HU181534B - Process for preparing the antibiotic a/16686 - Google Patents
Process for preparing the antibiotic a/16686 Download PDFInfo
- Publication number
- HU181534B HU181534B HU80822A HU82280A HU181534B HU 181534 B HU181534 B HU 181534B HU 80822 A HU80822 A HU 80822A HU 82280 A HU82280 A HU 82280A HU 181534 B HU181534 B HU 181534B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- antibiotic
- water
- atcc
- acceptable acid
- acid addition
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C10—PETROLEUM, GAS OR COKE INDUSTRIES; TECHNICAL GASES CONTAINING CARBON MONOXIDE; FUELS; LUBRICANTS; PEAT
- C10G—CRACKING HYDROCARBON OILS; PRODUCTION OF LIQUID HYDROCARBON MIXTURES, e.g. BY DESTRUCTIVE HYDROGENATION, OLIGOMERISATION, POLYMERISATION; RECOVERY OF HYDROCARBON OILS FROM OIL-SHALE, OIL-SAND, OR GASES; REFINING MIXTURES MAINLY CONSISTING OF HYDROCARBONS; REFORMING OF NAPHTHA; MINERAL WAXES
- C10G49/00—Treatment of hydrocarbon oils, in the presence of hydrogen or hydrogen-generating compounds, not provided for in a single one of groups C10G45/02, C10G45/32, C10G45/44, C10G45/58 or C10G47/00
- C10G49/02—Treatment of hydrocarbon oils, in the presence of hydrogen or hydrogen-generating compounds, not provided for in a single one of groups C10G45/02, C10G45/32, C10G45/44, C10G45/58 or C10G47/00 characterised by the catalyst used
- C10G49/08—Treatment of hydrocarbon oils, in the presence of hydrogen or hydrogen-generating compounds, not provided for in a single one of groups C10G45/02, C10G45/32, C10G45/44, C10G45/58 or C10G47/00 characterised by the catalyst used containing crystalline alumino-silicates, e.g. molecular sieves
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J29/00—Catalysts comprising molecular sieves
- B01J29/04—Catalysts comprising molecular sieves having base-exchange properties, e.g. crystalline zeolites
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01B—NON-METALLIC ELEMENTS; COMPOUNDS THEREOF; METALLOIDS OR COMPOUNDS THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASS C01C
- C01B33/00—Silicon; Compounds thereof
- C01B33/20—Silicates
- C01B33/26—Aluminium-containing silicates, i.e. silico-aluminates
- C01B33/28—Base exchange silicates, e.g. zeolites
- C01B33/2807—Zeolitic silicoaluminates with a tridimensional crystalline structure possessing molecular sieve properties; Isomorphous compounds wherein a part of the aluminium ore of the silicon present may be replaced by other elements such as gallium, germanium, phosphorus; Preparation of zeolitic molecular sieves from molecular sieves of another type or from preformed reacting mixtures
- C01B33/2884—Zeolitic silicoaluminates with a tridimensional crystalline structure possessing molecular sieve properties; Isomorphous compounds wherein a part of the aluminium ore of the silicon present may be replaced by other elements such as gallium, germanium, phosphorus; Preparation of zeolitic molecular sieves from molecular sieves of another type or from preformed reacting mixtures the aluminium or the silicon in the network being partly replaced
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C1/00—Preparation of hydrocarbons from one or more compounds, none of them being a hydrocarbon
- C07C1/02—Preparation of hydrocarbons from one or more compounds, none of them being a hydrocarbon from oxides of a carbon
- C07C1/04—Preparation of hydrocarbons from one or more compounds, none of them being a hydrocarbon from oxides of a carbon from carbon monoxide with hydrogen
- C07C1/0425—Catalysts; their physical properties
- C07C1/043—Catalysts; their physical properties characterised by the composition
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C1/00—Preparation of hydrocarbons from one or more compounds, none of them being a hydrocarbon
- C07C1/02—Preparation of hydrocarbons from one or more compounds, none of them being a hydrocarbon from oxides of a carbon
- C07C1/04—Preparation of hydrocarbons from one or more compounds, none of them being a hydrocarbon from oxides of a carbon from carbon monoxide with hydrogen
- C07C1/0425—Catalysts; their physical properties
- C07C1/043—Catalysts; their physical properties characterised by the composition
- C07C1/0435—Catalysts; their physical properties characterised by the composition containing a metal of group 8 or a compound thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C1/00—Preparation of hydrocarbons from one or more compounds, none of them being a hydrocarbon
- C07C1/02—Preparation of hydrocarbons from one or more compounds, none of them being a hydrocarbon from oxides of a carbon
- C07C1/04—Preparation of hydrocarbons from one or more compounds, none of them being a hydrocarbon from oxides of a carbon from carbon monoxide with hydrogen
- C07C1/0425—Catalysts; their physical properties
- C07C1/043—Catalysts; their physical properties characterised by the composition
- C07C1/0435—Catalysts; their physical properties characterised by the composition containing a metal of group 8 or a compound thereof
- C07C1/044—Catalysts; their physical properties characterised by the composition containing a metal of group 8 or a compound thereof containing iron
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C10—PETROLEUM, GAS OR COKE INDUSTRIES; TECHNICAL GASES CONTAINING CARBON MONOXIDE; FUELS; LUBRICANTS; PEAT
- C10G—CRACKING HYDROCARBON OILS; PRODUCTION OF LIQUID HYDROCARBON MIXTURES, e.g. BY DESTRUCTIVE HYDROGENATION, OLIGOMERISATION, POLYMERISATION; RECOVERY OF HYDROCARBON OILS FROM OIL-SHALE, OIL-SAND, OR GASES; REFINING MIXTURES MAINLY CONSISTING OF HYDROCARBONS; REFORMING OF NAPHTHA; MINERAL WAXES
- C10G35/00—Reforming naphtha
- C10G35/04—Catalytic reforming
- C10G35/06—Catalytic reforming characterised by the catalyst used
- C10G35/065—Catalytic reforming characterised by the catalyst used containing crystalline zeolitic molecular sieves, other than aluminosilicates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/005—Glycopeptides, glycoproteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C2529/00—Catalysts comprising molecular sieves
- C07C2529/04—Catalysts comprising molecular sieves having base-exchange properties, e.g. crystalline zeolites, pillared clays
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/045—Actinoplanes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/827—Actinoplanes
Description
A találmány A/16686 jelű antibiotikum előállítására alkalmas eljárásra vonatkozik.
A találmány szerinti eljárással előállítható és önkényesen A/16686 számmal jelölt antibiotikus hatású anyagot az alábbiakban leírt törzs tenyésztésével állítjuk elő, amely osztálybasorolás szempontjából az Actinoplanes nemnek egy új törzse.
Az A/16686 számmal jelölt antibiotikus hatású anyag egy bázikus jellegű glikopeptid antibiotikum, amely savaddíciós sókat tud alkotni. Ennélfogva az A/16686 számmal jelölt antibiotikum fiziológiailag elfogadható savaddíciós sóinak az előállítása szintén a találmány körébe tartozik.
