FI79117C - Foerfarande foer framstaellning av bovine-, svin- eller humaninsulin. - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av bovine-, svin- eller humaninsulin. Download PDFInfo
- Publication number
- FI79117C FI79117C FI830813A FI830813A FI79117C FI 79117 C FI79117 C FI 79117C FI 830813 A FI830813 A FI 830813A FI 830813 A FI830813 A FI 830813A FI 79117 C FI79117 C FI 79117C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- process according
- bovine
- insulin
- amino acid
- reaction
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/26—Containing cys-cys disulfide bridge between nonadjacent cysteine residues
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
79117
Menetelmä naudan, sian tai ihmisen insuliinin valmistamiseksi
Keksintö koskee menetelmää naudan, sian tai ihmisen 5 insuliinin valmistamiseksi vastaavasta esiproinsuliiniana-logista.
Sian insuliini voidaan muuttaa eri menetelmiä käyttäen sinänsä tunnetulla entsyymikatalysoidulla transami-doinnilla (katso esim. DE-patenttijulkaisu 31 04 49 ja 10 "Obermeier R., et ai., Proceedings Neue Insuline, Freiburg, 1981"). Tämän ohella nämä yksivaiheiset menetelmät soveltuvat myös tuottamaan insuliinia proinsuliinista ja välituote-insuliineista. Muutettaessa sian insuliinia määrätyissä menetelmän mukaisissa olosuhteissa trypsiinin 15 avulla tapahtuu LysB29-Ala®30 OH:n transamidointi -LysB29-Thr-O-esteriksi, josta valmistetaan tunnettujen esteriloh-kaisumenetelmien mukaisesti vapaata insuliinia. Proinsu-liinin tai välituote-insuliinien ollessa kyseessä tapahtuu -LysB29-Ala®30-Arg.Arg'in uudelleenamidointi LysB29-Thr-O-20 esteriksi ja tämän lisäksi -Lys-ArgAO-GlyA 1 -:ssä.
Ihmisen tai eläimen ruumiissa muodostunut insuliini muodostuu ensiksi lineaarisena esiproinsuliinina, jolloin N-terminaaliseen PheB1:een liittynyt esisekvenssi on rakentunut noin 24 aminohappo-ryhmästä. Tällä molekyyliosal-25 la on signaalivaikutus sekä proteiinibiosynteesissä että myös syntetisoivan solun kalvon läpi tapahtuvassa siirto-mekanismissa .
Edellä mainittu ihmisen insuliinin puolisynteettinen valmistus luonnon sian insuliinista on menettämässä 30 merkitystään johtuen siitä, että ihmisen insuliinia pystytään tuottamaan modifioidun E.coli-DNA:n erilaisena geeni-tuotteena .
Nämä geeniteknologiset menetelmät mahdollistavat sen, että signaalinukleotidiosan variaatioilla tuotetaan 35 luonnon esiproinsuliinin kanssa analogista tuotetta. Täi- 79117 2 laisten aminohapposekvenssimuutosten päämääränä on analogisen esiproinsuliinin biosynteesi, jolla mahdollistetaan optimaalinen lohkeaminen insuliiniksi. Eräässä tunnetussa menetelmässä (Riggs A.D., et ai Peptides 1979, ed E.Gross, 5 J.Meienhofer Pierce Chemical Company, Rockford Illinois, sivut 985-992) esisekvenssi on modifioitu siten, että se on liittynyt metioniiniryhmän kautta proinsuliinin N-ter-minaaliseen PheB1:een, niin että -Met-PheB1-sidos voidaan lohkaista BrCN-menetelmän avulla (Gross E., Witkop B., 10 J.Biol. Chem. 1856 (1962)). Tulokseksi saatava proinsulii-ni muutetaan tämän jälkeen entsymaattisin keinoin (Kemmler A., J.Biol. Chem. 246, 3786 (1971)) trypsiinillä ja kar-boksipeptidaasi B:llä ihmisen insuliiniksi. Sekä BrCN-loh-kaisu että myös toisessa vaiheessa seuraava entsyymiseok-15 sella käsittely voivat aiheuttaa epäspesifisten reaktioiden vaikutuksesta melkoisia menetyksiä lopputuotteessa. Tämän vuoksi on toivottavaa, että kehitettäisiin menetelmiä, joiden avulla olisi mahdollista tuottaa insuliinia geeniteknologisesti tuotetuista analogisista esiproinsu-20 liineista, saantojen ollessa korkeita, s.o. myös mahdollisimman harvoja reaktiovaiheita käyttäen.
