FR2468608A1 - Derives de la 1-oxadethiacephalosporine, leur procede de production et compositions anti-bacteriennes les contenant - Google Patents

Abstract

Ces dérivés présentent la formule générale :

Description

L'invention concerne de nouveaux dérivés de la 1-oxadéthiacéphalosporine

présentant une activité anti- bactérienne élevée 'lin vitro" et "in vivo", particuliè- rement vis-à-vis des bactéries produisant la 9-lactamase. 5 Elle concerne également un procédé de production de ces dérivés et les compositions antibactériennes contenant ces dérivés ou leurs sels et esters pharmaceutiquement acceptables. On a déjà fabriqué et utilisé différents dérivés 10 de la céphalosporine dans le traitement thérapeutique des infections bactériennes (cf par exemple les brevets US No 4 011 216, 4 013 648, 4 013 653, 4 031 083, 4 o45 438, 4 138 486 et 4 180 571). Les inventeurs ont entrepris des recherches poussées pour essayer de trou- 15 ver d'autres dérivés de la 1-oxathiacéphalosporine pré- sentant une activité antibactérienne élevée et large vis- à-vis des bactéries gram-positives et gram-négatives et même vis-à-vis des souches productrices de 9-lactamase qui sont habituellement résistantes aux céphalosporines 20 connues. Ils ont réussi à synthétiser de nouveaux dérivés de la 1-oxadéthiacéphalosporine et ont déterminé que ces dérivés présentaient des propriétés antibacté- riennes supérieures à celles des dérivés connus. L'invention a tout d'abord pour objet de nouveaux 25 dérivés de la 1-oxadéthiacéphalosporine présentant une activité antibactérienne élevée et utile dans le trai- tement chimiothérapeutique des infections bactériennes elle a également pour objet un procédé de production de ces dérivés qui peut être effectué de façon efficace 30 et simple et convient à la production industrielle. Selon un premier aspect, l'invention a donc pour objet de nouveaux dérivés de la 1-oxadéthiacéphalospo- rine de formule générale : NH y 35 CH_(CH2)xS(CH2) -CONH C00H _ (T)j-- COOH 2468608 2 dans laquelle R est un groupe hét6rocyclique ou un groupe -S-Het, -Het- correspondant à un groupe hét6ro- cyclique, Y est un atome d'hydrogène ou un groupe mé- thoxy -OCH et x et y correspondent chacun à un nombre 3 - 5 entier de 1 à 3, ainsi que les sels et esters pharmaceu- tiquement acceptables de ces compos6s. Selon un deuxième aspect l'invention a également pour objet un procédé de production des nouveaux d6rivés 1-oxadéthiacéphalosporines de formule I qui comporte les 10 étapes suivantes : a) condensation d'un compos6 1-oxacéphem de formule : Y Z-(CH2) CONH 15 N R (I) o2 COOR' dans laquelle R est un groupe hétérocyclique ou un 20 groupe -S-Het, -Het correspondant à un groupe hétéro- cyclique, Y est un atome d'hydrogène ou un groupe m6thoxy -OCH3, R' est un atome d'hydrogène ou un groupe carboxy-protecteur, particulièrement un groupe formateur d'ester connu conmme groupe carboxy-protecteur, Z est un 25 groupe halo, spécialement le chlore, le brome ou l'iode, y est un nombre entier de 1 à 3 avec un acide aminé contenant du soufre de formule : NH2 CH- (CH2)x-SH (III) t 30 COOH dans laquelle x est un nombre entier de 1 à 3, ou un dérivé fonctionnellement équivalent dudit acide aminé, dans un solvant, pour produire le produit de condensa- tion de formule : 35 NH y 2 ' CH-(CH2)x S(CH2)y-CONIt 0~/ 'N H2R COOH N ~H2R COOR' 2468608 3 dans laquelle R, R', Y, z et y ont les d6finitions ci- dessus, et b) élimination, si nécessaire, du groupe protec- teur r6siduel du produit de condensation I', de façon 5 connue, quand ce groupe protecteur résiduel est présent. Les dérivés de 1-oxadéthiacéphalosporine de for- mule I selon le premier aspect de l'invention peuvent 6galement se trouver sous la forme de leurs sels pharmaceutiquement acceptables avec un métal alcalin tel que 10 le sodium et le potassium, ou avec un acide aminé basi- que tel que la L-lysine ou avec une base organique phar- maceutiquement acceptable telle que la triéthylamine et la cyclohexylamine. En outre, le dérivé de formule I peut se trouver sous la forme de son ester pharmaceutiquement 15 acceptable (tel qu'un carboxylate) avec un alcool phar- maceutiquement acceptable. L'ester peut être un alkyles- ter inférieur (C1 à C6) tel que le méthyl-, l'éthyl-, le propyl- ou le t-butylester ; un alkylester alkylamino inférieur tel que le diméthylaminoéthylester ; un alkyl- 20 ester alcoxy inférieur tel que le méthoxyméthyl-, ou l'éthoxyéthylester ; un alkylester acyloxy inférieur tel que l'acétoxyméthyl- l'acétoxylèthyl-, le propionyloxy- méthyl-, le propionyloxyéthyl, le pivaloyloxyméthyl-, le pivaloxyéthyl-ester ; un alkylester alcoxy carbonyloxy- 25 inférieur tel que le méthoxycarbonyloxyméthyl-, le me- thoxycarbonyloxyéthyl-, 1'éthoxycarbonyloxyméthyl- ou l'éthoxycarbonyloxyéthyl-ester, et similaire. Il peut s'agir de phthalidyl-, acétoxyméthyl-, pivaloyloxyméthyl-, acétoxyéthyl-, propionyloxyéthyl-, indanyl-, phényldimé- 30 thylphényl-, méthoxyphényl-, méthoxycarbonyloyéthyl-, éthoxycarbonylméthyl- ou phénacyl- esters. De plus, l'es- ter peut être sous la forme du mono-ester sur le groupe carboxy en 4 du noyau 1-oxacéphem ou sur le substituant carboxy terminal présent dans le radical acide aminé

35 rattaché au groupe amino en 7 du noyau 1-oxacéphem, ou sous la forme du di-ester sur ces deux groupes carboxy. Le radical acide aminé rattaché au groupe amino en 7 du noyau 1-oxacéphem présent dans la molécule du 2468-608 4 nouveau composé de formule I peut être sous la forme du stéréoiomere D ou du stéréoisomère L. Le composé de formule I dans laquelle Y est le groupe méthoxy -OCH3 présente une activité antibactérienne aussi élevée que 5 le composé de formule I dans laquelle Y est l'hydrogène quand ils sont appliqués à des bactéries sensibles. Le premier composé est toutefois plus stable et donc plus actif que le second vis-à-vis des bactéries produisant la 9-lactamase. 10 Dans le nouveau composé de formule I selon l'in- vent, le noyau 1-oxacéphem porte le substituent en 3 de formule -CH2R dans laquelle R est un groupe hétérocyclique ou le groupe -S-Het tel que défini ci-avant, que l'on peut appeler anneau S-hétérocyclique. Le groupe 15 hétérocyclique (R) aussi bien que le groupe hétérocycli- que (Het) présent dans le substituent en 3 -CH2R peut être un anneau hétérocyclique de 5 à 6 membres contenant de 1 à 4 atomes d'azote en tant qu'hétéroatome, et sur cet anneau il peut y avoir un ou plusieurs substituents 20 tels que les groupes méthyl, éthyl, carboxy, carbamoyl, amino, hydroxy, carboxyméthyl, sulfonylméthyl ou diméthylaminoéthyl. L'anneau hétérocyclique peut de plus contenir, comme hétéro atome additionnel, 1 ou 2 atomes de soufre. Comme exemple de groupe hétérocyclique pour le 25 groupe R on peut citer le reste pyridinium de formule : 30 ou le reste 4-carbamoylpyridinium de formule : - N- CONH2 35 Comme exemples du groupe -S - Het, on peut donner 2468608 5 les groupes : - 1 méthyl-lH-tétrazole-5-yl de formule : 5 < ~~~~~N 1 Il 5 N -,,N CH3 2-carboxyméthyl-lH-triazole-5-yl de formule : N~ N 10 I C-CH 2-COOH H 4-m6thyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4- 15 triazine-3-yl de formule : "/ N OH N N O 20 CH3 - t6trazole-(1,5-b)-pyridazine-5-yl, substitu6 en 8 ou non substitué de formule : N 25 N NX/ N -N dans laquelle Q est un atome d'hydrogène ou un groupe amino, hydroxy ou carboxy. 30 1-sulfonylm6thyl-lH-t6trazole-5-yl de formule : N N Il . Il N N / CH2-SO3H 35 2468608 6 - 1-sulfonyléthyl-lH-t6trazole-5-yl de formule : 1'1 N-N CH2CH2-SO3H - 1-carboxyméthyl-lH-tétrazole-5-yl de formule : N N 10 N CH2-COOH - 1-méthyl-2-carboxy-lH-triazole-5-yl de formule : N N 15 N COOH I CH3 - 1-diméthylaminoéthyl-lH-tétrazole-5-yl de for- 20 mule : N / N 25 , , AH3 CH2CH2 3 CH3 On peut citer, comme exemples préférés du substituant -CH2R en 3 les groupes suivants : le groupe 30 (1-méthyl-lH-tétrazole-5-yl) thiométhyle ; le groupe (1-carboxyl-méthyl-lH-tétrazole-5-yl) thiométhyle ; le groupe (2-carboxyméthyl-lH-tétrazole-5-yl) thiométhyle, le groupe (4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4- triazine-3-yl) thiométhyle ; le groupe (8-amino-tétrazo- 35 lo-(1,5-b)-pyridazine-6-yl) thiométhyl ; le groupe (py- ridinium) méthyle, le groupe (4-carbamoyl-pyridinium) méthyle, et le groupe (1-diméthylaminoéthyl-lH-tétrazole- 2468608 7 5-yl) thiométhyl. Selon un premier aspect, l'invention a avantageusement pour objet de nouveaux d6rivés de 1-oxadéthiacéphalospo- rine de formule gén6rale : NH y 2 CH-CH -S-CH -CONH (I") 1 2 2 ~COOH ~ON CH2R" COOH dans laquelle R" est le groupe (1-méthyl-lH-tétrazole-5-yl) thio, le groupe(1-carboxylméthyl-lH-tétrazole-5-yl)thio, le groupe (2-carboxym6thyl-1H-t&trazole-5-y1)thio, le groupe (4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5dihydro-1 ,2,4-triazine-3-yl) thio, le groupe (8-amino-tétrazole-(1,5-b)pyridazine-6-yl)thio, le groupe pyridinium, le groupe 4-carbamoyl pyridinium et le groupe (1-diméthyl-aminoéthyl-HI-tétrazole-5-yl)thio, et Y est un atome d'hydrogène ou un groupe méthoxy, ainsi que leurs sels et esters pharmaceutiquement acceptables. Selon une autre caractéristique de son premier aspect, l'invention a pour objet de nouveaux dérivés 1-oxad6thiacé- phalosporine de formule générale : y CH-CH2-S-CH2-CONH (Im) LOOH ' CH 2R"' COOH dans laquelle R"' est le groupe (1-m6thyl-1H-tétrazole-5-yl) thio ou le reste 4-carbamoylpyridinium, et Y est un atome d'hydrogène ou un groupe mèthoxy, ainsi que leurs sels ou esters pharmaceutiquement acceptables. Comme exemples de composés de formule générale I selon l'invention, on peut citer : 1) L'acide 7P-3(2D-2-amino-2-carboxy)éthylthioacéto- amido] -7o-m6thoxy-3-[(l-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thio 2468608 8 méthylj -1-oxad6thia-3-céphem-4-carboxylique, 2) L'acide 75[(3D-3-amino-3-carboxy)propylthio-. acétoamidoj -7a-méthoxy-3- [ (1-méthyl-lH-tétrazole-5-yl) thiométhyl -1-oxadéthia-3-céphem-4-carboxylique, 5 3) L'acide 79[(2D-1-amino-2-carboxyj éthylthio- propioamidoj -7a-méthoxy-3f(1-méthyl-lH-tétrazole-5- yl)thiométhyl] -1l(oxadéthia-3-céphem-4-carboxylique, 4) L'acide 70- [ (2D-2-amino-2-carboxy)éthylthio- acétoamidoJ -3- [ (1-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thiométhyl) 10 -1-oxadéthia-3-céphem-4-carboxylique, 5) L'acide 75[(2D-2-amino-2-carboxy)éthylthio-

acétoamido] -3- [(4-carbamoylpyridinium)méthylJ -1-oxadéthia-3-céphem-4-carboxylique, 6) L'acide 70[(2D-2-amino-2-carboxy)éthylthio- 15 acétoamido] -7a-méthoxy-3(4-carbamoylpyridinium)méthyf -1-oxadéthia-3-c6phem-4-carboxylique, 7) L'acide 7P- [(3D-3-amino-3-carboxy)propylthio- acétoamidoJ -7a-méthoxy-3[(4-carbamoylpyridinium)mé- thyl] -1-oxadéthio-3-céphem-4-carboxylique, 20 8) L'acide 71- [(2D-2-amino-2-carboxy)éthylthiopro- pioamido] -7a-méthoxy-3- [(4-carbamoylpyridinium)méthylj -1-oxadéthia-3-céphem-4-carboxylique, 9) L'acide 7P[(2D-2-amino-2-carboxy)éthylthio- acetoamidoj -7a-méthoxy-3- L (4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy- 25 4,5-dihydro-1,2,4-triazine-3-yl)thiom6thyl] -1-oxadéthia- 3-céphem-4-carboxylique, 10) L'acide 7P- [ (2D-2-amino-2-carboxy)éthylthioa- cétoamido] -7a-méthoxy-3[(8-amino-tétrazolo-(1,5-b)- pyridazine-6-yl)thiométhylj -1-oxadéthia-3-céphem-4-car- 30 boxylique, 11) L'acide 7P [(2D-2-amino-2-carboxy)éthylthioa- cétoamido J -7a-méthoxy-3- t (1-diméthylaminoéthyl-lH-té- trazole-5-yl)thiométhyl] -1-oxadéthia-3-céphem-4-carbo- xylique, 35 12) Le 1-acétoxyéthyl 7- [ (2D-2-amino-2-éthoxycar- boxy)éthylthioacétoamido] -7a-méthoxy-3[(1-m&thyl-lH-te- trazole-5-yl)thiométhylj -1-oxadéthia-3-céphem-4-carboxy- late, 2468608 9 13) Le 1-acétoxy6thyl 73[ (2D-2-amino-2-carboxy) éthylthioacétoamido] -7a-méthoxy-3|(l-méthyl-lH-tétra- zole-5-yl)thiométhylj -1-oxadéthia-3-céphem-4-carboxy- late, 5 14) Le 1-éthoxy6thyl 79[(2D-2-amino-2-6thoxycar- boxy)éthylthioacétoamidoj -7a-m6thoxy-3[(1-m6thyl-IH- t6trazole-5-yl)thiométhylJ -1-oxad6thia-3-c6phem-4-carboxy- late, 15) L'acide 73[(2D-2-amino-2-éthoxycarboxy)6thyl- 10 thioacétoamido j -7a-méthoxy-3- [ (1-méthyl-lH-tétrazole- 5-yl)thiométhylJ -1-oxadthia-3-c6phem-4-carboxylique, 16) Le 1-éthoxyéthyl 79[(2D-2-amino-2-éthoxycar- boxy)éthylthioacétoamido] -7a-méthoxy-3L(4-méthyl-5-oxo- 6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazine-3-yl)thiométhylj -1- 15 oxadéthia-3-céphem-4-carboxylate, 17) Le 1-ac6toxy6thyl 70 [(2D-2-amino-2-6thoxycar- boxy) 6thylthioac6toamido -7a- m6thoxy-3[(l-diméthylamino- 6thyl-lH-t6trazole-5-yl)thiométhyl] -1-oxadéthia-3-céphem- 4-carboxylate. 20 Les compos6s de formule I selon l'invention présen- tent une activit6 antibactérienne élevée "in-vitro". La Table I ci-après rassemble les concentrations inhibi- toires minimum des composés préparés dans les exemples 1 à 3 ci-après. 25 TABLE I Concentration inhibitoire minimum "in vitro" ( g/ml) Composés examinés Escherichia Escherichia coli n 29 coli GN 30 Composé de l'exemple 1 0,39 0,39 Composé de l'exemple 2 0,39 3,13 Composé de l'exemple 3 0,78 0,78 35 Le spectre antibactérien du composé de l'exem- ple 1,.c'est-à-dire l'acide 71- [ (2D-2-amino-2-carboxy) 2468608 10 6thylthioacétoamido J-7G-m6thoxy-3- [(1-m6thyl-lH-t6tra- zole-5-yl)thiom6thyl] -1-oxad6thia-3-c6phem-4-carboxy- lique (sous forme de son sel mono-sodique) a 6t6 mesur6 et est report6 dans la table 2 ci-après. Les concentra- 5 tions minimum inhibitoires du compos6 examin6 vis-à-vis de la croissance de diverses bact6ries ont ét6 d6termi- n6es par pr6incubation d'une culture sur plaques du microorganisme d'essai dans du bouillon de soja tripti- case (BBL C ) à 37 C pendant toute une nuit, dilution 10 à 100 du bouillon incub6 dans le même bouillon que ce- lui utilis6 dans la pr6incubation pour donner un ino- culum, inoculation de l'inoculum ainsi pr6par6 dans un milieu agar nutritif (Difco) comme milieu de culture pour la d6termination de la C.I.M., puis incubation du 15 milieu inoculé à 37 C pendant 20 heures. Dans un but de comparaison, on a d6termin6 comme ci-dessus les spec- tres antibact6riens de l'acide 7?-(a-p-hydroxyph6nyl-a- carboxyac6toamido)-7a-m6thoxy-3- [ (1-m6thyl-lH-t6trazole- 5-yl)thiom6thyl] -1-oxad6thia-3-c6phem-4-carboxylique 20 (sous forme de sel disodique) du brevet US N 4 138 486 (appelé "Compos6 6059-S") et de l'acide 7- [ (2D-2-amino- 2-carboxy)éthylthioac6toamido -7a-méthoxy-3- [(1-méthyl1H-tétrazole-5-yl)thiométhylj -3-c6phem-4-carboxylique (sous forme de sel mono-sodique) du brevet belge 880 656 25 (ou de la demande de brevet US SN 104 220 (appelé "Com- pos6 MT-141") et on a rassemblé les r6sultats dans la Table 2 ci-après. 2468608 11 TABLE 2 C I M Compos6 de l'exemple 1 de l'invention 5 Organismes essayés Sta. aureus 209P JC-1 3,13 Sta. aureus Smith 10 (I) 1,56 B. subtilis ATCC 6633 1,56 E. coli W 3630 RGN 823 0,025 15 E. coli W 3630 RGN 238 0,39 E. coli ML 1410 0,39 20 Kleb. pneumoniae GN 69 0,78 Pro. mirabilis GN 79 0,20 Sal. Typhimurium LT-2 0,39 25 Shigella dysenteriae shigae 0,20 Pro. vulgaris GN 76 0,39 Pro. morganii 1510 0,78 3O Citro. Freundii GN 0,78 346/16 Ps. aeruginosa 12,5 . MB-3829 35 Ps. cepacia M-0527 3,13 (mcg/ml) Compos6 Composé de l'exemple de l'exemple 6059-S MT-141 (comparaison) (comparaison) 6,25 6,25 25 0,05 0,20 0,10 0,39 0,39 0,20 0,10 0,39 0,39 0 ,10 3,13 6,25 12,5 6,25 6,25 0,05 0,78 0,78 1,56 0,39 0,78 0,39 0,39 0,78 0,78 12,5 6,25 2468608 12 Tous les nouveaux composés de formule générale I selon

l'invention présentent une faible toxicité : ils ont tous une valeur LD50 de 7-8 g/kg par injection intraveineuse chez les souris. Ces nouveaux composés sont donc utiles 5 dans le traitement thérapeutique des infections occasion- - nées par diverses bactéries gram-n'gatives et gram-posi- tives, y compris les souches résistant aux bactéries. Les nouveaux composés selon l'invention aussi bien que leurs sels et esters pharmaceutiquement acceptables peuvent être 10 administrés par voie orale, intrapéritonéale, intravei- neuse, sous-cutanée ou intramusculaire en utilisant toute forme connue pour l'administration et de façon similaire à celle utilisée pour les céphalosporines connues. On peut par exemple administrer les nouveaux composés par voie 15 orale en utilisant toute forme pharmaceutique connue pour ce type d'administration telle que, par exemple, les pou- dres, capsules, tablettes, sirops et similaires. Les nou- veaux composés selon l'invention peuvent être administrés par injection intramusculaire, intraveineuse ou sous-cu- 20 tanée ou par perfusion à une dose de 0,5 à 2,0 g par personne deux ou trois fois par jour, 2 à 4 g par personne et par jour constituant ue dose convenable des composés selon l'invention pour l'application par voie orale pour un traitement efficace des affections bactériennes. Il 25 est préférable d'administrer cette dose en trois à quatre fois par jour. Les nouveaux composés selon l'invention peuvent de plus être formulés en suppositoires contenant le composé actif à une concentration de 0,15 à 15 % en poids en mélange avec une base de suppositoire connue. 30 Les nouveaux composés sont également utiles pour la stérili- sation des instruments chirurgicaux. L'invention concerne également une composition antibactérienne contenant une quantité antibactériellement effi- cace du composé de formule I ou de l'un de ses sels ou 35 esters pharmaceutiquement acceptables, combiné à un sup- port pharmaceutiquement acceptable de l'ingrédient actif. Dans la composition pharmaceutique selon l'invention, l'in- 2468608 13 grédient actif peut être incorporé selon une dose variant de 0,1 à 90 % en poids de l'ensemble de la composition. La méthode d'inhibition de la croissance bactérienne consiste à administrer une quantité sûre et antibactériel- 5 lement efficace du composé de formule I selon l'invention aux animaux, y compris à l'homme, susceptibles de croissance bactérienne. La méthode d'inhibition de la crois- sance bactérienne in vitro consiste à mettre en contact une surface susceptible de ladite croissance bactérienne 10 avec une quantité antibactériellement efficace d'un compo- sé selon l'invention. Le nouveau composé de formule I selon l'invention est intéressant en ce qu'il présente une activité antibactérienne élevée in vivo ainsi qu'un effet curatif élevé 15 dans le traitement chimiothérapeutique des animaux, y com- pris de l'homme, qui ont été infestés par les bactéries. Afin de démontrer ce qui précède, on a effectué le test de traitement thérapeutique de l'infection bactérienne chez les souris par inoculation par voie intrapéritonéale d'un 20 inoculum d'Escherichia coli n0 29 (suspension de bactéries dans l'eau contenant 2,5 % de mucine) dans des groupes de souris (chaque groupe comprenant 5 souris mâles de souche ICR, agées de 4 semaines et pesant en moyenne 20 g) selon une dose d'inoculum de 2,0 x 107 cellules par souris. 25 Trente minutes après l'inoculation, chaque souris était traitée par injection sous-cutanée de 0,2 ml d'une solu- tion du composé actif dans du sérum physiologique. On dé- termine ainsi les valeurs ED50 du composé à essayé. On a également essayé de la même manière, dans un but de 30 comparaison, la Cefoxitine et le composé 6059-S (sel di- sodique). Les résultats sont rassemblés dans la Table 3 ci-après. TABLE 3 Composés essayés Valeur ED50 (mg/souris) 35 Composé de l'exemple i 0,03 Composé de l'exemple 2 0,05 Cefoxitine (comparaison) 0,50 Composé 6059-S (comparaison) 0,16 2468608 14 Il ressort clairement que les nouveaux composés selon l'invention présentent un effet curatif élevé, compara- tivement à la céfoxitine et au composé 6059-S qui sont connus pour être des agents antibactériens utiles dans 5 le traitement chimiothérapeutique de diverses infections bactériennes. Les nouveaux composés de formule I selon l'invention peuvent être produits de différente façon, principalement en partant d'un composé 7-amino-1-oxadéthiacéphem de 10 formule générale : y 15 -CH2R1 (Iv) dans laquelle Y est un atome d'hydrogène ou un groupe méthoxy, R est un groupe hétérocyclique ou un groupe -S- 20 Het tel que défini ci-avant et R est un atome d'hydrogène ou un groupe carboxy protecteur connu. La préparation de ce composé de départ de formule IV peut être effectuée comme décrit par exemple dans "Canadian Journal of Chemistry" 50, 2894 (1972) ; "IJournal of American Chemical Society" 25 96, 7582 (1977) ; "Journal of Medicinal Chemistry" 20 551 (1977) ; "Journal of Medicinal Chemistry" 22, p. 757

(1979) ; et "Journal of American Chemical Society" 101 4403 (1979). Fondamentalement la préparation du composé de formule 30 (IV) peut ê're effectuée par une méthode qui consiste à chauffer un composé de formule générale : Y R3 ,COCH2-R1 35 11C = P(Ar)3 02 3 O0R2 (V) 2468608 15 dans laquelle Y, R et R ont les définitions données ci- avant pour la formule IV, R3 est un groupe acylamino et Ar est un groupe aryl tel que le groupe phényle, dans un solvant organique inerte tel qu'un hydrocarbure aromatique, 5 un hydrocarbure halog6n6 ou le dioxanne, à une température de 70 à 150 C pendant plusieurs heures pour effectuer la cyclisation du composé V, puis à traiter le produit de cy- clisation obtenu avec du pentachlorure de phosphore et une base organique telle que la pyridine et la N-N-dim6- 10 thylaniline, à une température de -20 à 400C pour transformation préférentielle du groupe acylamino en 7 (R3) en groupe amino en 7 libre. Le composé initial de for- mule V peut, à son tour, être préparé par différentes méthodes connues, telles que décrites par exemple dans le 15 brevet US N 4 180 571. Pour produire le composé de formule I selon l'inven- tion, il est par exemple possible de suivre une première voie selon laquelle on fait réagir le composé 7-amino-i- oxadéthia-cephem de formule IV avec un acide haloalcanol- 20 que, ou son dérivé réactif de formule générale : Z-(CH2) COX (VI) dans laquelle Z est un atome d'halogène, spécialement le brome ou le chlore, X est -OH ou un groupe chloré oubromé ou un autre grope réactif fonctionnellement équivalent au 25 radical -OH présent dans le groupe carboxyle et y est un nombre entier de 1 à 3, pour produire le produit de con- densation de formule générale : Y 3~~~~~~~~~~0 30 Z(cH2) -CONH N CH2R 2 (II') COOR 1 2 35 dans laquelle R , R , Y, Z et y ont les définitions données ci-avant, que l'on fait ensuite réagir avec le composé acide aminé de formule générale : 2468608 16 1 2 ~~~~~~~~~~~~(III) 1 2 CH-(CH2)x -SH COOH dans laquelle x est un nombre entier de 1 à 3, et si néces- 5 saire, on 6élimine le groupe carboxy-protecteur (R ) quand il est pr6sent. On peut également emprunter une seconde voie selon la- quelle on fait r6agir le composé 7-amino-1-oxad6thia-zc- phem de formule IV avec un composé de formule gén6rale : 10 B H- (CH2) S(CH 2) COX (VII) - ~~(VII) 2 x 2 y iOOA dans laquelle X est un groupe -OH, un groupe bromo ou chloro ou un autre groupe r6actif fonctionnellement équiva- 15 lent au radical -OH pr6sent dans le groupe carboxy, x et y sont chacun un nombre entier de i à 3, A est un groupe car- boxy-protecteur connu et B est un groupe amino-protecteur connu , puis on 6élimine les groupes protecteurs résiduels (A, B) du produit de condensation obtenu.Le r6actif de for- 20 mule VI aussi bien que le réactif de formule VII employés dans les deux voies mentionn6es ci-dessus peuvent se trouver sous la forme du dérivé actif d'un acide carboxylique qui peut être un halogénure d'acide, un anhydride d'acide mixte, un d6rivé succinilimino ou l'ester p-nitrophényle. Dans le 25 produit de formule VII, le groupe amino-protecteur B peut inclure les groupes t-butoxycarbonyle, trichlor6thoxycar- bonyle et benzyloxycarbonyle, substitués ou non, le groupe carboxy-protecteur (A) peut inclure les groupes diphényl- méthyle, trichlor6thyle, benzyle et t-butyle substitu6s ou 30 non. Les groupes protecteurs peuvent tous être introduits et enlev6s selon une technique conventionnelle de protec- tion ou de d6protection. L'atome d'halogène (Z) dans les formules (II') ou (VI) peut être le chlore, le brome ou l'iode, le chlore et le brome convenant bien. 35 Dans la première ou la seconde voie mentiomnnée ci- avant, on peut effectuer la réaction du composé 7-amino-1 2468608 17 dithiaoxacéphem de formule IV avec le composé d-'acide haloalcanoique de formule VI ou avec le composé de for- mule VII dans un solvant organique inerte dans des con- ditions de réaction permettant la formation d'une liaison 5 amido connues dans la synthèse conventionnelle des pep- tides. Le solvant convenant dans ce but peut être un sol- vant organique tel que le dichlorométhane, le chloroforme, l'acétate d'éthyk, le diméthylformamide et similaire. Quand le composé de formule VI ou VII est utilisé sous 10 forme d'un halogénure d'acide en tant qu'un des dérivés acides réactifs, sa réaction avec le composé de formule IV peut être effectuée à une température allant de la température ambiante à une température inférieure à 00C en présence d'un agent liant les acides qui peut être un 15 agent de triméthylsilylation connu ou une base organique, par exemple une amine tertiaire telle que la pyridine, la diméthylaniline et similaires. Quand le composé réactif de formule VI ou VII par contre, est utilisé sous forme d'a- cide carboxylique libre, la réaction peut être effectuée 20 selon une méthode à l'ester actif connue en présence d'un agent déshydratant tel que la N,N-dicyclohexylcarbodiimide. Le temps nécessaire à la réaction peut varier selon la

réactivité du dérivé d'acide carboxylique de formule VI ou VII employé et peut habituellement se situer entre 1 et 25 5 heures. Dans la première voie mentionnée de production du com- posé de formule I, la réaction du composé amino en 7 de formule IV avec le réactif acide haloalcanoique de for- mule VI est suivie d'une réaction du produit de conden- 30 sation de formule II' obtenu avec le composé amino acide de formule III. Cette réaction peut se produire à température ambiante ou à température inférieure dans un solvant iner- te, de préférence en présence d'un bicarbonate de métal alcalin, d'un trialkylamine, de pyridine ou similaire comme agent de liaison d'acide. Cette réaction peut être habituellement terminée en 1 à 5 heures, quoiqu'en général le temps de réaction nécessaire puisse varier se- 2468608 18 ion la r6activit6 du groupe halo (Z) pr6sent dans le compos6 II', la nature de l'agent de liaison d'acide et le solvant utilises. Le procédé selon le second aspect de l'invention 5 correspond à une partie, c'est-à-dire à la dernière phase de la première voie décrite ci-dessus. Quand on effectue le procédé selon le second aspect de l'invention, on fait r6agir le compos6 1-oxacéphem de formule II avec une quantité équimolaire ou sensibleemnt 10 équimolaire de l'amino-acide contenant du soufre de for- mule III dans un milieu de r6action liquide qui peut être l'eau, un alcanol aqueux tel que le méthanol aqueux, dans lequel on peut dissoudre ou mettre en suspension les r6actifs. La température de réaction peut se situer en- 15 tre 0 et 30"C, et peut très bien se d6rouler à température ambiante. Comme l'acide halogéné est lib6r6 au cours de la condensation, on préfère effectuer la condensation en présence d'un agent de liaison d'acide tel qu'un alcali ou une base organique. 20 La D-cysteine est un exemple préf6re de l'acide aminé de formule III. L'acide aminé de formule III peut, si on le désire, être sous forme d'un d6rivé fonctionnellement équivalent, par exemple sous forme d'un mercaptide de m6tal alcalin 25 sur le groupe thiol terminal. Quand le composé 1-oxac6phem de formule II est utilisé sous la forme de son d6rivé carboxy-prot6gé dans lequel le groupe R' est un groupe carboxy-protecteur connu tel qu'un groupe formateur d'ester, par exemple un groupe 30 alkyl ou aryl, le produit de condensation de formule I' tel que form6 peut, si nécessaire, ou désiré, être soumis à une étape de déprotection pour l'6limination du groupe carboxy-protecteur R' qui peut être menée à bien de fa- çon connue. Quand le groupe carboxy-protecteur R' est un 35 groupe alkyl ou aryl, son élimination peut être effectuée par hydrolyse acide ou alcaline de façon connue. Si le groupe R' formateurd'ester est un groupe pharmaceutique- 2468608 19 ment acceptable, il n'est pas nécessaire de l'éliminer du produit de condensation de formule I'. Quand le produit de condensation de formule I ou I' est obtenu sous forme d'acide carboxylique libre ou sous forme 5 d'ester d'acide carboxylique, il peut à nouveau être con- verti en son sel pharmaceutiquement acceptable par réac- tion avec une base pharmaceutiquement acceptable telle qu'un carbonate ou un hydroxyde de m6tal alcalin selon une méthode connue pour la formation de carboxylate (sel). 10 Le produit désiré de formule I obtenu comme ci-dessus soit sous forme acide carboxylique libre, soit sous forme de carboxylate pharmaceutiquement acceptable peut être ré- cupéré du mélange réactionnel par un procédé conventionnel. Par exemple, on peut diluer le mélange réactionnel conte- 15 nant le produit I avec de l'eau puis le traiter avec une résine absorbante ou du charbon actif pour adsorption du produit désiré, et éluer avec de l'eau ou un solvant organique aqueux tel que l'éthanol aqueux ce qui permet d'isoler et de purifier le produit final désiré. Si né- 20 cessaire on peut procéder à un isolement et à une purifi- cation ultérieure par chromatographie sur colonne d'un agent de filtration sur gel tel que le Séphadex LH-20 ou G-10 (Pharmacia C , Suède) ou une résine adsorbante non- ionique microporeuse telle qu'un copolymère styrène divi- 25 nylbenzéne par exemple le Diaion HP-20 (Mitsubushi Kasei C , Japon). Les exemples suivants illustrent bien l'invention sans toutefois la limiter. Exemle 1 30 a) L'ester benzylique de l'acide 79-amino-7a-méthoxy-3- [(1-méthyl-lH-tétrazol-5-yl)thiométhyl -1-oxadéthia-3-cé- phem-4-carboxylique (150 mg) est dissous dans un mélange d'ac6tate d'éthyl (7 ml) et de bis(triméthyl-silyl)acéta- mide (370 mg). On ajoute à la solution une solution de 35 bromure de bromacétyl (120 mg) dans l'acétate d'éthylt(2 ml), puis on mélange le tout à -20 C pendant une heure et en- suite pendant 1 heure de plus entre O et 5 C. On ajoute à 2468608 20 la solution réactionnelle résultant de l'acétate d'éthyle (10 ml) et on lave le mélange avec une solution aqueuse à 5 % d'acide chlorhydrique (10 ml), avec de l'eau (10 ml), avec une solution aqueuse à 5 % de bicarbonate de sodium 5 (10 ml) et enfin avec de l'eau (10 ml). On sépare la

phase acétate d'éthyle de la phase aqueuse puis on sèche sur sulfate de magnésium anhydre et on concentre à sicci- té sous pression réduite pour obtenir 220 mg d'un produit huileux. 10 Ce produit huileux est repris dans du chlorure de mé- thylène sec (10 ml) et la solution résultante est mélangée avec de l'anisole (440 mg) et une solution de trichlorure d'aluminium (266 mg) (4 ml) sous agitation et refroidisse- ment à la glace. Le mélange est agité pendant 15 minutes 15 sous agitation à la glace puis à température ambiante pen- dant encore 1,5 heure. La solution réactionnelle, après que l'on y ait ajouté 60 ml d'acétate d'éthyle est lavée deux fois avec une solution aqueuse à 2 % d'acide chlor- hydrique, puis extraite deux fois avec une solution aqueuse 20 à 5 % de bicarbonate de sodium. Après addition d'acétate d'éthyle (40 ml) on règle le pH de l'extrait à 1 par addi- tion d'une solution aqueuse à 5 % d'acide chlorhydrique. La phase acétate d'éthyle est séparée de la phase aqueuse, et la phase aqueuse restante extraite avec 30 ml d'acétate 25 d'éthyle. Les extraits (solution dans l'acétate d'éthyle) sont combinés , séchés sur sulfate de magnésium anhydre puis concentrés à siccité pour donner 40 mg d'acide 7e- (2-bromoacétoamido -7a-méthoxy-3- [(1-m6thyl-lH-tétrazol5-yl) thiométhyl 3 -1-oxadéthia-3-céphem-4-carboxylique. 30 b) Le produit (40 mg) obtenu dans le procédé ci-dessus est mis en suspension dans l'eau (10 ml) et le pH de la suspension est ajusté à 7 par addition d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium, grâce à quoi le composé céphem se dissout dans l'eau. On ajoute alors de la D- 35 cystéine (20 mg) à la solution obtenue et on effectue la réaction à température ambiante pendant 1,5 heure, le pH de la solution réactionnelle étant maintenu à 7-7,5. Une 2468608 21 fois la réaction terminée, on règle le pH entre 5,5 et 6,5 par addition d'acide chlorhydrique et on concentre. On fait passer la solution concentrée au travers d'une colon- ne de 40 ml d'une résine adsorbante, le Diaion HP-20 5 (Mitsubishi Kasei C , Japon) que l'on élue ensuite à l'eau. On rassemble les fractions de l'éluat contenant le composé désiré, on concentre sous pression réduite et on sèche par congélation pour obtenir 45 mg de sel de sodium de l'acide 71-[(2d-2-amino-2-carboxy)éthylthioacétoamidoI - 10 7a-méthoxy-3- [ (1-méthyl-lH-tétrazol-5-yl)thiométhyl3-1oxadéthia-3-céphem-4-carboxylique sous forme de poudre in- colore. Point de fusion : 129 à 135 C (Déc.). Ce produit présente un Rf de 0,35 en chromatographie en couche mince (développée avec un mélange n-butanolacide acétique-eau = 2:1:1). Analyse élémentaire Calculé pour C16H20N708S2Na.2H20 (561,53) ; C 34,22 ; H 4,31 ; N 17,46 % Trouvé C 33,91 ; H 4,41 ; N 16,96 % 20 PMR. (80 Hz) (dans l'eau lourde) 93,36 s (2H), 3,41 s (3H), 3,93 s (3H), 4,05 q (2H), 4,46 s (2H), 5,05 s (1H) Exemple 2 On répète le procédé de l'exemple 1 en utilisant 150 mg 25 de benzyl ester de l'acide 75-amino-3- [(1-méthyl-1H-tétrazol-5-yl)thiométhyl3-1-oxadéthia-3-céphem-4-carboxylique. On obtient avec un rendement de 50 mg le sel de sodium de l'acide 73[(2D-2-amino-2-carboxy)éthylthioacétoamidoJ- 3L(1-méthyl-lH-tétrazol-5-yl)thiométhyl -1-oxadéthia-3céphem-4-carboxylique. Point de fusion : 133-138 C (Déc.). Ce produit présente un Rf de 0,39 en chromatographie en couche mince de gel de silice (développée avec un mé- lange n-butanol-acide acétique-eau = 2:1:1)o 35 Exemple 3 On répète le procédé de l'exemple 1 en utilisant 300 mg du benzyl ester del'acide 7P-amino-7a-méthoxy-3- 2468608 22 ~(4-carbamoyl-pyridinium)méthyl]-1-oxad6thia-3-c6phem-4- carboxylique. On obtient 65 mg de l'acide 73-[(2D-2-amino-2-carboxy) éthylthioacétoamido3-7a-méthoxy-3- (4-carbamoylpyridinium) 5 méthyl]-1-oxadéthia-3-céphem-4-carboxylique. Point de fusion : 115--120 C (Déc.) Ce produit présente un Rf de 0,21 en chromatographie en couche mince de gel de silice (développée avec un me- lange n-butanol-acide acétique-eau (2:1:1). 10 Analyse élémentaire Calculé pour C20H24N509S .H20 (528,53) ; C 45,45 ; H 4,96 ; N 13,25 % Trouvé C 45,42 ; H 5,05 ; N 13,15 % Exemple 4 15 a) On dissout 150 mg d'ester benzhydrylde l'acide 7Pamino-7a-méthoxy-3- ú(i-méthyl-lH-tétrazol-5-yl)thiométhyl] -1-oxadéthia-3-céphem-4-carboxylique dans du dichlorométhane (5 ml). On ajoute à la solution obtenue de la diméthylani- line (0,042 ml) et du bromure de bromacétyl (70 mg) à -10 C 20 puis on agite le mélange obtenu à -10C pendant 1,5 heure. La solution réactionnelle est lavée avec une solution aqueuse d'acide chlorhydrique à pH 2, avec une solution aqueuse à 5 % de carbonate et finalement avec de l'eau, puis séchée sur sulfate de sodium anhydre et concentrée à 25 siccité sous pression réduite pour donner 190 mg de l'es- ter benzhydryl de l'acide 7f-(2-bromoacétoamido)-7a-méthoxy3-[(1-méthyl-lH-tétrazol-5-yl)thiométhyl]-1-oxadéthia-3-céphem-4-carboxylique sous forme de poudre hygroscopique. Le produit pulv6rulent obtenu ci-dessus est dissous

30 dans l'anisole (0,5 ml) et on ajoute de l'acide trifluora- c6tique (1 ml) à la solution résultante à -10 C, puis on a- gite une heure à -10 C pour effectuer l'6limination du groupe benzhydryl. La solution r6actionnelle est concentr6e à sic- cité sous pression r6duite en-dessous de 30 C. Le résidu 35 obtenu est repris dans l'acétate d'6thyle (20 ml), lavé à l'eau puis extrait avec une solution aqueuse à pH 8 de bicarbonate de sodium (20 ml). Le pH de l'extrait aqueux est réglé à 1,0 avec une solution aqueuse 5 N d'acide 2468608 23 chlorhydrique puis extrait avec deux portions de 20 ml d'acétate d'éthylU Les phases ac6tate d'6thyl (les ex- traits) sont combin6es, lav6es à l'eau, séchées sur sul- fate de magnésium anhydre et évaporées à siccité sous 5 pression r6duite pour donner 98 mg d'acide 7e-(2-bromoacétoamido)-7a-méthoxy-3-[(1l-m&thyl-lH-tetrazol-5-yl)thiométhy1l-1-oxadéthia-3-céphem-4-carboxylique. b) Le produit (98 mg) obtenu dans le proc6d6 ci-des- sus est mis en suspension dans 5 ml d'eau, et le pH de la 10 suspension est ajust6 à 7,0 avec une solution aqueuse à 5 % de bicarbonate de sodium pour effectuer la dissolution du composé céphem. On ajoute 45 mg de D-cyst6ine à la so- lution obtenue et on agite le mélange entre 5 et lO C pen- dant une heure tout en maintenant le pH du mélange entre 15 6,8 et 7,0 par addition d'une solution aqueuse de bicar- bonate de sodium. Le pH de la solution r=actionnelle est régl6 a 5,0 avec une solution aqueuse d'acide chlor- hydrique 5N. La solution réactionnelle est concentrée à un volume d'environ 2 ml 7 la solution concentrée est plac6e dans une colonne de 50 ml d'une r6sine adsorbante, l'Amberlite XAD-2 (Robhm & Haas C USA) et la colonne est développée à l'eau. Les fractions de l'éluat contenant le produit d6siré sont rassemblées, concentrées sous pression réduite et s6ch6es par congélation pour donner 25 73 mg du sel de sodium de l'acide 7?-3(2D-2-amino-2-carbo- xy) éthylthioacé6toamidol -7a-m&thoxy-3 -[( 1-méthyl-1H-tétra- zol-5-yl)thiométhyl -1-oxadéthia-3-c6phem-4-carboxylique sous forme de poudre incolore de point de fusion : 129. 135 C (D6c.). 30 Exemple5 On met en suspension dans l'eau (t ml) 100 mg d'acide 7P-(2-bromoacétoamido)-7a-méthoxy-3-[(I1-dim6thyl-aminoéthyl-lH-tétrazole-5-yl)thiométhylJ --oxadéthia-3-céphem- 4-carboxylique et l'on règle le pH de la suspension obte- 35 nue à 6,8 par addition d'une solution aqueuse à 10 % de bicarbonate de sodium, ce qui permet de dissoudre dans l'eau ledit compos6 c6phemo On mélange la solution ainsi 2468608 24 obtenue avec du chlorhydrate de D-cystéine, puis on agite à 0-5 C pendant 2 heures en maintenant le pH de la solu- tion réactionnelle à 6,8-7,0. Le pH de la solution réac- tionnelle est alors réglé à 6 par addition d'acide chlor- 5 hydrique 5N et concentr6 à un volume d'environ 5 ml. On fait passer la solution concentrée au travers d'une colonne de 60 mi de résine adsorbante, microporeuse, non-ionique, le Diaion HP-20 que l'on élue à l'eau. On rassemble les fractions de l'éluat contenant le composé désiré, on con- 10 centre sous pression réduite et on sèche par congélation pour obtenir 98 mg d'une poudre incolore d'acide 7P- (2D-2amino-2-carboxy)éthylthioacétoamido -7a-méthoxy-3- f (1-diméthylaminoéthyl-lH-tétrazole-5-yl)thiométhyl] -1-oxadéthia-3céphem-4-carboxylique. 15 Ce produit présente un Rf de 0,32 en chromatographie en couche mince de gel de silice (d6veloppée avec un mélange n-butanol-acide acétique-eau (2:1:1). Exemple 6 On met en suspension dans l'eau (5 ml) (50 mg)d'acide 20 7b-(2-bromoacétoamido)-7a-méthoxy-3- [(1-méthyl-lHR-t6tra- zole-5-yl) thiométhyl-1-oxadéthia-3-çéphem-4-carboxylique et on règle le pH de la suspension obtenue à 7,0 par addition d'une solution aqueuse à 5 % de bicarbonate de sodium ce qui assure la dissolution dans l'eau dudit 25 composé c6phem. La solution ainsi obtenue est mélangée au chlorhydrate-de D-cyst6ine éthyl ester (18 mg) puis on agite entre 5 et 10 C pendant 3 heures tout en maintenant le pH de la solution réactionnelle à 6,8-7,0. Le pH de la solution r6actionnelle est ensuite réglé6 à 6,0 par ad- 30 dition d'acide chlorhydrique 5N puis on la fait passer à travers une colonne de 3 ml de r6sine Diaion HP-20 que l'on lave ensuite à l'eau et que l'on élue avec une solution aqueuse à 30 % d'éthanol. Les fractions del'éluat contenant le produit désiré sont rassemblées, concentrées sous 35 pression r6duite et s6chées par congélation pour donner 41 mg d'une poudre incolore d'acide 7P-1(2D-2-amino-2- éthorycarbonyl)éthylthioacétoamidoJ -70-méthoxy-3-[ (1-mé- 2468608 25 thyl-1lH-tétrazole-5-yl)thiom6thylj-1-oxad6thia-3-céphem-4- carboxylique. Ce produit présente un Rf de 0,57 en chromatographie en couche mince sur gel de silice (d6veloppée avec un 5 mélange ac6tone-méthanol (2:1). Exemple 7 On met en suspension dans 3 ml d'eau 60 mg d'acide 7P-(2-bromoac6toamido)7a-m6thoxY-3- [(4-méthyl-5-oxo-6hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazine-3-yl) thiométhyl--1-

10 oxadéthia-3-céphem-4-carboxylique et on règle le pH de la suspension obtenue A 7 par addition d'une solution aqueuse à 5 % de bicarbonate de sodium, ce qui permet la dissolution du compos6 c6phem dans l'eau. On mélange la solution ainsi obtenue avec du chlorhydrate de D-cys- 15 t6ine (28 mg), puis on agite 2 heures en maintenant le pH de la solution r6actionnelle A 6,8-7,0. On traite ensuite la solution réactionnelle comme dans l'exemple 5 pour ob- tenir 52 mg d'une poudre incolore de 79-3(2D-2-amino-2carboxy)éthylthioacétoamido]-7?-méthoxy-3-|(4-m6thyl-5-oxo6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2 ,4-triazine-3-yl)thiométhyl]-1oxadéthia-3-céphem-4-carboxylate de sodium. Ce produit pr6sente un Rf de 0,38 en chromatographie en couche mince de gel de silice (développée avec un mélange n-butanol-a- cide ac6tique-eau 2:1:1).

25 Exemple 8 a) On dissout 100 mg d'acide 7e-(2-bromoacétoamido)-7a- m6thoxy-3[(1-m6thyl-liH-t6trazole -5-yi) thiométhylj -1oxadéthia-3-c6phem-4-carboxylique dans 1 ml de diméthyl- formamide et on ajoute à la solution obtenue 0,03 ml de 30 triéthylamine à -25 C puis, goutte A goutte, en 10 minutes, 0,5 ml d'une solution de 55 mg d'iodure de 1-acétoxy-éthyl dans le N-N-diméthylformamide ; on agite ensuite entre -5 C et 0 C pendant 1 heure. La solution réactionnelle est diluée à l'eau (5 ml) puis extraite avec 20 ml d'acétate 35 d'éthyU. L'extrait dans l'acétate d'éthyU est lavé deux fois avec des portions de 5 ml d'eau, séché sur sulfate de sodium anhydre et concentré à siccité sous pression ré- 2468608 26 duite. Le résidu est lavé à l'6ther de p6trole pour donner 120 mg de 1-ac6toxyéthyl 71-(2-bromoacétoamido)-7a-m6thoxy3-L(1-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thiométhyly-oxadéthia-3céphem-4-carboxylate. 5 b) Le produit obtenu ci-dessus est dissous dans 2 ml d'acétone, et la solution obtenue est mélangée à 5 ml d'eau puis à 20 mg de chlorhydrate de D-cystéiue m6thyl ester, puis on agite à 0-5 C pendant 3 heures en maintenant le pH de la solution réactionnelle à 6,5 par addition d'une solu- 10 tion aqueuse à 5 % de bicarbonate de sodium. Le pH de la solution réactionnelle est réglé à 8,0 par addition de la solution aqueuse de bicarbonate puis extraite avec 20 ml d'acétate d'éthyl. L'extrait dans l'acétate d'éthyl est concentré à un volume de 2 ml et l'on fait passer la solu- 15 tion concentrée au travers d'une colonne de 40 ml de Sé- phadex LH-20 qui a été saturée avec de l'acétate d'éthyl&. La colonne est développée à l'acétate d'éthylt et les fractions de l'éluat contenant le produit désiré sont rassem- blées et concentrées à siccité sous pression réduite pour 20 donner 95 mg d'une poudre incolore de 1-acétoxyéthyl 79L(2D-2-amino-2-méthoxycarbonyl)éthylthioacétoamido]-7amethoxy-3-L(1-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thiométhylJ-1-oadéthia-3-céphem-4-carboxylate. Ce produit présente un Rf de 0,73 en chromatographie 25 en couche mince de gel de silice (développée avec un mé- lange acétate d'éthyl-acétone 5:1). 2468608 27

Claims (13)

- REVENDICATIONS -

1 - D6riv6s dela 1-oxad6thiacéphalosporine, carac- t6ris6s en ce qu'ils présentent la formule générale : Y 5 NH I CH-(CH2)xS(CH2)y-CONH COOH N CH2R o N 2 10 COOH (I) dans laquelle R est un groupe hét6rocyclique ou un groupe -S-Het , -Het correspondant a un groupe hété- rocyclique, Y est un atome d'hydrogène ou un groupe 15 méthoxy -OCH3 et x et y correspondent chacun & un nombre entier de 1 à 3, ainsi que les sels et esters pharmaceutiquement acceptables de ces composés.

2 - Dérivés de la 1-oxad6thiac6phalosporine selon la revendication 1, caractéris6 en ce qu'ils présentent 20 la formule gé6nérale : NE T CH-CH2 -S-CH2-CONH COOH I~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ 25 O CH2R" (I") COOH dans laquelle R" est le groupe (1-méthyl-IH-tétrazole- 5-yl) thio ; le groupe (1-carboxylm6thyl-IH-t6trazole- 30 5-yl) thio ; le groupe (2-carboxy-méthyl-IH-tétrazole- 5-yl) thio ; le groupe (4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5- dihydro-1,2,4-triazine-3-yl) thio ; le groupe (8-amino- t6trazolo-(1,5-b)-pyridazine-6-yl) thio ; le groupe pyridinium ; le groupe 4-carbamoyl pyridinium et le groupe 35 (1-dim6thylamino6thyl-lH-tétrazole-5-yl) thio, et Y est un atome d'hydrogène ou un groupe méthoxy, ainsi que leurs sels et esters pharmaceutiquement acceptables. 2468608 28

3 - D6riv6s de la 1-oxad6thiacéphalosporine selon la revendication 1, caractérisés en ce qu'ils présentent la formule générale : 5 1 2 CH-CH2-S-CH2-CONHA(I) COOH N CH2R"' 10 COOH dans laquelle R"' est le groupe (1-m6thyl-lH-tétrazole- 5-yl) thio ou le reste 4-carbamoylpyridinium et Y est un atome d'hydrogène ou un groupe méthoxy, ainsi que leurs sels ou esters pharmaceutiquement acceptables. 15

4 - Dérivé de la 1-oxad6thiacéphalosporine selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est l'acide 73- [(2D-2-amino-2-carboxy) 6thylthioacétoamido7-7a-mé- thoxy-3[(i-méthyl-IH-tétrazol-5-yl)thiométhyl J- 1-oxadéthia-3-céphem-4-carboxylique, ainsi que ses sels et 20 esters pharmaceutiquement acceptables.

5 - Dérivé de la 1-oxadéthiacéphalosporine selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est l'acide 7- [(2D-2-amino-2-carboxy) éthylthioacétoamido] -3-[(1- méthyl-1H-tétrazole-5-yl ) thiométhylj -1-oxadéthia-3-céphem- 25 4-carboxylique, ainsi que ses sels et esters pharmaceu- tiquement acceptables.

6 - Dérivé de la 1-oxadéthiacèphalosporine selon la revendication 1, caract6risé en ce qu'il est l'acide 7--r (2D-2-amino-2-carboxy) thylthioacétoamidoJ-3-[(4- 30 carbamoylpyridinium)méthylj1-oxadéthia-3-céphem-4-car- boxylique, ainsi que ses sels et esters pharmaceutique- ment acceptables.

7 - Dérivé de la 1-oxadéthiacéphalosporine selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est l'acide 35 7b(2D-2-amino-2-carboxy)é6thylthioac6toamido&-7a-méthoxy- 3- [( 1-dim6thylaminoéthyl-l1H-tétrazole-5-yl) thiométhyl3-1- 2458608 29 oxadéthia-3-cephem-4-carboxylique, ainsi que ses sels et esters pharmaceutiquement acceptables.

8.- Dériv6 de la 1-oxadéthiacéphalosporine selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est choisi parmi 5 l'acide 70[(3D-3-amino-3-carboxy)propylthioac6toamido] - 70-méthoxy-3[(1-m6thyl-lH-tétrazol-5=yl)thiométhylj -1oxadéthia-3-céphem-4-carboxylique; l'acide 70- [(2D-2-amino2-carboxy)éthylthiopropioamido) -7a-m&thoxy-3- ( 1-m6thyl1H-tétrazol-5-yl)thiom6thyl] -1-oxad6thia-3-céphem-4- 10 carboxylique; l'acide 7- [ (2D-2-amino-2-carboxy)6thylthio- acétoamido ] -7a-m6thoxy-3[(4-carbamoylpyridinium)méthylj- 1-oxad6thia-3-céphem-4-carboxylique; l'acide 70- [(3D-3- amino-3-carboxy)propylthioacétoamido)-7a-méthoxy-3[(4- carbamoylpyridinium)méthyl]-1-oxadéthia-3-c6phem-4- 15 carboxylique; l'acide 7p- f(2D-2-amino-2-darboxy)éthyl- thiopropioamido] -7a-méthoxy-3I(4-carbamoylpyridinium) méthyl] -1-oxadéthia-3-céphem4=carboxylique; l'acide 70- [(2D-2-amino-2-carboxy)éthylthioacétoamidoJ-7a-méthoxy- 3L[(4-méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1?2,4-triazine-3- 20 yl)thiométhyl -1-oxadéthia-3-c6phem-4-carboxylique; l'acide 70[(2D-2-amino-2-carboxy)éthylthioacétoamido]-7t-méthoxy- 3- [ (8-amino-tétrazolo-( 1,5-b)-pyridazine-6-yl)thiométhyl]1-oxadéthia-3-céphem-4-carboxylique ; le 4-carbôxylate de 1-acétoxyéthyl 70- |(2D-2-amino-2-éthoxycarboxy)éthylthio- 25 acétoamidoj-7a-méthoxy-3- L (1-m6thyl-îH-tétrazol-5-yl)thio- mnthyl- 1-oxadéthia-3-céphem; le 4-carboxylate de 1- acétoxyéthyl 70L(3D-3-amino-3-carboxy)éthylthioacéto- amidoJ-7 a-méthoxy-3- ( 1-méthyl-lH-tétrazol-5-yl)thiométhyl- 1-oxadéthia-3-céphem; le 4-carboxylate de 1-6thoxyéthyl- 30 7-~J-e 30 7 P[(2D-2-amino-éthoxycarboxy)éthylthioacétoamido] -7"9- méthoxy-3L(1-méthyl-1H-t6trazol-5-yl)thiométhylJ -1- oxad6thia-3-c6phem; l'acide 7P- L(2D-2-amino-2-éthoxy- carboxy)-éthylthioacétoamidoJ-7a-mé6thoxy-3(1-méthyl-l1H- tétrazol-5-yl)thiométhylj -1-oxadéthia-3-céphem-4-carboxy35 lique; le 4-carboxylate de 1-éthoxyethyl o- [(2D-2-amino2-éthoxycarboxy)éthylthioacétoamidoJ-7a-méthoxy-3- L (4méthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazine-3-yl) 2468608 30 thiométhyll-1-oxadéthia-3-céphem; et le 4-carboxylate de 1-acétoxyéthyl 7 - [(2D-2-amino-2-éthoxycarboxy)éthyl- thioacétamido -7a-méthoxy-3- [(l 1-diméthylaminoéthyl-lH- t6trazole-5-yl)thiométhylJ -1-oxadéthia-3-céphem. 5

9.- Procédé de fabrication des composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce qu'il comporte une étape de condensation d'un composé 1-oxacéphem de formule : Y 10 Z-(CH ) yCONH (II) 0 N- CH2R 15 COOR' dans laquelle R est un groupe hétérocyclique ou un groupe -S-Het, Het correspondant à un groupe hétérocyclique, Y est un atome d'hydrogène ou un groupe méthoxy -0CH3, R' est un atome d'hydrogène ou un groupe carboxy protecteur, Z est 20 un groupe halo, y est un nombre entier de 1 à 3 avec un acide aminé contenant du soufre de formule : NH2 CH-(CH2) -SH (III) 2 x COOH 25 dans laquelle x est un nombre entier de I à 3, ou un dérivé fonctionnellement équivalent dudit acide aminé, dans un solvant, pour produire le produit de condensation de formule : Y M2 ~ ~ ~ ~ ~ ~ 2 N H ON 30 CHCH2)xS(CH2)y -CONH (') COOH N HR O 2 COOR' dans laquelle R, R', Y, x et y ont les définitions ci-dessus. 35

10.- Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce qu'il comporte une étape supplémentaire d'élimination 2468608 31 de l'éventuel groupe carboxy protecteur R' du produit de condensation de formule I'.

11.- Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que l'&tape de condensation est effectuée dans 5 l'eau ou dans un solvant organique aqueux entre O et 30 C.

12.- Proc6dé selon la revendication 9, caractérisé en ce que l'étape de condensation est effectuée en pr6sence d'un agent liant l'acide.

13.- Composition anti-bactérienne, caractérisée en ce 10 qu'elle comporte, comme ingrédient actif, une quantité anti-bactériellement efficace d'un des dérivés de 1-oxa- déthiacéphalosporine selon leune quelconque des revendica- tions 1 A 8, ou son sel ou ester pharmaceutiquement acceptable, en combinaison avec un support pharmaceutique- 15 ment acceptable de l'ingrédient actif.