FI73440C - Foerfarande foer framstaellning av som laekemedel anvaendbara alkyl-(eller alkoxi-)karbonyloxialkyl-7-/2- (aminotiazol-4-yl)-2-metoxi-(eller etoxi-)iminoacetamido/- 3-metoxi-metyl-3-cefem-4-karboxylat. - Google Patents

Description

73440 1 Menetelmä lääkeaineena käyttökelpoisten alkyyli-(tai alkoksi-)-karbonyylioksialkyyli-7-/2-(-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-(tai etoksi-)iminoasetamidq7-3-metoksi-metyyli-3-kefeemi-4-karboksylaattien valmistamiseksi 5 Förfarande för framställnlng av som läkemedel användbara alkyl-(eller alkoxi-)karbonyloxialkyl-7-/2-(aminotiazol-4-yl)-2-metoxi-(eller etoxi-)iminoacetamido7-3-metoxi-metyl-3-cefem-4-karboxylat 10 Keksinnön kohteena on menetelmä kaavan (I) mukaisten lääkeaineena käyttökelpoisten alkyyli-(tai alkoksi-)karbonyylioksialkyyli-7-/2-(-amino-tiatsol-4-yyli)-2-metoksi-(tai etoksi-)iminoasetamidoy-3-metoksi-metyyli-3-kefeemi-4-karboksylaattien: 15 K-n— C — C—N-1-f ] I n il i _ h2h^s^, K 0 H n\^^ch2och3 1 ok1. I (Il 20 Λ af o-cH-o-c-s3 I, Il R2 0 25 (jossa R^ tarkoittaa alempaa alkyyliryhmää, valittuna metyyliryhmistä ja etyyliryhmistä; 2 R tarkoittaa vetyatomia tai metyyllryhmää; 30 ja 3 R tarkoittaa C^-C,. alkyyliryhmää tai C^-C,. alkoksiryhmää); sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoaddltlosuolojen valmistamiseksi.

35

Esillä oleva keksintö koskee sarjaa uusia kefalosporiiniyhdisteitä, jotka ovat erityisen sopivia annettavaksi lääkkeeksi suun kautta, menetelmiä ja välituotteita näiden yhdisteiden valmistamiseksi sekä näitä yhdisteitä sisältäviä koostumuksia.

2 73440 1 Vaikkakin on löydetty useita kefalosporllnln johdannaisia, joilla on erinomainen antibakteerlnen teho, useimmat niistä ovat parents-raalisestl lääkkeeksi annettavia. Lääkkeen antamista suun kautta pidetään kuitenkin parempana, paitsi milloin suuria antiblottlannoksla 5 on annettava nopeasti, koska potilas voi Itse ottaa suun kautta annettavat valmisteet, tarvitsematta koulutettua valvojaa tai avustajaa. Valitettavasti hyvin harvoissa löydetyistä monista kefalosporllnln johdannaisista yhdistyvät erinomainen antibakteerlnen teho, laaja antibakteerlnen spektri sekä gram-positiivisia että gram-negatiivisia 10 bakteereita vastaan (erityisesti Staphylococcus aureus’ta vastaan) ja kyky imeytyä tehokkaasti ruoansulatuskanavasta.

Esimerkiksi kefalotiinia, kefatsolilnia ja kefmetatsolla käytetään yleisesti lääkkeenä parenteraallsestl annettuna, erityisesti ruiskeina, 15 Kuitenkin annettaessa näitä yhdisteitä suun kautta vain noin 5% annoksesta erittyy virtsan mukana, mikä osoittaa niiden huonon imeytymisen ruoansulatuskanavasta ja niiden sopimattomuuden suun kautta tapahtuvaan lääkitsemiseen. Tämän ajatellaan johtuvan 4-asemassa olevan karbokslryhmän voimakkaasta dlssosloltumlsesta (so. alhaisesta pKa-20 arvosta) ja vahvasta happamuudesta.

Tämän johdosta on tehty useita yrityksiä parantaa kefalosporllnln johdannaisten imeytymistä ruoansulatuskanavasta esterölmällä 4-karboksiryhmä, mutta lähes kaikki tällaiset yritykset ovat späonnistu-25 neet sellaisten kefalosporllnln johdannaisten aikaansaamisessa, jotka imeytyvät hyvin ruoansulatuskanavasta ja jotka siten sopisivat suun kautta annettaviksi; kuten jälmepänä selostetaan, siinä yhdessä tapauksessa, jossa imeytyminen ruoansulatuskanavasta on merkittävästi parantunut, puuttuu saadulta yhdisteeltä toivottu 30 laaja antibakteerlnen spektri.

Esimerkiksi julkaisussa The Journal of Antibiotics, voi. 32 (1979) n:o 11, 1155 selitetään, ettei kefamandolin Imeytyminen ruoansulatuskanavasta parane esterölmällä asetokslmetyyllesterlksi, koska tämä 35 esteri liukenee vain niukasti veteen. Vaikkakin esterin Imeytymistä ruonsulatuskanavasta voidaan rajoitetussa määrin parantaa antamalla esteri liuoksena määrätyissä orgaanisissa lluottlmlssa (kuten propy-leenlglykolissa), el tämä ole erityisen hyvä ratkaisu ongelmaan.

ti 3 73440 1 Toisaalta ilmoitetaan julkaisussa The Journal of Medicinal Chemistry, voi. 22 (1979), 657, että erään toisen kefalosporiinin esterin, joka liukenee helposti veteen, imeytyminen ruoansulatuskanavasta ei merkittävästi parane, johtuen esterin kemiallisesta pysymättömyydestä.

5

Lisäksi on tunnettua, ettei kefalosporiinien alempialkyyli- ja bentshydryyliestereillä itsessään ole yleensä juuri mitään antibak-teerista tehoa ja etteivät ne hydrolysoidu in vivo (mikä muutoin saattaisi muuntaa ne tehokkaaksi hapoksi) eikä niillä näin ollen ole 10 arvoa terapeuttisessa käytössä, vaikkakin ne voivat olla käyttökelpoisia synteettisinä välituotteina.

Monista erilaisista tunnetuista kefalosporiinin johdannaisista eräällä luokalla on 2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-alkoksi-iminoase-15 tamidoryhmä 7-asemassa ja se voidaan esittää seuraavalla kaavalla; N-n—C — C—N—-f η

Il II II l u u c s' NOH A- 20 H2fK^S^ \ $7

E

(jossa B, D ja E ovat substituentteja).

25 Esimerkiksi japanilaisessa patenttihakemuksessa Kokai (so. pantu julkisesti nähtäväksi) n:o 149296/76 selitetään seuraavat yhdisteet: (a) 7- [2-(aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidoJ -3-metyyli- 3-kefem-4-karboksyylihappo; 30 (b) 3-asetoksimetyyli-7- [2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidoj -3-kefem-4-karboksyylihappo ja (c) 7- E2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamido31 -3-(1-35 metyyli-lH-tetratsol-5-yyli) tiometyyli-3-kefem-4-karboksyylihappo.

Olemme todenneet, että näiden yhdisteiden erittyminen virtsan mukana 4 73440 1 (millä voidaan mitata niiden sopivuutta suun kautta annettaviksi) on vain 3,2%, 1,5% ja 2% vastaavasti yhdisteille (a), (b) ja (c); nämä yhdisteet ovat siis sopimattomia suun kautta annettaviksi.

5 Samoin japanilaisessa patenttihakemuksessa Kokai n:o 86188/81 (joka on julkaistu esilläolevan hakemuksen prioriteettipäivän jälkeen) selitetään 7- £2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoase-tamido^ -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksyylihappo (d), joka on tiettyjä esilläolevan keksinnön mukaisia yhdisteitä vastaava vapaa 10 karboksyylihappo. Olemme kuitenkin havainneet, että yhdisteen (d) erittyminen virtsan mukana on vain 5,5% ja se on tästä johtuen sopimaton suun kautta annettavaksi. Selityksessä on käsitelty myös yhdistettä (d) lähellä olevien kefalosporiinien tiettyjä esteritä, erityisesti t-butyyli- ja bentshydryyliestereitä. Kuten edellä on 15 selitetty, ei tällaisten estereiden kuitenkaan uskota helposti muuttuvan vastaavaksi karboksyylihapoksi in vivo ja tästä johtuen ne eivät saata olla käytännössä tehokkaita.

Japanilaisissa patenttihakemuksissa Kokai n:o 9296/79 ja 34795/78 seli-20 tetään seuraavat pivaloyylioksimetyyliesterit; (e) pivaloyylioksimetyyli-3-asetoksimetyyli-7- |^2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidoJ -3-kefem-4-karboksylaatti ja 25 (f) pivaloyylioksimetyyli-7- [ 2-(2-aminotiatsol-4-yyli)~2-metoksi- iminoasetamidoJ -3-(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)tiometyyli-3-kefem-4-karboksylaatti.

Olemme myös havainneet, että näiden yhdisteiden erittyminen virtsan 30 mukana on vain 8% ja 14%, vastaavasti yhdisteille (e) ja (f), ja nämäkin yhdisteet ovat sopimattomia suun kautta annettaviksi.

Verrattaessa yhdisteiden (a), (b) ja (c) erittymistä yhdisteiden (e) ja (f) erittymiseen ovat tulokset varsin yllättäviä; tiedetään 35 nimittäin, että ampislllllnin imeytyminen ruoansulatuskanavasta paranee huomattavasti muuntamalla se pivaloyylioksimetyyliesteriksi.

5 73440 1 Em. japanilaisessa patenttihakemuksessa Kokai n:o 34795/78 selitetään myös pivaloyylioksimetyyli-7- j_2-(2-aminotiätsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamido^ -3-metyyli-3-kefem-4-karboksylaatti, jäljempänä "yhdiste (g)". Olemme tutkineet tätä yhdistettä perusteellisesti ja 5 havainneet, että se erittyy erittäin hyvin virtsan mukana, lähes esilläolevan keksinnön mukaisiin yhdisteisiin verrattavalla tasolla, mikä antaa aiheen olettaa, että se saattaa hyvinkin soveltua suun kautta annettavaksi. Kuten jäljempänä osoitetaan, hydrolysoituu kuitenkin yhdiste (g) suun kautta annettuna ja muuttuu in vivo vastaa-10 vaksi karboksyylihapoksi, jolla puolestaan on heikko teho Staphylococcus aureus*ta vastaan. Kyvyttömyys estää tämän kliiniseltä kannalta ehkä yhden tärkeimmistä, bakteerin kasvua saattaa olla käytännössä haitta.

Edellä esitetyn perusteella on siis selvää, että sellaisen kefalospo-15 riinin johdannaisen, joka täyttää kaikki kolme vaatimusta; hyvä imeytyminen ruoansulatuskanavasta, korkea antibakteerinen teho ja laaja antibakteerinen spektri, valmistus ei ole yksinkertaista. Kefalosporiini-rungossa on monta kohtaa, joihin voidaan liittää erilaisia substi-tuentteja ja jonkin tietyn substltuentln liittäminen yhden ominaisuuden 20 parantamiseksi voi haitallisesti vaikuttaa muihin ominaisuuksiin aivan arvaamattomalla tavalla. Lisäksi on selvästi osoitettu, että silloinkin kun tietyn kemiallisen muuntamisen tiedetään parantavan jonkin yksittäisen yhdisteen ominaisuuksia (esim. kuten valmistettaessa pivalo-yylioksimetyyliesteri amplsllllinin imeytymisen parantamiseksi), ei 25 tämä mitenkään osoita, että samanlainen muuntaminen parantaisi samalla tavalla jonkin toisen yhdisteen ominaisuuksia.

Olemme nyt yllättäen keksineet rajoitetun joukon kefalosporiinin johdannaisia, joita voidaan antaa lääkkeeksi euun kautta, koska ne imey-30 tyvät helposti ruoansulatuskanavasta ja jotka sitten helposti hydrolysoituvat ja muuttuvat in vlvo vastaavaksi karboksyylihapoksi, joka puolestaan osoittaa aivan erinomaista tehoa sekä gram-positiivisia että gram-negatilvlsia bakteereita vastaan.

35 Keksinnön mukainen menetelmä kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistami6-tamieeksi on tunnettu siitä, että 6 73440 1 (la) saatetaan reagoimaan kaavan (Ha) mukainen yhdiste: N--|—C—CO-R . , 5 II I « (n*) * 10 tai sen reaktiivinen johdannainen kaavan (lila) mukaisen yhdisteen kanssa: R2 o 20 joissa A tarkoittaa happiatomia tai ryhmää N-OR'1', jossa R*- on edellä määritelty; 25 R tarkoittaa hydroksiryhmää ja B tarkoittaa ryhmää

30 _JL

0^\CH2OCH3 c

o'V

35

II

7 73440 1 tai R tarkoittaa ryhmää — N —I-

5 H I

IK CH20CH3 coon 10 ja B tarkoittaa halogeeniatomia; 4 R tarkoittaa aminoryhmää tai suojattua aminoryhmää; 15 2 3 ja R ja R ovat edellä määritellyt); (Ib) kun A tarkoittaa happiatomia, saatetaan vaiheen (la) tuote reagoimaan kaavan (XII) mukaisen yhdisteen kanssa: 20 H2N"0r1 (XLI) 25 (jossa R1 on edellä määritelty); 4 (le) kun R tarkoittaa suojattua aminoryhmää, poistetaan suojaus; ja (Id) tarvittaessa muutetaan tuote suolakseen; tai 30 (2a) saatetaan reagoimaan kaavan (VII) mukainen yhdiste:

R5S0?0CH2— C — C—COOH

n n 35 · on non w 8 73440 1 (jossa R^ tarkoittaa C^-C^ alkyyliryhmää tai aryyliryhmää ja R* on edellä määritelty) tai sen reaktiivinen johdannainen kaavan (III) mukaisen yhdisteen kanssa: 5 H2H-j——r^S\ ° '''Y''^CH200H3 f m ] 10 /C\ 0X x0—CH—0 — C— R3 I, 11

Rz 0 15 2 3 (jossa R ja R ovat edellä määritellyt) kaavan (VI) mukaiseksi yhdisteeksi: 20 r5so2och2-c-c-c—«η-f'S ',πι

0 N 0 H J-N A

25 w.\m, 0/ xy^ch2och3 c (T S0-CH-0-C-R3 I, Il

30 RO

12 3 5 35 (jossa R , R , R ja R ovat edellä määritellyt) ja saattamalla tämä kaavan (VI) mukainen yhdiste tai kaavan (VI) mukainen yhdiste, jossa R tarkoittaa alkyyliryhmää, reagoimaan tiourean kanssa, ja

II

9 73440 1 (2b) tarvittaessa muutetaan tuote suolakseen; tai (3a) nitrosoidaan kaavan (IX) mukainen yhdiste: 5 · X—ch2~ c—ch2-c—W—,-S >

I! L II I I

0 0 H J-n 0 . >^^CH20CH3 10 c im 0 0-CIH-C-R3 L II R1 0 15 2 3 (jossa R ja R ovat edellä määritellyt ja X on Cl) kaavan (X) 20 mukaiseksi yhdisteeksi: 25 X-CHZ" 8 “n " ιΓ iΤΖΓ 'Ίί

OHO H J

,syn! OH . T m /\-CH-0-C-03 30 I, Il

R1 . O

3 (jossa R ja R ovat edellä määritellyt ja X on Cl), alkyloidaan 35 tämä kaavan (X) mukainen yhdiste kaavan (VIII) mukaiseksi yhdisteeksi: 10 73440

1 S

X—CH? — C — C — C— N—I-s' N

1 It II II I. I

OHO H J-N JL

5 Ιφ>1 ''ORI 0 Ni^^CHjOCHj Λ ίΈΠΓ1

o' 0-CH-0-C-R3 I, II

.. R2 O

10 12 3 (jossa R , R ja R ovat edellä määritellyt) ja saatetaan tämä kaavan (VIII) mukainen yhdiste tai kaavan (VIII) mukainen yhdiste, jossa X on halogeeniatomi, reagoimaan tiourean kanssa, ja 15 (b) tarvittaessa muutetaan tuote suoIäkseen.

Keksinnön mukaisia yhdisteitä voi käyttää farmaseuttisissa koostumuksissa, jotka käsittävät vaikuttavana ainesosana yhden tai useampia keksinnön mukaisista yhdisteistä sekoitettuna farmaseuttisesti hyväksyttä-20 vään kanto- tai lairaennusaineeseen.

3

Kun R kaavan (I) mukaisissa yhdisteissä tarkoittaa 1-5 hiiliatomia sisältävää alkyyliryhmää, se on edullisesti metyyli-, etyyli-, propyyli-, isopropyyli-, butyyli-, isobutyyli-, sek^-butyyli-, t-butyyli-, pen-25 tyyli-, isopentyyli- tai t-pentyyliryhmä, edullisimmin t-butyyliryhmä.

3

Edullisimmin R tarkoittaa 1-5 hiiliatomia sisältävää alkyyliryhmää 2 kun R tarkoittaa vetyatomia.

3

Kun R tarkoittaa 1-5 hiiliatomia sisältävää alkoksiryhmää, se on 30 edullisesti metoksi-, etoksi-, propoksi-, isopropoksi-, butoksi-, isobutoksi-, sek.-butoksi-, t-butoksi-, pentyylioksi- tai 1-etyyli- 3 propoksiryhmä, edullisimmin etoksiryhmä. Edullisimmin R tarkoittaa 2 1-5 hiiliatomia sisältävää alkoksiryhmää kun R tarkoittaa metyyli-ryhmää .

Esimerkkejä keksinnön mukaisista yhdisteistä on annettu seuraavassa listassa, yhdisteet tunnistetaan jäljempänä niille listassa annetuilla numeroilla.

