ES2898024T3 - Gemcitabina oral metronómica para terapia contra el cáncer - Google Patents

Abstract

Gemcitabina (GEM) para su uso en el tratamiento de un tumor sensible a gemcitabina, o para inducir la regresión de un tumor sensible a GEM, en un sujeto de una especie, en donde la GEM debe administrarse por vía oral al sujeto en una formulación que, tras la ingestión oral, libera en una forma biodisponible menos de la mitad de la dosis máxima tolerada (MTD) de GEM para la especie, en donde la formulación es una composición farmacéutica autoemulsionante (SEP) que comprende: (a) una cantidad terapéuticamente eficaz de GEM o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, siendo la cantidad una fracción de la MTD para GEM cuando se administra por vía oral a humanos en la composición de SEP; (b) uno o más solventes capaces de disolver el fármaco o la sal para formar una solución de GEM-solvente; (c) un sistema surfactante que comprende uno o más surfactantes, el sistema surfactante mostrando un valor de HLB de 8 a 17; y (d) uno o más portadores hidrófilos que son compatibles con la solución de GEM-solvente y el sistema surfactante, en donde la formulación se administra al sujeto varias veces en un programa regular sin una interrupción significativa durante un período de tiempo sostenido.

Description

DESCRIPCIÓN

Gemcitabina oral metronómica para terapia contra el cáncer

REFERENCIAS CRUZADAS A SOLICITUDES RELACIONADAS

Esta solicitud tiene derecho de prioridad para la Solicitud de patente provisional de Estados Unidos N° 62/344.660 presentada el 2 de junio de 2016.

ANTECEDENTES DE LA DIVULGACIÓN

La invención se refiere de manera general al campo del uso de agentes terapéuticos orales, incluyendo la gemcitabina, para el tratamiento de ciertos tumores.

La administración oral es un modo de administración de fármacos conveniente y fácil de usar, ya sea en forma de sólido o suspensión líquida, que continúa dominando el área de las tecnologías de administración de fármacos. Incluso aunque muchos tipos de fármacos podrían administrarse por vía oral con una eficacia aceptable, sigue habiendo un problema para algunas clases de fármacos, especialmente aquellos que se sabe que tienen buena solubilidad, pero que se metabolizan ampliamente en el hígado, fácilmente extraídos por el epitelio intestinal (mala permeabilidad) o son irritantes para la mucosa gástrica, como los fármacos de Clase III del Sistema de Clasificación Biofarmacéutica (BCS) proporcionados por la Food and Drug Administration de los Estados Unidos. Para estos fármacos, de los cuales el agente terapéutico gemcitabina (GEM) es uno, la administración por inyección se vuelve la opción principal para lograr una absorción y biodisponibilidad del fármaco aceptable que sin embargo lleva a un riesgo y gastos aumentados y además es doloroso para los pacientes.

Se han descrito composiciones farmacéuticas para la administración oral de fármacos relativamente hidrófilos como GEM. Por ejemplo, publicación de solicitud de patente de Estados Unidos Número 2010/0273730 de Innopharmax, Inc. describe preparaciones autoemulsionantes de dichos fármacos que presentan una buena biodisponibilidad (es decir, comparable a la obtenida mediante inyección intravenosa) y estabilidad de almacenamiento del fármaco.

Se ha descrito el uso de GEM para tratar una variedad de carcinomas. Para lograr el efecto antitumoral máximo, la GEM se administra a menudo por vía intravenosa a la dosis máxima que es, o es probable que sea, tolerada por el paciente (la "MTD"). Una deficiencia de las terapias de GEM existentes es que el fármaco puede suprimir la producción de células sanguíneas en los pacientes, especialmente cuando se usa en MTD.

La quimioterapia "metronómica" ha sido descrita por otros (por ejemplo, Sharovsky et al., 2009, Curr. Oncol.

16(2):7-15). Este nombre hace referencia a la administración crónica, aproximadamente igualmente espaciada, de (generalmente) dosis bajas de fármacos quimioterapéuticos sin períodos de descanso prolongados. La terapia metronómica implica la administración de fármacos muy por debajo de su MTD. La dosificación metronómica de GEM ha sido descrita por otros, pero solo en el contexto de la inyección de GEM o la administración oral de un profármaco (designado LY2334737) destinado a ser metabolizado para formar GEM después de la ingestión. Ver, por ejemplo, Yapp et al., 2016, Angiogenesis 19:229-244; Hasnis et al., 2014, Neoplasia 16:501-510; Vives et al., 2013, Int. J. Cancer 133:2464-2472; Pratt et al., 2013, Mol. Cancer Ther. 12:481-490; Francia et al., 2012, Mol. Cancer Ther. 11:680-689; Cham et al., 2010, Br. J. Cancer 103:52-60; Laquente et al., 2008, Mol. Cancer Ther.

7:638-647. La dosificación metronómica oral de GEM en sí no ha demostrado ser eficaz, presumiblemente debido a la baja biodisponibilidad atribuible a un extenso metabolismo de primer paso. Veltkamp et al. 2008, Clin. Cancer Res.

14:3477-3486. La US 2010273730 A1 divulga una composición auto-microemulsionante oral de un fármaco hidrófilo, solventes para disolver el fármaco hidrófilo y un sistema surfactante, además comprende uno o más portadores hidrófilos que son compatibles con dicha solución fármaco-solvente y el sistema surfactante. La composición muestra una biodisponibilidad comparativa con la del fármaco hidrófilo a través de inyección y es estable durante el almacenamiento. Natale et al., 2005 (Lung Cancer 50 Suppl 1:S2-4) revisaron los datos de diez años de progreso en el tratamiento del cáncer de pulmón de células no pequeñas con gemcitabina. A partir de la literatura, los autores concluyen que cuando se combina con un análogo de platino, la gemcitabina produce el mejor resultado de supervivencia libre de progresión de cualquier régimen basado en platino en el contexto de tratamiento de NSCLC avanzado de primera línea. Yardley, D, 2004 (Clin Breast Cancer 4 Suppl 3:S107-12) revisó los datos de que la gemcitabina y los taxanos son un nuevo estándar de terapia en el cáncer de mama. Se descubrió que la gemcitabina muestra actividad antitumoral con una actividad de monoterapia significativa en el cáncer de mama, dependiendo de las características previas al tratamiento de las pacientes. La US2015283237 A1 divulga, entre otras cosas, métodos para tratar el cáncer mediante la administración de un agente anti-CTLA-4 en combinación con gemcitabina.

Sería ventajoso si se desarrollara una terapia eficaz contra el cáncer que evitara tanto las desventajas de la administración parenteral (por ejemplo, Incomodidad y necesidad de administración profesional) como los caprichos de la administración de profármacos (por ejemplo, variabilidad del metabolismo de profármacos entre pacientes) y, en su lugar, proporcionase una cantidad eficaz de un agente terapéutico anticanceroso en una forma administrada por vía oral. La presente divulgación describe tal terapia.

BREVE RESUMEN DE LA DIVULGACIÓN

Esta divulgación se refiere a métodos de tratamiento de tumores sensibles a GEM en sujetos de una especie. Estos métodos incluyen administrar por vía oral al sujeto una forma de dosificación que incluye una cantidad terapéuticamente eficaz de GEM en una formulación que, tras la ingestión oral, libera en una forma biodisponible menos de la mitad de la dosis máxima tolerada (MTD) de GEM para la especie. A modo de ejemplo, la formulación puede ser una que forme espontáneamente una emulsión tras ponerse en contacto con un medio acuoso a 37 grados Celsius bajo agitación mecánica suave (es decir, condiciones como las del tracto gastrointestinal de un sujeto humano). La formulación puede administrarse al sujeto varias veces, como en un intervalo de dos o tres días entre administraciones sucesivas.

De acuerdo con la invención, se divulga gemcitabina para su uso en el tratamiento de un tumor sensible a gemcitabina, o para inducir la regresión de un tumor sensible a GEM, en un sujeto de una especie, en donde la GEM debe administrarse por vía oral al sujeto en una formulación que, tras la ingestión oral, libera en una forma biodisponible menos de la mitad de la dosis máxima tolerada (MTD) de GEM para la especie. La formulación es una composición farmacéutica autoemulsionante (SEP) que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de GEM o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, siendo la cantidad una fracción de la MTD para la GEM cuando se administra por vía oral a humanos en la composición de SEP; uno o más solventes capaces de disolver el fármaco o la sal para formar una solución de solvente de GEM; un sistema surfactante que comprende uno o más surfactantes, el sistema surfactante mostrando un valor de HLB de 8 a 17; y uno o más portadores hidrófilos que son compatibles con la solución de solvente de GEM y el sistema surfactante. La formulación se administra al sujeto varias veces en un programa regular sin una interrupción significativa durante un período de tiempo prolongado. A modo de ejemplo, una de tales formulaciones descritas en la presente ("GEMORAL") es una combinación de GEM (o una sal farmacéuticamente aceptable de GEM), agua, glicerol, PEG, polisorbato y oleoil polioxilglicéridos. Las formulaciones descritas en la presente pueden administrarse en forma de cápsulas, como cápsulas blandas.

Las composiciones descritas en la presente son útiles para tratar tumores sensibles a GEM, como tumores de mama, vejiga, páncreas y conductos biliares, así como tumores pulmonares de células no pequeñas en humanos. Para tratar tales tumores en humanos, la GEM puede administrarse en formulaciones que liberan no más de, por ejemplo, 1/3, 1/4, 1/5, 1/6, 1/7, 1/10, 1/12, 1/15, 1/20 o 1/40 de la MTD de GEM para humanos cuando se administra por la misma vía.

Otro aspecto de lo que se divulga en la presente son los métodos para inducir la regresión de un tumor sensible a GEM en un paciente humano. Estos métodos se realizan sustancialmente de manera similar a los descritos anteriormente, es decir, administrando oralmente al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de GEM en una formulación que, tras la ingestión oral, libera en forma biodisponible menos de la mitad de la MTD de GEM para el paciente.

En otro aspecto más de lo que enseña esta divulgación se encuentran los métodos para inhibir el crecimiento de un tumor en un paciente humano. Estos métodos también se practican administrando oralmente al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de GEM en una formulación que, tras la ingestión oral, libera en una forma biodisponible menos de la mitad de la MTD de GEM para el paciente.

La presente invención también divulga GEM para su uso en el tratamiento de un tumor sensible a GEM o para inducir la regresión de un tumor sensible a GEM en un sujeto de una especie, en donde la GEM se administra por vía oral al sujeto en una formulación que, tras la ingestión oral, libera en una forma biodisponible menos que la MTD de la GEM para la especie como se describe en la presente. También se proporciona el uso de GEM para la fabricación de un medicamento para tratar un tumor sensible a GEM o inducir la regresión de un tumor sensible a GEM en un sujeto de una especie en la que la GEM se administra por vía oral al sujeto en una formulación que tras la ingestión oral, libera en una forma biodisponible menos que la MTD de GEM para la especie como se describe en la presente.

