-3-(hidroxi-metil)-2-guanint eredményez.

A protonmágneses rezonanciaspektrum adatai (DMSO-d₆): δ 3,96 és 4,10 (2d, 2x2H) =C(CH₂O)₂; 4,68 (d, 2H) N-CH,; 4,83 (2t,

-10193595

2Η) 20Η; 5,60 (t, IH) CH=; 6,50 (széles s, 2H) NH₂; 7,66 (s, IH) H8; 10,6 (széles s. IH) NH.

A kiindulási vegyületként használt 1-benziloxi-2-(benziloxi-metil)-2-hidroxi-3-butént a következőképp állítjuk elő:

4,0 g (37,4 mmól) vinil-bromid 8 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített oldatához nitrogéngáz alatt 60°C-on hozzáadunk 0,94 g (38,7 mmól) magnéziumot 3 ml tetrahidrofuránban, és az elegyet szárazjeges etanollal hűtött visszafolyó hűtő alatt 1 óra hosszat forraljuk.

Az elegyhez 10°C-on cseppenként hozzáadjuk 7,4 ml (27,4 mmól) 1,3-dibenziloxi-2-oxo-propán (Araki Y. et al., J. Chem.Soc., Perkin Trans. 1, 1981, 19) 25 ml tetrahidrofuránnal készített oldatát, és az elegyet szobahőmérsékleten 2 óra hosszat keverjük. Utána hozzáadunk 8 ml 20%-os vizes ammónium-klorid oldatot, majd a szerves fázist bepároljuk, a maradékot dietil-éterben oldjuk, vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. így 7,90 g nyers 1-benziloxi-2- (benziloxi-metil)-2-hÍdroxi-3-butént kapunk olajként.

A protonmágneses rezonanciaspektrum adatai (CDC1₃): δ 2,67 (s, IH) OH; 3,50 (s, 4H) C(CH₂O)₂; 4,55 (s,4H) 2 OCH₂Ph; 5,0—6,3 (m, 3H) CH₂=CH; 7,32 (széles s, 10H) fenil.

7. példa cisz-9- (4-Hidroxi-2-butenil)-guanin (VSA 151) előállítása (d) eljárás.

3,4 g 2-amino-6-klór-purin, 1,65 g butadién-monoepoxid és 1,0 g tetrakisz (trifenilfoszfin) -palládium (O) 75 ml vízmentes dimetil-formamiddal készített elegyét nitrogénatmoszférában keverjük, és 60°C-on 45 percig melegítjük. Az oldószert 13 Pa (0,1 mmHg) nyomáson eldesztilláljuk, és a maradékot négyszer 50 ml forró kloroformmal eldörzsöljük. Az egyesített,kloroformos oldatokat 25 mire bepároljuk, majd 100 ml dietil-éterrel hígítjuk. A gumiszerü csapadékot kiszűrjük, szárítjuk, és háromszor 50 ml forró 1,2-dimetoxi-etánnal eldörzsöljük. Az egyesített oldatokat 13 Pa (0,1 mmHg) nyomáson bepároljuk, 4 g nyers keveréket kapunk, amelyet 500 g szilikagéllel töltött oszlopon 800 ml kloroform : metanol (10:1) eleggyel majd kloroform : metanol (8:1) eleggyel eluálva választunk szét. Körülbelül 15 ml-es frakciókat szedünk, és a 74-78. frakciókból 0,2 g melléktermékként cisz-4- (2-amino-6-klór-9-purinil) -l-hidroxi-2-butént kapunk. Olvadáspont 160—I65°C.

Az ultraibolya spektrum adatai:

^max (nm): 0,1 mólos sósavoldat 241,315 0,1 mólos nátrium-hidroxid oldat 246,308

A protonmágneses rezonanciaspektrum adatai (DMSO-d₆): δ 4,20 (t, J=5, 4HZ, 2H) CH₂O; 4,76 (d, J=6, 8Hz, 2H) NCH₂; 5,54-5,83 (m, 2H) CH=CH); 6,69 (s, 2H)NH₂; 8,06 (s, 1H1 H8.

