FI86432C - Foerfarande foer framstaellning av nya tillvaexthormon-frigoerande peptider. - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av nya tillvaexthormon-frigoerande peptider. Download PDFInfo
- Publication number
- FI86432C FI86432C FI843141A FI843141A FI86432C FI 86432 C FI86432 C FI 86432C FI 843141 A FI843141 A FI 843141A FI 843141 A FI843141 A FI 843141A FI 86432 C FI86432 C FI 86432C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- leu
- arg
- ser
- ala
- lys
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 27
- 101710119601 Growth hormone-releasing peptides Proteins 0.000 title abstract description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 52
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 27
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 54
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 54
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 17
- -1 aspartyl Chemical group 0.000 claims description 16
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 claims description 14
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims description 6
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 5
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 5
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 claims description 4
- 125000000030 D-alanine group Chemical group [H]N([H])[C@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 claims description 3
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 125000000240 D-tyrosyl group Chemical group N[C@@H](C(=O)*)CC1=CC=C(C=C1)O 0.000 claims description 2
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 claims description 2
- 125000001980 alanyl group Chemical group 0.000 claims 2
- 125000002237 D-aspartyl group Chemical group [H]OC(=O)[C@]([H])(N([H])[H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 claims 1
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 claims 1
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 abstract description 28
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 abstract description 28
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 abstract description 28
- 230000003578 releasing effect Effects 0.000 abstract description 14
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 10
- 102000038461 Growth Hormone-Releasing Hormone Human genes 0.000 abstract description 9
- 239000000095 Growth Hormone-Releasing Hormone Substances 0.000 abstract description 9
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 abstract description 6
- 102100033367 Appetite-regulating hormone Human genes 0.000 abstract description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 2
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 abstract description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 2
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 abstract description 2
- 101710142969 Somatoliberin Proteins 0.000 abstract 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 29
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 23
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 23
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 20
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 16
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 16
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N D-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 14
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 14
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 13
- 239000000463 material Substances 0.000 description 12
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 11
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 11
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 11
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 11
- OUYCCCASQSFEME-MRVPVSSYSA-N D-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 10
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 10
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 10
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 10
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 9
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 101800000736 Growth hormone-releasing factor Proteins 0.000 description 8
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- MDXGYYOJGPFFJL-QMMMGPOBSA-N N(alpha)-t-butoxycarbonyl-L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OC(C)(C)C MDXGYYOJGPFFJL-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- WBIIPXYJAMICNU-AWEZNQCLSA-N (2s)-5-[amino-[(4-methylphenyl)sulfonylamino]methylidene]azaniumyl-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]pentanoate Chemical compound CC1=CC=C(S(=O)(=O)NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)C=C1 WBIIPXYJAMICNU-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 6
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 6
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 6
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 6
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 6
- IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N p-cresol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1 IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 6
- DCXYFEDJOCDNAF-UWTATZPHSA-N D-Asparagine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UWTATZPHSA-N 0.000 description 5
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 5
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 5
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- FHOAKXBXYSJBGX-YFKPBYRVSA-N (2s)-3-hydroxy-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FHOAKXBXYSJBGX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- QJCNLJWUIOIMMF-YUMQZZPRSA-N (2s,3s)-3-methyl-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]pentanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OC(C)(C)C QJCNLJWUIOIMMF-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229930182846 D-asparagine Natural products 0.000 description 4
- 101100338242 Drosophila virilis His1.1 gene Proteins 0.000 description 4
- 125000003047 N-acetyl group Chemical group 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- CNBUSIJNWNXLQQ-NSHDSACASA-N (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 CNBUSIJNWNXLQQ-NSHDSACASA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930195709 D-tyrosine Natural products 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N Dimethyl sulfide Chemical compound CSC QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- 125000000393 L-methionino group Chemical group [H]OC(=O)[C@@]([H])(N([H])[*])C([H])([H])C(SC([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 3
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 3
- ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N diphenhydramine Chemical group C=1C=CC=CC=1C(OCCN(C)C)C1=CC=CC=C1 ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 3
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 3
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001379 D-asparagine group Chemical group [H]N([H])[C@@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C(N([H])[H])=O 0.000 description 2
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 125000003798 L-tyrosyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C(O[H])C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- 101100459248 Mus musculus Mxra8 gene Proteins 0.000 description 2
- FYYSQDHBALBGHX-YFKPBYRVSA-N N(alpha)-t-butoxycarbonyl-L-asparagine Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O FYYSQDHBALBGHX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- LJSQFQKUNVCTIA-UHFFFAOYSA-N diethyl sulfide Chemical compound CCSCC LJSQFQKUNVCTIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- VZPHXKVSMQQSEI-LBPRGKRZSA-N (2s)-3-(1h-imidazol-5-yl)-2-[(4-methylphenyl)sulfonylamino]propanoic acid Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 VZPHXKVSMQQSEI-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 125000002861 (C1-C4) alkanoyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Natural products NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001622557 Hesperia Species 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 125000003412 L-alanyl group Chemical group [H]N([H])[C@@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 description 1
- 125000003338 L-glutaminyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(=O)N([H])[H] 0.000 description 1
- 125000002066 L-histidyl group Chemical group [H]N1C([H])=NC(C([H])([H])[C@](C(=O)[*])([H])N([H])[H])=C1[H] 0.000 description 1
- 125000003440 L-leucyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 125000002435 L-phenylalanyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- BSOLAQMZTBVZLA-QMMMGPOBSA-N L-tyrosinyl radical Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C([O])C=C1 BSOLAQMZTBVZLA-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 241000234479 Narcissus Species 0.000 description 1
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OLBNGQCGJGTMBZ-UHFFFAOYSA-N O.CC(C)CO.OC(=O)CC1=CC=CC=N1 Chemical compound O.CC(C)CO.OC(=O)CC1=CC=CC=N1 OLBNGQCGJGTMBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100021923 Prolow-density lipoprotein receptor-related protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710202113 Prolow-density lipoprotein receptor-related protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 150000008065 acid anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 125000001589 carboacyl group Chemical group 0.000 description 1
- KFGRVLINLVVMJA-MITYVQBRSA-N chembl440262 Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 KFGRVLINLVVMJA-MITYVQBRSA-N 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC([O-])=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 244000144980 herd Species 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 125000000741 isoleucyl group Chemical group [H]N([H])C(C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])C(=O)O* 0.000 description 1
- 210000004731 jugular vein Anatomy 0.000 description 1
- 229940070765 laurate Drugs 0.000 description 1
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 229940105631 nembutal Drugs 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N phenylalanine group Chemical group N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 229920005990 polystyrene resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 1
- 239000003488 releasing hormone Substances 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 108010056001 somatotropin releasing hormone (1-29) Proteins 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical class CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 210000002268 wool Anatomy 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Ultra Sonic Daignosis Equipment (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
1 86432
Menetelmä uusien kasvuhormonia vapauttavien peptidien valmistamiseksi Käsiteltävänä oleva keksintö koskee menetelmää 5 uusien kasvuhormonia vapauttavien peptidien valmistamiseksi.
Hiljattain (1) R. Guillemin, P. Brazeau, P. Böhlen, F. Esch, N. Ling ja W.B. Wehrenberg (Science, 218, 585 (1982)) ja (2) J. Spiess, J. Rivier, M. Thorner ja W. Vale 10 (Biochemistry, 21, 6037 (1982) ovat eristäneet ja karakterisoineet kasvuhormonia vapauttavia tekijöitä (GRF) ihmisen haimasaarekekasvaimesta (hpGRF) sekä osoittaneet niillä olevan kasvuhormonia (GF) vapauttavaa aktiivisuutta in vivo ja in vitro rotan aivolisäkkeen etulohkossa. Li-15 säksi Spiess et ai. raportoivat viitteessä (2), että synteettisellä hpGRF( 1-29 )-NH2:11a, joka on luonnon hpGRFLb:n amidoitu fragmentti, on täysin sisäsyntyinen biologinen aktiivisuus.