Il 35 11 73440 1 1. Asetoksimetyyli-7- ^2-(2-aminotiatsol-A-yyli)-2~metoksi-imino- asetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefein-4-karboksylaatti 2. Propionyyliok8imetyyli-7- t2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi- 5 iminoasetamidoJ-3-metoksimetyyli-3-kefem~4-karbok6ylaatti 3. l-Asetoksietyyli-7- [2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-raetoksi-imino asetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefein-4-karboksylaatti 10 4. Propionyylioksiraetyyli-7- [2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-etoksi- iminoasetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 5. Isopropionyyliok8imetyyli-7- j_2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidoj -3-raetoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 15 6. Butyryylioksimetyyli-7- j2-(2-amlnotiatsol-4-yyli)-2-etoksi-iminoasetamido^ -3-Tnetok8imetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 7. l-Propionyylioksietyyli-7- jj2“(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-etoksi- 20 iminoasetamidoj -3-metoksimetyyli-3*-kefenj-4-karboksylaatti 8. l8obutyryylioksimetyyli-7- ^2~(2-atninotiatsol-4-yyli)-2-metoksl-iminoasetamidoj -3-roetoksimetyyli-*3-kefeni-4-karbok8ylaat:ti 25 9. Pivaloyylioksimetyyll-7- £2-(2-aminotiat8ol~4-yyli)-2-metoksi- iminoasetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 10. Plvaloyyliokeimetyyli-7- £.2-(2-atninotlatsol-4-yyli)-2-etoksl-imlnoasetamid<0 -3-metok8imetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 30 11. Isovaleryylioksimetyyli-7- £2-(2-aminotiat8ol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamldoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 12. l-Pivaloyylioksietyyli-7- []2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-etoksi- 35 iminoasetamidcj -3-metokslmetyyll-3-kefetn-4-karboksylaatti 13. Metokslkarbonyylloksimetyyli-7- j^2-(2-arainotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidoj -3-metokslmetyyll-3-kefein-4-karboksylaat:ti TT" 12 73440 1 IA. l-Metoksikarbonyylioksietyyli-7- {j2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2- etoksi-iminoasetamidoj -3-raetoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 15. Etoksikarbonyylioksimetyyli-7- ^2-(2-aminotiatsol-A-yyli)-2- 5 metoksi-iminoasetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karbok8ylaatti 16. l-Etoksikarbonyylioksietyyli-7- £2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetatnidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 10 17. l-Etoksikarbonyylioksletyyll-7- ^2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2- etoksi-iminoasetamido3 -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 18. Propoksikarbonyylioksimetyyli-7- jj2-(2-aminotiatso l-4-yyli)-2-etoksi-iminoasetamido j, -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatii 15 19. l-Isopropoksikarbonyylioksietyyli-7- £2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidoj -3-metokeimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 20. l-Butoksikarbonyylioksietyyli-7- £2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2- 20 etoksi-iminoasetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karbokeylaatti 21. Isobutoksikarbonyylioksimetyyli-7- |^2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-itninoasetamldoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 25 22. l-sek.-butoksikarbonyylioksietyyli“7- j^2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2- metoksi-iminoasetamidoJ -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 23. l-(l-etyylipropoksikarbonyylioksl)etyyli-7- [^2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metokai-iminoasetamido3 -3-metoksimetyyli-3-kefem-4- 30 karboksylaatti 24. 1-(1-etyylipropoksikarbonyyIloksi)etyyli-7- j^2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-etoksi-iminoasetamidoJ -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-kar-boksylaatti 35 25. 3,3,3-Trimetyylipropionyylioksimetyyli-7- f2-(2-arainotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidoJ -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-kar-boksylaatti 13 73440 1 Edellä luetelluista yhdisteistä ovat yhdisteet 9,10,16 ja 17 edullisimpia.

Kuten kaavassa on osoitettu, ovat esillä olevan keksinnön mukaiset, 5 kaavan (I) yhdisteet syn-muotoa, jolla on havaittu olevan paljon voimakkaampi antibakteerinen teho kuin vastaavilla anti-isomeereillä.

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet muodostavat happoadditiosuoloja monien erilaisten happojen kanssa ja keksintö käsittää näin ollen myös tällaiset 10 suolat farmaseuttisesti hyväksyttävien happojen, esimerkiksi epäorgaanisten happojen (kuten kloorivetyhapon, rikkihapon tai fosforihapon) tai orgaanisten happojen (kuten metaanisulfonihapon, bentseenisulfoni-hapon tai malonihapon) kanssa. Happoadditiosuoloista ovat hydrokloridit edullisimpia.

15

Esilläolevan keksinnön mukaiset yhdisteet voidaan siis valmistaa joukolla menetelmiä, esimerkiksi seuraavassa kuvatuilla.

Menetelmä 1 20

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa saattamalla reagoimaan kaavan (II) mukainen yhdiste:

25 ?,-n— c-COOK

ϊ 1Π ϋ R‘^SX . ,N . (D) (synl OR1 30 (jossa R tarkoittaa amlnoryhmää tai suojattua aminoryhmää ja R on edellä määritelty) tai tämän, kaavan (II) mukaisen yhdisteen reak-35 tiivinen johdannainen kaavan (III) mukaisen yhdisteen kanssa: 14 7 3 4 4 0 1 · «2» I r s K CH2OCH3 (mi c \f no-ch-o- c-r3

I, II

R2 0 10 2 3 (jossa R ja R ovat edellä määritellyt), Ja tarvittaessa poistamalla 4 ryhmän R suoj aus.

15 Edellä esitetyissä kaavan (II) mukaisissa yhdisteissä ovat edullisia 4 amino-suojaavia ryhmiä R ;ssä sellaiset ryhmät, jotka voidaan helposti poistaa vapaan aminoryhmän palauttamiseksi, esimerkiksi trityyli-, formyyli-, t-butoksikarbonyyli- tai 2-etoksikarbonyyll-l-metyylivinyyli-ryhmät, jotka voidaan poistaa käsittelemällä hapolla, 2,2,2-trikloori-20 etoksikarbonyyliryhmä, joka voidaan poistaa pelkistämällä, 2-metaani-sulfonyylietoksikarbonyyliryhmä, joka voidaan poistaa käsittelemällä emäksellä tai klooriasetyyliryhmä, joka voidaan poistaa käsittelemällä tiourealla.

25 Kaavan (II) mukaista karboksyylihappoa voidaan itseään käyttää vapaana tai sitä voidaan käyttää reaktiivisena johdannaisena. Sopivia reaktiivisia johdannaisia ovat happohalogenidi, happoanhydridi, hapon seka-anhydridit, reaktiiviset esterit, reaktiiviset amidit ja happoatsidi. Edullisia hapon seka-anhydridejä ovat seka-anhydridit mono(alempi alkyyli) 30 karbonaattien, kuten monometyylikarbonaatin tai monoisobutyylikarbo- naatin kanssa ja seka-anhydridt alempien alkaanihappojen, kuten pivaali-hapon tai trikloorietlkkahapon kanssa. Edullisia reaktiivisia este-reitä ovat p-nitrofenyyliesteri, pentakloorifenyyliesteri ja N-hydroksi-ftalimidiesteri.

Kun kaavan (II) mukaista yhdistettä käytetään vapaana happona, on edullista suorittaa reaktio kondensointiaineen läsnäollessa. Esimerkkejä 35 li 15 73440 1 sopivista kondensointialnelsta ovat; dlsubetituoldut karbodi-imidit, kuten dlsykloheksyyllkarbodl-imldl; imidatsolidit, kuten karbonyyli-di-imidatsoli tai tlonyylldl-imldateoll; N-etoksikarbonyyli-2-etoksi- 1,2-dihydrokinoliini; tai dimetyyliformamidista ja esimerkiksi fosfori-5 oksiklorldleta tai tionyyliklorldlsta valmistettu Vllsmeler-reagenssi.

Kun käytetään hapon (II) reaktiivista johdannaista, ei tällaisen kondensolntiaineen käyttö ole tarpeen; tiettyjen reaktiivisten johdannaisten kohdalla voi olla kuitenkin toivottavaa suorittaa reaktio 10 emäksen läsnäollessa. Esimerkkejä sopivista emäksisistä ovat; alkali-metalllyhdisteet, kuten natriumbikarbonaatti, kallumblkarbonaattl, natriumkarbonaatti tai kaliumkarbonaatti; alifaattiset, aromaattiset tai typpi-heterosykliset emäkset, kuten trietyyliemiini, N,N-dimetyyli-aniliini, Ν,Ν-dietyylianiliini, N-metyylipiperidiini, N-metyylipyrroli-15 diini, pyridiini, kollidiini tai lutldiini.

Hapon (II) tel sen reaktiivisen johdannisen reaktio kaavan (lii) mukaisen yhdisteen kanssa suoritetaan edullisesti liuottimen läsnäollessa; liuottimen luonne ei ole kriittinen, edellyttäen ettei sillä ole haitallista 20 vaikutusta reaktioon. Edullisia liuottimia ovat inertlt orgaaniset liuottimet (kuten asetoni, metyylietyyllketonl, tetrahydrofuraanl, dioksaani, etyyliasetaatti, kloroformi, metyleenikloridi, asetonitriili, * dlmetyyliformamldl tai dlmetyylisulfoksldi) tai tällaisen liuottimen ' ja veden seos.

: 25 * Reaktlolämpötilalla el ole erityisiä rajoituksia, mutta tavallisesti pidämme edullisena reaktion suorittamista ympäristön lämpötilassa tai jäähdyttäen. Reaktioon tarvittava aika vaihtelee, riippuen pääasiallisesti asylointlmenetelmästä ja reaktiolämpötllasta, mutta tavallisesti 30 reaktion tarvitsema aika voi vaihdella useista kymmenistä minuuteista useisiin kymmeniin tunteihin.

Reaktion mentyä loppuun voidaan reaktiotuote ottaa talteen reaktio-seoksesta tavanomaisin keinoin. Esimerkiksi, jos käytetään veteen 35 sekoittuvaa liuotinta, liuotin poistetaan edullisesti tislaamalla alennetussa paineessa Ja jäännös liuotetaan veteen sekolttumattomaan liuottimeen. Näin saatu liuos pestään sitten hapolla ja emäksellä 16 734 4 0 1 ja kuivataan, minkä jälkeen liuotin poistetaan tislaamalla jolloin saadaan haluttu tuote. Jos reaktiossa käytetään veteen sekoittumatonta liuotinta, reaktioseos pestään hapolla tai emäksellä ja kuivataan, minkä jälkeen liuotin poistetaan tislaamalla. Näin saatu tuote voi-5 daan tarvittaessa edelleen puhdistaa tavanomaisin keinoin, esimerkiksi kromatografisilla menetelmillä.

Suojaavan ryhmän poistamiseen tarvittava reaktio, milloin R tarkoittaa suojattua iminoryhmää, on kuten edellä mainittiin tavanomai-1Q nen ja vaihtelee riippuen valitusta suojaavasta ryhmästä. Suojaavan ryhmän poistamisen jälkeen voidaan haluttu tuote ottaa talteen reaktioseoksesta ja puhdistaa, esim. kuten edellä on ehdotettu, jolloin saadaan haluttu kaavan (I) mukainen yhdiste.

15 Menetelmä 2

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet voidaan saada saattamalla reagoimaan kaavan (IV) mukainen yhdiste: 20 N—n—C —C—N-,- N 0 H J-j R S ^nA0Rl N^^CH20CH3 25 COOH 1 ®

1 A

(jossa R ja R ovat edellä määritellyt) tai sen reaktiivinen johdannainen kaavan (V) mukaisen yhdisteen kanssa: 30 X—CU—0 — C—R3 I η II / TT l R2 ' 0 (I) 35 (jossa X tarkoittaa halogeenlatomla, kuten kloori-, bromi- tai 2 3 jodiatomia, edullisesti jodiatomia Ja R ja R ovat edellä määri-tellyt) ja sitten tarvittaessa poistamalla ryhmän R suojaus.

ti 17 73440 1 Kaavan (IV) mukaisen yhdisteen edullisia reaktiivisia johdannaisia o\at suolat, esimerkiksi suolat metallin (kuten natriumin tai kaliumin) tai orgaanisen amiinin (kuten trietyyliamiinin) kanssa. Käytettäessä vapaata happoa (IV) reaktio aikaansaadaan edullisesti sitovan 5 aineen läsnäollessa; tämä aine voi olla orgaaninen tai epäorgaaninen, esimerkiksi kaliumkarbonaatti, natriumkarbonaatti, natriumbikarbonaatti, trietyyliamiini, disykloheksyyliamiini, pyridiini tai N,N-dimetyyli-aniliini.

10 Reaktio aikaansaadaan edullisesti liuottimen läsnäollessa liuottimen luonne ei ole kriittinen edellyttäen, ettei sillä ole haitallista vaikutusta reaktioon. Sopivia liuottimia ovat dimetyyliformamidi, dimetyyliasetamidi, dimetyylisulfoksidi, heksametyylifosforitriamidi tai asetonitriili; voidaan käyttää kahden toi useamman tällaisen liuot-15 timen seosta samoin kuin yhden tai useamman näistä liuottimista seosta yhden tai useamman muun inertln orgaanisen liuottimen kanssa. Reaktio voidaan aikaansaada laajalla lämpötila-alueella, mutta yleisesti pidämme edullisena sen suorittamista ympäristön lämpötilassa tai jäähdyttäen. Reaktioon tarvittava aika voi vaihdella useista minuuteista useisiin 20 tunteihin.

Reaktion mentyä loppuun reaktioseos edullisesti laimennetaan veteen sekolttumattomalla liuottimelle, pestään peräjälkeen kaliumbisulfaa-tin vesiliuoksella ja emäksisellä vesiliuoksella ja sitten kuiva-25 taan, minkä jälkeen liuotin poistetaan tislaamalla, jolloin saadaan haluttu tuote. Tämä tuote voidaan edelleen puhdistaa tavanomaisin keinoin, esimerkiksi kromatografisin menetelmin.

4

Milloin R tarkoittaa suojattua amlnoryhmää, se voidaan muuttaa 30 vapaaksi aminoryhmäksi kuten on selostettu menetelmän 1 yhteydessä.

Menetelmä 3

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet voidaan saada saattamalla reagoimaan 35 kaavan (VI) mukainen yhdiste: 18 73440

S

R5S020CH2 —c— C—C—H—I-r" N

L L || Il II I (S ]

0 H 0 H A-f J

5 . M\si Q/ ^y^ch2och3 c (r u-CH-O-C—$

I, II

R2 O

10 5 12 3

(jossa R tarkoittaa alkyyliryhmää tai aryyliryhmää ja R ,R ja R

ovat edellä määritellyt) tiourean kanssa. Kaavan (VI) mukaiset yhdisteet ovat uusia ja ovat itse osa esilläolevaa keksintöä.

15

Kun R^ kaavan (VI) mukaisissa yhdisteissä on alkyyliryhmä, on se edullisesti alkyyliryhmä, jossa on 1-6 hiiliatomia, esimerkiksi metyyli-, etyyli-, propyyli-, isopropyyli-, butyyli-, isobutyyli-, pentyyli- tai heksyyliryhmä, edullisemmin metyyli- tai etyyliryhmä.

20 Kun R^ tarkoittaa aryyliryhmää, se on edullisesti substituoitu tai substituoimaton fenyyli- tai naftyyliryhmä.

Substituoiduissa ryhmissä voi olla yksi tai useampia substituentteja, tavallisesti 1-5 substituenttia, jotka voivat olla samoja tai erilai-25 siä. Sopivia substituentteja ovat C^-C^, alkyyliryhmät (esim. metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli tai butyyli), C^-C^ alkoksiryhmät (esim. metoksi, etoksi, propoksi, isopropoksi, butoksi tai isobutoksi) ja halogeeniatomit (esim. kloori-, bromi- tai fluoriatomit). Edullisimmat R :n tarkoittamat aryyliryhmät ovat fenyyli- ja p-metyyli-30 fenyyliryhmät.

Edustavia esimerkkejä kaavan (VI) mukaisista yhdisteistä ovat: 26. Asetoksimetyyli-7-(2-*metoksi-imino-3-okso-4-p-tolueenisulfonyyli-35 oksibutyryyliamino)-3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti li 19 7 3440 1 27. l-Asetoksietyyli-7-(2-etokei-imino-3-okso-4-tolueeni8ulfonyyli- okslbutyryyliamino)-3-metok8imetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 28. Propionyylioksimetyyli-7-(4-bentseenisulfonyylioksi-2-metoksi- 5 imino-3-oksobutyryyliamino)-3-metok8i.metyyli-3-kefem-4-karboksy- laattl 29. l-Propionyyliok8ietyyli-7-(4-metaanisulfonyyliok8i-2-oetoksi-imino-3-oksobutyryyliamino)-3-metok8imetyyli-3-kefem-4-karboksy- 10 laattl 30. l-Butyryylioksietyyli-7-(4-etaanisulfonyylioksi-2-etoksi-iinino- 3-oksobutyryyliamino)-3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 15 31. lBobutyryyllok8imetyyli-7-(2-metok8i-imino-3-okso-4-p-tolueeni- 6ulfonyyliok8ibutyryyliamlno)-3-metoksinietyyli-3-kefein-4-kar-boksylaatti 32. Pivaloyyliokeimetyyll-7-(2-metok8i-iiiilno-3-okso-4-p-tolueeni- 20 sulfonyyliok8ibutyryyllamino)-3-metokeiinetyyli-3-kefem-4-kar- boksylaatti • 33. Plvaloyyliok8imetyyli-7-(2-etok8i-lmino-3-ok80-4-p-tolueenl- : sulfonyylloksibutyryyliamino)-3-metoksimetyyli-3-kefem-4-kar- : 25 bokeylaatti 34. Plvaloyylioksimetyyli-7-(4-bent8eenieulfonyyliok8i-2-metoksi-imlno-3-okeobutyryyllamlno)-3-metoksimetyy11-3-kefem-4-karboksy-laattl 30 35. Plvaloyyllok8lmetyyll-7-(4-metaani8ulfonyyliokel-2-inetok8l-imlno- 3-okeobutyryyliamino)-3-metok8imetyyll-3-kefem-4-karbokeylaatti 36. Pivaloyyllok8imetyyll-7-(4-etaanleulfonyylioksi-2-etoksi-imino-3- 35 me t o kslme tyyli-3-kefem-4-karbokeylaattl 37. l-Pivaloyylloksietyyli-7-(2-metok8l-lmino-3-ok80-4-p-tolueeni-8ulfonyylioksibutyryyliamlno)-3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karbok-sylaattl 20 73440 1 38. Metoksikarbonyylioksimetyyli-7-(4-metaanisulfonyylioksi-2- raetoksi-imino-3-oksobutyryyliamino)“3-metoksimetyyli-3-kefeni- 4-karboksylaatti 5 39. Etoksikarbonyyliokeimetyyli-7-(4-benteeenisulfonyylioksi-2- etoksi-imino-3-oksobutyryyliamino)-3-metoksimetyyli-3-kefem-4- karboksylaatti 40. l-Etoksikarbonyyliok8ietyyli-7-(2-metoksi-imino-3-okso-4-p- 10 tolueenisulfonyylioksibutyryyliamino)-3-metoksiinetyyli-3- kefem-4-karboksylaatti 41. l-Etoksikarbonyylioksietyyli-7-(4-metaanisulfonyylioksi-2-metoksi-imino-3-oksobutyryyliamino)-3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksy- 15 laattl 42. l-Etoksikarbonyylioksietyyli-7-(2-etokei-imino-3-okso-4-p-tolueenisulfonyylioksibutyryyliamino)-3-metoksimetyyli-3-kefem- 4-karboksylaatti 20 43. Isopropoksikarbonyyliok8imetyyli-7-(2-metoksi-iinino-3-okso-4-p-tolueenisulfonyylioksibutyryyliamino)-3-metokslmetyyli-3-kefem- 4-karboksylaa 11 i 25 44. l-Butoksikarbonyyliok8ietyyli-7-(4-bentseenisulfonyylioksi-2- metok8i-imino-3-oksobutyryyliainino)-3-metoksimetyyli-3-kefem-4- karboksylaatti 45. l-(l-etyylipropoksikarbonyylioksi)etyyli-7-(2-metoksi-imino-3- 30 okso-4-p-tolueenisulfonyylioksibutyryyliamino)-3-raetok8imetyyli- 3-kefem-4-karboksylaatti 46. 3,3,3-trimetyylipropionyylioksimetyyli-7-(2-metoksi-imino-3-okso-4-p-tolueenisulfonyylioksibutyryyliainino)-3-metok8imetyyli-3- 35 kefem-4-karboksylaatti 21 73440 1 Kaavan (VI) aukaiset yhdisteet voidaan valmistaa esimerkiksi saattamalla reagoimaan kaavan (VII) mukainen yhdiste:

5 R5S02 OCH? — C — C — COOH

5 II II

0 N (DI) M/X0R1 10 1 5 (jossa R·*" ja R ovat edellä määritellyt) tai sen reaktiivinen johdannainen kaavan (III) mukaisen yhdisteen kanssa: .s.