Védőcsoport-eltávolítás:

mg cisz-4- (2-amino-6-klór-9-purinil) -1-hidroxi-2-butént 5 ml 70%-os vizes hangyasavoldatban nitrogéngáz alatt 45°C-on 20 óra hosszat melegítjük. Az oldószert vákuumban ledesztilláljuk, és a maradékot megszárítjuk. Hozzáadunk 0,5 ml vizet, és az oldatot vizes ammónium-hidroxid oldattal semlegesítjük. A csapadékot kiszűrjük, vízzel, etanollal és dietil-éterrel mossuk, és szárítás után 40 mg cisz-9- (4-hid roxi-2-bu tenil) -guanint kapunk.

A protonmágneses rezonanciaspektrum adatai (DMSO-d₆): δ 4,15 (diffúz t, 2H) CH₂O 4,65—4,90 (ABX rendszer, 2H) NCH₂; 5,75 (m, 2H) CH=CH; 6,52 (széles s, 2H) NH₂; 7,66 (s, IH) H8.

8. példa

9-(4-Hidroxi-2-butinil)-guanin (VSB 631) előállítása (c) eljárás.

1,78 g (10 mmól) N-bróm-szukcinimidet adunk apránként keverés közben 2,50 g (30 mmól) l,4-dihidroxi-2-butin és 2,62 g (10 mmól) trifenil-foszfin 20 ml diklór-metánnal készített szuszpenziójához szobahőmérsékleten. Az elreagáltatlan butin-diolt 1 óra múlva kiszűrjük. Az oldatot vákuumban kis térfogatra bepároljuk, 20 ml vízmentes diklór-metánnal oldjuk, és 0°C-on keverés közben hozzáadjuk 1,70 g (10 mmól) 2-amino-6-klór-purin és 2,07 g (15 mmól) finomra elporított, vízmentes kálium-karbonát 75 ml vízmentes dimetil-formamiddal készített szuszpenziójához. A keverést szobahőmérsékleten 3 napig folytatjuk. Utána az elegyet vákuumban szárazra pároljuk. A szilikagélen kloroform : metanol (7:1) eleggyel végzett kromatográfia és vízből történő átkristályosítás (az 1,4-dihidroxi-2-butin eltávolítása miatt) utána 467 mg (20%) 4-(2-amino-6-klór-9-purinil)-1 -hidroxi-2-butint kapunk. (Vékonyréteg-kromatográfia szilikagélen kloroform : metanol = =5:1 elegyben; R/=0,57).

A protonmágneses rezonanciaspektrum adatai (DMSO-d₆): δ 4,10 (dt, 2H) CH₂O; 4,96 (t, J=2,0 Hz, 2H) NCH₂; 5,12 (t, J=5,9 Hz, IH) OH; 6,89 (széles s, 2H) NH₂; 8,17 (s, IH) H8.

A ^l3C magmágneses rezonanciaspektrum adatai (DMSO-d₆): δ 32,79 (NCH₂); 49,07 (CH₂O); 77,80 és 85,19 (C=C) ; 123,43 (C5) ; 142,43 (C8); 149,82 (C6); 153,69 (C4); 160,01 (C2).

Védőcsoport-eltávolítás:

140 mg (0,59 mmól) 4- (2-amino-6-klór-9-purínil)-1-hidroxi-2-butin 2 ml 50%-os vizes hangyasavval készített oldatát 6 óra hosszat 80°C-on melegítjük, és utána vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 2 mi víz: tömény ammónium-hidroxid oldat (1:1) eleggyel oldjuk, és az oldatot 1 óra hosszat 80°C-on melegítjük, majd vákuumban szárazra pároljuk. Vízből végzett átkristátyosítás után 90 mg (70%) 9-(4-hidroxi-2-butinil)-guanint kapunk.

-11193595

A protonmágneses rezonanciaspektrum adatai (DMSO-d₆): δ 4,09 (m,2H) CH₂O; 4,84 (t, J=2,0 Hz, 2H) NCH₂; 5,11 (t, J=6,0 Hz,

H) OH; 6,44 (széles s, 2H) NH₂; 7,73 (s, 1H)

H8. 5

A következő példák a jelen találmány szerinti gyógyszerkészítmények összetételét szemléltetik. A „hatóanyag kifejezés a jelen találmány szerinti valamely vegyületet vagy annak 10 valamilyen sóját jelenti.

Tabletták:

Egy tabletta összetétele:

Hatóanyag	20,0	mg, 15
Kukoricakeményítő	25,0	mg,
Laktóz	190,0	mg,
Zselatin	1,5	mg,
Tál kun?	12,0	mg,
Magnézium-sztearát	1,5 250,0	mg, 20 mg.

