ES2960766T3

ES2960766T3 - Membrana de eliminación de virus

Info

Publication number: ES2960766T3
Application number: ES15777331T
Authority: ES
Inventors: Ryo Hamamoto; Tomoko Hongo; Yusuke Kon
Original assignee: Asahi Kasei Medical Co Ltd
Current assignee: Asahi Kasei Medical Co Ltd
Priority date: 2014-04-11
Filing date: 2015-04-10
Publication date: 2024-03-06
Anticipated expiration: 2035-04-10
Also published as: KR101822773B1; JP6220447B2; CN105980038B; US10675593B2; US20170028360A1; JPWO2015156401A1; WO2015156401A1; CN105980038A; EP3130393B1; EP3130393A1; EP3130393A4; KR20160087892A

Abstract

Esta membrana de eliminación de virus (10) para eliminar un virus de una solución que contiene proteínas comprende celulosa y está provista de: una superficie del lado primario (1) a la que se suministra la solución que contiene proteínas; y una superficie del lado secundario (2) desde la cual se descarga un permeado que ha atravesado la membrana de eliminación de virus (10). Cuando se suministra una solución que incluye oro coloidal que tiene un diámetro de 20 nm a la membrana de eliminación de virus desde el lado primario, el oro coloidal es capturado por la membrana de eliminación de virus (10), y la luminancia en una sección transversal de la membrana de eliminación de virus (10), el valor obtenido al dividir, por el promedio de las áreas de desplazamiento de luminancia en el espectro, la desviación estándar de dichas áreas, está en el rango de 0,01-1,5 inclusive. Además, en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus (10), los espesores de las regiones donde se captura oro coloidal que tiene un diámetro en el intervalo de 20 a 30 nm inclusive están en el intervalo de 10,0 a 30,0 μm inclusive en estado húmedo. . (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Membrana de eliminación de virus

Campo técnico

La presente invención se refiere a una membrana de eliminación de virus para eliminar virus de una solución.Técnica anterior

En los últimos años han sido necesarias medidas para potenciar la seguridad frente a los virus no solo en los derivados del plasma derivados de sangre humana, sino también en los productos biofarmacéuticos. Por lo tanto, los fabricantes farmacéuticos han estudiado la introducción de una etapa de eliminación/inactivación de virus en un procedimiento de fabricación. En particular, un procedimiento de eliminación de virus mediante filtración con una membrana de eliminación de virus es un procedimiento eficaz que puede proporcionar reducción de virus sin desnaturalizar una proteína útil.

Entre los virus, en particular, se ha informado del parvovirus con respecto a un caso de infección por parvovirus humano B19 en el campo de los derivados plasmáticos, y un caso de contaminación de células CHO (ovario de hámster chino) por parvovirus de ratón en el campo biofarmacéutico. El parvovirus, que es un virus pequeño, no tiene envoltura, por lo que es fisicoquímicamente estable y resistente al calentamiento, a un pH bajo y a un tratamiento con un agente químico que corresponde a una etapa de inactivación realizada en general durante un procedimiento de fabricación farmacéutica. Por lo tanto, existe una necesidad creciente de eliminación de parvovirus mediante una membrana de eliminación de virus como un procedimiento de eliminación de virus que tiene un mecanismo diferente al de un procedimiento de inactivación.

Por ejemplo, la literatura de patente 1 divulga una membrana porosa de polímero de fibras huecas que tiene una estructura de poros en la que la porosidad en el plano disminuye primero desde la superficie de la pared interior de la membrana hacia la pared interior de la misma, a continuación toma al menos un valor mínimo local y, después de eso, se incrementa en la porción de pared exterior de la misma (a continuación en el presente documento también denominada "estructura de gradiente"), así como un procedimiento de eliminación de virus que incluye filtrar una solución acuosa de proteínas mediante el uso de la membrana. La membrana de eliminación de virus que tiene una estructura de gradiente de este tipo y que tiene un tamaño de poro promedio específico se considera adecuada para la eliminación de virus con una alta tasa de eliminación y para la recuperación de proteínas con una alta eficacia de permeación sin desnaturalizar una proteína, en la eliminación de virus de una solución acuosa de proteínas. La membrana de eliminación de virus presenta una propiedad de eliminación de virus que tienen un tamaño intermedio (35 nm a 55 nm), pero no puede garantizar ninguna propiedad de eliminación de virus de virus pequeños (parvovirus y similares).

La literatura de patente 2 divulga un procedimiento de producción de una membrana de fibras huecas que puede lograr una elevada propiedad de eliminación de virus, y este procedimiento implica la coagulación de una solución de celulosa-cupramonio en un tubo en U para suprimir, en la medida de lo posible, el desorden estructural debido al estiramiento durante la formación de la estructura por separación de microfases. El procedimiento es eficaz para eliminar virus de tamaño intermedio (JEV), pero no puede garantizar una propiedad de eliminación suficiente de virus pequeños.

La literatura de patente 3 divulga la eliminación de un parvovirus como un virus pequeño mediante el ajuste de la proporción (BP/y) entre el punto de burbuja BP (MPa) a la tensión superficial y (N/m) de una membrana de eliminación de virus.

La literatura de patente 4 divulga la evaluación característica de una membrana de eliminación de virus, que se realiza usando virus y proteínas. Esta literatura describe la tinción de virus y proteínas mediante un tinte fluorescente y una estructura de membrana necesaria para un alto rendimiento de eliminación de virus y permeabilidad de las proteínas. Sin embargo, no se han realizado estudios suficientes sobre las condiciones para garantizar la propiedad de eliminación de virus, ni se han realizado estudios para potenciar las eficacias de filtración (rendimiento de filtración y tasa de filtración).

Lista de citas

Literatura de patentes

Literatura de patente 1: patente japonesa abierta a consulta pública n.° 1-148305

Literatura de patente 2: patente japonesa abierta a consulta pública n.° 4-371221

Literatura de patente 3: publicación internacional n.° WO 01/14047

Literatura de patente 4: patente japonesa abierta a consulta pública No. 2010-14564. El documento JP 2012206063 divulga una membrana de hidrogel de celulosa que permite una filtración profunda. La membrana se prepara mediante un procedimiento que implica coagulación y tiene un grosor de 50-1000 |jm (preferentemente de 100-500) y un diámetro de poro de 1-20 nm. Un lado de la superficie de la membrana tiene poros más grandes, que permiten el paso de coloides de Au de 5 y 20 nm, que son retenidos en un 85 % y un 99 %, respectivamente, por la membrana. El caudal de agua está entre 30 y 150 l/m2/h a 1 MPa y la membrana puede ser plana o en forma de fibras huecas.

El documento EP 1206961 A1 divulga membranas de fibra hueca de celulosa o planas para la eliminación de virus. Las membranas tienen un grosor de 20-100 jm y un caudal de 70-200 l/m2/h a 0,1 MPa. El documento EP 1206961 A1 enseña que "si la tasa de extrusión y la tasa de bobinado son bajas, la distribución del tamaño de poro se vuelve estrecha y el grosor de la región eficaz de la membrana que tiene un tamaño de poro homogéneo se incrementa"'.

El documento JP 2003275300 divulga una membrana de fibras huecas para purificación de sangre hecha de celulosa regenerada. La capa densa se extiende desde la pared interior hacia el centro y representa un 20-60 % del grosor total de la membrana, por tanto, 1-30 jm. El tamaño de poro es de 10-50 nm.

Sumario de la invención

Problema técnico

En el sector de la fabricación farmacéutica se ha demandado una membrana de eliminación de virus que tenga elevadas propiedades de eliminación de virus con respecto a virus pequeños (por ejemplo, parvovirus) que tienen un tamaño cercano al tamaño de una proteína útil y que también tenga una alta eficacia de filtración de proteínas, y la demanda de una membrana de eliminación de virus ha sido cada vez más severa año tras año. En vista de lo anterior, la cantidad total de virus que se van a cargar en una membrana de eliminación de virus (la cantidad de virus que se van a añadir a una proteína farmacéutica o la cantidad total de los mismos que se van a filtrar) se ha incrementado en una prueba de evaluación de la membrana de eliminación de virus en la que se examina la capacidad de una etapa de eliminación de virus en un procedimiento de fabricación farmacéutica. Por tanto, las condiciones para superar con éxito la prueba de evaluación de la membrana de eliminación de virus han sido cada vez más severas año tras año.

Sin embargo, convencionalmente ha resultado difícil mantener una alta eficacia de filtración manteniendo al mismo tiempo un alto rendimiento de eliminación de virus. Un objetivo de la presente invención es entonces proporcionar una membrana de eliminación de virus que tenga propiedad de eliminación de virus y eficacia de filtración elevadas.

Solución al problema

La presente invención proporciona una membrana según se establece en la reivindicación 1. Los modos de realización preferentes se describen en las reivindicaciones dependientes.

Por ejemplo, una porción donde se capturan coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm se localiza en un lugar correspondiente a un 15 % o más y un 60 % o menos del grosor de la membrana de eliminación de virus de la superficie principal, una porción donde se capturan coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm se localiza en un lugar correspondiente a un 25 % o más y un 85 % o menos del grosor de la membrana de la superficie principal, y una porción donde se capturan coloides de oro que tienen un diámetro de 15 nm se localiza en un lugar correspondiente a un 60 % o más y un 90 % o menos del grosor de la membrana de la superficie principal, en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus en estado húmedo.