La presente divulgación también enseña GEM para su uso en la inhibición del crecimiento de un tumor en un paciente humano, en donde la GEM debe administrarse por vía oral al sujeto en una formulación que, tras la ingestión oral, libera en una forma biodisponible menos que la MTD de la GEM para el paciente como se describe en la presente. También se proporciona el uso de GEM para la fabricación de un medicamento para inhibir el crecimiento de un tumor en un paciente humano, en donde la GEM es para administración por vía oral al sujeto en una formulación que, tras la ingestión oral, libera en una forma biodisponible menos que la MTD de la GEM para el paciente como se describe en la presente.

Esta divulgación también se refiere a la fabricación de medicamentos útiles para poner en práctica los métodos descritos en la presente. Es decir, se divulgan métodos para elaborar formulaciones administrables por vía oral que incluyen una cantidad terapéuticamente eficaz de GEM en una formulación que, tras la ingestión oral, libera en forma biodisponible menos de la mitad de la MTD de la GEM para la especie. Tales formulaciones pueden ser aquellas que forman espontáneamente una emulsión tras entrar en contacto con un medio acuoso a 37 grados Celsius bajo agitación mecánica suave (es decir, condiciones como las del tracto gastrointestinal de un sujeto humano). Las formulaciones pueden administrarse al sujeto varias veces, como en un intervalo de dos o tres días entre administraciones sucesivas.

La formulación que puede elaborarse como se describe en la presente puede incluir por lo menos tres componentes, concretamente (a) GEM disuelta en un solvente hidrófilo; (b) un sistema surfactante que muestra un valor de equilibrio hidrófilo-lipófilo (HLB) de aproximadamente 8 a aproximadamente 17 y que incluye por lo menos un surfactante; y (c) un portador hidrófilo que es compatible tanto con la solución de GEM-solvente como con el sistema surfactante. A modo de ejemplo, una de tales formulaciones descritas en la presente ("GEMORAL") es una combinación de GEM (o una sal farmacéuticamente aceptable de GEM), agua, glicerol, PEG, polisorbato y oleoil polioxilglicéridos. Las formulaciones como se describen en la presente pueden elaborarse en forma de cápsulas, como cápsulas blandas.

BREVE RESUMEN DE LAS VARIAS VISTAS DE LOS DIBUJOS

La Figura 1 es un gráfico del volumen tumoral a lo largo del tiempo para animales a los que se les había xenoinjertado un colangiocarcinoma humano derivado de un paciente. En el Ejemplo 2 se describen detalles adicionales.

La Figura 2 es un gráfico de la tasa de supervivencia de los animales del estudio descrito en el Ejemplo 2. La Figura 3 es un gráfico del volumen tumoral a lo largo del tiempo para animales a los que se les había xenoinjertado la línea celular de colangiocarcinoma humano HuCCT1. En el Ejemplo 3 se describen detalles adicionales.

La Figura 4 es un gráfico de la tasa de supervivencia de los animales del estudio descrito en el Ejemplo 3. La Figura 5 es un gráfico del volumen tumoral a lo largo del tiempo para animales a los que se les había xenoinjertado la línea celular de cáncer de páncreas humano CFPAC-1. En el Ejemplo 4 se describen detalles adicionales.

La Figura 6 es un gráfico de la tasa de supervivencia de los animales del estudio descrito en el Ejemplo 4. La Figura 7 es un gráfico del volumen tumoral a lo largo del tiempo para animales a los que se les había xenoinjertado la línea celular de cáncer de páncreas humano CFPAC-1. En el Ejemplo 5 se describen detalles adicionales.

La Figura 8 es un gráfico de la tasa de supervivencia de los animales del estudio descrito en el Ejemplo 5.

DESCRIPCIÓN DETALLADA

La divulgación se refiere a composiciones y métodos para administrar gemcitabina (GEM) por vía oral a sujetos para tratar un tumor en el sujeto. Dicho tratamiento puede incluir reducir el volumen, el peso o la tasa de crecimiento del tumor, por ejemplo, y también puede incluir la inducción de la regresión del tumor.

El uso de GEM como agente anticanceroso se conoce desde hace mucho tiempo. Sin embargo, el uso de GEM se ha limitado durante mucho tiempo a la inyección del fármaco o la administración oral de profármacos que se esperaba que se metabolizasen dentro del cuerpo de un paciente para producir GEM.

En la presente se describen datos que demuestran que la propia GEM puede administrarse por vía oral de forma metronómica, ya sea como monoterapia o como suplemento de otra terapia antitumoral, y ejercerá un efecto antitumoral eficaz. Aunque los datos presentados en la presente se recopilaron usando modelos de xenoinjerto de animales no humanos de colangiocarcinomas humanos y cánceres de páncreas, un experto en la técnica apreciará que los datos indican la utilidad de las terapias descritas en la presente para tratar o aliviar estos tumores en pacientes humanos. Un experto en la técnica reconocerá además a partir de la información presentada en la presente que se puede esperar que la administración metronómica oral de GEM ejerza efectos antitumorales favorables contra todos los tumores humanos conocidos o que se descubra más tarde que responden a la terapia con GEM (por ejemplo, aquellos que responden a GEM inyectada, incluyendo por lo menos cánceres de mama, vejiga, páncreas, conducto biliar, y de pulmón de células no pequeñas).

Hemos descubierto que la inyección de GEM (por ejemplo, por vía intraperitoneal o intravenosa) a una dosis más alta (por ejemplo, una dosis igual o cercana a la dosis máxima tolerada, MTD), seguido de la administración oral metronómica de una dosis sustancialmente más baja de GEM puede producir una mayor regresión tumoral que la inyección sola. La dosis oral puede ser, por ejemplo, una preparación autoemulsionante de GEM, como se describe en la publicación de solicitud de patente de Estados Unidos N° 2010/0273730 y puede incluir una fracción del MTD, como 1/2, 1/3, 1/4, 1/5, 1/6, 1/7, 1/10, 1/12, 1/20 o 1/40 del MTD de la GEM.

También hemos descubierto que la administración oral metronómica de GEM a una dosis sustancialmente más baja que la MTD puede inducir la regresión del tumor, incluso en ausencia de inyección de GEM, o después del tratamiento con un agente antitumoral diferente, como el 5-fluorouracilo (5FU).

Administración oral metronómica de GEM

Un aspecto importante de la materia descrita en la presente es el descubrimiento de que GEM muestra efectos antitumorales significativos cuando se administra por vía oral en una forma biodisponible, a una dosificación sustancialmente más baja que la dosis máxima tolerada (MTD) de GEM, y especialmente cuando se administra con regularidad durante un período de tiempo prolongado (por ejemplo, semanas, meses o años). A tal administración se hace referencia genéricamente como administración "metronómica" y se ha considerado un régimen de tratamiento eficaz para algunos otros agentes antitumorales. Sin embargo, antes de la presente divulgación, se desconocía si GEM mostraría efectos antitumorales significativos cuando se administra por vía oral como parte de un régimen metronómico y cómo funciona un régimen metronómico de GEM.

Se ha demostrado previamente que GEM inhibe el crecimiento tumoral cuando se administra por vía oral a una dosis cercana a la MTD. Sin embargo, tras la interrupción de la administración oral de MTD-GEM, la tasa de crecimiento tumoral rebota a una tasa aproximadamente igual a la tasa de crecimiento tumoral en animales tratados con vehículo por lo demás similares (es decir, sin GEM administrada). Debido a los efectos perjudiciales atribuibles a la administración oral de MTD-GEM, dicha terapia puede proporcionarse solo durante períodos de tiempo limitados. La terapia de GEM metronómica oral permite una mayor duración de la inhibición de la tasa de crecimiento tumoral mediada por GEM. Ya sea administrada como una terapia única o junto con otras terapias antitumorales, la terapia de GEM metronómica oral extiende el período de eficacia antitumoral.

Es bien sabido que ciertos fármacos antitumorales, como GEM, pueden administrarse por vías no orales (por ejemplo, por vía parenteral o transepitelial). Sin embargo, la vía oral es aquella por la que una gran mayoría de pacientes son capaces de tolerar la administración de fármacos durante períodos de tiempo relativamente largos (por ejemplo, días, semanas, meses, años o incluso durante toda la vida) y para los que el cumplimiento de la administración de fármacos tiende a ser alto. Además, la administración de fármacos por vía oral típicamente puede realizarse en entornos no clínicos (por ejemplo, en el hogar o mientras se viaja), mientras que la administración por otras vías (y/o la administración de fármacos en o cerca de su MTD) puede requerir una visita a o período de confinamiento en una institución clínica. Debido a que los métodos terapéuticos descritos en la presente pueden implicar solo la administración oral de GEM en cantidades inferiores a MTD, los sujetos que se someten a tales métodos terapéuticos pueden permanecer no institucionalizados e independientes. También de estas maneras, los métodos descritos en la presente representan un avance significativo con respecto a los métodos antitumorales previamente conocidos.

La MTD de un fármaco se considera comúnmente como la dosis más alta de un fármaco que no provoca un efecto secundario inaceptable atribuible al fármaco en su receptor. En la práctica, la MTD habitualmente se determina empíricamente, administrando dosis crecientes de un fármaco a individuos que son similares a los pacientes que se espera que reciban el fármaco clínicamente y observando los efectos secundarios experimentados por esos individuos después de la administración. La MTD puede seleccionarse observando la dosis más grande que induce un efecto secundario inaceptable en una fracción suficientemente pequeña de individuos a los que se administra (por ejemplo, menos de 1/2, 1/4 o 10% de los individuos). La MTD puede variar entre especies, entre vías de administración, por tanto es importante que la MTD se determine por la vía correspondiente para una población de individuos análoga a los pacientes que se espera que reciban el fármaco clínicamente por la misma vía.

A modo de ejemplo, para evaluar la MTD para la GEM para los ratones xenoinjertados descritos en el Ejemplo 2, administramos oralmente la composición GEMORAL descrita en el Ejemplo 1 a grupos de 5 ratones desnudos BALB/c (edad inicial 10 semanas) durante 28 días a niveles de dosis de 3 o 5 mg/kg por día, o 10 o 20 mg/kg cada dos días para los varios grupos. Se siguió la supervivencia y la pérdida de peso corporal durante el período de estudio de cuatro semanas. Se determinó que la MTD de GEMO^{r a} L para la administración diaria y cada dos días era de 3 mg/kg y 10 mg/kg, respectivamente. Todas las dosis se expresan en miligramos por kilogramo de equivalente de base libre de GEM.