Kúpok:

Egy kúp összetétele Hatóanyag Aszkorbil-palmitát Kúpalap (Imhausen	20,0 mg, LtUmg, H vagy Witepsor H) 2000,0 mg-ra.	25
Szirup:			30
Hatóanyag		0,200 g,
Folyékony glükóz		30,0'g
Szacharóz		5,0 g
Aszkorbinsav		0,1 g	35
Ná t r i um - pirosz u I f it		0,01 g
Dinátrium-edetát		0,01 g
Narancsesszencia		0,025 g
Engedéylezett színezőanyag	0,015 g
Tisztított víz kiegészítve	100,0 g-ra.	40
Injekciós oldat:<
Hatóanyag		3,000 mg,
Nátrium-piroszulfit		0,500 mg,
Dinátrium-edetát		0,100 mg,	45
Nátrium-klorid		8,500 mg,
Injekciós minőségű,	steril
vízzel feltöltve	1,00 ml-re.
Nyelv alá helyezendő (sublingualis)	tabletták:	50
Hatóanyag	5,0 mg,
Laktóz	85,0 mg,
Talkum	5,0 rng,
Agár	5,0 mg,
	100,0 mg.		55

Kenőcs I.

Hatóanyag	i,o g,
(Ceti 1-t rimeti 1-ammón ium) -
-brómid	0,6 g,
Sztearil-alkohol	2,25 g,
Cetilalkohol	6,75 g.
Folyékony paraffin	17,0 g,
Glicerin	12,0 g,
Sósav pH 6,5-ig
Desztillált vízzel kiegészítve 100,0 g-ra.
Kenőcs 11:
Hatóanyag	3,0 g,
Polietilén-glikol 1500	50 g,
Polietilén-glikol 4000	15 g,
Propilén-glikol kiegészítve	100 g-ra.
Kenőcs III:
Hatóanyag	0,3 g
Szorbitán-monooleát	5,0 g,
Vazelin kiegészítve	100,0 g-ra.
Kenőcs IV:
Hatóanyag	5 g,
Lanolin	20 g,
T ween® 60	4 g,
Span®60	2 g,
Paraffinolaj	4 g,
³ ro pi lén-gl i kol	5 g,
Sósav pH 6,5—8-ig
Steril víz kiegészítve	100, g-ra

Kenőcs V: Hatóanyag Lanolin T ween®60 Span®40 Paraffinolaj Propi 1 én-gl i kol Bórsav nátrium-hidroxid pH 6,5—8-ig Steril víz kiegészítve g, g, g, 2 g, g, g, 2 g,

100 g-ra.

Zsele:

Hatóanyag 1,0 g,

Methocem 4,0 g,

Metil-p-hidroxi-benzoát 0,12 g.

Propil-p-hidroxi-benzoát 0,05 g,

Nátrium-hidroxiddal és sósavval pH 6,7-re állítva.

Desztillált vízzel kiegészítve 100,0 ml-re.

Szemcsepp I:

Hatóanyag Q,lg,

Dinátrium-edetát 0,10g,

Nátriutn-klorid, izotoniához	szükséges
mennyiség Sósav pH 6,5—8-ig Methocef® 65 HG 4000	0,65 g.
Steril víz kiegészítve	100 ml-re.
Szemcsepp 11: Hatóanyag	0,3 g,
Dinátrium-edetát	0,10 g,
Nátrium-klorid, izotóniához	szükséges
mennyiség Sósav pH 6,5—8,0-ig Methocer

Szemcsepp III:

Hatóanyag 0,2 g,

Dinátrium-edetát 0,1 g,

Nátrium-klorid, izotóniához szükséges mennyiség

-12193595

Bórsav	0.1 g.
Methocel HG 4000	0,65 g,
Steril víz kiegészítve	100 ml-re.
Szemkenőcs I:
Hatóanyag	5 g.
Paraffinolaj	19 g,
vazelin	76 g,
Krém:
Hatóanyag	3,0 g,
Arlaton®	4,0 g.
Cetilalkohol	2,0 g,
Sztearilsav	2,0 g,
Paraffinolaj	2,0 g.
Propilén-glikol	2,0 g,
Glicerin.	1,5 g,
Metil-p-hidroxi-benzoát	0,06 g,
Propil-p-hidroxi-benzoát	0,03 g
Nátrium-hidroxid	0,002 g,
2 mólos sósavoldat pH 8,0-ig	(vizes fázis)
Desztillált víz kiegészítve	100 g-ra.
Zselé:
Hatóanyag	3,0 g,
Methocel®	2,45 g,
Glicerin	10,0 g,
T ween®	0,10 g,
Metil-p-hidroxi-benzoát	0,06 g,
Propil-p-hidroxi-benzoát	0,03 g,
Nátrium-hidroxid	0,002 g,
2 mólos sósavoldat pH 8,0-ig
Desztillált víz kiegészítve	100 g-ra.

Tabletták: 35

Egy tabletta összetétele:

Hatóanyag 100,00 mg,

Keményítő 600,0 mg,

Laktóz	190,0 mg,
Polivinilpirrolidon	5,0 mg.
Magnézium-sztearát	5,0 mg,
	360,0 mg.

Biológiai vizsgálatok:

A találmány szerinti vegyületek herpeszvírusra gyakorolt gátló hatását az alább leírt módszerek alkalmazásával vizsgáltuk. A vegyületnek a gazdasejt működésénél észlelhető celluláris toxicitását is vizsgáltuk.

A következőkben a 9- [4-hidroxi-2- (hidroxi-metil)-butil] -guanint (bázis) VSA 671 vegyületként, a 9- [4-hidroxi-3-(hidroxi-metil)-butil] -guanint (bázis) VIS 873 vegyületként, a cisz-9- (4-hidroxi-2-butenil)-guanint (bázis) VSA 151 vegyületként és a 9-[4-hidroxi-3- (hidroxi-metil)-2-butenil ] -guanint (bázis) VSA 668 vegyületként jelöljük. A Herpes simplex type 1 vírust HSV-t, a Herpes simplex type 2 vírust HSV-2 és a Varicella zoster vírust VZV jelzéssel rövidítve jelöljük.

I. A vírus multiplikáció gátlása sejttenyéQ7pfpkhpn

AHSV-l (C42 törzs) VSA671„VIS 873, VSA 151 és VSA 668 által okozott gátlását foit-csökkenés meghatározással (plaque reduction assay) mérjük Verő sejtekben (kabócamajom vese) és HEL (humán embrió tüdő) sejtekben,, ahogy Ejercito és mtsai [J.Gén.Virol. 2, 357 (1968)] leírják. A VSA 671-nek VZV (néhány törzs) HL (humán tüdő fibroblast) sejtekben való multiplikáció]ára gyakorolt hatását friss antigénnek keletkezésének mérésével határoztuk meg a B. Wahren és mtsai [J Virologicai Methods 6, 141 — 149 (1983)] által leírt ELISA eljárás segítségével Az eredmények az 1. táblázatban láthatók.

1. táblázat.

Herpeszvírus multiplikáció gátlása VSA 671, VIS 873, VSA 151 és VSA 668 vegyületekkel.

HSV-1 VZV

Vegyület	Verő sejtekben gátlás /%,//konc./pM/	HEL sejtekben HL sejtekben ID₅₀ /p/ IL₅₀ /pM/
VSA 671	> 90/1	0,2 1,3 - 2,5
VIS 873	> 90/1	0,4
VSA 151	> 90/10	0,6
VSA 668	>90/25

II. VSA 671, VIS 873, VSA 151 és VSA 668 affinitása herpeszviru9 indukált timidin-kinázhoz.

A HSV-1 timidin-kinázhoz való affinitást mutató (K,j inhibiciós konstansokat A. Larsson és mtsai [Antimicrob. Agents Chemot13

-13193595

her. 23, 664 (1983)) módszere szerint hatá roztuk meg. Az inhibiciós konstansok a 2. táblázatban láthatók. 2. tab1 azat VSA 671, VIS 873, VSA 151 es VSA 668 inhibiciós konstansai HSV-1 timidin-kinazra
Vegyület	K. 1
	/ρ mól/
VSA 671	0,6
VIS 873	1,5
VSA 151	7
VSA 668	25

A vírus timidin kinázhoz való affinitás előny az antivirális aktivitás szempontjából olyan körülmények között, amikor a vegyüleúknek tinndinnel kell konkurrálnia. A

VSA 671 affinitása közel olyan, mint a természetes szubsztráté, a timidiné (K_m 0,42 pmól).

