ES2969233T3

ES2969233T3 - Formulación de anticuerpos anti-Pd-1

Info

Publication number: ES2969233T3
Application number: ES17838513T
Authority: ES
Inventors: Wei Cao; Junfeng Li; Xiaolin Liu
Original assignee: Innovent Biologics Suzhou Co Ltd
Current assignee: Innovent Biologics Suzhou Co Ltd
Priority date: 2016-08-09
Filing date: 2017-07-17
Publication date: 2024-05-17
Anticipated expiration: 2037-07-17
Also published as: WO2018027524A1; CN109562173B; EP3496753B1; EP3496753A4; AU2017310916A1; BR112019001233B1; AU2017310916B2; CN109562173A; US20210040211A1; JP2019527712A; JP6848046B2; US11130809B2; CA3030929C; WO2018028383A1; BR112019001233A2; EP3496753A1; CA3030929A1

Abstract

En el presente documento se proporcionan formulaciones farmacéuticas para anticuerpos anti-PD-1. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Formulación de anticuerpos anti-Pd-1

La presente invención se refiere al campo de la medicina. Más particularmente, la presente invención se refiere a una formulación farmacéutica de un anticuerpo anti-muerte celular programada humana 1 (anti-PD-1). Se espera que esta formulación farmacéutica de anticuerpo anti-PD-1 sea útil en el tratamiento de cánceres que responden a anticuerpos anti-PD-1 como monoterapia y en combinación con quimioterapia y otras terapias contra el cáncer.

Se necesitan formulaciones farmacéuticas de anticuerpos anti-PD-1 para el tratamiento de pacientes con cáncer. Se necesitan ciertas concentraciones de anticuerpos anti-PD-1 para formulaciones farmacéuticas, de modo que el anticuerpo pueda administrarse por vía intravenosa al paciente. Esta formulación farmacéutica con una cierta concentración del anticuerpo anti-PD-1 debe mantener la estabilidad física y química del anticuerpo anti-PD-1 durante largos períodos de tiempo en almacenamiento. Para el uso del anticuerpo anti-PD-1 en todo el mundo bajo condiciones que pueden variar significativamente, la formulación no sólo debe mantener la estabilidad del anticuerpo anti-PD-1 durante períodos de tiempo a temperatura ambiente, sino mantener la estabilidad bajo posibles fluctuaciones de temperatura y bajo posibles exposiciones a la luz.

Los anticuerpos contra PD-1, así como las composiciones farmacéuticas que los comprenden, se han descrito previamente (véase en particular: documentos WO2012135408, WO2011110604, WO2011110621, WO2016032927, WO2016011357, WO2016092419, WO2006121168, WO2004056875, Daugherty et al., Advanced Drug Delivery Reviews, vol. 58, 22 de mayo de 2006, páginas 686-706).

Los anticuerpos anti-PD-1 usados en las presentes formulaciones farmacéuticas se describen en el documento WO2017024465. Se descubrió que esos anticuerpos eran propensos a la inestabilidad química, incluida la oxidación, cuando se almacenan durante un largo período de tiempo y en diversas condiciones ambientales. Por lo tanto, se necesitan formulaciones farmacéuticas para anticuerpos anti-PD-1 que eviten estos problemas observados y también demuestren estabilidad durante una vida útil prolongada.

Por consiguiente, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende un anticuerpo anti-PD-1 en una concentración en el intervalo de alrededor de 5 mg/ml a alrededor de 15 mg/ml, citrato en una concentración de alrededor de 15 mM a alrededor de 25 mM, histidina en una concentración de alrededor de 20 mM a alrededor de 30 mM, manitol en una concentración de alrededor de 130 mM a alrededor de 165 mM, cloruro de sodio en una concentración de alrededor de 45 mM a alrededor de 55 mM, edetato en una concentración de alrededor de 0,01 mM a alrededor de 0,03 mM, polisorbato 20 o polisorbato 80 en una concentración en el intervalo de alrededor de 0,01 % a alrededor de 0,03 %, y pH de alrededor de 5,5 a alrededor de 6,5, en la que el anticuerpo anti-PD-1 comprende dos cadenas ligeras (LC) y dos cadenas pesadas (HC), en la que la secuencia de aminoácidos de ambas LC es SEQ ID NO: 2, y la secuencia de aminoácidos de ambas h C es la misma, y es SEQ ID NO: 3 o SEQ ID NO: 4.

La presente invención también proporciona una formulación farmacéutica que comprende un anticuerpo anti-PD-1 en una concentración de alrededor de 10 mg/ml, citrato en una concentración de alrededor de 15 mM a alrededor de 25 mM, histidina en una concentración de alrededor de 20 mM a alrededor de 30 mM, manitol en una concentración de alrededor de 130 mM a alrededor de 165 mM, cloruro de sodio en una concentración de alrededor de 45 mM a alrededor de 55 mM, edetato en una concentración de alrededor de 0,01 mM a alrededor de 0,03 mM, polisorbato 20 o polisorbato 80 en una concentración en el intervalo de alrededor de 0,01 % a alrededor de 0,03 %, y pH de alrededor de 5,5 a alrededor de 6,5, en la que el anticuerpo anti-PD-1 comprende dos cadenas ligeras (LC) y dos cadenas pesadas (HC), en la que la secuencia de aminoácidos de ambas LC es SEQ ID NO: 2, y la secuencia de aminoácidos de ambas HC es la misma, y es SEQ ID NO: 3 o SEQ ID NO: 4.

La presente invención también proporciona una formulación farmacéutica que comprende un anticuerpo anti-PD-1 en una concentración en el intervalo de alrededor de 5 mg/ml a alrededor de 15 mg/ml, citrato en una concentración de alrededor de 20 mM, histidina en una concentración de alrededor de 20 mM a alrededor de 30 mM, manitol en una concentración de alrededor de 130 mM a alrededor de 165 mM, cloruro de sodio en una concentración de alrededor de 45 mM a alrededor de 55 mM, edetato en una concentración de alrededor de 0,01 mM a alrededor de 0,03 mM, polisorbato 20 o polisorbato 80 en una concentración en el intervalo de alrededor de 0,01 % a alrededor de 0,03 %, y pH de alrededor de 5,5 a alrededor de 6,5, en la que el anticuerpo anti-PD-1 comprende dos cadenas ligeras (LC) y dos cadenas pesadas (HC), en la que la secuencia de aminoácidos de ambas LC es SEQ ID NO: 2, y la secuencia de aminoácidos de ambas HC es la misma, y es SEQ ID NO: 3 o SEQ ID NO: 4.

La presente invención también proporciona una formulación farmacéutica que comprende un anticuerpo anti-PD-1 en una concentración en el intervalo de alrededor de 5 mg/ml a alrededor de 15 mg/ml, citrato en una concentración de alrededor de 15 mM a alrededor de 25 mM, histidina en una concentración de alrededor de 25 mM, manitol en una concentración de alrededor de 130 mM a alrededor de 165 mM, cloruro de sodio en una concentración de alrededor de 45 mM a alrededor de 55 mM, edetato en una concentración de alrededor de 0,01 mM a alrededor de 0,03 mM, polisorbato 20 o polisorbato 80 en una concentración en el intervalo de alrededor de 0,01 % a alrededor de 0,03 %, y pH de alrededor de 5,5 a alrededor de 6,5, en la que el anticuerpo anti-PD-1 comprende dos cadenas ligeras (LC) y dos cadenas pesadas (HC), en la que la secuencia de aminoácidos de ambas LC es SEQ ID NO: 2, y la secuencia de aminoácidos de ambas HC es la misma, y es SEQ ID NO: 3 o SEQ ID NO: 4.

La presente invención también proporciona una formulación farmacéutica que comprende un anticuerpo anti-PD-1 en una concentración en el intervalo de alrededor de 5 mg/ml a alrededor de 15 mg/ml, citrato en una concentración de alrededor de 15 mM a alrededor de 25 mM, histidina en una concentración de alrededor de 20 mM a alrededor de 30 mM, manitol en una concentración de alrededor de 140 mM, cloruro de sodio en una concentración de alrededor de 45 mM a alrededor de 55 mM, edetato en una concentración de alrededor de 0,01 mM a alrededor de 0,03 mM, polisorbato 20 o polisorbato 80 en una concentración en el intervalo de alrededor de 0,01 % a alrededor de 0,03 %, y pH de alrededor de 5,5 a alrededor de 6,5, en la que el anticuerpo anti-PD-1 comprende dos cadenas ligeras (LC) y dos cadenas pesadas (HC), en la que la secuencia de aminoácidos de ambas LC es SEQ ID NO: 2, y la secuencia de aminoácidos de ambas HC es la misma, y es SEQ ID NO: 3 o SEQ ID NO: 4.

La presente invención también proporciona una formulación farmacéutica que comprende un anticuerpo anti-PD-1 en una concentración en el intervalo de alrededor de 5 mg/ml a alrededor de 15 mg/ml, citrato en una concentración de alrededor de 15 mM a alrededor de 25 mM, histidina en una concentración de alrededor de 20 mM a alrededor de 30 mM, manitol en una concentración de alrededor de 130 mM a alrededor de 165 mM, cloruro de sodio en una concentración de alrededor de 50 mM, edetato en una concentración de alrededor de 0,01 mM a alrededor de 0,03 mM, polisorbato 20 o polisorbato 80 en una concentración en el intervalo de alrededor de 0,01 % a alrededor de 0,03 %, y pH de alrededor de 5,5 a alrededor de 6,5, en la que el anticuerpo anti-PD-1 comprende dos cadenas ligeras (LC) y dos cadenas pesadas (HC), en la que la secuencia de aminoácidos de ambas LC es SEQ ID NO: 2, y la secuencia de aminoácidos de ambas HC es la misma, y es SEQ ID NO: 3 o SEQ ID NO: 4.

La presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende un anticuerpo anti-PD-1 en una concentración en el intervalo de alrededor de 5 mg/ml a alrededor de 15 mg/ml, citrato en una concentración de alrededor de 15 mM a alrededor de 25 mM, histidina en una concentración de alrededor de 20 mM a alrededor de 30 mM, manitol en una concentración de alrededor de 130 mM a alrededor de 165 mM, cloruro de sodio en una concentración de alrededor de 45 mM a alrededor de 55 mM, edetato en una concentración de alrededor de 0,02 mM, polisorbato 20 o polisorbato 80 en una concentración en el intervalo de alrededor de 0,01 % a alrededor de 0,03 %, y pH de alrededor de 5,5 a alrededor de 6,5, en la que el anticuerpo anti-PD-1 comprende dos cadenas ligeras (LC) y dos cadenas pesadas (HC), en la que la secuencia de aminoácidos de ambas LC es SEQ ID NO: 2, y la secuencia de aminoácidos de ambas HC es la misma, y es SEQ ID NO: 3 o SEQ ID NO: 4.