2 86432
' 1 I — I
00 o ao no ao £ ~ 'Z *- — <r u
^ >> CO >. Q
*""* r*~"' r~~* < ϋ < o <
* * ll I
}- ao I- ao u oj u ω u οι < to < to
'1 II I
m 3 33 3 ^ <U —I O)
-3 O JO -J
' I I ( I
^ C C c c ^ o o o o
1 I II I
C ^ C >N
W »—« (/5 ^ u < o < o
1 I I I I
3 U 3 l_ 3 <U 0)0 4)
, to J to J
'1 li I
~ 3 - 3 — CO ^ <0 — Γ3 > o > o >
'1 II I
"j >n « >, (Λ Ή ^ ^
W J O JO J
U) 1 I I I I
C CO C =0 C ao Q) — u — u > < O < O <
M 1 I II I
ω U c U c U CM
5 Λ' —* >* — >^ — g *7 O E- O Hz
o 1 11 II
Jr ^ eO O' uoOC' u cο σ'
(2 ,¾ U CM O U CM CJUfM
"5 V < to < CO < § ' 1 1 ' '1
-H ,n u C u C U
c: J2 0> cc o wo 5 < CO < to <00
...: ' 11 I I
" · c ^ u U Ul U J_l m £ <U JZ <c j= o ® *7 = Η Σ Η Σ ... Ό λ, 1 11 * -H OJ φ O O 01 0) ***: j £ — jz ~ £: ~ Q. , *-“* Οι — CL I—
·,·. ¢) J 1 '1 I I
- (¾ ω O- CM 0)0. 0)C- *""* Cfl ΙΞ ·—* ζΛ y; G *7 < Z — < >— < ..: a) ' I 1 ii ii •Γ-l ^ C 3 < CO C ac * * d "“j —< o < ^h_ _ J <oj <o <o
+) ' « 1 ll I I
<0 “* 3 a0 O. 3 0.3 >«0)U WO) wo 3 <Cj< <_j <_j : « i ' I ii I , 0 CO CO 3 CO 3 • * ’"“J <D ' l—" O * Ql 7 “J O <C —J <.
1 I II i ( b1 (Λ ao u w u w ..: = H j < h j = h j . . * ^ /*N .—.
:' < o e?' . . <t C -J· cm
* I · H I I
* - ^ £ ·—* * ^ U S»/
O »—> U. O J
si cc —* Ci
U 3 O <0 O
G. O Q. > Cl
J ' JC
3 86432 L-aminohapon koodaus IUPAC-IUB:n biokemiallisen nomenklatuurikomission mukaan (Biochemistry, 11, 1726-1732 (1972)) on seuraavaa:
His = histidiini, Ser = seriini, Asp = asparagii-5 nihappo, Ala = alaniini, Gly = glysiini, Val = väliini, Phe = fenyylialaniini, Thr = treoniini, Asn = asparagiini, Tyr = tyrosiini, Arg = arginiini, Leu = leusiini, Lys = lysiini, Gin = glutamiini, Met = metioniini, lie = isoleu-siini, Glu = glutamiinihappo.
10 Koska nämä hpGRF-peptidit sisältävät 29-44 amino- happoyksikköä, joiden molekyylipainot vaihtelevat alueella 3085-5035 daltonia, on toivottavaa lisätä niiden tehoa siten, että sopivien kasvuhormonipitoisuuksien vapauttamiseksi nisäkkäissä voidaan niiden annostusta käytännössä 15 vähentää. Niinpä käsiteltävänä olevan keksinnön eräänä kohteena on tarjota tehokkaampia, hpGRF:ää muistuttavia peptidejä, joilla voidaan lisätä kasvuhormonin vapautuminen sopivalle tasolle nisäkkäissä.
Tämä päämäärä saavutetaan yllättäen korvaamalla 20 luonnonaminohapot 1-, 2- ja 3-asemassa ja derivatisoimalla hpGRF:n 1-29 N-terminaalinen aminohappotähde seuraavassa esitetyllä kaavan (I) mukaisella rakenteella. Nämä tulokset ovat yllättäviä, erityisesti ottaen huomioon julkaisut | ”· N. Ling ja P. Brauzeau (The Endocrine Society Program and .. . 25 Abstracts, 65th Annual Meeting, nro 295, 8-10. kesäkuuta ; 1983, San Antoniossa, Texasissa), joiden mukaan Ac-Tyr1- ja D-Tyr1-hpGRF-analogien teho on vähäinen luonnon peptidiin verrattuna, sekä J. Rivier et ai. (Abstract 8th American Peptide Symposium, 22-27. toukokuuta, 1983, esitelmä 10-30 B), jotka hpGBF (l-27):n kohdalla ilmoittavat: "Tyr-jään- nös on jossain määrin manipuloitavissa, mikäli vapaa ami-nopääte säilytetään".
Keksinnön kohteena on menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen peptidin valmistamiseksi, jolla on kaava 35 R1-A-B-C-Ala-Ile-Phe-Thr-X-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln- 4 86432
Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Y-Ser-Arg-NH2 (I) jossa R1 on vety tai suora tai haarautunut Ci-C^-alkanoyyli; A on tyrosyyli, D-tyrosyyli tai histidyyli; B on alanyyli tai D-alanyyli; C on aspartyyli tai D-aspratyyli; X on 5 asparaginyyli tai D-asparaginyyli; Y on norleusyyli tai metionyyli; sillä ehdolla, että kun R1 on vety ja B on alanyyli ja C on aspartyyli ja X on asparaginyyli ja Y on metionyyli, A ei voi kaavassa (I) olla tyrosyyli, sekä sen farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi. 10 Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden edullisemmassa ryhmässä R1 on vety tai asetyyli.
Tässä käytetyllä sanonnalla "farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat" tarkoitetaan myrkyttömiä, farmaseuttisesti teollisuudessa yleisesti käytettyjä alkalimetal-15 li-, maa-alkalimetalli-, ammonium-, organoammonium- ja me-tallisuoloja. Näihin suoloihin kuuluvat, niihin kuitenkaan rajoittamatta, natrium-, kalium-, litium-, kalsium-, magnesium-, sinkki-, ammonium-ja trimetyyliammoniumsuolat, jotka valmistetaan tekniikan tason tuntemin menetelmin. 20 Sanonta tarkoittaa myös myrkyttömiä happoadditiosuoloja kuten hydrokloridia, hydrobromidia, asetaattia, fosfaattia, sulfaattia, sitraattia, lauraattia, stearaattia, pa-moaattia ja oleaattia niihin kuitenkaan rajoittumatta. Myös happoadditiosuolat valmistetaan tekniikan tason tun-25 ternin menetelmin.
Vakionomenklatuurin mukaisesti käsiteltävänä olevassa patenttiselityksessä ja patenttivaatimuksissa käytettyjen kiraalisten aminohappotähteiden lyhenteet ovat seuraavat: 30 Lyhenne_Nimi_
His L-histidyyli
Ser L-serinyyli
Asp L-aspartyyli D-Asp D-aspartyyli 35 Ala L-alanyyli 5 86432
Lyhenne_Nimi_ D-Ala D-alanyyli
Vai L-valinyyli
Phe L-fenyylialanyyli 5 Thr L-treonyyli
Asn L-asparaginyyli D-Asn D-asparaginyyli
Tyr L-tyrosinyyli
Arg L-arginyyli 10 Leu L-leusyyli
Nle L-norleusyyli
Lys L-lysyyli
Gin L-glutaminyyli
Met L-metionyyli 15 Ile L-isoleusyyli D-Tyr D-tyrosyyli
Jollei muuta mainita, tässä ilman etuliitettä L mainitut aminohappotähteet tarkoittavat luonnossa esiintyvää absoluuttista L-konfiguraatiota. Ryhmä R1 tarkoittaa 20 vakionomenklatuurin mukaisesti peptidin N-pääteaminohapos- sa olevaa substituenttia (1-asema).
Muut tässä selityksessä käytetyt lyhenteet ovat: Fmoc fluorenyylimetyylioksikarbonyyli BOC tert-butyylioksikarbonyyli 25 Tos p-tolueenisulfonyyli HPLC suuren erotuskyvyn nestekromatografia TLC ohutkerroskromatografia TFA trifluorietikkahappo 30 Ac asetyyli • Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista se, mitä vaatimuksessa 1 mainitaan.
Kaavaa (I) olevien peptidien kiintofaasisynteesi ···’ voidaan suorittaa Beckman 990 automaattisella peptidisyn- • : 35 tetisoijalla. Preparatiivinen HPLC voidaan suorittaa pak- 6 86432 suseinäisessä lasikolonnissa (2,5 X 45 cm), joka sisältää Whatman LRP-1 käänteisfaasitäytteen ja joka on varustettu Fluid Metering Companyn pumpulla ja sykkeenvaimentimella. Aminohappoanalyysit voidaan suorittaa Beckman 119 CL ana-5 lysaattorilla ja tulokset käsitellä System AA laskevalla integraattorilla.
Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistuksessa käytetyt aminohappojohdannaiset ovat saatavissa monista kemikaaleja myyvistä yrityksistä, joista mainittakoon 10 Bachem, Inc., Torrance, California ja Chemical Dynamics, Inc., Plainfield, New Jersey.
Kaavan I mukaiset peptidit voidaan mukavasti valmistaa kiintofaasivakiotekniikkojen avulla, esim. aminohappo, jonka C-terminaalinen pää on suojattu, voidaan 15 liittää kloorimetyylihartsiin, hydroksimetyylihartsiin, bentshydryyliamiini(BHA)hartsiin tai p-metyylibentsyyli-hydryyliamiini(p-Me-BHA)hartsiin. Erästä tällaista kloori-metyylihartsia myy Bio Rad Laboratories, Richmond, California, kauppanimellä BiopBeads SX-1. Hydroksimetyy1ihart-20 sin valmistusta kuvaavat Bodansky et ai., Chem. Ind. (-Lontoo) 38, 1597 (1966). BHA-hartsin ovat kuvanneet Piettä _ . ja Marshall, Chem. Commun. 650 (1970) ja sitä myy kaupal lisesti Bachem, Inc., Torrance, California.
Keksinnön erään toteuttamismuodon mukaisesti kaavaa 25 (I) olevat peptidit valmistetaan vakiomenettelyin pepti dien kiintofaasisynteesin kautta, joskin ne voidaan myös valmistaa käsittelemällä peptidihartsia ammoniakilla, jol-loin saadaan haluttu sivuketjusuojattu amidi, tai alkyyli-amiinilla, jolloin saadaan sivuketjusuojattu alkyyliamidi 30 tai dialkyyliamidi.
Käytettäessä kloorimetyyli- tai hydroksimetyyli-hartsia asianmukaisen aminohapon α-aminosuojaryhmänä on Fmoc ja sivuketjun suojaryhmänä tert-Bu- bentsyylin asemesta .
35 Sivuketjun suojaus voidaan myöhemmin poistaa taval- ____ liseen tapaan käsittelemällä HF:llä, jolloin saadaan vapaat peptidiamidit, -alkyyliamidit tai dialkyyliamidit.
7 86432
Yllä käsitelty kiintofaasimenettely on tekniikan tasolla tunnettu ja sen ovat olennaisilta osiltaan kuvanneet Stewart ja Young, Solid Phase Peptide Synthesis, Freeman and Company, San Fransisco, California (1969).
5 β 86432
Virtauskaavio I
/D-Ala^/-hpGRF(1-29)-NI^ :n valmistus BHA -hartsi + Boc-Arg(Tos) 5 (CH3)2CH-N=C=N-CH(CH3)2
V/ch2ci2 JA
Boc-Arg(Tos) -BHA -hartsi (а) CH2Cl2"Pesu IQ (b) 33% TFA/CH2CI2,kahdesti (c) CH2Cl2"Pesu
(d) Et OH >B
(e) CH2Cl2-Pesu (f) EC3N/CHCI3 , kahdesti 15 ^(g) CH2CI2 ~Pesn _
Boc- Arg(Tos)-BHA -nartsi
(1) Boc-Set(0CH2), A, B
(2) Boc-Met, A, B
20 (3) Boc-Ile, A, B
(4) Boc-Asp(0CH2), A, B
(5) Boc-Gln, A, B
(б) Boc-Leu, A, B
(7) Boc-Leu, A, B
25 (8) Boc-Lys(4-C10CH2OCO), A, B
(9) Boc-Arg(Tos), A, B
(10) Boc-Ala, A, B
(11) . Boc-Ser (0CH2), A, B
(12) Boc-Leu, A, B
:Λ*: 30 (13) Boc-Gln, A, B
(14) Boc-Gly, A, B .·.·. (15) Boc-Leu, A, B
(16) Boc-Val, A, B
*:*' (17) Boc-Lys(4-C10CH2OCO) , A, B
V.: 35 (18) Boc-Arg(Tos) , A, B
\/19) Boc-Tyr^-Br0CH2oco), a. β 9 86432
Virtauskaavio I (jatkoa) 5 (20) Boc-Ser(0CH2), A> B,
MeOH -resu, sykli B
(21) Boc-Asn, A, B
(22) Boc-Thr(0CH2)> A- B
(23) Boc-Phe, A, B
10 (24) Boc-Ile, A, B '
(25) Boc-Ala, A, B
(26) Boc-Asp(0CH2) , A> B
(27) Boc-D-Ala, A, B
(28) Boc-Tyr, A, B
15 V
D-Ala2hpGRF(l-29) -BHA"hartsi ( a ) H F, diiretyylisulf idi, p-kresoli 20 (b) Et20 -pesu '·· (c) HOAc , Sephaclcx G-50 pylväskroma- tografia •: · · · (d ) kylmäkuivaus „ (e) kramatografia: oktadesyylisilaani- : 2b silika, 15-50 % CH3CN/H20/0.1% TFA/5,6 kg/an2 ( f ) kyiiräkuivaus
.... V
3Q [D-A1 a 2]-hpGRF(1 - 29)-NH2 10 86432 N-päätteisen alkanoyylipeptidin valmistamiseksi hartsiin sidottua peptidiä sekoitetaan liuoksissa, joissa on 5-20 % asianmukaista happoanhydridiä CH2Cl2:ssa, joka sisältää trietyyliamiinia tai muita tavallisesti käytet-5 tyjä happoakseptoriemäksiä, 20-120 minuuttia huoneenlämpö-tilassa. Tämän jälkeen käytetään vakioreagensseja peptidin lohkaisemiseksi hartsista ja saadaan haluttu kaavaa (I) oleva peptidi.
Yllä kuvatun menettelyn avulla voidaan valmistaa 10 seuraavat peptidit: [N-asetyyli]-hpGRF(1-29)-NH2 [D-Tyr1] -hpGRF( 1-29 )-NH2 [N-asetyyli-D-Tyr’ ]-hpGRF(1-29)-NH2 [N-asetyyli,D-Ala2]-hpGRF(1-29)-NH2 15 [D-Asp3] -hpGRF( 1-29 ) -NH2 [N-asetyyli, D-Asp3]-hpGRF( 1-29 )-NH2 [D-Tyr1, D-Ala2] -hpGRF( 1-29 )-NH2 [N-asetyyli-D-Tyr1, D-Ala2] -hpGRF( 1-29 ) -NH2 [His1, D-Ala2] -hpGRF( 1-29 )-NH2 20 [N-asetyyli-His1, D-Ala2] -hpGRF( 1-29 )-NH2 [D-Tyr1, D-Ala2, D-Asp3] -hpGRF( l-29)-NH2 [N-asetyyli-D-Tyr1, D-Ala2, D-Asp3]-hpGRF( 1-29 )-NH2 [His1, D-Ala2-Asp3]-hpGRF( 1-29 )-NH2 [N-asetyyli-His1, D-Ala2, D-Asp3] -hpGRF( 1-29 )-NH2 25 [D-Asn8] -hpGRF( 1-29 ) -NH2 [D-Ala2, Nle27]-hpGRF( 1-29 )-NH2 [ His1, D-Ala2, Nle27] -hpGRF( 1 -29 ) -NH2 [D-Ala2, D-Asn8, Nle27]-hpGRF( 1-29 )-NH2 [D-Asp3, D-Asn8, Nle27] -hpGRF( 1-29 )-NH2 - 30 [D-Ala2, D-Asp3, D-Asn8, Nle27]-hpGRF( 1-29 )-NH2 [Asp3]-hpGRF( 1-29 )-NH2 [N-asetyyli, Asp3]-hpGRF( 1-29 )-NH2
On havaittu käytännössä, että keksinnön mukaisesti * valmistetut kaavaa (I) olevat yhdisteet pystyvät lisäämään . 35 kasvuhormonin vapautumista nisäkkäissä annettaessa yhdis teitä niille määränä, joka pystyy aikaansaamaan mainitun 11 86432 vaikutuksen nisäkkäissä, eli määränä 0,000001-0,1 mg/kg nisäkkään kehonpainoa/päivä mainittua kaavaa (I) olevaa yhdistettä.
Nämä peptidit ovat käyttökelpoisia kasvuhormoniva-5 jaukseen liittyvien oireiden hoitamiseen lisäämään villan kasvua, lisäämään lihakarjan kasvunopeutta, parantamaan lihakarjan ruhon laatua (ts. enemmän ja proteiinia ja vähemmän rasvaa), parantamaan lihakarjan ja lypsylehmien rehun hyväksikäyttöä, lisäämän lypsykarjan maidontuotantoa 10 ja parantamaan haavoja.
Seuraavat esimerkit helpottavat keksinnön ymmärtämistä ja niiden ensisijaisena tehtävänä on valaista eräitä keksinnön erityiskohtia.