III. Celluláris toxicitás.

A VSA 671, VIS 873, VSA 151 és VSA 668 10 vegyületeket humán embriósejtekre gyakorolt cebuláris toxicitás szempontjából is megvizsgáltuk a K. Stenberg [Biochemical Pharmacology 30, 1005—1008 (1980)] által leírtak szerint. Mindegyik vegyület alacsony cellulá15 ris toxicitási mutatott (lásd 3. táblázat) olyan koncentrációknál, amelyek a herpeszvírus multiplikációt több, mint 90%-ra gátolják, (lásd 1. táblázat).

5« táblázat.

A VSA 671, VIS 873, VSA 151 és VSA 668 vegyületek celluláris toxicitása 48 óra inkubáció utáni sejtszaporodás /Flow 1000/ százalékos csökkenésében kifejezve.

Koncentráció /p mól/	Vegyület	Sejtszaporodás százalékos csökkenése
200	VSA 671	18
200	VIS 873	7
200	VSA 151	0
200	VSA 668	0

IV. Állatkísérletek.

a) A tengerimalacokon herpeszvírus bőrfertőzésre végzett kísérleteket az S. Alenius és B. Öberg [Archives of Virology 58, 277—

-288 (1978)] által korábban leírtak szerint hajtjuk végre. A kísérletek azt mutatják, hogy ^b a 'Ί5 873 herpeszvírus bőrfertőzések esetében gyógyászati hatással rendelkezik, ha a 4. táblázatban megadottak szerint helyileg alkalmazzuk. Harminc mikroliter oldatot vagy oldószert adunk helyileg naponta háromszor 4 napig a fertőzést követő 24 órától kezdődően.

4. táblázat.

Gyógyászati hatás herpeszvírus bőrfertőzésnél.

VIS 873 koncentrációja dimetil-szu'lfoxiában %	A placebo kezeléshez viszonyított százalékos csökkenés halmozott számításban
2,5	36

b) HSV-1 vagy HSV-2 vírussal „szisztemikusan fertőzött egerek VSA 671 vagy VIS 873 vegyülettel végzett kezelését intraperitoneálisan hajtjuk végre az A. Larsen és intsai [Antimicrob. Agents Chemother. 23, 664 670 (1983)] által leírtak szerint.

Az egereket 10⁵ pfu (plaque-formig units) HSV-1 (C42) vagy 10⁴ pfu HSV-2 (91075 törzs) vírussal intraperitoneálisan megfertőzzük, és a kezelést a fertőzés után 1 órával kezdjük A kezelés 5 napig tart naponta kétszer valamelyik nukleozid-análóg foszfát-pufíerolt

-14193595 nátrium-klorid oldattal készített oldatának intraperitoneális beadásával. A halmozott elhullást (kezelt a kezeletlen állathoz viszo28 nyitva) a kísérlet teljes tartamára, azaz 21 napra számoljuk. Az eredmények az 5. táblázatban láthatók.

5. táblázat.

A VIS 873 és VSA 671 vegyületek antivirális hatása intrapermtonealisan szisztemikusan HSVA-1 és HSV-2 fertőzött egerekre.

Vegyület	Dózis	Vírus	Halmozott elbdllás /%/ /kezelt/kezeletlen/
VSA 671	25 mg/kg	HSV-1	30/90
	50 mg/kg	HSV-1	30/90
	25 mg/kg	HSV-2	40/90
	50 mg/kg	HSV-2	30/90
VIS 873	5 mg/kg	HSV-1	30/80
	10 mg/kg	HSV-1	0/80
	5 mg/kg	HSV-2	70/90
	10 mg/kg	HSV-2	20/90
	25 mg/kg	HSV-2	0/90
	50 mg/kg	HSV-2	10/100

A találmány kivitelezésének legjobb módja:

A jelen találmány szerinti I általános kép- 40 letű vegyületek közül a 9-[4-hidroxi-3-(hidroxi-metil) -butil] -guanin, 9- [4-hidroxi-2- (hidroxí-meti 1) - buti 1 ] -guanin és cisz-9-(4-hidroxi-2-butenil)-guanin használata a jelenleg ismert legjobb módszer herpeszvírus fertőzések ₄₅kezelésére. A 9-[4-hidroxi-2-(hidroxi-metil) -butil]-guanin nagyon jó hatást mutat varicella zoster vírus multiplikáció ellen.