Por ejemplo, la membrana de eliminación de virus no captura coloides de oro que tengan un diámetro de 10 nm. Además, por ejemplo, en la membrana de eliminación de virus, una tasa logarítmica de eliminación de coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm es 1,00 o más, una tasa logarítmica de eliminación de coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm es 1,00 o más, una tasa de eliminación de coloides de oro que tienen un diámetro de 15 nm es 0,10 o más, y una tasa logarítmica de eliminación de coloides de oro que tienen un diámetro de 10 nm es inferior a 0,10. Por ejemplo, en la membrana de eliminación de virus, un tamaño de poro promedio es 13 nm o más y 21 nm o menos. Por ejemplo, un tamaño de poro disminuye y a continuación se incrementa desde la superficie principal hacia la superficie secundaria en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus. Por ejemplo, la porción donde se capturan los coloides de oro en la membrana de eliminación de virus engloba una porción donde el tamaño de poro es un valor mínimo.

Por ejemplo, el grosor de la membrana de eliminación de virus es de 24 |jm o más y de 41 |jm o menos en estado seco. Además, por ejemplo, un punto de burbuja de la membrana de eliminación de virus es 1,2 MPa o más y 1,8 MPa o menos, y una tasa de permeación de agua pura es de 30 l/m2/h/0,1 MPa o más y 120 l/m2/h/0,1 MPa o menos. La membrana de eliminación de virus es una membrana de fibras huecas.

Por ejemplo, el valor obtenido al dividir una desviación típica de un valor de área de un espectro de variación de la luminancia entre un promedio de un valor de área de un espectro de variación de la luminancia puede ser 0,01 o más y 1,20 o menos. Por ejemplo, el grosor de una porción donde se capturan coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm o más y de 30 nm o menos en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus en estado húmedo puede ser 13,0 jm o más y 20,0 jm o menos. Efectos ventajosos de la invención

La presente invención hace posible proporcionar una membrana de eliminación de virus que tiene propiedad de eliminación de virus y eficacia de filtración elevadas.

Breve descripción de los dibujos

[Figura 1] La Figura 1 es una vista esquemática de una membrana de eliminación de virus que tiene conformación de membrana de fibras huecas, de acuerdo con un modo de realización de la presente invención.

[Figura 2] La Figura 2 es una vista esquemática de una porción de captura de virus de una membrana de eliminación de virus que tiene conformación de membrana de fibras huecas, de acuerdo con el Ejemplo de referencia de la presente invención.

[Figura 3] La Figura 3 es una vista esquemática de una porción de captura de virus de una membrana de eliminación de virus que tiene conformación de membrana de fibras huecas, de acuerdo con un modo de realización de la presente invención.

[Figura 4] La Figura 4 es una vista esquemática de una membrana de eliminación de virus que tiene conformación de membrana plana, de acuerdo con un modo de realización de la presente invención.

[Figura 5] La Figura 5 es una tabla que muestra condiciones de fabricación de una membrana de eliminación de virus de acuerdo con cada Ejemplo de la presente invención.

[Figura 6] La Figura 6 es una tabla que muestra condiciones de fabricación de una membrana de eliminación de virus de acuerdo con cada Ejemplo comparativo de la presente invención.

[Figura 7] La Figura 7 es una tabla que muestra los resultados de la evaluación de una membrana de eliminación de virus de acuerdo con cada Ejemplo de la presente invención.

[Figura 8] La Figura 8 es una tabla que muestra los resultados de la evaluación de una membrana de eliminación de virus de acuerdo con cada Ejemplo comparativo de la presente invención.

Descripción de modos de realización

A continuación en el presente documento se describen modos de realización de la presente invención. En la siguiente descripción de dibujos, la misma pieza o similar está representada por el mismo signo de referencia o similar. Los dibujos, sin embargo, son esquemáticos y no se ilustran con exactitud mediante dimensiones específicas y similares. En consecuencia, se requiere comprender las dimensiones específicas y similares a la vista de la siguiente descripción y, por supuesto, se incluye cualquier pieza cuya relación dimensional y proporciones sean diferentes entre los dibujos.

Como se ilustra en la Figura 1, una membrana de eliminación de virus 10 para eliminar virus de una solución que contiene proteínas, de acuerdo con un modo de realización, incluye una superficie principal 1 a la que se aplica la solución que contiene proteínas, y una superficie secundaria 2 desde la que se fluye un líquido que pasa a través de la membrana de eliminación de virus 10.

Los virus pequeños que se van a eliminar mediante la membrana de eliminación de virus 10 tienen un diámetro, por ejemplo, de 10 a 30 nm o de 18 a 24 nm. Ejemplos específicos de virus incluyen parvovirus. El parvovirus tiene un diámetro de aproximadamente 20 nm. La membrana de eliminación de virus 10 tiene una porción de captura de virus, donde se capturan los virus, en la sección transversal de la misma. En la membrana de eliminación de virus 10, la cantidad de virus capturados en la porción de captura de virus en la sección transversal es preferentemente uniforme, independientemente del punto de una superficie de filtración (superficie principal 1) por el que entra la solución. El motivo de esto es que, si la cantidad de virus capturados en la membrana de eliminación de virus 10 no es uniforme dependiendo del punto de la superficie de filtración, la solución se concentra en un determinado punto de la superficie de filtración incrementando parcialmente la cantidad de virus que se van a cargar en el punto y, por tanto, se puede producir una fuga de los virus desde el punto en caso de filtración de gran capacidad bajo condiciones de alta presión. Cuando la membrana de eliminación de virus 10 tiene una conformación de membrana de fibras huecas, la cantidad de virus capturados en la porción de captura de virus no es desigual como se ilustra en la Figura 2, sino preferentemente uniforme como se ilustra en la Figura 3, en la dirección periférica.

Además, en la membrana de eliminación de virus 10, el grosor de una porción donde se capturan los virus es preferentemente uniforme en la porción de captura de virus. Cuando la membrana de eliminación de virus 10 tiene la conformación de membrana de fibras huecas, el grosor de la porción de captura de virus es preferentemente uniforme en la dirección periférica. El motivo de esto es que, cuando el grosor de la porción de captura de virus es uniforme, la solución se puede extender uniformemente en la dirección periférica para dar como resultado una reducción de las fugas de virus.

La estructura de la membrana de eliminación de virus 10 es preferentemente una estructura asimétrica donde un tamaño de poro disminuye y a continuación se incrementa desde la superficie principal hacia la superficie secundaria. En la sección transversal de la membrana de eliminación de virus 10, la porción de captura de virus incluye una porción donde el tamaño de poro de un poro es mínimo. La estructura que incluye una porción donde el tamaño de poro del poro es mínimo es eficaz para potenciar la propiedad de eliminación de virus.

Aquí, puede resultar difícil detectar visualmente un virus capturado por la membrana de eliminación de virus 10. Por el contrario, un coloide de oro no permite la transmisión de la luz pero tiene un diámetro comparable al tamaño de un virus y, por lo tanto, se detecta visualmente con facilidad. Por lo tanto, las características de la membrana de eliminación de virus 10 se pueden evaluar, por ejemplo, filtrando una solución que contiene coloides de oro por la membrana de eliminación de virus 10 y, después de esto, midiendo la luminancia relativa de una porción de captura de coloides de oro donde la membrana de eliminación de virus 10 captura los coloides de oro, en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus 10.

Con respecto a la membrana de eliminación de virus 10 de acuerdo con el modo de realización, cuando se aplica una solución que contiene coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm a través de la superficie principal 1 a la membrana de eliminación de virus 10 para permitir que la membrana de eliminación de virus 10 capture los coloides de oro para la medición de la luminancia en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus 10, el valor obtenido al dividir la desviación típica del valor del área del espectro de variación de la luminancia entre el promedio del valor del área del espectro de variación de la luminancia es 0,01 o más y 1,50 o menos. El valor expresa el coeficiente de variación de la cantidad de los coloides de oro que se capturan en la membrana de eliminación de virus 10, y un valor más pequeño expresa una mayor uniformidad de la cantidad de los coloides de oro que se capturan en la porción de captura de coloides de oro de la membrana de eliminación de virus 10.

En la membrana de eliminación de virus 10 de acuerdo con el modo de realización, el valor que indica el coeficiente de variación es 0,01 o más y 1,50 o menos, 0,01 o más y 1,40 o menos, 0,01 o más y 1,30 o menos, 0,01 o más y 1,20 o menos, 0,01 o más y 1,10 o menos y 0,01 o más y 1,00 o menos. El límite de medición del coeficiente de variación es inferior a 0,01. Un coeficiente de variación de más de 1,50 puede hacer que la solución se concentre en al menos un punto determinado en la dirección periférica de la membrana, dando de este modo como resultado una fuga de virus.

Un coeficiente de variación de 0,01 o más y 1,50 o menos puede permitir que los virus se capturen uniformemente en la porción de captura de virus de la membrana (en la dirección periférica con respecto a la membrana de fibras huecas) y permitir que se mantenga un elevado rendimiento de eliminación de virus incluso en el caso de un incremento de la cantidad total de virus que se van a cargar en la membrana de eliminación de virus (la cantidad de virus que se van a añadir a una proteína farmacéutica o la cantidad total de los mismos que se van a filtrar).

El coeficiente de variación se mide, por ejemplo, mediante el siguiente procedimiento. Se corta un trozo de la membrana de eliminación de virus aplicada para filtración de una solución de coloides de oro, y se mide el perfil de luminancia en cada uno de una pluralidad de puntos en una pieza teñida por los coloides de oro en la sección transversal del trozo mediante un microscopio óptico. Un coloide de oro absorbe la luz y, por lo tanto, la variación de la luminancia depende de la cantidad de coloides de oro que se capturan. En el presente documento, si es necesario, se puede eliminar el ruido de fondo del perfil de luminancia. Después de esto, se genera un gráfico con el grosor representado en el eje horizontal y la variación de la luminancia representada en el eje vertical, y se calcula el área del espectro de variación de la luminancia presentado en el gráfico. Además, el valor obtenido al dividir la desviación típica del área del espectro de variación de la luminancia en la pluralidad de puntos entre el promedio del área del espectro de variación de la luminancia en la pluralidad de puntos se calcula como el valor que indica el coeficiente de variación de la cantidad de coloides de oro que se capturan en la porción de captura de coloides de oro de la membrana de eliminación de virus 10.

El grosor de una porción donde se capturan coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm o más y 30 nm o menos en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus 10 en estado húmedo es de 10,0 |jm o más y 30,0 jm o menos, de 10,0 jm o más y 25,0 jm o menos, de 10,0 jm o más y 22,0 jm o menos, de 10,0 jm o más y 20,0 jm o menos, preferentemente de 11,0 jm o más y 20,0 jm o menos, más preferentemente de 12,0 jm o más y 20,0 jm o menos, aún más preferentemente de 13,0 jm o más y 20,0 jm o menos. Cuando el grosor de la porción de captura de coloides de oro es superior a 30,0 jm, se tiende a reducir la eficacia de filtración no sólo de una solución que contiene coloides de oro sino también de una solución que contiene virus. No es preferente un grosor de menos de 10 jm, ya que un incremento de la cantidad total de virus que se van a cargar en la membrana de eliminación de virus (la cantidad de virus que se van a añadir a una proteína farmacéutica o la cantidad total de los mismos que se van a filtrar) puede dar como resultado una fuga de virus.

El grosor de la porción donde se capturan los coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm o más y 30 nm o menos se obtiene mediante, por ejemplo, el siguiente procedimiento. Se corta un trozo de la membrana de eliminación de virus aplicada para filtración de cada una de las respectivas soluciones de coloides de oro que tienen diámetros de 20 nm y 30 nm. Se mide el perfil de luminancia en cada uno de una pluralidad de puntos en una pieza teñida por los coloides de oro en la sección transversal del trozo mediante un microscopio óptico. En el presente documento, se mide en la dirección del grosor una primera distancia "a" desde la superficie principal 1 de la membrana de eliminación de virus 10 hasta una parte de la porción de captura de coloides de oro que está lo más cerca de la superficie principal. Además, se mide en la dirección del grosor una segunda distancia "b" desde la superficie principal 1 de la membrana de eliminación de virus 10 hasta una parte de la porción de captura de coloides de oro que está lo más cerca de la superficie secundaria 2.

A continuación, se calcula el valor "A" (= a/c (expresado en porcentaje)) obtenido al dividir la primera distancia "a" entre el grosor "c" de la membrana de eliminación de virus húmeda y expresado en porcentaje en cada uno de los pluralidad de puntos, y se calcula el promedio del valor "A" en la pluralidad de puntos como un primer nivel de logro. Además, se calcula el valor "B" (= b/c (expresado en porcentaje)) obtenido al dividir la segunda distancia "b" entre el grosor "c" de la membrana de eliminación de virus húmeda y expresado en porcentaje en cada uno de los pluralidad de puntos, y se calcula el promedio del valor "B" en la pluralidad de puntos como un segundo nivel de logro.

Además, como se representa en la siguiente expresión (1), el valor obtenido al multiplicar la diferencia entre el promedio "B<20>" del segundo nivel de logro en la membrana de eliminación de virus aplicada para capturar los coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm mediante filtración y el promedio "A<30>" del primer nivel de logro en la membrana de eliminación de virus aplicada para capturar los coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm mediante filtración por el promedio "Cprom" del promedio "C<20>" del grosor de la membrana de eliminación de virus húmeda aplicada para capturar los coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm mediante filtración y el promedio "C30" del grosor de la membrana de eliminación de virus húmeda aplicada para capturar los coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm mediante filtración se calcula como el grosor "T" de la porción donde se capturan los coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm o más y 30 nm o menos en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus 10 al hacer fluir los coloides de oro que tienen el diámetro de 20 nm y los coloides de oro que tienen el diámetro de 30 nm. El grosor "T" de la porción de captura de coloides de oro también se expresa como el grosor "T" de la capa densa de la membrana de eliminación de virus.

T= (B20 - A 30) x CPR0M (1 )

En el procedimiento anterior, la porción donde se capturan los coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm o más y 30 nm o menos se determina como el grosor de una región entre la primera posición de logro en la membrana de eliminación de virus aplicada para capturar los coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm mediante filtración y la segunda posición de logro en la membrana de eliminación de virus aplicada para capturar los coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm mediante filtración, y se confirma que los coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm o más y 30 nm o menos, excepto por el margen de error, se capturan dentro de la región.

Cuando la solución que contiene los coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm se filtra por la membrana de eliminación de virus 10, la porción donde se capturan los coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus 10 en estado húmedo se localiza en un lugar correspondiente a, por ejemplo, un 15 % o más y un 60 % o menos, o un 20 % o más y un 55 % o menos del grosor de la membrana desde la superficie principal 1, medido con un microscopio óptico. En una membrana donde los coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm se capturan en un lugar correspondiente a menos de un 15 % del grosor de la membrana desde la superficie principal, los virus y las impurezas se capturan en una posición más cercana a la superficie principal de la membrana y, por lo tanto, se pueden producir más obstrucciones. Además, en una membrana donde los coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm se capturan en un lugar correspondiente a más de un 60 % del grosor de la membrana desde la superficie principal, los virus previstos se capturan en una posición más cercana a la superficie secundaria de la membrana y, por lo tanto, en ocasiones no se pueden capturar los virus. En el presente documento, incluso cuando se captura una pequeña cantidad de coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm en una región de menos de un 15 % o más de un 60 % del grosor de la membrana desde la superficie principal 1, se puede considerar que un caso donde el valor absoluto del espectro de variación de la luminancia, determinado restando el perfil de luminancia medido de una constante (255) observada con un microscopio óptico, es de un 10 % o menos en relación con el valor máximo absoluto del espectro está dentro del margen de error con respecto a la captura de coloides de oro en la región, en términos de capacidad de eliminación de virus de la membrana de eliminación de virus. En consecuencia, en dicho caso, se puede considerar que la porción donde se capturan los coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm está localizada en un lugar correspondiente a un 15 % o más y un 60 % o menos del grosor de la membrana desde la superficie principal 1.

La porción donde se capturan los coloides de oro se puede formar de manera continua o formar de manera intermitente en la dirección del grosor dependiendo de la estructura de la membrana al pasar los coloides de oro desde la superficie principal hacia la superficie secundaria en la dirección del grosor de la membrana. En la membrana de eliminación de virus de acuerdo con el modo de realización, la porción donde se capturan los coloides de oro se forma preferentemente de manera continua desde el interior de la superficie principal hacia el interior de la superficie secundaria. Cuando la porción donde se capturan los coloides de oro se forma de manera continua en la dirección de paso sin ninguna discontinuidad, apenas se produce obstrucción.

Cuando la solución que contiene los coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm se filtra por la membrana de eliminación de virus 10, una porción donde se capturan los coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus 10 en estado húmedo se localiza en un lugar correspondiente a, por ejemplo, un 25 % o más y un 85 % o menos, o un 30 % o más y un 80 % o menos del grosor de la membrana desde la superficie principal 1, medido con un microscopio óptico. En una membrana donde los coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm se capturan en un lugar correspondiente a menos de un 25 % del grosor de la membrana desde la superficie principal, los virus y las impurezas se capturan en una posición más cercana a la superficie principal de la membrana y, por lo tanto, se pueden producir más obstrucciones. Además, en una membrana donde los coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm se capturan en un lugar correspondiente a más de un 85 % del grosor de la membrana desde la superficie principal, los virus previstos se capturan en una posición más cercana a la superficie secundaria de la membrana y, por lo tanto, en ocasiones no se pueden capturar los virus. En el presente documento, incluso cuando se observan coloides de oro en la región de menos de un 25 % o más de un 85 % del grosor de la membrana desde la superficie principal 1, como en el caso de los coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm, se puede considerar que un caso donde el valor absoluto del espectro de variación de la luminancia, determinado restando el perfil de luminancia medido de una constante (255) medida con un microscopio óptico, es de un 10 % o menos en relación con el valor máximo absoluto del espectro está dentro del margen de error. En el presente documento, en la membrana de eliminación de virus de acuerdo con el modo de realización, la porción donde se capturan los coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm se forma preferentemente de manera continua en la dirección del grosor de la membrana desde el interior de la superficie principal hacia el interior de la superficie secundaria.

Cuando una solución que contiene los coloides de oro que tienen un diámetro de 15 nm se filtra por la membrana de eliminación de virus 10, una porción donde se capturan los coloides de oro que tienen un diámetro de 15 nm en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus 10 en estado húmedo se localiza en un lugar correspondiente a, por ejemplo, un 60 % o más y un 90 % o menos, preferentemente un 60 % o más y un 89 % o menos, un 60 % o más y un 88 % o menos, un 60 % o más y un 87 % o menos del grosor de la membrana desde la superficie principal 1, medido con un microscopio óptico. En particular, es preferente un valor de un 87 % o menos en términos de captura de virus. Además, es más preferente un valor de un 86 % o menos. En una membrana donde los coloides de oro que tienen un diámetro de 15 nm se capturan en un lugar correspondiente a menos de un 60 % del grosor de la membrana desde la superficie principal, los virus y las impurezas se capturan en una posición más cercana a la superficie principal de la membrana y, por lo tanto, se pueden producir más obstrucciones. Además, en una membrana donde los coloides de oro que tienen un diámetro de 15 nm se capturan en un lugar correspondiente a más de un 90 % del grosor de la membrana desde la superficie principal, los virus previstos se capturan en una posición más cercana a la superficie secundaria de la membrana y, por lo tanto, en ocasiones no se pueden capturar los virus. En el presente documento, incluso cuando se observan coloides de oro en la región de menos de un 60 % o más de un 90 % del grosor de la membrana desde la superficie principal 1, como en los casos de los respectivos coloides de oro que tienen diámetros de 30 nm y 20 nm, se puede considerar que un caso donde el valor absoluto del espectro de variación de la luminancia, determinado restando el perfil de luminancia medido de una constante (255) medida con un microscopio óptico, es de un 10 % o menos en relación con el valor máximo absoluto del espectro está dentro del margen de error. En el presente documento, en la membrana de eliminación de virus de acuerdo con el modo de realización, la capa de porción donde se capturan los coloides de oro que tienen un diámetro de 15 nm se forma preferentemente de manera continua en la dirección del grosor de la membrana desde el interior de la superficie principal hacia el interior de la superficie secundaria.

