NL8005992A

NL8005992A - 1-oxadethiacefalosporinederivaten, en bereidingswijze daarvoor.

Info

Publication number: NL8005992A
Application number: NL8005992A
Authority: NL
Original assignee: Meiji Seika Kaisha
Priority date: 1979-11-02
Filing date: 1980-10-31
Publication date: 1981-06-01
Also published as: SE8007403L; CA1148949A; DE3041160C2; YU42987B; ZA806526B; ATA528480A; DE3041160A1; YU278580A; US4325951A; BE885999A; ES496480A0; IL61335A; AU6387280A; AU538028B2; IL61335A0; GR70222B; JPH0120156B2; IT8009577A1; IT8009577A0; FR2468608B1

Description

? ♦ ' Lx 5742 l-oxadethiacefalosgorinederiyaten^en bereidingswijze daarvoor.

De uitvinding beeft betrekking op nieuwe voor bacteriebe-strijding dienende 1-oxadethiacefalosporinederivaten met een sterke bacteriebestrijdingswerking in vitro en in vivo, en in bet bijzonder tegen β-lactamase voortbrengende bacteriën. De uitvinding beeft ver-5 der betrekking op een werkwijze voor bet bereiden van dergeïijke derivaten. Voorts beeft de uitvinding betrekking op een bacteriebestrij-dingsmiddel, dat dergelijke derivaten bevat, en op bet chemothera-peutiscb gebruik van dergelijke derivaten en de farmaceutisch aanvaardbare zouten en esters daarvan.

10 Er zijn reeds verschillende cefalosporinederivaten bereid en voor behandeling van bacterie-infecties gebruikt. Onlangs zijn 1-oxadethiacefalosporinederivaten synthetisch bereid en voor dergelijke toepassingen voorgesteld, waartoe kan worden verwezen naar ÏÏS 4011216, 4 013 648, 4 013 653» 4031 083 , 4045 438 , 4138 486 en 15 4 180 571· Om verdere derivaten een sterke en brede bestrijdingswer-king tegen gram-positieve en gram-negatieve bacteriën, en zelfs tegen β-lactamase voortbrengende stammen, die gewoonlijk bestand zijn tegen de bekende cefalosporinen, te verkrijgen, zijn uitvoerige onderzoekingen verricht. Deze hebben geleid tot nieuwe 1-oxadethiacefalos-20 porinederivaten, die betere bacteriebestrijdingseigenschappen hebben dan de bekende.

De uitvinding beoogt dergelijke nieuwe derivaten te verschaffen, die een sterke bacteriebestrijdingswerking vertonen, en voor behandeling van bacterie-infecties geschikt zijn.' Voorts ver-25 schaft de uitvinding een werkwijze voor het bereiden daarvan, die op een doeltreffende en gemakkelijke wijze kan worden uitgevoerd, en voor vervaardiging op industriële schaal geschikt is.

De uitvinding verschaft nieuwe 1-oxadethiacefalosporine-derivaten met de volgende algemene formule;

Y

NEL 7 I 2 ' /0 s.

CH-(CH2)xS(CH2)y-C0MH-^ > (I) C00H o^nVv^-ch2r 8 0 0 5 9 9 2 nnnw t - 2 - waarin R een heterocyclische groep of een -S-Het is, waarin '’Het1' een heterocyclische groep voorstelt, terwijl Y een waterstofatoQo of een methoxygroep^QCH^ is, en x en y een geheel getal 1, 2 of 3 voorstellen, terwijl voorts tevens farmaceutisch aanvaardbare zouten en 3 esters van deze verbinding worden beoogd.

Verder verschaft de uitvinding een werkwijze voor het bereiden van een dergelijk derivaat met de algemene formule (I]), die de volgende stappen omvat; (a) het condenseren van een 1-oxacefemverbinding met de formule;

Y

: .o Z-(CH2) conh ——f > 10 y (II)

0? N

C00R' waarin R, Y en y dezelfde betekenis als boven hebben, R' . waterstof of een carboxyl-beschermingsgroep, en in het bijzonder een es-tervormende groep, en Z een groep m?t een halogeen, in het bijzonder broom, chloor of jood, voorstellen, samen met een zwavel bevattend 15 aminozuur met de formule;

NHL

i 2 ch-(ch2)x-sh (III)

C00H

waarin x weer 1, 2 of 3 voorstelt, of met een aan gelijkwaardig derivaat van dit aminozuur, en dit in een oplosmiddel, teneinde een con-densatieprodukt met de volgende formule te verkrijgen:

V

m2 Y n 1 2 ! v

20 C00H <T 2R

C00R' waarin R, R', Y, x en y weer dezelfde betekenis hebben; en (b) het zonodig verwijderen van de overblijvende beschermingsgroep O Λ n R O 0 o i « - 3 - uit het condensatieprodukt (I1) op een bekende wijze, wanneer een dergelijke groep aanwezig is·

Het 1-oxadethiacefalosporinederivaat met de formule (1) kan ook de. vorm hebben van een farmaceutisch bruikbaar zout van een 5 alkalimetaal zoals natrium of kalium, of met een basisch aminozuur zoals L-lysine, of met een farmaceutisch aanvaardbare organische base zoals triethylamine of cyclohexylamine. Verder kan het. derivaat met de formule (1) de vorm van een farmaceutisch aanvaardbare ester daarvan (zoals een carboxylaat) met een farmaceutisch aanvaardbare 10 alkohol hebben. Deze ester kan een alkylester met 1..6 C-atomen zijn, zoals methyl-, ethyl-, propyl- of t-butylester, dan wel een.alkyl-amino-alkylester zoals dimethylaminoethylester, een alkoxyalkylester zoals methoxymethyl-, ethoxymethyl- of ethoxyethylester, een acyloxy-alkylester zoals acetoxymethyl-, acetoxyethyl-, propionyloxymethyl-, 15 propionyloxyethyl-, pivaloyloxymethyl- of pivaloyloxyethylester, of een alkoxycarbonyloxyalkylester zoals methoxycarbonyloxymethyl-, methoxycarbonyloxyethyl-, ethoxycarbonyloxymethyl- of ethoxycarbonyl-oxyethylester en dergelijke. De ester is bij voorkeur een ftalidyl-, acetoxymethyl-, pivaloyloxymethyl-, acetoxyethyl-, propionyloxyethyl-, 20 indanyl-, fenyl-, dimethylfenyl-, methoxyfenyl-, methoxycarbonyloxyethyl-, ethoxycarbonylmethyl- of fenacylester. Voorts kan deze ester de vorm hebben van een mono-ester aan de 4-carboxylgroep van de 1-oxacefemkern of aan de eind-carboxylsubstituent aanwezig in het ami-nozuurgedeelte dat aan de 7-arainogroep van de 1-oxacefemkern is ge-25 hecht, of wel de vorm van de di-ester aan deze twee carboxylgroepen.

Het aminozuurgedeelte, dat aan de 7-,aniinogroep van de 1- oxacefemkern in de verbinding met de formule (I) is gehecht, kan de vorm hebben van een D-stereo-isomeer of L-stereo-isomeer voor wat het kader van de uitvinding betreft. De D-vorm heeft meestal een sterkere 50 bacteriebestrijdingswerking dan de L-vorm. De verbinding met de for- v mule (I), waarin Y een methoxygroep -QCH^ is, heeft een even sterke werking als een verbinding, waarin Y waterstof is, bij toepassing op gevoelige bacteriën. De eerstgenoemde verbinding is echter stabieler, en derhalve ook werkzamer, in het geval van (J-lactamase voortbrengen-35 de bacteriën.

