BR112019001233B1

BR112019001233B1 - Formulação farmacêutica e uso da mesma

Info

Publication number: BR112019001233B1
Application number: BR112019001233-8A
Authority: BR
Inventors: Wei Cao; Junfeng Li; Xiaolin Liu
Original assignee: Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd.
Priority date: 2016-08-09
Filing date: 2017-07-17
Publication date: 2021-10-26
Also published as: WO2018027524A1; US20210040211A1; EP3496753B1; CN109562173A; CA3030929C; WO2018028383A1; EP3496753A1; BR112019001233A2; JP6848046B2; AU2017310916B2; US11130809B2; CA3030929A1; EP3496753A4; JP2019527712A; ES2969233T3; CN109562173B; AU2017310916A1

Abstract

a presente invenção refere-se a formulações farmacêuticas para anticorpos anti-pd-1.

Description

[001] A presente invenção se refere ao campo da medicina. Mais especificamente, a presente invenção se refere em uma formulação far-macêutica de um anticorpo anti morte humana programada 1 (anti-PD- 1). É esperado que esta formulação farmacêutica de anticorpo anti-PD- 1 seja útil no tratamento de canceres que respondem a anticorpos anti- PD-1 como uma monoterapia e em combinação com quimioterapia e outras terapêuticas de câncer.

[002] Formulações farmacêuticas de anticorpos anti-PD-1 são ne cessárias para o tratamento de pacientes com câncer. Certas concen-trações de anticorpos anti-PD-1 são necessárias para formulações far-macêuticas, de modo que o anticorpo possa ser administrado por via intravenosa ao paciente. Esta formulação farmacêutica com uma deter-minadaconcentração do anticorpo anti-PD-1 deve manter a estabilidade física e química do anticorpo anti-PD-1 durante longos períodos de tempo em armazenamento. Para utilização do anticorpo anti-PD-1 em todo o mundo sob condições que podem variar significativamente, a formulação deve não só manter a estabilidade do anticorpo anti-PD-1 por períodos de tempo em temperatura ambiente, mas também manter a estabilidade sob possíveis flutuações de temperatura e sob exposições potenciais à luz.

[003] Os anticorpos Anti-PD1 usados nas presentes formulações farmacêuticas estão revelados na PCT/CN2015/086494. Esses anticorpos foram descobertos como propensos à instabilidade química, incluindo a oxidação, quando armazenados por um longo período de tempo e sob várias condições ambientais. Por esse motivo, são necessárias formulações farmacêuticas para anticorpos anti-PD-1 que evitem esses problemas observados e que também demonstrem esta- bilidade durante o prazo de permanência em armazenamento prolongado.

[004] Em concordância, a presente invenção proporcione uma formulação farmacêutica que compreende um anticorpo anti-PD-1 em uma concentração na faixa de 5 mg/ml até cerca de 15 mg/ml, citrato em uma concentração de cerca de 15 mM até cerca de 25 mM, histidi- na em uma concentração de cerca de 20 mM até cerca de 30 mM, manitol em uma concentração de cerca de 130 mM até cerca de 165 mM, cloreto de sódio em uma concentração de cerca de 45 mM até cerca de 55 mM, edetato em uma concentração de cerca de 0,01 mM até cerca de 0,03 mM, polissorbato 20 ou polissorbato 80 em uma concentração na faixa a partir de cerca de 0,01% até cerca de 0,03% em pH a partir de cerca de 5,5 até cerca de 6,5, em que o anticorpo anti-PD-1 compreenda duas cadeias leves (LCs) e duas cadeias pesadas (HCs), em que a sequência de aminoácidos de ambas as LCs é SEQ ID N°: 2 e a sequência de aminoácidos de ambos os HCs é a mesma e é tanto a SEQ ID N°: 3 como a SEQ ID N°: 4.

[005] A presente invenção também proporciona uma formulação farmacêutica que compreenda um anticorpo anti-PD-1 em uma con-centração de cerca de 10 mg/ml, citrato em uma concentração de cerca de 15 mM até cerca de 25 mM, histidina em uma concentração de cerca de 20 mM até cerca de 30 mM, manitol em uma concentração de cerca de 130 mM até cerca de 165 mM, cloreto de sódio em uma concentração de cerca de 45 mM até cerca de 55 mM, edetato em uma concentração de cerca de 0,01 mM até cerca de 0,03 mM, polis- sorbato 20 ou polissorbato 80 em uma concentração na faixa a partir de cerca de 0,01% até cerca de 0,03% em pH de cerca de 5,5 até cerca de 6,5, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende duas cadeias leves (LCs) e duas cadeias pesadas (HCs), em que a sequência de aminoácidos de ambas as LCs são as SEQ ID N°: 2 e a sequência de aminoácidos de ambos os HCs é a mesma e é tanto a SEQ ID N°: 3 como a SEQ ID N°: 4.

[006] A presente invenção também proporciona uma formulação farmacêutica que compreende um anticorpo anti-PD-1 em uma con-centração na faixa de cerca de 5 mg/ml até cerca de 15 mg/ml, citrato em uma concentração de cerca de 20 mM, histidina em uma concentração de cerca de 20 mM até cerca de 30 mM, manitol em uma concentração de cerca de 130 mM até cerca de 165 mM, cloreto de sódio em uma concentração de cerca de 45 mM até cerca de 55 mM, edeta- to em uma concentração de cerca de 0,01 mM até cerca de 0,03 mM, polissorbato 20 ou polissorbato 80 em uma concentração na faixa de cerca de 0,01% até cerca de 0,03% em pH de cerca de 5,5 até cerca de 6,5, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende duas cadeias leves (LCs) e duas cadeias pesadas (HCs), a sequência de aminoácidos de ambas as LCs é a SEQ ID N°: 2 e a sequência de aminoácidos de ambos os HCs é a mesma e é SEQ ID N°: 3 ou a SEQ ID N°: 4.

[007] A presente invenção também proporcione uma formulação farmacêutica que compreende um anticorpo anti-PD-1 em uma con-centração na faixa de cerca de 5 mg/ml até cerca de 15 mg/ml, citrato em uma concentração de cerca de 15 mM até cerca de 25 mM, histidi- na em uma concentração de cerca de 25 mM, manitol em uma concentração de cerca de 130 mM até cerca de 165 mM, cloreto de sódio em uma concentração de cerca de 45 mM até cerca de 55 mM, edeta- to em uma concentração de cerca de 0,01 mM até cerca de 0,03 mM, polissorbato 20 ou polissorbato 80 em uma concentração na faixa de cerca de 0,01% até cerca de 0,03% em pH de cerca de 5,5 até cerca de 6,5, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende duas cadeias leves (LCs) e duas cadeias pesadas (HCs), a sequência de aminoácidos de ambas as LCs é a SEQ ID N°: 2 e a sequência de aminoácidos de ambos os HCs é a mesma e é a SEQ ID N°: 3 ou a SEQ ID N°: 4.

[008] A presente invenção também proporciona uma formulação farmacêutica que compreende um anticorpo anti-PD-1 em uma con-centração na faixa de cerca de 5 mg/ml até cerca de 15 mg/ml, citrato em uma concentração de cerca de 15 mM até cerca de 25 mM, histi- dina em uma concentração de cerca de 20 mM até cerca de 30 mM, manitol em uma concentração de cerca de 140 mM, cloreto de sódio em uma concentração de cerca de 45 mM até cerca de 55 mM, ede- tato em uma concentração de cerca de 0,01 mM até cerca de 0,03 mM, polissorbato 20 ou polissorbato 80 em uma concentração na faixa de cerca de 0,01% até cerca de 0,03% e em um pH de cerca de 5,5 até cerca de 6,5, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende duas cadeias leves (LCs) e duas cadeias pesadas (HCs), a sequência de ami- noácidos de ambas as LCs é a SEQ ID N°: 2 e a sequência de amino- ácidos de ambos os HCs é a mesma e é a SEQ ID N°: 3 ou a SEQ ID N°: 4.

[009] A presente invenção também proporciona uma formulação farmacêutica que compreende um anticorpo anti-PD-1 em uma con-centração na faixa de cerca de 5 mg/ml até cerca de 15 mg/ml, citrato em uma concentração de cerca de 15 mM até cerca de 25 mM, histidina em uma concentração de cerca de 20 mM até cerca de 30 mM, manitol em uma concentração de cerca de 130 mM até cerca de 165 mM, cloreto de sódio em uma concentração de cerca de 50 mM, edetato em uma concentração de cerca de 0,01 mM até cerca de 0,03 mM, polissorbato 20 ou polissorbato 80 em uma concentração na faixa de cerca de 0,01% até cerca de 0,03% e pH de cerca de 5,5 até cerca de 6,5, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende duas cadeias leves (LCs) e duas cadeias pesadas (HCs), a sequência de aminoácidos de ambas as LCs é SEQ ID N°: 2 e a sequência de ami- noácidos de ambos os HCs é a mesma e é a SEQ ID N°: 3 ou a SEQ ID N°: 4.

[0010] A presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que compreende um anticorpo anti-PD-1 em uma concentração na faixa de cerca de 5 mg/ml até cerca de 15 mg/ml, citrato em uma concentração de cerca de 15 mM até cerca de 25 mM, histidina em uma concentração de cerca de 20 mM até cerca de 30 mM, mani- tol em uma concentração de cerca de 130 mM até cerca de 165 mM, cloreto de sódio em uma concentração de cerca de 45 mM até cerca de 55 mM, edetato em uma concentração de cerca de 0,02 mM, polis- sorbato 20 ou polissorbato 80 em uma concentração na faixa de cerca de 0,01% até cerca de 0,03%, e em um pH de cerca de 5,5 até cerca de 6,5, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende duas cadeias leves (LCs) e duas cadeias pesadas (HCs), em que a sequência de aminoá- cidos de ambas as LCs é SEQ a ID N°: 2 e a sequência de aminoácidos de ambos os HCs é a mesma e é a SEQ ID N°: 3 ou a SEQ ID N°: 4.

[0011] A presente invenção também proporciona uma formulação farmacêutica que compreende um anticorpo anti-PD-1 em uma con-centração na faixa de cerca de 5 mg/ml até cerca de 15 mg/ml, citrato em uma concentração de cerca de 15 mM até cerca de 25 mM, histidi- na em uma concentração de cerca de 20 mM até cerca de 30 mM, manitol em uma concentração de cerca de 130 mM até cerca de 165 mM, cloreto de sódio em uma concentração de cerca de 45 mM até cerca de 55 mM, edetato em uma concentração de cerca de 0,01 mM até cerca de 0,03 mM, polissorbato 20 ou polissorbato 80 em uma concentração de cerca de 0,02% e em um pH a partir de cerca de 5,5 até cerca de 6,5, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende duas cadeias leves (LCs) e duas cadeias pesadas (HCs), em que a sequência de aminoácidos de ambas as LCs é a SEQ ID N°: 2 e a sequência de aminoácidos de ambos os HCs é a mesma e é tanto a SEQ ID N°: 3 como a SEQ ID N°: 4.

[0012] A presente invenção também proporciona uma formulação farmacêutica que compreende um anticorpo anti-PD-1 em uma con-centração na faixa de cerca de 5 mg/ml até cerca de 15 mg/ml, citrato em uma concentração de cerca de 15 mM até cerca de 25 mM, histidi- na em uma concentração de cerca de 20 mM até cerca de 30 mM, manitol em uma concentração de cerca de 130 mM até cerca de 165 mM, cloreto de sódio em uma concentração de cerca de 45 mM até cerca de 55 mM, edetato em uma concentração de cerca de 0,01 mM até cerca de 0,03 mM, polissorbato 20 ou polissorbato 80 em uma concentração de cerca de 0,01% até cerca de 0,03% e em um pH de cerca de 6,0, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende duas cadeias leves (LCs) e duas cadeias pesadas (HCs), em que a sequência de aminoácidos de ambas as LCs é a SEQ ID N°: 2 e a sequência de aminoácidos de ambos os HCs é a mesma e é tanto a SEQ ID N°: 3 como a SEQ ID N°: 4.

[0013] A presente invenção também proporciona uma formulação farmacêutica que compreende um anticorpo anti-PD-1 em uma con-centraçãocerca de 10 mg/ml, citrato em uma concentração de cerca de 20 mM, histidina em uma concentração de cerca de 25 mM, manitol em uma concentração de cerca de 140 mM, cloreto de sódio em uma concentração de cerca de 50 mM, edetato em uma concentração de cerca de 0,02 mM, polissorbato 80 em uma concentração de cerca de 0,02% e em um pH de cerca de 6,0, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende duas cadeias leves (LCs) e duas cadeias pesadas (HCs), em que a sequência de aminoácidos de ambas as cadeias LCs é a SEQ ID N°: 2 e a sequência de aminoácidos de ambos os HCs é a mesma e é tanto a SEQ ID N°: 3 como a SEQ ID N°: 4.

[0014] A presente invenção também proporciona uma formulação farmacêutica que compreende um anticorpo anti-PD-1 em uma con-centraçãocerca de 10 mg/ml, citrato em uma concentração de cerca de 20 mM, histidina em uma concentração de cerca de 25 mM, manitol em uma concentração de cerca de 140 mM, cloreto de sódio em uma concentração de cerca de 50 mM, edetato em uma concentração de cerca de 0,02 mM, polissorbato 20 em uma concentração de cerca de 0,02% e em um pH de cerca de 6,0, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende duas cadeias leves (LCs) e duas cadeias pesadas (HCs), em que a sequência de aminoácidos de ambas as cadeias LCs é a SEQ ID N°: 2 e a sequência de aminoácidos de ambos os HCs é a mesma e é tanto a SEQ ID N°: 3 como a SEQ ID N°: 4.

[0015] Em uma modalidade, a presente invenção também proporciona uma formulação farmacêutica que compreende uma concentração de anticorpo anti-PD-1 de cerca de 5 mg/ml até cerca de 15 mg/ml. Em outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que compreende uma concentração de anticorpo anti-PD-1 de cerca de 5 mg/ml. Em outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que compreende uma concentração de anticorpo anti-PD-1 de cerca de 10 mg/ml. Em outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que compreende uma concentração de anticorpo an- ti-PD-1 de cerca de 15 mg/ml.

[0016] Em uma modalidade, a presente invenção também proporciona uma formulação farmacêutica que é tamponada com citrato na faixa de cerca de 15 mM até cerca de 25 mM. Em outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que é tamponada com citrato na faixa de 15 mM até 25 mM. Em outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que é tamponada com citrato em uma concentração de cerca de 15 mM, cerca de 20 mM ou cerca de 25 mM. Em uma outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que é tamponada com citrato em uma concentração de cerca de 20 mM.

[0017] Em outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que é tamponada com histidina na faixa de 20 mM até 30 mM. Em outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que é tamponada com histidina em uma concentração de cerca de 20 mM, cerca de 25 mM ou cerca de 30 mM. Em outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que é tamponada com histidina em uma concentração de cerca de 25 mM.

[0018] Em uma modalidade, a presente invenção também proporciona uma formulação farmacêutica que compreende uma concentração de manitol de cerca de 130 mM até cerca de 165 mM. Em outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que compreende uma concentração de manitol de cerca de 130 mM, cerca de 135 mM, cerca de 140 mM, cerca de 145 mM, cerca de 155 mM, cerca de 155 mM, cerca de 160 mM ou cerca de 165 mM. . Em uma outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que compreende uma concentração de mani- tol de cerca de 140 mM.

[0019] Em uma modalidade, a presente invenção também proporciona uma formulação farmacêutica que compreende uma concentração de NaCl de cerca de 45 mM até cerca de 55 mM. . Em outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que compreende uma concentração de NaCl de cerca de 45 mM, cerca de 50 mM ou cerca de 55 mM. Em uma outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que compreende uma concentração de NaCl de cerca de 50 mM.

[0020] Em uma modalidade, a presente invenção também proporciona uma formulação farmacêutica que compreende uma concentração de edetato de cerca de 0,01 mM até cerca de 0,03 mM. Em outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farma- cêutica que compreende uma concentração de edetato dissódico de cerca de 0,01 mM, cerca de 0,015 mM, cerca de 0,02 mM, cerca de 0,025 mM ou cerca de 0,03 mM. Em uma outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que compreende uma concentração de edetato dissódico de cerca de 0,02 mM.

[0021] Em uma modalidade, a presente invenção também proporciona uma formulação farmacêutica que compreende uma concentração de polissorbato 80 ou de polissorbato 20 de cerca de 0,01% até de 0,03%. Em outra modalidade a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que compreende uma concentração de polissorbato 80 de cerca de 0,01%, cerca de 0,015%, cerca de 0,02%, cerca de 0,025% ou cerca de 0,03%. Em uma outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que compreende uma concentração de polissorbato 80 de cerca de 0,02%.

[0022] Em uma modalidade, a presente invenção também proporciona uma formulação farmacêutica dentro de uma faixa de pH de cerca de 5,5 até cerca de 6,5. Em outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que compreende um pH de cerca de 5,5, cerca de 6,0 ou cerca de 6,5. Em uma outra modalidade, a presente invenção proporciona uma formulação farmacêutica que compreende um pH de cerca de 6,0.

[0023] Determinadas formulações farmacêuticas são de preferência. As seleções enumeradas que se seguem descrevem essas classes de preferência: o anticorpo anti-PD-1 compreende um anticorpo que com-preende duas cadeias leves (LCs) e duas cadeias pesadas (HCs), em que cada LC é a sequência de aminoácidos da SEQ ID N°: 2 e cada HC é a sequência de aminoácidos da SEQ ID N°: 3 ou da sequência de aminoácidos da SEQ ID N°: 4; o anticorpo anti-PD-1 a uma concentração de cerca de 5 mg/ml até cerca de 15 mg/ml; o anticorpo anti-PD-1 a uma concentração de cerca de 10 mg/ml; o polissorbato 80 está em uma concentração de cerca de 0,01% até cerca de 0,03% polissorbato 80 está em uma concentração de cerca de 0,02% o polissorbato 20 está em uma concentração de cerca de 0,01% até cerca de 0,03%; polissorbato-20 está em uma concentração de cerca de 0,02% o citrato está e, uma concentração de cerca de 15 mM até cerca de 25 mM; o citrato está em uma concentração de cerca de 20 mM; o histidina está em uma concentração de cerca de 20 mM até cerca de 30 mM; o histidina está a uma concentração de cerca de 25 mM; o manitol está a uma concentração de cerca de 130 mM até cerca de 165 mM; o manitol está a uma concentração de cerca de 140 mM; o cloreto de sódio está em uma concentração de cerca de 45 mM até cerca de 55 mM; o cloreto de sódio está a uma concentração de cerca de 50 mM; o edetato está em uma concentração na faixa de cerca de 0,01 até cerca de 0,03 mM. o edetato está a uma concentração de cerca de 0,02 mM; a histidina está a uma concentração de cerca de 25 mM e o citrato em uma concentração de cerca de 20 mM. o pH é de 5,5 até 6,5. o pH é de cerca de 6,0.

[0024] Além disso, a presente invenção proporciona um modo para o tratamento de cânceres que podem responder a anticorpos anti-PD- 1 que compreende a administração a um doente que esteja necessitando uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica descrita aqui, neste pedido de patente. Além disso, o método para o tratamento do câncer que compreende a administração para um doente que esteja necessitando de uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica da presente invenção, em que o câncer é selecionado a partir do grupo de melanoma, câncer do pulmão, cabeça e pescoço, câncer colorretal, câncer do pâncreas, câncer gástrico, câncer do rim, câncer da bexiga, câncer da próstata, câncer da mama, câncer do ovário ou carcinoma hepato celular. Mais especificamente, a presente invenção proporciona um método para o tratamento do melanoma, que compreende a administração a um paciente que dele necessite de uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica da presente invenção. Além disso, a presente invenção proporciona um método para o tratamento do câncer do pulmão, que compreenda a administração, a um doente que esteja necessitando, de uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica da presente invenção. Além disso, a presente invenção proporciona um método para o tratamento de câncer de cabeça e de pescoço, que compreenda a administração a um paciente que esteja necessitando do mesmo uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica da presente invenção. Além disso, a presente invenção proporciona um método para o tratamento do câncer colorre- tal, que compreende a administração a um doente que dele necessite uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica da presente invenção. Além disso, a presente invenção proporciona um método para o tratamento do câncer do pâncreas, que compreenda a adminis- tração a um paciente que esteja necessitando do mesmo uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica da presente invenção. Além disso, a presente invenção proporciona um método para o tratamento de câncer gástrico, que compreenda a administração a um paciente que esteja necessitando do mesmo uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica da presente invenção. Além disso, a presente invenção proporciona um método para o tratamento do câncer do rim, que compreende a administração a um doente necessitado uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica da presente invenção. Além disso, a presente invenção proporciona um método para o tratamento do câncer da bexiga, que compreende a administração, a um doente necessitado, de uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica da presente invenção. Além disso, a presente invenção proporciona um método para o tratamento do câncer da próstata que compreende a administração a um paciente em necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica da presente invenção. Além disso, a presente invenção proporciona um método para o tratamento do câncer da mama que compreende a administração a um paciente em necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica da presente invenção. Além disso, a presente invenção proporciona um método para o tratamento do câncer do ovário, que compreende a administração a um paciente com necessidade da mesma de uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica da presente invenção. Além disso, a presente invenção proporciona um método para o tratamento do carcinoma hepato celular, que compreende a administração, a um paciente em necessidade da mesma, de uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica da presente invenção. Além disso, a presente invenção proporciona a formulação farmacêutica da presente invenção para ser usada para o tratamento de câncer. Além disso, a presente invenção proporciona a formulação farmacêutica da presente invenção para ser utilizada para o tratamento de melanoma, câncer do pulmão, câncer da cabeça e do pescoço, câncer colorretal, câncer do pâncreas, câncer gástrico, câncer dos rins, câncer da bexiga, câncer da próstata, câncer da mama, câncer de ovário ou carcinoma hepato celular. Mais especificamente, a presente invenção proporciona a formulação farmacêutica da presente invenção para ser utilizada para o tratamento de melanoma. Além disso, a presente invenção proporciona a formulação farmacêutica da presente invenção para ser utilizada no tratamento de câncer do pulmão. Além disso, a presente invenção fornece a formulação farmacêutica da presente invenção para ser utilizada para o tratamento de câncer de cabeça e pescoço. Além disso, a presente invenção fornece a formulação farmacêutica da presente invenção para ser utilizada para o tratamento do câncer colorretal. Além disso, a presente invenção fornece a formulação farmacêutica da presente invenção para ser utilizada para o tratamento de câncer gástrico. Além disso, a presente invenção fornece a formulação farmacêutica da presente invenção para ser utilizada para o tratamento do câncer co- lorretal. Além disso, a presente invenção proporciona a formulação farmacêutica da presente invenção para utilização no tratamento do câncer do rim. Além disso, a presente invenção proporciona a formulação farmacêutica da presente invenção para utilização no tratamento do câncer da bexiga. Além disso, a presente invenção fornece a formulação farmacêutica da presente invenção para ser utilizada para o tratamento do câncer de próstata. Além disso, a presente invenção proporciona a formulação farmacêutica da presente invenção para ser utilizada no tratamento do câncer da mama. Além disso, a presente invenção fornece a formulação farmacêutica da presente invenção para ser utilizada para o tratamento do câncer de ovário. Além disso, a presente invenção proporciona a formulação farmacêutica da presente invenção para ser utilizada para o tratamento do carcinoma hepato celular.

[0025] As formulações farmacêuticas da presente invenção compreendem citrato. O citrato pode ser produzido com a utilização de um ou mais de ácido cítrico, citrato trissódico di-hidratado e citrato de sódio mono hidratado; ou ácido cítrico mono hidratado, fosfato de sódio dibásico e ácido cítrico. Também pode ser feito citrato que compreenda o citrato de sódio monobásico, sal trissódico do ácido cítrico ou hidratotribásico de citrato de sódio. De preferência, o citrato é feito com citrato de sódio di-hidratado e ácido cítrico. Outros contra íons além do sódio podem ser usados.

[0026] As formulações farmacêuticas da presente invenção compreendem edetato. O edetato de preferência é o edetato dissódico (EDTA. 2Na).

[0027] O anticorpo 1 é um anticorpo anti-PD-1 que compreende duas cadeias leves (LCs) e duas cadeias pesadas (HCs), em que a sequência de aminoácidos de cada LC é a SEQ ID N°: 2 e a sequência de aminoácidos de cada HC é a SEQ ID N°: 3.

[0028] O anticorpo 2 é um anticorpo anti-PD-1 que compreende duas cadeias leves (LCs) e duas cadeias pesadas (HCs), em que a sequência de aminoácidos de cada LC é a SEQ ID N°: 2 e a sequência de aminoácidos de cada HC é a SEQ ID N°: 4.

[0029] Um anticorpo anti-PD-1 para uso nas formulações da presente invenção pode ser produzido com a utilização de técnicas bem conhecidas na técnica, por exemplo, tecnologias recombinantes, tecnologias de exibição de fagos, tecnologias sintéticas ou combinações de tais tecnologias ou outras tecnologias prontamente conhecidas na técnica. Os métodos para a produção e a purificação de anticorpos e fragmentos de ligação ao antígeno são bem conhecidos na técnica e podem ser encontrados, por exemplo, em Harlow e Lane (1988) Anti- bodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, Nova Iorque, capítulos 5-8 e 15, ISBN 0-87969314-2.

[0030] Os anticorpos 1 e 2 podem ser preparados em sistemas de expressão de mamíferos que são comumente utilizados para cultura de células em escala industrial, com a utilização de conhecimentos comuns na técnica de anticorpos. Tal como expresso em tais sistemas de expressão de mamífero comuns, tais como CHO ou NSO, os anticorpos expressos terão as ligações de dissulfeto esperadas dentro e entre as cadeias. Além disso, os anticorpos serão glicosilados dentro de CH2.

[0031] Para ser considerado estável, um anticorpo em solução deve ter estabilidade química e estabilidade física suficientes. Oxidação, desamidação e hidrólise são exemplos de problemas de estabilidade química que um anticorpo pode ter em uma formulação. Agregação e formação de gel são exemplos de problemas de estabilidade física que um anticorpo pode ter em uma formulação. Uma formulação farmacêutica de um anticorpo é considerada como estável se o grau de degradação, modificação, agregação, perda de atividade biológicas e semelhantes, do anticorpo nela contido forem aceitavelmente controladas e não aumentarem de forma não aceitável com o passar do tempo. A estabilidade pode ser avaliada através de métodos bem conhecidos na técnica, que incluem a medição da dispersão de luz de uma amostra, atenuação aparente da luz (absorvência ou densidade ótica), tamanho dos agregados ou outras formas polimerizadas do anticorpo (por exemplo através der cromatografia por exclusão de tamanho ( SEC)), atividade biológica in vitro ou in vivo e/ou propriedades medidas por calorimetria exploratória diferencial (DSC). Outros métodos para a avaliação da estabilidade são bem conhecidos na técnica e podem também ser utilizados de acordo com a presente invenção.

[0032] Como mencionado, a presente invenção proporciona um modo para o tratamento de canceres que podem responder a anticorpos anti-PD-1, que compreende a administração a um paciente que esteja necessitando da mesma, de uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica descrita aqui, neste pedido de patente. Uma quantidade eficaz da formulação de anticorpo anti-PD-1 da presente invenção é a quantidade que quando administrada a um paciente com necessidade de tratamento resulta no efeito terapêutico desejado sem causar efeitos colaterais inaceitáveis quando administrado a um indivíduo com aumento de niveis de PD- 1.

Exemplo 1.

[0033] Os ingredientes de tampão sólido são pesados e transferidos para um béquer ao qual é adicionado 80% do volume alvo de H2O dd e a mistura é agitada com um agitador magnético para dissolver os ingredientes. Depois de todos os ingredientes estarem dissolvidos, o pH da solução é ajustado para 6,0 com a utilização de 2 M ácido cítrico e é adicionada dd H2O para atingir o volume alvo. O polissorbato 80 é em seguida preparado a 20 mg/ml com a utilização do tampão inicial para ser atingida uma concentração de 100 x de polissorbato 80. As amostras de anticorpo são concentradas para cerca de 15 mg/ml com a utilização de um filtro centrífugo Amicon Ultra-30K a 3800 g. As amostras de anticorpos concentrados são submetidas a 6 a 7 ciclos de troca de tampão no tampão inicial. As amostras de anticorpo permutadas em tampão são diluídas com o tampão inicial e 100 x polissorbato 80 para chegar a uma concentração final de 10 mg/ml de anticorpo e 0,2 mg/ml de polissorbato 80. As amostras são esterilizadas através de filtração com filtro de 0,22 μm para ser obtido o produto final. Tabela 1: Formulação do Produto de Fármaco de Anticorpo

Tabela 2: Formulação do Produto de Fármaco de Anticorpo

Efeito do PH

[0034] Para que uma formulação farmacêutica atinja estabilidade, tanto as fontes físicas como as químicas de instabilidade precisam ser abordadas na formulação. A instabilidade química pode resultar na degradação do Anticorpo.

[0035] Com a finalidade de avaliar o efeito do pH na estabilidade química do Anticorpo 1 a 5 mg/ml as amostras de Anticorpo 1 são anali-sadas em tampão de citrato em um pH variável. O tampão de citrato é preparado a 10 mM em água bidestilada (dd H2O) e o pH do tampão é ajustado para um pH de 4, 5, 6, 7 ou 8. O Anticorpo 1 é diluído para 5 mg/ml nos diversos tampões de citrato com pH ajustado e é incubado a 37°C durante 10 dias. As amostras são testadas no D ia 0 e no Dia 10 através de SEC-HPLC (Cromatografia Líquida de Alta Resolução - Cromatografia Líquida de Alta Resolução) conforme a Pharmacopoeia of the People's Republic of China, (Edition 2010, Section 3, Appendix IIIB), e são detectadas através de colunas de exclusão de tamanho de gel de sílica hidrofílica, e a pureza da amostra é medida através da normalização da área. O dia 0 da % da área do pico principal foi de 98,65%.

[0036] Os resultados, como demonstrado na Tabela 3, indicam que o Anticorpo 1 é mais estável em um pH de 6 e apenas ligeiramente menos estável em um pH de 5. O Anticorpo 1 é menos estável em condições de pH mais ácidas ou condições de pH mais alcalinas. Estes resultados indicam que o pH da formulação da solução farmacêutica para Anticorpo 1 deve ficar entre pH 5 e pH 6. Tabela 3: Resultados de SEC-HPLC do efeito do pH sobre o Anti- corpo1 em 5 mg/ml em Tampão de Citrato.

Efeitos do tampão, Álcool Poliídrico, Surfatante e outros Excipien- tes sobre a Estabilidade do Anticorpo 1.

[0037] Os efeitos dos tampões comumente usados sobre a estabilidade do Anticorpo são explorados para entender qual seria o sistema de tampão ideal para o Anticorpo 1. O estudo usa uma abordagem multivariada para examinar a estabilidade física e química das formulações da solução do Anticorpo 1. As formulações de solução do Anticorpo 1 são preparadas de acordo com a Tabela 4. O tampão fosfato e o tampão Citrato são preparados em H2O dd a 20 mM. Vários excipi- entes de teste como mostrado na Tabela 4 são testados para a determinação da formulação ideal para Anticorpo 1. Os excipientes são adicionados aos vários tampões e o pH é ajustado para 6,0 com relação a cada amostra. As amostras de teste são incubadas a 25°C durante até três meses. As amostras são testadas quanto à estabilidade no Dia 0, e nos Meses 1 e 3 por meio de CEX-HPLC (Cromatografia Líquida de Alta Eficiência - Cromatografia Líquida de Alta Performance) conforme a Pharmacopoeia of the People's Republic of China, (Edition 2010, Section 3, Appendix IIIB), e é detectada através de colunas de cá- tions, e a pureza da amostra é medida através da normalização da área. Os resultados estão ilustrados na Tabela 5. Tabela 4: Projeto para a Formulação Para Teste para o Anticorpo 1.

Os valores são em mM.

[0038] Cada formulação testada compreendia 10 mg/ml de Anticorpo 1, 50 mM de cloreto de sódio, e 0,02% de polissorbato, e cada uma das formulações teve o seu pH ajustado para 6,0. Tabela 5. Resultados de CEX- HPLC dos efeitos do tampão sobre o Anticorpo 1.

Os valores são em % de eluato deCEX-HPLC.

[0039] Os resultados demonstram que as amostras de teste de formulação F2 e F6 têm um aumento mais lento nas espécies de ácido, o que não só indica que a formulação de F2 e F6 proporcionou um ambiente mais estável para o Anticorpo 1 quando comparado com as outras formulações testadas, mas surpreendentemente uma combinação única de Polissorbato 80, Manitol e Histidina em tampão citrato fornece maior estabilidade para Anticorpo 1. Efeitos da exposição à luz com relação á estabilidade do Anticorpo 1.

[0040] A formulação e as condições das amostras de teste F2 e F6 são duplicadas para o teste de sensibilidade com relação á luz do Anticorpo 1. As amostras de teste F2 e F6 contendo Anticorpo 1 a 10 mg/ml são expostas a uma luz fluorescente de alta intensidade (5000 Lux) a 25°C durante 10 dias. As amostras são testad as com relação à estabilidade nos Dia 0, Dia 5 e Dia 10 com a utilização da tecnologia CEX-HPLC e SEC-HPLC. Tabela 6: Resultados de CEX-HPLC e SEC-HPLC com relação à exposição à luz no Anticorpo 1.

Os valores são em %.

[0041] Os resultados mostrados na Tabela 6 demonstram de forma surpreendente que a formulação da amostra de teste F6 proporcionou maiores propriedades anti oxidantes com relação ao Anticorpo 1 quando comparadas com a formulação de teste F2, resultando, por consequência em uma estabilidade aumentada e propriedades anti oxidantes com relação ao Anticorpo 1.

Testagem da Estabilidade Acelerada do Anticorpo 1.

[0042] O Anticorpo 1 é testado com relação à estabilidade por meio de um método de teste de estabilidade acelerado, com a utilização da formulação F6. O Anticorpo 1 na formulação acima é distribuído de modo asséptico para frascos de vidro, e é vedado com tampas de borracha e tampas plásticas e é incubado a 25°C ± 2°C durante 1 mês. As amostras são testadas quanto à estabilidade no Dia 0 e Mês1 com a utilização das tecnologias CEX-HPLC e SEC-HPLC.

[0043] Os resultados do teste de estabilidade acelerada estão ilustrados na Tabela 7 e na Tabela 8. Os resultados demonstram que a pureza e a estabilidade global do Anticorpo 1 na formulação acima mencionada não foram significativamente afetadas depois de um período de incubação de 1 mês sob as condições aceleradas. Outras análises com relação á aparência, concentração, turbidez também mostraram resultados semelhantes. A formulação foi dessa forma demonstrada como sendo capaz de manter a estabilidade do Anticorpo 1 durante pelo menos um mês a 25°C. Tabela 7: CEX-HPLC e SEC-HPLC Resultados do Teste de Estabilidade Acelerada do Anticorpo 1 a 25°C ± 2°C .

Os valores são em %.

Teste de Estabilidade em Longo Prazo do Anticorpo 1.

[0044] Os fármacos biológicos são armazenados a 5°C ± 3°C para minimizar a degradação química e física durante a permanência em armazenagem de um produto. O Anticorpo 1 a 10 mg/ml é testado com relação à estabilidade em longo prazo na formulação F6.

[0045] O Anticorpo 1 é dispensado de forma asséptica em frascos e é vedado com tampas de borracha e tampas de plástico e é incubado de 2°C até cerca de 8°C durante 11 dias. As amos tras são testadas quanto à estabilidade no Dia 0 e em 3, 6 e 11 vezes em pontos de tempo com a utilização das tecnologias CEX-HPLC e SEC-HPLC.

[0046] Os resultados do teste de estabilidade em longo prazo estão ilustrados na Tabela 9 e na Tabela 10. Os resultados demonstram que a pureza e a estabilidade global do Anticorpo 1 na formulação acima mencionada não foi significativamente afetada depois de 11 meses de incubação sob condições em longo prazo. Outras análises com relação á aparência, concentração, turbidez também mostraram resultados semelhantes. Esta formulação única, além dos benefícios de estabilidade anteriormente exemplificados, mostrou ainda ser capaz de manter a estabilidade do Anticorpo 1 durante pelo menos 11 meses em de 2°C até cerca de 8°C. Tabela 8: Resultados de CEX-HPLC e SEC-HPLC do Teste de Estabilidade de Longo Prazo a 2°C e até 8°C do Antico rpo 1.

Os valores são em %.

Teste de Estabilidade Congelamento - Descongelamento do Anticorpo 1.

[0047] O Anticorpo 1 a 10 mg/ml é testado quanto à estabilidade de congelamento - descongelamento na formulação F6. O Anticorpo 1 na formulação acima mencionada no Exemplo 5 é distribuído de forma asséptica para frascos de vidro e é vedado com rolhas de borracha e tampas de plástico e é incubado a - 80°C seguido po r um ciclo de des-congelamento em temperatura ambiente. O ciclo de congelamento- descongelamento é repetido até 6 vezes com relação á mesma amostra. As amostras são testadas quanto à estabilidade antes do congelamento e nos 3° e 6° ciclos de degelo, com a utilização das tecnologias CEX-HPLC e SEC-HPLC.

[0048] Os resultados do teste de estabilidade de congelamento - descongelamento estão ilustrados na Tabela 9. Os resultados de-monstram que a pureza e a estabilidade global do Anticorpo 1 na for-mulação acima mencionada não foi afetada de modo significativo depois de 6 ciclos. Outras análises com relação á aparência, concentração, turbidez também mostraram resultados semelhantes. A formulação se mostrou, dessa forma, capaz de conter a estabilidade do Anticorpo 1 durante 6 ciclos de congelamento - descongelamento. Tabela 9: Resultados de CEX-HPLC e SEC-HPLC do teste de estabilidade de congelamento - descongelamento a -80°C no Anticorpo 1.

Os valores estão em %.

[0049] Como demonstrado nos exemplos acima mencionados, foram realizados testes extensivos com a finalidade de desenvolver uma formulação que seja capaz de manter a estabilidade de um Anticorpo monoclonal anti -programado humano (PD-1) humano recombinante sob condições variáveis. Uma formulação nova e única, com uma combinação inesperada de ingredientes que proporcionam propriedades que podem melhorar a estabilidade física e química do Anticorpo anti-PD-1, através da provisão de propriedades antioxidantes, prolongando a permanência em armazenamento e aumentando potencialmente a segurança clínica de o Anticorpo. Uma formulação única que permite ao Anticorpo anti-PD-1 manter uma estabilidade química e física sob condições extenuantes, variando as temperaturas a partir de 2 - 8°C, 25°C, 37°C e -80°C. Sequências SEQ ID N°: 1 (PD-1 humano) MQIPQAPWPVVWAVLQLGWRPGWFLDSPDRPWNPPTFSPALLVVT EGDNATFTCSFSNTSESFVLNWYRMSPSNQTDKLAAFPEDRSQPGQ DCRFRVTQLPNGRDFHMSVVRARRNDSGTYLCGAISLAPKAQIKESL RAELRVTERRAEVPTAHPSPSPRPAGQFQTLVVGVVGGLLGSLVLLV WVLAVICSRAARGTIGARRTGQPLKEDPSAVPVFSVDYGELDFQWR EKTPEPPVPCVPEQTEYATIVFPSGMGTSSPARRGSADGPRSAQPL RPEDGHCSWPL SEQ ID N°: 2 (Cadeia Leve) DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLISAA SSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQANHLPFTFGGGT KVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNAL QSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSP VTKSFNRGEC SEQ ID N°: 3 (Cadeia Pesada) QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLE WMGLIIPMFDTAGYAQKFQGRVAITVDESTSTAYMELSSLRSEDTAV YYCARAEHSSTGTFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTS ESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLS SVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAP EFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYV DGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSN KGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGF YPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQ EGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK EQ ID N°: 4 (Cadeia Pesada) QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMG LIIPMFDTAGYAQKFQGRVAITVDESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARAEH SSTGTFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKD YFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYT CNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMI SRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRV VSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPP SQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGS FFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG

Claims

1. Formulação farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende: um Anticorpo anti-PD-1 em uma concentração de 5 mg/ml até 10 mg/ml; citrato em uma concentração de 15 mM até 25 mM; Histidina em uma concentração de 20 mM até 30 mM; Manitol em uma concentração de 130 mM até 165 mM; Cloreto de sódio em uma Concentração de 45 mM até 55 mM; Edetato em uma Concentração de 0,01 mM até 0,03 mM; e Polissorbato 20 ou Polissorbato 80 em uma concentração de 0,01% até 0,03%; e com um pH de 5,0 até 6,0; em que o Anticorpo anti-PD-1 compreende duas cadeias leves (LCs) e duas cadeias pesadas (HCs), em que a sequência de aminoácidos de ambas as LCs é a SEQ ID N°: 2 e a sequência de aminoácidos de ambas as HCs é a mesma e é a SEQ ID N°: 3.

2. Formulação de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zada pelo fato de que a concentração do anticorpo anti-PD-1 é de 10 mg/ml.

3. Formulação de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que a concentração de polissorbato 80 é de 0,02%.

4. Formulação de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 3, caracterizada pelo fato de que a concentração de polissorbato 20 é de 0,02%.

5. Formulação de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 4, caracterizada pelo fato de que a concentração de citrato é de 20 mM.

6. Formulação de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 5, caracterizada pelo fato de que a concentração de histidina é de 25 mM.

7. Formulação de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 6, caracterizada pelo fato de que a concentração de manitol é de 140 mM.

8. Formulação de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 7, caracterizada pelo fato de que a concentração de cloreto de sódio é de 50 mM.

9. Formulação de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 8, caracterizada pelo fato de que o pH é de 6,0.

10. Formulação farmacêutica de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a concentração do Anticorpo anti-PD-1 é de 10 mg/ml, a concentração de citrato é de 20 mM, a concentração da histidina é de 25 mM, a concentração de manitol é de 140 mM, a concentração de cloreto de sódio é de 50 mM, a concentração de edetato é de 0,02 mM, a concentração do polissorbato 80 é de 0,02%, e o pH é de 6,0.

11. Uso de uma quantidade efetiva de uma formulação farmacêutica conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de ser na preparação de um medicamento para tratar câncer em um paciente que esteja necessitando da mesma.