Claims

SZABADALMI IGÉNYPONTOK □U

1. Eljárás az I általános képletű guaninszármazékok — a képletben A jelentése (Aa) vagy (Ab) általános képletű csoport, amelyekben m értéke 1 vagy 2; 55 n értéke 1 vagy 2, ahol m értéke 1, ha n értéke 2, és m értéke 2, ha n értéke 1;

R_a jelentése -(CH₂)_POH általános képletű csoport vagy karboxicsoport; θθ p értéke 1, 2, 3 vagy 4;

RT és R”* jelentése hidrogénatom vagy

R’í, hidrogénatom és R”& -(CH₂)_POH általános képletű csoport, vagy

R’í, és R”& együtt egy további szén-szén kötést alkotnak; θ® azzal a fenntartással, hogy ha m értéke 2 és n értéke 1 és R_a jelentése -(CH₂)_POH általános képletű csoport, akkor p értéke 2, 3 vagy 4— és fiziológiásán elviselhető savaddíciós sóik, valamint geometriai izomereik előállítására, azzal jellemezve, hogy olyan 1 általános képletű vegyületek előállítására, amelyek képletében A jelentése a tárgyi körben meghatározott (Aa) általános képletű csoport

a) egy V általános képletű vegyületet kondenzálunk egy IVa általános képletű guaninszármazékkal — a képletekben m és n értéke a tárgyi körben megadottakkal azonos;

X_ü jelentése kilépőcsoport, előnyösen klóratom, brómatom, jódatom vagy szulfoniloxi-csoport;

Y jelentése hidrogénatom vagy a nitrogénatommal együtt kvaterner ammónium-ion;

R₃ü jelentése hidrogénatom vagy bidroxicsoportot védő csoport, előnyösen benzilcsoport,

R₂a jelentése R„ a tárgyi körben megadott jelentésével azonos vagy védett karbo.xicsoport, előnyösen alkoxi-karbonilcsoport vagy -(CH₂)_POR_7U általános képletű cso15

-15193595 port, amelyben p a tárgyi körben megadott,

R_7Ü hidrogénatom vagy hidroxicsoportot védőcsoportot védő csoport, előnyösen benzilcsoport;

R₄ü és R₅„ hidrogénatom vagy aminocsoportot védő csoport;

R_6ű jelentése kilépő csoport—, előnyösen X_ajelentésénél megadott valamely csoport—, hidroxilcsoport vagy kevés szénatomos alkoxicsoport— majd ezt követően eltávolítjuk az adott esetben jelenlévő védőcsoporto(ka)t és/vagy ha R_6a jelentése hidroxilcsoporttól eltérő, ezt hidroxilcsoporttá alakítjuk, vagy

b) egy XI általános képletü vegyületet — a képletben m és n a tárgyi körben megadott:

R₄a, R₅u és R_6B az a) eljárásnál meghatározott; R,_|Ujelentése hidroxilcsoport vagy karboxilcsoportot védő csoport, előnyösen kevés szénatomos alkoxicsoport, és

R_12ű jelentése adott esetben védett karboxicsoport vagy - (CH₂)p_,COR_I|a általános képletü csoport, amelyben p és R_ua az előzőekben meghatározott — redukálunk, előnyösen alkálifém-bórhidriddel, majd ezt követően eltávolítjuk az adott esetben jelenlévő védőcsoporto(ka)t és/vagy ha R₆„ hidroxicsoporttól eltérő, ezt hidroxicsoporttá alakítjuk;

olyan I általános képletü vegyületek előállítására, amelyek képletében A jelentése a tárgyi körben meghatározott (Ab) általános képletü csoport

c) egy XVII általános képletü vegyületet kondenzálunk egy IVb általános képletü vegyülettel — a képletekben

Χ/, jelentése kilépőcsoport, előnyösen klóratom, brómatom, jódatom vagy szulfoniloxi-csoport;

Y jelentése hidrogénatom vagy a nitrogénatommal együtt kvaterner ammóniumion;

R₃ö jelentése hidrogénatom vagy hidroxicsoportot védő csoport, előnyösen benzilcsoport,

R_2f> jelentése hidrogénatom; és

R_7í, jelentése hidrogénatom vagy - (CH₂)_pOR_9f, általános képletü csoport; p értéke 1, 2, 3 vagy 4;

Rgt, jelentése hidrogénatom vagy hidroxicsoportot védő csoport, előnyösen benzilcsoport,

