FI100109B - Hemopeptidiä aktiivisena komponenttina sisältävä mikroperoksidaasivalm iste - Google Patents
Hemopeptidiä aktiivisena komponenttina sisältävä mikroperoksidaasivalm iste Download PDFInfo
- Publication number
- FI100109B FI100109B FI921606A FI921606A FI100109B FI 100109 B FI100109 B FI 100109B FI 921606 A FI921606 A FI 921606A FI 921606 A FI921606 A FI 921606A FI 100109 B FI100109 B FI 100109B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- peroxidase
- gln
- preparation
- pumilus
- peroxide
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0065—Oxidoreductases (1.) acting on hydrogen peroxide as acceptor (1.11)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/32—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Bacillus (G)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/795—Porphyrin- or corrin-ring-containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
- C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
- C11D3/0005—Other compounding ingredients characterised by their effect
- C11D3/0021—Dye-stain or dye-transfer inhibiting compositions
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
- C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
- C11D3/16—Organic compounds
- C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
- C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
- C11D3/38654—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase containing oxidase or reductase
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Detergent Compositions (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Coloring (AREA)
- Chemical Or Physical Treatment Of Fibers (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Description
5 100109
Hemopeptidiä aktiivisena komponenttina sisältävä mikroper-oksidaasivalmiste - Mikroperoxidaspreparat innehällande en hemopeptid som en aktiv komponent Tämä keksintö kohdistuu hemopeptidiin, jolla on peroksidaa-siaktiivisuutta, peroksidaasivalmisteeseen ja tällaisen valmisteen valmistamiseen ja käyttöön.
10
Peroksidaasiaktiivisuus katalysoi substraatin hapettumista (elektroni tai vetydonori) yhdessä vetyperoksidin kanssa.
Eräät mikro-organismit valmistavat solunsisäisesti runsas-15 molekyylisiä peroksidaaseja (E.C.1.11.1.7.) . S. Loprasert et ai., Journal of General Microbiology (1988), 134, 1971-1976) kuvaavat Bacillus stearothermophiluksesta peräisin olevan peroksidaasikatalaasin, jonka molekyylipaino on 175000, ja US-patentissa 4 698 306 kuvataan Coprinuksesta peräisin ole-20 van peroksidaasi, jonka molekyylipaino on 37000-41000. Tunnetaan myös nisäkäsalkuperää olevia niin kutsuttuja mikrope-roksidaaseja, jotka ovat hemopeptideitä, joiden molekyyli-paino on alueella 1500-3000 ja joilla on peroksidaasitoimin-taa (esim. DE-3 134 526).
25
Peroksidaasin käyttöä yhdessä vetyperoksidin tai vetyperok- ’·...· sidiprekursorin kanssa on ehdotettu esimerkiksi massan vai- ί.Σ.ί kaisuun paperinvalmistuksessa (SE-88/0673) , massan valmis- *:**: tuksesta peräisin olevan jäteveden puhdistukseen US-4 623 ·'·.· 30 465, JP-A 2-31887) ja suurpesuaineiden valkaisukyvyn paran- • · tamiseen (WO-89/09813) . US-patenttihakemuksessa sarjanumero 07/421 414 (jätetty 13. lokakuuta 1989) ja siitä jatketussa PCT-hakemuksessa selostetaan käyttöä värin siirtymisen inhi- • · · *... boimiseksi pyykkiä pestessä.
35
Keksinnön kohteena on saada aikaan näihin tarkoituksiin tar-: : koitettu parannettu peroksidaasi. Peroksidaasin tulee olla ···. aktiivista ja vakaata korkeassa lämpötilassa ja H202-pitoi- suudessa, erityisesti aikalisissä olosuhteissa. Sen tulee 2 100109 olla vapaata katalaasista, koska tämä toiminta hajottaa reaktiossa tarvittavan vetyperoksidin. Paremman tuotantotalouden takia peroksidaasin tulee olla mikrobista ja kyseisen mikro-organismin tulee tuottaa se solunulkoisesti.
5
Nyt on yllättäen keksitty, että jotkin Bacillus pumilus -kannat tuottavat peroksidaasia solunulkoisesti. B. pumiluk-sesta peräisin oleva uusi peroksidaasivalmiste on mikroper-oksidaasivalmiste, so. se sisältää hemopeptidiä aktiivisena 10 komponenttina. Valmisteen stabiilius on parempi korkeissa lämpötiloissa, korkeassa pH:ssa ja korkeissa vetyperoksidi-konsentraatioissa. Se voidaan valmistaa ilman ei-toivottua katalaasiaktiivisuutta.
15 Keksinnön mukaisesti on näin ollen aikaansaatu hemopeptidi, jolle on tunnusomaista, että sillä on kaava:
Gln-Glu-Gln-Thr-Cys-Ile-Ser^Cys-His-Gly-Asp-Asn-Met-Gln '"''""'H e emi 20 jossa kahden kysteiinin rikkiatomit ovat kytkeytyneenä hee-min vinyyliryhmiin.
.·. Keksinnön mukaisesti on myös aikaansaatu peroksidaasivalmis- ,··. 25 te, jolle on tunnusomaista, että se käsittää edellä määri- tellyn hemopeptidin aktiivisena komponenttina.
• · · • · [ . Keksinnön mukaisesti on lisäksi aikaansaatu peroksidaasival- *· miste, jolle on tunnusomaista, että • · · m m ’ 3 0 - se käsittää yhden tai useamman aktiivisen komponentin, joka on johdettu B. pumilus -kannasta, jonka molekyylipaino • · • '·· on alueella 800-2500, ja joka sisältää heemiryhmän, joka on kytkeytynyt peptidiketjuun, joka sisältää sekvenssin Gln-Glu-Gln-Thr-Xaa-Ile-Ser-Yaa-His-Gly-Asp-Asn-Met-Gln, jossa 'Xl 35 Xaa ja Yaa ovat mikä tahansa aminohappo, ·; - sen pH-optimi on alueella 7-9, • ti-: - se säilyttää vähintään 40 % jäännösaktiivisuutta 30 minuu- tin jälkeen 80 °C:ssa ja pH:ssa 7, ja 3 100109 - sillä on lisääntyvä reaktionopeus 20 mM:iin H202 saakka.
Mainittu pH-optimi voi olla alueella 7,5-9 ja valmiste voi säilyttää vähintään 50 % jäännösaktiivisuutta 2 tunnin jäl-5 keen 80 °C:ssa ja valmisteella on optimiaktiivisuus H202-kon-sentraatiossa yli 20 mM.
Lisäksi keksintö saa aikaan menetelmän peroksidaasivalmis-teen valmistamiseksi, jolle on tunnusomaista, että se käsit-10 tää peroksidaasia tuottavan B. pumilus -kannan viljelemisen, mitä seuraa peroksidaasin talteenotto.
Lisäksi keksintö saa aikaan edellä mainitun peroksidaasival-misteen käytön yhdessä vetyperoksidin kanssa (muodostettu 15 optionaalisesti in situ) ligniiniä sisältävän materiaalin valkaisussa.
Hemopeptidi
Kuten edellä mainittiin, eräs keksinnön suoritusmuoto saa 20 aikaan mikroperoksidaasin, so. hemopeptidin, jolla on kaava:
Gln-Glu-Gln-Thr-Cys- Ile-Sei>,Cys-His-Gly-Asp-Asn-Met-Gin ^Heemi*^ , ·, 25 jossa kahden kysteiinin rikkiatomit ovat kytkeytyneenä hee- "I min kahteen vinyyliryhmään. Tämä yhdiste voidaan valmistaa • · · * *. synteettisesti alalla hyvin tunnetuilla menetelmillä, nimit- [ * täin syntetoimalla ensin peptidiketju, joka sisältää kaksi • · · *♦ kysteiiniä, ja antamalla sitten tämän peptidin reagoida hee- • · · V * 30 min kanssa tai se voidaan valmistaa geneettisesti alalla tunnetuilla menetelmillä: syntetoidaan rappeutunut oligonuk-j *.· leotidikoetin (perustuu tunnettuun aminohapposekvenssiin) ja käytetään sitä mikroperoksidaasin prekursoripeptidiketjua . koodaavan B. pumilus -geenin eristämiseen. Modifioidut mik- *;;; 35 roperoksidaasit saadaan tämän jälkeen paikkasuunnatulla mu- "* tageneesillä (viite, Molecular Cloning, A Laboratory Manual, : Cold Spring Harbor, 1989, toim. J. Sambrook, E.F. Fritsh ja :‘: T. Maniatis, ISBN 0-87969-309-6).
4 Ί 00 Ί 09
Edellä esitetty hemopeptidi voidaan valmistaa viljelemällä B. pumilus -kantaa jäljempänä kuvatusti.
Seuraavaksi esitetään keksinnön mukaisten hemopeptidien sek-5 venssien ja tunnetun, eläimestä tai kasvista peräisin olevan sytokromin C hydrolysoinnilla valmistetun mikroperoksidaasin (DE-3 134 526) välinen vertailu:
Tekniikan taso: 10 Phe-Val-Gln-Lys-Cys-Ala-Gln^Cys-His-Thr-Val-Glu-Lys-Gly 'Sv'Heemi/,//^
Keksintö
Gln-Glu-Gln-Thr-Cys-Ile-Ser-Cys-His-Gly-Asp-Asn-Met-Gln 15 Ns^Heemix’^
On nähtävissä, että uusi mikrobinen mikroperoksidaasi on hyvin vähän homologinen tunnetun mikroperoksidaasin kanssa.
20 B. pumiluksen viljeleminen B. pumilus -kannat, joita voidaan käyttää keksintöä toteutettaessa, ovat ei-tyypillisiä kyvyltään tuottaa peroksidaa-sia. Joidenkin B. pumilus -kantojen, mukaan lukien tyyppi-kanta, ei ole havaittu tuottavan peroksidaasia.
25 '···' Kaksi peroksidaasia tuottavaa kantaa on vapaasti saatavissa *.’·* talletusnumeroilla ATCC 12905 ja NCIB 8600 ja hakija on tal- '·*’· lettanut yhden kannan (kansainvälinen nimitys S 197) Buda- • · :/·· pestin sopimuksen mukaisesti; talletus tehtiin 23. heinäkuu- ; 30 ta 1990 ja talletusnumero on DSM 6124.
^ ATCC tarkoittaa American Type Culture Collectionia, 12301
Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, USA, NCIB tarkoittaa National Collection of Industrial and Marine Bacte-35 ria Ltd., Torry Research Station, P.O. Box 31, 135 Abbey '·...· Road, Aberdeen AB9 8 DG, Skotlanti, ja DSM tarkoittaa Deut- .···. sche Sammlung von Mikroorganismenia, Mascheroder Weg IB, ·.·.·. 3300 Braunschweig, Saksa.
Il 5 100109
Peroksidaasia tuottavia B. pumilus -kantoja voidaan viljellä aerobisissa olosuhteissa ravintoväliaineessa, joka sisältää assimiloituvaa hiiltä ja typpeä yhdessä muiden oleellisten ravintoaineiden kanssa. Väliaine voi olla koostettu alalla 5 tunnettujen periaatteiden mukaisesti.
Solut erittävät viljelyn aikana peroksidaasia solunulkoises-ti samalla kun ne ilmeisesti tuottavat katalaasia solunsi-säisesti. Peroksidaasin solunulkoinen tuottaminen on edul-10 lista, koska se mahdollistaa korkean fermentointisaannon ja yksinkertaisen talteenoton. Katalaasi on ei-haluttua useimmissa peroksidaasin käytöissä, joten peroksidaasin talteenotto käsittää edullisesti solumassan erottamisen solu-liemestä välttäen solulyysiä, esim. suodattamalla tai sent-15 rifugoimalla.
Saatu soluton viljelyliemi sisältää hemopeptidiseoksen, jossa on peroksidaasiaktiivisuus molekyylipainon ollessa alueella 800-2500. Sitä voidaan käyttää sellaisenaan, optionaa-20 lisesti esim. haihduttamalla tai ultrasuodattamalla konsent-roinnin jälkeen. Haluttaessa voidaan erilaiset hemopeptidit erottaa ja puhdistaa haluttuun asteeseen konventionaalisilla menetelmillä, esim. pylväskromatografiällä.
25 pH ia lämpötilasta riippuvuus . Keksinnön mukaisella raa'alla peroksidaasivalmisteella (ku- • · vio 1) ja samanlaisella puhdistetulla valmisteella (kuvio 2) • · . on hieman erilainen pH-optimi mutta kumpikin on alueella 7-9.
30
Keksinnön mukaisten peroksidaasivalmisteiden lämpöstabiilius ! ’* (kuviot 3 ja 4) on merkittävästi parempi kuin tekniikan ta- ··· : son mukaisella mikrobisella peroksidaasilla (kuvio 5). Kek sinnön mukainen raakavalmiste (kuvio 3) on lämpövakaampi 35 kuin samanlainen puhdistettu valmiste. Kumpikin keksinnön • valmisteista säilyttää yli 40 % jäännösaktiivisuudesta 30 minuutin inkuboinnin 80 °C:ssa pH:ssa 7 jälkeen.
6 100109
Vetyperoksidista riippuvuus
Keksinnön mukaisella peroksidaasivalmisteella (kuvio 4) on lisääntynyt reaktionopeus 20 mM:iin H202 saakka (korkein testattu) . Vertailtaessa on tekniikan tason mukaisella mikrobi -5 sella peroksidaasilla laskenut reaktiotaso H202-konsentraa-tioissa yli 0,1 mM (kuvio 7).
Ligniiniä sisältävän materiaalin valkaiseminen Johtuen keksinnön mukaisen peroksidaasivalmisteen hyvästä 10 stabiiliudesta korkeissa lämpötiloissa ja korkeassa H202-kon-sentraatiossa, se sopii yhdessä vetyperoksidin kanssa ligniiniä sisältävien materiaalien, kuten paperituotannon massan tai massan valmistuksesta peräisin olevan jäteveden, valkaisemiseen, kuten on kuvattu SE-88/0673:ssa, US-4 623 15 465:ssä tai JP-A-2-31887:ssä. Tavanomaiset olosuhteet ovat pH 7-10, 25-70 °C, 10-300 mM H202 ja annostus 10-100 NOPA/g kuiva-ainetta. Vetyperoksidia voidaan lisätä sellaisenaan tai se voidaan muodostaa in situ, esim. sisällyttämällä pre-kursori, kuten perboraatti tai perkarbonaatti, tai entsy-20 maattinen järjestelmä, joka kykenee generoimaan vetyperoksidia, esim. oksidaasi ja sen substraatti (kuten glukoosi ja glukoosioksidaasi).
Muita peroksidaasin käyttönä 25 Keksinnön mukaisten peroksidaasivalmisteiden käyttäminen on erityisen edullista korkeissa lämpötiloissa ja/tai korkeissa ♦ · · *·*·’ H202-konsentraatioissa ja emäksisessä pH: ssa. Esimerkiksi sitä voidaan sisällyttää suurpesuaineisiin yhdessä vetype- l.’·· roksidiprekursorin (kuten natriumperboraatti tai -perkar- • ·· i 30 bonaatti) kanssa tahrojen valkaisemisen parantamiseksi WO-89/09813 mukaisesti.
• · • · • · ·
Toisena esimerkkinä peroksidaasivalmistetta voidaan käyttää tekstiilivärin toisesta kudoksesta toiseen kudokseen siir-35 tymisen inhiboimiseksi kudoksia pesuliuoksessa pestäessä ja/tai huuhdeltaessa lisäämällä sitä yhdessä vetyperoksidi-• prekursorin kanssa pesunesteeseen, jossa kudoksia pestään ".·. ja/tai huuhdellaan.
li 7 100109
Peroksidaasitesti (NOPA)
Peroksidaasiaktiivisuus mitataan 2 mM H202:ssa. Seuraavat sekoitetaan 30 °C:ssa termostaatilla varustetussa 1 ml:n kvartsikulhossa: 5 200 μΐ 1 mM 4-aminoantipyriiniä (4-AA, Sigma No. A-4382, 0,2 mg/ml) 200 μΐ N-etyyli-N-sulfobutyyli-m-toluidiini-Na:a {ESBT, 5,86 mg/ml) 200 μΐ 0,5 M fosfaattipuskuria, pH 7,0 10 200 μΐ entsyyminäytettä, laimennettu 0,02-0,10:een NOPA/ml
Lisätään 200 μΐ 10 mM vetyperoksidia ja absorbanssia seurataan 550 nmrssä 1 min. Aktiivisuus ilmaistaan yksikköinä, jotka merkitään NOPA, laskettuna absorbanssin lisäyksenä 15 ensimmäisen viiden minuutin aikana H202:n lisäämisen jälkeen kerrottuna laimennoksella. Entsyyminäyte tulee laimentaa siten, että absorbanssin lisäys minuutissa on alueella 0,02-0,10.
20 Kuviot 1 ja 2 esittävät keksinnön mukaisen raa'an ja puhdistetun peroksidaasivalmisteen pH-aktiivisuutta vastaavasti mitattuna NOPA-menetelmällä mutta vaihdellen pH: ta esitetys-ti.
··. 25 Kuviot 3 ja 4 esittävät keksinnön mukaisen raa'an ja puhdis- tetun peroksidaasin lämpöstabiiliutta mainitussa järjestyk- • · · * sessä. Vertailun vuoksi esitetään kuviossa 5 tekniikan tason | mukaisen peroksidaasivalmisteen (Coprinuksesta) lämpöstabii- l * * •lius. Mittaukset suoritettiin inkuboimalla osoitetun ajan ja :·* * 30 osoitetussa lämpötilassa, sitten näyte laimennettiin välit tömästi 10-kertaisesti 0,1 M fosfaattipuskuriin, pH 7, 25 • "·· °C:ssa ja peroksidaasiaktiivisuus mitattiin (NOPA) .
• · ·
Kuviot 6 ja 7 esittävät reaktiota erilaisissa H202-konsent-35 raatioissa tämän keksinnön mukaisen peroksidaasin ja teknii-; kan tason mukaisen peroksidaasin (Coprinus) ollessa kyseessä I I · mainitussa järjestyksessä. ESBT + 4-AA:n hapettamista seura-': si absorbanssin mittaaminen 550 nm.-ssä.
8 100109
Kuviot 1 ja 3 tehtiin käyttäen esimerkissä 1 valmistettua solutonta viljelylientä. Kuviot 2, 4, 6 ja 7 tehtiin käyttämällä esimerkin 1 poolia II.
5 Kuviot 8-11 esittävät keksinnön mukaisen peroksidaasin puhdistuksesta olevia kromatogrammeja. Yksityiskohdat on annettu esimerkissä 2.
Esimerkit 10
Esimerkki 1
Peroksidaasin valmistaminen Bacillus pumiluksesta Väliaineet valmistettiin seuraavasti (aineosat g:na/l): 15 TY* 3
Trypticase, BBL g/1 60
Hiivauute, Difco g/1 15
FeS04-7H20 g/1 0,025
MnS04'4H20 g/1 0,0026 20 MgS04'7H20 g/1 0,045 pH 7,3 (säädetty KOH:lla) Väliainetta autoklavoitiin 121 °C:ssa 45 minuuttia.
25 Aqar3
Peptone Bacto g/1 6 • « ·
Pepticase g/1 4 • · . . Hiivauute, Difco g/1 3 *· *· Lihauute l, 5 • *1 V 30 Glukoosi 1 pH 7,3 • « * *·· Agar (Merckiltä) 20 (lisättiin viimeisenä) • · ·
Agaria autoklavoitiin 121 °C:ssa 45 minuuttia.
35 11' Istutus-agar: io Agar3-viisteeseen istutettiin 1 pakastekui- vattu Bacillus pumilus -kanta no S197 ja inkuboitiin ' : 30 °C:ssa 24 tuntia.
Il 9 Ί 00109
Istutusväliaine: Kahteen 500 ml ravistuspulloon, jotka sisälsivät 100 ml TY*3-välianetta, istutettiin yksi Agar3-viiste ja inkuboitiin 30 °C:ssa ja 250 rpmrssä 24 tuntia.
5 Peroksidaasin tuotanto: 50 ravistuspulloon, jotka sisälsivät 100 ml TY*3, istutettiin kuhunkin 2 ml edellä kuvattua istutetta. Sitten jokaiseen ravistuspulloon lisättiin 2,5 ml steriiliä 40 % (paino/paino) glukoosia vedessä. Ravis-tuspulloja inkuboitiin 30 °C:ssa 48 tuntia ja sitten kor-10 jättiin saanto. Lopullinen peroksidaasiaktiivisuus on 1 NOPA/ml (NOPA mitattu 20 mM:ssa H2O2)·
Esimerkki 2
Peroksidaasin puhdistaminen B. pumiluksesta 1 5 3250 ml esimerkissä 1 saatua vilj elylientä suodatettiin
Seitz Supra 100 -suodatinlevyn läpi ja seuraavaksi Supra 50 levyn läpi puhtaan suodoksen saamiseksi, jonka aktiivisuus on 1,29 NOPA/ml.
20 900 ml:aan suodatetta lisättiin 70 g Amberlite XAD16 hydro fobista hartsia ja seosta sekoitettiin yön yli 4 °C:ssa. Hartsi erotettiin dekantoimalla ja pestiin 10 % til./til. etanolilla. Peroksidaasi uutettiin hartsista 200 ml:11a 50 • : : % til./til. etanolia, joka haihdutettiin 72 ml:aan aktiivi- 25 suuden ollessa 13,8 NOPA/ml (saanto: 86 %).
....; Haihdutettua peroksidaasiuutetta levitettiin DEAE Sepharose .·. ; FF -pylvääseen (5x8 cm), joka oli tasapainotettu 20 mM fos- • · · I./ faatilla pH 7. Pylväs pestiin yli yhdellä tilavuudella pus- • · · * 30 kuria, joka sisälsi 0,1 M NaCl, ja peroksidaasi eluoitiin puskurilla, joka sisälsi 0,3 M NaCl. 10 ml:n fraktiot ke- • · « *· ’·' rättiin ja yhdistettiin kolmeen pooliin proteiini- (A280) ··« : ja aktivisuusprofiilien mukaisesti (kuvio 8): .··*. 35 Fraktio no ml A280 A404 NOPA/ml Saanto '·[ Pooli A 23-26 40 8,1 4 1,37 2,33 9,3 %
Pooli B 27-30 40 6,41 1,05 2,17 8,7 %
Pooli C 36-42 40 8,90 1 ,84 6,89 27,7 % 10 100109
Kokonaissaanto: 45, 7 % 90 ml näytteeseen, jonka NOPA/ml oli 7,34 poolista C, lisättiin 1,6 M ammoniumsulfaattia 108 mS johtavuuteen (pH 5 7,05) ja levitettiin Octyl-Sepharose-pylvääseen (5x11 cm), joka oli tasapainotettu 0,8 Milla ammoniumsulfaattia pH 7. Sitoutumaton materiaali eluoitiin 0,8 M ammoniumsulfaatilla ja peroksidaasiaktiivisuus eluoitiin sitten lineaarisella ammoniumsulfaattigradientilla 0,8:sta 0 mooliseen (puhdas 10 vesi).
10 ml:n fraktiot kerättiin ja yhdistettiin kolmeen pooliin peroksidaasiaktiivisuuden mukaisesti (kuvio 9): 15 Fraktio no ml A280 A398 NOPA/ml Saanto
Pooli I 84-92 90 0,26 0,19 1,47 20,0 %
Pooli II 94-96 30 0,58 0,37 2,09 9,5 %
Pooli III 97-100 40 0,55 0,30 1,57 9,5 % 20 Kokonaissaanto: 39 % Näyte poolia I konsentroitiin ultrasuodattamalla 50 ml Ami- conissa sekoitettu solu DDS GS90PP-kalvolla. 7,5 ml konsen- troitua näytettä, jonka aktiivisuus oli 131,2 NOPA/ml, le- 25 vitettiin Sepharyl-S200-pylvääseen (2,5x85 cm), joka oli : tasapainotettu 12,5 mM fosfaattipuskuria pH 7,0 ja eluoitu samalla puskurilla virtausnopeudessa 0,9 ml/min. 9,8 ml:n : fraktiot kerättiin ja yhdistettiin peroksidaasiaktiivisuu- • · · ·..* den ja spektriominaisuuks ien mukaisesti (RZ-arvo: *** * 30 A398/A280) (kuvio 10): • · *· *· Fraktio no ml A280 A398 NOPA/ml Saanto V : Pooli IA 47-50 38 0,47 1,22 11,2 43,3 % ··· Pooli IB 45 9,8 0,73 0,69 6,76 6,7 % .···. 35 Pooli IC 46 9,8 1 ,1 6 1 ,65 1 5,97 1 5,8 % ’···' Kokonaissaanto: 65,8 ¾ 100109 11
Poolin IA massaspektrissä on yksi päähuippu Mw 2214,0/2228,1 ja pienempää huippua Mw 972,8 ja 1768,1 vastaavasti. Pääkomponentin aminohapposekvenssi osoittautui olevan: 5
Gln-Glu-Gln-Thr-?-Ile-Ser-?-His-Gly-Asp-Asn-Met-Gln jossa kahden puuttuvan aminohapon uskotaan kummankin olevan kysteiini, joiden kautta heemiryhmä (vastuussa A398-absor-10 banssista) voi sitoutua.
Näyte poolia II konsentroitiin ultrasuodattamalla 50 ml Amiconissa sekoitettu solu DDS GS90PP-kalvolla. 10 ml konsentroitua näytettä, jonka aktiivisuus oli 143,8 NOPA/ml, 15 levitettiin AcA 202 -pylvääseen (2,5x85 cm), joka oli tasapainotettu 12,5 mM fosfaattipuskuria pH 7,0 ja eluoitu samalla puskurilla virtausnopeudessa 0,4 ml/min. 5 ml:n fraktiot kerättiin ja niistä tarkkailtiin A280, A398 ja perok-sidaasiaktiivisuus (kuvio 11).
20
Valmistaja väittää Aca 202 -geelin erottavan molekyylit alueella 1 kD - 1 5 kD. Kromatogrammista on nähtävissä, että laaja alue suhteellisen alhaisen molekyylipainon substans- • siä eluoitui ja kaikissa oli sama peroksidaasiaktiivisuus, 25 joka liittyy A398 (Soret) -absorbanssiin.
Esimerkki 3 • · . . Sulfaattisellun valkaiseminen » · · Tässä esimerkissä käytetty peroksidaasi oli permeaatti, • · · ’·' ’ 30 joka oli peräisin supernatantin ultrasuodattamisesta solut- toman viljelyliemen alkoholiuuttamisesta (saatu oleellises-ti kuten esimerkissä 1 ) .
• · · • · · • · « ♦ 1 g lehtipuu(koivu)sulfaattisellua, josta poistettiin lig-35 niini hapella, sekoitettiin 250 ml:aan vettä säädettynä pH:hon 8,0-8,2 NaOH:lla. H2O2 lisättiin pitoisuuteen 1 % (0,3 M) ja edellä mainittua peroksidaasivalmistetta lisät-tiin annostukseen 0,32 NOPA/ml. Seosta inkuboitiin 40 °C:s-sa 2 tuntia. Sitten massa kerättiin Buchner-suppiloon ja se 100109 12 pestiin riittävällä määrällä vettä kirkkaan suodoksen saamiseksi. Massa puristettiin ja kuivattiin ja saadun levyn ISO-vaaleus mitattiin. Vertailu tehtiin samalla tavoin ilman entsyymiä.
