FI76255B - Foerfarande foer framstaellning av en antiviral foerbaettrad topisk olja-i-vatten-komposition av 9-(2-hydroxietoximetyl)guanin eller ett farmaceutiskt godtagbart salt eller ester daerav. - Google Patents

Description

! 76255

Menetelmä virustenvastaisen 9-(2-hydroksietoksimetyyli)-guaniinin tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan tai esterin parannetun paikallisesti käytettävän öljy-vedessä- valmistemuodon valmistamiseksi 5

Keksinnön kohteena on menetelmä virustenvastaisen 9-(2-hydroksietoksimetyyli)guaniinin (asyklovirin) tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan tai esterin parannetun paikallisesti käytettävän öljy-vedessä-valmis-10 temuodon, joka sisältää dispergoidun öljyfaasin ja jatkuvan vesipitoisen faasin, valmistamiseksi.

Asyklovirillä ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävillä suoloilla ja estereillä tiedetään olevan virus-vastainen vaikutus erilaisia DNA- ja RNA-viruksia vas-15 taan sekä in vitro että in vivo, ks. GB-patenttijulkaisu 1 523 865. Erityisesti tämä yhdiste vaikuttaa Herpes simplex-virusta vastaan, joka aiheuttaa rokahtumaista sarveiskalvon tulehdusta kaniineilla, rokahtumaista aivokalvontulehdusta hiirillä ja ihorokahtumaa marsuilla.

20 Asyklovirillä on se haitta, että sen liukoisuus veteen on pieni ja että se on melkein täysin liukenematon hydrofobisiin liuotinsysteemeihin. Niinmuodoin on vaikeata valmistaa paikallisesti käytettävä formulaatio, joka sisältää vaikuttavaa ainetta liuenneena riittäväs-25 sä pitoisuudessa, jotta se olisi mahdollisimman tehokas ja myös optimoida yhdisteen tunkeutumista ihoon. Vapautumisen helppouden lisäksi on myös tärkeätä, että farmaseuttisesti aktiivisen yhdisteen kaikki valmistemuodot olisivat pysyviä pitkiä ajanjaksoja, eivät menettäisi 30 tehoaan, eivät menettäisi väriään tai muodostaisi liukenemattomia aineita tai komplekseja eivätkä myöskään saisi liiallisesti ärsyttää ihoa tai limakalvoa.

GB-patenttijulkaisun 1 523 865 esimerkissä 26 on esitetty öljy-vedessä-voiteen, joka sisältää 5 %, pai-35 no/paino, asykloviriä, aineosat, joista 5 %, paino/pai-no, on propyleeniglykolia. Propyleeniglykolin tehtävänä esimerkin 26 valmistemuodossa on toimia kostutusaineena, 2 76255 ts. hygroskooppisena aineosana, jonka tulisi parantaa tuotteen kosmeettista tuntua ja myös rajoittaa veden poistumista varastoinnin aikana. Eläinkokeissa tämä valmistemuoto ja vesipitoisen voiteen B.P. (British Pharma-5 cope ia) valmistemuoto, joka sisälsi asykloviriä, ei antanut erikoisen nopeata parannusta, mikä todennäköisesti johtui riittämättömästä määrästä vaikuttavaa aineosaa liuoksessa ja vaikuttavan aineosan huonosta tunkeutumisesta ihoon.

10 Ottaen huomioon ihon pinnan, erityisesti marras- keden lipidiluonteen, on jo pitkään ajateltu, että hyvän ihoon tunkeutumisen saavuttamiseksi tulisi vaikuttavan aineosan emulsiossa sijaita öljyfaasissa, niin että se voi jakautua ihon lipidikomponentteihin.

15 Nyt on keksitty, että asyklovirin vapautumisen optimoimiseksi paikallisesti käytettävistä valmistemuodoista lääkeaineen suurimman liuenneen pitoisuuden tulisi olla öljyvedessä-emulsiovalmisteen ulkofaasissa, ts. vesipitoisessa faasissa. Lisäksi on havaittu, että käyttä-20 mällä polyhydrisen alkoholin suurta väkevyyttä rinnakkais-liuottimena vesipitoisessa faasissa, esimerkiksi ainakin 50 % tilav./tilav., tästä faasista, saavutetaan liuenneen asyklovirin lisääntynyt pitoisuus, mikä johtaa tällaisten valmistemuotojen pidentyneeseen aktiivisuuteen 25 ja tehokkuuteen. Polyhydrisen alkoholin tällainen suuri väkevyys poistaa myös tarpeen lisätä jotakin säilöntäainetta lisäaineosaksi yhdistelmään.

Tällaiset paikallisesti käytettävät valmistemuodot tyydyttävät myös kriteeriot riittävän pysyvyyden ja 30 tehokkuuden ylläpitämisen suhteen eivätkä ole liiallisesti ihoa tai limakalvoa ärsyttäviä ja alan aikaisempaan valmistemuotoon verrattuna niillä on etuna tehokkaampi tunkeutuminen ihoon ja suurempi väkevyys, minkä seurauksena päästään infektion nopeaan, täydelliseen parantu-35 miseen.

Tämän keksinnön mukaisesti valmistetaan paikallisesti käytettävä farmaseuttinen öljy-vedessä-valmistemuo-

II

3 76255 to nisäkkäiden ihon tai limakalvon sairauksien hoitoon, joka valmistemuoto käsittää dispergoidun öljyfaasin ja jatkuvan vesipitoisen faasin, joka sisältää vettä, vähintään 30 % veden kanssa sekoittuvaa polyhydristä alkoholia 5 (yhdistelmän painosta) ja liuotettua asykloviriä. Edullisesti yhdistelmä sisältää enintään 50 % vettä.

Asyklovir tässä yhteydessä käsittää myös sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat ja esterit, ellei yhteydestä selvästi toisin käy ilmi.

10 Keksinnön mukaiselle menetelmälle virustenvastai- sen 9-(2-hydroksietoksimetyyli)guaniinin (asyklovirin) tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan tai esterin parannetun paikallisesti käytettävän öljy-vedessä-val-mistemuodon valmistamiseksi on tunnusomaista, että 15 1-10 %, paino/paino, asykloviriä tai sen suolaa tai es teriä yhdistetään 30-50 %:iin, paino/paino, veden kanssa sekoittuvaa polyhydristä alkoholia ja 20-40 %:iin, paino/paino, vettä öljy-vedessä-valmistemuodon vesipitoisen faasin muodostamiseksi ja senjälkeen emulgoidaan öl-20 jyfaasi ainakin osalla tätä vesipitoista faasia.

Edullisin valmistemuoto sisältää 2-5 %, paino/paino, asykloviriä, 35-45 %, paino/paino, polyhydristä alkoholia, 25-40 %, paino/paino, vettä yhdessä öljyfaasin kanssa. Yhdistelmän tulisi edullisesti sisältää n. 40 %, 25 paino/paino, polyhydristä alkoholia.

Polyhydrinen alkoholi on alkoholi, jossa on kaksi tai useampia hydroksyyliryhmiä. Keksinnön mukaisesti paikalliseen valmistemuotoon yhdistettäviksi sopivia polyhydrisiä alkoholeja ovat glykolit ja makrogolit, ku-30 ten esimerkiksi propyleeniglykoli ja butaani-1,3-dioli, propyleeniglykolin ollessa edullinen alkoholi.

Kun käytetään ainakin 50 %, tilav./tilav., polyhydristä alkoholia keksinnön mukaisesti valmistetun valmistemuodon vesipitoisessa faasissa, nousee asyklovirin 35 maksimiväkevyys ympäristön lämpötilassa 0,15 %:sta, pai- 4 76255 no/paino, joka on asyklovirin maksimiliukoisuus veteen, 0,3 %:iin, paino/paino. Siten, jos vesipitoisen faasin pitoisuuksia, jotka ovat suurempia kuin 0,3 %, paino/paino, asykloviriä, käytetään valmistemuodossa, on 5 0,3 % ylittävän aktiivisen aineosan määrä suspensiossa ja toimii lääkeainevarastona. Valmistemuodossa olevan asyklovirin määrän tulisi olla ainakin riittävä ollakseen virustenvastaisesti tehokas ja ollakseen ei-myr-kyllinen. Valmistemuodossa käytetty vesi on edullisesti 10 puhdistettua vettä, joka on puhdistettu British Pharma-copeian normien mukaisesti.

Keksinnön mukaisesti saatujen emulsioiden öljy-faasi voidaan muodostaa tunnetuista aineosista tunnetulla tavalla. Samalla kun tämä faasi voi sisältää pel-15 kästään emulgoimisaineen (jota nimitetään myös emulgaat-toriksi), se edullisesti sisältää myös seoksen, jossa on ainakin yhtä emulgaattoria rasvan ja/tai öljyn kanssa. Edullisesti, kuten seuraavassa yksityiskohtaisesti selostetaan, hydrofiilinen emulgoimisaine sisällytetään 20 yhdessä lipofiilisen emulgoimisaineen kanssa, joka toimii stabiloimisaineena. On myös edullista sisällyttää sekä öljy että rasva. Yhdessä emulgoimisaine (aineet) stabiloimisaineen (aineiden) kanssa tai ilman niitä muodostavat ns. emulgoimisvahan, ja vaha yhdessä öljyn 25 ja/tai rasvan kanssa muodostavat ns. emulgoimisvoide- pohjan, joka muodostaa emulsioiden öljydispergoidun faasin .

Paikallisesti käytettäviä öljy-vedessä-valmiste-muotoja voidaan muodostaa lukuisilla eri tavoilla, jois-30 ta kaikki riippuvat ensisijaisesti emulgaattorin eli emulgoimisaineen ja emulsion stabiloimisaineen suuntautumisesta öljy/vesi-rajapinnalla, jolloin ei-polaariset tai lipofiilisest ryhmät ovat liukoisia öljyfaasiin ja polaariset tai hydrofiiliset tai lipofiiliset ryhmät 35 vesipitoiseen eli jatkuvaan faasiin. Siten polaarisem-mat hydrofiiliset emulgaattorit antavat öljy-vedessä-

II

= 76255 emulsioita. Tämä periaate on systemoitu ajatukseen "hyd-rofili-lipofiilitasapainosta". (H.L.B.) Griffen, W.C., J. Soc. Cos. Mat. Chem. 5 (1954) 249 ja eri emulgaattoreil-le on annettu H.L.B-numerot, joista niiden käyttäytyminen 5 vesi- ja öljyfaasien aineosien kanssa (joihin sovelletaan teoreettisesti laadittavia H.A.B.-numeroita) voidaan ennustaa .

On hyvin todistettu teoria öljy-vedessä-emulsio-valmisteista, että lipofiilisen emulgaattorin yhdistel-10 mää hydrofiilin emulgaattorin kanssa, jotka ovat samaa kemiallista tyyppiä, voidaan käyttää eri suhteissa antamaan tarvittava H.L.B-arvo. Polyhydrisen alkoholin suurella pitoisuudella, joka vaaditaan maksimoimaan asyklo-virin vapautuminen keksinnön mukaisesti valmistetusta 15 formulaatiosta on H.L.B-arvo väliltä 3,5 - 10,0 edullisesti 4,0 - 8,0 ja edullisimmin n. 5,5 edullinen, verrattuna hyväksyttyyn H.L.B.-alueeseen 8-18 mineraali-öljy- vedessä -emulsioille .

Sopivia emulgaattoreita ja emulsion stabiloimis-20 aineita käytettäviksi valmistemuodoissa ovat esimerkiksi polyoksietyleenisorbitaanimonostearaatti (Polysorba-te 60), setostearyylialkoholi, glyseryylimonostearaatti ja natriumlauryylisulfaatti. Eräs edullinen emulgaatto-riyhdistelmä on setostearyylialkoholi ja natriumlauryy-25 lisulfaatti suhteessa 3:1 - 30:1, edullisesti 6:1 - 20:1 ja edullisimmin 9:1 - 15:1.

Lisäksi valmistemuoto voi valinnaisesti sisältää muita emulgaattoreita, kuten poloksameerejä määrässä 0,1-3 %, paino/paino, edullisesti 0,3-2 %, paino/paino, ja 30 edullisimmin n. 1 %, paino/paino, valmistemuodon painosta laskettuna.

Sopivien öljyjen tai rasvojen valinta valmistemuotoa varten perustuu haluttujen kosmeettisten ominaisuuksien saavuttamiseen, koska asyklovirin liukoisuus useim-35 piin öljyihin, joita sopivasti käytetään farmaseuttisiin 6 76255 emulsioyhdistelmiin, on hyvin alhainen. Voiteen tulisi siten edullisesti olla ei-rasvainen, ei tahraava ja pestävä tuote, jolla on sopiva konsistenssi vuotamisen estämiseksi putkiloista tai muista säiliöistä. Voidaan käyt-5 tää suora- tai haaraketjuisia yksi- tai kaksiemäksisiä alkyyliestereitä, kuten esimerkiksi isopropyylimyristaat-tia tai 2-etyyliheksyylipalmitaattia. Näitä voidaan käyttää yksinään tai yhdistelminä riippuen halutuista ominaisuuksista. Vaihtoehtoisesti voidaan käyttää korkeaan sula-10 mispisteen omaavia lipidejä, ktuen esimerkiksi valkoista pehmeätä parafiinia ja/tai nestemäistä parafiinia.

Asyklovirin polyhydrisen alkoholin ja veden muodostama vesifaasi sekoitetaan öljyfaasin kanssa emulsion muodostamiseksi.

15 Tapa, jolla emulsio keksinnön mukaisesti muodoste taan, vaihtelee tietenkin aineosien määrän ja luonteen mukaan, mutta siitä huolimatta se seuraa tunnettuja menetelmiä emulsioteknologiassa (ks. The Pharmaceutical Codex, Lontoo, The Pharmaceutical Press, 1979). Asyklovir voi-20 daan esimerkiksi aluksi yhdistää täydellisesti vesipitoiseen osaan, jossa se muodostaa pelkästään liuoksen tai liuos/suspensio-seoksen ja emulgoidaan sitten voiteen perusaineen kanssa. Vaihtoehtoisesti, kun käytetään asyklovirin suuria väkevyyksiä, osa vesipitoisesta osasta voi-25 daan muodostaa emulsioksi ja loput vedestä, polyhydrinen alkoholi ja asyklovir lisätään ja dispergoidaan tähän emulsioon. Eräässä toisessa vaihtoehdossa asyklovir voidaan sisällyttää emulgoivaan voiteeseen ennen emulgointia vesipitoisen osan kanssa. Käytettäessä näitä menetelmiä 30 on edullista kuumentaa vesipitoinen osa ja voiteen perusaine n. 40-80°C: seen, edullisesti 50-70°C:seen, ennen emulgointia, johon päästään voimakkaasti sekoittaen käyttäen esimerkiksi normaalia laboratoriosekoitinta. öljy-faasin hienompia dispersioita saadaan homogenoimalla tai 35 jauhamalla kolloidimyllyssä.

li 7 76255

Keksinnön mukaisesti valmistettua paikallista valmistemuotoa voidaan käyttää hoidettaessa tai estettäessä virusinfektioita, joita aiheuttavat esimerkiksi Herpes zoster, Herpes variella ja Herpes simplex tyypit 1 ja 2, 5 jotka aiheuttavat sairauksia kuten vyöruusua, vesirokkoa, huulirokahtumia ja sukuelinherpestä. Valmistemuotoa tulisi edullisesti levittää ihon sairaalle alueelle 2-6 kertaa päivässä, edullisesti 3-4 kertaa.

GB-patenttijulkaisun 1523865 mukaisesti valmistele) tut voideformulaatiot A ja B sekä keksinnön mukaisesti valmistetut voideformulaatiot C ja D on verrattu toisiinsa sen määrittämiseksi, onko formulaatioilla teknis-far-maseuttisia eroja aktiivisen aineosan (asyklovirin) läpäisevyyden suhteen hiiren paljaaksi ajetun nahan läpi.

15 Tutkitut emulsiot olivat seuraavat:

Formulaatiot A ja B

aineosat % paino/paino asyklovir(faktoroitu)* 5,00 setostearyylialkoholi, B.P. 6,75 20 natriumlauryylisulfaatti, B.P. 0,25 valkoinen pehmeä parafiini, B.P. 12,50 nestemäinen parafiini, B.P. 5,00 propyleeniglykoli, B.P. 40,00 puhdistettu vesi, B.P. ad 100,00 25

*formulaatiossa A on käytetty mikronisoitua aktiivista ainetta ja formulaatiossa B jauhettua aktiivista ainetta Formulaalitot C ja D

aineosat % paino/paino 30 asyklovir(fraktoroitu)* 5,00 vedetön lanoliini, B.P. 20,00

Polysorbaatti 60, B.P. 4,00 sorbitaanimonopalmitaatti 2,00 kevyt nestemäinen parafiini 4,00 35 propyleeniglykoli, B.P. 5,00 metyylihydroksibentsoaatti, B.P. 0,10 puhdistettu vesi, B.P. ad 100,00 7625 5 *formulaatiossa C on käytetty mikronisoitua aktiivista ainetta ja formulaatiossa D jauhettua aktiivista ainetta.

Formulaatioiden sisältämän asyklovirin iholäpäise-5 vyys in vitro määritettiin käyttäen hiiren paljaaksi ajettua täysipaksuista nahkaa. Ihonalainen rasva poistettiin ennen koetta 1:1 metanoli:eetteri-seoksella, jotta vältettiin diffusoivien aineiden kerääntyminen rasvakerrokseen. Jokaista formulaatiota kohti tehtiin 5 rinnakkaiskoetta.

10 Diffuusiokammion luovutusastia ja vastaanottoastian reunat rasvattiin varovasti valkoisella pehmeällä parafiinillä, jotta kalvo sulkeutuisi tiiviisti. Luovutusfaasi täytettiin käyttäen noin 20 g formulaatiota. Vastaanotto-astia täytettiin 50 ml:lla fosfaattipuskuria (pH 7,4; 15 Na-jHPC^ x 2H20 ja KH2PO^), ja osastoon lisättiin magneetti. Nahan orvaskesipuoli asetettiin luovutusastiaan päin.

Kammiot asetettiin magneettisekoitusalustalle, joka oli upotettu 30°C:seen säädettyyn vesihauteeseen. Sekoi-tusnopeus säädettiin arvoon 50 rpm. Vastaanottoastiasta 20 otettiin 5 ml:n näyte 30 min välein, joka näyte korvattiin 5 ml:lla puskuriliuosta.

Näytteet analysoitiin HPLC:tä käyttäen, koska iho-näytteiden fosfolipidit häiritsevät UV-analyysiä.

Eluentti oli tislattu vesi:jääetikka:muurahaishap-25 po:metanoli suhteesa 1000:5:5:50 kolonni spherisorb 10 ODS, detektori 254 nm, virtausnopeus 3,0 ml/min, injektio-volyymi 35 ui ja retentioaika 7,0 min.

Tunkeumaprofiilin tasapaino(steady state)-osan kaltevuutta käytettiin sen määrittämiseksi, poikkesivatko 30 formulaatioiden A ja C, B ja D, A ja B sekä C ja D läpäi-sevyysarvot t-testissä merkittävästi toisistaan. Formulaatioiden A-D sisältämän asyklovirin läpäisevyys on esitetty taulukoissa 1-4, ja jokaisen formulaation keskimääräinen läpäisevyys on esitetty graafisesti kuviossa 1.

li

5 Asyklovirin määrä (mg), joka kulkeutuu Zovirax-voiteesta P

(formulaatio A) hiiren paljaaksi ajetun nahan läpi 8 tun nin aikana 9 76255

Taulukko 1

Formulaatiosta A läpäisseen asyklovirin määrä (mg) 10---

Aika ajo (mm)______ __1_2_3_4_5_ 30 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 60 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 15 90 0,03 0,03 0,04 0,05 0,03 120 0,05 0,05 0,05 0,07 0,05 150 0,06 0,06 0,07 0,09 0,06 20 180 0,08 0,08 0,09 0,11 0,08 210 0,12 0,11 0,13 0,17 0,10 240 0,17 0,16 0,18 0,24 0,14 270 0,23 0,23 0,25 0,33 0,21 25 300 0,32 0,31 0,35 0,45 0,31 330 0,42 0,41 0,45 0,58 0,43 360 0,52 0,57 0,64 0,82 0,59 390 S 0,70 0,73 0,81 1,02 0,75 30 I I ; I 420 j 0,84 0,91 0,99 1,19 0,97 i 450 | 0,99 1,03 1,13 1,32 1,09 j 480 | 1,10 1,12 1,22 1,38 1,21 | f :

_<_ J

35

Taulukko 2

5 Asyklovirin määrä (mg), joka kulkeutuu Zovirax-voiteesta P

(formulaatio B) hiiren paljaaksi ajetun nahan läpi 8 tun nin aikana 76255 ίο in Formulaatiosta B läpäisseen asyklovirin määrä (mq)

Aika ajo ' (min) ---—---—_ 1 2 3 4 5 30 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 i 60 0,01 0,01 0,01 0,02 0,02 90 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 120 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 150 0,05 0,06 0,06 0,06 0,05 20 180 0,07 0,08 0,07 0,08 0,09 210 0,11 0,12 0,12 0,12 0,15 240 0,14 0,18 0,16 0,17 0,20 270 0,20 0,24 0,22 0,22 0,29 25 300 0,29 0,33 0,31 0,29 0,40 i 330 0,36 0,41 0,38 0,39 0,53 i 360 0,51 0,56 0,54 0,54 0,69 j 390 0,65 0,76 0,79 0,70 0,94 ! 30 i 420 0,86 0,92 0,91 0,84 1,06 ! i I 450 0,99 1,14 1,08 1,04 1,23 ( l ‘ 480 1,12 1,31 1,19 1,26 1,36 : i

_._______ I

35 '

II

11 76255

Taulukko 3

Asyklovirin määrä (mg), joka kulkeutuu asyklovir-voitees-ta (formulaatio C) hiiren paljaaksi ajetun nahan läpi 5 8 tunnin aikana

Formulaatiosta C läpäisseen asyklovirin määrä (mg) (min) _ ai°____ 10__3_l_3 4 5 30 0,08 0,07 0,08 0,08 0,08 60 0,11 0,10 0,10 0,10 0,10 90 0,12 0,12 0,13 0,12 0,13 15 120 0,15 0,14 0,15 0,14 0,15 150 0,17 0,17 0,16 0,16 0,16 180 0,19 0,19 0,19 0,18 0,18 210 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 20 240 0,25 0,25 0,24 0,25 0,25 270 0,28 0,28 0,29 0,27 0,29 300 0,33 0,32 0,32 0,31 0,32 330 0,35 0,35 0,38 0,37 0,35 25 360 0,42 0,41 0,42 0,41 0,41 390 0,46 0,46 0,46 0,46 0,46 420 0,53 0,52 0,52 0,51 0,52 30 450 0,59 0,58 0,58 0,50 0,58 480 0,65 0,65 0,66 0,65 0,66 5 Asyklovirin määrä (mg), joka kulkeutuu asyklovir-voitees- ta (formulaatio D) hiiren paljaaksi ajetun nahan läpi 8 tunnin aikana

Taulukko 4 76255 12

Formulaatiosta D läpäisseen asyklovirin määrä (mg) 10 Aika -;- (min) _^_ __1_2_3_4_5 30 0,06 0,07 0,06 0,06 0,06 60 0,10 0,09 0,10 0,10 0,09 15 90 0,12 0,11 0,11 0,11 0,12 120 0,14 0,13 0,13 0,13 0,13 150 0,15 0,15 0,14 0,15 0,15 2Q 180 0,17 0,17 0,18 0,17 0,17 210 0,21 0,20 0,20 0,20 0,21 240 0,24 0,23 0,23 0,23 0,23 270 0,26 0,26 0,26 0,26 0,26 25 300 0,30 0,30 0,30 0,30 0,30 310 0,34 0,34 0,34 0,34 0,32 360 0,39 0,37 0,38 0,41 0,39 390 0,47 0,47 0,47 0,47 0,48 j 30 420 0,53 0,53 0,53 0,54 0,54 j 450 0,63 0,62 0,63 0,63 0,63 j 480 0,76 0,74 0,74 0,74 0,76 ..__: 35 ii 76255 13

Asyklovirin diffuusionopeus kustakin formulaa-tiosta on esitetty taulukossa 5.

Taulukko 5 5 Asyklovirin diffuusionopeus (mg/min) kustakin formulaatiosta

Formulaatto_ __A_B_C_D_ 10 0,00452 0,00517 0,00185 0,00250 0,00477 0,00567 0,00186 0,00243 diffuusionopeus 0,00514 0,00525 0,00181 0,00244 0,00552 0,00537 0,00183 0,00242 mg/min 0,005236 0,00554 0,00189 0,00256 15 _______

Tulokset osoittavat, että asyklovirin määrä, joka kulkeutui keksinnön mukaisesti valmistetusta voiteesta hiiren paljaaksi ajetun nahan läpi, oli merkittävästi 20 suurempi kuin GB-patenttijulkaisun 1523865 mukaisesta voiteesta kulkeutunut asyklovirin määrä, kun tasapaino-(steady state) oli saavutettu.

Formulaatioiden tehokkuus Herpes simplex tyyppi I-viruksen marsuissa aiheuttamien ihoinfektioiden hoidossa 25 on myös määritetty. Vertailuformulaationa käytetty voide 1 on esitetty GB-patentttijulkaisun 1523865 esimerkissä 26 ja sisältää 5 % asykloviriä ja 5 % propyleeni-glykolia. Voiteet 2 ja 3 valmistettiin keksinnön mukaisesti. Voide 2 sisältää 10 % asykloviriä ja 40 % propy-30 leeniglykolia ja voide 3 5 % asykloviriä ja 50 % propy-leeniglykolia. Tutkimuksen tarkoituksena oli näin ollen verrata voiteiden 2 ja 3, jotka sisälsivät 40 % ja vastaavasti 50 % propyleeniglykolia, tehokkuus voiteen 1, joka sisälsi 5 % propyleeniglykolia tehokkuuteen. Voideformu-35 laatioiden koostumukset olivat seuraavat: 14 76255

Voide 1

Aineosat 1 kg:n erää varten

Asyklovir 50,0 g vedetön lanoliini, B.P. 200,0 g 5 Polysorbate 60, B.P. 40,0 g

Sorbitaanin monopalmitaatti 20,0 g kevyt nestemäinen parafiini 40,0 g propyleeniglykoli, B.P. 50,0 g metyylihydroksibentsoaatti, B.P. 1,0 g 10 puhdistettu vesi, B.P. ad 1000,0 g

Voide 2

Aineosat 1 kg:n erää varten

Asyklovir 100,0 g 15 Poloxamer 407 10,0 g propyleeniglykoli, B.P. 400,0 g setostearyylialkoholi, B.P. 67,5 g natriumlauryylisulfaatti 7,5 g valkoinen pehmeä parafiini, B.P. 125,0 g 20 nestemäinen parafiini, B.P. 50,0 g puhdistettu vesi, B.P. ad 1000,0 g

Voide 3

Aineosat 1 kg:n erää varten 25 Asyklovir 50,0 g

Poloxamer 407 10,0 g propyleeniglykoli, B.P. 500,0 g setostearyylialkoholi, B.P. 67,5 g natriumlauryylisulfaatti 7,5 g 30 valkoinen pehmeä parafiini, B.P. 125,0 g nestemäinen parafiini, B.P. 50,0 g puhdistettu vesi, B.P. ad 1000,0 g

Voiteiden 1, 2 ja 3 kanssa samankaltaisia inert-35 tejä tai plasebovoiteita valmistettiin ja tutkittiin samalla tavalla.

li is 76255 6 600-700 g painavan naaraspuolisen albinomarsun (Porcellus Animae Breeding Ltd., Heatfield, UK), kyljet ajettiin paljaaksi ja jäljellä oleva nahka poistettiin karvanpoistoaineella, Nair. Eläimet infektioitiin Herpes 5 simplex tyyppi I-viruksen H31-kannalla. Infektointi tapahtui raapimalla marsun iho tylsällä leikkausveitsellä ja lisäämällä naarmuun tippa virussuspensiota, jonka pitoisuus oli 2 x 106 p.f.u. Eläimet pidettiin pareittain häkeissä ja niille annettiin ruokaa ja vettä ad lib.

10 Hoito aloitettiin 18 tuntia infektion jälkeen, kun infektion ensimmäiset aineet, kohonneita näppylöitä ja paikallista punoitusta, ilmenivät. Käsittelynä 1 g voidetta lisättiin kyljen infektiokohtaan ja levitettiin niin, että se kunnolla peitti infektiokohdan kahdesti päi-15 vässä (aamuin ja illoin) 3 päivää. Käsittelyryhmän kummankin eläimen oikeanpuoleiseen kylkeen levitettiin asyklo-viriä sisältävä koostumus. Toisen eläimen vasemmanpuoleiseen kylkeen levitettiin vastaavaa inerttiä plasebovoidetta. Toisen eläimen vasen kylki toimi kontrollina eikä sitä 20 siis käsitelty.

Infektiolaajuus arvioitiin päivittäin viimeisen käsittelyn jälkeiseen aamuun asti (4. päivä) ja arvioitiin vielä 7. päivänä.

Pistesysteemi oli seuraava: 25 pisteet A. Spesifinen punoitus infektion tuloksena 0-1-2-3 B. kovettuma infektiokohdassa 0-1-2 C. märkärakkuloiden muodostuminen 0-1-2-3 - koko, lukumäärä ja yhtenäinen alue 30 D. ruven muodostuminen-luonnollisten paran- 0-1-2 tumisprosessien alkaminen E. infektio levinnyt koko 0-1-2 infektioalueelle ja yli tämän alueen 35 Jokaisen eläimen infektion laajuudelle kokeen ai kana annetut pistemäärät on esitetty taulukossa 6 ja graa fisesti kuvioissa 2, 3 ja 4.

16 7 6255 m vo U VO VO Ό vo r-~ vo -¾1 M rr m VO Hf O ΓΗ ΓΗ ΓΗ in 00

EH rH ΓΗ <N

o oo <Tt O vo ld m Ä CM >n c ri" hI in io m Ö in in 9 σι oo r~ co r- vo σι r-

X Eh ro in 'S' r-H —I I—I

rH

:<ΰ •Γ-Ι -p (D C---

0) Ο γη vo M

_p -h Cl vn H1 vn 01 4-> pj „ oo cn oo di (D m n ^ ^ in *4-1 c; c in Ln -h

9 * >H CM rH VO O 00 ΟΊ VO Γ- H

t. EHH'H'H' rHINrH rHrHiH , T* C ·Η pn H :(¾ Λ Λ

:(¾ ί>___I—I *H

I—I Ή !>i t—I

M :(¾ X rH

Λ m m m O

U m (N ΓΗ >i V-|

-P -P

•H C

oh ro o 9 9

(N h -rr -3· m -P X

in -H -H

- v in c r^iH^r -<r m m 'vr γη m Η

Eh m m γη m γη γηγηγη >,|y+J

X :(¾ V £ ___ ΪΗ rH G)

-P »H i—I

vo vo vo Ή 0 QJ

O -H rH rH J) Λ -P

VO -P 0) -P

•H 01 -H

O 01 (¾ 01 X :(¾ rH :(¾

Λί vo Γ- VO X di X

^ «“I M i—I I—| r-H

I—I II II li 3 m (¾ EH H u

Eh vor^vo vovovo r^r^r'

EH '—I I—I rH rH rH rH rH rH t—I

g p p p H γη m 5 5 >

:(¾ (N OH H OOCTlH O rH H

HO σ> en ra h h id γη γη (d WC · · -H <τι σι -H σι σι ·Η 0 01¾ >ι <υ ω qj

rH Λί X X

01 .Η ΓΗ m -Ρ :¾ 0} 01 αι •HE Η 'Ό Η C0 ,2 Ή Ή ·ιΗ S fr £_g_g 17 76255

Voiteella 1, joka sisälsi 5 % asykloviriä ja 5 % propyleeniglykolia, oli ainoastaan hyvin vähäinen virusten-vastainen vaikutus. Kliinisten aineiden vähenemistä havaittiin vasta 48 tunnin hoidon jälkeen, jolloin infektio 5 oli jo levinnyt laajalle ja aiheuttanut paljon vahinkoa. Parantumista ei tapahtunut kokeen aikana. Sekä aktiivinen että plasebo-voide olivat lievästi erotrogeeniset, joten vaikutus oli ilmeisesti kantajan aiheuttama. Plasebolla ei ollut vaikutusta.

10 48 tunnin hoidon jälkeen voiteella 2, joka sisälsi 10 % asykloviriä ja 40 % propoyleeniglykolia, havaittiin huomattava virustenvastainen vaikutus, eikä infektio levinnyt 24 tunnin jälkeen. Tällöin ei myöskään enää havaittu aktiivista infektiota. Hoidon jälkeen todettiin vain 15 hyvin vähäisiä jälkiä vaurioista ja parantuminen oli täydellistä. Plasebovaikutusta ei havaittu.

Voide 3, joka sisälsi 5 % asykloviriä ja 50 % propyleeniglykolia, aikaansai myös nopeaa kliinisten aineiden vähenemistä. Tulokset olivat verrattavissa voiteel-20 la 2 saatuihin tuloksiin, vaikka oireet vähenivät hieman vähemmän. Plasebovaikutusta ei havaittu.

Voiteet 2 ja 3 olivat siten erittäin tehokkaita edellä kuvatussa testissä, kun taas voide 1 oli ainoastaan lievästi virustenvastainen.

25 Keksinnön mukaisesti valmistettua voideformulaa- tiota, joka sisälsi 5 % asykloviriä ja 30 % propyleeniglykolia, on myös tutkittu edellä kuvatulla tavalla ja käyttäen samaa pistesysteemiä.

Voiteen 4 koostumus oli seuraava: is 76255

Voide 4

Aineosat 1 kg:n erää varten

Asyklovir 50,0 g

Pluronic F127 1,0 g 5 propyleeniglykoli, B.P. 300,0 g setostearyylialkoholi, B.P. 67,5 g natriumlauryylisulfaatti 7,5 g valkoinen pehmeä parafiini, B.P. 125,0 g nestemäinen parafiini, B.P. 50,0 g 10 puhdistettu vesi, B.P. ad 1000,0 g

Tulokset on esitetty taulukossa 7.

Taulukko 7 15 Aika käsittelyn aloittamisen jälkeen (päivä)

Eläin no 0 1 23 6

TCTC TCTCT C

G601 17 16 19 18 4 32 10 49 7 45 G602 16 17 22 29 10 42 9 50 4 40 20 T = käsitelty kylki C = käsittelemätön kontrollikylki

Tuloksista ilmenee, että voiteella 4 on huomattava 25 virustenvastainen vaikutus.

Seuraavassa esimerkkejä keksinnöstä.

Esimerkki 1: 2-%:inen, paino/paino, vesipitoinen voide

Vesipitoinen voide valmistettiin seuraavista aineosista: 1. asyklovir 20,0 g 30 2. setostearyylialkoholi, B.P. 67,5 g 3. natriumlauryylisulfaatti, B.P. 7,5 g 4. valkoinen pehmeä parafiini, B.P. 125,0 g 5. nestemäinen parafiini, B.P. 50,0 g 6. propyleeniglykoli, B.P. 400,0 g 35 7. puhdistettu vesi, B.P. 1000,0 g:ksi.

Il 15 76255

Osa asykloviristä (2 g) liuotettiin veteen ja propyleeni-glykoliin ympäristön lämpötilassa vesipitoisen liuoksen valmistamiseksi. Parafiini (4,5) ja emulgoimisaineet (2,3) sekoitettiin keskenään ja kuumennettiin 60°C:seen 5 ja emulgoitiin vesipitoisella liuoksella, myös 60°C:ssa, käyttäen laboratoriosekoitinta kierrosluvulla 8000 r/min. Jäljellä oleva asyklovir lisättiin, seos dispergoitiin, annettiin jäähtyä ja täytettiin lakattuihin alumiiniput-kiloihin.

10 Esimerkki 2: 5-%:inen, paino/paino, vesipitoinen voide

Edellä kuvatulla tavalla valmistettiin vesipitoinen voide, joka sisälsi 5 %, paino/paino, asykloviriä. Esimerkki 3: 0,25-%;inen, paino/paino, vesipitoinen voide 1. asyklovir 2,0 g 15 2. isopropyylimyristaatti, B.P. 100,0 g 3. 2-etyyliheksyylipalmitaatti 50,0 g 4. vaalea nestemäinen parafiini, B.P. 50,0 g 5. setostearyylialkoholi, B.P. 30,0 g 6. glyseryylimonostearaatti, B.P. 16,0 g 20 7. Polysorbate 60, B.P.C. 4,0 g 8. propyleeniglykoli, B.P. 400,0 g 9. puhdistettu vesi, B.P. 1000,0 g:ksi.

Voide valmistettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, paitsi että kaikki asyklovir liuotettiin aluksi propy- 25 leeniglykoli/vesi-aineosiin (8, 9).

Esimerkki 4: 2-%:inen, paino/paino vesipitoinen voide

Vesipitoinen voide valmistettiin seuraavista aineosista esimerkissä 1 kuvatulla menetelmällä.

1. asyklovir 20,0 g 30 2. setostearyylialkoholi, B.P. 67,5 g 3. natriumlauryylisulfaatti, B.P. 7,5 g 4. valkoinen pehmeä parafiini, B.P. 125,0 g 5. nestemäinen parafiini, B.P. 50,0 g 6. butaani-1,3-dioli, B.P. 400,0 g 35 7. puhdistettu vesi, B.P. 1000,0 g:ksi.

Claims (10)

20 7 6 2 5 5

1. Menetelmä virustenvastaisen 9-(2-hydroksietoksi-metyyli)guaniini (asyklovirin) tai sen farmaseuttisesti hy-5 väksyttävän suolan tai esterin parannetun paikallisesti käytettävän öljy-vedessä-valmistemuodon, joka sisältää dis-pergoidun öljyfaasin ja jatkuvan vesipitoisen faasin, valmistamiseksi, tunnettu siitä, että 1-10 %, paino/ paino, asykloviriä tai sen suolaa tai esteriä yhdistetään 10 30-50 %:iin, paino/paino, veden kanssa sekoittuvaa poly- hydristiä alkoholia ja 20-40 %:iin, paino/paino, vettä öljy-vedessä-valmistemuodon vesipitoisen faasin muodostamiseksi ja sen jälkeen emulgoidaan öljyfaasi ainakin osalla tätä vesipitoista faasia.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että vesipitoinen faasi ja öljyfaasi kuumennetaan kumpikin n. 40-80°C:seen ennen emulgointia.

3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että 2-5 %, paino/paino, asyklovi- 20 riä tai sen suolaa tai esteriä yhdistetään 35-45 %:iin, paino/paino, polyhydristä alkoholia ja 25-40 %:iin, paino/ paino, vettä.

4. Jonkin edellä esitetyn patenttivaatimuksen mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että polyhydrinen 25 alkoholi on glykoli tai makrogoli.

5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että glykoli tai makrogoli on propyleeni-glykoli tai butaani-1,3-dioli.

6. Patenttivaatimuksen 5 mukainen menetelmä, t u n - 30. e t t u siitä, että polyhydrinen alkoholi on propyleeni- glykoli.

7. Jonkin edellä esitetyn patenttivaatimuksen mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että öljyfaasi sisältää ainakin yhden emulgointiaineen. li 76255

8. Patenttivaatimuksen 7 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että emulgoimisaine on setostearyylial-koholi, glyseryylimonostearaatti, natriumlauryylisulfaatti tai polyoksietyleenisorbitaanimonostearaatti.

9. Patenttivaatimuksen 7 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että öljyfaasi sisältää myös rasvan ja/ tai öljyn.

10. Patenttivaatimuksen 9 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että rasva ja/tai öljy ovat isopropyyli-10 myristaatti, 2-etyyliheksyylipalmitaatti, valkoinen pehmeä parafiini tai nestemäinen parafiini. 76255