R₂* és R₇„ együtt egy további kötést alkotnak; R₆ft jelentése hidroxilcsoport vagy kilépő csoport, előnyösen klóratom vagy kevés szénatomos alkoxicsoport;

R₄í, és R₅í, jelentése hidrogénatom vagy aminocsoportot védő csoport— majd ezt követően eltávolítjuk az adott esetben jelenlévő védőcsoporto(ka) t és/vagy ha R_ef> jelentése hidroxilcsoporttól eltérő, ezt hidroxilcsoporttá alakítjuk;

d) egy XIX általános képletü vegyületet — amely képletben R₂í, és R₇í, jelentése a c) eljárásnál meghatározott, kondenzálunk egy VIlb 16 általános képletü vegyülettel — amely képletben

R₄í, R₅* és R₆(, jelentése az előbb a c) eljárásnál megadottakkal azonos — majd ezt kővetően eltávolítjuk az adott esetben jelenlévő védőcsoportokat; és/vagy ha R₆ö hidroxilcsoporttól eltérő, ezt hidroxicsoporttá alakítjuk, majd kívánt esetben a kapott vegyületet savaddíciós sójává alakítjuk, kívánt esetben geometriai izomerjeire szétválasztjuk.
2. Az 1. igénypont szerinti a) vagy b) eljárás az I általános képlet keretébe tartozó II általános képletü vegyület — amely képletben m értéke 1 vagy 2;

és r értéke 1 vagy 2; ahol m értéke 1, ha n értéke 2, és m értéke -, ha m értéke 1, ha n értéke 2, és m értéke 2, ha ni;

R’ü jelentése -(CH₂)_POH általános képletü csoport vagy karboxicsoport, p értéke 1-4 azzal a fenntartással, hogy ha m értéke 2, n értéke 1, és R’_a jelentése -(CH₂)_POH általános képletü csoport, akkor p 2-től 4-ig terjedő egész szám— vagy fiziológiásán elfogadható savaddíciós sója előállítására, azzal jellemezve, hogy megfelelően helyettesített kiindulási vegyületeket reagáltatunk.
3. Az 1. igénypont szerinti c) vagy d) eljárás az 1 általános képlet keretébe tartozó III általános képletü vegyület — amely képletben RN és R”z, jelentése hidrogénatom vagy R’_ö hidrogénatom és R’F -(CH₂)_POH általános képletü csoport, amelyben p értéke 1-től 4-ig terjedő egész szám, vagy R’_pés R”t, együtt egy további szén-szén kötést alkotnak — vagy fiziológiásán elfogadható savaddíciós sója előállítására, azzal jellemezve, hogy megfelelően helyettesített kiindulási vegyületeket reagáltatunk.
4. Az 1. igénypont szerinti c) vagy d) eljárás 9- [4-hidroxi-3- (hidroxi-metil) -2-butenil] -guanin előállítására, azzal jellemezve, hogy megfelelően helyettesített kiindulási vegyületeket reagáltatunk.
5. Az 1. igénypont szerinti c) vagy d) eljárás 9-(4-hidroxi-2-butenil)-guanin előállítására, azzal jellemezve, hogy megfelelően helyettesített kiindulási vegyületeket reagáltatunk.
6. Az 5. igénypont szerinti eljárás cisz-9- (4-hidroxi-2-butenil) -guanin előállítására, azzal jellemezve, hogy megfelelően helyettesíted kiindulási vegyületeket reagáltatunk.
7. Az 1. igénypont szerinti c) vagy d) eljárás 9-(4-hidroxi-2-butinii)-guanin előállítására, azzal jellemezve, hogy megfelelően helyettesített kiindulási vegyületeket reagáltatunk.
8. Az 1. igénypont szerinti a) vagy b) eljárás 9- [4-hidroxi-2- (hidroxi-metil) -butil] -guanin dőállítására, azzal jellemezve, hogy megfelelően helyettesített kiindulási vegyületeket reagáltatunk.
9. Eljárás hatóanyagként I általános képletü vegyületet — a képletben A jelentése az 1. igénypontban megadottakkal azonos —

-16193595 vagy valamilyen fiziológiásán elviselhető savaddiciós sóját vagy geometriai izomerjét tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy az előző igénypontok bármelyike szerinti eljárással előállított ható32 anyagot a gyógyszerek készítésénél szokásos hordozó, hígító, töltő, ízesítő és/vagy egyéb segédanyagokkal összekeverjük és gyógyszerkészítménnyé kikészítjük.