FI113768B - Migreeninvastaisia indolijohdossuoloja - Google Patents

Description

113768

Migreenin vastaisia indolijohdossuoloja - Indolderivatsalter mot migrän

Esillä oleva keksintö koskee 3-(N-metyyli-2(R)-pyrrolidinyylimetyyli)-5-(2-fenyyli-5 sulfonyylietyyli)- lH-indolin vetybromidisuoloja, joilla on kaava (I): ch3 S0 2 | J" Il : HBr (I)

H

Erään edullisen toteutusmuotonsa mukaan keksintö koskee edellä määritellyn vety-10 bromidisuolan erästä erityistä polymorfista muotoa, jota tästedes nimitetään a-muo-doksi. Lisäksi se koskee mainitun vetybromidisuolan erästä polymorfista välimuotoa, jota tästedes nimitetään β-muodoksi, menetelmiä a- ja β-muotojen valmistamiseksi, α-muotoa sisältäviä farmaseuttisia koostumuksia ja α-muodon käyttöä lääketieteessä.

15 WO-A-92/06973 koskee sarjaa 3,5-disubstituoituja indoleja ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja, joita voidaan käyttää migreenin ja muiden häiriöiden hoidossa. Siinä mainittuja esimerkkejä sellaisista suoloista ovat vetykloridi, vetybro-. midi, vetyjodidi, nitraatti, sulfaatti tai bisulfaatti, fosfaatti tai happofosfaatti, asetaat- , · · ·, 20 ti, laktaatti, sitraatti tai happositraatti, tartraatti tai bitartraatti, sukkinaatti, maleaatti, _ i ' · < fumaraatti, glukonaatti, sakkaraatti, bentsoaatti, metaanisulfonaatti ja pamoaatti. Eri- !. tyisesti siinä mainitaan 3-(N-metyyli-2(R)-pyrrolidinyylimetyyli)-5-(2-fenyyli-sulfo- ’;" ’ nyylietyyli)-1 H-indoli ja sen hemisukkinaattisuola, joka karakterisoidaan ei-kiteisek- 1" ' ‘ si vaahdoksi. Lisätutkimukset ovat vahvistaneet, että tämä suola ei sovi farmaseutti- ' 25 seen valmisteeseen, koska lukemattomat yritykset saada sitä muodossa, jolla on val misteeseen vaadittavat ominaisuudet, ovat epäonnistuneet.

: Niinpä ongelma, jonka ratkaisemiseen esillä olevalla keksinnöllä pyritään, on 3-(N- _ ‘ . metyyli-2(R)-pyrrolidinyylimetyyli)-5-(2-fenyylisulfonyylietyyli)-1 H-indolin farma- ... 30 seuttisesti hyväksyttävän suolan, jota voidaan tehokkaasti prosessoida, jotta lääk- ’ ·; * ’ keestä voidaan saada stabiileja ja tehokkaita valmisteita, erityisesti kiinteitä ja puris- tettavia annosmuotoja, aikaansaaminen. Sellaisia annosmuotoja ovat tavanomaisesti vapautuvat suun kautta annosteltavat tabletit, säädellysti lääkeainetta vapauttavat (matriksi)tabletit, nopeasti liukenevat tabletit (esimerkiksi pakastekuivatut), kielen 2 113768 alle asettavat tabletit, bukkaalitabletit, suun kautta annosteltavat jauheella tai rakeilla täytetyt kapselit, rekonstituoitavia suspensioita varten tarkoitetut jauheet, konven-tionaalisesti ja säädellysti lääkeainetta vapauttavat monipartikulaarisysteemit, jotka on pakattu kapseleihin tai puristettu tableteiksi, imeskelytableteiksi, lääkerakeiksi, 5 peräpuikoiksi, emätintableteiksi, kiinteiksi implanteiksi, lyofiilisiksi tulpiksi, nano-partikkeleiksi ja mikropartikkeleiksi ja jauheeksi suspensiota ja nenän kautta antoa varten ja kuivia inhalaatiosysteemejä varten.

Tärkeitä kriteerejä, jotka valitun suolan tulee täyttää, ovat inter alia, että suolan 10 tulee olla kiteinen, sillä tulee olla sopiva sulamispiste, se ei saa olla hygroskooppinen, sen tulee olla puristettavissa ja sen tulee olla stabiili kiinteässä tilassa ja lisäksi sillä tulee olla hyväksyttävä solubiliteetti ja liukenemiskäyttäytyminen.

Tämä ongelma on ratkaistu löytämällä yllättävästi kaavan (I) vetybromidisuolalle 15 uusi α-muoto, joka täyttää edellä mainitut vaatimukset; niinpä se on erinomaisen sopiva käytettäväksi farmaseuttisiin valmisteisiin kiinteänä annosmuotona, erityisesti suun kautta, posken limakalvolle ja kielen alle asettavaa antoa varten.

Ensimmäinen vaihe ongelman ratkaisemisessa oli kehittää yksihappoisen emäksen, 20 3-(N-metyyli-2(R)-pyrrolidinyylimetyyli)-5-(2-fenyylisuIfonyylietyyli)-lH-indolin, happoadditiosuola, joka on sekä kiteinen että riittävän korkean sulamispisteen (> noin 130 °C) omaava, jotta se kestäisi farmaseuttisen prosessoinnin kiinteätä an-

• I

nosmuotoa valmistettaessa ja muokattaessa.

: ; 25 Seuraavista suoloista yritettiin saada aikaan sopiva muoto: vetykloridi, vetybromidi, hemisulfaatti, bisulfaatti, nitraatti, happofosfaatti, fosfaatti, metaanisulfonaatti, bent-seenisulfonaatti, p-tolueenisulfonaatti, (+)-kamforisulfonaatti, asetaatti, bentsoaatti, sitraatti, hemifumaraatti, fumaraatti, hemimaleaatti, maleaatti, hemisukkinaatti, suk-kinaatti, hemi-L-tartraatti, L-tartraatti, hemi-D-tartraatti, D-tartraatti, L-laktaatti, . _ 30 (R)-(-)-mandelaatti, hippuraatti, hemiftalaatti, ftalaatti ja hemitereftalaatti.

• » t > I » Näistä kolmestakymmenestä mahdollisesta suolasta ainoastaan neljä voitiin saada •: * : kiteisinä kiinteinä aineina, nimittäin hemisulfaatti, vetykloridi, vetybromidi ja bent- :'": seenisulfonaatti; loput saatiin ei-kiteisinä/alhaisen tai ei tarkan sulamispisteen omaa- 35 vina/tahmeina kiinteinä aineina, kumeina, lasimaisina aineina, vaahtoina, hartseina tai öljyinä. Neljästä kiteisestä suolasta lisäksi bentseenisulfonaatilla osoittautui ‘ · : olevan liian alhainen sulamispiste (sp.) 74-75 °C. Niinpä ainoastaan hemisulfaatilla, vetykloridilla ja vetybromidilla edettiin yksityiskohtaisempiin tutkimuksiin.

3 113768

Hemisulfaattisuola

Alunperin eristetyllä hemisulfaattisuolalla (sp. 145-147 °C), joka nimettiin β-muo-doksi, ei havaittu selvää yhtä sulamisendotermiapiikkiä, kun sitä tutkittiin differenti-5 aalisella skannauskalorimetrialla (DSC), vaan pikemminkin monimutkaista poly-morfista transitiota osoittava jälki. Tämä β-muoto on erittäin hygroskooppinen yli 50 %:n suhteellisissa kosteuksissa ja tietyissä olosuhteissa veden imeytyminen saattaa aiheuttaa polymorfisen muuttumisen toiseksi vaihtoehtoiseksi muodoksi, jota nimitetään α-muodoksi, jonka sulamispiste on 185 °C, ja jopa hajoamisen. Lisäksi β-10 muodon väri muuttuu puristettaessa ja aiheuttaa painimen kalvottumista tabletoinnin aikana ja siten useista syistä sen fysikaalis-kemialliset ominaisuudet tekevät siitä sopimattoman kiinteiden annosmuotojen kehittämiseen.

Vaikka hemisulfaattisuolan α-muodolla ei esiinnykään kiinteän tilan epästabiiliutta 15 veden imeytymisen yhteydessä, se on kuitenkin äärimmäisen hygroskooppinen ja sen vuoksi sopimaton kehitettäväksi siitä seuraavien vaikeuksien vuoksi, joihin kuuluvat vaihtelevat virtausominaisuudet ja massan ja annosmuotojen epästabiilius, mikä estää, inter alia, lääkeaktiivisuuden täsmällisen kohdentamisen.

20 Vetykloridisuola

Reaktioväliaineena ja kiteyttämiseen käytetystä liuotteesta riippuen voidaan valmistaa kumpaa tahansa kahdesta vetykloridimuodosta. Näistä ensimmäisen eristettävän ’ ja karakterisoitavan, joka nimettiin β-muodoksi ja jonka sulamispiste on * * i 125-129 °C (leveä endoterminen huippu 135 °C:ssa DSC:llä pyyhkäisynopeudella : V: 25 20 °C /min, mutta ei hydraatin poistumista osoittavia endotermisiä piikkejä havaitta- ‘: vissa) vesipitoisuuden todettiin olevan 4,42 % (1,08 mol) Karl Fischerin titrimetrial- la (KFT). Vaikka hygroskooppisuustutkimukset paljastivat, että β-muoto on stabiili . ·: \ kiinteässä tilassa, se suljettiin kuitenkin pois edelleenkehittelystä sen vuoksi, miten se käyttäytyi puristustutkimuksissa, joissa havaittiin levyn sulamista ja tarttumista 30 painimiin, mikä vahvisti vaatimusta korkeammalla sulavasta kiinteästä aineesta.

‘ *; · ‘ Vaihtoehtoisella vetykloridisuolalla, joka nimettiin α-muodoksi, todettiin suurempi, ;· : terävä endoterminen piikki 165 °C:ssa DSC:llä (skannausnopeus 20 °C /min). Sen :'' ’: hygroskooppisen profiilin määrittäminen paljasti, että kun sitä oli pidetty seitsemän ,1, 35 vuorokautta 40 °C:n lämpötilassa (T) ja 75 %:n suhteellisessa kosteudessa (RH), se I · *; * \ oli, toisin kuin β-muoto, imenyt huomattavan määrän kosteutta. Tämän kosteuden

I I I

’ · : imeytymisen todettiin liittyvän muutoksiin DSC-jäljessä, joka osoitti, että ainakin tällaisissa kosteusolosuhteissa vedetön α-muoto muuttuu hydratoituneeksi β-muo- 4 113768 doksi. Näin siis α-muodonkin farmaseuttisen kehittelyn sulkee pois sen sopimaton fysikaalinen stabiilius.

V ety bromidisuola 5 Vetybromidisuola voidaan sekin eristää toisessa kahdesta muodosta käytetyistä val-misteluolosuhteista riippuen. Alhaisemmassa lämpötilassa sulavaa muotoa, joka nimettiin β-muodoksi, ei todettu toteuttamiskelpoiseksi vaihtoehdoksi kiinteän annos-muodon kehittämiseen, koska, kun sen laatua yritetään parantaa, siinä tapahtuu poly-morfinen muutos korkeammalla sulavaan muotoon, joka nimettiin a-muodoksi.

10

Sitä vastoin kaavan (I) mukaisen vetybromidisuolan uusi α-muoto todettiin kuitenkin ainutlaatuiseksi siinä mielessä, että sillä oli odottamattomasti sellainen ominaisuuksien yhdistelmä, joka vaaditaan, jotta kiinteitä annosmuotoja pystytään tehokkaasti kehittämään, nimittäin kiteisyys, tarpeeksi korkea sulamispiste, hygroskooppi-15 suuden puuttuminen, kiinteän tilan stabiilius, puristettavuus ja polymorfisen muutoksen puuttuminen yhdistyneenä tyydyttäviin solubiliteetti- ja liukenemisnopeus-profiileihin.

Keksinnön oleelliset tunnusmerkit on esitetty oheisissa patenttivaatimuksissa.

20

Esillä oleva keksintö koskeekin siis kaavan (I) mukaisen vetybromidisuolan kiteistä, polymorfista α-muotoa, jonka paraffiiniöljyssä jauhennetun näytteen infrapuna-spektri (IR) osoittaa merkittäviä absorptiokaistoja aaltoluvuilla v = 3371, 3293, : 2713, 2524, 1419, 1343, 1307, 1264, 1151, 1086, 1020, 1008, 999, 922, 900, 805, ; V: 25 758, 740, 728, 689, 672, 652, 640, 598, 581, 573, 531, 498, 465, 457, 443, 428, 422, 414 ja 399 cm’1.

, ’: , α-muotoa karakterisoi edelleen sen röntgenjauhediffraktiokuvio (PXRD), joka saa tiin käyttämällä grafiittimonokromaattorilla suodatettua kuparisäteilyä (λ = 30 0,15405 nm) ja jossa tärkeimmät piikit olivat kulmissa 9,7, 10,7, 15,9, 16,5, 17,8, 18,3, 19,3, 19,8, 20,1,21,2, 24,4, 25,5, 25,8, 26,7, 27,6 ja 29,4 20.

t t ·:’ : α-muotoa karakterisoi edelleen sen differentiaalisen skannauskalorimetrian (DSC) : ’ “: jälki, jossa esiintyy terävä endoterminen piikki 176,5 °C:n kohdalla skannausnopeu- ,;, 35 della 20 °C/min.

* t

• I I

’ · ! Keksintö koskee myös kaavan (I) vetybromidisuolan kiteistä, polymorfista β-muo- toa, jota voidaan käyttää välituotteena a-muodon valmistuksessa. Sen paraffiiniöl- 5 113768 jyssä jauhennetun näytteen IR-spektrissä esiintyy merkittävät absorptiokaistat aalto-luvuilla v = 3239, 2672, 2656, 2632, 1409, 1366, 1351, 1334, 1303, 1293, 1152, 1138, 1122, 1098, 1086, 791, 771, 746, 688, 634, 557, 528, 484, 476, 469, 463, 455, 432, 424, 413, ja 401 cm-1.

5 β-muotoa karakterisoi edelleen sen grafiittimonokromaattorilla suodatettua kupari-säteilyä (λ = 0,15405 nm) käyttämällä saatu PXRD-kuvio, jossa näkyy tärkeimmät piikit kulmissa 11,0, 17,2, 19,2, 20,1, 21,6, 22,6, 23,6 ja 24,8 20.

10 β-muotoa karakterisoi vielä sen DSC-jälki, jossa esiintyy terävä endoterminen piikki 154,8 °C:n kohdalla skannausnopeudella 20 °C/min.

Keksintö koskee vielä menetelmiä kaavan (I) yhdisteen α-muodon valmistamiseksi, kuten seuraavassa kuvataan.

15 (A) Käsittelemällä 3-(N-metyyli-2(R)-pyrrolidinyylimetyyli)-5-(2-fenyylisulfonyylietyy-li)-lH-indolin liuosta jossakin sopivassa liuotteessa, edullisesti asetonissa, huoneenlämpötilassa, vetybromidin vesiliuoksella ja sen jälkeen kiteyttämällä eristetty raa-20 kaöljy jostakin sopivasta liuotteesta, edullisesti 2-propanolista, saadaan halutun vetybromidisuolan a-muoto.

(B) : Käsittelemällä 3-(N-metyyli-2(R)-pyrrolidinyylimetyyli)-5-(2-fenyylisulfonyylietyy- 25 li)-lH-indolin liuosta jossakin sopivassa liuotteessa, edullisesti asetonissa tai jossa- kin eetteriliuotteessa, kuten tetrahydrofuraanissa tai 1,2-dimetoksietaanissa, vielä : . edullisemmin 1,2-dimetoksietaanissa, 0-10 °C: n lämpötilassa, vetybromidin vesi- ’ ·; ·, liuoksella saadaan halutun vetybromidin β-muoto.

, 30 β-muodon kiteyttäminen jostakin sopivasta liuotteesta, edullisesti vesipitoisesta ase- •; · ’ tonista, ja sen jälkeen saadun seoksen liettäminen antaa halutun a-muodon.

> · ·:’··: (C) .1 “. Käsittelemällä 3-(N-metyyli-2(R)-pyrrolidinyylimetyyli)-5-(2-fenyylisulfonyylietyy- 35 li)-lH-indolin liuosta jossakin sopivassa liuotteessa, edullisesti asetonissa, 0-5 °C:n · ‘ lämpötilassa vetybromidin vesiliuoksella ja sitten liettämällä reaktioseos ja valinnai- ·. : sesti kuumentamalla refluksoiden, jäähdyttämällä ja edelleen liettämällä, saadaan haluttu a-muoto.

6 113768

Kuten edellä mainittiin, WO-A-92/06973 koskee 3-(N-metyyli-2(R)-pyrrolidinyyli-metyyli)-5-(2-fenyylisulfonyylietyyli)-lH-indolia ja sen farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja, jotka ovat tarkoitetut migreenin ja muiden häiriöiden hoitoon (sisälly-5 tetään tähän viitejulkaisuna). Niinpä esillä oleva keksintö koskee myös farmaseuttisia koostumuksia, jotka sisältävät sen vetybromidisuolan a-muotoa, α-muodon käyttöä lääkkeenä ja migreenin ja mainittujen muiden häiriöiden hoitoon tarkoitetun lääkkeen valmistukseen.

10 α-muodon perifeerinen 5-HT{-reseptoriagonistiaktiivisuus voidaan määrittää in vitro testaamalla, missä määrin se matkii sumatriptaania supistamalla eristettyä koiran jalkavarren iholaskimoliuskaa (P.P.A. Humphrey et ai, Brit. J. Pharmacol., 1988, 94, 1123). Tämä vaikutus voidaan estää metiotepiinillä, eräällä tunnetulla 5-HT -antagonistilla. Sumatriptaania tiedetään voitavan käyttää migreenin hoidossa ja 15 se nostaa selektiivisesti päävaltimon vastusta nukutetussa koirassa ja sen seurauksena vähentää päävaltimon verenvirtausta. Tämän on esitetty (W. Feniuk et ai, Brit.

J. Pharmacol., 1989, 96, 83) olevan sen tehon perustana.

α-muodon keskeinen 5-HT) -agonistiaktiivisuus voidaan mitata in vitro reseptoriin 20 sitoutumiskokeilla, joita on kuvattu 5-HT| A-reseptorin yhteydessä, käyttämällä rotan korteksia reseptorilähteenä ja [3H]8-OH-DPAT:tä radioligandina (D. Hoyer et ai, Europ. J. Pharmacol., 1985, 118, 13), ja joita on kuvattu 5-HT1D-reseptorin yhtey-: dessä, käyttämällä naudan häntätumaketta reseptorilähteenä ja [3H]5-HT:tä radioli- " : gandina (R.E. Heuring ja S.J. Peroutka, J. Neuroscience, 1987, 7, 894).

: 25 ; Hoidossa kaavan (I) vetybromidisuolan α-muotoa voidaan antaa yksinään, mutta ; ·, yleensä se annetaan sekoitettuna farmaseuttisesti hyväksyttäviin apuaineisiin, liuku- .;_ aineet, hajotusaineet ja voiteluaineet mukaanlukien, jotka valitaan aiottua antotapaa ja standardin mukaista farmaseuttista käytäntöä silmällä pitäen. Erityisesti se voi-30 daan antaa suun kautta tablettien, lääkerakeiden tai imeskelytablettien muodossa, : jotka sisältävät täyteaineita, kuten tärkkelystä tai laktoosia, tai kapseleina, emätin- *... ‘ tabletteina tai implantteina, joko yksinään tai sekoitettuina täyteaineisiin. Bukkaa- -;··· lisesti tai kielen alle sitä voidaan antaa tabletteina, lääkehelminä tai imeskelytab- . ". letteinä, jotka voidaan formuloida konventionaaliseen tapaan.

’·’ 35 ‘ · ‘ Kun kaavan (I) mukaisen suolan α-muotoa annetaan potilaalle suun kautta, posken \ : limakalvolle tai kielen alle asetettuna, sen vuorokausiannos on 0,01 mg - 20 mg/kg (yhtenä tai jaettuina annoksina). Tabletit tai kapselit sisältävät tällöin 0,5 mg - 0,5 g 7 113768 vaikuttavaa yhdistettä annettavaksi kerran tai kahdesti tai useamman kerran vuorokaudessa, kuten sopivaksi katsotaan. Hoitava lääkäri määrää joka tapauksessa käytettävän annoksen, joka on sopivin kullekin potilaalle ja se voi vaihdella kysymyksessä olevan potilaan iän, painon ja vasteen mukaan. Edellä mainitut annokset ovat 5 esimerkkejä keskimääräisestä tapauksesta; voi tietysti esiintyä yksilöllisiä tapauksia, joissa tulee käyttää suurempia tai pienempiä annoksia ja sellaiset sisältyvät tämän keksinnön suoja-alaan.

Keksintö koskee siis farmaseuttista koostumusta, joka käsittää kaavan (I) mukaisen 10 yhdisteen cc-muodon yhdessä jonkin farmaseuttisesti hyväksyttävän laimennusai-neen tai kantajan kanssa.

Keksintö koskee myös kaavan (I) mukaisen yhdisteen α-muotoa tai jotakin sen farmaseuttista koostumusta, joka on tarkoitettu käytettäväksi lääkkeenä.

15

Keksintö koskee vielä kaavan (I) mukaisen yhdisteen α-muodon tai jonkin sen farmaseuttisen koostumuksen käyttöä sekä lääkkeen, joka on tarkoitettu migreenin tai jonkin siihen liittyvän tilan, kuten jatkuvan päänsäryn, kroonisen paroksysmaalisen hemi-kranian tai johonkin verenkiertohäiriöön liittyvän päänsäryn, tai masennuksen, 20 tuskaisuuden, syömishäiriön, lääkkeiden väärinkäytön, kohonneen verenpaineen tai oksentelun parantavaan ja ennaltaehkäisevään hoitoon, että lääkkeen, joka on tarkoitettu lääketieteellisen tilan, jota voidaan hoitaa jollakin 5-HTj-reseptorien selektiivi-:, . sellä agonistilla, parantavaan ja ennaltaehkäisevään hoitoon, valmistukseen.

; 25 Hakemuksessa esitetään myös menetelmä ihmisen, joka tarvitsee migreenin tai jonkin siihen liittyvän tilan, kuten jatkuvan päänsäryn, kroonisen paroksysmaalisen hemikranian tai johonkin verenkiertohäiriöön liittyvän päänsäryn, tai masennuksen, '... ( tuskaisuuden, syömishäiriön, lääkkeiden väärinkäytön, kohonneen verenpaineen tai oksentelun, parantavaa tai ennaltaehkäisevää hoitoa, hoitamiseksi ja menetelmä , 30 ihmisen, joka tarvitsee sellaisen lääketieteellisen tilan, jota voidaan hoitaa jollakin ·;;; 5-HTrreseptorien selektiivisellä agonistilla, parantavaa tai ennaltaehkäisevää hoi- • * *·*·’ toa, hoitamiseksi, joissa menetelmissä mainitulle ihmiselle annetaan tehokas määrä •: · : kaavan (I) mukaisen yhdisteen α-muotoa tai jotakin sen farmaseuttista seosta.

I * 35 Kaavan (I) mukaisen vetybromidisuolan α-muodon ja sen farmaseuttisten koostu-' * · ' musten valmistusta kuvataan seuraavien esimerkkien avulla.

Huoneenlämpötila tarkoittaa 20-25 °C ja sp. tarkoittaa sulamispistettä.

8 113768 IR tarkoittaa infrapunaa, PXRD tarkoittaa röntgenjauhediffraktiota, DSC tarkoittaa differentiaalista skannauskalorimetriaa, T tarkoittaa lämpötilaa, RH tarkoittaa suhteellista kosteutta, HPLC tarkoittaa suuren erotuskyvyn nestekromatografiaa, KFT 5 tarkoittaa Karl Fischerin titrimetriaa.

Esimerkki 1 3-(N-metyyli-2(R)-pyrrolidinyylimetyyli)-5-(2-fenyylisulfonyylietyyli)-lH-indo-lihydrobromidi, a-muoto 10 49-prosenttista (paino/paino) bromivetyhappoa (432 mg, 0,3 ml, 2,6 mmol) lisättiin sekoitettuun liuokseen, jossa oli 3-(N-metyyli-2(R)-pyrrolidinyylimetyyli)-5-(2-fe-nyylisulfonyylietyyli)-lH-indolia (1,0 g, 2,6 mmol) asetonissa (10 ml), huoneenlämpötilassa. Vielä 15 minuutin sekoittamisen jälkeen reaktioseosta haihdutettiin alipaineessa, jolloin saatiin keltainen neste; siinä oleva jäännösvesi poistettiin atseotroop-15 pisesti 2-propanolia käyttäen. Saatu samea kellertävä öljy (1,55 g) jauhennettiin eetterin kanssa ja liuotettiin sitten kuumaan 2-propanoliin (25 ml); tämä liuos tuotti jäähtyessään otsikkoyhdisteen (1,13 g) vaaleankeltaisena kiteisenä kiinteänä aineena suodatuksen, 2-propanolilla pesun ja in vacuo kuivaamisen jälkeen, sp. 165-170 °C. Todettiin: C 56,67; H 5,78; N 5,82. C22H26N202S; HBr edellyttää C 57,02; H 5,87; 20 N 6,04 %.

Esimerkki 2 » » » :,,. 3-(N-metyyli-2(R)-pyrrolidinyylimetyyli)‘5-(2-fenyylisulfonyylietyyli)-lH-indo- : ] : livetybromidi, a-muoto : V: 25 (a) 3-(N-metyyli-2(R)-pyrrolidinyylimetyyli)-5-(2-fenyyIisulfonyylietyyli)-lH- indolivetybromidi, β-muoto : ·, 49-prosenttista (paino/paino) bromivetyhappoa (27,86 ml, 0,25 mol) lisättiin 1 tun- nin kuluessa sekoitettuun liuokseen, jossa oli 3-(N-metyyli-2(R)-pyrrolidinyylime-tyyli)-5-(2-fenyylisulfonyylietyyli)-lH-indolia (92,86 g, 0,24 mol) 1,2-dimetoksi-30 etaanissa (2,08 1), noin 5 °C:ssa. Jäähdytyshaude poistettiin ja saadun lietteen annet-• ; tiin rakeistua sekoittamalla sitä huoneenlämpötilassa vielä 18 tuntia. Suodatus ja sen ’···“ jälkeen pesu 1,2-dimetoksietaanilla ja kuivaus in vacuo tuotti halutun tuotteen ·; ·· (97,9 g) kiinteänä aineena, sp. 150-151 °C. Todettiin: C 56,77; H 5,87; N 5,85.

: ’ ': C22H26N202S; HBr edellyttää C 57,02; H 5,87; N 6,04 %.

35 (b) Sekoitettua seosta, joka sisälsi edellä saatua tuotetta (20 g), asetonia (140 ml) ja . : vettä (6 ml), kuumennettiin refluksoiden, kunnes β-muoto oli täydellisesti liuennut.

Liuoksen annettiin sitten jäähtyä huoneenlämpötilaan, sitä sekoitettiin 1 tunti ja sit- 9 113768 ten saatuun lietteeseen lisättiin asetonia (460 ml). Vielä 1 tunnin kuluttua liete jäähdytettiin 0-5 °C:seen ja sekoittamista jatkettiin vielä 18 tuntia. Väritön kiteinen kiinteä aine koottiin suodattamalla, pestiin asetonilla ja kuivattiin in vacuo, jolloin saatiin otsikkoyhdiste (13,22 g), joka oli identtinen esimerkin 1 tuotteen kanssa.

5

Esimerkki 3 3-(N-metyyli-2(R)-pyrrolidinyylimetyyli)-5-(2-fenyylisulfonyylietyyli)-lH-indo-livetybromidi, a-muoto 62-prosenttista (paino/paino) bromivetyhappoa (1 706 g, 13,07 mmol) lisättiin 1 tun-10 nin kuluessa sekoitettuun liuokseen, joka sisälsi 3-(N-metyyli-2(R)-pyrrolidinyyli-metyyli)-5-(2-fenyylisulfonyylietyyli)-lH-indolia (5,0 g, 13,07 mmol) asetonissa (112 ml), 0-5 °C. Kun reaktioseosta oli lietetty 0-5 °C 3 tuntia, sitä kuumennettiin refluksoiden 2 tuntia, sen jälkeen jäähdytettiin 0-5 °C:seen ja lietettiin sitten vielä 1 tunti tässä lämpötilassa. Suodattaminen, sen jälkeen pesu asetonilla ja kuivaus in 15 vacuo tuotti otsikkoyhdisteen (5,18 g), joka oli identtinen esimerkin 1 tuotteen kanssa.

Esimerkeissä 4-6 "aktiivinen aineosa" tarkoittaa vetybromidisuolan a-muotoa.

20 Esimerkki 4

Suun kautta annettavia tabletteja A. Suorapuristus mg/tabletti 50 g:n seosta varten : : Aktiivinen aineosa 12,12 6,06 g : Y: Mikrokiteinen selluloosa Ph Eur 25,00 12,50 g

Laktoosi Ph Eur 60,88 30,44 g ti · :·. Natriumkroskarmelloosi NF 1,00 0,50 g

Magnesiumstearaatti Ph Eur 1,00 0,50 g

Aktiivinen aineosa seulotaan ja sekoitetaan muiden komponenttien kanssa. Saatu ·;;; 25 seos puristetaan tableteiksi käyttämällä rotaatiotablettipuristinta (Manesty Beta- ’ · y' press), joka on varustettu 6 mm:n normaaleilla koveroilla painimilla. Saadut tabletit -: * · · voidaan kalvopäällystää jollakin sopivalla kalvopäällystysaineella.

» » J » 10 113768 B. Kostearakeistus mg/tabletti 50 g:n seosta varten

Aktiivinen aineosa 1,21 0,76 g

Laktoosi Ph Eur 56,03 35,02 g

Maissitärkkelys Ph Eur 18,68 11,67 g

Polyvinyylipyrrolidoni (2 % paino/paino liuos) 1,60 1,00 g

Kolloidinen vedetön piioksidi Ph Eur 0,08 0,05 g

Natriumkroskarmelloosi NF 1,60 1,00 g

Magnesiumstearaatti Ph Eur 0,80 0,50 g

Polyvinyylipyrrolidoni liuotetaan puhdistettuun veteen sopivaksi konsentraatioksi. Aktiivinen aineosa seulotaan ja sekoitetaan kaikkien muiden komponenttien paitsi 5 magnesiumstearaatin kanssa. Sopivia tilavuuksia polyvinyylipyrrolidoniliuosta lisätään ja jauheet rakeistetaan. Kuivaamisen jälkeen rakeet seulotaan ja sekoitetaan magnesiumstearaatin kanssa. Sitten rakeet puristetaan tableteiksi käyttäen sopivan-läpimittaisia painimia.

10 Muunväkevyisiä tabletteja voidaan valmistaa muuttamalla aktiivisen aineosan ja valmistuksen apuaineiden suhteita tai puristuspainoa ja käyttämällä sopivia painimia.

Esimerkki 5 15 Kapselit mg/kapseli

Aktiivinen aineosa 18,18

Laktoosi Ph Eur 208,89 .. Maissitärkkelys Ph Eur 69,63

Kolloidinen vedetön piioksidi Ph Eur 0,30

Magnesiumstearaatti Ph Eur 3,00 :: Täyttöpaino 300,00 . · ·. Aktiivinen aineosa seulotaan ja sekoitetaan muiden komponenttien kanssa. Seok- ’ sella täytetään No. 2 kovia gelatiinikapseleita sopivaa laitteistoa käyttäen. Muita ‘ ' annoksia voidaan valmistaa muuttamalla täyttöpainoa ja tarpeen vaatiessa muutta- : 20 maila kapselikokoa sopivaksi.

11 113768

Esimerkki 6

Kielen alle asetettavat tabletit mg/tabletti 50 g:n seosta varten

Aktiivinen aineosa 1,2 0,750 g

Laktoosi Ph Eur 25,0 15,625 g

Maissitärkkelys Ph Eur 25,0 15,625 g

Mannitoli Ph Eur 25,0 15,625 g

Natriumkroskarmelloosi NF 3,0 1,875 g

Magnesiumstearaatti Ph Eur 0,8 0,500 g

Aktiivinen aineosa seulotaan sopivan seulan läpi, sekoitetaan täyteaineisiin ja puris-5 tetaan sopivia painimia käyttäen. Väkevyydeltään muunlaisia tabletteja voidaan valmistaa muuttamalla joko aktiivisten aineosien ja täyteaineiden suhdetta tai puris-tuspainoa ja käyttämällä sopivia painimia.

Vetybromidisuolan a- ja β-muotojen karakterisointi IR-, PXRD- ja DSC-ana-10 lyyseillä (a) IR-spektroskopia IR-spektrit määritettiin 4000-400 cm~':n aaltoluku(v)alueella parafiiniöljyyn jau-hennetuista näytteistä käyttämällä Nicolet 800 FT-IR -spektrometria ja ne on esitetty kuvioissa IA ja IB. Merkittävien absorptioalueiden aaltoluvun v identifioimiseksi 15 vide supra.

j (b) PXRD

PXRD-kuviot saatiin käyttämällä Siemens D500 -diffraktometria käyttöjännitteellä ". 40kV/30mA ja grafiittimonokromaattorilla suodatettua kuparisäteilyä (λ = »i» 20 0,15405 nm) ja tuikelaskinilmaisinta. Kustakin muodosta rekisteröitiin säteen in- tensiteetti kulman 20 funktiona alueelta 2°-45° 20 käyttäen askelskannausmoodia * * > kuuden sekunnin 0,03° 20 -askelvälein. Kunkin kuvion, jotka on esitetty kuvioissa . 2A ja 2B, pääpiikkien (aste 20) identifioimiseksi vide supra.

25 (c) DSC

;··· Näytteitä (noin 5 mg) kummastakin muodosta analysoitiin käyttäen Perkin-Elmer 7

Series -lämpöanalysaattoria skannausnopeudella 20 °C/minuutti. Vastaavien endo-termisten piikkien, jotka on esitetty kuvioiden 3A ja 3B vastaavissa DSC-termo-’ · > ‘ gram-meissa, identifioimiseksi vide supra.

:l'i 30 12 113768

Hygroskooppisuutta/kiinteän tilan stabiiliutta koskevat tutkimukset Näytteitä (noin 10 mg) seulottiin (250 μιη) ja varastoitiin sitten kummassakin seu-raavista lämpötila (T)- ja suhteellinen kosteus(RH)olosuhteista 4 viikkoa: 30 °C, 11, 75 ja 90% RH 5 ja 40 °C, 11, 75 ja 90% RH, jolloin tarvittavat kosteudet saatiin aikaan käyttämällä sopivia kyllästettyjä suoloja dessikkaattorissa. Vesipitoisuuden muutosten mittaukset suoritettiin painoanalyysil-lä, jossa käytettiin mikrovaakaa ja Karl Fischerin titrimetriaa (KFT) ja kemiallinen ja fysikaalinen stabiilius määritettiin suuren erotuskyvyn nestekromatografialla 10 (HPLC) ja DSC:llä.

HPLC-analyysit suoritettiin LDC isokraattisella systeemillä seuraavissa olosuhteissa: kolonni - Novapak C18, 5 μιη, 15 cm; liikkuva faasi - pH 6,0, 60:40 v/v 0,02 M 15 KH2P04 (0,5 % trietyyliamiini); metanoli; detektio - UV (254 nm); virtausnopeus 1,0 ml/min; injektiotilavuus - 20 μΐ; näyte 0,1 mg/ml liikkuvassa faasissa.

KFT suoritettiin käyttämällä Mitsubishi-kosteusmittaria ja noin 10 mg kumpaakin näytettä.

20

Taulukko 1 esittää vetybromidisuolan a-muodon ja hemisulfaattisuolan a- ja β- muotojen hygroskooppisuustuloksia ilmoitettuina kosteudenmuutoksina paino-%:ina ' * * ___ :., / erilaisissa T(°C)- ja RH(%)-olosuhteissa.

25 Taulukosta 1 voidaan havaita, että vetybromidisuolan α-muodon paino pysyi suh- 1. teellisen stabiilina koko tutkimuksen ajan, vähäinen kosteuden alenema matalassa (11 %) RH:ssa havaittiin sekä 30 °C:ssa että 40 °C:ssa, ja KFT-analyysissä saadut >, tulokset vahvistivat nämä tulokset. Erityisen merkille pantavaa on, että sen kos teuspitoisuudessa todettiin pieni muutos 75 % RH:ssa verrattuna huomattavaan kos-30 teuden imeytymiseen 40 °C:ssa hemisulfaattisuolan sekä β-muodossa että etenkin a-muodossa. Lisäksi veden imeytymiseen hemisulfaattisuolan β-muodossa liittyi näytteen värin muuttuminen kermanvärisestä keltaiseksi; vaikka hemisulfaattisuolan a- -; muoto absorboi vettä vieläkin nopeammin kuin β-muoto, ei siinä esiintynyt mitään ·. siihen liittyvää värin muutosta. Kuten aikaisemmin mainittiin, hemisulfaattisuolan β 35 -muodon hygroskooppisuus johtaa polymorfiseen muutokseen α-muodoksi ja mahdollisesti hajoamiseen.

Taulukko 1 13 113768

Suolan muoto T/RH Viikko 1 Viikko 2 Viikko 3 Viikko 4 a-HBr 30/11 -0,45 -0,51 +0,20 +0,09 30/75 +0,08 +0,01 +0,17 +0,25 30/90 +0,53 +0,46 +0,50 +0,49 40/11 -0,48 +0,58 -0,51 -0,49 40/75 +0,06 +0,23 0,00 +0,11 _40/90 +0,87 +1,27 +1,16 +1,23 P-Vai7SOA 40/75 +1,33 +3,79 +3,38 +1,69 a-*fli2S04 140/75 [+6,0 +4,85 +5,46 +4,04

Taulukko 2 (T/RH = 40/75) 5 __

Suolan muoto Päivä 5 Viikko 1 Viikko 2 Viikko 3 Viikko 4 β-HCl_ND_0_+0,27 +0,23 +0,19

α-HCl +0,56 +0,79 ND ND ND

ND = ei määritetty

Vetybromidisuolan α-muodossa ei ilmennyt DSC-profiilin muutosta T = 40 °C/RH =15 % -näytteissä, samalla kun HPLC-analyysi vahvisti sen stabiiliuden 10 kaikissa tutkituissa olosuhteissa.

Taulukko 2 esittää vetykloridisuolan a- ja β-muotojen hygroskooppisuustuloksia ilmoitettuna paino-%:ina määritettyinä kosteuden muutoksina T = 40°C /RH = ; ·' 75 % -olosuhteissa.

15 β-muoto arvosteltiin ei-hygroskooppiseksi molempien taulukossa 2 esitettyjen tulosten ja lähemmin verrattavissa olevien tulosten, jotka saatiin KFT-analyysillä viikolla 4, perusteella, eikä kiinteän tilan epästabiiliutta ilmennyt. Vaikka α-muotoa inku-: ‘ ‘ ’: boitiin tässä tutkimuksessa vain 1 viikko, on selvää, että se on imenyt itseensä mer- ‘ : 20 kittävän määrän kosteutta jopa tuossa ajassa ja että tähän veden imeytymiseen liittyi .,. DSC-jäljessä muutoksia, jotka paljastivat α-muodon muuttuvan β-muodoksi näissä ' ‘' olosuhteissa.

25 14 113768

Puristustutkimukset Näytteitä (200 mg) puristettiin käyttäen penkki-IR-puristinta (Graseby Specac Model 15.011) 5 tonnin painolla 1 minuutin ajan käyttämällä 13 mm:n painin- ja suulakesarjaa, sitten arvioitiin, oliko niiden väri muuttunut ja ilmenisikö niissä sula-5 mistä. Lisätutkimuksia (DSC ja HPLC) suoritettiin, kun puriste oli jauhettu huhmaretta ja survinta käyttäen.

Vetybromidisuolan α-muodossa ei havaittu muutoksia lämpökäyrässä sen enempää sulamispisteen kuin fuusioentalpian suhteen puristuksen eikä jauhamisen jälkeen. 10 Myöskään mitään näyttöä muutoksesta näytteen ulkonäössä tai painimen kalvottu-misesta puristettaessa ei ollut.

Kuten edellä mainittiin, hemisulfaattisuolan β-muodossa tapahtuu värin muutos puristettaessa ja se aiheuttaa myös painimen kalvottumista puristuksessa, samalla kun 15 vetykloridisuolan β-muoto sulaa ja aiheuttaa levyn tarttumista painimiin puristuksen aikana, mikä käyttäytyminen ei ole yllättävää ottaen huomioon sen merkittävästi alhaisemman sulamispisteen. Vetykloridisuolan α-muoto ei sulanut puristettaessa.

Polymorfinen muutos 20 DSC:tä käytettiin sekä vetybromidisuolan ja hemisulfaattisuolan β-muotojen poly-morfisen muuttumisen niiden vastaaviksi α-muodoiksi määrittämiseen että myös vetykloridisuolan α-muodon muuttumisen sen β-muodoksi, minkä uskotaan olevan anhydraatti-hydraatti-transitio, määrittämiseen.

; 25 Vetybromidisuolan α-muodossa ei todettu polymorfisia muutoksia tutkituissa olo- ’. suhteissa. 1 > * * t 1 «

Claims (15)

113768

1. Yhdisteen kiteinen oc-polymorfinen muoto, jolla on kaava CH, SO N : HBr (I) 5 ίί tunnettu parafiiniöljyyn jauhennetusta näytteestä saadusta infrapunaspektristä, jossa näkyy merkittäviä absorptiokaistoja aaltoluvuilla v = 3371, 3293, 2713, 2524, 1419, 1343, 1264, 1151, 1086, 1020, 1008, 999, 922, 900, 805, 758, 740, 728, 689, 672, 10 652, 640, 598, 581, 573, 531, 498, 465, 457, 443, 428, 422, 414 ja 399 cm'1.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu lisäksi grafiittimonokro-maattorilla suodatettua kuparisäteilyä käyttämällä (λ = 0,15405 nm) saadusta rönt-genjauhediffraktiokuviosta, jossa esiintyy pääpiikit kulmissa 9,7, 10,7, 15,9, 16,5, 15 17,8, 18,3, 19,3, 19,8, 20,1, 21,2, 24,4, 25,5, 25,8, 26,7, 27,6 ja 29,4 20.

3. Yhdisteen kiteinen β-polymorfinen muoto, jolla on kaava ch3 . ·.; SQ ^ ^ 3 | Il : HBr (I) : H 20 *; ·, tunnettu parafiiniöljyyn jauhennetusta näytteestä saadusta infrapunaspektristä, jossa näkyy merkittäviä absorptiokaistoja aaltoluvuilla v = 3239, 2672, 2656, 2632, 1409, 1366, 1351, 1334, 1303, 1293, 1152, 1138, 1122, 1098, 1086, 791, 771, 746, 688, ,:; 634, 557, 528,484,476,469, 463,455,432,424,413 ja 401 cm1. 25

:* 4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen yhdiste, tunnettu lisäksi grafiittimonokro- maattorilla suodatettua kuparisäteilyä käyttämällä (λ = 0,15405 nm) saadusta rönt-genjauhediffraktiokuviosta, jossa esiintyy pääpiikit kulmissa 11,0, 17,2, 19,2, 20,1, ';··; 21,6, 22,6, 23,6, ja24,8 20. / : 30 113768

5. Farmaseuttinen koostumus, tunnettu siitä, että se käsittää patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukaisen yhdisteen yhdessä jonkin farmaseuttisesti aktiivisen laimennus-aineen tai kantaja-aineen kanssa.

6. Patenttivaatimuksen 5 mukainen farmaseuttinen koostumus, tunnettu siitä, että se on kiinteässä annosmuodossa.

7. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen yhdiste tai patenttivaatimuksen 5 tai 6 mukainen farmaseuttinen koostumus, tunnettu siitä, että se on tarkoitettu käytettä- 10 väksi lääkkeenä.

8. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukaisen yhdisteen tai patenttivaatimuksen 5 tai 6 mukaisen farmaseuttisen koostumuksen käyttö lääkkeen, joka on tarkoitettu jonkin lääketieteellisen tilan, jota voidaan hoitaa jollakin 5-HT1-reseptorien selektiivisellä 15 agonistilla, parantavaan tai ennaltaehkäisevään hoitoon, valmistukseen.

9. Patenttivaatimuksen 8 mukainen käyttö, tunnettu siitä, että lääketieteellinen tila on migreeni tai jokin siihen liittyvä tila, kuten jatkuva päänsärky, krooninen pa-roksysmaalinen hemikrania tai johonkin verenkiertohäiriöön liittyvä päänsärky, tai 20 masennus, tuskaisuus, syömishäiriö, liikalihavuus, lääkkeiden väärinkäyttö, kohonnut verenpaine tai oksentelu.

10. Menetelmä patenttivaatimuksen 1 mukaisen yhdisteen kiteisen a-polymorfisen * · ·.: muodon valmistamiseksi, jolla on kaava (I) 25 CH, : S°2 : HBr (I) H ..! ja jolle on tunnusomaista parafiiniöljyyn jauhennetusta näytteestä saatu infrapuna- :,,7 spektri, jossa näkyy merkittäviä absorptiokaistoja aaltoluvuilla v = 3371, 3293, : 30 2713, 2524, 1419, 1343, 1264, 1151, 1086, 1020, 1008, 999, 922, 900, 805, 758, -.740, 728, 689, 672, 652, 640, 598, 581, 573, 531, 498, 465, 457, 443, 428, 422, 414 ja 399 cm"1, ,: tunnettu siitä, että se käsittää >,: ; a) kaavan (II) 113768 ch3 I I I (11) H mukaisen yhdisteen liuoksen jossakin ensimmäisessä sopivassa liuotteessa käsittelyn 5 vetybromidin vesiliuoksella, minkä jälkeen eristetty raaka öljy kiteytetään jostakin toisesta sopivasta liuotteesta; b) kaavan (I) mukaisen yhdisteen β-polymorfisen muodon, jolle on tunnusomaista parafiiniöljyyn jauhennetusta näytteestä saatu infrapunaspektri, jossa näkyy merkittäviä absorptiokaistoja kohdissa v = 3239, 2672, 2656, 2632, 1409, 1366, 1351, 10 1334, 1303, 1293, 1152, 1138, 1122, 1098, 1086, 791, 771, 746, 688, 634, 557, 528, 484, 476, 469, 463, 455, 432, 424, 413 ja 401 cm"1, kiteyttämisen jostakin sopivasta liuotteestaj sen jälkeen saadun seoksen liettämisen; tai c) kaavan (II) mukaisen yhdisteen liuoksen jossakin sopivassa liuotteessa käsittelyn vetybromidin vesiliuoksella ja sitten reaktioseoksen liettämisen, sen jälkeen va- 15 linnaisesti kuumentamisen refluksoiden, jäähdyttämisen ja edelleen liettämisen.

11. Patenttivaatimuksen 10 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että a) ensimmäinen sopiva liuote on asetoni, toinen sopiva liuote on 2-propanoli, vetybromidin vesiliuos on 49-prosenttinen (paino/paino) ja sillä käsittely suoritetaan 20 20-25 °C:ssa; ; b) sopiva liuote on vesipitoinen asetoni; ja c) sopiva liuote on asetoni, vetybromidin vesiliuos on 62-prosenttinen ' ‘; ’ (paino/paino) ja sillä käsittely suoritetaan 0-5 °C:ssa. • ’· 25

12. Patenttivaatimuksen 10 tai 11 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kaa- v : van (I) mukaisen yhdisteen α-polymorfinen muoto on lisäksi tunnettu grafiittimono- kromaattorilla suodatettua kuparisäteilyä käyttämällä (λ = 0,15405 nm) saadusta ·’:· röntgenjauhediffraktiokuviosta, jossa esiintyy pääpiikit kulmissa 9,7, 10,7, 15,9, 16,5, 17,8, 18,3, 19,3, 19,8, 20,1, 21,2, 24,4, 25,5, 25,8, 26,7, 27,6 ja 29,4 20, ja • ( 30 kaavan (I) mukaisen yhdisteen β-polymorfinen muoto on lisäksi tunnettu grafiitti- monokromaattorilla suodatettua kuparisäteilyä käyttämällä (λ = 0,15405 nm) '..saadusta röntgenjauhediffraktiokuviosta, jossa esiintyy pääpiikit kulmissa 11,0, . 17,2, 19,2, 20,1, 21,6, 22,6, 23,6, ja24,8 20. : ί f I i | 113768

13. Patenttivaatimuksen 10 tai 12 mukainen menetelmä kaavan (I) mukaisen yhdisteen kiteisen β-polymorfisen muodon valmistamiseksi, tunnettu liuotteessa käsittelyn vetybromidin vesiliuoksella.

14. Patenttivaatimuksen 13 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että sopiva liuote on asetoni tai jokin eetteriliuote, kuten tetrahydrofuraani tai 1,2-dimetoksietaani, vetybromidin vesiliuos on 49-prosenttinen (paino/paino) ja sillä käsittely suoritetaan 0-10 °C:ssa.

15. Patenttivaatimuksen 13 tai 14 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että sopiva liuote on 1,2-dimetoksietaani.