CZ277898A3 - Inhibitory serinproteázy a farmaceutický prostředek - Google Patents
Inhibitory serinproteázy a farmaceutický prostředek Download PDFInfo
- Publication number
- CZ277898A3 CZ277898A3 CZ982778A CZ277898A CZ277898A3 CZ 277898 A3 CZ277898 A3 CZ 277898A3 CZ 982778 A CZ982778 A CZ 982778A CZ 277898 A CZ277898 A CZ 277898A CZ 277898 A3 CZ277898 A3 CZ 277898A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- carbon atoms
- alkyl
- pro
- lysininyl
- chr
- Prior art date
Links
- 239000003001 serine protease inhibitor Substances 0.000 title claims description 18
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 69
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 claims abstract description 16
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- -1 C 1 -C 6 alkoxy Chemical group 0.000 claims description 256
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 84
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 43
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims description 26
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 19
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 19
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 17
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 17
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 15
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 claims description 15
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 14
- 150000008574 D-amino acids Chemical group 0.000 claims description 13
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 13
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 12
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 11
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 11
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 11
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 10
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims description 9
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 9
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 8
- 125000004043 oxo group Chemical group O=* 0.000 claims description 8
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 8
- CQYBNXGHMBNGCG-UHFFFAOYSA-N 2,3,3a,4,5,6,7,7a-octahydro-1h-indol-1-ium-2-carboxylate Chemical compound C1CCCC2NC(C(=O)O)CC21 CQYBNXGHMBNGCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 7
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 7
- DZLNHFMRPBPULJ-UHFFFAOYSA-N thioproline Chemical compound OC(=O)C1CSCN1 DZLNHFMRPBPULJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 125000006552 (C3-C8) cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- OMGHIGVFLOPEHJ-UHFFFAOYSA-N 2,5-dihydro-1h-pyrrol-1-ium-2-carboxylate Chemical compound OC(=O)C1NCC=C1 OMGHIGVFLOPEHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 6
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000000051 benzyloxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])O* 0.000 claims description 6
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 6
- HXEACLLIILLPRG-RXMQYKEDSA-N l-pipecolic acid Natural products OC(=O)[C@H]1CCCCN1 HXEACLLIILLPRG-RXMQYKEDSA-N 0.000 claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 6
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 229950001139 timonacic Drugs 0.000 claims description 6
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims description 5
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 5
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 5
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 claims description 5
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims description 5
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 4
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 claims description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- IADUEWIQBXOCDZ-UHFFFAOYSA-N azetidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1CCN1 IADUEWIQBXOCDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 claims description 4
- 125000000640 cyclooctyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims description 4
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 claims description 4
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 4
- 125000006710 (C2-C12) alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- IMSODMZESSGVBE-UHFFFAOYSA-N 2-Oxazoline Chemical compound C1CN=CO1 IMSODMZESSGVBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 claims description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Chemical group CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004473 Threonine Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 3
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims description 3
- 125000001316 cycloalkyl alkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000001712 tetrahydronaphthyl group Chemical group C1(CCCC2=CC=CC=C12)* 0.000 claims description 3
- CBDKQYKMCICBOF-UHFFFAOYSA-N thiazoline Chemical compound C1CN=CS1 CBDKQYKMCICBOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 claims description 3
- 125000001711 D-phenylalanine group Chemical group [H]N([H])[C@@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical group C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 claims description 2
- SRJOCJYGOFTFLH-UHFFFAOYSA-N isonipecotic acid Chemical compound OC(=O)C1CCNCC1 SRJOCJYGOFTFLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 2
- FNNIAKKPBXJGNJ-UHFFFAOYSA-N pyrazolidine-1-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)N1CCCN1 FNNIAKKPBXJGNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 2
- 229940122055 Serine protease inhibitor Drugs 0.000 claims 4
- 101710102218 Serine protease inhibitor Proteins 0.000 claims 4
- HXEACLLIILLPRG-UHFFFAOYSA-N pipecolic acid Chemical compound OC(=O)C1CCCCN1 HXEACLLIILLPRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 125000000229 (C1-C4)alkoxy group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000003504 2-oxazolinyl group Chemical group O1C(=NCC1)* 0.000 claims 1
- UCUNFLYVYCGDHP-BYPYZUCNSA-N L-methionine sulfone Chemical compound CS(=O)(=O)CC[C@H](N)C(O)=O UCUNFLYVYCGDHP-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims 1
- 101100478211 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) spo3 gene Proteins 0.000 claims 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 3
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 abstract description 2
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 abstract description 2
- 230000014508 negative regulation of coagulation Effects 0.000 abstract 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 260
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 189
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 181
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 168
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 131
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 119
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 95
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 86
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 82
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 69
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 61
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 57
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 54
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 52
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 49
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 49
- 238000000034 method Methods 0.000 description 45
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 43
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 41
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 39
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 35
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 33
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 32
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 32
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 29
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 29
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 23
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 22
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 22
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 19
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 17
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 17
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 16
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 16
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 15
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 14
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 14
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 14
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 12
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 12
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 11
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 11
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N tert-butoxycarbonyl anhydride Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)OC(=O)OC(C)(C)C DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 8
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 7
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 7
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 7
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 7
- 229940122388 Thrombin inhibitor Drugs 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 6
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003868 thrombin inhibitor Substances 0.000 description 6
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 5
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 5
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 5
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 5
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 5
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 5
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HXEACLLIILLPRG-YFKPBYRVSA-N L-pipecolic acid Chemical group [O-]C(=O)[C@@H]1CCCC[NH2+]1 HXEACLLIILLPRG-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 4
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 4
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 4
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 4
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PJUPKRYGDFTMTM-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxybenzotriazole;hydrate Chemical compound O.C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 PJUPKRYGDFTMTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FRYULLIZUDQONW-IMJSIDKUSA-N Asp-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FRYULLIZUDQONW-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 3
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 125000006319 alkynyl amino group Chemical group 0.000 description 3
- 239000004019 antithrombin Substances 0.000 description 3
- 108010040443 aspartyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 3
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 3
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 3
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 3
- CBKWNWDCQZFTCJ-UHFFFAOYSA-N diethyl 2-acetamido-2-(4-acetamidobut-2-ynyl)propanedioate Chemical compound CCOC(=O)C(C(=O)OCC)(NC(C)=O)CC#CCNC(C)=O CBKWNWDCQZFTCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- HQEIPVHJHZTMDP-JEDNCBNOSA-N methyl (2s)-pyrrolidine-2-carboxylate;hydrochloride Chemical compound Cl.COC(=O)[C@@H]1CCCN1 HQEIPVHJHZTMDP-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 3
- FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M sodium iodide Chemical compound [Na+].[I-] FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 3
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical class O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 229960002317 succinimide Drugs 0.000 description 3
- HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N thioanisole Chemical compound CSC1=CC=CC=C1 HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- QNGGSVANUAULGK-DDWIOCJRSA-N (2r)-2-amino-3-cyclohexylpropanoic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.OC(=O)[C@H](N)CC1CCCCC1 QNGGSVANUAULGK-DDWIOCJRSA-N 0.000 description 2
- MSZQAQJBXGTSHP-LLVKDONJSA-N (2r)-3-cyclohexyl-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](C(O)=O)CC1CCCCC1 MSZQAQJBXGTSHP-LLVKDONJSA-N 0.000 description 2
- 125000004191 (C1-C6) alkoxy group Chemical group 0.000 description 2
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003161 (C1-C6) alkylene group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003974 3-carbamimidamidopropyl group Chemical group C(N)(=N)NCCC* 0.000 description 2
- HZVTZSFWPLLBRF-UHFFFAOYSA-N 4-chlorobut-2-ynylazanium;chloride Chemical compound Cl.NCC#CCCl HZVTZSFWPLLBRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N N-Butyllithium Chemical compound [Li]CCCC MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 2
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 2
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 2
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 2
- NIJJYAXOARWZEE-UHFFFAOYSA-N Valproic acid Chemical compound CCCC(C(O)=O)CCC NIJJYAXOARWZEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- NEDMOHHWRPHBAL-UHFFFAOYSA-N benzyl pyrrolidin-1-ium-2-carboxylate;chloride Chemical compound Cl.C1CCNC1C(=O)OCC1=CC=CC=C1 NEDMOHHWRPHBAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HTZCNXWZYVXIMZ-UHFFFAOYSA-M benzyl(triethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].CC[N+](CC)(CC)CC1=CC=CC=C1 HTZCNXWZYVXIMZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N benzylamine Chemical compound NCC1=CC=CC=C1 WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XGIUDIMNNMKGDE-UHFFFAOYSA-N bis(trimethylsilyl)azanide Chemical compound C[Si](C)(C)[N-][Si](C)(C)C XGIUDIMNNMKGDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Chemical compound BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 2
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 2
- BGTOWKSIORTVQH-UHFFFAOYSA-N cyclopentanone Chemical compound O=C1CCCC1 BGTOWKSIORTVQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 239000004312 hexamethylene tetramine Substances 0.000 description 2
- 235000010299 hexamethylene tetramine Nutrition 0.000 description 2
- VKYKSIONXSXAKP-UHFFFAOYSA-N hexamethylenetetramine Chemical compound C1N(C2)CN3CN1CN2C3 VKYKSIONXSXAKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- FMMOVZRXLNVNBI-FYZOBXCZSA-N methyl (2r)-2-aminohexanoate;hydrochloride Chemical compound Cl.CCCC[C@@H](N)C(=O)OC FMMOVZRXLNVNBI-FYZOBXCZSA-N 0.000 description 2
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 2
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 2
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 2
- 229940093429 polyethylene glycol 6000 Drugs 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 2
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 2
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 2
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N succinimide Chemical group O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- BNWCETAHAJSBFG-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 2-bromoacetate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)CBr BNWCETAHAJSBFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZJTYRNPLVNMVPQ-GFCCVEGCSA-N tert-butyl n-[(2r)-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]carbamate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](C=O)CC1=CC=CC=C1 ZJTYRNPLVNMVPQ-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 2
- FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium fluoride Chemical compound [F-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- YDMBNDUHUNWWRP-VJBWXMMDSA-N (2s)-1-[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]-n-[(2s)-5-(diaminomethylideneamino)-1-(4-nitroanilino)-1-oxopentan-2-yl]piperidine-2-carboxamide Chemical compound C([C@@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)C1=CC=CC=C1 YDMBNDUHUNWWRP-VJBWXMMDSA-N 0.000 description 1
- BVAUMRCGVHUWOZ-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-(cyclohexylazaniumyl)propanoate Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC1CCCCC1 BVAUMRCGVHUWOZ-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- HBPFWIKVDHYDFG-VIFPVBQESA-N (2s)-2-(cyclooctylamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC1CCCCCCC1 HBPFWIKVDHYDFG-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- SAUDSWFPPKSVMK-LBPRGKRZSA-N (2s)-2-(n-phenylanilino)propanoic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1N([C@@H](C)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 SAUDSWFPPKSVMK-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- WAMWSIDTKSNDCU-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-azaniumyl-2-cyclohexylacetate Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)C1CCCCC1 WAMWSIDTKSNDCU-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- WFPSMPYVXFVVFA-LURJTMIESA-N (2s)-4-methoxy-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound COC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OC(C)(C)C WFPSMPYVXFVVFA-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- DQUHYEDEGRNAFO-QMMMGPOBSA-N (2s)-6-amino-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]hexanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN DQUHYEDEGRNAFO-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 125000006273 (C1-C3) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004454 (C1-C6) alkoxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006711 (C2-C12) alkynyl group Chemical group 0.000 description 1
- NSENYWQRQUNUGD-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-decahydroisoquinolin-2-ium-3-carboxylate Chemical compound C1CCCC2CNC(C(=O)O)CC21 NSENYWQRQUNUGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RCHDLEVSZBOHOS-UHFFFAOYSA-N 1,4-dichlorobut-2-yne Chemical compound ClCC#CCCl RCHDLEVSZBOHOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HTTPGMNPPMMMOP-UHFFFAOYSA-N 1-azaniumyl-2,3-dihydroindene-1-carboxylate Chemical compound C1=CC=C2C(N)(C(O)=O)CCC2=C1 HTTPGMNPPMMMOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RXNZFHIEDZEUQM-UHFFFAOYSA-N 2-bromo-1,3-thiazole Chemical compound BrC1=NC=CS1 RXNZFHIEDZEUQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 1
- GYIUDLLQLVWKPP-UHFFFAOYSA-N 2-propylpentanoyl 2-propylpentanoate Chemical compound CCCC(CCC)C(=O)OC(=O)C(CCC)CCC GYIUDLLQLVWKPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BZQGAPWJKAYCHR-UHFFFAOYSA-N 3,3-diphenylpropanoic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(CC(=O)O)C1=CC=CC=C1 BZQGAPWJKAYCHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HJBLUNHMOKFZQX-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxy-1,2,3-benzotriazin-4-one Chemical compound C1=CC=C2C(=O)N(O)N=NC2=C1 HJBLUNHMOKFZQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004042 4-aminobutyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H] 0.000 description 1
- HVCNXQOWACZAFN-UHFFFAOYSA-N 4-ethylmorpholine Chemical compound CCN1CCOCC1 HVCNXQOWACZAFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical group [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000031104 Arterial Occlusive disease Diseases 0.000 description 1
- 206010003162 Arterial injury Diseases 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDQZEJBSPWDNRJ-YGFGXBMJSA-N C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)N1C([C@@H]2CCCC[C@@H]2CC1)C(=O)O Chemical compound C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)N1C([C@@H]2CCCC[C@@H]2CC1)C(=O)O KDQZEJBSPWDNRJ-YGFGXBMJSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N Chlorine Chemical compound ClCl KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000248349 Citrus limon Species 0.000 description 1
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 1
- 206010051055 Deep vein thrombosis Diseases 0.000 description 1
- ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N Diisopropyl ether Chemical compound CC(C)OC(C)C ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N Dodecane Natural products CCCCCCCCCCCC SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000964562 Homo sapiens Zinc finger FYVE domain-containing protein 9 Proteins 0.000 description 1
- 206010022998 Irritability Diseases 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 239000012901 Milli-Q water Substances 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 101800004937 Protein C Proteins 0.000 description 1
- 208000010378 Pulmonary Embolism Diseases 0.000 description 1
- 108010039286 S 2238 Proteins 0.000 description 1
- 101800001700 Saposin-D Proteins 0.000 description 1
- 102400000827 Saposin-D Human genes 0.000 description 1
- 239000004133 Sodium thiosulphate Substances 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Chemical class 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- RAHZWNYVWXNFOC-UHFFFAOYSA-N Sulphur dioxide Chemical compound O=S=O RAHZWNYVWXNFOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 102100040801 Zinc finger FYVE domain-containing protein 9 Human genes 0.000 description 1
- XAKBSHICSHRJCL-UHFFFAOYSA-N [CH2]C(=O)C1=CC=CC=C1 Chemical group [CH2]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAKBSHICSHRJCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011481 absorbance measurement Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N alpha-acetylene Natural products C#C HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002399 angioplasty Methods 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 208000021328 arterial occlusion Diseases 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MJSHDCCLFGOEIK-UHFFFAOYSA-N benzyl (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) carbonate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)OCC1=CC=CC=C1 MJSHDCCLFGOEIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- SIPUZPBQZHNSDW-UHFFFAOYSA-N bis(2-methylpropyl)aluminum Chemical compound CC(C)C[Al]CC(C)C SIPUZPBQZHNSDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 1
- 150000003857 carboxamides Chemical group 0.000 description 1
- 238000007675 cardiac surgery Methods 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000009903 catalytic hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Chemical class 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Chemical class 0.000 description 1
- KXZJHVJKXJLBKO-UHFFFAOYSA-N chembl1408157 Chemical compound N=1C2=CC=CC=C2C(C(=O)O)=CC=1C1=CC=C(O)C=C1 KXZJHVJKXJLBKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- JZCCFEFSEZPSOG-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate pentahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.[Cu+2].[O-]S([O-])(=O)=O JZCCFEFSEZPSOG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000582 cycloheptyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 description 1
- NKLCNNUWBJBICK-UHFFFAOYSA-N dess–martin periodinane Chemical compound C1=CC=C2I(OC(=O)C)(OC(C)=O)(OC(C)=O)OC(=O)C2=C1 NKLCNNUWBJBICK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- ISOLMABRZPQKOV-UHFFFAOYSA-N diethyl 2-acetamidopropanedioate Chemical compound CCOC(=O)C(NC(C)=O)C(=O)OCC ISOLMABRZPQKOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003438 dodecyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- FRYHCSODNHYDPU-UHFFFAOYSA-N ethanesulfonyl chloride Chemical compound CCS(Cl)(=O)=O FRYHCSODNHYDPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PSLIMVZEAPALCD-UHFFFAOYSA-N ethanol;ethoxyethane Chemical compound CCO.CCOCC PSLIMVZEAPALCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- 125000003187 heptyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- USZLCYNVCCDPLQ-UHFFFAOYSA-N hydron;n-methoxymethanamine;chloride Chemical compound Cl.CNOC USZLCYNVCCDPLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001972 isopentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- JMMWKPVZQRWMSS-UHFFFAOYSA-N isopropyl acetate Chemical compound CC(C)OC(C)=O JMMWKPVZQRWMSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YDCHPLOFQATIDS-UHFFFAOYSA-N methyl 2-bromoacetate Chemical compound COC(=O)CBr YDCHPLOFQATIDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- PMLHJHJCNMWPBW-UHFFFAOYSA-N n-(4-chlorobut-2-ynyl)acetamide Chemical compound CC(=O)NCC#CCCl PMLHJHJCNMWPBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OAHKWDDSKCRNFE-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl chloride Chemical compound ClS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 OAHKWDDSKCRNFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 125000004368 propenyl group Chemical group C(=CC)* 0.000 description 1
- 125000002568 propynyl group Chemical group [*]C#CC([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229960000856 protein c Drugs 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 230000003331 prothrombotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 125000005493 quinolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 150000003355 serines Chemical class 0.000 description 1
- BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N sodium cyanoborohydride Chemical compound [Na+].[B-]C#N BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009518 sodium iodide Nutrition 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Chemical class 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- XJJBXZIKXFOMLP-ZETCQYMHSA-N tert-butyl (2s)-pyrrolidine-2-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)[C@@H]1CCCN1 XJJBXZIKXFOMLP-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 229960003766 thrombin (human) Drugs 0.000 description 1
- 201000005060 thrombophlebitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001732 thrombotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- GBXQPDCOMJJCMJ-UHFFFAOYSA-M trimethyl-[6-(trimethylazaniumyl)hexyl]azanium;bromide Chemical compound [Br-].C[N+](C)(C)CCCCCC[N+](C)(C)C GBXQPDCOMJJCMJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- 229930195735 unsaturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N urethane group Chemical group NC(=O)OCC JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000604 valproic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 239000003039 volatile agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
- C07K5/0202—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-X-X-C(=0)-, X being an optionally substituted carbon atom or a heteroatom, e.g. beta-amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
- C07K5/022—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
- C07K5/022—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2
- C07K5/0222—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2 with the first amino acid being heterocyclic, e.g. Pro, Trp
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
- C07K5/06113—Asp- or Asn-amino acid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
- C07K5/06165—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic and Pro-amino acid; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Oblast techniky
Vynález se týká skupiny inhibitorů serinproteázy a farmaceutického prostředku, který tyto látky obsahuje. Uvedené inhibitory je možno použít pro výrobu farmaceutického prostředku k léčení a prevenci chorob, u nichž dochází k poruchám funkce thrombinu.
Dosavadní stav techniky C .
Serinproteázy jsou enzymy, které mimo jiné hrají důležitou úlohu při srážení krve. Mezi látky, které mohou srážení krve ovlivnit jako proteázy, náleží například thrombin, trypsin, faktory Vila, IXa, Xa, Xla, Xlla a protein C.
Thrombin je serinproteáza, která řídí poslední stupeň koagulační kaskády. Primární funkcí thrombinu je štěpení fibrinogenu za vzniku monomerů fibrinu, které pak zesítěním vytvářejí nerozpustný gel. Mimoto reguluje thrombin svou vlastní produkci aktivací faktorů V a VIII v předchozích stupních kaskády. Má rovněž důležitou funkci na buněčné úrovni, kde působí na specifické receptory za vzniku shlukování destiček, aktivace endotheliálních buněk a proliferace fibroblastů. Tím má thrombin ústřední řídící úlohu při srážení krve a tvorbě thrombů. Vzhledem k tomu, že inhibitory throminu mohou mít široké léčebné použití, provádí se v tomto oboru stále intenzivní výzkum.
Při vývoji syntetických inhibitorů serinproteáz a zvláště thrombinu se zájem soustředí na malé syntetické peptidy, které jsou rozpoznávány proteolytickými enzymy podobně jako přírodní látky. Na základě tohoto výzkumu byly připraveny skupiny nových inhibitorů, podobných peptidům, například inhibitory thrombinu v přechodném stavu.
Snaha nalézt účinnější a selektivnější inhibitory thrombinu stále trvá vzhledem k tomu, že by bylo žádoucí nalézt inhibitory thrombinu, které je možno podávat v nízkých dávkách a které by měly menší množství vedlejších účinků nebo u nichž by byly vedlejší účinky méně závažné.
Mimoto je kladen velký důraz na biologickou dostupnost takových látek při perorálním podání. Účinné inhibitory, vhodné pro nitrožilní podání jsou klinicky používány v akutních případech, vyžadujících okamžité léčení chorob, spojených s poruchami funkce thrombinu. Avšak zvláště při prevenci takových chorob, například srdečního infarktu, thrombosy a mozkové mrtvice je třeba provádět dlouhodobou léčbu a v těchto případech je výhodné perorální podání.
Většina inhibitorů thrombinu peptidové povahy, popsaná v dřívějších publikacích obsahuje postranní řetězce argininu. Inhibitory thrombinu mohou také obsahovat místo argininového řetězce lysinové postranní řetězce, jako například inhibitor N-Me-D-Cha-Pro-Lys-COOH a jeho deriváty, popsané v publikaci Jones a další, J. Enzyme Inhibition, 9, 1995, až 60 a inhibitory vzorce N-Me-D-Phe-Pro-Lys-X, v nichž X znamená karboxamidovou nebo karboxylovou skupinu, popsané v publikaci Lewis a další, Thrombosis and Haemostasis,
74(4), 1995, 1107 až 1112. Mimoto se v publikaci Brady a další, Bioorganic and Medical Chemistry, 3, 1995, 1063 až 1078 popisuje D-Phe-Pro-Lys-ketoester. Další inhibitory thrombinu byly popsány v mezinárodní patentové přihlášce WO 94/25051, v těchto inhibitorech je lysinový nebo argininový postranní řetězec nahrazen aminocyklohexylovými skupinami. Hlavním problémem známých inhibitorů s obsahem argininu a lysinu je jejich nízká biologická dostupnost při perorálním podání.
- 3 Podstata vynálezu
Podstatu vynálezu tvoří nové inhibitory serinproteáz, zvláště thrombinu, obecného vzorce I nh2
A-B-X-NH-CH-C(O)Y (I) kde
A znamená atom vodíku, popřípadě substituovaný D,L-alfahydroxyacetyl, R1, R1-O-C(O)-, R1-C(O)-, R1-SO -, R2OOC-(CHR2)m-S02-, R2OOC-(CHR2) -, H2NCO-(CHR2)^nebo N-ochrannou skupinu, kde R^ se volí ze skupiny alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku, alkenyl nebo alkinyl vždy o 2 až 12 atomech uhlíku nebo cykloalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku, přičemž tyto skupiny mohou být popřípadě substituovány cykloalkylovou skupinou o 3 až 8 atomech uhlíku, alkoxyskupinou o 1 až 6 atomechuhlíku, oxoskupinou, skupinou OH, COOH, CFq nebo atomem 1 2 halogenu, nebo může R znamenat aryl o 6 až 14 atomech uhlíku, aralkyl o 7 až 15 atomech uhlíku nebo aralkenyl o 8 až 16 atomech uhlíku, kde arylové skupiny jsou popřípadě substituovány alkylovou skupinou o 1 až 6 atomech uhlíku, cykloalkylovou skupinou o 3 až 8 atomech uhlíku, alkoxyskupinou o 1 až 6 atomech uhlíku, skupinou OH, COOH, CFq nebo atomem halogenu a R i nezávisle znamená vodík nebo má význam R , m znamena
1, 2 nebo 3, ·· ·· ► · · 4 ’ · · 4 •9 · • · · • · · · • · ·
B znamená chemickou vazbu, zbytek aminokyseliny vzorce
-NH-CH/(CH2) C(O)OH/-C(O)- nebo jejího esterového derivátu, kde p znamená 0, 1, 2 nebo 3, -N(alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku)-CH2~C0-, -N-(alkenyl o 2 až 12 atomech uhlíku)-CH2-CO-, -N(alkinyl o 2 až 12 atomech uhlíku)-CHg-CO-, -N(benzyl)-CH2~CO-, D-l-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-l-Piq, D-3-Piq nebo zbytek D-aminokyseliny s hydrofobním, bazickým nebo neutrálním postranním řetězcem, přičemž tyto zbytky aminokyseliny jsou popřípadě na atomu dusíku substituovány alkylovým zbyt kem o 1 až 6 atomech uhlíku, nebo
4 5
A a B společně tvoří zbytek vzorce R R N-CHR -C(0)-, kde
4,, 1
R a R mají nezávisle význam odpovídající R , R1-O-C(O)-, R1-C(O)~, R1-SO2-, R200C-(CHR2)m-S02-,
R200C-(CHR2) -, H„NCO-(CKR2) - nebo N-ochrannou skum ά m 3 a 5 pinu, nebo je jedna ze skupin R a R spojena s R za vzniku 5- nebo 6-členného kruhu spolu se skupinou
N-C, na niž jsou vázány, přičemž tento kruh může být kondenzován s alifatickým nebo aromatickým 6-členným 5 kruhem a R znamená hydrofobní, bazický nebo neutrální postranní řetězec,
X znamená zbytek L-aminokyseliny s hydrofobním postranním řetězcem, zbytek šeřinu,'threoninu, cyklické aminokyseliny, popřípadě obsahující další heteroatom ze skupiny N, 0 nebo S a popřípadě substituovaný alkylovou skupinou nebo alkoxyskupinou vždy o 1 až 6 atomech uhlíku, benzyloxyskupinou nebo oxoskupinou, nebo znamená X skupinu -NR -CH2~C(O)- nebo fragment
-NH-CH z(CH2)n^
N-CH2-C(O)nebo
tt ·· • 999 « • · · · * • · · · · · • · · · « ·· ··
-5 kde n znamená 2, 3 nebo 4 a
W znamená CH nebo N,
Y znamená vodík, -CHF2, -CFg, -CO-NH-(alkylen o 1 až atomech uhlíku)-CgH5 nebo -C00R6, přičemž R6 znamená vodík, alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku nebo sku7 8 7 8 z· pinu -CONR R , kde R a R nezávisle znamenají vodík nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku nebo společně tvoří alkylenový zbytek o 3 až 6 atomech uhlíku, nebo Y znamená heterocyklický zbytek ze skupiny 2-thiazol, 2-thiazolin, 2-benzothiazol, 2-oxazol, 2-oxazolin a 2-benzoxazol, přičemž tyto heterocyklické zbytky jsou popřípadě substituovány alkylovým zbytkem o 1 až 6 atomech uhlíku, fenylovým zbytkme, aikoxyskupinou o 1 až 6 atomech uhlíku, benzyloxyskupinou nebo oxoskupinou a r znamená celé číslo 0, 1, 2 nebo 3, jakož i prekursory těchto látek a jejich farmaceuticky přija telné soli.
Tyto látky jsou účinnými a selektivními inhibitory serinproteáz a mimoto mají některé z těchto látek dobrou biologickou dostupnost při perorálním podání.
Sloučeniny podle vynálezu je možno použít k léčení a prevenci chorob, zprostředkovaných thrombinem nebo spojených s porušenou funkcí této látky. Jde o řadu thrombotických a prothrombotických stavů, u nichž dochází k aktivaci koagulační kaskády, jako jsou thrombosa hlubokých žil, plicní embolie, thromboflebitida, uzávěry tepen v důsledku thrombosy nebo embolie, opětný uzávěr tepny v průběhu angioplastiky nebo po ní nebo po rozpuštění thrombů, opětné zúžení po poranění tepny nebo po kardiochirurgických zákrocích, • 9.
·· ·· ·· · • · « · · · · • · · · · ··· * · · ··· ····· • · · · · · 9 ·· ·· ·· · pooperační žilní thrombose nebo embolie, akutní nebo chronická atherosklerosa, mozková mrtvice, infarkt srdečního svalu, zhoubné nádory včetně metastáz a neurodegenerativní onemocnění. Sloučeniny podle vynálezu je možno použít jako antikoagulační látky také v mimotělním krevním oběhu, jak je to nutné při dialýze a některých chirurgických zákrocích Mimoto je uvedené látky možno použít in vitro.
Výhodné jsou zejména ty sloučeniny obecného vzorce I, v němž X znamená zbytek L-aminokyseliny s hydrofobním postranním řetězcem, zbytek šeřinu, threoninu nebo skupinu -nr2-ch2-c(o)-.
Dalšími výhodnými sloučeninami podle vynálezu jsou ty látky, v nichž A má svrchu uvedený význam, B znamená che mickou vazbu, zbytek aminokyseliny obecného vzorce
-NH-CH/(CH2)pC(0)OH/-C(0)- nebo jejího esterového derivátu, kde p znamená 0, 1, 2 nebo 3, -N-(alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku)-CH2~C0-, -N(alkenyl o 2 až 6 atomech uhlíku)-CH2~C0 -N(benzyl)-CH2-CO-, D-l-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-l-Piq, D-3-Piq nebo zbytek aminokyseliny s hydrofobním postranním řetězcem, přičemž zbytky aminokyselin jsou popřípadě na ato mu dusíku substituovány alkylovým zbytkem o 1 až 6 atomech uhlíku, nebo A a B společně tvoří zbytek R3R4N-CHR5-C(0)ve svrchu uvedeném významu a X znamená cyklickou aminokyselinu, popřípadě obsahující další heteroatom ze skupiny N, nebo S a popřípadě substituovanou alkylovým zbytkem nebo alkoxyskupinou vždy o 1 až 6 atomech uhlíku, benzyloxyskupinou nebo oxoskupinou nebo znamená X zbytek vzorce -NR2-CH2-C(0)- nebo fragment z(CH2)n -NH-CH
N-CH2-C(O)-NH
N-CH2-C(O)nebo ·· ·♦ • · · ·
• · · · · · · • · · · · · ·· ·· ··
- 7 Jednu z velmi výhodných skupin sloučenin obecného vzorce I tvoří ty látky, v nichž A znamená vodík, 2-hydroxy-3-cyklohexylpropionyl, 9-hydroxyfluoren-9-karboxyskupina,
R1, R1-SO -, R2OOC-(CHR2) -SO -, R200C-(CHR2) -, H NC0-(CHR2) nebo N-ochrannou skupinu, kde R1- znamená alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku, alkenyl o 2 až 12 atomech uhlíku, aryl o 6 až 14 atomech uhlíku, aralkyl o 7 až 15 atomech uhlíku nebo o aralkenyl o 8 až 16 atomech uhlíku, R nezávisle znamenají atom vodíku nebo mají význam, uvedený pro R^, B znamená chemickou vazbu, D-l-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-l-Piq, D-3-Piq nebo zbytek D-aminokyseliny s hydrofobním postranním řetězcem, přičemž aminokyseliny jsou popřípadě na atomu dusíku substituovány alkylovým zbytkem o 1 až 6 atomech uhlíku nebo A a B společně tvoří zbytek R2rSi-CHR5-C(O)-, Y znamená -CO-NH-(alkylen o 1 až 6 atomech uhlíku)-CgHg, -C00R6, -CONR^R7 8 nebo Y znamená heterocyklický zbytek ze skupiny 2-thiazol, 2-thiazolin, 2-benzothiazol, 2-oxazol, 2-oxazolin a 2-benzoxazol.
Zvláště výhodné jsou ty látky, v nichž A znamená vo1 2 2 dík, R -S02~ nebo R OOC-(CHR ) -, B znamená chemickou vazbu
D-l-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-l-Piq, D-3-Piq nebo zbytek
D-aminokyseliny s hydrofobním postranním řetězcem, nebo A 3 4 5 a B společně tvoří zbytek vzorce R R N-CHR -C(0)-, v němž o 3 4 2 2 alespoň jeden ze symbolu R a R znamená skupinu R OOC-(CHR ) o m nebo R -S02 a druhý z těchto zbytků nezávisle znamená alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku, alkenyl nebo alkinyl vždy o 2 až 12 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku, aralkyl o 7 až 15 atomech uhlíku, R^-SO»- nebo R2OOC-(CHR2) - a 2 m
R znamená hydrofobní postranní řetězec, Y znamená skupinu
-CO-NH-(alkylen o 1 až 6 atomech uhlíku)-C^Hp., -COOR8, kde θ 7 8
R znamená vodík nebo alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, -CONR R ,
8 kde R a R nezávisle znamenají vodík nebo alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku nebo R a R tvoří alkylenový zbytek o 3 až 5 atomech uhlíku nebo Y znamená heterocyklický zbytek ze skupiny 2-thiazol, 2-benzothiazol, 2-oxazol nebo 2-benzoxazol.
• ft
2
V případě, že A znamená skupinu R OOC-(CHR )m~» znamená B s výhodou zbytek D-aminokyselinu s hydrofobním postranním řetězcem nebo A a B společně tvoří zbytek
R3R4N-CHR3-C(O)-, kde alespoň jeden ze symbolů R3 a R4 zna2 2 mená skupinu R OOC-(CHR ) - a druhý nezávisle znamená alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku, alkenyl o 2 až 6 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku, benzyl, skupinu R1-SO?nebo R OOC-(CHR ) - a X znamená zbytek 2-azetidinkarboxylové kyseliny, prolinu, kyseliny pipekolové, 4-thiazolidinkarboxylové, 3,4-dehydroprolinu, 2-oktahydroindolkarboxylové kyseliny nebo zbytek -/N(cykloalkyl o 3 až 8 atomech uhlí ku)/-CH2~C(0)-. Nejvýhodnější jsou ty látky, v nichž A znamená H00C-CH2-> B znamená D-Phe, D-Cha, D-Coa, D-Dpa, p-Cl-D-Phe, p-Omethyl-D-Phe, p-Oethyl-D-Phe, D-Nle, m-Cl-D-Phe,
3,4-di-OMe-D-Phe, D-Chg nebo A a B společně tvoří skupinu R3R4N-CHR3-C(0)-, v níž alespoň jeden ze symbolů R3 a R4 znamená skupinu HOOC-CH2~ a druhý nezávisle znamená alkyl, alkyl-SO_- vždy o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové části 5 z nebo HOOC-CH2- a R znamena cykloalkyl o 3 az 8 atomech uhlíku, cykloalkylalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku v cykloalkylové části a 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové části, fenyl, benzyl, popřípadě substituovaný atomem chloru nebo alkoxyskupinou o 1 až 4 atomech uhlíku. Zvláště výhodné jsou také ty látky, v nichž Y znamená heterocyklický zbytek ze skupiny 2-thiazol, 2-benzothiazol, 2-oxazol nebo 2-benzoxazol.
V případě, že A znamená R1-SO2-, znamená B s výhodou chemickou vazbu, D-l-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-l-Piq,
D-3-Piq nebo zbytek D-aminokyselinu s hydrofobním postranním řetězcem nebo tvoří A a B zbytek R3R4N-CHR3-C(O)-, kde o 3 4 1 alespoň jeden ze symbolů R a R znamená skupinu R -SOga druhý nezávisle znamená alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku nebo skupinu R^-SO2-, X znamená zbytek kyseliny 2-azetidin- 9 ·· ·· ·« • · · · · • · · · · • · · · · · • · « · · · • · · · · · · ···· · • · · ·· karboxylové, prolinu, kyseliny pipekolové, 4-thiazolidinkarboxylové, 3,4-dehydroprolinu, 2-oktahydroindolkarboxylové, skupinu -/N(cyklopentyl)/-CH2-C(0)- nebo fragment
-NH-CH
N-CH2-C(O)nebo
Velmi výhodné jsou také ty sloučeniny, v nichž A znamená ethyl-SO2~ nebo benzyl-SO2~, B znamená chemickou vazbu, D-Phe, D-Cha, D-Coa, D-Dpa, p-Cl-D-Phe, p-Omethyl-D-Phe, p-Omethyl-D-Phe, D-Nle, m-Cl-D-Phe, 3,4-di-OMe-D-Phe 3 4 5
D-Chg nebo tvoří A a B společně skupiny R°R N-CHR -C(0)-,
4 kde alespoň jeden ze symbolu R a R znamená ethyl-S02~ nebo benzyl-SO„- a druhý nezávisle znamená alkyl o 1 až 12 ato2 1 5 mech uhlíku nebo R -S02~ a R znamena cykloalkyl o 3 az 8 atomech uhlíku, cykloalkylalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku v cykioalkylové části a 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové části, fenyl, benzyl, difenylmethinyl, přičemž tyto skupiny jsou popřípadě substituovány atomem chloru nebo alkoxyskupinou o 1 až 4 atomech uhlíku. Velmi výhodné jsou ty látky, v nichž Y znamená -CO-NH-CH--CcHc , -CO-NH-CH„CH_.-CCHC nebo 78 7 8 265 2265
-CONR R , kde R a R nezávisle znamenají vodík nebo alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku nebo společně tvoří alkylenový zbytek o 3 až 5 atomech uhlíku nebo Y znamená heterocyklický zbytek ze skupiny 2-thiazol, 2-benzothiazol, 2-oxazol nebo 2-benzoxazol.
Ve sloučeninách obecného vzorce I je nejvýhodnějším významem pro r celé číslo 1.
• ·
• * • · · • ·
- 10 N-ochranná skunina ve významu A .je jakákoliv N-ochranná skuDina. užívaná v chemii nentidů. Vhodné N-oohranné skuDinv jsou uvedenv nanříklad v publikaci T. W. Green a P. G.M. Wuts. Protective Groups in Organic Synthesis. 2. vvdání, Wiley, NY, 1991 a také v publikaci The Peptides, Analysis, Synthesis, Biology, sv. 3, E. Gross a J. Meienhofer, Eds., Academie Press, New York, 1981.
Popřípadě substituovaný D,L-alfa-hydroxyacetyl znamená skupinu obecného vzorce HO-CR R -C(0)-, kde R a R nezávisle znamenají vodík, hydrofobní postranní řetězec nebo Ra a Rb společně tvoří 5- nebo 6-členný kruh, popřípadě kondenzovaný s jedním nebo dvěma alifatickými nebo aromatickými
6-člennými kruhy, přičemž 5- nebo 6-členný kruh je tvořen atomy uhlíku a popřípadě jedením heteroatomem ze skupiny N, a S. Výhodnými D,L-alfa-hydroxyacetylovými skupinami jsou 2-hydroxy-3-cyklohexylpropionylová a 9-hydroxyfluoren-9-karboxylová skupina.
Alkylový zbytek o 1 až 12 atomech uhlíku znamená alkyl s přímým nebo rozvětveným řetězcem s uvedenou délkou řetězce, například methyl, ethyl, terč.butyl, isópentyl, heptyl, dodecyl a podobně. Výhodné alkylové skupiny obsahují 1 až 6 atomů uhlíku. Ještě výhodnější jsou alkylové skupiny o 1 až 4 atomech uhlíku a nejvýhodnějšími alkylovými skupinami ve významech symbolu R , R a R jsou alkylové skupiny o 1 až 3 atomech uhlíku, jako methyl, ethyl nebo isopropyl.
Alkenylová skupina o 2 až 12 atomech uhlíku je nenasycený uhlovodíkový zbytek s přímým nebo rozvětveným řetězcem. Výhodné jsou alkenylové zbytky o 2 až 6 atomech uhlíku. Jako příklady je možno uvést ethenyl, propenyl, allyl a podobně.
4 • 4 « ·
4444 4
4
4 4
• 4 4 4 .Alkylenový zbytek o 1 až 6 atomech uhlíku může mít rovněž přímý nebo rozvětvený řetězec, jde například o zbytky -(CHO) kde m znamená 1 až 6, -CH(CH )-, -CH(CHq)-(CHo)
d. m <5 <5 ed a podobně. Výhodnými alkylenovými zbytky ve významu Y jsou ethylenová a methylenová skupina.
Alkinylová skupina o 2 až 12 atomech uhlíku může mít přímý nebo rozvětvený řetězec a obsahuje trojnou vazbu. Výhodné jsou alkinylové skupiny o 2 až 6 atomech uhlíku, například ethinyl nebo propinyl.
Arylová skupina o 6 až 14 atomech uhlíku je aromatická skupina, která může obsahovat ještě jeden nebo větší počet heteroatomů, například N, S nebo 0. Příkladem arylových skupin mohou být fenyl, naftyl, (iso)chinolyl, insanyl a podobně. Nejvýhodnější skupinou je fenyl.
Aralkylová skupina o 7 až 15 atomech uhlíku a aralkenylová skupina o 8 až 16 atomech uhlíku mohou být alkylové nebo alkenylové skupiny, substituované jednou nebo větším počtem arylových skupin, celkové množství uhlíkových atomů je pro každou skupinu uvedeno.
Alkoxyskupina ve významu různých symbolů může obsahovat 1 až 6 atomů uhlíku a může mít přímý nebo rozvětvený řetězec.
Cykloalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku je například cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl a cyklooktyl. Výhodnými skupinami jsou cyklopentyl a cyklohexyl .
Atomem halogenu může být atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu.
·· • « • · ··· *
·· ♦ · ♦* · * • ·· • · «4» • · >
»· ·» '*» · t · · • · * · • · ··♦· · • · · ♦ · · ·· # · • · ··· • *
Esterovým derivátem se rozumí jakýkoliv příslušný esterový derivát, s výhodou jde o alkylestery o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové části, jako methylester, ethylester nebo terč.butylester.
Pojmy -1 a 3-Tiq znamenají kyselinu 1,2,3,4-tetrahydroisochinolin-1- nebo -3-karboxylovou,’ 1- a 3-Piq znamená 1- a 3-karboxyperhydroisochinolin, Atc je kyselina 2-aminotetralin-2-karboxylová, Aic je kyselina aminoindankarboxylová, Phe je fenylalanin, Cha je cyklohexylalanin,
Dpa je difenylalanin, Coa je cyklooktylalanin, Chg je cyklohexylglycin, Nle je norleucin a Asp je kyselina asparagová
Hydrofobním postranním řetězcem se rozumí alkylový zbytek o 1 až 12 atomech uhlíku, popřípadě substituovaný nejméně jednou cykloaikylovou skupinou o 3 až 8 atomech uhlíku nebo arylovou skupinou o 6 až 14 atomech uhlíku, popřípadě obsahující heteroatom, například atom dusíku a může tedy jít o cyklohexyl, cyklooktyl, fenyl, pyridinyl, naftyl, tetrahydronaftyl a podobně, přičemž hydrofobní postranní řetězec může být popřípadě substituován atomem halogenu, trifluormethylovou ;skupinou, nižším alkylovým zbytkem, jako je methyl nebo ethyl, nižší alkoxyskupinou, například methoxyskuplnou, fenyloxyskupinou, benzyloxyskupinou a pod.
Pod pojmem substituovaný se ve významu různých substituentů rozumí substituce jedním nebo větším počtem substituentů.
Aminokyseliny s bazickým postranním řetězcem jsou například arginin a lysin, s výhodou arginin. Aminokyselinami s neutrálním postranním řetězcem jsou například methioninsul fon a podobně.
• · · · > · ·· • · · · ·
Cyklické aminokyseliny jsou například kyselina 2-azetidinkarboxylová, prolin, kyselina pipekolová, 1-amino-1-karboxycykloalkan o 3 až 8, s výhodou 4, 5 nebo 6 atomech uhlíku v cykloalkanové části, kyselina 4-piperidinkarboxylová, kyselina 4-thiazolidinkarboxylová, 3,4-dehydroprolin, azaprolin, kyselina 2-oktahydroindolkarboxylová a podobně. Výhodné jsou kyseliny 2-azetidinkarboxylová, prolin, kyselina pipekolová, kyselina 4-thiazolidinkarboxylová, 3,4-dehydroprolin a kyselina 2-oktahydroindolkarboxylová.
Prekursorem se rozumí sloučenina, v níž je vedlejší řetězec alkinylaminoskupina ve sloučenině obecného vzorce I chráněn,’ například hydroxyskupinou, alkoxyskupinou o 1 až 6 atomech uhlíku nebo alkoxykarbonylovou skupinou o 1 až 6 atomech uhlíku v alkoxylové části.
Vynález se dále týká způsobu výroby sloučenin obecného vzorce I, včetně vazby chráněných aminokyselin nebo analogů aminokyselin s následným odstraněním ochranných skupin.
Sloučeniny obecného vzorce I.mohou být připraveny způsobem, obvyklým pro výrobu takových sloučenin. Modifikovaná aminokyselina s alkinylaminoskupinou jako postranním řetězcem se zavádí způsobem, který je obdobný jako při výrobě jiných aminokyselin.
Postupuje se tak, že se Nalfa-chráněné (a v případě reaktivních postranních řetězců také na postranním řetězci chráněné) deriváty aminokyselin nebo peptidů aktivují a naváží na vhodný derivát aminokyseliny nebo peptidu s chráněnou karboxylovou skupinou v roztoku nebo na pevném nosiči. Ochrana aminoskupiny v poloze alfa se obvykle provádí urethanovou funkcí, například terč.butyloxykarbonylovou skupinou Boc, labilní v kyselém prostředí, benzyloxykarbonylovou • · • 99 • 999 9
skupinou Z nebo substituovanými analogy 9-fluorenylmethyloxykarbonylové skupiny Fmoc, labilní v alkalickém prostředí. Skupinu Z je možno odstranit také katalytickou hydrogenací. Další vhodné ochranné skupiny pro aminoskupinu zahrnují Nps, Bmv, Bpoc, Msc a podobně. Souhrn ochranných skupin pro aminoskupiny je možno nalézt v publikaci The Peptides, Analysis, Synthesis, Biology, sv. 3, E. Gross a J. Meienhofer, Eds., Academie Press, New York, 1981. Karboxylovou skupinu je možno chránit tvorbou esteru, například tvorbou esterů, labilních v alkalickém 'prostředí, jako methylesteru nebo ethylesteru, esterů, labilních v kyselém prostředí, jako tercbutylesteru nebo hydrogenolyticky labilních esterů, jako benzylesteru. Alkinylaminoskupinu jako postranní řetězec je možno chránit rovněž při použití svrchu uvedených skupin. Aktivaci karboxylové skupiny příslušně chráněných aminokyselin nebo peptidů je možno uskutečnit tvorbou azidu, směsného anhydridu, aktivního esteru nebo karbodiimidu, zvláště v přítomnosti katalytických látek a látek, potlačujících racemizaci, například 1-hydroxybenzotriazolu, N-hydroxysukcinimidu, 3-hydroxy-4-oxo-3,4-dihydro-l,2,3-benzotriazinu nebo N-hydroxy-5-norbornan-2,3-dikarboximidu, jak je popsáno například ve svrchu uvedené publikaci The Peptides, Analysis, Synthesis, Biology nebo v publikaci Pure and Applied Chem., 59(3), 331 až 344, 1987.
Sloučeniny podle vynálezu je možno izolovat z reakční směsi ve formě farmaceuticky přijatelných solí nebo je tyto soli možno vytvořit ze získané volné baze vzorce I působením organické nebo anorganické kyseliny jako kyseliny chlorovodíkové, bromovodíkové, jodovodíkové, sírové, fosforečné, octové, propionové, glykolové, maleinové, malonové, methansulfonové, fumarové, jantarové, vinné, citrónové, benzoové nebo askorbové.
Sloučeniny podle vynálezu mají nejméně jeden chirální atom uhlíku a mohou tedy být získány jako čisté enanciomery, • · · jako směs enanciomerů nebo jako směs diastereomerů. Postupy pro získání čistých enanciomerů jsou známé, jde například o krystalizaci solí, získaných s opticky aktivními kyselinami nebo chromatografií s použitím chirálních sloupců, popřípadě v reverzní fázi.
Sloučeniny podle vynálezu je možno podávat enterálně nebo parenterálně, denní dávka pro člověka bude obvykle 0,001 až 100 mg/kg hmotnosti, s výhodou 0,01 až 10 mg/kg. Ve farmaceutických prostředcích je možno použít různé pomocné látky, popsané například v publikaci Gennaro a další, Remingtons Pharmaceutical Sciences, 18. vydání, Mack Publishing Company, 1990, zvláště část 8: Pharmaceutical Preparations and Their Manufacture, směs účinné látky a pomocných látek je možno zpracovat na pevné lékové formy, jako pilulky, tablety nebo na kapsle nebo čípky. V kapalné formě je uvedené látky možno aplikovat také ve formě roztoků, suspenzí nebo emulzí v injekční formě nebo jako spreje, například do nosu.
Při výrobě lékových forem, například tablet padá v úvahu použití běžných přísad, například plniv, barviv, polymerních pojiv a podobně. Obecně je možno použít jakoukoliv farmaceutickou pomocnou látku, která neinterferuje s účinností účinných látek. Vhodnými nosiči jsou například laktosa, škrob, deriváty celulosy a podobně nebo směsi uvedených látek.
Praktické provedení vynálezu bude osvětlen následujícími příklady, které však nemají v žádném směru sloužit k omezení rozsahu vynálezu.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
HOOC-CH2-D-Cha-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl) část a: l-amino-4-chlor-2-butin-hydrochlorid
V 600 ml chloroformu se rozpustí 73,8 g 1,4-dichlor-2-butinu. Přidá se 84,0 g hexaminu a reakčni směs se 2,5 hodiny zahřívá pod refluxem, a následně se 24 hodin chladí na teplotu 5°C. Po oddělení 220 g hexaminového komplexu filtrací se reakčni roztok tohoto komplexu v 1 1 etanolu 24 hodin míchá při teplotě místnosti za přítomnosti 180 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Filtrací se oddělí chlorid amonný jako sraženina a filtrát se zahustí za sníženého tlaku tak, aby nedošlo ke krystalizací. Po přidání dietyleteru vznikne hydrochlorid l-amino-4-chlor-2-butinu jako sraženina. Krystalizací ze směsi etanolu a eteru vznikne 59,75 g výsledné sloučeniny.
TLC: Rf = 0,60, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu, metanolu a vody v poměru 70:30:5.
část b: l-acetylamino-4-chlor-2-butin
Ve 335 ml 10% vodného roztoku octanu sodného se rozpustí 59,75 g l-amino-4-chlor-2-butin-hydrochloridu a do reakčního roztoku se přidá 500 ml etylacetátu. Po kapkách se při teplotě místnosti přidá 70 ml anhydridu ·· ·· • · · · • · ·· • * · · • · · · ·· ·
kyseliny octové. Přidá se 25% vodný roztok octanu sodného k dosaženi pH 5 a reakční roztok se 30 minut míchá při teplotě místnosti. Etylacetátový podíl se oddělí, vodný podíl se extrahuje dvakrát etylacetátem a sloučené organické podíly se promyjí vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem sodným, filtruje se a odpařuje ve vakuu za vzniku 58,8 g žlutého sirupu výsledné sloučeniny.
TLC: Rf = 0,99, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu, metanolu a vody v poměru 70:30:5.
část c: dietylester kyseliny acetamido(4-acetamido-2butinyl)malonové
Do roztoku 3,48 g 60% disperze hydridu sodného v minerálním oleji v 70 ml dioxanu zchlazeného na teplotu 0°C se po kapkách přidá 70 ml absolutního etanolu. Reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a po kapkách se přidá roztok 20,5 g dietyl-acetamido-malonátu v 70 ml dioxanu. Po přidání 9,07 g jodidu sodného a při teplotě místnosti přidá po kapkách roztok 11 g 1-acetylamino-4-chlor-2-butinu ve 140 ml dioxanu. Po přidání dalších 100 ml etanolu se směs 2,5 hodiny zahřívá pod refluxem. Reakční směs se zchladí a vytvořená sraženina se oddělí filtrací. Zbytek se po absorbcí na oxid křemičitý čistí chromatografií při eluci směsí etylacetátu a metanolu v poměru 9:1 za vzniku 15,9 g dietylesteru kyseliny acetamido-(4-acetamido-2-butinyl)malonové.
TLC: Rf = 0,25, silikagel, eluční činidlo: etylacetát.
• · · 9 · ··
9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9
999999 999 999
9 9 9 9
9 9 9 99 • · část d: dihydrochlorid 2,6-diamino-4-hexinové kyseliny (H-lysinin-dihydrochlorid)
Ve směsi 140 ml kyseliny octové a 290 ml 6M roztoku kyseliny chlorovodíkové se rozpustí 7,64 g dietylesteru kyseliny acetamido(4-acetamido-2-butinyl)malonové. Reakční roztok se přes noc zahřívá na teplotu 95°C.
Směs se zahustí ve vakuu a vytvořený zbytek se nechá krystalizovat ze směsi etanolu a vody za vzniku 4,0 g krystalického prášku výsledné sloučeniny.
část e: Boc-lysininyl(Cbz)-OH
Do roztoku 500 mg dihydrochloridu 2, 6-diamino-4-hexinové kyseliny v 17 ml směsi dioxanu a vody v poměru 3:2 se přidá 287 mg pentahydrátu sulfátu měďnatého. Přidáním 2M roztoku hydroxidu sodného se přivede pH 9. Po kapkách se přidá roztok 573 mg N-(benzyloxy-karbonyl-oxy)sukcinimidu 10 ml dioxanu při teplotě místnosti při zachování pH mezi 9-9,5 přidáváním 2M roztoku hydroxidu sodného. Po ukončení adice se reakční směs míchá přes noc při teplotě místnosti. Reakční směs se filtruje a vytvořená sraženina se uvede do suspenze ve 20 ml dioxanu. Přidá se 500 mg di-t-butyldikarbonátu a pH směsi se přidáním 4M roztoku hydroxidu sodného se přivede na pH 12-13. Reakční směs se přes noc míchá při teplotě místnosti, směs se pak filtruje a filtrát se promyje vodou. Přidá se 4M roztok kyseliny chlorovodíkové k pH 2 a vodný podíl se dvakrát extrahuje dichlormetanem. Sloučené organické podíly se promyjí vodou, ·· > «
I · • · · suší se nad síranem sodným a rozpouštědlo se odstraní odpařováním za vzniku 540 mg Boc-lysininyl(Cbz)-OH. TLC: Rf = 0,70, silikagel, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 63:20:6:11.
část f: Boc-lysininyl(Cbz)-NMeOMe
Do roztoku 1,4 g Boc-lysininyl(Cbz)-OH v 50 ml dichlormetanu se přidá 363 mg N,O-dimetyl-hydroxylamin-hydrochloridu a 1,2 g [2-(ΙΗ-benztriazol-l-yl)-1,1,3,3-tetrametyluronium-tetrafluorborátu. Přidáním N,N-diisopropyletylaminu se reakční směs přivede na pH 9-10. Reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti a důkladně se promyje studeným 2M roztokem kyseliny chlorovodíkové, vodou, 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou. Organický podíl se suší nad síranem sodným, filtruje se a zahustí se odpařováním. Vytvořený zbytek se po absorbci na oxid křemičitý čistí chromatografií při eluci směsí etylacetátu a heptanu v poměru 3:2 za vzniku 1,37 g Boc-lysininyl(Cbz)-NMeOMe TLC: Rf = 0,70, silikagel, eluční činidlo: směs etylacetátu a heptanu v poměru 4:1.
část g: Boc-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolyl)
Do míchaného roztoku 10,9 mmol n-butyllithia v 10,9 ml dietyleteru o teplotě -78°C se po kapkách přidá roztok 1,78 g 2-bromthiazolu v 10 ml dietyleteru. Reakční roztok se nejprve 30 minut míchá při teplotě -78°C, a
00
0 0
0
0 0 4
0 0 00 00 > 0 0 ► 0 0
000 « pak se pomalu přidává roztok 1,37 g Boc-lysininyl(Cbz)-NMeOMe v 15 ml bezvodého tetrahydrofuranu. Reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě -78°C, a přidá se 5% vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a podíly se oddělí. Vodný podíl se extrahuje dietyleterem. Sloučené organické podíly se promyjí vodou, suší se nad síranem sodným, filtrují se a zahustí se odpařováním. Zbytek se po absorbci na kolonu oxidu křemičitého čistí chromatografií při eluci směsí etylacetátu a heptanu v poměru 1:1 za vzniku 1,21 g výsledné sloučeniny.
TLC: Rf = 0,72, silikagel, eluční činidlo: směs etylacetátu a heptanu v poměru 3:1.
část h: H-lysinyl(Cbz)-(2-thiazolyl) -TFA
V 15 ml směsi kyseliny trifluoroctové a dichlormetanu v poměru 1:1 se rozpustí 1,21 g N-Boc-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolyl) a reakční směs se 1 hodinu míchá pří teplotě místnosti. Surový amin se po odstranění rozpouštědla odpařováním oddělí jako žlutý olej s kvantitativním výtěžkem a bez dalšího čištění se použije k přípravě sloučeniny N-BOc-N-(terč.-butyloxy-karbonylmetyl-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolyl). TLC: Rf = 0,25, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 63:20:6:11.
část i: H-D-Cha-OMe · HCl
- 21 99 99 99 9 99 99
9 9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 99 9 9 9 9 9 9 9 9
99 999 999999 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9
9« 99 9· 9 99 99
Do 195 ml bezvodého metanolu o teplotě -20°C se po kapkách přidá 28 ml thionylchloridu. Do reakčního roztoku se přidá 40 g H-D-Cha-OH -HC1 a reakčni směs se zahřívá pod refluxem 5 hodin. Reakčni směs se zahustí ve vakuu a třikrát se odpařuje z metanolu. Zbytek se nechá krystalizovat ze směsi metanolu a dietyleteru za vzniku 40,9 g H-D-Cha-OMe · HC1 jako bílého krystalického prášku.
TLC: Rf = 0,66, silikagel, eluční činidlo: směs n-butanolu, kyseliny octové a vody v poměru 10:1:3.
část j: N-(t-butyloxykarbonylmetyl)-D-Cha-OMe
Do míchaného roztoku 40,9 g Η-D-Cha-OMe-HC1 ve 400 ml acetnitrilu se přidá 36 g t-butyl-bromacetátu. Reakčni směs se přidáním N,N-diisopropyletylaminu přivede na pH
8,5 a reakčni směs se 16 hodin míchá při teplotě místnosti, a následně se odpařuje ve vakuu. Zbytek se rozpustí v dichlormetanu a roztok se promyje vodou, suší se nad síranem sodným a odpařuje se ve vakuu. Vytvořený zbytek se po absorbci na kolonu silikagelu čistí chromatografií při eluci směsí heptanu a etylacetátu v poměru 9:1 za vzniku 64 g N-(t-butyloxykarbonylmetyl ) -D-Cha-OMe.
TLC: Rf = 0,25, silikagel, eluční činidlo: směs etylacetátu a heptanu v poměru 1:1.
část k: N-(t-butyloxykarbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-OMe
Do reakčního roztoku 64 g N-(t-butyloxykarbonyl0« 00 0 0 0 0 metyl)-D-Cha-OMe a 40,3 g di-t-butyl-dikarbonátu se k pH 8,5 přidá N,N-diisopropyletylaminu. Reakční směs se 16 hodin míchá při teplotě místnosti, rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a do zbytku se přidá dichlormetan a vody. Organický podíl se oddělí, promyje se studeným IN roztokem kyseliny chlorovodíkové, vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou, suší se nad síranem sodným a odpařuje se za vzniku 59,6 g N-(t-butyloxykarbonylmetyl ) -N-Boc-D-Cha-OMe jako amfoterní pevné látky.
TLC: Rf = 0,50, silikagel, eluční činidlo: směs etylacetátu a heptanu v poměru 1:1.
část 1: N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-OH
Na roztok 59,6 g N-(t-butyloxykarbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-OMe v 900 ml směsi dioxanu a vody v poměru 9:1 se při teplotě místnosti působí 6N roztokem hydroxidu sodného k udržení pH 12 roztoku. Reakční směs se vlije do vody a extrahuje se dichlormetanem. Organický podíl se promyje vodou a suší se nad síranem sodným. Filtrát se odpaří za vzniku 54 g N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-OH.
TLC: Rf = 0,60, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 9:1.
část m: N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-OSu
Na roztok 12,5 g N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D4 4 4 4 • 4 · 4
4 44
4 4 4
4 4 4
44
4 4 4 44
4 4 4 4 4
4 4 4 4 4 4
444 4 « 444 4 4 4
4 4 4
4 44 44 • 4
-Cha-OH ve 200 ml acetnitrilu se přes noc při teplotě místnosti působí 4,1 g N-hydroxysukcinimidu a 6,84 g 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid-hydrochloridu. Reakční směs se odpařuje dosucha a zbytek se rozpustí v etylacetátu. Organický podíl se promyje vodou, suší se nad síranem sodným a zahustí se za vzniku aktivního esteru, který bez čištění použije v následující syntéze.
část η: N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-OH
Ve 100 ml vody se rozpustí 7,5 g H-Pro-OH -HCI. Po přidání IN roztoku hydroxidu sodného k pH 8 se po kapkách přidá roztok N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-OSu ve 100 ml N,N-dimetylformamidu. Reakční směs se přes noc míchá při teplotě místnosti při udržování pH okolo 8. Reakční směs se zchladí a přidáním IN roztoku kyseliny chlorovodíkové se okyselí na pH 2. Vodný podíl se extrahuje etylacetátem, organický podíl se promyje vodou, suší se nad síranem sodným a odpařuje se ve vakuu. Vytvořený zbytek se po absorbci na kolonu silikagelu čistí chromatografií při eluci gradientem koncentrací směsi etylacetátu a metanolu v poměru od 9:1 do 1:1 za vzniku 11,0 g požadovaného dipeptidu.
TLC: Rf = 0,81, silikagel, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 163:20:6:11.
část o: N-Boc-N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolyl)
• 99 99 • 9 9 9 9
9 9 9 9 9
9999 9 999 999
9 9
99 99
Do roztoku 1,31 g N-Boc-N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-D-Cha-Pro-OH v 15 ml N,N-dimetylformamidu se přidá 750 μΐ trietylaminu a vytvořená reakční směs se umístí do atmosféry dusíku a zchladí se na teplotu -15°C. Následně se přidá 352 μΐ isobutylchlormravenčanu. Po 15 minutách se za stálého míchání při teplotě -15°C do studeného roztoku anhydridu po kapkách přidá roztok 1,15 g H-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolyl) -TFA v 10 ml bezvodého N,N-dimetylformamidu. Přidáváním trietylaminu se pH reakční směsi udržuje na hodnotě pH 8,5. Reakční směs se 30 minut míchá při teplotě -15°C, reakční směs se odpaří dosucha a vytvořený zbytek se rozpustí v etylacetátu, postupně se promyje vodou, 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem sodným a zahustí se ve vakuu. Zbytek se po absorbci na kolonu oxidu křemičitého čistí chromatografií při eluci směsí díchlormetanu a metanolu v poměru 95:5 za vzniku 1,77 g N-Boc-N-(t-butyloxykarbonylmetyl)-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolyl) jako výsledné sloučeniny.
část p: HOOC-CH2-D-Cha-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl)
Při teplotě místnosti se 4 hodiny míchá roztok 1,77 g N-Boc-N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-D-Cha-Pro-lysininyl-(Cbz)-(2-thiazolyl) ve 20 ml směsí kyseliny trifluoroctové a thioanisolu v poměru 10:1. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek rozpustí ve vodě. Vodný podíl se promyje přebytkem dietyleteru. Vodný podíl se ·«
0 0
0 00
0 0
0 0 0 0 0 0
00 00 0 • 0 0 • ·
0 0 0 0 000
00 0 0 0 0 0 0 0 0
000 000 0 0
00 přímo podrobí preparativní HPLC na koloně Supelcosil LC-18-BD při elucí gradientem koncentrací elučního systému od A 20%, B 70%, C 10% do A 20%, B 50% a C 30% během 45 minut při rychlosti průtoku 20 ml/min.
(A: 0,5M roztok fosfátového pufru, pH = 2,1; B: voda;
C: směs acetnitrilu a vody v poměru 3:2).
Výtěžek diastereoisomerů:
300 mg. Hmotnostní spektrum ESI+ : 518,5[AH]+;
259,8 [AH2]2+
Rt (kapalinová chromatografie) = 28,81 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 % během 40 minut.
• 500 mg. Hmotnostní spektrum ESI+ : 518,5[AH]+;
259,8 [AH2]2+
Rt (kapalinová chromatografie) = 29,88 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 % během 40 minut.
Příklad 2
N-Me-D-Phe-Pro-lysininyl-Ψ [COCO]-OH část a: Boc-lysininyl(Cbz)-OMe
Do roztoku 2,15 g Boc-lysininyl(Cbz)-OH ve 25 ml směsi dichlormetanu a metanolu v poměru 9:1 se přidá 1,83 g 2-(lH-benztriazol-l-yl)-1,1,3,3-tetrametyluroniumtetrafluorborátu. Přidáním N,N-diisopropyletylaminu se pH reakční směsi přivede na 7-8. Reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti. Směs se promyje IN
99 99 9 ·· ·· • ♦ · · ··· · * ♦ · 9 9 99 9 * · · 9 9 9 9
99 999 9 9999 9 999 999
9 9 9 9 9 9 · · ·· ·· ·· · ·· ·♦ roztokem kyseliny chlorovodíkové, vodou, 5% roztoku hydrogenuhličitanu sodného a vodou, organický podíl se suší nad bezvodým síranem sodným a filtrát se zahustí ve vakuu. Vytvořený zbytek se po absorbci na kolonu oxidu křemičitého čistí chromatografií při eluci směsí etylacetátu a heptanu v poměru 6:4. Vznikne 2,17 g výsledné sloučeniny.
TLC: Rf = 0,5, silikagel, eluční činidlo: směs etylacetátu a heptanu v poměru 3:1.
část b: 2-acetoxy-3-(t-butyloxykarbonylamino)-7-(benzyloxykarbonylamino)-hept-5-in-nitril
Do míchaného roztoku 2 g Boc-lysininyl-OMe v 60 ml dichlormetanu se při teplotě -78 °C přidá 18,2 ml předem zchlazeného l,0M roztoku diisobutyl-aluminium-hydridu v hexanu tak, aby se teplota nezvýšila nad -70°C. Roztok se 0,5 hodiny, vlije se do roztoku kyseliny citrónové ve vodě a extrahuje se dichlormetanem. Sloučené extrakty se promyjí vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou, suší se nad bezvodým síranem sodným a filtrují se. Filtrát se zahustí ve vakuu za vzniku 2,25 g oleje. Tento surový produkt se rozpustí ve 25 ml dichlormetanu. Roztok se zchladí na 0°C a přidá se 0,31 g benzyltrietyl-amoniumchloridu,
1,2 ml anhydridu kyseliny octové a roztok 2,5 g kyanidu sodného v 75 ml vody. Reakční směs se 30 minut energicky míchá při teplotě 0-5°C. Organický podíl se oddělí, dvakrát se promyje vodou, suší se nad bezvodým síranem · 99 ·
9 9
9
9 9«
9
9
999 9 9 • · sodným a odpařuje se dosucha. Vytvořený zbytek se po absorbci na kolonu oxidu křemičitém čistí chromatografií pří eluci směsí heptanu a etylacetátu v poměru 8:2 za vzniku 1,4 g 2-acetoxy-3-(t-butyloxykarbonylamino)-7-(benzyloxykarbonylamino)-hept-5-in-nitrilu.
TLC: Rf = 0,6, silikagel, eluční činidlo: směs heptanu a etylacetátu v poměru 1:1.
část c: H-lysininyl(Cbz)-T[CHOHCO]-OH
Roztokem 1,4 g 2-acetoxy-3-(t-butyloxykarbonylamino)-7-(benzyloxykarbonylamino)-hept-5-in-nitrilu ve směsi dietyleteru a metanolu v poměru 9:1 se při teplotě -20°C nechá procházet 6,5 g plynného chlorovodíku. Reakční směs se přes noc míchá při teplotě 0-4°C, zchladí se na -20°C a přidá se 6,75 ml vody. Reakční směs se 4 hodiny míchá při teplotě 20°C a organický podíl se oddělí. Přidáním IN roztoku hydroxidu sodného se přivede pH vodného podílu na pH 10, a podíl se pak extrahuje 1-butanolem. Sloučené extrakty se promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného a zahustí se ve vakuu za vzniku 650 mg H-lysininyl(Cbz)-Ψ[CHOHCO]-OH. TLC: Rf = 0,17, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 63:20:6:11.
část d: N-Boc-N-Me-D-Phe-OH
V 165 ml směsi dioxanu a vody v poměru 1:2 se rozpustí 11 g běžně dodávaného H-N-Me-D-Phe-OH. Do roztoku se přidá 19,1 g di-terc.butyldikarbonátu a přidá se • ·
- 28 44 49 · 44 99 • 9 9 9 999 9999 • 9 44 9999 9999
99 9 9 4 999999 444 944
4444449 4 4
44 94 4 44 49 hydroxid sodný k pH 8,5-9. Reakčni směs se zahustí ve vakuu a zbytek se rozpustí v etylacetátu. Organický podíl se promyje O,1N roztokem kyseliny chlorovodíkové a nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem sodným, filtruje se a odpařuje dosucha za vzniku 17,1 g výsledného produktu.
TLC: Rf = 0,35, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 8:2.
část e: N-Boc-N-Me-D-Phe-Pro-OH
Vazebná reakce 17,1 g N-Boc-N-Me-D-Phe-OH a 10,1 g H-Pro-OMe-HCI se provede podle postupu syntézy N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-OSu (příklad 1). Na roztok získáno dipeptidu N-Boc-N-Me-D-Phe-Pro-OMe ve 200 ml směsi dioxanu a vody v poměru 9:1 se přes noc působí 21,7 ml 4N roztoku hydroxidu sodného při teplotě místnosti. Reakčni směs se zředí 300 ml ledové vody, okyselí se pH 2 přidáním 4N roztoku kyseliny chlorovodíkové a extrahuje se dichlormetanem. Sloučené organické podíly se promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem sodným, filtruje se a odpařuje dosucha za vzniku surového produktu. Krystalizací ze směsi dietyleteru a heptanu v poměru 2:3 za vzniku 12,6 g N-Boc-N-Me-D-Phe-Pro-OH část f: N-Boc-N-Me-D-Phe-Pro-lysininyl(Cbz)-Ψ[ΟΗΟΗΟΟ] -OH
Do roztoku 0,195 g N-Boc-N-Me-D-Phe-Pro-OH v 10 ml ftft ·· ft· · ftft ·· ftftftft ftftft ftftftft ···· ···· ···· • ·· ftftft · ftftftft ft ··· ftftft • •••«•ft · ft • ft ftft ftft ft ·· · ·
- 29 N,N-dimetylformamidu se při teplotě ~20°C přidá 0,101 g isobutylchlormravenčanu a přidáním trietylaminu se směs přivede na pH 8. Do tohoto reakčního roztoku se přidá při teplotě -20°C roztok 0,3 g H-lysininyl(Cbz)-Ψ [CHOHCO]-OH (část c příkladu 2) v 10 ml N,N-dimetylformamidu, který se přidáním trietylaminu u upraví na pH 8,5. Reakční směs se přes noc míchá, a protože reakce není ukončena přidá se roztok 293 mg N-Boc-N-Me-D-Phe-Pro-OH (část e příkladu 2) v 5 ml N,N-dimetylformamidu, na který se při teplotě 0°C působí 95 mg N-hydroxysukcinimidu a 1, 3-dicyklohexylkarbodiimidu při pH 8,5. Reakční směs se 4 hodiny míchá při teplotě místnosti. Těkavý podíl se oddělí ve vakuu a zbytek se rozpustí v dichlormetanu. Roztok se promyje vodou, suší se nad síranem sodným, filtruje se a odpařuje dosucha. Zbytek se po absorbci na silikagel čistí chromatografií při eluci směsí etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 63:5:1,5:2,75. Podíly obsahující výslednou sloučeninu se sloučí za vzniku 0,26 g N-Boc-N-Me-D-Phe-Pro-lysininyl(Cbz) -Ψ[ΟΗΟΗΟΟ]-OH.
TLC: Rf = 0,24, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 63:5:1,5:2,75.
část g: N-Boc-N-Me-D-Phe-Pro-lysininyl (Cbz)-Ψ[0000] -OH
Na roztok 260 mg N-Boc-N-Me-D-Phe-Pro-lysininyl(Cbz)-Ψ [CHOHCO]-OH ve 20 ml dichlormetanu se působí 180 mg *· *· ·· A WA AA • · A · · · A · A · « • A AA · · ♦ » A A A A • · · AAA A ···· A ·♦· AAt ······« A · • β 99 AA A AA 99
1,1,1-triacetoxy-l,l-dihydro-l,2-benzjodoxol-3(1H)-onu. Reakční směs se 3,5 hodiny míchá při teplotě místnosti, promyje se roztokem thiosulfátu sodného a vodou. Organický podíl se suší nad bezvodým síranem sodným a odpařuje se dosucha za vzniku 0,35 g N-Boc-N-Me-D-Phe-Pro-lysininyl(Cbz)-Ψ[0000]-OH s příměsí reakčních činidel.
TLC: Rf = 0,36, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 63:20:6:11.
část h: N-Me-D-Phe-Pro-lysininyl-Ψ [COCO]-OH
Při teplotě místnosti se 4 hodiny míchá roztok 0,3 g N-Boc-N-Me-D-Phe-Pro-lysininyl(Cbz) -Ψ [COCO]-OH v 10 ml směsi kyseliny trifluoroctové a thioanisolu v poměru 10:1. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu, zbytek se rozpustí ve vodě a promyje se dietyleterem. Zbytek se suší ve vakuu za vzniku 430 mg surového N-Me-D-Phe-Pro-lysininyl-Ψ [COCO]-OH, který se čistí preparativní HPLC na koloně Supelcosil LC-18-BD při eluci gradientem koncentrací elučního systému od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 70% a C 10% během 45 minut při rychlosti průtoku 20 ml/min.
Výtěžek diastereoisomerů:
• 53,7 mg. Hmotnostní spektrum FAB* : 429, 1 [M+H]+;
426,9 [M-H]
Rt (kapalinová chromatografie) = 15,25 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 % během 40 minut.
- 31 ·· · ·· »· • · · ·· ·· • · · 9 9 9 9
9 99 9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9999 9 999 999
9 9 9 9 9 9 9 9
99 99 9 99 99 • 51,6 mg. Hmotnostní spektrum FAB+ : 429,1 [M+H]+;
FAB“ : 426, 8 [M-H]
Rt (kapalinová chromatografie) = 16,30 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 % během 40 minut.
Příklad 3
N-Me-D-Cha-Pro-lysininyl-Ψ [COCO]-OH část a: N-Me-N-Boc-D-Cha-Pro-OH
Výsledná sloučenina se připraví za použití
N-Me-N-Boc-D-Cha-OH a H-Pro-OMe -HCI při zachování postupu části e příkladu 2.
TLC: Rf = 0,26, silikagel, eluční činidlo: směs etylacetátu a metanolu v poměru 4:1.
část b: Boc-lysininyl(Cbz)-T[CHOHCO]-OMe
Roztokem 36 g 2-acetoxy-3-(t-butyloxykarbonylamino)-7-(benzyloxykarbonylamino)-hept-5-in-nitrilu (část b příkladu 2) vil směsi dietyleteru a metanolu v poměru 3:1 se při teplotě -20°C nechá procházet plynný chlorovodík k dosažení koncentrace 3M (109 g). Reakční směs se přes noc míchá při teplotě 0-4°C, přidá se 170 ml vody při zachování teploty směsi nižší než 5°C. Reakční směs se nechá ohřát a dalších 5 hodin se míchá při teplotě místnosti. Organický podíl se oddělí. Přidáním zředěného roztoku hydroxidu sodného se přivede • · 0
- 32 pH vodného podílu na pH 10, a podíl se pak extrahuje 1-butanolem. Sloučené extrakty se promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného a zahustí se dosucha za vzniku 58 g H-lysininyl(Cbz)-Ψ[CHOHCO]-OMe.
Do roztoku 58 g H-lysininyl(Cbz)-Ψ[CHOHCO]-OMe v metanolu se přidá 18,4 g di-t-butyl-dikarbonátu. Přidáváním trietylaminu se upraví pH roztoku na pH 8. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti, rozpouštědlo se odstraní zahuštěním ve vakuu a zbytek se rozpustí v etylacetátu. Roztok se promyje O,1N roztokem kyseliny chlorovodíkové a nasyceným roztokem chloridu sodného. Organický podíl se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpařuje. Vytvořený zbytek se po absorbci na kolonu oxidu křemičitého čistí chromatografií při eluci gradientem směsí heptanu a etylacetátu v poměru 7:3, etylacetátem do směsi etylacetátu a metanolu v poměru 8:2 za vzniku 4,76 g Boc-lysininyl(Cbz)-Ψ [CHOHCO]-OMe.
TLC: Rf = 0,40, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a etanolu v poměru 9:1.
Jako vedlejší produkt se izolovalo 0,94 g Boc-lysininyl (Cbz)-Ψ [CHOHCO]-OBu.
TLC: Rf = 0,47, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 9:1.
část c: H-lysininyl(Cbz)-Ψ [CHOHCO]-OMe-TFA
Podle postupu části h příkladu 1 se z 500 mg Boc-lysi- 33 ·· ·· ··· ·· 99
9 9 9 9 9 9 9 9 9 i
9 99 9 9 9 9 9 9 9 i
99 999 999999 999 ··« ······· · « ·· 99 99 9 99 99 ninyl(Cbz) -Ψ [CHOHCO]-OMe připraví 500 mg výsledné sloučeniny, která se ihned použije v dalším postupu syntézy.
TLC: Rf = 0,12, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 95:5.
část d: N-Me-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz)-Ψ [CHOHCO]-OMe
Do studeného roztoku 546 mg N-Me-N-Boc-D-Cha-Pro-OH v 10 ml N,N-dimetylformamidu o teplotě 0°C se postupně přidává 202 mg 1-hydroxy-benztriazolu (HOBT), 308 mg dicyklohexyl-karbodiimidu (DCCI), 516 mg H-lysininyl(Cbz)-Ψ [CHOHCO]-OMe-TFA. Přidáním trietylaminu se pH reakční směsi upravuje na pH 8. Reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě 0°C, a pak se teplota přes noc udržuje na teplotě místnosti. Reakční směs se zchladí na teplotu -20°C a dicyklohexylmočovina se odstraní filtrací. Po odpaření filtrátu dosucha se vytvořený zbytek rozpustí v etylacetátu a postupně se promyje IN roztokem kyseliny chlorovodíkové, vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou. Po sušení nad síranem sodným a zahuštění ve vakuu vznikne zbytek, který se po absorbci na kolonu silikagelu čistí chromatografií při eluci gradientem poměrů směsi heptanu a etylacetátu od 1:1 do 1:4. Podíly obsahující N-Me-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz) -Ψ [CHOHCO]-OMe se sloučí a odpaří za vzniku 544 mg produktu.
TLC: Rf = 0,39, silikagel, eluční činidlo: směs ·· · • · • · · ·
·· ··
dichlormetanu a metanolu v poměru 95:5.
část e: N-Me-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz)-Ψ[CHOHCO] -OH
Do roztoku 544 mg N-Me-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz)-Ψ [CHOHCO]-OMe v 13 ml směsi dioxanu a vody v poměru 7:3 se během 1 hodiny při teplotě místnosti přidává 0,61 ml 2N roztoku hydroxidu sodného. Reakční směs se zředí 30 ml vody, přidá se 2N roztok kyseliny chlorovodíkové k pH 2 a vodný podíl se extrahuje se dichlormetanem. Sloučené organické podíly se promyjí vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem sodným, filtruje se a zahustí se ve vakuu za vzniku 560 mg výsledné sloučeniny.
TLC: Rf = 0,47, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 4:1.
část f: N-Me-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz)-T[COCO] -OH
Ve 2,3 ml 0,5 M roztoku 1-hydroxy-l,2-benzjodoxol-3-(1H)-on-l-oxidu v dimetylsulfoxidu se rozpustí 500 mg N-Me-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz) -Ψ[CHOHCO]-OH a reakční roztok se přes noc míchá při teplotě místnosti, reakce se ukončí přidáním roztoku 1,25 g thiosulfátu sodného ve 150 ml vody, zchladí se v lázni ledu a přidá se 2N roztok kyseliny chlorovodíkové k pH 2. Vodný podíl se extrahuje dichlormetanem. Organický podíl se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se • · · ·· ·· • · · 4 nad síranem sodným, filtruje se a zahustí se ve vakuu za vzniku surového výsledného produktu.
TLC: Rf = 0,71, silikagel, směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 88:31:18:7.
část g: N-Me-D-Cha-Pro-lysininylT[COCO]-OH
Podle části h příkladu 2 za použití N-Me-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl-Ψ[COCO]-OH vznikne po 175 mg surového N-Me-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz) Ψ [COCO]-OH jako směsi diastereoisomerů.
Rt (kapalinová chromatografie) = 22,19 a 22,83 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 % během 40 minut.
Příklad 4
3,3-difenylpropionyl-Pro-lysininyl-T [COCO]-OH část a: 3,3-difenylpropionyl-prolyl-OH
Podle postupu části e příkladu 2 a za použití 5,0 g kyseliny 3,3-difenylpropionové a 3,66 g H-Pro-OMe -HC1 vznikne 5,2 g 3,3-difenylpropionyl-prolyl-OH.
TLC: Rf = 0,65, silikagel, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 63:20:6:11.
část b: 3,3-difenylpropionyl-Pro-lysininyl(Cbz)T[CHOHCO] -OMe
- 36 ·· ··
I · · 4 » · · · » · · 4 » · · 4 • · · · ·· ··
Podle postupu příkladu 3 se provede vazebná reakce 648 mg 3,3-difenylpropionyl-prolyl-OH a 722 mg H-lysininyl(Cbz)-Ψ[CHOHCO]-OMe-TFA. Po čištění vznikne 1,13 g chráněného tripeptidu 3,3-difenylpropionyl-Pro-lysininyl(Cbz) -Ψ [CHOHCO]-OMe.
TLC: Rf - 0,40, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 95:5.
část c: 3,3-difenylpropionyl-Pro-lysininyl-Ψ [COCO]-OH
Podle postupu části e příkladu 3 se provede saponifikace 860 mg 3,3-difenylpropionyl-Pro-lysininyl-Ψ [CHOHCO]-OMe. Roztok surového produktu v 80 ml dichlormetanu se podle části g příkladu 2 oxiduje za použití 594 mg 1,1,1-triacetoxy-l,1-dihydro-l,2-benziodoxol-3(1H)onu. Podle části h příkladu 2 se provede odštěpení ochranných skupin v TFA a thioanisolu. Vznikne 229 mg 3,3-difenylpropionyl-Pro-lysininyl-Ψ [COCO]-OH jako směsi diastereoisomerů.
Rt (kapalinová chromatografie) = 20,31 min; od A 20%, B 60%, C 20% do A 20%, B 80%, C 0 % během 30 minut.
Příklad 5
BenzylS02-norLeu (cyklo) -Gly-lysininyl-Ψ [COCO] -OH norLeu(cyklo)-Gly označuje strukturální fragment vzorce:
·· « • · · ··
část a: N-Boc-L-a-amino-s-kaprolaktam
Do míchaného roztoku 10 g L-a-amino-s-kaprolaktamu ve 30 ml směsi dioxanu a vody v poměru 2:1 se přidá 7,8 ml IN roztoku hydroxidu sodného, a následně 18,8 g di-t-butyl-d.ikarbonátu. Reakční směs se 16 hodin míchá při teplotě místnosti a zahustí se ve vakuu. Vytvořený zbytek se rozpustí v etylacetátu a promyje se vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem sodným, filtruje se a zahustí se odpařováním ve vakuu za vzniku surového materiálu, který se rozetře s hexanem. Po filtraci a sušení ve vakuu vznikne 16 g N-Boc-L-a-amino-s-kaprolaktamu.
TLC: Rf = 0,85, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs heptanu a etylacetátu v poměru 1:1.
část b: Boc-nor-Leu(cyklo)-Gly-OMe
Ve 100 ml dichlormetanu se rozpustí 10 g N-Boc-L-a-amino-s-kaprolaktamu. Pomalu se při teplotě -20°C přidá • · · * · · • β · · · · • · ·» · · • · · · · · · • · > ♦ « · ·· ·· ·· • · · ♦ ·· ekv. 1Μ roztoku bis(trimetylsilyl)amidu ve směsi tetrahydrofuřanu a cyklohexanu v poměru 1:1. Po 30 minutách míchání se přidají 4 ml metylbromacetátu a reakční směs se 2 hodiny míchá při teplotě místnosti.
K ukončení reakce se přidá další část 1M roztoku bis(trimetylsilyl)amidu ve směsi tetrahydrofuřanu a cyklohexanu v poměru 1:1. Reakční směs se zředí dichlormetanem a promyje se O,1N roztokem kyseliny chlorovodíkové, vodou, 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem sodným, filtruje se a zahustí se odpařováním ve vakuu za vzniku zbytku, který se po absorbci na kolonu silikagelu čistí chromatografií při elucí směsí heptanu a etylacetátu v poměru 6:4. Vytvoří se 12 g výsledné sloučeniny.
TLC: Rf = 0,55, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs heptanu a etylacetátu v poměru 4:6.
část c: benzylS02-nor-Leu (cyklo)-Gly-OMe
Ve 40 ml směsi kyseliny trifluoroctové a dichlormetanu v poměru 1:1 se rozpustí 5,4 g Boc-nor-Leu(cyklo)-Gly-OMe a reakční roztok se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti. Reakční směs se odpařuje ve vakuu a vytvořený surový amin se rozpustí ve 40 ml dichlormetanu.
Přidá se roztok 3,43 g benzylsulfonylchloridu při teplotě 0°C. Přidáváním trietylaminu se pH během reakce udržuje na hodnotě 8. Reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti, směs se zahustí ve vakuu a • ft ♦ ft · ftft ftft ft • · · « I» · · • · · ft · . · • · ftft · · • ftft · · · ft ft • · · · zbytek se rozpustí v etylacetátu a promyje se 5% roztokem hydrogenuhličitanů sodného, vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem sodným, filtruje se a zahustí se odpařováním ve vakuu za vzniku 6,1 g benzylS02-nor-Leu(cyklo)-Gly-OMe.
TLC oxid křemičitý (dichlormetan:etylacetát = 9:1):
Rf 0,88.
část d: benzylS02-nor-Leu (cyklo)-Gly-OH
Na roztok 6,1 g benzylS02-nor-Leu(cyklo)-Gly-OMe ve 100 ml dioxanu a vody v poměru 9:1 se při teplotě místnosti 2 hodiny působí IN roztokem hydroxidu sodného k pH 13. Po okyselení se směs vlije do vody a extrahuje se dichlormetanem. Organický podíl se promyje vodou a suší se nad síranem sodným. Filtrát se odpaří za vzniku 6,3 g výsledné sloučeniny.
TLC: Rf = 0,73, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 63:20:6:11.
část e: benzylS02-nor-Leu (cyklo)-Gly-lysininyl— -T[COCO] -OH
Výsledná sloučenina se za použití 385 mg benzylS02-nor-Leu(cyklo)-Gly-OH a 520 mg H-lysininyl(Cbz)-Ψ [CHOHCO]-OMe-TFA připraví podle postupu příkladu 3.
Saponifikace, oxidace a odstranění ochranných skupin 625 mg chráněného tripeptidu se provede podle příkladu 4 . Po čištění HPLC vznikne 68 mg benzylS02-nor-Leu• · · · ·· ·
9 ** *· ·· • 9 · · · · • # ♦· 9 ♦ • 9 · 9 · · ·
9 9 9 9 9 9
9 99 99 · ► · » ·
9 9
- (cyklo)-Gly-lysíninyl-Ψ[COCO]-OH jako směs diastereoisomerů.
Rt (kapalinová chromatografíe) = 25,9 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 % během 40 minut.
Příklad 6 etylS02-D~Cha-Pro-lysininyl~T [COCO] -OH část a: Boc-D-Cha-Pro-OPac (OPAc = fenacylester)
Boc-D-Cha-Pro-OPac se připraví podle postupu příkladu 2 za použití Boc-D-Cha-OH a H-Pro-OPac.
TLC: dichlormetan: metanol = 95:5 na silikagelu; Rf =
0,5.
část b: etylS02-D-Cha-Pro-OPac
Ve 25 ml směsi kyseliny trifluoroctové a dichlormetanu v poměru 1:1 se rozpustí 3,8 g Boc-D-Cha-Pro-OPac. Reakční směs se 30 minut míchá při teplotě místnosti, a následně se odpaří ve vakuu. Surový amin se rozpustí v 50 ml dichlormetanu a do roztoku se při teplotě -78 °C přidá 0,8 ml etansulfonylchloridu. K pH 8 se přidává trietylamin. Reakční směs se 3 hodiny míchá při teplotě 0°C, přidá se 25 ml vody a po 30 minutách míchání při teplotě místnosti se reakční směs zahustí ve vakuu. Vytvořený zbytek se rozpustí v dietyleteru a promyje se IN roztokem kyseliny chlorovodíkové, vodou, 5% roztokem »0 00
0 0
0 0
000 000 » 0
00 hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem sodným, filtruje se a zahustí se odpařováním ve vakuu za vzniku surového materiálu. Tento zbytek se rozetře s metanolem za vzniku 3,0 g etylS02-D-Cha-Pro-OPac.
TLC: dichlormetan: metanol = 95:5 na silikagelu; Rf =
0,6.
část c: etylS02-D-Cha-Pro-OH
Do roztoku 10 g etylSO,-D-Cha-Pro-OPac ve 250 ml tetrahydrofuranu se přidá 84 ml 1M roztoku tetrabutylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu. Reakční směs se 30 minut míchá při teplotě místnosti a vlije se do 1 1 vody. Vodný roztok se extrahuje etylacetátem. Sloučené organické podíly se postupně promyjí IN roztokem kyseliny chlorovodíkové a vodou, suší se nad síranem sodným a zahustí se ve vakuu. Vytvořený zbytek se čistí krystalizací ze směsi etylacetátu a diisopropyleteru za vzniku 6,0 g etylS02-D-Cha-Pro-OH.
TLC: Rf = 0,2, silikagel, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 163:20:6:11.
část d: etylSO^D-Cha-Pro-lysininyl-'?[COCO]-OMe
Vazebná reakce 515 mg etylS02-D-Cha-Pro-OH a
H-lysininyl(Cbz) T[CHOCHO]-OMe-TFA se provede podle postupu částí d příkladu 3 za vzniku 550 mg chráněného tripeptidu. Oxidací a odstranění ochranných skupin
- 42 »· ·· 99 * · » 4 » · » 99 9 99 9 ► · 9 podle postupu příkladu 2 vznikne 130 mg směsi diastereoisomerů výsledné sloučeniny.
Rt (kapalinová chromatografie) = 38,2 a 38,5 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 % během 40 minut.
Příklad 7 etylS02-D-Cha-Pro-lysininyl-T[COCO] -OH
Podle postupu příkladu 6 se připraví 550 mg etylSO2-D-Cha-Pro-lysininyl-Ψ[COCO]-OMe. Následnou saponifikací, oxidací a odštěpením ochranných skupin podle postupu příkladu 3 a 2 a po čištění HPLC vznikne 180 mg diastereoisomerické směsi etylS02-D-Cha-Pro-lysininyl-Ψ [COCO]-OH.
Rt (kapalinová chromatografie) = 35,7 a 36,0 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60%.
Příklad 8 l-Piq-Pro-lysininyl-T[COCO]-OH část a: 2-Cbz-(4aR, 8aR)-perhydroisochinolin-1(R,S)-karboxylová kyselina ( = N-(Cbz)-1-Piq-OH)
Výroba sloučeniny je popsána v EP 0643073, příklad 1. TLC: Rf = 0,85, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs
Μ 4
9 4
4 4 4
94444 4
4 4
4 #4 44 • 4 4 · • · 4· • · 4 · 9
4 4 ·
94
94
9 9 4
4 4 4
444 949 • 9
44 etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 63:20:6:11.
část b: N-(Cbz)-1-Piq-Pro-OH
Vazebnou reakcí 270 mg H-Pro-OtBu a 500 mg N-(Cbz)-l-Piq-OH podle příkladu 2 vznikne 634 mg N-(Cbz)-1-Piq-OtBu. Odstranění t-butylesteru se provede ve směsi 1 ml dichlormetanu, 3 ml kyseliny trifluoroctové a 0,15 ml anisolu se 1 hodinu při teplotě místnosti. Reakčni směs se zahustí ve vakuu při nízké teplotě a zbytek se rozpustí ve vodě o pH 9,5. Vodný podíl se promyje dietyleterem, následně se okyselí 2M roztokem kyseliny chlorovodíkové k pH 2,5. Vodný podíl se extrahuje etylacetátem a organický podíl se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem sodným a zahustí se ve vakuu za vzniku 588 mg N-(Cbz)-1-Piq-Pro-OH.
TLC: Rf - 0,54, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 60:3:1:2.
část c: l-Piq-Pro-lysíninyl-T[COCO]-OH
Podle příkladu 3 se provede vazebná reakce 478 mg N-(Cbz)-1-Piq-Pro-OH s lysininylovou skupinou. Čištěný chráněný tripeptid (667 mg) se saponifikuje, oxiduje a zbaví ochranných skupin podle postupu příkladu 2. Po čištění HPLC vznikne 33 mg l-Piq-Pro-lysininyl-Ψ[COCO]-OH jako jediný izomer.
·· *9 9
9 99
9« 9 9
9 9 9
99
9 9
9 9
9 9 9
9 9999
9 9
9
99
9 9 «
9 9 9
999 999
9
99
Rt (kapalinová chromatografie) = 20,08 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60%.
Příklad 9
HOOC-CH2-D-Cha-Pro-lysininyl-T [COCO] -OH
Podle postupu příkladu 3 se provede vazebná reakce 658 mg N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-OH (příklad 1) a H-lysininyl(Cbz)Ψ[CHOCHO]-OMe-TFA (část c příkladu 3) za vzniku 658 mg mg chráněného tripeptidu. Saponifikací, oxidací a odštěpením ochranných skupin vznikne po čištění 158 mg směsi diastereoisomerů HOOC-CH2-D-Cha-Pro-lys ininyl-Ψ [COCO] -OH.
Rt (kapalinová chromatografie) = 22,3 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60%.
Příklad 10
HOOC-CH2-D-Cha-N-cyklopentyl-Gly-lysininyl-T [COCO] -OH část a: N-cyklopentyl-Gly-OMe
Ve 400 ml metanolu se rozpustí 46,4 g H-Gly-OMe-HCI, přidá se 34 g cyklopentanonu a 14 g kyanborhydridu sodného a reakce probíhá 16 hodin při teplotě místnosti. Reakce se ukončí přidáním 6M roztoku kyseliny chlorovodíkové do pH 2 a 30 minut se míchá při teplotě místnos• 0 ♦ ·♦· *0 00 • 0 0 · 0 0 • 0 00 00 • 0 0 0 0 0 0 ♦ · 0 0 0 0
00 00 ·» ··
0 0 0
0 0 0 >00 000 • 0 0
00 00 ti. Rozpouštědlo se odstraní odpařováním za sníženého tlaku, zbytek se rozpustí ve vodě a promyje se dietyleterem. Po přidání 6 M roztoku hydroxidu sodného k hodnotě pH vyšší než 10 se produkt extrahuje dichlormetanem, promyje se nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem sodným, filtruje se a zahustí za sníženého tlaku. Sloučenina se nechá krystalizovat z etylacetátu za vzniku 43,5 g hydrochloridu
N-cyklopentyl-Gly-OMe.
TLC: Rf = 0,71, silikagel, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 88:31:18:7.
část b: N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-N-cyklopentyl-Gly-OH
Výsledná sloučenina se připraví podle postupu příkladu 1 pro dipeptidovou skupinu za použití N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-OH (část 1 příkladu 1) a N-cyklopentyl-Gly-OMe.
TLC: Rf = 0,30, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 9:1.
část c: HOOC-CH2-D-Cha-N-cyklopentyl-Gly-lysininyl- T[COCO]-OH
Podle postupu příkladu 3 se provede vazebná reakce 547 mg N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-N-cyklopentyl-Gly-OH a H-lysininyl(Cbz)Ψ[ΟΗΟΟΗΟ]-OMe -TFA (část c příkladu 3) za vzniku 660 mg chráněného tripeptidu.
·· ·· • 9 9 • · · • *
··· • · ·· * * 9
Saponifikací, oxidací a odštěpením ochranných skupin vznikne po čištění 212 mg směsi diastereoisomerů HOOC-CH2-D-Cha-N-cyklopentyl-Gly-lysininyl-T [COCO] -OH. Rt (kapalinová chromatografie) = 28,5 a 29,1 min; od A
20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 %
Příklad 11
HOOC-CH2-D-Phe-Pro-lysininyl-T[COCO] -OH
N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Phe-Pro-OH se připraví podle příkladu 19 za použití N-(t-butyloxykarbonylmetyl)-N-Boc-D-Phe-OH a H-Pro-OBzl-HCI.
TLC: Rf = 0,63, sílikagel, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 664:31:18:7.
HOOC-CH2-D-Phe-Pro-lysininyl-T[COCO] -OH
Podle postupu příkladu 3 se provede vazebná reakce 677 mg N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Phe-Pro-OH a H-lysininyl (Cbz) Ψ [CHOHCO]-OMe-TFA za vzniku 814 mg chráněného tripeptidu. Saponifikací, oxidací a odštěpením ochranných skupin vznikne po čištění 284 mg směsi diastereoisomerů HOOC-CH2-D-Phe-Pro-lysininyl-T[COCO] -OH.
Rt (kapalinová chromatografie) = 16,1 a 17,0 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 %.
• «
9·9·
- 47 ··· ···
Příklad 12
HOOC-CH2-D-p-Cl-Phe-Pro-lysininyl-T [COCO] -OH část a: N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-p-Cl-Phe-OH
Podle postupu příkladu 1 se 10 g H-D-p-Cl-Phe-OH -HCI přemění na 16,7 g N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-p-Cl-Phe-OH.
TLC: Rf = 0,27, silikagel, eluční činidlo: směs etylacetátu a metanolu v poměru 9:1.
část b: N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-p-Cl-Phe-OSu (Su = sukcinimid)
Na roztok 14,67 g N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-p-Cl-Phe-OH ve 250 ml acetnitrilu se přes noc při teplotě místnosti působí 4,11 g N-hydroxysukcinimidu a
6,86 g 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidhydrochloridu. Reakční směs se odpařuje dosucha a zbytek se rozpustí v etylacetátu. Organický podíl se promyje vodou, suší se nad síranem sodným a zahustí se za vzniku 19,11 g aktivního esteru, který bez čištění použije v následující syntéze.
část c: N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-p-Cl-Phe-Pro-OH
Ve 100 ml N,N-dimetylformamidu a 100 ml vody se rozpustí 10,79 g H-Pro-OH-HCI. Po přidání IN roztoku • · 9 · • φ ·· • · « • · · * · · · · • · • · · » hydroxidu sodného k pH 8 se po kapkách přidá roztok 19,11 g N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-p-Cl-Phe-OSu ve 120 ml N,N-dimetylformamidu. Reakční směs se přes noc míchá při teplotě místnosti při udržování pH okolo 8. Reakční směs se zchladí a přidáním IN roztoku kyseliny chlorovodíkové se okyselí na pH 2. Vodný podíl se extrahuje dichlormetanem, organický podíl se promyje vodou, suší se nad síranem sodným a odpařuje se ve vakuu. Vytvořený zbytek se po absorbci na kolonu silikagelu čistí chromatografií při eluci gradientem koncentrací směsi etylacetátu a metanolu v poměru od 9:1 do 1:1 za vzniku 7,04 g požadovaného dipeptidu.
TLC: Rf = 0,24, silikagel, eluční činidlo: směs etylacetátu a metanolu v poměru 8:2.
část d: HOOC-CH2-D-p-Cl-Phe-Pro-lysininyl-T[COCO]-OH .
Podle postupu příkladu 3 se provede vazebná reakce 500 mg N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-p-Cl-Phe-N-Pro-OH a H-lysininyl(Cbz) Ψ [CHOCHO]-OMe-TFA za vzniku 572 mg chráněného tripeptidu. Saponifikací, oxidací a odštěpením ochranných skupin vznikne po čištění HPLC 129 mg směsi diastereoisomerů HOOC-CH2-D-p-Cl-Phe-Pro-lysininyl-Ψ [COCO]-OH.
Rt (kapalinová chromatografie) = 22,3 a 23,1 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60%.
• 0
0 0
0 0
00 0 « 0 0 • 00 00 ·· 00 0 0 0 0 0 0 •00« 00 0 0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0
0« 00 00
000»
Příklad 13
HOOC-CH2-D-Cha-Pro-lysininyl-T [COCO] -NH2
N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-OH se připraví podle příkladu 1. Příprava Boc-lysininyl (Cbz)-Ψ[CHOCHO]-OBu je popsána v části b příkladu 3.
část a: Boc-lysininyl (Cbz)-Ψ[ΟΗΟΟΗΟ] -OH
Do roztoku 320 mg Boc-lysininyl(Cbz) -Ψ [CHOCHO]-OBu v
11,2 ml směsi dioxanu a vody v poměru 9:1 se při teplotě místnosti přidá 1 ml IN roztok hydroxidu sodného. Reakční směs se 3 hodiny míchá při teplotě místnosti. Přidá se IN roztok kyseliny chlorovodíkové k pH 7 roztoku a dioxan se odstraní odpařováním. Reakční směs se vlije do studené vody a extrahuje se etylacetátem. Organický podíl se promyje vodou a suší se nad síranem horečnatým. Filtrát se odpaří ve vakuu za vzniku 308 mg Boc-lysininyl(Cbz)-Ψ[CHOCHO]-OH.
TLC: Rf = 0,46, silkagel, dichlormetan:metanol = 8:2.
část b: Boc-lysininyl (Cbz)-T[CHOCHO]-NH2
Ve 16,6 ml N,N-dimetylformamidu se rozpustí 308 mg Boc-lysininyl(Cbz)-Ψ[CHOCHO]-OH. Do roztoku se přidá přidá 117 mg 1-hydroxy-benztriazol-hydrátu, 132 μΐ Nmetylmorfolinu, 107 mg chloridu amonného a 186 mg l-(3dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidhydrochloridu. Reakční směs se 3 hodiny míchá při teplotě místnosti, vlije se do vody a extrahuje se etylacetátem. Sloučené »9
«4 4
44
4 44 • · · 4 • ·4 4
444 444
4 ·· extrakty se promyjí IN roztokem kyseliny chlorovodíkové, vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a odpařují za vzniku zbytku, který se po absorbci na oxid křemičitý čistí chromatografií při eluci gradientem poměrů směsi dichlormetanu a metanolu od 98:2 do 96:4 za vzniku 117 mg Boc-lysininyl (Cbz)-Ψ[CHOCHO]-NH2.
TLC: Rf = 0,14, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 97:3.
část c: H-lysininyl(Cbz) -Ψ [CHOCHO]-NH2'TFA
Výsledná sloučenina se připraví podle části h příkladu
1.
část d: N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz) -Ψ [CHOCHO]-NH2
Do roztoku 119,6 mg N-(t-butyloxy-karbonyl-metyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-OH ve 2 ml N,N-dimetylformamidu se při teplotě 0°C přidá 50 mg 1-hydroxy-benztriazol-hydrátu a 60 mg dicyklohexyl-karbodiimidu (DCCI). Reakčni směs se 0,5 hodiny míchá při teplotě 0°C. Do studené reakčni směsi se přidá roztok 100 mg H-lysininyl(Cbz)-Ψ [CHOCHO] -NH2 -TFA v 1 ml N, N-dimetylf ormamidu, jehož pH se upraví přidáním N,N-diisopropyletylaminu k pH 8. Reakčni směs se 1 hodinu míchá při teplotě 0°C, a pak se ohřeje a přes noc se míchá při teplotě místnosti. Reakčni směs se zchladí na teplotu -20°C, filtruje se a filtrát se zahustí za sníženého tlaku. Vytvořený zbytek • · · · • · ·· • · · · • · · · ·· ·· ·· · • · · ♦ • · · · • · · · ···· · • · · · ·· ·
··· ··· • · ·« ·· se rozpustí v etylacetátu a důkladně se promyje 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou, 2% roztokem kyseliny citrónové a nasyceným roztokem chloridu sodného. Po sušení nad síranem hořečnatým, filtraci a odpařování vznikne zbytek, který se po absorbci na kolonu oxidu křemičitého čistí chromatografií při eluci gradientem poměrů směsi dichlormetanu a metanolu od 97:3 do 95:5 za vzniku 93,5 mg N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz) -Ψ[CHOCHO]-NH2.
TLC: Rf = 0,34, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 95:5.
část e: N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl (Cbz ) -Ψ[ΟΟΟΟ] -NH2
Výsledná sloučenina se připraví podle postupu části g příkladu 2.
Reakční směs se promyje roztokem thiosulfátu sodného,
5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou.
TLC: Rf - 0,38, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 95:5.
část f: HOOC-CH2-D-Cha-Pro-lysininyl-T[COCO]-NH2
Výsledná sloučenina, HOOC-CH2-D-Cha-Pro-lysininyl-Ψ [COCO]-NH2, se připraví podle postupu části h příkladu 2 přímo podrobí preparativní HPLC na koloně DeltaPak při eluci gradientem koncentrací elučního systému od A 20%, B 70%, C 10% do A 20%, B 30% a C 50% během 40 minut při rychlosti průtoku 50 ml/min.
• · · · · · · • · · · · · · • · ·· · · · · • ftft ··· · · · · « • · * · ftft · • ft ·· ·· · ftft ·· » ftft · • ftft ftftft • · • ft ftft (A: 0,5M roztok fosfátového pufru, pH = 2,1; B: voda; C: směs acetnitrilu a vody v poměru 3:2).
Z 87 mg N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl (Cbz)-T[COCO]-NH2 vznikne 35 mg HOOC-CH2-D-Cha-Pro-lysininyl-T [COCO] -NH2.
Hmotnostní spektrum CI+ : 478,4 [M-H]+;
ď: 476,4 [M-H]+.
Rt (kapalinová chromatografie) = 21,10 a 21,41 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60% během 40 minut.
Příklad 14
HOOC-CH2-D-Cha-Pro-Lysininyl-T [COCO] -OEt
N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-OH se připraví podle příkladu 1. Příprava Boc-lysininyl(Cbz)-Ψ[CHOCHO]-OMe je popsána v části b příkladu 3.
část a: H-lysininyl(Cbz)-Ψ[ΟΗΟΟΗΟ]-OEt -HC1
Ve 100 ml 3M roztoku kyseliny chlorovodíkové v etanolu se při teplotě -20°C rozpustí 2,14 g Boc-lysininyl-(Cbz) -TfCHOCHO]-OMe. Reakční směs se 6 hodin míchá při teplotě místnosti a zahustí se ve vakuu za vzniku 2,36 g H-lysininyl(Cbz)-Ψ[CHOCHO]-OEt-HC1.
TLC: Rf = 0,17 a Rf = 0,25 (směs diastereoisomerů), silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a
- 53 • · · · · • · · · · · • ·· · · · · • · ··· ····· • · · · · · metanolu v poměru 95:5.
část b: N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz)-Ψ[COHCO]-OEt
Za použití 2,38 g N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-OH a 2,40 g H-lysininyl(Cbz)-Ψ[CHOCHO]-OEt •HCI a podle postupu části d příkladu 13 se připraví N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-Lysininyl-Ψ [COHCO]-OEt.
Namísto N,N-diisopropyletylaminu se použije trietylamin. Surový produkt se po absorbci na oxid křemičitý čistí chromatografií při eluci směsí heptanu a etylacetátem v poměru 1:1, a pak gradientem poměrů směsí dichlormetanu a metanolu od 97:3 do 95:5. Vznikne
1,24 g výsledné sloučeniny.
TLC: Rf = 0,5, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 95:5.
část c: N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz)-Ψ [COCO]-OEt
Výsledná sloučeniny se připraví podle postupu části e příkladu 13.
TLC: Rf = 0,51, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 97:3.
část d: HOOC-CH2-D-Cha-Pro-Lysininyl—Ψ [COCO] -OEt
Výsledná sloučenina, HOOC-CH2-D-Cha-Pro-Lysininyl-Ψ[COCO]-OEt, se připraví podle postupu části f • · · · · · · • · · · · · · • · · · · · · • · · · · · · · • · · · · · ·· ·· ··
- 54 příkladu 13. Vodný podíl se přímo podrobí preparativní HPLC na koloně DeltaPak při elucí gradientem koncentrací elučního systému od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 54% a C 26% během 45 minut při rychlosti průtoku 80 ml/min.
(A: 0,5M roztok fosfátového pufru, pH = 2,1; B: voda;
C: směs acetnitrilu a vody v poměru 3:2).
Z 293 mg N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz)-Ψ[COCO]-OEt vznikne 62 mg HOOC-CH2-D-Cha-Pro-lysininyl-T [COCO] -OEt.
Hmotnostní spektrum ESI+: 507,9[MH]+;
Rt (kapalinová chromatografie) = 26,45 a 27,30 min (směs diastereoisomerů);
od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60% během 40 minut.
Příklad 15
HOOC-CH2-D-Cha-Pro-Lysininyl-T[COCO] - (1-azetidin)
N- (t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-OH se připraví podle příkladu 1. Příprava Boc-lysininyl(Cbz)-Ψ[CHOCHO]-OBu je popsána v části b příkladu 3.
N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-LysininylΨ[COCO]-(1-azetidin) se připraví podle postupu příkladu 13 za použití Boc-lysininyl(Cbz)—Ψ[CHOCHO]-OBu jako výchozí látky. Čištěním HPLC 427 mg
N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-Lysininyl-T[COCO]-(1-azetidinu) podle • · ► ftft « • · ftft ♦ · ft • · • · · • ftftftft · postupu části f příkladu 13 vznikne 105 mg výsledné sloučeniny.
HPLC: kolona DeltaPak při eluci gradientem koncentrací elučního systému od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 45% a C 35% během 45 minut při rychlosti průtoku 80 ml/min. (A: 0,5M roztok fosfátového pufru, pH = 2,1; B: voda;
C: směs acetnitrilu a vody v poměru 3:2).
Hmotnostní spektrum FAB+ : 518,3[M+H]+;
FAB' : 516,2 [M+H]'
Rt (kapalinová chromatografie) = 26,24 a 26,70 min (směs diastereoisomerů); od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 % během 40 minut.
Příklad 16
HOOC-CH2-D-Cha-N-cyklopentyl-Gly-Lysininyl-T[COCO] -(1-azetidin)
N- (t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-N-cyklopentylglycin se připraví podle příkladu 1.
N- (t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-N-cyklopentylGly-Lysininyl-Ψ [COCO]-(1-azetidin) se připraví podle postupu příkladu 15. Odštěpením ochranných skupin ze 401 mg N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-N-cyklopentyl-Gly-Lysininyl-Ψ [COCO]-(1-azetidinu) a po HPLC vznikne 107 mg výsledné sloučeniny.
Hmotnostní spektrum FAB+ : 546,2 [M+H]+;
FAB' : 544,0 [M+H]' ·· ·· • · · ·
Rt (kapalinová chromatografie) = 35,85 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 % během 40 minut.
Příklad 17
HOOC-CH2-D-Cha-Pro~lysininyl-T[COCO] -NHCH2Ph
N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-OH se připraví podle příkladu 1. Příprava H-lysininyl (Cbz)-Ψ[CHOCHO]-OMe -TFA je popsána v části c příkladu 3.
část a: N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz)-Ψ[CHOCHO]-OMe
Výsledná sloučeniny se připraví podle části d příkladu 13 za použití 1,09 g H-lysininyl(Cbz) -Ψ [CHOCHO]-OMe-TFA a 1,18 g N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-OH. Surový produkt se po absorbci na oxid křemičitý čistí chromatografií při eluci gradientem poměrů směsi heptanu a etylacetátu v poměru od 4:6 do 3:7 za vzniku 0,99 g N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz) -Ψ[CHOCHO]-OMe.
TLC: Rf = 0,5, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 95:5.
část b: N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl (Cbz)-T[CHOCHO] -OH
Do roztoku 0,98 g N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz) -Ψ [CHOCHO]-OMe ve 20 ml směsi • · • ·
• · ·
9 9 • · · 9 • · 9 · 9 · dioxanu a vody v poměru 9:1 se přidá 1 ml IN roztok hydroxidu sodného. Reakční směs se vlije do studené vody, okyselí se na pH 2 přidáním IN kyseliny chlorovodíkové a extrahuje se etylacetátem. Organický podíl se promyje vodou a suší se nad síranem hořečnatým. Filtrát se odpaří ve vakuu za vzniku 1,05 g N-(t-butyloxykarbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz)-T[CHOCHO]-OH.
TLC: Rf = 0,4, silikagel, eluční činidlo: směs etylacetátu a metanolu v poměru 7:3.
část c: N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz)-Ψ[CHOCHO]-NHCH2Ph
Ve 16,6 ml N,N-dimetylformamidu se rozpustí 502 mg N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz)-Ψ [CHOCHO]-OMe. Do roztoku se přidá přidá 150 mg 1-hydroxy-benztriazol-hydrátu, 152 μΐ N-metylmorfolinu, 155 μΐ benzylaminu a 190 mg 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidhydrochloridu. Reakční směs se 17 hodin míchá při teplotě místnosti, vlije se do studeného IN roztoku kyseliny chlorovodíkové a extrahuje se etylacetátem. Sloučené organické podíly se promyjí vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a odpařují za vzniku 512,4 mg N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysinínyl(Cbz)-Ψ [CHOCHO]-NHCH2Ph .
TLC: Rf = 0,5, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 95:5.
• * · · » · · · » · · · • · · · · · část d: N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz)-Ψ[COCO]-NHCH2Ph
Výsledná sloučenina se připraví podle části e příkladu
13.
TLC: Rf = 0,32, silikagel, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 97:3.
část e: HOOC-CH2-D-Cha-Pro-lysininyl-T [COCO] -NHCH2Ph
Výsledná sloučenina se připraví podle části f příkladu
13.
Rt (kapalinová chromatografie) = 39,05 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 % během 40 minut.
Příklad 18
HOOC-CH2-D-Cha-Pro-lysininyl-T [COCO] -N (CH3) 2
HOOC-CH2-D-Cha-Pro-lysininyl-T [COCO]-N (CH3) 2 se připraví podle postupu příkladu 17 za použití N-(t-butyloxykarbonylmetyl ) -N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz) Ψ[CHOCHO]-OH (příklad 17, část b) jako výchozí sloučeniny.
Rt (kapalinová chromatografie) = 32,84 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 % během 40 minut.
Příklad 19
HOOC-CH2-D-Dpa-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl) • · 9 · • · · · • · · · • 9 9 9
99
část a: Boc-D-Dpa-Pro-OBzl
Do studeného roztoku 5,2 g Boc-D-Dpa-OH v 50 ml N,N-dimetylformamidu o teplotě 0°C se postupně přidává 3,1 g 1-hydroxy-benztriazolu (HOBT), 3,3 g dicyklohexylkarbodiimidu (DCCI), 4,07 g H-Pro-OBzl-HCI a 2,46 ml trietylamínu. Reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě 0°C, a pak se teplota přes noc udržuje na teplotě místnosti. Reakční směs se zchladí na teplotu -20°C a dicyklohexylmočovina se odstraní filtrací. Po odpaření filtrátu dosucha se vytvořený zbytek rozpustí v etylacetátu a důkladně se promyje 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného. Po sušení nad síranem sodným a zahuštění ve vakuu vznikne zbytek, který se po absorbci na kolonu silikagelu čistí chromatografií při eluci směsí heptanu a etylacetátu v poměru 4:6. Vznikne 8,7 g Boc-D-Dpa-Pro-OBzl.
TLC: Rf = 0,95, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 520:31:18:7.
část b: Boc-D-Dpa-Pro-OH
Do roztoku 7,0 g Boc-D-Dpa-Pro-OBzl v 140 ml metanolu se přidá 1 g 10% roztoku paladia na aktivním uhlí. Reakční směs se 1 hodinu hydrogenuje při atmosférickém tlaku a při teplotě místnosti. Katalyzátor se odstraní filtrací, rozpouštědlo se odstraní odpařováním za sníženého tlaku. Vznikne 5,5 g Boc-D-Dpa-Pro-OH.
• 4
4444 4
4 4 * 4 4 4 4 • 4 4 4 4 4
4 44 4 4 ·· 4 4 4 4
4 4 4 4 4 ·* 44 44
TLC: Rf = 0,59, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 520:31:18:7.
část c: N-Boc-D-Dpa-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl)
Vazebnou reakcí Boc-D-Dpa-OH s H-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolyl) -TFA (příklad 1) se podle postupu příkladu 22 připraví 560 mg výsledné sloučeniny, N-Boc-D-Dpa-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl).
TLC: Rf = 0,1, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs toluenu a etylacetátu v poměru 3:7.
část d: H-D-Dpa-Pro-lysíninyl(Cbz)-(2-thiazolyl)-TFA
Ve 2,5 ml bezvodého dichlormetanu a 2,5 ml kyseliny trifluoroctové se rozpustí 560 mg N-Boc-D-Dpa-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl) a reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti. Roztok se zahustí ve vakuu a odpařuje se s toluenem za vzniku 670 mg H-D-Dpa-Pro-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolyl) -TFA.
TLC: Rf = 0,51, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs toluenu a etylacetátu v poměru 1:1.
část e: N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-D-Dpa-Pro-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolyl)
Do míchaného roztoku 570 mg H-D-Dpa-Pro-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolyl) -TFA v 10 ml acetnitrilu se přidá 141 μΐ terc.butyl-bromacetátu. Reakční směs se přidáním N,N-diisopropyletylaminu udržuje na pH 8 a reakční směs • 0 00
0 0 0
0
0 0
0 0 0
0 0 · 0» 0 0
00 0 0 0 0
0 0 · •00 000
0 • 0 0 0 se 2 dny míchá při teplotě místnosti, a následně se odpařuje ve vakuu. Zbytek se rozpustí v etylacetátu a roztok se promyje vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem hořečnatým a znovu se zahustí. Vytvořený zbytek se po absorbci na kolonu oxidu křemičitého čistí chromatografií při eluci směsí etylacetátu a toluenu v poměru 1:4 za vzniku 499 mg N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-D-Dpa-Pro-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolyl).
TLC: Rf = 0,47, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 96:4.
část f: HOOC-CH2-D-Dpa-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl)
Odštěpením ochranných skupin a čištěním N-(t-butyloxykarbonylmetyl ) -D-Dpa-Pro-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolyl) podle postupu příkladu 22 vznikne 177 mg výsledné sloučeniny jako dva oddělené diastereoisomery.
Rt (kapalinová chromatografie) = 32,57 a 33,22 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 % během 40 minut.
Příklad 20
HOOC-CH2~D-Cha-N-cyklopentyl-Gly-Lysininyl-T[COCO] -NH2
N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-N-cyklopentylglycin se připraví podle postupu přípravy dipeptidů uvedeného v příkladě 1.
»9
9 9
4 99
9 4
9 9
Η
9 49 49 · 4 4 9 4 9
449 9 99 9
4 4449 β 999 494
4 4 4 9
9 99 49
Ν-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-N-cyklopentylGly-Lysininyl-Ψ[COCO]-ΝΗ2 se připraví podle postupu příkladu 13 za použití Boc-lysininyl(Cbz) -Ψ[ΟΗΟΟΗΟ]-OMe jako výchozí sloučeniny.
Rt (kapalinová chromatografie) = 34,09 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 % během 40 minut.
Příklad 21
HOOC-CH2-D-Cha-Pro-lysininyl-T[COCO] -NHCH3
HOOC-CH2-D-Cha-Pro-lysininyl-T [COCO]-NHCH3 se připraví podle postupu uvedeného v příkladě 17 za použití N-(t-butyloxy-karbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-Pro-lysininyl(Cbz)-Ψ[CHOCHO]-OH jako výchozí sloučeniny.
Rt (kapalinová chromatografie) = 29,61 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 % během 40 minut.
Příklad 22
N-Me-D-Nle-Pro-lysininyl-(2-thizolyl) část a; H-D-Nle-OMe · HCI
Do 270 ml metanolu o teplotě -15°C se přidá 18,2 g thionylchloridu. Následně se teplota na 20 minut zvýší na teplotu -10°C a do reakčního roztoku se přidá 10 g H-D-Nle-OH. Teplota se pomalu zvýší a reakčni směs se ·· 99 9 »· ·Φ •999 · 9 · 9 9 9 9
9·· · · · · · · · · • 99 9 · 9 9 999· · ··· ··« • 999«·· « « ·· 99 ·9 · ·· ·«
- 63 zahřívá pod refluxem 5 hodin. Produkt se nechá krystalizovat ze směsi metanolu a dietyleteru při teplotě 4°C za vzniku 12,9 g H-D-Nle-OMe HCI.
TLC: Rf = 0,61, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs n-butanolu, kyseliny octové a vody v poměru 10:1:3.
část b: Boc-D-Nle-OMe
Do roztoku 12,9 g H-D-Nle-OMe-HCI ve 200 ml bezvodého metanolu se přidá 15,5 g di-t-butyl-dikarbonátu a 19,8 ml trietylaminu. Reakční směs se 3 hodiny míchá při teplotě místnosti, a následně se zahustí ve vakuu. Zbytek se rozpustí v etylacetátu a roztok se promyje vodou. Vytvořený produkt se po absorbci na kolonu oxidu křemičitého čistí chromatografií při eluci směsí heptanu a etylacetátu v poměru 3:1 za vzniku 16,9 g Boc-D-Nle-OMe.
TLC: Rf = 0,55, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs etylacetátu a heptanu v poměru 1:3.
část c: N-Me-Boc-D-Nle-OMe
Ve 200 ml bezvodého N,N-dimetylformamidu se v atmosféře dusíku rozpustí 16,9 g Boc-D-Nle-OMe. Přidá se 24,9 ml metyljodidu a po zchlazení směsi na teplotu 0°C se přidá 3,31 g hydridu sodného jako 60% disperze v minerálním oleji. Reakční směs se 16 hodin míchá při teplotě místnosti, a pak se zahustí ve vakuu. Zbytek se rozpustí v etylacetátu a promyje se 0,lN roztokem kyseliny chlorovodíkové, vodou, 5% roztokem hydrogenuhličitanu • 9 9 9 9
99999 9
9
sodného a vodou, suší se a znovu se zahustí za vzniku 18,8 g alkylovaného produktu.
TLC: Rf = 0,56, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs etylacetátu a heptanu v poměru 1:3.
část d: N-Me-Boc-D-Nle-OH
Roztok 18 g N-Me-Boc-D-Nle-OMe ve 400 ml směsi dioxanu a vody v poměru 9:1 se přivede přidáním IN roztoku hydroxidu sodného na pH 12. Reakce probíhá 2 hodiny při udržování konstantní hodnoty pH 12. Reakční roztok se zpracuje kyselinou chlorovodíkovou, zchladí se v ledové lázni, přidá se 400 ml vody a extrahuje se dichlormetanem. Organický podíl se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného a zahustí se ve vakuu za vzniku 18,9 g N-Me-Boc-D-Nle-OH.
TLC: Rf = 0,26, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 9:1.
část e: N-Me-Boc-D-Nle-Pro-OH
Nejprve se připraví N-sukciimidester z N-Me-Boc-D-Nle-OH: Ve 250 ml acetnítrilu se rozpustí 18 g N-Me-Boc-D-Nle-OH a do roztoku se přidá 14,5 g l-etyl-3-[3-(dimetylamino)propyl]-karbodiimidhydrochloridu (EDCI) a 8,7 g N-hydroxysukciimidu (HONSu). Reakční směs se nechá 16 hodin při teplotě místnosti, rozpouštědlo se pak odstraní a zbytek se rozpustí v etylacetátu a promyje se vodou. Po sušení vznikne 24,3 g surového N-sukciimidesteru (ONSu-ester).
0 0 • 0 0
00
0 0 ·
0 0 00000 0 0 0
0
V druhé části přípravy se ve 300 ml N,N-dimetylformamidu a 300 ml vody rozpustí 20,9 g prolin-HCl a pH se přivede k pH 8 přidáním 2N roztoku hydroxidu sodného. Při zachování pH 8 se po kapkách do tohoto roztoku přidá roztok 24,3 g ONSu esteru ve 300 ml N,N-dimetylformamidu. Reakce je ukončena po 5 hodinách. Organické rozpouštědlo se odstraní odpařováním při teplotě místnosti za sníženého tlaku. Přidá se 300 ml vody a směs se okyselí. Produkt se extrahuje etylacetátem a promyje se vodou. Po sušení, filtraci a zahuštění vznikne 22,2 g žlutého oleje. Tento produkt se se po absorbci na oxid křemičitý čistí chromatografií při eluci směsí etylacetátu a metanolu v poměru 8:2 za vzniku 13,2 g výsledného produktu.
TLC: Rf = 0,65, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 163:20:6:11.
část f: N-Me-Boc-D-Nle-Pro-lysininyl(Cbz)-(2-thizolyl)
Do roztoku 376 mg N-Me-Boc-D-Nle-Pro-OH ve 3 ml bezvodého N,N-dimetylformamídu se přidá 0,19 ml N,N-diisopropyletylaminu a reakční směs se umístí pod dusík a zchladí se na teplotu -20°C. Následně se přidá 136 μΐ isobutylchlormravenčanu a směs se 15 minut míchá při teplotě -20°C. Za stálého míchání se do studeného roztoku anhydridu po kapkách přidá roztok H-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolyl) -TFA (příklad 1) v 3 ml bezvodého N, N-dimetylformamidu. Přidáváním N,N-diisopropyletyl·· 00 • 0 0 0 • 0 00 • »0 0 · · 0
00
- 66 0 0
0 0 0 0000 ·
aminu se pH reakční směsi udržuje na hodnotě pH 8,5. Reakční směs se 15 minut míchá při teplotě -20°C, a pak 1 hodinu při teplotě místnosti. Reakční směs se odpaří dosucha a vytvořený zbytek se rozpustí v etylacetátu. Postupně se promyje 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného a zahustí se ve vakuu. Zbytek se po absorbci na kolonu oxidu křemičitého čistí chromatografií při eluci směsí etylacetátu a heptanu v poměru 1:1 za vzniku 408 mg Boc-N-Me-D-Nle-Pro-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolylu). TLC: Rf = 0,21, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs etylacetátu a heptanu v poměru 1:1.
část g: N-Me-D-Nle-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl)
408 mg Boc-N-Me-D-Nle-Pro-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolylu) , se připraví podle postupu části p příkladu 1. Surový produkt se čistí preparativní HPLC na koloně DeltaPak C18 RP při eluci gradientem koncentrací elučního systému od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 30% a C 50% během 40 minut při rychlosti průtoku 80 ml/min. Výtěžek dvou diastereoisomerů:
• 105 mg. Rt (kapalinová chromatografie) = 19,17 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 % během 40 minut.
• 110 mg. Rt (kapalinová chromatografie) = 21,47 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20%, C 60 % během 40 minut.
·· ·» ·* 9 ···· t * · · · · · · » · 9 • · ·· 4» · » · · · · · • · · 9 9 9 · 9999 9 999 999
9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 99 9 9 9 9 9
- 67 Příklad 23
N-Me-D-Phe-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl) část a: N-Me-Boc-D-Phe-Pro-OH
Příprava N-Me-Boc-D-Phe-Pro-OH za použití H-D-Phe-OH je popsána v příkladě 2.
část b: N-Me-D-Phe-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl)
Vazebná reakce N-Me-Boc-D-Phe-Pro-OH a
H-lysinyl(Cbz)-(2-thiazolyl) -TFA (část d příkladu 1), odštěpení ochranných skupin a čištění se provede podle postupu příkladu 22 za vzniku dvou diastereoisomerů.
Výtěžek:
mg. Rt (kapalinová chromatografie) = 8,45 min; od
A 20%, B 60%, C 20% do C 100% během 40 minut.
• 63 mg. Rt (kapalinová chromatografie) = 10,98 min; od
A 20%, B 60%, C 20% do C 100% během 40 minut.
Příklad 24
N-Me-D-Cha-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl) část a: N-Me-Boc-D-Cha-Pro-OH
Příprava N-Me-Boc-D-Cha-Pro-OH za použití H-D-Cha-OH je popsána v příkladě 3.
část b: N-Me-D-Cha-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl)
- 68 ·· ·· ♦ · · ·» ·♦ ···· ♦ · · · · · · • · ·· · · · · * a · · • ·· aaa a a··· a aaa aaa aaaaaaa a a aaaa aa a aaaa
Vazebná reakce N-Me-Boc-D-Cha-Pro-OH a H-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolyl)-TFA (část d příkladu 1), odštěpení ochranných skupin a čištění se provede podle postupu příkladu 22 za vzniku dvou diastereoisomerů.
Výtěžek:
• 140 mg. Rt (kapalinová chromatografie) = 12,93 min; od A 20%, B 60%, C 20% do C 100% během 40 minut.
139 mg. Rt (kapalinová chromatografie) = 14,31 min; od A 20%, B 60%, C 20% do C 100% během 40 minut.
Příklad 25 etylS02-D-Cha-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl) část a: etylSOz-D-Cha-Pro-OH
Příprava etylS02-D-Cha-Pro-OH za použití Boc-D-Cha-OH a H-Pro-OPac je popsána v příkladě 6.
část b: etylS02-D-Cha-Pro-lysininyl- (2-thiazolyl)
Vazebná reakce etylS02-D-Cha-Pro-OH a H-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolyl) -TFA (část d příkladu 1), odštěpení ochranných skupin a čištění se provede podle postupu příkladu 22 za vzniku 127 mg výsledné sloučeniny jako směsi diastereoisomerů.
Rt (kapalinová chromatografie) = 44,52 a 45,58 min; od A 20%, B 80%, C 20% do A 20%, B 80% a C 60% během 40 minut.
- 69 ·· *· ·· · ·· ·< ···> « · · * ·β · ···· · · · · · · · · • ·· · · · · ···· · ··· ··· ····»·· · · ·· »r · ·· ··
Příklad 26
2-propylpentinoyl-Asp(OMe)-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl) část a: Boc-Asp(OMe)-OH
Ve 150 ml směsi dioxanu a vody v poměru 2:1 se rozpustí 10,0 g Η-Asp-(OMe)OH. Roztok se zchladí v ledové lázni a po částech se přidá 4,6 g hydrogenuhličitanu sodného a 13,1 g di-terc.butyldíkarbonátu. Reakční směs se 16 hodin míchá při udržování pH 8,5 přidáváním hydrogenuhličitanu sodného. Přidá se 400 ml vody a směs se promyje heptanem, zchladí se v lázni ledu a okyselí se přidáním IN roztoku kyseliny chlorovodíkové na pH 2,5. Po extrakci 300 ml etylacetátu se organický podíl promyje vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad sulfátem sodným, filtruje se a zahustí ve vakuu za vzniku 10,25 g výsledné sloučeniny.
TLC: Rf = 0,58, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 163:20:6:11.
část b: Boc-Asp(OMe)-Pro-OBzl
Výsledná sloučenina se připraví podle příkladu 1 WO 95/35312 při užití N-etylmorfolinu namísto N-metylmorfolinu.
TLC: Rf = 0,40, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs díchlormetanu a metanolu v poměru 95:5.
část c: Η-Asp(OMe)-Pro-OBzl-HCI • · ·· • · · · • · · ·
V 25 ml bezvodého etylacetátu se rozpustí 7,25 g Boc-Asp(OMe)-Pro-OBzl a zchladí se v lázni ledu. Přidá se 45 ml etylacetátu nasyceného kyselinou chlorovodíkovou a reakční směs se 5 hodin míchá při teplotě 0°C. Přebytek kyseliny chlorovodíkové se odstraní proudem dusíku a roztok se zahustí ve vakuu za vzniku 6,21 g Η-Asp(OMe)-Pro-OBzl-HCI jako bílé pevné látky.
TLC: Rf = 0,17, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 95:5.
část d: 2-propylpentinoyl-Asp(OMe)-Pro-OBzl
V 15 ml bezvodého dichlormetanu se rozpustí 1,63 ml 2-propyl-pentanové, roztok se zchladí v lázni ledu, přidá se 1,11 g 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu a vytvořený reakční roztok se 5 minut míchá. Do tohoto roztoku anhydridu kyseliny 2-propylpentenové se přidá při teplotě 0°C 6,21 g Η-Asp(OMe)-Pro-OBzl-HCI, 10 ml bezvodého dichlormetanu a 200 μΐ N,N-diisopropyletylaminu. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 16 hodin a pH se upraví na pH 8,5 přidáním N,N-diisopropyletylaminu. Přidá se 0,5 ekv. anhydridu 2-propylpentanové kyseliny a reakční roztok se 4 hodiny míchá.
1,3-Dicyklohexylurea se odstraní filtrací. Filtrát se zahustí ve vakuu a vytvořený zbytek se rozpustí v etylacetátu. Reakční roztok se postupně promyje IN roztok kyseliny chlorovodíkové, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem sodným a zahustí se ve
·· ··
4 4 4 vakuu. Zbytek se po absorbci na oxid křemičitý čistí chromatografií při eluci směsí toluenu a etylacetátu v poměru 8:2 za vzniku 6,54 g 2-propylpentinoyl-Asp (OMe)-Pro-OBzl.
TLC: Rf = 0,65, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs dichlormetanu a metanolu v poměru 95:5.
část e: 2-propylpentinoyl-Asp(OMe)-Pro-OH
Do roztoku 705 mg 2-propylpentinoyl-Asp(OMe)-Pro-OBzl v 10 ml metanolu se přidá 750 mg 10% roztoku paladia na aktivním uhlí. Reakční směs se 2 hodiny hydrogenuje při atmosférickém tlaku a při teplotě místnosti.
Katalyzátor se odstraní filtrací, rozpouštědlo se odstraní odpařováním za sníženého tlaku. Vznikne 580 mg 2-propylpentinoyl-Asp(OMe)-Pro-OH.
TLC: Rf = 0,48, oxid křemičitý, eluční činidlo: směs etylacetátu, pyridinu, kyseliny octové a vody v poměru 163:20:6:11.
část f: 2-propylpentinoyl-Asp(OMe)-Pro-lysininyl- (2-thiazolyl)
Vazebnou reakcí 2-propylpentinoyl-Asp(OMe)-Pro-OH s H-lysininyl(Cbz)-(2-thiazolyl)-TFA (příklad 1) se podle postupu příkladu 22 připraví 186 mg výsledné sloučeniny jako směsi dvou diastereoisomerů.
Rt (kapalinová chromatografie) = 23,16 a 24,30 min; od A 20%, B 60%, C 20% do C 100% během 40 minut.
Příklad 27
1-Piq-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl) část a: 1-Piq-Pro-OH
Příprava 1-Piq-Pro-OH je popsána v příkladě 8.
část b: 1-Piq-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl)
Vazebná reakce 1-Piq-Pro-OH a H-lysinyl(Cbz)-(2-thiazolyl) -TFA (část d příkladu 1), odštěpení ochranných skupin a čištění se provede podle postupu příkladu 22 za vzniku dvou diastereoisomerů.
Výtěžek dvou diastereoisomerů:
• 92 mg. Rt (kapalinová chromatografie) = 23,75 min; od
A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20% a C 60% během 40 minut.
• 97 mg. Rt (kapalinová chromatografie) = 25,72 min; od
A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20% a C 60% během 40 minut.
Příklad 28
HOOC-CH2-D-Cha-N-cyklopentyl-Gly-lysininyl-(2-thiazolyl) část a: N-(t-butyloxykarbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-N-cyklopentyl-Gly-OH
Příprava N- (t-butyloxykarbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-N- 73
-cyklopentyl-Gly-OH za použití H-D-Cha-OH -HCI je popsána v příkladě 10.
část b: HOOC-CH2-D-Cha-N-cyklopentyl-Gly-lysininyl- (2-thiazolyl)
Vazebná reakce N-(t-butyloxykarbonylmetyl)-N-Boc-D-Cha-N-cyklopentyl-Gly-OH a H-lysinyl(Cbz)-(2-thiazolyl) · TFA (část d příkladu 1), odštěpení ochranných skupin a čištění se provede podle postupu příkladu 22 za vzniku 107 mg výsledné sloučeniny jako směsi diastereoisomerů.
Rt (kapalinová chromatografie) = 20,39 a 20,82 min; od A 20%, B 60%, C 20% do C 100% během 40 minut.
Příklad 29
HOOC-CH2-D-Phe-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl) část a: N-(t-butyloxykarbonylmetyl)-N-Boc-D-Phe-Pro-OH
Příprava N-(t-butyloxykarbonylmetyl)-N-Boc-D-Phe-Pro-OH za použití H-D-Phe-OH-HCI je popsána v příkladě 11.
část b: HOOC-CH2-D-Phe-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl)
Vazebná reakce N-(t-butyloxykarbonylmetyl)-N-Boc-D-Phe-Pro-OH a H-lysinyl(Cbz)-(2-thiazolyl)· TFA (část d příkladu 1), odštěpení ochranných skupin a čištění se provede podle postupu příkladu 22 za vzniku dvou diastereoisomerů.
• ft • · · • · · · · · ftft · • ft · • ftft ftftft • · • 143 mg. od A 20%, minut.
149 mg.
Rt (kapalinová chromatografie) = 24,98 min;
B 80%, C 0% do A 20%, B 20% a C 60% během 40
Rt (kapalinová chromatografie) = 26,91 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20% a C 60% během 40 minut.
Příklad 30
HOOC-CH2-D-p-Cl-Phe-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl) část a: N-(t-butyloxykarbonylmetyl)-N-Boc-D-p-Cl-Phe-Pro-OH
Příprava N-(t-butyloxykarbonylmetyl)-N-Boc-D-p-Cl-Phe-Pro-OH za použití H-D-p-Cl-Phe-OH-HCI je popsána v příkladě 12.
část b: HOOC-CH2-D-p-Cl-Phe-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl)
Vazebná reakce N-(t-butyloxykarbonylmetyl)-N-Boc-D-p-Cl-Phe-Pro-OH a H-lysinyl(Cbz)-(2-thiazolyl) TFA (část d příkladu 1), odštěpení ochranných skupin a čištění se provede podle postupu příkladu 22 za vzniku 187 mg výsledné sloučeniny jako směsi diastereoisomerů. Rt (kapalinová chromatografie) = 28,86 a 30,63 min; od A 20%, B 80%, C 0% do A 20%, B 20% a C 60% během 40 minut.
*· 4 • « 4 4 » · · · · » · 4 4·· »··· · ·· · ··>
- 75 Příklad 31
Podle postupu uvedeného v současném vynálezu se připraví následující sloučeniny:
HOOC-CH2-D-Cha-Pec-lysininyl-T[COCO] -OH
HOOC-CH2-D-Cha-Pec-lysininyl-(2-thiazolyl)
HOOC-CH2-D-Cha- (N-cyklohexyl) -Gly-lysininyl-Ψ [COCO] -OH HOOC-CH2-D-Cha-(N-cyklohexyl)-Gly-lysininyl(2-thiazolyl) HOOC-CH2-D-Cha- (N-cyklopřopyl) -Gly-lysininyl-Ψ[COCO] -OH HOOC-CH2-D-Cha-(N-cyklopropyl)-Gly-lysininyl-(2-thiazolyl)
N-Me-D-Phe- (N-cyklopentyl) -Gly-lysininyl-Ψ [COCO] -OH N-Me-D-Phe-(N-cyklopentyl)-Gly-lysininyl-(2-thiazolyl) 2-propylpentanoyl-Asp (OMe) -Pro-lysininyl-Ψ[COCO] -OH 2-propylpentanoyl-Asp-Pro-lysininyl-vF [COCO]-OH 2-propylpentanoyl-Asp-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl) 2-hydroxy-3-cyklohexyl-propionyl-Pro-lysininyl-vF [COCO] -OH
2-hydroxy-3-cyklohexyl-propionyl-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl)
1-Piq- (N-cyklopentyl) -Gly-lysininyl-Ψ[COCO] -OH
1-Piq-(N-cyklopentyl)-Gly-lysininyl-(2-thiazolyl)
Difenylpropionyl-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl) N-Me-D-Nle-Pro-lysininyl-Ψ [COCO]-OH EtylS02-D-Phe-Pro-lysininyl-vP[COCO] -OH EtylS02-D-Phe-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl)
EtylSO2-N (Me) -D-Cha-Pro-lysininyl-Ψ [COCO] -OH EtylSO2-N(Me)-D-Cha-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl)
EtylSO2-N(Me)-D-Cha-Pro-lysininyl-(2-oxazolyl) • · · · · *
• 0 0 · » · » • · · · 0 0 •0 00 »0
00 00
0 0 0 » • · »»·» 0000 0 ·»· · · 0 > 0 0 • 00 00
HOOC-CH2-N (Me) -D-Cha-Pro-lysininyl-Ψ [COCO] -OH
HOOC-CH2-N(Me)-D-Cha-Pro-lysininyl-(2-thiazolyl) HOOC-CH2-N(Me)-D-Cha-Pro-lysininyl-(2-oxazolyl)
Příklad 32
Zkouška antitrombinového účinku
Trombin (faktor Ha) je jedním z faktorů koagulační kaskády.
Spektrofotometrickým měřením míry hydrolýzy chromogenního substrátu S-2238 vyvolané trombinem se stanoví antitrombinová aktivita sloučenin podle současného vynálezu. Touto zkouškou antitrombinového účinku v systému pufrů lze stanovit hodnotu IC50 sloučenin podle současného vynálezu.
Prostředí pro zkoumanou látku: pufr trometamin-NaCl-polyetylenglykol 6000 (TNP).
Referenční sloučenina: 12581 (Kabi)
Nosné prostředí: TNP pufr
Sloučeniny jako dimetylsulfoxid, metanol, etanol, acetnitril nebo terč.butylalkohol podpoří rozpouštění. V koncentracích do 2,5% v konečné reakční směsi nemají žádné nežádoucí účinky.
«·
Způsob provedení
Činidla*:
1. Pufr trometamin-NaCl (TN)
Složení pufru: trometamin (Tris) 6,057 g (50 mmol) NaCl 5,844 g (100 mmol) voda do 1 1
Hodnota pH roztoku se přidáním 10 mmol/1 kyseliny chlorovodíkové upraví při teplotě 37°C na pH 7,4.
2. Pufr TNP
Polyetylenglykol 6000 se rozpustí v pufru TN na koncentraci 3 g/1.
3. Roztok S-2238
Zkumavka obsahující 25 mg S-2238 (Kabi Diagnostica, Švédsko) se rozpustí ve 20 ml pufru TN k dosažení koncentrace 1,25 mg/ml (2 mmol/1).
4. Roztok trombinu
V TNP pufru se rozpustí lidský trombín (16 000 nKat/ /zkumavka, Centraal Laboratorium voor
Bloedtransfusie, Amsterdam, Nizozemsko) za vzniku zásobního roztoku s koncentrací 835 nKat/ml.
Před použitím se tento roztok zředí na koncentraci 3,34 nKat/ml.
* Všechny použité složky jsou analyticky čisté * Pro výrobu vodných roztoků se použije ultračistá voda (Milli-Q) ·· ·· • 9 9 · • · ·· • · · · • · · · • · ·« • · ···· ·· ·· » 9 9 9 ► · · 9
999 999
Příprava roztoků zkoumané sloučeniny a referenčních sloučenin:
Zkoumané a referenční sloučeniny se rozpustí v Milli-Q vodě za vzniku zásobního roztoku s koncentrací 10'2 mol/1. Před použitím se roztok zředí nosným prostředím na koncentrace 10'3, 1CT4, a 10' mol/1. Ke zkoušce se použijí tyto roztoky včetně zásobního roztoku. Konečné koncentrace v reakční směsi: 3-10-3, 10‘3, 3Ί0'4, 10-4, ·10'\ 105, 3 -10~6 a 10'6.
Postup
Do vyhloubení mikroploten se při teplotě místnosti střídavě pipetou přidá 0,075 ml, respektive 0,025 ml, zkoumané látky nebo roztoku referenční látky nebo nosného prostředí a tyto roztoky se zředí 0,115 ml, respektive 0,0165 ml, pufru TNP. Do každého prohloubně se přidá 0,030 ml roztoku S-2238 a mikroplotna se 10 minut předehřívá a předběžně inkubuje protřepáváním v inkubátoru (Amersham) při teplotě 37°C. Přidáním 0,030 ml roztoku trombinu do každého prohloubení a následnou předběžnou inkubací začne probíhat hydrolýza. Mikroplotna se pak inkubuje (30 sekund s protřepáváním) při teplotě 37°C. Po 1 minutě inkubace se se provede měření absorbance jednotlivých vzorků, které se pak opakuje každé 2 minuty po dobu 90 minut. Měření se provádí při 405 nm na odečítacím zařízení Twinreader plus (Flow Laboratories).
·· ·· ·· · ·«
9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 99 9 9 · 9 999
99 999 9 999· · ···
9 9 9 9 9 9 9
99 ·· · ·*
- 79 Údaje se zpracují na osobním počítači IBM programem LOTUS-MEASURE. Graficky se znázorní koncentrace každé sloučeniny (vyjádřené v mol/1 reakční směsi) a absorbance slepé zkoušky proti reakční době v minutách.
Vyhodnocení výsledků
Pro každou konečnou koncentraci reakční směsi se podle získané křivky vypočítá maximální absorbance. Hodnota IC50 (konečná koncentrace vyjádřená v μιηοΐ/ΐ, při které dojde k 50% inhibici maximální absorbance slepé zkoušky) se vypočítá metodou (logit transformation analysis) podle Hafnera a spol. (Arzneim.-Forsch./Drug Res. 1977; 27 (II), 1871-3) .
V následující tabulce jsou uvedené hodnoty IC50 sloučenin podle současného vynálezu:
Příklad IC50
I 0,56
4,3
II 5
0,7
4,64
5,1 (μΜ)
Claims (15)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Inhibitory serinproteázy obecného vzorce IA-B-X-NH-CH-C(O)Y (I) kdeA znamená atom vodíku, popřípadě substituovaný D,L-alfahy droxy ace tyl , R1, R1-O-C(O)-, R1-C(O)-, R1-SO -, R2OOC-(CHR2) -SO -, R2OOC-(CHR2) -, H„NC0-(CHR2) nebo N-ochrannou skupinu, kde Rx se volí ze skupiny alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku, alkenyl nebo alkinyi vždy o 2 až 12 atomech uhlíku nebo cykloalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku, přičemž tyto skupiny mohou být popřípadě substituovány cykíoalkylovou skupinou o 3 až 8 atomech uhlíku, alkoxyskupinou o 1 až 6 atomechuhlíku, oxoskupinou, skupinou OH, COOH, CFq nebo atomemO sz 1 halogenu, nebo může R znamenat aryl o 6 až 14 atomech uhlíku, aralkyl o 7 až 15 atomech uhlíku nebo aralkenyl o 8 až 16 atomech uhlíku, kde arylové skupiny jsou popřípadě substituovány alkylovou skupinou o 1 až 6 atomech uhlíku, cykíoalkylovou skupinou o 3 až 8 atomech uhlíku, alkoxyskupinou o 1 až 6 atomech uhlíku, skupinou OH, COOH, CFq nebo atomem halogenu a R nezávisle znamená vodík nebo má význam R , m znamená1, 2 nebo 3,99 99 • 9 9 9 • 9 999 9 9 9 • · ♦ · ·· 99- 81 99 « » · 99 9 9 999 9 99999 9 999 999 999 9 9 99 9 9 99 999 9999 999 99B znamená chemickou vazbu, zbytek aminokyseliny vzorce-NH-CH/(CH2)pC(O)OH/-C(O)- nebo jejího esterového derivátu, kde p znamená 0, 1, 2 nebo 3, -N(alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku)-CH2-CO-, -N-(alkenyl o 2 až 12 atomech uhlíku)-CHg-CO-, -N(alkinyl o 2 až 12 atomech uhlíku)-CH2-CO-, -N(benzyl)-CH2-C0-, D-l-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-l-Piq, D-3-Piq nebo zbytek D-aminokyseliny s hydrofobním postranním řetězcem, kterým je 'alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku, popřípadě substituovaný jednou nebo větším počtem cykloalkylových skupin o 3 až 8 atomech uhlíku nebo arylových skupin o 6 až 14 atomech uhlíku, popřípadě obsahujících heteroatom, například atom dusíku, jde tedy například o cyklohexyl, cyklooktyl, fenyl, pyridinyl, naftyl, tetrahydronaftyl a podobně, přičemž hydrofobní postranní řetězec je popřípadě substituován substituenty ze skupiny atom halogenu, trifluormethyl, nižší alkyl, jako methyl nebo ethyl, nižší alkoxyskupina, jako methoxyskupina, fenyloxyskupina, benzyloxyskupina a podobně, nebo B znamená L- nebo D-aminokyselinu s bazickým postranním řetězcem, například arginin nebo lysin nebo B znamená L- nebo D-aminokyselinu s neutrálním postranním řetězcem, například methioninsulfon a podobně, přičemž hydrofobní, bazická nebo neutrální aminokyselina jsou popřípadě substituovány na atomu dusíku alkylovým zbytkem o 1 až 6 atomech uhlíku, nebo3 4 5A a B společně tvoří zbytek vzorce R R N-CHR -C(0)-, kde3 4 1R a R mají nezávisle význam odpovídající R ,R1-O-C(O)-, R1-C(0)-, R1-SO2-, R2OOC-(CHR2)m-SO2-,R200C-(CHR2) -, H?NC0-(CHR2) - nebo N-ochrannou skum d m 3 4 5 pinu, nebo je jedna ze skupin R a R spojena s R za vzniku 5- nebo 6-členného kruhu spolu se skupinouN-C, na niž jsou vázány, přičemž tento kruh může být kondenzován s alifatickým nebo aromatickým 6-ělenným 5 kruhem a R znamena hydrofobní, bazický nebo neutrální postranní řetězec,X ·· ·« * · · · 9 99999 99 • · · 9 9 9 99 9 9 9 9 999 99 9999 999 9 9 99 9 9 99 999 999 • 9 9 • ·« 99 • · ···· znamená L-aminokyselinu s hydrofobním postranním řetězcem, kterým je alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku, popřípadě substituovaný jednou nebo větším počtem cykloalkylových skupin o 3 až 8 atomech uhlíku nebo arylových skupin o 6 až 14 atomech uhlíku, popřípadě obsahujících heteroatom, například atom dusíku, jde tedy o cyklohexyl, cyklooktyl, fenyl, pyridinyl, naftyl, tetrahydronaftyl a podobně, přičemž hydrofobní postranní řetězec je popřípadě substituován substituenty ze skupiny atom halogenu, trifluormethyl, nižší alkyl, jako methyl nebo ethyl, nižší alkoxyskupina, například methoxyskupina, fenyloxyskupina, benzyloxyskupina a podobně nebo X znamená serin nebo threonin nebo X znamená cyklickou aminokyselinu, například kyselinu 2-azetidinkarboxylovou, prolin, kyselinu pipekolinovou, 1-amino-l-karboxycykloalkan o 3 až 8 atomech uhlíku v cykioalkylové části, kyselinu 4-piperidinkarboxylovou nebo 4-thiazolidinkarboxylovou, 3,4-dehydroprolin, azaprolin, 2-oktahydroindolkarboxylovou kyselinu a podobně, přičemž cyklická aminokyselina popřípadě obsahuje další heteroatom ze skupiny N, 0 nebo S a je popřípadě substituována alkylovým zbytkem, alkoxyskupinou vždy o 1 až 6 atomech uhlíku, benzyloxyskupinou nebo oxoskupinou, nebo X znamená -NR -CH2~C(O)- nebo zbytek-NH-CH z(CH2)n^N-CH2-C(O)nebo kde n znamená 2, 3 nebo 4 a W znamená CH nebo N, * · · 4 znamená vodík, -CHF-, -CF-, -CO-NH-(alkylen o 1 až 6 66 atomech uhlíku)-CgHj. nebo -COOR , přičemž R znamená vodík, alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku nebo sku7 8 7 8 pinu -CONR R , kde R a R nezávisle znamenají vodík nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku nebo společně tvoří alkylenový zbytek o 3 až 6 atomech uhlíku, nebo Y znamená heterocyklický zbytek ze skupiny 2-thiazol, 2-thiazolin, 2-benzothiazol, 2-oxazol, 2-oxazolin a 2-benzoxazol, přičemž tyto heterocyklické zbytky jsou popřípadě substituovány alkylovým zbytkem o 1 až 6 atomech uhlíku, fenylovým zbytkme, alkoxyskupinou o 1 až 6 atomech uhlíku, benzyloxyskupinou nebo oxoskupinou a r znamená celé číslo 0, 1, 2 nebo 3, jakož i prekursory těchto látek a jejich farmaceuticky přijatelné soli.
- 2. Inhibitory serinproteázy obecného vzorce I podle nároku 1, v nichž X znamená zbytek L-aminokyseliny s hydrofobním postranním řetězcem, serin, threonin nebo skupinu -nr2-ch2-c(o)~.
- 3. Inhibitory serinproteázy obecného vzorce I podle nároku 1, v nichž A má svrchu uvedený význam, B znamená chemickou vazbu, zbytek aminokyseliny vzorce-NH-CH/(CH_) C(O)OH/-C(O)- nebo jeho esterový derivát a p znamená 0, 1, 2 nebo 3, -N(alkyl)-CH2~CO o 1 až 6 atomech uhlíku v alkylové části, -N(alkenyl)-CH2-CO- o 2 až 6 atomech uhlíku v alkenylové části, -N(benzyl)-CH2~CO-, D-l-Tiq, D-3-Tiq, D- Atc, Aic, D-l-Piq, D-3-Piq nebo zbytek D-aminokyseliny s hydrofobním postranním řetězcem, popřípadě substituovaný na atomu dusíku alkylovým zbytkem o 1 až 6 atomech uhlíku, nebo • · ·*·99 9 99 • ♦ 9 99 9 9 9 99 9999 9 9999 9 9 « «« · ··A a B společně tvoří zbytek R3R4N-CHR5-C(0)-, aX znamená cyklickou aminokyselinu, popřípadě obsahující další heteroatom ze skupiny N, 0 nebo S a popřípadě substituovaný alkylovým zbytkem, alkoxyskupinou vždy o 1 až6 atomech uhlíku, benzyloxyskupinou nebo oxoskupinou, nebo 2X znamená skupinu -NR -CH^CCO)- nebo fragment:-NH-CH Z(CH2)^N-CH2-C(O)nebo
- 4. Inhibitory serinproteázy obecného vzorce I podle nároku 3, v nichž A znamená atom vodíku, 2-hydroxy-3-cyklohexylpropionyl, 9-hydroxyfluoren-9-karboxyl, R1, R^-SOg-, R2OOC-(CHR2)m-S02-, R2OOC-(CHR2)m-, H^NCO-(CHR2)m~ nebo ochrannou skupinu na atomu dusíku, přičemž R^ se volí ze skupiny alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku, alkenyl o 2 až 12 atomech uhlíku, aryl o 6 až 14 atomech uhlíku, aralkyl o 7 až , 215 atomech uhlíku a aralkenyl o 8 az 16 atomech uhlíku a R nezávisle znamená atom vodíku nebo má význam, uvedený pro R1, B znamená chemickou vazbu, D-l-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-l-Piq, D-3-Piq nebo zbytek D-aminokyseliny s hydrofobním postranním řetězcem, popřípadě substituovaný na atomu dusíku alkylovým zbytkem o 1 až 6 atomech uhlíku nebo A a B společně tvoří zbytek R3R4N-CHR5-C(0)-, Y znamená -CO-NH-alkylen-CrH^ s alkylenovým zbytkem o 1 až 6 atomech uhlíku, -COOR^, θ 5 7 o-CONR R nebo znamená Y heterocyklický zbytek ze skupiny 2-thiazolyl, 2-thiazolinyl, 2-benzothiazolyl, 2-oxazolyl, 2-oxazolinyl nebo 2-benzoxazolyl.
- 5. Inhibitory serinproteázy obecného vzorce I podle inároku 4, v nichž A znamená atom vodíku, R^-SC> - nebo p OR OOC-(CHR ) -, B znamena chemickou vazbu, D-l-Tiq, D-3-Tiq, • ft ftftft· • ft ftft ► ftft 1 • ·· 4 ftftft ftft 4 • 1D-Atc, Aic, D-l-Piq, D-3-Piq nebo zbytek D-aminokyseliny s hydrofobním postranním řetězcem, nebo A a B společně tvoří zbytek R°R n-CHR -C(0)-, kde alespoň jeden ze symbolů RJ a R4 znamená skupinu R2OOC-(CHR2)m- nebo R^-SO2~ a druhý nezávisle znamená alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku, alkenyl, alkinyl vždy o 2 až 12 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku, aralkyl o 7 až 15 atomech uhlíku, R^-SCA2 2 5 , , nebo R OOC-(CHR ) - a R znamená hydrofcbní postranní řetězec,Y znamená -CO-NH-alkylen-C^Hj. o 1 až 5 atomech uhlíku V alkylenové části, -COOR , kde R° znamená atom vodíku nebo alkyl o 7 8 7 8 až 3 atomech uhlíku, -CONR R , kde R a R nezávisle znamenají 7 8 atom vodíku nebo alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku nebo R a R společně tvoří alkylenový zbytek o 3 až 5 atomech uhlíku neboY znamená heterocyklický zbytek ze skupiny 2-thiazolyi, 2-benzothiazolyl, 2-oxazolyl nebo 2-benzoxazolyl.
- 6. Inhibitory serinproteázy obecného vzorce I podle nároku2 25, v nichž A znamená R OOC-(CHR ) -, B znamená zbytek D-aminokyseliny s hydrofobním postranním řetězcem, nebo A a B spo3 4 5 léčně tvoří zbytek R R N-CHR -C(0)-, v němž nejméně jeden ze o 3 4 z 2 2 symbolu R a R znamená zbytek R OOC-(VHR ) - a druhý nezávisle znamená alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku, alkenyl o 2 až6 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku, benzyl,1 2 2R -S0„- nebo R OOC-(CHR ) -, a X znamená kyselinu 2-azetidin2 m karboxylovou, prolin, kyselinu pipekolinovou nebo 4-thiazolidinkarboxylovou, 3,4-dehydroprolin, kyselinu 2-oktahydroindolkarboxylovou nebo -/N-cykloalkyl/-CH2-C(0)- o 3 až 8 atomech uhlíku v cykloalkylové části.
- 7. Inhibitory serinproteázy obecného vzorce I podle nároku 5, v nichž A znamená HOOC-CHg-, B znamená D-Phe, D-Cha, D-Coa, D-Dpa, p-Cl-D-Phe, p-Omethyl-D-Phe, p-Oethyl-D-Phe,D-Nle, m-Cl-D-Phe, 3,4-di-0methyI-D-Phe, D-Chg, nebo A a B 3 4 5 společně tvoří zbytek R R B-CHR -C(0)-, v němž nejméně ·· · ·· • · · · · · • · ·· · · • · · ♦ · · « • · · · · · ··♦* o 3 4 jeden ze symbolu R a R znamena skupinu HOOC-CH^- a druhý nezávisle znamená alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, alkyl-SO , 5 o 1 až 4 atomech uhlíku nebo HOOC-CH,,- a R znamena cykloalkyl 'o 3 až 8 atomech uhlíku, cykloalkylalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku v cykloalkylová části o 1 až 4 atomech uhlíku v aikylové části, fenyl, benzyl, popřípadě substituovaný atomem chloru nebo alkoxyskupinou o 1 až 4 atomech uhlíku.
- 8. Inhibitory serinproteázy obecného vzorce I podle nároku 7, v nichž Y znamená heterocyklický zbytek ze skupin 2-thiazolyl, 2-benzothiazolyl, 2-oxazolyl nebo 2-benzoxazolyl.
- 9. Inhibitory serinproteázy obecného vzorce I, podle inároku 5, v nichž A znamená R“-SO2-, B znamená chemickou vazbu, D-l-Tiq, D-3-Tiq, D-Atc, Aic, D-l-Piq, D-3-Piq nebo zbytek D-aminokyseliny s hydrofobním postranním řetězcem, nebo3 4 5A a B společně tvoří zbytek R R N-CHR -C(0)-, v němž nejméně o 3 4 1 jeden ze symbolu R a R znamená R^-SO»- a druhý nezávisle v i znamená alkyl o 1 az 12 atomech uhlíku nebo R^-SO^-, X znamená kyselinu 2-azetldinkarboxylovou, prolin, kyselinu pipekolinovou nebo 4-thiazolidinkarboxylovou, 3,4-dehydroprolin, kyselinu 2-oktahydroíndolkarboxylovou, -/N-(cyklopentyl)/-CH2~C(O)- nebo zbytek z(CH2)n -NH-CHN-CH2-C(O)nebo
- 10. Inhibitory serinproteázy obecného vzorce I podle nároku 9, v nichž A znamená ethyi-SO2~ nebo benzyl-S02~,B znamená chemickou vazbu, D-Phe, D-Cha, D-Cia, D-Dpa, p-Cl-D-Phe, p-Omethyl-D-Phe, p-Oethyl-D-Phe, D-Nle, m-Cl-D-Phe, 3,4-di-0methyl-D-Phe, D-Chg, nebo A a B společně tvoří4 99 94 49 99 9 999 · ♦ · ·· • 9 9 ··· ··· • 999 99 akupinu R3R4N-CHR5-C(O), v níž nejméně jeden ze symbolů R3 a R4 znamená ethyl-SO9- nebo benzyl-SO.- a druhý nezávisle d ^15 znamená alkyl o 1 až 12 atomech uhlíku nebo R -S02~ a R znamená cykloalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku, cykloalkylalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku v cykloalkylové části a 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové části, fenyl, benzyl, difenylmethinyl, přičemž tyto skupiny jsou popřípadě substituovány atomem chlo ru nebo alkoxyskupinou o 1 až 4 atomech uhlíku.
- 11. Inhibitory serinproteázy obecného vzorce I podle nároku 10, v nichž Y znamená -CO-NH-CH„-CcHc , -C0-NH-CHoCHo78 78 265 2 2-h H,_ nebo -CONR R , kde R a R nezávisle znamená vodík neo 5 7 8 bo alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku nebo R a R společně tvoří alkylenový zbytek o 3 až 5 atomech uhlíku nebo Y znamená heterocyklický zbytek ze skupiny 2-thiazolyl, 2-benzothiazolyl, 2-oxazolyl nebo 2-benzoxazolyl.
- 12. Inhibitory serinproteázy obecného vzorce I podle některého z nároků 1 až 11, v nichž r = 1.
- 13. Farmaceutický prostředek, vyznačuj íc i se t í m , že jako účinnou složku obsahuje inhibitory serinproteázy podle některého z nároků 1 až 12 spolu s farmaceuticky přijatelnými pomocnými látkami.
- 14. Inhibitory serinproteázy obecného vzorce I podle některého z nároků 1 až 12 pro použití k léčebným účelům.
- 15. Použití inhibitorů serinproteázy podle některého z nároků 1 až 12 pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčení nebo prevenci chorob, vyvolaných poruchami thrombinu.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP96200543 | 1996-03-01 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ277898A3 true CZ277898A3 (cs) | 1999-06-16 |
Family
ID=8223736
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ982778A CZ277898A3 (cs) | 1996-03-01 | 1997-02-26 | Inhibitory serinproteázy a farmaceutický prostředek |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6410684B1 (cs) |
| EP (1) | EP0886647B1 (cs) |
| JP (1) | JP2000506837A (cs) |
| KR (1) | KR19990087415A (cs) |
| CN (1) | CN1212704A (cs) |
| AR (1) | AR006310A1 (cs) |
| AT (1) | ATE221080T1 (cs) |
| AU (1) | AU709330B2 (cs) |
| BR (1) | BR9707808A (cs) |
| CA (1) | CA2246246A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ277898A3 (cs) |
| DE (1) | DE69714222T2 (cs) |
| DK (1) | DK0886647T3 (cs) |
| ES (1) | ES2180933T3 (cs) |
| HU (1) | HUP9900390A3 (cs) |
| IL (1) | IL120310A (cs) |
| NO (1) | NO983991L (cs) |
| NZ (1) | NZ331484A (cs) |
| PL (1) | PL328875A1 (cs) |
| PT (1) | PT886647E (cs) |
| RU (1) | RU2178419C2 (cs) |
| TR (1) | TR199801704T2 (cs) |
| TW (1) | TW442452B (cs) |
| WO (1) | WO1997031937A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA971667B (cs) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR19990082424A (ko) * | 1996-02-13 | 1999-11-25 | 이.에이치. 리링크 | 세린 프로테아제 억제제 |
| JP2001525823A (ja) | 1997-05-15 | 2001-12-11 | イーライ・リリー・アンド・カンパニー | 抗血栓化合物 |
| EA003856B1 (ru) | 1998-04-30 | 2003-10-30 | Агурон Фармасьютикалз, Инк. | Антипикорнавирусные композиции, их получение и применение |
| WO2000009542A1 (en) * | 1998-08-17 | 2000-02-24 | Cortech, Inc. | SERINE PROTEASE INHIBITORS COMPRISING α-KETO HETEROCYCLES |
| WO2000051623A2 (en) | 1999-03-05 | 2000-09-08 | The Trustees Of University Technology Corporation | Inhibitors of serine protease activity, methods and compositions for treatment of nitric oxide-induced clinical conditions |
| US7704958B1 (en) | 1999-03-05 | 2010-04-27 | Bio Holding, Inc. | Methods and compositions for inhibiting apoptosis using serine protease inhibitors |
| US6849605B1 (en) | 1999-03-05 | 2005-02-01 | The Trustees Of University Technology Corporation | Inhibitors of serine protease activity, methods and compositions for treatment of viral infections |
| DK1206484T3 (da) | 1999-08-04 | 2005-01-24 | Agouron Pharma | Antipicornavirale forbindelser og sammensætninger, deres farmaceutiske anvendelser og materialer til deres syntese |
| AU2001266924A1 (en) | 2000-06-14 | 2001-12-24 | Agouron Pharmaceuticals, Inc. | Antipicornaviral compounds and compositions, their pharmaceutical uses, and materials for their synthesis |
| KR100904788B1 (ko) | 2000-07-21 | 2009-06-25 | 쉐링 코포레이션 | Ｃ형 간염 바이러스의 ｎｓ3-세린 프로테아제억제제로서의 신규한 펩티드 |
| NZ523781A (en) * | 2000-07-21 | 2004-10-29 | Corvas Int Inc | Novel peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus |
| US7244721B2 (en) | 2000-07-21 | 2007-07-17 | Schering Corporation | Peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus |
| EP1358178A2 (en) | 2001-01-30 | 2003-11-05 | Bristol-Myers Squibb Company | Sulfonamide lactam inhibitors of factor xa |
| US7405210B2 (en) * | 2003-05-21 | 2008-07-29 | Osi Pharmaceuticals, Inc. | Pyrrolopyridine-2-carboxylic acid amide inhibitors of glycogen phosphorylase |
| JP2007527904A (ja) | 2004-03-08 | 2007-10-04 | プロシディオン・リミテッド | グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤としてのピロロピリジン−２−カルボン酸ヒドラジド化合物 |
| JP2008521873A (ja) | 2004-12-02 | 2008-06-26 | プロシディオン・リミテッド | ピロロピリジン−２−カルボン酸アミド類 |
| JP5740308B2 (ja) * | 2008-10-15 | 2015-06-24 | ダニスコ・ユーエス・インク | 修飾変異ボウマンブリックプロテアーゼインヒビター |
| FI3472149T3 (fi) | 2016-06-21 | 2023-11-09 | Orion Ophthalmology LLC | Heterosyklisiä prolinamidijohdannaisia |
| US10526315B2 (en) | 2016-06-21 | 2020-01-07 | Orion Ophthalmology LLC | Carbocyclic prolinamide derivatives |
| US11351149B2 (en) | 2020-09-03 | 2022-06-07 | Pfizer Inc. | Nitrile-containing antiviral compounds |
Family Cites Families (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4556655A (en) * | 1984-09-24 | 1985-12-03 | Schering Corporation | Antihypertensive compounds having both diuretic and angiotensin converting enzyme inhibitory activity |
| CA2008116C (en) * | 1989-02-23 | 2001-11-20 | Thomas Weller | Glycine derivatives |
| ZW11290A1 (en) * | 1989-07-14 | 1990-10-31 | Smithkline Beecham Corp | Hemoregulatory peptides |
| DE69431718T2 (de) * | 1993-04-30 | 2003-07-10 | Merck & Co., Inc. | Thrombin-inhibitoren |
| US5672582A (en) * | 1993-04-30 | 1997-09-30 | Merck & Co., Inc. | Thrombin inhibitors |
| SE9301916D0 (sv) | 1993-06-03 | 1993-06-03 | Ab Astra | New peptides derivatives |
| ZA951618B (en) | 1994-03-04 | 1996-08-27 | Lilly Co Eli | Antithrombotic agents |
| ZA951617B (en) | 1994-03-04 | 1997-02-27 | Lilly Co Eli | Antithrombotic agents. |
| US5561146A (en) | 1994-06-10 | 1996-10-01 | Bristol-Myers Squibb Company | Modified guanidino and amidino thrombin inhibitors |
| WO1995035311A1 (en) | 1994-06-17 | 1995-12-28 | Corvas International, Inc. | 3-amino-2-oxo-1-piperidineacetic derivatives as enzyme inhibitors |
| JPH0820597A (ja) * | 1994-07-07 | 1996-01-23 | Meiji Seika Kaisha Ltd | トロンビン阻害作用を有する複素環カルボニル化合物 |
| CA2208772A1 (en) | 1994-12-22 | 1996-06-27 | Benoit Bachand | Low molecular weight bicyclic thrombin inhibitors |
-
1997
- 1997-02-25 TW TW086102261A patent/TW442452B/zh not_active IP Right Cessation
- 1997-02-25 IL IL12031097A patent/IL120310A/en not_active IP Right Cessation
- 1997-02-26 TR TR1998/01704T patent/TR199801704T2/xx unknown
- 1997-02-26 AU AU18775/97A patent/AU709330B2/en not_active Ceased
- 1997-02-26 BR BR9707808A patent/BR9707808A/pt not_active Application Discontinuation
- 1997-02-26 PT PT97905099T patent/PT886647E/pt unknown
- 1997-02-26 CA CA002246246A patent/CA2246246A1/en not_active Abandoned
- 1997-02-26 DE DE69714222T patent/DE69714222T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1997-02-26 CZ CZ982778A patent/CZ277898A3/cs unknown
- 1997-02-26 HU HU9900390A patent/HUP9900390A3/hu unknown
- 1997-02-26 ZA ZA9701667A patent/ZA971667B/xx unknown
- 1997-02-26 RU RU98117949/04A patent/RU2178419C2/ru active
- 1997-02-26 AT AT97905099T patent/ATE221080T1/de not_active IP Right Cessation
- 1997-02-26 PL PL97328875A patent/PL328875A1/xx unknown
- 1997-02-26 NZ NZ331484A patent/NZ331484A/xx unknown
- 1997-02-26 DK DK97905099T patent/DK0886647T3/da active
- 1997-02-26 CN CN97192682A patent/CN1212704A/zh active Pending
- 1997-02-26 KR KR1019980706833A patent/KR19990087415A/ko not_active Ceased
- 1997-02-26 WO PCT/EP1997/000938 patent/WO1997031937A1/en not_active Application Discontinuation
- 1997-02-26 EP EP97905099A patent/EP0886647B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-02-26 ES ES97905099T patent/ES2180933T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-02-26 US US09/142,110 patent/US6410684B1/en not_active Expired - Fee Related
- 1997-02-26 JP JP9530600A patent/JP2000506837A/ja not_active Ceased
- 1997-03-03 AR ARP970100833A patent/AR006310A1/es unknown
-
1998
- 1998-08-31 NO NO983991A patent/NO983991L/no not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES2180933T3 (es) | 2003-02-16 |
| DE69714222T2 (de) | 2003-02-20 |
| AU1877597A (en) | 1997-09-16 |
| EP0886647A1 (en) | 1998-12-30 |
| HK1021541A1 (en) | 2000-06-16 |
| AU709330B2 (en) | 1999-08-26 |
| JP2000506837A (ja) | 2000-06-06 |
| IL120310A0 (en) | 1997-06-10 |
| PL328875A1 (en) | 1999-03-01 |
| PT886647E (pt) | 2002-12-31 |
| AR006310A1 (es) | 1999-08-25 |
| NO983991D0 (no) | 1998-08-31 |
| IL120310A (en) | 2002-02-10 |
| HUP9900390A2 (hu) | 1999-06-28 |
| EP0886647B1 (en) | 2002-07-24 |
| WO1997031937A1 (en) | 1997-09-04 |
| ATE221080T1 (de) | 2002-08-15 |
| KR19990087415A (ko) | 1999-12-27 |
| TW442452B (en) | 2001-06-23 |
| NO983991L (no) | 1998-10-30 |
| NZ331484A (en) | 2000-01-28 |
| DE69714222D1 (de) | 2002-08-29 |
| RU2178419C2 (ru) | 2002-01-20 |
| ZA971667B (en) | 1997-09-10 |
| DK0886647T3 (da) | 2002-11-04 |
| US6410684B1 (en) | 2002-06-25 |
| TR199801704T2 (xx) | 1998-12-21 |
| CA2246246A1 (en) | 1997-09-04 |
| BR9707808A (pt) | 1999-07-27 |
| CN1212704A (zh) | 1999-03-31 |
| HUP9900390A3 (en) | 2000-11-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100339456B1 (ko) | 신규펩티드유도체 | |
| CZ277898A3 (cs) | Inhibitory serinproteázy a farmaceutický prostředek | |
| US6034067A (en) | Serine protease inhibitors | |
| RU2178796C2 (ru) | Ингибиторы тромбина | |
| CZ277998A3 (cs) | Inhibitory serinproteázy a farmaceutický prostředek | |
| KR20010012174A (ko) | 세린 프로테아제 억제제 | |
| CA2338524A1 (en) | Inhibitors of urokinase and blood vessel formation | |
| JPH04208299A (ja) | プロリルエンドペプチターゼ阻害ペプチド | |
| EP0956293B1 (en) | Thrombin inhibitors | |
| RU2172321C2 (ru) | Ингибиторы сериновых протеаз | |
| HK1021541B (en) | Serine protease inhibitors | |
| MXPA98007091A (en) | Inhibitors of protease being | |
| CZ9903880A3 (cs) | Inhibitory serinové proteázy | |
| MXPA98003479A (en) | Tromb inhibitors | |
| MXPA98007090A (en) | Inhibitors of serine prote |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic |