FI113656B - Välituotteena käyttökelpoiset 6-amino-5-okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksyylihappojohdannaiset ja menetelmä niiden valmistamiseksi - Google Patents

Description

113656 Välituotteena käyttökelpoiset 6-amino-5-okso-oktahydrotiatso-lo[3,2-a]atsepiini-3-karboksyylihappojohdannaiset ja menetelmä niiden valmistamiseksi 5 Tämä hakemus on jakamalla erotettu hakemuksesta FI-961199. Keksinnön käyttöala Tämä keksintö koskee uutta välituotteena käytettävää substitu-oitua 6-amino-5-okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-kar-boksyylihappojohdannaista tai sen farmakologisesti sopivaa 10 suolaa sekä menetelmää niiden valmistamiseksi.

Tekniikan tason kuvaus

Viime vuosina on uusina sydänvikalääkkeinä kiinnitetty huomiota inhibiittoreihin neutraaliendopeptidaasia vastaan (NEP-24,11, lyhennetty tässä jäljessä NEP) ja angiotensiini I: tä 15 muuttavaa entsyymiä (lyhennetty tässä jäljessä ACE) vastaan.

Sydämenseinämän natriureettinen peptidi (lyhennetty tässä jäljessä ANP) on hormoni, jota on elävässä elimistössä, ja jolla on voimakas hydroureettinen ja natriureettinen vaikutus sekä verisuonia laajentava vaikutus, sekä näiden lisäksi myös inhi-1 20 boiva vaikutus norepinefriinin vapautumista vastaan johtuen * sympatikushermon heikkenemisestä, inhiboiva vaikutus reniinin ’ erittymiseen munuaisista ja inhiboiva vaikutus aldosteronin • · * * · erittymiseen lisämunuaisesta, ja edelleen perfuusiota alentava » ' * vaikutus lisäämällä laskimoiden vedenläpäisevyyttä, ja niin ·...· 25 edelleen. ANP:n vaikutuksen potilaisiin, jotka kärsivät esi merkiksi verentungosta aiheuttavasta sydänviasta yhdistyneenä ;* kasvavaan kuormitukseen, uskotaan olevan edullisen ei vain sy- dänvian, vaan myös korkean verenpaineen hoidossa.

Kuitenkin tässä on se ongelma, että ANP:n kliininen käyttö ra-! : 30 joittuu nykyään akuutteihin tiloihin, koska ANP on peptidi, ja ,’··, sen vuoksi sitä ei voida antaa oraalisesti, ja sen metabolinen ! stabiilisuus on huono. Lisäksi on myös raportoitu, että ANP:n vaikutukset vähenevät, kun sitä annetaan pitemmän aikaa. Lisäksi sen käytössä täytyy olla erittäin varovainen.

2 113656 ANP:n edellä olevien ominaisuuksien tarkan harkinnan jälkeen ne, jotka nykyään huomioidaan ANP:n sukuisina valmisteina oraalisesti annettaviksi, ovat neutraaliendopeptidaasi-inhi-biittorit (lyhennetty tässä jäljessä NEP-inhibiittorit), jotka 5 edellä kuvattiin. On raportoitu, että kun NEP-inhibiittoria annetaan sydänviasta kärsivälle potilaalle, se lisää veren ANP-konsentraatiota aikaansaaden natriureettisen vaikutuksen. Tekniikan tason NEP-inhibiittorit vaikuttivat kuitenkin hieman sydämen veren käyttäytymiseen, ja se vuoksi alentumisia alku-10 ja loppukuormituksissa ei selvästi ilmennyt.

Toisaalta verisuonten laajentamiseen käyttökelpoiset ACE-inhi-biittorit inhiboivat angiotensiini (II) :n muodostumista, joka on sydänvikaa pahentava tekijä, ja sen vuoksi niillä saadaan merkittävä parannus NYHA-sairauden vakavuuteen ja saadaan pa-15 remmin estettyä sen muuttuminen krooniseksi sydänviaksi, ja näin ollen niiden käyttökelpoisuus mukaanluettuna niiden elämää pidentävät vaikutukset on todistettu. Tekniikan tason ACE-inhibiittoreiden tehokkuussuhde potilaille ei aina ole korkea ja kunkin inhibiittorin tehokkuus vaihtelee potilaitten mu- 20 kaan. Lisäksi on osoitettu sellainen ongelma, että inhibiittorit esimerkiksi aiheuttavat sivuvaikutuksia, kuten alhaista verenpainetta, niin että niiden antamista potilaille, joilla : on munuaisten vajaatoiminta, täytyy rajoittaa.

• t » · • * Kuten edellä kuvattiin, NEP-inhibiittoreita ja ACE-inhibiitto- 25 reita pidetään uusina lääkkeinä sydänvikaan, mutta tekniikan tason NEP-inhibiittoreilla ja ACE-inhibiittoreilla on rajoi-tuksensa käyttökelpoisuudessaan. Sen vuoksi on innokkaasti odotettu sellaisen lääkkeen kehittämistä, jolla on meriitit sekä NEP-inhibiittoriaktiivisuudessa että ACE-inhibiittori-,>··. 30 aktiivisuudessa.

Japanilainen patenttijulkaisu A nro 6-56790 esittää seuraavat yhdisteet, joilla on NEP-inhibiittoriaktiivisuus ja ACE-inhi-biittoriaktiivisuus: > * • * 113656 3 ? \

rJL * I

R2-C N

I H COOR12 <ch2) n 0 SR1 • 1 3 18 2 19 (jossa R on vety, R-CO- tai R -S; R ja R ovat kumpikin toisistaan riippumatta vety, alkyyli, sykloalkyyli-(CH2)m-, subs-tituoitu alkyyli, aryyli-(CH2)m-, substituoitu aryyli-(CH2)m-5 tai heteroaryyli-(CH3)m; n on 0 tai 1, sillä edellytyksellä, että n:n täytyy olla 0, kun sekä R2 että R19 ovat muu kuin vety; m on 0 tai kokonaisluku 1-6; R3 on alkyyli, substituoitu alkyyli, sykloalkyyli-(CH2) m-, aryyli-(CH2)m- , substituoitu aryyli-(CH2)m- tai heteroaryyli-(CH2)m; R18 on alkyyli, substituoitu al-10 kyyli, sykloalkyyli-(CH2)m-, aryyli-(CH2)m-, substituoitu aryyli-(CH2)ro- tai heteroaryyli-(CH2)m; R12 on vety, alkyyli, substituoitu alkyyli, aryyli-(CH2)m-, substituoitu aryyli-(CH2)m- tai heteroaryyli- (CH2)m,

O

1 Λ

-CH -0-C-R,c O O

I \_/

Ri4 tai ; ch2 Ri£ ··· j 15 ja v ja w ovat kumpikin 1 tai 2) .

* · ; · Nämä yhdisteet ovat kuitenkin rakenteellisesti erilaisia tämän keksinnön yhdisteiden kanssa, ja lisäksi sekä niiden NEP-inhi- ·. biittoriaktiivisuus että ACE-inhibiittoriaktiivisuus on liian heikko tyydyttämään tähän mennessä vaaditut voimakkuudet, ja , 20 edelleen yhdisteet ovat ongelmallisia oraalisesti annettaessa.

* ·

Sen vuoksi niiden kliinistä käyttöä on rajoitettu. W0 94/10193 * esittää muuten myös samanlaisia yhdisteitä kuin ne, jotka on *: esitetty japanilaisessa patenttijulkaisussa A nro 6-56790.

Näissä edellä kuvatuissa olosuhteissa tämän keksinnön tekijät 25 ovat aloittaneet tutkimuksensa löytääkseen lääkkeen, jolla on ‘ : erinomainen inhiboiva vaikutus sekä NEP:tä että ACE:tä vastaan ja joka voi antaa suuren tehokkuuden annettuna mitä tahansa kautta. Tuloksena tästä he ovat keksineet, että edellä oleva 113656 4 tarkoitus voidaan saavuttaa seuraavilla yhdisteillä, jolloin tämä keksintö syntyi.

Keksinnön kuvaus Tämän keksinnön kohteena on välituote, jota käytetään substi-5 tuoidun tiatsolo[3,2-a]atsepiinijohdannaisen, jota esittää seuraava yleiskaava (I), tai sen farmakologisesti sopivan suolan valmistamisessa: p4 0 R3~~y'~\ R2— (CH2L II /—s yvvpc (CH2)n 0 I .R7 COOR8 SR1 (I) (jossa R1 on vetyatomi tai tioliryhmän suojaryhmä; R2 on vety- 10 atomi, alempi alkyyliryhmä, aryyliryhmä, jolla voi olla subs- tituentti, heteroaryyliryhmä, jolla voi olla substituentti, alempi alkoksyyliryhmä tai alempi alkyylitioryhmä; R3, R4 ja R5 ovat toistensa kanssa samoja tai erilaisia ja kukin on vety- atomi, alempi alkyyliryhmä, alempi alkoksyyliryhmä, alempi al- ,;t 15 kyylitioryhmä, aryyliryhmä, jolla voi olla substituentti, tai !"! heteroaryyliryhmä, jolla voi olla substituentti, tai vaihtoeh- • » · ® * # 3 4 5 * toisesti kaksi ryhmistä R , R ja R , jotka ovat toistensa vie- ' i · t * * ressä, voivat muodostaa renkaan yhdessä hiiliatomien kanssa, > · joihin ne ovat sitoutuneet, sillä edellytyksellä, että se ta- * 20 paus, jolloin kaikki ryhmistä R3, R4 ja R5 ovat vetyatomeita, on ,· poissuljettu; R6 ja R7 ovat toistensa kanssa samoja tai erilaisia ja ovat :: kumpikin vetyatomi tai alkyyliryhmä; R8 on vetyatomi tai kar- h boksyyliryhmän suojaryhmä; ja . ·>. 25 n ja m ovat toisistaan riippumatta 0, 1 tai 2) .

Edellä olevissa määritelmissä alempi alkyyliryhmä, joka sisäl- » * » tyy ryhmien R2, R3, R4, R5, R6 ja R7 määritelmiin, on suoraket-juinen tai haarautunut alkyyliryhmä, jossa on 1-6 hiiliatomia. Esimerkkejä siitä ovat metyyli, etyyli, n-propyyli, isopropyy-30 li, n-butyyli, isobutyyli, sek.butyyli, tert.butyyli, n-pen- s 113656 tyyli, isopentyyli, neopentyyli, tert. pentyyli, 1-metyylibu-tyyli, 2-metyylibutyyli, 1,2-dimetyylipropyyli, n-heksyyli, isoheksyyli, 1-metyylipentyyli, 2-metyylipentyyli, 3-metyyli-pentyyli, 1,1-dimetyylibutyyli, 1,2-dimetyylibutyyli, 2,2-di- 5 metyylibutyyli, 1,3-dimetyylibutyyli, 2,3-dimetyylibutyyli, 3,3-dimetyylibutyyli, 1-etyylibutyyli, 2-etyylibutyyli, 1,1,2- trimetyylipropyyli, 1,2,2-trimetyylipropyyliryhmä, 1-etyyli-l- metyylipropyyli, l-etyyli-2-metyylipropyyli ja vastaavat. Näiden joukossa edullisia voivat olla metyyliryhmä, etyyliryhmä, 10 n-propyyliryhmä, n-butyyliryhmä, isobutyyliryhmä ja sek.butyy- liryhmä.

Alempi alkoksyyliryhmä, joka sisältyy ryhmien R2, R3, R4 ja R5 määritelmiin, on alkoksyyliryhmä, jossa on 1-6 hiiliatomia, ja niitä ovat esimerkiksi metoksiryhmä, etoksiryhmä, n-propoksi-15 ryhmä tai vastaava.

Alempi alkyylitioryhmä, joka sisältyy ryhmien R2, R3, R4 ja R5 määritelmiin, on alkyylitioryhmä, jossa on 1-6 hiiliatomia, ja sellainen on esimerkiksi metyylitioryhmä, etyylitioryhmä, n-propyylitioryhmä tai vastaava.

20 Aryy li ryhmässä, jolla voi olla substituentti ryhmien R2, R3, R4 ja R5 määritelmissä, aryyli on fenyyli, 1-naftyyli, 2-naftyyli, • j · antrasenyyli tai vastaava.

. Heteroaryyliryhmässä, jolla voi olla substituentti ryhmien R2, , R3, R4 ja R5 määritelmissä, heteroaryyli on rengas, joka koostuu ’ / 25 3-8 jäsenestä, edullisesti 5-6 jäsenestä ja jossa on 1-4 hete- '*··’ roatomia, kuten typpiatomi, rikkiatomi tai happiatomi.

Samalla kun "aryy li ryhmässä, jolla voi olla substituentti" ja .*·. "heteroaryyliryhmässä, jolla voi olla substituentti", jotka • _ sisältyvät ryhmien R2, R3, R4 ja R5 määritelmiin, "substituent- * * 30 ti" voi käsittää alemmat alkyyliryhmät, kuten metyyli, etyyli, I I ( n-propyyli ja t-butyyli; halogeeniatomi t, kuten fluoriatomi, klooriatomi, bromiatomi ja jodiatomi; alemmat alkoksiryhmät, t · t kuten metoksi, etoksi, n-propoksi ja t-butoksi; nitroryhmän; aminoryhmän, joka voi olla mono- tai di-substituoitu; ja vas- 35 taavat. Näillä substituenteilla syntyy 1-3 substituutiota.

6 113656

Tioliryhmän suojaryhmä, joka sisältyy Rx:n määritelmään, käsittää esimerkiksi alemmat alkyyliryhmät, kuten metyyli, etyyli, n-propyyli ja t-butyyli; asyyliryhmät, joista esimerkkinä ovat ryhmät, jotka on saatu alifaattisista tyydyttyneistä monokar-5 boksyylihapoista, kuten asetyyliryhmä, propionyyliryhmä, buty-ryyliryhmä, pivaloyyliryhmä, palmitoyyliryhmä ja stearoyyli-ryhmä; ryhmät, jotka on saatu alifaattisista tyydyttymättömistä karboksyylihapoista, kuten akryloyyliryhmä, propioloyyli-ryhmä, metakryloyyliryhmä, krotonoyyliryhmä ja oleoyyliryhmä; 10 ryhmät, jotka on saatu karbosyklisistä karboksyylihapoista, kuten bentsoyyliryhmä, naftoyyliryhmä, toluoyyliryhmä, apoto-yyliryhmä ja sinnamoyyliryhmä; ryhmät, jotka on saatu karbosyklisistä karboksyylihapoista, kuten furoyyliryhmä, tenoyyli-ryhmä, nikotinoyyliryhmä ja isonikotinoyyliryhmä; asyyliryh-15 mät, joita ovat esimerkiksi ryhmät, jotka on saatu hydroksi-karboksyylihaposita tai alkoksikarboksyylihapoista, kuten gly-koloyyliryhmä, 1aktoyyliryhmä, glyseroyyliryhmä, maloyyliryh- mä, tartaroyyliryhmä, bentsiloyyliryhmä, salisyloyyliryhmä, anisoyyliryhmä, vanilloyyliryhmä ja piperonyloyyliryhmä; aryy-2 0 liryhmät, kuten fenyyli ja naftyyli; heteroaryyliryhmät, kuten furoyyli, pyridyyli ja tienyyli; aryylialkyyliryhmät, kuten bentsyyli; heteroaryylialkyyliryhmät, kuten furoyylimetyyli-‘1* ryhmä, tienyylimetyyliryhmä ja pyridyylimetyyliryhmä; ja vas- ; taavat.

♦ * » · ♦ 25 Karboksyyliryhmän suojaryhmä, joka sisältyy ryhmän R8 määritelmään, on alempi alkyyliryhmä, kuten metyyli, etyyli, n-propyy- ♦ ' * li ja t-butyyli; aryylialkyyliryhmä, kuten bentsyyli, 1-naf- .· tyylimetyyli ja 2-naftyylietyyli; heteroaryylialkyyliryhmä, kuten 2-pyridyylimetyyli, 3-pyridyylipropyyli ja 2-tienyyli-:* 30 etyyli; tai vastaavat. Lyhyesti, se voi olla mikä tahansa, kunhan se poistuu in vivo antaen karboksyyliryhmän.

Mainittaessa "kaksi substituenttia, jotka ovat toistensa vie-: ressä, voivat muodostaa renkaan yhdessä hiiliatomien kanssa, joihin ne ovat sitoutuneet" ryhmien R3, R4 ja R5 määritelmissä, 35 muodostunut rengas on edullisesti rengas, joka koostuu 5-8 jäsenestä.

113656 7

Lisäksi farmakologisesti sopivat suolat käsittävät, ei ainoastaan epäorgaaniset suolat, kuten hydrokloridi, sulfaatti ja nitraatti, vaan myös orgaaniset suolat, kuten maleaatti, sit-raatti ja asetaatti, ja suolat alkalimetallien kanssa, kuten 5 natriumsuola ja kaliumsuola; ja lisäksi suolat aminohappojen kanssa, kuten aspartaatti ja glutamaatti.

Esillä olevan keksinnön kohteena on 6-amino-5-okso-oktahydro-tiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksyylihappojohdannainen, jota esittää yleinen kaava (II), tai sen farmakologisesti sopiva 10 suola: < 5 AA 1111 0 I 8

COOFT

jossa toinen ryhmistä R4 ja R5 on vetyatomi ja toinen on alempi alkyyli tai vaihtoehtoisesti R4 ja R5 voivat muodostaa syklohek-syylirenkaan yhdessä niiden hiiliatomien kanssa, joihin ne ovat 15 sitoutuneet; ja R8 on vetyatomi tai karboksyyliryhmän suojaryh-mä, joka on alempi alkyyli.

Lisäksi keksinnön kohteena on menetelmät kaavan II mukaisen 6-'** ; amino-5-okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksyyli- happojohdannaisen valmistamiseksi.

• 20 Keksinnön oleelliset tunnusmerkit on esitetty oheisissa pa- ,·. tenttivaatimuksissa.

Tämän keksinnön välituotteilla saaduilla yhdisteillä on erin-.omainen inhiboiva vaikutus sekä NEP:tä että ACE:tä vastaan.

Seuraavan yleiskaavan (I1) esittämät yhdisteet ovat halutuim-25 pia tämän keksinnön yhdisteiden joukossa, koska niillä on kor-kea biologinen saatavuus ja ne ovat erinomaisen tehokkaita !’ myös oraalisesti annettuina: 113656 8 ., H.

(jossa R1 on vetyatomi tai tioliryhmän suojaryhmä; R4 ja R5 voivat olla toistensa kanssa samoja tai erilaisia ja kumpikin on vetyatomi, alempi alkyyliryhmä, alempi alkoksyyliryhmä, alempi 5 alkyylitioryhmä, aryyliryhmä, jolla voi olla substituentti, tai heteroaryyliryhmä, jolla voi olla substituentti, tai vaihtoehtoisesti R4:n ja R5:n joukosta kaksi substituenttia, jotka ovat toistensa vieressä, voivat muodostaa renkaan yhdessä hiiliatomien kanssa, joihin ne ovat sitoutuneet, sillä edellytyk-10 sellä, että se tapaus, jolloin R4 ja R5 ovat vetyatomeita, on poissuljettu, ja erityisesti ne tapaukset, jolloin R4 on vety-atomi ja R5 on alempi alkyyliryhmä, ovat edullisia, ja alempi alkyyliryhmä tässä tapauksessa on edullisesti metyyliryhmä; R6 ja R7 voivat olla toistensa kanssa samoja tai erilaisia, ja 15 kumpikin on vetyatomi tai alempi alkyyliryhmä, edullisin on tapaus, jossa sekä R6 että R7 ovat vetyatomeita; ja R8 on vety-atomi tai karboksyyliryhmän suojaryhmä).

; .·. Tämän keksinnön yhdisteiden (I) joukossa halutuimpia yhdistei- tä esittää seuraava yleiskaava (A) : gH3 o / Λ.

/ \/r6 SR1 H 0 , 20 COOR8 (A) (jossa R1 on vetyatomi tai tioliryhmän suojaryhmä; R5 on alempi alkyyliryhmä, alempi alkoksyyliryhmä, alempi alkyylitioryhmä, aryyliryhmä, jolla voi olla substituentti, tai heteroaryyli-'(* ryhmä, jolla voi olla substituentti, edullisesti alempi alkyy- 25 liryhmä, edullisimmin metyyliryhmä; ’ · R6 ja R7 voivat olla toistensa kanssa samoja tai erilaisia, ja kumpikin on vetyatomi tai alempi alkyyliryhmä, edullisin on tapaus, jossa sekä R6 että R7 ovat vetyatomeita; ja R8 on 113656 9 vetyatomi tai karboksyyliryhmän suojaryhmä, edullisimmin vetyatomi).

Edelleen halutuimpia yhdisteitä tämän keksinnön yhdisteiden 5 (A) joukossa esittää seuraava yleiskaava (A'): » "

Γ h O C00R

SR1 U

(jossa R1 on vetyatomi tai tioliryhmän suojaryhmä, edullisesti 15 vetyatomi tai asetyyliryhmä; R5 voi olla sama tai erilainen kuin toiset ja on alempi alkyyliryhmä, alempi alkoksyyliryhmä, alempi alkyylitioryhmä, aryyliryhmä, jolla voi olla substi-tuentti, tai heteroaryyliryhmä, jolla voi olla substituentti; 20 R6 ja R7 voivat olla toistensa kanssa samat tai erilaiset ja kumpikin on vetyatomi tai alempi alkyyliryhmä, jolloin edullisin on tapaus, jossa molemmat niistä ovat vetyatomeita; :··· ja R8 on vetyatomi tai karboksyyliryhmän suojaryhmä, jolloin : edullisin on tapaus, jossa se on vetyatomi)* :-:25 ;··: Tämän keksinnön yhdisteiden (A') joukossa edullisimpia ·;··· yhdisteitä ovat ne, joita esittävät seuraavat kaksi kaavaa, jotka vastaavat niitä, joissa R5 on metyyliryhmä kaavassa (A')· ; 30 -qh3 !» « m 1 , H \ COOR8 ··. SR1 0 ch3 113656 10 5 T, H ft COOR8 SR1 0

Seuraavat kaksi yhdistettä, joissa kaikki ryhmistä R1, R6 ja R7 näissä kaavoissa ovat vetyatomeita, ovat tämän keksinnön 10 halutuimpia yhdisteitä.

Näiden joukossa yhdisteet, joissa R8 on vetyatomi, ovat seuraavat.

15 ΛΙΙ f)

H3 c^yV

SR1 20

Eräs edullisten yhdisteiden ryhmä, joita edellä on kuvattu, . ovat yhdisteet, jotka saadaan liittämällä (2S,3S)-3-metyyli-2- ; ·; tiopentanamidoryhmä tiatsolo[3,2-a]atsepiinirunkoon asemaan · 6, ja yhdisteet, joissa on substituentti, kuten alempi ’ :25 alkyyliryhmä tiatsolo[3,2-a]atsepiinirungossa asemassa 9.

Vaikka edellämainittu japanilainen patenttijulkaisu A nro 6- *: ja EP tekniikan tasona ehdottavat yhdisteitä, joissa on : tiatsolo[ 3,2-a]atsepiinirunko, niissä esitetyissä yhdisteissä jokainen substituentti tiatsolo[3,2-a]atsepiinirungossa ,,,.:30 asemassa 6 on useimmiten bentsyyliryhmä, eikä niissä esitetä * · tässä keksinnössä olevaa ryhmää, jolla on spesifinen avaruus-'! * rakenne, t.s.

gH3 o O„ SR1 113656 11 Tämän keksinnön tekijät ovat suorittaneet spesifisen konfiguraation omaavan (2S,3S)-3-metyyli-2-tiopentanamidoryhmän liittämisen tiatsolo[3/2-a]atsepiinirenkaaseen asemaan 6 perustuen kokonaan erilaiseen ideaan, ja ovat sattumalta 5 keksineet, että tekemällä tällainen liitos voidaan saada yhdiste, joka on äärimmäisen erinomainen kaksitoimisena inhibiittorina sekä NEPztä että ACEztä vastaan verrattuna niihin, jotka on esitetty edellä kuvatussa tekniikan tasossa. Tämä keksintö on tehty tämän löydöksen pohjalta.

10

Edelleen tämä keksintö käsittää yhdisteet, jotka saadaan liittämällä alempi alkyyliryhmä (edullisimmin metyyliryhmä) tiatsolo[3,2-a]atsepiinirenkaaseen asemaan 9.

15 Näin ollen tämä keksintö on tehty kokonaan uuden käsityksen perusteella, jossa tämän keksinnön huippuyhdisteillä (I) on kullakin tiatsolo[3,2-a]atsepiinirengas, jonka 6-asema on substituoitu ryhmällä

20 QH3 O

SR1 : *:25 ·:**: jolla on spesifinen konfiguraatio, ja sen 9-asema on substitu- . oitu alemmalla alkyyliryhmällä, kuten metyyliryhmällä.

.··. Yhdistämällä tämän uuden käsityksen mukaisen ryhmän he ovat * · onnistuneet saamaan tämän keksinnön yhdisteet, jotka ovat .30 erinomaisia kaksitoimisia inhibiittoreita.

Tämän keksinnön huippuyhdisteillä on nimittäin sellaiset : ominaisuudet, että niillä kullakin on ei vain erinomainen : kaksitoiminen inhibiittorivaikutus, vaan myös parempi biologi- ' . 35 nen hyväksikäyttö ja että niillä on erinomainen vaikutus myös oraalisesti annettaessa, verrattuna tekniikan tasossa esitet-··* tyihin yhdisteisiin.

113656 12 Näistä seuraavat yhdisteet ovat halutuimpia.

CH3 5 Me O ( /*S\

«.vV-W

SH H o COOH

10 CH3

Me O r>S

SH H O COOH 15

Vaikka tämä keksinnön yhdisteet voidaan valmistaa tunnetulla menetelmällä tai yhdistämällä tunnettuja menetelmiä, ongelma on ollut siinä, että lähtöyhdisteet ovat kalliita ja että 20 operaatio oli monimutkainen. Sen vuoksi tämän keksinnön tekijät ovat suorittaneet tutkimuksia löytääkseen menetelmän, . jolla teollisesti voidaan edullisesti valmistaa tämän ;·; keksinnön yhdisteitä. Tuloksena näistä tutkimuksista he ovat : löytäneet valmistusprosessit, joita kuvataan jäljessä.

: ”:*25 ‘ ‘· Valmistusmenetelmä 1 R4 ...

T T (18)

N^COOH

H

' ’ 1 . vaihe N-asylointi . !·. ,r R4

RsJvR5 TI (19)

N^COOH

z 2. vaihe esteröinti '' 113656 13 R4 "SV’ ^'N'xOOR11 ^ z 3. vaihe elektrolyyttinen hapetus " R4 'Λ''

Ri20-r^N^COORu (21)

Z

Ά1" «‘•O^^COOR" (22) z 7r r6 4. vaihe konversio X^COOR8*

. ·;· v tiatsolidiiniksi na l W

• * * · T Wlij : r3 r5 R“ooc R’( »A i*hn'coor*i • 5. vaihe esteriryhmän suojauksen poisto • * ' * ·* · R3 R5 ZHN Ri “COOR«‘ (25) 6. vaihe eyklieointi laktsemiksi ” 14 1Ί3656 R4 Rs 0 COOR** (26^ 7. vaihe aminoryhmän suojauksen poisto R4 R5 h ä Is G?) COOR8*

δ. vaihe COOH

amidointi R2—(CH^— <CH2)n I (29)

. SRU

. jj Rs =.:!· , Vn^Öa** t «!-<CHύ„~1 H f y^R, (CH,Jn COOR** L- m 9. vaihe hydrolyysi » · i . ό&·

(CHJn COOH

1 (31)

·:·· SH

··' 10. vaihe S-asylointi

T

113656 15 t K' CÖ>· R2 —(CHl)m—/ H r

5 (CH2)n COOH

I u (32) SR1* (kaavasarjassa R3, R4 ja R5 ovat kukin toisistaan riippumatta 10 vetyatomi, alempi alkyyliryhmä, alempi alkoksyyliryhmä, alensi alkyylitioryhmä, aryyliryhmä, jolla voi olla substituentti, tai heteroaryyliryhmä, jolla voi olla substituentti, tai vaihtoehtoisesti R3, R4 tai Rs voi muodostaa renkaan yhdessä hiiliatomin kanssa, johon on sitoutunut, sillä edellytyksellä, 15 että se tapaus, jossa kaikki ryhmät R3, R4 ja R5 ovat vetyato-meitä, on poissuljettu; R6 ja R7 ovat kumpikin toisistaan riippumatta vetyatomi, alempi alkyyli, aryyliryhmä, joka voi olla substituoitu, tai 20 aryylialkyyliryhmä, joka voi olla substituoitu; R1* on asyyli-ryhmä; R8a on karboksyyliryhmän suojaryhmä; R12 on ryhmä, joka . muodostaa aldehydiekviValentin yhdessä endosyklisen typpiato- ; min kanssa; Z on asyyliryhmä tai karbamaattiryhmä; ja m ja n 1·· : merkitsevät samaa kuin niillä yleiskaavassa (I)).

:25 "“· (1. vaihe) Tämä vaihe on sellainen, jossa asyloidaan pipekoliinihappojohdannainen (18), jolloin syntyy N-asyylipipekoliinihappojohdan-,,,,:30 nainen (19). Yhdiste (19) voidaan saada tavanomaisella mene-telmällä. Yhdiste (19) voidaan saada esim. antamalla yhdisteen T (18) reagoida happoanhydridin, kuten etikkahappoanhydridin kanssa huoneenlämmöstä 100°C:n lämpöön, antamalla yhdisteen : (18) reagoida happohalogenidin, kuten asetyylikloridin ja ,j;35 bentsoyylikloridin kanssa emäksen, kuten pyridiinin ja dimetyyliaminopyridiinin, läsnäollessa lämpötilassa 0°C:sta huoneenlämpötilaan, tai edelleen niinsanotulla Schotten-Baumannin reaktiolla, jossa annetaan yhdisteen (18) reagoida 113656 16 happohalogenidin kanssa emäksen, esim. natriumhydroksidin tai natriumvetykarbonaatin, läsnäollessa.

(2. vaihe) 5 Tämä vaihe käsittää ensimmäisessä vaiheessa saadun N-asyylipi-pekoliinihappojohdannaisen (19) karboksyylihapon esteröimisen, jolloin syntyy esteri (20). Esteriryhmä on edullisesti ryhmä, josta voidaan poistaa suojaus niissä olosuhteissa, joissa 10 tavalliset alkyyliesterit eivät hydrolysoidu esterin, kuten t-butyyliesterin, mahdollisesti metoksiryhmällä substituoidun bentsyyliesterin tai vastaavan, ja alkyylisilyylietyylieste-rin, suojauksen poiston aikana. Kun valmistetaan t-butyylies-teri, se voidaan syntetisoida antamalla yhdisteen (19) rea-15 goida isobutyleenin kanssa orgaanisessa liuottimessa, kuten dioksaani ja tetrahydrofuraani, happokatalyytin, kuten rikkihapon ja p-tolueenisulfonihapon, läsnäollessa, tai antamalla yhdisteen (19) reagoida t-butanolin kanssa kondensoivan aineen, kuten Ν,Ν'-disykloheksyylikarbodi-imidin (DCC) ja 1-2 0 (3-dimetyyliaminopropyyli) -3-etyylikarbodi-imidihydrokloridin (DEC), kanssa. Samalla kun esteri, kuten bentsyyliesteri, . metoksibentsyyliesteri ja alkyylisilyylietyyliesteri valmiste- I"; taan, yhdiste (20) voidaan saada suorittamalla esteröinti : esteröivän aineen, kuten bentsyylihalogenidin, metoksibentsyy- ‘ *25 lihalogenidin ja alkyylisilyylietyylihalogenidin, kanssa emäksen, kuten kaliumkarbonaatin, natriumkarbonaatin ja alkyyliamiinin, läsnäollessa inertissä orgaanisessa liuotti-messa, kuten tetrahydrof uraani, dime tyyli f ormamidi ja dikloo-rimetaani.

30 * · (3. vaihe) Tämä vaihe käsittää 2. vaiheessa saadun pipekoliinihappojoh-dannaisen (20) elektrolyyttisen hapetuksen, jolloin syntyy 35 hemiasetaali (21) . Elektrolyyttinen hapetus voidaan suorittaa erilaisissa olosuhteissa. Hemiasetaali (V) voidaan saada esim. hapettamalla elektrolyyttisesti yhdiste (20) platina, hiili, ruostumaton teräs, lyijyoksidi tai vastaava elektrodina 113656 17 käyttäen tukielektrolyyttinä elektrolyyttiä, joka lisää sähkönjohtavuutta vesijärjestelmässä tai orgaanisessa liuotin-jär jestelmässä, kuten tetra-alkyyliammoniumperkl oraat it, esim. tetraetyyliammoniumperkloraatti tai tetrametyyliammoniumper-5 kloraatti; alkalimetallisuolat, esim. natriumperkloraatti tai litiumperkloraatti; tetra-alkyyliammoniumsulfonaatit, esim. tetraetyyliammonium-p-tolueenisulfonaatti; tetra-alkyyliam-moniumtetrafluoriboraatit; ja tetra-alkyyliammoniumheksa-fluorifosfaatit, liuottimessa, kuten vesi/asetonitriili-10 järjestelmä, vesi/alkoholi-järjestelmä ja vesi/etikkahappo-järjestelmä. Kulkeneen virran määränä käytetään yleensä 2 F tai enemmän moolia kohti käytettyä yhdistettä (20). Erityisesti sellainen tapaus, jossa käytetään platinaa tai hiiltä elektrodina, ja tukielektrolyyttinä käytetään tetraetyyliam-15 moniumperkloraattia,tetraetyyliammoniumtetrafluoriboraattia tai tetrametyyliammoniumheksaf luorif osf aattia, antaa paremman tuloksen.

(4. vaihe) 20 Tämä vaihe on sellainen, jossa 3. vaiheessa saadun hemiasetaa-lin (22) annetaan reagoida kysteiiniesterijohdannaisen (23) < * · · · kanssa tiatsolidiinijohdannaisen (24) saamiseksi. Käytännössä : tiatsolidiinijohdannainen (24) voidaan saada lisäämällä kyste- *' *25 iiniesterijohdannainen (23) reaktiojärjestelmään 3. vaiheen tapahtumisen jälkeen eristämättä hemiasetaalia (22) käsittelyn ·:**: suorittamiseksi. Kun tähän reaktioon käytettävänä kysteiininä käytetään optisesti aktiivista L- tai D-kysteiiniä, yhdisteen (24) tiatsolidiinirenkaan 4-asemassa olevan karboksyyliryhmän ,,,,:30 absoluuttinen konfiguraatio on R- tai S-konfiguraatio.

• · (5. vaihe) * » · « I · : Tässä vaiheessa selektiivisesti poistetaan suojaryhmä karbok- ' .35 syylihaposta, jota esittää R9 vaiheessa 4 saadussa tiatsoli-diinijohdannaisessa (24) , jolloin syntyy karboksyylihappojohdannainen (25). Karboksyylihappojohdannainen (25) voidaan saada käsittelemällä se de-t-butyloivalla aineella, kuten 113656 18 trifluorietikkahappo, vetykloridihappo ja joditrimetyylisilaa-ni, kun yhdiste (24) on t-butyyliesteri, tai tavalla, jolla tavallisesti poistetaan suojaus vain vastaavasta esterisuoja-ryhmästä, esimerkiksi katalyyttinen hydraus, vetykloridihappo, 5 2,3-dikloori-5,6-disyaani-l,4-bentsokinoni (DDQ) tai tetra- alkyyliammoniumfluoridi, kun yhdiste (24) on esteri, kuten bentsyyliesteri, metoksibentsyyliesteri ja alkyylisilyylietyy-liesteri.

10 (6. vaihe) Tässä vaiheessa syklisoidaan 5. vaiheessa saatu tiatsoli-diinikarboksyylihappojohdannainen (25) kondensoinnilla, jolloin syntyy tiatsoloatsepiinijohdannainen (26). Syklisointi 15 voidaan suorittaa tavanomaisella kondensoivalla aineella.

Syklisoitu tuote (26) voidaan saada esim. antamalla yhdisteen (25) reagoida l-etoksikarbonyyli-2-etoksi-l,2-dihydrokinolii-nin (EEDQ), DCC:n, DEC:n tai vastaavan kanssa liuottimessa, kuten etanoli, tetrahydrofuraani ja dikloorimetaani.

20 (7. vaihe) a · I"; Tässä vaiheessa poistetaan N-asetyylisuojaryhmä 6. vaiheessa ·’ : saadusta tiatsoloatsepiini johdannaisesta (26), jolloin saadaan ’25 aminohappojohdannainen (27). Vaikka tunnetaan erilaisia N- ' "· asetyyliryhmän poistomenetelmiä, kohdeaminohappojohdannainen ‘ (27) voidaan saada esim. kuumentamalla sitä laimean mineraali- hapon, kuten vetykloridihapon ja rikkihapon alkoholiliuokses- sa, käsittelemällä sitä natriumhydroksidin, kaiiumhydroksidin , ,,.*30 tai vastaavan alkoholiliuoksella, tai antamalla sen reagoida > · ,···. fosforipentakloridin tai oksalyylikloridin kanssa pyridiinis- » ” sä, jonka jälkeen käsitellään alkoholilla.

* * · (8. vaihe) ;.:35 • Tässä vaiheessa kondensoidaan 7. vaiheessa saatu aminohappo- johdannainen (27) karboksyylihappojohdannaisen kanssa, jota esittää yleinen kaava (29) , tai sen aktiivisella johdannaisel- 113656 19 la, kuten sen happohalogenidilla, jolloin syntyy amidijohdan-nainen (30). Tämä kondensointi voidaan suorittaa tavanomaisella menetelmällä, ja esimerkki siitä on aminohappo johdannaisen (27) kondensointi karboksyylihappojohdannaisen (29) kanssa 5 tavallisesti käytetyn kondensoivan aineen, kuten EEDQ:n, DCC:n, DEC:n tai dietyylisyanofosfonaatin läsnäollessa. Voidaan käyttää kaikkia reaktiolle inerttejä orgaanisia liuottimia reaktioliuottimena, ja esimerkkejä niistä ovat metyleenikloridi ja tetrahydrofuraani. Kun reaktio suoritetaan 10 happohalogenidin, kuten karboksyylihappojohdannaisen (29) happokloridin kautta, voidaan yhdiste (30) saada antamalla karboksyylihappojohdannaisen (29) reagoida tavallisesti käytetyn klooraavan aineen, esim. tionyylikloridin tai oksalyylikloridin, kanssa sopivassa inertissä liuottimessa, 15 jolloin muodostuu sen happokloridi, ja antamalla sen reagoida aminohappojohdannaisen (27) kanssa.

(9. vaihe) 20 Tässä vaiheessa hydrolysoidaan a-asyylitiokarboksyyliamidi-johdannainen (30), joka saatiin 8. vaiheessa, jolloin syntyy α-merkaptokarboksyyliamidijohdannainen (31).

* i · • t • * « t i i !.: : Se voidaan hydrolysoida tavanomaisella hydrolyysillä, toisin "":25 sanoen laimeassa emäksen, kuten natriumhydroksidin ja litium-' hydroksidin vesiliuoksessa tai laimeassa mineraalihapon vesiliuoksessa.

(10. vaihe) .30

Iitti * · Tässä vaiheessa asyloidaan α-merkaptokarboksyyliamidijohdan- • « *;·* nainen (31), joka saatiin 9. vaiheessa, jolloin syntyy a-asyy- [t: litiokarboksyyliamidijohdannainen (32).

< * · t « • · * * « ’ .35 Reaktio voidaan suorittaa tavanomaisella tavalla. a-Asyyli-tiokarboksyyliamidijohdannainen (32) voidaan saada esim. ’*··* antamalla α-merkaptokarboksyyliamidi johdannaisen (31) rea- goidan asyloivan aineen, kuten happoanhydridin, esim. etikka- 20 113656 happoanhydridin, ja happohalogenidin kanssa ei-vesipitoisessa liuottimessa, kuten asetonitriili, tetrahydrofuraani ja dikloorimetaani, katalyytin, kuten kobolttikloridin läsnäollessa, tai käsittelemällä sitä emäksen, kuten kaliumvetykar-5 bonaatin, natriumvetykarbonaatin ja trietyyliamiinin läsnäol lessa vesipitoisessa liuottimessa myöskin.

Erityisesti voidaan parempia tuloksia saada käyttämällä asyloivana aineena aktiivista esteriä, joka saatiin antamalla 10 karboksyylihapon reagoida karbodi-imidatsolin kanssa.

Edelläolevassa menetelmässä yleiskaavan (27) yhdisteet ovat äärettömän tärkeitä välituotteita valmistettaessa tämän keksinnön yhdisteitä.

15

Valmistusmenetelmä 2 R4 Rs H2N^Y^^r< (27) ° COOR*4 • i · • »

!COOH

·’* · 8. vaihe amidointi R2 (CH^),,, \ ·:·: \ (CHJn ·;: I (29)

. SRU

*; " · «4 R3-(CHl)m-/ H f y^R7 ; (CH2)n COOR*4 r (30)

SRU

4 * * t 1 ) » l|» I · » • · • · I t · tiit· 9. vaihe hydrolyysi « t » »

» I

* I · v 2i 113656 ,

/PH s COOH

(CH2)n (31)

SH

10. vaihe S-asylointi

t rS

R2 (CHj)m l H f

(CH2)n COOH

k- (32) 3 l R! V'Cvc** R2—(CH^-C H jf YV SR * COOR8* (36) : 4. vaihe hydrolyysi : yN^KR<

R1—(CH^-C H r V^r7 SH COOH

(37) ; 5. vaihe asyylitioryhmän liittäminen VVb^ R:-(CHH r v%,

SRl* COOH

(38) 113656 22 (kaavasarjassa R3, R4 ja R5 ovat kukin toisistaan riippumatta vetyatomi, alempi alkyyliryhmä, alempi alkoksyyliryhmä, alempi alkyylitioryhmä, aryyliryhmä, jolla voi olla substituentti, tai heteroaryyliryhma, jolla voi olla substituentti, tai 5 vaihtoehtoisesti R3, R4 tai R5 voi muodostaa renkaan yhdessä hiiliatomin kanssa, johon on sitoutunut, sillä edellytyksellä, että se tapaus, jolloin R3, R4 ja R5 ovat kaikki vetyatomeita, on poissuljettu; 10 R6 ja R7 ovat kumpikin toisistaan riippumatta vetyatomi, alempi alkyyli, aryyliryhmä, joka voi olla substituoitu, tai aryylialkyyliryhmä, joka voi olla substituoitu; Rla on asyyli-ryhmä; Rea on karboksyyliryhmän suojaryhmä; X on poistuva ryhmä, kuten halogeeniatomi, metaanisulfonyylioksiryhmä tai 15 p-tolueenisulfonyylioksiryhmä; ja m:llä ja n:llä on samat merkitykset kuin yleiskaavassa (I)).

(1. vaihe) 20 Tässä vaiheessa kondensoidaan valmistusmenetelmässä A saatu aminohappojohdannainen (27) karboksyylihappojohdannaisen kanssa, jota esittää yleiskaava (33), tai sen aktiivisen johdannaisen, kuten sen happohalogenidin kanssa, jolloin • · :.· : syntyy amidijohdannainen (34). Tämä kondensointi suoritetaan ‘i“: 25 samalla tavalla kuin kondensointi valmistusmenetelmän A 8.

•: * : vaiheessa, paitsi että a-hydroksikarboksyylihappoa (33) • käytetään karboksyylihappo johdannaisen (29) sijasta.

• · • · (2. vaihe) . 30

M M I

Tässä vaiheessa halogenoidaan hydroksikarboksyyliamidi johdan-···’ nainen (34), joka saatiin 1. vaiheessa, jolloin syntyy a-halo- :karboksyyliamidijohdannainen (35). Tunnetaan erilaisia raene-telmiä yhdisteen (34) halogenoimiseksi kääntämällä hydroksyy- • * * • , 35 liryhmän avaruusrakenne, esimerkiksi (i) menetelmä, joka käsittää sen, että sen annetaan reagoida dialkyyliatsodi-’...· karboksylaatin, trifenyylifosfiinin ja joko sinkkibromidin tai sinkkijodidin kanssa orgaanisessa liuottimessa, kuten tetra- 113656 23 hydrofuraani, (ii) menetelmä/ jossa annetaan sen reagoida organofosforiyhdisteen, kuten trialkyylifosfiinin, trifenyyli-fosfiinin/ ja halogeeniyhdisteen, kuten N-halosukkiini-imidin ja bromin/jodin kanssa orgaanisessa liuottimessa, kuten aseto-5 nitriili/ dimetyyliformamidi ja dikloorimetaani emäksen, kuten pyridiinin, läsnäollessa tai ilman emästä, ja (iii) menetelmä, jossa annetaan sen reagoida tosyylikloridin, trifluorimetaa-nisulfonihappoanhydridin tai vastaavan kanssa inertissä liuottimessa, kuten dikloorimetaani, emäksen, kuten pyridiinin 10 ja trietyyliamiinin läsnäollessa sulfonihappoesterin muodostamiseksi, jonka jälkeen sen annetaan reagoida halogenoivan aineen, kuten litiumhalogenidin kanssa. Erityisen edullinen on menetelmä, jossa käytetään trifenyylifosfiinia ja bromia kohdan (ii) olosuhteissa.

15 (3. vaihe) Tässä vaiheessa liitetään asyylitioryhmä 2. vaiheessa saatuun o-halogeenikarboksyyliamidi johdannaiseen (35), jolloin syntyy 20 a-asyylitiokarboksyyliamidijohdannainen (36).

r. Reaktio voidaan suorittaa tavanomaisella tavalla. a-Asyyli- tiokarboksyyliamidijohdannainen (36) voidaan saada esim. j antamalla α-halokarboksyyliamidijohdannaisen (35) reagoida » · i « · '25 tiokarboksyylihapon suolan, kuten kaliumtioasetaatin ja * · natriumtioasetaatin kanssa polaarisessa liuottimessa, kuten asetonitriili ja asetoni, tai antamalla yhdisteen (35) rea-: goida tiokarboksyylihapon, kuten tioetikkahapon ja tiobent- soehapon kanssa emäksen, kuten kaliumkarbonaatin ja cesiumkar-30 bonaatin läsnäollessa.

• · 113656 24 emäksen, kuten natriumhydroksidin ja litiumhydroksidin vesi-liuoksessa, tai laimeassa mineraalihapon vesiliuoksessa.

(5. vaihe) 5 Tässä vaiheessa asyloidaan 4. vaiheessa saatu a-merkaptokar-boksyliamidijohdannainen (37), jolloin saadaan a-asyylitio-karboksyyliamidijohdannainen (38).

10 Reaktio suoritetaan tavanomaisella tavalla. a-Asyylitiokar-boksyyliamidijohdannainen (38) voidaan saada esim. antamalla α-merkaptokarboksyyliamidijohdannaisen (37) reagoida asyloivan aineen, kuten happoanhydridin, esim. etikkahappoanhydridin, ja happohalogenidin kanssa vedettömässä liupttimessa kuten 15 asetonitriili, tetrahydrofuraani ja dikloorimetaani, katalyytin, kuten kobolttikloridin läsnäollessa, tai myös käsittelemällä sitä emäksen, kuten kaliumvetykarbonaatin, natriumve-tykarbonaatin ja trietyyliamiinin läsnäollessa vesipitoisessa liuottimessa.

20

Erityisesti voidaan saavuttaa parempia tuloksia käyttämällä . asyloivana aineena aktiivista esteriä, joka on valmistettu > · · ;··; antamalla karboksyylihapon reagoida karbodi-imidatsolin ·” · kanssa.

25

Valmistusmenetelmä 3 • · * 5> ·:··: 30 O TV'S 6

Vn\n

Ra—(Οηλ,-Γ h f Y^r7 X COOR** (35) • * · ,,,,: ^5 1. vaihe hydrolyysi 113656 25

5 X COOH

(39) 2. vaihe asyylitioryhmän liittäminen 10

Rv Ri yNX^K.R‘ R>-<C HJ.-T Hu Ο τ'·»7 Π81

SRU COOH

15 (kaavasarjassa R3, R4 ja R5 ovat kukin toisistaan riippumatta vetyatomi, alempi alkyyliryhmä, alempi alkoksyyliryhmä, alempi 20 alkyylitioryhmä, aryyliryhmä, jolla voi olla substituentti, tai heteroaryyliryhmä, jolla voi olla substituentti, tai vaihtoehtoisesti R3, R4 tai R5 voi muodostaa renkaan yhdessä ;· ; hiiliatomin kanssa, johon se on sitoutunut, sillä edellytyk- :*: : sellä, että se tapaus, jossa R3, R4 ja R5 ovat kaikki vety- *25 atomeita, on poissuljettu; ·*'*: R‘ ja R7 ovat kukin toisistaan riippumatta vetyatomi, alempi alkyyli, aryyliryhmä, joka voi olla substituoitu, tai aryy-lialkyyliryhmä, joka voi olla substituoitu; Rla on asyyliryh-30 mä; R8a on karboksyyliryhmän suojaryhmä; X on poistuva ryhmä, .··. kuten halogeeniatomi, metaanisulfonyylioksiryhmä ja p-tolu- eenisulfonyylioksiryhmä; ja m:llä ja n:llä on samat merkityk-set kuin yleiskaavassa (I)).

35 (1. vaihe) “** Tässä vaiheessa hydrolysoidaan valmistusmenetelmässä 2 saadun halogenidin (35) esteriryhmä, jolloin saadaan karboksyylihap- 113656 26 pojohdannainen (39). Se voidaan hydrolysoida tavanomaisella hydrolyysillä, toisin sanoen laimeassa emäksen, kuten natrium-hydroksidin ja 1itiumhydroksidin kanssa, tai mineraalihapon laimeassa vesiliuoksessa.

5 (2. vaihe) Tässä vaiheessa liitetään asyylitioryhmä 1. vaiheessa saatuun a-halokarboksyyliamidijohdannaiseen (39), jolloin syntyy a-10 asyylitiokarboksyyliamidijohdannainen (38). Reaktio voidaan suorittaa tavanomaisella tavalla. a-Asyylitiokarboksyyliami-dijohdannainen (38) voidaan saada esim. antamalla α-halokar-boksyyliamidi johdannaisen (38) reagoida tiokarboksyylihappo-suolan, kuten kaliumtioasetaatin ja natriumtioasetaatin kanssa 15 polaarisessa liuottimessa, kuten asetonitriili, dimetyylisul-foksidi ja asetoni, tai antamalla johdannaisen (38) reagoida tiokarboksyylihapon, kuten tioetikkahapon ja tiobentsoehapon kanssa emäksen, kuten kaliumkarbonaatin ja cesiumkarbonaatin läsnäollessa.

20

Va 3 πηϊ stusmenetelmä 4

·"·. COOH

: R2—(CHj)m ( 25 NHa (4°) hydroksylointi 30

C°°H

R2—(CHa)m—( • OH (33) 35 • « ... (kaavasarjassa R2:lla ja m:llä on edelläkuvatut merkitykset).

113656 27 Tämä vaihe käsittää sen, että korvataan luonnollisen tai ei-luonnollisen aminohapon (40) aminoryhmä hydroksyyliryhmällä, jolloin saadaan a-hydroksikarboksyylihappo (33). Korvaaminen hydroksyyliryhmällä suoritetaan joko antamalla aminohapon (40) 5 reagoida nitraavan aineen, kuten natriumnitriitin kanssa laimeassa rikkihapossa, tai antamalla aminohapon (40) reagoida natriumnitriitin kanssa etikkahapossa, jolloin muodostuu asetaatti, ja sen jälkeen suorittamalla hydrolyysi.

10 Kun sekä R4 että R5 ovat vetyatomeita edullisissa yhdisteissä (I') tämän keksinnön yhdisteiden joukossa, on jo tunnettua menetelmä, jossa yhdiste saadaan suorittamalla yhdisteelle (II) ja yhdisteelle (i), (ro) tai (ha) amidointi.

15

£H3 O

1? 11 (i) (R on asyyliryhmä tai vas- taava)

SR

20 ch3 o

. ·;· H3C JL

• ·* OH (ro) (Y on poistuva ryhmä, ku- : Ϋ ten halogeeniatomi) 25

*:··: CH3 O

:.7: H3C. JL

(ha)

30 0H

• · ·;·’ On kuitenkin vaikeata sanoa, että edelläoleva menetelmä on : : teollisesti edullinen, koska kaikki edelläolevat yhdisteet (i), (ro) ja (ha) ovat kalliita ja D-allo-isoleusiinia, josta • I · ' . 35 massatuotanto vaatii paljon työtä, käytetään lähtöaineena.

• · ... Menetelmät, joita jäljessä kuvataan, ovat teollisesti edulli- i · ·' siä menetelmiä, joilla yhdiste (I') voidaan valmistaa suurella saannolla edullisesti.

28 1 13656

Valmistusmenetelmä 5 CHgO

CH3vv^vAoh * (9) nh2 k j 1. vaihe ^ hydroksylointi ch3o ch3VA^Aoh 0H R‘ 1 2. vaihe amidointi ^ "3L ' ^.,R8 H2N öN* R1 1 f COOR8 ™3° «U „ °h . , R‘aOOC ^R ^ . 3. vaihe halogenointi

: T

CH30 r\J1 rs ί’’/ 1 o^Vl 03)

R^ooc”pR

'·'1· 2 · vaihe asyylitioryhmän liittäminen 2 f · 29 1 13656

ch3^AnhRVVRS

RlaS (8a) ° H'r*

R8*OOC

5. vaihe hydrolyysi R4

ch3 O r3\/ c ™j^/-nh4[R

„T >Λ -

HOOC

* f 5 « · lit* ’ · 6. vaihe asylointi • T?4

* *«* · * IV

:¾

RlaS N^S (8c) \"= ° h·* ...: HOOC ^7 113656 30 (1. vaihe) Tässä vaiheessa hydroksyloidaan L-isoleusiinin (9) aminoryhmä tavanomaisella tavalla, jolloin saadaan a-hydroksikarboksyy-5 lihappo (10) . Vaikka hydroksylointi voidaan suorittaa tavallisesti käytetyllä menetelmällä, on edullista suorittaa se joko antamalla L-isoleusiinin (9) reagoida nitraavan aineen kuten natriumnitriitin kanssa laimeassa rikkihapossa tai antamalla L-isoleusiinin (9) reagoida natriumnitriitin kanssa etikkaha-10 possa asetaatin muodostamiseksi, ja suorittamalla sen jälkeen hydrolyysi.

(2. vaihe) 15 Tässä vaiheessa suoritetaan 1. vaiheessa saadun a-hydroksi-karboksyylihapon (10) kondensointi amiinijohdannaisen (11) kanssa tavanomaisella tavalla, jolloin saadaan hydroksikarbok-syyliamidijohdannainen (12).

20 Reaktio voidaan suorittaa tavallisesti käytetyllä menetelmällä. Amidijohdannainen (12) voidaan saada esim. antamalla a- . hydroksikarboksyylihapon (10) reagoida amiinijohdannaisen (11) * · kanssa tavallisesti käytetyn kondensoivan aineen, esim.

: EEDQin, DCC:n, DEC:n tai dietyylisyanofosfonaatin kanssa * 25 inertissä liuottimessa, kuten metyleenikloridi ja tetrahydro-*’*·* f uraani.

(3. vaihe) • » · 30 Tässä vaiheessa halogenoidaan hydroksikarboksyyliamidi johdan- * t ,···, nainen (12) tavanomaisella tavalla, jolloin saadaan a-halokar- boksyyliamidijohdannainen (13).

I t » * 1 ·

Kaikkia tavallisesti käytettyjä menetelmiä voidaan käyttää, 35 kunhan se on menetelmä, jossa käytetään halogenointia yhdis-tettynä avaruudelliseen kääntämiseen. Esimerkkejä näistä menetelmistä ovat (i) menetelmä, jossa sen annetaan reagoida dialkyyliatsodikarboksylaatin, trifenyylifosfiinin ja joko 113656 31 sinkkibromidin tai sinkki jodidin kanssa orgaanisessa liuotti-messa, kuten tetrahydrofuraani, (ii) menetelmä, jossa sen annetaan reagoida organofosforiyhdisteen, kuten trialkyylifos-fiinin, trifenyylifosfiinin ja trifenyylifosfiitin ja halo-5 geeniyhdisteen kanssa, kuten N-halosukkiini-imidin ja bromin/ jodin kanssa orgaanisessa liuottimessa, kuten asetonitrii-li, dimetyyliformamidi ja dikloorimetaani, emäksen kuten pyridiinin läsnäollessa tai ilman sitä, ja (iii) menetelmä, jossa sen annetaan reagoida tosyylikloridin, trifluorime-10 taanisulfonihappoanhydridin tai vastaavan kanssa emäksen, kuten pyridiinin ja trietyyliamiini kanssa inertissä liuottimessa, kuten dikloorimetaani, jolloin syntyy sulfonihappoeste-ri, jonka jälkeen sen annetaan reagoida halogenoivan aineen, kuten litiumhalogenidin kanssa. Erityisen edullinen on 15 menetelmä, jossa sen annetaan reagoida organofosforiyhdisteen, kuten trialkyylifosfiinin, trifenyylfosfiinin ja trifenyyli-fosfiitin ja halogeeniyhdisteen, kuten N-halosukkiini-imidin ja bromin/jodin kanssa orgaanisessa liuottimessa, kuten asetonitriili, dimetyylformamidi ja dikloorimetaani, emäksen, 20 kuten pyridiinin läsnäollessa tai ilman sitä. Erityisen edullinen on menetelmä, jossa käytetään trifenyylifosfiinia . ja bromia reagensseina.

• « • » · : (4. vaihe) ' *25 Tässä vaiheessa liitetään asyylitioryhmä 3. vaiheessa saatuun α-halokarboksyyliamidijohdannaiseen (13), jolloin saadaan a-asyylitiokarboksyyliamidijohdannainen (8a).

,,,.;30 Reaktio voidaan suorittaa tavanomaisella tavalla. o-Asyyli- ·.· tiokarboksyyliamidi johdannainen (8a) voidaan saada esim.

: » T antamalla α-halokarboksyyliamidijohdannaisen (13) reagoida tiokarboksyylihapposuolan, kuten kaliumtioasetaatin ja : natriumtioasetaatin kanssa polaarisessa liuottimessa, kuten 35 asetonitriili ja asetoni, tai antamalla johdannaisen (13) reagoida tiokarboksyylihapon, kuten tioetikkahapon ja tiobent-soehapon kanssa emäksen, kuten kaliumkarbonaatin ja cesiumkar-bonaatin kanssa.

(5. vaihe) 32 1 13656 Tämä vaihe on tarkoitus suorittaa kun R1 ja R8 ovat vetyato-meita, tai kun R1 on asyyliryhmä ja R® on vetyatomi. Toisin 5 sanoen, se on vaihe, jossa (2S,3S)-3-metyyli-2-tiopentaanihap-pojohdannainen (8b) saadaan hydrolysoimalla tavallisella tavalla α-asyylitiokarboksyyliamidijohdannainen (8a), joka saatiin 4. vaiheessa.

10 Se voidaan hydrolysoida tavallisella hydrolyysillä, toisin sanoen laimeassa emäksen, kuten natriumhydroksidin ja litium-hydroksidin vesiliuoksessa, tai mineraalihapon laimeassa vesiliuoksessa. Kun haluttu yhdiste on sellainen, jossa R1 on asyyliryhmä, seuraava 6. vaihe suoritetaan käyttäen saatua 15 (2S,3S)-3-metyyli-2-tiopentaanihappojohdannaista (8b).

(6. vaihe) Tämä vaihe suoritetaan, kun kohdeyhdiste on sellainen, jossa 20 R1 on asyyliryhmä. Toisin sanoen se on vaihe, jossa asyloidaan (2S,3S)-3-metyyli-2-tiopentaanihappojohdannainen (8b), joka saatiin 5. vaiheessa, tavanomaisella tavalla, jolloin saadaan » a α-asyylitiokarboksyyliamidijohdannainen (8c).

• « * • · ’25 Reaktio voidaan suorittaa tavallisesti käytettävällä menetel- * * mällä. α-Asyylitiokarboksyyliamidijohdannainen (8c) voidaan saada esim. antamalla a-merkaptokarboksyyliamidijohdannaisen : : (8b) reagoida asyloivan aineen, kuten happoanhydridin, esim.

etikkahappoanhydridin, ja happohalogenidin kanssa vedettömässä ....:30 liuottimessa, kuten asetonitriili, tetrahydrofuraani ja .···. dikloor imetaani, tai käsittelemällä sitä emäksen, kuten ·' kaliumvetykarbonaatin, natriumvetykarbonaatin ja trietyyli- amiinin läsnäollessa, tai myös kobolttikloridilla vesipitoi- • » * sessa liuottimessa.

•35 » * » * a ,·>·, Kohdeyhdiste voidaan myös saada menetelmällä, jota kuvataan jäljessä, kun on saatu a-halohydroksikarboksyyliamidijohdannainen (13) hydroksyloimalla L-isoleusiini ja kondensoimalla 113656 33 se amiini johdannaisen (11) kanssa valmistusprosessin 5 mukaan. Valmistusprosessi 6 5 3 R4 H3C O r\J fj s X 6 03)

RIjOOCr7R

1. vaihe hydrolyysi p3 R4 H4 9 V^r5 cH3sA/NHjjr X (14) HOOC~r7r6 ( a t > I « * * · » · .* 2. vaihe asyy litioryhmän i * * * liittäminen v 1 » : : n3 r4 0 H3C O RyT rs ch3 nh

RlaS 0^N S (8c) '·"· ^ f-R6 HOOC r7k i * * » * » »

1 ! I

a · * ·

* I I

tilli a a a » a • · * a l < a 113656 34 (1. vaihe) Tässä vaiheessa hydrolysoidaan valmistusmenetelmän 5 3.

vaiheessa saatu α-halokarboksyyliamidijohdannainen (13) 5 tavallisella tavalla, jolloin saadaan karboksyylihappo (14).

Se voidaan hydrolysoida tavallisella hydrolyysillä, toisin sanoen laimeassa emäksen, kuten natriumhydroksidin ja litium-hydroksidin vesiliuoksessa tai mineraalihapon laimeassa vesi-10 liuoksessa.

(2. vaihe) Tässä vaihessa liitetään asyylitioryhmä a-halokarboksyyliami-15 di johdannaiseen (14) , joka saatiin 1. vaiheessa, jolloin syntyy o-asyylitiokarboksyyliamidijohdannainen (8c). Reaktio suoritetaan tavanomaisella tavalla. α-Asyylitiokarboksyyliamidijohdannainen (8c) voidaan saada esim. antamalla a-halokarbok-syyliamidijohdannaisen (14) reagoida tiokarboksyylihappo-20 suolan, kuten kaliumtioasetaatin ja natriumtioasetaatin kanssa polaarisessa liuottimessa, kuten asetonitriili, dimetyylisul-foksidi ja asetoni, tai antamalla johdannaisen (14) reagoida | tiokarboksyylihapon, kuten tioetikkahapon ja tiobentsoehapon ♦ 1 2 · i kanssa emäksen, kuten kaliumkarbonaatin ja cesiumkarbonaatin 25 läsnäollessa.

* 1 • US 4415496 ja US 4617301 esittävät yleiskaavan (II) mukaisten amiinien joukossa amiinit (II7''), joissa kaikki ryhmistä R3, R4 ja R5 ovat vetyatomeita. Näiden amiinien (II/##) valmistus- : ·· 30 menetelminä on tähän asti tunnettu menetelmä, joka on kuvattu US 4415496:ssa ja jossa käytetään (S)-2-amino-6-hydroksihek- • · ·

‘a saanihappoa lähtöaineena, sekä menetelmä, joka on kuvattu US

2 :·1 4617301:ssä ja US 5118810:ssa, jossa käytetään ε-Ν-BOC-L- lysiiniä lähtöaineena. On kuitenkin vaikea sanoa, että ope-35 raatiot ovat edullisia, koska lähtöaineet ovat vaikeasti saatavia, ja ne vaativat monta vaihetta, ja ioninvaihtohartsia ja paljon Raney-nikkeliä kaikissa niissä. Valmistusmenetelmät, joita kuvataan jäljessä ovat sellaisia, jotka tekevät mahdol- 113656 35 liseksi valmistaa ei vain amiineja (II'"), joiden teollinen tuotanto oli huomattavan rajoitettua toiminnallisissa ja teollisissa suhteissa, vaan myös amiineita, joissa mitkä tahansa yksi tai kaksi tai useampi ryhmistä R3, R4 ja R5 ovat 5 muita ryhmiä kuin vetyjä, ja joita ei voitaisi helposti valmistaa valmistusmenetelmillä, jotka esitettiin amiinien (II'") valmistusmenetelminä, pienin kustannuksin suurella saannolla edullisella toimintatavalla.

10 Valmistusmenetelmä A

kN^COOH

H

1. vaihe N-asylointi R4 RVvR3 (16)

UN^COOH

Z

• · · « ·

IMI

• · • » · M : 2. vaihe esteröinti

....· V

* · R4 .···’ (2·) ^N^COOR11 » | • « · » » ·;·’ 3. vaihe 'elektrolyyttinen . v hapetus ::· R!^XR3 R12O^N XOOR11 z 113656 36 RVV (3·) r^o^n^coor11 z konversio , , ‘ tiatsolidiiniksi *\/ .

' 4. vaihe -:- ^X^OOR- (4·) v NH2

R3 RJ

RnOOC. 1 1/S R7 TT 1/R< (5·)

ZHN R4 HN

COOR** 5. vaihe esteriryhmän suojauksen poisto R3 R5 H0°cJvTySvRl Y Y \ Tr‘ ZHN R4 HN_C ..

COOR** . 6. vaihe ~ sykliaointi laktaamiksi * * * * ’ R4 R5 τ:; ζ,ΤΥγ'Τ : : O * v /) COOR8 ···* 7. vaihe aminoryhmän suojauksen poisto : r4 r5 ·:··! Y * ' h2n ^ιΓN Y^" R4 O') o » .

COOR1* 113656 37 (kaavasarjassa R3, R4 ja R5 ovat kukin toisistaan riippumatta vetyatomi, alempi alkyyliryhmä, alempi alkoksyyliryhmä, alempi alkyylitioryhmä, aryyliryhmä, jolla voi olla substituentti, tai heteroaryyliryhmä, jolla voi olla substituentti, tai 5 vaihtoehtoisesti R3, R4 tai R5 voi muodostaa renkaan yhdessä hiiliatomin kanssa, johon se on sitoutunut, sillä edellytyksellä, että se tapaus, jolloin R3, R4 ja R5 ovat vetyatomeita, on poissuljettu; 10 R6 ja R7 ovat kumpikin toisistaan riippumatta vetyatomi, alempi alkyyliryhmä, aryyliryhmä, joka voi olla substituoitu, tai aryylialkyyliryhmä, joka voi olla substituoitu; R2* on karboksyyliryhmän suojaryhmä; R12 on ryhmä, joka muodostaa aldehydiekviValentin yhdessä endosyklisen typpiatomin kanssa; 15 ja Z on asyyliryhmä tai karbamaattiryhmä).

(1. vaihe) Tässä vaiheessa asyloidaan optisesti aktiivinen (2S)-pipe-20 koliinihappojohdannainen (15), jolloin saadaan N-asyylipipeko- liinihappojohdannainen (16). Yhdiste (16) voidaan saada tavanomaisella asyloinnilla. Yhdiste (16) voidaan saada esim.

* * · :··: antamalla yhdisteen (15) reagoida happoanhydridin, kuten : etikkahappoanhydridin kanssa lämpötilassa huoneenlämmöstä 25 100°C:een, tai antamalla yhdisteen (15) reagoida happohalo- genidin, kuten asetyylikloridin ja bentsoyylikloridin kanssa ·;··; emäksen, kuten pyridiinin ja dimetyyliaminopyridiinin kanssa lämpötilassa 0°C:sta huoneenlämpötilaan, tai edelleen niin kutsutulla Schotten-Baumann-reaktiolla, jossa annetaan yhdis- . 30 teen (15) reagoida happoanhydridin tai happohalogenidin kanssa • · ... emäksen, esim. natriumhydroksidin, natriumkarbonaatin tai ·;·* natriumvetykarbonaatin läsnäollessa.

: ”’: (2. vaihe) Λ 35 ... Tässä vaiheessa esteröidään 1. vaiheessa saadun N-asyylipipe- ’·*·’ koliinihappo johdannaisen (16) karboksyylihappo, jolloin syntyy esteri (2'). Esteriryhmä on edullisesti ryhmä, josta voidaan 113656 38 poistaa suojaus sellaisissa olosuhteissa, joissa tavalliset alkyyliesterit eivät hydrolysoidu esterin, kuten t-butyylies-terin, bentsyyliesterin, joka voi olla substituoitu metoksi-ryhmällä tai vastaavalla ja alkyylisilyylietyyliesterin, 5 suojauksenpoiston aikana. Kun valmistetaan t-butyyliesteri, se voidaan syntetisoida antamalla yhdisteen (16) reagoida isobutyleenin kanssa eetteriliuottimessa, kuten dioksaani, ja tetrahdydrofuraani, tai orgaanisen liuottimen, kuten dikloori-metaani, happokatalyytin, kuten rikkihapon ja p-tolueenisul-10 fonihapon läsnäollessa, tai antamalla yhdisteen (16) reagoida t-butanolin kanssa kondensoivan aineen, kuten disykloheksyyli-atsodikarboksylaatin (DCC) ja 1- (3-dimetyyliaminopropyyli) -3-etyylikarbodi-imidin (DEC) läsnäollessa. Samalla kun valmistetaan esteri, kuten bentsyyliesteri, metoksibentsyyliesteri ja 15 alkylisilyylietyyliesteri, voidaan yhdiste (2') saada suorittamalla esteröinti esteröivällä aineella, kuten bentsyylihalo-genidi, metoksibentsyylihalogenidi ja alkyylisilyylietyyliha-logenidi, emäksen, kuten kaliumkarbonaatin, natriumkarbonaatin ja alkyyliamiinin läsnäollessa inertissä orgaanisessa liuotti-20 messa, kuten tetrahydrofuraani, dimetyyliformamidi ja dikloo-rimetaani.

‘.(3. vaihe) :·:25 Tässä vaiheessa suoritetaan elektrolyyttinen hapetus 2. ·;·; vaiheessa saadulle pipekoliinihappo johdannaiselle (2'), *:·; jolloin saadaan hemiasetaali (3').

Elektrolyyttinen hapetus voidaan suorittaa erilaisissa . 30 olosuhteissa. Hemiasetaali (3') voidaan saada esim. elektrolyyttisesti hapettamalla yhdiste (2') platina, hiili, ruostu-·;·* maton teräs, lyijyoksidi tai vastaava elektrodina käyttäen : tukielektrolyyttinä elektrolyyttiä, joka lisää sähkönjohta- vuutta vesijärjestelmässä tai orgaanisessa liuotinjärjestel- » * · • . 35 mässä, kuten tetra-alkyyliammoniumperkloraatteja, esim. tetra- ’ ^ * etyyliammoniumperkloraatti tai tetrametyyliammoniumperkloraat- » · -·· ti; alkalimetallisuoloja, esim. natriiimperkloraattia tai litiumperkloraattia; tetra-alkyyliammoniumsulfonaatteja, esim.

113656 39 tetraetyyliammonium-p-tolueenisulf aonaatti; tetra-alkyyliam-moniumtetrafluoriboraatteja; ja tetraalkyyliammoniumheksa-fluorifosfaatteja, liuottimessa, kuten vesi/asetonitriili-järjestelmä, vesi/alkoholi-järjestelmä ja vesi/etikkahappo-5 järjestelmä. Yleensä käytetty kulkenut virran määrä on 2 F moolia kohti tai enemmän, perustuen käytettyyn yhdisteeseen (2'). Erityisesti tapaus, jossa elektrodina käytetään platinaa tai hiiltä, ja tukielektrolyyttinä tetraetyyliammoniumperklo-raattia, tetraetyyliammoniumtetrafluoriboraattia, tetrametyy-10 liammoniumheksafluorifosfaattia tai tetraetyyliammonium-p- tolueenisulfonaattia, antaa parempia tuloksia.

(4. vaihe) 15 Tässä vaihessa annetaan 3. vaiheessa saadun hemiasetaalin (3) reagoida L-kysteiiniesterijohdannaisen (4) kanssa, jolloin saadaan tiat solidiini johdannainen (5). Tiatsolidiini johdannainen (5) voidaan saada lisäämällä L-kysteiiniesterijohdannaista (4) reaktiojärjestelmään 3. vaiheen suorittamisen jälkeen 20 eristämättä hemiasetaalia (3) käsittelyn suorittamiseksi.

(5. vaihe) * · : Tässä vaiheessa selektiivisesti poistetaan suojaryhmä karbok- 25 syylihaposta, jota esittää Ru 4. vaiheessa saadussa tiatsoli-diinijohdannaisessa (5'), jolloin saadaan karboksyylihappojoh-·:··; dannainen (6'). Karboksyylihappo johdannainen (6') voidaan saada käsittelemällä sitä de-t-butyloivalla aineella, kuten trifluorietikkahapolla, vetykloridihapolla ja joditrimetyy-_>i; 30 lisilaanilla, kun yhdiste (5') on t-butyyliesteri, tai muulla ... tavalla, jolla tavallisesti voidaan poistaa suojaus vain vastaavasta esterisuojaryhmästä, esimerkiksi katalyyttisesti hydraamalla, vetykloridihapolla, 2,3-dikloori-5,6-disyaani- 1,4-bentsokinonilla (DDQ) tai tetra-alkyyliammoniumfluoridil-‘ . 35 la, kun yhdiste (5') on esteri, kuten bentsyyliesteri, metok-sibentsyyliesteri ja alkyylisilyylietyyliesteri.

(6. vaihe) 40 113 6 56 Tässä vaiheessa syklisoidaan tiatsolidiinikarboksyylihappojoh-dannainen (6'), joka saatiin 5. vaiheessa kondensoimalla, 5 jolloin saadaan aminohappojohdannainen (7'). Syklisointi voidaan suorittaa tavanomaisella kondensoivalla aineella. Aminohappojohdannainen (7') syklisenä voidaan saada esim. antamalla yhdisteen (6') reagoida 2-etoksi-l-etoksi-l,2-dihydrokinoliinin (EEDQ), DCC:nf DEC:n tai vastaavan kanssa 10 liuottimessa, kuten etanoli, tetrahydrofuraani ja dikloorime-taani.

(7. vaihe) 15 Tässä vaiheessa suoritetaan 6. vaiheessa saadussa aminohappo- johdannaisessa (7') olevan N-asetyylisuojaryhmän poisto, jolloin saadaan aminohappo johdannainen (1'). Vaikka tunnetaan erilaisia N-asetyyliryhmän poistotapoja, kohdeaminohappo voidaan saada esim. kuumentamalla sitä laimean mineraalihapon, 20 kuten vetykloridihapon ja rikkihapon alkoholiliuoksessa, käsittelemällä sitä natriumhydroksidin, kaliumhydroksidin tai ·' vastaavan alkoholiliuoksella, tai antamalla sen reagoida !"! f osf oripentakloridin tai oksalyylikloridin kanssa pyridiinis- [ sä, jonka jälkeen käsitellään alkoholilla.

: ·.· 25

*Valmistusmenetelmä B

: : Valmistusprosessin Ai. ja 2. vaihe voidaan suorittaa myös seuraavalla menetelmällä: 30 rO\^r3 T T (15)

;···; N^COOH

H

* · vaihe esteröinti 35 113656 41 R< R5\A.R5 li „ (17)

N ^COOR11 H

5 2. vaihe N-asylointi i° rvV3 n^coor11 (1) z (kaavasarjassa R3, R4 ja R5 ovat kukin toisistaan riippumatta 15 vetyatomi, alempi alkyyliryhmä, alempi alkoksyyliryhmä, alempi alkyylitioryhmä, aryyliryhmä, jolla voi olla substituentti, tai heteroaryyliryhmä, jolla voi olla substituentti, tai vaihtoehtoisesti R3, R4 tai R5 voi muodostaa renkaan yhdessä hiiliatomin kanssa, johon on sitoutunut, sillä edellytyksellä, 20 että se tapaus, jossa R3, R4 ja R5 ovat kaikki vetyatomeita, on poissuljettu; R11 on karboksyyliryhmän suojaryhmä; ja Z on asyyliryhmä tai ’ : ; karbamaattiryhmä).

25 • (1. vaihe) : : Tässä vaiheessa t-butyyliesteröidään optisesti aktiivinen (2S)-pipekoliinihappojohdannainen (15), jolloin saadaan esteri 30 (17). Esteri (17) voidaan saada samalla tavalla kuin kuvattiin , *·. valmistusmenetelmän A 2. vaiheessa, toisin sanoen antamalla ·' yhdisteen (2) reagoida isobutyleenin kanssa orgaanisessa ' liuottimessa, kuten dioksaani ja tetrahydrofuraani, happokata- ! * · : lyytin, kuten rikkihapon ja p-tolueenisulfonihapon läsnäolles- 35 sa, tai antamalla yhdisteen (2) reagoida t-butanolin kanssa kohderisoivan aineen, kuten disykloheksyyliatsodikarboksylaatin (DCC) ja 1-(3-dimetyyliaminopropyyli)-3-eyylikarbodi-imidin (DEC) läsnäollessa.

(2, vaihe) 42 1 13656 Tässä vaiheessa asyloidaan 1. vaiheessa sadun esterin (17) typpiatomi, jolloin saadaan asyylipipekoliinihappojohdannainen 5 (2). Yhdiste (2) voidaan saada samalla tavalla kuin kuvattiin valmistusmenetelmän A 1. vaiheessa. Toisin sanoen, yhdiste (2) voidaan saada antamalla yhdisteen (17) reagoida happoanhydri-din, kuten etikkahappoanhydridin kanssa lämpötilassa huoneenlämmöstä 100°C:een, tai antamalla yhdisteen (15) reagoida 10 happohalogenidin, kuten asetyylikloridin ja bentsoyylikloridin kanssa emäksen, kuten pyridiinin ja dimetyyliaminopyridiinin läsnäollessa lämpötilassa 0°C:sta huoneenlämpöön, tai edelleen niin kutsutulla Schotten-Baumann-reaktiolla, jolloin yhdisteen (15) annetaan reagoida happohalogenidin kanssa emäksen, esim. 15 natriumhydroksidin tai natriumvetykarbonaatin läsnäollessa.

Valmistusmenetelmä C

Kun R5 on haarautunut alkyyliryhmä, se voidaan valmistaa myös 20 seuraavalla menetelmällä: R4

; l CT

N^COOH (18’) * « # · !· valhe elektrolyyttinen hapetus • · t · R4 rY' ·;·1 RMO^N^1COOH (19’) : z • I · · „ 113656 43 R4 Λ” ., N COOR Z 5 3. vaihe asylointi '· 10 r,,VxR> ^N^XOOR11 (4i) z 4. vaihe pelkistys 15 R4 R»-VY3 S^COOR" ....

20 I (42)

Z

(1. vaihe) Tässä vaiheessa suoritetaan elektrolyyttinen hapetus ta- • : ; vanomaisella tavalla saadulle pipekoliinihappojohdannaiselle • : ti * *25 (18') tai tavanomaisella tavalla, jolloin saadaan hemiasetaali • (19'). Elektrolyyttinen hapetus voidaan suorittaa erilaisissa olosuhteissa. Hemiasetaali (19') voidaan saada esim. hapetta-: \* maila elektrolyyttisesti yhdiste (18') käyttäen platinaa, hiiltä, ruostumatonta terästä, lyijyoksidia tai vastaavaa 30 elektrodina, ja käyttämällä tukielektrolyyttinä alkalimetal-.···. lisuolaa, kuten tetraetyyliammoniumperkloraattia ja tetrame- ·* tyyliammoniumperkloraattia, tetra-alkyyliammoniumheksafluori- • :.* fosfaattia, kuten tetraetyyliammonium-p-tolueenisulfonaattia 1 I · : tai vastaavaa liuottimessa, kuten vesi/alkoholi-järjestelmä ,: 35 ja vesi/etikkahappojärjestelmä. Yleensä käytetty läpikulkeneen « virran määrä on 2 F moolia kohti käytettyä yhdistettä (18') tai enemmän. Erityisesti se tapaus, jossa elektrodina käytetään platinaa tai hiiltä ja tukielektrolyyttinä tetraetyyliam- 113656 44 moniumtetrafluoriboraattia tai tetrametyyliammoniumheksa-fluorifosfaattia, antaa parempia tuloksia.

(2. vaihe) 5 Tässä vaihessa suoritetaan 1. vaiheessa saadulle hemiasetaa-lille (19') 1,2-eliminaatio, jolloin saadaan iminojohdannainen (40). Yhdiste (40) voidaan saada tavanomaisella eliminaatiol-la, kuten happokatalyytillä ja termisellä reaktiolla.

10 (3. vaihe) Tässä vaiheessa asyloidaan 2. vaiheessa saatu imimojohdannainen (40), jolloin saadaan ketoni (41). Yleensä siihen voidaan 15 liittää erilaisia asyyliryhmiä käyttämällä hyväksi elektrofii-listä substituutioreaktiota iminoryhmään. Ketoni (41) voidaan saada esim. Volsmeierin menetelmällä, joka suoritetaan inertissä liuottimessa, kuten dikloorimetaani, kloroformi ja dimetyyliformamidi, käyttämällä fosforioksikloridia, tionyyli-20 kloridia tai vastaavaa, formylaatiomenetelmällä, kuten

Gatterman-Koch-menetelmä, tai Friedel-Crafts-menetelmällä . käyttäen alumiinikloridia, titaanitetrakloridia tai vastaavaa.

• · · · j (4. vaihe) ' *25 ‘ ‘ Tässä vaihessa pelkistetään 3. vaiheessa saadun ketonin (41) : karbonyyliryhmä, jolloin saadaan metyleeniyhdiste (42).

: Ketonin pelkistys voidaan suorittaa tavanomaisella tavalla.

Metyleeniyhdiste (42) voidaan saada esim. katalyyttisellä ....:30 hydrauksella, Wolff-Kishner-pelkistyksellä käyttäen hydratsii- .···. nia tai pelkistyksellä käyttäen hydrosilaania, kuten trikloo- ’>* risilaania ja trietyylisilaania.

• > · I I · * » ·

:,,,ϊ Valmistusmenetelmä D

35

Kun R5 on haarautunut alkyyliryhmä, se voidaan valmistaa myös seuraavalla menetelmällä: 113656 45 0 f s *“VxR3 N COOK" (4 z 10 1.vaihe ^ Witti8-reaktLo ,Ä.· 7 C00Rl1 (44)

XD Z

2.vaihe pelkistys ' 20 oli p23 K yR K4 . Rl,\VR3 = 7: 7 C00R" (45) ... . z 25 « · i < « · · • · t * • a • i · (1. vaihe) ____; 30 « · Tässä vaihessa muutetaan valmistusmenetelmän C 3. vaiheessa • · ;* saadun asyyliyhdisteen (43) karbonyyli olefiiniksi, jolloin saadaan olefiiniyhdiste (44). Olefiiniyhdiste (44) voidaan : saada muuttamalla karbonyyli olefiiniksi, esim. Wittig- ' . 35 reaktiolla käyttäen alkylidiinifosforaania ja vahvaa emästä, kuten natriumamidia ja n-butyylilitjumia, tai Hornerin • · ”** menetelmällä käyttäen fosfonihappoesteriä.

(2. vaihe) 46 1 13656 Tässä vaiheessa pelkistetään 1. vaiheessa saadun olefiiniyh-disteen (44) kaksoissidos, jolloin saadaan tyydyttynyt 5 johdannainen (45) . Tyydyttynyt johdannainen (45) voidaan saada tavanomaisella reaktiolla kaksoissidoksen pelkistämiseksi, esimerkiksi katalyyttisesti hydraamalla.

Kuten edellä kuvattiin, voidaan tämän keksinnön yhdisteet 10 valmistaa myös teollisesti edullisesti, ja ovat erinomaisia yhdisteitä myös tässä suhteessa.

Seuraavassa kuvataan farmakologisia kokeellisia esimerkkejä tämän keksinnön käyttökelpoisuuden esittämiseksi yksityiskoh-15 taisesti.

Farmakologinen kokeellinen esimerkki 1 Lääkkeiden NEP-inhibiittorivaikutusten määrittäminen rotan munuaiskuorella 20 1. Koemenetelmä « NEP-aktiivisuus määritettiin membraanifraktiolla, joka t · '.· · preparoitiin rotan munuaiskuoresta Boothin ja Kennyn menetel- 25 män mukaan (A Rapid Method for the Purification of Microvilli • ;1'1 from Rabbit Kidney, Andrew G. Booth and A. John Kenny,

Biochem. J., 1974, 142, 575-581) .

t « t » NEP-aktiivisuus määritettiin Orlowskyn ja Wilkin menetelmän . 30 mukaan (Purification and Specificity of a Membrane-Bound • I » 1

Metalloendopeptidase from Bovine Pituitaries., Marian Orlowsky • « >·’ and Shrwin Wiik, Biochemistry, 1981, 20, 4942-4950) seuraaval- : la menetelmällä.

t · • · _ 35 Substraattina käytettiin bentsoyyli-glysyyli-arginyyli- » » 1 t · arginyyli-2-naftyyliamidia (bentsoyyli-Gly-Arg-Arg-2-naftyy-liamidia (Nova Biochem., Sveitsi)). NEP-entsyyminäytteen läsnäollessa vapautunut naftyyliamiini ja ylimäärä leu- 113656 47 siiniaminopeptidaasia (Sigma Chemical Co., USA) värikehitet-tiin ensimmäisellä syvänpunaisella värillä (Sigma Chemical Co., USA), ja absorbanssi määritettiin aallonpituudella 540 nm.

5 NEP-inhibiittoriaktiivisuus määritettiin lisäämällä koeyhdiste edellolevaan koejärjestelmään lopullisten konsentraatioiden ollessa 1, 3, 10, 30, 100, 300 ja 1000 nM, jolloin muodostui inhibiitiokäyrä, ja määritettiin konsentraatio, jossa 50% 10 aktiivisuudesta inhiboitui, tämä oli IC50. Vertailuyhdisteenä käytettiin [4S-(4a,7a(R*), 12 bp)]-7-[(l-okso-2(S)-tio-3- f enyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyri-do[2,1-a]-[2]-bentsatsepiini-4-karboksyylihappoa (joka on japanilaisessa patenttijulkaisussa A nro 6-56790 esitetty 15 yhdiste).

2. Koetulokset

Edelläolevan kokeen tulokset annetaan jäljessä olevassa 20 taulukossa 1.

, Farmakologinen kokeellinen esimerkki 2 * * » Lääkkeiden ACE-inhibiittorivaikutusten määrittäminen rotan

» » — 1 1—^^— -I» - — ........—. — —II. .1 I I ... I ΙΙΙ·.ΙΙ· I

« » * : keuhkoilla *25 ; 1. Koemenetelmä ACE-inhibiittorivaikutusta tutkittiin membraanifraktiolla, * * * joka oli preparoitu rotan keuhkoista Wu-Wong et ai. :n menetel-,,,,:30 män mukaan (Characterization of Endothelin Converting Enzyme ,..., in Rat Lung, Junshyum R. Wu-Wong, Gerald P. Budzik, Edward M.

‘ Devine and Terry J. Opgenorth, Biochem. Biophys. Res. Commun., ··,;[: 1990, 171, 1291-1296).

« i « • » t · • I « ti|,;35 ACE-aktiivisuus määritettiin Cushman-Cheung-menetelmää i · ... modifioimalla (jossa boraattipuskurin pH muutettiin 8,3:een) "** (Spectrophotometric Assay and Properties of the Angiotensin- 113656 48

Converting Enzyme of Rabbit Lung., Cushman D.W. and Cheung H.S., 1971, 20, 1637-1648).

Hippuryyli-histidyyli-leusiinista (Hippuryyli-His-Leu (Pepti-5 deinstitute Inc., Japani)) ACE:n läsnäollessa vapautunut hippuraatti uutettiin etyyliasetaatilla, ja absorbanssi määritettiin aallonpituudella 228 nm.

ACE-inhibiittorivaikutus määritettiin lisäämällä koeyhdiste 10 edelläolevaan koejärjestelmään lopullisten konsentraatioiden ollessa 1, 3, 10, 30, 100, 300 ja 1000 nM, jolloin muodostui inhibiitiokäyrä, ja määritettiin konsentraatio, jossa 50% aktiivisuudesta inhiboitui, tämä oli IC50. Vertailuyhdisteenä käytettiin [4S-(4a,7a(R1), 12 bp)]-7-[(l-okso-2(S)-tio-3- 15 f enyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyri- do[2,l-a]-[2]-bentsatsepiini-4-karboksyylihappoa (joka on japanilaisessa patenttijulkaisussa A nro 6-56790 esitetty yhdiste).

20 2. Koetulokset

Edelläolevalla koemenetelmällä suoritetun kokeen tulokset on ! annettu taulukossa 1.

Il» • « · « · · • » » 113656 49 NEP- ja ACE-inhibiittorivaikutukset esimerkkiyhdisteellä ja vertailuyhdisteellä 5 NEP-inhibiittori- ACE-inhibiittori- vaikutus IC50 (nM) vaikutus IC50(nM)

Esim.3 4,3 2,5

Esim. 11 6,7 2,2

Esim. 24 1,5 2,5

Esim. 9 13 5,1 10 Esim. 10 12 4,3

Vert.yhd.*1 27 9 huom.) *1 Vertailuyhdiste:[4S-(4a,7o(R*), 12 bP)]-7-[(l-okso-2(S)-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-15 oksopyrido[2,l-a]-[2]-bentsatsepiini-4-karboksyylihappo (yhdisteen merkintä MDL-100,173) - Esimerkit * · · 11 1 * | * f t 20 Seuraavassa kuvataan esimerkkejä tämän keksinnön ymmärtämisen helpottamiseksi edelleen; on kuitenkin tarpeetonta sanoa, että tämä keksintö ei rajoitu niihin. Ennen esimerkkejä kuvataan . synteesiesimerkkeinä valmistusesimerkkejä yhdisteistä, joita käytetään lähtöyhdisteinä tämän keksinnön yhdisteiden valmis-25 tamiseksi.

• ‘ Svnteesiesimerkki 1 • ·. Etwli-S-metwlipyridiini^-karboksvlaatti 30 Mtn N COOEt 113656 50 200 ml etanolia ja 100 ml (1,88 mol) konsentroitua rikkihappoa lisättiin 55,5 g:aan 5-metyylipyridiini-2-karbonitriiliä homogeenisen liuoksen muodostamiseksi, jonka jälkeen sitä kuumennettiin palautusjäähdytyksessä 2 päivää. Reaktioneste 5 kaadettiin vähän kerrallaan natriumvetykarbonaatin kyllästettyyn vesiliuokseen jäillä jäähdyttäen rikkihapon neutralointi -seksi, jonka jälkeen uutettiin dikloorimetaanilla. Orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä tavallisen suolan vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Suodatuksen 10 jälkeen suodos konsentroitiin alipaineessa, jolloin saatiin 78,1 g ruskeata öljyä otsikon yhdisteestä epäpuhtaana tuotteena.

15 1H_NMR {400MHz- CDC13)<5; 8.57 (1H. m), 8.03 (1H, dt, J = 8.0, 0.5Hz), 7.63 (1H, ddd, J = 1.0, 2.5, 8.0Hz), 4.47 (2H, q, J = 7.0Hz), 2.42 (3H, s), 1.44 (3H, t, J = 7.0Hz).

20

Svnteesiesimerkki 2 ,:. 2-Karboksi-5-metwlipvridiinikloridi > Men

:··: N COOH

HCt ...·' 78,1 g synteesiesimerkissä 1 saatua etyyli-5-metyylipyridiini- 2-karboksylaatin epäpuhdasta tuotetta liuotettiin 200 ml:aan ·;··· 30 6N-vetykloridihappoa, jonka jälkeen kuumennettiin palautus- • jäähdytyksessä 16 tuntia. Reaktioliuos konsentroitiin alipaineessa. Sitten jäännökseen lisättiin asetonitriiliä, ja näin • · · saostuneet valkoiset kiteet otettiin talteen suodattamalla, • · *··* pestiin asetonitriilillä ja kuivattiin 90°C:ssa, jolloin 35 saatiin 26*3 g otsikon yhdistettä. Saanto 37%.

:···: 1H-NMR (400MHz, CDC13)$; 8.51 (1H, m), 8.37 (1H, ra), 8.21 (1H, d, J = 8.0Hz), 2.42 (3H, s).

5 51 113656

Svnteesiesimerkki 3 (2S*.5S*l-2-Karboksi-5-metwlipiperidiinikloridi ia (2S*.5R*1-2-karboksi-5-metwlipiperidiinikloridi CH3*V^s1 (D- ja ^-i*30111001^) ^N'StOOH H *HCI syn:anti=3:l 10 26,3 g (151 mmol) synteesiesimerkissä 2 saatua 2-karboksi-5- metyylipyridiinikloridia liuotettiin 300 ml:aan etanoli-vesi-seosta (1:1). Sitten lisättiin 2 g platinaoksidia, jonka jälkeen hydrattiin 50°C:ssa ja paineessa n. 1600 kPa (16 atm) yön yli. Kun katalyytti oli poistettu suodattamalla, suodos 15 konsentroitiin alipaineessa, ja näin saadut valkoiset kiteet kuivattiin 90°C:ssa, jolloin saatiin 27,0 g otsikon yhdistettä seoksena (diastereomeerisuhde 3:1). Saanto 99%.

2Q 1H-NMR (400MHz, D20) δ ; 4.06 (3/4H. t, J = 5.0Hz), 3.71 (1/4H, m), 3.24 (1/4H, ddd, J = 1.5, 4.0, 13.0Hz), 3·10 (3/4H* dd- J = 4.5, 13.0Hz), 2.82 (3/4H, dd, J= 10.0, 13.0Hz) : 2·53 (1/4H· *· J = 13.0Hz), 2.22-2.04 (1H, m), 1.90-1.52 (2H, m), ‘:";25 1.22-1.04 (1H, m), 0.82 (3x3/4H, d, J = 7.0Hz), ’ ! 0.81 (3xl/4H, d, J = 7.0Hz).

• · • · ·:·· 30 Svnteesiesimerkki 4 (2S*.5S* \ -N-Asetwli-5-metwlipiperidiini-2-karboksvvlihappo * * * I I · • * ·

CH

35 (D- ja L-isomeerit)

N^COOH

...· Ac 52 113656 27,0 g (150 mmol) synteesiesimerkissä 3 saatua (2S*,5S*)-2-karboksi-5-metyylipiperidiinikloridin ja (2S*, 5R*) -2-karboksi- 5-metyylipiperidiinikloridin seosta suspendoitiin 700 ml:aan dikloorimetaania. Sitten lisättiin 21 ml (150 mmol) trietyy-5 liamiinia, jonka jälkeen sekoitettiin huoneenlämmössä 2 tuntia. Valkoiset kiteet otettiin talteen suodattamalla, pestiin dikloorimetaanilla ja kuivattiin sitten 50eC:ssa, jolloin saatiin 15,9 g (2S*,5S*)-5-metyylipiperidiini-2-karboksyyli-happoa. Saanto 74%.

10 15,9 g (111 mmol) edellä kuvattua (2S*,5S*)-5-metyylipiperi-diini-2-karboksyylihappoa liuotettiin 220 ml:aan dikloorime-taanin ja veden seosta (1:1). 93,3 g (1,11 mol) natriumvety-karbonaattia ja 21,0 ml (222 mmol) etikkahappoanhydridiä 15 lisättiin tässä järjestyksessä huoneenlämmössä, jonka jälkeen sekoitettiin 3 päivää. Reaktioliuos kaadettiin 6N vetykloridi-happoon jäillä jäähdyttäen, ja uutettiin sitten kloroformilla. Sitten orgaaninen kerros kuivattiin vedettömällä natriumsul-faatilla. Suodatuksen jälkeen suodos konsentroitiin alipai-20 neessa, jolloin saatiin 20,1 g otsikon yhdistettä värittömänä öljynä. Saanto 98%.

1H-NMR (400MHz, CDC13) δ ; 10.17 (1H, br), 5.41 (1H, d, J = 5.5Hz), 4.54-4.44 (2xl/4H, m), 3.62 (1H, dd, J = 4.5, 13.5Hz), 2·90 (]H- dd· J= 12.0, 13.5Hz), 2.39-2.26 (2x3/4H, m), O 2.17 (3x3/4H, s), 2.13 (3xl/4H, s), 1.96-1.52 (2H, m), . 30 1.15-1.03 (1H, m), 0.92 (3x3/4H, d, J = 6. 5Hz), 0.90 (3xl/4H, d, J = 7.0Hz).

35 53 113656

Synteesiesimerkki 5 t-Butwli-12S1. 5S1) -N-asetwli-5-metwlipiperidvvli-2-karbok-svlaatti 5 CH3V^ (D- ja L-isomeerit) ^N^COO-b-Bu

Ac 16,3 g (88 mmol) synteesiesimerkissä 4 saatua (2S1,5S1)-N-10 asetyyli-5-metyylipiperidiini-2-karboksyylihappoa liuotettiin 180 ml saan dikloorimetaania, ja lisättiin 6,1 ml (0,11 mol) konsentroitua rikkihappoa. Sitten reaktiojärjestelmään syötettiin isobutyleenikaasua, jonka jälkeen sekoitettiin huoneenlämmössä 4 päivää. Reaktioliuos kaadettiin natriumkar-15 bonaatin kyllästettyyn vesiliuokseen jäillä jäähdyttäen, jonka jälkeen uutettiin kloroformilla. Orgaaninen kerros pestiin natriumvetykarbonaatin kylläisellä vesiliuoksella ja tavallisen suolan kylläisellä vesiliuoksella, ja kuivattiin sitten vedettömällä natriumsulfaatilla. Suodatuksen jälkeen suodos 20 konsentroitiin alipaineessa, jolloin saatiin 16,4 g otsikon yhdistettä värittömänä öljynä. Saanto 77%.

f.:': 1H-NMR (400MHz, CDC13)<5; 5.26 (1H, dd. J = 1.0, 6.0Hz), ':"; 25 4.50-4.32 (3/4H, m), 3.59 (1H, dd, J = 4.5, 13.0Hz), 2.90 (1H, dd, J.= 12.0, 13.0Hz), 2.30-2.17 (5/4H, m), • · .··. 2.13 (3x3/4H, s), 2.07 (3xl/4H, s), 1.73-1.56 (2H, m), 1.47 (9x1/4H, s), 1.46 (9x3/4H, s), 1.05-0.94 (1H, ra), 30 0.91 (3x3/4H, d, J = 6.5Hz), 0.90 (3xl/4H, d, J = 7.0Hz).

• 1 # • » · • « « 35 » 113656 54

Svnteesiesimerkki 6

Metyyli-(2RS.4R1-2-Γ (2S.4S1 -4-asetvvliamino-4-(t-butoksikar-bonwlil -2-metvvlibutvvlil tiatsolidiini-4-karboksvlaatti ia metwli- (2RS. 4R1 -2- Γ f 2R. 4R1 -4-asetvvliamino-4 - (t-butoksikar-5 bonvylil-2-metvvlibutvvliltiatsolidiini-4-karboksvlaatti 1 I (D- ja L-isomeent)

MeO^N^COO-fc-.Ba

Ac 10 9,41 g (39 mmol) synteesiesimerkissä 5 saatua t-butyyli-(2S*,5S*)-N-asetyyli-5-metyylipiperidiini-2-karboksylaattia liuotettiin 150 ml:aan metanolia, jonka jälkeen lisättiin tetraetyyliammonium-p-tolueensulfonaattia (Et4NOTs, 1,5 g, 1 15 p/t-%). Vakiovirta (480 mA) kuljetettiin sen läpi hiilielekt- rodeilla olosuhteissa 11,4 F/mol ja virrantiheys (60 mA/cm2) huoneenlämmössä. Kun reaktioliuos oli konsentroitu alipaineessa, jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, pestiin vedellä ja kyllästetyllä tavallisen suolan vesiliuoksella, ja orgaaninen 20 kerros kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Suodatuksen jälkeen suodos konsentroitiin alipaineessa, jolloin saatiin 11,5 g (2S*,5S*)-N-asetyyli-6-metoksi-5-metyylipiperidiini-2- !".* karboksylaattia epäpuhtaana tuotteena.

1 · ’25 11,5 gylläolevaa (2S*,5S*)-N-asetyyli-6-metoksi-5-metyylipi- ' * peridiini-2-karboksylaattia liuotettiin 100 ml:aan etikkahapon ja veden seosta (1:1), ja sitten lisättiin 6,0 ml (55 mmol) - N-metyylimorfoliinia ja 8,7 g (51 mmol) metyyli-L-kysteiinaat- tihydrokloridia, jonka jälkeen sekoitettiin typpiatmosfäärissä 30 huoneenlämmössä 3 päivää. Reaktioliuos konsentroitiin etikka- hapon poistamiseksi. Kun oli uutettu dikloorimetaanilla, orgaaninen kerros pestiin vedellä ja tavallisen suolan kyllästetyllä vesiliuoksella, ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Suodatuksen jälkeen suodos konsentroi-35 tiin alipaineessa ja saatu jäännös puhdistettiin silikageeli- ,···, pylväskromatografiällä (eluointi dikloorimetaani:etanolilla 98:2), jolloin saatiin 9,21 g otsikon yhdistettä vaaleankeltaisena öljynä (diastereomeerisuhde 1:1:1:1). Saanto 63%.

113656 55 1H-NMR (400MHz, CDCI3) δ ; 6.18-6.04 (1H, m), 4.56-4.36 (2H, m), 4.14-4.04 (2x1/4H, m), 3.82-3.68 (2xl/4H, m), 3.79 (3x2/4H, s), 5 3.77 (3x2/4H, s), 3.30-3.25 (2xl/4H, m), 3.20-3.16 (2xl/4H, m).

3.04-2.97 (2xl/4H. m), 2.80'2.70 (2xl/4H, m), 2.03 (3x2/4H, s), 2.02 (3x1/4H, s), 2.01 (3xl/4H, s), 2.00-1.50 (5H, m), !·482 (9xl/4H- s), 1.478 (9xl/4H, s), 1.473 (9xl/4H, s), 1.470 (9x1/4Hf s), 1.10 (3xl/4H, d, J = 7.0Hz), 1.04 (3xl/4H, d, J = 7.0Hz), 1.03 (3xl/4H, d, J = 7.0Hz), 0.97 (3x1/4H, d, J = 7.0Hz).

15

Synteesiesimerkki 7

Metyyli-Γ 3R- (3α. 6tt. 96.9aB) Ί-6-asetwliamino-9-metwli-5-okso-oktahvdrotiatsolor 3,2-a1atsepiini-3-karboksvlaatti ia Metwli- Γ 3R- (3a. 6a. 9g. 9a6) 1 -6-asetwliamino-9-metwli-5-okso-20 oktahvdrotiatsolor 3,2-a1atsepiini-3-karboksvlaatti achn-Oy^ achn-^t^ ’ 25 O COOMe O COOMe • t * « « 50 ml trifluorietikkahappoa lisättiin 8,30 g:aan (22,2 mmol) synteesiesimerkissä 6 saatua metyyli-(2RS,4R)-2-[(2S,4S)-4- • a..: 30 asetyyliamino-4-(t-butoksikarbonyyli) -2-metyylibutyyli]- .··.- tiatsolidiini-4-karboksylaatin ja metyyli-(2RS,4R)-2-[ (2R,4R)- 4-asetyyliamino-4-(t-butoksikarbonyyli) -2-metyylibutyyli]-tiatsolidiini-4-karboksylaatin seosta jäillä jäähdyttäen, • · · jonka jälkeen lämpötila nostettiin asteittain huoneenlämpöön. 35 Kun oli sekoitettu 6 tuntia, seos tislattiin liuottimen S··, poistamiseksi, ja suoritettiin atseotrooppinen tislaus tolueenin kanssa, jolloin saatiin 9,84 g (2R,4R)-2-[(2S,4RS)- 4-asetyyliamino-4- (t-butoksikarbonyyli) -2-metyylibutyyli] - 56 113656 tiatsolidiini-4-karboksyylihapon trifluorietikkahapposuolan ja(2R,4R)-2-[(2R,4RS)-4-asetyyliamino-4-(t-butoksikarbonyy-li)-2-metyylibutyyli]-tiatsolidiini-4-karboksyylihapon trif luorietikkahapposuolan seosta (isomeerisuhde 1,4:1,4:1:1) 5 epäpuhtaana tuotteena. 9,84 g tätä epäpuhdasta tuotetta liuotettiin 150 ml:aan tetrahydrofuraania, jonka jälkeen lisättiin 9,8 ml (89 mmol) N-metyylimorfoliinia pH:n säätämiseksi 7:ään. 2-Etoksi-l-etoksikarbonyyli-l, 2-dihydrokinoliinia (EEDQ, 6,59 g, 27 mmol) lisättiin huoneenlämmössä, jonka 10 jälkeen sekoitettiin typpiatmosfäärissä huoneenlämpötilassa yön yli. Kun reaktioneste oli konsentroitu alipaineessa, lisättiin jäännökseen 100 ml 2N-vetykloridihappoa säätämään pH arvoon 1 tai sen alapuolelle, jonka jälkeen uutettiin dikloorimetaanilla. Orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä 15 natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella ja tavallisen suolan kyllästetyllä vesiliuoksella, ja kuivattiin sitten vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Suodatuksen jälkeen suodos konsentroitiin alipaineessa, saatu jäännös puhdistettiin silikageeli-pylväskromatografiällä (eluointi dikloorimetaani:etanoli-20 seoksella 98:2) ja saatiin 2,59 g otsikon yhdisteiden seosta (isomeerisuhde 2:1) valkoisina kiteinä uudelleenkiteyttämällä (etyyliasetaatti-heksaani) . Saanto 39%.

• * M · I · ' » * 1H-NMR (400MHz, CDC13) d; 6.83-6.74 (1H, m), 5.33 (2/3H, dd, J = 3.2, 25 :·: 6.4Hz), 5.23 (1/3H, s), 4.96 (1/3H, t, J = 6.8Hz), 4.82 (2/3H, d, J = 9.

5Hz), 4.60-4.58 (1H, m), 3.79 (3H, s), 3.32 (1/3H, dd, 6.4, 11.6Hz), 3.2 « « 2 (2/3H, dd, J = 3.2, 11.6Hz), 3.14 (1/3H, dd, J = 6.8, 11.6Hz), 3.10 (2 ,,,,:30 /3H, dd, J = 6.8, 11.6Hz), 2.01 (3x2/3H, s), 2.00 (3xl/3H, s), 2.10-1.89 ·;;;.· OH, m), I.8O-I.66 (2H, m), 1.12 (3xl/3H, d, J = 7.2Hz), 1.00 (3x2/3H, . !·. ' d, J = 6.8Hz).

• · • ♦ · 35 57 113656

Svnteesiesimerkki 8 2-Asetwlidekahvdro- (4aR, 8aR1 -isokinoliini-3 (S) -karboksvvli-happo

H

H

10 Seos, jossa oli dekahydroisokinoliini-3(S)-karboksyylihapon (4aR,8aS)-isomeeriä, (4aR,8aR)-isomeeriä ja trans-isomeeriä, liuotettiin 72 ml:aan vettä, jonka jälkeen lisättiin 60,9 g (725 mmol) natriumvetykarbonaattia ja 72 ml dikloorimetaania huoneenlämmössä. Sen jälkeen lisättiin hitaasti pisaroittaan 15 27,4 ml (290 mmol) etikkahappoanhydridiä, jonka jälkeen sekoitettiin 22 tuntia. Liukenemattomat aineet erotettiin suodattamalla. Kun 6N vetykloridihappoa oli kaadettu pH:n säätämiseksi arvoon 3, lisättiin tavallista suolaa kyllästy-mispisteeseen saakka. Suoritettiin uuttaminen kloroformilla, 20 ja orgaaninen kerros kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatil-la. Suodatuksen jälkeen suodos konsentroitiin alipaineessa. Lisättiin dikloorimetaania, jolloin saatiin 5,45 g otsikon yhdisteen kiteitä. Saanto 33,4% (kaksi vaihetta).

• · * 25 Svnteesiesimerkki 9 : ; t-Butyyli-2-asetwlidekahvdro- f 4aR. 8aRΪ -isokinoliini-3 (S) - * ': ‘ ’ ·* karboksvlaatti

H

•h 30 CXXc • * · • * * 5,21 g otsikon yhdistettä saatiin käyttämällä synteesiesimer-35 kissä 8 saatua yhdistettä samalla tavalla kuin synteesiesimer-kissä 5. Saanto 77%.

» · 58 1 13656

Svnteesiesimerkki 10

Metyyli-(2RS.4Ri-2-Γ(1R.2R\-2-Γ(2SΪ-2-asetvvliamino-2-(t-butoksikarbonvvli i etyvli 1 svkloheksyvli 1 -tiätsolidiini-4-karboksvlaatti 5

AcHN 4COO'Bu

Jj^COOMe 10 1,61 g otsikon yhdistettä saatiin käyttämällä synteesiesimer-kissä 9 valmistettua tuotetta, samalla tavalla kuin synteesi-15 esimerkissä 6. Saanto 21%.

1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) δ; 7.28 and 6.15 ( total 1H , each brd ) , 4.57"3.75 ( total 3H , m ) , 3.78 and 3.76 ( total 3H , each s ) , 20 3.30-3.20 ( total 1H , m ) , 3.04 and 2.76 ( total 1H , dd and t ) . 2.01 and 1.97 ( total 3H , each s ) , * · ·

• I

i ,·. 1.50 and 1.47 ( total 9H , each s ) , 2.40-1.05 ( total 12H . m ) * * * · 1*1*· ‘ *25 i · • · * « · : : Svnteesiesimerkki 11

Metyyli- f 3R. 6S . 7aR. llaR. 1 IbR) -6-asetvvliamino-5-okso-....{30 2.3.5.6.7,7a, 1 la. 1 lb-oktahvdrosvklohekswli Γ c 1 tiat solo- .··, Γ 3.2-ai at sepiini-3-karboksvlaatti S- R.

.···. AcHN^YNY^ o COOMe 113656 59 0,48 g otsikon yhdistettä saatiin käyttämällä synteesiesimer-kissä 10 valmistettua yhdistettä, samalla tavalla kuin synteesiesimerkissä 7. Saanto 36%. Absoluuttinen konfiguraatio määritettiin NOEslla NMR-spektroskopialla.

5 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) δ; 6.76 ( 1H , brd , J=6.0Hz ) , 5.14 ( 1H , s ) , 4.91 ( 1H . t , J=7.0Hz ) , 10 4.56 ( 1H , ddd , J=1.8 , 6.0 , 11.4Hz ) , 3.79 ( 3H , s ) .

3.29 ( 1H , dd , J=7.0 , 11.6Hz ) , 3.13 ( 1H , dd , J=7.0 , 11.6Hz ) , 2.35-2.30 ( 1H , tn ) , 2.07-1.15 ( 11H , m ) , 2.00 ( 3H , s ) 15 Ν0Ε Ö ; 3.29 ( H2 0 ) i - 1.70 ( Hll ) 5.14 ( Hl 1 b ) 1- 1.85 ( Hila ) ,2.33 ( H7a ) , 4.56 ( H6.

20 4.91 ( H3 ) l -1 3.13 ( H2<1 ) ... 4, 56 ( H6 ) 1 -1 2.33 ( Hl ex ) • 4 ________ * · > · :j25 * ! I 1 ·

Svnteesiesimerkki 12 : Metyyli- Γ 3R- (3a .6α. 8a. 9a6) 1 -6-asetwliamino-8-metwli-5-okso- > i · oktahydrotiatsolor3.2-a1atsepiini-3-karboksvlaatin ia metyyli-Γ 3R- (3c. 6a. 86.9afl \ 1 -6-asetwliamino-8-metwli-5-okso-oktahvd- ·; J30 rotiatsolor3.2-a1atsepiini-3-karboksvlaatin seos « » · * « • ......... ...........

s: . ,.¾ ..,.¾ 35 AcH & r0Me 0 cooMe 1 · • ·

• I

* 1 · 113656 60

Edellä mainittujen otsikon yhdisteiden seos suhteessa noin 1:1 syntetisoitiin käyttämällä DL-(2S1,4S1)-2-karboksi-4-metyyli-piperidiinikloridia samalla tavalla kuin synteesiesimerkissä A-4'7 .

5 Svnteesiesimerkki 13 t-Butwli- (S) -N-asetwli-5-formwli-l .2,3.4-tetrahvdroDvridii-ni-2-karboksvlaatti ij''XNs'coo,bu \ | N XOO'Bu

Ac I

Ac 82 ml (880 mmol) fosforioksikloridia lisättiin 137 ml:aan 10 (1,77 mol) dimetyylif ormamidia 0°C:ssa, ja sitten lisättiin liuos, jossa oli 39,8 g (177 mmol) t-butyyli-(S)-N-asetyyli- 1,2,3,4-tetrahydropyridiini-2-karboksylaattia, joka saatiin synteesiesimerkissä 13, 40 ml:ssa dimetyyliformamidia, lämpö tilassa -10 - 0°C, jonka jälkeen lämpötila nostettiin asteit-15 tain huoneenlämpöön. Kun reaktioliuosta oli sekoitettu yksi tunti, se kaadettiin 2,0 l:aan vesiliuosta, jossa oli 365 g . (4,49 mol) natriumsulfaattia, jonka jälkeen uutettiin etyyli- * · · ”·) asetaatilla. Orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä natrium- i i · ·2 · vetykarbonaatin vesiliuoksella ja tavallisen suolan kylläste- «•Ml * · 20 tyllä vesiliuoksella, jonka jälkeen kuivattiin natriumsulfaa- ’·"· tiliä. Liuotin poistettiin tislaamalla, ja jäännös uudelleen- ”"·1 kiteytettiin isopropyylieetteristä, jolloin saatiin 18,1 g ot- sikon yhdistettä. Saanto 40 %.

• · I

1H-NMR (400MHz, CDC13) d; 9,35 (1/6H, s), 9,30 (5/6H, s), 8,16 • i 1 ·;;; 25 (1/6H, s), 7,50 (5/6H, s), 5,13 (5/6H, s), 4,62 (1/6H, br) , 2,60-2,40 (2H, m), 2,41 (3x5/6H, s), 2,22 (3xl/6H, s), 1,98- ·:··: 1,70 (2H, m) , 1,45 (9H, s) .

• · • · « t · · · • · * · 2 > » i si 113656

Svnteesiesimerkki 14 t-Butwli- (2S.5S) -N-asetvvli-5-metwlipiperidiini-2-karboksv- laatti

OHC

N^^^COO’Bu L

I N ^COO%u

Ac I

Ac 5 140 mg (0,529 mmol) t-butyyli-(S)-N-asetyyli-5-formyyli- 1,2,3,4-tetrahydropyridiini-2-karboksylaattia, joka saatiin synteesiesimerkissä 14, liuotettiin 20 ml:aan etanolia, jonka jälkeen lisättiin 5 % Pd/C:tä (140 mg). Seosta käsiteltiin 3 kg/cm2:n vetyätmosfäärissä käyttämällä keskipaineista kata-10 lyyttistä pelkistyslaitteistoa hydrauksen suorittamiseksi. Katalyytti poistettiin suodattamalla ja suodos konsentroitiin, jolloin saatiin 140 mg otsikon yhdistettä. Saanto 100 %.

Svnteesiesimerkki 15 t-Butvvli-(S)-N-asetvvli-5-vinwli-l.2.3.4-tetrahvdropvridii-15 ni-2-karboksvlaatti ö Y1 _. Vi • : KrNcoofcu SrNioofcu

·:1·: I I

AC Ac n-Butyylilitiumin eetteriliuos (42,5 ml) lisättiin suspendoi-tuun liuokseen, jossa oli 15,2 g (42,5 mmol) metyylitrifenyy-lifosfoniumbromidia dietyylieetterissä (80 ml) 30 °C:ssa tai .···. 20 sen alapuolella. Tähän liuokseen lisättiin THF-liuos, jossa

»· I

• · • · · • · • · • · · • · · 1 · * 9 113656 62 oli 8,98 g (35,5 mmol) t-butyyli-(S)-N-asetyyli-5-formyyli- 1,2,3,4-tetrahydropyridiini-2-karboksylaattia, joka saatiin synteesiesimerkissä 14, huoneenlämmössä ja sekoittamista jatkettiin yön yli. Vettä lisättiin reaktioliuokseen, jonka jäl-5 keen uutettiin etyyliasetaatilla. Kun liuos oli pesty tavallisen suolan kylläisellä vesiliuoksella, se kuivattiin natrium-sulfaatilla. Se puhdistettiin silikageelipylväskromatogra-fialla (eluointi n-heksaani:etyyliasetaatti-seoksella 2:1), jolloin saatiin 4,08 g otsikon yhdistettä. Saanto 46 %.

10 1H-NMR (400MHz, CDC13) d; 7,35 (1/6H, s), 6,69 (5/6H, s), 6,38 (1/6H, dd, «7=10,8, 17,6Hz) , 6,30 (5/6H, dd, «7=10,8, 17,2Hz), 5,11 (5/6H, m), 5,05 (5/6H, d, «7=17,2Hz), 5,03 (1/6H, d, «7=17,6 Hz), 4,95 (5/6H, d, «7=10,8Hz), 4,93 (1/6H, d, «7=10,8 Hz), 4,53 (1H, m), 2,52-2,38 (1H, m), 2,34-2,24 (1H, m), 2,26 15 (3x5/6H, s), 2,14 (3xl/6H, s), 2,04-1,78 (2H, m), 1,45 (9xl/6H, s), 1,44 (9x5/6H, s).

Svnteesiesimerkki 16 t-Butwli- (2S . 5S) -N-asetwli-5-etwlipiperidiini-2-karboksv-20 laatti ·:*: N>/J>\:00,Bu ¥ coo%u ....: I 1

Ac Ac ♦ * * * · .··*. 4,08 g (16,3 mmol) t-butyyli-(S)-N-asetyyli-5-vinyyli-l, 2,3,4- • · tetrahydropyridiini-2-karboksylaattia, joka saatiin synteesi- , esimerkissä 16, liuotettiin 150 ml:aan etanolia, jonka jälkeen ·;;; 25 lisättiin 4,0 g 10 % Pd/C. Suoritettiin käsittely 3 kg/cm2:n • · '···’ vetyatmosfäärissä käyttäen keskipaineista katalyyttistä reak- ·:··· tiolaitteistoa hydrauksen suorittamiseksi. Katalyytti poistet- :"’j tiin suodattamalla, jolloin saatiin 140 mg otsikon yhdistettä.

.1. Saanto 100 %.

• · * · » * ·

Fv 30 113656 63 1H-NMR (400MHz, CDC13) d; 5,27 (1H, d, J=6,0Hz), 4,52-4,35 (3/4H, m) , 3,64 (1H, dd, J=4,5, 13,0Hz), 2,91 (1H, dd, cJ=12,0, 13,0Hz), 2,35-2,15 (5/4H, m) , 2,13 (3x3/4H, s), 2,07 (3xl/4H, s), 1,80-1,50 (2H, m) , 1,47 (9xl/4H, s), 1,46 (9xl/4H, s) , 5 1,35-1,20 (2H, m) , 1,05-0,95 (1H, m), 0,93 (3x3/4H, t, J=7,6Hz), 0,90 (3xl/4H, t, J=7,6Hz).

Svnteesiesimerkki 17

Metyyli-(2RS,4R)-2-Γ (2S.4 S)-4-asetwliamino-4-t-butoksikarbo-10 nyvli)-2-etvvlibutvyli1tiatsolidiini-4-karboksvlaatti ^n^^coo^j. /^n'^'^coo^ achn I CHP I CO^e

Ac Ac 4,29 g (16,8 mmol) t-butyyli-(2S,5S)-N-asetyyli-5-etyylipipe-ridiini-2-karboksylaattia, joka saatiin synteesiesimerkissä 15 17, liuotettiin 43 ml:aan metanolia, jonka jälkeen lisättiin 0,43 g tetraetyyliammoniumtosylaattia. Seoksen läpi vietiin . vakiovirta (0,33A) hiilielektrodeilla olosuhteissa 5 F/mol I · ♦ '••j huoneenlämmössä. Reaktioliuos konsentroitiin alipaineessa ja • 1 · :·: · jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin. Se pestiin vedellä ja • 1 20 tavallisen suolan kylläisellä vesiliuoksella ja orgaaninen '·“· kerros kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Suodatuksen jälkeen saatiin suodoksesta 5,08 g (2S,5S)-N-asetyyli-6-me-toksi-5-metyylipiperidiini-2-karboksylaattia epäpuhtaana tuot- t 1 · · teenä. Seuraavaksi edellä oleva epäpuhdas tuote liuotettiin 60 25 ml:aan etikkahappo-vesi-seosta (1:1), ja 2,4 ml (23,7 mmol) N- i IM» ,···, metyylimorfoliinia ja 3,46 g (20,2 mmol) metyyli-L-kystei- » · ’·’ naattihydrokloridia lisättiin siihen, jonka jälkeen sekoitet- ·’ · tiin typpiatmosfäärissä huoneenlämmössä 3 päivää. Reaktioliuos

I t I

kaadettiin vesiliuokseen (120 ml), jossa oli 49 g natriumvety-30 karbonaattia, jonka jälkeen uutettiin etyyliasetaatilla. Suo- * · » · * · 113656 64 ritettiin pesu kyllästetyllä tavallisen suolan vesiliuoksella, ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Suodatuksen jälkeen suodos konsentroitiin ja jäännös puhdistettiin silika-geelipylväskromatografiällä (dikloorimetaani: etanoli-seos, 5 100:1), jolloin saatiin 3,62 g otsikon yhdistettä. Saanto 55 %.

1H-NMR (400MHz, CDC13) d; 6,11 (2/3H, d, J= 7,6Hz), 6,06 (1/3H, d, J=8,0Hz), 4,60 (1/3H, m), 4,55-4,40 (2x2/3H, m), 4,12 (1/3H, m), 3,78 (3x2/3H, s), 3,77 (3xl/3H, s), 3,85-3,70 (1H, 10 m), 3,28 (2/3H, dd, J=7,2, 10,4Hz), 3,17 (1/3H, dd, J=1,6, 10,8Hz), 3,03 (1/3H, 1/3H, dd, J=5,6, 10,8Hz), 2,77 (2/3H, dd, 10,0, 10,4Hz), 2,02 (3H, s), 1,90-1,20 (7H, m), 1,48 (9xl/3H, s), 1,47 (9x2/3H, s), 0,92 (3x2/3H, t, J=7,6 Hz), 0,90 (3xl/3H, t, J-l,6Hz) , {fztz L, 1:2® i?7 Z 15 (1:2 diastereomeeriseoksena)

Svnteesiesimerkki 18

Metyyli- f 3R- (3a. 6a. 9β, 9aB) 1 -6-asetwliamino-9-etwli-5-okso-oktahvdrotiatsolo Γ3.2-alatsepiini-3-karboksvlaatti 20

Oi COOMe * 1 · . 21,5 ml trifluorietikkahappoa lisättiin 3,62 g:aan (9,31 mmol) lii metyyli- (2RS, 4R) -2- [ (2S, 4S) -4-asetyyliamino-4-t-butoksikar- <i1i1 • · • · · • » • · • 1 1 #

Mi • · • ·

III

· · • · ·

• I

• · 113656 65 bonyyli)-2-etyylibutyyli]-tiatsolidiini-4-karboksylaattia, joka Saatiin synteesiesimerkissä 18, jäillä jäähdyttäen, jonka jälkeen lämpötila nostettiin asteittain huoneenlämpöön. Kun oli sekoitettu 5 tuntia, seos tislattiin liuottimen poistami-5 seksi, jonka jälkeen suoritettiin atseotrooppinen tislaus tolueenin kanssa, jolloin saatiin (2R,4R)-2-[(2S,4RS)-4-asetyyliamino-4-(t-butoksikarbonyyli)-2-etyylibutyyli]-tiatsolidiini-4-karboksyylihapon trifluorietikkahapposuolaa epäpuhtaana tuotteena. Tämä epäpuhdas tuote liuotettiin 60 10 ml:aan tetrahydrofuraania, jonka jälkeen lisättiin 4,09 ml (37,2 mmol) N-metyylimorfoliinia pH:n säätämiseksi arvoon 7. 2-Etoksi-l-etoksikarbonyyli-l,2-dihydrokinoliinia (EEDQ, 2,76 g, 11,2 mmol) lisättiin huoneenlämmössä, ja sen jälkeen sekoitettiin typpiatmosfäärissä huoneenlämmössä yön yli. Kun 15 reaktioseos oli konsentroitu alipaineessa, jäännökseen lisättiin 100 ml 2N vetykloridihappoa pH:n säätämiseksi arvoon 1 tai sen alapuolelle, jonka jälkeen uutettiin dikloorime-taanilla. Orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä natriunrvety-karbonaatin vesiliuoksella ja tavallisen suolan kyllästetyllä 20 vesiliuoksella, ja kuivattiin sitten vedettömällä magnesium-sulfaatilla. Suodatuksen jälkeen suodos konsentroitiin alipaineessa, ja saatu jäännös puhdistettiin silikageelipyl-··1· väskromatografiällä (eluointi dikloorimetaani:etanoli-seoksel- la 100:1 - 100:3), jolloin saatiin 1,3 g otsikon yhdistettä 25 valkoisina kiteinä. Saanto 44%.

1H-NMR (400MHz, CDC13) d; 6.80 ( 1H, br ), 5.30 (1H, dd, J = 3.6, 6.8H z), 4.87 (1H, d, J=9.2Hz ), 4.58 (1H, in), 3.79 (3H, s), 3.22 (1H, dd, ....: 30 3.6, 11.6Hz), 3.10 (1H, dd, J = 6.8, 11.6Hz), 2.18-2.08 (1H, m), 2.01 (3H, s), 1.84-1.56 (SH, id), 1.31 (1H, m), 0.92 (3H, t, J = 7.6Hz) ’ . 35 • · 1 · 113656 66

Esimerkki 1

Metyyli- Γ 3R- (3g, 6a, 96.9a6) -6-amino-9-metvvli-5-okso-oktahvd-rotiatsolor3.2-a1atsepiini-3-karboksvlaatti ia metyyli- Γ 3R- (3a.6g.9g, 9a81 -6-amino-9-metvvli-5-okso-oktahvd-5 rotiatsolof 3.2-alatsepiini-3-karboksvlaatti 10 o COOMe o COOMe 2,59 g (8,6 mmol) metyyli-[3R-(3a,6a,9p,9aP)-6-asetyyli-amino- 9-metyyli-5-okso-oktahydrotiatsolo [ 3,2-a]atsepiini-3-karboksy-15 laatin ja metyyli-[3R-(3a,6a,9a,9aP)-6-asetyyli-amino-9-metyy-li-5-okso-oktahydrotiatsolo[ 3,2-a] atsepiini-3-karboksylaatin seosta (isomeerisuhde 2:1), joka saatiin synteesiesimerkissä 7, liuotettiin 10% vetykloridihapon liuokseen metanolissa (100 ml), jonka jälkeen kuumennettiin palautusjäähdytyksessä 26 20 tuntia. Kun seos oli tislattu alipaineessa liuottimen poistamiseksi, lisättiin 2N vetykloridihappoa, jonka jälkeen pestiin dikloorimetaanilla. Kun vesikerros oli tehty emäksiseksi ammo-:..: niakin vesiliuoksella, suoritettiin uutto dikloorimetaanilla, : ja orgaaninen kerros kuivattiin vedettömällä kaliumkarbonaa- :··: 25 tiliä. Suodatuksen jäkeen suodos konsentroitiin alipaineessa, *: *: jolloin saatiin 2,01 g otsikon yhdisteiden seosta (isomee- :··· risuhde 2:1) värittömänä öljynä. Saanto 90%.

• · 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) d; 5.3δ (2/3H, dd, J = 3.2, 6.8Hz), 4.99 (1/ ·:··: 3H* t, J = 6.8Hz), 4.76 (2/3H, d, J = 10.0Hz), 4.78-4.70 (1/3H, m), 3.78 ' : (3x2/3H, s), 3.76 (3x 1/3H, s), 3.55 (2/3H, dd, J = 2.2, 10.6Hz), 3.49 (

^ = 2.0, 10.8Hz), 3.30 (1/3H, dd, J = 6.0, 11.6Hz), 3.21 (2/3H

’’•’*35 ' dd’ J = 3·2, 12-0Hz)> 3.11 (1/3H, dd, J = 7.2, 11.6Hz), 3.09 (2/3H, dd .···. ’ J = 6*4> 12.0Hz), 2.12-1.50 (7H, m), 1.12 (3xl/3H, d, J = 6.8Hz), 1.00 (3x2/3H, d, J = 6.8Hz).

113656 67

Esimerkki 2

Metyyli-T3R- (3a, 6cc, 9β, 9aB) -6- Γ Γ (2S. 3S >-l-okso-2-asetwlitio-3-metwliDentwlil amino l-9-metwli-5-okso-oktahvdrotiatsolor 3,2-alatsepiini-3-karboksvlaatti ia 5 metyyli-Γ3R-f 3g,6a,9a,9aB\-6-Γ Γ (2S.3Sl-l-okso-2-asetwlitio-3- metwlipentwli1amino1-9-metwli-5-okso-oktahvdrotiatsolof 3,2-alatsepiini-3-karboksvlaatti

10 Me O Me O

'^YANySrNV

SAc H O COOMe SAc H O COOMe 15 Liuos, jossa oli 1,78 g (9,3 mmol) (2S,3S)-2-asetyylitio-3-metyylipentaanihappoa tetrahydrofuraanissa (100 ml), lisättiin 2,01 g:aan (7,8 mmol) metyyli-[3R-(3a,6a,9p,9aP)]-6-amino-9-metyyli-5-okso-oktahydrotiatsolo[ 3,2-a]atsepiini-3-karboksy-laatin ja metyyli-[3R-(3α,6α,9a,9aP)]-6-amino-9-metyyli-5-20 okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksylaatinseosta (isomeerisuhde (2:1), joka saatiin esimerkissä 1, jäähdyttäen jäillä. Tähän liuokseen lisättiin peräkkäin 1,79 g (9,3 mmol) :..! ’ l-etyyli-3-(3-dimetyyliaminopropyyli)karbodi-imidihydroklori- ·.: * dia (DEC.HC1), 1,03 ml (9,3 mmol) N-metyylimorfoliinia ja 1,26 : :25 g (9,3 mmol) 1-hydroksi-lH-bentsotriatsolimonohydraattia (HOBT), jonka jälkeen sekoitettiin typpiatmosfäärissä huoneen- • lämmössä 18 tuntia. Kun oli lisätty vettä ja uutettu etyyli- .··. asetaatilla, orgaaninen kerros pestiin IN vetykloridihapolla, • · kyllästetyllä natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella ja taval- .30 lisen suolan kyllästetyllä vesiliuoksella, ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Suodatuksen jälkeen suodos ···* konsentroitiin alipaineessa ja saatu jäännös puhdistettiin : silikageelipylväskromatografiällä (eluointi heksaani:etyyli- • · · asetaattiseoksella (3:1). 837 mg metyyli-[3R-(3a,6a,9P,9aP)-6-• t 35 [ [ (2S,3S)-l-okso-2-asetyylitio-3-metyylipentyyli]amino]-9- * ’ metyyli-5-okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksy- '...· laattia värittömänä öljynä otettiin talteen ensimmäisenä 113656 68 effluenttina. Saanto 42%. Yhdisteen absoluuttinen konfiguraatio määritettiin NOE-kokeella.

1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) d; 7.37 (1H, d, J = 6.0Hz), 5.35 (1H, dd, J

5 =3.0, 7.0Hz), 4.80 (1H, d, J = 9.5Hz), 4.53 (1H, m), 3.97 (1H, d, J = 7 . 0Hz), 3.79 (3H, s), 3.22 (1H, dd, J = 3.0, 11.5Hz), 3.10 (1H, dd, J = 7 .0, 11.5Hz), 2.38 (3H, s), 2.14-1.90 (3H, m), 1.78-1.62 (3H, m), 1.57 (1 H, m), 1.16 (1H, m), 1.00 (3H, d, J = 6.5Hz), 0.99 (3H, d, J = 7.0Hz), 0 10 . 88 (3H, t, J = 7.5Hz).

Ν0Ε δ ; 1.00 ( 9-Me ) i - 4. 80 ( H9a ) 3.10 ( H2a ) i — 4.80 ( H9a ) , 5.36 ( H3 ) 3.22 ( H2/? ) > -* 1.95 ( H9 ) , 3.79 ( 3-COOMe ) 15 4.53 ( H6 ) 1 - 4.80 ( H9a )

Edelleen otettiin talteen 532 mg metyyli-[3R-(3a,6a,9a,9aP)-6-[ [ (2S, 3S) -l-okso-2-asetyylitio-3-metyylipentyyli]amino]-9-20 metyyli-5-okso-oktahydrotiatsolo [ 3,2-a]atsepiini-3-karboksy-laattia värittömänä öljynä toisena effluenttina. Saanto 16%. Yhdisteen absoluuttinen konfiguraatio määritettiin ΝΟΕΙ..:’ kokeella.

: ’;25 1H-NMR ( 400MHz , CDCI3 ) d; 7.32 (1H, brd, J = 6.1Hz), 5.20 (1H, s), ..J 5.00 (1H, dd, J = 6.0, 6.4Hz), 4.48 (1H, m), 3.96 (1H, d, J = 6.6Hz), 3.

• · ;···; 78 (3H, s), 3.32 (1H, dd, J = 6.0, 11.7Hz), 3.13 (1H, dd, J =6.4, 11.7 * * ·

Hz), 2.37 (3H, s), 2.20-1.50 (7H, m), 1.15 (1H, m), 1.10 (3H, d, J = 7.4 ':,,i Hz), 0.98 (3H, d, J = 6.8Hz), 0.87 (3H, t, J = 7.2Hz).

Ν0Ε δ; 1.10 ( 9-Me ) 1 — 3.32 ( H2 0 ) , 3.78 ( 3-C00Me ) 3.13 ( H2a ) 1— 5.20 ( H9a ) , 5.00 ( H3 ) *:** 35 . 4.48 ( H6 ) 1 — 5.20 ( H9a ) 113656 69

Esimerkki 3 Γ3R-(3e.6a.9B.9aB)1-6-rr (2S.3S1 -l-Okso-2-tio-3-metvvlipen-tyylil amino l-9-metwli-5-okso-oktahvdrot iät solo Γ 3.2-alatsepii-ni-3-karboksvvlihappo 5

Me 0 / VSv

SH H 0 COOH

10 167 mg (0,39 mmol) metyyli-[3R-(metyyli-[3R-(3α,6a,9P,9aP)-6-[ [ (2S, 3S) -l-okso-2-asetyylitio-3-metyylipentyyli]amino]-9-metyyli-5-okso-oktahydrotiatsolo[ 3,2-a]atsepiini-3-karboksy-15 laattia, joka saatiin esimerkissä 2, liuotettiin 5 ml:aan ilmastettua etanolia, lisättiin 2,0 ml (2,0 mmol) IN litium-hydroksidin vesiliuosta jäillä jäähdyttäen, jonka jälkeen sekoitettiin typpiatmosfäärissä huoneenlämmössä yksi tunti. Reaktioliuos tehtiin happamaksi lisäämällä 7,5 ml IN vetyklo-20 ridihappoa jäillä jäähdyttäen. Kun oli suoritettu laimennus vedellä, suoritettiin uuttaminen dikloorimetaanilla. Orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä tavallisen suolan vesiliuok-sella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla.

• J { Suodatuksen jälkeen suodos konsentroitiin alipaineessa. Saatu • · 25 amorfinen jäännös uudelleenkiteytettiin (dikloorimetaani- . heksaani) ja kuivattiin kuumassa ilmassa 50°C:ssa 12 tuntia, jolloin saatiin 118 mg otsikon yhdistettä valkoisina kiteinä.

> ·

Saanto 81%.

• · • · t »

3Q 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) d; 7.66 (1H. d, J = 6.5Hz), 5.39 (1H, dd, J

=3·0· 7-OHz), 4.86 (1H, d, J = 9.5Hz), 4.60 (1H, m), 3.29 (1H, dd, J = • · ;·* 3.0, 12.0Hz),· 3.22 (1H, dd, J = 7.0, 9.0Hz), 3.13 (1H, dd, J = 7.0, 12.0

Hz^· 2.10-1.90 (4H, m), 1.87 OH, d, J = 9.0Hz), 1.81-1.64 (2H, m), 1.61 35 (1H, m), 1.21 (1H, m), 1.03 (3H, d, J = 7.0Hz), 1.00 (3H, d, J = 7.0Hz) » < t · · !..* , 0.90 (3H, t, J = 7.0Hz).

φ 113656 70

Esimerkki 4

Metyyli-(3 R .6S,7aR,1laR.llbRI-6-amino-5-okso-2,3,5.6.7.7a.11a.llb-oktahvdrosvkloheksvvlircltiatsolo-Γ 3.2-a1atsepiini-3-karboksvlaatti 10 O COOMe 0,23 g otsikon yhdsitettä saatiin käyttäen synteesiesimerkissä 11 saatua yhdistettä samalla tavalla kuin esimerkissä 1. 15 Saanto 57%.

1H-NMR (400MHz, CDC13) δ ; 5. 08 ( 1H , s ) , 4. 94 ( 1H , t , J=6.8Hz )·, 3.78 ( 3H , s ) , 3.54-3.52 ( 1H , m ) , 20 3.27 ( 1H , dd , J=6.8, 11. 6Hz ) , 3.11 ( 1H , dd , J=6.8, 11. 6Hz ) 2.23-1.18 ( 14H . m ) « * · \“:25 Esimerkki 5 . ..J Metwli-(3R.6S.7aR.llaR.llbRl-6-r Γ (2S.3S1 -l-okso-2-asetvvli- tio-3-metvvlipentvvlil amino! -5-okso-2.3.5.6.7,7a.11a. 11b-t ^ oktahvdrosvklohekswlirc1tiatsolo-r3.2-a1atsepiini-3-karboksv- laatti

R

SAc H O COOMe 9ϊβ 0,32 g otsikon yhdistettä saatiin käyttämällä esimerkissä 4 ,,,· saatua yhdistettä samalla tavalla kuin esimerkissä A. Saanto 88%.

113656 71 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) δ ; 7.33 ( 1H , brd , J=6.0Hz ) 5. 14 ( 1H , s ) , 4.96 ( 1H , t , J=6.6Hz ) , 4.57-4.52 ( 1H , m ) , c 3.97 ( 1H , d , J=6.8Hz ) , 3.79 ( 3H , s ) , 3.30 ( 1H , dd , J=6, 6 , 11.6Hz ), 3.14 ( 1H , dd , J=6, 6 , n.6Hz ) 2.38 ( 3H , s ) , 2.40-0.85 ( 15H , » ) , 0.99 ( 3H , d , J=6.8Hz ) , 0. 89 ( 3H , t , J=7.4Hz ) iO ----------—-------

Esimerkki 6 (3R. 6S, 7aR. llaR, llbm -6-Γ Γ (2S.3S) -l-Okso-2-tio-3-metvvlipen-twliTamino1-5-okso-2.3.5.6.7,7a, 11a. llb-oktahydrosvkloheksw-lircltiatsolor3.2-alatsepiini-3-karbokswlihappo 15

Q

Me O ( VS\

2o SH H O COOH

0,18 g otsikon yhdistettä saatiin valkoisina kiteinä käyttä-{ : j mällä esimerkissä 5 saatua yhdistettä samalla tavalla kuin • ;25 esimerkissä 3. Saanto 63%.

• ( ·;·: 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) δ ; 7.33 ( 1H , brd , J=6.0Hz ) , 5. 14 ( 1H . s ) , 4.96 ( 1H , t , J=6.6Hz ) , 4.57~4.52 ( 1H , m ) .

.30 3.97 ( in , d , J=6.8Hz ) , 3.79 ( 3H , s ) , .·1·. 3·30 ( 1H > dd , J=6.6 , 11.6Hz ) , 3.14 ( 1H , dd , J=6.6 , 11.6Hz ) . \ 2.38 ( 3H , s ) , 2.40-¾. 85 ( 15H , m ) , 0. 99 ( 3H , d, J=6. 8Hz ) , • 1 · 0.89 ( 3H , t , J=7.4Hz ) ':'35 * » » « 72 113 6 5 6

Esimerkki 7

Metwli- Γ 3R- (3α. 6α. 8α, 9a6) -6-amino-8-metvvli-5-okso-oktahvd-rotiatsolor3.2-a1atsepiini-3-karboksvlaatti ia metwli-Γ 3R- (3a. 6g. 8β, 9aB) -6-amino-8-metvvli-5-okso-oktahvd-5 rotiatsolor3.2-a1atsepiini-3-karboksvlaatti 10 0 COOMe 0 COOMe 940 mg (3,12 mmol) seosta noin suhteessa 1:1, yhdisteistä metyyli- [ 3R- (3α, 6α, 8α, 9aP) ]-6-asetyliamino-8-metyyli-5-okso-15 oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksylaattia ja metyyli-[3R-(3α,6o/8P,9aP) ]-6-asetyliamino-8-metyyli-5-okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksylaattia, joka oli saatu synteesiesimerkissä 12, liuotettiin 24 ml:aan 10% vetykloridin liuosta metanolissa, jonka jälkeen kuumennettiin 20 palautusjäähdytyksessä 24 tuntia. Kun oli suoritettu tislaus alipaineessa liuottimen poistamiseksi, lisättiin vettä, jonka jälkeen pestiin dikloorimetaanilla. Saatu vesikerros tehtiin , ··· emäksiseksi lisäämällä natriumvetykarbonaatin kyllästettyä : vesiliuosta, ja sitten se uutettiin dikloorimetaanilla, jonka 25 jälkeen kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Jäännös, . joka saatiin konsentroimalla, puhdistettiin silikageelipylväs- . kromatografiällä (kloroformi:metanoli:ammoniakin vesiliuos = «tl»· ]it* 98:2:0,2), jolloin saatiin 220 mg seosta kahdesta otsikon * · yhdisteestä noin suhteessa 1,4:1. Saanto 27%.

30 .

1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) δ; 5.29 ( lHxl.4/2.4 , dd , J=2.4 . 6.4Hz ) , 5.00 ( lHxl.4/2.4 , d , J=10.4Hz ) , 3.78 ( 3Hxl. 4/2.4 , s ) , 3. 54 ( lHxl.4/2.4 , dd , J=1.2 , 10.8Hz ) , 3.26 ( lHxl.4/2.4 , dd , J=2.4 , 1 : 35 1.6Hz ) , 3.17 (lHxl.4/2.4, dd , J=6. 4 , 11.6Hz) , 1.43-2.05 ( 7Hx 1.4/ 2.4 , m ) . 1.00 ( 3Hx 1.4/2.4 , d , J=6. 8Hz ) I · 113656 73 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) δ; 5.21 ( lHxl.0/2.4 , dd , J=3.2 , 6.4Hz ) , 5.15 ( lHxl.0/2.4 , dd , J=2. 2 , 10.2Hz ), 3. 78 ( 3Hx 1.0/2. 4 s ) 5 3·71 ( 1Hx]-°/2·4 , dd , J=3.2 , 10.8Hz ), 3.27 ( lHxl.0/2.4 dd , j= 3.2 , 12.0Hz ) , 3.18 (lHxl.0/2.4 , dd , J=6.4 , 12. OHz ) , 1.60-2.33 ( 7Hxl.0/2.4 , m ) , 1.16 ( 3Hxl.0/2.4 , d , J=7.2Hz )

Esimerkki 8 10 Metyyli-r3R-f3ot.6a.86.9afl1-6-Γ Γ (2S. 3S1-l-okso-2-asetwlitio-3- metwlipentwlil amino 1 -8-metwli-5-okso-oktahvdrot iat solo Γ 3,2-alatsepiini-3-karboksvlaatti ~ia metwli-f 3R-(3tt.6a.8a,9a6l-6-r Γ (2S. 3S1-l-okso-2-asetwlitio-3-metwlipentwlilaminol-8-metwli-5-okso-oktahydrotiatsolor 3.2-15 alatsepiini-3-karboksvlaatti

i? ( V* S\ Me O ( V* S

^V'N’SrV 'v^YAiorlV

20 SAc H O COOMe SAc H q COOMe

Liuos, jossa oli 214 mg (1,12 mmol) (2S,3S)-2-asetyylitio-3- » · : metyylipentaanihappoa tetrahydrofuraanissa (17 ml), lisättiin : ·; 25 215 mg:aan (0,83 mmol) metyyli-[3R-(3a,6a,8P,9ap)-6-amino-8- * ··· metyyli-5-okso-oktahydrotiatsolo[ 3,2-a] atsepiini-3-karboksy- laatin jametyyli-[3R-(3a,6a,8a,9aP)-6-amino-8-metyyli-5-okso- _ oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksylaatin seosta » ♦ (isomeerisuhde 1:1,4), joka oli saatu esimerkissä 7, jäillä # 30 jäähdyttäen. Tähän liuokseen lisättiin peräkkäin 207 mg (1,08 * > * i « mmol) 1-etyyli-3- (3-dimetyyliaminopropyylikarbodi-imidihydro- ...· kloridia (DEC.HCl), 0,12 ml (1,08 mmol) N-metyylimorfoliinia . ja 166 mg (1,08 mmol) 1-hydroksi-lH-bentsotriatsolimonohyd- /··. raattia (HOBT), jonka jälkeen sekoitettiin typpiatmosfäärissä » · ·* 35 huoneenlämmössä 18 tuntia. Reaktioliuos konsentroitiin, siihen e 1 * lisättiin vettä, ja se uutettiin etyyliasetaatilla. Sen jäl- keen orgaaninen kerros pestiin IN vetykloridihapolla, kyllästetyllä natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella ja kyllästetyllä 74 113656 tavallisen suolan vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Suodatuksen jälkeen jäännös, joka saatiin konsentroimalla suodos alipaineessa, puhdistettiin silikageelipylväskromatografiällä (eluointi heksaani:etyy-5 liasetaattiseoksella 3:1), jolloin saatiin 254 mg seosta (isomeerisuhde 1:1,3) kahdesta otsikon yhdisteestä. Edelleen tämä seos pantiin preparatiiviseen kolonniin, YMC-Pack SIL (SH-043-5) (eluointi heksaani:etyyliasetaatilla 4:1), erotuksen ja puhdistuksen suorittamiseksi. Näin saatiin 97 mg 10 metyyli-[3R-(3a,6a,8p,9aP)J-6-[[(2S,3S)-l-okso-2-asetyylitio- 3-metyylipentyyli] amino ]-8-metyyli-5-okso-oktahydrotiatsolo-[3,2-a]atsepiini-3-karboksylaattia värittömänä öljynä ensimmäisenä effluenttina. Saanto 27%. Yhdisteen absoluuttinen konfiguraatio määritettiin NOE-kokeella.

15 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) Ö; 7.26 ( 1H , brd , J=6.1Hz ) , 5.21 ( 1H , dd , J=2.9 , 6.6Hz ) , 5.20 ( 1H , dd , J=1.5 , 10.6Hz ) , 4.75 (. 1H , ddd , J=5.0 , 6.1 , 9.0Hz ) , 3.95 ( 1H , d , J=7.1Hz ) , 3.79 ( 3H , s 20 ) , 3.28 ( 1H , dd , J=2.9 , 12.0Hz ) , 3.20 ( 1H , dd , J=6.6 , 12.0Hz ) , 2.37 ( 3H , s ) , 2.30-1.10 ( 8H , m ) , 1.26 ( 3H , d , J=7.1Hz ) ;':f , 0.99 ( 3H , d, J=6.6Hz ) , 0.88 ( 3H , t , J=7.4Hz ) ]l25 Ν0Ε δ; 1.26 ( 8-Me ) I - 4.75 ( H6a ) , 5.20 ( H9a a) , 1.68 ( H9a ) 5.20 ( H9aa ) l - 1.68 ( H9a ) , 4.75 ( H6a ) ·:·*: 2.28 ( H80 ) J - 1.68 ( H9a ) • * * · » » · 30 136 mg metyyli-[3R-(3a,6a,8a,9aP)]-6-[[(2S,3S)-l-okso-2-‘,.. · ase tyy 1 it io- 3 -metyy 1 ipentyy 1 i ] amino) -8-metyyli-5-okso-oktahyd- . rotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksylaattia saatiin värittö- ! I 9 .··♦. mänä öljynä toisesta effluentista. Saanto 38%. Yhdisteen » · '!* 35 absoluuttinen konfiguraatio määritettiin NOE-kokeella.

M M * » > · J t • I | 113656 75 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) δ ; 7.38 ( 1H , brd , J=6. 0Hz ), 5.27 ( 1H , dd , J=2.4 , 6.4Hz ), 5.03 ( 1H , d , J= 10.4Hz ), 4.55 ( 1H , dd , 5 J=6.4 , 10.0Hz ), 3.97 ( 1H , d , J=6.8Hz ), 3.79 ( 3H , s ) , 3.27 ( 1H , dd , J=2.4 , 11.8Hz ) , 3.19 ( 1H , dd , J=6.4 , 11.8Hz ) , 2.38 ( 3H , s ) , 2.15-4. 11 ( 8H , m ) , 0.99 ( 6H , d , J=6.8Hz ) , 0.89 ( 3H , t , J=7.4Hz ) 10 NOE δ ; 2.09 ( H8 ) i - 1.88 ( Η9α ) , 1. 92 ( Η7α ) , 4. 55 ( H6 ) , 5 . 03 ( H9a ) 5.03 ( H9a ) i- 1.88 ( H9a ) , 4.55 ( H6 ) 4.55 ( H6 ) 1 - 1.92 ( H7a ) 15

Esimerkki 9 r3R-(3tt,6tt.8n.9a6l 1-6-Γ Γ (2S.3S1-l-Okso-2-tio-3-metvvlipen-tyyli Ί amino 1 -8-metvvli-oktahvdro-5-oksotiatsolof 3,2-alatsepii-20 ni-3-karboksvvlihappo

Me 0 Γ:

..:25 SH H O COOH

in ♦ 130 mg (0,30 mmol) metyyli-[3R-(3α,6α,8α,9ββ)-6-[[(2S,3S)-1- ·’ okso-2-asetyylitio-3-metyylipentyyli] amino ]-8-metyyli-5-okso- 30 oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksylaattia, joka saatiin esimerkissä 8, liuotettiin 4,3 ml:aan ilmastettua ‘itt! EtOHta. Seuraavaksi lisättiin 2,1 ml IN litiumhydroksidin , |·, vesiliuosta jäillä jäähdyttäen, jonka jälkeen sekoitettiin ,!! typpiatmosfäärissä huoneenlämmössä yksi tunti. Kun seos oli » · ;· 35 tehty happamaksi lisäämällä 1,5 ml 2N vetykloridihappoa jäillä jäähdyttäen, lisättiin vettä, jonka jälkeen uutettiin dikloo-rimetaanilla. Kun seos oli pesty kyllästetyllä tavallisen suolan vesiliuoksella, se kuivattiin vedettömällä magnesium 113656 76 sulfaatilla ja konsentroitiin alipaineessa. Saatu amorfinen aine uudelleenkiteytettiin (etyyliasetaatti-heksaani) ja kuivattiin kuumassa ilmassa 50eC:ssa 24 tuntia, jolloin saatiin 90 mg otsikon yhdistettä. Saanto 80%.

5

1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) δ ; 7.61 ( 1H , brd , J=6.4Hz ) , 5.29 ( 1H

, dd , J=2.4 , 6.4Hz ), 5.07 ( 1H , d , J=10.4Hz ) , 4.62 ( 1H , dd , J

=6.8 , 11.2Hz ) , 3.37 ( 1H , dd , J=2.4 . 12.0Hz ) , 3.22 ( 1H , dd , J

10 =6.4 , 8.8 Hz ) , 3. 21 ( 1H , dd , J=6. 4 , 12. 0 Hz ), 2. 15Ί. 18 ( 8H , m ) , 1.87 ( 1H , d . J=8.8Hz ) , 1.01 ( 3H , d , J=6.4Hz ) , 1.00 ( 3 H , d , J=6.8Hz ) , 0.91 ( 3H , t , J=7.4Hz ) 15

Esimerkki 10 r3R-r3g.6a,86.9a6M-6-r Γ f 2S . 3S) -l-Okso-2-tio-3-metvvlipen-twlilaminol-S-metwli-oktahydro-S-oksotiatsolir 3.2-alatsepii-ni-3-karbokswlihappo 20

Me O \ V*S\

-VnVV

;: SH H ° COOH

*:25 t < · » » ♦ *·. 93 mg (0,216 mmol) metyyli-[3R-(3a,6a,8p/9aP)-6“[ ((2S,3S)-1- okso-2-asetyylitio-3-metyylipentyyli] amino] -8-metyyli-5-okso-,30 oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksylaattia, joka saatiin esimerkissä 8, liuotettiin 3,1 ml:aan ilmastettua t | ;·* EtOH:a. Seuraavaksi lisättiin 1,5 ml IN litiumhydroksidin ; vesiliuosta jäillä jäähdyttäen, jonka jälkeen sekoitettiin ! 1 t ; typpiatmosfäärissä huoneenlämmössä yksi tunti. Kun seos oli t * · *,35 tehty happamaksi 1,1 ml:11a 2N vetykloridihappoa jäillä

Mill jäähdyttäen, lisättiin vettä, jonka jälkeen uutettiin dikloo-r imet äänillä. Kun oli suoritettu pesu kyllästetyllä tavallisen suolan vesiliuoksella, kuivattiin vedettömällä magnesiumsul 113656 77 faatilla ja konsentroitiin alipaineessa. Saatu amorfinen aine uudelleenkiteytettiin (dikloorimetaani-heksaani) ja kuivattiin kuumalla ilmalla 50°C:ssa 24 tuntia, jolloin saatiin 66 mg otsikon yhdistettä. Saanto 82%.

5 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) δ; 7.49 ( 1H , brd , J=6.0Hz ) , 5.27-5.21 ( 2H , m ) , 4.84-4.77 ( 1H , m ) , 3.37 ( 1H , dd , J=2.4 , 12.0Hz ) , 3.22 ( 1H , dd . J=7.0 , 12.0Hz ) , 3.19 ( 1H , dd , J=7.2 , 8.8Hz 10 ) , 1.88 ( 1H , d , J=8.8Hz ) , 2.33-1.58 ( 7H , m ) , 1.28 ( 3H , d , J=7.2Hz ) , 1.30-1.18 ( 1H , m ) , 1.00 ( 3H , d , J=6.8Hz ) , 0.90 ( 3H , t , J=7.2Hz ) 15 Esimerkki 11 Γ 3R- (3a ,6a ,9a, 9aB) 1-6-Γ Γ (2S.3Sl-l-Okso-2-tio-3-metvvlipen-tvvlil amino l-9-metwli-5~okso-oktahvdrotiatsolor 3,2-alatsepii-ni-3-karbokswlihappo 20

Me O O-S

: .1' T

: SH H O COOH

» · 25 « * · ♦ * “i 1,43 g (3,33 mmol metyyli-[3R-(3a,6a,9a,9aP)-6-[[(2S,3S)-1- :" *: okso-2-asetyylitio-3-metyylipentyyli ] amino]-9-me tyyli-5-okso- oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksylaattia, joka 30 saatiin esimerkissä 2, liuotettiin 30 ml:aan ilmastettua

... etanolia, ja lisättiin 20 ml (20 mmol) litiumhydroksidin IN

;* vesiliuosta jäillä jäähdyttäen, jonka jälkeen sekoitettiin typpiatmosfäärissä huoneenlämmössä yksi tunti. Reaktioseos : tehtiin happamaksi lisäämällä 50 ml 2N vetykloridihappoa ] ; 35 jäillä jäähdyttäen, ja laimennettiin vedellä, jonka jälkeen I » ... uutettiin dikloorimetaanilla. Orgaaninen kerros pestiin kyl- '···* lästetyllä tavallisen suolan vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Suodatuksen jälkeen suodos 113656 78 konsentroitiin alipaineessa. Saatu amorfinen aine uudelleenki-teytettiin (dikloorimetaani-heksaani) ja se kuivattiin kuumalla ilmalla 50°C:ssa 12 tuntia, jolloin saatiin 1,10 g otsikon yhdistettä valkoisina kiteinä. Saanto 89%.

5 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) d; 7.57 (1 H, brd, J = 6.4Hz), 5.25 (1H, s), 5.08 (1H, dd, J = 3.2, 6.8Hz), 4.60 (1H, m), 3.48 (1H; dd, J = 3.2, 11.6

Hz), 3.25 (1H, dd, J = 6.4, 8.4Hz), 3.13 (1H, dd, J = 6.8, 11.6Hz), 2.16 10 -1.54 (7H, m), 1.85 (1H, d, J = 8.4Hz), 1.24 (1H, m), 1.03 (3H, d, J = 6 . 4Hz), 1.01 (3H, d, J = 6.4Hz), 0.91 (3H, t, J = 7.2Hz).

15 Esimerkki 12 Γ3R-(3α,6α,9β, 9a8) -6-Γ Γ f 2S, 3S) -l-Okso-2-asetwlitio-3-metwli-pentwli 1 aminol -9-metwli-5-okso-oktahvdrotiatsolo- Γ 3,2-al -atsepiini-3-karbokswlihappo 20 &

Me O

T v^VLror'V

; ; SAc H o COOH

25 9 ·*: 522 mg (1,39 mmol) esimerkissä 3 saatua [3R-(3a,6a,9P,9aP) ]-6- : "i [[(2S,3S)-l-Okso-2-tio-3-metyylipentyyli]amino]-9-metyyli-5- okso-oktahydrotiatsolo[3,2**a] atsepiini-3-karboksyylihappoa , 30 liuotettiin asetonitriilin (15 ml) ja tetrahydrofuraanin (15 ... ml) seokseen. 54 mg (0,42 mmol) vedetöntä kobolttikloridia ja 170 ml (1,81 mmol) etikkahappoanhydridiä lisättiin huoneenläm-mössä typpiatmosfäärissä, jonka jälkeen sekoitettiin 5 tuntia.

: Vettä lisättiin reaktioliuokseen, jonka jälkeen uutettiin ) . 35 etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä I « ... tavallisen suolan vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Suodatuksen jälkeen suodos konsentroitiin alipaineessa. Saatu amorfinen aine uudelleenkiteytettiin 79 1Ί3656 (etyyliasetaatti-heksaani) ja se kuivattiin kuumassa ilmassa 50eC 18 tuntia, jolloin saatiin 439 mg otsikon yhdistettä valkoisina kiteinä. Saanto 76%.

5 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) d; 7.38 (1H, brd, J = 6.0Hz), 5.39 (1H, dd, J = 2.8, 6.4Hz), 4.83 (1H, d, J =9.6Hz), 4.56 (1H, m), 3.96 (1H, d, J = 6.8Hz), 3.29 (1H, dd, J =2.8, 11.6Hz), 3.12 (1H, dd, J = 6.4, 11.6Hz), 10 2.38 (3H, s), 2.14-1.88 (4H, m), 1.77-1.64 (2H, m), 1.58 (1H, m), 1.16 ( 1H, m), 1.01 (3H, d, J = 7.2Hz), 1.00 (3H, d, J = 6.8Hz), 0.88 (3H, t, J = 7. 2Hz).

15

Esimerkki 13 Γ3R-(3a,6a,98.9aB Π-6 Γ Γ f 2S.3S1-l-Okso-2-propionvvlitio-3-metvvlipentwli1 amino1-9-metvvli-5-okso-oktahvdrotriatsolo-Γ 3.2-‘alatsepiini-3-karbokswlihappo 20

: ·* Me O

i

: EtCOS H O COOH

;25 » · i * t · 30 mg otsikon yhdistettä saatiin valkoisina kiteinä 60 mg:sta (0,16 mmol) esimerkissä A-3 saatua [3R-(3a,6o,9P,9aP)]-6-/ 30' [ [ (2S,3S)-l-okso-2-tio-3-metyylipentyyli]amino]-9-metyyli-5- . · ··. okso-oktahydrot iät solo [ 3,2-a] atsepiini-3-karboksyylihappoa, ·’ 17 mlssta (0,19 mmol) propionyylikloridia ja 6 mgista (0,05 mmol) vedetöntä kobolttikloridia samalla tavalla kuin esimer- • t · kissä 12. Saanto 44%.

,.:.:35

> I

80 113 6 5 6 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) d; 7.40 (1H, brd, J = 6.4Hz), 5.39 (1H, dd, J = 2.4, 6.8Hz), 4.83 (1H, d, J=9.6Hz), 4.56 (1H, m), 3.98 (1H, d, J = 5 6.8Hz), 3.29 (1H, dd, J =2.8, 11.6Hz), 3.11 (1H, dd, J = 6.8, 11.6Hz), 2.63 (2H, q, J = 7.6Hz), 2.16-1.88 (4H, m), 1.76-1.64 (2H, m), 1.57 (1H, m), 1.19 (3H, t, J = 7.6Hz), 1.17 (1H, m), 1.01 (3H, d, J = 6.8Hz), 1.0 10 0 (3H, d, J = 6. 8Hz), 0.88 (3H, t, J = 7. 2Hz).

Esimerkki 14 Γ 3R- (3α.6α,9B. 9afl Π-6-ΓΓ (2S.3S1 -l-Okso-2-bentsoyvlitio-3-metwljpentwlil amino l-9-metwli-5-okso-oktahvdrotriatsolo-15 Γ 3,2-alatsepiini-3-karbokswlihappo

Me O ( 20 •νΑ/'ιΑγ'Υ

PhCOS H O C00H, * t · • * 490 mg otsikon yhdistettä saatiin valkoisina kiteinä 434 ‘25 mg:sta (1,16 mmol) esimerkissä A-3 saatua [3R-(3α,6a,9P,9aP)]- *· 6-[[ (2S,3S)-l-okso-2-tio-3-metyylipentyyli]amino]-9-metyyli-5- okso-oktahydrotriatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksyylihappoa, : 300 mg:sta (1,33 mmol) bentsoehappoanhydridiä ja 45 mg:sta ' * 9 (0,35 mmol) vedetöntä kobolttikloridia samalla tavalla kuin . ..:30 esimerkissä 12. Saanto 88%.

1H-NMR ( 400MHz, CDC13 ) d; 8.00-7.96 (2H, m), 7.62-7.42 (4H, m), 5.3 8 (lH, dd, J = 2.4, 6.4Hz), 4.84 (1H, d, J =9.6Hz), 4.59 (1H, m), 4.20 ( ;>:35 1H, d, J = 7.2Hz), 3.27 (1H, dd, J =2.4, 11.6Hz), 3.10 (1H, dd, J = 6.4 .···. , 11. 6Hz), 2.22-1.60 (7H, m), 1.25 (1H, m), 1.06 (3H, d, J = 6.8Hz), 1.0 0 (3H, d, J = 6.8Hz), 0.92 (3H, t, J = 7.2Hz).

113656 81

Esimerkki 15 Γ 3R- (3et. 6α, 96,9aB) 1 -6- Γ Γ f 2S. 3S) -1-Qkso- (1,1-dimetvvlipro-pionwli ϊ tio-3-metwlipentwli 1 amino 1 -9-ntetwli-5-okso-okta-hvdrotiatsolor 3, 2-a1atsepiini-3-karbokswlihappo 5 ? j

Me O rVs ^νλ-ν

10 tBuCOS H o COOH

58 mg otsikon yhdistettä saatiin valkoisina kiteinä 54 mg:sta (0,14 mmol) esimerkissä A-3 saatua [3R-(3a,6a,9P,9aP)]-6-15 [ [ (2S,3S)-l-okso-2-tio-3-metyylipentyyli]amino]-9-metyyli-5- okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksyylihappoa, 27 mg:sta (0,22 mmol) pivaloyylikloridia ja 6 mg: st a (0,05 mmol) vedetöntä kobolttikloridia samalla tavalla kuin esimerkissä 12. Saanto 88%.

20 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) d; 7.41 (1H, brd, J = 6.0Hz), 5.39 (1H, dd, • · · : 0 = 2.4, 6.4Hz), 4.83 (1H, d, J= 9.6Hz), 4.56 (1H, m), 3.92 (1H, d, J = : 6.8Hz), 3.29 oh, dd, J=2.4, 11.6Hz), 3.10 (1H, dd, J = 6.4, 11.6Hz), • ··: 25 2.18-1.52 (7H, m), 1.'25 (9H, s), 1.20 (1H, m), 1.01 (3H, d, J = 6.8Hz), ' 1.00 (3H, d, J = 6.8Hz), 0.87 (3H, t, J = 7.2Hz).

I · I · I · • ··: 30 • Esimerkki 16 • ................

Γ3R-( 3a.6«,9B,9aB 11 -6-Γ Γ (2S.3S1-l-Okso-2-f 4-morfolinvvli)- asetvylitio-3-metwlipentwli 1 amino 1 -9-metwli-5-okso-oktahvd- ' ···1 rotiatsolor3.2-alatsepiini-3-karbokswlihappo 35 , f

Me O ( VSv

H o COOH O

82 113656 44 mg (0,24 mmol) 4-morfoliinietikkahappohydrokloridia liuotettiin ilmastettuun vedettömään N, N-dimetyylif ormamidiin (1,2 ml) typpiatmosfäärissä, ja sitten lisättiin 27,3 mg (1,68 mmol) Ν,Ν'-karbodi-imidatsolia jäillä jäähdyttäen, jonka 5 jälkeen sekoitettiin huoneenlämmössä yksi tunti. Lisättiin ilmastetussa, kuivassa tetrahydrofuraanissa (1,6 ml) oleva liuos, jossa oli 60 mg (0,16 mmol) esimerkissä 3 saatua [3R-(3a,6o,9p,9aP) ]-6-[ [ (2S,3S)-l-Okso-2-tio-3-metyylipentyyli]-amino] -9-metyyli-5-okso-oktahydrotiatsolo [ 3,2-a]atsepiini-3-10 karboksyylihappoa jäillä jäähdyttäen, jonka jälkeen edelleen sekoitettiin huoneenlämmössä 2 päivää. Kun reaktioliuos oli konsentroitu, siihen lisättiin etyyliasetaattia ja tavallisen suolan kyllästettyä vesiliuosta, jolloin tapahtui neste-neste-erottuminen. Orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä tavalli-15 sen suolan vesiliuoksella, jonka jälkeen kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Suodatuksen jälkeen suodos konsentroitiin alipaineessa. Saatu amorfinen aine uudelleenki-teytettiin (etyyliasetaatti-eetteri-heksaani) ja kuivattiin kuumassa ilmassa 50°C:ssa yön yli, jolloin saatiin 68 mg 20 otsikon yhdistettä valkoisina kiteinä. Saanto 85%.

1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) d; 7.40 (1H, brd, J = 6.0Hz), 5.35 (1H, dd, ij J = 2.4, 6.8Hz), 4.82 (1H, d, J=9.2Hz), 4.55 (1H, m), 3.92 (1H, d, J = ! 25 6.8Hz), 3.77 (4H, t, J = 4.4Hz), 3.31 (2H, s), 3.28 (1H, dd, J =2.4, 11 .6Hz), 3.12 (1H, dd, J = 6.8, 11.6Hz), 2.62 (4H, m), 2.14-1.52 (7H, m),

1.17 (1H, m), 1.01 (3H, d, J = 6.4Hz), 1.00 (3H, d, J = 6.8Hz), 0.87 (3H

, t, J = 7. 6Hz).

30

• I

I · • · »

. t I

* · * · 1 , 35 · · 113656 83

Esimerkki 17 f 3R-( 3a, 6ot ,96,9a6l Ί-6-Γ Γ (2S. 3S)-l-Okso-2- (4-tiomorfolinyvli1-asetwlitio-3-metwliDentYvli1 amino 1 -9-metwli-5-okso-oktahvd-rotiatsolor3.2-alatsepiini-3-karbokswlihappo 5 ΐ* 9

«SrV

10 H 0 C00H

kJ o 81 mg otsikon yhdistettä saatiin valkoisina kiteinä 70 mg:sta (0,19 mmol) esimerkissä 3 saatua [3R-(3a-,6a,9p,9aP) ]-6-15 [ [ (2S,3S)-l-okso-2-tio-3-metyylipentyyli]amino]-9-metyyli-5- okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksyylihappoa, 55mg:sta (0,28 mmol) 4-tiomorfolinyylietikkahappohydroklori-dia ja 33 mg:sta (0,21 mmol) Ν,Ν'-karbodi-imidatsolia samalla tavalla kuin esimerkissä 16. Saanto 84%.

20 ---------------------- ----------- 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) d; 7.40 (1H, brd, J = 6.4Hz), 5.33 (1H, m), . ' 4.83 (1H, d, J =9.6Hz), 4.56 (1H, m), 3.89 (1H, d, J = 7.2Hz), 3.32-3.2 ? 6 (1H, m), 3.30 (2H, s), 3.12 (1H, dd, J = 6.4, 11.2Hz), 2.88-2.82 (2H, > * « ' '*· 2 ra), 2.76-2.70 (2H, m), 2.14-1.90 (4H, m), 1.78-1.54 (3H, m), 1.18 (1H, m ), 1.01 (3H, d, J = 6.8Hz), 1.00 (3H, d, J = 6.4Hz), 0.90 (3H, t, J = 7. 6Hz).

> I

Esimerkki 18 : 30 Γ3R-(3a,6a.96.9aB)1-6-Γ Γ(2S.3S)-l-Okso-2-14-dioksotiomor- folinvvlilasetvylitio^S-metvylipentyylilaminoT-g-metvvli-S- I » okso-oktahvdrotiatsolor3,2-a1atsepiini-3-karbokswlihappo

• · F

35 Mc O / Vsx '-V^nVy

H O COOH

02S-^J o 113656 84 73 mg otsikon yhdistettä saatiin valkoisina kiteinä 70 mg:sta (0,19 mmol) esimerkissä 3 saatua [3R-(3a,6a,9P,9ap)]-6-[ [ (2S,3S)-l-okso-2-tio-3-metyylipentyyli] amino ]-9-metyyli-5-okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksyylihappoa, 5 54 mgista (0,28 mmol) 4-dioksotiomorfolinyylietikkahappoa ja 33 mg:sta (0,21 mmol) Ν,Ν'-karbodi-imidatsolia samalla tavalla kuin esimerkissä 16. Saanto 71%.

10 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) d; 7.50 (1H, brd, J = 6.4Hz), 5.27 (1H, dd, J = 3.2, 6.8Hz), 4.81 (1H, d, J =9.6Hz), 4.55 (1H, m), 3.96 (1H, d. J = 6.4Hz), 3.46 (2H, s), 3.27 (1H, dd, J = 3.2, 12.0Hz), 3.24-3.10 (5H, m) , 2.18-1.92 (4H, m), 1.76-1.63 (2H, m), 1.55 (1H, m), 1.17 (1H, m), 1.01 15 (3H, d, J = 6.8Hz), 1.00 (3H, d, J = 6.8Hz), 0.90 (3H, t, J = 7.6Hz).

Esimerkki 19 20 Γ 3R-(3a.6a.98.9aB)1-6-ΓΓ(2S.3S)-l-Okso-2-nikotinowlitio-3-metyylipentyvlil amino 1-9-metvvli-5-okso-oktahvdrotiatsolo-. ' Γ 3.2-a1atsepiini-3-karboksvvlihappo I » • · » · 25 f

"i Me O

, ·. K JyS H O COOH

N O

. 30 * « ·* 28 mg otsikon yhdistettä saatiin valkoisina kiteinä 50 mg:sta *,i.: (0,13 mmol) esimerkissä 3 saatua [3R-(3a,6a,9p,9ap) ]-6- '"· [ [ (2S,3S)-l-okso-2-tio-3-metyylipentyyli]amino]-9-metyyli-5- ,. *.:35 okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksyylihappoa, 18 mg:sta (0,15 mmol) nikotiinihappoa ja 23 mg;sta (0,14 mmol) * · Ν,Ν'-karbodi-imidatsolia samalla tavalla kuin esimerkissä 12. Saanto 44%.

113656 85 1H-NMR (400MHz, CDC13 ) d; 9.17 (1H, br), 8.80 (1H, br), 8.22 (1H, b rd, J -8.4Hz), 7.58 (1H, br), 7.43 (1H, m), 5.27 (1H, br), 4.82 (1H, br 5 ), 4.60 (1H, br), 4.23 (1H, brd, J = 7.2Hz), 3.34 (1H, br), 3.12 (1H, br) , 2.24-1.92 (4H, m), 1.80-1.58 (3H, m), 1.24 (1H, m), 1.06 (3H, d, J = 6 . 8Hz), 1.00-0.84 (6H, m).

10

Esimerkki 20 r3R-(3e,6a,9g.9aB)1-6-ΓΓ (2S.3S1-l-Okso-2-asetvvlitio-3-metvylipentvvli1aminol-9-metvvli-5-okso-oktahvdrotiatsolo-15 Γ 3,2-a1atsepiini-3-karbokswlihappo

Me O

20

AcS M O COOH

ί 4 · ’25 163 mg otsikon yhdistettä saatiin valkoisina kiteinä 212 mgtsta (0,57 mmol) esimerkissä 11 saatua [3R-(3«,6e,9a,9aP)]-' '· 6-[ [ (2S,3S)-l-Okso-2-tio-3-metyylipentyyli]amino]-9-metyyli-5- : okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksyylihappoa, 64 ml:sta (0,68 mmol) etikkahappoanhydridiä ja 22 mg:sta (0,17 . 30 mmol) vedetöntä kobolttikloridia samalla tavalla kuin esimer- .··. kissä 12. Saanto 69%.

. !·. 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) d; 7.30-7.20 (1H, m), 5.28 (1H, s), 5.08 (1H

• > · , dd, J = 2.4, 6.4Hz), 4.59 (1H, m), 3.95 (1H, d, J = 7.2Hz), 3.48 (1H, • · · ·:*·: 35 dd, J-2.4, 11.6Hz), 3.12 (1H, dd, J-6.4, 11.6Hz), 2.40 (3H, s), 2.16 C: -1.52 (7H, m), 1.18 (1H, m), 1.01 (3H, d, J = 6.4Hz), 1.00 (3H, d, J = 7 . 2Hz), 0.91 (3H, t, J = 7. 2Hz).

86 113 6 5 6

Esimerkki 21 r3R-(3g.6g«9a.9a6n-6-rr (2S.3S1 -l-Okso-2-bentsovvlitio-3-metwlipentvvlil amino 1-9-metvvli-5-okso-oktahvdrot iatsolo-Γ 3.2-al atsepiini-3-karbokswlihappo 5

Me 0 (VSv

^SrAtfnr'Y

PhCOS H o COOH

10 163 mg otsikon yhdistettä saatiin valkoisina kiteinä 265 15 mg:sta (0,71 mmol) esimerkissä 11 saatua [3R-(3g,6g,9g,9aP)]-6-[ [ (2S,3S)-l-Okso-2-tio-3-metyylipentyyli]amino]-9-metyyli-5-okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-3-karboksyylihappoa, 176 mg:sta (0,78 mmol) bentsoehappoanhydridiä ja 28 mg:sta (0,21 mmol) vedetöntä kobolttikloridia samalla tavalla kuin 20 esimerkissä 12. Saanto 48%.

: 1H-NMR < ΊΟ1» . CDC13 ) d: 7.99 (2H. ,). 7.60-7.40 (in, n), 5.22 (1 I I · "l2S H, s), 5.03 (1H. br), 4.60 (1H, m), 4.08 (1H. br), 3.42 (1H, br), 3.03 ( • » « « ! 1H, br), 2.20-1.60 (7H, m), 1.24 (1H, m), 1.10-0.90 (9H, m).

* · «· · • · » ·

• « I

Esimerkki 22 .,,.:30 Metyyli-Γ 3R-f 3g.6g,9B.9aBl 1 -6-amino-9-etvvli-5-okso-oktahvd- » · >·.# rotiasoloT 3.2-alatsepiini-3-karboksvlaatti

Et :··:35 h2nOv ... O COOMe • · • · 113656 87 1,3 g (4,13 mmol) synteesiesimerkissä 19 saatua metyyli-[3R-(3α, 6α, 9β, 9aP) ]-6-asetyyliamino-9-etyyli-5-okso-oktahydrotiat-solo[3,2-a]atsepiini-3-karboksylaattia liuotettiin 10% vety-kloridihapon liuokseen metanolissa (50 ml), jonka jälkeen 5 kuumennettiin palautusjäähdytyksessä 2 päivää. Kun oli suoritettu tislaus alipaineessa liuottimen poistamiseksi, lisättiin vettä, jonka jälkeen pestiin dikloorimetaanilla. Kun saatu vesikerros oli tehty emäksiseksi lisäämällä natriumvetykar-bonaatin kyllästettyä vesiliuosta, uutettiin dikloorimetaanil-10 la, jonka jälkeen kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla.

Suodatuksen jälkeen suodos konsentroitiin alipaineessa, jolloin saatiin 0,83 g otsikon yhdistettä värittömänä öljynä. Saanto 74%.

15 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) d; 5.32 (1H, dd. J = 3.5, 6.8Hz), 4.89 (1H. d, J =9.2Hz), 3.78 (3H, s), 3.55 (1H, dd, J = 2.0, 10.5Hz), 3.21 (1H, d d, J = 3.5, 11.6Hz) , 3.09 (1H, dd, J = 6.8, 11.6Hz), 2.20-1.40 (9H, m) , 0.92 (3H, t, J = 7.6Hz) 20

Esimerkki 23 ' ·· Metwli-T3R-f 3a.6a.9B.9a8l 1-6-Γ Γ (2S.3Sl-l-okso-2-asetwlitio- : 3-metvvlipentYvlilamino1-9-etwli-5-okso-oktahYdrotiatsolo- 25 Γ3.2-a1atsepiini-3-karboksvlaatti • t ·

Et • γ

: Me O

. 30 SAcH ° COOMe 1 · · • · : : : Liuos, jossa oli 0,70 g (3,66 mmol) (2S,3S)-2-asetyylitio-3- metyylipentaanihappoa tetrahydrof uraanissa (50 ml), lisättiin » »t . 35 0,83 g:aan (3,05 mmol) esimerkissä 22 saatua metyyli-[3R- * 1 » 1 · ’t‘ (3α,6α,9β,9aP)]-6-amino-9-etyyli-5-okso-oktahydrotiasolo[3,2- '···1 a]atsepiini-3-karboksylaattia jäillä jäähdyttäen. Tähän 88 113656 liuokseen lisättiin peräkkäin 0,70 g (3,66 mmol) l-etyyli-3-(3-dimetyyliaminopropyyli)karbodi-imidihydrokloridia (DEC.HC1), 0,4 ml (3,66 mmol) N-metyylimorfoliinia ja 0,50 g (9,3 mmol) 1-hydroksi-lH-bentsotriatsolimonohydraattia (HOBT), 5 jonka jälkeen sekoitettiin typpiatmosfäärissä huoneenlämmössä 18 tuntia. Vettä lisättiin reaktioliuokseen ja se uutettiin etyyliasetaatilla. Sitten orgaaninen kerros pestiin IN vety-kloridihapolla, kyllästetyllä natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella ja kyllästetyllä tavallisen suolan vesiliuoksella, ja 10 kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Suodatuksen jälkeen suodos konsentroitiin alipaineessa, ja saatu jäännös puhdistettiin silikageelipylväskromatografiällä (heksaani: etyyliasetaatti = 3:1), jolloin saatiin 476 mg otsikon yhdistettä värittömänä öljynä. Saanto 35%.

15 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) d; 7.36 (1H, d, J = 6.0Hz), 5.34 (1H, dd, J = 3.2, 6.4Hz), 4.86 (1H, d, J = 9.6Hz), 4.54 (1H, m), 3.97 (1H, d, J = 6.8Hz), 3.78 (3H, s), 3.21 (1H, dd, J = 3.2, 12.0Hz), 3.11 (1H, dd, J = 20 6.4, 12.0Hz). 2.38 (3H, s), 2. 16~2.04 (2H, m), 1.82“1.52 (6H, m), 1.31 (1H, m), 1.16 (1H, m), 0.99 (3H, d, J = 6.4Hz), 0.91 (3H, t, J = 7.2Hz), :.:r 0.88 (3H, t, J = 7.2Hz) ‘25 Esimerkki 24 ' * r3R-(3e.6a.9B.9a6) 1 —6— Γ Γ (2S.3S!-l-Okso-2-tio-3-metvvlipen- tvvlil amino!-9-etwli-5-okso-oktahvdrotiatsolor 3.2-alatsepii-: ni-3-karbokswlihappo . ..:30

Et

T

Me O / Y-S

ώ

.···. SH M O COOH

* t · 35 » » · 476 mg (1,07 mmol) esimerkissä 23 saatua metyyli-[3R-(3a,6a,9p,9ap)]-6-[((2S,3S)-l-okso-2-asetyylitio-3-metyyli-

» I

113656 89 pentyyli]amino]-9-etyyli-5-okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atse-piini-3-karboksylaattia liuotettiin 10,7 ml:aan ilmastettua etanolia, ja lisättiin 5,36 ml ilmastettua IN 1itiumhydroksidin vesiliuosta jäillä jäähdyttäen, jonka jälkeen sekoitettiin 5 typpiatmosfäärissä yksi tunti. Reaktioliuos tehtiin happamaksi lisäämällä 2N vetykloridihappoa siihen jäillä jäähdyttäen ja laimennettiin vedellä, jonka jälkeen uutettiin dikloorime-taanilla. Orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä tavallisen suolan vesiliuoksella, ja kuivattiin vedettömällä magnesium-10 sulfaatilla. Suodatuksen jälkeen suodos konsentroitiin alipaineessa. Saatu amorfinen aine trituroitiin heksaanilla, jonka jälkeen kerättiin talteen suodattamalla. Tämä kuivattiin kuumassa ilmassa 50°C:ssa 12 tuntia, jolloin saatiin 300 mg otsikon yhdistettä. Saanto 72%.

15 1H-NMR ( 400MHz , CDC13 ) d; 7.66 (1H, d, J = 6.4Hz), 5.36 (1H, dd, J = 3.2, 6.4Hz), 4.91 (1H, d, J = 9.2Hz), 4.61 (1H, tn), 3.28 (1H, dd, J = 3.2, 12.0Hz), 3.22 (1H, dd, J = 6.8, 8.8Hz), 3.13 (1H, dd, J = 6.4, 12.0 20 Hz), 2.16-2.08 (2H, m), 1.98 (1H, m), 1.87 (1H, d, J=8.8Hz), 1.84 ‘1.56 . (5H, tn), 1.38~1.18 (2H, tn), 0.99 (3H, d, J = 6.4Hz), 0.93 (3H, t, J = 7 . 2Hz), 0.90 (3H, t, J = 7.6Hz) * • · • · • · · __________________ • · < · *25 * · * > · · • · • · · I · ♦ ....:30 * · •«« • · »«· » · 1 t I I ut lit • · • 1 • · · I I » I » • · · 1 t · • · I I <

Claims (5)

113656 90 1. 6-amino-5-okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atsepiini-S-kar-boksyylihappojohdannainen, jota esittää yleinen kaava (II) , tai sen farmakologisesti sopiva suola: p4 <«> o I a

5 COOR° (jossa toinen ryhmistä R4 ja R5 on vetyatomi ja toinen on alempi alkyyli tai vaihtoehtoisesti R4 ja R5 voivat muodostaa sykloheksyylirenkaan yhdessä niiden hiiliatomien kanssa, joihin ne ovat sitoutuneet; ja R8 on vetyatomi tai karbok-10 syyliryhmän suojaryhmä, joka on alempi alkyyli).

2. Derivat eller ett farmakologiskt acceptabelt salt därav enligt patentkrav 1, som representeras av den allmänna formeln (II' ) : » : ::^vO ^11 : o I .·· , 15 C00R8 I » (vari R5 betecknar lägre alkyl och R8 betecknar detsamma som : ( : i patentkrav 1).

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen johdannainen tai sen farmakologisesti sopiva suola, jota esittää yleinen kaava (II·): . .R5 )—S Η,Ν-^y^N7 \ t11')

0. O COOR 15 (jossa R5 on alempi alkyyliryhmä ja R8 tarkoittaa samaa kuin patenttivaatimuksessa 1). .·· 3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen johdannainen tai sen • · farmakologisesti sopiva suola, jota esittää yleinen kaava (II"): 113656 91 H \ t11") 0 8 COOR (jossa R4, R5 ja Rb tarkoittavat samaa kuin patenttivaatimuksessa 1) .

3. Derivat eller ett farmakologiskt acceptabelt salt därav • enligt patentkrav 1, som representeras av den allmänna for- : 20 mein (II"): 113656 104 H f11"' 0 * 8 COORö (väri R4, R5 och R8 betecknar detsamma som i patentkrav 1) .

4. Förfarande för framställning av ett 6-amino-5-oxo-okta-hydrotiazolo[3,2-a]azepin-3-karboxylsyraderivat som repre-5 senteras av den allmänna formeln (II): p4 H2HArN{~3 (I1) o I 8 COORö (väri den ena av grupperna R4 och R5 representerar en väte-atom och den andra representerar lägre alkyl eller alterna-tivt kan R4 och R5 bilda en cyklohexylring tillsammans med 10 kolatomerna vid vilka de är bundna; och R8 representerar en : : : väteatom eller en skyddsgrupp för en karboxylgrupp som ut- ’ görs av lägre alkyl), , kännetecknat av att man avlägsnar skyddet frän ett tiazoli- ,, dinderivat, som representeras av den allmänna formeln (5): » * R5 R11OOCL .. / \ : / "COOR8 : R4 h ; 15 NH-Z Λ (5) I I (väri R8 representerar en skyddsgrupp för karboxylsyra; R4 ; och R5 betecknar det samma som ovan; R11 representerar en skyddsgrupp för karboxylsyra; och Z representerar en acyl-grupp eller en karbamatgrupp), 113656 105 för bildande av ett tiazolidinderivat, som representeras av den allmänna formeln (6): R5 s__ HOOC. / \ /^~-coor8 d4 H NH-Z (6) (väri R4, R5, R8 och Z betecknar det samma som ovan) , 5 man cykliserar detta derivat för erhällande av ett aminosy-raderivat, som representeras av denna allmänna formel (7): R4 \ R5 )-S !'" r V

0 I 8 COOR (7) (väri R4, R5, R8 och Z betecknar det samma som ovan) , » j j ; och man överför detta derivat tili ett aminosyraderivat, som *:*·* 10 representeras av den allmänna formeln (II) .

5. Förfarande för framställning av 6-amino-5-oxo-oktahydro-‘ * tiazolo[3,2-a]azepin-3-karboxylsyraderivat som representeras ’<·’ av den allmänna formeln (II) : p4 ; H2N^S^Nv^ {ii> O I o COOR ‘ 15 (väri den ena av grupperna R4 och R5 representerar en väte- atom och den andra representerar lägre alkyl eller alterna- 113656 106 tivt kan R4 och R5 bilda en cyklohexylring tillsammans med kolatomerna vid vilka de är bundna; och R8 representerar en väteatom eller en skyddsgrupp för en karboxylgrupp som ut-görs av lägre alkyl), 5 kännetecknat av att man omsätter ett hemiacetal, som repre-senteras av den allmänna formeln (3): R4 r12ox^X^n coor11 Z (3) (väri R4 och R5 betecknar det samma som ovan; R11 representerar en skyddsgrupp för karboxylsyra; R12 representeras av den 10 grupp som bildar en aldehydekvivalent tillsammans med den endocykliska kväveatomen; och Z representerar en acylgrupp eller karbamatgrupp), . med ett cysteinderivat, som representeras av den allmänna ; , formeln (4): .COOR8 ·:1 : HS '15 NH2 (4) t » (väri R8 representerar en skyddsgrupp för karboxylsyra), varvid man erhäller ett tiazolidinderivat, som representeras av den allmänna formeln (5): r5 S : r1:looci .. / \ : / -coor8 R4 H NH-Z (5) 113656 107 (väri R4, R5, R8, R11 och Z betecknar det samma som ovan) , man cykliserar ett tiazolidinderivat, som erhölls genom att ytterligare avlägsna skyddet frän derivatet ovan och som re-presenteras av den allmänna formeln (6): R5__ HOO ^ yS~~~ "COOR8 I4 H

5 NH-Z λ (6) (väri R4, R5, R8 och Z betecknar det samma som ovan), varvid man erhaller ett aminosyraderivat, som representeras av den allmänna formeln (7): R4 \ R5 )-S 0 > s COOR (7) ;· · 10 (väri R4, R5, R8 och Z betecknar det sainma som ovan), * * och man avlägsnar skyddet frän detta derivat, varvid man er-häller ett aminosyraderivat, som representeras av den ali- » i • » ' manna formeln (II) . y, , 6. Förfarande för framställning av ett 6-amino-5-oxo-ok- t ,·· , 15 tahydrotiazolo [3,2-a] azepin-3-karboxylsyraderivat som rep resenteras av den allmänna formeln (II): » » t : » t 113656 108 R4 (II) 0. a COOR0 (vari den ena av grupperna R4 och R5 representerar en väte-atom och den andra representerar lägre alkyl eller alterna-tivt kan R4 och R5 bilda en cyklohexylring tillsammans med 5 kolatomerna vid vilka de är bundna; och R8 representerar en väteatom eller en skyddsgrupp för en karboxylgrupp som ut-görs av lägre alkyl), kännetecknat av att man oxiderar elektrolytiskt ett pipeko-linsyraderivat, som representeras av den allmänna formeln 10 (2): R4 \ u N COOR i · I z (2) > t (vari R4 och R5 betecknar det samma som ovan, R11 represente-* rar en skyddsgrupp för karboxylsyra; och Z representerar en : acylgrupp eller en karbamatgrupp) , 15 för bildande av ett hemiacetal som representeras av den allmänna formeln (3): 113656 109 R4 r12o n coor11 Z (3) (väri R4, R5, R11 och Z betecknar det samma som ovan; och R12 representerar en grupp som bildar en aldehydekvivalent till-sammans med den endocykliska kväveatomen) , 5 man omsätter det erhällna hemiacetalet (3) med ett cystein-derivat, som representeras av den allmänna formeln (4): ... .COOR8 HS If (4) (väri R8 representerar en skyddsgrupp för en karboxylsyra), varvid man erhäller ett tiazolidinderivat, som representeras 10 av den allmänna formeln (5): i t; ’: R5 s__ ·:··: / ‘COOR8 p4 H NH-Z K (5) (väri R4, R5, R8, R11 och Z betecknar det samma som ovan) , • 9 * V ; ; man cykliserar ett tiazolidinderivat, som erhölls genom att , ytterligare avlägsna skyddet frän derivatet ovan och som re- ’ ; 15 presenteras av den allmänna formeln (6): 1in 113656 110 R5 s__ HOOC / \ / COOR8 R4 H NH-Z K (6) (väri R4, R5, R8 och Z betecknar det sanrana som ovan) , varvid man erhäller ett aminosyraderivat, som representeras av den allmänna formeln (7): R4 \ R5 )-S

0 I 8

5 COOR (7) (väri R4, R5, R8 och Z betecknar det samma som ovan) , och man överför detta derivat till ett aminosyraderivat som representeras av den allmänna formeln (II). • ; 7. Förfarande enligt patentkrav 4 för framställning av ett .., : 10 derivat, som representeras av den allmänna formeln (II") : i U H2HA(H-> oi COOR0 (väri den ena av grupperna R4 och R5 representerar en väte-11 atom och den andra representerar lägre alkyl eller alterna- tivt kan R4 och R5 bilda en cyklohexylring tillsammans med 15 kolatomerna vid vilka de är bundna, och Rs representerar en väteatom eller en skyddsgrupp för en karboxylgrupp som ut-görs av lägre alkyl), 113656 111 kännetecknat av att man avlägsnar skyddet frän ett tiazoli-dinderivat, som representeras av den allmänna formeln (5a): R5 s___ R1XOOCL / \ /"^COOR8 § N Ξ 4 H NH-Z * (5a) (väri R8 representerar en skyddsgrupp för karboxylsyra; R4 5 och R5 betecknar det sarama som ovan; R11 representerar en skyddsgrupp för karboxylsyra; och Z representerar en acyl-grupp eller en karbamatgrupp), för bildande av ett tiazolidinderivat, som representeras av den allmänna formeln (6a): R5 s_ HOOCt I / \ /^'COOR8 = N = R4 H

10 NH-Z Λ (6a) (väri R4, R5, R8 och Z betecknar det samma som ovan) , '· man cykliserar detta derivat, varvid man erhäller ett amino- syraderivat, som representeras av den allmänna formeln (7a): :;i ° T ' COOR8 (7a) ! 15 (väri R4, Rs, R8 och Ζ betecknar det samma som ovan) , 113656 112 och man överför detta derivat till ett aminosyraderivat, som representeras av den allmänna formeln (II").

8. Förfarande enligt patentkrav 5 för framställning av ett derivat, som representeras av den allmänna formeln (II"): H* 0. a

5 COORa (väri den ena av grupperna R4 och R5 representerar en väte-atom och den andra representerar lägre alkyl eller alterna-tivt kan R4 och R5 bilda en cyklohexylring tillsammans med kolatomerna vid vilka de är bundna; och R8 representerar en 10 väteatom eller en skyddsgrupp för karboxylgrupp som utgörs av lägre alkyl), kännetecknat av att man omsätter ett hemiacetal som representeras av den allmänna formeln (3a): R4 ! : -yk, R120 N^^^COOR1 χ z (3a) 15 (väri R4 och R5 betecknar det samma som ovan; R11 represente-• rar en skyddsgrupp för karboxylsyra; och väri R12 represente rar en grupp, som bildar en aldehydekvivalent tillsammans med den endocykliska kväveatomen; och Z representerar en acylgrupp eller en karbamatgrupp), 20 med ett cysteinderivat, som representeras av den allmänna formeln (4a): 113656 113 .COOR8 HS NH2 (4a) (väri R8 representerar en skyddsgrupp för karboxylsyra), varvid man erhäller ett tiazolidinderivat (5a): R5 R11OOC c_. ΥΥΧλ- NH-Z R4 N H (5a) 5 (väri R4, R5, R8, R11 och Z betecknar det samma som ovan) , man cykliserar ett tiazolidinderivat, som erhölls genom att ytterligare avlägsna skyddet frän derivatet ovan och som representeras av den allmänna formeln (6a): R5 HOOC ^ o__ ΥΥ\λ- : : : NH-Z r4 N ....: H (6a) • ’ 10 (väri R4, R5, R8 och Z betecknar det samma som ovan) , varvid man erhäller ett aminosyraderivat, som representeras av den allmänna formeln (7a): R4 ί Z-HN^^y COOR8 (7a) 113656 114 (väri R4, R5, R8 och Z betecknar det samma som ovan) , och man överför detta derivat tili ett aminosyraderivat, som representeras av den allmänna formeln (II").

9. Förfarande enligt patentkrav 6 för framställning av ett 5 derivat, som representeras av den allmänna formeln (II"): K \ \ (I1·' 0. s COOR° (väri en ena av grupperna R4 och R5 representerar en väteatom och den andra representerar lägre alkyl eller alternativt kan R4 och R5 bilda en cyklohexylring tillsammans med kolato-10 merna vid vilka det är bundna, och R8 representerar en väteatom eller en skyddsgrupp för karboxylgrupp, som utgörs av lägre alkyl), kännetecknat av att man oxiderar elektrolytiskt ett pipeko-linsyraderivat, som representeras av den allmänna formeln ; . 15 (2a) : : R4 N^^^COOR11 i z (2a) » ” (väri R4 och R5 betecknar det samma som ovan; R11 represente- *” rar en skyddsgrupp för karboxylsyra; och Z representerar en : acylgrupp eller en karbamatgrupp) , 20 varvid det bildas ett hemiacetal, som representeras av den allmänna formeln (3a): 113656 115 R4 r12ojJ^^'n'^S^coor11 Z (3a) (väri R4, R5, R11 och Z betecknar det samma som ovan; och R12 representerar en grupp som bildar en aldehydekvivalent till-sammans med den endocykliska kväveatomen), 5 man omsätter hemiacetalet (3a) med ett cysteinderivat, som representeras av den allmänna formeln (4a): .. .COOR8 HS NH2 (4a) (väri R8 representerar en skyddsgrupp för karboxylsyra), varvid man erhaller ett tiazolidinderivat, som representeras 10 av den allmänna formeln (5a): :.: : R5 R^OOC λ ς__ YYiL NH-Z R4 N H (5a) (väri R4, R5, R8, R11 och Z betecknar det samma som ovan), man cykliserar ett tiazolidinderivat, som erhölls genom att ί ytterligare avlägsna skyddet frän derivatet ovan och som re- • 15 presenteras av den allmänna formeln (6a): 116 113656 R5 HOOC. c-v yyxx„, NH-Z R4 N H (6a) (väri R4, R5, R8 och Z betecknar det sairana som ovan) , varvid man erhäller ett aminosyraderivat, som representeras av den allmänna formeln (7a): R4 5 z - N s.^^3

4. Menetelmä 6-amino-5-okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atse-5 piini-3-karboksyylihappojohdannaisen valmistamiseksi, jota esittää yleinen kaava (II): p4

0 I 8 COOR ···.' (jossa toinen ryhmistä R4 ja R5 on vetyatomi ja toinen on alempi alkyyli tai vaihtoehtoisesti R4 ja R5 voivat muodostaa 10 sykloheksyylirenkaan yhdessä niiden hiiliatomien kanssa, joihin ne ovat sitoutuneet, ja R8 on vetyatomi tai karbok-·· · syyliryhmän suojaryhmä, joka on alempi alkyyli), ‘ ’ tunnettu siitä, että poistetaan suojaus tiatsolidiinijohdan naisesta, jota esittää yleinen kaava (5): R5 R4 H

15 NH-Z K (5) (jossa R8 on karboksyylihapon suojaryhmä; R4 ja R5 tarkoitta-• · vat samaa kuin edellä; R11 on karboksyylihapon suojaryhmä; ja ' ' Z on asyyliryhmä tai karbamaattiryhmä), 113656 92 tiatsolidiinijohdannaiseksi, jota esittää yleinen kaava (6): R5 HOOC. JL / \ / COOR8 R4 H NH-Z K (6) (jossa R4, R5, R8 ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä), syklisoidaan tämä johdannainen, jolloin saadaan aminohappo-5 johdannainen, jota esittää yleinen kaava (7): R4 5 z"u )r'0

0 I 9 COOR (7) ;’ ; (jossa R4, R5, R8 ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä) , ·· ja muutetaan tämä johdannainen aminohappojohdannaiseksi, jo- · ta esittää yleinen kaava (II).

5. Menetelmä 6-amino-5-okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atse- piini-3-karboksyylihappojohdannaisen valmistamiseksi, jota esittää yleinen kaava (II): „4 : · 1111 O I o :· COOR0 ; (jossa toinen ryhmistä R4 ja R5 on vetyatomi ja toinen on ' ·“ 15 alempi alkyyli tai vaihtoehtoisesti R4 ja R5 voivat muodostaa sykloheksyylirenkaan yhdessä niiden hiiliatomien kanssa, 113656 93 joihin ne ovat sitoutuneet; ja R8 on vetyatomi tai karbok-syyliryhmän suojaryhmä, joka on alempi alkyyli), tunnettu siitä, että annetaan yleinen kaavan (3) mukaisen hemiasetaalin: R4 Rl^. r12o n coor11 5 z (3) (jossa R4 ja R5 tarkoittavat samaa kuin edellä; R11 on karbok-syylihapon suojaryhmä; R12 esittää ryhmää, joka muodostaa al-dehydiekvivalentin yhdessä endosyklisen typpiatomin kanssa; ja Z on asyyliryhmä tai karbamaattiryhmä), 10 reagoida kysteiinijohdannaisen kanssa, jota esittää yleinen kaava (4): .COOR8 .. ' HS i;j NH^ (4) ’· * (jossa R8 on karboksyylihapon suojaryhmä) , « jolloin saadaan tiatsolidiinijohdannainen, jota esittää 15 yleinen kaava (5): R5 . RnOOCi .. I. I \ . y/ COOR8 r4 h NH-Z (5) . (jossa R4, R5, R8, R11 ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä), 94 113656 syklisoidaan tiatsolidiinijohdannainen, joka saatiin edelleen poistamalla suojaus edellä olevasta johdannaisesta ja jota esittää yleinen kaava (6): R5 HOOC. / \ / COOR8 R4 H NH-Z K (6) 5 (jossa R4, R5, R8 ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä), jolloin saadaan aminohappojohdannainen, jota esittää yleinen kaava (7) : R4 5 Z-HN • !· COOR8 (7) (jossa R4, R5, R8 ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä) , , 10 ja poistetaan suojaus tästä johdannaisesta, jolloin saadaan aminohappojohdannainen, jota esittää yleinen kaava (II).

6. Menetelmä 6-amino-5-okso-oktahydrotiatsolo[3,2-a]atse-piini-3-karboksyylihappojohdannaisen valmistamiseksi, jota esittää yleinen kaava (II): '' ' R\ :*· * o |

15 COOR0 (II) 113656 95 (jossa toinen ryhmistä R4 ja R5 on vetyatomi ja toinen on alempi alkyyli tai vaihtoehtoisesti R4 ja R5 voivat muodostaa sykloheksyylirenkaan yhdessä niiden hiiliatomien kanssa, joihin ne ovat sitoutuneet, ja R8 on vetyatomi tai karbok-5 syyliryhmän suojaryhmä, joka on alempi alkyyli), tunnettu siitä, että hapetetaan elektrolyyttisesti pipeko-liinihappojohdannainen, jota esittää yleinen kaava (2): R4 ^’N^^'COOR11 z (2) (jossa R4 ja R5 tarkoittavat samaa kuin edellä, Ru on karbok-10 syylihapon suojaryhmä; ja Z on asyyliryhmä tai karbamaatti-ryhmä) , : jolloin syntyy yleinen kaavan (3) mukainen hemiasetaali: ... R4 κ5·γΧ r^o^^^n'^^coor11 z (3) (jossa R4, R5, R11 ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä; ja R12 . , 15 esittää ryhmää, joka muodostaa aldehydiekvivalentin yhdessä endosyklisen typpiatomin kanssa), , . annetaan saadun hemiasetaalin (3) reagoida kysteiinijohdan- : naisen kanssa, jota esittää yleinen kaava (4): 113656 96 >>. .COOR8 HS nh2 (4) (jossa R8 on karboksyylihapon suojaryhmä), jolloin saadaan tiatsolidiinijohdannainen, jota esittää yleinen kaava (5): R5 s__ RnOOCL 1. I \ ^ / 'COOR8 R4 H

5 NH-Z K (5) (jossa R4, R5, R8, R11 ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä), syklisoidaan tiatsolidiinijohdannainen, joka saatiin edelleen poistamalla suojaus edellä olevasta johdannaisesta ja jota esittää yleinen kaava (6): R5 h°oc / \ > / COOR8 N • 4 H : 10 nh-z r (6) (jossa R4, R5, R8 ja Ζ tarkoittavat samaa kuin edellä) , t jolloin saadaan aminohappojohdannainen, jota esittää yleinen kaava (7) : : ': R4 5 Z_HN ; •i o| COOR (7) 113656 97 (jossa R4, R5, R8 ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä) , ja muutetaan tämä johdannainen aminohappojohdannaiseksi, jota esittää yleinen kaava (II).

7. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä johdannaisen 5 valmistamiseksi, jota esittää yleinen kaava (II"): H ! \ <Iin> 0. g COORs (jossa toinen ryhmistä R4 ja R5 on vetyatomi ja toinen on alempi alkyyli tai vaihtoehtoisesti R4 ja R5 voivat muodostaa sykloheksyylirenkaan yhdessä niiden hiiliatomien kanssa, 10 joihin ne ovat sitoutuneet, ja R8 on vetyatomi tai karbok-syyliryhmän suojaryhmä, joka on alempi alkyyli), ; tunnettu siitä, että poistetaan suojaus tiatsolidiinijohdan- naisesta, jota esittää yleinen kaava (5a) : R5 ^ = r4 H NH-Z K (5a) 15 (jossa R8 on karboksyylihapon suojaryhmä; R4 ja R5 tarkoittavat samaa kuin edellä; R11 on karboksyylihapon suojaryhmä; ja '· 1 Z on asyyliryhmä tai karbamaattiryhmä), t ’ ‘ tiatsolidiinijohdannaiseksi, jota esittää yleinen kaava {6a): 98 113656 R5 ^ ^ NH-Z r4 H (6a) (jossa R4, R5, R8 ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä) , syklisoidaan tämä johdannainen, jolloin saadaan aminohappo -johdannainen, jota esittää yleinen kaava (7a): Z-HN

5 COOR8 (7a) (jossa R4, R5, R8 ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä) , ja muutetaan tämä johdannainen aminohappojohdannaiseksi, jota esittää yleinen kaava (II").

8. Patenttivaatimuksen 5 mukainen menetelmä johdannaisen 10 valmistamiseksi, jota esittää yleinen kaava (II"): K- ;·· oi • ‘ COORÖ ► » » ·;» (jossa toinen ryhmistä R4 ja R5 on vetyatomi ja toinen on alempi alkyyli tai vaihtoehtoisesti R4 ja R5 voivat muodostaa • * ‘ * sykloheksyylirenkaan yhdessä niiden hiiliatomien kanssa, 15 joihin ne ovat sitoutuneet; ja R8 on vetyatomi tai karbok-syyliryhmän suojaryhmä, joka on alempi alkyyli), 113656 99 tunnettu siitä, että yleisen kaavan (3a) mukaisen hemiase-taaIin: R4 R12OjJ'/VVNX^^CC)OR11 z (3a) (jossa R4 ja R5 tarkoittavat samaa kuin edellä; R11 on karbok-5 syylihapon suojaryhmä; ja jossa R12 esittää ryhmää, joka muodostaa aldehydiekvivalentin yhdessä endosyklisen typpiatomin kanssa; ja Z on asyyliryhmä tai karbamaattiryhmä), annetaan reagoida kysteiinijohdannaisen kanssa, jota esittää yleinen kaava (4a) : .COOR8 HS Y I 10 NH2 (4a) (jossa R8 on karboksyylihapon suojaryhmä), ·· jolloin saadaan tiatsolidiinijohdannainen (5a): r5 RnOOCv A e__ γγχλ, ·· : NH-Z R4 n H (5a) ‘ (jossa R4, R5, R8, R11 ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä), ·'· 15 syklisoidaan tiatsolidiinijohdannainen, joka saatiin edel- leen poistamalla suojaus edellä olevasta johdannaisesta ja ..... jota esittää yleinen kaava (6a): 113656 100 R5 HOOC ς__ yyV\ = I \ / ^^COOR8 NH-Z R4 N H (6a) (jossa R4, R5, Re ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä) , jolloin saadaan aminohappojohdannainen, jota esittää yleinen kaava (7a) : R4 s ---

5 COOR8 (7a) (jossa R4, R5, R8 ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä) , ja muutetaan tämä johdannainen aminohappojohdannaiseksi, jota esittää yleinen kaava (II").

9. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä johdannaisen - . 10 valmistamiseksi, jota esittää yleinen kaava (II"): K O l a . . COORö 1 (jossa toinen ryhmistä R4 ja R5 on vetyatomi ja toinen on alempi alkyyli tai vaihtoehtoisesti R4 ja R5 voivat muodostaa : · sykloheksyylirenkaan yhdessä niiden hiiliatomien kanssa, ‘ 1 15 joihin ne ovat sitoutuneet, ja R8 on vetyatomi tai karbok- syyliryhmän suojaryhmä, joka on alempi alkyyli), 113656 101 tunnettu siitä, että hapetetaan elektrolyyttisesti pipeko-liinihappojohdannainen, jota esittää yleinen kaava (2a): R4 N'^^^COOR11 z (2a) (jossa R4 ja R5 tarkoittavat samaa kuin edellä; Rn on karbok-5 syylihapon suojaryhmä; ja Z on asyyliryhmä tai karbamaatti-ryhmä), jolloin syntyy hemiasetaali, jota esittää yleinen kaava (3a) : R4 • · R120“rrrSs'>sN'//,^^C00R11 Z (3a) : ^ 10 (jossa R4, R5, Rn ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä; ja R12 esittää ryhmää, joka muodostaa aldehydiekvivalentin yhdessä endosyklisen typpiatomin kanssa), annetaan hemiasetaalin (3a) reagoida kysteiinijohdannaisen '· ’ kanssa, jota esittää yleinen kaava (4a) : '· · XOOR8 hs .·.· 15 NH2 (4a) ·1 (jossa R8 on karboksyylihapon suojaryhmä) , 113656 102 jolloin saadaan tiatsolidiinijohdannainen, jota esittää yleinen kaava (5a): R5 R^OOC o_. vyvi I L \ .X^^COOR8 NH-Z R4 N H (5a) (jossa R4, R5, R8, R11 ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä) , 5 syklisoidaan tiatsolidiinijohdannainen, joka saatiin edelleen poistamalla suojaus edellä olevasta johdannaisesta ja jota esittää yleinen kaava (6a) : R5 HOOC ς__ vVxx»· NH-Z R4 N H (6a) .*’! (jossa R4, R5, Rb ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä) , 10 jolloin saadaan aminohappojohdannainen, jota esittää yleinen 'N* kaava (7a): R4 s . ’ COOR8 (7a) (jossa R4, R5, R8 ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä) , ja muutetaan tämä johdannainen aminohappojohdannaiseksi, jo-15 ta esittää yleinen kaava (II"). 113656 103 1. 6-amino-5-oxo-oktahydrotiazolo[3,2-a]azepin-3-karboxyl-syraderivat som representeras av den allmänna formeln (II) eller ett farmakologiskt acceptabelt salt därav: p4 h2n^n^'Nn \ (ii) o I

5 C00R8 (vari den ena av grupperna R4 och R5 representerar en väteat om och den andra representerar lägre alkyl eller alterna-tivt kan R4 och R5 bilda en cyklohexylring tillsammans med kolatomerna vid vilka de är bundna; och R8 representerar en 10 väteatom eller en skyddsgrupp för en karboxylgrupp som ut-görs av lägre alkyl).

5 COOR8 (7a) (väri R4, R5, R8 och Z betecknar det samma som ovan) , och man överför detta derivat till ett aminosyraderivat, som representeras av den allmänna formeln (II"). »