FI70926C - Foerfarande foer framstaellning av isomaltulos (6-0-alfa-d-glukopyranosido-d-fruktos) medelst immobiliserade mikrobceller - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av isomaltulos (6-0-alfa-d-glukopyranosido-d-fruktos) medelst immobiliserade mikrobceller Download PDFInfo
- Publication number
- FI70926C FI70926C FI812560A FI812560A FI70926C FI 70926 C FI70926 C FI 70926C FI 812560 A FI812560 A FI 812560A FI 812560 A FI812560 A FI 812560A FI 70926 C FI70926 C FI 70926C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- cells
- immobilized
- isomaltulose
- sucrose
- solution
- Prior art date
Links
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims abstract description 34
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims abstract description 34
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims abstract description 34
- PVXPPJIGRGXGCY-TZLCEDOOSA-N 6-O-alpha-D-glucopyranosyl-D-fructofuranose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)C(O)(CO)O1 PVXPPJIGRGXGCY-TZLCEDOOSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 210000001822 immobilized cell Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 24
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 14
- 241001622809 Serratia plymuthica Species 0.000 claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims description 5
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims description 4
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000005189 flocculation Methods 0.000 claims description 3
- 230000016615 flocculation Effects 0.000 claims description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 3
- 229920001747 Cellulose diacetate Polymers 0.000 claims description 2
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims description 2
- 241000607715 Serratia marcescens Species 0.000 claims description 2
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 claims description 2
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 claims description 2
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 claims description 2
- 229920002284 Cellulose triacetate Polymers 0.000 claims 1
- 241000192130 Leuconostoc mesenteroides Species 0.000 claims 1
- NNLVGZFZQQXQNW-ADJNRHBOSA-N [(2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-diacetyloxy-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-triacetyloxy-6-(acetyloxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6s)-4,5,6-triacetyloxy-2-(acetyloxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-2-yl]methyl acetate Chemical compound O([C@@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H](OC(C)=O)[C@H]1OC(C)=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](OC(C)=O)[C@@H](COC(C)=O)O1)OC(C)=O)COC(=O)C)[C@@H]1[C@@H](COC(C)=O)O[C@@H](OC(C)=O)[C@H](OC(C)=O)[C@H]1OC(C)=O NNLVGZFZQQXQNW-ADJNRHBOSA-N 0.000 claims 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000648 calcium alginate Substances 0.000 claims 1
- 235000010410 calcium alginate Nutrition 0.000 claims 1
- 229960002681 calcium alginate Drugs 0.000 claims 1
- OKHHGHGGPDJQHR-YMOPUZKJSA-L calcium;(2s,3s,4s,5s,6r)-6-[(2r,3s,4r,5s,6r)-2-carboxy-6-[(2r,3s,4r,5s,6r)-2-carboxylato-4,5,6-trihydroxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylate Chemical compound [Ca+2].O[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)O[C@@H](C([O-])=O)[C@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O2)C([O-])=O)O)[C@H](C(O)=O)O1 OKHHGHGGPDJQHR-YMOPUZKJSA-L 0.000 claims 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims 1
- 230000003311 flocculating effect Effects 0.000 claims 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 claims 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 35
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 6
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 6
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 5
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 5
- 102100039111 FAD-linked sulfhydryl oxidase ALR Human genes 0.000 description 4
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000209149 Zea Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- SERLAGPUMNYUCK-YJOKQAJESA-N 6-O-alpha-D-glucopyranosyl-D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SERLAGPUMNYUCK-YJOKQAJESA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 1
- 241000219310 Beta vulgaris subsp. vulgaris Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 101000959079 Homo sapiens FAD-linked sulfhydryl oxidase ALR Proteins 0.000 description 1
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000192132 Leuconostoc Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000588701 Pectobacterium carotovorum Species 0.000 description 1
- 241000586779 Protaminobacter Species 0.000 description 1
- 241000607720 Serratia Species 0.000 description 1
- 235000021536 Sugar beet Nutrition 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N ciprofloxacin Chemical compound C12=CC(N3CCNCC3)=C(F)C=C2C(=O)C(C(=O)O)=CN1C1CC1 MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011437 continuous method Methods 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 229960001760 dimethyl sulfoxide Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- -1 polysaccharide sulfur ester Chemical class 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 235000021092 sugar substitutes Nutrition 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/10—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a carbohydrate
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/04—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier entrapped within the carrier, e.g. gel or hollow fibres
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/24—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of an isomerase, e.g. fructose
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
1 70926
Menetelmä isomaltuloosin (6-0-<*—D-glukopyranosido-D-fruk-toosin) valmistamiseksi immobilisoitujen mikrobisolujen avulla 5 Keksinnön kohteena on menetelmä isomaltuloosin (6-0-Λ- D-glukopyranosido-D-fruktoosi) valmistamiseksi sakkaroosin entsymaattisella konversiolla kuolleitten immobilisoitujen isomaltuloosia muodostavien mikrobisolujen avulla reaktorissa, joka sisältää näitä soluja, ja sen jälkeen kiteyttämällä. 10 Isomaltuloosi on välituote glukopyranosidi-1,6-mannito lin (DE-kuulutusjulkaisu DE-AS 2 520 173) ja glukopyranosi-di-1,6-sorbitolin (isomaltitolin, DE-patentti 2 217 628) valmistamiseksi. Kumpaakin ainetta voidaan käyttää sokerin kor-viketuotteena.
15 DE-patentista 1 049 800 on tunnettua sakkaroosin entsy- maattinen konversio isomaltuloosiksi. Tähän tarvittavat entsyymit ovat alkuperältään mikrobisia. Protaminobacter rub-rum’in ohella ovat muut bakteerit, kuten Erwinia carotovora, Serratia marcescens, Serratia plvmuthica ja Leuconostoc 20 mesenteroides sopivia tähän toisiintumisreaktioon (S.
Schmidt-Berg-Lorenz, W. Mauch, Zeitschrift fiir die Lucker-industrie 14, 625-627 (1964); F.H. Stodola, 126th Meeting, Amer. Chem. Soc., syyskuu 1954, Abstracts of papers, s. 5 D; W. Mauch, S. Schmidt-Berg-Lorenz, Zeitschrift fiir die Zucker-25 Industrie 14, 309-315 ja 375-383 (1964).
Lisäksi on DE-patentissa 2 217 628 (FI-51 714) tunnettua, että sakkaroosin entsymaattinen konversio isomaltuloosiksi voidaan toteuttaa 15-40 %:isessa liuoksessa voimakkaasti sekoittaen aerobisissa olosuhteissa 20-37°C:ssa pa-30 noksittain tai jatkuvasti.
Edelleen on DE-kuulutusjulkaisussa 2 806 216 (FI-64 641) tunnettua viljellä isomaltuloosia muodostavia mikrobeja ja suorittaa samanaikaisesti sakkaroosin jatkuva konversio isomaltuloosiksi.
35 Edellä mainituilla tunnetuilla menetelmillä on hait toja, kuten esim.
2 70926 a) että elävät ja lisääntyvät soluviljelmät käyttävät tai hengittävät osan lisätystä sakkaroosista omia elintoiminto-jaan (kasvua ja lisääntymistä) varten, minkä vaikutuksesta sakkaroosin tämä osa menee hukkaan konversiolta isomaltuloo- 5 siksi; b) että sakkaroosin konversio isomaltuloosiksi ja samanaikainen solujen lisääntyminen vaativat fermentointia voimakkaan sekoituksen ja ilmastuksen alaisina, mihin puolestaan liittyy suuri energian kulutus; 10 c) että ravintoväliaineen pitoisuus 25 % (DE-hakemusjulkaisu 2 806 216) tai 15-40 % (DE-patentti 2 217 628) on jälkeen-tulevaa isomaltuloosin talteenottoa varten suoraan kiteyttämällä liian pieni; (reagoimaan saatettu sakkaroosiliuos täytyy solumassan erottamisen jälkeen ensin haihduttaa, ennen 15 kuin se voidaan saattaa kiteytykseen. Siten täytyy 100 kgrsta reagoimaan saatettua sakkaroosiliuosta DE-hakemusjulkaisun 2 806 216 mukaan haihduttaa noin 67 kg vettä ennen kuin iso-maltuloosi kiteytyy).
d) että solumassan lisääntyminen ei tarvitse ainoastaan so-20 pivaa hiililähdettä, vaan myös typpi- ja ravintosuoloja.
(Edellä mainitussa menetelmässä tapahtuu typpi- ja ravinto-suolojen lisäys siten, että puhtaiden sakkaroosi!iuosten asemesta käytetään vähemmän puhtaita sokeriliuoksia, jollaisia saadaan sokeritehtaalla. Näitä epäpuhtauksia (ei-sokeri-25 aineita) tarvitaan toisaalta solun kasvua varten välttämättä, toisaalta ne aiheuttavat kiteytyksessä isomaltuloosihä-viöitä melassin muodostuksen johdosta).
Edellä mainitut haitat ovat periaatteessa vältettävissä, jos onnistutaan erottamaan sakkaroosin konversio isomal-30 tuloosiksi solun lisääntymisestä ja stabiloimaan isomaltuloo-si pidemmäksi ajaksi.
Nyt keksittiin yllättäen, että on mahdollista puhtaista sakkaroosiliuoksista isomaltuloosia muodostavien mikrobien immobilisoitujen solujen avulla suorittaa sakkaroosin 35 konversio isomaltuloosiksi. Ei ollut odotettavissa, että isomaltuloosia muodostavat mikrobit, esim. Protaminobacter 3 70926 rubrum (CBS 574 77) pystyvät kuolleessa tilassa aikaansaamaan sellaisten puhtaiden sakkaroosiliuosten konversion, joilla on suuri pitoisuus, ja tällöin tuottamaan isomaltuloosia erittäin puhtaana.
5 Keksinnölle on tunnusomaista, että soluilla täytettyyn reaktoriin johdetaan jatkuvasti puhdasta sakkaroosiliuosta, jonka pitoisuus on 45-75, edullisesti 65-75 paino-%, lämpötilassa 40-65°C.
Sakkaroosiliuoksen reaktio immobilisoitujen solujen 10 avulla voi tapahtua joko panoksittaisella tai jatkuvalla menetelmällä .
Reaktioon sopivien bakteerisolujen immobilisoimiseen erittäin edullisiksi osoittautuneita menetelmiä, oi esitetty epäitsenäisissä patenttivaatimuksissa.
15 Keksinnön mukaisen menetelmän edut ovat: a) isomaltuloosipitoinen liuos voidaan ilman esihaihdutusta saattaa heti kiteytettäväksi, minkä ansiosta saavutetaan huomattava energian säästö.
b) Kuolleiden solujen käyttö lisää isomaltuloosin saantoa, 20 koska sakkaroosia ei enää tarvita bakteerimassan aineenvaihduntaa varten.
c) Isomaltuloosin saanto paranee vielä sen ansiosta, että voidaan käyttää puhtaita sakkaroosiliuoksia ja melassin muodostus siten suurinpiirtein vältetään.
25 d) Koska sakkaroosiliuokset, joiden pitoisuudet ovat yli 65 paino-%, ovat mikrobiologisesti pysyviä, voidaan substraatin sterilointi jättää pois.
e) Eräs lisäetu, jota ei voi jättää huomioonottamatta, on siinä, että suurempien substraattipitoisuuksien johdosta 30 käsiteltävät tilavuusmäärät ovat pienempiä ja siten tullaan toimeen pienemmillä laitteilla.
f) Bakteerimassan saattaminen lisääntymään immobilisoitujen solujen valmistamiseksi voi tapahtua optimoiduissa kasvuolosuhteissa eikä siten enää ollut tarpeen sovitella opti- 35 moiduissa kasvuolosuhteissa eikä siten enää ollut tarpeen tehdä kompromissia isomaltuloosin konversion optjmiolosuh- ____ .. ____ . ΤΓ^ .
4 70926 teiden ja bakteerien kasvun optimiolosuhteiden välillä, g) Bakteerimassan valmistusta varten voidaan käyttää halvempaa ravintoväliainetta, esim. laimennettua melassiliuosta.
Keksinnön mukaiseen menetelmään liittyvien immobili-5 soitujen solujen saamiseksi tapahtuu optimaalinen solujen lisääntymään saattaminen ravintovällaineessa, jonka kuiva-ainepitoisuus on vain noin 5 paino-%. Ravintoväliaine sisältää paksua siirappia (erästä sokeriteollisuuden välituotetta) , maissin liotusvettä ja (NH^^HPO^. Edullista on kuiten-10 kin käyttää olennaisesti halvempaa ravintoainetta, joka sisältää vain sokerijuurikasmelassia ja (NH^^HPO^. Tämän ra-vintoväliaineen valmistamiseksi melassi laimennetaan tislatulla vedellä 5 paino-%:n kuiva-ainepitoisuuteen. Ylimääräiseksi typpi- ja fosfaattilähteeksi lisätään 109 kg:aan tätä 15 liuosta 0,1 kg (NH^^HPO^. ρΗ-arvo säädetään NaOH:lla, KOH:lla tai kloorivetyhapolla 7,2:een.
Isomaltuloosia muodostavan mikrobin, esim.Protamino-bacter rubrum'in (CBS 574 77), ymppi lietetään 10 m:aan steriiliä ravintoainesubstraattia, jolla on edellä esitetty 20 koostumus, ja inkuboidaan ravistelukolvissa 200 ml:ssa samaa ravintoväliainetta 29°C:ssa. Heti kun ituluku ravisteluvil- q jelyssä on noussut 5.10 ituun/ml, siirretään ravisteluvil-jely pienoisfermentoriin, jossa on koostumukseltaan samaa ravintoväliainetta ja saatetaan edelleen lisääntymään mah-25 dollisimman suurella ilmastusmäärällä ja sekoitusnopeudella 29°C:ssa. Lisääntymisen valvominen tapahtuu kuten ravistelu-viljelyssä ituluvun määrityksellä. Heti kun ituluku on nous- 9 sut 5.10 ituun/ml, voidaan tuote kerä talteen fermentoris-ta.