Para la GEM, otros han determinado los valores de MTD para pacientes con cáncer humanos. Por ejemplo, Fossella et al. (1997, J. Clin. Oncol. 15:310-316) estimaron una MTD de 2.400 mg/m2/semana para un régimen de infusión intravenosa de GEM (2.400 mg/m2 correspondientes a 3.893 mg/60 kg para un paciente humano, igual a 64,88 mg/kg). El etiquetado de un producto de GEM comercial, comercializado con la marca GEMZAR (Eli Lilly and Co.) recomienda una dosificación intravenosa de 1.000 o 1.250 mg/m2. En detalle, la administración de la dosificación de GEMZAR se realiza a una dosis de 1.000 mg/m2, correspondiente a 1.622 mg/60 kg para un paciente humano, igual a 27,03 mg/kg, administrados los días 1 y 8 o los días 1, 8 y 15 de un ciclo de 21 días, o s una dosis de 1250 mg/m2, correspondiente a 2.027 mg/60 kg para un paciente humano, igual a 33,78 mg/kg, administrados los días 1, 8 y 15 de un ciclo de 28 días.

A modo de ejemplo, se administró GEM por vía oral a pacientes con cáncer humanos como se describe en el Ejemplo 6 en un intento de determinar la MTD. No se determinó la MTD en esos experimentos, porque no se observó toxicidad limitante de la dosis (DLT) en el intervalo de dosificación de GEM estudiado (0-80 mg). Los métodos para determinar la MTD son bien conocidos y un experto en la técnica puede determinar fácilmente la MTD para la GEM administrada por vía oral en la formulación ^g E^m ORAL. Los experimentos descritos en el Ejemplo 6 demuestran que esta MTD es superior a 80 mg en el régimen de dosificación usado, lo que significa que este valor puede usarse como una estimación (baja) de MTD para los propósitos descritos en la presente. Es decir, una fracción de esta dosis puede seleccionarse como dosis metronómica.

Como se usa en la presente, la administración "metronómica" de una formulación de GEM oral a un sujeto se refiere a la administración repetida de una formulación de GEM oral a un paciente que padece un tumor sensible a GEM, cada dosis de la formulación de GEM oral conteniendo solo una fracción de la MTD de GEM para tales sujetos, como la mitad, una tercera, una cuarta, una quinta, una sexta, una séptima, una décima, una duodécima, una decimoquinta, una vigésima o una cuadragésima parte de la MTD de GEM. El valor de MTD usado para calcular tales dosis puede ser un valor informado en la técnica para sujetos análogos, un valor determinado empíricamente para análogos de tales sujetos (por ejemplo, participantes del estudio de fase I), un valor estimado por comparación con los valores para sujetos afectados por un tumor sensible a GEM o una combinación de estos. A modo de ejemplo, en estudios descritos en la presente en ratones que llevan tejido tumoral humano xenoinjertado, se administró una dosis metronómica oral del 10 mg/kg cada dos días, representando una dosis que es de aproximadamente un sexto a una duodécimo de la MTD de GEM administrada por vía oral cada tres días a ratones similares.

La dosis oral adecuada para la administración metronómica de acuerdo con la invención, es decir, la dosis de formulación de GEM que, tras la ingestión oral, libera en una forma biodisponible menos de la mitad de la dosis máxima tolerada (MTD) de GEM para la especie, puede seleccionarse usando una fracción (como antes) de la dosis "segura" más alta conocida. Por tanto, la MTD puede estimarse observando la dosis más alta tolerada con seguridad por uno o más sujetos en las circunstancias, y esa dosis más alta tolerada con seguridad puede usarse como una estimación de la MTD para los propósitos descritos en la presente. A modo de ejemplo, se demostró que una dosis de GEM de 80 mg, administrada por vía oral tres veces por semana (los días 1, 3, 5, 8, 10 y 12) en la formulación de GEMORAL era segura para los pacientes humanos (siendo el peso corporal medio de aproximadamente 60 kg) que padecen cáncer avanzado del tracto biliar (ver el Ejemplo 6; para un peso corporal humano medio de 60 kg, la dosis de 80 mg equivale a 1,33 mg/kg). Así, por ejemplo, una fracción de esta dosis segura conocida puede usarse para la administración oral metronómica en esta población de pacientes en lugar de la MTD. Una dosis metronómica debería mostrar por lo menos algún efecto terapéutico sobre el tumor a tratar. Así, por ejemplo, siempre que se observe por lo menos algún efecto terapéutico mínimo sobre el tumor (por ejemplo, reducción en la tasa de crecimiento tumoral o contracción de la masa o volumen del tumor), por lo menos después de que se continúe la dosificación metronómica durante por lo menos un mes.

En pacientes humanos (siendo el peso corporal medio de aproximadamente 60 kg) como, en particular, pacientes que padecen uno o más de tumores de mama, vejiga, páncreas, vías biliares y pulmón de células no pequeñas, las dosis orales adecuadas de GEM de acuerdo con la invención incluyen, por ejemplo, una fracción de 80 mg, por ejemplo, 40, 27, 20, 16, 11, 8, 6,7, 5,3 o 4,0 mg, correspondiente a una fracción de 1,33 mg/kg, por ejemplo, 0,67 mg/kg, 0,45 mg/kg, 0,33 mg/kr, 0,27 mg/kg, 0,18 mg/kg, 0,13 mg/kg, 0,11 mg/kg, 0,088 mg/kg, 0,067 mg/kg. Por tanto, se proporciona GEM, para su uso en el tratamiento de un tumor, preferiblemente un tumor sensible a GEM, en un sujeto, preferiblemente un paciente humano, en donde la GEM se administra por vía oral en una unidad de dosis de no más de 50 mg (0,83 kg/mg), preferiblemente menos de 40 mg (0,67 kg/mg), preferiblemente menos de 20 mg (0,33 kg/mg). En una realización preferida, la GEM puede administrarse por vía oral en una unidad de dosis de entre 4 y 40 mg (0,067 mg/kg a 0,67 kg/mg). En algunas realizaciones, la GEM puede administrarse por vía oral a no más de 120 mg (2,00 mg/kg), no más de 100 mg (1,67 mg/kg) o no más de 80 mg (1,33 mg/kg) por dosis metronómica. Tales dosis orales pueden administrarse repetidamente, por ejemplo, cada 2 a 4 días. La GEM se formula en una composición autoemulsionante como se describe a continuación: (a) la GEM disuelta en un solvente hidrófilo; (b) un sistema surfactante que muestra un valor de equilibrio hidrófilo-lipófilo (HLB) de aproximadamente 8 a aproximadamente 17 y que incluye por lo menos un surfactante; y (c) un portador hidrófilo compatible con la solución de GEM-solvente y con el sistema surfactante. Preferiblemente, la composición comprende por lo menos tal surfactante y polietilenglicol (PEG), por ejemplo, como en la composición del Ejemplo 1. Preferiblemente, el tratamiento dura por lo menos dos o tres semanas, o por lo menos un mes, de 1 a 6 meses o incluso años, por ejemplo, de 1 a 2 años. Las dosis pueden administrarse en el régimen de dosificación descrito en el Ejemplo 6. Alternativamente, las dosis orales metronómicas adecuadas de GEM pueden determinarse determinando la MTD (o una dosis libre de DLT utilizable como una estimación baja de la MTD) para un régimen de dosificación deseado (como se hizo en el Ejemplo 6 para el régimen de dosificación descrito ahí) y seleccionando una fracción de la MTD (o la dosis libre de DLT determinada más alta) como la dosis adecuada para el régimen deseado.

La administración metronómica se refiere coloquialmente a administraciones de dosis repetidas que generalmente proceden en un programa regular sin interrupciones significativas o "vacaciones de fármacos", ya sea de forma indefinida o durante un período de tiempo prolongado. Como se usa en la presente, la administración oral "metronómica" de GEM significa administraciones repetidas de una formulación oral de MTD fraccionada de GEM en un programa regular no interrumpido. Dicho programa puede incluir frecuencias de dosificación como programas de dosificación de tres veces al día, dos veces al día, diariamente (QD), cada dos días (es decir, Q2D), cada tres días (es decir, Q3D), cada cuatro días (es decir, Q4D), cada cinco días (es decir, Q5D), semanal, dos veces a la semana o tres veces a la semana, por ejemplo. El esquema de dosificación puede mantenerse durante un período de tiempo prolongado o durante el mayor número de dosis que se desee y que el sujeto sea capaz de tolerar. Deseablemenet, tal dosificación metronómica puede ejercer un efecto terapéutico antitumoral (por ejemplo, reducción, cese o inversión del crecimiento tumoral) durante un periodo prolongado, como meses o años (o indefinidamente).

La forma física de la formulación de GEM oral administrada metronómicamente, como se describe en la presente, no es crítica. Puede emplearse sustancialmente cualquier forma de dosificación oral que suministre GEM en una forma biodisponible al tracto gastrointestinal del sujeto en las cantidades y en los programas descritos en la presente, como cualquiera de las formas de dosificación descritas en la Solicitud de patente publicada de Estados Unidos 2010/0273730. Preferiblemente, la formulación de GEM oral se administra en forma de cápsula que contiene el material descrito en la solicitud de patente publicada de Estados Unidos 2010/0273730. Como ejemplo, dicho material podría tener la composición descrita en la tabla del Ejemplo 1.

La administración metronómica de una formulación oral de GEM a un sujeto puede lograrse, por ejemplo, administrando una sola cápsula o cápsula blanda que contenga la dosis completa, administrando múltiples cápsulas o cápsulas blandas que contengan cada una porción de la dosis completa, administrando un comprimido, o administrando una emulsión líquida al sujeto. La administración oral metronómica de GEM puede usarse como monoterapia para tratar (por ejemplo, inhibir el crecimiento, disminuir el tamaño o eliminar) un tumor. La administración oral metronómica de GEM también puede realizarse como tratamiento complementario antes, después o solapado con otro tratamiento antitumoral usando GEM u otro agente antitumoral. A modo de ejemplo, un sujeto puede tratarse con una cantidad cercana a la MTD (por ejemplo, >1/2 MTD) de GEM u otro agente antitumoral y, tras la interrupción de dicho tratamiento, la administración oral metronómica de GEM puede realizarse como se describe en la presente. Alternativamente, la administración oral metronómica de GEM puede iniciarse al mismo tiempo que un tratamiento cercano a la MTD y durar más allá de la interrupción del mismo. Como otra alternativa más, puede realizarse la administración oral metronómica de GEM y puede realizarse otro tratamiento antitumoral durante solo una parte del período durante el cual tiene lugar la administración oral metronómica de GEM. Cuando la administración oral metronómica de GEM se realiza como tratamiento complementario, el otro tratamiento puede ser uno que implique la administración oral de GEM u otro agente antitumoral, uno que implique un tratamiento no oral (por ejemplo, inyección intravenosa o intratumoral) de GEM u otro agente antitumoral, o un tratamiento no farmacológico (por ejemplo, cirugía de resección tumoral).

Composiciones farmacéuticas orales autoemulsionantes

La materia descrita en la presente incluye una composición farmacéutica autoemulsionante (SEP) de GEM para administración oral. Además de GEM, la composición de SEP incluye uno o más solventes para disolver GEM para formar una solución de GEM-solvente. La composición de SEP también incluye un sistema surfactante. El sistema surfactante es uno o más surfactantes que muestran un valor de equilibrio hidrófilo-lipófilo (HLB) que varía de aproximadamente 8 a aproximadamente 17. En la composición de SEP, la solución de GEM-solvente y el sistema surfactante se combinan con uno o más portadores hidrófilos que son compatibles tanto con la solución de GEM-solvente como con el sistema surfactante. Cuando se administra por vía oral en la composición de SEP oral, se observa una excelente biodisponibilidad de GEM. Asombrosamente, las dosis de GEM que se administran de este modo por vía oral pueden proporcionar las respuestas terapéuticas tumorales beneficiosas descritas en la presente. Las composiciones de SEP orales de GEM también muestran una buena estabilidad en almacenamiento.

Por consiguiente, en un aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica autoemulsionante oral para su administración a humanos, que comprende:

(a) una cantidad terapéuticamente eficaz de una GEM o una sal farmacéuticamente aceptable de GEM, siendo la cantidad una fracción (es decir, menos de la mitad) de la MTD para GEM cuando se administra por vía oral a humanos en una composición de SEP idéntica (o sustancialmente similar);

(b) uno o más solventes capaces de disolver el fármaco o la sal para formar una solución de GEM-solvente; (c) un sistema surfactante que comprende uno o más surfactantes, el sistema surfactante mostrando un valor de HLB de aproximadamente 8 a aproximadamente 17; y

(d) uno o más portadores hidrófilos que sean compatibles con la solución de GEM-solvente y el sistema surfactante.

El término "autoemulsionante" se usa en la presente en el mismo sentido que en la publicación de solicitud de patente de Estados Unidos Número 2010/0273730. Es decir, el término se usa para describir una formulación que produce una emulsión fina de aceite y agua cuando la formulación entra en contacto con un medio acuoso (como cuando se combina con agua a 37 grados Celsius y 1 atmósfera de presión con agua bajo agitación mecánica suave, como agitación o removido suave). Preferiblemente, la composición de SEP forma una emulsión con un tamaño de partícula medio de menos de 800 nm (más preferiblemente menos de 400 nm, 200 nm o 100 nm, por ejemplo, aproximadamente 10 nm) cuando entra en contacto con dicho medio acuoso.

Como se usa en la presente, el término "cantidad terapéuticamente eficaz" significa una dosis de GEM que es eficaz para ejercer un efecto terapéutico, particularmente una dosis del fármaco que, después de la absorción en el cuerpo a través de las paredes del tracto gastrointestinal (GI), ejerce una efecto terapéutico antitumoral detectable en un tumor sensible a GEM del sujeto al que se administra la composición. Los expertos en la técnica entienden que las cantidades de GEM incluidas en la composición varían con la situación particular, incluyendo la especie, tamaño, edad y condición del sujeto, por ejemplo.

Como se usa en la presente, el término "sal farmacéuticamente aceptable" incluye sales de adición de ácido que retienen sustancialmente la eficacia biológica y las propiedades de GEM. Tales sales de adición de ácido pueden formarse con ácidos inorgánicos como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares, y ácidos orgánicos como ácido acético, ácido propiónico, ácido pirúvico, ácido maleico, ácido malónico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido p-toluensulfónico, ácido salicílico, ácido trifluoroacético y similares.

En las composiciones de SEP, se usan uno o más solventes para disolver GEM o una sal de GEM para formar una solución de GEM-solvente. Preferiblemente, cada uno de los solventes puede disolver aproximadamente 1 parte (en peso) de GEM o sal en menos de 100 partes (o 30, 10 o 1 partes) del solvente. Los ejemplos de solventes adecuados incluyen agua, etanol, polietilenglicol (PEG), isopropanol (IPA), 1,2-propanodiol (propilenglicol), glicerol, ácido acético y combinaciones de estos. A modo de ejemplo, el o los solventes pueden estar presentes en una cantidad que varía de aproximadamente el 2,5% a aproximadamente el 60% (p/p) en base al peso de la composición de SEP.

El sistema surfactante de la composición de SEP incluye uno o más surfactantes y muestra un valor de HLB que varía de aproximadamente 8 a aproximadamente 17. El valor de HLB es conocido en la técnica para clasificar los surfactantes de acuerdo con el equilibrio entre las porciones hidrófila y lipófila del agente surfactante; cuanto mayor es el valor de HLB, más hidrófilo es el agente surfactante; y cuanto menor es el valor de HLB, menos hidrófilo es el agente surfactante. En las composiciones de SEP puede usarse un solo surfactante que tenga un valor de HLB que varíe de aproximadamente 8 a aproximadamente 17. Alternativamente, puede usarse una combinación de un surfactante con HLB alto y un surfactante con HLB bajo. Las elecciones y las identidades precisas de los surfactantes no son críticas siempre que el surfactante o la combinación de surfactantes presenten un valor de HLB en el intervalo de aproximadamente 8 a aproximadamente 17. Los surfactantes adecuados incluyen surfactantes catiónicos, aniónicos, y no iónicos. Ejemplos de surfactantes adecuados incluyen polisorbato, poloxámeros, oleoil polioxilglicéridos (como los que se venden con el nombre comercial LABRAFIL™ M1944CS), linoleoil polioxilglicéridos (como LABRAFIL™ M2125CS), caprilocaproil polioxilglicéridos (como Labrasol), derivados de aceite de ricino de polioxietileno (como aceite de ricino hidrogenado PEG 40, los que se venden con el nombre comercial CREMOPHOR™ EL o Cr EMOPHOR™ RH), éteres de alquilo de polioxietileno (como los que se venden con el nombre comercial BRIJ™), ésteres de ácidos grasos de sorbitán (como los que se venden con el nombre comercial SPANS™), monooleato de glicerilo (como los que se venden con el nombre comercial PECEOL™), monolinoleato de glicerilo (como los que se venden con el nombre comercial MAISINE™ 35-1), triglicéridos de cadena media, oleato de poliglicerilo (como los que se venden con el nombre comercial PLUROL OLFIQUF™ CC497), lauroil polioxilglicérido (como los vendidos con el nombre comercial GELUCIRE™ 44/14), estearoil polioxilglicéridos (como los que se venden con el nombre comercial GELUCIRE™ 50/13), dicaprilocaprato de propilenglicol (como los que se venden con el nombre comercial LABRAFAC™ PG), laurato de propilenglicol (como los que se venden con el nombre comercial LAUROGLYCOL™ FCC), monolaurato de propilenglicol (como los que se venden con el nombre comercial LAUROGLYCOL™ 90), caprilato de propilenglicol (como los que se venden con el nombre comercial CAPRYOL™ PGMC) y monocaprilato de propilenglicol (como los que se venden con el nombre comercial CAPRYOL™ 90). Estos surfactantes pueden usarse solos o en combinación, sujeto a la característica HLB descrita en la presente. Más preferiblemente, el o los surfactantes que tienen un valor de HLB de aproximadamente 9 a aproximadamente 13, incluso más preferiblemente de aproximadamente 10 a aproximadamente 12, se incluyen en la composición de SEP. Por ejemplo, la composición de SEP puede incluir una mezcla de polisorbato y polioxilglicéridos de oleoilo como sistema surfactante. La identidad y la cantidad precisas del sistema surfactante no son críticas, pero el sistema está presente preferiblemente en una cantidad de aproximadamente el 20% a aproximadamente el 75% (p/p) en base al peso de la composición de SEP.

La composición de SEP incluye uno o más portadores hidrófilos que son compatibles con la solución de GEM-solvente y el sistema surfactante. Como se usa en la presente, "compatible" significa que el portador o portadores hidrófilos pueden mezclarse o dispersarse con la solución de GEM-solvente y el sistema surfactante para formar una solución homogénea estable sin un mezclado extenso u otro procesamiento. Preferiblemente, cada portador hidrófilo puede combinarse con los otros componentes de la composición de SEP en cantidades tales que 1 parte de GEM o una sal de GEM se combine homogéneamente con aproximadamente de 10 a 10.000 partes (en peso) del portador hidrófilo. Los ejemplos de portadores hidrófilos adecuados incluyen polisorbato, etanol, polietilenglicoles (PEG, como PEG200, PEG300, PEG400, PEG600, PEG1000, PEG2000, PEG3000, PEG4000, PEG6000 o PEG8000), glicerol, 1,2-propanodiol (propilenglicol), carbonato de propileno (PC) y éter monoetílico de dietilenglicol (como el que se vende con el nombre comercial TRANSCUTOL™ HP). El portador o portadores hidrófilos están presentes preferiblemente en una cantidad de aproximadamente el 2% a aproximadamente el 60% (p/p) en base al peso de la composición de SEP.

La composición de SEP puede incluir, opcionalmente, otros componentes, como un antioxidante (por ejemplo, succinato de D-a-tocoferil polietilenglicol 1000, TPGS). El pH de la composición de SEP se ajusta preferiblemente para que tenga un pH por encima de la constante de disociación (pKa) de GEM (es decir, por encima de pH 4,0), como un pH de 5-8.

Los componentes y cantidades de la composición de SEP deben seleccionarse (por ejemplo, empíricamente) para que muestre una buena estabilidad durante el almacenamiento, lo que particularmente significa que no haya una separación de fases sustancial, precipitación de material, cambio de textura o degradación de la GEM contenida en el mismo durante un período de almacenamiento seleccionado, como un período de uno, tres, seis o doce meses. "Sin degradación sustancial de GEM" significa que la cantidad de GEM que se vuelve terapéuticamente inactiva en la composición después de ser almacenada durante el período de tiempo seleccionado es menos de aproximadamente el 20%, y preferiblemente menos de aproximadamente el 10%, de la cantidad original.

En algunas realizaciones, el o los solventes y el o los portadores hidrófilos están particularmente presentes juntos en una cantidad que varía de aproximadamente el 25% a aproximadamente el 65% (p/p), más particularmente de aproximadamente el 40% a aproximadamente el 60% (p/p), e incluso más particularmente de aproximadamente el 50% (p/p), en base al peso de la composición farmacéutica de la invención. Específicamente, el o los solventes y el o los portadores hidrófilos están presentes en una proporción de aproximadamente 1:0,1 a aproximadamente 1:9 en peso en la composición farmacéutica de la invención. Más específicamente, si la composición farmacéutica de la invención está en forma de solución oral, el o los solventes y el o los portadores hidrófilos están presentes en una proporción de aproximadamente 1:0,1 a aproximadamente 1:2 en peso en la composición farmacéutica de la invención; y si la composición farmacéutica de la invención está en forma de cápsula, el o los solventes y el o los portadores hidrófilo están presentes en una proporción de aproximadamente 1:1a aproximadamente 1:9 en peso en la composición farmacéutica de la invención. Por otro lado, el o los portadores hidrófilos y el sistema surfactante están particularmente presentes juntos en una cantidad que varía de aproximadamente el 50% a aproximadamente el 95% (p/p), más particularmente de aproximadamente el 65% a aproximadamente el 85% (p/p), e incluso más particularmente de aproximadamente el 75% (p/p), en base al peso de la composición farmacéutica de la invención. Específicamente, el o los portadores hidrófilos y el sistema surfactante están presentes en una proporción de aproximadamente 1:0,3 a aproximadamente 1:32,5, más específicamente de aproximadamente 1:1 a aproximadamente 1:20, e incluso más específicamente de aproximadamente 1:1,5 en peso en la composición farmacéutica de la invención.

En una realización, el o los solventes, el o los portadores hidrófilos y el sistema surfactante están presentes en una proporción de aproximadamente 2:3:4,5 en peso en la composición farmacéutica de la invención.

En una determinada realización, la composición farmacéutica automicroemulsionante de la invención comprende gemcitabina o su sal farmacéuticamente aceptable, agua, glicerol, PEG, polisorbato y oleoil polioxilglicéridos. En un ejemplo específico, la gemcitabina está presente en una cantidad de aproximadamente el 2,00% (p/p) en base al peso de la composición farmacéutica; el agua está presente en una cantidad de aproximadamente el 20,00% (p/p) en base al peso de la composición farmacéutica; el glicerol y el PEG están presentes juntos en una cantidad de aproximadamente el 32,30% (p/p) en base al peso de la composición farmacéutica; y el polisorbato y los oleoil polioxilglicéridos están presentes juntos en una cantidad de aproximadamente el 45,70% (p/p) en base al peso de la composición farmacéutica.

En una determinada realización, la composición farmacéutica autoemulsionante de la invención comprende gemcitabina o su sal farmacéuticamente aceptable, agua, propilenglicol, PEG, polisorbato y oleoil polioxilglicéridos. En un ejemplo específico, la gemcitabina está presente en una cantidad de aproximadamente el 2,00% (p/p) en base al peso de la composición farmacéutica; el agua está presente en una cantidad de aproximadamente el 20,00% (p/p) en base al peso de la composición farmacéutica; el propilenglicol y el PEG están presentes juntos en una cantidad de aproximadamente el 32,30% (p/p) en base al peso de la composición farmacéutica; y el polisorbato y los oleoil polioxilglicéridos están presentes juntos en una cantidad de aproximadamente el 45,70% (p/p) en base al peso de la composición farmacéutica.

En una determinada realización, la composición farmacéutica autoemulsionante de la invención comprende gemcitabina o su sal farmacéuticamente aceptable, agua, glicerol, PEG, polisorbato, oleoil polioxilglicéridos y TPGS. En un ejemplo específico, la gemcitabina está presente en una cantidad de aproximadamente el 1,98% (p/p) en base al peso de la composición farmacéutica; el agua está presente en una cantidad de aproximadamente el 19,8% (p/p) en base al peso de la composición farmacéutica; el glicerol y el PEG están presentes juntos en una cantidad de aproximadamente el 31,98% (p/p) en base al peso de la composición farmacéutica; el polisorbato y los oleoil polioxilglicéridos están presentes juntos en una cantidad de aproximadamente el 45,25% (p/p) en base al peso de la composición farmacéutica; y el TPGS está presente en una cantidad de aproximadamente el 0,99% (p/p) en base al peso de la composición farmacéutica.

Las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden administrarse por vía oral en cualquier forma de dosificación aceptable por vía oral, incluyendo cápsulas, comprimidos, polvos o gránulos recubiertos, que pueden contener excipientes farmacéuticos conocidos en la técnica como aglutinantes, cargas, cargas/aglutinantes, adsorbentes, agentes humectantes, disgregantes, lubricantes y similares según sea necesario.

En determinadas realizaciones de la invención, la composición farmacéutica se encapsula en una cápsula blanda o dura sellada. La cápsula puede ser de cualquier tipo conocido que se disuelva en una región particular del tracto GI, por ejemplo, liberando allí su contenido. Un ejemplo de una cápsula de este tipo es una cápsula de gelatina blanda o dura con recubrimiento entérico. El recubrimiento entérico, como se conoce, es un recubrimiento con una sustancia o una combinación de sustancias que resiste la disolución en el líquido gástrico pero se deshace en el intestino.

La composición de SEP descrita en la presente puede prepararse mezclando GEM con uno o más solventes, el uno o más portadores hidrófilos y el sistema surfactante usando cualquier método estándar usado comúnmente en la técnica en vista de la presente divulgación. En algunas realizaciones, la GEM se mezcla con uno o más solventes y uno o más portadores hidrófilos primero y luego se mezcla adicionalmente con el sistema surfactante. Los detalles de la preparación se describen en los ejemplos siguientes.

Las composiciones de SEP de GEM se describen en la publicación de solicitud de patente de Estados Unidos número 2010/0273730 de Innopharmax, Inc. (ver, por ejemplo, "Formulación IV" en esa publicación), y estas formulaciones, ajustadas para administrar cantidades de dosificación metronómica, pueden usarse en los métodos descritos en la presente.

Ejemplos

La materia de esta divulgación se describe ahora con referencia a los siguientes Ejemplos. Estos Ejemplos se proporcionan únicamente con propósitos ilustrativos.

En los ejemplos se usan las siguientes abreviaturas:

"GEM" significa gemcitabina.

"5FU" significa 5-fluorouracilo.

"Q3D" tiene su significado tradicional de cada tres días.

"Q2D" tiene su significado tradicional de cada dos días.

"GEMORAL" significa una preparación autoemulsionante de GEM formulada para administración oral, como se describe en la presente.

Ejemplo 1

Preparación de GEMORAL

La composición GEMORAL descrita en la presente tenía la siguiente composición, expresada como cantidades por dosis unitaria para una formulación destinada a contener 80 mg de base libre de GEM por dosis unitaria:

La composición de GEMORAL descrita en la presente se elaboró de la siguiente manera. Se pesaron glicerina y PEG400 y se mezclaron en un recipiente con la parte superior abierta lo suficiente como para que se formara un vórtice visible en la superficie del líquido. El mezclado continuó por lo menos hasta que los componentes dejaron de ser distinguibles por separado. A esta solución, se le añadió gradualmente la cantidad indicada de GEM HCl a la mezcla de glicerina/PEG400, mientras se continuaba mezclando, en el transcurso de aproximadamente cinco minutos, y se continuó mezclando durante por lo menos aproximadamente 15 minutos después de la adición. Mientras continuaba el mezclado, el pH de la mezcla se ajustó a 6,00 ± 0,10 mediante la adición de NaOH 5N. Se añadió agua a la mezcla mientras continuaba la agitación. La agitación continuó durante diez minutos adicionales y luego se interrumpió. Todo los pasos hasta este punto se realizaron a temperatura ambiente (aproximadamente 20 grados Celsius) usando reactivos que estaban a aproximadamente la temperatura ambiente, sin control de temperatura impuesto.

Se combinaron LABRAFIL® y TWEEN® 80 (surfactantes) y se mezclaron hasta la homogeneidad aparente a 30 grados Celsius lo suficiente como para que se formara un vórtice visible en la superficie del líquido. Mientras continuaba el mezclado, la mezcla que contenía GEM HCl se combinó con la mezcla de surfactante y se continuó mezclando durante aproximadamente 30 minutos mientras las temperaturas de la mezcla se controlaban a 30 grados Celsius, y luego se detuvo el mezclado y la mezcla combinada (la composición de GEMORAL) se envasó (por ejemplo, en viales) y se almacenó (por ejemplo, a 20-25 grados Celsius).

Para algunos experimentos, la composición de GEMORAL se envasó y almacenó en viales individuales, cada uno de los cuales contenía aproximadamente 4,6 gramos de composición de GEMORAL. Para otros experimentos, se almacenaron a granel cantidades más grandes de la composición de GEMORAL antes de su uso. La formulación de GEMORAL es adecuada para su inclusión en varias formas de dosificación, incluyendo las cápsulas de tipo gel blando. Por ejemplo, una cantidad de la formulación de GEMORAL que contiene 40 mg de GEM (en base libre) puede incorporarse sola, o mezclada con otros excipientes en una cápsula de gel blanda para administración oral.

Para elaborar la solución de dosificación (1 y 0,3 mg/ml de GEM en base libre) usada en los estudios de ratones xenoinjertados descritos en la presente, la formulación de GEMORAL descrita anteriormente se llevó a temperatura ambiente (aproximadamente 25 grados Celsius), combinada con agua desionizada con agitación a temperatura ambiente.

Para elaborar una solución de dosificación oral de 10 mg/kg de GEM, se combinaron 6,289 gramos de una solución de GEMORAL de 1,6 mg/kg (preparada diluyendo 80 mg de formulación de GEMORAL con agua desionizada para proporcionar una composición que contenía 1,6 mg/ml de GEM en base libre) con agua en un matraz aforado de 10 mililitros. Después de agitar, el volumen se llevó a 10,0 mililitros (para proporcionar una solución de 1 mg de GEM/ml) y la solución se administró por vía oral a ratones xenoinjertados individuales basándose en el peso corporal de los ratones individuales en el plazo de cuatro horas después de la preparación.

Para elaborar una solución de dosificación oral de GEM de 3 mg/kg, se combinaron 1,887 gramos de la solución de GEMORAL de 1,6 mg/kg con agua en un matraz aforado de 10 mililitros. Después de la agitación, el volumen se llevó a 10,0 mililitros (para proporcionar una solución de 0,3 mg de GEM/ml) y la solución se administró por vía oral a ratones xenoinjertados individuales basándose en el peso corporal del ratón individual en el plazo de cuatro horas después de la preparación.

Ejemplo 2

Eficacia in vivo de la inyección de alta dosis de GEM y/o la administración de GEMORAL en un modelo de ratón xenoinjertado de colangiocarcinoma humano.

Este ejemplo describe un estudio en el que los efectos de la gemcitabina sobre ratones en los que se xenoinjertaron porciones de un colangiocarcinoma derivado de un paciente humano. Los ratones xenoinjertados se trataron luego con uno de los cinco regímenes de tratamiento y se observaron los resultados.

Para preparar los ratones xenoinjertados usados en el estudio, se inyectaron fragmentos primarios de colangiocarcinoma humano obtenidos de pacientes humanos en ratones desnudos macho BALB/c "stock". Posteriormente, se recogieron fragmentos tumorales (aproximadamente 2-3 milímetros de diámetro) de los ratones "stock" y se inocularon por vía subcutánea en el costado derecho de otros ratones desnudos macho BALB/c. Luego se observó el desarrollo tumoral en los ratones inoculados, y se seleccionaron 40 de estos ratones para su inclusión en el estudio cuando el volumen del tumor alcanzó aproximadamente 180 milímetros cúbicos (el volumen se evaluó multiplicando la longitud del tumor por 1/2 (anchura del tumor al cuadrado) (es decir, LxW/2), midiendo la longitud y la anchura con un calibre). Los ratones se dividieron en 5 grupos de 8 ratones cada uno para el estudio, todos los ratones de cada grupo tenían tumores de aproximadamente el mismo tamaño. El día en el que se administró la primera dosis a los ratones se designó "Día 1" del estudio, y el estudio continuó durante 76 días. Los ratones se dividieron en los Grupos 1, 2, 3, 4 y 5. Los ratones de cada grupo se trataron de manera idéntica.

A los ratones del Grupo 1 se les inyectaron por vía intraperitoneal 60 mg/kg de GEM los días 1, 4, 7 y 10 del estudio (es decir, Q3D x 4) y no se trataron más posteriormente.

A los ratones del Grupo 2 se les inyectaron por vía intraperitoneal 60 mg/kg de GEM los días 1, 4, 7 y 10 del estudio (es decir, Q3D x 4). A partir del día 13 del estudio, a los ratones se les administraron por vía oral 10 mg/kg de GEM en la composición GEMORAL (en lo sucesivo "10 mg/kg de GEMORAL") cada dos días (es decir, Q2D x 32) hasta el final del estudio.

A los ratones del Grupo 3 se les inyectaron por vía intraperitoneal 60 mg/kg de GEM los días 1, 4, 7 y 10 del estudio (es decir, Q3D x 4). También a partir del día 1 del estudio, a los ratones se les administraron por vía oral 10 mg/kg de GEMORAL cada dos días (es decir, Q2D x 38) hasta el final del estudio.

A los ratones del Grupo 4 se les administraron por vía oral 10 mg/kg de GEMORAL en días alternos (es decir, Q2D x 38), comenzando el día 1 del estudio y extendiéndose hasta el final del estudio.

Los ratones del Grupo 5 fueron controles y no se les administró GEM. Se les inyectó por vía intraperitoneal solución salina los días 1, 4, 7 y 10 del estudio (es decir, Q3D x 4). A partir del día 13 del estudio, a los ratones se les administró por vía oral agua destilada desionizada cada dos días (es decir, Q2D x 32) hasta el final del estudio.

El estudio continuó hasta el día 76 y se observaron las pérdidas de peso corporal entre los ratones de los varios Grupos. Para cada uno de los Grupos 1 y 2, 4 de 8 ratones estaban muertos el día 76 ("muertos" incluía tanto ratones que habían muerto como ratones que presentaban un tamaño de tumor >1000 milímetros cúbicos). Las tasas de supervivencia de los ratones usados en el estudio se muestran en la Figura 2. Para el Grupo 3, 6 de 8 ratones estaban muertos el día 10. Para el Grupo 4, el tratamiento fue bien tolerado, como lo demuestra el hecho de que todos los ratones sobrevivieron hasta el día 76 (en el Grupo 5 de control, por el contrario, todos los ratones murieron alrededor de día 62).

Como se ilustra en la Figura 1, los ratones de cada uno de los Grupos 1, 2, 3 y 4 mostraron una regresión tumoral significativa (es decir, respuesta antitumoral), en comparación con los ratones de control del Grupo 5.

En la Figura 1 se muestran los efectos de los varios tratamientos sobre el volumen tumoral. En comparación con el grupo de vehículo (Grupo 5), los ratones de los Grupos 1, 2, 3 y 4 mostraron respuestas antitumorales significativas. en la Tabla 1 se indican valores que reflejan respuestas antitumorales, en comparación con el tratamiento con vehículo (% de T/C, calculado como la proporción entre el volumen tumoral medio en el grupo de tratamiento y el volumen tumoral medio en el grupo de control {Grupo 5}, expresado como porcentaje) en diferentes días de estudio. Los ratones del grupo 1 (es decir, MTD de GEM, 60 mg/kg Q3D x 4; dosis acumulada = 240 mg/kg), mostraron una respuesta antitumoral significativa (T/C = 52%) el día 14. Los ratones de los Grupos 2 y 4 mostraron respuestas similares (valores de T/C del 58% y 57%) el día 14; cabe señalar que para el día 14 la dosis acumulada de GEM para el Grupo 4 era solo de aproximadamente el 25% de la del Grupo 1.

Los animales del Grupo 1 mostraron un crecimiento tumoral significativo después de completar la dosificación programada (es decir, después del día 11) en el grupo 1. Por el contrario, los animales de los Grupos 2 y 4 mostraron un volumen tumoral menor desde el día 42 al 76 que el volumen tumoral original el día 0. GEMORAL como agente individual o después del tratamiento con GEM-MTD, produjo una respuesta antitumoral significativa en comparación con el tratamiento con vehículo (T/C = 3% para cada uno de los Grupos 2 y 4, P<0,05 el día 76). Además, el volumen tumoral en los Grupos 2 y 4 demostró una inhibición del crecimiento tumoral significativamente mayor que un programa de MTD (Grupo 1) desde el día 42 al 76 (p<0,05).

Tabla 1. Respuesta antitumoral de los tratamientos frente a xenoinjertos de colangiocarcinoma derivado de acientes

Los ratones con xenoinjerto tumoral que recibieron GEMORAL además de GEM inyectado (Grupos 2 y 3), o que recibieron GEMORAL solo (Grupo 4), mostraron una mayor regresión tumoral que los ratones que recibieron GEM inyectado solo (Grupo 1). Los ratones que recibieron gemcitabina tanto oral como inyectada durante los primeros diez días del estudio mostraron una mayor mortalidad que los que recibieron solo el fármaco inyectado (un efecto potencial de toxicidad del fármaco). Los ratones que recibieron solo gemcitabina oral mostraron una menor mortalidad que los que recibieron solo el fármaco inyectado o tanto oral como inyectado, hasta el final del estudio.

Estos resultados indican que la gemcitabina metronómica oral puede usarse eficazmente, junto con gemcitabina inyectada, o sin gemcitabina inyectada, para inducir la regresión de por lo menos los colangiocarcinomas.

Ejemplo 3

Eficacia in vivo de la inyección de GEM de dosis alta y/o la administración de GEMORAL en un segundo modelo de ratón xenoinjertado de colangiocarcinoma humano.

El Ejemplo 3 es un estudio en el que los efectos de GEM sobre ratones en los que se xenoinjertaron células de la línea celular de colangiocarcinoma humano HuCCT1. Luego, los ratones xenoinjertados se trataron con uno de los cinco regímenes de tratamiento y se observaron los resultados durante el período de estudio de 90 días.

Para preparar los ratones xenoinjertados usado sen el estudio, se trasplantaron 1 x 106 células humanas de colangiocarcinoma HuCCT1 por vía subcutánea en el costado derecho de ratones desnudos BALB/c machos de 6 semanas de edad. El crecimiento del tumor se observó una vez a la semana y el volumen tumoral se midió como L x W2/2 mediante un calibre. Luego se observó el desarrollo tumoral en los ratones xenoinjertados, y se seleccionaron 40 de tales ratones para su inclusión en el estudio cuando el volumen de su tumor alcanzó aproximadamente 124 milímetros cúbicos. Los ratones se dividieron en 5 grupos de 8 ratones cada uno para el estudio. El día en el que se administró la primera dosis a los ratones se designó "Día 0" del estudio, y el estudio continuó durante 90 días.

A los ratones del Grupo 1 se les inyectaron por vía intraperitoneal 60 mg/kg de GEM los días 0, 3, 6 y 9 del estudio (es decir, Q3D x 4) y no se trataron más a partir de entonces.

A los ratones del Grupo 2 se les inyectaron por vía intraperitoneal 60 mg/kg de GEM los días 0, 3, 6 y 9 del estudio (es decir, Q3D x 4). A partir del día 13 del estudio, a los ratones se les administraron por vía oral 10 mg/kg de GEM en la composición de GEMORAL (en lo sucesivo "10 mg/kg de GEMORAL") cada dos días (es decir, Q2D x 40) hasta el final del estudio.

A los ratones del Grupo 3 se les inyectaron por vía intraperitoneal 60 mg/kg de GEM los días 0, 3, 6 y 9 del estudio (es decir, Q3D x 4). También a partir del día 1 del estudio, a los ratones se les administraron por vía oral 10 mg/kg de GEMORAL cada dos días (es decir, Q2D x 46) hasta el final del estudio.

A los ratones del Grupo 4 se les administraron por vía oral 10 mg/kg de GEMORAL cada dos días (es decir, Q2D x 46), comenzando el día 1 del estudio y extendiéndose hasta el final del estudio.

Los ratones del Grupo 5 fueron controles y no se les administró GEM. Se les inyecto por vía intraperitoneal solución salina los días 0, 3, 6 y 9 del estudio (es decir, Q3D x 4). A partir del día 13 del estudio, a los ratones se les administró por vía oral agua destilada desionizada cada dos días (es decir, Q2D x 40) hasta el final del estudio.

El estudio continuó hasta el día 90 y se observaron pérdidas de peso corporal entre los ratones de los varios Grupos. En el Grupo 3, todos los ratones perdieron más del 20% de peso corporal para el día 12. El tratamiento se toleró en todos los demás grupos de tratamiento (es decir, Grupos 1, 2 y 4, como se indica por las tasas de supervivencia mostradas en la Figura 4. La tasa de supervivencia se calculó usando el análisis de Kaplan-Maier y las tasas de supervivencia en el día 90 fueron del 50% (4/8 ratones) para el Grupo 1, 87,5% (7/8 ratones) para el Grupo 2, 0% (0/8 ratones) para el Grupo 3, 87,5% (7/8 ratones) para el Grupo 4 y 37,5% (3/8 ratones) para el Grupo 5. El tiempo medio de supervivencia (MST) para los ratones del Grupo 1, 2, 3, 4 y 5 fue de 69, >90, 8, >90 y 79 días, respectivamente. Las MST para ratones de los Grupos 2 y 4 se prolongaron marginalmente de manera significativa en comparación con el tratamiento con vehículo (Grupo 5). La MST no fue significativamente diferente entre los ratones de los Grupos 1, 3 y 5.

Como se ilustra en la Figura 3, los ratones de cada uno de los Grupos 1, 2, 3 y 4 mostraron una regresión tumoral significativa (es decir, respuesta antitumoral), en comparación con los ratones de control del Grupo 5. En la Tabla 2 se indican valores que reflejan respuestas antitumorales, en comparación con el tratamiento con vehículo (T/C%) en diferentes días de estudio. Los ratones de los Grupos 1, 2 y 4 mostraron respuestas antitumorales significativas desde el día 6 al día 30, desde el día 6 al día 90, y desde el día 12 al día 76, respectivamente, y los valores máximos de inhibición del crecimiento tumoral fueron del 47% el día 27 para el Grupo 1, del 27% el día 37 para el Grupo 2 y del 36% el día 37 para el Grupo 4. Cabe señalar que para el día 12 la dosis acumulada de GEM para el Grupo 4 fue solo de aproximadamente el 25% que la del Grupo 1.

T l 2. R ni m r l l r mi n fr n x n in r l n i r in m H T1.

En este estudio, descubrimos que la inyección intraperitoneal de GEM a aproximadamente la MTD podría inhibir significativamente el crecimiento del tumor de colangiocarcinoma in vivo, ya sea que se administre o no una dosis oral metronómica de GEM junto con o después de la inyección; la GEM metronómica oral también podría inhibir significativamente el crecimiento tumoral de colangiocarcinoma in vivo en ausencia de inyección de GEM. Sin embargo, la inyección de GEM no siguió mostrando una actividad antitumoral significativa después de que se interrumpieron las inyecciones de GEM, como lo indica el crecimiento tumoral observado en ratones del Grupo 1 después del día 30. Se sabe que la recaída del tumor sigue a la quimioterapia clínica, por lo menos algunas veces, y estos datos parecen reflejar esa experiencia. Evaluamos si la GEM metronómica oral combinada con la terapia GEM parenteral podría reprimir el crecimiento del tumor durante un período de tiempo más largo. Los resultados indican que la GEM metronómica oral combinada con la terapia de GEM parenteral amplio significativamente la tiene una inhibición del crecimiento tumoral, con respecto a la monoterapia de GEM inyectada desde por lo menos el día 34 al 58. Además, la monoterapia de GEM metronómica oral (es decir, Grupo 4) o cuando se sigue la terapia con GEM parenteral (es decir, el Grupo 2) produjo una actividad antitumoral significativa en comparación con el tratamiento con vehículo hasta por lo menos el día 76 y el día 90, respectivamente. Además, la monoterapia con GEM metronómica oral, ya sea como monoterapia o después de la terapia con GEM parenteral, prolongó significativamente el tiempo de supervivencia en comparación con el tratamiento con vehículo.

En resumen, los resultados que se muestran en este ejemplo indican que la monoterapia con GEM metronómica oral, ya sea como monoterapia o después de la terapia con GEM parenteral, inhibió el crecimiento tumoral de colangiocarcinoma HuCCT1 y prolongó el tiempo de supervivencia in vivo, lo que sugiere que estas terapias pueden proporcionar un nuevo enfoque para tratar por lo menos los colangiocarcinomas. y otros tumores susceptibles a GEM.

Ejemplo 4

Eficacia in vivo de inyección de GEM de dosis alta y/o la administración de GEMORAL en un modelo de ratón xenoinjertado de cáncer de páncreas humano.

El Ejemplo 4 es un estudio en el que los efectos de GEM sobre ratones en los que se xenoinjertaron células de la línea celular de cáncer de páncreas humano CFPAC-1. Los ratones xenoinjertados se trataron luego con uno de los seis regímenes de tratamiento y los resultados se observaron durante el período de estudio de 91 días.

Para preparar los ratones xenoinjertados usados en el estudio, se trasplantaron por vía subcutánea 1 x 106 células de cáncer de páncreas CFPAC-1 humanas en el costado derecho de ratones desnudos BALB/c macho de 6 semanas de edad. El crecimiento del tumor se observó una vez a la semana y el volumen del tumor se midió como LxW/2 mediante un calibre. Luego se observó el desarrollo tumoral en los ratones xenoinjertados, y se seleccionaron 48 de estos ratones para su inclusión en el estudio cuando su volumen tumoral alcanzó aproximadamente 141 milímetros cúbicos. Los ratones se dividieron en 6 grupos de 8 ratones cada uno para el estudio. El día en el que se administró la primera dosis a los ratones se designó "Día 0" del estudio, y el estudio continuó durante 91 días.

A los ratones del Grupo 1 se les inyectaron por vía intraperitoneal 120 mg/kg de GEM el día 0 y cada tercer día a partir de entonces hasta el día 66 (es decir, Q3D x 23) y no se trataron más posteriormente.

A los ratones del Grupo 2 se les inyectaron por vía intraperitoneal 120 mg/kg de GEM los días 0, 3, 6 y 9 del estudio (es decir, Q3D x 4). A partir del día 12 del estudio, a los ratones se les administraron por vía oral 10 mg/kg de GEM en la composición de GEMORAL (en lo sucesivo "10 mg/kg de GEMORAL") cada dos días (es decir, Q2D x 28) hasta el día 66; los ratones no recibieron más tratamiento posteriormente

A los ratones del Grupo 3 se les inyectaron por vía intraperitoneal 120 mg/kg de GEM los días 0, 3, 6 y 9 del estudio (es decir, Q3D x 4). A partir del día 12 del estudio, a los ratones se les administraron por vía oral 3 mg/kg de GEM en la composición de GEMORAL (en lo sucesivo, "3 mg/kg de GEMORAL") todos los días (es decir, QD x 55) hasta el día 66; los ratones no recibieron más tratamiento posteriormente.

A los ratones del Grupo 4 se les administraron por vía oral 3 mg/kg de GEMORAL todos los días (es decir, QD x 92), comenzando el día 0 del estudio y extendiéndose hasta el final del estudio.

A los ratones del Grupo 5 se les administraron por vía oral 10 mg/kg de GEMORAL cada dos días (es decir, Q2D x 46), comenzando el día 0 del estudio y extendiéndose hasta el final del estudio.

Los ratones del Grupo 6 eran controles y no se les administró GEM. Se les inyectó por vía intraperitoneal solución salina los días 0, 3, 6 y 9 del estudio (es decir, Q3D x 4). A partir del día 13 del estudio, a los ratones se les administró por vía oral agua destilada desionizada cada dos días (es decir, Q2D x 28) hasta el final del estudio.

El estudio continuó hasta el día 91. En la Figura 6 se muestran las tasas de supervivencia de los ratones usados en el estudio. Las tasas de supervivencia se evaluaron usando un análisis de Kaplan-Maier ("muertos" incluía tanto ratones que habían muerto como ratones que presentaban un tamaño de tumor >2500 milímetros cúbicos). Las MST para los ratones de los Grupos 1, 2, 3, 4, 5 y 6 fueron >91, >91, >91, 53,5, >91 y 60 días, respectivamente. Las MST para ratones de los Grupos 1, 2, 3 y 5 se prolongaron marginalmente de manera significativa en comparación con el tratamiento con vehículo (Grupo 6). La MST no fue significativamente diferente entre los ratones del Grupo 4 y el grupo de vehículo (Grupo 6).

En la Figura 5 se muestra el crecimiento tumoral de los ratones de cada grupo. Los ratones de cada uno de los Grupos 1, 2, 3, 4 y 5 mostraron una respuesta antitumoral significativa desde el día 14 al 91 en comparación con el tratamiento con vehículo (Grupo 6). La respuesta antitumoral máxima se observó el día 81 (T/C 0%) para los ratones del Grupo 1, el día 39 (T/C 0,8%) para los ratones del Grupo 2, el día 67 (T/C 0%) para ratones del Grupo 3, el día 74 (T/C 0,1%) para los ratones del Grupo 4 y el día 77 (T/C 3%) para los ratones del Grupo 5. Además, en comparación con el volumen tumoral en ratones en el grupo de tratamiento con vehículo (Grupo 6), los ratones de cada grupo de tratamiento mostraron regresión tumoral después de 1-2 semanas de tratamiento. Por lo menos algunos ratones en varios grupos de tratamiento estaban libres de tumores: en los días 44-91 para los ratones del Grupo 1 (6/8 ratones libres de tumor en el día 91), en los días 32-91 para los ratones del Grupo 2 (6/8 ratones libres de tumor el día 91), en los días 28-91 para los ratones del Grupo 3 (5/8 ratones libres de tumor en el día 91),

Algunos ratones mostraron una tasa de respuesta parcial, lo que significa que se observó por lo menos una disminución del 30% en el volumen tumoral (con respecto al volumen tumoral original). Las proporciones de tales ratones fueron del 13% (1/8 ratones) en el Grupo 3, 25% (2/8 ratones) en el Grupo 4 y 38% (3/8 ratones) en el Grupo 5.

En este estudio, descubrimos que la administración metronómica oral de GEM, la inyección intraperitoneal de GEM cercana a MTD y las combinaciones de estas terapias muestran eficacia in vivo contra una línea celular de cáncer de páncreas humano xenoinjertada en ratones. Estos datos indican que estos tratamientos pueden usarse para tratar cánceres de páncreas en humanos.

Ejemplo 5

Eficacia in vivo de la inyección de 5-fluorouracilo seguida de la administración de GEMORAL en un modelo de ratón xenoinjertado de cáncer de páncreas humano.

Se conoce la monoterapia del cáncer de páncreas con la inyección de 5-fluorouracilo (5FU). Sin embargo, algunos tumores pancreáticos no responden (o no responden fuertemente) a la terapia con 5FU. Investigamos la administración de GEM metronómico oral como tratamiento de segunda línea en tumores pancreáticos que no responden a 5FU usando un modelo de xenoinjerto.

Para preparar los ratones xenoinjertados usados en el estudio, se trasplantaron 1 x 106 células de cáncer de páncreas CFPAC-1 humanas por vía subcutánea en el costado derecho de ratones desnudos BALB/c macho de 6 semanas de edad. El crecimiento tumoral se observó una vez a la semana, el volumen tumoral se midió como LxW/2 mediante un calibre, y se seleccionaron los ratones para su inclusión en el estudio cuando su volumen tumoral alcanzó aproximadamente 131 milímetros cúbicos. Los ratones se dividieron en cuatro grupos de 6-8 ratones cada uno para el estudio. El día en el que se administró la primera dosis a los ratones se designó "Día 0" del estudio, y el estudio continuó durante 112 días.

A los ratones del Grupo 1 se les administraron por vía oral 10 mg/kg de GEMORAL cada dos días (es decir, Q2D x 56), comenzando el día 0 del estudio y extendiéndose hasta el final del estudio.

A los ratones del Grupo 2 se les inyectaron por vía intraperitoneal tres veces por semana 20 mg/kg de 5FU comenzando el día 0 y continuando durante las primeras 9 semanas del estudio. A partir del día 63 del estudio, a los ratones se les administraron por vía oral 10 mg/kg de GEMORAL cada dos días (es decir, Q2D x 25) hasta el final del estudio.

A los ratones del Grupo 3 se les inyectaron por vía intraperitoneal tres veces por semana 20 mg/kg de 5FU comenzando el día 0 y continuando durante las primeras 3 semanas del estudio. A partir del día 21 del estudio, a los ratones se les administraron por vía oral 10 mg/kg de GEMORAL cada dos días (es decir, Q2D x 46) hasta el final del estudio.

Los ratones del Grupo 4 eran controles y no se les administró 5FU ni GEM. Se les inyectó por vía aron intraperitoneal solución salina los días 0, 3, 6 y 9 del estudio (es decir, Q3D x 4). A partir del día 13 del estudio, a los ratones se les administró por vía oral agua destilada desionizada cada dos días (es decir, Q2D x 51) hasta el final del estudio.

El estudio continuó hasta el día 112. En la Figura 8 se muestran las tasas de supervivencia de los ratones utilizados en el estudio y se evaluaron usando un análisis de Kaplan-Maier ("muertos" incluía tanto ratones que habían muerto como ratones que presentaban un tamaño de tumor >2500 milímetros cúbicos). Las MST para los ratones de los grupos 1,2, 3 y 4 fueron >112, >112, >112 y 60 días, respectivamente. Las MST para ratones de los Grupos 1, 2 y 3 se prolongaron marginalmente de manera significativa en comparación con el tratamiento con vehículo (Grupo 4).

En la Figura 7 se muestra el crecimiento tumoral de los ratones de cada grupo. Los ratones de cada uno de los Grupos 1, 2 y 3 mostraron respuestas antitumorales significativas en comparación con el tratamiento con vehículo (Grupo 4), en los días 11-112 para el Grupo 1, en los días 74-112 para el Grupo 2 y en los días 32-112 para el Grupo 3. Se observó una respuesta antitumoral máxima el día 77 (T/C 3%) para los ratones del Grupo 1, el día 105 (T/C 39%) para los ratones del Grupo 2 y el día 112 (T/C 8%) para ratones del Grupo 3.

No se observó una respuesta antitumoral significativa atribuible al tratamiento con 5FU en los ratones de los Grupos 2 y 3. Sin embargo, se observó una respuesta antitumoral atribuible a GEM metronómico oral poco después del comienzo de la administración de GEMORAL (con una respuesta antitumoral significativamente diferente a la de los ratones tratados con vehículo comenzando por lo menos el día 74 para el Grupo 2 y el día 32 para el Grupo 3).

Un ratón del Grupo 3 estaba libre de tumores el día 112.

Estos resultados indican que la administración de GEM metronómica oral puede usarse como un tratamiento de segunda línea para los cánceres de páncreas tratados con 5FU, o para el tratamiento primario de tales cánceres que no responden al tratamiento con 5FU.

Ejemplo 6

Determinación de MTD para GEMORAL para la selección de dosis metronómica en pacientes humanos Se realizaron estudios de aumento de dosis en cohortes secuenciales de 3 a 6 pacientes humanos (el peso corporal medio siendo de aproximadamente 60 kg) cada uno en un intento de determinar la MTD para GEM administrada por vía oral en la formulación de GEMORAL. No se observó DLT para GEMORAL en el intervalo de dosis estudiado. Estos experimentos demuestran que la MTD para GEM administrada por vía oral en la formulación de GEMORAL es mayor que la dosis de 80 mg (correspondiente a 1,33 mg/kg) en el esquema de dosificación estudiado.

En una primera fase de estos estudios, se administró GEMORAL por vía oral a pacientes humanos individuales en una de las dosis de 2, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80 mg de GEM (expresado en base a la base libre de GEM) (correspondiente a 0,033 mg/kg, 0,083 mg/kg, 0,17 mg/kg, 0,33 mg/kg, 0,50 mg/kg, 0,67 mg/kg, 0,83 mg/kg, 1,00 mg/kg, 1,17 mg/kg, 1,33 mg/kg). La dosis seleccionada se administró por vía oral a cada paciente los días 1, 3, 5, 8, 10 y 12 (es decir, 6 dosis en total) de un ciclo de estudio de 21 días. En cada cohorte, el régimen de dosificación fue bien tolerado. No se produjeron DLT en ningún paciente para ninguna de las cohortes de dosis. Por lo tanto, no se identificó la MTD, pero se determinó que 80 mg es una dosis segura para este régimen de dosificación.

Se evaluará un estudio multicéntrico y abierto de GEMORAL después de la quimioterapia primaria o la quimiorradioterapia combinada para el cáncer de vías biliares avanzado. Este estudio se realizará en 2 partes: una fase de aumento de la dosis (Parte 1) y una fase de expansión de la dosis (Parte 2).

Tanto en la Parte 1 como en la Parte 2, a los pacientes elegibles se les asignará la administración oral de GEMORAL en forma de dosificación de gelatina blanda los días 1, 3, 5, 8, 10, 12, 15, 17 y 19 de un ciclo de 21 días (9 dosis por ciclo). No habrá ningún intervalo entre los ciclos, es decir, el siguiente ciclo comenzará inmediatamente al día siguiente al día 21 del ciclo anterior (es decir, el día 22 en general para el segundo ciclo), excepto que no se permitirá la dosificación en dos días consecutivos; habrá por lo menos un día entre dosis.

Parte 1: Fase de aumento de la dosis (Fase 1b)

La parte 1 del estudio seguirá un esquema de aumento de dosis de 3+3 a niveles de dosis predefinidos. Habrá cohortes secuenciales de 3 a 6 pacientes cada una con dosis crecientes de 40 mg (0,67 mg/kg), 80 mg (1,33 mg/kg) y 120 mg (2,00 mg/kg) por cohorte. No habrá aumento dosis intrapaciente. El ciclo 1 (21 días) se define como el período de evaluación de la toxicidad limitante de la dosis (DLT). Si no se identifica una MTD después del aumento de la dosis a 120 mg (2,00 mg/kg), también puede evaluarse el nivel de dosis intermedio de 100 mg (1,67 mg/kg). Si se evalúa un nivel de dosis intermedio, se inscribirán hasta 6 pacientes adicionales en ese nivel de dosis.

Parte 2: Fase de expansión de la dosis (Fase 2)

En la Parte 2 del estudio se ampliará el nivel de dosis más alto de la forma de dosificación de gelatina blanda de GEMORAL probado en el que menos de dos de los seis pacientes en una cohorte experimentan una DLT. Además, debido a que el nivel de dosis más alto seleccionado en la Parte 1 podría provocar toxicidad acumulativa durante el tratamiento, el siguiente nivel de dosis más bajo por debajo del más alto evaluado en la Parte 1 en el que por lo menos dos de seis pacientes experimentaron una DLT también se ampliará para su evaluación en la Parte 2. Si no se identifica una MTD en la Parte 1 del estudio, los dos niveles de dosis usados en la Parte 2 serán 120 mg (2,00 mg/kg) y 80 mg (1.33 mg/kg), o 120 mg (2,00 mg/kg) y 100 mg (1,67 mg/kg) si se ha evaluado en la Parte 1 la dosis intermedia de 100 mg (1,67 mg/kg).

Claims (10)

REIVINDICACIONES

1. Gemcitabina (GEM) para su uso en el tratamiento de un tumor sensible a gemcitabina, o para inducir la regresión de un tumor sensible a GEM, en un sujeto de una especie, en donde la GEM debe administrarse por vía oral al sujeto en una formulación que, tras la ingestión oral, libera en una forma biodisponible menos de la mitad de la dosis máxima tolerada (MTD) de GEM para la especie,

en donde la formulación es una composición farmacéutica autoemulsionante (SEP) que comprende:

(a) una cantidad terapéuticamente eficaz de GEM o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, siendo la cantidad una fracción de la MTD para GEM cuando se administra por vía oral a humanos en la composición de SEP;

(b) uno o más solventes capaces de disolver el fármaco o la sal para formar una solución de GEM-solvente; (c) un sistema surfactante que comprende uno o más surfactantes, el sistema surfactante mostrando un valor de HLB de 8 a 17; y

(d) uno o más portadores hidrófilos que son compatibles con la solución de GEM-solvente y el sistema surfactante,

en donde la formulación se administra al sujeto varias veces en un programa regular sin una interrupción significativa durante un período de tiempo sostenido.

2. GEM para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde

el o los solventes se seleccionan del grupo que consiste de agua, etanol, polietilenglicol (PEG), isopropanol (IPA), 1,2-propanodiol (propilenglicol), glicerol, ácido acético y cualquier combinación de los mismos;

el sistema surfactante comprende uno o más surfactantes seleccionados del grupo que consiste de polisorbato, poloxámeros, oleoil polioxilglicéridos, linoleoil polioxilglicéridos, caprilocaproil polioxilglicéridos, derivados del aceite de ricino de polioxietileno, alquil éteres de polioxietileno, monooleato de glicerilo, monolinoleato de glicerilo, triglicéridos de cadena media (MCT), oleato de poliglicerilo, lauroil polioxilglicérido, estearoil polioxilglicéridos, propilenglicol dicaprilocaprato, propilenglicol laurato, propilenglicol monolaurato, propilenglicol caprilato y propilenglicol monocaprilato y combinaciones de los mismos; y

el o los portadores hidrófilos se seleccionan del grupo que consiste de polisorbato, etanol, polietilenglicol (PEG), glicerol, 1,2-propanodiol (propilenglicol), carbonato de propileno (PC), dietilenglicol monoetil éter y combinaciones de los mismos; y

en donde el solvente está presente en una cantidad del 2,5% al 60% (p/p), el sistema surfactante está presente en una cantidad del 20% al 75% (p/p) y el portador hidrófilo está presente en una cantidad del 2,0% al 60% (p/p), en base al peso total de la formulación.

3. GEM para su uso de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en donde la formulación se selecciona del grupo que consiste de

(i) una formulación que comprende GEM o su sal farmacéuticamente aceptable en una cantidad del 2,00% (p/p); agua en una cantidad del 20,00% (p/p); glicerol y PEG juntos en una cantidad del 32,30% (p/p); y polisorbato y oleoil polioxilglicéridos juntos en una cantidad de 45,70% (p/p), en donde los valores de % (p/p) se basan en el peso total de la formulación;

(ii) una formulación que comprende GEM o su sal farmacéuticamente aceptable en una cantidad del 2,00% (p/p); agua en una cantidad del 20,00% (p/p); propilenglicol y PEG en una cantidad del 32,30% (p/p); y polisorbato y oleoil polioxilglicéridos en una cantidad de 45,70% (p/p), en donde los valores de % (p/p) se basan en el peso total de la formulación; y

(iii) una formulación que comprende GEM o su sal farmacéuticamente aceptable en una cantidad del 1,98% (p/p); agua en una cantidad del 19,8% (p/p); glicerol y PEG juntos en una cantidad del 31,98% (p/p); polisorbato y oleoil polioxilglicéridos juntos en una cantidad del 45,25% (p/p); y TPGS en una cantidad de 0,99% (p/p), en donde los valores de % (p/p) se basan en el peso total de la formulación.

4. GEM para uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde la formulación se administra al sujeto durante semanas, meses o años.

5. GEM para su uso de acuerdo con la reivindicación 4,

en donde el intervalo entre administraciones sucesivas de la forma de dosificación no es de más de a tres días; o en donde el intervalo entre administraciones sucesivas de la forma de dosificación no es de más de dos días.

6. GEM para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde la fracción de MTD para GEM es 1/3, 1/4, 1/5, 1/6, 1/7, 1/10, 1/12, 1/15, 1/20 y 1/40 de la MTD de GEM.

7. GEM para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en donde la GEM se administra en una cápsula, preferiblemente en una cápsula blanda.

8. GEM para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en donde la formulación comprende: GEM o una sal farmacéuticamente aceptable de GEM, agua, glicerol, PEG, polisorbato y oleoil polioxilglicéridos; o

GEM o una sal farmacéuticamente aceptable de GEM, agua, propilenglicol, PEG, polisorbato y oleoil polioxilglicéridos.

9. GEM para uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 7 a 8, en donde el sujeto es un humano, preferiblemente en donde el tumor se selecciona del grupo que consiste de tumores de mama, vejiga, páncreas, conductos biliares y pulmón de células no pequeñas.

10. GEM para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde la cantidad de GEM o su sal farmacéuticamente aceptable se selecciona del grupo que consiste de no más de 2,00, no más de 1,67 y no más de 1,33 mg/kg de peso corporal del sujeto.