Tämä tehtävä ratkaistaan esillä olevan keksinnön mukaisella menetelmällä. On havaittu, että insuliineja voidaan valmistaa esiproinsuliinien analogeista suoritta-25 maila aminohappoesterin läsnäollessa trypsiinin tai try-psiinin kaltaisen entsyymin avulla samanaikaisesti transamidointi PheB1:n ja GlyA1 :n N-terminaalisessa pepti-disidoksessa sekä transamidointi LysB29:ssä.
Esillä oleva keksintö koskee menetelmää naudan, 30 sian tai ihmisen insuliinin valmistamiseksi vastaavasta esiproinsuliinianalogista. Menetelmälle on tunnusomaista, että naudan, sian tai ihmisen esiproinsuliinianalogi, jossa proinsuliinin N-terminaaliin on liittynyt lysiini tai arginiini tai näiden asyyliamino-asyylitähde esisekvenssin 35 karboksyylipäänä ja jonka kaava on 79117 3 C-ketju
5 L YA0 I ~1 A~ketjU_ OH
s s (I) I i !
1 I
S S I
R1-YB0___J____!______________YB29 ; 10 B-ketju jossa Y on Lys tai Arg ja R1 on vety, L-aminohappo tai signaalisekvenssinä toimivan peptidin tähde, saatetaan pH-arvossa, joka on insuliinin isoelektrisen pisteen alapuo-15 lella, ja trypsiinin tai trypsiinin kaltaisen endopepti-daasin läsnäollessa reagoimaan Ala-0tBu:n tai Thr(tBu)-OtBurn kanssa, minkä jälkeen esteriryhmä ja mahdollinen suojaryhmä lohkaistaan.
Insuliiniin nähden aminohappoesteriä käytetään moo-20 liylimäärin, jolloin suhde on edullisesti 1:50 - 1:500, erityisesti 1:100 - 1:250.
Reaktio suoritetaan edullisesti pH-arvossa alle 5,5, erityisesti pH-arvossa 3,8 - 5,0, ja lämpötilassa +2 - +37°C, edullisesti +4 - +10°C.
25 Trypsiinin ohella (katso "The Enzymes", Voi. 4, P.D. Boyer et ai., Acad. Press, N.Y., 2. painos 1960, s. 119-132, ja voi. 3, 3. painos 1971, s. 250-275) keksinnön mukaiseen menetelmään soveltuvat myös sellaiset endopep-tidaasit, jotka tunnetaan kirjallisuudesta trypsiinin kal-30 täisinä, s.o. sellaiset, jotka lohkaisevat spesifisesti emäksisten aminohappojen karboksyylipäässä olevat peptidisidokset (katso esim. "Kontakte Merck" 1/73 s. 8-10, 2/73 s. 3-8; Z. Physiol. Chem. 348 [1967] 1319; Comp. Biochem. Physiol. 28 [1969] 1275; Z. Physiol. Chem. 352 35 [1971] 583; Arch. Biochem. Biophys. 129 [1969] 620; ja 126 79117 4
[1968] 971; Biochem. Biophys. Res. Comm. 37 [1969] 99). Käytettävän fermentin määrä voi olla 1:1-100:1, jolloin luvut tarkoittavat painosuhdetta: esiproinsuliinianalogi: fermentti. Edullisesti työskennellään painosuhteen olles-5 sa 10:1-4:1.
Keksinnön mukainen reaktio johtaa ensiksi insuliinien B30-estereihin, jotka voidaan muuttaa sinänsä tunnettujen menetelmien mukaisesti lohkaisemalla esteriryhmä ja mahdollisesti lohkaisemalla suojaryhmä, vastaavaksi valo paaksi insuliiniksi.
Estereille voidaan suorittaa ennen niiden vapaiksi insuliineiksi muuttamista tarpeelliset puhdistustoimenpiteet, esimerkiksi käyttäen apuna tunnettuja pylväskromato-grafisia menetelmiä.