La presente invención también proporciona una formulación farmacéutica que comprende un anticuerpo anti-PD-1 en una concentración en el intervalo de alrededor de 5 mg/ml a alrededor de 15 mg/ml, citrato en una concentración de alrededor de 15 mM a alrededor de 25 mM, histidina en una concentración de alrededor de 20 mM a alrededor de 30 mM, manitol en una concentración de alrededor de 130 mM a alrededor de 165 mM, cloruro de sodio en una concentración de alrededor de 45 mM a alrededor de 55 mM, edetato en una concentración de alrededor de 0,01 mM a alrededor de 0,03 mM, polisorbato 20 o polisorbato 80 en una concentración de alrededor de alrededor de 0,02 %, y pH de alrededor de 5,5 a alrededor de 6,5, en la que el anticuerpo anti-PD-1 comprende dos cadenas ligeras (LC) y dos cadenas pesadas (HC), en la que la secuencia de aminoácidos de ambas LC es SEQ ID NO: 2, y la secuencia de aminoácidos de ambas HC es la misma, y es SEQ ID NO: 3 o SEQ ID NO: 4.

La presente invención también proporciona una formulación farmacéutica que comprende un anticuerpo anti-PD-1 en una concentración en el intervalo de alrededor de 5 mg/ml a alrededor de 15 mg/ml, citrato en una concentración de alrededor de 15 mM a alrededor de 25 mM, histidina en una concentración de alrededor de 20 mM a alrededor de 30 mM, manitol en una concentración de alrededor de 130 mM a alrededor de 165 mM, cloruro de sodio en una concentración de alrededor de 45 mM a alrededor de 55 mM, edetato en una concentración de alrededor de 0,01 mM a alrededor de 0,03 mM, polisorbato 20 o polisorbato 80 en una concentración en el intervalo de alrededor de 0,01 % a alrededor de 0,03 %, y pH de alrededor de 6,0, en la que el anticuerpo anti-PD-1 comprende dos cadenas ligeras (LC) y dos cadenas pesadas (HC), en la que la secuencia de aminoácidos de ambas LC es SEQ ID NO: 2, y la secuencia de aminoácidos de ambas HC es la misma, y es SEQ ID NO: 3 o SEQ ID NO: 4.

La presente invención también proporciona una formulación farmacéutica que comprende un anticuerpo anti-PD-1 en una concentración de alrededor de 10 mg/ml, citrato en una concentración de alrededor de 20 mM, histidina en una concentración de alrededor de 25 mM, manitol en una concentración de alrededor de 140 mM, cloruro de sodio en una concentración de alrededor de 50 mM, edetato en una concentración de alrededor de 0,02 mM, polisorbato 80 en una concentración de alrededor 0,02 %, y pH de alrededor de 6,0, en la que el anticuerpo anti-PD-1 comprende dos cadenas ligeras (LC) y dos cadenas pesadas (HC), en la que la secuencia de aminoácidos de ambas LC es SEQ ID NO: 2, y la secuencia de aminoácidos de ambas HC es la misma, y es SEQ ID NO: 3 o SEQ ID NO: 4.

La presente invención también proporciona una formulación farmacéutica que comprende un anticuerpo anti-PD-1 en una concentración de alrededor de 10 mg/ml, citrato en una concentración de alrededor de 20 mM, histidina en una concentración de alrededor de 25 mM, manitol en una concentración de alrededor de 140 mM, cloruro de sodio en una concentración de alrededor de 50 mM, edetato en una concentración de alrededor de 0,02 mM, polisorbato 20 en una concentración de alrededor 0,02 %, y pH de alrededor de 6,0, en la que el anticuerpo anti-PD-1 comprende dos cadenas ligeras (LC) y dos cadenas pesadas (HC), en la que la secuencia de aminoácidos de ambas LC es SEQ ID NO: 2, y la secuencia de aminoácidos de ambas HC es la misma, y es SEQ ID NO: 3 o SEQ ID NO: 4.

En una realización, la presente invención también proporciona una formulación farmacéutica que comprende una concentración de anticuerpo anti-PD-1 de alrededor de 5 mg/ml a alrededor de 15 mg/ml. En otra realización, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende una concentración de anticuerpo anti-PD-1 de alrededor de 5 mg/ml. En otra realización, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende una concentración de anticuerpo anti-PD-1 de alrededor de 10 mg/ml. En otra realización, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende una concentración de anticuerpo anti-PD-1 de alrededor de 15 mg/ml.

En una realización, la presente invención también proporciona una formulación farmacéutica que está amortiguada con citrato en el intervalo de alrededor de 15 mM a alrededor de 25 mM. En otra realización, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que está amortiguada con citrato en el intervalo de 15 mM a 25 mM. En otra realización, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que está amortiguada con citrato en una concentración de alrededor de 15 mM, alrededor de 20 mM, o alrededor de 25 mM. En una realización adicional, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que está amortiguada con citrato en una concentración de alrededor de 20 mM.

En otra realización, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que está amortiguada con histidina en el intervalo de 20 mM a 30 mM. En otra realización, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que está amortiguada con histidina en una concentración de alrededor de 20 mM, alrededor de 25 mM, o alrededor de 30 mM. En una realización adicional, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que está amortiguada con histidina en una concentración de alrededor de 25 mM.

En una realización, la presente invención también proporciona una formulación farmacéutica que comprende una concentración de manitol de alrededor de 130 mM a alrededor de 165 mM. En otra realización, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende una concentración de manitol de alrededor de 130 mM, alrededor de 135 mM, alrededor de 140 mM, alrededor de 145 mM, alrededor de 150 mM, alrededor de 155 mM, alrededor de 160 mM, o alrededor de 165 mM. En una realización adicional, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende una concentración de manitol de alrededor de 140 mM.

En una realización, la presente invención también proporciona una formulación farmacéutica que comprende una concentración de NaCl de alrededor de 45 mM a alrededor de 55 mM. En otra realización, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende una concentración de NaCl de alrededor de 45 mM, alrededor de 50 mM, o alrededor de 55 mM. En una realización adicional, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende una concentración de NaCl de alrededor de 50 mM.

En una realización, la presente invención también proporciona una formulación farmacéutica que comprende una concentración de edetato de alrededor de 0,01 mM a alrededor de 0,03 mM. En otra realización, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende una concentración de edetato disódico de alrededor de 0,01 mM, alrededor de 0,015 mM, alrededor de 0,02 mM, alrededor de 0,025 mM, o alrededor de 0,03 mM. En una realización adicional, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende una concentración de edetato disódico de alrededor de 0,02 mM.

En una realización, la presente invención también proporciona una formulación farmacéutica que comprende una concentración de polisorbato-80 o polisorbato-20 de alrededor de 0,01 % a alrededor de 0,03 %. En otra realización, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende una concentración de polisorbato-80 de alrededor de 0,01 %, alrededor de 0,015 %, alrededor de 0,02 %, alrededor de 0,025 %, o alrededor de 0,03 %. En una realización adicional, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende una concentración de polisorbato-80 de alrededor de 0,02 %.

En una realización, la presente invención también proporciona una formulación farmacéutica dentro de un intervalo de pH de alrededor de 5,5 a alrededor de 6,5. En otra realización, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende un pH de alrededor de 5,5, alrededor de 6,0, o alrededor de 6,5. En una realización adicional, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende un pH de alrededor de 6,0.

Se prefieren ciertas formulaciones farmacéuticas. Las siguientes selecciones enumeradas describen tales clases preferidas:

1) el anticuerpo anti-PD-1 comprende un anticuerpo que comprende dos cadenas ligeras (LC) y dos cadenas pesadas (HC), en el que cada LC es la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, y cada HC es la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 3 o la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 4;

2) el anticuerpo anti-PD-1 en una concentración de alrededor de 5 mg/ml a alrededor de 15 mg/ml;

3) el anticuerpo anti-PD-1 en una concentración de alrededor de 10 mg/ml;

4) el polisorbato-80 está en una concentración de alrededor de 0,01 % a alrededor de 0,03 %

5) el polisorbato-80 está en una concentración de alrededor de 0,02 %

6) el polisorbato-20 está en una concentración de alrededor de 0,01 % a alrededor de 0,03 %;

7) el polisorbato-20 está en una concentración de alrededor de 0,02 %

8) el citrato está en una concentración de alrededor de 15 mM a alrededor de 25 mM;

9) el citrato está en una concentración de alrededor de 20 mM;

10) la histidina está en una concentración de alrededor de 20 mM a alrededor de 30 mM;

11) la histidina está en una concentración de alrededor de 25 mM;

12) el manitol está en una concentración de alrededor de 130 mM a alrededor de 165 mM;

13) el manitol está en una concentración de alrededor de 140 mM;

14) el cloruro de sodio está en una concentración de alrededor de 45 mM a alrededor de 55 mM;

15) el cloruro de sodio está en una concentración de alrededor de 50 mM;

16) el edetato está en una concentración en el intervalo de alrededor de 0,01 a alrededor de 0,03 mM.

17) el edetato está en una concentración de alrededor de 0,02 mM;

18) la histidina está en una concentración de alrededor de 25 mM, y el citrato en una concentración de alrededor de 20 mM.

19) el pH es de 5,5 a 6,5.

20) el pH es alrededor de 6,0.

Las referencias a "métodos de tratamiento" en los párrafos siguientes deben interpretarse como referencias a las composiciones farmacéuticas de la presente invención para uso en un método para el tratamiento del cáncer.

Además, la presente invención proporciona un método para tratar cánceres que pueden responder a anticuerpos anti-PD-1 , que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad eficaz de una formulación farmacéutica descrita aquí. Además, el método para tratar el cáncer comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad eficaz de una formulación farmacéutica de la presente invención, en el que el cáncer se selecciona del grupo de melanoma, cáncer de pulmón, cáncer de cabeza y cuello, cáncer colorrectal, cáncer de páncreas, cáncer gástrico, cáncer de riñón, cáncer de vejiga, cáncer de próstata, cáncer de mama, cáncer de ovario, o carcinoma hepatocelular. Más particularmente, la presente invención proporciona un método para tratar el melanoma, que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad eficaz de una formulación farmacéutica de la presente invención. También, la presente invención proporciona un método para tratar el cáncer de pulmón, que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad eficaz de una formulación farmacéutica de la presente invención. También, la presente invención proporciona un método para tratar el cáncer de cabeza y cuello, que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad eficaz de una formulación farmacéutica de la presente invención. También, la presente invención proporciona un método para tratar el cáncer colorrectal, que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad eficaz de una formulación farmacéutica de la presente invención. También, la presente invención proporciona un método para tratar el cáncer de páncreas, que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad eficaz de una formulación farmacéutica de la presente invención. También, la presente invención proporciona un método para tratar el cáncer gástrico, que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad eficaz de una formulación farmacéutica de la presente invención. También, la presente invención proporciona un método para tratar el cáncer de riñón, que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad eficaz de una formulación farmacéutica de la presente invención. También, la presente invención proporciona un método para tratar el cáncer de vejiga, que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad eficaz de una formulación farmacéutica de la presente invención. También, la presente invención proporciona un método para tratar el cáncer de próstata, que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad eficaz de una formulación farmacéutica de la presente invención. También, la presente invención proporciona un método para tratar el cáncer de mama, que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad eficaz de una formulación farmacéutica de la presente invención. También, la presente invención proporciona un método para tratar el cáncer de ovario, que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad eficaz de una formulación farmacéutica de la presente invención. También, la presente invención proporciona un método para tratar el carcinoma hepatocelular, que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad eficaz de una formulación farmacéutica de la presente invención. Además, la presente invención proporciona la formulación farmacéutica de la presente invención para uso en el tratamiento del cáncer. Además, la presente invención proporciona la formulación farmacéutica de la presente invención para uso en el tratamiento de melanoma, cáncer de pulmón, cáncer de cabeza y cuello, cáncer colorrectal, cáncer de páncreas, cáncer gástrico, cáncer de riñón, cáncer de vejiga, cáncer de próstata, cáncer de mama, cáncer de ovario, o carcinoma hepatocelular. Más particularmente, la presente invención proporciona la formulación farmacéutica de la presente invención para uso en el tratamiento del melanoma. También, la presente invención proporciona la formulación farmacéutica de la presente invención para uso en el tratamiento del cáncer de pulmón. También, la presente invención proporciona la formulación farmacéutica de la presente invención para uso en el tratamiento del cáncer de cabeza y cuello. También, la presente invención proporciona la formulación farmacéutica de la presente invención para uso en el tratamiento del cáncer colorrectal. También, la presente invención proporciona la formulación farmacéutica de la presente invención para uso en el tratamiento del cáncer gástrico. También, la presente invención proporciona la formulación farmacéutica de la presente invención para uso en el tratamiento del cáncer colorrectal. También, la presente invención proporciona la formulación farmacéutica de la presente invención para uso en el tratamiento del cáncer de riñón. También, la presente invención proporciona la formulación farmacéutica de la presente invención para uso en el tratamiento del cáncer de vejiga. También, la presente invención proporciona la formulación farmacéutica de la presente invención para uso en el tratamiento del cáncer de próstata. También, la presente invención proporciona la formulación farmacéutica de la presente invención para uso en el tratamiento del cáncer de mama. También, la presente invención proporciona la formulación farmacéutica de la presente invención para uso en el tratamiento del cáncer de ovario. También, la presente invención proporciona la formulación farmacéutica de la presente invención para uso en el tratamiento del carcinoma hepatocelular.

Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención comprenden citrato. El citrato se puede preparar usando uno o más de ácido cítrico, citrato trisódico dihidratado y ácido cítrico monohidratado; o ácido cítrico monohidrato, fosfato sódico dibásico y ácido cítrico. También, se puede obtener citrato que comprende citrato de sodio monobásico, sal trisódica del ácido cítrico, o citrato de sodio tribásico hidratado. Preferiblemente, el citrato se obtiene con citrato de sodio dihidratado y ácido cítrico. Se pueden usar otros contraiones, además del sodio.

Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención comprenden edetato. Preferiblemente, el edetato es edetato disódico (EDTA.2Na).

El Anticuerpo 1 es un anticuerpo anti-PD-1 que comprende dos cadenas ligeras (LC) y dos cadenas pesadas (HC), en el que la secuencia de aminoácidos de cada LC es SEQ ID NO: 2, y la secuencia de aminoácidos de cada HC es SEQ ID NO: 3.

El Anticuerpo 2 es un anticuerpo anti-PD-1 que comprende dos cadenas ligeras (LC) y dos cadenas pesadas (HC), en el que la secuencia de aminoácidos de cada LC es SEQ ID NO: 2, y la secuencia de aminoácidos de cada HC es SEQ ID NO: 4.

Un anticuerpo anti-PD-1 para uso en las formulaciones de la presente invención se puede producir usando técnicas bien conocidas en la técnica, por ejemplo tecnologías recombinantes, tecnologías de presentación en fagos, tecnologías sintéticas, o combinaciones de tales tecnologías u otras tecnologías fácilmente conocidas en la técnica. Los métodos para producir y purificar anticuerpos y fragmentos de unión a antígeno son bien conocidos en la técnica, y se pueden encontrar, por ejemplo, en Harlow y Lane (1988) Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, Nueva York, capítulos 5-8 y 15, ISBN 0-87969-314-2.

Los Anticuerpos 1 y 2 se pueden preparar en sistemas de expresión de mamíferos que se usan comúnmente para cultivos celulares a escala industrial usando conocimientos habituales en la técnica de anticuerpos. Como se expresan en tales sistemas habituales de expresión de mamíferos, tales como CHO o NS0, los anticuerpos expresados tendrán los enlaces de disulfuro esperados dentro y entre las cadenas. Además, los anticuerpos estarán glicosilados en CH2.

Para ser considerado estable, un anticuerpo en disolución debe tener suficiente estabilidad química y estabilidad física. La oxidación, la desamidación y la hidrólisis son ejemplos de problemas de estabilidad química que puede tener un anticuerpo en una formulación. La agregación y la formación de gel son ejemplos de problemas de estabilidad física que puede tener un anticuerpo en una formulación. Una formulación farmacéutica de un anticuerpo se considera estable si el grado de degradación, modificación, agregación, pérdida de actividad biológica y similares del anticuerpo que contiene están aceptablemente controlados y no aumentan de manera aceptable con el tiempo. La estabilidad puede evaluarse mediante métodos bien conocidos en la técnica, incluida la medida de la dispersión de la luz de la muestra, la atenuación aparente de la luz (absorbancia, o densidad óptica), el tamaño de los agregados u otras formas polimerizadas del anticuerpo (por ejemplo, mediante cromatografía de exclusión por tamaño (SEC)), actividad biológicain vitrooin vivo,y/o propiedades medidas mediante calorimetría diferencial de barrido (DSC). Otros métodos para evaluar la estabilidad son bien conocidos en la técnica, y también pueden usarse según la presente invención.

Como se mencionó, la presente invención proporciona un método para tratar cánceres que pueden responder a anticuerpos anti-PD-1, que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad eficaz de una formulación farmacéutica descrita aquí. Una cantidad eficaz de la formulación de anticuerpo anti-PD-1 de la presente invención es la cantidad que, cuando se administra a un paciente que necesita tratamiento, da como resultado el efecto terapéutico deseado sin causar efectos secundarios inaceptables cuando se administra a un sujeto con niveles de PD-1 aumentados.

Ejemplo 1

Los ingredientes sólidos del amortiguador se pesan y se transfieren a un vaso de precipitados al que se añade el 80 % del volumen diana de H<2>O dd, y la mezcla se agita con un agitador magnético para disolver los ingredientes. Después de que se disuelvan todos los ingredientes, el pH de la disolución se ajusta hasta 6,0 usando ácido cítrico 2 M, y se añade H<2>O dd para lograr el volumen diana. Después, se prepara polisorbato 80 a 20 mg/ml usando el amortiguador inicial, para alcanzar una concentración 100x de polisorbato 80. Las muestras de anticuerpo se concentran hasta alrededor de 15 mg/ml usando un filtro centrífugo Amicon Ultra-30K a 3800 g. Las muestras de anticuerpo concentradas se someten a 6-7 rondas de intercambio de amortiguador en el amortiguador inicial. Las muestras de anticuerpo intercambiadas con amortiguador se diluyen con el amortiguador inicial y polisorbato 80100x, para lograr una concentración final de 10 mg/ml de anticuerpo y 0,2 mg/ml de polisorbato 80. Las muestras se filtran de forma estéril con un filtro de 0,22 pm para obtener el producto farmacéutico final.

T l 1: F rm l i n r f rm i n i r

Tabla 2: Formulación de producto farmacéutico de anticuerpo

Efecto del pH

Para que una formulación farmacéutica alcance estabilidad, es necesario abordar en la formulación las fuentes de inestabilidad tanto físicas como químicas. La inestabilidad química puede dar como resultado la degradación del anticuerpo.

Para evaluar el efecto del pH sobre la estabilidad química del Anticuerpo 1 a 5 mg/ml, las muestras de Anticuerpo 1 se analizan en amortiguador de citrato a pH variable. El amortiguador de citrato se prepara a 10 mM en agua bidestilada (H<2>O dd), y el pH del amortiguador se ajusta hasta un pH de 4, 5, 6, 7 u 8. El Anticuerpo 1 se diluye a 5 mg/ml en los distintos amortiguadores de citrato con pH ajustado, y se incuba a 37°C durante 10 días. Las muestras se analizan el Día 0 y el Día 10 mediante SEC-HPLC (cromatografía de exclusión por tamaño-cromatografía de líquidos de alto rendimiento) según la Farmacopea de la República Popular China (edición de 2010, sección 3, apéndice 11 IB), y se detectan mediante columnas de exclusión de tamaño de gel de sílice hidrófilo, y la pureza de las muestras se mide mediante normalización del área. El % del área del pico principal del Día 0 fue 98,65 %.

Los resultados demostrados en la Tabla 3 indican que el Anticuerpo 1 es más estable a un pH de 6, y sólo ligeramente menos estable a un pH de 5. El Anticuerpo 1 es menos estable en condiciones de pH más ácidas o en condiciones de pH más alcalinas. Estos resultados indican que el pH de la formulación de la disolución farmacéutica para el Anticuerpo 1 debe estar entre pH 5 y pH 6.

Tabla 3: Resultados de SEC-HPLC del efecto del pH sobre el Anticuerpo 1 a 5 m /ml en amorti uador de citrato

Efectos del amortiguador, alcoholes polihidroxilados, tensioactivos y otros excipientes sobre la estabilidad del Anticuerpo 1

Se exploran los efectos de los amortiguadores de uso común sobre la estabilidad del Anticuerpo para comprender cuál sería el sistema amortiguador óptimo para el Anticuerpo 1. El estudio usa un enfoque multivariado para examinar la estabilidad física y química de las formulaciones de disoluciones de Anticuerpo 1. Las formulaciones de disoluciones de Anticuerpo 1 se preparan según la Tabla 4. El amortiguador de fosfato y el amortiguador de citrato se preparan en H<2>O dd a 20 mM. Se evalúan diversos excipientes de prueba, como se muestra en la Tabla 4, para determinar la formulación óptima para el Anticuerpo 1. Se añaden excipientes a los distintos amortiguadores, y el pH se ajusta a 6,0 para cada muestra. Las muestras de prueba se incuban a 25°C durante un máximo de tres meses. La estabilidad de las muestras se prueba en el Día 0, y en los Meses 1 y 3 mediante CEX-HPLC (cromatografía de intercambio iónicocromatografía de líquidos de alto rendimiento) según la Farmacopea de la República Popular China (edición de 2010, sección tres, apéndice IIIB), y se detecta con columnas de cationes, y la pureza de las muestras se mide mediante normalización del área. Los resultados se ilustran en la Tabla 5.

Tabla 4: Diseño para la prueba de formulación para Anticuerpo 1

Los valores están en mM

Cada formulación probada comprendía 10 mg/ml de Anticuerpo 1, cloruro de sodio 50 mM, y polisorbato al 0,02 %, y cada una tenía su pH ajustado a 6,0.

Tabla 5: Resultados de CEX-HPLC de los efectos del amorti uador en el Anticuerpo 1

Los resultados demuestran que la formulación de las muestras de prueba F2 y F6 tienen un aumento más lento en especies ácidas, lo que no sólo indica que la formulación de F2 y F6 proporcionó un ambiente más estable para el Anticuerpo 1 en comparación con las otras formulaciones probadas, sino que sorprendentemente mostró que la combinación única de polisorbato 80, manitol e histidina en amortiguador de citrato proporciona una estabilidad mejorada para el Anticuerpo 1.

Efectos de la exposición a la luz sobre la estabilidad del Anticuerpo 1

La formulación y las condiciones de las muestras de prueba F2 y F6 se duplican para realizar pruebas de sensibilidad a la luz del Anticuerpo 1. Las muestras de prueba F2 y F6 que contienen el Anticuerpo 1 a 10 mg/ml se exponen a una luz fluorescente de alta intensidad (5000 lux) a 25°C durante 10 días. La estabilidad de las muestras se prueba el Día 0, el Día 5 y el Día 10 usando la tecnología CeX-HPLC y SEC-HPLC.

Tabla 6: Resultados de CEX-HPLC SEC-HPLC de la exposición a la luz en el Anticuerpo 1

Los resultados mostrados en la Tabla 6 demuestran sorprendentemente que la formulación de la muestra de prueba F6 proporciona mayores propiedades antioxidantes para el Anticuerpo 1 en comparación con la formulación de la muestra de prueba F2, y en consecuencia da como resultado una mayor estabilidad y propiedades antioxidantes para el Anticuerpo 1.

Prueba de estabilidad acelerada del Anticuerpo 1

Se prueba la estabilidad del Anticuerpo 1 mediante un método de prueba de estabilidad acelerada, usando la formulación F6. El Anticuerpo 1 en la formulación anterior se dispensa asépticamente en viales de vidrio, se sella con tapones de goma y cubiertas de plástico, y se incuba a 25°C ± 2°C durante 1 mes. La estabilidad de las muestras se prueba el Día 0 y a 1 mes usando la tecnología CEX-HPLC y SEC-HPLC.

Los resultados de la prueba de estabilidad acelerada se ilustran en la Tabla 7 y la Tabla 8. Los resultados demuestran que la pureza y la estabilidad general del Anticuerpo 1 en la formulación mencionada anteriormente no se vieron afectadas significativamente después de un período de incubación de 1 mes en las condiciones aceleradas. Análisis adicionales sobre el aspecto, la concentración y la turbidez también mostraron resultados similares. Por tanto, se demostró que la formulación era capaz de mantener la estabilidad del Anticuerpo 1 durante al menos un mes a 25°C.

Tabla 7: Resultados de CEX-HPLC y SEC-HPLC de la prueba de estabilidad acelerada del Anticuerpo 1 a 25°C ± 2°C

Prueba de estabilidad a largo plazo del Anticuerpo 1

Los productos farmacéuticos biológicos se almacenan a 5°C ± 3°C para minimizar la degradación química y física durante la vida útil de un producto. Se prueba la estabilidad a largo plazo del Anticuerpo 1 a 10 mg/ml en la formulación F6.

El Anticuerpo 1 se dispensa asépticamente en viales, se sella con tapones de goma y cubiertas de plástico, y se incuba a 2°C hasta alrededor de 8°C durante 11 meses. Se prueba la estabilidad de las muestras en el Día 0 y en los puntos temporales de 3, 6 y 11 meses usando la tecnología CEX-HPLC y SEC-HPLC.

Los resultados de la prueba de estabilidad a largo plazo se ilustran en la Tabla 9 y la Tabla 10. Los resultados demuestran que la pureza y la estabilidad general del Anticuerpo 1 en la formulación mencionada anteriormente no se vieron afectadas significativamente después de un período de incubación de 11 meses en las condiciones a largo plazo. Análisis adicionales sobre el aspecto, la concentración y la turbidez también mostraron resultados similares. Se demostró además que esta formulación única, además de los beneficios de estabilidad ejemplificados anteriormente, es capaz de mantener la estabilidad del Anticuerpo 1 durante al menos 11 meses a 2°C hasta alrededor de 8°C.Tabla 8: Resultados de CEX-HPLC y SEC-HPLC de las pruebas de estabilidad a largo plazo a 2 y 8°C del Anticuerpo 1

Prueba de estabilidad en la congelación-descongelación del Anticuerpo 1

Se prueba la estabilidad en la congelación-descongelación del Anticuerpo 1 a 10 mg/ml en la formulación F6. El Anticuerpo 1 en la formulación antes mencionada en el Ejemplo 5 se dispensa asépticamente en viales de vidrio, se sella con tapones de goma y cubiertas de plástico, y se incuba a -80°C, seguido de un ciclo de descongelación a temperatura ambiente. El ciclo de congelación-descongelación se repite hasta 6 veces para la misma muestra. Se prueba la estabilidad de las muestras antes de la congelación, y en el 3o y 6o ciclo de descongelación, usando tecnología CEX-HPLC y SEC-HPLC.

Los resultados de la prueba de estabilidad en la congelación-descongelación se ilustran en la Tabla 9. Los resultados demuestran que la pureza y la estabilidad general del Anticuerpo 1 en la formulación antes mencionada no se vieron afectadas significativamente después de 6 ciclos. Análisis adicionales sobre el aspecto, la concentración y la turbidez también mostraron resultados similares. Por tanto, se demostró que la formulación era capaz de mantener la estabilidad del Anticuerpo 1 durante 6 ciclos de congelación-descongelación.

Tabla 9: Resultados de CEX-HPLC y SEC-HPLC de las pruebas de estabilidad en la congelacióndescongelación a -80°C en el Anticuerpo 1

Como se demuestra en los ejemplos antes mencionados, se realizaron pruebas exhaustivas para desarrollar una formulación que fuera capaz de mantener la estabilidad de un anticuerpo monoclonal humano recombinante antimuerte celular programada-1 (PD-1) en condiciones variables. Una formulación nueva y única, con una combinación inesperada de ingredientes que proporcionan propiedades que pueden mejorar la estabilidad física y química del anticuerpo anti-PD-1, al proporcionar propiedades antioxidantes, extender la vida útil, y mejorar potencialmente la seguridad clínica del anticuerpo. Una formulación única que permite que el anticuerpo anti-PD-1 mantenga la estabilidad química y física en condiciones exigentes, y temperaturas variables que oscilan de 2-8°C, 25°C, 37°C y -80°C.

Secuencias

SEQ ID NO: 1 (PD-1 humana)

M Q IPQAPW PVVW AVLQLGW RPGW FLDSPDRPW NPPTFSPALLVVTEGDNATFT

C SF SNT SE SF V LN W YRM SP SNQTDKL AAFPEDRS QPGQDCRFRVT QLPN GRDFH

M SYVRARRNDSGTYLCGAISLAPKAQIK ESLRAELRYTERRAEYPTAHPSPSPRPA

GQF QTL V V G V V GGLLGSLVLL VW VL AVIC SRAARGTIGARRT GQPLKEDP S AVP

VF S VD Y GELDF QWREKTPEPP VPC VPEQTE Y ATI VFP SGMGT S SP ARRGS ADGPR

SAQPLRPEDGHC S WPLSEQ ID NO: 2 (cadena ligera)

DIQ M TQSPSSVSASVGDRVTITCRASQ GISSW LAW YQQ KPGKAPKLLISAASSLQ S

GVP SRF S GS GS GTDF TLTIS SLQPEDF AT Y Y C Q Q ANEtLPF TF GGGTK VEIKRT V A A

PSVFIFPPSDEQ LK SG TASVVCLLNNFYPREAK VQ W K VDNALQ SG NSQ ESVTEQ D

SKD ST Y SL S STLTL SK AD YEKHK V Y ACE VTHQGL S SP VTKSFNRGECSEQ ID NO: 3 (cadena pesada)

QVQLVQ SGAEVK KPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISW VRQAPGQG LEW M GLIIPM

FDTAG YAQ K FQ G RVAITVDESTSTAYM ELSSLRSEDTAVYYCARAEH SSTG TFD

YW G Q G TLVTVSSASTK G PSVFPLAPCSRSTSESTAALG CLVK DYFPEPVTVSW NS

GALT S GVHTFP A VLQ S S GL Y SL S S V VT VP S S SLGTKT YT CN VDHKP SNTK V D K R V

ESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQ

FN W YV D G V E VHNAKTKPREEQFN STYRVV S VLTVLHQDW LNGK EYKCKV SNK

GLP S SIEKTISKAKGQPREPQ VYTLPP SQEEMTKN Q V SLTCL VKGF YP SDIAVEW E

SNG Q PENNYK TTPPVLDSDGSFFL Y SRLT YDKSRW QEGNVF SC S VM H EALH NH Y

TQKSLSLSLGKSEQ ID NO: 4 (cadena pesada)

QVQLVQ SGAEVK KPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISW VRQAPGQG LEW M GLIIPM FDTAG YAQ K FQ G RVAITVDESTSTAYM ELS SLRSEDT A V Y Y C ARAEHS STGTFD YW GQ GTL VT Y S S AS TKGP S VFPL APC SRS T SE S T A ALGCL VK D YFPEP YT Y S W N S GALT S GYHTFP A VLQ S S GL Y SL S S Y VT YP S S SLGTKT YT CN YDHKP SNTK V D K R V ESKYGPPCPPCPAPEAAG GPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQ FNW YVDG VEYH NAK TK PREEQ FN ST Y R V V S YLTVLHQDW LNGK EYKCKV SNK GLPS SIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEM TKNQV SLTCLVKGFYPSDIAVEW E SN GQPENNYKTTPP VLD SDGSFFL Y SRLT V D K SRW QEGN VF S C S VM HE ALH NH Y TQKSLSLSLG

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una formulación farmacéutica, que comprende:

un anticuerpo anti-PD-1 en una concentración de alrededor de 5 mg/ml a alrededor de 15 mg/ml;

citrato en una concentración de alrededor de 15 mM a alrededor de 25 mM;

histidina en una concentración de alrededor de 20 mM a alrededor de 30 mM;

manitol en una concentración de alrededor de 130 mM a alrededor de 165 mM;

cloruro de sodio en una concentración de alrededor de 45 mM a alrededor de 55 mM;

edetato en una concentración de alrededor de 0,01 mM a alrededor de 0,03 mM; y

polisorbato 20 o polisorbato 80 en una concentración de alrededor de 0,01 % a alrededor de 0,03 %;

y que tiene un pH de alrededor de 5,5 a alrededor de 6,5;

en la que el anticuerpo anti-PD-1 comprende dos cadenas ligeras (LC) y dos cadenas pesadas (HC), en la que la secuencia de aminoácidos de ambas LC es SEQ ID NO: 2, y la secuencia de aminoácidos de ambas HC es la misma, y es SEQ ID NO: 3 o SEQ ID NO: 4.

2. La formulación de la reivindicación 1, en la que la secuencia de aminoácidos de ambas HC es SEQ ID NO: 3.

3. La formulación de la reivindicación 1, en la que la secuencia de aminoácidos de ambas HC es SEQ ID NO: 4.

4. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que la concentración de anticuerpo anti-PD-1 es alrededor de 10 mg/ml.

5. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que la concentración de polisorbato-80 es alrededor de 0,02%.

6. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que la concentración de polisorbato-20 es alrededor de 0,02%.

7. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en la que la concentración de citrato es 20 mM.

8. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que la concentración de histidina es 25 mM.

9. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en la que la concentración de manitol es 140 mM.

10. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en la que la concentración de cloruro de sodio es 50 mM.

11. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en la que el pH es 6,0.

12. La formulación farmacéutica de la reivindicación 1, en la que

la concentración del anticuerpo anti-PD-1 es alrededor de 10 mg/ml,

la concentración de citrato es alrededor de 20 mM,

la concentración de histidina es alrededor de 25 mM,

la concentración de manitol es alrededor de 140 mM,

la concentración de cloruro de sodio es alrededor de 50 mM,

la concentración de edetato es alrededor de 0,02 mM,

la concentración de polisorbato-80 es alrededor de 0,02%, y

el pH es alrededor de 6,0.

13. La formulación farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, para uso en el tratamiento del cáncer.