La posición de captura de cada uno de los respectivos coloides de oro que tienen diámetros de 30 nm, 20 nm y 15 nm se mide sistemáticamente con respecto a los coloides de oro capturados por la membrana. En consecuencia, los coloides de oro que no captura la membrana y que pasan a través de la membrana no se someten a dicha medición. En otras palabras, no se mide la posición de captura de todos los coloides de oro que pueden pasar a través de la membrana, sino que se mide la posición de captura de los coloides de oro capturados por la membrana, en la membrana.

Cuando se filtra una solución que contiene los coloides de oro que tienen un diámetro de 10 nm por la membrana de eliminación de virus 10, la cantidad de coloides de oro que tienen un diámetro de 10 nm capturados en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus 10 es casi nula. Esto se puede confirmar como sigue: el espectro de luminancia no se puede detectar significativamente mediante observación usando un microscopio óptico (Biozero, BZ8100, fabricante Keyence Corporation). Esto también se puede confirmar a partir de una reducción en la tasa logarítmica de eliminación. En el presente documento, el hecho de que no se capturen coloides de oro que tienen un diámetro de 10 nm indica que proteínas útiles que tienen un diámetro de aproximadamente 10 nm, tales como IgG, pueden lograr una alta permeabilidad.

El material de la membrana de eliminación de virus 10 incluye celulosa. Como dicha celulosa se puede usar celulosa regenerada, celulosa natural, acetato de celulosa y similares. Un procedimiento de producción de celulosa regenerada incluye un procedimiento (procedimiento de cupramonio) que incluye preparar celulosa regenerada a partir de una solución de celulosa-cupramonio, y un procedimiento (procedimiento de saponificación) que incluye saponificar acetato de celulosa mediante un álcali para producir celulosa regenerada. La membrana de eliminación de virus 10 tiene, por ejemplo, una conformación de membrana de fibras huecas. De forma alternativa, la membrana de eliminación de virus 10 puede tener una conformación de membrana plana como se ilustra en la Figura 4. La membrana de fibras huecas, aunque tiene un gran área de membrana, se puede empaquetar en un recipiente para preparar un filtro compacto.

El grosor de la membrana de eliminación de virus 10 ilustrada en la Figura 1 es, por ejemplo, de 24 |jm o más y 41 jm o menos, preferentemente de 24 jm o más y 40 jm o menos, más preferentemente de 24 jm o más y 35 jm o menos, aún más preferentemente de 24 jm o más y 30 jm o menos, en estado seco. Un grosor de membrana de menos de 24 jm puede dar como resultado una reducción de la resistencia de la membrana provocando que la membrana no resista la presión de filtración, y un grosor de más de 41 jm puede dar como resultado una reducción de la tasa de filtración.

El tamaño de poro promedio del poro de la membrana de eliminación de virus 10 es, por ejemplo, de 13 nm o más y 21 nm o menos, preferentemente de 13 nm o más y 20,5 nm o menos, más preferentemente de 13,5 nm o más y 20,5 nm o menos. Un tamaño de poro promedio de menos de 13 nm puede dar como resultado una reducción de la tasa de filtración, y un tamaño de poro promedio de más de 21 nm puede provocar que se produzcan fugas de virus. El tamaño de poro del poro disminuye y a continuación se incrementa desde la superficie principal hacia la superficie secundaria en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus 10. Por ejemplo, la porción de captura de virus incluye una porción donde el tamaño de poro del poro es mínimo, en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus 10.

La tasa logarítmica de eliminación (LRV: valor de reducción logarítmica) de virus mediante la membrana de eliminación de virus 10 es preferentemente, por ejemplo, de 4,00 o más, ya que los virus se eliminan suficientemente mediante filtración por membrana, y la tasa logarítmica de eliminación es más preferentemente de 4,50 o más, de 5,00 o más o de 6,00 o más. Se considera que una tasa logarítmica de eliminación de virus de 6,00 o más permite eliminar los virus, dando como resultado fugas de virus casi nulas.

La membrana de eliminación de virus 10 tiene una tasa logarítmica de eliminación (LRV) de coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm de, por ejemplo, 1,00 o más, preferentemente 1,20 o más. La membrana de eliminación de virus 10 tiene una tasa logarítmica de eliminación de coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm de, por ejemplo, 1,00 o más, preferentemente 1,20 o más. La membrana de eliminación de virus 10 tiene una tasa logarítmica de eliminación de coloides de oro que tienen un diámetro de 15 nm de, por ejemplo, 0,10 o más, preferentemente 0,15 o más, más preferentemente 0,20 o más. La membrana de eliminación de virus 10 tiene una tasa logarítmica de eliminación de coloides de oro que tienen un diámetro de 10 nm de, por ejemplo, menos de 0,10.

Por ejemplo, la porción de captura de coloides de oro incluye una porción donde el tamaño de poro del poro es mínimo, en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus 10.

El punto de burbuja medido en la membrana de eliminación de virus 10 es, por ejemplo, 1,2 MPa o más y 1,8 MPa o menos. La tasa de permeación de agua pura medida en la membrana de eliminación de virus 10 es de 30 l/m2/h/0,1 MPa o más y 120 l/m2/h/0,1 MPa o menos, de 40 l/m2/h/0,1 MPa o más y 115 l/m2/h/0,1 MPa o menos o de 50 l/m2/h/0,1 MPa o más y 110 l/m2/h/0,1 MPa o menos.

La membrana de eliminación de virus de acuerdo con el modo de realización, que tiene las características descritas anteriormente, se fabrica mediante, por ejemplo, un procedimiento que se describe a continuación. En la producción de la membrana de eliminación de virus en forma de membrana de fibras huecas, en primer lugar se prepara una solución de celulosa-cupramonio disolviendo la celulosa en una solución de cupramonio de modo que la concentración de celulosa sea, por ejemplo, de aproximadamente un 7,0 % en peso o más y aproximadamente un 8,0 % en peso o menos, y se añade una sal inorgánica a la misma para proporcionar una solución de hilatura en bruto. En el presente documento, la sal inorgánica se puede añadir antes de que la celulosa se disuelva en una solución de cupramonio. Como sal inorgánica se pueden utilizar sulfatos, sulfitos y carbonatos de sodio, potasio, calcio y magnesio. Entre ellos, son preferentes los sulfatos y sulfitos de sodio y potasio, y son más preferentes el sulfato de sodio y el sulfito de sodio. La cantidad de sal inorgánica que hay que añadir es de un 0,02 % en peso o más y un 0,90 % en peso o menos, de un 0,03 % en peso o más y un 0,80 % en peso o menos, o de un 0,04 % en peso o más y un 0,70 % en peso o menos.

Además, como líquido de coagulación se prepara una solución que permita que se produzca la separación en microfases de la solución de celulosa-cupramonio, incluyendo la solución al menos un disolvente orgánico que no tenga ningún grupo hidroxilo, teniendo una solubilidad de un 10 % en peso o más en una solución acuosa de amoníaco al 28 % en peso y celulosa que no se hincha. Dicha separación de microfases se describe más adelante. Por ejemplo, el líquido de coagulación incluye acetona, amoniaco y agua. En la producción de la membrana de fibras huecas, como se describe más adelante, se preparan un líquido de coagulación interno y un líquido de coagulación externo. En el líquido de coagulación interno, por ejemplo, la concentración de acetona es de aproximadamente un 30 % en peso o más y aproximadamente un 50 % en peso o menos, y la concentración de amoníaco es de aproximadamente un 0,5 % en peso o más y aproximadamente un 1,0 % en peso o menos. En el líquido de coagulación externo, por ejemplo, la concentración de acetona es de aproximadamente un 20% en peso o más y aproximadamente un 40 % en peso o menos, y la concentración de amoníaco es de aproximadamente un 0 % en peso o más y aproximadamente un 0,2 % en peso o menos.

A continuación, la solución de hilatura en bruto se descarga a través de una hilera (spinneret) doble anular a una velocidad constante de 1,5 cc/min o más y 8,0 cc/min o menos y, al mismo tiempo, el líquido de coagulación interno se descarga a través de una salida de hilatura central proporcionada en el centro de la doble hilera anular. La solución de hilatura en bruto y el líquido de coagulación interno descargado se sumergen en el líquido de coagulación externo en un baño de coagulación. Aquí, la separación de microfases se produce en la solución de hilatura en bruto por la acción de los líquidos de coagulación interno y externo. Dicha separación de microfases significa que una fase de concentración de celulosa se separa como partículas que tienen un diámetro de 0,01 a varios |jm de un disolvente o una fase de dilución de celulosa, y se dispersa y estabiliza. La separación de microfases se produce primero en la interfase entre la solución de hilatura en bruto y los líquidos de coagulación interno y externo, y también se produce gradualmente en el interior de la solución de hilatura en bruto. Las partículas formadas por la separación de microfases forman partículas grandes, mientras se repiten colisiones y coalescencias. Al mismo tiempo, las partículas se solidifican gradualmente por la acción del líquido de coagulación y forman una membrana de fibras huecas que tiene una estructura porosa de polímero en la que las partículas están unidas tridimensionalmente. Se enrolla la membrana de fibras huecas formada.

Cuando el baño de coagulación está formado por un tubo estrecho, la velocidad de flujo de la solución de hilatura en bruto en el baño de coagulación es, por ejemplo, de 5 m/min o más y 20 m/min o menos, de 8 m/min o más y 15 m/min o menos, o de 9 m/min o más y 12 m/min o menos. En el presente documento, la velocidad del flujo de la solución de hilatura en bruto en el baño de coagulación es igual a la velocidad de enrollado (velocidad de hilatura) de la membrana de fibras huecas que se va a formar. El caudal del líquido de coagulación externo que se va a aplicar al baño de coagulación es, por ejemplo, de 50 cc/min o más y 500 cc/min o menos, de 100 cc/min o más y 300 cc/min o menos, o de 130 cc/min o más y 200 cc/min o menos. La velocidad de flujo del líquido de coagulación externo en el baño de coagulación, determinada al dividir el caudal del líquido de coagulación externo entre el área de la sección transversal del tubo estrecho que forma el baño de coagulación, es por ejemplo de 1,8 m/min o más y 10,4 m/min o menos, de 3,2 m/min o más y 7,8 m/min o menos, o de 3,5 m/min o más y 5,4 m/min o menos. Además, la proporción entre la velocidad de flujo del líquido de coagulación externo y la velocidad de flujo de la solución de hilatura en bruto en el baño de coagulación es, por ejemplo, de 0,32 o más y 0,54 o menos, o de 0,33 o más y 0,53 o menos. En el presente documento, cuando la proporción entre la velocidad de flujo del líquido de coagulación externo y la velocidad de flujo de la solución de hilatura en bruto está en el intervalo anterior, los valores absolutos respectivos de la velocidad de flujo de la solución de hilatura en bruto y la velocidad de flujo del líquido de coagulación externo son arbitrarios.

La membrana de fibras huecas enrollada se sumerge en ácido sulfúrico diluido al 2 % en peso o más y al 10 % en peso o menos y, a continuación, se lava con agua pura. Por tanto, la celulosa se regenera. Además, la humedad en la membrana de fibras huecas se reemplaza por un disolvente orgánico. Como disolvente orgánico se pueden usar metanol, etanol, acetona y similares. A continuación, se fijan ambos extremos del haz de membrana de fibras huecas y el haz de membrana de fibras huecas se estira entre un 1 % y un 8 % y, después de esto, se seca a 30 °C o más y 60 °C o menos bajo una presión reducida de 5 kPa o menos para proporcionar la membrana de eliminación de virus en forma de membrana de fibras huecas.

Convencionalmente, no se ha añadido ninguna sal inorgánica a una solución de hilatura en bruto. Por el contrario, los autores de la presente invención han descubierto por primera vez que se puede añadir la sal inorgánica a la solución de hilatura en bruto para cambiar de este modo la velocidad de difusión de las partículas formadas por la fase de concentración de celulosa, afectando a la velocidad de progresión de la separación de microfases. Por lo tanto, se puede controlar la estructura de la membrana, por ejemplo, el grado de cambio (gradiente) de cada uno del tamaño de poro desde la superficie hacia el interior de la membrana de eliminación de virus y el tamaño de poro en la dirección del grosor de la membrana, y se puede controlar el grosor de la porción de captura de virus para alcanzar un grosor apropiado. Además, se puede añadir la sal inorgánica para estabilizar de este modo la solubilidad de la celulosa, permitir que la separación de microcapas progrese uniformemente en la dirección circunferencial y formar una estructura en la que la cantidad de virus capturado sea uniforme en la porción de captura de virus, independientemente del lugar en la superficie de filtración.

Además, los autores de la presente invención también han descubierto que resulta eficaz hacer que la porción de captura de virus y/o la porción de captura de coloides de oro de la membrana de eliminación de virus sean homogéneas y finas para suprimir la resistencia del baño en el baño de coagulación en un procedimiento de coagulación de una membrana porosa de polímero. La resistencia del baño en el baño de coagulación se puede suprimir para suprimir de este modo la rotura de la estructura de la membrana debida al estiramiento, formando una estructura de membrana uniforme en la dirección circunferencial de la membrana. La resistencia del baño en el baño de coagulación se puede suprimir estableciendo una relación apropiada entre la velocidad del flujo de la solución de hilatura en bruto y la velocidad del flujo del líquido de coagulación. Específicamente, la proporción entre la velocidad de flujo del líquido de coagulación y la velocidad de flujo de la solución de hilatura en bruto se establece dentro del intervalo anterior para suprimir de este modo la resistencia del baño en el baño de coagulación.

Como se describe anteriormente, en un procedimiento de fabricación se puede controlar la separación de microfases y se puede suprimir la resistencia del baño en el baño de coagulación para permitir de este modo la fabricación de la membrana de eliminación de virus en forma de membrana de fibras huecas que tiene la elevada propiedad de eliminación de virus.

Además, la membrana de eliminación de virus en forma de membrana plana se fabrica mediante, por ejemplo, el siguiente procedimiento. Se añade una sal inorgánica a una solución de celulosa-cupramonio y se mezcla con la misma para proporcionar una solución de formación de membrana. Posteriormente, se somete la solución de formación de membrana a tratamientos de filtración y desgasificación. El tipo de sal inorgánica que se va a usar es el mismo que como se describe anteriormente.

A continuación, la solución de formación de membranas se vierte y se extiende sobre un soporte que se desplaza por un baño de coagulación y se coagula. La velocidad de movimiento del soporte se establece en aproximadamente 1,0 a 10,0 m/min. Una membrana plana formada se somete a un tratamiento de regeneración con un ácido, se deja pasar a través de un baño de agua adicional y se estira y, después de esto, se seca mediante el uso de un secador. Para que la porción de captura de virus y/o la porción de captura de coloides de oro de la membrana de eliminación de virus en forma de membrana plana que se va a fabricar sean homogéneas y finas, se establecen la velocidad de vertido y la velocidad de movimiento del líquido de coagulación para que estén en una relación apropiada. Específicamente, se establece la proporción entre la velocidad de movimiento del líquido de coagulación y la velocidad de movimiento del soporte en un determinado intervalo.

Las membranas de eliminación de virus tanto de fibras huecas como planas fabricadas mediante los procedimientos anteriores se pueden usar para preparar un filtro en el que un espacio principal cerca de la entrada de un líquido que se va a filtrar y un espacio secundario cerca de la salida de un filtrado estén separados por una membrana.

Aunque la presente invención se ha descrito anteriormente con referencia a modos de realización, no se debe entender que la presente invención está limitada por la descripción y los dibujos que constituyen parte de la divulgación. Diversos modos de realización, ejemplos y técnicas operativas alternativas resultarán evidentes para un experto en la técnica, en base a la divulgación. Se debe entender que la presente invención engloba diversos modos de realización y similares no descritos aquí.

Ejemplos

(Fabricación de la membrana de eliminación de virus)

Un linter de algodón (peso molecular promedio: 1,44 x 105) y sulfato de sodio (fabricado por Kishida Chemical Co., Ltd.) se disolvieron en una solución de cupramonio preparada mediante un procedimiento conocido, y se filtraron y desespumaron para proporcionar una solución de hilatura en bruto en la que la concentración de celulosa y la concentración de sulfato de sodio como una sal inorgánica eran como se describe en la Figura 5 y la Figura 6, la concentración de amoníaco era de un 4,4 % en peso y la concentración de cobre era de un 2,7 % en peso. A continuación, se descargó la solución de hilatura en bruto a través de la salida de hilatura exterior de la hilera doble anular a una velocidad de 3,0 cc/min o 3,65 cc/min y, al mismo tiempo, se descargó un líquido de coagulación interno que incluía acetona/amoníaco/agua en una proporción en peso representada en la Figura 5 y la Figura 6 a través de la salida de hilatura central de la hilera doble anular a una velocidad de 1,8 cc/min.

La solución de hilatura en bruto y el líquido de coagulación interno descargados a través de la hilera doble anular se introdujeron en un baño de coagulación lleno con el líquido de coagulación externo que incluía acetona/amoniaco/agua en una proporción en peso representada en la Figura 5 y la Figura 6, para formar una membrana de fibras huecas, y la membrana de fibras huecas se enrolló a una velocidad de enrollado (velocidad de hilatura) de 10 m/min. Como baño de coagulación se usó un tubo estrecho de embudo en forma de U que tenía un diámetro de 7 mm, descrito en la patente japonesa abierta a consulta pública n.° 4-371221. La velocidad de flujo promedio del líquido de coagulación externo en el tubo estrecho de embudo fue la representada en la Figura 5 y la Figura 6. Además, la proporción entre la velocidad de flujo promedio del líquido de coagulación externa y la velocidad de enrollado (velocidad de hilatura) fue la representada en la Figura 5 y la Figura 6.

La membrana de fibras huecas se enrolló en agua a 30 °C. Después de enrollar la membrana de fibras huecas durante 60 minutos, la membrana de fibras huecas enrollada se sumergió en otra agua a 30 °C durante 60 minutos. A continuación, se regeneró la celulosa de la membrana de fibras huecas mediante una solución acuosa de ácido sulfúrico al 5 % en peso y se lavó adicionalmente con agua. La humedad en el haz de membrana de fibras huecas resultante se reemplazó por metanol en cada uno de los Ejemplos 1 a 4, así como en los Ejemplos comparativos 1, 2 y 4, y por etanol en cada uno de los Ejemplos 5 a 9, y después de esto se sometió a secado a vacío en condiciones de 50 °C y 3 kPa mientras ambos extremos del haz estaban fijados y se estiró un 5,0 %. La membrana de fibras huecas obtenida mediante el procedimiento anterior se definió como una membrana de eliminación de virus de acuerdo con cada Ejemplo o Ejemplo comparativo. Sin embargo, no se pudo fabricar ninguna membrana en sí misma en las condiciones de acuerdo con el Ejemplo comparativo 3 ni con el Ejemplo comparativo 5 representados en la Figura 5 y la Figura 6. El diámetro interior, el grosor de la membrana, el tamaño de poro promedio, el punto de burbuja y la tasa de permeación de agua pura antes de la esterilización de la membrana de eliminación de virus resultante fueron los representados en la Figura 5 y la Figura 6.

(Evaluación de la membrana de eliminación de virus usando coloides de oro)

(1) Preparación de una solución de coloides de oro

Se adquirieron soluciones respectivas que incluían coloides de oro con tamaños de partícula de 10, 15, 20 y 30 nm (fabricados por Cytodiagnostics Inc.). A continuación, cada una de las soluciones de coloide de oro se diluyó con agua destilada para inyectables, éter de polioxietilen-naftilo (1,59 % en volumen) y poli(4-estirenosulfonato de sodio) (0,20 % en volumen) de modo que la absorbancia a la longitud de onda de absorción máxima de los coloides de oro de cada una de las soluciones de coloides de oro, medida con un espectrofotómetro ultravioleta-visible UVmini-1240 (fabricado por Shimadzu Corporation), fuera de 0,25.

(2) Filtración de una solución de coloides de oro

Se filtraron 40 ml de cada una de las soluciones de coloides de oro preparadas bajo una presión de 78,4 kPa por la membrana de eliminación de virus fabricada en cada uno de los Ejemplos y Ejemplos comparativos. El área de superficie de filtración de la membrana de eliminación de virus era de 0,001 m2.

(3) Medición de la tasa de eliminación de coloides de oro por la membrana de eliminación de virusCon respecto a cada una de las soluciones de coloides de oro, se midieron la absorbancia "A" de la solución de coloides de oro antes de la filtración y la absorbancia "B" del filtrado, a la longitud de onda de absorción máxima de los coloides de oro, usando un espectrofotómetro ultravioleta-visible UVmini-1240 (fabricado por Shimadzu Corporation), y se calculó la tasa logarítmica de eliminación (LRV) de coloide de oro por la membrana de eliminación de virus de acuerdo con cada uno de los Ejemplos y Ejemplos comparativos, dada por la siguiente expresión (2). Los resultados se representan en la Figura 7 y la Figura 8.

LRV = logio (A/B) (2)

(4) Medición de la uniformidad de la porción de captura de coloides de oro

Se cortó un trozo (grosor: 8 |jm) de la membrana de eliminación de virus de acuerdo con cada uno de los Ejemplos y Ejemplos comparativos después de la filtración de cada una de las soluciones de coloide de oro, y se midió el perfil de luminancia en cada uno de los 16 puntos teñidos por los coloides de oro en la sección transversal del trozo usando un microscopio óptico (Biozero, BZ8100, fabricado por Keyence Corporation). A continuación, se restó el perfil de luminancia medido de una constante (255). Después de esto, se generó un gráfico con el grosor de la membrana (en porcentaje) representado en el eje horizontal y la variación de la luminancia representada en el eje vertical, y se calculó el área del espectro de variación de la luminancia presentado en el gráfico. Además, el valor obtenido al dividir la desviación típica del área del espectro de variación de la luminancia en los 16 puntos entre el promedio del área del espectro de variación de la luminancia en los 16 puntos se calculó como el valor que indica el coeficiente de variación de la cantidad de coloides de oro capturados en la porción de captura de coloides de oro de la membrana de eliminación de virus de acuerdo con cada uno de los Ejemplos y Ejemplos comparativos. En la Figura 7 y la Figura 8 se representan solo los resultados del flujo de los coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm. La membrana de eliminación de virus de acuerdo con cada Ejemplo tendía a tener un coeficiente de variación bajo en comparación con la membrana de eliminación de virus de acuerdo con cada Ejemplo comparativo. En consecuencia, se indicó que la uniformidad de la cantidad de coloides de oro capturados en la porción de captura de coloides de oro de la membrana de eliminación de virus de acuerdo con cada Ejemplo era alta. Además, entre los Ejemplos, cuanto mayor era la cantidad de sulfato de sodio añadido y mayor era la proporción entre la velocidad de flujo promedio del líquido de coagulación externo y la velocidad de hilatura, mayor tendía a ser la uniformidad de la cantidad de coloides de oro capturados en la porción de captura de coloides de oro.

(5) Medición del grosor de la porción de captura de coloides de oro

Se cortó un trozo (grosor: 8 |jm) de la membrana de eliminación de virus en estado húmedo con la que se filtraron las respectivas soluciones de coloides de oro con diámetros de 20 y 30 nm. Se midió el perfil de luminancia en cada uno de los 16 puntos teñidos por los coloides de oro en la sección transversal del trozo en estado húmedo usando un microscopio óptico (Biozero, BZ8100, fabricado por Keyence Corporation). Aquí, se midió en la dirección del grosor una primera distancia "a" desde la superficie principal de la membrana de eliminación de virus hasta una parte donde se capturaron los coloides de oro y que estaba lo más cerca de la superficie principal. Además, se midió en la dirección del grosor una segunda distancia "b" desde la superficie principal de la membrana de eliminación de virus hasta una parte donde se capturaron los coloides de oro y que estaba lo más cerca de la superficie secundaria.

A continuación, se calculó el valor "A" (= a/c (expresado en porcentaje)) obtenido al dividir la primera distancia "a" entre el grosor "c" de la membrana de eliminación de virus en estado húmedo y expresado en porcentaje en cada uno de 16 puntos, y se calculó el promedio del valor "A" en 16 puntos como el primer nivel de logro. Además, se calculó el valor "B" (= b/c (expresado en porcentaje)) obtenido al dividir la primera distancia "b" entre el grosor "c" de la membrana de eliminación de virus en estado húmedo y expresado en porcentaje en cada uno de 16 puntos, y se calculó el promedio del valor "B" en 16 puntos como el segundo nivel de logro.

Además, como se representa en la siguiente expresión (3), el valor obtenido al multiplicar la diferencia entre el promedio "B<20>" del segundo nivel de logro en la membrana de eliminación de virus aplicada para capturar los coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm mediante filtración y el promedio "A<30>" del primer nivel de logro en la membrana de eliminación de virus aplicada para capturar los coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm mediante filtración por el promedio "C<prom>" del promedio "C<20>" del grosor de la membrana de eliminación de virus en estado húmedo aplicada para capturar los coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm mediante filtración y el promedio "C<30>" del grosor de la membrana de eliminación de virus en estado húmedo aplicada para capturar los coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm mediante filtración se calculó como el grosor "T" de la porción de captura de los coloides de oro de la membrana de eliminación de virus. El grosor "T" de la porción de captura de coloides de oro también se expresa como el grosor "T" de una capa densa de la membrana de eliminación de virus. Los resultados se representan en la Figura 7 y la Figura 8. La membrana de eliminación de virus de acuerdo con cada Ejemplo tendía a tener un grosor "T" grande de la capa densa, que estaba en el intervalo de 20 jm o menos, en comparación con la membrana de eliminación de virus de acuerdo con cada Ejemplo comparativo. Además, entre los Ejemplos, cuanto mayor era la cantidad de sulfato de sodio añadido y mayor era la proporción entre la velocidad de flujo promedio del líquido de coagulación externo y la velocidad de hilatura, mayor tendía a ser el grosor de la capa fina.

(B20 “ A30) x CpRQH (3 )

En el procedimiento anterior, para medir el grosor de la capa densa se usaron al menos dos membranas de eliminación de virus: la membrana de eliminación de virus aplicada para capturar los coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm mediante filtración y la membrana de eliminación de virus aplicada para capturar los coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm mediante filtración. Sin embargo, para medir el grosor de la capa densa también se puede usar una sola membrana de eliminación de virus. En este caso, se usó una membrana de eliminación de virus para filtrar una solución de coloides de oro que incluía coloides de oro que tenían tanto diámetros de 20 nm como de 30 nm. De forma alternativa, se usó una membrana de eliminación de virus para filtrar una solución de coloides de oro con un diámetro de 20 nm y, a continuación, filtrar una solución de coloides de oro con un diámetro de 30 nm.

A continuación, se cortó un trozo de la membrana de eliminación de virus con la que se filtró cada una de las soluciones de coloides de oro con diámetros de 20 nm y 30 nm, y se midió el perfil de luminancia en cada uno de los 16 puntos teñidos con los coloides de oro en la sección transversal del trozo usando un microscopio óptico (Biozero, BZ8100, fabricado por Keyence Corporation). En el presente documento, se midió en la dirección del grosor una primera distancia "ai" desde la superficie principal de la membrana de eliminación de virus hasta una parte de la porción de captura de coloides de oro que estaba lo más cerca de la superficie principal. Además, se midió en la dirección del grosor una segunda distancia "bi" desde la superficie principal de la membrana de eliminación de virus hasta una parte de la porción de captura de coloides de oro que estaba lo más cerca de la superficie secundaria.

A continuación, se calculó el valor "Ai" (= ai/ci (expresado en porcentaje)) obtenido al dividir la primera distancia "ai" entre el grosor "c" de la membrana de eliminación de virus húmeda y expresado en porcentaje en cada uno de los i6 puntos, y se calculó el promedio del valor "Ai" en i6 puntos como primer nivel de logro. Además, se calculó el valor "Bi" (= bi/ci (expresado en porcentaje)) obtenido al dividir la segunda distancia "bi" entre el grosor "c" de la membrana de eliminación de virus húmeda y expresado en porcentaje en cada uno de los i6 puntos, y se calculó el promedio del valor "Bi" en i6 puntos como segundo nivel de logro.

Además, como lo representa la siguiente expresión (4), el valor obtenido al multiplicar la diferencia entre el promedio "Bi" del segundo nivel de logro en la membrana de eliminación de virus y el promedio "Ai " del primer nivel de logro en la membrana de eliminación de virus por el "C" promedio del grosor de la membrana de eliminación de virus húmeda se calculó como el grosor "T" de la porción de captura de coloides de oro de la membrana de eliminación de virus. Se confirmó que no se produjo una gran diferencia entre el grosor "T" calculado mediante la expresión (3) y el grosor "T" calculado mediante la expresión (4).

(6) Medición de la propiedad de dependencia del tamaño de partícula de la porción de captura de coloides de oro de la membrana de eliminación de virus

Se cortó un trozo (grosor: 8 |jm) de la membrana de eliminación de virus con la que se filtraron las respectivas soluciones de coloide de oro con diámetros de i5 nm, 20 nm y 30 nm. Se midió el perfil de luminancia en cada uno de los i6 puntos teñidos por los coloides de oro en la sección transversal del trozo usando un microscopio óptico (Biozero, BZ8i00, fabricado por Keyence Corporation). Aquí, se midió en la dirección del grosor una primera distancia "a" desde la superficie principal de la membrana de eliminación de virus hasta una parte donde se capturaron los coloides de oro y que estaba lo más cerca de la superficie principal. Además, se midió en la dirección del grosor una segunda distancia "b" desde la superficie principal de la membrana de eliminación de virus hasta una parte donde se capturaron los coloides de oro y que estaba lo más cerca de la superficie secundaria.

A continuación, se calculó el valor "A" (%) obtenido al dividir la primera distancia "a" entre el grosor "c" de la membrana de eliminación de virus húmeda y expresado en porcentaje en cada uno de los i6 puntos, y se calculó el promedio del valor "A" (%) en i6 puntos como primer nivel de logro. Además, se calculó el valor "B" (%) obtenido al dividir la segunda distancia "b" entre el grosor "c" de la membrana de eliminación de virus húmeda y expresado en porcentaje en cada uno de los i6 puntos, y se calculó el promedio del valor "B" (%) en i6 puntos como segundo nivel de logro. El promedio del primer nivel de logro y el promedio del segundo nivel de logro con respecto a cada uno de los respectivos coloides de oro que tienen diámetros de i5 nm, 20 nm y 30 nm se representan en la Figura 7 y la Figura 8. En la Figura 7 y la Figura 8, los valores numéricos de la izquierda representan cada uno el promedio del primer nivel de logro, y los valores numéricos de la derecha representan cada uno el promedio del segundo nivel de logro. La posición de captura de cada uno de los respectivos coloides de oro que tienen diámetros de 30 nm, 20 nm y i5 nm se midió sistemáticamente con respecto a los coloides de oro capturados por la membrana, y los coloides de oro no capturados por la membrana no se sometieron a dicha medición.

(Capacidad de eliminación de virus de la membrana de eliminación de virus)

(1) Preparación de una solución de proteínas que contiene virus

Se usó un anticuerpo policlonal (IgG humana) (Venoglobulin-IH, fabricado por Benesis Corporation) para proporcionar una solución de anticuerpos que se diluyó con agua para inyectables (Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd.) para tener una concentración de anticuerpos de i mg/ml. Se ajustó la concentración de sal a 0,i mol/l mediante el uso de una solución acuosa de NaCl i mol/l. Además, se ajustó el exponente del iones de hidrógeno (pH) a 4,0 mediante el uso de HCl 0,i mol/l o NaOH 0,i mol/l para proporcionar una solución de proteínas. A la solución de proteínas resultante se le añadió parvovirus porcino (PPV; Asociación Japonesa de Productos Biológicos Veterinarios) a una concentración de un i,0 % en volumen y se agitó bien para proporcionar una solución de proteínas que contenía virus.2

(2) Filtración de una solución de proteínas que contiene virus

i3

Se usó la membrana de eliminación de virus fabricada, que tiene un área de membrana de 0,001 m2, a una presión de filtración de 78,4 kPa para realizar una filtración sin salida de la solución de proteínas que contiene virus hasta que la cantidad de filtración alcanzó 75 l/m2. Se midió la presión de filtración mediante un manómetro dispuesto cerca de un recipiente de solución de alimentación. A continuación, se prepararon soluciones diluidas 1:10, 1: 102, 1: 103, 1:104 y 1:105 del filtrado de la solución de proteínas que contiene virus, con FBS/D-MEM al 3 % en volumen. Además, también se prepararon soluciones diluidas 1:102, 1: 103, 1: 104, 1: 105, 1:106 y 1:107 de la solución de proteínas que contiene virus no filtrada (solución de proteína que contiene virus), que se tomaron inmediatamente antes de la filtración, con FBS/D-MEM al 3 % en volumen.

(3) Medición de la tasa de eliminación de virus

Se prepararon células PK-13 (ATCC n.° CRL-6489) obtenidas de la American Type Culture Collection (ATCC) y se cultivaron. Además, se preparó un líquido mixto de suero bovino al 3 % en volumen (fabricado por Upstate) calentado en un baño de agua a 56 °C durante 30 minutos e inactivado y D-MEM (fabricado por Invitrogen Corporation, alto en glucosa) que contenía un 1 % en volumen de penicilina/estreptomicina (+10000 unidades/ml de penicilina, 10000 |jg/ml de estreptomicina, fabricado por Invitrogen Corporation). A continuación en el presente documento, el líquido mixto se denomina "FBS/D-MEM al 3 % en volumen". A continuación, se diluyeron las células PK-13 con FBS/D-MEM al 3 % en volumen para preparar una suspensión celular diluida que tenía una concentración celular de 2,0 x 105 (células/ml). A continuación, se prepararon diez placas de cultivo celular de fondo redondo de 96 pocillos (fabricadas por Falcon Corporation) y se dispensaron 100 j l de la suspensión celular diluida en cada uno de los pocillos.

Se dispensó cada uno del filtrado de la solución de proteínas que contiene virus, de las soluciones diluidas 1:10, 1: 102, 1: 103, 1:104 y 1:105 del filtrado y de las soluciones diluidas 1:102, 1:103, 1:104, 1:105, 1:106 y 1:107 de la solución de proteínas que contiene virus no filtrada a uno de cada ocho pocillos de cada una de las placas de cultivo celular, a los que se dispensaron 100 j l de la suspensión celular diluida. Después de esto, se colocó cada una de las placas de cultivo celular en una estufa de incubación a 37 °C en una atmósfera de dióxido de carbono al 5 % y se cultivaron las células durante 10 días.

Las células cultivadas durante 10 días se sometieron a una medición de dosis infecciosa del 50 % del cultivo tisular (TCID50) mediante el uso del procedimiento de adsorción de eritrocitos (véase Experimental Study of Viruses, General, editado por el Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas, p. 173) que se describe a continuación. En primer lugar, se diluyó 1:5 sangre de pollo conservada (fabricada por Nippon Bio-Test Laboratories Inc.) con PBS (-) (fabricada por Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.; preparada mediante el procedimiento descrito en las instrucciones adjuntas al producto) y, a continuación, se centrifugó a 2500 rpm a 4 °C durante 5 minutos para precipitar los eritrocitos. Después de esto, se eliminó el sobrenadante mediante aspiración y el precipitado resultante que contenía los eritrocitos se diluyó de nuevo 1: 200 con PBS (-).

A continuación, se dispensaron 100 j l de la solución diluida en PBS (-) del precipitado de eritrocitos en todos los pocillos de las placas de cultivo celular y se dejaron reposar durante dos horas. Después de esto, se confirmó visualmente la presencia de adsorción de eritrocitos en la superficie del tejido celular cultivado, y se contabilizó cada pocillo en el que se había confirmado la adsorción como un pocillo con infección vírica y cada pocillo en el que no se había confirmado la adsorción como un pocillo sin infección vírica. Además, se confirmó el grado de infección vírica en cada uno de los pocillos a los que se les dispensó cada uno del filtrado de la solución de proteínas que contiene virus, de las soluciones diluidas del filtrado y de las soluciones diluidas de la solución de proteínas que contiene virus no filtrada, se calculó el log<10>(TCID50/ml) como un valor de infecciosidad de acuerdo con el procedimiento de Reed-Muench (véase Experimental Study of Viruses, General, editado por el Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas, p. 479-480) y se calculó la tasa logarítmica de eliminación (LRV) del virus usando la siguiente expresión (5). Los resultados se representan en la Figura 7 y la Figura 8. En comparación con la membrana de eliminación de virus de acuerdo con cada Ejemplo comparativo, la membrana de eliminación de virus de acuerdo con cada Ejemplo tendía a tener una tasa de eliminación de virus elevada. Además, entre los Ejemplos, cuanto mayor era la cantidad de sulfato de sodio añadido y mayor era la proporción entre la velocidad de flujo promedio del líquido de coagulación externo y la velocidad de hilatura, mayor tendía a ser la tasa de eliminación de virus.

LRV = l o g i o ( C o / C F) (5)

En la expresión, C<0>representa el valor de infecciosidad de la solución de proteínas que contiene virus no filtrada (solución de proteínas que contiene virus) antes de la filtración por la membrana de eliminación de virus, y CF representa el valor de infecciosidad del filtrado después de la filtración por la membrana de eliminación de virus.

(4) Procedimiento de medición del punto de burbuja (Procedimiento de medición descrito en la publicación internacional n.° WO 2001/014047)

Cuando una membrana se humedece con un líquido que tiene una tensión superficial y (N/m) y, después de esto, se aplica presión gradualmente a la membrana mediante un gas, se generan continuamente burbujas de aire desde la superficie de la membrana a una determinada presión, y aquí se mide la presión del gas. Aquí, la presión del gas se denomina punto de burbuja (MPa).

En cualquier procedimiento de medición conocido, la presión a la que se confirma visualmente la generación de burbujas de aire continuas se define como punto de burbuja. Sin embargo, un procedimiento de determinación de este tipo provoca que se produzca fácilmente un error, ya que la cantidad de burbujas de aire que se generan es pequeña en el caso de un área de membrana pequeña y, por tanto, se pueden pasar por alto las burbujas de aire, y las burbujas de aire (no las burbujas de aire generadas por un fenómeno de fractura interfacial) adheridas a la superficie de la membrana antes de la presurización, que no llegan a la superficie de la membrana, se pueden confundir con burbujas de aire debidas a un fenómeno de fractura interfacial.

En el presente Ejemplo, para proporcionar un error de medición menor, la presión (MPa) a la que se generaron burbujas de aire a una tasa cuantitativa de 3,0 ml/min por centímetro cuadrado del área de la membrana se definió como punto de burbuja. Además, se usó perfluorocarbono que tenía una tensión superficial de 0,012 (N/m) como líquido húmedo y se usó nitrógeno como gas de presurización.

(5) Procedimiento de medición del diámetro interior y del grosor de la membrana (fibra hueca seca)En el presente Ejemplo, se observó el corte transversal de la fibra hueca seca mediante un proyector (V-12B, fabricado por Nikon Corporation), se midieron los diámetros interiores en 2 puntos y los grosores de la membrana en 4 puntos en la dirección perpendicular y en la dirección horizontal en cada una de las secciones transversales de fibra hueca, y se definieron los promedios respectivos de los mismos como los valores de medición del diámetro interior y del grosor de la membrana.

(6) Procedimiento de medición del grosor de la membrana (fibra hueca húmeda)

Cuando se midió el grosor de la membrana de fibras huecas en estado húmedo en el presente Ejemplo, se sometió a medición la fibra hueca húmeda para capturar coloides de oro con diámetros de 30 nm, 20 nm y 15 nm mediante filtración (40 l/m2) usando un microscopio óptico (Biozero, BZ8100, fabricado por Keyence Corporation).

(7) Procedimiento de medición del tamaño de poro promedio (procedimiento de medición descrito en la patente japonesa n.° 2707274)

En el presente Ejemplo, se calculó la porosidad "Pr" mediante el siguiente procedimiento. Se determinó la densidad aparente pa de la fibra hueca a partir de mediciones del grosor, el área y el peso de la membrana, y se determinó la porosidad mediante la expresión (6).

p a = Wd/Vw = 4Wd/7il (Do2 - D i 2)

Pr (%) = (1 - p a / p p ) x 100 (6)

En la expresión, pa representa la densidad aparente (g/cm3) de la fibra hueca, Wd representa el peso completamente seco (g) de la fibra hueca, Vw representa el volumen aparente (cm3) de la fibra hueca, l representa la longitud (cm) de la fibra hueca, Do representa el diámetro exterior (cm) de la fibra hueca, Di representa el diámetro interior (cm) de la fibra hueca y pp representa la densidad (g/cm3) de la celulosa..

Se calculó el tamaño de poro promedio mediante el siguiente procedimiento. Se agruparon diez fibras para preparar un módulo de modo que la longitud eficaz fuera de 16 cm. Se cerró un extremo del módulo, se aplicó una presión de 200 mmHg al otro extremo del mismo y se permitió pasar agua a 37 °C. La cantidad de agua que salía a través de la membrana se midió como la cantidad de permeación de agua.

Con antelación, se habían medido el diámetro interior y el grosor de la membrana en estado seco. Se calculó el área de la membrana a partir de dichos valores.

Se calculó el tamaño de poro promedio (nm) mediante la expresión (7).

2r = 2 x 103 x V ( V * d * ( i / P * A * P r ) (7)

En la expresión, 2r representa el tamaño de poro promedio (nm), V representa la cantidad de permeación de agua (ml/min), d representa el grosor de la membrana (<|J>m), |j representa la viscosidad (cp) del agua, P representa la diferencia de presión (mmHg), A representa el área de la membrana (cm2) y Pr representa la porosidad (%).

(8) Procedimiento de medición del peso molecular promedio

En el presente Ejemplo, la medición se llevó a cabo por el mismo procedimiento que el procedimiento descrito en la publicación de patente japonesa n.° 59-204912.

(9) Procedimiento de medición de la tasa de permeación de agua pura antes de la esterilización

La tasa de permeación de agua pura se obtuvo llenando ambas superficies de la membrana, la superficie principal para alimentación de líquido y la superficie secundaria para descarga de filtrado, con agua pura, filtrando después de esto el agua pura a una temperatura de 37 °C y a una presión diferencial en la membrana de 35 kPa, y convirtiendo la cantidad de permeación de agua pura que sale de la superficie principal hacia la superficie secundaria a la unidad (l/h/0,1 MPa por metro cuadrado de área de membrana de fibras huecas seca). Agua pura se refiere al agua purificada por ultrafiltración.

Lista de signos de referencia

1 superficie principal

2 superficie secundaria

10 membrana de eliminación de virus

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una membrana de eliminación de virus de fibras huecas para eliminar virus de una solución que contiene proteínas,

comprendiendo la membrana de eliminación de virus

una superficie principal a la que se aplica la solución que contiene proteínas, y

una superficie secundaria desde la que se fluye un líquido que pasa a través de la membrana de eliminación de virus, en la que,

cuando se aplica una solución que contiene coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm a través de la superficie principal a la membrana de eliminación de virus para permitir que la membrana de eliminación de virus capture los coloides de oro para la medición de la luminancia en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus, un valor obtenido al dividir la desviación típica de un valor de un área de un espectro de variación de la luminancia entre un promedio del valor del área del espectro de variación de la luminancia, medido como se describe en la descripción, es 0,01 o más y 1,50 o menos;

un grosor de una porción donde se capturan coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm o más y de 30 nm o menos en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus en estado húmedo es de 10,0 |jm o más y 30,0 |jm o menos; y

la membrana de eliminación de virus está formada de celulosa, en la que

una porción donde se capturan coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm se localiza en un lugar correspondiente a un 15 % o más y un 60 % o menos de un grosor de la membrana de eliminación de virus desde la superficie principal,

una porción donde se capturan coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm se localiza en un lugar correspondiente a un 25 % o más y un 85 % o menos del grosor de la membrana desde la superficie principal, y

una porción donde se capturan coloides de oro que tienen un diámetro de 15 nm se localiza en un lugar correspondiente a un 60 % o más y un 90 % o menos del grosor de la membrana desde la superficie principal en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus en estado húmedo,

en el que un tamaño de poro disminuye y a continuación se incrementa desde la superficie principal hacia la superficie secundaria en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus.

2. La membrana de eliminación de virus de acuerdo con la reivindicación 1, en la que no se capturan coloides de oro con un diámetro de 10 nm.

3. La membrana de eliminación de virus de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en la que

una tasa logarítmica de eliminación de coloides de oro que tienen un diámetro de 30 nm es 1,00 o más,

una tasa logarítmica de eliminación de coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm es 1,00 o más,

una tasa logarítmica de eliminación de coloides de oro que tienen un diámetro de 15 nm es 0,10 o más, y

una tasa logarítmica de eliminación de coloides de oro que tienen un diámetro de 10 nm es inferior a 0,10,

en el que la tasa logarítmica de eliminación de oro se mide como se describe en la descripción.

4. La membrana de eliminación de virus de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que un tamaño de poro promedio, medido como se describe en la descripción, es de 13 nm o más y 21 nm o menos.

5. La membrana de eliminación de virus de acuerdo con la reivindicación 1, en la que la porción donde se capturan los coloides de oro incluye una porción donde el tamaño de poro es mínimo.

6. La membrana de eliminación de virus de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que el grosor de la membrana es de 24 |jm o más y 41 |jm o menos en estado seco.

7. La membrana de eliminación de virus de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en la que el punto de burbuja, medido como se describe en la descripción, es 1,2 MPa o más y 1,8 MPa o menos.

8. La membrana de eliminación de virus de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que la tasa de permeación de agua pura es de 30 l/m2/h/0,1 MPa o más y 120 l/m2/h/0,1 MPa o menos.

9. La membrana de eliminación de virus de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en la que el valor obtenido al dividir una desviación típica de un valor de un área de un espectro de variación de la luminancia entre un promedio del valor de un área del espectro de variación de la luminancia es de 0,01 o más y 1,20 o menos.

10. La membrana de eliminación de virus de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en la que el grosor de una porción donde se capturan coloides de oro que tienen un diámetro de 20 nm o más y de 30 nm o menos en la sección transversal de la membrana de eliminación de virus en estado húmedo es de 13,0 jm o más y 20,0 jm o menos.