FI72316C

FI72316C - Foerfarande foer framstaellning av farmaceutiskt aktiva n2-arylsulfonyl-l-argininamider och farmaceutiskt acceptabla salter daerav.

Info

Publication number: FI72316C
Application number: FI780073A
Authority: FI
Inventors: Shosuke Okamoto; Yoshikuni Tamao; Ryoji Kikumoto; Kazuo Ohkubo; Tohru Tezuka; Shinji Tonomura; Akiko Hijikata
Original assignee: Mitsubishi Chem Ind; Shosuke Okamoto
Priority date: 1977-01-19
Filing date: 1978-01-10
Publication date: 1987-05-11
Also published as: NO158681B; NL187746B; DK150521B; DE2801478C2; UA8370A1; NO780191L; DK150521C; IL53685A; SE7800512L; NO158681C; NZ186198A; IL53685A0; NL187746C; CH633773A5; FI72316B; SU1181539A3; CA1131621A; PH15913A; GB1596971A; FI780073A

Description

7231 6 2

Menetelmä farmaseuttisesti aktiivisten, N -aryylisulfonyyli-L-arginiini-amidien ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi -Förfarande för framställning av f^rmaceutiskt aktiva N -arylsyifonyl-L-argininamider och farmaceutiskt acceptabla salter därav

Esillä oleva keksintö koskee menetelmää määrättyjen uusien N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamidien ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, joilla yhdisteillä on erikoista arvoa johtuen niiden erinomaisista verisuonitukoksia estävistä ominaisuuksista ja alhaisesta myrkyllisyydestä.

Tähän asti on tehty useita yrityksiä uusien ja parempien ai- 2 neiden saamiseksi verisuonitukosten käsittelemiseksi. N -(p-tolyylisulfonyyli)-L-arginiiniesterit on todettu sellaisiksi aineiksi, joita voidaan käyttää tähän tarkoitukseen ja niiden on todettu tehokkaasti liuottavan verihyytymiä (ks. US-patenttijulkaisua n:o 3 622 615). Eräs yhdisteryhmä, joka on todettu erittäin käyttökelpoiseksi spesifisenä veri- 2 suonitukoksia estävänä aineena, on N -dansyyli-L-arginiini- esteri tai -amidi (US-patenttijulkaisu n:o 3 978 045). Li- 2 säksi tunnetaan DE-hakemusjulkaisusta 2 550 088 N -naftyyli- sulfonyyli-L-arginiiniestereitä ja -amideja, jotka ovat hyvin spesifisiä verisuonitukoksia estäviä aineita.

2 72316

Kuitenkin tarvitaan jatkuvasti erittäin spesifisiä verisuoni- tukoksia estäviä aineita, joilla on alhainen myrkyllisyys.

2

Nyt on todettu, että tietyillä uusilla N -aryylisulfonyyli-L-arginiini-amideilla on verisuonitukoksia estävä aktiivisuus ja alhaisempi myrkyllisyys kuin em. julkaisuista US-3 978 045 ja DE-2 550 088 tunnetuilla yhdisteillä käytettäessä yhtä tehokkaita määriä kuten jäljempänä esitetystä selityksestä ilmenee.

Esillä oleva keksintö koskee menetelmää uuden farmaseutti- 2 sesti aktiivisen N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamidin tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi, jolla yhdisteellä on kaava (I): C - N - CHoCH_CH„CHC0R (I) I 2 2 2| H_N ^ H HNS0o 2 t 2

Ar jossa R on (1) COOR, :r? (RC ) _ d m jossa Rg on vety tai -C^-alkyyli, kukin R^ on vety tai C^-C4-alkyyli ja m on kokonaisluku 0-2, jolloin R^ voi olla 4- tai 6-asemassa; tai

(2) COOH

Ό tai 7231 6 3

(3) COOH

-N 0 tai

(4) COOH

-Nio ja Ar on fenyyliryhmä, joka on substituoitu vähintään yhdellä substituentilla, jona on amino, -Cg-alkyyliamino, hydroksialkyyli, C^-C^g-fenyylialkyyli tai -C^-hydroksi-alkoksi; tax

Ar on fenyyliryhmä, joka on substituoitu vähintään yhdellä substituentilla, jona on hydroksi, C1-C,-alkyyli tai C..-C -alkoksi, ja vähintään yhdellä substituentilla, jona on C2-Cg-alkyylikarbonyyli tai fenyyli; tai

Ar on dibentsotienyyli-, 9,9-dioksodibentsotienyyli-, fenoksati'inyyli-, kinolyyli-, ftalatsinyyli-, fenatsinyyli-tai akridinyyliryhmä, joista kukin on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai useammalla hydroksi-, C^-C^-alkoksi-tai C^-C^-alkyyliryhmällä; tai

Ar on Cg-C^g-sykloalkyylifenyyli-, fluorenyyli-, tioksantenyyli-tai 2H-kromenyyliryhmä, joista kukin on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai useammalla -Cg-alkyyli-, C^-Cg-alkoksi- tai oksoryhmällä; tai

Ar on fenyyliryhmä, joka on substituoitu vähintään yhdellä substituentilla, jona on C1-C4~haloalkoksi- tai C2-C7~ alkoksialkoksiryhmä ja mahdollisesti substituoitu fenyyli-ryhmä on substituoitu edelleen vähintään yhdellä substituentilla, jona on metyyli, etyyli, metoksi, etoksi, hydroksi tai halogeeni.

7231 6

Ryhmän R kaavassa (1) ryhmä Rg on esimerkiksi vety, metyyli, etyyli, propyyli, butyyli tai tert-butyyli ja kukin R^ on erikseen esimerkiksi vety, metyyli, etyyli, propyyli, iso-propyyli tai butyyli.

Tyypillisiä kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat mm. seuraavat: 1-/N -(kinoliini-8-sulfonyyli)-L-arginyyli7-4-metyyli-2-pipe-ridiinikarboksyylihappo, 1-/N -(3-metyylikinoliini-8-sulfonyyli)-L-arginyyli/-4-metyyli-2-piperidiinikarboksyylihappo, 1- /N -(3-etyylikinoliini-8-sulfonyyli)-L-arginyyli7~4-metyyli- 2- piperidiinikarboksyylihappo, _ o 1-/N -(4-metoksi-3-sykloheksyylibentseeni-1-sulfonyyli)-L-arginyyli7~4-metyyli-2-piperidiinikarboksyylihappo, ja näiden yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa siten, että G G 2 a) N -substituentti poistetaan N -substituoidusta N -aryyli- sulfonyyli-L-arginiiniamidista, jolla on kaava:

HN

X.

C - N - CH,CH,CH.,CHCOR (XX) ^ I 2 2 2| HN R" HNS0o I I 2 R' Ar jossa R ja Ar on määritelty edellä, R' ja R" ovat vety tai guanidinoryhmän suojaryhmä, ja ainakin toinen ryhmistä R' ja R" on guanidinoryhmän suojaryhmä, happohydrolysoimalla tai hydraamalla ja haluttaessa hydrolysoidaan näin saatu reaktiotuote, tai 2 b) N -aryylisulfonyyli-L-arginyylihalogenidi, jolla on kaava

MJ

X

C - N - CH.CH.CH.CHCOX (XXII)

/ I 2 2 2I

H„N H HNSO-, 2 I 2

Ar

II

7231 6 jossa Ar on määritelty edellä ja X on halogeeni, saatetaan reagoimaan aminohappojohdannaisen kanssa, jolla on kaava RH (IV) jossa R on määritelty edellä, ja haluttaessa hydrolysoidaan saatu reaktiotuote, ja haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi.

Menetelmässä a) happohydrolyysi toteutetaan yleensä saatta-G 2 maila N -substituoitu N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamidi (XX) ja happoylimäärä, esim. fluorivety-, kloorivety-, bromi-vety- tai trifluorietikkahappo kosketuksiin keskenään ilman liuotinta tai liuottimessa, kuten eetterissä (tetrahydrofu-raani, dioksaani), alkoholissa (metanoli, etanoli) tai etik-kahapossa lämpötilassa välillä -10 ja 100°C, edullisesti 10-60°C, ja vielä edullisemmin huoneen lämpötilassa 30 minuutin ja 24 tunnin välisen ajan. Tuotteet erotetaan haihduttamalla liuotin ja ylimääräinen happo tai hankaamalla sopivan liuottimen kanssa, jota seuraa suodattaminen ja kuivaaminen.

Johtuen ylimääräisen hapon käytöstä ovat tuotteet yleensä 2 N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamidien (I) happoadditio-suoloja, jotka voidaan muuttaa helposti neutraloimalla vapaaksi amidiksi.

Nitroryhmän ja oksikarbonyyliryhmän, esim. bentsyylioksi-karbonyyliryhmän ja p-nitrobentsyylioksikarbonyyliryhmän , poistaminen toteutetaan helposti hydraamalla.

Samanaikaisesti muutetaan bentsyyliesteriryhmä, joka voi sisältyä R-ryhmään, karboksyyliryhmäksi hydrauksella .

Hydraus toteutetaan inertissä reaktioliuottimessa, esim. metanolissa, etanolissa, tetrahydrofuraanissa tai dioksaa- 7231 6 nissa, vedyllä aktivoidun katalyytin, esim. Raney-nikkelin, palladiumin tai platinan, läsnäollessa vetykehässä lämpötilassa, joka on 0°C ja liuottimen kiehumispisteen välillä ja edullisesti 10-80°C, 2-120 tunnin kuluessa.

Vedyn paine ei ole kriittinen ja ilmakehän paine on riittävä. 2 N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamidit (I) erotetaan suodattamalla katalyytti, jota seuraa liuottimen haihduttaminen.

2 N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamidit (I) voidaan puhdistaa trituoimalla tai kiteyttämällä uudelleen sopivasta liuotti-mesta, kuten dietyylieetteri-tetrahydrofuraanista, dietyyli-eetteri-metanolista ja vesi-metanolista, tai suorittamalla kromatografinen käsittely piioksidigeelin avulla.

G 2 Lähtöaineena käytetyt N -substituoidut N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamidit (XX) voidaan valmistaa seuraavasti: HN.

C - N - CH_CH_CH_CHCOOH (II) -> / I 22 2! H2N h NH2 il 7 7231 6 HN\ +RH (IV) C - N - CH„CH_CH„CHCOOH (III) I 2 2 2, -> HN ' 1

I R" HN

I I

R' R’" HN ^ - N - CH^CH^CH^CHCOR (V) ^ I 2 2 2. -> HN 1 1

I R" HN

I I

R' R"'

HN

.C - N - CH_CH-CH9CHC0R (XIX) ArSO?X(VII)

I I

I R” NH9

R* Z

HN

- N - CH_CHnCH~CHCOR (XX) / I 222.

HN 1 1 I R" HNS02 R' 1

Ar

Edellä esitetyissä kaavoissa R, Ar, X, R' ja R" on määritelty edellä. Ryhmien R' ja R" ollessa guanidinoryhmän suojaryhmiä, ne ovat edullisesti nitro, tosyyli, trityyli tai oksikarbo-nyyli. R"1 on α-aminoryhmän suojaryhmä, kuten bentsyyli-oksikarbonyyli tai tert-butoksikarbonyyli.

Edellä esitetyssä kaaviossa L-arginiiniamidit (XX) voidaan valmistaa suojaamalla L-arginiinin (II) guanidino- ja a-ami- noryhmät nitraamalla, asetyloimalla, formyloimalla, ftaloyloi- malla, trifluoriasetyloimalla, p-metoksibentsyylikarbonyloi- malla, bentsoyloimalla, bentsyylioksikarbonyloimalla, tert- butoksikarbonyloimalla tai trityloimalla, ja kondensoimalla G 2 sitten muodostunut N -substituoitu N -substituoitu L-arginiini 7231 6 (III) vastaavan aminohappojohdannaisen (IV) kanssa käyttäen sellaista tavanomaista menetelmää kuin happokloridimenetelmää, atsidimenetelmää, sekoitettua anhydridimenetelmää, aktivoitua esterimenetelmää tai karbodi-imidimenetelmää, ja poistamalla tämän jälkeen selektiivisesti ainoastaan N -substituoidun 2 2 N -substituoidun L-arginiiniamidin (V) N -substituentti hyd- raamalla tai happohydrolyysillä ja kondensoimalla sitten tä- ten saatu N -substituoitu L-arginiiniamidi (XIX) aryylisul- fonyylihalogenidin (VII) kanssa, edullisesti kloridin kanssa, emäksen ollessa liuottimena. Aminohappojohdannaiset (IV),

G

jotka ovat lähtöaineita valmistettaessa N-substituoituja N -substituoituja L-arginiiniamideja (V), voidaan esittää seuraavilla kaavoilla:

COOR, COOH

) \ / ^ H-N ) (X) H-N^_O (XII) (R.) b m

COOH

COOH j H-N^) (XI) Η"θθ <XIII)

Edellä mainituissa kaavoissa , R^ ja m on määritelty edellä.

Aminohappojohdannaisista ovat aminohappo-tert-butyyliesteri-johdannaiset edullisimpia, koska ne voidaan helposti muuttaa muiksi esterijohdannaisiksi happohydrolyysillä vastaavan alkoholin läsnäollessa käyttäen epäorgaanista happoa (HC1, ^SO^ jne.) tai käyttäen orgaanista happoa (tolueenisulfoni-happoa, trifluorietikkahappoa jne.). Sen menetelmän mukaisesti, jota käytetään valmistettaessa 2-piperidiinikarboksyyli-happo-johdannaisia (X), kuvataan menetelmää seuraavan kaavion avulla: 11 7231 6 (^<vmJäa2£^ O-'V.-'08-» 1 » H Cl (XIV) (XV) (XVI)

^ N^CN (H+) ^N^CO,H

' , 2

H H

(XVII) (XVIII)

Edellä esitetyn kaavion ensimmäisen reaktion mukaisesti saatetaan sopivasti substituoitu piperidiini (XIV) kosketuksiin natriumhypokloriitin vesiliuoksen kanssa lämpötilassa välillä -5 ja 0°C. Saatu tuote (XV) erotetaan uuttamalla liuottimena, esim. dietyylieetterillä, ja käsitellään sitten kaliumhydr-oksidilla alempi alkanoliliuottimessa, jolloin saadaan 1,2-de- 10 7231 6 hydropiperidiiniä (XVI). Syanogenoimisaineiden, esim. syaani-vedyn tai natriumsyanidin, vaikutuksesta muutetaan 1,2-dehyd- ' ropiperidiinit (XVI) vastaaviksi 2-syanoanalogeiksi (XVII). Hydrolysoitaessa 2-syanopiperidiinejä (XVII) 2-piperidiini-karboksyylihappojen (XVIII) valmistamiseksi suoritetaan tämä käsittelemällä 2-syanopiperidiinejä (XVII) epäorgaanisella hapolla, kuten kloorivetyhapolla tai rikkihapolla.

Aryylisulfonyylihalogenidit (VII), jotka ovat lähtöaineita 2 valmistettaessa N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamideja (I), voidaan valmistaa halogenoimalla vastaavia aryylisulfoni-happoja tai niiden suoloja, esim. natriumsuoloja, tavanomaisilla menetelmillä, jotka ovat alan asiantuntijalle hyvin tunnettuja. .

Käytännössä toteutetaan halogenoiminen ilman liuotinta tai sopivassa liuottimessa, esim. halogenoidussa hiilivedyssä ’

tai DMF:ssä, halogenoimisaineen, esim. fosforioksikloridin, J

tionyylikloridin, fosforitrikloridin, fosforitribromidin ! tai fosforipentakloridin läsnäollessa lämpötilassa välillä j -10 ja 200°C 5 minuutin ja 5 tunnin välisen ajan kuluessa.

Reaktion päättymisen jälkeen kaadetaan reaktiotuote jää- · veteen ja uutetaan sitten liottimella, kuten eetterillä, j bentseenillä, etyyliasetaatilla, kloroformilla yms.

Aryylisulfonyylihalogenidi voidaan puhdistaa kiteyttämällä uudelleen jostain sopivasta liuottimesta, kuten heksaanista, bentseenistä yms.