Esimerkki 1 15 Suojattu (ihmishaiman kasvuhormonia vapauttava tekijä) (9-29)-bentshydryyliamiinihartsi Lisättiin 6,0 g (3,0 mmol) bentshydryyliamiini-po-lystyreenihartsia (myy Bachem, Inc., Torrance, California) kloridimuodossa Beckman 990 automaattisen peptidisynteti-20 sojän reaktioastiaan, joka oli ohjelmoitu suorittamaan seuraava synteesi- ja pesujakso: . (a) CH2C12, (b) 33 % trifluorietikkahappoa CH2Cl2:ssa (kaksi kertaa, ‘ kumpikin 1 ja 25 minuuttia), 25 (c) CH2C12, (d) C2H5OH, (e) CH2C12, (f) 10 % (C2H5)3N:ää CHCl3:ssa (kaksi kertaa, kumpikin 2 minuuttia) ja (g) CH2C12.
Sekoitettiin tunti neutraloitua hartsia, tert-bu-tyylioksikarbonyyli(Boc)-N-tosyyli-l-arginiinia /Boc-Arg-30 (Tos)/ ja 6 mmol di-isopropyylikarbodi-imidiä CH2Cl2:ssa ja sitten muodostunut aminohappohartsi kierrätettiin yllä kuvatun pesuohjelman vaiheiden (a)-(g) kautta. Tämän jäl-_ keen seuraavat L-aminohapot (3 mmol) kytkettiin peräkkäin saman reaktiojakson avulla: Boc-Ser(bentsyyli), Boc-Met, *: 35 Boc-Ile, Boc-Asp(bentsyyli), Boc-Gln, Boc-Leu, Boc-Leu, —i Boc-Lys(4-kloorikarbentsoksi), Boc-Arg(Tos), Boc-Ala, Boc- i2 86432
Ser(bentsyyli), Boc-Leu, Boc-Gln, Boc-Gly, Boc-Leu, Boc-Val, Boc-Lys(4-kloorikarbentsoksi) Boc-Arg(tosyyli), Boc-Tyr(4-bromikarbentsoksi) ja Boc-Ser(bentsyyli) sillä erolla, että Boc-Gln kytkettiin dimetyyliformamidin läsnäol-5 lessa 1-hydroksibentsotriatsolissa (6 mmol).
Sitten täydellinen peptidi-bentshydryyliamiinihart-si, josta N-päätteinen Boc-ryhmä oli poistettu, pestiin CH3OH:lla ja kuivattiin ilmassa ja saatiin 11,79 g materiaalia.
10 Esimerkki 2
Suojatun D-tyrosiini-l-(ihmishaiman kasvuhormonia vapauttava tekijä) (1-29)-bentshydryyliamiinihart-sin valmistus 0,98 g:11a (0,25 mmol) peptidi-bentshydryyliamiini- 15 hartsia, jossa oli peptidin tähteet 9-29, suoritettiin esimerkissä 1 kuvattu synteesi- ja pesujakso. Sekoitettiin neutraloitua hartsia, 0,75 mmol Boc-L-asparagiinia, 0,75 mmol di-isopropyylikarbodi-imidiä ja 0,75 mmol 1-hydroksi-bentsotriatsolia.
20 Sitten seuraavat aminohappojohdannaiset (0,75 mmol) kytkettiin peräkkäin saman käsittelyjakson avulla kuin esimerkissä 1: Boc-Thr(bentsyyli), Boc-Phe, Boc-Ile, Boc-Ala, Boc-Asp(bentsyyli), Boc-Ala ja Boc-D-Tyr. Sitten täy-’ dellinen (1-29) peptidihartsi kierrätettiin esimerkissä 1 .. . 25 kuvatun synteesi- ja pesuvakio-ohjelman läpi N-päätteisen Boc-ryhmän poistamiseksi.
Esimerkki 3 D-tyrosiini-l-(ihmishaiman kasvuhormonia vapauttavan (1-29) amidin) [ (D-Tyr1 )-hpGRF( 1-29 )-NH2] val-: 30 mistus : : Seosta, jossa oli 0,75 mmol esimerkissä 2 kuvattua (1-29)peptidiä, 10 ml vetyfluoridia, 26 ml dimetyylisulfi-dia ja 4 ml p-kresolia, sekoitettiin 75 minuuttia 0°C:ssa. Sitten reagenssien ylimäärä poistettiin haihduttamalla no-'35 peasti kuivassa typpivirrassa, lisättiin 35 ml vetyfluoridia ja seosta sekoitettiin vielä 45 minuuttia 0°C:ssa. Ve- i3 86432 tyfluoridin ylimäärä haihdutettiin typpivirrassa ja jäännös plus vapaa peptidi pestiin p-kresolivapaaksi suurella tilavuudella dietyylieetteriä.
Peptidi uutettiin 50 %:seen etikkahappoliuokseen ja 5 liuos kaadettiin Sephadex G-50:tä sisältävään pylvääseen (2,5 x 95 cm), joka eluoitiin 2-m etikkahapolla. Eluoitumista tarkkailtiin aallonpituudella 280 nm ja fraktiot, jotka saatiin UV-pääabsorptiopiikin kohdalla, yhdistettiin ja kylmäkuivattiin. Kylmäkuivatun jauheen liuos 10 eluoitiin pylväässä (1,5 x 45 cm), joka sisälsi oktadekyy-lisilaanisilikaa, hiukkaskoko 15-20 meshiä, huokoskoko 300 A (myyjä Vydac, Hesperia, California). Käytettiin eluoin-tilineaarigradienttia 15-50 % asetonitriiliä 0,1 %:ssa trifluorietikkahappoliuoksessa ja pumppauspaineessa 5,6 15 kg/cm2. Poistuvia fraktioita tarkkailtiin aallonpituudella 280 nm ja jokainen fraktio tutkittiin analyyttisen HPLC:n avulla aallonpituudella 215 nm yhdistettyjen fraktioiden maksimihomogeenisuuden varmistamiseksi. Kylmäkuivaamalla nämä fraktiot saatiin 32 mg otsikkopeptidiä valkoisena 20 jauheena.
Analyyttisessä HPLC-analyysissä saatiin tällä aineksella yksi piikki 38 minuutin kohdalla käytettäessä pylvästä (0,4 x 25 cm), jonka täytteenä oli Vydac oktade-kyylisilaanisilika (hiukkaskoko 5 meshiä, 300 A), jonka 25 läpi pumpattiin 2 ml/min lineaarigradientilla 20-40 % asetoni triiliä 0,1 %:sessa trifluorietikkahappoliuoksessa. TLCrssä silikageelillä käyttäen liuotinsysteemiä isobuta-noli-pyridiinietikkahappo-vesi (15:10:3:12) saatiin yksi täplä visualisoituna kloori-tärkkelyssumutusreagenssilla. 30 Aminohappoanalyysi 6-m HCl-hydrolysaatilla antoi seuraavat aminohapposuhteet: Asp 3,08, Thr 1,08, Ser 3,01, Glu 2,22, Gly 1,10, Ala 3,30, Vai 0,87, Met 0,97, Ile 1,69, Leu 3,61, Tyr 1,60, Phe 1,05, Lys 2,07, Arg 3,28.
i4 8 6 432
Esimerkki 4
Suojatun N-asetyyli-(ihmishaiman kasvuhormonia vapauttava tekijä) (1-29)-bentshydryyliamiinihartsin valmistus 5 Suoritettiin esimerkissä 2 kuvatut kytkemisjaksot 0,98 g:11a (0,25 mmol) esimerkissä 1 valmistettua peptidi-bentshydryyliamiinihartsia sillä erolla, että D-Tyr:in asemesta käytettiin L-Tyr:iä. (1-29)peptidihartsi, josta N-päätteinen Boc-ryhmä oli poistettu, asetyloitiin sekoit-10 tamalla 30 minuuttia liuoksessa, jossa oli 10 % asetanhyd-ridi-Et3N: ää metyleenikloridissa.
Esimerkki 5 N-asetyyli-(ihmishaiman kasvuhormonia vapauttava tekijä) (l-29)amidin [N-asetyyli-hpGRF(1-29)-NH2] 15 valmistus 0,75 mmol esimerkissä 4 kuvattua peptidihartsia käsiteltiin vetyfluoridiseoksilla ja puhdistettiin esimerkissä 3 kuvatulla tavalla. Kylmäkuivattu, puhdistettu peptidi painoi 16,2 mg.
20 Esimerkissä 3 kuvatuissa analyyttisen HPLC:n olo suhteissa tällä aineksella saatiin yksi piikki, joka il- ____ mestyi 36,5 minuutin kuluttua. TLCtssä, jonka olosuhteet myös on kuvattu esimerkissä 3, saatiin yksi täplä. Amino-happoanalyysi 6-m HCl-hydrolysaatilla antoi seuraavat ami-.. . 25 nohapposuhteet: Asp 3,05, Thr 1,08, Ser 2,96, Glu 2,20, ;* Gly 1,20, Ala 3,30, Vai 0,81, Met 1,00, Ile 1,65, Leu 3,50, Tyr 1,61, Phe 1,20, Lys 2,10, Arg 3,17.
Esimerkki 6
Suojatun D-alaniini2-( ihmishaiman kasvuhormonia va- 30 pauttava tekijä) (1-29)-bentshydryyliamiinihartsin valmistus '· Suoritettiin esimerkissä 2 kuvatut kytkemisjaksot 0,98 g:11a (0,25 mmol) esimerkissä 1 valmistettua peptidi-bentshydryyliamiinihartsia sillä erolla, että 2-asemassa 35 käytettiin D-alaniinia L-alaniinin sijasta ja 1-asemassa L-tyrosiinia D-tyrosiinin sijasta.
is 86432
Esimerkki 7 D-alaniini2-( ihmishaiman kasvuhormonia vapauttavan (1-29 )-amidin) [D-Ala2)-hpGRF( 1-29 )-NH2] valmistus 0,25 mmol esimerkissä 6 kuvattua peptidihartsia kä-5 siteltiin vetyfluoridiseoksilla ja puhdistettiin esimerkissä 3 kuvatulla tavalla. Puhdistettu, kylmäkuivattu peptidi painoi 27,9 mg. Esimerkissä 3 kuvatuissa analyyttisen HPLC:n olosuhteissa tällä aineksella saatiin yksi piikki, Joka ilmestyi 35 minuutin kuluttua. Esimerkissä 3 kuva-10 tuissa olosuhteissa TLC antoi yhden täplän. Aminohappo-analyysi 6-m HCl-hydrolysaatilla antoi seuraavat aminohap-posuhteet: Asp 3,06, Thr 1,07, Ser 3,05, Glu 2,19, Gly 1,02, Ala 3,29, Vai 0,94, Met 1,10, Ile 1,72, Leu 3,66, Tyr 1,62, Phe 0,90, Lys 2,07, Arg 3,19.
15 Esimerkki 8
Suojatun D-asparagiinihappo3-( ihmishaiman kasvuhormonia vapauttava tekijä) (1-29)-bentshydryyliamii-nihartsin valmistus
Suoritettiin esimerkissä 2 kuvatut kytkemisjaksot 20 0,98 g:11a (0,25 mmol) esimerkissä 1 valmistettua peptidi- bentshydryyliamiinihartsia sillä erolla, että 3-asemassa käytettiin D-asparagiinihappoa L-asparagiinihapon sijasta ja 1-asemassa L-tyrosiinia D-tyrosiinin sijasta.
Esimerkki 9 25 D-asparagiinihappo3-(ihmishaiman kasvuhormonia va pauttavan (1-29)-amidin) [ (D-Asp3 )-hpGRF(1-29)-NH2] valmistus 0,25 mmol esimerkissä 8 kuvattua peptidihartsia käsiteltiin vetyfluoridiseoksilla ja puhdistettiin esimer-: 30 kissä 3 kuvatulla tavalla. Puhdistettu, kylmäkuivattu peptidi painoi 15,3 mg. Esimerkissä 3 kuvatuissa analyyttisen HPLCrn olosuhteissa tällä aineksella saatiin yksi piikki, .···, joka ilmestyi 34 minuutin kuluttua. Esimerkissä 3 kuva- tuissa olosuhteissa TLC antoi yhden täplän. Aminohappo-v 35 analyysi 6-m HCl-hydrolysaatilla antoi seuraavat aminohap-posuhteet: Asp 3,17, Thr 1,22, Ser 3,08, Glu 2,36, Gly 16 86432 1,06, Ala 3,30, Vai 0,96, Met 0,84, Ile 1,76, Leu 3,71, Tyr 1,00, Phe 0,92, Lys 2,21, Arg 3,30.
Esimerkki 10
Suojatun N-asetyyli-D-tyrosiini1, D-alaniini2( ih-5 mishaiman kasvuhormonia vapauttava tekijä) (1-29)- bentshydryyliamiinihartsin valmistus Suoritettiin esimerkissä 2 kuvatut kytkemisjaksot 0,98 g:11a (0,25 mmol) esimerkissä 1 valmistettua peptidi-bentshydryyliamiinihartsia sillä erolla, että 2-asemassa 10 käytettiin D-alaniinia L-alaniinin sijasta.
Esimerkki 11 N-asetyyli-D-tyrosiini1, D-alaniini2- (ihmishaiman kasvuhormonia vapauttavan (1-29)-amiinin [(N-ase-tyyli-D-Tyr1, D-Ala2 )-hpGRF( 1,29) -NH2] -valmistus 15 0,25 mmol esimerkissä 10 kuvattua peptidihartsia käsiteltiin vetyfluoridiseoksilla ja puhdistettiin esimerkissä 3 kuvatulla tavalla. Puhdistettu, kylmäkuivattu peptidi painoi 5 mg. Esimerkissä 3 kuvatuissa analyyttisen HPLC:n olosuhteissa tällä aineksella saatiin yksi piikki, 20 joka ilmestyi 33 minuutin kuluttua. Esimerkissä 3 kuvatuissa olosuhteissa TLC antoi yhden täplän. Aminohappoana-lyysi 6-m HCl-hydrolysaatilla antoi seuraavat aminohappo-. suhteet: Asp 3,08, Thr 1,08, Ser 3,01, Glu 2,22, Gly 1,10,
Ala 3,30, Vai 0,87, Met 0,97, Ile 1,69, Leu 3,61, Tyr 25 1,60, Phe 1,05, Lys 2,07, Arg 3,28.
Esimerkki 12 --- Suojatun N-asetyyli-D-tyrosiini1, D-alaniini2, D- asparagiinihappo3-( ihmishaiman kasvuhormonia vapauttava tekijä) (1-29)-bentshydryyliamiinihartsin • 30 valmistus
Suoritettiin esimerkissä 4 kuvatut kytkemisjaksot 0,98 g:lla (0,25 mmol) esimerkissä 1 valmistettua peptidi-bentshydryyliamiinihartsia sillä erolla, että 3-asemassa * käytettiin D-asparagiinihappoa L-asparagiinihapon sijasta, . : : 35 2-asemassa käytettiin D-alaniinia L-alaniinin sijasta ja 1-asemassa D-tyrosiinia L-tyrosiinin sijasta.
i7 86432
Esimerkki 13 N-asetyyli-D-tyrosiini1, D-alaniini2, D-asparagii-nihappo3-(ihmishaiman kasvuhormonia vapauttavan (1- 29)amidin) [N-asetyyli-D-Tyr1, D-Ala2, D-Asp3)-5 hpGRF(1-29)-NH2] valmistus 0,25 mmol esimerkissä 12 kuvattua peptidihartsia käsiteltiin vetyfluoridiseoksilla ja puhdistettiin esimerkissä 3 kuvatulla tavalla. Puhdistettu, kylmäkuivattu peptidi painoi 12 mg. Esimerkissä 3 kuvatuissa analyyttisen 10 HPLC:n olosuhteissa tällä aineksella saatiin yksi piikki, joka ilmestyi 34 minuutin kuluttua. Esimerkissä 3 kuvatuissa olosuhteissa TLC antoi yhden täplän. Aminohappo-analyysi 6-m HCl-hydrolysaatilla antoi seuraavat aminohap-posuhteet: Asp 3,06, Thr 1,07, Ser 3,00, Glu 2,18, Gly 15 1,H, Ala 3,30, Vai 0,82, Met 0,97, Ile 1,62, Leu 3,43,
Tyr 1,69, Phe 0,92, Lys 2,03, Arg 3,13.
Esimerkki 14
Suojatun N-asetyyli-tosyyli-L-histidiini1, D-alaniini2- ( ihmishaiman kasvuhormonia vapauttava teki-20 jä) (1-29)-bentshydryyliamiinihartsin valmistus
Suoritettiin esimerkissä 4 kuvatut kytkemisjaksot 0,98 g:11a (0,25 mmol) esimerkissä 1 valmistetulle pep-tidibentshydryyliamiinihartsille sillä erolla, että 2-···*: asemassa käytettiin D-alaniinia L-alaniinin sijasta ja 1- 25 asemassa L-tosyylihistidiiniä L-tyrosiinin sijasta. Esimerkki 15 N-asetyyli-L-histidiini1, D-alaniini2-(ihmishaiman kasvuhormonia vapauttavan (1-29)-amiinin) [(N-aset-yyli-His1, D-Ala2 )-hpGRF( 1-29 )-NH2] valmistus 30 0,25 mmol esimerkissä 14 kuvattua peptidihartsia käsiteltiin vetyfluoridiseoksilla ja puhdistettiin esimerkissä 3 kuvatulla tavalla. Puhdistettu, kylmäkuivattu peptidi painoi 18 mg. Esimerkissä 3 kuvatuissa analyyttisen HPLC:n olosuhteissa tällä aineksella saatiin yksi piikki, 35 joka ilmestyi 31 minuutin kuluttua. Esimerkissä 3 kuvatuissa olosuhteissa TLC antoi yhden täplän. Aminohappo- ie 86432 analyysi 6-m HCl-hydrolysaatilla saatiin seuraavat amino-happosuhteet: Asp 3,06, Thr 1,10, Ser 3,00, Glu 2,26, Gly 1,10, Ala 3,30, Vai 0,79, Met 0,97, Ile 1,69, Leu 3,71, Tyr 0,81, Phe 0,96, His 0,95, Lys 2,15, Arg 3,30.
5 Esimerkki 16 D-asparagiini8-(ihmishaiman kasvuhormonia vapauttavan (1-29)-amidin) [ (D-Asn8)-hpGRF(1-29)-NH2] valmistus
Suoritettiin esimerkissä 2 kuvatut kytkemisjaksot 10 esimerkissä 1 valmistetulla peptidi-bentshydryyliamiini-hartsilla (0,25 mmol hartsia) sillä erolla, että L-Tyr käytettiin D-Tyr:n sijasta, ja että 8-asemassa käytettiin D-asparagiinia L-asparagiinin sijasta. Saanto oli 38 mg ja peptidin eluoitumisaika HPLCrssä oli 28 minuuttia virtaus-15 nopeudella 1,5 ml/min. Aminohappoanalyysi antoi Asp 3,05, Tgr 0,95, Ser 2,96, Glu 2,21, Gly 1,04, Ala 3,02, Vai 0,95, Ile 1,85, Leu 2,00, Met 0,97, Tyr 2,10, Phe 0,96, Lys 1,97, Arg 3,20.
Esimerkki 17 20 D-alaniini2, norleusiini27 (ihmishaiman kasvuhormo nia vapauttavan (1-29)-amidin [(D-Ala2,Nle27)-hpGRF(1-29)-NH2] valmistus
Peptidi-bentshydryyliamiinihartsi valmistettiin kuten esimerkissä 1 siten, että kytkemisjaksossa korvattiin 25 27-asemassa L-metioniini L-norleusiinilla. L-norleusiinis-sa käytettiin Boc-suojaryhmää. Sitten tämä aines kytkettiin esimerkissä 2 kuvatulla tavalla sillä erolla, että L-Tyr käytettiin D-Tyr:n sijasta ja siten, että D-alaniini korvasi 2-asemassa L-alaniinin. Käytetystä 0,25 millimoo-30 lista hartsia saatiin 71 mg ja eluoitumisaika HPLCissä oli 28,5 minuuttia virtausnopeudella 1,5 ml/min. Aminohappoanalyysi antoi Asp 3,06, Thr 1,00, Ser 2,96, Glu 2,20, Gly 1,06, Ala 3,10, Vai 0,90, Ile 1,78, Leu 4,08, Nle 1,00, Tyr 1,96, Phe 0,88, Lys 2,00, Arg 3,14.
19 86432
Esimerkki 18
Histidiini1, D-alaniini2, norleusiini27-( ihmishai-man kasvuhormonia vapauttavan (1-29)-amidin) [His1, D-Ala2, Nle27) -hpGRF( 1-29 ) -NH2] valmistus 5 Peptidi-bentshydryyliamiinihartsi valmistettiin kuten esimerkissä 1 siten, että kytkemisjaksossa korvattiin 27-asemassa L-metioniini L-norleusiinilla. Sitten tämä aines kytkettiin esimerkissä 2 kuvatulla tavalla sillä erolla, että L-Tyr käytettiin D-Tyr:n sijasta ja si-10 ten, että L-histidiini korvasi 1-asemassa L-tyrosiinin ja D-alaniini 2-asemassa L-alaniinin. Käytetystä 0,25 milli-moolista hartsia saatiin 23 mg ja eluoitumisaika HPLC:ssä oli 27,5 minuuttia virtausnopeudella 1,5 ml/min. Amino-happoanalyysi antoi Asp 3,13, Thr 1,00, Ser 2,98, Glu 15 2,27, Gly 1,10, Ala 3,15, Vai 0,99, Ile 1,88, Leu 4,20,
Nle 1,05, Tyr 0,98, Phe 0,91, His 1,17, Lys 2,01, Arg 3,11.
Esimerkki 19 D-alaniini2, D-asparagiini®, norleusiini27-20 (ihmishaiman kasvuhormonia vapauttavan (1-29)- amidin) [ (D-Ala2, D-Asn®, Nle27 )hpGRF(1-29 )NH2] valmistus
Peptidi-bentshydryylihartsi valmistettiin kuten esimerkissä 1 siten, että kytkemisjaksossa korvattiin 27-. . 25 asemassa L-metioniini L-norleusiinilla. Sitten tämä aines kytkettiin esimerkissä 2 kuvatulla tavalla sillä erolla, että L-Tyr käytettiin D-Tyr:n sijasta ja siten, että D-alaniini korvasi 2-asemassa L-alaniinin ja D-asparagiini 8-asemassa L-asparagiinin. Käytetystä 0,25 millimoolista 30 hartsia saatiin 41 mg ja eluoitumisaika HPLC:ssä oli 28,5 minuuttia virtausnopeudella 1,5 ml/min. Aminohappoanalyysi antoi Asp 299, Thr 1,00, Ser 2,87, Glu 2,14, Gly 1,06, Ala 3,04, Vai 0,93, Ile 1,80, Leu 4,02, Nle 0,98, Tyr 1,99, " Phe 0,90, Lys 2,01, Arg 3,08.
20 86432
Esimerkki 20 D-asparagiinihappo3, D-asparagiini8, norleusiini27-(ihmishaiman kasvuhormonia vapauttavan (1-29)-amidin ) [ (D-Asp3, D-Asn8, Nle27 ) -hpGRF(1-29 ) -NH2] 5 valmistus
Peptidi-bentshydryylihartsi valmistettiin kuten esimerkissä 1 siten, että kytkemisjaksossa korvattiin 27-asemassa L-metioniini L-norleusiinilla. Sitten tämä aines kytkettiin esimerkissä 2 kuvatulla tavalla sillä erolla, 10 että L-Tyr käytettiin D-Tyr:n sijasta ja siten, että D-asparagiinihappo korvasi 3-asemassa L-asparagiinihapon ja D-asparagiini 8-asemassa L-asparagiinin. Käytetystä 0,25-millimoolista hartsia saatiin 114 mg ja eluoitumisaika HPLC:ssä oli 29,1 minuuttia virtausnopeudella 1,5 ml/min. 15 Aminohappoanalyysi antoi Asp 2,99, Thr 1,00, Ser 2,85, Glu 2,16, Gly 1,03, Ala 3,03, Vai 0,94, Ile 1,82, Leu 4,03, Nle 0,99, Tyr 1,97, Phe 0,92, Lys 2,06, Arg 3,05. Esimerkki 21 D-alaniini2, D-asparagiinihappo3, D-asparagiini8, 20 norleusiini27-(ihmishaiman kasvuhormonia vapautta van (1-29)-amidin) [ (D-Ala2, D-Asp3, D-Asn8, Nle27)-hpGRF27)hpGRF(1 -29 ) -NH2 ] valmistus
Peptidi-bentshydryylihartsi valmistettiin kuten esimerkissä 1 siten, että kytkemisjaksossa korvattiin 27-25 asemassa L-metioniini L-norleusiinilla. Sitten tämä aines kytkettiin esimerkissä 2 kuvatulla tavalla sillä erolla, että L-Tyr käytettiin D-Tyr:n sijasta ja siten, että D-alaniini korvasi 2-asemassa L-alaniinin, D-asparagiinihappo 3-asemassa L-asparagiinihapon ja D-asparagiini 8-ase-30 massa L-asparagiinin. Käytetystä 0,25 millimoolista hartsia saatiin 67 mg ja eluoitumisaika HPLC:ssä oli 28 minuuttia virtausnopeudella 1,5 ml/min. Aminohappoanalyysi antoi Asp 3,01, Thr 1,00, Ser 2,90, Glu 2,20, Gly 1,05, Ala 3,08, Vai 0,95, Ile 1,86, Leu 4,01, Nle 0,96, Tyr ' ’ 35 1,95, Phe 0,93, Lys 2,05, Arg 3,11.
2i 86432
Kaavan (I) mukaisten peptidien biologinen vaikutus Kasvuhormonin vapautumiseen kohdistuva peptidivai-kutus määritettiin nisäkkäissä käyttämällä rottaa testi-eläinlajina.
5 Tässä määrityksessä käytettiin menettelyjä, jotka ovat kuvanneet W.A. Murphy et ai., Endocrinology 109:491-495 (1980).
Kasvuhormoni(GH )kokeissa anestetisoitiin koirasrot-tia (Charles River) NembutalRilla (6 mg 100 grammaa kohti 10 kehonpainoa), jota myös käytettiin ylläpitämään stimuloituja GH-pitoisuuksia plasmassa. Tarkalleen 30 minuuttia rottien anestetisoinnin jälkeen annettiin subkutaanibo-luksen muodossa 0,5 ml keittosuolaliuosta tai testipep-tidin keittosuolaliuosta. Viisitoista minuuttia peptidi-15 keittosuolaliuosruiskeen jälkeen kaulalaskimosta otettiin 1 ml:n verinäyte. GH-pitoisuudet määritettiin NIADDKD rotan GH RlA-komponenttien avulla.
hpGRF(1-29)-NH2:n rakenteen aktiivisuustutkimuksia Analogi Annos (pg/100 g Plasman GH
20 _kehonpainoa)_(nq/ml)_
Keittosuolaliuos - 333 ± 50 (5)* N-Ac-D-Tyr1, D-Ala2] - hpGRF( 1-29 )-NH2 0,05 499 ± 50 (5) [ N-Ac-D-Tyr1, D-Ala2 ] - 25 hpGRF( 1-29 )-NH2 0,2 680 ± 100 (7) [N-Ac-D-Tyr1, D-Ala2] - hpGRF(1-29)-NH2 0,8 2063 ± 251 (6) [N-Ac-D-Tyr1, D-Ala2] - hpGRF(1-29)-NH2 3,2 3818 ± 412 (6) '30 *) Rottien lukumäärä sulkeissa 22 86432 GRF(l-29)-NH2 Annos ( ,ug/100 g Plasman GHx) analogi kehonpainoa) (ng/ml)
Keittosuolaliuos - 366 ±81 (6) (a) D-Asn 4 1296 ± 118 (5) 5 10 2397 + 246 (6)
Keittosuolaliuos 278 ± 37 (6) 10 (b) D-Ala2-Nle27 0,1 465 ±75 (6) " 1,0 2287 ± 265 (6)
Keittosuolaliuos ...
- 214 ± 29 (6 ) 15 (c) His1-D-Ala2-Nle27 0,1 904 ± 111 .. 1,0 3379 ± 389 (6)
Keittosuolaliuos - 203 ± 39 (8) 20 2 8 27 (d) D-Ala -D-Asn -Nle 0f05 407 ±53 (6) .* " 0,5 1613 ± 138 (6) • · · · * : V 25 Keittosuolaliuos ” 383 ±79 (6) · — (e) D-Asp3-D-Asn8-Nle27 0,1 810 i 86 (6) 1,0 3213 ± 590 (6) * (f) D~Ala2-D-Asp3-D-Asn8- 0,1 767 ± 146 (6) :T: 30 " 27 1,0 2419 ± 252 (6)
Nle : Teho määritettiin vertaamalla yhdistettyihin standardeihin: GRF(l-29)-NH2 10 1185 ± 74 (78) •:*v 35 » 25 2570 ± 121 (70) x) Arvot ovat keskiarvo t keskiarvon keskivirhe (n).
Claims (5)
- 23 8 6 4 3 2
- 1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen peptidin valmistamiseksi, jolla on kaava R^A-B-C-Ala-Ile-Phe-
- 5 Thr-X-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys- Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Y-Ser-Arg-NH2 (I) jossa R1 on vety tai suora tai haarautunut C1-C6-alkanoyyli; A on tyrosyyli, D-tyrosyyli tai histidyyli; B on alanyyli tai D-alanyyli; C on aspartyyli tai D-aspartyyli; X on asparaginyyli tai 10 D-asparaginyyli; Y on norleusyyli tai metionyyli; sillä ehdolla, että kun R1 on vety ja B on alanyyli ja C on aspartyyli ja X on asparaginyyli ja Y on metionyyli, A ei voi kaavassa (I) olla tyrosyyli, sekä sen farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, tunnettu 15 siitä, että aminohappo, jonka C-terminaalinen pää on suo jattu liitetään hartsiin kytkentäaineen läsnäollessa; pestään inertillä liuottimena; suojaus poistetaan hapon läsnäollessa; toistetaan tämä sekvenssi tarkoituksenmukaisessa järjestyksessä toisilla suojatuilla, kaavassa (I) mää-20 ritellyillä aminohapoilla vaiheittain lähtien peptidin C- terminaalisesta päästä; mahdollisesti peptidihartsi asety-loidaan; ja lopuksi irrotetaan peptidi hartsista, jolloin saadaan kaavan (I) mukainen peptidi.
- 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä kaavan ' 25 I mukaisen peptidin valmistamiseksi, tunnettu sii tä, että mainitulla peptidillä on kaava Tyr-D-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-NH2 ja sen far- . . maseuttisesti hyväksyttävät suolat; Tyr-Ala-D-Asp-Ala-Ile-
- 30 Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala- Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-NH2 ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat; D-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-NH2 ja sen far-• 35 maseuttisesti hyväksyttävät suolat; Ac-Tyr-Ala-Asp-Ala- 24 86432 Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-NH2 ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat; Ac-His-D-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-5 Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-NH2 ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat; Ac-D-Tyr-D-Ala-D-Asp-Ala-lle-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-lle-Met-Ser-Arg-NH2 ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat; Ac-D-Tyr-D-Ala-Asp-10 Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu- Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-lle-Met-Ser-Arg-NH2 ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat; Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-D-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-NH2 ja sen far-15 maseuttisesti hyväksyttävät suolat; Tyr-D-Ala-Asp-Ala-Ile- Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Nle-Ser-Arg-NH2 ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat; His-D-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-20 Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Nle-Ser-Arg-NH2 ja sen far maseuttisesti hyväksyttävät suolat; Tyr-D-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-D-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Nle-Ser-Arg-NH2 ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat; Tyr-Ala-D-Asp-Ala-Ile-25 Phe-Thr-D-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala- -Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Nle-Ser-Arg-NH2 ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat; tai Tyr-D-Ala-D-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-D-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Nle-Ser-Arg-NH2 ja sen far-30 maseuttisesti hyväksyttävät suolat. 25 86432
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI910205A FI910205A0 (fi) | 1983-08-10 | 1991-01-15 | Nya tillvaexthormon frigoerande peptider. |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US52206783A | 1983-08-10 | 1983-08-10 | |
| US52206783 | 1983-08-10 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI843141A0 FI843141A0 (fi) | 1984-08-09 |
| FI843141A FI843141A (fi) | 1985-02-11 |
| FI86432B FI86432B (fi) | 1992-05-15 |
| FI86432C true FI86432C (fi) | 1992-08-25 |
Family
ID=24079327
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI843141A FI86432C (fi) | 1983-08-10 | 1984-08-09 | Foerfarande foer framstaellning av nya tillvaexthormon-frigoerande peptider. |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0136475B1 (fi) |
| JP (1) | JPH0684400B2 (fi) |
| KR (1) | KR850001772A (fi) |
| AT (1) | ATE60062T1 (fi) |
| AU (1) | AU575843B2 (fi) |
| CA (1) | CA1268898A (fi) |
| DE (1) | DE3483931D1 (fi) |
| DK (1) | DK167361B1 (fi) |
| ES (2) | ES8606400A1 (fi) |
| FI (1) | FI86432C (fi) |
| HK (1) | HK73692A (fi) |
| IL (1) | IL72630A (fi) |
| NO (1) | NO165804C (fi) |
| NZ (1) | NZ209078A (fi) |
| PT (1) | PT79055B (fi) |
| SG (1) | SG28692G (fi) |
| ZA (1) | ZA846191B (fi) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4518586A (en) * | 1983-01-13 | 1985-05-21 | The Salk Institute For Biological Studies | GRF Analogs III |
| IL70530A (en) * | 1983-01-13 | 1986-09-30 | Salk Inst For Biological Studi | Synthetic peptides having growth hormone releasing factor activity and compositions containing them |
| PT79094B (en) * | 1983-08-29 | 1986-08-14 | Salk Inst For Biological Studi | Grf analogs |
| US4528190A (en) * | 1983-10-25 | 1985-07-09 | The Salk Institute For Biological Studies | GRF Analogs IV |
| DE3436819A1 (de) * | 1984-10-06 | 1986-04-17 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Arzneimittel mit grf-wirkung |
| CA1271600A (en) * | 1985-01-07 | 1990-07-10 | David Howard Coy | Growth hormone-releasing peptides and method of treating mammals therewith |
| EP0193910A3 (en) * | 1985-03-06 | 1988-11-23 | Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited | Synthesis of a derivative of grf and intermediate peptides |
| FR2594832B1 (fr) * | 1986-02-24 | 1990-05-25 | Sanofi Sa | Derives du facteur de liberation de l'hormone de croissance (grf) possedant des aminoacides modifies |
| FR2599038B1 (fr) * | 1986-05-26 | 1990-06-29 | Sanofi Sa | Procede de preparation de nonacosapeptides et peptides intermediaires |
| DE3742633A1 (de) * | 1987-12-16 | 1989-06-29 | Hoechst Ag | Peptide mit beeinflussender wirkung auf die hypophyse von saeugern |
| US5565606A (en) * | 1986-10-21 | 1996-10-15 | Hoechst Aktiengesellschaft | Synthesis of peptide aminoalkylamides and peptide hydrazides by the solid-phase method |
| IL86102A (en) * | 1987-05-11 | 1994-04-12 | Univ Tulane | Alkylated peptides that release growth hormone and their use |
| US5002931A (en) * | 1987-05-22 | 1991-03-26 | The Salk Institute For Biological Studies | GRF analogs VII |
| US4801456A (en) * | 1987-07-09 | 1989-01-31 | International Minerals & Chemical Corp. | Growth hormone-releasing factor analogs |
| USRE33699E (en) * | 1987-07-09 | 1991-09-24 | International Minerals & Chemical Corp. | Growth hormone-releasing factor analogs |
| EP0307860B1 (en) * | 1987-09-18 | 1994-06-08 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Cyclic GRF-analogs |
| US4959352A (en) * | 1987-09-18 | 1990-09-25 | Hoffmann-La Roche Inc. | Cyclic growth hormone releasing factor analogs and method for the manufacture thereof |
| US5756458A (en) * | 1989-06-16 | 1998-05-26 | Pharmacia & Upjohn Company | Stabilized potent GRF analogs |
| WO1990015821A1 (en) * | 1989-06-16 | 1990-12-27 | The Upjohn Company | Stabilized, potent grf analogs |
| CN107936090B (zh) * | 2017-12-08 | 2021-09-24 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 一种低成本合成ARK-Cu的方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NZ204456A (en) * | 1982-06-16 | 1987-05-29 | Salk Inst For Biological Studi | Synthetic pancreatic growth-hormone releasing factor |
| US4563352A (en) * | 1982-10-04 | 1986-01-07 | The Salk Institute For Biological Studies | Human pancreatic GRF |
| US4518586A (en) * | 1983-01-13 | 1985-05-21 | The Salk Institute For Biological Studies | GRF Analogs III |
| IL70530A (en) * | 1983-01-13 | 1986-09-30 | Salk Inst For Biological Studi | Synthetic peptides having growth hormone releasing factor activity and compositions containing them |
| DK162130C (da) * | 1983-03-07 | 1992-03-02 | Hoffmann La Roche | Grf-analoge peptider, fremgangsmaade til fremstilling deraf, grf-analoge peptider som terapeutiske midler, anvendelse af grf-analoge peptider, fremgangsmaade til fremstilling af farmaceutiske praeparater indeholdende grf-analoge peptider samt parenterale farmaceutiske praeparater indeholdende grf-analoge peptider |
-
1984
- 1984-07-31 AU AU31334/84A patent/AU575843B2/en not_active Ceased
- 1984-08-01 NZ NZ209078A patent/NZ209078A/xx unknown
- 1984-08-06 DE DE8484109312T patent/DE3483931D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1984-08-06 AT AT84109312T patent/ATE60062T1/de not_active IP Right Cessation
- 1984-08-06 EP EP84109312A patent/EP0136475B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1984-08-08 KR KR1019840004730A patent/KR850001772A/ko not_active Application Discontinuation
- 1984-08-08 CA CA000460517A patent/CA1268898A/en not_active Expired - Lifetime
- 1984-08-09 ZA ZA846191A patent/ZA846191B/xx unknown
- 1984-08-09 ES ES535032A patent/ES8606400A1/es not_active Expired
- 1984-08-09 IL IL72630A patent/IL72630A/xx not_active IP Right Cessation
- 1984-08-09 DK DK384084A patent/DK167361B1/da not_active IP Right Cessation
- 1984-08-09 FI FI843141A patent/FI86432C/fi not_active IP Right Cessation
- 1984-08-09 PT PT79055A patent/PT79055B/pt not_active IP Right Cessation
- 1984-08-09 NO NO843195A patent/NO165804C/no unknown
- 1984-08-10 JP JP59166634A patent/JPH0684400B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1985
- 1985-07-31 ES ES545760A patent/ES8608540A1/es not_active Expired
-
1992
- 1992-03-09 SG SG286/92A patent/SG28692G/en unknown
- 1992-09-24 HK HK736/92A patent/HK73692A/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0136475B1 (en) | 1991-01-16 |
| CA1268898A (en) | 1990-05-08 |
| FI843141A0 (fi) | 1984-08-09 |
| DK384084A (da) | 1985-02-11 |
| SG28692G (en) | 1992-05-15 |
| KR850001772A (ko) | 1985-04-01 |
| PT79055B (en) | 1986-08-12 |
| ZA846191B (en) | 1985-03-27 |
| NO843195L (no) | 1985-02-11 |
| IL72630A0 (en) | 1984-11-30 |
| EP0136475A3 (en) | 1987-03-11 |
| HK73692A (en) | 1992-10-02 |
| PT79055A (en) | 1984-09-01 |
| NO165804B (no) | 1991-01-02 |
| DK384084D0 (da) | 1984-08-09 |
| IL72630A (en) | 1988-11-30 |
| NO165804C (no) | 1991-04-10 |
| DE3483931D1 (de) | 1991-02-21 |
| AU575843B2 (en) | 1988-08-11 |
| ATE60062T1 (de) | 1991-02-15 |
| EP0136475A2 (en) | 1985-04-10 |
| AU3133484A (en) | 1985-02-14 |
| DK167361B1 (da) | 1993-10-18 |
| JPS6057000A (ja) | 1985-04-02 |
| ES545760A0 (es) | 1986-07-16 |
| FI86432B (fi) | 1992-05-15 |
| NZ209078A (en) | 1989-03-29 |
| ES8606400A1 (es) | 1986-05-01 |
| JPH0684400B2 (ja) | 1994-10-26 |
| FI843141A (fi) | 1985-02-11 |
| ES535032A0 (es) | 1986-05-01 |
| ES8608540A1 (es) | 1986-07-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI86432C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya tillvaexthormon-frigoerande peptider. | |
| FI91075B (fi) | Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten peptidien valmistamiseksi | |
| US5084555A (en) | An octapeptide bombesin analog | |
| US5877277A (en) | Octapeptide bombesin analogs | |
| JPH0532696A (ja) | 副甲状腺ホルモン誘導体 | |
| US5416073A (en) | Growth hormone-releasing peptides and method of treating animals, therewith | |
| EP0270376B1 (en) | Calcitonin gene-related peptide derivatives | |
| AU6751290A (en) | Synthetic calcitonin peptides | |
| CA1271600A (en) | Growth hormone-releasing peptides and method of treating mammals therewith | |
| US4687839A (en) | Calcitonin gene related peptide analogs with C-terminal D-amino acid substituents | |
| JP2007526900A (ja) | Ｇｈ−ｒｈのアンタゴニスト誘導体（２００３） | |
| EP0350318A2 (en) | Novel peptides | |
| US5112808A (en) | Alkylated hormone-releasing peptides and method of treatig mammals therewith | |
| US6028168A (en) | Lanthionine bridged peptides | |
| EP0181121B1 (en) | Novel polypeptide and process for producing the same | |
| EP0307860B1 (en) | Cyclic GRF-analogs | |
| AU613364B2 (en) | Novel alkylated growth hormone-releasing peptides and method of treating mammals therewith | |
| EP0300737B1 (en) | Calcitonin gene related peptide derivatives | |
| AU644128B2 (en) | Hexapeptides with sulphate ester groups | |
| JPH0551398A (ja) | ポリペプチドおよびその用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: THE ADMINISTRATORS OF THE TULANE |