FI90069B - Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara dihydroindolderivat - Google Patents

Description

o ri n o 2 1 ' . L.' J

Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten dihyd-roindolijohdannaisten valmistamiseksi

Jakamalla erotettu hakemuksesta 812652 5

Keksintö koskee uusien kaavan I mukaisten dihydro-indolijohdannaisten ja niiden fysiologisesti hyväksyttävien suolojen valmistusta,

QCC

XCO-CH-NH-CH-COORo

I I J

R1 R2 15 jossa kaavassa Rx on alkyyli, jossa on enintään 6 hiili-atomia ja joka voi olla substituoitu fluorilla, aminolla tai fenyylillä, ja R2 on а) alkyyli, jossa on enintään 6 hiiliatomia ja jo-20 ka voi olla substituoitu 1) C5_7-sykloalkyylillä 2) C5_7-sykloalkenyylillä 3) hydroksilla 4) fenyylioksilla, joka voi olla substituoitu me-25 toksilla, etoksilla, karboksilla, karbamoyylillä, aminolla, C^g-alkyyliaminolla, halogeenilla tai nitrolla 5) aminolla б) monoalkyyliaminolla, jossa on enintään 7 hiili-atomia ja jossa alkyyliryhmä voi olla substituoitu hyd- 30 rokeilla, karboksilla, karbamoyylillä, etoksikarbonyylil-lä, aminolla, Cj^-alkyyliaminolla, di-C^-alkyyliaminol-la, piperidinolla tai morfolinolla 7) dialkyyliaminolla, jossa on enintään 7 hiili-atomia ja jossa alkyyliryhmä voi olla substituoitu koh-·... 35 dassa a)6) mainituilla radikaaleilla 2 90069 8) sykloalkyyliaminolla, jossa on enintään 7 hiiliatomia ja jossa alkyyliryhmä voi olla substituoitu kohdassa a)6) mainituilla radikaaleilla 9) disykloalkyyliaminolla, jossa on enintään 7 5 hiiliatomia ja jossa alkyyliryhmä voi olla substituoitu kohdassa a)6) mainituilla radikaaleilla 10) C1.4-alkoksikarbonyyliaminolla 11) fenyylioksikarbonyyliaminolla, jossa fenyyli-ryhmä voi olla mono- tai disubstituoitu C1.2-alkoksilla, 10 metyleenidioksilla, aminolla, hydroksilla, asetoksilla, karboksilla, karbamoyylillä, etoksikarbonyylillä, halogeenilla tai nitrolla 12) fenyylialkyylioksikarbonyylillä, jossa fenyy- liryhmä voi olla mono- tai disubstituoitu kohdassa a)11) 15 mainituilla radikaaleilla 13) C1.6-alkyyliureidolla 14) fenyyliureidolla, jossa fenyyliryhmä voi olla mono- tai disubstituoitu samanlaisilla tai erilaisilla, kohdassa a)ll) mainituilla radikaalileilla 20 15) fenyylialkyyliureidolla, jossa fenyyliryhmä voi olla mono- tai disubstituoitu kohdassa a)11) mainituilla radikaaleilla 16) formyylillä 17) alkanoyyliaminolla, jossa on enintään 10 hii- 25 liatomia 18) fenoyyliaminolla, jossa on enintään 10 hiili-atomia ja jossa fenyyliryhmä voi olla mono- tai disubstituoitu kohdassa a)11) mainituilla radikaaleilla 19) fenyylialkanoyyliaminolla, jossa on enintään 30 10 hiiliatomia ja jossa fenyyliryhmä voi olla mono- tai disubstituoitu kohdassa a) 11) mainituilla radikaaleilla 20) fenyyliaminolla, jossa fenyyliryhmä voi olla substituoitu samanlaisilla tai erilaisilla, kohdassa a)11) mainituilla radikaaleilla 35 21) fenyylialkyyliaminolla, jossa fenyyliryhmä voi olla substituoitu kohdassa a)11) mainituilla radikaaleilla 3 v n C 6 9 22) alkyylimerkapto-, alkyylisulfinyyli- tai alkyylisulf onyyliryhmällä, jossa on enintään 7 hiiliatomia ja jossa alkyyliosa voi olla substituoitu nietoksilla, etoksilla, hydroksilla, karboksilla, karbamoyylillä, 5 etoksikarbonyylillä, aminolla tai C1.6-alkyyliaminolla 23) fenyylimerkapto-, fenyylisulfinyyli- tai fe-nyylisulfonyyliryhmällä, jossa fenyyliosa voi olla substituoitu kohdassa a)22) mainituilla radikaaleilla tai halogeenilla, nitrolla tai sulfamoyylillä 10 24) bentsyylimerkapto-, bentsyylisulfinyyli- tai bentsyylisulfonyyliryhmällä, jossa alkyyliosa voi olla substituoitu kohdassa a)22) mainituilla radikaaleilla ja fenyyliosa voi olla substituoitu edellä alkyyliosan yhteydessä mainituilla tai kohdassa a)23) mainituilla radi- 15 kaaleilla 25) karboksilla 26) karbamoyylillä 27) alkyylikarbamoyylillä, jossa on enintään 6 hiiliatomia 20 28) sykloalkyylikarbamoyylillä, jossa on enintään 6 hiiliatomia 29) dialkyylikarbamoyylillä, jossa on enintään 6 hiiliatomia 30) fenyylikarbamoyylillä . 25 31) fenyylialkyylikarbamoyylillä 32) guanidinolla 33) fenyyli-, naftyyli-, dihydronaftyyli- tai tet-rahydronaftyyliryhmällä, joka voi olla mono- tai disubs-tituoitu halogeenilla, hydroksilla, asetoksilla, karbok- 30 silla, karbamoyylillä, sulfamoyylillä, nitrolla, metyylillä, etyylillä, nietoksilla ja/tai etoksilla 34) 5-7-jäsenisellä monosyklisellä tai 9-10-jäse-nisellä bisyklisellä heterosyklisellä ryhmällä, jonka kaava on - 35 4 90069 -o y . xj . X).

H

Cy y'

H

10 ja joka voi olla substituoitu halogeenilla, hydroksilla, karboksilla, karbamoyylillä, sulfamoyylillä, nitrolla, nietoksilla ja/tai etoksilla; b) sykloalkyyli- tai sykloalkenyyliryhmä, jossa on 5-7 hiiliatomia, 15 c) fenyyli- tai osittain hydrogenoitu fenyyliryh- mä, tai d) kohdassa a)34) mainittu mono- tai bisyklinen heterosyklinen ryhmä; ja R3 on vety, alkyyli, jossa on 1-6 hiiliatomia, alkenyyli, jossa on 2-6 hiiliatomia, fe- 20 nyylialkyyli, jossa on 7-14 hiiliatomia, tai p-nitrobent-syyli.

Näillä yhdisteillä on verenpainetta alentava vaikutus.

Kaavan I mukaisia dihydroindolijohdannaisia ja . 25 niiden fysiologisesti hyväksyttäviä suoloja voidaan valmistaa siten, että a) kaavan II mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan kaavan III mukaisen yhdisteen kanssa, 30 " coor4 Q-CH-COOR3 l| I Ro

CO-CH-Q

(ID Rj (III) 35 joissa kaavoissa Rlf R2 ja R3 tarkoittavat samaa kuin 5 ' · Ο Γ 6 9 edellä, toinen symboleista Q on nukleofuginen ryhmä ja toinen on NH2 ja R4 on H, metyyli, etyyli, bentsyyli tai tert.-butyyli, ja haluttaessa saatu esteri muutetaan kar-boksyylihapoksi (R3 ja/tai R4 = vety), tai 5 b) yhdiste, jonka kaava on POOC-CH-NH-CH-COOP (IV)

I I

Rl Rl 10 jossa Rx ja R2 tarkoittavat samaa kuin edellä, P on vety tai toisella symboleista P voi myös olla edellä määritellyn R3:n muut merkitykset, mukaan lukien tert-butyyli, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka kaava on 15 — coor4 Ο-Λ

H

20 jossa R4 tarkoittaa samaa kuin edellä, kondensointiaineen läsnäollessa, ja haluttaessa toinen tai kumpikin esteri-ryhmä muutetaan karboksyylihapoksi, tai c) kaavan VI mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan 25 kaavan VII mukaisen yhdisteen kanssa, coor4 T=C-C00R3 30 -N\ ^

XC0-C=T

(VI) i (VII) joissa kaavoissa Rx, R2, R3 ja R4 tarkoittavat samaa kuin edellä ja toinen symboleista T on vety ja NH2 ja toinen 35 on happi, ja saatu Shiffin emäs pelkistetään; 6 ) ' < Ί * . _/ s ja haluttaessa saadut rikkifunktiot hapetetaan sulfoksi-delksl tai sulioneiksi ja haluttaessa saatu yhdiste muutetaan suolaksi.

Valmistettaessa yhdisteitä I voidaan lähteä esi-5 merkiksi 2-halogeenikarboksyylihappojohdannaisista II tai III, jotka reagoivat nukleofiilisten yhdisteiden kanssa. Tämä reaktio suoritetaan ensisijaisesti veden kanssa sekoittuvissa orgaanisissa liuottimissa, mahdollisesti veden läsnäollessa, jolloin lisätään epäorgaanista tai teriö tiääristä tai kvaternääristä orgaanista emästä. Jos reaktio-osapuolet liukenevat aproottisiin orgaanisiin liuottimiin, sellaista liuotinta on pidettävä parempana, jolloin emäkseksi on edullista lisätä trialkyyliamiinia, tetra-alkyyliammoniumhydroksidia tai tetrametyyliguani-15 diinia tai alkali- tai maa-alkalikarbonaatin suspensiota.

Lähtöaine 20 Li Jx (VIII)

COOH

H

tunnetaan kirjallisuuden perusteella, sen spesifistä far-25 makologista vaikutusta kaavan I mukaisten yhdisteiden aineosana ei kuitenkaan ole toistaiseksi selostettu. Yhdistettä VIII voidaan valmistaa artikkelin Aust. J. Chem. 20 (1967), s. 1935, mukaisesti.

Yhdisteestä VIII saadaan tunnetulla tavalla este-30 reitä, joissa on R4, ja ne kondensoidaan halogeenikarbok-syylihapoilla yhdisteiksi II (Q = halogeeni) joko happo-kloridien, seka-anhydridien, aktiivisten esterien kautta tai muin menetelmin, joita on perusteellisesti selostettu teoksessa Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, 35 Band 15. Kun Rx = CH3, voidaan lähteä esim. L-maitohapos-ta helposti saatavasta D-2-klooripropionihaposta.

7 9 O 6 9

Kaavan II mukaisia välituotteita (Q = NH2) saadaan yleiskaavan V mukaisista karboksyylihappoestereistä kon-densoimalla N-suojatun 2-aminokarboksyylihapon kanssa. Suojaryhmä lohkaistaan kondensoinnin päätyttyä jälleen 5 pois. Suojaryhmänä tulee kysymykseen esim. bensyylioksi-karbonyyli.

Kondensointi voidaan paitsi DCC/HOBt-yhdistelmällä (disykloheksyylikarbodi-imidi/l-hydroksibensotriatsoli) myös suorittaa muulla sopivalla kondensointiaineella, 10 esim. teoksessa Houben-Weyl, Band 15 selostetulla kondensointiaineella .

Menetelmätavassa (b) lähdetään kaavan IV mukaisista yhdisteistä.

Jos 1*! ja R2 ovat identtiset, niin P voi olla ve-15 ty. Kondensointi suoritetaan silloin esim. disykloheksyy-likarbodi-imidin läsnäollessa ekvivalenttimäärän kanssa kaavan V mukaista yhdistettä ja R4 lohkaistaan tunnetulla tavalla. Reaktio tapahtuu mahdollisesti eristettävissä olevan anhydridin XII kautta, joka avataan sen jälkeen 20 kaavan V mukaisella yhdisteellä.

H

N

/ \ CH CH?. ^-COOR.

R.-HC CH-R„ R.CXXX/ un2 \ sT ά 4 L I 2 T l> M., ^2

°=b c=0 + HIK (CH <T C0-CH-N-CH-C00H

. . 25 ^ 0X ιτη

H

n = n (XII) (V) »-

Jos tähteet Ri ja R2 yhdisteessä IV ovat erilaiset, ensi-. . 30 sijaisesti ainoastaan toinen tähteistä P on vety, toisen tulisi merkitä lähinnä R3:a tai tert.-butyyliä. Kondensointi suoritetaan silloin selostetulla tavalla kaavan V' mukaisten yhdisteiden kanssa ja toinen tai kummatkin es-teriryhmät muutetaan mahdollisesti karboksyylihapoksi.

35 8 ό9

Kun kaavoissa VI tai VII T = NH2 ja H, merkittävä kondensointi 2-ketokarboksyylihappojen tai niiden esterien kanssa menetelmän (c) mukaisesti johtaa tunnetulla tavalla Schiffin emäksien kautta esim. natriumboorihyd-5 ridillä tai natriumsyaaniboorihydridillä pelkistämisen jälkeen, hydraamalla katalyyttisesti tai pelkistämällä elektrolyyttisesti, vastaavien kaavan I mukaisten yhdisteiden muodostumiseen hyvin puhtaina.

Uusissa yhdisteissä on muun muassa 3 kiraalista 10 keskusta α-C-atomien kohdalla. Ligandien järjestys vastaa lähinnä L-konfiguraatiota. Kiteyttämällä voidaan yleensä saada steerisesti suurin piirtein yhtenäisiä kaavan I mukaisia yhdisteitä. Steerisesti yhtenäisempien muotojen rikastamiseksi ensisijaisia ovat vastavirtajakautus- tai 15 preparatiiviset HPLC-menetelmät.

Välituotevaiheessa X ja XI diastereomeerit voidaan mahdollisesti erottaa kiteyttämällä tai preparatiivisella HPLC-menetelmällä siten, että edellä selostetun menetelmän mukaisesti voidaan saada kaavan I mukaisia tuotteita, 20 joissa kaikissa kiraalisissa keskuksissa on yhtenäinen steerinen järjestys.

Kaavan I mukaisilla uusilla yhdisteillä on pitkäaikainen, intensiivinen verenpainetta alentava vaikutus.

Niitä voidaan käyttää erilaisista syistä aiheutu-25 neen korkean verenpaineen torjuntaan ja niitä voidaan käyttää sellaisinaan tai yhdistelmänä muiden verenpainetta alentavien, verisuonia laajentavien tai virtsaneritystä lisäävien yhdisteiden kanssa. Tyypillisiä näiden vai-kutusluokkien edustajia on selostettu esim. artikkelissa 30 Erhart-Rusching, Arzneimittel, 2. Auflage, Weinheim 1972. Niitä voidaan käyttää laskimonsisäisesti, ihonalaisesti tai suun kautta.

Suun kautta annettaessa annostus on 20-200 mg yksittäistä annosta kohden. Vaikeammissa tapauksissa sitä 35 voidaan myös suurentaa, koska toistaiseksi ei ole todettu 9 9 O n 6 9 toksisia ominaisuuksia. Myös annoksen pienentäminen on mahdollista ja sitä sovelletaan ensisijaisesti silloin, kun samanaikaisesti annetaan virtsaneritystä lisääviä aineita. Laskimonsisäisesti tai ihonalaisesti annettaessa 5 yksittäisen annoksen pitäisi olla välillä 0,01 - 10 mg.

Kaavan I mukaiset yhdisteet esiintyvät sisäisinä suoloinaan. Mikäli molemmat karboksyyliryhmät ovat vapaita, lisäksi voidaan muodostaa alkali- ja maa-alkalisuolo-ja ja suoloja fysiologisesti vaarattomien amiinien kansio sa. Edelleen läsnäolevan vapaan aminoryhmän voidaan antaa reagoida suolaksi epäorgaanisen hapon tai orgaanisen hapon kanssa. Myös muita kaavan I mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää vapaassa muodossa tai mainitun kaltaisina suoloina.

15 Yhdisteiden farmakologinen aktiivisuus on määri tetty ACE-analyysin avulla. ACE vastaa ensisijaisesti an-giotensiini I:n hydrolyysistä vasopressoriaktapeptidiksi angiotensiini II. Sen aktiivisuus voidaan määrittää käyttäen substraattina hippuryyli-l-histidyyli-l-leusiinia 20 (HHL) tai hippuryyliglysidyyliglysiiniä.

Entsyymi valmistetaan seuraaavalla tavalla: 10 g kaniinin keuhkojauhetta uutetaan 10 min 100 ml:11a ka-liumfosfaattipuskuria (50 mol, pH 8,3) ja sentrifugoidaan sitten 40 min 40 000 g. Supernatantti säilytetään 25 5 °C:ssa. Entsyymianalyysi on muunnelma julkaisusta Bio- chem. Pharmacol. 20 (1971), s. 1673 tunnetusta menetelmästä. Yhdisteiden inhiboiva vaikutus tutkitaan siten, että 10 ml inhibiittoria tislatussa vedessä tai DMS0:ssa lisätään 40 yl:aan puskuria (750 nM, 115 mol kaliumfos-30 faattia, pH 8,3) ja 40 pl:aan (3-H)-HHL (500 pmol) 115 mol kaliumfosfaattipuskurissa, pH 8,3. DMSO-pitoisuus pidetään alle 1 %:n. Reaktio saatetaan tapahtumaan lisäämällä 20 μΐ em. entsyymiliuosta. Inkuboidaan 60 min 37 °C:ssa, jonka jälkeen reaktio pysäytetään lisäämällä 35 1 ml 0,1 HC1. (3-H )hippuurihappo uutetaan sitten 1 ml :11a 10 ' · ' -' O ) etikkaesteriä. 10 min sentrifugoinnin jälkeen päällä olevasta etikkahappouutteesta otetaan 150 - 200 μΐ ja lisätään se 10 ml:aan tuikenestettä. Radioaktiivisuus mitataan tuikelaskimella ja tuloksesta lasketaan IC50-arvo.

5 Keksinnön mukaisesti valmistetuilla yhdisteillä on pitkäaikainen intensiivinen verenpainetta alentava vaikutus. Vertailukoetulokset osoittavat myös selvästi, että yhdisteiden ACE:ta inhiboiva vaikutus in vitro-kokeessa on suurempi kuin EP-A-julkaisussa 18 549 esitettyjen yh-10 disteiden.

Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä.

Esimerkeissä käytetään seuraavia lyhenteitä:

Tie 1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo

Die dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 15 Idc indoliini-2-karbonihappo

Oic oktahydroindoli-2-karbonihappo Z bentsyylioksikarbonyyli

Boc tert.-butyylioksikarbonyyli tBu, Bu*, 20 tert-C4H9 tert.-butyyli

Nb 4-nitrobentsyyli DCC disykloheksyylikarbodi-imidi DMF dimetyyliformamidi DMA dimetyyliasetamidi 25 NEM N-etyylimorfoliini CA sykloheksyyliamiini DCA disykliheksyyliamiini

Mikäli mitään muuta menetelmää ei ole mainittu, 30 seuraavissa esimerkeissä selostetut yhdisteet puhdistetaan analyysiä ja biologista määritystä varten HPLC-puh-distusmenetelmällä.

Esimerkit 1-23 eivät koske kaavan I mukaisia yhdisteitä, mutta mainituista esimerkeistä ilmenevät mene-35 telmät, joilla kaavan I mukaisia voidaan valmistaa.

11 9 0 0 69

Esimerkki 1 N-(l-karboksi-3-fenyylipropyyli)-L-alanyyli- 1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo a) 2-karbobentsoksi-3-karboksi-l,2,3,4-tetra-5 hydroisokinoliini (Z-Tic) 188 g (1,05 moolia) 3-karboksi-l,2,3,4-tetra-hydroisokinoliinia lisätään 0°:ssa 1050 ml:aan 1-norm. Na0H:a, ja sitten lisätään tiputtamalla tässä lämpötilassa sekoittaen samanaikaisesti 160 ml kloorihiili-10 happobentsyyliesteriä ja vielä 1050 ml 1-norm. NaOH:a.

Sen jälkeen sekoitetaan 2 tuntia huoneen lämpötilassa. Uutetaan kolme kertaa eetterillä ja alkalinen vesifaa-si tehdään happameksi väk. HClrlla pH-arvoon 1. Erottunut öljy uutetaan etikkaesteriin. Etikkaesteriliuos 15 pestään vedellä kunnes vesifaasin pH on 3,0. Natrium-sulfaatilla kuivaamisen jälkeen tuote kiteytyy etik-kaesteriliuoksesta konsentroinnin ja hiertämisen jälkeen. Kidesuspensioon lisätään 1,5 litraa di-isopro-pyylieetteriä ja sekoitetaan tunnin ajan huoneen lämpö-20 tilassa/ suodatetaan imussa, ja tuote kuivataan suur-tyhjössä fosforipentoksidin päällä.

Saanto: 256,7 g Sp. 138-139°C.

- b) 2-karbobentsoksi-3-karboksi-l,2,3,4-tetra- hydroisokinoliini-tert,-butyyliesteri 25 Liuokseen, jossa on 248,8 g (0,8 moolia) 2- karbobentsoksi-3-karboksi-l,2,3,4-tetrahydroisokinolii-nia 1600 ml:ssa metyleenikloridia, lisätään 312 ml tert,-butanolia ja 8 g 4-dimetyyliaminopyridiiniä. Jäähdytetään -5°C:seen ja sitten lisätään annoksittain 30 liuos, jossa on 176 g disykloheksyylikarbodi-imi- diä 350 ml:ssa metyleenikloridia. Sekoitetaan 5 tuntia 0°:ssa ja seoksen annetaan sitten olla paikoil- i2 90 069 laan 16 tuntia huoneen lämpötilassa. Kun disykloheksyy-liurea on imetty pois, reaktioliuos uutetaan kolme kertaa kyllästetyllä natriumvetykarbonaattiliuoksella. Kuivataan magnesiumsulfaatilla, konsentroidaan vakuu-5 missä huoneen lämpötilassa öljymäiseksi. Jälelle jää 286 g tuotetta kellertävänä öljynä (97 % teoreettisesta) .

NMR: 7,30 s (5H); 7,20 s (4H); 5,l-4,3m (3H); 5,Os (2H) ; 1,46 (9H) .

10 c) 3-karboksi-l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini- tert-butyyliesterihydrokloridi 284 g 2-karbobentsoksi-3-karboksi-l,2,3,4-tetra-hydroisokinoliini-tert.-butyyliesteriä (0,775 moolia) liuotetaan 3 litraan metanolia, lisätään 15 g 10 %:ista 15 Pd-bariumsulfaatti-katalyyttiä ja hydrataan vedyllä normaalipaineessa. Liuoksen pH-arvo pidetään 1-norm.

HCl:n metanoliliuosta tiputtaen lisäämällä 4,0:ssa (lasielektrodi). Katalyytti suodatetaan pois ja liuos haihdutetaan kuiviin vakuumissa huoneen lämpötilassa.

20 Kiteistä tuotetta hierretään vedettömän eetterin kanssa, suodatetaan imussa ja kuivataan vakuumissa fosfori-pentoksidin päällä.

Saanto: 156 g sp. 180° (hajoten).

Tosylaattia voidaan saada joko lisäämällä hyd-25 rauksen aikana suolahapon metanoliuoksen asemesta tolueenisulfonihapon metanoliuosta, tai hydrokloridi liuotetaan veteen, lisätään laskettu määrä natrium-tosylaattia ja jäähdytetään lisäämällä siemenkiteitä ja sekoittamalla noin 4°C:seen. Tällöin tosylaatti 30 saostuu erilleen kiteisessä muodossa. Kiteet suodatetaan erilleen, pestään vedellä ja kuivataan.

Sp. 139-140° (hajoten).

d) Karbobentsoks.i-L-alanyyli-3-karboksyyli-12,3,4-tetrahydroisokinoliini-tert.-butyyliesteri 35 27 g (0,15 moolia) 3-karboksi-l,2,3,4-tetra- hydroisokinoliini-tert.-butyyliesterihydrokloridia 13 .) f; Γ · 6 9 suspendoidaan 200 ml:aan dimetyyliformamidia, jäähdytetään sekoittaen ja kosteudelta suojattuna -5°C:seen, ja lisätään 19 ml (0,15 moolia) N-etyylimorfoliinia sekä liuos, jossa on 33,4 g karbobentsoksialaniinia, 5 20 g N-hydroksibentsotriatsolia ja 33 g disykloheksyyli- karbodi-imidiä 100 ml:ssa dimetyyliformamidia. Sekoitetaan tunnin ajan 0°C:ssa, annetaan olla paikoillaan yön ajan +4°C:ssa ja jatkokäsitellään sitten tunnin ajan huoneen lämpötilassa sekoittamisen jälkeen. Eroit-10 tunut disykloheksyyliurea suodatetaan erilleen ja reaktioliuos haihdutetaan suurvakuumissa huoneen lämpötilassa kuiviin. Jälelle jäänyt öljy liuotetaan 1 litraan etikkaesteriä ja pestään kolme kertaa 150 ml:n erillä kyllästettyä natriumkarbonaattiliuosta, 5 %:isella 15 kaliumvetysulfaattiliuoksella ja kerran vedellä. Ve dettömällä natriumsulfaatilla kuivaamisen jälkeen liuotin tislataan pois vakuumissa huoneen lämpötilassa. Saanto: 59 g öljyä.

e) L-alanyyli-3-karboksi-l,2,3,4-tetrahydroiso-20 kinoliini-tert.-butyyliesteri-hydrokloridi (Ala-Tic-0-But) 15 g karbobentsoksi-alanyyli-3-karboksi-l,2,3,4-. . tetrahydroisokinoliini-tert.-butyyliesteriä hydra-

taan 400 ml:ssa metanolia 8 grammalla 10 %:ista Pd/ba-25 riumsulfaatti-katalyyttiä. Liuoksen näennäinen pH

pidetään (lasielektrodi) 1-norm. suolahapon metanoli-liuosta lisäämällä arvossa 4,0. 8 tunnin kuluttua katalyytti suodatetaan pois ja liuos haihdutetaan va-kuumissa huoneen lämpötilassa kuiviin. Kiinteätä jään-30 nöstä digeroidaan sitten di-isopropyylieetterin kanssa ja kuivataan vakuumissa.

Sulamispiste 110° (hajoten).

Samalla tavalla kuin yhdistettä Ala-Tic-OBut valmistetaan yhdisteitä: i4 ,;'0~69

Ori N ""Χ 00-1·-C , H Q i 4 9 c=o H3C-CH-NH2 5 7,3-6,5m (4H); 4,4t (1H); 3,8-3,0 m+d (3H); 1,4s (9H); 1,2d (3H) 10 COO-t-C^Hg li I 2

0 R

15 seuraavat signaalit ovat yhteisiä seuraaville yhdisteille: 7,2s (4H); 5,1-3,3m (3H); 3,9-3,0m (4H); 1,4s (9H) kun R:H ,2s (4H); 3,9-3,Om (5H)

: H

13,Is (1H); 7,5s (1H); 6,8s (1H); 2,8m (2H) .· 25 CH, CH-CH„- 1,5m (3H); 0,9d (6H) CH3 CH2F" 5,1-4,3m (5H) 15 -7::0,0 ' ,ν s ^ ^-S-CH2-CH2 7,2-7,Om (9K) ? 2,7-2,On (4E) CH.-CH--CH- 1,5-1 ,Om (9H) 5 a CK2- 7,1s (5H); 2,7d (2H) 10 ^-/CK2 Γ 1Γ Jl 7,B-6,4n (9H)

H

HO-CH2- 3,7d (2H) 15 / VcH,-0-C-KIi-CH2-CH2-CH2-CH2- 7, Is (5H) ; 5,0s O (2H) ; 2,4m (2H) ; 1,8-1,3m (6H) 20 O 7,Is (5H); 5,Os -ch2-o-c-kh-ch2-ch2-ch2-ch2-ch2- (2h). 2/4m 0 (2H); 1,8-1,3m (8H) 25 / \-CK2-0-C-NH-CH2-CH2-CIl2- 7 *ls <5H) ; 5'0s (2H) ; \s=/ J ^ 2,4m (2H); l,8-l,3m (4H) 16 9Π069 C^S-CH' -0-C-KH-CHo- 7 f Is (5H) ; 5,0s (2H) ; 2,3m J 2 h UH)

5 II2N

C-NCH,CH,CH,— 8,3-7,6m (2H) ; 2,9-1,6m (6H) JIN ^ ~ “ z 10 / VcH2-0-C-NH-CH2CH0- 7,1s (5H) ; 5,0s (2H) ; 2,4m 0 ~ (2H) ; 1,7-1,4m (?H) f) N-(l-karboksi-3-fenyylipropyyli)-L-alanyyli- 1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo-tert.-bu-15 tyyliesteri 305 mg alanyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini- 3-karbonihappobutyyliesteriä (Ala-Tic-OBut) ja 445 mg 4-fenyyli-2-okso-voihappoa liuotetaan 4 ml:aan meca-nolia ja pH säädetään 1-norm. Na0H:n vesiliuoksella 20 arvoon 7,5. Lisätään 200 mg natriumsyaaniboorihydridiä ja annetaan reagoida 36 tuntia. Haihdutetaan kuiviin ja aine otetaan talteen kromatografioimalla kolonnissa silikageelillä (eluointiseos: kloroformi/metanoli/ vesi/jääetikka 20 + 15+-2 + 1) .

25 Saanto: 382 mg; sp. 120°:sta alkaen, hajoten.

g) N-(l-karboksi-3-fenyylipropyyli)-L-alanyyli- 1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 350 mg yhdistettä N-(l-karboksi-3-fenyylipro-pyyli)-Ala-Tic-OBut liuotetaan 3 mlraan vedetöntä 30 trifluorietikkahappoa ja annetaan olla 30 minuuttia huoneen lämpötilassa. Haihdutetaan kuiviin vakuumissa ja jälelle jäänyttä öljyä hierretään kylmän di-isopro-pyylieetterin ja petrolieetterin kanssa.

17 -V69

Saanto: 276 mg amorfista ainetta.

NMR: 7,20 u. 7,10 (s); 4,3 (s, leveä); 3,0-3,9 (m, leveä); 1,23 u. 1,15 (d).

Esimerkki 2 5 N-(l-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-L-alanyyli- 1.2.3.4- tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 4,8 g yhdistettä H-Ala-Tic-0But. Tos-OH liuotetaan 40 ml:aan absoluuttista etanolia, pH säädetään K0H:n etanoliliuoksella arvoon 7 ja lisätään 6,2 g 10 2-okso-4-fenyylivoihappo-etyyliesteriä ja sekoitetaan siten, että läsnä on 9 g jauhettua molekyyliseulaa 4 A, lisäämällä hitaasti liuos, jossa on 2 g natriumsyaani-boorihydridiä 15 mlrssa absoluuttista etanolia.

Noin 20 tunnin kuluttua suodatetaan ja liuotin tisla-15 taan pois vakuumissa. Jäännös jaetaan etikkaesteriin ja veteen liukeneviin osiin, etikkaesterifaasi eroite-taan ja haihdutetaan kuiviin vakuumissa. Jäännös kroma-tografioidaan silikageelillä käyttämällä eluointiai-neena seosta etikkaesteri/sykloheksaani (1:2 1:4).

20 Tuote liuotetaan 20 ml:aan trifluorietikkahappoa ja sekoitetaan 30 min. huoneen lämpötilassa. Trifluori-etikkahappo tislataan pois vakuumissa, sitten tislataan tolueenin kanssa ja kromatografioidaan silikageelillä käyttämällä seosta metyleenikloridi/metano-25 li (10:1).

Saanto: 2,2 g.

Esimerkki 3 N-(l-karboksi-5-aminopentyyli)-L-alanyyli- 1.2.3.4- tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 30 1,2 gramman päälle N-(l-karboksi-5-Boc-amino- pentyyli)-L-alanyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappoa kaadetaan 10 ml jääkylmää trifluorietikkahappoa ja sekoitetaan tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Tämän jälkeen haihdutetaan kuiviin vakuu-35 missä. Jäännös liuotetaan veteen ja kuivataan jäähdy- tyskuivausta käyttäen.

Saanto: 0,95 g.

i8 9 O n 6 9

Esimerkki 4 N-(l-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-L-alanyyli-5 1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 880 mg N-(l-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-L-alanyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappoa liuotetaan 20 ml:aan dioksaani/vesi-seosta (9:1) ja saippuoidaan huoneen lämpötilassa 4,5 ml :11a 1-norm.

10 natriumhydroksidiliuosta. Tunnin kuluttua liuos tehdään happameksi ekvivalenttimäärällä 1-norm. suolahappoa ja pääosa dioksaanista haihdutetaan pois. Jäännös uutetaan useaan kertaan etikkaesterillä, ja liuottimen poistamisen jälkeen, orgaaninen faasi kromato-15 grafioidaan kationinvaihtajalla (D0WEX 50).

Saanto: 630 mg.

Esimerkki 5 N-(l-karbetoksi-3-amino-propyyli)-L-alanyyli- 1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 20 1,1 g N-(l-karbetoksi-3-bensoksikarbonyyliamino- propyyli)-L-alanyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappoa liuotetaan 150 ml:aan metanolia ja hyd-rataan 40°C:ssa normaalipaineessa siten, että läsnä ori 100 mg palladium-aktiivihiili-katalyyttiä (10 %:ista). 25 Reaktion päätyttyä katalyytti suodatetaan pois ja liuotin imetään pois vakuumissa.

Saanto: 0,79 g.

Esimerkki 6 N-(l-karboksi-3-fenyyli-3-tiapropyyli)-alanyyli-30 1,2 ,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo a.) 2-(2-okso-propionyyli)-1,2,3,4-tetrahydro-isokinoliini-3-karbonihappotert-butyyliesteri -50°C:seen jäähdytettyyn liuokseen, jossa on 700 mg yhdistettä Tic-OBut ja 630 mg disyklohek-35 syylikarbodi-imidiä 15 ml:ssa vedetöntä kloroformia,

19 gn-<Q

, - J s sekoitetaan nopeasti vasta tislattu liuos, jossa on 270 mg palorypälehappoa 5 mlrssa kloroformia. Seoksen annetaan olla 16 tuntia syväjäähdytyskaapissa (-20°C) ja erilleen laskehtinut DC-urea suodatetaan pois.

5 Liuos pestään KHSO^-liuoksella ja sen jälkeen KHCO^-liuoksella, kuivataan NajSO^jlla ja konsentroidaan vakuumissa. Yhdiste (öljyä) sisältää hiukan disyklo-heksyyliureaa; sitä kromatografioitiin analyysiä varten silikageelillä seoksella CHCl^/CH^OH 15:1.

10 Samalla tavalla kuin kondensoitaessa palorypäle happoa yhdisteen Tic-OBut kanssa, yhdisteestä Tie, Idc ja vastaavasta J^ketokarbonihaposta valmistetaan seuraavia kondensaatiotuotteita.

ti I 7,3-6,5m (4H)? 2,4s (3H); l,4s 15 CO-CO-CH3 20 v/\/s\/coo"t"c4H9 seuraavien yhdisteiden osalta | T T j havaitaan yhdenmukaisesti seuraa- 25 R vat perusrungolle ominaiset o signaalit 7 ,2s (4H); 5,1-4,3m (3H); 3,9-3,0m (2H); 1,4s (9H) 30 13,Is (1H) ; 7,5s (1H) ; 6,8s *CH2Oh (1H); 3,9-3,0m (4H) 20 '"'f—6 9 -CH2-CH(CH3)2 2,4-1,0 m+d (9H) -CH2-S^3 7,2 -7 , Om (9H); 2,5m (2H) -CH2F 4,4s (2H) 10 -CH /Λ 2 \_/ 7,15s (5H); 3,0s (2H) -CH,-CH-CH--CH, 2,4-1,9m (3H) ; l,5-l,0m (8H)

i. | ^ J

CH,

15 J

'cH2i n 7,8-6,4m (9H); 3,9-2,9m (4H)

H

20 b.) N-(l-karboksi-3-fenyyli-3-tiapropyyli)-ala- nyyli-1,2,3,4-tetrahydro-isokinoliini-3-karbonihappo-tert.-butyyliesteri 1,52 g yhdistettä pyruvyyli-Tic-OBut ja 394 mg S-fenyyli-kysteiiniä liuotetaan 5 ml:aan metanolia : 25 ja pH säädetään 1-norm. NaOHslla (vesiliuos) arvoon 7,0.

Lisätään 400 mg natriumsyaaniboorihydridiä ja seoksen annetaan olla 24 tuntia huoneen lämpötilassa. Haihdutetaan kuiviin vakuumissa, liuotetaan kloroformiin, kuivataan natriumsulfaati11a ja haihdutetaan kuiviin.

30 Tuote saadaan puhtaana kromatografioimalla silikagee-lillä (seos CHC^/O^OH/C^COOH/^O 50/20/5/1).

NMR: 7,3-7,Om (9H); 5,l-4,3m (3H); 3,9-3,0m (4H); 2 ,5m (2 H) .

21 ;V"' ^ 1 c.) N-(l-karboksi-3-fenyyli-3-tiapropyyli)-ala-nyyli-1/2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 1 g esimerkin 6b butyyliesteriä liuotetaan 5 ml: 5 aan trifluorietikkahappoa. Haihdutetaan 30 minuutin kuluttua kuiviin vakuumissa, jäännöstä digeroidaan di-isopropyylieetterin kanssa ja kuivataan kaliumhydrok-sidilla.

Saanto 0,95 g trifluoriasetaattia (hygroskooppista). 10 NMR: 7,4-7,lm (9H); 5,2-4,4m (3H); 3,9-3,0m (4H); 2,5m (2H);1,25m (3H).

Esimerkki 7 N-(l-karbetoksi-2-bentsyylisulfinyylietyyli)-L-alanyyli-L-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 15 Jäillä jäähdytettynä sekoitettuun seokseen, jos sa on 0,64 g natriumperjodaattia ja 20 ml vettä, lisätään 1,3 g N-(l-karbetoksi-2—bentsyylitio—etyyli)-L— alanyyli-L—1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karboni-happoa liuotettuna 20 ml:aan metanolia. Reaktioseosta 20 sekoitetaan 24 tuntia 0°C:ssa ja sen jälkeen natrium-jodaatti suodatetaan pois. Suodos uutetaan useaan kertaan metyleenikloridilla. Liuottimen poistamisen jälkeen saadaan 1,1 g sulfoksidia. NMR-spektrissä on havaittavissa seuraavat signaalit: 7,3-7,0m (9H); 5,l-4,3m 25 (3H); 4,Is (2H); 3,9-3,0m (4H); 2,6m (2H); l,2d (3H).

Esimerkki 8 N-(l-karbetoksi-3-fenyylisulfonyyli-propyyli)-L-alanyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 260 mg N-(l-karbetoksi-3-fenyylitio-propyyli)-L-30 alanyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihap- poa ja 20 mg natriumvolframaatti-dihydraattia lisätään 50 ml:aan vettä ja tiputtamalla lisätään 1 ml per-hydrolia (30 %:sta). Seosta lämmitetään 30 minuuttia 80°C:ssa ja sen jälkeen sekoitetaan tunnin ajan 35 huoneen lämpötilassa. Sen jälkeen ylimääräinen peroksidi 2 2 '1 Π η κ η '' * ~ · ✓ tuhotaan bariumsulfaatilla olevalla palladiumilla ja hapen kehittymisen päätyttyä palladium-katalyytti suodatetaan pois liuoksesta, joka haihdutetaan kuiviin. Raakatuote puhdistetaan ioninvaihtokromatograafises-5 ti DOWEX 50 H+-muodolla.

Saanto: 220 mg NMR: 7,7m (9H); 5,l-4,3m (3H); 3,9-3,0m (4H); 2,8m (2H); 1,5m (2H); l,2d (3H).

Esimerkki 9 10 N-(2-amino-l-karboksipropyyli)-L-alanyyli-1,2,3,4- tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 2,2 g N/* -Boc-oifft -diaminovoihappoa, valmistettu artikkelin Coll. czech, chem. Commun. 31, 2955 (1966) mukaisesti samalla tavalla kuin N* -Boc-yhdistettä, 15 annetaan reagoida 2,4 gramman kanssa yhdistettä pyru-vyyli-Tic-OBut, valmistettu esimerkin 6a) mukaisesti, esimerkissä 6b) selostetulla tavalla. Boc-suojaryhmä lohkaistaan sen jälkeen pois esimerkissä 3 selostetulla tavalla.

20 Saanto: 2,6 g.

Esimerkki 10 N- (1-karboksi-3-fenyylipropyyli)-L-alanyyli- dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo a. L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo (Die) 25 250 g L-l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbo- nihappoa suspendoidaan 2 litraan 90 %:ista etikkahappoa. Lisätään 10 g hiilellä olevaa rodium-katalyyttiä ja hydrataan 24 tuntia 60-80°C:ssa ja 120 baarin paineessa. Suodatettu liuos haihdutetaan kuiviin, jäännös liuo-30 tetaan 200 ml:aan etikkaesteriä ja lisätään tiputtamalla voimakkaasti sekoitettuun 2 litraan di-isopropyyli-eetteriä. Liuos dekantoidaan hartsimaisen jäännöksen päältä, haihdutetaan kuiviin vakuumissa ja sama käsittely toistetaan noin 1/3:11a edellä käytetystä liuotin-35 määrästä. Hartsimaiset sakat yhdistetään ja niitä käsi- 23 tellään kuumalla etikkaesterillä, jolloin ainoastaan osa liukenee- Lisätään juoksuttamalla voimakkaasti sekoittaen 3 litraan dietyylieetteri-di-isopropyylieet-teri-seosta 1:1, jolloin muodostuu höytymäistä sakkaa, 5 joka suodatetaan erilleen, pestään eetterillä ja kuivataan. Saanto: 234 g; ohutkerroskromatograafisesti se ei ole yhtenäistä (diastereoisomeeriseosta). UV-spektrin ja NMR:n perusteella aromaattista ainetta ei enää ole läsnä, alkuaineanalyysi on moitteeton.

10 Ainetta käytetään enempää puhdistamatta seuraa- vassa vaiheessa.

b. N-bentsyylioksikarbonyyli-L-dekahydroisokino-liini-3-karbonihappo (Z-Dic-OH) 58 g L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappoa 15 liuotetaan 315 ml:aan 1-norm. NaOH:a. Voimakkaasti sekoittaen 0-5°C:ssa lisätään tunnin kuluessa tiputtamalla samanaikaisesti 48 ml bentsyylioksikarbonyyli-kloridia ja 370 ml 1-norm. NaOH:a. Tällöin saostuu paksu sakka. Lisäyksen päätyttyä sekoitetaan vielä 2 20 tuntia, sitten uutetaan eetterillä ja sakka suodatetaan erilleen (=diastereoisomeerin "A" natriumsuolaa; saanto 43 g). Suodoksen pH säädetään väkevällä HCl:lla arvoon 1,5-2, jolloin laskehtii erilleen öljyä. Se liuotetaan etikkaesteriin. Vesifaasi uutetaan etikka-25 esterillä, yhdistetyt etikkaesteriliuokset pestään vedellä, kuivataan natriumsulfaati11a ja konsentroidaan pienitilavuiseksi (noin 200 ml:ksi). Lisättäes-sä 15-18 ml sykloheksyyliamiinia (CA) saostuu sakka, joka jäävedellä jäähdyttämisen jälkeen suodatetaan .. . 30 erilleen ja pestään pienellä määrällä kylmää etikka- esteriä ja kuivataan sen jälkeen. Saanto: 48 g (iso-meeriseoksen B CA-suolaa).

"A":n natriumsuola muutetaan CA-suolaksi seuraavasti: yhdiste suspendoidaan 500 ml:aan vettä, päälle 35 kaadetaan kerrokseksi 200 ml etikkaesteriä ja tehdään 2 4 > f· r < q - . H- ^ happameksi väkevällä HClrlla kunnes pH on 1,5-2. Ravistelun jälkeen etikkaesteri-faasi eroitetaan, pestään pienellä määrällä vettä ja kuivataan natriumsulfaatilla. Konsentroidaan kuten edellä ja lisätään 16 ml syklohek-5 syyliamiinia. CA-suola eristetään kuten edellä.

Puhdistusta varten "A":n CA-suola kiteytetään uudelleen kahdeksankertaisesta etikkaesterimäärästä . Sulamispiste 197-198°C, = 7,5° (c = 1, metanolis- sa). Alkuaineanalyysi on moitteeton.

10 "B":n Ca-suola kiteytetään uudelleen nelinker taisesta etikkaesterimäärästä. Sp.: 190° (sintrau-tuu 187°:sta alkaen) 1 ^ = +14,6° (c = 1, metano- lissa). Alkuaineanalyysi on moitteeton.

Vapaita happoja saadaan tunnetulla tavalla 15 suspendoimalla CA-suolat vesi/etikkaesteri-seokseen ja tekemällä happameksi sitruunahapolla. Etikkaesterifaasit pestään pienellä määrällä vettä ja haihdutetaan kuiviin. Saadaan yhdistettä Z-Dic-OH öljymäisenä jäännöksenä .

20 c. Bentsyylioksikarbonyyli-L-dekahydroisokinolii- ni-3-karbonihappo-tert.-butyyliesteri (Z-Dic-OBu*') .

41 g yhdistettä Z-Dic-OH ("A") liuotetaan 35 0 ml s aan metyleenikloridia. Lisätään 52 ml t-butanolia ja 25 1,3 g 4-dimetyyliaminopyridiiniä, jäähdytetään 0°C:seen ja sekoittaen lisätään tiputtamalla liuos, jossa on 29 g disykloheksyylikarbodi-imidiä (DCC) 60 ml:ssa metyleenikloridia. Sen jälkeen sekoitetaan vielä 20 min. 0°C:ssa ja 5 tuntia huoneen lämpötilassa ja erilleen laskehti-30 nut disykloheksyyliurea suodatetaan pois. Suodos haihdutetaan vakuumissa kuiviin, jäännös liuotetaan etikka-esteriin, liuos pestään peräkkäin KHSO^/^SO^liuoksel-la, natriumvetykarbonaatilla (Z-Dic-0H:n reagoimaton -- Na-suola saostuu ja suodatetaan pois) ja vedellä, kui- 35 vataan ja haihdutetaan kuiviin vakuumissa. Jäännös öljy-mäistä. Saanto: 38,5 g /e^7D = “17,3° (c = 1, metano- 25 -)nr;6? lissa) . Analogisen yhdisteen saamiseksi yhdisteestä "B" menetellään samalla tavalla. Saanto 38,1 g, = +6,7° (c = 1, metanolissa).

d. L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo-tert.- 5 butyyliesteri-tosylaatti (H-Dic-OBi^ .TosOH) .

27 g esimerkin 10c mukaisesti valmistettu "A":n yhdistettä hydrataan katalyyttisestä 250 mltssa metano-lia lisäämällä tiputtaen 4-norm. TosOH:n metanoliliuos-ta, Pd/hiili-katalyyttiä, käyttäen pH:n ollessa 4,5 10 (pH-Stat). Suodaettu liuos haihdutetaan sitten kuiviin vakuumissa/ kiteistä jäännöstä digeroidaan eetterin kanssa ja kuivataan. Saanto: 22,6 g. Analyysiä varten kiteytetään uudelleen näyte etikkaesteristä. Sp.: 159-160°C; b = -6»5° (C = 1, metanolissa). Alkuaineana-15 lyysi on moitteton. Yhdiste on ohutkerroskromatograafi-sesti yhtenäistä.

Isomeeriseoksen "B":n esimerkin 10c mukaisesti valmistetun yhdisteen osalta menetellään samalla tavalla. Etikkaesteristä uudelleenkiteytyksen jälkeen saadaan 20 tällöin ainetta, jonka sulamispiste on 162-164°C, = “4 ,4° (c = 1, metanolissa). Alkuaineanalyysi on moitteeton.

e. N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli-L-deka-hydroisokinoliini-3-karbonihappo-tert.-butyy- 25 liesteri (Z-Ala-Dic-OBu*") 12,4 g yhdistettä H-Dic-OBu1" .TosOH, valmistettu esimerkin lOd mukaisesti yhdistettä "A" käyttäen, liuotetaan 250 mitään metyleenikloridia. Lisätään 6,7 g yhdistettä Z-Ala-0H ja 4,05 ml 1-hydroksibensotriatso-.. . 30 lia (HOBt), lisätään 4,2 ml N-etyylimorfoliinia ja 0-4°C: ssa sekoittaen lisätään tiputtamalla liuos, jossa on 6,6 g disykloheksyylikarbodi-imidiä (DCC) 30 ml:ssa metyleenikloridia. 5 tunnin kuluttua suodatetaan, suo-dos haihdutetaan kuiviin, jäännös liuotetaan etikka-35 esteriin ja pestään lämpötilan ollessa 5°C:n alapuo- ~ '*' S' ^ 26 ' j lella 10 %:sella KHSO^/i^SO^-seoksella (1:2), 1-mo-laarisella natriumvetykarbonaatilla ja vedellä, kuivataan natriumsulfaatilla ja liuotin tislataan pois. Jäännös hartsia, liukenee helposti kaikkiin orgaanisiin 5 liuottimiin. Saanto: 15,2 g. Samalla tavalla menetellään isomeeriseoksen "B" yhteydessä, joka voidaan tässä vaiheessa eristää käyttämällä preparatiivista HPLC-kä-sittelyä silikageelillä eluoimalla seoksella klorofor-mi/sykloheksaani (9:1).

1q f. L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karboni- happo-tert.-butyyliesteri-tosylaatti (H-Ala-Dic-OBu*' .TosOH) 8,5 g Z-yhdistettä hydratuan katalyyttisesti esimerkin lOd mukaisesti. Liuottimen tislaamisen jäl-15 keen aluksi hartsimainen jäännös kiteytyy jonkin ajan kuluttua tai hierrettäessä etikkaesterin kanssa ja kiteytetään analyysiä varten uudelleen etikkaesteristä.

Sp.: 151-153°C (haj.), )Ώ = -28,8° (c = 1, metanolis- sa). Alkuaineanalyysi on moitteton. Samalla tavalla 2q menetellään isomeeriseoksen "B" osalta. Saadaan kiteyty-mätöntä hartsia; alkuaineanalyysi on moitteeton.

Samalla tavalla kuin yhdistettä H-Ala-Dic-OBu^ valmistetaan yhdistettä alanyyli-oktahydroindoli-2-karbonihappo-t-butyyliesteriä (H-Ala-Oic-OBu^) ja 25 seuraavia yhdisteitä ja eristetään ensisijaisesti tosy-laatteina (NMR-arvot perusrungon osalta): 4,9 t (1H); 4,5-3,0 m (2H) ; 1,4 s (9H); 1,2 d(3H); 2,0-1,0 m (11H), (H-Ala-Oic-OBu1).

CXX

V C00-t-C.Hq c=o H3C“CH-NH2 27 o n H £1 .J s

Aminokarbonihappo-lähtöainetta oktahydroindoli- 2-karbonihappoa valmistetaan seuraavasti: 45 g indoli-2-karbonihappoa liuotetaan 500 mlraan 4-prosenttista natronlipeää. Lisätään 20 g Raney-nik-5 keliä ja hydrataan 24 tuntia 40°C:ssa. Suodatetaan, tehdään happameksi väk. HCl:lla, liukenematon aines suodatetaan pois ja vesifaasi uutetaan useaan kertaan butanolilla. Orgaaninen faasi konsentroidaan ja kroma-tografioidaan. (CHCl^/metanoli/jääetikka 50:20:5).

10 Saanto: 22 g. Sp.: 260°C.

Samalla tavalla valmistetaan seuraavia yhdisteitä. Yhdisteiden NMR-signaalit ovat seuraavat: /V^N^^-COO-t-C^ 5,1-4,3 m (2H) ; 3,9-3,0 m 15 li A. (2H); 1,4 s (9H); 2,0-1,0m || I 2 (12H)

O R

kun R : H 3,9-3,0 m (4H) 20

CH

.«-S' 2 13,1 s (1H) ; 7,5 s (1H) ; 6,8 s (1H) ; 2,8 m (2H)

H

25

CH

3\ 1,0-2,0 m . (1 5H) ; 0,9 d (6H) CH-CH2- ch3 30 —CH2F 5,1-4,3 m (4H) 7,2 s (SH) ; 2,7-2,0 m (4H) v y—s-ch2-ch2~ 2 8 . ) ' η· < λ CH..-CK--CH- 1,0-2,0 m (21Η) ch3

5 /“V

\_ycii2~ 7,1 5 (5H); 2,7 d (2H) ch — Γ |1 U 7,8-6,4 m (5 H} ; 2,8 m (2H)

H

HO-CH2- 3,7 d (2H) 15 \ /-CH -O-C-NH-CH -CH -CU -CH - 7,1 s {5 H > ; 5,0 s (2H); O 2,4 m (2H) ; 2,0-1 ,0 m (1 8 H) 20 CH2-CKj:-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2- 7,1 s (5H); 5,0 s 0 (2H); 2,4 m (2H); 2,0-1,0 m (2OH) 25 (/ V-CH2-CM>NH-CH2-CH2-CH2- 7,1 s(5H); 5,0s (2H); O 2,4 m (2H) ; 2,0-1,0 m (16H) 29 -)0 0 69 // \S-CH^-O-C-NH-CH^- 7,1 s (5H) ; 5,0 s (2H); 0 2,3 m {2H) H2N\ . C-NCH2CH2CHj- 8,3-7,6 m (2H); 2,9-1,0 m 5 (18H) H2N\ C-NH-CHr- 8,3-7,6 m (2H); 2,9-2,5 m

Hi* (2H) 10

A

\ /-CH2-0-C-NH-CH2CH2- 7,1 s (5H) ; 5,0 s (2 H) ; 0 2,4 m (2H) ; 2,0-1,0 m(14H)

H C

15 <λ /)—NH-CH2-CH2-CH- 7,4 s (1H) ; 2,5 m (2H); 2,3 s (6H); 2,0-1,0 m (16K) CH3

CH

20 /^~N\ // \— NH_CH_ 7,4 s (1 H} ; 2,5 it. { 2H) ; l** 2,3 s (6 H)

CH

3 25 ||- 4,9 m (1H) ; 4,5-3,0 m (2H); COO-t-C.H 1,4 s (9H) ; 2,0-1,0 m (11H) \ C-CH-NH- ni2

O R

30 kun R : H 3/9-3,0 m (4H) CH_ «-2 13,1 s (1H) ; 7,5 s (1H); 35 6,8 s (1H) ; 2,8 m (2H)

H

30 V ) j'\ Γ· ^ Q

CH3\ ,CH-CH2~ 1,0-2,0 m (14H); 0,9 d (6H)

CH3X

5 “cH2F 5,1-4,3 m (4H) ^ -S-CH^-CH- 7,2-7,0 m (5H) ; 2,7-2,0 m(4H) 10 CH -CH_-CH- 1,0-2,0 m (20H) 3 2 | ch3 -CH9- 7,1 s (5H) ; 2,7 d (2H) 15 2 7,8-6,4 m (5 H) ; 2,8 m (2H)

H

20 HO-CH2~ 3,7 d (2H) (/ ^-CH2-0-C-NH-CH2-CH2-CH2-CH2- 7,1 s (5H) ; 5,0 s (2H); 0 2,4 m (2H) ; 2,0-1,0 m (1 7 H) CH2-0-C-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2- 7,1 s (5H) ; 5,0 s (2H); 0 2,4 m (2H) ; 2,0-1,0 m 30 (19H) (/ V\_CH.-0-C-NH-CH -CH_-CH - 7,1 s (5H); 5,0 s (2H); \ / 2 II 2 2 2 ^=7 0 2,4 m (2H); 2,0-1,0 m (15H) 35 31 1 n n < ·) ' <· ✓ CH2-0-C-NH-CH^- 7,1 s (5 H) ; 5,0 s (2H); O 2,3 m (2H)

H Νχ H

5 ^C_N_CH2CH2CHr 8,3-7,6 m (2H); 2,9-1,0 m m (1 7 H)

H Νχ H

^C-N-CH - 8,3-7,6 m (2H); 2,9-2,5 m HN^ * , <2H) 10 (/ V-CH2-0-C-NH-CH2CH2- 7,1 s (5H) ; 5,0 s (2H); O 2,4 m (2H) ; 2,0-1 ,0 m (13H) H3\_ 15 /=r\ 7,4 s (1 H) ; 2,5 m(2H); 2,3 s / ^H-CH2CH2CH2- (6H). 2,0-1 ,0 m (15H)

H3C

H3c7=yv £ Λ—NH-CH,— 7,4 s (1 H) ; 2,5 m (2H) ; 20 y~H 2,3 s (6H)

H3C

g. N-(1—karboksi—3-fenyylipropyyli)-L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo- 25 tert.-butyyliesteri 305 mg alanyyli-dekahydroisokinoliini-3-karboni-happo-t-butyyliesteriä (Ala-Dic-OBut) ja 445 mg 4-fe-nyyli-2-okso-voihappoa liuotetaan 4 ml:aan metanolia ja pH säädetään 1-norm. Na0H:n vesiliuoksella arvoon 7,5.

; 30 Lisätään 200 mg natriumsyaaniboorihydridiä ja seoksen annetaan reagoida 36 tuntia. Haihdutetaan kuiviin ja aine saadaan talteen kromatografroimalla silikageeliko-lonnissa (eluointiseos: kloroformi/metanoli/vesi/jää-etikka 20+15+2+1).

32

- ^ W ‘sj S

Saanto: 376 mg; sp.: 123°:sta alkaen, hajoten.

h. N- (l-karboksi-3-fenyylipropyyli)-L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 350 mg yhdistettä N-(l-karboksi-3-fenyylipro-5 pyyli)-Ala-Dic-OBut liuotetaan 3 ml:aan vedetöntä trifluorietikkahappoa ja annetaan olla 30 minuuttia huoneen lämpötilassa. Haihdutetaan kuiviin vakuumissa ja jälelle jäänyttä öljyä hierretään kylmän di-iso-propyylieetterin ja petrolieetterin kanssa.

10 Saanto: 226 mg amorfista ainetta.

NMR: 7,10 (s); 3,0-3,9 (m, leveä); 1,23 ja 1,15 (d) ; 2,0-1,0 (m, leveä).

Esimerkki 11 N-(l-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-L-alanyyli-15 L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 4,83 g yhdistettä H-Ala-Dic-OBu*" .TosOH liuotetaan 40 ml:aan absoluuttista etanolia, pH säädetään Κ0Η:n etanoliliuoksella arvoon 7 ja lisätään 6,2 g 2-ok-so-4-fenyylivoihappoetyyliesteriä ja sekoitetaan, siten, 20 että läsnä on 9 g jauhettua molekyyliseulaa 4 A, lisää mällä hitaasti liuos, jossa on 2 g natriumsyaaniboori-hydridiä 15 ml:ssa absoluuttista etanolia. Noin 20 tunnin kuluttua suodatetaan ja liuotin tislataan pois vakuumissa. Jäännös jaetaan etikkaesteriin ja veteen liuke-.25 neviin osiin, etikkaesterifaasi eroitetaan ja haihdu tetaan kuiviin vakuumissa. Jäännös kromatografioidaan silikageelillä käyttämällä eluointiin etikkaesteri syk-loheksaani-seosta (1:2—*1:4) .

Tuotetta liuotetaan 30 minuutinuajan 20 ml:aan 30 trifluorietikkahappoa. Trifluorietikkahappo tislataan pois vakuumissa, sitten tislataan tolueenin kanssa kro-matografioidaan silikageelillä seoksella metyleeni-kloridi/metanoli (10:1).

Saanto: 1,8 g.

33 9 0 J 6 9

Esimerkki 12 N-(l-karboksi-3-fenyyli-3-tiapropyyli)-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo a.) 2 -(2-okso-propionyyli)-L-dekahydroisokino-5 liini-3-karbonihappo-tert,-butyyliesteri -50°C:seen jäähdytettyyn liuokseen, jossa on 700 mg yhdistettä Dic-OBut ja 630 mg disykloheksyyli-karbodi-imidiä 15 mltssa vedetöntä kloroformia, sekoitetaan nopeasti jäähdytetty ja vastatislattu liuos, 10 jossa on 270 mg palorypälehappoa 5 ml:ssa kloroformia. Seos jätetään 16 tunniksi syväjäähdytyskaappiin (-20°C) ja erilleen laskehtinut DC-urea suodatetaan pois. Liuos pestään KHSO^- ja sitten KHCO^-liuoksella, kuivataan Na~S0.:lla ja haihdutetaan kuiviin vakuumissa. Yhdiste 15 (öljyä) sisältää hiukan disykloheksyyliureaa; analyysiä varten sitä kromatografioitiin silikageelillä seoksella CHC13/CH30H (15:1).

Samalla tavalla kuin kondensoitaessa palorypälehappoa yhdisteen Dic-OBut kanssa vastaavien a<-keto-20 karbonihappojen kanssa valmistetaan seuraavia konden-saatiotuotteita.

4,9 m (1H) ; 4,2-3,5 m -1 (1H) ; 3,0-1,2 m (UH) ; 2,4 s (3 H) ; 1,4 s (9H) 25 I COO-t-C4H9 CO-CO-CH3 — seuraavien yhdisteiden yh- teydessä havaitaan perusrun-_n | J I ff gon osalta yhtenäisesti ... ||R seuraavat signaalit: 0 5,1-4,8m (1H); 3,9-3,0m (2H); 1,4 s (9H); 2,0-1,0m (12H) 34 \) — CH2~Y'N^| 13'1 s ΠΗ); 7,5 s (1H) ; 6,8s i-NH ΠH) ; 3,9-3,0 m (4H) —CH2-CH(CH3)2 2,4-1,0 m (21H) -CH2-s-Q 7,2-7,0 m (SH) ; 2,5 m (2H) 10 -CH2F 4,4 s <2H) ~ CH2~<yZ/^ 7,15 (5H); 3,0 s (2H) 15 - CH2-p-CH2-CH3 2,4-1,0 m (23H) CH 3 ~CH2 Π-7,8-6,4 m (5H) ; 3,9-2,9 m(4H)

H

b.) N-(l-karboksi-3-fenyyli-3-tiapropyyli)-ala-nyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karboni-25 happo-tert. -bu tyyli esteri 1,52 g yhdistettä pyruvyyli-Dic-OBut ja 394 mg fenyyli-kysteiiniä liuotetaan 5 ml:aan metanolia ja; pH säädetään 1-norm. NaOH:lla (vesiliuos) arvoon 7,0. Lisätään 400 mg natriumsyaaniboorihydridiä ja seoksen 30 annetaan olla 24 tuntia huoneen lämpötilassa. Haihdu tetaan kuiviin vakuumissa, liuotetaan kloroformiin, kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin. Tuote saadaan puhtaana kromatografioimalla silikagee-lillä (seos CHC13/CH30H/CH3C00H/H20 50/20/5/1) .

35 90 069 NMR: 7,3 m (5H); 5,1-4,8 m (1H) ; 3,9-3,0 m (4H); 2,5 m (H H2H) .

c.) N - (1-karboksi-3-fenyyli-3-tiapropyy1i)-ala-nyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 5 1 g esimerkissä 12b saatua butyyliesteriä liuo tetaan 5 ml:aan trifluorietikkahappoa. 30 minuutin kuluttua haihdutetaan kuiviin vakuumissa, jäännöstä di-geroidaan di-isopropyylieetterin kanssa ja kuivataan kaliumhydroksidin päällä.

10 Saanto: 0,95 g trifluoriasetaattia (hygroskooppista).

NMR: 7,3 m (5H); 5,2-4,8 m (1H); 3,9-3,0 m (4H); 2,5 m (2H); 1,25 m (3H).

Esimerkki 13 N-(1-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-L-alanyyli-L-15 dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 880 mg N-(l-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappoa liuotetaan 20 ml: aan dioksaani/vesi-seosta (9:1) ja saippuoidaan huoneen lämpötilassa 4,5 ml :11a 1-norm. natriumhydroksidiliuos-20 ta. Tunnin kuluttua liuos tehdään happameksi ekvivalent-timäärällä 1-norm. suolahappoa ja pääosa dioksaanista haihdutetaan pois. Jäännös uutetaan useaan kertaan etikkaesterillä, ja liuottimen poistamisen jälkeen, orgaaninen faasi kromatografioidaan kationinvaihtajalla ·. 25 (DOWEX 50) .

Saanto: 630 mg.

Esimerkki 14 N- (l-karboksi-5-aminopentyyli)-L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 30 1,2 gramman päälle N-(l-karboksi-5-Boc-amino- pentyyli)-L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karboni-happoa kaadetaan 10 ml jääkylmää trifluorietikkahappoa ja sekoitetaan tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Sen jälkeen haihdutetaan kuiviin vakuumissa. Jäännös liuo-35 tetaan veteen ja kuivataan jäähdytyskuivausta jäyttäen. Saanto: 0 ,90 g.

36 '0Γ'69

Esimerkki 15 N-(l-karbetoksi-3-amino-propyyli)-L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 1,1 g N-(l-karbetoksi-3-bentsoksikarbonyyliamino-5 propyyli)-L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karboni- happoa liuotetaan 150 ml:aan metanolia ja hydra-taan 100 mg:n palladium/aktiivihiili-erän (10 %:ista) läsnäollessa 40°C:ssa normaalipaineessa. Reaktion päätyttyä katalyytti suodatetaan pois ja liuotin imetään 10 pois vakuumissa. Saanto: 0,79 g.

NMR: 5,1-4,8 m (1H); 3,9-2,5 m (6H)j 2,0-1,0 m (14H); 1,2 d (3H).

Esimerkki 16 N-(l-karbetoksi-2-bentsyylisulfinyylietyyli)-L-15 alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo Jäissä jäähdyttäen sekoitettuun seokseen, jossa on 0,64 g natriumperjodaattia ja 20 ml vettä, lisätään 1,3 g N-(l-karbetoksi-2-bentsyyli-tioetyyli)-L-ala-nyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappoa liuotettu-20 na 20 mitään metanolia. Reaktioseosta sekoitetaan sekoitetaan 24 tuntia 0°C:ssa ja suodatetaan sen jälkeen erilleen natriumjodaatista. Suodos uutetaan useaan kertaan metyleenikloridilla. Liuottimen poistamisen jälkeen saadaan 1,1 g sulfoksidia. NMR-spektrissä havai-25 taan seuraavat signaalit: 7,3 m (5H); 5,1-4,8 m (1H); 4,1 s (1H); 3,9-3,0 m (4H); 2,6 m (2H); 1,2 d (3H).

Esimerkki 17 N-(l-karbetoksi-3-fenyylisulfonyyli-propyyli)-L-30 alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 260 mg N-(l-karbetoksi-3-fenyylitio-propyyli)-L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappoa ja 20 mg natriumvolframaatti-dihydraattia lisätään 50 ml:aan vettä ja tiputtamalla lisätään 1 ml per-35 hydrolia (30 %:ista). Seosta lämmitetään 30 min. 80°C:ssa 37 90 06 9 ja sen jälkeen sekoitetaan tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Ylimääräinen peroksidi tuhotaan sitten barium-sulfaatilla olevalla palladiumilla ja hapen kehittymisen päätyttyä liuos suodatetaan erilleen palladium-5 katalyytistä ja haihdutetaan kuiviin. Raakatuote puhdistetaan suorittamalla ioninvaihtokromatografiointi DOWEX 50 H+-muodolla. Saanto: 220 mg.

NMR: 7,7 m (5H); 5,1-4,8 m (1H); 3,9-3,0 m (4H); 2,8 m (2H) ; 1,5 m (2H) ; 1,2 d (3H) .

10 Esimerkki 18 N-(2-amino-l-karboksipropyyli)-L-alanyyli-L-deka-hydroisokinoliini-3-karbonihappo 2,2 g N/5 -Boc-·^, ft -diaminovoihappoa, valmistettu artikkelin Coll. Czech, chem. Commun. 31, 2955 (1966) 15 mukaisesti, annetaan reagoida 2,4 gramman kanssa yhdistettä pyruvyyli-Dic-OBut, valmistettu esimerkin 12a mukaisesti, esimerkissä 12b selostetulla tavalla. Boc-suojaryhmä lohkaistaan tämän jälkeen esimerkissä 14 selostetulla tavalla. Saanto: 2,6 g.

20 NMR: 5,1-4,8 m (1H); 3,9-3,0 m (5H); 2,0-1,0 m (15H); 1,2 d (3H).

Esimerkki 19 L-N-(l-karbetoksi-5-aminopentyyli)-L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 25 a) 35 g N.6 -bentsyylioksikarbonyyli-L-lysiini-etyy- liesteri-hydrokloridia ja 30,6 g ο^-bromipropionihappoa liuotetaan seokseen, jossa on 350 ml dioksaania, 50 ml etanolia ja 75 ml 4-norm. Na0H:a. Sekoitetaan yön ajan huoneen lämpötilassa pitämällä pH vakiona arvossa 8,8-9 30 autotitraattoria käyttäen, minkä jälkeen pH säädetään pienellä määrällä HCl:a arvoon 7-8 ja liuotin tislataan pois vakuumissa. Jäännös liuotetaan mahdollisimman pieneen määrään vettä ja liuoksen'pH säädetään suolahapolla arvoon 5-6. Jäähdytetään jäillä ja sakka suodate-35 taan erilleen lyhyen paikoillaan olon jälkeen, pestään 38 9 0 0 6 9 pienellä määrällä jääkylmää vettä ja eetterillä ja kuivataan vakuumissa. Vesiliuos voidaan muuttaa myös heikosti emäksisen ioninvaihtajan avulla kahtaisioniksi ja puhdistaa. Sen jälkeen suodos yksinkertaisesti lyofi-5 loidaan. Saanto: 12,9 g (52 %).

b) Yhdiste liuotetaan 100 ml:aan dimetyyliform-amidia ja lisätään peräkkäin huoneen lämpötilassa 23 g yhdistettä H-Dic-OBzl. TosOH (valmistettu tavalliseen tapaan aminohaposta kiehuttamalla bensyylialkoholi- 10 tolueenisulfonihapossa vettä eroittaen), 6,5 ml N-etyylimorfoliinia, 6,8 g 1-hydroksibensotriatsolia ja 11 g disykloheksyylikarbodi-imidiä. 4 tunnin sekoittamisen jälkeen urea suodatetaan erilleen, liuotin tislataan pois vakuumissa ja jäännös kromatografioidaan 15 silikageelillä seoksella sykloheksaani-etikkaesteri (4:1).

Tällöin diastereoisomeerit eroittuvat. Otsikon yhdistettä sisältävät yhtenäiset fraktiot yhdistetään, liuotin tislataan pois vakuumissa.

c) Jäännös liuotetaan metanoliin, hydrataan 20 katalyyttisesti Pd/hiilikatalyytillä, ja mahdollisen katalyytin erilleen suodattamisen jälkeen, suoritetaan muuttaminen hydrokloridiksi säätämällä liuoksen pH ar-, voon 3. Liuotin tislataan pois ja jäännös kuivataan vakuumissa.

25 Esimerkki 20 L-N-(l-karbetoksi-3-fenyylipropyyli)-L-alanyyli-L-oktahydroindoli-2-karboksyylihappo a) Seosta, jossa on 55 g 2-bromi-4-fenyyli-n-voihappoetyyliesteriä, 14,5 g L-alaniini-t-butyylies-30 teriä ja 45 ml trietyyliamiinia, pidetään 24 tuntia tetrahydrofuraanissa. Liuotin tislataan pois vakuumissa, jäännös jätetään veteen ja etikkaesteriin liukeneviin osiin, etikkaesterifaasi eroitetaan, kuivataan nat-riumsulfaatilla ja liuotin tislataan pois vakuumissa.

39 O Π P ,< O

Jäännös kromatografioidaan silikageelillä seoksella syk-loheksaani-etikkaesteri (4:1), jolloin puhdistumisen lisäksi tapahtuu myös diastereoisomeerien eroittuminen. Vastaavien fraktioiden konsentroinnin jälkeen pidettäessä yhdistettä 5 trifluorietikkahapossa 20 minuutin ajan t-butyyliesteri lohkeaa. Trifluorietikkahappo tislataan pois vakuumissa ja sen jälkeen tislataan vakuumissa tolueenin kanssa.

b) 7 gN-(l-L-karbetoksi-3-fenyylipropyyli)-L-alaniinia, 11 g oktahydroindoli-2-karbonihappo-bentsyyli-10 esteri-tosylaattia, 3,2 ml N-etyylimorfoliinia, 3,3 g 1-hydroksibensotriatsolia ja 5,5 g disykloheksyylikarbo-di-imidiä annetaan sitten reagoida esimerkin 19b mukaisesti dimetyyliformamidissa, käsittelyä jatketaan siinä selostetulla tavalla ja diastereomeerit erote-15 taan kromatografioimalla silikageelillä seoksella syk- loheksaani-etikkaesteri (4:1). Bentsyyliesteri lohkaistaan kromatograafisesti yhtenäisestä yhdisteestä hydraamalla katalyyttisestä.

Esimerkki 21 20 L-N-/JL-karbetoksi-4- (4,6-dimetyyli-pyrimidyyli- 2-amino) -butyyli7**L“alanyyl:i--b-dekahydroisokino- 1iini-3-karbonihappo a) 15,3 g <ai-bromipropionihappoa ja 41,1 g yhdistettä H-Dic-OBut.TosOH kondensoidaan 300 ml:ssa 25 tetrahydrofuraania, jolloin läsnä on 12,8 ml N-etyyli morfoliinia ja 1,35 g 1-hydroksibentsotriatsolia, käyttämällä 22 g disykloheksyylikarbodi-imidiä. 4 tunnin kuluttua urea suodatetaan pois ja liuotin tislataan pois vakuumissa. Jäännös liuotetaan etikkaesteriin, liuos pes-30 tään natriumvetykarbonaatti- ja sitruunahappoliuoksella ja vedellä, etikkaesteriliuos kuivataan natriumsulfaa-tilla ja liuotin tislataan pois vakuumissa.

b) 3,75 g yhdistettä o4rbromipropionyyli-Dic-0But annetaan reagoida huoneen lämpötilassa 20 ml:ssa tetra- 35 hydrofuraania 2,5 gramman kanssa -(4,6-dimetyyli- pyrimidin-2-yyli-L-ornitiini-etyyliesteriä lisäämällä 1 ml 40 QPn6 9 di-isopropyylietyyliainiinia. 2 4 tunnin kuluttua liuotin tislataan pois vakuumissa, jäännös liuotetaan etikka-esteriin, liuos pestään vedellä, kuivataan natriumsul-faatilla ja haihdutetaan kuiviin vakuumissa. Jäännös kro-5 matografioidaan esimerkin (20 b) mukaisesti diastereo-isomeerien eroittuessa. t-butyyliesteri lohkaistaan liuottamalla yhdiste dioksaani/HCl-seokseen. 10-15 minuutin kuluttua liuotin tislataan pois ja jäännös kuivataan tarkasti vakuumissa K0H:n päällä. Yhdiste on 10 hydrokloridina.

Esimerkki 22 N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-cis-oktahydroindoli-2-S-karboksyylihappo a) N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-alaniini 15 bentsyyliesteri

Uuttamalla etikkaesterillä natriumkarbonaatin vesiliuoksesta, jossa on 70 g alaniini-bentsyyliesteri-tolueenisulfonaattia, saadaan vapaata emästä. Vedettömällä natriumsulfaatilla kuivattuun orgaaniseen faasiin 20 lisätään 200 ml dimetyyliasetamidia (DMA) ja haihdute taan huoneen lämpötilassa kuiviin vesisuihkuvakuumia käyttäen. Kun on lisätty 90 g o£-bromi-fenyyli-voihappo-etyyliesteriä ja 40 ml N-etyylimorfoliinia, liuoksen annetaan olla 4 päivää huoneen lämpötilassa. Reaktion 25 kulkua seurataan ohutkerroskromatograafisesti silikagee- lilevyillä (seos: sykloheksaani/etikkaesteri 2:1). Haihdutetaan lähes kuiviin vakuumissa, pH säädetään 2-norm, suolahapon metanoliliuoksella arvoon 3 ja lisätään 10 ml vettä. Ylimääräinen bromiesteri ja lipofiilinen tuote 30 uutetaan petrolieetteriin, metanolifaasi haihdutetaan kuiviin, lisätään 3 %:sta soodaliuosta (250 ml) ja reaktiotuotteet uutetaan etikkaesteri/eetteri-seokseen (1:1). Kiinteällä natriumsulfaatilla kuivaamisen jälkeen haihdutetaan kuiviin ja puhdistus ja diastereomeerien eroit- 41 ΊΠΠΟ • ' ν - ✓ taminen suoritetaan kromatografioimalla silikageelil-lä (seos sykloheksaani/etikkaesteri 4:1). S,S-yhdisteen R^-arvo on alhaisempi ja laskehtii pääosiltaan raskaampana erilleen (48 %). öljymäistä ainetta käsitellään 5 välittömästi edelleen.

b) N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alaniini 37 g bentsyyliesteriä liuotetaan 250 ml:aan etanolia ja bentsyyli lohkaistaan hydraamalla karalyyttises-ti 2 tuntia normaalipaineessa käyttämällä 1 g Pd/hiili- 10 katalyyttiä (10 % Pd). Katalyytti suodatetaan pois, liuos haihdutetaan vakuumissa lähes kuiviin ja saostami-nen suoritetaan lisäämällä petrolieetteriä.

Saanto: 33 g; amorfista ainetta; NMR: 1,18 (d, 3H) ; 1,18 (t, 3H) ; 1,5-2,1 (m, 2H) ? 15 2,4-2,8 (m, 2H); 3,0-3,4 (2 m, kumpikin 1H); 4,07 (q, 2H) ; 4,3-5,5 (b, 2H) ; 7,17 (s, 5H) . DMSO-dg.

c) N- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-ala-nyyli-cis-oktahydroindoli-2-R,S-karbonihappo-bensyyliesteri 20 5 g N-(l-S-karbetoksi-3-fenyylipropyyli)-S-ala- niinia liuotetaan 20 ml:aan DMF:a. Lisätään 2,45 g 1-hydroksibentsotriatsolia, 5,1 g cis-oktahydroindoli-2-karboksyylihappo-bentsyyliesteri-hydrokloridia, 1,5 ml N-etyylimorfoliinia sekä 4 g disykloheksyylikarbodi- 25 imidiä ja sekoitetaan 3 tuntia huoneen lämpötilassa.

Laimennetaan 30 ml :11a etikkaesteriä ja urea suodatetaan pois. Vakuumissa suoritetun kuiviin haihduttamisen jälkeen jäännös liuotetaan 100 ml:aan eetteriä ja uutetaan 2 kertaa vetykarbonaatin vesiliuoksella. Natrium- 30 sulfaatilla kuivattu ja kuiviin haihdutettu orgaaninen faasi kromatografoidaan silikageelillä. Eluoidaan etikka-ester/petrolieetteri-seoksella 4:3 ja saadaan 2 fraktiota, joista haihduttamalla kuiviin vakuumissa saadaan värittömiä öljyjä.

42 c) O O 6 9

Alkuaineanalyysit: C H N

laskettu yhdisteelle <“31H40I^2®5 71,5 7,7 5,4 Saanto:

Fraktio 1 71,3 7,8 5,3 3,3 g 5 Fraktio 2 71,6 7,6 5,6 3,9 g d) N—(1—S—karbetoksi—3—fenyyli—propyyli)-S-alanyy-li-cis-oktahydroindoli-2-S-karbonihappo 3 g bentsyyliesteriä (fraktio 2) liuotetaan etanoliin ja bensyyli lohkaistaan hydraamalla katalyytti-10 sesti normaalipaineessa 200 mg:11a Pd/hiilikatalyyttiä (10 %). Vedyn sitoutumisen päätyttyä (noin tunnin kuluttua) katalyytti suodatetaan pois ja liuos haihdutetaan kuiviin vakuumissa. Lisätään hiukan pentaania, lämmitetään noin 45°C:seen ja käsitellään tehokkaassa 15 vakuumissa. Muodostuu amorfista, kiinteätä vaahtoa.

Saanto: 2,4 g.

NMR (CDC13): 1,20 (d, 3H); 1,23 (t, 3H); multiplet-ti 1,0-2,9 (11H) ; 3,0-4,5 (m, 3H) ; 4,12 (q, 2H) ; 4,65 (b, 2H); 7,13 (s, 5H) .

20 Esimerkki 23 N-(1-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-alanyyli-oktahydroindoli-2-karbonihappobensyyliesteri a) N-tert.-butyylioksikarbonyyli-alanyyli-okta- hydroindoli-2-karbonihappo-bentsyyliesteri (Boc-Ala-0ic-: 25 OBzl) 19 g yhdistettä Boc-Ala-0H liuotetaan 100 ml: aan DMF:a ja lisätään 13 ml N-etyylimorfoliinia, 13,5 g yhdistettä HOBt sekä 29,6 g oktahydroindoli-2-karboni-happobentsyyliesteri-hydrokloridia. Jäähdytetään jäähau-30 teessä, lisätään 21 g disykloheksyylikarbodi-imidiä ja sekoitetaan 15 tuntia huoneen lämpötilassa. Erilleen laskehtinut urea suodatetaan pois imussa, suodos haihdutetaan kuiviin vakuumissa ja jäännös liuotetaan etikka-esteriin. Uutetaan 3 kertaa KHSO^- ja KHCO^-vesiliuok-35 sella ja kyllästetyillä NaCl-liuoksilla ja orgaaninen 4 3 Π < 9 faasi haihdutetaan kuiviin vakuumissa.

Saanto: 38,5 g.

NMR: 1,26 (d, 3H); 1,40 (s, 9H) ; 1,1-2,4 (m, 12H); 3,2-3,9 (m, 2H) ; 5,28 (s, 2H) ; 7,31 (s, 5H) .

5 b) Alanyyli-oktahydroindoli-2-karbonihappobent- syyliesteri-trifluoriasetaatti 21,5 g yhdistettä Boc-Ala-Oic-OBzl liuotetaan 50 ml:aan trifluorietikkahappoa. Haihdutetaan kuiviin vakuumissa, jäännöstä digeroidaan useaan kertaan di-iso-10 propyylieetterin kanssa ja kuivataan vakuumissa.

Saanto: 21 g.

NMR:ssä tert.-butyyliryhmän protonisignaali puuttuu täydellisesti.

c) N - (l-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-alanyyli-15 oktahydroindoli-2-karbonihappobentsyyliesteri

Seosta, jossa on 11,1 g yhdistettä Ala-Oic-OBzl. TFA, 7 g e^-bromi-fenyylihappoetyyliesteriä ja 3,3 ml N-etyylimorfoliinia, sekoitetaan 4 päivää huoneen lämpötilassa 20 ml:ssa dimetyyliasetamidia. Haihdutetaan 20 lähes kuiviin vakuumissa, jäännös liuotetaan metanoliin, pH säädetään 2-norm. HCl:n vesiliuoksella arvoon 2 ja lipofiiliset yhdisteet uutetaan petrolieetterillä. Metanolifaasi haihdutetaan kuiviin, lisätään 5 %:ista soodaliuosta ja reaktiotuote uutetaan etikkaesteriin.

25 Kromatografoimalla silikageelillä (seos, etikkaes- teri petrolieetteri 5:3) saadaan otsikon yhdistettä värittömänä öljynä.

Seuraavassa esitetyt esimerkkiyhdisteet on valmistettu jollakin seuraavista menetelmistä A-H, jolloin : 30 osoitetut menetelmät ovat luonnehdittavissa seuraavasti: 44 ):-:59

Menetelmä Λ:

Kondensaatiotuotteen, joka on valmistettu esimerkin (6a tai 12a) mukaisesti yhdisteestä Tie tai Dic-0tC4Hg-esteri tai -bentsyyliesteri tai yhdistees-5 tä Oic-OtC^Hg-esteri tai -bentsyyliesteri ja vastaavasta ^-ketokarbonihaposta, pelkistysaminointi vastaavalla aminohappojohdannaisella esimerkin (6b) mukaisesti, suojaryhmien lohkaiseminen esimerkin (6c tai 12c tai 22d) mukaisesti ja mahdollinen saippuointi esimer-10 kin (13) mukaisesti.

Menetelmä B:

Dipeptidi-t-butyyliesterin, joka on valmistettu esimerkin (le tai lOe, f) mukaisesti, pelkistysaminointi vastaavalla otketokarbonihappojohdannaisella esi-15 merkin (lf, lOg, 11) mukaisesti ja mahdollisesti suojaryhmien lohkaiseminen esimerkin (lOh tai 11) mukaisesti ja/tai mahdollisesti esimerkin (13) mukaisesti.

Menetelmä C;

Menetelmän A mukainen pelkistysaminointi ja 20 tO-suojattua bifunktionaalista aminohappoa käytettäes sä, suojaryhmän lohkaisu käytetystä aminohappojohdannaisesta esimerkin 3 tai 14 mukaisesti.

Menetelmä D; Perusaineena olevan rikkiyhdisteen hapettaminen sulfoksidiksi esimerkin 7 tai 16 mukaises-; 25 ti.

Menetelmä E; Perusaineena olevan rikkiyhdisteen hapettaminen sulfoniksi esimerkin (8) tai (17) mukaisesti.

Menetelmä F: 30 Vastaavan N-alkyloidun o^-aminohapon (valmis tettu. esimerkin 19a) mukaisesti kondensointi aminohappo-esterin (esim. yhdisteen Dic-OBu1" tai Dic-OBzl tai 0ic-0Bux: tai Oic-OBzl) kanssa esimerkin 19b tai 22c mukaisesti ja suojaryhmän lohkaisu esimerkin 19c tai 35 22d mukaisesti.

45 Γΐ H < 1

Menetelmä G: N-asyloidun aminohappoesterin, jonka asyyliosassa amidiryhmään nähden α-asemassa on nukleofuuginen ryhmä (kuten esim. halogeeni, aryylisulfonyyli tai alkyylisul-5 fonyyli), valmistettu esimerkin 21a mukaisesti, reaktio vastaavan aminohapon tai vastaavan aminohappoesterin kanssa esimerkin 21b mukaisesti ja suojaryhmien lohkaisu.

Menetelmä H;

Esimerkin 23a, 23b mukaisesti valmistetun dipepti-10 di-bensyyliesterin reaktio vastaavasti substituoidun a- aryylisulfonyyli- tai α-alkyylisulfonyyli- tai a-halogee-ni-karbonihapon tai karbonihappoesterin, valmistettu esimerkin 23c mukaisesti, kanssa ja bensyyliesterin lohkaisu kaavan I mukaisiksi yhdisteiksi esimerkissä 22d mainitul-15 la tavalla.

Ellei toisin ole ilmoitettu, alempana esitettyjen yhdisteiden osalta pätevät seuraavat NMR-arvot (J^-arvot, ppm; TMS standardina):

Dihydroindolin 7,2 - 6,5m (4H); 4,9t (1H); 20 bentseenirengas 3,6 - 3,0m (4H).

Kun kyseessä on etyyliesteri, esiintyvät lisäksi seuraavat signaalit: 4.2 q u Hz (2H) 1.2 t 7 Hz (3H).

25 46 onr'<9

Ξ S S S

vo · . .

^ ^ ι- Ε ° ~ ~ ~ o* ^ cv fv ® <* ’«* ϋ • ' · 1

<*> rv (M M

o\· »g o' δ S\ cv ^ — —

. E ·— E E H

^ *n ^ ί

Ό ~ O VO VO

. rv 1 _ 1 1 £ ™ £ CDS CDS vr Ξ Z ’ *2. · r^ · n r~ rv r~ — r- — e

«H

Φ "k S < < < <

§ S

0 S

s es U-C

a—2

_ I

§ S-S s" X10 ^ ^ V f~° κ ^ o1 υ" o' / *V.

f f 0 in \j f Q 9 .9 w 8 8 8 8 :‘i *-* H =-* =-i : .·. rv χ" J." >

: ^ υ υ o D

»- JT' rl n ”« e 5 5 5

c O O o O

θ' O ^ rv • . P* O CD ao 47 } Π O 6 9 o ^ T“ m ^ w c ·* ·* ,^ Ξ ό Ξ Ξ - ~

™ ^ *~ <N (n rs X

'1- I

ε e e ε e _ °I ·°; o\ ~ <S — JS = Μ ~ rs rs <N n (n ίή ·— — ·' —' ·' ·' — ·> W .. ^ .. i· ~ ~ ς; C ~ Ό - fl S + Zl r^J CD · CO · CD · - «j en ~ in in ^ in — -f — iDrn ^ (Nm \o S ό <n vo rv (Nm 1 - * * i ~ I w | - |~ p p m

g t^.(N O (ΝΓΊ Ό ^ VO LP o m o <N

X r* «- m m *- r«*r- ™ r- J3 ω -p c<<,e:<<< < <u s m

C

0 J° _y __in m un V n~ ΓΤ1 > ~<N “(N “tm ~ =nj

~f» “UUOOU U

u-e =-z . „

j *"i (N

S Y-« V ίί^> <ί?^\ Y =" ><· Φ f 0 O 0 Q f rs rs *' *? _ I ' 1 ' = *·· *— I 1 21—2 *^«««2 rr f j H H 8 . 8 o-y ~ > V, Vs > f-ζ κ~τ =-4 =4 v Ϋ ? ? . - f ) «s sT* aT* -Γ· J- 1« '« >

: : W/ k o υ G G G u G

_ ^Γ>Μίη«ηηι»ι ^ ?: κ e K s k t;

t) U CJ U U U CJ

c O O o o o o o *λ vo t- eo σι 00 ® «o co oo co cd 48 90 0 69 t* u.

C? oo ** ·« ^

2 Cr ~ <N

5. 5 5 ·« r-s a a E -* ' e ~ O' O' — — o 4? „ *^ ^ΓΜ ν' ή E ^ nj pj — w in «_ ** - H 2 H ^ ** u

= <n = - ~ S oi = ~S

- -· s -ο ε .: * s s · rs * w *- E ·* E «-! E ** E P e ~ m -. vS ^ *- _ ί ; ΌΓ>4 VO CT vo rg <n n ro ιο γν • p »S ,w , “ , ~ , “ _ E E ό T3 e s ^in in ^ CO in O <n io <n <n in Ä r- r- r*· ^ γ^τ- m ^ rl r·* pj :*d ·,§ *=<<<< <

CU

4-1 Q>

C

(1)

*”« S

8 y «4° JP Jp m un “ Γ4 n ~ΓΜ ~(M “in “cm “cm =ηι y—« k υ u υ Μ ~<-o u ^ f 1--- 0 δ <9* f ><“ -f -I Ί '1 o 0 “"l, s—z z-z s—z z—z Ί z_z JN n, I I l i ) --f o g aT -Τ' J* _Γ· J'·

"\/· V V V V V V

/f\ N = * bM -n \ ' / os υ u o o ö u _ J?* m *ri n n

* D υ S D ö S

e o o o o o o S H N »n rr un 04 * w σ> m οι 49 η ε m rr

τ- (N

Γ'· ^ ro f© , νο ^ ^ ^ ^ Ε ε 01 ό e ε ™

^ Cl « (M (VJ

in η τ- jj ~ 1 1 ™ K S E S CO CO ·* 00 ro 00. CN · · ^

^ ^ w ^ r- T- S

ε ό ε ε .. — LT» f\ *rm ^ ^ * · ·· 2S“ 2 S £ x Ό·- vDr- in m (Nn inn I ·' I ~ 10' “ K IDS (Ns 4r(N ·» IN 4·(Ν ft · <N · <N · . _ i.

— Γ'·— t~ —' (Nr— Nr- Γ-r- :a$ ε i-H rf ^ a; < < y u 0 +> 8 0) u c 1 <u S (N 5* u-ts Ä ' J° m *£—»Z 32 22 *r*

I ' ” <N (N “L

= =- K u u S s ϋ

O U-K

O I

>.u-o JP

< - .8 V °v 1 y -yt11 o • · '-' II IN n 1

N N S = IN

---- IN S S ft ft = . . k S y ϋ Η υ _ « μ η η »Τ* *— s s s , os u u y 2 v c ® o e> o o Ό r* CO Os ^ cv ^ a> 50 9 0 C 6 9

S

so ·* K W , —. Λ 4* ' S § P n g « *- i i s ε = g " i' n. ·* « - - s Z = St- b t-‘ - ~ ' E ” o> s s; *“ JJ £* Es Es e ^ ZL ^ 2 w> W n 5 £ ™ T tj T tn Te 7« *° ^ "1 -i « * ri S Λ S, ^ *“ f' « r~ N NO r-*· r-‘ ad

M

Q)

4J

0) Q) *~ "« 2 8 υ O-* m J" JP _m m jn

a =-?._ κ ? 3" 3n &* oN

§><;°

>/ Λ ^ 0 f Q

o · 9 9*· ? i ;

V. sM SN

s G V V v -« S S S' «* ° o υ u v c ° o o o o

0ti 05 O r·! CM

^ <7 inm m rH rH rH rH ^ 51 90069 in = έ — 9 ~ _ ~ N t _ Λ w E— I “ ·, — p — r r^rn p'n <n m unvc o

N _ «Ν W .* ~ -T

2 « «-. Ό Ό

M ·' IN — (N ·· O

« s - Ξ ^ C cr

£ ® ® n S

*-· -— "· n «- -w

Ess E" Εκ ε·— ‘Ί™ ^ ™ o m £ π fis

? - “ Cl M

*1 "l M «n «Λ Ji \£>M u!,m *" t^r- n»- <N t- [C ,-0 :<0

E

r—I

OJ

Φ < < < < (-j

G

ci aj <* a o 0 u G-« m jp J0 jn s=-i κ Γγ* Γγ* m "m “m __ i · o o o u y o D-Te

o I

> .P-o 2\= X δ" [Xl

u o 6 V I

^5 "· I· :- I !. O

'c V v V °”? S sf af S*

• o D S O

*« cT =T aT -M -Τ’ - o υ o o u c o o o o o n v m to in tn in m rv

rH i-H t—I rH LO

rH

52 9 n O 6 9 K ^ ^

5 5 5 § N

ε n Ξ n e ΐ _ ~ »o ^ 2. ™ Ό S o F, rg M * ^ o—» -o *" M _ *h ·« N rU »5

es Ä ^ * * *"°i "%fN

2 E S.. 5 5 ” 51- 4 5 ^ 5. in S $> £ ,f = 'f M CM ^ U5^ • IS I Ό I e ie ^ “1 ” * »o ·* in Ji ^

^ »- r- ΓΜ (N r-' fC ,Γ (sT

:rd g

r-I

φ ί « <u 8 s U i 9- _ _m *n tn

““f « <N =«s =N ST

— — _ U U fj N (N

O O-K o o O l ><’°

KJ ? O i O Q

O -«Of ? °i °’i~

o-ώ °e? v V

-V ‘m =T sT S* 5 V V V v -« s" aT tP sT -Γ»

ϋ υ S g D

c O o o o O

.CO 01 o rH C\J

m in ιο id io r-t r-l r-l i-l 53 9Q069 Ä C —· Ό Ό S S <N f-j *n

2 - S

^ w r- , Ό *Ö .s ^ ·' CN ·* CN ·- Λ g ·“ 35 Ξ S s

Ci .. « m - s ** ^ w

Ex m = - p <5 p » «N «- <n in . <5 • — · — · fS .

e ^ e — v ™

- ·' ^ - «n ·* X

s ~ - = - Ci r c S 00 σ' m ö! 5 “ ^ -^ » '-•O — — ex e Ξ s'-· e e

vo ro tn m in — in iK

• '— . ___ , , Ό vo m ·*. io \rj

• w IE i — I Λ I

von il r- CO S CO — rL

• · · · · fn .m r~ <n r~ m es — n·— r» :nj ε <—1 0) „ s ° ° » « 8 *

O

υ S-« m sT J" ;« J" j« — X P* .Γ4 . «N ~(N "Tn P p p υ υ δ · υ·^"χ ./> Λι V s” VJ* V 4 Q φ • .·. W V V V o=w=o o=X=-o "· - S* jn* jo* jm m

: p p D S' S

r« sT sT JT S'

-:**; P u D S D

c ö o o o o ; - · ^ LO to t*-

<0 VO lO VO

- '- ^ ^ ή -I -I

54 90069 ci ci ci ^ ε e c ,- ® in 5 Ä M J ^ * —^ θί ^

d *j ™ ^ (N

Ά ^ E ε p ~ *N o CO <o ^

^ *" ™ rl cn W

.% Ό ^ ^ ä ** ·* rsi Σ CT. fV\ Λ» “ ·* ' 2 w Cl Cl * ro ε = r. e = b - P- “1 2 'C >n Π mm m?3 _. 7 ro ro ~ vo“ 1 l fl i f·* I *» 2 Ί O r-5 05 ri-m f'’- ro rl m ® m r,',.· :t0

G

rH

O

m 4j ci O)

8 £ W M H H H

V ®

i S

“ n U-K _ I =—z _ J. ui m m s»“ s k m

0 u-K ro . ΓΝ M ro ro S

01 OS O n , X (N

Ογ jj -o u J* J" υ W o f o 6 6 w M V V 1" 1« °^=0 k o* tn·» o o»tn-=o u D -T*

: : 1N '<m '(n '«n V

V DO S

1 * t D

*"« a" *" sT g"

.: υ ο o υ D

c o O o o o

J2 CD O rH CNJ

.. ^ to

: ^ ^ ^ -H rH

55 9 0 0 69 rs e

CD

ίΝ

(N <S

« = £ n n m rr T- Ό

·<· (N

k =:-- ~ S CP» rD —,

«—« O

2 = £ - m <n r** vo r» * I E i -3 M in o t- f— 1— n r-

-fO

e r-i

<D

-P

o O) ia ta a s § «

u S

J

~ fS

j mm S-Z ^ - = I o es es sr— ku υ

o u-K

><' o i O u rs ^ Λ-/~ ? ? (/ \ o=w^o CN=w.=o

\=/ "K

u u

I I

<V M

G G

m o «ss o u CO o co *r e- *—f 1—t 56 > η π 9

S

w ® 5. Cl N ri π «·> W ~ w N i. 01 Ό WO T3

. ®1 o ™ ON S

— M ** »“ T· *1" k JC JC CT JC ·* ·*

55 ~ w °ί ϊ° δ 5 N

= »1 -.= II il ^ \0 ip M | . k I I Tl , v Vp n ro “i ^ ™ N Ch -i m <J, g r> ^ ^ n n n 0‘

:«J

G i—I 0)

+J

0) c «f - Φ * < < < < s

fO

£ 8 υ “ n n «j0 -1° Jf* m in

V~K K n “(m “Jm S E

* ci r i ^ N

X-2 . u u CT o o S C-^ei 8s />-=> / '^ n 5 ? f O V ό K "- i V ? T Ϊ

1 I IN CM

S 2 υ υ *"« jT* _p jp jp

C G D S S

c ° o o o o

CO Oi O t—( OJ

CM C\l n CO CO

CM C\i CM CM CM

57 }nn,< o V ' . ν-< /

M (N

+ ·· * w ε c: *- 7 - = = JL ε — cn ^ O m -—· ^ * «.

oj ^ g C

. z: Or- O

_/ * ** tN k — £ ~ ^ - M _

^ ·—·"“' S

Ä CO C“> *V v» w Ό w ^ Λ rs» CN ^ ^ C· * E - E = — r3 E = ® *" 2 Ci — o?:

7 " Ό ΙΛ M

' — 1,0 E JS —. 7-0

°i= ^ ^ - >Λ= (Λ N

^ ^ f- »- tN M3 — M^- :<Ö e

I—I

<u

-P

^ < < < In [n

- S

ci * 8 u — rs «n u-i υ-ci M e: ~ __* OS tN (N ~ ~ _ =-2 u o x o . ΰ-Γκ O i pvj \ ^“° T, /\ s - -C z ™ (N i l G S =Γ* J? y~i f o=i = =~ i

u ? if? I

JN JN

u ‘ U U O

'“β. J*1 «n m

<-> δ S o D

c o o o o o ^ "C LO (Ό t> <^> en n co n cv sv cv C\l cv 58 n ^6? Λ-t 4 •o rri *“

' " ·> K

E tn “ g CT c *1 ·*ι J2 '"'l fN s; ^ <N <N w “

— ~ (N ε . E

g 21 ^ O iT)

z S 5 - £ M

E = E = EH 2 ~ CT

“112 ‘'Id »« n ft Ό VO VO ~ w

^ 4 rl S £ = 2 S

^ ^ ^ n r~ -r- rl ^

WJ

E

•H

0) μ 0) G ^ !* h to d Q) *· 2 n ci 8

V

55 es n in

U-CS «55 = — ^ S

ffi-2 U

^ 1 i 9-^ y-o

li , o ’"o 6 « I

O =T =T =i § !~

:-W " H ? 8 B

»T* M rs ts υ G S g = "« =n *" s « ° u u g J3 c ° o o o o co σ> o vh c\j CO CD V 'Τ ·ςΓ

CU CU CU CU CU

59 Κ;Π.<9 Ό <Ν “Ε — .. Ν ο

S S Ε = E = c*F

— ^ o cc ™ c E <N <NJ m ^ T .. S S s CC V *- Λ. •«‘OJ — in S = - Ξ ~‘ p ^ „

Z w .» S CO E

“ 3e E e e~ f ~

Ci ' ^2. n LT rv! 1T(NJJ

e ~ ™ Ό Te Te f c ’ T z ® °i τ TL TT. - γν Ν " ^ »" r- »- rC^T ri r-J ^ :nS rj r—i <u

+J

a) C ^ < <! < «-

φ “ K

ro S

e 8 d = « 1Λ ΙΛ J" O— es m S E TS — , _ ' K (N “<N Tn - ,Γ*

K-2 O U <J ~ U

O uC*K jc

γ-ο cT

)—z' ®x o

;~ : ., f o Ö O

Ά, /- 2 z sz E 2 - Λ y< -« V ? V V °=4 w * * * > '-

V V V V V

J™ JS JS! JN

u ϋ D ' C ö '"k jT1 «Τ’ J"1 _p jo

c s D S S

c ° o o o o P) Tj· lD '£> ^

C\J CM CM CM CM

6 o H 0 69 ** fsi ** + S ~ <3 Ξ E Ci r: "

^ to VD

e CT '«r m ^ E S I ^ tn rr

''l' « *- - eS S

h fc -_- «Λ m Ό ~ p •'O - = -in

JJ, ~ » —. fN

S 12 5? fS *" z ~ - — h — ..

ε 9 c Ί ~ ε ~

cm ·*> m (N n (N S

VO —

I *0 I — Ό IE

<o <N v s M

*· *· -in

N r- f~ — ·- Γ- IN

e

»H

(U

-P

(1) G ^ l£ 0) *· g n es 8

Zn »n =° S' JT

y-K « N *n -Γ ϋ “ΓΝ s—s u u c_>c- o υ I έΓ« ίΛ V h° -S O ~~ /~z\ s v

~J 'C ~ S* !N

«n* _jn o g o ö 5 «z =Z -2 K ^ I S· W VV ?

-Τ' -Γ* M

D S D

-k sP J?

w . υ D

c o o o

cc en O

^ in

CM CM CM

61 1) :: ) = x x <N <n γν e ε ε r~ r* £ r“' r* x x x

fN (N CN

ε e ε ^ r* co ^ rv rv

* X X

en co r- o: — w- ^ V* A Λ

2 EX EX EX

io n m in mm vo vp vo I *D I Ό I Ό iN rs m <n «o (n :ιϋ *- r- r- r- e

I—I

a) p Q)

°X G

8 s u X (N U-o: jc-cx m

i m X

X X r- {£ <N

g υ-e u x x y \q k R"

V. _JN ' \ (N

ΰ ΰ υ G

I I

«n n rs

U 5 S

T“

K

SS™

Duo e o O o h cu m «H H i—! co ro co 62 s ^

‘ ; - J S

5 = 5- = 2. -- G 3

£ £ * "Γ E

- 5 [2 ^ 5 - = 5 = ^ ^ w CN W« aS c J; £ ~ ^ ^ οε, " ro Di , «_»· rl ™ T3 ~ {Ξ Ξ. o ^ § 5 G : s ε5 -C ε = = « “ 2~ Ä s " " • Ό «. ¥ ·α ό“

Ί 'Ί AS “ϊ " -S

r- - " " » - » ~ · · ^ - r - ^ :(d ε

«-I

ω

n -P

~ S ° « a e ffl 6 C " O (v

V S

s cn u-c j-^i, Jp in ·-. * * rn — M *n "Tv =r S — s: “* — s L> u 9 υ-α

G I

>*r° _/ v. ^ V , R- R Pk o δ δ S A—£

-Γ1 y Vs. V7 .« V

D DG \=/ G—G

*- Π ^ -Γ s* ‘ δ B δ o =" c o o o o ° S Λ ^ r- ro ™ S S S s 6 3 } η n a 9

' e s - JC

® ΓΜ CM n =

rl ‘ w (N

' E T) ^ r~~ CM g — ’ · r~

— *- CM

Γ\· n oi in <n Ξ ™ w ^ ~ „ w

I ~ O — 10 — E

r~ s: Cv VO Cv o CJJ c • r*"i . >w . -w , ~ <N! w" r*·) m fSj M «O rs, -O - O ..M .. 7.

^ CM Λ . _ ___ S'- S r~ ^ o 5 5 E ~ E “ e — w E·-- i; 1/1 — nm m(N g inn n * 1— .w m . ·— 2 Ό · vo I I Ό IE vo i ό ^ E oi cm cm co t Γ~-(Μ • *O » · · · 03 , ^ ^ . f-»- r- <- .

r** :n3

E

r-H

^ S

o ω ° n ° e a

o C

u a)

icM S

o—a __4- jn m m in _ * n ΓΜ CM “cm -cm “cm

O D-T« CO U U U O

O i V ^"°

/ 2\ O

/ XC I ~ S*

JN "Tm y\ O V

y G u C ^==/ 2-=/

— I I I CM

_ΓΜ JM ΓΜ 2

G G 5 V

»- ^2 __n __m nm

K G ΰ G G G

e· o o o o ° σ> o m cm ro

n C\J CM CM CM

ro n ro co co 64 n .<9 m ^ a Ξ

IN

• Ό

"" O

6 g 3 σ>

<N

VO ^ *·** «_ X £ 5 Z 1/Ί • ns 0 Ό 1 π*ι Γ- • *r r*·

UtJ

e r—t 0) c; o a ® S c S 0> T s a m o-a 1 >Λ ΙΛ s-a ^ s -x

i ^ " M

— — — r υ o o υ-κ νγ ^-o y\

^JN fN

U O IN

"tf - V- •A —/ o -- a υ «M»

M X

X o K u Ui C O o sr oo c\j oo 00 n

Claims (2)

65 1 : ; /

1. C5_7-sykloalkyylillä

2. C5_7-sykloalkenyylillä 20 3) hydroksilla 4. fenyylioksilla, joka voi olla substituoitu nietoksilla, etoksilla, karboksilla, karbamoyylillä, aminolla, C^g-alkyyliaminolla, halogeenilla tai nitrolla 5. aminolla 25 6) monoalkyyliaminolla, jossa on enintään 7 hiili- atomia ja jossa alkyyliryhmä voi olla substituoitu hyd roksilla, karboksilla, karbamoyylillä, etoksikarbonyy-lillä, aminolla, C^-alkyyliaminolla, di-C1.4-alkyyliami-nolla, piperidinolla tai morfolinolla 30 7) dialkyyliaminolla, jossa on enintään 7 hiili- atomia ja jossa alkyyliryhmä voi olla substituoitu koh dassa a)6) mainituilla radikaaleilla 8. sykloalkyyliaminolla, jossa on enintään 7 hiiliatomia ja jossa alkyyliryhmä voi olla substituoitu koh-35 dassa a)6) mainituilla radikaaleilla 66 < v 9. disykloalkyyliaminolla, jossa on enintään 7 hiiliatomia ja jossa alkyyliryhmä voi olla substituoitu kohdassa a)6) mainituilla radikaaleilla

10. C1.4-alkoksikarbonyyliaminolla 5 11) fenyylioksikarbonyyliaminolla, jossa fenyyli- ryhmä voi olla mono- tai disubstituoitu C1_2-alkoksilla, metyleenidioksilla, aminolla, hydroksilla, asetoksilla, karboksilla, karbamoyylillä, etoksikarbonyylillä, halogeenilla tai nitrolla 10 12) fenyylialkyylioksikarbonyylillä, jossa fenyy- liryhmä voi olla mono- tai disubstituoitu kohdassa a)11) mainituilla radikaaleilla

13. Ci.g-alkyyliureidolla 14. fenyyliureidolla, jossa fenyyliryhmä voi olla 15 mono- tai disubstituoitu samanlaisilla tai erilaisilla, kohdassa a) 11) mainituilla radikaalileilla 15. fenyylialkyyliureidolla, jossa fenyyliryhmä voi olla mono- tai disubstituoitu kohdassa a)11) mainituilla radikaaleilla 20 16) formyylillä 17. alkanoyyliaminolla, jossa on enintään 10 hiiliatomia 18. fenoyyliaminolla, jossa on enintään 10 hiili-atomia ja jossa fenyyliryhmä voi olla mono- tai disubsti- 25 tuoitu kohdassa a)ll) mainituilla radikaaleilla 19. fenyylialkanoyyliaminolla, jossa on enintään 10 hiiliatomia ja jossa fenyyliryhmä voi olla mono- tai disubstituoitu kohdassa a) 11) mainituilla radikaaleilla 20. fenyyliaminolla, jossa fenyyliryhmä voi olla 30 substituoitu samanlaisilla tai erilaisilla, kohdassa a)ll) mainituilla radikaaleilla 21. fenyylialkyyliaminolla, jossa fenyyliryhmä voi olla substituoitu kohdassa a)ll) mainituilla radikaaleilla 35 22) alkyylimerkapto-, alkyylisulfinyyli- tai al- kyylisulfonyyliryhmällä, jossa on enintään 7 hiiliatomia

67. V'-S ^ ja jossa alkyyliosa voi olla substituoitu nietoksilla, etoksilla, hydroksilla, karboksilla, karbamoyylillä, etoksikarbonyylillä, aminolla tai C^-alkyyliaminolla 23. fenyylimerkapto-, fenyylisulfinyyli- tai fe-5 nyylisulfonyyliryhmällä, jossa fenyyliosa voi olla substituoitu kohdassa a)22) mainituilla radikaaleilla tai halogeenilla, nitrolla tai sulfamoyylillä 24. bentsyylimerkapto-, bentsyylisulfinyyli- tai bentsyylisulfonyyliryhmällä, jossa alkyyliosa voi olla 10 substituoitu kohdassa a)22) mainituilla radikaaleilla ja fenyyliosa voi olla substituoitu edellä alkyyliosan yhteydessä mainituilla tai kohdassa a)23) mainituilla radikaaleilla 25. karboksilla 15 26) karbamoyylillä 27. alkyylikarbamoyylillä, jossa on enintään 6 hiiliatomia 28. sykloalkyylikarbamoyylillä, jossa on enintään 6 hiiliatomia 20 29) dialkyylikarbamoyylillä, jossa on enintään 6 hiiliatomia 30. fenyylikarbamoyylillä 31. fenyylialkyylikarbamoyylillä 32. guanidinolla 25 33) fenyyli-, naftyyli-, dihydronaftyyli- tai tet- rahydronaftyyliryhmällä, joka voi olla mono- tai disubs-tituoitu halogeenilla, hydroksilla, asetoksilla, karboksilla, karbamoyylillä, sulfamoyylillä, nitrolla, metyylillä, etyylillä, nietoksilla ja/tai etoksilla 30 34) 5-7-jäsenisellä monosyklisellä tai 9-10-jäse- nisellä bisyklisellä heterosyklisellä ryhmällä, jonka kaava on 35 68 ·;. i 1 <. 9 -O' o' & O' H ©O' <* Ό H ja joka voi olla substituoitu halogeenilla, hydroksilla, 10 karboksilla, karbamoyylillä, sulfamoyylillä, nitrolla, metoksilla ja/tai etoksilla; b) sykloalkyyli- tai sykloalkenyyliryhmä, jossa on 5-7 hiiliatomia, c) fenyyli- tai osittain hydrogenoitu fenyyliryh- 15 mä, tai d) kohdassa a)34) mainittu mono- tai bisyklinen heterosyklinen ryhmä; ja R3 on vety, alkyyli, jossa on 1-6 hiiliatomia, alkenyyli, jossa on 2-6 hiiliatomia, fe-nyylialkyyli, jossa on 7-14 hiiliatomia, tai p-nitrobent- 20 syyli, tunnettu siitä, että a) kaavan II mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan kaavan III mukaisen yhdisteen kanssa,

25. C00R4 Q-CH-COOR3 U-r2 CO-CH-Q z (II) Rl 1 (III) 30 joissa kaavoissa Rlf R2 ja R3 tarkoittavat samaa kuin edellä, toinen symboleista Q on nukleofuginen ryhmä ja toinen on NH2 ja R4 on H, metyyli, etyyli, bentsyyli tai tert.-butyyli, ja haluttaessa saatu esteri muutetaan kar-boksyylihapoksi (R3 ja/tai R4 = vety), tai 69 ; < V b) yhdiste, jonka kaava on POOC-CH-NH-CH-COOP (IV) k K 5 jossa Rx ja R2 tarkoittavat samaa kuin edellä, P on vety tai toisella symboleista P voi myös olla edellä määritellyn R3:n muut merkitykset, mukaan lukien tert-butyyli, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka kaava on 10 r^\^\^C00R4

15 H jossa R4 tarkoittaa samaa kuin edellä, kondensointiaineen läsnäollessa, ja haluttaessa toinen tai kumpikin esteri-ryhmä muutetaan karboksyylihapoksi, tai 20 c) kaavan VI mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan kaavan VII mukaisen yhdisteen kanssa, C00R/i t=c-coor3

25 -N\ R2 xC0-C=T (VD l R1 (VII) joissa kaavoissa R3, R2, R3 ja R4 tarkoittavat samaa kuin 30 edellä ja toinen symboleista T on vety ja NH2 ja toinen on happi, ja saatu Shiffin emäs pelkistetään; ja haluttaessa saadut rikkifunktiot hapetetaan sulfoksi-deiksi tai sulfoneiksi ja haluttaessa saatu yhdiste muutetaan suolaksi. • v, ✓

1. Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten kaavan I mukaisten dihydroindolijohdannaisten ja nii-5 den fysiologisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, —Ns U>

10 CO-CH-NH-CH-COOR, I I 3 R1 R2 jossa kaavassa Rx on alkyyli, jossa on enintään 6 hiili-atomia ja joka voi olla substituoitu fluorilla, aminolla 15 tai fenyylillä, ja R2 on a) alkyyli, jossa on enintään 6 hiiliatomia ja joka voi olla substituoitu

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa Rj on metyyli ja R2 on fenyyli tai fe-netyy1iryhmä, joka voi olla substituoitu halogeenilla, 5 metyylillä tai nietoksilla. 7i '> O 6 9