In de verbinding met de formule (I) volgens de uitvinding draagt de 1-oxacefemkern de 3-substituent van -CH^B, waarin E een he- terocyclische groep of een S-heterocyclische ring, in het voorgaande # * % - if - vijf dan vel zee leden bestaande heterocyclische ring zijn met 1.Λ N-atomen als het hetero-atoom, waarbij verder een of meer substituent en zoals methyl-, ethyl-, carboxyl-, carbamoyl-, amino-, hydroxyl-, carboxymethyl-, eulfonylmethyl- of dimethylamino-ethylgroepen aanwe-5 zig kunnen zijn· Se heterocyclische ring kan verder één of twee zwa-velatomen als bijkomend hetero-atoom bevatten· Voorbeelden van de groep B zijn een pyridiniumrest met de formule:

O

of de 4-carbamoylpyriddniumrest met de formule:

10 -®/~y-coMZ

Geschikte voorbeelden van -S-Het zijn: 1- methyl-1H-tetrazool-5-yl net de formule:

n—:—N

Λ ¥ i.

CH3 2- carboxymethyl-1H-triazool-5-yl met de formule: v

N-N

II

,5 1 C-CH--C00H

A»/ 2

H

^-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1, 2,*i—triazine-3-yl met de formule : - 5 - γ0Η Α„Α ι ch3 8-gesubstitueerd of niet-gesubstitueerd tetrazool-(l,5-b)-pyridazine-6-yl met de formule:

Q

I II .

n 5 waarin Q een waterstofatoom of een amino-, bydroxyl- of carboxyl-groep is, 1-sulfonylmetbyl-1H-tetrazool-5-yl met de formule:

N -N

II

CH2-S0,H

1-sulfonyletbyl-1H-tetrazool-5-yl met de formule:

N -N

II

10

CH2CH2-S03H

t » 1-carboxymethyl-1H-tetrazool-5-yl met de formule: 8005992 - 6 -

N -N

I 11

An^

CH2-C00H

1-oethyl-2-carboxy-1H-triazool-5-yl met de formule; N -

N ^OOH

ch3 1-dimethylaminoethyl-1H-tetrazool-5-yl met de formule:

N-N

jl U

ch9ch«n< 5 2 2 ^ CH3

Voorkeursvoorbeelden van de 3-substituent -CH^B zijn (1-oethyl-1H-tetrazool-5-yl)-thiomethyl, (1-carboxylmethyl-1H-tetrazool- 5-yl)-thiomethyl, (2-carboxymethyl-1H-tetrazool-5-yl)-thio»ethylt C 4-me thyl-5-oxo-6-hy droxy-4·, 5-dihydro-1,2, Jf-triazine-3-yl) -1 hiomethyl, 10 (8-amino-tetrazool-(1,5-b)-pyridazine-6-yl)-thiomethyl, (pyridinium)-methyl, (4-carbamoyl-pyridinium)-methyl, en (1-dimethylaminoethyl- v 1H-tetrazool-5-yl)-thiomethyl.

Als een voorkeursvorm verschaft de uitvinding een derivaat met de volgende formule:

?% T

I · n CH-CHp-S-CHp-CONH--f A (IM) ” u TJ 1^.

8005992 0 y - 7 - waarin RM een (1-methyl-1H-tetrazool-5-yl)-thio-, een (1-carboxyl-methyl-1H-tetrazool-5-yl) j-thio-, een (2-carboxymethyl-1H-tetrazool- 5-yl)-thio-, een (4-methyl-5-o2CQ-6“hydroxy-*f ,5-dihydro-.1 ,2,^-tria-zine-3-yl)-thio-,-een (8-amino-tetrazool-(1,5-b)-pyridazine-6-yl)-5 thio-, een pyridinium-, een 4-carbamoyl-pyridinium-, of een (1-di-methylaminoethyl-1H-tetrazool-5-yl)-thiogroep is, en Y een waterstofatoom of een methoxygroep voorstelt, terwijl ook een farmaceutisch geschikt zout of ester daarvan kan worden gebruikt·

Ren ander voorbeeld is een derivaat met de volgende for- 10 mulei NEL . * I2 : ch-ch2-s-ch2-conh--r > (I"' )

“OH

C00H .

waarin EH' een (1-methyl-1H-tetrazool-5-yl)-thiogroep of een 4-car-bamoylpyridiniumrest, en Y een waterstofatoom of een methoxygroep is, terwijl ook een farmaceutisch aanvaardbaar zout of ester daar-15 van kan worden gebruikt·

Als bijzondere voorbeelden van de verbinding met de algemene formule (l) kunnen de volgende worden genoemd: (1) 76 - [ (2D-2-amino-2-carboxy) ethylthioacetoamido}-7cx - me-thoxy-3-[C 1-methyl-1H-tetrazool-5-yl) thiomethyl] -1-oxadethia-3- 20 cefem-4-carbonzuur; (2) 70 — C (3D“3“eniao-3-carboxy)propylthioacetoamidoi -7oc- me- thoxy-3-[(1-methyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethyll-1-oxadethia-3-ce-fem-A-carbonzuur; (3) 76 - [ (2D-2-amino-2-carboxy) ethylthiopropioamidol-7oc - me-25 thoxy-3-£(1-methyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethyl] -1-oxadethia-3- cefem-A-carbonzuurj d) 7ö - C (2D-2-emino-2-carboxy)ethylthioacetoamido!.-3- [(1- methyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethylJ-ï1-oxadethia-3-cefem-4-carbon-€0 zuur*, ^ 30 (5) 76 - [ (2D-2 -amino-2-carboxy) ethylthioacetoamidoD -3“üd- <j\ carbamoylpyridinium)methyl]-1-oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur; ® (6) 7β -1(2D-2-amino-2-carboxy)ethylthioacetoamido^-7a-me- - δ - carbonzuur; (7) 7β- COD-3-affliao-3-carboxy)propyltbioacetoamidoj -7α- me- thoxy-3-[(4-carbamoylpyri dinium)methyl]-1-oxadetbia-3-cefea-4-carbonzuur; 5 C8) 7^-1 (2D- 2-amino-2-carboxy)ethyltbiopropioamido] -7« - aetboxy-3-f(4-carbamoylpyridinium)metbyiQ -1-oxadetbia-3-cefem-4-carbonzuur; (9) 7β-L (2D-2-amino-2-carboxy)ethyltbioacetoamido]-7« -metboxy-3- [(^-metbyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dibydro-1,2t4-triazine-3- 10 yl) tbiomethyl| -1-oxadetbia-3-cefem-4-carbonzuur; (10) 70 - [ (2D-2-amino-2-carboxy)etbylthioacetoamido] -7«*-aetboxy-3- [(8-amino-tetrazool-(1,5-b)-pyridazine-6-yl)tbioaethylJ-1-oxadetbia-3-cefea-4-carbonzuur; (11) 7β- C(2D-2-amino-2-carboxy)etbyltbioacetoamid«^ -7«- 15 metboxy-3-[(1-dimethylaainoetbyl-1H-tetrazool-5-yl)tbiometbyl]-1-oxadethia-3-cef em-Jf- carbonzuur; (12) 1-acetoxyethyl-70- f(2D-2-amino-2-etboxycarboxy)-etbyl-thioacetoamidoj-7«- methoxy-3-((1-methyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethyl] -1-oxadethia-3-cefem-4-carboxylaat; 20 (13) 1-acetoxyetbyl-7P-(,(2D-2-amino-2-carboxy)ethylthioaceto-amido] -7cc- aetboxy-3-£( 1-aetbyl-1H-tetrazool-5-yl)-tbiometbyl] -1-oxadetbia-3-cefem-4-carboxylaat; (1½) 1-etboxyethy1-70- C(2D-2-amino-2-ethoxycarboxy)ethylthio- acetoamido} -7«- methoxy-3-[( 1-aethyl-1H-tetrazodL-5-yl)thiomethylJ -1-25 oxadethia-3-cefem-^-carboxylaat; (15) 70 - f(2D-2-amino-2-ethoxycarboxy)ethylthioacetoamido}-7« -aethoxy-3-C(1-aethyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethyl] -1-oxadethia-3-cefem-^-carbonzuur; (16) 1-etboxyetbyl-70-£ (2D-2-amino-2-ethoxycarboxy)ethylthio-30 acetoamido] -7«- oethoxy-3-[(i^-methyl-5-oxo-6-hydroxy-J^15-dihydro- 1,21 ^-triazine^-yl) tbiometbyl] -1-oxadethia-3-cefβα-4-carboxylaat, en (17) 1-acetoxyethyl-78-C (2D-2-aaino-2-ethoxycarboxy)-ethylthio-acetoamido] -7<x- methoxy-3- [(1-dimethylaminoethyl-1H-tetrazool-5-yl)-tbioaetbyl] -1-oxadethia-3-cefem-4-carboxylaat.

35 De verbinding met de formule (l) volgens de uitvinding beeft een sterke bacteriebestrijdingswerking in vitro. Tabel A toont de kleinste werkzame concentraties van de verbindingen, die op de wijze van de voorbeelden I..III werden bereid.

8 0 05 09 2 - 9 -

Tabel A

kleinste werkzame concentratie in vitro (ug/ml)

Escherichia -Escherichia

Proefverbinding coli Mo» 29 coli GN

5 Voorbeeld 1 0*39 0,39

Voorbeeld 2 0,39 3*13

Voorbeeld 3 0*78 0,78

Het werkingsspectrum van de verbinding volgens voorbeeld 1« d.w.z. 7& -[(2D-2-amino-2-carboxy)ethylthioacetoaoido) -7«- methoxy-10 3- [(1-methyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethyl] -1-oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur of het mono-natriumzout daarvan, werd bepaald, waarvan de uitkomsten in de onderstaande tabel B zijn opgegeven. De kleinste werkzame concentraties voor het onderdrukken van de groei van verschillende bacteriën werden bepaald door een plaatcultuur van het 13 onderzochte mikro-organisme in een in de handel verkrijgbaar tripti-case-soja-vocht voor te kweken bij 37 °C gedurende een nacht, waarna het vocht tot de 100-voudige inhoud werd verdund met hetzelfde doch niet geënte vocht, waarbij met dit aldus verkregen entvocht een voe-dingsagar werd geënt, teneinde de kleinste werkzame concentraties te 20 bepalen, waarna bij 37 °C gedurende 20 h werd gekweekt. Voor vergeld jkingsdoeleinden werd ook het spectrum van 7Ö- (ee-p-hydroxyfenyl-cc - carboxyacetoamido)-7« -methoxy-3-[(1-methyl-1H-tetrazool-5-yl) thiomethyl] -l-oxadethia-3-cefea-^-carbonzuur in de vorm van het di-natriumzout volgens US 4 138 A-86 (afgekort als ,,6059-S-verbiading,‘) 25 en van 7Ö- Ï(2D-2-amino-2-carboxy)ethylthioacetoamido3-7«-nethoxy- 3-[.(l-methyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethyl} -3-cefem-4-carbonzuur in de vorm van het mono-natriumzout volgens BE 880 656 (afgekort als ”MT-1*H-verbinding”) op dezelfde wijze bepaald. De uitkomsten zijn in de onderstaande tabel B vermeld.

80 059 9 2 - 10 -

Tabel B

kleinste werkzame concentratie (ng/ml)

Verbinding van ·-- - 6059-S .MT-141

Proef organisme voorbeeld i

Sta. aureus 209P JC-1 '3,13 6,25 12,3 5 Sta. aureus Smith (i) 1,56 6,25 6,25 B. subtilis ATCC 6633 1,56 25 ’6,25 E. coli V 363Ο EGN 823 0,025 0*05 0,05 E. coli V 3630 EGN 23$ 0,39 0,20 0,78 E. coli HL 1410 0,39 0,10 0,78 10 Kleb. pneumoniae GN 69 0,78 0,39 1,56

Pro. mirabilis GN 79 0,20 0,39 0,39

Sal. typhimurium LT-2 0,39 0,20 0,78

Shigella dysenteriae Shigae 0,20 0,10 0,39

Pro. vulgaris GN 76 0,39 0,39 0,39 15 Pro. morganii 1510 0,78 0,39 0,78

Citro. freundii GN 346/16 0,?8 0,10 0,78

Ps. aeruginosa MB-3829 12,5 3,13 12,5

Pa. cepacia M-0527 3,13 6,25 6,25

De nieuwe verbindingen met de formule (1) volgens de uit-20 vinding zijn weinig giftig, zoals bleek uit het feit, dat alle de waarde van LD^q 7..8 g/kg bij intraveneuze injectie in muizen vertoonden. Deze verbindingen zijn derhalve geschikt voor therapeutische behandeling van infecties door verschillende gram-negatieve en gram-positieve bacteriën, met inbegrip van sterke bacteriestammen. De 25 nieuwe verbindingen volgens de uitvinding en de farmaceutisch aanvaardbare zouten en esters ervan kunnen op verschillende wijzen worden toegediend, zoals oraal, intraperitoneaal, intraveneus, subcutaan of intramusculair, waarbij elke farmaceutisch bekende vorm en 'de bij de bekende cefalosporinen gebruikelijke toedieningswijze kunnen vor-30 den gebruikt. Zo kunnen deze verbindingen bijvoorbeeld oraal worden toegediend in een voor deze toedieningswijze geschikte vorm, zoals poeders, capsules, tabletten, stroop of dergelijke. Ook kan toediening door intramusculaire, intraveneuze of subcutane injectie of druppelinfusie worden toegepast, en wel met een dosering van 0,5*.

35 2,0 g per persoon, en dit twee tot driemaal per dag. Een geschikte dosis voor een doeltreffende behandeling van een bacterie-infectie is ΕΘΓΒΟΟη Per dag bij orale toediening. Bij voorkeur ge- - 11 - schiedt de toediening dan in drie of vier porties per dag. Ook kannen deze stoffen in zetpilvorm worden toegediend, waarbij dan de werkzame verbinding in een hoeveelheid van 0,5..15 gew.# in de verder uit bekende stoffen bestaande zetpil aanwezig is. Ook kannen de-5 ze verbindingen worden gebruikt voor het steriliseren van heelkundige instrumenten.

De uitvinding verschaft een bacteriebestrijdingssamenstel-ling, die een voor bacteriebestrijding geschikte hoeveelheid van de nieuwe verbinding met de formule (I) of van een farmaceutisch aan-10 vaardbaar zout of ester daarvan als werkzaam bestanddeel bevat, samen met een farmaceutisch aanvaardbare drager voor dit bestanddeel. Daarbij kan het werkzame bestanddeel in een. hoeveelheid van 0,1«.90$ van het geheel aanwezig zijn.

De uitvinding verschaft voorts een werkwijze voor het on-15 herdrukken van bacteriegroei, omvattende het toedienen van een werkzame en veilige hoeveelheid van een nieuwe verbinding volgens de uitvinding met de formule (I) aan een dier of mens die de bacteriegroei kan bevorderen. Ook kan de bacteriegroei in vitro worden onderdrukt, waarbij dan een voor bacteriegroei geschikt oppervlak in aan-20 raking wordt gebracht met een doeltreffende hoeveelheid van een verbinding volgens de uitvinding.

De nieuwe verbinding volgens de uitvinding met de formule (I) vertoont een zeer sterke bacteriebestrijdingswerking in vivo en een groot medisch effekt bij chemotherapeutische behandeling van die-25 ren en mensen, die met bacteriën zijn besmet. Om dit aan te tonen werd een muizenproef uitgevoerd door een entvloeistof met Escherichia coli No. 29 (als een waterige suspensie met 2,5 $> mucine) intraperi-toneaal in muizengroepen in te enten, waarbij elke groep bestond uit vijf mannelijke muizen van ICR-stam, 4 weken oud, en met een gemid- 7 30 delde massa van 20 g, en dit. met een dosis van 2,0.10 cellen per muis. 30 min na de enting werden de muizen ieder behandeld met een onderhuidse injectie van 0,2 ml van een oplossing van de proefvloeistof in een fysiologische zoutoplossing. Op deze wijze werd de ED^q-waarde van de proefverbindingen bepaald. Cefoxitine en de verbinding 35 6059-S (als di-Na-zout) werden op dezelfde wijze onderzocht voor ver-gelijkingsdoeleinden. De proefuitkomsten zijn in de onderstaande tabel C weergegeven.

- 12 -

Tabel C

Proefverbindiagen E)g0 Ug/auia)

Voorbeeld 1 0,03

Voorbeeld 2 0,05 5 Cefoxitine (vergelijking) 0,30 6059-S (vergelijking) 0,16

Hieruit volgt, dat de nieuwe verbindingen volgens de uitvinding een beter genezingseffekt hebben dan cefoxitine en 6039-3, die als bruikbare bacteriebestrijdingsaiddelen bij chemotherapeu-10 tische behandeling van verschillende bacterie-infecties bekend staan· De nieuwe verbinding met de voornoemde formule (I) kan langs verschillende wegen worden bereid, waarbij in beginsel wordt uitgegaan van een 7-amiuo-l-oxadethia-cefemverbinding net de formule: H2lT--< w 1 dv) COOR2 13 waarin ï een waterstofatoom of een methoxygroep, B een heterocy- 2 clische groep of een S-Het-groep, en B een waterstofatoom of een bekende carboxylbeschermingsgroep is. De bereiding van de uitgangsver-binding (IV) kan op bekende wijze geschieden, bijvoorbeeld zoals beschreven in Can· J· Chem. £0 (1972) 289^, J. Am. Chem. Soc. 96 20 (1977) 7582, J· Med. Chem. 20 (1977) 551» J. Med. Chem- 22 (1979) 757» en J. Am. Chem. Soc. 101 (1979) H03·

Bij deze bereiding kan gebruik worden gemaakt vein een werkwijze, die het verwarmen van een verbinding met de volgende formule omvat:

T

3 ; X OCI^COCi^-R1 R I (V) J—ül

Cr XC « -P(Ar), 8005992 1 2 COOn - 13 - 1 2 waarin Y, R en R dezelfde betekenis hebben als in de formule (IV), terwijl B? een acylaminogroep, en Ir een arylgroep zoals fenyl voorstellen, hetgeen plaatsvindt in een inert organisch oplosmiddel zoals een aromatische koolwaterstof, een halogeen bevattende koolwater-

Q

5 stof of dioxan, bij een temperatuur van 70·«150 C gedurende enxge h, teneinde de verbinding (V) cyclisch te maken, waarna het verkregen produkt met fosforpentachloride en een organische base zoals pyridine en Ν,Ν-dimethylaniline wordt behandeld bij een temperatuur van -20..kö °C om de 7-acylaminogroep (S^) bij voorkeur in de vrije 7” 10 aminogroep om te vormen. De uitgangsverbinding volgens de formule (V) kan op verschillende bekende wijzen worden bereid, bijvoorbeeld zoals beschreven in US 4ΐ8θ571·

Om de verbinding volgens de uitvinding met de formule (I) te bereiden, is het bijvoorbeeld mogelijk een eerste weg te volgen, 15 waarin de 7-amiao-1-oxadethiacefemverbiading met de formule (IV) in reactie wordt gebracht met een halogeenalkaancarbolzuur of een reactief derivaat daarvan met de formule: 2-(CH2)yC0X (VI) waarin Z een halogeen atoom, in het bijzonder broom of chloor, is, 20 terwijl X -OH of een broom of chloor bevattende groep of andere re-actieve groep is, die functioneel gelijkwaardig is aan het radikaal -OH van de carboxylgroep, terwijl y gelijk is aan 1, 2 of 3i hetgeen leidt tot het condensatieprodukt met de volgende formule:

Y

’ / Z(CHc) -COÏÏH--f 1 2 7 (II') GOOR2 1 2 25 waarin R , R , Y, Z en y de in het voorgaande genoemde betekenis hebben, welk produkt dan in reactie wordt gebracht met een aminozuurver-binding met de volgende formule: m0 I 2 ch-(ci2)x-se (XII) 8 0 05 9 9 2 oooh - 1½ - 2 wijderen van de beschermingsgroep R , xndien deze aanwezig ie.

Ook kan een tweede weg worden gevolgd, waarin de 7-amino- 1-oxadethiacefemverbinding met de formule (IV) in reactie wordt gebracht met een verbinding met de volgende formule:

HH B

5 OH-tCH^StCH^yCOX · (VI!)

aooA

waarin X -OH of een broom of chloor bevattende groep of een andere reactieve groep voorstelt, die functioneel gelijkwaardig is aan de -0Ξ uit de carboxylgroep, terwijl x en y weer 1, 2 of 3 kunnen zijn, A een bekende carboxyl-beschermingsgroep, en B een bekende aaino-10 beschermingsgroep is, waarna de resten van A en B uit het verkregen condensatieprodukt worden verwijderd.

De voornoemde stoffen (VI) en iTII) , die in de voornoemde bereidingswijzen worden gebruikt, kunnen de vorm hebben van een actief derivaat van een carbonzuur, zoals een zuur halogenide, een gemengd 13 zuuranhydride, een succinyliminoderivaat of een p-nitrofenylester.

In het geval van de stof (VII) kan de groep B t-butoxycarbonyl-, tri-chloorethoxycarbonyl-, en al dan niet gesubstitueerde benzyloxycar-bonylgroepen bevatten. De groep A kan difenylmethyl-, trichloorethyl-, al dan niet gesubstitueerde benzyl- en t-butylgroepen bevatten. Deze 20 groepen kunnen op de gangbare wijzen worden ingevoerd en verwijderd. Het halogeen atoom 2 in de formules (Il')en(VI) kan chloor, broom of jood zijn, doch chloor en broom verdienen de voorkeur.

In de beide gevallen kan de reactie tussen de 7~amino-1-oxadethiacefemverbinding met de formule (IV) aan de verbindingen met 23 de formule (VI) resp. (VII) in een inert organisch oplosmiddel onder zodanige reactie-omstandigheden plaatsvinden, dat de amidoverbinr dingen worden gevormd, die bij de gangbare synthese van peptiden bekend zijn. Het oplosmiddel kan bijvoorbeeld dichloormethaan, chloroform, ethylacetaat, dimethylformamide of dergelijke zijn. Wanneer de 30 stoffen met de formule (VI) of (VII) worden gebruikt in de vorm van een zuur halogenide als een van.de.reactieve zuurderivaten, zal de reactie met de verbinding met de formule (IV) kunnen worden uitgevoerd bij een temperatuur tussen de omgevingstemperatuur en een temperatuur beneden 0 °C in tegenwoordigheid van een zuur binder, bijvoor-33 beeld een bekend trimethylsilylatiemiddel of een organische base, ft η ης o o 9 - 15 - bijvoorbeeld een tertiair amine zoals trialkylamine, pyridine, di-methylaniline en dergelijke. Vanneer daarentegen de stoffen met de formule (VI) of (Vil) worden gebruikt in de vorm van een vrij carbon-zuur, kan de reactie.volgens een bekende actieve esterwerkwijze wor-5 den uitgevoerd in tegenwoordigheid van een ontwateringsmiddel zoals Ν,Ν-dicyclohexylcarbodiimide. De voor de reactie vereiste tijd kan verschillen afhankelijk van de reactiviteit van het gebruikte car-bonzuurderivaat met de formule (VI) of (Vil), en zal in de regel ongeveer 1..5 h bedragen.

10 Bij de voornoemde eerste weg voor het bereiden van een ver binding met de formule (1)* wordt de reactie tussen de 7-amiaoverbinding met de formule (IV) en het halogeenalkaancarbonzuur met de formule (VI) gevolgd door een reactie van het verkregen condensatie-produkt met de formule (II·) met de aminozuurverbinding met de for- 15 mule (III)· Deze laatste reactie kan bij kamertemperatuur of bij lagere temperatuur in een inert oplosmiddel plaatsvinden, bij voorkeur in tegenwoordigheid van een alkalimetaal- (of waterstof-) carbonaat, een trialkylamine, pyridine of dergelijke als zuurbinder. Deze reactie zal gewoonlijk binnen 1..5 h verlopen, hoewel in het algemeen 20 de vereistereactieduur kan veranderen, afhankelijk van de reactiviteit van de halogeengroep (Z) in de verbinding (II*), de aard .van de zuurbinder en het gebruikte oplosmiddel.

De uitvinding heeft nu in het bijzonder betrekking op het laatste gedeelte van de voornoemde eerste weg.

25 Bij het uitvoeren van de werkwijze volgens de uitvinding, wordt de 1-oxacefemverbinding met de formule (II) in reactie gebracht met een althans nagenoeg equimolaire hoeveelheid van het zwavel bevattende aminozuur met de formule (III) in een vloeibaar midden, zoals bijvoorbeeld water, een waterig alkanol zoals methanol, waarin v 30 de reactie met bestanddelen kunnen worden opgelost of gesuspendeerd. De reactietemperatuur kan 0..30 C bedragen, doch is bij voorkeur de omgevingstemperatuur. Daar halogeenwaterstof tijdens de condensatie vrij komt, verdient het de vo.orkeur de condensatie in tegenwoordigheid van een zuurbinder zoals een anorganische of organische base uit CD 35 te voeren.

0 D-cysteine is een voorkeursvoorbeeld van het aminozuur met de formule .(III).

<0 Dit.aminozuur kan desgewenst de vorm hebben van een functi- <0 __*ί 4 -ί_____.. j j -·____i. v.· j - 16 - aan de eindthiolgroep daarvan·

Wanneer de 1-oxacefemverbinding met de formule (II) wordt gebruikt in de vorm van het carboxyl-beschermingsderivaat, waarin de groep E’ een bekende beschermingsgroep zoals een estervormende groep, 5 bijvoorbeeld een alkyl- of arylgroep, is, kan het condensatieprodukt met de formule (I') zonodig of desgewenst worden onderworpen aan een bewerking voor het verwijderen van de beschermingsgroep E*', hetgeen op de bekende wijze kan plaatsvinden. Wanneer de groep R’ een alkyl-of arylgroep is, kan het verwijderen ervan op bekende wijze door 10 zure of basische hydrolyse plaatsvinden. Wanneer de groep E' een farmaceutisch aanvaardbare groep is, is het niet nodig deze uit het condensatieprodukt met de formule (I1) te verwijderen.

Wanneer het condensatieprodukt met de formule (I) of (l‘) wordt verkregen in de vorm van een vrij carbonzuur of een ester daar-15 van, kan deze verder in een farmaceutisch aanvaardbaar zout worden omgezet door een reactie met een farmaceutisch aanvaardbare base, bijvoorbeeld een alkalimetaalcarbonaat of -hydroxide, zoals dit bij het vormen van c&rbonzuurzouten bekend is.

Het gewenste produkt met de formule (1), dat op de voor-20 noemde wijze is verkregen, hetzij in de vorm van een vrij carbonzuur of in de vorm van een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan, kan op gebruikelijke wijze uit het reactiemengsel worden afgescheiden. Dit mengsel kan bijvoorbeeld met water worden verdund, en dan met een ad-sorptiehars of actieve kool worden behandeld om het gewenste produkt 25 te adsorberen, waarna het met water of een waterig organisch oplosmiddel zoals ethanol kan worden uitgewassen, waarbij dan een gezuiverd produkt kan worden afgescheiden. Zonodig kan een verdere afscheiding en zuivering worden verkregen door middel van kolomchromatogra-fie of een gelfilter, zoals sephadex LH-20 of G-10 (van Pharmacia Co·, 30 Zweden), of met behulp van een mikroporeuze niet-ionische adsorptie-hars zoals een styreen-divinylbenzeen-copolymeer, bijvoorbeeld Diaion HP-20 (van Mitsubishi Kasei Co., Japan).

De uitvinding zal nu aan de hand van enige niet beperkende voorbeelden nader worden toegelicht.

^ 35 Voorbeeld 1 q (a) 7P-amino-7a-methoxy-3-f(l-methyl-1H-tetrazool-5-yl)thio- methyl}-1-oxadethia-3.-cefem-4-carbonzuur-benzylester (150 mg) werd opgelost in een mengsel van ethylacetaat (7 ml) en bis(trimethyl-silyl) -acetoamide (370 mg). Aan deze oplssing werd een oplossing van broom- - 17 - acetylbromide (120 mg) in ethylacetaat (2 ml) toegevoegd, waarna het geheel bij -20.°C gedurende 1 h, en daarna bij Q..5 °C gedurende 1 h werd geroerd. Ethylacetaat (10 ml) werd aan de aldus verkregen re-actie-oplossing toegevoegd, ..waarna het mengsel werd gewassen met een 5 5 #*s chloorwaterstofoplossing (10 ml), met water (10 ml), met een 5 #’s natriumhydrocarbonaatoplossing (10 ml), en tenslotte met water (10-ml). De ethylacetaatfase werd van-de waterige fase afgescheiden, en vervolgens op watervrij magnesiumsulfaat gedroogd, waarna volledig werd nagedroogd onder lagere druk, waarbij 220 mg van een olie-10 achtig produkt werd verkregen.

Dit produkt werd in droog methyleenchloride (10 ml) opgelost, en vervolgens met anisool (bbO mg) en een oplossing van alu-miniumtrichloride (266 mg) in nitromethaan (4 al) onder roeren en af-koelen met ijs gemengd. Dit geschiedde gedurende 15 min, waarna het 15 roeren bij omgevingstemperatuur gedurende 1,5 h werd voortgezet. De reactie-oplossing werd na toevoeging van 60 al ethylacetaat tweemaal gewassen met een 2 %'s ehloorwateratofzuuroplossing, en daarna tweemaal geëxtraheerd met een 5 #‘s natriumhydrocarbonaatoplossing. Na toevoeging van ethylacetaat (40 ml) werd de pH van het extract op 1 ^ 20 gebracht door toevoeging van een 5 %'a ehloorwaterstofzuuroplossing.

De ethylacetaatfase werd van de waterige fase afgescheiden, waarna de waterige fase verder werd geëxtraheerd met 50 ml ethylacetaat. De extracten (oplossingen in ethylacetaat) werden vervolgens samengevoegd, op watervrij magnesiumsulfaat gedroogd, en vervolgens nog vol-25 ledig nagedroogd, hetgeen bQ. mg·70-(2-broomacetoamido)-7cc-methoxy- 3-[(1-methyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethylj -1-oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur opleverde.

(b) bO mg van het voornoemde produkt werd in water (10 ml) ge suspendeerd, waarna de pH op 7 werd gebracht door toevoeging vaneen 30 natriumhydrocarbonaatoplossing, zodat de cefemverbinding in water werd opgelost* Vervolgens werd D-cysteine (20 mg) aan deze oplossing toegevoegd, waarna een reactie-bij kamertemperatuur gedurende 1,5 h tot stand werd gebracht, terwijl de pïï op 7·»7»5 werd gehouden. Nadat de reactie was voltooid,werd de oplossing op een pïï van 5»5·*6,5 ia-O 55 gesteld door toevoeging van ehloorwaterstofzuur, waarna de oplossing O werd geconcentreerd. De geconcentreerde oplossing werd door een kolom ^ van b0 ml adsorptiehars (Diaion HP-20) gevoerd, die daarna met water ¢0 werd uitgewassen. Delen van de wasvloeistof, die de gewenste verbin- - 18 - vervolgens door vriezen gedroogd, hetgeen 45 ag van het natriuazout van 7/3-L (2D-2-amino-2-carboxy)ethylthioacetoamido3- 7«“ oethoxy- 3-[(1-methyl-1H-te trazool-5-yl) thiomethyll -1-oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur als een kleurloos poeder werd verkregen· De smelttempera-5 tuur bedroeg 129·*135 °C, waarbij ontleding optrad. Bij dunnelaag-chrooatografie in een silieagel (ontwikkeld aet n-butanol/azijnzuur/ water 2;1s1) bedroeg de Bf van dit produkt 0,35·

Elementanalyse^

Berekend voor (561,53)* 10 C : 34,22, Η ί 4,31, N i 17,1*6 %

Gevonden: C ί 33*91, H : 4,41, N : 16,96 %

Paramagnetische resonantie (80 Hz) (in D^O): 6 3,36 s(2H), 3,41 a(3H), 3,93 s(3H), 4,05 q(2H), 4,46 s(2H), 5,05 s(1H).

15 Voorbeeld 2

De bewerking volgens voorbeeld 1 werd herhaald, waarbij 150 mg van 76-amino-3-[(l-methyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethyll-1-oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur-benzylester werd gebruikt· Daarbij werd 50 ag van het natriumzout van 76-C(2D-2-amino-2-carboxy)ethyl-20 thioacetoamido] -3-L(1-methyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethylj -1-oxa-dethia-3-cefea-4-carbonzuur verkregen. De smeltteunperatuur ervan bedroeg 133··136 °C (ontleding). Bij dunnelaag-chromatografie in sili-cagel bedroeg Rf ervan 0,39*

Voorbeeld 3 25 De bewerking volgens voorbeeld 1 werd herhaald, waarbij 300 mg van de benzyleater van 7$*-amino-7ci- methoxy-3- [(4-carbamoyl-pyridinium)methyl]-1-oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur werd gebruikt. Daarbij werd 65 mg van 7p-[(2D-2-amino-2-carboxy)ethylthioacetoamido] -7«- methoxy-3- C(4-carbamoylpyridinium)methyl] -1-oxadethia-3-ce£em-30 4-carbonzuur verkregen. De smelttemperatuur ervan bedroeg 115».120 °C (ontleding)· Bij dunnelaag.-chromatografie bedroeg de Rf ervan 0,21.

qq Berekend voor C^H^N^OgS.H^ (528,53): ° 6 : 45,45, H 4,96, N : 13;25 % S 35 Gevonden? C ; 45,42, H; 5,05, N ? 13,15 % <0

Voorbeeld 4.

<0 - (a) 150 mg benzhydrylester van 7P"amia°“7<* “ methoxy-3-[(1- Λ - 19 - methyl-lH-tetrazool-5-yl)thiomethyl3-1-oxadethia-3-cefem-4-carbon-zuur werd opgelost in 3 ml dichloormethaan. Aan de verkregen oplossing werd dimethylaniline (0,042 ml) en broomacetylbromide (70 mg) bij -10' C toegevoegd, waarna het mengsel bij -10 C gedurende 1,5 h 5 werd geroerd. De reactie-oplossing werd met een chloorwaterstofzuur-oplossing met pH 2, vervolgens met 5 #‘s natriumcarbonaat, en tenslotte met water gewassen, daarna op watervrij natriumsulïaat gedroogd, en tenslotte onder verlaagde druk geheel gedroogd, hetgeen 190 mg van de benzhydrylester van 7A-(2-broomacetoamido(-7cc- methoxy-10 3“r(l**®ethyl-1H-tetrazool-5-yl)thiOffiethyl] -1-oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur als een hygroskopisch poeder opleverde·

Dit poeder werd opgelost in anisool (0,5 ml),waarna tri-fluorazijnzuur (1 ml) bij -10 °G werd toegevoegd, waarna gedurende 1 h bij deze temperatuur werd geroerd om de benzhydrylgroep te ver-15 wijderen. De reactie-oplossing werd bij verlaagde druk en beneden 30 °C volledig gedroogd. De aldus verkregen rest werd opgelost in ethylacetaat (20 ml), met water gewassen, en vervolgens met een na-triumhydrocarbonaatoplossing met een pH van 8 (20 ml) geëxtraheerd.

Het extract werd op een pH van 1,0 gebracht met 5N-chloorwaterstof-20 zuur, en vervolgens met twee delen van 20 ml ethylacetaat geëxtraheerd. De ethylacetaatfasen werden weer samengevoegd, met water gewassen, op watervrij magnesiumsulfaat gedroogd, en vervolgens onder verlaagde druk geheel gedroogd, waarbij 98 mg van 7$-(2-broomaceto-amido)-7cc- methoxy-3- [(1-methyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethylJ -1-25 oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur werd verkregen.

(b) Dit produkt werd in 5 ml water gesuspendeerd, waarna de pH

van de suspensie op 7*0 werd gebracht met 5 %'e natriumhydrocarbonaat om de cefemverbinding op te lossen. Daarna werd D-cysteine (45 mg) toegevoegd, en werd~het mengsel bij 5**10 °C gedurende 1 h geroerd, 30 terwijl de pH van het mengsel op 6,8..7,0 werd gehouden door toevoeging van natriumhydrocarbonaat. De pH van de oplossing werd op 5i0 gebracht met 5N-chloorwaterst.ofzuur* De reactie-oplossing werd vervolgens geconcentreerd tot ongeveer 2.ml. Daarna werd de oplossing

in een kolom van 50 ml van een adsorptiehars (Amberlite XAD-2) ge-OO

_ 35 plaatst, welke kolom daarna met water werd ontwikkeld. De wasvloei- O stof, die het gewenste produkt bevatte, werd verzameld, .onder ver- ^ laagde druk geconcentreerd, en vervolgens door bevriezen gedroogd,

CO

udoï»V»i 1 97 me» rravt Vïö4· yiq+t*·? «τηΐ7Λΐι+ van *7ft* Γι ηΛβΡβ/ίΛτΟιηγν 1 -20- thiomethyl]-1-oxadethia-3-cefem-*H-carbonzuur ale een kleurloos poeder met een smeltpunt van 129·*135 °0 (ontleding) werd verkregen.

Voorbeeld 5 7β-(2-broomacetoamido)~7« - methoxy-3-ί(1-dimethyl-amino~ 5 ethyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethyl] -1-oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur (100 mg) verd in water (4 ml) gesuspendeerd, waarna de pH van de suspensie op 6,8 werd gebracht door het toevoegen van 10 %*a hatrium-hydrocarbonaat, teneinde de cefemverbinding in water op te lossen·

Aan de oplossing werd D-cysteine-hydrochloride (30 mg) toegevoegd, 10 waarna het geheel gedurende 2 h bij 0··3 °C werd geroerd, terwijl de pH op 6,8'«7fO werd gehouden· Daarna werd de pH van de oplossing op 6 gebracht door toevoeging van 3N-chloorwaterstofzuur, en werd deze oplossing tot ongeveer 3 ml geconcentreerd. Het concentraat werd door een kolom van 60 ml mikroporeuze niet-ionische adsorptiehars 13 (Diaion HP-20) gevoerd, die vervolgens met water werd gewassen. De wasvloeistof werd opgevangen, onder verlaagde druk geconcentreerd, en door bevriezing gedroogd, hetgeen 98 mg van een kleurloos poeder van 7£-f (2D-2-amino-2-carboxy)ethylthioacetoamidoJ -7cs-methoxy-3-t(1-demithylaminoethyl-1H-tetrazool-3-yl)thiomethyl]-1-oxadethia-3-20 cefem-^-carbonzuur opleverde. De Ef bij dunnelaag-chromatografie bedroeg 0,32.

Voorbeeld 6 70-(2-broomacetoamido)-7cx- methoxy-3-[(1-methyl-1H-tetra-zool-5-yl)thiomethyl]-1-oxadethia-3-cefeo-A-carbonzuur. (50 mg) werd 25 ia water (5 ml) gesuspendeerd, waarna de pH op 7*0 werd gebracht door toevoeging van een 5 #’s natriumhydrocarbonaat, teneinde de cefem-oplossing in water op te lossen. Aan de oplossing werd D-cysteine-ethylester-hydrochloride (18 mg) toegevoegd, waarna de oplossing bij 5·«10 °C gedurende 3 h werd geroerd, terwijl de pH op 6,8..7,0 werd 30 gehouden. Vervolgens werd de pH op 6 gebracht door toevoeging van 5N-chloorwaterstofzuur, en vervolgens door een kolom van 30 ml adsorptiehars (Diaion HP-20) gévoerd, die daarna met water en vervolgens met 30 #-s ethanol werd gewassen. De wasvloeistoffen werden ver-00 zameld, onder-verlaagde druk geconcentreerd, en door bevriezing ge-^ 35 droogd, hetgeen ^1 mg van een kleurloos poeder van 7Ö- [(2D-2-amino-ςχι 2-ethoxycarbonyl)ethylthioacetoamido] -7«- methoxy-3-£(1*methyl-1H- tetrazool-5-yl)thiomethyl] -1-oxadethia-3.-cefem-4-carbonzuur opleverde. Br dunnelaag-chromatografie in silicagel (ontwikkeld met aceton/ 'v *s - 21 - methanol 2:1) bedroeg Hf 0,57·

Voorbeeld 7 7(3- (2-broomacetoamido) -7<x - methoxy-3- [(^—methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1, 2,4-triazine-3-yl) thiomethylQ -1-oxadethia-3-3 cefem-^-carbonzuur (60 mg) werd in water (3 al) gesuspendeerd, waarna de pH van de suspensie-op 7 werd gebracht door toevoeging van 5 %'b natriumhydrocarbonaat, teneinde de cefemverbinding in water op te lossen. Aan de oplossing werd D-cysteine-hydrochloride (28 mg) toegevoegd, waarna gedurende 2 h werd geroerd, terwijl de pH op 10 6,8..7,0 werd gehouden. De reactievloeistof werd verder op de wijze van voorbeeld 3 behandeld, hetgeen 32 mg van een kleurloos poeder van natrium-7&-[(2D-2-amino-2-carboxy)ethylthioacetoamido’I-7a-methoxy-3-.I(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,3-dihydro-1,2,Jf-triazine-3-yl)thiomethylj -1-oxadethia-3-cefem-4-carboxylaat opleverde. Bij dunnelaag-chromato-15 grafie bedroeg Hf ervan 0,38 (ontwikkeld als in voorbeeld 1).

Voorbeeld 8 (a) 7!i**(2-broomacetoamido)-7os- methoxy-3- L(1~methyl-1H-tetra- zool-5-yl)thiomethyl]-1-oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur (100 mg) werd opgelost in N,N-dimethylformamide (1 ml), waarna aan de oplossing 20 0,03 ml triethylamine bij -25 °C werd toegevoegd, waarna verder 0,5 ml van een oplossing van 5? mg 1-acetoxyethyljodide in N,N-dimethyl-formamide gedurende 10 min druppelsgewijs werd toegevoegd, gevolgd door roeren bij -5...0 °C gedurende 1 h. De oplossing werd verdund met water (5 ml), en daarna met 20 ml ethylacetaat geëxtraheerd. Het 25 extract werd tweemaal met 5 ml water gewassen, boven watervrij na-triumsulfaat gedroogd, vervolgens onder verlaagde druk volledig ge. droogd. De rest werd met petroleumether gewassen, hetgeen 120 mg 1-acetoxyethyl-70-(2-broomacetoamido)-7ce-methoxy-3-[(1-methyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethylj-oxadethia-3-cefem-4-carboxylaat oplevprde.

30 (b) Dit produkt werd in 2 ml aceton opgelost, waaraan vervol gens 5 ml water, en daarna 20 mg D-cysteine-methylester-hydrochlori-de werd toegevoegd, hetgeen werd gevolgd door roeren bij 0··5 °0 gedurende 3 h, terwijl de pH op 6,5 werd gehouden door toevoeging van 5 /6‘s natriumhydrocarbonaat. Vervolgens werd de pH op 8,0 gebracht 35 door toevoeging van natriumhydrocarbonaat, waarna, met 20 ml ethylacetaat werd geëxtraheerd* Het extract werd geconcentreerd tot 2 ml, en vervolgens door een kolom-van ^0 ml sephadex LH-20 gevoerd, dat met ethylacetaat was verzadigd. De kolom werd met ethylacetaat ontwikkeld, - 22 ~ waarna de wasvloeistof, die het gewenste produkt bevatte, werd verzameld, en onder verlaagde druk volledig werd gedroogd, hetgeen 95 mg van een kleurloos poeder van 1-acetoxyethyl-70-£(2D-2-amino-2-methoxycarbonyl)ethylthloacetoamido]-7oi- methoxy-3-[(l-aethyl-1H-3 tetrazoQl-5-yl)thiomethyl]-1-oxadethia-3-cefe»-4-carboxylaat opleverde. Bij dunnelaag-chromatografie in een silicagel (ontwikkeld met ethylacetaat/aceton 5·1) bedroeg Bf ervan 0,73· s

V

8005992

Claims

1 -i ^ - 23 -

1. Nieuw 1-oxadethiacefalosporine-derivaat, met het kenmerk, dat de formule daarvan als volgt iss *j®2 ; ° CH-(CH2)xS(CH2)y-COIIH-1-< X . C00H y~ » COOH - waarin B een heterocyclische groep of een S-heterocyclische groep is, 5. een waterstofatoom of een methoxygroep -QCHj is, en x en y 1,2 of 3 zijn, dan wel farmaceutisch aanvaardbare zouten of esters daarvan.

2. Nieuw 1-oxadethiacefalosporine-derivaat, met het kenmerk, dat de formule daarvan is: nh0 y I i ! 0 CH-CHo-S-CH«-C0NH--(I'") I 2 2 COOH , vr <T Νχ^-αΗ2β" COOH 10 waarin B" een (1-methyl-1H-tetrazool-5-yl)thio-, (1-carboxymethyl-1H-tetrazool-5-yl)thio-, (2-carboxymethyl-1H-tetrazool-5-yl)thio-, (^-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,if-triazine-3-yl)thio-, (8-amino-terazool-(1,5-b)-pyridazine-6-yl)thio-, pyridinium-, 4-carbamoyl-pyridinium-, of (1-dimethylaminoethyl-1H-tetrazool-5-yl)-15 thiogroep, en~Y een waterstofatoom of een methoxygroep is, en wevl een farmaceutisch aanvaardbaar zout of ester daarvan.

3· Nieuw 1-oxadethiacefalosporine-derivaat, me't het kenmerk, dat de formule daarvan, is: nh2 T CH-CH«-S-CHo-CONH--'N (Γ"') I 2 2 COOH j— n \xy~~ ch2rm * 80 05 9 9 2 “ X - Zh - waarin B,M een (l-methyl-1H-tetrazool-5-yl)thiogroep of een 4-car-bamoylpyridiumrest is, en 7 een waterstofatoom of een methoxygroep ia, dan wel een farmaceutisch aanvaardbaar zout of ester daarvan. b, 70- [(2D-2-amino-2-carboxy) ethylthioacetoamido] -7«· methoxy 5 -3-ï,(1-nethyl-1H-*tetrazool-5-yl) thiomethyl]-1-oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur, of een farmaceutisch aanvaardbaar zout of ester daarvan. 5· 7Ö- H(2D-2-amino-2-carboxy) ethylthioacetoamido] -3- {]( 1- methyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethyl]--1-oxadethia-3-ceiem-^-carbon-zuurt of een farmaceutisch aanvaardbaar zout of ester daarvan. 10 6. 7jP~ [(2D-2-amino-2-carboxy)ethylthioacetoamido] -3-U^-car- bamoylpyridinium)methyl]-1-oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur, of een farmaceutisch aanvaardbaar zout of ester daarvan. 7· 70-[(2D-2-amino-2-carboxy)ethylthioacetoamido] -7<x- methoxy -3-[(1-dimethylaminoethyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethyl] -1-oxadethia-13 3-cefem-4-carbonzuur, of een farmaceutisch aanvaardbaar zout of ester daarvan.

8. Verbinding volgens conclusie 1, bestaande uit 70-[(3D-3-amino-3-carboxy)propylthioacetoamido] -7« - methoxy-3- [,(1-methyl-1H-tetrazool-5-yl) thiomethyl] -1-oxadethia-3-cefem-A-carbonzuur, 7^-(( 2D-20 2-amino-2-carboxy)ethylthiopropioamido] -7« - methoxy-3- [(1-methyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethyl] -1-oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur, 7^-2D-2-amino-2-carboxy)ethylthioacetoamido} -7«- methoxy-3-£(A-car-bamoylpyridinium) methyl] -1-oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur, 7 0- [(3D- 3-aoino-3-carboxy)propylthioacetoamidoJ -7«- methoxy-3-£(4-carbamoyl-25 pyrldinium)methyl] -1-oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur» 7^-[(2D-2-amino -2-carboxy)ethylthiopropioamido]-7« - methoxy-3- [(4-carbamoylpyridini-um)methyl] -1 -oxadethia-3-cefem-^f-carbonzuur * 7A-L(2D-2-amino-2-car-boxy) ethylthioacetoamido] -7<x- methoxy-3- [(A-methyl-5-oxo-6-hydroxy-b,5-dihydro-l,2,b-triazine-3-yl)thiomethyl] -1-oxadethia-3-cefem-4-30 carbonzuur, 7Ö- [(2D-2-amino-2-carboxy) ethylthioacetoamido]-7oc - oethoxy-3- £(8-amino-tetrazool-(l ,5-b)-pyridazine-6-yl) thiomethyl] -1-oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur, 1-acetoxyethyl-7Ö-C(2D-2-amino-2-ethoxy-carboxy)ethylthioacetoamido] -7«- methoxy-3-[(1-methyl-1ïï-tetrazool-5-yl)thiomethyl -1-oxadethia-3-cefem-4-carboxylaat, 1-ace-qq 35 toxyethyl-7ö-[(3D-3-amino-3-carboxy)ethylthioacetoamido]-7«- methoxy-O 3-[(1-methyl-1H-tetrazool-5-yl)thiomethyl] -1-oxadethia-3-cefem-4- ® carboxylaat, 1-ethoxyethyl-7$-£(2D-2-amino-2-ethoxycarboxy)ethylthio- <© acetoamido] -7<x - methoxy-3- [(1-methyl-1H-tetrazool-5-yl) thiomethyl] - <© l-oxadethia-S-.cefem-^-carboxylaat, 7ö-C(2D-2-afflino-2-ethoxycarboxy)- - 25 - * ethylthioacetoamido] -7α- methoxy-3-[(1-methyl-1H-tetrazool-5-yl) thiomethyl]-1-oxadethia-3-cefem-4-carbonzuur, 1rethoxyethyl-7(3- £( 2D- 2-amino-2-ethoxycarboxy) ethylth.ioacetoamid.oJ -7a - methoxy-3- [(4-methyl -5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazine-3-yl)thiomethyl}-1-oxa-3 dethia-3-cefem-4-carboxylaat, en 1-acetoxyethyl-7/3-[.(2P-2-amino-2-ethoxycarboxy)ethylthioacetoamido]-7a -methoxy-3- [1-dimethylamino-ethyl-1H-tetrazool-5-yl) thiomethyl] -1-oxadethia-3-cefem-4-carboxy-laat·

9· Werkwijze voor het bereiden van het mengsel volgens con-10 elneie 1, gekenmerkt door: (&) het condenseren van een 1-oxacefemverbinding met de formu le: Y Z-(CH2)yCONH --;--j/° <Π) y~ H COOR' '· waarin E een heterocyclische groep of een -S-heterocyclische groep 13 is, Y een waterstofatoom of een methoxygroep -OCH^ is, R’ een waterstofatoom of een carboxyl-beschermingsgroep is, Z een halogeengroep is, en y 1, 2 of 3 is, met een zwavel bevattend aminozuur met de formule: I 2 CH-(CHp) -SH tin) I * x COOH 20 waarin x 1, 2 of 3 is, dan wel een functioneel gelijkwaardig de'ri- > vaat van het aminozuur, in een oplosmiddel, teneinde een condensatie-produkt met de volgende formule te verkrijgen: ®2 I O (I·) CO -CONH-1-p X O COOH Qi N ^J_cH2R (0. I & COOR» __ waarin. B. Br . Y. v en v de voornoemde betekenis hebben. - 26 -

10. Werkwijze volgens conclusie 9i gekenmerkt door een bijkomende stap (b)} waarbij uit het condensatieprodukt met de formule (I1) de carboxyl-beschermingsgroep (£')* indien aanwezig, op bekende wijze wordt verwijderd, indien dit.nodig is.

11. Werkwijze volgens conclusie 9« net het kenmerk, dat de condensatiebewerking (a) in water of in een waterig organisch Q oplosmiddel wordt uitgevoerd bij een temperatuur van 0..JK) -G.

12. Werkwijze volgens conclusie 9i net het kenmerk, dat de condensatie (a) wordt uitgevoerd in tegenwoordigheid van een 10 zuurbinder.

13· Bacteriebestrijdingsmiddel, bestaande uit een doel treffende hoeveelheid van het 1-oxadethiacefalosporine van conclusie 1, dan wel van een farmaceutisch aanvaardbaar zout of ester daarvan als werk van bestanddeel, samen met een farmaceutisch aanvaardbare 13 drager voor het actieve bestanddeel.

14. Werkwijze voor het onderdrukken van bacteriegroei, gekenmerkt door het toedienen van een doeltreffende en veilige hoeveelheid van het 1-oxadethiacefalosporine van conclusie 1 of van een farmaceutisch aanvaardbaar zout of ester daarvan aan een dier of 20 mens waarin bacteriegroei kan optreden·

15. Werkwijze voor het onderdrukken van bacteriegroei in vitro, gekenmerkt door het in aanraking brengen van een voor bacteriegroei geschikt oppervlak met een doeltreffende hoeveelheid van het 1-oxadethiacefalosporine van conclusie 1 of van een farmaceutisch 23 aanvaardbaar zout of ester daarvan· \ f 8005992