30 Tuotettujen solujen immobilisointiin sopivat periaat teessa kaikki I. CHIBATA'n (Immobilized Enzymes, John Wiley and Sons, New York, Lontoo 1978) mainitsemat menetelmät kokonaisten solujen immobilisoimiseksi. Seuraavat menetelmät havaittiin erityisen sopiviksi: 5 70926 a) Fermentorin sisältöön lisätään joko itse fermentorissa tai jossakin muussa astiassa kationi-aktiivisen flokkulointi-aineen 1-%:ista liuosta. Flokkulointiliuoksen tarvittava määrä täytyy määrittää esikokeessa. Flokkuloituneen solumassan 5 annetaan laskeutua, päällä oleva neste kaadetaan pois, sakka pestään kahdesti fosfaatti-puskurilla (0,1 M, pH 7,0). Sen jälkeen solumassasta poistetaan vettä niin, että saadaan suulakepuristettava tahna, joka suulakepuristetaan säikeiksi, kuivataan, jauhetaan ja seulotaan.
10 b) 10 Iraan käymislientä lisätään hitaasti sekoittaen 0,5 - 2,0 0,2-%:ista Chitosan-liuosta. Flokkuloitunut solumassa pestään fosfaatti-puskurilla (0,1 M, pH 7,0), poistetaan vettä lingossa, esim. malja- tai täysvaippalingossa, suulakepuristetaan säikeiksi, kuivataan, jauhetaan ja seulotaan.
15 c) Solumassa erotetaan lingossa käymisliemestä. 5-20 g tätä solususpensiota (kuiva-ainepitoisuss n. 10 %) suspendoidaan 45-60 mlraan Na-alginaattiliuosta (8 g 100 mlrssa) ja annetaan tippua liitosputken (läpimitta 0,55 mm) läpi 2-%:iseen CaC^-liuokseen. Syntyneitä helmiä sekoitetaan edelleen noin 20 15 minuuttia CaC^'liuoksessa ja pestään sitten vedellä. Hel miä kuivataan noin 20 tuntia huoneen lämpötilassa, d) Solumassa erotetaan lingossa käymisliemestä, pestään fosfaatti-puskurilla (0,1 M, pH 7,0) ja lyofiloidaan.
15 g selluloosadiasetaattia liuotetaan 100 mlraan 25 seosta, jossa on dimetyylisulfoksidia ja asetonia (6r4), 90°C:ssa palautusjäähdyttäen. Jäähdyttämisen jälkeen 3C°Crseen lisätään 3-30 g lyofiloituja soluja. Tämän suspension annetaan injektioruiskun (kanyyli 0,8 mm) avulla tippua veteen huoneen lämpötilassa. Muodostuneet helmet kuivataan.
30 e) Solumassa erotetaan lingossa käymisliemestä. 5 g tätä solumassaa suspendoidaan 5 mlraan fysiologista keittosuola-liuosta 45-50°C:ssa. 1,7 g K-Carrageenan'ia (liukoista poly-sakkaridirikkiesteriä) liuotetaan 34 mlraan fysiologista keittosuolaliuosta 45-60°Crssa. Kumpaakin liuosta sekoite-35 taan ja pidetään 30 minuuttia 10°Crssa. Syntynyt geeli kovetetaan kylmässä 0,3-moolisessa KCl-liuoksessa ja rikotaaan sitten noin 3 mmm suuruisiksi kappaleiksi.
6 70926 f) Käymisliemeen lisätään joko itse fermentorissa tai jossakin muussa astiassa ensin kationi-aktiivisen höytälöi-misaineen 1-%:ista liuosta ja sitten anioniaktiivisen flokku-lointiaineen 1-%:ista liuosta. Flokkulointiaineen tarvitta-5 va määrä täytyy määrittää esikokeissa. Flokkuloituneen solu-massan annetaan laskeutua, pestään fosfaattipuskurilla (0,1 M, pH 7,0), suulakepuristetaan säikeiksi, kuivataan, jauhetaan ja seulotaan.
Edellä esitettyjen menetelmien mukaisesti valmistetut 10 preparaatit täytyy silloittaa solujen kuivaksi vuotamisen estämiseksi. Silloitukseen käytetään bifunktionaalisia rea-gensseja, kuten esim. glutaarialdehydiä. Tavallisesti käytettyjä glutaarialdehydipitoisuuksia 2,5-5,0 % kosketusajan ollessa 3C-45 minuuttia ei voida käyttää isomaltuloosia muo-15 dostaville mikrobeille. Havaittiin, että kaikki immobilisoi-dut preparaatit inaktivoituivat täydellisesti näissä olosuhteissa. Optimaalisiksi silloitusolosuhteiksi määritettiin tätä menetelmää varten 0,1 % glutaarialdehydipitoisuus ja 10 minuutin käsittelyaika.
20 Jonkun edellä kuvatun menetelmän mukaisesti immobili- soiduilla ja silloitetuilla soluilla voidaan täyttää sopiva pylväsreaktori. Tämän reaktorin lämpötilaa täytyy voida muutella ja sen läpimitan suhteen kerroskorkeuden tulee olla 1:1-1:20, edullisesti 1:1-1:10, erityisesti 1:1,5-1:5. Puh-25 dasta sakkaroosiliuosta (65-75 paino-%:ista) pumpataan lämpötilassa 40-60°C joko alhaalta ylöspäin tai ylhäältä alaspäin pylvään läpi. Tällöin virtausnopeus säädetään sellaiseksi, että kosketusajaksi saadaan 1-10 tuntia, edullisesti 4-7 tuntia (tämä vastaa 0,2-0,8 g sakkaroosia, edullisesti 30 0,4-0,6 g sakkaroosia grammaa kohti immobilisoituja soluja (kuivia) tunnissa). Lisätty sakkaroosi reagoi tällöin täydellisesti, jolloin syntyy noin 1 % glukoosia, 4 % fruktoosia, 82 % isomaltuloosia ja 13 % 1-O-ot-D-glukopyranosidi-D-fruktoosia.
7 70926
Osa isomaltuloosista voidaan saada talteen kiteisenä yksinkertaisesti jäähdyttämällä liuos. Haihduttamalla ja jäähdyttämällä voidaan emäliuoksesta kiteyttää lisää isomal-tuloosia, niin että yhteensä voidaan saada kiteisenä talteen 5 noin 91,5 % syntyneestä isomaltuloosista.
Menetelmän erään edullisen suoritusmuodon mukaisesti sakkaroosiliuos johdetaan nopeammin pylvään läpi, niin että vain noin 75-80 % sakkaroosista reagoi. Tuotevirrasta voidaan osa isomaltuloosista kiteyttää jäähdyttämällä ja loppu-10 osa tuoreella sakkaroosiliuoksella täydentämisen jälkeen johtaa uudelleen pylvään läpi. Tämän työskentelytavan etu on siinä, että 1-0-ot-D-glukopyranosidi-D-fruktoosin muodostuminen lyhyemmän kosketusajan johdosta pienenee ja lopputuloksena voidaan saada suurempi saanto toivottua isomaltu-15 loosi-tuotetta.
Menetelmän työskentelytapaa valaistaan lähemmin seu-raavalla kahdella esimerkillä.
Esimerkki 1 a) Protaminobacter rubrum (CBS 574 77)-kannan soluja liete-20 tään 10 mlraan steriiliä ravintoväliainetta, joka sisältää 8 kg paksua siirappia sokeritehtaalta (kuiva-ainepitoisuus = 65 %) , 2 kg maissin liotusvettä, 0,1 kg (NH^^HPO^ ja 89,9 kg tislattua vettä (tarpeen vaatiessa säädetty pH-ar-voon). Tämä suspensio toimii ymppinä ravisteluesiviljelyä 25 varten 1 l:n pulloissa 200 ml:n kanssa ravintoliuosta, jolla on edellä esitetty koostumus.
30-tuntisen inkubointiajan jälkeen 29°C:ssa ympätään kullakin 20 pullolla (41) 16 1 ravintoaineliuosta, jolla on edellä esitetty koostumus, 30 l:n pienoisfermentorissa 30 ja käytetään 29°C:ssa johtaen 20 1 ilmaa minuutissa ja sekoittaen kierrosluvulla 350 r/min. Kasvava ituluku määrite- g tään mikroskooppisesti. Kun ituluku 5.10 itua/ml on saavutettu, siirretään fermentorin sisältö toiseen astiaan, ja siihen lisätään kationiaktiivista flokkulointiainetta 35 (kuten esim. PRIMAFLOC C 7 firmasta Rohm & Haas, Philadel-phia/USA). Flokkuloituneiden solujen annetaan laskeutua, 8 70926 dekantoidaan, pestään C,1 M fosfaattipuskurilla, pH 7,0, ja poistetaan vesi linkoamalla. Massa suulakepuristetaan sitten säikeiksi, kuivataan ilmassa ja jauhetaan, b) Seulajaetta 0,3-9,8 mm edellä saadusta preparaatista se-5 koitetaan 0,1-%:isessa glutaarialdehydi-liuoksessa 10 minuuttia, pestään fosfaatti-puskurilla (0,1 M, pH 7,0) ja täytetään veden alla temperoitavaan pylvääseen. Pylväs kuumennetaan sitten 50°C:seen ja sen läpi saatetaan jatkuvasti virtaamaan 70-paino-%:inen sakkaroosiliuos. Virtausnopeus sää-10 detään tällöin niin, että pylvään päässä ei sakkaroosia enää ole osoitettavissa. Näin talteenotettu isomaltuloosi-liuos johdetaan jäähdytyskiteyttimeen, jäähdytetään 20°C:seen ja kiteytynyt isomaltuloosi erotetaan emäliuoksesta suodatus-korilingoilla.
15 Esimerkki 2
Protaminobacter rubrum (CBS 574 77)-kannan soluja lie-tetään 10 ml:aan steriiliä ravintoväliainetta, joka sisältää 6,25 kg juurikasmelassia (kuiva-ainepitoisuus = 80 %), 0,1 kg (NH^^HPO^ ja 93,65 kg tislattua vettä (jos on tarpeen 20 säädetään pH-arvoon 7,2 HClrllä). Tämä suspensio toimii ymp-pinä ravisteluesiviljelyä varten 1 l:n pulloissa, joissa on 200 ml ravintoliuosta, jolla on edellä esitetty koostumus. 30-tuntisen inkubointiajän jälkeen 29°C:ssa ympätään kullakin 20 pullolla (41) 16 1 ravintoliuosta, jolla on edellä 25 esitetty koostumus, 30 l:n pienoisfermentorissa ja käytetään 29°C:ssa johtaen 20 1 ilmaa minuutissa ja sekoittaen kierros-luvulla 350 r/min. Jatkokäsittely suoritetaan kuten esimerkissä 1a ja 1b on kuvattu.
Claims (9)
1. Menetelmä isomaltuloosin (e-O-'X-D-glukopyranosi-do-D-fruktoosi) valmistamiseksi sakkaroosin entsymaattisella 5 konversiolla kuolleitten immobilisoitujen isomaltuloosia muodostavien mikrobisolujen avulla reaktorissa, joka sisältää näitä soluja, ja sen jälkeen kiteyttämällä, tunnettu siitä, että soluilla täytettyyn reaktoriin johdetaan jatkuvasti puhdasta sakkaroosiliuosta, jonka pitoisuus on 45 - 75, 10 edullisesti 65 - 75 paino-%, lämpötilassa 40 - 65 °C.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mikrobit ovat Protaminobacter rubrum (CBS 547.77), Serratia plymuthica (ATCC 15928), Serratia marcescens (NCIB 8285) tai Leuconostoc mesenteroides (NRRL
15 B-512F (ATCC 10830a)), edullisesti Protaminobacter rubrum (CBS 574.77).
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että immobilisoidut solut silloitetaan bi-funktionaalisella reagenssilla, kuten glutaarialdehydillä 20 tai syanuurihalogenidilla.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että solut immobilisoidaan flokkuloimalla kationi-aktiivisella flokkulointiaineella.
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, t u n -25 n e t t u siitä, että solut immobilisoidaan flokkuloimalla Chitosan'illa.
6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että solut immobilisoidaan sulkemalla ne kalsiumalginaatti-matriisiin.
7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että solut immobilisoidaan sulkemalla ne selluloosadiasetaattiin tai selluloosatriasetaattiin.
8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että solut immobilisoidaan sulkemalla ne 35 K-Carrageenan-geeliin. 70926
9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että solut immobilisoidaan flokkuloimalla ne kationi-aktiivisella tai anioni-aktiivisella flokkulointi-aineella tai näiden kummankin yhdistelmällä. 70926
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3038219 | 1980-10-09 | ||
| DE19803038219 DE3038219A1 (de) | 1980-10-09 | 1980-10-09 | Verfahren zur herstellung von isomaltulose (6-o-(alpha)-d-glucopyranosido-d-fructose) mit hilfe von immobilisierten bakterienzellen |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI812560L FI812560L (fi) | 1982-04-10 |
| FI70926B FI70926B (fi) | 1986-07-18 |
| FI70926C true FI70926C (fi) | 1986-10-27 |
Family
ID=6114020
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI812560A FI70926C (fi) | 1980-10-09 | 1981-08-19 | Foerfarande foer framstaellning av isomaltulos (6-0-alfa-d-glukopyranosido-d-fruktos) medelst immobiliserade mikrobceller |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4640894A (fi) |
| EP (1) | EP0049742B1 (fi) |
| JP (1) | JPS5794298A (fi) |
| AT (1) | ATE16406T1 (fi) |
| DD (1) | DD201695A5 (fi) |
| DE (2) | DE3038219A1 (fi) |
| DK (1) | DK150310C (fi) |
| ES (1) | ES505364A0 (fi) |
| FI (1) | FI70926C (fi) |
| IE (1) | IE51455B1 (fi) |
| SU (1) | SU1512489A3 (fi) |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3213107A1 (de) * | 1982-04-07 | 1983-10-13 | Süddeutsche Zucker AG, 6800 Mannheim | Verfahren zur herstellung von isomaltulose (6-o-(alpha)-d-glucopyranosido-d-fructose) mit hilfe von immobilisierten bakterienzellen |
| DE3241788A1 (de) * | 1982-11-11 | 1984-05-17 | Süddeutsche Zucker AG, 6800 Mannheim | Verfahren zur herstellung von 1-0-(alpha)-d-glucopyranosido-d-fructose und verwendung als suessungsmittel |
| DE3528752A1 (de) * | 1985-04-27 | 1986-10-30 | Bayer Ag, 5090 Leverkusen | Kontinuierliches verfahren zur enzymatischen herstellung von isomaltulose |
| JPH01199592A (ja) * | 1987-07-27 | 1989-08-10 | Showa Denko Kk | イソマルツロースの製造方法 |
| JPH02273192A (ja) * | 1989-04-13 | 1990-11-07 | Meito Sangyo Kk | イソマルチユロースの製造方法 |
| CU22292A1 (es) * | 1991-05-07 | 1995-01-31 | Cigb | Procedimiento para la obtencion a escala industrial de licores de fructosa-glucosa a partir de sacarosa e instalacion para el mismo |
| FI104563B (fi) * | 1996-05-17 | 2000-02-29 | Xyrofin Oy | Menetelmä ja kantaja isomaltuloosin tuottamiseksi immobilisoitujen mikro-organismien avulla |
| FI105048B (fi) * | 1997-05-22 | 2000-05-31 | Xyrofin Oy | Menetelmä isomaltuloosin ja muiden tuotteiden valmistamiseksi |
| DE19747642B4 (de) * | 1997-10-29 | 2004-12-23 | Südzucker AG Mannheim/Ochsenfurt | Verfahren zur Herstellung von Isomelezitose-haltigen Süßungsmitteln, von Isomelezitose und von Isomaltulose |
| FR2928817B1 (fr) * | 2008-03-19 | 2010-12-17 | Ecopsi | Procede et unite de production de dreches de betteraves et de jus sucre a partir de betteraves |
| DE102011100772A1 (de) | 2011-05-05 | 2012-11-08 | Evonik Degussa Gmbh | Verfahren zur Herstellung von Isomaltulose aus Pflanzensäften |
| US9695411B2 (en) | 2012-04-17 | 2017-07-04 | Petiva Private Limited | Polynucleotide for recombinant expression of isomaltulose synthase |
| DE102012216955A1 (de) | 2012-09-21 | 2014-03-27 | Evonik Degussa Gmbh | Verfahren umfassend eine kontinuierliche Kristallisation von Isomaltulose |
| DE102014203964A1 (de) | 2014-03-05 | 2015-09-10 | Evonik Degussa Gmbh | Granulat enthaltend Isomaltulose Synthase |
| WO2019175634A1 (en) * | 2018-03-15 | 2019-09-19 | Petiva Private Limited | Novel whole-cell biocatalyst for the production of isomaltulose |
| CN113481257B (zh) * | 2021-07-09 | 2022-11-29 | 东北师范大学 | 一种重组酶在合成含有α-(1,4)糖苷键的果糖衍生物中的应用 |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE1049800B (de) * | 1957-10-11 | 1959-01-29 | Süddeutsche Zucker-Aktiengesellschaft, Mannheim | VERFAHREN ZUR HERSTELLUNG VON PALATINOSE (6-a-GLUCOSIDO-FRUCTOFURANOSE) |
| US3779869A (en) * | 1971-05-13 | 1973-12-18 | Miles Lab | Enzyme stabilization |
| USRE29130E (en) * | 1971-07-09 | 1977-02-01 | R. J. Reynolds Tobacco Company | Enzymatic process using immobilized microbial cells |
| US3974036A (en) * | 1974-09-03 | 1976-08-10 | Miles Laboratories, Inc. | Process for conditioning bacterial cells containing glucose isomerase activity |
| US4208482A (en) * | 1976-04-23 | 1980-06-17 | Anheuser-Busch, Incorporated | Immobilization of glucose isomerase |
| US4167447A (en) * | 1976-07-19 | 1979-09-11 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Method for insolubilizing enzymes on chitosan |
| DE2860239D1 (en) * | 1977-09-13 | 1980-12-04 | Bayer Ag | Process for the continuous isomerisation if saccharose to isomaltulose by means of microorganisms |
| US4251632A (en) * | 1978-09-11 | 1981-02-17 | Miles Laboratories, Inc. | Preparation of a bacterial cell aggregate |
| DE3066516D1 (en) * | 1979-11-07 | 1984-03-15 | Tate & Lyle Plc | Production of isomaltulose |
-
1980
- 1980-10-09 DE DE19803038219 patent/DE3038219A1/de active Granted
-
1981
- 1981-07-21 DE DE8181105743T patent/DE3172822D1/de not_active Expired
- 1981-07-21 AT AT81105743T patent/ATE16406T1/de not_active IP Right Cessation
- 1981-07-21 EP EP81105743A patent/EP0049742B1/de not_active Expired
- 1981-07-24 IE IE1670/81A patent/IE51455B1/en not_active IP Right Cessation
- 1981-08-19 FI FI812560A patent/FI70926C/fi not_active IP Right Cessation
- 1981-09-10 ES ES505364A patent/ES505364A0/es active Granted
- 1981-09-10 DD DD81233191A patent/DD201695A5/de not_active IP Right Cessation
- 1981-09-10 SU SU813335150A patent/SU1512489A3/ru active
- 1981-10-01 DK DK434981A patent/DK150310C/da not_active IP Right Cessation
- 1981-10-01 JP JP56154935A patent/JPS5794298A/ja active Pending
-
1985
- 1985-10-30 US US06/793,005 patent/US4640894A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE3172822D1 (en) | 1985-12-12 |
| ES8206623A1 (es) | 1982-08-16 |
| ATE16406T1 (de) | 1985-11-15 |
| SU1512489A3 (ru) | 1989-09-30 |
| JPS5794298A (en) | 1982-06-11 |
| DE3038219A1 (de) | 1982-04-15 |
| DK150310B (da) | 1987-02-02 |
| FI70926B (fi) | 1986-07-18 |
| US4640894A (en) | 1987-02-03 |
| DK434981A (da) | 1982-04-10 |
| DK150310C (da) | 1987-09-28 |
| EP0049742A1 (de) | 1982-04-21 |
| DD201695A5 (de) | 1983-08-03 |
| IE51455B1 (en) | 1986-12-24 |
| FI812560L (fi) | 1982-04-10 |
| EP0049742B1 (de) | 1985-11-06 |
| DE3038219C2 (fi) | 1988-05-11 |
| ES505364A0 (es) | 1982-08-16 |
| IE811670L (en) | 1982-04-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI70926C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av isomaltulos (6-0-alfa-d-glukopyranosido-d-fruktos) medelst immobiliserade mikrobceller | |
| CA1259939A (en) | Production of isomaltulose | |
| KR970009295B1 (ko) | 트레할룰로스 및 이소말툴로스의 제조방법 | |
| SU1630617A3 (ru) | Способ получени фруктозилдисахаридов | |
| TW201307565A (zh) | 由樹汁製造異麥芽酮糖的方法 | |
| TWI762577B (zh) | 製造含有異麥芽酮糖晶體和海藻糖之固體物料之方法 | |
| FI72345C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av isomaltulos (6-0- -d-glukopyranosido-d-fruktos) med tillhjaelp av immobiliserade bakterieceller. | |
| FI64641B (fi) | Foerfarande foer kontinuerlig framstaellning av isomaltulos fron sackaros med tillhjaelp av isomaltulosbildande mikroor gaismer | |
| JPS59140894A (ja) | １―０―α―Ｄ―グルコピラノシド―Ｄ―フルクトースの製造方法 | |
| EP0873995B1 (en) | Crystalline 1-kestose and process for preparing the same | |
| JPS6023838B2 (ja) | 微生物の全細胞におけるスクロ−ス・ムタ−ゼの固定化方法 | |
| US5334516A (en) | Production method of branched fructooligosaccharides | |
| EP4317429A1 (en) | Method for producing tagatose by immobilized multi-enzyme system | |
| KR0131134B1 (ko) | 고수율, 고순도 이소말토 올리고당의 제조방법 | |
| KR0182865B1 (ko) | 신규 고정화법에 의한 이소말툴로스의 제조방법 | |
| KR840000893B1 (ko) | 모라노린 유도체의 제조방법 | |
| KR950007223B1 (ko) | 분기올리고당의 제조방법 | |
| JPH0481432B2 (fi) | ||
| JPH04211341A (ja) | 甘味剤 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MA | Patent expired |
Owner name: SYDDEUTSCHE ZUCKER-AG |