5
Keksintö: 57,2 % ISO-vaaleus Vertailu: 55,6 % ISO-vaaleus
Esimerkki 4 10 Kemikuumahierteen valkaisu
Esimerkin 3 koe toistettiin 30 °C:ssa kemikuumahierrehavu-puu(mänty)massalla.
Keksintö: 59,7 % ISO-vaaleus 15 Vertailu: 56,1 % ISO-vaaleus
Esimerkki 5
Liuoksena olevien värien valkaisu
Keksinnön mukaisen peroksidaasivalmisteen vaikutus valkais-20 taessa liuotettua tekstiiliväriä testattiin. Testatut väriaineet olivat Direct Blue 1 (C.I. # 24410, Keystone Anili-nen tuote), Acid Red 151 (C.I. #26900, Sandozin tuote).
Procion Blue H ERD (ICI:n tuote) ja Procion Blue H EXL ',·/ (ICI:n tuote). Peroksidaasivalmiste oli soluton viljely- 25 liemi, joka oli valmistettu oleellisesti kuten esimerkissä 1.
• · : Valmistettiin reaktioliuos, joka sisälsi 50 mM natriumfos-
• M
.·;· faattia, 0,3 NOPA/ml peroksidaasia, väriainettta (edellä • e · 30 mainittu), joka vastaa absorptiomaksimia (näkyvällä alueel-. . la) 0,025-0.035 ja 0,25 mM H2O2 huoneenlämpötilassa jäljem- pänä annetussa pH:ssa. Η2θ2:η lisäämisen jälkeen (lisättiin • · · ’·1 ’ viimeisenä) suoritettiin kahdentoista minuutin aikana mi- ; nuutin välein spektriskannaus. Seuraavaksi on lueteltu ab- 35 sorbanssin muutos maksimiabsorption aallonpituudessa.
100109 13
Absorbanssin muutos Aallon Väriaine pH heti / 12 min kuluttua pituus
Acid Red 151 7,0 0,030/0,032 513 nm 9.0 0,033/0,033 513 - 5 10,5 0,027/0,030 513 -
Direct Blue 1 7,0 0,024/0,025 597 nm 9.0 0,022/0,026 597 - 10.5 0,009/0,023 597 - 10
Procion Blue H ERD 7,0 0,022/0,021 617 nm 9.0 0,009/0,022 617 - 10.5 0,001/0,010 617 - 15 Procion Blue H EXL 9,0 0,021/0,026 626 nm 10.5 0,016/0,025 626 -
Kun kaksi absorbanssimuutoksen arvoa ovat lähekkäisiä, on 20 valkaisu käytännössä äkillistä. Tavallisesti valkaisu koko näkyvissä olevalla alueella noudattaa edellä mainittuja suuntauksia absorbanssimaksimilla.
Kaikissa tapauksissa 0,2 mM H2C>2:a käyttö ilman entsyymiä 25 jätti värin ennalleen.
Tämä esimerkki valaisee keksinnön mukaisen peroksidaasival-: misteen potentiaalista käyttökelpoisuutta estettäessä voi- makkaasti värjätystä kuidusta peräisin olevaa ylimääräistä » » « 30 väriä kerrostumasta uudelleen pesun aikana.
• « « · • · · 1 · · • · · • · ·
Claims (10)
1. Hemopeptid, kännetecknad av att den har formeln: Gln-Glu-Gln-Thr-Cys-Ile-Ser-Cys-His-Gly-Asp-Asn-Met-Gln ' 1 25 • * väri svavelatomerna i de tvä cysteinerna är bundna tili vi- • » · *·*·* nylgrupperna i hem. • · 4 · · • · *.'· 2. Peroxidaspreparat, kännetecknat av att det omfattar • »« i 30 hemopeptiden enligt patentkrav 1 som en aktiv komponent.
1. Hemopeptidi, tunnettu siitä, että sillä on kaava:
2. Peroksidaasivalmiste, tunnettu siitä, että se käsittää patenttivaatimuksen 1 mukaisen hemopeptidin aktiivisena komponenttina .
3. Peroxidaspreparat, kännetecknat av att - det omfattar en eller flera aktiva komponenter härledda frän en stam av B. pumilus, med en molekylvikt i omrädet 35 800-2500 och innehällande en hemgrupp bunden tili en peptid- i...‘ kedja innehällande sekvensen Gln-Glu-Gln-Thr-Xaa-Ile-Ser- Yaa-His-Gly-Asp-Asn-Met-Gln, väri Xaa och Yaa betecknar vil-ken som heist aminosyra, 100109 - det har ett pH-optimum i omrädet 7-9, - det bibehäller ätminstone 40 % restaktivitet efter 30 minuter vid 80 °C och pH 7, och - det uppvisar stigande reaktionshastighet upp tili 20 mM
3. Peroksidaasivalmiste, tunnettu siitä, että - se käsittää yhden tai useamman aktiivisen komponentin, joka on johdettu B. pumilus -kannasta, jonka molekyylipaino on alueella 800-2500, ja joka sisältää heemiryhmän, joka on kytkeytynyt peptidiketjuun, joka sisältää sekvenssin Gln-
20 Glu-Gln-Thr-Xaa-Ile-Ser-Yaa-His-Gly-Asp-Asn-Met-Gln, jossa Xaa ja Yaa ovat mikä tahansa aminohappo, - sen pH-optimi on alueella 7-9, - se säilyttää vähintään 40 % jäännösaktiivisuutta 30 minuu-tin jälkeen 80 °C:ssa ja pH:ssa 7, ja . ·; 25 - sillä on lisääntyvä reaktionopeus 20 mM:iin H202 saakka. « » · m · *
4. Peroxidaspreparat enligt patentkrav 3, kannetecknat av att stammen av B. pumilus är DSM 6124, ATCC 12905 eller NCIB 8600. 10
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen peroksidaasivalmiste, . . tunnettu siitä, että B. pumilus -kanta on DSM 6124, ATCC I./ 12905 tai NCIB 8600. « ♦ » • « · 30
5. Katalas-fritt peroxidaspreparat enligt nagot av patent-kraven 2 -4.
5 H202.
5. Minkä tahansa patenttivaatimuksen 2-4 mukainen katalaa- • · ' *·· siton peroksidaasivalmiste. • * * • » »
5 Gln-Glu-Gln-Thr-Cys-Ile-Ser-Cys-His-Gly-Asp-Asn-Met-Gln Vv'Heemi'^ jossa kahden kysteiinin rikkiatomit ovat kytkeytyneenä hee-min vinyyliryhmiin. 10
6. Förfarande för producering av ett peroxidaspreparat, 15 kännetecknat av att det omfattar odling av en peroxidas-pro- ducerande stam av B. pumilus, efterföljt av utvinning av peroxidas.
6. Menetelmä peroksidaasivalmisteen valmistamiseksi, tun-35 nettu siitä, että se käsittää peroksidaasia tuottavan B. pumilus -kannan viljelemisen, mitä seuraa peroksidaasin tal-teenottaminen. 100109
7. Förfarande enligt patentkrav 6, kännetecknat av att 20 stammen av B. pumilus producerar peroxidas extracellulärt, och utvinningen omfattar avlägsnande av cellmassa.
7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että B. pumilus -kanta tuottaa peroksidaasia solunulkoi-sesti ja talteenotto käsittää solumassan poistamisen.
8. Förfarande enligt patentkrav 6 eller 7, kännetecknat av . att stammen av B. pumilus är DSM 6124, ATCC 12905 eller NCIB . 25 8600. i · « • · # • * · 4 * v,,.j 9. Användning av peroxidaspreparatet enligt nagot av pa- •t · tentkraven 2-5 eller av ett preparat producerat enligt ett • ·· förfarande enligt nagot av patentkraven 6-8 tillsammans med • t Γ • 30 väteperoxid (möjligen bildad in situ) vid blekning av lig nin- innehällande material. ·« « · • ·· • ··
8. Patenttivaatimuksen 6 tai 7 mukainen menetelmä, tunnet tu siitä, että B. pumilus -kanta on DSM 6124, ATCC 12905 tai NCIB 8600.
9. Minkä tahansa patenttivaatimuksen 2-5 mukaisen perok-10 sidaasivalmisteen tai minkä tahansa patenttivaatimuksen 6-8 mukaisella menetelmällä valmistetun valmisteen käyttö yhdessä vetyperoksidin kanssa (muodostettu mahdollisesti in situ) ligniiniä sisältävän materiaalin valkaisussa.
10. Patenttivaatimuksen 9 mukainen käyttö massan valkaisuun paperintuotannossa tai massan valmistuksesta peräisin olevan jäteveden valkaisuun. 20
10. Användning enligt patentkrav 9 vid blekning av massa för papperstillverkning eller avfallsvatten frän massatill-35 verkning.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US42141489A | 1989-10-13 | 1989-10-13 | |
| US42141489 | 1989-10-13 | ||
| DK9000260 | 1990-10-12 | ||
| PCT/DK1990/000260 WO1991005858A1 (en) | 1989-10-13 | 1990-10-12 | A microperoxidase preparation containing a hemopeptide as an active component |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI921606A FI921606A (fi) | 1992-04-10 |
| FI921606A0 FI921606A0 (fi) | 1992-04-10 |
| FI100109B true FI100109B (fi) | 1997-09-30 |
Family
ID=23670411
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI921315A FI921315A (fi) | 1989-10-13 | 1992-03-26 | Foerhindrande av faergoeverfoering. |
| FI921606A FI100109B (fi) | 1989-10-13 | 1992-04-10 | Hemopeptidiä aktiivisena komponenttina sisältävä mikroperoksidaasivalm iste |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI921315A FI921315A (fi) | 1989-10-13 | 1992-03-26 | Foerhindrande av faergoeverfoering. |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (2) | EP0495836B2 (fi) |
| JP (2) | JPH05500899A (fi) |
| KR (1) | KR920703800A (fi) |
| CN (1) | CN1046775C (fi) |
| AR (1) | AR247767A1 (fi) |
| AT (2) | ATE87029T1 (fi) |
| AU (2) | AU6515790A (fi) |
| BR (1) | BR9007739A (fi) |
| CA (1) | CA2067748C (fi) |
| DE (2) | DE69001131T3 (fi) |
| DK (2) | DK0497794T3 (fi) |
| ES (2) | ES2057593T3 (fi) |
| FI (2) | FI921315A (fi) |
| GR (1) | GR3035118T3 (fi) |
| IE (1) | IE63940B1 (fi) |
| MA (1) | MA21974A1 (fi) |
| MX (1) | MX172807B (fi) |
| MY (1) | MY107414A (fi) |
| PE (1) | PE14291A1 (fi) |
| PT (1) | PT95553B (fi) |
| TR (1) | TR26687A (fi) |
| WO (2) | WO1991005858A1 (fi) |
Families Citing this family (66)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5273896A (en) * | 1989-10-13 | 1993-12-28 | Novo Nordisk A/S | Hemopeptide having peroxidase activity for bleaching dyes |
| WO1992018683A1 (en) * | 1991-04-12 | 1992-10-29 | Novo Nordisk A/S | Process for bleaching of dyed textiles |
| ATE155539T1 (de) * | 1991-04-12 | 1997-08-15 | Novo Nordisk As | Entfernung überschüssigen farbstoffes von neuen textilien |
| TR26870A (tr) * | 1991-10-14 | 1994-08-22 | Procter & Gamble | Yikamada boya aktarimini önleyen deterjan bilesimleri |
| EP0537381B1 (en) * | 1991-10-14 | 1998-03-25 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions inhibiting dye transfer in washing |
| US5610129A (en) * | 1991-11-06 | 1997-03-11 | The Proctor & Gamble Company | Dye transfer inhibiting compositions |
| US5811382A (en) * | 1991-12-20 | 1998-09-22 | Novo Nordisk A/S | Detergent compositions |
| EP0553608B1 (en) * | 1992-01-31 | 1998-06-17 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions inhibiting dye transfer in washing |
| EP0553607B1 (en) * | 1992-01-31 | 1998-03-18 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions inhibiting dye transfer in washing |
| US5316922A (en) * | 1992-04-15 | 1994-05-31 | The United States Of America As Represented By Department Of Health And Human Services | Method for indentifying and expressing proteins that recognize and adhere to specific probes |
| DK72992D0 (da) * | 1992-06-01 | 1992-06-01 | Novo Nordisk As | Enzym |
| EP0581751B1 (en) * | 1992-07-15 | 1998-12-09 | The Procter & Gamble Company | Enzymatic detergent compositions inhibiting dye transfer |
| CA2140288A1 (en) * | 1992-07-15 | 1994-02-03 | Abdennaceur Fredj | Enzymatic detergent compositions inhibiting dye transfer |
| DE59309078D1 (de) * | 1992-08-22 | 1998-11-26 | Clariant Gmbh | Verwendung von wasserlöslichen Copolymeren auf Basis von Acrylamidoalkylensulfonsäure als Waschmittelzusatz |
| DK144392D0 (da) * | 1992-12-01 | 1992-12-01 | Novo Nordisk As | Aktivering af enzymer |
| DK144192D0 (da) * | 1992-12-01 | 1992-12-01 | Novo Nordisk As | Aktivering af enzymer |
| ATE237681T1 (de) * | 1992-12-01 | 2003-05-15 | Novozymes As | Beschleunigung von enzymreaktionen |
| US5288746A (en) * | 1992-12-21 | 1994-02-22 | The Procter & Gamble Company | Liquid laundry detergents containing stabilized glucose/glucose oxidase as H2 O2 generation system |
| DK154292D0 (da) * | 1992-12-23 | 1992-12-23 | Novo Nordisk As | Nyt enzym |
| CA2160231C (en) * | 1993-04-09 | 1999-09-21 | Marnix Karel Christiane Moens | Machine dishwashing method employing a metallo catalyst and enzymatic source of hydrogen peroxide |
| DK48893D0 (da) * | 1993-04-30 | 1993-04-30 | Novo Nordisk As | Enzym |
| DK77393D0 (da) * | 1993-06-29 | 1993-06-29 | Novo Nordisk As | Aktivering af enzymer |
| KR100338786B1 (ko) * | 1993-10-13 | 2002-12-02 | 노보자임스 에이/에스 | H2o2-안정한퍼록시다제변이체 |
| EP0730641A1 (en) * | 1993-10-26 | 1996-09-11 | Novo Nordisk A/S | Myxococcaceae peroxidase |
| US5445755A (en) * | 1994-05-31 | 1995-08-29 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions containing a peroxidase/accelerator system without linear alkylbenzenesulfonate |
| JPH10500728A (ja) * | 1994-05-31 | 1998-01-20 | ノボ ノルディスク アクティーゼル スカブ | 染料移行阻止製剤、およびそのような製剤を含んでなる洗剤組成物 |
| DE69518751T2 (de) * | 1994-06-03 | 2001-02-15 | Novo Nordisk Biotech, Inc. | Gereinigte scytalidium lacassen und nukleinsäuren dafür kodierend |
| CN1192108C (zh) * | 1994-06-03 | 2005-03-09 | 诺沃奇梅兹生物技术有限公司 | 纯化的毁丝霉属漆酶及编码该酶的核酸 |
| AU3253695A (en) * | 1994-08-26 | 1996-03-22 | Novo Nordisk A/S | Coprinaceae laccases |
| DE4430327C1 (de) * | 1994-08-27 | 1996-05-09 | Degussa | Enzymatische, aktiven Sauerstoff liefernde Mischung sowie Verfahren zur enzymatischen Herstellung von Persäuren |
| JP3691516B2 (ja) * | 1994-09-27 | 2005-09-07 | ノボザイムス アクティーゼルスカブ | アセトシリンゴンのような増強剤 |
| EP0787229B1 (en) * | 1994-10-20 | 2002-03-27 | Novozymes A/S | Bleaching process comprising use of a phenol oxidizing enzyme system and an enhancing agent |
| PL320062A1 (en) * | 1994-10-20 | 1997-09-01 | Novo Nordisk As | Method of decolouring by use of phenol, oxidising enzyme, hydrogen peroxide source and toughening agent |
| US5698476A (en) * | 1995-03-01 | 1997-12-16 | The Clorox Company | Laundry article for preventing dye carry-over and indicator therefor |
| US6008029A (en) | 1995-08-25 | 1999-12-28 | Novo Nordisk Biotech Inc. | Purified coprinus laccases and nucleic acids encoding the same |
| JPH09206071A (ja) | 1996-01-29 | 1997-08-12 | Novo Nordisk As | バクテリア由来の酸化酵素 |
| MA24175A1 (fr) * | 1996-05-13 | 1997-12-31 | Procter & Gamble | Compositions detergentes comprenant un enzyme laccase |
| EP0928329A1 (en) * | 1996-09-03 | 1999-07-14 | Novo Nordisk A/S | Peroxidase variants |
| EP0941298B1 (en) * | 1996-11-25 | 2001-08-29 | Unilever N.V. | Enzymatic oxidation process |
| FR2762324A1 (fr) * | 1997-04-16 | 1998-10-23 | Rhodia Chimie Sa | Utilisation d'un systeme anti-oxydant en detergence et compositions obtenues |
| AU8020398A (en) | 1997-06-10 | 1998-12-30 | Unilever Plc | Method for enhancing the activity of an enzyme, bleach composition, detergent composition and process for inhibiting dye transfer |
| DE69802204T2 (de) | 1997-09-08 | 2002-04-18 | Unilever N.V., Rotterdam | Verfahren zur verbesserung der enzymeaktivität |
| US6492110B1 (en) | 1998-11-02 | 2002-12-10 | Uab Research Foundation | Reference clones and sequences for non-subtype B isolates of human immunodeficiency virus type 1 |
| WO1999032652A1 (en) * | 1997-12-19 | 1999-07-01 | Novo Nordisk A/S | Modification of polysaccharides by means of a phenol oxidizing enzyme |
| AU3408199A (en) | 1998-05-01 | 1999-11-23 | Novo Nordisk A/S | Enhancers such as n-hydroxyacetanilide |
| US6129769A (en) * | 1998-11-24 | 2000-10-10 | Novo Nordisk Biotech, Inc. | Enzymatic methods for dyeing with reduced vat and sulfur dyes |
| TR200103627T2 (tr) | 1999-06-23 | 2002-06-21 | Unilever N.V. | Bir enzimin etkinliğini artırmak için yöntem ve bileşim. |
| AU5403500A (en) | 1999-06-23 | 2001-01-31 | Breel, Greta J. | Bleaching detergent compositions |
| WO2001034749A1 (en) | 1999-11-11 | 2001-05-17 | Unilever N.V. | Method and composition for enhancing the activity of an enzyme |
| GB0005090D0 (en) * | 2000-03-01 | 2000-04-26 | Unilever Plc | Bleaching and dye transfer inhibiting composition and method for laundry fabrics |
| EP1330507A1 (en) | 2000-10-31 | 2003-07-30 | Unilever Plc | Oxidation process and composition |
| GB0030877D0 (en) | 2000-12-18 | 2001-01-31 | Unilever Plc | Enhancement of air bleaching catalysts |
| EP1550711A4 (en) * | 2002-10-08 | 2006-01-11 | Mitsui Chemicals Inc | PROCESS FOR USING PEROXIDASE-DERIVED RICE |
| DE10257389A1 (de) | 2002-12-06 | 2004-06-24 | Henkel Kgaa | Flüssiges saures Waschmittel |
| EP1682655B1 (en) | 2003-10-30 | 2009-09-02 | Novozymes A/S | Carbohydrate-binding modules |
| ITTO20050321A1 (it) * | 2005-05-11 | 2006-11-12 | Loro Piana & C S P A Ing | Procedimento per ottenere un effetto invecchiato o scolorito su capi in fibre proteiche quali, cachemire e seta e prodotto relativo. |
| DE102005039580A1 (de) | 2005-08-19 | 2007-02-22 | Henkel Kgaa | Farbschützendes Waschmittel |
| DE102006012018B3 (de) | 2006-03-14 | 2007-11-15 | Henkel Kgaa | Farbschützendes Waschmittel |
| EP2383330A1 (en) | 2006-03-31 | 2011-11-02 | Novozymes A/S | A stabilized liquid enzyme composition |
| EP2245060B1 (en) | 2008-02-01 | 2017-11-01 | Novozymes A/S | Liquid enzyme composition |
| RU2510662C2 (ru) | 2008-03-26 | 2014-04-10 | Новозимс А/С | Стабилизированные жидкие ферментные композиции |
| ES2569913T3 (es) | 2008-07-07 | 2016-05-13 | Basf Se | Composición de enzima que comprende partículas poliméricas que contienen enzima |
| CN103409244B (zh) * | 2013-08-07 | 2015-02-11 | 惠州市泰和化工有限公司 | 一种皂洗酶、其皂洗方法及其在清洗染色后的布料中的应用 |
| US10980864B2 (en) | 2014-05-22 | 2021-04-20 | University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education | Use of microperoxidases for the treatment of carboxyhemoglobinemia |
| EP4004577A1 (en) | 2019-07-30 | 2022-06-01 | Telefonaktiebolaget LM Ericsson (publ) | Technique for determining a relative position between vehicles |
| EP4053328A1 (de) * | 2021-03-02 | 2022-09-07 | CHT Germany GmbH | Kombinierte bleichbehandlung für textilien |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3172910A (en) * | 1965-03-09 | Ch ) s(ch | ||
