FI106197B - Menetelmä farmaseuttisesti käyttökelpoisten dipeptoidityyppisten alfa-metyylitryptofaanijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

106197

Menetelmä farmaseuttisesti käyttökelpoisten dipeptoidi-tyyppisten a-metyylitryptofaanijohdannaisten valmistamiseksi - Förfarande för framställning av farmaceutiskt använd-bara α-metyltryptofanderivat av dipeptoidtyp

Keskeisiin kolekystokiniini- (CCK) reseptoreihin vaikutta-vat aineet saavat aikaan kylläisyyden tunteen (Schick,

Yaksh ja Go, Regulatory Peptides 14:277-291, 1986). Niiden oletetaan toimivan myös analgeettisina aineina (Hill, Hughes ja Pittaway, Neuropharmacoloqy 26:289-300, 1987) ja antikonvulsiivisina aineina (MacVicar, Kerrin ja Davidson, Brain Research, 406:130-135, 1987).

CCK-peptidien alentuneita tasoja on havaittu skitsofreenisten potilaiden aivoissa verrattuina kontrolleihin (Roberts, Ferrier, Lee, Crow, Johnstone, Owens, Bacarese-Ha-milton, McGregor, O'Shaughnessey, Polak ja Bloom, Brain Research 288, 199 - 211, 1983). On ehdotettu, että nucleus accumbensiln ulottuvien CCK-neuronien aktiivisuuden muutoksilla voi olla merkitystä skitsofreenisissa prosesseissa, siten että ne vaikuttavat dopaminergiseen toimintaan (Totterdell ja Smith, Neuroscience 19, 181 - 192, 1986).

Tämä vastaa useita raportteja siitä, että CCK-peptidit moduloivat dopaminergistä toimintaa tyviganglioissa ja etenkin nucleus accumbensissa (Weiss, Tanzer ja Ettenberg, Pharmacology, Biochemistry and Behaviour 30, 309 - 317, 1988; Schneider, Allpert ja Iversen, Peptides 4, 749 -753, 1983). Tästä syystä voidaan odottaa, että CCK-reseptori-aktiivisuutta modifioivat aineet voivat olla terapeuttisesti arvokkaita tiloissa, jotka liittyvät keskeisen dopaminergisen toiminnan häiriytyneeseen toimintaan, kuten skitsofreniassa ja Parkinsonin taudissa.

CCK- ja gastriini-peptideillä on yhteinen karboksi-pään pentapeptidisekvenssi ja CCK-peptidit voivat sitoutua vatsan limakalvon gastriini-reseptoriin ja saada aikaan hapon erittymistä useissa lajeissa, ihminen mukaanlukien 2 106197 (Konturek, Gastrointestinal Hormones, Ch. 23, s. 529 -564, 1980, julk. G. B. J. Glass, Raven Press, NY). CCK-B-reseptorin antagonistien voitaisiin myös odottaa olevan vatsan gastriini-reseptorin antagonisteja, ja tämä saattaisi olla myös arvokasta tiloissa, joissa esiintyy liiallista hapon erittymistä.

CCK- ja gastriini-peptideillä on troofisia vaikutuksia haimaan ja gastrointestinaalisen alueen erilaisiin kudoksiin (Johnson, ibid., s. 507 - 527), vaikutuksia, jotka liittyvät lisääntyneeseen DNA- ja RNA-synteesiin. Lisäksi gastriinia erittäviä soluja liittyy määrättyihin gastro-intestinaalisiin tuumoreihin, kuten Zollinger-Ellison-syndroomassa (Stadi!, ibid., s. 279 - 739), ja muutamat kolorektaaliset (paksusuoli-peräsuoli-) tuumorit voivat olla myös gastriini/CCK-riippuvaisia (Singh, Walker, Townsend ja Thompson, Cancer Research, 46, 1612 (1986), ja Smith, J. P., Gastroenterology, 95, 1541 (1988)). CCK/-gastriini-reseptorien antagonistit voisivat siten olla terapeuttisesti arvokkaita antituumoriaineina.

CCK-peptidit ovat laajalti jakautuneet kehon erilaisiin elimiin, kuten gastrointestinaalinen alue, endokriiniset rauhaset (umpirauhaset) ja perifeerisen ja keskushermoston hermot. On tunnistettu erilaisia biologisesti aktiivisia : muotoja, mukaanlukien 33-aminohappo-hormoni ja tämän pep tidin erilaisia karboksyylipään fragmentteja (esim. okta-peptidi CCK26-33 ja tetrapeptidi CCK30-33). (G. J.

Dockray, Br. Med. Bull., 38 (No. 3): 253 - 258, 1982).

Erilaisten CCK-peptidien ajatellaan osallistuvan pehmeiden lihasten supistumiskyvyn, eksokriinisten (avoeritteisten) ja endokriinisten (sisäeritteisten) rauhasten erityksen, tuntohermosiirron ja erilaisten aivotoimintojen valvontaan. Luontaisten peptidien antaminen saa aikaan sappirakon supistumista, amylaasierittymistä, keskushermosolujen 3 106197 kiihottumista, ruokinnan eston, antikonvulsiivisia vaikutuksia ja muita käyttäytymisvaikutuksia ("Cholecystokinin: Isolation, Structure and Functions", G. B. J. Glass, julk., Raven Press, New York, I960, s. 169 - 221; J. E. Morley, Life Sciences 27: 355 - 368, 1980; "Cholecystokinin in the Nervous System", J. de Belleroche ja G. J. Dockray, julk., Ellis Horwood, Chichester, Englanti, 1984, S. 110 - 127).

CCK-peptidien korkeat konsentraatiot useilla aivojen alueilla osoittavat myös tärkeitä aivotoimintoja näille peptideille (G. J. Dockray, Br. Med. Bull., 38 (No. 3): 253 - 258, 1982). Aivojen CCK:n runsain löydetty muoto on CCK26-33, vaikkakin esiintyy myös pieniä määriä CCK30-33:a (Rehfeld ja Gotterman, J. Neurochem., 32: 1339 - 1341, 1979). Keskushermoston CCK:n merkitystä ei tunneta varmuudella, mutta se on paljastunut syömisen kontrollissa (Del-la-Fera ja Baile, Science 206: 471 - 473, 1979).

Tällä hetkellä käytettävissä olevat ruokahalua ehkäisevät lääkeaineet vaikuttavat joko perifeerisesti lisäämällä energian kulutusta (kuten tyroksiini) tai jollakin muulla tavalla (kuten biguanidit) tai ne toimivat kohdistamalla keskeisen vaikutuksen ruokahaluun tai kylläisyyteen.

. Keskeisesti vaikuttavat ruokahalua ehkäisevät aineet joko tehostavat keskeisen katekolamiinin ratoja ja pyrkivät olemaan stimulantteja (esimerkiksi amfetamiini) tai vaikuttavat serotonergisiin ratoihin (esimerkiksi fenflura-miini). Lääketerapian muut muodot käsittävät täyteaineita, jotka vaikuttavat täyttämällä mahalaukun ja saamalla täl-• löin aikaan kylläisyyden "tunteen".

CCK:n tiedetään olevan läsnä joissakin kortikaalisissa in-terneuroneissa, jotka sisältävät myös gamma-aminovoihappoa (GABA) (H. Demeulemeester et ai., J. Neuroscience 8, 988 - 4 106197 1000, 1988). Aineita, jotka modifioivat GABA-vaikutusta, voidaan käyttää anksiolyyttisinä tai hypnoottisina aineina (S. C. Harvey, The Pharmacological Basis of Therapeutics (7. painos) 1985, s. 339 - 371, MacMillan). Siten aineilla, jotka modifioivat CCK-vaikutusta, voi olla rinnakkaisia anksiolyyttisiä tai hypnoottisia aktiivisuuksia.

EP-patenttihakemuksessa n:o 106 281 esitetään yhdisteitä, joiden indolyyliryhmässä on OR4-substituentti. Yksikään esillä olevan hakemuksen mukaisen yhdisteen indolyyli ei ole substituoitu. Viitejulkaisussa mainitaan myös trypto-faanijohdannaiset, kun taas esillä olevan keksinnön mukaiset yhdisteet ovat a-metyylitryptofaaneja. Edelleen, ryhmä N ei vastaa esillä olevan hakemuksen ryhmää \R2a

H H H

i i i -N-C-C-Ph R3 R4 EP-224 151:n mukaiset yhdisteet eroavat esillä olevan keksinnön mukaisista yhdisteistä N-pään sulkuryhmien osalta. Yhdisteemme poikkeavat täysin viitejulkaisussa esitetyistä.

Keksinnön mukaisissa yhdisteissä α-hiilessä on metyyli, ei vety kuten viitejulkaisun EP-230 151 mukaisissa yhdisteissä. Myös yhdisteiden N-päät eroavat toisistaan täysin, ja keksinnön mukaisten yhdisteiden liitoskohdan A määrittely eroaa viitejulkaisun yhdisteiden vastaavasta kohdasta. Edelleen, keksinnössä R1 ei koskaan ole fenyyli, mikä sen : taas tulee olla viitejulkaisun mukaisesti.

Keksintö koskee menetelmiä uusien kaavan I

5 106197

H

*

R1-A- NH'I'CONtK. tK

Me Ph R3 mukaisten yhdisteiden ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, jossa kaavassa tähteillä R1, R3, R4 ja A on alla määritelty merkitys.

Näistä yhdisteistä voidaan valmistaa farmaseuttisia koostumuksia ruokahalun hillitsemiseksi, jotka koostumukset sisältävät vaikuttavan määrän kaavan I mukaista yhdistettä yhdessä farmaseuttisesti hyväksyttävän kantoaineen kanssa yksikköannostusmuodossa.

Yhdisteitä voidaan käyttää myös anksiolyyttisinä, antipsy-koottisina aineina, etenkin skitsofreenisen käyttäytymisen hoitamiseksi, aineina ekstapyramidaalisen liikehermojärjestelmän häiriöiden hoitamiseksi, aineina CCK:n ja gast-riinin troofisten ja kasvua stimuloivien vaikutusten sal-paamiseksi ja aineina gastrointestinaalisen liikkuvuuden hoitamiseksi.

Keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää myös anal-geettisina aineina ja ne tehostavat morfiinin vaikutusta. Niitä voidaan käyttää morfiinin ja muiden opioidien lisänä vakavan kivun, kuten syöpäkivun hoitamiseksi ja ne vähentävät morfiinin annosta hoidettaessa kipua, jossa morfiini . ‘ on hoidolle esteenä.

Yhdisteiden, kuten esimerkin 26 mukaisen jodatun yhdisteen ylimääräisenä käyttönä on- se, että sopiva radioleimattu jodi127-isotooppi tuottaa aineen, joka sopii gastriinista 6 106197 riippuvaisten tuumoreiden, kuten paksusuolisyövässä todettujen tuumoreiden hoitamiseksi. Esimerkin 26 mukaista I-125-radioleimattua yhdistettä voidaan käyttää myös diagnostisena aineena gastriini- ja CCK-B-reseptorien paikal-listamiseksi sekä perifeerisessä että keskeisessä kudoksessa.

Yhdisteitä voidaan käyttää myös farmaseuttiseen koostumukseen mahahapon erityksen vähentämiseksi, joka koostumus sisältää mahahapon erittymisen vähentämiseksi vaikuttavan määrän kaavan I mukaista yhdistettä yhdessä farmaseuttisesti hyväksyttävän kantoaineen kanssa yksikköannostusmuo-dossa.

Yhdisteitä voidaan käyttää myös farmaseuttiseen koostumukseen, joka sisältää pelon vähentämiseksi vaikuttavan määrän kaavan I mukaista yhdistettä yhdessä farmaseuttisesti hyväksyttävän kantoaineen kanssa yksikköannostusmuodossa.

Yhdisteitä voidaan käyttää myös farmaseuttiseen koostumukseen, joka sisältää gastrointestinaalisten haavaumien hoitamiseksi vaikuttavan määrän kaavan I mukaista yhdistettä yhdessä farmaseuttisesti hyväksyttävän kantoaineen kanssa yksikköannostusmuodossa.

*" Yhdisteitä voidaan käyttää myös farmaseuttiseen koostumuk seen, joka sisältää psykoosin, s.o. skitsofrenian hoitamiseksi vaikuttavan määrän kaavan I mukaista yhdistettä yhdessä farmaseuttisesti hyväksyttävän kantoaineen kanssa yksikköannostusmuodossa.

Samoin keksinnön mukaisista yhdisteistä saadaan farmaseuttisia koostumuksia CCK- tai gastriini-reseptorien stimu-loimiseksi tai salpaamiseksi, aivoneuronien aktiivisuuden muuttamiseksi, skitsofrenian hoitamiseksi, ekstrapyrami-daalisen liikehermojärjestelmän häiriöiden hoitamiseksi, » « 7 106197 CCK:n ja gastriinin troofisten ja kasvua stimuloivien vaikutusten salpaamiseksi ja gastrointestinaalisen liikkuvuuden hoitamiseksi.

Keksinnön mukaisista yhdisteistä voidaan myös valmistaa farmaseuttisia koostumuksia vieroitusreaktion estämiseksi, jonka aiheuttaa lääkkeiden tai alkoholin pitkäaikainen käyttö tai väärinkäyttö. Tällaisia lääkkeitä ovat bentsodiatsepiinit, etenkin diatsepaami, kokaiini, alkoholi ja nikotiini. Vieroitusoireita hoidetaan antamalla vieroitushoitoon tehokas määrä tämän keksinnön mukaista yhdistettä. Etenkin käyttökelpoisia ovat esimerkeissä 20 ja 20A valmistetut yhdisteet (20) ja (20A).

Piirustuksissa kuvio 1 esittää pentagastriini-stimuloidun mahahappoeri-tyksen estoa Ghosh ja Schild-kokeessa yhdisteellä 20, kuvio 2 esittää yhdisteen 20 anksiolyyttistä aktiivisuutta, joka yhdiste annetaan oraalisesti valoisa/pimeä-tutki-mustestissä hiirille, kuvio 3 esittää yhdisteen 20A antipsykoottista aktiivisuutta intra-accumbens-annostellun amfetamiinin antagonismin suhteen, • · · »* · kuvio 4 esittää yhdisteen 20 antipsykoottista aktiivisuutta intra-accumbens-annostellun amfetamiinin suhteen, kuvio 5 esittää yhdisteen 20 vaikutusta nikotiinin pitkäaikaiskäyttöön ja siitä vieroittamiseen, • ·' • · ' kuvio 6 esittää yhdisteen 20A vaikutusta nikotiinin pitkä aikaiskäyttöön ja siitä vieroittamiseen, kuvio 7 esittää yhdisteen 20 vaikutusta diatsepaamin pitkäaikaiskäyttöön ja siitä vieroittamiseen, 8 106197 kuvio 8 esittää yhdisteen 20A vaikutusta diatsepaamin pitkäaikaiskäyttöön ja siitä vieroittamiseen, kuvio 9 esittää yhdisteen 20 vaikutusta alkoholin pitkäaikaiskäyttöön ja siitä vieroittamiseen, kuvio 10 esittää yhdisteen 20A vaikutusta alkoholin pitkäaikaiskäyttöön ja siitä vieroittamiseen, kuvio 11 esittää yhdisteen 20 vaikutusta kokaiinin pitkäaikaiskäyttöön ja siitä vieroittamiseen, kuvio 12 esittää yhdisteen 20A vaikutusta kokaiinin pitkäaikaiskäyttöön ja siitä vieroittamiseen, kuvio 13 esittää yhdisteen 20 vaikutusta rotan sosiaalisen vuorovaikutuksen testissä pelkoa ehkäisevien aineiden suhteen, kuvio 14 esittää yhdisteen 20 vaikutusta rotan korotetun Xsokkelon (+ sokkelo) testissä (Rat Elevated X-Maze (+ Maze) Test) pelkoa ehkäisevien aineiden suhteen, kuvio 15 esittää tämän keksinnön mukaisen viiden yhdisteen vaikutuksia verrattuna apuaineeseen ja yhdisteeseen 20 ro-·· tan korotetun X-sokkelon testissä pelkoa ehkäisevien ai neiden suhteen, ja kuvio 16 esittää, miten yhdiste 20 vähentää koukistaja-reaktiota stimuloidussa spinalisoidussa rotan (aivot poistettu) preparaatissa samalla tavalla kuin morfiini. Kun • » yhdistettä 20 annetaan yhdessä morfiinin kanssa (alempi kaavio), tämä tehostaa suuressa määrin vaikutusta, joka kestää 3 tunnin ajan.

Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet muodostetaan kondensoi-malla kaksi modifioitua aminohappoa ja tästä syystä ne ei- m 9 106197 vät ole peptidejä. Pikemminkin ne ovat "dipeptoideja", synteettisiä peptidin sukuisia yhdisteitä, jotka poikkeavat luonnollisista dipeptideistä siten, että a-hiilen substituentti on metyyli.

Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet tai niiden farmaseuttisesti hyväksyttävä suola esitetään kaavalla A) - R1 - A- NH A CONHn. JJv.

Me Ph R3 jossa R1 on 3-12 hiiliatomia sisältävä sykloalkyyli- tai poly-sykloalkyylihiilivety, jossa on 0-4 substituenttia, joita ovat suora tai haarautunut C2“Cg-alkyyli, halogeeni tai CF3, A on -OC(=0)-, -S02-, -CH2C0-, R3 ja R4 ovat toisistaan riippumatta H, C1-C4-alkyyliryhmä tai -(CH2)n-B-D, jossa n on kokonaisluku 0-3, B on sidos ::: -oco(CH2)n-, -0(CH2)n-, -NHC0(CH2)n-, -CONH(CH2)n-, -NHCOCH=CH-, -S(CH2)n-, -S (=0) - (CH2) n- tai , -S02(CH2)n-, jossa n tarkoittaa samaa kuin edel lä, ja D on H, -COOR*, -OH tai tetratsoli, josa R* on H tai suora tai haarautunut C^-Cg-alkyyli ja Ph on fenyyliryhmä, joka on mahdollisesti substituoitu ha-logeeniatomilla.

« 10 106197

Edullisissa sykloalkyyli- tai polysykloalkyyli-substituen-teissa on kuusi - kymmenen hiiliatomia.

Tämän keksinnön mukaisia edullisimpia yhdisteitä ovat sellaiset, joissa R1 2 on 2-adamantyyli tai l-(S)-2-endobornyyli,

O

II

A on -O-C-, R3 on H, -CH2OH, -CH20C0CH2CH2C02H, -CH2NHC0CH=CHC02CH3, -CH2NHCOCH2CH2CO2H tai -CH2NHC0CH=CHC02H ja R4 on H, -NHC0CH2CH2C02H ([D]-konfiguraatio) tai -NHCOCH= CHC02H ([D]-konfiguraatio).

D- ja L-konfiguraatiot ovat mahdollisia kiraalisissa keskuksissa ja ne kuuluvat keksinnön piiriin.

1. α-metyyli on edullisesti [D]-konfiguraatiossa; 2. R3 on edullisesti -CI^OCOCHjCHjCOjH tai -CH2NHCOCH2CH2-C02H, jolloin [D]-konfiguraatio on Trp-a-hiiliatomissa ja [L]-konfiguraatio on Phe-a-hiiliatomissa, ja 3. R4 on edullisesti -NHCOCH2CH2CO2H ([D]-konfiguraatio) tai NHC0CH=CHC02H ([D]-konfiguraatio), jolloin [D]-konfi-guraatio on Trp-a-hiiliatomissa.

Patenttivaatimuksen tunnusmerkkiosan mukaisesti voidaan valmistaa mm. seuraavia yhdisteitä: [lS-[laf2p[S*[S*(E)]],4a]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)- ’* 2-metyyli-l-okso-2-[[[(l,7,7,-trimetyylibisyklo[2.2.1]- hept-2-yyli)oksi]karbonyyli]amino]propyyli]amino]-1-fenyy-lietyyli]amino]-4-okso-2-buteenihappo, 2 [lS-[la,2p[S*(S*)],4a]]-4-[[2-[[3-<lH-indol-3-yyli)-2- 3 metyyli-l-okso-2-[[[(l/7,7,-trimetyylibisyklo[2.2.1]hept- 4 2-yy1i)oks i]ka rbonyy1i]amino]propyyli]metyy1iamino]-1-fe- 11 106197 nyylietyyli]amino]-4-oksobutaanihappo, 3. [lS-[la,2£[S*(S*)],4a-[[2-[[3-(1H-indol-3-yyli)-2-me-tyyli-l-okso-2-[[[(1,7,7-trimetyylibisyklo[2.2.1]hept-2-yyli)amino]karbonyyli]amino]propyyli]amino]-l-fenyylietyy- li]amino]-4-oksobutaanihappo, 4. [R-(R*,R*)]-4-[[2-[[3-(1H-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-ok-so-2-[(trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yylisulfonyyli)amino]-propyyli]amino]-l-fenyylietyyli]amino]-4-oksobutaanihappo, 5. [R-(R*,S*)]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-ok-so-2-[(trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yylisulfonyyli)amino]-propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]amino]-4-oksobutaanihappo , 6. [lR-[la[R*(S*)],2β]]- ja [lS-[la[S*(R*)] ,2β]]-4-[[2- C E 2—[[[(2-fluorisykloheksyyli)oksi]karbonyyli]amino]-3- (1H-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-oksopropyyli]amino]-3-fenyylipropyyli ]amino]-4-oksobutaanihappo, 7. [1R-[la[R*(S*)],2β]]- ja [lS-[la[S*(R*)],2β]]—4—[[2-[[2-[[[(2-fluorisykloheksyyli)oksi]karbonyyli]amino]-3- (1H-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-oksopropyyli]metyyliamino]- 3-fenyylipropyyli]amino]-4-oksobutaanihappo, 8. [lR-[la[R*(S*)],2p]]- ja [lS-[la[S*(R*)],2β]]-4-[[2- [[3-(1H-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[[[2-(trifluori-metyyli)sykloheksyyli]oksi Jkarbonyyli]amino]propyyli]amino ]-3-fenyylipropyyli]amino]-4-oksobutaanihappo, 9. [lR-[la[R*(S*)],28]]- ja [lS-[la[S*(R*)],2p]]-4-[[2- [[3-(1H-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[[[2-(trifluori-metyyli)sykloheksyyli]oksi]karbonyyli]amino]propyyli]me-tyyliamino]-3-fenyylipropyyli]amino]-4-oksobutaanihappo, 10. [R-(R*,S*)]-4-[[2-[[3-(1H-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]- ” amino]propyyli]metyyliamino]-3-fenyylipropyyli]amino]-4- oksobutaanihappo, 11. [lS-[ia,2p[S*(R*)],4a]]-[l-(lH-indol-3-yylimetyyli)-l-metyyli-2-okso-2-[[2-[[l-okso-3-(lH-tetratsol-5-yyli)-propyyli]amino]-1-(fenyylimetyyli)etyyli]amino]etyyli]-karbamiinihappo-l,7,7-trimetyylibisyklo[2.2.1]hept-2-yy- 106197 li-esteri, 12. [lS-[la^[S*(R*) ] ,4a] ]-[l-(lH-indol-3-yylimetyyli)- 1- metyyli-2-okso-2-[[2-[[l-okso-3-(lH-tetratsol-5-yyli)-propyyli]amino]-2-fenyylietyyli]amino]etyyli]karbamiini-happo-1,7,7-trimetyylibisyklo[2.2.1]hept-2-yyli-esteri, 13. N-[2-metyyli-N-[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)-karbonyyli]-D-tryptofyyli]-L-fenyylialanyyliglysiini, 14. N-[2-metyyli-N-[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)-karbonyyli]-D-tryptofyyli]-L-fenyylialanyyli-p-alaniini j a 15. (R)-trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yyli-[1-(lH-indol-3-yy-limetyyli)-l-metyyli-2-[metyyli(2-fenyylietyyli) amino]-2-okso-etyylikarbamaatti.

Lisäksi voidaan valmistaa seuraavia yhdisteitä: 16. (±)-trans-2-kloorisykloheksyyli-[1-(lH-indol-3-yylime-tyyli)-l-metyyli-2-okso-2-[(2-fenyylietyyli) amino]etyyli]-karbamaatti, 17. 2-kloorisykloheksyyli-[2-[[1-(hydroksimetyyli)-2-fenyylietyyli ]amino]-l-(lH-indol-3-yylimetyyli)-1-metyyli- 2- oksoetyyli]karbamaatti, 18. 2-[[2-[[[(2-kloorisykloheksyyli)oksi]karbonyyli]ami-no]-3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-oksopropyyli]amino]-3-fenyylipropyyli-butaanidioaatti, 19. 2-[[2-[[[(2-metyylisykloheksyyliJoksi]karbonyyli]amino ]-3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-oksopropyyli]amino]- 3- fenyylipropyyli-butaanidioaatti, 20. (±)-trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yyli-[1-(lH-indol-3-yy-limetyyli)-l-metyyli-2-okso-2-[(2-fenyylietyyli) amino]-etyylikarbamaatti, 21. trisyklo[3.3.l.l3,7]dek-2-yyli-[2-[[1-(hydroksimetyyli )-2-fenyylietyyli]amino]-1-(lH-indol-3-yylimetyyli)-1-metyyli-2-oksoetyyli]karbamaatti, 22. 2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo [3.3.l.l3,7] dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]propyyli]-amino]-3-fenyylipropyyli-butaanidioaatti, 13 106197 23. 2-[ [3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo [3.3.1.13,7] dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]propyyli]-amino]-1-fenyylietyyli-butaanidioaatti, 24. [R-(R*,R*J]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-1-fenyylietyyli]amino]-4-oksobutaa-nihappo, 25. [lS-[la,2p[S*(S*)],4a]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[[(1.7,7-trimetyylibisyklo[2.2.1]hept- 2-yy1i) oksi]karbonyyli]amino]propyy1i]amino]-1-fenyy1i-etyyli]amino]-4-oksobutaanihappo, 26. [R-[R*,S*-(E)]]-4-[[2—[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyy1i-l-okso-2-[[trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]amino]-4-okso-2-buteenihappo, 27. [R-(R*,S*)]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]amino-4-oksobutaa-nihappo, 28. (R)-trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yyli-[1-(1H-indol-3-yy-limetyyli)-l-metyyli-2-[metyyli (2-fenyylietyyli) amino]-2-oksoetyyli]karbamaatti, 29. [R-(R*,S*)] — [[2—£ £3 — (1H-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-ok-so-2-[[(trisyklo[3.3.1.l3,7]dek-2-yylioksi)]karbonyyli]- .. amino]propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]sulfinyyli]etikka- happo , 30. [R-(R*,S*)]-[[2-[[3-(1H-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-ok-so-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)]karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]sulfonyyli]etikka-happo-etyyliesteri, 31. [R-(R*,S*)]-[[2-[[3-(1H-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-ok-so-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)]karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]sulfinyyli]etikka-happo-etyyliesteri, 32. [R-[R*,R*-(E)]]—4—[[2—[[3-(1H-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)]karbonyy- 14 106197 li]amino]propyyli]amino]-l-fenyylietyyli]amino]-4-okso-2-buteenihappo, 33. [R-(R*,S*)]-[[2-[[2-[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)]karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-3-f enyylipropyyli] t io ]etikkahappo, 34. [lS-[la,28[S*[S*(E)]],4a]]—4—[[2—[[3-(lH-indol-3-yy-li)-2-metyyli-l-okso-2-[[[(1,7,7-trimetyylibisyklo[2.2.1]-hept-2-yyli)oksi]karbonyyli]amino]propyyli]amino]-l-f enyylietyyli ]amino]-4-okso-2-buteenihappo-metyyliesteri (bi-syklo-järjestelmä on lS-endo)# 35. [lS-[ld,2p[S*[S*(E)]],4a]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yy-li)-2-metyyli-l-okso-2-[[[(1,7,7-trimetyylibisyklo[2.2.1]-hept-2-yyliJoksi]karbonyyli]aminoJpropyyli]amino]-1-fenyy-lietyyli]amino]-4-okso-2-buteenihappo (bisyklo-järjestelmä on lS-endo), 36. [R-(R*,R*)]-3-[[2-[[3-(1H-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)]karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-1-fenyylietyyli]amino]-3-okso-pro-paanihappo, 37. [R-(R*,S*)]-3-(lH-indol-3-yylimetyyli)-3-metyyli-4,10-diokso-6-(fenyylimetyyli)-ll-okso-8-tia-trisyklo-[3.3.1.l3,7]dek-2-yyli-2,5-diatsatridekaanihappo tai sen esteri, 38. [R-(R*,S*)]-β-[[3-(1H-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso- .. 2-[[trisyklo[3.3.1.l3/7]dek-2-yylioksi)]karbonyyli]amino]- propyyli]amino]bentseenibutaanihappo, 39. [R-(R*,S*)]-N-[3-[[3-(1H-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-ok-so-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)]karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-4-fenyylibutyyli]glysiini, 40. [R-[R*,S*-(E)3]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-2-[[(bisyklo[3.3.1]non-9-yylioksi)karbonyyli]amino]-l-ok- ♦ « sopropyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]amino]-4-okso-2-butee-nihappo, 41. mono-[R-(R*,R*)]-2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-amino]-1-fenyylietyyli-butaanidioaatti, is 106197 42. 3-[[3-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(tri-syklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)Jkarbonyyli]amino]propyy-li]amino]-l-okso-2-fenyylipropyyli]amino]propaanihappo (TRP on R, toinen keskus on RS), 43. [lR-[la[R*(S*)],2β]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-me-tyyli-2-[[[(2-metyyli-l-sykloheksyyli)oksiJkarbonyyli]-amino]-1-oksopropyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]amino] -4-okso-2-buteenihappo-(-)-isomeeri, 44. [1R-[la[R*(S*)],2β]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-me-tyyli-2-[[[(2-metyyli-l-sykloheksyyli)oksi]karbonyyli]amino] -1-oksopropyyli]amino-3-fenyylipropyyli]amino]-4-okso-butaanihappo-(-)-isomeeri, 45. [1R-[la[R*(S*)],2β]]-4-[[2-[[3-(ΙΗ-indol-3-yyli)-2-me-tyyli-2-[[[(2-metyyli-l-sykloheksyyli) oksi]karbonyyli]amino ]-1-oksopropyyli]amino]-l-fenyylietyyli]amino]-4-okso- 2- buteenihappo-(-)-isomeeri, 46. [1R-[la[R*(S*)],2β]]-4-[[2-[[3-(ΙΗ-indol-3-yyli)-2-me-tyyli-2-[[[(2-metyyli-l-sykloheksyyli)oksiJkarbonyyli]amino ]-1-oksopropyyli]amino]-l-fenyylietyyli]amino]-4-okso-butaanihappo-(-)-isomeeri, 47. 2-metyylisykloheksyyli-[1R-[la[R*(S*)]],2β]-[2-[[1-(hydroksimetyyli)-2-fenyylietyyli]amino]-l-(lH-indol-3-yy-1imetyy1i)-1-metyy1i-2-oksoetyyli]karbamaatti, 48. [R-[R*,S*-(E,E)]]—6—[[3—(1H-indol-3-yyli)-2-metyyli- ... l-okso-2- [ [ (trisyklo- [3.3.1.13,7 ]dek-2-yylioksi)karbonyy li ]amino]propyyli]amino]-7-fenyyli-2,4-heptadieenihappo, 49. [R-(R*,R*)]-[2-[[2-[[1,4-diokso-4-(lH-tetratsol-5-yy-liamino)butyyli]amino]-2-fenyylietyyli]amino]-l-(lH-indol- 3- yy1imetyy1i)-1-metyy1i-2-oksoetyy1i]karbamiinihappo, 50. trisyklo-[3.3.1.13,7]dek-2-yyli-[S-[R*,S*-(E)]]—12— (lH-indol-3-yylimetyyli)-12-metyyli-3,ll-diokso-9-(fenyy-limetyyli)-2-oksa-7,10,13-triatsatetradek-4-en-l4-oaatti, 51. [R-(R*,S*)]-3-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo-[3.3.1.13/7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]amino-3-oksopro-paanihappo, • 16 106197 52. etyyli-[R-(R*,S*)]-[[2-[[2-[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli- 1-okso- 2- [[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)kar-bonyyli]amino]propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]tio]ase-taatti, 53. [R-(R*,S*)]-β-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso- 2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]-propyyli]amino]-4-j odi-bentseenibutaanihappo, 54. [R-(R*,R*)]—[2—[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso- 2-[[(l-(trisyklo[[(3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-1-fenyylietoksi Jetikkahappo, 55. [[3-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo [3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]propyy-li]amino]-1-okso-2-fenyylipropyyli]amino]etikkahappo (TRP-keskus on R, toinen keskus on RS), 56. (R)-[[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-l-okso-2-metyyli-2- [[(trisyklo[3.3.1.I3'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli)amino]-propyyli]amino]-1-fenyylietylideeni) amino]oksi]etikkahap-po, 57. [R-(R*,S*)]-β-[[3-{lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso- 2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]-propyyli]amino]bentseenibutaanihappo, 58. [R-(R*,S*)]—N-[3-[[3-{lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-ok-so-2-[[(trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-propyyli]amino]-4-fenyylibutyyli]glysiini, 59. 2-[[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2- [[(trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli)amino]-propyyli]amino]-1-fenyylietyyli]amino]karbonyyli]syklo-propaanikarboksyylihappo (syklopropaanirengas on transit), muut keskukset ovat R), 60. [R-(R*,S*)]-[1-(lH-indol-3-yylimetyyli)-1-metyyli-2-okso-2-[[2-[[1-okso-3-(lH-tetratsol-5-yyli)propyyli]ami-no)-2-fenyylietyyli]amino]etyyli-karbamiinihappo-trisyklo-[3.3.1.13'7]dek-2-yyliesteri, 61. [R-(R*,S*)]-a-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso- 2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]-propyyli]amino-bentseeniheptaanihappo, I’ 106197 62. metyyli-(±)-β-[[(2-fenyylietyyli)amino]karbonyyli]-^~ [[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]-lH-indoli-3-butanoaatti, 63. [R-(R*,S*)]-4-[[2-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso- 2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]-propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]amino]-4-okso-2-buteeni-happo, 64. [3^-[1α,2β,3a[R*(S*)],4a]]-3-[[[[2-[[1-(hydroksimetyyli )-2-fenyylietyyli]amino]-l-(lH-indol-3-yylimetyyli)-l-metyyli-2-oksoetyyli]amino]karbonyyli]oksi]-4,7,7-trime-tyyli-bisyklo[2.2.1]heptaani-2-etikkahappo, 65. [1R-[la[R*(R*)]2β]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-me-tyyli-2-[[[(2-metyyli-l-sykloheksyyli)oksi]karbonyyli]amino ]-1-oksopropyyli]amino]-1-fenyylietyyli]amino]-4-okso-butaanihappo-(-)-isomeeri, 66. [1R-[la[R*(R*],2β]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-me-tyyli-2-[[[(2-metyyli-l-sykloheksyyli)oksi]karbonyyli]-amino]-1-oksopropyyli]amino]-1-fenyylietyyli]amino]-4-ok-so-2-buteenihappo-(-)-isomeeri, 67. [lR-[la[R*(S*)]/2β]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-me-tyyli-2-[[[(2-metyyli-l-sykloheksyyli)oksi]karbonyyli]amino ]-1-oksopropyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]amino]-4-okso-butaanihappo-(-)-isomeeri, ja 68. [1R-[la[R*(S*)],2β]]—4—[[2—[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-me- :: tyyli-2-[[[(2-metyyli-l-sykloheksyyli)oksi]karbonyyli]ami no ]-l-oksopropyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]amino]-4-okso-2-buteenihappo-(-)-isomeeri.

69. [[3—[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[trisyk-lo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]propyyli]- , amino]-l-okso-2-fenyylipropyyli]aminoJetikkahappo (TRP- keskus on R, toinen keskus on RS), 70. [R-(R*,R*)]-[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso- 2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]-propyyli]amino]-1-fenyylietoksi]etikkahappo, 71. [1R-[ία,2β[R*(R*)]]]-2-[[[2-(3-(lH-indol-3-yyli)-2-me-tyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)kar- • 18 106197 bonyyli]amino]propyyli]amino]-l-fenyylietyyli]amino]karbo-nyyli]syklopropaani-karboksyylihappo, 72. [lS-[la^[S*(S*)]]]-2-[[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)-karbonyyli]amino]propyyli]amino]-l-fenyylietyyli]amino]-karbonyyli]syklopropaani-karboksyylihappo, 73. [R-(R*,R*)]-3-[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-ok-so-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-l-fenyylietoksi]propaanihappo, 74. [R-(R*,R*)]-mono-2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-amino]-l-propyyli]amino]fenyylietyyli-butaanidihappo, 75. 3—[[3—[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo [ 3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]propyyli ] amino]-l-okso-2-fenyylipropyyli]amino]propaanihappo (TRP on R, toinen keskus on RS), 76. [R-(R*,S*)]-β-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13/7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]-propyyli]amino]-4-j odibentseenibutaanihappo, 77. [1R-[la[R*(S*),2β]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-me-tyyli-2-[[[(2-metyyli-l-sykloheksyyli)oksi]karbonyyli]am-no]-1-oksopropyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]amino]-4-okso-2-buteenihappo ((-)-isomeeri), 78. [1R-[la[R*(S*)],2β]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-me- : tyyli-2-[[[(2-metyyli-l-sykloheksyyliJoksi]karbonyyli]ami no ]-l-oksopropyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]amino]-4-okso-butaanihappo ((-)-isomeeri), 79. [1R-[la[R*(R*)],2β]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-me-tyyli-2-[[[(2-metyyli-l-sykloheksyyli]oksi]karbonyyli]amino ]-l-oksopropyyli]amino]-l-fenyylietyyli]amino]-4-okso- . 2-buteenihappo ((-)-isomeeri), * 80. [lR-[la(R*(R*)],28]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-me-tyyli-2-[[[(2-metyyli-l-sykloheksyyli)oksi]karbonyyli]amino ]-l-oksopropyyli]amino]-l-fenyylietyyli]amino]-4-oksobu-taanihappo ((-)-isomeeri), 81. [R-(R*,S*)]-β-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso- • 19 106197 2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioks i)karbonyyli]amino]-propyy1i]amino]bentseeniheptaanihappo, 82. 2-[[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2- [[(trisyklo[3.3.l.l3,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]-propyyli]amino]-1-fenyylietyyli]amino]karbonyyli]syklopro-paanikarboksyylihappo (syklopropyyli-rengas on trans-(±), muut keskukset ovat R), 83. 2-metyylisykloheksyyli-[lR-[la[R*(S*)]],2β]-[2-[[1- (hydroks imetyy1i)-2-fenyylietyyli]amino]-1-(1H-indol-3 -yy-limetyyli)-l-metyyli-2-oksoetyyli]-karbamaatti ((-)-isomeeri ), 84. [R-[R*,S*-(E,E)]]-6-[[3-(1H-indol-3-yyli)-2-metyyli- 1- okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli ]amino]propyyli]amino]-7-fenyyli-2,4-heptadieenihappo, 85. trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yyli-[2—[[l—(hydroksimetyy-li)-2-hydroksi-2-fenyylietyyli]amino]-1-(1H-indol-3-yyli-metyyli)-l-metyyli-2-oksoetyyli]karbamaatti, 86. trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yyli-[R-(R*,R*)j—[1—(lH-in-dol-3-yylimetyyli)-l-metyyli-2-okso-2-[[2—[[l-okso-3-(lH-tetratsol-5-yyli)propyyli]amino]-2-fenyylietyyli]amino]-etyyli]karbamaatti, 87. [R-(R*,S*)]-2-[[2—[[3—(1H-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yyIloksi)karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]sulfinyyli]etik-kahappo, 88. [R-(R*,S*)]-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-ok-so-2-[[(trisyklof 3.3.1.I3,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]sulfonyyli]etikka-happo, 89. etyyli-[R-(R*,S*)]-[[2-[[3-(1H-indol-3-yyli)-2-metyy-li-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)]karbo-nyyli]amino]propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]sulfonyyli]-asetaatti, 90. 2-kloorisykloheksyyli-[2-[[l-(hydroksimetyyli)-2-fe-nyylietyyli]amino]-1-(1H-indol-3-yylimetyyli)-l-metyyli- 2- oksoetyyli]karbamaatti, isomeeri II, rengaskeskukset 20 1 06 1 97 ovat trans, trp-keskus on D, toinen keskus on S, ((-)- tai (+)-muoto), 91. [R-[R*,R*(E)]]-4-[[2-[[3-(lH-indoi-3-yyli)-2-metyyli- 1- okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yyliamino)karbonyy-li]amino]propyyli]amino]-1-fenyylietyyli]amino]-4-okso- 2- buteenihappo, 92. [R-(R*,R*)3-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,73 dek-2-yylioksi)karbonyyli]-amino]propyy1i]amino]-1-fenyy1ietyyli]amino]-4-oksobutaa-nihappo, 93. [R-(R*,S*)3-mono-[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli- 1- okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli 3 amino 3 propyyli]amino 3-3-fenyylipropyyli3 butaanidioaat-ti, 94. trisyklo[3.3.1.l3'73dek-2-yyli-[R-(R*,S*)]-[2-[[1- (hyd roks imetyy1i)-2-fenyy1ietyyli 3 amino]-1-(1H-indol-3-yylimetyyli)-l-metyyli-2-oksoetyyli3karbamaatti, 95. [lS-[la^[S*[S*(E)]],4a]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yy-li)-2-metyyli-l-okso-2-[[[(l,7,7-trimetyylibisyklo[2.2.13-hept-2-yyli)oksi 3karbonyyli 3 amino^propyyli] amino]-1-fenyy-lietyyli]amino]-4-okso-2-buteenihappo (bisyklo-j Sr j estelmä on lS-endo), 96. [IS-[ία,2β[S*(S*)3,4a]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)- 2- metyyli-l-okso-2-[[[(1,7,7-trimetyylibisyklo[2.2.1]hept- ·. 2-yyli)oksi]karbonyyli 3 amino3propyyli]amino]-1-fenyyli etyyli ]amino 3-4-okso-2-buteenihappo (bisyklo-j Srj estelmä on lS-endo), 96a. [IS-[Ια,2β[S*(S*)],4a]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[[(l,7,7-trimetyylibisyklo[2.2.13hept-2-yyli)-oksi]-karbonyyli]amino]propyyli]amino]-l-fenyyli-• etyyli]amino]-4-oksobutaanihappo, 97. [R-[R*,S*-(E)]3-4-[[2-[[3-(ΙΗ-indol-3-yyli)-2-metyy-li-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli ]amino]propyyli]amino 3-3-fenyylipropyyli]amino]-4-okso-2-buteenihappo, 98. N-[2-metyyli-N-[(trisyklo[3.3.1.13/7]dek-2-yylioksi)- 2i 106197 karbonyyli]-D-tryptofyyli]-L-fenyylialanyyliglysiini, 99. [R-(R*,S*)]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.l.l3'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]amino]-4-oksobu-taanihappo, 100. trisyklo[3.3.1.1.3'7]dek_2_yyij_£R_(R*^R*)]-[2-[[2- [[1,4-diokso-4-(lH-tetratsol-5yyliamino)butyyli]amino]-2-fenyylietyyli]amino]-1-(lH-indol-3-yylimetyyli)-1-metyyli-2-oksoetyyli]karbamaatti, 101. [R-(R*,R*)]-3-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.I3'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-1-fenyylietyyli]amino]-3-oksopropaa-nihappo, 102. [R-(R*,s*)]-3-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]amino]-3-oksopro-paanihappo, 103. [R-[R*,S*-(E)]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyy-li-2-[[(bisyklo[3.3.1]non-9-yylioksi)karbonyyli]amino]-l-oksopropyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]amino]-4-okso-2-bu-teenihappo, 104. [R-(R*,S*)]-5-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]~ amino]propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]amino]-5-oksopen- * taanihappo, 105. etyyli-[R-(R*,S*)]-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyy-li-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli ]amino]propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]sulfinyyli]-asetaatti, 106. [R-[R*,R*-(E)]]-4-[[2—[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyy-li-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli ]amino]propyyli]amino]-l-fenyylietyyli]amino]-4-okso-2-buteenihappo, 107. [R-(R*,S*)]-N-[3-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.l.l3,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-l-okso-4-fenyylibutyyli]-β-alanii- 22 106197 ni, 108. N-[N-[α-metyyli-N-[(trisyklo[3.3.1.13#7]dek-2-yyli-oksi)karbonyyli]-D-tryptofyyli]-L-fenyylialanyyli]-β-ala-niini, 109. [R-(R*,S*)]-3-[[2—[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklof3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]tio]-propaanihap-po, 110. [R-(R*,S*)]-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.I3'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-amino]propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]tio]etikkahappo, 111. [R-(R*,S*)]—β—[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]-propyyli]amino]bentseenibutaanihappo, ja 112. trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yyli-[R-(R*,S*)]-3-(lH-in-dol-3-yylimetyyli)-3-metyyli-4,10-diokso-6-(fenyylimetyy-li)-ll-oksa-8-tia-2,5-diatsatridekanoaatti.