2

Menetelmässä b) N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamidi (I) 2 valmistetaan kondensoimalla N -aryylisulfonyyli-L-arginyyli-halogenidi (XXII), edullisesti kloridi, vähintään ekvimolaa-risen määrän kanssa aminohappojohdannaista (IV).

* i

Kondensaatioreaktio voidaan toteuttaa käyttämättä lisättyä liuotinta emäksen läsnäollessa. Tyydyttäviä tuloksia saadaan kuitenkin käytettäessä liuotinta, kuten emäksisiä liuottimia ti 11 7231 6 (dimetyyliformamidia, dimetyyliasetamidia jne.)» tai halo-genoituja liuottimia (kloroformia, dikloorimetaania jne.).

Käytetyn liuottimen määrä ei ole kriittinen ja se voi vaih- 2 della välillä noin 5-100-kertaisesti käytetyn N -aryylisulfo-nyyli-L-arginyylihalogenidin (XXII) painoon verrattuna.

Edullisimmat kondensaatioreaktion lämpötilat ovat alueella välillä -10 ja 80°C ja edullisesti 20-50°C. Reaktioaika ei ole kriittinen, mutta vaihtelee käytetystä aminohappojohdannaisesta (IV) riippuen. Yleensä 5 minuutin ja 10 tunnin välinen aika on sopiva.

2

Saatu N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamidi voidaan erottaa ja puhdistaa edellä kuvatulla tavalla.

2 Lähtöaineena käytetty N -aryylisulfonyyli-L-arginyylihaloge-nidi (XXII) voidaan valmistaa seuraavasti: HNX f - N - CH2CH2CH2CHCOOH (VII) +ArSQ2X ^ H2N NH2 ”

HN. H

X I

C - N - CH2CH2CH2CHCOOH (XXD _> H2N hLo, I 2

Ar HN% f - N_ - CH2CH2CH2CHCOX (XXII) h~n ti* λ 2 HNS0o I 2

Ar

Edellä esitetyissä kaavoissa R, Ar ja X on määritelty edellä.

2 12 7231 6

Edellä esitetyssä kaaviossa N -aryylisulfonyyli-L-arginiini (XXI) voidaan valmistaa kondensoima11a L-arginiini (II) oleellisesti ekvimolaarisen määrän kanssa aryylisulfonyylihaloge-nidia (VII) käyttäen samanlaista menetelmää, joka on kuvattu kondensoitaessa L-arginiiniamidi aryylisulfonyylihalidin kanssa.

2 N -aryylisulfonyyli-L-arginyylihalogenidi (XXII) voidaan 2 valmistaa saattamalla N -aryylisulfonyyli-L-arginiini (XXI) reagoimaan ainakin ekvimolaarisen määrän kanssa halogenoimis-ainetta, kuten tionyylikloridia, fosforioksikloridia, fosfori-trikloridia, fosforipentakloridia tai fosforitribromidia. Halogenoiminen voidaan toteuttaa käyttäen liuotinta tai ilman tätä.

Edullisimpia liuottimia ovat klooratut hiilivedyt, kuten kloroformi ja dikloorimetaani, metaani ja eetterit, kuten tetrahydro-furaani ja dioksaani.

Käytetyn liuottimen määrä ei ole kriittinen ja voi vaihdella 2 noin 5-100-kertaisesti N -aryylisulfonyyli-L-arginiinin (XXI) painoon verrattuna.

Edullisin reaktiolämpötila on arvosta -10°C aina huoneen lämpötilaan. Reaktioaika ei ole kriittinen, mutta vaihtelee riippuen halogenoimisaineesta ja reaktiolämpötilasta. Yleensä aika, joka on välillä 15 minuuttia ja 5 tuntia, on sopiva.

2 Tältä alalta on hyvin tunnettua, että sellainen N -aryyli- sulfonyyli-L-arginiiniamidin (I) esterijohdannainen, jossa 2

Rg on alkyyli voidaan valmistaa sellaisesta N -aryylisulfo-nyyli-L-arginiiniamidin johdannaisesta, jossa Rg on vety, tavanomaisilla esteröimismenetelmillä, jotka ovat alan asiantuntijalle hyvin tunnettuja. On myös hyvin tunnettua tältä alalta, että karboksyylihappojohdannainen voidaan valmistaa esterijohdannaisesta tavanomaisen hydrolyysi- tai asidolyy-simenetelmän avulla. Ne olosuhteet, joiden vallitessa este-röiminen, hydrolyysi tai hapolla hajottaminen voidaan toteuttaa, ovat asiantuntijalle tunnettuja.

tl 2 13 7231 6

Keksinnön mukainen N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamidi (I) muodostaa happoadditiosuolan erilaisten epäorgaanisten ja 2 orgaanisten happojen kanssa. Muutamat N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamidit, jotka sisältävät vapaan karboksyyliryhmän muodostavat suoloja erilaisten epäorgaanisten ja orgaanisten emästen kanssa.

Edellä kuvatut reaktiotuotteet voidaan erottaa vapaassa muodossa tai suolojen muodossa. Lisäksi tuote voidaan saada farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen muodossa saattamalla jokin vapaa emäs reagoimaan hapon, kuten kloo-rivetyhapon, bromivetyhapon, jodivetyhapon, typpihapon, rikkihapon, fosforihapon, etikkahapon, sitruunahapon, maleiini-hapon, meripihkahapon, maitohapon, viinihapon, glukonihapon, bentsoehapon, metaanisulfonihapon, etaanisulfonihapon, bent-seenisulfonihapon, p-tolueenisulfonihapon yms. kanssa. Samalla tavoin voidaan tuote saada farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan muodossa saattamalla jokin vapaa karboksyylihappo reagoimaan emäksen, kuten natriumhydroksidin, kaliumhydroksidin, ammoniumhydroksidin, trietyyliamiinin, prokaiinin, dibentsyy-liamiinin, 1-efenamiinin, N,N'-dibentsyylietyleenidiamiinin, N-etyylipiperidiinin yms. kanssa.

Samalla tavoin käsiteltäessä suoloja emäksellä tai hapolla aikaansaadaan vapaan amidin regeneroiminen. 1

Kuten edellä mainittiin, on keksinnön mukaisille N -aryyli-sulfonyyli-L-arginiiniamideille ja niiden suoloille tunnusomaista niiden erittäin spesifinen estovaikutus imettäväisissä verisuonitukosten suhteen samoin kuin niiden oleellinen myrkyttömyys, ja tämän johdosta nämä yhdisteet ovat käyttökelpoisia diagnostisina reagensseina määrättäessä verisuonitukoksia veressä ja/tai verisuonitukosten estämiseksi .

7231 6 14

Keksinnön mukaiset yhdisteet o\ t myös käyttökelpoisia estettäessä verihiutaleiden aggregoituminen.

2

Keksinnön mukaisen N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamidin verisuoni-tukoksia hajottavaa aktiivisuutta verrattiin tunnetun verisuonitu- n koksia vastustavan aineen N -(p-tolyylisulfonyyli)-L-arginiinime-tyyliesterin vaikutukseen määräämällä fibrinogeenin koaguloitumisaika. Fibrinogeenin koaguloimusaikamittaukset suoritettiin seuraavasti: 0,8 ml:n suuruinen osa fibrinogeeniliuosta, joka oli valmistettu liuottamalla 150 mg naudan fibrinogeeniä (Cohn-fraktio I), jota valmistaa Armour Inc., 40 ml:an boraatti-suolapuskuria (pH 7,4) sekoitettiin 0,1 ml:n kanssa boraattisuolapuskuria, pH 7,4 (vertailu), tai samassa puskurissa olevan näyteliuoksen kanssa, ja 0,1 ml trom-biiniliuosta (5 yksikköä/ml), jota valmistaa Mochida Pharmaceutical Co., Ltd., lisättiin näihin liuoksiin jääkylvyllä.

Välittömästi sekoittamisen jälkeen johdettiin reaktioseos jääkyl-vyltä sellaiseen kylpyyn, jota pidettiin lämpötilassa 25°C. Koa-guloimisajaksi otettiin se aika, joka kului siirrosta 25°C lämpötilan omaavaan kylpyyn siihen hetkeen, jolloin ensimmäiset fibriini-säikeet ilmaantuivat. Niissä tapauksissa, joissa lääkenäytteitä ei lisätty, oli koaguloitumisaika 50-55 sek. Koetulokset on esitetty taulukossa 1. Termi "väkevyys, joka vaaditaan pidentämään koagu-loimisaika kaksinkertaiseksi", on sen aktiivisen aineosan väkevyys, joka tarvitaan pidentämään normaali koaguloitumisaika, 50-55 sekuntia, 100-110 sekunniksi.

Väkevyys, joka tarvittiin pidentämään koaguloitumisaika kaksinkertaiseksi käytettäessä tunnettua verisuonitukoksia estävää ainetta N1-(p-tolyylisulfonyyli)-L-arginiinimetyyliesteriä, oli llOO^um. Inhibiittorit on esitetty taulukossa 1 esittämällä R ja Ar kaavassa (I) ja addiitioryhmä.

y

Annettaessa liuosta, joka sisälsi keksinnön mukaista N -aryyli-sulfonyyli-L-arginiiniamidia intravenööttisesti eläimille, säilyi voimakas verisuonitukoksia estävä aktiivisuus kiertävässä veressä 1-3 tuntia. Keksinnön mukaisten verisuonitukoksia estävien yhdisteiden puoliintumisaika kiertävässä veressä oli suunnilleen 60 min. Koe-eläinten (rotat, kaniinit, koirat ja simpanssit) fysiologiset 4* 15 7231 6 tilat voitiin hyvin ylläpitää. Fibrinogeenin kokeellinen hajottaminen eläimissä, joka aikaansaatiin infusoimalla trombiinia, voitiin valvoa tyydyttävästi antamalla samanaikaisesti keksinnön mukaisia yhdisteitä.

Akuuttiset myrkyllisyysarvot (LD^q) määrättynä antamalla laskimon sisäisesti kaavan (I) mukaisia yhdisteitä hiirille (uros-hiiri 20 g) ovat noin 150-600 mg/kg ruumiin painoa.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden tyypilliset LD^^-arvot on esitetty seuraavassa taulukossa.

Yhdiste

HN

X

C - NH - (CH~)CHCOR

/ 2 3i H2N HNS02Ar LD50 (mg/kg)

Ar R

CH3 /—\ I - N V- CH_ 270 \ / 3 '

1 COOH

Cl J ‘ ">_V CH3 300

I COOH

Vastaavasti saatiin seuraavat LD^Q-arvot annettaessa hiirille laskimonsisäisesti US-patenttijulkaisusta 3 978 045 tun-2 nettuja N -dansyyli-L-arginiinijohdannaisia.

16 7231 6

Yhdiste HN.

V

C - NH - (CH0)oCHC0R

/ 2 3I

h2n hnso2 /v/^l

{JLJ

n(ch3) 2

Yhdiste R LD5Q(mg/kg) 2 N -dansyyli-L-arginiinin -0(CH2)3CH3 60 n-butyyliesteri 4-metyyli-1-(N2-dansyyli- _ ^ VCH 8 L-arginyyli)piperidiini V_/ ^ 4-etyyli-1- (N^-dansyyli) - . Ν^Λ-ΟΗ,α!, 8 L-arginyyli)piperidiini \—f 2- (N2-dansyyli-L-arginyyli) - _ 0 isoindoliini

Vastaavat LD^^-arvot annettaessa yllämainittuja yhdisteitä suun kautta ovat >6000, 1310, 1375 ja 1360 mg/kg, kuten on esitetty US-patenttijulkaisun 3 978 045 palstan 13 riveillä 36-44.

DE-hakemusjulkaisun 2 550 088 sivulla 31 on esitetty, että LD^Q-arvot määritettynä antamalla hiirille (uroshiiri 20 g) suun kautta N2-naftyylisulfonyyli-L-arginiinijohdannaisia ovat noin 1000-10 000 mg/kg ruumiin painoa. On huomattava, että nämä LD^Q-arvot on saatu antamalla yhdisteitä suun kautta, joten ne eivät ole suoraan vertailukelpoisia niihin LDj-Q-arvoihin, jotka on saatu antamalla keksinnön mukaisia 17 7231 6 yhdisteitä laskimonsisäisesti hiirille. On yleisesti omaksuttu, että suun kautta annetun yhdisteen LD^^-arvo on paljon suurempi kuin jos samaa yhdistettä annetaan laskimonsisäisesti. Yleensä laskimonsisäisesti annetun yhdisteen LD^^-arvo eroaa suun kautta antamalla saadusta LD,...-arvosta kertoimella 100. Tämä merkitsee sitä, että DE-hakemusjulkaisussa 2 550 088 esitetyt, suun kautta antamalla saadut LD^-arvot 1000-10 000 rag/kg vastaavat laskimonsisäisellä annostuksella likimain LD^-Q-arvoja 10-100 mg/kg.

Edellä esitetystä ilmenee selvästi, että keksinnön mukaisilla 2 uusilla N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamideilla on olennaisesti alhaisempi myrkyllisyys kuin US-patenttijulkaisusta 3 978 045 ja DE-hakemusjulkaisusta 2 550 088 tunnetuilla yhdisteillä.

On ilmeistä, että typpeä sisältävän renkaan, kuten piperi-diinin, 2-asemaan sitoutunut karboksyylihapporyhmä keksinnön mukaisissa yhdisteissä myötävaikuttaa yllättävän alhaiseen myrkyllisyyteen.

Keksinnön mukaisia terapeuttisia aineita voidaan annostella imettäväisille, ihmiset mukaanlukien, pelkästään sellaisinaan tai yhdessä farmaseuttisesti sopivien kantaja-aineiden kanssa, joiden määrä määrätään riippuen yhdisteen liukoisuudesta ja kemiallisesta luonteesta, annostustavasta ja tavanomaisesta farmaseuttisesta käytännöstä.

Näitä yhdisteitä voidaan injektoida esim. parenteraalisesti, so. lihakseen intravenööttisesti tai subkutaanisesti. Parente-raalista annostelua käytettäessä voidaan yhdisteitä käyttää steriilien liuosten muodossa, jotka sisältävät muita liukenevia aineita, esim. riittävästi suolaa tai glukoosia, liuoksen tekemiseksi isotoniseksi. Yhdisteet voidaan annostella oraalisesti tablettien, kapselien tai rakeiden muodossa, jotka sisältävät sopivia lisäaineita, kuten tärkkelystä, laktoosia, sokeria yms. Yhdisteet voidaan annostella myös sublinguaali-sesti rakeiden tai juoksevassa muodossa, jolloin kukin aktii- 18 7231 6 vinen aineosa on sekoitettu sokerin ja maissisiirapin kanssa sekä maku- ja väriaineiden kanssa ja dehydrattu sitten riittävästi seoksen tekemiseksi sopivaksi puristusta varten kiinteään muotoon. Yhdisteet voidaan annostella myös oraalisesti sellaisten liuosten muodossa, jotka voivat sisältää väri- ja makuaineita. Lääkäri määrää näiden terapeuttisten aineiden sen annoksen, joka on sopivin ihmisille, ja nämä annokset voivat vaihdella riippuen annostustavasta ja käytetystä yhdisteestä. Lisäksi annostus voi vaihdella riippuen käsiteltävästä potilaasta.

Kun seosta annostellaan oraalisesti, niin suurempi aktiivisen aineen määrä tarvitaan saman vaikutuksen aikaansaamiseksi mikä aikaansaadaan pienempää parenteraalista annosta käytettäessä.

Terapeuttinen annos on yleensä 10-50 mg/kg aktiivista aineosaa parenteraalisesti ja 10-500 mg/kg oraalisesti vuorokaudessa .

Seuraavassa keksintöä kuvataan lähemmin suoritusesimerkkien avulla.

Esimerkki 1 _G 2 (A) Etyyli-1-/N -nitro-N -(3-sykloheksyyli-4-metoksifenyyli-sulfonyyli)-L-arginyyli7-4-metyyli-2-piperidiinikarb-oksylaatti.

Q

Hyvin sekoitettuun liuokseen, jossa oli 2,05 g etyyli-1-(N -nitro-L-arginyyli)-4-metyyli-2-piperidiinikarboksylaatti-hydrokloridia ja 1,26 g NaHCO^ 10 ml:ssa vettä ja 40 ml:ssa dioksaania, lisättiin annoksittain 2,2 g 3-sykloheksyyli-4-metoksibentseenisulfonyylikloridia samalla kun lämpötila pidettiin arvossa 0°C. Reaktioseosta sekoitettiin yön yli huoneen lämpötilassa. Tämän jakson päätyttyä reaktioseos haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 50 ml:aan etyyliasetaattia ja etyyliasetaattiliuos pestiin peräkkäin 10 %:sella sitruunahapolla, kyllästetyllä NaClrlla, kyllästetyllä tl 19 7231 6

NaHCO.j:lla ja kyllästetyllä NaCl-liuoksella. Etyyliasetaatti- liuos haihdutettiin ja jäännöstä käsiteltiin kromatografi- sesti piioksidigeelillä, joka oli pakattu kloroformiin, ja eluoitiin kloroformilla, joka sisälsi 3 % metanolia. Pääfrak- tio haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 2,6 g etyyli-1-— G 2 /N -nitro-N -(3-sykloheksyyli-4-metoksibentseenisulfonyyli)-L-arginyyli7-4-metyyli-2-piperidiinikärboksylaattia.

I.R. (KBr): 3400, 1735, 1635, 1250 (cm‘1).

_2 (B) Etyyli-1-/N -(3-sykloheksyyli-4-metoksifenyylisulfonyyli)-L-arginyyli7~4-metyyli-2-piperidiinikarboksylaattiase-taatti.

_G 2

Liuokseen, jossa oli 2,6 g etyyli-1-/N -nitro-N - (3-sykloheksyy- li-4-metoksifenyylisulfonyyli)-L-arginyyli7-4-metyyli-2-piperi-diinikarboksylaattia 40 ml:ssa etanolia, 10 ml vettä ja 20 ml etikkahappoa, lisättiin 0,5 g palladiummustaa ja tämän jälkeen seosta ravistettiin vetykehässä 15 tuntia huoneen lämpötilassa. Liuos suodatettiin katalyytin poistamiseksi ja haihdutettiin, jolloin saatiin öljymäinen tuote.

Saostettaessa uudelleen etanoli-dietyylieetteristä saatiin 2 2,4 g etyyli-1-/N -(3-sykloheksyyli-4-metoksifenyylisulfonyyli)-L-arginyyli7-4-metyyli-2-piperidiinikarboksylaattiasetaattia.

_2 (C) 1-/N -(3-sykloheksyyli-4-metoksifenyylisulfonyyli)-L-arginyyli7-4-metyyli-2-piperidiinikarboksyylihappo.

_2

Liuosta, jossa oli 2,4 g etyyli-1-/N -(3-sykloheksyyli-4-metoksifenyylisulfonyyli)-L-arginyyli/-4-metyyli-2-piperi-diinikarboksylaattiasetaattia 10 ml:ssa etanolia ja 10 ml 1-n NaOH-liuosta, sekoitettiin yli yön huoneen lämpötilassa.

Tämän jälkeen reaktioseos väkevöitiin ja liuotettiin 10 ml:aan vettä. Liuos neutraloitiin 2N HCl-liuoksella, jolloin saatiin valkoinen, kumimainen sakka, joka liuotettiin 150 mlraan kloroformia. Kloroformiliuos pestiin kyllästetyllä NaCl-liuoksel- la, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutet- -2 20 7231 6 tiin tyhjössä, jolloin saatiin 1,52 g 1-/N - (3-sykloheksyyli-4-metoksifenyylisulfonyyli)-L-arginyyli7-4-metyyli-2-piperi-diinikarboksyylihappoa amorfisena kiinteänä aineena.

I.R. (KBr): 3350, 2920, 1620, 1250 cm"1.

Analyysi - laskettu yhdisteelle C26H41°6N51 2 3 4 (%): C 56,60; H 7,49; N 12,70 Todettu (%): C 56,51; H 7,53; N 12,68

Esimerkki 2 Tässä esimerkissä esitetään yleinen kuvaus, kuinka kaavan I 2 mukaisia N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamideja voidaan valmistaa menetelmällä b.

2 (A) N -(trisubstituoitu fenyylisulfonyyli)-L-arginiini.

Hyvin sekoitettuun liuokseen, jossa oli 16,7 g L-arginiinia 150 ml:ssa 10 %:sta kaliumkarbonaattiliuosta, lisättiin 26,1 g trisubstituoitua fenyylisulfonyylikloridia 150 ml:ssa bentsee-niä. Reaktioseosta sekoitettiin 60°C:ssa 5 tuntia, jolloin tuote saostui. Reaktioseoksen annettiin seistä yhden tunnin ajan huoneen lämpötilassa, minkä jälkeen sakka erotettiin suodattamalla ja pestiin peräkkäin bentseenillä ja vedellä, jolloin 2 saatiin 31,4 g (81 %) N -(trisubstituoitua fenyylisulfonyyli)-L-arginiinia.

2 (B) N -(trisubstituoitu fenyylisulfonyyli)-L-arginyyli-kloridi.

li lä, jolloin saatiin N -(trisubstituoitua fenyylisulfonyyli)- L-arginyylikloridia.

2

Suspensiota, jossa oli 3,93 g N -(trisubstituoitua fenyyli-sulfonyyli)-L-arginiinia 20 mltssa tionyylikloridia, sekoi 3 tettiin 2 tuntia huoneen lämpötilassa. Lisättäessä kylmää kuivaa dietyylieetteriä muodostui sakka, joka erotettiin suodattamalla ja pestiin useita kertoja kuivalla dietyylieetteril- 4 2 _2 21 7231 6 (C) Etyyli-1-^N - (trisubstituoitu fenyylisulfonyyli)-L-arginyyli7-4-metyyli-2-piperidiinikarboksylaatti.

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli 1,7 g 4-metyyli-2-piperi- diinikarboksyylihapon etyyliesteriä ja 4,0 ml trietyyliamii- nia 50 ml:ssa kloroformia ja jota jäähdytettiin jää-suola- 2 hauteella, lisättiin varovasti yllä valmistettua N -(tri- substituoitua fenyylisulfonyyli)-L-arginyylikloridia. Reak- tioseosta sekoitettiin yön yli huoneen lämpötilassa. Tämän ajanjakson lopussa lisättiin 50 ml kloroformia ja klorofor- miliuos pestiin kahdesti 25 ml:11a kyllästettyä natrium- kloridiliuosta, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin tyhjössä, öljymäinen jäännös pestiin etyyli- -2 eetterillä, jolloin saatiin 2,1 g jauhemaista etyyli-1-/N -(trisubstituoitua fenyylisulfonyyli)-L-arginyyli/-4-metyyli- 2-piperidiinikarboksylaattia.

-2 — (D) 1-/N -(trisubstituoitu fenyylisulfonyyli)-L-arginyyli/- 4-metyyli-2-piperidiinikarboksyylihappo.

_2

Liuos, jossa oli 2,0 g etyyli-1-^N -(trisubstituoitua fenyylisulf onyyli) -L-arginyyli7~4-metyyli-2-piperidiinikarboksylaat-tia 10 mlsssa metanolia ja 10 mlrssa 2N NaOH-liuosta, lämmitettiin lämpötilaan 40°C ja pidettiin tässä lämpötilassa 10 tuntia. Tämän ajanjakson lopussa reaktioseos väkevöitiin ja (r) kromatografoitiin 200 ml:11a Daiaion ^ SK 102-ioninvaihto-hartsia (200-300 mesh, H+-muoto, valmistaja Mitsubishi Chemical Industries Limited), joka oli pakattu veteen ja pesty etanoli/vedellä (1:4), eluoiden etanoli/vesi/NH^OH:11a (10:9:1). Pääfraktio haihdutettiin kuiviin ja pestiin etyyli-eetterillä, jolloin saatiin 1,2 g (69 %) 1-/N -(trisubstituoitua fenyylisulfonyyli)-L-arginyyli7_4-metyyli-2-piperidiini-karboksyylihappoa amorfisena kiinteänä aineena. 1

Erilaisia muita N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamideja tai niiden happoadditiosuoloja valmistettiin synteettisesti edellä esitetyissä esimerkeissä kuvattujen menetelmien avulla ja koetulokset on esitetty taulukossa 1.

22 7 2 3 1 6 ^ o o o ίο I m ΰη δ o ~~ rl ojin c\i «— cn «— en <7> CNj vO^— vO \£) v£> ^ ® λ «s », *s * * λ «v jjo- oo o o oo oo oo m cm m vo oo m <t Ovo m vo en cm <j·^ m <— <f m ▼— m»— m *— m *— en <— ^ -—---.--- 't! 2 O xi 'j- ui γ^τ- r^vo noo lj Z, r-~ oo r-~ mj- en cMn r- as cm cm cm cm n cm nn n cm couiTO t— t— ^ ^ ^- C « O ------- ?'_IU as en r^o von o n o oo <rn ό-γ^ tn vo nm -r- o "2,cL \D \D uin SOVO 1Λ1Ο a G G __ ^ ω 4> c_>------ ti ί o - nm voin oo oo r-. in

~ vo LO CM »- <f in »—O r^O

« · « » * · * -v£>vo r*- rs men οσ> *— cn mm mm mm mun mm Π3 * H i-J ~ ’ 1 " —

^ u ci Φ a> e T3 ιλ v> «r-ι O >>·^ S O Ui i—« O W

t <u----- (Λ d ·

• h dj icd S £6 6·«-* O

r-IU)HW·· (fl ^ a) <y e >uuw ^ T—i o i e i , V<^ O · rJ ♦ — - —»—---- v ·—> *rJ | i w

3 i-* 3 ^ u G

"" · u ^ o. il b 3

1—1 UI -r4 ·>-< UI 41 -C

3 >, Ό O C ^ c« x <o ι-ί cfl E C ,_ ,_ μ > Λ 3 ·ηΜ M M .> „ „

0)>öOnJUU)Ulj 0 Q O

Jbi O VI C ^ J<| :ro nj o · r4 ^ ^ G Ό ^ ui j o • rJ '"" ~~ ' · 1 · jj :^3

•h H

t) x Ό >> < ^ I i I I | m - i * rS - = = r°) o o & K^y ®/%r y ? ni 7 m | ä i o I oi o-^ a 1 o esi |

K 32 U

esi-----

X

u

(N

X

O

80 T /-n, ,r-\ <©> (O) <θ) /\ < v*/ » <S) »r >=< V\ V< β p ¥ M p

to__________J__I

:<TJ .. j ! X. e — cm n ! <r n 7231 6 23 o o o o o o

Γ} CN σ> CM CM

^ ^ ^ CM MD O

»—1 T— T __ cd g .5 " * *

O. O O ΙΛΟ O O O O O uO

^ O CO I^vO Oio O -d O ro •d vO ro <t «d cn -d -d o ro··— ro — ro *— ro -»— ro *- ------ «n I ·τ-ο ro at oo m o o inco

£ 73 rj ul-d — ro ro <r CO O oO

r* t: " ·> « ·> *> «λ " r. »> ^ j2 <u N m n n cn cm -o « »1 Ό ^ ^ ^ ^ ' C (fl O X-----

<0 H D

Ϊ .. cm vo v£>r^ vooo σ>νο <r in .iJ .M cj ro -- O v£> \£> -d ro 00 T- ^ g“ g" uouo νονβ r'- o~ o- vor^

Jt! <U « O----- '"j tr! m oo vooo n n o cm in ^

\o oo OOO CO CM OOO 00 VO

« fl #1 /1 A ^ f) A A A

* roro ro <j- γ*-*γ·ή \o vo v^vd mm mm mm mm mm

Cd ·Η 4J ~ " ' ‘ * - 1 — ^ li n} <D Ö) C Ό (Λ V) *pl 3 >%·*-! 0 3 U4 H O V) /"“s

3 I

p i «-----— - v V) e

i) (i) ;cd S

Cd £ β S ’rA O

T-. »—I W f—« W *· w n) 3 o) o) e _ __ _

> u U w o I e I

^ O *H · r·! ------M

V .·—>.r-l I | C/> Π} -—n.

- u 0 —« ^ U g * u U a* Q) U o w .h »h (/) a» ^ 3 >> Ό o e n: ^ n) >i n) .-i rt 6 d t-i > fl 3 ·ηΜ ή -rl 41 > M d u M B) u» dd to 0> C d>d .

:co to O a) to a> 0 > d<! dd Soi tn

O

• ψΑ ~ Γ _ " ““““ 4-i :rd e ® T3 J= o a >» o < u I I I I o ro

X

O

g° pTk1 8 S Ι'φ »krO ivOg^Xh

S3 'f oi o o o | υ o I

5-z o 1 o 1 o I

CM I

te 33 U

CM-----

X

u

CM

λ = M .© Q| . © ί § ^ <β M P £5) U i >> o----- | :cd .» i vo e 0 ; 'o oo σ\ T- 24 7231 6 t-i Γ" ................ 11 I . .....—.

to o o oo oo o lo oo

^ CM M CO 0-4 \0 CN 00 CM O

C3- v£> CO v£> CO sO -x? CM s£) t— oi 1 e (f> λ * * n #i * am M O. oo oo oo oo oo 00 vO OvO 0000 0000 lo 00

CO st st sf coo coco COCO

CO ·— CO··— CO·— CO·— CO »- z ------

'5! 3 3 'O LO VOIO MD Ό CO T~ CM

^ jj U MD < vO 00 MD LO vOvD CM CM

QJ i_i ^ * ΛΛ -£> Ό vDvO vA \0 ^OvO Ό c3v)T3 ^ C CO O X-----

Rj .-14-1 2-., ., ^ co σ> o o>r^* eri c-j ·«— ν,ο .η com co cm coco co <r mdoo rö Cl Q> λ Λ * * #» #>λ 3 g g vD vD \£) v£> '»O'^O vO vO νβ Ό ^ coco o- oo r^. m r^. oo co lo <r ► ^ ^ A A A firt ^ ft , sfst sr-a- st~t stst co co

CO LO LOLO LOCO LOCO COLO

Π3 <H j-l “ U Π) 1) •rJ , --1 B 3 ·§ -s ^ H O “> = r = = 3 ·<->

3 I

t, I ------- cfl wc· .™ OJ s ^ C? b e b < o ,-IWr-CW··

n) 3 <U <U C

>4_ιυ^ eg CM CM CM CM

H

o I C I

, V O * ^ » I ^ I — 111

vj *n*r4 i \ in o3 -^N

3 4-1 3 ^ u £ * iJ U a > T3 O C ‘-I ^ <d ϊ>> rj ♦—« «tj E d i ..-.

a) > oo pj 4J w w! * Ä ^ (¾ W C ^ ^ ' Q ¢3 Q y-vj n) o ^ o» fl) CJ i ^ ^ > ^ E Ό ^ in o •H - -*----

4-1 :rj E

Ό jd Ό >> < M I I I I I ! .1 ‘ h . ·

£ ? ^ I

υ^ΐ= S

X 32 u CM-----

X

o EC1 v s { \ JrC ZV{ Ζ^Λ a^ye’ CO PC I co j

<l) EC U ! EC

4J CJ ! cj I !

>s o----j___ I

:ro ·♦ I ! ^ c ^ CN co f LO j il 25 7231 6 __________ i! o o ~ ~ ~ ~ rj cm oo :rt :rt :rt :rt ·*· so m a) * p> > > > , >- — 4) Φ 4) Φ J 1 a —ι —' '—1 I—1 * £· «« —- v— m O OOO O O m oom ooo i-1 ^ o in mom m — m m — so m -st m ic i- m so — n io *- m λ - »s * *s * »ι ^Λ»ι *»*<*» m τ— m *— m m *- m *— ·«— ------- •rt ,3 _ ^ σι 00 mesi σ> oo oo ϊ ti * ι μ ν <3·<χ m <τ viesj^resj

jjj SO 5θ sO M3 00 00 sO sO MT mT

rt m -ο »-ι— τ- ν C rt O 3J----- rt ι—ι u *ί — m γμ oo m οο cm — οο ο ^'·· sO SO m — <f CM Ο") — 00 00 ·« * ·-* ·Η #,λ r, *· * * ÄÄ #s#t so so r~ C"* sOso ι— γμ so so O Be Φ Q) U ------ r* ^ oom o ° - -- o — mo <>*< me- cso mo cm — — o *1 Μ Λ Λ · Λ Λ Λ» mm <r ^ oo <t cn cm ι mm m ^ mm mmmm <tj ι rt .h jj — " " " " ·" υ co O)

<y e Ό (U

tO (Λ ·γΊ D _2

>>»r4 B D 3 * S ~ C

li< H O W

/-v 3 ι 3 ι cu-----

Tj <λ e · tl aiM B ^ ® ε e e -i o ^7 f-4 to H VJ ··

CÖ3(UDC^si Csj CN Csj CN

> AJ iJ w

p—I

O | e I

.V. O *rl »rl ι —— — ι .— i- - —- -I— . — — - - V ·*“) *r-l I I t0 Π3 /-~s

- MJ 3 -r-l ^ U E

j- « u o o. φ Vj 3 —1 ίο ·ι-ι -rl in Φ - 3 χ m o e ---ι ^ rt x rt —ι rt 6 C f_i > rt 3 ·>-> :rt ·η ·rj Φ > öo rt m-ι tn in 3*: rt tn e jd rt rt O 'rl Φ B) 41

> -ϋ E rt m i I

O

♦ H '' ' — *"“*““— — "

4-J :qJ E

xj X

X) >> < m ι ι ι ι ι mm m

O 5 O

I?" -vU &1 · άΐ = S-i 8 1 I u ι ° ΓΜ 1 K X o CM-----

X

0 CM os 05 li _ V ¥ S.,

1 Λ Λ 3 cm C J

υ VJ Sf \V I Ä I K

/ \ ^ yV «f * “ ^ vs^ -i> -ö -ö ^-6 m i φ x MJ U 11 x o-----1 | :rt · 1

X. n SO IM 00 OS O

26 7 2 3 1 6

hi y->s /*—v /—% /-n /-% A

3 :cd :cd :td :cd :td :cd red red :td

CD Φ0> DO) 0)<U 0)<U

^ Γ"· > >> >> >> >> , Ο ω <V (D Q) Ci Φ 0)0)

^ — ?—4 I—I r—I ι—I i—l i—I i—f t—I i“H

K G v^/ N»/ s^/ w Vw/ 'w'

’ y O O LO ΟΟυΊ O O LO O O uo OOlO

^ UO <N m ΟΟιΛ o O LO lO *— u0 LO LO

CO vO CO s£> CO vO Cl vD CO sO *— CO V CO *— 1— CO *-* *“ (O'— co X-----_ ^ CN CN Cs) CT> CO CO *— CO On

^ ^ J O co O CO 0^0^ NT CN <T CO

^ ^ hi <r co coco coco coco I—1 X G) ,_ T_ ,_ ^_ ,_ ,_ '_ ,__ co cn ~0 » C <0 O ------ cO .—i u JJ vO -- v£> lO vO 00 vD )"- Ό r- c " vom vo en m en r-~ oO r^o

3 S’ 9* vDvD vDO OvD OO OvO

3 EE

x l< <tvD <r Cn) voo- CMCO CN -- •v «V ft* *******

OO o o co co LO LO LO LO

' LO uo LOlO LO LO LO uO lO LO

π! I

(¾ ·Η A-J ' -" — — — I

U Cd <D

(1) e T3 ifl ΙΛ-Η D A} >> -h s o

Cjl< i—i 0 W 3 ~ “ cd D ,

0 I

^ l 0)______

4J V> C

cd ¢) :(¾ E y—n •ι-n ε ε ε ·*-< o \^y r-( ΙΛ *-< W · * to 3 41 oi e

>4-14-)'-' CM CN CN esi CM

•—4 oic; i ,'jL O ’ H · fi *r4 1 — — -1 — .....— i ___

V ‘Π'γΙ I I to fd y—N

3 u D ^ i u £

* U U CL 0) U D

*—1 c/j ,,-t cn 0) 3 >.OOC‘H^w

cd >> cd <d ε C

£-1 > d 3 **—> led ·H ‘r-4 d > CD d U ΙΛ (Λ ^ cd ω c ^ :<d cd o <d cd <d .

> ^ ε Ό ^ tn ;

I I O

♦ p-4 _ ~~ “—" — — 11 1 1,1 ' - u :rd ·-) ε to x: Ό >v

< 1-) t I t I I

CO

t13

Cd CJ

« t, Ai o o I I ffi

o oo Sz-^O

Ä I TO

o- u fM I n: 33 o

CsJ ------

X

o cm X ffi X o o 00

U CN * K

I K O- u ® x z a u esi o

I O esl a CN

o u esi a o a a / \ < a υ ο υ eno // \ u o . cn a a z z esi / _I _ a o— u - sQ! <5 -Oi-Os s£> v£> ^ ( t 0^ E r< λ a a * a »> ' ^ oo o LO oo mm oo ^ o co oor^. m<r x> -<f o ro <t roro ro *“ ro cm Γθτ~ C0t- rO'- ro ro 22-----_ *rf f? - ctn oo \Octn rooo rnro

^ Ij vO CO CN'- cr\ vO vO

^ S ti CM CM 'sO roro CM CM CM CM

«—^^ ,_ ,_ .,_ ,_ ^ ro u) "O ' C <ϋ O -------

Cfl r-i U

JJ -d-oo n co vO\o o <f .5.^.^ roro ro cm '00 cMm *- o 2 S* 2* mm \D i— r-- 3 EH ____ ^ <r σ> m so ^— ·»— rooo <?M<* <r cm \o co <r cm ·«— cm <j- *- «- <r <r cm rM roro <r <r * \o \o mm mm mm mm cö 1 rö »H 4-» ' ...— -n,,,., -—.

^ iJ Π3 4)

4) C TJ W V) »H 3 >1 *rJ 0 3 (K H O <A

^ * o I OJ----- Z> ΙΛ C · 11 4) :π) β '"n

cO E E H ·*-< O

βτη w 1 tn ·· c\J 3 <U Φ C2 rs» rM cm cm *—

> u u 'S

1—t otd 1 o ·>-Ι ·-·-----

·>—) -rJ I I tn rt r-N

- u 3 ·~ι u £ ·> ·υ iJ O. a) u 3 1-1 U) Ui rt » 3 XT) O C ·-! ^ « x m h « e d H > rt 3 ·>-ι :rt ·-< -r-i a) > oo rt u u) m ,*: rt «n c :rt rt o · ri rt rt <D! > jd ^ £ T3 ^ tn i

O

»Γ-l ~-Φ— _ “ ' .III—. 1 ' — — I

i-i :π3 ·-* ε -ο χ: ό >>

< *-* I 1 I I I

ro 32 co /—ν U 32 κ * //A 1 0 I s" 01 Οι Λι = CXs υ— z f 1 o es 1 1 z z υ rs---------- Z co <-> ro ro z S4 z * u z cj u es U _ ro O O r^ * l /, Λ Z rs ro rs

ZZ // \i U Z r-, Z

I \ / \ u ro es U

U *-* \—/ > , ro cn Z Z

// \ < \ // \\ z z o o o

X \ > (/ z υ υ o, -χ U

Z 01 / V=/ N ? \ /° / rr O O" ö ! O -O-i ! OJ / “ ) f u >0 O______ :o3 · x e vo 00 σ> o

CM CM CM CM CO

28 7231 6

m Ö O O ö S

rj ro σ·\ cvi esi tr.

c, ^ lO O lO lO O

r—4 • I *” *” e , , .

' ‘i OU-) OO LOLO

O LO O 00 m <t <J- ^ O co -3· CO T“ CO *— CO T- :s ---—---- *w3-J ^ O Ovo osir- i? ii ri CM CO O CM ^ 00

«O *j iJ AA AA AA

^ ^ CMCSJ _ f-4 V \1 co V) T3 c n) o rd-— _ — J ^ u uo o> esim co-nO- 5 00 r^. O ON o *—

C·*·* •‘a Aa * a A

« α'α Ό ^ ^ 10 ^ ^

3 E B

^ 0) <D U ----- —_ ^r'rj m σ\ oo^o os o

< >* < CM co cm <r o CM

AA Aa ^ a o o mm r~ L mm <t <j· mm <o i o) «.m u ~ " " — ^ U fl] d)

•*4 Oi C Ό tn w ·*-ι D >>--* Q O ^ H O W

/-N

3 I

3 I <u______ ΐ OTC*

ti ·-< <u :n) E

.il e e e ·-< o ./ >—* V) 1-4 <f) ·· Π3 3 (U QJ e

> U U

r—4

O \ e I

. ^ Q " * *4 m Il n — I — I· ^ V ··—1 ·<-* ( I 1/1 Id - U u e J~ A 4-) U CL <D μ ^ * C0 · · *-4 ΙΛ . (d h n) g c £-4 > ¢0 D »r-v *.c0 «Η »r-l oi > öo (¾ aj v) w lo <r ^ η (Λ c ^ ^ :ro ro o ·*-< o» «o ^ ^ 6 T3 ^ w j i ! o • rH |“ "" — - I ." ' — « 4-) :to ·* H.

Ό XT : "O ϊο

< ^ I I I

CO

nd

OS CJ

«i Λ

O O l I SC

υ oo S,^. 0

23 I I O

o— :¾ I u

(N I

*y* ~r* 5 “ cn ΓΜ---¢0---

23 Vi U

U CO PQ CSI

™ SC <N S3 X o sc u 23 0 2-3 0

I OI CNI CN

23 sc SC SC

I u o u

υ VmcM CO CN| CO CM

/\<KPCÄSCSCSn //% υ ο o o uu

Z2 22 OO OO OO

** >=< ff )=< g*’ W

Λ>8 Ό-8 Ό"8

XJ

X o------- :ctj ..

X. C CM CO ; CO CO co f ti 29 7231 6

Seuraavassa taulukossa 2 esitetyt yhdisteet valmistettiin samalla tavoin. Tässä taulukossa esitetty viittaus aikaisempaan tekniikkaan (taulukon toisessa sarakkeessa) esittää sen yhdisteen valmistusmenetelmän, joka on esitetty toisessa sarakkeessa.

30 7 2 31 6 m

ro ro K

K K <N

U U U

sr Η-s 61 6-1 a S V ° | ° 18 I u U-Z I ' u ro K 1 (M —-------------

K

H n m J? 6 Ö.

ä ‘ P o o o z z

K CM K

S ro ro ffi

2 E E CM

tn /7“Λ LO U U U

i i I 8-i 61 6f 6f S ro o « KU o K o

rH 2 G U U

3 Ä Ή

rtJ :o3 E

eh μτ <2 _ « H — — ro Z U ^ 'S* K ro cn ro rH ro U O O o> u en O Ui Ui i- CM T- o"« 5 3-ft - <n> <n s w s “ 3 i ° >=<. s _W Ms O 3 a s s li ϊ °=< ( / - V\ N - S i 2 ”, f O ^ W ^ o lO \=s/ r- ^ y rH "H W ” S *§ \=/ *§

Hm C -ΓΗ % ^ O) φ o i? Oi u £ S -H -H 001 ^ - n 43 43 ^ ^ · Or Or n - ε e 0) < o o

_M U U U

q T- cm ro ^ Z ------ tl 31 7231 6 r- ffi ro ro

K U

g o" “ -,Χ^Χε φ'δ 5-§ * I § 1 δ ro ffi u CN] —----

K

U

1 Ö Ö °=o o Ä 5 o o 2 2 X rs]

X

S en ro 2 g ° > s I jfx=" 0-8

; 2 35 35 NCJ X O

i «3 Λ CJ O o 3 Λ o n

H 4J C H

3 A -H U

3 :(0 E

Ί hl' <____ Γ0 in σ> ro γ- οο <— iö H 2 U rol ro

te "m <n r^| O

o- « 5 s e " o lö -h (rt v W H Ή \ 5 )-> * I s b I Q- -h => >==< . ^¾.

<Ö e W __/ ' n 2' Z

jj Q) ·η 0=< ro y v_/ H S S /=< W f \ - vs ä g W g

o u g S

ro -H -H a n « λ; 2 mi «a* ij —- -e ro ”· ^ (¾ ·*τ| • <

_>3 U

O roro ·· 2 -------

Claims

7231 6 2

1. Menetelmä farmaseuttisesti aktiivisen N -aryyli- sulfonyyli-L-arginiiniamidin tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi, jolla yhdisteellä on kaava (I): HN. S- C - N - CH~CH~CHoCHC0R (I) I 2 2 2I Η„ΚΓ H HNSO~ 2 i 2 Ar jossa R on (1) COOR, 0 (RC ) m 5 m jossa R6 on vety tai C1-C^-alkyyli, kukin R5 on vety tai C^-C^-alkyyli ja m on kokonaisluku 0-2, jolloin R^ voi olla 4- tai 6-asemassa; tai (2) COOH V-, -O tai (3) COOH \ -N^_O tai (4) COOH -00 ti 33 7231 6 ja Ar on fenyyliryhmä, joka on substituoitu vähintään yhdellä substituentilla, jona on amino, -Cg-alkyyliamino, C^-C^-hydroksialkyyli, C^-C^g-fenyylialkyyli tai C.J-C,--hydroksialkoksi; tai Ar on fenyyliryhmä, joka on substituoitu vähintään yhdellä substituentilla, jona on hydroksi, C^-Cg-alkyyli tai C^-Cg-alkoksi, ja vähintään yhdellä substituentilla, jona on C2-Cg-alkyylikarbonyyli tai fenyyli; tai Ar on dibentsotienyyli-, 9,9-dioksodibentsotienyyli-, fenoksati1inyyli-, kinolyyli-, ftalatsinyyli-, fenatsinyyli-tai akridinyyliryhmä, joista kukin on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai useammalla hydroksi-, C^-C^-alkoksi-tai -C^-alkyyliryhmällä; tai Ar on Cg-C^g-sykloalkyylifenyyli-, fluorenyyli-, tioksantenyy-li- tai 2H-kromenyyliryhmä, joista kukin on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai useammalla -Cg-alkyyli-, C^-Cg- alkoksi- tai oksoryhmällä; tai Ar on fenyyliryhmä, joka on substituoitu vähintään yhdellä substituentilla, jona on -C^-haloalkoksi- tai C2~C7-alkoksi-alkoksiryhmä ja mahdollisesti substituoitu fenyyliryhmä on substituoitu edelleen vähintään yhdellä substituentilla, jona on metyyli, etyyli, metoksi, etoksi, hydroksi tai halogeeni, tunnettu siitä, että G G 2 a) N -substituentti poistetaan N -substituoidusta N - aryylisulfonyyli-L-arginiiniamidista, jolla on kaava HN X C - N - CH-CH..CH-CHCOR (XX) / I 2 2 2| HN R" HNSO_ I I 2 R' Ar jossa R ja Ar on määritelty edellä, R' ja R" ovat vety tai guanidinoryhmän suojaryhmä, ja ainakin toinen ryhmistä R' 34 72 31 6 ja R" on guanidinoryhmän suojaryhmä, happohydrolysoimalla tai hydraamalla ja haluttaessa hydrolysoidaan näin saatu reaktiotuote, tai 2 b) N -aryylisulfonyyli-L-arginyylihalogenidi, jolla on kaava HN C - N - CH„CH„CHoCHC0X (XXII) I 2 [ H-N ^ H HNSCL· 2 | 2 Ar jossa Ar on määritelty edellä ja X on halogeeni, saatetaan reagoimaan aminohappojohdannaisen kanssa, jolla on kaava RH (IV) jossa R on määritelty edellä, ja haluttaessa hydrolysoidaan saatu reaktiotuote, ja haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet- G t u siitä, että happohydrolyysi toteutetaan saattamalla N -2 substituoitu N -aryylisulfonyyli-L-arginiiniamidi kosketuksiin happoylimäärän kanssa lämpötilassa välillä -10 ja 100°C.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että hydraus toteutetaan inertissä reaktioliuotti-messa aktivoivan vetykatalyytin läsnäollessa vetykehässä lämpötilassa, joka on 0°C ja liuottimen kiehumispisteen välillä.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet- 2 t u siitä, että N -aryylisulfonyyli-L-arginyylihalogenidi saatetaan reagoimaan ainakin ekvimolaarisen määrän kanssa aminohappojohdannaista lämpötilassa välillä -10 ja +80°C.