A leírás egyszerűsítése érdekében az „A/16686 antibiotikum” megjelölést egyaránt használjuk az A/16686 antibiotikum szabad bázis és fiziológiailag elfogadható savaddíciós sói megjelölésére.
Az A/16686 antibiotikum in vitro gátolja bizonyos patogén baktériumok, mégpedig a Gram-pozitív baktériumok fejlődését. Ezen túlmenően parenterális beadás esetén az A/16686 antibiotikum nagyfokú védelmet biztosít kísérleti fertőzések ellen egereknél.
Ahogy fent említettük az A/16686 antibiotikumot az Actinoplanes nem új törzsének a tenyésztésével állítjuk elő. E törzs egy tenyészetét, Vaghalbod-nál (India) gyűjtött talajmintából való izolálás után, 1979. január 30-án helyeztük letétbe az ATCC (American Type Culture Collection) állandó tenyészgyűjteményénél — 12301 Parklawn Drive, Rockville — Maryland 20852 — USA, ahol az ATCC 33076 deponálási számot kapta.
Az Actinoplanes sp. ATCC 33076 jellemzőit a következőkben adjuk meg.
Morfológia
A törzs jól fejlődik különböző közegeken narancs színű micélium-kivonattal. Pigmentet nem termel. Légmicélium mindig hiányzik.
Mikroszkópos vizsgálatnál a vegetatív micélium elágazó gombafonalakat (hyphae) mutat, ezek átmérője körülbelül 1 pm. A sporangiumok csak gyéren képződnek burgonya táptalajon és gömbalakúak nagyon szabálytalan felülettel, átmérőjük pedig 5,0—9,0 pm tartományban van. Spórafel1 > szabadulás észlelhető a sporangium falának a hasadása után.
A majdnem gömbalakú spórák mozgékonyak (1,0—1,5 pm átmérő). A sejtfalalkotók analízise mezo-diaminopimelinsav és D típusú cukor jelenlétére utal (Lechevalier és mtsai., — A kémiai összetétel kritérium az Actinomycetes osztályo20 zásánál. Adv. Applied Microbiology, 14, 1971. Academic Press N. Y.).
Tenyésztési jellemzők
Az I. táblázat az Actinoplanes ATCC 33076 tenyésztési jellemzőit foglalja össze, amelyet különböző szabványos közegeken tenyésztettünk Shirling és Gottlieb javaslata alapján (Intern. J. System. Bact. 16,313—340,1966) és más közege30 ken tenyésztettünk Waksman ajánlata alapján (The Actino-1181534 mycetes, Vol. Π — The Williams and Wilkins Co. 1961). A tenyésztési jellemzőket 6—14 napos 30 C°-on történő tenyésztés után határoztuk meg.
I. táblázat
Tenyésztési jellemzők
A tápközegek némelyikénél feltüntetett szám Shirling és Gottlieb által a Methods fór characterization of Streptomyces species ismertetésben megadott szám — Intem. J. System. Bact. 16. 313—340. 1966.
Tápközegek | Tenyésztési jellemzők |
Burgonya 5 Zselatin Cellulóz | Gyér fejlődés, kérges, világos barna Gyér fejlődés, világos narancs Nagyon gyér fejlődés, vé kony, áttetsző |
10 Szén-használat |
Tápközegek
2. számú közeg (élesztőkivonat-maláta táptalaj)
3. számú közeg (zabliszt táptalaj)
4. számú közeg (szervetlen sók-keményítő táptalaj)
5. számú közeg (glicerolaszperagin táptalaj)
6. számú közeg (peptonélesztőkivonat-vas táptalaj)
7. számú közeg (tirozin táptalaj)
Zabliszt táptalaj (Waksman szerint)
Hickey és Tresner táptalaj
Czapek glükóz táptalaj
Glükóz aszparagin táptalaj
Erősítő táptalaj
Burgonya táptalaj
Bennett táptalaj
Kalciummaleát táptalaj
Soványtej táptalaj
Czapek táptalaj
Tojás táptalaj
Pepton glükóz táptalaj
Agár táptalaj
Loeffler szérum
Tenyésztési jellemzők
Kiadós fejlődés, egyenetlen, ráncos felület, világos barna 12 H 12
Gyér fejlődés, vékony, vilá- 20 gos narancs 9 B 6
Mérsékelt fejlődés, kérges felület, narancs 11 L 12
Gyér fejlődés, áttetsző
Gyér fejlődés, áttetsző—világos barna
Gyér fejlődés, sima felület, barna 5 D 11 30
Kiadós fejlődés, egyenetlen, ráncos felület, narancs — barna 12 C 10
Kiadós fejlődés, kérges felület, narancs 11 G 8 35
Mérsékelt fejlődés, kérges felület, narancs 11 G 8
Gyér fejlődés, kérges felület világos narancs 11 F 6
Mérsékelt fejlődés, sima fe- 40 lület narancs 11 G 8
Kiadós fejlődés, egyenetlen, ráncos felület, borostyánbarna 12 E 10
Kiadós fejlődés, egyenetlen 45 ráncos felület, narancs 11 C8
Mérsékelt fejlődés, sima felület, világos narancs 10 C6 50
Kiadós fejlődés, egyenetlen, ráncos felület, narancs 9 C2
Mérsékelt fejlődés, kérges felület 10 D 7 55
Mérsékelt fejlődés, sima felület, áttetsző — világos narancs
Kiadós fejlődés, egyenetlen, ráncos felület, narancs 11 60 G 11
Nagyon gyér fejlődés, sima felület, áttetsző
Nagyon gyér fejlődés, sima felület, narancs 65
A II. táblázat szénforrások használatát mutatja be Pridham és Gottlieb módszere szerint vizsgálva (J. Bact. 56,107, 1948).
II. táblázat
Szénforrások | Használat |
Inozitol | _ |
Fruktóz | + |
Ramóz | + |
Mannitol | - |
Xilóz | + |
Raffinóz | - |
Arabinóz | + |
Cellulóz | - |
Szukróz | + |
Glükóz | + |
Mannóz | + |
Laktóz | - |
Szalicin | + |
+ = pozitív eredmény
- = nincs fejlődés
Fiziológiai jellemzők
A III. táblázat a törzs fiziológiai jellemzőit tünteti fel.
III. táblázat
Vizsgálat | Eredmények |
Keményítőhidrolízis | pozitív |
H2S képződés / | pozitív |
Tirozináz-reakció | negatív |
Kazein-hidrolízis | pozitív |
Kalciummaleát-szolubilizáció | negatív |
Zselatin-elfolyósítás | pozitív |
Lakmusztej koagulálás | pozitív |
Lakmusztej peptonizálás | negatív |
Cellulózlebontás | negatív |
A/16686 antibiotikum termelése érdekében az ATCC 33076 Actinoplanes sp törzset aerob körülmények között vizes tápközegben tenyésztjük, amely asszimilálható szénfor-2181534 rást, asszimilálható nitrogénforást és szervetlen sókat tartalmaz. A tápközeg bármely, a fermentációnál szokásosan alkalmazott táptalaj lehet, de bizonyos közegek előnyösek. Előnyös szénforrások például a glükóz, fruktóz, mannóz, szukróz és hasonlók. Előnyös nitrogénforrások a szójababliszt, pepton, húskivonat, élesztőkivonat, tripton, aminosavak és hasonlók. A tápközegekbe bevihető szervetlen sók közül azokat a szokásosan oldható sókat említjük meg, amelyek nátrium-, kálium-, vas-, cink-, kobalt-, magnézium-, kalcium-, ammónium-, klorid-, karbonát-, szulfát-, nitrát- és hasonló ionokat szolgáltatnak. Az antibiotikumot termelő törzset egy rázólombikban előtenyésztjük és utána a tenyészetet széles szájú fermentorok beoltására használjuk jelentős mennyiségű A/16686 antibiotikum termelése érdekében. A közeg, amelyet az előtenyésztésnél használunk a nagyobb fermentációkhoz használt közeg lehet, de más közegeket is alkalmazhatunk.
Az A/16686 antibiotikumot termelő törzs körülbelül 20 C’ és 37 C° közötti hőmérsékleten fejlődik, az előnyös hőmérséklet pedig 28—30 C° tartományban van.
A fermentáció folyamán az antibiotikumtermelést nyomon követhetjük oly módon, hogy a táptalaj vagy a szilárd micélium-kivonat mintáit megvizsgáljuk ántibiotikus aktivitás tekintetében.
Az A/16686 antibiotikumra érzékeny ismert organizmusokat használjuk erre a célra. Egyik jól használható kísérleti organizmus a Sarcina lutea. A biokisérletet hagyományos módon agar diffúziós módszerrel agar lapokon végezzük. Legnagyobb mérvű antibiotikumtermelés általában körülbelül a harmadik és az ötödik nap között történik. Az Actinoplanes sp. ATCC 33076 törzs fermentálásánál az antibiotikumtermelés mind a táptalajban, mind a micéliummasszában végbemegy. Az A/16686 antibiotikum kinyerését a táptalaj és a micélium külön-külön történő extrahálásával végezzük.
A micéliummassza extrahálását a legkedvezőbben metanollal végezzük, de más kis szénatomszámú alkoholok és a kloroform is alkalmas erre a célra. Az A/16686 antibiotikumot az extraháló oldószerből szokásos módon kapjuk nyerstermékként. Hasonló módon a táptalajt előnyösen n-butanollal extraháljuk és további mennyiségű A/16686 antibiotikumot kapunk nyerstermékként az oldatból való kicsapással. A nyers A/16686 antibiotikum tisztítását úgy végezzük, hogy az extraháló oldószerekből kinyert terméket 4:7:2 arányú kloroform: etanol: víz eleggyel kezeljük, a képződő olajos terméket elkülönítjük és vízbe öntjük. Ez a kezelés a termék megszilárdulását okozza, amelyet szűréssel elkülönítünk és szilikagél-oszlopon kromatográfiásan tovább tisztítunk, az eluálást 1:1 arányú acetonitril: 0,01 n HCl-oldateleggyel végezzük. Ily módon az A/16686 antibiotikumot hidroklorid formájában kapjuk, amelyet térhálósított dextrángél-oszlopon kezelünk kromatográfiásan és a sóformából felszabadítjuk az antibiotikumot.
A tisztítás mindegyik lépését vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálattal követjük, amelynek során alkalmas oldószerrendszert, így bázikus oldószer-rendszer, például 2:3:4 arányú n-propanol: n-butanol: n-ammóniumhidroxidelegyet (felső fázis) vagy metanol: 10%-os vizes ammóniumacetát: 10%-os ammónium-hidroxid-elegyet 10:9:1 arány bán alkalmazunk, amelynek során az A/16686 antibiotikim savaddiciós sóját szabad bázissá alakítjuk. A fenti lépések mindegyike hozzájárul ahhoz, hogy tiszta A/16686 antibiotikumot különítsünk el, amelyre jellegzetes Rf érték jellemző az alkalmazott oldószer-rendszernek megfelelően.
Emellett más tisztítási módszerek is megfelelően alkalmazhatók, ide számítva a hagyományos extrakciós és adszorpciós módszereket is. Ezeket az alternatív módszereket lépésenként összeállíthatjuk és a tisztítás előrehaladását vékonyréteg-kromatográfiával követjük, ahogy az előzőekben említettük. A megfelelő Rf értékű A/16686 antibiotikum vékonyréteg-kromatográfiás foltjának a figyelembe vételével a szakember megfelelően választhatja meg a műveleteket annak érdekében, hogy tiszta A/16686 antibiotikumot különíthessen el.
Kívánt esetben a tiszta A/16686 antibiotikum hidrokloridját, amelyet a fenti módon kaptunk, a megfelelő szabad bázissá vagy más fiziológiailag elfogadható savaddiciós sóvá alakíthatjuk szokásos módszerekkel.
Az A/16686 antibiotikum egy mikrobaellenes hatóanyag és különösen Gram-pozitív mikroorganizmusok ellen hatásos. Az A/16686 antibiotikum in vitro aktivitás-spektrumát a következő, IV. táblázatban foglaljuk össze.
A táblázatban a mikroorganizmusokat és a legkisebb gátlókoncentrációt (Μ. I. C.) adjuk meg pg/ml-ben az A/16686 antibiotikumra.
IV. táblázat Or8an™HS A/l«86anS^otiLin
S. aureus ATCC 6538 | 0,16 |
S. aureus ATCC 9144 | 0,16 |
S. aureus Tour | 0,31 |
Staphylococcus 10B Ciba | 0,08 |
S. epidermidis ATCC 12228 | 0,08 |
S. saprophyticis NCTC 7292 | 0,16 |
M. flavus ATCC 10240 | 0,016 |
S. lutea ATCC 9341 | 0,02 |
S. pyrogenes C 203 SKF 13400 | 0,01 |
S. pneumoniae Féltőn UC 41 | 0,05 |
S. faecalis ATCC 7080 | 0,31 |
S. foecium ATCC 10541 | 0,08 |
S. agalactiae ATCC 7077 | 0,02 |
S. mutáns ATCC 27607 | 0,08 |
C. diphtheriae var. mitis ATCC 11051 | 0,31 |
C. xerosis NCTC 9755 | 0,02 |
B. subtilis ATCC 6633 | 0,062 |
B. cereus var. mycoidés ATCC 11778 | 0,08 |
C. perfringens ISS 30543 | 0,16 |
P. acnes ATCC 6919 | 0,4 |
P. acnes ATCC 6922 | 0,8 |
P. acnes ATCC 25746 | 0,4 |
Az V. táblázat olyan kísérletek eredményeit mutatja be, amelyeknél az A/16686 antibiotikum hatását vizsgáltuk különböző klimkailag elkülönített Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae és Streptococcus faecalis törzsek ellen.
-3181534
V. táblázat
A/1668UiSÖum
S. aureus 54310 L 1096 | 0,62 |
S. aureus 54560/1L 1097 | 0,31 |
S. aureus 54635 L 1098 | 0,31 |
S. pyogenes L 33 | 0,04 |
S. pyogenes L 794 | 0,08 |
S. pyogenes L 800 | 0,04 |
S. pyogenes L 801 | 0,16 |
S. pyogenes L 802 | 0,08 |
S. pyogenes L 803 | 0,08 |
S. pyogenes L 804 | 0,62 |
S. pyogenes L 805 | 0,08 |
S. pneumoniae L 1055 | 0,04 |
S. pneumoniae L 1102 | 0,04 |
S. pneumoniae L 1174 | 0,08 |
S. faecalis L 768 | 0,31 |
S. faecalis L 876 | 0,31 |
S. faecalis L 922 | 0,31 |
S. faecalis L 949 | 0,31 |
S. faecalis L 965 | 0,31 |
S. faecalis L 1139 | 0,62 |
S. foedum L 763 | 0,16 |
Azt találtuk továbbá, hogy az A/16686 antibiotikum nagy mértékű aktivitást mutat in vivő is különböző patogén orga- |
nizmusok ellen. Az A/16686 antibiotikum hatásossága jól látható a VI. táblázat adataiból, amely az EDSO értékeket adja meg egerek esetében három különböző mikroorganizmus ellen.
VI. táblázat
ED,o mg/kg s.c. | |||
S. aureusc Tour | S. pyogenes C203ISM | S. pneumoniae Féltőn UC 41 | |
A/16686 | 24,6 | 0,09 | 0,2 |
Azt találtuk, hogy az A/16686 antibiotikum viszonylag alacsony szintű toxidtást mutat kísérleti állatoknál. így az LDjo érték például egereknél intraperitoneális beadás esetében körülbelül 500—750 mg/kg nagyságú.
Az A/16686 antibiotikumot baktériumellenes szerek hatóanyagaként használhatjuk. Az A/16686 antibiotikumot gyógyszerkészítmények alakjában ipari méretekben állíthatjuk eló.
Ezeket a gyógyszerkészítményeket, amelyek orális, topikális vagy parenterális beadásra alkalmasak, a gyógyszergyártásnál szokásosan alkalmazott és a szakember által jól ismert módon készíthetjük el. E készítmények előállítása például a Remington’s Pharmaceutical Sdences 15Λ Ed., 1975 Mack Publishing Co. Easton, Pennsylvania, irodalmi helyen van leírva.
Ezek a készítmények tabletták, kapszulák, porok, kenőcsök, folyékony oldatok, befecskendezhető oldatok és hasonlók lehetnek. Az egységadag 0,5—99%, előnyösen 5— 80%, hatóanyagot tartalmazhat. A napi adag különböző tényezők figyelembe vételével állapítható meg és függ a testsúlytól, a fertőző organizmustól, a fertőzés mértékétől, továbbá a beadás időtartamától és módjától.
A találmány szerinti eljárást a következőkben kiviteli példákon is bemutatjuk.
1. példa
Az Actinoplanes sp. ATCC 33 076 törzs fermentálása
Actinoplanes sp. ATCC 33 076 kultúrát előtenyésztünk oly módon, hogy a törzset rázóedényben a következő összetételű közegben hagyjuk fejlődni:
húskivonat | 3 g/1 |
élesztőkivonat | 5 g/1 |
tripton | 5 g/1 |
oldható keményítő - | 24 g/1 |
glükóz | 1 g/1 |
CaCO3 | 4 g/1 |
csapvíz | 1 liter |
A lombikokat körülbelül 96 óra hosszat rázzuk 28— 30 C’-on és utána az előtenyészeteket (1 liter) a széles szájú fermentorok beoltására használjuk, amelyek mindegyike 10 liter következő összetételű tápközeget tartalmaz:
húskivonat | 40 g |
pepton | 40g |
élesztőkivonat | 10 g |
nátriumklorid | 25 g |
szójababliszt | 100 g |
glükóz | 250 g |
CaCO3 | 50 g |
csapvíz | 10 liter |
A fermentádós anyagokat keverés közben 28—30 C°-on levegőigényes körülmények között inkubáljuk. Időközönként mikrobiológiailag megvizsgáljuk az antibiotikus hatást agar-difiuziós módszerrel, kísérleti organizmusként Sardna lutea-t alkalmazunk. A maximális aktivitást 72—120 órás fermentádó után érjük el.
2. példa
Az A/16686 antibiotikum kinyerése
Teljes fermentádós táptalajt készítünk (170 liter) az 1. példában leírt módon, 10 C’-ra lehűtjük a táptalajt és a pH-t 18%-os HCl-oldattal 3,5-re állítjuk. A keletkező savas táptalajt szűrőn (Clarcel Flow-Ma) szűrjük és a micella-pogácsát vízzel mossuk. Ezután a szűrt táptalajt és a micéliumot a továbbiakban külön-külön dolgozzuk fel.
a) 30 ml metanolt használunk a micéliummassza extrahálására, amelyet szűrés után ismét extrahálunk metanol/vízeleggyel (30 liter metanol és 5 liter víz). A kimerült micéliumot eldobjuk és a két metanolos kivonatot 40 C’ alatti hőmérsékleten vákuumban betöményítjük, így 6 liter vizes koncentrátumot kapunk. Ezt a vizes koncentrátumot 10—10 liter n-butanollal háromszor extraháljuk, a kivonatokat egyesítjük és vákuumban kis térfogatra betöményítjük.
Ezt a koncentrátumot petroléterhez adjuk és a keletkező csapadékot dekantálással elkülönítjük, majd további petroléterhez adjuk. A kivált csapadékot szűréssel elkülönítjük és vákuumban szobahőmérsékleten szárítjuk. Ily módon 80 g A/16686 antibiotikumot kapunk nyers anyag alakjában, amelynek az Μ. I. C. értéke S. pneumoniae UC 41 ellen 0,1 gg/ml.
b) A szűrt (165 liter) táptalajt mossuk, 10 C°-ra hűtjük és a pH-t tömény HCl-el (2,5 liter) 3,5-re állítjuk be. A kapott oldatot 80 liter n-butanollal extraháljuk és a szerves kivona-4181534 tót ezt követően 35 C° alatti hőmérsékleten vákuumban betöményítjük, így 6 liter butanolos koncentrátumot kapunk. Ezt a koncentrátumot petroléterhez adjuk és a kapott csapadékot dekantálással elválasztjuk, majd további petroléterhez adjuk. A szilárd anyagot szűréssel elkülönítjük és 5 vákuumban szobahőmérsékleten szárítjuk, így 26,3 g nyers A/16686 antibiotikumot kapunk, amelynek az Μ. I. C. értéke S. pneumoniae UC 41 ellen 0,8 gg/ml.
3. példa
Az A/16686 antibiotikum tisztítása
47,7 g 2a. példa szerint előállított nyers A/l 6686 antibioti- 15 kumot 1,4 liter (4:7:2 arányú) kloroform: etanol: vízeleggyel (tf: tf: tf) kezelünk és a képződött olajos terméket dekantálással elkülönítjük az oldattól. További 70 ml fenti elegyet adunk az olajos termékhez és az elkülönítést megismételjük. Az olajos terméket 440 ml vízzel mossuk, majd a megszilárdult anyagot szűréssel és centrifugálással elkülönítjük.
a) Az elkülönített szilárd anyagot 170 ml vízben oldjuk, 400 ml metanolt adunk az oldathoz és szűrjük. Ezután az oldószereket n-butanol hozzáadása mellett 35 C° alatti hő- 25 mérsékleten vákuumban kiűzzük az oldatból és így 50 ml butanolos koncentrátumot kapunk. A koncentrátumhoz 500 ml dietilétert adunk, ekkor csapadék képződik, amelyet szűréssel elkülönítünk és szobahőmérsékleten vákuumban szárítunk. Ily módon 1,012 g csaknem tiszta A/16686 antibiotikumot kapunk, amelynek az Μ. I. C. értéke S. pyogenes ellen 0,025 pg/ml. A csaknem tiszta A/16686 antibiotikumot a következő módon tovább tisztítjuk:
1,58 g fenti A/16686 antibiotikumot, amelynek az Μ. I. C. értéke 0,025 pg/ml, feloldunk 1:1 (tf/tf) arányú acetonitril/ víz-elegyben és a keletkező oldatot olyan oszlopra visszük, amely 430 g szilikagél 60-t (Merek 0,06—0,2 mm) tartalmaz és ugyanilyen eleggyel készült. Az oszlopot először ugyanazzal az acetonitril/viz-eleggyel előhívjuk és 70 darab 20 ml-es frakciót szedünk le. Ezután acetonitril/0,01 n HCl-elegyet (1:1 tf/tf arány) használunk és 290 darab ugyancsak 20 mles frakciót szedünk le. Az oszlop eluálását vékonyrétegkromatográfiával követjük 60 F2 54 szilikagél lapokon és meghatározzuk a frakcióknak Sarcina lutea elleni hatását. A 130—265 frakciókat egyesítjük és az oldószereket n-buta- 45 nollal kihajtjuk, így 20 ml n-butanolos koncentrátumot kapunk. A kapott kis térfogatú anyagot nagy mennyiségű etiléterbe öntjük és a képződött csapadékot szűréssel szárítjuk. Ily módon 1,015 g A/16686 antibiotikumot kapunk.
0,67 g így kapott anyagot feloldunk 24 ml víz és 76 ml metanol elegyében. A keletkező oldatot 3,0 x 62,0 cm méretű oszlopra visszük, amely 220 g Sephadex LH—20-at tartalmaz és 7: 3 arányú (tf/tf) metanol/víz-elegyben készült.
Az oszlopot ugyanazzal az eleggyel eluáljuk és 10 ml-es frakciókat szedünk le. A 24—32 frakciókat egyesítjük és az oldószert vákuumban 35 C° alatti hőmérsékleten n-butanollal kiűzzük, így 10 ml butanolos oldatot kapunk. Ezt az oldatot etiléterhez adjuk és a kívánt tiszta A/16686 antibiotikumot kicsapjuk. A csapadékot szűréssel elkülönítjük, etiléterrel mossuk és vákuumban P2O5 felett szobahőmérsékleten szárítjuk, így 0,26 g tiszta A/16686 antibiotikumot kapunk.
b) A szűrletet vákuumban 35 C° alatti hőmérsékleten n-butanol hozzáadása mellett sztrippeljük és így 50 ml nbutanolos koncentrátumot kapunk. Petroléter hozzáadása esetén csapadék képződik, amelyet szűréssel elkülönítünk és vákuumban szobahőmérsékleten szárítunk. Ily módon 42,9 g részben tisztított A/16686 antibiotikumot kapunk, amelynek az Μ. I. C. értéke S. pyogenes ellen 0,2 pg/ml. Ezt az antibiotikus hatású anyagot 2,5 liter vízben szuszpendáljuk és 1 n NaOH hozzáadása útján a pH 7-re állítása mellett oldjuk. A kapott vizes oldatot 5—5 liter n-butanollal háromszor extraháljuk és a szerves fázist vízzel való mosás után 200 ml-re betöményítjük vákuumban 35 C° alatti hőmérsékleten.
Dietilétemek a koncentrátumhoz való hozzáadása után csapadék képződik, amelyet szűréssel elkülönítünk és vákuumban szobahőmérsékleten szárítunk. A száraz terméket 160 ml 2:3:4 (tf/tf/tf) arányú n-propanol: n-butanol: 1 n ammóniumhidroxid-elegy felső rétegében oldjuk. A keletkező oldatot 100 cm magas és 7,5 cm átmérőjű oszlopra viszszük, amely 1,7 kg szilikagél 60-t (Merek 0,06—0,2 mm) tartalmaz és a fenti oldószer-eleggyel készült. Az oszlopot ugyanazzal az eleggyel eluáljuk és 300 ml-es frakciókat sze20 dünk le. Az oszlop eluálását vékonyrétegkromatográfiával követjük. A 21—26 frakciókat egyesítjük és az egyesített frakciókat n-butanollal sztrippeljük 35 C* alatti hőmérsékleten vákuumban, így 50 ml n-butanolos koncentrátumot kapunk. Dietiléter hozzáadásakor csapadék képződik, amelyet szűréssel elkülönítünk, dietiléterrel mosunk és vákuumban P2O5 felett szárítunk szobahőmérsékleten. Ily módon 1,875 g majdnem tiszta A/16686 antibiotikumot kapunk, amelyet azután tovább tisztítunk az a) pontban leírt módon.
Az A/16686 antibiotikum hidroklorid alakjában fehér, kristályos, gyengén higroszkópos anyag, amely 224— 226 C°-on olvad. Nagyon jól oldódik vízben és dimetilformamidban, oldható metanolban, etanolban, propanolban és butanolban, de nem oldódik etiléterben, petroléterbcn és 35 benzolban. Az A/16686 antibiotikum-hidroklorid 140 C°-on közömbös légkörben való szárítás után a következő százalékos összetételt mutatja közelítőleg (néhány elemzés átlaga): szén: 51,73%; hidrogén 6,34%; nitrogén 9,96%; klór(összklórtartalom) 5,84%; klorid-ionok 4,74% és a maradék 1%.
Az infravörös abszorpciós spektrum nujolban az 1. ábra diagramján látható.
A következő abszorpciós maximumok voltak észlelhetők (cm <ben): 3290—3070, 2930 és 2860 (nujol), 1765, 1630, 1510,1455,1375 (nujol), 1230,1175,1130, 1065,1030, 1015, 980,840 és 820. Az ultraibolya abszorpciós spektrumot a 2. ábra mutatja és a következő abszorpciós maximumokkal rendelkezik:
a) metanolban
232 nm (Ej^ =178)
265 nm (E]/^, =107)
b) 0,1 n HCl-t tartalmazó metanolban
231 nm (¾ =167)
270 (E’%,=96)
c) 0,1 n NaOH-t tartalmazó metanolban
250 nm (E!°4, -232)
295 nm (váll)
d) 7,38 pH-jú puffért tartalmazó metanolban
231 nm (Ej^ = 167)
270 nm (¾ = 96)
Az ultraibolya abszorpciós spektrumokat Beckman DK—2 spektrofotométerrel határoztuk meg).
Az A/16686 antibiotikum-hidroklorid fajlagos forgatóké65 pessége: [a]g = +49,7° (c=0,43% DMF-ben).
-5181534
Az A/l6686 antibiotikum a következő jellemző reakciókai
mutatja: | |
ninhidrin (3%-os etanolos oldat) | negatív |
ninhidrin (3%-os etanolos oldat | pozitív |
+nátriumacetát) | pozitív |
1% FeCl3—1% K3Fe(CN)6 | pozitív (zöld) |
(vizes oldat) | |
Molisch | pozitív |
Fehling | negatív |
Biuret | pozitív |
Anthron | pozitív |
Miliőn | negatív |
H2SO4 konc. | negatív |
KMnO4 vizes | pozitív |
Az A/16686 antibiotikum Rf értékeit papírkromatográfiás | |
úton meghatároztuk, amelynek során különböző eluáló sze | |
reket és S. aureus ATCC 6538 organizmust használtuk. Az | |
eredményeket a VII. táblázatban foglaljuk össze. |
VII. táblázat
Az A/16686 antibiotikum kromatográfiás viselkedése (Whatman Nr. 1 papír)*
Eluáló rendszerek | Rf értékek |
1. n-butanol pH 6-os Sörensen oldattal telítve 2. n-butanol 2% p-toluolszulfonsavat tartalmazó vízzel telítve 3. n-butanol 2% ammóniumhidroxidot tartalmazó vízzel telítve 4. Sörensen pufier, pH 6,0, n-butanollal telítve 5. n-butanol: metanol: víz 4:1:2 arányú elegye 6. etilacetát vízzel telítve 7. n-butanol: ecetsav: víz 2:1 · 1 arányú elegye 8. n-butanol:piridin:víz 4:3:7 arányú elegye | 0,00 0,00 0,00 0,05 0,43 0,00 0,52 0,87 |
(A táblázat folytatása) | |
Eluáló rendszerek | Rf értékek |
* leszálló kromatográfia | |
Rm: 40 cm Mennyiségek: 20 gg vegyület vizes metanolban oldva (2 mg' ml) Az A/16686 antibiotikum Rf értékeit különböző vékonyrétegkromatográfiás rendszerekben mérve a VIII. táblázatban adjuk meg (a körülményeket a táblázatban tüntetjük fel). | |
VIII. táblázat | |
Eluáló rendszer (tf/tf/tf) | Rf értékek |
1. n-propanol: n-butanol: 1 n ammóniumhidroxid 2:3:4 arányú elegy (felső fázis) 2. n-butanol:ecetsav:víz 4:2:5 arányú elegye 3. n-butanol: etanol: 0,1 n HC1 elegye 4. kloroform: etanol: 10%-os ecetsav 4:7:2 arányú elegye 6 | 0,15 0,61 0,61 0,00 |
(A táblázat folytatása)
Eluáló rendszer (tf/tf/tf) | Rf értékek |
5. n-butanol: ecetsav: víz 4:1:5 arányú | |
5 elegye | 0,17 |
6. metanol: 10%-os vizes ammóniumace- | |
tát: 10%-os ammóniumhidroxid 10:9:1 | |
arányú elegye | 0,52 |
7. n-butanol: piridin: víz: ecetsav | |
1θ 6:4:3:1 arányú elegy | 0,45 |
8. metanol: 10%-os vizes ammóniumace- | |
tát: 10%-os vizes ammóniumhidroxid | |
10:9:1 arányú elegy | 0,11 |
9.0,5 mólos vizes NaH2PO4: acetonitril | |
15 1:1 arányú elegy | 0,68 |
10. metanol: 10%-os vizes ammóniumacetát | |
1:1 arányú elegy | 0,65 |
11.n-butanol:ecetsav:víz 4:2:5 arányú | |
elegy 20 | 0,77 |
Rm: körülbelül 140 mm
Mennyiségek: a vegyület 1:1 arányú acetonitril/víz-eleggyel készített oldatának (1 mg/ml) 2—5 μΐ-re
Előhívás: a) bioatográfia agar lapokon B. subtilis ATCC 6633-al beoltva; b) karbonizálás α-naftol-kénsawal hevítve; c) jódgőz; d) klór-toluidin reagens; e) UV-fény 254 nm-nél
1—7. Silicagel 60 F254 lapok (Merek); előhívás a, e b, c, d, e 30 8, 9. Silicagel 60 F2S4 szilánozott (Merek); előhívás e
10,11. Cellulose F lapok (Merek); előhívás a,
Ahogy nagyteljesítményű kromatográfiás módszerekkel való meghatározások mutatják, az A/16686 antibiotikum, a
3. példában leírt elkülönítés és tisztítás után, egy főkompo35 nenst tartalmaz, amely 70—80%-ot tesz ki, és a fennmaradó 30—20%-ot legalább két kisebb komponens alkotja.
Az előző példákban leírt módon izolált (/16686-hidroklorid egy klórtartalmú bázikus glikopeptid hidrokloridja, amely abban különbözik a klasszikus glikopeptid-csoport40 tói, hogy klórt tartalmaz, továbbá abban tér el, hogy számos aminosav-komponenst foglal magában. Valójában az A/16686 antibiotikum aminosav-analízise 6 n hidrogénklorid-oldatban 110 C°-on 6 óra hosszat történő hidrolízis után, aminosav-autoanalizátorral meghatározva, a következő 45 aminosavak jelenlétét mutatja: omitin (118 gg/ mg=0,58 gM/mg), aszparaginsav (29,2 gg/mg=0,22 gM/ mg), treonin (68 gg/mg=0,57 gM/mg), glicin (25 gg/ mg=0,33 gM/mg), alanin (29 gg/mg=0,32gM/mg), leucin (41 gg/mg=0,31 gM/mg) és fenilalanin (42 gg/ 50 mg=0,25 gM/mg).
További négy csúcsot határoztunk meg semleges és savas aminosavak meghatározására szolgáló oszlopon. A négy aminosav közül kettőt gázkromatográfiás — tömegspektrometriás méréssel határoztunk meg a megfelelő metilészter55 -trifiuoracetil-származékokká való alakítás után és a szerkezetük az I, illetve a II képletnek felel meg.
4. példa
A szabad bázis elkülönítése
0,05 g A/16686 antibiotikum 3 ml víz és 8 ml etanol elegyével készített oldatát 2 ml 1,2-epoxibutánnal kezeljük. Az 65 elegyet 1 napig állni hagyjuk alacsony hőmérsékleten, ekkor
-6181534 csapadék képződik, amelyet centrifugálással elkülönítünk, etanollal mosunk és P2OS felett vákuumban szobahőmérsékleten szárítunk. Ily módon 0,016 g megfelelő szabad bázist kapunk.
Amennyiben a szabad bázis alakú A/16686 antibiotikumot gyógyszerészetileg elfogadható szervetlen vagy szerves savval kezeljük, akkor a megfelelő savaddíciós sót kapjuk. A gyógyszerészetileg elfogadható savak olyan nem toxikus savak, amelyek alkalmazhatók terápiásán használható sók képzésére, amelyek a szakterületen ismertek. Ilyen savak például a hidrogénklorid, hidrogénbromid, kénsav, foszforsav, salétromsav, borkősav, ecetsav, szukcinsav, tejsav, glutaminsav és a metánszulfonsav.
Claims (3)
- Szabadalmi igénypontok1. Eljárás A/16686 jelű antibiotikus hatású anyag szabad bázisként vagy fiziológiailag elfogadható savaddíciós sóként, előnyösen hidrokloridként történő előállítására, amely 20A) fehér kristályos anyag és olvadáspontja 224—226 C°;B) nagyon jól oldható vízben és dimetilfonnamidban; oldható metanolban, etanolban, propanolban és butanol- ban, de oldhatatlan etiléterben, petroléterben és benzolban;C) elemi összetétele: 51,73% szén, 6,34% hidrogén, 9,96% 25 nitrogén, 5,84% teljes klór, 4,74% klórion és 1% maradék;F) fajlagos forgatóképessége [a]??=+49,7° (c=0,43% DMF-ben); azzal jellemezve, hogy az Actinoplanes sp. ATCC 33 076 törzset valamely asszimilálható szénforrást, asszimilálható nitrogénforrást és szervetlen sókat tartalmazó tápközegben alámentett levegőztetéses körülmények között addig tenyésztjük, amíg elegendő mennyiségű A/16686 antibiotikum termelődik és az antibiotikus hatású anyagot kinyerjük, kívánt esetben tisztítjuk és kívánt esetben az A/16686 antibiotikum-hidrokloridot ismert módon szabad 5 vegyületté alakítjuk, vagy a szabad vegyületből ismert módon, gyógyászatilag elfogadható savakkal sót képezünk.
- 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja A/16686 jelű antibiotikus szabad bázisként vagy nem-toxikus gyógyszerészetileg elfogadható savaddíciós sóként, elő-10 nyösen hidrokloridként történő előállítására azzal jellemezve, hogy az Actinoplanes sp. ATCC 33 076 törzs tenyésztésével kapott, antibiotikus hatású anyagot a táptalaj és a micélium külön-külön extrahálásával valamely szerves oldószer, előnyösen rövidszénláncú alkanol vagy kloroform segítségével különítjük el, az antibiotikus hatású anyagot 4:7:2 arányú kloroform: etanol: viz eleggyel való kezeléssel kivonjuk az extraháló oldószerekből, az olajos terméket vízbe öntjük, az elkülönülő szilárd terméket kiválasztjuk és szilikagél-oszlopon tovább tisztítjuk, az eluálást 1:1 arányú acetonitril/0,01 n HCl-eleggyel végezzük, térhálósított dextrángél-oszlopon kromatográfiás úton sómentesitjük és kívánt esetben az A/16686 antibiotikum-hidrokloridot szokásos módon a megfelelő szabad bázissá vagy más fiziológiailag elfogadható savaddíciós sóvá alakítjuk.
- 3. Eljárás antibiotikus hatású gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1. igénypont szerinti A/16686 antibiotikum hatásos mennyiségét szabad bázisként vagy fiziológiailag elfogadható savaddíciós sóként a gyógyszerkészítésnél szokásosan alkalmazott vivőanyagok-30 kai és/vagy adalékanyagokkal gyógyászati készítménnyé feldolgozzuk.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GB7912298 | 1979-04-07 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HU181534B true HU181534B (en) | 1983-10-28 |
Family
ID=10504421
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU80822A HU181534B (en) | 1979-04-07 | 1980-04-03 | Process for preparing the antibiotic a/16686 |
Country Status (30)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US4303646A (hu) |
JP (2) | JPS5697237A (hu) |
AR (1) | AR222217A1 (hu) |
AT (1) | AT370130B (hu) |
AU (2) | AU533951B2 (hu) |
BE (1) | BE882632A (hu) |
CA (1) | CA1142866A (hu) |
CH (1) | CH655515B (hu) |
DE (1) | DE3013246A1 (hu) |
DK (1) | DK149336C (hu) |
ES (1) | ES8103170A1 (hu) |
FI (1) | FI65630C (hu) |
FR (1) | FR2452931A1 (hu) |
GR (1) | GR67279B (hu) |
HK (1) | HK23584A (hu) |
HU (1) | HU181534B (hu) |
IE (1) | IE49327B1 (hu) |
IL (1) | IL59704A (hu) |
IT (1) | IT1212411B (hu) |
LU (1) | LU82327A1 (hu) |
MX (1) | MX5958E (hu) |
NL (1) | NL192989C (hu) |
NO (1) | NO155496C (hu) |
NZ (1) | NZ193357A (hu) |
PH (1) | PH17230A (hu) |
PT (1) | PT71064A (hu) |
SE (1) | SE441188B (hu) |
SG (1) | SG22687G (hu) |
YU (1) | YU41917B (hu) |
ZA (1) | ZA801629B (hu) |
Families Citing this family (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ATE7031T1 (de) | 1980-08-16 | 1984-04-15 | Gruppo Lepetit S.P.A. | Antibiotikum a/16686 faktor a2, verfahren zu dessen herstellung und die gleichzeitig hergestellten antibiotika a/16686 faktoren a1 und a3. |
US4375513A (en) * | 1980-12-18 | 1983-03-01 | Eli Lilly And Company | Biologically pure culture of Actinoplanes missouriensis |
US4613503A (en) * | 1984-10-11 | 1986-09-23 | The Dow Chemical Company | Antibiotic A26201-1 and antibiotic A26201-2 produced by a novel strain of actinoplanes |
US4859599A (en) * | 1984-10-11 | 1989-08-22 | The Dow Chemical Company | Antibiotic A26201-1 and antibiotic A26201-2 produced by a novel strain of actinoplanes |
GB8624806D0 (en) * | 1986-10-16 | 1986-11-19 | Pfizer Ltd | Glycopeptide antibiotic |
GB8720980D0 (en) * | 1987-09-07 | 1987-10-14 | Lepetit Spa | Derivatives |
GB8729989D0 (en) * | 1987-12-23 | 1988-02-03 | Lepetit Spa | Novel hydrogenated derivatives of antibiotic a/16686 |
GB8808658D0 (en) * | 1988-04-13 | 1988-05-18 | Lepetit Spa | Aglycons of a/16686 antibiotics |
AU2001245263A1 (en) * | 2000-01-21 | 2001-07-31 | Kosan Biosciences, Inc. | Method for cloning polyketide synthase genes |
US7257562B2 (en) * | 2000-10-13 | 2007-08-14 | Thallion Pharmaceuticals Inc. | High throughput method for discovery of gene clusters |
EP1326983B1 (en) * | 2000-10-13 | 2005-04-06 | Ecopia Biosciences Inc. | Gene cluster for ramoplanin biosynthesis |
US20030211567A1 (en) * | 2001-07-24 | 2003-11-13 | Ecopia Biosciences, Inc. | Compositions, methods and systems for discovery of lipopeptides |
WO2003076460A1 (en) * | 2002-03-08 | 2003-09-18 | Vicuron Pharmaceuticals Inc. | A process for the production of ramoplanin-like amide derivatives |
CA2430580A1 (en) * | 2002-04-17 | 2003-09-04 | Ecopia Biosciences Inc. | Specialized dual condensation/epimerization domain in non-ribosomal peptide synthetase systems |
WO2003103699A1 (en) * | 2002-06-06 | 2003-12-18 | Vicuron Pharmaceuticals Inc. | Use of ramoplanin to treat diseases associated with the use of antibiotics |
US20040147441A1 (en) * | 2002-08-23 | 2004-07-29 | Leach Timothy S. | Methods and reagents for preventing bacteremias |
US20040127403A1 (en) * | 2002-09-06 | 2004-07-01 | Francesco Parenti | Methods for treating and preventing Gram-positive bacteremias |
US20050043223A1 (en) * | 2003-04-25 | 2005-02-24 | Leach Timothy S. | Methods for reducing or preventing transmission of nosocomial pathogens in a health care facility |
US20170028016A1 (en) | 2014-04-16 | 2017-02-02 | Nanotherapeutics, Inc. | Methods of treatment of c. difficile spores with ramoplanin |
US20180002741A1 (en) | 2016-07-01 | 2018-01-04 | The United States Of America As Represented By The Department Of Veterans Affairs | Method of diagnosis and treating gastrointestinal and neurological diseases associated with species of genus clostridium |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
BE790627A (fr) * | 1971-10-27 | 1973-04-27 | Lilly Co Eli | L'antibiotique a477 et son procede de preparation |
GB1458512A (en) * | 1973-11-22 | 1976-12-15 | Lepetit Spa | Antibiotic substance |
US4038383A (en) * | 1975-01-17 | 1977-07-26 | Pfizer Inc. | Mixture of antibiotics produced by a species of actinoplanes |
US4001397A (en) * | 1975-08-11 | 1977-01-04 | Pfizer Inc. | Antibiotic compound 41,012 |
US4115552A (en) * | 1976-04-19 | 1978-09-19 | Eli Lilly And Company | Factor A and B of antibiotic A-4696 |
US4169887A (en) * | 1978-02-21 | 1979-10-02 | Pfizer Inc. | Antibiotics produced by species of actinoplanes |
JPS54135703A (en) * | 1978-04-11 | 1979-10-22 | Dainippon Pharmaceut Co Ltd | Antibiotic ab-102 and preparation thereof |
-
1980
- 1980-03-20 ZA ZA00801629A patent/ZA801629B/xx unknown
- 1980-03-21 FI FI800881A patent/FI65630C/fi not_active IP Right Cessation
- 1980-03-22 GR GR61511A patent/GR67279B/el unknown
- 1980-03-25 NO NO800869A patent/NO155496C/no unknown
- 1980-03-25 IL IL59704A patent/IL59704A/xx unknown
- 1980-03-31 PH PH23840A patent/PH17230A/en unknown
- 1980-03-31 US US06/135,560 patent/US4303646A/en not_active Expired - Lifetime
- 1980-04-01 DK DK140080A patent/DK149336C/da not_active IP Right Cessation
- 1980-04-01 AU AU57036/80A patent/AU533951B2/en not_active Expired
- 1980-04-01 CH CH256780A patent/CH655515B/it unknown
- 1980-04-02 ES ES490236A patent/ES8103170A1/es not_active Expired
- 1980-04-03 BE BE0/200117A patent/BE882632A/fr not_active IP Right Cessation
- 1980-04-03 HU HU80822A patent/HU181534B/hu unknown
- 1980-04-03 LU LU82327A patent/LU82327A1/fr unknown
- 1980-04-03 SE SE8002601A patent/SE441188B/sv not_active IP Right Cessation
- 1980-04-03 PT PT71064A patent/PT71064A/pt unknown
- 1980-04-03 DE DE19803013246 patent/DE3013246A1/de active Granted
- 1980-04-03 IE IE697/80A patent/IE49327B1/en not_active IP Right Cessation
- 1980-04-03 IT IT8021162A patent/IT1212411B/it active
- 1980-04-03 FR FR8007547A patent/FR2452931A1/fr active Granted
- 1980-04-03 NL NL8001982A patent/NL192989C/nl not_active IP Right Cessation
- 1980-04-03 NZ NZ193357A patent/NZ193357A/xx unknown
- 1980-04-04 AT AT0187480A patent/AT370130B/de not_active IP Right Cessation
- 1980-04-04 YU YU935/80A patent/YU41917B/xx unknown
- 1980-04-07 AR AR280577A patent/AR222217A1/es active
- 1980-04-07 JP JP4476480A patent/JPS5697237A/ja active Granted
- 1980-04-07 MX MX808745U patent/MX5958E/es unknown
- 1980-04-08 CA CA000349360A patent/CA1142866A/en not_active Expired
- 1980-06-04 AU AU59036/80A patent/AU535727B2/en not_active Ceased
- 1980-12-11 US US06/215,310 patent/US4328316A/en not_active Expired - Lifetime
-
1984
- 1984-03-15 HK HK235/84A patent/HK23584A/xx not_active IP Right Cessation
-
1987
- 1987-03-06 SG SG226/87A patent/SG22687G/en unknown
- 1987-04-13 JP JP62088966A patent/JPS62282579A/ja active Granted
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
HU181534B (en) | Process for preparing the antibiotic a/16686 | |
US4946941A (en) | Novel glycopeptide antibiotics | |
SU1423001A3 (ru) | Способ получени гликозидных антибиотиков ВВМ-2478А и ВВМ-2478 В антибиотического комплекса ВВМ-2478 | |
EP0046201B1 (en) | Antibiotic a/16686 factor a2, the process for the preparation thereof, and the co-produced antibiotic a/16686 factors a1 and a3 | |
US3824305A (en) | Antibiotic a-287 and process for production thereof | |
US4764602A (en) | Antibiotics, and their production | |
US4373028A (en) | Culture of Nocardia ATCC 31309 | |
GB2045231A (en) | Antibiotic A/16686 and its preparation from actinoplanes | |
US5109122A (en) | Antibiotics, dexylosylbenanomicin B | |
US4292309A (en) | Antibiotics C-14482 B1, B2 and B3 | |
US4692333A (en) | Antimicrobial and antitumor antibiotic M 9026 and its pure individual factors 1, 2, and 3 and microbial process for production thereof | |
JPS5831195B2 (ja) | コウセイブツシツガルジマイシンルイノ セイゾウホウ | |
KR950013857B1 (ko) | 신규 항생물질 무레이도마이신 a, b, c 및 d 그의 제조 방법 및 치료학적 용도 | |
US3969501A (en) | Antibiotic 342-14-I and production thereof | |
KR830001443B1 (ko) | 항생물질 a/16686의 제법 | |
US4830967A (en) | Process for producing antibiotic A80438 | |
CA1220746A (en) | Luzopeptin e.sub.2 | |
GB1575533A (en) | Viridogrisein antibiotics | |
US5140101A (en) | Antiviral antibiotic BU-4344V | |
US5256548A (en) | Antiviral antibiotic BU-4344V | |
US4001086A (en) | Antibiotic a-30641 and process for production thereof | |
GB2159150A (en) | Antibiotics do-248-a and b and their preparation | |
JPS5810392B2 (ja) | Oa↓−7653物質 | |
EP0515927A2 (en) | Pradimicin antibiotics | |
JPH0565297A (ja) | エノペプチンa、その製造方法、並びに抗ウイルス剤 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
HU90 | Patent valid on 900628 | ||
HPC4 | Succession in title of patentee |
Owner name: BIOSEARCH ITALIA S.P.A.,, IT |