HU185981B - Reagnt-strips for analytical purpose - Google Patents
Reagnt-strips for analytical purpose Download PDFInfo
- Publication number
- HU185981B HU185981B HU813944A HU394481A HU185981B HU 185981 B HU185981 B HU 185981B HU 813944 A HU813944 A HU 813944A HU 394481 A HU394481 A HU 394481A HU 185981 B HU185981 B HU 185981B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- reagent
- mesh
- handle
- reagents
- reagent strip
- Prior art date
Links
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 108
- 239000000123 paper Substances 0.000 claims description 29
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 10
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims description 9
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 239000004033 plastic Substances 0.000 claims description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 7
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 7
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 claims description 6
- 239000000835 fiber Substances 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 claims description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 6
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 5
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims description 4
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 9
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000003466 welding Methods 0.000 description 4
- KRNUKKZDGDAWBF-UHFFFAOYSA-N 2-(n-ethyl-n-m-toluidino)ethanol Chemical compound OCCN(CC)C1=CC=CC(C)=C1 KRNUKKZDGDAWBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 3
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 3
- 102000013460 Malate Dehydrogenase Human genes 0.000 description 3
- 108010026217 Malate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 3
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical class NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 3
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 3
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 3
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 3
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- UPLLQJUZZIYKHI-DFWYDOINSA-N (2s)-2-aminopentanedioic acid;2-oxobutanedioic acid Chemical compound OC(=O)CC(=O)C(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O UPLLQJUZZIYKHI-DFWYDOINSA-N 0.000 description 2
- KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-N 2-oxoglutaric acid Chemical compound OC(=O)CCC(=O)C(O)=O KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000892220 Geobacillus thermodenitrificans (strain NG80-2) Long-chain-alcohol dehydrogenase 1 Proteins 0.000 description 2
- 108010008488 Glycylglycine Proteins 0.000 description 2
- 102000000019 Sterol Esterase Human genes 0.000 description 2
- 108010055297 Sterol Esterase Proteins 0.000 description 2
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 description 2
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 108010092464 Urate Oxidase Proteins 0.000 description 2
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 229940043257 glycylglycine Drugs 0.000 description 2
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 description 2
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 2
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 description 2
- BZSXEZOLBIJVQK-UHFFFAOYSA-N 2-methylsulfonylbenzoic acid Chemical compound CS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1C(O)=O BZSXEZOLBIJVQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XSRCFFDUTPZZHD-UHFFFAOYSA-N 3-methyl-2h-1,3-benzothiazole 1-oxide Chemical compound C1=CC=C2N(C)CS(=O)C2=C1 XSRCFFDUTPZZHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010089254 Cholesterol oxidase Proteins 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 101710098398 Probable alanine aminotransferase, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229940099352 cholate Drugs 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 239000006101 laboratory sample Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000012113 quantitative test Methods 0.000 description 1
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 1
- 239000004627 regenerated cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000013214 routine measurement Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N31/00—Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods
- G01N31/22—Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods using chemical indicators
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
- G01N33/525—Multi-layer analytical elements
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/805—Test papers
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
A találmány tárgya fogantyúval és ennek alsó részére erősített, reagenssel impregnált, szívóképes hordozóval rendelkező reagenscsík, valamint új eljárás folyadékok komponenseinek kémiai analízisére, különösen pedig a szilárd halmazállapotú reagensek új hozzáadást módszerére, reagenscsíkok segítségével.
Mivel a közvetlen fizikai vagy fizikai-kémiai analízis csak különleges esetekben lehetséges, a kémiai analízis — vagyis megfelelő reagensek hozzáadása és az ezzel előidézett reakció meghatározása — még mindig a legfontosabb kvalitatív és kvantitatív vizsgálati módszer folyadékok alkotóelemeinek meghatározására. Ilyenkor a reagenseket gyakran fölöslegben adagolják, de egyéb analitikai eljárásoknál, így a kinetikai méréseknél vagy a térfogatos analíziseknél, az adagolást pontosan kell végezni. A jó adagolhatóság érdekében a szilárd halmazállapotú reagenseket a hozzáadás előtt általában valamely alkalmas oldószerben oldják fel és ennek az oldatnak az aliquot részét használják fel az analízishez. Annak érdekében, hogy a felhasználó — különösen több reagens használata esetén — a fáradságos kimérést és az oldást megtakaríthassa, kész reagensoldatok már régóta beszerezhetők a kereskedelemben. Az egymással össze nem férő reagenseket külön-külön kell feloldani és közvetlenül felhasználás előtt kell egyesíteni. Az oldat formájában instabilis reagenseket általában tablettázó segédanyagok felhasználásával készült reagens-tabletták vagy ampullába töltött liofilizátumok alakjában hozzák forgalomba, melyek röviddel a felhasználás előtt oldószerekkel reagensoldatokká alakíthatók át.