| NL125452C (fi) * | 1968-04-19 | Colgate Palmolive Co | ||
| GB1541576A (en) * | 1975-06-20 | 1979-03-07 | Procter & Gamble Ltd | Inhibiting dye ltransfer in washing |
| GB2101167B (en) * | 1981-07-07 | 1984-10-10 | Unilever Plc | Bleach composition comprising hydrogen peroxide precursor |
| DE3134526A1 (de) * | 1981-09-01 | 1983-03-17 | Tiggemann, Dr., 7753 Allensbach | Haemverbindungen als aktiver wirkstoff |
| FR2516920B1 (fr) * | 1981-11-25 | 1986-03-14 | Inst Nat Rech Chimique | Nouveaux composes a chaine perfluoree, leur application notamment comme transporteurs industriels et/ou biologiques de gaz dissous et leur procede d'obtention |
| EP0423890A3 (en) * | 1984-07-27 | 1991-07-03 | Unilever Nv | Use of oxidoreductases in bleaching and/or detergent compositions and their preparation by microorganisms engineered by recombinant dna technology |
| NL8601454A (nl) * | 1986-06-05 | 1988-01-04 | Unilever Nv | Werkwijze voor het bereiden van een catalase-vrij oxidoreductase en van een catalase-vrije oxidoreductase bevattende gist, en gebruik daarvan. |
-
1990
- 1990-10-05 PE PE1990175816A patent/PE14291A1/es not_active Application Discontinuation
- 1990-10-09 TR TR90/0982A patent/TR26687A/xx unknown
- 1990-10-10 PT PT95553A patent/PT95553B/pt active IP Right Grant
- 1990-10-10 MX MX022781A patent/MX172807B/es unknown
- 1990-10-11 MY MYPI90001769A patent/MY107414A/en unknown
- 1990-10-11 AR AR90318066A patent/AR247767A1/es active
- 1990-10-12 KR KR1019920700819A patent/KR920703800A/ko not_active Application Discontinuation
- 1990-10-12 AU AU65157/90A patent/AU6515790A/en not_active Abandoned
- 1990-10-12 AT AT90915097T patent/ATE87029T1/de not_active IP Right Cessation
- 1990-10-12 ES ES90915095T patent/ES2057593T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1990-10-12 AU AU65160/90A patent/AU646645B2/en not_active Ceased
- 1990-10-12 AT AT90915095T patent/ATE108484T1/de active
- 1990-10-12 DE DE69001131T patent/DE69001131T3/de not_active Expired - Fee Related
- 1990-10-12 MA MA22243A patent/MA21974A1/fr unknown
- 1990-10-12 IE IE366990A patent/IE63940B1/en not_active IP Right Cessation
- 1990-10-12 DK DK90915095.5T patent/DK0497794T3/da active
- 1990-10-12 EP EP90915097A patent/EP0495836B2/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-10-12 JP JP2513889A patent/JPH05500899A/ja active Pending
- 1990-10-12 CA CA002067748A patent/CA2067748C/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-10-12 BR BR909007739A patent/BR9007739A/pt not_active IP Right Cessation
- 1990-10-12 ES ES90915097T patent/ES2040131T5/es not_active Expired - Lifetime
- 1990-10-12 DE DE69010691T patent/DE69010691T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1990-10-12 WO PCT/DK1990/000260 patent/WO1991005858A1/en active IP Right Grant
- 1990-10-12 EP EP90915095A patent/EP0497794B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-10-12 WO PCT/DK1990/000261 patent/WO1991005839A1/en active IP Right Grant
- 1990-10-12 DK DK90915097T patent/DK0495836T4/da active
- 1990-10-12 JP JP2513890A patent/JP2801398B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1990-10-13 CN CN90109131A patent/CN1046775C/zh not_active Expired - Lifetime
-
1992
- 1992-03-26 FI FI921315A patent/FI921315A/fi unknown
- 1992-04-10 FI FI921606A patent/FI100109B/fi not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-12-19 GR GR20000402806T patent/GR3035118T3/el not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI100109B (fi) | Hemopeptidiä aktiivisena komponenttina sisältävä mikroperoksidaasivalm iste | |
| Elisashvili et al. | Physiological regulation of laccase and manganese peroxidase production by white-rot Basidiomycetes | |
| FI95596B (fi) | Puhdistava lisäaine kankaissa olevien tahrojen valkaisemiseksi | |
| US5712153A (en) | Dye transfer inhibition | |
| Sugano et al. | Complete decolorization of the anthraquinone dye Reactive blue 5 by the concerted action of two peroxidases from Thanatephorus cucumeris Dec 1 | |
| Jang et al. | Laccase production from repeated batch cultures using free mycelia of Trametes sp. | |
| EP1294859B1 (en) | Novel laccase enzyme and the gene encoding the enzyme | |
| KR900007645B1 (ko) | 리그닌을 분해하는 신규의 효소 | |
| EP0188931B1 (fr) | Microorganismes de souche Phanerochaete chrysosporium et leur utilisation | |
| EP1064359B1 (en) | Phenol oxidizing enzyme enzymes | |
| EP1311719B1 (en) | A method for treating proteinaceous fibres | |
| TAKANO et al. | Manganese peroxidase from Phanerochaete crassa WD1694 | |
| MXPA01006388A (es) | Enzimas oxidantes de fenol. | |
| Viswanath et al. | Production and purification of laccase from Stereum ostrea and its ability to decolorize textile dyes | |
| JP2003528582A (ja) | 新規なフェノール酸化酵素 | |
| Miki et al. | Isolation and characterization of a novel lignin peroxidase from the white-rot basidiomycete Trametes cervina | |
| Park et al. | Production and characterization of crude laccase from Irpex sp. JS7 that decolorizes synthetic and natural melanin | |
| JP4116172B2 (ja) | 有機溶媒耐性チロシナーゼおよびその製造方法 | |
| JP4354787B2 (ja) | メラニン分解酵素 | |
| RU2385930C1 (ru) | ТЕРМОСТАБИЛЬНАЯ ЛАККАЗА III ГРИБА Steccherinum ochraceum LE (BIN) 1833 D И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛАККАЗ | |
| KR100451708B1 (ko) | 신규한 바실러스 균주, 그를 이용하여 얻은 고활성산소소거효소 효능의 식품 | |
| EP1066364A2 (en) | Phenol oxidizing enzymes and their use | |
| JP2007110913A (ja) | 新規インジゴ還元微生物及び当該微生物を用いたインジゴの還元方法 | |
| Wuyep et al. | Purification and partial characterization of laccase from Lachnocladium sp. | |
| JPH10174583A (ja) | 酸化酵素、その製造方法及び用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |