FI75436B - Foerfarande och vid detta anvaendbar framkallningsloesning foer paovisande av blod i ett prov. - Google Patents
Foerfarande och vid detta anvaendbar framkallningsloesning foer paovisande av blod i ett prov. Download PDFInfo
- Publication number
- FI75436B FI75436B FI831850A FI831850A FI75436B FI 75436 B FI75436 B FI 75436B FI 831850 A FI831850 A FI 831850A FI 831850 A FI831850 A FI 831850A FI 75436 B FI75436 B FI 75436B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- guaiac
- buffered
- substrate
- acid
- paper
- Prior art date
Links
- 241000147041 Guaiacum officinale Species 0.000 claims abstract description 32
- 229940091561 guaiac Drugs 0.000 claims abstract description 32
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 17
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 15
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 15
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims abstract description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 21
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 4
- 229940069078 citric acid / sodium citrate Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 claims description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 abstract description 18
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 abstract 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 9
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 9
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 9
- CCGSUNCLSOWKJO-UHFFFAOYSA-N cimetidine Chemical compound N#CNC(=N/C)\NCCSCC1=NC=N[C]1C CCGSUNCLSOWKJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229960001380 cimetidine Drugs 0.000 description 8
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 7
- 108700020962 Peroxidase Proteins 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 4
- 230000007797 corrosion Effects 0.000 description 3
- 238000005260 corrosion Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010017788 Gastric haemorrhage Diseases 0.000 description 2
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 description 2
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 2
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 1
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 description 1
- 208000012671 Gastrointestinal haemorrhages Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000001680 brushing effect Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000013872 defecation Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 229940061607 dibasic sodium phosphate Drugs 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- 208000030304 gastrointestinal bleeding Diseases 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000002913 oxalic acids Chemical class 0.000 description 1
- -1 p-isooctyl phenyl Chemical group 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000003016 phosphoric acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 208000037974 severe injury Diseases 0.000 description 1
- 230000009528 severe injury Effects 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- POSZUTFLHGNLHX-KSBRXOFISA-N tris maleate Chemical compound OCC(N)(CO)CO.OCC(N)(CO)CO.OC(=O)\C=C/C(O)=O POSZUTFLHGNLHX-KSBRXOFISA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
- G01N33/721—Haemoglobin
- G01N33/726—Devices
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Description
1 75436
Menetelmä ja siinä käytettävä kehitysliuos näytteessä piilevän veren osoittamista varten
Testiliuskat näytettä varten ja menetelmät, joiden avulla voidaan saada selville ulosteissa piilevä veri, ovat hyvin tunnettuja. Esimerkiksi US-patentissa 3 996 006 tehdään selkoa liuskoista, joissa on substraattia, joka muodostuu etu-seinämän ja takaseinämän välissä olevasta levystä, johon pannaan näyte ja etuseinämässä on yksi tai useampia aukkoja ja takaseinämässä yksi aukko ja kääntyvät kannet peittävät nämä aukot. Kun kyseessä on testi piilevän veren havaitsemiseksi ulosteista, on näytteen vastaanottava levy tyypillisesti absorboivaa paperia, joka on impregnoitu tai painettu guajakil-la, ja kehitysliuos kuten peroksidi1iuos pannaan takaseinä-mässä olevan aukon läpi. Erästä tällaista testiliuskaa myydään tavaramerki11ä "Hemoccult".
Testimenetelmä on lyhyesti seuraava. Ulostusnäyte voidellaan guajakkipaperi 11 e etuseinämässä olevan aukon kautta. Seinämä peitetään sen jälkeen ja avataan takaseinämän läppä. Kehitys-liuosta, kuten vetyperoksidia, pannaan guajakkipaperi 11 e vastaavan aukon kautta takaseinämässä. Jos ulosteissa on verta, guajakkireaktio värjää paperin siniseksi. Sininen väri johtuu hemoglobiinin katalysoimasta guajakin hapettumisesta.
guajakki H 0 "hapettunut" guajakki 2 2 -» väritön hemoglobiini sininen väri
Eräs guajakkitestiä rajoittava ominaisuus on se, että hemoglobiinin katalysoiman sinisen värin syntyminen on riippuvainen pH-arvosta. Kehitysliuos e1 toimi uudelleen toistettavasi! jonkin määrätyn pH-arvon alapuolella. Edellä olevan tunnetun systeemin menestykselliseen suorittamiseen tarvittava pH-alue on noin 4,0 - 7,0, ja optimaalinen pH on 5,5 - 6,0. Jos siis hemoglobiinia pannaan guajakilla käsitellylle substraatille sellaisessa väiaineessa, joka 2 75436 eroaa huomattavasti optimi pH:sta, havaitaan vain vähän tai ei lainkaan väriä.
Kyseessä olevan testiliuskan edellä mainitusta haitasta johtuen se ei sovellu testaamaan piilevää verta näytteissä, joiden pH on alhainen kuten mahaneste, jonka pH voi olla alle 2. Mahan sisällössä olevien yhdisteiden havaitseminen joita siellä ei normaalisti ole, erikoisesti piilevän veren olemassaolon selville saaminen on kliinisesti tärkeätä. Mahalaukussa oleva veri voi olla peräisin useista eri lähteistä kuten nieltyä verta jostakin traumasta gastroin- / testinaaliseudun ulkopuolella, ja gastrointestinaalisesta verenvuodosta. Joissakin patologisissa tiloissa kuten mahalaukun karsinoina, mahahaava ja gastriitti, voi verta esiintyä mahalaukussa. Alkoholin nauttiminen ja useat eri lääkkeet kuten aspiriini, muut analgeetit ja kortikosteroidit voivat aiheuttaa syöpymistä mahalaukun limakalvon soluissa ja mahdollisesti mahalaukun verenvuotoa. Mahalaukun syöpymistä ja siitä johtuvaa verenvuotoa on havaittu myös potilaissa, jotka on tuotu sairaalaan vaikeiden loukkaantumisien tai palamisen takia. Tämän tyyppistä syöpymistä voi ilmetä 24 h kuluessa alkuperäisestä traumasta ja seurauksena voi olla akuutti hengenvaarallinen mahalaukun verenvuoto. Gastrointitestinaalialueella yllättäen piilevän veren selville saaminen aikaisessa vaiheessa on tärkeätä, sillä se helpottaa diagnoosin tekemistä edellä mainituissa sairaustiloissa jo aikaisessa vaiheessa, sillä-hoito voi olla tällöin tehokkaampaa.
Tämän keksinnön kohteena on sen vuoksi saada aikaan testi-liuska, johon eivät vaikuta vaihtelut näytteessä tai näytteen pH-arvossa ja jota voitaisiin käyttää muihinkin näytteisiin kuin ulosteisiin.
Tämän keksinnön kohteena on myös saada aikaan nopea, helppo kvalitatiivinen testi, joka auttaa tekemään diagnoosia 3 75436 gastrointestinaal1-sairauksissa paljastamalla alkaisin maha-nesteissä piilevä veri.
Tämän keksinnön kohteena on vielä saada aikaan testiliuska, joka eliminoisi virheelliset positiiviset reaktiot, jotka johtuvat peroksidaasien, raudan, kuparin ja kemikaalien, kuten simetidiinin, läsnälosta.
Aikaisemmin on yritetty stabiloida guajakilla Impregnoitua paperia tai testiliuskaa pH-vaihtelui1 ta ja häiritseviltä aineilta kuten peroksidaasei1 ta. Saksalaisessa hakemusjui kaisus-sa 2 716 060 tehdään selkoa puskuriaineista tai kelaatteja muodostavista aineista guajakki paperissa , joilla voitaisiin voittaa edellä mainitut probleemat. Kaikkein kriittisin on puskuri aineen tarve silloin, kun testatut väliaineet poikkeavat suuresti optimaalisesta pH-arvosta, kuten mahanesteet, tai kun on saatava selville pieniä määriä katalysaattoria, kuten hemoglobi1ni a.
Yllättäen on keksitty, että kun puskurlainelta pannaan kehi-tysliuokseen eikä impregnoida niitä guajakkipaperiin, kuten aikaisemmassa tekniikassa on selostettu, testiliuskaan eivät näytteen tai kokeen pH-vaihtelut vaikuta ja virheelliset positiiviset reaktiot, jotka johtuvat peroksidaasien, metalli-ionien ja simetidlinin läsnäolosta, voitiin eliminoida.
Keksinnön tunnusmerkit on esitetty patenttivaatimuksissa.
Useita suuria etuja voidaan saavuttaa, kun puskuroidaan ke-hitysliuos sen sijaan että impregnoi tais11 n guajakklpaperi puskuria1ne111 a. Guajakki paperiin pantavien puskuri aineiden määrää rajoittaa paperin absorptiokyky. Jos sen vuoksi tarvitaan voimakas puskurointi, olisi tehokkaampaa puskuroida kehltysl1uos. Olisi myös vaikeata saada puskuria1 neet jakautumaan tasaisesti paperille. Puskuroitaessa kehitysliuos ei pH ole rajoittunut substraatin pH:hon, so. ph:ta voidaan muuttaa. Kun paperi on impregnoitu, sen pH on määrätty ja rajoittunut. Voimakas suo! akonsentraatio paperilla 4 75436 voisi myös vaikuttaa muihin reagensseihin ja itse paperin fysikaalisiin ominaisuuksiin. Kun puskuroidaan kehitysliuos, testiliuskan valmistusmenetelmässä ei tulisi olemaan mitään muutosta. Tämä mahdollisuus vaikuttaa paljon kustannuksiin.
On saatu erittäin edullisia tuloksia käyttämällä yhdistelmää hapolla käsitelty guajakkipaperi ja puskuroitu kehitys-aine. On havaittu, että guajakkipaperin happokäsittely eliminoi virheellisesti positiivisia testejä simetidiinin kanssa ja vähensi peroksidaasien haittoja. Lisäksi guajakkipape-rissa oleva happo estää yllättäen guajakin muuttumasta siniseksi varastoinnin aikana, kun tapahtuu mahdollisesti atmosfääristä hapettumista. Puskuroitua kehitysainetta tarvitaan sen vuoksi, että voidaan saada selville hemoglobiini happamissa olosuhteissa guajakissa. Tätä valaisevat seuraa-vien kokeiden tulokset.
Valmistettiin näytteitä synteettisestä mahanesteestä, joka sisälsi 0,05 mg hemoglobiinia ja 30 mg simetidiiniä per ml. i 25 ^,ul:n näytteitä pantiin "Hemocculf-liuskoille ja kehi tettiin puskuroitujen ja ei-puskuroitujen kehitysaineiden kanssa. "Hemanculf-liuskoja tehtiin sen jälkeen happamik-si käsittelemällä guajakkipaperia hapolla ennen näytteen levittämistä ja näytteiden kehittämistä. Taulukot 1 ja 2 seuraavassa esittävät näiden kokeiden tuloksia.
TAULUKKO 1: Puskuroitu vast, ei-puskuroitu kehitysaine käytettyinä tavallisten "Hemoccult"-liuskojen kanssa Lukemat 30 sek kuluttua
Hemoglobiini________ Simetidi ini_ Näytteen Puskuroitu Ei-pusku- Puskuroitu Ei-puskuroi- pH_ kehitin roitu kehitin kehitin tu kehitin 1.32 3 1 0 1 2,20 3 3 0 2 3.60 4 4 0 2 4.32 4 40 2 5.60 4 3 0 4 6,37 4 3 0 4 75436 5 TAULUKKO 2: Happoa sisältävät vast, happoa sisältämättömät levyt ja puskuroitua kehitys-liuosta _Hemoglobiini_ _Simetidiini_
Levyt Happoa_Ei happoa Happoa Ei happoa
Lukema- aika 0,5 2 5 0,5 2 5 0,5 2 50,52 5 (min)_ _ Näytteen
PH
1/32 2 55 3 55 0 00000 5,60 5 55 5 55 0 00015 6,37 5 55 4 55 0 00035 "Hemoccult"-levyt tehtiin happamiksi käsittelemällä guajak-kipaperin keskusta 25 ^ul:n kanssa 0,1 M sitruunahappoa. Paperin annettiin kuivua ympäristön olosuhteissa ennen käyttöä. Puskuroitu kehitysaine sisälsi vetyperoksidia 0,2 M sirtuunahappoa/sitraattipuskurissa, jonka pH oli 5,8. Pus-kuroimaton kehitysaine oli kaupasta saatavaa "Hemoccult" kehitysainetta, joka sisältää vetyperoksidia etanolissa ja vedessä.
Sinisen värin intensiteetti arvosteltiin asteikolla 1-5 ja 0 oli väritön. Taulukosta 1 havaitaan, että puskuroidun kehitysaineen käyttö tavanmukaisissa "Hemoccult"-levyissä saa aikaan luotettavamman hemoglobiinin positiivisen testin. Puskuroitu kehitysaine myös eliminoi simetidiinin aiheuttamat virheellisesti positiiviset testit. Taulukon 2 tulokset osoittavat, että happamaksi tehdyn guajakkipaperin käyttö yhdessä puskuroidun kehitysaineen kanssa ei aiheuta virheellisesti positiivista tulosta simetidiinistä johtuen vaikka testilukemia viivyteltiin ja lukemat otettiin vasta määrättyjen 30 sekunnin jälkeen. Havaitaan, että tämä käsittely ei häirinnyt hemoglobiinitestiä.
Peroksidaasin katalysoima virheellisesti positiivinen reaktio 75436 6 on myös pH:sta riippuvainen, katalyysi vähenee pH:n pienentyessä. Havaittiin, että guajakkipaperin happokäsittely ennen näytteen sivelemistä estää virheellisesti positiivisen reaktion, jota katalysoivat happo-labiilit peroksidaasit. Käsitelty paperi, kun sitä käytetään puskuroidun kehitys-aineen kanssa, synnyttää sinisen värin hemoglobiinia sisältävien näytteiden kanssa eikä häiritse hemoglobiinitestiä. Esimerkiksi synteettinen mahaneste, pH 6,5, joka sisälsi puhdistettua piparjuuriperoksidaasia (2 yksikköä/ml) antoi "Hemoccult"-levyillä testattuna virheellisesti positiivisia tuloksia. Kun guajakkipaperia oli esikäsitelty hapon kanssa ja edellä mainittua synteettistä mahanestettä ja perok-sidaasia pantiin levylle ja annettiin reagoida hapon kanssa viisi minuuttia ennen kehittämistä, ei syntynyt sinistä positiivista väriä.
Guajakkipaperin käsittelyssä ovat osoittautuneet tehokkaiksi hapoiksi kloorivety-, rikki-, sitruuna-, fosfori- ja oksaalihappo. Muita voimakkaita orgaanisia ja epäorgaanisia happoja voidaan myös käyttää. Parhaana pidetty resepti ja menetelmä guajakkipaperin käsittelyyn hapolla on seuraava:
Liuos I
Guajakki 7,8 g
Isopropanoli 92,2 g
Liuos II
Liuos I 800 g
Sitruunahappo 768 g
Isopropanoli 432 g
Vesi 300 g
Liuos II:ta voidaan levittää absorboivalle paperille impreg noimalla tai painamalla.
Kehitysaine voidaan puskuroida millä tahansa hyvin tunnetulla puskurisysteemillä, joita ovat esimerkiksi sitruuna- 75436 7 happo/natriumsitraatti, sitruunahappo/kaksiemäksinen nat-riumfosfaatti, tris-maleaatti tai EDTA.
Puskuroitu kehitysliuos sisältää edullisesti noin 1 % - 5 % vetyperoksidia. Seuraavaa puskuroitua kehitysainetta, joka on 0,2 M sitruunahappoa/sitraatti-puskuria, jonka pH on 5,8, on käytetty edullises/i tässä keksinnössä.
Vetyperoksidi 2,17 g
Etanoli 32,87 g
Sitruunahappo 0,75 g
Natriumsitraatti 4,37 g
Vesi 58,80 g
Triton X-100 1,04 g
Ei-ionista pinta-aktiivista ainetta lisätään edullisesti puskuroituun kehitysaineeseen auttamaan peroksidaasin inhiboimista. Kaikkein edullisimmin käytetään Triton X pinta-aktiivista ainetta, polyetyleeniglykoli-p-iso-oktyylifenyy-lieetteriä.
Kun puskuroitua kehitysainetta levitetään hapolla käsitellyn guajakkipaperin substraatille, on tuloksena testiliuska, joka on stabiili ja jonka avulla voidaan testata piilevän veren läsnäolo näytteissä, joiden pH on alhainen, kuten mahanesteessä. Lisäksi virheellisesti positiiviset tulokset, jotka johtuvat simetidiinistä, peroksidaaseista ja metalli-ioneista kuten kuparista ja raudasta, eliminoituvat.
Claims (5)
1. Menetelmä, jonka avulla voidaan testata mahanesteessä piilevä veri, tunnettu siitä, että mahanestettä levitetään puskuroimattoman hapolla käsitellyn absorboivan substraatin päälle, joka sisältää guajakkia reagenssina ja levitetään puskuroitua kehitysliuosta mainitulle substraatille ja tarkastetaan värjäytyykö substraatti siniseksi.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kehitysliuos sisältää vetyperoksidia.
3· Testikitti, jolla voidaan määrätä mahanesteessä pii levän veren läsnäolo, tunnettu siitä, että se muodostuu hapolla käsitellystä absorboivasta substraatista, joka sisältää guajakkireagenssia ja säiliöstä, joka sisältää puskuroitua kehitysliuosta, joka reagoi sanotun reagenssin kanssa värjäten substraatin siniseksi.
4· Patenttivaatimuksen 1 mukaisessa menetelmässä käytet tävä kehitysliuos, tunnettu siitä, että se sisältää noin 1 ^ - noin 5 % vetyperoksidia, joka on puskuroitu 0,2 M sit-ruunahappo/natriumsitraatilla, jonka pH on noin 5>8.
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen liuos, tunnettu sii tä, että siihen lisätään ei-ionista pinta-aktiivista ainetta.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US38290882A | 1982-05-28 | 1982-05-28 | |
| US38290882 | 1982-05-28 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI831850A0 FI831850A0 (fi) | 1983-05-24 |
| FI831850L FI831850L (fi) | 1983-11-29 |
| FI75436B true FI75436B (fi) | 1988-02-29 |
| FI75436C FI75436C (fi) | 1988-06-09 |
Family
ID=23510927
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI831850A FI75436C (fi) | 1982-05-28 | 1983-05-24 | Foerfarande och vid detta anvaendbar framkallningsloesning foer paovisande av blod i ett prov. |
Country Status (23)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0095302B1 (fi) |
| JP (1) | JPS58215557A (fi) |
| KR (1) | KR900005485B1 (fi) |
| AT (1) | ATE18307T1 (fi) |
| AU (1) | AU557883B2 (fi) |
| BG (1) | BG42009A3 (fi) |
| CA (1) | CA1216501A (fi) |
| CS (1) | CS259514B2 (fi) |
| DD (1) | DD211874A5 (fi) |
| DE (1) | DE3362264D1 (fi) |
| DK (1) | DK159173C (fi) |
| ES (1) | ES522738A0 (fi) |
| FI (1) | FI75436C (fi) |
| GR (1) | GR79286B (fi) |
| HU (1) | HU192806B (fi) |
| IE (1) | IE54507B1 (fi) |
| IL (1) | IL68767A0 (fi) |
| NO (1) | NO161196C (fi) |
| NZ (1) | NZ204343A (fi) |
| PH (1) | PH23572A (fi) |
| PL (1) | PL142241B1 (fi) |
| PT (1) | PT76748B (fi) |
| ZA (1) | ZA833856B (fi) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3314308A1 (de) * | 1983-04-20 | 1984-10-25 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren und reagens zur bestimmung des haemoglobin-haptoglobin komplexes in gegenwart von freiem haemoglobin |
| US4541987A (en) * | 1983-09-29 | 1985-09-17 | Helena Laboratories Corporation | Test pad for detecting occult blood |
| US5374328A (en) * | 1993-03-25 | 1994-12-20 | Watkins Johnson Company | Method of fabricating group III-V compound |
| CN111273007B (zh) * | 2020-03-13 | 2023-08-01 | 内江师范学院 | 一种用于快速检测鱼类鮰爱德华氏菌的试剂盒及检测方法 |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3933594A (en) * | 1974-08-16 | 1976-01-20 | Polaroid Corporation | Method and device for determining the concentration of a substance in a fluid |
| DE2716061C2 (de) * | 1977-04-09 | 1982-03-25 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Guajaconsäure A, Verfahren zu ihrer Herstellung und die Verwendung dieser Substanz als diagnostische Mittel |
| DE2716060C3 (de) * | 1977-04-09 | 1980-06-12 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Stabilisierte Schnelldiagnostica mit Oxydationsindikatoren |
| AT360176B (de) * | 1977-07-01 | 1980-12-29 | Roehm Gmbh | Testkarte fuer den nachweis okkulten bluts im stuhl |
| US4175923A (en) * | 1978-06-26 | 1979-11-27 | Friend William G | Method and apparatus for occult blood testing in the home |
| US4277250A (en) * | 1979-12-10 | 1981-07-07 | Baylor College Of Medicine | Methods for detecting and quantifying occult blood |
| ZA829434B (en) * | 1982-01-05 | 1984-05-30 | Hematec Corp | Home diagnostic aid and method for determining the presence of occult blood for use by the general public |
| ZA831268B (en) * | 1982-04-30 | 1984-10-31 | Hematec Corp | Home diagnostic aid and method for determining the presence of occult blood for use by the general public |
| JPS6432947A (en) * | 1987-07-30 | 1989-02-02 | Shiroki Corp | Door lock/unlock detecting device for burglary preventing device for automobile |
-
1982
- 1982-05-25 PH PH28955A patent/PH23572A/en unknown
-
1983
- 1983-05-17 AT AT83302770T patent/ATE18307T1/de not_active IP Right Cessation
- 1983-05-17 DE DE8383302770T patent/DE3362264D1/de not_active Expired
- 1983-05-17 EP EP83302770A patent/EP0095302B1/en not_active Expired
- 1983-05-23 IL IL68767A patent/IL68767A0/xx unknown
- 1983-05-24 FI FI831850A patent/FI75436C/fi not_active IP Right Cessation
- 1983-05-24 DK DK231083A patent/DK159173C/da not_active IP Right Cessation
- 1983-05-24 CA CA000428695A patent/CA1216501A/en not_active Expired
- 1983-05-24 PT PT76748A patent/PT76748B/pt unknown
- 1983-05-24 NZ NZ204343A patent/NZ204343A/en unknown
- 1983-05-24 GR GR71446A patent/GR79286B/el unknown
- 1983-05-25 AU AU14976/83A patent/AU557883B2/en not_active Ceased
- 1983-05-25 KR KR1019830002290A patent/KR900005485B1/ko not_active Expired
- 1983-05-25 JP JP58093292A patent/JPS58215557A/ja active Granted
- 1983-05-26 PL PL1983242217A patent/PL142241B1/pl unknown
- 1983-05-26 CS CS833802A patent/CS259514B2/cs unknown
- 1983-05-26 ES ES522738A patent/ES522738A0/es active Granted
- 1983-05-26 BG BG061091A patent/BG42009A3/xx unknown
- 1983-05-26 NO NO831871A patent/NO161196C/no unknown
- 1983-05-27 ZA ZA833856A patent/ZA833856B/xx unknown
- 1983-05-27 DD DD83251341A patent/DD211874A5/de not_active IP Right Cessation
- 1983-05-27 HU HU831892A patent/HU192806B/hu unknown
- 1983-05-27 IE IE1262/83A patent/IE54507B1/en unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4486536A (en) | Specimen slide for occult blood testing | |
| US4541987A (en) | Test pad for detecting occult blood | |
| FI73087C (fi) | Bestick foer test av blod inneslutet i ett prov. | |
| US3598704A (en) | Diagnostic device for various sugars | |
| FI71767C (fi) | Testkomposition och testanordning foer bestaemning av glukos i ett prov av vaetskeform samt foerfarande foer semikvantitativ bestaemning av glukos i urin. | |
| US4059407A (en) | Disposable chemical indicators | |
| US4042329A (en) | Method and device for detecting cholesterol | |
| US5391498A (en) | Test for fecal occult blood | |
| EP0256562B1 (en) | Dry-type multilayer analytical element | |
| US4725553A (en) | Test composition for detecting occult blood | |
| US5310680A (en) | Test for fecal occult blood | |
| JPS6322260B2 (fi) | ||
| EP0814335B1 (en) | Method for the detection of creatinine | |
| EP0317070A2 (en) | Digital colorimetric quantitative assay system | |
| US5182213A (en) | Method for detecting the presence of peroxidatively active substance in basic media | |
| FI75436B (fi) | Foerfarande och vid detta anvaendbar framkallningsloesning foer paovisande av blod i ett prov. | |
| JPS6359466B2 (fi) | ||
| EP0158964B1 (en) | Tester for detecting a substance in a body fluid | |
| EP1022566A2 (en) | Assay for the detection of creatinine | |
| JPH0532040B2 (fi) | ||
| EP0553820A2 (en) | Composition and test strip for measuring peroxidatively active substances | |
| JPH05260994A (ja) | ペルオキシド−ペルオキシダーゼ試験系を使用する唾液中の被検体の検出法 | |
| US5439827A (en) | Composition for detecting peroxide active material | |
| JPS6374500A (ja) | 体液中のしゆう酸塩を検出するための試験片 | |
| JPH03282259A (ja) | レドックス反応に基づく過酸化活性物質測定用組成物及びそれを用いた試験片 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: SMITHKLINE DIAGNOSTICS, INC. |