A reagens-tablettáknak az a hátránya, hogy készítésük vagy tárolásuk alatt kopás következtében tömegük csökken, ezáltal a reagens mennyisége változhat, vagy pedig olyan nagy nyomással kell sajtolni őket, hogy újrafeloldásuk nehézségekbe ütközik. A tablettázáshoz használt segédanyagoknak, különösen csúsztató- és formaleválasztószereknek az analízist zavaró hatása is korlátozza a tabletták általános alkalmazását.
A reagensoldatok ampullákban végzett liofilizálása reprodukálhatósági szempontból optimális és lehetővé teszi egymással össze nem férő reagensek „réteges liofilizátum’-kénti egymásrafagyasztását és szárítását is. Az eljárás azonban igen munkaigényes és drága.
A 2 301 999 sz. Német Szövetségi Köztársaság-beli nyilvánosságrahozatali iratban oldatban instabilis anyagok stabilizálására azt javasolták, hogy szívóképes hordozót, például szűrőpapírt reagens oldattal itatnak át, megszárítanak vagy liofilizálnak és a szűrőpapír alkalmas nagyságú- ezáltal megfelelő mennyiségű reagenst tartalmazó — darabjait egy — például műanyagból készült — „keverőpálca”ként szolgáló fogantyúra ragasztják fel. Valamely oldószer vagy a vizsgálandó folyadék megfelelő mennyiségének e keverőpálcával végzett keverésével a reagenseket újra eluálják és megkapják a kész analízis — elegyet. Bár ez a technika elvileg használható, a gyakorlat azt mutatta, hogy az így előállított keverőpálcákról csak a nagyon jól oldódó anyagok oldódnak le gyorsan és tökéletesen, a többi reagens azonban tökéletlenül eluálódik. Attól eltekintve, hogy emiatt, szükségtelenül nagy mennyiségű reagenssel kell a hordozót impregnálni, a mindenkori eluált mennyiség az elució körülményeitől (idejétől, hőmérsékletétől, a keverési sebességtől, a viszkozitástól) is függ, ezért a reagensek egzakt koncentrációja nem garantálható.
Ezért merült fel az a feladat, hogy az említett „keverőpálcák” minőségét úgy javítsuk meg, hogy olyan reagenscsíkokat kapjunk, amelyekről a reagensek gyorsan, reprodukálhatóan, és lehetőleg tökéletesen leoldhatók legyenek.
A találmány szerint ezt a feladatot úgy oldottuk meg, hogy a szívóképes hordozót nem ragasztjuk fel a fogantyúra, hanem egy afölött elhelyezett műanyaghálóval erősítjük fel a fogantyúra oly módon, hogy a hálót a szívóképes hordozó egymással szemben levő szélein hegesztéssel rögzítjük a nyélhez. Reagenstartalmú, szívóképes hordozónak a műanyag fogantyú és egy vékony háló közé történő behegesztését a 2 118 455 SZ. Német Szövetségi Köztársaság-beli közzétételi irat már leírta, de az ott leírt, kb. 6x6 mm méretű tesztpapíroknál még vizeletsugárban sem észlelhető „kimosási” effektus (3. oszlop, 76—16). Ezért meglepő, hogy ilyen reagenscsíkokból egy oldószerben végzett rövid keveréssel a reagensek gyakorlatilag kvantitatívan eluálódnak, míg megfelelően felragasztott (a 2 301 999 sz. Német Szövetségi Köztársaságbeli nyilvánosságrahozatali irat szerinti) hordozóból, melynek felülete az oldószer számára teljesen hozzáférhető, a reagensek csak tökéletlenül oldódnak ki.
A kioldás sebessége még fokozható, ha a reagensek nagyobb mennyiségének felvételére szükséges vastagabb papírt több réteg vékonyabb papírra osztjuk. Ezáltal egy további, keresztirányú átáramoltatás érhető el. Ilyen, egymástól elválasztott papírrétegek egymással össze nem férhető reagensek fizikai elválasztására is szolgálhatnak.
Ezen túlmenően az átáramoltatás és ezzel az eluálás sebessége azzal is javítható, hogy az ilyen papírrétegek közé, ill. a papír és a fogantyú közé egy további műanyaghálót iktatunk. Abban az esetben, ha a különböző papírrétegekben egymástól eltérő reagenseket használunk, akkor az ilyen, közbenső hálók biztonságosan meggátolnak egy esetleges maradó egymásrahatást.
Noha a hálók anyaga elvileg lehet természetes rost vagy fém, az egyszerű feldolgozhatóság és a kedvező ár miatt a találmány szerint előnyösen műanyaghálót, például poliamidból, poliészterből, PVC-ből stb. készült hálót használunk hegesztett borítóháló, és közbenső-, illetve alátétháló gyanánt. A borítóhálók lyukbősége 50—250 μ, előnyösen 100—150 μ, az alátéthálók lyukbősége 80—250 μ, előnyösen 100—200 μ. A hálók szálvastagsága általában 10 és 50 μ közötti. Szőtt vagy hurkolt hálók egyaránt alkalmasak, a szálkeresztezéseknél a szálak egymáshoz is hegeszthetők, ill. ragaszthatok.
Szívóképes hordozóként előnyösen gyapotból, cellulózból, regenerált cellulózból, például poliamidpoliészter- műszálból vagy ezek keverékéből készült papírok és filcek alkalmasak. Természetesen kizárt az olyan anyagok használata, melyek a reagensekkel kémiai kötést létesítenek, reakcióba lépnek vagy szilárd komplexet képeznek. Könnyű Ieoldhatóságuk, jó szívóképességük, valamint sok reagenssel végzett ímpregnálás után is megmaradó jó feldolgozhatóságuk miatt különösen előnyösek a poliamid- és poliamid-cellulóz papírok.
A találmány szerinti reagenscsíkok lehetővé teszik érzékeny szilárd reagensek stabilis alakban történő tárolását és reagens-oldatokká való gyors átalakítását is.
Az alkalmazott hordozó vastagságának és méretének, valamint az impregnálásra használt reagensoldat koncentrációjának változtatása útján a kész oldat reagenskoncentrációja tág határok között szabályozható. Nagyobb reagens-szükséglet esetén egy fogantyún egymá-2185 981 són vagy egymás mellett több papír is rögzíthető. A reagensek több papírdarabra osztása lehetővé teszi a különböző tesztek céljára — például pufferelegyek céljára — szolgáló megfelelő reagenspapírok együtt történő előállítását és azok alkalmas összetételben történő kombinálását a lehegesztés során.
A találmány szerinti reagenscsíkok felépítését az ábrák szemléltctik.
Az 1. ábra a találmány szerinti reagenscsíkok oldalnézeti (la) és felülnézeti (lb) képét mutatja, az 1 fogantyúval, 2 reagenspapírral, 3 fedőhálóval amely a 4 rögzítési helyeken van fogantyúhoz rögzítve.
A 2. ábra olyan reagenscsík oldal nézeti képe, amely két, egymástól elválasztott, kétrétegű 2 reagenspapírt hordoz az 1 fogantyú egyik, és két, egymástól elválasztott, egyrétegű 2 reagenspapírt annak másik oldalán.
A 3. ábra olyan további reagenscsíkot szemléltet, melynél a reagenspapírokat egy 6 közbenső háló választja el és amelynél a papírok és az 1 fogantyú között 7 alátétháló van elhelyezve.
A reagenscsíkok előállítása célszerűen hosszú műanyag-, reagenspapír- és hálóanyag-pályák ismert hegesztőberendezésen végzett, folyamatos összehegesztése útján történik. A nyert szalagoknak a csíkokra merőleges irányban, a kívánt szélességű szeletekre vágása a 2 118 455 sz. Német Szövetségi Köztársaság-beli közzétételi iratban leírtakkal analóg módon történhet. A következő példákban leírt tesztek céljára a reagenscsíkokat ennek megfelelően állítottuk elő, de laboratóriumi minták és kis sorozatok természetesen oly módon is előállíthatók, hogy előzetesen előállított „üres” reagenscsíkokat egy reagens oldat előre kimért mennyiségével nedvesítünk meg, majd megszárítunk.
A példák a találmány megvilágítását célozzák, és azt nem korlátozzák.
1. példa
Reagenscsíkok glutamát-oxalacetát-transzamináz (GOT) meghatározására szérumban mm rétegvastagságú mérőküvettábá 7—8 cm hosszú, 6 mm széles olyan reagenscsíkot helyezünk el, amelyet száraz atmoszférában tároltunk (1 éven át szobahőmérsékleten stabilisnak mutatkozott), és amely alsó végén két, egymástól elválasztott területen egy-egy 6x6 mm felületű, kb. 120 μ lyukbőségű finom szitaszövet és a hordozófólia közé rögzített reagenspapírt foglal magában. Az egyik terület 0,4 μηκ>1 nikotinamid-adeninnukleotidet (NADH), 0,2 mg Na2CO.,-ot és 0,3 mg NaHCO3-ot, a másik terület 28 ftmól α-ketoglutarátot,
1,7 E (egység) laktátdehidrogenázt (LDH), 1,1 E malátdehídrogenázt (MDH), és 0,2 mg trisz-(hidroxi-metil)aminometánt (trisz-puffert) tartalmaz.
Ezután 2 ml 7,8 pH-jú, szobahőmérsékleten 1 évig tárolható, 88 mmól/1 trisz-(hidroximetil)-aminometánt, 264 mmól/1 L-aszparaginsavas nátriumot és 0,5 g nátriumazidot tartalmazó szubsztrátum-puffcrelegyet adunk hozzá. Ezután az elegyhez 0,2 ml szérumot pipettázunk, kb. 5 másodpercig a reagenscsíkkal jól megkeverjük, azt eltávolítjuk és szobahőmérsékleten 2 percig állni hagyjuk.
A glutamát-oxálacetát-transzamináz (GOT) aktivitásait ezután fotometriásan 334 nm, 340 nm vagy 366 nm hullámhossznál folytonos regisztrálás útján vagy bizonyos időközönkénti (pl. 60 másodpercenkénti) extinkció-érték leolvasással határozzuk meg. Ha sorozatmérés céljára nagyobb, mintegy 10 ml mennyiségű reagensoldatot kell előállítanunk, akkor ezt egyszerűen úgy végezzük, hogy a megadott anyagkoncentrációval rendelkező 0,36 cm3 reagens-hordozó felületet pl. 1,8 cm2-re növeljük (a reagenscsík 10 mm széles, és a behegesztett reagenspapírok felülete egyenként 18x10 mm).
Ha egy ilyen reagenscsíkot a fentiekben leírt pufferszubsztrátum-elegy 10 ml-ével eluálunk, akkor a következő összetételű reagens-oldatot kapjuk:
trisz-puffer (pH = 7,8) 88 mmól/'
L-aszpartát 264 mmól/1
NADH 0,20 mmó/1
LDH 660 E/l
MDH 460 E/l a-ketoglutarát 13,2 mmól/1.
Ez az oldat sorozatmérésekre a szokásos módon használható.
példa
Reagenscsík trigliceridek szérumban történő meghatározására
Alkalmas üvegedénybe 13 ml szobahőmérsékleten 1 évnél hosszabb ideig stabilis, 8,1 pH-jú, 0,1 mól/l glicilglicint, 0,16 mól/l ammóniumkloridot, 1 mmól/1 nátriumklorátot, detergensként 0,2% polietoxi-tridecilétert és 1 g/1 nátriumazidot tartalmazó pufferoldatot töltünk és az oldatba olyan, kb. 100 mm hosszú és 10 mm széles reagenscsíkot mártunk, amely két területen 2—2 egymás fölött elhelyezett, 10x15 mm méretű reagenspapírt foglal magában az 1. példában leírt lehegesztett alakban. A reagenspapír-területekből történő anyagkioldás meggyorsítása érdekében a reagenspapírok alá egy-egy- 10x15 nm nagyságú, 250 ^lyukbőségű szitaszövetet helyezünk el. A reagenscsík alsó végén rögzített reagens-terület az alsó reagenshordozón 13 mg NAD-t, az afelett elhelyezett reagenshordozón pedig 3,9 mg 3-(4,5-dimetiltiazo1 (1-2-)-2,5-difeniltetrazoliumbromidot (MTT) tartalmaz.
Az emellett elhelyezett reagens-terület kél reagenshordozót tartalmaz egyenként 45 E glicerin-dehidrogenázzal, 6 E diaforázzal és 13 E koleszterineszterézzel.
A reagenscsíkot 5 másodpercig intenzíven mozgatjuk, ezután 5 percig állni hagyjuk, ismét 5 másodpercig mozgatjuk, majd az eluált reagenshordozót eldobjuk.
