HU180892B

HU180892B - Process for preparing 9-/hydroxy-alkyl/-purine derivatives

Info

Publication number: HU180892B
Application number: HU79NE618A
Authority: HU
Inventors: Alfredo Giner-Sorolla
Original assignee: Newport Pharmaceuticals; Sloan Kettering Inst Cancer
Priority date: 1978-09-15
Filing date: 1979-09-14
Publication date: 1983-05-30
Also published as: IE791752L; MX6270E; IL58086A; PH15921A; YU41885B; IE48826B1; CA1121818A; ZA793972B; EP0009155A1; FI67847C; RO77559A; YU224679A; IL58086A0; ES484168A1; EP0009155B1; US4221910A; CS241023B2; JPH031310B2; NO152446C; PL218318A1

Description

A találmány tárgya eljárás az I általános képletü új 9-(hidroxi-alkil)-purin-származékok előállítására — ebben a képletben

R¹ jelentése 5—8 szénatomos alkilcsoport, és

R² jelentése metilcsoport. 5

A találmány szerinti vegyületek immunmodulátorok, vírusellenes hatással és tumorgátló hatással rendelkeznek, és enziminhibitorok is.

Enziminhibitor-hatású purin-származékokat ismertet a J. 10 Med. Chem. 17, 6 (1974) és a J. Med Chem. 10, 689 (1967) közlemény.

Az R¹ szubsztituens jelentése előnyösen egyenesláncú alkilcsoport, például n-pentil-, η-hexil-, n-heptil- vagy n-oktil- 15 csoport.

A találmány szerint az I általános képletü 9-(hidroxialkil)-purin-származékokat úgy állíthatjuk elő, hogy egy II általános képletü 6-amino-purinban — ahol R¹ és R² az 20 I általános képletnél megadott jelentésüek — az aminocsoportot diazotáljuk, majd hidrolizáljuk, vagy egy VI általános képletü 6-klór-purint — ahol R¹ és R²az általános képletnél megadott jelentésüek — hidrolizálva 25 a klóratomot hidroxilcsoportra cseréljük ki.

A VI általános képletü vegyületek például úgy állíthatók elő, hogy a III képletü 5-amino-4,6-diklór-pirimidint valamely IV általános képletü aminnal V általános képletü 5-amino-4-(hidroxi-alkil-amino)-6-klór-pirimidin-származék- 30 ká kondenzáljuk, amelyet ortohangyasav-trietilészterrel VI általános képletü purinszármazékká kondenzálunk.

A VI általános képletü vegyületek amidálással II általános képletü vegyületekké is átalakíthatok.

A IV általános képletü aminszármazékok például úgy állíthatók elő, hogy VII általános képletü aminosavakat ecetsavanhidriddel reagáltatva acetamido-származékká, majd ezeket savas hidrolízissel VIII általános képletü vegyületekké alakítjuk, amelyekből redukcióval IV általános képletü vegyületeket kapunk.

Az eljárások műveleti részleteit a példákban ismertetjük.

Az immunmodulátor olyan vegyület, amely szabályozza az immunválaszt. Ez immunstimulációt és immuninhibíciót is jelenthet. Az immunstimuláció például hasznps az immunitás kialakulásában. Az immuninhibíció is számos területen kerül alkalmazásra. Például hasznos szervátültetéseknél, így például vese- vagy szívátültetésnél, ahol gátolja a szerv kilökődését.

A találmány szerinti vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények emlősök (és emlősök sejtjeinek), beleértve az embereket is, például sertés, kutya, macska, szarvasmarha, ló, juh, kecske, egér, nyúl, patkány, tengerimalac, hörcsög, majom kezelésére használhatók.

A találmány szerinti eljárást szemlélteti a következő példa. Amennyiben másképp nem jelezzük, a rész mindig súlyrészt, a százalék mindig súlyszázalékot jelent.

A hőmérsékletet Celsius-fokban adjuk meg.

-1180892

1. példa

Erithro-9-(2-hidroxi-3-nonil)-hipoxantin (NPT 15 392) előállítása.

Az erithro-9-(2-hidroxi-3-nonil)-hipoxantin („nonil-hipoxantin) előállítására több módszert használtunk. Az egyik H. J. Schaeffer és C. F. Schwender [J. Med. Chem. 17, 6 (1974)] erithro-9-(2-hidroxi-3-nonil)-6-klór-purin-szintézisének továbbfejlesztésén alapul. Az utolsó lépés, a 6-klórpurin-származék nonil-hipoxantinná való hidrolízise A. Giner—Sorolla, C. Geyte, A. Bendich és G. B. Brown [J. Org. Chem. 34, 2157 (1969) által a halogén-purinok hidrolízisére leírt módszer adaptációja.

A másik módszer, azaz -erithro-9-(2-hidroxi-3-nonil)adenin („EHNA”) „nonil-hipoxantinná” való nitrozálása az előbbi eljárást annyiban tartalmazza, hogy a klór-származékot ammonolízissel amino-purinná („EHNA”) alakítjuk, majd ennek nitrozálásával nyerjük a nonil-hipoxantint.

a) Erithra-9-(2-hidroxi-3-nonil)-hipoxantin szintézisvázlata.

1. lépés: A VII általános képletü vegyületek körébe tartozó

2- amino-oktánsavat — ahol

R' jelentése n-hexilcsoport — ecetsavamhidriddel acilezve 70%-os hozammal a VIII általános képletü vegyületek körébe tartozó acetamido-nonán-2onná alakítjuk.

2. lépés: A fenti vegyületet sósavval 67%-os hozammal

3- amino-nonan-2-on-hidrokloriddá alakítjuk.

3. lépés: A 3-amino-nonan-2-on-hidrokloridot káliumborohidriddel 75%-os hozammal a IV általános képletü vegyületek körébe tartozó erithro-3-amino-2-nonanollá — ahol R¹ jelentése n-hexilcsoport,

R² jelentése metilcsoport — redukáljuk.

4. lépés: Az erithro-3-aminQ-2-nonanolt a III képletü 5-ammo-4,6-diklór-pirimidinnel az V általános képletü vegyületek körébe tartozó 5-amino-4-klór-6-(2-hidroxi-3-nonil-amino)-pirimidinné — ahol

R¹ jelentése n-hexilcsoport, R² jelentése metilcsoport — kondenzáljuk 54%-os hozammal.

5. lépés: Az erithro-5-amino-4-klór-6-(2-hidroxi-3-nonilamino)-pirimidint ortohangyasav-etilészterrel gyűrűzárással 100%-os hozammal a VI általános képletü vegyületek körébe tartozó erithro-9-(2-hidroxi-3-nonil)-6-klór-purinná kondenzáljuk — ahol

R¹ jelentése n-hexilcsoport, R² jelentése metilcsoport.

6. lépés: A fenti 6-klór-purin-származékot 100%-os hozammal az I általános képletü vegyületek körébe tartozó erithro-9-(2-hidroxi-3-nonil)-hipoxantinná hidrolizáljuk — ahol

R¹ jelentése n-hexilcsoport,

R² jelentése metilcsoport.

b) Erithro-9-(2-hidroxi-3-nonil)-hipoxantin másik szintézismódszerének vázlata.

1. lépés: A VI általános képletü vegyületek körébe tartozó crithro-9-(2-hidroxi-3-nonil)-6-klór-purint — ahol

R¹ jelentése n-hexilcsoport,

R² jelentése metilcsoport — ammonolízissel 92%-os hozammal a II általános képletü vegyületek körébe tartozó erithro-9-(2-hidroxi-3-nonil)adeninné alakítjuk — ahol

R¹ jelentése n-hexilcsoport, R² jelentése metilcsoport.

2. lépés: A fenti erithro-9-(2-hidroxi-3-nonil)-adenint nitrozálással 75%-os hozammal az I általános képletü vegyületek körébe tartozó erithro-9-(2-hidroxi-3-nonil)-hipoxantinná alakítjuk — ahol R¹ jelentése n-hexilcsoport, R² jelentése metilcsoport.

Az eljárások részletes leírása a következő:

3-Acetamido-nonan-2-on előállítása.

200 g (1,26 mól) 2-amino-l-oktánsav, 960 ml ecetsavanhidrid és 640 ml piridin elegyét forró vízfürdőn 4 órán át melegítjük. A reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, és a maradékot 6—8-szor kirázzuk 400 ml 5%-os vizes nátriumhidrogén-karbonát oldat és 400 ml éter elegyével. Az egyesített éteres extraktumokat vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és bepárlás után 154 g (70%) nyers 3-acetamidononan-2-ont kapunk.

3-Amino-nonan-2-on-hidroklorid előállítása.

Az előbbi műveletben kapott 154 g nyersterméket feloldjuk 1540 ml tömény vizes sósavoldatban, és 2 órán át visszafolyó hűtő alatt forraljuk, majd vákuumban szárazra pároljuk. A kapott szilárd anyagot 200 ml meleg etanolból átkristályosítjuk, lehűtjük 25C°-ra az oldatot, és 600 ml dietil-étert adunk hozzá. Fehér, kristályos csapadék válik ki. A szuszpenziót éjszakán át 5C°-on állni hagyjuk, majd a csapadékot kiszűrjük, és 100 ml éterrel mossuk. így 125 g (67%) kristályos terméket kapunk, amely 112C°-on bomlás közben olvad.

Ha a kristályos anyag nem teljesen fehér, vagy alacsonyabb az olvadáspontja, úgy tetrahidrofuránból aktívszénnel végzett derítéssel átkristályosítandó. Az átkristályosításnál 100 g nyers hidrokloridhoz 150 ml tetrahidrofuránt használunk.

Erithro-3-Amino-2-nonanol előállítása.

43,8 g (0,226 mól) 3-amino-nonan-2-on-hidrokloridot feloldunk 150 ml vízmentes metanolban, és sós-jeges fürdőben - 10C°-on hűtjük (1). Kis adagokban 24,4 g (0,45 mól) kálium-borohidridet adunk hozzá 2—3 óra alatt (2). A reakcióelegy hőmérsékletét 3 órán át - 10C° és - 15C° között tartjuk (3,4), majd lassan hagyjuk szobahőmérsékletre (kb. 22C°) felmelegedni, és éjszakán át (20 óra) szobahőmérsékleten kevertetjük. Az elegyet utána vákuumban szárazra pároljuk, és a kapott szirupot 150 ml víz és 150 ml kloroform elegyével rázzuk. A vizes fázist elválasztás után még háromszor 100 ml kloroformmal extraháljuk. A kloroformos fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így enyhén sárgás, olajos terméket kapunk. Ezt a folyadékot 0,15 Hgmm nyomáson desztillálva 95—100C°on 26,4 g (75%) tiszta erithro-3-amino-2-nonanolt kapunk, amely 81—86C°-on olvad.

(Megyjegyzések:

(1) Az oldat lehűtésekor némi anyag kiválik. Ez nem befolyásolja a reakció kimenetelét.

-2180892 (2) A jelen eljárás itt eltér a Schaeffer és munkatársaiétól. Schaeffer a kálium-borohidriddel egyidejűleg ecetsavat is ad a reakcióelegyhez, hogy a pH-t 5—6 között tartsa. Mi azt találtuk, hogy a semlegesítés kálium-borohidrid veszteséget von maga után, és 5 feletti pH áll be. Sokkal lényegesebb az 5 a tény, hogy az ecetsav és a kálium-borohidrid együttes adagolása (amit Schaeffer javasol) a reakciót nagyon nehezen szabályozhatóvá teszi. A hőmérséklet jelentősen emelkedik, és kitermelés-csökkenés és/vagy a termék minőségének romlása lép fel. 10

3. Ajánlatos hatékony keverést biztosítani a reakció jó lefutása céljából, amely akkor tekinthető befejezettnek, ha az összes apró rög és az összes adag kálium-borohidrid feloldódott.

4. A 0C°-ra való hűtés, amit Schaeffer és munkatársai 15 írnak, elégtelen. Lényeges javítást jelent, hogy a reakciót jóval 0C° alatt végezzük; legjobb egész idő alatt - 10C° alatt tartani a hőmérsékletet. Ha a hőmérsékletet hagyjuk - 10C° fölé emelkedni ez jelentős kitermelés csökkenést eredményezhet. 20

Erithro-5-Amino-4-klór-6-(2-hidroxi-3-nonil-amino)-pirimidin előállítása.

24,6 g (0,15 mól) 4,6-diklór-5-amino-pirimidin és 26,2 g 25 (0,0164 mól) erithro-3-amino-2-nonanol 1080 ml 1-pentanollal készült elegyét és 350 ml tributil-amint 25 C°-on kevertetünk. A keletkező szuszpenziót nitrogénatmoszférában 28 órát forraljuk visszafolyó hűtő alatt. (Körülbelül 30 perc elteltével oldat keletkezik.) Ekkor a reakciótennék mintája 30 vízben pH 5,5-nél 267 és 297 nm-nél ultraibolya abszorpciós maximumot mutat.

A kapott oldatot forró vízfürdőn 10 Hgmm nyomáson szirupsűrűségűre bepároljuk, majd olajfürdőn 100 C°-on és 0,1 Hgmm nyomáson tovább pároljuk, míg viszkózus folya- 35 dékot kapunk, amelyhez 450 ml n-hexánt adunk. Az elegyet 1 órán át visszafolyó hűtő alatt forraljuk, és a forró sárgás, felülúszó hexános folyadékot elválasztjuk a gömblombik alján összegyűlt folyadéktól.

A kapott világosbarna olajat, amelyből a maradék hexánt 40 vákuumban eldesztilláltuk, feloldjuk 150 ml kloroformban. A kloroformos oldatot 8x250 ml telített vizes nátriumhidrogén-karbonát oldattal mossuk (Az extrakciót addig végezzük, amíg már nem fejlődik széndioxid.). A kloroformos fázist utána (vízmentes nátrium- vagy magnézium-szul- 45 fáttal) szárítjuk, és 0,1 Hgmm nyomáson 40 C°-os vízfürdőről bepároljuk. Halványbama olajat kapunk, amely hűtésre megszilárdul. Ez az anyag közvetlenül felhasználható a következő lépéshez vagy az alábbiak szerint tisztítható. A kapott olajat 75—100 ml kloroformban oldjuk, és körülbelül 50 300 ml n-hexánt adunk hozzá, mire fehér, kristályos anyag válik ki, amelyet kiszűrünk a lehűtött oldatból. Ezt a kezelést még kétszer megismételjük. Kitermelés: 23,3 g (54%). Ultraibolya spektrum adatok (víz; pH 5,5): λ 267, 296 nm. Olvadáspont: 113—116C⁰. 55

Erithro-9-(2-Hidroxi-3-nonil)-6-klór-purin előállítása.

Az előző lépésben kapott szirupszerű nyers erithro-5- 60 amino-4-klór-6-(2-hidroxi-3-nonil-amino)-pirimidinből ll,48g-ot (40 mmól) feloldunk 106 ml ortohangyasav-trietilészterben, és 34 ml kloroformot és 10 csepp etánszulfonsavat adunk hozzá, hogy oldatot kapjunk. Éjszakán át 25 C°-on áll, utána az oldatot vákuumban szirupsűrűségűre 65 bepároljuk. Kitermelés: 11,7 g (kvantitatív). Ezt a nyers erithro-9-(2-hidroxi-3-nonil)-6-klór-purint tartalmazó szirupot használjuk a következő lépéshez. Ultraibolya spektrum adat: λ 264 nm.

max

Erithro-9-(2-Hidroxi-3-nonil)-hípoxantin előállítása.

(A 6-klór-purin-származék hidrolízisével.)

4,0 g (13,4 mmól) erithro-6-klór-9-(2-hidroxi-3-nonil)purin 40 ml 0,5 n nátrium-hidroxid oldattal készült szuszpenzióját 2 órán át visszafolyó hűtő alatt forraljuk, majd lehűtjük. Ecetsavval való semlegesítés és lehűtés után kristályos csapadékként erithro-9-(2-hidroxi-3-nonil)-hipoxantint kapunk, amelyet kiszűrünk, és megszárítunk. Kitermelés;

3,8 g (kvantitatív). Olvadáspont: 196 CL Ultraibolya spektrum adatok: λ (pH 5,5) 251 nm.

Az így kapott nyerstermék papírkromatográfiásan homogén (3 különböző oldószerelegyben) és klórra negatív reakciót ad (rézdrót és láng, nátriumos olvasztás, savanyítás és ezüst-nitrát).

A nyerstermék mintáját vizes etanolból háromszor átkristályosítva (lásd tisztítás) színtelen kristályos anyagot kapunk. Olvadáspont: 202 C°

Az analízis eredményei a C₁₄H₂₂N₄O₂ összegképlet alapján: számított: C % 60,41; H % 7,97; N % 20,13; talált: C % 60,47; H % 7,86; N % 20,08.

Erithro-9-(2-Hidroxi-3-nonil)-hipoxantin tisztítása.

A nyers „nonil-hipoxantint” átkristályosítással tisztítjuk. A nyersterméket melegítéssel feloldjuk 6—10-szeres súlyú etanolban, majd egyenlő térfogatú vizet adunk hozzá. Az oldatot csontszénnel derítjük egy Erlenmeyer-lombikban, majd Celit-en át forrón szűrjük. Az oldatot állandó keverés közben elektromos fűtőlapon bepároljuk. Kis adagokban vizet adunk az elpárolgott térfogat pótlására, amíg bőséges csapadék-kiválás lesz. Az oldatot tovább pároljuk az etanol eltávolítása céljából, közben ismételten vizet adunk hozzá, amíg az anyag súlyának 8—10-szeresét el nem érjük. Az anyagveszteség körülbelül 10% minden egyes átkristályosításnál. Két átkristályosítással az olvadáspont 202C°-ra emelkedik, és színtelen kristályos terméket kapunk, míg a nyerstermék gyengén sárga vagy vörös, és 192 C’-on olvad.

Erithro-9-(Hidroxi-3-nonil)-adenin-hidroklorid.

Az előbbiekben kapott olajszerű nyers erithro-6-klór-9-(2hídroxi-3-nonil)-purinból 6,15 g-ot feloldunk 300 ml ammóniával telített metanolban, hozzáadunk 1 g ammóniumkloridot, és 1 órán át 80-100 C°-on melegítjük rozsdamentes acél bombában. Lehűtés után az oldatot vákuumban szárazra pároljuk. Metanolt adunk hozzá, és háromszor egymás után bepároljuk az ammónia feleslegének eltávolítása céljából.

A szirupszerű maradékot vízmentes metanolban oldjuk, és jeges vizes fürdőben hűtve 20 C° alatti hőmérsékleten vízmentes hidrogén-klorid gázt buborékoltatunk bele. A gázbevezetést | óráig folytatjuk, utána az elegyet lehűtjük 5 C’ra. A csapadékot zsugorított üvegszűrőn kiszűrjük, hideg metanollal mossuk, és levegőn megszárítjuk. Kitermelés 6,0 g (92%). Olvadáspont: 173—175 C° (bomlás közben). Ultraibolya spektrum adatok (víz; pH 5,5): λ 260 nm.

-3180892

Másik módszer erithro-9-(2-hidroxi-3-nonil)-hipoxantin előállítására.

[erithro-9-(2-Hidroxi-3-nonil)-adenin dezaminálásával.J

5,6 g (71 mmól) nátrium-nitritet adunk lassan, keverés közben 4,0 g (14 mmól) erithro-9-(2-hidroxi-3-nonil)-adenin 20 ml 50%-os ecetsawal és 3,2 ml 1 n sósavval készült oldatához 25 C°-on. A reakcióelegyet 2 óra hosszat keverjük 25 C°-on. Utána ultraibolya spektrumot veszünk fel. Ha az ultraibolya elnyelési maximum 250 nm-nél lesz, az oldatot 2 n nátrium-hidroxid oldattal semlegesítjük. A kapott csapadékot kiszűrjük, és vízzel mossuk. Kitermelés: 3,03 g (75%). Olvadáspont: 195 C’.

A tennék egy részét analitikai minta céljára háromszor átkristályosítjuk vízből, így 202 C° olvadáspontú terméket kapunk.

Az analízis eredményei a C₁₄H₂₂N₄O₂ összegképlet alapján: számított: C % 60,40; H % 7,96; N % 20,13; talált: C % 60,40; H % 7,90; N % 20,12.

Ultraibolya színképe:

λ max	λ . min	koncentráció 10	pH
250	224	12,1	7
248	222	13,3	1
254	220	14,1	10

Egerek in vivő kezelése.

Lépsejtek szaporodásának concanavalin A által in vitro kiváltott stimulációjára gyakorolt hatás

A vizsgálat célja az, hogy meghatározzuk egerek NPT 15392 vegyülettel való in vivő kezelésének hatását ezen állatokból izolált lépsejtek későbbi működésére, és értékeljük in vitro szaporodási válaszukat a concanavalin A (Con A) mitogénre.

Eljárás.

In vivő kezelés.

Kilenc darab 8—9 hetes korú, 18—20 g súlyú hím Balb/C egeret két csoportba osztunk. Az egyik csoportot naponta kétszer (1 napig), reggel és délután, szájon át beadott 10 mg/kg NPT 15392-vel kezeljük. A második csoport placebo kontrollként sóoldatot kap.

In vitro lépsejt vizsgálat: sejtpreparálás.

A következő napon mindegyik csoportot leöljük, a lépeket eltávolítjuk, és összegyűjtjük. A lépeket felaprítjuk, és a sejteket RPMI—1640 tápoldatban (Grand Island Biologicals gyártmánya) mossuk, amelyhez adalékként 2 mmól glutamint és antibiotikumokat adtunk. Az egyes preparátumok sejtkoncentrációját sejtszámlálóval meghatározzuk, és RPMI tápoldattal 5 · 10® sejt/ml koncentrációra állítjuk be.

Mikrotiter lemez-meghatározás.

A mikrotiter meghatározásokat 0,2 ml inkubációs térfogatban végezzük, amelyben 5 10⁵ sejt és ConA vagy Con 5 A és a megfelelő vegyület van a megadott koncentrációkban. Minden egyes meghatározást 6 párhuzamos kísérletben végzünk, és csak sejteket tartalmazó vakpróbával hasonlítjuk össze. A vizsgálati lemezeket 37 C’-on 4 napig inkubáljuk 5% széndioxidot tartalmazó légtérben. Az inkubálás utolsó 10 18—20 órájában 0,5 ml ³HTdR-t (triciált timidint) (10 pCi/ml; 6 Ci/mmól) adunk minden egyes tenyészethez. A tenyészeteket többcsatornás automatikus mintagyűjtő egységgel (MASH-unit) összegyűjtjük, és a beépült ³HTdR-t Beckmann LS 8000 folyadékszcintillációs számlálóval hatá15 rozzuk meg, ezt tekintjük a sejtszaporodás mértékének. Az eredményeket a Con A-val vagy a ConA-val és a megfelelő vegyülettel kezelt tenyészetben és a kontroll tenyészetekben talált aktivitás arányaként táblázatba gyűjtjük.

A 15392jelzésű vegyülettel történő in vivő kezelés fokozza 20 a lépsejtek ezt követő válaszát in vitro Con A stimulációra szuboptimális mitogén koncentrációnál (5 pg/ml). A 15392-vel kezelt egerekből izolált lépsejtekben 120:1 stimulációs arányt észleltünk a placebóval kezelt egerekből izolált lépsejteknél észlelt 40:1 arányhoz viszonyítva.

Vizsgáltuk a Con A-val stimulált sejtek ezt követően in vitro 1 pg/ml NPT 15392 vegyülettel való kezelésének hatását is. Mindkét vegyület kifejezett képességet mutat a Con A stimuláció fokozására, különösen a szuboptimális mitogén koncentrációnál (5 pg/ml), és kisebb mértékben 30 10 pg/ml-nél. Az 5 pg/ml Con A koncentrációnál az NPT 15392 által kifejtett stimuláció 2,8-szerese az egyedül a Con A-énak.

Ezek az eredmények a vegyületek immunomodulátor ha35 tását jelzik a lépsejt-szaporodásra. Az állatoknak a vegyületek valamelyikével való előkezelése érzékenyíti a sejteket az ezt követő mitogén stimulációra, míg a sejtek in vitro ezt követően mitogén stimulációt okozó vegyületek hatásának való kitétele fokozza a szaporodási választ.

Claims

Szabadalmi igénypontok

1. Eljárás I általános képletű 9-(2-hidroxi-alkil)-purin45 származékok előállítására — ebben a képletben

R¹ jelentése 5—8 szénatomos alkilcsoport, és

R² jelentése metilesoport — azzal jellemezve, hogy

a) egy*II általános képletű 6-amino-purint — ahol R¹ és 50 R² a fenti jelentésűek — diazotálunk, majd hidrolizáljuk, vagy

b) egy VI általános képletű 6-klór-purint — ahol R’ és R²a fenti jelentésűek'— hidrolizálunk.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja 55 9-(2-hidroxi-3-nonil)-hipoxantin előállítására azzal jellemezve, hogy

a) 9-(2-hidroxi-3-nonil)-adenint diazotálunk, majd hidrolizáljuk, vagy

b) 9-(2-hidroxi-3-nonil)-6-klór-purint hidrolizálunk.