JP2019517490A - がん療法のためのメトロノミック経口ゲムシタビン - Google Patents

Abstract

ヒトなどの患者における腫瘍の退縮を誘導するか、または腫瘍の増殖を阻害することなどの治療のための、自己乳化経口投与剤形に含まれるゲムシタビンの使用。ゲムシタビンはメトロノミック様式で経口投与される。【選択図】なし

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年６月２日に出願された米国仮特許出願第６２／３４４，６６０号に対する優先権を与えられる。その出願は参照により本明細書に組み込まれる。

本発明は、概して、ある特定の腫瘍の治療のためのゲムシタビンを含む経口治療剤の使用の分野に関する。

経口投与は、固体または液体懸濁液の形態の薬物投与の便利で使いやすい様式であり、薬物送達技術の分野において優勢であり続けている。たとえ多くの種類の薬物が許容される効力で経口投与され得るとしても、いくつかのクラスの薬物、とりわけ、良好な溶解性を有することが知られているが、肝臓において広範に代謝され、腸上皮によって容易に排出されるか（不十分な透過性）、または胃粘膜に刺激性であるもの、例えば米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって提供されるＢｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（ＢＣＳ）のクラスＩＩＩ薬物について課題が残ったままである。それらの薬物の１つである治療剤ゲムシタビン（ＧＥＭ）について、注射投与が、許容される薬物吸収およびバイオアベイラビリティを達成するための主要な選択肢となるが、これは危険性および費用の増加をもたらし、さらに患者にとって痛みを伴う。

ＧＥＭなどの比較的親水性の薬物の経口投与のための医薬組成物が記載されている。例えば、Ｉｎｎｏｐｈａｒｍａｘ，Ｉｎｃ．の特許文献１は、良好なバイオアベイラビリティ（すなわち、静脈内注射によって達成されるものに匹敵する）および薬物の貯蔵安定性を示す、このような薬物の自己乳化調製物を記載している。

ＧＥＭは、種々のがん腫を治療するための使用について記載されている。最大の抗腫瘍効果を達成するために、ＧＥＭは、多くの場合、患者によって耐容されるか、または耐容される可能性がある最大用量（「ＭＴＤ」）で静脈内に投与される。既存のＧＥＭ療法の欠点は、薬物が、特にＭＴＤで使用される場合に患者の血球産生を抑制し得ることである。

「メトロノミック」化学療法が他に記載されている（例えば、非特許文献１）。この名称は、長期の休薬期間なしに（一般的に）低用量の化学療法薬の慢性的なほぼ等間隔の投与を言及している。メトロノミック療法は、それらのＭＴＤより十分に低い薬物の投与を含む。ＧＥＭのメトロノミック投与は他に記載されているが、ＧＥＭを注射するか、または摂取後にＧＥＭを形成するように代謝されることを意図したプロドラッグ（ＬＹ２３３４７３７と称される）を経口投与するかのいずれかの状況においてのみ記載されている。例えば、非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４；非特許文献５；非特許文献６；非特許文献７；非特許文献８を参照のこと。ＧＥＭ自体の経口メトロノミック投与は、おそらく広範な初回通過代謝に起因する低いバイオアベイラビリティのために、有効性は示されていない。非特許文献９。

非経口投与の欠点（例えば、不快感および専門的な投与の必要性）およびプロドラッグ投与の不安定性（例えば、患者間のプロドラッグ代謝の可変性）の両方を回避し、代わりに有効量の抗がん治療剤を経口投与形態で送達する有効な抗がん療法が開発されれば、有益であろう。本開示はそのような療法を記載する。

米国特許出願公開第２０１０／０２７３７３０号

Ｓｈａｒｏｖｓｋｙら、２００９、Ｃｕｒｒ．Ｏｎｃｏｌ．１６（２）：７−１５ Ｙａｐｐら、２０１６、Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ １９：２２９−２４４ Ｈａｓｎｉｓら、２０１４、Ｎｅｏｐｌａｓｉａ １６：５０１−５１０ Ｖｉｖｅｓら、２０１３、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ １３３：２４６４−２４７２ Ｐｒａｔｔら、２０１３、Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．１２：４８１−４９０ Ｆｒａｎｃｉａら、２０１２、Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．１１：６８０−６８９ Ｃｈａｍら、２０１０、Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ １０３：５２−６０ Ｌａｑｕｅｎｔｅら、２００８、Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．７：６３８−６４７ Ｖｅｌｔｋａｍｐら、２００８、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１４：３４７７−３４８６

本開示は、ある種の対象におけるＧＥＭ感受性腫瘍を治療する方法に関する。これらの方法は、経口摂取時に、その種についてのＧＥＭの最大耐量（ＭＴＤ）の半分未満を生物学的に利用可能な形態で放出する製剤中の治療有効量のＧＥＭを含む剤形を対象に経口投与する工程を含む。例えば、製剤は、軽度の機械的撹拌（すなわち、ヒト対象の胃腸管内のような状態）下で３７℃にて水性媒体と接触すると、エマルションを自然に形成するものであり得る。製剤は、連続投与の間に２日または３日の間隔などで複数回、対象に投与されてもよい。

好ましい実施形態において、製剤は、少なくとも３つの成分、すなわち、（ａ）親水性溶媒中に溶解したＧＥＭ；（ｂ）約８〜約１７の親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）値を示し、少なくとも１種の界面活性剤を含む界面活性剤系；および（ｃ）ＧＥＭ−溶媒溶液および界面活性剤系の両方と適合する親水性担体を含む。例として、本明細書に記載される１つのこのような製剤（「ＧＥＭＯＲＡＬ」）は、ＧＥＭ（またはＧＥＭの薬学的に許容される塩）、水、グリセロール、ＰＥＧ、ポリソルベート、およびオレオイルポリオキシルグリセリドの組み合わせである。本明細書に記載される製剤は、軟質カプセルなどのカプセルの形態で投与されてもよい。

本明細書に記載される組成物は、乳房、膀胱、膵臓、および胆管の腫瘍、ならびにヒトにおける非小細胞肺腫瘍などのＧＥＭ感受性腫瘍を治療するに有用である。ヒトにおけるこのような腫瘍を治療するために、ＧＥＭは、同じ経路によって投与される場合、例えば、ヒトについてのＧＥＭのＭＴＤの１／３、１／４、１／５、１／６、１／７、１／１０、１／１２、１／１５、１／２０、または１／４０以下を放出する製剤中で投与されてもよい。

本明細書に開示されるものの別の態様は、ヒト患者におけるＧＥＭ感受性腫瘍の退縮を誘導する方法である。これらの方法は、上記の方法と実質的に同様に実施され、すなわち、経口摂取時に、患者についてのＧＥＭのＭＴＤの半分未満を生物学的に利用可能な形態で放出する製剤中の治療有効量のＧＥＭを患者に経口投与することによって実施される。

本開示が教示するもののさらに別の態様において、ヒト患者における腫瘍の増殖を阻害する方法である。これらの方法は同様に、経口摂取時に、患者についてのＧＥＭのＭＴＤの半分未満を生物学的に利用可能な形態で放出する製剤中の治療有効量のＧＥＭを患者に経口投与することによって実施される。

本発明はまた、ある種の対象におけるＧＥＭ感受性腫瘍を治療するか、またはＧＥＭ感受性腫瘍の退縮を誘導するのに使用するためのＧＥＭも開示し、ＧＥＭは、経口摂取時に、本明細書に記載される種についてのＧＥＭのＭＴＤ未満を生物学的に利用可能な形態で放出する製剤中で対象に経口投与される。また、ある種の対象におけるＧＥＭ感受性腫瘍を治療するため、またはＧＥＭ感受性腫瘍の退縮を誘導するための医薬の製造のためのＧＥＭの使用も提供され、ＧＥＭは、経口摂取時に、本明細書に記載される種についてのＧＥＭのＭＴＤ未満を生物学的に利用可能な形態で放出する製剤中で対象に経口投与される。

本発明はまた、ヒト患者における腫瘍の増殖を阻害するのに使用するためのＧＥＭも開示し、ＧＥＭは、経口摂取時に、本明細書に記載される患者についてのＧＥＭのＭＴＤ未満を生物学的に利用可能な形態で放出する製剤中で対象に経口投与される。また、ヒト患者における腫瘍の増殖を阻害するための医薬の製造のためのＧＥＭの使用も提供され、ＧＥＭは、経口摂取時に、本明細書に記載される患者についてのＧＥＭのＭＴＤ未満を生物学的に利用可能な形態で放出する製剤中で対象に経口投与される。

本開示はまた、本明細書に記載される方法を実施するのに有用な医薬の製造に関する。すなわち、経口摂取時に、ある種についてのＧＥＭのＭＴＤの半分未満を生物学的に利用可能な形態で放出する製剤中の治療有効量のＧＥＭを含む経口投与可能な製剤を製造するための方法が開示される。このような製剤は、軽度の機械的撹拌（すなわち、ヒト対象の胃腸管内のような状態）下で３７℃にて水性媒体と接触するとエマルションを自然に形成するものであり得る。製剤は、連続投与の間に２日または３日の間隔などで複数回、対象に投与されてもよい。

本明細書に記載されるように製造され得る製剤は、少なくとも３つの成分、すなわち、（ａ）親水性溶媒中に溶解したＧＥＭ；（ｂ）約８〜約１７の親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）値を示し、少なくとも１種の界面活性剤を含む界面活性剤系；および（ｃ）ＧＥＭ−溶媒溶液および界面活性剤系の両方と適合する親水性担体を含んでもよい。例として、本明細書に記載される１つのこのような製剤（「ＧＥＭＯＲＡＬ」）は、ＧＥＭ（またはＧＥＭの薬学的に許容される塩）、水、グリセロール、ＰＥＧ、ポリソルベート、およびオレオイルポリオキシルグリセリドの組み合わせである。本明細書に記載される製剤は、軟質カプセルなどのカプセルの形態で製造されてもよい。

患者由来のヒト胆管がんが異種移植されている動物についての経時的な腫瘍体積のグラフである。さらなる詳細は実施例２に記載される。 実施例２に記載される試験の動物についての生存率のグラフである。 ヒト胆管がん細胞株ＨｕＣＣＴ１が異種移植されている動物についての経時的な腫瘍体積のグラフである。さらなる詳細は実施例３に記載される。 実施例３に記載される試験の動物についての生存率のグラフである。 ヒト膵臓がん細胞株ＣＦＰＡＣ−１が異種移植されている動物についての経時的な腫瘍体積のグラフである。さらなる詳細は実施例４に記載される。 実施例４に記載される試験の動物についての生存率のグラフである。 ヒト膵臓がん細胞株ＣＦＰＡＣ−１が異種移植されている動物についての経時的な腫瘍体積のグラフである。さらなる詳細は実施例５に記載される。 実施例５に記載される試験の動物についての生存率のグラフである。

本開示は、対象における腫瘍を治療するためにゲムシタビン（ＧＥＭ）を対象に経口投与するための組成物および方法に関する。このような治療は、例えば、腫瘍の体積、質量、または増殖速度を低減させることを含んでもよく、また、腫瘍の退縮を誘導することを含んでもよい。

抗がん剤としてのＧＥＭの使用は長い間知られている。しかしながら、ＧＥＭの使用は、薬物の注射またはＧＥＭを生じるように患者の体内で代謝されることが望まれる／期待されるプロドラッグの経口投与に長い間制限されてきた。

ＧＥＭ自体が、単独療法または別の抗腫瘍療法に対する補充のいずれかとしてメトロノミック様式で経口投与され得、効果的な抗腫瘍効果を発揮することを実証するデータが本明細書に記載される。本明細書に提示されるデータは、ヒト胆管がんおよび膵臓がんの非ヒト動物異種移植モデルを使用して収集されたが、当業者は、このデータがヒト患者におけるこれらの腫瘍を治療または軽減するための本明細書に記載される療法の有用性を示すことを理解するであろう。当業者はさらに、ＧＥＭの経口メトロノミック投与が、ＧＥＭ療法に反応することが知られているか、または後に発見される全てのヒト腫瘍（例えば、少なくとも特定の乳房、膀胱、膵臓、胆管、および非小細胞肺がんを含む、注射されるＧＥＭに反応するもの）に対して好ましい抗腫瘍効果を発揮することが期待され得ることを本明細書に提示される情報から認識するであろう。

本発明者らは、ＧＥＭのより高い用量（例えば、最大耐量、ＭＴＤまたはその付近の用量）での注射（例えば、腹腔内または静脈内）、続いて実質的により低い用量のＧＥＭのメトロノミック経口投与が、注射単独よりも大きな腫瘍退縮を生じ得ることを発見した。経口用量は、例えば、米国特許出願公開第２０１０／０２７３７３０号に記載されているものなどのＧＥＭの自己乳化調製物であってもよく、ＧＥＭのＭＴＤの画分、例えば、ＧＥＭのＭＴＤの１／２、１／３、１／４、１／５、１／６、１／７、１／１０、１／１２、１／２０、または１／４０を含んでもよい。

本発明者らはまた、ＧＥＭの注射がなくても、または５−フルオロウラシル（５ＦＵ）などの異なる抗腫瘍剤による治療の後でさえ、ＭＴＤよりも実質的に低い用量でのＧＥＭのメトロノミック経口投与が腫瘍退縮を誘導することができることを発見した。

ＧＥＭのメトロノミック経口投与
本明細書に記載される主題の重要な態様は、ＧＥＭが、生物学的に利用可能な形態で、ＧＥＭの最大耐量（ＭＴＤ）よりも実質的に低い投薬量で経口投与された場合、特に、長期間（例えば、数週間、数ヶ月、または数年）にわたって定期的に投与された場合に、有意な抗腫瘍効果を示すという発見である。このような投与は一般に「メトロノミック」投与と称され、いくつかの他の抗腫瘍剤のための有効な治療レジメンとして考慮されている。しかしながら、本開示以前には、ＧＥＭが、メトロノミックレジメンの一部として経口投与された場合に有意な抗腫瘍効果を示すかどうか、およびＧＥＭメトロノミックレジメンがどのように作用するかは知られていなかった。

ＧＥＭは、ＭＴＤに近い用量で経口投与された場合、腫瘍増殖を阻害することが以前に示されている。しかしながら、ＭＴＤ−ＧＥＭ経口投与の中止後、腫瘍増殖速度は、他の点では同様のビヒクル処置（すなわち、ＧＥＭ投与なし）動物における腫瘍増殖速度とほぼ等しい速度に回復する。ＭＴＤ−ＧＥＭ経口投与に起因する有害な効果のために、このような療法は、限られた期間のみ提供され得る。経口メトロノミックＧＥＭ療法は、より長い期間のＧＥＭ介在性腫瘍増殖速度の阻害を可能にする。単独の療法として投与されるか、他の抗腫瘍療法と共に投与されるかに関わらず、経口メトロノミックＧＥＭ療法は抗腫瘍効力の期間を延長する。

ＧＥＭなどの特定の抗腫瘍薬は、非経口経路（例えば、非経口または経上皮）によって投与され得ることが周知である。しかしながら、経口経路は、大多数の患者が比較的長期間（例えば、数日、数週、数ヶ月、数年、または生涯の間にさえ）にわたる薬物投与に耐えることができ、薬物投与の遵守が高い傾向にある経路である。さらに、経口経路による薬物の投与は典型的には非臨床環境（例えば、家庭または旅行中）で実施することができ、一方、他の経路による投与（および／またはＭＴＤもしくはその近くでの薬物の投与）は、臨床施設への訪問または臨床施設への収容期間を必要とすることがある。本明細書に記載される治療方法はＭＴＤ以下の量でのＧＥＭの経口投与のみを含み得るので、このような治療方法を受ける対象は施設に収容されず、独立したままであり得る。これらの方法においても、本明細書に記載される方法は、以前から知られている抗腫瘍方法を超える有意な進歩を示す。

薬物のＭＴＤは一般的に、受容者において薬物に起因する許容できない副作用を引き起こさない薬物の最高用量であると考えられる。実際には、ＭＴＤは、通常、臨床的に薬物を受けると予想される患者に類似する個体に漸増用量の薬物を投与すること、および投与後にこれらの個体が経験する副作用を観察することによって経験的に決定される。ＭＴＤは、投与される個体の十分に少ない画分（例えば、個体の１／２、１／４、または１０％未満）において許容できない副作用を誘導する最大用量を観察することによって選択され得る。ＭＴＤは、種間、投与経路間で変動し得るので、ＭＴＤは同じ経路によって臨床的に薬物を受容すると予想される患者と類似する個体集団についての対応する経路によって決定されることが重要である。

例として、実施例２に記載される異種移植マウスのＧＥＭについてのＭＴＤを評価するために、本発明者らは、実施例１に記載されるＧＥＭＯＲＡＬ組成物を、５匹のＢＡＬＢ／ｃヌードマウスの群（初期１０週齢）に、１日あたり３もしくは５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで、または種々の群について１日おきに１０もしくは２０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで、２８日間経口投与した。４週間の試験期間中、生存率および体重減少を追跡した。ＧＥＭＯＲＡＬの毎日および１日おきの投与のＭＴＤは、それぞれ３ｍｇ／ｋｇおよび１０ｍｇ／ｋｇと決定された。全ての用量は、ＧＥＭ遊離塩基当量１ｋｇ当たりのミリグラムとして表される。

ＧＥＭについては、ヒトがん患者についてのＭＴＤ値を決定した者もいる。例えば、Ｆｏｓｓｅｌｌａら（１９９７、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１５：３１０〜３１６）は、ＧＥＭ静脈内注入レジメンについて２，４００ｍｇ／ｍ^２／週のＭＴＤを推定した（６４．８８ｍｇ／ｋｇに等しいヒト患者の３，８９３ｍｇ／６０ｋｇに相当する２，４００ｍｇ／ｍ^２）。ＧＥＭＺＡＲ（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏ．）の商標名で市販されている市販のＧＥＭ製品についての標識は、１，０００または１，２５０ｍｇ／ｍ^２の静脈内投与量を推奨する。詳細には、ＧＥＭＺＡＲ用量投与は、２１日サイクルの１日および８日または１日、８日および１５日に投与して、２７．０３ｍｇ／ｋｇに等しいヒト患者の１，６２２ｍｇ／６０ｋｇに相当する１，０００ｍｇ／ｍ^２の用量で、または２８日サイクルの１日、８日および１５日に投与して、３３．７８ｍｇ／ｋｇに等しいヒト患者の２，０２７ｍｇ／６０ｋｇに相当する１，２５０ｍｇ／ｍ^２の用量で行う。

例として、ＭＴＤを決定する試みにおいて、実施例６に記載されるように、ＧＥＭをヒトがん患者に経口投与した。試験したＧＥＭ用量範囲（０〜８０ｍｇ）にわたって用量制限毒性（ＤＬＴ）が観察されなかったため、これらの実験ではＭＴＤは決定されなかった。ＭＴＤを決定する方法は周知であり、当業者は、ＧＥＭＯＲＡＬ製剤において経口投与されるＧＥＭについてのＭＴＤを容易に決定することができる。実施例６に記載される実験は、このＭＴＤが使用した投薬レジメンにおいて８０ｍｇより大きいことを実証し、この値が本明細書に記載される目的のためのＭＴＤの（低）推定値として使用され得ることを意味する。すなわち、この用量の画分をメトロノミック用量として選択することができる。

本明細書に使用される場合、対象へのＧＥＭの経口製剤の「メトロノミック」投与とは、ＧＥＭ応答性腫瘍に罹患した患者への経口ＧＥＭ製剤の反復投与を指し、経口ＧＥＭ製剤の各々の用量は、このような対象のためのＧＥＭのＭＴＤの画分のみ、例えば、ＧＥＭのＭＴＤの半分、３分の１、４分の１、５分の１、６分の１、７分の１、１０分の１、１２分の１、１５分の１、２０分の１、または４０分の１を含む。このような用量を計算するために使用されるＭＴＤ値は、類似対象について当該分野において報告される値、このような対象（例えば、第Ｉ相試験参加者）の類似体について経験的に決定される値、異なるＧＥＭ応答性腫瘍に罹患した対象についての値と比較して推定される値、またはこれらの組み合わせであり得る。例として、異種移植ヒト腫瘍組織を有するマウスにおける本明細書に記載される試験において、１０ｍｇ／ｋｇの経口メトロノミック用量が１日おきに投与され、これは、類似のマウスに３日ごとに経口投与されるＧＥＭのＭＴＤの約１／６〜１／１２の用量に相当する。

別の実施形態において、本発明によるメトロノミック投与に適した経口用量、すなわち、経口摂取時に、種についてのＧＥＭの最大耐量（ＭＴＤ）の半分未満を生物学的に利用可能な形態で放出するＧＥＭ製剤の用量は、最高の既知の「安全」用量の（上記のような）画分を使用することによって選択することができる。したがって、ＭＴＤは、その状況下で１人または複数の対象が安全に耐えられる最高用量を観察することによって推定することができ、その最高安全耐量は、本明細書に記載される目的のためのＭＴＤについての推定値として使用することができる。例として、ＧＥＭＯＲＡＬ製剤中の８０ｍｇのＧＥＭの用量を週３回（１日目、３日目、５日目、８日目、１０日目、および１２日目）経口投与すると、進行性胆道がんに罹患したヒト患者（平均重量約６０ｋｇ）にとって安全であることが実証された（実施例６を参照のこと；平均ヒト重量６０ｋｇの場合、８０ｍｇ用量は１．３３ｍｇ／ｋｇに等しい）。したがって、例えば、この既知の安全な用量の画分を、ＭＴＤの代わりに、この患者集団におけるメトロノミック経口投与に使用することができる。メトロノミック用量は、処置されるべき腫瘍に対して少なくともいくらかの治療効果を示すはずである。したがって、例えば、腫瘍に対する少なくともいくらかの最小の治療効果（例えば、腫瘍増殖速度の減少または腫瘍塊もしくは体積の縮小）が観察可能である限り、少なくともメトロノミック投与後、少なくとも１ヶ月間継続される。

特に、乳房、膀胱、膵臓、胆管、および非小細胞肺の腫瘍のうちの１つ以上に罹患している患者などのヒト患者（平均体重約６０ｋｇ）において、本発明によるＧＥＭの適切な経口用量は、１．３３ｍｇ／ｋｇ、例えば、０．６７ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．２７ｍｇ／ｋｇ、０．１８ｍｇ／ｋｇ、０．１３ｍｇ／ｋｇ、０．１１ｍｇ／ｋｇ、０．０８８ｍｇ／ｋｇ、０．０６７ｍｇ／ｋｇの画分に相当する、例えば、８０ｍｇ、例えば、４０、２７、２０、１６、１１、８、６．７、５．３、または４．０ｍｇの画分を含む。したがって、対象、好ましくはヒト患者における腫瘍、好ましくはＧＥＭ感受性腫瘍の治療に使用するためのＧＥＭが提供され、ここで、ＧＥＭは、５０ｍｇ（０．８３ｋｇ／ｍｇ）以下、好ましくは４０ｍｇ（０．６７ｋｇ／ｍｇ）未満、さらに好ましくは２０ｍｇ（０．３３ｋｇ／ｍｇ）未満の用量単位で経口投与される。好ましい実施形態において、ＧＥＭは、４〜４０ｍｇ（０．０６７ｍｇ／ｋｇ〜０．６７ｋｇ／ｍｇ）の用量単位で経口投与されてもよい。いくつかの実施形態において、ＧＥＭは、メトロノミック用量あたり１２０ｍｇ（２．００ｍｇ／ｋｇ）以下、１００ｍｇ（１．６７ｍｇ／ｋｇ）以下、または８０ｍｇ（１．３３ｍｇ／ｋｇ）以下で経口投与されてもよい。このような経口用量は、例えば２〜４日毎に反復して投与されてもよい。好ましくは、ＧＥＭは、以下に記載される自己乳化組成物、好ましくは（ａ）親水性溶媒中に溶解したＧＥＭ；（ｂ）約８〜約１７の親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）値を示し、少なくとも１種の界面活性剤を含む界面活性剤系；ならびに（ｃ）ＧＥＭ−溶媒溶液および界面活性剤系と適合する親水性担体中に製剤化される。好ましくは、組成物は、例えば実施例１の組成物におけるような、少なくともそのような界面活性剤およびポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む。好ましくは、治療は、少なくとも２週間もしくは３週間、または少なくとも１ヶ月、１ヶ月から６ヶ月、またはさらには数年、例えば１年から２年間継続する。特定の実施形態において、用量は実施例６に記載される投薬レジメンで投与される。あるいは、ＧＥＭの適切なメトロノミック経口用量は、所望の投薬レジメン（実施例６で概説される投薬レジメンについて実施例６で行われたように）についてのＭＴＤ（またはＭＴＤの低い推定値として使用可能なＤＬＴを含まない用量）を決定し、ＭＴＤの画分（または最高の決定されたＤＬＴを含まない用量）を所望のレジメンのための適切な用量として選択することによって決定され得る。

メトロノミック投与は、無期限にまたは持続期間にわたって重大な中断または「休薬」なしに規則的なスケジュールで一般に進行する反復用量投与を口語的に指す。本明細書に使用される場合、ＧＥＭの「メトロノミック」経口投与は、規則的な中断されないスケジュールでのＧＥＭの分画ＭＴＤ経口製剤の反復投与を意味する。このようなスケジュールは、例えば、１日３回、１日２回、１日１回（ＱＤ）、１日おき（すなわちＱ２Ｄ）、３日毎（すなわちＱ３Ｄ）、４日毎（すなわちＱ４Ｄ）、５日毎（すなわちＱ５Ｄ）、週１回、週２回、または週３回の投与スケジュールなどの投与頻度を含んでもよい。投与計画は、所望される限り、長時間、または最大の回数の用量で、対象が耐えることができる限り、維持され得る。望ましくは、このようなメトロノミック投与は、数ヶ月または数年（または無期限）などの長期間にわたって抗腫瘍治療効果（例えば、腫瘍増殖の減少、停止、または反転）を発揮することができる。

本明細書に記載される、メトロノミック投与される経口ＧＥＭ製剤の物理的形態は重要ではない。米国特許出願公開第２０１０／０２７３７３０号に記載されている剤形のいずれかなどの、実質的に、生物学的に利用可能な形態で対象の胃腸管にＧＥＭを送達する任意の経口剤形を、本明細書に記載される量およびスケジュールで利用することができる。好ましくは、経口ＧＥＭ製剤は、米国特許出願公開第２０１０／０２７３７３０号に記載されている物質を含有するカプセルの形態で投与される。一例として、そのような物質は実施例１の表に記載された成分を有することができる。

ＧＥＭの経口製剤の対象へのメトロノミック投与は、例えば、対象に、全用量を含有する単一のカプセルもしくは軟質カプセルを投与することによって、それぞれ全用量の一部を含有する複数のカプセルもしくは軟質カプセルを投与することによって、錠剤を投与することによって、または液状エマルションを投与することによって達成され得る。ＧＥＭのメトロノミック経口投与は、腫瘍を治療する（例えば、腫瘍の増殖を阻害する、腫瘍の大きさを減少させる、または腫瘍を排除する）ための単剤療法として使用され得る。ＧＥＭのメトロノミック経口投与はまた、ＧＥＭまたは別の抗腫瘍剤を使用する別の抗腫瘍処置の前、後、またはそれと重複する補助的処置として実施されてもよい。例として、対象は、ＭＴＤ付近（例えば、１／２のＭＴＤより多い）の量のＧＥＭまたは別の抗腫瘍剤で処置されてもよく、このような処置の中断後、ＧＥＭのメトロノミック経口投与が本明細書に記載されるように実施されてもよい。あるいは、ＧＥＭのメトロノミック経口投与は、ＭＴＤ付近の処置と同時に開始され、その中断を超えて耐えることができる。さらに別の代替として、ＧＥＭのメトロノミック経口投与を実施することができ、別の抗腫瘍治療を、ＧＥＭのメトロノミック経口投与が行われる期間の一部のみの間に実施することができる。ＧＥＭのメトロノミック経口投与が補助的処置として実施される場合、他の処置は、ＧＥＭまたは別の抗腫瘍剤の経口投与を伴う処置、ＧＥＭまたは別の抗腫瘍剤の非経口（例えば、静脈内または腫瘍内注射）、または非薬物処置（例えば、腫瘍切除手術）を伴う処置であってもよい。

自己乳化経口医薬組成物
本明細書に記載される主題は、経口投与のためのＧＥＭの自己乳化医薬（ＳＥＰ）組成物を含む。ＧＥＭに加えて、ＳＥＰ組成物は、ＧＥＭを溶解してＧＥＭ溶媒溶液を形成するための１種以上の溶媒を含む。ＳＥＰ組成物はまた、界面活性剤系も含む。界面活性剤系は、約８〜約１７の範囲の親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）値を示す１種以上の界面活性剤である。ＳＥＰ組成物において、ＧＥＭ−溶媒溶液および界面活性剤系は、ＧＥＭ溶媒溶液および界面活性剤系の両方と適合する１種以上の親水性担体と組み合わされる。経口ＳＥＰ組成物で経口投与した場合、ＧＥＭの優れた生物学的利用能が観察される。驚くべきことに、このように経口投与されるＧＥＭの用量は本明細書に記載される有益な腫瘍治療応答を提供することができる。ＧＥＭの経口ＳＥＰ組成物はまた、良好な貯蔵安定性も示す。

したがって、一態様において、本発明は、ヒトに投与するための経口自己乳化医薬組成物であって、以下を含む医薬組成物を提供する：
（ａ）治療有効量のＧＥＭまたはＧＥＭの薬学的に許容される塩、その量は、同一（または実質的に類似）のＳＥＰ組成物中でヒトに経口投与される場合、ＧＥＭについてのＭＴＤの画分（すなわち半分未満）である、
（ｂ）ＧＥＭ溶媒溶液を形成するために薬物または塩を溶解することができる１種以上の溶媒、
（ｃ）１種以上の界面活性剤を含む界面活性剤系であって、約８〜約１７のＨＬＢ値を示す界面活性剤系、ならびに
（ｄ）ＧＥＭ溶媒溶液および界面活性剤系と適合する１種以上の親水性担体。

「自己乳化」という用語は、本明細書において、米国特許出願公開第２０１０／０２７３７３０号と同じ意味で使用される。すなわち、この用語は、製剤が水性媒体と接触したとき（軽いかき混ぜまたは回転などの軽度の機械的撹拌下で３７℃および１気圧で水と混合したときなど）に微細な油−水エマルションを生成する製剤を記述するために使用される。好ましくは、ＳＥＰ組成物がそのような水性媒体と接触すると、８００ｎｍ未満（より好ましくは４００ｎｍ未満、２００ｎｍ未満、または１００ｎｍ未満、例えば約１０ｎｍ）の平均粒径を有するエマルションを形成する。

本明細書に使用される場合、「治療有効量」という用語は、治療効果を与えるのに有効なＧＥＭの用量、特に、胃腸（ＧＩ）管の壁を通して体内に吸収された後に、組成物が投与される対象のＧＥＭ感受性腫瘍に対して検出可能な治療抗腫瘍効果を与える薬物の用量を意味する。通常、当業者は、組成物に含まれるＧＥＭの量が、例えば、対象の種、大きさ、年齢、および状態を含むがこれらに限定されない特定の条件によって変化することを理解する。

本明細書に使用される場合、「薬学的に許容される塩」という用語は、ＧＥＭの生物学的有効性および特性を実質的に保持する酸付加塩を含むが、これらに限定されない。このような酸付加塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、および酢酸、プロピオン酸、ピルビン酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、トリフルオロ酢酸などの有機酸を用いて形成することができる。

ＳＥＰ組成物において、１種以上の溶媒が、ＧＥＭ溶媒溶液を形成するためにＧＥＭまたはＧＥＭ塩を溶解するために使用される。好ましくは、溶媒の各々は、溶媒１００部（または３０、１０もしくは１部）未満にＧＥＭまたは塩の約１部（重量部）を溶解することができる。適切な溶媒の例としては、水、エタノール、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、イソプロパノール（ＩＰＡ）、１，２−プロパンジオール（プロピレングリコール）、グリセロール、酢酸、およびこれらの組み合わせが挙げられる。例として、溶媒は、ＳＥＰ組成物の重量を基準として約２．５％〜約６０％（ｗ／ｗ）の範囲の量で存在することができる。

ＳＥＰ組成物の界面活性剤系は、１種以上の界面活性剤を含み、約８〜約１７の範囲のＨＬＢ値を示す。ＨＬＢ値は、界面活性剤の親水性部分と親油性部分との間のバランスに従って界面活性剤をランク付けするために当該技術分野において公知であり、ＨＬＢ値が高いほど、界面活性剤は親水性が高く、ＨＬＢ値が低いほど、界面活性剤は親水性が低い。約８〜約１７の範囲のＨＬＢ値を有する単一の界面活性剤がＳＥＰ組成物に使用されてもよい。あるいは、高いＨＬＢの界面活性剤と低いＨＬＢの界面活性剤との組み合わせが使用されてもよい。界面活性剤または界面活性剤の組み合わせが約８〜約１７の範囲のＨＬＢ値を示す限り、界面活性剤の正確な選択および同一性は重要ではない。適切な界面活性剤には、カチオン性、アニオン性、および非イオン性界面活性剤が含まれる。適切な界面活性剤の例には、ポリソルベート、ポロキサマー、オレオイルポリオキシルグリセリド（商標名ＬＡＢＲＡＦＩＬ（商標）Ｍ１９４４ＣＳとして販売されているものなど）、リノレオイルポリオキシルグリセリド（ＬＡＢＲＡＦＩＬ（商標）Ｍ２１２５ＣＳなど）、カプリロカプロイルポリオキシルグリセリド（Ｌａｂｒａｓｏｌなど）、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体（ＰＥＧ４０硬化ヒマシ油、商標名ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（商標）ＥＬまたはＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（商標）ＲＨとして販売されているものなど）、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（商標名ＢＲＩＪ（商標）として販売されているものなど）、ソルビタン脂肪酸エステル（商標名ＳＰＡＮＳ（商標）として販売されているものなど）、モノオレイン酸グリセリル（商標名ＰＥＣＥＯＬ（商標）として販売されているものなど）、モノリノール酸グリセリル（商標名ＭＡＩＳＩＮＥ（商標）３５−１として販売されているものなど）、中鎖トリグリセリド、オレイン酸ポリグリセリル（商標名ＰＬＵＲＯＬ ＯＬＥＩＱＵＥ（商標）ＣＣ４９７として販売されているものなど）、ラウロイルポリオキシルグリセリド（商品名ＧＥＬＵＣＩＲＥ（商標）４４／１４として販売されているものなど）、ステアロイルポリオキシルグリセリド（商品名ＧＥＬＵＣＩＲＥ（商標）５０／１３として販売されているものなど）、プロピレングリコールジカプリロカプレート（商品名ＬＡＢＲＡＦＡＣ（商標）ＰＧとして販売されているものなど）、プロピレングリコールラウレート（商品名ＬＡＵＲＯＧＬＹＣＯＬ（商標）ＦＣＣとして販売されているものなど）、プロピレングリコールモノラウレート（商品名ＬＡＵＲＯＧＬＹＣＯＬ（商標）９０として販売されているものなど）、プロピレングリコールカプリレート（商品名ＣＡＰＲＹＯＬ（商標）ＰＧＭＣとして販売されているものなど）、およびプロピレングリコールモノカプリレート（商品名ＣＡＰＲＹＯＬ（商標）９０として販売されているものなど）などが含まれる。これらの界面活性剤は、本明細書に記載されるＨＬＢ特性にされて、単独でまたは組み合わせて使用されてもよい。より好ましくは、約９〜約１３、さらにより好ましくは約１０〜約１２のＨＬＢ値を有する界面活性剤がＳＥＰ組成物に含まれる。例えば、ＳＥＰ組成物は、界面活性剤系としてポリソルベートおよびオレオイルポリオキシルグリセリドの混合物を含んでもよい。界面活性剤系の正確な同一性および量は重要ではないが、系は好ましくはＳＥＰ組成物の重量に基づいて約２０％〜約７５％（ｗ／ｗ）の量で存在する。

ＳＥＰ組成物は、ＧＥＭ溶媒溶液および界面活性剤系と適合する１種以上の親水性担体を含む。本明細書に使用される場合、「適合する」とは、広範な混合または他の処理を必要とせずに安定な均質な溶液を形成するように親水性担体がＧＥＭ溶媒溶液および界面活性剤系と混合され得るかまたは分散され得ることを意味する。好ましくは、各々の親水性担体は、１部のＧＥＭまたはＧＥＭ塩が約１０〜１０，０００部（重量部）の親水性担体と均質に混合されるような量で、ＳＥＰ組成物の他の成分と混合可能である。好適な親水性担体の例としては、ポリソルベート、エタノール、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ２００、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００、ＰＥＧ１０００、ＰＥＧ２０００、ＰＥＧ３０００、ＰＥＧ４０００、ＰＥＧ６０００、またはＰＥＧ８０００などのＰＥＧ）、グリセロール、１，２−プロパンジオール（プロピレングリコール）、プロピレンカーボネート（ＰＣ）、およびジエチレングリコールモノエチルエーテル（商標名ＴＲＡＮＳＣＵＴＯＬ（商標）ＨＰとして販売されているものなど）が挙げられる。親水性担体は、好ましくは、ＳＥＰ組成物の重量に基づいて約２％〜約６０％（ｗ／ｗ）の量で存在する。

ＳＥＰ組成物は、任意選択で、抗酸化剤（例えば、Ｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコール１０００コハク酸エステル、ＴＰＧＳ）などの他の成分を含んでもよい。ＳＥＰ組成物のｐＨは、好ましくは、ＧＥＭの解離定数（ｐＫａ）を超えるｐＨ（すなわち、ｐＨ４．０超）、例えば５〜８のｐＨを有するように調節される。

ＳＥＰ組成物の成分および量は、保存中に良好な安定性を示すように（例えば、実験的に）選択されるべきであり、このことは、特に、１、３、６、または１２ヶ月の期間などの選択された保存期間中に、その中に含まれるＧＥＭの実質的な相分離、物質沈殿、テクスチャ変化、または分解がないことを意味する。「ＧＥＭの実質的な分解なし」とは、選択された期間、保存された後に組成物中で治療的に不活性になるＧＥＭの量が、元の量の約２０％未満、好ましくは約１０％未満であることを意味する。

いくつかの実施形態において、溶媒および親水性担体は、特に、本発明の医薬組成物の重量に基づいて、約２５％〜約６５％（ｗ／ｗ）、より具体的には約４０％〜約６０％（ｗ／ｗ）、さらにより具体的には約５０％（ｗ／ｗ）の範囲の量で一緒に存在する。特に、溶媒および親水性担体は本発明の医薬組成物中に約１：０．１〜約１：９の重量比で存在する。より具体的には、本発明の医薬組成物が経口溶液の形態である場合、溶媒および親水性担体は、本発明の医薬組成物中に約１：０．１〜約１：２の重量比で存在し；本発明の医薬組成物がカプセルの形態である場合、溶媒および親水性担体は、本発明の医薬組成物中に約１：１〜約１：９の重量比で存在する。他方で、親水性担体および界面活性剤系は、特に、本発明の医薬組成物の重量に基づいて、約５０％〜約９５％（ｗ／ｗ）、より具体的には約６５％〜約８５％（ｗ／ｗ）、さらにより具体的には約７５％（ｗ／ｗ）の範囲の量で一緒に存在する。具体的には、親水性担体および界面活性剤系は、本発明の医薬組成物中に約１：０．３〜約１：３２．５、より具体的には約１：１〜約１：２０、さらにより具体的には約１：１．５の重量比で存在する。

一つの実施形態において、溶媒、親水性担体および界面活性剤系は、本発明の医薬組成物中に約２：３：４．５の重量比で存在する。

特定の実施形態において、本発明の自己微小乳化医薬組成物は、ゲムシタビンまたはその薬学的に許容される塩、水、グリセロール、ＰＥＧ、ポリソルベート、およびオレオイルポリオキシルグリセリドを含む。特定の例において、ゲムシタビンは医薬組成物の重量に基づいて約２．００％（ｗ／ｗ）の量で存在し；水は医薬組成物の重量に基づいて約２０．００％（ｗ／ｗ）の量で存在し；グリセロールおよびＰＥＧは医薬組成物の重量に基づいて約３２．３０％（ｗ／ｗ）の量で一緒に存在し；ポリソルベートおよびオレオイルポリオキシルグリセリドは医薬組成物の重量に基づいて約４５．７０％（ｗ／ｗ）の量で一緒に存在する。

特定の実施形態において、本発明の自己乳化医薬組成物は、ゲムシタビンまたはその薬学的に許容される塩、水、プロピレングリコール、ＰＥＧ、ポリソルベート、およびオレオイルポリオキシルグリセリドを含む。特定の例において、ゲムシタビンは医薬組成物の重量に基づいて約２．００％（ｗ／ｗ）の量で存在し、水は医薬組成物の重量に基づいて約２０．００％（ｗ／ｗ）の量で存在し、プロピレングリコールおよびＰＥＧは医薬組成物の重量に基づいて約３２．３０％（ｗ／ｗ）の量で一緒に存在し、ポリソルベートおよびオレオイルポリオキシルグリセリドは医薬組成物の重量に基づいて約４５．７０％（ｗ／ｗ）の量で一緒に存在する。

特定の実施形態において、本発明の自己乳化医薬組成物は、ゲムシタビンまたはその薬学的に許容される塩、水、グリセロール、ＰＥＧ、ポリソルベート、オレオイルポリオキシルグリセリド、およびＴＰＧＳを含む。特定の例において、ゲムシタビンは医薬組成物の重量に基づいて約１．９８％（ｗ／ｗ）の量で存在し、水は医薬組成物の重量に基づいて約１９．８％（ｗ／ｗ）の量で存在し、グリセロールおよびＰＥＧは医薬組成物の重量に基づいて約３１．９８％（ｗ／ｗ）の量で一緒に存在し、ポリソルベートおよびオレオイルポリオキシルグリセリドは医薬組成物の重量に基づいて約４５．２５％（ｗ／ｗ）の量で一緒に存在し、ＴＰＧＳは医薬組成物の重量に基づいて約０．９９％（ｗ／ｗ）の量で存在する。

本発明の医薬組成物は、必要に応じて、結合剤、充填剤、充填剤／結合剤、吸着剤、湿潤剤、崩壊剤、潤滑剤および類似物などの当該技術分野において公知の医薬賦形剤を含有してもよい、カプセル、錠剤、粉末またはコーティングされた顆粒剤を含むがこれらに限定されない、任意の経口的に許容される剤形で経口投与されてもよい。

本発明の特定の実施形態において、医薬組成物は、密封された軟質カプセルまたは硬質カプセルにカプセル化される。カプセルは、ＧＩ管の特定の領域で溶解する、例えば、その内容物をそこで放出する、任意の公知の種類であってもよい。このようなカプセルの例は、腸溶コーティング軟質または硬質ゼラチンカプセルである。腸溶コーティングは、公知のように、胃液中での溶解に抵抗するが、腸内で崩壊する物質または物質の組み合わせでコーティングされる。

本明細書に記載されるＳＥＰ組成物は、本開示を考慮して当該技術分野において一般に使用される任意の標準的な方法を使用して、ＧＥＭを１種以上の溶媒、１種以上の親水性担体、および界面活性剤系と混合することによって調製され得る。いくつかの実施形態において、ＧＥＭは、１種以上の溶媒および１種以上の親水性担体と最初に混合され、次いで界面活性剤系とさらに混合される。調製の詳細は以下の実施例に記載される。

ＧＥＭのＳＥＰ組成物は、Ｉｎｎｏｐｈａｒｍａｘ，Ｉｎｃ．の米国特許出願公開第２０１０／０２７３７３０号（例えば、その公報における「Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ＩＶ」を参照のこと）に記載されており、これらの製剤は、メトロノミック投薬量を送達するように調節されて、本明細書に記載される方法に使用され得る。

本開示の主題をここで以下の実施例を参照して説明する。これらの実施例は例示のみのために提供され、主題はこれらの実施例に限定されず、むしろ、本明細書に提供される教示の結果として明らかである全ての変形を包含する。

以下の略語を実施例において使用する：
「ＧＥＭ」はゲムシタビンを意味する。
「５ＦＵ」は５−フルオロウラシルを意味する。
「Ｑ３Ｄ」は３日毎のその従来の意味を有する。
「Ｑ２Ｄ」は２日毎のその従来の意味を有する。
「ＧＥＭＯＲＡＬ」は、本明細書に記載される経口投与のために製剤化されたＧＥＭの自己乳化調製物を意味する。

実施例１
ＧＥＭＯＲＡＬ調製物
本明細書に記載されるＧＥＭＯＲＡＬ組成物は、単位用量あたり８０ｍｇのＧＥＭ遊離塩基を含有することを意図した製剤についての単位用量あたりの量として表される、以下の組成を有した：

本明細書に記載されるＧＥＭＯＲＡＬ組成物は以下のように作製した。グリセリンおよびＰＥＧ４００を秤量し、液体表面に目に見える渦が形成されるように蓋なし（オープントップ（ｏｐｅｎ−ｔｏｐ））容器中で十分に混合した。少なくとも成分が、もはや別々に区別できなくなるまで混合を続けた。約５分間にわたって混合を続けながら、この溶液に、示した量のＧＥＭ ＨＣｌをグリセリン／ＰＥＧ４００混合物に徐々に添加し、添加後、少なくとも約１５分間混合を続けた。混合を継続しながら、混合物のｐＨを５ＮのＮａＯＨの添加により６．００±０．１０に調整した。撹拌を継続しながら、水を混合物に添加した。さらに１０分間撹拌を継続し、次いで停止した。この時点までの全ての工程は、温度制御を課さずにほぼ室温の試薬を使用して室温（約２０℃）にて実施した。

ＬＡＢＲＡＦＩＬ（登録商標）およびＴＷＥＥＮ（登録商標）８０（界面活性剤）を合わせ、液体表面に目に見える渦が形成されるように３０℃にて均一に見えるように十分に混合した。混合を継続しながら、ＧＥＭ ＨＣｌ含有混合物を界面活性剤混合物と合わせ、混合物の温度を３０℃に制御しながら約３０分間混合を継続し、次いで混合を停止し、合わせた混合物（ＧＥＭＯＲＡＬ組成物）を（例えば、バイアル中に）充填し、保存した（例えば、２０〜２５℃）。

いくつかの実験では、ＧＥＭＯＲＡＬ組成物を充填し、個々のバイアルに保存し、その各々は約４．６グラムのＧＥＭＯＲＡＬ組成物を含有した。他の実験では、多量のＧＥＭＯＲＡＬ組成物を使用前にバルクで保存した。ＧＥＭＯＲＡＬ製剤は軟質ゲル型カプセルを含む様々な剤形に含めるのに適している。例えば、４０ｍｇのＧＥＭ（遊離塩基ベースで）を含有するＧＥＭＯＲＡＬ製剤の量を、単独で、または他の賦形剤と混合して、経口投与用の軟質ゲルカプセルに組み込むことができる。

本明細書に記載される異種移植マウス試験で使用される投与溶液（遊離塩基ベースで１および０．３ｍｇ／ｍｌのＧＥＭ）を作製するために、上記のＧＥＭＯＲＡＬ製剤を室温（約２５℃）にし、室温にて撹拌しながら脱イオン水と合わせた。

１０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭ経口投与溶液を作製するために、６．２８９グラムの１．６ｍｇ／ｋｇのＧＥＭＯＲＡＬ溶液（ＧＥＭＯＲＡＬ製剤８０ｍｇを脱イオン水で希釈して、遊離塩基ベースで１．６ｍｇ／ｍｌのＧＥＭを含有する組成物を得ることによって作製した）を、１０ミリリットルのメスフラスコ中で水と合わせた。撹拌後、体積を１０．０ミリリットルにし（１ｍｇのＧＥＭ／ｍｌ溶液を得た）、調製の４時間以内に、個々のマウス体重に基づいて、個々の異種移植マウスに溶液を経口投与した。

３ｍｇ／ｋｇのＧＥＭ経口投与溶液を作製するために、１．６ｍｇ／ｋｇのＧＥＭＯＲＡＬ溶液１．８８７グラムを、１０ミリリットルメスフラスコ中の水と合わせた。撹拌後、体積を１０．０ミリリットルにし（０．３ｍｇのＧＥＭ／ｍｌ溶液を得た）、調製の４時間以内に、個々のマウス体重に基づいて、個々の異種移植マウスに溶液を経口投与した。

実施例２
ヒト胆管がんの異種移植マウスモデルにおける高用量のＧＥＭ注射および／またはＧＥＭＯＲＡＬ投与のｉｎ ｖｉｖｏ有効性
この実施例は、ヒト患者由来胆管がんの一部が異種移植されたマウスに対するゲムシタビンの効果の試験を記載する。次いで異種移植マウスを５つの処置レジメンのうちの１つで処置し、結果を観察した。

本試験で使用する異種移植マウスを準備するために、ヒト患者から得た原発性ヒト胆管がん断片を「ストック」雄ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスに注射した。続いて、腫瘍断片（約２〜３ｍｍ直径）を「ストック」マウスから採取し、他の雄ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスの右側腹部に皮下接種した。次いで、接種されたマウスにおける腫瘍の発生を観察し、４０匹のそのようなマウスを、それらの腫瘍体積が約１８０立方ミリメートルに達したときに、この試験に含めるために選択した（体積は、腫瘍長さに１／２（腫瘍幅の２乗）を掛けることによって評価し（すなわち、Ｌ×Ｗ^２／２）、長さおよび幅はカリパスを使用して測定した）。マウスを、試験のために各々８匹のマウスの５つのグループに分け、各グループにおける全てのマウスは、ほぼ等しいサイズの腫瘍を有した。マウスが最初に投薬された日を試験の「１日目」と指定し、試験を７６日間継続した。マウスをグループ１、２、３、４および５に分けた。各群のマウスを同様に処置した。

グループ１のマウスに、試験の１、４、７、および１０日目に６０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭを腹腔内注射し（すなわち、Ｑ３Ｄ×４）、その後さらに処置しなかった。

グループ２のマウスに、試験の１、４、７、および１０日目に、６０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭを腹腔内注射した（すなわち、Ｑ３Ｄ×４）。試験の１３日目に開始して、マウスに、ＧＥＭＯＲＡＬ組成物中の１０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭ（本明細書以下、「１０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭＯＲＡＬ」）を、試験の終わりまで１日おきに経口投与した（すなわち、Ｑ２Ｄ×３２）。

グループ３のマウスに、試験の１、４、７、および１０日目に、６０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭを腹腔内注射した（すなわち、Ｑ３Ｄ×４）。また、試験の１日目に開始して、マウスに、１０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭＯＲＡＬを、試験の終わりまで１日おきに経口投与した（すなわち、Ｑ２Ｄ×３８）。

グループ４のマウスに、１０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭＯＲＡＬを１日おきに経口投与し（すなわち、Ｑ２Ｄ×３８）、試験の１日目に開始し、試験の終わりまで延長した。

グループ５のマウスは対照であり、ＧＥＭを投与しなかった。それらに、試験の１、４、７および１０日目に生理食塩水を腹腔内注射した（すなわち、Ｑ３Ｄ×４）。試験の１３日目から始めて、マウスに、蒸留脱イオン水を、試験の終わりまで１日おきに経口投与した（すなわち、Ｑ２Ｄ×３２）。

この試験を７６日目まで継続し、種々のグループのマウスの体重減少を観察した。グループ１および２の各々について、８匹のマウスのうち４匹が７６日目までに死亡した（「死亡した」は、死亡したマウスおよび腫瘍サイズ＞１０００立方ミリメートルを示すマウスの両方を含む）。この試験に使用したマウスの生存率を図２に示す。グループ３では、１０日目までに８匹のマウスのうち６匹が死亡した。グループ４では、全てのマウスが７６日目まで生存したことから明らかなように処置は十分に許容された（対照グループ５では、対照的に、全てのマウスが約６２日目までに死亡した）。

図１に示すように、グループ１、２、３および４の各々からのマウスは、グループ５の対照マウスと比較して、有意な腫瘍退縮（すなわち、抗腫瘍反応）を示した。

腫瘍体積に対する種々の処置の効果を図１に示す。ビヒクルグループ（グループ５）と比較して、グループ１、２、３および４のマウスは有意な抗腫瘍反応を示した。異なる試験日における、ビヒクル処置と比較した抗腫瘍反応を反映する値を表１に示す（Ｔ／Ｃ％、処置グループにおける平均腫瘍体積対対照群｛グループ５｝における平均腫瘍体積の比率として計算した、パーセンテージとして表す）。グループ１のマウス（すなわち、ＧＥＭのＭＴＤ、６０ｍｇ／ｋｇのＱ３Ｄ×４；累積用量＝２４０ｍｇ／ｋｇ）は、１４日目に有意な抗腫瘍反応（Ｔ／Ｃ＝５２％）を示した。グループ２および４のマウスは１４日目に同様の反応（５８％および５７％のＴ／Ｃ値）を示した；１４日目までに、グループ４についてのＧＥＭの累積用量がグループ１の約２５％に過ぎなかったことは注目に値する。

グループ１における動物は、グループ１における予定された投与の完了後（すなわち、１１日後）に顕著な腫瘍増殖を示した。対照的に、グループ２および４の動物は、０日目の元の腫瘍体積よりも４２日目から７６日目までに小さな腫瘍体積を示した。単剤としてのＧＥＭＯＲＡＬまたはＧＥＭ−ＭＴＤ処置後に、ビヒクル処置と比較して有意な抗腫瘍反応が生じた（グループ２および４の各々についてＴ／Ｃ＝３％、７６日目にｐ＜０．０５）。さらに、グループ２および４における腫瘍体積は、４２日目から７６日目までのＭＴＤスケジュール（グループ１）よりも有意に大きい腫瘍増殖阻害を示した（ｐ＜０．０５）。

ＧＥＭ注射に加えてＧＥＭＯＲＡＬを与えられた腫瘍異種移植マウス（グループ２および３）、またはＧＥＭＯＲＡＬのみを与えられた腫瘍異種移植マウス（グループ４）は、ＧＥＭのみを注射されたマウス（グループ１）よりも大きな腫瘍退縮を示した。試験の最初の１０日間にゲムシタビンの経口投与と注射の両方を受けたマウスは、注射した薬物のみを受けたマウスよりも高い死亡率を示した（潜在的な薬物毒性効果）。ゲムシタビンの経口投与のみを受けたマウスは、試験の最後まで、薬物の注射のみまたは経口投与および注射の両方を受けたマウスよりも低い死亡率を示した。

これらの結果は、経口メトロノミックゲムシタビンが、少なくとも胆管がんの退縮を誘導するために、ゲムシタビン注射と一緒に、またはゲムシタビン注射なしで効果的に使用され得ることを示す。

実施例３
ヒト胆管がんの第２の異種移植マウスモデルにおける高用量のＧＥＭ注射および／またはＧＥＭＯＲＡＬ投与のｉｎ ｖｉｖｏ有効性
実施例３は、ヒト胆管がん細胞株ＨｕＣＣＴ１の細胞が異種移植されたマウスに対するＧＥＭの効果の試験である。次いで異種移植マウスを５つの処置レジメンのうちの１つで処置し、結果を９０日の試験期間にわたって観察した。

この試験に使用する異種移植マウスを準備するために、１×１０^６のＨｕＣＣＴ１ヒト胆管がん細胞を、６週齢の雄ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスの右側腹部に皮下移植した。腫瘍増殖を週に１回観察し、腫瘍体積をカリパスによりＬ×Ｗ^２／２として測定した。次いで異種移植マウスにおける腫瘍発生を観察し、４０匹のそのようなマウスを、それらの腫瘍体積が約１２４立方ミリメートルに達したときに、この試験に含めるために選択した。マウスを、試験のために各々８匹のマウスの５つのグループに分けた。マウスが最初に投薬された日を試験の「０日目」と指定し、試験を９０日間継続した。

グループ１のマウスに、試験の０、３、６、および９日目に６０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭを腹腔内注射し（すなわち、Ｑ３Ｄ×４）、その後さらに処置しなかった。

グループ２のマウスに、試験の０、３、６、および９日目に、６０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭを腹腔内注射した（すなわち、Ｑ３Ｄ×４）。試験の１３日目に開始して、マウスに、ＧＥＭＯＲＡＬ組成物中の１０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭ（本明細書以下において「１０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭＯＲＡＬ」）を、試験の終わりまで１日おきに経口投与した（すなわち、Ｑ２Ｄ×４０）。

グループ３のマウスに、試験の０、３、６、および９日目に、６０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭを腹腔内注射した（すなわち、Ｑ３Ｄ×４）。また、試験の１日目に開始して、マウスに、１０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭＯＲＡＬを、試験の終わりまで１日おきに経口投与した（すなわち、Ｑ２Ｄ×４６）。

グループ４のマウスに、１０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭＯＲＡＬを１日おきに経口投与し（すなわち、Ｑ２Ｄ×４６）、試験の１日目に開始し、試験の終わりまで延長した。

グループ５のマウスは対照であり、ＧＥＭを投与しなかった。それらに、試験の０、３、６および９日目に生理食塩水を腹腔内注射した（すなわち、Ｑ３Ｄ×４）。試験の１３日目から始めて、マウスに、蒸留脱イオン水を、試験の終わりまで１日おきに経口投与した（すなわち、Ｑ２Ｄ×４０）。

この試験を９０日目まで継続し、種々のグループのマウスの体重減少を観察した。グループ３では、全てのマウスが１２日目までに２０％を超える体重が減少した。処置は他の全ての処置グループ（すなわち、図４に示す生存率によって示されるグループ１、２および４）において許容された。Ｋａｐｌａｎ−Ｍａｉｅｒ分析を使用して生存率を計算すると、９０日目の生存率はグループ１で５０％（４／８匹のマウス）、グループ２で８７．５％（７／８匹のマウス）、グループ３で０％（０／８匹のマウス）、グループ４で８７．５％（７／８匹のマウス）、グループ５で３７．５％（３／８匹のマウス）であった。グループ１、２、３、４および５におけるマウスについての平均生存時間（ＭＳＴ）は、それぞれ、６９、＞９０、８、＞９０および７９日であった。グループ２および４におけるマウスについてのＭＳＴは、ビヒクル処置（グループ５）と比較して、わずかに有意に延長した。ＭＳＴは、グループ１、３および５におけるマウスの間で有意に異ならなかった。

図３に示すように、グループ１、２、３および４の各々からのマウスはグループ５の対照マウスと比較して、有意な腫瘍退縮（すなわち、抗腫瘍反応）を示した。異なる試験日におけるビヒクル処置と比較した抗腫瘍反応を反映する値を表２に示す（Ｔ／Ｃ％）。グループ１、２および４のマウスは、それぞれ、６日目から３０日目まで、６日目から９０日目まで、および１２日目から７６日目までに有意な抗腫瘍反応を示し、最大腫瘍増殖阻害値は、グループ１については２７日目で４７％、グループ２については３７日目で２７％、およびグループ４については３７日目で３６％であった。１２日目までに、グループ４についてのＧＥＭの累積用量はグループ１の約２５％に過ぎなかったことは注目に値する。

本試験において、本発明者らは、ＧＥＭをほぼＭＴＤで腹腔内注射すると、ＧＥＭのメトロノミック経口投与を注射と一緒にまたは注射後、投与するか、しないかに関わらず、ｉｎ ｖｉｖｏで胆管がん腫瘍増殖を有意に阻害できること；経口メトロノミックＧＥＭはまた、ＧＥＭの注射なしでｉｎ ｖｉｖｏで胆管がん腫瘍増殖を有意に阻害できることを見出した。しかしながら、ＧＥＭ注射は、３０日後にグループ１のマウスで観察された腫瘍増殖において示されるように、ＧＥＭ注射を停止した後も有意な抗腫瘍活性を示し続けなかった。腫瘍再発は、少なくとも時々、臨床化学療法後に起こることが知られており、これらのデータはその経験を反映しているようである。本発明者らは、非経口ＧＥＭ療法と併用した経口メトロノミックＧＥＭが、より長期間にわたって腫瘍増殖を抑制できるかどうかを評価した。結果は、非経口ＧＥＭ療法と併用した経口メトロノミックＧＥＭが、少なくとも３４日目から５８日目まで注射ＧＥＭ単剤療法と比較して、有意に腫瘍増殖阻害を延長したことを示す。さらに、経口メトロノミックＧＥＭ単剤療法（すなわち、グループ４）または非経口ＧＥＭ療法後（すなわち、グループ２）の場合、それぞれ、少なくとも７６日目および９０日目まで、ビヒクル処置と比較して有意な抗腫瘍活性を生じた。さらに、単剤療法として、または非経口ＧＥＭ療法後の経口メトロノミックＧＥＭ単剤療法は、ビヒクル処置と比較して生存期間を有意に延長した。

まとめると、この実施例に示された結果は、単剤療法として、または非経口ＧＥＭ療法後の経口メトロノミックＧＥＭ単剤療法が、ＨｕＣＣＴ１胆管がん腫瘍増殖を阻害し、ｉｎ ｖｉｖｏでの生存期間を延長したことを示し、これらの療法が、少なくとも胆管がんおよびＧＥＭに感受性のある他の腫瘍を治療するための新たな手法を提供し得ることを示唆する。

実施例４
ヒト膵臓がんの異種移植マウスモデルにおける高用量ＧＥＭ注射および／またはＧＥＭＯＲＡＬ投与のｉｎ ｖｉｖｏ有効性
実施例４は、ヒト膵臓がん細胞株ＣＦＰＡＣ−１の細胞が異種移植されたマウスに対するＧＥＭの効果の試験である。次いで異種移植マウスを６つの処置レジメンのうちの１つで処置し、結果を９１日間の試験期間にわたって観察した。

この試験に使用する異種移植マウスを準備するために、１×１０^６のヒトＣＦＰＡＣ−１膵臓がん細胞を、６週齢の雄ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスの右側腹部に皮下移植した。腫瘍増殖を週に１回観察し、腫瘍体積をカリパスによりＬ×Ｗ^２／２として測定した。次いで異種移植マウスにおける腫瘍発生を観察し、４８匹のそのようなマウスを、それらの腫瘍体積が約１４１立方ミリメートルに達したときに、この試験に含めるために選択した。マウスを、試験のために各々８匹のマウスの６つのグループに分けた。マウスが最初に投薬された日を試験の「０日目」と指定し、試験を９１日間継続した。

グループ１のマウスに、０日目およびその後６６日目まで３日毎に（すなわち、Ｑ３Ｄ×２３）、１２０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭを腹腔内注射し、その後さらに処置しなかった。

グループ２のマウスに、試験の０、３、６、および９日目に（すなわち、Ｑ３Ｄ×４）、１２０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭを腹腔内注射した。試験の１２日目に開始して、マウスに、ＧＥＭＯＲＡＬ組成物中の１０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭ（本明細書以下において「１０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭＯＲＡＬ」）を、６６日目まで１日おきに（すなわち、Ｑ２Ｄ×２８）経口投与し、その後、マウスをさらに処置しなかった。

グループ３のマウスに、試験の０、３、６、および９日目に（すなわち、Ｑ３Ｄ×４）、１２０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭを腹腔内注射した。試験の１２日目に開始して、マウスに、ＧＥＭＯＲＡＬ組成物中の３ｍｇ／ｋｇのＧＥＭ（本明細書以下において「３ｍｇ／ｋｇのＧＥＭＯＲＡＬ」）を、６６日目まで毎日（すなわち、ＱＤ×５５）経口投与し、その後、マウスをさらに処置しなかった。

グループ４のマウスに、試験の０日目に開始し、試験の終わりまで延長して、３ｍｇ／ｋｇのＧＥＭＯＲＡＬを毎日（すなわち、ＱＤ×９２）経口投与した。

グループ５のマウスに、１０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭＯＲＡＬを１日おきに（すなわち、Ｑ２Ｄ×４６）経口投与し、試験の０日目に開始し、試験の終わりまで延長した。

グループ６のマウスは対照であり、ＧＥＭを投与しなかった。それらに、試験の０、３、６および９日目（すなわち、Ｑ３Ｄ×４）に生理食塩水を腹腔内注射した。試験の１３日目から始めて、マウスに、試験の終わりまで１日おきに（すなわち、Ｑ２Ｄ×２８）、蒸留脱イオン水を経口投与した。

試験を９１日目まで継続した。試験に使用したマウスの生存率を図６に示す。生存率は、Ｋａｐｌａｎ−Ｍａｉｅｒ分析を使用して評価した（「死亡」は、死亡したマウスおよび腫瘍の大きさ＞２５００立方ミリメートルを示すマウスの両方を含んだ）。グループ１、２、３、４、５、および６におけるマウスについてのＭＳＴは、それぞれ、＞９１、＞９１、＞９１、５３．５、＞９１、および６０日であった。グループ１、２、３および５におけるマウスについてのＭＳＴは、ビヒクル処置（グループ６）と比較してわずかに有意に延長した。ＭＳＴは、グループ４におけるマウスとビヒクル群（グループ６）におけるマウスとの間で有意差はなかった。

各群におけるマウスについての腫瘍増殖を図５に示す。グループ１、２、３、４および５の各々におけるマウスは、ビヒクル処置（グループ６）と比較して１４日目から９１日目までに有意な抗腫瘍反応を示した。最大抗腫瘍反応は、グループ１のマウスについて８１日目（Ｔ／Ｃ０％）、グループ２のマウスについて３９日目（Ｔ／Ｃ０．８％）、グループ３のマウスについて６７日目（Ｔ／Ｃ０％）、グループ４のマウスについて７４日目（Ｔ／Ｃ０．１％）、およびグループ５のマウスについて７７日目（Ｔ／Ｃ３％）に観察された。さらに、ビヒクル処置群（グループ６）のマウスにおける腫瘍体積と比較して、各々の処置群におけるマウスは処置の１〜２週間後に腫瘍退縮を示した。いくつかの処置群における少なくとも数匹のマウスは、グループ１のマウスについては４４〜９１日目（６／８匹のマウスは９１日目に腫瘍がない）、グループ２のマウスについては３２〜９１日目（６／８匹のマウスは９１日目に腫瘍がない）、グループ３のマウスについては２８〜９１日目（５／８匹のマウスは９１日目に腫瘍がない）、およびグループ４のマウスについては３９〜９１日目（２／８匹のマウスは９１日目に腫瘍がない）に腫瘍がなかった。

一部のマウスは部分反応率を示し、これは腫瘍体積（親腫瘍体積と比較して）の少なくとも３０％の減少が観察されたことを意味する。このようなマウスの割合は、グループ３で１３％（１／８匹のマウス）、グループ４で２５％（２／８匹のマウス）、およびグループ５で３８％（３／８匹のマウス）であった。

この試験において、本発明者らは、ＧＥＭの経口メトロノミック投与、ほぼＭＴＤのＧＥＭの腹腔内注射、およびこれらの療法の組み合わせが、マウスに異種移植されたヒト膵臓がん細胞株に対してｉｎ ｖｉｖｏ有効性を示すことを見出した。これらのデータは、これらの処置がヒトにおける膵臓がんを処置するために使用され得ることを示す。

実施例５
ヒト膵臓がんの異種移植マウスモデルにおける５−フルオロウラシル注射、その後のＧＥＭＯＲＡＬ投与のｉｎ ｖｉｖｏ有効性
５−フルオロウラシル（５ＦＵ）注射を使用した膵臓がん単剤療法が知られている。しかしながら、一部の膵臓腫瘍は５ＦＵ療法に反応しない（または強く反応しない）。本発明者らは、異種移植モデルを使用して５ＦＵ非反応性膵臓腫瘍における第二選択処置としての経口メトロノミックＧＥＭ投与を調べた。

この試験に使用する異種移植マウスを準備するために、１×１０^６のヒトＣＦＰＡＣ−１膵臓がん細胞を、６週齢の雄ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスの右側腹部に皮下移植した。腫瘍増殖を週に１回観察し、カリパスによって腫瘍体積をＬ×Ｗ^２／２として測定し、マウスを、それらの腫瘍体積が約１３１立方ミリメートルに達したときにこの試験に含めるために選択した。マウスを、試験のために各々６〜８匹のマウスの４つのグループに分けた。マウスが最初に投薬された日を試験の「０日目」と指定し、試験を１１２日間継続した。

グループ１のマウスに、１０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭＯＲＡＬを１日おきに（すなわち、Ｑ２Ｄ×５６）経口投与し、試験の０日目に開始し、試験の終わりまで延長した。

グループ２のマウスに、０日目に開始し、試験の最初の９週間継続して、２０ｍｇ／ｋｇの５ＦＵを週３回腹腔内注射した。試験の６３日目に開始して、マウスに、１０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭＯＲＡＬを、試験の終わりまで１日おきに（すなわち、Ｑ２Ｄ×２５）経口投与した。

グループ３のマウスに、０日目に開始し、試験の最初の３週間継続して、２０ｍｇ／ｋｇの５ＦＵを週３回腹腔内注射した。試験の２１日目に開始して、マウスに、１０ｍｇ／ｋｇのＧＥＭＯＲＡＬを、試験の終わりまで１日おきに（すなわち、Ｑ２Ｄ×４６）経口投与した。

グループ４のマウスは対照であり、５ＦＵまたはＧＥＭを投与しなかった。それらに、試験の０、３、６および９日目（すなわち、Ｑ３Ｄ×４）に生理食塩水を腹腔内注射した。試験の１３日目から開始して、マウスに、蒸留脱イオン水を、試験の終わりまで１日おきに（すなわち、Ｑ２Ｄ×５１）経口投与した。

試験を１１２日目まで継続した。この試験に使用したマウスの生存率を図８に示し、Ｋａｐｌａｎ−Ｍａｉｅｒ分析を使用して評価した（「死亡」は、死亡したマウスおよび腫瘍サイズ＞２５００立方ミリメートルを示すマウスの両方を含む）。グループ１、２、３および４におけるマウスについてのＭＳＴは、それぞれ、＞１１２、＞１１２、＞１１２および６０日であった。グループ１、２、および３におけるマウスについてのＭＳＴは、ビヒクル処置（グループ４）と比較してわずかに有意に延長した。

各群におけるマウスについての腫瘍増殖を図７に示す。グループ１、２および３の各々におけるマウスは、ビヒクル処置（グループ４）と比較して、グループ１について１１〜１１２日目、グループ２について７４〜１１２日目、およびグループ３について３２〜１１２日目に有意な抗腫瘍反応を示した。最大抗腫瘍反応は、グループ１のマウスについて７７日目（Ｔ／Ｃ３％）、グループ２のマウスについて１０５日目（Ｔ／Ｃ３９％）、グループ３のマウスについて１１２日目（Ｔ／Ｃ８％）に観察された。

５ＦＵ処置に起因する有意な抗腫瘍反応はグループ２および３のマウスにおいて観察されなかった。しかしながら、経口メトロノミックＧＥＭに起因する抗腫瘍反応は、ＧＥＭＯＲＡＬ投与の開始直後に観察可能であった（抗腫瘍反応はビヒクル処置マウスとは有意に異なり、グループ２について少なくとも７４日目までに開始し、グループ３について３２日目までに開始する）。

グループ３の１匹のマウスは１１２日目までに腫瘍がなかった。

これらの結果は、経口メトロノミックＧＥＭ投与が、５ＦＵ処置膵臓がんのための、または５ＦＵ処置に反応しないこのようながんの主要な処置のための第二選択処置として使用され得ることを示す。

実施例６
ヒト患者におけるメトロノミック用量選択のためのＧＥＭＯＲＡＬについてのＭＴＤの決定
用量漸増試験を、ＧＥＭＯＲＡＬ製剤で経口投与されるＧＥＭについてのＭＴＤを決定する目的で、各々３〜６人のヒト患者（平均体重約６０ｋｇ）の連続コホートにおいて実施した。試験した用量範囲にわたって、ＧＥＭＯＲＡＬについてはＤＬＴは観察されなかった。これらの実験は、ＧＥＭＯＲＡＬ製剤で経口投与したＧＥＭについてのＭＴＤが、試験した投薬スケジュールにおける８０ｍｇ用量（１．３３ｍｇ／ｋｇに相当）より大きいことを実証する。

これらの試験の第１段階において、ＧＥＭＯＲＡＬを、２、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０ｍｇのＧＥＭの用量（ＧＥＭ遊離塩基ベースで表す）（０．０３３ｍｇ／ｋｇ、０．０８３ｍｇ／ｋｇ、０．１７ｍｇ／ｋｇ、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．５０ｍｇ／ｋｇ、０．６７ｍｇ／ｋｇ、０．８３ｍｇ／ｋｇ、１．００ｍｇ／ｋｇ、１．１７ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇに相当する）のうちの１つで個々のヒト患者に経口投与した。選択した用量を、２１日間の試験サイクルの１、３、５、８、１０および１２日目（すなわち、合計６用量）に各患者に経口投与した。各コホートにおいて、投薬レジメンは耐容性が良好であった。いずれの用量コホートについてのいずれの患者においてもＤＬＴは生じなかった。したがって、ＭＴＤは同定されなかったが、８０ｍｇがこの投薬レジメンのための安全な用量であると決定された。

進行性胆道がんに対する主要な化学療法または併用化学放射線療法後のＧＥＭＯＲＡＬの非盲検、多施設共同試験を評価する。この試験は以下の２部で実施する：用量漸増相（パート１）および用量増量相（パート２）。

パート１およびパート２の両方において、適格な患者を、２１日サイクルの１、３、５、８、１０、１２、１５、１７および１９日目（１サイクルあたり９用量）に軟質ゲル剤形でＧＥＭＯＲＡＬを経口投与するように割り当てる。サイクル間に空白はなく、すなわち、次のサイクルは前のサイクルの２１日後の翌日（すなわち、２回目のサイクルについては全体として２２日目）に直ちに開始するが、ただし、連続する２日間の投与は許可されず、投与間に少なくとも１日が存在する。

パート１：用量漸増相（第１ｂ相）
試験のパート１は、所定の用量レベルで３＋３用量漸増スキームに従う。コホート当たり４０ｍｇ（０．６７ｍｇ／ｋｇ）、８０ｍｇ（１．３３ｍｇ／ｋｇ）および１２０ｍｇ（２．００ｍｇ／ｋｇ）の用量を増加させた、各々３〜６人の患者の連続したコホートが存在する。患者内の用量の増加はない。サイクル１（２１日）は、用量制限毒性（ＤＬＴ）評価期間として定義される。１２０ｍｇ（２．００ｍｇ／ｋｇ）への用量漸増後にＭＴＤが同定されなかった場合、１００ｍｇ（１．６７ｍｇ／ｋｇ）の中間用量レベルも評価できる。中間用量レベルが評価される場合、６人までのさらなる患者がその用量レベルで登録される。

パート２：用量増量相（第２相）
コホートの６人の患者のうちの２人未満がＤＬＴを経験する、試験したＧＥＭＯＲＡＬ軟質ゲル剤形の最高用量レベルは試験のパート２で拡大する。さらに、パート１で選択された最高用量レベルは治療中の累積毒性につながる可能性があるため、パート１で評価された最高用量レベルより次に低い用量レベル（６人の患者のうち少なくとも２人がＤＬＴを経験した）もパート２での評価のために拡大する。ＭＴＤが試験のパート１で同定されなかった場合、パート２で使用した２つの用量レベルは、１２０ｍｇ（２．００ｍｇ／ｋｇ）および８０ｍｇ（１．３３ｍｇ／ｋｇ）、または中間用量の１００ｍｇ（１．６７ｍｇ／ｋｇ）をパート１で評価した場合、１２０ｍｇ（２．００ｍｇ／ｋｇ）および１００ｍｇ（１．６７ｍｇ／ｋｇ）とする。

本明細書に引用された全ての特許、特許出願、及び刊行物の開示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

この主題は具体的な実施形態を参照して開示されているが、他の実施形態および変形が、本明細書に記載される主題の真の趣旨および範囲から逸脱することなく、当業者によって考案され得ることは明らかである。添付の特許請求の範囲には、そのような実施形態および均等な変形は全て含まれている。

Claims (55)

1. ある種の対象におけるゲムシタビン感受性腫瘍を治療する方法であって、経口摂取時に、前記種についてのゲムシタビン（ＧＥＭ）の最大耐量（ＭＴＤ）の半分未満を生物学的に利用可能な形態で放出する製剤中の治療有効量のゲムシタビン（ＧＥＭ）を含む剤形を、前記対象に経口投与する工程を含む、方法。
2. 前記製剤が、軽度の機械的撹拌下で３７℃にて水性媒体と接触すると、エマルションを自然に形成する、請求項１に記載の方法。
3. 前記製剤が、前記対象の胃腸管内でエマルションを自然に形成する、請求項１または２に記載の方法。
4. 前記製剤が、
   （ａ）親水性溶媒中に溶解したＧＥＭと、
   （ｂ）約８〜約１７の親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）値を示し、少なくとも１種の界面活性剤を含む界面活性剤系と、
   （ｃ）ＧＥＭ溶媒溶液および界面活性剤系と適合する親水性担体と、
   を含む、請求項３に記載の方法。
5. 前記剤形を前記対象に複数回投与する工程をさらに含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
6. 前記剤形の連続投与の間の間隔が３日以内である、請求項５に記載の方法。
7. 前記剤形の連続投与の間の間隔が２日以内である、請求項５に記載の方法。
8. 前記剤形の連続投与の間の間隔が、ＧＥＭのＭＴＤが前記対象に投与される通常の間隔よりも短い、請求項５に記載の方法。
9. 前記製剤が、１／３、１／４、１／５、１／６、１／７、１／１０、１／１２、１／１５、１／２０および１／４０からなる群から選択される画分以下の、前記種についてのＭＴＤの画分を放出する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
10. 前記剤形がカプセルである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
11. 前記剤形が軟質カプセルである、請求項１０に記載の方法。
12. 前記剤形が、ＧＥＭまたはＧＥＭの薬学的に許容される塩、水、グリセロール、ＰＥＧ、ポリソルベートおよびオレオイルポリオキシルグリセリドを含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
13. 前記対象がヒトである、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
14. 前記腫瘍が、乳房、膀胱、膵臓、胆管、および非小細胞肺の腫瘍からなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
15. ヒト患者におけるＧＥＭ感受性腫瘍の退縮を誘導する方法であって、経口摂取時に、前記患者についてのＧＥＭのＭＴＤの半分未満を生物学的に利用可能な形態で放出する製剤中の治療有効量のＧＥＭを前記患者に経口投与する工程を含む、方法。
16. 前記製剤が、軽度の機械的撹拌下で３７℃にて水性媒体と接触すると、エマルションを自然に形成する、請求項１５に記載の方法。
17. 前記製剤が、対象の胃腸管内でエマルションを自然に形成する、請求項１５または１６に記載の方法。
18. 前記製剤が、
    （ａ）親水性溶媒中に溶解したＧＥＭと、
    （ｂ）約８〜約１７の親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）値を示し、少なくとも１種の界面活性剤を含む界面活性剤系と、
    （ｃ）ＧＥＭ溶媒溶液および界面活性剤系と適合する親水性担体と、
    を含む、請求項１７に記載の方法。
19. 剤形を対象に複数回投与する工程をさらに含む、請求項１５〜１８のいずれか一項に記載の方法。
20. 前記製剤が、１／３、１／４、１／５、１／７、１／１０、１／１２、１／１５および１／２０からなる群から選択される画分以下の、種についてのＭＴＤの画分を放出する、請求項１５〜１８のいずれか一項に記載の方法。
21. 剤形が、ＧＥＭまたはＧＥＭの薬学的に許容される塩、水、グリセロール、ＰＥＧ、ポリソルベートおよびオレオイルポリオキシルグリセリドを含む、請求項１５〜１８のいずれか一項に記載の方法。
22. 前記腫瘍が、乳房、膀胱、膵臓、胆管、および非小細胞肺の腫瘍からなる群から選択される、請求項１５〜１８のいずれか一項に記載の方法。
23. ヒト患者における腫瘍の増殖を阻害する方法であって、経口摂取時に、前記患者についてのＧＥＭのＭＴＤの半分未満を生物学的に利用可能な形態で放出する製剤中の治療有効量のＧＥＭを前記患者に経口投与する工程を含む、方法。
24. 前記製剤が、軽度の機械的撹拌下で３７℃にて水性媒体と接触すると、エマルションを自然に形成する、請求項２３に記載の方法。
25. 前記製剤が、対象の胃腸管内でエマルションを自然に形成する、請求項２３または２４に記載の方法。
26. 前記製剤が、
    （ａ）親水性溶媒中に溶解したＧＥＭと、
    （ｂ）約８〜約１７の親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）値を示し、少なくとも１種の界面活性剤を含む界面活性剤系と、
    （ｃ）ＧＥＭ溶媒溶液および界面活性剤系と適合する親水性担体と、
    を含む、請求項２５に記載の方法。
27. 剤形を対象に複数回投与する工程をさらに含む、請求項２３〜２６のいずれか一項に記載の方法。
28. 前記製剤が、１／３、１／４、１／５、１／７、１／１０、１／１２、１／１５および１／２０からなる群から選択される画分以下の、種についてのＭＴＤの画分を放出する、請求項２３〜２７のいずれか一項に記載の方法。
29. 剤形が、ＧＥＭまたはＧＥＭの薬学的に許容される塩、水、グリセロール、ＰＥＧ、ポリソルベートおよびオレオイルポリオキシルグリセリドを含む、請求項２３〜２８のいずれか一項に記載の方法。
30. 前記腫瘍が、乳房、膀胱、膵臓、胆管、および非小細胞肺の腫瘍からなる群から選択される、請求項２３〜２９のいずれか一項に記載の方法。
31. ある種の対象におけるゲムシタビン感受性腫瘍を治療するか、またはＧＥＭ感受性腫瘍の退縮を誘導するのに使用するためのゲムシタビン（ＧＥＭ）であって、ＧＥＭが、経口摂取時に、前記種についてのＧＥＭの最大耐量（ＭＴＤ）の半分未満を生物学的に利用可能な形態で放出する製剤中で前記対象に経口投与される、使用するためのゲムシタビン（ＧＥＭ）。
32. 前記製剤が、軽度の機械的撹拌下で３７℃にて水性媒体と接触すると、エマルションを自然に形成する、請求項３１に記載の使用するためのＧＥＭ。
33. 前記製剤が、前記対象の胃腸管内でエマルションを自然に形成する、請求項３１または３２に記載の使用するためのＧＥＭ。
34. 前記製剤が、
    （ａ）親水性溶媒中に溶解したＧＥＭと、
    （ｂ）約８〜約１７の親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）値を示し、少なくとも１種の界面活性剤を含む界面活性剤系と、
    （ｃ）ＧＥＭ溶媒溶液および界面活性剤系と適合する親水性担体と、
    を含む、請求項３３に記載の使用するためのＧＥＭ。
35. ＧＥＭが前記対象に複数回投与される、請求項３１〜３４のいずれか一項に記載の使用するためのＧＥＭ。
36. 剤形の連続投与の間の間隔が３日以内である、請求項３５に記載の使用するためのＧＥＭ。
37. 剤形の連続投与の間の間隔が２日以内である、請求項３５に記載の使用するためのＧＥＭ。
38. 剤形の連続投与の間の間隔が、ＧＥＭのＭＴＤが前記対象に投与される通常の間隔よりも短い、請求項３５に記載の使用するためのＧＥＭ。
39. 前記製剤が、１／３、１／４、１／５、１／６、１／７、１／１０、１／１２、１／１５、１／２０および１／４０からなる群から選択される画分以下の、前記種についてのＭＴＤの画分を放出する、請求項３１〜３８のいずれか一項に記載の使用するためのＧＥＭ。
40. ＧＥＭがカプセルで投与される、請求項３１〜３９のいずれか一項に記載の使用するためのＧＥＭ。
41. ＧＥＭが軟質カプセルで投与される、請求項４０に記載の使用するためのＧＥＭ。
42. 前記製剤が、ＧＥＭまたはＧＥＭの薬学的に許容される塩、水、グリセロール、ＰＥＧ、ポリソルベートおよびオレオイルポリオキシルグリセリドを含む、請求項３１〜４１のいずれか一項に記載の使用するためのＧＥＭ。
43. 前記対象がヒトである、請求項４１または４２に記載の使用するためのＧＥＭ。
44. 前記腫瘍が、乳房、膀胱、膵臓、胆管、および非小細胞肺の腫瘍からなる群から選択される、請求項４３に記載の使用するためのＧＥＭ。
45. ヒト患者における腫瘍の増殖を阻害するのに使用するためのゲムシタビン（ＧＥＭ）であって、ＧＥＭが、経口摂取時に、前記患者についてのＧＥＭのＭＴＤの半分未満を生物学的に利用可能な形態で放出する製剤中で前記患者に経口投与される、使用するためのゲムシタビン（ＧＥＭ）。
46. 患者における腫瘍を治療するか、または患者における腫瘍の増殖を阻害するのに使用するためのゲムシタビン（ＧＥＭ）であって、ＧＥＭが、０．８３ｍｇ／ｋｇ以下、好ましくは０．６７ｍｇ／ｋｇ未満、さらに好ましくは０．３３ｍｇ／ｋｇ未満の用量単位で前記患者に経口投与される、使用するためのゲムシタビン（ＧＥＭ）。
47. ＧＥＭが、０．０６７〜０．６７ｍｇ／ｋｇの用量単位で経口投与される、請求項４６に記載の使用するためのＧＥＭ。
48. ＧＥＭが、
    （ａ）親水性溶媒中に溶解したＧＥＭと、
    （ｂ）約８〜約１７の親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）値を示し、少なくとも１種の界面活性剤を含む界面活性剤系と、
    （ｃ）ＧＥＭ溶媒溶液および界面活性剤系と適合する親水性担体と、
    を含む製剤中で投与される、請求項４６または４７に記載の使用するためのＧＥＭ。
49. 前記腫瘍が、乳房、膀胱、膵臓、胆管、および非小細胞肺の腫瘍からなる群から選択される、請求項４６〜４８のいずれか一項に記載の使用するためのＧＥＭ。
50. ある種の対象におけるゲムシタビン感受性腫瘍を治療するため、またはゲムシタビン感受性腫瘍の退縮を誘導するための医薬の製造のためのゲムシタビン（ＧＥＭ）の使用であって、ＧＥＭが、経口摂取時に、前記種についてのＧＥＭの最大耐量（ＭＴＤ）の半分未満を生物学的に利用可能な形態で放出する製剤中で前記対象に経口投与される、ゲムシタビン（ＧＥＭ）の使用。
51. ヒト患者における腫瘍の増殖を阻害するための医薬の製造のためのゲムシタビン（ＧＥＭ）の使用であって、ＧＥＭが、経口摂取時に、前記患者についてのＧＥＭのＭＴＤの半分未満を生物学的に利用可能な形態で放出する製剤中で前記患者に経口投与される、ゲムシタビン（ＧＥＭ）の使用。
52. 患者における腫瘍を治療するため、または患者における腫瘍の増殖を阻害するための医薬の製造のためのゲムシタビン（ＧＥＭ）の使用であって、ＧＥＭが、０．８３ｍｇ／ｋｇ以下、好ましくは０．６７ｍｇ／ｋｇ未満、さらに好ましくは０．３３ｍｇ／ｋｇ未満の用量単位で、前記患者に経口投与される、ゲムシタビン（ＧＥＭ）の使用。
53. ＧＥＭが、０．０６７〜０．６７ｍｇ／ｋｇの用量単位で経口投与される、請求項５２に記載のＧＥＭの使用。
54. ＧＥＭが、
    （ａ）親水性溶媒中に溶解したＧＥＭと、
    （ｂ）約８〜約１７の親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）値を示し、少なくとも１種の界面活性剤を含む界面活性剤系と、
    （ｃ）ＧＥＭ溶媒溶液および界面活性剤系と適合する親水性担体と、
    を含む製剤中で投与される、請求項５２または５３に記載のＧＥＭの使用。
55. 前記腫瘍が、乳房、膀胱、膵臓、胆管、および非小細胞肺の腫瘍からなる群から選択される、請求項５２〜５４のいずれか一項に記載のＧＥＭの使用。