Ily módon a következő összetételű reagensoldat képződik.
glicilglicin 0,1 mól/l
NH4C1 0,16 mól/I
Na-kolát 1 mmól/1 polietoxi-trideciléter 0,2%
MTT 270 mg/1
NAD 1000 mg/1 glicerindehidrogenáz 6 KE/1 diaforáz 400 E/l koleszterineszteráz 900 E/l
A szérum triglicerid tartalmát úgy határozzuk meg, hogy ennek a reagensoldatnak 2 ml-éhez a vizsgálandó minta 0,020 ml-ét adjuk, és 30 perc 20—25 °C-on végzett inkubálás után meghatározzuk az extinkciót (E) Hg 578 nm hullámhosszon reagens vakpróbával (R) szemben. A trigliceridek koncentrációja (C) az alábbi képlettel számítható ki:
C (mg/100 ml) = 498.5 (E - ER)
-3185 981
3. példa
Reagenscsík szérum húgysavtartalmának meghatározására
Alkalmas üvegedénybe töltött, szobahőmérsékleten 1 évig stabilis, 7,0 pH-jú, 0,5% detergenst és 1 mmól/1 mennyiségű N-etil-N-(2-hidroxi-etil)-m-toluidint (EHT) tartalmazó 0,1 mólos káliumfoszfát oldat 80 ml-ébe kb. 120 mm hosszú és 10 mm széles olyan reagenscsíkot helyezünk, amely 3 területén, egyenként két-két egymás felett elhelyezett, 10x15 mm felületű reagenshordozót tartalmaz az előző példákban leírt módon hálóval rögzített alakban. A reagenscsík alsó részén elhelyezkedő két terület reagenshordozóként 2,5 mg 3-metilbenztiazolonhidrazon-6-szulfonsavat (SMBTH) és egyenként
1,7 mg K4[Fe(CN)6]-ot tartalmaz, a felettük elhelyezkedő egy-egy reagenshordozó 6 egység urikázt, 3 mg 7 pH-jú trisz-citrátpuffert és 20 egység peroxidázt (POD) tartalmaz. A száraz atmoszférában szobahőmérsékleten 1 éven át stabilis reagenscsíkokat aj2,példában leírt módon eluáljuk. !
A következő összetételű reagensoldatot nyerjük:
Káliumfoszfát puffer (pH = 7,0) 0,1 mól/1
EHT 1 mmól/1
Detergens . 0,5%
SMBTH 0,2 mmól/1
K4[Fe(CN)6] 20 mg/1
Urikáz 255 E/l
POD 470 R/l
A szérum húgysavtartalmát úgy határozzuk meg, hogy ennek a reagensoldatnak 2 ml-éhez a minta 0,050 ml-ét adjuk, és 20—25 °C-on 20 percig végzett inkubálás után meghatározzuk az extinkciót Hg 578 nm hullámhosszon, standardt összehasonlító oldattal szemben.
Analóg módon vittük át reagenscsík-technikára a bejelentő ismert:
glükóz (GOD/PAP), koleszterin (CHOD/PAP)-, és glutamátpiruvát-transzamináz (UI)tesztmódszerét.
Ezek stabilitása és funkció-alkalmassága megfelel az előző példákban leírtaknak.
Összehasonlító kísérletek
A technika állásához tartozó, különböző reagenshordozók és a találmányunk szerinti reagenshordozó eluálási hányadának összehasonlítására hálóval különbözőképpen bevont, illetve felragasztott 3-(4,5-dimetiltiazolil-2-)2,5-difeniltetrazoliumbromid-(MTT)-reagenspapírokat a
2. példában ismertetett előírás szerint (5—10 másodperces intenzív mozgatás 13 ml pufferoldattal, 5 perces állás, újabb 5—10 másodperces kezelés a pufferoldattal és mérés 450 nm-nél) kezelünk. Minden esetben 10x15 nmes reagenspapírt használtunk, amelyet műanyagból készült fogantyúra erősítettünk (ragasztottunk) a mindenkori irodalmi adatok szerint. Összehasonlítás céljára egy ugyanilyen papírt fogantyú nélkül 15 percig extraháltunk a pufferben (teljes eluálás).
Tesztcsíkok | n | X átl. eluálás | X eluálás% | eluálás/c | eluálás % |
MTT teljes eluálás | 4 | 290 | |||
MTT felragasztva (DE-A 2 301 999 szerint | 4 | 220 | 75,8% | 72,4% | 77,9% |
MTT hálóval bevonva (DE-A 2 118 455 szt). | 4 | 222 | 76,5% | 71,0% | 79,3% |
Enzim (MTT hálóval bevonva (DE-A 2 118455 szerint) | 4 | 211 | 72,8% | 67,9% | 75,9% |
Szitaszövet (MTT hálóval bevonva a találmány szerint | 4 | 272 | 93,8% | 91,0% | 97,9% |
Szitaszövet (enzim) MTT hálóval bevonva a találmány szerint | 4 | 258 | 88,9% | 86,2% | 91,0% |
Enzim (szitaszövet) MTT hálóval bevonva a talál- mány szerint | 4 | 257 | 88,6% | 85,2% | 92,8% |
Mint az összehasonlító kísérleteket tartalmazó Táblázatból kitűnik, a találmány szerinti tesztpapírok jobban és gyorsabban eluálhatók.
Claims (8)
1. Reagenscsík, amely fogantyúval és ennek alsó részére erősített, reagenssel impregnált, szívóképes hordozóval rendelkezik, azzal jellemezve, hogy a szivóképes hordozó egy azt borító, 50—250 μ lyukbőségű és 10—50 μ szálvastagságú, a két ellentétes végen a fogantyúhoz ragasztott vagy hegesztett háló segítségével van rögzítve, és a hordozó és a fogantyú között vagy a hordozó két egymás felett elhelyezkedő rétege között 50—250 i Íyukbőségű és 10—50 μ szálvastagságú közbenső háló van.
2. Az 1. igénypont szerinti reagenscsík kivitelt alakja, azzal jellemezve, hogy a fogantyúra egymás mellett vagy egymás felett több szívóképes hordozó van rögzítve.
3. A 2. igénypont szerinti reagenscsík kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a különböző hordozók különféle reagenseket hordoznak.
4. Az 1—3. igénypont bármelyike szerinti rcagcnscsík kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a fogantyú és a háló(k) műanyagból és a szívóképes hordozó cellulózpapírból vagy poliamidból, illetve poliamid) cellulóz nemezből állnak.
5. Eljárás adott koncentrációjú rcagensoldatok előállítására a szilárd reagenseknek a reagenscsíkböl való kioldásával, azzal jellemezve, hogy az 1—4. igénypont bármelyike szerinti, az adott reagenst tartalmazó reagenscsíkokat az adott koncentrációhoz szükséges mennyiségű, oldáshoz alkalmas oldó- vagy hígttószerrel eluáljuk.
185 981
6. Eljárás folyadékok komponenseinek kémiai analízisére a szükséges reagenseknek a vizsgálandó folyadékhoz való hozzáadásával, az analízishez szükséges műveletek elvégzésével és az eredmények leolvasásával, azzal jellemezve, hogy egy vagy több az analízishez szükséges szilárd reagenst az 1—4. igénypont bármelyike szerinti reagenscsíkból közvetlenül vagy közvetve kinyert reagens formájában adagoljuk a vizsgálandó folyadékba.
7. A 6. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja, azzal jellemezve, hogy a reagenscsíkot közvetlenül a vizsgálati oldatba merítjük.
8. A 6. igénypont szerinti eljárás foganatositási módja, 5 azzal jellemezve, hogy a reagenscsíkot hígítószerrel eluáljuk és az így kapott oldat aliquot részét használjuk analízisre.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE19803048799 DE3048799A1 (de) | 1980-12-23 | 1980-12-23 | Reagenzstreifen fuer analytische zwecke |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HU185981B true HU185981B (en) | 1985-04-28 |
Family
ID=6120152
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU813944A HU185981B (en) | 1980-12-23 | 1981-12-23 | Reagnt-strips for analytical purpose |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4605629A (hu) |
EP (1) | EP0054679B1 (hu) |
JP (1) | JPS57168159A (hu) |
AR (1) | AR226398A1 (hu) |
AT (1) | ATE14936T1 (hu) |
CS (1) | CS249117B2 (hu) |
DD (1) | DD201944A5 (hu) |
DE (2) | DE3048799A1 (hu) |
HU (1) | HU185981B (hu) |
Families Citing this family (26)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3233809A1 (de) * | 1982-09-11 | 1984-03-15 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Kuevette zur bestimmung chemischer verbindungen in fluessigkeiten |
JPH0736012B2 (ja) * | 1984-10-05 | 1995-04-19 | テルモ株式会社 | 試験片 |
DE3523439A1 (de) * | 1985-06-29 | 1987-01-08 | Boehringer Mannheim Gmbh | Testtraeger |
US4618475A (en) * | 1985-08-30 | 1986-10-21 | Miles Laboratories, Inc. | Reagent test device containing hydrophobic barriers |
DE3616105A1 (de) * | 1986-05-13 | 1987-11-19 | Merck Patent Gmbh | Teststreifen |
