FI86557B - Foerfarande foer framstaellning av alfaamylas medelst en mikroorganism av arten bacillus subtilis. - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av alfaamylas medelst en mikroorganism av arten bacillus subtilis. Download PDFInfo
- Publication number
- FI86557B FI86557B FI844845A FI844845A FI86557B FI 86557 B FI86557 B FI 86557B FI 844845 A FI844845 A FI 844845A FI 844845 A FI844845 A FI 844845A FI 86557 B FI86557 B FI 86557B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- bacillus subtilis
- amylase
- fermentation
- microorganism
- alpha
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2405—Glucanases
- C12N9/2408—Glucanases acting on alpha -1,4-glucosidic bonds
- C12N9/2411—Amylases
- C12N9/2414—Alpha-amylase (3.2.1.1.)
- C12N9/2417—Alpha-amylase (3.2.1.1.) from microbiological source
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/07—Bacillus
- C12R2001/125—Bacillus subtilis ; Hay bacillus; Grass bacillus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/832—Bacillus
- Y10S435/839—Bacillus subtilis
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Detergent Compositions (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
> 86557
Menetelmä alfa-amylaasin valmistamiseksi Bacillus subtilis-lajin mikro-organismilla Förfarande för framställning av alfaamylas medelst en mikroorganism av arten Bacillus subtilis
Alfa-amylaasi on eräs teollisesti tärkeimpiä entsyymejä ja sitä käytetään laajalti esimerkiksi tärkkelys-, tekstiili- ja elintarviketeollisuudessa tärkkelyksen hydrolyysiin. Alfa-amylaasin teollisella valmistuksella on siksi jonkin verran taloudellista merkitystä.
Alfa-amylaasin valmistuksesta tiedetään yleisesti, että alfa-amylaasia voidaan saada talteen taloudellisesti edustavilla saannoilla fermentoimalla Bacillus-sukuun kuuluvia erilaisia mikro-organismilajeja, muun muassa Bacillus subtilista ja sen alalajeja. Tilanne on erityisen edullinen silloin, kun aktiivista entsyymiä on jo fermentointialustassa mahdollisimman korkea pitoisuus. Siksi on tehty paljon työtä mahdollisimman korkean entsyymipitoisuuden saavuttamiseksi fermentointialustassa kasvatuksellisin ja menetelmäteknisin toimenpitein. Yoneda et ai., aikakauslehdessä "Applied and Environmental Microbiology"; vuosikerta 1980, nide 39, sivulta 274 alkaen, ja teoksessa "Molecular Cloning and Gene Regulation in Bacilli”, toimittajat Ganesan, Chang ja Hoch, ilmestynyt 1982, Academic Press, Inc., New York, esittävät esimerkiksi menetelmän, jolla voidaan suurentaa alfa-amylaasin saantoa fermentointialustassa 130...150 U/ml:sta 25000 U/ml:aan teollisesti käytetyllä Bacillus subtilis-kannalla geenifragmenttien suunnattua siirtoa käyttäen. Tämä suureneminen merkitsee tässä tapauksessa noin 170-kertaista tuottokyvyn paranemista. Tällainen tuottokyky on kuitenkin vielä riittämätön alfa-amylaasin teollisen valmistuksen kannalta.
Keksinnön tarkoituksena on tästä syystä valmistaa sellainen Bacillus subtilis-lajiin kuuluva mikro-organismi ja vastaavas- 2 86557 ti kehittää alfa-amylaasin valmistusmenetelmä, jossa käytetään sellaista mikro-organismia, jolla voidaan saavuttaa oleellisesti korkeampi tuottokyky.
Tämä voidaan saavuttaa valmistamalla mikro-organismi Bacillus subtilis DSM 2704 ja vastaavasti alfa-amylaasin valmistusmenetelmällä, jossa käytetään tätä mikro-organismia.
Uusi mikro-organismi DSM 2704 havaittiin teollisen fermentoin-nin normaalin kontrollitutkimuksen yhteydessä (fermentointi-lieminäytteiden maljaviljely, näillä maljoilla kasvavien pesäkkeiden fermentointi ravistelupulloissa, ravistelupulloista otettujen fermentointilieminäytteiden maljaviljely) poikkeavana pesäkkeenä erään ravistelupullosta otetun näytteen kontrol-limaljalla, eristettiin puhdasviljelmänä systemaattisen skree-nauksen avulla ja todettiin mutantiksi, joka erosi alkuperäisestä mikro-organismista morfologisten ja fysiologisten ominaisuuksien suhteen.
Uusi mikro-organismi, jota kutsutaan sisäisesti nimellä A4, on tallennettu mikrobikokoelmaan Deutsche Sammlung von Mikroorga-"V: nismen talletusnumerolla DSM 2704.
Mikro-organismin DSM 2704 morfologiset ja aineenvaihdunnallis-fysiologiset ominaisuudet tutkittiin, ja määrittämistä varten niitä verrattiin teoksessa "Bergey's Manual of determinative bacteriology" esitettyihin ominaisuuksiin. Seuraavat yksittäiset ominaisuudet määritettiin: katalaasin muodostus positiivinen anaerobinen kasvu ravintoagarilla negatiivinen kaasunmuodostus glukoosista negatiivinen kaasunmuodostus ksyloosista negatiivinen kaasunmuodostus mannitolista negatiivinen kaasunmuodostus arabinoosista negatiivinen kaasunmuodostus trehaloosista negatiivinen pH glukoosilla 6,1 3 86557 pH ksyloosilla 6,7 pH mannitolilla 6,1 pH arabinoosilla 6,75 pH trehaloosilla 6,8 propionaatin käyttö negatiivinen sitraatin käyttö positiivinen kasvu 65 °C:s s a negatiivinen kasvu ravintolihaliemessä 5 %
NaCl:n läsnäollessa positiivinen kasvu ravintolihaliemessä 7 %
NaCl:n läsnäollessa positiivinen kasvu ravintolihaliemessä 10 %
NaCl:n läsnäollessa positiivinen
Voges-Proskauer-reaktio positiivinen pH V.P,-lihaliemessä 5,45 kasvu 0,001 % lysotsyymissä negatiivinen kasvu 0,02 % Na-atsidissa negatiivinen tärkkelyksen hydrolyysi positiivinen hippuraatin hydrolyysi negatiivinen tyrosiinin hajotus negatiivinen kaseiinin hajotus positiivinen nitraatin pelkistys positiivinen gelatiinin nesteytys > 1 cm φ munankeltuaisreaktio negatiivinen
Yksisoluisen organismin morfologiset ominaisuudet vastaavat Bacillus subtiliksen vastaavia ominaisuuksia; pesäkemorfologia on samoin suurin piirtein identtinen tunnettujen Bacillus subtilis-kantojen pesäkemorfologian kanssa. Kantaa A4 suoraan lähtöviljelmään verrattaessa pistää silmään sen voimakkaasti poimuttuneet ja yläpinnaltaan epätasaiset pesäkkeet, jotka näyttävät läpivalaistuksessa ruskehtavan tummilta ja rakenteeltaan rakeisilta.
Teoksessa "Bergey's Manual of determinative bacteriology" annettua määritystaulukkoa käyttäen todettiin suurin mahdollinen vastaavuus kannan Bacillus subtilis (Ehrenberg) Cohn 4 86557 kanssa. Tämän johdosta haluamme nimetä tämän kannan lajiin Bacillus subtilis (Ehrenberg) Cohn kuuluvaksi.
Uusi mikro-organismi DSM 2704 on alfa-amylaasin tuottokyvyltään aivan ylivoimainen samaan sukuun ja lajiin kuuluviin tunnettuihin mikro-organismeihin verrattuna. Alfa-amylaasin pitoisuus fermentointialustassa on vakinaisesti yli 250000 U/ml ja kohoaa osittain yli 300000 U/ml. Uudessa mikro-organismissa on erityisen edullista nimenomaan se, että se muodostaa proteaasia vähemmän kuin Bacillus subtilis-lajiin kuuluvat tunnetut mikro-organismit. Niinpä ei proteaasin pitoisuus fermentointialustassa ole koskaan ollut suurempi kuin 10 NU/ 100000 amylaasiyksikköä. Proteaasin pitoisuus on tavallisesti alle 8 NU/100000 amylaasiyksikköä.
Keksinnön kohteena on oheisten patenttivaatimusten määrittelemä menetelmä, jossa käytetään hyväksi uutta mikro-organismia Bacillus subtilis DSM 2704 tai sen luonnollisia ja keinotekoisia mutantteja erityisesti silloin, kun ne muodostavat fermen-toinnissa vähintään 200000 U/ml, mielellään vähintään 250000 U/ml alfa-amylaasia.
Keksinnön mukaan tällaiset mikro-organismit ovat erityisen edullisia silloin, kun ne muodostavat fermentoinnissa proteaasia korkeintaan 10 Nu/100000 amylaasiyksikköä, mielellään korkeintaan 8 NU/100000 amylaasiyksikköä.
Uuden mikro-organismin Bacillus subtilis DSM 2704 fermentointi tai keksinnön mukainen alfa-amylaasin valmistus kantaa DSM 2704 tai sen mutanttia käyttäen voidaan suorittaa sekä nestemäisessä ravintoalustassa submerssiviljelynä että kiinteällä ravintoalustalla, mutta valmistus nesteviljelmänä on yleisesti edullisempi. Fermentointi suoritetaan nykyään tavallisten menetelmien mukaisesti. Käytettävän ravintoalustan valmistus suoritetaan samoin tunnetulla tavalla. Ravintoalusta sisältää assimiloitavia hiilenlähteitä, assimiloitavia typenlähteitä ja muita mikro-organismin kasvulle edullisia tai välttämättömiä 5 865E7 ravinto- ja apuaineita. Sopiviksi hiilenlähteiksi ovat osoittautuneet erilaiset sokerit ja sokeripitoiset aineet, joissa sokeri voi olla erilaisina polymeereinä; esimerkkeinä voidaan mainita tärkkelys, dekstriini, raakasokeri, maitosokeri, maltoosi, fruktoosi, glukoosi. Typenlähteinä voidaan käyttää sekä epäorgaanisia että orgaanisia typpiyhdisteitä yksinään tai myös kombinaatioina. Esimerkkeinä mainittakoon proteiinipitoi-set aineet, kuten esim. soijasta, lihasta ja kaseiinista saatu peptoni, gelatiini, hiivaproteiini tai hiivauute, teurastamoja lihanjalostamojätteet, ammoniumsuolat. Näiden lisäksi voi olla edullista lisätä epäorgaanisia suoloja, erityisesti alkali- ja maa-alkalimetallisuoloja ja fosfaatteja, sekä hivenaineita, kuten esimerkiksi Pe, Mg, Mn, Co, Ni.
Fermentointi suoritetaan pH-alueella 5 ja 9 välillä, mielellään 6 ja 8 välillä, ja lämpötilassa 25...50 °C, mielellään 33.. .45 °C. Fermentointiaika on 30...90 tuntia, mielellään 50.. .70 tuntia.
Jäljempänä esitetään keksintöä kuvaavat fermentointiesimerkit, mutta keksintö ei kuitenkaan rajoitu näihin esitettyihin esimerkkeihin.
Alfa-amylaasiaktiivisuuden määritys suoritettiin FUWA:n (1954) aikakauslehdessä "Journal of Biochemistry (Tokyo)", vuosikerta 1954, nide 41, sivulta 583 eteenpäin, esittämän menetelmän mukaisesti. Entsyymisubstraattina käytettiin hyvin puhdasta amyloosia (Sigma Chemicals Co., tilausnumero A 0512). Kaikki muut reagenssit olivat standardilaatua "pro analysi".
Amyloosiliuos 0,2 %: 200 mg amyloosia sekoitettiin 4 ml:aan 1 N NaOH:a ja annettiin seistä jääkaapissa yön yli. Laimennettiin noin 80 mlrksi, jonka jälkeen neutraloitiin 1 N etikkahapolla ja täytettiin 100 ml:ksi. Tämä liuos on valmistettava päivittäin.
6 86557
Reagenssi A: 0,2 % jodin ja 2 % kaliumjodidin liuos. Tämä liuos on valmistettava päivittäin viisinkertaisesti konsentroidusta kantaliu-oksesta vedellä laimentamalla.
Määritysmenetelmä: 500 yrl 0,5 M asetaattipuskuria ja 500 ytl entsyymipitoista liuosta, joka on tarpeen vaatiessa laimennettu kalsiumasetaat-til iuoksella, sekoitetaan 100 ytltn amyloosil iuosta (0,2 %) kanssa ja inkuboidaan 30 minuuttia 37 °C:ssa vesihauteessa.
Reaktio pysäytetään lisäämällä 2000 jjl 1 N etikkahappoa, seos laimennetaan 1:50 reagenssi A:11a, ja ekstinktio luetaan aallonpituudella 700 nm ja 10 mm:n kyvetillä. Yksi amylaasiyksik-kö (U) vastaa joditärkkelys-värikompleksin 10 %:sta reduktiota. Kalibrointikäyrä on lineaarinen alueella l-noin 5 yksikköä.
Proteaasiaktiivisuus määritetään seuraavalla menetelmällä: Kaseiiniliuos: 0,2 % kaseiini (Casein nach Hammarsten, Merck, Art.-Nr. 2242) liuotettiin puskuriin 1 lämmittämällä 45 minuuttia 40 °C:ssa.
Puskuri 1: 10,3 g boorihappoa, 46,18 g dinatriumvetyfosfaatti x 7 H20:a, 60,7 g trinatriumsitraattia x 2 H20:a täytettiin 2 l:ksi tislatulla vedellä; pH = 8,0.
Puskuri 2: 120 g natriumasetaattia x 3 H20:a ja 160 ml etikkahappoa täytettiin 2 l:ksi tislatulla vedellä; pH = 4,0.
7 86557 Määritysmenetelmä: Näytteen kanssa määritetään samanaikaisesti kuumentamalla denaturoitu nollanäyte. 50 ml:a kaseiiniliuosta (temperoitu 40 °C:ksi + 1 ml entsyymiliuosta tai nollanäytettä (entsyymiliuos on laimennettu siten, että aktiivisuus on välillä 0,07 ja 0,11 NU/ml) inkuboidaan 35 minuuttia 40 °C:ssa; reaktio pysäytetään lisäämällä 25 ml puskuria 2.
15 minuutin seisotuksen jälkeen liuos suodatetaan (sininauha, Schleicher & Schiill nr 5893) .
Suodoksesta määritetään typpi Kjeldahlin menetelmällä. Proteiinipitoisuus lasketaan kaavalla proteiini = typpi x 6,25 1 proteaasiyksikkö (NU) määritetään sinä aktiivisuutena, jolla koeolosuhteissa hydrolysoituu 40 % kaseiinista.
Esimerkki 1 1 litra ravintoalustaa valmistettiin sekoittamalla 90 g laktoosia, 30 g soijajauhoa, 10 g proteaasipeptonia Oxoid nro L46, annosteltiin ä 50 ml per erlenmeyerpullo, steriloitiin ja siirrostettiin Bacillus subtilis A4:llä. Kasvatettiin 70 tuntia ravistelijassa, sentrifugoitiin solut pois, ja supernatan-tista märitettiin aktiivisuus. Aktiivisuus oli keskimäärin 300000 U/ml, proteaasiaktiivisuus oli 21 NU/ml.
Esimerkki 2 1 litra ravintoalustaa valmistettiin sekoittamalla 90 g maltodekstriiniä, 30 g soijaa, 10 g gelatiinia, 2,5 g diammonium-fosfaattia, annosteltiin ä 50 ml erlenmeyer-shikane-pulloihin, steriloitiin ja kasvatettiin kuten esimerkissä 1. Saanto oli keskimäärin 280000 U/ml, proteaasiaktiivisuus oli 22 NU/ml.
s 86557
Esimerkki 3
Esimerkin 1 mukaan valmistettua alustaa käytettiin fermentoin-tiin 2 l:n fermentorissa, jossa 1iuostilavuus oli 650 ml, ilmastus 1,3 vvm ja sekoittimen kierrosluku 900-1. Saanto oli 70 tunnin kuluttua 300000 U/ml, proteaasiakt i ivisuus oli 24 NU/ml.
Keksinnön mukaan valmistetun fermentointiliemen loppukäsittely ja alfa-amylaasin talteenotto suoritetaan yleisesti tunnetuilla menetelmillä ja tavoilla.
Claims (5)
1. Menetelmä alfa-amylaasin valmistamiseksi fermentoimalla Bacillus subtilis-lajin mikro-organismeja sellaisenaan tunnetulla menetelmällä ravintoalustassa, jonka koostumus on Bacillus subtilis-lajin mikro-organismeille sellaisenaan tunnettu, ja tarpeen vaatiessa erottamalla alfa-amylaasi fermen-tointialustasta, tunnettu siitä, että fermentoidaan kantaa Bacillus subtilis DSM 2704 tai sen luonnollisia tai keinotekoisia mutantteja, jotka muodostavat fermentoinnissa vähintään 200000 U/ml, mielellään vähintään 250000 U/ml alfa-amylaasia.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että fermentoidaan kantaa Bacillus subtilis DSM 2704 tai sen luonnollisia tai keinotekoisia mutantteja, jotka muodostavat fermentoinnissa vähintään 200000 U/ml, mielellään k vähintään 250000 U/ml aifa-amylaasia, ja proteaasia korkeintaan 10 NU/100000 amylaasiyksikköä, mielellään korkeintaan 8 NU/100000 amylaasiyksikköä.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että fermentointi suoritetaan pH:ssa 5,0...9,0, mielellään pH:ssa 6,0...8,0.
4. Jonkin patenttivaatimuksen 1...3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että fermentointi suoritetaan 25 °C...50 °C:ssa, mielellään 33 °C...45 °C:ssa.
5. Jonkin patenttivaatimuksen 1...4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että fermentointiaika on 30...90 tuntia, mielellään 50...70 tuntia. 10 86557
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP83112408 | 1983-12-09 | ||
| EP83112408A EP0145798B1 (de) | 1983-12-09 | 1983-12-09 | Bacillus subtilis DSM 2704 und Verfahren zur Herstellung von Alpha-Amylase |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI844845A0 FI844845A0 (fi) | 1984-12-07 |
| FI844845L FI844845L (fi) | 1985-06-10 |
| FI86557B true FI86557B (fi) | 1992-05-29 |
| FI86557C FI86557C (fi) | 1992-09-10 |
Family
ID=8190867
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI844845A FI86557C (fi) | 1983-12-09 | 1984-12-07 | Foerfarande foer framstaellning av alfaamylas medelst en mikroorganism av arten bacillus subtilis. |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4610964A (fi) |
| EP (1) | EP0145798B1 (fi) |
| JP (1) | JPS60153791A (fi) |
| AT (1) | ATE26303T1 (fi) |
| DE (1) | DE3370652D1 (fi) |
| DK (1) | DK164176C (fi) |
| FI (1) | FI86557C (fi) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5264366A (en) * | 1984-05-29 | 1993-11-23 | Genencor, Inc. | Protease deficient bacillus |
| WO1988006619A1 (en) * | 1987-02-24 | 1988-09-07 | Institut Mikrobiologii I Virusologii Imeni D.K.Zab | Preparation for prophylaxis and treatment of gastro-intestinal disturbances in farm animals |
| US7550281B2 (en) * | 2000-10-10 | 2009-06-23 | The Hong Kong Polytechnic University | Method for production of alpha-amylase in recombinant Bacillus |
| US20030134396A1 (en) * | 2001-12-19 | 2003-07-17 | Shetty Jayarama K. | Process for hydrolyzing starch without pH adjustment |
| US9700318B2 (en) | 2013-04-09 | 2017-07-11 | Covidien Lp | Apparatus for endoscopic procedures |
| US9775610B2 (en) | 2013-04-09 | 2017-10-03 | Covidien Lp | Apparatus for endoscopic procedures |
| CN104450572B (zh) * | 2014-12-04 | 2017-05-24 | 湖南新鸿鹰生物工程有限公司 | 一株产中温α‑淀粉酶的枯草芽孢杆菌 |
-
1983
- 1983-12-09 EP EP83112408A patent/EP0145798B1/de not_active Expired
- 1983-12-09 DE DE8383112408T patent/DE3370652D1/de not_active Expired
- 1983-12-09 AT AT83112408T patent/ATE26303T1/de not_active IP Right Cessation
-
1984
- 1984-12-05 US US06/678,468 patent/US4610964A/en not_active Expired - Lifetime
- 1984-12-07 JP JP59257732A patent/JPS60153791A/ja active Granted
- 1984-12-07 DK DK585784A patent/DK164176C/da not_active IP Right Cessation
- 1984-12-07 FI FI844845A patent/FI86557C/fi not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK585784D0 (da) | 1984-12-07 |
| EP0145798B1 (de) | 1987-04-01 |
| DK164176B (da) | 1992-05-18 |
| DE3370652D1 (en) | 1987-05-07 |
| FI844845A0 (fi) | 1984-12-07 |
| FI86557C (fi) | 1992-09-10 |
| FI844845L (fi) | 1985-06-10 |
| JPS60153791A (ja) | 1985-08-13 |
| EP0145798A1 (de) | 1985-06-26 |
| DK164176C (da) | 1992-10-12 |
| DK585784A (da) | 1985-06-10 |
| US4610964A (en) | 1986-09-09 |
| ATE26303T1 (de) | 1987-04-15 |
| JPH0436676B2 (fi) | 1992-06-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4480037A (en) | Alkaline protease and preparation method thereof | |
| US5554532A (en) | Bacteria useful for production of optically active 3-phenyl-1,3-propanediol | |
| CA1168999A (en) | Method for preparing 2,5-diketo-d-gluconic acid | |
| US3871963A (en) | Microbial protease and preparation thereof | |
| FI86557B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av alfaamylas medelst en mikroorganism av arten bacillus subtilis. | |
| AU615661B2 (en) | Acid urease and production thereof | |
| CA1208579A (en) | Microorganisms of the genus hyphomicrobium and process for degrading compounds which contain methyl groups in aqueous solutions | |
| US5281527A (en) | Process for producing pullalanase | |
| FI71575B (fi) | Foerfarande foer odling av mikroorganismer | |
| JP2005151967A (ja) | バリダマイシンをバリエナミンおよびバリダミンに変換する新規微生物 | |
| US5496715A (en) | Process for preparing indigo | |
| KR100511048B1 (ko) | 바실러스 리케니포르미스 ｇｎ-ｍ１０ 변이주 및 이를 이용한 프로테아제의 생산방법 | |
| US5110739A (en) | Process for selective fermentation with mutants of Pediococcus halophilus | |
| US5234819A (en) | Method for preparing 2,5-diketo-D-gluconic acid | |
| KR960007741B1 (ko) | 신규 α-1, 6-글루코시다제 및 그의 제조방법 | |
| JP3873512B2 (ja) | Ｄ−３−（２−ナフチル）アラニンの製造方法 | |
| KR810001114B1 (ko) | 발효법에 의한 l-알기닌의 제조법 | |
| JPS63279782A (ja) | アルカリプロテア−ゼ産生微生物 | |
| JPH07227276A (ja) | リパーゼ、これを産生する微生物及び該微生物の取得方法 | |
| KR0162725B1 (ko) | 스트렙토키나제 및 스트렙토도르나제의 동시 제조방법 | |
| JP3272416B2 (ja) | 新規サイクロデキストリン・グルカノトランスフェラーゼ、その製造法及び該酵素を用いるサイクロデキストリンの製造法 | |
| KR19980023443A (ko) | 알칼리성 단백질 분해 효소를 생산하는 미생물 | |
| JPH07194371A (ja) | 新規微生物 | |
| JPS5914787A (ja) | 新規微生物 | |
| JPH0889269A (ja) | Ｌ−シトルリンの製造法および新種細菌 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: SOLVAY ENZYMES GMBH & CO KG |