Taulukot I ja II esittävät yllä esitettyjä yhdisteitä. Vasemmassa sarakkeessa olevat numerot vastaavat yllä esitettyjä yhdisteiden numeroita. Stereokemiaa ei ole esitetty taulukossa I.

Yhdisteet käsittävät kaavan I mukaisten yhdisteiden sol-.: vaatit ja hydraatit sekä farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.

Tämän keksinnön mukaisissa yhdisteissä voi olla moninkertaiset kiraaliset keskukset, jotka käsittävät yllä esitetyssä kaavassa I merkeillä *, t, t esitetyt riippuen nii-.. den rakenteista. Lisäksi asymmetriakeskuksia voi esiintyä substituenteissa R1, R3, R4 ja/tai Ph. Etenkin tämän keksinnön mukaiset yhdisteet voivat esiintyä diastereomee-reinä, diastereomeerien seoksina tai seka- tai yksittäisinä optisina enantiomeereinä. Tämä keksintö koskee kaikkia tällaisia yhdisteiden muotoja. Diastereomeerien seokset 106197 saadaan tavallisesti alla tarkemmin selitettyjen reaktioiden tuloksena. Yksittäiset diastereomeerit voidaan erottaa diastereomeerien seoksista tavanomaisilla menetelmillä, kuten pylväskromatografiällä tai toistuvilla kiteytyksillä. Yksittäiset enantiomeerit voidaan erottaa tavanomaisella, alalla hyvin tunnetulla menetelmällä, kuten muuntamalla suolaksi optisesti aktiivisella yhdisteellä ja erottamalla kromatografiällä tai uudelleenkiteyttämällä ja muuntamalla takaisin ei-suolan muotoon.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden edullisin stereokemia on esimerkin 20 mukaisen yhdisteen stereokemia.

Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet voidaan muodostaa kytkemällä yksittäiset substituoidut α-aminohapot alalla hyvin tunnetuilla menetelmillä. (Ks. esimerkiksi synteettisiä standardimenetelmiä, joita on esitetty moniosaisessa tutkimuksessa "The Peptides, Analysis, Synthesis, Biology", Gross ja Meienhofer, Academic Press, New York.) Yksittäiset substituoidut alfa-aminohappo-lähtöaineet ovat yleisesti tunnettuja tai, mikäli eivät, ne voidaan syntetisoida ja haluttaessa erottaa alalla tunnetuilla menetelmillä. (Raseemisen [DL]-a-metyylitryptofaani-metyylieste-rin synteesi - ks. Brana, M. F., et ai, J. Heterocyclic Chem., 1980, 17:829).

Avainvälituote kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistuksessa on kaavan Via CO ...

roconhH^cooh

Me mukainen yhdiste, jossa R on R1, 9-fluorenyylimetyyli, Bz 24 106197 tai muu sopiva N-suojaryhmä. Näitä voidaan käyttää välituotteina kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi. Yhdisteet, joissa R on r\ kuten 1-adamantyyli, 2-adamantyyli, 4-protoadamantyyli, ekso-bornyyli, endo-bornyyli, ekso-norbornyyli, endo-norbornyyli, 2-metyy-lisykloheksyyli, 2- kloorisykloheksyyli tai kamfanyyli, ovat uusia ja niitä pidetään parhaimpina.

US-julkaisu 4,757,151 on tässä viitejulkaisuna. Siinä esitetään 9-fluorenyylimetyyli-suoj aryhmä.

Kaavan Via mukaiset yhdisteet valmistetaan saattamalla kaavan

RÖH III

mukainen yhdiste, jossa tähteellä R on yllä määritelty merkitys, reagoimaan fosgeenin tai fosgeeni-substituutin (vastikkeen) kanssa, jolloin saadaan vastaava kaavan

ROCOC1 IV

mukainen yhdiste, ja saattamalla sitten kaavan IV mukainen yhdiste reagoimaan a-metyylitryptofäänin kanssa, jolloin •Σ saadaan haluttu yllä esitetyn kaavan Via mukainen yhdiste.

Vaihtoehtoisesti kaavan IV mukainen yhdiste voidaan saattaa reagoimaan α-metyylitryptofaani-metyyliesterin kanssa, jolloin saadaan kaavan 106197

/O

ROCONH^i COOMe

Me mukainen yhdiste, joka voidaan muuntaa kaavan via mukaiseksi yhdisteeksi tunnetulla tavalla, kuten hydrolysoimalla vesipitoisella litiumhydroksidilla.

Alla esitetty kaavio I esittää menetelmätapoja välituotteiden valmistamiseksi, joita voidaan käyttää valmistettaessa kaavan I mukaisia lopputuotteita.

Avainvälituote (2) valmistetaan sellaisen ryhmän alkoholi-muodosta, jona on 1-adamantyyli, 2-adamantyyli, 4-proto-adamantyyli, 9-fluorenyylimetyyli, ekso-bornyyli, endo-bornyyli, ekso-norbornyyli, endo-norbornyyli, 2-metyyli-sykloheksyyli, 2-kloorisykloheksyyli tai kamfanyyli. Alkoholi liuotetaan liuottimeen, kuten metyleenikloridiin. Sitten se muunnetaan vastaavaksi kloroformiaatiksi saattamalla reagoimaan bis(trikloorimetyyli)karbonaatin kanssa pyridiinissä n. OeC:ssa. Tuote muodostetaan kondensoimalla amiinilla, kuten a-metyyli-D-tryptofaani-metyyliesterillä. Reaktio suoritetaan liuottimessa, kuten THFrssä, jolloin saadaan esimerkiksi N-[(2-adamantyylioksi)karbonyyli]-a-metyyli-D-tryptofaani-metyyliesteri. Tämä käsitellään sitten litiumhydroksidilla ja sekoitetaan huoneen lämpötilas-, sa yön ajan, jolloin saadaan vastaava karboksyylihappo.

.. Tätä uutta avainvälituotetta (2) voidaan käyttää kaavan I

. mukaisten yhdisteiden valmistuksessa, kuten selitetään myöhemmin kaavioissa II ja III.

Vaihtoehtoisesti kloroformiaatti voidaan muuntaa yhdisteeksi (2) saattamalla reagoimaan a-metyyli-DL-tryptofaa-nin alkalisen liuoksen kanssa.

106197

Eräässä toisessa menetelmässä (jakso 3,4,5,6) tert-butyy-lioksikarbonyyli-L-fenyylialaninoli käsitellään pyridii-nissä p-tolueenisulfonyylikloridilla, jolloin saadaan vastaava tosylaatti. Tosylaatti käsitellään natriumatsidilla Ν,Ν-dimetyyliformamidissa vastaavan atsidin valmistamiseksi. Tämä muunnetaan vapaaksi aminoatsidiksi (6) saattamalla reagoimaan p-tolueenisulfonihapon kanssa dikloorimetaa-ni-liuoksessa huoneen lämpötilassa. Tämä saatetaan sitten reagoimaan halutun kaavan 2 mukaisen yhdisteen kanssa tämän keksinnön mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, kuten esimerkiksi kaavioissa I, II ja III.

Samoin (jakso 7-12) tert-butyylioksikarbonyyli-D-2-fe-nyyliglysinoli voidaan muuntaa vastaavaksi amiini-substi-tuoiduksi atsidiksi (10) käyttämällä yllä esitettyä mene-telmätapaa. Bentsyylivetysukkinaatin liuos saatetaan reagoimaan Ν,Ν-disykloheksyyli-karbodi-imidin ja 1-hydroksi-bentsotriatsolin ekvimolaarisen seoksen kanssa. Reaktio suoritetaan etyyliasetaatissa n. tunnin kuluessa. Tämän jälkeen lisätään vapaata amiinia (10) reaktioseokseen, jolloin saadaan amidi (11). Yhdisteen (11) atsidi-osa hyd-rataan Lindlar-katalysaattorilla amiinin (12) muodostamiseksi.

.; 2-adamantyylioksikarbonyyli-a-metyyli-D-tryptofaanin liuos ·· < etyyliasetaatissa reagoi N,N-disykloheksyyli-karbodi-imi-din ja 1-hydroksibentsotriatsolin ekvimolaarisen liuoksen kanssa. Reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa n. tunnin ajan. Tämän jälkeen kaavion I amiinin (12) annetaan reagoida etyyliasetaatissa 18 tunnin ajan huoneen lämpötilassa dipeptoidi-bentsyyliesterin (kaavio II) muodostamiseksi. Lopuksi bentsyyliesteriä hydrataan neljän tunnin ajan käyttämällä palladium-hiili-katalysaattoria. Suodattamisen ja pesemisen jälkeen suodos tuottaa halutun kaavan I mukaisen yhdisteen.

27 106197

KAAVIO I - VÄLITUOTTEITA

κ 1 11 RÖH ----- - ROCOCl -- r | , \ \ ROCONH'T'COOMe \ He \ lii

iv I

\ /o ROCON H "Τ'" COOH Me XOH v OTs vi ^.Ph JL ^.Ph * X Ph 5 t-BuOCOHH t-BuOCONH ^ 2 1 vii r- TOSOH HjN'^V^' ?h £ .

Ph v_ Ph v* Ph t-BuOCONH'^Ss^°H t-BuOCONHy^v-,'OT3 t-BuOCONH‘^Ns»'Nj 3 2 fi • · ** vii ix Vili Jh — - ΒιΟ*^0""^·» - Η,ΝΛ-Ν) 10

Ph Ph

12 U

1 ·

Selitys: (i) COCl2, difosgeeni tai trifosgeeni, pyridiini, (ii) a-metyyli-tryptofaani-metyyliesteri, (iii) LiOH, ve-sip. 1,4-dioksaani, (iv) a-metyyli-tryptofaani, (v) TsCl, pyridiini tai NEt3, (vi) NaN3, DMF, (vii) TSOH, CH2Cl2, (viii) bentsyylivetysukkinaatti, DCCI, HOBt, (ix) Lindlar,

. EtOH

28 106197

Silloin, kun R on kaavan VI mukaisessa välituotteessa muu kuin R1, se voidaan poistaa synteesin sopivassa kohdassa alalla jokaiselle vastaavalle ryhmälle tunnetuilla menetelmillä ja korvata haluttu R1 sen tilalle.

Kaavan I mukaisia yhdisteitä valmistetaan seuraavasti a) kaavan Ia ί!χ) h2n "T" CONH\J^

Me J ph R3

mukainen yhdiste, jossa R3 ja R4 tarkoittavat samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan kaavan IV

R3 —A—Cl (IV) mukaisen yhdisteen kanssa, jossa R1 ja A tarkoittavat samaa kuin edellä, tai

b) sellaisten kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa A on -0C(=0)-, kaavan VI

fO ™ R1-OCONH 'j'' COOH Me 29 106197 mukainen yhdiste, jossa R1 tarkoittaa samaa kuin edellä,

• saatetaan reagoimaan kaavan VII

H2N- CHR3 - CHR4 -Ph (VII) mukaisen amiinin, jossa R3 ja R4 tarkoittavat samaa kuin edellä, tai sen trifluoriasetaattisuolan kanssa ja tarvittaessa vapautetaan saatu yhdiste suolastaan, tai

c) sellaisten kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa A on -0C(=0)-, R1 tarkoittaa samaa kuin edellä, R3 on -CH2OCOCH2CH2COOH ja R4 on vety, kaavan VIII

/'O «...

R1 - OCONHCONIK·

Me J Ph

^OH

mukainen alkoholi saatetaan reagoimaan meripihkahappoan-hydridin kanssa, tai

d) sellaisten kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa R1 tarkoittaa samaa kuin edellä ja A on -0C(=0)-, R3 on -CH2NHCOCH=CHCOOCH3, -ch2nhcoch2ch2cooh tai -CH2NHCOCH=CHCOOH ja R4 on H, kaavan IX

A) R1 OCONH CONHv. ,

Me Ph ^N3 30 106197 mukainen atsidi saatetaan reagoimaan meripihkahappoanhyd-ridin tai fumaarihapon suolan tai esterin kanssa, tai

e) sellaisten kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa R1 tarkoittaa samaa kuin edellä, A on -OC(=0)-, R3 on H ja R4 on -NHCOCH2CH2COOH tai —NHCOCH=CHCOOH, kaavan VI

/O „„

Rl-OCONH COOH Me

mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan kaavan X

/v . CONHs. /s (X)

Ph mukaisen amiinin kanssa, jonka jälkeen saatu bentsyylies-teri hydrataan vapaaksi hapoksi, ja haluttaessa näin saadut kaavan I mukaiset yhdisteet muunnetaan farmaseuttisesti hyväksyttäviksi suoloikseen, ja/tai niiden mahdollisesti sisältämät alkyyliesteriryh-mät hydrolysoidaan vapaiksi happoryhmiksi.

31 106197

Kaavioissa II-VU kuvataan edelleen menetelmätapoja kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi.

Alla esitetty kaavio II esittää menetelmätapoja kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi käyttämällä kaavion I avainvälituotetta, yhdistettä (2).

Eräässä menetelmässä, joka on esitetty jaksolla 2, 13, 14, 2-adamantyylioksikarbonyyli-a-metyyli-D-tryptofaani saatetaan reagoimaan disykloheksyylikarbodi-imidin (DCCI) ja 1- hydroksibentsotriatsolin (HOBt) kanssa etyyliasetaatti-liuoksessa.

2- amino-l-fenyyli-etanolin lisäyksen jälkeen saadaan alkoholi, kuten kaavion yhdisteessä (13). Tämä alkoholi saatetaan sitten reagoimaan meripihkahappoanhydridin kanssa, jolloin saadaan yhdiste (14), tämän keksinnön mukainen yhdiste.

32 106197

Eräs toinen keksinnön mukainen menetelmä on esitetty kaavion II jaksoilla 2, 16, 15. Tässä menetelmässä välituote (2) saatetaan reagoimaan DCCI:n ja pentafluorifenolin kanssa etyyliasetaatissa. Seosta sekoitetaan tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten se saatetaan reagoimaan L-fenyylialaninolin kanssa, jolloin saadaan yhdiste (16).

Tätä kuumennetaan palautusjäähdyttäen meripihkahappoanhyd-ridin ja DMAPrn kanssa 24 tunnin ajan. Reaktioseos pestään ja orgaaninen faasi kuivatetaan MgS04:n päällä. Liuottimen haihduttaminen tuottaa yhdisteen, joka on esitetty numerolla (15).

Jaksossa 2, 21, 22 välituote (2) (R on 9-fluorenyylimetyy-li) käsitellään liuoksessa pentafluorifenolin kanssa DCCIrn liuoksella etyyliasetaatissa. Tätä liuosta sekoitetaan tunnin ajan OeC:ssa ja sitten neljän tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Suodattamisen ja saostuneen DCU:n pesemisen jälkeen yhdistetyt suodokset saatetaan reagoimaan 2-fenyylietyyliamiinin kanssa yhdisteen (21) valmistamiseksi. Tämä yhdiste muunnetaan vapaaksi amiiniksi (22) saattamalla reagoimaan 20%:isen piperidiinin kanssa DMF-liuoksessa. Tämä voidaan käsitellä substituoidulla kloro-formiaatilla halutun amidin (21) tuottamiseksi.

: Eräässä toisessa menetelmässä, jakso 2, 16, 17 ja sitten 18, tai 19 tai 20, yhdiste (12) muunnetaan yhdisteeksi (16) (R on 9-fluorenyylimetyyli), kuten yllä on esitetty. Amidi (16) muunnetaan vapaaksi amiiniksi (17) saattamalla reagoimaan 20%risen pyridiinin kanssa DMFrssä.

Amiinin (17) liuos saatetaan reagoimaan substituoidun ase-tyylikloridin kanssa vastaavan substituoidun asyyliamidin (18) muodostamiseksi.

Vaihtoehtoisesti vapaan amiinin (17) liuos saatetaan reagoimaan substituoidun sulfonyylikloridin kanssa vastaavan 33 106197 sulfonamidin (19) muodostamiseksi. Reaktio suoritetaan THF- ja dimetyyliaminopyridiini- (DMAP) liuoksessa huoneen lämpötilassa n. neljän tunnin kuluessa.

Lisäksi vapaan amiinin (17) liuos voidaan saattaa reagoimaan substituoidun isosyanaatin kanssa halutun yhdisteen (20) tuottamiseksi. Tämä voidaan muuntaa haluttaessa farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi.

• · - 106197 34

KAAVIO II

/q —~—- A) ROCONH'T'CONH^J ROCONh4"cOHHv

Me Ph Me NwA.

Ph 12 li

N, L

fiO ÄD /¾ -

ROCONH^T-CONHv^s. ROCONH 'r'rnn H I

Me Y ?h ROCONH I COOH ROCONH A'CONHv^ 1 Me Ph IS ^occr—S^COOH 2

Iii vi/ 11 21<i iv v jA)__iv. .J^O Ä ROCONH^CONH-^v v H2N 4^CONH^^v \

Me YT Ph Me X^Ph I

L I HjN-XcONHv.^.

li OH il Xh Me Ph 'ty' vlil ώο XX) XX) RCH2CONH Ά CONHv. ^ RS02NH Ά CONHv. RNHCONH Ά CONH^

Me YT Ph Me X'Xh Me X'Xh

1£ ^OH 12 ^OH 20. ^OH

• ·

Selitys: (i) DCCI, HOBT, (+)- tai (-)-2-amino-l-fenyyli-etanoli, (ii) meripihkahappoanhydridi, DMAP, (iii) DCCI, PPP, 2-fenetyyliamiini, (iv) 20%’:inen piperidiini DMPrssä, (v) ROCOCl, (vi) DCCI, PFP, L-fenyylialaninoli, (vii) R- • · 35 106197 asetyylikloridi, (viii) R-sulfonyylikloridi, (ix) R-iso-syanaatti

Alla esitetty kaavio lii esittää menetelmiä kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi.

Eräs menetelmä on esitetty kaavion jaksolla 2, 23, 24. 2-adamantyylioksikarbonyyli-a-metyyli-D-tryptofaani-välituo-te käsitellään etyyliasetaatissa peräkkäin DCCI:llä ja HOBTrllä ja saatetaan sitten reagoimaan amiinin kanssa (12 kaaviossa I) halutun bentsyyliesterin (23) tuottamiseksi. Tämä pelkistetään vapaaksi karboksyylihapoksi (24) käyttämällä vetyä ja 10%:ista palladium-hiili-katalysaattoria n. neljän tunnin kuluessa. Reaktioseos suodatetaan, pestään ja konsentroidaan tyhjössä, jolloin saadaan yhdiste (24).

Eräs toinen menetelmä on esitetty jaksolla 2, 25, 26 ja 27 tai 28. Tässä menetelmässä yhdiste (2) saatetaan reagoimaan DCCI:n ja PFP:n kanssa etyyliasetaatissa. Sekoitetaan tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten seos saatetaan reagoimaan amino-atsidin (6 kaaviossa I) kanssa yhdisteen (25) tuottamiseksi. Tämä liuotetaan sitten seokseen, jossa on 5 % etikkahappoa ja 95 % etanolia, ja muunnetaan raa'aksi amiiniasetaatiksi (26) hydraamalla katalysaattorin, kuten l0%:isen palladium-hiilen läsnäollessa.

Yhdiste (26) voidaan sitten saattaa reagoimaan meripihka-happoanhydridin kanssa vapaan karboksyylihapon (28) muodostamiseksi.

Samoin yhdiste (26) saatetaan reagoimaan fumaryylidiklori-din kanssa yhdisteen (27) muodostamiseksi.

Yhdiste (27) tai (28) voidaan muuntaa haluttaessa sen farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi.

36

KAAVIO III

r^O^coos, Ä) ROCONH'T'CONHs^ 1 ?HC0

He \Ab. ROCONH I CONHv. I

Ph M* Ph “ /0 - A)

— tC0NHY-ph ROCONH^COOH

2S ^N, z iv I Ad H ROCONH CONHv.

^"s^V --Me J^Ph c0OH

\---- 21 NHCO‘//***r/ ROCONH ^P" CONHv. ^

Me Y^-Ph

: k + ^__Vl H

2Sl NHjAcO* .Ν,νν.

J-O

ROCONH “i* CONHv. λ

Me Y^Ph

I COOH

2fi NHCO^— ·· Selitys: (i) 12, DCCI, HOBT, (ii) 10%:inen Pd/C, EtOH,

(iii) 6, DCCI, PFP, (iv) 10%:inen Pd/C, l%:inen AcOH EtOH:ssa, (v) i. fumaryylidikloridi; ii. OH“, (vi) meri-pihkahappoanhydridi, DMAP

• 37 106197

Alla esitetty kaavio IV esittää edullisten C-päätteisten sivuketjujen ja R4 synteesiä, joita käytetään kaaviossa VI esitettyjen lopputuotteiden valmistamiseksi.

Siten yhdisteen (35) muunto yhdisteeksi (37) suoritetaan kondensoimalla yhdisteen (35) isobutyyliformyyliesteri 2-(trimetyylisilyyli)etanolilla, jolloin saadaan välituote (36), minkä jälkeen TMS-ryhmä lohkaistaan TFA:lla, jolloin saadaan yhdiste (37).

Oksiimiesteri-välituote (40) valmistetaan asyloimalla ami-noasetofenonikloorivetyhappo (38) 2-(trimetyylisilyyli)-etyylikloroformiaatilla THF:ssä, minkä jälkeen kondensoi-daan hydroksyyliamiinihydrokloridilla ja natriumasetaatil-la, jolloin saadaan oksiimi. Yhdiste (39) valmistetaan sitten lisäämällä metyylibromiasetaattia 10%:isen NaOH:n ja TBABtn läsnäollessa tolueenissa. Trimetyylisilyylietyy-li-ryhmä poistetaan sitten selektiivisesti tetrabutyyliam-moniumfluoridilla.

Välituote (42) valmistetaan alkoholista (41) vaiheissa, joissa tosyloidaan alkoholi, syrjäytetään tosylaatti nat-riumatsidilla DMF:ssä ja sitten pelkistetään katalyytti-sesti.

: Tetratsolikarboksyylihappo-välituote (44) valmistetaan nitriilistä (43) kolmessa vaiheessa lisäämällä atsidia tetratsolin muodostamiseksi, joka suojataan bentsyloimal-la, minkä jälkeen hydrolysoidaan metyyliesteri vapaaksi karboksyylihapoksi käyttämällä litiumhydroksidin vesipitoista THF-liuosta.

» · ·

Dieeniesteri (47) valmistetaan BOC-suojatusta fenyyliala-niinista (45) aldehydin (46) kautta käyttämällä Wittig-reagenssia Ph3P=CHCH=CHC02CH3.

♦ • · 38 106197 Välituote-eetteri (50) valmistetaan kloorihydroksiyhdis-teestä (48) syrjäyttämällä kloridi natriumatsidilla ja al-kyloimalla hydroksyyli-ryhmän anioni metyylijodiasetaatil-la, jolloin saadaan atsido-eetteri (49), joka pelkistetään sitten katalyyttisissä olosuhteissa.

Etyyliesteri (52) valmistetaan hydraamalla katalyyttisesti nitriili (51).

KAAVIO IV

39 106197

Ar/^Y^NHB°C 0 «) Ar^S^NHBOC jii) - Αί/'-'γ"NH>TFA

CO,H L/CO.R L/C°.« f») ^ ^ 0 NO/^CO,C^. -SiMe, NO^^CO.CH, phxAs/NHIHa iv> v? -^hXjQ/NH«

M ” W M

Ph ?h 1 .OH —*”»-«> - ^A^NH»

BnOCOHN^^^ BnOCONH

(«) («) .CHN «>-*'> Jn/Ph

MeOjC' HO,C^

M M

ρ„/γΝΗΒος . «i») «jy) Ph^YNHBOC CT) ίΚ) -^-MUjTTA

(«0 O* H MCHO Ph(47jWCO.CH.

OH o^CO,CH, O^^CO.CH,

PhA^C, -ViiOxviL- phA/N« -¾ - Ä/MH» H H Ph (io) HCI-NthU.

NCv^^COjEt χνϋ) jl

Ph-^CO.EI

(51) (SZ)

Selitys: (i) N-metyylimorfoliini, isobutyylikloroformiaat-ti, THF; (ii) hopeabentsoaatti, NEt3/ MeOH tai 2-(trime-tyylisilyyli)etanoli; (iii) TFA, CH2C12; (iv) 2-(trimetyy-.. lisilyyli)etyylikloroformiaatti, NEt3, THF; (v) NH2OH*HCl, CH3C02Na, EtOH/H20; sitten [CH3(CH2) 3]4NBr, BrCH2C02Me, 10%:inen NaOH, tolueeni; (vi) TBAF; pTsCl, NEt3, CH2C12; (viii) NaN3, DMF, Δ; (ix) H2, Lindlar-katalysaattori, EtO-Ac; (x) NaN3, NH4CT, DMF, Δ; (xi) BzBr, Cs2C03, DMF; (xii) LiOH, vesip. THF; (xiii) CH3NHOCH3-HCl, isobutyylikloro- a « 106197 formiaatti, N-metyylimorfoliini, THF; (xiv) LAH, THP; (xv) Ph3P=CH·CH=CHC02CH3, THP; (xvi) NaH, IC^CC^CT^' TMEDA, THP; (xvii) 10%:inen Pd/C, H2; HCl/EtOH.

Alla oleva kaavio V esittää edelleen kaavan I mukaisten yhdisteiden synteesiä, joissa on tähteiden R3 ja R4 parhaimpina pidettyjä esimerkkejä.

Avainvälituote (2) muunnetaan O-eetteri-sidotuksi sivuket-jukarboksyylihapoksi (54) kondensoimalla amiinilla (kaavion IV 50), kuten yllä on esitetty, ja suorittamalla tämän jälkeen hydrolyysi.

Yhdiste (65), jossa on α-pentaanihappo-sivuketju, valmistetaan hydraamalla ja hydrolysoimalla tämän jälkeen tyydyt-tymätön esteri (64), joka valmistetaan kondensoimalla monikäyttöhappo (flexible acid) (2) amiinilla (kaavion IV 47).

Glysyylijohdannainen (56) valmistetaan kondensoimalla gly-siinin bentsyyliesteri hapolla (55) ja hydraamalla tämän jälkeen katalyyttisesti bentsyyliryhmän poistamiseksi.

Happo (55) valmistetaan puolestaan monikäyttöhaposta (2) kondensoimalla amiinilla (kaavion IV 52).

Oksiimieetteri-karboksyylihappo (57) valmistetaan myös monikäyttöisestä happovälituotteesta (2) kondensoimalla välituotteella (40) (kaavio IV) ja hydrolysoimalla tämän jälkeen etyyliesteri vesipitoisella litiumhydroksidilla THF:ssä.

Tetratsoli (62) valmistetaan kondensoimalla amiini (60) bentsyloidulla tetratsoli-karboksyylihapolla (kaavion IV 44) ja poistamalla tämän jälkeen bentsyyliryhmä hydraamalla katalyyttisesti.

• ~ » 41 106197 Välituoteamiini (60) valmistetaan monikäyttöhaposta (2) kon-densoimalla kaavion IV amiini (42) ja poistamalla tämän jälkeen bentsyylioksikarbonyyli-ryhmä hydraamalla katalyytti-sesti.

α-glysinaatti-johdannainen (59) valmistetaan kondensoimal-la α-etikkahappojohdannainen (58) etyyliglysinaatilla ja hydrolysoimalla tämän jälkeen etyyliesteri IM NaOH:lla etanolissa.

Happo (58) valmistetaan avainvälituotteesta (2) kondesoi-malla kaavion IV yhdisteellä (37) ja hydrolysoimalla tämän jälkeen metyyliesteri vesipitoisella litiumhydroksidilla THP:ssä. 1 .

KAAVIO V

IOC 197 <V| f° .

RCKONH^00"" ROCONHt^CONHy^Y^

Γ (15) \vui)vi) CONH-^\cO,H

*oco4>»-y: \h l1.

Μ Γ“·" cO /^-co c„ to

H \ C0>CH’ <C]1 J

<ΛΠ tocONK^/” \ ROCONHjt,eCONM .. ^ .Ph

£ \ (64) ROCONh]^CONH^Y

ΡΟΟΟΝ·ί^εΟΝΗγ^ρν \ m (**) CO' M ^ to_ to ^ H 1Jv<U^ ROCOmifc'CO»H ROCONiuPCONH'/VsY^

n~-^nSs t λ NO^^-CO,H

pOiT "- I Ph H yiii) roconhJ^'conh'^v/ ,H" J^j (s,i u,,« N-V^h' ROCONHj^CONH'^V|X'Ph <k 1 J ^ (60) NH, ^CONH-^'COjH y .

1 1 Ph /1>v)vi) \xvj Viii) ROCON^CONK^' / \ H ^ (ss) £j / \ toil £07 to r JL /^/ph n_k ^^CONH/^V^Ph ROCONHMeCONH/l "OC^ ^ A „ M ™“ & , , NHCO 1 (61) r = 2 adamantyyli

Selitys: (i) DCC, HOBt, 37., EtOAc; (ii) TBAF, THF; (iii) DCC, HOBt, 50, NEt3, EtOAc; (iv) 1M NaOH, EtOH; (v) DCC, HOBt, 52, NEt3, EtOAc; (vi) LiOH, vesip. THF; (vii) DCC, HOBt, HCl-NH2CH2C02Bn, NEt3, EtOAc; (viii) 20%:inen Pd(OH)2/C, H2, EtOH; (ix) DCC, HOBt, 40, EtOAc; (x) DCC, 43 1G61Z7 HOBt, 37, NEt3, EtOAc; (xi) DCC, HOBt, HCl·H2NCH2Et, NEt3, EtOAc; (xii) DCC, HOBt, 42, EtOAc; (xiv) DCC, HOBt, mono-metyyli-syklopropaanidikarboksylaatti, EtOAc; (xv) DCC, PFP, 44, EtOAc; (xvi) DCC, HOBt, 47, NEt3, EtOAc.

Alla oleva kaavio VI esittää kaavan I mukaisen difunk-tionalisoidun johdannaisen synteesiä, jossa R3 on hydrok-simetyleeni ja R4 on hydroksyyli. Välituote (2) kondensoi-daan L-(+)-treo-2-amino-l-fenyyli-l,3-propaanidiolilla käyttämällä yhdisteen (2) PFP-esteriä.

KAAVIO VI

-4— F°r ROCONhX^C°.H ROCONH]^'CONH/S/Ph

W (72) 0H

Reagenssit: (i) PFP, DCC, L-(+)-treo-2-amino-l-fenyyli- 1,3-propaanidioli, EtOAc.

Alla oleva kaavio VII esittää erästä edullista hellävaraista menetelmää yhdisteen (82) valmistamiseksi, kun TMS-es-teri (81) lohkaistaan karboksyylihapoksi (82) miedoissa olosuhteissa käyttämällä tetrabutyyliammoniumfluoridia THF:ssä. Kaavio esittää myös yhdisteen (80) valmistusta asetyloimalla amiini (60K) meripihkahappoanhydridillä etyyliasetaatissa.

KAAVIO VII

44 1 06 1 97

CO

JL/ OCONHMeC0NH'^/ [ J NH* (60 K) / v £q

Te /\C0NH-^OPh iiori*1) R=CH,CH,TMS

,i--OCONHfoeC | _ ,CO,H »(K)R-h I I NHCO-^^^ (80)

Reagenssit: (i) meripihkahappoanhydridi, EtOAc; (i±) pfp, DCC, trans.-Me3SiCH2CH20C0CH=CHC02H/ EtOAc; (iii) (n-Bu)4N+F~, THF.

Tämän keksinnön mukaisten yhdisteiden biologista aktiivisuutta arvioitiin käyttämällä alkuseulontatestiä, joka mittasi nopeasti ja tarkasti testatun yhdisteen sitoutumi- 106197 sen tunnettuihin CCK-reseptori-paikkoihin. Spesifisten CCK-reseptoreiden on osoitettu esiintyvän keskushermostossa. (Ks. Hays et ai.. Neuropeptides 1: 53 - 62, 1980; ja Satuer et ai., Science, 208: 1155 - 1156, 1980.

Tässä seulontatestissä koiraspuolisista CFLP-hiiristä (paino 30 - 40 g) otetut aivokuoret leikeltiin jään päällä, punnittiin ja homogenoitiin 10 tilavuusmäärään 50 mM Tris-HCl-puskuria (pH 7,4 0 - 4eC:ssa). Muodostunut suspensio sentrifugoitiin, supernatantti heitettiin pois ja pelletti pestiin suspendoimalla uudelleen Tris-HCl-pusku-riin ja sentrifugoimalla uudelleen. Lopullinen pelletti suspendoitiin uudelleen 20 tilavuusmäärään 10 nM Hepes-puskuria (pH 7,2 23*C:ssa), joka sisälsi 130 mM NaCl:ää, 4,7 nM KClrää, 5 nM MgCl2:ta, 1 nM EDTA:ta, 5 mg/ml nau-danalbumiinia ja basitrasiinia (0,25 mg/ml).

Kyllästystutkimuksissa aivokuorikalvoja inkuboitiin 23eC:ssa 120 minuutin ajan 500 ylitran lopullisessa määrässä Hepes-inkubaatiopuskuria (pH 7,2) yhdessä 0,2 - 20 nM tritioidun pentagastriinin (Amersham International, Englanti) kanssa.

Syrjäytyskokeissa kalvoja inkuboitiin ligandin yhden ai-. noan konsentraation (2 nM) kanssa yhdessä kompetitiivisen testiyhdisteen kasvavien konsentraatioiden (10-11 -10“14M) kanssa. Kussakin tapauksessa ei-spesifiseksi sitoutumiseksi määriteltiin sitoutuminen, joka säilyy lei-maamattoman oktapeptidin CCK26_33 (10_6M) läsnäollessa.

: Inkubaation jälkeen kalvoihin sitoutunut radioaktiivisuus • < *L erotettiin vapaana liuoksessa olevasta suodattamalla no peasti Whatman GF/B-suodattimien läpi ja pestiin kolme kertaa 4 ml:11a jääkylmää Tris-HCl-puskuria. Suodokset, jotka saatiin näytteistä, joita oli inkuboitu tritioidun pentagastriinin kanssa, sijoitettiin polyetyleenipienpul- « 106197 loihin, joissa on 4 ml tuikeseosta, ja radioaktiivisuus määritettiin nestetuikespektrometrialla (tehokkuus 47 - 52 %)·

Spesifinen sitoutuminen CCK-reseptori-paikkoihin määritettiin kaikkiaan sitoutuneena tritioituna pentagastriinina miinus tritioidun pentagastriinin määrä, joka sitoutui 10“6 oktapeptidin CCK26_33 läsnäollessa.

Kyllästyskäyrät spesifiselle tritioidun pentagastriinin sitoutumiselle hiiren kuorikalvoihin analysoitiin Scat-chardin (Ann. New York Acad. Sei. 51: 660 - 672, 1949) ja Hillin (J. Physiol. 40: IV - Vili, 1910) menetelmien mukaisesti sitoutumispaikkojen (Bmax) enimmäismäärän ja ta-sapainodissosiaatiovakion (Ka) arvioiden muodostamiseksi.

Syrjäytyskokeissa inhibitiokäyrät arvioitiin joko logit-log-kaavioilla tai iteratiivisella käyrällä soveltamalla tietokoneohjelmaa ALLFIT (DeLean, Munson ja Redbard, 1978) ic50- ja nH- (näennäinen Hillin kerroin) arvioiden muodostamiseksi. (IC50-arvot määriteitään testiyhdisteen konsentraa-tiona, joka vaaditaan spesifisen sitoutumisen 50%:isen inhibition aikaansaamiseksi.) ·· Testiyhdisteen inhibitiovakio (K^) laskettiin sitten

Cheng-Prusoff'in yhtälön mukaisesti:

Ki = IC50 1 + [L]/Ka jossa [L] on radioleiman konsentraatio ja Ka on tasapainoni dissosiaatiovakio.

Useiden tämän keksinnön mukaisten esimerkkiyhdisteiden K^/M-arvot on esitetty taulukossa III.

Tämän keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää ruoka-• halua hillitsevinä aineina alla selitettyjen testien pe rusteella.

106197

Palatable Diet Feeding-analyysissä täysikasvuisia koiras-puolisia Hooded Lister-rottia, jotka painoivat 200 - 400 g, pidettiin yksittäin ja ne koulutettiin syömään maukasta ravintoa. Tämä ravinto käsitti Nestl^n makeutettua kondensoitua maitoa, jauhettua rotan rehua ja rotan vettä, jotka sekoitettuna yhteen sitoutuivat kiinteäksi konsistenssik-si. Jokaiselle rotalle annettiin 20 - 30 g maukasta ravintoa 30 minuutin ajan päivässä valoisa-pimeä-jakson valoisan vaiheen aikana viiden päivän harjoitusjakson ajan. Maukkaan ravinnon otto mitattiin punnitsemalla ruokasäiliö enhen 30-minuuttista ruokailujaksoa ja sen jälkeen (0,1 g:n tarkkuusrajat). Huolehdittiin siitä, että mahdollisesti läikkynyt ravinto kerättiin ja otettiin huomioon laskelmissa. Rotilla oli vapaa pääsy ruokapelletteihin ja veteen paitsi 30minuuttisen testijakson aikana.

Harjoitusjakson jälkeen annos-vastekäyrät muodostettiin CCK8:lle ja useille tämän keksinnön mukaisille esimerkki-yhdisteille (n = 8 - 10 rottaa/annostaso). MPE50-arvot (±95 %:n luotettavuusraja) saatiin näiden yhdisteiden ano-rektisille vaikutuksille ja ne on esitetty taulukossa III.

Terapeuttisessa käytössä ruokahalua hillitsevinä aineina tämän keksinnön mukaisia yhdisteitä annetaan potilaalle annostustasoissa, jotka ovat n. 200 - n. 2800 mg/päivä.

Alla oleva taulukko III esittää sitoutumis- ja tehokkuus-arvoja.

« •.

« 48 106197

TAULUKKO III

Sitoutumis- ja tehokkuusarvot rottien ravinnonoton inhiboin-tianalyysissä

Sitoutuminen Ravinnonoton inhibointi keskus-COt- rotan maukkaan ravinnon

Esim. reseptoreihin _analyysissä_ n:o Κι (μΜ) (n)a I.P. MPE50 (mg/kg)

Ϊ 1/23 (T) NT

2 3,15 (3) 9,6 3 0/26 (3) 30,7 4 0,17 (3) >20 5 2,23 (3) 33,6

6 0,44 (3) NT

7 0,76 (3) NT

8 0,84 (3) NT

9 7,50 (2) NT

10 8,80 (2) NT

11 0,054 (3) NT

12 0,085 (3) NT

13 0,127 (3) NT

14 10,5 (1) 19,5 15 0,026 (3) 15,7 16 0,03 (2) 10,5 17 0,063 (2) 13,1

18 21,02 (1) NT

19 0,014 (2) NT

19A 0,00008 (1) NT

20 0,0085 (2) 17,4

20A 0,003 (3) NT

33 0,006 (1) NT

32 0,0051 (1) NT

40 0,0039 (1) NT

41 0,00029 (1) NT

43_0,004_QJ_NT_ NT = ei testattu 49 106197 * MPE5Q-arvo = yhdisteen annos, joka tuottaa 50 % maksimaalisesta mahdollisesta vaikutuksesta, joka näissä kokeissa olisi 0 ravinnon ottoa.

(n)a = analyysien määrä.

Koiraspuolisia Hooded Lister-rottia (175 - 250 g) pidettiin yksittäin ja niiden annettiin paastota yön ajan (vapaa veden saanti). Ne anestesoitiin uretaanilla (1,5 g/kg i.p.) ja henkitorvi kanyloitiin spontaanin hengityksen helpottamiseksi. Mahalaukkua perfundoitiin jatkuvasti käyttämällä Ghosh'in % Schild'in alkuperäisen menetelmän ("Continuous recording of acid secretion in the rat", Br♦ J. Pharmac. 13: 54 - 61, 1956) muunnelmaa, jonka on esittänyt Parsons julkaisussa "Quantitative studies of drug-induced gastric acid secretion". (Ph. D. Thesis, University of London, 1969.). Mahalaukun onteloa perfundoitiin 3 ml/min.:n nopeudella 5,4%:isella w/v glukoosi-liuoksella sekä ruokatorvi- että kehokanyylin kautta. Nestettä kuljetettiin eteenpäin rumpupumpulla (Gilson, Minipuls 2) kuu-mennuskierukoiden kautta sen lämpötilan saattamiseksi 37 ± leC:seen. Perfuusioneste kerättiin pohjakoontisuppilolla ja ohjattiin pH-elektrodiin, joka oli kytketty Jenway-pH-mittariin (PHM6). Tulos otettiin pH-mittarista Rikadenki-piirturille mahaperfusaatin pH:n rekisteröimiseksi suo-·· raan.

Pentagastriini varastoitiin jäädytettynä määräeränä ja laimennettiin vaadittuihin konsentraatioihin steriilillä 0,9%:isella (w/v) NaCltllä. Uudet yhdisteet liuotettiin steriiliin 0,9%:iseen (w/v) NaCliiin koepäivänä. Lääkeaineet annettiin i.v. kanyloidun kaulalaskimon kautta bolus-injektiona 1 ml/kg:n annosmääränä, joka oli pesty 0,15 ml:11a 0,9%:ista (w/v) NaCl:llä. Perus-pH:n annettiin stabiloitua ennen yhdisteiden antamisen aloittamista. Tavallisesti kului 30 minuuttia kirurgian ja ensimmäisen yhdisteen antamisen välillä.

so 106197

Yhdiste (20) antagonisoi mahahappoerityksen stimulointia, joka tuotettiin pentagastriinin 1 nmoolia/kg:n vakioannok-sella (kuvio 1). Yhdiste (16) vähensi myös mahahapon määrää, joka erittyi annettaessa 1 nmoolia/kg pentagastriinia (pentagastriinin alkuvaste 254 ymoolia/l H+, yhdisteen (16) jälkeen (kumulatiivinen 1,1 ymoolia/kg:n annos) 128 pmoolia/l H+). Molemmilla yhdisteillä antagonismi on rever-siibeli vasteen palautuessa täysin pentagastriinin suhteen.

Tämän keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää myös haavaumia estävinä aineina, kuten alla selitetään.

Aspiriini-indusoitua mahavauriota analysoitiin kulloinkin 10 rotan ryhmissä.

Kaikkien eläinten annettiin paastota 24 tuntia ennen koetta ja koko kokeen ajan. Lääkeaine tai apuaine annettiin 10 minuuttia ennen kuin annettiin oraalisesti l ml aspiriinin 45 mg/ml:n suspensiota 0,5%:isessa karboksimetyylisellu-loosassa (CMC).

Eläimet tapettiin 5 tunnin kuluttua aspiriinin antamisesta ja mahalaukut poistettiin ja avattiin niiden tutkimiseksi.

Mahavauriolle annettiin pisteet seuraavasti:

Pisteet 1 pieni verenvuoto 2 suuri verenvuoto 3 pieni haavauma 4 suuri haavauma 5 puhj ennut haavauma

Keskimääräinen haavaumapistemäärä oli suolaliuoskontrolli-ryhmässä 12,1 ± 6,85 (±SD). Käsittely ranitidiinilla (15 51 106197 mg/kg p.o.) esti haavauman muodostumista 74 %:illa, jolloin haavaumapistemääräksi saatiin 3,2 ± 2,35 (p <0,001 verattuna kontrolleihin). Käsittely [R-(R*,R*)-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.-13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]propyyli]amino]-1-fe-nyylietyyli]amino]-4-oksobutaanihapolla (10 mg/kg p.o.) tuotti haavaumapistemääräksi 6,3 ± 4,14 (p <0,05 verrattuna kontrolleihin), 48 %:in lasku haavauman muodostumisessa.

Käytettyjä spesifisiä annostuksia voidaan kuitenkin vaihdella riippuen potilaasta, hoidettavan tilan vakavuudesta ja käytetyn yhdisteen aktiivisuudesta. Alan ammattihenkilö voi määrittää optimaaliset annostukset.

Tämän keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää myös anksiolyyttisinä aineina, kuten selitetään ja esitetään seuraavassa.

Kuvio 2 esittää oraalisesti annetun yhdisteen (20) tehokkuutta anksiolyyttisen aktiivisuuden suhteen. Anksiolyyt-tistä aktiivisuutta analysoitiin valoisa/pimeä-tutkimus-testissä hiirissä (B. J. Jones, et ai., Br. J. Pharmacol. 93: 985 - 993, 1988).

Kuviossa 2 hiirien määrä on 5 ja esikäsittelyaika oli 40 minuuttia. Yhdiste annettiin p.o. annosten ollessa 0,1, 1 ja 10 mg/kg.

Laite oli ylhäältä avoin laatikko, 45 cm pitkä, 27 cm le- .. veä ja 27 cm korkea ja se oli jaettu pieneen alueeseen • « (2/5) ja suureen alueeseen (3/5) väliseinällä, joka ulottui 20 cm seinämien yläpuolelle. Väliseinässä oli 7,5 x 7,5 cm:n aukko lattian tasolla. Pieni osasto maalattiin mustaksi ja suuri osasto valkoiseksi. Kummankin osaston lattia merkittiin 9 cm:n neliöiksi. Valkoista osastoa va- 52 1 06 1 97 laistiin 100 Wattin elohopealampulla, joka oli 17 cm laatikon yläpuolella, ja mustaa osastoa samalla tavalla sijoitetulla 60 Wattin punaisella lampulla. Laboratoriota valaistiin punaisella valolla.

Kaikki testit suoritettiin 13.00 - 18.00 välillä. Jokaista hiirtä testattiin sijoittamalla se valkoisen alueen keskiosaan ja antamalla sen tutkia uutta ympäristöä viiden minuutin ajan. Sen käyttäytyminen taltioitiin videonauhalle ja käyttäytymisanalyysi suoritettiin tämän jälkeen taltioinnista. Mitattiin viisi parametriä: latenssi mustaan osastoon saapumisen suhteen, kummallakin alueella kulutettu aika, siirtymisten määrä osastojen välillä, viivojen määrä, joiden poikki kuljettiin kummassakin osastossa ja pystyynnousemisten määrä kummassakin osastossa.

Tässä testissä valoisalla alueella kulutetun ajan kasvu on herkkä mitta useiden anksiolyyttisten vakiolääkkeiden anksiolyyttisille vaikutuksille - se on suoraan suhteessa näihin. Lääkkeet liuotettiin veteen tai suolaliuokseen ja annettiin joko subkutaanisesti, intraperitoneaalisesti tai suun kautta (p.o.) mahaneulan kautta.

Yhdiste (20) ja yhdiste [R-(R*,R*)]-4-[[2-[[3-(lH-indol- .. 3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[ (trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2- yylioksi) karbonyyli ] amino ]propyyli ] amino ] -1-fenyylietyy-li]amino]-4-oksobuteenihappo olivat aktiivisia subkutaanisesti annettuina. Kontrollieläimillä oli 3 % ylityksiä pimeälle alueelle viiden minuutin mittausjaksoina. Hiirillä, jotka oli käsitelty 1 mg/kg:lla (s.c.) yhdistettä (20), oli 85 ylitystä valoisalle alueelle ja ainoastaan 24 yli- • « tystä pimeälle alueelle, merkitsevä (p <0,01) ero pelokkaista kontrollieläimistä. Diatsepaamilla (0,25 mg/kg) oli yhdisteen (20) kaltainen vaikutus samassa kokeessa. Lisä-kokeissa yhdiste [R-(R*,R*)]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)- 2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)- 53 106197 karbonyyli]aminojpropyyli]amino]-1-fenyylietyyli]amino]- 4-oksobuteenihappo (mg/kg s.o.) ja yhdiste (20) (1 mg/kg p.o.) lisäsivät merkitsevästi (p <0,01) testilaatikon valoisalla alueella kulutettua aikaa.

Tämän keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää anti-psykoottisina aineina. Yhdistettä (20) (joka on esitetty yhdisteenä (24) kaaviossa III) ja yhdistettä (20A) testattiin niiden kyvyn suhteen vähentää intra-accumbens-amfeta-miinin vaikutuksia rotassa, kuten selitetään seuraavassa.

Käytettiin koiraspuolisia Sprague Dawley (CD) Bradford-kannan rottia. Rottia pidettiin viiden ryhmissä 21 ± 2eC:n lämpötilassa 12 tunnin valoisa-pimeä-jaksossa valojen ollessa päällä 07.00 - 20.00. Rottia ruokittiin CRM-ravin-nolla (Labsure) ja ne saivat vettä mielin määrin.

Rotat anestesoitiin kloraalihydraatilla (400 mg/kg s.c.) ja sijoitettiin Kopfin stereotaktiseen rakenteeseen. Pitkäaikaisesti pysyvät ohjauskanyylit (valmistettu ruostumatonta terästä olevasta putkesta, jonka läpimitta oli 0,65 mm, ja pidettiin kaksipuolisesti Parspex-pidikkeissä) istutettiin käyttämällä stereotaktisia vakiomenetelmiä, niin että ne päätyivät 3,5 mm nucleus accumbensin keskuksen yläpuolelle (ant. 9,4, vert. 0,0, lat. 1,6) tai 5,0 mm mantelitumakkeen (nucleus amygdala) keskuksen yläpuolle (ant. 5,8, vert. -1,8, lat. ±4,5) (atlas of De Groot, 1959). Ohjaimet pidettiin avoimina 14-päiväisen toipumis-jakson ajan käyttämällä ruostumatonta terästä olevia puikkoja, läpimitta 0,3 mm, jotka ulottuivat 0,5 mm ohjauskär-kien yli.

Rottia pidätettiin manuaalisesti ja puikot poistettiin. Asennettiin intraserebraaliset injektiokanyylit, läpimitta 0,3 mm, ja lääkeitä annettiin 0,5 yl 5 sekunnin ajan (55 lisäsekuntia annettiin laskeutumista varten) Hamilton- 54 1 06 1 97 ruiskuista, jotka oli kiinnitetty polyteeniputken kautta injektioyksiköihin. Eläimiä käytettiin ainoastaan yhteen ainoaan tilanteeseen.

Käyttäytymiskokeita suoritettiin 07.30 - 21.30 välisenä aikana hiljaisessa huoneessa, joka pidettiin 22 ± 2eC:n lämpötilassa. Rotat otettiin odotustilasta ja niiden annettiin sopeutua tunnin ajan uuteen ympäristöön. Lokomoto-rinen (liikunta-) aktiivisuus analysoitiin yksilöllisissä suojatuissa Perspex-häkeissä (25 x 15 x 15 cm (korkea) (30 ryhmissä), joista jokainen oli varustettu yhdellä valoken-noyksiköllä pitempää akselia pitkin 3,5 cm sivusta; tämän aseman on todettu minimoivan virheaktiivisuusmääriä esimerkiksi pöyhistely- ja päänliikkeiden johdosta, kun eläin on paikallaan. Valonsäteen katkeamiset rekisteröitiin joka 5. minuutti. Tänä aikana eläimiä tutkittiin myös lokomoto-risen aktiivisuuden mahdollisten ei-spesifisen muutoksen suhteen, esim. rauhoittuminen, uupuminen, stereotyyppiset liikkeet, jotka saattaisivat häiritä lokomotorisen aktiivisuuden taltiointia.

Mitattiin yhdisteiden (20) ja (20A) kyvyt inhiboida hyper-aktiivisuus, joka aiheutettiin antamalla amfetamiini-injektio rotan nucleus accumenbens1in.

Lokomotorinen aktiivisuus lisääntyi sen jälkeen, kun oli annettu amfetamiinin (20 pg) bilateraalinen injektio nucleus accumbensiin; huippuaktiivisuus (50 - 60 kertaa/5 min.-1) tapahtuu 20 - 40 minuutin kuluttua injektiosta.

Kun rotille annettiin intraperitoneaalisena injektiona yhdistettä (20A) (20 mg/kg tai 30 mg/kg) tai yhdistettä (20) (10 mg/kg), tämä vähensi hyperaktiivisuutta, joka oli saatu aikaan amfetamiinin intra-accumbens-injektiolla (kuviot 3 ja 4). Tämä testin tiedetään olevan prediktiivinen (ennustava) antipsykoottiselle aktiivisuudelle (Costall, 55 106197

Domeney & Naylor & Tryers, Brit. J. Pharmac. 92: 881 -894) .

Kuvio 3 esittää yhdisteen (20A) intra-accumbens-amfetamii-nin (20 yg) antagonismia. Amfetamiini-kontrolli on esitetty merkillä -O-/ apuaine merkillä merkki -Δ— esittää yhdistettä (20) 1 mg/kg:n i.p.-annoksessa ja merkki -A-esittää yhdistettä 10 mg/kg:n i.p.-annoksessa. Testattu määrä oli viisi. *P on <0,05. Aika minuutteina on esitetty aktiivisuutta vastaan (määrät/5 minuuttia).

Kuvio 4 esittää yhdisteen (20) intra-accumbens-amfetamii-nin (20 yg) antagonismia. Kuvion selitys on sama kuin kuviolle 3 yllä.

Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet estävät ja hoitavat vieroitusreaktiota, joita syntyy, kun lääkkeen pitkäaikainen käyttö lopetetaan tai kun alkoholin väärinkäyttö lopetetaan. Näitä yhdisteitä voidaan siten käyttää terapeuttisina aineina hoidettaessa pitkäaikaista lääkkeen tai alkoholin väärinkäyttöä, kuten alla selitetään.

Tämän keksinnön mukaisten yhdisteiden vaikutus on esitetty esimerkiksi hiiren "valoisa/pimeä-laatikko"-testissä ku-- vioissa 5 - 12.

Kuviossa 5 viidelle eläimelle annettiin nikotiinia, 0,1 mg/kg i.p. kahdesti päivässä 14 päivän ajan. 24-tuntisen vieroitusjakson jälkeen yhdistettä (20) annettiin 1,0 mg/kg i.p. kahdesti päivässä. Valoisalla alueella kulutetun ajan lisääntyminen on herkkä mitta yhdisteen (20) vaikutuksesta aineena hoitaa nikotiinista vieroittamisen vaikutuksia.

Kuvio 6 esittää nikotiinin pitkäaikaiskäytön ja siitä vie-toittamisen vaikutuksia käytettäessä yhdistettä (20A).

56 106197

Viidelle hiirelle annettiin nikotiinia 0,1 mg/kg i.p. kahdesti päivässä 14 päivän ajan. 24-tuntisen vieroitusjakson jälkeen yhdistettä (20A) annettiin 10 mg/kg i.p. kahdesti päivässä. Yhdisteen (20A) vaikutus voidaan nähdä valoisalla alueella kulutetun ajan lisääntymisestä.

Kuvio 7 esittää diatsepaamin pitkäaikaiskäytön ja siitä vieroittamisen vaikutusta käytettäessä yhdistettä (20). Viidelle hiirelle annettiin diatsepaamia 10 mg/kg i.p. kahdesti päivässä seitsemän päivän ajan. 24-tuntisen vieroitus jakson jälkeen yhdistettä 20 annettiin 1,0 mg/kg i.p. kahdesti päivässä. Valoisalla alueella kulutetun ajan kasvu osoittaa yhdisteen (20) vaikutuksen.

Kuvio 8 esittää yhdisteen (20A) vaikutusta diatsepaamin pitkäaikaiskäyttöön ja siitä vieroittamiseen. Viidelle hiirelle annettiin diatsepaamia 10 mg/kg i.p. kahdesti päivässä seitsemän päivän ajan. 24-tuntisen vieroitusjakson jälkeen yhdistettä (20A) annettiin 10 mg/kg i.p. kahdesti päivässä. Valoisalla alueella kulutetun ajan määrä yhdisteen (20A) antamisen jälkeen osoittaa yhdisteen tehokkuuden .

Kuvio 9 esittää yhdisteen (20) vaikutusta alkoholin pitkäaikaiskäyttöön ja siitä vieroittamiseen. Viidelle hiirelle annettiin alkoholia juomavedessä, 8 % (w/v), 14 päivän ajan. 24-tuntisen vieroitusjakson jälkeen yhdistettä (20) annettiin 1,0 mg/kg i.p. kahdesti päivässä. Valoisalla alueella kulutetun ajan määrä yhdisteen antamisen jälkeen osoittaa yhdisteen tehokkuuden.

Kuvio 10 esittää yhdisteen (20A) vaikutusta alkoholin pitkäaikaiskäyttöön ja siitä vieroittamiseen. Viidelle hiirelle annettiin alkoholia juomavedessä, 8 % (w/v), 14 päivän ajan. 24-tuntisen vieroitusjakson jälkeen yhdistettä (20A) annettiin 10 mg/kg i.p. kahdesti päivässä. Valoisal- 57 1 06 1 97 la alueella kulutetun ajan kasvu osoittaa yhdisteen (20A) vaikutuksen hiiriin.

Kuvio 11 esittää tehokkuutta kokaiinin pitkäaikaiskäyttöön ja siitä vieroittamiseen. Viidelle hiirelle annettiin kokaiinia 1,0 mg/kg i.p. kahdesti päivässä 14 päivän ajan. Valoisalla alueella kulutetun ajan kasvu osoittaa yhdisteen (20) tehokkuuden hoidossa.

Kuvio 12 esittää vaikutusta kokaiinin pitkäaikaiskäyttöön ja siitä vieroittamiseen käytettäessä yhdistettä (20A). Viidelle hiirelle annettiin kokaiinia 1,0 mg/kg i.p. kahdesti päivässä 14 päivän ajan. 24-tuntisen vieroitusjakson jälkeen yhdistettä (20A) annettiin 1,0 mg/kg i.p. kahdesti päivässä. Yhdisteen (20A) käytön vaikutus on osoitettu valoisalla alueella kulutetun ajan kasvulla.

Kuvio 13 esittää yhdisteen 20 anksiolyyttisiä vaikutuksia Rat Social Interaction-testissä (rotan sosiaalisen vuorovaikutuksen testi) annettaessa sitä 0,001 - 1,0 mg/kg:n annoksena pareittain oleville rotille s.c. Yhdisteen 20 anksiolyyttinen vaikutus osoitetaan sosiaalisessa vuorovaikutuksessa kulutetun ajan kasvulla verrattuna kontrol-liarvoon C (Costall, B., University of Bradford).

•

Kuvio 14 esittää yhdisteen 20 anksiolyyttisiä vaikutuksia Rat Elevated X-Maze-testissä (rotan korotetun X-sokkelon testi) annettaessa sitä 0,01 - 1,0 mg/kg s.c. Anksiolyyttinen vaikutus osoitetaan avoimen haaraosan päätyosassa kulutetun ajan kasvulla verrattuna kontrolliin C.

• · •,

Kuvio 15 esittää viiden keksinnön mukaisen yhdisteen anksiolyyttisiä vaikutuksia verrattuna yksinään käytettyyn apuaineeseen ja yhdisteeseen 20 Rat Elevated x-Maze-tes-tissä. Annos vastaa 0,1 mg/kg:n p.o.-annosta yhdistettä 20.

• « 58 106197

Kuvio 16 esittää, että yhdiste 20 vähentää koukistajareak-tiota stimuloidussa spinalisoidussa rotan preparaatissa (aivot poistettu) morfiinin tavoin. Yhdisteen 20 antaminen yhdessä morfiinin kanssa (alempi kaavio) tehostaa suuressa määrin vaikutusta, joka kestää 3 tunnin ajan.

Farmaseuttisten koostumusten valmistamiseksi tämän keksinnön mukaisista yhdisteistä voidaan käyttää inerttejä, farmaseuttisesti hyväksyttäviä kantoaineita, jotka ovat joko kiinteitä tai nestemäisiä. Kiinteän muodon omaavat valmisteet käsittävät jauheita, tabletteja, dispergoituvia rakeita, kapseleita, tärkkelyskapseleita ja suppositorioita.

Kiinteänä kantoaineena voi olla yksi tai useampi aine, joka voi toimia myös laimentimena, makua parantavana aineena, liukoiseksi tekevänä aineena, voiteluaineena, suspen-dointiaineena, sideaineena tai tablettia hajottavana aineena. Se voi olla myös kapselointiaine.

Jauheissa kantoaineena on hienojakoinen kiintoaine, joka on sekoitettu hienojakoisen aktiivisen komponentin kanssa. Tableteissa aktiivinen komponentti sekoitetaan kantoaineen kanssa, jolla on tarvittavat sitomisominaisuudet, sopivissa suhteissa ja puristetaan haluttuun muotoon ja kokoon.

• »

Suppositoriovalmisteiden valmistamiseksi alhaisessa lämpötilassa sulava vaha, kuten rasvahappoglyseridien ja kaa-kaovoin seos, sulatetaan ensin ja sitten aktiivinen aineosa dispergoidaan siihen, esimerkiksi sekoittaen. Sulanut homogeeninen seos kaadetaan sitten sopivankokoisiin muot-·· teihin ja niiden annetaan jäähtyä ja jähmettyä.

• * k

Jauheet ja tabletit sisältävät edullisesti 5 - n. 70 % aktiivista komponenttia. Sopivia kantoaineita ovat magnesiumkarbonaatti, magnesiumstearaatti, talkki, laktoosi, sokeri, pektiini, dekstriini, tärkkelys, tragantti, metyy- > 59 106197 liselluloosa, natriumkarboksimetyyliselluloosa, alhaisessa lämpötilassa sulava vaha, kaakaovoi ja vastaavat.

Eräs edullinen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola on N-metyyli-glukamiini-suola.

Käsite "valmiste" käsittää myös aktiivisen aineosan ja kantoaineena käytetyn kapselointiaineen yhdistelmän kapselin muodostamiseksi, jossa aktiivinen aineosa (muiden kan-toaineiden kanssa tai ilman niitä) on ympäröity kantoai-neella, joka on siten yhteydessä siihen. Samoin tähän sisältyvät tärkkelyskapselit.

Tabletteja, jauheita, tärkkelyskapseleita ja kapseleita voidaan käyttää myös oraaliseen käyttöön sopivina kiinteinä annostusmuotoina.

Nestemäiset valmistusmuodot käsittävät liuoksia, suspensioita ja emulsioita. Esimerkkinä parenteraaliseen käyttöön sopivista nestemäisistä valmistusmuodoista voidaan mainita aktiivisten yhdisteiden steriilit vesi- tai vesi-propyleeniglykoli-liuokset. Nestemäiset valmisteet voidaan muodostaa myös liuoksena vesipitoisessa polyetyleeniglyko-li-liuoksessa.

• < • <

Oraaliseen käyttöön sopivat vesiliuokset voidaan valmistaa liuottamalla aktiivinen aineosa veteen ja lisäämällä haluttaessa sopivia väriaineita, makua parantavia aineita, stabilointiaineita ja sakeutusaineita. Oraaliseen käyttöön tarkoitetut vesisuspensiot voidaan valmistaa dispergoimal-la hienojakoinen aktiivinen aineosa veteen yhdessä viskoo- • « sin aineen, kuten luonnollisten, synteettisten kumien, hartsien, metyyliselluloosan, natriumkarboksimetyylisellu-loosan ja muiden farmaseuttisten valmisteiden valmistuksessa tunnettujen suspendointiaineiden kanssa.

• · 60 106197

Farmaseuttinen valmiste on edullisesti yksikköannostusmuo-dossa. Tällaisessa muodossa valmiste on jaettu yksikköan-noksiksi, jotka sisältävät sopivia määriä aktiivista aineosaa. Yksikköannostusmuoto voi olla pakattu valmiste, jolloin pakkaus sisältää erillisiä määriä valmistetta, esimerkiksi pakattuja tabletteja, kapseleita ja jauheita pienpulloissa tai ampulleissa. Yksikköannostusmuoto voi olla myös itse kapseli, tärkkelyskapseli tai tabletti tai se voi olla sopiva määrä jotakin näistä pakatuista muodoista.

Esimerkit A - I esittävät menetelmiä esiasteiden tai välituotteiden valmistamiseksi lopputuotteita varten, jotka on esitetty esimerkeissä 1-45 (vastaavat kuvioissa ja kokeissa esitettyjä yhdisteitä 1-45, mutta eivät kaavioissa esitettyjä numeroita).

Välituote-esimerkki A

Ν-Γ(l-adamantyylioksi)karbonyvli1-a-metyyli-DL-tryptofaani

Liuokseen, jossa oli a-metyyli-DL-tryptofaania (2,18 g, 10 mmoolia) IM NaOH-liuoksessa (10 ml), lisättiin 0eC:ssa NaHC03:a (0,92 g, 11 mmoolia) ja sitten liuos, jossa oli 1-adamantyylifluoroformiaattia (2,18 g, 11 mmoolia) 1,4-dioksaanissa (10 ml). Seosta sekoitettiin 0eC:ssa tunnin ajan ja sitten 24 tunnin ajan huoneen lämpötilassa.

Dioksaani poistettiin tyhjössä ja vesifaasi uutettiin kolmella annoksella eetteriä (30 ml). Vesifaasi jäähdytettiin jäässä ja peitettiin etyyliasetaatilla (30 ml), minkä jäl-·· keen se tehtiin happamaksi pH-arvoon 2-3 natriumvetysul- faatti-liuoksella. Tämän jälkeen suoritettiin vielä kaksi orgaanista tai etyyliasetaatti-uuttoa, sitten orgaaniset kerrokset yhdistettiin, pestiin vedellä (30 ml) ja kuivatettiin MgS04:n päällä. Etyyliasetaatti poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin l-adamantyylioksikarbonyyli-a-me- 61 106197 tyyli-DL-tryptofaani (1,154 g, 29 %) valkoisena kiintoaineena, joka kiteytettiin uudelleen etyyliasetaatista, sp. 206 - 218eC (EtOAc); IR (kalvo) 1681 cm-1; NMR (CD3OD) 6: 1,43 (3H, s), 1,68 (6H, lev. s), 2,13 (9H, lev. s), 3,35 (2H, ABq J 14 Hz), 6,95 - 7,56 (5H, m).

Välituote-esimerkki B

2-adamantyylikloroformlaatti

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli 2-adamantanoiia (0,912 g, 6 mmoolia) kuivassa C^C^iSsa (15 ml), lisättiin bis-(trikloorimetyyli)karbonaattia (0,653 g), pyridiiniä kuivassa C^C^zssa (10 ml) OeC:ssa. Reaktioseos lämmitettiin huoneen lämpötilaan ja sitä sekoitettiin kahden tunnin ajan. Liuotin poistettiin tyhjössä 30eC:ssa, otettiin etyyliasetaattiin (30 ml) ja sekoitettiin 10 minuutin ajan. Pyridiniumhydrokloridi-sakka suodatettiin pois ja liuotin poistettiin tyhjössä 30eC:ssa, jolloin saatiin öljy, joka jähmettyi seistessään (1,29 g, 100 %). IR (kalvo): 1778 cm*"1; NMR (CDCI3) 6: 1,55 - 1,65 (2H, m), 1,70 - 1,80 (4H, m), 1,85 - 1,95 (4H, m), 2,00 - 2,10 (2H, m), 2,15 - 2,20 (2H, m), 5,02 (1H, 6, J 3,3 Hz CHOCOCl).

Välituote-esimerkki C

N- Γ (2-adamantvyl·ioksi)karbonvyli^-α-metvyli-D-trvptofaani-metyyllesteri

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli 2-adamantyyliklorofor-miaattia (0,965 g, 4,5 mmoolia) kuivassa THF:ssä (10 ml), lisättiin tipoittain liuos, jossa oli a-metyyli-D-trypto-·· faani-metyyliesteriä (0,928 g, 4 mmoolia) kuivassa THFrssä (20 ml), ja sitten liuos, jossa oli trietyyliamiinia (0,808 g, 8 mmoolia) kuivassa THF:ssä (20 ml). 15 minuutin kuluttua reaktioseos suodatettiin, liuotin poistettiin tyhjössä ja pylväskromatografoitiin käyttämällä eluenttina 2 % MeOH:ta/98 % jolloin saatiin otsikkoyhdiste 62 1 06 1 97 (1,42 g, 89 %) siirappina. IR (kalvo): 1740 - 1695 b.r cm"1; NMR (CDC13) δ: 1,50 - 1,60 (2H, m), 1,67 (3H, s), 1,70 - 2,10 (12H, m), 3,38 (1H, d, J « 14,5 Hz), 3,50 - 3,60 (1H, lev. S), 3,68 (3H, s), 4,86 (1H, lev. s), 5,28 (1H, lev. s), 6,93 (1H, d, J 2,4 Hz), 7,04 - 7,10 (2H, m), 7,33 (1H, d, J 8,2 Hz), 7,54 (1H, d, J 7,8 Hz), 8,18 (1H, lev. s).

Välituote-esimerkki D

N-Γ(2-adamantyylioksi)karbonyyli1-α-metyyli-D-tryptofaani

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli N-[(2-adamantyylioksi)-karbonyyli]-α-metyyli-D-tryptofaani-metyyliesteriä (1,36 g, 3,3 mmoolia) vesipitoisessa 1,4-dioksaanissa (1:2) (20 ml), lisättiin ylimäärä LiOH:ta (0,210 g, 5 mmoolia) ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön ajan. Liuotin poistettiin tyhjössä ja jäännös kromatografoltiin käyttämällä eluentteina 5 % MeOH:ta/95 % CH2Cl2:ta ja sitten 10 % MeOH:ta/90 % CH2Cl2:ta, jolloin saatiin happo (0,953 g, 90 %) valkoisena kiintoaineena, joka kiteytettiin n-heksaa-nista, sp. 210 - 215eC (EtOAc/n-heksaani); IR (kalvo): 1689 cm-1; NMR (CDC13-D20) 6: 1,3 - 2,2 (14H, m), 1,70 (3H, s), 3,26 (1H, d, J 13,5 Hz), 3,63 (1H, d, 13,5 Hz), 4,77 (1H, lev. s), 6,85 - 7,60 (5H, m).

Välituote-esimerkki E

(±)-9H-fluoren-9-yylimetyyll-Γ1-(lH-indol-3-yylimetvyli)-l-metyyli-2-okso-2-Γ(2-fenyylietyyll)amino1etyyli 1karba-maatti

Liuokseen, jossa oli N-[(9H-fluoren-9-yylimetyylioksi)-* karbonyyli1-g-metyyli-DL-tryptofaania (8,80 g, 20 mmoolia) kuivassa etyyliasetaatissa (350 ml), lisättiin pentafluo-rifenolia (3,68 g, 20 mmoolia) ja sekoitettiin 10 minuutin ajan. Reaktioseos jäähdytettiin 0°C:seen ja sitten lisättiin tipoittain liuos, jossa oli disykloheksyylikarbodi- 63 1 06 1 97 imidiä (20 mmoolia) etyyliasetaatissa (25 ml). Tätä liuosta sekoitettiin tunnin ajan 0*0:333, sitten huoneen lämpötilassa neljän tunnin ajan, minkä jälkeen se jätettiin yön ajaksi 4eC:seen. Seos suodatettiin ja sakka pestiin kylmällä etyyliasetaatilla (30 ml) ja sitten yhdistettyihin suodoksiin lisättiin tipoittain liuos, jossa oli 2-fen-etyyliamiinia (2,66 g, 22 mmoolia) etyyliasetaatissa (30 ml). Seosta sekoitettiin 48 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Reaktioseos suodatettiin ja jäännös pestiin kylmällä etyyliasetaatilla (2 x 30 ml), jolloin saatiin otsikko-yhdiste (3,73 g, 75 %). Suodokset yhdistettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä ja otettiin jälleen etyyliasetaattiin (5 ml), jolloin saatiin toinen erä, 1,67 g (15 %), jolloin kokonaissaanto oli 90 % valkoisena kiintoaineena, sp. 179 - 181eC (EtOAc); IR (kalvo) 1708, 1652 cm-1; NMR (DMSO-dg) 6: 1,30 (3H, s), 2,64 (2H, t, J 7,2 Hz), 3,2 - 3,3 (4H, m), 4,19 (1H, t, J 6,7 Hz), 4,25 - 4,40 (2H, m), 6,9 - 7,9 (20H, m), 10,8 (1H, S).

Välituote-esimerkki F

(±) -q-amino-a-metyyli-N- (2-fenyylietyyli) -1H-indoli-3-pro-paaniamidi (±) -9H-fluoren-9-yylimetyyli- [ 1- (lH-indol- 3-yylimetyyli) -·· l-metyyli-2-okso-2-[ (2-fenyylietyyli) amino] etyyli ]karba- maattia (10 g, 18,4 mmoolia) liuotettiin 20%:iseen piperi-diiniin DMF-liuoksessa (50 ml) ja sekoitettiin 12 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Liuotin poistettiin tyhjössä ja kromatografoitiin piihappogeelillä käyttämällä eluentteina CH2cl2:ta 3a sitten 5 % MeOH:ta/95 % CH2Cl2:ta. Otsikkoyh-·· diste kiteytettiin etyyliasetaatista (4,73 g, 80 %), sp.

, 106 - 110eC (EtOAc); IR (kalvo) 1646 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,39 (3H, S), 2,56 - 2,74 (2H, m), 2,82 (1H, d, J 14 Hz), 3,28 - 3,40 (1H, m), 3,48 (1H, d, J 14 Hz), 3,44 - 3,53 (1H, m), 7,1 - 7,7 (11H, m), 8,3 (1H, s); anal.

(c2oh23n3°) C, H, N.

64 106197

Välituote-esimerkki G

9H-fluoren-9-yylimetyyli-Γ 2-Γ Γ1-(hydroksimetyyli)-2-fenyy-lietyyli1amino1-1-(lH-indol-3-yylimetyyli)-1-metyyli-2-ok-soetyylilkarbamaatti, rS-(R*,R*)1- 1a rR-(R*,S*)1-isomee-rlen seos

Liuos, jossa oli N-[(9H-fluoren-9-yylimetoksi)karbonyyli]-g-metyyli-DL-tryptofaania (10 g, 22,7 mmoolia) ja penta-fluorifenolia (4,18 g, 22,7 mmoolia) kuivassa etyyliasetaatissa (200 ml), käsiteltiin tipoittain 0eC:ssa liuoksella, jossa oli disykloheksyylikarbodi-imidiä (4,9 g, 24 mmoolia) etyyliasetaatissa (20 ml). Tämän annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitten sekoitettiin vielä tunnin ajan. Tämä seos käsiteltiin sitten tipoittain liuoksella, jossa oli L-fenyylialaninolia (3,775 g, 25 mmoolia) etyyliasetaatissa (15 ml), ja saatua seosta sekoitettiin 15 tunnin ajan. Tämä seos suodatettiin ja suodos pestiin peräkkäin 2M sitruunahappo-liuoksella, IM NaOH-liuoksella, kyllästetyllä NaHC03-liuoksella ja sitten vedellä. Sitten se kuivatettiin MgS04:n päällä ja konsentroitiin tyhjössä öljyksi. Tämä öljy kromatografoltiin piihappogeelillä käyttämällä eluenttina 4 % MeOH:ta/96 % C^C^ita, jolloin saatiin otsikkoyhdiste (11,7 g, 90 %) valkoisena kiintoaineena ja kahden diastereoisomeerin seoksena. Nämä kaksi ·· diastereomeeristä muotoa erotettiin puhdistamalla edelleen kromatografisesti käyttämällä eluenttina 1 % i-PrOH:ta, 99 % CHClg.-a, jolloin saatiin yhtä suuret määrä puhtaita dia-stereoisomeerejä valkoisina amorfisina kiintoaineina.

isomeeri I

rR-(R*,S*)l-9H-fluoren-9-yylimetyyll-r2-r Γ1-(hydroksime-tvyli)-2-fenyylietvyli)amino]-1-(1H-indol-3-vylimetyvli)-l-metyyli-2-oksoetyylilkarbamaatti, sp. 89 - 93°C (CHC13); IR (KBr) 1696, 1651 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,35 (3H, s),

2,74 (2H, m), 3,30 (2H, Abq, J, 14,5 Hz), 3,45 (1H, dd, J 11 ja 6 Hz), 3,70 (1H, m), 4,14 (2H, m), 4,46 (2H, dg, J

106197 10,5 ja 6 Hz), 5,09 (1H, S), 6,10 (1H, d, J 8 Hz), 6,65 (1H, d, J 2 Hz), 7,07 - 7,80 (17H, m), 7,98 (1H, s); anal.

(C36H35N3°4>' C' H' N·

Isomeeri II

ΓS-(R*,R*)1-9H-fluoren-9-vvlimetyyli-Γ 2-Γ Γ1-(hydroksime-tyyll)-2-fenyylietyyli1amino1-1-(lH-indol-3-vvlimetyyli)-l-metyyll-2-oksoetyyllIkarbamaattl, sp. 89 - 93eC (CHC13); IR (KBr) 1703 ja 1646 cm-1; NMR (CDCI3) 6: 1,50 (3H, S), 2,70 (2H, dq, J 14 ja 8 Hz), 3,20 (2H, Abq J 14,5 Hz), 3,41 (1H, dd, J 11,5 ja 5 Hz), 3,60 (1H, dd, J 11,5 ja 3,5 HZ), 4,12 (2H, m), 4,35 (2H, m), 5,37 (1H, S), 6,06 (1H, d, J 9 Hz), 6,75 (1H, d, J 2 Hz), 7,08 - 7,77 (17H, m), 8,07 (1H, s); anal. (C36H35N304‘0,25H20), C, H, N.

Välituote-esimerkki H

(R)-trisyklor 3.3.1.l3/7ldek-2-yyli-r2-r Γ2-hydroksi-2-fe-nyylletyyli1amino1-1-(lH-indol-3-yylimetyyli)-l-metyyli-2-oksoetyyli1karbamaatti

Liuos, jossa oli 2-adamantyylioksikarbonyyli-a-metyyli-D-tryptofaania (0,060 g, 0,15 mmoolia) etyyliasetaatissa, käsiteltiin disykloheksyylikarbodi-imidillä (0,034 g, 0,165 mmoolia) ja 1-hydroksibentsotriatsolilla (0,022 g, • 0,163 mmoolia). Sekoitettiin kahden tunnin ajan huoneen lämpötilassa, lisättiin 2-amino-l-fenyyli-etanolia (0,021 g, 0,153 mmoolia) etyyliasetaatissa (2 ml) ja reaktioseos-ta sekoitettiin edelleen kahden tunnin ajan. Sitten suspensio suodatettiin ja suodos konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin väritön kumi (0,175 g). Raakatuote kroma-·· tografoitiin aluminiumoksidillä käyttämällä eluenttina 80 % EtOAc:tä/20 % n-heksaania, jolloin saatiin otsikkoyhdis-te hieman epäpuhtaana valkoisena kiintoaineena (0,058 g, 74 %); IR (kalvo) 3338, 2927, 2855, 1690 ja 1622 cm-1; NMR (inter alia) (CDCI3) δ: 1,50 - 2,05 (17H, m), 3,15 - 3,55 (4H, m), 3,75 (1H, m), 4,85 (1H, m), 5,10 ja 5,20 (kumpi- 66 106197 kin O,5H, s), 6/55 (1H, m), 7,00 - 7,40 (9H, m), 7,60 (1H, d, J 9 Hz), 8,15 (1H, 2s).

Välituote-esimerkki I

(4-nltrofenyyll)metyyll-riR-(la,2cr,38) 1-2-Γ (kloorlkarbo-nyyli)oksi1-1,7,7-trimetyylibisyklo Γ 2.2.1lheptaanl-3-ase-taattl

Menetelmänä sama kuin välituote-esimerkissä B sillä erotuksella, että käytettiin [lR-(2-endo,3-ekso]-3-hydroksi- 4,7,7-trimetyyli-bisyklo[2.2.1]heptaani-2-etikkahappo-para-nitrobentsyyliesteriä; IR (kalvo) 1773 ja 1741 cm-1; NMR (CDC13) 6: 0,88 (3H, s), 0,89 (3H, s), 1,05 (3H, s), 1,06 - 1,15 (1H, m), 1,25 - 1,40 (1H, m), 1,50 - 1,80 (3H, m), 2,45 (1H, dd, J 7 ja 15 Hz), 2,55 - 2,85 (2H, m), 4,41 (1H, d, J 4 HZ), 5,20 (2H, S), 7,50 (2H, d, 8 Hz), 8,22 (2H, d, J 8 HZ).

Esimerkki 1 (±)-trisyklo Γ3.3.1.13'7!dek-l-yyli-Γ1-(lH-indol-3-yylime-tyyli)-1-metyyli-2-okso-2-r(2-fenyylietyyli)amino1etyyli1-karbamaattl

Liuokseen, jossa oli N-[(trisyklo[3.3.1.l3,7]dek-l-yyliok-si)karbonyyli]-a-metyyli-DL-tryptofaania (1,0 g, 2,5 mmoo-lia) 1,4-dioksaanissa (40 ml), lisättiin liuos, jossa oli pentafluorifenolia (0,465 g, 2,5 mmoolia) 1,4-dioksaanissa (5 ml), ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa 15 minuutin ajan, jäähdytettiin 0“C:seen ja sitten lisättiin tipoit-tain liuos, jossa oli disykloheksyylikarbodi-imidiä (0,547 g, 2,65 mmoolia) 1,4-dioksaanissa (10 ml). Sekoitettiin huoneen lämpötilassa kahden tunnin ajan ja sitten lisättiin fenetyyliamiinia (0,333 g, 2,75 mmoolia) yhtenä annoksena. Seosta sekoitettiin 24 tunnin ajan.

Reaktioseos suodatettiin, minkä jälkeen liuotin poistettiin tyhjössä ja jäännös otettiin etyyliasetaattiin (30 67 1 06 1 97 ml) ja pestiin IM sitruunahappoliuoksella (2 x 10 ml), kyllästetyllä NaHC03-liuoksella (3 x 10 ml), IM NaOH-liuoksella (2 x 10 ml), suolavedellä (2 x 10 ml) ja vedellä (2 x 20 ml). Orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä ja liuotin haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin valkoinen kiintoaine (0,617 g, 49 %), sp. 84 - 86eC (EtOAc); IR (kalvo) 1700, 1660 cm-1; NMR (CDCI3) 6: 1,50 (3H, S), 1,63 (6H, lev. s), 2,00 - 2,05 (6H, m), 2,14 (3H, lev. s), 2,66 (1H, t, J 7,2 Hz), 2,67 (1H, t, J 6,9 Hz), 3,19 (1H, d, J 14,5 Hz), 3,4 - 3,50 (3H, m), 4,93 (1H, lev. s), 6,30 (1H, lev. s), 6,98 - 7,60 (10H, m), 8,24 (1H, lev. s).

Esimerkki 2 (±)-trans-2-kloorisykloheksyyli-fl-(lH-indol-3-yylimetyy-li)-l-metyyli-2-okso-2-Γ(2-fenyylietyyli)amino1etyyliIkar-bamaatti

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli trans-(±)-2-kloorisyklo-heksyyli-kloroformiaattia (0,16 g, 0,75 mmoolia) vedettömässä THF:ssä (5 ml) huoneen lämpötilassa, lisättiin ti-poittain liuos, jossa oli a-metyyli-DL-tryptofyylifenetyy-liamidia (0,23 g, 0,7 mmoolia) THF:ssä (5 ml), ja sitten liuos, jossa oli trietyyliamiinia (0,07 g, 0,7 mmoolia) THF:ssä (5 ml). Reaktio päättyi 30 minuutin kuluttua ohut-kerroskromatografia-analyysin mukaisesti. Liuotin poistettiin tyhjössä ja jäännös otettiin etyyliasetaattiin (30 ml) ja pestiin peräkkäin IM vesipitoisella sitruunahapolla (2 x 20 ml), kyllästetyllä NaHC03-liuoksella (2 x 20 ml), IM NaOH-liuoksella (20 ml) ja vedellä (4 x 20 ml). Orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä ja suodatettiin. Liuottimen poisto tyhjötislaamalla tuotti otsikkoyhdisteen (0,273 g, 81 %) valkoisena kiintoaineena, joka kiteytettiin eetteri-heksaanista, sp. 69 - 78°C (eetteri-heksaa-ni); IR (kalvo) 1709 ja 1656 cm-1; NMR (CDCI3) 6: 1,2 - 1,4 (3H, m), 1,54 (3H, s), 1,6 - 1,8 (3H, m), 2,03 - 2,23 68 1 06 1 97 (2H, m), 2,63 - 2,69 (2H, m), 3,2 - 3,5 (4H, m), 3,72 -3,79 (1H, m), 4,67 - 4,73 (1H, m), 5,23 (1H, lev. s), 6,1 - 6,2 (1H, m), 7,0 - 7,6 (10H, m), 8,08 (1H, lev. s); anal. (C27H32N3O3CI), C, H, Cl, N.

Esimerkki 3 (±)-trans-2-kloorisykloheksyyll-Γ 2-Γ Γ1-(hydroksimetyyli)-2-fenyylietyyli1amino1-1-(1H-lndol-3-vvlimetyyli)-1-metyy-li-2-oksoetyyli Ikarbamaatti (D-tryptofaani-tähde; L-f:enyy-lialaniini-tähde)

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli (±)-trans-2-kloorisyklo-heksyyli-klorbformiaattia (1,94 g, 9,1 mmoolia) vedettömässä THF:ssä (10 ml) huoneen lämpötilassa, lisättiin ti-poittain liuos, jossa oli a-metyyli-D-tryptofaani-L-fenyy-lialaninolia (2,9 g, 8,3 mmoolia) THF:ssä (20 ml), ja sitten liuos, jossa oli trietyyliamiinia (9,92 g, 9,1 mmoolia) THF:ssä (10 ml). Reaktio päättyi 30 minuutin kuluttua ohutkerroskromatografia-analyysin mukaisesti. Reaktioseos suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin kromatografoimalla piihapolla käyttämällä eluentteina CH2Cl2:ta ja sitten 4 % MeOH:ta/93 % CH2Cl2:ta. Uudelleenkiteytys etyyliasetaatista tuotti tuotteen valkoisina neulasina, sp. 117 - 127°C (EtOAc); IR *' (kalvo) 1699 ja 1600 cm-1; NMR (CDC13) 6: 1,20 - 1,45 (3H, m), 1,32 (3H, S), 1,40 (3H, S), 1,70 - 1,80 (3H, m), 2,09 - 2,25 (2H, m), 2,67 - 2,83 (2H, m), 3,28 - 3,52 (3H, m), 3,68 - 3,83 (2H, m), 4,10 - 4,30 (1H, m), 4,68 - 4,80 (1H, m), 5,97 (1H, S), 6,08 (1H, s), 6,09 (1H, d, J 7,9 Hz), 6,19 (1H, d, J 7,6 Hz), 6,91 - 7,60 (10H, m), 8,08 (1H, " m); anal. (C28H34N3O4Cl-0,25H2), C, H, N, Cl.

69 106197

Esimerkki 4 2-Γ Γ2-Γ Γ Γ2-kloorisykloheksyyli)oksii-karbonyylilamino1-3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-propyyli1 amino1-3-fe-nyyllpropyyli-butaanidioaatti

Liuosta, jossa oli 2-kloorisykloheksyyli-[2-[[l-(hydroksi-metyyli) -2-fenyylietyyli ] amino ] -1- (lH-indol-3-yylimetyy-li)-l-metyyli-2-oksoetyyli]karbamaattia (1,3 g, 2,54 mmoo-lia), meripihkahappoanhydridiä (0,254 g, 2,54 mmoolia) ja 4-N,N-dimetyyliaminopyridiiniä (0,62 g, 5,08 mmoolia) kuivassa etyyliasetaatissa (50 ml), kuumennettiin palautus-jäähdyttäen 18 tunnin ajan. Sitten reaktioseos pestiin IM sitruunahappoliuoksella, sitten vedellä ja kuivatettiin MgS04:n päällä. Konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin öljy, joka kromatografoltiin piihappogeelillä käyttämällä eluenttina 10 % MeOH:ta/90 % Cl^C^ita, jolloin saatiin otsikkoyhdiste (0,86 g, 55 %) amorfisena kiintoaineena, sp. 75®C (EtOAc-heksaani); IR (kalvo) 3370, 1723 ja 1659 cm"1; NMR (CDCI3) 6: 1,30 (3H, m), 1,45 (1,5H, s), 1,58 (1,5H, s), 1,66 (3H, m), 2,16 (2H, m), 2,60 (5H, m), 2,79 (1H, dd, J 11 ja 6 Hz), 3,28 (2H, Abq 14,5 Hz), 3,85 (3H, m), 4,45 (1H, m), 4,70 (1H, m), 5,45 (1H, lev. s), 6,5 (1H, m), 6,90 - 7,70 (10H, m), 8,37 (0,5H, S) ja 8,49 (0,5H, s). Anal. (^32^38^3^7^^) > C, H, N, Cl.

• ·

Esimerkki 5 rR-(R*,S*)1-N-Γ1-(hydroksimetyyll-2-fenyylietyyli1-g-me-tyyli-g-Γ(trisyklo Γ3.3.1.13,71dek-l-yyliasetyyli)-amino1-lH-indoli-3-propaaniamidl

Liuos, jossa oli a-metyyli-D-tryptofyyli-L-fenyylialanino- »· « lia (1 g, 2,85 mmoolia) ja 4-N,N-dimetyyliaminopyridiiniä (0,35 g, 2,87 mmoolia) kuivassa THF:ssä (50 ml) 0eC:ssa, käsiteltiin tipoittain sekoittaen liuoksella, jossa oli 1-adamantyyliasetyylikloridia (0,605 g, 2,85 mmoolia). Välittömästi muodostui sakka. Reaktioseoksen annettiin seis- 70 106197 tä, kunnes kaikki lähtöaineet oli käytetty TLC- ja IR-spektroskopia-analyysien mukaisesti. Lopullinen TLC osoitti kolme täplää (10 % MeOH:ta/90 % CJ^C^ita). Reaktioseos pestiin IM sitruunahappoliuoksella ja uutettiin etyyliasetaattiin. Sitten orgaaninen faasi pestiin vedellä ja kuivatettiin MgS04:n päällä. Konsentrointi tyhjössä tuotti siirapin (1,7 g), joka kromatografoitiin piihapolla käyttämällä eluenttina 2 % MeOH:ta/98 % OE^C^tta, jolloin saatiin otsikkoyhdiste (1,35 g, 90 %), joka kiteytettiin etyyliasetaatti-heksaanista, sp. 91 - 94eC (EtOAc-heksaa-ni); IR (KBr) 3304 ja 1652 cm"1; NMR (CDC13) 6: 1,48 (9H, m), 1,59 (6H, m), 1,76 (2H, q, J 13 Hz), 1,9 (3H, m), 2,74 (2H, d, J 7 Hz), 3,21 (1H, puoli ABq J 14,5 Hz), 3,30 (1H, 6, J 6 Hz), 3,40 (1H, puoli Abq J 14,5 Hz), 3,45 (1H, m), 3,70 (1H, m), 4,16 (1H, m), 5,91 (1H, S), 6,38 (1H, d, J 8 Hz), 6,92 (1H, d, J 3 Hz), 7,07 - 7,27 (7H, m), 7,35 (1H, d, J 8 Hz), 7,56 (1H, d, J 8 Hz) ja 8,54 (1H, s); anal.

(C33H41N3°3*°'25H2°), c' H' N·

Esimerkki 6 (±)-trisyklo Γ3.3.1.1^'71dek-2-yyli-Γ1-(lH-indol-3-yylime-tyyli)-l-metyyli-2-okso-2-[(2-fenyylietyyli)amino1etyylil-karbamaatti ·· Käytettiin esimerkin 2 menetelmää sillä erotuksella, että käytettiin 2-adamantyyli-kloroformiaattia. Tuote saatiin kiintoaineena CCl4-heksaanista (0,385 g, 77 %), sp. (ei-kiteinen) 79 - 85eC; IR (kalvo) 1701 ja 1656 cm-1; NMR (CDCl3) 5: 1,5 - 1,6 (2H, m), 1,54 (3H, S), 1,7 - 2,0 (12H, m), 2,6 (2H, t, J 7 Hz), 3,26 (1H, d, J 14,5 Hz), 3,40 - 3,50 (3H, m), 4,79 (1H, lev. S), 5,15 (1H, lev. s), 6,20 (1H, t), 6,95 - 7,11 (10H, m), 8,08 (1H, s); anal.

(c3iH37N3°3)' C, H, N.

71 106197

Esimerkki 7 (±) -endo-1,7,7-trimetyyliblsyklo Γ 2.2.1lhept-2-yyli- Γ1- (1H-lndol-3-yylimetyyll)-1-metyyli-2-okso-2-Γ(2-fenyylietyy-li) amino1etyyli1karbamaatti Käytettiin esimerkin 2 menetelmää sillä erotuksella, että käytettiin 1-(S)-2-endo-bornyyli-kloroformiaattia. Raaka jäännös kromatografoitiin piihapolla käyttämällä eluentti-na GHCl3:a, jolloin saatiin tuote (0,443 g, 88 %) värittömänä vaahtona, sp. (ei-kiteinen) 65 - 69°C; IR (kalvo) 3327, 1702 ja 1658 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 0,81 (3H, s), 0,85 (3H, s), 0,89 (3H, S), 0,96 - 1,02 (1H, m), 1,11 - 1,30 (3H, m), 1,54 (1,5H, S), 1,54 (1,5H, S), 1,65 - 1,82 (2H, m), 2,32 (1H, m), 2,65 (2H, t, J 7 Hz), 3,25 (1H, puoli ABq, J 14,5 Hz), 3,39 - 3,49 (3H, m), 4,84 (1H, m), 5,21 (1H, lev. s), 6,14 (1H, lev. s), 6,95 (1H, d, J 2 Hz), 7,03 - 7,26 (7H, m), 7,35 (1H, d, J 8 Hz), 7,58 (1H, d, J 8 Hz) ja 8,18 (1H, S).

Esimerkki 8 (i) -ekso-1,7,7-trimetyylibisyklo Γ 2.2.1 Thept-2-yyli- Γ1- (1H-indol-3-vvlimetyyli)-l-metyyli-2-okso-2-r(2-fenyylietyy-li)amino1etyyliIkarbamaatti " Käytettiin esimerkin 2 menetelmää sillä erotuksella, että käytettiin (±)-ekso-bornyyli-kloroformiaattia. Raaka jäännös kromatografoitiin piihapolla käyttämällä eluenttina CHCl3:a, jolloin saatiin otsikkotuote vaaleankeltaisena vaahtona (0,294 g, 59 %), sp. (ei-kiteinen) 61 - 65eC; IR (kalvo) 1705 ja 1658 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 0,75 - 1,30 " (13H, m), 1,45 - 1,82 (6H, m), 2,63 (2H, m), 3,23 (1H, puoli ABq J 14,5 Hz), 3,35 - 3,52 (3H, m), 4,56 (1H, m), 5,18 (0,5H, s), 5,25 (0,5H, s), 6,16 (1H, m), 6,95 (1H, d, J 2 Hz), 6,99 - 7,25 (7H, m), 7,34 (1H, d, J 8 Hz), 7,57 (1H, d, J 8 Hz) ja 8,19 (1H, s).

106197

Esimerkki 9 (±)-ekso-bisyklo f 2.2.1lhept-2-yyli-Γ1-(lH-indol-3-yylime-tyyli)-l-metyyli-2-okso-2-Γ(2-fenyylietyyli)amino]etyyli 1-karbamaatti Käytettiin esimerkin 2 menetelmää sillä erotuksella, että käytettiin (±)-ekso-norbornyyli-kloroformiaattia. Raaka jäännös kromatografoitiin piihapolla käyttämällä eluent-teina CHjC^Jta, sitten 2 % MeOH:ta/98 % CH2Cl2:ta, jolloin saatiin otsikkoyhdiste (0,346 g, 75 %) värittömänä vaahtona, sp. (ei-kiteinen) 74 - 78eC; IR (kalvo) 3341, 1703 ja 1656 cm-1; NMR (CDClg) 6: 1,06 - 1,16 (3H, m), 1,33 - 1,51 (3H, m), 1,53 (1,5H, S), 1,54 (1,5H, S), 1,65 - 1,70 (2H, m), 2,24 (2H, lev. s), 2,65 (2H, m), 3,21 (1H,

puoli ABq J 14,5 Hz), 3,39 - 3,47 (3H, m), 4,51 (1H, d, J

6,5 Hz), 5,09 (1H, S), 6,15 (1H, lev. s), 6,95 (1H, d, J 2 Hz), 7,03 - 7,25 (7H, m), 7,35 (1H, d, J 8 Hz), 7,57 (1H, d, J 8 Hz), 8,24 (1H, s); anal. (C28H33N3O3-0,25H2O), C, H, N.

Esimerkki 10 (±)-endo-bisyklor2.2♦1lhept-2-yyli-r1-(lH-indol-3-yyIlme-tyyli )-l-metyyli-2-okso-2-f(2-fenyylietyyli)amino]etyyli 1-karbamaatti Käytettiin esimerkin 2 menetelmää sillä erotuksella, että käytettiin (±)-endo-norbornyyli-kloroformiaattia. Raaka jäännös kromatografoitiin piihapolla käyttämällä eluentti-na 50 % EtOAc:tä/50 % n-heksaania, jolloin saatiin otsikkoyhdiste (0,318 g, 69 %) värittömänä vaahtona, sp. (ei-.. kiteinen) 62 - 68eC; IR (kalvo) 3325, 1703 ja 1654 cm"'1; NMR (CDCI3) 6: 0,94 (1H, m), 1,19 - 1,40 (4H, m), 1,48 - I, 72 (5H, rn), 1,95 (1H, m), 2,19 (1H, lev. s), 2,43 (1H, lev. s), 2,65 (2H, t, J 7 Hz), 3,23 (1H, puoli ABq J 14,5 HZ), 3,39 - 3,48 (3H, m), 4,88 (1H, m), 5,17 (0,5H, S), 5,21 (0,5H, s), 6,16 (1H, m), 6,94 (1H, d, J 2 Hz), 7,04 - 73 106197 7.25 (7H, m), 7,35 (1H, d, J 8 Hz), 7,57 (1H, d, J 8 Hz), 8,16 (1H, s); anal. (C28H33N303 ·0,75H20), C, H, N.

Esimerkki 11 2,5-metano-lH-inden-7-yyli-r2-r Γ1- (hydroksimetyyli)-2-fe-nyylietyyli 1 amino 1-1- (lH-indol-3-yylimetvvll) -1-metyyll-2-oksoetyyliIkarbamaatti

Synteettinen menetelmä oli sama kuin esimerkissä 3 sillä erotuksella, että käytettiin 4-protoadamantyyliklorofor-miaattia. Tuote kromatografoitiin piihapolla käyttämällä eluenttina 4 % MeOH:ta/96 % CH2Cl2:ta, jolloin saatiin ot-sikkoyhdiste (80 %) valkoisena amorfisena kiintoaineena ja kahden diastereoisomeerin seoksena (suunnilleen protoadaman-taani; D-tryptofaani-tähde), sp. 90 - 92eC (EtOAc-heksaani), IR (kalvo) 3318, 1691 ja 1662 cm-1; NMR (CDCI3) 6: 1,34 (1,5H, s), 1,36 (1,5H, S), 1,3 - 2,5 (14H, m), 2,74 - 2,78 (2H, m), 3,13 (1H, lev. S), 3,43 (1H, m), 3,67 (1H, m), 4,17 (1H, lev. s), 4,95 (1H, dt, J 3 ja 8 Hz), 5,03 (0,5H, s), 5,06 (0,5H, s), 6,22 (1H, d, J 8 Hz), 6,89 (1H, s), 7,05 - 7.26 (7H, m), 7,33 (1H, d, J 8 Hz), 7,54 (1H, d, J 8 Hz) ja 8,51 (1H, lev. s); anal. (C32H39N304), C, H, N.

Esimerkki 12 2- r3-lH-indol-3-vyli)-2-metyvli-2-r Γ Γ(oktahydro-2,5-meta-no-lH-inden-7-yyli) oksi Ikarbonyyli 1 amino T -1-oksopropyyli 1 - 3- fenyylipropyyli-butaanidioaatti

Synteettinen menetelmä oli sama kuin esimerkissä 4 sillä erotuksella, että käytettiin esimerkin 11 alkoholia. Tuote ·* kromatografoitiin piihapolla käyttämällä eluenttina 2 %

MeOH.-ta, 98 % CHCl3:a, jolloin saatiin valkoinen amorfinen kiintoaine (80 %) ja kahden diastereoisomeerin seos (suunnilleen protoadamantaani), sp. 56 - 57eC (EtOAc-heksaani); IR (kalvo) 1724 ja 1659 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,25 - 2,50 (17H, m), 2,59 (6H, m), 3,25 (2H, 2 x ABq, J 14,5 Hz), 74 1 06 1 97 3,91 (2H, Π»), 5,51 (1H, lev.), 6,62 (1H, m), 6,92 - 7,57 (10H, m), 8,65 (1H, lev. s) ja 9,04 (1H, lev.); anal.

(C36H43N3°7*1/25H2°)' C' H' N·

Esimerkki 13 (R)-trisvklo Γ3.3.1.13'7!dek-1-yyli-Γ1- (ΙΗ-indol-3-yvlime-tyyll)-l-metyyll-2-okso-2-Γ(2-fenyylletvvll)amino Tetyyll1-karbamaatti

Synteettinen menetelmä oli sama kuin esimerkissä 1 sillä erotuksella, että käytettiin 2-adamantyylioksikarbonyyli-α-metyyli-D-tryptofaania. Tuote kromatografoitiin piiha-polla käyttämällä eluenttina 4 % MeOH:ta/96 % CH2Cl2:ta, jolloin saatiin otsikkoyhdiste (0,13 g, 26 %) valkoisena kiintoaineena, sp. 82 - 88eC (CHClg-heksaani); IR (kalvo) 1699 ja 1659 cm-1; NMR (CDCI3) 6: 1,5 - 1,6 (17H, m), 2,67 (2H, 6, J 7 Hz), 3,26 (1H, d, J 14,5 Hz), 3,4 - 3,5 (3H, m), 4,80 (1H, lev. s), 5,15 (1H, lev. s), 6,17 (1H, lev. s), 6,95 - 7,60 (10H, m) ja 8,05 (1H, lev. s); anal. (C31H37n3°3·0,25H2°), C, H, N.

Esimerkki 14 (ί)-trans-2-kloorisykloheksyyli-f 2— Γ Γ1—(hydroksimetyyli)-2-fenyylietyyli1amino1-1-(ΙΗ-indol-3-yylimetyyli)-1-metyy-li-2-oksoetyylilkarbamaatti

Synteettinen menetelmä oli sama kuin esimerkissä 3 sillä erotuksella, että käytettiin a-metyyli-L-tryptofaani-L-fe-nyylialaninolia. Tuote kromatografoitiin piihapolla käyttämällä eluenttina 4 % MeOH:ta/96 % CH2Cl2:ta, jolloin saatiin otsikkoyhdiste (60 %) värittömänä vaahtona; sp. (ei-kiteinen) 82 - 86eC; IR (kalvo) 3402, 1703 ja 1657 cm-1; NMR (CDCI3) 6: 1,32 (3H, m), 1,54 (1,5H, s), 1,57 (1,5H, S), 1,58 - 1,75 (4H, m), 2,04 (1H, m), 2,20 (1H, m), 2,66 (2H, m), 3,15 (1H, puoli ABq, J 14,5 Hz), 3,26 (1H, puoli ABq, J 14,5 Hz), 3,45 (1H, dd, J 6 ja 11 Hz), 75 1 06 1 97 3,60 (0,5H, m), 3,75 1,5H, m), 4,05 (0,5H, m), 4,17 (0,5H, m), 4,70 (1H, m), 5,27 (0,5H, s), 5,29 (0,5H, s), 6,12 (1H, m), 6,88 (0,5H, d, J 2 Hz), 6,92 (0,5H, d, J 2 Hz), 7,08 - 7,28 (7H, m), 7,30 (1H, d, J 8 Hz), 7,57 (1H, d, J 8 Hz) ja 8,13 (1H, lev. s), anal. (028Η34Ν304αΐ), C, H, N, Cl.

Esimerkki 15 TR-(R*,S*)1-trlsykloΓ3.3.1.13/7ldek-2-yyll-Γ2-Γ Γ1-(hydrok-simetvvll)-2-fenyylietyyll1 amino 1-1- (lH-indol-3-yylimetyy-li) -l-metyyli-2-oksoetyyli Ikarbamaatti

Vaihe l

Noudattamalla esimerkin G menetelmää Fmoc-a-metyyli-D-tryptofyyli-L-fenyylialaninolia (7 g, 12,2 mmoolia) liuotettiin 20%:iseen piperidiinin liuokseen DMF:ssä (50 ml) ja sekoitettiin 12 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Liuotin haihdutettiin sitten ja jäännös kromatografoitiin pii-hapolla käyttämällä eluentteina CH2c^2:^a 3a sitten 4 % MeOH:ta/96 % CH2Cl2:ta, jolloin saatiin tuote (4 g, 95 %) värittömänä vaahtona. IR (kalvo) 3305 ja 1646 cm-1; NMR (CDC13) δ: 1,28 (3H, s), 2,71 (2H, ABx, J 8 ja 13,5 Hz), 2,78 (1H, puoli ABg, J 14 Hz), 2,91 (3H, lev. s), 3,43 (1H, puoli ABq, J 14 Hz), 3,45 (2H, ABx, J 6 ja 11 Hz), 4,03 (1H, m), 6,96 (1H, d, J 2 Hz), 7,03 - 7,23 (7H, m), 7,29 (1H, d, J 8 Hz), 7,67 (1H, d, J 7,5 Hz) ja 8,64 (1H, s).

Vaihe 2

Liuos, jossa oli a-metyyli-D-tryptofyyli-L-fenyylialanino-lia (0,5 g, 1,42 mmoolia) ja 4-N,N-dimetyyliaminopyridii-niä (0,2 g, 1,64 mmoolia) vedettömässä THF:ssä (20 ml), käsiteltiin tipoittain huoneen lämpötilassa liuoksella, jossa oli 2-adamantyylikloroformiaattia (1,4 mmoolia) ve- 76 106197

dettömässä THF:ssä (20 ml). Reaktiota valvottiin IR-spek-troskopialla. Kun se oli päättynyt, reaktioseos laimennettiin etyyliasetaatilla ja pestiin IM sitruunahappoliuok-sella ja sitten vedellä. Kuivatettu (MgS04) orgaaninen faasi haihdutettiin kuiviin ja kromatografoitiin piihapol-la käyttämällä eluenttina 2 % MeOH:ta/98 % CH2Cl2:ta. Tämä tuotti vaaditun yhdisteen (65 % yhdessä 20 %:n karbonaatti-epäpuhtauden kanssa. HUOM: muutamat happamammat labiilit uretaanit vaativat kromatografiaa neutraaleilla sta-tionaarisilla faaseilla.) Sp. 96 - 100eC (EtOAc-heksaani); IR (KBr) 3316, 1695 ja 1658 cm-1; NMR (CD3OD) 6: 1,28 (3H, S), 1,55 (2H, m), 1,68 - 2,06 (12H, m), 2,76 (2H, ABx, J

13,5 ja 17 HZ), 3,31 (2H, Abq, J 14,5 Hz), 3,45 (2H, m), 4,12 (1H, m), 4,78 (1H, lev. s) ja 6,8 - 7,5 (10H, m); anal. (032^39^3^4)* O, H, N.

Esimerkki 16 TR- (R*,S*)1-2-Γ Γ 3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-f Γ(trisykloΓ3.3.1.13'7!dek-2-yylioksi)karbonyyll)amino1-propyyli 1 amino ] -3-f enyylipropyyli-butaanidioaatti

Noudattamalla esimerkissä 4 esitettyä muuntomenetelmää tämä yhdiste valmistettiin esimerkin 15 tuotteesta. Tuote eristettiin yksittäisenä stereoisomeerinä, joka kromato-grafoittiin käänteisfaasikromatografialla käyttäen piihappoa kiinteänä faasina käyttämällä eluentteina 50 % MeOH:ta/50 % H20:ta, sitten 75 % MeOH:ta/25 % H20:ta, jolloin saatiin valkoinen amorfinen kiintoaine (98 %:n saanto), sp 66 -69eC (MeOH-H20), IR (kalvo) 1718 ja 1660 cm-1; NMR (CDC13) 6: 1,54 (5H, m), 1,70 - 2,00 (12H, m), 2,62 (4H, s), 2,76 [[ (2H, ABx, J 13 ja 13,5 Hz), 3,33 (2H, ABq, 14,5 Hz), 3,90 (2H, m), 4,35 (1H, m), 4,88 (1H, lev. S), 6,8 (1H, s), 7,1 - 7,3 (7H, m), 7,34 (1H, d, J 8 Hz), 7,59 (1H, d, J 8 Hz), ja 8,25 (1H, s); anal. (036Η23Ν307), C, H, N.

106197 77

Esimerkki 17 2-ΓΓ 3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-ΓΓ(trisyklo-Γ3.3.1.1^7] dek-2-yylioksi)karbonyyli1amino1propyyli1ami-no-l-fenyylietvvll-butaanldioaatti

Liuosta, jossa oli esimerkin H alkoholia (0,058 g, 0,113 mmoolia) etyyliasetaattia (10 ml), kuumennettiin palautus-jäähdyttäen 24 tunnin ajan meripihkahappoanhydridissä (0,013 g, 0,13 mmoolia) ja 4-N,N-dimetyyliaminopyridiinis-sä (0,027 g, 0,22 mmoolia). Reaktioseos pestiin sitten IM sitruunahappoliuoksella ja orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä. Liuottimen haihduttaminen tyhjössä tuotti värittömän kumin (0,13 g), joka kromatografoitiin piiha-polla käyttämällä eluentteina 10 % MeOH:ta/90 % CH2Cl2:ta ja sitten 20 % MeOH:ta/80 % CH2Cl2:ta, jolloin saatiin ot-sikkoyhdiste ei-kiteisenä valkoisena kiintoaineena (0,021 g, 30 %) ja kahden diastereoisomeerin seoksena, sp. 94 -100*C (MeOH-CH2Cl2); IR (kalvo) 3352, 2911, 2855, 1722 ja 1665 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,45 - 2,10 (17H, m), 2,60 84H, lev. s), 3,15 - 3,50 (4H, m), 3,85 (1H, lev. m), 4,90 (1H, 2 lev. s), 5,60 (0,5H, s), 5,00 (0,5H, s), 6,95 - 7,60 (10H, m); anal. (C35H41N307*1,25H20), C, H, N.

Esimerkki 18 g-Γ Γ Γ(7,7-dimetyyli-2-oksobisykloΓ2♦2.Π-hept-l-yyli)-metyyli 1sulfonyyli1amino1-N-Γ1-(hydrokslmetyyli)-2-fenyyli-etyyli]-a-metyyli-lH-indoli-3-propaaniamidi (Trp-keskus R, fenyylialanyyli-keskus S)

Liuos, jossa oli esimerkin 15 vaiheen 1 vapaata emästä (0,322 g, 0,92 mmoolia) ja 4-N,N-dimetyyliaminopyridiiniä (0,25 g, 2 mmoolia) vedettömässä THF:ssä (20 ml), käsiteltiin tipoittain liuoksella, jossa oli 10-(-)-kamferisulfo-nyylikloridia (0,23 g, 0,92 mmoolia) THF:ssä (15 ml). Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa neljän tunnin ajan ja sitten reaktio pysäytettiin vedellä. Reak- 78 106197 tioseos laimennettiin etyyliasetaatilla ja pestiin kyllästetyllä NaHCOg-liuoksella, sitten vedellä, sitten IM sit-ruunahappoliuoksella, sitten vedellä. Kuivatettu (MgS04) orgaaninen faasi haihdutettiin tyhjössä ja jäännös kroma-tografoitiin piihapolla käyttämällä eluentteina 2 % MeOH:ta/98 % O^C^sta ja sitten 4 % MeOH:ta/96 % C3i2Cl2:ta, jolloin saatiin otsikkoyhdiste vaahtona. Amorfinen kiintoaine saatiin EtOAc-heksaanista (0,4 g, 70 %), sp. 81 - 85°C (EtOAc-heksaani); IR (KBr) 3259, 1742, 1672, 1359 ja 1170 cm-1; NMR (CDC13) 6: 0,75 (3H, s), 1,01 (3H, s), 1,28 (1H, m), 1,48 (1H, m), 1,64 - 1,99 (7H, m), 2,24 (1H, lev. s), 2,29 (1H, lev. s), 2,57 (1H, m), 2,76 ja 3,33 (2H, ABq, J 14,5 Hz), 3,40 (2H, m), 3,39 (1H, m), 4,10 (2H, m), 5,80 (3H, lev.), 6,78 (2H, d, J 7 Hz), 7,07 - 7,25 (5H, m), 7,40 (1H, d, J 8 Hz), 7,51 (1H, d, J 8 Hz), 7,57 (1H, s) ja 9,60 (1H, S).

Esimerkki 19 fR-(R*,S*)l-4-r Γ2-Γ r3-(lH-indol-3-yvli)-2-metvvll-l-okso-2-Γ Γ(trisvklor3.3.1.13/7ldek-2-vvlloksi)karbonvyli1aminol-propyyli1 amino1-3-fenyylipropyyll1 amino1-4-oksobutaanihap-po

Vaihe 1 Jäähdytetty (jäävesikylpy) liuos, jossa oli tert-butyyli-oksikarbonyyli-L-fenyylialaninolia (2,043 g, 8,14 mmoolia) vedettömässä pyridiinissä (9 ml) käsiteltiin p-tolueeni-sulfonyylikloridilla (1,6 g, 8,14 mmoolia) sekoittaen. Tämän seoksen annettiin seistä yön ajan 4°C:ssa ja sitten se kaadettiin jääveteen (600 ml). Muodostunut kiintoaine suodatettiin, pestiin jääkylmällä vedellä, sitten n-heksaa-nilla ja kuivatettiin tyhjössä, jolloin saatiin tarvittava tosylaatti (3 g, 95 %), joka oli riittävän puhdas sen käyttämiseksi vaiheessa 2 ilman lisäpuhdistusta, sp. 96 -98°C (EtOAc-heksaani); IR (KBr) 3320, 3029, 2978 ja 1713 ™ 106197 cm-1; NMR (CDCI3) 6: 1,38 (9H, s), 2,45 (3H, s), 2,8 (2H, m), 3,9 (3H, m), 4,71 (1H, lev.)/ 7,05 - 7,79 (9H, S).

Vaihe 2

Liuos, jossa oli vaiheen 1 tosylaattia (3 g, 7,4 mmoolia) vedettömässä N,N-dimetyyliformamidissa (20 ml), käsiteltiin natriumatsidilla (0,52 g, 8 mmoolia) ja muodostunutta seosta kuumennettiin 120°C:ssa 1,5 tunnin ajan. Sitten sen annettiin jäähtyä ja konsentroitiin tyhjössä. Siirappi laimennettiin etyyliasetaatilla j a pestiin vedellä (x 3). Orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä ja haihdutettiin, jolloin saatiin atsidi (1,31 g) hieman epäpuhtaana vahamaisena kiintoaineena, joka käytettiin sellaisenaan vaiheessa 3, sp. 44 - 45"C; IR (kalvo) (mm.) 3341, 2978, 2101 ja 1698 cm-1.

Vaihe 3

Liuos, jossa oli vaiheessa 2 valmistettua epäpuhdasta ure-taania (1,17 g), liuotettiin dikloorimetaaniin (25 ml) ja sekoitettiin p-tolueenisulfonihapon (1 g, 5,3 mmoolia) kanssa huoneen lämpötilassa 18 tunnin ajan. Liuotin haihdutettiin tyhjössä ja jäännös liuotettiin uudelleen etyyliasetaattiin. Tämä liuos pestiin vedellä, kyllästetyllä NaHC03-liuoksella ja sitten vedellä ja orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä. Liuotin poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin raaka siirappi (0,6 g), joka fraktioitiin piihapolla käyttämällä eluenttina 5 % MeOH:ta/95 % CH2cl-2:ta/ jolloin saatiin puhdas vapaa amiini (0,4 g, 54 %) siirappina. IR (kalvo) 2100 cm-1; NMR (CDCI3) 5: 1,28 (2H, s), 2,54 (1H, puoli ABx, J 18 ja 12 Hz), 2,76 (1H, puoli ABx, J 18 ja 12 Hz), 3,10 - 3,34 (3H, m), 7,14 - 7,31 (5H, m).

80 106197

Valhe 4

Liuos, jossa oli 2-adamantyylioksikarbonyyli-a-metyyli-D-tryptofaania (0,9 g, 2,27 iranoolia) ja pentafluorifenolia (0,418 g, 2,27 mmoolia) vedettömässä etyyliasetaatissa (35 ml) OeC:ssa, käsiteltiin liuoksella, jossa oli disyklohek-syylikarbodi-imidiä (0,468 g, 2,27 mmoolia) etyyliasetaatissa (6 ml). Tämän seoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitä sekoitettiin vielä kahden tunnin ajan ennen vaiheen 3 mukaisesti valmistetun amiinin (0,4 g, 2,27 mmoolia) lisäämistä. Tämän seoksen annettiin seistä 48 tunnin ajan, sitten se suodatettiin ja suodos pestiin kyllästetyllä NaHC03-liuoksella, sitten vedellä, sitten IM sitruunahappoliuoksella ja sitten jälleen vedellä. Orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä ja liuotin haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin siirappi, joka käänteis-faasikromatografoitiin piihapolla käyttämällä eluenttina 20 % H2O:ta/80 % MeOH:ta. Tämä tuotti [R-(R*,S*)]-trisyk-1o[3.3.1.13/7]dek-2-yyli-(2-[[1-(atsidometyyli)-2-fenyy-lietyyli]amino]-1-(lH-indol-3-yylimetyyli)-l-metyyli-2-ok-soetyyli]karbamaatin (0,6 g, 48 %), joka kiteytettiin Et-OAc-n-heksäänistä, sp. 77 - 78eC (EtOAc-n-heksaani); IR (kalvo) 3339, 2909, 2102, 1699 ja 1668 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,45 - 2,1 (17H, m), 2,73 (2H, m), 3,10 (2H, m), 3,40 , , (2H, ABq, J 14 Hz), 4,25 (1H, m), 4,84 (1H, S), 5,17 (1H, S), 6,45 (1H, d, J 8 Hz), 6,95 (1H, d, J 2 Hz), 7,00 - 7,60 (9H, m) ja 8,61 (1H, s); anal. (C32H38N603).

Vaihe 5

Liuos, jossa oli [R-(R*,S*)]-trisyklo[3.3.1.I3'7]dek-2-yy-li-[2-[[1-(atsidometyyli)-2-fenyylietyyli]amino]-l-(1H-indol-3-yylimetyyli)-l-metyyli-2-oksoetyyli]karbamaattia (0,2 g, 0,36 mmoolia) etikkahapon (5 %) ja etanolin (95 %) seoksessa (100 ml), käsiteltiin 10%:isella palladium-hiilellä (0,02 g, 10 % w/v) ja laitettiin vedyn atmosfää- ei 106197 riin 51 psi:n paineessa 30eC:ssa sekoittaen. Kun vedyn ottoa ei enää havaittu, seos suodatettiin Celiten läpi ja konsentroitiin tyhjössä vaahdoksi (0,25 g), joka käytettiin välittömästi vaiheessa 6. IR (kalvo) 1676 lev. cm-1.

Valhe 6

Vaiheessa 5 valmistettu raaka amiiniasetaatti (0,25 g) liuotettiin vedettömään etyyliasetaattiin (30 ml) ja käsiteltiin meripihkahappoanhydridillä (0,15 g, 1,5 mmoolia) ja DMAP:llä (0,15 g, 1,23 mmoolia) ja kuumennettiin palautus jäähdyttäen 18 tunnin ajan. Liuos pestiin sitten IM sitruunahappoliuoksella ja sitten vedellä. Orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä ja haihdutettiin tyhjössä. Saatu jäännös käänteisfaasikromatografoitiin piihapolla käyttämällä eluenttina 20 % H20:ta/80 % MeOH:ta, jolloin saatiin otsikkoyhdiste (0,1 g, 44 % vaahtoa vaiheesta 5) valkoisena kiintoaineena, joka kiteytettiin etyyliasetaatin ja heksaanin seoksesta, sp. 110 - 114eC (EtOAc-heksääni); IR (kalvo) 3306, 2906, 2854, 1695 ja 1651 cm-1; NMR (CDCI3) 6: 1,34 - 1,97 (17H, m), 2,38 (2H, m), 2,55 (2H, m), 2,62 (2H, m), 2,98 (1H, m), 3,27 (2H, m), 3,45 (1H, m), 4,20 (1H, m), 4,77 (1H, S), 5,43 (1H, lev. S), 6,05 (1H, lev. s), 6,43 (1H, lev. s), 6,85 - 7,55 (10H, m) ja . 8,91 (1H, s); anal. (C36H44N406), C, H, N.

Esimerkki 19A

fR-(R*,S*)1-4-f Γ2-Γri-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-Γ Γ(trisvklor3.3.1.1^/7ldek-2-yvlioksikarbonvvli1amino)-propyyli1amino 1-3-fenyylipropyyli1 amino1-4-okso-2-buteeni-I.' happo

Vaihe 1

Suspensio, jossa oli monometyylifumaraattia (200 mg, 1,54 mmoolia) EtOAc:ssä (20 ml), käsiteltiin pentafluorifeno- 82 106197 lilla (340 mg, 1,85 mmoolia) ja disykloheksyylikarbodi-imidillä (349 g, 1,69 mmoolia) ja sekoitettiin 3 tunnin ajan. Tämän jälkeen suspensio suodatettiin ja suodos käsiteltiin esimerkin 19 vaiheen 5 amiinilla (816 mg, 1,54 mmoolia) ja sekoitettiin 18 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Reaktioseos suodatettiin, suodos haihdutettiin tyhjössä ja jäännös käänteisfaasikromatografoitiin piihappo-geelillä käyttämällä eluenttina 75%:ista MeOH:ta H20:ssa, jolloin saatiin tuote amorfisena valkoisena kiintoaineena (867 mg, 88 %), sp. 161 - 166eC (MeOH/H20); [a]Dae +13,3° (c = 1,04, MeOH); IR (kalvo) 1728, 1700 ja 1666 cm-1; NMR (CDC13) 6: 1,34 {3H, s), 1,50 - 1,60 (2H, m), 1,70 - 2,10 (12H, m), 2,73 (2H, d, J 7 Hz), 3,10 - 3,25 (1H, m), 3,28 (1H, d, J 15 Hz), 3,38 (1H, d, J 15 Hz), 3,70 - 3,80 (1H, m), 3,75 (3H, S), 4,25 - 4,35 (1H, m), 4,80 (1H, S), 5,00 (1H, s), 6,12 (1H, d, J 8 HZ), 6,80 (1H, d, J 16 Hz), 6,92 (1H, d, J 16 HZ), 6,93 (1H, d, J 2 Hz), 7,05 - 7,30 (8H, m), 7,35 (1H, d, J 8 Hz), 7,57 (1H, d, J 8 Hz), 8,21 (1H, s); anal. *H2Oj C, H, N.

Valhe 2

Vaiheen 1 metyyliesteri (867 mg, 1,35 mmoolia) käsiteltiin liuoksena THFrssä (35 ml) 0eC:sa tipoittain LiOH:n vesi-liuoksella (13,5 ml 0,1M-Iiuosta, 1,35 mmoolia). Muodostunutta seosta sekoitettiin 0eC:ssa 4,5 tunnin ajan ja sitten sen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja tehtiin happamaksi IM sitruunahappoliuoksella. Seos konsentroitiin kolmasosaan sen alkuperäisestä määrästä ja jäännös uutettiin EtOAc:llä (75 ml) ja pestiin H20:lla (75 ml). Orgaa- *· ninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja • · haihdutettiin tyhjössä. Sitten jäännös käänteisfaasikromatografoitiin piihappogeelillä käyttämällä eluenttina 75%:ista MeOHrta H20:ssa, jolloin saatiin tuote amorfisena valkoisena kiintoaineena (611 mg, 72 %); sp. 166 - 170°C (Me0H/H20); [a]D20 +105,2° (c = 1,07, MeOH); IR (kalvo) 83 106197 3341, 1706 ja 1665 cm-1; NMR (CDCI3) 6: 1,38 (3H, s), 1,45 - 1,55 (2H, m), 1,70 - 2,10 (12H, m), 2,00 (C02H ja H20), 2,60 - 2,80 (2H, m), 3,10 - 3,20 (1H, lev. m), 3,22 (1H, d, J 12 Hz), 3,34 (1H, d, J 14 Hz), 3,50 - 3,60 (1H, lev. m), 4,20 - 4,30 (1H, lev. m), 4,78 (1H, S), 5,23 (1H, s), 6,35 - 6,45 (1H, lev. m), 6,75 (1H, d, J 15,5 Hz), 6,89 (1H, d, J 15,5 Hz), 6,90 (1H, d, J 2 Hz), 7,00 - 7,30 (8H, m), 7,31 (1H, d, J 8 Hz), 7,54 (1H, d, J 8 Hz), 8,54 (1H, s); anal. C3gH42N40g; H» H.

Esimerkki 20 (yhdiste 20) TR-(R*,R*)1-4-f Γ2-Γ Γ 3-(lH-lndol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-Γ Γ(trisvklor3.3.1.13/71dek-2-yylioksl)karbonyyliTamino1-propyyll 1 amino 1 -1-feny yli etyyli 1 amino 1 -4-oksobutaanihappo

Vaihe 1

Liuokseen, jossa oli tert-butyylioksikarbonyyli-D-2-fenyy-liglysinolia (5,85 g, 24,7 mmoolia) vedettömässä dikloori-metaanissa (60 ml), lisättiin 0eC:ssa trietyyliamiinia (5,08 g, 50,3 mmoolia) ja sitten £-tolueenisulfonyyliklo-ridia (6,8 g, 35,7 mmoolia) liuoksena dikloorimetaanissa (10 ml). Reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja annettiin seistä 18 tunnin ajan. Seos laimennet-• tiin sitten dikloorimetaanilla (100 ml) ja pestiin IM sit- ruunahappoliuoksella. Orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä ja haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin kiintoaine, joka kiteytettiin uudelleen etyyliasetaatti-heksaanista (6,8 g, 70 %), sp. 114 - 118eC (EtOAc-heksaa-ni); IR (kalvo) 3388, 2978, 1713, 1365 ja 1176 cm-1; NMR (CDCI3) 6: 1,40 (9H, S), 2,43 (3H, S), 4,20 (2H, m), 4,89 (1H, lev. s), 5,10 (1H, lev. s), 7,27 (2H, m), 7,31 (5H, m), 7,65 (2H, d, J 8 Hz); anal. (C20H25NO5S), C, H, N.

84 1 06 1 97

Vaihe 2

Noudatettiin esimerkin 19 vaiheen 2 menetelmää sillä erotuksella, että käytettiin esimerkin 20 vaiheessa 1 valmistettua tosylaattia (2,37 g, 70 %), jota ei puhdistettu, sp. 76 - 78eC; IR (kalvo) 3380, 2095, 1682 ja 1515 cm”1; NMR (CDC13) 6: 1,44 (9H, s), 3,763 (2H, m), 4,87 (1H, lev. s), 5,03 (1H, lev. s), 7,30 - 7,40 (5H, m).

Vaihe 3

Noudatettiin esimerkin 19 vaiheen 3 menetelmää sillä erotuksella, että käytettiin esimerkin 20 vaiheen 2 uretaania (3,43 g, >100 %) vaiheessa 4 ilman lisäpuhdistusta; IR (kalvo) 3030 ja 2104 cm”1; NMR (CDCI3) 6: 3,37 (1H, dd, J 8 ja 12 Hz), 3,52 (1H, dd, J 5 ja 12 Hz), 4,13 (1H, dd, J 5 ja 8 Hz), 7,20 - 7,40 (5H, m).

Vaihe 4

Liuokseen, jossa oli bentsyyli-hemisukkinaattia (3,14 g, 15,1 mmoolia) etyyliasetaatissa (60 ml), lisättiin N,N-di-sykloheksyylikarbodi-imidiä (3,42 g, 16,6 mmoolia) ja 1-hydroksibentsotriatsolia (2,24 g, 16,6 mmoolia). Reaktio-seoksen annettiin seistä tunnin ajan ja sitten lisättiin vaiheessa 3 valmistettu amiini (2,23 g) liuoksena etyyliasetaatissa (5 ml). Tätä lopullista seosta sekoitettiin vielä kolmen tunnin ajan, sitten se suodatettiin ja suodos haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin kumi (10 g), joka kromatografoitiin piihapolla käyttämällä eluentteina 25 % .. EtOAc:tä/75 % n-heksaania ja sitten 50 % EtOAc:tä/50 % n- ·* heksaania, jolloin saatiin vaadittu aminoatsidi (3,96 g, 70 %) valkoisena kiintoaineena, sp. 51 - 54°C (EtOAc-hek-saani); IR (kalvo) 3295, 3065, 2103, 1736 ja 1651 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 2,55 (2H, t, J 7 Hz), 2,72 (2H, t, J 6 Hz), 3,63 (2H, d, J 7 Hz), 5,12 (2H, s), 5,16 (1H, m), 6,25 85 106197 (1H, lev. d), 7,30 - 7,40 (10H, m), anal. (C19H20N12O2), C, H, N.

Vaihe 5

Liuokseen, jossa oli vaiheen 4 mukaisesti valmistettua aminoatsidia (1,659 g, 4,7 mmoolia) absoluuttisessa etanolissa (45 ml), lisättiin Lindlar-katalysaattoria (0,664 g, 40 % w/w). Reaktio suoritettiin vedyn atmosfäärissä kolmen tunnin kuluessa. Sitten reaktioseos suodatettiin Celiten päällä ja pestiin etanolilla. Liuotin haihdutettiin tyhjössä ja jäännös käytettiin välittömästi ilman lisäpuhdis-tusta vaiheessa 6 (1,07 g, n. 70 %). IR (kalvo) 3325, 1733, 1703 ja 1651 cm-1; NMD ((CD3)2SO) 6: 2,65 (2H, m), 2,70 (2H, m), 4,74 (1H, lev. q), 5,08 (2H, s), 7,20 - 7,40 (10H, mj, 8,25 (1H, d).

Valhe 6 2-adamantyylioksikarbonyyli-a-metyyli-D-tryptofaani (1,36 g, 3,4 mmoolia), joka oli liuoksena etyyliasetaatissa (30 ml), käsiteltiin peräkkäin N,N-disykloheksyylikarbodi-imi-dillä (0,778 g, 3,8 mmoolia) ja 1-hydroksibentsotriatso-lilla (0,51 g, 3,8 mmoolia) ja sekoitettiin tunnin ajan ja sitten lisättiin vaiheessa 5 valmistettu amiini (1,07 g) liuoksena etyyliasetaatissa (5 ml). Muodostunutta seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 18 tunnin ajan ja sitten se suodatettiin. Suodos konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin kumi (3,4 g), joka käänteisfaasikromatografoitiin piihapolla käyttämällä eluentteina 30 % H2O:ta/70 %

MeOH:ta ja sitten 20 % H20:ta/80 % MeOH:ta, jolloin saa-·* tiin vaadittu tuote (1,403 g, 41 % vaiheesta 5) ei-kitei- senä kiintoaineena. IR (kalvo) 3305, 2856, 1729, 1695 ja 1651 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,47 (3H, S), 1,50 - 2,05 (14H, m), 2,57 (2H, m), 2,70 (2H, q, J 5 Hz), 3,35 (1H, m), 3,40 (2H, dd, J 15 Hz), 3,95 (1H, m), 4,86 (1H, lev. s), 5,11 86 - 106197 {3H, S), 6,40 (1H, lev. s), 7,00 (1H, d), 7,05 - 7,35 (9H, m), 7,57 (1H, d, J 7 Hz), 3,27 (1H, s).

Vaihe 7

Liuos, jossa oli vaiheessa 6 valmistettua bentsyyliesteriä (1,403 g, 2,0 mmoolia) absoluuttisessa etanolissa (50 ml), käsiteltiin 10%:isella palladium-hiilellä (0,14 g, 10 % w/w) ja sijoitettiin vedyn atmosfääriin neljäksi tunniksi. Sitten reaktioseos suodatettiin Celiten päällä ja pestiin etanolilla ja sitten asetonilla. Suodos konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikkoyhdiste (0,967 g, 79 %), joka kiteytettiin uudelleen metanolista, sp. 142 - 146°C (MeOH); IR (kalvo) 3306, 2908, 1713 ja 1670 cm-1; NMR ((CD3)2SO) 6: 1,20 (3H, s), 1,49 (2H, lev. s), 1,65 - 1,85 (8H, m), 1,95 (4H, m), 2,39 (4H, lev. s), 3,40 (4H, lev.

m), 4,69 (1H, lev. s), 4,96 (1H, lev. d, J 6 Hz), 6,70 (1H, s), 6,90 (2H, s), 7,01 (1H, 5, J 7Hz), 7,22 (1H, m), 7,31 (5H, lev. s), 7,44 (1H, d, J 7 Hz), 7,78 (1H, lev. s), 8,30 (1H, s) ja 10,85 (1H, s), anal.

(C35H42N4°6 * 0'5H2°)· C' H' N·

Esimerkki 20A

Vastaavalla tavalla, mutta käyttämällä 1-(S)-2-endobornyy-lioksikarbonyyli-[D]-a-metyylitryptofaania valmistettiin [IS-[ία,2β[S*(S*)],4β]]-4-t[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-me-tyyli-l-okso-2-[[[(l,7,7-trimetyylibisyklo[2.2.1]hept-2-yyli)oksi]karbonyyli]amino]propyyli]amino]-1-fenetyyli]-amino]-4-oksobutaanihappo.

» 87 106197

Esimerkki 21 (R)-trlsyklor 3.3.1.13 r7ldek-2-yyli-r1-(lH-indol-3-yylime-tyyli)-l-metyyll-2 Γmetyyli(2-fenyylietyyli)aminoΊ-2-okso-etyylllkarbamaatti

Noudatettiin esimerkin 19 vaiheen 4 menetelmää sillä erotuksella, että käytettiin N-metyyli-fenetyyliamiinia. Saatiin 50 mg (61 %:n saanto) amorfisena valkoisena kiintoaineena, sp. 90 - 95eC (MeOH-H20); IR (kalvo) 3295, 2855, 1698 ja 1625 cm-1; NMR (CDCI3) 6: 1,5 - 2,0 (17H, m), 2,84 (2H, lev. t, J 7 Hz), 3,07 (3H, lev. s), 3,4 - 3,8 (4H, m), 4,86 (1H, lev. s), 5,28 (1H, lev. s), 6,95 - 7,30 (8H, m), 7,35 (1H, d, J 8 Hz), 7,56 (1H, d, J 8 Hz), 8,2 (1H, lev. s); anal. (032^9^()3), C, H, N.

Esimerkki 22 TR-ΓR*,R*~(E)Π-4-Γ Γ 2-Γ Γ 3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-Γ Γ(trisykloΓ3.3.1.13*7!dek-2-yylioksi)karbonyyli)-amino 1 pr opyyll 1 amino 1 -1-f enyylietyyli) amino 1 -4-okso-2-bu-teenihappo

Vaihe 1

Liuokseen, jossa oli tert-butyylioksikarbonyyli-D-fenyyli-glysinolia (5,85 g, 24,7 mmoolia) vedettömässä dikloori-metaanissa (60 ml) 0eC:ssa, lisättiin trietyyliamiinia (5,08 g, 50,3 mmoolia) ja sitten p-tolueenisulfonyyliklo-ridia (6,8 g, 35,7 mmoolia) liuoksena dikloorimetaanissa (10 ml). Reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitten sen annettiin seistä 18 tunnin ajan. Seos ·· laimennettiin sitten dikloorimetaanilla (100 ml) ja pes tiin IM sitruunahappoliuoksella (100 ml). Orgaaninen faasi kuivatettiin vedettömän MgS04:n päällä ja haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin kiintoaine, joka kiteytettiin uudelleen etyyliasetaatin ja n-heksaanin seoksesta; (6,8 g, 70 %), sp. 114 - 118eC (EtOAc/n-heksaani); IR (kalvo) 106197 88 3388, 2978, 1713, 1365 ja 1176 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,40 (9H, s), 2,43 (3H, S), 4,20 (2H, m), 4,89 (1H, lev. s), 7,27 (2H, m), 7,31 (5H, m), 7,65 (2H, d, J 8 Hz); anal.

(C20H25NO5S)' C' B' N* vaihe 2

Liuos, jossa oli tosylaattia (4,67 g, 11,9 mmoolia) vedettömässä DMF:ssä (60 ml), käsiteltiin natriumatsidilla (868 mg, 13,4 mmoolia). Seosta kuumennettiin 120eC:ssa 1,5 tunnin ajan. Jäähtymisen jälkeen liuos kaadettiin veteen (250 ml) ja vesikerros uutettiin yhtä suurella määrällä eetteriä. Eetterifaasi pestiin vedellä, kuivatettiin MgS04:n päällä ja liuotin poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin haluttu atsidi valkoisena kiteisenä kiintoaineena, joka käytettiin ilman lisäpuhdistusta (2,37 g, 70 %), sp. 76 -78eC; IR (kalvo) 3380, 2095, 1682 ja 1515 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,44 (9H, s), 3,76 (2H, m), 4,87 (1H, lev. s), 5,03 (1H, lev. s), 7,30 - 7,40 (5H, m).

Vaihe 3

Liuos, jossa oli atsidia (6,44 g, 24,6 mmoolia) vedettömässä etyyliasetaatissa (100 ml), alistettiin vedyn atmosfäärille 45 psi:n paineessa Lindlar-katalysaattorin (2,58 g, 40 % w/w) päällä 6 tunnin ajaksi huoneen lämpötilassa. Tämän jälkeen reaktioseos suodatettiin suodatusapuaineen läpi ja pestiin etyyliasetaatin lisämäärällä. Raakatuote, joka oli liuoksena, käytettiin välittömästi reaktiojakson seuraavassa vaiheessa. IR (kalvo) 3350, 3000 ja 1696 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,43 (9H, S), 2,10 (2H, lev. S), 3,10 (2H, lev. s), 4,70 (1H, m), 5,45 (1H, lev. s), 7,25 - 7,40 (5H, m).

89 1 06 1 97

Vaihe 4

Liuokseen, jossa oli Fmoc-a-Me-D-Trp-OH:ta (1,800 mg, 4,091 mmoolia) etyyliasetaatissa (35 ml), lisättiin N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidiä (927 mg, 4,50 mmoolia) ja 1-hydroksibentsotriatsoli-hydraattia (689 mg, 4,50 mmoolia). Sekoitettiin tunnin ajan huoneen lämpötilassa, sitten suspensioon lisättiin amiini (965 mg, 4,09 mmoolia) etyyliasetaatissa (5 ml). Sekoitettiin edelleen 3 tunnin ajan, sitten reaktioseos suodatettiin ja suodos haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin kumi (2,9 g). Raakatuote puhdistettiin pyiväskromatografiällä käyttämällä eluenttina 25 % - 75 % EtOAc:tä n-heksaanissa, jolloin saatiin haluttu amidi keltaisena, ei-kiteisenä kiintoaineena (1970 mg, 73 %), sp. 78 - 82eC; IR (kalvo) 3300, 3100 - 2900, 1695 ja 1660 cm-1; NMR (CDC13) 6: 1,40 (9H, lev. s), 1,50 (3H, s), 3,30 - 3,50 (3H, m), 3,65 (1H, m), 4,15 (1H, lev. s), 4,41 (2H, lev. s), 4,75 (1H, m), 5,35 (1H, s), 5,45 (1H, m), 6,55 (1H, lev. s), 6,83 (1H, lev. s), 7,10 - 7,45 (12H, m), 7,50 - 7,65 (3H, m), 7,75 (2H, m), 8,05 (1H, lev. s).

Vaihe 5 Jäähdytettyyn liuokseen (0eC), jossa oli uretaania (3,611 g, 5,488 mmoolia) vedettömässä dikloorimetaanissa (40 ml), lisättiin p-tolueenisulfonihappoa (1,301 g, 6,839 mmoolia). Reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitten sen annettiin seistä 18 tunnin ajan. Sitten lisättiin dikloorimetaania (100 ml) ja seos pestiin kyllästetyllä natriumvetykarbonaatti-liuoksella (100 ml). Orgaaninen faasi kuivatettiin (MgS04) ja haihdutettiin, jolloin *' saatiin amiini keltaisena ei-kiteisenä kiintoaineena, joka puhdistettiin kromatografoimalla käyttämällä eluenttina 5 % MeOH:ta CH2Cl2:ssa (2,915 g, 95 %), sp. 84 - 88eC; IR (kalvo) 3300 - 3400, 1713 ja 1658 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,50 (3H, s), 1,65 (2H, lev. s), 3,15 (1H, m), 3,25 (1H, 106197 90 ABq:n Ha, J 15 Hz), 3,45 - 3,55 (2H, m), 3,95 (1H, m), 4,15 (1H, t, J 8 Hz), 4,35 - 4,50 (2H, m), 5,32 (1H, S), 6,43 (1H, lev. t), 6,77 (1H, d, J 12 Hz), 7,05 - 7,45 (12H, m), 7,50 - 7,65 (3H, m), 7,75 (2H, m), 8,05 (1H, s); m/e 559 (M+, perushuippu); anal. (C35H34N403·0,2506Η14), C, H, N.

Vaihe 6

Fmoc-a-Me-D-TrpNHCH2CH (NHCOCHCHCC^Me) Ph; TR-(R*,R*~(E)11-4-rΓ 2— ΓΓ 2— ΓΓ(9H-fluoren-9-yyli)metoksi)-karbonyyli1 amino)-3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyll-l-okso-propyyll1 amino1-1-fenyylietyyli1 amino1-4-okso-2-buteeni-happo-metyyllesterl

Liuokseen, jossa oli mono-metyylifumaraattia (330 mg, 2,54 mmoolia) etyyliasetaatissa (50 ml), lisättiin 1-hydroksi-bentsotriatsoli-hydraattia (390 mg, 2,55 mmoolia) ja sitten N,N-disykloheksyylikarbodi-imidiä (570 mg, 2,77 mmoolia). Sekoitettiin tunnin ajan huoneen lämpötilassa, sitten lisättiin vaiheen 5 amiini (1,40 g, 2,51 mmoolia) etyyliasetaatissa (3 ml) ja muodostunutta suspensiota sekoitettiin 18 tunnin ajan. Sitten reaktioseos suodatettiin, suodos haihdutettiin tyhjössä ja jäännös puhdistettiin kromatografoimalla piihappogeelillä käyttämällä eluenttina 50 - 75 % EtOAcrtä n-heksaanissa, jolloin saatiin tuote valkoisena amorfisena kiintoaineena (1,21 g, 72 %), sp. 78 - 82eC; IR (kalvo) 3309, 3064, 2950, 1724 ja 1668 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,39 (3H, s), 3,30 (3H, m), 3,69 (3H, S), 4,05 (1H, m), 4,16 (1H, t, J 8 Hz), 4,40 (1H, dd, J 8 ja 11 Hz), 5,16 (1H, S), 5,21 (1H, m), 6,21 (1H, m), 6,78 (1H, d, J 15 Hz), 6,79 (1H, d, J 2 Hz), 7,03 (1H, d, * J 15 Hz), 7,15 - 7,60 (16H, m), 7,77 (2H, t, J 8 Hz), 8,17 (1H, S); anal. (C40H3gN4O6·5Η20), C, H, N.

91 106197

Vaihe 7 H-a-Me-D-TrpNHCH2CH(NHC0CHCHC02Me)Ph;

Tr-fR*,R*-(E)11-4Γ Γ2-Γ Γ2-amino-3-(lH-indol-3-vvli)-2-me-tyyll-l-oksopropyylilaminol-l-fenyylietyyliΊamino)-4-okso-2-buteenlhappo-metyyliesteri

Piperidiiniä (156 mg, 1,84 mmoolia) lisättiin liuokseen, jossa oli uretaania (1,21 g, 1,81 mmoolia) vedettömässä DMFrssä (20 ml) 0°C:ssa. Reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja 4 tunnin kuluttua se konsentroitiin kumiksi. Tämä raakatuote kromatografoitiin piihappogeelil-lä käyttämällä eluenttina 2,5 - 5 % MeOHtta CH2Cl2:ssa, jolloin saatiin amiini ei-kiteisenä, vaaleankeltaisena kiintoaineena (801 mg, 97 %), sp. 75 - 77eC; IR (kalvo) 3400 - 3300, 3100, 2900, 1728, 1660 ja 1646 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,41 (3H, s), 1,60 (2H, lev. s), 2,81 (1H, ABq:n Ha, J 15 Hz), 3,45 - 3,60 (3H, m), 5,00 (1H, m), 6,80 (1H, d, J 16 Hz), 6,90 - 7,20 (9H, m), 7,40 (1H, d, J 8 Hz), 7,64 (2H, lev. d, J 8 Hz), 7,90 (1H, t, J 6 Hz), 8,31 (1H, lev. s); anal. (C25H20N4O4), C, H, N.

Vaihe 8 2-Adoc-a-Me-D-TrpNHCH2CH(NHC0CHCHC02Me)Ph; rR-rR*,R*-(E) 11-4-Γ Γ2-Γ ΓS-qH-indol-S-yylil^-metyyli-l-okso^-r Γ(trisyklor3.3.1.13/71dek-2-yylioksi)karbonyylil-amlno1propyyli)amino1-1-fenyylletyyli)amino1-4-okso-2-bu-teenihappo-metyyllesteri Jäällä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli amiinia (794 mg, 1,77 mmoolia) vedettömässä THFrssä (10 ml), lisättiin ti-.. poittain 2-adamantyyli-kloroformiaattia (380 mg, 1,77 “ mmoolia) THF:ssä (3 ml) ja sitten trietyyliamiinia (215 mg, 2,13 mmoolia) TBFrssä (2 ml). Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 3 tunnin ajan ja sitten se konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin ruskea jäännös (11 g). Raakatuote puhdistettiin pylväskromatografiällä käyt- 92 106197 tämällä eluenttina 60 % etyyliasetaattia n-heksaanissa, jolloin saatiin haluttu uretaani (5lc) amorfisena kiintoaineena (734 rng, 66 %), sp, 109 - 112eC; IR (kalvo) 3440 -3300, 2900, 1720 ja 1667 cm"1; NMR (CDCI3) 6: 1,42 (3H, s), 1,54 (2H, m), 1,70 - 2,05 (12H, m), 3,34 (1H, ABq:n Ha, J 14 HZ), 3,42 (1H, m), 3,50 (1H, ABq:n Hb, J 14 Hz), 3,79 (3H, S), 4,05 (1H, m), 4,84 (1H, lev. s), 5,03 (1H, s), 5,20 (1H, m), 6,35 (1H, m), 6,82 (1H, d, J 15 Hz), 6,95 - 7,35 (10H, m), 7,57 (2H, d, J 8 Hz), 8,30 (1H, s); anal. (C2gH^2N40g*0,5H20) # C, H, N.

Vaihe 9 2-Adac-ct-Me-D-TrpNHCH2CH (NHCOCHCHCC^H) Ph; ~R-TR*,R*-(E) 11-4-Γr2-rr3-(lH-indol-3-yyli)-2-metvvli-l-okso-2-Γ Γ(trisvklor3.3.1.13/71dek-2-vvlioksi)karbonyyli1-amino Ipropyyll 1 amino 1 -1-f enyylietyyll 1 amino 1 -4-okso-2-bu-teenihappo

Litiumhydroksidin 0,1M vesiliuosta (12,16 ml, 1,22 mmoo-lia) lisättiin tipoittain 0eC:ssa 2 tunnin kuluessa liuokseen, jossa oli metyyliesteriä (726 mg, 1,16 mmoolia) THF:ssä (73 ml). Reaktioseoksen annettiin sitten lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitä sekoitettiin 18 tunnin ajan. Tämän jälkeen lisättiin kloorivetyhappoa (1,34 ml lM-liuosta) ja seos konsentroitiin. Sitten lisättiin etyyliasetaattia (150 ml) ja vettä ja erotettu orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä ja haihdutettiin, jolloin saatiin raaka kiintoaine. Tämä käänteisfaasikromatografoi-tiin piihapolla käyttämällä eluenttina 75 % MeOH:ta H20:ssa, jolloin saatiin haluttu tuote amorfisena kiintoaineena (324 mg, 46 %), sp. 145 - 150°C; [a]20 +13,70° (c =0,24, CHCI3); IR (kalvo) 3300, 2910, 1706 ja 1667 cm'1; NMR (DMSO-d6) 6: 1,18 (3H, s), 1,74 (2H, m), 1,65 - 2,00 (12H, m), 3,30 - 3,50 (4H + H20), 4,66 (1H, lev. s), 5,06 (1H, m), 6,52 (1H, d, J 15 Hz), 6,77 (1H, lev. s), 6,90 -7,10 (4H, m), 7,20 - 7,35 (6H, m), 7,44 (1H, d, J 8 Hz), 93 1 06 1 97 7,82 (1H, t, J 6 Hz), 8,78 (1H, lev. s), 10,85 (1H, s); snsl· (CggH^Q^Og ·0,5H2O)C, Η, N.

Esimerkki 23 fR-(R*,S*)T-Γ Γ 2-Γ Γ 3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-ΓΓ(trisyklo Γ3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amlno-propyyli 1 amino 1 - 3-f enyylipropyyll 1 sulf iny yli l etikkahappo vaihe 1

Natriumperjodaattia (908 mg, 4,24 mmoolia) vedessä (10 ml) lisättiin tipoittain huoneen lämpötilassa sulfidiin BOCNHCH-(CS^SCS^CX^EtJCS^Ph (750 m9' 2,12 mmoolia) metanolissa (20 ml). Tämän seoksen annettiin seistä 2 tunnin ajan, sitten se konsentroitiin kolmannekseen määrästään ja jaettiin etyyliasetaatin ja natriumkloridi-liuoksen välillä. Orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja haihdutettiin tyhjössä valkoiseksi kiintoaineeksi (782 mg, 100 %), joka oli kahden diastereoisomeerin seos ja käytettiin sellaisenaan ilman lisäpuhdistusta. IR (kalvo) 1739, 1689 ja 1046 cm-1; NMR (CDC13) 6: 1,27 (3H, t, J 7 Hz), 1,41 (4,5H, S), 1,42 (4,5H, S), 2,92 - 3,20 (4H, m), 3,66 - 3,84 (2H, m), 4,18 - 4,29 (3H, m), 4,80 (0,5H, lev.), 5,30 (0,5H, lev.), 7,19 - 7,35 (5H, m).

·* Vaihe 2 H2NCH( C3i2S0CH2C02Et) CH2Ph; (S) - Γ(2-amino-3-fenyylipropyyli)sulfinyyliletikkahappo-etyyliesteri N-BOC-suojattua sulfoksidia (462 mg, 1,25 mmoolia) sekoitettiin tunnin ajan huoneen lämpötilassa dikloorimetaanis-sa, joka sisälsi trifluorietikkahappoa (5 ml l:l-seosta). Kaikki haihtuvat aineosat poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin siirappi, joka käytettiin ilman lisäpuhdistusta (479 mg).

94 106197

Vaihe 3 2-adoc-a-Me-D-TrpNHCH(GH2S0GH2C02Et)CH2Ph; TR-(R*,S*)1-Γ Γ 2-Γ Γ 3-(lH-indol-3-vvli)-2^metyyll-l-okso-2-ΓΓ(trisyklor3.3.1.13/71dek-2-yylioksi)karbonyyli!aminol-propyyli1amino 1-3-fenyylipropyyli Ίsulfinyyli1etikkahappo-etyyliesteri N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidiä (165 mg, 0,801 mmoolia) lisättiin liuokseen, jossa oli 2-ADOCaMe-D-TrpOH:ta (286 mg, 0,720 mmoolia) ja 1-hydroksibentsotriatsoli-hydraattia (122 mg, 0,797 mmoolia) etyyliasetaatissa (10 ml). Tunnin kuluttua lisättiin tipoittain raaka amiinisuola (63) (345 mg, 0,9 mmoolia) ja trietyyliamiinia (243 mg, 2,40 mmoolia) etyyliasetaatissa (10 ml) ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 22 tunnin ajan. Tämä seos suodatettiin ja suodos pestiin IM sitruunahappoliuoksella (2 x 10 ml), kyllästetyllä natriumvetykarbonaatti-liuoksella (2 x 10 ml) ja natriumkloridi-liuoksella (10 ml). Orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja haihdutettiin tyhjössä ja jäännös kromatografoitiin piihappogeelillä käyttämällä eluenttina 2 % MeOH:ta CH2Cl2:ssa, jolloin saatiin tuote valkoisena amorfisena kiintoaineena (263 mg, 56 %) kahden diastereoisomeerin seoksena, sp. 87 - 99eC; IR (kalvo) 1719, 1659 ja 1071 cm-1; NMR (CDC13) 6: 1,22 - 1,28 (3H, m), 1,47 - 2,00 (17H, m), 2,81 - 3,14 (4H, m), * 3,22 - 3,49 (2H, m), 3,56 - 3,79 (2H, m), 4,16 - 4,23 (2H, m), 4,48 (1H, m), 4,80 (1H, S), 5,21 (1H, S), 6,77 - 7,62 (11H, m); MS m/e (EI) 648 (72) 130 (100); anal.

<C36H45N3°6S>' C' H' N' S* • · • · 95 106197

Vaihe 4 2-adoc-a-Me-D-TrpNHCH (CH2S°CH2C02H) CH2Ph; rR-(R*,S*)1-ΓΓ2-Γr3-(lH-lndol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-f Γ(trisyklof 3.3.1.13'7Tdek-2-yylioksi)karbonyyli Ί amino1-propyyli 1 amino 1 - 3-fenyylipropyyli ] sulf inyyli 1 etikkahappo

Litiumhydroksidia (8,3 ml 0,1M liuosta, 0,83 mmoolia) lisättiin tipoittain jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli esteriä 8467 mg, 0,752 mmoolia) THF:ssä (45 ml). Seosta sekoitettiin 6 tunnin ajan huoneen lämpötilassa, sitten lisättiin kloorivetyhappoa (9,1 ml 0,1M liuosta, 0,91 mmoolia) ja THF haihdutettiin. Jäännös otettiin etyyliasetaattiin ja pestiin vedellä, orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja konsentroitiin jäännökseksi, joka käänteisfaasikromatografoltiin piihappogeelillä käyttämällä eluenttina 80 % MeOH:ta H20:ssa, jolloin saatiin tuote amorfisena valkoisena kiintoaineena (304 mg, 65 %), sp. 125 - 141eC; IR (kalvo) 1709 ja 1664 on"1; KMR (CDCl3) 6: 1,50 - 2,04 (17H, m), 2,68 - 3,05 (4H, m), 3,16 - 3,77 (4H, m), 4,39 (1H, m), 4,80 (1H, lev. S), 5,46 (2H, lev.), 6,99 - 7,34 (10H, m), 7,54 (1H, d, J 8 Hz), 8,79 (1H, lev.); MS m/e (FAB) 620 (100); anal.

{c34H4iN3°6'1'2H2°) ' C, H, N, S.

Esimerkki 24 fR-(R*,S*)1 —Γ2-Γ Γ2-Γ Γ 3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-ok-so-2-Γ Γ(trisyklor3.3.1.13/71dek-2-yylioksi)karbonyyli1 amino 1propyyli1 amino 1-3-fenyylipropyyli1tio1etikkahappo

Vaihe 1 BOCNHCH(CH2OMs)CH2Ph; (S)-ri-rΓ(metyylisulfonyyli)oksi1metyylil-2-fenyylietyv-li1-karbamiinihappo-1,1-dimetyyliesteri

Metaanisulfonyylikloridiä (2,51 g, 21,9 mmoolia) vedettömässä THFrssä (10 ml) lisättiin tipoittain 0°C:ssa liuok- 96 106197 seen, jossa oli N-tert-BOC-L-fenyylialaninolla (5,00 g, 19,9 mmoolia) ja trietyyliamiinia (2,77 g, 27,4 mmoolia) vedettömässä THPtssä (20 ml). Tunnin kuluttua reaktioseos suodatettiin ja suodos konsentroitiin tyhjössä kiintoaineeksi, joka kiteytettiin uudelleen etyyliasetaatti-n-hek-saanista (6,35 g, 97 %), sp. 106 - 108*C (EtOAc/n-heksaa-ni); IR (kalvo) 1682, 1356 ja 1167 cm"1; NMR (CDCl3) 6: 1,38 (9H, s), 2,81 - 2,91 (2H, m), 3,01 (3H, S), 4,09 -4,25 (3H, m), 4,72 (1H, lev. s), 7,20 - 7,35 (5H, m).

Valhe 2

BocNHCH (CH2SCH2C02Et) CH2Ph; (S)-r Γ2-Γ Γ(l,l-dimetyylietoksi)karbonyyli1amino1-3-fenyy-lipropyyliT tio 1 etikkahappoetyyliesterl

Etyyli-2-merkaptoasetaattia (1,206 g, 10,4 mmoolia) vedettömässä THF:ssä (10 ml) lisättiin tipoittain huoneen lämpötilassa suspensioon, jossa oli 60 % natriumhydridiä (400 mg, 10,0 mmoolia) sekoitettuna THF:ään (30 ml). 1,5 tunnin kuluttua lisättiin tipoittain 5 minuutin kuluessa mesy-laattia (2) (3,0 g, 9,11 mmoolia) THFrssä (15 ml). Sekoitettiin 24 tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten liuotin poistettiin tyhjössä ja jäännös jaettiin etyyliasetaatin ja natriumkloridi-liuoksen välillä. Orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja liuotin haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin öljy, joka kroma-tografoitiin piihappogeelillä käyttämällä eluenttina CH2Cl2:ta, saatiin tuote siirappina (1,58 g, 49 %); IR (kalvo) 1733 ja 1713 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,26 (3H, t, J 7 Hz), 1,41 (9H, S), 2,66 - 2,89 (4H, m), 3,25 (2H, dd, J 4 ja 14 Hz), 4,03 (1H, m), 4,18 (2H, q, J 7 Hz), *' 4,75 (1H, s), 7,18 - 7,32 (5H, m).

97 1 06 1 97 · vaihe 3 - H2NCH(CH2sCH2C02Et)CH2Ph,CF3C02H; (S)-Γ(2-amino-3-fenyyllpropyyli)tio]etikkahappoetyylieste-rl-trifluoriasetaatti (SUOLA) (1:1) N-suojattua esteriä (225 mg, 0,637 mmoolia) sekoitettiin 30 minuutin ajan puhtaassa trifluorietikkahapossa (3 ml) huoneen lämpötilassa. Ylimääräinen trifluorietikkahappo haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin raaka trifluori-asetaatti-suola, joka käytettiin välittömästi ilman lisä-puhdistusta, saanto 321 mg.

Vaihe 4 2-Adoc-a-Me-D-TrpNHCH (CH2SCH2C02Et) CH2Ph;

Tr-TR1,S11-r Γ2-Γ r3-(lH-lndol-3-yyll)-2-metvvli-l-okso-2-ΓΓ(trisyklo Γ3.3.1.13/71dek-2-yylioksi)karbonyyli1amino1-propyyli T amino1-3-fenyyllpropyyli1tioletikkahappoetyylies-teri Ν,Ν'-disykloheksyylikarbodi-imidiä (145 mg, 0,704 mmoolia) lisättiin sekoitettuun liuokseen, jossa on 2-Adoc-a-Me-D-TrpOH:ta (254 mg, 0,640 mmoolia) ja 1-hydroksibentsotriat-soli-hydraattia (122 mg, 0,797 mmoolia) etyyliasetaatissa (10 ml). Tunnin kuluttua lisättiin 4-dimetyyliaminopyri-diiniä (20 mg, 0,16 mmoolia) ja sitten liuos, jossa oli trifluoriasetaatti-suolaa (59) (235 mg, 0,64 mmoolia) ja trietyyliamiinia (152 mg, 1,50 mmoolia) etyyliasetaatissa (10 ml). Sekoitettiin huoneen lämpötilassa 24 tunnin ajan ja sitten reaktioseos suodatettiin ja suodos pestiin IM sitruunahappoliuoksella (2 x 20 ml), kyllästetyllä nat-riumvetykarbonaatti-liuoksella (2 x 20 ml) ja sitten nat- * riumkloridi-liuoksella (20 ml). Orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä ja suodatettiin. Suodos haihdutettiin tyhjössä ja jäännös kromatografoitiin piihappogeelillä käyttämällä eluentteina CH2cl2:^a 3a sitten 2 % MeOH:ta CH2Cl2:ssa, jolloin saatiin tuote valkoisena vaahtona (293 - - 98 106197 mg, 73 %), sp. 63 - 68°C; IR (kalvo) 1713 ja 1658 cm-1; NMR (CDC13) 5: 1,25 (3H, t, J 7 Hz), 1,52 - 2,00 (17H, m), 2,64 - 2,86 (4H, m), 3,21 (2H, dd, J 4 ja 15 Hz), 3,31 (1H, ABgin Ha, J 15 Hz), 3,49 (1H, ABg:n Hb, J 15 Hz), 4,16 (2H, q, J 7 Hz), 4,31 (1H, m), 4,8 (1H, lev.)/ 5/23 (1H, lev.), 6,72 (1H, d, J 8 Hz), 6,94 (1H, d, J 2 Hz), 7,07 - 7,26 (7H, m), 7,34 (1H, d, J 8 Hz), 7,62 (1H, d, J 8 Hz), 8,17 (1H, lev.); MS m/e (FAB) 632 (100); anal.

(C36H45N3°5S)' C' H' N' S*

Vaihe 5 2-Adoc-a-Me-D-TrpNHCH(CH2SCH2C02H)CH2Ph; [R-(R* ,S*) 1-Γ.Γ2-Γ r3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-ΓΓ(trisyklor3.3.1.1^/71dek-2-yylioksl)karbonvylilamlnoT-propyyli1amino1-3-fenyyllpropyyli1tio1etikkahappo

Liuokseen, jossa oli etyyliesteriä (100 mg, 0,16 mmoolia) etanolissa (2 ml), lisättiin IM NaOH- (0,17 ml) liuosta. Muodostunutta homogeenista reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 tunnin ajan. Tämän jälkeen liuos konsentroitiin tyhjössä ja jäännös jaettiin etyyliasetaatin ja IM HCl-liuoksen välillä. Orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä natriumkloridi-liuoksella, kuivatettiin (MgS04) ja konsentroitiin, jolloin saatiin amorfinen kiintoaine (80 mg). Tämä raakatuote puhdistettiin sitten käänteisfaa- • · sipylväskromatografialla käyttämällä eluenttina 66 % MeOHcta H20:ssa, jolloin saatiin haluttu tuote (61) amorfisena kiintoaineena (61 mg, 63 %), sp. 112 - 130,5eC; IR (kalvo) 1709 ja 1657 cm”1; NMR (CDCI3) 6: 1,50 - 1,99 (16H, m), 2,45 - 2,85 (4H, m), 3,15 - 3,25 (3H, m), 3,44 (1H, ABq:n Ha, J 15 Hz), 4,29 (1H, m), 4,82 (1H, lev. s), 5,40 (1H, lev. s), 6,79 (1H, lev. m), 6,98 - 7,25 (9H, m), 7,31 (1H, d, J 8 Hz), 7,56 (1H, d, J 8 Hz), 8,44 (1H, lev. s); MS m/e (FAB) 135 (100) 604 (13); anal.

(C34H41N305S,0,1H2°)' C' H' N' s· « 99 106197

Esimerkki 25 rR-(R*,S*)1-Γ Γ2-Γ r3-(lH-indol-3-yyli)-2-metvyli-l-ok- so-2-ΓΓ(trisvklor 3.3.1.13/71dek-2-yylioksi)karbonyyli1amino T propyyli1amino1-3-fenyylipropyyli1sulfonyyli1etikkahap-joo

Vaihe 1

BocNHCH (CH2S02CH2C02Et) CH2Ph ; (S)-f2-Ff(1,1-dimetyylietoksi)karbonyyli]amino Ί-3-fenyy-lipropyyli1sulfonyyli1etikkahappoetyyliesteri

Liuos, jossa oli kaliumpermanganaattia (411 mg, 2,60 mmoo-lia) vedessä (5 ml), lisättiin tipoittain 5 minuutin kuluessa liuokseen, jossa oli sulfidia, B0CNHCH-(CH2SCH2C02-Et)CH2Ph:ta (459 mg, 1,3 mmoolia) 50%:isessa vesipitoisessa etikkahapossa (10 ml). Tunnin kuluttua lisättiin vetyperoksidin 30%:inen liuos, kunnes seos muuttui värittömäksi. Sitten se laimennettiin etyyliasetaatilla ja pestiin kyllästetyllä patriumvetykarbonaatti-liuoksella. Kuivatettu (MgS04) orgaaninen faasi suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin sulfoni valkoisena amorfisena kiintoaineena (424 mg, 85 %), sp. 141 - 142eC; IR (kalvo) 1741, 1692, 1323 ja 1138 cm-1; NMR (CDC13) 5: 1,28 (3H, t, J 7 Hz), 1,41 (9H, S), 2,99 - 3,03 (2H, m), 3,43 - 3,51 (2H, m), 4,00 - 4,11 (2H, m), 4,23 (2H, q, J 7 Hz), 4,40 (1H, m), 4,95 (1H, lev.), 7,20 - 7,34 (5H, m).

Vaihe 2 H2NCH(CH2S02CH2C02Et)CH2Ph·CF3C02H; (S)-Γ(2-amino-3-fenyylipropyyli)sulfonyyli1etikkahappo-etyyliesteri-trifluoriasetaatti (suola) (1:1) •«

Noudatettiin esimerkin 24 vaiheen 3 menetelmää sillä erotuksella, että käytettiin yllä esitettyä N-suojattua esteriä (saanto 439 mg 424 mg:sta).

100 106197

Vaihe 3 2-Adoc-a-Me-D-TrpNHCH (O^SOjO^CC^Et) CH2Ph;

Tr-iR*,S*1-Γ Γ 2-Γ Γ 3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-ΓΓ(trisyklor3.3.1.13#7ldek-2-yvlioksi)karbonyyli1amino1-propyyll 1 amino 1 - 3-f enyylipropyyli 1 sulfonyyli 1 etlkkahappo-etyyliesteri

Noudatettiin esimerkin 24 vaiheen 4 menetelmää sillä erotuksella, että käytettiin yllä esitettyä amiinia (saanto 55 %), sp. 69 - 80eC; IR (kalvo) 1739, 1704 ja 1665 cm-1; NMR (CDC13) 6: 1,25 (3H, t, J 7 Hz), 1,46 (3H, s), 1,52 - 2,04 (14H, m), 2,91 (1H, dd, J 7 ja 14 Hz), 3,02 (1H, dd, J 7 ja 14 Hz), 3,18 - 3,52 (4H, m), 3,85 (1H, ABq:n Ha, J 15 HZ), 4,01 (1H, ABq:n Hb, J 15 Hz), 4,13 - 4,22 (2H, m), 4,64 - 4,68 (1H, m), 4,79 (1H, S), 5,07 (1H, S), 6,95 - 7,39 (10H, m), 7,59 (1H, d, J 8 Hz), 8,15 (1H, lev.); MS m/e 664 (100); anal. (C36H45N307S), C, H, N, S.

Valhe 4 2-Adoc-a-Me-D-TrpNHCH (CH2S02CH2C02H) CH2Ph; rR-rR*,S*l-r Γ2-Γ r3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-ΓΓ(trisyklor3.3.1.13/7 ldek-2-yylioksi)karbonyyli1amino 1-propyyli 1 amino 1 -3-f enyylipropyyli 1 sulf onyyli 1 etlkkahappo

Noudatettiin esimerkin 24 vaiheen 5 menetelmää sillä erotuksella, että käytettiin hiilihappoesteriä, (saanto 63 %) valkoinen amorfinen kiintoaine, sp. 121 - 136°C; IR (kalvo) 1713 - 1664, 1317 ja 1116 cm-1; NMR (CDC13) 6: 1,46 - 2,01 (17H, m), 2,94 (2H, d, J 6 Hz), 3,17 - 3,44 (4H, m), 3,92 (2H, lev.) 4,63 (1H, m), 4,80 (1H, lev. s), 5,32 (2H, lev.), 6,95 - 7,25 (9H, m), 7,31 (1H, d, J 8 :· Hz), 7,54 (1H, d, J 8 HZ), 8,46 (1H, lev. s); MS m/e 658 (FAB) (100); anal. (C34H4]N3O7S-0,lH2O) , C, H, N, S.

) « ,01 106197

Esimerkki 26 TR-fR*,S*) Τ^β-Γ r3-(lH-indol-3-vvli)-2-metyyli-l-okso-2-Γ Γ(trisyklor3.3.1«13#71dek-2-vvlioksi)karbonwli1amino1-propyyli1amino1-4-1odi-bentseenibutaanihappo (S)-2-t-butyylioksikarbonyyliamino-3-(4-j odifenyyli)pro-pionihappo (0,79 g, 2,0 mmoolia) liuotettiin vedettömään THPrään (10 ml) typen atmosfäärissä ja sitten lisättiin N-metyylimorfoliinia (0,20 g, 2,0 mmoolia). Seos jäähdytettiin jää/suolalla ja sitten lisättiin tipoittain isobutyy-likloroformiaattia (0,27 g, 2,0 mmoolia). Sekoitettiin 20 minuutin ajan ja sitten seos suodatettiin ja sakka pestiin THPrllä. Jäähdytettyyn suodokseen lisättiin yhtenä annoksena liuos, jossa oli diatsometaania (n. 7 mmoolia) Et20:ssa ja liuosta sekoitettiin yön ajan. Sitten se haihdutettiin kuiviin, jäännös liuotettiin EtOAc:hen ja pestiin vedellä, 10%:isella sitruunahappo-liuoksella, kyllästetyllä NaHCt^-liuoksella ja vedellä. Kuivatettiin MgS04:n päällä ja sitten liuottimet haihdutettiin ja jäännös kiteytettiin uudelleen EtOAcrstä, jolloin saatiin otsikkoyh-diste vaaleankeltaisina kiteinä (0,43 g, 52 %), sp. 119 -122°C; IR (kalvo) 2114 cm"1; NMR (CDCl3) 5: 1,41 (9H, s), 2,85 - 3,05 (2H, m), 4,30 - 4,50 (1H, m), 5,00 - 5,10 (1H, m), 5,20 - 5,30 (1H, S), 6,93 (2H, d, J 8 Hz), 7,62 (2H, d, J 8 Hz); anal. (C15H18IN3°3)' C' H' N·

Vaihe 2

Vaiheessa 1 saatu diatsoketoni (1,07 g, 2,58 mmoolia) sus-pendoitiin 2-(trimetyylisilyyli)-etanoliin ja sitten lisättiin tipoittain liuos, jossa oli hopeabentsoaattia “ (0,10 g) trietyyliamiinissa (1 ml). Typen kehittymisen päätyttyä lisättiin lisää hopeabentsoaattia (0,01 g) trietyyliamiinissa (0,10 ml). Sekoitettiin 15 minuutin ajan ja sitten seos laimennettiin EtOAc:llä, käsiteltiin hiilellä ja suodatettiin. Liuos pestiin IM NaHCOg-liuoksella, > « Λ · — 102 106197 vedellä, IM kloorivetyhapolla, vedellä, IM NaHCOj-liuok-sella ja vedellä. Orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös puhdistettiin pikakromatografiällä (flash chromatography) käyttämällä eluenttina 20 % EtOAc:tä/n-heksaania, jolloin saatiin vaaleankeltainen öljy (0,80 g, 61 %); NMR 6: 0,05 (9H, S), 0,95 - 1,00 (2H, m), 1,40 (9H, S), 2,40 (1H, dd, J 6, 16 Hz), 2,47 (1H, dd, J, 6, 16 Hz), 2,76 (1H, dd, J, 7, 14 Hz), 2,80 - 2,95 (1H, m), 4,05 - 4,20 (3H, m), 5,00 - 5,10 (1H, lev. d), 6,94 (2H, d, J 8 Hz), 7,61 (2H, d, J 8 Hz); anal. (C20H32lNO4Si), C, H, N.

Vaihe 3

Liuokseen, jossa oli vaiheen 2 (S)-trimetyylisilyylietyy-li-3-t-butyylioksikarbonyyliamino-4- (4-jodifenyyli)buty-raattia (0,75 g, 1,5 mmoolia) CH2Cl2:ssa (10 ml), lisättiin trifluorietikkahappoa (0,6 ml, 7,8 mmoolia). Sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön ajan ja sitten liuos pestiin kyllästetyllä NaHCOg-liuoksella ja vedellä. Kuivatettiin MgS04:n päällä ja sitten liuos suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin haluttu amiini öljynä (0,60 g, 99 %); NMR (CDClg) 6: 0,04 (9H, s), 0,95 - 1,00 (2H, m), 2,29 (1H, dd, J 6, 16 Hz), 2,45 (1H, dd, J 4, 16 Hz), 2,55 (1H, dd, J 8, 13 Hz), 2,71 (1H, dd, J 6, 13 Hz), 3,45 - 3,50 (1H, m), 4,15 - 4,20 (2H, m), 6,96 (2H, d, J 8 Hz), 7,63 (2H, d, J 8 Hz); anal. (C15H24IN02Si), C, H, N.

Vaihe 4 . a-metyyli-N-[(trisyklo[3. 3.1.13'7]dek-2-yylioksiJkarbonyy- li]-R-tryptofaania (0,55 g, 1,4 mmoolia) sekoitettiin EtOAcrssä (20 ml) typen atmosfäärissä. Sitten lisättiin l-hydroksibentsotriatsoli-hydraattia (0,21 g, 1,4 mmoolia) ja sitten N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidiä. Sekoitettiin 2 tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten seos suoda- 103 1 06 1 97 tettiin ja suodokseen lisättiin liuos, jossa oli vaiheen 3 (S)-trimetyylisilyylietyyli-3-amino-4-(4-j odifenyyli)-bu-tyraattia (0,60 g, 1,5 mmoolia) EtOAcrssä (10 ml). Sekoitettiin 16 tunnin ajan ja sitten seos konsentroitiin tyhjössä ja jäännös puhdistettiin pikakromatografiällä käyttämällä eluenttina 30 % EtOAc:tä/n-heksaania. Tuote kiteytettiin kahdesti uudelleen EtOAc/n-heksaanista, jolloin saatiin haluttu amidi värittöminä kiteinä (0,4 g, 36 %), sp. 98 - 103eC; NMR (CDCI3) 6: 0,02 (9H, s), 0,90 - 1,00 (2H, m), 1,45 - 2,05 (17H, m), 2,32 (2H, d, J 5 Hz), 2,62 (1H, dd, J 8 Hz), 2,75 (1H, dd, J 7, 14 Hz), 3,30 (1H, d, J 15 HZ), 3,45 (1H, d, J 15 Hz), 4,03 - 4,16 (2H, m), 4,30 - 4,45 (1H, m), 4,78 (1H, S), 5,11 (1H, S), 6,87 (2H, d, J 9 Hz), 6,90 (1H, d, J 3 Hz), 7,07 (1H, d, J 7 Hz), 7,09 (1H, t, J 7 Hz), 7,15 (1H, t, J 8 Hz), 7,32 (1H, d, J 8 HZ), 7,54 (2H, d, J 8 Hz), 7,58 (1H, d, J 8 Hz), 8,06 (1H, S) .

Vaihe 5 Jäällä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli vaiheessa 4 saatua esteriä (0,30 g, 0,38 mmoolia) THFrssä (25 -ml), lisättiin typen atmosfäärissä tipoittain liuos, jossa oli tet-rabutyyliammoniumfluoridia (1,0 M THFrssä, 1,0 ml, 1,0 mmoolia). Sekoitettiin tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten reaktioseos konsentroitiin tyhjössä. Jäännös otettiin EtOAcrhen ja pestiin 10%:isella sitruunahappo-liuoksella ja sitten suolavedellä. Orgaaninen liuos kuivatettiin MgSO^rn päällä ja konsentroitiin tyhjössä, jäännös otettiin MeOHrhon ja sitten lisättiin vettä, jolloin saatiin otsikkoyhdiste värittömänä kiintoaineena (0,12 g, 59 %), sp. 104 - 109eC; NMR (dg-DMSO) δ: 1,21 (3H, s), 1,45 - 1,60 (2H, m), 1,70 - 2,05 (12H, m), 2,30 - 2,50 (2H, m), 2,65 - 2,85 (2H, m), 3,14 (1H, d, J 15 Hz), 3,37 (1H, d, J 15 Hz), 4,20 - 4,'35 (1H, m), 4,69 (1H, s), 6,73 (1H, lev. S), 6,90 - 7,20 (5H, m), 7,33 (1H, d, J 8 Hz), 7,48 (1H, • » t ,04 106197 d, J 8 Hz), 7,61 (2H, d, J 8 Hz), 7,65 (1H, d, J 9 Hz), 10,90 (1H, s’)·, 12,25 (1H, lev. s); anal. (C33H38IN305), C, H, N.

Esimerkki 27 fR-(R*,R*)1-Γ 2-Γ Γ 3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-Γf(trisyklo Γ3.3.1.13'7]dek-2-yylioksl)karbonyyli1amino1-propyyli1amino1-1-fenyylietoksi1etikkahappo

Vaihe l

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli (R)-2-kloori-l-fenyyli-etanolia (3,56 g, 22,89 mmoolia) vedettömässä DMFissä (40 ml), lisättiin yhtenä annoksena natriumatsidia (1,64 g, 25,18 mmoolia). Annettiin seistä 8 tunnin ajan 100eC:ssa ja sitten seos kaadettiin jään päälle ja uutettiin Et20:lla (3 x 100 ml). Yhdistetyt Et20-uutteet pestiin vedellä (3 x 50 ml), kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin kromatografoimalla piihappogeelillä käyttämällä eluenttina CH2Cl2:ta, jolloin saatiin haluttu atsidi (3,10 g, 85 %) värittömänä öljynä; IR (kalvo) 3413 ja 2107 cm-1; NMR (CDC13) 6; 2,86 81H, d, J 3,0 Hz), 3,32 - 3,44 (2H, m), 4,75 - 4,80 (1H, m), 7,26 - 7,37 (5H, m); anal. (C8H9N30), C, H, N.

Vaihe 2

Suspensioon, jossa oli 60 % NaH:ta (149 mg, 3,71 mmoolia) vedettömässä THFrssä (3 ml) lisättiin 0eC:ssa ja N2-atmos-·* fäärissä tetrametyylietyleenidiamiinia (0,90 ml, 5,94 mmoolia) ja sitten 3 minuutin kuluessa liuos, jossa oli vaiheen 1 (R)-2-atsido-l-fenyylietanolia (485 mg, 2,97 mmoolia) vedettömässä THF:ssä (3 ml). Kylmää liuosta sekoitettiin 1,5 tunnin ajan ja sitten lisättiin tipoittain liuos, jossa oli metyylijodiasetaattia (742 mg, 3,71 mmoo- • - 105 106197

lia) vedettömässä THPtssä (3 ml). Annettiin seistä 24 tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten liuos laimennettiin Et20:lla (25 ml) ja pestiin 5%:isella sitruunahappo-liuoksella (2 x 25 ml) ja suolavedellä (25 ml). Et20-ker-ros kuivatettiin (MgS04), suodatettiin ja liuottimet poistettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin kromatografoimalla piihappogeelillä käyttämällä eluenttina CH2Cl2:ta, jolloin saatiin haluttu eetteri (257 mg, 37 %) valkoisena vahamai-sena kiintoaineena, sp. 37 - 41eC; IR (kalvo) 2105 ja 1757 cm-1; NMR (CDC13) 5: 3,29 (1H, dd, J 3,9, 12,9 Hz), 3,60 (1H, dd, J 8,1, 12,9 Hz), 3,74 (3H, s), 3,95 (1H, d, J

16.1 Hz), 4,12 (1H, d, J 16,4 Hz), 4,67 (1H, dd, J 4,0, 8.1 Hz), 7,32 - 7,42 (5H, m); anal. (C11H13N303), C, H, N.

Vaihe 3

Liuos, jossa oli vaiheen 2 atsidoesteriä (247 mg, 1,05 mmoolia) ja 10M HCl-liuosta (0,53 ml, 5,3 mmoolia) absoluuttisessa EtOH:ssa (50 ml), pelkistettiin 10%:isella Pd/C:llä (25 mg) 40eC:ssa H2:n atmosfäärissä 45 psirssä 5 tunnin kuluessa. Katalysaattori suodatettiin pois ja liuotin poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin amiinihydroklo-ridi (287 mg), joka käytettiin ilman lisäpuhdistusta seu-raavassa vaiheessa; IR (kalvo) 1738 cm-1.

* Vaihe 4

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli a-metyyli-N-[(trisyklo- [3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-R-tryptofaania (333 mg, 0,84 mmoolia) ja l-hydroksibentsotriatsoli-hydraattia (161 mg, 1,05 mmoolia) EtOAc:ssä (30 ml), lisättiin N,N‘-!!. disykloheksyylikarbodi-imidiä (191 mg, 0,92 mmoolia). An nettiin seistä tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten lisättiin trietyyliamiinia (0,174 ml, 1,25 mmoolia) ja sitten tipoittain liuos, jossa oli vaiheen 3 amiinihydro-kloridia (272 mg, 1,05 mmoolia) EtOAc:ssä (10 ml). 24 tun- 106 106197 nin kuluttua reaktloseos suodatettiin ja EtOAc pestiin 5%:isella sitruunahappo-liuoksella (2 x 25 ml), kyllästetyllä NaHC03-liuoksella (2 x 25 ml), 5%:isella sitruuna-happo-liuoksella (25 ml) ja suolavedellä (25 ml). EtOAc-uute kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin kromatografoi-malla piihapolla käyttämällä eluenttina 30 % EtOAc:tä/n-heksaania ja sitten 70 % EtOAc:tä/n-heksaania, jolloin saatiin haluttu amidi valkoisena kiintoaineena (200 mg, 40 %), sp. 74 - 81eC; IR (kalvo) 1743, 1705 ja 1659 cm-1; NMR (CDCI3) δ: 1,26 (3H, t, J 7,2 Hz), 1,48 - 2,04 (17H, m), 3,17 - 3,26 (1H, m), 3,48 - 3,60 (2H, m), 3,61 - 3,68 (1H, m), 3,81 (1H, d, J 16,8 Hz), 4,07 (1H, d, J 17,0 Hz), 4,15 - 4,32 (3H, m), 4,84 (1H, S), 5,60 (1H, lev. s), 7,03 - 7,42 (10H, m), 7,68 (1H, d, J 7,8 Hz), 8,14 (1H, s); anal.

(C35H43N3°6)' C' H' N* vaihe 5

Sekoitettuiin liuokseen, jossa oli vaiheen 4 esteriä (178 mg, 0,30 mmoolia) EtOHrssa (10 ml), lisättiin 0eC:ssa tipoittaan 1,OM NaOH-liuosta (0,33 ml, 0,33 mmoolia). Jäähdytettyä liuosta sekoitettiin 2,5 tunnin ajan ja sitten huoneen lämpötilassa 21 tunnin ajan. Lisättiin 1,0M HC1-liuosta (0,36 ml, 0,36 mmoolia) ja sitten liuottimet pois-* tettiin tyhjössä. Jäännös liuotettiin EtOAc:hen (25 ml) ja pestiin suolavedellä (25 ml). EtOAc-uute kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin käänteisfaasikromatografiällä piihapolla käyttämällä eluenttina 67 % MeOH:ta/33 % . H20:ta, sitten 75 % MeOH:ta/25 % H20:ta, jolloin saatiin happo valkoisena kiintoaineena (67 mg, 39 %), sp. 198 -212°C; IR (kalvo) 1700 ja 1649 cm-1; NMR (CDCI3) δ: 1,54 - 2,01 (17H, m), 3,13 - 3,17 (1H, m), 3,21 - 3,55 (3H, m), 3,70 - 3,75 (1H, m), 3,95 (1H, dd, J 16,6 Hz), 4,12 (1H, m), 4,18 (1H, lev. s), 7,01 - 7,63 (10H, m); anal. (c33H3gN3°6·0,5Η2ο), C, H, N.

107 106197

Esimerkki 28 Γ Γ3—f Γ 3—(lH-^indol—3—yyli)—2—metyyli—1—okso—2—f Γ (trisyklo-Γ3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli1amino Ίpropyyli1amino 1 -l-okso-2-fenyylipropyyli1amino1etikkahappo (TRP-kes-kus on R, toinen keskus on RS)

Vaihe 1

Liuos, jossa oli RS-etyylifenyylisyanoasetaattia (5,0 g, 26,43 mmoolia) ja 10M HClrää (13,2 ml, 132 mmoolia) EtOH:ssa (200 ml), pelkistettiin 10%:isella Pd/C:llä 30°C:ssa H2:n atmosfäärissä 45 psi:ssä 18 tunnin kuluessa. Katalysaattori suodatettiin pois ja liuotin poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin kiinteä jäännös. Uudelleenkitey-tys EtOH:n ja Et20:n seoksta (1:3, 100 ml) tuotti amiinin (4,90 g, 81 %) valkoisina prismoina, sp. 158 - 160eC (Et0H:Et20); NMR (d4-MeOH) 6: 1,22 (3H, t, J 7,1 Hz), 3,22 (1H, dd, J 6,0, 12,9 Hz), 3,55 (1H, dd, J 8,9, 12,9 Hz), 4,09 - 4,28 (3H, m), 7,28 - 7,43 (5H, m); anal.

(CllH16ClN02*0'1H2°)' C' H' N*

Vaihe 2

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli a-metyyli-N-[(trisyklo-[ 3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-R-tryptofaania (397 : : mg, 1,0 mmoolia) ja 1-hydroksibentsotriatsoli-hydraattia (191 mg, 1,25 mmoolia) EtOAc:ssä (40 ml), lisättiin N,N’-disykloheksyylikarbodi-imidiä (227 mg, 1,10 mmoolia). Tunnin kuluttua lisättiin vaiheen 1 aminoesterihydrokloridi (253 mg, 1,10 mmoolia) ja sitten tipoittain liuos, jossa oli trietyyliamiinia (0,153 ml, 1,10 mmoolia) EtOAc:ssä (5 *· ml). Sekoitettiin huoneen lämpötilassa 20 tunnin ajan, sitten seos suodatettiin ja EtOAc-liuos pestiin 5%:isella sitruunahappo-liuoksella (2 x 25 ml), kyllästetyllä NaHC03-liuoksella (2 x 25 ml), 5%:isella sitruunahappo-liuoksella (25 ml) ja suolavedellä (25 ml). EtOAc-uute kuivatettiin 108 106197

MgS04:n päällä ja sitten liuotin poistettiin tyhjössä.

- Jäännös puhdistettiin kromatografoimalla piihapolla käyt tämällä eluenttina 1 % MeOH:ta/99 % CH2Cl2:ta, jolloin saatiin haluttu amidi (361 mg, 63 %) valkoisena kiintoaineena, sp. 68 - 77eC; IR (kalvo) 1719 ja 1661 cm-1; NMR (CDC13) 6: 1,17 (3H, t, J 7,1 Hz), 1,47 - 1,99 (17H, m), 3,24 - 3,44 (2H, m), 3,61 - 3,90 (3H, m), 4,05 - 4,14 (2H, m), 4,80 (1H, lev. s), 5,05 - 5,20 (1H, m), 6,50 - 6,70 (1H, m), 6,92 - 7,59 (10H, m), 8,16 - 8,18 (1H, m); anal. (c34H41N3°5·0,25H2°)> C, H, N.

Valhe 3

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli vaiheen 2 esteriä (1,28 g, 2,23 mmoolia) THF:ssä (130 ml), lisättiin OeC:ssa ti-poittain 75 minuutin kuluessa 0,1M LiOH-liuos (24,6 ml, 2,46 mmoolia). Tätä jäähdytettyä liuosta sekoitettiin 27 tunnin ajan lämmittäen asteittain huoneen lämpötilaan. Sitten lisättiin 1,0M HCl-liuosta (2,7 ml, 2,7 mmoolia) ja THF poistettiin tyhjössä. Jäännös uutettiin EtOAc:llä (2 x 50 ml) ja yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin suolavedellä (1 x 50 ml). EtOAc-kerros kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin käänteisfaasikromatografialla piihapolla käyttämällä eluenttina 67 % MeOH:ta/33 % H20:ta, jolloin * saatiin haluttu happo 2 diastereoisomeerin seoksena ja valkoisena kiintoaineena, sp. 179 - 188eC; IR (kalvo) 1700, 1657 cm-1; NMR (d4-MeOH) δ: 1,31 ja 1,33 (3H, 2 s), 1,54 - 2,03 (14H, m), 3,18 - 3,81 (5H, m), 4,75 (1H, lev. s), 6,94 - 7,50 (10H, m); anal. (C32H37N305·l,0H2O), C, H, N.

• ·

Vaihe 4

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli vaiheen 3 happoa (272 mg, 0,50 mmoolia) ja 1-hydroksibentsotriatsoli-hydraattia 106197 109 (96 mg, 0,63 mmoolia) EtOAc:ssä (30 ml), lisättiin N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidiä (124 mg, 0,60 mmoolia). Annettiin seistä tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten lisättiin glysiinibentsyyliesterihydrokloridia (151 mg, 0,75 mmoolia) ja sitten trietyyliamiinia (0,112 ml, 0,80 mmoolia). Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 24 tunnin ajan ja sitten se suodatettiin. EtOAc-liuos pestiin 5%:isella sitruunahappo-liuoksella (2 x 25 ml), kyllästetyllä NaHC03-liuoksella (2 x 25 ml), 5%:isella sitruunahappo-liuoksella (25 ml) ja suolavedellä (25 ml). EtOAc-liuos kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin kromatografoi-malla piihapolla käyttämällä eluenttina 50 % EtOAc:tä/50 % n-heksaania, jolloin saatiin haluttu amidi valkoisena kiintoaineena ja 2 diastereoisomeerin seoksena (222 mg, 64 %), sp. 86 - 95eC; IR (kalvo) 1742, 1710 ja 1661 cm-1; NMR (CDC13) 6: 1,49 - 2,03 (17H, m), 3,22 - 3,53 (4H, m), 3,68 - 3,80 (2H, m), 3,94 - 4,13 (1H, m), 4,80 (1H, m), 5,06 - 5,40 (3H, m), 5,74 - 5,78 (1H, m), 6,78 - 7,39 (10H, m), 7,57 ja 7,65 (1H, 2d, J 8 Hz), 8,06 ja 8,22 (1H, 2s); anal. (C41H46N4O6«0,25H2O), C, H, N.

Vaihe 5

Liuos, jossa oli vaiheen 4 bentsyyliesteriä (145 mg, 0,21 ’ mmoolia) absoluuttisessa EtOH:ssa (50 ml), pelkistettiin

Pd(OH)2/C:llä (15 mg) 40eC:ssa H2:n atmosfäärissä 45 psi:ssä 6 tunnin kuluessa. Katalysaattori suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin vaahto. Puhdistettiin käänteisfaasikromatografialla piihapolla käyttämällä 67 % MeOH:ta/33 % H20:ta ja sitten 75 % MeOH:ta/25 « ♦ * % H20:ta, jolloin saatiin tuote valkoisena kiintoaineena ja 2 diastereoisomeerin seoksena (62 mg, 49 %), sp. 122 -131 eC; IR (kalvo) 1700 ja 1661 cm"1; NMR (d6-DMSO) δ: 1,22 - 1,97 (17H, m), 3,17 - 3,67 (6H, m), 3,90 (1H, dd, J 7,5, 15,1 HZ), 4,71 (1H, lev. s), 6,61 - 6,65 (1H, m), 6,92 - 110 106197 7,08 (3H, m), 7,24 - 7,48 (7H, m), 7,62 ja 7,81 (1H, 2 lev. s), 8,29 - 8,36 (1H, m), 10,88 (1H, s); anal.

(C34H40N4O6*°'75H2°)' C' H' N*

Esimerkki 29 (R)-r ΓΓ2-Γ r3-(lH-indol-3-yyli)-l-okso-2-metvvli-2-ff(tri-syklo Γ3.3.1.13'7!dek-2-yylioksi)karbonyyll1amino1propyy-111 amino T~1-fenyylietylideenl Ί amino 1 oksi 1 etikkahappo

Vaihe l

Sekoitettuun suspensioon, jossa oli a-aminoasetofenoni-hydrokloridia (6,60 g, 38,5 mmoolia) vedettömässä THFrssä (100 ml), lisättiin 0eC:ssa 2-(trimetyylisilyyli)etyyli-kloroformiaattia (7,0 g, 38,5 mmoolia) ja sitten liuos, jossa oli trietyyliamiinia (7,78 g, 76,9 mmoolia) THF:ssä (30 ml). Reaktio päättyi 10 tunnin kuluttua ohutkerroskro-matografia-analyysin mukaisesti. Reaktioseos suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin kromatografoimalla piihapolla käyttämällä 25 % EtOAc/n-heksaania, jolloin saatiin haluttu uretaani (5,62 g, 53 %) keltaisena kiteisenä kiintoaineena; IR (kalvo) 1692 cm-1; NMR (CDC13) 6: 0,05 (9H, s), 1,19 (2H, t, J 7 Hz), 4,16 (2H, t, J 4 HZ), 4,64 (2H, d, J 4 Hz), 5,72 (1H, lev. S), 7,42 (2H, t, J 7 HZ), 7,52 - 7,57 (1H, m), 7,90 (2H, d, J : : 7 Hz) .

Vaihe 2

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli vaiheen 1 ketonia (5,62 g, 20,1 mmoolia) absoluuttisessa EtOHissa (50 ml), lisät-• tiin liuos, jossa oli hydroksyyliamiinihydrokloridia (2,31 g, 33,2 mmoolia) ja natriumasetaattia (3,30 g, 40,2 mmoolia) vedessä (25 ml). Reaktioseosta kuumennettiin palautus jSähdyttSen ja reaktio päättyi 18 tunnin kuluttua ohut-kerroskromatografia-analyysin mukaisesti. Reaktio jäähdy- 111 106197 tettiin huoneen lämpötilaan ja liuotin poistettiin tyhjössä. Orgaaninen materiaali uutettiin EtOAc:llä (2 x 100 ml), pestiin vedellä (2 x 50 ml) ja kuivatettiin MgS04:1-lä. Liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin kromatografoimalla piihapolla käyttämällä 25 % EtOAc:tä/n-heksaania, sitten 50 % EtOAc:tä/n-heksaania, jolloin saatiin oksiimi (3,01 g, 51 %) vaaleankeltaisena kiteisenä kiintoaineena, sp. 61 - 65eC; IR (kalvo) 1692 cm“*; NMR (CDC13) 6: 0,02 (9H, S), 1,23 - 1,28 (2H, t, J 7 Hz), 4,16 (2H, t, J 8 Hz), 4,45 (2H, d, J 6 Hz), 5,37 (1H, lev. s), 7.38 (3H, t, J 3 Hz), 7,74 (2H, lev. s), 8,30 (1H, lev. s).

Vaihe 3

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli vaiheen 2 oksiimia (1,85 g, 6,3 mmoolia) tolueenissa (30 ml), lisättiin tetrabutyy-liammoniumbromidia (0,37 g, 1,1 mmoolia) ja metyyli-2-bro-mi-asetaattia (1,93 g, 12,6 mmoolia). Tähän reaktioseok-seen lisättiin tipoittain NaOH-liuosta (5 ml, 10 % w/w). Reaktio päättyi 4 tunnin kuluttua ohutkerroskromatografia-analyysin mukaisesti. Reaktioseos laimennettiin Et20:lla (50 ml), orgaaninen kerros pestiin vedellä, kuivatettiin MgS04:llä ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin kromatografoimalla piihapolla käyttämällä eluent-’ tina 25 % EtOAc:tä/n-heksaania, sitten 50 % EtOAc:tä/n- heksaania, jolloin saatiin haluttu oksiimieetteri (1,02 g, 49 %) vaaleankeltaisena öljynä. Tämä varastoitiin typen atmosfäärissä jääkaapissa sen myöhempää käyttöä varten; IR (kalvo) 1751, 1717 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 0,03 (9H, s), 0,99 - 1,02 (2H, m), 3,79 (3H, s), 4,16 - 4,22 (2H, m), 4,45 (2H, d, J 6 Hz), 4,81 (2H, s), 6,05 (1H, lev. s), 7,36 - 7.39 (3H, m), 7,75 - 7,77 (2H, m).

Vaihe 4 106197

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli vaiheen 3 esteriä (1,00 g, 2,7 mmoolia) asetonitriilissä (50 ml), lisättiin typen atmosfäärissä IM tetrabutyyliammoniumfluoridi-liuosta THF:ssä (2 ml, 6,9 mmoolia). Reaktio päättyi 70 tunnin kuluttua ohutkerroskromatografia-analyysin mukaisesti. Liuotin poistettiin tyhjössä, jäännös uutettiin EtOAcrllä (2 x 50 ml), pestiin kyllästetyllä NaHCOj-liuoksella, vedellä ja kuivatettiin MgS04:n päällä. Liuotin poistettiin tyhjössä ja jäännös puhdistettiin kromatografoimalla piiha-polla käyttämällä eluenttina 5 % MeOH:ta/CH2Cl2:ta, jolloin saatiin amiini (0,265 g, 44 %) keltaisena öljynä; IR (kalvo) 1757 cm”1; NMR (CDCl3) δ: 1,67 (2H, lev. s), 3,77 (3H, S), 3,92 (2H, lev. S), 4,78 (2H, S), 7,37 - 7,40 (3H, m), 7,61 - 7,64 (2H, m).

Valhe 5

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli a-metyyli-N-[(trisyklo-[ 3.3.1.13'7 ]dek-2-yylioksi )karbonyyli]-R-tryptofaania (446 mg, 1,13 mmoolia) EtOAc:ssä (20 ml), lisättiin 1-hydroksi-bentsotriatsoli-hydraattia (189 mg, 1,23 mmoolia) ja sitten liuos, jossa oli N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidiä (278 mg, 1,35 mmoolia) EtOAcrssä (5 ml). Seosta sekoitettiin tunnin ajan, minkä jälkeen lisättiin vaiheen 4 amiini (250 mg, 1,13 mmoolia) EtOAcissä (10 ml). Tätä seosta sekoitettiin 24 tunnin ajan, sitten se suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin kromatografoimalla käyttämällä 25 % EtOAc:tä/n-heksaania, sitten . 50 % EtOAc:tä/n-heksaania. Tämä tuotti halutun amidin (379 ·> mg, 56 %) valkoisena vaahtona; NMR (CDCI3) δ; 1,47 - 1,96 (17H, m), 3,46 (2H, lev. S), 3,72 (3H, S), 4,53 (2H, d, J 5 Hz), 4,75 (2H, S), 4,81 (1H, lev. S), 6,58 (1H, lev. s), 6,87 - 7,72 (12H, m), 7,90 (1H, lev. s).

Vaihe 6 113 106197

Liuokseen, jossa oli vaiheen 5 metyyliesteriä (100 mg, 0,17 mmoolia) THFrssä (8 ml), lisättiin -15eC:ssa 0,1M LiOHrta (1,75 ml, 0,175 mmoolia) tipoittain tunnin kuluessa. Muodostuneen liuoksen annettiin lämmetä hitaasti huoneen lämpötilaan 10 tunnin kuluessa. Reaktioseos tehtiin happamaksi IM HCl:llä pH-arvoon 4 ja liuotin poistettiin tyhjössä. Orgaaninen jäännös uutettiin EtOAc:llä (2 x 20 ml), pestiin vedellä, kuivatettiin MgS04:n päällä ja suodatettiin. Liuotin poistettiin sitten tyhjössä. Raakatuote puhdistettiin käänteisfaasikromatografialla käyttämällä eluenttina MeOH:n ja H20:n 2,5:l-seosta. Tämä tuotti halutun hapon (55 mg, 56 %) valkoisena vaahtona, sp. 138 -142*C; IR (kalvo) 1726, 1703 cm"1; NMR (dg-DMSO) 6: 1,08 (3H, lev. S), 1,47 - 1,90 (14H, m), 3,16 (2H, S), 4,43 (2H, d, J 4 Hz), 4,64 (1H, lev. s), 4,70 (2H, lev. s), 6,56 (1H, lev. s), 6,87 - 7,54 (10H, m), 8,04 (1H, lev. s), 10,8 (1H, lev. s); anal. (C33H38N406), C, H, N.

Esimerkki 30 TR-(R*,S*)1-β-Γ Γ 3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-ΓΓ(trisyklo Γ3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli1amino1-propyyli1amino1bentseenibutaanihappo • «

Vaihe l

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli N-t-butyylioksikarbonyy-li-S-fenyylialaniinia (7,12 g, 26,8 mmoolia) ja N-metyyli-morfoliinia (3,0 ml, 26,8 mmoolia) vedettömässä THFrssä (30 ml), lisättiin -10eC:ssa tipoittain isobutyyli-kloro- • · formiaattia (3,4 ml, 26,8 mmoolia). 20 minuutin kuluttua N-metyyli-morfoliini-hydrokloridi suodatettiin pois ja suodokseen lisättiin -10eC:ssa yhtenä annoksena liuos, jossa oli diatsometaahia (33,4 ml) Et20:ssa (50 ml). Jäähdytettyä liuosta sekoitettiin 30 minuutin ajan ja sitten 106197 16 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Liuottimet poistettiin tyhjössä ja jäännös liuotettiin EtOAc:hen (50 ml) ja pestiin vedellä (2 x 25 ml), 5%:isella sitruunahappo-liuoksella (2 x 25 ml), IM NaHCOjilla (25 ml) ja suolavedellä (25 ml). EtOAc-liuos kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin diatsoketoni vaaleankeltaisena kiintoaineena (7,04 g, 90 %); IR (kalvo) 2109, 1709 ja 1641 cm-1; NMR (CDC13) δ: 1,41 (9H, s), 3,02 (2H, d, J 6,8 Hz), 4,40 (1H, lev. s), 5,08 - 5,21 (2H, m), 7,17 - 7,33 (5H, m).

Vaihe 2

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli vaiheen 1 2-okso-3-(t-butyy1ioksikarbonyy1iamino)-3-fenyylipropanolia (7,04 g, 24,0 mmoolia) MeOHrssa (70 ml), lisättiin 7 ml liuosta, jossa oli hopea-(I)-bentsoaattia (1,37 g, 6,0 mmoolia) trietyyliamiinissa (14 ml), jolloin alkoi muodostua kaasua. Kun typen kehittyminen oli päättynyt, lisättiin toinen annos hopea-(I)-bentsoaattia (0,28 ml) ja muodostunutta ruskeaksi värjäytynyttä liuosta sekoitettiin 15 minuutin ajan. Tämän jälkeen liuos käsiteltiin hiilellä, suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä jäännökseksi, joka liuotettiin EtOAcrhen (50 ml). Keltainen EtOAc-liuos pestiin vedellä (2 x 25 ml), IM NaHC03:lla (2 x 25 ml), IM HCl:llä (2 x 25 ml), IM NaHCOgilla (25 ml) ja suolavedellä (25 ml). EtOAc-liuos kuivatettiin (MgS04), suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin metyylieste-ri öljynä (5,27, 75 %); IR (kalvo) 1741 ja 1713 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,40 (9H, S), 2,40 - 2,55 (2H, m), 2,77 - 2,95 : (2H, m), 3,67 (3H, S), 4,08 - 4,17 (1H, m), 4,97 (1H, lev.

s), 7,11 - 7,31 (5H, m).

> « ns 106197

Valhe 3

Sekoitettuiin liuokseen, jossa oli vaiheen 2 metyyli-3-(t-butyylioksikarbonyyliamino)-4-fenyylibutyraattia (4,16 g, 14,19 mmoolia) CH2Cl2:ssa (10 ml)/ lisättiin trifluori-etikkahappoa (10 ml). Sekoitettiin tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten liuottimet poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin haluttu amiini öljynä, joka käytettiin ilman lisäpuhdistusta seuraavassa vaiheessa.

Valhe 4

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli a-metyyli-N-[(trisyklo-[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-R-tryptofaania (4,5 g, 11,35 mmoolia) ja 1-hydroksibentsotriatsoli-hydraattia (1,92 g, 12,54 mmoolia) EtOAczssä (100 ml), lisättiin huoneen lämpötilassa Ν,Ν'-disykloheksyylikarbodi-imidiä (2,93 g, 14,19 mmoolia). Tunnin kuluttua lisättiin 4-dimetyylia-minopyridiiniä (0,14 g, 1,14 mmoolia) ja sitten tipoittain liuos, jossa oli vaiheen 3 metyyli-3-amino-4-fenyylibuty-raatti-trifluorietikkahapposuolaa (4,36 g, 14,19 mmoolia) ja trietyyliamiinia (4,5 ml, 32,00 mmoolia) EtOAcissä (25 ml), ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 72 tunnin ajan. Sitten reaktioseos suodatettiin ja EtOAc-liuos pestiin 5%:isella sitruunahappo-liuoksella (2 x 25 ml), kyllästetyllä NaHC03-liuoksella (2 x 25 ml), 5%:isella sitruunahappo-liuoksella (50 ml) ja suolavedellä (50 ml). EtOAc-kerros kuivatettiin (MgS04), suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin kromatografoi-malla piihapolla käyttämällä eluenttina 1 % MeOH:ta/99 % CH2Cl2:ta, jolloin saatiin haluttu amidi (3,27 g, 50 %) valkoisena kiintoaineena, sp. 78 - 84eC; IR (kalvo) 1722 ja 1658 cm-1; NMR (CDCI3) 6: 1,45 (3H, S), 1,50 - 2,16 (14H, m), 2,40 (2H, d, J 5,1 Hz), 2,71 (1H, dd, J 7,9,

13.7 Hz), 2,84 (1H, dd, J 6,6, 13,7 Hz), 3,30 (1H, d, J

14.7 HZ), 3,47 (1H, d, J 14,7 Hz), 3,60 (3H, S), 4,42 - 116 106197 4,45 (1H, m), 4,81 (1H, S), 5,14 (1H, S), 6,89 - 7,28 (9H, m), 7,33 (1H, d, J 8,0 Hz), 7,59 (1H, d, J 7,8 Hz), 8,20 (1H, s); anal. (C34H41N3O5-0,25H2O), C, H, N.

Vaihe 5

Liuokseen, jossa oli vaiheen 4 metyyliesteriä (2,5 g, 4,37 mmoolia) THF:ssä (250 ml), lisättiin 0eC:ssa tipoittain 50 minuutin kuluessa LiOH:n 0,1M vesiliuos (48 ml, 4,80 mmoolia). Jäähdytetyn liuoksen annettiin hitaasti lämmetä huoneen lämpötilaan 2 tunnin kuluessa ja sitten sitä sekoitettiin tässä lämpötilassa vielä 20 tunnin ajan. Tämän jälkeen lisättiin IM HCl:ää (5,3 ml, 5,3 mmoolia) ja sitten liuos pestiin Et20:lla (2 x 100 ml), Et20-uute kuivatettiin (MgS04), suodatettiin ja liuottimet poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin happo valkoisena kiintoaineena (2,24 g, 92 %), sp. 123 - 137eC; IR (kalvo) 1708 ja 1658 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,51 - 2,00 (17H, m), 2,27 - 2,34 (2H, m), 2,70 (1H, dd, J 8,1, 13,5 Hz), 2,82 (1H, dd, J 6,3, 13,6 Hz), 3,23 (1H, d, J 14,7 Hz), 3,43 (1H, d, J

14,7 HZ), 4,42 (1H, m), 4,81 (1H, S), 5,41 (1H, lev. s), 6,87 - 7,31 (10H, m), 7,55 (1H, d, J 7,8 Hz), 8,50 (1H, s)ϊ anal. (C33^39^3^5 * 0,1H20), C, H, N.

Esimerkki 31 ; TR-(R*,S*)1-Ν-Γ3-Γ r3-(lH-lndol-3-vyli)-2-metyyli-l-okso-2- ΓΓ(trisyklof 3.3.1.13'71dek-2-yyljoksi)karbonyvlilpropvv-li1amino1-4-fenyylibutyyli1glysilni

Vaihe 1 • • Sekoitettuun liuokseen, jossa oli esimerkin 30 vaiheen 5 hap poa (291 mg, 0,52 mmoolia) ja 1-hydroksibentsotriatsoli-hyd-raattia (88 mg, 0,65 mmoolia) EtOAcrssä (30 ml), lisättiin N,N'-disykloheksyyiikarbodi-imidiä (129 mg, 0,62 mmoolia). Annettiin seistä tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten 1” 106197 lisättiin 4-dimetyyliaminopyridiiniä (6 mg, 0,05 mmoolia) ja sitten trietyyliamiinia (0,109 ml, 0,78 mmoolia) ja sitten glysiinietyyliesteri-hydrokloridia (109 mg, 0,78 mmoolia). Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 tunnin ajan ja sitten se suodatettiin. EtOAc-liuos pestiin 5%:isella sitruunahappo-liuoksella (2 x 25 ml), kyllästetyllä NaHCOg-liuoksella (2 x 25 ml), 5%:isella sitruunahappo-liuoksella (25 ml) ja suolavedellä (25 ml). EtOAc-liuos kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin kromatografoi-malla piihapolla käyttämällä eluenttina 2 % MeOH:ta/98 % CH2^2·^a' jolloin saatiin haluttu amidi valkoisena kiintoaineena (212 mg, 64 %), sp. 82 - 94eC; IR (kalvo) 1741, 1705 ja 1651 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,27 (3H, t, J 7 Hz), 1,37 (3H, s), 1,50 - 2,01 (14H, m), 2,30 (1H, dd, J 4,4, 14,0 Hz), 2,51 (1H, dd, J 3,9, 13,7 Hz), 2,70 - 2,85 (2H, m), 3,31 (2H, S), 3,75 (1H, dd, J 5,2, 17,8 Hz), 4,09 - 4,23 (3H, m), 4,39 - 4,48 (1H, m), 4,74 (1H, lev. S), 5,17 (1H, S), 6,73 (1H, m), 6,81 (1H, d, J 2,1 Hz), 7,06 - 7,28 (8H, m), 7,32 (1H, d, J 7,9 Hz), 7,57 (1H, d, J 7,8 Hz), 8,16 (1H, lev. s); anal. (C37H46N406), C, H, N.

Valhe 2 :* Sekoitettuun liuokseen, jossa oli vaiheen 1 etyyliesteriä (788 mg, 1,23 mmoolia) EtOH:ssa (75 ml), lisättiin 0eC:ssa NaOH-liuosta (13,5 ml 0,1M liuosta, 1,35 mmoolia) 10 minuutin kuluessa. Kylmää liuosta sekoitettiin antamalla sen asteittain lämmetä uudelleen huoneen lämpötilaan 5,5 tunnin kuluessa. EtOH poistettiin tyhjössä ja jäännökseen li-sättiin 5%:ista sitruunahappo-liuosta (25 ml). Vesiliuos uutettiin Et20:lla (2 x 25 ml), Et20-uute kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin haluttu happo valkoisena vaahtona (553 mg, 73 %), sp. 98 - 103eC; IR (kalvo) 1700 ja 1657 cm-1; NMR (CDCl3) 5: 1,37 - 1,98 (17H, m), 2,25 - 2,32 118 106197 (2H, m), 2,69 - 2,79 (2H, m), 3,20 (1H, d, J 14,6 Hz), 3,29 (1H, d, J 14,5 Hz), 3,76 (1H, dd, J 4,7, 18,1 Hz), 4,04 (1H, dd, J 5,8, 17,7 Hz), 4,36 - 4,40 (1H, m), 4,75 (1H, S), 5,37 (1H, lev. s), 6,83 - 7,19 (10H, m), 7,29 (1H, d, J 8,0 Hz), 7,53 (1H, d, J 7,8 Hz), 8,40 - 8,65 (1H, m); anal. (^35^42^4^6^^2^)' N*

Esimerkki 32 2— Γ Γ Γ 2— Γr3-(lH-lndol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-r Γ(tri-syklo Γ3.3.1.13'7!dek-2-yylloksi)karbonyyll1amino1propyy-li 1 amino 1 -1-fenyylietyyli 1 amino Ikarbonyyli 1 syklopropaani-karboksyylihappo (syklopropaani-renqas on trans-(i), muut keskukset ovat R)

Valhe 1

Liuos, jossa oli (R)-p-[l-(fenyylimetyyli)amino]bentseeni-etanolia (6,44 g, 23,8 mmoolia) vedettömässä CH2Cl2:ssa (50 ml), käsiteltiin trietyyliamiinilla (2,88 g, 28,5 mmoolia) ja sitten liuoksella, jossa oli p-tolueenisulfo-nyylikloridia (5,43 g, 28,5 mmoolia) C^C^issa (20 ml). Sekoitettiin 18 tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten reaktioseos pestiin IM sitruunahappo-liuoksella (2 x 50 ml) ja orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja liuotin haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin raaka, vaaleankeltainen kiintoaine (8,49 g), sp. 103 - 105,5eC (EtOAc/n-heksaani); IR (kalvo) 3410, 1703, 1361 ja 1190 cm-1; NMR (CDC13) 6: 2,42 (3H, s), 4,25 (2H, m), 4,98 (1H, lev. S), 5,07 (2H, s), 5,35 (1H, lev. S), 7,20 - 7,40 (12H, m), 7,65 (2H, d, J 8 Hz); anal. (C16H17N03), C, \\ H, N. Tämä raaka kiintoaine (7,57 g) liuotettiin vedettö mään DMF:ään (100 ml) ja käsiteltiin natriumatsidillä (1,21 g, 18,6 mmoolia), sitten sitä lämmitettiin 80eC:ssa 3 tunnin ajan, jäähdytettiin ja.kaadettiin jääveteen (200 ml). Tämä seos uutettiin Et20:lla (2 x 200 ml) ja sitten yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin H20:lla (200 ml), • · 106197 119 kuivatettiin MgS04:n päällä ja haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin keltainen öljy (4,95 g); IR (kalvo) 3300, 2130 ja 1697 cm"1; NMR (CDCl3) 6: 3,66 (2H, m), 4,95 (1H, m), 5,09 (1H, d, J 11 Hz), 5,12 (1H, d, J 11 Hz), 5,31 (1H, m), 7,25 - 7,45 (10H, m). Tämä raaka öljy (5 g) käsiteltiin EtOAc:ssä (100 ml) Lindlar-katalysaattorilla (2 g, 40 % w/w) ja laitettiin vedyn atmosfääriin 45 psi:ssä 30eC:ssa 6 tunnin ajaksi, sitten se suodatettiin suodatus-apuainen läpi, jolloin saatiin halutun amiini-(R)-0-[l-(fenyylimetyyli)amino]bentseenietanolin liuos, joka käytettiin välittömästi olettaen, että saanto oli kvantitatiivinen; IR (kalvo) 3300, 1703 cm-1.

Valhe 2

Liuos, jossa oli happoa, a-metyyli-N-[(trisyklo[3.3.1.-l3'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-R-tryptofaania (4,60 g, 11,6 mmoolia) EtOAc:ssä (30 ml), käsiteltiin 1-hydroksi-bentsotriatsoli-hydraatilla (1,96 g, 12,8 mmoolia) ja N,N1-disykloheksyylikarbodi-imidillä (2,87 g, 13,9 mmoolia) ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 tunnin ajan ja sitten lisättiin vaiheen 1 amiini (4,46 g, 16,9 mmoolia) EtOAc:ssä (10 ml). Sekoittamista jatkettiin vielä 18 tunnin ajan, sitten seos suodatettiin, konsentroitiin tyhjös-;* sä ja puhdistettiin piihappogeelikromatografiällä, jolloin saatiin haluttu uretaani valkoisena kiintoaineena (6,17 g, 56 %), sp. 69 - 73eC; [a]D*° +8,9° (c = 1, MeOH); IR (kalvo) 3350, 1700 ja 1662 cm"1; NMR (CDCI3) 6: 1,54 (5H, lev.), 1,60 - 1,95 (14H, m), 3,23 (1H, d, J 14 Hz), 3,35 (1H, m), 3,43 (1H, d, J 14 Hz), 3,72 (1H, m), 4,79 (2H, *; lev. s), 5,07 (2H, s), 5,13 (1H, s), 5,90 (1H, lev. s), 6,43 (1H, lev. s), 6,93 (1H, s), 7,10 - 7,40 (13H, m), 7,55 (1H, d, J 8 Hz), 7,95 (1H, s); anal.

(C39H44N4°5*0'5H2°)' C' H' N‘ vaihe 3 120 106197

Liuos, jossa oli vaiheen 2 bentsyyliuretaania (6,17 g, 8,94 mmoolia) absoluuttisessa EtOHrssa (50 ml), käsiteltiin Pearlman ' in katalysaattorilla (620 mg, 10 % w/w).

Seos laitettiin vedyn atmosfääriin 45 psi:ssä 18 tunnin ajaksi 25°C:ssa, suodatettiin ja konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin amiini, trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yyli-[R-(R*,R*)]-[2-[2- amino- 2 - f enyyl ietyy 1 i)amino]-1-(1H- in-dol-3-yylimetyyli)-l-metyyli-2-oksoetyyli]karbamaatti valkoisena vaahtona, joka oli tarpeeksi puhdas, jotta se voitiin käyttää suoraan seuraavassa vaiheessa (4,44 g, 89 %), sp. 91 - 94°C; [a]Dao +10,3* (c - 1, MeOH); IR (kalvo) 3340, 1701 ja 1658 cm-1; NMR (CDCI3) 6: 1,54 (5H, lev. S), 1,70 - 2,05 (14H, m), 3,15 (1H, ddd, J 6, 8 ja 14 Hz), 3,31 (1H, d, J 15 Hz), 3,54 (1H, d, J 15 Hz), 3,55 (1H, m), 3,97 (1H, m), 4,82 (1H, S), 5,15 (1H, S), 6,49 (1H, lev. s), 6,96 (1H, d, J 2 Hz), 7,10 - 7,40 (8H, m), 7,5.9 (1H, d, J 8 Hz), 8,19 (1H, S); anal. (C31H3gN403*0,75H20), C, H, N.

Vaihe 4

Liuos, jossa oli RS-mono-metyyli-syklopropaanidikarboksy-laattia (126 mg, 0,88 mmoolia) vedettömässä EtOAc:ssä (10 ml), käsiteltiin 1-hydroksibentsotriatsoli-hydraatilla (132 mg, 0,86 mmoolia) ja I^N'-disykloheksyylikarbodi-imi-dillä (186 mg, 0,90 mmoolia) ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa ja sitten lisättiin vaiheen 3 amiini (300 mg, 0,58 mmoolia). Sekoitettiin vielä 3 tunnin ajan ja sitten ;; reaktioseos suodatettiin, konsentroitiin tyhjössä ja puh distettiin piihappogeelikromatografiällä, jolloin saatiin haluttu amidi 2 diastereoisomeerin seoksena (258 mg, 69 %), sp. 118 - 122°C; IR (kalvo) s 3320, 2909, 2855, 1720,-1700, 1659 ja 1531 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 1,25 - 2,05 (20H, m), 2,15 (2H, m), 3,32 (2H, m), 3,48 (1H, d, J 14 Hz), 121 106197 3,67 ja 3,69 (3H, 2s), 3,95 (1H, m), 4,84 (1H, lev. s), 5,04 (1H, s), 5,11 (1H, lev. s), 6,40 (1H, lev. s), 6,95 ja 6,97 (1H, 2d, J 3 Hz), 7,10 - 7,35 (9H, m), 7,55 ja 7,58 (1H, 2d, J 4 Hz), 8,24 (1H, s); anal.

(C37H42N4°6 * 0,5H2°) · C, H, N.

Vaihe 5

Vaiheen 4 metyyliesteri (238 mg, 0,37 mmoolia) käsiteltiin liuoksena THFissä (20 ml) 0eC:ssa tipoittain LiOH:n vesi-liuoksella (3,72 ml 0,1M liuosta, 0,37 mmoolia). Muodostunutta seosta sekoitettiin 0eC:ssa 4 tunnin ajan ja sitten sen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan 16 tunnin kuluessa. Tämän jälkeen reaktioseos tehtiin happamaksi IM Helillä (0,5 ml), konsentroitiin tyhjössä ja uutettiin EtOAcillä. Orgaaninen faasi kuivatettiin MgSO^in päällä, suodatettiin ja haihdutettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin käänteisfaasikromatografialla käyttämällä eluenttina MeOHin ja H20:n 2,5:l-seosta, jolloin saatiin haluttu happo amorfisena valkoisena kiintoaineena ja kahden diaste-reoisomeerin seoksena (45 mg, 20 %), sp. 138 - 142eC; NMR (d6-DMSO) 6: 1,14 (2H, m), 1,28 (3H, S), 1,52 (2H, lev. s), 1,70 - 2,15 (14H, m), 3,10 - 3,50 (4H, m, +H20), 4,71 (1H, s), 5,05 (1H, m), 6,46 (1H, lev. s), 6,94 (2H, lev.

*’ s), 7,03 (1H, t, J 7 Hz), 7,24 (1H, m), 7,31 (5H, lev. s), 7,46 (1H, d, J 7 Hz), 7,68 (1H, m), 8,43 (1H, lev. s), 10,75 (1H, lev. s); anal. (C36H42N406·0,5Η20), C, H, N.

Esimerkki 33 ΓΓ(Trisvklor3.3.1.13'71dek-2-yyli-rR,(R*,S*1-ri-(lH-in-·« dol-3-vylimetyyli)-l-metvyli-2-okso-2-r Γ2-Γ Tl-ok:so-3-(lH- tetratsol-5-yyli)propyyli1amino]-2-fenyylietyyli]-amino1-etyyliIkarbamiinihappoesteri „2 106197

Vaihe 1

Liuokseen, jossa oli metyyli-3-syanopropionaattia (l g, 8,8 mmoolia) vedettömässä DMFtssä (15 ml), lisättiin NaN3:a (0,77 g, 11,9 mmoolia) ja NH4Cl:ää (0,65 g, 11,9 mmoolia). Reaktioseosta kuumennettiin sitten 110*C:ssa 48 tunnin ajan. Tämän jälkeen reaktioseos konsentroitiin tyhjössä ja jäännös jaettiin kyllästetyn NaHC03-liuoksen ja Et20:n välillä, vesifaasi erotettiin, tehtiin happamaksi pH-arvoon 3 IM HCl:llä ja uutettiin EtOAcrllä. Orgaaninen uute kuivatettiin sitten MgS04:n päällä ja konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin haluttu tetratsoli värittömänä nesteenä (0,75 g, 69 %); IR (kalvo) 2400 - 3400 lev., 1738 cm-1; NMR (CDC13) 6: 2,89 (2H, t, J 7 Hz), 3,30 (2H, t, J 7 Hz), 3,70 (3H, S).

Vaihe 2

Liuokseen, jossa oli vaiheen 1 tetratsolia (0,36 g, 2,9 mmoolia) vedettömässä DMF:ssä (7 ml), lisättiin cesiumkar-bonaattia (1,05 g, 3,2 mmoolia) ja bentsyylibromidia (0,53 g, 3,1 mmoolia). Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 72 tunnin ajan. Tämän jälkeen reaktioseos suodatettiin ja konsentroitiin tyhjössä. Jäännös jaettiin veden ja Et20:n välillä ja orgaaninen kerros kuivatettiin MgS04:n päällä ja haihdutettiin, jolloin saatiin kumimai-nen jäännös (0,4 g). Jäännös puhdistettiin pylväskromato-grafiällä, eluentti 50 % EtOAc:tä/n-heksaania, jolloin saatiin haluttu bentsyylitetratsoli sen kahdessa tautomee-risessä muodossa (0,25 g, 34 %); tautomeeri I (144 mg, no-'[ peimmin valuva fraktio); IR (kalvo) 3025, 1739 cm-1; NMR

(CDCl3) 6: 2,83 (2H, t, J 7 Hz), 3,20 (2H, t, J 7 Hz), 3,65 (3H, s), 5,70 (2H, s), 7,35 (5H, s); tautomeeri II (104 mg, hitaimmin valuva fraktio) IR (ks. yllä); NMR (CDCl3) 6: 2,90 (2H, t, J 7 Hz), 3,00 (2H, t, J 7 Hz), 3,70 (3H, S), 5,60 (2H, S), 7,25 (2H, m), 7,35 (3H, m).

Vaihe 3 106197 Jääkylmään liuokseen, jossa oli vaiheen 2 bentsyylitetrat-solin yhdistetyt tautomeeriset muodot (248 mg, 1,0 mmoo-lia) THF:ssä (15 ml), lisättiin tipoittain 2 tunnin kuluessa 0,IM LiOH-liuosta (10,6 ml, 1,0 mmoolia). Reaktio-seoksen annettiin sitten hitaasti lämmetä huoneen lämpötilaan 16 tunnin kuluessa. Tämän jälkeen reaktioseos tehtiin happamaksi pH-arvoon 3 IM HCl:llä ja konsentroitiin tyhjössä. Jäännös jaettiin veden ja EtOAc:n välillä ja orgaaninen kerros kuivatettiin (MgS04) ja konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin haluttu happo värittömänä nesteenä (151 mg, 65 %) ja bentsyylitetratsolin kahden tautomeerin seoksena; IR (kalvo) 2600 - 3600, 1729 cm-1; NMR (CDCl3) δ: 2,90 (α3Η, m) ja 3,20 (alH, t, J 7 Hz), 5,55 ja 5,65 (2H, S), 7,35 (5H, s).

Vaihe 4

Liuokseen, jossa oli vaiheen 3 happoa (135 mg, 0,58 mmoolia) vedettömässä EtOAc:ssä (10 ml), lisättiin pentafluo-rifenolia (108 mg, 0,58 mmoolia) ja Ν,Ν'-disykloheksyyli-karbodi-imidiä (120 mg, 0,58 mmoolia). Sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan ja sitten lisättiin vaiheen 3 amiini, trisyklo[3.3.1.1^'7]dek-2-yyli-[R-(R*,R*)]-2-[ (2-amino-2-fenyylietyyli) amino]-l- (lH-indol-3-yylimetyy-li)-l-metyyli-2-oksoetyyli]karbamaatti (300 mg, 0,58 mmoolia), EtOAcissä (2 ml). Reaktioseosta sekoitettiin 16 tunnin ajan, sitten se suodatettiin ja konsentroitiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin pylväskromatografiällä, eluentti »«

EtOAcrn ja n-heksaanin 3:l-seos, jolloin saatiin haluttu amidi kahtena tautomeerisenä muotona bentsyylitetratsoli-osan ympärillä (115 mg, 27 %), sp. 100 - 105°C; IR (kalvo) 3300, 2912, 1690 ja 1661 cm-1; tautomeeri I (105 mg, nopeimmin valuva fraktio); NMR (CDC13) 6: 1,47 (3H, s), 1,50 - 2,00 (14H, m), 2,73 (2H, t, J 7 Hz), 3,20 (2H, t, J 7 124 1 06 1 97

Hz), 3,33 (2H, d, J 15 Hz ja m), 3,45 (1H, d, J 15 Hz), 3,92 (1H, m), 4,81 (1H, lev. s), 5,10 (1H, m), 5,13 (1H, S), 5,65 (2H, s), 6,39 (1H, m), 6,93 (1H, d, J 7 Hz), 6,99 (1H, d, J 2 Hz), 7,05 - 7,20 (7H, m), 7,32 (6H, S), 7,57 (1H, d, J 8 Hz), 8,50 (1H, s); tautomeeri II (110 mg, hitaimmin valuva fraktio); NMR (CDd3) 6: 1,45 (3H, s), 1,50 (2H, m), 1,65 - 1,95 (12H, m), 2,75 - 2,95 (3H, m), 3,10 (1H, m), 3,25 (2H, m), 3,45 (1H, d, J 15 Hz), 4,00 (1H, rn), 4,75 (1H, lev. S), 5,05 (1H, m), 5,10 (1H, S), 5,45 (2H, S), 6,47 (1H, m), 6,95 - 7,35 (14H, m), 7,45 (1H, d, J 7 Hz), 7,60 (1H, d, J 7 Hz), 8,80 (1H, s), anal.

(C42H48N8°4,0'85H2°)' C' H' N*

Vaihe 5

Liuos, jossa on vaiheen 4 bentsyylitetratsoli-tautomeeri-seosta (100 mg, 0,14 mmoolia) absoluuttisessa EtOH:ssa (50 ml), käsiteltiin Pearlman’in katalysaattorilla (20 mg, 20 % w/w). Seos laitettiin vedyn atmosfääriin 45 psitssä 18 tunnin ajaksi 50eC:ssa, suodatettiin ja konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin kumi (100 mg). Jäännös puhdistettiin käänteisfaasikromatografialla - eluentti MeOH:n ja H20:n 3:l-seos - jolloin saatiin haluttu tetratsoli valkoisena kiintoaineena (30 mg, 34 %), sp. 169 - 173eC; IR (kalvo) 3300, 2907, 1704, 1659 ja 1535 cm-1; NMR (d6-DMSO) 6: 1,28 (3H, S), 1,46 (2H, m), 1,65 - 1,95 (12H, m), 2,45 (2H, m), 2,89 (2H, t, J 7 Hz), 3,20 - 3,50 (4H, m ja H20), 4,67 (1H, lev. s), 4,98 (1H, m), 6,80 - 7,05 (4H, m), 7,25 (6H, rn), 7,46 (1H, d, J 8 Hz), 8,35 (2H, m), 10,90 (1H, s); anal. (C35H42N804·1H20), C, H, N.

125 106197

Esimerkki 34 ΓΗ/ (R*,S*) 1-ri-(lH-indol-3-yylimetvvli)-l-metvyll-2-okso-2-Γ Γ2-Γ ri-okso-3-(lH-tetratsol-5-vvli)propyyli1amino,]-2-f enyyliety yli 1 amino 1 etyyli 1 -karbamllnihappo- Γ t r isyklo-Γ3.3.1»13/7Ίdek-2-vvli-esteri

Vaihe 1

Liuokseen, jossa oli metyyli-3-syanopropionaattia (1 g, 8,8 mmoolia) vedettömässä DMP:ssä (15 ml), lisättiin NaN3:a (0,77 g, 11,9 mmoolia) ja NH4Cl:ää (0,65 g, 11,9 mmoolia). Reaktioseosta kuumennettiin sitten 110°C:ssa 48 tunnin ajan. Tämän jälkeen reaktioseos konsentroitiin tyhjössä ja jäännös jaettiin kyllästetyn NaHC03-liuoksen ja Et20:n välillä. Vesifaasi erotettiin, tehtiin happamaksi pH-arvoon 3 IM HCl:llä ja uutettiin EtOAc:llä. Orgaaninen uute kuivatettiin sitten MgS04:n päällä ja konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin haluttu tetratsoli värittömänä nesteenä (0,75 g, 69 %); IR (kalvo) 2400 - 3400 lev., 1738 cm-1; NMR (CDC13) 6: 2,89 (2H, t, J 7 Hz), 3,30 (2H, t, J 7 Hz), 3,70 (3H, S).

Vaihe 2

Liuokseen, jossa oli vaiheen 1 tetratsolia (0,36 g, 2,9 mmoolia) vedettömässä DMF:ssä (7 ml), lisättiin cesiumkar-bonaattia (1,05 g, 3,2 mmoolia) ja bentsyylibromidia (0,53 g, 3,1 mmoolia). Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 72 tunnin ajan. Tämän jälkeen reaktioseos suodatettiin ja konsentroitiin tyhjössä. Jäännös jaettiin veden .. ja Et20:n välillä ja orgaaninen kerros kuivatettiin

MgS04:n päällä ja haihdutettiin, jolloin saatiin kumimai-nen jäännös (0,4 g). Jäännös puhdistettiin pylväskromato-grafiällä, eluentti 50 % EtOAc:.tä/n-heksaania, jolloin saatiin haluttu bentsyylitetratsoli sen kahdessa tautomee-risessä muodossa (0,25 g, 34 %); tautomeeri I (144 mg, no ,2« 106197 peimmin valuva fraktio); IR (kalvo) 3025, 1739 cm”1; NMR (CDC13) S: 2,83 (2H, t, J 7 Hz), 3,20 (2H, t, J 7 Hz), 3,65 (3H, s), 5,70 (2H, s), 7,35 (5H, s); tautomeeri II (104 mg, hitaimmin valuva fraktio) IR (ks. yllä); NMR (CDCl3) 6: 2,90 (2H, t, J 7 Hz), 3,00 (2H, t, J 7 Hz), 3,70 (3H, S), 5,60 (2H, S), 7,25 (2H, m), 7,35 (3H, m).

Vaihe 3 Jääkylmään liuokseen, jossa oli vaiheen 2 bentsyylitetrat-solin yhdistetyt tautomeeriset muodot (248 mg, 1,0 mmoo-lia) THF:ssä (15 ml), lisättiin tipoittain 2 tunnin kuluessa 0,IM LiOH-liuosta (10,6 ml, 1,0 mmoolia). Reaktio-seoksen annettiin sitten hitaasti lämmetä huoneen lämpötilaan 16 tunnin kuluessa. Tämän jälkeen reaktioseos tehtiin happamaksi pH-arvoon 3 IM HClrllä ja konsentroitiin tyhjössä. Jäännös jaettiin veden ja EtOAc:n välillä ja orgaaninen kerros kuivatettiin (MgS04) ja konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin haluttu happo värittömänä nesteenä (151 mg, 65 %) ja bentsyylitetratsolin kahden tautomeerin seoksena; IR (kalvo) 2600 - 3600, 1729 cm-1; NMR (CDCl3) δ: 2,90 (~3H, m) ja 3,20 (-1H, t, J 7 Hz), 5,55 ja 5,65 (2H, s), 7,35 (5H, S).

. Vaihe 4

Liuokseen, jossa oli vaiheen 3 happoa (135 mg, 0,58 mmoo-lia) vedettömässä EtOAc:ssä (10 ml), lisättiin pentafluo-rifenolia (108 mg, 0,58 mmoolia) ja N,N'-disykloheksyyli-karbodi-imidiä (120 mg, 0,58 mmoolia). Sekoitettiin huo-... neen lämpötilassa tunnin ajan ja sitten lisättiin vaiheen 3 amiini, trisyklo[3.3.1.1^/7]dek-2-yyli-[R-(R*,R*)]-2-[(2-amino-2-fenyylietyyli)amino]-1-(lH-indol-3-yylimetyy-li)-l-metyyli-2-oksoetyyli]karbamaatti (300 mg, 0,58 mmoolia), EtOAc:ssä (2 ml). Reaktioseosta sekoitettiin 16 tunnin ajan, sitten se suodatettiin ja konsentroitiin tyhjös- 106197 127 sä. Jäännös puhdistettiin pylväskromatografiällä, eluentti EtOAc:n ja n-heksaanin 3:l-seos, jolloin saatiin haluttu amidi kahtena tautomeerisenä muotona bentsyylitetratsoli-osan ympärillä (115 mg, 27 %), sp. 100 - 105“C; IR (kalvo) 3300, 2912, 1690 ja 1661 cm-1; tautomeeri I (105 mg, nopeimmin valuva fraktio); NMR (CDCl3) 6: 1,47 (3H, s), 1,50 - 2,00 (14H, m), 2,73 (2H, t, J 7 Hz), 3,20 (2H, t, J 7 Hz), 3,33 (2H, d, J 15 Hz ja m), 3,45 (1H, d, J 15 Hz), 3,92 (1H, m), 4,81 (1H, lev. s), 5,10 (1H, m), 5,13 (1H, S), 5,65 (2H, S), 6,39 (1H, m), 6,93 (1H, d, J 7 Hz), 6,99 (1H, d, J 2 HZ), 7,05 - 7,20 (7H, m), 7,32 (6H, s), 7,57 (1H, d, J 8 Hz), 8,50 (1H, s); tautomeeri II (110 mg, hitaimmin valuva fraktio); NMR (CDClg) 6: 1,45 (3H, s), 1,50 (2H, m), 1,65 - 1,95 (12H, m), 2,75 - 2,95 (3H, m), 3,10 (1H, m), 3,25 (2H, m), 3,45 (1H, d, J 15 Hz), 4,00 (1H, m), 4,75 (1H, lev. S), 5,05 (1H, m), 5,10 (1H, s), 5,45 (2H, S), 6,47 (1H, m), 6,95 - 7,35 (14H, m), 7,45 (1H, d, J 7 Hz), 7,60 (1H, d, J 7 Hz), 8,80 (1H, s), anal.

(C42H48N8°4*0'85H2°>' C' H' N‘

Vaihe 5

Liuos, jossa oli vaiheen 4 bentsyylitetratsoli-tautomeeri-seosta (100 mg, 0,14 mmoolia) absoluuttisessa EtOH:ssa (50 . ml), käsiteltiin Pearlman'in katalysaattorilla (20 mg, 20 % w/w). Seos laitettiin vedyn atmosfääriin 45 psi:ssä 18 tunnin ajaksi 50eC:ssa, suodatettiin ja konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin kumi (100 mg). Jäännös puhdistettiin käänteisfaasikromatografiällä - eluentti MeOH:n ja H20:n 3:l-seos - jolloin saatiin haluttu tetratsoli valkoisena kiintoaineena (30 mg, 34 %), sp. 169 - 173°C; IR (kalvo) 3300, 2907, 1704, 1659 ja 1535 cm-1; NMR (d6-DMS0) 6: 1,28 (3H, s), 1,46 (2H, m), 1,65 - 1,95 (12H, m), 2,45 (2H, m), 2,89 (2H, t, J 7 Hz), 3,20 - 3,50 (4H, m ja H20), 4,67 (1H, lev. s), 4,98 (1H, m), 6,80 - 7,05 (4H, m), 7,25 (6H, m), 7,46 (1H, d, J 8 Hz), 8,35 (2H, m), 10,90 (1H, S); diisl* (C35H42NgC>4 · IH2O) / C, H/ N· 128 106197

Esimerkki 35 TR,(R*,S*)1-α-Γ r3-(lH-indol-3-yylimetyyli)-2-metyyli-l-ok-so-r Γ(trisyklof 3.3*1.13'7ldek-2-yylioksi)karbonyyll1amino )propyyli1amino1-bentseeniheptaanihappo

Valhe 1

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli N-(t-butyylioksikarbo-nyyli)fenyylialaniinia (13 g, 49,0 mmoolia) ja N-metyyli-morfoliinia (11 ml, 100 mmoolia) CH2Cl2:ssa (125 ml), lisättiin -10eC:ssa isobutyylikloroformiaattia (6,5 ml, 50,0 mmoolia). Annettiin olla 15 minuutin ajan -l0eC:ssa ja sitten lisättiin Ν,Ο-dimetyylihydroksyyliamiini-hydroklo-ridia (5,02 g, 51,5 mmoolia) ja kylmää liuosta sekoitettiin tunnin ajan, sitten huoneen lämpötilassa 3 tunnin ajan. Seos kaadettiin veteen (100 ml) ja orgaaninen kerros erotettiin. Vesikerros uutettiin CH2Cl2:lla (2 x 100 m1)' yhdistetyt orgaaniset kerrokset kuivatettiin (MgS04), suodatettiin ja liuottimet poistettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin suodattamalla piihappogeelillä käyttämällä eluenttina 2 % MeOH:ta/98 % CH2Cl2:ta, joka tuotti tuotteen (14,39 g, 95 %) öljynä; NMR (CDC13) 6: 1,38 (9H, s), 2,84 - 3,16 (5H, m), 3,65 (3H, s), 4,94 - 4,96 (1H, m), 5,22 - 5,25 (1H, m), 7,16 - 7,30 (5H, S).

Vaihe 2

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli vaiheen 1 hydroksamaat-tia (1,38 g, 4,48 mmoolia) vedettömässä THF:ssä (20 ml), lisättiin 0eC:ssa tipoittain liuos, jossa oli 1,0M LiAH4:ää THF:ssä (11,7 ml, 11,70 mmoolia). 30 minuutin kuluttua lisättiin märkää Et20:ta (100 ml) ja sitten jääkylmää 20%:ista sitruunahappo-liuosta (100 ml). Annettiin seistä 30 minuutin ajan, sitten Et20-kerros erotettiin ja vesiliuos uutettiin kerran Et20:lla (100 ml). Yhdistetyt Et20-uutteet pestiin kyllästetyllä NaHCOg-liuoksella (50 ,29 1 06 1 97 ml), vedellä (50 ml), 5%:isella sitruunahappo-liuoksella (50 ml) ja vedellä (50 ml). Et20-liuos kuivatettiin sitten MgS04:n päällä, suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin valkoinen kiintoaine (1,09 g, 97 %); IR (kalvo) 3367, 1733 ja 1689 cm"1; NMR (CDC13) 5: 1,43 (9H, s), 3,11 (2H, d, J 6 Hz), 4,38 - 4,45 (1H, m), 5,10 (1H, m), 7,15 - 7,35 (5H, m), 9,62 (1H, s).

Valhe 3

Metyyli-4-bromiasetaattia (4,48 g, 25 mmoolia) ja trife-nyylifosfiinia (6,55 g, 25 mmoolia) kuumennettiin yhdessä 150eC:ssa 25 minuutin ajan. Ruskean jäännöksen uudelleen-kiteytys EtOH/Et20:sta tuotti fosfoniumsuolan (5,76 g, 52 %) harmahtavana kiintoaineena, sp. 180 - 181eC.

Vaihe 4

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli vaiheen 3 fosfoniumsuo-laa (1,91 g, 4,33 mmoolia) vedessä (100 ml), lisättiin ti-poittain IM NaOH:ta (4,5 ml, 4,5 mmoolia). 10 minuutin kuluttua tuote uutettiin CH2Cl2:een (50 ml), joka kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös liuotettiin kuumaan EtOAc:hen ja liuke-• . nematon materiaali suodatettiin pois. Suodoksen määrää vä hennettiin ja sitten lisättiin 40:60-petrolia, jolloin ylidi saostui (0,86 g, 55 %), sp. 132 - 143eC.

Vaihe 5 v .. Sekoitettuun liuokseen, jossa oli vaiheen 4 ylidiä (800 mg, 2,22 mmoolia) vedettömässä THF:ssä (20 ml), lisättiin huoneen lämpötilassa liuos, jossa oli 2-(t-butyylioksikar-bonyyliamino)-3-fenyylipropanolia (553 mg, 2,22 mmoolia) THF:ssä (10 ml). 3 tunnin kuluttua liuottimet poistettiin tyhjössä ja jäännös puhdistettiin kromatografoimalla pii- 130 106197 hapolla käyttämällä eluenttina CH2^-2:^a sitten 1 % Me-OH:ta/99 % C^C^ita. Liuottimen poisto tyhjössä tuotti halutun tuotteen (271 mg, 37 %) valkoisena kiteisenä kiintoaineena; IR (kalvo) 3357, 1713 ja 1646 cm”1; NMR (CDCl3) 6: 1,40 (9H, S), 2,78 - 2,92 (2H, m), 3,73 (3H, S), 4,53 - 4,81 (2H, m), 5,82 (1H, d, J 15,4 Hz), 6,03 (1H, dd, J 5,4, 15,3 HZ), 6,20 (1H, dd, J 10,8, 15,3 Hz), 7,14 - 7,31 (6H, m).

Vaihe 6

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli vaiheen 5 esteriä (335 mg, 1 mmoolia) CH2Cl2lssa (5 ml), lisättiin trifluorietik-kahappoa (5 ml). Annettiin seistä tunnin ajan huoneen lämpötilassa, sitten liuottimet poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin haluttu amiini jäännöksenä, joka käytettiin ilman lisäpuhdistusta seuraavassa vaiheessa.

Vaihe 7

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli a-metyyli-N-[(trisyklo-[3.3.1.I3'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]-R-tryptofaania (441 mg, 1,11 mmoolia) ja 1-hydroksibentsotriatsoli-hydraattia (213 mg, 1,39 mmoolia) EtOAcissä (20 ml), lisättiin N,N’-. . disykloheksyylikarbodi-imidiä (252 mg, 1,22 mmoolia). An nettiin seistä tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten lisättiin vaiheen 6 amiinisuola (349 mg, 1,01 mmoolia) ja trietyyliamiinia (0,292 ml, 2,10 mmoolia) tipoittain EtOAc:ssä (10 ml) 5 minuutin kuluttua. 24 tunnin kuluttua liuos suodatettiin ja suodos pestiin 5%:isella sitruuna- • · .. happo-liuoksella (2 x 25 ml), kyllästetyllä NaHC03-liuok- sella (2 x 25 ml), 5%:isella sitruunahappo-liuoksella (25 ml) ja suolavedellä (25 ml). EtOAc-uute kuivatettiin (MgS04), suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin kromatografoimalla piihapolla käyttämällä eluenttina 1 % MeOH:ta/99 % CH2Cl2:ta, jolloin „1 106197 saatiin amidituote (286 mg, 46 %) valkoisena kiintoaineena, sp. Ill - 125eC; IR (kalvo) 1703 ja 1646 cm-1; NMR (CDC13) 6: 1,43 (3H, S), 1,50 - 1,98 (14H, m), 2,75 - 2,80 (2H, m), 3,26 (1H, d, J 14,7 Hz), 3,52 (1H, d, J 14,7 Hz), 3,73 (3H, S), 4,81 - 4,85 (2H, m), 5,07 (1H, S), 5,78 (1H, d, J 15,4 Hz), 5,94 (1H, dd, J 15,4, 5,4 Hz), 6,14 (1H, dd, J 10,6, 15,5 Hz), 6,37 (1H, d, J 8,1 Hz), 6,91 (1H, d, J 2,2 Hz), 7,10 - 7,27 (8H, m), 7,34 (1H, d, J 8,0 Hz), 7,58 (1H, d, J 7,9 Hz), 8,15 (1H, s); anal. (C37H43N305), C, H, N.

Vaihe 8

Liuos, jossa oli vaiheen 7 tyydyttymätöntä esteriä (227 mg, 0,37 mmoolia) absoluuttisessa EtOH:ssa (30 ml), hyd-rattiin 10%:isella Pd/C:llä (25 mg) 30*C:ssa vedyn atmosfäärissä 50 psi:n paineessa 6,5 tunnin kuluessa. Katalysaattori suodatettiin pois ja pestiin liuottimena. Yhdistetyt suodokset konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin tuote vaahtona (145 mg, 64 %); IR (kalvo) 1718 ja 1657 cm-1; NMR (CDC13) 6: 1,22 - 1,98 (23H, m), 2,24 (2H, t, J

7,4 Hz), 2,63 (1H, dd, J 6,9, 13,7 Hz), 2,73 (1H, dd, J

6,1, 13,7 Hz), 3,26 (1H, d, J 14,7 Hz), 3,51 (1H, d, J

14,7 Hz), 3,65 (3H, S), 4,12 - 4,14 (1H, m), 4,80 (1H, S), 5,14 (1H, S), 6,13 (1H, d, J 8,5 Hz), 6,91 (1H, d, J 2,3 Hz), 7,08 - 7,29 (7H, m), 7,34 (1H, d, J 7,9 Hz), 7,60 (1H, d, J 7,7 HZ), 8,34 (1H, S).

Vaihe 9 • *

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli vaiheen 8 metyyliesteriä (145 mg, 0,24 mmoolia) THFrssä (15 ml), lisättiin 0eC:ssa tipoittain LiOHrn vesiliuosta (2,6 ml 0,1M liuosta, 0,26 mmoolia). Liuosta sekoitettiin Ja sen annettiin hitaasti lämmetä huoneen lämpötilaan 24 tunnin kuluessa. Sitten lisättiin 0,1M HCl:ää (2,9 ml, 0,29 mmoolia) ja reaktioseos 132 106197 uutettiin Et20:lla (2 x 25 ml). Et20-uutteet kuivatettiin MgS04:n päällä, suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin käänteisfaasikromatografiällä piihapolla käyttämällä eluenttina 75 % MeOH:ta/25 %

H20:ta. Tämä tuotti halutun hapon (55 mg, 38 %) valkoisena kiintoaineena, sp. 79 - 90*C; IR (kalvo) 1709 ja 1655 cm-1; NMR (CDC13) δ: 1,20 - 1,97 (23H, m), 2,22 (2H, t, J 7,2 HZ) 2,60 (1H, dd, J 6,8, 13,6 Hz), 2,71 (1H, dd, J 6,0, 13,5 Hz), 3,24 (1H, d, J 14,7 Hz), 3,47 (1H, d, J

14,7 HZ), 4,10 (1H, m), 4,80 (1H, S), 5,34 (1H, s), 6,20 (1H, d, J 8,5 Hz), 6,93 (1H, d, J 2,0 Hz), 7,05 - 7,24 (7H, m), 7,33 (1H, d, J 7,9 Hz), 7,57 (1H, d, J 7,7 Hz), 8,67 (1H, S); anal. (C36H45N305*0,25H20), C, H, N.

Esimerkki 36

Metyyli-(±)-β-Γ Γ(2-fenyylietvvli)aminolkarbonyyliT-18-ΓΓ(trisyklo Γ3.3.1.13,71dek-2-yylloksi)karbonyylilamino1-lH-indoli-3-butanoaatti vaihe 1 (±)-N-formyylitryptofaania (10,00 g, 43 mmoolia) suspen-doitiin H20:hon (100 ml). Liuokseen lisättiin yhtenä annoksena cesiumkarbonaattia (7,70 g, 23,5 mmoolia). Liuosta sekoitettiin, kunnes (±)-N-formyylitryptofaani oli liuennut kokonaan. Liuotin haihdutettiin sitten tyhjössä, jäännös liuotettiin vedettömään DMFiään (50 ml) ja sitten lisättiin bentsyylibromidia (7,50 g, 44 mmoolia). Liuosta sekoitettiin 4 tunnin ajan, sitten lisättiin Et20:ta (200 ml), ja liuos pestiin H20:lla (100 ml). Eetterikerros kui-.. vatettiin (MgS04) ja konsentroitiin tyhjössä, jolloin saa tiin haluttu bentsyyliesteri (14,32 g, al00 %), sp. 85 -B6eC; IR (kalvo) 3294, 1739, 1673 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 3,28 (2H, d, J 7 Hz), 5,02 (3H,m), 6,66 (1H, d, J 8 Hz), 6,77 (1H, S), 7,03 - 7,33 (8H, m), 7,50 (1H, d, J 7 Hz), 7,98 (1H, s), 8,94 (1H, s); anal. (C19H18N203-0,1H20), C, H. N.

133 106197

Vaihe 2

Vaiheen (±)-bentsyyli-N-formyylitryptofaani-esteriä (8,16 g, 24,8 mmoolia) suspendoitiin vedettömään DMFtään (100 ml) typen atmosfäärissä. Sitten lisättiin ruiskulla 4-di-metyyliaminopyridiiniä (n. 1,0 g), joka oli liuotettu DMF:ään (5 ml). Sitten lisättiin tipoittain di-t-butyyli-dikarbonaattia (5,43 g, 24,8 mmolia) DMF:ssä (10 ml).

Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 24 tunnin ajan. Liuos konsentroitiin tyhjössä ja jäännös liuotettiin Et20:hon (100 ml). Eetteriliuos pestiin 10%:isella sitruunahappo-liuoksella, kuivatettiin (MgS04), suodatettiin ja konsentroitiin kuiviin. Haluttu indoli-suojattu tuote eristettiin pylväskromatografiällä (75 % EtOAc:tä/n-hek-saania), jolloin saatiin keltainen öljy (3,58 g, 34 %); IR (kalvo) 3257, 1734, 1687 cm-1; NMR (CDC13) δ: 1,64 (9H, S), 3,22 (1H, d), 3,24 (1H, d), 5,04 (3H, m), 6,99 (1H, d, J 8 Hz), 7,15 - 7,32 (7H, m), 7,41 (1H, S), 7,49 (1H, d, J 8 Hz), 8,09 (1H, d, J 8 Hz), 8,14 (1H, s); anal.

(C24H26N2°5 * 0'33H2°)· C' H' N*

Vaihe 3

Vaiheen 2 l-[(1,l-dimetyylietoksi)karbonyyli]-N-formyyli-.. DL-tryptofaani-bentsyyliesteri (3,04 g, 7,20 mmoolia)

liuotettiin CH2Cl2:een (10 ml) typen atmosfäärissä. Liuos jäähdytettiin 0eC:seen jää-suola-hauteessa. Sitten lisättiin trietyyliamiinia (2,21 g, 21,6 mmoolia) ja sitten trifosgeenia (0,80 g, 2,4 mmoolia) CH2Cl2:ssa (15 ml). Liuoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitten sitä sekoitettiin 10 tunnin ajan. Liuotin konsentroitiin tyhjössä ja jäännös otettiin Et20:hon. Trietyyliamiinihyd-rokloridi suodatettiin pois, suodos konsentroitiin kuiviin ja tuote eristettiin pikakromatografiällä (75 % EtAOc:tä/-n-heksaani), jolloin saatiin haluttu isonitriili keltaisena öljynä (2,54 g, 87 %); IR (kalvo) 2149, 1735 cm-1; NMR

134 106197 (CDC13) 6: 1,67 (9H, S), 3,29 (1H, dd, J 7, 15 Hz), 3,41 (1H, dd, J 7, 15 Hz), 4,60 (1H, dd, J 7, 7 Hz), 5,18 (2H, S), 7,23 - 7,36 (7H, m), 7,49 (1H, d, J 8 Hz), 7,57 (1H, s), 8,15 (1H, d, J 8 Hz); anal. (C24H24N204-0,5H20), C, H, N.

Valhe 4

Vaiheen 3 isonitriili (2,05 g, 5,1 mmoolla) liuotettiin vedettömään THF:ään (15 ml) ja liuos jäähdytettiin -78eC:seen argonin atmosfäärissä. Lisättiin HMPA:ta (0,88 ml, 5,1 mmoolia) ja sitten liuos, jossa oli litium-bis-(trimetyylisilyyli)-amidia (6,0 ml 0,1M liuosta). Sekoitettiin 30 minuutin ajan -78eC:ssa ja sitten lisättiin hitaasti metyylijodidia (0,31 ml, 5,2 mmoolia). 3 tunnin kuluttua seoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitä sekoitettiin vielä tunnin ajan. Liuotin konsentroitiin tyhjössä, jäännös liuotettiin veteen ja uutettiin. Et20:lla (2 x 25 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivatettiin (MgS04), suodatettiin ja konsentroitiin tyhjössä. Raakatuote puhdistettiin pikakromatografiällä (50 %

Et20:ta/n-heksaania), jolloin saatiin haluttu alkyloitu tuote valkoisena kiintoaineena (1,94 g, 79 %), sp. 29 -30°C; IR (kalvo) 2138, 1741 cm"1; NMR (CDCl3) 6: 1,58 (9H, .7 s), 2,72 (1H, d, J 17 Hz), 3,13 (1H, d, J 17 Hz), 3,20 (1H, d, J 15 Hz), 3,29 (1H, d, J 15 Hz), 3,54 (3H, s), 4,99 (1H, d, J 12 Hz), 5,03 (1H, d, J 12 Hz), 7,07 - 7,28 (7H, m), 7,42 (1H, d, J 8 Hz), 7,54 (1H, s), 8,05 (1H, d, J 8 Hz); anal. (C2yH2gH2Og), C, H, H.

.« .. Vaihe 5 1-metyyli-(±)-β-syano-l-[(1,l-dimetyylietoksi)karbonyyli]-β-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-1H-indoli-3-butanoaattia (0,241 g, 0,50 mmoolia) liuotettiin EtOH:hon (5 ml). Liuos jäähdytettiin -5°C:seen asetoni-jää-hauteessa ja sitten 135 106197 lisättiin tipoittain etanolista HCl:ää. Lisättiin vettä (0,1 ml) ja reaktio lämmitettiin huoneen lämpötilaan. Liuosta sekoitettiin 24 tunnin ajan ja liuotin konsentroitiin tyhjössä. Öljy liuotettiin EtOAc:hen (50 ml) ja pestiin 10%:isella Na2C03-liuoksella (50 ml). Orgaaninen kerros kuivatettiin (MgS04), suodatettiin ja konsentroitiin tyhjössä. Tuote eristettiin pikakromatografiällä (50 % EtOAc:tä/n-heksaania), jolloin saatiin haluttu amiini (0,120 g, 67 %) keltaisena öljynä; IR (kalvo) 3350, 3245, 1741 cm"1; NMR (CDCI3) 6: 2,12 (2H, lev. s), 3,17 (1H, d, J 18 Hz), 3,28 (1H, d, J 18 Hz), 3,37 (1H, d, J 15 Hz), 3,43 (3H, s), 3,53 (1H, d, J 15 Hz), 4,82 (1H, d, J 12

Hz), 4,92 (1H, d, J 12 Hz), 6,73 (1H, d, J 2 Hz), 6,95 - 7,21 (8H, m), 7,47 (1H, S), 8,42 (1H, S).

Vaihe 6

Vaiheen 5 metyyli-(±)-0-amino-8-[(fenyylimetoksi)karbonyy-Ii]-1H-indoli-3-butanoaattia (120 mg, 0,33 mmoolia) liuotettiin vedettömään THF:ään (10 ml) argonin atmosfäärissä. Lisättiin ruiskulla trietyyliamiinia (55 pl, 0,40 mmoolia). Liuos jäähdytettiin 0eC:seen jää-suola-hauteessa ja sitten lisättiin ruiskulla 2-adamantyyli-kloroformiaattia (77 mg, 0,36 mmoolia), joka oli liuotettu THF:ään (5 ml).

. Liuosta sekoitettiin 12 tunnin ajan huoneen lämpötilassa, minkä jälkeen trietyyliamiinihydrokloridi suodatettiin pois. Lisätttiin dikloorimetaania (50 ml) ja liuos pestiin vedellä (2 x 25 ml). Orgaaninen kerros kuivatettiin (MgS04), suodatettiin ja konsentroitiin tyhjössä. Tuote eristettiin pikakromatografiällä (50 % EtOAc:tä/n-heksaa- • · nia), jolloin saatiin haluttu uretaani (105 mg, 58 %), sp. 61 - 62°C; IR (kalvo) 3412, 1738 cm"1; NMR (CDCI3) 6: 1,49 - 2,09 (14H, m), 3,12 (1H, d, J 15 Hz), 3,30 (1H, d, J 15 Hz), 3,38 (3H, S), 3,72 (1H, d, J 15 Hz), 3,80 (1H, d, J 15 Hz), 4,83 (1H, lev. s), 4,98 (1H, d, J 12 Hz), 5,11 (1H, d, J 12 Hz), 6,88 (1H, s), 6,79 (1H, s), 7,03 (1H, t, 136 106197 J 7 Hz), 7,14 (1H, t, J 7 Hz), 7,17 - 7,34 (6H, m), 7,48 (1H, d, J 8 Hz), 8,30 (1H, s); anal. (C32H36N206), C, H, N.

Vaihe 7

Vaiheen 6 metyyli-(±)-β-[(fenyylimetoksi)karbonyyli]-p-[[(trisyklo[3.3.1.13,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]-lH-indoli-3-butanoaattiin (105 mg, 0,19 mmoolia) lisättiin 250 ml:n astiassa palladium-hiiltä (10 %, Ca 20 mg) ja EtOH:ta (75 ml). Astia suljettiin Parrin hydrauslaitt.ee-seen ja paineistettiin H2-kaasulla (45 psi). Ravistelu aloitettiin paineistamisen jälkeen ja sitä jatkettiin 12 tunnin ajan. Reaktion päättymisen jälkeen palladium-hiili suodatettiin pois ja suodos konsentroitiin tyhjössä. Tuote puhdistettiin pikakromatografiällä (2:1 MeOH/H20), jolloin saatiin haluttu happo valkoisena jauheena (77 mg, 88 %), sp. 108 - 109eC; IR (kalvo) 3413, 1733 cm-1; NMR (CDC13) 6: 1,47 - 2,07 (14H, m), 3,14 (1H, d, J 16 Hz), 3,26 (1H, d, J 16 HZ), 3,64 (3H, s), 3,76 (1H, d, J 15 Hz), 3,84 (1H, d, J 15 Hz), 4,83 (1H, lev. s), 5,75 (1H, lev. s), 5,96 (1H, S), 6,98 - 7,04 (2H, m), 7,10 (1H, t, J 7 Hz), 7,28 (1H, d, J 8 Hz), 7,61 (1H, d, J 8 Hz), 8,34 (1H, s); anal. ( C25H30N2°6)' C' H' N- «

Vaihe 8

Vaiheen 7 metyyli-(±)-β-[[(trisyklo[3.3.1.I3,7]dek-2-yyli-oksi)karbonyyli]amino]-lH-indoli-3-butanoaattia (200 mg, O, 44 mmoolia) liuotettiin vedettömään THF:ään (10 ml). Li- • · sättiin pentafluorifenolia (88 mg, 0,48 mmoolia) ja sitten N,N’-disykloheksyylikarbodi-imidiä (100 mg, 0,48 mmoolia). Liuosta sekoitettiin 2 tunnin ajan ja sitten liuokseen ruiskutettiin fenyylietyyliamiinia (60 mg, 0,50 mmoolia). Seosta sekoitettiin 16 tunnin ajan. Liuos konsentroitiin tyhjössä, EtOAc:tä lisättiin ja disykloheksyyliurea suoda- 137 1 06 1 97 tettiin pois. Suodos konsentroitiin tyhjössä ja tuote eristettiin pikakromatografiällä (25 % EtOAc:tä/n-heksääniä), jolloin saatiin valkoinen kiintoaine (180 mg, 73 %), sp. 78 - 79'C; IR (kalvo) 3333, 1730, 1659 cm”1; NMR (CDClg) 6: 1,51 - 2,04 (14H, m), 2,61 (2H, m), 2,94 (1H, d, J 16 Hz), 3,21 (1H, d, J 16 Hz), 3,37 (1H, d, J 7 Hz), 3,41 (1H, d, J 7 Hz), 3,46 (1H, d, J 15 Hz), 3,57 (1H, d, J 15 Hz), 3,62 (3H, s), 4,78 (1H, lev. s), 5,88 (1H, lev. s), 6,58 (1H, lev. s), 6,92 (1H, d, J 2 Hz), 7,03 - 7,26 (7H, m), 7,33 (1H, d, J 8 Hz), 7,56 (1H, d, J 8 Hz); anal. (c33H3gN3O5*0,75H20) / C, H, N.

Esimerkki 37 Γ1- (lH-indol-3-yylimetyyli) -1- Γ Γ (2-fenyylietyyli) amino 1 -karbonyyli1-3-butynyyli1-karbamiinihappo-(trisyklo Γ3.3.-l.l3/7ldek-2-yyliesteri, (t)-muoto

Esimerkki 37 valmistettiin käyttämällä propargyylibromidia esimerkin 36 vaiheessa 4.

Esimerkki 38 riR-ria,2P,3aTR*(S*)1,4α11 — 3—ΓΓΓ Γ2-Γ f1-(hydroksimetyyli)-2-fenyylietyyli1 amino1-1-(lH-indol-3-yylimetyyli)-1-metyy-li-2-oksoetyyli1aminoIkarbonyyllToksi1-4,7,7-trimetyyli-. bisyklo Γ 2.2.1lheptaani-2-etlkkahappo

Vaihe 1

Noudatettiin tarkasti esimerkkiä 5 sillä erotuksella, että käytettiin (4-nitrofenyyli)-metyyli-[lR-(ία,2α,3β)]-2- * #« [ (2-kloorikarbonyyli)oksi]-1,7,7-trimetyyli-bisyklo-[2.2.1]heptaani-3-asetaattia, sp. 78 - 81eC; [a]D20 +6,2° (c » 0,62, MeOH); IR (kalvo) 1729, 1696 ja 1660 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 0,79 (3H, s), 0,85 (3H, s), 0,96 (3H, s), 1,05.

- 1,20 (1H, m), 1,20 - 2,00 (7H, m), 2,43 (1H, dd, J 8 ja 15 HZ), 2,60 - 2,70 (1H, m), 2,75 - 2,90 (3H, m), 3,00 - 138 106197 3,10 (1H, m), 3,29 (1H, d, J 15 Hz), 3,35 - 3,50 (2H, m), 3,40 (1H, d, J 14 Hz), 4,10 - 4,30 (2H, m), 5,07 (1H, lev. s), 5,13 (2H, s), 6,23 (1H, lev. d, J 7 Hz), 6,98 (1H, d, J 2 HZ), 7,00 - 7,25 (7H, m), 7,32 (1H, d, J 8 Hz), 7,43 (2H, d, J 8 Hz), 8,15 (2H, d, J 8 Hz), 8,39 (1H, s); anal.

^41^48^8^4'

Valhe 2

Vaiheen 1 esteri (430 mg, 0,59 mmoolia) käsiteltiin liuoksena absoluuttisessa EtOH:ssa (100 ml) 10%:isella Pd/C:llä (43 mg, 10 % w/w) ja muodostunut seos laitettiin vedyn atmosfääriin 50 psi:n paineessa sekoittaen tunnin ajaksi. Tämän jälkeen seos suodatettiin suodatinapuaineella ja liuotin poistettiin tyhjössä ja jäännös käänteisfaasikro-matografoitiin piihappogeelillä käyttämällä eluenttina 50 % MeOHrta H20:ssa, jolloin saatiin happo valkoisena kiintoaineena (130 mg, 37 %), sp. 93,7 - 97,5eC (Me0H/H20); [a]Dao +7,7° (c = 0,96, MeOH); IR (kalvo) 1708 ja 1660 cm-1; NMR (CDC13) 6: 0,75 (3H, s), 0,82 (3H, S), 0,93 (3H, S), 1,05 - 1,40 (2H, m), 1,46 (3H, S), 1,50 - 1,65 (3H, m), 2,27 (1H, dd, J 8 ja 13 Hz), 2,35 - 2,49 (1H, m), 2,50 - 2,60 (1H, m), 2,67 (1H, dd, J 7 ja 14 Hz), 2,90 (1H, dd, J 7 ja 14 Hz), 3,12 (1H, d, J 15 Hz), 3,28 (1H, d, J 15 Hz), 4,05 - 4,20 (1H, m), 4,31 (1H, d, J 4 Hz), 4,40 - 4,70 (1H, lev.), 5,21 (1H, lev. s), 6,57 (1H, d, J 9 Hz), 6,94 (1H, lev. s), 7,05 - 7,30 (7H, m), 7,33 (1H, d, J 8 Hz), 7,55 (1H, d, J 8 Hz), 8,54 (1H, s); anal.

C34H43N3O6*0'5H2O; C' H' n* . Esimerkki 39 [lR-[ia,2a-[R*(S*) Π 1- ia riS-ria,2a-rs*(R*mi-f Γ2-ΓΓ f Γ2-Γ Γ1—(hydroksimetyyli)-2-fenyylietyyli1 amino 1-1-(lH-indol- 3-yylimetyyli)-l-metyyli-2-oksoetyyli1 amino 1karbonyyll1ok-si-l-metyylisykloheksyylilkarbonvylilglysiini

Vaihe 1 139 1 06 1 97

Noudatettiin esimerkkiä 5 sillä erotuksella, että käytettiin fenyylimetyyli-cis-(±)-[[[2-[(kloorikarbonyyli)oksi]-l-metyyli-l-sykloheksyyli]karbonyyliJamino]asetaattia, sp. 78 - 81eC; IR (kalvo) 3600 - 3200, 3000 - 2800, 1760, 1705 ja 1651 cm"1; NMR (CDCI3) 6: 1,16 (1,5H, s), 1,19 (1,5H, s), 1,20 - 2,20 (11H, m), 2,78 (2H, d, J 8 Hz), 3,20 - 3,75 (4H, m), 3,80 - 4,00 (1H, m), 4,10 - 4,30 (2H, m), 4,78 (0,5H, t, J 6 Hz), 4,90 - 5,10 (2,5H, m), 5,26 (0,5H, lev. s), 5,52 (0,5H, lev. s), 6,38 (0,5H, d, J 8 Hz), 6,48 (0,5H, d, J 8 Hz), 6,52 - 6,65 (1H, m), 6,90 - 7,00 (1H, m), 7,00 - 7,50 (13H, m), 7,57 (1H, d, J 8 Hz), 8,05 (1H, lev.); anal. C^^H^gN^O^*0,5Η^Ο; C, H, N.

Valhe 2

Vaiheen 1 esteri (60 mg, 0,09 mmoolia) ja 10%:ista Pd/C:tä (50 mg) laitettiin absoluuttisessa EtOH:ssa (50 ml) vedyn atmosfääriin 50 psi:ssä ja 25eC:ssa sekoittaen 4 tunnin ajaksi. Tämän jälkeen seos suodatettiin suodatusapuaineella ja konsentroitiin tyhjössä ja jäännös käänteisfaasikro-matografoitiin piihappogeelillä käyttämällä eluenttina 60 % MeOHrta H20:ssa, jolloin saatiin tuote ei-kiteisenä .< kiintoaineena (40 mg, 80 %), sp. 94 - 99eC; IR (kalvo) 1709 ja 1694 cm"1; NMR (CDCI3) 6: 1,10 - 2,00 (13H, m), 2,10 - 2,30 (1H, m), 2,72 (1H, dd, J 6 ja 14 Hz), 2,84 (1H, dd, J 7 ja 14 Hz), 3,15 - 3,60 (4H, m), 3,75 - 4,05 (2H, m), 4,15 - 4,30 (1H, lev. s), 4,55 - 4,75 (0,5H, m), 4,80 - 5,00 (0,5H, m), 6,90 - 7,10 (3H, m).

• · » · 140 106197

Esimerkki 40 4— Γ Γ2— Γ Γ 3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-2-r Γ Γ (2-metyyl:L-l-sykloheksyyli)oksiikarbonyylilamino1-1-oksopropyyll1amino 1-1-fenyylietyyli1amino1-4-okso-butaanihappo-Γ1R-Γία ΓΒ*-(R*)12011-f-)-isomeeri

Kaavion IX amiini 60K (100 mg, 0,21 mmoolia) käsiteltiin liuoksena EtOAc:ssä (30 ml) meripihkahappoanhydridillä (30 mg, 0,3 mmoolia) ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa 18 tunnin ajan ja sitten liuotin poistettiin tyhjössä ja jäännös käänteisfaasikromatografoitiin piihappogeelillä käyttämällä eluenttina 60 % MeOH:ta H20:ssa, jolloin saatiin tuote (93 mg, 77 %), sp. 106 - llleC (MeOH/H20); [a]D20 -33,5° (c = 0,81, MeOH); IR (kalvo) 3320, 2933, 2860, 1714 ja 1661 Cm-1; NMR (CDCl3) 6: 0,88 (3H, d, J 6,5 Hz), 1,0 - 1,35 (4H, m), 1,47 (3H, S), 1,40 - 1,80 (4H, m), 1,95 - 2,05 (1H, lev. m), 2,40 - 2,65 (4H, m), 3,20 -3,35 (3H, m), 3,75 - 3,85 (1H, m), 4,20 - 4,30 (1H, m), 4,90 - 5,00 (1H, lev. s), 5,30 - 5,40 (1H, lev. s), 6,40 - 6,50 (1H, lev. S), 6,97 (1H, s), 7,05 - 7,30 (8H, m), 7,33 (1H, d, J 8 Hz), 7,54 (1H, d, J 8 Hz), 8,60 (1H, S); MS (FAB) m/e 577,2 (M+l) ja 217,0 (100); anal.

C32H40N4°6*°'5H20' C' H' N·

Esimerkki 41 4-Γ Γ2-Γ Γ3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-2-r Γ Γ(2-metyyli-l-sykloheksyyli) oksi lkarbonyyll l amino 1 -1-oksopropyyli 1 amino 1-1-fenyylietyylilamino1-4-okso-2-buteenihappo-Γ1R-flarR*(R*)1,2811-(-)-isomeeri

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli mono-(2-trimetyylisilyy-li)-etyylifumaraattia (350 mg, 0,7 mmoolia) EtOAc:ssä (20 ml) ja pentafluorifenolissa (184 mg, 1,00 mmoolia), käsiteltiin disykloheksyylikarbodi-imidillä (218 mg, 1,05 mmoolia) ja amiinilla 6K (kaavio IX) (1 mmooli) ja annettiin seistä huoneen lämpötilassa 18 tunnin ajan. Reaktio- 9 106197 seos suodatettiin sitten ja suodos pestiin H20:lla (2 x 20 ml) ja kuivatettiin MgS04:n päällä. Liuotin poistettiin tyhjössä ja jäännös käänteisfaasikromatografoltiin piihap-pogeelillä käyttämällä eluenttina 75 % MeOH:ta H20:ssa, jolloin saatiin hieman epäpuhdas esteri (400 mg), joka liuotettiin THF:ään (20 ml) ja käsiteltiin tetrabutyyliam-moniumfluoridilla THFissä (3 ml IM liuosta, 3 mmoolia) ja sekoitettiin 1,5 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Tämän jälkeen reaktioseos konsentroitiin tyhjössä ja jäännös otettiin EtOAc:hen (30 ml) ja pestiin IM sitruunahappo-liuoksella (30 ml) ja sitten H20:lla (30 ml). Orgaaninen faasi kuivatettiin MgS04:n päällä ja konsentroitiin tyhjössä ja jäännös käänteisfaasikromatografoitiin piihappo-geelillä käyttämällä eluenttina 75 % MeOH:ta H20:ssa, jolloin saatiin tuote valkoisena kiintoaineena (200 mg, 47 %), sp. 131 - 135®C (MeOH/H20); [a]Dae -36,le (c = 1,

MeOH); IR (kalvo) 3307, 2933, 2858, 1707 ja 1666 cm-1; NMR (CDCl 3) 6: 0,85 (3H, d, J 6,5 Hz), 1,0 - 1,75 (UH, m), 1,95 - 2,05 (1H, lev. m), 3,22 (1H, d, J 14,5 Hz), 3,33 (1H, d, J 14,5 Hz), 3,50 - 3,80 (2H, m), 3,50 - 4,20 (1H, lev.), 4,20 - 4,30 (1H, m), 5,10 - 5,20 (1H, lev. s), 5,30 (1H, lev. S), 6,64 (1H, lev. s), 6,79 (1H, d, J 15 Hz), 6,90 - 7,35 (10H, m), 7,50 (1H, d, J 8 Hz), 7,79 (1H, lev. s), 8,59 (1H, S); MS (FAB) m/e 575,1 (M+l) ja 288,9 (100); anal. C33H38N4O6*0,25H2O; C, H, N.

Esimerkki 42 4-Γ Γ2-Γr3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-2-r f Γ(2-metyyli-l-sykloheksvyli)oksiIkarbonyyli1amino1-1-oksopropyyli1amino 1-3-fenvylipropyyli1amino1-4-okso-butaanihappo-Γ1R-flaTR*(S*)1,2811-(-)-isomeeri Käytettiin esimerkissä 19 käytettyjä menetelmiä sillä erotuksella, että käytettiin trans-(-)-2-metyylisykloheksyy-lioksikarbonyyli-a-metyyli-R-tryptofaania (2K kaaviossa I) (216 mg, 61 %), sp. 97 - 102°C (Me0H/H20); [a]Dao +37° (c 106197 = 0,22, MeOH); IR (kalvo) 3315, 2930, 2859, 1700 ja 1660 cm-1; NMR (CDCl3) 6: 0,82 (3H, d, J 6,5 Hz), 1,0-1,75 (11H, m), 1,90 - 2,00 (1H, lev. s), 2,40 - 2,70 (6H, m), 2,85 - 3,00 (1H, lev. m), 3,23 (1H, d, J 14,5 Hz), 3,30 (1H, d, J 14,5 Hz), 3,45 - 3,65 (1H, lev. s), 4,20 - 4,30 (2H, lev. m), 5,26 (1H, S), 5,10 - 5,80 (1H, lev.), 6,15 -6,25 (1H, lev. s), 6,90 - 7,20 (9H, m), 7,33 (1H, d, J 8 Hz), 7,53 (1H, d, J 8 Hz), 8,72 (1H, s); MS(FAB) m/e 591,2 (M+l, 100); anal. C33H42N406; C, H, N.

Esimerkki 43 4— Γ Γ 2— ΓΓ 3-(lH-indol-3-vvll)-2-metyyli-2-rΓ Γ(2-metyyll-l-sykloheksyyli) oksi 1 karbonyyll 1 amino 1 -1-oksopropwli 1 amino 1-3-fenyylipropyyli1 amino1-4-okso-2-buteenihappo-Γ1R-riarR*(S*)1,2311-(-)-isomeeri Käytettiin esimerkissä 19A esitettyjä menetelmiä sillä erotuksella, että käytettiin trans-(-)-2-metyylisyklohek-syylioksikarbohyyli-a-metyyli-R-tryptofaania (170 mg, 7,3 %), sp. 118 - 128*C (MeOH/H20); [a]Dao +74° (c = 0,42, MeOH); IR (kalvo) 3500 - 3200, 2933, 2858, 1695 ja 1662 cm-1; NMR (CD3OD) 6: 0,89 (3H, d, J 6,5 Hz), 1,00 - 1,80 (UH, m), 2,00 - 2,10 (1H, lev. m), 2,65 - 2,75 (2H, m), 2,95 - 3,05 (1H, m), 3,16 (1H, d, J 14,5 Hz), 3,36 (1H, d, J 14,5 Hz), 3,60 - 3,70 (1H, m), 4,30 - 4,40 (2H, m), 6,72 (1H, d, J 15 Hz), 6,90 - 7,30 (9H, m), 7,30 (1H, d, J 8 Hz), 7,50 (1H, d, J 8 Hz); MS (FAB) m/e 589,2 (M+l) 220,2 288,9 (100); anal. C33H40N4O6 ·Η20; C, H, N.

Esimerkki 44 Γ2-Γ Γ1-(hydroksimetyyli)-2-hydroksi-2-fenyylietyyli1amino 1-1-(lH-indol-3-yylimetyyli)-l-metyylietyylil-karbamii-nihappo-trisykloΓ 3.3.1.13/71dek-2-yyli-esteri

Noudatettiin esimerkin 19 vaiheen 4 menetelmää sillä erotuksella, että amiinina käytettiin L-(+)-treo-2-amino-l-• - 143 1 06 1 97 fenyyli-l,3-propaanidiolia. Saanto 2 g, 73 %, sp. 69 -73eC, [a]Da0 +47,3° (c = 0,97, MeOH); IR (kalvo) 3396, 1695 ja 1663 cm"1; NMR (CDCl3) 6: 1,48 (3H, s), 1,52 -

1,97 (14H, m), 3,10 (1H, lev. s), 3,17 (1H, d, J 15 Hz), 3,27 (1H, d, J 15 Hz), 3,72 - 4,10 (4H, m), 4,77 (1H, lev. s), 5,01 (1H, d, J 3,5 Hz), 5,26 (1H, s), 6,69 (1H, d, J

7,5 Hz), 6,81 (1H, d, J 2 Hz), 7,09 - 7,40 (8H, m), 7,55 (1H, d, J 8 Hz), 8,13 (1H, s); anal. α32Η39Ν3Ο5·0,25Η2Ο; C, H, N.

TAULUKKO I

106197 .

u js js λ js js & < Q. Oi CU Ö* O. O.

M

n

(g S S S S SS

JS

CU

(Γ) Λτ:* § y—Ϋ / o s s / x s o o o

S O rt O O

sz £ o — o υ \__ y. u M rt rt υ s s — —

\ 4, / Φ O O M M

i r δ s a 00-- z o o o o 7 o · o o ' s s s s < » z s z z _

I cc I t I I SS

M

ei rt

'cc' S S S S SS

A

s s 8 8 o o «M rt "rt *rt S s o o o o

1-1 O O

I ss 1 u z s a (m pj

~ < SS

2 i , rt o o S —O^pS K S S S S 1 t <N _ (Ti Φ

«S S S S SS

IV"\ *_1 \ // d o ® ® ® «®

05 z ^_ff S S S S S SS

°=| P” , , 4 , έ

Il o o o «m r» o

£? o O S O O I

«' 1 s I I z « w o

£C — U--O o O I I · I

'

o rt rt rt ΙΛ VO

z TAULUKKO I (jatkuu) 145 1 06 1 97 U J5 x: £ £ £ £ Oi Oi Oi Oi Oi n x x x x x x "*X X X X S £

M

XX X £ £ £ £ £ £ £ 8 S S 8 υ u o υ

N n N N N

M . IN CN (N N

£ £ £ £ £ O U CJ u u o o o o o o u u o u £ £ £ £ £

Z £ Z Z Z

(M N IN Μ Π £ £ £ £ £ n o υ u u o

£ I I I I I

• σ» 9 O ®

XX XX XX

(N φ Φ Φ Φ Φ £ £ £ £ £ £ tiili O o o o o 0 u u u u

1 I I I I

o o o o o

<1 I I I I

O r- to oi o <-·

Z H H

1« 106197 TAULUKKO I (jatkuu) k JS JS JS JS £ < Q. Oi Oi Oi Oa rt

01 S S S S S

IN

n

X

u 0 υ x

>» X

Xl XX X X

(N

'k X XX X X

X

. §

M «S

O X

o u

N N

X X

o o

X X

z z o o

rt U O

XX II X X

0t o

XX XX X X

NO 0 0 o o

XX XX X X

1 II I I

o o o o o 0 υ υ υ υ

1 il I I

o o o o o

<1 III I

OM r> ^ m \o

2 rH *-< i-t «* H

ι«7 106197 TAULUKKO I (jatkuu)

us s s s s JZ

< cu Cu cu cu cu a, r>

'cc S S S X X X

*Χ X X X X X X

f»

XXX X X X X

XX X

§ 8 8 ου o

PJ CS PJ

XX ~

O O PJ

PJ PJ X

XX o o o - o o o x o u o O O O - o

PJ PJ PJ PJ

xxx x

n O O O O

XII I X X I

“xxx X X X = o

PJ

pj S β O ® X e

XXX X X o X

Il I I I I

o o o o o o o o o . o o o

Il I I I I

o o o o o o

<11 I I I I

-- =b * .¾ s

Or-® o> o h <s

3ζ »-< «-< «-» <S W <N

148 106197 TAULUKKO I (jatkuu)

U & -C JC jc JS

< a, o. o. cu a, r> 'a s s s x x

X

o

O X X

u o o

CM O O

~ o o

CM CM CM

X

CJ CM CM

— X X

o u o a — ~ 0 o o

CM U U

XXX

<<r O z z a: i i i x x

CM

"ei X X X X X

X

I I

O CM

X ~

O CM

n x X u

O

o o υ u

X X

z z

CM CM

X X

n O O

X XXXII

*X X X X X X

CM Cl O V AI S)

X X X X X X

1 I I I I

o o o o o 0 υ o υ o

1 I I I I

o o o o o <11111

X

o O x /\, / V. o VM Q o · \J 1 C )/ a

Ai H

o n id r*» 2 CS 04 04 04 Γ4 149 106197 TAULUKKO I (jatkuu)

U Λ J3 JS jC -C

K O· O, Oi Oi Qa n a x x x s x

X

o o u s u

B

X

u o o

X

_ z

•<r S E I

Oi S S

n •H S S s

Oi s s *> s u 8 M 8 υ o u m O o»

SOS

0 MU

1 S I

~ O —

0 I O

- <T i

to M CO

1 I I

N N (M

S S S

n o o υ

Oi X I I t s c\ «

* K X X X X X

(M O Φ O O V

Oi s s s s s i i i i i o o o o o o o u o o

» 1 I I I

o o o o o

< I I I I I

o o o o o fH a a a a a

X

O βο 0\ O Ή <M

z fN M o « n 150 106197 TAULUKKO I (jatkuu) li JS Λ £ Jf jc: < CU CU Ot Cu Ci rt 'a s s s s s e s o s o o

0 O X

1 υ o

X 3 O

O O O

β I ci

XXX CJ CJ CJ

0 O O

CJ O O

XXX X Z X

1 I I X

« X

a

Ci

rt X X X X X

CC

u § 8

O CJ

O Ci

IM X

X CJ

CJ o tn w

Ci CJ

X X

rt CJ CJ

K i x x x i

*3 X X X X X

Cl O «I β O ®

CC £ S X X X

liiti 0 o o o o cj υ o cj cj 1 II I i o o o o o <11111 * 4 s ^ ä O rt ·« ΙΟ Ό t" Z rt Cl rt Cl rt TAULUKKO I (jatkuu) ,51 106197 U JS J3 JS JS .e K cu cu x cu β, n 'x x s a x x

X

X o e o 0 u

CJ (S

M <N

X X

s °

1 I

O X

υ z • o o cj * xxxii

X

IM

•H X X X X X

K

X

i I

-* o

IM X

X cj

Z I

X

X CJ

X cj o

O IM CJ

0 X X

CJ CJ z

IM IN IM

XXX n CJ CJ O

X I I I X X

*« X X X X X

IM O O S O 0)

X X X X X X

1 I I I I

o o o o o

0 CJ CJ CJ CJ

1 i i i i o o o o o < i i i i i 1 b ^ ' O co «n o <-· im

Z n r> ^ v »T

152 106197 TAULUKKO I (jatkuu) U JC G Λ JS x:

^ CU CU Cu CU CU

r» a x s x x s; X o § 8

O M

X

0 N

1 X

X u 0 —

1 I

o o υ o

X X

X z t x x i i x cc

IN

-u X X X X X

cc

X

I §

O IM

X

U IM

X

X o 0 —

1 I

o o 0 o

1 I

X X

Z X X

IM IM O

XX _r«

rt U U X

X I I X X u

Oi

X X X X X X

• IM «I Cl 0 « 4)

X X X X X X

liiti o o o o o 0 o u u υ

1 I I I I

o o o o o < i i i i i •_ n \ a a o o a \_y O n ** ιΛ so r* SS ^ ^ ^ ^ ^ 153 106197 TAULUKKO I (jatkuu) u c js a sz < CU X Oi Oi n

"os S X S X

r>

Y

X

z o 0

IN

w

X

u o 0

X

z

<* X I X X

X

IN

•H X X X X

X

o

X

8 x X 8 8 8 0 o

I IN

U XX

<N o o — o o X o o

O XX

I z z

X IN IN

O XX

n w O O

X I X I I

σι

K X X X X

o e e o o

X S X S X

I I I I

o o o o o o o o

I I I I

o o o o

< I I I I

<_ / y) o o o H \ // a o o H ...

O CO <Ti O «H

25 m in

TAULUKKO II

154 1 06 1 97 ί?.

O o n» D ** Ξ A.

/ \ A

/id )s Γ no.

o

rte II

D Nh = iv X\ / /CD2H

rrr γ 'p-Y^ tu · l

NH

TAULUKKO II (jatkuu) 155 1 06 1 97 •7/.

»1 rTV’Y"'i 1

il P* O

D V

tkj w Γι'" n z.

~ä Λ ^ . D ►« Ξ /~v / m J--k,, Y κη ,f co2h iki ’ l ‘ ’ ry- 73« TAULUKKO II (jatkuu) 156 106197 o nm || ui if T *» pd ' CJ" 7V· -il .. °

riY'YT' M

tU · L

lYm 106197 TAULUKKO II (jatkuu) nr.

o o . o ) Λ ω u w°

^ C°2H

(fYY 1 ’

Yd ° V\ A/- 77, TAULUKKO II (jatkuu) 158 106197

Ph A"* * | mm / cd2m 'Yf Τ' 'k kk n 8.

' WfX-'f-'’· V ^ 0 l

KU

kk TAULUKKO II (jatkuu) 159 1 06 1 97 o n<\.

H» || D S ö' W-fr-

• · I

1 m 160 106197 TAULUKKO II (jatkuu) 9/·' . / n» Il i O NM Ξ Av /T\/ 'm*· sy~ 8a.

-1 Λ ,.iU l 1 lY"' 161 106197 TAULUKKO II (jatkuu) S3.

OH

j m

H

§>γ.

:: ίϋ S^ il" 162 106197 TAULUKKO II (jatkuu)

S5"- ^.DH

Me | r ( 1 l 08 Υλ (1 ky &ώ.

___N

H Ϊ! ^ λ· Il j| n °n\/'wh/ :. L / D l PK 0

-· dd V

ly* 163 106197 TAULUKKO II (jatkuu) §7- /h «. j f i HJ y A/ SS.

«. || f : ^ ! Λ?- ' ky TAULUKKO II (jatkuu) 164 1 06 1 97 89.

° if ° 0 Et rTT y x M 'rV 1 · • « « · 165 106197 TAULUKKO II (jatkuu) ^ m 0===\ o / » Il Υ>γ^^γν^ \ n1 fh o

Nh 92 /

0=K

; 0¾^ 166 1 06 1 97 TAULUKKO II (jatkuu)

93 H02C \ y NH

• 94

m I

0 OH

167 106197 TAULUKKO II (jatkuu) 95 & 96

Me 0

z Me II

Jv. .0. NH : J! * :=κ T T T ^ ’ Vn "V* H / '

. NH

»I I

CO^H

96 a rw ·:=. Z^X Y "f* * . Ύ \ Ph 0 " , »i 168 1 06 1 97 TAULUKKO II (jatkuu) 97 98 ' 0Yf '69 106197 TAULUKKO II (jatkuu) 99 H°2C^j T*° o

Me II *

/NH

100 • ·

___- N

0 D »' ^ * Il II II " rfY Y i “Ά .Hd · L “ ’ ry· 170 1 06 1 97 TAULUKKO II (jatkuu) o 101 ne ^ 0 m r ✓v NH ^ ν^ω,Ν fcU ° " 1 rY” • · 102 τ'- TAULUKKO IX (jatkuu) 171 106197 103 €) \ \ 104 »Hl P* , irr"Yi ’ V J 0 -ι 72 1 06 1 97 TAULUKKO II (jatkuu) 105

Ph o Y o n. I! V 11 ifY °Y i Yd 0 A/w

Yy1 106 0 n> I!

= ΓΓΥ Y ; Y

/id " V\ Y

»

YY

173 106197 TAULUKKO II (jatkuu) 107

PK

ö • ( • t TAULUKKO II (jatkuu) 1,4 106197 108.

• · < « 4 TAULUKKO II (jatkuu) ,75 1 06 1 97 109 / ,1' ' . ' ' .

^ 'rV

• » » ·' • ♦ TAULUKKO II (jatkuu) 176 1 06 1 97 I ιο.

o rv II :

^ NH r A X

0 Y t^· w « 177 106197 TAULUKKO II (jatkuu) 111 ccyi 0 fW !| : ^ ^ 0. * z JL A pk /ΛΎ ΝΑ

IU · L

A/w kk

• I

TAULUKKO II (jatkuu) 178 1 06 1 97 l li.

rh Ί f 'VX Y"τ' 5χ/^" ^ 'x> kk «

Claims (12)

106197 Patenttivaatimukset 1. Menetelmä kaavan I /¾. - R1 - A - NH *1* CONH\ JK ^ Me Ph R3 mukaisten dipeptoidityyppisten a-metyylitryptofaanijohdannaisten tai niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, jossa kaavassa R1 on 3-12 hiiliatomia sisältävä sykloalkyyli- tai polysyklo-alkyylihiilivety, jossa on 0-4 substituenttia, joita ovat suora tai haarautunut Cj-Cg-alkyyli, halogeeni tai CF3, A on —OC(=0) —, -S02- tai -CH2C0-, R3 ja R4 ovat toisistaan riippumatta H, Cj-C^-alkyyliryhmä tai -(CH2)n-B-D, jossa n on kokonaisluku 0-3, B on sidos, -0C0(CH2) n-, -0 (CH2) „—, -NHCO ( CH2) n-, -CONH (CH2) n-, -NHCOCH=CH-, -S (CH2) n—, -S (=0) - (CH2) „— tai -S02(CH2)n—, jossa n tarkoittaa samaa kuin edellä, ja D on H, -COOR*, -OH tai tetratsoli, jossa R* on H tai suora tai haarautunut C^-Cg-alkyyli ja Ph on fenyyliryhmä, joka on mahdollisesti substituoitu halogeeniatomilla, tunnettu siitä, että a) kaavan Ia 106197 jöjI «»> ^ R4 H.N'f c°NH^Aph R3 mukainen yhdiste, jossa R3 ja R4 tarkoittavat samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan kaavan IV Ra-A-Cl (IV) mukaisen yhdisteen kanssa, jossa R1 ja A tarkoittavat samaa kuin edellä, tai b) sellaisten kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa A on -0C(=0)-, kaavan VI j±0 ™ R1 - OCONH l'”' COOH Me mukainen yhdiste, jossa R1 tarkoittaa samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan kaavan VII H2N-CHR3-CHR4-Ph (VII) mukaisen amiinin, jossa R3 ja R4 tarkoittavat samaa kuin edellä, tai sen trifluoriasetaattisuolan kanssa ja tarvittaessa vapautetaan saatu yhdiste suolastaan, tai c) sellaisten kaavan Ϊ mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa A on -0C(=0)-, R1 tarkoittaa samaa kuin edellä, R3 on -CH2OCOCH2CH2COOH ja R4 on vety, kaavan VIII 181 106197 /Ό S (VIII) R1 - OCONH ‘’’T"* CONH\ , Me Y^Ph ^OH mukainen alkoholi saatetaan reagoimaan meripihkahappoanhydri-din kanssa, tai d) sellaisten kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa R1 tarkoittaa samaa kuin edellä ja A on -0C(=0)-, R3 on -CH2NHCOCH*CHCOOCH3, -ch2nhcoch2ch2cooh tai -ch2nhcoch=ch-COOH ja R1 on H, kaavan IX ήο { (IX) R1 OCONH *1** CONHv. Me Ph mukainen atsidi saatetaan reagoimaan meripihkahappoanhydridin tai fumaarihapon suolan tai esterin kanssa, tai e) sellaisten kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa R1 tarkoittaa samaa kuin edellä, A on -OC(=0)-, R3 on H ja R1 on -NHCOCH2CH2COOH tai -NHCOCH=CHCOOH, kaavan VI XX) R1-OCONH P'COOH Me mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan kaavan X 182 1 06 1 97 /s. CONfk. Bz02C Y^nh2 (x) Ph mukaisen amiinin kanssa, jonka jälkeen saatu bentsyyliesteri hydrataan vapaaksi hapoksi, ja haluttaessa näin saadut kaavan I mukaiset yhdisteet muunnetaan farmaseuttisesti hyväksyttäviksi suoloikseen, ja/tai niiden mahdollisesti sisältämät alkyyliesteriryhmät hydrolysoidaan vapaiksi happoryhmiksi.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan (±)trans-2-kloorisykloheksyyli[1-(lH-indol-3-yylimetyyli)-1-metyy1i-2-okso-2-[(2-fenyy1ietyy1i)amino]etyyli]karbamaatti, (+)- tai (-)-2-kloorisykloheksyyli[l-(lH-indol-3-yyli~ metyyli)-l-metyyli-2-okso-2-[(2-fenyylietyyli)amino]-etyyli]karbamaatti tai 2-kloorisykloheksyyli[2-[[1-(hydroksimetyyli)-2-fenyyli-etyyli]amino]-1-(lH-indol-3-yylimetyyli)-l-metyyli-2-okso-etyyli]karbamaatti.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2-[[2-[[[(2-kloorisykloheksyyli)oksi]karbonyyli]amino]-3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyy1i-l-oksopropyyli]amino]-3-fenyy-lipropyyli-butaanidioaatti tai 2-[[2-[[[(2-metyylisykloheksyyli)oksi]karbonyyli]amino]-3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-oksopropyyli]amino]-3-fenyy-lipropyyli-butaanidioaatti. 1 Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 106197 (±) -trisyklo[3.3.1. l3,7]dek-2-yyli-[ 1- (lH-indol-3-yylimetyy-li)-l-metyyli-2-okso-2-[(2-fenyylietyyli)amino]etyyli]karba-maatti, " trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yyli-[2-[ [l-(hydroksimetyyli)- 2-fenyylietyyli]amino]-1-(lH-indol-3-yylimetyyli)-1-metyy-li-2-oksoetyyli]karbamaatti tai (R) -trisyklo [3.3.1.I3'7 ] dek-2-yyli- [ 1- (lH-indol-3-yylimetyy-1i)-l-metyy1i-2-[metyy1i-(2-fenyy1i etyy1i) amino]-2-okso-etyylikarbamaatti.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo-[3.3. l.l3*7] dek-2-yylioksi)karbonyyli] amino] propyyli] amino] -3-fenyylipropyyli-butaanidioaatti tai 2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[(trisyklo-[3.3.1.13'7] dek-2-yy lioksi) karbonyyli ] amino] propyyli] amino] -l-fenyylietyyli-butaanidioaatti.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan [R-(R*,R*) ]“4**[ [2-[ [3-(lH-indol-3-yyli) -2-metyyli-1-okso-2 [ [ (trisyklo[3.3.1. l3,7]dek-2-yylioksi) karbonyyli]amino]-propyyli]amino]-l-fenyylietyyli]amino]-4-oksobutaanihappo.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan [R—[R*,S*-(E)]]—4—[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2 [ [ (trisyklo[3.3.1. l3,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]-propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli] amino]-4-okso-2-buteeni-happo, [R-[R*,R*-(E)]]-4-[[2-[[3 —(lH-indol-3—yyli)—2-metyyli-1-okso- 1M 106197 2 [ [ (trisyklo[3.3. 1. l3,7]dek-2-yylioksi) karbonyyli]amino]-propyyli]amino]-1-fenyylietyyli]amino]-4-okso-2-buteenihappo tai [R“[R*,S*)]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2[ [ (trisyklo[3.3.1. l3,7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]-propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]amino]-4-oksobutaanihappo.

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan [lS-[la,2P[S*[S*(E)]],4a]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[[(l,7,7-trimetyylibisyklo[2.2.1]hept-2-yyli)oksi]karbonyyli]amino]propyyli]amino]-1-fenyyli-etyyli]amino]-4-okso-2-buteenihapon metyyliesteri (bisyklojärjestelmä on lS-endo) tai [lS-[la,2P[S*[S*(E)]],4a]]-4-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[[[(l,7,7-trimetyylibisyklo[2.2.1]hept-2-yyli)oksi]karbonyyli]amino]propyyli]amino]-1-fenyyli-etyy1i]amino]-4-okso-2-buteenihappo (bisyklojärj estelmä on lS-endo).

9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan [R-(R*,S*)]~P~[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[ [ (trisyklo[ 3.3.1. l3,7]dek-2-yylioksi) karbonyyli] amino] -propyyli]amino]bentseenibutaanihappo.

10. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan [R-(R*,S*)]-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2-[ [ (trisyklo[3.3.1.13'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]-propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]sulfinyyli]etikkahappo tai sen etyyliesteri, [R-(R*,S*)]-[[2-[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso-2- 185 1 06 1 97 [ [ (trisyklo[3.3. l.l3'7]dek-2-yylioksi)karbonyyli]amino]-propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]sulfonyyli]etikkahappo tai sen etyyliesteri tai [R-(R*,S*)]-[[2~[[3-(lH-indol-3-yyli)-2-metyyli-l-okso~2-[ [ (trisyklof 3.3.1. l3,7]dek-2-yylioksi) karbonyyli]amino] -propyyli]amino]-3-fenyylipropyyli]tio]etikkahappo.

11. Kaavan VI ΧΌ ™ R1-CX:ONH'l'COOH Me mukainen välituoteyhdiste, jossa R1 tarkoittaa samaa kuin patenttivaatimuksessa 1.

12. Patenttivaatimuksen 11 mukainen välituoteyhdiste, jossa R1 on l-adamantyyli, 2-adamantyyli, 4-protoadamantyyli, eksobornyyli, endobornyyli, eksonorbornyyli, endonorbornyyli, 2-kloorisykloheksyyli, 2-metyylisykloheksyyli tai kamfanyyli. 1.6 106197