US5238847A (en) * | 1987-05-20 | 1993-08-24 | Boehringer Mannheim Gmbh | Test kit and process for the determination of an analyte in a pasty sample |
SE8703675L (sv) * | 1987-09-23 | 1989-03-24 | Life Science International Ab | Luminometrisk analys paa cellulaert atp |
FR2621393B1 (fr) * | 1987-10-05 | 1991-12-13 | Toledano Jacques | Dispositif de detection immunoenzymatique de substances a partir d'une goutte de sang ou de liquide provenant d'un quelconque milieu biologique |
DE3742786A1 (de) * | 1987-12-17 | 1989-06-29 | Boehringer Mannheim Gmbh | Analysesystem zur bestimmung eines bestandteils einer fluessigkeit |
US5304467A (en) * | 1988-11-30 | 1994-04-19 | Kyoto Daiichi Kagaku Co., Ltd. | Device for assay of liquid sample |
US5234813A (en) * | 1989-05-17 | 1993-08-10 | Actimed Laboratories, Inc. | Method and device for metering of fluid samples and detection of analytes therein |
JP3146078B2 (ja) * | 1992-10-21 | 2001-03-12 | 島久薬品株式会社 | 微生物を培養する装置 |
US5268146A (en) * | 1992-03-25 | 1993-12-07 | Litmus Concepts, Inc. | Fast response test panel |
US5766552A (en) * | 1993-04-20 | 1998-06-16 | Actimed Laboratories, Inc. | Apparatus for red blood cell separation |
US5652148A (en) * | 1993-04-20 | 1997-07-29 | Actimed Laboratories, Inc. | Method and apparatus for red blood cell separation |
US5660798A (en) * | 1993-04-20 | 1997-08-26 | Actimed Laboratories, Inc. | Apparatus for red blood cell separation |
US5413761A (en) * | 1994-06-09 | 1995-05-09 | Dulaney; Dolores P. | Perforated diagnostic device |
US5989845A (en) * | 1996-04-05 | 1999-11-23 | Mercury Diagnostics, Inc. | Diagnostic compositions and devices utilizing same |
US5776719A (en) * | 1997-07-07 | 1998-07-07 | Mercury Diagnostics, Inc. | Diagnostic compositions and devices utilizing same |
US6040151A (en) | 1998-03-10 | 2000-03-21 | Mercury Diagnostics, Inc. | Diagnostic compositions and devices utilizing same |
US6571651B1 (en) * | 2000-03-27 | 2003-06-03 | Lifescan, Inc. | Method of preventing short sampling of a capillary or wicking fill device |
US6612111B1 (en) * | 2000-03-27 | 2003-09-02 | Lifescan, Inc. | Method and device for sampling and analyzing interstitial fluid and whole blood samples |
JP3351518B2 (ja) * | 2000-10-10 | 2002-11-25 | 健次 中島 | pH試験紙の乾燥が著しく遅延するpH検査用スティック |
US20060246596A1 (en) * | 2005-04-29 | 2006-11-02 | Industrial Test Systems, Inc. | Reagent delivery device and method |
US7491546B2 (en) * | 2004-09-27 | 2009-02-17 | Industrial Test Systems, Inc. | Reagent delivery and photometric chlorine analysis |
US7955484B2 (en) * | 2005-12-14 | 2011-06-07 | Nova Biomedical Corporation | Glucose biosensor and method |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2118455B1 (de) * | 1971-04-16 | 1972-09-21 | Boehringer Mannheim Gmbh | Teststreifen |
CH583422A5 (hu) * | 1972-01-25 | 1976-12-31 | Hoffmann La Roche | |
US3912655A (en) * | 1973-12-26 | 1975-10-14 | American Cyanamid Co | Reagent impregnated paper strips for use in preparing TLC spray reagents |
DE2436598C2 (de) * | 1974-07-30 | 1983-04-07 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Stabiler Teststreifen zum Nachweis von Inhaltsstoffen in Flüssigkeiten |
JPS5181690A (ja) * | 1975-01-16 | 1976-07-17 | Mitsubishi Heavy Ind Ltd | Kagakushikenniokerushakunotenkahoho |
JPS536551A (en) * | 1976-07-07 | 1978-01-21 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | Piezo electric vibrator |
SE404703C (sv) * | 1976-09-20 | 1986-06-23 | Garphytte Bruk Ab | Ventilfjedertrad av laglegerat stal |
DE2655977A1 (de) * | 1976-12-10 | 1978-06-22 | Macherey Nagel & Co Chem | Teststreifen |
DE2709625C3 (de) * | 1977-03-05 | 1982-03-04 | Battelle-Institut E.V., 6000 Frankfurt | Verfahren zur wissenschaftlichen, analytischen oder diagnostischen Untersuchung |
DE2739008A1 (de) * | 1977-08-30 | 1979-03-15 | Behringwerke Ag | Vorrichtung zum nachweis von inhaltsstoffen einer fluessigkeit |
DE2821469A1 (de) * | 1978-05-17 | 1979-11-22 | Boehringer Mannheim Gmbh | Diagnostisches mittel zur bestimmung von harnstoff |
US4193766A (en) * | 1978-11-13 | 1980-03-18 | Miles Laboratories, Inc. | Device and method for preparation of a control solution for ketone determination |
US4234316A (en) * | 1979-04-02 | 1980-11-18 | Fmc Corporation | Device for delivering measured quantities of reagents into assay medium |
-
1980
- 1980-12-23 DE DE19803048799 patent/DE3048799A1/de not_active Withdrawn
-
1981
- 1981-10-23 DE DE8181108795T patent/DE3171828D1/de not_active Expired
- 1981-10-23 EP EP81108795A patent/EP0054679B1/de not_active Expired
- 1981-10-23 AT AT81108795T patent/ATE14936T1/de not_active IP Right Cessation
- 1981-12-16 AR AR287827A patent/AR226398A1/es active
- 1981-12-18 CS CS819512A patent/CS249117B2/cs unknown
- 1981-12-21 DD DD81235989A patent/DD201944A5/de not_active IP Right Cessation
- 1981-12-23 HU HU813944A patent/HU185981B/hu unknown
- 1981-12-23 JP JP56207276A patent/JPS57168159A/ja active Granted
-
1984
- 1984-07-27 US US06/634,667 patent/US4605629A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE3171828D1 (en) | 1985-09-19 |
DE3048799A1 (de) | 1982-07-08 |
AR226398A1 (es) | 1982-06-30 |
JPS57168159A (en) | 1982-10-16 |
DD201944A5 (de) | 1983-08-17 |
EP0054679B1 (de) | 1985-08-14 |
CS249117B2 (en) | 1987-03-12 |
ATE14936T1 (de) | 1985-08-15 |
US4605629A (en) | 1986-08-12 |
JPH0252824B2 (hu) | 1990-11-14 |
EP0054679A1 (de) | 1982-06-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
HU185981B (en) | Reagnt-strips for analytical purpose | |
JP3718242B2 (ja) | テトラゾリウム塩指示薬を含有する診断用試験片の調製 | |
JP3220486B2 (ja) | 血液グルコース濃度用可視試験片 | |
EP0654659B1 (en) | Defined volume test device | |
CN1207393C (zh) | 用于分析物测定的试剂测试条带 | |
JPH0698028B2 (ja) | 分析用組成物,分析要素及び被分析物の測定方法 | |
EP0296826B1 (en) | Diagnostic assay employing signal producing agent on support | |
JP5925026B2 (ja) | クレアチニン測定用乾式試験片及びクレアチニン測定法 | |
EP0299044A1 (en) | Dry reagent delivery system | |
JPS6267442A (ja) | 酵素電極型のセンサ− | |
EP0252750B1 (en) | Composition and analytical element having stabilized peroxidase | |
EP0481436A1 (en) | Integral multilayer analytical element for determination of ammonia or ammonia-producing substance | |
US5264180A (en) | Mobile reagents in an analyte assay in a self-contained apparatus | |
JPS6412343B2 (hu) | ||
US20040219694A1 (en) | Lateral flow test format for enzyme assays | |
JPS5926061A (ja) | 体液中の成分定量用試験片 | |
JPS6212995B2 (hu) | ||
JPH0159536B2 (hu) | ||
EP0345460B1 (en) | Method and device employing covalently immobilized colored dyes | |
CA2306554A1 (en) | Uric acid assay device with stabilized uricase reagent composition | |
JPH01108997A (ja) | 血液又は血液から導出した試料中の血清のフルクトスアミン含量を特異的に測定する方法及び試薬、及び非特異的還元作用を有するか、又は/及び溷濁を惹起する試料成分を除去する方法 | |
JP2590803B2 (ja) | バイオセンサ | |
JP2522970B2 (ja) | 体液中のクレアチニン定量用試験片及びその製法 | |
JPH0584099A (ja) | アスコルビン酸耐性組成物および液体試薬溶液中の成分を検出する試験装置 | |
JP3493411B2 (ja) | カリウムイオン測定用試薬組成物および試験片 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
HU90 | Patent valid on 900628 |