15 Saatua insuliinia voidaan käyttää tavanomaisiksi annostelumuodoiksi valmistettuna sokeritaudin hoidossa käytettävänä lääkeaineena.
Seuraavissa esimerkeissä käytettyjä esiproinsulii-nianalogeja saatiin pääasiallisesti tunnettujen menetel-20 mien mukaisesti (Naithani V.K., et ai., Insuline, ed. D. Branderburg, A.Wollmer, 1980, W, de Gruyter Berlin-New York, sivu 99-106) asyloimalla proinsuliini suoraan BOC-Lys(BOC)OH:n, B0C-Arg(AdOC)2-0H:n, BOC-Ala-Gln-Lys-(BOC)OH:n, BOC-Ala-Gln-Arg(AdOC)2 OH:n, B0C-Gln(tBU)-Pro-25 Lys(BOC)-Pro-Ala-Arg(AdOC)2-0H:n ja B0C-Gln(tBu)-Pro-Lys-(B0C)-Pro-Ala-Lys(B0C)-0H:n seka-anhydrideillä. Yhdisteiden puhdistaminen tapahtui ioninvaihtajaa käyttäen, suoja-ryhmien lohkaiseminen tapahtui trifluorietikkahapolla. Kulloisetkin aminohappoanalyysit vastasivat teoreettisia 30 arvoja.
Esimerkki 1 a) 75 mg naudan LysB0-proinsuliinia liuotetaan yhdessä 250 mg:n kanssa Ala0(tBu):ta 0,5 ml:aan vettä ja pH saatetaan jääetikalla arvoon 4,8. Liuokseen lisätään 8 35 mg trypsiiniä, liuotettuna 0,1 ml:aan vettä. Sen jälkeen 5 7911 7 kun on annettu seistä 16 tunnin ajan 4°C:ssa keskeytetään reaktio seostamalla 68 ml:11a asetonia. Sakka sentrifugoi-daan. Sen jälkeen kun on pesty eetterillä kuivataan vakuu-missa.
5 Tämä raakamateriaali kromatografioidaan silikagee- li-pylväällä, käyttäen eluointiaineena kloroformi/ meta-noli/H2O/trietyyliamiini/muurahaishappoa = 600/500/120/-15/3. Ensiksi eluoitu piikki otetaan talteen ja haihdutetaan vakuumissa pieneen tilavuusmäärään. Liuokseen lisä-10 tään 25 ml asetonia ja saostettu naudan insuliini-B30-es-teri sentrifugoidaan. Sakka pestään eetterillä ja kuivataan vakuumissa.
b) 25 mg naudan insuliini-B30-esteriä liuotetaan trifluorietikkahappoon (0,5 ml) ja annetaan seistä 60 mi-15 nuutin ajan huoneen lämpötilassa. Tämän jälkeen lisätään 5 ml eetteriä ja saostettu vapaa naudan insuliini sentrifugoidaan ja sen jälkeen kun on pesty eetterillä kuivataan vakuumissa.
Saanto: 23 mg.
20 Aminohappoanalyysi, nestekromatogratia-eluointiaika ja biologinen aktiviteetti antavat tulokseksi naudan insuliinin kanssa identtiset arvot.
Esimerkki 2: 500 mg LysB0-naudan insuliinia (Geiger R., Chemi-25 ker-Zeitung 100, 111 (1976) und Geiger, R., Molecular Endocrinology, ed. Mac Intyre & Selke 1977, Elsevier/North Holland Biomedical Press, sivu 27-41) liuotetaan 3,0 ml:aan vettä yhdessä 2 g:n kanssa Ala0(tBu):ta. Ph saatetaan etikkahapolla arvoon 4,5. Insuliini-liuokseen lisä-30 tään 20 mg trypsiiniä, liuotettuna 0,5 ml:aan vettä.
Menetellään edelleen vastaavasti kuten esimerkissä la. Raakamateriaalin, - joka sisältää nestekromatografia-ana-lyysin mukaan 67 % naudan insuliini B30-Ala0(tBu):ta -, saanto on 563 mg.
35 Saanto pylväskromatografisen puhdistuksen jälkeen 409 mg.
79117 6
Esterin lohkaisu tapahtuu vastaavasti kuten esimerkissä
Ib.
Esimerkki 3: 75 mg:n naudan Ala-Gln-LysB0-proinsuliinia (valmis-5 tus, kts. sivu 5) annetaan reagoida vastaavasti kuten esimerkissä 1, mutta käyttäen -7°Creen lämpötilaa ja pH-ar-voa 4,5, trypsiinin ja AlaOtBurn kanssa. Sen jälkeen kun on annettu seistä 16 tunnin ajan käsitellään edelleen ja muodostunut naudan insuliini-B30-esteri erotetaan kromato-10 graafisesti.
Saanto: 47 mg.
Tämän materiaalin aminohappoanalyysi vastaa naudan insuliinin aminohappoanalyysiä.
Esterin lohkaisu tapahtuu vastaavasti kuten esimer-15 kissä Ib.
Esimerkki 4: 75 mg:n sian Ala-Gln-LysB°-proinsuliinia (valmistettu vastaavasti kuten esimerkissä 3) annetaan reagoida + 9°C:ssa ja pH-arvon ollessa 4,4 vastaavasti kuten esi-20 merkissä 3 AlaOtBurn kanssa. Sian insuliiniesterin saanto on 39 mg (edelleenkäsittely vastaavasti kuten esimerkissä Ib).
Esimerkki 5: 75 mg:n sian Ala-Gln-LysB0-proinsuliinia annetaan 25 reagoida kuten esimerkissä la) 500 mg:n Thr(tBu)0tBu:ta kanssa trypsiinin läsnäollessa. 16 tunnin reaktioajan jälkeen voidaan eristää 49 mg humaani-insuliini-B30(tBu)-Ot-Bu:ta. Menetellään edelleen vastaavasti kuten esimerkissä Ib).
30 Esimerkki 6: 75 mg:n naudan ArgB0-proinsuliinia annetaan reagoida 500 mg:n Thr(tBu)OtBu:ta kanssa kuten esimerkissä la trypsiinin läsnäollessa. Sen jälkeen kun on annettu seistä yön ajan käsitellään edelleen, kuten esimerkissä la). Nau-35 dan insuliini-B30-Thr(tBu)0tBu:n saanto on 45 mg, ja sitä 7 79117 käsitellään edelleen vastaavasti kuten esimerkissä Ib.
Esimerkki 7; 75 mg:n sian Ala-Gln-ArgB°-proinsuliinia annetaan reagoida 400 mg:n Thr(tBu)OtBu:ta kanssa kuten esimerkissä 5 la. Sen jälkeen kun on pidetty 20 tunnin ajan 6°C:ssa on humaani-insuliini-B30(tBu)OtBu:n saanto 39 mg. (Edelleen-käsittely vastaavasti kuten esimerkissä Ib).
Esimerkki 8: 5 mg naudan Gln-Pro-Lys-Pro-Ala-Gln-LysB0-proinsu-10 liinia liuotetaan yhdessä 15 mg:n kanssa AlaOtBu:ta 0,1 ml:aan vettä. Ph säädettiin hiukkasella jääetikkaa arvoon 4-5 ja lisättiin 1 mg trypsiiniä ja reaktio pidettiin 24 tunnin ajan 4°C:ssa. Nestekromatografian avulla mitataan 63 % naudan insuliini-B30-tBu:ta, jota käsitellään edel-15 leen vastaavasti kuten esimerkissä Ib.
Esimerkki 9: 5 mg:n sian Gln-Pro-Lys-Pro-Ala-Gln-ArgB°-proinsuliinia annettiin reagoida 25 mg:n kanssa Thr(tBu)0tBu:ta, kuten esimerkissä 8 ilmoitettiin. 24 tuntia kestäneen 20 reaktion jälkeen voitiin nestekromatografian avulla analysoida 71 % humaani-insuliini-B30(tBu)0tBu:ta. Preparatii-visen nestekromatografian avulla voitiin eristää esteri. Saanto: 2,8 mg.
Sen jälkeen kun tert.-butyyli-suojaryhmät oli loh-25 kaistu tavanomaisella tavalla oli tuote nestekromatografian ja aminohappoanalyysin mukaan identtinen humaani-insuliinin kanssa.
Esimerkki 10: 75 mg:n sian Pro-Ala-Ala-LysB0-proinsuliinia anne-30 taan reagoida kuten esimerkissä la 500 mg:n kanssa
Thr(tBu)0tBu:ta trypsiinin läsnäollessa. 16 tuntia kestäneen reaktion jälkeen eristetään 52 mg humaani-insuliini-B30-(tBu)-OtBu:ta. Sitä käsitellään edelleen vastaavasti kuten esimerkissä Ib.
Claims (11)
1. Menetelmä naudan, sian tai ihmisen insuliinien valmistamiseksi vastaavasta esiproinsuliinianalogista, 5 tunnettu siitä, että naudan, sian tai ihmisen esi-proinsuliinianalogi, jossa proinsuliinin N-terminaaliin on liittynyt lysiini tai arginiini tai näiden asyyliamino-asyylitähde esisekvenssin karboksyylipäänä ja jonka kaava on 10 C-ketj u _ YA0 fS S~| A-ketJU_ OH 15 7 Γ s s (I) | i r1-ybo__j_______1__ YB2li B-ketj u 20 jossa Y on Lys tai Arg ja R1 on vety, L-aminohappo tai signaalisekvenssinä toimivan peptidin tähde, saatetaan pH-arvossa, joka on insuliinin isoelektrisen pisteen alapuolella, ja trypsiinin tai trypsiinin kaltaisen endopepti- 25 daasin läsnäollessa reagoimaan Ala-0tBu:n tai Thr(tBu)-OtBu:n kanssa, minkä jälkeen esteriryhmä ja mahdollinen suojaryhmä lohkaistaan.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktio suoritetaan pH-arvos- 30 sa 3,8 - 5,5.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktio suoritetaan pH-arvossa 3,8 - 5,0.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 35 tunnettu siitä, että entsyymi/substraatti-suhde on 9 79117 1:1 - 1:100 paino-osaa.
5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että entsyymi/substraatti-suhde on 1:4 - 1:10 paino-osaa.
6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että aminohappoesteriä käytetään 50-500-kertaisena mooliylimääränä.
7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että aminohappoesteriä tai sen joh- 10 dannaista käytetään 100-250-kertaisena mooliylimääränä.
8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktiolämpötila on +2 -+37° C.
9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 15 tunnettu siitä, että reaktiolämpötila on +4 - +10°C.
10. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktio suoritetaan pH-arvossa 3,8-5,5, entsyymisubstraatti-suhde on 1:1-1:100 paino- 20 osaa, käytetään 50-500-kertaista molaarista ylimäärää aminohappoesteriä tai sen johdannaista ja että reaktiolämpötila on +2 - +37°C.
11. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktio suoritetaan pH-arvos- 25 sa 3,8-5,0, entsyymi-substraatti-suhde on 1:4-1:10 paino-osaa, käytetään 100-250-kertaista molaarista ylimäärää aminohappoesteriä tai sen johdannaista ja että reaktiolämpötila on +4 - +10°C. 10 791 1 7
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19823209184 DE3209184A1 (de) | 1982-03-13 | 1982-03-13 | Verfahren zur umwandlung von praeproinsulinanaloga zu insulinen |
| DE3209184 | 1982-03-13 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI830813A0 FI830813A0 (fi) | 1983-03-10 |
| FI830813L FI830813L (fi) | 1983-09-14 |
| FI79117B FI79117B (fi) | 1989-07-31 |
| FI79117C true FI79117C (fi) | 1989-11-10 |
Family
ID=6158163
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI830813A FI79117C (fi) | 1982-03-13 | 1983-03-10 | Foerfarande foer framstaellning av bovine-, svin- eller humaninsulin. |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4639333A (fi) |
| EP (1) | EP0089007B1 (fi) |
| JP (1) | JPS58190398A (fi) |
| KR (1) | KR900003502B1 (fi) |
| AT (1) | ATE21118T1 (fi) |
| AU (1) | AU553832B2 (fi) |
| CA (1) | CA1195273A (fi) |
| DE (2) | DE3209184A1 (fi) |
| DK (1) | DK154573C (fi) |
| ES (1) | ES8401448A1 (fi) |
| FI (1) | FI79117C (fi) |
| GR (1) | GR78453B (fi) |
| IE (1) | IE54605B1 (fi) |
| IL (1) | IL68103A (fi) |
| ZA (1) | ZA831693B (fi) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3326472A1 (de) * | 1983-07-22 | 1985-02-14 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Neue insulin-derivate, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung sowie pharmazeutische mittel zur behandlung des diabetes mellitus |
| DE3333640A1 (de) * | 1983-09-17 | 1985-04-25 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Verfahren zur herstellung von insulin-derivaten, deren b-kette c-terminal verlaengert ist, neue basisch modifizierte insulin-derivate diese enthaltende mittel und ihre verwendung |
| US4581165A (en) * | 1984-06-14 | 1986-04-08 | Eli Lilly And Company | Anti-diabetic compounds |
| US4569791A (en) * | 1984-06-14 | 1986-02-11 | Eli Lilly And Company | Anti-diabetic compounds |
| US4569792A (en) * | 1984-06-14 | 1986-02-11 | Eli Lilly And Company | Anti-diabetic compounds |
| DK129385A (da) * | 1985-03-22 | 1986-09-23 | Novo Industri As | Peptider og fremstilling deraf |
| EP0280534B1 (en) * | 1987-02-25 | 1993-04-21 | Novo Nordisk A/S | Novel insulin derivatives |
| US5514646A (en) * | 1989-02-09 | 1996-05-07 | Chance; Ronald E. | Insulin analogs modified at position 29 of the B chain |
| NZ239652A (en) * | 1990-09-05 | 1992-09-25 | Hoechst Ag | Hydrolysis of preproinsulin to insulin and analogues using clostripain and optionally carboxypeptidase |
| BRPI0823004B8 (pt) | 2008-08-07 | 2021-05-25 | Biocon Ltd | processo para preparação de compostos de insulina |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3276961A (en) * | 1963-04-08 | 1966-10-04 | Squibb & Sons Inc | Process for preparing human insulin |
| GB1426061A (en) * | 1972-12-28 | 1976-02-25 | Ici Ltd | Polypeptides |
| US3903068A (en) * | 1972-12-26 | 1975-09-02 | Us Health Education & Welfare | Facile synthesis of human insulin by modification of porcine insulin |
| JPS55138393A (en) * | 1979-04-13 | 1980-10-29 | Shionogi & Co Ltd | Semisynthesis of insulin |
| EP0017938B1 (en) * | 1979-04-13 | 1983-08-03 | Shionogi & Co., Ltd. | Process for preparing a b30-threonine insulin |
| DK147437A (en) * | 1980-02-11 | 1900-01-01 | Process for preparing human insulin or threonine B30 esters of human insulin, or a salt or complex thereof | |
| PH16156A (en) * | 1980-03-27 | 1983-07-18 | Lilly Co Eli | Process for producing an insulin precursor |
| DK319780A (da) * | 1980-07-24 | 1982-01-25 | Forenede Bryggerier As | Fremgangsmaade til enzymatisk udskiftning af b-30 aminosyren i insuliner |
| DE3101382A1 (de) * | 1981-01-17 | 1982-09-02 | Hoechst Ag, 6000 Frankfurt | "verfahren zur herstellung von humanisulin oder dessen derivaten aus schweineinsulin oder dessen derivaten" |
-
1982
- 1982-03-13 DE DE19823209184 patent/DE3209184A1/de not_active Withdrawn
-
1983
- 1983-03-10 EP EP83102337A patent/EP0089007B1/de not_active Expired
- 1983-03-10 DE DE8383102337T patent/DE3364838D1/de not_active Expired
- 1983-03-10 AT AT83102337T patent/ATE21118T1/de not_active IP Right Cessation
- 1983-03-10 FI FI830813A patent/FI79117C/fi not_active IP Right Cessation
- 1983-03-10 IL IL68103A patent/IL68103A/xx not_active IP Right Cessation
- 1983-03-11 DK DK117883A patent/DK154573C/da not_active IP Right Cessation
- 1983-03-11 GR GR70765A patent/GR78453B/el unknown
- 1983-03-11 KR KR1019830000978A patent/KR900003502B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1983-03-11 IE IE529/83A patent/IE54605B1/en not_active IP Right Cessation
- 1983-03-11 CA CA000423391A patent/CA1195273A/en not_active Expired
- 1983-03-11 ES ES520493A patent/ES8401448A1/es not_active Expired
- 1983-03-11 ZA ZA831693A patent/ZA831693B/xx unknown
- 1983-03-11 AU AU12428/83A patent/AU553832B2/en not_active Ceased
- 1983-03-11 JP JP58039298A patent/JPS58190398A/ja active Granted
-
1984
- 1984-10-12 US US06/659,865 patent/US4639333A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK154573B (da) | 1988-11-28 |
| IE54605B1 (en) | 1989-12-06 |
| AU553832B2 (en) | 1986-07-31 |
| DK117883A (da) | 1983-09-14 |
| ZA831693B (en) | 1983-11-30 |
| FI79117B (fi) | 1989-07-31 |
| KR840004169A (ko) | 1984-10-10 |
| ES520493A0 (es) | 1983-12-16 |
| DK154573C (da) | 1989-05-22 |
| JPH0536034B2 (fi) | 1993-05-28 |
| US4639333A (en) | 1987-01-27 |
| FI830813L (fi) | 1983-09-14 |
| EP0089007A1 (de) | 1983-09-21 |
| EP0089007B1 (de) | 1986-07-30 |
| ES8401448A1 (es) | 1983-12-16 |
| IL68103A (en) | 1986-01-31 |
| ATE21118T1 (de) | 1986-08-15 |
| DK117883D0 (da) | 1983-03-11 |
| DE3209184A1 (de) | 1983-09-15 |
| DE3364838D1 (en) | 1986-09-04 |
| AU1242883A (en) | 1983-09-15 |
| IE830529L (en) | 1983-09-13 |
| KR900003502B1 (ko) | 1990-05-21 |
| GR78453B (fi) | 1984-09-27 |
| FI830813A0 (fi) | 1983-03-10 |
| IL68103A0 (en) | 1983-06-15 |
| CA1195273A (en) | 1985-10-15 |
| JPS58190398A (ja) | 1983-11-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5015728A (en) | Process for the preparation of insulin derivatives, the B chain of which is lengthened c-terminally | |
| Gregory et al. | The primary structure of human urogastrone | |
| EP0477885A2 (en) | Parathyroid hormone derivatives | |
| EP0020290A1 (de) | Verfahren zur spezifischen Abspaltung von Proteinsequenzen aus Proteinen | |
| FI77876C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av humaninsulin eller en treoninb30-ester av humaninsulin eller ett salt eller komplex daerav. | |
| FI79117C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av bovine-, svin- eller humaninsulin. | |
| JPS642360B2 (fi) | ||
| FI79860B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av humaninsulin des-pheb1-humaninsulin eller derivat daerav ur svininsulin, des-pheb1-svininsulin eller derivat daerav. | |
| HU202886B (en) | Process for producing insulin derivatives | |
| EP0095351B1 (en) | A precursor of a c-terminal amidated peptide and production thereof | |
| JPH03503958A (ja) | カルシトニン遺伝子関連ペプチドの製造方法 | |
| AU644032B2 (en) | Process for the enzymatic preparation of GRF(1-44) amide | |
| Obermeier et al. | Enzyme-catalyzed semisyntheses with porcine insulin | |
| JPS58189149A (ja) | ヒトインシユリンの半合成方法 | |
| UENO et al. | Insulin-stimulating peptide from a tryptic digest of bovine serum albumin: purification and characterization | |
| Kubiak et al. | Trypsin-catalysed formation of pig des-(23-63)-proinsulin from desoctapeptide-(B23-30)-insulin | |
| CHU et al. | Intramolecular enzymatic peptide synthesis: trypsin-mediated coupling of the peptide bond between B22-arginine and B23-glycine in a split crosslinked insulin | |
| DANHO et al. | Human Proinsulin, IV. Synthesis of a Protected Peptide Fragment Corresponding to the Sequence 1-23 of the Prohormone | |
| JP2714430B2 (ja) | Ｎａ，Ｋ―ＡＴＰａｓｅ阻害作用を有する新規ペプタイド | |
| JPS58500739A (ja) | インシユリン誘導体の製造法 | |
| JPH06107686A (ja) | 新規ペプチド又はその塩 | |
| Krause et al. | ENZYMATIC SEMISYNTHESES WITH INSULIN: PREPARATION OF (ARG B3l) INSULIN | |
| JPS6312480B2 (fi) | ||
| JPH0150719B2 (fi) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT |