FI71575B - Foerfarande foer odling av mikroorganismer - Google Patents
Foerfarande foer odling av mikroorganismer Download PDFInfo
- Publication number
- FI71575B FI71575B FI820537A FI820537A FI71575B FI 71575 B FI71575 B FI 71575B FI 820537 A FI820537 A FI 820537A FI 820537 A FI820537 A FI 820537A FI 71575 B FI71575 B FI 71575B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- ferm
- growth
- broth
- test
- media
- Prior art date
Links
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 22
- 239000002699 waste material Substances 0.000 claims description 21
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 18
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 16
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims description 16
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 claims description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 14
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 14
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 11
- 241000186073 Arthrobacter sp. Species 0.000 claims description 10
- 241000194110 Bacillus sp. (in: Bacteria) Species 0.000 claims description 8
- 241000186249 Corynebacterium sp. Species 0.000 claims description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 91
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 44
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 40
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 31
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 26
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 25
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 230000008859 change Effects 0.000 description 22
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 20
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 18
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 17
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 17
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 17
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 17
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 17
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 17
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 17
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 16
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 13
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 13
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 12
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 11
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 10
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 10
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 10
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 10
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 10
- 241000186146 Brevibacterium Species 0.000 description 9
- 238000009651 Voges-Proskauer test Methods 0.000 description 9
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 9
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 9
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 9
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 8
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 8
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 8
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 8
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 8
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 8
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 8
- 238000003794 Gram staining Methods 0.000 description 8
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N L-arabinopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N 0.000 description 8
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 8
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 8
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 8
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 8
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 8
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 8
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 8
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 8
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 8
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 8
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 8
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 8
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 8
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 8
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 8
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 8
- CEQFOVLGLXCDCX-WUKNDPDISA-N methyl red Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1\N=N\C1=CC=CC=C1C(O)=O CEQFOVLGLXCDCX-WUKNDPDISA-N 0.000 description 8
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 8
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 8
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 8
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 8
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 8
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 8
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 8
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 7
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 7
- 241000186063 Arthrobacter Species 0.000 description 6
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 6
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 description 6
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 6
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 6
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 6
- GMKMEZVLHJARHF-SYDPRGILSA-N meso-2,6-diaminopimelic acid Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CCC[C@@H]([NH3+])C([O-])=O GMKMEZVLHJARHF-SYDPRGILSA-N 0.000 description 6
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000009604 anaerobic growth Effects 0.000 description 4
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 4
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 4
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 3
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 3
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 3
- 244000131522 Citrus pyriformis Species 0.000 description 3
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 3
- 210000003495 flagella Anatomy 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 229920005610 lignin Polymers 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- GZCGUPFRVQAUEE-KCDKBNATSA-N aldehydo-D-galactose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-KCDKBNATSA-N 0.000 description 2
- 229910001854 alkali hydroxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 2
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 2
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101100283604 Caenorhabditis elegans pigk-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241001595482 Columbicola bacillus Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 230000009603 aerobic growth Effects 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000005550 amino acid supplement Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- QFFVPLLCYGOFPU-UHFFFAOYSA-N barium chromate Chemical compound [Ba+2].[O-][Cr]([O-])(=O)=O QFFVPLLCYGOFPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000005266 casting Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002485 combustion reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001879 copper Chemical class 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 210000004349 growth plate Anatomy 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011147 inorganic material Substances 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 159000000014 iron salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 150000002696 manganese Chemical class 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 229910017464 nitrogen compound Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002830 nitrogen compounds Chemical class 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011368 organic material Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000004537 pulping Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/22—Processes using, or culture media containing, cellulose or hydrolysates thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/24—Processes using, or culture media containing, waste sulfite liquor
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S210/00—Liquid purification or separation
- Y10S210/928—Paper mill waste, e.g. white water, black liquor treated
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/804—Single cell protein
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/83—Arthrobacter
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/832—Bacillus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/84—Brevibacterium
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/843—Corynebacterium
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
1 71575
Mikro-organismien viljelymenetelmä Förfarande för odlinn av mikroorganismer Tämä keksintö koskee mikro-organismien viljelymenetelmää, joka sisältää vaiheet, jossa mikro-organismit siirros-tetaan viljelyysi laineelle ja viljellään niitä viljelyväliaines s s a, jolloin viljelyväliaineen sisältämät orgaaniset 5 hapot tulevat hyväksikäytetyiksi.
Kuten tunnettua, keitettäessä kuitupitoisia raaka-aineita kuten puuta ja puuta sisältämättömiä kasveja, erittäin alkaalisissa olosuhteissa korotetussa lämpötilassa ja paineessa sulfaattimenetelmällä, soodamenetelmällä, happi-alkali-me-10 netelmällä, aikai isolla su 1 fii11imenete 1nä11ä tai jollakin muulla alkalisella keittomenetelmällä suuri määrä hemisellu-loosamateriasi ia ja osa seiluloosamateriaa!ia sekä licniini-materiaali, jotka sisältyvät kuitupitoiseen raaka-ainneseen, liukenevat ja hajoavat siirtyen uuteliemeen tai j äte 1 i erieen .
15 Kuten julkaisussa Tappi, Voi. 59, No. 9, 118-121 (1976) on selostettu, erilaisia orgaanisia happoja, mm. isosokeri-happoja ja metasokerihappoja, jotka ovat syntyneet pääasiassa hiilihydraateista, muodostuu ja liukenee jäte liemeen aikaii-sen sellunkeiton aikana. Luonnollisten kuitupitoisten raaka-20 aineiden sisältämien hiilihydraattien hajoamis- ja liukene-mismekanismi tunnetaan ns. kuoriutumisreaktiona (peeling reaction). Kuitenkaan ei ole ennestään tunnettua, että mikro-organismit voisivat käyttää näitä orgaanisia happoja aikalisissä olosuhteissa.
25 Alkalihydroksilipeän läsnäolosta johtuen on aika 11 sen keitto liemen alku-pH noin 14. Vaikka keiton aikana muodostuneet orgaaniset hapot kuluttavatkin keittoliemen sisältämää alkalihydroksidia, keittojärjestelmästä keiton alku- ja välivaiheissa uutetut liemet ja jäteliemi sisältävät yleensä 30 jäännösalkalia väkevyytenä 2-30 g/1 Na^Oina laskettuna ja ovat edelleen voimakkaan emäksisiä, pH 10-14. Näin ollen aikaiisesta sellunkeitosta saatu uute liemi tai jäte-liemi sisältää orgaanisena aineena ligniiniä ja erilaisia orgaanisia happoja ja lisäksi suuren määrän erilaisia suoloja.
35 Alkalisessa keitossa saatu selluloosapitninen liukene maton materiaali käytetään suoraan massana paperinvalm.istuk- 2 71575 sessa. Sitävastoin jäljelle jäänyt uuteliemi ja jäteliemi on tähän asti poltettu väkevöinnin jälkeen. Näin ollen orgaanisista aineista on otettu talteen vain polttoenergiaa ja epäorgaanisista aineista on otettu talteen vain keitto-5 kemikaalit.
Näin ollen tämän keksinnön tarkoituksena on käyttää tehokkaasti hyäväksi edellämainittuja uuttolientä ja jäte-lientä viljelemällä mikro-organismeja, jotka käyttävät orgaanisia aineita ja erityisesti erilaisia orgaanisia happoja, 10 joita uuteliemi tai jäteliemi sisältää, ja suorittamalla viljely emäksisellä alueella, so. neutraloimatta alkalista uute-lientä tai jätelientä.
Muut keksinnön kohteet ja edut ilmenevät seuraavasta selostuksesta.
15 Tämä keksintö tarjoaa menetelmän, jolle on tunnuso maista se, että (i) alkalisesta sellunkeitosta saatua uutelientä tai jätelientä käytetään viljelyväliaineena, (ii) viljely suoritetaan viljelyvällaineessa pH-alu-20 eella 8,0...12,5 aerobisissa olosuhteissa, ja
(iii) ainakin yhtä seuraavista bakteereista Bacillus sp. FERM-P no 5861, Bacillus sp. FERM-P no 5862, Arthrobacter sp. FERM-P
no 5 86 3, Arthrobacter sp. FERM-BP no 88, Corynebacterium sp. FERM-BP not 89 ja 90, ja Brevibacterium FERM-BP not 91 ja 92 25 käytetään mikro-organismina.
Keksinnön tekijät ovat tutkineet mikro-organismeja, joita voidaan tuottaa kaupallisesti emäksisissä olosuhteissa, mielellään pH -alueella 8,0-12,5, käyttämällä suuren suolakonsentraation sisältävää alkalista uutelientä tai jä-30 telientä. Etsittäessä ja luokiteltaessa erilaisia luonnon-maaperästä saatuja bakteerikantoja on sukuihin Bacillus, Arthrobacter, Corynebacterium tai Brevibacterium kuuluvat bakteerit, jotka kykenevät elämään alkalisessa uuteliemessä tai jäteliemessä, eristetty luonnonmaaperästä (Shinonome, 35 Koto-ku, Tokio, Japani).
Tyypillisiä tässä keksinnössä käytettäviksi sopivia bakteereja ovat sellaiset, jotka kuuluvat seuraaviin sukuihin: Bacillus kuten Bacillus sp. FERM-P no 6861, joka on 3 71575 taltioitu 30. tammikuuta 1981 the Fermentation Research Instituten (FRI) kokoelmiin Japanissa (kaikki tästä lähtien mainitut koodit "FERM-P" tarkoittavat taltiointinume-roita tässä instituutissa) ja Bacillus sp. FERM-P No.
5 5862, taltioitu samana päivänä; Arthrobacter, kuten
Arthrobacter sp. FERM-P No. 5863, taltioitu samana päivänä, ja Arthrobacter sp. FERM-BP No. 88, taltioitu 2. helmikuuta 1982 the Fermentation Research Instituten (FRI) kokoelmiin (so. International Depository Authority under 10 Budapest Treaty) Tsukubassa Japanissa; Corynebacterium sp. FERM-BP No:t 89 ja 90, taltioitu 2. helmikuuta 1982 FRI-kokoelmiin Budapestin sopimuksen mukaan; ja Brevibacterium FERM-BP No:t 91 ja 92, taltioitu 2. helmikuuta 1982 FRI-kokoelmiin Budapestin sopimuksen mukaan. Kaikki nämä tal-15 tioinnit suoritti Mr. Yukio Kita, joka on yksi tämän keksinnön tekijöistä.
Näiden bakteerien morfologiset ominaisuudet on selostettu jäljempänä. Morfologisten ominaisuuksien kokeet ja bakteerien luokittelu suoritettiin noudattamalla seuraavia 20 lähdeteoksia: N.R. Smith, R.E. Gordon & F.E. Clark "Aerobic
Sporeforming Bacteria (United States Department of Agriculture, Nov. 1952)" ja "Bergey's Manual of Determinative Bacteriology (8th edition, 1974)".
25 Bacillus FERM-P No. 5861 :n morfologiset, viljelylli'set ja biokemialliset ominaisuudet (a) Morfologiset ominaisuudet 1. Solun koko ja muoto sauvoja, 0,7-0,9 x 1,8-3,0yiA.
30 2. Solun pleomorfismi ei pleomorfinen 3. Liikkuvuus liikkuva, peritrikkisesti järjestyneet flagellat 4. Itiöidenmuodostus muodostaa endosporeja, itiöpesäkkeet eivät ole 35 selvästi turvonneita, itiöt 0,6-0,9 x 1,0-1,5^ soikeita, keskuksellisia 71575 5. Gram-värjäys positiivinen 6. Haponkestävyysvärjäys ei haponkestävä (b) Viljelyllinen karakterisointi
Viljelyllinen karakterisointi 3 Kasvualustat
Kasvualustojen pH pH 7,0 pH 10,0 1 1. Ravintoagar- huono kasvu hyvä kasvu, ympyränmuo- levy toinen, tasainen tai ko- 10 honnut, lankamainen, ker- manvärinen, läpinäkymätön, sileä, kimalteleva 2. Ravintoagar- huono kasvu hyvä kasvu, leviävä vinopinta 13 3. Ravintoliemi huono kasvu kohtalaisen samea, ei pintakasvua, sedimentti 4. Gelatiini- huono kasvu pintakasvu, nesteytyminen, pistos kraaterimainen 5. Litmus- ei muutosta ei muutosta 2 0 maito
Kasvualustoihin lisättiin Na^O^ (1%) (c) Biokemialliset ominaisuudet 1. Nitraatin pelkistyminen nitriitiksi + 23 2. Nitraattirespiraatio 3. Metyylipunakoe värinmuutosta ei voida havaita emäksisen väliaineen vuoksi 4. Voges-Proskauer-koe 30 5. Indolin tuotanto 6. H2S:n tuotanto 7. Tärkkelyksen hydrolyysi + 8. Sitraatin käyttö
Koser-sitraattiagar + 33 Christensen- sitraattiagar + 71575 9. Epäorgaanisen typpi- lähteen käyttö käyttää nitraatteja ja amxnoniumsuolo ja 10. Pigmentintuotanto ei lainkaan 5 11. Ureaasikoe 12. Oksidaasikoe + 13. Katalaasikoe + 14. Kasvun pH ja lämpötila 10 kasvun pH 7,5-11,5, optimaalinen pH noin 10 kasvun lämpötila korkeintaan 50°C, opti
maalinen lämpötila noin 40°C
15 15. Suhde happeen aerobinen 16. O-F-koe (Hugh-
Leifson-väliaine) hapettava 17. Hiilihydraattien käyttö (I) L-arabinoosi + 20 (2) D-ksyloosi + (3) D-glukoosi + (4) D-mannoosi + (5) D-fruktoosi + (6) D-galaktoosi + 25 (7) Maltoosi + (8) Sakkaroosi + (9) Laktoosi (10) Trehaloosi (II) D-sorbitoli + 30 (12) D-mannitoli + (13) Inositoli + (14) Glyseroli + (15) Tärkkelys + 18. Muita tunnusmerkkejä 35 hyvä kasvu 7 % NaCl-ravintoliemessä * Kasvualustoihin lisättiin Na2CO^ (1%).
Symbolit: + positiivinen, - negatiivinen 6 71575
Bacillus FERM-P No. 5862:n morfologiset,viljelylliset ja biokemialliset ominaisuudet (a) Morfologiset ominaisuudet 1. Solun koko ja muoto sauvoja, 0,7-0,8 x 2,0-3,5/^ 5 2. Solun pleomorfismi ei pleomorfinen 3. Liikkuvuus liikkuva, peritrikkisesti järjestyneet flagellat 4. Itiöidenmuodostus muodostaa endosporeja, itiöpesäkkeet eivät ole 10 selvästi turvonneita, itiöt 0,6-0,9 x 1,0-1,5yuu, soikeita, keskuksellisia 5. Gram-värjäys positiivinen 6. Haponkestävyysvärjäys ei haponkestävä (b) Viljelyllinen karakterisointi 15 Viljelyllinen karakterisointi
Kasvualustat
Kasvualustojen pH pH 7,0 pH 10,0 * 1. Ravintoagar- hyvin huono hyvä kasvu, ympyränmuo- 20 levy kasvu toinen, tasainen tai ko honnut, lankamainen, ker-manvärinen, läpinäkymätön, sileä, kimalteleva 2. Ravintoagar- hyvin huono hyvä kasvu, leviävä vinopinta kasvu 3. Ravintoliemi hyvin huono kohtalaisen samea, ei 25 kasvu pintakasvua, sedimentti 4. Gelatiini- hyvin huono pintakasvu, nesteytyminen, pistos kasvu kraaterimainen 5. Litmus- ei muutosta ei muutosta maito 30 * Kasvualustoihin lisättiin Na2CC>3 (1%) (c) Biokemialliset ominaisuudet * 1. Nitraatin pelkistyminen nitriitiksi + 2. Nitraattirespiraatio 7 71575 3. Metyylipunakoe värinmuutosta ei voida havaita emäksisen väliaineen vuoksi 4. Voges-Proskauer-koe 5 5. Indolin tuotanto - 6. I^Srn tuotanto + 7. Tärkkelyksen hydrolyysi + 8. Sitraatin käyttö
Koser-sitraattiagar + 10 Christensen- sitraattiagar + 9. Epäorgaanisen typpiläh- teen käyttö käyttää nitraatteja ja anrnion i umsuo lo j a 15 10. Pigmentintuotanto ei lainkaan 11. Ureaasikoe 12. Oksidaasikoe + 13. Katalaasikoe + 14. Kasvun pH ja 20 lämpötila kasvun pH 7,5*12,0, optimaalinen pH noin 10 kasvun lämpötila korkeintaan 50°C, opti maalinen lämpötila n. 40°C 25 15. Suhde happeen aerobinen 16. O-F-koe (Hugh-
Leifson-väliaine) hapettava 17. Hiilihydraattien käyttö (1) L-arabinoosi + 50 (2) D-ksyloosi + (3) D-glukoosi + (4) D-mannoosi + (5) D-fruktoosi + (6) D-galaktoosi + 55 (7) Maltoosi + (8) Sakkaroosi + (9) Laktoosi 8 71575 (10) Trehaloosi + (11) D-sorbitoli + (12) D-mannitoli (13) Inositoli + 5 (14) Glyseroli (15) Tärkkelys + 18. Muita tunnusmerkkejä hyvä kasvu 7 % NaCl-ravintoliemessä * Kasvulaustoihin lisättiin Na2CC>3 (1%) 10 Symbolit: + positiivinen, - negatiivinen
Arthrobacter FERM-P No. 5863:n morfologiset, vilje-lylliset ja biokemialliset ominaisuudet (a) Morfologiset ominaisuudet 1. Solun muoto ja koko sauvoja, 0,4-0,6 x 1,0-2,0|Ιλ/ 15 2. Solun pleomorfismi pleomorfinen, jakautuu kuroutumalla 3. Liikkuvuus ei liikkuva 4. Itiönmuodostus ei muodosta itiöitä 5. Gram-värjäys positiivinen 20 6. Haponkestävyysvärjäys ei haponkestävä (b) Viljelyllinen karakterisointi
Viljelyllinen karakterisointi
Kasvualustat Kasvualustojen pH
25 pH 7,0 pH 10,0 * 1. Ravintoagar- hyvin huono hyvä kasvu, ympyränmuotoi- levy kasvu nen, tasainen tai kupera keskus, kermanvärinen, läpinäkymätön, sileä, ki- 30 malteleva 2. Ravintoagar- hyvin huono hyvä kasvu, lankamainen vinopinta kasvu 3. Ravintoliemi hyvin huono kohtalaisen samea, ei kasvu pintakasvua, sedimentti 35 4. Gelatiini- hyvin huono pintakasvu, nesteytyminen, pistos kasvu kraaterimainen 5. Litmus- ei muutosta ei muutosta maito 9 71575 * Kasvualustoihin lisättiin Na^O^ (1 %) (c) Biokemialliset ominaisuudet * I. Nitraatin pelkistyminen nitriitiksi 5 2. Nitraattirespiraatio 3. Metyylipunakoe värinmuutosta ei voida havaita emäksisen väliaineen vuoksi 4. Voges-Proskauer-koe 10 5. Indolin tuotanto 6. f^Sin tuotanto 7. Tärkkelyksen hydrolyysi 8. Sitraatin käyttö
Koser-sitraattiagar + 15 Christensen-sitraatti- agar + 9. Epäorgaanisen typpiläh- teen käyttö käyttää nitraatteja ja ammoniumsuoloj a 20 10. Pigmentintuotanto ei lainkaan II. Ureaasikoe 12. Oksidaasikoe 13. Katalaasikoe + 14. Kasvun pH ja 25 lämpötila kasvun pH 7,5-12,0, optimaalinen pH noin 10 kasvun lämpötila korkeintaan 42°C, opti maalinen lämpötila n. 37°C 30 15. Suhde happeen aerobinen T6. O-F-koe (Hugh-
Leifson-väliaine) aerobinen kasvu 17. Hiilihydraattien käyttö (1) L-arabinoosi + 35 (2) D-ksyloosi + (3) D-glukoosi + (4) D-mannoosi + 10 71 575 (5) D-fruktoosi + (6) D-galaktoosi + (7) Maltoosi + (B) Sakkaroosi + 5 (9) Laktoosi + (10) T rehaloosi + (11) D-sorb i toii + (12) D-mannitoli + (13) Inositoli + 10 (14) Glyseroli + (15) Tärkkelys + 18. Muita tunnusmerkkejä (1) Solunseinämät sisältävät meso-DAP;t.ä (2) Ei hajota selluloosaa 15 * Kasvualustoihin lisättiin Na^CO-j (1 ?ό).
Symbolit: + positiivinen, - negatiivinen
Arthrobacter FERM-BP no 88:n morfologiset, vilie-lylliset ja biokemialliset ominaisuudet (a) Morofologiset ominaisuudet 20 1. Solun muoto ja koko sauvoja, 0,4-0,6 x l,2-2,0^,u 2. Solun pleomorfismi pleomorfinen, jakautuu liikkumalla 3. Liikkuvuus ei liikkuva 4. Itiönmuodostus ei muodosta itiöitä 25 5. Gram-värjäys positiivinen 6. Haponkestävyysvärjäys ei haponkestävä 11 71575 (b) Viljelyllinen karakterisointi
Viljelyllinen karakterisointi
Kasvualustat Kasvualustojen pH
pH 7,0 pH 10,0* 5 1. Ravintoagar- hyvin huono hyvä kasvu, ympyränmuotoi- levy kasvu nen, tasainen, yhtenäinen, kermanvärinen, läpinäkymätön, sileä, kimalteleva 2. Ravintoagar- hyvin huono hyvä kasvu, lankamainen 10 vinopinta kasvu 3. Ravintoliemi hyvin huono kohtalaisen samea, ei kasvu pintakasvua, kohtalainen sedimentti 4. Gelatiini- hyvin huono ei nesteytymistä 15 pistos kasvu 5. Litmus- koaguloitu- ei muutosta maito nut, osit tain peptoni- soitunut 20 * Kasvualustoihin lisättiin Na2CC>3 (1%) (c) Biokemialliset ominaisuudet* 1 . Nitraatin pelkistyminen nitriitiksi 2. Nitraattirespiraatio - 25 3. Metyylipunakoe värinmuutosta ei voida havaita emäksisen väliaineen vuoksi 4. Voges-Proskauer-koe 5. Indolin tuotanto 30 6. H2S:n tuotanto 7. Tärkkelyksen hydrolyysi 8. Sitraatin käyttö
Koser-sitraattiagar
Christensen-sitraatti- 3 5 agar + 9. Epäorgaanisen typpi- lähteen käyttö käyttää nitraatteja ja ammoniumsuoloja 10. Pigmentintuotanto ei lainkaan 12 71 575 11. Ureaasikoe 12. Oksidaasikoe 13. Katalaasikoe IA. Kasvun pH ja 3 lämpötila kasvun pH 7,7-12,0, optimaali nen pH noin 10 kasvun lämpötila korkeintaan 47°C, opti maalinen lämpötila n. 40°C 10 15. Suhde happeen aerobinen 16. 0-F-koe (Hugh-
Leifson-väliaine ) aerobinen, anaerobinen kasvu 17. Hiilihydraattien käyttö 15 (1) L-arabinoosi + (2) D-ksyloosi + (3) D-glukoos i + (A) D-mannoosi + (5) D-fruktoosi + 20 (6) D-galaktoosi + (7) Maltoosi + (8) Sakkaroosi + (9) Laktoosi + (10) Trehaloosi + 25 (11) D-sorbitoli + (12) D-manni toli + (13) Inositoli + (IA) Glyseroli + (15) T ärkkelys + 30 18. Muita tunnusmerkkejä (1) Solunseinämät sisältävät meso-DAP;tä.
(2) Ei hajota selluloosaa * Kasvualustoihin lisättiin NA^CO-j (1 ?£) <
Symbolit: + positiivinen, - negatiivinen 13 71 575
Corynebacterium FERM-BP No. 89:n morfologiset, vilje-lylliset ja biokemialliset ominaisuudet (a) Morfologiset ominaisuudet
1. Solun muoto ja koko sauvoja, 0,4-0,6 x 0,8-1,2^L
5 2. Solun pleomorfismi pleomorfinen, jakautuu kuroutumalla 3. Liikkuvuus ei liikkuva 4. Itiönmuodostus ei muodosta itiöitä 5. Gram-värjäys positiivinen 10 6. Haponkestävyysvärjäys ei haponkestävä (b) Viljelyllinen karakterisointi
Viljelyllinen karakterisointi Kasvualustat Kasvualustojen pH
pH 7,0 pH 10,0 * 15 1. Ravintoagar- kohtalainen hyvä kasvu, ympyränmuotoi- levy kasvu nen, tasainen, yhtenäinen, kermanvärinen, läpinäkymätön, sileä, kimalteleva 2. Ravintoagar- kohtalainen hyvä kasvu, lankamainen 20 vinopinta kasvu 3. Ravintoleimi hyvin huono hyvin huono kasvu kasvu 4. Gelatiini- kohtalainen pintakasvu, nesteytyminen, pistos kasvu kraaterimainen 25 5. Litmus- hapan, ei muutosta maito koaguloitunut, osittain pep-tonisoitunut * Kasvualustoihin lisätty Ν32<30^ (1%) 30 (c) Biokemialliset ominaisuudet * 1. Nitraatin pelkistyminen nitriitiksi - 2. Nitraattirespiraatio 3. Metyylipunakoe värinmuutosta ei voida 35 havaita emäksisen väli aineen vuoksi 14 71 575 4. Voges-Proskauer-koe 5. Indolin tuotanto 6. E^Stn tuotanto 7. Tärkkelyksen hydrolyysi 5 8. Sitraatin käyttö
Koser-sitraattiagar
Christensen-sitraatti- agar + 9. Epäorgaanisen typpiläh- 10 teen käyttö käyttää nitraatteja ja ammoniumsuoloja 10. Pigmentintuotanto ei lainkaan 11. Ureaasikoe 12. Oksidaasikoe 15 13. Katalaasikoe + 14. Kasvun pH ja lämpötila kasvun pH 6,5-12,0, optimaalinen pH noin 10 20 kasvun lämpötila korkeintaan 47°C, opti maalinen lämpötila n. 40°C T5. Suhde happeen aerobinen 16. O-F-koe (Hugh-
Leifson-väliaine) kasvu sekä aerobinen 25 että anaerobinen 17. Hiilihydraattien käyttö (1) L-arabinoosi + (2) D-ksyloosi + (3) D-glukoosi + 30 (4) D-mannoosi + (5) D-fruktoosi + (6) D-galaktoosi + (7) Maltoosi + (8) Sakkaroosi + 35 (9) Laktoosi + (10) Trehaloosi + 15 71 575 (11) D-sorbitoli + (12) D-mannitoli + (13) Inositoli + (14) Glyseroli + 5 (15) Tärkkelys + 18. Muita tunnusmerkkejä (1) Solunseinät eivät sisällä meso-DAP:tä.
(2) Ei hajota selluloosaa * Kasvualustoihin lisättiin Na2C0^ (T %) .
10 Symbolit: + positiivinen, - negatiivinen
Corynebacterium FERM-BP No. 90:n morfologiset, vilje-lylliset ja biokemialliset ominaisuudet (a) Morfologiset ominaisuudet 1. Solun muoto ja koko sauvoja, 0,4-0,5 x 0,5-T,QyK/ 15 2. Solun pleomorfismi pleomorfinen, jakautuu kuroutumalla 3. Liikkuvuus ei liikkuva 4. Itiönmuodostus ei muodosta itiöitä 5. Gram-värjäys positiivinen 20 6. Haponkestävyysvärjäys ei haponkestävä (b) Viljelyllinen karakterisointi
Viljelyllinen karakterisointi Kasvualustat Kasvualustojen pH
25 pH 7,0 pH 10,0* 1. Ravintoagar- kohtalainen hyvä kasvu, ympyränmuo- levy kasvu toinen, tasainen, yhte näinen, kermanvärinen, läpinäkymätön, sileä, 30 kimalteleva 2. Ravintoagar- kohtalainen hyvä kasvu, lankamainen vinopinta kasvu 3. Ravintoliemi kohtalainen kohtalaisen samea, ei kasvu pintakasvua, kohtalainen 35 sedimentti 4. Gelatiini- kohtalainen pintakasvu, nesteytyminen, pistos kasvu kraaterimainen 5. Litmus- ei muutosta ei muutosta maito 71575 16 * Kasvualustoihin lisättiin Na2C02 (1%) (c) Biokemialliset ominaisuudet* I. Nitraatin pelkistyminen nitriitiksi 5 2. Nitraattirespiraatio 3. Metyylipunakoe Värinmuutosta ei voida havaita emäksisen väliaineen vuoksi 10 4. Voges-Proskauer-koe 5. Indolin tuotanto 6. H2S:n tuotanto 7. Tärkkelyksen hydrolyysi 8. Sitraatin käyttö 15 Koser-sitraattiagar
Christensen-sitraatti- agar + 9. Epäorgaanisen typpiläh- teen käyttö käyttää nitraatteja ja 20 ammoniumsuoloja 10. Pigmentintuotanto ei lainkaan II. Ureaasikoe 12. Oksidaas.ikoe 13. Katalaasikoe + 25 14. Kasvun pH ja lämpötila kasvun pH 6,5-12,0, optimaalinen pH noin 10 kasvun lämpötila korkeintaan 47°C, opti-
30 maalinen lämpötila n. 40°C
15. Suhde happeen aerobinen 16. O-F-koe (Hugh-
Leifson-väliaine) aerobinen, anaerobinen kasvu 35 17. Hiilihydraattien käyttö (1) L-arabinoosi + (2) D-ksyloosi + (3) D-glukoosi + 17 71 575 (4) D-mannoosi + (5) D-fruktoosi + (6) D-galaktoosi + (7) Maltoosi + 5 (8) Sakkaroosi + (9) Laktoosi + (10) Trehaloosi + (11) D-sorbitoli + (12) D-mannitoli + 10 (13) Inositoli + (14) Glyseroli + (15) Tärkkelys + 18. Muita tunnusmerkkejä (1) Solunseinät eivät sisällä meso-DAP:tä.
15 (2) Ei hajota selluloosaa.
* Kasvualustoihin lisätty (1 %).
Symbolit: + positiivinen, - negatiivinen
Brevibacterium FERM-BP No. 9t:n morfoligiset, vilje-lylliset ja biokemialliset ominaisuudet 20 (a) Morfologiset ominaisuudet 1. Solun muoto ja koko lyhyitä sauvoja, 0,6-0,7 x 0,9-1,0 ^ 2. Solun pleomorfismi ei pleomorfinen 3. Liikkuvuus ei liikkuva 25 4. Itiönmuodostus ei muodosta itiöitä 5. Gram-värjäys positiivinen 6. Haponkestävyysvärjäys ei haponkestävä 18 71 575 (b) Viljelylliset ominaisuudet
Viljelylliset ominaisuudet Kasvualustat Kasvualustojen pH
pH 7,0 pH 10,0* 5 1. Ravintoagar- hyvin huono hyvä kasvu, ympyränmuotoi- levy kasvu nen, yhtenäinen, vaalean- sitruunankeltainen, läpinäkymätön, sileä, kimalte-10 leva 2. Ravintoagar- hyvin huono hyvä kasvu, lankamainen vinopinta kasvu 3. Ravintoliemi hyvin huono hieman samea, ei pintakas- kasvu vua, ei sedimenttiä 15 4. Gelatiini- hyvin huono pintakasvu, ei nesteyty- pistos kasvu mistä 5. Litmus- ei muutosta ei muutosta maito * Kasvualustoihin lisätty (1%) 20 (c) Biokemialliset ominaisuudet * 1. Nitraatin pelkistyminen nitriitiksi + 2. Nitraattirespiraatio 3. Metyylipunakoe värinmuutosta ei voida 25 havaita emäksisen väli aineen vuoksi 4. Voges-Proskauer-koe 5. Indolin tuotanto 6. H2S;n tuotanto 30 7. Tärkkelyksen hydrolyysi 8. Sitraatin käyttö
Koser-sitraattiagar
Christensen- sitraattiagar + 35 9. Epäorgaanisen typpi- lähteen käyttö käyttää nitraatteja ja ammoniumsuoloja 19 71575 10. Pigmentintuotanto vaalensitruunankeltainen, ei diffusoidu väliaineeseen 11. Ureaasikoe - 12. Oksidaasikoe 5 13. Katalaasikoe + 14. Kasvun pH ja lämpötila kasvun pH 7,5-12,5, optimaalinen pH noin 10 10 kasvun lämpötila korkeintaan 47°C, optimaa
linen lämpötila noin 40°C
15. Suhde happeen aerobinen 16. O-F-koe (Hugh-
Leifson-väliaine) aerobinen, anaerobinen 15 kasvu 17. Hiilihydraattien käyttö (1) L-arabinoosi + (2) D-ksyloosi + (3) D-glukoosi + 20 (4) D-mannoosi + (5) D-fruktoosi + (6) D-galaktoosi + (7) Maltoosi + (8) Sakkaroosi + 25 (9) Laktoosi + (10) Trehaloosi + (11) D-sorbitoli + (12) D-mannitoli + (13) Inositoli + 30 (14) Glyseroli + (15) Tärkkelys + 18. Muita tunnusmerkkejä * Kasvualustoihin lisätty Ν32θΟ^ Π%).
Symbolit: + positiivinen, - negatiivinen 20 71 5 75
Brevibacterium FERM-BP No. 92:n morfologiset, vilje-lylliset ja biokemialliset ominaisuudet (a) Morfologiset ominaisuudet 1. Solun muoto ja koko lyhyitä sauvoja 5 0,4-0,5 x 0,6-1,2^t 2. Solun pleomorfismi ei pleomorfinen 3. Liikkuvuus ei liikkuva 4. Itiönmuodostus ei muodosta itiöitä 5. Gram-värjäys positiivinen 10 6. Haponkestävyysvärjäys ei haponkestävä (b) Viljelyllinen karakterisointi
Viljelyllinen karakterisointi Kasvualustat Kasvualustojen pH
pH 7,0 pH 10,0 * 15 1. Ravintoagar- hyvin huono hyvä kasvu, ympvränmuo- levy kasvu toinen, kupera, yhte näinen, vaalensitruunan-keltainen, läpinäkymätön, sileä, kimalteleva 20 2. Ravintoagar- hyvin huono hyvä kasvu, lankamainen vinopinta kasvu 3. Ravintoliemi hyvin huono hieman samea, ei pinta- kasvu kasvua, ei sedimenttiä 4. Gelatiini- hyvin huono pintakasvu, ei nesteyty- 25 pistos kasvu mistä 5. Litmus- ei muutosta ei muutosta maito * Kasvualustoihin lisättiin Na2CO^ (1%) (c) Biokemialliset ominaisuudet * 50 1. Nitraatin pelkistyminen nitriitiksi 2. Nitraattirespiraatio 3. Metyylipunakoe värinmuutosta ei voida havaita emäksisen väli- 55 aineen vuoksi 4. Voges-Proskauer-koe 21 71575 5. Indolin tuotanto - 6. H^Srn tuotanto - 7. Tärkkelyksen hydrolyysi 8. Sitraatin käyttö 5 Koser-sitraattiagar
Christensen- sitraattiagar + 9. Epäorgaanisen typpiläh- teen käyttö käyttää nitraatteja ja 10 ammoniumsuoloja 10. Pigmentintuotanto vaaleansitruunankeltainen, ei diffuntoidu väliaineeseen 11. Ureaasikoe 12. Oksidaasikoe 15 13. Katalaasikoe + 14. Kasvun pH ja lämpötila
kasvun pH 7,5-12,5, optimaalinen pH
noin TO
20 kasvun lämpötila korkeintaan 47°C, optimaa
linen lämpötila noin 40°C
15. Suhde happeen aerobinen 16. O-F-koe (Hugh-
Leifson-väliaine) aerobinen, anaerobinen 25 kasvu 17. Hiilihydraattien käyttö (1) L-arabinoosi + (2) D-ksyloosi + (3) D-glukoosi + 30 (4) D-mannoosi + (5) D-fruktoosi + (6) D-galaktoosi + (7) Maltoosi + (8) Sakkaroosi + 35 (9) Laktoosi + 22 71575 (10) Trehaloosi + (11) D-sorbitoli + (12) D-mannitoli + (13) Inositoli + 5 (14) Glyseroli + (15) Tärkkelys + 18. Muita tunnusmerkkejä * Kasvualustoihin lisätty (1%)
Symbolit: + positiivinen, - negatiivinen 10 Kannat FERM-P No. 5861 ja 5862 ovat kumpikin aerobisia, itiöitämuodostavia, grampositiivisia, liikkuvia ja sauva-maisia bakteereja, joilla on peritrikkisesti järjestäytyneet flagellat.On selvää, että näiden kahden kannan pitäisi kuulua Bacillus-sukuun. Näille bakteereille oli luonteenomaista 15 se, että ne kasvoivat paremmin emäksisissä väliaineissa kuin neutraaleissa väliaineissa, kuten ravintoliemessä, ja kasvun optimaalinen pH oli noin 10. Näiden kantojen mikrobiologiset ominaisuudet olivat samantapaiset kuin Bacillus subtiliksen ominaisuudet. Kumpikin eristetty kanta kuiten-20 kin erosi tyypillisestä Bacillus subtilis-kannasta kasvun pH:n suhteen, sillä Bacillus-kannat FERM-P No. 5861 ja 5862 kasvoivat paremmin emäksisissä väliaineissa kuin neutraaleissa väliaineissa, ja Voges-Proskauer-kokeen kohdalla kumpikin eristetty kanta oli negatiivinen, kun taas tyypil-25 linen Bacillus subtilis-kanta on positiivinen. Kanta FERM-P No. 5861 erosi kannasta FERM-P No. 5P6? solujen koon, H2S:n tuotannon ja hiilihydraateista tuotetun hapon suhteen. Näin ollen on selvää, että nämä kaksi kantaa eivät ole samoja.
30 Kannat FERM-P No. 5863 ja FERM-BP No. 88 ovat aerobisia, itiöitämuodostamattomia sauvoja, grampositiivisia, ei-hapon-kestäviä, pleomorfisia ja jakautuvat kuroutumalla. Nämä kaksi bakteeria eivät myöskään hajota selluloossa eivätkä niiden solunseinät sisällä meso-DAP:tä. On selvää, että 35 näiden kahden kannan pitäisi kuulua Arthrobacter-sukuun.
25 71575
Kanta FERM-P no 5863 erosi kannasta FERM-BP no 88 viljelyl-lisessä karakterisoinnissa gelatiinipistoksessa ja litmus-maidossa. Näin ollen on selvää, että nämä kaksi kantaa eivät ole samoja.
5 Kannat FERM-BP no 89 ja 90 ovat aerobisia, itiöitä- muodostamattomia sauvoja, grampositiivisia, ei-haponkestäviä, pleomorfisia ja jakautuvat kuroutumalla. Nämä kaksi bakteeria eivät myöskään hajota selluloosaa ja solunseinät sisältävät meso-DAP:tä. On selvää, että näiden kahden kannan pi-10 täisi kuulua Corynebacterium-sukuun. Kanta FERM-BP no 89 erosi kannasta FERM-BP no 90 vi1jely11isessä karakterisoinnissa ravintoliemessä ja litmusmaidossa. Näin ollen on selvää, että nämä kaksi kantaa eivät ole samoja.
Kannat FERM-BP no 91 ja 92 ovat aerobisia, itiöitämuo-15 dostamattomia lyhyitä sauvoja, grampositiivisia, ei-haponkestäviä, ei-p1eomorfis ia, eivätkä haaraudu tai fragmentoidu. On selvää, että näiden kahden kannan pitäisi kuulua Brevibacte-rium-sukuun. Kanta FERM-BP no 91 erosi kannasta FERM-BP no 92 solunkoon suhteen ja kyvyltään pelkistää nitraattia nit-20 riitiksi. Näin ollen on selvää, että nämä kaksi kantaa eivät ole samoja.
Kantojen FERM-P no 5861, 5862 ja 5863 ja FERM-BP no 88, 89, 90, 91 ja 92 taksonomisia ominaisuuksia tutkittiin menetelmällä, jota on selostettu teoksessa"Bergey's Manual of 25 Determinative Bacteriology". Nämä eristetyt kannat erosivat eräiden ominaisuuksiensa kohdalla tyypillisistä kannoista. Näille eristetyille kannoille ominainen piirre on se, että ne kasvoivat paremmin emäksisissä väliaineissa kuin neutraaleissa väliaineissa kuten ravintoliemessä, optimaalisen k a s -30 vun pH:n ollessa noin 10.
Näiden bakteerien tärleä viljelyllinen vaatimus on viljelyalustan pH. Tällä tarkoitetaan sitä, että näiden bakteerien, so. Bacillus sp. FERM-P no 5861 ja FERM-P no 5862, Arthrobacter sp. FERM-P no 5863 ja FERM-BP no 88, Coryne-35 bacterium FERM-BP no 89 ja 90 ja Brevibacterium FERM-BP no 91 ja 92, kasvu viljelyn aikana riippuu suuressa määrin viljelyalustan pH-arvosta. Viljelyväliaineen edullinen pH on alueella 8,0 - 12,5. Tämä onkin edullista, 24 71 575 sillä edellä luetellut mikro-organismit kasvavat hyvin alkalisessa uuteliemessä tai jäteliemessä, jotka on saatu alkalisesta keittoprosessista. Vaikka tämän keksinnön mukaisesti päähiililähteenä käytetäänkin emäksistä uute-5 lientä tai jätelientä, on syytä huomata, että uuteliemen tai jäteliemen kanssa voidaan yhdessä käyttää muita sellaisia hiililähdeaineita, joita mikro-organismit kykenevät käyttämään hyväkseen.
Tämän keksinnön mukaisessa varsinaisessa viljelyssä 10 voidaan typpilähteenä käyttää epäorgaanisia typpiyhdisteitä, kuten ammoniumsuoloja ja nitraatteja, sekä typpipitoisia orgaanisia aineita, kuten ureaa ja kaseiinia. Lisäksi voidaan vilejlyalustaan lisätä epäorgaanisia suoloja, kuten kalsiumsuoloja, magnesiumsuoloja, kaliumsuoloja, fosfaat-15 teja, mangaanisuoloja, sinkkisuoloja, rautasuoloja ja kuparisuoloja ja mahdollisesti myös mikro-organismien kasvuntehostajia, kuten vitamiineja, aminohappoja, maissin-liotusvettä ja hiivauutetta.
Tämän keksinnön mukainen viljely suoritetaan esim. siir-20 rostamalla bakteereja, jotka kykenevät kasvamaan alkalisesta keittoprosessista saadussa emäksisessä uuteliemessä tai jäteliemessä, kyseiseen viljelyväliaineeseen ja toimimalla aerobisissa olosuhteissa esim. noin 40°C:ssa viljelyalan ollessa 48 tuntia. Tällöin viljelyalustan si-25 sältämät orgaaniset hapot voidaan käyttää hyväksi. Kun viljeltyä tuotetta sentrifugoidaan nopeudella 5000-8000 1/min 5-15 minuuttia, saadaan kasvaneet mikrobien osat tai solut helposti erotetuiksi. Erotetut solut otetaan talteen ja kuivataan tavallisilla menetelmillä niin, että saadaan 30 kuivattu solutuote.
Jotta tämän keksinnön mukaisesti tapahtuvaa viljelyä, erotusta ja talteenottovaihetta voitaisiin helpottaa, saattaa olla edullista suorittaa ennen viljelyn aloittamista esikäsittely, kuten emäksisen uuteliemen tai jäteliemen 35 sisältämän ligniinikomponentin poisto tai hapetus, jotta ligniini ei viljelyn aikana laskeutuisi tai saostuisi.
25 71 575 Määrityksissä on voitu todeta, että nämä emäksisessä uuteliemessä tai jäteliemessä viljelemällä saadut solut sisältävät suuria määriä epäpuhdasta proteiinia. Näin ollen tämän keksinnön mukaisella viljelymenetelmällä saatuja so-5 luja voidaan tyydyttävästi käyttää esim. proteiini-amino-happolisänä, eläintenrehuna tai kalanrehuna.
Tätä keksintöä valaistaan seurnav.il' la esimerkeillä, joissa kaikki prosentit ovat painoprosentteja, ellei nimenomaan toisin mainita.
10 Esimerkki 1 Jätel-iemen, joka oli saatu soodaprosessista, ja joka sisälsi noin 2 % orgaanisia happoja, mm. isosokerihappoa ja metasokerihappoa, pH säädettiin hiilidioksidilla arvoon 10,0. Hiilidioksidin lisäyksen yhteydessä muodostunut sakka suoda-15» tettiin pois suodatinpaperin avulla niin, että saatiin jäte-liuos, joka ei sisältänyt mainittavaa määrää suspendoitunut-ta kiinteätä ainetta.
Saatuun jäteliemeen lisättiin 0,2 % hiivauutetta, 0,15 % K2HP04, 0,05 % MgS04 7H20 ja 0,5 % KN03. Tämän jälkeen 20 pH säädettiin natriumkarbonaatilla uudelleen arvoon 10,0.
rn ml erät edellä valmistettua viljelyalustaa sijoitettiin 300 ml:n pulloihin ja steriloitiin 15 minuuttia 120°C:ssa.
Bacillus sp. FERM-P No. 5861 ja 5862 ja Arthrobacter sp. FERM-P No. 5863 siirrostettiin viljelyalustoihin, yhtä 25 kantaa kuhunkin viljelmään.
Bakteerikantoja viljeltiin ravisteluviljelminä 40°C:ssa noin 48 tuntia. Soluja sentrifugoitiin nopeudella 5000 1/min 15 minuuttia ja niitä kuivattiin 24 tuntia 100°C:ssa. Kuivattuja soluja saatiin seuraavat määrät.
30 Talteenotettu oo1umäärä
Inkuboitu bakteeri m^; / m J vil jelrnäa 1 us taa FERM-P No. 5861 7,5 FERM-P No. 586? 6,5 FERM-P No. 586/ 8,0 26 71575
Jokaisen viljelyalustan pH bakteeriviljelyn jälkeen oli 9,5 - 10,0. Solujen FERM-P No. 5861, 5862 ja 5863 poistamisen jälkeen sisälsivät viljelvalustat orgaanisia happoja 0,5 %, 0,6 % ja 0,2 %, vastaavasti.
5 Edellä olevat tulokset osoittavat selvästi, että mai nitut mikro-organismit käyttävät emäksisissä olosuhteissa hyväkseen niitä orgaanisia happoja, joita soodaprosessis-ta saatu jäteliemi sisältää, ja tällöin orgaaniset hapot muuntuvat solumateriaaliksi.
10 Solujen FERM-P No. 5861, 5862 ja 5863 epäpuhtaan pro teiinin pitoisuus oli 55 %, 60 % ja 55 %, vastaavasti.
Esimerkki 2 Jäteliemen, joka oli saatu sulfaattiprosessista, ja joka sisälsi noin 3,0 % orgaanisia happoja, mm. isosokeri-15 happoa ja metasokerihappoa, pH säädettiin hiilidioksidilla arvoon 10,0. Hiilidioksidin lisäyksen yhteydessä muodostunut sakka suodatettiin pois suodatinpaperin avulla niin, että saatiin jäteliuos, joka ei sisältänyt mainittavaa määrää suspendoitunutta kiinteätä ainetta.
20 Näin saatuun jäteliemeen lisättiin 0,2 % hiivauutetta, 0,15 % I^HPO^, 0,05 % MgSO^ 7H2O ja 0,2 % virtsa-ainetta. Tämän jälkeen pH säädettiin natriumkarbonaatilla uudelleen arvoon 9,5.
50 ml erät edellä valmistettua viljelyalustaa sijoi-25 tettiin 300 ml:n pulloihin ja steriloitiin 15 minuuttia 120°C:ssa. Bacillus sp. FERM-P No. 5861 ja 5862 ja Arthrobacter sp. FERM-P No. 5863 siirrostettiin viljelyalus-toihin, yhtä kantaa kuhunkin viljelmään.
Siirrostuksen jälkeen bakteerikantoja viljeltiin ravis-30 teluviljelminä 48 tuntia 40°C:ssa. Soluja sentrifugoitiin 15 minuuttia nopeudella 5000 1/min ja niitä kuivattiin 24 tuntia 100 °C:ssa. Seuraavassa taulukossa on ilmoitettu saadut kuivatut solumäärät ja niiden sisältämät epäpuhtaan proteiinin pitoisuudet.
27 7 1 5 7 5 F.'pupuhtaan
Inkuboitu Talteenotettu so]umäärä proteiinin bakteeri (mi'/ml viljelyni us taa) pitoisuus (%) FERM-P No. 5361 7,5 54 5 FERM-P No. 5862 8,0 5() F F·’. R M - P N o. 5 8 6 5 9,5 53
Jokaisen viljelyalustan pH bakteeriviljelyn jälkeen oli 9,5-10,0.
Edellä olevat tulokset osoittavat selvästi, että 10 mainitut organismit käyttävät tehokkaasti hyväkseen jäte-liemen sisältämiä orgaanisia happoja.
Esimerkki 3
Esimerkki 1 toistettiin käyttämällä bakteereja Arthorbacter FERM-BP No. 88, Corynebacterium FERM-BP No.
Ib 89 ja 90 ja Brevibacterium FERM No. 91 ja 92 siten, että orgaanisten happojen pitoisuus oli noin 5 %. Saadut tulokset olivat seuraavat.
Talteenotettu Orgaanisten hap- Epäpuhtaan
Inkuboitu solumäärä (mg/ml pojen määrä proteiinin 2 0 bakteer i vil j e 1 y a 1 u s t a a viljely alus tässä p ito: suur» FERM-BP No.88 15,5 0.4% 60% FERM-BP No.89 9,5 1,6 62 FERM-BP No.90 10,0 1,5 58 FERM-BP No.91 12,0 0,6 58 25 FERM-BP No.92 11,5 0,8 56
Esimerkki 4
Esimerkki 2 toistettiin käyttämällä bakteereja 28 71 5 75
Arthrobacter FERM-BP No. 88, Corynebacterium FERM-BP No. 89 ja 90 ja Brevibacterium FERM-BP No. 91 ja 92 siten, että orgaanisten happojen pitoisuus oli noin 6 % ja pH säädettiin arvoon 10,5. Saadut tulokset olivat seuraavat.
5 Talteenotetut Epäpuhtaan
Inkuboidut solumäärät proteiinin bakteerit (Mg/ml viljelyalustaa pitoisuus (%) FERM-BP-No. 88 16,5 58 FERM-BP-No. 89 10,0 60 10 FERM-BP-No. 90 11,0 58 FERM-BP-No. 91 1^,5 60 FERM-BP-No. 92 13,5 56 FERM-BP-No:t 89 ja 91 20,0 60
Kannat Bacillus sp. FERM-P No. 5861 ja 5862 ja 15 Arthrobacter sp. FERM-P No. 5863 taltioitiin uudestaan 5. helmikuuta 1982,(voimassaoleva taltiointipäivä 1 toukokuuta 1981) the Fermentation Research Instituten (FRI) kokoelmiin Japaniin Budapestin sopimuksen mukaisesti numeroilla FERM-BP No. 97, 98 ja 99, vastaavasti.
20 Oji Paper Co. Ltd taltioi mikro-organismit FERM No. 88, 89, 90, 91 , 92, 97, 98 ja 99 myös IFO-kokoelmiin (Institute for Fermentation at Osaka), jossa niille on annettu numerot IFO 14150, 14151, 14152, 14153, 14154, 14155, 14156 ja 14157, vastaavasti.
Claims (2)
1. Mikro-organismien viljelymenetelmä, joka sisältää vaiheet, joissa mikro-organismit siirrostetaan viljely-väliaineelle ja viljellään niitä viljelyväliaineessa, jolloin viljelyväliaineen sisältämät orgaaniset hapot tulevat 5 hyväksikäytetyiksi, tunnettu siitä, että (i) alkalisesta sellunkeitosta saatua uutelientä tai jätelientä käytetään vi1je 1yvä1iaineena, (ii) viljely suoritetaan viljelyväliaineessa pH-alu-ee11 a 8,0...12,5 aerobisissa olosuhteissa, ja 10 (iii) ainakin yhtä kantojm i j a c i11u s sp. FERM-P no 5861, Bacillus sp. FERM-P no 5862, Arthrobacter sp. FERM-P no 5863, Arthrobacter sp. FERM-BP no 88, Corynebacterium sp. FERM-BP no: t 89 ja 90, ja Brevibocterium FERM-BP no:t 91 ja 92 joukosta valittua bakteerin käytetään mikro-organismina.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n - nettu siitä, että viljelyn aikana kasvaneet solut otetaan talteen.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2367281 | 1981-02-21 | ||
| JP56023672A JPS57138382A (en) | 1981-02-21 | 1981-02-21 | Preparation of microbial cell |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI820537L FI820537L (fi) | 1982-08-22 |
| FI71575B true FI71575B (fi) | 1986-10-10 |
| FI71575C FI71575C (fi) | 1987-01-19 |
Family
ID=12116970
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI820537A FI71575C (fi) | 1981-02-21 | 1982-02-18 | Foerfarande foer odling av mikroorganismer. |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4514501A (fi) |
| JP (1) | JPS57138382A (fi) |
| CA (1) | CA1179617A (fi) |
| FI (1) | FI71575C (fi) |
| FR (1) | FR2500477B1 (fi) |
| SE (1) | SE452775B (fi) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61197096A (ja) * | 1985-02-23 | 1986-09-01 | Shimizu Constr Co Ltd | パルプ製紙廃水蒸発凝縮液のメタン発酵処理法 |
| US4664805A (en) * | 1985-07-23 | 1987-05-12 | Regents Of The University Of California | Analog enrichment decontamination process |
| AU3598297A (en) * | 1996-07-11 | 1998-02-09 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Biopulping with phlebia subserialis |
| JP2002028693A (ja) * | 2000-07-14 | 2002-01-29 | Kurabo Ind Ltd | アルカリ性排水の処理方法 |
| US20050245398A1 (en) * | 2004-04-29 | 2005-11-03 | Healthy Soils, Inc. | Biological composition for enhancing vegetation growth |
| US20090082205A1 (en) * | 2004-04-29 | 2009-03-26 | Stock Raymond W | Biological composition for generating and feeding microorganisms that are intended for distribution in an agricultural system |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2382010A (en) * | 1942-01-19 | 1945-08-14 | Lillian F Hodges | Process for the treatment of paper mill effluent |
| US2431163A (en) * | 1944-03-31 | 1947-11-18 | Masonite Corp | Preparation of clarified sugar solutions |
| FR1100415A (fr) * | 1954-03-03 | 1955-09-20 | Applic Biochimiques Soc Et | Procédé d'épuration et d'utilisation des eaux résiduaires provenant de la fabrication de la pâte à papier préparée par le procédé à la soude |
| GB1084154A (fi) * | 1965-05-11 | |||
| US3778349A (en) * | 1971-06-07 | 1973-12-11 | Research Corp | Production of single cell protein material |
| US3737374A (en) * | 1971-07-22 | 1973-06-05 | Betz Laboratories | Treatment of pulp mill wastes |
| ZA766073B (en) * | 1975-10-24 | 1977-09-28 | D Econimidis | Production of pulp |
| US4030968A (en) * | 1975-12-22 | 1977-06-21 | Consolidated-Bathurst Limited | Disposal of paper pulp mill sludge |
| SU590387A1 (ru) * | 1976-04-12 | 1978-01-30 | Ленинградская Ордена Ленина Лесотехническая Академия Им.С.М.Кирова | Способ переработки сульфитного щелока |
| JPS5392259A (en) * | 1977-01-25 | 1978-08-12 | Uumiyatsuku Kk | Method for treating hull |
| JPS5449321A (en) * | 1977-09-27 | 1979-04-18 | Nippon Beet Sugar Mfg | Protecting of root decay desease of beet and production of protecting agent |
| JPS582673B2 (ja) * | 1979-11-09 | 1983-01-18 | 工業技術院長 | 好アルカリ性バチルス属菌によるペクチン酸リア−ゼの製造法 |
| US4370199A (en) * | 1981-11-09 | 1983-01-25 | Westvaco Corporation | Enzymatic catalyzed biocide system |
-
1981
- 1981-02-21 JP JP56023672A patent/JPS57138382A/ja active Granted
-
1982
- 1982-02-10 CA CA000396009A patent/CA1179617A/en not_active Expired
- 1982-02-12 US US06/348,194 patent/US4514501A/en not_active Expired - Fee Related
- 1982-02-18 SE SE8200987A patent/SE452775B/sv not_active IP Right Cessation
- 1982-02-18 FI FI820537A patent/FI71575C/fi not_active IP Right Cessation
- 1982-02-19 FR FR8202815A patent/FR2500477B1/fr not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI820537L (fi) | 1982-08-22 |
| CA1179617A (en) | 1984-12-18 |
| FR2500477B1 (fr) | 1985-07-05 |
| SE452775B (sv) | 1987-12-14 |
| JPS57138382A (en) | 1982-08-26 |
| JPH0378112B2 (fi) | 1991-12-12 |
| SE8200987L (sv) | 1982-08-22 |
| FR2500477A1 (fr) | 1982-08-27 |
| FI71575C (fi) | 1987-01-19 |
| US4514501A (en) | 1985-04-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4317843A (en) | Microbiological production of protein | |
| CA1168999A (en) | Method for preparing 2,5-diketo-d-gluconic acid | |
| US4540666A (en) | Methane fermentation | |
| US4443542A (en) | Process for the production of butanol and novel microorganism composition used therein | |
| DE2614114B2 (de) | Verfahren zur Herstellung von Kreatininamidohydrolase | |
| US4226941A (en) | Process for the optical resolution of d,l-2-amino-4-methylphosphinobutyric acid | |
| US3930947A (en) | Method of producing microbial cells from methane | |
| FI71575B (fi) | Foerfarande foer odling av mikroorganismer | |
| AU615661B2 (en) | Acid urease and production thereof | |
| US3989594A (en) | Microbiological production of protein | |
| GB2031896A (en) | A process for the optical resolution of D,L-2-amino-4- methylphosphinobutyric acid | |
| US4490471A (en) | Microorganisms of the genus Pseudomonas and process for degrading compounds which contain methyl groups in aqueous solutions | |
| US3970522A (en) | Method for the production of D-ribose | |
| FI86557B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av alfaamylas medelst en mikroorganism av arten bacillus subtilis. | |
| HU176399B (en) | Processs for producing cell-mateiral of bacteria | |
| US4707449A (en) | Pichia pastoris yeast strains of enhanced tryptophan content | |
| US5234819A (en) | Method for preparing 2,5-diketo-D-gluconic acid | |
| US4368271A (en) | Production of microbial cells from methanol | |
| US3623951A (en) | Method for producing l-glutamic acid | |
| DE2659878B2 (de) | Verfahren zur Herstellung von Kreatinamidinohydrolase | |
| KR810001114B1 (ko) | 발효법에 의한 l-알기닌의 제조법 | |
| JPH03143398A (ja) | イプシロン―ポリ―ｌ―リシンの製造方法 | |
| DE3040951A1 (de) | Verfahren zur herstellung von 6-amino-penicillansaeure oder deren s-oxid | |
| JPS58158181A (ja) | 微生物の培養法 | |
| JPS6016228B2 (ja) | 微生物菌体の製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: OJI PAPER CO., LTD. |