FI78702C - Foerfarande foer framstaellning av -laktamantibioter och vid framstaellningen anvaendbara mellanprodukter. - Google Patents

Foerfarande foer framstaellning av -laktamantibioter och vid framstaellningen anvaendbara mellanprodukter. Download PDF

Info

Publication number
FI78702C
FI78702C FI822606A FI822606A FI78702C FI 78702 C FI78702 C FI 78702C FI 822606 A FI822606 A FI 822606A FI 822606 A FI822606 A FI 822606A FI 78702 C FI78702 C FI 78702C
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
group
acid
formula
amino
solution
Prior art date
Application number
FI822606A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI78702B (fi
FI822606A0 (fi
FI822606L (fi
Inventor
Peter Henry Milner
Original Assignee
Beecham Group Plc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Beecham Group Plc filed Critical Beecham Group Plc
Publication of FI822606A0 publication Critical patent/FI822606A0/fi
Publication of FI822606L publication Critical patent/FI822606L/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI78702B publication Critical patent/FI78702B/fi
Publication of FI78702C publication Critical patent/FI78702C/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D501/00—Heterocyclic compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring
    • C07D501/14—Compounds having a nitrogen atom directly attached in position 7
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/06—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having one or two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/08—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having one or two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with oxygen atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
    • C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
    • C07D311/06—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 2
    • C07D311/08—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 2 not hydrogenated in the hetero ring
    • C07D311/12—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 2 not hydrogenated in the hetero ring substituted in position 3 and unsubstituted in position 7
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D463/00—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbacephalosporins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring
    • C07D463/10—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbacephalosporins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2
    • C07D463/14—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbacephalosporins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2 with hetero atoms directly attached in position 7
    • C07D463/16—Nitrogen atoms
    • C07D463/18—Nitrogen atoms further acylated by radicals derived from carboxylic acids or by nitrogen or sulfur analogues thereof
    • C07D463/20—Nitrogen atoms further acylated by radicals derived from carboxylic acids or by nitrogen or sulfur analogues thereof with the acylating radicals further substituted by hetero atoms or by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C07D463/22—Nitrogen atoms further acylated by radicals derived from carboxylic acids or by nitrogen or sulfur analogues thereof with the acylating radicals further substituted by hetero atoms or by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen further substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D499/00—Heterocyclic compounds containing 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. penicillins, penems; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D505/00—Heterocyclic compounds containing 5-oxa-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. oxacephalosporins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring

Description

1 78702
Menetelmä 8-laktaamiantibioottien valmistamiseksi ja niiden valmistuksessa käyttökelpoiset välituotteet
Esillä oleva keksintö koskee menetelmää uusien β-laktaamijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on bakteereja vastustava aktiivisuus ja jotka ovat arvokkaita käsiteltäessä infektioita eläimissä, erikoisesti imettäväisissä ihminen mukaan lukien, jotka infektiot aiheutuvat hyvin erilaisista organismeista, erikoisesti gramnegatiivisista organismeista. Keksintö koskee myös välituotteita, joita käytetään näiden yhdisteiden valmistamisessa.
Keksinnön avulla aikaansaadaan ryhmä β-laktaami-antibiootteja, joissa on orformamido (formamidyyli)-substituentti 6-laktaami-renkaan karbonyyliryhmän viereisessä hiiliatomissa. Termi o-formamido tarkoittaa rakennetta
NHCHO
J-^ 0^ ’N\
Keksintö koskee näin ollen menetelmää 3-laktaami-antibiootin valmistamiseksi, jolla on kaava (II)
CHO
NH H 3 ti R -CO-NH^-1--(II) CO H 2 2 78702 tai sen farmaseuttisesti sopivan suolan tai in vivo,hydroly- 3 3 R -CO-NH- on antibakteerisesti aktiivisissa penisilliineissä tai kefalosporiineissa esiintyvä asyyliaminoryhmä, ja Y on ^S\ ^CH /Y\
3 CH tai CH
/ \ /2 |2
/ CH3 , / yP-Z
jossa Y on happi tai rikki ja Z on kefalosporiini-kemiassa tavanomainen 3-aseman substituentti.
Z voi olla vety, halogeeni, C -alkoksi, -CH Q tai -CH=CH-Q, 1—4 2 jossa Q on vety, halogeeni, hydroksi, merkapto, syano, kar- boksi, karboksyyliesteri, C -alkyylioksi, asyylioksi, 1—4 aryyli, heterosyklinen ryhmä, joka on sitoutunut hiiliatomin välityksellä, heterosyklyylitioryhmä tai typen sisältävä heterosyklinen ryhmä, joka on sitoutunut typen välityksellä.
Tässä yhteydessä termi "halogeeni" on sopivasti fluori, kloori, bromi tai jodi, edullisesti kloori tai bromi, ellei muuta ole mainittu.
Termi "karboksyyliesteri" tarkoittaa, ellei muuta ole mainittu, sopivasti ^-alkyyliestereitä.
3 73702
Termi "asyylioksi" tarkoittaa, ellei muuta ole mainittu, sopivasti C^g-alkyylikarbonyylioksiryhmiä.
Termi "aryyli" tarkoittaa, ellei muuta ole mainittu, sopivasti fenyyliä ja naftyyliä, edullisesti fenyyliä, joka mahdollisesti on substituoitu aina viidellä halogeenilla, C. - l-o alkyylillä, C^_g-alkoksilla, halo-(C^_g)-alkyylillä, hydroksil- la, aminolla, karboksilla, C, ,-alkoksikarbonyylillä tai C, — i—o l—o alkoksikarbonyyli-(C1_g)-alkyyliryhmillä.
Termi "heterosyklyyli" tarkoittaa, ellei muuta ole mainittu, sopivasti yhtä tai useampaa rengasta, joissa voi olla aina neljä heteroatomia renkaassa, ja jotka on valittu ryhmästä happi, typpi ja rikki ja mahdollisesti substituoitu aina kolmella halogeenilla, C^_g-alkyylillä, C^_g-alkoksilla, halo-(C1_g) alkyylillä, hydroksilla, aminolla, karboksilla, C^_g-alkoksikarbonyylillä, C^_g—alkoksikarbonyyli-(C^_g)-alkyy-lillä, aryylillä tai oksoryhmillä.
Keksinnön mukaiset yhdisteet voivat sisältää aminoryhmän ja/tai karboksyyliryhmän ja voivat tämän johdosta esiintyä amfotee-risessa muodossa tai muodostaa suoloja sopivien happojen tai emästen kanssa.
Formamidoryhmä voi esiintyä kahdessa edullisessa avaruusrakenteessa, jolloin vetyatomit -NH-CHO-ryhmässä ovat cis- tai trans-asemassa, jolloin cis-rakenne on tavallisesti vallitsevana.
Y on sopivasti -S-C(CH3)2-, -S-CH2~, -S-CH2-C(CH2Q')=; tai -o-ch2-c(ch2q')=, joissa kaavoissa Q' on vety, halogeeni, hydroksi, merkapto, syano, karboksi, karboksyyliesteri, C^^-alkyylioksi, asyylioksi tai heterosyklyylitioryhmä.
4 73702 Y on edullisesti kaavan (II) mukaisissa yhdisteissä -S—C(CH ) - ja -S-CH -C(CH Q)=, eli kaavan (II) mukainen yh-3 2 2 2 diste on tällöin penisilliini- tai kefalosporiinijohdannainen.
Erittäin edullisesti Y on -S-C(CH ) 3 2
Edelleen Y on edullisesti -S-CH^-CZ=, jossa kaavassa Z on määritelty edellä.
Koska keksinnön mukaiset antibioottiset S-laktaamiyhdisteet ovat tarkoitetut käytettäviksi farmaseuttisissa seoksissa, on helposti ymmärrettävää, että ne valmistetaan oleellisesti puhtaassa muodossa, esimerkiksi vähintään 50-%:sesti puhtaina, sopivammin vähintään 75-%:sesti puhtaina ja edullisesti vähintään 95-%:sesti puhtaina (tämä prosenttimäärä on laskettu painon perusteella). Näiden yhdisteiden epäpuhtaita valmisteita voidaan käyttää valmistettaessa sellaisia puhtaampia muotoja, joita käytetään farmaseuttisissa seoksissa. Vaikkakin keksinnön mukaisten välituoteyhdisteiden puhtaus on vähemmän kriittinen, on ymmärrettävä, että oleellisesti puhdas muoto on edullisin antibioottisia B-laktaamiyhdisteitä varten. Mikäli mahdollista valmistetaan keksinnön mukaiset yhdisteet kiteisessä muodossa.
Esimerkkejä sopivista farmaseuttisesti käyttökelpoisista in vivo hydrolysoiduista esteriryhmistä ovat sellaiset, jotka hajoavat helposti ihmisen ruumiissa, jolloin jäljelle jää pe-rushappo tai sen suola. Sopivia tällaisia esteriryhmiä ovat esimerkiksi sellaiset, joilla on osittaiskaava (i), (ii) ja (iii): 5 73702
Ra b -CO CH-O.CO.R (i) 2 d
C /R
-CO -R -N (ii)
2 V
-CO CH -ORf (iii) 2 2 a b joissa kaavoissa R on vety, metyyli tai fenyyli, R on a . b C -alkyyli, C -alkoksi tai fenyyli, tai R ja R 1-6 1-6 muodostavat yhdessä 1,2-fenyleeniryhmän, joka mahdollisesti c on substituoitu yhdellä tai kahdella metoksiryhmällä, R on C -alkyleeni, joka mahdollisesti on substituoitu metyyli- 1-6 d e tai etyyliryhmällä, R ja R ovat kumpikin erikseen C ^-alkyyli ja R on C^ ^-alkyyli. Esimerkkejä sopivista in vivo hydrolysoituvista esteriryhmistä ovat esimerkiksi asyylioksialkyyliryhmä, kuten asetoksimetyyli, piva-loyylioksimetyyli, α-asetoksietyyli ja α-pivaloyylioksietyyli, alkoksikarbonyylioksialkyyliryhmät, kuten etoksikarbonyyliok-simetyyli ja α-etoksikarbonyylioksietyyli, dialkyyliaminoal-kyyli, erikoisesti di-alempi alkyyliamino, alkyyliryhmät, kuten dimetyyliaminometyyli, dimetyyliaminoetyyli, dietyyliami-nometyyli tai dietyyliaminoetyyli, laktoniryhmät, kuten fta-lidyyli ja dimetoksiftalidyyli, ja esterit, jotka ovat sitoutuneet toiseen β-laktaami-antibioottiin tai β-laktamaasi-inhi-biittoriin.
Sopivia kaavan (II) mukaisen yhdisteen karboksiryhmän farmaseuttisesti käyttökelpoisia suoloja ovat esimerkiksi metalli-suolat, kuten aluminium- ja alkalimetallisuolat, kuten natrium ja kalium, maa-alkalimetallisuolat, kuten kalsium ja magnesium ja ammonium- tai substituoidut ammoniumsuolat, esimerkiksi sellaiset, jotka on muodostettu alempien alkyyliamii-nien, kuten trietyyliamiinin, hydroksi-alkyyliamiinin, kuten 6 78702 2-hydroksietyyliamiinin, bis(2-hydroksietyyli)-amiinin tai tris-(2-hydroksietyyli)-amiinin, sykloalkyyliamiinien, kuten disykloheksyyliamiinin, tai prokaiinin, dibentsyyliamiinin, Ν,Ν-dibentsyylietyleenidiamiinin, 1-efenamiinin, N-etyylipipe-ridiinin, N-bentsyyli-B-fenetyyliamiinin, dehydroabietyyli-amiinin, Ν,Ν'-bisdehydroabietyyliamiinin, etyleenidiamiinin tai pyridiinityyppisten emästen, kuten pyridiinin, kollidii-nin tai kinoliinin tai muiden amiinien kanssa, joita on käytetty suolojen muodostamiseen käytettäessä tunnettuja penisilliinejä ja kefalosporiineja. Muita sopivia suoloja ovat esimerkiksi litium- ja hopeasuola.
Muutamia keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan kiteyttää tai uudelleenkiteyttää vesipitoisista liuottimista. Tällaisissa tapauksissa voi muodostua hydraatiovettä. Keksinnön piiriin kuuluvat myös stökiometriset hydraatit, samoin kuin yhdisteet, jotka sisältävät vaihtelevia määriä vettä, jota voidaan muodostaa erilaisten menetelmien, kuten lyofilisoimisen avulla.
Q on sopivasti asetoksi, heterosyklyylitioryhmä tai typpipitoinen heterosyklinen ryhmä, joka on sitoutunut typpiatomin välityksellä.
7 78702
Vielä sopivammin Q ja Q' ovat asetoksi- tai heterosyklyyli-tioryhmä.
Heterosyklyylitioryhmällä voi sopivasti olla kaava - S - Het jossa kaavassa "Het" on 5-6 jäseninen heterosyklinen rengas, jossa on 1-4 atomia, jotka on valittu ryhmästä N, O ja S, jotka ovat substituoitumattornia tai substituoidut yhdellä tai kahdella ryhmällä C^_g-alkyyli, C^_g-alkoksi, hydroksi-alkyyli, C^_g-alkenyyli, alkoksialkyyli, karboksialkyyli, sulfonyylialkyyli, karbamoyylialkyyli, trifluorimetyyli, hydroksi, halogeeni, okso, (subst)aminoalkyyli tai karboksialkyyli, tai kaksi substituenttia voi olla sitoutuneina toisiinsa niin, että muodostuu heterosyklisen tai karboksyylisen renkaan jäännös.
Esimerkkejä ryhmästä "Het" ovat substituoimaton ja substituoi-tu imidatsolyyli, triatsolyyli, tetratsolyyli, tiatsolyyli, tiadiatsolyyli, tiatriatsolyyli, oksatsolyyli, triatsinyyli ja oksadiatsolyyli.
Sopivia ryhmiä "Het" ovat substituoimaton tai substituoitu 1,2,3-triatsolyyli, 1,2,4-triatsolyyli, tetratsolyyli, oksatsolyyli, tiatsolyyli, 1,3,4-oksadiatsolyyli, 1,3,4-tiadiatsolyy-li ja 1,2,4-tiadiatsolyyli. Heterosyklyylitioryhmä on edullisesti l-metyyli-lH-tetratsol-5-yylitio, 2-metyyli-l,3,4-tiadiatsol-5-yylitio, l-karboksimetyyli-lH-tetratsol-5-yyli-tio tai 6-hydroksi-2-metyyli-5-okso-2H-l,2,4-triatsin-3-yylitio.
Typpipitoinen heterosyklinen ryhmä, joka on sitoutunut typpi-atomin välityksellä, on sopivasti pyridiniumryhmä, joka on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai kahdella ryhmällä C1_6-alkyyli, C1_g-alkoksi, hydroksialkyyli, C1_g-alkenyyli, alkoksialkyyli, karboksialkyyli, sulfonyylialkyyli, karbamoyy-limetyyli, karbamoyyli, trifluorimetyyli, hydroksi, halogeeni, okso tai aminoalkyyli.
3 8 78702
Sopivia ryhmiä R CO- kaavan (II) mukaisissa yhdisteissä ovat esimerkiksi sellaiset, joilla on alakaavat (a)-(e): A - (CH ) - CH - (CH ) - CO - (a) 1 2 n I 2 m
X
A - CO - (b) 2 CH CO - χι c
1 CH X
2 A - X - (CH ) - CO - (d) 2 2 2 n A - C - CO - 3 II ,e>
N - OA
4
joissa kaavoissa n on 0, 1 tai 2, m on 0, 1 tai 2, A on C
1 1-6 alkyyli, substituoitu C^ ^-alkyyli, C^ ^-sykloalkyyli, sykloheksenyyli, sykloheksadienyyli, aromaattinen ryhmä, kuten 9 78702 fenyyli, substituoitu fenyyli, tienyyli, pyridyyli, mahdollisesti substituoitu tiatsolyyliryhmä, C^g-alkyylitioryhmä tai C. c-alkyylioksi, X on vety tai halogeeniatomi, karboksyy-lihappo, karboksyylihappoesteri, sulfonihappo, atsido, tetrat-solyyli, hydroksi, asyylioksi, amino, ureido, asyyliamino, heterosyklyyliamino, guanidino tai asyyliureidoryhmä, A2 on aromaattinen ryhmä, kuten fenyyli, 2,6-dimetoksifenyyli, 2-alkoksi-l-naftyyli, 3-aryyli-isoksatsolyyli, 3-aryyli-5-metyyli-isoksatsolyyli, substituoitu alkyyli tai substituoitu ditietaani, on CH2OCH2, CH2SCII2 tai (CH2^n' X2 on happi-tai rikkiatomi, on aryyli- tai heteroaryyliryhmä, kuten fenyyli, substituoitu fenyyli tai aminotiatsolyyli, ja A4 on vety, C1_g-alkyyli, C3_g-sykloalkyyli, aryyliaminokarbonyyli, C^_g-alkyyliamino-karbonyyli, C^_g-alkanoyyli, C^_g-alkoksi-karbonyyli, C2_g-alkenyyli, karboksi-C^_g-alkyyli, C^_g-alkyy-lisulfonyyli tai di-C3_g-alkyylifosfatometyyli.
Vielä sopivammin A^ on C1_g-alkyyli, C3_g-sykloalkyyli, syklo-heksenyyli, sykloheksadienyyli, fenyyli, hydroksifenyyli, tienyyli tai pyridyyli, ja X on vety- tai halogeeniatomi, karboksyylihappo, karboksyylihappoesteri, atsido, tetratsolyy-li, hydroksi, asyylioksi, amino, ureido, guanidino tai asyyli-ureido.
Muita erittäin sopivia ryhmiä ovat dihydroksifenyyli ja diasetoksifenyyli.
Edullisimpia ryhmiä R3 kaavan (II) mukaisissa yhdisteissä ovat sellaiset, joilla on alakaava (f) ja (g) R4 - CH - le (f) R6 - CH - l7 (g)
R
4 5 joissa kaavoissa R on fenyyli, tienyyli tai fenoksi, R on vetyatomi tai metyyliryhmä, R6 on fenyyli, substituoitu fenyyli, 10 73702 substituoitu tiatsolyyli, tienyyli tai sykloheksadienyyli, 7 ja R on hydroksyyli, karboksyylihappo tai alempi alkyyli, tai sen fenyyli-, tolyyli- tai indanyyliesteri, amino- tai substituoitu aminoryhmä.
Substituoitu fenyyliryhmä on edullisesti sellainen fenyyli- ryhmä, joka on substituoitu aina kolmella ryhmällä, jotka ovat C, alkyyli, fenyyli, halogeeni, C, ^-alkoksi, amino, ±—b 1-b nitro, hydroksi, C1_6~alkyyliamido, C^_6-alkyylikarbonyyliok- si, karboksi, C^^-alkoksikarbonyyli, halo-(C1_6)-alkyyli, okso-(C.. ,)-alkyyli, C, ,-alkyylikarbonyyli, aryylioksi, 1-b l“b aralkyylioksi, aryylikarbonyyli, C^_g-alkyyliamino tai di-(C^_g)-alkyyliamino.
R^ on edullisesti fenyyli, p-hydroksifenyyli, tienyyli tai sykloheksadienyyli.
Muita edullisia ryhmiä R^ ovat 3,4-dihydroksifenyyli ja 3,4-diasetoksifenyyli.
7 R on edullisesti substituoitu aminoryhmä.
7
Vielä edullisemmin substituoitu aminoryhmä R on ureido, asyy-liamino tai asyyliureido.
Eräs sopiva keksinnön mukainen alaryhmä aikaansaa kaavan (III) mukaisen yhdisteen tai sen farmaseuttisesti sopivan suolan tai in vivo hydrolysoituvan esterin:
CHO
(
NH H
o * 1 *—^ R .CH.CO.NH -K \ i I y (m)
NH - N-_J
I o'- |
?° C02H
N
/X10 0 11 78702 jossa kaavassa Y on määritelty kaavan (II) yhteydessä, ja R on fenyyli, substituoitu fenyyli, sykloheksenyyli, syklo-heksadienyyli, tai 5- tai 6-jäseninen heterosyklinen rengas, jossa on aina 3 heteroatomia, jotka ovat happi, rikki tai typpi, ja joka on mahdollisesti substituoitu hydroksi-, amino-, halogeeni-, substituoitu amino- tai C, ,-alkoksiryhmillä,
Q A O
R* on vety tai C^g-alkyyliryhmä, ja R10 on mahdollisesti substituoitu 5- tai 6-jäseninen heterosyklinen ryhmä, jossa 9 10 on 1-2 typpiheteroatomia, tai R ja R muodostavat yhdessä sen typpiatomin kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, mahdollisesti substituoidun 5- tai 6-jäsenisen heterosyklisen ryhmän, jossa on 1 tai 2 typpiheteroatomia.
O
Substituoitu fenyyliryhmä R on sopivasti sellainen fenyyli-ryhmä, joka on substituoitu aina kolmella ryhmällä, jotka ovat C1_6-alkyyli, fenyyli, halogeeni, C^g-alkoksi, amino, nitro, hydroksi, C^_g-alkyyliamido, C^_g—alkyylikarhonyyli-oksi, karboksi, C^_g-alkoksikarbonyyli, halo-(C^_g)-alkyyli, okso-(C1_6)-alkyyli, C^g-alkyylikarbonyyli, aryylioksi, aralkyylioksi, aryylikarbonyyli, C. ..-alkyyliamino tai di-(C^g)-alkyyliamino.
Q
Kaavassa (III) ryhmä R on edullisesti fenyyli, 4-hydroksi-fenyyli, 3,4-di(C1_g-alkyylikarbonyylioksi)fenyyli, 3,4-di-hydroksifenyyli, 2-tienyyli, 3-tienyyli tai 2-amino-4-tiatsolyyli.
0
Erittäin edullisia ryhmiä R ovat 3,4-dihydroksifenyyli ja 3,4-diasetoksifenyyli.
9 R on sopivasti vety.
Sopivia substituentteja 5- tai 6-jäsenisessä heterosyklisessä ryhmässä R^ tai + R^ ovat mahdollisesti substituoitu alkyyli, alkenyyli, alkynyyli, sykloalkyyli tai sykloalkenyyli, mahdollisesti substituoitu fenyyli, okso, hydroksi, joka mahdollisesti on substituoitu alkyyli-, alkenyyli-, syklo- 12 73702 alkyyli-, fenyyli-, pyridyyli-, pyrimidyyli- tai bentsyyliryh-mällä, mahdollisesti substituoitu merkaptoryhmä, alkyyli-sulfonyyliryhmä, substituoitu iminoryhmä tai sellainen amino-ryhmä, joka on mahdollisesti substituoitu alkyyli-, alkenyyli-, sykloalkyyli-, fenyyli-, substituoitu fenyyli- tai bentsyyli-ryhmällä. Vaihtoehtoisesti voi kaksi renkaassa olevaa subs-tituenttia muodostaa jonkin toisen karbosyklisen tai hetero-syklisen renkaan jäännöksen.
Kaavan (III) mukaisissa yhdisteissä Y on edullisesti -S-C(CH^)^ tai -S-Ci^-C(CH2Q)=, jolloin Q on määritelty edellä, so. kun kaavan (III) mukaiset yhdisteet ovat penisilliinin tai kefa-losporiinin johdannaisia.
Hiiliatomi, joka on merkitty merkillä * esillä olevissa kaavoissa, on epäsymmetrinen niin, että nämä yhdisteet voivat esiintyä kahden optisesti aktiivisen diastereoisomeerin muodossa. Yleensä sillä yhdisteellä, joka on valmistettu D-sivuketjusta, on voimakkaampi bakteereja tappava aktiivisuus, ja näin ollen D-yhdiste tai DL-seokset ovat edullisimpia, jolloin D-yhdiste on erittäin edullinen.
Edullisimpia kaavan (III) mukaisia yhdisteitä ovat kaavan (IV) mukaiset penisilliinijohdannaiset tai niiden farmaseuttisesti sopivat suolat ja in vivo hydrolysoituvat esterit:
CHO
NH H
R .CH.CO.NH^f-\y * I / (IV)
NH 1_N
I Cr
CO h CO H
R12 V3 jossa kaavassa on fenyyli, substituoitu fenyyli, syklo- heksenyyli, sykloheksadienyyli tai 5- tai 6-jäseninen hetero- 13 78702 syklinen rengas, jossa on aina kolme heteroatomia, jotka ovat happi, rikki tai typpi, ja jotka mahdollisesti on substituoi- tu hydroksilla, aminolla, halogeenilla tai C, ,-alkoksilla, 12 13 R on vety tai C1_6~alkyyli ja R on mahdollisesti substi- tuoitu 5- tai 6-jäseninen heterosyklinen ryhmä, jossa on yksi 12 13 tai kaksi typpiheteroatornia, tai R ja R muodostavat yhdessä sen typpiatomin kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, mahdollisesti substituoidun 5- tai 6-jäsenisen heterosykli-sen ryhmän, jossa on 1-2 typpiheteroatomia.
Kaavassa (IV) ryhmä R^ on edullisesti fenyyli, 4-hydroksi-fenyyli, 2-tienyyli, 3-tienyyli, 2-amino-4-tiatsolyyli, 3,4-dihydroksifenyyli tai 3,4-diasetoksifenyyli.
Erittäin edullisia ryhmiä R^ ovat 3,4-dihydroksifenyyli ja 3,4-diasetoksifenyyli.
13 12 13 5- tai 6-jäsenisen heterosyklisen ryhmän R tai R + R sopivia substituentteja ovat alkyyli, alkenyyli, alkynyyli, sykloalkyyli tai sykloalkenyyli, mahdollisesti substituoitu fenyyli, okso ja hydroksi, joka mahdollisesti on substituoitu alkyyli-, alkenyyli-, sykloalkyyli-, fenyyli-, pyridyyli-, pyrimidyyli- tai bentsyyliryhmällä, mahdollisesti substituoitu merkaptoryhmä, alkyylisulfonyyliryhmä, substituoitu imino-ryhmä, tai aminoryhmä, joka mahdollisesti on substituoitu alkyyli-, alkenyyli-, sykloalkyyli-, fenyyli-, substituoitu fenyyli- tai bentsyyliryhmällä. Vaihtoehtoisesti voi kaksi renkaassa olevaa substituenttia muodostaa jonkin muun karbo-syklisen tai heterosyklisen renkaan jäännöksen.
12 R on edullisesti vety.
Eräs erittäin edullinen keksinnön mukainen alaryhmä aikaansaa kaavan (V) mukaisen yhdisteen tai sen farmaseuttisesti sopivan suolan tai in vivo hydrolysoituvan esterin: 14 78702
CHO
NH
X Z -N.
R8-CH-CO-NHii_Y Λ I™ 1 Y (V) I /—'"-τ'
CO I
16 l CO,H
Rγ"γθ 2 15^\N^o R14 jossa kaavassa R® ja Y on määritelty kaavan (III) yhteydessä, ja R14 on vety, C. --alkyyli, substituoitu alkyyli, aryyli tai aralkyyli, R 5 ja R ovat samanlaisia tai erilaisia ja ovat vety, C, --alkyyli, substituoitu alkyyli, halogeeni, -L~0 Te φ amino, hydroksi tai C^_g-alkoksi, tai R ja R muodostavat yhdessä 5- tai 6-jäsenisen karbosyklisen tai heterosyklisen renkaan jäännöksen.
Y on sopivasti kaavan (V) mukaisissa yhdisteissä -S-CiCH^j” tai -S-CH2~C(CH2Q)=, jolloin Q on määritelty edellä.
Y on edullisesti kaavan (V) mukaisissa yhdisteissä -S-CiCH^^-tai -S-CH2-C(CH2Q')=, jolloin Q' on määritelty edellä.
Edullisimpia kaavan (V) mukaisia yhdisteitä ovat kaavan (VI) mukaiset penisilliinijohdannaiset tai niiden farmaseuttisesti sopivat suolat tai in vivo hydrolysoituvat esterit:
CHO
il * S>H ? o R - CH - CO - NH k- : NH X (VI) co o^~
Η16^/Ν-γΟ H C02H
-lsX^N'^O
R14 is 78702 jossa kaavassa R11, R14, R15 ja R16 on määritelty edellä.
Sopivia C^_g-alkyyliryhmiä R^4, R^ ja R^ kaavassa (V) ja (VI) ovat esimerkiksi metyyli, etyyli, n- ja isopropyyli, 14 n-, sek-, iso- ja tert-butyyli. R on edullisesti etyyli.
15 16 R ja R ovat edullisesti vety.
Eräs toinen edullinen keksinnön mukaisten yhdisteiden alaryhmä ovat sellaiset yhdisteet, joilla on kaava (VII), tai niiden farmaseuttisesti sopivat suolat ja in vivo hydrolysoituvat esterit: CH0
Lh H i 3 ^ R -CO.NH -Γ | 9 (VII)
J-N\ _QZ
o *
co2H
3 1 jossa kaavassa R on määritelty edellä, Y on happi tai rikki, 2 ja Q on asetyylioksi, ryhmä -SHet, jossa Het on määritelty 2 edellä, tai Q on alaryhmä, jolla on kaava (h) -·ςχ„ - R* jossa kaavassa R^ ja R^ voivat olla samanlaisia tai erilaisia ja ovat kumpikin vety, C^__g-alkyyli, C^g-alkoksi, hydroksi-alkyyli, alkenyyli, alkoksialkyyli, karboksialkyyli, sulfonyylialkyyli, karbamoyylialkyyli, karbamoyylitrifluori-metyyli, hydroksihalogeeni tai aminoalkyyli.
3
Sopivia R CO-ryhmiä kaavassa (VII) ovat sellaiset, joilla on kaava (a)-(g), jotka on määritelty edellä kaavan (II) yhteydessä.
ie 78702
Sopivia ryhmiä "Het" kaavassa (VII) ovat substituoitu ja substituoitumaton 1,2,3-triatsolyyli, 1,2,4-triatsolyyli, tetratsolyyli, oksatsolyyli, tiatsolyyli, 1,3,4-oksadiatso-lyyli, 1,2,4-triatsinyyli, 1,3,4-tiadiatsolyyli ja 1,2,4-tiadiatsolyyli. Ryhmä "SHet" on edullisesti 1-metyyli-lH-tetratsol-5-yylitio, 2-metyyli-l,3,4-tiadiatsol-5-yylitio, l-karboksimetyyli-lH-tetratsol-5-yylitio tai 6-hydroksi-2-metyyli-5-okso-2H-l,2,4-triatsin-3-yylitio.
on sopivasti vety.
Rp on sopivasti vety, sulfonyylialkyyli tai karbamoyyli ja substituentti Rp on edullisesti 4-asemassa.
Y1 on sopivasti rikki.
Y^· on sopivasti happi.
3 R on edullisesti kaavassa (VII) alaryhmä, jolla on kaava (j) : CO -NH-CH- R16 J k8
yV
jossa kaavassa R®, R^, R^ ja R^® on määritelty edellä kaavan (V) yhteydessä.
Edullisia spesifisiä keksinnön mukaisia yhdisteitä ovat seu-raavat ja niiden farmaseuttisesti sopivat suolat ja in vivo hydrolysoituvat esterit: a) 6ct-formamido-63-/D-2-/ (4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino7-2-fenyyliasetamido/penisillaanihappo, 6a~formamido-6g-fenoksiasetamidopenisillaanihappo, 6a~formamido-6B-/7-karboksi-2-(3-tienyyli)asetamido/penisil-laanihappo, 17 78702 6a-formamido-6fl-(2-karboksi-2-fenyyliasetamido)penisillaani-happo, ja b) 66-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-ami.no/-2- (4-hydroksifenyyli) asetamido/-6ci~formamidopenisil-laanihappo, 6(3-/L-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliami-no7-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/-6a“fonnamidopenisillaani-happo, 6a-formamido-6f3-/D-2-/T4-hydroksi-2-fenyyliaminopyrimidin- 5-yyli)ureido/-2-fenyyliasetamido/penisillaanihappo, 66-/D-2-amino-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7“6a-formamidopenisillaanihappo, 66-/D-2-(3-kinnamoyyli-3-metyyliureido)-2-fenyyliasetamido/-6a-formamidopenisillaanihappo, 6ct-formamido-6g-/D-2-/T2-oksoimidatsolidin-l-yyli) karbonyyli-amino7”2-fenyyliasetamido/penisillaanihappo, 6a-formamido-6B-/D-2-/T3-metyylisulfonyyli-2-okso-imidatsoli-din-l-yyli)karbonyyliamino/-2-fenyyliasetamido/penisillaani-happo, 6a-formamido-6B-/D-2-/3-metyyli-3-(tien-2-yyli-karbonyyli)-ureido7-2-fenyyliasetamido/penisillaanihappo, 6a-formamido-66-/D-2-/T7-hydroksi-l,2,4-triatsolo/2,3-a7pyrimi-din-6-yyli)karbonyyliamino7~2-fenyyliasetamido/penisillaani-happo, 66-/D-2-/(2-bentsyyliamino-4-hydroksipyrimidin-5-yyli)karbonyy-liamino/-2-fenyyliasetamido/-6a -formamidopenisillaanihappo, 6a-formamido-66-/D-2-(4-hydroksifenyyli)-2-/T2-oksoimidatsoli-din-l-yyli)karbonyyliamino7asetamido7penisillaanihappo/ 66 -/D-2-(3-kinnamoyyli-3-metyyliureido)-2-(4-hydroksifenyyli)-asetamido7-6a-formamidopenisillaanihappo, ja c) 6a-formamido-6B-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli) karbonyyliamino/-2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido/-penisillaanihappo, ιθ 73702 6a-formamido-6B-/D-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliami.no/-2- (3,4-dihydroksifenyyli)asetamido/penisil-laanihappo, ja d) 6|3-/D-2-/3-/2-(4-aminosulfonyylifenyyli)amino-4-hydroksi-pyrimidin-5-yyli/ureido/-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/-6a-formamidopenisillaanihappo, 6a-formamido-66-/D-2-{/3-(furan-2-yylimetyleeniamino)-2-okso-imidatsolidin-l-yyli/karbonyyliamino}-2-(4-hydroksifenyyli)-asetamido/penisillaanihappo, 6 0-/D-2-(D-2-karbamoyyliamino-3-fenyylipropionamido)-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-6a-formamidopenisillaanihappo, 6B-/2-/Tkumarin-3-yyli)karbonyyliamino7“2-(4-hydroksifenyyli)-asetamido7“6a-formamidopenisillaanihappo, 6a-formamido-6 g-/D-2-(4-hydroksifenyyli)-2-/(3-metyylisulfonyy-li-2-oksoimidatsolidin-l-yyli)karbonyyliamino/asetamido/peni-silaanihappo, 6g-/D-2-/75-etoksikarbonyyli-imidatsol-4-yyli)karbonyyliamino/- 2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-6a-formamidopenisillaanihappo/ 6g-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliami-no7-2-(tien-2-yyli)asetamido7-6a-formamidopenisillaanihappo, 6g-/L-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliami-no7-2-(tien-2-yyli)asetamido/-6a-formamidopenisillaanihappo, 6g-/D-2-amino-2-(tien-2-yyli)asetamido7~6a~formamidopenisillaa-nihappo, 6g-/L-2-amino-2-(tien-2-yyli)asetamido7“6a-formamidopenisil-laanihappo, 6g-/T2R,3S)-3-bentsyylioksi-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin- 1-yyli)karbonyyliamino7butyyriamido7-6a-formamidopenisillaanihappo , 6a-formamido-6g-/D-2-(4-hydroksifenyyli)-2-/3-/4-hydroksi-2-(fenyyliamino)pyrimidin-5-yyli/ureido/asetamido/penisillaani-happo, is 78702 70-(D-2-amino-2-fenyyliasetamido)-7ot-f ormamidokef alosporaani-happo, 70-/D-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliami-no7“2-fenyyliasetamido7-7a-formamidokefalosporaanihappo, 7a-formamido-7 3-/D-2-i/3-(metyylisulfonyyli)-2-oksoimidatsoli-din-l-yyli7karbonyyliamino}-2-fenyyliasetamido/kefalosporaani-happo, 10-/D-2-/ (4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliami-no7~2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/-7a-formamidokefalosporaa-nihappo, 70-/L-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliami-no7-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-7a-formamidokefalosporaa-nihappo, 70-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliami-no7-2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido7-7a-formamidokefalo-sporaan ihappo, 7a-formamido-70-(tien-2-yyliasetamido)kefalosporaanihappo, 70-/2-karboksi-2-(tien-3-yyli)asetamido7-7a-formamidokefalo-spor aanihappo, 70-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino7-2-(tien-2-yyli)asetamido7-7a-formamidokefalosporaani- happo, 70-/L-2-(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/- 2- (tien-2-yyli)asetamido7-7a-formamido-kefalosporaanihappo/ 70-/2-(2-aminotiatsol-4-yyli)asetamido7-7a-formamidokefalosporaanihappo, ja e) 6B-/D-2-/7kumarin-3-yyli)ureido7-2-(4-hydroksifenyyli)-asetamido7-6a-formamidopenisillaanihappo, 60-/D-2-/3-(4-okso-4H-l-bentsopyran-3-yyli)ureido/-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/-6a-formamidopenisillaanihappo, 6a-formamido-66-/D-2-/74-hydroksi-7-metyyli-l,8-naftyridin- 3- yyli)karbonyyliamino/-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7~ penisillaanihappo, 20 73702 6£-/D-2-/D-2-amino-3-(N-metyylikarbamoyyli)propionamido/-2-(4-hydroksifenyyli) asetaxnido/-6a-formamidopenisillaanihappo, 73-/2-(syanometyylitio)asetamido7-7a-formamidokefalosporaani-happo, 73-/2-/(aminokarbonyyli)amino/-2-(tien-2-yyli)asetamido/-7a-formamidokefalosporaanihappo, (f) 7a-formamido-7B-/2-(tien-2-yyli)asetamido/-3-/Tl-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli7kef-3-em-4-karboksyylihappo, 7a-formamido-7 β-/2-(tien-2-yyli)asetamido7-3-/(2-metyyli-l,3,4-tiadiatsol-5-yyli) tiometyyljL/kef-3-ein-4-karboksyylihappo, ja 73-/2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin- 1-yyli)karbonyyliamino/asetamido7-7a-formamido-3-/(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli7kef-3-em-4-karboksyylihappo, 73-/2-(3,4-dihydroksifenyyli)-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin- 1-yyli) karbonyyliamino7“7a-formamido-3-/Tl-inetyyli-lH-tetrat-sol-5-yyli)tiometyyli7kef-3-em-4-karboksyylihappo, 63-/L-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino/-2-(3,4-dihydroksifenyyli)asetamido/-6a-formamidopenisil-laanihappo, 7a-formamido-3-(pyridiniummetyyli)-73-(tien-2-yyli-asetamido)-kef-3-em-4-karboksyylihappo, 63”fenoksiasetamido-6a-formamidopenaami-3-karboksyylihappof 73-/D“2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino7-2-fenyyliasetamido7~7a-formainido-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksyylihappo, 6a-formamido-63-(R-2-fenyyli-2-sulfoasetamido)penisillaanihappo, 63-/D-2-amino-2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido/-6a-formami-dopenisillaanihappo, 7a-formamido-73-/DL-2-fenoksikarbonyyli-2-(tien-3-yyli)aset-amido/-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksyylihappo, 6a-formamido-6B“(fenyyliasetamido)penisillaanihappo, 21 78702 73-/(Z)-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(1-karboksi-l-metyyli-etoksi-imino)asetamido7-7a-formamidokefalosporaanihappo, 73-/2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperat-sin-l-yyli)karbonyyliamino/asetamido/-7a-formamido-3-/(2-metyy-li-1,3/ 4-tiadiatsol-5-yyli) tiometyyli/kef-3-em-4-karboksyyli-happo, 7 3-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino7-2-(3,4-dihydroksifenyyli)asetamido/-7a-formamidokefalosporaanihappo , 63-/D-2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/3-/2-(4-aminosulfonyylife-nyyli) amino-4-hydroksipyrimidin-5-yyli/ureido/asetamido-6a-f ormamidopen is i11aanihappo, 63-/D-2-/D-2-amino-3-(N-metyylikarbamoyyli)propionamido/-2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido/-6a-formamidopenisillaani-happo, 73-/2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/- 2- (4-hydroksifenyyli)asetamido7-7a-formamido-3-/7l-nietyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli7kef-3-em-4-karboksyylihappo, 73“/2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/- 2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido7-7a-formamido-3-/T2-metoksi- 1,3,4-tiadiatsol-5-yyli)tiometyyli7kef-3-em-4-karboksyyli-happo.
Keksinnön mukaiset antibioottiset yhdisteet voidaan valmistaa annostelua varten millä hyvänsä sopivalla tavalla käytettäväksi ihmisten tai eläinten lääkkeinä käyttäen sinänsä tunnettua tekniikkaa ja valmistusmenetelmiä, joita on käytetty muita antibiootteja valmistettaessa, ja keksinnön piiriin kuuluvat myös sellaiset farmaseuttiset seokset, jotka sisältävät keksinnön mukaista antibioottia, esimerkiksi kaavan (II) mukaisena yhdisteenä, yhdessä farmaseuttisesti sopivan kantaja-tai lisäaineen kanssa.
Nämä seokset voidaan muodostaa annostelua varten millä hyvänsä sopivalla tavalla, esimerkiksi oraalisesti tai parenteraali- 22 78702 sesti tai pinnallista lisäämistä varten. Nämä seokset voivat olla tablettien, kapselien, jauheiden, rakeiden, salvojen tai nestemäisten preparaattien muodossa, esimerkiksi oraalisina tai steriileinä parenteraalisina liuoksina tai suspensioina.
Oraalista annostelua varten tarkoitetut tabletit ja kapselit voivat olla annosyksikkömuodossa ja voivat sisältää tavanomaisia lisäaineita, kuten sideaineita, esim. siirappia, akaasiaa, gelatiinia, sorbitolia, traganttia tai polyvinyy-lipyrrolidonia, täyteaineita, esimerkiksi laktoosia, sokeria, malssitärkkelystä, kalsiumfosfaattia, sorbitolia tai glysii-niä, tabletoimisvoiteluaineita, esimerkiksi magnesiumstea-raattia, talkkia, polyetyleeniglykolia tai piidioksidia, hajottamisaineita, esimerkiksi perunatärkkelystä, tai sopivia kostutusaineita, kuten natriumlauryylisulfaattia. Tabletit voidaan päällystää menetelmillä, jotka ovat hyvin tunnettuja tavanomaisesta farmaseuttisesta käytännöstä. Oraaliset nestemäiset valmisteet voivat olla esimerkiksi vesi- tai öljysuspensioiden, liuosten, emulsioiden, siirappien tai eliksiirien muodossa, tai niitä voidaan käyttää kuivatuottee-: na lisättäväksi veteen tai johonkin muuhun sopivaan väliai neeseen ennen käyttöä. Samanlaiset nestemäiset preparaatit voivat sisältää tavanomaisia lisäaineita, kuten suspendoimis-aineita, esimerkiksi sorbitolia, metyyliselluloosaa, glukoo-sisiirappia, gelatiinia, hydroksietyyliselluloosaa, karboksi-metyyliselluloosaa, aluminiumstearaattigeeliä tai hydrattu-ja syötäviä rasvoja, emulgoimisaineita, esimerkiksi lesitiiniä, sorbitaanimono-oleaattia tai akaasiaa, ei-vesipitoisia väliaineita (jotka voivat sisältää nautittavia öljyjä), esimerkiksi manteliöljyä, öljymäisiä estereitä, kuten glyserii-niä, propoyleeniglykolia tai etyyliglykolia, säilöntäaineita, esimerkiksi metyyli- tai propyyli-p-hydroksibentsoaattia tai sorbiinihappoa, ja haluttaessa tavanomaisia maku- ja väriaineita.
Peräpuikot sisältävät tavanomaisia peräpuikon perusaineita, esimerkiksi kaakaovoita tai muita glyseridejä.
23 78702
Parenteraalista annostelua varten valmistetaan nestemäiset annosyksikkömuodot käyttäen keksinnön mukaista yhdistettä ja steriiliä väliainetta, joista vesi on edullisin. Yhdiste voidaan riippuen väliaineesta ja käytetystä väkevyydestä joko suspendoida tai liuottaa väliaineeseen. Liuoksia valmistettaessa voidaan yhdiste liuottaa veteen injektoimista varten ja steriloida suodattamalla ennen täyttämistä sopiviin pulloihin tai ampulleihin ja ennen niiden sulkemista. Edullisesti väliaineeseen liuotetaan sellaisia aineita, kuten paikallispuudutusaineita, säilöntäaineita ja puskuroimis-aineita. Stabiilisuuden parantamiseksi voidaan seos jäädytys-kuivata lisäämisen jälkeen pulloon ja poistaa vesi tyhjössä. Kuiva lyofilisoitu jauhe suljetaan sitten pulloon ja toista pulloa, joka sisältää injektoitavaa vettä, voidaan käyttää nesteen aikaansaamiseksi ennen käyttöä. Parenteraaliset suspensiot valmistetaan oleellisesti samalla tavoin lukuunottamatta sitä, että yhdiste suspendoidaan väliaineeseen eikä liuoteta siihen, eikä steriloimista voida suorittaa suodattamalla. Yhdiste voidaan steriloida etyleenioksidin avulla ennen suspendoimista steriiliin väliaineeseen. Edullisesti lisätään seokseen pinta-aktiivista tai kostutusainetta yhdisteen tasaisen jakaantumisen edistämiseksi.
Tämä seos voi sisältää 0,1 paino-%:sta alkaen, edullisesti 10-60 paino-% aktiivista ainetta annostustavasta riippuen. Mikäli seokset muodostavat annosyksiköitä, sisältää kukin yksikkö edullisesti 50-500 mg aktiivista aineosaa. Annostus, jota käytetään täysikasvuista henkilöä käsiteltäessä, on edullisesti alueella 100-10000 mg/vrk, esimerkiksi 1500 mg/vrk, riippuen annostustavasta ja sen taajuudesta.
24 73702
Keksinnön mukaiset antibioottiset yhdisteet ovat aktiivisia hyvin erilaisia gram-positiivisia ja gram-negatiivisia bakteereja vastaan, erikoisesti ne ovat käyttökelpoisia käsiteltäessä hengitysteiden ja virtsateiden infektioita ihmisissä ja mastiittia nautakarjassa. Eräs erikoisetu keksinnön mukaisissa antibakteerisesti aktiivisissa yhdisteissä on niiden stabiilisuus 8-laktamaasi-entsyymien suhteen ja ne ovat tämän johdosta tehokkaita 8-laktamaasia valmistavia organismeja vastaan.
Keksintö koskee lisäksi yhdistettä, jolla on kaava (I)
CHO
NH H
1 ? ^ R -NH «n-T^\ {I)
-N Y
° Y, CO R 2 tai sen suola, jossa kaavassa R on vety tai aminosuojaryh-mä, R on vety tai helposti poistettavissa oleva karboksyy-lisuojaryhmä ja Y on
^ S >Y
^ \ ^-CH ^ V
/ Xch3 , / 2 yi-z jossa Y on happi tai rikki ja Z on kefalosporiini-kemiassa tavanomainen 3-aseman substituentti, joka yhdiste on käyttökelpoinen välituotteena valmistettaessa 0-laktaamiantibioot-teja, joilla on kaava (II).
·’ 1
Sopivia aminosuojaryhmiä R ovat sellaiset, jotka ovat tältä alalta hyvin tunnettuja ja voidaan poistaa tavanomaisissa olosuhteissa hajottamatta molekyylin jäljellä olevaa osaa.
25 7 8 7 0 2
Esimerkkejä ryhmän R aminosuojaryhmistä ovat bentsyyli, jonka fenyylirengas on mahdollisesti substituoitu yhdellä tai kahdella substituentilla, jotka on valittu ryhmästä C -J 1-4 alkyyli, ^-alkoksi, trifluorimetyyli, halogeeni ja nitro, C -alkoksikarbonyyli, esimerkiksi tert-butoksikarbonyyli, 1-4 bentsyylioksikarbonyyli, joka mahdollisesti on substituoitu kuten edellä bentsyylin yhteydessä on esitetty, allyylioksi-karbonyyli, trityyli tai trikloorietoksikarbonyyli.
Sopivia esimerkkejä N-suojaryhmistä ryhmässä R ovat sellaiset, jotka edellä on lueteltu ja jotka ovat poistettavissa happamissa olosuhteissa mahdollisesti ryhmän Ilb-metallin läsnäollessa.
Sopivia helposti poistettavia karboksyylisuojaryhmiä kaavan (I) mukaista ryhmää -CO R varten ovat mm. karboksyyli- 3 happojen esterijohdannaiset. Tällainen johdannainen on edullisesti sellainen, joka voidaan lohkaista helposti.
Sopivia esterin muodostavia karboksyylisuojaryhmiä ovat sellaiset, jotka voidaan poistaa tavanomaisissa olosuhteissa.
2 Tällaisia ryhmiä ryhmää R varten ovat mm. bentsyyli, p-met- oksibentsyyli, bentsoyylimetyyli, p-nitrobentsyyli, 4-pyridyy- limetyyli, 2,2,2-trikloorietyyli, 2,2,2-tribromietyyli, t- butyyli, t-amyyli, allyyli, difenyylimetyyli, trifenyylimet- yyli, adamantyyli, 2-bentsyylioksifenyyli, 4-metyylitiofen- yyli, tetrahydrofur-2-yyli, tetrahydropyran-2-yyli, penta- kloorifenyyli, asetonyyli, p-tolueenisulfonyylietyyli, metok- simetyyli, silyyli, stannyyli tai fosforipitoinen ryhmä, ok-...... o o siimiradikaali, jolla on kaava -N=CHR , jossa R on aryy- li tai heterosyklinen yhdiste, tai in vivo hydrolysoituva es- teriradikaali, siten kuin edellä on määritelty.
Karboksyyliryhmä voidaan regeneroida mistä hyvänsä edellä esitetystä esteristä tavanomaisilla menetelmillä, jotka ovat . . .. 2 sopivia käytettyä R -ryhmää varten, esimerkiksi käyttäen 26 7 3 7 0 2 hapon tai emäksen avulla katalysoituvaa hydrolyysiä tai entsymaattisesti katalysoitua hydrolyysiä tai vedyllä hajottamista.
2
Helposti poistettavissa oleviin karboksyylisuojaryhmiin R sisältyvät myös farmaseuttisesti sopivat in vivo hydrolysoituvat esteriryhmät.
Kaavan (II) mukaiset 0-laktaami-antibiootit voidaan keksinnön mukaisesti valmistaa siten, että a) yhdiste, jolla on kaava (X)
NH H
17 *- 2 s_ R -NH^-r-^\ ) (X) I 18 CO R 2 jossa Y on määritelty kaavan (II) yhteydessä, jolloin mahdol- 17 liset reaktiokykyiset ryhmät voivat olla suojattuja, R on aipinosuojaryhmä tai sellainen asyyliryhmä, joka esiintyy an-tibakteerisesti aktiivisissa penisilliineissä tai kefalospo-riineissa, jolloin mahdolliset reaktiokykyiset ryhmät voivat olla suojattuja, ja R on helposti poistettavissa oleva karboksyylisuojaryhmä, käsitellään formyloimisaineella, edul- o lisesti lämpötila-alueella -50-30 C aproottisessa liuotti-messa, ja tämän jälkeen, mikäli tarpeellista, suoritetaan yksi tai useampi seuraavista vaiheista: 17 3 i) ryhmä R muutetaan ryhmäksi R -CO-, 18 ii) ryhmä R muutetaan vedyksi, iii) ryhmä Z muutetaan toiseksi ryhmäksi Z, iv) tuote muutetaan suolaksi tai in vivo hydrolysoituvak- * si esteriksi, tai : b) yhdiste, jolla on kaava (XVII) 27 78702
CHO
ΪΤΗ H
• Ϊ ^ Η Η I \ (XVII)
2 Y
CO R 2 jossa kaavassa aminoryhmä on mahdollisesti substituoitu sellaisella ryhmällä, joka mahdollistaa asyloimisen tapahtumisen, Y on määritelty kaavan (II) yhteydessä ja R on vety tai helposti poistettavissa oleva karboksyylisuojaryhmä, saatetaan reagoimaan sellaisen hapon, jolla on kaava (XVIII) 3 R CO H (XVIII) 2 3 N-asyloimisjohdannaisen kanssa, jossa kaavassa R on määritelty kaavan (II) yhteydessä, jolloin mahdolliset reaktioky- kyiset ryhmät voivat olla suojattuja, edullisesti lämpötila- o alueella -50 - 50 C, ja tämän jälkeen, mikäli tarpeellista, suoritetaan yksi tai useampi seuraavista vaiheista: i) mahdollinen karboksyylisuojaryhmä R poistetaan, ii) mahdolliset suojaryhmät poistetaan sivuketjuryhmästä, iii) sivuketjuryhmä derivoidaan edelleen, iv) ryhmä Z muutetaan toiseksi ryhmäksi Z, v) tuote muutetaan suolaksi tai in vivo hydrolysoituvaksi esteriksi.
Menetelmässä a) sopivia formyloivia aineita ovat mm. seosan-hydridit, kuten muurahaishappo-etikkahappo-anhydridi. Reaktio voidaan 28 78702 toteuttaa sopivasti lämpötila-alueella välillä -50 ja +30°C sopivassa liuottimessa, kuten esimerkiksi dikloorimetaanis-sa, kloroformissa, dimetyyliformamidissa, tetrahydrofuraa-nissa, heksametyylifosforiamidissa tai dimetyylisulfoksidis-sa, tertiäärisen emäksen läsnäollessa. Eräs edullinen ter-tiäärinen emäs, jota voidaan käyttää tässä reaktiossa, on pyridiinityyppinen emäs, kuten pyridiini, lutidiini tai pikoliini.
Menetelmä kaavan (X) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi on esitetty US-patentissa 3 962 214 ja UK-patentissa 1 348 984.
Kaavan (X) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa saattamalla vastaava yhdiste, jolla on kaava (XI) cp1
SR H
R17-Nte i-- ^ Y (XI) ---Nv / C02R18 17 18 19 jossa kaavassa Y, R ja R on määritelty edellä ja R on C^_g-alkyyli, aryyli tai bentsyyli, reagoimaan vedettömän am- : moniakin, ammoniumsuolan tai amiinin kanssa, jolla on kaava ·' (XII) R2-NH2 (XII) . 20 jossa kaavassa R on poistettavissa oleva suojaryhmä, kuten bentsyyli, metalli-ionin, kuten elohopean, hopean, talliumin, lyijyn tai kuparin läsnäollessa ja poistamalla tämän jälkeen, mikäli tarpeellista, mahdollinen suojaryhmä kaavan (X) mukaisen yhdisteen muodostamiseksi.
2
Sopivia esimerkkejä alkyyliryhmästä R ovat C^_g-alkyyli-ryhmät, kuten metyyli, etyyli, n- tai isopropyyli, n-, sek-, iso- tai tert-butyyliryhmät.
29 7 3 7 0 2 19
Eräs edullinen alkyyliryhmä R on metyyli.
19
Sopivia esimerkkejä aryyliryhmästä R ovat fenyyli, joka mahdollisesti on substituoitu CL ^.-alkyylillä, C. ,-alkoksil- 1-b i-b la, halogeenilla tai nitrolla. Edullisia aryyliryhmiä R ovat esimerkiksi fenyyli, o-, m- tai p-metyylifenyyli, o-, m-tai ρ-nitrofenyyli, erikoisesti p-metyylifenyyli.
Sopivia liuottimia, joissa reaktio voidaan toteuttaa, ovat esimerkiksi dietyylieetteri, tetrahydrofuraani, dimetyyliform-amidi, metanoli ja heksametyylifosforiamiini. Reaktiot toteutetaan tavallisesti inertisessä kaasukehässä ja kohtalaisen alhaisissa lämpötiloissa, so. lämpötila-alueella välillä -100 ja +30°C. Reaktion kulkua voidaan seurata tavanomaisilla menetelmillä, esimerkiksi käyttäen ohutkerroskroma-tografiaa, ja reaktio lopetetaan silloin, kun optimimäärä tuotetta esiintyy reaktioseoksessa.
Edullisin metalli-ioni, jota voidaan käyttää edellä mainitussa menetelmässä, on elohopeaioni, joka on edullisesti elohopea-asetaatin muodossa.
Vaihtoehtoisesti voidaan kaavan (X) mukaisia yhdisteitä valmistaa saattamalla vastaava yhdiste, jolla on kaava (XIII) R19
+S-Hal I H
r17-nh*j—(XIII)
0^-"Y
co2R18 17 1 O ]Q .
jossa kaavassa R , R ja R on määritelty edellä, Hai on kloori tai bromi, reagoimaan vedettömän ammoniakin, ammonium-suolan tai kaavan (XII) mukaisen amiinin kanssa, ja poistamalla 30 78702 tämän jälkeen, mikäli tarpeellista, mahdollinen suojaryhmä niin, että muodostuu kaavan (X) mukainen yhdiste. Kaavan (XIII) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa saattamalla kaavan (XI) mukainen yhdiste reagoimaan halogenoimisaineen, kuten kloorin tai bromin, kanssa inertisessä liuottimessa, esimerkiksi dikloorimetaanissa, alhaisessa lämpötilassa, esimerkiksi välillä -80 ja -30°C.
Eräs toinen menetelmä kaavan (X) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi käsittää yhdisteen, jolla on kaava (XIV) r19 S=0 R: ,-NB J- 1 (xiv)
° T
co2r18 17 18 19 jossa RA , R ja R on määritelty edellä, saattamisen rea-• goimaan vedettömän ammoniakin, axmnoniumsuolan tai kaavan : (XII) mukaisen amiinin kanssa, ja poistamalla tämän jälkeen, i mikäli tarpeellista, mahdollinen suojaryhmä kaavan (X) mukaisen yhdisteen muodostamiseksi.
Tällainen reaktio toteutetaan sopivasti kohtuullisella lämpötila-alueella 0-60°C, tavallisesti 10-40°C, ja edullisesti ympäristön lämpötilassa. Reaktio suoritetaan tavallisesti aproottisessa liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa tai dioksaanissa.
On huomattava, että menetelmät kaavan (X) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi tapahtuvat imiinivälituotteen välityksellä.
31 78702
Kaavan (XIV) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa hapettamalla kaavan (XI) mukainen yhdiste. Tällainen hapettaminen voidaan toteuttaa sopivasti tavanomaisella tavalla esimerkiksi käyttäen per-happoa, kuten peretikkahappoa tai m-kloori-perbentsoehappoa, sopivasti ympäristön tai hieman alennetussa lämpötilassa. Sopivia liuottimia, joita voidaan käyttää tällaisessa sulfoksidoimisessa, ovat esimerkiksi etyyliasetaatti, kloroformi, dikloorimetaani, dioksaani ja tetra-hydrofuraani.
20
Esimerkkejä sopivista ryhmän R suojaryhmistä ovat sellaiset alalla tunnetut, jotka ovat pois lohkaistavissa niin, että muodostuu -NH-ryhmä. Tällaisina voidaan mainita silyyli-ryhmät, kuten trimetyylisilyyli, tertiäärinen butyylidimetyy-lisilyyli ja tri-isopropyylisilyyli. Eräs edullinen suoja-ryhmä on (p-metoksimetoksi)fenyyli, joka voidaan poistaa kerium-ammoniumnitraatin avulla. Muita mielenkiintoisia suo-jaryhmiä ovat sellaiset, jotka ovat poistettavissa metano-lyysin avulla, kuten -CfCC^R^O (tämä ryhmä voidaan johtaa ryhmistä, jotka ovat tyyppiä -C(CC^R)=C(CH^) . Muita sopivia suojaryhmiä ovat esimerkiksi 4-nitrobentsyyli ja 2,4-dimetok-sibentsyyli, joka voidaan poistaa kaliumpersulfaatin avulla.
Hapetettaessa kaavan (XI) mukainen yhdiste, joka sisältää rikkiatomeja tässä kaavassa esitettyjen atomien lisäksi, voivat nämä lisä-rikkiatomitkin hapettua ja näin ollen voi olla välttämätöntä pelkistää täten muodostettu sulfoksidi tai sulfoni vastaavaksi sulfidiksi.
Kaavan (XIII) mukaisessa yhdisteessä on Y edullisesti -0-CH2“CZ=, jossa kaavassa Z on määritelty edellä.
Lähtöaine edellä mainittuja menetelmiä varten, so. kaavan (XI) mukainen yhdiste, voidaan valmistaa asyloimalla tai suojaamalla tavanomaisissa olosuhteissa yhdiste (XV) 32 73 702 SR19 i h Η2Ν*ί-] 1 _l } (XV) f C02R18 18 19 jossa kaavassa R , R ja Y on määritelty edellä.
Kaavan (XV) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa tunnetuilla tai niihin nähden analogisilla menetelmillä, joiden avulla on aikaisemmin valmistettu 7a-substituoituja tio-kefalo-sporiineita ja 6a-substituoituja tio-penisilliinejä.
Kaavan (XV) mukaisia yhdisteitä voidaan sopivasti valmistaa Schiffin emäksen johdannaisesta siten, kuin seuraavasta kaaviosta 1 ilmenee.
Kaavio 1 VO Y"0
y -» _ A X
</-y ™ ^ »> co2R18 co2r18
M
sr19 SR19 = -- Hz'—\ Ar-CH=N ^ ^ ! \ •π ; >- γγ ,ci J-"Y X,.·· CO,*18 2 (XV) 33 78702
Kaavan (XV) mukainen yhdiste valmistetaan saattamalla ami-noyhdiste (A) reagoimaan aldehydin kanssa, jolla on kaava Ar-CHO, jossa Ar on aryyliryhmä, Schiffin emäksen (B) muodostamiseksi. Tämä Schiffin emäs (B) saatetaan reagoimaan emäksen kanssa niin, että muodostuu anioni, jota käsitellään tiosulfonaatilla, jolla on kaava 19 19 r *s.so2ir* tai sulfenyylikloridilla, jolla on kaava 19 R-^SCl 19 jossa kaavassa R on määritelty edellä, jolloin saadaan kaavan (C) mukainen yhdiste. Käsiteltäessä tätä Schiffin emästä happohydrolyysin avulla saadaan kaavan (XV) mukainen g-aminoyhdiste.
Kaavan (XV) mukaisia yhdisteitä voidaan myös valmistaa saattamalla tio-oksiimiyhdiste, jolla on kaava (XVI)
H
κ19-5-ν-ΗΟυ
oJ—V
C02R18 18 19 jossa R ja R on määritelty edellä, reagoimaan tri(alkyyli)-fosfiinin tai tri(aryyli)fosfiinin kanssa, jota seuraa käsittely happokatalysaattorilla, kuten piioksidigeelillä. Tällainen menetelmä on kuvattu US-patentissa 4 119 778 ja aikakausjulkaisussa J.Amer.Chem.Soc. 1980, 102, 1690.
Kaavan (XV) ja (XVI) mukaisia yhdisteitä voidaan myös valmistaa US-patentin 3 962 214 mukaisella menetelmällä tai sen muunnoksilla.
34 78702
Menetelmässä b) sopivia ryhmiä, jotka mahdollistavat asyloin- nin suorittamisen ja jotka mahdollisesti esiintyvät kaavan (XVII) mukaisen lähtöaineen aminoryhmässä, ovat esimerkiksi N-silyyli, N-stannyyli ja N-fosfori, esimerkiksi trialkyyli- silyyliryhmät, kuten trimetyylisilyyli, trialkyylitinar^hmät, kuten tri-n-butyylitinä, ryhmät, joilla on kaava -P.R R , a jossa kaavassa R on alkyyli, halogeenialkyyli, aryyli, aralkyyli, alkoksi, haloalkyyli, haloalkoksi, aryylioksi, b a aralkyylioksi tai dialkyyliamino, R on sama kuin R tai a b on halogeeni, tai R ja R muodostavat yhdessä renkaan, 35 73702 jolloin tällaiset fosforiryhmät ovat sopivasti -P(OC2H,.)2 ja -P(C2H5)2 /°\ ^o/
Karboksyyliryhmä voidaan regeneroida mistä hyvänsä edellä mainitusta esteristä tavanomaisilla menetelmillä, jotka soveltu-2 vat käytetyn R -ryhmän käsittelyyn käyttäen esimerkiksi hapon ja emäksen avulla katalysoitua hydrolyysiä tai entsymaattisesti katalysoitua hydrolyysiä, tai vedyllä hajottamisen avulla.
2
Kaavassa (XVII) olevan ryhmän -C02R sopivia karboksyylisuoja-ryhmiä ovat karboksyylihapon suolat ja esterijohdannaiset, joita on edellä kuvattu kaavan (I) yhteydessä.
Edellä mainitussa menetelmässä käytetään hapon (XVIII) reak-tiokykyistä N-asyloimisjohdannaista. Reagoivan johdannaisen valintaan vaikuttaa luonnollisesti hapon substituenttien kemiallinen luonne.
Sopivia N-asyloimisjohdannaisia ovat esimerkiksi happohalidi, edullisesti happokloridi tai -bromidi. Asyloiminen happohali-din kanssa voidaan toteuttaa happoa sitovan aineen, esimerkiksi tertiäärisen amiinin (kuten trietyyliamiinin, pyridiinin tai dimetyylianiliinin), epäorgaanisen emäksen (kuten kalsiumkarbonaatin tai natriumbikarbonaatin) tai oksiraanin läsnäollessa, joka sitoo sen halogeenivedyn, joka on vapautunut asy-loimisreaktiossa. Tämä oksiraani on edullisesti (C. .)-1,2- l—o alkyleenioksidi, kuten etyleenioksidi tai propyleenioksidi. Asyloimisreaktio käyttäen happohalidia voidaan toteuttaa lämpötila-alueella välillä -50 ja +50°C, edullisesti välillä -20 ja +20°C, vettä sisältävässä tai sitä sisältämättömässä väliaineessa, kuten vedessä, asetonissa, tetrahydrofuraanissa, etyyliasetaatissa, dimetyyliasetamidissa, dimetyyliformami-dissa, asetonitriilissä, dikloorimetaanissa, 1,2-dikloorietaa- 36 78702 nissa tai näiden seoksissa. Vaihtoehtoisesti reaktio voidaan toteuttaa veteen sekoittumattoman liuottimen pysymättö-mässä emulsiossa, esimerkiksi alifaattisessa esterissä tai ketonissa, kuten metyyli-isobutyyliketonissa tai butyyliase-taatissa.
Happohalidi voidaan valmistaa saattamalla happo (XVIII) tai sen suola reagoimaan halogenoimis- (esim. klooraus tai bro-maus) aineen, kuten fosforipentakloridin, tionyylikloridin tai oksalyylikloridin kanssa.
Vaihtoehtoisesti voi hapon (XVIII) N-asyloimisjohdannainen olla symmetrinen tai anhydridiseos. Sopivia anhydridiseoksia ovat alkoksimuurahaishappoanhydridi tai anhydridit esimerkiksi karbonihappomonoestereiden, trimetyylietikkahapon, tio-etikkahapon, difenyylietikkahapon, bentsoehapon, fosfori-happojen (esimerkiksi fosforihapon tai fosforihapokkeen) tai alifaattisten tai aromaattisten sulfonihappojen (kuten p-tolueenisulfonihapon) kanssa. Symmetristä anhydridiä käytettäessä voidaan reaktio toteuttaa 2,6-lutidiinin ollessa läsnä katalyyttinä.
Hapon (XVIII) vaihtoehtoisia N-asyloimisjohdannaisia ovat happoatsidi tai aktivoidut esterit, kuten esterit 2-merkapto-pyridiinin, syanometanolin, p-nitrofenolin, 2,4-dinitrofeno-lin, tiofenolin, halogeenifenolien, mukaanlukien pentakloori-fenoli, monometoksifenolin, n-hydroksimeripihkahappoimidin tai 8-hydroksikinoliinin kanssa, tai amidit, kuten N-asyyli-sakkariinit, N-asyylitiatsolidin-2-tioni tai N-asyyliftaali-imidit, tai alkylideeni-iminoesteri, joka on valmistettu hapon (XVIII) reaktion avulla oksiimin kanssa.
Muita hapon (XVIII) reaktiokykyisiä N-asyloimisjohdannaisia ovat sellaiset reaktiokykyiset välituotteet, jotka on muodostettu reaktion avulla in situ kondensoimisaineen, kuten karbodi-imidin, esimerkiksi N,N'-dietyyli-, dipropyyli- tai di-isopropyylikarbodi-imidin. N,N'-disykloheksyylikarbodi- 37 78702 imidin tai N-etyyli-N^/T-idimetyyliaminoJpropyyli/karbodi-imidin kanssa, sopivan karbonyyliyhdisteen, esimerkiksi N,N' -karbonyylidi-imidatsolin tai N,N1-karbonyyliditriatsolin kanssa, isoksatsoliniumsuolan, esimerkiksi N-etyyli-5-fenyyli-isoksatsolinium-3-sulfonaatin tai N-t-butyyli-5-metyyli-isoksatsoliniumperkloraatin tai N-alkoksikarbonyyli- 2-alkoksi-l,2-dihydrokinoliinin, kuten N-etoksikarbonyyli-2-etoksi-1,2-dihydrokinoliinin kanssa. Muita kondensoimisai-neita ovat Lewis-hapot (esimerkiksi BBr_-CcH,) tai fosfori-
J O D
happokondensoimisaineet, kuten dietyylifosforyylisyanidi. Kondensoimisreaktio suoritetaan edullisesti orgaanisessa reaktioväliaineessa, esimerkiksi metyleenikloridissä, dimetyy-liformamidissa, asetonitriilissä, alkoholissa, bentseenissä, dioksaanissa tai tetrahydrofuraanissa.
Kaavan (XVIII) mukainen happo on sopivasti sellainen, jolla on kaava (XIX) Q x
R- CH - CO_H
! 1 NH
i
CO
I (XIX)
N
/ XR10 8 9 10 jossa kaavassa R , R ja R on määritelty edellä, jolloin saadaan kaavan (III) mukainen yhdiste.
Y voi olla sopivasti kaavassa (XVII) -S-C(CH.j)2~ ja kaavan (XVIII) mukainen happo sellainen happo, jolla on kaava (XX) 11 *
R - CH - C0oH
I 2
NH
CO (XX)
N
Rlf XR13 38 78702 jossa kaavassa R , R ja R on määritelty edellä, jolloin saadaan kaavan (IV) mukainen yhdiste.
Kaavan (III) mukaiset yhdisteet voidaan myös sopivasti valmistaa saattamalla yhdiste, jolla on kaava (XXI)
CHO
NH
l H
R8-CH . CO. NH -Y Λ | y (XXI) NH2 o'- H C02R2 2 8 jossa kaavassa R , R ja Y on määritelty edellä ja oraminoryhmä on mahdollisesti substituoitu sellaisella ryhmällä, joka mahdollistaa asyloimisen suorittamisen, ja mahdolliset reaktio-kykyiset ryhmät voivat olla suojattuja, sellaisen hapon N-asyloimisjohdannaisen kanssa, jolla on kaava (XXII)
CO H
: i N (XXII) £ XR10 9 10 jossa kaavassa R ja R on määritelty edellä ja jossa kaikki reaktiokykyiset ryhmät voivat olla suojattuja, ja suorittamalla tämän jälkeen mikäli tarpeellista yksi tai useampi seuraavista vaiheista: 2 1) mahdollisen karboksyylisuojaryhmän R poistaminen, 2) mahdollisten suojaryhmien poistaminen sivuketjuryhmästä, 3) yhden ryhmän Z muuttaminen toisenlaiseksi ryhmäksi Z, 4) tuotteen muuttaminen suolaksi tai sen in vivo hydrolysoituvaksi esteriksi.
Kaavan (IV) mukaisia yhdisteitä voidaan sopivasti valmistaa saattamalla yhdiste, jolla on kaava (XXIII) i· 39 78702
CHO
NH H
11 5 f.S
R—CH.CO.NH—^ «2 j—'»~jC <XXIII) H C02R2 jossa kaavassa α-aminoryhmä on mahdollisesti substituoitu sellaisella ryhmällä, joka mahdollistaa asyloimisen suorittamisen, ja kaikki reaktiokykyiset ryhmät voivat olla suojat-2 11 tuja, ja R ja R on määritelty edellä, reagoimaan sellaisen hapon N-asyloimisjohdannaisen kanssa, jolla on kaava (XXIV)
CO,H
N (XXIV)
^12 ^ 13 RXi: RXJ
12 13 jossa kaavassa R ja R on määritelty kaavan (IV) yhteydessä, ja mahdolliset reagoivat ryhmät voivat olla suojattuja, ja suorittamalla tämän jälkeen, mikäli tarpeellista, yksi tai useampi seuraavista vaiheista: 2 1) karbonyylisuojaryhmän R poistaminen, 2) suojaryhmien poistaminen sivuketjuryhmästä, 3) tuotteen muuttaminen suolaksi tai sen in vivo hydrolysoituvaksi esteriksi.
Kaavan (XXI) mukaisia yhdisteitä, jotka ovat mm. välituotteita valmistettaessa kaavan (III) mukaisia yhdisteitä, voidaan valmistaa saattamalla yhdiste, jolla on kaava (XVII), reagoimaan sellaisen hapon N-asyloimisjohdannaisen kanssa, jolla on kaava (XXV) o x
R .CH.C02H
NHR21 (XXV) 21 jossa kaavassa R on aminosuojaryhmä ja poistamalla tämän
. 21 jälkeen suojaava ryhmä R
40 73702 21
Sopivia aminosuojaryhmiä R ovat sellaiset, joita edellä on käsitelty ryhmän R yhteydessä, jolloin alkoksikarbonyyli-ryhmät, kuten esimerkiksi 4-nitrobentsyylioksikarbonyyli ja trikloorietyylioksikarbonyyli, ovat erittäin edullisia.
Kaavan (XXIII) mukaisia yhdisteitä, jotka ovat mm. välituotteita, ja kaavan (IV) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa saattamalla yhdiste, jolla on kaava (XXVI)
CHO
l
NH H
t 5___/ H H«-l---- / 2 y— / (XXVI) /—k-V 2
O I '*-CO R
1 2
H
2 jossa R on määritelty edellä, reagoimaan sellaisen hapon N-asyloimisjohdannaisen kanssa, jolla on kaava (XXVII) 11 R .CH.CO H 2
21 , X
NHR (XXVII) 11 jossa kaavassa R on määritelty edellä, ja kaikki siinä . 21 olevat reaktiokykylset ryhmät voidaan suojata, ja R on aminosuojaryhmä, ja poistamalla tämän jälkeen suojaava ryhmä 21 R .
Kaavan (XVII) mukainen välituoteyhdiste voidaan sopivasti ; valmistaa formyloimalla yhdiste, jolla on kaava (XXX) 41 78702
NH H
21 S 2 ϊ _
R -NHfc-p-S’ X
1 (XXX) I 18 CO R 2 18 21 jossa kaavassa R , R ja Y on määritelty edellä ja pois- 21 tamalla tämän jälkeen suojaryhmä R , ja mikäli välttämä- 18 2 töntä, muuttamalla ryhmä R ryhmäksi R .
Sopivat formyloimisaineet ja reaktio-olosuhteet ovat sellaiset kuin edellä on määritelty.
Kun Y kaavan (XXX) mukaisessa yhdisteessä on -S-C(CH ) -, 3 2 saadaan menetelmän avulla kaavan (XXVI) mukainen yhdiste.
42 78702
Keksinnön raukaisten yhdisteiden alaryhmä, joilla on kaava (XXXI)
CHO
NH h V1 R-CO-NH*4-f | l (xxxi) ^CH2S Het co2r2 jossa kaavassa ja "Het" on määritelty edellä kaavan (VII) 3 2 yhteydessä, ja R ja R on määritelty edellä, voidaan sopivasti valmistaa saattamalla yhdiste, jolla on kaava (XXXII)
CjHO
NH H yl R3-CO-NH »f-1 j I I (XXXII) CH2-r22 COjR2 13.2 jossa kaavassa Y , R ]a R on määritelty edellä, ja jossa 22 kaikki reaktiiviset ryhmät voidaan suojata ja R on poistuva ryhmä, reagoimaan sellaisen tiolin avulla, jolla on kaava
HetSH
22 sillä edellytyksellä, että kun R on asyylioksiryhmä, on 2 ryhmän-COjR oltava vapaan hapon tai suolan muodossa.
22
Sopivia poistuvia ryhmiä R ovat halogeeni, kuten jodi tai bromi, ja asyylioksiryhmät, kuten esimerkiksi asetyylioksi-ryhmä.
Tioli HetSH voidaan saattaa reagoimaan vapaana yhdisteenä tai suolana alkalimetallin, kuten natriumin tai kaliumin kanssa. Tämä reaktio toteutetaan edullisesti liuottimessa.
« 78702 Tällöin voidaan käyttää esimerkiksi vettä tai orgaanisia liuottimia, jotka ovat inertisiä lähtöaineyhdisteiden suhteen, kuten dimetyyliformamidia, dimetyyliasetamidia, dioksaania, asetonia, alkoholia, 1,2-dikloorietaania, asetonitriiliä, dimetyylisulfoksidia tai tetrahydrofuraania tai näiden seoksia. Reaktiolämpötila ja aika riippuvat mm. lähtöaineyhdis-teistä ja käytetystä liuottimesta, mutta tavallisesti reaktio toteutetaan valitussa lämpötilassa alueella 0-100°C sellaisen ajan kuluessa, joka on muutamista tunneista useisiin vuorokausiin. Reaktio toteutetaan edullisesti pH-arvossa välillä 3 ja 7.
Tioyhdisteiden hapettumisen estämiseksi on edullista suorittaa reaktio inertisessä kaasukehässä, esimerkiksi typpikehässä.
Keksinnön mukaisten yhdisteiden alaryhmä, jolla on kaava (XXXIII)
CHO
I ! NH H Y1
r3-cd-nh·^-'N
j_N. U N (XXXIII)
CO-R2 I
2 r5 jossa kaavassa , R2, R^, R^ ja Y^ on määritelty edellä, voidaan sopivasti valmistaa saattamalla kaavan (XXXII) mukainen yhdiste reagoimaan sopivasti substituoidun pyridiinin kanssa.
Reaktio pyridiinin kanssa toteutetaan sopivasti polaarisessa liuottimessa, kuten vedessä, ja katalyytin, kuten alkalime-tallitiosyanaatin tai alkalimetallihalidin, esimerkiksi nat-riumjodidin, läsnäollessa.
Kuten edellä esitetystä ilmenee, ovat kaavan (XVII) mukaiset yhdisteet ja niiden suojatut johdannaiset arvokkaita välituotteita ja muodostavat keksinnön erään toisen edullisen toteuttamismuodon.
44 73702
Erittäin edullisia kaavan (XXVII) mukaisia yhdisteitä ovat kaavan (XXXIV) mukaiset amfoteeriset yhdisteet ja niiden suolat
CHO
NH H
H2N-t- v (XXXIV) cr- co2h jossa kaavassa Y on määritelty edellä.
Y on sopivasti kaavoissa (XVII) ja (XXXIV) - S - c(ch3)2-, - S - ch2-, - S - CH2 - C(CH2Q')= tai - O - ch2 - C(CH2Q')=, joissa kaavoissa Q' on määritelty edellä.
Y on edullisesti kaavan (XVII) ja (XXXIV) mukaisissa yhdisteissä -S-C(CH3)2- ja -S-CH2-C(CH2Q)=, so. silloin, kun nämä yhdisteet ovat penisilliini- ja kefalosporiinirenkaan johdannaisia.
Y on erittäin edullisesti kaavoissa (XVII) ja (XXXIV) -s-c(ch3)2-.
Spesifisiä kaavan (XVII) mukaisia yhdisteitä ovat mm. seuraa-vat ja niiden suolat: 6 g-amino-6a-formamidopenisillaanihappo ja sen bentsyyliesteri, 7S-amino-7a-formamidokefalosporaanihappo ja sen t-butyyli-esteri, 6g-amino-6a-formamidopenaami-3-karboksyylihappo tai sen bentsyyliesteri, 7 6-amino-7a-formamido-3-(asetoksimetyyli)-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksyylihappo ja sen difenyylimetyyliesteri, 45 78702 73-amino-7a-formamido-3-/7l~nietyyli-lH-tetratsol-5-yyli)-tiometyyli/kef-3-em-4-karboksyylihappo ja sen difenyyli-metyyliesteri, 73-amino-7ot-formamido-3-/72-metyyli-l, 3,4-tiadiatsol-5-yyli)-tiometyyli/kef-3-em-4-karboksyylihappo ja sen difenyylimetyy-liesteri, 78-amino-7a-formamido-3-metyyli-l-oksadetiakef-3-em-4-karbok-syylihappo ja sen t-butyyliesteri, 7f3-amino-7a-formamido-3- (pyridiniurnmetyyli) kef-3-em-4-karbok-syylihappo ja sen difenyylimetyyliesteri, 78-amino-7a-formamido-3-/T6-hydroksi-4-metyyli-5-okso-4H- 1,2,4-triatsin-3-yyli)tiometyyli7kef-3-em-4-karboksyylihappo ja sen difenyylimetyyliesteri, 7B-amino-7a-formamido-3-/T2-metoksi-l,3,4-tiadiatsol-5-yyli)-tiometyyli/kef-3-em-4-karboksyylihappo ja sen difenyylimetyyliesteri, ja 7B-amino-7a-formamido-3-/7l-karboksimetyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli/kef-3-em-4-karboksyylihappo ja sen difenyyli-esteri.
Keksinnön mukaiset antibioottiset yhdisteet ovat aktiivisia hyvin erilaisia gram-negatiivisia ja gram-positiivisia organismeja vastaan, joihin sisältyvät esimerkiksi E.coli, kuten esimerkiksi ESS, JT4, JT425 ja NCTC 10418, Pseudomonas Spp- kuten Ps.aeruginosa, esimerkiksi 10662 ja Dalgleish, Serratia marcescens US32, Klebsiella aerogenes A, Enterobacter cloacae Nl, P.mirabilis, kuten esimerkiksi C977 ja 889, P.morganii, P.rettgeri, B.subtilis, Staph aureus, kuten esimerkiksi Oxford ja Russell, N.catarrhalis 1502, Strep faecalis I, β-Haemolytic Strep CN10. Seuraavissa esimerkeissä esitetyt MIC-arvot kuvaavat keksinnön mukaisten yhdisteiden aktiivisuutta.
Seuraavissa esimerkeissä on esitetty keksinnön mukaisten yhdisteiden valmistus ja käyttö.
46 78702
Esimerkki 1 6a-formamido-68-fenoksiasetamido-penisillaanihappo, natrium-suola____ a) Bentsyyll-6a-amlno-68-fenoksiasetamido-penisillanaatti Bentsyyli-6a-metyylitio-68-fenoksiasetamido-penisillanaattia (389 mg, 0,8 mmoolia) DMFrssä (10 ml) käsiteltiin lämpötilassa -40°C typpikehässä liuoksella, jossa oli merkuriasetaattia (260 mg; 0,8 mmoolia) DMF:ssä (1 ml), jota seurasi välittömästi käsittely liuoksella, jossa oli vedetöntä ammoniakkia (15 mg; 0,88 mmoolia) DMF:ssä (1 ml). Reaktioliuoksen annettiin lämmetä lämpötilaan 0°C 0,75 tunnin kuluessa ennen kaatamista eetteriin ja pestiin vedellä ja suolaliuoksella. Orgaaninen liuos kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin jäljelle jäi oleellisesti puhdas tuote vaaleankeltaisena vaahtona (320 mg, 88 %), vmakg (CH2C12) 3385, 3310, 1790, 1748, 1690, 1495 cm-1; 6 (CDC13) 1,37 (6H, s, gem-dimetyylit), 2,78 (2H, br.s, aminoprotönit), 4,51 (3H, s, PhOCHp- ja C-3 protoni), 5,19 (2H, s, esteri CH2), 5,48 (1H, s, C-5 protoni), 6,70-7,60 (10H, m, aromaattiset) ja 7,90 (1H, br.s, amidoprotoni).
b) Bentsyyli-6a-formamido-6g-fenoksiasetamido-penisillanaatti Liuosta, jossa oli bentsyyli-6a-amino-6g-fenoksiasetamido-penisillanaattia (320 mg; 0,7 mmoolia) vedettömässä dikloori-metaanissa (20 ml) lämpötilassa 0°C, käsiteltiin peräkkäin pyridiinillä (553 mg; 565 ^,ul; 7 mmoolia) ja muurahais-etikkahappoanhydridillä (310 mg; 3,5 mmoolia). Reaktioliuos-ta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 1,5 tuntia ennen pesemistä peräkkäin 0,5 N kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbo-naattiliuoksella ja suolaliuoksella. Se kuivattiin magnesium-sulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin jäljelle jäi tuote valkoisena vaahtona (300 mg). Tämä puhdistettiin piioksidigeelin avulla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (240 mg, 71 %), vmaks (CH2C12) 3395, 3310, 1792, 1748, 1700, 1690 (sh.), 1495 cm*1; δ(CDC13) 1,36 (6H, s, gem-dimetyylit), 4,51 (3H, s, PhOCH^- ja C-3-protoni), 47 78702 5,19 (2H, s, esteri CH2), 5,75 (1H, s, C-5-protoni), 6,70-7,50 (10H, m, aromaattiset), 8,19 (1H, s, formyyliprotoni), 8,23 (1H, s, 6g-amidoprotoni) ja 8,46 (1H, s, formamidopro-toni).
c) 6a-formamido-68-fenoksiasetamido-penisillaanihappo, natriumsuola_
Liuos, jossa oli bentsyyli-6a-formamido-68-fenoksiasetamido-penisillanaattia (210 mg? 0,44 mmoolia) THF:ssä (10 ml), lisättiin suspensioon, jossa oli 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (250 mg) etanolissa (10 ml) ja vedessä (1 ml), ja jota oli esihydrattu 0,5 h. Seosta hydrattiin 2,5 tuntia ja tämän jälkeen katalyytti suodatettiin ja pestiin laimealla natrium-bikarbonaattiliuoksella ja THF:llä. Orgaaniset liuottimet haihdutettiin ja vesipitoinen liuos pestiin etyyliasetaatilla (3 x 30 ml) ennen hapottamista pH-arvoon 1,5 laimealla kloo-rivetyhapolla. Tuote uutettiin etyyliasetaattiin (3 x 30 ml) ja yhdistetyt uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Saatu vaahto (130 mg) liuotettiin asetoniin ja sitä käsiteltiin teoreettisella määrällä 2N natriumetyyliheksanoaattia metyyli-isobutyy-liketonissa (170 ^ulj 0,34 mmoolia). Sitten lisättiin vedetöntä eetteriä ja saostunut natriumsuola suodatettiin ja pestiin eetterillä. Tuote kuivattiin tyhjössä fosforipentoksidin avulla, jolloin saatiin tuotetta 99 mg (55 %). Hplc-analyy-sissä esiintyi huippu vmaks (KBr) 1765, 1675, 1600, 1655 can Vapaa happo: ä/iCDjJjCO/ 1,51 (6H, s, gem-dimetyylit), 4,50 (1H, s, C-3-protoni), 4,68 (2H, s, PhOCH2-), 5,72 (1H, s, C-5-protoni), 6,48 (br.s, -C02H ja H20), 6,80-7,60 (5H, m,aromaattiset) ja 8,25, 8,52 ja 8,60 (3H, 3s, amido-ja formyyli-protonit).
MIC (^,ug/ml) P.mirabilis 889 > 100.
Esimerkki 2 6a-formamido-6 β- (2-karboksi-2-fenyyliasetamido)penisillaani- happo, dinatriumsuola_ a) Bentsyyli-6a-metyylitio-66-J/2- (p-nitrobentsyylioksikarbo- nyyli)-2-fenyyliasetamido/penisillanaatti_
Liuos, jossa oli 2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-2-fenyyli- 48 78702 asetyylikloridia (2 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml), lisättiin tipottain samalla sekoittaen jään avulla jäähdyttäen liuokseen, jossa oli bentsyyli-6a-metyylitio-60-aminopeni-sillanaattia (0,70 g; 2 mmoolia) ja pyridiiniä (0,24 g; 3 mmoolia) dikloorimetaanissa (30 ml). Reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 1 tunti ja tämän jälkeen 2 tuntia huoneen lämpötilassa. Se pestiin sitten peräkkäin 0,5 N kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaattiliuoksella ja suolaliuoksella ennen kuivaamista magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Saatu vaaleankeltainen vaahto (1,06 g) puhdistettiin piioksidigeelin avulla, jolloin saatiin puhdas tuote valkoisena vaahtona (0,83 g, 64 %), v .
IUaKS
(CH2C12) 3400, 3325, 1788, 1745, 1690, 1530, 1355, 1320 cm ; 6(CDC13) 1,30 (6H, br.s, gem-dimetyylit), 2,11 ja 2,20 (3H, 2s, -SCH^ diastereoisomeerit), 4,42 (1H, s, C-3-protoni), 4,85 (1H, s, α-protoni), 5,19 (2H, s, bentsyyliesteri CH2), 5,29 (2H, s, PNB-esteri CH2), 5,56 (1H, s, C-5-protoni), 7,10-7,65 (12H, m, aromaattiset) ja 7,90-8,30 (3H, m, aromaattiset ja amidoprotoni).
b) Bentsyyli-6a-amino-68-/2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)- 2-fenyyliasetamido/penisillanaatti Liuosta, jossa oli bentsyyli-6a-metyylitio-68-,/2-(p-nitro-bentsyylioksikarbonyyli)-2-fenyyliasetamido7penisillanaattia (390 mg; 0,6 mmoolia) DMF:ssä (10 ml) lämpötilassa -40°C typ-pikehässä, käsiteltiin elohopea-asetaatilla (190 mg; 0,6 mmoolia) kuivassa DMFsssä (1 ml), ja tämän jälkeen välittömästi liuoksella, jossa oli vedetöntä ammoniakkia (11 mg; 0,66 m-moolia) DMF:ssä (0,5 ml). Seosta sekoitettiin lämpötilassa välillä -40°C ja -10°C 1 tunti ennen kaatamista eetteriin ja pestiin vedellä ja suolaliuoksella. Se kuivattiin magnesium-sulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin erittäin puhdas tuote valkoisena vaahtona (310 mg, 84 %), vmaks (CH2C12) 3395' 3330' 1787' 1742' 1530, 1357 cm"1; 6(CDC13) 1,31 (6H, br.s, gem-dimetyylit), 2,63 (2H, s, amino-protonit), 4,42 (1H, s, C-3-protoni), 4,73 (1H, s, α-protoni), 5,20 (2H, s, bentsyyliesteri CH2), 5,31 (2H, s, PNB-esteri « 73702 CH2)/ 5,41 (1H, s, C-5-protoni), 7,20-7,60 (12H, m, aromaattiset) , 7,86 (1H, s, amidoprotoni) ja 8,20 (2H, osa AA'BB', PNB-aromaattiset).
c) Bentsyyli-6a-formamido-66-/2-(p-nitrobentsyylioksi-karbonyyli)-2-fenyyliasetamido7penisillanaatti
Liuosta, jossa oli bentsyyli-6a-amino-6B-/2-(p-nitrobentsyyli-oksikarbonyyli)-2-fenyyliasetamido/penisillanaattia (310 mg; 0,5 mmoolia) kuivassa dikloorimetaanissa (20 ml) lämpötilassa 0°C, käsiteltiin peräkkäin pyridiinillä (400 mg; 5 mmoolia) ja muurahaishappoanhydridillä (220 mg; 2,5 mmoolia). Reaktioliuosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 1 tunti ennen pesemistä 0,5 N kloorivetyhapolla ja laimealla natriumbikarbo-naattiliuoksella ja suolaliuoksella. Se kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin jäljelle jäi raakatuote (250 mg). Tämä puhdistettiin piioksidi-geelin avulla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste valkoisena vaahtona (220 mg, 69 %) , (CH2C12) 3400, 3315, 1795, 1850, 1700, 1690 (sh), 1530, 1355 cm"1; δ(CDC13) 1,26 (6H, br.s, gem-dimetyylit), 4,42 ja 4,46 (1H, 2s, C-3-protoni-diastereoisomeerit), 4,85 (1H, br.s, α-protoni), 5,18 (2H, s, bentsyyliesteri Cl·^), 5,27 (2H, s, PNB-esteri CH2), 5,70 (1H, s, C-5-protoni), 7,10-7,60 (12H, m, aromaattiset) ja 7,90-8,70 (5H, m, aromaattiset amido- ja formyyliprotonit); m/e 557, 486, 377, 270, 249, 212, 136, 114, 91.
d) 6a-formamido-68-(2-karboksi-2-fenyyliasetamido)penisil- laanihappo, di-natriumsuola_
Liuos, jossa oli bentsyyli-6a-formamido-66-/2-(p-nitrobentsyy-lioksikarbonyyli)-2-fenyyliasetamido7penisillanaattia (200 mg; 0,31 mmoolia) THF;ssä (10 ml), lisättiin suspensioon, jossa oli 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (200 mg) etanolissa (10 ml) ja vedessä (1 ml) ja jota oli esihydrattu 1 tunti. Seosta hydrattiin sitten 3 tuntia ja katalyytti suodatettiin sitten ja pestiin laimealla natriumbikarbonaattiliuoksella. Suodos pestiin etyyliasetaatilla (3 x 30 ml) ennen hapotta- so 78702 mistä pH-arvoon 1,5 1 N kloorivetyhapolla. Tuote uutettiin etyyliasetaattiin (3 x 30 ml) ja yhdistyneet uutteet pestiin suolavedellä, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin jäljelle jäi vapaa happo värittömänä öljynä (110 mg). Tämä liuotettiin asetoniin ja sitä käsiteltiin 2N natriumetyyliheksanoaatilla metyyli-isobutyyliketonissa (260 ^ul; 0,52 mmoolia) ja tämän jälkeen vedettömällä eetterillä. Saatu sakka suodatettiin, pestiin eetterillä ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin tuote valkoisena kiinteänä aineena (103 mgj 72 %). Hplc-analyysissä oli huippu vmajcs (KBr) 1765, 1665, 1600 cm Vapaa happo: S/fCD^^CO/ 1,10-1,70 (6H, 4s, gem-dimetyyli-diastereoisomee-rit), 4,41 ja 4,48 (1H, 2s, C-3-protoni-diastereoisomeerit), 4,89 (1H, s, α-protoni), 5,66 (1H, s, C-5-protoni), 7,20-7,80 (m, aromaattiset aineet, -C02H ja vesi) ja 8,10-9,10 (3H, m, amido- ja formyyli-diastereoisomeerit).
MIC (^ug/ml) P.mirabilis 889 50.
Esimerkki 3 6a“formamido-68-/2-karboksi-2-(3-tienyyli)asetamido7penisil- laanihappo, di-natriumsuola_ a) Bentsyyli-6a-metyylitio-68-/2-(p-nitrobentsyylioksi-karbonyyli)-2-(3-tienyyli)asetamido/penisillanaatti
Liuosta, jossa oli bentsyyli-6B-amino-6ot-(metyylitio)penisil-lanaattia (1,76 g) ja N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidiä (1,13 g) tetrahydrofuraanissa (10 ml), sekoitettiin ja jäähdytettiin lämpötilaan 0-5°C ja käsiteltiin tipottain liuoksella, jossa oli 2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-2-(tien-3-yyli)etikkahappoa tetrahydrofuraanissa (lO ml). Reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 0,5 h ja sitä pidettiin sitten 18 h lämpötilassa 4°C. Se laimennettiin etyyliasetaatilla ja saostettu N,N'-disykloheksyyliurea poistettiin suodattamalla. Suodos haihdutettiin kuiviin tyhjössä ja saatu valkoinen vaahto käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin avulla 60 (230 mesh ASTM), jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (2,67 g, 81 %). v .g (CH2C12) 3390, 3320, 1785, 1748, 1695, 1525, 1350, 1318 cm-*; <$ (CDC13) 1,31 (6H, s, gem-dimetyylit) , 51 78702 2,15 ja 2,21 (3H, 2s, -SCH^ diastereoisomeerit) 4,44 (1H, s, C-3-protoni), 4,96 ja 4,99 (1H, 2s, a-protoni-diastereo-isomeerit), 5,20 (2H, s, bentsyyliesteri CH2), 5,32 (2H, s, PNB-esteri CH2), 5,58 (1H, s, C-5-protoni), 7,10-7,60 (10H, m, aromaattiset), 7,85 ja 7,91 (1H, 2s, amido-diastereoisomee-rit) ja 8,20 (2H, osa AA1BB1, PNB-aromaattiset); m/e 655, 607, 550, 456, 303, 276, 250, 136, 114, 91.
b) Bentsyyli-6a-amino-60-/2- (p-nitrobentsyylioksikarbonyyli- 2-(3-tienyyli)asetamido7penlsillanaatti_
Liuosta, jossa oli bentsyyli-6a-metyylitio-6 0-/2-(p-nitro-bentsyylioksikarbonyyli)-2-(3-tienyyli)asetamido7penisilla-naattia (1,33 g; 2 mmoolia) DMF:ssä (30 ml) lämpötilassa -40°C typpikehässä, käsiteltiin merkuriasetaatilla (0,64 g; 2 nunoo-lia) kuivassa DMF:ssä (3 ml) ja tämän jälkeen välittömästi liuoksella, jossa oli vedetöntä ammoniakkia (38 mg; 2,2 mmoolia) DMF:ssä (1 ml). Seosta sekoitettiin lämpötilassa välillä -40 ja -10°C 1 tunti ennen kaatamista eetteriin ja se pestiin vedellä ja suolaliuoksella. Seos kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin käytännöllisesti katsoen puhdasta tuotetta vaahtona (1,18 g, 94 %) vmaks (CH2C12) 3380, 3310, 1785, 1745, 1690, 1525, 1350 cm”^* 6(CDCl^) 1,33 (6H, s, gem-dimetyylit), 2,79 (2H, br.s, aminoprotonit), 4,46 (1H, s, C-3-protoni), 4,93 (1H, s, α-protoni), 5,20 (2H, s, bentsyyliesteri CH2), 5,31 (2H, s, PNB-esteri CH2), 5,43 (1H, s, C-5-protoni), 7,10-7,70 (10H, m, aromaattiset), 7,87 (1H, s, amidoprotoni) ja 8,21 (2H, osa AA1BB', PNB-aromaattiset).
c) Bentsyyli-6a-formamido-60-/2-(p-nitrobentsyylioksi-karbonyyli)-2-(3-tienyyli)asetamido/penisillanaatti
Liuosta, jossa oli 6a-amino-60-/2-(p-nitrobentsyylioksi-karbonyyli) -2- (3-tienyyli) asetamido7penisillanaattia (1,15 g; 1,8 mmoolia) kuivassa dikloorimetaanissa (30 ml) lämpötilassa 0°C, käsiteltiin peräkkäin pyridiinillä (1,42 g; 18 mmoolia) ja muurahaishappo-etikkahappoanhydridillä (0,79 g> 9 mmoolia).
52 78702
Reaktioliuosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 2 tuntia ennen pesemistä 0,5N kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaatti liuoksella ja suolavedellä. Se kuivattiin magnesium-sulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin jäljelle jäi raakatuote (0,97 g). Tämä puhdistettiin piioksidi-geelin avulla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste valkoisena vaahtona (0,16 g? 52 %) vmajcs (CH2C12) 3390, 3310, 1790, 1745, 1695, 1525, 1350 cm"1? 6(CDC13) 1,28 (6H, m, gem- dimetyyli-diastereoisomeerit), 4,00 ja 4,02 (1H, 2s, C-3-proto-ni-diastereoisomeerit), 4,83 ja 4,86 (1H, 2s, a-protoni-diastereoisomeerit), 5,14 (2H, s, bentsyyliesteri CH2>, 5,23 (2H, s, PNB-esteri CH2), 5,60 (1H, s, C-5-protonit), 700-750 (10H, m, aromaattiset), 7,79 ja 7,82 (1H, 2s, vaihdettavissa D20:n kanssa, 68-amido-diastereoisomeerit) ja 7,97-8,25 (4H, m, 1H vaihdettavissa D20:n kanssa, PNB-aromaattiset, form-amido- ja formyyli-protoni)? m/e 499, 471, 469, 456, 441, 303, 276, 250, 240, 194, 153, 136, 114, 91.
d) 6a-formamido-68-/2-karboksi-2-(3-tienyyli)asetamido7“ penlsillaanlhappo, di-natriumsuola_
Liuos, jossa oli bentsyyli-6a-formamido-6B_/2-(p-nitrobentsyyli-oksikarbonyyli)-2-(3-tienyyli)asetamido7penisillanaattia (0,55 g? 0,84 mmoolia) THFtssä (15 ml), lisättiin suspensioon, jossa oli 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (0,6 g) etanolissa (10 ml) ja vedessä (1 ml) ja jota oli esihydrattu 1 tunti ennen lisäkatalyytin (0,6 g) lisäämistä. Hydrausta jatkettiin 2 tuntia ja katalyytti suodatettiin tämän jälkeen ja pestiin laimealla natriumbikarbonaattiliuoksella. Suodos pestiin eetterillä, sen pH säädettiin arvoon 4 ja pestiin etyyliasetaatilla. Tämän jälkeen pH alennettiin arvoon 1 ja tuote uutettiin etyyliasetaattiin. Yhdistetyt uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin, jolloin jäljelle jäi vapaa happo valkoisena vaahtona (0,25 g). Tämä liuotettiin asetoniin ja sitä käsiteltiin 2N natriumetyyliheksanoaatilla metyyli-isobutyyli-ketonissa (0,59 ml? 1,18 mmoolia) ja tämän jälkeen eetterillä. Sakka suodatettiin, pestiin eetterillä ja kuivattiin tyhjössä, 53 78702 jolloin saatiin otsikossa mainittua penisilliiniä 0,16 g (40 %). Hplc-analyysissä oli huippu ^maks (KBr) 1765, 1665, 1600, 1550 cm δ(D20) 1,20-1,60 (6H, m, gem-dimetyyli-diastereoisomeerit), 4,25 (1H, m, C-3-diastereoisomeerit), 5,59 (1H, s, C-5-protoni), 7,05-7,50 (3H, m, aromaattiset) ja 8,09 ja 8,12 (1H, 2s, formyyli-dlastereoisomeerit).
MIC (yug/ml) P.mirabilis 889 25.
Esimerkki 4 6a-formamido-68-/D-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino7~2-fenyyliasetamido/penisillaanihappo, natriumsuola_ a) Bentsyyli-6a-amino-6$-/D-2-(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-1-yyli)karbonyyliamino/-2-fenyyliasetamido7penisillanaatti
Liuosta, jossa oli bentsyyli-6a-metyylitio-6$-/D-2-/(4-etyyli- 2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7_2-fenyyliasetami-do7penisillanaattia (978 mg; 1,5 mmoolia) kuivassa DMF:ssä (15 ml) lämpötilassa -40°C typpikehässä, käsiteltiin elohopea-asetaatilla (480 mg; 1,5 mmoolia) DMF:ssä (2 ml), ja tämän jälkeen välittömästi liuoksella, jossa oli vedetöntä ammoniakkia (28 mg; 1,65 mmoolia) DMF:ssä (1 ml). Seosta sekoitettiin lämpötilassa välillä -40 ja -10°C 1 tunti ennen kaatamista etyyliasetaattiin ja pestiin vedellä ja suolaliuoksella. Se kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin oleellisesti puhdas tuote vaaleankeltaisena lasimaisena aineena (710 mg, 76 %) , vmaks (CI^C^) 3380, 3280, 1780, 1740, 1715, 1690 cm-1; δ(CDC13) 0,80-1,50 (9H, m, gem-dimetyylit ja -CH2CH3) 2,82 (2H, br.s, amino-protonit), 3,20-3,80 (4h, m, piperatsiini CH2 ja CH^CHj), 3,85-4,25 (2H, m, piperatsiini CH2), 4,34 (1H, s, C-3-protoni), 5,18 (2H, s, esteri CH2), 5,42 (1H, s, C-5-protoni), 5,58 (1H, d, J=7Hz, α-protoni), 7,20-7,60 (11H, m, aromaattiset ja NH) ja 10,05 (1H, d, J=7Hz, amido-protoni).
54 7 8 7 0 2 b) Bentsyyli-6a-formainido-6 |3-/D-2-/74-etyyli-2,3-diokso- piperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7-2-fenyyliasetamido/-penis il lanaa ttl__
Liuosta, jossa oli bentsyyli-6a-amino-6$-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7-2-fenyyliasetamido7-penisillanaattia (0,50 gj 0,8 mmoolia) vedettömässä dikloori-metaanissa (30 ml) lämpötilassa 0°C, käsiteltiin peräkkäin pyridiinillä (0,63 g; 8 mmoolia) ja muurahais-etikkahappo-anhydridillä (0,35 g; 4 mmoolia). Reaktioliuoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan 3 tunnin kuluessa ennen kuin se pestiin 0,5 N kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaat-tiliuoksella ja suolaliuoksella. Se kuivattiin magnesium-sulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettin, jolloin jäljelle jäi raakatuote (0,45 g). Tämä puhdistettiin piioksidigeelin avulla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste 0,37 g (71 %), vmaks (KBr) 3400, 3300, 1785, 1740, 1710, 1680, 1500 cm”^f 0,07-1,20 (9K, m, gem-dimetyylit ja -CH2CH3), 3,20-3,65 (4H, m, piperatsiini CH2 ja CH2CH3), 3,75-4,00 (2H, m, piperatsiini CH2), 4,40 (1H, s, C-3-protoni), 5,14 (2H, s, esteri CH2), 5,45 (1H, s, C-5-protoni), 5,63 (1H, d, J=7Hz, α-protoni), 7,20-7,60 (10H, m, aromaattiset), 8,03 (1H, s, formyyli-protoni), 9,09 (1H, s, vaihdettavissa DjOtn kanssa, 6g-amido-protoni) ja 9,96 (2H, m, vaihdettavissa D20:n kanssa, 6$-amido- ja formamido-protonit).
c) 6or-formamido-6 8-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l- yyli)karbonyyliamino/-2-fenyyliasetamido/penisillaani-happo, natriumsuola_
Liuos, jossa oli bentsyyli-6a-formamido-66-/D-2-(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/-2-fenyyliasetamido/-penisillanaattia (200 mg; 0,31 mmoolia) THFrssä (15 ml), lisättiin suspensioon, jossa oli 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (200 mg) etanolissa (10 ml) ja vedessä (1 ml) ja jota oli esihydrattu 15 min. Seosta hydrattiin sitten 2,5 tuntia ja katalyytti suodatettiin sitten ja pestiin laimealla nat-riumbikarbonaattiliuoksella. Suodos pestiin sitten etyyliasetaatilla, kyllästettiin natriumkloridilla ja hapotettiin 55 73702 pH-arvoon 1,5 ennen tuotteen uuttamista THF/etyyliasetaat-tiin (50:50). Yhdistetyt uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin, jolloin jäljelle jäi vapaata happoa (0,12 g) 6/TCD3)2C07 0,90-1,70 (9H, m, gem-dimetyylit ja -CH2CH3), 3,20-4,20 (6H, m, piperat-siini CH2~ryhmät ja -CH2CH3), 4,40 (1H, s, C-3-protoni), 5,70 (1H, s, C-5-protoni), 5,82 (1H, d, J=7Hz, a-protoni), 7,30-7,90 (5H, m, aromaattiset), 8,30 (1H, s, formyyli-protoni), 8,57 (1H, s, 68-amido-protoni) , 9,06 (1H, s, formamido-protoni). Tämä liuotettiin THF:ään ja natriumsuola muodostettiin lisäämällä 2N natriumetyyliheksanoaattia metyyli-isobutyyliketonissa ja tämän jälkeen eetteriä. Tuote suodatettiin, pestiin eetterillä ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikossa mainittu penisilliini (130 mg; 72 %). Hplc-analyysissä oli yksi huippu (KBr) 1765, 1710, 1675, 1600, 1515 can ^ ö (DjO) 0,90-1,50 (9H, m, gem-dimetyylit ja -CH2CH3), 3,10-3,95 (6H, m, piperatsiini CH2-ryhmät ja -CH2CH3), 4,02 (1H, s, C-3-protoni), 5,37 (1H, s, C-5-protoni), 5,50 (1H, s, α-protoni), 7,40 (5H, s, aromaattiset) ja 8,07 (1H, s, formyyli-protoni).
MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 0,2.
Esimerkki 5 6a-formamido-68-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino7-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/penisillaani- happo, natriumsuola_ a) Bentsyyli-6 ormetyylitio-6 8"/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli) karbonyyliamino/-2-(4-bentsyylioksi- karbonyylioksifenyyli)asetamido7penisillanaatti_
Liuos, jossa oli D-2-J/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino7-2-(4-bentsyylioksikarbonyylioksifenyyli)-asetyylikloridia (12,2 mmoolia) vedettömässä dikloorimetaanis-sa (60 ml), lisättiin tipottain jään avulla jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli bentsyyli-6a*-metyylitio-6 g-amino-penisillanaattia (13,42 mmoolia? 1,1 ekvivalenttia) ja pyridiiniä (1,45 g? 18,3 mmoolia) dikloorimetaanissa (100 ml). Reaktioliuosta sekoitettiin lämpötilassa 0°C 0,5 h ja tämän jälkeen 1 h huoneen lämpö- 56 73702 tilassa. Se haihdutettiin sitten kuiviin, liuotettiin etyyliasetaattiin ja pestiin laimealla kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaatilla ja suolaliuoksella. Se kuivattiin sitten, haihdutettiin ja käsiteltiin kromatogra-fisesti piioksidigeelissä, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste 19 %:n saannolla yhdessä 15 %:n saannolla L-isomeeriä.
D-isomeeri vma]cg (CH2C12) 3250, 1780, 1765, 1750, 1718, 1715, 1680 (sh), 1500, 1220 cm"1·, S/TCD^CO? 1*07 ja 1,21 (6H, 2s, gem-dimetyylit), 1,16 (3H, t, J7Hz, -CH2CH3), 2,28 (3H, s, -SCH3), 3,47 (2H, q, J7Hz, -CH2CH3), 3,68 (2H, m, piperatsii-ni -CH2), 4,01 (2H, m, piperatsiini -CH2), 4,37 (1H, s, C-3-protoni), 5,19 (2H, s, esteri -CH2), 5,25 (2H, s, karbonaatti -CH2), 5,42 (1H, s, C-5-protoni), 5,71 (1H, d, J7Hz, muuttuu juovaksi D20-vaihdossa, α-protoni), 7,10-7,70 (14H, m, aromaattiset), 8,77 (1H, s, vaihdettavissa D20:n kanssa, 6β-amido-protoni), ja 10,01 (1H, d, J7Hz, vaihdettavissa D20:n kanssa, α-amido-protoni).
L-isomeeri vmakg (CH2C12) 3280, 1750, 1765, 1755, 1720, 1690, 1500, 1215 cm"1? 2C0/ 1,16 (3H, t, J7Hz, -CH2CH3), 1,35 ja 1,51 (6H, 2s, gem-dimetyylit), 1,95 (3H, s, -SCH3), 3,47 (2H, q, J7Hz, -CH2CH3), 3,68 (2H, m, piperatsiini -¾) , 4,01 (2H, m, piperatsiini -CH2), 4,45 (1H, s, C-3-protoni), 5,22 (2H, s, esteri -CH2), 5,27 (2H, s, karbonaatti -CH2), 5,46 (1H, s, C-5-protoni), 5,72 (1H, d, J7Hz, muuttuu juovaksi D20-vaihdossa, α-protoni), 7,10-7,70 (14H, m, aromaattiset), 8,82 (1H, s, vaihdettavissa D20:n kanssa, 6g-amido-protoni) ja 10,02 (1H, d, J7Hz, vaihdettavissa D20:n kanssa, amido-protoni).
b) Bentsyyli-6a-amino-68-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-1-yyli)karbonyyliamino/-2-(4-bentsyylioksikarbonyylioksi- fenyyli)asetamidQ7penisillanaatti_
Liuosta, jossa oli bentsyyli-6a-n^tyylitio~6fy-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7~2-(4-bentsyylioksi- 57 78702 karbonyylioksifenyyli)asetamido/penisillanaattia (1,75 g; 2.18 mmoolia) kuivassa DMF:ssä (30 ml) lämpötilassa -50°C typpikehässä, käsiteltiin elohopea-asetaatilla (0,70 g; 2.18 mmoolia) DMF:ssä (4 ml) ja tämän jälkeen välittömästi vedettömän ammoniakin liuoksella (41 mg; 2,4 mmoolia) DMF:ssä (2 ml). Seosta sekoitettiin lämpötilassa välillä -50 ja -30°C 1 tunti ennen kaatamista etyyliasetaattiin ja pestiin vedellä ja suolaliuoksella. Se kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin oleellisesti puhdasta tuotetta (1,56 g, 93 %) , vmajcs (CH2C12) 3280, 1780 (sh), 1765, 1750, 1720, 1695, 1680 (sh), 1500, 1220 cm_1; 6/TcD3)2C07 0,80-1,50 (9H, m, gem-dimetyylit ja -CH2CH3), 3,02 (2H, br.s, -NHj), 3,25-3,80 (4H, m, piperatsiini -CH2 ja -CH2CH3), 3,80-4,20 (2H, m, piperatsiini -CH2), 4,39 (1H, s, C-3-protoni), 5,19 (2H, s, esteri -CH2), 5,28 (2H, s, karbonaatti -CH2), 5,43 (1H, s, C-5-protoni), 5,75 (1H, d, J7Hz, α-protoni), 7,10-7,90 (14H, m, aromaattiset), 8,87 (1H, s, 68-amido-protoni) ja 10,15 (1H, d, J7Hz, a-amido-protoni).
c) Bentsyyli-6a-formamido-68-/D-2-(4-etyyli-2,3-dioksopiper-atsin-l-yyli)karbonyyliamino7~2-(4-bentsyylioksikarbonyy- lioksifenyyll)asetamido7penisillanaatti_
Liuosta, jossa oli bentsyyli-6a-amino-68-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7“2-(4-bentsyylioksi-karbonyylioksifenyyli)asetamido7penisillanaattia (1,56 g; 2,0 mmoolia) vedettömässä dikloorimetaanissa (60 ml) lämpötilassa 0°C, käsiteltiin pyridiinillä (1,55 g; 20 mmoolia) ja muura-haishappoetikkahappoanhydridillä (0,88 g; 10 mmoolia). Reak-tioliuosta sekoitettiin lämpötilassa 0°C 0,25 h ja tämän jälkeen 1 tunti huoneen lämpötilassa. Se pestiin sitten 0,5 N kloorivetyhapolla,laimealla natriumbikarbonaattiliuoksella ja suolaliuoksella ennen kuivaamista magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Raakatuote (1,39 g) puhdistettiin kromatografisesti, jolloin saatiin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,95 g, 59 %) , vmakg (CH2C12) 3275, 1790, 1770, 1750, 1725, 1715, 1695, 1682 (sh), 1500, 1210 cm 6/(CH3)2C0/ 0,97 ja 1,18 (6H, 2s, gem-dimetyylit), 58 78702 1,17 (3H, t, J7Hz, -CH2CH3), 3,48 (2H, q, J7Hz, -CH2CH3), 3,65 (2H, m, piperatsiini -CH2), 4,00 (2H, m, piperatsiinl -CH2) , 4,39 (1H, d, C-3-protoni), 5,18 (2H, s, esteri -¾) , 5,26 (2H, s, karbonaatti -CH2), 5,58 (1H, s, C-5-protoni), 5,73 (1H, d, J7Hz, muuttuu juovaksi D20-vaihdossa, α-protoni), 7,10-7,70 (14H, m, aromaattiset), 8,16 (1H, s, -NHCHO), 8,23 (1H, s, vaihdettavissa D20:n kanssa, -NHCHO), 8,88 (1H, s, vaihdettavissa D20:n kanssa, 68-amido-protoni) ja 10,05 (1H, s, J7Hz, vaihdettavissa D20:n kanssa, α-amido-protoni).
d) 6a-formamido-63-/5-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/- penisillaanihappo, natriumsuola_
Liuos, jossa oli bentsyyli-6a-formamido-68-/5-2-/(4-etyyli- 2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/-2-(4-bentsyyli-oksikarbonyylioksifenyyli)asetamido/penisillanaattia (0,50 gj 0,625 mmoolia) THFsssä (15 ml), lisättiin suspensioon, jossa oli 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (0,50 g) etanolissa (15 ml) ja vedessä (1 ml) ja jota oli esihydrattu 1/2 tuntia. Seosta hydrattiin sitten 45 minuuttia ja katalyytti suodatettiin ja pestiin laimealla natriumbikarbonaattiliuoksella.
: Suodos pestiin sitten etyyliasetaatilla, kyllästettiin natrium- kloridilla ja hapotettiin pH-arvoon 1,5 ennen tuotteen uuttamista THF/etyyliasetaattiin (50:50). Yhdistetyt uuteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin, jolloin jäljelle jäi vapaa happo valkoisen kiinteän aineen muodossa (0,25 g). Tämä suspendoitiin veteen ja pH säädettiin varovaisesti arvosta 2,0 arvoon 7,0 lisäämällä laimeata natriumbikarbonaattiliuosta. Saatu liuos suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittua penisilliiniä 256 mg (69 %). Hplc-analyysissä oli yksi pää-huippu vmakg (KBr) 1770, 1710, 1685, 1670, 1610, 1510 cm-1; 6(D20) 0,95 ja 1,33 (6H, 2s, gem-dimetyylit), 1,21 (3H, t, J7Hz, -CH2CH3), 3,50 (2H, q, J7Hz, -CH2CH3), 3,65 (2H, m, piperatsiini -CH2), 3,98 (2H, m, piperatsiini -CHj), 4,16 (1H, s, C-3-protoni), 5,37 (1H, s, C-5-protoni), 5,59 (1H, s, a^protoni), 6,86 ja 7,35 (4H, AA'BB1, J9Hz, aromaattiset) ja 8,00 (1H, s, -NHCHO).
59 7 8 7 0 2 MIC (yUg/ml) P.mirabilis 889 0,1.
Esimerkki 6 6a-formamido-68-/L-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino/-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/penisillaa-nihappo, natriumsuola_ a) Bentsyyli-6a-amino-68-/L-2-/(4-etyyll-2,3-dioksopiperat- sin-l-yyli)karbonyyliamino/-2-(4-bentsyylioksikarbonyyli-oksifenyyli)asetamido/penisillanaatti_ Tämä yhdiste valmistettiin 84 %:n saannolla saattamalla bentsyy-li-6a-metyylitio-68-/L-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7~2-(4-bentsyylioksikarbonyylioksifenyyli)-asetamido7penisillanaatti reagoimaan ammoniakin kanssa merkuri-asetaatin läsnäollessa siten kuin edellä on kuvattu D-isomee-riä käsiteltäessä. vmaks (CH2C12) 3280, 1780, 1765, 1750, 1715, 1690, 1680 (sh), 1495, 1215 cm'1; ö(CDCl3) 0,95-1,40 (9H, m, gem-dimetyylit ja -CH2CH3), 2,61 (2H, s, -NH2), 3,10-3,70 (4H, m, piperatsiini -CH2 ja -CH2CH3), 3,75-4,15 (2H, m, piperatsiini -CH2), 4,31 (1H, s, C-3-protoni), 5,11 (2H, s, esteri -CH2), 5,19 (2H, s, karbonaatti -CH2), 5,33 (1H, s, C-5-protoni), 5,45 (1H, d, J6Hz, α-protoni), 6,90-7,70 (14H, m, aromaattiset) 8,22 (1H, s, 63-amido-protoni) ja 9,81 (1H, d, J6Hz, α-amido-protoni).
b) Bentsyyli-6a~formamido-63-/L-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiper- atsin-l-yyli)karbonyyliamino/-2-(4-bentsyylioksikarbonyy-lioksifenyyli)asetamido7penisillanaatti_ Tämä yhdiste valmistettiin 61 %:n saannolla saattamalla bentsyy-li-6a-amino-68-/L-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino/-2-(4-bentsyylioksikarbonyylioksi-fenyyli)-asetamido7penisillanaatti reagoimaan muurahaishappo-etikkahap-poanhydridin kanssa pyridiinin läsnäollessa siten kuin D-iso-meerin käsittelyssä edellä on kuvattu. vmaks (CH2C12) 3280, 1790, 1765, 1750, 1715, 1690, 1500, 1480, 1215 cm-1; δ /7cd3)2C07 1/13 (3H, t, J7Hz, -CH2CH3), 1,31 (6H, s, gem-dimetyylit), 3,45 (2H, q, J7Hz, -CH2CH3), 3,62 (2H, m, 60 78702 piperatsiini -CH2), 4,00 (2H, m, piperatsiini -CH2), 4,46 (1H, s, C-3-protoni), 5,19 (2H, s, esteri -CH2), 5,26 (2H, s, karbonaatti -CH2), 5,61 (1H, s, C-5-protoni), 5,75 (1H, d, J7Hz, muuttuu juovaksi D20-vaihdossa, α-protoni), 7,10-7,65 (14H, m, aromaattiset), 8,08 (1H, s, -NHCHO), 8,31 (1H, s, vaihdettavissa D20:n kanssa, -NHCHO), 8,60 (1H, s, vaihdettavissa D20:n kanssa, 6a-amido-protoni) , ja 9,99 (1H, d, J7Hz, vaihdettavissa D20:n kanssa, α-amido-protoni).
c) 6a-formamido-60-/L-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7"2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/- penisillaanihappo, natriumsuola_ Tämä yhdiste valmistettiin 44 %:n saannolla hajoittamalla vedyn avulla bentsyyli-6a-formamido-68~/L-2-/T4-etyyli-2,3-di-oksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7-2-(4-bentsyylioksi-karbonyylioksifenyyli)asetamido7penisillanaatti siten kuin D-isomeerin käsittelyn yhteydessä on kuvattu, vmakS (KBr) 1770, 1710, 1675, 1610, 1510 cm"1; δ(D20) 1,13 (3H, s, gem-dimetyy-li), 1,21 (3H, t, J7Hz, -CH2CH3), 1,43 (3H, s, gera-dimetyyli), 3,52 (2H, q, J7Hz, -CH2CH3), 3,69 (2H, m, piperatsiini -CH2), 4,01 (2H, m, piperatsiini -CH2), 4,22 (1H, s, C-3-protoni), 5,49 (1H, s, C-5-protoni), 5,58 (1H, s, α-protoni), 6,93 ja 7,36 (4H, AA1BB', J9Hz aromaattiset) ja 8,11 (1H, s, -NHCHO). MIC (^ug/ml) P.mirabilis 889 125.
Esimerkki 7 6a-formamido-66-/D-2-(2-fenyyliamino-4-hydroksipyrimidin-5-yyliureido)-2-fenyyliasetamido7penisillaanihappo, dinatrium-suola_ 5-amino-2-fenyyliamino-4-hydroksipyrimidiiniä (51 mg; 0,25 mmoolia) vedettömässä THFrssä (10 ml) käsiteltiin trietyyli-amiinilla (25 mg; 0,25 mmoolia) ja jäähdytettiin jääkylvyssä. Sitten lisättiin 12 %:nen p/t fosgeeniliuos tolueenissa (250 yug) ja liuosta sekoitettiin lämpötilassa 0°C 1 h. Ylimääräinen fosgeeni poistettiin sitten tyhjössä ja saatu suspensio jäähdytettiin ja lisättiin yhdessä erässä jään avulla jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli 6a-formamidoampisilliiniä ei 73702 (75 mg? 0,25 mmoolia) ja trietyyliamiinia (35 ^ugj 0,25 mmoolia) THF:ssä (8 ml) ja vedessä (2 ml). Reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa 0°C 1/2 tuntia ja tämän jälkeen 1 tunti huoneen lämpötilassa, jolloin pH pidettiin arvossa 7,5 koko trietyyliamiinin lisäämisen ajan. Tuote liuotettiin laimeaan natriumbikarbonaattiliuokseen ja pestiin etyyliasetaatilla. Vesifaasi kyllästettiin natriumkloridillä ja hapo-tettiin pH-arvoon 1,5 ennen tuotteen uuttamista etyyliase-taatti/THF (50:50). Uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin jäljelle jäi vapaata happoa (20 mg). Tämä liuotettiin meta-noliin ja sitä käsiteltiin teoreettisella määrällä 2N natrium-etyyliheksanoaattia metyyli-isobutyyliketonissa. Lisättäessä eetteriä saostui tuote ja se suodatettiin ja pestiin hyvin asetoni/eetterillä, jolloin saatiin kuivaamisen jälkeen 20 mg (12 %) tuotetta vmakg (KBr) 1765, 1660, 1600,1535 cm-1; δ(D20) 0,91 ja 1,28 (6H, 2s, gem-dimetyylit), 4,17 (1H, s, C-3-proto-ni), 5,33 (1H, s, C-5-protoni), 5,58 (1H, s, a-protoni), 7,30-7,60 (10H, m, aromaattiset), 7,79 (1H, s, pyrimidiini-pro*. töni) ja 8,10 (1H, s, -NHCHO).
MIC (^ug/ml) P.mirabilis 889 5,0.
Esimerkki 8 6a-formamido-6|3- (D-2-amino-2-fenyyliasetamido) penisillaani-haepo_:_ a) Bentsyyli-6a-amino-68-/D-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyy-liamino)-2-fenyyliasetamido7penisillanaatti
Bentsyyli-6a-metyylitio-68-/D-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyli-amino)-2-fenyyliasetamido7penisillanaattia (1,8 g; 30 mmoolia) DMFrssä (25 ml) käsiteltiin lämpötilassa -40°C typpikehässä liuoksella, jossa oli merkuriasetaattia (0,98 gj 31 mmoolia) DMF:ssä (3 ml). Reaktioseoksen annettiin lämmetä lämpötilaan 0°C, 1 tunnin kuluttua se kaadettiin eetteriin, pestiin vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,97 g; 57 %) 6(CDCl^), 0,96, 1,19 (6H, 2s, gem-dimetyylit), 2,74 (2H, m, NH2), 4,38 (1H, s, C-3-protoni), 5,15 (4H, s,
ArCHQ, 5,41 (1H, s, C-5-protoni), 5,53 (1H, m, a-protoni), 62 78702 6,89 (1H, m, NH), 7,36 (12H, m, aromaattiset protonit), 7,90-8,40 (3H, m, NH aromaattiset protonit); vmafcs (CH2C12) 1610, 1680, 1715, 1745, 1780 cm"1.
b) Bentsyyli-6a-formamido-68-/D-2-(4-nitrobentsyylioksi-karbonyyliamino)-2-fenyyliasetamido7penisillanaatti
Bentsyyli-6a-amino-6 6-/D-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyli-amino)-2-fenyyliasetamido7penisillanaattia (0,97 g; 1,65 mmoo-lia) dikloorimetaanissa (40 ml) käsiteltiin lämpötilassa 0°C pyridiinillä (1,3 ml; 16,5 mmoolia) ja sitten etikkahappo-muurahaishappoanhydridillä (0,73 g; 8,2 mmoolia). Reaktioseos-ta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 1 h, pestiin 0,5N kloori-vetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaattiliuoksella ja suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla ja haihdutettiin, jolloin saatiin raakatuotetta. Puhdistettaessa pii-oksidigeelin avulla saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,60 g, 59 %), öiCDCl^) 0,93, 1,17 (6H, 2s, gem-dimetyylit), 4,41 (1H, s, C-3-protoni), 5,16 (4H, s, ArCH^), 5,64 (2H, m, a- ja C-5-protonit), 6,89 (1H, s, NH), 7,39 (12H, m, aromaattiset protonit), 8,14 (3H, m, aromaattiset protonit ja CHO), 8,85 (1H, m, NH) ; vmaks (CH2C12) 1605, 1690, 1740, 1785 cm"1.
c) 6a-formamido-6β-(D-2-amino-2-fenyyliasetamido)penisillaa- nihappo__
Liuos, jossa oli bentsyyli-6a-formamido-68-/D-2-(4-nitro-bentsyylioksikarbonyyliamino)-2-fenyyliasetamido/penisillanaat-tia (0,60 g; 0,9 mmoolia) THFissä (5 ml), etanolissa (10 ml) ja vedessä (2 ml), lisättiin 10 %:seen hiilellä olevaan palladiumiin (0,7 g) THF:ssä (2,5 ml), etanolissa (5 ml) ja vedessä (1 ml), jota oli esihydrattu 15 minuuttia. Seosta hydrat-tiin 2 tuntia, lisättiin lisää katalyyttiä (0,5 g) ja hydraus-ta jatkettiin 2 h. Katalyytti suodatettiin ja pestiin peräkkäin THF:llä, etanolilla ja vedellä. Orgaaniset liuottimet haihdutettiin suodoksesta ja vesipitoinen liuos pestiin etyyliasetaatilla ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,33 g, 93 %), 6(D20) 0,96, 1,36 (6H, 2s, gem-dimetyylit), 4,19 (1H, s, C-3-protonit), 4,94 (1H, s, a- 63 7 3 7 0 2 protoni), 5,63 (1H, s, CHO)} vmakg (KBr) 1600, 1675, 1765 cm"1. MIC (^ug/ml) P.Mirabilis 889 25.
Esimerkki 9 6a-formamido-63-/D-2-amino-2- (4-hydroksifenyyli)asetamido/-penisillaanlhappo_ a) Bentsyyli-6a-amino-60-/D-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyy- liamino)-2-(4-bentsyylioksikarbonyylioksifenyyli)-asetamido/penisillanaatti_
Bentsyyli-6a-amino-66-/D-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyliami-no7~2-(4-bentsyylioksikarbonyylioksifenyyli)asetamido7penisil-lanaattia (0,84 g; 1,03 mmoolia) DMF:ssä (20 ml) jäähdytettiin lämpötilaan -40°C, käsiteltiin merkuriasetaatilla (0,34 g; l, 03 mmoolia) DMF:ssä (3 ml) ja tämän jälkeen vedettömällä ammoniakilla (0,019 g; 1,1 mmoolia) DMFsssä (1,1 ml). Reak-tioseoksen annettiin lämmetä lämpötilaan 0°C 1,5 tunnin kuluessa, kaadettiin eetteriin, pestiin vedellä, suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla ja haihdutettiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,35 g, 43 %), SiCDCl^) 0,96, 1,19 (6H, 2s, gem-dimetyylit), 2,57 (1H, m, NH2), 4,34 (1H, s, C-3-protoni), 5,16 (5H, m, ArCH^ ja α-protoni), 5,39 (1H, s, C-5-protoni), 6,63 (1H, m, NH), 7,37, 7,42 (12H, 2s + m, aromaattiset protonit ja NH), 8,08 (2H, m, aromaattiset protonit); vmaks (CH2C12) 1610, 1680, 1770cm"1.
b) Bentsyyli-6ct-formamido-68-/D-2-(4-nitrobentsyylioksi-karbonyyliamino)-2-(4-bentsyylioksikarbonyylioksifenyy-li)asetamido7penisillanaatti
Liuos, jossa oli bentsyyli-6a~formamido-68-/D-2-(4-nitro-bentsyylioksikarbonyyliamino)-2-(4-bentsyylioksikarbonyylioksi-fenyyli)asetamido7penisillanaattia (0,35 g; 0,45 mmoolia) di-kloorimetaanissa (10 ml), jäähdytettiin lämpötilaan 0°C, käsiteltiin pyridiinillä (0,32 ml; 4,0 mmoolia) ja etikkahappo-muurahaishappoanhydridillä (0,19 g; 2,2 mmoolia). Reaktio-seosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 1 tunti, pestiin 0,5 N
kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaattiliuoksella, 64 78702 suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin. Raakatuote puhdistettiin piioksidigeelin avulla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,18 g, 50 %), 6(CDCl^) 0,94, 1,15 (6H, 2s, gem-dimetyylit), 4,34 (1H, s, C-3-protoni), 5,10 (2H, s, ArCH2), 5,21 (2H, s, ArCHj), 5,55 (2H, m, C-5- ja α-protonit), 7,31, 7,39 (14H, 2s + m, aromaattiset protonit ja NH), 7,99 (3H, aromaattiset protonit ja CH0), 8,86 (1H, m, NH)f vmaks (CHClj) 1610, 1710, 1750, 1770, 1790 cm"1.
c) 6a-formamido-68-/D-2-amino-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7“ penisillaanihappo_
Bentsyyli-6a-formamido-66-/D-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyli-amino)-2-(4-bentsyylioksikarbonyylioksifenyyli)asetamido/peni-sillanaattia (0,29 g? 0,36 mmoolia) THF:ssä (2 ml), etanolissa (5 ml) ja vedessä (1 ml) lisättiin suspensioon, jossa oli 10 % hiilellä olevaa palladiumia (0,3 g) THFtssä (2 ml), etanolissa (5 ml) ja vedessä (2 ml), ja jota oli esihydrattu 15 minuuttia. Seosta hydrattiin 4 tuntia. Katalyytti suodatettiin ja pestiin peräkkäin THF:llä, etanolilla ja vedellä. Orgaaniset liuottimet haihdutettiin suodoksesta ja vesipitoinen jäännös pestiin etyyliasetaatilla ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin kvantitatiivisella saannolla otsikossa mainittu yhdiste. <5 (D20) 0,97, 1,28 (6H, 2s, gem-dimetyylit), 6,14 (1H, s, C-3-protoni), 5,25 (1H, s, α-protoni), 5,55 (1H, s, C-5-protoni), 6,83, 7,27 (4H, AA'BB1, JlOHz, aromaattiset protonit), 8,18 (1H, s, CHO); vmaks (KBr) 1600, 1670, 1765 cm”1. MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 50.
Esimerkki 10 6a~formaraido-68-/D-2-(3-kinnamoyyli-3-metyyliureido)-2- fenyyllasetamido7penislllaanihappo, natriumsuola_
Liuos, jossa oli 6a-formamido-6B-/D-2-amino-2-fenyyliasetami-do)penisillaanihappoa (0,08 g; 0,2 mmoolia) vedessä (10 ml), säädettiin pH-arvoon 7,5 IN natriumbikarbonaattiliuoksella, jäähdytettiin jään avulla ja laimennettiin THFrllä (2 ml).
65 78702 Tähän lisättiin liuos, jossa oli N-kloorikarbonyyli-N-metyyli-kinnamamidia (0,044 g; 0,2 itunoolia) THFissä (3 ml). Reaktio-seosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa 2 h, pestiin etyyliasetaatilla, hapotettiin pH-arvoon 1,5 IN kloorivety-hapolla ja uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaniset uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla ja haihdutettiin, jolloin saatiin vapaa happo (0,08 g; 0,15 mmoolia). Tämä liuotettiin asetoniin ja sitä käsiteltiin 2N natriumetyyliheksanoaatilla metyyli-isobutyyliketonissa (0,08 ml) ja tämän jälkeen eetterillä. Sakka suodatettiin ja kuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,085 g, 69 %), δ(D2°) 1,18 (6H, m, gem-dimetyylit), 2,80 (3H, s, NCH3), 4,04 (1H, s, C-3-protoni), 5,33 (1H, s,a-protoni), 5,49 (1H, s, C-5-protoni), 6,45 (1H, d, CH=), 7,17 (11H, m, aromaattiset protonit ja CH=), 8,02 (1H, s, CHO); vmaks (KBr) 1605' 16?5, 1765 cm-1. MIC ^ug/ml) P.Mirabilis 889 1,0.
Esimerkki 11 6a-formamido-68-/D-2-(2-oksoimidatsolidin-l-yylikarbonyyliami- no)-2-fenyyliasetamldo7penisillaanihappo, natrlumsuola_
Liuosta, jossa oli 6a-formamido-63-(D-2-amino-2-fenyyliaset-amido)penisillaanihappoa (0,2 g; 0,5 mmoolia) vedessä (10 ml), käsiteltiin IN natriumbikarbonaattiliuoksella (1,25 ml), jäähdytettiin jään avulla ja laimennettiin asetonilla. Tähän lisättiin liuos, jossa oli 2-oksoimidatsolidin-l-yyli-karbonyyli-kloridia (0,074 g* 0,5 mmoolia) asetonissa (5 ml). Reaktio-seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 tuntia, pestiin etyyliasetaatilla, hapotettiin pH-arvoon 1,5 IN kloorivetyhapolla ja uutettiin etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin vapaata happoa. Tämä liuotettiin veteen, joka saatettiin pH-arvoon 6,5 lisäämällä varovaisesti laimeata natrium-bikarbonaattiliuosta ja liuos suodatettiin ja jäädytyskuivat-tiin, jolloin saatiin natriumsuola (120 mg; 45 %). 6(D20) 0,91, 1,27 (6H, 2s, gem-dimetyylit), 3,3-3,6 (2H, m, imidatsolidiini CH2), 3,7-4,0 (2H, m, imidatsolidiini CH^), 4,13 (1H, s, C-3-protoni), 5,37 (1H, s, C-5-protoni), 5,54 (1H, s, α-protoni), 66 73702 7,40 (5H, m, aromaattiset protonit), 8,08 (1H, s, NHCHO); vmaks (KBr) 1530' 1600' 1655' 1715' 1765 cm_1· MIC (^ug/ml) P.mirabilis 889 1,0.
Esimerkki 12 6a-formamido-68-/D-2-(3-metyylisulfonyyll-2-oksoimidatsolidin-1-yylikarbonyyliamino)-2-fenyyliasetamido7penisillaanihappo, natrlumsuola_ 6a-formamido-6B-(D-2-amino-2-fenyyliasetamido)penisillaani-happoa (0,29 g; 0,5 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml) ja trietyyliamiinia (0,13 ml; 0,94 mmoolia) ja jauhettua 4A mole-kyyliseulaa sekoitettiin 30 minuuttia ja suodatettiin tämän jälkeen. Suodos jäähdytettiin lämpötilaan 0°C, sitä käsiteltiin liuoksella, jossa oli 3-metyylisulfonyyli-2-okso-imidatso-lidin-l-yylikarbonyylikloridia (0,11 g; 0,5 mmoolia) dikloorimetaanissa (5 ml), sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 tuntia ja liuotin haihdutettiin. Jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin ja veteen ja kerrokset erotettiin. Orgaaninen faasi uutettiin kahdesti IN natriumbikarbonaattiliuoksella. Yhdistetyt vesiuutteet pestiin etyyliasetaatilla ja hapotettiin pH-arvoon : 1,5 IN kloorivetyhapolla. Tuote uutettiin etyyliasetaattiin, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin vapaata happoa. Tämä suspendoitiin veteen, joka oli säädetty pH-arvoon 6,5 lisäämällä varovaisesti laimeata nat-riumbikarbonaattiliuosta, ja saatu liuos suodatettiin ja jää-dytyskuivattiin, jolloin saatiin natriumsuola (81 mg; 26 %) 6(D20) 0,88, 1,27 (6H, 2s, gem-dimetyylit), 3,36 (3H, s, -SO2CH3), 3,86 (4H, m, imidatsolidiini-metyleenit), 4,14 (1H, s, C-3-protoni), 5,43 (1H, s, C-5-protoni), 5,56 (1H, s, α-protoni), 7,3-7,6 (5H, m, aromaattiset protonit), 8,10 (1H, s, -NHCHO) . \aks (KBr) 1520, 1600, 1670, 1725, 1765 can"1.
MIC (^ug/ml) P.mirabilis 889 0,5.
Esimerkki 13 6a-formamido-68-/D-2-/3-metyyli-3-(2-tienyylikarbonyyli)urei- do7-2-fenyyliasetamido7penisillaanihappo, natrlumsuola_
Liuos, jossa oli 6ce-formamido-68-/D-2-amino-2-fenyyliasetamido) -penisillaanihappoa (0,2 g; 0,5 mmoolia) vedessä (10 ml), jossa f 78702 oli myös IN natriumbikarbonaattiliuosta (1,25 ml) ja asetonia (3 ml), jäähdytettiin jään avulla ja käsiteltiin /N-metyyli-(2-tienyyli)karboksiamido/karbonyylikloridilla (0,16 g; 0,8 mmoolia) asetonissa (5 ml). Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 h, se laimennettiin vedellä, pestiin etyyliasetaatilla ja hapotettiin pH-arvoon 1,5. Tuote uutettiin etyyliasetaattiin, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin vapaata happoa. Tämä suspendoitiin veteen ja lisättiin varovaisesti laimeata natriumbikarbonaattia pH-arvoon 6,5 liuoksen saamiseksi, joka suodatettiin ja jäädy-tyskuivattiin, jolloin saatiin natriumsuola (90 mg; 30 %), δ(D20) 0,86, 1,22 (6H, 2s, gem-dimetyylit), 3,19 (3H, s, -NCH^), 4,11 (3H, s, C-3-protoni), 5,38 (1H, s, C-5-protoni), 5,54 (1H, s, α-protoni), 6,8-7,7 (8H, m, aromaattiset ja tiofeeni-protonit), 8,09 (1H, s, NHCHO); Vmakg (KBr) 1600, 1670, 1765 cm-1. MIC (yug/ml) P. Mirabilis 889 2,5.
Esimerkki 14 6a~formamido-66-/D-2-(7-hydroksi-l,2,4-triatsolo/2,3-a7pyrimi-din-6-yylikarboksiamido)-2-fenyyliasetamido7penisillaanihappo, dinatriumsuola________________ 6-karboksi-7-hydroksi-l,2,4-triatsolo/5,3-a7pyrimidiiniä (0,18 g; 1,0 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml), joka sisälsi myös trietyyliamiinia (0,3 ml; 2,2 mmoolia), jäähdytettiin lämpötilaan -20°C ja käsiteltiin tionyylikloridilla (0,074 ml). Reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa -20°C 1,5 h ja sakka suodatettiin ja kuivattiin.
6a-formamido-68-(D-2-amino-2-fenyyliasetamido)penisillaanihap-poa (0,10 g; 0,25 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml), joka sisälsi myös trietyyliamiinia (0,13 ml; 0,9 mmoolia), sekoitettiin jauhetun 4A molekyyliseulan kanssa 1 h. Saatua dietyyli-ammoniumsuolaa (0,90 g; 0,18 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml), joka sisälsi myös trietyyliamiina (0,07 ml; 0,5 mmoolia) käsiteltiin lämpötilassa -20°C aktivoidulla triatsolopyrimi-diinijohdannaisella, joka oli valmistettu edellä kuvatulla tavalla (0,041 g; 0,18 mmoolia). Reaktioseosta sekoitettiin 68 73702 lämpötilassa -10°C 2 h ja haihdutettiin. Jäännös liuotettiin natriumbikarbonaattiliuokseen ja pestiin etyyliasetaatilla. Liuos kyllästettiin natriumkloridilla, hapotettiin pH-arvoon 1/5 ja uutettiin 1:1 THF:llä ja etyyliasetaatilla. Uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin. Vapaa happo suspendoitiin veteen, joka säädettiin huolellisesti pH-arvoon 6,5 natriumbikarbonaattiliuoksen avulla. Liuos suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin dinatrium-suola (0,068 g; 48 %) ; 6(D20) 0,91, 1,26 (6H, 2s, gem-dimetyy- lit), 4,45 (1H, s, C-3-protoni), 5,84 (1H, s, α-protoni), 5,57 (1H, s, C-5-protoni), 7,40 (5H, m, fenyyli-protonit) 8,09 (1H, s, NCHO), 8,14 (1H, s, pyrimidiini-protoni), 8,67 (1H, s, triatsoli-protoni); vmaks ^KBr) 1530, 1650, 1770 cm-1.
MIC (yUg/ml) P. Mirabilis 889 >100.
Esimerkki 15 6a-formamido-6&-/D-2-(2-bentsyyliamino-4-hydroksipyrimidin-5-yylikarboksiamido)-2-fenyyliasetamido7penisillaanihappo, di- natrlumsuola_ 2-bentsyyliamino-5-karboksi-4-hydroksipyrimidiini (0,06 g; 0,25 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml), joka sisälsi myös trietyy-liamiinia (0,27 ml), jäähdytettiin lämpötilaan -20°C ja käsiteltiin tionyylikloridilla (0,02 ml; 0,27 mmoolia). Liuosta sekoitettiin lämpötilassa -20°C 1 h. 6a-formamido-68-(D-2-amino-2-fenyyliasetamido)penisillaanihappoa (0,10 g; 0,25 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml), joka sisälsi myös trietyyli-amiinia (0,13 ml; 0,9 mmoolia), sekoitettiin huoneen lämpötilassa 1,5 h. Seos jäähdytettiin lämpötilaan -20°C, sitä käsiteltiin edellä mainitulla aktivoidun hapon liuoksella, sekoitettiin lämpötilassa -10°C 2 tuntia, suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös liuotettiin veteen ja pestiin etyyliasetaatilla. Liuos hapotettiin pH-arvoon 1,5 ja uutettiin etyyliasetaatilla. Uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin. Vapaa happo suspendoitiin veteen, joka säädettiin varovaisesti pH-arvoon 6,5 natriumbikarbonaatin avulla. Saatu liuos suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin dinatrium- 69 7 8 7 0 2 suola (80 mg; 47 %); 6(DjO) 0,91, 1,23 (6H, 2s# gem-dimetyy- lit), 5,23 (1H, s, α-protoni), 5,51 (1H, s, C-5-protoni), 7.25 (10H, m, aromaattiset protonit), 8,07 (1H, s, NCH), 8,26 (1H, s, pyrimidiini-protoni) ; vmaJcs (KBr) 1440, 1600, 1660, 1765 can”1. MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 50.
Esimerkki 16 6a-formamido-6g-/D-2-(2-oksoimidatsolidin-l-yylikarbonyyli-amino)-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7penisillaanihappo, natriumsuola__ 6a-formamido-6g-/D-2-amino-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/-penisillaanihappo (0,10 g; 0,25 mmoolia) vedessä (10 ml) ja asetonissa (3 ml) säädettiin pH-arvoon 7,5 IN natriumbikarbo-naattiliuoksen avulla. Sitten lisättiin 2-oksoimidatsolidin-1-yylikarbonyylikloridia (0,037 g? 0,25 mmoolia) asetonissa (3 ml) ja reaktioseosta pidettiin pH-arvossa 7,5 2 tuntia. Reaktioseos laimennettiin vedellä, pestiin etyyliasetaatilla, hapotettiin pH-arvoon 1,5 ja uutettiin etyyliasetaatilla.
Uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin. Jäännös liuotettiin veteen pH-arvossa 6,5 ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin natriumsuola (54 mg; 41 %); δ(D2O) 0,91, 1.25 (6H, 2s, gem-dimetyylit), 3,2-3,5 (2H, m, imidatsolidiini-metyleeni), 3,6-3,9 (2H, m, imidatsolidiini-metyleeni), 4,13 (1H, s, C-3-protoni), 5,26 (1H, m, α-protoni), 5,55 (1H, s, C-5-protoni), 6,83 (2H, m, aromaattiset protonit), 7,31 (2H, m, aromaattiset protonit), 8,10 (1H, s, NCHO).
MIC (yUg/ml) P.mirabilis 889 0,5.
Esimerkki 17 6ot-formamido-68-/D-2- (3-kinnamoyyli-3-metyyliureido) -2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7penisillaanihappo, natriumsuola 6a~formamido-6 g-/D-2-amino-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/-penisillaanihappo (0,10 g; 0,25 mmoolia) vedessä (10 ml) ja THF:ssä (3 ml) säädettiin pH-arvoon 7,5 natriumvetykarbonaat-tiliuoksen avulla. Tähän lisättiin N-kloorikarbonyyli-N-metyyli-kinnamidia (0,055 g; 0,25 mmoolia) THF:ssä (3 ml). Reaktioseosta sekoitettiin pH-arvossa 7,5 2 tuntia, laimen- 70 78702 nettiin vedellä ja pestiin etyyliasetaatilla. Reaktioseos ha-potettiin pH-arvoon 1,5 ja uutettiin etyyliasetaatilla.
Uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin. Vapaa happo liuotettiin veteen, joka säädettiin varovasti pH-arvoon 6,5 natriumbikarbonaattiliuoksella ja saatu liuos suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin natriumsuola (105 mg, 69 %); <$(D20) 0,92, 1,29 (6H, 2s, gem-dimetyylit) , 2,87 (3H, s, NCH3), 4,14 (1H, s, C-3-protoni), 5,27 (1H, s, α-protoni), 5,56 (1H, s, C-5-protoni), 6,5-7,5 (6H, m, vinyyli-ja aromaattiset protonit), 8,07 (1H, s, NCHO); vmaks ^Br) 1515, 1610, 1675, 1770 cm-1.
MIC (yug/ml) P. Mirabilis 889 2,5.
Esimerkki 18 60-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/- 2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido/-6a-formamidopenisiliaani- happo, natriumsuola__ a) D-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliami- no7~2-(3,4-dihydroksifenyyli)etikkahappo_ D-3,4-dihydroksifenyyliglysiiniä (1,00 gj 5,46 mmoolia) suspen-doitiin N,N-dietyyli-l,1,1-trimetyylisilyyliamiiniin (10 ml) ja kuumennettiin lämpötilassa 80-90°C typpikehässä 3 h. Tämän jakson päätyttyä esiintyi liukenematonta kiinteätä ainetta. Ylimääräinen reagenssi poistettiin haihduttamalla suurtyhjössä ja jäännös suspendoitiin kuivaan tetrahydrofuraaniin (10 ml). Seosta sekoitettiin lämpötilassa 0°C ja lisättiin 4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karbonyylikloridia (1,23 g; 1,1 ekvivalentti) yhdessä erässä. Seoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja sekoittamista jatkettiin 1 h. Tämän ajan kuluttua seos kaadettiin veteen (aikaansai pH-arvon 2) ja uutettiin 1;1 n-butanoli:etyyliasetaatilla. Vesifaasi kyllästettiin suolaliuoksella ja uutettiin kahdesti edelleen samalla liuotinseoksella ja tämän jälkeen yhdistetyt uutteet kuivattiin natriumsulfaatin avulla. Haihdutettaessa saatiin öljyä, joka sitä eetterin kanssa hangattaessa aikaansai otsikossa mainitun hapon vaaleanruskeana kiinteänä aineena, josta liuotin 71 78702 oli vaikea poistaa (1,9 g; liuos poistettu 99 %:sesti);
Rf 0,35 n-butanoli:etikkahappo:vedessä 4:1:1 -81,7° (c 1,0 EtOH:ssa); vmaks (KBr) 1710, 1670, 1610, 1520 cm"1; 6/TCD3)2S07 1/07 (3H, t, J8Hz, CH3CH2N), 3,0-3,7 (4H, m, 2 CH2N), 3,7-4,0 (2H, m, CHjN), 5,10 (1H, d, J7Hz, NCH(Ar)CO), 6,5-6,9 (3H, m, aryylit), 9,0 (2H, br, D20-vaihto, fenoli-OH), 9,60 (1H, br s, J7Hz, NH).
b) D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli- amino7-2-(3,4-dlasetoksifenyyli)etlkkahappo_ D-2-/4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/-2-(3,4-dihydroksifenyyli)etikkahappoa (1,87 g; 5,33 mmoolia) sekoitettiin kuivassa tetrahydrofuraanissa (20 ml) typpike-hässä lämpötilassa 0°C. Sitten lisättiin kuivaa pyridiiniä (1,36 g; 3,2 ekv.) ja etikkahappoanhydridiä (1,36 g; 2,5 ekv.) ja sekoittamista jatkettiin. Lisää etikkahappoanhydridiä (0,2 g) lisättiin noin 1/2 tunnin kuluttua ja tämän jälkeen liuoksen annettiin jälleen saavuttaa huoneen lämpötila. Se kaadettiin sitten etyyliasetaatin ja veden seokseen ja vesifaasi hapotettiin pH-arvoon 2. Orgaaninen faasi erotettiin, vesi-faasi uutettiin vielä kahdesti etyyliasetaatilla ja uutteet kuivattiin natriumsulfaatin avulla. Haihdutettaessa saatiin keltaista hartsia, jota hangattiin eetterin ja petrolieetterin kanssa, jolloin saatiin raakatuote. Puhdistaminen suoritettiin liuottamalla saatu materiaali kloroformiin ja lisäämällä tipottain suuri ylimäärä kuivaa eetteriä. Suodatettaessa saatua kiinteätä ainetta saatiin haluttu diasetoksihappo (1,78 g; 77 %), jossa eetterin jäännökset pysyivät sitkeästi.
0,25 n-butanoli:etikkahappo:vesi 4:1:1; ^ma^g (KBr) 1765, 1710, 1675 ja 1500 cm"1; ö(CDCl3) 1,14 (3H, t, J8Hz, CH3CH2N), 2,22 (6H, s, 2 CH3C0), 3,25-3,70 (4H, m, 2 CH2N), 4,80-5,10 (2H, m, CH2N), 5,48 (1H, d, J7Hz, NCHCO), 7,05-7,35 (3H, m, fenyylit), 7,42 (1H, brs, D20-vaihto, COjH), 9,88 (1H, d, J7Hz, NH); (Todettu, pitkän kuivauksen jälkeen: C 51,6, H 4,9, N 9,3 C19H21N3°9' 0,5 H2° vastaa: c 51,4, H 4,95, N 9,5 %).
78702 72 c) Bentsyyli-6B“/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l- yyli)-karbonyyliamino7_2-(3,4-diasetoksifenyyli)aset-amido7~6ot-formamidopenlslllanaatti_
Bentsyyli-6$-/72,2,2-trikloorietoksi)karbonyyliamino7-6a-formamidopenisillanaatista poistettiin suojaus käyttäen jauhemaista sinkkifosfaattipuskuria. Muodostunut aminoesteri (0,200 g; 0,55 mmoolia) liuotettiin kuivaan dikloorimetääniin (3 ml) yhdessä disykloheksyylikarbodi-imidin (0,110 g; 1 ekv.) kanssa. Tämä liuos jäähdytettiin lämpötilaan 0°C ja sitä sekoitettiin samalla kun lisättiin D-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopi-peratsin-l-yyli)karbonyyliamino/-2-(3,4-diasetoksifenyyli)-etikkahappoa (0,220 g; 1 ekv.) kuivassa dikloorimetaanissa (3 ml) 0,17 tunnin kuluessa. Liuoksesta alkoi heti saostua kiinteätä ainetta ja sen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan. 3 tunnin kuluttua erotettiin saostunut disykloheksyyliurea suodattamalla ja suodos haihdutettiin kuiviin. Hangattaessa eetterin kanssa saatiin kiinteätä ainetta, jota käsiteltiin kromatogra f lsesti piioksidigeelissä (40 g) ja elutoitiin 5 %:sella metanoli-kloroformilla. Saadut fraktiot koottiin yhteen ja haihdutettiin ja saostettaessa uudelleen kloroformi-eetteristä saatiin oleellisesti puhdasta penisilliiniesteriä (0,140 gf 33 %). ?Q
0,35 10 %:sessa metanoli-kloroformissa /~0_/d +103° : (c 0,57 CHCl3:ssa). vmaks (KBr) 1770, 1740, 1710, 1680 ja : 1500 cm-1; 6(CDC13) 0,85 ja 1,18 (6H, 2s, (CH3)2), 1,23 (3H, ! t, J7Hz, CH3CH2N), 2,22 ja 2,24 (6H, 2s, 2 CH3C0), 3,40-3,60 (4H, m, 2 CH2N), 3,75-3,95 (2H, m, CHjN), 4,36 (1H, s, 3-H ), 5,12 (2H, s, PhCH20), 5,52 (1H, s, 5-H), 5,64 (1H, d, J7Hz, NCH(Ar)CO), 7,12 (1H, d, J7Hz, aryyli-H), 7,33 (6H, s, fenyy-lit ja yksi aryyli-H), 7,45 (1H, d, J7Hz, aryyli-H), 8,0-8,1 (2H, br sj terävä s, 1H, D20-vaihto, NHCHO), 8,79 (1H, brs, ; D20-vaihtO, 6-NH), 10,11 (1H, brd, J7Hz, NHCH); (Todettu: C 54,35, H 5,0, N 10,8. C35H3qN6012S.0,5H20 vastaa C 54,2, H 5,0, N 10,8 %).
d) 6 0-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyy- liamino7~2-(3,4-diasetoksifenyyli^/asetamido-6x-form-amidopenisillaanihappo, natriumsuola___
Bentsyyli-6 8-/U-2-i/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli) -2- 73 7 3 7 0 2 (3,4-diasetoksifenyyli)/asetamido-6a-formamidopenisillanaat-tia (0,100 g; 0,131 mmoolia) liuotettiin tetrahydrofuraani-veteen (4:1; 10 ml). Sitten lisättiin 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (0,050 g) ja seosta hydrattiin ympäristön lämpötilassa ja paineessa 1 h. Tämän ajan kuluttua lähtöainetta ei ollut nähtävissä t.1.c.-analyysissä. Katalyytti erotettiin suodattamalla ja pestiin hyvin vedellä ja tetrahydrofuraani11a. Suodokseen lisättiin 2M natrium-2-etyyliheksanoaattia metyyli-isobutyyliketonissa (0,065 ml) ja liuos haihdutettiin kuiviin. Hangattaessa jäännöstä eetterin kanssa saatiin vaaleahkoa kiinteätä ainetta, joka suodatettiin, pestiin hyvin asetonilla ja eetterillä, kuivattiin sitten, jolloin saatiin otsikossa mainitun penisilliinin natriumsuola (0,060 g; 70 %), 0,20 n-butanoli:etikkahappo:vedessä 4:1:1; vmaks (nu3ol) 1775' 1710 sh' 1680' 1610' 1500 e"1”1? 5(D20) 0,91 ja 1,27 (6H, 2s, (CH3)2), 1,16 (3H, t, J7Hz, CELjC^N) , 2,30 (6H, s, 2 CH3C0), 3,30-3,80 (4H, m, 2 CH2N), 3,80-4,05 (2H, m, CH2N), 4,15 (1H, s, 3-H), 5,46 (1H, s, 5-H), 5,56 (1H, s, NCHCO), 7,15-7,55 (3H, m, aryylit), 8,07 (1H, s, NHCHO).
MIC (yug/ml) P.Mirabilis 889 0,5.
6 (3-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli) karbonyyliami-no7~2- (3,4-diasetoksifenyylij_7asetamido7-6a-formamidopenisil-laanihapon asetoksiryhmät poistettiin käsittelemällä kannalla Subtilisin Carlsberg, jolloin saatiin 68“/D-2-/(4-etyyli- 2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7“2-(3,4-dihydroksi-fenyyli/7asetamido-6ot-formamidopenisillaanihapon natriumsuola.
Esimerkki 19 66-/0-2-/3-/2-(4-aminosulfonyylifenyyli)amino-4-hydroksipyri-midin-5-yyli/ureido/-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-6a“form- amidopenislllaanihappo, dinatriumsuola_
Suspensiota, jossa oli 4-/T5-amino-4-hydroksipyrimidin-2-yyli)-amino/bentseenisulfonamidia (281 mg) kuivassa tetrahydrofu-raanissa (250 ml) typpikehässä, käsiteltiin sekoittamalla huoneen lämpötilassa trietyyliamiinin (101 mg) kanssa. Seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 1 h ja se jäähdytettiin sitten lämpötilaan 0°C ja sitä käsiteltiin fosgeenitolueeniliuok- 74 78702 sella (1 ml* 12,5 % p/t). Seoksen annettiin saavuttaa jälleen huoneen lämpötila 1/2 tunnin kuluessa ja sitä sekoitettiin sitten huoneen lämpötilassa 1/2 tuntia. Saatu seos väkevöi-tiin tyhjössä noin 50 ml tilavuuteen.
66-/D-2-amino-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-6a-formamido-penisillaanihappoa (462 mg) liuotettiin 50 %:seen vesipitoiseen tetrahydrofuraaniin (30 ml) lämpötilassa 0°C lisäämällä samalla IM natriumbikarbonaatin vesiliuosta pH-arvoon 7,5 saakka. Tätä liuosta käsiteltiin lämpötilassa 0°C edellä valmistetulla asyloimisaineen liuoksella, jolloin samanaikaisesti lisättiin IM natriumbikarbonaatin vesiliuosta reaktioseok-sen pH:n pitämiseksi arvossa välillä 7,0 ja 7,5. Lisäämisen jälkeen reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 1/2 tuntia ja sen annettiin sitten lämmetä huoneen lämpötilaan 1/2 tunnin kuluessa. Orgaaniset liuottimet poistettiin tyhjössä ja vesipitoinen jäännös pestiin etyyliasetaatilla (2 x 100 ml), eetterillä (100 ml) ja hapotettiin pH-arvoon 2 etyyliasetaatin (50 ml) ja eetterin (50 ml) läsnäollessa. Saatu sakka otettiin talteen suodattamalla, pestiin hyvin eetterillä ja kuivattiin tyhjössä fosforipentoksidin avulla, jolloin saatiin epäpuhdasta tuotetta (200 mg). Tämä kiinteä aine suspendoitiin veteen (20 ml), pH säädettiin arvoon 7 IM natriumbikarbonaatin vesi-liuoksella, seos suodatettiin ja suodos jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin vaaleanruskeata kiinteätä ainetta (162 mg). Suoritettaessa kromatografinen käsittely piioksidigeeliin 60 (230-400 mesh ASTM) avulla ja elutoitaessa etyyliasetaatti/ propan-2-oli/vedellä 5:4:2, saatiin jäädytyskuivauksen jälkeen 6 β-/D-2-/2-/2-(4-aminosulfonyylifenyyli)amino-4-hydroksipyri-midin-5-yyli7ureido7“2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/-6a-form-amidopenisillaanihapon dinatriumsuolaa (52 mg; 7 %) ; vmakg (KBr) 1765, 1655, 1610, 1590, 1530 br, 1410, 1385, 1340, 1215, : 1158 ja 1100 cm"1; δ βΖΌ^) 2S0 + CD-jOD + D207 0,95, 1,31 (6H, 2s, 2-C(CH3)2), 4,10 (1H, s, 3-H), 5,30 (1H, s, 5-H), 5,56 (1H, s, NCHCO) , 6,88 ja 7,38 (4H, 2d, J8Hz, CgH^H) 7,70 ja 7,82 (4H, 2br s, CgH4S02NH2), 8,07 (1H, brs, pyrimidinyyli), ja 8,11 (1H, s, CHO).
MIC (^,ug/ml) P. Mirabilis 889 0,5.
73 7 8 7 0 2
Esimerkki 20 6a-formamido-63-/Ό-2- /3-(furan-2-yylimetyleenlamino)-2-okso-imidatsolidin-l-yyli7karbonyyllaiaino7“2- (4-hydroksifenyyli) -asetamido7penisillaanihappo, natriumsuola 63-/D-2-amino-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-6a-formamido-penisillaanihappoa (0,23 g) suspendoitiin veteen (5 ml) ja tetrahydrofuraaniin (5 ml), pH säädettiin arvoon 7,5 lisäämällä trietyyliamiinia ja saatua liuosta sekoitettiin ja jäähdytettiin lämpötilassa 0-5°C. Sitten lisättiin tipottain suspensio, jossa oli /3-(furan-2-yylimetyleeniamino)-2-oksoimidatsolidin-l-yyli7karbonyylikloridia tetrahydrofuraanissa (10 ml) ja seoksen pH pidettiin arvossa 7,5 trietyyliamiinia lisäämällä. Kun lisääminen oli päättynyt, sekoitettiin seosta lämpötilassa 0-5°C 1/2 tuntia ja orgaaninen liuotin haihdutettiin alipaineessa. Vesipitoinen jäännös pestiin kahdesti etyyliasetaatilla ja kerran dietyylieetterillä ennen hapottamista pH-arvoon 2 5M kloorivetyhapolla etyyliasetaatin (25 ml) läsnäollessa. Faasit erotettiin, vesifaasi uutettiin edelleen etyyliasetaatilla (25 ml), uutteet yhdistettiin, pestiin vedellä pH-arvossa 2, vedellä kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin vedettömän magnesiumsulfaatin avulla ja orgaaniset liuottimet haihdutettiin kuiviin alipaineessa. Jäännös suspendoitiin veteen (10 ml), joka sisälsi natriumbikarbonaattia (0,018 g), seos suodatettiin ja suodos jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittua yhdistettä (0,137 g); vmaks ^KBr^ 3320 br, 1770, 1722, 1670, 1610, 1511, 1479, 1416, 1390, 1273, 1235 ja 1210 sh cm’1? ä/p20/(CD3)2S0/CD30D?2:1:l7 0,89 ja 1,26 (6H, 2s, C(CH3)2), 3,81 (4H, br, s, kaksi CH2-ryhmää), 4,08 (1H, s, 3-H), 5,36 (1H, d, J8Hz, CHCO), 5,52 (1H, s, 5H) 6,56 (1H, m, furyyli-H), 6,76-6,92 (3H, m, furyyli ja kaksi CgH4-H-ryhmää), 7,21-7,43 (2H, m, furyyli-H ja CH=N), 7,57-7,73 (2H, m, kaksi CgH4-H-ryhmää), 8,08 (1H, s, CHO), 9,07 (1H, d, J8Hz, NHCHCO).
MIC (yug/ml) P. Mirabilis 889 0,25.
’e 73702
Esimerkki 21 6 8-/D-2-(D-2-karbamoyyliamino-3-fenyylipropionamido)-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/-6a-formamidopenisillaanihappo, natriumsuola_
Suspensiota, jossa oli D-2-karbamoyyliamino-3-fenyylipropioni-happoa (208 mg) kuivassa asetonissa (10 ml), käsiteltiin vedettömissä olosuhteissa trietyyliamiinilla (101 mg) ja saatua seosta sekoitettiin ja se jäähdytettiin lämpötilaan välillä -10 ja -20°C. Sitten lisättiin isobutyylikloroformaattia (136 g) ja seosta sekoitettiin lämpötilassa välillä -10 ja -20°C 20 minuuttia. Reaktioseos jäähdytettiin lämpötilaan -40°C ja lisättiin jääkylmään liuokseen, jossa oli 68-/D-2-amino-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-6a-formamidopenisillaa-nihappoa (462 mg) vedessä (20 ml), joka sisälsi asetonia (5 ml), pH-arvossa 7,5. Lisäämisen jälkeen reaktioseoksen annettiin saavuttaa jälleen huoneen lämpötila 1/2 tunnin kuluessa ja sitä sekoitettiin sitten 1 h huoneen lämpötilassa. Orgaaniset liuottimet haihdutettiin tyhjössä ja vesipitoinen jäännös pestiin etyyliasetaatilla (2 x 50 ml), eetterillä (50 ml) ja hapotettiin sitten pH-arvoon 2 5M kloorivetyhapolla etyyliasetaatin (25 ml) ja eetterin (25 ml) läsnäollessa. Saatu valkoinen sakka otettiin talteen suodattamalla, pestiin hyvin eetterillä ja kuivattiin tyhjössä fosforipentoksi-: din avulla. Kuivattu kiinteä aine suspendoitiin veteen (25 ml) ja pH säädettiin arvoon 6,5 IM natriumbikarbonaatin vesi-liuoksella, seos suodatettiin ja suodos jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin 296 mg epäpuhdasta tuotetta. Käsiteltäessä kromatografisesti 200 mg tätä tuotetta piioksidigeelin 60 avulla (230-400 mesh ASTM) ja elutoitaessa etyyliasetaatti/ propan-2-oli/vedellä 5:3:1, saatiin 66-/D-2-(D-2-karbamoyyli-amino-3-fenyylipropionamido)-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/-6ct-formamidopenisillaanihapon natriumsuola (117 g; 19 %) jää-dytyskuivauksen jälkeen, vmaks (KBr) 1765, 1645 br, 1600 br, \ 1512, 1385, 1265, 1210 ja 1178 cm"1* 6(D20) 0,89, 1,21 (6H, 2s, 2-C(CH3)2), 2,94 (2H, m, CH2), 4,07 (1H, s, 3-H), 5,22 (1H, s, 5-H), 5,48 (1H, s, NCHCO), 6,75-6,90 ja 7,05-7,40 (9H, m, CgH5 ja CgH4) ja 8,05 (1H, S, CHOj .
77 78702 MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 2,5.
Esimerkki 22 63-/2-/7kumarin-3-yyli)karbonyyliamino7-2-(4-hydroksifenyyli)-asetamldo7_6a-formamidopenisillaanihappo, natriumsuola a) Kumarlini-3-karbonyylikloridi
Kumariini-3-karboksyylihappoa (2,1 g; 10 mmoolia) suspendoi-tiin kuivaan dikloorimetaaniin (10 ml) ja kuumennettiin palautus jäähdyttäen 2 h tionyylikloridin (5 ml) kanssa. Tämän ajan kuluttua pieni määrä liukenematonta materiaalia erotettiin suodattamalla ja suodokseen lisättiin petrolieetteriä 60-80°C (35 ml). Happokloridi suodatettiin, pestiin eetterillä ja kuivattiin (1,63 g; 71 %), sp. 138-141°C. vmaks (chc13> 1790, 1740, 1610, 1570 cm"1; 6(CDC13) 7,30-8,10 (4H, m, fenyylit), 8,95 (1H, s, kumariini 4-H) .
b) Natrium-6 3-/2-/7kumarin-3-yyli)karbonyyliamino7~2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/—6a-formaiaidopenlsillanaatti 6 8-/2-amino-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7“6a-formamido-penisillaanihappoa (0,100 g; 0,25 mmoolia) suspendoitiin veteen (5 ml) ja jäähdytettiin lämpötilaan 0°C samalla sekoittaen. Lisättiin liuos, jossa oli kumariini-3-karbonyyliklo^· ridia (0,060 g; 1,2 ekv.) tetrahydrofuraanissa (2 ml) ja pH pidettiin alueella 8,0-8,5 lisäämällä IM natriumbikarbonaat-tiliuosta. Seoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja sekoittamista jatkettiin 1 h. Tämän ajan kuluttua lisättiin lisää vettä (5 ml) ja liuos pestiin kahdesti etyyliasetaatilla ja takaisinpesu suoritettiin joka kerran vähäisellä vesimäärällä. Vesipitoinen liuos kyllästettiin natrium-kloridilla ja hapotettiin pH-arvoon 2 2M kloorivetyhapolla, jolloin samanaikaisesti tuote uutettiin 1:1 etyyliasetaatti: tetrahydrofuraanilla (2 x 20 ml). Yhdistetyt uutteet pestiin kahdesti suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatin avulla ja haihdutettiin, jolloin saatiin tuotetta happo-muodossa (0,170 g). Se liuotettiin asetoniin ja suodatettiin sitten, lisättiin 1,89M natrium-2-etyyliheksanoaattia metyy-li-isobutyyliketonissa (0,13 ml; 1 ekv.) ja tämän jälkeen ?s 78702 eetteriä saostumisen tekemiseksi täydelliseksi. Otsikossa mainittu penisilliinisuola suodatettiin, pestiin asetonilla ja eetterillä ja kuivattiin (0,110 g; 73 %).
Rf 0,55 n-butanoli:etikkahappo:vedessä 4:1:1; vmaks (nu3ol) 3250, 1770, 1710, 1610, 1565, 1510 cm-1; 6/D20: (CD3) 2SO:CD3OD, 7:2:37 1,13 ja 1,44 (6H, 2s, (CH^C), 4,22 (1H, S, 3-H), 5,40 (1H, s, 5-H), 5,67 (1H, s, NCHCO), 6,98 (2H, d, aryyli H), 7,51 (4H, m, aryyli H), 7,70-8,00 (2H, m, aryyli H), 8,22 (1H, s, NHCHO), 8,86 (1H, s, kumariini 4-H).
MIC (yug/ml) P. Mirabilis 889 10.
Esimerkki 23
Bentsyyli-68-/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyyli/-2-/"(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/aset-amido7“6a-formamidopenisi1lanaatti a) Bentsyyli-6a-amino-66-/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)-fenyyli7-2-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliamino)aset-cunido7penisillanaatti
Liuosta, jossa oli bentsyyli-6 -/D-2-/T-(bentsyylioksikarbonyylioksi) fenyyli7~2-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliamino)aset-amido7~6 -(metyylitio)penisillanaattia (0,460 g) kuivassa N,N-dimetyyliformamidissa (7 ml), sekoitettiin typpikehässä ja jäähdytettiin lämpötilaan -40°C. Sitten lisättiin merkuri-asetaatin (0,81 g) liuos Ν,Ν-dimetyyliformamidissa (1 ml) ja tämän jälkeen ammoniakkia (0,011 g) Ν,Ν-dimetyyliformamidissa (0,58 ml). Reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa välillä -50 ja -10°C 1 h ja se jaettiin sitten etyyliase taatin ja veden välillä. Orgaaninen faasi pestiin neljästi vedellä, kerran suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja väkevöitiin. Käsiteltäessä jäännöstä kromatografisesti piioksidigeelillä 60 (230 mesh ASTM) ja elutoitaessa etyyli-asetaatti/heksaanilla 1:1, saatiin bentsyyli-6a-amino-68-/D-2-(4-bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyy11/-2-(2,2,2-trikloor ietoksikarbonyyliamino) asetamidopenisillanaattia (0,285 g)f vmaks (CHC13) 3400, 3310, 3020, 2950, 1765, 1745, 1685, 1605 ja 1500 cm”3-; 6(CDCl3) 1,00 ja 1,20 (6H, 2s, 79 7 8 7 0 2 2-CH3-ryhmät), 2,60 (2H, s, NH2), 4,30 (1H, s, 3-H), 4,64 (2H, s, CH2CC13), 5,11 ja 5,20 (4H, 2s, PhCH2-ryhmät), 5,24 (1H, d, J7Hz, NCHCO), 5,36 (1H, s, 5-H), 6,41 (1H, d, J7Hz, NH) , 7,10 ja 7,44 (4H, 2d, J8Hz, fenyyli) ,7,31 ja 7,36 (UH, 2s, fenyyli ja NH).
b) Bentsyyli-68-/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyy- li7-2-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliamino)asetamido7~ 6a-formamldopenisillanaatti_
Liuosta, jossa oli bentsyyli-6a-amino-62-/74-(bentsyylioksikarbonyylioksi) fenyyli/-2-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyy-liamino)asetamido7penisillanaattia (0,256 g) dikloorimetaanis-sa (10 ml), sekoitettiin argon-kehässä ja jäähdytettiin lämpötilaan 0°C. Sitä käsiteltiin pyridiinillä (0,26 ml) ja etikkahappo-muurahaishappoanhydridillä (0,13 ml) ja sen annettiin sitten lämmetä huoneen lämpötilaan 3 h kuluessa.
Saatu liuos pestiin 0,5N kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, suolaliuoksella ja kuivattiin natriumsulfaatin avulla. Liuos väkevöitiin ja sitä käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 (<230 mesh ASTM) avulla ja elutoitiin etyyliasetaatti/heksaanilla 1:1, jolloin saatiin bentsyyli-68-/D-2-/T-(bentsyylioksikarbonyylioksi)-fenyyli/-2- (2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliamino) asetamido7~ 6a-formamidopenisillanaattia (0,230 g) värittömänä vaahtona Vmaks (chc13) 3420, 3300, 3000 br, 1780 sh, 1765, 1745, 1695, 1605 ja 1500 cm"1? δ(CDC13) 1,00 ja 1,20 (6H, 2s, C(CH3)2, 4,36 (1H, s, 3-H), 4,64 (2H, s, CH2CC13), 5,12 ja 5,20 (4H, 2s, PhCH2-ryhmät), 5,48 (1H, d, J7Hz, NCHCO), 5,56 (1H, s, 5-H), 6,56 (1H, brd, J7Hz, NH), 7,09 ja 7,47 (4H, 2d, J9Hz, fenyyli), 7,30 ja 7,37 (11H, 2s, fenyylit ja NH), 8,09 (1H, s, NCHO), ja 8,50 (1H, b, NH).
c) Bentsyyli-68-/D-2-amino-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi) asetamido/-6a-formamidopenisillanaatti
Liuosta, jossa oli bentsyyli-6g-/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi) fenyyli7-2-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyli-amino)asetamido7”6a-formamidopenisillanaattia (0,200 g) 8o 78702 tetrahydrofuraanissa (10 ml), sekoitettiin huoneen lämpötilassa ja käsiteltiin IM kaliumdivetyfosfaatin vesiliuoksella (2 ml) ja tämän jälkeen tuoreella hapolla pestyllä sinkki-jauheella (0,400 g). Sekoittamista jatkettiin siksi, kunnes suojauksen poisto oli täydellinen (noin 4 h), ja seos suodatettiin sitten celiten lävitse. Suodos väkevöitiin ja jaettiin etyyliasetaatin ja suolaliuoksen välillä. Etyyliase-taattiliuos kuivattiin natriumsulfaatin avulla ja väkevöitiin, jolloin saatiin bentsyyli-68-/D-2-amino-2-/4-(bentsyylioksi-karbonyylioksi)fenyyli7asetamido7-6a-formamidopenisillanaattia.
d) Bentsyyli-68-/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyyli/- 2-/j4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/- asetamido7-6g-formamldopenisillanaatti_
Bentsyyli-6 8-/D-2-amino-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyy-li7asetamido7"6a-formamidopenisillanaatti valmistettiin vastaavasta N-trikloorietoksikarbonyylijohdannaisesta (0,200 g) ja liuotettiin sitten kuivaan tetrahydrofuraaniin (5 ml). Sitä sekoitettiin lämpötilassa 0°C typpikehässä ja käsiteltiin 4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karbonyylikloridilla (0,050 g). Reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan 1 tunnin kuluessa ja se väkevöitiin sitten. Jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin natriumsul-faatilla ja väkevöitiin. Jäännöstä käsiteltiin kromatografi-sesti piioksidigeelin 60 avulla ( <230 mesh ASTM), jolloin saatiin bentsyyli-6$-/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyy-li7-2-//(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/-asetamido/-6a-formamidopenisillanaattia (0,055 g); vmafcs (CHC13) 3280, 2980, 2875, 1780, 1765, 1745, 1710, 1685, 1610 ja 1505 cm”1? δ(CDC13) 0,85 ja 1,12 (6H, 2s, 2-CH3-ryhmät), 1,26 (3H, t, J7Hz,NEt:n CH3), 3,4-3,8 (6H, m, NCH2CH2NCH2), 4,36 (1H, s, 3-H), 5,07 ja 5,16 (2H, ABq, Jl2Hz, bentsyylinen CH2), 5,21 (2H, s, bentsyylinen CH2), 5,50 (1H, s, 5-H), 5,65 (1H, d, J7Hz, NCHCO), 7,11 ja 7,53 (4H, 2d, J9Hz, fenyyli), 7,2-7,5 (10H, m, fenyylit),8,05 ja 8,69 (2H, 2 br s, NH-ryhmät), 8,14 (1H, d, J7Hz, NH).
81 78702
Esimerkki 24 6a-formamido-6|3-/D-2-(4-hydroksifenyyli)-2-/j3-metyylisulfonyy-li-2-oksoimidatsolidin-l-yyli)karbonyyliamino/asetamido/peni- slllaanihappo, natrlumsuola_ a) Bentsyyli-68-/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyyli/- 2-/(3-metyylisulfonyyli-2-oksoimidatsolidin-l-yyli)karbo- nyyli amino/asetamido/-6 a-formamldopeni si1lanaatti_
Bentsyyli-6(S-/D-2-amino-2-/4- (bentsyylioksikarbonyylioksi) fenyy-li7asetamido7-6a-formamidopenisillanaattia valmistettiin sen N-trikloorietoksikarbonyylin avulla suojatusta esituotteesta (0/400 g). Liuosta, jossa oli aminoyhdistettä kuivassa tetra-hydrofuraanissa (10 ml), sekoitettiin lämpötilassa 0°C typpi-kehässä ja käsiteltiin 3-(metyylisulfonyyli)-2-okso-imidatsoli-diini-l-karbonyylikloridilla (0,112 g) ja tämän jälkeen pyri-diinillä (0,050 g). Jäähdytyskylpy poistettiin ja reaktio-seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 h. Se väkevöitiin sitten, liuotettiin etyyliasetaattiin, pestiin suolaliuoksella ja kuivattiin natriumsulfaatin avulla. Käsiteltäessä kromatografisesta piioksidigeelin 60 (< 230 mesh ASTM) avulla ja elutoitaessa etyyliasetaatilla, jossa etyyliasetaatin ja etanolin suhde oli 19:1, saatiin bentsyyli-68-/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi) fenyyli7“2-/3-metyylisulfonyyli-2-oksoimidat-solidin-l-yyli)karbonyyliamino7asetamido7-6a-formamidopenisil-lanaattia värittömänä, lasimaisena tuotteena (0,150 g); s (CHC13) 3330, 3020, 1780, 1760 sh, 1735, 1690, 1665, 1505, 1355 ja 1170; 6(CDC13) 0,86 ja 1,11 (6H, 2s, 2-CH3-ryhmät), 3,40 (3H, s, S02CH3), 3,6-4,1 (4H, m, NCH2CH2N), 4,37 (1H, s, 3-H),5,12 ja 5,20 (4H,2s,bentsyyliset CH2-ryhmät) , 5,50 (1H, d, J7Hz, NCHCO), 5,54 (1H, s, 5-H), 7,09 ja 7,49 (4H, 2d, J9Hz, fenyyli), 7,31 ja 7,36 (10H, 2s, fenyylit), 7,99, 8,15 ja8,24 (3H, 3s, CHO- ja NH-ryhmät), ja 9,07 (1H, d, J7Hz, NH).
b) 6a-formamido-66-/D-2-(4-hydroksifenyyli)-2-/73-metyyli-sulfonyyli-2-oksoimidatsolidin-l-yyli)karbonyyliamino7- asetamido7penlslllaanihappo, natrlumsuola_
Suspensiota, jossa oli 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumkata-lyyttiä (0,100 g) dioksaanissa (10 ml) ja vedessä (2,5 ml), 82 78702 esihydrattiin 15 minuuttia. Seokseen lisättiin sitten liuos, jossa oli bentsyyli-6S-/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)-fenyyli.7“2-/73-metyylisulfonyyli-2-oksoimidatsolidin-l-yyli) -karbonyyliamino7asetamido7~6a-formamidopenisillanaattia (0,100 g) dioksaanissa (2,5 ml) ja hydraus suoritettiin ilmakehän paineessa siksi, kunnes suojauksen poisto oli täydellinen (noin 2 h). Saatua seosta käsiteltiin liuoksella, jossa oli natriumbikarbonaattia (0,010 g) vedessä (1 ml) ja suodatettiin sitten. Dioksaani haihdutettiin suodoksesta ja vesipitoinen liuos, joka jäi jäljelle, pestiin etyyliasetaatilla. Vesipitoinen liuos jäädytyskuivattiin sitten, jolloin saatiin 6a-formamido-63-/D-2-(4-hydroksifenyyli)-2-/73-metyylisulfonyy-li-2-oksoimidatsolidin-l-yyli)karbonyyliamino7asetamido7~ penisillaanihapon natriumsuola. (0,074 g) ; vmaits (RBr) 3320, 3010, 2970, 2920, 1770, 1730, 1675, 1610, 1515, 1355 ja 1170 cm”1; 6(D20) 0,88 ja 1,24 (6H, 2s, 2-CH3-ryhmät), 3,29 (3H, s, S02CH3), 3,80 (4H, br, NCH2CH2N), 4,09 (1H, s, 3H), 5,27 (1H, s, NCHCO), 5,49 (1H, s, 5-H), 6,79 ja 7,27 (4H, 2d, J9Hz, fe- nyyli), ja 8,01 (1H, s, CHO).
MIC (^,ug/ml) P. Mirabilis 889 0,1.
Esimerkki 25 68-/D-2-/T5-etoksikarbonyyli-imidatsol-4-yyli)karbonyyliamino/-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-6a-formamidopenisillaanihappo, natriumsuola____ a) Bentsyyli-68-/D-2-/4- (bentsyylioksikarbonyylioksi) fenyylj./- 2-/T5-etoksikarbonyyli-imidatsol-4-yyli)karbonyyliamino7- asetamido7~*6a-formamldopenisillanaatti_
Bentsyyli-68-/D-2-amino-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyy-li7asetamido7“6a-formamidopenisillanaatti valmistettiin N-tri-kloorietoksikarbonyylijohdannaisesta (0,400 g) ja liuotettiin kuivaan dikloorimetaaniin (15 ml). Tähän lisättiin dietyyli- 5,10-diokso-5,10-dihydrcdi-imidatso/l, 5-a; 1', 5' -d/pyratsiini- 1,6-dikarboksylaattia (0,246 g) ja pyridiiniä (0,039 g) ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 3 vrk. Tuote sentrifugoi-tiin kiinteiden aineiden poistamiseksi ja sakan yläpuolella oleva liuos väkevöitiin ja sitä käsiteltiin kromatografisesti piioksid;Lgeelillä 60 (1:1 seos, >230 mesh ja 230-400 mesh ASTM) , 83 7 8 7 0 2 elutoitiin kloroforxni/etanolilla 1:0-4:1, jolloin saatiin bentsyyli-6 -/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyyli7“2-/(5-etoksikarbonyyli-imidatsol-4-yyli)karbonyyliamino7asetami-do7~ 6°1-formamidopenisillanaattia kiteisenä kiinteänä aineena (0,162 g), sp. 216-220°C hajoaa (kloroformi/etyyliasetaatti); Vmaks (CHC13) 3260, 2980, 1770, 1750 sh, 1695, 1640, 1580, 1520, 1510 ja 1490 cm”1; <$(CDC13) 0,95 ja 1,11 (6H, 2s, 2-CH3-ryhmät) , 1,48 (3H, t, J7Hz, 0Et:n CH3), 4,34 (1H, s, 3-H), 4,56 (2H, q, J7Hz, OCHj), 5,11 ja 5,18 (4H, 2s, bentsyyliset CH2-ryhmät), 5,50 (1H, s, 5-H), 6,49 (1H, d, J8Hz, NCHCO), 6,95 ja 7,54 (4H, 2d, J8Hz, fenyyli), 7,2-7,4 (11H, m, fenyylit ja NH), 7,74 (1H, s, imidatsoli-CH), 8,08 (1H, s, CHO), 9,67 (1H, br, s, NH), ja 11,79 (1H, d, J8Hz, NH); (Todettu: C 58,3, H 4,8, N 10,7 %.
C39H38N6°11S vastaa c 58'6' H 4'8' N 10'5 %)· b) 68-/D-2-/T5-etoksikarbonyyli-imidatsol-4-yyli)karbonyyli-amino7“2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-6a-formamidopeni- sillaanlhappo, natrium suo la__
Suspensiota, jossa oli 10 % hiilellä olevaa palladiumkatalyyt-tiä (0,070 g) dioksaanissa (10 ml) ja vedessä (2,5 ml), esi-hydrattiin 15 min. Lisättiin liuos, jossa oli bentsyyli-63-/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyyli7“2-/(5-etoksi-karbonyyli-imidatsol-4-yyli)karbonyyliamino/asetamido/-6a~ formamidopenisillanaattia (0,070 g) dioksaanissa (5 ml), ja seosta hydrattiin ilmakehän paineessa 3 h, jonka jälkeen ohut-kerroskromatografiän avulla todettiin täydellinen reaktio.
Sitten lisättiin liuos, jossa oli natriumvetykarbonaattia (0,0074 g) vedessä (1 ml), ja katalyytti poistettiin suodattamalla. Saatu liuos haihdutettiin pieneen tilavuuteen dioksaa-nin poistamiseksi, pestiin etyyliasetaatilla, jäädytyskuivat-tiin, jolloin saatiin 63-/D-2-^75-etoksikarbonyyli-imidatsol- 4-yyli)karbonyyliamino7~2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-6a-formamidopenisillaanihapon natriumsuolaa värittömänä kiinteänä aineena (0,050 g); vmaks (KBr) 1765, 1680, 1605 ja 1510 cm-1; 6(D20) 0,85 ja 1,22 (6H, 2s, 2-CH3-ryhmät), 1,25 (3H, t, J7Hz, 0Et:nCH3), 4,08 (1H, s, 3-h), 4,21 (2H, q, J7Hz, 0CH2), 5,41 ja 5,49 (2H, 2s, 5-H ja NCHCO), 6,80 ja 7,32 (4H, 2d, J8Hz, fenyyli), 7,72 (1H, s, imidatsolyyli 2-H) ja 8,03 (1H, s, NCHO). MIC (yug/ml) P· Mirabilis 889 10.
84 78702
Esimerkki 26 6 B-/D-2-(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/- 2- (tien-2-yyli)asetamido/-6a-formamidopenisillaani-happo, natriumsuola_ a) Bentsyyli-6 B-/DL-2-i/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli) - karbonyyliamino/-2-(tien-2-yyli)asetamido/-6a-(metyylitio)-penisillanaatti_
Liuosta, jossa oli bentsyyli-6B-amino-6a-(metyylitio)penisil-lanaattia (1,46 g) ja N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidiä (0,92 g) dikloorimetaanissa (25 ml), sekoitettiin ja jäähdytettiin lämpötilaan 0-5°C ja käsiteltiin tipottain liuoksella, jossa oli DL-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyy-liamino7~2-(tien-2-yyli)etikkahappoa (1,35 g) asetonissa (5 ml) ja dikloorimetaanissa (25 ml) 1 h kuluessa. Reaktioseoksen annettiin saavuttaa jälleen huoneen lämpötila 1 h kuluessa ja sitä sekoitettiin tässä lämpötilassa 18 h. Saostunut N,N'-disykloheksyyliurea poistettiin suodattamalla ja pestiin di-kloorimetaanilla (20 ml). Orgaaninen suodos väkevöitiin tyhjössä ja jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti piioksidigee-lillä 60 ( <230 mesh ASTM) ja elutoitiin etyyliasetaatilla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (1,291 g) ·, v .
IUciKS .
(KBr) 3450 br, 3280, 1778, 1740, 1710, 1680, 1510 ja 1185 cm-1; 5/7CD3)2C07 1,04-1,60 (9H, m, C(CH3)2 ja NCHjCH-j) , 2,05 ja 2,28 (3H, 2s, SCH3), 3,46 (2H, q, J8Hz, NCH^H-j), 3,68 ja 4,02 (4H, 2m, NCH2CH2N), 4,39 ja 4,44 (1H, 2s, 3-H), 5,19 ja 5,21 (2H, 2s, PhCH2-ryhmät), 5,45 (1H, s, 5-H), 5,97 (1H, d, J7Hz, CH), 6,88-7,03 (1H, m, tienyyli-H), 7,15-7,50 (7H, m, fe-nyyli ja tienyyli-H2), 8,81 (1H, d, J7Hz,NH), ja 9,79-10,02 (1H, br, CONH).
b) Bentsyyli-6a-amino-68-/DL-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperat sin-l-yyli) karbonyyliamino/-2-(tien-2-yyli)asetamido/-penisillanaatti_______
Liuos, jossa oli bentsyyli-6B-/DL-2-/(4-etyyli-2,3-diokso-piperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/-2-(tien-2-yyli)asetamido/-6a-(metyylitio)penisillanaattia (1,3 g) N,N-dimetyyliformami-dissa (13 ml), jäähdytettiin lämpötilaan -40°C typpikehässä 85 73702 ja sekoitettiin. Sitten lisättiin merkuriasetaattia (0,63 g) ja tämän jälkeen liuos, jossa oli ammoniakkia N,N-dimetyyli-formamidissa (2,2 ml; 16 mg/ml) ja seosta sekoitettiin lämpötilassa välillä -20 ja -40°C 1/2 tuntia. Reaktioseoksen annettiin lämmetä jälleen huoneen lämpötilaan 1 h ja se laimennettiin etyyliasetaatilla (100 ml). Seos suodatettiin ja suodos pestiin viidesti vedellä,kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuos väkevöi-tiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (1,16 g); 6/TCD3)2C07 1,00-1,50 (9H, m, C(CH3)2 ja NCH2CH3), 2,67-3,10 (2H, brs, NH2), 3,27-3,82 ja 3,87-4,19 (6H, m, piperatsiini-CH2-ryhmät), 4,36 ja 4,41 (1H, 2s, 3-H), 5,20 (2H, s, CH2Ph), 5,37 ja 5,39 (1H, 2s, 5-H), 5,91 (1H, d, J7Hz, CH), 6,78-7,07 ja 7,10-7,45 (8H, m, fenyyli ja tienyyli -H-ryhmät), 8,50 ja 8,60 (1H, 2s, CONH), 9,90 (1H, d, J7Hz, NHCH).
c) Bentsyyli-66-/DL-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino/-2-(tien-2-yyli)asetamido/-6cr*formamido- penlsillanaatti__
Pyridiiniä (1,5 ml) lisättiin liuokseen, jossa oli bentsyyli-6a-amino-68-/DL-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino7~2-(tien-2-yyli)asetamido7penisillanaattia (1,16 g) dikloorimetaanissa (20 ml) lämpötilassa 0-5°C.
Liuosta käsiteltiin etikkahappo-muurahaishappoanhydridillä (0,81 g) ja seosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 1 h ja sen annettiin saavuttaa jälleen huoneen lämpötila 1/2 tunnin kuluessa. Se pestiin IM kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, vedellä, kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatin avulla. Liuos väkevöitiin tyhjössä ja sitä käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 ( <230 mesh ASTM) avulla ja elutoitiin etyyliasetaatilla, jolloin saatiin erotetut diastereoisomeerit.
Ensimmäiseksi elutoitiin se diastereoisomeeri, jonka sivu-
AQ
ketjulla oli L-avaruusrakenne (0,44 g); /cx_7q + 71,5° (C 1 CHC13:ssa); vmaks (KBr), 3280 br, 1782, 1740, 1710, 86 78 702 1680 br, 1505 br, 1460, 1392, 1368, 1324 br, 1265 br, 1200 sh ja 1187 cm-1; 6(CDC13) 1,04-1,36 (9H, m, C(CH3)2 ja (CH2CH3), 3,31-3,65 (4H, m, NCHjCF^N), 3,90-4,15 (2H, m, CH2CH3), 4,39 (1H, s, 3-H), 5,13 (2H, s, CHjPh), 5,61 (1H, s, 5-H), 5,78 (1H, d, J8Hz, NHCH), 6,85-7,00 ja 7,11-7,40 (8H, m, fenyyli ja tienyyli-H-ryhmät), 7,75 (1H, s, CONH), 8,02 (1H, s, NHCHO), 8,11 (1H, s, CHO), 9,82 (1H, d, J8Hz, NHCH). Se diastereoisomeeri, jonka sivuketjulla oli D-avaruus-rakenne, elutoitui toisena (0,33 g) ; +79,8° (C 1 CHCl3:ssa); vmaks (KBr) 3400 sh, 3280, 1782, 1740 sh, 1710, 1680 br, 1505, 1460, 1391, 1368, 1330, 1280, 1262 ja 1185 cm~1} 6(CDC13) 0,98 ja 1,10-1,37 (9H, m, C(CH3)2 ja CH2CH3), 3,25-3,98 (6H, m, NCH2CH2NCH2), 4,38 (1H, s, 3-H), 5,12 (2H, s, CHjPh), 5,54 (1H, s, 5-H), 5,82 (1H, d, J8Hz, NHCH), 6,80- 7,00 ja 7,10-7,42 (8H, m, fenyyli ja tienyyli-H-ryhmät), 8,13 (2H, brs, NHCHO), 8,58 (1H, brs, CONH), 10,00 (1H, d, J8Hz, NHCH).
d) 6 8-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyy-liamino7“2-(tien-2-yyli)asetamido7-6a-formamidopenisil- laanihappo, natriumsuola_
Bentsyyli-6 8-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino/-2-(tien-2-yyli)asetamido/-6a-formamidopeni-sillanaattia (280 mg) tetrahydrofuraanissa (20 ml), joka sisälsi vettä (280 mg), hydrattiin 4 h 10 %:sen hiilellä olevan palladiumin (280 mg) ollessa katalyyttinä. Katalyytti poistettiin suodattamalla, se pestiin tetrahydrofuraanilla ja suodokset ja pesunesteet yhdistettiin ja väkevöitiin tyhjössä. Vesipitoinen jäännös peitettiin etyyliasetaatilla ja pH säädettiin arvoon 8 IM natriumbikarbonaattiliuoksella. Faasit erotettiin, vesipitoinen faasi pestiin etyyliasetaatilla ja eetterillä ja hapotettiin pH-arvoon 2 5M kloorivety-hapolla etyyliasetaatin läsnäollessa.
Faasit erotettiin ja vesipitoinen faasi uutettiin edelleen etyyliasetaatilla, uutteet yhdistettiin, pestiin vedellä pH-arvossa 2, kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivattiin 87 73702 vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuos haihdutettiin kuiviin tyhjössä, jolloin saatiin 66-/D-2-/T4-etyyli-2,3-di-oksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7-2-(tien-2-yyli)aset-amido/-6a~formamidopenisillaanihappoa (70 mg). Happo suspen-doitiin veteen (30 ml), pH säädettiin arvoon 6,1 lisäämällä IM natriumbikarbonaatin vesiliuosta ja 15 minuutin kuluttua seos suodatettiin ja suodos jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (58 mg) ; (KBr) 3740- 2600, 1770, 1720, 1680 br, 1610, 1510, 1400, 1370 ja 1190 cm-1; 6(D20) 1,08 ja 1,32 (6H, 2s, C(CH3)2),1,18 (3H, t, J8Hz, NCH2CH3), 3,50 (2H, q, J8Hz, NCH2CH3), 3,69 (2H, brt, NCH2CH2N), 4,00 (2H, brt, NCH2CH2N), 4,20 (1H, s, 3-H), 5,59 (1H, s, 5-H), 5,78 (1H, s, CH), 7,07, 7,28 ja 7,49 (3H, m, tienyyli-H-ryhmät), 8,10 (1H, s, CHO).
MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 0,1.
Esimerkki 27 6$-/L-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino/-2-(tien-2-yyli)asetamido7-6a-formamidopenisillaanihappo, natriumsuola_
Bentsyyli-63-i/L-2-Z (4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyy-liamino/-2-(tien-2-yyli)asetamido7-6a-formamidopenisillanaat-tia (390 mg) tetrahydrofuraanissa (25 ml), joka sisälsi vettä (2 ml), hydrattiin niin, että läsnä oli 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (390 mg) 2 tunnin ajan. Katalyytti poistettiin suodattamalla ja suodosta hydrattiin edelleen käyttäen tuoretta katalyyttiä (390 mg) 2 tunnin ajan. Katalyytti poistettiin suodattamalla, pestiin hyvin tetrahydrofuraanilla ja suodos ja pesuneste yhdistettiin, väkevöitiin tyhjössä ja väke-vöity jäännös laimennettiin etyyliasetaatilla. Seoksen pH säädettiin arvoon 7,5 IM natriumbikarbonaattiliuoksella ja faasit erotettiin. Vesipitoinen faasi pestiin etyyliasetaatilla ja eetterillä ja hapotettiin pH-arvoon 2 2M kloorivety-hapolla etyyliasetaatin läsnäollessa. Faasit erotettiin, vesipitoinen faasi uutettiin edelleen etyyliasetaatilla, uutteet yhdistettiin, pestiin vedellä pH-arvossa 2, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä magnesium- 88 73702 sulfaatilla ja liuos haihdutettiin kuiviin tyhjössä, jolloin saatiin 68-/L-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbo-nyyliamino7-2- {tien-2-yyli) asetamido7-6a-formamidopenisillaa-nihappoa (143 mg). Tämä suspendoitiin veteen (30 ml) ja pH säädettiin arvoon 6,5 IM natriumbikarbonaattiliuoksella, seos suodatettiin ja suodos jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (155 mg)} vmaks (KBr) 3800-2500, 1770, 1710, 1680 br, 1610, 1505, 1465, 1395, 1370 ja 1190 cm"1; 6(D20) 1,15 (3H, t, J8Hz, NCH2CH3), 1,22 ja 1,41 (6H, 2s, C(CH3)2), 3,45 (2H, t, J8Hz, CH2), 3,50-3,77 (2H, m, CH2), 3,81-4,05 (2H, m, CH2), 4,19 (1H, s, 3-H), 5,54 (1H, s, 5-H), 5,83 (1H, s, CH), 6,92-7,48 (3H, m, tienyyli-H-ryhmät), 8,05 (1H, s, CHO).
MIC (yug/ml) P. Mirabilis 889 0,5.
Esimerkki 28 68-/D-2-amino-2-(tien-2-yyli)asetamido/-6a-formamidopenisil- laanihappo____ a) Bentsyyli-6a-(metyylitio)-6 8-/DL-2-(4-nitrobentsyyli- oksikarbonyyliamino)-2-(tien-2-yyli)asetamido7penisilla- naatti_
Liuosta, jossa oli bentsyyli-68-amino-6a-metyylitiopenisilla-naattia (3,52 g) ja N,N1-disykloheksyylikarbodi-imidiä (2,26 g) asetonissa (20 ml), sekoitettiin ja jäähdytettiin lämpötilaan 0-5°C ja sitä käsiteltiin tipottain 1 tunnin kuluessa liuoksella, jossa oli DL-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyliami-no)-2-(tien-2-yyli)etikkahappoa (3,26 g) asetonissa (20 ml). Seoksen annettiin saavuttaa jälleen huoneen lämpötila 1 tunnin kuluessa ja sitä sekoitettiin sitten huoneen lämpötilassa 18 h. Saostunut Ν,Ν-disykloheksyyliurea poistettiin suodattamalla, pestiin asetonilla ja kuivattiin (1,67 g) . Suodos ja pesunesteet yhdistettiin ja haihdutettiin kuiviin tyhjössä. Suoritettaessa kromatografinen käsittely piioksidigeelin 60 ( <230 mesh ASTM) avulla ja elutoitaessa 20 %:sella etyyliasetaatilla sykloheksaanissa saatiin otsikossa mainittu yhdiste (5,1 g); vmaks (KBr) 3400 sh, 3050, 1780, 1745, 1720 sh, 1680, 1520, 1348, 1230, 1205 ja 1183 cm-1; 6(CDCl3) 1,10, 89 78702 l, 25, 1,30 ja 1,35 (6H, 4s, C(CH3)2), 2,02 ja 2,19 (3H, 2s, SCH3) 4,34 ja 4,40 (1H, 2s, 3-H), 5,15, 5,16 ja 5,22 (4H, 2s ja brs, 2CH2-ryhmät), 5,53 (1H, s, 5-H), 5,72-5,95 (1H, m, CH), 6,31 (1H, d, J8Hz, NHCH), 6,82-7,60 ja 8,05-8,25 (12H, m, CgH^, fenyyli ja tienyyli-H-ryhmät); todettu: M+ 670.1194, C30H29N4°8S3 vastaa ** 670.1178).
b) Bentsyyli-6a-amino-6$-/DL-2-(4-nitrobentsyylioksikarbo-nyyliamino)-2-(tien-2-yyli)asetamido/penisillanaatti
Bentsyyli-6a-(metyylitio)-68-/DL-2-(4-nitrobentsyylioksikarbo-nyyliamino)-2-(tien-2-yyli)asetamido/penisillanaattia (5,1 g) liuotettiin N,N-dimetyyliformamidiin (40 ml), jäähdytettiin lämpötilaan 0-5°C ja käsiteltiin elohopea-asetaatilla (2,4 g) ja sitten ammoniakilla (126 mg) N,N-dimetyyliformamidissa (6 ml). Seosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 15 min, se laimennettiin sitten etyyliasetaatilla (150 ml), suodatettiin ja faasit erotettiin. Etyyliasetaattikerros pestiin viidesti vedellä, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin vedettömän magnesiumsulfaatin avulla ja haihdutettiin kuiviin tyhjössä Käsiteltäessä kromatografisesti piioksidigeelin 60 (<230 mesh ASTM) avulla ja elutoitaessa 50 %:sella etyyliasetaatilla syk-loheksaanissa saatiin otsikossa mainittu yhdiste (3,3 g); v maks (KBr) 3370, 3310, 1772, 1738, 1725 sh, 1675 br, 1520, 1350, 1264, 1240 sh, 1210 ja 700 cm"1.
c) Bentsyyli-6a-formamido-66-/DL-2-(4-nitrobentsyylioksi-karboryyliamino)-2-(tlen-2-yyli)asetamidojpenisillanaatti
Liuosta, jossa oli bentsyyli-6a~amino-66-/DL-2-(4-nitrobentsyy-lioksikarbonyyliamino)-2-(tien-2-yyli)asetamido7penisillanaat-tia (3,0 g) dikloorimetaanissa (25 ml) lämpötilassa 0,5°C, käsiteltiin pyridiinillä (3,7 ml) ja tämän jälkeen etikkahappo-muurahaishappoanhydridillä (1,72 ml) typpikehässä. Puolen tunnin seisottamisen jälkeen lämpötilassa 0-5°C annettiin seoksen lämmetä jälleen huoneen lämpötilaan 1 h kuluessa, se pestiin IM kloorivetyhapolla, IM natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin vedettömän magnesiumsulfaatin avulla ja haihdutettiin kuiviin tyhjössä.
90 78702
Diastereoisomeerien puhdistaminen ja erottaminen suoritettiin käyttäen "Waters prep 500" suuritehoista kromatografista käsittelyä "PrepPak-500"/piioksidipatsaassa pysyvänä faasina ja 50 %:sta etyyliasetaatti-sykloheksaania elutoimis-aineena. Se materiaali, jonka sivuketjulla oli D-avaruusraken-ne, elutoitui ensin (1,15 g) ? /"q_7p° +168,5° (C 1 MeOHsssa) ; vmaks (KBr) 3300 br' 1780' 1740, 1700, 1680, 1520, 1350, 1247, 1210, 1185 ja 700 cm-1; 6(CDCl3) 1,07 ja 1,26 (6H, 2s, C(CH3)2), 4,38 (1H, s, 3-H), 5,13 (4H, brs, 2CH2-ryhmät), 5,60 (1H, s, 5-H), 5,68 (1H, d, J8Hz, CH), 6,81-7,49 (10H, m, fenyyli, tienyyli ja 2 CgH^ protonit), 7,65 (1H, brs, CONH), 7,70-8,00 (1H, NHCHO) , 8,01-8,20 (3H, m, CHO ja 2 CgH^protonit) . Se otsikossa mainittu yhdiste, jonka sivuketjulla oli L-avaruus-rakenne, elutoitui toisena (0,92 g); +112,8° (C 1
MeOH:ssa)·, vmaks (KBr) 3300 br, 1780, 1735, 1680 br, 1605, 1520, 1350, 1250 br, 1210 ja 700 cm"1? 6(CDC13) 1,15 ja 1,21 (6H, 2s, C(CH3)2), 4,39 (1H, s, 3-H), 5,12 (4H, brs, 2CH2-ryh-mät), 5,60 (1H, s, 5-H), 5,79 (1H, d, J8Hz, CH), 6,30-6,70 (1H, br, NHCH), 6,81-6,96 (2H, m, tienyyli-H2), 7,08-7,49 (8H, m, tienyyli-H, fenyyli ja 2 CgH4~protonit), 7,82 (1H, brs, CONH), 8,00-8,20 (2H, m, CHO ja 2 CgH4-protonit), 8,30-8,80 (1H, br, NHCHO).
d) 63~/D-2-amino-2-(tien-2-yyli)asetamido/-6a- formamidopenisillaanihappo_
Bentsyyli-6a-formamido-68-^D-2- (4-nitrobentsyylioks jkarbonyyliamino)- 2-(tien-2-yyli)asetamido7penisillanaattia (645 mg) liuotettiin tetrahydrofuraaniin (10 ml) ja liuos laimennettiin vedellä (2 ml) ennen hydraarnista käyttäen 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (650 mg) 4 tunnin ajan. Katalyytti poistettiin suodattamalla, pestiin tetrahydrofuraanilla ja vedellä, suodokset ja pesunesteet yhdistettiin, väkevöitiin, pestiin hyvin etyyliasetaatilla ja eetterillä ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (175 mg); vmaks (KBr) 3740-2200, 1770, 1675 br, 1604, 1500, 1390, 1340 ja 1250 cm"1.
91 73702
Esimerkki 29 6B-/L-2-amino-2- (tien-2-yyli) asetamido7“6a~fomicunidopenisil- laanihappo_
Bentsyyli-6a-formamido-68-/L-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyy-liamino)-2-(tien-2-yyli)asetamido7penisillanaattia (0,33 g) liuotettiin tetrahydrofuraaniin (10 ml), laimennettiin vedellä (5 ml), sitten etanolilla (3 ml) ja hydrattiin 10 %:sen hiilellä olevan palladiumin (0,33 g) läsnäollessa 1 h. Katalyytti poistettiin suodattamalla ja reaktioseokseen lisättiin uutta 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (0,33 g).
1 tunnin kuluttua katalyytti poistettiin suodattamalla, pestiin tetrahydrofuräänillä, vedellä ja etanolilla, suodos ja pesunesteet yhdistettiin ja väkevöitiin. Jäännös pestiin hyvin etyyliasetaatilla ja eetterillä ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (94 mg)j vmaks (KBr) 3420 b, 3230 br, 1768, 1670 br, 1600 br, 1510 br, 1380, 1340 ja 1250 cm-1.
Esimerkki 30 68-/T2R,3S)-3-bentsyylioksi-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-1-yyli)karbonyyliamino7butyramido/-6a~formamidopenisillaani- happo, natriumsuola_ a) (2R,3S)-3-bentsyylioksi-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin- 1-yyli)karbonyyliamino/butyyrlhappo_ O-bentsyyli-D-treoniinia (0,92 gj 4,4 mmoolia) (valmistettu menetelmällä, jonka ovat esittäneet T. Mizoguchi, G.Levin, D.W. Woolley ja J.M. Stewart, J.Org.Chem. 1968 3^3, 903, jossa on kuvattu L-isomeeri) suspendoitiin veteen (20 ml) ja pH säädettiin arvoon 9,5, jolloin aikaansaatiin käytännöllisesti katsoen täydellinen liukeneminen. Liuos jäähdytettiin lämpötilaan 0°C ja sitä sekoitettiin samalla kun siihen lisättiin tipottain 4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karbonyylikloridia (1,00 g; 4,9 mmoolia) AR-asetonissa (10 ml). Lisäämällä lisää emästä pidettiin pH arvossa 9,5 samalla kun liuoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan. 2 tunnin kuluttua liuos hapo-tettiin pH-arvoon 2 ja pääosa asetonia poistettiin haihduttamalla. öljymäinen tuote uutettiin etyyliasetaattiin (3 x 50 ml), tämän jälkeen kaikki orgaaniset faasit pestiin kerran 92 78702 suolaliuoksella ja kuivattiin natriumsulfaatilla. Haihdutettaessa saatiin otsikossa mainittu happo (1/36 g; 82 %) värittömänä, ei-kiteisenä vaahtona, josta liuottimen jäännökset eivät poistuneet helposti, 0,35 kloroformi/metanoli/ etikkahapossa 17:2:1; 6(CDCl3) 0,75-1,35 (5H, m, CH-jCH ja NCH2CH3), 3,1-3,7 (4H, m, 2 NCH2), 3,9-4,25 (2H, m, NCH2), 4,50 (2H, m, CH-CH), 6,25 (1H, brs, D20-vaihto, OH), 7,25 (5H, s, aryyli), 9,50 (1H, brd), J7Hz, D20-vaihto, NH), 9,70 (1H, brs, D20-vaihto, C02H).
b) Bentsyyli-68-/T2R,3S)-3-bentsyylioksi-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/butyramido/-6a- (metyylitio)penisillanaatti_
Edellä mainittu hapan bentsyylieetteri (1,29 g; 3,42 mmoolia) liuotettiin kuivaan dikloorimetaaniin (7 ml) ja lisättiin ti-pottain samalla sekoittaen lämpötilassa 0°C 1/2 tunnin kuluessa liuokseen, jossa oli bentsyyli-66-amino-6a-(metyylitio)-penisillanaattia (1,20 g; 3,4 mmoolia) ja disykloheksyyli-karbodi-imidiä (0,70 g; 3,4 mmoolia) dikloorimetaanissa (5 ml). Seoksen annettiin saavuttaa jälleen huoneen lämpötila ja sekoittamista jatkettiin yli yön. 16 tunnin kuluttua saostunut di-sykloheksyyliurea erotettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin ja suodatettu liuos pestiin peräkkäin vedellä, 0,5M kloorivety-hapolla, vedellä, kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, vedellä ja suolaliuoksella ja kuivattiin sitten nat-riumsulfaatin avulla. Haihdutettaessa saatiin raakatuotetta, jota käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelissä (120 g) ja elutoitiin 2 %:sella kloroformissa olevalla metanolilla, jolloin saatiin otsikossa mainittu 6 -(metyylitio)penisillii-niesteri värittömänä hajoavana vaahtona (0,59 g; 24 %);
Rf 0,60 10 %:sessa metanoli-klorofonnissa; 6(CDC13) 1,17 (3H, t, J7Hz, NCH2CH3), 1,26 (3H, d, J7Hz, CH3CH), 1,32 ja 1,45 (6H, 2s, (CH3)20, 2,12 (3H, s, CH3S) , 3,50 (4H, m, 2 NCH2), 3,90-4,30 /3H, m, NCH2+CH(CH3]7, 4,42 (1H, s, 3-H), 4,45-4,65 (3H, m, Ph CH20 (eetteri) + CHNH), 5,15 (2H, s, Ph CH20), 5,51 (1H, s, 5-H), 7,27 ja 7,32 (10H, 2s, fenyylit), 7,62 (1H, brs, D20-vaihto, 6-NH), 9,50 (1K, brd, J7Hz, D20-vaihto, CH-NH).
93 7 8 7 0 2 c) Bentsyyli-63-/72R,3S)-3-bentsyylioksi-2-/T4-etyyli-2,3- dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7butyramido/-6a-aminopenlslllanaattl_
Edellä mainittu 6<x-metyylitio johdannainen (0,59 g? 0,83mmoo-lia) liuotettiin kuivaan dimetyyliformamidiin (6,4 ml) ja sitä sekoitettiin typpikehässä lämpötilassa -40°C merkuriase-taatissa (0,26 g; 1 ekv.) ja lisättiin peräkkäisesti ammoniakkia (0,016 g; 1 ekv.) dimetyyliformamidissa (1 ml), ja seoksen annettiin sitten saavuttaa jälleen huoneen lämpötila ja sitä sekoitettiin 1,5 h. Edelleenkäsittely suoritettiin jakamalla reaktioseos etyyliasetaatin ja veden kesken, orgaaninen faasi erotettiin, pestiin vielä vedellä (4 kertaa) ja suolaliuoksella ja kuivattiin natriumsulfaatin avulla. Haihdutettaessa saatiin 6a-amino-penisilliini hajoavan keltaisen vaahdon (0,44 g) muodossa, joka oli riittävän puhdasta välittömästi käytettäväksi? 0,4 10 %:sessa metanoli-klorofor-missa? 6(CDC13) 1,14 (3H, t, J7Hz, NCH2CH3), 1,26 (3H, d, J 7Hz, CH3 CHO), 1,30 ja 1,42 (6H, 2s, (CH3)2C), 2,87 (2H, brs, DjO-vaihto, NH2), 3,30-3,75 (4H, m, 2 NCH2), 3,90-4,30 (3H, m, NCH2 & CHNH), 4,41 (1H, s, 3-H), 4,50 (1H, m, CHO), 4,59 (2H, s, PhCH20-eetterissä), 5,20 (2H, s, Ph CH20-esterissä), 5,33 (1H, s, 5-H), 7,2-7,5 (10H, m, fenyylit), 8,07 (1H, brs, D20-vaihto, 6-NH), 9,55 (1H, brd, J7Hz, D20-vaihto, CHNH).
d) Bentsyyli-6B-/72R,3S)-3-bentsyylioksi-2-/(4-etyyli-2,3- dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/butyramido7-6a~ formamidopenisillanaatti_
Edellä saatu 6a-aminojohdannainen (0,42 g? 0,62 mmoolia) liuotettiin dikloorimetaaniin (5,5 ml) ja sekoitettiin lämpötilassa 0°C lisäämällä samalla pyridiiniä (0,49 ml? 10 ekv.) ja etikkahappo-muurahaishappoanhydridiä (0,25 ml? 5 ekv.). Liuoksen annettiin saavuttaa jälleen huoneen lämpötila ja sitä sekoitettiin 1 h. Se jaettiin sitten 0,5M kloorivetyhapon ja riittävän määrän etyyliasetaattia kesken, jolloin orgaaninen kerros muodostui ylemmäksi kerrokseksi. Orgaaninen faasi erotettiin ja pestiin 0,5M kloorivetyhapolla, vedellä, kyllästettiin natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, vedellä ja suolaliuoksella ja kuivattiin natriumsulfaatin avulla. Haihdutet- 94 78702 taessa saatiin keltaista kiinteätä ainetta, jota käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin (40 g) avulla ja elutoi-tiin 2 %:sella metanoli-kloroformilla. Tuoterikkaista fraktioista saatiin haihduttamisen ja eetterin kanssa hankaami-sen jälkeen otsikossa mainittu 6a-formamidopenisilliini valkoisena puolikiinteänä aineena (0,25 g; 57 %) ; 0,35 10 %:sessa metanoli-kloroformissa; ö/7CD3)2C07 1,13 (3H, t, J 7Hz, NCH2CH3), 1,25 (3H, d, J7Hz, CH-jCH) , 1,31 ja 1,46 (6H, 2s, (CH3)2C), 3,30-3,75 (4H, m, 2 NCH2), 3,90-4,30 (3H, m, NCH2 + CHNH), 4,48 (1H, S, 3-H), 4,55 (1H, m, CHO), 4,60 (2H, s, PhCH20-eetterissä), 5,20 (2H, s, PhCH20-esterissä), 5,60 (1H, s, 5-H), 7,20-7,50 (10H, m, fenyylit), 8,12 (1H, s, NHCHO), 8,22 ja 8,35 (2H, 2 brs, D20-vaihto, 6-NH-ryhmät), 9,55 (1H, brd, J7Hz, D20-vaihto, CKNH).
e) 6 3-/T2R,2S)-3-bentsyylioksi-2-/74-etyyli-2,3-diokso-piperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7butyramido7“6a-form- amldopenisillaanihappo, natriumsuola_
Edellä saatu 6a-formamido-bentsyyliesteri (0,23 g; 0,32 mmoo-lia) liuotettiin tetrahydrofuraani/veteen (10 ml; 4:1). Sitten lisättiin 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumkatalyyttiä (0,15 g) ja seosta hydrattiin kaikkiaan 6 h käyttäen yhtä suodatusta ja katalyytin vaihtoa 3 h kuluttua. Tämän ajan kuluttua katalyytti erotettiin suodattamalla ja pestiin hyvin kummallakin liuottimena, tämän jälkeen suodos väkevöitiin tetra-hydrofuraanin poistamiseksi ja jaettiin etyyliasetaatin ja IM natriumbikarbonaattiliuoksen kesken (kaksi erää). Vesifaasi tehtiin happamaksi pH-arvoon 2 2M kloorivetyhapolla ja tuote uutettiin tetrahydrofuraani/etyyliasetaatilla (kolme erää 1:1). Orgaaninen uute kuivattiin natriumsulfaatin avulla ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin asetoniin ja muutettiin natriumsuolakseen lisäämällä 2M natrium-2-etyyli-heksanoaattia metyyli-isobutyyliketonissa. Tällä menetelmällä saatiin otsikossa mainittu penisilliini (90 mg; 55 %);
Rf 0,45 n-butanoli/etikkahappo/vedessä 4:1:1, vmafcs (KBr) 1765, 1710 cm-1; 6(D20) 1,18 (3H, t, J7Hz, NCH2CH3), 1,2-1,5 (9H, m, CH3CH & (CH3)2C), 3,30-3,75 (4H, m, 2 NCH2), 3,90-4,10 (2H, m, NCH2), 5,21 (2H, s, PhCH20), 5,51 (1H, s, 5-H), 7,30 95 78702 (5H, s, fenyylit), 8,05 (1H, s, NHCHO), 8,15 (1H, brd, J 7Hz, vaihto, NH). Muut signaalit peittää vesihuippu.
MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 >100.
Esimerkki 31
Bentsyyli-60-amino-6g-formamidopenisillanaatti a) Bentsyyli-60-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliamino)-6a- • (metyylitio)penisillanaatti_
Bentsyyli-60-amino-6ar-(metyylitio)penisillanaattia (3,52 g; 10 mmoolia) sekoitettiin lämpötilassa 0°C kuivan pyridiinin (1,22 ml; 1.5 ekv.) kanssa kuivassa dikloorimetaanissa (20 ml). Liuos, ^ jossa oli 2,2,2-trikloorietyyli-kloroformaattia (2,20 g; 1.5 ekv.) samassa liuottimessa, lisättiin tipottain noin 0,25 h kuluessa. Saadun seoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja se kaadettiin sitten seokseen, jossa oli etyyliasetaattia (50 ml) ja 0,5 M kloorivetyhappoa (30 ml). Orgaaninen faasi erotettiin ja pestiin edelleen 0,5 M kloorivety-hapolla (kaksi kertaa), vedellä, kyllästetyllä natriumbi-karbonaattiliuoksella, vedellä ja suolaliuoksella ja kuivat- _ tiin sitten natriumsulfaatin avulla. Haihdutettaessa saatiin suojattu 6a-(metyylitio)-johdannainen hauraan melkein värittömänä vaahtona (5,17 g; 98 %); 0,80 10 %:sessa metano- li-kloroformissa; 6(CDC13) 1,45 ja 1,60 (6H, 2s, C(CH3)2), 2,40 (3H, s, CH3S), 4,60 (lH,~s, 3-H), 4,85 (2H, kapea d, C13CCH20), 5,30 (2H, S, PhCH20), 5,60 (1H, S, 5-H), 6,40 (1H, brs, D20-vaihto, NH), 7,50 (5H, s, fenyylit); (Todettu: M+, 525.9943. ci9H2iC13N2°5S2 vastaa *?, 525.9940).
b) Bentsyyli-6 0-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliamino)-6a- aminopenisillanaatti_
Bentsyyli-60-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliamino)-6a~(metyylitio) penisillanaattia (5,15 g; 9,76 mmoolia) liuotettiin kuivaan dimetyyliformamidiin (20 ml) ja jäähdytettiin lämpötilaan -40°C samalla sekoittaen. Tähän liuokseen lisättiin peräkkäin elohopea-asetaattia (3,15 g; 1 ekv.), ja liuos, jossa oli vedetöntä ammoniakkia (0,17 g; 1 ekv.) kuivassa dimetyyliformamidissa (6 ml). Saadun seoksen annettiin läm-" _ metä huoneen lämpötilaan 1 tunnin kuluessa ja se kaadettiin __ - -db 9« 78702 sitten seokseen, jossa oli etyyliasetaattia (100 ml) ja vettä (50 ml). Orgaaninen faasi erotettiin ja pestiin edelleen vedellä (4 kertaa), sitten suolaliuoksella ja kuivattiin natriumsulfaatin avulla. Haihdutettaessa saatiin 6ot-amino-penisilliini vaaleankeltaisena vaahtona (4,44 g; 89 %), jota käytettiin sitä enempää puhdistamatta, 0,65 10 irsessa metanoli-kloroformissa; 6(CDC13) 1,40 ja 1,55 (6H, 2s, (CH3)2C), 2,65 (2H, brs, D20-vaihto, NH2), 4,55 (1H, s, 3-H), 4,80 (2H, s, C13CCH20), 5,25 (2H, s, PhCH20), 5,45 (1H, s, 5-H), 6,45 (1H, brs, D20-vaihto, NH), 7,45 (5H, s, fenyylit).
(c) Bentsyyli-68-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliamino)- 6a-formamidopenisillanaatti_
Bentsyyli-68-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliamino)-6a-amino-penisillanaattia (4,40 g; 8,86 mmoolia) sekoitettiin lämpötilassa 0°C kuivassa dikloorimetaanissa (30 ml). Tähän liuokseen lisättiin kuivaa pyridiiniä (6,95 ml; 10 ekv.) ja etik-kahappo-muurahaishappoanhydridiä (3,51 ml; 10 ekv.). Saadun vaaleankeltaisen liuoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan 1 h kuluessa, se pestiin sitten peräkkäin 0,5 M kloo-rivetyhapolla (2 x 100 ml), vedellä, kyllästetyllä natrium-bikarbonaattiliuoksella, vedellä ja suolaliuoksella ja kuivattiin lopuksi natriumsulfaatin avulla. Haihdutettaessa saatiin raakatuote, jota käsiteltiin kromatografisesti piioksidi-geelin avulla (350 g) ja elutoitiin 2 %;sella metanoli-kloroformilla, jolloin saatiin haluttu 6a-formamidopenisil-liini (3,03 g; 65 %). Tämän huomattiin myöhemmin kiteytyvän hangattaessa sitä eetterin kanssa, sp. 132-134°C, Rf 0,45 10 %:sessa metanoli-kloroformissa; vma^s (KBr) 3340, 3160, 1790, 1745 ja 1670 cm"1; 6 (CDC13) 1,37 ja 1,53 (6H, 2s, (CH3)2C), 4,52 (1H, s, 3-H), 4,72 (2H, s, C13CCH20), 5,17 (2H, s, PhCH20), 5,66 (1H, s, 5-H), 6,75 (1H, brs, D20-vaihto, NH), 7,34 (5H, s, fenyylit), 7,70 (1H, brs, D20-vaihto, NH), 8,19 (1H, s, NHCHO); Todettu: C 43,6, H 4,1, N 7,85 %. C19H20C13N3°6^ vastaa c 43,5, H 3,8, N 8,0 %).
97 73702 d) Bentsyyli-6S-amino-6a-formamidopenisillanaatti Bentsyyli-66-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliamino)-6a-formamidopenisillanaattia (1,44 g; 2,75 mmoolia) liuotettiin tetrahydrofuraaniin (45 ml) ja 1M kaliumdivetyfosfaat-tiin (9 ml). Saatua seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa ja lisättiin jauhemaista sinkkiä (2 g), joka oli hiljakkoin aktivoitu pesemällä kloorivetyhapolla ja sitten vedellä. Seoksen pH pidettiin arvossa 4,5 lisäämällä 2M kloorivety-happoa. Reaktion kulkua säädettiin t.l.c.-analyysin avulla ja 4 tunnin kuluttua lähtöainetta ei voitu todeta. Edelleen käsittelyä varten erotettiin sinkki suodattamalla ja suodos jaettiin etyyliasetaatin ja veden kesken. Orgaaninen faasi erotettiin ja pestiin edelleen veden ja suolaliuoksen avulla ja kuivattiin sitten natriumsulfaatin avulla. Haihdutettaessa saatiin raakatuote vaaleankeltaisena hartsina (0,66 g» 84 %), R^ 0,30 10 %:sessa metanoli-kloroformissa. Tuote ei ollut pysyvä tässä muodossa. Se voitiin kuitenkin muuttaa kiteiseksi tolueeni-p-sulfonaattisuolakseen sekoittamalla etyyliasetaattiliuoksen kanssa käyttäen stökiometristä määrää tolueeni-p-sulfonihappoa lietteenä etyyliasetaatissa. Tällä tavoin 0,44 g:sta (1,26 mmoolia) epäpuhdasta vapaata emästä saatiin 0,44 g (67 %) 6$-amino-johdannaista tolueeni- 4 p-sulfonaattina. Suola oli liuotettava d -metanoliin tai d6-dimetyylisulfoksidiin n.m.r.-analyysin suorittamiseksi ja siinä tapahtui jossain määrin hajoamista. Suoritettaessa talteenotto kuitenkin puhtaana emäksenä sen jälkeen, kun suola oli seissyt eksikaattorissa viikon ajan, saatiin puhdas tuote? R^ kuten edellä; 6(CDCl^) 1,45 ja 1,70 (6H, 2s, (CH3)2C); 2,60 (2H, brs, D20-vaihto, NH2); 4,60 (1H, s, 3-H); 5,30 (2H, s, PhCH20); 5,70 (1H, s, 5-H) , 7,05 (1H, brs, D20-vaihto, NHCHO), 7,50 (5H, s, fenyylit), 8,35 (1H, s, NHCHO).
Esimerkki 32 6a-formamido-6 (J-/D-2-(4-hydroksifenyyli)-2-/3-/4-hydroksi-2-(fenyyliamino)pyrimidin-5-yyli7ureido7asetamido7penisillaani- happo, natriumsuola_ 6 |3-/D-2-amino-2- (4-hydroksifenyyli)asetamido7“6a-formamido-penisillaanihappoa (0,20 g) suspendoitiin veteen (20 ml) ja pH säädettiin arvoon 7,5 lisäämällä trietyyliamiinia. Saatua 98 78702 liuosta sekoitettiin ja se jäähdytettiin lämpötilaan 0-5°C ja sitä käsiteltiin annoksittain /4-hydroksi-2-(fenyyliamino)-pyrimidin-5-yyli7aminokarbonyylikloridilla (0,114 g) ja pH pidettiin arvossa välillä 7 ja 7,5 lisäämällä trietyyliamii-nia. Seosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 1/2 tuntia ja se väkevöitiin sitten alipaineessa. Vesipitoinen jäännös pestiin kahdesti etyyliasetaatilla (25 ml) ja dietyylieette-rillä ennen hapottamista pH-arvoon 2 5M kloorivetyhapolla etyyliasetaatin läsnäollessa (25 ml). Saatu sakka otettiin talteen suodattamalla, pestiin vedellä, etyyliasetaatilla ja dietyylieetterillä ja suspendoitiin veteen (10 ml), joka sisälsi natriumbikarbonaattia (0,018 g), seos suodatettiin ja suodos jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,15 g); vmaks (KBr) 3700-3200, 1770, 1660, 1610, 1593, 1540, 1518, 1499, 1444, 1390, 1350 sh, 1265 sh, ja 1217 cm"1; δ /P2°/(CD3)2SO/CD3ODj 2:l:l7 0,95 ja 1,29 (6H, 2s, C(CH3)2), 4,05 (1H, s, 3-H), 5,26 (1H, S, CHCO), 5,50, (1H, s, 5-H), 6,64-6,90 ja 7,00-7,50 (9H, 2m, fenyyli ja CgH4), 7,90 (1H, s, pyrimidiini-H), 8,02 (1H, s, CHO).
MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 5,0.
Esimerkki 33 66-/2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7- 2-(3,4-dihydroksifenyyli)asetamido/-6ot“fonnainidopenisillaani- happo, natrlumsuola_
Subtilisin-alkalaasia (Mitibishu WH-105) pestiin huolellisesti vedellä kaikkien sakan yläpuolella olevien puskurijään-nösten poistamiseksi. Kosteata hartsiin sidottua entsyymiä (2 g) lisättiin sekoitettuun liuokseen, jossa oli 6β-/2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/-2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido7”6a-formamidopenisillaani-hapon natriumsuolaa (100 mg; 0,143 mmoolia) vedessä (10 ml) huoneen lämpötilassa. Tehokas pH-arvo oli 7,5-8,0. Tunnin kuluttua hartsi erotettiin suodattamalla ja suodos kyllästettiin natriumkloridilla ja hapotettiin sitten pH-arvoon 2 2M kloorivetyhapolla ja uutettiin sitten etyyliasetaatti/tetra-hydrofuraaniin (1:1 3 x 20 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivattiin natriumsulfaatin avulla ja haihdutettiin 99 78702 kuiviin ja suspendoitiin sitten veteen (5 ml). Tämän jälkeen pH säädettiin arvoon 6,5 lisäämällä natriumbikarbonaat-tiliuosta, jolloin saatiin kirkas liuos. Haihduttamista seurasi hankaaminen asetonin kanssa, suodattaminen, peseminen asetonilla ja eetterillä, ja kuivattaessa saatiin di-hydroksi-penisilliinin natriumsuola (40 mg; 45 %), Rf 0,15 n-butanoli/etikkahappo/vedessä 4:1:1; vmaks (KBr) 1770, 1710, 1675, 1560 cm"1; δ (D20) 0,93 ja 1,32 (6H, 2s, (CH3)2C), 1,20 (3H, t, J7Hz, CH3CH2N), 3,30-3,80 (4H, im, 2 x CH2N), 3,90-4,10 (2H, m, CH2N), 4,15 (1H, s, 3-H), 5,27 (1H, s, 5-H), 5,57 (1H, s, COCHN), 6,80-7,00 (3H, m, aryyli-H), 8,10 (1H, s, NHCHO). MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 0,2.
Esimerkki 34 7 fä-amino-7ot-formamidokefalosporaanihappo trifluorietikkahappo-suola_ a) t-butyyli-7a-metyylitio-73-(trikloorietoksikarbonyyli- amino)kefalosporanaatti_ t-butyyli-73-amino-7a-(metyylitio)kefalosporanaattia (6,92 g; 18,5 mmoolia) dikloorimetaanissa (50 ml) ja pyridiinissä (2,2 ml; 27,2 mmoolia) jäähdytettiin lämpötilaan 0°C ja käsiteltiin lisäämällä tipottain 1/2 tunnin kuluessa liuosta, jossa oli 2,2,2-trikloorietyyli-kloroformaattia (2,5 ml; 18,5 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml). Kun lisääminen oli päättynyt, reaktioliuosta sekoitettiin 5 minuuttia, pestiin IN kloorivetyhappoliuoksella, suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla ja haihdutettiin, jolloin saatiin melkein puhdas tuote (9,86 g, 97 %), 6(CDCl3) 1,54 (9H, s, C(CH3>3), 2,06 (3H, s, 0C0CH3), 2,38 (3H, s, SCH3), 3,35 & 3,49 (2H, ABq, J18HZ, 2-H2) 4,6-5,2 (5H, m, 6-H, CH20Ac, CH2CC13), 6,08 (1H, s, NH); Vmaks (CH2C12) 3380, 2930, 1780, 1740, 1620 cm 1; (Laskettu: M+, 548.0010. ci8H23^'13N2°7®2 vas*-aa M, 548.0010).
b) t-butyyli-7 a-amino-7 g- (trikloorietoksikarbonyyliamino)- kefalosporanaatti_ t-butyyli-7a-metyylitio-7g--trikloorietoksikarbonyyliamino-kefalosporanaattia (9,86 g; 17,9 mmoolia) dimetyyliformamidissa 10° 73702 (60 ml) lämpötilassa -40°C käsiteltiin liuoksella, jossa oli elohopea-asetaattia (5,72 g; 17,9 mmoolia) dimetyyliformami-dissa (10 ml) ja tämän jälkeen ammoniakilla (0,30 g; 17,9 mmoolia) dimetyyliformamidissa (15 ml). Reaktioseoksen annettiin lämmetä lämpötilaan 0°C 1,5 tunnin kuluessa, se kaadettiin sitten etyyliasetaattiin, pestiin hyvin vedellä, suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (8,0 g; 86 %) ; 6{CDC13) 1,56 (9H, s, C(CH3)3), 2,10 (3H, s, 0C0CH3), 2,75 (2H, brs, NH2), 3,32 & 3,52 (2H, ABq, J18Hz, 2-H2), 4,4-5,2 (5H, m, 6-H, CH20Ac, CH2CC13), 6,53 (1H, s, NH). Vmakg (THF) 3200, 1790, 1740, 1730 cm c) t-butyyli-7a-formamido-78-(trikloorietoksikarbonyyliamino)- kefalosporanaatti_ t-butyyli-7a-amino-7 8-(trikloorietoksikarbonyyliamino)kefalo-sporanaattia (8,0 g; 0,015 moolia) dikloorimetaanissa (60 ml) jäähdytettiin lämpötilaan 0°C ja käsiteltiin pyridiinillä (13 ml; 0,16 moolia) ja etikkahappo-muurahaishappoanhydridillä (6,5 ml; 0,082 moolia). Reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa 0°C 1,5 h, pestiin IN kloorivetyhapolla, kyllästettiin natriumbikarbonaattiliuoksella, suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (8,13 g, 96 %) ; δ (CDCl-j) 1,53 (9H, s, C(CH3)3), 2,07 (3H, s, 0C0CH3), 3,28 & 3,46 (2H, ABq, Jl7Hz, 2-H2), 4,7-5,3 (5H, m, 6-H, CH20Ac, CH2CC13), 6,66 (1H, s, NH), 7,63 (1H, brs, NH), 8,22 (1H, s, CHO); vmaks (CH2Cl2), 3380, 1790, 1735, 1700 cm"1.
d) t-butyyli-7 B-amino-7g-formamidokefalosporanaatti t-butyyli-7a-formamido-7 8-(trikloorietoksikarbonyyliamino)-kefalosporanaattia (8,13 g; 14,9 mmoolia) tetrahydrofuraanissa (100 ml) ja IM kaliumdivetyfosfaattiliuosta (20 ml) sekoitettiin sinkkijauhon (15 g) kanssa, joka oli hiljattain aktivoitu pesemällä 5N kloorivetyhapolla ja tämän jälkeen vedellä.
6 tunnin kuluttua reaktioseos suodatettiin ja tetrahydrofuraani haihdutettiin. Jäännös laimennettiin etyyliasetaatilla, pestiin vedellä, suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin. Raakatuote kiteytettiin uudelleen etyyliasetaatti/heksaanista, ιοί 78702 jolloin saatiin tuote (2,5 g; 45 %); sp. 166-170°C (haj.)j 6(CDC13) 1,58 (9H, s, C(CH3)3), 2,10 (3H, s, OCOCH3), 2,43 (2H, s, NH2), 3,35 & 3,55 (2H, ABq, J18Hz, 2-H2), 4,81 & 4,99 (2H, ABq, Jl3Hz), CH2OCO), 5,11 (1H, s, 6-H), 6,92 (1H, s, NH), 8,25 & 8,26 (1H, 2s, CHO); vmaks (CH2C12) 3410, 1790, 1740, 1700 cm-1; (Todettu: C 48,5, H 5,9, N 11,4 %.
C15H21N3°6Svastaa C 48'5' H 5'7' N lli3 %)* e) 78-amino-7a-formamidokefalosporaanihappo, trifluorietikka- happosuola_ t-butyyli-78-amino-7a-formamidokefalosporanaattia (0,10 g; 0,23 mmoolia) trifluorietikkahapossa (5 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa 1/2 tuntia. Liuos haihdutettiin kuiviin ja jäännöstä hangattiin eetterin kanssa ja kiinteä tuote suodatettiin ja kuivattiin (0,083 g, 72 %); δ(CFjCOOH), 2,23 (3H, S, C0CH3), 3,74 (2H, s, 2-H2>, 5,27 ja 5,41 (2H, ABq, J15Hz, CH20C0) f 5,41 (1H, s, 6-H), 8,52 (1H, s, CHO) } ^>maks (KBr) 3320, 2980, 2960, 1795, 1780, 1725 ja 1665 cm"1.
Esimerkki 35 7β- (D-2-amino-2-fenyyliasetamido) -7ot-formamidokefalosporaani- happo, trifluorietikkahapposuola__ a) t-butyyli-78-/D-2-(t-butoksikarbonyyliamino)-2-fenyyli- asetamido/-7a-formamidokefalosporanaatti_
Liuos, jossa oli D-2-(t-butoksikarbonyyliamino)-2-fenyylietik-kahappoa (0,126 g; 0,5 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml), lisättiin hitaasti tipottain sekoitettuun liuokseen, jossa oli t-butyyli-78-amino-7a-formamidokefalosporanaattia (0,186 g; 0,5 mmoolia) ja N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidiä (0,113 g; 0,55 mmoolia) dikloorimetaanissa (15 ml). Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 vuorokautta ennen suodattamista ja se haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, suodatettiin, pestiin laimealla kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, suolavedellä ja kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla. Liuos haihdutettiin sitten kuiviin ja raakatuotetta käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 (<230 mesh) avulla ja elutoitiin etyyli-asetaatti/heksaanilla 1:1, jolloin saatiin otsikossa mainittu 102 78702 yhdiste (0,100 g; 33 %) f Xmakg (EtOH) 261 nm (ε 7340) } vmakg (CH2C12) 3380, 3265, 1788, 1740 sh, 1722, 1685 cm-1f 6(CDC13) 1,37 (9H, s, (CH3)3COCONH) , 1,51 (9H, s, (CH^COCO), 2,01 (3H, s, 0C0CH3), 2,95 ja 3,21 (2H, ABq, J17Hz, 2-H2), 4,78 ja 4,95 (2H, ABq, J13Hz, -CH2OCOCH3), 5,21 (1H, s, 6-H), 5,44 (1H, d, J8Hz, α-protoni), 7,20-7,60 (6H, m, aromaattiset, ja α-NHCO), 7,83 (1H, brs, NHCHO), 8,07 (1H, s, NHCHO) ja 8,68 (1H, s, 78-NHCO).
b) 78-(D-2-amino-2-fenyyliasetamido)-7a-formamidokefalo- sporaanihappo, trifluorletikkahapposuola_
Liuoksen, jossa oli t-butyyli-76~/D-2-(t-butoksikarbonyyliami-no)-2-fenyyliasetamido/-7a-formamidokefalosporanaattia (0,087 g; 0,144 mmoolia) trifluorietikkahapossa (5 ml), annettiin seistä huoneen lämpötilassa 1/2 tuntia. Se haihdutettiin sitten kuiviin, käsiteltiin tolueenilla ja haihdutettiin uudelleen. Jäännöstä hangattiin eetterin kanssa ja saatu kiinteä aine suodatettiin ja pestiin hyvin eetterillä ja etyyliasetaatilla. Se kuivattiin tyhjössä, jolloin tuote saatiin vaaleankeltaisena, kiinteänä aineena (0,041 g, 51 %) ; ^makg (H20) 260 nm ( ε 8959) ; vmaks (KBr) 1780, 1735 sh, 1680, 1620 sh, 1500 cm-1; δ(CF3C02D) 2,23 (3H, s, 0C0CH3), 3,12 ja 3,40 (2H, ABq, J17HZ, 2-H2) , 5,22 ja 5,42 (2H, ABq, J14HZ, CH^COCHj), 5,39 (1H, s, 6-H), 5,54 (1H, s, a-protoni), 7,57 (5H, s, aromaattiset) ja 8,33 (1H, s, NHCHO).
MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 >100.
Esimerkki 36 78-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7~ 2-fenyyliasetamido/-7oi-formamidokefalosporaanihappo, natrium- suola_ a) t-butyyli-78-/D-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino/-2-fenyyliasetamido/-7a-(metyylitio)kefa- losporanaatti__ D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsi n-l-yyli)karbonyyliamino7~2-fenyylietikkahappo (0,48 g; 1,5 mmoolia) dikloorimetaanissa (30 ml) muutettiin happokloridikseen käsittelemällä oksalyyliklori- 103 78 702 dilla (0,38 g; 3 iranoolia). Kun oli sekoitettu huoneen lämpötilassa 1 tunti, haihdutettiin reaktioliuos kuiviin. Saatu happokloridi dikloorimetaanissa (20 ml) lisättiin sitten tipottain sekoitettuun seokseen, jossa oli t-butyyli-7a-amino-73-(metyylitio)kefalosporanaattia (0,56 g; 1,5 mmoo-lia) ja jauhettua 4A molekyyliseulaa (3,0 g) dikloorimetaanissa (25 ml) lämpötilassa 0°C. Seosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 1/2 tuntia ja tämän jälkeen 2 h huoneen lämpötilassa ennen suodattamista ja kuiviin haihduttamista. Raakatuotetta käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 ( <230 mesh ASTM) avulla, elutoitiin etyyliasetaatti/heksaanilla 2:1 sekä etyyliasetaatilla, jolloin saatiin haluttua tuotetta 0,61 g (60 %) v v. (CH0Cl0) 3390, 3280, 1790, 1740 sh, 1725, 1698 cm”1; 6(CDC13) 1,22 (3H, t, J7Hz, CH2gH3), 1,53 (9H, s, C(CH3)3), 2,09 (3H, s, 0C0CH3), 2,30 (3H, s, SCH3), 3,20 ja 3,40 (2H, ABq, J18Hz, 2-H2), 3,54 (4H, m, piperatsiini CH2 ja CH2CH3), 3,90-4,20 (2H, m, piperatsiini CH2), 4,77 ja 5,03 (2H, ABq, J13Hz, CHjOCOCH-j) , 4,91 (1H, s, 6-H) 5,67 (1H, d, J7Hz, α-protoni), 7,16 (1H, s, 78-NHCO-), 7,30-7,55 (5H, m, aromaattiset) ja 10,01 (1H, d, J7Hz, a-NHC0-).
b) t-butyyli-7a-amino-7 B-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperat-sin-l-yyli)karbonyyliamino7-2-fenyyliasetamido7kefalo- sporanaatti_ t-butyyli-7 B-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino/-2-fenyyliasetamido/-7a-(metyylitio)kefalo-sporanaatti (0,52 g; 0,77 mmoolia) dimetyyliformamidissa (15 ml) jäähdytettiin lämpötilaan -50°C typpikehässä. Sitten lisättiin liuos, jossa oli merkuriasetaattia (0,25 g; 0,77 mmoolia) dimetyyliformamidissa (0,77 ml), ja tämän jälkeen välittömästi ammoniakkia (0,014 g; 0,85 mmoolia) dimetyyliformamidissa (1 ml). Seosta sekoitettiin lämpötilassa välillä -50 ja -20°C 1 tunti ennen sen kaatamista etyyliasetaattiin ja pesemistä vedellä ja suolaliuoksella. Orgaaninen liuos kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin raakatuote. Käsiteltäessä kroma- 104 73702 tografisesti piioksidigeelin 60 ( < 230 mesh ASTM) avulla ja elutoltaessa etyyliasetaatilla saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,20 g? 41 %)? vmakg (CH2C12) 3490, 3290, 1790, 1740 sh, 1725, 1695 cm”1·, 6 (CDCl-j) 1,23 (3H, t, J6Hz, CHjCH-j) , 1.54 (9H, s, C(CH3)3), 2,08 (3H, s, 0C0CH3), 2,95 (2H, brs, NH2), 3,09 ja 3,37 (2H, ABq, Jl8Hz, 2-H2), 3,54 (4H, m, piper-atsiini-CH2 ja -CH^CH^), 3,88-4,20 (2H, m, piperatsiini-CH2), 4,72 ja 4,97 (2H, ABq, J13HZ, CH2OCOCH3), 4,88 (1H, s, 6-H), 5,50 (1H, d, J7Hz, α-protoni), 7,30-7,50 (5H, m, aromaattiset), 7,65 (1H, brs, 78-NH) ja 10,00 (1H, d, J7Hz, α-NHCO).
c) t-butyyli-78-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino7-2-fenyyliasetamido7-7a-formamidokefa- losporanaatti_
Liuosta, jossa oli t-butyyli-7a-amino-76-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/-2-fenyyliasetamido/-kefalosporanaattia (0,182 g f 0,29 mmoolia) dikloorimetaanissa (20 ml) lämpötilassa 0°C, käsiteltiin pyridiinillä (0,095 g? 1,2 mmoolia) etikkahappo-muurahaishappoanhydridillä (0,053 g; 0,6 mmoolia). Liuosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 0,25 h ja tämän jälkeen 0,75 h huoneen lämpötilassa. Se pestiin sitten 0,5 N kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, suolaliuoksella ja kuivattiin magnesium-sulfaatin avulla. Liuos haihdutettiin ja sitä käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 ( <230 mesh ASTM) avulla ja elutoitiin etyyliasetaatilla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,059 g, 37 %) ; vmaks (^2^2* 3270, 1790, 1740 sh, 1720, 1690 cm"1? δ (CDC13) 1,25 (3H, t, J7Hz, CH2CH3), 1.55 (9H, s, C(CH3)3), 2,08 (3H, s, 0C0CH3), 2,96 ja 3,28 (2H, ABq, Jl8Hz, 2-H2) 3,52 (4H, m, piperatsiini-CH2 ja -CH2CH3), 3,80-4,20 (2H, m, piperatsiini-CH2), 4,77 ja 4,99 (2H, ABq, J13HZ, CH2OCOH3), 5,17 (1H, s, 6-H), 5,53 (1H, d, J7Hz,a~ protoni), 7,30-7,50 (5H, m, aromaattiset), 7,90 (1H, s, 76- NHCO), 8,16 (1H, s, 7a-NHCH0), 8,19 (1H, s, NHCHO) ja 10,02 (1H, d, J7Hz, a-NHCO-).
1°5 73702 d) 7g-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino7-2-fenyyliasetamido7-7a-formamidokefalosporaani- happo, natriumsuola __ t-butyyli-76-7D-2-/T4-etyyli-2/3-di-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino/-2-fenyyliasetamido7“7a-formamidokefalospora-naattia (0,057 g* 0,085 mmoolia) liuotettiin jään avulla jäähdytettyyn 88 %:seen muurahaishappoon (5 ml) ja saatua liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 5 h. Liuos haihdutettiin sitten kuiviin ja lisättiin tolueenia (5 ml) ja haihdutettiin sen seikan takaamiseksi, että muurahaishappo poistui täydellisesti. Jäännös liuotettiin laimeaan natriumbikarbonaatin vesiliuokseen ja saatu vesiliuos pestiin etyyliasetaatilla.
Se kyllästettiin sitten natriumkloridilla, peitettiin etyyli-asetaatti/tetrahydrofuraanilla (1:1) ja hapotettiin pH-arvoon 1,5 IN kloorivetyhapolla. Orgaaninen faasi erotettiin ja vesi-faasi uutettiin vielä etyyliasetaatti/tetrahydrofuraanilla, yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin vapaata happoa. Tämä suspendoitiin veteen ja pH säädettiin arvoon 6,5 laimean natriumbikarbonaatin vesiliuoksen avulla. Saatu liuos suodatettiin ja jäädytys-kuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,017 g? 32 %)} vmaks (KBr) 1770, 1710, 1680, 1610, 1510 cm-1; δ(D20) 1,20 (3H, t, J7Hz, CH2CH3), 2,09 (3H, s, 0C0CH3), 3,05 (1H, d, J18Hz, 2-H), 3,52 (5H, m, piperatsiini-CH2, CH2CH3 ja 2-H), 3,80-4,10 (2H, m, piperatsiini-CH2) 4,62 ja 4,84 (2H, ABq, J13Hz, CH3OCOCH3) , 5,28 (1H, s, 6-H) , 5,52 (1H, s, <*“ protoni), 7,35-7,60 (5H, m, aromaattiset) ja 8,15 (1H, s, NHCHO) . MIC (y.ug/ml) P. Mirabilis 889 0,2.
Esimerkki 37 t-butyyli-7B-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino7“2-fenyyliasetamido7-7a-formamidokefalospora- naatti______ a) t-butyyli-7B-^5-2-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliamino)-2-fenyyliasetamido7"7a-formamidokefalosporanaatti Liuosta, jossa oli D-2-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliamino)- 106 7 8 7 0 2 2-fenyylietikkahappoa (0,163 g* 0,5 mmoolia) ja dimetyyli-fonnamidia (1 tippa) dikloorimetaanissa (10 ml), käsiteltiin oksalyylikloridilla (0,127 g; 1 mmoolia) ja liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 1 h. Reaktioliuos haihdutettiin sitten kuiviin, sitä käsiteltiin tolueenilla ja haihdutettiin uudelleen. Saatu happokloridi dikloorimetaanissa (5 ml) lisättiin sitten tipottain sekoitettuun liuokseen, jossa oli t-butyyli-78-amino-7a-formamidokefalosporanaattia (0,185 g; 0,5 mmoolia) ja pyridiiniä (0,059 g? 0,75 mmoolia) dikloorimetaanissa (15 ml) lämpötilassa 0°C. Tätä liuosta sekoitettiin lämpötilassa 0°C 0,25 h ja sitten huoneen lämpötilassa 2,5 h ennen pesemistä 0,5N kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja suolaliuoksella. Se kuivattiin sitten magnesiumsulfaatin avulla, haihdutettiin kuiviin ja jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti piioksidi-geelin 60 ( < 230 mesh ASTM) avulla ja elutoitiin etyyliase-taatti/heksaanilla 1:1, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,167 g, 50 %) ·, vmaks (CH2C12) 3400, 3290, 1792, 1740, 1725 sh, 1698, 1490, 1212 cm-*; 6(CDC13) 1,50 (9H, s, C(CH3)3), 2,02 (3H, s, 0C0CH3), 3,02 ja 3,28 (2H, ABq, J17Hz, 2-H2), 4,67 (2H, s, CH2CC13), 4,80 ja 5,00 (2H, ABq, Jl3Hz, CH2OCOCH3), 5,14 (1H, s, 6-H) , 5,41 (1H, d, J7Hz, α-protoni), 6,47 (1H, d, J7Hz, a-NHCO) 7,20-7,50 (5H, m, aromaattiset), 7,66 (1H, s, 78-NHCO), 8,01 (1H, s, NHCHO) ja 8,11 (1H, s, NHCHO).
b) t-butyyli-7 ¢-(D-2-amino-2-fenyyliasetamido)-7a-form- amidokefalosporanaatti_
Liuosta, jossa oli t-butyyli-7Q-/O-2-(2,2,2-trikloorietoksi-karbonyyliamino)-2-fenyyliasetamido/-7a-formamidokefalospora-naattia (0,083 g* 0,122 mmoolia) tetrahydrofuraanissa (6 ml), käsiteltiin IM kaliumdivetyfosfaatin liuoksella (1 ml) ja hiljakkoin hapon avulla pestyllä sinkkijauholla (0,50 g). Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 5,5 h samalla kun pH pidettiin arvossa 4 lisäämällä fosfaattipuskuria. Se suodatettiin sitten ja kun suodokseen oli lisätty etyyliasetaattia, pestiin suolaliuoksella. Seos kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin otsikossa mainittu 107 78702 yhdiste raakana ja sitä käytettiin edelleen sitä enempää puhdistamatta.
c) t-butyyli-7fi-/D-2-/ (4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/-2-fenyyliasetamido7~7a-formamido- kefalosporanaatti_
Liuos, jossa oli 4-etyyli-2,3-dioksopiperatsiini-l-karbonyyli-kloridia (0,021 g; 0,1 mmoolia) dikloorimetaanissa (5 ml), lisättiin tipottain sekoitettuun liuokseen, jossa oli t-butyy-li-73-(D-2-amino-2-fenyyliasetamido)-7a-formamidokefalospora-naattia (0,050 g? 0,1 mmoolia) ja pyridiiniä (0,012 g; 0,15 mmoolia) dikloorimetaanissa (5 ml) lämpötilassa 0°C. Reaktio-liuosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 1/2 h ja tämän jälkeen 2 h huoneen lämpötilassa. Se pestiin sitten 0,5N kloori-vetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja suolaliuoksella ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Se haihdutettiin kuiviin ja jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 ( < 230 mesh ASTM) avulla ja elutoitiin 5 %:sella etanoli/etyyliasetaatilla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,015 g, 22 %).
Esimerkki 38 7a-formamido-73~/D-2-{/3-(metyylisulfonyyli)-2-oksoimidatsoli-din-l-yyliykarbonyyliaminoj^-fenyyliasetamido/kefalosporaani- happo, natriumsuola__ a) t-butyyli-7a-formamido-7B-/D-2-{/3-(metyylisulfonyyli)-2-oksoimidatsolidin-l-yyli7karbonyyliamino}-2-fenyyli- asetamido7kefalosporanaatti_
Liuos, jossa oli 3-(metyylisulfonyyli)-2-oksoimidatsolidin-1-karbonyylikloridia (0,136 g; 0,6 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml), lisättiin tipottain samalla sekoittaen liuokseen, jossa oli t-butyyli-73-(D-2-amino-2-fenyyliasetamido)-7a-form-amidokefalosporanaattia (0,302 gy 0,6 mmoolia) ja pyridiiniä (0,071 gy 0,9 mmoolia) dikloorimetaanissa (lO ml) lämpötilassa 0°C. Reaktioliuosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 1/2 tuntia ja 3 tuntia huoneen lämpötilassa ennen pesemistä 0,5N kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuok- 108 73702 sella ja suolaliuoksella. Se kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla, haihdutettiin kuiviin ja jäännöstä käsiteltiin kroma-tografisesti piioksidigeelin 60 ( <230 mesh ASTM) avulla, elutoitiin etyyliasetaatti/heksaanilla 2:1 aina puhtaaseen etyyliasetaattiin saakka, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,081 g; 19 %) ; vmaks (CH2C12) 3325, 1790, 1738, 1695, 1675, 1390, 1170 cm"1; 6 (CDC13). 1,52 (9H, s, C(CH3)3), 2,06 (3H, s, OCOCH3), 2,88 ja 3,25 (2H, ABq, J17Hz, 2-H2), 3,43 (3H, s, S02CH3), 3,60-4,10 (4H, m, imidatsolidiini-H-ryhmät), 4,75 ja 5,00 (2H, ABq, Jl3Hz, CH2COCH3), 5,20 (1H, s, 6-H), 5,63 (1H, d, J7Hz, α-protoni), 7,40 (5H, brs, aromaattiset), 8,00-8,45 (3H, m, NHCHO ja 7 6-NHCO) ja 9,05 (1H, d, J7Hz, ct-NHCO) .
b) 7a-formamido-7 8-/D-2-{/3-(metyylisulfonyyli)-2-okso- imidatsolidin-l-yyli/karbonyyliamino}-2-fenyyliasetamido/- kefalosporaanihappo, natriumsuola_ t-butyyli-7a-formamido-78-/D-2-{/3- (metyylisulfonyyli) -2-oksoimidatsolidin-l-yyli7karbonyyliamino}-2-fenyyliasetamido/-kefalosporanaattia (0,67 g; 0,097 mmoolia) liuotettiin jään avulla jäähdytettyyn trifluorietikkahappoon (5 ml) ja saatua liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 1/2 tuntia. Se haihdutettiin sitten kuiviin, sitä käsiteltiin tolueenilla ja haihdutettiin uudelleen. Jäännös liuotettiin laimeaan natriumbikarbonaatin vesiliuokseen ja liuos pestiin etyyliasetaatilla ennen kyllästämistä natriumkloridilla. pH säädettiin sitten arvoon 1,5 IN kloorivetyhapolla ja tuote uutettiin tetrahydrofuraani/etyyliasetaattiin (1:1). Yhdistetyt uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin vapaata happoa.
Tämä suspendoitiin veteen ja pH säädettiin arvoon 6,5 laimean natriumbikarbonaatin vesiliuoksen avulla. Saatu liuos suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu natriumsuola (0,054 g; 84 %); vmaks (KBr) 1765, 1730, 1675, 1605, 1525 cm"1; δ (D20) 1,93 (1H, s, 0C0CH3), 2,85 ja 3,26 (2H, ABq, J17Hz, 2-H2), 3,21 (3H, s, S02CH3), 3,50-3,85 (4H, m, imidatsolidiini-H-ryhmät), 4,35-4,75 (m, CH20C0CH3 plus IHOD), 5,11 (1H, s, 6-H), 5,35 (1H, s, a-protoni) , 7,20- 109 7 8 7 0 2 7,50 (5H, m, aromaattiset) ja 8,00 (1H, s, NHCHO).
MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 1,0.
Esimerkki 39 78-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino7-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/-7a-formamidokefalo- sporaanihappo, natriumsuola_ a) t-butyyli-7 8-/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyy-li7“2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli- amino7asetaxnido7~7a- (metyylitio) kef alosporanaattl_ D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyyli/-2-774-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7etikkahappoa (1,88 g; 4 mmoolia) tetrahydrofuraanissa (40 ml), joka sisälsi dimetyy-liformamidia (1 tippa), käsiteltiin oksalyylikloridilla (1,02 g; 8 mmoolia). Kun oli sekoitettu huoneen lämpötilassa 1,5 h haihdutettiin liuos kuiviin, sitä käsiteltiin tolueenilla ja haihdutettiin uudelleen. Saatu happokloridi dikloorimetaa-nissa (50 ml) lisättiin sitten tipottain samalla sekoittaen seokseen, jossa oli t-butyyli-76-amino-7a-(metyylitio)kefa-losporanaattia (1,50 g? 4 mmoolia) ja 4A molekyyliseuloja (9,0 g) lämpötilassa 0°C. Seosta sekoitettiin sitten lämpötilassa 0-5°C 0,75 h ja tämän jälkeen 1,75 h huoneen lämpö tilassa ennen suodattamista ja suodos haihdutettiin kuiviin. Raakatuotetta käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 (<.230 mesh ASTM) avulla, jolloin saatiin otsikossa mainitun yhdisteen ja t-butyyli-7 6-/L-2-74--(bentsyylioksikarbonyylioksi) fenyyli/-2-/(4-etyyli-2,3-dioksipiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino7asetamido7-7a-(metyylitio)kefalosporanaatin seos, josta aineosia ei voitu erottaa toisistaan (1,07 g; 32 %) .
Vmaks (CH2C12) 3380' 3275' 1785' 1765 sh' 1740 sh' 1720' 1695, 1500, 1220 cm-1; <5(CDC13) 1,21 (3H, t, J7Hz, CH2CH3) , 1,54 (9H, s, C(CH3)3), 2,00 ja 2,29 (3H, 2s, SCH3), 2,08
(3H, s, 0C0CH3), 3,19 ja 3,38, ja 3,27 ja 3,45 (2H, 2ABq, J
17Hz, 2-H2), 3,55 (4H, m, piperatsiini-CH2 ja -CH2CH3), 4,05 (2H, m, piperatsiini-CH2), 4,77 ja 5,05 (2H, ABq, Jl3Hz, 110 78702 CH2OCOCH3), 4,88 ja 4,90 (1H, 2s, 6-H-ryhmät), 5,26 (2H, s, CHjPh), 5,64 (1H, d, J9Hz, α-protoni), 7,00-7,60 (10H, m, aromaattiset ja 7β-ΝΗ), ja 10,02 (1H, d, J7Hz, α-NHCO).
b) t-butyyli-7a-amino-7 8-/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyyli-oksi)fenyyli7”2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino/asetamido/kefalosporanaatti t-butyyli-7 8-/DL-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyyli7~ 2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/-asetamido-7a-(metyylitio)kefalosporanaattia (1,07 g; 1,3 mmoolia) kuivassa dimetyyliformamidissa (25 ml) lämpötilassa -50°C typpikehässä käsiteltiin merkuriasetaatilla (0,42 g; 1,3 mmoolia) dimetyyliformamidissa (3 ml) ja tämän jälkeen välittömästi ammoniakilla (0,024 g; 1,43 mmoolia) dimetyyliformamidissa (1 ml). Reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa välillä -50 ja -20°C 1 h ennen kaatamista etyyliasetaattiin ja pestiin hyvin vedellä ja suolaliuoksella. Orgaaninen liuos kuivattiin magnesiumsulfaatilla, haihdutettiin kuiviin ja käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 ( <230 mesh ASTM) avulla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,29 g; 28 %). v maks (CH2C12) 3380, 3275, 1785, 1765, 1742, 1720, 1695, 1502, 1220 cm"1; 6(CDC13) 1,21 (3H, t, J7Hz, -CH2CH3), 1,53 (9H, s, C(CH3)3), 2,08 (3H, s, 0C0CH3), 2,60-3,20 (2H, brs, NHj), 3,04 ja 3,33 (2H, ABq, J18Hz, 2-H2), 3,65 (4H, m, piperatsiini-CH2 ja CH2CH3), 4,00 (2H, m, piperatsiini-CH2), 4,72 ja 4,98 (2H, ABq, J13Hz, CH2OCOCH3), 4,84 (1H, s, 6-H), 5,26 (2H, s, CH2Ph), 5,57 (1H, d, J7Hz, α-protoni), 7,10-7,57 (9H, m, aromaattiset), 7,83 (1H, s, 76-NHC0) ja 10,05 (1H, d, J7Hz, α-NHCO-).
Reaktioseoksesta erotettiin myös t-butyyli-7 o-amino-78-/L-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyyll7“2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/asetamido/kefalospo-ranaattia (0,36 g; 35 %).
vmaks (CH2C12) 3380' 3275' 1785# 1765, 1740 sh' 1720/ 1692' 1500, 1220 cm-1; 6 (CDCl-j) 1,22 (3H, t, J7Hz, CH2CH3) , 1,54 (9H, s, C(CH3)3), 2,10 (3H, s, 0C0CH3), 2,50-2,80 (2H, brs, NH2), 3,19 ja 3,45 (2H, ABq, J18Hz, 2-H2), 3,55 (4H, m.
111 73702 piperatsiini-CH2 ja -CH2CH3), 4,02 (2H, m, piperatsiini-CH2), 4,77 ja 5,00 (2H, ABq, Jl3Hz, CH2OCOCH3), 4,88 (1H, s, 6-H), 5,27 (2H, s, CH2Ph), 5,53 (1H, d, J7Hz , α-protoni), 7,15-7,50 (10H, m, aromaattiset ja 78-NHCO) ja 9,94 (1H, d, J7Hz, α-NHCO).
c) t-butyyli-78-/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyy-li7-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino7asetamido7“7a-formamidokefalosporanaatti
Liuos, jossa oli t-butyyli-7a-amino-78-i/D-2-/?- (bentsyylioksikarbonyylioksi) fenyyli7~2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7asetamido7kefalosporanaattia (0,272 g; 0,343 mmoolia) ja pyridiiniä (0,171 g; 2,17 mmoolia) dikloori-metaanissa (20 ml), jäähdytettiin jääkylvyn avulla ja käsiteltiin etikkahappo-muurahaishappoanhydridillä (0,096 g; 1,09 mmoolia) . Reaktioliuosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 1/2 tun tia ja huoneen lämpötilassa 1 tunti ennen pesemistä 0,5 N kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja suolaliuoksella. Se kuivattiin sitten magnesium-sulfaatilla, haihdutettiin kuiviin ja raakatuotetta käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 ( < 230 mesh ASTM) avulla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,200 g? 71 %)> vmaks (CH2C12} 3375 sh' 3270' 1790, 1765, 1740 sh, 1720, 1692, 1500, 1220 cm”1; δ (CDC13) 1,25 (3H, t, J7Hz, CH2CH3), 1,54 (9H, s, C(CH3)3), 2,07 (3H, s, 0C0CH3), 2,88 ja 3,22 (2H, ABq, J18Hz, 2-H2), 3,54 (3H, m, piperatsiini-H ja -CH2CH3), 3,68-4,20 (3H, m, piperatsiini-H-ryhmät), 4,74 ja 5,00 (2H, ABq, J13Hz, CH20C0CH3), 5,13 (1H, s, 6-H), 5,26 (2H, s, CH2Ph), 5,61 (1H, d, J7Hz, α-protoni), 7,10-7,60 (9H, m, aromaattiset), 7,99 ja 8,35 (2H, 2brs, 78-NHCO ja 7ct-NHCHO), 8,16 (1H, s, NHCHO),ja 10,07 (1H, d, J7Hz, α-NHCO).
d) t-butyyli-78-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)- karbonyyliamino7-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-7a-formamidokefalosporanaatti_
Seosta, jossa oli t-butyyli-78-/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi) fenyyli/-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino/asetamido/-7a-formamidokefalosporanaattia 112 702 (0,096 g; 0,117 mmoolia) ja 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (0,100 g) tetrahydrofuraanissa (12 ml), ja vettä (2 ml), ravistettiin vetykehässä 2 tuntia. Katalyytti suodatettiin sitten pois, suodos haihdutettiin melkein kuiviin ja jäännös liuotettiin etyyliasetaatin ja tetrahydrofuraanin (1:1) seokseen. Tämä liuos pestiin sitten suolavedellä, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin jäljelle jäi otsikossa mainittu yhdiste (0,068 g; 85 %).
Vmaks (CH2C12) 3280' 1788, 1740 sh, 1718, 1690, 1515 cm"1; 6(CDC13) 1,20 (3H, t, J7Hz, CH2CH3), 1,52 (9H, s, C(CH3)3), 2,08 (3H, s, 0C0CH3), 3,01 ja 3,30 (2H, ABq, J18Hz, 2-H2), 3,50 (3H, m, piperatsiini-H ja -CH2CH3), 3,60-4,20 (3H, m, piperatsiini-H-ryhmät), 4,74 ja 4,98 (2H, ABq, J13HZ, CH2OCOCH3), 5,16 (1H, s, 6-H), 5,49 (1H, d, J13Hz, α-protoni), 6,75 ja 7,25 (4H, 2d, J8Hz, aromaattiset), 8,10 ja 8,33 (3H, 2brs, NHCHO ja 7B-NHC0-) ja 9,86 (1H, d, J7Hz, α-NHCO).
e) 7$-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino7~2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7“7a-formamido- kefalosporaanlhappo, natriumsuola_ t-butyyli-78-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino7”2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-7a-formamido-kefalosporanaattia (0,047 g; 0,068 mmoolia) liuotettiin jääkylmään 98 %: seen muurahaishappoon (5 ml) ja saatua liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 4,5 tuntia. Reaktioliuos haihdutettiin sitten kuiviin, sitä käsiteltiin tolueenilla ja se haihdutettiin uudelleen. Jäännös liuotettiin laimeaan natriumbikarbonaatin vesiliuokseen ja pestiin etyyliasetaatilla. Vesiliuos kyllästettiin natriumkloridillä, peitettiin etyyliasetaatti/tetrahydrofuraanilla (1:1) ja hapotettiin pH-arvoon 1,5 IN kloorivetyhapolla. Orgaaninen kerros erotettiin ja vesifaasi uutettiin vielä etyyliasetaatti/tetrahydro-furaanilla. Yhdistetyt uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin jäljelle jäi vapaa happo. Tämä suspendoitiin veteen ja pH säädettiin arvoon 6,5 laimean natriumbikarbonaatin vesiliuoksen avulla. Saatu liuos suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,018 g; 40 %).
113 78702
Vmaks (KBr) 1770/ 1715/ 1675/ 1615 δ (D20) 1,18 (3H, t, J7Hz, CH2CH3), 2,07 (3H, s, OCOCH3), 3,08 (1H, d, J18Hz, 2-H), 3,50 (3H, m, 2-H ja CH2CH3), 3,69 (2H, m, piperatsiini-H2), 4,00 (2H, m, piperatsiini-H2), 5,27 (1H, s, 6-H), 5,40 (1H, s, a-protoni), 6,90 ja 7,39 (4H, 2d, J8Hz, aromaattiset) ja 8,12 (1H, s, NHCHO).
f) t-butyyli-78-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)- karbonyyliamino7~2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7~7a-form- amldokefalosporanaatin vaihtoehtoinen valmistus_ D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7-2-(4-hydroksifenyyli)etikkahappoa (0,335 gj 1 mmooli) tetra-hydrofuraanissa (30 ml) lisättiin tipottain 2 tunnin kuluessa sekoitettuun liuokseen, jossa oli t-butyyli-78 *amino-7a-formamidokefalosporanaattia (0,371 g; 1 mmooli) ja N,N'-di-sykloheksyylidikarbodi-imidiä (0,220 g; 1,1 mmoolia) tetra-hydrofuraanissa (10 ml). Reaktioseosta sekoitettiin 24 h huoneen lämpötilassa ja se haihdutettiin sitten kuiviin.
Jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, suodatettiin ja suodos haihdutettiin kuiviin. Raakatuotetta käsiteltiin kromatogra-fisesti piioksidigeelin 60 (< 230 mesh ASTM) avulla, elutoi-tiin etyyliasetaatilla käyttäen 5 %:sta etanoli/etyyliasetaat-tia, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,100 g; 15 %). MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 0,2.
Esimerkki 40 7g-/L-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7~ 2- (4-hydroksifenyyli) asetamido7-'7a-formamidokefalosporaani- happo, natriumsuola___ a) t-butyyli-78-/L-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyyli/-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/- asetamido7~7a-formamldokefalosporanaatti_
Liuos, jossa oli t-butyyli-7a-amino-7B-/L-2-74-(bentsyylioksikarbonyylioksi) fenyyli7-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli) karbonyyliamino/asetamido7kefalosporanaattia (0,350 gj 0,44 mmoolia) ja pyridiiniä (0,350 g; 4,4 mmoolia) dikloori-metaanissa (20 ml), jäähdytettiin jääkylvyn avulla ja sitä 114 78702 käsiteltiin etikkahappo-muurahaishappoanhydridillä (0,194 g; 2.2 mmoolia). Reaktioliuosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 1/2 tuntia ja tämän jälkeen 1 tunti huoneen lämpötilassa. Se pestiin sitten 0,5N kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, suolaliuoksella ja kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla. Liuos haihdutettiin kuiviin ja jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 ( < 230 mesh) avulla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,250 g; 69 %); vmaks (CH2Cl2), 3380, 3260, 1790, 1765, 1740 Sh, 1720, 1695, 1500, 1220 cm"1; δ (CDCl-j) 1,24 (3H, t, J7Hz, CH2CH3) , 1,53 (9H, s, C(CH3)3), 2,10 (3H, s, OCOCH-j) , 3,03 (2H, s, 2-H2), 3,57 (3H, m, piperatsiini-H ja -CH2CH3), 3,71, 3,89 ja 4,36 (3H, 3m, piperatsiini-H-ryhmät), 4,83 ja 4,16 (2H, ABq, J13HZ, CH2OCOCH3), 4,98 (1H, s, 6-H), 5,29 (2H, s, CH2Ph), 5,91 (1H, d, J7Hz, α-protoni), 7,21 ja 7,60 (4H, 2d, J8Hz, fenyyli), 7,43 (5H, m, fenyyli), 8,01 (1H, s, NHCHO), 8,08 (1H, s, NHCHO), 9,22 (1H, brs, 78-NHCO), ja 10,06 (1H, d, J7Hz, α-NHCO).
b) t-butyyli-78-/L-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino/-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/-7a-form- amidokefalosporanaatti_
Seosta, jossa oli t-butyyli-78-/L-2-/4-(bentsyylioksikarbonyyli-oksi)fenyyli/-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyy-liamino7asetamido7_7a-formamidokefalosporanaattia (0,113 g; 0,138 mmoolia) ja 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (0,120 g) tetrahydrofuraanissa (12 ml) ja vettä (2 ml), ravistettiin vetykehässä 1,75 h. Katalyytti erotettiin sitten suodattamalla, suodos haihdutettiin melkein kuiviin ja jäännös liuotettiin etyyliasetaatin ja tetrahydrofuraanin seokseen (1:1). Tämä liuos pestiin sitten suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,092 g; 97 %); vmaks (CH2C12) 3375, 3290, 1790, 1740sh, 1715, 1695, 1515 cm"1; 6/TCD3)2C07 1,18 (3H, t, J7Hz, CH2CH3), 1,52 (9H, s, C(CH3)3), 2.03 (3H, s, 0C0CH3), 3,20-3,87 (6H, m, piperatsiini-H2, 2-H2, 115 78702 ja -CH2CH3), 3,90-4,30 (2H, m, piperatsiini-H2), 4,75 ja 5,05 (2H, ABq, J13HZ, CH2OCOCH3), 5,26 (1H, s, 6-H), 5,75 (1H, d, J7Hz, α-protoni), 6,89 ja 7,40 (4H, 2d, J8Hz, aromaattiset), 8,20 (1H, s, NHCHO) 8,38 (1H, s, NHCHO), 8,95 (1H,brs, 78-NHCO) ja 10,00 (1H, d, J7Hz, α-NHCO).
c) 7g-/L-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino7~2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-7a-formamido- kefalosporaanihappo, natriumsuola_ t-butyyli-7$-/L-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino7-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7~7a-formamido-kefalosporanaattia (0,089 g; 0,129 mmoolia) liuotettiin jään avulla jäähdytettyyn 98 %:seen muurahaishappoon (10 ml) ja saatua liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 5 tuntia. Reaktioliuos haihdutettiin sitten kuiviin, sitä käsiteltiin tolueenilla ja se haihdutettiin uudelleen. Jäännös liuotettiin laimeaan natriumbikarbonaatin vesiliuokseen ja pestiin etyyliasetaatilla. Vesiliuos kyllästettiin natriumkloridillä, peitettiin etyyliasetaatti/tetrahydrofuraanilla (1:1) ja tehtiin happamaksi pH-arvoon 1,5 IN kloorivetyhapolla. Orgaaninen kerros erotettiin ja vesifaasi uutettiin vielä etyyliase-taatti/tetrahydrofuraanilla. Yhdistetyt uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin jäljelle jäi vapaa happo. Tämä suspen-doitiin veteen ja pH säädettiin arvoon 6,5 laimean natriumbikarbonaatin vesiliuoksen avulla. Saatu liuos suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,020 g; 24 %); vmaks (KBr) 1770, 1710, 1675, 1615, 1515 cm-1* δ (D20) 1,16 (3H, t, J7Hz, CH2CH3), 2,07 (3H, s, 0C0CH3), 3,04 (1H, d, J18Hz, 2-H), 3,47 (3H, m, 2-H ja CH2CH3), 3,66 (2H, m, piperatsiini-H2), 3,98 (2H, m, piperatsiini-H2), 4,64 (1H, d, J13Hz, CH0C0CH3), 5,19 (1H, s, 6-H), 5,42 (1H, s, a-protoni), 6,89 ja 7,33 (4H, 2d, J8Hz, aromaattiset) ja 8,06 (1H, s, NHCHO).
MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 100.
116 78702
Esimerkki 41 78-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliami-no7~2- (3,4-diasetoksifenyyli) asetamido/-7a-formamidokefalo-sporaanihappo, natriumsuola_ a) t-butyyli-7B-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)- karbonyyliamino/-2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido7-7a-formamidokefalosporanaatti_ D-2-(3/4-diasetoksifenyyli)-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperat-sin-l-yyli)karbonyyliamino7etikkahappoa (0,11 g? 0,25 mmoo-lia) liuotettiin dikloorimetaaniin (10 ml) ja lisättiin ti-pottain liuokseen, jossa oli t-butyyli-76-amino-7a-formamido-kefalosporanaattia (0,09 g; 0,24 mmoolia) ja N,N'-disyklo-heksyylikarbodi-imidiä (0,55 g; 0,24 mmoolia) dikloorimetaa-nissa (10 ml). Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 3 vuorokautta. Liuotin haihdutettiin ja jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, pestiin IN kloorivetyhapolla, kyllästetyllä natriumbikarbonaattiliuoksella, suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla ja haihdutettiin kromatogra-fisesti (piioksidigeeli 5 %:nen etanolietyyliasetaatissa), jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,067 g; 35 %) 6(CDC13) 1,24 (3H, t, J8Hz, CH^H-j) , 1,54 (9H, s, C(CH3)3), 2,07 (3H, s, CH2OCOCH3), 2,25 ja 2,27 (6H, 2s, aryyli-OCOCH-j-ryhmät) , 2,87, 3,20 (2H, ABq, J16Hz, 2-H2) , 3,4-4,2 (6H, m, NCH2CH2NCH2), 4,76, 5,03 (2H, ABq, J14Hz, CH20), 5,11 (1H, s, 6-H), 5,65 (1H, d, J7Hz, CH), 7,1-7,5 (3H, m, aromaattiset-H-ryhmät), 7,97 (lH, brs, NH), 8,11 (1H, s, CHO), 8,56 (1H, brs, NH), 10,08 (lH, d, J8Hz, NH); v (CH.Cl ) 3270, 2930, 1715, 1690 cnf1.
b) 7 8-/D-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyy- liamino/-2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido7~7a-form-amidokefalosporaanihappo_ t-butyyli-7 8-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino/-2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido7-7a- formamidokefalosporanaattia (0,068 g; 0,086 mmoolia) sekoitettiin trifluorietikkahapon kanssa 1 h ja haihdutettiin kuiviin. Jäännöstä hangattiin eetterin kanssa ja saatu kiinteä aine liuotettiin veteen, joka oli säädetty varovasti pH-arvoon 117 78702 6,5 laimean natriumbikarbonaattiliuoksen avulla. Liuos pestiin etyyliasetaatilla, suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,048 g; 74 %); 6(D20) 1,10 (3H, t, J6Hz, CH2CH3), 1,98 (3H, s, 0C0CH3), 2,23 (6H, s, 0C0CH3-ryhmät), 2,85, 3,25 (2H, ABq, J18Hz, 2-H2), 3,25, 4,00 (6H, m, NCH2CH2NCH2), 4,48 (CH20AC peitetty H0D:llä), 5,16 (1H, s, 6-H), 5,42 (1H, s, CH), 7,06-7,53 (3H, m, aromaattiset-H-ryhmät), 8,05 (1H, s, CHO); vmakS (KBr) 3440, 1765, 1710, 1675, 1610 cm-1.
MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 0,1.
Esimerkki 42 7a-formamido-78~(tien-2-yyliasetamido)kefalosporaanihappo, natriumsuola__ a) t-butyyli-78-(tien-2-yyliasetamido)-7a-(metyylitio)kefa- lo sporanaatti_
Tiofeeni-2-etikkahappoa (0,85 g; 6,0 mmoolia) kuumennettiin palautusjäähdyttäen tionyylikloridissa (5 ml) 1 h. Ylimääräinen tionyylikloridi haihdutettiin ja jäljelle jäänyt happo-kloridi dikloorimetaanissa (10 ml) lisättiin jään avulla jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli t-butyyli-78-amino-7a-(metyylitio) kefalosporanaattia (1,80 g; 4,8 mmoolia) dikloorimetaanissa (25 ml) ja pyridiiniä (0,57 ml; 7,0 mmoolia). Reaktioseos-ta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 h. Liuotin haihdutettiin ja jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, pestiin IN kloo-rivetyhapolla, kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin. Kromatografisen käsittelyn avulla (piioksidigee-li, 3:1 heksaani/etyyliasetaatti) saatiin otsikossa mainittu yhdiste (1,75 g; 73 %); δ(CDC13) 1,51 (9H, s, C(CH3)3), 2,04 (3H, s, 0C0CH3), 2,24 (3H, s, SCH3), 3,30, 3,42 (2H, ABq, J18Hz, 2-H2), 3,84 (2H, s, ArCH2), 4,84, 5,05 (2H, ABq, J13,5Hz, CH20), 4,89 (1H, s, 6-H), 6,46 (1H, s, NH), 6,92-7,04 (2H, m, tiofeeni-H-ryhmät), 7,16-7,30 (1H, m, tiofeeni-H); vroaks (CH,C12), 3280, 2970, 2920, 1775, 1735 sh, 1720, 1670, 1510 cm ; (Todettu: M+, 498.0930. C21H26N2°6^3 vastaa M, 498.0952).
118 73702 b) t-butyyli-7ct-amino-7B- (tien-2-yyliasetamido) kefalo- sporanaatti_ t-butyyli-7B”(tien-2-yyliasetamido)-7a-(metyylitio)kefalospo-ranaattia (1/00 g; 2,0 itimoolia) dimetyyliformamidissa (20 ml) lämpötilassa -40°C käsiteltiin liuoksella, jossa oli merkuri-asetaattia (0,64 g; 2,0 mmoolia) dimetyyliformamidissa (5 ml), ja tämän jälkeen liuoksella, jossa oli ammoniakkia (0,034 g; 2,0 mmoolia) dimetyyliformamidissa (1,5 ml). Reaktioseoksen annettiin lämmetä 1,5 tuntia, se kaadettiin etyyliasetaattiin, pestiin hyvin vedellä, suolaliuoksella, kuivattiin magnesium-sulfaatin avulla ja haihdutettiin, jolloin saatiin haluttu tuote (0,90 g; 96 %) ; δ (CDC13) 1,54 (9H, s, C(CH3)3), 2,09 (3H, s, 0C0CH3), 2,81 (2H, brs, NH2) 3,25, 3,55 (2H, ABq, J18Hz, 2-H2), 3,90 (2H, s, ArCH2), 4,5-5,3 (3H, m, 6-H ja CH20), 6,87-7,4 (3H, m, aromaattinen); vma)cs (tetrahydrofuraani) 1790, 1745, 1725 & 1680 cm-1.
c) t-butyyli-7a-formamido-7 8-(tien-2-yyliasetamido)kefalo- sporanaattl__ t-butyyli-7 a-amino-7 6-(tien-2-yyliasetamido)kefalosporanaat-tia (0,90 g; 1,9 mmoolia) dikloorimetaanissa (20 ml) lämpötilassa 0°C käsiteltiin pyridiinillä (1,51 ml; 19 mmoolia) ja muurahaishappo-etikkahappoanhydridillä (0,76 g; 9,5 mmoolia) . Reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa 0°C 1 tunti, pestiin IN kloorivetyhapolla, kyllästetyllä natriumbikarbonaat-tiliuoksella, suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin. Tuote kiteytettiin uudelleen dikloorimetaa-ni/heksaanista, sp. 160-164°C (0,62 g; 66 %); 6/TCD3)2C07 1,54 (9H, s, C(CH3)3) 2,00 (3H, s, OCOCH3), 3,33, 3,61 (2H, ABq, J18HZ, 2-H2), 3,92 (2H, s, ArCH2), 4,73, 4,99 (2H, ABq, Jl3Hz, CH20), 5,21 (1H, s, 6-H) 6,8-7,1 (2H, m, tienyyli-H-ryhmät) 7,2-7,4 (1H, m, tienyyli-H), 8,19 (1H, s, CHO); v . (KBr) itiä K s 3330, 2980, 1770, 1740, 1720, 1695, 1660 & 1530 cm"1, (Todettu: C 50,7, H 5,1, N 8,4 %. C21H25N3°7S2 vastaa C 50,9, H 5,1, N 8,5 %) .
119 78702 d) 7ct-formamido-78- (tien-2-yyliasetamido) kefalosporaanihappo, natriumsuola_ t-butyyli-7a-formamido-78-(tien-2-yyliasetamido) kefalospora-naattia (0,100 gj 0,2 mmoolia) lisättiin jääkylmään 98 %:seen muurahaishappoon (8 ml) ja veteen (5 tippaa). Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 4 tuntia. Muurahaishappo haihdutettiin ja jäännös liuotettiin laimeaan natriumbikarbo-naattiliuokseen ja pestiin etyyliasetaatilla. Vesifaasi hapotettiin pH-arvoon 1,5 ja uutettiin etyyliasetaatilla. Uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin. Jäännös liuotettiin veteen, joka säädettiin pH-arvoon 6,5 nat-riumbikarbonaattiliuoksella. Liuos suodatettiin ja jäädytys-kuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,054 g; 58 %)i δ (D20) 2,09 (3H, s, 0CH3), 3,23, 3,57 (2H, ABq, J17Hz, 2-H2), 3,92 (2H, s, ArCH2), 5,28 (2H, s, CH20), 5,60 (1H, s, 6-H), 6,9-7,2 (2H, m, tiofeeni-H-ryhmät), 7,3-7,5 (1H, m, tiofeeni-H), 8,14 (1H, s, CHO)j vmaks (KBr) 1770, 1740, 1720, 1695 & 1660 cm-1.
MIC (yug/ml) P. Mirabilis 889 10.
Esimerkki 43 78-/2-karboksi-2-(tien-3-yyli)asetamido7“7a-formamido- kefalosporaanlhappo, dinatriumsuola_ a) t-butyyli-7a-formamido-78-/2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyy- li)-2-(tien-3-yyli)asetamido7kefalosporanaattl_ 2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-2-(tien-3-yyli)etikkahappoa (0,170 g} 0,53 mmoolia) tionyylikloridissa (5 ml) kuumennettiin lämpötilassa 70°C 2 h. Liuos haihdutettiin sitten kui viin ja jäännöstä käsiteltiin tolueenilla ja se haihdutettiin uudelleen. Saatu happokloridi liuotettiin dikloorimetaaniin (10 ml) ja lisättiin tipottain samalla sekoittaen liuokseen, jossa oli t-butyyli-73-amino-7a-formamidokefalosporanaattia (0,186 g; 0,5 mmoolia) ja pyridiiniä (0,059 g; 0,75 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml) lämpötilassa 0°C. Reaktioliuosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 0,75 h ja tämän jälkeen 0,5 h huoneen lämpötilassa ennen kuiviin haihduttamista. Jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, pestiin 0,5N kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja suolaliuok- 120 78702 sella. Liuos kuivattiin, haihdutettiin kuiviin ja jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 (< 230 mesh) avulla, elutoitiin etyyliasetaatti/heksaanilla (1:1), jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,168 g; 50 %) ; λ (EtOH) 245 nm (ε 15147), 262 nm ( ε16862); vmakg (CH2C1?) 3390, 3305, 1790, 1740, 1700, 1525, 1350, 1212, 1160 cm"1» 6(CDC13) 1,56 (9H, s, C(CH3)3), 2,10 (3H, s, 0C0CH3), 3,12 ja 3,39 (2H, ABq, J18Hz, 2-H2), 4,85 ja 5,08 (2H, ABq, J13Hz, CH2OCOCH3), 4,85 (1H, s, «-protoni), 5,12 (1H, s, 6-H), 5,30 (2H, s, CH2Ar), 7,13 (1H, m, tienyyli-H) 7,33-7,50 (5H, m, aromaattiset ja 78-NHCO), 7,78 ja 7,86 (1H, 2s, 7a-NHCH0-diastereoisomeerit) ja 8,11-8,23 (3H, m, aromaattiset ja -NHCHO).
b) t-butyyli-7 8-/2-karboksi-2- (tien-3-yyli) asetamido7“7oi- formamidokefalosporanaatti_ t-butyyli-7ot-formamido-7 8-^2- (4-nitrobentsyylioksikarbonyyli) -2-(tien-3-yyli)asetamido/kefalosporanaattia (0,163 g» 0,25 mmoolia) ja 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (0,20 g) tetrahydrofuraanissa (10 ml) ja vedessä (2 ml) ravistettiin keskenään vetykehässä 1 tunti. Sitten lisättiin lisää katalyyttiä (0,20 g) ja käsittely toistettiin 1,5 tunnin ajan. Katalyytti suodatettiin sitten ja pestiin hyvin laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella. Suodos pestiin etyyliasetaatilla, pH säädettiin arvoon 2 IN kloorivetyhapolla ja tuote uutettiin etyyliasetaattiin. Uute pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,72 g; 53 %); λ maks (Et0H) 239 ™ (ε 10267); ^ maks (CH2C12) 3275, 1790, 1740, 1725, 1695, 1500 cm"1; 6(CDC13) 1,52 (9H, s, C(CH3)3), 2,08 ja 2,09 (3H, 2s, OCOCH3~^diastereoisomeerit) , 3,07 ja 3,34, ja 3,12 ja 3,37 (2H, 2ABq, J17Hz, 2-H2-diaste-reoisomeerit), 4,83 ja 4,91 (1H, 2s, α-protoni), 4,81 ja 5,02, ja 4,88 ja 5,07 (2H, 2ABq, Jl2Hz, CH20C0CH3—diastereoisomee— rit), 5,17 ja 5,20 (1H, 2s, 6-H-diastereoisomeerit), 7,13-7,45 (3H, m, aromaattiset), 8,13 (1H, s, NHCHO), 8,13 ja 8,22 (1H, 2s, NHCHO-diastereomeerit) , 8,36 ja 8,61 (1H, 2s, 7g- NHCO).
121 78702 c) 78-/2-karboksi-2-(tien-3-yyli)asetamido/-7a-formamido- kefalosporaanihappo, dinatriumsuola_
Liuosta, jossa oli t-butyyli-78-/2-karboksi-2-(tien-3-yyli)-asetamido7-7a-formamidokefalosporanaattia (0,062 g; 0,115 mmoolia) 98 %:sessa muurahaishapossa (5 ml), sekoitettiin huoneen lämpötilassa 6 h. Muurahaishappo poistettiin sitten tyhjössä, jäännöstä käsiteltiin tolueenilla ja liuos haihdutettiin. Saatu hartsi liuotettiin laimeaan natriumbikarbonaatin vesiliuokseen ja pestiin etyyliasetaatilla ennen hapotta-mista pH-arvoon 4 ja pestiin uudelleen etyyliasetaatilla. Tämän jälkeen pH säädettiin arvoon 1,5 ja tuote uutettiin etyy-liasetaatti/tetrahydrofuraaniin (1:1). Yhdistetyt uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin vapaa happo. Tämä sus-pendoitiin veteen, pH säädettiin arvoon 6,5 laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja saatu liuos suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,026 g; 43 %) ; Xmaks (H O) 234 nm (e 9589)? v maks (KBr) 1765, 1670, 1600, 1505 cm ? δ (D20) 2,08 ja 2,09 (3H, 2s, OCOCH^-diastereoisomeerit), 3,17 ja 3,56, ja 3,25 ja 3,58 (2H, 2ABq, J18Hz, 2-H2“diastereoisomeerit), 4,60-4,90 (2ABq, HOD, CI^OCOCH^-diastereoisomeerit), 5,28 ja 5,32 (1H, 2s, 6-H), 7,00-7,50 (3H, m, aromaattiset) ja 8,13 ja 8,17 (1H, 2s, NHCHO-diastereoisomeerit).
MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 100.
Esimerkki 44 7β-/ϋ-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliami-no7~2-(tien-2-yyli)asetamido7“7a-formamido-kefalosporaani- happo, natriumsuola_ a) t-butyyli-73-/DL-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino7-2-(tien-2-yyli)asetamido7_7a~formamido- kefalosporanaatti__ α“/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7tio-feeni-2-etikkahappoa (0,49 g? 1,5 mmoolia) dikloorimetaanissa (5 ml) käsiteltiin oksalyylikloridilla (0,20 ml; 2,5 mmoolia) ja dimetyyliformamidilla (2 tippaa) ja sekoitettiin huoneen 122 73702 lämpötilassa 1 tunti. Liuotin haihdutettiin ja jäännökseen dikloorimetaanissa (5 ml) lisättiin jääkylmä liuos, jossa oli t-butyyli-7 8-amino-7cx-formamidokefalosporanaattia (0,45 g* 1,2 mmoolia) ja pyridiiniä (0,18 ml» 2,2 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml). Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 3 tuntia ja liuotin haihdutettiin. Jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, pestiin IN kloorivetyhapolla, kyllästetyllä natriumbikarbonaattiliuoksella, suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin. Suoritettaessa kromatografinen käsittely (piioksidigeeli, etyyliasetaatti) saatiin erilliset diastereoisomeerit. D-isomeerillä (0,14 g; 17 %) oli seuraavat arvot δ (CDCl^) l, 25 (3H, t, J7Hz, NCH2CH3), 1,50 (9H, s, C(CH3)3), 3,0-4,3 (8H, m, 2-H2 ja NCH2CH2NCH2), 4,71, 4,97 (2H, ABq, J13Hz, CH20) 5,18 (1H, s, 6-H), 6,00 (1H, d, ArCH), 6,7-7,4 (3H, m, tiofeeni-H-ryhmät), 8,0-8,4 (2H, m, CHO & NH), 8,4-8,8 (1H, m, NH), 9,2-10,2 (1H, m, NH) j v maks (CH2C12) 3260, 1790, 1710, 1690 & 1500 cm L-isomeerillä (0,079 g, 10 %) oli arvot <S (CDC13) 1,20 (3H, t, NHCH2CH3) , 1,51 (9H, s, C(CH3)3), 2,05 (3H, s, 0C0CH3), 3,16 (2H, s, 2-H2) 3,3-4,5 (6H, m, NCH2CH2NCH2), 4,84, 5,10 (2H, ABq, J13Hz, CH20), 4,96 (1H, s, 6-H), 6,10 (1H, d, ArCH), 6,7-7,4 (3H, m, tiofeeni-H-ryhmät), 8,04 (2H, m, CHO & NH), 9,30 (1H, s, NH), 9,87 (1H, d, NH); vmaks (CH2C12) 3260 br' 1770' 1740 sh' 1690 & 1520 c®”1· b) 7g-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyy-liamino-2-(tien-2-yyli)asetamido7-7a-formamidokefalospo- raanihappo, natriumsuola_ t-butyyli-78-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino/-2-(tien-2-yyli)asetamido/-7a-formamidokefalo-sporanaattia (0,14 g; 0,21 mmoolia) sekoitettiin trifluori-etikkahapon (2,5 ml) kanssa huoneen lämpötilassa 1/2 tuntia. Trifluorietikkahappo haihdutettiin ja jäännös liuotettiin laimeaan natriumbikarbonaattiliuokseen, pestiin etyyliasetaatilla, hapotettiin IN kloorivetyhapolla pH-arvoon 1,5 ja uutettiin etyyliasetaatilla. Uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin. Jäännös suspendoitiin veteen ja säädettiin pH-arvoon 6,5 laimealla 123 78702 natriumbikarbonaattilluokse11a. Saatu liuos suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,054 g; 41 %); δ(D20) 1,15 (3H, t, J6Hz, NCH2CH3), 2,05 (3H, s, OCOCH-j) , 3,05-4,10 (10H, m, 2-H2, CH20 ja N2CH2CH2NCH2), 5,24 (1H, s, ArCH), 5,78 (1H, s, 6-H), 6,9-7,5 (3H, m, tiofeeni-H-ryhmät), 8,10 (1H, s, CHO)j Vmaks (KBr) 3440' 2980, 1770, 1680 & 1610 cm"1.
MIC (yug/ml) P. Mirabilis 889 0,1.
Esimerkki 45 7 £-/L-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino7~2-(tien-2-yyli)asetamido7-7a-formamidokefalosporaani- happo, natriumsuola_ t-butyyli-7a-/L-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino/-2-(tien-2-yyli)asetamido/-7a-formamidokefa-losporanaattia (0,079 g? 0,12 mmoolia) trifluorietikkahapossa (2 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa 1/2 tuntia. Tri-fluorietikkahappo haihdutettiin ja jäännös liuotettiin laimeaan natriumbikarbonaattiliuokseen. Liuos pestiin etyyliasetaatilla, hapotettiin pH-arvoon 1,5 IN kloorivetyhapolla ja uutettiin etyyliasetaatilla. Uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin. Jäännös suspendoitiin veteen ja säädettiin pH-arvoon 6,5 laimean natriumbikarbonaat-tiliuoksen avulla. Saatu liuos suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,024 g? 32 %); δ(ϋ20) 1,20 (3H, t, NCH2CH3), 2,09 (3H, s, OCOCH3) 3,00-4,15 (10H, m, 2-H2, CH20 ja NCH2CH2NCH2), 5,22 (1H, s, ArCH), 5,84 (1H, s, 6-H), 6,97-7,52 (3H, m, tiofeeni-H-ryhmät) ja 8,08 (1H, s, CHO); vmaks (KBr) 3400, 2970, 2920, 1730, 1710, 1650 & 1610 cm"1. MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 0,25.
Esimerkki 46 7β-/2-(2-aminotiatsol-4-yyli)asetamido7-7a~formamidokefalo- sporaanihappo, trifluorietikkahapposuola_ a) t-butyyli-7a-formamido-7£-/2-/2-(trifenyylimetyyliamino)- tiatsol-4-yyl//asetamido/kefalosporanaatti_
Liuos, jossa oli 2-/2-(trifenyylimetyyliamino)tiatsol-4-yyli/- '24 78702 etikkahappoa (0,200 g; 0,5 mmoolia) tetrahydrofuraanissa (10 ml), lisättiin hitaasti tipottain liuokseen, jossa oli N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidiä (0,227 g* 1,1 mmoolia) tetrahydrofuraanissa (5 ml) lämpötilassa 0°C. Tämän lisäyksen jälkeen lisättiin tipottain liuos, jossa oli t-butyyli-78-amino-7a-formamidokefalosporanaattia (0,185 g; 0,5 mmoolia) tetrahydrofuraanissa (5 ml) ja reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 16 h. Liuos suodatettiin sitten, haihdutettiin kuiviin ja jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin ja pestiin 0,5N kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaat-tivesiliuoksella ja suolaliuoksella. Se kuivattiin magnesium-sulfaatin avulla, haihdutettiin kuiviin ja raakatuotetta käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 ( < 230 mesh) avulla ja elutoitiin etyyliasetaatti/heksaanilla (4:1), jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,23 g; 61 %) λ maks (EtOH) 262 nm ( ε 13928) ϊ vmaks (CH^l,) 3400, 3200, 1792, 1740, 1725, 1700, 1680, 1520, 1225 cmδ (CDC13) 1,52 (9H, s, C(CH3)3), 2,01 (3H, s, 0C0CH3), 3,28 (2H, brs, 2-H2), 3,51 (2H, brs, ArCH2C0), 4,83 ja 5,06 (2H, ABq, J14Hz, CH2OCOCH3), 5,18 (1H, s, 6-H) 6,07 (1H, s, tiatsolyyli-H), 7,05 (1H, brs, vaihdettavissa D20:n kanssa, NHCPh3), 7,28 (15H, s, CPh3), 8,15 (1H, s, NHCHO), 8,28 (1H, brs, vaihdettavissa D20:n kanssa, NHCHO) ja 9,23 (1H, brs, vaihdettavissa D20:n kanssa, 78-NHCO).
b) 7 8-/2-(2-aminotiatsol-4-yyli)asetamido7-7a-formamido- kefalosporaanihappo, trifluorietikkahapposuola_
Liuosta, jossa oli t-butyyli-7cx-formamido-7 8-/2-/2-{trifenyy-limetyyliamino) tiatsol-4-yyli./asetamido/kefalosporanaattia (0,150 g; 0,20 mmoolia) trifluorietikkahapossa (5 ml), sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 tuntia. Liuos haihdutettiin kuiviin ja jäännöstä käsiteltiin tolueenilla ja se haihdutettiin uudelleen. Saatua hartsia käsiteltiin etyyliasetaatilla ja kiinteä aine suodatettiin ja pestiin hyvin etyyliasetaatilla ja eetterillä. Se kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,078 g; 69 %); vmafcs (KBr) 1775, 1725, 1670, 1630 sh, 1525 cm"1; δ (CF3C02D) 2,25 (3H, s, OCOCH3), 3,48 ja 3,65 (2H, ABq, J17Hz, 2-H2), 125 78702 3,98 (2H, s, ArCH2CO), 5,26 ja 5,42 (2H, ABq, J14HZ, CH2OCOCH3) , 5,42 (1H, s, 6-H), 6,69 (1H, s, tiatsolyyli-H) ja 8,40 (1H, s, NHCHO).
MIC (yug/ml) P. Mirabilis 889 100.
Esimerkki 47 6B-/D-2-/3-(kumarin-3-yyli)ureido7-2-(4-hydroksifenyyli)-asetamldo7-6ot-formamidopenisillaanihappo, natrlumsuola 68 i/D-2-amino-2- (4-hydroksifenyyli)asetamido7-6a-formamido-penisillaanihappoa (0,231 g) vedessä (25 ml) käsiteltiin tri-etyyliamiinilla pH-arvon 6,5 saamiseksi ja liuos laimennettiin tetrahydrofuraanilla (25 ml). Sitten lisättiin kumarin-3-yyli-isosyanaattia (0,094 g) tetrahydrofuraanissa (15 ml) ja pH pidettiin välillä 6,5 ja 7,5 trietyyliamiinia lisäämällä. Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 1/2 tuntia ja se väkevöitiin sitten tyhjössä. Vesipitoinen jäännös pestiin etyyliasetaatilla (2 x 35 ml), eetterillä (35 ml) ja peitettiin sitten etyyliasetaatin (35 ml) kerroksella ja hapotet-tiin pH-arvoon 2 5M kloorivetyhapolla. Faasit erotettiin ja vesipitoinen faasi uutettiin edelleen etyyliasetaatilla (35 ml), orgaaniset uutteet yhdistettiin, pestiin vedellä pH-arvos-sa 2 (35 ml), vedellä (35 ml), kyllästetyllä suolaliuoksella (25 ml) ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Haihdutettaessa kuiviin tyhjössä saatiin vaaleanpunainen vaahto (0,266 g), joka liuotettiin uudelleen kuivaan asetoniin (10 ml) ja jota käsiteltiin liuoksella, jossa oli 2M natrium-2-etyyliheksanoaattia 4-metyylipentan-2-onissa (0,22 ml) ja tämän jälkeen eetterillä. Saatu sakka otettiin talteen suodattamalla, pestiin eetterillä ja kuivattiin tyhjössä (saanto 0,292 g), vmaks<KBr) 3300 br' 1763, 1675, 1675 br, 1600, 1530 br, 1460, 1362, 1230, 1205 sh, ja 1175 cm"1? 6(D20) 0,96 ja 1,31 (6H, 2s, C(CH3)2), 4,15 (1H, s, 3-H), 5,20 (1H, s, 5-H), 5,45 (1H, s, CH), 6,30-6,60 (1H, m, kuma-riini-H), 6,75-7,13 (5H, m, fenyyli-H2 ja kumariini-H3), 7,38 (2H, d, J8Hz, fenyyli), 7,60 (1H, s, kumariini-H), 8,14 (1H, s, CHO). MIC (yug/ml) P. Mirabilis 889 100.
126 78702
Esimerkki 48 6 6-/D-2-/3-(4-okso-4H-1-bentsopyran-3-yy1i)ureido/-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-6a-formamidopenisillaanihappo, natriumsuola_ a) 4-okso-4H-l-bentsopyran-3-yyli-isosyanaattl
Kromoni-3-karboksyylihappoa (0,19 g) kuivassa dikloorimetaa-nissa (10 ml) käsiteltiin huoneen lämpötilassa oksalyyliklori-dilla (0,1 ml) ja tämän jälkeen kuivalla Ν,Ν-dimetyyliform-amidilla (2 tippaa). Seosta sekoitettiin 1 tunti huoneen lämpötilassa, se haihdutettiin kuiviin tyhjössä, liuotettiin uudelleen 1,2-dikloorietaaniin (10 ml) ja sitä käsiteltiin trimetyylisilyyliatsidilla (0,13 ml). Seosta sekoitettiin 1 tunti huoneen lämpötilassa ja se kuumennettiin sitten lämpötilaan 90°C tunnin ajaksi. Haihdutettaessa kuiviin tyhjössä, saatiin vaaleata kiinteätä ainetta (0,186 g), (1»2- dikloorietaani) 2230, 1680, 1645, 1615, 1462, 1376, 1250, 850, ja 760 cm b) 66-/D-2-/3-(4-okso-4H-l-bentsopyran-3-yyli)ureido7"2- (4-hirdroksifenyyli) asetamido7“6cx-formamidopenisillaani-happo, natriumsuola_ 68-/D-2-amino-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-6a-formamido-penisillaanihappoa (0,231 g) suspendoitiin 50 %:seen tetra-hydrofuraanin vesiliuokseen (20 ml), lisättiin trietyyliamii-nia pH-arvoon 6,5 ja tätä seosta käsiteltiin liuoksella, jossa oli 4-okso-4H-l-bentsopyran-2-yyli-isosyanaattia (0,093 g) tetrahydrofuraanissa (10 ml). Koko käsittelyn ajan pidettiin pH välillä 6,5-7,0 trietyyliamiinia lisäämällä. Kun seoksen oli annettu seistä 1/2 tuntia huoneen lämpötilassa, se väke-vöitiin tyhjössä, jäännös pestiin etyyliasetaatilla (2 x 25 ml), eetterillä (25 ml) ja peitettiin etyyliasetaattikerrok-sella (25 ml), hapotettiin pH-arvoon 2 5M kloorivetyhapolla ja faasit erotettiin. Vesifaasia uutettiin edelleen etyyliasetaatilla (25 ml), orgaaniset uutteet yhdistettiin, pestiin vedellä pH-arvossa 2 (25 ml), vedellä (25 ml) ja kyllästetyllä suolaliuoksella (25 ml) ennen kuivaamista vedettömän magnesium 127 78702 sulfaatin avulla. Haihdutettaessa tyhjössä saatiin valkoista jauhetta (0,227 g), joka liuotettiin uudelleen kuivaan asetoniin (10 ml) ja jota käsiteltiin 2M natrium-2-etyyli-heksanoaatilla 4-metyylipenta-2-onissa (0,19 ml) ja tämän jälkeen eetterillä. Sakka otettiin talteen suodattamalla, pestiin eetterillä ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,217 g), v ^ (KBr) 3320 br, 1765, 1665 br, 1607, 1540, 1510, 1468, 1382, 1265 sh, ja 1215 cm-1; 6 (D20) 0,99 ja 1,33 (6H, 2s, C(CH3)2), 4,18 (1H, s, 3-H), 5,28 (1H, s, CH), 5,56 (1H, s, 5-H), 6,60-7,55 (8H, m, aromaattiset ja kromoniprotonit), 8,09 (1H, s, CHO), ja 8,38 (1H, s, kromoni-2H). MIC (^ug/ml) 889 P. Mirabilis 889 50.
Esimerkki 49 6a-formamido-68-/TD-2-/T4-hydroksi-7-metyyli-l,8-naftyridin- 3- yyli)karbonyyliamino/-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/peni- sillaanlhappo, natriumsuola_ a) Bentsyyli-6g-/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyyli/-2-/(4-hydroksi-7-metyyli-l,8-naftyridin-3-yyli)karbonyyli-amino/asetamido/-6a--formamidopenisillanaatti 4- hydroksi-7-metyyli-l,8-naftyridiini-3-karboksyylihappoa (0,204 g) suspendoitiin kuivaan dikloorimetaaniin (20 ml) ja seosta käsiteltiin trietyyliamiinilla (0,42 ml). Saatu liuos jäähdytettiin lämpötilaan välille -20 ja -25°C ja sitä käsiteltiin fosgeenilla tolueenissa (0,8 mlj 12,5 % p/p) ja seosta sekoitettiin lämpötilassa välillä -20 ja -25°C 1/2 tun tia. Tämän jälkeen lisättiin liuos, jossa oli bentsyyli-6$-/D-2-amino-2-/4-bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyyli/asetamido/-6ot-formamidopenisillanaattia (0,632 g) kuivassa dikloorimetaa-nissa (20 ml). Seoksen annettiin lämmetä lämpötilaan 0°C ja sitä sekoitettiin sitten tunnin ajan lämpötilassa välillä 0-5°C. Se haihdutettiin kuiviin tyhjössä ja jäännöstä käsiteltiin etyyliasetaatilla (100 ml) ja vedellä (50 ml), faasit erotettiin ja vesipitoista faasia uutettiin vielä etyyliasetaatilla (50 ml). Orgaaniset uutteet yhdistettiin, pestiin vedellä (50 ml), suolaliuoksella (25 ml), kuivattiin vedettömällä 128 7 8 7 0 2 magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin tyhjössä, jolloin saatiin ruskeata vaahtoa, joka puhdistettiin kroma-tografisesti piioksidigeelin 60 (< 230 mesh ASTM) avulla, elutoitiin etyyliasetaatilla ja 5 %:sella etyyliasetaatissa olevalla etanolilla. Väkevöitäessä vastaavat fraktiot ja laimennettaessa eetterillä, jota seurasi hankaaminen ja suodattaminen, saatiin otsikossa mainittu yhdiste valkeana jauheena (0,232 g), vmaks (KBr) 3240 br, 1780, 1760, 1680 sh, 1650, 1612, 1525, 1508, 1450, 1240, 1216, ja 1182 cm"1·, 6(CDC13 + D20) 0,9 ja 1,18 (6H, 2s, C(CH3)2), 2,71 (3H, s, naftyridiini-CH3), 4,45 (1H, s, 3-H), 5,14 ja 5,26 (4H, 2s, 2CH2-ryhmät), 5,41 (1H, m, CH), 5,81 (1H, s, 5-H), 6,99-8,15 (17H, m, aromaattiset, CHO-ja 2-naftyridiini-H-ryhmät), 8,42 (1H, s, naftyridiini-2-H).
b) 6a-formamido-6g-/D-2-/74-hydroksi-7-metyyli-l,8-naftyri-din-3-yyli)karbonyyliamino/-2-(4-hydroksifenyyli)aset- amido7penisillaanihappo, natriumsuola_
Bentsyyli-68-/D-2-/4-(bentsyylioksikarbonyylioksi)fenyyli/-2-/T4-hydroksi-7-metyyli-l,8-naftyridin-3-yyli)karbonyyliami-no7asetamido7“6a-formamidopenisillanaattia (0,202 g) hydrat-tiin käyttäen esihydrattua 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia seoksessa, jossa oli 1,4-dioksaania (15 ml) ja vettä (2,5 ml), 3,5 h. Reaktioseosta käsiteltiin liuoksella, jossa oli natriumbikarbonaattia (0,02 g) vedessä (10 ml), suodatettiin ja suodos pestiin etyyliasetaatilla (2 x 50 ml) ja eetterillä (25 ml), ja vesipitoinen faasi jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin tuote valkoisena jauheena (0,116 g), vmaks (KBr) 3420 br, 3230 br, 1765, 1650, 1610, 1525 sh, 1511, 1450, 1358, ja 1250 cm"1» δ (D20) 0,91 ja 1,27 (6H, 2s, C(CH3)2), 2,15 (3H, s, naftyridiini-CH3), 4,12 (1H, s, 3-H), 5,44 (1H, s, CH), 5,55 (1H, s, 5-H), 6,60 (1H, d, J9Hz naftyridiini-H), 6,88 ja 7,37 (4H, 2d, J8Hz, aromaattiset), 7,79 (1H, d, J9Hz, naftyridiini-H), 8,06 (1H, s, CHO), 8,20 1H, s, naftyridiini-2-H). MIC (yug/ml) P. Mirabilis 889 5,0.
129 78702
Esimerkki 50 6B“/D-2-amino-3-(N-metyylikarbamoyyli)propionamido7-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7”6a“formamidopenisillaanihappo, natrlumsuola_ a) Metyyli-β-D-aspartaatti, hydroklorldi
Yhdiste valmistettiin 50 m molaarisessa mittakaavassa käyttäen menetelmää, jonka ovat esittäneet K. Hofmann ym. J.Amer.Chem. Soc. 1957, 79, 5701, L-sarjoissa. Uudelleenkiteyttämisen jälkeen metanoli-eetteristä saatiin 6,19 g (67 %) yhdistettä, sp. 183-185°C. Toisen uudelleenkiteyttämisen jälkeen saatiin tuotetta, jonka sp. oli 185,5-187°C, /"o_7q° -14,8° (cl, etano-li:vesi 1:3), 0,1 n-butanoli:etikkahappo:vedessä 4:1:1.
b) D-2-amino-3-(N-metyylikarbamoyyli)propionihappo Edellä saatu metyyliesteri-hydrokloridi (1,83 g; 10 mmoolia) liuotettiin metanoliin (8 ml) ja lisättiin liuos, jossa oli metyyliamiinia etanolissa (33 % p/tj 4,7 ml). Pullo suljettiin tiiviisti ja sen annettiin olla huoneen lämpötilassa 65 h, jonka jälkeen oli erottunut huomattava määrä kiinteätä ainetta. Tämä suodatettiin, pestiin metanolilla ja eetterillä ja kuivattiin. Suodos ja pesunesteet haihdutettiin kuiviin ja liuotettiin veteen (20 ml), ja pH säädettiin sitten arvoon 5,5 lisäämällä kloorivetyhappoa. Liuos haihdutettiin jälleen kuiviin ja sitä hangattiin sitten metanolin kanssa, jolloin saatiin lisää tuotetta, joka erotettiin edellä esitetyllä tavalla, jolloin kokonaissaanto oli 1,28 g (88 %); sp.
230-235°C (haj.)j Z a_7p^ -30,8° (cl, M hydrokloorihappo)j 6(D20) 2,73 (3H, s, CH-jN) , 2,90 (2H, d, J6Hz, CH^CH) , 4,16 (1H, t, J6Hz, CHCHj), Rf 0,05 n-butanoli:etikkahappo:vedessä 4:1:1; (Todettu: C 41,1, H 6,85, N 19,2. C5HioN2°3 vastaa C 41,1, H 6,85, N 19,2 %).
c) D-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)-3-(N-metyyli- karbamoyyli)propionihappo_
Edellä saatu aminohappo-N-metyyliamidi (0,73 g; 5 mmoolia) liuotettiin IM natriumbikarbonaattiliuokseen (10 ml). Lisättiin liuos, jossa oli 4-nitrobentsyylioksikarbonyylikloridia (1,35 g; 1,25 ekv.) tetrahydrofuraanissa (2 ml) ja seosta 130 78702 sekoitettiin voimakkaasti huoneen lämpötilassa 16 h. Tämän ajan kuluttua lisättiin vettä ja liuos pestiin kahdesti etyyliasetaatilla ja takaisinpesu suoritettiin vedellä kummallakin kerralla. Yhdistetyt vesifaasit hapotettiin pH-arvoon 2 lisäämällä 2M kloorivetyhappoa, jolloin tuote saostui valkoisena kiinteänä aineena, joka suodatettiin, pestiin vedellä ja kuivattiin; saanto 1,23 g (76 %). Kiteytettäessä uudelleen tetrahydrofuraani-petrolieetteristä (60-80°) saatiin puhdasta materiaalia, sp. 135-136°C; Ζ"α_/β^ "0*23° (cl, dimetyyliformamidi) ? δ /TCD3)2S07 2,40-2,65 (5H, m, CH^N + CHCH2) , 4,35 (1H, m; t, J7Hz D20 - vaihto, CH-CH2) , 5,17 (2H, s, ArCH20), 7,50-7,90 (4H, m, 2H, d, D20-vaihto, aryy-li-H ja 2-NH), 8,23 (2H, d, aryyli-H), 12,60 (1H, brs, D20-vaihto, C02H); 0,50 n-butanoli:asetaattihappo:vedessä 4:1:1; (Todettu C 47,8, H 4,75, N 12,5. ci3Hi5N3°7 vastaa C 48,0, H 4,6, N 12,9 %).
d) D-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)-3-(N-metyyli-karbamoyyli)propionihappo, N-hydroksisukkinimidiesteri Edellä saatu suojattu happo (0,65 g; 2 mmoolia) liuotettiin yhdessä N-hydroksi-meripihkahappoimidin (0,23 g; 1 ekv.) kanssa kuivaan dimetyyliformamidiin (10 ml). Liuos jäähdytettiin lämpötilaan 0°C ja sitä sekoitettiin ja tämän jälkeen lisättiin disykloheksyylikarbodi-imidiä (0,41 g; 1 ekv.). Kun lisääminen oli päättynyt, jatkettiin sekoittamista 1 tunti, jonka ajan kuluessa seos saavutti huoneen lämpötilan ja tämän jälkeen hyvin suljettua pulloa varastoitiin lämpötilassa 5°C 16 h. Saostunut kiinteä aine erotettiin suodattamalla ja pestiin tetrahydrofuraanilla, ja tämän jälkeen yhdistetyt suodokset ja pesunesteet haihdutettiin kuiviin. Hangattaessa jäännöstä propan-2-olin kanssa saatiin aktiivinen esteri valkoisena kiinteänä aineena, joka suodatettiin, pestiin vähäisellä määrällä kylmää propan-2-olia, eetteriä ja kuivattiin, saanto 0,59 g (70 %), sp. 128-129°C; +19,7° (cl, dimetyyliformamidi); <$Z(CD3) 2S0/ 2,45-2,75 (5H, m, CH3N + CHCH2), 2,80 (4H, s, COCH2CH2CO), 4,90 (1H, m, CHCH2), 5,21 (2H, s , ArCH20), 7,61 (2H, d, aryyli-H), 7,90 (2H, br m, D20-vaihto, 2NH), 8,23 (2H, d, aryyli-H). (Todettu: C 48,2, H 4,3; N 13,1. c17Hl8N4C)9 vastaa C 48,3, H 4,3, N 13,3 %) .
131 78702 e) Natrium-63-/D-2-/D-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyli-amino)-3-(N-metyylikarbamoyyli)propionamido/-2-(4-hydrokslfenyyli)asetamido7~6a-formamidopenisillanaatti 60-/D-2-amino-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-6a-formamido-penisillaanihappoa (0,150 g; 0,325 mmoolia) suspendoitiin seokseen, jossa oli kuivaa dikloorimetaania (2 ml) ja kuivaa dimetyyliformamidia (1 ml). Suspensio jäähdytettiin lämpötilaan 0°C ja sekoitettiin, sitten lisättiin peräkkäin tri-etyyliamiinia (0,06 ml) ja edellä saatua aktiivista esteriä (0,137 g; 1 ekv.). Sekoittamista jatkettiin lämpötilassa 0-5°C, jolloin saatiin kirkas, keltainen liuos, mutta oli välttämätöntä lisätä lisää dimetyyliformamidia (1 ml) liuoksen estämiseksi tulemasta erittäin viskoottiseksi. 2,5 tunnin kuluttua poistettiin suurin osa dimetyyliformamidia haihduttamalla paineessa < 1 mm Hg ympäristön lämpötilassa ja jäännös jaettiin etyyliasetaatin ja veden kesken, joka sisälsi riittävästi natriumbikarbonaattia niin, että pH-arvoksi saatiin noin 8. Vesifaasi pestiin vielä kerran etyyliasetaatilla, takaisinpesu suoritettiin kullakin kerralla vähäisellä vesimäärällä, jonka jälkeen hapotettiin pH-arvoon 2 kloorivety-hapolla ja uutettiin kahdesti etyyliasetaatti:tetrahydrofuraa-nilla 1:1. Orgaaniset uutteet pestiin kerran suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin, jolloin saatiin puolikiinteä, keltainen, hartsimainen aine. Tämä liuotettiin asetoniin, vähäinen liukenematon aine erotettiin suodattamalla ja lisättiin natrium-2-etyyliheksanoaatin 2M liuos 4-metyylipenta-2-onissa (0,17 ml; 1 ekv.). Saatu suspensio väkevöitiin ja lisättiin kuivaa eetteriä, jolloin saatiin penisilliinin natriumsuola valkoisena kiinteänä aineena, joka suodatettiin, pestiin asetonilla ja eetterillä ja kuivattiin, saanto 0,15 g (63 %); vmakg (KBr) 1770, 1665, 1610, ja 1515 cm-1; 6 (D20) 0,90 ja 1,27 (6H, 2s, (CH^C), 132 78702 2/67 (5H, m, CH3N + CH2CH), 4,11 (1H, s, 3-H), 5,11 (2H, s, ArCH20), 5,29 (1H, s, 5-H), 5,53 (1H, s, ArCHNH), 6,60-6,80 (2H, m, aryyli-H), 7,00-7,50 (4H, m, aryyli-H), 7,90-8,10 (2H, m, aryyli-H), 8,04 (1H, s, NHCHO); Rf 0,35 n-buta-noli:etikkahappo;vedessä, 4:1:1.
f) Natrium-6$-/D-2-/D-2-amino-3-(N-metyylikarbamoyyli)-propionamido7“2- (4-hydroksifenyyli) asetamido7“6a-forxn- amidopenisillanaattl_
Natrium-6B-/D-2-/D-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)- 3-(N-metyylikarbamoyyli)propionamido7“2-(4-hydroksifenyyli)-asetamido/-6a-formamidopenisillanaattia (0,13 g; 0,18 mmoo-lia) liuotettiin veteen (5 ml) ja lisättiin 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (0,06 g). Seosta hydrattiin ilmakehän paineessa ja huoneen lämpötilassa 1 tunti, tämän jälkeen katalyytti erotettiin suodattamalla ja pestiin hyvin vedellä.
Suodos pestiin kahdesti etyyliasetaatilla, takaisinpesu suoritettiin kulloinkin vähäisellä vesimäärällä ja tämän jälkeen vesifaasi haihdutettiin kuiviin. Hangattaessa eetterin kanssa saatiin suojauksesta vapautettu penisilliinin natriumsuola (0,08 g; 81 %) vaaleankeltaisena jauheena; vmaks ^KBr) 1770, 1650 br, 1605, 1510 cm"1; 6(D20) 0,93 ja 1,28 (6H, 2s, (CH3)2C), 2,50-2,75 (5H, m, CH3N + CH2CH), 3,80 (1H, m, CH(NH2)C0), 4,12 (1H, s, 3-H), 5,31 (1H, s, 5-H), 5,54 (1H, s, ArCH(NH)CO), 6,87 (2H, d, aryyli-H), 7,35 (2H, d, aryyli-H), 8,09 (1H, s, NHCHO); 0,05 n-butanoli:etikkahappo:vedessä, 4:1:1. MIC (^,ug/ml) P. Mirabilis 889 1,0.
Esimerkki 51 713-/2- (syanometyylitio) asetamido7-7a-formamidokefalosporaani- happo, natriumsuola_ a) t-butyyli-7B”/2-(syanometyylitio)asetamido7-7a-formamido- kefalosporanaatti_ 2-(syanometyylitio)etikkahappo (0,144 g; 1,1 mmoolia) dikloo-rimetaanissa (10 ml), joka sisälsi dimetyyliformamidia (1 tippa) , muutettiin happokloridikseen käsittelemällä oksalyyli- 133 78702 kloridilla (0,279 g; 2,2 nvmoolia) . Kun oli sekoitettu huoneen lämpötilassa 0,75 h, haihdutettiin liuos kuiviin, sitä käsiteltiin tolueenilla ja se haihdutettiin uudelleen. Jäännös liuotettiin dikloorimetaaniin (5 ml) ja lisättiin tipot-tain liuokseen, jossa oli t-butyyli-78-amino-7a-formamidoke-falosporanaattia (0,371 g; 1,0 mmoolia) ja pyridiiniä (0,119 gj 1,5 mmoolia) dikloorimetaanissa (25 ml), lämpötilassa 0°C. Reaktioliuosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 0,5 h ja tämän jälkeen 2 h huoneen lämpötilassa ennen pesemistä 0,5 N kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja suolaliuoksella. Se kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin. Raakatuotetta käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 ( <230 mesh ASTM) avulla ja elutoitiin etyyliasetaatti/heksaanilla 2:1, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,207 g; 43 %), vmafcS (CH2CL2) 3285, 2240, 1790, 1742, 1730, 1695, 1495,1215 cm-1? <$(CDC13) 1,54 (9H, s, C(CH3)3), 2,08 (3H, s, OCOCH-j) , 3,27 ja 3,51 (2H, ABq, J17Hz, 2-H2), 3,50 (4H, s, CH2SCH2), 4,82 ja 5,06 (2H, ABq, J13Hz, CH2OCOCH3), 5,21 (1H, s, 6-H), 8,00 ja 8,33 (2H, 2s D20-vaihdon jälkeen, NHCO-ryhmät) ja 8,20 (1H, s, CHO).
b) 7 8-/2- (syanometyylitio) asetamido7-7 ct-formamidokefalospo- raanihappo, natriumsuola_ t-butyyli-7 3-/2-(syanometyylitio)asetamido/-7a-formamidokefalosporanaattia (0,157 gj 0,32 mmoolia) liuotettiin jään avulla jäähdytettyyn trifluorietikkahappoon (5 ml) ja saatua liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 0,5 h. Se haihdutettiin sitten kuiviin, jäännöstä käsiteltiin tolueenilla ja haihdutettiin uudelleen. Jäännös liuotettiin laimeaan natriumbikarbonaatin vesiliuokseen ja pestiin etyyliasetaatilla. Vesi-liuos kyllästettiin natriumkloridilla, säädettiin pH-arvoon 1,5 IN kloorivetyhapolla ja tuote uutettiin tetrahydrofuraani/ etyyliasetaattiin (1:1). Uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin vapaa happo. Tämä suspendoitiin veteen ja pH säädettiin arvoon 6,5 laimean natriumbikarbonaatin vesiliuoksen avulla. Saatu liuos suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, 134 73702 jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,091 g; 62 %); vmaks (KBr)' 2240' 1765' 1675' 1610 cm_1' δ (D20) 2,04 (3H, s, 0C0CH3), 3,15-3,75 (6H, m, CH2SCH2 ja 2-H2), 4,50-4,95 (m, HOD ja CH2OCOCH3), 5,29 (1H, s, 6-H), ja 8,10 (1H, s, CHO). MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 25.
Esimerkki 52 78-/2-/(aminokarbonyyli)amino/-2-(tien-2-yyli)asetamido7-7a- formamidokefalosporaanihappo, natriumsuola_ a) t-butyyli-7 B-/2-/Taminokarbonyyli)amino7-2-(tien-2-yyli)- asetamldo/-7g-formamidokefalosporanaatti_
Tionyylikloridia (0,87 g; 7,3 mmoolia) lisättiin suspensioon, jossa oli 2-7(aminokarbonyyli) amino/-2-(tien-2-yyli) etikkahap-poa (0,60 gj 3 mmoolia) kuivassa asetonitriilissä (17 ml) lämpötilassa 0-5°C typpikehässä. 5 minuutin kuluttua lisättiin kuivaa eetteriä (29 ml) ja saatua lietettä sekoitettiin 10 minuuttia. Sakka suodatettiin sitten typpikehässä ja pestiin hyvin eetterillä. Tuote kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin 2-amino-4-(tien-2-yyli)-4H-oksatsol-5-oni-hydroklori-dia (0,60 g·, 92 %) lohenpunaisena jauheena, v (nujol) 1878, 1745, 1725 cm"1.
t-butyyli-7B~amino-7a-formamidokefalosporanaattia (0,557 g; 1,5 mmoolia) kuivassa dikloorimetaanissa (10 ml) typpikehässä jäähdytettiin lämpötilaan -60°C. Sitten lisättiin kuivaa di-metyyliformamidia (10 ml) ja propyleenioksidia (1,3 ml; 1,08 g; 18,6 mmoolia) ja seos jäähdytettiin uudelleen lämpötilaan -60°C. Sitten lisättiin yhdessä erässä edellä mainittu oksatsoloni-hydrokloridi (0,60 g) ja saatua liuosta sekoitettiin lämpötilassa välillä -60°C ja -20°C 3 h. Haihtuvat aineosat poistettiin sitten tyhjössä ja jäljelle jäänyt liuos laimennettiin etyyliasetaatilla ja pestiin vedellä, laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, 0,5N kloorivetyhapolla ja suolaliuoksella. Orgaaninen liuos kuivattiin magnesium-sulfaatin avulla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin jäljelle jäi raakatuote. Suoritettaessa kromatografinen käsittely piioksidigeelin 60 ( <230 mesh ASTM) avulla ja elutoitaessa etyyliasetaatti/heksaanilla 4:1 sekä 5 %:sella etanoli/etyyli- 135 73702 asetaatilla saatiin kaksi isomeeriä. Isomeeri 1 oli vähemmän polaarinen näistä kahdesta isomeeristä.
Isomeeri 1: vmajcs (tetrahydrofuraani) 3460, 3350, 3200, 1790, 1745, 1695 br, 1670 sh cm“S S/TCD3)2C07 1/51 (9H s, C(CH3)3), 2,01 (3H, s, 0C0CH3), 3,28 ja 3,56 (2H, ABq, J17HZ, 2-H2), 4,71 ja 5,03 (2H, ABq, Jl3Hz, CH2OCOCH3), 5,21 (1H, s, 6-H), 5,50 (2H, brs, C0NH2), 6,14 (1H, d, J8Hz, α-protoni), 6,69 (1H, d, J8Hz, a-NHCO), 6,85-7,40 (3H, m, aromaattiset), 8,16 (1H, s, CHO) ja 8,40 ja 9,12 (2H, 2s, 7β-ΝΗ00 ja NHCHO).
Isomeeri 2; sp. 194°C (haj.) (asetonis ta) ; v^^g (tetrahydro-furaani) 3460, 3350, 3190, 1785, 1740, 1695 br, 1660 cm-1; 6/TCD3)2NCD07 1,52 (9H, s, C(CH3)3), 2,05 (3H, s, 0C0CH3), 3,31 ja 3,62 (2H, ABq, J18Hz, 2-H2), 4,68 ja 4,95 (2H, ABq, J12Hz, CH20C0CH3), 5,29 (1H, s, 6-H), 5,92 (3H, m, a-protoni ja NHCONH2), 6,85 (1H, d, J8Hz, NHCONH2), 6,95 (1H, dd, J5 ja 3Hz, tienyyli-4-H), 7,21 (1H, d, J3Hz, tienyyli-3-H), 7,43 (1H, d, J5Hz, tienyyli-5-H), 8,22 (1H, s, CHO), 9,29 ja 9,61 (2H, 2s, NHCHO ja 7β-ΝΗ).
(Todettu: C 47,9, H 4,8 N 12,7. C22H27N5°8S2 vastaa C,47,7, H 4,9, N 12,65 %).
b) 7$-/2-/Taminokarbonyyli)amino7-2-(tien-2-yyli)asetamido/-7ot-formamidokefalosporaanihappo, natriumsuola (isomeeri 1) t-butyyli-78-/2-/Taminokarbonyyli)amino7-2-(tien-2-yyli)-aset-amido7-7a-formamidokefalosporanaattia (isomeeri 1) (0,216 g; 0,39 mmoolia) liuotettiin jään avulla jäähdytettyyn trifluori-etikkahappoon (5 ml) ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa 0,75 h. Liuos haihdutettiin kuiviin, lisättiin tolueenia ja haihdutettiin. Jäännös liuotettiin laimeaan natriumbikarbonaatin vesiliuokseen ja saatu liuos pestiin etyyliasetaatilla. Se kyllästettiin sitten natriumkloridilla, pH säädettiin arvoon 1,5 IN kloorivetyhapon avulla ja tuote uutettiin tetrahydrofuraani/etyyliasetaattiin. Uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin sitten kuiviin, jolloin saatiin vapaa happo. Tämä suspen-doitiin veteen, pH säädettiin arvoon 6,5 laimean natriumbi- '36 78702 karbonaatin vesiliuoksen avulla ja saatu liuos suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu natriumsuola (0,181 g; 89 %); vmaks (KBr) 1760, 1680, 1615, 1530, 1380 cm”1* <S (C2<0) 2,01 (3H, s, 0C0CH3> 3,11 ja 3,49 (2H, ABq, J17HZ, 2-H2), 4,40-4,80 (m, HOD ja CH2OCOCH3), 5,18 (1H, s, 6-H), 5,58 (1H, s, α-protoni), 6,90-7,50 (3H, m, aromaattiset) ja 8,03 (1H, s, CHO).
MIC (y\iq/ml) P. Mirabilis 889 125.
c) 7g-/2-/Taminokarbonyyli) amino7“2- (tien-2-yyli) asetamido7~ 7ot-formamldokefalosporaanihappo, natriumsuola (Isomeeri 2) t-butyyli-7g-/2-J/(aminokarbonyyli) amino7-2- (tien-2-yyli) aset-amio7~7a-formamidokefalosporanaattia (isomeeri 2) (0,080 g; 0,14 mmoolia) liuotettiin jään avulla jäähdytettyyn trifluori-etikkahappoon (5 ml) ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa 0,5 h. Liuos haihdutettiin kuiviin, lisättiin tolueenia ja haihdutettiin. Jäännös kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin vapaa happo valkoisena kiinteänä aineena. Tämä suspendoitiin veteen ja pH säädettiin arvoon 6,5 lisäämällä laimeata natriumbikarbonaatin vesiliuosta. Saatu liuos pestiin etyyliasetaatilla ja jäädytyskuivattiin sitten, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste; vmaks 1760, 1675, 1620, 1530 cm 6(D20) 2,01 (3H, s, OCOCH3), 3,06 ja 3,46 (2H, ABq, J17Hz, 2-H2), 4,50-4,85 (m, HOD ja CHjOCOCH-j), 5,22 (1H, s, 6-H), 5,55 (1H, s, α-protoni), 6,90-7,50 (3H, m, aromaattiset) ja 8,10 ja 8,41 (1H, 2s, CHO-rotameerit).
MIC (yug/ml) P. Mirabilis 889 25.
Esimerkki 53 7ct-formamido-7|3-/2- (tien-2-yyli) asetamido/-3-/ (1-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli/-kef-3-em-4-karboksyylihappo, natriumsuola_ a) Bentshydryyli-7a-formamido-7g-/2-(tien-2-yyli)asetamido/- 3- /7l”metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli7~kef-3-em- 4- karboksylaatti___ 7a-formamido-7g-/2-(tien-2-yyli)asetamido7kefalosporaanihappoa (0,35 g; 0,8 mmoolia) 1,2-dikloorietaanissa (15 ml), joka 137 78702 sisälsi myös l-metyyli-lH-tetratsol-5-tiolia (0,10 g; 0,86 nunoolia), kuumennettiin lämpötilassa 80°C 6 tuntia, annettiin jäähtyä ja annettiin seistä huoneen lämpötilassa yli yön. Sitten lisättiin liuos, jossa oli difenyyli-diatsome-taania (0,27 g; 1,4 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml), ja reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 3 h. Reak-tioseos sammutettiin jääetikkahapon (1 ml) avulla ja haihdutettiin. Jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti (piioksidi-geeli 60; 1:1 heksaani/etyyliasetaatti), jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,072 g; 14 %); öiCDCl^) 3,22, 3,48 (2H, ABq, J16Hz, 2-H2), 3,85 (2H, s, ArCH2), 3,87 (3H, s, NCH3), 4,36, 4,52 (2H, ABq, Jl3Hz, CH2S), 5,17 (1H, s, 6-H), 6,86-7,04 (3H, m, tiofeeni-H-ryhmät jaPhjCH), 7,2-7,6 (11H, m, tiofeeni-H ja aromaattiset H-ryhmät), 8,16 (1H, s, CHO) ; vmaks (CH2C12) 1790' 1698, 1630 cm-1.
b) 7a-formamido-78-/2-(tien-2-yyli)asetamido7-3-/Tl-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tioraetyyli7kef-3-em-4-karboksyyli- happo, natriumsuola_
Bentshydryyli-7a-formamido-78-/2-(tien-2-yyli)asetamido7“3-/(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli/kef-3-em-4-karboksy-laattia (0,07 g; 0,11 mmoolia) trifluorietikkahapossa (5 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa 0,5 h ja haihdutettiin kuiviin. Jäännöstä hangattiin eetterin kanssa ja se suspendoi-tiin veteen, joka säädettiin pH-arvoon 6,5 kyllästetyn natrium-bikarbonaattiliuoksen avulla. Saatu liuos pestiin etyyliasetaatilla, suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,03 g; 55 %); <5(°20) 3,34, 3,68 (2H, ABq, J17Hz, 2-H2) 3,96 (2H, s, ArCH2), 4,04 (3H, s, NCH^) (3,96, 4,04 signaaleja, jotka peittävät CH2S:n lH:n), 4,2-4,3 (1H, d, J13Hz, CH2S), 5,28 (1H, s, 6-H) 6,95-7,15 (2H, m, tiofeeni-H-ryhmät), 7,3-7,45 (1H, m, tiofeeni-H), 8,16 (1H, s, CHO); vmaks (KBr) 1610, 1677, 1764 cm-1.
MIC (yug/ml) P. Mirabilis 889 10.
Esimerkki 54
Difenyylimetyyli-70-amino-7a-formamido-3-/(l-metyyli-lH- tetratsol-5-yyli)tiometyyli/kef-3-em-4-karboksylaatti 138 78702 a) t-butyyli-7a-formamido-7$-/T4-nitrobentsyyli) oksikarbonyy- liamlno7kefalosporanaatti_
Liuos, jossa oli 4-nitrobentsyylikloroformaattia (3,24 g; 15 mmoolia) tetrahydrofuraanissa (20 ml), lisättiin tipottain sekoitettuun liuokseen, jossa oli t-butyyli-70-amino-7a-form-amidokefalosporanaattia (1,11 g; 3 mmoolia) ja pyridiiniä (1,19 g; 15 mmoolia) tetrahydrofuraanissa (30 ml) lämpötilassa 0°C. Reaktioliuosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 0,5 h ja tämän jälkeen 6 h huoneen lämpötilassa. Se haihdutettiin sitten kuiviin, jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin ja saatu liuos pestiin laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, 0,5 N kloorivetyhapolla ja suolaliuoksella. Se kuivattiin sitten magnesiumsulfaatin avulla ja raakatuotetta käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 ( < 230 mesh ASTM) avulla ja elutoitiin etyyliasetaatti/heksaanilla 1:2 aina suhteeseen 3:2 saakka, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (1,06 g; 64 %)i Vmaks <CH2C12) 3395' 3300' 1795, 1740, 1725, 1700, 1525, 1495, 1350, 1230 cm”1; 6(CDC13) 1,51 (9H, s, C(CH3)3), 2,06 (3H, s, 0C0CH3), 3,21 ja 3,45 (2H, ABq, Jl7Hz, 2-H2), 4,82 ja 5,07 (2H, ABq, J13Hz, CH20C0CH3), 5,15 (1H, s, 6-H), 5,21 (2H, s, CH2Ar), 6,60 (1H, s, NHCOO), 7,49 ja 8,18 (4H, 2d, J8Hz, aromaattiset), 7,61 (1H, brs, NHCHO) ja 8,20 (1H, s, CHO).
b) 7a-formamido-78-/74-nitrobentsyyli)oksikarbonyyliaminoZ- kef alosporaanlhappo_ t-butyyli-7a-formamido-7 0-/74-nitrobentsyyli)oksikarbonyyli-amino7kefalosporanaattia (0,94 g; 1,7 mmoolia) liuotettiin jään avulla jäähdytettyyn trifluorietikkahappoon (10 ml) ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa 0,75 h. Liuos haihdutettiin kuiviin ja jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin (30 ml). Kun liuos oli väkevöity 5 ml:n tilavuuteen, lisättiin eetteriä ja saostettu tuote suodatettiin, pestiin hyvin eetterillä ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,66 g; 78 %)j vmaks (KBr) 3420 br, 1780, 1720 br, 139 78702 1680 sh, 1520, 1350 cm”1; δ(CF3C02H) 2,26 (3Η, s, 0C0CH3), 3,39 ja 3,62 (2H, ABq, J17Hz, 2-H2), 5,20-5,60 (5H, m, CH2OCOCH3, CH2Ar ja 6-H), 7,64 (2H, d, J8Hz, aromaattiset), 8,33 (2H, d, J8Hz, aromaattiset) ja 8,42 (1H, s, CHO).
c) Difenyylimetyyli-7a-formamido-7B-/(4-nitrobentsyyli)oksi-karbonyyliamino/-3-/(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli ) tio- metyyli/kef-3-em-4-karboksylaatti_ 7a-formamido-7g-/T4-nitrobentsyyli)oksikarbonyyliamino/kefalo-sporaanihappoa (0,60 g; 1,21 mmoolia) ja 1-metyyli-l-H-tetrat-soli-5-tiolia (0,16 g; 1,34 mmoolia) 1,2-dikloorietaanissa (50 ml) kuumennettiin palautusjäähdyttäen 6,5 h. Saatu liuos dekantoitiin liukenemattomasta materiaalista ja jäähdyttämisen jälkeen huoneen lämpötilaan sitä käsiteltiin liuoksella, jossa oli difenyylidiatsometaania dikloorimetaanissa (14 ml). Reaktioliuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 0,5 h ja tämän jäLkeen lisättiin jääetikkahappoa (1 tippa) ja sekoittamista jatkettiin 10 minuuttia. Liuos haihdutettiin sitten kuiviin ja raakatuotetta käsiteltiin kromatografisesti piioksi-digeelin 60 ( <. 230 mesh ASTM) avulla ja elutoitiin etyyliase-taatti/heksaanilla 1:1 aina suhteeseen 2:1 saakka, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,198 g; 23 %); vmaks (CH2C12) 3395, 1795, 1725, 1700, 1525, 1495, 1350, 1230 cm"1; 6(CDC13) 3,47 (2H, brs, 2-H2), 3,79 (3H, s, NCH3), 4,27 ja 4,51 (2H, ABq, J13Hz, CH2S), 5,14 (2H, s, CHjAr), 5,24 (1H, s, 6-H), 6,61 (1H, s, NHCOO), 6,88 (1H, s, CHPh2), 7,10-7,60 (13H, m, aromaattiset ja NHCHO), 8,05-8,25 (3H, m, aromaattiset ja CHO).
d) Difenyylimetyyli-7B-amino-7a-formamido-3-/(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli7kef-3-em-4-karboksylaatti
Suspensiota, jossa oli 10 % hiilellä olevaa palladiumia (0,100 g) tetrahydrofuraanissa (10 ml) ja vedessä (1 ml), esihydrattiin 0,5 h. Sitten lisättiin difenyylimetyyli-7a-formamido-7B-/T4-nitrobentsyyli)oksikarbonyyliamino/-3-/(1-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli/kef-3-em-4-karboksy-laattia (0,100 g; 0,14 mmoolia) tetrahydrofuraanissa (5 ml) 140 78702 ja hydrausta jatkettiin vielä 1/2 tuntia. Katalyytti erotettiin suodattamalla ja pestiin hyvin tetrahydrofuraanilla ja etyyliasetaatilla. Suodos haihdutettiin kuiviin, jäännös liuotettiin tetrahydrofuraaniin (10 ml) ja veteen (1 ml)/lisättiin 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (0,100 g) ja hydrausta jatkettiin vielä 0,75 h. Katalyytti suodatettiin, pestiin etyyliasetaatilla ja suodos pestiin suolaliuoksella. Kuivaamisen jälkeen magnesiumsulfaatin avulla haihdutettiin liuos kuiviin ja jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 ( < 230 mesh ASTM) avulla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,006 g; 8 %) ; vmaks (CH2C12) 3395, 1782, 1720 sh, 1695, 1380 cm-1; 6 (CDC13) 2,43 (2H, brs, NH2),3,60 ja 3,67 (2H, ABq, J16Hz, 2-H2) , 3,86 (3H, s, NCH-j) , 4,31 ja 4,45 (2H, ABq, J13Hz, CH2S), 5,17 (1H, s, 6-H), 6,48 (1H, s, NHCHO), 6,97 (1H, s, CHPh2), 7,20-7,55 (lOH, m, aromaattiset) ja 8,23 (1H, s, CHO).
e) Difenyylimetyyli-7f3-amino-7oi”formamido-3-/(l-metyyli- lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli/kef-3-em-4-karboksylaatti 7 8-amino-7a-formamido-kefalosporaanihappo-trifluoriasetaatti-suolaa (1,2 g; 2,8 mmoolia) vedessä (25 ml) ja asetonissa (10 ml) säädettiin pH-arvoon 6,5 natriumdikarbonaattiliuoksen avulla. Tähän lisättiin l-metyyli-lH-tetratsoli-5-tiolia (0,4 g; 3,4 mmoolia) ja reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa 60°C 6 h. Reaktioseoksen annettiin jäähtyä, se hapotet-tiin pH-arvoon 2,0 ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin dimetyyliformamidiin (60 ml) ja sitä käsiteltiin difenyy-lidiatsometaanilla dikloorimetaanissa (30 ml). Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2,5 h, siihen lisättiin jääetikkahappoa (0,5 ml), se laimennettiin etyyliasetaatilla, pestiin hyvin vedellä, suolaliuoksella, kuivattiin magnesium-sulfaatilla ja haihdutettiin. Jäännöstä käsiteltiin kroma-tografisesti (piioksidigeeli 60; 1:3 heksaani/etyyliasetaatti), jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,47 g; 26 %).
141 78702
Esimerkki 55
Difenyylimetyyli-7a-fοπη amido-78-/(trikloorietoksi)karbonyy-liamino/-3-/(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli/kef- 3-em-4-karboksylaatti_ a) 7a-formamido-78-/(trikloorietoksi)karbonyyliamino/- kefalosporaanihappo_ t-butyyli-7a-formamido-7B-/(trikloorietoksi)karbonyyliamino/-kefalosporanaattia (1/44 g; 2,6 mmoolia) liuotettiin kylmään trifluorietikkahappoon (15 ml) ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa 0,75 h. Liuos haihdutettiin sitten kuiviin, sitä käsiteltiin tolueenilla ja se haihdutettiin uudelleen. Jäännös liuotettiin laimeaan natriumbikarbonaattiliuokseen ja vesi-liuos pestiin etyyliasetaatilla ennen hapottamista pH-arvoon 1,5 IN kloorivetyhapolla. Tuote uutettiin tetrahydrofuraani/ etyyliasetaattiin ja yhdistetyt uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,96 g* 74 %)} 6/TCD3)2C07 2,08 (3H, s, 0C0CH3), 3,60 (2H, brs, 2-H2), 4,88 (2H, brs, CH2CC13), 4,87 ja 4,19 (2H, ABq, Jl3Hz, CH2OCOCH3), 5,39 (1H, s, 6-H), 8,10-8,80 (3H, 3s, NHCO ja NHCHO) ja 10,53 (1H, s, C02H).
b) Difenyylimetyyli-7a-formamido-78-/(trikloorietoksi)- karbonyyliamino7-3-/—(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)-tiometyyli7kef-3-em-5-karboksylaatti_ 7a-formamido-78-/7trikloorietoksi)karbonyyliamino7kefalosporaa-nihappoa (0,49 g; 1 mmooli) ja l-metyyli-lH-tetratsoli-5-tiolia (0,13 g; 1,1 mmoolia) 1,2-dikloorietaanissa (30 ml) kuumennettiin palautusjäähdyttäen 7 h. Reaktioliuos haihdutettiin kuiviin ja raakaa 7a-formamido-78-/Ttrikloorietoksi)-karbonyyliamino7~3-/7l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli7~ kef-3-em-4-karboksyylihappoa käytettiin puhdistamatta.
Edellä mainitun hapon (1 mmooli) liuosta dikloorimetaanissa (25 ml) käsiteltiin liuoksella, jossa oli difenyylidiatso-metaania dikloorimetaanissa (12 ml) (so. riittävästi reaktion päättämiseksi t.l.c.-analyysillä määrättynä). Kun oli sekoi- 142 78702 tettu huoneen lämpötilassa 0,5 h, lisättiin jääetikkahappoa (3 tipppaa) ja sekoittamista jatkettiin vielä 0,25 h. Liuotin haihdutettiin sitten kuiviin ja raakatuotetta käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 ( <230 mesh ASTM) avulla, elutoitiin etyyliasetaatti/heksaanilla 1:2 suhteeseen 1:1 saakka, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,121 g* 17 %)f vmaks (CH2C12) 3390' 1798' 1735, 1705, 1490 br, 1382, 1230 cm-1* δ (CDC13) 3,48 ja 3,62 (2H, ABq, J17Hz, 2-H2), 3,87 (3H, s, NCH3), 4,37 ja 4,60 (2H, ABq, J13Hz, CH2S), 4,72 ja 4,81 (2H, ABq, J12Hz, CH2CCl3), 5,20 (1H, s, 6-H), 6,61 (1H, s, NHCOO), 6,93 (1H, s, CHPh2), 7,20-7,60 (11H, m, aromaattiset ja NHCHO) ja 8,21 (1H, s, NHCHO).
Esimerkki 56 7a-formamido-76-/2-(tien-2-yyli)asetamido7“3-/T2-metyyli- l, 3,4-tiadiatsol-5-yyli)tiometyyli7kef-3-em-4-karboksyyli- happo, natriumsuola_ a) Difenyylimetyyli-7a-formamido-78-/2-(tien-2-yyli)asetami-do7~ 3-/7 2 -metyy 1 i-1,3,4-tiadiatsol-5-yyli) tiometyyli_/- kef-3-em-4-karboksylaatti_ 7a-formamido-78“/2-(tien-2-yyli)asetamido7kefalosporaanihap-poa (0,50 g; 1,14 mmoolia) 1,2-dikloorietaanissa (20 ml), joka sisälsi myös 2-metyyli-l,3,4-tiadiatsoli-5-tiolia (0,18 g} 1,36 mmoolia), kuumennettiin lämpötilassa 80°C 6 h ja annettiin seistä huoneen lämpötilassa 16 h. Sitten lisättiin liuos, jossa oli difenyylidiatsometaania dikloorimetaanissa (10 ml) (so. riittävästi reaktion lopettamiseksi t.l.c.-analyysillä määrättynä), ja reaktioseosta sekoitettiin 3 tuntia, lisättiin jääetikkahappoa (0,5 ml) ja liuos haihdutettiin kuiviin. Jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti (piioksi-digeelij 1:1 heksaani/etyyliasetaatti), jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,042 g? 6 %); δ(CDC13) 2,64 (3H, s, CH3), 3,21, 3,38 (2H, ABq, J16Hz, 2-H), 3,78 (2H, s, CH2C0), 4,28, 4,58 (2H, ABq, Jl3,5Hz, CH2S), 5,15 (1H, s, 6-H), 6,83-7,02 (3H, m, PhjCH, tiofeeni-H-ryhmät), 7,10-7,75 (12H, m, aromaattiset H-ryhmät ja NH), 7,86 (1H, s, NH), 8,06 (1H, s, CHO) ; ^maks (CH2C12) 1789, 1728, 1695 cm"1.
143 7 8 7 0 2 b) 7a-formamido-7B-/2-(tien-2-yyli)asetamido7“3-/72-metyy-li-1, 3,4-tiadiatsol-5-yyli)tiometyyljL/kef-3-em-4-karbok- syylihappo, natrlumsuola__
Difenyylimetyyli-7a-formamido-7 6-/2-(tien-2-yyli)asetamido/- 3-/(2-metyyli-l,3,4-tiadiatsol-5-yyli)tiometyyli/kef-3-em-4-karboksylaattia (0,038 g? 0,06 inmoolia) trifluorietikkahapos-sa (4 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa 0,5 h ja haihdutettiin kuiviin. Jäännöstä hangattiin eetterin kanssa ja se suodatettiin. Saatu kiinteä aine suspendoitiin veteen, joka säädettiin sitten pH-arvoon 6,5 natriumbikarbonaatti-liuoksen avulla. Saatu liuos pestiin etyyliasetaatilla, suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,018 g; 63 %); δ (D20) 2,72 (3H, s, CH3), 3,24, 3,62 (2H, ABq, Jl7,5Hz, 2-H), 3,82-3,98 (3H, m, CH2C0 ja CH2S:n 1H), 4,34-4,44 (1H, d, J18Hz, CH2S), 5,23 (1H, s, 6-H), 6,9-7,4 (3H, m, tiofeeni-H-ryhmät), 8,13 (1H, s, CHO); vmaks (KBr) 1767' 1678, 1574 cm-1.
MIC (/ug/ml) P. Mirabilis 889 25.
Esimerkki 57 7 8-/2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperat-sin-l-yyli) karbonyyliamino7asetamido7_7 cx-formamido-3-/Tl-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli/kef-3-em-4-karboksyyli- happo, natriumsuola_ a) Difenyylimetyyli-7 8-/D,L-2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2- /(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/-asetamido7-7a-formamido-3-/7l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiOTietyyli7kef-3-em-4-karboksylaatti
Liuos, jossa oli D,L-2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/74-etyyli- 2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/etikkahappoa (0,31 gi 0,71 mmoolia) dikloorimetaanissa (15 ml), lisättiin hitaasti tipottain liuokseen, jossa oli difenyylimetyyli-7 g-amino-7 a-formamido-3-/7l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tio-metyyli7kef-3-em-4-karboksylaattia (0,47 g; 0,88 mmoolia) ja N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidiä (0,16 gt 0,78 mmoolia) dikloorimetaanissa (25 ml). Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 3 vuorokautta ja se haihdutettiin. Jäännös 144 78702 liuotettiin etyyliasetaattiin, pestiin IN kloorivetyhapolla, kyllästetyllä natriumbikarbonaattiliuoksella, suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla ja haihdutettiin. Kromatografisessa käsittelyssä (piioksidigeeli, etyyliasetaatti) aikaansaatiin ainoastaan osittainen kahden isomeerin erottuminen. Isomeerillä 1 (epäpuhtautena 20 % isomeeriä 2) (0,06 g; 10 %) oli seuraavat arvot 6(CDC13) 1,19 (3H, t, J7Hz, CH2CH3), 2,22, 2,23 (6H, 2s, CH3CO-ryhmät), 2,78, 3,04 (2H, ABq, J17,5Hz, 2-H), 3,4-3,7 (4H, m, piperatsiini-CH2 ja CH2CH3), 3,84 (3H, s, NCH3), 3,8-4,1 (2H, m, piperatsiini-CH2), 4,26, 4,56 (2H, ABq, J12,5Hz, CH2S), 5,18 (1H, S, 6-H), 5,65 (1H, d, J7Hz, ArCH), 6,88 (1H, s, Ar2CH), 7,05-7,60 (13H, m, aromaattiset H-ryhmät), 8,02 (1H, s, NH), 8,10 (1H, s, CHO), 8,51 (1H, m, NH), 10,10 (1H, d, J7Hz, NH); vmaks (CH2C12) 1779, 1718, 1692 cm-1. Isaneerillä 2 (jossa on n. 30 % isomeeriä 1) (0,12 g, 20 %) oli seuraavat arvot <$ (CDClj) 1,21 (3H, t, J7Hz, CH2CH3), 2,26, 2,28 (6H, 2s, CH3C0), 2,74, 3,14 (2H, ABq, J17,5Hz, 2-H), 3,4-3,7 (4H, m, piperatsiini-CH2 ja CH2CH3), 3,86 (3H, s, NCH3), 3,8-4,2 (3H, m, piperatsiini-CH2 + CH2S:n 1H), 4,77 (1H, d, J12,5Hz, CH2S), 5,07 (1H, s, 6-H), 5,76 (1H, d, J7Hz, ArCH), 6,84 (1H, s, Ar2CH), 7,1-7,6 (13H, m, aromaattiset protonit), 7,94 (1H, s, NH), 8,02 (1H, S, CHO), 8,48 (1H, m, NH), 9,91 (1H, d, J7Hz, NH); υ maks CH2C12) 1779, 1718, 1692 cm"1.
b) 78-/2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/(4-etyyli-2,3-diokso-piperatsin-l-yyli) karbonyyliamino/asetamido/-7ct-formami-do-3-/(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli) tiometyyli/kef-3- em-4-karboksyylihappo, natriumsuola, isomeeri 1_
Difenyylimetyyli-7 β-/2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/(4-etyyli- 2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7asetamido/-7a-formamido-3-/Tl-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli/kef- 3-em-4-karboksylaattia isomeeriä 1 (sisälsi noin 20 % isomeeriä 2) (0,06 g? 0,07 mmoolia) trifluorietikkahapossa (5 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa 0,5 h ja haihdutettiin kuiviin. Jäännöstä hangattiin eetterin kanssa, se 145 78702 liuotettiin veteen, joka oli säädetty pH-arvoon 6,5 laimean natriumbikarbonaattiliuoksen avulla, pestiin etyyliasetaatilla ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste, isomeeri 1 (sisälsi noin 20 % isomeeriä 2) (0,04 g; 63 %) 6(D20) 1,21 (3H, t, J7Hz, CH2CH3), 2,34, 2,36 (6H, 2s, CH3C0), 3,00, 3,39 (2H, ABq, Jl7,5Hz, 2-H), 3,53 (2H, q, J7Hz, CH2CH3), 3,6-3,8 (2H, m, piperatsiini-CH2) , 3,8-4,2 (3H, m, piperatsiini-CH2 + CH2S:n 1H), 3,98 (3H, s, NCH3), 4,24 (1H, d, J13Hz, CH2S:n 1H), 5,26 (1H, s, 6-H), 5,56 (1H, s, ArCH), 7,3-7,6 (3H, m, aromaattiset protonit), 8,15 (1H, s, CHO); vmakg (KBr) 3430, 1770, 1676, 1620 cm”1.
c) 7 8-/2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/T4-etyyli-2,3-diokso-piperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7asetamido7~7ot-form-amido-3-/Tl-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli/kef- 3-em-4-karboksyylihappo, natriumsuola, isomeeri 2_
Difenyylimetyyli-7 &-/2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/74-etyyli)- 2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/asetamido/-7a-formamido-3-/ (l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli) tiometyyli./kef- 3-em-4-karboksylaattia, isomeeri 2 (sisälsi noin 30 % isomeeriä 1) (0,12 g; 0,14 mmoolia) trifluorietikkahapossa (5 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa 0,5 h ja haihdutettiin kuiviin. Jäännöstä hangattiin eetterin kanssa ja se liuotettiin veteen, joka säädettiin pH-arvoon 6,5 laimean natriumbikarbonaattiliuoksen avulla. Liuos pestiin etyyliasetaatilla ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste, isomeeri 2 (sisälsi noin 30 % isomeeriä 1); 6 (D20) 1,21 (3H, t, J7Hz, CH2CH3), 2,47 (6H, m, CILjCO) , 3,12 (1H, d, J17Hz, 2-H:n 1H), 3,45-3,64 (3H, m, 2-H:n 1H ja CH2CH3)< 3,65-3,83 (2H, m, piperatsiini-CH2), 3,9-4,2 (6H, m, NCH3, piperatsiini-CH2 ja CH2S:n 1H), 4,36 (1H, d, J13Hz, CH2S:n 1H), 5,17 (1H, s, 6-H), 5,60 (1H, s, ArCH), 7,3-7,6 (3H, m, aromaattiset H-ryhmät), 8,13 (1H, m, CHO); (KBr), 3440, 1770, 1680, 1630 cm-1.
MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 0,1.
146 73 702
Esimerkki 58 66-/L-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino7-2- (3,4-dihydroksifenyyli) asetamido/-6a-formamido-penisillaanlhappo, natriumsuola_ a) DL-2-/"f4-etyyli-2, 3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino/-2-(3,4-diasetoksifenyyli)etikkahappo Tämä yhdiste valmistettiin 27,3 m molaarisessa mittakaavassa kahdessa vaiheessa DL-3,4-dihydroksifenyyliglysiinistä tavalla, joka oli identtinen sen kanssa, joka on kuvattu D-enantiomeerin yhteydessä (esimerkki 18). Saanto oli 70 % ja saadulla tuotteella oli identtiset spektroskooppiset ja kromatografiset ominaisuudet D-enantiomeeriin verrattuna, lukuunottamatta sitä, että sillä ei ollut optista taittokykyä.
b) Bentsyyli-6 B-/L-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli) karbonyyliamino/-2- (3,4-diasetoksifenyyli)asetami-do7-6a-formamido-penisillanaatti
Bentsyyli-68-amino-6a-formamidopenisillanaatti saatiin käyttäen pelkistämistä sinkin avulla ja sen N-2,2,2-trikloorietok-sikarbonyyli-johdannaista 4 m molaarisessa mittakaavassa siten kuin edellä on kuvattu (esimerkki 31). Tuotetta ei erotettu kiinteänä aineena, mutta sen etyyliasetaattiliuos kuivattiin ja väkevöitiin 10 ml:ksi ja sitten lisättiin disyklo-heksyylikarbodi-imidiä (0,80 g? 3,91 mmoolia). Saatu keltainen liuos jäähdytettiin lämpötilaan 0°C ja sekoitettiin samalla kun siihen lisättiin tipottain liuos, jossa oli DL-2-/74-etyy-li-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7-2-(3,4-dihydroksifenyyli) etikkahappoa (1,70 g; 3,91 mmoolia) kuivassa dikloorimetaanissa (15 ml) noin 0,5 tunnin kuluessa. Seoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja sekoittamista jatkettiin 2,5 h. Tämän ajan kuluttua ilmeni t.l.c.-analyysissä mitätön happokomponentti, joten saostettu disykloheksyyli-urea erotettiin suodattamalla ja jäännös haihdutettiin kuiviin. Raakatuote liuotettiin pieneen tilavuusmäärään 5 %:sta metanoli-kloroformia ja lisättiin piioksidigeelipatsaaseen (350 g), joka oli tasapainotettu samalla liuottimena. Elutoitaessa saatiin ensin jonkin verran värillistä, alhaisen polaari-suuden omaavaa epäpuhdasta tuotetta ja tämän jälkeen haluttua 147 78702 bentsyyliesteriä (0,91 g; 30 %). Edelleen elutoitaessa saatiin edellä kuvattua D-bentsyyliesteriä (0,97 g; 32 %). L-enantiomeerillä oli seuraavat arvot vroajcs (KBr) 1780, 1745, 1710, ja 1685 cm-1, 6(CDC13) 1,02 ja 1,27 (6H, 2s, (CH3)2C), 1,20 (3H, t, J7Hz, CH3CH2N), 2,26 ja 2,28 (6H, 2s, 2 x CH3 CO), 3,35-3,65 (4H, m, 2 x CH2N), 3,95-4,15 (2H, m, CHjN), 4,38 (1H, s, 3-H), 5,16 (2H, pH CH20), 5,55 (1H, s, 5-H), 5,64 (1H, d, J7Hz, Ar CH CO), 7,15-7,45 (8H, m, aryyli-H), 7,59 (1H, s, D20-vaihto, NH) , 7,96 (2H, brs, 1H, s, D^-vaihto, NHCHO), 9,99 (1H, d, D 0-vaihto, CHNH), Rf 0,41 10 %:sessa metanoli-klorofonnissa, / o_7q +57,3 (c 0,4, CHC13), (Todettu: C 53,35, H 5,1, N 10,75. C35H38N6°12S' H20 vastaa C 53,6, H 5,1, N 10,7 %).
c) 68-/L-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyy-liamino7-2-(3,4-dihydroksifenyyli)asetamido/-6a-form- amidopenisillaanihappo, natriumsuola_
Bentsyyli-68-/L-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino7“2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido/-6a-formamidopenisillanaattia (0,3 gj 0,39 mmoolia) liuotettiin tetrahydrofuraani/veteen 4:1 (15 ml). Sitten lisättiin 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (250 mg) ja seosta hydrat-tiin huoneen lämpötilassa ja ilmakehän paineessa 1 tunti.
Tämän ajan kuluttua todettiin t.l.c.-analyysissä hieman lähtöainetta niin,että katalyytti suodatettiin ja pestiin hyvin vedellä ja tetrahydrofuraanilla. Liuos väkevöitiin orgaanisen liuottimen pääosan poistamiseksi ja tämän jälkeen jäljelle jäänyttä vesipitoista liuosta (10 ml) sekoitettiin 1,5 h yhdessä huolellisesti pestyn, hartsiin sidotun subtilisiinin (6 g) kanssa. Tämän ajan kuluttua entsyymi erotettiin suodattamalla ja suodos pestiin tämän jälkeen kahdesti etyyliasetaatilla. Vesifaasi kyllästettiin natriumkloridilla, hapo-tettiin 2 M kloorivetyhapolla ja uutettiin 1:1 etyyliasetaat-ti/tetrahydrofuraaniin (2 x 20 ml). Orgaanisiin uutteisiin lisättiin kuivaamisen jälkeen natriumsulfaatin avulla 1,89 M natrium-2-etyyliheksanoaattia (1 ekv. laskettuna bentsyyli- 148 73702 esteristä) ja tämän jälkeen ylimäärin kuivaa eetteriä. Saostunut natriumsuola otettiin talteen suodattamalla, pestiin asetonilla ja eetterillä ja kuivattiin, jolloin saatiin natriumsuola (0,15 g; 63 %). T.l.c.- ja n.m.r.-analyysit osoit tivat, että ainoastaan osittainen deasetyloituminen oli tapahtunut. Tämän jälkeen välituote (0,060 gm, 0,085 mmoolia) liuotettiin kyllästettyyn natriumbikarbonaattiliuokseen (3 ml), pH säädettiin arvoon 9 ja liuoksen annettiin seistä ympäristön lämpötilassa 0,5 h. Tämän ajan kuluttua liuos laimennettiin ja pestiin kahdesti etyyliasetaatilla, kyllästettiin sitten natriumkloridilla, hapotettiin pH-arvoon 2 2M kloorivety-hapolla ja happo uutettiin tetrahydrofuraani/etyyliasetaat-tiin, 1:1 (2 x 25 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivattiin natriumsulfaatin avulla, haihdutettiin kuiviin ja suspen-doitiin veteen. Tämä vesisuspensio tehtiin emäksiseksi pH-arvoon 6,5 kyllästetyn natriumbikarbonaattiliuoksen avulla ja haihdutettiin sitten kuiviin. Hangattaessa eetterin kanssa, jota seurasi saadun kiinteän aineen talteenotto, saatiin di-hydroksipenisilliinin natriumsuolaa (0,40 g; 75 %) ; ^g^g (KBr) 1770, 1715, 1680, 1610 cm"1, 6(D20) 1,03 ja 1,38 (6H, 2s, (CH3)2C), 1,16 (3H, t, J7Hz, CHj-CH N), 3,30-3,80 (4H, m, 2 x CH2N), 3,80-4,10 (2H, m, CH2N), 4,19 (1H, s, 3-H), 5,30 (1H, s, 5-H), 5,40 (1H, s, ArCH-CO), 6,93 (3H, brs, aryyli-H), 8,16 (1H, s, NHCHO), 0,14 (n-butanoli:etikkahappo:vesi 4:1:1). MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 100.
Esimerkki 59 6B-fenoksiasetamldo-6a-formamidopenaami-3-karboksyylihappo a) Bentsyyli-68-(4-nitrobentsylideeniamino)penaami-3- karboksylaatti__
Bentsyyli-68-aminopenaami-3-karboksylaattia (1,11 g; 4 mmoolia) kuivassa dikloorimetaanissa (4 ml), joka sisälsi myös tri-metyyliortoformaattia (0,42 g; 0,44 ml} 4 mmoolia), käsiteltiin 4-nitrobentsaldehydillä (0,61 g; 0,4 mmoolia) kuivassa metanolissa (10 ml) huoneen lämpötilassa 1,5 h. Seos haihdutettiin sitten kuiviin, sitä hangattiin etanolin kanssa ja kiinteä materiaali otettiin talteen suodattamalla. Kiteytet- 149 73702 täessä uudelleen etanoli/etyyliasetaatista saatiin melkein värittömiä neulasia (1/2 g; 74 %)/ sp. 95-96°C; vmakS (CH2C12) 1795, 1750, 1530, 1360 cm-1; 6(CDCl3) 8,68 (1H, d, J2Hz, CH=N), 8,27 ja 7,94 (4H, 2d, J9Hz, nitrofenyyli), 7,38 (5H, s, fenyyli), 5,51 (1H, d, J4Hz, 5-H), 5,45 (1H, dd, J2Hz ja 4Hz, 6-H), 5,23 (2H, s, CH2Ph), 4,93 (1H, t, J5,5Hz, 3-H) ja 3,45 (2H, d, J5,5Hz, 2-H).
b) Bentsyyli-6g-amino-6a-(metyylltio)penam-3-karboksylaatti Bentsyyli-6g-(4-nitrobentsylideeniamino)-penam-3-karboksy-laatti (1,05 g; 2,55 mmoolia) kuivassa etyyliasetaatissa (30 ml) jäähdytettiin lämpötilaan -10°C ja siihen lisättiin metyyli-metaanitiosulfonaattia (0,32 g; 0,26 ml; 2,55 mmoolia) ja tämän jälkeen kaliumhydroksidia (0,16 g; 2,55 mmoolia) etanolissa (5 ml). Lisäämisen jälkeen seosta sekoitettiin 0,5 h, se kaadettiin veteen (25 ml) ja orgaaninen faasi erotettiin, pestiin vedellä (2 x 25 ml), suolaliuoksella (2 x 25 ml), kuivattiin sitten (MgSO^) ja väkevöitiin lopuksi noin 10 ml:ksi. Tätä liuosta käsiteltiin tolueeni-p-sulfonihappomonohydraa-tilla (0,48 g; 2,55 mmoolia) ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa 3 h. Liuos pestiin sitten laimella natriumbikarbo-naattiliuoksella, suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin oranssinvärinen hartsi, jota käsiteltiin kroma-tografisesti piioksidigeelin 60 ( < 230 mesh ASTM) avulla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste keltaisena hartsina (0,41 g; 49 %); v makg (CH2C12) 1795, 1750 cm"1; δ (CDC13) 7,45 (5H, s, fenyyli), 5,27 (3H, s, 5-H ja CH2Ph), 5,15 (1H, m, 3-H), 3,45-3,25 (2H, m, 2-H2), 2,31 (3H, s, SCH3) ja 2,18 (2H, rs, NH2).
c) Bentsyyli-6g-fenoksiasetamido-6a-(metyylitio)penam-3- karboksylaatti__
Bentsyyli-68-amino-6a-(metyylitio)penam-3-karboksylaattia (0,11 g; 0,34 mmoolia) kuivassa dikloorimetaanissa (5 ml) lämpötilassa 0°C käsiteltiin pyridiinillä (0,035 g; 0,036 ml; 1,3 ekv.) ja sitten fenoksiasetyylikloridilla (0,058 g; 0,038 ml; 0,34 mmoolia). Seoksen annettiin lämmetä huoneen lämpö- 150 78702 tilaan ja sitä sekoitettiin 2 h, se pestiin laimealla kloori-vetyhapolla (10 ml), laimealla natriumbikarbonaattiliuoksel-la (10 ml), vedellä (10 ml), suolaliuoksella (10 ml), kuivattiin (MgSO^) ja haihdutettiin, jolloin saatiin oranssinvärinen hartsi. Tätä raakaa materiaalia käsiteltiin kromatogra-fisesti piioksidigeelin 60 ( < 230 mesh ASTM) avulla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste vaaleankeltaisena vaahtona (0,062 gj 54 %) ·, v ^ (CH2C12) 1800, 1755, 1700, 1500 cm”1? 6(CDC13) 7,41-6,92 (UH, m, aryyli-H-ryhmät ja NH), 5,32 (1H, s, 5-H), 5,20 (2H, ABq, CH2Ph), 5,08 (1H, dd, J6 ja 2Hz, 3-H), 4,57 (2H, s, PhOCH2), 3,42 (2H, m, 2-H2) ja 2,32 (3H, s, SCH3).
d) Bentsyyli-68-fenoksiasetamido-6a-aminopenam-3-karboksy- laatti_
Bentsyyli-68-fenoksiasetamido-6a-(metyylitio)penam-3-karboksy-laattia (0,048 g; 0,105 mmoolia) kuivassa dimetyyliformamidis-sa (1 ml) käsiteltiin lämpötilassa -50°C typpikehässä merkuri-asetaatilla (0,033 g; 0,105 mmoolia) dimetyyliformamidissa (1 ml) ja tämän jälkeen ammoniakin kyllästetyllä liuoksella dimetyyliformamidissa (0,002 g; 0,1 ml). Seosta sekoitettiin 1 tunti, jonka ajan kuluessa lämpötilan annettiin nousta arvoon -10°C. Seos laimennettiin sitten etyyliasetaatilla (30 ml), pestiin vedellä (3 x 10 ml), suolaliuoksella (20 ml), kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste puolikiinteänä materiaalina (0,044 g; 98 %); vmakg (CH2C12) 1795, 1750, 1690 cm"1} <5 /CDC13+(CD3)2C07 7,42-6,85 (11H, m, aryyli-H-ryhmät ja NH), 5,18 (4H, m, 3-H, 5-H ja CHjPh), 4,58 (2H, s, 0CH2), 3,33 (2H, m, 2-H2) ja 2,60 (2H, brs, NH2).
e) Bentsyyli-6 6~fenoksiasetamido-6a-formamidopenam-3- karboksylaatti__
Bentsyyli-6 B-fenoksiasetamido-6a-aminopenam-3-karboksylaat-tia (0,042 g; 0,103 mmoolia) kuivassa dikloorimetaanissa (5 ml) käsiteltiin lämpötilassa 0°C typpikehässä pyridiinillä (0,08 g? 0,084 ml? 1,03 mmoolia) ja sitten etikkahappo-muurahaishappoanhydridillä (0,045 g} 0,52 mmoolia). Seoksen 151 78702 annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitä sekoitettiin 3 tuntia. Se pestiin sitten laimealla kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaattiliuoksella, suolaliuoksella, kuivattiin (MgSO^) ja haihdutettiin. Raakatuotetta käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 ( <230 mesh ASTM) avulla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste värittömänä hartsina (0,01 g; 20 %) ; vmaks ^CH2C12^ 1795' 1745, 1690 ja 1260 cm"1; ö(CDC13) 8,21 (1H, d, JlHz, NHCHO), 7,89 (1H, d, JlHz, NHCHO), 7,45-6,86 (UH, m, aryyli-H-ryhmät ja NH), 5,48 (1H, s, 5-H), 5,17 (2H, m, CH2Ph), 5,04 (1H, d, J 7Hz, 3-H), 4,52 (2H, m, PhOCH2), 3,27 (1H, d, JllHz, 2-H), ja 2,84 (1H, dd, Jll ja 7Hz, 2-H).
Bentsyyliryhmä poistettiin vedyn avulla hajoittamalla tavanomaisissa olosuhteissa, jolloin saatiin 63-fenoksiasetamido- 6a-formamidopenam-3-karboksyylihappoa.
Esimerkki 60 7a-formamido-3-(pyridiniummetyyli)-73-(tien-2-yyliasetamido)- kef-3-em-4-karboksylaatti_
Natrium-3-(asetoksimetyyli)-7a-formamido-7 6~(tien-2-yyli-asetamido)kef-3-em-4-karboksylaattia (0,300 g) liuotettiin veteen (noin 2 ml), joka sisälsi natriumjodidia (0,975 g) ja pyridiiniä (noin 0,5 ml). Seoksen pH säädettiin arvoon 6,5 fosforihapon avulla. Seosta kuumennettiin lämpötilassa 65°C 3 h, se jäähdytettiin sitten ja laimennettiin vedellä (noin 5 ml). Liuosta käsiteltiin kromatografisesti käyttäen tuotetta "Diaion HP20SS” (noin 25 ml), elutoitiin aluksi vedellä ja sitten asetoni/vedellä. Tuotetta sisältävät fraktiot lyo-filisoitiin, jolloin saatiin tuote (0,045 g) ; ^ ks ^6 11111 (ε 13,800); v makg (KBr) 3390, 3240, 1775, 1675 ja 1615 cm"1; 6(D20) 3,05, 3,56 (2H, ABq, J17Hz, 2-H), 3,91 (2H, s, CH2C0), 5,29 ja 5,45 (2H, ABq, J12HZ, NCH2), 5,36 (1H, s, 6-H), 6,97- 7,10 (2H, m, tienyyli-H-ryhmät), 7,30-7,42 (1H, m, tienyyli-H), 8,00-8,16 (2H, m, pyridyyli-H-ryhmät), 8,17 (1H, s, CHO), 8,51-8,64 (1H, m, pyridyyli-H) ja 8,80-8,99 (2H, m, pyridyyli-H-ryhmät) . MIC (yUg/ml) P. Mirabilis 889 50.
152 78702
Esimerkki 61 78-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino/-2-fenyyli-asetamido7“7cfformamido-3-metyyli-l-oksa-detia-kef-3-em-4-karboksyyllhappo_ a) t-butyyli-78-(4-nitrobentsylideeniamino)-3-metyyli-l- oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaatti_
Liuosta, jossa oli t-butyyli-78-amino-3-metyyli-l-oksa-detia-kef-3-em-4-karboksylaattia (C.L. Branch ja M.J. Pearson; J.Chem.Soc. Perkin Trans 1. 1979, 2268) (186 mg; 0,73 mmoo- lia) ja 4-nitrobentsaldehydiä (110 mg; 0,73 mmoolia) vedettö-mässä seoksessa, jossa oli tolueenia (25 ml) ja etyyliasetaattia (5 ml), sekoitettiin 6 tuntia huoneen lämpötilassa yhdessä 4A molekyyliseulojen kanssa. Reaktioseos suodatettiin sitten ja suodos haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin uudelleen kuivaan tolueeniin ja liuos haihdutettiin ja käsittely toistettiin. Hangattaessa jäännöstä eetterin kanssa saatiin otsikossa mainittu yhdiste valkoisena kiinteänä aineena (227 mg; 80 %) ; (CKCl^) 1780, 1715, 1640, 1525, 1350 cm-1; 6(CDC13) 1,56 (9H, s, ), 2,01 (3H, s), 4,36
(1H, s,), 5,31 (2H, s), 7,98 (2H, d, J8Hz), 8,29 (2H, d, J
• 8Hz), 8,78 (1H, s).
b) t-butyyli-7s~(4-nitrobentsylideeniamino)-7a-metyylitio- 3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaatti_ t-butyyli-7 β-(4-nitrobentsylideeniamino)-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaattia (257 mg; 0,66 mmoolia) liuotettiin vedettömään metyleenidikloridiin (5 ml), joka sisälsi metyy-limetaanitiolisulfonaattia (92 mg; 0,73 mmoolia) ja jäähdytettiin lämpötilaan 0°C argonkehässä. Tähän voimakkaasti sekoitettuun liuokseen lisättiin tipottain 1,8-diatsabisyklo-/5.4.o7undek-7-eeniä (100 mg; 0,66 mmoolia) metyleenidiklo-ridissa (2 ml). 1 tunnin pituisen seisottamisen jälkeen lämpö tilassa 0-5°C laimennettiin liuos metyleenidikloridilla ja pestiin peräkkäin kyllästetyllä ’ammoniumkloridin vesiliuoksella (x 2), suolaliuoksella, kuivattiin (MgSO^) ja haihdutettiin. Käsiteltäessä jäännöstä kromatografisesti piioksidi-geelin avulla saatiin otsikossa mainittu yhdiste vaaleankeltaisena kiinteänä aineena (242 mg; 84 %) ; u . (nujol) 1740, maKs 153 7 8 7 0 2 1620 cm"1; <5(CDC13) 1,57 (9H, s) , 1,99 (3H, s) , 2,30 (3H, s) , 4.33 (2H, s), 5,14 (1H, s), 8,02 (2H, d, J8Hz), 8,29 (2H, d, J8Hz), 8,87 (1H, s).
c) t-butyyli-7&-amino-7a-metyylitio-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaatti, tolueeni-β-sulfonlhapposuola t-butyyli-7 β-(4-nitrobentsylideeniamino)-7a~metyylitio-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaattia (238 mg; 0,54 mmoolla) liuotettiin seokseen, jossa oli etyyliasetaattia (8 ml) ja metyleenidikloridia (4 ml), ja tähän lisättiin liuos, jossa oli tolueeni-p-sulfonihappomonohydraattia (105 mg; 0,55 mmoolia) vähäisessä määrässä etyyliasetaattia. Saostuminen tapahtui melkein välittömästi, ja kun oli sekoitettu huoneen lämpötilassa 2 tuntia, tuote suodatettiin, pestiin hyvin etyyliasetaatilla, eetterillä ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste valkoisena kiinteänä aineena (193 mg; 75 %) ; (nujol) 3150, 1780, 1715, 1705, 1640 cm"1; ö/TCD3)2S07 1,47 (9H, s), 1,94 (3H, s), 2,30 (3H, s), 2,39 (3H, s), 4,49 (2H, AA'), 5,35 (1H, s), 7,10 (2H, d, J9Hz), 7,47 (2H, d, J9Hz), 8,0-9,7 (3H, br, vaihto).
d) t-butyyli-7 B-/D-2-/j4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)- karbonyyliamino/-2-fenyyliasetamido-7a-metyylitio-3-metyy-li-1-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaatti_ D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7~2-fenyylietikkahappoa (200 mg; 0,63 mmoolia) vedettömässä mety-leenikloridissa (5 ml), joka sisälsi katalyyttisen määrän di-metyyliformamidia, käsiteltiin oksalyylikloridilla (174 mg; 1.34 mmoolia). Kun oli sekoitettu huoneen lämpötilassa 1,5 h, haihdutettiin liuos kuiviin, käsiteltiin tolueenilla ja haihdutettiin uudelleen. Saatu happokloridi liuotettiin kuivaan metyleenikloridiin (5 ml) ja lisättiin tipottain samalla sekoittaen seokseen, jossa oli t-butyyli-73-amino-7a-metyyli-tio-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaattia, tolueeni-p-sulfonihapposuolaa (193 mg; 0,41 mmoolia) ja pyridiiniä (84 mg; 0,94 mmoolia) metyleenidikloridissa (5 ml) lämpötilassa 154 78702 0°C. Kun oli sekoitettu lämpötilassa 0-5°C 0,5 tuntia ja 1 tunti lämpötilassa 5°C-huoneen lämpötila, pestiin reak-tioseos laimella kloorivetyhapolla, kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, suolaliuoksella, kuivattiin (MgSO^) ja haihdutettiin. Käsiteltäessä jäännös kromatogra-fisesti piioksidigeelissä saatiin otsikossa mainittu yhdiste amorfisena kiinteänä aineena (169 mg; 67 %); v . (CHC1-) 3400, 3275, 1785, 1720 sh, 1710, 1690, 1640 sh cm”1; δ(CDCl3) 1,20 (3H, t, J8Hz), 1,51 (9H, s), 1,93 (3H, s), 2,28 (3H, s), 3,4-3,7 (4H, m), 3,9-4,3 (2H, m) päällekkäin 4,03 ja 4,19 (2H, ABq, J17HZ), 4,93 (1H, s), 5,55 (1H, d, J6Hz), 6,52 (1H, s), 7,3-7,5 (5H, m), 9,89 (1H, d, J6Hz).
e) t-butyyli-7a-amino-73-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiper- atsin-l-yyli-karbonyyliamino/-2-fenyyliasetamido/-3- metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaattl_
Voimakkaasti sekoitettuun liuokseen, jossa oli t-butyyli-7β-/D-2-i/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/-2-fenyyliasetamido/-7a-metyylitio-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaattia (30 mg; 0,05 mmoolia) dioksaanissa (2 ml) huoneen lämpötilassa, lisättiin peretikkahappoa (75 ml; 5,07 %:sta liuosta etikkahapossa 0,05 mmoolia). 15 minuutin kuluttua haihdutettiin liuos kuiviin. Jäännös liuotettiin kuivaan tolueeniin ja liuos haihdutettiin ja tämä toistettiin kahdesti. Käsiteltäessä jäännöstä kromatografisesti piioksidigeelissä saatiin t-butyyli-78-/D-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperat-sin-l-yyli)karbonyyliamino/-2-fenyyliasetamido/-7a-metyylisul-finyyli-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaattia valkoisena kiinteänä aineena (29 mg; 94 %), joka liuotettiin vedettömään tetrahydrofuraaniin (2 ml) ja lisättiin ammoniakkia (2,3 ml; 0,10 mmoolia). Reaktioseoksen annettiin seistä yli yön huoneen lämpötilassa, haihdutettiin ja jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelissä, jolloin saatiin seos, jonka aineosia ei voitu erottaa toisistaan ja jossa oli otsikossa mainittua yhdistettä; vmaks (CHC13) 3400, 3275, 1780, 1715, 1690, 1640 sh cm 6 (CDC13) inter alia 1,22 (3H, t, J6Hz), 1,52 (9H, s), 1,94 (3H, s), 2,5-2,9 (2H, brs, vaihto), 3,4-3,7 (4H, m), 3,9-4,2 (2H, m), 4,02 ja 155 73702 4,22 (2H, ABq, J18Hz), 4,87 (1H, s), 5,42 (1H, d, J6,5Hz), 6,57 (1H, s,vaihto), 7,3-7,5 (5H, s), 9,92 (1H, d, J6,5Hz); ja t-butyyli-7B-amino-7a-/D-2-/T4-ety yli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli) karbonyyl iamino7”2-f enyyliasetamido/-3-me tyyli-1-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaattia (20 mg; 75 %) ; (SfCDCl^) inter alia 1,22 (3H, t, J6Hz), 1,52 (9H, s), 1,95 (3H, s), 2,5-2,9 (2H, brs, vaihto); 3,4-3,7 (4H, m), 3,9-4,2 (2H, m) , 4,40 (2H, s), 5,03 (1H, s), 5,42 (1H, d, J6,5Hz), 6,59 (1H, s, vaihto), 7,3-7,5 (5H, s), 9,92 (1H, d, 6,5Hz).
f) Vaihtoehtoinen tapa valmistaa t-butyyli-7a~amino-7 β- /D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino7-2-fenyyliasetamido7~3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaatti__ t-butyyli-7 8-/D-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbo-nyyliamino7-2-fenyyliasetamido7-7a-metyylitio-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaattia (30 mg; 0,05 mmoolia) kuivassa dimetyyliformamidissa (0,5 ml) käsiteltiin lämpötilassa -50°C argonkehässä merkuriasetaatilla (16 mg; 0,05 mmoolia) dimetyyliformamidissa (0,1 ml) ja välittömästi tämän jälkeen ammoniakilla (17 mg; 0,08 mmoolia) dimetyyliformamidissa (0,1 ml). Reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa välillä -50 ja -20°C 1 tunti ennen kaatamista etyyliasetaattiin ja pestiin hyvin vedellä ja suolaliuoksella. Orgaaninen liuos kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla, haihdutettiin ja jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin avulla, jolloin saatiin otsikossa mainittua tuotetta ja t-butyyli-73-amino-7or/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyy-liamino7”2-fenyyliasetamido7-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em- 4-karboksylaattia seoksena, jonka aineosia ei voitu erottaa toisistaan (18 mg; 63 %).
g) t-butyyli-73-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)- karbonyyliamino7~ 2-fenyy1iasetamido7~ 7 or formamido-3-metyy-li-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaatti_
Liuos, jossa oli t-butyyli-7-amino-7-/D-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli) karbonyyliamino7**2-fenyyliasetamido7-3- 156 78702 metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaatin C-7 isomeeri-seosta (80 mg; 0,14 mmoolia) ja pyridiiniä (109 mg; 1,4 mmoo-lia) metyleenidikloridissa (3 ml), jäähdytettiin lämpötilaan 0°C ja käsiteltiin etikkahappo-muurahaishappoanhydridillä (62 mg; 0,7 mmoolia). Reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa 0-5°C 1/2 tuntia ja huoneen lämpötilassa 1 tunti ennen laimentamista kuivalla tolueenilla ja se haihdutettiin sitten. Jäännös liuotettiin uudelleen kuivaan tolueeniin ja liuos haihdutettiin ja tämä toistettiin kahdesti. Käsiteltäessä jäännöstä kromatografisesti piioksidigeelissä saatiin otsikossa mainittu tuote amorfisena kiinteänä aineena (45 mg; 54 %); Xmaks (Et0H> 257 ™ («12211), vmakg (CHC13) 3400, 3275, 1790, 1715, 1690, 1640 sh cm"1; δ (CDCl-j) 1,20 (3H, t, J7Hz) , 1,50 (9H, s), 1,92 (3H, s), 3,4-3,7 (4H, m), 3,9-4,3 (2H, m) päällekkäin 4,08 ja 4,23 (2H, ABq, J17Hz), 5,14 (1H, s), 5,49 (1H, d, J6Hz), 7,2-7,5 (6H, m), 7,57 (1H, s, vaihto), 8,15 ja 8,49 (s ja d, J13Hz, yhdessä lH:n kanssa; muuttuu 2s:ksi arvoissa 8,15 ja 8,49 vaihdon jälkeen), 9,90 (1H, d, J6Hz). Reaktioseoksesta erotettiin myös t-butyyli-7a-/D-2-/(4-etyyli- 2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/-2-fenyyliaset-amido/-7 8-formamido-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksy-laatti (6 mg; 7 %); vmakg (CHC13) 3400, 3275, 1790, 1715, 1690, 1640 sh cm"1; δ(CDC13) inter alia 1,20 (3H, t, J7Hz), 1,50 (9H, s), 1,94 (3H, s), 3,4-3,8 (4H, m), 3,9-4,2 (2H, m), 4,31 (2H, s), 5,08 (1H, s), 5,5 (1H, d, J6Hz), 7,2-7,5 (6H, m), 7,88 (1H, vaihto), 8,05 ja 8,27 (s ja d, Jl3Hz, yhdessä lH:n kanssa; muuttuu 2s:ksi arvoissa 8,05 ja 8,27 vaihdon jälkeen), 9,92 (1H, d, J6Hz).
h) 7 8-/D-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino/-2-fenyyliasetamido/-7 a-formamido-3-metyyli-l- oksadetia-kef-3-em-4-karboksyylihappo__ t-butyyli-7 8-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino7-2-fenyyliasetamido7-7 a-formamido-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaattia käsiteltiin lyhyen aikaa trifluorietikkahapolla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste vaaleana kiinteänä aineena;
Vmaks (KBr) 3400_330° br» 1785, 1710, 1680 cm"1.
157 78702
Esimerkki 62 7a-formamido-78-/DL-2-fenoksikarbonyyli-2- (tien-3-yyli) -asetamido7‘~3-metyyll~l-oksadetia-kef-3-em-4~karboksyyllhappo a) t-butyyli-7a-metyylitio-7fS-trikloorietoksikarbonyyli-amino-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaatti
Trikloorietyylikloroformaattia (64 mg; 0,3 mmoolia) vedettömässä metyleenidikloridissa (1 ml) lisättiin tipottain hyvin sekoitettuun seokseen, jossa oli t-butyyli-7B-amino-7a-metyy-litio-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaattia toluee-ni-p-sulfonihapposuolana (129 mg; 0,27 mmoolia) ja pyridiiniä (56 mg; 0,7 mmoolia) vedettömässä metyleenidikloridissa (5 ml) lämpötilassa 0°C. 0,25 tunnin kuluttua pestiin reaktioseos laimealla kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaatti-vesiliuoksella, suolaliuoksella, kuivattiin (MgSO^) ja haihdutettiin. Käsiteltäessä jäännöstä kromatografisesti piioksidi-geelissä saatiin otsikossa mainittu yhdiste (112 mg; 93 %);
Vmaks 3400' 1790' 1745' 1730, 1640 cm”1; 6 (CDC13) 1,55 (9H, s), 1,99 (3H, s), 2,40 (3H, s), 4,29 (2H, s), 4,73 ja 4,80 (2H, ABq, JllHz), 4,93 (1H, s), 5,7 (1H, brs, vaihto).
b) t-butyyli-7a-amino-7 8-trikloorietoksikarbonyyliamino-3- metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaatti_ t-butyyli-7a-metyylitio-78-trikloorietoksikarbonyyliamino-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaattia (100 mg; 0,225 mmoolia) kuivassa dimetyyliformamidissa (2 ml) käsiteltiin lämpötilassa -50°C argonkehässä merkuriasetaatilla (72 mg; 0,225 mmoolia) dimetyyliformamidissa (0,4 ml) ja tämän jälkeen välittömästi ammoniakilla (6,5 mg; 0,38 mmoolia) kuivassa dimetyyliformamidissa (0,3 ml). Kun oli sekoitettu lämpötilassa -50°C 0,75 h, kaadettiin reaktioseos etyyliasetaat tiin ja pestiin hyvin vedellä ja suolaliuoksella. Orgaaninen liuos kuivattiin magnesiumsulfaatilla, haihdutettiin ja jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin avulla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (74 mg; 79 %); vmaks (CIIC13) 3400, 1790, 1735, 1715, 1640 cm"1; δ (CDC13) 1,55 (9H, s), 1,99 (3H, s), 2,2-2,9 (2H, brs, vaihto), 4,33 (2H, s), 4,77 (2H, s), 4,89 (1H, s), 6,01 (1H, brs, vaihto).
158 73702
Reaktioseoksesta erotettiin myös t-butyyli-78-amino-7a-trikloorietoksikarbonyyliamino-3-metyyli-l-oksadetia-kef- 3-em-4-karboksylaatti (6 mg; 6 %); vmaks (CHC13) 3400, 1790, 1740, 1718, 1640 cnf1; 6 (CDCl3) inter alia 1,52 (9H, s), I, 96 (3H, s), 1,9-2,6 (2H, s, vaihto), 4,37 (2H, s), 4,77 (2H, s), 5,13 (1H, s), 5,94 (1H, s, vaihto).
c) t-butyyli-7a-formamido-7 β-trikloorietoksikarbonyyliamino- 3-metyyll-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaattl_ t-butyyli-7a-amino-7 g-trikloorietoksikarbonyyliamino-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaattia (60 mg? 0,145 mmoolia) liuotettiin kuivaan metyleenikloridiin (2 ml), joka sisälsi pyridiiniä (115 mg? 1,45 mmoolia), seos jäähdytettiin lämpötilaan 0°C argonkehässä ja sitä käsiteltiin etikkahappo-muurahaishappoanhydridillä (64 mg; 0,725 mmoolia). Reaktio-seosta sekoitettiin lämpötilassa 0-10°C 1 h, laimennettiin kuivalla tolueenilla ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin uudelleen kuivaan tolueeniin ja liuos haihdutettiin ja tämä toistettiin kahdesti. Käsiteltäessä jäännöstä kromatografisesta piioksidigeelissä saatiin otsikossa mainittu yhdiste (63 mg; 100 %); vmaks (CHC13) 3400, 1795, 1740, 1700, 1690 sh cm-1; δ (CDC13) 1,54 (9H, s), 2,01 ja 2,03 (yhdessä 3H:n kanssa), 4,36 ja 4,41 (yhdessä 2H:n kanssa), 4,74 ja
4,78 (yhdessä 2H:n kanssa), 5,06 ja 5,28 (yhdessä lH:n kanssa), 6,21 ja 6,45 (1H, vaihto), 8,29 (d, JlHz) ja 8,61 (d, J
II, 6Hz) (yhdessä lH:n kanssa) .
d) t-butyyli-7 8-amino-7a_formamido-3-metyyli-l-oksadetia- kef-3-em-4-karboksylaattl__ t-butyyli-7 a-formamido-7 8-trikloorietoksikarbonyyliamino-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksylaattia (33 mg; 0,075 mmoolia) liuotettiin tetrahydrofuraaniin (2 ml) ja kaliumdi-vetyfosfaattiin (IM; 0,4 ml) ja seosta sekoitettiin voimakkaasti aktivoidun sinkin (60 mg; 0,92 mmoolia) kanssa huoneen lämpötilassa 3 tuntia. Seos laimennettiin etyyliasetaatilla, suodatettiin piimään lävitse, orgaaninen faasi erotettiin, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (MgSO^) ja haihdutettiin.
159 7 8 7 0 2 Käsiteltäessä jäännöstä kromatografisesti piioksidigeelin avulla saatiin otsikossa mainittu yhdiste (14 mg; 70 %) , jossa kahden edullisimman formamidoryhmän suhde oli 3:1.
Xmaks (Et0H) 272 nm (ε 6916); vmaks (CHC13) 3400, 3275, 1780, 1700, 1640 sh cm"1; δ (CDC13) trans 1,56 (9H, s), 1,98 (3H, s), 1,9-2,5 (2H, s, vaihto), 4,35 (2H, s), 5,14 (1H, s), 6,29 (1H, leveä s, vaihto), 8,24 (1H, d, Jl,lHz); cis 1,54 (9H, s), 1,9-2,5 (2H, s, vaihto), 2,02 (3H, s), 4,35 (2H, s), 4,87 (1H, s), 6,05 (1H, d, Jll,6Hz vaihto), 8,42 (1H, d, Jll,6Hz).
e) t-butyyli-7a-formamido-78-/DL-2-fenoksikarbonyyli-2-(tien-3-yyli)asetamido/-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3- em-4-karboksylaatti_ DL-2-fenoksikarbonyyli-3-(tien-3-yyli)etikkahappoa (27 mg; 0,11 mmoolia) vedettömässä metyleenikloridissa (1 ml), joka sisälsi katalyyttisen määrän dimetyyliformamidia, käsiteltiin oksalyylikloridilla (21 mg; 0,16 mmoolia) . Kun oli sekoitettu huoneen lämpötilassa 1,5 h haihdutettiin liuos kuiviin, sitä käsiteltiin metyleenikloridilla ja se haihdutettiin uudelleen. Käsittely toistettiin kahdesti. Saatu happokloridi liuotettiin kuivaan metyleenidikloridiin (0,5 ml) ja lisättiin tipot-tain samalla sekoittaen seokseen, jossa oli t-butyyli-78-amino-7a-formamido-3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksy-laattia (20 mg; 0,075 mmoolia) ja pyridiiniä (9 mg; 0,11 mmoolia) metyleenidikloridissä (2 ml) lämpötilassa -10°C.
15 minuutin kuluttua laimennettiin reaktioseos etyyliasetaatilla, pestiin peräkkäin laimealla kloorivetyhapolla, laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja haihdutettiin. Käsiteltäessä jäännöstä kramatografisesti piioksidigeelin avulla saatiin otsikossa mainittu yhdiste (23 mg; 57 %); λ kg (EtOH) 263 nm (ε 13545), 314 nm (ε 5545); vmakg (CHC13) 3400, 1790, 1740, 1720 sh, 1690 cm-1; δ (CDC13) 1,52 (9H, s), 1,97 ja 2,00 (yhdessä 3H:n kanssa, s), 4,15-4,40 (2H, m), 4,91 ja 4,95 (yhdessä lH:n kanssa, s), 5,21 ja 5,23 (yhdessä lH:n kanssa, s), 7,0-7,5 (10H, m), 7,80 (~0,5H, s), 8,16, 8,19 ja 8,52 (yhdessä lH:n kanssa), 8,22 CO,5H, s).
160 73702 t-butyyli-suojaryhmä poistettiin tavanomaisissa olosuhteissa, jolloin saatiin 7a-formamido-76-/DL-2-fenoksikarbonyyli-2-(tien-3-yyli)asetamido7“3-metyyli-l-oksadetia-kef-3-em-4-karboksyylihappo.
Esimerkki 63 6ct”formamido-63- (R-2-fenyyli-2-sulfoasetamido) penisillanaatti, dinatriumsuola_ i) Bentsyyli-6a-amino-63-(R-2-fenyyli-2-sulfoasetamido)- penisillanaatti, trletyyliammoniumsuola_
Bentsyyli-6a-metyylitio-63-(R-2-fenyyli-2-sulfoasetamido)-penisillanaatti-trietyyliammoniumsuolaa (3,25 g) dimetyyli-formamidissa (15 ml) käsiteltiin huoneen lämpötilassa merkuri-asetaatilla (1,60 g) ja tämän jälkeen 1 minuutin kuluttua liuoksella, jossa oli ammoniumasetaattia (0,77 g) ja trietyy-liamiinia (1,05 ml) DMF:ssä (10 ml). 10 minuutin kuluttua lisättiin kloroformia (250 ml) ja 0,5M trietyyliammoniumsul-fidin vesiliuosta (15 ml* pH 7,3), seos suodatettiin, vesipitoinen kerros heitettiin pois ja kloroformiliuos kuivattiin vedettömän magnesiumsulfaatin avulla ja haihdutettiin sitten öljyksi tyhjössä. Tätä öljyä hangattiin eetterin kanssa (2 x 100 ml), sitten lisättiin asetonia (20 ml) ja seoksen annettiin seistä kiteytymistä varten. Muodostuneet kiteet (1,67 g) otettiin talteen, pestiin asetonilla, sitten eetterillä ja kuivattiin tyhjössä; vmaks^KBr^ 178°* 1740, 1670, 1535, 1325, 1245, 1205, 1175 ja 1040 cm”1; 6/(CD3)2S07 1,15 (9H, t, J7Hz, HN(CH2CH3)3) 1,27, 1,40 (6H, 2s, 2-(CH3)2), 3,06 (6H, q, J7Hz, HN(CHjCHj)3), 3,23 (2H, brs, NH2), 4,45 (1H, s, 3-H), 4,51 (1H, S, CHCONH), 5,18 (2H, s, 0CH2Ph), 5,21 (1H, s, 5-H), 7,1-7,5 (10H, m, fenyylit), 9,27 (1H, s, CONH).
(ii) Bentsyyli-6a-formamido-68”(R-2-fenyyli-2-sulfoaset- amido)penisillanaatti, trietyyliammoniumsuola_
Bentsyyli-6a~amino-68~(R-2-fenyyli-2-sulfoasetamido)penisilla-naattia, trietyyliammoniumsuolaa (0,62 g) dikloorimetaanissa (5 ml) käsiteltiin etikkahappo-muurahaishappoanhydridillä 161 73702 (0,2 ml) ja tämän jälkeen pyridlinillä (1 ml). Seistyään 5 minuuttia huoneen lämpötilassa kaadettiin liuos eetteriin (100 ml) ja saostunut kiinteä aine otettiin talteen, pestiin eetterillä ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,49 gj 75,6 %)? vmaks ^KBr^ 1785, 1742, 1675, 1320, 1245, 1205, 1180 ja 1040 cm”*·, 6/TCD3)2C07 1/20 (9H, t, J7Hz, ÄH(CH2CH3)3), 1,30, 1,48 (6H, 2s, 2-(CH3)2), 3,08 (6H, q, J7Hz, NH(CH2CH3) ), 4,49 (1H, s, 3-H), 4,98 (1H, s, CHCONH), 5,21 (2H, s, 0CH2Ph), 5,68 (1H, s, 5-H), 7,2-7,8 (10H, m, fenyylit), 8,04 (1H, s, CONH), 8,17 (1H, s, NHCHO), 8,4-9,2 (1H, brs, Äh), 9,38 (1H, S, CONH).
(iii) 6a-formamido-6B~(R-2-fenyyli-2-sulfoasetamido)peni- sillanaatti, dinatriumsuola__
Bentsyyli-6a-formamido-68-(R-2-fenyyli-2-sulfoasetamido)-penisillanaatin trietyyliammoniumsuolaa (0,30 g) vedessä (10 ml), joka sisälsi IN natriumbikarbonaattia (0,93 ml), hydrat-tiin 10 %:sen hiilellä olevan palladiumkatalyytin läsnäollessa (0,3 g) 0,5 h. Katalyytti erotettiin suodattamalla ja suodos johdettiin "Amberlite IR120" (Na) patsaan lävitse ja jäädytyskuivattiin tämän jälkeen (0,22 g; 94 %) ; (KBr) 1772, 1675, 1610, 1210 ja 1042 cm-1; δ (DjO) 1,09, 1,28 (6H, 2s, 2-(CH3)3), 4,15 (1H, s, 3-H), 5,05 (1H, s, CHCONH), 5,56 (1H, s, 5-H), 7,3-7,7 (5H, m, Ph), 8,10 (1H, s, NHCHO).
Esimerkki 64 66~/D-2-amino-2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido7“6a-form- amldopeni s 11 laanihappo_ '___ (i) DL-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)-2-(3,4-di- hydroksifenyyli)etlkkahappo__ DL-3,4-dihydroksifenyyliglysiiniä (2,0 gj 10,9 mmoolia) kuumennettiin lämpötilaan 60°C typpikehässä N,N-dietyyli-l,1,1-trimetyylisilyyliamiinissa (8 ml). Täydellinen liukeneminen oli aikaansaatu 0,5 h kuluessa. Ylimääräinen reagenssi poistettiin haihduttamalla (öljypumppu; <1 mm Hg) ja jäännös liuotettiin kuivaan tetrahydrofuraaniin (20 ml). Liuos jäähdytettiin lämpötilaan 0°C ja sitä sekoitettiin samalla kun 162 78 702 siihen lisättiin liuos, jossa oli 4-nitrobentsyyliklorofor-maattia (2,58 g; 1,1 ekvivalenttia) tetrahydrofuraanissa (5 ml). Saadun seoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan samalla kun sekoittamista jatkettiin 1 h. Se kaadettiin sitten veteen ja sekoitettiin 0,5 h, tämän jälkeen kyllästettiin natriumkloridiliuoksella ja uutettiin etyyliasetaatti/ tetrahydrofuraanilla 1:1 (2 x 50 ml). Yhdistetyt uutteet kuivattiin natriumsulfaatin avulla ja haihdutettiin, jolloin saatiin raaka tuote. Puhdistamista varten tämä jaettiin natriumbikarbonaattiliuoksen ja etyyliasetaatin (3 x 30 ml) kesken ja orgaaniset pesunesteet heitettiin pois. Vesifaasi hapotettiin pH-arvoon 2 2M kloorivetyhapon avulla ja uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 50 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin pienellä tilavuusmäärällä vettä, sitten suolaliuoksella ja kuivattiin natriumsulfaatin avulla. Haihduttamisen jälkeen jäännöksen annettiin seistä petrolieetterin kanssa (60-80°C), joka sisälsi vähäisen määrän dietyylieetteriä, jolloin saatiin otsikossa mainittu suojattu happo hartsina, joka jähmettyi vähitellen. Se suodatettiin, pestiin petroli-eetterillä (60-80°) ja kuivattiin, jolloin saatiin haluttu tuote (2,12 g; 54 %), sp. 154-157°C; <$Z~CD3)2C-7 5,17 (1H, : d, J7Hz, s D20:n va*hdon jälkeen, NCHC0), 5,22 (2H, s,
ArC^O) , 6,75-7,05 (4H, m, 3H D20:n vaihdon jälkeen, aryyli-H3 + NH), 7,60 ja 8,20 (4H, 2d, aryyli-H), 7,0-9,0 (3H, brs, D^O vaihtunut, 3 x OH); 0,80 n-butanoli:etikkahappo:vedessä, 4:1:1.
(ii) DL-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)-2-(3,4- diasetokslfenyyli)etikkahappo_ DL-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)-2-(3,4-dihydroksi-fenyyli)etikkahappoa (1,81 g; 5 mmoolia) liuotettiin kuivaan tetrahydrofuraaniin (19 ml). Liuos jäähdytettiin lämpötilaan 0°C ja sekoitettiin samalla kun lisättiin kuivaa pyridiiniä (1,30 ml; 3 ekvivalenttia) ja etikkahappoanhydridiä (1,18 ml; 2,5 ekvivalenttia). Liuoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitä sekoitettiin 3 tuntia ja 1 tunnin kuluttua lisättiin lisää etikkahappoanhydridiä (0,5 ml). Tetrahydro- 163 78702 furaani poistettiin sitten haihduttamalla, jäännös jaettiin etyyliasetaatin ja veden kesken ja pH nostettiin arvoon 7,5. Vesifaasi erotettiin ja pestiin jälleen etyyliasetaatilla, orgaaniset faasit poistettiin sitten, suoritettiin hapotta-minen pH-arvoon 2 2M kloorivetyhapon avulla ja uutettiin kahdesti etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin sitten natrium-sulfaatin avulla ja haihdutettiin, jolloin saatiin raakatuote. Uudelleensaostaminen suoritettiin lisäämällä tipottain raaka-tuotteen dikloorimetaaniliuosta ylimäärin käytettyyn petroliin samalla voimakkaasti sekoittaen, jolloin saatiin otsikossa mainittu happo amorfisena jauheena, joka suodatettiin, pestiin petrolilla ja kuivattiin. Se pidätti itsessään voimakkaasti liuottimia (1,46 g; 65 %); δ(CDCl^) 8,24 ja 8,26 (6H, 3s, 2 x CH3CO), 5,15 (2H, s, ArCH20), 5,22 (1H, d, J7Hz, NCHCO) 7,0-7,6 (7H, m, 5H D20:n vaihdon jälkeen, aryyli-H+NH+OH), 8,13 (2H, d, J9Hz, aryyli-H)j 0,50 kloroformirmetanoli: etikkahapossa, 17:2:1.
(iii) Bentsyyli-68-/DL-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyli-amino)-2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido/-6a-form- afflidopenisillanaatti__
Bentsyyli-68-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyliamino)-6a-form-amidopenisillanaattia (1,51 g; 3 mmoolia) pelkistettiin sinkin avulla aikaisemmin (esimerkki 31) kuvatulla tavalla. Lopuksi saatu bentsyyli-68-amino-6a-formamidopenisillanaatin etyyli-asetaattiuute väkevöitiin 10 ml:ksi ja sekoitettiin lämpötilassa 0°C disykloheksyylikarbodi-imidin (0,62 g; 1 ekvivalentti) kanssa. Tähän liuokseen lisättiin tipottain 0,4 h kuluessa liuos, jossa oli DL-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)-2-(3,4-diasetoksifenyyli)etikkahappoa (1,34 gj 1 ekvivalentti) kuivassa dikloorimetaanissa (10 ml). Seoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja sekoittamista jatkettiin 3 tuntia. Tämän ajan kuluttua saostunut disykloheksyyliurea erotettiin suodattamalla ja pestiin etyyliasetaatilla. Suodos pestiih peräkkäin vedellä, 0,5M kloorivetyhapolla (2 kertaa), vedellä, kyllästetyllä natriumbikarbonaatilla (2 kertaa), vedellä ja suolaliuoksella. Kuivattaessa natriumsulfaatin avulla ja 164 78702 haihdutettaessa saatiin raakatuote (2,27 g) diastereoiso-meerien seoksena. Suoritettaessa kromatografinen käsittely piioksidigeelin (230 g) avulla ja elutoitaessa 2,5 %:sella metanolilla kloroformissa saatiin ensin alhaisen polaari-suuden omaavia epäpuhtauksia, tämän jälkeen L-isomeeri (0,62 gi Rj 0,46 10 %:sessa metanoli-kloroformissa) ja sitten haluttu otsikossa mainittu esteri (0,58 g); v . (CHC1,) 1780, 1750, 1690 ja 1610 cm χ·, δ (CDCl^) (D-isomeeri) 0.95 ja 1,20 (6H, 2s, (CH3)2C), 2,15 ja 2,22 (6H, 2s, OCOCH-j-ryhmät), 4,35 (1H, s, 3-H), 5,10 (4H, brs, 2 x ArCH20), 5,30-5,65 (2H, m, NCHCO ja 5-H), 6,50 (1H, brs, D20-vaihto, NH), 6,95-7,50 (11H, m, 10 aryyli-H+NH), 8,10 (3H, m, aryyli-H2 ja CHO), 8,75 (1H, brs, D20-vaihto, NH); 0,53 10 %:sessa
MeOH-CHCl3:ssa.
iv) 68-/D-2-amino-2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido7-6a- formamidopenisillaanihappo_
Bentsyyli-68-/D-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)-2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido/-6a-formamidopenisillanaattia (0,55 g; 0,7 mmoolia) liuotettiin tetrahydrofuraani/veteen 4:1 (20 ml). Lisättiin 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (0,55 g) ja seosta hydrattiin ilmakehän paineessa 3 h. Tämän ajan kuluttua t.l.c.-analyysi osoitti, ettei oleellisesti lähtöainetta ollut jäljellä ja että muuttuminen oli tapahtunut yhdeksi polaarisemmaksi tuotteeksi. Katalyytti erotettiin suodattamalla ja pestiin hyvin tetrahydrofuraanilla ja vedellä, ja suodos pestiin sitten kahdesti etyyliasetaatilla ja takai-sinpesu suoritettiin molemmilla kerroilla pienellä vesimäärällä. Kokonaisvesifaasi suodatettiin jälleen, haihdutettiin sitten alennetussa lämpötilassa, jolloin saatiin otsikossa mainittu amfoteerinen penisilliini vaaleankeltaisena, hiutalemaisena kiinteänä aineena (0,33 g; 92 %) ; vmaks ^KBr) 1770 br, 1685, 1600 ja 1505 cm-1; <$/D20: (CD^SO, l:l7 0,73 ja 1,14 (6H, 2s, (CH^c), 2,17 (6H, s, OCOCH-j-ryhmät) , 3,88 (1H, s, 3-H), 4,93 (1H, s, NCHCO), 5,39 (1H, s, 5-H), 7,15-7,50 (3H, m, aryyli-H3), 7,96 (1H, s, CHO); Rf 0,15 n-butanoli;etikkahappo:vedessä, 4:1:1.
MIC (yug/ml) P. Mirabilis 889 100.
165 73702
Esimerkki 65
Difenyylimetyyli-78-amino-7a-formamido-3-/(2-metyyli-l,3,4- tiadiatsol-5-yyli) tiometyyli/kef-3-em-4-karboksylaatti_ 73-amino-7a-formamido-kefalosporaanihappo (2,0 g; 4,7 mmoolia) vedessä (30 ml) ja asetonissa (10 ml) säädettiin pH-arvoon 6,5 kyllästetyn natriumbikarbonaattiliuoksen avulla. Lisättiin 2-metyyli-l,3,4-tiadiatsol-5-tiolia (0,8 g; 6,0 mmoolia) ja reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa 60°C 6 h. Hapot- tamisen jälkeen IN kloorivetyhapolla haihdutettiin reaktio-seos kuiviin. Jäännös liuotettiin dimetyyliformamidiin (15 ml), sitä käsiteltiin ylimäärin käytetyllä difenyylidiatsome-taanilla dikloorimetaanissa ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 h. Reaktioseos laimennettiin etyyliasetaatin kanssa, pestiin hyvin vedellä, suolaliuoksella, kuivattiin magnesium-sulfaatilla ja haihdutettiin. Kromatografisen käsittelyn avulla (piioksidigeelij 1:3 heksaani/etyyliasetaatti) saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,78 g; 50 %) ? <5 (CDCl^) 3,3-2,5 (2H, brs, NH2) 2,69 (3H, S, CH3), 3,54, 3,65 (2H, ABq, Jl7Hz, 2-H) , 4,27, 4,55 (2H, ABq, J13Hz, CH2S), 5,16 (1H, s, 6-H), 6,60 (1H, s, NH), 6,98 (1H, s, Ar2CH), 7,2-7,6 (10H, m, aromaattiset H-ryhmät), 8,10 (0,85H, d, JlHz, CHO-trans), 8,41 (0,15H, d, JllHz, CHO-cis) ♦, v maks (CH2C12) 1781, 1720, 1692 cm-1.
Esimerkki 66 6g-formamido-6ft-(fenyyliasetamido)penisillaanihappo a) Bentsyyli-6a“metyylisulfinyyli-63-(fenyyliasetamido)- penisillanaatti_
Liuosta, jossa oli bentsyyli-6a-metyylitio-63~(fenyyliasetamido) penisillanaattia dikloorimetaanissa lämpötilassa 0°C, käsiteltiin liuoksella, jossa oli m-klooriperbentsoehappoa (1,1 ekv.) dikloorimetaanissa. Sekoittamisen jälkeen tässä lämpötilassa 75 minuuttia pestiin reaktioseos kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, kuivattiin (MgSO^) ja haihdutettiin. Käsiteltäessä jäännöstä kromatografisesti piioksi-digeelipatsaassa saatiin muiden tuotteiden ohella otsikossa mainittua yhdistettä? (CH2C12) 3400, 1785, 1745, ja 166 78702 1690 cm"1? δ (CDC13) 1,32 ja 1,39 (6H, 2s, 2-(CH3)2), 2,68 (3H, s, SMe), 3,63 (2H, s, PhCH2CO), 4,49 (1H, s, 3-H), 5,13 (2H, s, PhCH20), 6,01 (1H, S, 5-H), 7,35 ja 7,37 (10H, 2s, aromaattiset), ja 7,51 (1H, s, NH).
b) Bentsyyli-6ot-amino-68- (f enyyliasetamido)penislllanaatti Liuos, jossa oli bentsyyli-6a-metyylisulfinyyli-68-(fenyyli-asetamido)penisillanaattia (0,183 g; 0,377 mmoolia) tetrahyd-rofuraanissa (5 ml) pullossa, joka oli varustettu väliseinän omaavalla korkilla, jäähdytettiin lämpötilaan 0°C ja siihen injektoitiin ammoniakkikaasua (17 ml; 0,759 mmoolia). Saatua seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 16 h, liuotin haihdutettiin tyhjössä ja jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin avulla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,178 g; 47 %); v -s (CHC13) 3520, 3390, 3300, 1780, 1745, 1670 ja 1490 cnT*; δ (CDC13) 1,25 ja 1,30 (6H, 2s, 2-(CH3)2), 2,50 (2H, br, D20-vaihto, 6a-NH2) 3,56 (2H, s, PhCH2C0), 4,36 (1H, s, 3-H), 5,13 (2H, ABq, Jl2Hz, PhCH20), 5,34 (1H, s, 5-H), 6,75 br (1H, D20-vaihto, 6&-NH), ja 7,26 ja 7,33 (10H, 2s, aromaattiset).
c) Bentsyyli-6a-formamido-66-(fenyyliasetamido)penisilla- naatti_
Liuos, jossa oli bentsyyli-6a-amino-68-(fenyyliasetamido)-penisillanaattia dikloorimetaanissa, saatettiin reagoimaan etikkahappo-muurahaishappoanhydridin ja pyridiinin kanssa esimerkissä Ib kuvatulla tavalla, jolloin saatiin formamidopeni-silliiniä; δ (CDC13) 1,25 ja 1,29 (6H, 2s, 2-(CH3)2), 3,54 (2H, s, PhCH2C0), 4,42 (1H, s, 3-H), 5,15 (2H, s, PhCH20), 5,60 (1H, s, 5-H), 7,1-7,5 (UH, m, fenyylit ja NH), 7,84 (1H, brs, NH), ja 8,05 (1H, s, CHO).
Bentsyyliesteri poistettiin esimerkissä le kuvatulla tavalla, jolloin saatiin 6a*-formamido-68"(fenyyliasetamido)penisil-laanihappo.
167 78702
Esimerkki 67 73-/(Z)-2-(2-amin0tiats0l-4-yyli)-2-(1-karboksi-metyyli-etoksi-imino)asetamido/-7a-formamidokefalosporaanihappo, dlnatriumsuola_ i) t-butyyli-73-/Tz)-2-(1-t-butoksikarbonyyli-l-metyyli-etoksi-imino)-2-/2-(trifenyylimetyyliamino)tiatsol-4- yy1i/asetamldo/-7 a-formamldokefalosporanaatt1_
Liuos, jossa oli (Z)-2-(1-t-butoksikarbonyyli-l-metyylietoksi-imino)-2-/2-(trifenyylimetyyliamino)tiatsol-4-yyli7etikka-happoa (2,53 g; 5,0 mmoolia) dikloorimetaanissa (15 ml), lisättiin hitaasti liuokseen, jossa oli t-butyyli-78-amino-7a-formamidokefalosporanaattia (1,9 g; 5,0 mmoolia) ja N,N’-disykloheksyylikarbodi-imidiä (1,1 g; 5,5 mmoolia) dikloorimetaanissa. Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 4 vuorokautta ja se haihdutettiin. Etyyliasetaatissa oleva jäännös pestiin IN kloorivetyhapolla, kyllästetyllä nat-riumbikarbonaattiliuoksella, suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin. Jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti (pii-oksidigeeli; 2:1 heksaani/etyyliasetaatti) ja haihdutettiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,50 g; 11 %); 6(CDC13) 1,45 (9H, s, C(CH3)3), 1,57 (9H, s, C(CH3>3), 1,55 (3H, s, 0CCH3) , 1,64 (3H, s, 0CCH3) , 2,08 (3H, s, OCOCH-j) , 3,23, 3,53 (2H, ABq, J18,5Hz, 2-H2), 4,79, 4,98 (2H, ABq, J13Hz, CH20), 5,39 (1H, s, 6-H), 6,92 (2H, m, tiatsoli-H ja NH), 7,28 (15H, s, trityyli), 7,57 (1H, s, NH), 8,13 (1H, s, NH), 8,27 (1H, s, CHO).
(ii) 7 $'-/ (Z) - 2- (1-karboksi-l-metyylietoksi-imino)-2-/2-(trifenyylimetyyliamino)tiatsol-4-yyli7asetamido7-7a- formamldokefalosporaanihappo_ t-butyyli-7 β-/(Z)-2-(1-t-butoksikarbonyyli-l-metyylietoksi-imino)-2-/2-(trifenyylimetyyliamino)tiatsol-4-yyli7asetamido7-7a-formamidokefalosporanaattia (0,05 g; 0,055 mmoolia) tri-fluorietikkahapossa (5 ml) sekoitettiin huoneen lämpötilassa 0,5 h, haihdutettiin kuiviin, hangattiin veden kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste; 6(CF3C02H) 1,83 (6H, s, C(CH3) ), 2,24 (3H, s, 0CH3), 3,49, 3,58 (2H, ABq, J16Hz, 2-H2), 5,32, 5,48 (2H, ABq, J14Hz, us 78702 CI^O), 5,47 (1H, s, 6-H), 7,49 (1H, s, tiatsoli-H), 7,64-8,50 (15H, m, trityyli).
(iii) 78-/TZ)-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(1-karboksi-l-metyylietoksi-imino)asetamido/-7oc-formamidokefalo- sporaanihappo, dinatriumsuola_ 7 ¢-/(Z)-2-(1-karboksi-l-metyylietoksi-imino)-2-/2-(trifenyyli-metyyliamino) tiatsol-4-yyl_i/asetamido/-7a-formamidokef alo-sporaanihappoa sekoitettiin 70 %:sen muurahaishapon vesiliuoksen (4 ml) kanssa huoneen lämpötilassa 1,5 h ja haihdutettiin. Jäännöstä hangattiin eetterin kanssa, se liuotettiin veteen pH-arvossa 6,5, suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,011 g; 33 %); 6(D20) 1,48 (3H, s, CH3), 1,50 (3H, s, CH3), 2,11 (3H, s, 0C0CH3), 3,38, 3,69 (2H, ABq, J17HZ, 2-H2), 4,69, 4,87 (2H, ABq, J13,5Hz, CH20), 5,37 (1H, s, 6-H), 7,08 (1H, s, tiatsoli-H), 8,45 (1H, s, CHO); vmaks (KBr) 3400, 2980, 1765, 1720 sh, 1670, 1590 cm-1. MIC (/ug/ml) P. Mirabilis 889 30.
Esimerkki 68 7 β-/2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperat-sin-l-yyli)karbonyyliamino7asetamido/-7a-formamido-3-/T2-metyyli-1,3,4-tiadiatsol-5-yyli)tiometyyli/kef-3-em-karboksyy- lihappo, natriumsuola___ i) Difenyylimetyyli-7 8-/2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/-asetamido7~7 a-formamido-3-/72-metyyli-l,3,4-tiadiatsol- 5-yyli)tiometyyli/kef-3-em-4-karboksylaatti
Difenyylimetyyli-7 β-amino-7a-formamido-3-/72-metyyli-l,3,4-tiadiatsol-5-yyli)tiometyyli7kef-3-em-4-karboksylaattia (0,35 g; 0,63 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml), joka sisälsi myös N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidiä (0,11 g; 0,53 mmoolia), käsiteltiin lisäämällä hitaasti liuos, jossa oli 2-(3,4-diasetoksifenyyli) -2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino/etikkahappoa (0,22 g; 0,51 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml). Reaktioseosta sekoitettiin 24 tuntia ja se haihdutettiin. Jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti (piioksidigeeli; etyyliasetaatti), jolloin saatiin kefalospo- 169 73702 riiniesteri (0,23 gj 42 %), jonka muodosti kaksi diastereo-isomeeriä. Isomeerillä 1 oli seuraavat arvot: 6(CDC13) 1,19 (3H, t, CH2CH3) , 2,22, 2,25 (6H, 2s, OCOCH-j-ryhmät) , 2,58 (3H, s, CH3), 2,77, 3,12 (2H, ABq, J17Hz, 2-H2), 3,4-3,6 (4H, m, NCH2 ja piperatsiini-CH2), 3,9-4,1 (2H, m, piperat-siini-CH2), 4,21, 4,58 (2H, ABq, J13Hz, CHjS), 5,23 (1H, s, 6-H), 5,64 (1H, d, J7Hz, CH), 6,87 (1H, S, Ar2CH), 7,1-7,6 (13H, m, aromaattiset H-ryhmät), 8,09 (1H, s, NH), 8,16 (1H, s, CHO), 8,81 (1H, s, NH), 10,0-10,2 (1H, m, NH). Isomeerillä 2 oli seuraavat arvot: δ(CDCl3), 1,13 (3H, t, CH^CHj), 2,25, 2,26 (6H, 2s, 0C0CH3-ryhmät), 2,77, 3,22 (2H, ABq, J17Hz, 2-H2), 3,4-3,6 (4H, m, NCH^ ja piperatsiini-CH2), 3,9-4,1 (2H, m, piperatsiini-CH2), 4,16, 4,76 (2H, ABq, J13Hz, CH2S), 5,11 (1H, s, 6-H), 5,77 (1H, d, J7Hz, CH), 6,86 (1H, s, Ar2CH), 7,1-7,6 (13H, m, aromaattiset H-ryhmät), 7,87 (1H, s, NH), 8,11 (1H, s, CHO), 8,51 (1H, s, NH), 10,0-10,2 (1H, m, NH); Vmaks (CH2C12) 1775' 1730, 1690 cm"1.
ii) 78-/1-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/74-etyyli-2,3-diokso-piperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7asetamido7“7α-form-amido-3-/T2-metyyli-l, 3,4-tiadiatsol-5-yyli)tiometyyli7_ kef-3-em-4-karboksyylihappo, natriumsuola_
Difenyylimetyyli-7 8-/2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/(4-etyyli- 2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/asetamido/-7a-formamido-3-/72-metyyli-l,3,4-tiadiatsol-5-yyli)tiometyyli/-kef-3-em-4-karboksylaattia (0,23 g; 0,42 mmoolia) sekoitettiin trifluorietikkahapossa (5 ml) huoneen lämpötilassa 0,5 h ja haihdutettiin kuiviin. Jäännöstä hangattiin eetterin kanssa, se liuotettiin veteen, joka oli säädetty pH-arvoon 6,5 laimean natriumbikarbonaattiliuoksen avulla, pestiin etyyliasetaatilla, suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,15 g; 69 %) kahden di-astereoisomeerin seoksena. Isomeerillä 1 oli seuraavat arvot: 6(D20), 1,19 (3H, t, J7,5Hz, NCH2CH3), 2,31, 2,34 (6H, 2s, 0C0CH3-ryhmät), 2,93, 3,36 (2H, ABq, J17Hz, 2-H2), 3,50 (2H, ABq, J7,5Hz, NCH2), 3,6-3,8 (2H, m, piperatsiini-CH2) 3,9-4,1 (2H, m, piperatsiini-CH2), 4,21, 4,32 (2H, ABq, J 12Hz, CH2S), 5,25 (1H, s, 6-H), 5,54 (1H, s, CH), 7,1-7,6 170 7 8 7 0 2
(3H, m, aromaattiset H-ryhmät), 8,13 (1H, s, CHO). Isomeerillä 2 oli seuraavat arvot: 6 (D20) 1,19 (3H, t, J
7,5Hz, CH2CH3), 2,32, 2,35 (6H, 2s, OCOCH3-ryhmät), 3,07 (1H, d, J17Hz, 2-H), 3,4-3,6 (3H, m, NCH2 ja 2-H), 3,6-3,8 (2H, m, piperatsiini-CH2), 3,85-4,15 (3H, m, piperatsiini-CH2 ja CH2S:n 1H), 4,41 (1H, d, CHjSin 1H), 5,14 (1H, s, 6-H), 5,58 (1H, s, CH), 7,1-7,6 (3K, m, aromaattiset H-ryhmät), 8,11 (1H, s, CHO); vmakg (KBr) 3400, 1770, 1680 cm-1.
MIC (^ug/ml) P. Mirabilis 889 0,1.
Esimerkki 69 78-/D-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino7-2-(3,4-dihydroksifenyyli)asetamido7-7a-formamidokefalo- sporaanihappo, natriumsuola_ 78-/D-2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli) karbonyyliamino7-7a-formamidokefalosporaanihappo, natriumsuola (0,03 g; 0,04 mmoolia) vedessä (5 ml) säädettiin pH-arvoon 8,5 laimean natriumbikarbonaattiliuoksen avulla. Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 0,5 h, hapo-tettiin pH-arvoon 1,5 IN kloorivetyhapon avulla ja kyllästettiin natriumkloridilla. Vesifaasi uutettiin tetrahydro-furaani/etyyliasetaatilla (1:1) ja uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin. Jäännös liuotettiin veteen pH-arvossa 6,5, suodatettiin ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,01 g; 38 %); 6(D20) 1,17 (3H, t, J7Hz, NCH2CH3), 2,06 (3H, s, OCOCH^, 3,15 (1H, d, J18Hz, 2-H), 3,3-3,6 (3H, m, N-CH2CH3 ja 2-H), 3,6-3,8 (2H, m, piperatsiini-CH2), 3,9-4,1 (2H, m, piperatsii-ni-CH^,) , 5,2-5,4 (2H, m, CH ja 6-H), 6,8-7,1 (3H, m, aromaattiset H-ryhmät), 8,12 (1H, s, CHO); v_._ (KBr), 3420, 2670, 1765, 1710, 1675 cnT1.
MIC (yUg/ml) P. Mirabilis 889 0,1.
171 78702
Esimerkki 70 6 8-/D-2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/3-/2-(4-aminosulfonyyli-fenyyli)amino-4-hydroksipyrimidin-5-yyli7ureido7asetamido7“ 6q-formamldopenisillaanlhappo, natriumsuola_ 4-/T5-amino-4-hydroksipyrimidin-2-yyli)amino7bentseenisulfon-amidia (56 mg? 0,20 mmoolia) kuumennettiin palautusjäähdyttäen kuivassa tetrahydrofuraanissa (50 ml), joka sisälsi trietyyli-amiinia (0,03 ml), 1 h. Suspensio jäähdytettiin sitten lämpötilaan 0°C ja sitä sekoitettiin 12,5 %:sen p/p fosgeenin toluee-niliuoksen (0,20 ml) kanssa, jonka jälkeen sen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan 0,75 h kuluessa. Saatu vaaleankeltainen suspensio väkevöitiin pieneen tilavuuteen, laimennettiin 10 ml:ksi tetrahydrofuraanilla ja lisättiin sekoitettuun liuokseen, jossa oli 63~/D-2-amino-2-(3,4-diasetoksifenyyli)-asetamido/-6a_formamidopenisillaanihappoa (110 g; 0,22 mmoolia) vesi/tetrahydrofuraanissa (10 ml; 2:1 t/t) lämpötilassa 0°C. pH pidettiin arvossa noin 7,5 lisäämällä natriumbi-karbonaattiliuosta ja liuoksen annettiin lämmetä jälleen huoneen lämpötilaan 0,5 h kuluessa. Tämän ajan kuluttua erotettiin suodattamalla pieni määrä liukenematonta materiaalia ja suodos väkevöitiin, laimennettiin vedellä ja pestiin etyyliasetaatilla. Orgaaninen faasi pestiin takaisin vähäisellä vesimäärällä, tämän jälkeen koko vesifaasi kyllästettiin nat-riumkloridillä, hapotettiin 2M kloorivetyhapolla pH-arvoon 2 ja uutettiin tetrahydrofuraani/etyyliasetaatilla (1:1, 3 x 15 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivattiin natriumsul-faatin avulla ja haihdutettiin hartsiksi, joka suspendoitiin veteen ja tehtiin emäksiseksi pH-arvoon 6,5. Vähäinen määrä liukenematonta ainetta erotettiin suodattamalla ja tämän jälkeen suodos haihdutettiin, jolloin saatiin penisilliinin natriumsuola (80 mg; 48 %); 0,35 n-butanoli:etikkahappo: vedessä, 4:1:1, vmaks (KBr) 1770, 1660, 1595, 1540, 1500 cm”1; 6/D20:(CD3)2S0:CD30D, 2:1:17 1/05 ja 1,38 (6H, 2s, (CH3)2C), 2,37 (6H, s, 2 x CH3C0), 4,14 (1H, s, 3-H), 5,51 (1H, s, NCHCO), 5,63 (1H, s, 5-H), 7,20-7,70 (5H, m, aryyli-H-ryhmät), 7,70-8,00 (3H, m,aryyli-H2 ja pyrimidinyyli-6H), 8,18 (1H, s, NHCHO).
172 78702
Esimerkki 71
Oraalisten annosyksikköjen valmistus tablettien muodossa 66"/D“2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino7-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/-6a-formamidopenisil-laanihappo, natriumsuola.
Aineosat: 1. 63-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino7-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/-6a-formamidopenisil-laanihapon natriumsuolaa 500 mg (vapaa happo) 2. Karboksimetyyli-natriumtärkkelys-glykolaattia - 15 mg 3. Magnesiumstearaattia - 12 mg 4. Mikrokiteistä selluloosaa - 850 mg
Aineosat 1, 2 ja 4 sekoitettiin keskenään yhdessä 2/3 kanssa aineosaa 3 ja puristettiin pyörivän tabletoimiskoneen avulla. Saadut tabletit jauhettiin ja jauhettu materiaali sekoitettiin aineosan 3 jäljellä olevan osan kanssa. Seos puristettiin sitten pyörivässä tabletoimiskoneessa lopullisten tablettien valmistamiseksi.
Tabletit voivat olla päällystämättömiä tai voidaan käyttää tavanomaista kalvomaista päällystystä.
Parenteraalisten annosyksikköjen valmistus 25 g 6g-/D-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-kar-bonyyliamino7-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/-6a-formamido-pensillaanihapon natriumsuolaa liuotetaan aseptisissa olosuhteissa 2/00 ml saan tislattua vettä, joka on sopivaa injektoimista varten, ja liuos suodatetaan pienillä huokosilla varustetun suodattimen lävitse (huokossuuruus 0,22 mm). 2,0 ml:n erät suodosta täytetään 10 ml:n lasiampulleihin, sisällöt jäädytyskuivataan ja ampullit suljetaan kumitulpalla ja alu-miniumkorkilla. Kukin ampulli sisältää 246 mg aktiivista aineosaa.
173 73702
Ampullin aineosat kaadetaan 2 ml:aan injektioon sopivaa vettä ja sekoitetaan huolellisesti sen kanssa, jolloin aikaansaadaan injektoitava annosyksikkö intravenööttistä annostelua varten.
20 ml injektioon sopivaa tislattua vettä lisätään pullojen sisältöön ja saatu liuos liuotetaan 250 ml:aan natriumklori-din 0,9 %:sta vesiliuosta, joka on sopivaa injektoimista varten. Saadaan liuos, joka on sopiva jatkuvaa intravenööttistä infuusiota varten.
In vivo biologiset arvot
Esimerkin 5 mukaista yhdistettä kokeiltiin in vivo hiirissä kokeellisia infektioita vastaan. Näiden kokeiden tulokset on esitetty seuraavassa taulukossa:
Organismi Kaikkiaan* s.c. CDgQ (mg/kg) E. coli 96 R+ 5,2 E. coli 96 R- «3,1 K. aerogenes T767 3,7 xAnnettu 1 ja 5 tunnin kuluttua infektion jälkeen (5 hiirtä/ ryhmä) {s.c. = subkutaaninen)
Esimerkin 5 mukaista yhdistettä annettiin hiirille (5) subku-taanisesti annoksena 50 mg/kg ja määrättiin veren konsentraa-tio. Tulokset on esitetty seuraavassa taulukossa:
Yhdiste saatu Väkevyys ( ,ug/ml) min kuluttua A.U.C.
esimerkistä n:o 5 10 20 30 60 120 </U9T?in/ _ _ ml) 5 24,4 23,2 14,5 11,0 <0,9 <0,9 660,3 174 78702
Esimerkki 72
Pivaloyylioksimetyyli-66-/D-2-/72,3-diokso-4-etyylipiper-atsin-l-yyli)karbonyyliamino7-2-(4-hydroksifenyyli)aset-amido/-6a-formamidopenisillanaatti
Natrium-6 β-/"(2,3-diokso-4-etyyiipiperatsin-l-yyli)karbonyyli-amino7-2-(4-hydroksifenyyli) asetamido7-6ot-formamidopenisil-lanaattia (238 mg) suspendoitiin kuivaan asetoniin (20 ml) ja seosta käsiteltiin kuivalla N,N-dimetyyliformamidilla (5 ml), jolloin saatiin melkein kirkas liuos. Tätä seosta käsiteltiin bromimetyylipivalaatilla (73 mg) ja tämän jälkeen sekoitettiin huoneen lämpötilassa 24 h. Väkevöitäessä tyhjössä saatiin jäännös, joka laimennettiin etyyliasetaatilla (100 ml) ja pestiin kuudesti vedellä, sitten kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin vedettömän magnesium-sulfaatin avulla ja väkevöitiin tyhjössä pieneen tilavuuteen. Lisättäessä dietyylieetteriä (100 ml) saatiin valkoinen sakka, joka otettiin talteen suodattamalla, pestiin eetterillä ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (137 mg; 50 %) ; v (KBr) 3300 br, 1788, 1763, 1715, 1680 br, 1613, 1515, 1270 br, 1183 br, 1110 ja 937 cm"1; ö7lCD3)2C07 0,92-1,37 (18H, m, CH3-ryhmät), 3,48 (2H, q, J8Hz, NCH2CH3), 3,60-4,13 (4H, m, N(CH2)2N), 4,38 (1H, s, 3-H), 5,53 (1H, s, 5-H), 5,57 (1H, d, J7Hz, CH), 5,77 ja 5,83 (2H, ABq, J6Hz, C02CH20), 6,80 (2H, d, J9Hz, fenyy-li), 7,38 (2H, d, J9Hz, fenyyli), 8,11-8,69 (4H, m, NHCHO, CONH ja OH), 9,90 (1H, d, J7Hz, NHCH).
Esimerkki 73 7g-/2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7~ 2-(3,4-dihydroksifenyyli)asetamido7_7a-formamido-3-/7l-metyyli- 1H- tetrat soi- 5-yyli) tiometyyli7kef-3-em-4-karboksyyli- happo, natrlumsuola___ 7 β-/2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperat-sin-l-yyli)karbonyyliamino7asetamido7-7a-formamido-3-/Tl-metyyli-1H-tetratsoi-5-yyli)tiometyyli/kef-3-em-4-karboksyyli-happo, natriumsuola (0,048 g; 0,06 mmoolia) vedessä (5 ml) säädettiin pH-arvoon 9,0 käyttäen seosta, joka sisälsi kyllästettyä natriumbikarbonaattiliuosta ja laimeata natrium- 175 7 8 7 0 2 karbonaattiliuosta. Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 0,5 h, se hapotettiin pH-arvoon 1,5 IN kloorivety-hapon avulla, kyllästettiin natriumkloridillä ja uutettiin tetrahydrofuraanin ja etyyliasetaatin (1:1) seoksella. Orgaaniset uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin. Jäännös liuotettiin veteen, joka oli säädetty pH-arvoon 6,5 laimean natriumbikarbonaattiliuoksen avulla, pestiin etyyliasetaatilla ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,022 g; 58 %); δ(D20) 1,20 (3H, t, J8Hz, NCH2CH3), 3,11 (1H, d, J17,5Hz, 2-H:n 1H), 3,3- 3,6 (3H, m, 2-H:n 1H ja NCH^CHj), 3,71 (2H, m, piperatsiini-CH2), 3,8-4,4 (7H, m, NCH3, piperatsiini-CH2 ja CH2S), 5,00 (1H, s, 6-H), 5,41 (1H, s, CH), 6,9-7,6,3H, m, fenyyli-H-ryh-mät) 8,12 (1H, s, CHO) ·, v makg (KBr) 3430, 1780, 1722 sh, 1678, 1613 cm"1.
Esimerkki 74
Difenyylimetyyli-7 8-amino-7a-formamido-3-/(6-hydroksi-4-metyyli-5-okso-4H-l,2,4-triatsin-3-yyli)tiometyyli7kef-3-em- 4-karboksylaatti_ 3-asetoksimetyyli-78-amino-7a-formamidokef-3-em-4-karboksyyli-happoa, trifluorietikkahapposuolaa (0,54 g) ja 6-hydroksi-3-merkapto-4-metyyli-5-okso-4H-l,2,4-triatsiinia (0,20 g) suspendoitiin veteen (15 ml) ja tähän lisättiin natriumbikarbonaattia (0,28 g) pH-arvoon 8 saakka. Sitten lisättiin 5M kloorivetyhappoa pH-arvoon 6,5 saakka. Seosta kuumennettiin argonkehässä lämpötilassa 60°C 3 tuntia, jäähdytettiin sitten lämpötilaan 0-5°C ja tehtiin happamaksi pH-arvoon 2 5M kloorivetyhapon avulla. Saatu seos haihdutettiin kuiviin tyhjössä ja jäännöstä käsiteltiin N,N-dimetyyliformamidilla (25 ml) ja tämän jälkeen liuoksella, jossa oli difenyylidiatsome-taania dikloorimetaanissa siksi, kunnes punainen väri jäi pysyväksi. Sitä sekoitettiin yli yön huoneen lämpötilassa ja sitten lisättiin jääetikkahappoa ylimääräisen difenyylidiatso-metaanin hajoittamiseksi. Haihtuvat liuottimet poistettiin alipaineessa ja jäännöstä käsiteltiin etyyliasetaatilla (100 ml) ja vedellä (100 ml). Faasit erotettiin, orgaaninen faasi 176 7 3 7 0 2 pestiin viidesti vedellä, kerran kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin vedettömän magnesiumsulfaatin avulla ja haihdutettiin kuiviin tyhjössä. Suoritettaessa kromatografinen käsittely piioksidigeelin 60 ( < 230 mesh ASTM) avulla ja elutoitaessa etyyliasetaatilla saatiin otsikossa mainittu yhdiste valkoisena kiinteänä aineena (0,105 g; 19 %) hankaa-misen jälkeen dietyylieetterin kanssa, sp. 135-140°C, vmajcs (CHC13) 1780 ja 1710 cm"1» δ CDC13 2,68 (2H, brs, NH2), 3,33 (3H, s, CH3), 3,35 ja 3,53 (2H, ABq, Jl7Hz, 2-H2) 3,88 ja 4,30 (2H, ABq, Jl3Hz, 3-CH2), 5,18 (1H, s, 6-H), 7,02 (1H, s, CHPh2), 7,20-7,61 (10H, m, 2-fenyylit), 8,18 (1H, s, CHO), 10,18-11,09 (1H, brs, OH).
Esimerkki 75 68-/D-2-amino-3-(N-metyylikarbamoyyli)propionamido/-2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido7“6a-formamidopenisillaanihappo, natriumsuola__ a) 68-/D-2-/D-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)-3-(N-metyylikarbamoyyli)propionamido7~2-(3,4-diasetoksifenyy-li)asetamido7~6a-formamidopenisillaanihappo, natriumsuola 68-/D-2-amino-2- (3,4-diasetoksif enyyli) asetamido7~6a-formami-dopenisillaanihappoa (150 mg» 0,30 mmoolia) suspendoitiin seokseen, jossa oli kuivaa dikloorimetaania (2 ml) ja dime-tyyliformamidia (1 ml) lämpötilassa 0°C. Lisättiin trietyyli-amiinia (0,055 ml) ja seosta sekoitettiin, jolloin muutaman minuutin kuluessa saatiin kirkas keltainen liuos. Lämpötila pidettiin arvossa 0°C samalla kun lisättiin yhdessä erässä D-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)-3-(N-metoksikarbamo-yyli)propionihapon meripihkahappoimidoesteriä (125 mg; 0,30 mmoolia). Liuosta varastoitiin lämpötilassa 5°C 2 tuntia ja haihdutettiin sitten melkein kuiviin. Jäännös jaettiin sitten vedyn ja etyyliasetaatin kesken ja vesifaasin pH nostettiin arvoon 7,0. Vesifaasi erotettiin ja pestiin vielä kerran etyyliasetaatilla ja takaisinpesu suoritettiin kummallakin kertaa vähäisellä vesimäärällä. Koko vesifaasihapotettiin pH-arvoon 2 ja uutettiin kahdesti etyyliasetaatti/tetrahydrofuraani11a 1:1.
177 78702
Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin suolaliuoksella ja kuivattiin natriumsulfaatilla ja tämän jälkeen haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin kuivaan asetoniin ja siihen lisättiin natrium-2-etyyliheksanoaattia (1,89 M 4-metyyli-pentan-2-onissa) (0,13 ml). Väkevöitäessä maitomainen kolloidaalinen liuos pieneen tilavuuteen ja lisättäessä tämän jälkeen kuivaa eetteriä saatiin penisilliinin natriumsuola, joka suodatettiin, pestiin asetoni/eetterillä (1:1), eetterillä ja kuivattiin (180 mg; 75 %)} 0,50 n-butanoli:etikkahappo: vesi 4:1:1, vmaks (KBr) 1170, 1665, 1605 ja 1520 cm"1; 6 (D20) 1,87 ja 1,23 (6H, 2s, (CH^C), 2,22 (6H, s, 2 x CH3C0) , 2,45- 2,75 (5H, m, CH3N + CHCH2C0), 4,09 (1H, s, 3-H), 4,93 (1H, s, CH2CH(NH)C0), 5,22 (1H, s, 5-H), 5,52 (1H, s, ArCH(NH)CO), 6,95-7,50 (5H, m, aryyli-lH), 7,90-8,15 (2H, m, aryyli-H), 8,04 (1H, s, NHCHO).
b) 68-/D-2-/D-2-amino-3-(N-metyylikarbamoyyli)propionamido7~ 2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido7-6a-formamidopenisil- laanihappo, natriumsuola__
Natrium-68-/D-2-/D-2-(4-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)-3-(N-metyylikarbamoyyli7propionamido7-2-(3,4-diasetoksifenyyli)-asetamido/-6a-formamidopenisillanaattia (140 mg; 0,17 mmoolia) liuotettiin veteen (10 ml). Lisättiin 10 %:sta hiilellä olevaa palladiumia (70 mg) ja seosta hydrattiin 1 tunti. Tämän ajan kuluttua t.l.c.-analyysissä ilmeni, ettei lähtöainetta ollut jäänyt jäljelle. Katalyytti erotettiin suodattamalla ja pestiin vedellä, yhdistetyt suodokset haihdutettiin kuiviin ja niitä hangattiin eetterin kanssa, jolloin saatiin vaaleahkoa kiinteätä ainetta (110 mg), vmafcs (KBr) 1770, 1665, 1610 ja 1550 br cm-·*·.
Esimerkki 76 7 8-/2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-7a-formamido-3-/Tl-metyyli-lH-tetratsol—5—yyli)tiometyyl^7kef-3-em-4-karboksyylihappo, natriumsuola___________ 178 78702 a) Difenyylimetyyli-7$-/2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-1-yyli)karbonyyliamino/-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/-7a-formamido-3-/(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyy-li/kef-3-em-4-karboksylaatti
Liuos, jossa oli D-2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino7-2-(4-hydroksifenyyli)etikkahappoa (0,168 gj 0,5 mmoolia) tetrahydrofuraanissa (15 ml), lisättiin hitaasti sekoitettuun liuokseen, jossa oli difenyylimetyyli-7$-amino-7a-formamido-3-/(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli/kef- 3-em-4-karboksylaattia (0,269 g? 0,5 mmoolia) ja N,N'-disyklo-heksyylikarbodi-imidiä (0,113 g; 0,55 mmoolia) tetrahydro-furaanissa (10 ml). Reaktioseosta sekoitettiin 3 vuorokautta huoneen lämpötilassa ennen haihduttamista kuiviin. Jäännöstä, käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 ( < 230 mesh ASTM) avulla, elutoitiin etyyliasetaatti/heksaanilla 3:1 ja 2 %:sella etanolilla etyyliasetaatissa, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste diastereoisomeerien seoksena (noin 2:1), (0,065 g; 15 %); v maks (THF) 1790, 1715, 1695, 1510, 1380 cm"1* 5/TCD3)2C07 1,16 (3H, t, J7Hz, CH2CH3), 3,30-3,75 (6H, m, piperatsiini-CH2 ja CH2CH3), 3,92 ja 3,95 (3H, 2s, 2- H2 NCHj-diastereoisomeerit), 4,29 ja 4,31, ja 4,50 ja 4,52 (2H, 2ABq, J13Hz, CH2S-diastereoisomeerit), 5,25 ja 5,26 (1H, 2s, 6-H), 5,61 ja 5,65 (IE, 2d, J7Hz, ArCH), 6,90 (1H, s, CHAr2), 6,80 ja 6,82 (2H, dd, J8Hz, aromaattiset diastereo-isomeerit), 7,20-7,70 (13H, m, aromaattiset ja 7β-ΝΗ), 8,22 ja 8,27 (1H, 2s, CHO-diastereoisomeerit) 8,49 ja 8,60 (1H, 2s, NHCHO-diastereoisomeerit) ja 9,90 (1H, m, a-NH-diastereo-meerit).
b) 7 $-/2-/4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/-2- (4-hydroksifenyyli)asetamido7-7a-formamido-3-/7l~ roetyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli7kef-3-em-karboksyy-lihappo, natriumsuola_
Difenyylimetyyli-7 $-/2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino/-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido7-7a-formamido- 3- /(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli/kef-3-em-4- 179 78702 karboksylaattia (0,065 g; 0,076 mmoolia) liuotettiin trifluo-rietikkahappoon (5 ml) ja saatua liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 0,75 h. Se haihdutettiin sitten kuiviin ja jäännös suspendoitiin veteen ja pH säädettiin arvoon 6,5 laimean natriumbikarbonaatin vesiliuoksen avulla. Saatu liuos pestiin etyyliasetaatilla, suodatettiin ja jäädytyskui-vattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu natriumsuola kvantitatiivisella saannolla* vmaks (KBr) 1770, 1680 br, 1615, 1515 cm”1* δ(D20) 1,17 (3H, t, J7Hz, CH2CH3), 3,08 ja 3,12 (1H, 2ABq, Jl7Hz, 2-H-diastereoisomeerit), 3,39-3,58 (3H, m, CH2CH3 ja 2-H-diastereoisomeerit), 3,66 (2H, m, piperatsiini-CH2), 3,87-4,33 (7H, m, NCH^, piperatsiini-CH2 ja CH2S-diastereoisomeerit), 5,15 ja 5,23 (1H, 2s, 6-H-diastereoiso-meerit), 5,38 ja 5,44 (1H, 2s, ArCH-diastereoisomeerit), 6,88 (2H, d, J7,5Hz, aromaattiset), 7,33 ja 7,38 (2H, 2d, J7,5Hz, aromaattiset diastereoisomeerit) ja 8,06 ja 8,12 (1H, 2s, CHO-diastereoisomeerit).
Esimerkki 77
Difenyylimetyyli-78-amino-7a-formamido-3-/T2-metoksi-l,3,4- tladlatsol-5-yyll)tiometyyli7kef~3-em-4-karboksylaatti_ 78-amino-7a-formamidokefalosporaanihappo trifluorietikkasuola (1,04 g; 2,4 mmoolia) vedessä (25 ml) ja asetonissa (10 ml) säädettiin pH-arvoon 6,5 natriumbikarbonaattiliuoksen avulla. Lisättiin 2-metoksi-l,3,4-tiadiatsoli-5-tiolia (0,39 g* 2,6 mmoolia) ja reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa 60°C 6 h. Hapottamisen jälkeen pH-arvoon 2 IN kloorivetyhapolla liuotettiin reaktiojäännös dimetyyliformamidiin (40 ml), käsiteltiin ylimäärin käytetyllä difenyylidiatsometaanilla dikloorimetaanissa ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 h. Reaktioseos laimennettiin etyyliasetaatilla pestiin hyvin vedellä, suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin. Raakatuotetta käsiteltiin kromatografises-ti piioksidigeelin 60 (< 230 mesh ASTM) avulla, elutoitiin etyyliasetaatti/heksaanilla 1:1-4:1, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,43 g* 32 %)* υ maks iCH2C^2^ 3495, 180 78 702 1785/ 1720/ 1692/ 1520, 1380 cm"1; δ (CDC13) 2,54 (2H, brs, NH2), 3,56 (2H, brs, 2-H2>, 4,11 ja 4,45 (2H, ABq, Jl3Hz, CH2S), 4,13 (3H, s, OCH3), 5,20 (1H, s, 6-H), 7,08 (1H, s, CHAr2), 7,20-7,80 (11H, m, aromaattiset ja NHCHO) ja 8,18 (1H, 2, NHCHO).
Esimerkki 78
Difenyylimetyyli-78-amino-7a-formamido-3-/Tl”difenyylimetyyli-oksikarbonyylimetyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli7kef-3- em-4-karboksylaatti_ 7 8-amino-7a-formamidokefalosporaanihappo trifluorietikkahappo-suola (1,20 g; 2,8 mmoolia) vedessä (30 ml) ja asetonissa (12 ml) säädettiin pH-arvoon 6,5 natriumbikarbonaattiliuok-sen avulla. Lisättiin l-karboksimetyyii-(H-tetratsol-5-tiolia) (0,49 g; 3,1 mmoolia) ja pH säädettiin uudelleen arvoon 6,5. Reaktioseosta sekoitettiin sitten lämpötilassa 60°C 6 h.
Hapottamisen jälkeen pH-arvoon 2 IN kloorivetyhapolla haihdutettiin reaktioseos kuiviin. Jäännös liuotettiin dimetyyli-formamidiin (50 ml), sitä käsiteltiin ylimäärin käytetyllä difenyylidiatsometaanilla dikloorimetaanissa ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa yli yön. Reaktioseos laimennettiin etyyliasetaatilla, pestiin hyvin vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin. Raakatuotetta käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 (< 230 mesh ASTM) avulla, elutoitiin etyyliasetaatti/heksaanilla 3:2, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste, jossa oli vähäisenä epäpuhtautena D2-isomeeriä (0,08 g; 4 %); vma^s (CH2Cl2) 3390, 1785, 1760, 1730 sh, 1690 cm"1; 6 (CDC13) 2,28 (2H, brs, NH0), 3,49 (2H, brs, 2-H ), 4,20 (2H, m, CH_S), 5,12 (3H, m, CH2C02R ja 6-H), 6,95 (1H, s, CHAr2), 7,10-7,60 (21H, m, aromaattiset ja NHCHO) ja 8,11 (1H, s, NHCHO).
181 73702
Esimerkki 79 78-/2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino7~ 2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido7“7a-formamido-3-/72-metoksi- l, 3,4-tiadiatsol-5-yyli)tiometyyli7kef-3-em-4-karboksyyli- happo, natriumsuola_ a) Difenyylimetyyli-78-/2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin- 1-yyli)karbonyyliamino7-2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetami-do/-7a-formamido-3-/(2-metoksi-l, 3,4-tiadiatsol-5-yyli) - tiometyyli/kef-3-em-4-karboksylaatti_
Liuos, jossa oli DL-2-(3,4-diasetoksifenyyli)-2-/74-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyliamino/etikkahappoa (0,161 g; 0,37 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml), lisättiin hitaasti tipottain liuokseen, jossa oli difenyylimetyyli-78-amino-7a-formamido-3-/72-metoksi-l,3,4-tiadiatsol-5-yyli)-tiometyyli/kef-3-em-4-karboksylaatti (0,210 gj 0,37 mmoolia) ja Ν,Ν'-disykloheksyylikarbodi-imidiä (0,084 g·, 0,41 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml). Reaktioseosta sekoitettiin 3 vuorokautta huoneen lämpötilassa ja se haihdutettiin sitten kuiviin. Jäännöstä käsiteltiin kromatografisesti piioksidigeelin 60 (< 230 mesh ASTM) avulla, elutoitiin etyyliasetaatilla ja 5 %:sella etyyliasetaatissa olevalla etanolilla, jolloin saatiin otsikossa mainittu yhdiste (0,130 g; 36 %) diastereo-isomeerien seoksena, vmak5 (CHC12), 3380, 1780, 1720, 1690, 1500, 1370, 1210, 1185 cm-*; Ö/7CD3)2C07 1,15 (3H, 2t, J7Hz , CH^H—diastereoisomeerit), 2,25 (6H, m, OCOCH—diastereo-isomeerit), 2,79 ja 2,84 ja 3,23 ja 3,29 (2H, 2ABq, J16Hz, 2-H2-diastereoisomeerit), 3,49 (2H, m, CH^H—diastereo-isomeerit) 3,67 (2H, m, piperatsiini-CH2), 3,95-4,21 (6H, m, piperatsiini-CH2, CHS-ja OCH—diastereoisomeerit), 4,62 ja 4,63 (1H, ABq, CHS-diastereoisomeerit), 5,32 (1H, s, 6-H), 5,78 ja 5,85 (1H, 2d, J7Hz, CHAr-diastereoisomeerit), 6,85 ja 6,87 (1H, 2s, CHAr-diastereoisomeerit), 7,20-7,70 (13H, m, aromaattiset), 8,22 ja 8,30 (1H, 2s, CHO-diastereoisomee-rit), 8,49, 8,60, 8,65 ja 8,86 (2H, 4s, NHCHO-ja 7&-NHC0-diastereoisomeerit), 10,07 ja 10,12 (1H, 2d, J7Hz, α-NHCO).
182 78702 b) 7β-/2-/(4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)karbonyyli-ami.no/-2- (3,4-diasetoksifenyyli)asetamido7-7a-formamido- 3-/(2-metoksi-l, 3,4-tiadiatsol-5-yyli) tiometyyli./kef- 3-em-4-karboksyylihappof natriumsuola_
Difenyylimetyyli-7B-/2-/T4-etyyli-2,3-dioksopiperatsin-l-yyli)-karbonyyliamino/-2-(3,4-diasetoksifenyyli)asetamido7-7a-fonn-cunido-3-/(2-metoksi-l# 3,4-tiadiatsol-5-yyli) tiometyyli.7kef- 3-em-4-karboksylaattia käsiteltiin lyhyen aikaa trifluori-etikkahapolla ja saatu liuos haihdutettiin kuiviin. Jäännös suspendoitiin veteen, säädettiin pH-arvoon 6,5 laimean nat-riumbikarbonaattiliuoksen avulla, pestiin etyyliasetaatilla ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin otsikossa mainittu natriumsuola.

Claims (15)

183 78702
1. Menetelmä 0-laktaami-antibiootin valmistamiseksi, jolla on kaava (II) CHO NH H 3 3 : R -CO-NH^“-----(II) o/“V CO H 2 tai sen farmaseuttisesti sopivan suolan tai in vivo hydrolysoituvan esterin valmistamiseksi, jossa kaavassa R3-C0-NH-on antibakteerisesti aktiivisissa penisilliineissä tai kefa-losporiineissa esiintyvä asyyliaminoryhmä, ja Y on JZ'Z 3 CH tai CH / N», /1 M jossa Y on happi tai rikki ja Z on kefalosporiini-kemiassa tavanomainen 3-aseman substituentti, tunnettu siitä, että a) yhdiste, jolla on kaava (X) NH H 17 r 2 f____ R -NH^-j- Y (X) o^V 1 18 CO R 2 184 7 3 7 0 2 jossa Y on määritelty kaavan (II) yhteydessä, jolloin mahdolliset reaktiokykyiset ryhmät voivat olla suojattuja, R on aminosuojaryhmä tai sellainen asyyliryhmä, joka esiintyy an-tibakteerisesti aktiivisissa penisilliineissä tai kefaiospo-riineissa, jolloin mahdolliset reaktiokykyiset ryhmät voivat olla suojattuja, ja R on helposti poistettavissa oleva karboksyylisuojaryhmä, käsitellään formyioimisaineella, edul- o lisesti lämpötila-alueella -50-30 C aproottisessa liuotti- messa, ja tämän jälkeen, mikäli tarpeellista, suoritetaan yksi tai useampi seuraavista vaiheista: % 17 3 i) ryhmä R muutetaan ryhmäksi R -CO-, . 18 ii) ryhmä R muutetaan vedyksi, iii) ryhmä Z muutetaan toiseksi ryhmäksi Z, iv) tuote muutetaan suolaksi tai in vivo hydrolysoituvaksi esteriksi, tai b) yhdiste, jolla on kaava (XVII) CHO NH H HNW-1 N (XVII)
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että Y on -S-C(CH ) 3 2
2. Y J-N 1 CO R 2 jossa kaavassa aminoryhmä on mahdollisesti substituoitu sellaisella ryhmällä, joka mahdollistaa asyioimisen tapahtumisen, 2 Y on määritelty kaavan (II) yhteydessä ja R on vety tai helposti poistettavissa oleva karboksyylisuojaryhmä, saatetaan reagoimaan sellaisen hapon, jolla on kaava (XVIII) 3 R CO H (XVIII) 2 3 N-asyloimisjohdannaisen kanssa, jossa kaavassa R on määritelty kaavan (II) yhteydessä, jolloin mahdolliset reaktiokykyiset ryhmät voivat olla suojattuja, edullisesti lämpötila- 185 78702 o alueella -50 - 50 C, ja tämän jälkeen, mikäli tarpeellista, suoritetaan yksi tai useampi seuraavista vaiheista: i) mahdollinen karboksyylisuojaryhmä R poistetaan, ii) mahdolliset suojaryhmät poistetaan sivuketjuryhmästä, iii) sivuketjuryhmä derivoidaan edelleen, iv) ryhmä Z muutetaan toiseksi ryhmäksi Z, v) tuote muutetaan suolaksi tai in vivo hydrolysoituvaksi esteriksi.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että Y on -S-CH -CZ=. 2
4. Patenttivaatimuksen 1 tai 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että Z on vety tai -CH^Q, jossa Q on vety, C -alkyylikarbonyylioksi, yksirenkainen heterosyklyyliryh-1—6 mä, joka on pyridiniumryhmä, joka on sitoutunut typen välityksellä, ja joka mahdollisesti on substituoitu yhdellä tai kahdella ^-alkyyli-, ^-alkoksi-, hydroksialkyyli-, C -alkenyyli-, C -alkoksi-C -alkyyli-, karboksi-1-6 1-6 1-6 C -alkyyli-, sulfonyyli-C -alkyyli-, karbamoyylime-1-6 1-6 tyyli-, karbamoyyli-, trifluorimetyyli-, hydroksi-, halogeeni-, okso- tai amino-C -alkyyliryhmällä tai Q on hetero-syklyylitioryhmä -S-Het, jossa Het on 5- tai 6-jäseninen he-terosyklinen ryhmä, joka sisältää 1-4 heteroatomia valittuna joukosta typpi, happi ja rikki, ja joka mahdollisesti on substituoitu yhdellä tai kahdella C -alkyyli-, C -al- 1-6 1-6 koksi-, hydroksialkyyli-, C -alkenyyli-, alkoksialkyyli-, 1—6 karboksialkyyli-, sulfonyylialkyyli-, karbamoyylialkyyli-, trifluorimetyyli-, hydroksi-, halogeeni-, okso-, aminoalkyy-li- tai karboksialkyyliryhmällä. 186 7 8 7 0 2
5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu 3 siitä, että R on ryhmä, jolla on alakaava (f) tai (g) 4 R - CH - (f) 15 R 6 R - CH - (g) i7 . . 4 joissa kaavoissa R on fenyyli-, tienyyli- tai fenoksiryhmä, 5 6 R on vetyatomi tai metyyliryhmä, R on fenyyli, joka mahdollisesti on substituoitu 1-3 -alkyyli-, fenyyli-, ha logeeni-, C -alkoksi-, amino-, nitro-, hydroksi-, C ,, 1-6 1-6 alkyylikarbonyyliamino-, C -alkyylikarbonyylioksi-, karb- 1—6 oksi-, ^-alkoksikarbonyyli-, halo(C^ ^)alkyyli-, okso- (C )alkyyli-, C -alkyylikarbonyyli-, fenyylioksi-, 1—6 1—6 C -alkyylifenyylioksi-, fenyylikarbonyyli-, C -alkyy-1~6 _ . ., 1-6 liamino- tai di(C )alkyyliaminoryhmällä, tiatsolyyli, 1-6 7 tienyyli tai sykloheksadienyyliryhmä, ja R on hydroksyyli, karboksyylihapporyhmä tai sen C -alkyyli-, fenyyli-, 1-6 tolyyli- tai indanyyliesteri, amino, ureido, asyyliamino tai asyyliureidoryhmä.
6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jolla on kaava (III) 187 7 8 7 0 2 CHO NH H 8 * : R .CH.CO.NH»*;----v NH β-Nv J (III) i o Y CO CO H N /\
7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä, tunnettu 8 siitä että R on fenyyli, 4-hydroksifenyyli, 3,4-di-(C 1-6 alkyylikarbonyylioksi)fenyyli, 3,4-dihydroksifenyyli, 2-tie-nyyli, 3-tienyyli tai 2-amino-4-tiatsolyyli.
8. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jolla on kaava (V) CHO * NH 8. f __. R .CH.CO.NH^f-f i I ; NH f-N-/ (V) I 0 CO CO H ά i14 R tai sen farmaseuttisesti sopiva suola tai in vivo hydrolysoituva esteri, jossa kaavassa R ja Y on määritelty kaavan , % 14 (III) yhteydessä, ]a R on C^ ^-alkyyli.
9. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jolla on kaava (VI) 189 78702 CHO NH H 11. r = R - CH - CO - NH#--- NH ^-N I O JT'CO H (VI) CO H I 14 R tai sen farmaseuttisesti sopiva suola tai in vivo hydrolysoituva esteri, jossa kaavassa R on fenyyli, 4-hydroksifenyy- li, 2-tienyyli, 3-tienyyli, 2-amino-4-tiatsoli, 3,4-dihydr- 14 oksifenyyli tai 3,4-diasetoksifenyyli ja R on määritelty kaavan (V) yhteydessä.
9 N 10 R R tai sen farmaseuttisesti sopiva suola tai in vivo hydrolysoituva esteri, jossa kaavassa Y on määritelty kaavan (II) yhtey-8 dessä ja R on fenyyli, joka mahdollisesti on substituoitu yhdellä tai kahdella hydroksi-, tai C -alkyylikarbonyyli- 1-6 oksiryhmällä tai 5-jäseninen heterosyklinen rengas, joka sisältää 1 tai 2 heteroatomia valittuna joukosta rikki ja typpi, 9 ja joka mahdollisesti on substituoitu aminolla, R on vety 10 tai C^ ^-alkyyliryhmä, ja R on mahdollisesti substituoitu 5- tai 6-jäseninen heterosyklinen ryhmä, jossa on yksi 9 10 tai kaksi typpiheteroatornia, tai R ja R muodostavat yhdessä sen typpiatomin kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, mahdollisesti substituoidun 5- tai 6-jäsenisen heterosyklisen ryhmän, jossa on yksi tai kaksi^typpiheteroatornia, jolloin ryhmän R tai ryhmien R ja R yhdessä muodostaman ryhmän mahdolliset substituentit ovat C^ ^-alkyyli, alke-nyyli, sykloalkyyli, fenyyli, okso, hydroksi, joka mahdollisesti on substituoitu C -alkyyli-, alkenyyli-, sykloal- 1-6 kyyli-, fenyyli-, pyridyyli-, pyrimidyyli- tai bentsyyliryh- mällä, merkapto, alkyylisulfonyyli, imino tai amino, joka mahdollisesti on substituoitu C -alkyyli-, alkenyyli-, 1-6 sykloalkyyli-, fenyyli- tai bentsyyliryhmällä. 188 78 702
10. Patenttivaatimuksen 1 tai 6 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jolla on kaava (VII) CHO NH H ~ t 1 : : R .CO.NHP^f-J ^ (VII) J-N ^ f 2 O CH Q CO H 2 tai sen farmaseuttisesti sopiva suola tai in vivo hydrolysoi- 190 78702 3 tuva esteri, jossa kaavassa R on alaryhmä, jolla on kaava (j) CO-NH-CH- I *8 ex Il4 R 8 14 jossa kaavassa R ja R on määritelty edellä kaavan (V) yhteydessä, Y on happi tai rikki, ja Q on asetyylioksi tai ryhmä -S-Het, jossa Het on 5- tai 6-jäseninen heterosykli- nen ryhmä, joka sisältää 1-4 heteroatomia valittuna joukosta typpi, happi ja rikki, ja joka mahdollisesti on substituoitu yhdellä tai kahdella ^-alkyyli-, C ^-alkoksi-, hydr- oksialkyyli-, C -alkenyyli-, alkoksialkyyli-, karboksi-1—6 alkyyli-, sulfonyylialkyyli-, karbamoyylialkyyli-, trifluo- rimetyyli-, hydroksi-, halogeeni-, okso-, aminoalkyyli- tai 2 karboksialkyyliryhmällä, tai Q on alaryhmä, jolla on kaava (h) • . q p .... jossa kaavassa R ja R voivat olla samanlaisia tai erilaisia, ja ovat kumpikin vety, ^-alkyyli, ^-alkok- si, hydroksialkyyli, C -alkenyyli, alkoksialkyyli, karbok- 1—6 sialkyyli, sulfonyylialkyyli, karbamoyylialkyyli, karbamoyyli, trifluorimetyyli, hydroksi, halogeeni tai aminoalkyyli.
11. Patenttivaatimuksen 10 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että ryhmä "Het" on 1,2,3-triatsolyyli, 1,2,4-triatso- 191 78702 lyyli, tetratsolyyli, oksatsolyyli, tiatsolyyli, 1,3,4-oksa-diatsolyyli, 1,2,4-triatsinyyli, 1,3,4-tiadiatsolyyli tai 1,2,4-tiadiatsolyyli.
12. Patenttivaatimuksen 10 tai 11 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että Y on rikki.
13. Yhdiste, jolla on kaava (I) CHO NH H R -NH*-j-jT “X (I) Χγ, CO R 2 tai sen suola, jossa kaavassa R on vety tai aminosuojaryh-2 mä, R on vety tai helposti poistettavissa oleva karboksyy-lisuojaryhmä ja Y on \___CH \ C 3 .CH tai CH /X / 2 12 / CH ' ^,C-Z 3 ^ jossa Y on happi tai rikki ja Z on kefalosporiini-kemiassa tavanomainen 3-aseman substituentti, joka yhdiste on käyttökelpoinen välituotteena valmistettaessa β-laktaamiantibioot-teja, joilla on kaava (II) CHO NH H 3 r - R -CO-NH (II) __n Y / Y CO H 2 192 73702 tai niiden farmaseuttisesti sopivia suoloja tai in vivo hydrolysoituvia estereitä, jossa kaavassa F?-CO-NH- on antibakteeri-sesti aktiivisissa penisilliineissä tai kefalosporiineissa esiintyvä asyyliaminoryhmä, ja Y tarkoittaa samaa kuin edellä.
14. Patenttivaatimuksen 13 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että R on vety.
15. Patenttivaatimuksen 13 tai 14 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on yhdiste, jolla on kaava (XXXIV) CHO NH H H ----n. \ (XXXIV) γγ CO H 2 tai sen suola, jossa Y tarkoittaa samaa kuin patenttivaatimuksessa 13.
FI822606A 1981-07-25 1982-07-23 Foerfarande foer framstaellning av -laktamantibioter och vid framstaellningen anvaendbara mellanprodukter. FI78702C (fi)

Applications Claiming Priority (16)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB8123033 1981-07-25
GB8123034 1981-07-25
GB8123034 1981-07-25
GB8123033 1981-07-25
GB8136824 1981-12-07
GB8136824 1981-12-07
GB8136823 1981-12-07
GB8136823 1981-12-07
GB8207966 1982-03-18
GB8207966 1982-03-18
GB8209953 1982-04-03
GB8209954 1982-04-03
GB8209954 1982-04-03
GB8209953 1982-04-03
GB8215007 1982-05-22
GB8215007 1982-05-22

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI822606A0 FI822606A0 (fi) 1982-07-23
FI822606L FI822606L (fi) 1983-01-26
FI78702B FI78702B (fi) 1989-05-31
FI78702C true FI78702C (fi) 1989-09-11

Family

ID=27571208

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI822606A FI78702C (fi) 1981-07-25 1982-07-23 Foerfarande foer framstaellning av -laktamantibioter och vid framstaellningen anvaendbara mellanprodukter.

Country Status (18)

Country Link
US (3) US4539149A (fi)
EP (1) EP0071395B1 (fi)
KR (1) KR900000934B1 (fi)
AU (1) AU568062B2 (fi)
CA (1) CA1216576A (fi)
DE (1) DE3278878D1 (fi)
FI (1) FI78702C (fi)
GB (1) GB2107307B (fi)
GR (1) GR76544B (fi)
HK (1) HK58088A (fi)
KE (1) KE3810A (fi)
MY (1) MY8700744A (fi)
NO (1) NO162192C (fi)
NZ (1) NZ201369A (fi)
PH (4) PH20467A (fi)
PL (2) PL146182B1 (fi)
PT (1) PT75304B (fi)
YU (2) YU43083B (fi)

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2361184A (en) * 1983-01-21 1984-07-26 Beecham Group Plc Disubstituted 6-penicillins and 7-cephalosporins
GB8301694D0 (en) * 1983-01-21 1983-02-23 Beecham Group Plc Beta-lactam antibacterial agents
DK23784A (da) * 1983-01-21 1984-07-22 Beecham Group Plc Fremgangsmaade til fremstilling af beta-lactam
DE3468027D1 (en) * 1983-01-21 1988-01-21 Beecham Group Plc Beta-lactam antibacterial agents
GR79789B (fi) * 1983-01-24 1984-10-31 Beecham Group Plc
DE3479731D1 (en) * 1983-07-07 1989-10-19 Beecham Group Plc Substituted phenylglycine derivatives of beta-lactam antibiotics
JPS6066987A (ja) * 1983-09-20 1985-04-17 Takeda Chem Ind Ltd 抗生物質ｔａν−５４７，その製造法および微生物
DE3481769D1 (de) * 1984-01-23 1990-05-03 Takeda Chemical Industries Ltd Cephemderivate und ihre herstellung.
EP0160745A3 (en) * 1984-05-07 1986-11-05 Takeda Chemical Industries, Ltd. Cephem compounds and their production
EP0167011A3 (en) * 1984-06-12 1986-03-19 Beecham Group Plc Beta-lactam compounds, intermediates thereof, their use in preparing beta-lactams having a diketopiperazine group
EP0168177A3 (en) * 1984-06-28 1987-04-01 Pfizer Limited Cephalosporin antibiotics
EP0219926A3 (en) * 1985-06-25 1988-08-31 Beecham Group Plc Cephalosporins, processes for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
JPS6230789A (ja) * 1985-08-01 1987-02-09 Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd ７−ホルミルアミノセフアロスポリン化合物およびその製造法
EP0211656A3 (en) * 1985-08-10 1988-03-09 Beecham Group Plc Cephalosporin derivatives, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
GB8531202D0 (en) * 1985-12-18 1986-01-29 Pfizer Ltd Cephalosporin antibiotics
US4666835A (en) * 1986-04-29 1987-05-19 Baldwin Jack E 2-vinylpenams and process
GB8709666D0 (en) * 1987-04-23 1987-05-28 Beecham Group Plc Compounds
GB8719875D0 (en) * 1987-08-22 1987-09-30 Beecham Group Plc Compounds
GB8722477D0 (en) * 1987-09-24 1987-10-28 Beecham Group Plc Compounds
DE3733626A1 (de) * 1987-10-05 1989-04-13 Bayer Ag Heteroanellierte phenylglycin-(beta)-lactam-antibiotika, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel
DE69016719T2 (de) * 1989-09-04 1995-06-01 Beecham Group Plc Cephalosporinderivate, Verfahren zu ihrer Herstellung, pharmazeutische Präparate und Zwischenverbindungen.
US7601864B1 (en) * 2008-05-08 2009-10-13 Ufc Corporation Method for synthesizing 4,4-dihalogen-2-(dialkylamino)methylene-3-oxy-alkylbutyrate and derivatives thereof
WO2013057196A1 (en) 2011-10-20 2013-04-25 Dsm Sinochem Pharmaceuticals Netherlands B.V. Process for the preparation of cefamandole nafate
WO2013057197A1 (en) 2011-10-20 2013-04-25 Dsm Sinochem Pharmaceuticals Netherlands B.V. Process for the formylation of cefamandole

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AR205683A1 (es) * 1970-06-16 1976-05-31 Merck & Co Inc Procedimiento para la preparacion del ester de bencilo del acido 6-metoxi-6-acilamido penicilanico
GB1442302A (en) * 1972-07-21 1976-07-14 Glaxo Lab Ltd Penicillin and cephalosporin derivatives
US3868365A (en) * 1972-12-06 1975-02-25 Squibb & Sons Inc Method for preparing 6-substituted penicillins by replacement of oxygen containing groups
US4062842A (en) * 1973-09-06 1977-12-13 E. R. Squibb & Sons, Inc. Method for preparing 7-substituted cephalosporins and 6-substituted penicillins by replacement of sulfur-containing groups
US3937655A (en) * 1974-04-16 1976-02-10 Eli Lilly And Company Method for preparing stable β-lactam-type-antibiotic susceptibility test discs
US3962214A (en) * 1974-07-11 1976-06-08 Eli Lilly And Company Process for preparing amino substituted β-lactam antibiotics
US4281117A (en) * 1980-09-04 1981-07-28 Eli Lilly And Company Process for 3-chloro cephalosporin nucleus

Also Published As

Publication number Publication date
NO822538L (no) 1983-01-26
PT75304B (en) 1984-07-31
EP0071395A1 (en) 1983-02-09
PH21702A (en) 1988-01-27
CA1216576A (en) 1987-01-13
YU45671B (sh) 1992-07-20
PH21701A (en) 1988-01-27
KE3810A (en) 1988-08-05
PL146182B1 (en) 1989-01-31
NO162192B (no) 1989-08-14
KR840000559A (ko) 1984-02-25
MY8700744A (en) 1987-12-31
US4877783A (en) 1989-10-31
PT75304A (en) 1982-08-01
FI78702B (fi) 1989-05-31
NO162192C (no) 1989-11-22
US4539149A (en) 1985-09-03
EP0071395B1 (en) 1988-08-10
PL145252B1 (en) 1988-08-31
YU178484A (en) 1987-12-31
PL237640A1 (en) 1985-01-02
PL248815A1 (en) 1985-04-09
GR76544B (fi) 1984-08-10
FI822606A0 (fi) 1982-07-23
PH20467A (en) 1987-01-14
US4609652A (en) 1986-09-02
NZ201369A (en) 1985-12-13
GB2107307B (en) 1986-02-26
YU162382A (en) 1985-04-30
PH21703A (en) 1988-01-27
AU568062B2 (en) 1987-12-17
DE3278878D1 (en) 1988-09-15
HK58088A (en) 1988-08-05
FI822606L (fi) 1983-01-26
AU8635182A (en) 1984-10-18
GB2107307A (en) 1983-04-27
KR900000934B1 (ko) 1990-02-19
YU43083B (en) 1989-02-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI78702C (fi) Foerfarande foer framstaellning av -laktamantibioter och vid framstaellningen anvaendbara mellanprodukter.
JPH09511738A (ja) セファロスポリン抗生物質
EP0114752B1 (en) Beta-lactam antibacterial agents
US4447422A (en) Penicillins and compositions containing them
US4081545A (en) Penicillins
EP0131174B1 (en) Substituted phenylglycine derivatives of beta-lactam antibiotics
FI81354C (fi) Foerfarande foer framstaellning av formamidosubstituerad -laktam-antibiotika.
EP0114750A2 (en) Beta-lactam antibacterial agents
EP0287734A1 (en) 2-Beta-substituted methyl-penam derivatives
EP0643061A1 (en) Novel cephalosporin antibiotics and processes for preparation thereof
EP0293532A1 (en) 6- or 7-beta-[2-[4-(substituted)-2,3-dioxopiperazin-1-yl) carbonylamino]-(substituted)acetamido]-penicillin and cephalosporin derivatives
US4416883A (en) Penicillin derivatives
YOSHIDA et al. STUDIES ON MONOCYCLIC β-LACTAM ANTIBIOTICS II. SYNTHESIS AND ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF 3-ACYLAMINO-2-AZETIDINONE-1-OXYSULFONIC ACIDS
US4349551A (en) Penicillin derivatives and compositions containing them
EP0114751B1 (en) Beta-lactam antibacterial agents
WO1984002911A1 (en) beta-LACTAM ANTIBACTERIAL AGENTS
US4835150A (en) Cephem compounds
IE49525B1 (en) Penicillin derivatives,process for their preparation and pharmaceutical composition comprising them
JP2003509512A (ja) ７−アシルアミノ−３−ヘテロアリールチオ−３−セフェムカルボン酸抗生物質およびそのプロドラッグ
US4252808A (en) β-Lactam antibacterial agents, their use in pharmaceutical compositions, the process for their preparation and intermediates for use in that process
AU3735399A (en) Novel cephalosporin compounds, processes for preparation thereof and antimicrobial compositions containing the same
AP199A (en) Novel B-Lactam and a novel class cephalosporins.
US4837215A (en) Penem derivatives
IE53889B1 (en) Beta-lactam antibacterial agents
HU188983B (en) Process for producing formamidyl-beta-lactames

Legal Events

Date Code Title Description
MM Patent lapsed

Owner name: BEECHAM GROUP P.L.C.