Η?Ν—I—- 15 N\^i^CH20CH3 ΠΠ) c (Γ X0—CH—0— C— R3

20 L· H

R2 0 2 3 jossa R ja R ovat edellä määritellyt). Kaavan (VII) mukaiset 25 yhdisteet ovat uusia ja myös osa esilläolevaa keksintöä. Edustavia esimerkkejä kaavan (VII) mukaisista yhdisteistä ovat; 47. 2-Metoksi-iraino-3-okso-4-p-tolueenisulfonyylioksivoihappo 30 48. 2-Etoksi-imino-3-okso-4-p-tolueeni8ulfonyylioksivoihappo 49. 4-Bentseenisulfonyylioksi-2-metok8i-imino-3-ok8ivoihappo 50. 4-Metaanisulfonyyliok8i-2-metoksi-imino3-oksovoihappo 35 51. 4-Etaani8ulfonyylioksi-2-etoksi-imino-3-oksovoihappo 22 73440 1 Kaavan (VII) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa esimerkiksi reaktiosarjalla, jota valaisee seuraava reaktiokaavio yhdisteen 5 3 valmistamiseksi, jossa R on p-tolyyliryhmä ja R on metyyliryhmä: 5 8rCH2COCH2 COOC(CHj>3 * TsOAg -_

NaH02 10 Ts0CH2C0CH2COOC(CH3>3-— TsOCH, C0CC00CICH-,),

Il ^ j

N

noh f CH3) 2 H ® 15 ;-o- Ts0CH2C0C C00C|CH3)3-2—*-

K

OCH3

TsOCHiCOC— COOK 20 i li

H

\ch3

25 r- >--V

Ts = C H 3—'j—- SOj — 30 35 23 73440 1 Reaktiossa kaavan (VI) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi voidaan kaavan (VII) mukaista vapaata happoa käyttää sellaisenaan tai voidaan käyttää tämän vapaan hapon reaktiivista johdannaista. Käytettäessä vapaata happoa suoritetaan reaktio edullisesti konden-5 sointiaineen läsnäollessa, joka aine on esimerkiksi disubstituoitu karbodi-imidi kuten Ν,Ν'-disykloheksyylikarbodi-imidi; atsolidiyh-diste kuten Ν,Ν'-karbonyyli-imidatsoli; vettä sitova aine kuten N-etoksikarbonyyli-2-etoksi-l,2-dihydrokinoliini, fosforioksikloridi tai alkoksiasetyleeni tai dimetyyliformamidlsta ja fosforioksiklo-10 ridista valmistettu Vilsmeier-reagenssi.

Käytettäessä kaavan (VII) mukaisen hapon reaktiivista johdannaista ei tällaista kondensointiainetta tarvita, mutta reaktiivisen johdannaisen luonteesta riippuen voidaan reaktio edullisesti suorittaa emäk-15 sen läsnäollessa. Sopivia emäksiä ovat esimerkiksi alkalimetalli- yhdisteet, kuten natriumbikarbonaatti, kaliumbikarbonaatti, natrium-karbonaatti tai kaliumkarbonaatti; ja alifaattiset, aromaattiset tai typpiheterosyklieet emäkset, kuten trietyyliamiini, N,N-dimetyyli-aniliini, Ν,Ν-dietyylianiliini, N-metyylipiperidiini, N-metyylipyrro-20 lidiini, pyridiini, kollidiini tai lutidiini.

Hapon (VII) edullisia reaktiivisia johdannaisia ovat happohalogenidi, happoanhydridi, seka-anhydridit, aktiiviset esterit, aktiiviset amidit ja happoatsidi. Sopivia seka-anhydridejä ovat anhydridit hiilihapon 25 monoestereiden (esimerkiksi monometyylikarbonaatin tai monoisobutyyli-karbonaatin) ja alempien alkaanlhappojen tai alempien haloalkaanihap-pojen (kuten pivaalihapon tai trikloorietikkahapon) kanssa. Sopivia aktiivisia estereitä ovat esimerkiksi p-nitrofenyyliesteri, penta-kloorifenyyliesteri, N-hydroksiftalimidiesteri ja N-hydroksibentso-30 triatsoliesteri.

Reaktio aikaansaadaan edullisesti liuottimen läsnäollessa; liuottimen luonne ei ole kriittinen, edellyttäen ettei sillä ole haitallista vaikutusta reaktioon. Sopivia liuottimia ovat asetoni, tetrahydro-35 furaani, dioksaani, etyyliasetaatti, kloroformi, metyleenikloridi, dimetyyliformamidi, asetonitriili ja vesi, samoin kuin kahden tai useamman näiden liuottimien seokset.

24 73440 1 Reaktiolämpotila ei ole erityisen kriittinen ja sentähden reaktio tavallisesti suoritetaan huoneen lämpötilassa tai jäähdyttäen. Reaktioon tarvittava aika vaihtelee, riippuen etupäässä asylointlaineen luonteesta ja reaktiolämpötilasta, mutta tavallisesti reaktio menee 5 loppuun 10 minuutissa - useissa kymmenissä tunneissa.

Reaktion mentyä loppuun voidaan haluttu kaavan (Vll) mukainen yhdiste ottaa talteen reaktioseoksesta tavanomaisin keinoin ja vaikkakin yhdiste voidaan tarvittaessa puhdistaa (esimerkiksi uudelleenkiteyt-10 tämällä tai erilaisilla kromatografisilla menetelmillä), se voidaan käyttää myös ilman välillä tapahtuvaa puhdistamista tai erottamista seuraavassa vaiheessa, so. halutun, kaavan (I) mukaisen yhdisteen valmistuksessa.

15 Reaktio kaavan (I) mukaisen yhdisteen tuottamiseksi käsittää kaavan (VI) mukaisen yhdisteen saattamisen kosketukseen tlourean kanssa, edullisesti sopivan liuottimen läsnäollessa. Liuottimen luonne el ole kriittinen, edellyttäen ettei sillä ole haitallista vaikutusta reaktioon. Sopivia liuottimia ovat vesi, metanoli, etanoli, dimetyyli-20 formamldi, dimetyyliasetamldi, asetonitriili, tetrahydrofuraani ja kahden tai useamman näiden liuottimien seokset.

Haluttaessa voidaan emästä (kuten natrlumasetaattla tai natriumbikarbonaattia) lisätä reaktloseokseen reaktion edistämiseksi tai sen 25 viemiseksi loppuun. Sivutuotteiden muodostuminen voidaan estää aikaan-saattamalla reaktio puskuriliuoksen (pH 6,5-7) läsnäollessa.

Käytettävä tlourean määrä on edullisesti 1 ekvivalentti tai enemmän yhtä kaavan (VI) mukaisen yhdisteen ekvivalenttia kohti.

30

Reaktiolämpötlla ei ole erityisen kriittinen ja sentähden reaktio edullisesti alkaansaatetaan ympäristön lämpötilassa. Reaktion tarvittava aika vaihtelee, riippuen reaktio-olosuhteista, mutta yleensä tarvitaan alkaa useista kymmenistä minuuteista useisiin tunteihin.

35

Reaktion mentyä loppuun voidaan haluttu kaavan (I) mukainen yhdiste ottaa talteen tavanomaisin keinoin, esimerkiksi väkevöinnillä alennetussa paineessa, uutolla, uudelleen saostuksella tai kromatograflalla.

25 73440 1 Menetelmä 4

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet voidaan myös saada saattamalla reagoimaan kaavan (Vili) mukainen yhdiste: 5 CL- CH? — C — C — C— M—i-f >

1 II II II I I

0 H 0 H „ J-N Λ.

10 M' ORI ° vY^XCH20CH3 / ΠΠΕ )

Οκ ''O—CH-O-C— R3 L II R2 O

15 12 3 (jossa R , R ja R ovat edellä määritellyt) tiourean kanssa.

20 Kaavan (VIII) mukaiset yhdisteet, jotka ovat uusia ja ovat myös osa esilläolevaa keksintöä, voidaan valmistaa nltrosolmalla kaavan (IX) mukainen yhdiste: / S \

25 Cl—CH2-C — CH?- C — H—|-r I

I! Il I ,

0 0 H J-H

0 \p^CH20CH3 C (K) 30 0^\-CH-0-C-R3

L II

R2 0 2 3 35 (jossa R ja R ovat edellä määritellyt), kaavan (X) mukaiseksi yhdisteeksi: 26 73440

1 · S

ci—ch? - c — c — c— n—I-S '''ί c in i/ \-CH-o-c-n3 I, Il

Rz O

10 2 3 (jossa R ja R ovat edellä määritellyt) ja alkyloimalla sitten tämän kaavan (X) raukaisen yhdisteen iminotyppeen liittynyt hydroksi-ryhmä.

15

Edustavia esimerkkejä uusista kaavan (VIII) mukaisista yhdisteistä ovat: 52. Asetoksimetyyli-7-(4-kloori-2-metoksi-imino-3-oksobutyryyli- 20 amino)-3-metoksimetyyli-3-kefem~4-karboksylaatti 53. l-Asetoksietyyli-7-(4-kloori-2-metoksi“imino-3-oksobutyryyli-amino)-3-metoksimetyyli-3-kefem~4-karboksylaatti 25 54. l-Propionyylioksimetyyli-7-(4-kloori-2-metoksi-imino-3-okso- butyryyliamino)-3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 55. l-Etoksikarbonyylioksietyyli-7-(4-kloori-2-metoksi-imino-3-oksobutyryyliamino)-3-metoksimetyyli-3-kefem~4-karboksylaatti 30 56. l-Etoksikarbonyylioksietyyli-7-(4-kloori-2-etoksi-imino-3-oksobutyryyliamino)-3-metok8imetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 57. Metoksikarbonyylioksimetyyli-7-(4-kloori-2-metoksi-imino-3-okso- 35 butyryyliamino)-3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 27 73440 1 58. Etokeikarbonyylioksimetyyli-7-(4-kloori-2-etokei-iinino-3- oksobutyryyliami.no) “3-metokBimetyyli-3-kef em-4-karboksylaatti 59. Isopropoksikarbonyylioksimetyyli-7-(4-kloori-2-metok8i-imino-3- 5 okeobutyryyliamino)-3-metokBimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 60. Butoksikarbonyylioksimetyyli-7-(4-kloori-2-metoksi-i!nino-3-oksobutyryyliamino)-3“metokeimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 10 61. l-Propionyylioksietyyli-7-(4-kloori-2-metoksi-imino-3-oksobuty- ryyliamino)-3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 62. l-Butyryylioksietyyli-7-(4-kloori-2-etok8i-imino-3-oksobutyryyli-amino)-3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karbok8ylaatti 15 63. Isovaleryylioksimetyyli-7-(4-kloori-2“metoksi-imino-3-oksobutyryyllamino)-3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 64. Pivaloyylioksimetyyli-7-(4-kloori-2-metok8i-imino-3-okso- 20 butyryyliamino)-3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti .* 65. Pivaloyylioksimetyyli-7-(4-kloori-2-etoksi-imino-3-ok8obutyryyli- .* amino)-3-metokeimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti • ; 25 66. Isobutyryyliokslmetyyli-7-(4-kloori-2-metoksi-imino-3-ok8obuty- * ryyliamino)-3-metokeimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 67. l-Pivaloyyliokeietyyli-7-(4-kloori-2-metok8i-imino-3-okso-butyryyliamino)-3-metokeimetyyli-3-kefein-4-karboksylaatti 30 68. l-(l-Etyylipropoksikarbonyyliokei)etyyli-7-(4-kloori-2-metokei-imino-3-okeobutyryyliamino)-3-metoksimetyyli-3“kefem-4-kar-boksylaatti 35 69. 3,3,3-Trimetyylipropionyyliokeimetyyli-7-(4-kloori-2-metok8i- imino-3-oksobutyryyliamino)-3-metokeimetyyli-3-kefem-4-karboksy- laatti 28 73440 1 Kaavan (IX) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa asyloimalla kaavan (III) mukainen yhdiste: 5 h2i‘η—f imi c tr N-ch-o-c-r3.

10 I, Il R2 0 2 3 (jossa R ja R ovat edellä määritellyt) 4-kloori-3-oksobutyryyli-kloridilla (joka voidaan saada saattamalla diketeenl reagoimaan 15 kloorin kanssa). Tämä asylolntl voidaan suorittaa tavanomaisin keinoin ja aikaansaadaan edullisesti lluottimessa, jonka luonne el ole kriittinen, edellyttäen ettei sillä ole haitallista vaikutusta reaktioon. Sopivia liuottimia ovat metyleenlklorldi, kloroformi, tetrahydrofuraani ja dloksaanl. Asylointi suoritetaan edulli-20 eesti emäksen läsnäollessa, edullisesti orgaanisen emäksen kuten trietyyliamiinin, pyridiinin, Ν,Ν-dimetyylianiliinin tai N,N-dietyyli-anillinln. Reaktio aikaansaadaan edullisesti noin ympäristön lämpötilassa tai alemmassa lämpötilassa ja aikaa tarvitaan tavallisesti useista minuuteista useisiin tunteihin. Reaktion mentyä loppuun 25 voidaan kaavan (IX) mukainen tuote ottaa talteen ja puhdistaa tavanomaisin keinoin, esimerkiksi väkevöinnillä, uutolla orgaanisilla liuottimilla, kromatografisilla menetelmillä tai uudelleenklteytyk-sellä.

30 Kaavan (IX) mukaisen yhdisteen nitrosointl kaavan (X) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi voidaan aikaansaada tunnetuilla menetelmillä reaktiivisten metyleenlryhrnlen nitrosoimiseksi. Tällainen nitrosolntireaktlo aikaansaadaan tavallisesti käyttämällä typpi-hapokkeen metalllsuolaa happamlesa olosuhteissa tai typplhapokkeen 35 esteriä sopivissa olosuhteissa. Keksinnön mukaisia yhdisteitä valmistettaessa on kuitenkin välttämätöntä suorittaa reaktio sellal slssa olosuhteissa, että kefalosporilnirunko ja 7-asemaesa olevan 29 73440 1 sivuketjun klooriatomi eivät osallistu reaktioon. Näin ollen on suotavaa suorittaa reaktio heikosti happamissa tai heikosti emäksisissä olosuhteissa, ympäristön lämpötilaa alemmassa lämpötilassa.

Tämä reaktio suoritetaan tavallisesti liuottimen läsnäollessa; liuot-5 timen luonne ei ole kriittinen, edellyttäen että se kykenee liuottamaan kaavan (IX) mukaisen yhdisteen ja ettei sillä ole haitallista vaikutusta reaktioon. Sopivia liuottimia ovat muurahaishappo, etikkahappo, tetrahydrofuraani, metanoli, etanoli, kloroformi, etyyliasetaatti ja bentseeni tai veden seos yhden tai useam-10 man näistä liuottimista kanssa. Nitrosointiaineen luonteesta riippuu, mikä liuotin valitaan.

Esimerkkejä nitrosointiaineena käytettävistä typpihapokkeen metalli-suoloista ovat alkalimetallisuolat (kuten natrlumnitriitti tai 15 kaliumnitriitti), edullisesti natrlumnitriitti. Typpihapokkeen esteri on edullisesti esteri alemman alkoholin kanssa, esimerkiksi pentyylinitriitti tai butyylinitriitti.

Käytettäessä typpihapokkeen metallisuolaa nitrosointiaineena 20 täytyy reaktio suorittaa happamissa olosuhteissa ja ellei käytetä hapanta liuotinta (kuten muurahaishappoa tai etikkahappoa), on välttämätöntä lisätä happoa (joka voi olla orgaaninen tai epäorgaaninen) . Niinpä pidämme edullisena reaktion suorittamista käyttäen muurahaishappoa tai etikkahappoa reaktioliuottimena.

25

Reaktio suoritetaan edullisesti noin ympäristön lämpötilassa tai sen alapuolella ja siihen tarvittava aika voi vaihdella useista minuuteista useisiin tunteihin, 30 Reaktion mentyä loppuun vcoidaan saatu kaavan (X) mukainen tuote eristää ja puhdistaa tavanomaisin keinoin, esimerkiksi väkevöinnillä, uutolla orgaanisilla liuottimilla tai kromatografisilla menetelmillä.

Näin saadun, kaavan (X) mukaisen yhdisteen alkylointi kaavan (VIII) 35 mukaiseksi yhdisteeksi voidaan aikaansaada saattamalla kaavan (X) mukainen yhdiste reagoimaan alkylointlaneen kanssa, edullisesti liuottimen läsnäollessa. Liuottimen luonne ei ole kriittinen edel- 30 73440 1 lyttäen, ettei sillä ole haitallista vaikutusta reaktioon. Sopivia liuottimia ovat asetoni, tetrahydrofuraanl, dioksaani, metanoll, etanoli, kloroformi, etyyliasetaatti, dietyylieetteri ja dimetyyli-formamldi tai seos kahdesta tai useammasta näistä liuottimista.

5

Sopivia alkylointlaineita ovat dialkyylisulfaatlt (esim. dimetyyli-sulfaatti tai dietyylisulfaatti), diatsoalkaanit (esim. dlatsometaani) ja alkyylihalogenidit (esim. metyylijodidi tai etyylijodidi).

10 Reaktio aikaansaadaan edullisesti emäksen läsnäollessa, paitsi milloin diatsoalkaania (kuten diatsometaania) käytetään alkylointiaineena. Sopivia emäksiä ovat alkalimetallikarbonaatit, kuten natriumkarbonaatti tai kaliumkarbonaatti; alkalimetallihydroksidit, kuten natrium-hydroksidi tai kaliumhydrokeidi; ja typpeä sisältävät orgaaniset 15 emäkset, kuten trietyyliamiini, pyridiini tai N,N-dimetyylianiliini.

Reaktio aikaansaadaan edullisesti ympäristön lämpötilassa tai sen alapuolella ja siihen tarvitaan tavallisesti alkaa useista minuuteista useisiin tunteihin. Reaktion mentyä loppuun voidaan haluttu, 20 kaavan (VIII) mukainen yhdiste eristää ja puhdistaa tavanomaisin keinoin, esimerkiksi väkevöinnillä, uutolla orgaanisilla liuottimilla, kromatografisilla menetelmillä tai uudelleenklteytyksellä.

Kaavan (VIII) mukaisen yhdisteen reaktio tiourean kanssa halutuksi 25 kaavan (I) nukaiseksi yhdisteeksi on olennaisesti amlnotiatsolijoh-dannaisen synteesi haloketonin reaktiolla tiourean kanssa ja voidaan suorittaa paljolti samalla tavoin kuin tämäntyyppinen reaktio yleensä.

Reaktio suoritetaan tavallisesti liuottimen läsnäollessa; liuottimen 30 luonne ei ole kriittinen edellyttäen, ettei sillä ole haitallista vaikutusta reaktioon. Liuotin on edullisesti orgaaninen liuotin (kuten dlmetyyllformamldl, dlmetyyliasetamldl, metanoll, etanoli tai tetrahydofuraanl) tai veden seos yhden tai useamman kanssa näistä orgaanisista liuottimista.

35 Käytettävä tiourean määrä on edullisesti 1 ekvivalentti tai enemmän kaavan (V7.II) mukaisen yhdisteen ekvivalenttia kohti.

31 73440 1 Reaktion kiihdyttämiseksi voidaan reaktioseokseen lisätä natrium- jodidia ja reaktiossa muodostuva kloorivety voidaan neutraloida lisäämällä neutraalia fosfaattipuskuriliuosta.

5 Reaktio aikaansaadaan edullisesti ympäristön lämpötilassa ja menee tavallisesti loppuun 1-10 tunnissa.

Reaktion mentyä loppuun voidaan haluttu, kaavan (I) mukainen yhdiste eristää ja puhdistaa tavanomaisin keinoin, esimerkiksi väkevöinnillä, 10 uutolla orgaanisilla liuottimilla, kromatografisilla menetelmillä, uudelleensaostuksella tai uudelleenkiteytyksellä.

Menetelmä 5 15 Kaavan (I) mukaiset yhdisteet voidaan myös saada saattamalla reagoimaan kaavan (XI) mukainen yhdiste; N-n-C— C— H—,-r'''"3''''-!

„„ I II II I I

20 0 0 0 v—» K U \p^^CH20CH3 C (Ή ) (T X0-CH-0-C-R3 25 I, || R1 0 3 4 (jossa R ,R ja R ovat edellä määritellyt) kaavan (XII) mukaisen 30 yhdisteen kanssa; H^-O-R1 (XII) (jossa R^ on edellä määritelty) ja sitten tarvittaessa poistamalla 35 suojaus ryhmästä R^.

32 7344 0 1 Kaavan (XI) mukaiset yhdisteet ovat uusia ja ovat myös osa esilläolevaa keksintöä. Ne voidaan valmistaa saattamalla reagoimaan kaavan (XIII) mukainen yhdiste: 5

H--C— COOH

il II II I™1 s ' ^ fr * 10 4 (jossa R on edellä määritelty) tai sen reaktiivinen johdannainen 15 kaavan (III) mukaisen yhdisteen kanssa.

Edustavia esimerkkejä kaavan (XI) mukaisista uusista yhdisteistä ovat: 20 70. Pivaloyylioksimetyyli-7- ^2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-glyoksyyli- amidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 71. Pivaloyylioksimetyyli-7- C2-(2-formamidotiatsol-4-yyli)-glyok-syyliamidoJ\ -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 25 72. l-Etoksikarbonyylioksietyyli-7- [_2-(2-aminotiatsol-4-yyli)glyok-syyliamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 73. l-Etoksikarbonyylioksietyyli-7- ][2-(2-formamidotitatsol-4-yyli) 30 glyoksyyliamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti

Reaktiossa kaavan (XI) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi voidaan kaavan (XIII) mukaista yhdistettä käyttää joko vapaana happona tai sen reaktiivisena johdannaisena. Käytettäessä vapaata happoa reaktio 35 aikaansaadaan edullisesti kondensolntlalneen läsnäollessa; tällainen aine on esimerkiksi disubstituoitu karbodi-imidi, kuten Ν,Ν'-disyklo-heksyylikarbodi-imidi; imidatsolidi, kuten Ν,Ν'-karbonyyli-imidatsoli n 33 73440 1 tai tionyylidi-imidatsoli; N-etoksikarbonyyli-2-etoksi-l,2-dihydrokino-llinl; tai dimetyyliformamidista ja fosforioksikloridista tai tionyyli-kloridista valmistettu Vilsmeier-reagenssi.

5 Toisaalta, kun käytetään hapon (ΧΧΪΪ) reaktiivista johdannaista, el ole tarpeen käyttää kondensointlainetta, mutta reaktiivisen johdannaisen luonteesta riippuen voi olla edullista aikaansaada reaktio emäksen läsnäollessa. Sopivia emäksiä ovat alkalimetalliyhdisteet, kuten natriumbikarbonaatti, kaliumbikarbonaatti, natriumkarbonaatti tai kalium-10 karbonaatti; ja alifaattiset, aromaattiset tai typpi-heterosykliset emäkset, kuten trietyyliamiini, Ν,Ν-dimetyylianiliini, N-metyyliplperi-diini, N-metyylipyrrolidiini, pyridiini, kollidiini tai lutidiini.

Hapon (XIII) reaktiivisia johdannaisia ovat happohalogenidit, happo-15 anhydridi, hapon seka-anhydridit, aktiiviset esterit, aktiiviset amidit ja happoatsidi. Esimerkkejä sopivista seka-anhydrideistä ovat anhydridit hiilihapon monoestereiden (esimerkiksi monometyylikarbo-naatin tai monoisobutyylikarbonaatin), alempien alkaanihappojen ja alempien haloalkaanihappojen (kuten pivaalihapon tai trikloorietikka-20 hapon) kanssa. Sopivia aktiivisia estereitä ovat esimerkiksi p-nltrofe-nyyliesteri, pentakloorifenyyliesteri, N-hydroksiftalimidiesteri ja N-hydroksibentsotriatsoliesteri.

Reaktio aikaansaadaan edullisesti liuottimen läsnäollessa; liuottimen 25 luonne el ole kriittinen edellyttäen, ettei sillä ole haitallista vaikutusta reaktioon. Sopivia liuottimia ovat asetoni, metyylietyyli-ketoni, tetrahydrofuraanl, dloksaani, etyyliasetaatti, kloroformi, metyleenikloridi, dimetyyliformamidi, asetonitriili ja dimetyyli-sulfoksidi ja näiden liuottimien seokset veden kanssa.

30

Reaktiolämpötlialla ei ole erityisiä rajoituksia ja niinpä reaktio suoritetaan edullisesti ympäristön lämpötilassa tai jäähdyttäen.

Reaktioon tarvittava aika vaihtelee, riippuen pääasiallisesti asy-35 lointimenetelmän luonteesta ja reaktiolämpötllasta, mutta aika on tavallisesti 10 minuutista useisiin kymmeniin tunteihin.

34 73440 1 Reaktion mentyä loppuun voidaan kaavan (XI) mukainen yhdiste ottaa talteen reaktioseokseeta tavanomaisin keinoin ja voidaan sitten haluttaessa puhdistaa tavanomaisin menetelmin kuten kromatografiällä.

5 Kaavojen (XI) ja (XII) mukaisten yhdisteiden reaktio suoritetaan tavallisesti liuottioessa, jonka luonne ei ole kriittinen edellyttäen, ettei sillä ole haitallista vaikutusta reaktioon. Sopivia liuottimia ovat dimetyyliformamidi, dimetyyliasetamidi, asetonitriili ja erilaiset alkoholit, samoin kuin näiden liuottimien seokset veden kanssa.

10

Kaavan (XII) mukaista alkoksiamilnia käytetään edullisesti suolanaan epäorgaanisen hapon (kuten kloorivetyhapon, typpihapon tai rikkihapon) tai orgaanisen hapon (kuten etikkahapon tai bentsoehapon) kanssa.

15 Reaktiolämpötila ei ole kriittinen, mutta pidämme tavallisesti edullisena reaktion suorittamista lämpötilassa ympäristön lämpötilasta 60°C:een. Reaktioon tarvittava aika voi vaihdella reaktio-olosuhteista riippuen, mutta on yleensä 10 minuutista useisiin tunteihin.

20 Reaktion mentyä loppuun voidaan haluttu, kaavan (I) mukainen yhdiste ottaa talteen reaktioseokseeta tavanomaisin keinoin, esimerkiksi lisäämällä vettä ja veteen sekoittamatonta liuotinta (kuten etyyliasetaattia) reaktioseokseen, erottamalla orgaaninen kerros lievästi emäksisissä olosuhteissa vesikerroksesta ja poistamalla sitten tls- 25 laamalla orgaaninen liuotin tästä orgaanisesta kerroksesta halutun yhdisteen saamiseksi.

Lf

Kun ryhmä R tällä menetelmällä saadussa yhdisteessä on suojattu aminoryhmä, sen suojaus voidaan poistaa menetelmän 1 yhteydessä selos- 30 tettuja menettelytapoja käyttäen.

Haluttu kaavan (I) mukainen yhdiste voidaan tarvittaessa puhdistaa tavanomaisin keinoin kuten uudelleenkiteytyksellä ja/tai kromatografisilla menetelmillä.

35

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä ja niiden happoaddltlosuoloja voidaan hyödyllisesti käyttää suun kautta annettavissa antibakteerisissa li 35 73440 1 koostumuksissa. Jotta yhdistettä voitaisiin käyttää tähän tarkoitukseen,on oleellista, kuten edellä on mainittu, että se imeytyy hyvin ruoansulatuskanavasta suun kautta annettuna. Hyvää imeytymistä ruoansulatuskanavasta osoittaa yhdisteen tai sen hajoamistuotteiden 5 hyvä erittyminen virtsan mukana suun kautta tapahtuneen lääkkeeksi antamisen jälkeen.

Tunnetun yhdisteen (g) erittyminen virtsassa on 66,7%, mikä on hyvin verrattavissa esilläolevan keksinnön mukaisia yhdisteitä edustavien 10 yhdisteiden 5 ja 6 erittymisiin 75,9% ja 78%. Nämä luvut ovat aivan tyydyttäviä suun kautta tapahtuvaa antoa silmälläpitäen.

Tämän hyvän imeytymisen ruoansulatuskanavasta lisäksi on kuitenkin toivottavaa, että tunnetun yhdisteen (g) ja keksinnön mukaisten 15 yhdisteiden kaltaiset yhdisteet olisivat hydrolysoiduttuaan in vivo hyvin aktiivisia gram-positiivisa Ja gram-negatiivisia bakteereita vastaan. Keksinnön mukaiset yhdisteet, kuten myös yhdiste (g), hydrolysoituvat in vivo vastaaviksi karboksyylihapoiksi Ja täten näiden karbokeyylihappojen, pikemminkin kuin esterelden, antlbakteerlset 20 tehot ovat kliiniseltä kannalta tärkeät. Yhdisteitä 5 ja 6 sekä yhdistettä (g) vastaavien karbokeyylihappojen tehot erilaisia bakteereita vastaan on esitetty seuraavassa taulukossa plenimplnä estävinä väkevyyksinä (MIC), yksikkönä pg/ml.

25 30 35 36 73440 1 Taulukko 5 yhdiste 5 yhdiste 6 yhdiste (g) j ----- ---- " “ ' " 1 1 i jStaphylococcus aureus 209P 0.4 0.2 12.5 10 Staphylococcus aureus 56 0.8 0.4 25

j I

15 Escherichia coll ! NIHJ 0.4 0.8 0.8 i

Escherichia coll 609 0.4 0.8 0.8

Shigella flexnerl j 20 2a 0.8 0.4 j 0.8 f

Klebsiella pneumoniae > 806 0.1 j 0.2 0.2

Klebsiella sp. 846 0.8 0.8 1.5

Proteus vulgaris 0.01 0.01 < 0.1 25 Salmonella enterlti- dis G. 0.2 0.4 0.4 ---:-( 30

Edellisen taulukon perusteella on selvää, että keksinnön mukaiset yhdisteet ja tunnettu yhdiste ovat kalkki suun kautta annettuina hyvin tehokkaita gram-negatiivlsia bakteereita vastaan. Yhdisteet 35 5 ja 6 ovat kuitenkin tehokkaita gram-positiivisia bakteereita edus tavaa Staphylococcus aureus'ta vastaan, kun taas yhdisteellä (g) on varsin heikko teho näitä bakteereita vastaan.

11 37 73440 1 Keksinnön mukaiset yhdisteet annetaan lääkkeeksi edullisesti suun kautta, esimerkiksi kapseleina, tabletteina, jauheina, siirappeina tai suspensioina. Annostus riippuu potilaan iästä, oireista ja painosta sekä käsittelyn kestosta, mutta annostus voi tavallisesti 5 vaihdella 0,2g - 5g vuorokaudessa, edullisesti 0,5g - 3g vuorokaudessa aikuisille; tarvittaessa voidaan kuitenkin käyttää suurempia annoksia.

Esilläolevan keksinnön mukaisissa farmaseuttisissa koostumuksissa 10 voidaan käyttää mitä tahansa tavanomaista, farmaseuttisesti hyväksyttävää kantoalnetta tai laimenninta sekoitettuna aktiiviseen yhdisteeseen tai yhdisteisiin. Koska koostumus on yleisesti tarkoitettu suun kautta annettavaksi, on toivottavaa tarjota se muodossa, joka helposti imeytyy vatsalaukusta tai suolistosta. Tabletit tai 15 kapselit ovat tavallisesti yksikköannoksia ja voivat sisältää sideaineita (esim. siirappia, arablkumia, liivatetta, sorbitolia, traga-kanttikumia tai polyvinyylipyrrolidonia), laimentimia (esim. laktoosia, sokeria, maissitärkkelystä, kalsiumfosfaattia, sorbitolia tai glysiiniä), voiteluaineita (esim. magnesiumstearaattla, talkkia, polyetyleeni-20 glykolia tai piidioksidia), hajolttavia aineita (esim. perunatärkkelystä) tai kostutusalneita (esim. natriumlauryyllsulfaattla) tai näiden yhdistelmää. Tabletit voidaan, kuten on tunnettua, haluttaessa päällystää esim. suolistolluokolsella päällysteellä.

25 Nestemäiset koostumukset voivat olla vesi- tai öljysuspensioita, siirappeja, eliksiirejä tai vastaavia koostumuksia. Vaihtoehtoisesti voi koostumus olla kuivattu tuote, joka voidaan liuottaa uudelleen veteen tai muuhun sopivaan väliaineeseen ennen antoa. Tällaiset nestemäiset koostumukset voivat sisältää tavanomaisia lisäaineita, kuten suspen-30 dointiaineita (esim. sorbitolisiirappia, metyyliselluloosaa, glukoosi/ sokerisiirappla, liivatetta, hydroksietyyliselluloosaa, karboksiraetyy-llselluloosaa, alumiinistearaattihyytelöä tai kovetettua ravintorasvaa), emulgointiaineita (esim. lesitiiniä, sorbitolimono-oleaattia tai arablkumia), muita väliaineita kuin vettä (esim. manteliöljyä, 35 fraktioitua kookosöljyä, öljymäieiä estereitä, propyleeniglykolia tai etyylialkoholia) tai yhdistelmää näistä kahdesta tai useammasta.

38 73440 1 Kun keksinnön mukainen koostumus koostetaan yksikköannokeena, se sisältää edullisesti 50-500 mg keksinnön mukaista yhdistettä tai yhdisteitä yksikköannosta kohti.

5 Esilläolevan keksinnön mukaisten yhdisteiden valmistusta valaistaan edelleen seuraavilla esimerkeillä ja tiettyjen välituotteiden valmistusta valaistaan seuraavilla valmistuksilla. Keksinnön mukaisilla yhdisteillä on kaikilla syn-konfiguraatio.

10 Valmistus 1

Pivaloyylioksimetyyli-3-metoksimetyyli-7-fenoksiasetamido-3-kefem- 4-karboksylaatti 15 1 g natrium-3-metoksimetyyli-7-fenoksiasetamido-3-kefem-4-karboksy- laattia liuotettiin 50 ml:aan dimetyylisulfoksidia ja tähän lisättiin 975 mg pivaloyylioksimetyylibromidia, minkä jälkeen seosta hämennettiin huoneen lämpötilassa 15 minuuttia. Seos laimennettiin sitten 200 ml:11a etyyliasetaattia, pestiin peräjälkeen 50 ml:11a kyllästettyä natrium- 20 blkarbonaatln vesiliuosta ja 50 ml:11a kyllästettyä kaliumblsulfaa-tin vesiliuosta ja kuivattiin sitten vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Kuivausaine poistettiin suodattamalla, suodos väkevöitiin alennetussa paineessa ja saatu jäännös kromatografoitiin 100 g:lla pii-geellä, joka eluoitiin heksaanln ja etyyliasetaatin seoksella 1:1 25 (tilavuusosia), jolloin saatiin 750 mg haluttua pivaloyylioksimetyyli- 3-metoksimetyyli-7-fenoksiasetamido-3-kefem-4-karboksylaattia.

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 30 1,25 (9H, singlettl, t-butyyli); 3,35 (3H, singletti 0CH3); 3,54 (2H, singletti, 2-kefem H^); 4,29 (2H, singletti, metoksimetyylin CH^); 4,58 (2H, singletti, fenoksiaeetamldon C^); 35 5,01 (1H, dupletti, J - 5 Hz, 6-kefem H); 5.6- 6,1 (3H, multipletti, 7-kefem H ja pivaloyylioksimetyylin C^); 6.7- 7,6 (6H, multipletti, C H ja NH).

6 5 li 39 73440 1 Valmistus 2

Plvaloyylloksimetyyli-7-amlno-3-metoksImetyyli-3-kefem-4-karboksy-5 laattl-p-tolueenlsulfonaattl 488 mg fosforipentakloridia liuotettiin 5 ml:aan kuivaa metyleeni-kloridia ja sitten liuokseen lisättiin 120 mg fosforloksiklorldia.

10 Seosta huoneen lämpötilassa hämmentäen lisättiin 247 mg pyridllnä.

Seos jäähdytettiin sitten -10°C:een ja siihen lisättiin 769 mg pivaloyylioksimetyyli-3-metoksimetyyli-7-fenoksiasetamido-3-kefem-4-karboksylaattia. Seoksen annettiin sitten asteittain lämmetä huoneen lämpötilaan. Kun seosta oli hämmennetty 2 tuntia, se jäähdytettiin 15 uudelleen 0°C:een ja lisättiin 1,5 ml propanolia ja seosta hämmennettiin taas 30 minuuttia. Pieni määrä vettä lisättiin seokseen, jota sitten hämmennettiin edelleen 15 minuuttia. Seos laimennettiin 50 ml:11a etyyliasetaattia ja pestiin kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella. Etyyliasetaattikerros erotettiin ja kuivattiin vedettö-20 mällä magnesiumsulfaatilla. Kulvausaine poistettiin suodattamalla ja suodos väkevöltlin haihduttamalla alennetussa paineessa. Jäännök-seen lisättiin dl-isopropyylleetteriä ja astian seinämää raavittiin.

’ Saatu saostuma koottiin suodattamalla ja kuivattiin, jolloin saatiin : 443 mg haluttua pivaloyylioksimetyyli-7-amlno-3-metoksimetyyli-3- : 25 kefem-4-karboksylaattia.

Tämä yhdiste liuotettiin 5 ml:aan etyyliasetaattia ja sitten liuokseen lisättiin ekvlmolaarinen määrä p-tolueenleulfonihapon monohyd-raattla 5 ml:sea etyyliasetaattia. Saadun seoksen annettiin seistä 30 ympäristön lämpötilassa 3 tuntia, jolloin saatiin 523 mg otsikon yhdistettä, joka suli 160-170°C:s8a (hajoten, uudelleenkiteytetty * metyleenlklorldlsta ja etyyliasetaatista), neuloina.

Alkuaineanalyysi: 35 laskettu C^H^N^S ’ C^HgO^lle 40 73440 1 C 49,80%; H 5,70%; N 5,28%; S 12,08% löydetty C 49,76%; H 5,60%; N 5,00%; S 12,06% 5

Valmistus 3

Bentshydryyli-7- E2-(2-klooriasetamidotiat8ol-4-yyll)-2-metoksi-10 iminoasetamido3 -3-metok8imetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 0,057 ml:aan dimetyyliformamidia lisättiin 0,061 ml fosforioksikloridia, jäillä jäähdytettäen ja sekoittaen. Seosta hämennettiin sitten 40°C:ssa 15 1 tunti ja atseotrooppitislattiin kaksi kertaa kuivalla metyleeniklori- dilla. 1 ml etyyliasetaattia lisättiin näin saatuun seokseen, jota sitten hämmennettiin voimakkaasti huoneen lämpötilassa samalla kun lisättiin 200 mg 2-(2-klooriasetaraidotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-imino-etikkahappoa. Hämmentämistä jatkettiin vielä 30 minuuttia, jolloin saa-20 tiin seos (a).

Tällä välin liuotettiin 200 mg bentshydryyli-7-amino-3-metoksi-metyyli-3-kefem-4-karboksylaattia ja 145 mg N,N-dietyylianiliinia 5 ml:aan metyleenikloridia ja seosta hämennettiin -5°C:ssa, jolloin 25 saatiin seos (b).

Seos (a) lisättiin sitten tipoittaln seokseen (b) ja niitä hämmennettiin yhdessä 15 minuuttia, minkä jälkeen saatu reaktio-seos väkevöitiin alennetussa paineessa haihduttamalla. 20 ml etyyli-30 asetaattia ja 5 ml vettä lisättiin jäännökseen ja etyyliasetaatti-kerros erotettiin. Tämä kerros pestiin peräjälkeen 5 ml:11a kyllästettyä natriumkarbonaatin vesiliuosta, 5 ml:11a kloorivedyn 5 paino-% vesiliuosta ja lopuksi 5 ml:11a kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta, minkä jälkeen liuos kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaa-35 tiliä. Kuivausaine poistettiin suodattamalla ja suodos väkevöitiin haihduttamalla alennetussa paineessa. Saatu jäännös kromatogra- 73440 1 foltiin käyttäen 30 g pligeeliä (Kleselgel 60) ja eluolden heksaa-nin ja etyyliasetaatin seoksella 3:2 (tilavuusosia), Jolloin saatiin 213 mg haluttua bentehydryyli-7- ^-(Z-klooriasetamidotiatsol-A-yyli)- 2-metoksi-iminoasetamldoJ -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia.

5 NMR-spektri (CDCl^) £ ppm: 3.19 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 3,51 (2H, singletti, 2-kefemH2>; JO 4,09 (3H, singletti, metoksi-iminon OCH^); 4.20 (2H, singletti, metoksimetyylin C^); 4,22 (2H, singletti, klooriasetamidon CH^); 5,02 (1H, dupletti, J * 5,0 Hz, 6-kefem H); 5,86 (1H, kaksoisdupletti, J * 5,0 Hz ja 9,0 Hz; 15 7-kefem H); 6,7-7,6 (12H, multipletti).

Valmistus 4 20 7- [2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metok8i-lminoasetamldoJ -3-metoksime- tyyli-3-kefem-4-karboksyylihapon trifluoriasetaatti 200 mg bentshydryyli-7- ^2-(2~klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamido3 -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaettia 25 ja sen jälkeen 45 mg tioureaa liuotettiin 5 mitään dimetyyliasetarai-dla. Liuosta pidettiin huoneen lämpötilassa 2 tuntia, minkä jälkeen lisättiin kyllästetty natriumbikarbonaatin vesiliuos. Reaktioseok-sesta uutettiin sitten 20 mltila etyyliasetaattia ja uute pestiin vedellä ylimääräisen tiourean poistamiseksi ja kuivattiin sitten 30 vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Sen jäkeen kun kulvausalne oli poistettu suodattamalla, suodos väkevöitiin haihduttamalla alennetussa paineessa. Mäin saatu jäännös kromagorafoltlin käyttäen 30 g pll-geellä (Wacogel C-100) ja eluolden etyyliasetaatilla, jolloin saatiin 63 mg bentshydryyli-7- £2-(2-aminotiatsol-4~yyli)-2-metoksi-imino-35 asetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia.

“ 73440 1 Tämä tuote kokonaisuudessa!! liuotettiin 2 ml:aan anisolia ja liuokseen lisättiin 1 ml trifluorietikkahappoa, jäillä jäähdyttäen ja sekoittaen. Seosta pidettiin sitten huoneen lämpötilassa 30 minuuttia, minkä jälkeen se väkevöitiin haihduttamalla alennetussa paineessa ja 5 jäännökseen lisättiin di-isopropyylieetteriä. Syntynyt saostuma koottiin suodattamalla ja kuivattiin, jolloin saatiin 27 mg 7- jj2— (2— aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamido f -3-metoksimetyvli-3-kefem-4-karboksyylihapon trifluoriasetaattia.

10 NMR-spektri (deuteroasetoni/D^O) <1 ppm: 3.29 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 3,57 (2H, singletti, 2-kefem H2); 3.96 (3H, singletti, metoksi-iminon OCH^); 15 4,27 (2H, singletti, metoksimetyylin Cä^) ; 5,15 (1H, dupletti, J = 5,0 Hz, 6-kefem H).; 5.97 (1H, dupletti, J * 5,0 Hz, 7-kefem H); 6,59 (1H, singletti).

20 Valmistus 5 7- [2-(2-klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2-metoksl-lminoasetamido-3 -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksyylihappo 25 Seoksen, jossa oli 7,65g bentshydryyli-7- £.2-(2-klooriasetamido- tiätsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoa.setamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem- 4-karboksylaattia, 25 ml metyleeniklorida, 5 ml anisolia ja 20 ml trikloorietikkahappoa, annettiin reagoida huoneen lämpötilassa 30 minuutin ajan. Tämän ajan lopussa lisättiin reaktioseokseen 300 ml 30 di-isopropyylieetteriä ja syntynyt saostuma koottiin suodattamalla, jolloin saatiin 5,95g, 7- [^2-(2-klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2- metoksi-iminoasetamido^ -3-metoksimetyyli-3-ke£em-4-karboksyyli-happoa.

35 NMR-spektri (deuteroasetoni/deuterodimetyylisulfoksidi) £ppm: 3.30 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 43 73440 1 3,60 (2H, singlettl, 2-kefem H^); 3,97 (3H, singlettl, metoksi-iminon OCH^); A,25 (2H, singlettl, metokslmetyylln Ct^); A,37 (2H, singlettl, klooriasetamldon CH2); 5 5,20 (1H, dupletti, 6-kefem H); 5.90 (1H, kaksolsduplettl, J 5,0 Hz ja 9,0 Hz, 7-kefem H); 7,AO (1H, singlettl, 5-tlatsoli H); 9,50 (1H, dupletti, J * 9 Hz, 7-kefem NH).

10

Valmistus 6 7- C2-(2-aminotlatsol-A-yyli)-2-etoksl-lmlnoasetamldo^ -3-metoksl-metyyli-3-kefem-A-karbokByylihapon trifluorlasetaattl 15

Valmistuksen 3 mukaista menetelmää noudattaen 225 mg 2-(2-kloorl-asetamidotlatsol-A-yyli)-2-etoksi-imlnoetikkahappoa ja 200 mg bentshydryyli-7-amino-3-metoksimetyyli-3-kefem-A-karbok8ylaattia saatettiin reagoimaan ja saatiin 280 mg bentshydryyll-7- C2—(2— 20 klooriaeetamidotiatsol-A-yyli)-2-etoksi-iminoasetamido3 -3-metoksl-metyyli-3-kefem-A-karboksylaattia keltaisena jauheena.

NMR-spektri (CDCl^) 6ppm: 25 1,28 (3H, tripletti, OCHjCH^; 3,17 (3H, singlettl, OCH^); : 3,50 (2H, leveä singlettl, 2-kefem ; A,07 (2H, singlettl, metokslmetyylln CH2); A,0-A,5 (AH, multipletti, OCH^CH^ ja klooriasetamldon CH2>; 30 5,07 ( 1H, dupletti, J 5 Hz, 6-kefem H); 5,93 (1H, kaksolsduplettl, J 5 Ja 9 Hz, 7-kefem H); 6.90 (1H, singlettl, 5-tiatsoli H); : 7,06 (1H, singlettl, bentshydryylln CH); 35 7,31 [lOH, singlettl, (C^)^ ; 8,10 (1H, dupletti, J - 9 Hz, 7-kefem NH).

44 73440 1 191 mg tätä bentshydryyli-7- /2-(2-klooriasetamidotiatsol-4-yyli) 2- etoksi-iminoasetamld<T] -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karbok8ylaattia käsiteltiin sitten 40 mg:11a tloureaa, kuten on selitetty valmistuksessa 4, jolloin saatiin 117 mg bentshydryyli-7- Γ2-(2-βιη1ηο- 5 tiatsol-4-yyli)-2-etoksi-iminoaeetamidoJ -3-metoksimetyyli-3-kefem- 4-karboksylaattia vaalenapunaleena jauheena, jota käsiteltiin sitten 1,5 ml:11a trifluorietikkahappoa anisolin ja metyleenikloridin seoksessa. Lisättäessä seokseen di-isopropyylieetteriä saatiin saostuma ja tämä koottiin suodattamalla, jolloin saatiin 90 mg 7- [_2-(2-10 aminotiatsol-4-yyli)-2-etoksi-iminoasetamido]J -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksyylihapon trifluoriasetaattia.

NMR-spektri (deuterodimetyylisulfoksidi) <$ppm: 15 1,27 (3H, tripletti, J - 7 Hz, OCH2CH3); 3,23 (3H, singletti, OCH^); 3,53 (2H, singletti, 2-kefemH2>; 4,16 (2H, kvartetti, J - 7 Hz, OCH2CH3); 4,20 (2H, singletti, metokslmetyylin CH2>; 20 5,15 (1H, duplettl, J 5 Hz, 6-kefem H); 5,78 (1H, kaksoisdupletti, J - 5 ja 9 Hz, 7-kefem H); 6,80 (1H, singletti, 5-tiatsoli H); 9,70 (1H, dupletti, J ** 9 Hz, 7-kefem NH); 25 8,5-10,0 (4H, leveä multipletti, NH2 ja kaksi COOH).

Valmistus 7 t-Butyyli-3-okso-4-p-tolueenlsulfonyyllokslbutyraatti 30 50 ml:aan kuivaa asetonltrilliä lisättiin 7,lg t-butyyli-4-bromi- 3- oksobutyraattia Ja 9,45g hopea-p-tolueenlsulfonaattia ja seosta hämmennettiin 3 päivää huoneen lämpötilassa, valolta suojattuna. Sitten reaktloseos suodatettiin ja suodos väkevöitiin haihdutta- 35 maila in vacuo.

Saadut kiteet, joissa oli öljymäistä ainetta, liuotettiin etyyliasetaattiin ja liukenematon aines poistettiin suodattamalla. Suodos

II

45 73440 1 vMkevöitiin haihduttamalla in vacuo, jolloin saatiin ruskea öljy-mäinen aine, joka puhdistettiin kolonnikromatografiällä käyttäen piigeeliä ja eluoiden sykloheksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 4:1 (tilavuusosia). Näin saatu väritön öljymäinen aine uudelleen-5 kiteytettiin dietyylieetterin ja heksaanin seoksesta 1:2 (tila-vv.usosia) , jolloin saatiin 4,5g t-butyyli-3-okso-4-p-tolueenisul-fonyylioksibutyraattia värittöminä prismoina, jotka sulivat 67-69°C:ssa.

10 NMR-spektri (CDCl^) £ ppm: 1.43 (9H, singletti, t-butyyli); 2.43 (3H, singletti, tolueenin CH^); 3.43 (2H, singletti, -C^COO-); 15 4,60 (2H, singletti, -S020CH2-); 7,20-7,90 (4H, (¾).

Alkuaineanalyysi; 20 laskettu e, 5H,,00, S: lie II o C 54,92%; H 6,15%; S 9,78% löydetty C 55,03%; H 6,07%; S 9,86% 25

Valmistus 8 t-Butyyli-2-hydroksi-imino-3-ok8Q-4-p-tolueenisulfonyylioksibuty- raatti 30 4,5g t-butyyli-3-okso-4-p-tolueenisulfonyylioksibutyraattia liuotettiin 40 ml:aan etikkahappoa ja sitten liuokseen lisättiin l,42g natriumnitriittiä huoneen lämpötilassa, 10 minuutin aikana. Seosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa 50 minuuttia, minkä jälkeen lisät-35 tiin 200 ml etyyliasetaattia ja sitten seos pestiin natriumkloridin vesiliuoksella. Etyyliasetaattiliuos kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja sen jälkeen kun kuivausaine oli poistettu suodattamalla, 46 734 4 0 1 suodos väkevöitiin haihduttamalla alennetussa paineessa, jolloin saatiin ruskea öljymäinen aine. Tämä öljymäinen aine puhdistettiin kolonnikromatografiällä piigeelin läpi, eluoiden sykloheksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 4:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 5 l»66g t-butyyli-2-hydroksi-imino-3-okso-4-p-tolueenisulfonyyli- oksibutyraattia värittöminä kiteinä, jotka sulivat 106-108°C:ssa (hajoten, kiteytetty dietyylieetterin ja petroolieetterin seoksesta 1:1, tilavuusosia).

10 NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 1,52 (9H, singletti, t-butyy.1i); 2,43 (3H, singletti, tolueenin CH^); 5,04 (2H, singletti, -SO^Cl^CO-); 15 7,20-7,92 (4H, C,H.);

O H

10,23 (1H, singletti, hydroksi-iminon OH).

Alkuaineanalyysi: 20 laskettu C^5H^9NO^S:lie C 50,48%; H 5,36%; N 3,92%; S 8,98% löydetty C 50,62%; H 5,08%; N 3,83%; S 9,97% 25

Valmistus 9 t-Butyyli-2-metoksi-imino-3-okso-4-p-tolueenisulfonyylioksi- butyraatti 30 Jäillä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli l,66g t-butyyli-2-hydroksi-imino-3-okso-4-p-tolueenisulfonyylioksibutyraattia 20 ml:ssa kuivaa asetonia, lisättiin 960 mg vedetöntä kaliumkarbonaattia ja 0,466 ml dimetyylisulfaattia ja sitten seosta hämmennettiin huo-35 neen lämpötilassa 3 tuntia. Seos kaadettiin sitten jääveteen ja uutettiin metyleenikloridilla. Uute pestiin natriumkloridin vesi-liuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja väkevöitiin haihdutte- 47 73440 1 maila alennetussa paineessa ruskeaksi öljymäiseksi aineeksi. Tämä puhdistettiin kolonnikromatografiällä piigeelin läpi, eluoideu syklo-heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 4:1 (ttlavuusosia), jolloin saatiin 650 mg t-butyyli-2-(syn)-metoksi-imino-3-okso-4-p-tolu-5 eenisulfonyylioksibutyraattia vaalean keltaisena öljynä.

NMR-spektri (CDCl^) £ppm: 1,50 (9H, singletti, t-butyyli); 10 2,43 (3H, singletti, tolueenin CH^); 4,07 (3H, singletti, 0CH3>; 5,05 (2H, singletti, -S020CH2C0-); 7,20-7,90 (4H, C^).

15 Valmistus 10 2-Metoksi-imino-3-okso-4-p-tolueenisulfonyylioksivoihappo

Liuokseen, jossa oli 478 mg t-butyyli-2-(syn)-metoksi-imino-3-20 okso-4-p-tolueenisulfonyylioksibutyraattia 1 ml:ssa metyleenikloridia, lisättiin 2 ml trifluorietikkahappoa ja seosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa 4 tunnin ajan. Metyleenikloridi ja ylimääräinen tri-fluorietikkahappo poistettiin sitten tislaamalla in vacuo, jolloin jäi ruskea öljymäinen aine, joka liuotettiin di-isopropyylieetteriin 25 ja annettiin seistä, jolloin saatiin 178 mg 2-(syn)-metoksi-imino-3-okso-4-p-tolueenisulfonyylioksivoihappoa värittöminä keteinä, jotka sulivat 131-132°C:ssa (hajoten).

Alkuaineanalyysi: 30 laskettu C^H^NO^:lie C 45,72%; H 3,84%; N 4,45%; S 10,18% löydetty 35 c 45,50%; H 3,92%; N 4,32%; S 9,98% NMR-spektri (deuteroasetoni) S ppm: 48 7 3 4 4 0 1 2,47 (3H, singletti, tolueenin CH^); 4,10 (3H, singletti, OCH3); 5,20 (2H, singletti, -S020CH2C0-); 7,25-7,95 (4H, C^); 5 9,80 (1H, leveä singletti, COOH).

Valmistus 11

Pivaloyylioksimetyyli-7-(2-metoksi-imino-3-okso-4-p-tolueenisuI-10 fonyylioksibutyryyliamino)-3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksy3aatti

Suspensioon, jossa oli 464 mg 2-(syn)-metoksi-imino-3-okso-4-p-tolueenisulfonyylioksivoihappoa 20 ml:ssa metyleenikloridia, jäähdytettynä -5°C:een, lisättiin 0,204 ml trietyyliamiinia ja seosta häm-15 mennettiin 5 minuutin ajan täydelliseksi liuottamiseksi. Näin saatuun liuokseen lisättiin 0,17 ml oksalyylikloridia ja tippa dimetyyli-formamidia ja seosta hämmennettiin -5°C:ssa 20 minuutin ajan. Poistettaessa liuotin jäi 2-(syn)-metoksi-imino-3-okso-4-p-tolueenisulfonyyli-oksibutyryylikloridi. Tämä liuotettiin 10 mlraan metyleeniklorida 20 ja sitten lisättiin 0,394 ml Ν,Ν-dietyylianiliinia ja sen jälkeen metyleenikloridiliuos, -5°C:ssa, liuokseen, jossa oli 530 mg pivalo-yylioksimetyyli“7-amino-3-metoksimetyyli-3-kefern-4-karboksylaatin p-tolueenisulfonaattia 20 ml:ssa metyleenikloridia. Tätä seosta hämmennettiin -5°C:ssa 5 minuutin ajan, minkä jälkeen liuotin poistet-25 tiin tislaamalla. Saatu jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin ja pestiin laimealla kloorivetyhapon vesiliuoksella. Etyyliasetaatti-kerros erotettiin ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Kuivausaineen poistamisen suodattamalla jälkeen suodos väkevöitiin haihduttamalla alennetussa paineessa ruskeaksi öljymäiseksi aineeksi. Tämä puhdis-30 tettiin kolonnikromatografiällä piigeelin läpi, eluoiden sykloheksaa-nin ja etyyliasetaatin seoksella 4:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 51 mg pivaloyylioksimetyyli-7 £2-(syn)-metoksi-imino-3-okso-4-p-tolu-eenisulfonyylioksibutyryyliaminoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia värittömänä, vaahtomaisena aineena.

35 NMR-spektri (CDCl^) Sppm: 49 7 3440 1 1,22 (9H, singletti, t-butyyll); 2,A3 (3H, singletti, tolueenin CH^); 3.30 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 3,51 (2H, singletti, 2-kefem H^); 5 4,10 (3H, singletti, metoksi-iminon OCH^); 4,27 (2H, singletti, metoksimetyylin CH^); 4,97 (1H, dupletti, J = 5 Hz, 6-kefem H); 5,07 (2H, singletti, -S020CH.,C0-) ; 5,53-5,97 (3H, multipletti, 7-kefem H ja 10 pivaloyylioksimetyylin -0CH2~); 7,20-7,93 (5H, multipletti, 7-kefem NH ja C,H,).

o 4

Valmistus 12 15 Valmistuksessa 7 selostettua menettelytapaa noudattaen valmistettiin seuraavat yhdisteet: t-Butyyli-4-metaanisulfonyylioksi-3-oksobutyraatti vaaleana keltaisena öljynä.

20 NMR-spektri (CDCl^) £ ppm: 1,47 (9H, singletti, t-bytyyli); 3,14 (3H, singletti, CH3S02); 25 3,45 (2H, singletti, -C0CH2C0-); 4.87 (2H, singletti, -S020CH2C0-).

t-Butyyli-4-etaanisulfonyylioksi-3-oksobutyraatti, keltainen öljy.

30 NMR-spektri (CDCl^) ζ ppm: 1,32-1,62 (9H + 3H, singletti + tripletti, t-butyyli + CH3CH2S02); 3.30 (2H, kvartetti, J - 7,0 Hz, CH3CH2S02); 35 3,47 (2H, singletti, -C0CH2C0-); 4.87 (2H, singletti, -S020CH2C0-).

t-Butyyli-4-bentseenisulfonyylioksi-3-oksobutyraatti, värittömiä 50 73440 1 neulasia, jotka sulavat 94-96°C:ssa.

NMR-spektri (CDCl^) £ppm: 5 1,43 (9H, slngletti, t-butyyli); 3,43 (2H, slngletti, -COCH^O-); 4,63 (2H, slngletti, -S020CH2C0-); 7,40-8,03 (5H, multipletti, C^H^).

10 Valmistus 13

Valmituksessa 8 selostettua menettelytapaa noudattaen valmistettiin seuraavat yhdisteet: 15 t-Butyyli-2-hydroksi-imino-4-metaanisulfonyylioksi-3-oksobutyraatti, valkoisia kiteitä, jotka sulavat 103-104°C:ssa (hajoten).

NMR-spektri (CDCl^/deuteroasetoni) S ppm: I, 57 (9H, singletti, t-butyyli); 20 3,20 (3H, singletti, metaanisulfonyylin CH^); 5.23 (2H, singletti, -S020CH2C0-); II, 93 (1H, singletti, hydroksi-iminon OH).

t-Butyyli-4-etaanisulfonyylioksi-2-hydroksi-imino-3-oksobutyraatti 25 värittömiä kiteitä, jotka sulavat 85-87°C:ssa (hajoten).

NMR-spektri (CDCl^) 8 ppm: 1,47 (3H, tripletti, J = 7,0 Hz, CH-CH„S0„);

3 z Z

30 1.57 (9H, slngletti, t-butyyli); 3,33 (2H, kvartetti, J « 7,0 Hz, CH3CH2S02); 5.23 (2H, singletti, -S020CH2C0-); 10,50 (1H, singletti, hydroksi-iminon OH).

35 t-Butyyli-4-bentseenisulfonyylioksi-2-hydroksi-imino-3-oksobuty-raatti, värittömiä neulasia, jotka sulavat 93-95°C:ssa (hajoten).

51 73440 1 NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 1,57 (9H, slngletti, t-butyyli); 5.07 (2H, singletti, -S02OCH2CO-); 5 7,40-8,03 (5H, multipletti, C,He); o 5 10,17 (1H, leveä singletti, hydroksi-iminon OH).

Valmistus 14 10 Valmistuksessa 9 selostettuja menettelytapoja noudattaen valmistettiin seuraavat yhdisteet: t-Butyyli-4-metaanisulfonyylioksi-2-(syn)-metoksi-imino-3-oksobuty-raatti, väritön öljy.

15 NMR-spektri (CDCl^) S PPm: 1,54 (9H, singletti, t-butyyli); 3,19 (3H, singletti, metaanisulfonyylin CH^); 20 4,10 (3H, singletti, metoksi-iminon OCH^); 5,23 (2H, singletti, -S020CH2C0-).

t-Butyyli-4-etaanisulfonyylioksi-2-(syn)-metoksi-imino-3-oksobuty-raatti, vaalean keltainen öljy.

25 NMR-spektri (CDCl^) § ppm: 1,43 (3H, tripletti, J = 7,0 Hz, CH3CH2S02); 1,50 (9H, singletti, t-butyyli); 30 3,27 (2H, kvartetti, J * 7,0 Hz, CH3CH2S02); 4.07 (3H, singletti, metoksi-iminon OCH3); 5,18 (2H, singletti, -S020CH2C0-).

: t-Butyyli-4-bentseenisulfonyylioksi-2~(syn)-metoksi-imino-3-okso- 35 butyraatti, väritön öljy.

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 52 73440 1 1,50 (9H, singletti, t-butyyli); 4.05 (3H, singletti, metoksi-iminon OCH^); 5,07 (2H, singletti, -S020CH CO-); 7,30-8,00 (5H, multipletti, C,Hc).

0 J

5

Valmistus 15

Valmistuksessa 10 selostettua menettelytapaa noudattaen valmistettiin seuraavat yhdisteet: 10 4-Metaanisulfonyylioksi-2-(syn)-metoksi-imino-3-oksovoihappo, vaalean ruskea öljy.

NMR-spektri (deuteroasetoni) g ppm: 15 3,14 (3H, singletti, metaanisulfonyylin CH^); 4,10 (3H, singletti, metoksi-iminon OCH^); 5,27 (2H, singletti, -S020CH2C0-); 10,18 (1H, singletti, COOH).

20 4-etaanisulfonyylioksi-2-(syn)-metoksi-imino-3-oksovoihappo, sulaa 85,5-89°C:ssa.

NMR-spektri (deuteroasetoni) g ppm: 25 1,40 (3H, tripletti, J * 7,0 Hz, CH3CH2S02); 3,34 (2H, kvartetti, J = 7,0 Hz, CH^CH^O^; 4,13 (3H, singletti, metoksi-iminon OCH^); 5,33 (2H, singletti, -S020CH2C0-); 30 11,10 (1H, leveä singletti, COOH).

4-Bentseenisulfonyylioksi-2-(8yn)-metoksi-imino-3-oksovoihappo, kiteinä.

35 NMR-spektri (deuteroasetoni) g ppm: 4.06 (3H, singletti, metoksi-iminon OCH^); 5,17 (2H, singletti, -SO^CH^O-); 53 73440 1 7,37-8,03 (5H, multipletti, C,Hc);

O J

10,33 (1H, singletti, COOH).

Valmistus 16 5

Valmistuksessa 11 selostettua menettelytapaa noudattaen valmistettiin seuraavat yhdisteet:

Pivaloyylioksimetyyli-7- j^4-metaanisulfonyylioksi-2-(syn)-metoksi-10 imino-3-oksobutyryyliaminoJ -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksy-laatti, väritön, vaahtomainen aine.

NMR-spektri (CDCl^) gppm: 15 1,21 (9H, singletti, t-butyyli); 3,16 (3H, singletti, metaanisulfonyylin CH^); 3.30 (3H, singletti, metokeimetyylin OCH^); 3.53 (2H, leveä singletti, 2-kefem H2); 4,13 (3H, singletti, metoksi-iminon OCH^); 20 4,24 (2H, singletti, metokeimetyylin CH2); 4,99 (1H, dupletti, J = 4,0 Hz, 6-kefem H); 5,23 (2H, singletti, -S020CH2C0-); 5,60-5,93 (3H, multipletti, 7-kefem H ja pivaloyylioksimetyylin CH2) ; 25 7,58 (1H, dupletti, J * 9,0 Hz, 7-kefem NH).

Pivaloyylioksimetyyli-7- H.4-etaanisulfonyylioksi-2-(syn)-metoksi-imino-3-oksobutyryyliaminoJ -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksy-laatti, väritön, vaahtomainen aine.

30 NMR-spektri (CDCl^) g ppm: 1,22 (9H, singletti, t-butyyli); 1,43 (3H, tripletti, J - 7,0 Hz, CH3CH2S02>; 35 3,27 (2H, kvartetti, J » 7,0 Hz, CH-jCH^O^ ; 3.30 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^) ; 3.54 (2H, leveä singletti, 2-kefem H2); 54 73440 1 4,13 (3H, singletti, metoksi-imlnon OCH^)» 4.26 (2H, singletti, metoksimetyylin CH^); 5,00 (1H, dupletti, J = 5,0 Hz, 6-kefem H); 5.27 (2H, singletti, -SO^CH^O-); 5 5,60-5,97 (3H, multipletti, 7-kefem H ja pivaloyylioksimetyylin CH2); 7,55 (1H, dupletti, J = 9,0 Hz, 7-kefem NH),

Pivaloyylioksimetyyli-7- [4-bentseenisulfonyylioks1-2-(syn)-metoksi-10 lmino-3-oksobutyryyliamincP -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksy-laatti, vaalean keltainen, vaahtomainen aine.

NMR-spektri (CDCl^) £ppm: 15 1,22 (9H, singletti, t-butyyli); 3,30 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 3,52 (2H, leveä singletti, 2-kefem H2); 4,10 (3H, singletti, raetoksi-iminon OCH^); 4.27 (2H, singletti, metoksimetyylin CH2>; 20 4,98 (1H, dupletti, J 5,0 Hz, 6-kefem H); 5,08 (2H, singletti, -S020CH2C0-); 5,60-5,90 (3H, multipletti, 7-kefem H ja pivaloyylioksimetyylin CH2); 7,40-8,03 (6H, multipletti, ja 7-kefem NH).

25

Valmistus 17

Pivaloyylioksime tyy11-7-(4-kloori-3-oksobutyryyliamino)-3-metoksi-metyyli-3-kefem-4-karboksylaattl 30 725 mg diketeeniä liuotettiin 10 ml:aan kuivaa metyleenikloridia ja liuosta hämmennettiin -20°C:ssa. Tähän liuokseen lisättiin sitten tipoittain 30 ml hiilitetrakloridia, johon oli liuotettu 620 mg klooria, 4-kloori-3-oksobutyryylikloridin tuottamiseksi.

Tällä välin liuotettiin 2g pivaloyylioksimetyyli-7-amino-3-metoksi-metyyli-3-kefem-4-karboksylaatin p-tolueenisulfonaattia ja 1,16 ml N,N-dietyylianiliinia 20 mlraan metyleeniklorida. Saatu liuos jääh- 35 55 73440 1 dytettiin -10°C:een ja sitten edellä selostetulla tavalla saatu 4-kloori-3-oksobutyryylikloridin liuos lisättiin tipoittain. Seosta hämmennettiin sitten samassa lämpötilassa 30 minuutin ajan, minkä jälkeen se väkevöitiin haihduttamalla alennetussa paineessa. Jäännös 5 liuotettiin 50 ml:aan etyyliasetaattia ja pestiin sitten vuorollaan vedellä, kloorivedyn 5 p-% vesiliuoksella ja natriumkloridin vesi-liuoksella, minkä jälkeen se kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja väkevöitiin haihduttamalla alennetussa paineessa. Jäännös liuotettiin 3 ml:aan metyleeniklorida ja siihen lisättiin 30 ml dietyy-10 lieetteriä, minkä jälkeen seoksen annettiin seistä. Syntyneet neula-maiset kiteet koottiin suodattamalla, pestiin dietyylieetterillä ja kuivattiin, jolloin saatiin l,47g otsikon yhdistettä, joka suli 131,5-132,5°C:ssa.

15 NMR-spektri (CDCl^) £ ppm: 1,23 (9H, singletti, t-butyyli); 3,31 (3H, singletti, 0CH3); 3,54 (2H, singletti, 2-kefem H2>; 20 3,65 (2H, singletti, CH2); 4,26 (2H, singletti, CH2); 4,29 (2H, singletti, CH2); 4,97 (1H, dupletti, J 5,5 Hz, 6-kefem H); 5,65-6,0 (3H, multipletti, 7-kefem H ja 25 pivaloyylioksimetyylin CH2); 7,64 (1H, dupletti, J * 9 Hz, 7-kefem NH).

Valmistus 18 30 Pivaloyylioksimetyyli-7-(4-kloorl-2-hydrok8i-imlno-3-oksobutyryyli-amlno)-3-metok8imetyyli-3-kefem-4-karboksylaattl 2,57g pivaloyylioksimetyyli-7-(4-kloori-3-oksobutyryyliamino)-3-metok8imetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia liuotettiin 25 ml:aan 35 etikkahappoa ja sitten liuokseen lisättiin huoneen lämpötilassa vähitellen 409 mg natriumnitriittiä, minkä jälkeen seosta hämennettiin 30 minuutin ajan. Seos laimennettiin sitten 200 ml:11a etyyliase- 56 7 34 4 0 "I taattia, pestiin kolme kertaa kyllästetyllä natriumkloridin vesi-liuoksella, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja väke-vöitiin haihduttamalla alennetussa paineessa. Jäännös atseotrooppi-tislattiin kahdesti käyttäen tolueenia ja näin saatu jäännös kuivat- 5 tiin, jolloin saatiin 2,7g otsikon yhdistettä vaahtomaisena kiinteänä aineena.

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 10 1,23 (9H, singletti, t-butyyli); 3.33 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 3,59 (2H, singletti, 2-kefem H^); 4.33 (2H, singletti, metoksimetyylin CH^); 4,75 (2H, singletti, C1CH2); 15 5,05 (1H, dupletti, J *= 5,5 Hz, 6-kefem H); 5,6-6,1 (3H, multipletti, 7-kefem H ja pivaloyylioksimetyylin CH^); 9,3 (1H, dupletti, J * 9 Hz, 7-kefem NH).

20 Valmistus 19

Pivaloyylioksimetyyli-7- C 4-kloorl-2-(syn)-metoksi-imlno-3-okso-butyryyliamino] -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaa11i 25 5g pivaloyylioksimetyyli-7-(4-kloori-2-hydroksi-imino-3-okso- butyryyliamino)-3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia liuotettiin 40 ml:aan tetrahydrofuraania. Saatuun liuokseen lisättiin 2g natriumkarbonaattia liuotettuna 40 ml:ssa vettä ja seuraavaksi 5g dimetyylisulfaattia, minkä jälkeen seosta hämennettiin 30 minuu- 30 tin ajan. Seos laimennettiin sitten 150 ml:11a etyyliasetaattia ja pestiin vuorollaan kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja kyllästetyllä kaliumbisulfaatin vesiliuoksella, kummallakin kahdesti, minkä jälkeen se kuivattiin vedettömällä magnesium-sulfaatilla ja väkevöltlin haihduttamalla alennetussa paineessa.

35 Jäännös kromatografoitiin 100 g:n piigeeliä läpi, eluoiden kloroformin ja etyyliasetaatin seoksella 3:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin otsikon yhdistettä sisältävä kiinteä aine. Tämä liuotettiin 57 73440 1 30 ml:aan dietyylieetteriä ja jätettiin sitten seisomaan jäällä jäähdytettynä, jolloin saatiin kiteitä, jotka pestiin dietyyli-eetterillä ja kuivattiin, antaen l,9g otsikon yhdistettä neulasina, jotka sulivat 168,5-169,5°C:ssa.

5 NMR-spektri (CDCl^) S Ppm·’ 1,24 (9H, singletti, t-butyyli); 3,33 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 10 3,57 (2H, singletti, 2-kefem H„,); 4.19 (3H, singletti, metoksi-iminon OCH^); 4,30 (2H, singletti, metoksimetyylin CH^); 4.60 (2H, singletti, C1CH2); 5.03 (1H, dupletti, J = 5,5 Hz, 6-kefem H); 15 5,6-6,1 (3H, multipletti, 7-kefem H ja pivaloyylioksimetyylin C^) ; 7.19 (1H, dupletti, J = 9 Hz, NH).

Valmistus 20 20

Pivaloyylioksimetyyli-7- L4-kloori-2-(syn)-etoksi-imino-3-okso-butyryyliaminoJ -3-metok9imetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti

Valmistuksessa 19 selostettu menettely toistettiin käyttäen di-25 etyylisulfaattia dimetyylisulfaatin asemasta. Otsikon yhdiste saatiin neulasina, jotka sulivat 171-172°C:ssa.

NMR-spektri (CDCl^) g ppm: 30 1,23 (9H, singletti, t-butyyli); 1,39 (3H, tripletti, J * 7Hz); 3,35 (3H, singletti, OCH3); 3,57 (2H, singletti, 2-kefem H^); 4,32 (2H, singletti, metoksimetyylin CH2); 35 4,43 (2H, kvartetti, J = 7 Hz); 4.60 (2H, singletti, C1CH2); 5.04 (1H, dupletti, J = 5,5 Hz, 6-kefem H); 58 7 34 40 1 5,6-6,1 (3H, multipletti, 7-kefem H ja pivaloyylioksimetyylin C^); 7,17 (1H, duplettl, J 9 Hz, 7-kefem NH).

5 Valmistus 21

Pivaloyylioksimetyyll-7- [.2-(2-formamidotlatsol-4-yyll)-glyoksyy11-amido^ -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattl 10 0,544 ml:aan Ν,Ν-dltnetyyllformamidia lisättiin, jäällä jäähdyt täen, 0,582 ml fosforioksikloridia ja saatua seosta hämmennettiin 40-45°C:ssa 1 tunnin ajan. Alhaalla kiehuvat aineet poistettiin antamalla seoksen seistä 5 minuutin ajan in vacuo, minkä jälkeen jäännökseen lisättiin huoneen lämpötilassa vuorollaan 10 ml etyyli-15 asetaattia, l,25g 2-(2-formamidotiatsol-4-yyli) glyoksyylihappoa ja 3 ml Ν,Ν-dimetyyliformamidia. Seosta hämmennettiin 40 minuutin ajan ja sitten se lisättiin liuokseen, jossa oli 2,9g pivaloyylioksimetyyli- 7-amino-3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatin p-tolueenisulfonaattia ja 2,9 ml N,N-dietyylianiliinia 30 ml:ssa metyleenikloridia, lämpö-20 tilassa -20 - -30°C. Seosta hämmennettiin 0°C:ssa 30 minuutin ajan, minkä jälkeen se laimennettiin kloroformilla, pestiin vuorollaan kaliumbisulfiitin vesiliuoksella ja natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja kuivattiin sitten vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin poistettiin tislaamalla ja jäännös puhdistettiin kolonnikromatografi-25 alla piigeelin läpi, eluoiden etyyliasetaatin ja kloroformin seoksella 2:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin l,9g otsikon yhdistettä amorfisena jauheena.

NMR-spektri (deuterodimetyylisulfoksidi) £ ppm: 30 1,22 (9H, singletti, t-butyyli); 3.32 (3H, singletti, 0CH3); 3,57 (2H, leveä singletti, 2-kefem H3); 4.32 (2H, leveä singletti, metoksimetyylin Cä^); 35 5,07 (1H, singletti, 6-kefem H); 5,7-6,0 (3H, multipletti, -COOC^O- ja 7-kefem H); 8,03 (1H, leveä dupletti, J = 9 Hz, 7-kefem NH); 59 7 3 4 4 0 1 8,97 (1H, singletti); 9,05 (1H, leveä singletti).

Valmistus 22 5 l-Etokslkarbonyylioksietyyli-7- r2-(2-formamidotiatsol-4-yyli) glyok-syyliamldo] -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti

Valmistuksessa 21 selostettu menettely toistettiin, mutta käyttäen 10 2,8g l-etoksikarbonyylioksietyyli-7-amino-3-metoksimetyyli-3- kefem-4-karboksylaatin p-tolueenisulfonaattia ja l,25g 2-(2-formamido-tiatsol-4-yyli) glyoksyylihappoa, jolloin saatiin l,5g otsikon yhdistettä.

15 NMR-spektri (CDCl^) g ppm: 1.31 (3H, dupletti, J = 7Hz, etoksin CH^); 1.59 (3H, dupletti, J = 6 Hz, oksietyylin CH^); 3.32 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 20 3,56 (2H, leveä singletti, 2-kefem H^); 4,22 (2H, kvartetti, J = 7 Hz, etoksin CH^); 4.32 (2H, singletti, metoksimetyylin CH^); 5,03 (1H, dupletti, J * 5 Hz, 6-kefem H); 6.00 (1H, kaksoisdupletti, J * 5 ja 9 Hz, 7-kefem H); 25 6,7-7,1 (1H, multipletti, oksietyylin CH); 7,38 (1H, singletti, 5-tiatsoli H); 8.01 (1H, dupletti, J « 9 Hz, 7-kefem NH); 8.60 (1H, singletti, HC0); 9,0-12,0 (1H, leveä singletti, formamidin NH).

30

Esimerkki 1

Pivaloyylioksimetyyli-7- E2-(2-aminotiatsoi-4-yyli)-2-metoksi-imino-asetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 71 mg:aan dimetyyliformamidia lisättiin jäällä jäähdyttäen ja hämmentäen 135 mg fosforioksikloridia. Seosta hämmennettiin 40 C:ssa .1 tun- 35 60 7 3 4 4 0 1 nin ajan ja atseotrooppitislattiin sitten kahdesti käyttäen kuivaa metyleeniklorida. Saatuun seokseen lisättiin 1 ml etyyliasetaattia ja sen jälkeen voimakkaasti hämmentäen, huoneen lämpötilassa, 265 mg 2- (2-klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoetikkahappoa ja 5 hämmentämistä jatkettiin 30 minuutin ajan.

Tällä välin liuotettiin 121 mg pivaloyylioksimetyyli-7-amino-3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia ja 141 mg N,N-dietyyli-aniliinia 5 ml:aan metyleenikloridia ja hämmennettiin -5°C:ssa.

10 Saatu seos lisättiin tipoittain 2-(2-klooriasetamidotiatsol-4- yyli)-2-metoksi-iminoetikkahapon sisältävään seokseen, jonka valmistus on selostettu edellä. Reaktioseosta hämmennettiin 15 minuutin ajan ja sitten se väkevöitiin haihduttamalla alennetussa paineessa. Jäännökseen lisättiin 20 ml etyyliasetaattia ja 5 ml vettä ja etyyli-15 asetaattikerros erotettiin, pestiin vuorollaan 5 ml:lla kyllästettyä natriumbikarbonaatin vesiliuosta, 5 ral:lla kloorivedyn 5 p-% vesi-liuosta ja 5 ml:lla kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta ja kuivattiin lopuksi vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Kuivausaine poistettiin suodattamalla ja suodos väkevöitiin haihduttamalla alen-20 netussa paineessa. Jäännös kolonnikromatografoitiin 10 g:n piigeeliä läpi, eluoiden etyyliasetaatin ja heksaanin seoksella 2:1 (tilavuus-osia), jolloin saatiin 55 mg pivaloyylioksimetyyli 7~r2-(2-kloori-asetamidotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidoJ -3-metoksimetyyli- 3- kefem-4-karboksylaattia.

25 Tämä tuote liuotettiin 1 ml:aan dlmetyyllaeetamidla ja saatuun liuokseen lisättiin 13,5 mg tioureaa, liuosta hämmennettiin sitten huoneen lämpötilassa 2 tunnin ajan. Reaktioseos laimennettiin 20 ml :11a etyyliasetaattia, pestiin kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesi-30 liuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Kuivaus-aine poistettiin suodattamalla ja suodos väkevöitiin haihduttamalla alennetussa paineessa. Jäännös kolonnikromatografoitiin 5 g:n piigeeliä läpi, eluoiden etyyliasetaatin ja heksaanin seoksella 3:1 (tila-vuusosia), jolloin saatiin 36 mg otsikon yhdistettä.

NMR-spektri (deuteroasetoni) S ppm: 35 6i 734 4 0 1 1»19 (9H, singletti, t-butyyli); 3,23 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 3,52 (2H, singletti, 2-kefem H2); 3,90 (3H, singletti, metoksi-Iminon OCH^); 5 4,18 (2H, singletti, metoksimetyylin CH^); 5,12 (1H, dupletti, J = 5 Hz, 6-kefem H); 5,8-6,1 (3H, multipletti, 7-kefem H ja pivaloyylioksimetyylin CH2); 6,78 (1H, singletti, 5-tiatsoli H); 10 6,6-7,1 (2H, leveä singletti, NH2>; 8,01 (1H, dupletti, J = 9 Hz, 7-kefem NH).

Esimerkki 2 15 Esimerkissä 1 selostettua menettelytapaa noudattaen valmistettiin seuraavat yhdisteet:

Asetoksimetyyli-7- ^2-(2-arainotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoaseta-mido^} 3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti.

20 NMR-spektri (deuteroasetoni) S ppm: 2.10 (3H, singletti, CH CO); 3,22 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 25 3,52 (2H, singletti, 2-kefem H2); 3,92 (3H, singletti, metoksi-iminon OOH^); 4,20 (2H, singletti, metoksimetyylin CH2); 5.11 (1H, dupletti, 3=5 Hz, 6-kefem H); 5.6- 6,3 (3H, multipletti, asetoksimetyylin CH^ ja 7-kefem H); 30 6,76 (1H, singletti, 5-tiatsoli H); 6.6- 7,1 (2H, leveä singletti, NH2); 8,03 (1H, dupletti, J * 9 Hz, 7-kefem NH).

Isovaleryylioksimetyyli-7- ^2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-35 iminoasetamido] -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 62 7 3 4 4 0 1 NMR-spektri (CDCl^) $ ppm: 0,99 (6H, dupletti, J = 6,5 Hz, isovaleryylin kaksi CH^); 1,3-2,1 (1H, multipletti, isovaleryylin CH); 5 2,2-2,5 (2H, multipletti, isovaleryylin CH^); 3.32 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^) ; 3.56 (2H, leveä singletti, 2-kefem H2); 3,98 (3H, singletti, metoksi-iminon OCH^); 4,30 (2H, singletti, metoksimetyylin CH2) ; 10 5,06 (1H, dupletti, J = 5 Hz, 6-kefem H); 5.8 (2H, leveä singletti, NH2); 5,92 (2H, singletti, COOCH OCO) ; 6.08 (1H, kaksoisdupletti, J = 5,0 ja 9,0 Hz, 7-kefetn H); 6,70 (1H, singletti, 5-tiatsoli H); 15 8,20 (1H, dupletti, J = 9,0 Hz, 7-kefem NH);

Pivaloyylioksimetyyli-7- ^2-(2-aminotiatsol-4-yyyli)-2-etoksi-iminoasetaraidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti, jolla on esimerkissä 8 selostetut ominaisuudet.

20

Esimerkki 3

Esimerkissä 1 selostettua menettelytapaa noudattaen valmistettiin l-etoksikarbonyylioksietyyli-7- j^2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-25 iminoasetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti.

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 1.32 (3H, tripletti, OCH2CH3); 30 1,59 (3H, dupletti, karbonyylioksietyylin CH^); 3.33 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 3.57 (2H, singletti, 2-kefem H2>; 4,03 (3H, singletti, metoksi-iminon OCH^); 4,23 (2H, kvartetti, OCH^H^); 35 4,34 (2H, singletti, metoksimetyylin CH^); 5,05 (1H, dupletti, J = 5 Hz, 6-kefem H); 5,59 (1H, kaksoisdupletti, J = 5 ja 9 Hz, 7-kefem H); «3 7 3440 1 5,72 (2H, leveä singletti, NH^); 6,73 (1H, singletti, 5-tiatsoli H); 6,7-7,1 (1H, multipletti, karbonyylioksietyylin CH); 7,90 (1H, dupletti, J = 9 Hz, 7-kefem NH).

5

Esimerkki 4

Pivaloyylioksimetyyli-7- Γ2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamido3 -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 10 10 ml:aan dimetyylisulfoksidia lisättiin lg 7- .f2-(2-klooriasetamido-tiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksyylihappoa, 300 mg bromimetyylipivalaattia ja 240 mg kaliumfluoridia, minkä jälkeen seosta hämmennettiin huoneen lämpö-15 tilassa 1 tunnin ajan. Seos laimennettiin sitten 100 mlrlla etyyliasetaattia ja pestiin peräjälkeen vedellä, natriumbikarbonaatin 5 p-% vesiliuoksella, kaliumbisulfaatin 10 p-% vesiluoksella ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella, minkä jälkeen se kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin poistettiin tislaamalla 20 alennetussa paineessa ja jäännös kolonnikromatografoitiin piigeelin läpi, eluoiden kloroformin ja etyyliasetaatin seoksella 1:1 (tila-vuusosia) , jolloin saatiin 300 mg pivaloyylioksimetyyli-7-£ 2-(2-klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia vaalean keltaisena jauheena.

25 Tämä yhdiste liuotettiin, 60 mg:n tioureaa kanssa, 3 mlraan dimetyyli-asetamldla ja liuosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa 4 tunnin ajan. Seos kaadettiin sitten 10 ml:aan kyllästettyä natriumbikarbonaatin vesiliuosta ja uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin vuorol-30 laan kaliumbisulfaatin 10 p-% vesiliuoksella ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella, minkä jälkeen se kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja väkevöitiin haihduttamalla alennetussa paineessa. Jäännös puhdistettiin kolonnikromatografiällä piigeelin läpi, eluoiden etyyliasetaatin ja heksaanin seoksella 3:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 35 200 mg otsikon yhdistettä. Tämä yhdiste tunnistettiin NMR-spektroskopi- alla ja havaittiin identtiseksi esimerkissä 1 saadun yhdisteen kanssa.

“ 73440 1 Esimerkki 5

Isobutyryylioksimetyyli-7- ί2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 5

Esimerkissä 4 selostettu menettely toistettiin, paitsi että bromi-metyylipivalaatti korvattiin 360 mg:lla bromimetyyli-isobutyraattia. Saatiin 180 mg isobutyryylioksimetyyli-7- L2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksy-10 laattia kellertävänä jauheena.

NMR-spektri (CDCl^) § ppm: 1.20 (6H, dupletti, J = 6,5 Hz, isobutyryylin kaksi CH^); 15 2,66 (1H, septetti, J = 6,5 Hz, isobutyryylin CH); 3.21 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 3,40 (2H, AB kvartetti, 2-kefem Hj); 4,01 (3H, singletti, metoksi-iminon OCH^); 4.16 (2H, singletti, metoksimetyylin CH^); 20 5,05 (1H, dupletti, J = 5 Hz, 6-kefem H); 5,6-6,2 (5H, multipletti, N^, karbonyylioksimetyylin ja 7-kefem H); 6,65 (1H, singletti, 5-tiatsoli H); 8,06 (1H, dupletti, J 9 Hz, 7-kefem NH).

25

Esimerkki 6

Propionyylioksimetyyli-7- C2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 30

Esimerkissä 4 selostettu menettely toistettiin, paitsi että bromi-metyylipivalaatti korvattiin 340 mg:lla bromimetyylipropionaattia, jolloin saatiin 165 mg otsikon yhdistettä lähes värittömänä jauheena.

35 NMR-spektri (CDCl^) gppm; 1.17 (3H, tripletti, J = 6,5 Hz, C^CH^); 65 7 3 4 4 0 1 2,41 (2H, kvartetti, J = 6,5 Hz, CH^CH^); 3,20 (3H, singletti, metoksimetyylin CH^); 3,35 (2H, AB kvartetti, 2-kefem 4,02 (3H, singletti, metoksi-Imlnon OCH^); 5 4,17 (2H, singletti, metoksimetyylin CH^); 5,09 (1H, dupletti, J *= 5 Hz, 6-kefem H); 5,6-6,3 (5H, multipletti, N^, karbonyylioksimetyylln CH? ja 7-kefem H); 6,68 (1H, singletti, 5-tiatsoli H); 10 8,25 (1H, dupletti, J = 9 Hz, 7-kefem NH).

Esimerkki 7

Plvaloyylioksimetyyli-7- E2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-15 iminoasetamido] -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 45 mg:n natrium-7- [ 2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoaseta-midoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia (valmistettu vastaavasta trifluoriasetaatista) liuokseen 1 ml:ssa dimetyyli-20 asetamidia lisättiin -15°C:ssa 27 mg jodimetyylipivalaattia ja seoksen annettiin reagoida 15 minuutin ajan. Tämän ajan lopussa lisättiin reaktioseokseen 20 ml etyyliasetaattia ja seos pestiin vuorollaan vedellä, kaliumbisulfaatin vesiluoksella ja natriumbikarbonaatin vesiliuoksella. Orgaaninen faasi erotettiin ja väke-25 vöitiin haihduttamalla alennetussa paineessa, jäännös kolonnikroma-tografoitiin piigeelin läpi, eluoiden etyyliasetaatin ja heksaanin seoksella 3:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 49 mg otsikon yhdistettä, jonka ominaisuudet olivat identtiset esimerkissä 1 saadun yhdisteen kanssa.

30

Esimerkki 8

Pivaloyylioksimetyyli-7- [.2-(2-amlnotiatsol-4-yyll)-2-etoksi-imino-asetamldoD -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 35 Esimerkissä 7 kuvattu menettely toistettiin, paitsi että käytettiin natrium-7- [2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-etoksi-iminoasetamido^J -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia ja jodimetyylipivalaattia otsikon yhdisteen saamiseksi.

66 73440 1 NMR-spektri (CDCl^ £ ppm: 1,22 (9H, singletti, t-butyyli); 1.31 (3H, tripletti, OCH2CH3); 5 3,30 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 3,53 (2H, singletti, 2-kefem 1^); 4,28 (2H, kvartetti, 0CH2CH3); 4,30 (2H, singletti, metoksimetyylin CH2); 5,01 (1H, dupletti, J = 5 Hz, 6-kefem H); 10 5,7-6,2 (5H, multipletti, 7-kefem H, NH2 ja karbonyyli- oksimetyylin CH2); 6,76 (1H, singletti, 5-tiatsoli H); 7,70 (1H, dupletti, J = 9 Hz, 7-kefem NH).

15 Esimerkki 9 l-Etoksikarbonyylioksietyyli-7- [2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-etoksi-iminoasetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 20 500 mg:n natrium-7- [2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-etoksi-iminoasetamidol - -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia liuokseen 5 ml:ssa N,N-dimetyyliasetamidia lisättiin, jäällä jäähdyttäen, 395 mg 1-jodi-etyylietyylikarbonaattia ja sitten seosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa 30 minuutin ajan. Tämän ajan lopussa reaktioseokseen 25 lisättiin 50 ml etyyliasetaattia ja seos pestiin sitten vuorollaan 20 ml:lla vettä, 20 ml:lla kyllästettyä natriumbikarbonaatin vesi-liuosta ja 20 ml:lla natriumkloridin vesiliuosta. Seos kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja liuotin poistettiin tislaamalla alennetussa paineessa, jolloin saatiin jäännös, joka kromatografoltiin 30 20g:n piigeeliä läpi, eluoiden etyyliasetaatilla, jolloin saatiin 460 mg otsikon yhdistettä.

NMR-spektri (CDCl^) £ ppm: 35 1,30 (3H, tripletti, CH3CH2); 1.32 (3H, tripletti, CH3CH2); 1,59 (3H, dupletti, J * 6,0 Hz, karbonyylioksietyylin CH3>; il 67 7344 0 1 3,30 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 3,52 (2H, leveä singletti, 2-kefem H2); 4,22 (2H, kvartetti, CH3CH2); 4,27 (2H, kvartetti, CH^Hj); 5 4,30 (2H, singletti, metoksimetyylin CH2); 5,05 (1H, dupletti, J = 5,0 Hz, 6-kefem H); 5.08 (2H, leveä singletti, NH2); 6,00 (1H, kaksoisdupletti, J = 5,0 + 9,0 Hz, 7-kefem H); 6,75 (1H, singletti, 5-tiatsoli H); 10 6,7-7,1 (1H, multipletti, karbonyylioksietyylin CH); 7.8 (1H, dupletti, J *= 9Hz, 7-kefem NH).

Esimerkki 10 15 Pivaloyylioksimetyyli-7- L2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-imino-asetamidol -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattl 510 mg:n pivaloyylioksimetyyli-7- ^2-(syn)-metoksi-imino-3-okso-4-p-tolueenisulfonyylioksibutyryyliaminoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-20 4-karboksylaattia liuokseen 5 mlrssa etanolia lisättiin 76 mg tio-ureaa ja 84 mg natriumasetaattla. Seokseen lisättiin sitten 3 ml vettä tipoittain, minkä jälkeen koko seosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa 3,5 tunita. Tämän ajan lopussa etanoli poistettiin tislaamalla ja jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, pestiin natrium-25 kloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Etyyliasetaatti poistettiin tislaamalla, jolloin saatiin vaalean ruskea, vaahtomainen aine, joka puhdistettiin kolonnikromato-grafiällä piigeelin läpi, eluolden etyyliasetaatin ja metyleeniklori-din seoksella 2:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 392 mg otsikon 30 yhdistettä värittömänä vaahtomaisena aineena, jolla oli samat ominaisuudet kuin esimerkin 1 tuotteella.

Esimerkki 11 35 Proplonyylloksimetyyll-7- r2-(2-aminotlatso1-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidoj }-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti

Esimerkissä 10 selostettu menettely toistettiin, mutta käyttäen 68 73440 1 490 mg propionyylioksimetyyli-7- f2-(8yn)-metoksi-imino-3-okso-4- p-tolueenisulfonyylioksibutyryyliamino] -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia, jolloin saatiin 370 mg otsikon yhdistettä, jonka ominaisuudet olivat identtiset esimerkin 6 tuotteen kanssa.

5

Esimerkki 12

Esimerkissä 10 selostettu menettely toistettiin, paitsi että pivalo-yylioksimetyyli-7- ^2-(syn)-metoksi-imino-3-okso-4-p-tolueenisulfo-10 nyylioksibutyryyliaminoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti korvattiin l-etoksikarbonyylloksietyyli-7- £2~(syn)-metoksi-imino-3-okso-4-p-tolueenisulfonyylioksibutyryyliaminoJ -3-metoksi-metyyli-3-kefem-4-karboksylaatilla tai isobutyryylioksimetyyli-7- f_2-(syn)-metoksi-imino-3-okso-4-p-tolueenisulfonyylioksibutyryyliamino ^ -15 3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatilla, jolloin saatiin vastaavasti l-etoksikarbonyylioksietyyli-7- [^2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia (jonka ominaisuudet olivat identtiset esimerkin 3 tuotteen kanssa) ja isobutyryylioksimetyyli-7- ^2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-20 iminoasetamido3 -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia (jonka ominaisuudet olivat identtiset esimerkin 5 tuotteen kanssa).

Esimerkki 13 25 Esimerkissä 10 selostettu menettely toistettiin, paitsi että käytettiin 465 mg pivaloyylioksimetyyli-7- j^4-metaanisulfonyylioksi-2-(syn)-metoksi-imino-3-oksobutyryyliamino [] -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia ja 152 mg tioureaa, jolloin saatiin 390 mg pivaloyyli-oksimetyyli-7- £2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidoJ -3-30 metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia, jolla oli identtiset ominaisuudet esimerkin 1 tuotteen kanssa.

Sama yhdiste saatiin myös noudattaen samaa menettelytapaa mutta käyttäen, erillisissä kokeissa, pivaloyylioksimetyyli-7- [_4-etaanisulfo-35 nyylioksi-2-(syn)-metoksi-imino-3-oksobutyryyliaminoJ -3-metoksimetyyli- 3-kefem-4-karboksylaattia tai pivaloyylioksimetyyli-7- [4-bentseeni-sulfonyylioksi-2-(syn)-metoksi-imino-3-oksobutyryyliamino]] -3-metoksi-metyyli-3-kefem-4-karboksylaattia.

li 73440 1 Esimerkki 14

Plvaloyyllokslmetyyll-7- C2-(2-aminotlatsol-4-yyli)-2-metoksi-imino-asetamldol -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 5 47 mg pivaloyylloksimetyyll-7- [4-kloori-2-(syn)-metoksi-imino-3-oksobutyryyliaminoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia liuotettiin 5 ml:aan dimetyyliasetamidia ja sitten liuokseen lisättiin 14 mg tioureaa ja liuosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa 4 10 tunnin ajan. Reaktioseos laimennettiin 50 ml :11a etyyliasetaattia, pestiin 3 kertaa, kulloinkin 15 ml:lla vettä, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja väkevöitiin sitten haihduttamalla alennetussa paineessa. Jäännös liuotettiin 1 ml:aan kloroformia ja saatuun liuokseen lisättiin 20 ml di-isopropyylieetteriä. Muo-15 dostunut saostuma koottiin suodattamalla ja kuivattiin, jolJoin saatiin 50 mg otsikon yhdistettä värittömänä jauheena, jolla oli identtiset ominaisuudet esimerkin 1 tuotteen kanssa.

Esimerkki 15 20

Pivaloyylioksimetyyli-7- C2-(2-amlnotiatsol-4-yyll)-2-etoksi-imino-asetamido 3 -3-metoksimetyyll-3-kefem-4-karboksylaatti

Esimerkissä 14 selostettu menettely toistettiin, paitsi että pivalo-25 yylioksimetyyli-7- £4-kloori-2-(syn)-metoksi-imino-3-oksobutyryyli-aminoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti korvattiin pivaloyylioksimetyyli-7- l4-kloori-2-(syn)-etoksi-imino-3-oksobutyryyli3 -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatilla, jolloin saatiin otsikon yhdiste värittömänä jauheena, jolla oli identtiset ominaisuudet esi-30 merkin 8 tuotteen kanssa.

Esimerkki 16

Plvaloyyllok8imetyyli-7- r2-(2-amlnotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-imino-35 asetamldoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti (a) Liuosta, jossa oli 0,25g pivaloyylioksimetyyli-7- |^2-(2-forma- ™ 7 3440 1 midotiatsol-4-yyli)glyoksyyliamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4- karboksylaattia ja 65 mg metoksiamiinihydrokloridia 2 ml:ssa dimetyyli-asetamidia, hämmennettiin 40°C:ssa 140 minuutin ajan. Tämän ajan lopussa reaktioseokseen lisättiin etyyliasetaattia ja seos pestiin 5 kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin poistettiin tislaamalla ja jäännös kolonnikromatografoltiin piigeelin läpi, eluolden etyyliasetaatin ja kloroformin seoksella 2:1 (tilavuueosia), jolloin saatiin 0,2g raakaa pivaloyylioksimetyyli-7- [2-(2-formamidotiatsol-4-yyli)-2-10 (syn)-metoksi-iminoasetamido^] -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksy-laattia, joka puhdistettiin edelleen uudelleenkiteyttämällä 1 ml:sta etyyliasetaattia, jolloin saatiin 170 mg kiteitä, jotka sulivat 172°C:ssa (hajoten).

15 NMR-spektri (deuterodimetyylisulfoksidi) S ppm: 1.18 (9H, singletti, t-butyyli); 3,22 (3H, singletti, metoksimetyylln OCH^); 3.58 (2H, leveä singletti, 2-kefemH2); 20 3,88 (3H, singletti, metoksi-iminon OCH^); 4,14 (2H, singletti, metoksimetyylln CHj); 5.19 (1H, dupletti, J * 5 Hz, 6-kefem H); 5,82 (3H, multipletti, pivaloyylioksimetyylin CH^ ja 7-kefem H); 7,37 (1H, singletti, 5-tiatsoli H); 25 8,47 (1H, singletti, HCO); 9,66 (1H, dupletti, J ** 9 Hz, 7-kefem NH); 12.58 (1H, leveä singletti, formamidon NH).

(b) Liuokseen, jossa oli 2,6g pivaloyylioksimetyyli-7- [ 2-(2-forma-30 midotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-lminoasetamidoj -3-metoksimetyyli- 3-kefem-4-karboksylaattia, valmistettu yllä selostetulla tavalla, 72 ml:ssa metanolia, lisättiin jäällä Jäähdyttäen 0,7 ml väkävää kloorlvetyhappoa ja seosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa 2,5 tunnin ajan. Metanoll poistettiin tislaamalle in vacuo ja jäännökseen 35 lisättiin etyyliasetaattia ja vettä, 20 ml kumpaakin, minkä Jälkeen seos neutraloitiin lisäämällä kyllästettyä natriumbikarbonaatin vesiliuosta. Orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä natriumkloridin

II

7i 7 34 4 0 1 vesiliuoksella, kuivattiin ja sitten väkevöitiin haihduttamalla alennetussa paineessa. Jäännös liuotettiin 13 mlraan kloroformia ja liuos lisättiin tipoittain, hämmentäen, 100 ml:aan di-isopropyylieetteriä. Syntynyt saostuma koottiin suodattamalla, jolloin saatiin 2,2g otsi-5 kon yhdistettä värittömänä jauheena, jolla oli identtiset ominaisuudet esimerkin 1 tuotteen kanssa.

Esimerkki 17 10 Pivaloyylioksimetyyli-7- L2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-etoksi-imino-asetamldo^ -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti

Esimerkissä 16 (a) selostettu menettely toistettiin, paitsi että metoksiamiinihydrokloridi korvattiin 75 mg:11a etoksiamiinihydro-15 kloridia, jolloin saatiin 150 mg pivaloyylioksimetyyli-7- ^2-(syn)-etoksi-imino-2-(2-formamidotiatsol-4-yyli)asetamidoJ] -3-metoksi-metyyli-3-kefem-4-karboksylaattia kiteinä, jotka sulivat 153°C:ssa.

NMR-spektri (deuterodimetyylisulfoksidi) S ppm: 20 1.18 (9H, singletti, t-butyyli); 1,28 (3H, tripletti, OCH2CH3>; : 3,21 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 3,58 (2H, leveä singletti, 2-kefem H2); 25 4,15 (2H, singletti, metoksimetyylin CH2>; 4.19 (2H, kvartetti, OCH2CH3); 5.19 (1H, dupletti, J 5 Hz, 6-kefem H); 5,71-5,95 (3H, multipletti, pivaloyylioksimetyylin CH2 ja 7-kefem H); 30 7,38 (1H, singletti, 5-tiatsoli H); 8,48 (1H, singletti. HCO); 9,64 (1H, dupletti, J * 8 Hz, 7-kefem NH); 12,60 (1H, leveä singletti, formamidon NH).

35 Esimerkissä 16 (b) selostettu menettely toistettiin, paitsi että 9,65g pivaloyylioksimetyyli-7- r2-(syn)-etoksi-imino-2-(2-formamido-tiatsol-4-yyli)asetamido_3 -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia, 72 73440 1 170 ml metanolia ja 2 ml väkevää kloorivetyhappoa saatettiin reagoi maan huoneen lämpötilassa 3 tunnin ajan, jolloin saatiin 8,7g otsikon yhdistettä värittömänä jauheena, jolla oli identtiset ominaisuudet esimerkin 8 tuotteen kanssa.

5

Esimerkki 18 l-Etoksikarbonyylioksietyyli-7- C2-(2-aminotlatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidoji -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 10

Seos, jossa oli 180 mg l-etoksikarbonyylioksietyyli-7- /^2-(2-forma-midotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamidoj -3-metoksimetyyli- 3-kefem-4-karboksylaattia, 5 ml metanolia ja 0,05 ml väkevää kloorivetyhappoa, saatettiin reagoimaan kuten on selitetty esimerkissä 15 16 (b), jolloin saatiin 120 mg otsikon yhdistettä vaalean keltai sena jauheena, jolla oli identtiset ominaisuudet esimerkin 3 tuotteen kanssa.

Esimerkki 19 20

Metoksikarbonyylioksimetyyli-7- Γ 2-(2-amlnotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidol -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 500 rag:n natrium-7- £2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-25 iminoasetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia liuokseen 5 ml:ssa dimetyyliasetamidia lisättiin jäällä jäähdyttäen 500 mg jodimetyylimetyylikarbonaattia ja seosta hämmennettiin 30 minuutin ajan. Tämän ajan lopussa reaktioseos laimennettiin 50 ml :11a etyyliasetaattia, pestiin vuorollaan kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesi-30 liuoksella ja natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Magnesiumsulfaatti poistettiin suodattamalla ja suodos väkevöitiin haihduttamalla alennetussa paineessa. Jäännös puhdistettiin kolonnikromatografiällä piigeelin läpi, eluoiden etyyliasetaatilla, jolloin saatiin 433 mg otsikon yhdistettä vaahto-35 maisena aineena.

73 7 3440 1 NMR-spektri (CDCl^) & ppm: 3.31 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 3,56 (2H, leveä singletti, 2-kefem H2); 5 3,84 (3H, singletti, metokeikarbonyylin OCH^); 4,00 (3H, singletti, metoksi-iminon OCH^); 4.31 (2H, singletti, metoksimetyylin CH^); 5,05 (1H, dupletti, 6-kefemH); 5,5-6,3 (5H, multipletti, 7-kefem H, karbonyylioksimetyylin 10 CH2 ja NH2); 6,68 (1H, singletti, 5-tiatsoli H); 8,10 (1H, dupletti, J 9,0 Hz, 7-kefetn NH).

Esimerkki 20 15

Etoksikarbonyylioksimetyyll-7- i2-(2-amlnotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-imlnoasetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti 861 mg:n natrium-7- ^2-(2-klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-20 raeioksi-iminoasetamidoj -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia liuokseen 8,6 ml:sea dimetyyliasetamidia lisättiin -10°C:ssa 565 mg jodimetyylietyyllkarbonaattia ja seosta hämmennettiin 1 tunnin ajan.

: Tämän ajan lopussa lisättiin 100 ml etyyliasetaattia reaktioseok- : seen, joka sitten pestiin vuorollaan vedellä, kyllästetyllä natrium- : 25 bikarbonaatin vesiliuoksella ja natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Orgaaninen kerros väkevöitiin haihduttamalla alennetussa paineessa ja jäännös puhdistettiin kolonnikromato-grafialla pilgeelln läpi eluoiden etyyliasetaatin Ja kloroformin seoksella 2:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 696 mg etoksikarbonyyli-30 oksimetyyli-7- [*2-(2 -klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido 3 -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaattia.

Tämä yhdiste kokonaisuudessaan liuotettiin 6,4 ml:aan dimetyyliasetamidia ja saatuun liuokseen lisättiin 800 mg tioureaa, minkä jälkeen 35 seosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa yli yön. Seos laimennettiin sitten 100 ml:11a etyyliasetaattia, pestiin kolmasti vedellä ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin poistettiin 74 73440 1 tislaamalla ja jäännös kolonnikromatografoltiin piigeelin läpi, elu-oiden etyyliasetaatilla, jolloin saatiin 220 mg otsikon yhdistettä vaahtomaisena aineena.

5 NMR-spektri (CDCl^) £ ppm: 1.32 (3H, tripletti, J * 7 Hz, etoksin CH^); 3.32 (3H, singletti, metoksimetyylin OCH^); 3,53 (2H, leveä singletti, 2-kefem H^); 10 3,98 (3H, singletti, metoksi-itninon OCH^) ; 4,23 (2H, kvartetti, J * 7 Hz, OCH2CH3); 4,31 (2H, singletti, metoksimetyylin CH^); 5,04 (1H, dupletti, J * 6 Hz, 6-kefem H); 5,6-6,3 (5H, multipletti, 7-kefem H, karbonyylioksimetyylin 15 CH2jaNH2); 6,63 (1H, singletti, 5-tiatsoli H); 8,13 (1H, dupletti, J * 9,0 Hz, 7-kefem NH).

Esimerkki 21 20

Isovaleryylioksimetyyli-7- [2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidq] -3-metokslmetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti

Esimerkissä 20 selostettu menettely toistettiin otsikon yhdisteen 25 valmistamiseksi, jolla oli samat ominaisuudet kuin esimerkin 2 toisella yhdisteellä.

30 35

Claims (6)

75 73440

1. Menetelmä kaavan (I) mukaisten lääkeaineena käyttökelpoisten alkyyli-(tai alkoksi-)karbonyylioksialkyyli-7-/2-(-aminotiatsol“4-yyli)-2-5 metoksi-(tai etoksi-)iminoasetamido7-3-metoksi-metyyli-3-kefeemi-4-karboksylaattien: N,-η-C— C-K-1—r-S

10. I a I! I H °^-“y^CH2oa,3 r fl) 15 r 0-CH-0-C-R3 I, Il Rz 0 (jossa R^ tarkoittaa alempaa alkyyliryhmää, valittuna metyyliryh-mistä ja etyyliryhmistä; 20 : 2 I R tarkoittaa vetyatomia tai metyyliryhmää; : : r3 tarkoittaa (^-(^ alkyyliryhmää tai C^-C^ alkoksiryhmää); ; 25 sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoaddltlosuolojen *. valmistamiseksi, t u n n e t u siltä, että (la) saatetaan reagoimaan kaavan (11a) mukainen yhdiste: 30 H—n—c—C0_R /n i il 0 I (Πα) tai sen reaktiivinen johdannainen kaavan (lila) mukaisen yhdisteen kanssa: 35 f 76 734 4 0 B~iH“0_»~R3 {I1U) ' R2 0 5 joissa A tarkoittaa happiatomia tai ryhmää »N-OR^, jossa R^" on 10 edellä määritelty; R tarkoittaa hydroksiryhmää ja B tarkoittaa ryhmää m h2h-j—

20 X°- tai R tarkoittaa ryhmää -s-- 25 | H ^ Ν\^^0Η200Η3 COOH 30 ja B tarkoittaa halogeeniatomia; 4 R tarkoittaa aminoryhmää tai suojattua amlnoryhmää; Λ Λ 35 ja r ja RJ ovat edellä määritellyt); (Ib) kun A tarkoittaa happiatomia» saatetaan vaiheen (la) tuote reagoimaan kaavan (XII) mukaisen yhdisteen kanssa: 77 73440 1 Η,Ν-OR1 (XII) (jossa R^ on edellä määritelty); 4 5 (le) kun R tarkoittaa suojattua amlnoryhmää, poistetaan suojaus; ja (Id) tarvittaessa muutetaan tuote suolakseen; tai (2a) saatetaan reagoimaan kaavan (VII) mukainen yhdiste: 10 R5$020CH2 — C — C—COOH Il II °. N (HI)

15 MAorI (jossa R^ tarkoittaa C^-C^ alkyyliryhmää tai aryyliryhmää ja 20 on edellä määritelty) tai sen reaktiivinen johdannainen kaavan (III) mukaisen yhdisteen kanssa: M-T-— 25 _ o**"-''·\ρΑ^·αΗ2θεΗ3 (mi . c or X0—CH—0— c— R3 I, II 30 r2 o 2 3 (jossa R ja R ovat edellä määritellyt) kaavan (VI) mukaiseksi 35 yhdisteeksi: 78 73440 r5S020CH2_c_c—C-N-j-f<N (n) 5 ... o h o h J-r Λ.

0 CH2OCH3 c . o^nq-ch-o-c-r3

10. I, II R2 0 15 12 3 5 (jossa R , R , R ja R ovat edellä määritellyt) ja saattamalla tämä kaavan (VI) mukainen yhdiste tai kaavan (VI) mukainen yhdiste, jossa R tarkoittaa alkyyliryhmää, reagoimaan tiourean kanssa, ja 20 (2b) tarvittaessa muutetaan tuote suolakseen; tai (3a) nitrosoidaan kaavan (IX) mukainen yhdiste: 25 . \ X-CH2-C — C«2 — C — H-I [ L I! Il , _,i.

0. K \^^·0Η20Μ3 30 [ . im (f ^O-CH-O-C-R3 I, Il R2 0 tl 35 79 7 34 4 0 1 (jossa R ja RJ ovat edellä määritellyt ja X on Cl) kaavan (X) mukaiseksi yhdisteeksi: $

1 Patenttivaatimukset

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siltä, että R^ on metyyli, etyyli, bentsyyll tai p-tolyyli. 35 80 73440

3. Minkä tahansa edellisistä patenttivaatimuksista mukainen mene telmä, tunnettu siltä, että tarkoittaa metyyliryhmää.

4. Minkä tahansa edellisistä patenttivaatimuksista mukainen mene- 2 5 telmä, tunnettu siitä, että R tarkoittaa vetyatomia ja 3 R tarkoittaa C^-C^ alkyyliryhmää.

5. Minkä tahansa edellisistä patenttivaatimuksista mukainen mene- 2 telmä, tunnettu siitä, että R tarkoittaa metyyliryhmää 10 ja RJ tarkoittaa C^-C,. alkoksiryhmää.

5 X.—CH? — C — C — C—H-,-T z II II II |

0 H 0 H J-1 JL (syaj\ 0 \^^CH20CH3 C (X) 10 /\-CH-0-C-R3 I, Il R2 . 0 2 3 15 (jossa R ja R ovat edellä määritellyt ja X on Cl), alkyloidaan tämä kaavan (X) mukainen yhdiste kaavan (VIII) mukaiseksi yhdisteeksi:

20 X-CH,-C-C- C-H—__r^SN Il il. Il I. • 0 H o H J-N . (synl\$ D CHjOCHj 25 ^ \ ^ ^Ll I r x0—CH-O-C-R3 I, n — R2 0 12 3 30 (jossa R , R ja R ovat edellä määritellyt) ja saatetaan tämä kaavan (VIII) mukainen yhdiste tai kaavan (VIII) mukainen yhdiste, jossa X on halogeenlatomi, reagoimaan tlourean kanssa, ja (3b) tarvittaessa muutetaan tuote suolakseen.

6. Minkä tahansa edellisistä patenttivaatimuksista mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähtöaineet valitaan antamaan: 15 pivaloyylioksimetyyli-7-[2-(2-aTninotiatsol-4-yyli) ^-(sy^-metoksi-iminoasetamido] -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti, pivaloyylioksimetyyli-7-[2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-etoksi-20 iminoasetamido3 -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti, l-etoksikarbonyylioksietyyli-7- (^2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido^ -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti tai 25 l-etoksikarbonyylioksietyyli-7-[2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-etoksi-iminoasetamido] -3-metoksimetyyli-3-kefem-4-karboksylaatti, tai vastaava farmaseuttisesti hyväksyttävä happoadditiosuola. 30 11 35 81 73440