FR2630008A1

FR2630008A1 - Poudre de vers de terre sechee utile comme medicament et procede pour sa preparation

Info

Publication number: FR2630008A1
Application number: FR8901976A
Authority: FR
Inventors: Yoichi Ishii; Hisashi Mihara
Original assignee: Eimei Co Ltd
Current assignee: Eimei Co Ltd
Priority date: 1988-04-19
Filing date: 1989-02-15
Publication date: 1989-10-20
Anticipated expiration: 2009-02-15
Also published as: FR2630008B1; IT8919429A0; IT1230719B

Abstract

L'invention concerne une poudre de vers de terre séchée utile comme médicament et un procédé pour sa préparation; pour produire une poudre de vers de terre séchée, on laisse une espèce de vers de terre vivants séjourner dans de l'eau douce ou une solution aqueuse légèrement acide jusqu'à ce que leur canal alimentaire soit débarrassé de la terre, on broie à l'état humide les vers de terre vivants et on lyophilise, puis sèche sous vide la suspension obtenue sous un vide de 13 mbar (10 mmHg) ou moins pendant 10 à 100 heures en élevant graduellement la température de -60 degre(s)C à 80 degre(s)C; la poudre de vers de terre séchée, combinée à des véhicules convenant en pharmacie, constitue un médicament utile notamment pour le traitement ou la prévention de l'hyperlipémie, du diabète, de l'hypertension et de l'hypotension chez les mammifères, y compris les êtres humains.

Description

POUDRE DE VERS DE TERRE SECBEE UTILE COMME MEDICANENT ET
PROCEDE POUR SA PREPARATION
La présente invention concerne une poudre de vers de terre séchée utile corme médicament et un procédé pour sa préparation.

Plus particulièrement, l'invention concerne un procédé pour la production de poudre de vers de terre séchée ainsi que des préparations antihyperlipémiantes, antidiabétiques et régulatrices de la pression sanguine (antihypertensives et/ou antihypotensives) contenant la poudre de vers de terre séchée corme ingrédient actif
Plus particulièrement, elle concerne un nouveau procédé perfectionné pour la production d'une poudre de vers de terre séchée convenant en pharmacie, ayant d'excellents effets antihyperlipémiant, antidiabétique (ou hypoglycémiant), antihypertensif et/ou antihypotensif, ainsi qu'un degré élevé d'innocuité, de même que des préparations antihyperlipémiantes, antidiabétiques et régulatrices de la pression sanguine (antihypertensives et/ou antihypotensives) contenant la poudre de vers de terre séchée comme ingrédient actif. La poudre de vers de terre séchée produite selon le procédé de l'invention peut être combinée à des vehicules convenant en pharmacie pour former des compositions pharmaceutiques qui sont utiles dans le traitement ou la prévention de l'hyperlipémie, du diabète, de l'hypertension et de l'hypotension chez les naijif ères, et en particulier les êtres humains
On sait que l'hyperlipénie, avec l'hypertension, le diabète et le tabac, est un facteur causal important de l'artériosclérose, et divers médicaments antihyperlipémiants, conprenant des composés organiques synthétiques, ont été mis au point et utilisés pour le traitement et la prévention de l'hyperlipénie. Des exemples typiques en sont le clofibrate et le nicomol. Cependant, on sait que le clofibrate et ses dérivés provoquent fréquennent des douleurs nusculaires, des troubles fonctionnels hépatiques et la formation de calculs biliaires. On sait également que le nicomol provoque des effets secondaires, tels qu'une suffusion faciale et des troubles gastro-intestinaux. De plus, on a indiqué que le clofibrate peut provoquer un hépatome chez les animaux (D.J. Svoboda et coll.,
Cancer Res., Vol. 39, p. 3419 (1979)).

En plus du problème d'innocuité mentionné ci-dessus, une attention particuliere a été portée à l'effet et à la pharmacologie des médicaments antihyperlipémiants. En particulier, avec les progrès récents des recherches portant sur le métabolisme des lipides, et notamment la fonction des lipoprotéines sériques comme vecteurs lipidiques sériques, une grande importance a été attachée, non seulement à la capacité d'un médicament à réduire la concentration des lipides dans le sérum, mais également à son action sur les lipoprotéines.

Le cholestérol sérique, avec les triglycérides (appelés ci-après TG), les phospholipides (appelés ci-après PL) et des apoprotéines, forment des lipoprotéines. Selon la densité, ces lipoprotéines sont divisées en lipoprotéines de très basse densité (appelées ci-après VLDL), lipoprotéines de basse densité (appelées ci-après LDL) et lipoprotéines de haute densité (appelées ci-après
HDL). Parmi ces lipoprotéines, on considère que les VLDL et les LDL provoquent l'artériosclérose. En revanche, les HDL participent au transport du cholestérol des vaisseaux sanguins périphériques au foie, à la formation d'esters du cholestérol et au catabolisme des
TG et semblent avoir un effet de prévention et de régression de l'artériosclérose.

Par conséquent, dans la mise au point ultérieure d'un médicament antihyperlipémiant, on devra s'attacher non seulement à son effet d'abaissement du taux sérique du cholestérol total (appelé ci-après CT), mais également au type de lipoprotéines sur le cholestérol desquelles on peut agir. En particulier, il serait souhaitable de mettre au point un médicament ayant non seulement pour effet d'abaisser le taux de cholestérol des LDL (appelé ci-après LDL-C) et d'élever le taux de cholestérol des HDL (appelé ci-après HDL-C), mais également d'abaisser l'indice d'artériosclérose (appelé ci-après IA) que l'on calcule à partir de la formule : (CT - HDL-C)/HDL-C.

Classiquement, des composés organiques synthétiques, tels que des sulfonylurées et biguanides, ont été très utilisés comme médicaments antidiabétiques oraux. Généralement, les médicaments antidiabétiques sont utilisés pour normaliser le métabolisme dans l'état pathologique et ne sont pas des médicaments capables, à proprement parler, de guérir le diabète. Dans le cas du coma diabétique ou du diabète juvénile, les médicaments antidiabétiques oraux sont inefficaces et seule l'insuline est efficace. Dans plusieurs formes de diabètes où l'insuline est indispensable (par exemple le diabète associé à une céto-acidose ou à une infection grave) les médicaments antidiabétiques oraux sont inefficaces.

L'indication principale de l'emploi des médicaments antidiabétiques oraux est le diabète de l'adulte qui ne peut pas être complètement corrigé par le régiae. Egalement dans ce cas, ces médicaments antidiabétiques oraux tendent à provoquer des effets secondaires, tels qu'une hypoglycémie, des troubles fonctionnels hépatiques et une anorexie et doivent être utilisés sous le contrôle rigoureux d'un médecin. On recherche donc de plus en plus un médicament antidiabétique n'ayant pas d'effets secondaires.

Ces dernières années, on connait un grand nombre de patients présentant une hypertension ou une hypotension indépendamment de leur âge. Pour traiter ces patients, on administre souvent des hypotenseurs aux patients hypertendus et, bien que cela ne soit pas obligatoire, des hypertenseurs (agents augmentant la tension artérielle) sont souvent administrés aux patients hypotendus.

En particulier, avec l'accroissement récent du nombre des patients hypertendus, une grande diversité de médicaments contre l'hypertension (ou hypotenseurs) ont été mis au point et utilisés.

Dès que des patients hypertendus commencent à prendre un hypotenseur, l'arrêt de sa prise peut s'accompagner de symptômes plus graves que les symptômes initias Par conséquent, il est souvent nécessaire de prendre le médicament en continu pendant une période prolongée. Egalement, dans le cas des patients hypotendus auxquels un médicament est administré, cette administration est souvent poursuivie pendant une période prolongée. On a donc grand besoin d'un médicament n'ayant pas d'effets secondaires.

Par exemple, l'hydralazime, connue comme hypotenseur, a pour effet de dilater les vaisseaux sanguins périphériques et présente une excellente activité hypotensive. Cependant, elle peut provoquer une tachycardie comme effet secondaire, si bien qu'on l'utilise en association avec un B-bloquant. Généralement, on-utilise les hypotenseurs et les hypertenseurs pendant longtemps, si bien qu'il serait très souhaitable de disposer de tels médicaments dépourvus d'effets secondaires.

En particulier dans les pays orientaux, les vers de terre (également appelés "dilongs") ont été utilisés comme médicament depuis la plus haute antiquité. Les effets pharmacologiques suivants des vers de terre ont été mentionnés dans la littérature.

(1) Shinruy Ofuchi L"Nimizu-to-Jinsei (Earthworms and Human
Life)", Maki Shobo, 30 octobre 1947, pp. 223-226) et Nikiji Ratai L"Minizu (Earthworms), Reprinted Edition", Scientist Co., 30 avril 1980, pp. 160-163) ont mentionné que les vers de terre possèdent diverses activités pharmacologiques, entre autres qu'ils sont efficaces pour réduire la taille des calculs de la vessie et les éliminer de l'organisme, dans le traitement de l'ictère et comme inducteur de l'accouchement, reconstituant, tonique capillaire, tonique et antipyrétique. D'autre part, on a également mentionné certaines actions toxiques des vers de terre. Ainsi le poison des vers de terre lese les systèmes nerveux et provoque une hémolyse (ou destruction des globules rouges).

(2) La description qui suit figure dans "Pharmaceutical
Dictionary of the People's Republic of China" édité par le Comité d'Edition du Dictionnaire Pharmaceutique, Ministère de l'Hygiène,
République Populaire de Chine (Edition de 1977, Partie I, pp.

197-198).

Classiquement il existe deux types de dilongs. L'un d'entre eux est le gros dilong (Lumbricus kwangtungesis) que l'on obtient par incision du corps de chaque ver de terre, élimination par lavage des intestins et de la terre et séchage au soleil, à l'ombre ou à basse température. L'autre est le dilong de terre (Lumbricus nativus) que l'on produit en tuant des vers de terre dans des cendres de plantes, après quoi on les débarrasse de la cendre et on les sèche au soleil, à l'ombre ou à basse température. Les vers séchés ainsi produits contiennent de la terre dans leur organisme.

On indique que ces deux types de dilongs sont utilisés à une dose journalière de 4,5 à 9 g comme antipyrétique, anticonvulsivant, activateur de la circulation, remède contre l'hémiplégie, analgésique articulaire, diurétique, antiasthmatique et antihypertenseur.

(3) On indique, dans "Our Chinese Nedicine Series 3 : Dilong and Cuttlebone --- Scientific Research in China" (Matsuura Yakugyo
K.K., p. 7), que la teinture de dilong (c'est-à-dire un extrait de dilong dans l'alcool éthylique) a un effet hypotensif.

(4) Takuo Okuda dans ("Encyclopedia of Natural Medicines", Hirokava Shoten, 15 avril 1986, p. 215) indique que le dilong est utilisé comme antipyrétique, analgésique, diurétique et antidote.

(5) Mamotu Tanaka LHokkaido Medical Journal, Vol. 24, pp 18-24 (1949)] a présenté les résultats d'une expérience portant sur des vers de terre. Plus particulièrement, de petits morceaux de vers de terre séchés ont été débarrassés de la terre, puis extraits par l'eau bouillante. Après concentration de l'extrait obtenu, de l'alcool éthylique lui a été ajouté et la matière précipitée (lumbrofébrime) a été dissoute dans la solution de Rincer Cette solution a ensuite été injectée par voie intraveineuse à un chat anesthésié et a provoqué une baisse brusque de la pression sanguine.

De plus une accélération de la coagulation sanguine a été observée en proportion du choc.

(6) lenjiro Ikava Lyamaguchi Igaku, Vol. 9, pp. 571-576 (1960)] a indiqué que des solutions d'essai ont été préparées par extraction de dilong avec du soluté salé physiologique ou par extraction de dilong avec de l'alcool éthylique ou de l'acétone, évaporation à sec de l'extrait et dissolution du résidu dans du soluté salé physiologique. Lorsque chacune de ces solutions d'essai a été injectée par voie intraveineuse à un lapin adulte, une baisse de la pression sanguine a été observée.

(7) On indique, dans "Encyclopedia of Chinese Medicines,
Volume Two" édité par the Koso New Nedical Institute (Shanghai Scientific and Technical Publishing Company, 1980, p. 2112), que, lorsqu'on administre une teinture de gros dilong, une suspension de poudre de vers de terre séchée, une infusion dans l'eau chaude de vers de terre ou une décoction de vers de terre à des chiens, des gros rats, des chats ou des souris anesthésiés, présentant une hypertension rénale chronique, on observe un effet hypotensif lent et prolongé. Lorsqu'on injecte par voie intraveineuse de l'extrait de dilong à des chiens ou des chats anesthésiés, un effet hypotensif rapide apparaît.Cependant, on a également indiqué que ces produits étaient inefficaces lorsqu'on les administre par voie orale ou lorsqu'on les utilise dans des essais cliniques. De plus, le même ouvrage (p. 2114) indique que l'hypertension essentielle pourrait être efficacement corrigée par administra,tion orale de dilong. A cet effet, on administre 10 ml d'une teinture à 40 i de dilong (préparée par macération de 40 g de dilong dans 100 ml d'alcool éthylique à 60 %) trois fois par jour Lc'est-à-dire à une dose journalière de 12 g de dilong (calculée par les présents inventeurs)] et on poursuit ce traitement pendant 30 à 60 jours.Pour les sujets ne pouvant pas boire la teinture, on prépare des pilules à partir de la poudre de dilong pure mélangée avec de l'eau (et d'une petite quantité de charge) et on administre 3 à 4 g des pilules trois fois par jour [à une dose journalière de 3 à 12 g de dilong (calculée par les présents inventeurs)] De plus, on indique que l'hypertension essentielle pourrait également être effectivement corrigée par administration de 2 ml de liquide de dilong B1 (préparé par élimination de l'hypoxanthine des dilongs à l'aide d'HgCl2, puis isolement des composants hypotenseurs avec une résine échangeuse d'ions) trois fois par jour [une dose journalière de 24 g de dilong (calculée par les présents inventeurs)]
les procédés classiques de production des produits séchés ou de la poudre séchée de vers de terre se divisent de façon générale en les trois types suivants.

(i) Le procédé selon lequel on incise le corps de chaque ver de terre, on le débarrasse de son contenu (c'est-à-dire les intestins et la terre), puis on sèche au soleil, à l'ombre ou à basse température (généralement à 50 C au moins).

(ii) Le procédé selon lequel on tue les vers de terre en les plaçant dans de la cendre de plantes ou de charbon, on les débarrasse de la terre, puis on les sèche au soleil, à l'ombre ou à basse température (généralement à 50'C ou moins) pour obtenir des vers de terre séchés contenant de la terre.

(iii) Le procédé selon lequel on débarrasse les vers de terre de la terre présente dans leur organisne, puis on les sèche en les plaçant dans de la cendre de plantes ou de charbon.

A la demande, on réduit en poudre les vers de terre séchés ainsi obtenus et on les utilise. Les procédés décrits ci-dessus sont simples et économiques et ont l'avantage de pouvoir être facilement réalisés chez soi. Cependant, Si l'on conserve les vers de terre séchés (ou la poudre de vers de terre séchée) produits selon ces procédés à l'air libre, soit dans un réfrigérateur entre O et 5 C, soit dans une pièce entre 5 et 45 C, ils moisissent en environ 6 mois et ne peuvent plus être utilisés. Xême si on les conserve dans un récipient bien ferté, ils moisissent dans l'année.

Lorsqu'on utilise comme médicament des vers de terre séchés dont l'organisme contient de la terre, tels qu'on en produit dans le procédé (ii) précité ou des vers de terre séchés dans de la cendre de plantes ou de charbon, tels qu'on en produit selon le procédé (iii) précité, il est habituel de les extraire avec de l'eau chaude ou de les faire bouillir dans l'eau, de filtrer l'extrait ou la décoction obtenue et de recueillir le filtrat. En particulier, il est rare que les vers de terre séchés produits selon le procédé (ii) soient utilisés sous forme de teinture, de poudre ou de pilules de dilong.

Les vers de terre séchés produits selon le procédé (i) sont souvent utilisés sous forme d'une infusion dans l'eau chaude ou d'une décoction ou sous forme de teinture de dilong, de poudre ou de pilules de dilong (préparées à partir de poudre de dilong en mélange avec une petite quantité d'eau ou une petite quantité de charge).

Dans les cas des procédés (ii) et (iii), le rendement des vers de terre séchés ayant une teneur en humidité de 10 à 16 t est de 5 à 19 t relativement aux vers de terre vivants utilisés comme matière première.

Récemment, Yoichi Ishii, qui est un des présents inventeurs, a proposé un aliment de santé comprenant comme composants principaux les protéines et lipides dérivés de vers de terre et un procédé pour le produire [publication préliminaire de brevet japonais n 216572/1984 (date de dépôt : 6 décembre 1984)]. Ce procédé est excellent pour produire de la poudre de vers de terre séchée comme aliment de santé. Cependant, comme procédé pour produire de la poudre de vers de terre séchée, utile comme médicament antihyperlipémiant, antidiabétique et régulateur de la pression sanguine, le procédé précité n'est pas satisfaisant du point de vue de l'efficacité Particulièrement, si une action externe est exercée sur les vers de terre vivants pour éliminer la terre qui est présente dans leur organisme, il est impossible d'éliminer sélectivement la terre.On a également découvert que, même lorsqu'on prend les plus grands soins, les viscères et les liquides de l'organisme contenant la majeure partie des composants très importants du point de vue des effets médicaux sont au moins partiellement éliminés avec la terre, ce qui entraîne une efficacité insuffisante. De plus, le rendement est aussi faible que 10 à 19 t relativement aux vers de terre vivants utilisés comme matière première.De plus, un inconvénient important est que, comme le stade final de séchage sous vide est effectué à 80 C sous un vide de 0,4 mbar (0,3 torr) pendant une période de 20 heures ou plus, les enzymes présentes dans la poudre de vers de terre séchée, et qui jouent un rôle important dans la manifestation des effets médicaux, sont au moins partiellement détruites ou inactivés Par conséquent, l'effet antihypertensif de la poudre de vers de terre séchée, produite selon le procédé de la publication préliminaire de brevet japonais n 216572/1984, s'est révélé être d'environ 50 t de celui de la poudre de vers de terre séchée produite selon le procédé de l'invention
Récemment, Bisahi Mihara, un des présents inventeurs et ses collaborateurs, ont démontré que la substance fibrinolytique dérivée des vers de terre est une protéine enzymatique qui a un pH optimal de 8 à 10 ; est stable dans la gamme des pH de 5 à 10 ; est inhibée par le Trazirol (marque commerciale), la Transamime (nom commercial), l'inhibiteur de la trypsine du soja et le sérum ; a des effets d'activation du plasminogène et fibrinolytique ; et n'a pas d'effet fibrinogénolytique.

Une fraction brute de protéines enzymatiques, obtenue par extraction d'un ver de terre avec un milieu aqueux, et un procédé pour la préparation d'une substance fibrinolytique par purification de la fraction brute de protéines enzymatiques sont décrits dans la publication préliminaire de brevet japonais n 148824/1983 (déposée le 27 février 1982) et les demandes de brevets étrangers correspondantes, y compris la demande de brevet US n 470394 (déposée le 28 février 1983), la demande de brevet GB n 8305359 (déposée le 25 février 1983), la demande de brevet IT n 47795A (déposée le 25 février 1983), la demande de brevet FR n 03165 (déposée le 25 février 1983), la demande de brevet DE n P3306944.1 (déposée le 28 février 1983) et la demande de brevet CA n 422034 (déposée le 21 février 1983).

De plus, Hisashi Vihara et ses collaborateurs ont obtenu six nouvelles protéases à partir des vers de terre, comme décrit dans la publication préliminaire de brevet japonais n' 63184/1984 (déposée le 2 octobre 1982), et ont mis au point une préparation thrombolytique comprenant ces protéases comme ingrédients actifs, cosse décrit dans la publication préliminaire de brevet japonais n' 184131/1984 (déposée le 31 mars 1983). Ces inventions sont également décrites dans les autres demandes de brevets correspondantes, y compris la demande KR n 2990 (déposée le 30 juin 1983), la demande de brevet AT n 16293 (déposée le 27 juin 1983), la demande de brevet CA n 431387 (déposée le 28 juin 1983, la demande de brevet DK n 3008 (déposée le 29 juin 1983), la demande de brevet EP n 83106288.0 (déposée le 28 juin 1983), la demande de brevet ES n 523754 (déposée le 30 juin 1983), les demandes de brevets FI n' 832383 (déposée le 29 juin 1983) et n 2399 (déposée le 30 juin 1983), la-denande de brevet PB n 29151 (déposée le 30 juin 1983), la demande de brevet TW n 7211983 (déposée le 18 juin 1983) et la demande de brevet US n 508163 (déposée le 27 juin 1983).

La demanderesse a effectué des recherches bibliographiques qui ont donné les résultats suivants
(1) Dans la littérature on ne trouve aucune mention de l'effet antihyperlipémiant de préparations pharmaceutiques contenant de la poudre de vers de terre séchée ou du dilong comme ingrédient actif. On y mentionne encore moins que la poudre de vers de terre séchée a non seulement pour effet de réduire le taux sérique de CT, mais également l'effet de réduire le taux sérique de LDL-C et d'élever le taux sérique d'HDL-C pour provoquer un abaissement de l'IA et que la poudre de vers de terre séchée est un médicament de grande innocuité qui ne provoque pas d'effets secondaires, tels qu'une hypertrophie hépatique et des troubles fonctionnels hépatiques.

(2) Dans la littérature on ne trouve aucune mention de l'effet antidiabétique ou hypoglycémiant de préparations pharmaceutiques contenant de la poudre de vers de terre séchée comme ingrédient actif.

La littérature n'indique pas que, chez des rats présentant un diabète provoqué expérimentalement par l'alloxane, la glycémie peut être notablement réduite par administration de poudre de vers de terre séchée. Comme décrit ci-après, des capsules contenant de la poudre de vers de terre séchée, en association avec un régime alimentaire, ont été administrées à des patients diabétiques pendant 4 à 9 mois. Dans le cas de patients présentant un degré faible ou modéré de diabète, la glycémie a commencé à baisser après 2 ou 3 mois de traitement et est revenue à la valeur normale des sujets sains après 4 mois de traitement. Cet excellent effet n'est pas mentionné dans la littérature.

(3) Dans la littérature on ne trouve aucune mention de l'effet antihypotensif de préparations pharmaceutiques contenant de la poudre de vers de terre séchée comme ingrédient actif. De plus, on n'y mentionne pas que la poudre de vers de terre séchée a un effet de régulation de la pression sanguine, c'est-à-dire que l'administration de la poudre de vers de terre séchée à des patients atteints d'hypertension et/ou d'hypotension ramène leurs pressions sanguines maximale et minimale à la normale.

L'invention a pour buts de fournir
un procédé pour la production de poudre de vers de terre séchée permettant d'obtenir, avec un rendement élevé, une poudre de vers de terre séchée convenant en pharmacie et de grande innocuité présentant d'excellentes activités antihyperlipémiante, antidiabétique ou hypoglycémiante, antibypertensive et/ou antihypotensive, sans provoquer aucun effet secondaire ;
des préparations antihyperlipéniantes, antidiabétiques et régulatrices de la pression sanguine (antihypertensives et/ou antihypotensives) contenant comme ingrédient actif la poudre de vers de terre séchée produite selon le procédé précité ; et
un procédé pour le traitement de l'hyperlipémie, du diabète, de l'hypertension ou de l'hypotension des mammiferes, et en particulier des êtres humains, qui comprend l'administration d'une telle préparation afin de lutter contre la maladie sans provoquer aucun effet secondaire.

D'autres buts de l'invention apparaitront à la lecture de la description détaillée qui suit.

Comme les médicaments antihyperlipémiants, les médicaments antidiabétiques ou hypoglycémiants et les médicaments régulateurs de la pression sanguine (médicaments antihypertensif s ou antihypotensifs) sont susceptibles d'une utilisation prolongée, ils doivent non seulement avoir une excellente efficacité, mais également pouvoir être utilisés sans danger de production d'aucun effet secondaire. Pour atteindre cet objectif, la demanderesse a effectué une étude approfondie pendant de nombreuses années afin de produire des médicaments de grande innocuité et dépourvus d'effets secondaires à partir de matières naturelles, en particulier de vers de terre.

Plus particulièrement, on a tout d'abord tenté de mettre au point un médicament antihyperlipémiant de grande innocuité ayant une excellente activité antihyperlipémiante, abaissant le LDL-C sérique et élevant l'HDL-C sérique, de façon à réduire l'IA, et ne produisant aucun effet secondaire, tel qu'une hypertrophie hépatique et des troubles fonctionnels hépatiques.

Le second but était de mettre au point un médicament antidiabétique qui, lorsqu'on l'administre à des patients atteints de diabète de l'adulte, dont le diabète ne peut pas etre totalement corrigé par le régime alimentaire seul, est efficace dans le traitement et la prévention du diabète sans provoquer d'effet secondaire, tel qu'une hypoglycémie, des troubles fonctionnels hépatiques et une anorexie.

On considère que les hypotenseurs et les hypertenseurs sont des médicaments qui agissent de façon totalement différente. Les hypotenseurs ont pour effet d'abaisser la pression sanguine et les hypertenseurs ont pour effet d'élever la pression sanguine, si bien qu'ils doivent toujours être utilisés sous le contrôle d'un spécialiste médical. Par exemple, lorsqu'un effet hypotensif net est provoqué par l'emploi d'un hypotenseur, une mesure appropriée (telle qu'un changement de médicament ou un arrêt temporaire du traitement) est prise selon le degré d'hypertension. Si une élévation de la.

pression sanguine se produit, l'administration du médicament approprié doit être reprise. Il serait souhaitable de traiter les patients hypertendus et/ou hypotendus avec un seul médicament. A cette fin, il est nécessaire de disposer d'un médicament capable de rétablir les pressions sanguines maximales et minimales des patients hypertendus et/ou hypotendus à leurs valeurs normales. De plus, comme un tel médicament antihypertensif et/ou antihypotensif implique une utilisation prolongée, on désire fortement un médicament sans risque ne produisant aucun effet secondaire. Donc, un troisième but de l'invention est de produire, à partir de matières naturelles, un médicament antihypertensif et/ou antihypotensif de grande innocuité et dépourvu d'effets secondaires.

Comme décrit dans la littérature précitée, on sait que des produits séchés dérivant de vers de terre ont un effet hypotensif.

Cependant, le rendement des produits à base de vers de terre séchés, obtenus selon les techniques classiques, est aussi faible que 5 à 19 z relativement aux vers de terre vivants utilisés comme matière première. De plus, même si de tels produits à base de vers de terre séchés sont conservés dans un récipient bien fermé à la température ordinaire (5 à 45 C), il moisissent ou s'altèrent dans l'année et ne conviennent plus à l'utilisation comme médicaments. De plus, ces produits à base de vers de terre séchés ont pour inconvénient d'avoir une efficacité insuffisante ou inadéquate en raison de la destruction ou de l'inactivation partielles des enzymes qui y sont présentes et/ou l'inconvénient de provoquer des effets secondaires.

Donc, la demanderesse s'est efforcée de mettre au point un procédé pour produire de la poudre de vers de terre séchée, avec un rendement élevé, sans détruire ni inactiver les enzymes qui y sont présentes, de façon à obtenir de la poudre de vers de terre séchée stérile ayant un degré élevé d'innocuité et ne provoquant pas d'effets secondaires, tels qu'une hémolyse (c'est-à-dire une destruction des globules rouges) et une tachycardie, et que l'on peut conserver ou stocker dans un récipient bien fermé pendant au moins 4 ans.

L'invention va maintenant etre décrite de façon détaillée.

Pour résoudre les problèmes mentionnés ci-dessus, la demanderesse a effectué des études approfondies et a mis au point un nouveau procédé perfectionné pour la production de poudre de vers de terre séchée. Le procédé de l'invention est décrit de façon plus détaillée ci-après relativement à deux modes de réalisation préférés.

Procédé de production 1 :
On place une espèce de vers de terre vivants dans de l'eau douce ou une solution aqueuse ne contenant pas plus de 0,3 t en poids, de préférence pas plus de 0,1 t; en poids, d'au moins un composé choisi parmi les acides organiques, tels que l'acide acétique, l'acide citrique, l'acide succinique, l'acide malique, l'acide tartrique et l'acide lactique ; les acides minéraux, tels que l'acide phosphorique, l'acide sulfurique et l'acide chlorhydrique ; et les sels de sodium ou de potassium de ces acides.

Cette solution peut également être caractérisée comme une solution aqueuse faiblement acide ayant un pH de 3 à 6,5. On y laisse ces vers de terre vivants à une température de 1 à 25 C, de préférence de 2 à 15 C, pendant une période de 0,5 à 72 heures, de préférence de 1 à 40 heures. Ainsi, le canal alimentaire des vers de terre vivants est essentiellement débarrassé de la terre par l'activité d'excrétion. On lave ensuite les vers de terre vivants avec de l'eau pour éliminer toute saleté de la surface de leurs corps.

Ensuite, on broie les vers de terre vivants à l'état humide et on congèle la suspension obtenue à une température basse de -5 C ou moins, de préférence de -10 à -60'C. Ensuite on lyophilise et sèche sous vide la suspension congelée. Plus particulièrement, en élevant graduellement la température de -60 à +90 C, de préférence de -40 à +80 C, on lyophilise la suspension, puis on la sèche sous un vide de 133 mbar (100 mmHg ou moins), de préférence de 40 mbar (30 mmHg) ou moins pendant une période de 5 à 100 heures, de préférence de 10 à 60 heures. On obtient ainsi de la poudre de vers de terre séchée stérile.

Procédé de production 2
On lave une espèce de vers de terre vivants avec de l'eau pour éliminer toute saleté de la surface de leurs corps. Ensuite on place les vers de terre vivants dans de l'eau douce ou dans une solution aqueuse ne contenant pas plus de 0,3 @ en poids, de préférence pas plus de 0,1 t en poids, d'au moins un composé choisi parmi les acides organiques, tels que l'acide acétique, l'acide citrique, l'acide succinique, l'acide malique, l'acide tartrique et l'acide lactique ; les acides minéraux, tels que l'acide phosphorique, l'acide sulfurique et l'acide chlorhydrique ; et les sels de sodium ou de potassium de ces acides. Cette solution peut également être caractérisée comme une solution aqueuse faiblement acide ayant un pH de 3 à 6,5.On y laisse ces vers de terre vivants à une -température de 1 à 25'C, de préférence de 2 à 15'C, pendant une période de 0,5 à 72 heures, de préférence de 1 à 40 heures. Le canal alimentaire des vers de terre vivants est ainsi essentiellement débarrassé de la terre sous l'effet de l'excrétion. Ensuite on broie à l'état humide les vers de terre vivants et on congèle la suspension obtenue à une température basse de -5'C ou moins, de préférence de -10 à -60 C. Ensuite on lyophilise et sèche sous vide la suspension congelée.Plus particulièrement, en élevant graduellement la température de -60 à +90'C, de préférence de -40 à +80'C, on lyophilise la suspension, puis on la sèche sous un vide de 133 mbar (100 mmHg) ou moins, de préférence de 40 mbar (30 mmHg) ou moins, pendant une période de 5 à 100 heures, de préférence de 10 à 60 heures. On obtient ainsi de la poudre de vers de terre séchée stérile.

Dans le stade de broyage à l'état humide des vers de terre, c'est-à-dire le stade de destruction des tissus (ou cellules) des vers de terre, il est préférable de transformer les vers de terre en une suspension ou un homogénat à l'aide d'un dispositif approprié, tel qu'un homogénéisateur, un mélangeur, un mélangeur homogénéisateur, un pulpeur ou un désintégrateur de cellules sous pression. Ce stade de broyage à l'état humide est, de façon souhaitable, effectué à une température de 1'C à 25'C et de préférence de 2 à 15'C.

Selon l'un ou l'autre des procédés décrits ci-dessus on peut obtenir une poudre de vers de terre séchée ayant une couleur brun jaunâtre ou brune à partir de vers de terres vivants avec un rendement de 20 à 35 t.

Dans les cas ordinaires, la poudre de vers de terre séchée ainsi préparée a une teneur en humidité de 5 à 16 t, de préférence de 7 à 14 t, une teneur en cendres de 3 à 8 t, de préférence de 4 à 7 t et une teneur en azote de 1 à 11 t, de préférence de 6 à 11 t.

La poudre de vers de terre séchée ainsi obtenue contient environ 18 amino-acides, y compris l'acide aspartique, la thréonine, la sérine, l'acide glutamique, la proline, la glycine, l'alanine, la cystéine, la valine, la séthionine, l'isoleucine, la leucine, la tyrosine, la phénylalanine, le tryptophane, la lysine, l'histidine et l'arginine.

Essai 1
Les résultats de l'analyse approchée de plusieurs poudres de vers de terre séchées, obtenues selon les procédés de production 1 et 2 décrits ci-dessus, figurent dans le tableau 1.

Tableau 1
Poudre de vers de
terre séchée Analyse approchée
Procédé Nom Humidité (t) Cendres (t) Azote (t)
1 M-1 10,2 5,1 9,4
1 M-2 10,4 5,3 8,6
1 M-3 10,7 5,2 9,2
1 M-4 10,6 5,6 9,6
2 M-5 9,5 4,5 7,8
2 n-6 9,2 4,7 8,4
2 M-7 9,7 4,6 8,2
2 M-8 10,1 5,5 9,7
2 M-9 10,2 5,6 9,9
Essai 2
On a analysé la composition de deux poudres de vers de terre séchées (M-2 et M-4) obtenues selon le procédé de production 1 et d'une poudre de vers de terre séchée (M-5) obtenue selon le procédé de production 2. Les résultats obtenus figurent dans le tableau 2.

Tableau 2
M-2 M-4 M-5
Humidité 10,4 t 10,6 t 9,5 t
Protéines brutes 53,8 t 60,0 t 48,8 t
Lipides bruts 12,2 t 9,3 t 14,2 X
Matière non azotée
soluble 18,2 t 14,4 t 22,9 t
Cendres 5,3 t 5,6 t 4,5 t
Fibres brutes 0,1% 0,1% 0,1%
(en matières (en matières (en matières
sèches) sèches) sèches)
Ca 0,384 g t 0,389 g t 0,318 g t
Mg 0,194 g t 0,202 g t 0,166 g t
K 0,613 g t 0,624 g t 0,508 g t
Na 0,382 g t 0,388 g b 0,307 g %
P 0,504 g t 0,512 g t 0,417 g t
Fe 0,061 g t 0,064 g t 0,055 g %
Cu 1,72 mg t 1,78 mg t 1,40 mg g
Zn 5,63 mg t 5,78 mg t 4,84 ig %
Mn 1,54 mg t 1,66 mg t 1,39 mg %
Essai 3
On isole les protéines brutes de deux poudres de vers de terre séchées (M-2 et M-4) obtenues selon le procédé de production 1 et d'une poudre de vers de terre séchée (M-5) obtenue selon le procédé de production 2, puis on les soumet à une analyse des amino-acides. A titre comparatif, on analyse de la même façon deux aliments riches en protéines (c'est-à-dire une farine de poisson et une poudre de soja). Les résultats obtenus figurent dans le tableau 3.

Tableau 3
Poudre de vers
de terre séchée
Farine de Poudre de
M-2 M-4 M-5 de poisson* soja*
(g/100 g) (g/100 g) (g/100 g)
Acide aspartique 6,68 7,52 6,06
Thréonine 2,97 3,34 2,68 2,56 1,95
Sérine 3,06 3,42 2,77
Acide glutamique 8,27 9,31 7,67
Proline 1,23 1,37 1,09
Glycine 3,26 3,66 2,94 6,31 2,92
Alanine 3,69 4,14 3,41
Cystéine 0,59 0,65 0,55 0,59 0,90
Valine 3,26 3,63 2,99 2,83 2,44
Néthionine 1,03 1,12 0,95 1,84 0,72
Isoleucine 3,02 3,38 2,83 2,43 2,25
Leucine 4,89 5,49 4,49 4,27 3,42
Tyrosine 2,47 2,77 2,21 1,91 1,71
Phénylalanine 2,73 3,02 2,55 2,37 2,14
Tryptophane 0,32 0,38 0,29
Lysine 4,74 5,28 4,49 1,25 1,06
Histidine 1,65 1,83 1,55 4,53 3,07
Arginine 4,18 4,47 3,81 4,20 3,53 * Selon les valeurs indiqués par P. NcDonald, R.A. Edwards et J.F.D.

Greenhalgh : Animal Nutrition (1973).

Comme le montrent les tableaux 2 et 3, les poudres de vers de terre séchées obtenues selon les procédés de production 1 et 2 sont riches en protéines brutes, en lipides bruts et en divers métaux, et l'analyse des amino-acides des protéines brutes révèle qu'ils contiennent des proportions élevées d'amino:acides essentiels.

Les poudres de vers de terre séchées obtenues dans le procédé de production 1 sont quelque peu meilleures que celles obtenues dans le procédé de production 2. De plus, lorsqu'on laisse séjourner les vers de terre vivants dans une solution aqueuse contenant la faible concentration précitée d'au moins un composé choisi parmi un acide organique, un acide minéral et un sel de sodium ou de potassium d'un tel acide, leurs canaux alimentaires sont évacués plus rapidement et plus complètement que lorsqu'on les laisse séjourner dans de l'eau douce.

Hisashi Mihara et ses collaborateurs ont obtenu six nouvelles fractions de protéases (ou d'enzymes fibrinolytiques) à partir des vers de terre (publications préliminaires de brevets japonais n 63184/1984 et 184131/1984). Plus particulièrement, on mélange de la poudre de vers de terre séchée avec 10 volumes de soluté salé physiologique et on incube la suspension obtenue pendant 2 jours. On fractionne le surnageant avec du sulfate d'ammonium et on soumet le précipité obtenu à une filtration sur gel avec du
Sephacryl S-200. Lorsqu'on soumet la fraction protéinique obtenue à une chromatographie avec échange d'ions sur DEAE-cellulose, on obtient des fractions protéiniques I, II et III ayant des activités caséinolytique et fibrinolytique.Lorsqu'on purifie encore ces fractions protéiniques I, II et III avec de la DEAE-cellulose, du
Sephadex G-75, du Toyopearl HW55, de l'ACH-Sepharose, du
Benzamidine-Sepharose et similaires, on obtient six fractions enzymatiques purifiées. Lorsqu'on mesure les poids moléculaires, selon une technique d'électrophorèse sur gel de polyacrylamide additionné de dodécylsulfate de sodium, la fraction I-0 a le poids moléculaire le plus faible de 23 500. Les poids moléculaires des fractions I-1, I-2, II, III-1 et 111-2 augmentent dans cet ordre, celui de la fraction III-2 étant de 34 200.Lorsqu'on mesure les points isoélectriques de ces six fractions par électrophorèse au point isoélectrique, la fraction 1-0 a le point électrique le plus élevé qui est pH 4,12. Les points isoélectriques des fractions I-1, I-2, II, III-1 et III-2 diminuent dans cet ordre, celui de la fraction III-2 étant pH 3,52. Ces six fractions sont de nouvelles enzymes protéolytiques différentes des enzymes à sérine. On a également indiqué que ces enzymes protéolytiques ont un pH optimal d'environ 8 ou 8-10, sont stables dans la gamme des pH de 4 à 12 ou de 5 à 12, ont une température optimale de 50'C ou de 50-60 C et sont inactivées par chauffage à 70'C pendant 60 minutes.

L'activité fibrinolytique de la poudre de vers de terre séchée de la présente invention a été étudiée avec les produits constitués de poudres de vers de terre séchées M-4 et M-5 obtenues selon les procédés de production 1 et 2 décrits ci-dessus. Plus particulièrement, on mélange une partie de la poudre de vers de terre séchée M-4 avec 10 parties de soluté salé physiologique et on soumet le surnageant à un essai avec une plaque standard de fibrine.

Comme le montre le tableau 4, on observe immédiatement une activité fibrinolytique. Lorsqu'on incube à 37 C la suspension de la poudre de vers de terre séchée M-4 dans du soluté salé physiologique, l'activité fibrinolytique de son surnageant s'accroît d'environ 4 fois le 10ème jour, 5 fois le 50ème jour et 5,5 fois le 75ème jour.Cela semble suggérer que des quantités importantes de précurseurs d'enzymes protéolytiques sont présentes dans la poudre de vers de terre séchée et que leur activité enzymatique se manifeste par suite d'une autodigestion. Lorsqu'on exprime l'activité du surnageant en unités internationales d'urokinase, l'activité calculée observée le 50ème jour est d'environ 8 000 UI/ml. Le surnageant dissout à la fois une plaque de fibrine dépourvue de plasminogène et une plaque de fibrine standard.Comme la fenêtre de dissolution formée dans la plaque de fibrine standard est supérieure à celle formée dans la plaque de fibrine dépourvue de plasminogène, le surnageant se révèle avoir non seulement une activité enzymatique provoquant une dissolution directe de la fibrine, mais également un effet d'activation du plasminogène.

On répète le mode opératoire décrit ci-dessus en utilisant la poudre de vers de terre séchée n-5 au lieu de n-4. Les résultats ainsi obtenus sont essentiellement les mêmes que ceux qui figurent dans le tableau 4.

Tableau 4
Activité fibrinolyticue du surnageant obtenu par mise en
suspension d'une partie de la poudre de vers de terre séchée
de l'inveûtion dans 10 parties de soluté salé physiologique
et incubation de la suspension à 37'C
Période d'incubation Activité fibrinolytique (surface
(jours) dissoute d'une plaque standard de
fibrine, mm2)
0 200
2 400
6 717
10 810
20 ' 870
50 1 000
75 1 100
La poudre de vers de terre séchée obtenue selon le procédé de l'invention, lorsqu'on l'administre par voie orale à des rats et à des entres humains, a un effet antihyperlipémiant, un effet d'abaissement de la glycémie et un effet régulateur de la pression sanguine (c'est-à-dire un effet antihypertensif et/ou antihypotensif), mais la raison n'en est pas totalement élucidée.

Néanmoins, ces effets semblent être dus à l'action des enzymes protéolytiques (protéines) contenues dans la poudre de vers de terre séchée, des précurseurs (protéines) de ces enzymes, d'autres protéines, de lipides ou de composés inconnus ou de leurs combinaisons. Dans la forme particulièrement préférée d'utilisation comme médicament antihyperlipémiant, médicament antidiabétique et régulateur de la pression sanguine (ou médicament antihypertensif et/ou antihypotensif), la poudre de vers de terre séchée de l'invention a une teneur en azote de 7 à 10 t et, en d'autres termes, une teneur en protéines brutes de 43,8 z à 62,5 t.

Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, la suspension de vers de terre, obtenue par broyage à l'état humide des vers de terre dans les procédés de production 1 ou 2 décrits ci-dessus, est ensuite lyophilisée et séchée sous vide comme suit.

La suspension, obtenue par broyage à l'état humide des vers de terre, est congelée à une température de -10 à -60'C, de préférence de -30 à -50'C, pendant 5 à 60 heures. Ensuite, en maintenant la même température, la suspension congelée est lyophilisée sous un vide de 0,013 à 0,026 mbar (0,01 à 0,2 mmHg) pendant 5 à 12 heures. Ensuite, la poudre obtenue est séchée à une température de 20 à 30'C sous un vide de 0,013 à 0,026 mbar (0,01 à 0,2 mmHg) pendant 5 à 15 heures. Ensuite la poudre est séchée sous vide à une température de 35 à 50'C pendant 5 à 10 heures. On obtient ainsi une poudre de vers de terre séchée stérile ayant une teneur en humidité de 5 à 15 t. Le stade final de séchage sous vide a une importance capitale.Pour obtenir de la poudre de vers de terre séchée stérile, sans une activation des enzymes protéolytiques ou de leurs précurseurs présents dans la poudre de vers de terre séchée, la demanderesse a effectué des recherches approfondies et a découvert qu'une combinaison appropriée de trois facteurs (c'est-à-dire le degré de vide, la température et la durée) est critique dans le stade final de séchage sous vide. A partir de cette découverte, les conditions opératoires décrites ci-dessus ont été établies.

Comme précédemment décrit, on a mentionné que les six enzymes protéolytiques purifiées provenant de la poudre de vers de terre séchée (publications préliminaires de brevets japonais n 63184/1984 et 184131/1984) sont toutes inactivées par chauffage à 70'C pendant 60 minutes. Cependant, comme le montre le tableau 4, les enzymes protéolytiques présentes dans la poudre de vers de terre séchée, obtenue selon le procédé de l'invention, ne sont pas inactivées
Lorsqu'on conserve certains des produits constitués d'une poudre de vers de terre séchée obtenue selon les procédés de production 1 et 2 dans un récipient bien fermé, à la température ordinaire (5' à 45 C) pendant 5 ans, oP n'observe pas de signes de modification physique ou de détérioration chimique (tels qu'un développement de moisissure).

Les espèces de vers de terre utilisées dans l'invention peuvent être choisies parmi les diverses espèces courantes comprenant Lumbricus rubellus, Lumbricus terrestris, Eisenia foetida, Allolobophora caliinosa, Dendrobaena octaedra, Allolobophora lanonica nichaelsen, Drawida hattamimizu Ratai,
Pheretima divergens Michaelsen, Pheretima communissima, Pheretima agrestes, Pheritima sieboldi Horst, Pheretima hilvendorfi,
Pontodrilus matushimensis Bizuta, Tubifex hattai Nomura, Limnodrilus gotoi Ratai (= L. socialis Stephenson) et similaires.

Lorsqu'on utilise la poudre de vers de terre séchée de la présente invention en thérapeutique clinique, elle peut être sous forme d'une préparation orale ou d'une préparation parentérale.

Cependant, on préfère particulièrement l'administration orale de la poudre de vers de terre séchée. Pour l'administration orale, la poudre de vers de terre séchée de l'invention peut être utilisée seule ou en association avec des véhicules convenant en pharmacie pour former des préparations pharmaceutiques, telles que des capsules, des comprimés, des granules, des poudres, des comprimés enrobés, des comprimés dragéifiés et des émulsions.

Les véhicules pharmaceutiques appropriés comprennent par exemple des charges, telles que le lactose, le saccharose, le mannitol, le glucose, l'amidon, le sorbitol, la glycine, le phosphate de calcium et la cellulose microcristalline ; des liants, tels que l'amidon, la gélatine, la gomme arabique, le glucose, le saccharose, le sorbitol, le mannitol, la gomme adragante, l'hydroxypropylcellulose, l'hydroxypropoxyméthylcellulose, la carboxyméthylcellulose, un copolymère de 2-méthyl-5-vinylpyrîdine/ méthacrylate de méthyle/acrylate d'éthyle, la polivinylpyrrolidone et l'alginate de sodium ; des lubrifiants, tels que l'acide stéarique, une huile durcie, le stéarate de magnésium, le stéarate de calcium, le monostéarate de polyoxyéthylène, le talc, l'oxyde de silicium et le polyétbylèneglycol ; des agents de désintégration, tels que l'amidon de pommes de terre et de l'amidon contenant un agent tension-actif ou similaires ; et des humectants, tels que le laurylsulfate de sodium. Lorsqu'on désire effectuer une administration parentérale, la poudre de vers de terre séchée de l'invention peut être utilisée sous forme de suppositoires. Dans le cas des suppositoires, on peut utiliser cotoe bases du beurre de cacao, du
Witepsol, du Subanal, du polyéthylèneglycol, du polypropylèneglycol, de la glycérogélatine, des capsules de gélatine et similaires.

D'autres additifs comprennent des antiseptiques sans danger bien connus, tels que le p-hydroxybenzoate de méthyle, le p-hydroxybenzoate de propyle, le p-hydroxybenzoate de butyle et le butylhydroxyanisole ; et les colorants sans danger.

Lorsque la poudre de vers de terre séchée de l'invention est utilisée pour le traitement de l'hyperlipémie ou du diabète, sa posologie peut varier selon la voie d'administration, l'âge, le poids corporel et l'état du patient, ainsi que la nature de la maladie. Généralement, la posologie journalière préférée pour l'homme se situe dans la gamme environ de 0,01 à 5 g. Plus préférablement, on administre une dose journalière de 0,02 à 2 g en 1 à 3 prises divisées.

Lorsqu'on utilise la poudre de vers de terre séchée de l'invention pour la régulation de la pression sanguine ou pour le traitement de l'hypertension ou de l'hypotension, sa posologie peut varier selon la voie d'administration, l'âge, le poids corporel et l'état du patient, ainsi que la nature de la maladie. Généralement, la posologie journalière préférée pour l'homme peut se situer dans la gamme d'environ 0,01 à 3 g. Plus préférablement, on administre une dose journalière de 0,02 à 2 g en 1 à 3 prises divisées.

Effets
Le mode opératoire et les résultats d'essais de toxicité portant sur la poudre de vers de terre séchée de l'invention et les modes opératoires et les résultats des essais pharmacologiques relatifs aux effets antihyperlipémiant, antidiabétique (ou hypoglycémiant) et antihypertensif (ou hypotensif) sont décrits en détail ci-après.

A. Essais de toxicité aiguë
Les essais de toxicité aigue ont été effectués par administration orale de la poudre de vers de terre séchée de l'invention. Dans ces essais, on utilise des souris mâles de souche ddy pesant 30 t 2 g et des rats miles de souche Wistar pesant 100 + 2 g par groupes de cinq.Les échantillons étudiés sont les produits constitués d'une poudre de vers de terre séchée précités n-1 (ayant une teneur en humidité de 10,2 t, une teneur en cendres de 5,1 t et une teneur en azote de 9,4 *), h-2 (ayant une teneur en humidité de 10,4 t, une teneur en cendres de 5,3 X et une teneur en azote de 8,6 t > , X-3 (ayant une teneur en humidité de 10,7 t, une teneur en cendres de 5,2 t et une teneur en azote de 9,2 t), M-4 (ayant une teneur en humidité de 10,6 t, une teneur en cendres de 5,6 t et une teneur en azote de 9,6 5), M-5 (ayant une teneur en humidité de 9,5 t, une teneur en cendres de 4,5 t et une teneur en azote de 7,8 t) et M-6 (ayant une teneur en humidité de 9,2 t, une teneur en cendres de 4,7 t et une teneur en azote de 8,4 t). En utilisant une sonde oesophagienne, on gave les souris et les rats précités avec chacun des composés étudiés à des doses variant entre 0,1 et 5 g/kg pour les souris et 2 et 8 g/kg pour les rats. Pendant la période d'essai, on place les animaux dans une pièce maintenue entre 22 et 23'C et on les observe pendant 14 jours après l'administration.

Aucune mort ne se produit aux doses utilisées pour ces essais. On observe de temps en temps le comportement des animaux pour rechercher un éventuel empoisonnement, mais on n'établit pas de différence entre les groupes d'essais et le groupe témoin normal. De plus, il n'y a pas de différence appréciable de gain de poids entre les groupes d'essai et le groupe témoin normal. On effectue des autopsies à la fin des essais sans observer de modifications macroscopiques de l'un quelconque des organes principaux. Donc, la poudre de vers de terre séchée de l'invention a une toxicité si faible qu'il est impossible de déterminer sa DL50
B.Effet sur des rats présentant une hyperlipémie induite
expérimentalement :
Essai pharmacologique 1 1) Animaux
On utilise des rats mâles de souche Wistar pesant 100 t 1 g, par groupes de huit.

2) Aliments
On prépare un aliment riche en cholestérol par addition de 1 t en poids de cholestérol et 0,5 t en poids d'acide cholique à un aliment en poudre (CE-2 ; fabriqué par Nippon Clea Co.) et on mélange soigneusement. On prépare ensuite deux aliments d'essai par mélange de cet aliment riche en cholestérol avec 2 t de chacune des deux poudres de vers de terre séchées obtenues selon l'invention tc'est-à-dire n-2 (ayant une teneur en humidité de 10,4 t, une teneur en cendres de 5,3 t et une teneur en azote de 8,6 t) et M-5 (ayant une teneur en humidité de 9,5 t, une teneur en cendres de 4,5 t et une teneur en azote de 7,8 t)].

3) Conditions expérimentales
On place les rats dans des cages séparées et on leur fournit à volonté de l'aliment et de l'eau. On les maintient à une température constante de 23 + 1 C et une humidité relative constante de 55 + 5 t pendant 7 jours. Après 7 jours, on les prive d'aliment (en leur laissant l'eau de boisson) pendant une nuit, puis on les anesthésie avec du pentobarbital sodique (nom commercial :
Nembutal). On prélève un échantillon de sang dans l'aorte abdominale descendante et on le centrifuge en conditions réfrigérées pour obtenir le sérum.On détermine dans le sérum les taux de CT, de cholestérol libre (désigné ci-après par l'abréviation CL), de LDL-C et de HDL-C en utilisant le Toshiba TBA-480 Automatic Analyzer et les réactifs d'analyse TA480 fournis par Wako Pure Chemicals Co.,
Ltd. On calcule l'IA à partir des valeurs ainsi obtenues.

4) Résultats
Les résultats obtenus figurent dans le tableau 5.

Tableau 5
Groupe à aliment Groupe à aliment Groupe à aliment
riche en cholestérol contenant du M-2 contenant du M-5
Dose (% en poids) 2 2
Nombre de rats 8 8 8
Taux sériques)
CT (mg/dl) 325,5 # 20,8a) 1854,4 # 10,7***b) 186,8 # 10,6***b)
CL (mg/dl) 70,4 # 5,2 44,8 # 2,5** 45,2 # 2,4**
LDL-C (mg/dl) 229,8 # 22,5 113,6 # 7,7** 113,0 # 7,6**
HDL-C (mg/dl) 31,6 # 4,3 30,5 # 2,3 30,7 # 2,7
IA 10,21 # 2,42 5,52 # 0,94* 5,55 # 0,98* a) Chaque valeur est une moyenne # écart type pour 8 rats b) Significativité statistique relative aux valeurs du groupe à aliment riche en
cholestérol : * P < 0,05 ; ** P < 0,01 ; *** P < 0,001.

Dans les groupes recevant l'aliment contenant 2 t de poudre de vers de terre séchée de l'invention, les taux sériques de CT, de
CL, de LDL-C et l'IA présentent des diminutions statistiquement significatives, mais on n'observe pas de modification significative de l'HDL-C.

Donc la poudre de vers de terre séchée de l'invention se révèle avoir un excellent effet antihyperlipémiant.

Essai pharmacologique 2 : 1) Animaux
On utilise des rats mâles de souche Sprague-Dawley (appelée ci-après souche SD) pesant 105 + 1 g par groupes de huit.

2) Aliments
L'aliment riche en cholestérol utilisé dans l'essai pharmacologique 2 a la composition indiquée dans le tableau 6.

Tableau 6
Ingrédients t en poids
Cholestérol 0,5
Acide cholique 1,0
Caséine 20,0
Saccharose 50,5
Huile de coco durcie 12,0
Cellulose 4,0
Mélange de selsa 4,0
Mélange de vitamines 0,5
Farine de menhaden 7,5
(Nota) a, b : les compositions du mélange de sels et du mélange de
vitamines sont décrites par Fukushima et colt., dans
Japanese Journal of Pharmacy, Vol. 89, pp. 857-862 (1962).

On mélange soigneusement les ingrédients indiqués dans le tableau 6 pour préparer un aliment riche en cholestérol. On prépare ensuite des aliments d'essai par mélange de cet aliment riche en cholestérol avec 0,25 t en poids de la poudre de vers de terre séchée d-3 obtenue selon l'invention (ayant une teneur en humidité de 10,7 t, une teneur en cendres de 5,2 8 et une teneur en azote de 9,2 %), 0,5 t en poids de poudre de vers de terre séchée n-1 obtenue selon l'invention (ayant une teneur en humidité de 10,2 t, une teneur en cendres de 5,1 t et une teneur en azote de 9,4 8), 0,5 ou 1,0 t en poids de T-oryzanol (nom commercial : Hizet Fine Granules) comme médicament témoin ou 1,0 t en poids de sojastérol (nom commercial : Moristerol Fine Granules) comme médicament témoin.

3) Conditions expérimentales :
On place les rats par deux dans des cages séparées et on leur fournit à volonté l'aliment et l'eau. On les maintient à une température constante de 23 + 1'C et à une humidité relative constante de 55 t 5 t pendant 4 semaines. Après 4 semaines on les prive de nourriture (en leur laissant l'eau de boisson) pendant une nuit, puis on les anesthésie avec du pentobarbital sodique (nom commercial : Nembutal). On recueille un échantillon de sang dans l'aorte descendante abdominale et on centrifuge en conditions réfrigérées pour obtenir le sérum.

On détermine (ou calcule) les teneurs sériques de CT, CL,
TG, PL, acides gras libres (ci-après AGL), LDL-C, IA, transaminase glutaxique-oxaloacétique (ci-après GOT) et transaminase glutamiquepyruvique (ci-après GPT) en utilisant un Tosbiba TBA-480 Automatic
Analyzer et les réactifs d'analyse TA480 commercialisés par Wako
Pure Chemicals Co., Ltd. On extrait les lipides hépatiques selon la méthode de Folch et on détermine de la même façon que décrit ci-dessus les taux de CT, TG et PL dans les lipides hépatiques.

4) Résultats
Le tableau 7 présente les résultats de l'expérience dans laquelle l'effet de la poudre de vers de terre séchée de l'invention sur des rats atteints d'hyperlipémie induite expérimentalement a été étudié par cooparaison avec deux médicaments témoins (c'est-à-dire le T-oryzanol et sojastérol). Dans les deux groupes recevant les aliments contenant 0,25 X ou 0,5 t de la poudre de vers de terre séchée de l'invention, les taux sériques de CT, CL, PL et AGL présentent une diminution statistiquement significative par rapport au groupe recevant l'aliment riche en cholestérol. Le taux sérique de TG tend à être moindre, mais on n'observe pas de diminution significative.

Les aliments contenant 0,5 z ou 1 t de t-oryzanol provoquent une diminution sensible des AGL, mais on n'observe pas de baisse significative de CT, CL, TG ou PL. D'autre part, l'aliment contenant 1 t de sojastérol, comme médicament témoin, provoque une baisse significative de CT, CL et PL, mais les taux de TG et d'AGL sont sensiblement les mêmes que ceux du groupe recevant l'aliment riche en cholestérol.

Comme décrit ci-dessus, on considère que 1'HDL-C est un facteur améliorant l'artériosclérose, et de nombreux chercheurs, dans le domaine fondamental et clinique de la médecine, ont démontré qu'une élévation d'HDL-C est un critère utile pour l'évaluation des médicaments antihyperlipémiants. Comme le montre le tableau 7, les groupes recevant les aliments contenant la poudre de vers de terre séchée de l'invention présentent une élévation statistiquement significative d'HDL-C par rapport au groupe recevant l'aliment riche en cholestérol. En revanche, le t-oryzanol, utilisé comme médicament témoin, m'élève pas l'HDL-C. Cependant, le sojastérol provoque une élévation significative de 1'HDL-C.

Comme décrit ci-dessus, l'effet d'abaissement de l'IA est important pour les médicaments antihyperlipémiants. On a démontré que les groupes recevant les aliments contenant la poudre de vers de terre séchée de l'invention ou du sojastérol comme médicament témoin, présentent une baisse significative de l'IA. Cependant, dans les groupes recevant les aliments contenant le t-oryzanol, comme médicament témoin, l'IA présente une tendance à la baisse, mais on n'observe pas de baisse significative.

Comme décrit ci-dessus, les médicaments antihyperlipémiânts du commerce peuvent provoquer des troubles hépatiques comme effets secondaires. Par conséquent, cela pose un problème lors de leur utilisation prolongée. Pour examiner l'influence des médicaments étudiés sur le foie, on détermine la GOT et la GPT sériques. On sait généralement qu'une élévation de ces paramètres suggère un trouble fonctionnel hépatique. Le groupe recevant l'aliment contenant la poudre de vers de terre séchée de l'invention présente une baisse significative de la GOT et de la GPT par rapport au groupe recevant l'aliment riche en cholestérol.En revanche, le groupe recevant l'aliment contenant 0,5 t de Toryzanol, comme médicament témoin, présente une tendance nette, bien que non significative, à l'élévation, et le groupe recevant l'aliment contenant 1 t de t-oryzanol présente une élévation statistiquement significative de la GOT et de la GPT. A cet égard, le groupe recevant l'aliment contenant 1 X de sojastérol, comme médicament témoin, présente des taux plus faibles de la GOT et de la GPT que le groupe recevant l'aliment riche en cholestérol, mais cette baisse n'est pas statistiquement significative.

En ce qui concerne le poids du foie, les groupes recevant l'aliment contenant la poudre de vers de terre séchée présentent une baisse significative par rapport au groupe recevant l'aliment riche en cholestérol Cependant, on n'observe que peu de différence entre les groupes recevant l'aliment contenant le t-oryzanol ou le sojastérol et le groupe recevant l'aliment riche en cholestérol.

En ce qui concerne le CT présent dans les lipides hépatiques, les groupes recevant l'aliment contenant la poudre de vers de terre séchée et les deux groupes recevant un aliment contenant un médicament témoin, présentent une diminution significative par rapport au groupe recevant l'aliment riche en cholestérol.

En ce qui concerne les TG présents dans les lipides hépatiques, les groupes recevant l'aliment contenantla poudre de vers de terre séchée et les deux groupes recevant un aliment contenant un médicament témoin présentent une légère tendance à la baisse, nais aucun changement essentiel n'est établi.

En ce qui concerne les PL présents dans les lipides hépatiques, les groupes recevant l'aliment contenant la poudre de vers de terre séchée présentent une baisse significative par rapport au groupe recevant l'aliment riche en cholestérol. Cependant aucun changement n'est établi entre les deux groupes recevant un aliment contenant un médicament témoin.

Dans les deux groupes recevant un aliment contenant de la poudre de vers de terre séchée et les deux groupes recevant un aliment contenant un médicament témoin, le poids corporel des rats augmente régulièrement sans aucune variation significative.

Tableau 7

<tb> <SEP> Type <SEP> d'aliment <SEP> Aliment <SEP> normal <SEP> Aliment <SEP> riche <SEP> en
<tb> cholestérol
<tb> <SEP> Dose <SEP> (% <SEP> en <SEP> pides)
<tb> <SEP> Nombre <SEP> de <SEP> rats
<tb> <SEP> 8 <SEP> 8
<tb> <SEP> Serum
<tb> <SEP> CT <SEP> (mg/dl) <SEP> 50,4 <SEP> # <SEP> <SEP> 2,5*** <SEP> 420,2 <SEP> # <SEP> <SEP> 45,3a)
<tb> <SEP> CL <SEP> (mg/dl) <SEP> 11,0 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,9*** <SEP> 100,3 <SEP> # <SEP> <SEP> 11,8
<tb> <SEP> TG <SEP> (mg/dl) <SEP> 57,6 <SEP> # <SEP> <SEP> 7,9 <SEP> 83,4 <SEP> # <SEP> <SEP> 12,2
<tb> <SEP> PL <SEP> (mg/dl) <SEP> 9612 <SEP> + <SEP> 3,8*** <SEP> 17611 <SEP> # <SEP> <SEP> 14,2 <SEP>
<tb> <SEP> AGL <SEP> (mEq/l) <SEP> 0,768 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,022** <SEP> 1,043 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,074
<tb> <SEP> HDL-C <SEP> (mg/dl) <SEP> 28,5 <SEP> # <SEP> <SEP> 2,0*** <SEP> 16,4 <SEP> # <SEP> <SEP> 1,7
<tb> <SEP> IA <SEP> 0,81 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,12 <SEP> 29,69 <SEP> # <SEP> <SEP> 5,52
<tb> <SEP> GOT <SEP> (U/l) <SEP> 70,4 <SEP> + <SEP> 5,4*** <SEP> 372,3 <SEP> + <SEP> 54,7
<tb> <SEP> GPT <SEP> (U/1) <SEP> 28,8 <SEP> # <SEP> <SEP> 2,5*** <SEP> 180,7 <SEP> # <SEP> 27,8
<tb> <SEP> FOIE
<tb> <SEP> Poids <SEP> (g) <SEP> 9,2 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,3*** <SEP> 13,6 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,3
<tb> <SEP> CT <SEP> (mg/g) <SEP> 2r8 <SEP> + <SEP> 0,2*** <SEP> 40,2 <SEP> # <SEP> 0,9 <SEP>
<tb> <SEP> TG <SEP> (mg/g) <SEP> 6,6 <SEP> + <SEP> 1,0 <SEP> 7,5 <SEP> t <SEP> 0,3
<tb> <SEP> PL <SEP> (mg/g) <SEP> 13,1 <SEP> # <SEP> 0,3*** <SEP> 24,0 <SEP> # <SEP> 0,4
<tb> <SEP> Poids <SEP> corporel <SEP> (g)
<tb> <SEP> Initial <SEP> 105,2 <SEP> # <SEP> <SEP> 1,0 <SEP> 105,2 <SEP> # <SEP> <SEP> 1,0
<tb> <SEP> Final <SEP> 286,8 <SEP> # <SEP> <SEP> 5,8 <SEP> 252,6 <SEP> # <SEP> <SEP> 5,5
<tb>
Tableau 7 (suite)

Aliment <SEP> contenant <SEP> de <SEP> la
<tb> <SEP> poudre <SEP> de <SEP> vers <SEP> de <SEP> terre <SEP> séchée
<tb> <SEP> 0,25 <SEP> 015 <SEP>
<tb> 195,7 <SEP> # <SEP> 18,1***b) <SEP> 188,7 <SEP> # <SEP> 19,2***
<tb> <SEP> 42,6 <SEP> # <SEP> <SEP> 3,7*** <SEP> 42,2 <SEP> # <SEP> <SEP> 4,8***
<tb> <SEP> 68,1 <SEP> # <SEP> <SEP> 4,1 <SEP> 60,3 <SEP> # <SEP> <SEP> 10,2
<tb> <SEP> 114,8 <SEP> # <SEP> <SEP> 4,6*** <SEP> 116,5 <SEP> # <SEP> <SEP> 7,1***
<tb> <SEP> 0,773 <SEP> # <SEP> 0,049 <SEP> 0,681 <SEP> # <SEP> 0,6**
<tb> <SEP> 22,4 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,8* <SEP> 22,7 <SEP> # <SEP> 0,9*
<tb> <SEP> 8X07 <SEP> + <SEP> 1t84 <SEP> 7,75 <SEP> + <SEP> 2,12 <SEP>
<tb> <SEP> 136,7 <SEP> # <SEP> <SEP> 20,4*** <SEP> 97,4 <SEP> # <SEP> <SEP> 3,8***
<tb> <SEP> 61,8 <SEP> # <SEP> <SEP> 14,0** <SEP> 38,9 <SEP> # <SEP> <SEP> 2,7**
<tb> <SEP> 1113 <SEP> t <SEP> 0,3** <SEP> 10,4 <SEP> +
<tb> <SEP> 30,6 <SEP> # <SEP> <SEP> 1,2*** <SEP> 19,8 <SEP> #
<tb> <SEP> 6,5 <SEP> + <SEP> 0,6 <SEP> 7,0 <SEP> + <SEP> 0,6
<tb> <SEP> 20,7 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,3*** <SEP> 16,9 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,4***
<tb> <SEP> 105,4 <SEP> + <SEP> 1,1 <SEP> 105,2 <SEP> t <SEP> 1,0 <SEP>
<tb> <SEP> 259,2 <SEP> # <SEP> 6,2 <SEP> 259,7 <SEP> # <SEP> <SEP> 7,6
<tb>
Tableau s (suite)

<tb> <SEP> Aliment <SEP> contenant <SEP> du <SEP> Aliment <SEP> contenant
<tb> <SEP> γ <SEP> -orysanol <SEP> du <SEP> sojastérol
<tb> <SEP> 0,5 <SEP> 1,0 <SEP> 1,0
<tb> <SEP> 8 <SEP> 8 <SEP> 8
<tb> <SEP> 328,7 <SEP> # <SEP> <SEP> 39,5 <SEP> 307,4 <SEP> # <SEP> <SEP> 42,3 <SEP> 194,3 <SEP> # <SEP> <SEP> 19,0***
<tb> <SEP> 84,3 <SEP> t <SEP> 9,2 <SEP> 71,8 <SEP> + <SEP> 9,1 <SEP> 42,4 <SEP> t <SEP>
<tb> <SEP> 67,4 <SEP> # <SEP> <SEP> 11,4 <SEP> 56,9 <SEP> # <SEP> <SEP> 5,5 <SEP> 80,7 <SEP> # <SEP> <SEP> 10,0
<tb> <SEP> 163,9 <SEP> # <SEP> <SEP> 12,3 <SEP> 161,2 <SEP> # <SEP> <SEP> 9,7 <SEP> 143,5 <SEP> # <SEP> <SEP> 9,9*
<tb> <SEP> 0,688 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,062** <SEP> 0,799 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,060* <SEP> 1,031 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,058
<tb> <SEP> 18,0 <SEP> # <SEP> <SEP> 2,8 <SEP> 16,5 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,8 <SEP> 21,8 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,9*
<tb> <SEP> 19,86 <SEP> t <SEP> 4t82 <SEP> 18,44 <SEP> t <SEP> 4,32 <SEP> 8,82 <SEP> t <SEP> 2,20** <SEP>
<tb> <SEP> 475,8 <SEP> t <SEP> 77,1 <SEP> 618,4 <SEP> + <SEP> 94,8* <SEP> 246,4 <SEP> + <SEP> 33t8
<tb> <SEP> 249,7 <SEP> + <SEP> 35t4 <SEP> 32817 <SEP> + <SEP> 72,7* <SEP> 107,2 <SEP> + <SEP> 16,5
<tb> <SEP> 13,8 <SEP> + <SEP> 014 <SEP> 12,8 <SEP> + <SEP> 015 <SEP> 13;2 <SEP> + <SEP> 0,4 <SEP>
<tb> <SEP> 34,2 <SEP> # <SEP> <SEP> 1,3** <SEP> 32,8 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,9*** <SEP> 34,3 <SEP> # <SEP> <SEP> 1,3
<tb> <SEP> 6,5 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,6 <SEP> 6,5 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,6 <SEP> 7,1 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,6
<tb> <SEP> 23,1 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,9 <SEP> 23,2 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,6 <SEP> 23,0 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,6
<tb> <SEP> 105,1 <SEP> # <SEP> <SEP> 1,0 <SEP> 105,4 <SEP> # <SEP> <SEP> 1,0 <SEP> 105,3 <SEP> # <SEP> <SEP> 1,0
<tb> 256,4 <SEP> # <SEP> <SEP> 8,7 <SEP> 256,2 <SEP> # <SEP> <SEP> 10,8 <SEP> 258,4 <SEP> # <SEP> <SEP> 7,0
<tb> a) Chaque valeur est une moyenne + écart type pour 8 rats.

b) Significativité statistique par rapport aux valeurs du groupe à
aliment riche en cholestérol t P < 0,05, ** P < 0,01, *** P < 0,001.

C. Administration orale de poudre de vers de terre séchée à des
sujets humains atteints d'hyperlipémie
On administre par voie orale à 4 volontaires acceptant de participer à l'expérience, des capsules D (contenant chacune 150 mg du M-2 précédemment décrit (ayant une teneur en humidité de 10,4 t, une teneur en cendres de 5,3 X et une teneur en azote de 8,6 t > préparées comme décrit dans l'exemple 10 ci-après. La posologie est telle qu'une capsule soit administrée trois fois par jour dans les 30 minutes qui suivent chaque repas. On poursuit l'administration pendant une période de 6 ou 7 mois et, en principe, on détermine les teneurs sériques des lipides à des intervalles de 3 ou 4 mois après le début de l'administration.Pour cela, on prélève un échantillon de sang tôt le matin alors que l'estomac est vide et on détermine les taux sériques de CT, TG et HDL-C et l'ira On effectue les déterminations en utilisant les ensembles.de réactifs précédemment décrits commercialisés par Wako Pure Chemicals Co., Ltd. Les résultats ainsi obtenus figurent dans le Tableau 8.

Tableau 8
Y.I. (femme, 80 ans)
Avant l'admi- Après Après Après Après Après
nistration 1 mois 3 mois 4 mois 6 mois 7 mois
CT (mg/dl) 280,7 240,3 227,6 218,2 184,7 186,6
TG < mg/dl) 119,2 110,0 70,9 94,6 106,3 97,5
HDL-C (mq/dl) 36,0 36,7 36,0 36,5 37,4 38,3
IA 6,80 5,54 5,32 4,98 3,94 3,87
S.I. femme, 62 ans)
Avant l'admi- Après Après
nistration 4 mois 6 mois
CT (mg/dl) 239,6 206,2 197,2
TG (mg/dl) 92,5 92,0 90,1
HDL-C (mg/dl) 45,2 42,7 46,4
AI 4,30 3,83 3,25
A.K. (homme, 55 ans)
Avant l'admi- Après Après
nistration 3 mois 6 mois
CT (mg/dl) 264,7 220,4 209,4
TG (mg/dl) 125,4 122,4 6 92,8
HDL-C (mg/dl) 47,2 46,4 52,6
AI 4,61 3,75 2,98
G.K. (homme, 62 ans)
Avant l'admi- Après Après
nistration 3 mois 6 mois
CT (mg/dl) 238,4 194,8 174,7
TG (mg/dl) 116,6 99,5 83,7
HDL-C (mg/dl) 56,5 52,3 57,4
AI 3,22 2,72 2,04
Pour les habitants en bonne santé, de la région où l'expérience concernant l'administration de la poudre de vers de terre séchée de l'invention à 4 volontaires a été effectuée, les teneurs normales des lipides sériques sont de 130-230 mg/dl pour CT, 50-170 mg/dl pour TG et 35-60 mg/dl pour HDL-C. Le tableau 8 mont.re que chez chacun des 4 sujets, le taux de CT avant le début du traitement dépassait la gamme normale. Les taux de TG et d'HDL-C étaient dans leurs gammes normales.

Bien que les résultats qui figurent dans le tableau 8 aient été obtenus pour l'administration orale de poudre de vers de terre séchée à 4 volontaires seulement, les taux de CT de 238-280 mg/dl avant le début du traitement ont été réduits à 194-220 mg/dl (dans la gamme normale) après 3 ou 4 mois de traitement avec une baisse importante à 174-209 mg/dl après 6 ou 7 mois. L'IA commence à baisser nettement après 3 ou 4 mois de traitement. Après 6 ou 7 mois, on observe une baisse nette de l'IA associée à la baisse du
CT.

D'autre part, le taux d'HDL-C demeure presque constant et ne présente pas de changement appréciable. Cependant, on observe une tendance légère mais nette à l'élévation après 6 ou 7 mois. Le taux de TG tend à baisser après 3 ou 4 mois et présente une baisse nette après 6 ou 7 mois.

Dans cette expérience concernant l'administration orale à des sujets humains, une baisse nette du CT et de l'IA et une légère élévation de l'HDL-C ont été observées comme dans le cas de l'expérience concernant l'administration orale à des rats atteints d'hyperlipémie induite expérimentalement. Cependant, contrairement à l'administration orale à des rats atteints d'hyperlipémie induite expérimentalement, dans laquelle aucune baisse significative des TG n'a été observée, l'administration orale à des sujets humains a provoqué une baisse nette des TG après 6 ou 7 mois. On considère que cela est un résultat remarquable.

Cette expérience concernant l'administration orale de poudre de vers de terre séchée à des sujets humains pourrait être prolongée sans risque et sans production d'effets secondaires. Par exemple, une administration prolongée pendant une période de 6 ou 7 mois ne comporte pas de risque de provoquer une hypoglycémie au-dessous de la limite inférieure de la gamme normale (60 à 110 mg/dl). Comme le montre le tableau 8, la poudre de vers de terre séchée n'est pas un médicament antihyperlipémiant, qui, comme c'est le cas des médicaments comprenant des composés organiques synthétiques, permet d'obtenir l'effet désiré en une période relativement brève. On considère donc que la poudre de vers de terre séchée est un médicament antihyperlipémiant à action lente qui nécessite une administration continue pendant une période relativement longue.

Cependant, lorsque de la poudre de vers de terre séchée est administrée à des sujets humains, le CT et l'IA commencent à présenter une baisse nette après 3 ou 4 mois. De plus, l'HDL-C présente une légère tendance à l'élévation après 6 ou 7 mois et les
TG présentent une baisse nette après 6 ou 7 mois. Aucune limitation particulière n'est fixée à l'âge du patient auquel la poudre de vers de terre séchée de l'invention est administrée. Bien que la poudre de vers de terre séchée de l'invention ait un caractère universel, on pourrait de préférence l'administrer à des patients d'âge moyen ou avancé. A partir des résultats décrits ci-dessus, la poudre de vers de terre séchée de l'invention s'est révélée être un remède sans risque et efficace pour la prévention de l'hyperlipémie.

D. Effet sur des souris atteintes de diabète induit expérimentalement :
Essai pharmacologique 3 1) Animaux
Des souris mâles de la souche ddy, pesant 30 + 2 g, ont été utilisées par groupe de cinq.

2) Aliment et conditions expérimentales
On utilise dans cet essai un aliment solide du commerce fourni par Nippon Clea Co. On place les souris dans des cages séparées et on leur fournit à volonté l'aliment et l'eau. On les maintient à une température constante de 23 + 1'C et à une humidité relative constante de 55 + 5 t.

On fait jeûner pendant 16 heures les souris mâles précitées de la souche ddy, puis on les traite par injection intraveineuse de 75 mg/kg d'alloxane. Après 48 heures, on administre par voie orale à la dose de 300 mg/kg une suspension aqueuse de la poudre de vers de terre séchée de l'invention.A cet effet, les poudres de vers de terre séchées M-l (ayant une teneur en humidité de 10,2 t, une teneur en cendres de 5,1 t et une teneur en azote de 9,4 %), M-2 (ayant une teneur en humidité de 10,4 t, une teneur en cendres de 5,3 t et une teneur en azote de 8,6 t), M-3 (ayant une teneur humidité de 10,7 t, une teneur en cendres de 5,2 t et une teneur en azote de 9,2 t), M-4 (ayant une teneur en humidité de 10,6 t, une teneur en cendres de 5,6 t et une teneur en azote de 9,6 t), M-5 (ayant une teneur en humidité de 9,5 t, une teneur en cendres de 4,5 t et une teneur en azote de 7,8 t) et M-6 (ayant une teneur en humidité de 9,2 t, une teneur en cendres de 4,7 t et une teneur en azote de 8,4 t), ont été utilisées comme échantillons d'essai. Après 150 minutes, on prélève un échantillon de sang par ponction cardiaque et on détermine la glycémie selon la méthode à la glucose oxydase.

Les résultats des déterminations figurent dans le tableau 9.

La poudre de vers de terre séchée de l'invention se révèle capable d'abaisser la glycémie à un degré statistiquement significatif.

Tableau 9
Poudre de vers de terre séchée Glycémie (mg/dl), moyenne
de l'invention + écart type
Néant (témoin) 474 + 29
M-1 381 # 39**
M-2 354 t 45**
M-3 377 + 35**
M-4 342 + 32***
M-5 378 + 36**
M-6 383 + 27**
* P < 0,05 ; ** P < 0,01 ; *** P < 0,001.

E. Expérience d'administration orale de poudre de vers de
terre séchée à des suiets humains atteints de diabète
A 5 volontaires acceptant de participer à cette expérience, on administre, par voie orale, en association avec un régime alimentaire, des capsules C préparées dans l'exemple 6 ci-après (contenant chacune 150 mg de la poudre de vers de terre séchée M-3 (ayant une teneur en humidité de 10,7 t, une teneur en cendres de 5,2 t et une teneur en azote de 9,2 t). La posologie est telle qu'une capsule soit administrée trois fois par jour dans les 30 minutes qui suivent chaque repas. Chez un sujet du sexe masculin âgé de 62 ans, on poursuit le traitement pendant 9 mois et on recueille des échantillons de sang à des intervalles d'un mois.Chez un sujet du sexe masculin âgé de 59 ans, on recueille des échantillons de sang avant le traitement et après 2, 3 et 4 mois de traitement. Chez un sujet du sexe féminin âgée de 76 ans, on recueille des échantillons avant le traitement et après 4 mois de traitement, et chez un sujet du sexe féminin âgé de 79 ans, on recueille des échantillons de sang avant et après 3 et 6 mois de traitement. Chez un sujet du sexe féminin âgé de 61 ans, on recueille des échantillons de sang avant le traitement et après 1, 3, 4 et 8 mois de traitement. On détermine la glycémie selon la méthode à la glucose oxydase. On obtient les résultats qui figurent dans le tableau 10.

Tableau 10
Glycémie (mg/dl)
S.T. (homme, 62 ans)
Avant Après Après Après Après Après Après Après Après Après
traite- 1 2 3 4 5 6 7 8 9
ment mois mois mois mois mois mois mois mois mois
Avant le petit déjeuner 124 101 90 93 95 85 90 90 80 90 2 h après le petit déjeuner 179 169 154 135 132 127 130 128 102 129
Avant le déjeuner 133 130 110 102 100 99 92 98 90 97 2 h après le déjeuner 271 220 133 135 140 132 128 130 105 110
Avant le diner 225 196 108 105 98 100 105 99 95 98 2 h après le diner 270 220 202 185 150 148 145 143 130 132
K.K. (homme, 59 ans)
Avant Après Après Après
traite- 2 3 4
ment mois mois mois
Avant le petit déjeuner 205 198 100 92 2 h après le petit déjeuner 282 156 150 146
Avant le déjeuner 138 126 114 94 2 h après le déjeuner 283 262 117 150
Avant le diner 170 280 83 91 2 h après le diner 304 324 152 149 Tableau 10 (suite)
K.M. (femme, 79 ans)
Avant Après Après
traite- 3 6
ment mois mois
Avant le petit déjeuner 149 92 97 2 h après le petit déjeuner 302 130 107
Avant le déjeuner 172 95 80 2 h après le déjeuner 196 171 104
Avant le diner 127 107 91 2 h après le diner 142 99 116
T.Z. (femme, 76 ans)
Avant Aprés
traite- 4
ment mois
Avant le petit déjeuner 115 81 2 h après le petit déjeuner 155 95
Avant le déjeuner 148 95 2 h après le déjeuner 127 119
Avant le diner 127 96 2 h après le diner 114 112 Tableau 10 (suite)
K.K. (femme, 61 ans)
Avant Après Après Après Après
traite- 1 3 4 8
ment mois mois mois mois
Avant le petit déjeuner 129 162 74 79 89 2 h après le petit déjeuner 282 241 230 230 197
Avant le déjeuner 265 188 256 228 210 2 h après le déjeuner 393 325 325 152 141
Avant le diner 378 - 221 141 100 2 h après le diner 390 - 251 266 143
Pour les habitants en bonne santé de la région où l'expérience est effectuée, les glycémies normales sont de 50-100 mg/dl avant le petit déjeuner, 150 mg/dl ou moins deux heures après le petit déjeuner, 50-100 mg/dl avant le déjeuner, 150 mg/dl ou moins deux heures après le déjeuner, 50-100 mg/dl avant le dîner et 150 mg/dl ou moins deux heures après le diner.Avant le début du traitement, les 5 sujets indiqués dans le tableau 10 présentaient chacun une glycémie élevée avant le petit déjeuner (c'est-à-dire au moment de la faim) et étaient donc des patients diabétiques.

Le sujet de sexe masculin âgé de 62 ans, jugé atteint d'un degré modéré de diabète, a commencé à présenter une amélioration de la glycémie après 2 mois de traitement avec la poudre de vers de terre séchée de l'invention. Après 3 mois de traitement, les cinq résultats analytiques étaient revenus au voisinage de la normale, bien que la valeur 2 heures après le dîner atteigne 185 mg/dl. Après 4 mois de traitement, les six valeurs analytiques étaient toutes revenues à la normale. Ensuite, les six valeurs analytiques de la glycémie sont restées dans leurs gammes normales pendant 5 mois.

Chez le sujet de sexe masculin âgé de 59 ans, cinq valeurs analytiques sont revenues à la normale après 3 mois de traitement, bien que la valeur après le dîner soit légèrement supérieure (114 mg/dl). Après 4 mois de traitement, les six valeurs analytiques étaient revenues dans leurs gammes normales.

Chez le sujet de sexe féminin âgé de 79 ans, quatre valeurs analytiques sont revenues à la normale après 3 mois de traitement, bien que les valeurs 2 heures après le déjeuner et avant le diner aient été légèrement plus élevées (171 mg/dl et 107 mg/dl). Après 6 mois de traitement, les six valeurs étaient toutes complètement revenues à la normale.

Chez le sujet de sexe féminin âgé de 76 ans, qui était atteint de diabète faible, les six valeurs analytiques de la glycémie sont revenues à la normale après 4 mois de traitement.

Le sujet de sexe féminin âgé de 61 ans était atteint d'un degré de diabète relativement sévère. Après 4 mois de traitement avec la poudre de vers de terre séchée de l'invention, le sujet a commencé à présenter une amélioration de la glycémie. Après 8 mois, quatre valeurs analytiques étaient revenues à la normale, bien que les résultats 2 heures après le petit déjeuner et avant le déjeuner atteignent respectivement des valeurs élevées de 197 mg/dl et 210 mg/dl.

L'expérience concernant l'administration orale de poudre de vers de terre séchée à des sujets humains pourrait être prolongée sans risque et sans aucun effet secondaire. Par exemple, une administration prolongée pendant une période de 6 à 9 mois ne comporte pas de risque d'hypoglycémie avec abaissement de la glycémie au-dessous de la limite inférieure de sa gamme normale.

Donc, la poudre de vers de terre séchée de lrinventîon s'est révélée être un médicament sans risque.

Les résultats décrits ci-dessus peuvent être résumés comme suit : lorsqu'on a administré, par voie orale, la poudre de vers de terre séchée de l'invention à un patient présentant un degré sévère de diabète, il a été quelque peu difficile de rétablir chacune des six valeurs analytiques de la glycémie à la normale. Après 8 mois de traitement, on a obtenu cependant une amélioration de quatre des six valeurs analytiques qui sont revenues à la normale. Dans le cas de patients présentant un degré faible ou modéré de diabète, toutes les valeurs analytiques ont pu être ramenées à la normale après 4 mois de traitement et y demeurent. Donc, la poudre de vers de terre séchée de l'invention s'est révélée être un médicament hypoglycémiant sans risque et excellent utile pour le traitement et la prévention du diabète.

F. Effet sur des rats génétiquement hypertendus (RGH)
Essai pharmacologique 4 : (Effet hypotensif et accroissement de la fréquence cardiaque chez des RGH)
On administre par voie orale à des RGH mâles agés de 10 à 12 semaines (pesant 200 à 300 g et ayant une pression sanguine de 200 à 267 mbar (150 à 200 mmHg) à jeun depuis un jour et une nuit, une suspension d'un échantillon d'essai (c'est-à-dire la poudre de vers de terre séchée M-4) dans une solution aqueuse à 0,5 5 de carboxyméthylcellulose à la dose de 100 mg/kg. (La dose de chlorhydrate d'hydralazine utilise comme médicament témoin est de 10 mg/kg). On mesure la pression sanguine après 0, 1, 2, 4 et 6 heures. (Les résultats sont exprimés par la moyenne de 3 ou 4 mesures).On évalue l'effet hypotensif de l'échantillon étudié et l'accroissement de la fréquence cardiaque qu'il provoque par comparaison de la pression sanguine et de la fréquence cardiaque avant l'administration du composé étudié, à la pression sanguine et la fréquence cardiaque après administration de l'échantillon étudié.

On effectue les mesures de la pression sanguine de la façon suivante
On réchauffe préalablement les RGH à 45-50-C pendant environ 5 minutes et on mesure la pression systolique de l'artère caudale de manière non invasive par pléthysmographie de la queue en utilisant un enregistreur automatique de la pression sanguine [The
Journal of Laboratory and Clinical Medicine, Vol. 78, p. 957 (1971)]. Les résultats obtenus figurent dans le tableau 11.

On exprime l'effet hypotensif par la baisse maximale relative à la pression systolique observée avant l'administration.

Lorsqu'on administre par voie orale à des RGH les poudres de vers de terre séchées M-2 et M-4, obtenues dans le procédé~de production 1, et les poudres de vers de terre séchées M-2 et M-4, obtenues dans le procédé de production 2, à la dose de 100 mg/dl, on observe un effet hypotensif maximal 1 à 2 heures après l'administration. Donc, la poudre de vers de terre séchée abaisse la pression sanguine des RGH de 37 à 46 mbar (28 à 35 mmHg) et cet effet persiste 6 heures.

Les résultats de la mesure de l'accroissement de la fréquence cardiaque figurent également dans le tableau 11. On voit que, contrairement au chlorhydrate d'hydralazine utilisé comme médicament témoin, aucun des échantillons étudiés de poudre de vers de terre séchée ne provoque des effets secondaires indésirables (tels qu'une tachycardie) sur le coeur.

Tableau 11
Augmentation de la
Effet hypotensif sur les fréquence cardiaque
Echantillon étudié RGH (-L, mbar(xmHg)) (battements/uinute)
Poudre de vers de
terre séchée
M-2 44 (33) 18
M-4 46 (35) 19
H-5 37 (28) 22
M-6 41 (31) 20
(Témoin)
Chlorhydrate
d'hydralazine 80 (60) 85
G. Effet hémolytique
Essai pharmacologique 5
Dans cet essai, on utilise comme échantillon d'essai les poudres de vers de terre séchées M-2 et M-4, obtenues selon le procédé de production 1, et les poudres de vers de terre séchées n-5 et M-6, obtenues dans le procédé de production 2.Plus particulièrement, on ajoute 1 partie en poids de chacun des échantillons d'essai à 5 parties en poids de soluté salé physiologique et on met soigneusement en suspension. On laisse les suspensions obtenues reposer au réfrigérateur à 5 C pendant 24 heures puis on filtre sous pression réduite. On considère que le filtrat est un extrait aqueux.

On prépare des extraits dans l'alcool éthylique et dans l'acétone par addition de 5 parties en poids d'alcool éthylique ou d'acétone à 1 partie en poids de chacun des quatre échantillons d'essai et en mettant soigneusement en suspension. On laisse les suspensions obtenues reposer à 15-20'C pendant 24 heures, puis on filtre sous pression réduite. On évapore le filtrat à sec à 40-45'C.On dissout le residu obtenu dans du soluté salé physiologique contenant 1 X de carboxyméthylcellulose pour préparer une solution à 30 t. On évalue l'effet hémolytique de la façon suivante : on prélève du sang dans la veine de l'oreille d'un lapin adulte pesant environ 3 kg et on le soumet à un traitement de défibrimation. On dilue chacun des extraits dans l'eau, l'alcool éthylique et l'acétone précités avec du soluté salé physiologique à des concentrations de 5, 1, 0,1, 0,01, 0,001 et 0,0001 t en poids.

On place ces solutions dans des tubes à essai de 5 ml et on ajoute, avec une pipette à chaque tube à essai, une goutte du sang défibriné. Après une heure, on examine les tubes à essai pour chercher l'hémolyse. Les résultats des essais ainsi obtenus figurent dans le tableau 12 et indiquent qu'aucun des échantillons d'essai de poudre de vers de terre séchée ne provoque une hémolyse à une quelconque concentration.

Tableau 12
Concentration (% en poids)
Extrait de poudre de vers
de terre séchée 5 1 0,1 0,01 0,001 0,0001
Extrait aqueux - - - - - -
Extrait dans l'alcool
éthylique - - - - -
Extrait dans l'acétone - - - - -
On a mentionné dans la littérature que les vers de terre séchés ("dilongs") ont un effet toxique caractérisé par une hémolyse, c'est-à-dire une destruction des globules rouges Lshinryu
Ofuchi, "Mimizu-to-Jinsei (Earthworms and Human Life)", Maki Shobo, 30 octobre 1947, pp. 223-226 ; Nikiji Hatai, "nimizu (Earthworms),
Reprinted Edition", Scientist Co., 30 avril 1980, pp. 160-163]. On a également indiqué que les extraits dans l'eau ou l'alcool éthylique de vers de terre séchés ("dilongs") ont un effet hémolytique partiel [Kenjiro Ikawa, Yamaguchi Igaku, Vol. 9, pp.

571-576 (1960)]. Cependant, on a établi que la poudre de vers de terre séchée obtenue selon le procédé de l'invention ne provoque pas un tel effet hémolytique.

H. Administration orale de poudre de vers de terre séchée à des
sujets humains présentant une hypertension ou une hypotension
On administre par voie orale à 14 volontaires (7 hommes et 7 femmes) comprenant 8 patients hypertendus (4 hommes et 4 femmes) et 6 patients hypotendus (3 hommes et 3 femmes), ayant accepté de participer à l'expérience, la poudre de vers de terre séchée de l'invention.A cet effet, on utilise des capsules A, préparées dans l'exemple 4 ci-après (contenant chacune 150 mg de la poudre de vers de terre séchée h-2 ayant une teneur en humidité de 10,4 t, une teneur en cendres de 5,3 t et une teneur en azote de 8,6 S), des capsules E préparées dans exemple 11 ci-après (contenant chacune 150 mg de la poudre de vers de terre séchée M-4 ayant une teneur humidité de 10,6 t, une teneur en cendres de 5,6 t et une teneur en azote de 9,6 *) et des capsules F préparées dans l'exemple 12 ci-apres (contenant chacune 150 mg de la poudre de vers de terre séchée M-5 ayant une teneur en humidité dé 9,5 %, une teneur en cendres de 4,5 8 et une teneur en azote de 7,8 t). La posologie est telle qu'une capsule est administrée trois fois par jour dans les 30 minutes qui suivent chaque repas. On poursuit l'administration orale pendant une période de 2 à 11 mois pendant laquelle on observe les patients à des intervalles de 1 à 2 semaines, pendant les deux premiers mois, puis à des intervalles de 1 mois. Les résultats ainsi obtenus figurent dans le tableau 13. Lorsqu'on administre à des patients hypertendus la poudre de vers de terre séchée de l'invention, les pressions sanguines maximales et minimales sont toutes deux réduites d'environ 40 mbar (30 mmHg).

Plus particulièrement, la pression sanguine maximale des patients hypertendus est réduite de 40 à 52 mbar (30 à 39 mmHg) et la pression sanguine minimale est réduite de 35 à 45 mbar (26 à 34 mmHg). Dès que la pression sanguine est revenue à ses valeurs normales, elle s'y maintient pendant 3 à 7 mois. D'autre part, lorsqu'on administre la poudre de vers de terre séchée de l'invention à des patients hypotendus, la pression sanguine s'élève de 20 à 40 mbar (15 à 30 mmEg)). Plus particulièrement, la pression sanguine maximale des patients hypotendus s'élève de 27 à 40 mbar (20 à 30 mmHg) et leurs pressions sanguines minimales s'élèvent de 20 à 29 mbar (15 à 22 mmHg). Dès que la pression sanguine est revenue à ses valeurs normales, elle s'y maintient pendant 3 à 5 mois.Bien que les capsules contenant la poudre de vers de terre séchée de la présente invention aient été administrées pendant des périodes prolongées de 2 à 11 mois, on n'a observé ni baisse anormale ni élévation anormale de la pression sanguine, ni autres effets secondaires.

On a donc découvert que des préparations régulatrices de la pression sanguine ou des préparations antihypertensives et/ou antihypotensives contenant la poudre de vers de terre séchée de l'invention comme ingrédient actif ont un effet hypotensif et/ou hypertensif faible sur des êtres humains entrainant une légère baisse et/ou élévation de la pression sanguine et peuvent donc être utilisées sans risque pendant une période prolongée, non seulement pour le traitement de l'hypertension et de l'hypotension, mais également pour leur prévention.

Tableau 13
Après arrét du traitement
Pression sanguine Pression sanguine
avant le traite- après le traite- Pression sanguine
Patient ment mbar (mmHg) Traitement ment mbar (mmHg) mbar (mmHg)
pression Pression Pression Pression Période Pression Pression
sanguine sanguine Type de Période sanguine sanguine d'observation sanguine sanguine
Nom See Age maximale minimale capsule (mois) maximale minimale maximale minimale
K.H. masculin 57 220(165) 147(110) A 2 177(133) 112(84) 7 180(135) 111(83)
T.S. masculin 62 225(169) 147(110) E 10 176(132) 109(82) 6 173(130) 113(85)
F.H. masculin 58 223(167) 153(115) F 4 175(131) 113(85) 7 176(132) 113(85)
K.S. masculin 70 229(172) 157(118) E 10 181(136) 112(84) 3 179(134) 109(82)
Y.S. féminin 69 223(165) 152(114) A 8 176(132) 107(80) 4 173(130) 111(83)
I.S. féminin 62 220(165) 149(112) E 9 180(135) 111(83) 6 176(132) 107(80)
A.M. féminin 79 235(176) 160(120) F 11 183(137) 117(88) 4 181(136) 115(86)
S.Y. féminin 73 216(162) 155(116) E 9 176(132) 115(86) 3 179(134) 109(82)
I.Y. masculin 42 136(102) 87(65) A 6 176(132) 107(80) 5 173(130) 101(76)
N.K. masculin 36 133(100) 69(52) E 10 167(125) 99(74) 3 168(125) 97(73)
K.G. masculin 46 140(105) 80(60) F 8 171(128) 100(75) 3 167(125) 96(72)
K.Y. féminin 34 133(100) 85(64) A 6 165(124) 107(80) 4 168(126) 103(77)
N.M. féminin 32 144(108) 83(62) E 3 171(128) 104(78) 3 168(126) 101(76)
K.M. féminin 29 139(104) 75(56) F 3 168(26) 99(74) 3 169(127) 97(73)
Exemple 1
Comprimés A
Poudre de vers de terre séchée (ayant la même 150 mg composition que celle précédemment décrite pour n-3) Mannitol 123 mg
Hydroxypropoxyméthylcellulose 7 mg
Talc 5 api
Cellulose microcristalline 60 mg
Huile de ricin hydrogénée 5 mg
Total 350 mg
Comprimés B
Poudre de vers de terre séchée (ayant la même 150 mg composition que celle précédemment décrite pour
M-3)
Amidon de mais 60 mg
Lactose 80 mg
Talc 7 mg
Stéarate de magnésium 3 mg
Total 300 mg
Comprimés C
Poudre de vers de terre séchée (ayant la même 150 mg composition que celle précédemment décrite pour n-3)
Amidon soluble 20 mg
Amidon de mais 125 mg
Cellulose microcristalline 45 mg
Oxyde de silicium 6 mg
Stéarate de magnésium 4 mg
Total 350 mg
Selon chacune des compositions ci-dessus, on mélange intimement les ingrédients. Ensuite, en utilisant une machine à comprimés, on façonne le mélange de poudre en comprimés ayant le poids indiqué.

Exemple 2
Granules A
Poudre de vers de terre séchée (ayant la même 150 mg composition que celle précédemment décrite pour M-2)
Lactose 20 mg
Cellulose microcristalline 60 mg
Amidon de mais 15 mg Hydroxypropylcellulose 5 mg
Total 250 mg
Selon la composition ci-dessus, on prépare des granules en utilisant une machine de granulation à lit fluidisé. Plus particulièrement, on mélange soigneusement la poudre de vers de terre séchée, le lactose, la cellulose microcristalline et l'amidon de mais. On pulvérise le mélange en poudre obtenu avec une solution aqueuse à 5 t dthydroxypropyleellulose comme liant puis on sèche à basse température pour former les granules.

Exemple 3
Granules B
Poudre de vers de terre séchée (ayant la meme 100 mg composition que celle précédemment décrite pour n-2)
Mannitol 10 mg
Cellulose microcristalline 85 mg
Carboxyméthylcellulose calcique 2 mg
Stéarate de magnésium 1,5 mg
Huile durcie 1,5 mg
Total 200,0 mg
Granules C
Poudre de vers de terre séchée (ayant la même 150 mg composition que celle précédemment décrite pour M-2)
Lactose 53 mg
Amidon de mais 39 mg
Amidon de pomme de terre 2 mg
Talc 3 mg
Stéarate de magnésium 3 mg
Total 250 mg
Selon chacune des compositions ci-dessus, on mélange soigneusement les ingrédients. On granule le mélange en poudre obtenu en utilisant une extrudeuse.

Exemple 4
Capsules A
Poudre de vers de terre séchée (ayant la même 150 mg composition que celle précédemment décrite pour n-2)
Lactose 28 mg
Cellulose microcristalline 47 mg
Mannitol 10 mg
Amidon de mais 10 mg Pôlyvinylpyrrolidone 2 mg
Hydroxypropylcellulose 3 mg
Total 250 mg
Selon la composition ci-dessus, on prépare des granules en utilisant une machine de granulation à lit fluidisé. Plus particulièrement, on mélange soigneusement tous les ingrédients à l'exception de l'hydroxypropylcellulose. On pulvérise le mélange en poudre obtenu avec une solution aqueuse à 5 t d'hydroxypropylcellulose comme liant, puis on sèche à basse température pour former des granules. On prépare ensuite des capsules dures en introduisant 250 mg des granules dans des enveloppes dures.

Exemple 5
Capsules B
En utilisant les granules C obtenus dans l'exemple 3, on prépare des capsules dures en introduisant 250 mg de chacun des granules dans des enveloppes dures.

Exemple 6
Capsules C
Poudre de vers de terre séchée (ayant la même 150 mg composition que celle précédemment décrite pour M-3)
Phosphate dicalcique 60 mg
Phosphate disodique 10 mg
Mannitol 28 mg
Stéarate de magnésium 2 mg
Total 250 mg
Selon la composition ci-dessus, on mélange sqigneusement les ingrédients. On prépare ensuite des capsules en introduisant 250 mg du mélange en poudre obtenu dans des enveloppes de gélatine n' 1.

Exemple 7
Comprimés à délitage entérique
Poudre de vers de terre séchée (ayant la même 100 mg composition que celle précédemment décrite pour
Mannitol 10 mg
Cellulose microcristalline 85 mg
Carboxyméthylcellulose calcique 2 mg
Stéarate de magnésium 1,5 mg
Agent de durcissement - 1,5 mg
Total 200 mg
Selon la composition ci-dessus, on mélange intimement les ingrédients et on façonne le mélange en poudre obtenu en comprimés à l'aide d'une machine à comprimés.On forme ensuite les comprimés à enrobage entérique par enrobage des comprimés ci-dessus avec la composition d'enrobage à délitage entérique suivante :
Composition d'enrobage
Phtalate d'hydroxypropylméthylcellulose 14,8 mg
Phtalate de dioctyle 2,3 mg
Acide stéarique 2,3 mg
Oxyde de silicium léger 0,6 mg
Total 20,0 mg
Exemple 8
Poudre A
Poudre de vers de terre séchée (ayant la même 150 mg composition que celle précédemment décrite pour N-4)
Mannitol 50 mg
Amidon de mais 50 mg
Total 250 mg
Poudre B
Poudre de vers de terre séchée (ayant la même 150 mg composition que celle précédemment décrite pour M-4)
Phosphate de calcium dibasique 20 mg
Amidon de mais 80 mg
Total 250 mg
Selon chacune des compositions ci-dessus, on prépare des poudres par mélange intime des ingrédients dans un mélangeur comique.

Exemple 9
Suppositoires A
Poudre de vers de terre séchée (ayant la même 200 mg composition que celle précédemment decrite pour M-5)
Witepsol E-85 540 mg
Witepsol W-35 1 454 mg p-hydroxybenzoate de méthyle 3 mg p-hydroxybenzoate de butyle 3 mq
Total 2 200 mg
Suppositoires B
Poudre de vers de terre séchée (ayant la même 200 mg composition que celle précédemment décrite pour
M-6)
Hydroxyanisole butylé 6 mg
Glycéride semi-synthAtique 2 900 ma
Total 3 106 mg
Selon chacune des compositions ci-dessus, on mélange soigneusejent les ingrédients et on les fond. On façonne ensuite des suppositoires par coulée de la masse fondue dans des moules d'aluminium, puis refroidissement des moules.

Exemple 10
Capsules D
Poudre de vers de terre séchée (ayant la même 150 mg composition que celle précédemment décrite pour M-2)
Laurylsulfate de sodium 4 mg
Phosphate disodique 1 mg
Mannitol 93 mg
Stéarate de magnésium 2 mq
Total 250 mg
Selon la composition ci-dessus, on mélange soigneusement les ingrédients. On prépare ensuite des capsules en introduisant 250 mg du mélange en poudre obtenu dans des enveloppes de gélatine n' 1.

Exemple 11
Capsules E
Poudre de vers de terre séchée (ayant la même 150 mg composition que celle précédemment décrite pour M-4)
Phosphate dicalcique 60 mg
Phosphate disodique 10 mg
Mannitol 28 mg
Stéarate de magnésium 2 nq
Total 250 mg
Selon la composition ci-dessus, on mélange soigneusement les ingrédients. On prépare ensuite des capsules en introduisant 250 mg du mélange en poudre obtenu dans des capsules de gélatine n' 1.

Exemple 12
Capsules F
Poudre de vers de terre séchée (ayant la meme 150 mg composition que celle précédemment décrite pour
M-5)
Laurylsulfate de sodium 2 mg
Phosphate disodique 4 mg
Mannitol 92 mg
Stéarate de magnésium 2 mg
Total 250 mg
Selon la composition ci-dessus, on mélange soigneusement les ingrédients. On prépare ensuite des capsules en introduisant 250 mg du mélange en poudre obtenu.dans des enveloppes de gélatine n 1.

Exemple 13
On lave doucement avec de l'eau 1 kg constitué d'environ 20 000 vers de terre vivants (Lumbricus rubellus), puis on place dans 4 litres d'une solution aqueuse acide (pH 6,2) contenant de l'acide malique et de l'acide citrique dans un rapport de 1/1. On y laisse les vers de terre vivants à une température de 8'C pendant 3 heures, de façon à ce que leur canal alimentaire soit essentiellement débarrassé de la terre. Ensuite, on lave soigneusement les vers de terre vivants avec de l'eau pour éliminer toute saleté (telle que la boue et les excreta) de la surface de leur corps.

Ensuite, on broie les vers de terre vivants à l'état humide dans un mélangeur. On place la suspension obtenue dans un plateau et on congèle à -30'C pendant 40 heures. Ensuite, en maintenant la suspension congelée à -40'C, on la lyophilise sous un vide de 0,13 mbar (0,1 mmHg) pendant 6 heures. On élève ensuite la température de l'étagère sur laquelle le plateau est placé à 30 C et on sèche la poudre obtenue sous un vide de 0,13 mbar (0,1 nmEg) pendant 6 heures. Ensuite, on sèche encore sous vide la poudre à une température de l'étagère de 50-C sous un vide de 0,26 mbar (0,2 mmHg) pendant 10 heures, puis à une température de l'étagère de 80'C sous un vide de 0,26 mbar (0,2 mmHg) pendant 8 heures. On obtient ainsi 280 g d'une poudre de vers de terre séchée (M-1).

Exemple 14
On lave doucement avec de l'eau 1 kg de vers de terre vivants (Lumbricus rubellus), puis on place dans 3 litres d'une solution aqueuse acide (pH 5,5) contenant de l'acide phosphorique, de l'acide tartrique et de l'acide lactique dans un rapport de 1/1/1. On y laisse les vers de terre vivants à une température de 10-C pendant 2,5 heures de façon à ce que leur canal alimentaire soit essentiellement débarrassé de la terre. Ensuite, on lave soigneusement les vers de terre vivants avec de l'eau pour éliminer toute saleté (telle que la boue et les excreta) de la surface de leurs corps.

Ensuite on broie les vers de terre vivants à l'état humide dans un mélangeur. On place la suspension obtenue dans un plateau et on congèle à -25-C pendant 20 heures. Ensuite, en maintenant la suspension congelée à -35-C, on la lyophilise sous un vide de 0,13 mbar (0,1 moRg) pendant 7 heures. Après avoir élevé à 28-C la température de l'étagère sur laquelle le plateau est placé, on sèche la poudre obtenue sous un vide de 0,13 mbar (0,1 mmHg) pendant 10 heures. Ensuite, on soumet la poudre à un nouveau séchage sous vide à une température de l'étagère de 40 C sous un vide de 0,26 mbar (0,2 mmHg) pendant 13 heures, puis à une température de l'étagère de 78-C sous un vide de 0,13 mbar (0,1 mmHg) pendant 8 heures.On obtient ainsi 275 g d'une poudre de vers de terre séchée (M-2).

Exemple 15
On lave doucement 1 kg de vers de terre vivants (Lumbricus rubellus) avec de l'eau, puis on place dans 2 litres d'une solution aqueuse acide (pH 5,8) contenant de l'acide malique. On y laisse séjourner les vers de terre vivants à une température de 13-C pendant 3 heures pour que leur canal alimentaire soit essentiellement débarrassé de la terre. Ensuite, on lave à fond les vers de terre vivants avec de l'eau pour éliminer toute saleté (telle que la boue et les excreta) de la surface de leur corps. Ensuite, on broie à l'état humide les vers de terre vivants dans un mélangeur homogénéisateur (fabriqué par Nippon Seiki K.K.). On place la suspension obtenue dans un plateau et on congele à -30-C pendant 30 heures.En maintenant la suspension congelée à -30'C, on la lyophilise sous un vide de 0,13 mbar (0,1 mmHg) pendant 8 heures.

Lorsque la température de l'étagère sur laquelle le plateau est placé atteint 25'C, on lyophilise la poudre obtenue sous un vide de 0,13 mbar (0,1 mmHg) pendant 7 heures. Ensuite, on soumet la poudre à un séchage sous vide à une température de l'étagère de 45'C sous un vide de 0,13 mbar (0,1 mmHg) pendant 12 heures, puis à une température de l'étagère de 80'C sous un vide de 0,13 mbar (0,1 mmHg) pendant 7 heures. On obtient ainsi 275 g de poudre de vers de terre séchée (M-4).

Exemple 16
On lave doucement avec de l'eau 1 kg de vers de terre vivants (Lumbricus rubellus), puis on laisse séjourner dans 3 litres d'eau douce à une température de 10-C pendant 16 heures pour que leur canal alimentaire soit essentiellement débarrassé de la terre.

Ensuite, on lave à fond les vers de terre vivants avec de l'eau pour éliminer toute saleté (telle que la boue et les excreta) de la surface de leur corps. Ensuite, on broie les vers de terre vivants à l'état humide dans un mélangeur homogénéisateur. On place la suspension obtenue dans un plateau et on congèle à -25 C pendant 15 heures. Ensuite, en maintenant la suspension congelée à -35'C, on la lyophilise sous un vide de 0,13 mbar (0,1 mmHg > pendant 6 heures.

On porte ensuite la température à 30-C et on sèche la poudre obtenue sous un vide de 0,10 mbar (0,08 mmHg) pendant 10 heures. Ensuite on sèche la poudre à une température de 40 C sous un vide de 0,26 mbar (0,2 mmHg) pendant 15 heures, puis à une température de 78 C sous un vide de 0,13 mbar (0,1 mmHg) pendant 8 heures. On obtient ainsi 245 g d'une poudre de vers de terre séchée (M-3).

Exemple 17
On lave soigneusement 1 kg de vers de terre vivants (Lumbricus rubellus), cinq fois avec de l'eau, pour éliminer toute saleté (telle que la boue et les fragments de paille) de la surface de leur corps. Ensuite on maintient les vers de terre vivants dans 2,5 1 d'eau douce à une température de 15-C pendant 18 heures pour que leur canal alimentaire soit essentiellement débarrassé de la terre. Ensuite on lave doucement les vers de terre vivants avec de l'eau, puis on les broie à l'état humide dans un mélangeur homogénéisateur. On place la suspension obtenue dans un plateau et on congèle à -40'C pendant 24 heures. Ensuite, en maintenant la suspension congelée à -40-C, on la lyophilise sous un vide de 0,13 mbar (0,1 mmHg) pendant 5 heures.Après avoir porté la température à 25-C, on sèche la poudre obtenue tous un vide de 0,13 mbar (0,1 mmHg) pendant 8 heures. Ensuite on sèche encore la poudre à une température de 45 C sous un vide de 0,13 mbar (0,1 mmHg) pendant 12 heures, puis à une température de 80-C sous un vide de 0,13 mbar (0,1 mmHg) pendant 7 heures. On obtient ainsi 240 g d'une poudre de vers de terre séchée (M-5).

Exemple 18
On lave à fond 1 kg de vers de terre vivants (Lumbricus rubellus), quatre fois avec de l'eau, pour enlever toute saleté (telle que la boue et les excreta) de la surface de leur corps. On place ensuite les vers de terre vivants dans 2,5 1 d'une solution aqueuse acide (pH 5,7) contenant de l'acide malique et de l'acide lactique dans un rapport de 1/1 et on les y laisse séjourner à une température de 15 C pendant 2,5 heures pour que leur canal alimentaire soit débarrassé de la terre. Ensuite, on lave doucement les vers de terre vivants avec de l'eau, puis on broie à l'état humide dans un mélangeur. On place la suspension obtenue dans un plateau et on congèle à -35 C pendant 24 heures. Ensuite, en maintenant la suspension congelée à -35'C, on la lyophilise sous un vide de 0,13 mbar (0,1 mmHg) pendant 7 heures.Après avoir porté à 22 C la température de l'étagère sur laquelle le plateau est placé, on sèche la poudre obtenue sous un vide de 0,13 mbar (0,1 mmHg) pendant 10 heures. Ensuite, on sèche encore la poudre à une température de l'étagère de 42-C sous un vide de 0,26 mbar (0,2 mmHg) pendant 15 heures et finalement à une température de l'étagère de 78-C sous un vide de 0,13 mbar (0,1 mmHg) pendant 7 heures. On obtient ainsi 265 g d'une poudre de vers de terre séchée (M-6).

Exemnle 19
On dissout 1,5 g de phosphate monopotassique dans 2,5 1d'une solution aqueuse acide (pH 6,0) contenant de l'acide citrique.

On lave doucement avec de l'eau 1 kg de vers de terre vivants (Pheretima communissima), on les place dans la solution ci-dessus et on les y laisse à une température de 10'C pendant 2 heures pour débarrasser leur canal alimentaire de la terre. Ensuite on lave deux fois les vers de terre vivants avec de l'eau pour éliminer toute saleté (telle que la boue, les excreta et les fragments de paille) de la surface de leur corps. Ensuite, on broie les vers de terre vivants à l'état humide dans un mélangeur. On lyophilise la suspension obtenue et on la sèche sous vide de la même façon que décrit dans l'exemple 17. On obtient 280 g de poudre de vers de terre séchée.

Exemple 20
On lave à fond 1 kg de vers de terre vivants (Allolobophora caliginosa), cinq fois avec de l'eau pour éliminer toute saleté (telle que la boue, les excreta et les fragments de paille) de la surface de leur corps. On place ensuite les vers de terre vivants dans 3 1 d'une solution aqueuse acide (pH 5,7) contenant de l'acide succinique (et contenant de plus 1 g d'acétate de sodium et 0,5 g de sulfate de sodium) et on les y laisse à une température de 13-C pendant 2,5 heures de façon à débarrasser de la terre leur canal alimentaire.

Ensuite, on lave doucement les vers de terre vivants avec de l'eau, puis on broie à l'état humide dans un homogénéisateur. On lyophilise et sèche sous vide la suspension de la même façon que décrit dans l'exemple 18. On obtient ainsi 275 g de poudre de vers de terre séchée.

Exemple 21
On lave, cinq fois avec de l'eau pour éliminer toute saleté (telle que la boue, les excreta et les fragments de paille) de la surface de leur corps, 1 kg de vers de terre vivants (Pheretima communissima). On place ensuite les vers de terre vivants dans 2,5 1 d'une solution aqueuse acide (pH 5,9) contenant de l'acide citrique et de l'acide tartrique dans un rapport de 1/1 (et de plus contenant 0,7 g de citrate de potassium) et on les y laisse à une température de 15-C pendant 2 heures pour débarrasser leur canal alimentaire de la terre. Ensuite on lave doucement les vers de terre vivants avec de l'eau, puis on les broie à l'état humide dans un mélangeur. On lyophilise la suspension obtenue et on sèche sous vide de la même façon que décrit dans l'exemple 18. On obtient ainsi 283 g de poudre de vers de terre séchée.

Comme décrit ci-dessus, la présente invention concerne un procédé pour la production de poudre de vers de terre séchée qui comprend les stades consistant à laisser une espèce de vers de terre vivants dans de l'eau douce ou une solution aqueuse légèrement acide jusqu'à ce que leur canal alimentaire soit débarrassé de la terre, broyer à l'état humide les vers de terre vivants et lyophiliser ou sécher sous vide la suspension obtenue sous un vide de 13 mbar (10 mmHg) ou moins pendant 10 à 100 heures, en élevant graduellement la température de -60-C à 80'C, et des préparations antihypertipé- miantes, antidiabétiques, antihypertensives et antihypotensives contenant la poudre de vers de terre séchée comme ingrédient actif.

Les enzymes, présentes dans la poudre de vers de terre séchée produite selon le nouveau procédé perfectionné de l'invention, ne sont pas détruites, ni inactivées. De plus, la poudre de vers de terre séchée stérile, produite par le procédé de l'invention, peut être conservée ou stockée dans un récipient bien fermé pendant au moins 4 ans. Egalement, la poudre de vers de terre séchée peut être obtenue avec un rendement élevé de 20 à 35 t relativement aux vers de terres vivants utilisés comme matière première.

Par les expériences effectuées sur des rats recevant pendant 1 à 4 semaines un aliment riche en cholestérol contenant la poudre de vers de terre séchée, produite selon le procédé de l'invention, on a découvert que la poudre de vers de terre séchée de l'invention a un excellent effet antihyperlipémiant. Dans l'expérience d'une durée de 1 semaine, les groupes dont l'alimentation contenait de la poudre de vers de terre séchée ont présenté une baisse statistiquement significative des valeurs sériques du CT, du CL et du LDL-C et de l'IA, par rapport au groupe recevant l'aliment riche en cholestérol. Cependant, aucun changement significatif de 1'HDL-C sérique n'a été observé.Dans l'expérience d'une durée de 4 semaines, les groupes recevant l'aliment contenant de la poudre'de vers de terre séchée ont présenté une baisse significative des valeurs sériques du CT, du CL, des PL et des AGL par rapport au groupe recevant l'aliment riche en cholestérol. De plus, on a démontré que l'HDL-C (que l'on considère être un facteur d'amélioration de l'artériosclérose) présentait une élévation significative et que l'IA présentait une baisse significative. Une baisse significative des TG n'a pas été observée malgré une tendance à la baisse. Les GOT et GPT ont été réduites de façon significative.

Le poids du foie et les taux de CT et de PL dans les lipides hépatiques ont été significativement réduits, mais les TG n'ont pas présenté de modification essentielle. Le poids corporel des rats s'est accru régulièrement sans aucune variation significative.

Des capsules de poudre de vers de terre séchée (contenant chacune 150 mg) ont ensuite été administrées par voie orale à 4 volontaires pendant 6 ou 7 mois. La posologie était telle qu'une capsule soit administrée trois fois par jour après chaque repas.

Pendant le traitement on a déterminé les taux sériques du CT, des
TG, de l'HDL-C et l'IA. Le CT et l'IA ont nettement baissé après 3 ou 4 mois et cette baisse a persisté. D'autre part, 1'HDL-C n'a pas présenté de changement appréciable,si ce ntest une légère tendance à l'élévation après 6 ou 7 mois. Les TG ont présenté une baisse nette après 6 ou 7 mois.

Les expériences sur l'animal et l'expérience par administration orale à des sujets humains, décrites ci-dessus, ont révélé que la poudre de vers de terre séchée de l'invention est un médicament sans risque et excellent, utile pour le traitement et la prévention de l'hyperlipémie, pour l'amélioration du métabolisme des lipides sériques et pour le traitement et la prévention de l'artériosclérose.

L'invention concerne également des préparations antidiabétiques contenant de la poudre de vers de terre séchée comme ingrédient actif. Lorsque de la poudre de vers de terre séchée a été administrée à des souris atteintes de diabète, induit expérimentalement par l'alloxame, la glycémie a présenté une baisse statistiquement significative.

Ensuite, des capsules de poudre de vers de terre séchée (contenant chacune 150 mg), en combinaison avec un régime alimentaire, ont été administrées par voie orale à 5 volontaires qui étaient des patients diabétiques. La posologie était telle qu'une capsule soit administrée trois fois par jour après chaque repas et le traitement a été poursuivi pendant 4 à 9 mois. Après 1, 2, 3 ou 4 mois de traitement, on a déterminé la glycémie à des intervalles d'au moins 1 mois. A cet effet, six échantillons de sang ont été prélevés avant le petit déjeuner, deux heures après le petit déjeuner, avant le déjeuner, deux heures après le déjeuner, avant le diner et deux heures après le dîner et la glycémie en a été déterminée.Les résultats ont montré que les patients atteints d'un diabète de degré faible ou modéré ont commencé à présenter une amélioration après 2 ou 3 mois de traitement avec la poudre de vers de terre séchée. Finalement les six valeurs analytiques ont toutes pu être ramenées à la normale (50-100 mg/dl pour la valeur expérimentale obtenue avant chaque repas et 150 mg/dl ou moins, pour la valeur expérimentale obtenue deux heures après chaque repas) après 4 mois de traitement, la normalisation se maintenant ensuite.

Chez le patient présentant un degré sévère de diabète, il a été quelque peu difficile de ramener à la normale les six valeurs analytiques. Après 8 mois de traitement, une amélioration a cependant été obtenue en ce que quatre des six valeurs expérimentales ont été ramenées à la normale. Même une administration prolongée pendant une période de 6 à 9 mois ne comporte aucun risque d'hypoglycémie, c'est-à-dire de baisse de la glycémie au-dessous de la limite inférieure de sa gamme normale.

Donc, la poudre de vers de terre séchée de l'invention s'est révélée être un médicament sans risque et excellent pour le traitement et la prévention du diabète.

L'invention concerne également des préparations régulatrices de la pression sanguine ou préparations antihypertensives et/ou hypotensives contenant de la poudre de vers de terre séchée comme ingrédient actif. Lorsque la poudre de vers de terre séchée de l'invention a été administrée par voie orale à des rats génétiquement hypertendus (RGH), une baisse de la pression sanguine de 37 à 47 mbar (28 à 35 mmHg) a été observée 1 à 2 heures après l'administration et cet effet hypotensif a persisté 6 heures. La poudre de vers de terre séchée te l'invention n'a pas produit d'effets secondaires, tels qu'une tachycardie et une hémolyse et s'est révélée être un médicament sans risque ayant une bonne aptitude à la conservation (ou au stockage).

De plus, des capsules de poudre de vers de terre séchée (contenant 150 mg) préparées selon l'invention ont été administrées par voie orale à 14 volontaires (8 patients hypertendus et 6 patients hypotendus) pendant 2 à 11 mois. La posologie était telle qu'une capsule soit administrée trois fois par jour après chaque repas. Ces préparations ont eu pour effet de réduire la pression sanguine des patients hypertendus et d'élever la pression sanguine des patients hypotendus en rétablissant ainsi à la normale la pression sanguine de ces patients. De plus, les pressions sanguines normales obtenues grâce à ces préparations se sont maintenues pendant 3 à 7 mois. Pendant la période de traitement on n'a observé aucune baisse anormale, ni élévation anormale de la pression sanguine, ni d'autres effets secondaires.

Donc, les préparations de l'invention se sont révélées être des médicaments sans risque et excellents, utiles comme modulateurs de la pression sanguine (ou remèdes contre l'hypertension et/ou l'hypotension) ou préventifs de l'hypertension et/ou de l'hypotension.

Claims

REVENDICATIONS

1. Procédé pour la production de poudre de vers de terre séchée, caractérisé en ce qu'il comprend les stades consistant à (a) nettoyer une espèce de vers de terre vivants soit en laissant

les vers de terre vivants séjourner dans de l'eau douce ou une

solution aqueuse ne contenant pas plus de 0,3 8 en poids d'au

moins un compose choisi dans le groupe constitué par un acide

organique, un acide minéral, un sel de sodium d'un acide

organique, un sel de sodium d'un acide minéral, un sel de

potassium d'un acide organique et un sel de potassium d'un acide

minéral, jusqu'à ce que leur canal alimentaire soit débarrassé

de la terre, puis en lavant les vers de terre vivants avec de

l'eau pour éliminer toute saleté de la surface de leur corps,

soit en lavant les vers de terre vivants avec de l'eau pour

éliminer toute saleté de la surface de leur corps1 puis en

laissant les vers de terre vivants dans de l'eau douce ou ladite

solution aqueuse jusqu'à ce que leur canal alimentaire soit

débarrassé de la terre ; (b) broyer à l'état humide les vers de terre vivants (c) congeler la suspension obtenue à une température de -60 C à

-10'C ; et (d) lyophiliser, puis sécher sous vide la suspension sous un vide de

13 mbar (10 mmHg) ou moins pendant 10 à 100 heures en élevant

graduellement la température dans la gamme de -60-C à 80'C, la

poudre obtenue étant finalement séchée sous vide à une

température de 70 à 80'C sous un vide de 0,013 à 0,67 mbar

(0,01 à 0,5 mmHg) pendant 5 à 10 heures.

2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on nettoie les vers de terre vivants en les laissant séjourner dans de l'eau douce ou ladite solution aqueuse jusqu'à ce que leur canal alimentaire soit débarrassé de la terre, puis en lavant les vers de terre vivants avec de l'eau pour éliminer toute saleté de la surface de leur corps, après quoi on les soumet aux stades (b) à (d).

3. Procédé selon la revendication 2, caractérise en ce qu'avant de laisser séjourner les vers de terre vivants dans l'eau douce ou ladite solution aqueuse, on les lave avec de l'eau pour éliminer au moins une partie de leur saleté.

4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on nettoie les vers de terre vivants en les lavant avec de l'eau pour éliminer toute saleté de la surface de leur corps, puis en les laissant dans de l'eau douce ou ladite solution aqueuse jusqu'à ce que leur canal alimentaire soit débarrassé de la terre, après quoi on les soumet aux stades (b) à (d).

5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que, après avoir débarrassé de la terre le canal alimentaire des vers de terre vivants, on les lave de plus avec de l'eau pour en éliminer toute saleté.

6. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que l'acide organique est l'acide acétique, l'acide citrique, l'acide succinique, l'acide malique, l'acide tartrique ou l'acide lactique.

7. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que l'acide minéral est l'acide phosphorique, l'acide sulfurique ou l'acide chlorhydrique.

8. Produit tel qu'on l'a obtenu selon le procédé de l'une quelconque des revendications 1 à 7.

9. Nouveaux médicaments utiles notamment pour le traitement ou la prévention de l'hyperlipémie, du diabète, de l'hypertension et de l'hypotension, caractérisés en ce qu'ils comprennent (a) comme produit actif une quantité pharmacologique efficace du produit selon la revendication 8 et (b) un véhicule convenant en pharmacie.