FI113745B - Menetelmä bioaktiivisia steroideja sisältävien farmaseuttisten emulsioiden valmistamiseksi - Google Patents

Description

113745

Menetelmä bioaktiivisia steroideja sisältävien farmaseuttisten emulsioiden valmistamiseksi - Förfarande för framställning av farmaceutiska emulsioner innehällande bioaktiva steroider 5 Esillä oleva keksintö koskee menetelmää uusien öljy vedessä -emulsioiden valmistamiseksi, jotka sopivat bioaktiivisten steroidien, jotka muuten ovat vaikeasti solubili-soitavissa, parenteraaliseen antoon. Emulsiot käsittävät risiiniöljyä sisältävän lipidi-faasin, jossa voi olla lisälipidejä, kuten ainakin yhtä kasviöljyä ja/tai keskipitkäket-juisia triglyseridejä.

10 Keksinnön tausta

Monien terapeuttisesti käyttökelpoisten steroidien on havaittu liukenevan huonosti konventionaalisiin farmaseuttisiin kantajiin tai liuottimiin ja niiden liukoisuutta pyritään lisäämään esimerkiksi sisällyttämällä niihin liukoisuutta muuttavia ryhmiä tai parantamalla antoon käytettävien kantajien ominaisuuksia.

15 Brittiläisissä patenttijulkaisuissa GB 1317184 ja GB 1379730 käsitellään anesteetti-sia koostumuksia 3a-hydroksi-5a-pregnaani-ll,20-dionin antamista varten. Näillä koostumuksilla, jotka toteutettiin parenteraalisina steroidivalmisteina ionittoman pinta-aktiivisen polyoksietyleenirisiiniöljyn (Cremophor-EL) kanssa, oli kuitenkin . *. : vakavia sivuvaikutuksia.

t < * · : 20 Eurooppalaisessa patentissa EP 0233849 käsitellään parenteraalisesti annettavia 3a- :. ’ ’ hydroksi^-pregnan-20-onin (pregnanoloni) lipidiemulsioita, joissa aktiivinen ste- ,.: roidi on liuotettu lipidifaasiin, joka on valittu kookospähkinäöljyn, purasruohoöljyn, : safloriöljyn, puuvillansiemenöljyn, soijaöljyn ja synteettisten glyseridien joukosta, : joiden molekyylissä on pitkä- ja keskipitkäketjuisten rasvahappojen seos.

25 Risiiniöljyä on aikaisemmin ehdotettu vehikkeliksi steroidihormonien parenteraali-;; seen antoon yhdessä orgaanisten lisäliuottimien, kuten bentsyylialkoholin ja bent- '··* syylibentsoaatin, kanssa, kuten C. Riffkin et ai. kuvaavat julkaisussa J. of Pharm.

*:’ * Sei., Voi 53(8), 1964, s. 891-5, tai US-patenttijulkaisun 4 048 310 mukaan vehikke- ;‘: liksi paikallisesti käytettäviin valmisteisiin. Ehdotettuja lisäliuottimia Riffkinin et ai.

30 mukaan tuskin kuitenkaan hyväksyttäisiin nykyisin aineosiksi parenteraaliseen käyt-• · · · töön tarkoitettuihin farmaseuttisiin valmisteisiin.

EP-0 418 004 käsitellään prostaglandiini El -aktiivisuutta omaavia yhdisteitä varten tarkoitettuina kantajina käytettäviä rasva-emulsioita, joissa on lipidifaasi, joka 2 113745 sisältää jonkin öljyn, joka on valittu soijaöljyn, seesamiöljyn, risiiniöljyn, puuvillan-siemenöljyn ja oliiviöljyn joukosta. Nämä emulsiot sisältävät kuitenkin fosfolipidi-emulgaattorin lisäksi myös jotakin emulgointiadjuvanttia, suositeltavimmin vapaiden rasvahappojen muodossa, ja jotakin stabilaattoria. Vapaiden rasvahappojen taso 5 pyritään yleensä pitämään mahdollisimman alhaisena parenteraalisissa emulsioissa haitallisten vaikutusten välttämiseksi, joita käsitellään esimerkiksi julkaisussa The Lancet, huhtikuu 18, 1970, sivut 813-815 (V.A. Kurien et ai.) ja EP 0241553.

Huolimatta kuvauksista risiiniöljyn käyttökelpoisuudesta huonosti liukenevien farmaseuttisten aineiden liuottimena sitä ei ole käytännössä käytetty parenteraalisissa 10 emulsioissa, koska sen korkea viskositeetti johtaa käytännön ongelmiin ja koska se liitetään Cremophor-EL:n sisältämiin risiiniöljyjohdoksien aiheuttamiksi sanottuihin sivuvaikutuksiin ja mahdollisesti myös siksi, että siihen liittyy erittäin voimakas myrkky, risiini, jota on luonnostaan läsnä risiiniöljykasvissa.

Tarvittaisiin bioaktiivisiin steroideihin sopiva emulsiovehikkeli, jossa sekä steroidi-15 yhdisteiden liukenevuus, joka on huono konventionaalisiin kasviöljyihin, että sen stabiilius autoklavointi- ja varastointivaiheissa olisivat paremmat. Erityisen suotavaa olisi saada käyttöön sellainen farmaseuttinen emulsio, joka sisältäisi ainoastaan emulgointiaineita, solubilisointiaineita ja muita lisäaineita, joita on kuvattu kliinisesti hyväksyttäviksi, ja sopivina määrinä. Olisi sen vuoksi edullista välttää tavallisesti : 20 käytettyjä synteettisiä solubilisaattoreita emulsio-ominaisuuksien parantamiseksi, koska niillä on usein epäsuotavia sivuvaikutuksia. Pluronic F-68:lla on osoitettu i ·' olevan merkittäviä kardiovaskulaarisia vaikutuksia koirissa ja sen on osoitettu : aiheuttavan keuhko- ja munuaismuutoksia rotissa. Tween-80 aiheuttaa monenlaisia CNC-vaikutuksia rotissa ja hiirissä, aiheuttaa histamiinin vapautumista ja hypoten-\ 25 siota koirissa ja alentaa sydänlihaksen supistumiskykyä koe-eläinten sydänvalmis- teissa. Lisäksi edellä mainittu Cremophor El on potentiaalinen histamiinin vapauttaja-aine rotissa ja sen epäillään aikaansaavan yliherkkyysreaktioita ihmisissä, kun sitä I;! käytetään liuottimena nukutuslääkkeissä.

... : Esillä olevan keksinnön tavoitteena on tuoda käyttöön öljyvedessä -emulsion muo- ,· · , 30 dossa oleva koostumus, joka voi sisältää suurempia määriä liuenneita steroideja ‘ ’ ‘ lipidifaasissa ja jonka fysikaalinen ja kemiallinen stabiilius on parempi ja sen myötä potilaalle annettava kokonaislipidimäärä ja solubilisointiaineiden tai stabilaattorien määrä pienempi.

3 113745

Esillä olevan keksinnön tavoitteena on myös tuoda käyttöön emulsio, joka sisältää risiiniöljyä, mahdollisesti jonkin lisälipidin kanssa, ja joka on erinomaisen stabiili ja säilyttää sopivat ominaisuudet steroidien parenteraalista antoa silmällä pitäen pitkän varastoinnin jälkeen, samalla kun se sisältää vain dokumentoituja biologisesti hy-5 väksyttäviä konventionaalisia aineosia.

Keksinnön mukaisella emulsiolla on tarkoitus voittaa risiiniöljyn yhteydessä aikaisemmin esiintyneet emulgointi- ja stabiiliusongelmat ja tuoda käyttöön parempi bioaktiivisia steroideja varten tarkoitettu lipidiemulsiovehikkeli, joka käsittää kliinisesti dokumentoituja ja turvallisia aineosia.

10 Keksinnön kuvaus

Esillä oleva keksintö koskee menetelmää öljy vedessä -emulsion valmistamiseksi, joka emulsio soveltuu bioaktiivisten steroidien, jotka liukenevat niukasti konventionaalisiin liuottimiin, parenteraaliseen antoon, ja joka emulsio sisältää millilitraa valmista koostumusta kohti: 15 a) 0,1-15 mg steroidia, b) 50-200 mg lipidejä, jotka sisältävät risiiniöljyä ja mahdollisesti ainakin yhden lisälipidin, joka on valittu kasviöljyistä ja/tai synteettisistä tai puhdistetuista keskipit- , · : käketjuisista triglyserideistä, • . · c) 5-50 mg emulgaattoria, joka on valittu puhdistetuista munankeltuaisfosfolipideis- 20 tä, d) vettä injektiota varten, • ‘ e) isotonisuuden säätelijää, jota on lisätty valmiin koostumuksen tekemiseksi isoto- : niseksi, ja , : f) natriumhydroksidiliuosta, jota on lisätty sopivan pH-arvon saamiseksi, jolloin 25 lisäaineet, jotka on valittu polyetyleeniglykolista, Pluronic® F-68:sta, bentsyyli-•; · alkoholista ja bentsyylibentsoaatista, ovat poissuljetut.

:1 Tämä öljy vedessä -emulsio valmistetaan keksinnön mukaisesti siten, että steroidi ‘" liuotetaan lipidikoostumukseen, joka sisältää risiiniöljyä tai risiiniöljyä sekoitettuna : * ’ ^: ainakin yhteen lisälipidiin, joka on valittu kasviöljyistä ja synteettisistä tai puhdiste- ‘; t 30 tuista keskipitkäketjuisista triglyserideistä, ja sen jälkeen saatu steroidi-lipidikoostu-", mus emulgoidaan vesifaasilla, joka sisältää vettä, puhdistettua munankeltuaisfosfoli- pidiemulgaattoria, isotonisuuden säätelijää ja natriumhydroksidia stabiilin emulsion aikaansaamiseksi.

4 113745

Keksinnön mukaisesti valmistetun emulsion lipidit sisältävät puhtaudeltaan farmaseuttiseen käyttöön hyväksyttävää risiiniöljyä, joka voidaan yhdistää ainakin yhteen täydentävään lipidiin, joka on valittu kasviöljyjen, kuten soijaöljyn, safloriöljyn, seesamiöljyn, puuvillansiemenöljyn ja oliiviöljyn, joukosta ja synteettisistä tai puh-5 distetuista keskipitkäketjuisista triglyserideistä (MCT), joissa on rasvahappotähteitä, joiden molekyyli sisältää 6-12 hiiliatomia, kuten kookospähkinäöljystä johdettuja MCT-fraktioita. Mainittujen lipidien seokset ovat myös sopivia lisäaineiksi risiiniöljyyn. Emulgaattori valitaan kliinisesti hyväksyttävistä munankeltuaisfosfolipi-deistä vakiintuneiden menetelmien mukaisesti. Risiiniöljyn ja muiden lipidien suhde 10 on suositeltavimmin 90:10 % (w/w) - 10:90 % (w/w) risiiniöljyä ja lisälipidejä, vastaavassa järjestyksessä.

Sopivia lipidikoostumuksia ovat ainoastaan risiiniöljyä sisältävät tai seokset, joissa on 70 % (w/w) risiiniöljyä ja 30 % (w/w) soijaöljyä. Täydentävät lipidit lisätään sellaisena määränä, että risiiniöljyn liuotinkapasiteetti olennaisesti säilyy. Lipidien 15 suhteellinen määrä vaihtelee lisättyjen lipidiaineosien polaarisuuden (ketjunpituu-den) vaikutuksesta. Tämän tyyppiseen teknologiaan perehtyneet pystyvät kokemuksensa avulla löytämään sopivat määräsuhteet kullekin risiiniöljyn ja lisälipidien lipidiseokselle stabiilin emulsion, jolla on halutut liukoisuusominaisuudet, aikaansaamiseksi. Steroidien hyvän liukoisuuden risiiniöljyyn saattavat selittää läsnä f > ; 20 olevat hydroksyloidut rasvahapot (risiiniöljyhappo), jotka lisäävät omalta osaltaan polaarisuutta ja lisäävät liukoisuutta.

: : Bioaktiiviset steroidit, joita on määrä annostella esillä olevan keksinnön mukaisesti valmistetuissa emulsioissa tai koostumuksissa, liukenevat niukasti konventionaali-siin hydrofiilisiin ja hydrofobisiin liuottimiin ja ne vaikuttavat suositeltavimmin 25 keskushermostoon (CNS). Erityisen suositeltavia ovat sellaiset CNS-aktiiviset steroidit, joilla on anesteettinen vaikutus. Keksinnön mukaan suositeltavimmat steroidit valitaan ryhmästä, jonka muodostavat 5β-ρ^η3η-3α-ο1-20-οηΐ (eltanoloni ;;; tai pregnanoloni), 5P-pregnan-3P-ol-20-oni (epipregnanoloni), 5a-pregnan-3a-ol- ; ' 20-oni (allopregnan-3a-ol-20-oni), 5a-pregnan-3P-ol-20-oni (allopregnanoloni), 5a : 30 -pregnan-3a-ol-ll,20-dioni (alfaksaloni), 5β-ρ^η3η-3α,21^ΐο1-20-οηΐ (tetrahyd- : ’ : rodeoksikortikosteroni eli THDOC), 5a-pregnan-3a,21-diol-20-oni (allotetrahydro- deoksikortikosteroni eli alloTHDOC), 5a-androstan-3a-ol-17-oni (androsteroni; cis-androsteroni), 5-pregnen^-ol-20-onisulfaatti (pregnenolonisulfaatti), 11β-ll,17,21-trihydroksi-pregna-l,4-dieeni-3,20-dioni (prednisoloni) ja 11β,17α,21-35 trihydroksipregna-4-eeni-3,20-dioni (dihydrokortisoni).

5 113745

Eräs sopiva keksinnön mukaisesti valmistettu emulsio käsittää: a) bioaktiivista steroidia 5 mg/ml, b) lipidejä, jotka käsittävät risiiniöljyä ja lisälipidejä 10 % (w/w) koko lipidiemulsi-osta, 5 c) emulgaattoria määränä 1-5 g munankeltuaisfosfolipidejä/100 ml valmista koostumusta, d) vettä injektiota varten, e) isotonisuuden säätelijää, 0 natriumhydroksidia pH:n säätämiseen.

10 Emulsion lipidifaasi sisältää suositeltavimmin risiiniöljyä 10-90 % (w/w).

Eräs sopiva isotonisuuden säätelijä on glyseroli. Haluttaessa emulsio voi sisältää myös konventionaalisia, mutta kliinisesti hyväksyttäviä antioksidantteja ja säilytys-aineita.

Uusien öljy vedessä -emulsioiden valmistamiseksi on sopivaa liuottaa ensimmäi-15 sessä vaiheessa bioaktiivinen steroidiaine lipideihin. Saatu liuos emulgoidaan sitten konventionaalisesti käytetyillä korkeapainehomogenisaattoreilla vesipitoisessa väliaineessa, joka käsittää vettä injektiota varten, emulgaattoria ja isotonisuuden sääte-. lyainetta edellä kuvatun mukaisesti ja haluttaessa mitä tahansa erityislisäkompo- nentteja. Saadussa emulsiossa öljypallosten partikkelikoko on alle 5 μηι, suurimman 20 osan koon ollessa alle 1 μιη, suositeltavimmin 0,2-0,3 μιη.

Uudet öljy vedessä -emulsiot käsittävät pääasiassa bioaktiivisten steroidien liuoksen lipidifaasissa, jossa lipidifaasi on emulgoitu johonkin hydrofiiliseen faasiin. Nämä :1, emulsiot ovat erityisen käyttökelpoisia jonkin anesteettisesti vaikuttavan steroidin antamiseen parenteraalisesti potilaalle. 1

Esillä olevan keksinnön mukaiset emulsiot ovat kemiallisesti ja fysikaalisesti erin-:.,,: omaisen stabiileja ja ne hapettuvat minimaalisesti risiiniöljyn itsensä luontaisien .., : ominaisuuksien ansiosta ja niiden pallosilla on vähemmän taipumusta yhtymiseen, _···_ mistä seuraa kermottumisvaikutuksia, ja vapaiden rasvahappojen muodostuminen on ’! ‘ niissä vähäistä. Emulsiot kestävät myös autoklaavikäsittelyjä. Steroidien paremman . 30 liukoisuuden vuoksi erilaisiin pintoihin saostumisen ongelmat ovat vähäisemmät, : : jolloin valmistajat voivat vapaammin valita sopivia pakkauksia. Keksinnön mukai set emulsiot ovat myös paremmin yhteensopivia konventionaalisten muovi- ja kumi-esineiden, joita käytetään lääkintäsovelluksissa, kanssa.

6 113745

Emulsion hyvä liukenevuus ja parempi stabiilius antavat myös mahdollisuuden jättää pois useita traditionaalisesti käytettyjä, mutta tietyiltä kannoilta haitallisia lisäaineita, kuten Cremophor-EL, polyetyleeniglykoli, propyleeniglykoli, bentsyyli-alkoholi, bentsyylibentsoaatti ja etanoli.

5 Toinen etu on lipidien pienempi määrä uusissa emulsioissa, mikä johtaa pienempään lipidikuormitukseen potilaalla annostelussa. Lisää etuja selviää seuraavista esimerkeistä ja niitä ovat sellaiset eräälle anesteettisesti vaikuttavalle steroidille keksinnön mukaisessa emulsiossa annettuna tärkeät ominaisuudet kuten vähäisemmät kardio-vaskulaariset vaikutukset.

10 Esimerkit eivät ole tarkoitetut rajoittamaan keksinnön alaa. Niiden tarkoituksena on olla esimerkkeinä eräistä keksinnön mukaisista käytännössä toteutettavista emulsioista ja niiden biologisesta vaikutuksesta in vivo -annon jälkeen.

Esimerkki 1 koskee eräiden emulsioiden valmistusta esillä olevan keksinnön mukaisesti.

15 Esimerkki 2 koskee esillä olevan keksinnön mukaisten emulsioiden, jotka on biologisesti testattu esimerkeissä 3-5, koostumusta.

Esimerkki 3 koskee keksinnön mukaisessa emulsiossa annetun eltanolonin anesteet-: tista vaikutusta verrattuna tunnetun tekniikan mukaiseen tilanteeseen.

Esimerkki 4 koskee kardiovaskulaaristen vaikutusten vertailua.

20 Esimerkki 5 koskee akuutin toksisuuden tutkimista.

; Esimerkki 1

Risiiniöljyä erilaisten steroidien kanssa sisältävien emulsioiden laadun määrittämiseksi valmistettiin seuraavat koostumukset: 7 113745

Steroidit punnittiin 50 ml:n keittolasissa. Risiiniöljy (CO) tai risiiniöljyn ja soijaöl-jyn seos (CO+SBO) suhteessa 70:30 lisättiin lasiin, jota kuumennettiin ja steroidit liuotettiin. Fosfolipidit lisättiin öljyfaasiin ja sekoittamista jatkettiin vielä viisi minuuttia. Tämä seos lisättiin kuumennettuun vesifaasiin, joka sisälsi vettä ja glysero-5 lia, ja sekoitettiin viisi minuuttia. Sen jälkeen seos homogenoitiin emulsioksi kor-keapainelaboratoriohomogenisaattorissa teknisesti suurimmalla mahdollisella paineella. Saadut emulsiot dispergoitiin ja suljettiin 20 ml:n lasiampulleihin, jotka steriloitiin kuumentamalla. Emulsiot analysoitiin ulkonäön, ravistusstabiiliuden, PH:n ja tilavuusjakautuman suhteen. Alue tutkittiin Malvem Mastersizerilla. Yli 10 1 μ:η pallosten ulkonäköä ja keskimääräistä pinta-alaa relevantissa kuvassa ja sakan läsnäoloa tutkittiin mikroskoopilla. Varastointistabiilius 5 °C:ssa ja 40 °C:ssa tutkittiin myös.

Aine Vehikkeli pH D(4:3)pm Alue Pinta-ala Varastointi

5 ja 40 °C

15 1. Alfaksaloni CO 8,9 0,83 1,85 - >4 kuukautta CO+SBO 8,9 0,58 1,61 >4 kuukautta 2. Epipregnanoloni CO 8,8 0,75 1,81 53 >4 kuukautta CO+SBO 9,0 0,75 1,71 34 >4 kuukautta 3. Allopregnanoloni CO 8,8 0,69 1,70 49 >3 kuukautta ; 20 CO+SBO 9,0 0,53 1,58 - >3 kuukautta 4. Tetrahydrodeoksi- CO 9,0 0,86 1,80 25 >1 kuukausi ! kortikosteroni CO+SBO 9,1 0,58 1,52 2 >1 kuukausi » 5. Pregnenolonisulfaatti CO 8,8 0,97 1,76 40 >1 kuukausi CO+SBO 8,8 0,50 1,56 1 >1 kuukausi 25 6. Androsteroni CO 8,9 0,83 1,79 9 >1 kuukausi CO+SBO 9,2 0,51 1,50 1 >1 kuukausi 7. Prednisoloni CO 8,9 0,81 1,28 11 >2 kuukautta CO+SBO 8,9 0,70 1,26 4 >2 kuukautta I 8. Hydrokortisoni CO 8,7 0,76 1,43 3 ‘ , 30 CO+SBO 8,8 0,56 1,51 1 ; ' : Tulokset osoittavat, että emulsio, jossa on risiiniöljyä sisältävä öljyfaasi, on sopiva ‘ ;t vehikkeli monenlaisille niukkaliukoisille steroideille. Emulsiot säilyvät yleensä hyvin stabiileina pitkän varastoinnin aikana ja niiden ominaisuudet ovat hyvät parenteraalista annostelua silmällä pitäen.

8 113745

Esimerkki 2

Biologista kokeilua varten valmistettiin öljy vedessä -emulsioita seuraavista komponenteista:

Formulaatio 1 Formulaatio 2 Formulaatio 3 5 (mg) (mg) (mg)

Eltanolonia (INN) 4 4 4

Risiiniöljyä 70 70

Soijaöljyä 30 - 200 MCT 30 10 Diasetyylimonoglyseridiä - - 70

Fosfolipidejä 12 12 18

Glyserolia 22,5 22,5 17 pH säädettiin 8,5:een NaOHdla ja vettä lisättiin injektiota varten 1 ml:aan kaikissa formulaatioissa.

15 Formulaatiot 1 ja 2 ovat esillä olevan keksinnön mukaisia emulsioita, kun taas formulaatio 3 on tunnetun tekniikan mukainen emulsio eurooppalaisen patentin EP 233849 mukaan. Keskipitkäketjuiset triglyseridit formulaatiossa 2 on johdettu koo-, : kospähkinäöljystä ja ne sisältävät triglyseridifraktion, jossa on rasvahappotähteitä, : ‘ jotka sisältävät 6-12 hiiliatomia.

20 Esillä olevan keksinnön mukaisesti eltanoloni sekoitettiin ensiksi risiiniöljyyn tai risiiniöljyn ja soijaöljyn ja/tai MCT:n seokseen. Tämä johtaa eltanolonin olennai-seen liukenemiseen. Sitten valmistettiin emulsio saadusta öljy-eltanoloniseoksesta : mainittujen lisäkomponenttien kanssa. Saadut emulsiot olivat stabiileja ja niiden keskipartikkelikoko oli noin 0,2-0,3 μ ja ne voitiin steriloida autoklaavissa ilman 25 että ne hajosivat.

.1 On huomattavaa, että keksinnön mukaisissa formulaatioissa 1 ja 2 puolet lipidimää- : rästä riittää eltanolonin olennaiseen liukenemiseen verrattuna formulaatioon 3. Elta nolonin liukenevuus on esimerkiksi 5 kertaa suurempi formulaatiossa 1 kuin formulaatiossa 3.

30 Sen jälkeen valmistetaan samanlainen emulsio kuin formulaatiossa 1 käyttäen 4 mg/ml 5B-pregnan-3B-ol-20-onia (epipregnanoloni) eltanolonin sijasta samanlaisin tuloksin steroidin liukenevuuden ja emulsion stabiiliuden suhteen.

9 113745

Esimerkki 3

Anesteettisen vaikutuksen määrittäminen

Esimerkin 2 mukaisia formulaatioita 1 ja 3 vertailtiin anesteettisen vaikutuksen kannalta. Tähän kokeeseen käytettiin 30 Sprague-Dawley -urosrottaa, joiden paino oli 5 343-391 grammaa. Rotille asennettiin EEG-elektrodit, jotka muodostuivat nelikier- teisistä ruostumatonta terästä olevista johdoista (0,2 mm), jotka kiinnitettiin ihon alle korvien etuosaan.

Emulsiot annettiin laskimonsisäisenä infuusiona häntälaskimon kautta infuusioan-noksena 2 mg/kg/min. EEG:tä monitoroitiin jatkuvasti ja heti kun todettiin vähin-10 tään yhden sekunnin (“hiljainen sekunti41) EEG-purkauksen vaimentuminen, infuusio lopetettiin. Eläin pantiin sitten kyljelleen häkkiinsä ja sitä tarkkailtiin, kunnes se sai takaisin jaloilleennousurefleksinsä.

Mitatut parametrit olivat: - eltanoloniannos, joka tarvittiin hiljaisen sekunnin aikaansaamiseen 15 - nukkumisaika, ts. aika hiljaisen sekunnin esiintymisestä jaloilleennousurefleksin paluuseen.

Tulokset (ryhmän keskiarvot±SE): '· Emulsio Hiljaisen sekunnin aikaan- Nukkumisaika saamiseen tarvittu annos (min) ·. 20 (mg/kg) ^ Formulaatio 1 8,75+0,38 43±2

Formulaatio 3 8,73±0,55 28±1

Tulokset osoittavat, että käytetyllä infuusioannoksella emulsioiden välillä ei ollut :· eroa kortikaalisen EEG-hiljaisuuden (hiljaisen sekunnin) syntymisessä, kun taas '; 25 nukkumisaika oli jonkin verran pitempi formulaation 1 annon jälkeen.

Esimerkki 4

Kardiovaskulaarinen tutkimus : Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli verrata esimerkin 2 mukaisia formulaatioita 1 ‘: ja 3 kardiovaskulaaristen vaikutusten kannalta. Tähän tutkimukseen käytettiin viittä 30 jatkuvasti instrumentoitua koiraa. Tällä mallilla kardiovaskulaariset parametrit saadaan rekisteröidyksi ilman kirurgista stressiä ja lisälääkkeitä, kuten esilääkitystä ja 10 113745 perusanesteetteja. Siirtymistä valveilla olosta anestesiaan ja heräämiseen voitiin tällöin seurata keskeytyksettä. Molempia emulsioita kokeiltiin samaan eläimeen eri kerroilla. Eltanoloniannos oli 5 mg/kg boluksesta intravenoosina injektiona. Annos on suunnilleen kaksi kertaa annos, joka normaalisti tarvitaan koiran nukuttamiseen.

5 Tärkeimmät havainnot olivat:

Parametri Likimääräinen maksimimuutos (%) valvetilasta

Formulaatio 1 Formulaatio 3 Sydämen sykkimisnopeus +20 +100 10 Keskim. valtimo verenpaine ±0 -20

Iskutilavuus -20 -65

Vasemman kammion dP/dt max -10 -50 (supistumisvoima)

Formulaatiolla 1 aikaansaatuun nukutukseen liittyi olennaisesti vähemmän kardio-15 vaskulaarisia vaikutuksia kuin formulaatiolla 3 aikaansaatuun nukutukseen.

Esimerkki 5

Akuutin toksisuuden tutkiminen ♦ · ♦ t * ‘ ϊ Akuuttia toksisuutta yhden suuren annoksen (10 tai 16 kertaa tehokas nukutusannos , rotille) formulaatiota 1 intravenoosisen annon jälkeen tutkittiin rotissa. Käytettiin 40 ; · 20 Sprague-Dawley -urosrottaa, joiden paino oli 198-261 g. Mitattiin nukkumisaika, ts.

jaloilleennousurefleksin häviämisen ja palautumisen välinen aika. Nukutuksen ‘: aikana ja heräämisen jälkeen eläinten kliinisiä oireita, kuten hengitystapaa, sydämen • '; rytmiä ja ihon väriä, tarkkailtiin.

Eläinten yleiskuntoa tarkkailtiin kahden viikon seuranta-ajan ajan. Rotat punnittiin ; 25 välittömästi ennen antoa ja sitten päivinä 7 ja 14. Eläimet selvisivät kokeesta hengis- , · sä. Annokset, infuusiomäärät ja tulokset esitetään alla olevassa taulukossa.

Anestesian aikana todettiin jonkin verran hidastunut, mutta vakaa hengitysnopeus. Mitään syanoosin merkkejä ei kuitenkaan havaittu. Myös pulssi hidastui jonkin ver-:* ran, mutta se oli säännöllinen ja voimakas. Korisevia hengitysääniä todettiin j 30 joillakin eläimillä nukkumisjakson lopulla, mutta vain yksi eläin tarvitsi manuaalista hengitysapua. Kaikilla eläimillä todettiin ohimenevää ääreisverenkierron supistumista. Heti heräämisen jälkeen eläimet vaikuttivat aika veltoilta, mutta osoittautui- 11 113745 vat muutoin olevan hyvässä kunnossa. Rottien käyttäytyminen ja niiden yleinen terveydentila oli normaali seuranta-aikana, samoin kuin niiden painonnousu.

Ryhmä Annos Annos Infuusio- Eläinten Nukkumis- Paino Painon Painon mg/kg ml/kg nopeus lukuni. aika g lisäys g lisäys g ml/min min päivä 0 päiv. 0-7 päiv. 8-14 A 40 10 0,5 10 98±7 222±3 43±3 40+3 B 64 16 0,1 10 133±5 299±5 40±2 42±2 C 64 16 0,5 10 145±5 224±4 39±2 38±2 D 64 16 2,5 10 151±6 229±5 37±1 39±2

Nukkumisaika ja painot on rekisteröity keskiarvoinaiSE

5 Annokset, infuusionopeudet ja rottien koot olivat yhdenmukaisia aikaisemmin suoritettujen intravenoosisten anesteettien akuuttia toksisuutta koskevien kokeiden kanssa. Tulokset ovat tyydyttäviä ja osoittavat, että esillä olevan keksinnön mukaisella emulsiolla ei ole toksisia vaikutuksia.

• » • · »· ·

Claims (4)

113745