ES2895660T3 - Composición para estimular el crecimiento del cabello - Google Patents

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ES2895660T3 ES13764527T ES13764527T ES2895660T3 ES 2895660 T3 ES2895660 T3 ES 2895660T3 ES 13764527 T ES13764527 T ES 13764527T ES 13764527 T ES13764527 T ES 13764527T ES 2895660 T3 ES2895660 T3 ES 2895660T3
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George Cotsarelis
Garret Fitzgerald
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Abstract

Composición que comprende un antagonista de DP-2 para su uso en la estimulación del crecimiento del cabello en un sujeto que padece alopecia androgénica mediante administración tópica, en la que el antagonista de DP-2 es AM21 1.

Description

DESCRIPCIÓN
Composición para estimular el crecimiento del cabello
Campo de la invención
La invención se refiere a composiciones para regular el crecimiento del cabello. Específicamente, la invención se refiere a la regulación del crecimiento del cabello mediante la regulación de la actividad de uno de los receptores de prostaglandina D2 (PGD2), DP-2 (GPR44).
Antecedentes de la invención
El 80% de los hombres de raza blanca experimentan algún grado de alopecia androgénica (AGA) antes de los 70 años. La testosterona es necesaria para que la AGA se desarrolle, y un Iocus de susceptibilidad genética en el receptor de andrógenos está presente en una minoría de hombres con AGA; sin embargo, aún se desconocen factores adicionales que contribuyen a este trastorno. Los estudios sobre la AGA pueden aportar información sobre otras enfermedades mediadas por andrógenos, tales como la hipertrofia prostática benigna y el cáncer de próstata. Los tratamientos válidos actuales para la AGA incluyen la finasterida, el minoxidil y el trasplante capilar. La finasterida inhibe la 5-a reductasa 2 (s RD5A2), que convierte la testosterona en un andrógeno más potente, la dihidrotestosterona. Las dianas activas del minoxidil en la terapia contra AGA no se han identificado de manera concluyente.
En la AGA, Ios grandes folículos pilosos “terminales” que forman gruesos tallos pilosos se miniaturizan con el tiempo hasta convertirse en pequeños folículos que generan pelos efímeros microscópicos. La miniaturización del folículo va acompañada de una disminución de la duración de la fase de crecimiento del folículo (anágena), que normalmente dura varios años para producir pelos de más de 1 m de longitud, pero que disminuye a sólo días o semanas en la AGA. Esto da lugar a un aumento del porcentaje de folículos pilosos en reposo (Telógeno) que contienen pelos microscópicos en el cuero cabelludo calvo.
Además de estos cambios intrínsecos en el folículo piloso, se han identificado linfocitos y mastocitos infiltrados alrededor del folículo que se está miniaturizando, especialmente en la zona de la protuberancia rica en células madre. Las glándulas sebáceas, que se adhieren a cada folículo, se hipertrofian en el cuero cabelludo calvo. En el cuero cabelludo con calvicie, el número de células madre del folículo piloso permanece intacto, mientras que el número de células progenitoras que proliferan de manera más activa disminuye notablemente. Esto indica que el cuero cabelludo con calvicie carece de un activador o tiene un inhibidor del crecimiento del folículo piloso.
La publicación de patente estadounidense n.02011/0021599 A l describe métodos y composiciones para inhibir o reducir la caída del cabello (tal como la AGA u otros tipos de alopecia), el acné, la rosácea, el cáncer de próstata y la hipertrofia prostática benigna (HPB) mediante la administración de un compuesto o composición que puede disminuir la prostaglandina D2 (PGD2) o una ruta aguas abajo de la misma, tal como, por ejemplo, mediante la administración tópica de un antagonista del receptor DP-2.
La publicación de patente estadounidense n.o 2005/0112075 A l describe métodos para reducir el crecimiento del vello no deseado mediante la aplicación tópica de un agonista del receptor de prostaglandina DP, incluyendo la aplicación de PGD2.
La publicación de patente internacional n.o WO 2011/014588 A2 describe formulaciones tópicas, tales como las que comprenden un compuesto antagonista del receptor DP-2 (por ejemplo, ramatrobán, ACT-129968 (setipiprant)), para tratar una enfermedad o afección dermatológica (es decir, un estado anómalo de la epidermis, la dermis y/o Ios tejidos subcutáneos), incluyendo enfermedades autoinmunitarias, enfermedades proliferativas, el contacto con un alérgeno u otro agente irritante, cicatrices, quemaduras, mucinosis cutáneas o enfermedades o afecciones inflamatorias.
Garza et al., 2010 (J. Invest Dermatol. 2010; 130 (supl. 1): S103, Abstract 615, XP9188519) y Garza et al., 2012 (S cí Transí Med. 2 l de marzo de 2012; 4(126): l26ra34. doi:10.1126/scitranslmed.3003122) dan a conocer que la prostaglandina D2 inhibe el crecimiento del cabello y está elevada en el cuero cabelludo calvo de Ios hombres con alopecia androgénica.
Por consiguiente, existe la necesidad de identificar y caracterizar Ios agentes que regulan el crecimiento del folículo piloso.
Sumario de la invención
La presente invención proporciona una composición que comprende un antagonista de DP-2 para su uso en la estimulación del crecimiento del cabello en un sujeto que padece alopecia androgénica mediante administración tópica, en la que el antagonista de DP-2 es AM211.
En una realización, al sujeto se le administra además finasterida o minoxidil.
Otras características y ventajas de la presente invención se harán evidentes a partir de los siguientes ejemplos de descripción detallada y las figuras,
Breve descripción de los dibujos
Figura 1, Resumen de los perfiles de expresión génica del cuero cabelludo con pelo frente al calvo de cinco hombres con AGA. (A) Coeficientes de correlación para comparar el grado de diferencia entre todas las muestras con pelo, entre todas las muestras calvas, o entre las muestras con pelo frente a las calvas dentro de los individuos, Los datos son medias ± EEM (n = 5), ***P < 0,001 en comparación con sólo pelo y sólo calvicie, (B) Algoritmo de agrupación de genes de 250 genes significativos en cueros cabelludos con pelo y calvos en cinco hombres etiquetados de la A a la E, (C) Gráficos discontinuos con el nivel de expresión de los genes en el eje y y las muestras agrupadas como pares a lo largo del eje x para los 250 genes más significativos divididos en los más altos en el cuero cabelludo con pelo (H) (169; izquierda) y los más altos en el cuero cabelludo calvo (B) (81; derecha), En cada par, la primera muestra (comienzo de la línea) es el cuero cabelludo con pelo y la segunda muestra (final de la línea) es el cuero cabelludo calvo, (D) Categorías de ontología genética en el cuero cabelludo con pelo (izquierda) frente al cuero cabelludo con calvicie (derecha), Los porcentajes indicados son el número de transcritos en cada categoría sobre el número total de transcritos genéticos únicos, Los valores P son la puntuación exacta de Fisher modificada EASE (Expression Analysis Systematic Explorer) para el enriquecimiento significativo de cada categoría de función, (E) Cambio en veces en la expresión de PTGDS en el cuero cabelludo calvo en comparación con el cuero cabelludo con pelo, Los datos son medias ± EEM (n = 5), ***P < 0,0001 entre el cuero cabelludo con pelo y el cuero cabelludo calvo para cada conjunto de sondas, que cubre áreas distintas dentro del gen PTGDS, (F) Esquema de la ruta de PG d 2,
Figura 2, Actividad de la ruta de PGD2 aumentada en el cuero cabelludo con calvicie de hombres con AGA, (A) Expresión del ARNm de la PTGDS de tipo lipocalina en el cuero cabelludo calvo frente a con pelo, según la prueba de qPCR, Los datos son medias ± EEM (n = 4), (B y C) La cantidad de proteína PTGDS en cueros cabelludos calvos (B) y con pelo (H) emparejados (n = 4), tal como se muestra mediante inmunotransferencia de tipo Western con tinción de Ponceau usada para la verificación de la igualdad de carga (B) y su cuantificación como normalizada con respecto al cuero cabelludo con pelo (C), Los datos son medias ± EEM, (D) Producción de PGD2 en el cuero cabelludo calvo, tal como se somete a prueba mediante ELISA, Los datos son medias ± EEM (n = 3), (E y F) Cambio en veces en la expresión de PGD2 (n = 17), 15-dPGJ2) (n = 7) y PGE2 (n = 17) en el cuero cabelludo calvo en comparación con el cuero cabelludo con pelo (E), El contenido total de prostaglandinas se cuantifica en (F), Los datos son medias ± EEM, P < 0,05; **P < 0,01, En (F), el valor P compara las muestras con pelo frente a las calvas para cada prostaglandina,
Figura 3, Un aumento en la expresión de Ptgds precede a la elevación de los niveles de PGD2 en el folículo piloso murino durante la fase catágena, (A y B) En PN18 a PN53, se midió el ARNm de Ptgds (n = 4), Ptgfr (n = 4), y Fgf5 (n = 4) (A y B) y el lípido PGD2 (n = 3) (B) en diferentes fases del ciclo del folículo piloso, Las letras corresponden a las fases del ciclo capilar: A, anágena; C, catágena; T, telógena, Los datos son medias ± EEM, En (A), **P < 0,01 para la fase anágena tardía de Ptgds y Fgf5 frente al primer telógeno y para el primer telógeno de Ptgfr frente al segundo telógeno, En (B), *P < 0,05 para la fase catágena de Pg D2 frente a anágena temprana, (C) Expresión de Ptgds (n = 3) y producción de PGD2 (n = 3) en la piel murina durante el ciclo del folículo piloso inducido por la depilación, Los datos son medias ± EEM, **P < 0,o5 para Ptgds en el día 17 frente al día 0; **P < 0,01 para PGD2 en el día 19,5 frente al día 37, (D) Los queratinocitos de la vaina de la raíz externa murina por debajo de la zona de la protuberancia rica en células madre se tiñeron para Ptgds (marrón) 17 días después de la depilación, La línea de puntos delimita un folículo piloso completo, Barra de escala, 100 mm, (E a G) Krt15 (rojo) y Ptgds (verde) en compartimentos permanentes y no permanentes del folículo piloso el día 0 (anágena) (E), el día 17 (anágena tardía) (F) y el día 19 (catágena) (G) después de la depilación, Barras de escala, 100 mm,
Figura 4, La PTGDS se expresa en la porción no permanente de determinados folículos pilosos humanos del cuero cabelludo, y de forma más variable en el cuero cabelludo calvo, (A C) Inmunotinción de PTGDS (marrón) con contratinción nuclear azul en folículos pilosos humanos normales (A y B) y en el folículo piloso del cuero cabelludo calvo (C), (A) Un solo folículo en el cuero cabelludo con pelo con tinción para PTGDS inferior al istmo, (B) La mayoría de los folículos anágenos del cuero cabelludo con pelo se tiñen ligeramente para PTGDS, (C) Folículo piloso miniaturizado con tinción para PTGDS en sebocitos y queratinocitos del folículo piloso, Barras de escala, 100 mm, (D a F) Tinción de inmunofluorescencia para PTG D s (verde), núcleos (azul) y KRT15 (rojo) (D) o triptasa (rojo) (E y F) en el folículo piloso y la glándula sebácea adyacente en el cuero cabelludo calvo, El folículo catágeno con algunas células positivas para PTGDS también expresaba el marcador de mastocitos triptasa (E), Las células perifoliculares muestran poblaciones distintas de células positivas para PTGDS y triptasa con expresión superpuesta (F), Barras de escala, 100 mm,
Figura 5, La piel de los ratones transgénicos K14-Ptgs2 fenocopia AGA con alopecia, hiperplasia de las glándulas sebáceas y niveles elevados de PGD2 en la piel, (A y B) Los animales K14-Ptgs2 desarrollan alopecia (B) en comparación con los controles de tipo natural (WT) (A), (C y D) La piel teñida con hematoxilina y eosina de los animales WT (C) y K14-Ptgs2 (D) muestra la morfología de las glándulas sebáceas (flecha amarilla) y del folículo piloso (flecha negra), Barras de escala, 100 mm, (E) Cantidad de diferentes prostaglandinas presentes en el tejido cutáneo de ratones WT (n = 5) y ratones transgénicos K14-Ptgs2 (n= 3), Los datos son medias ± EEM, **P < 0,01 comparando WT con K14-Ptgs2,
Figura 6, La PGD2 inhibe el crecimiento del cabello en ratones y humanos a través de la GPR44. (A) Crecimiento del cabello en el transcurso de 16 días después de la depilación, Se aplicó 15-dPGJ2 (10 mg) o un vehículo por vía tópica a la piel de los ratones a partir del día 8 después de la depilación, Los datos son medias ± EEM (n = 3 por grupo de tratamiento), *P < 0,05 en comparación con el control, (B) Longitud del pelo 10 días después del tratamiento tópico con PGD2 (1 mg; n = 3), 15-dPGJ2 (1 mg; n = 3) o vehículo (n = 3), Los datos son medias ± EEM, *P < 0,05; **P < 0,01, (C) Crecimiento del cabello en ratones con inactivación (KO) de Ptgdr (n = 8), Ptgds (n = 6) y Gpr44 (n = 11) en respuesta a PGD2. Los datos son medias ± EEM y son representativos de tres experimentos independientes por ratón, *P < 0,05 en comparación con el vehículo, (D) Crecimiento in vitro de folículos pilosos humanos explantados en el transcurso de 7 días de cultivo con PGD2 (n = 3), 15-dPGJ2 (n = 3) o vehículo (n = 3), Los datos son medias ± EEM, ***P < 0,001 en comparación con el vehículo,
Figura 7 Los análogos de PGD2 inhiben el alargamiento del pelo humano según su agonismo relativo del GPR44. Crecimiento in vitro de folículos capilares humanos explantados en el transcurso de 7 días de cultivo con los análogos de PGD2 enumerados, prostaglandina 12 o control de vehículo (n = 3 por grupo de tratamiento), *P < 0,05 en comparación con el vehículo, a menos que se indique lo contrario, prueba t de Student, Descripción detallada de la invención
La invención se refiere a la regulación del crecimiento del cabello mediante la regulación de la actividad de uno de los receptores de prostaglandina D2 (PGD2), DP-2 (GPR44).
La presente invención proporciona, por tanto, una composición que comprende un antagonista de DP-2 para su uso en la estimulación del crecimiento del cabello en un sujeto que padece alopecia androgénica mediante administración tópica, en la que el antagonista de DP-2 es AM211.
En una realización, al sujeto se le administra además finasterida o minoxidil,
Los presentes inventores encontraron, de manera sorprendente e inesperada, niveles elevados de prostaglandina D2 sintasa (PTGDS) a nivel de mensaje y de proteína en el cuero cabelludo con calvicie frente a con pelo de los hombres con AGA. Dado el metabolismo de las prostaglandinas en el folículo piloso humano, los presentes inventores se centraron en la sintasa, tanto en el ratón (Ptgds) como en el ser humano (PTGDS), El producto enzimático de la PTGDS, la prostaglandina D2 (PGD2), también se encontró elevado en el tejido del cuero cabelludo humano calvo, Los presentes inventores muestran una estrecha relación temporal entre las elevaciones del ARNm de la Ptgds y los niveles de PGD2 en ratones con regresión del folículo piloso durante el ciclo normal del mismo, Los presentes inventores proporcionan además datos funcionales que demuestran que la PGD2 y su metabolito no enzimático, la 15-desoxi-D12,14-prostaglandina J2 (15-Dp GJ2), inhiben el crecimiento del cabello en los folículos pilosos de ratones y humanos, En ratones y humanos, la inhibición del crecimiento del cabello mediada por la PGD2 requería el receptor 44 acoplado a la proteína G (proteína heterotrimérica de unión a nucleótidos de guanina) (GPR44 o DP-2), pero no el receptor 1 de prostaglandina D2 (Ptgdr o DP-1). Además, los presentes inventores presentan un modelo de ratón (K14-Ptgs2) con niveles elevados de PGD2 en la piel que fenocopia la AGA humana, Estos resultados demuestran, entre otras cosas, el papel de la PGD2 y el DP-2 en la patogénesis de la AGA para el tratamiento del pelo,
También se dan a conocer en el presente documento métodos para seleccionar un compuesto como agente potencial para el tratamiento de la alopecia androgénica, comprendiendo los métodos las etapas de: medir la actividad de DP-2 en presencia de un compuesto que se sospecha que es un agente potencial para el tratamiento de la alopecia androgénica y en presencia de prostaglandina D2; en las mismas condiciones, medir la actividad de DP-2 en ausencia del compuesto que se sospecha que es un agente potencial para el tratamiento de la alopecia androgénica y en presencia de prostaglandina D2, en los que una actividad más baja de DP-2 en presencia de dicho compuesto que en ausencia de dicho compuesto es indicativa de un agente potencial para el tratamiento de la alopecia androgénica, Los métodos pueden comprender además: medir la actividad de DP-1 en presencia del compuesto que se sospecha que es un agente potencial para tratar la alopecia androgénica y en presencia de prostaglandina D2; en las mismas condiciones, medir la actividad de DP-1 en ausencia del compuesto que se sospecha que es un agente potencial para tratar la alopecia androgénica y en presencia de prostaglandina D2, en los que una actividad más baja de DP-2 y una actividad de DP-1 que es aproximadamente igual en presencia y ausencia de dicho compuesto es indicativa de un agente potencial para el tratamiento de la alopecia androgénica, Puede seleccionarse una pluralidad de compuestos,
Se dan a conocer en el presente documento métodos para seleccionar un compuesto como agente potencial para estimular el crecimiento del cabello, comprendiendo Ios métodos las etapas de: medir la actividad de DP-2 en presencia de un compuesto que se sospecha que es un agente potencial para estimular el crecimiento del cabello y en presencia de prostaglandina D2; en las mismas condiciones, medir la actividad de DP-2 en ausencia del compuesto que se sospecha que es un agente potencial para estimular el crecimiento del cabello en presencia de prostaglandina D2, en Ios que una actividad más baja de DP-2 en presencia de dicho compuesto que en ausencia de dicho compuesto es indicativa de un agente potencial para estimular el crecimiento del cabello. Los métodos pueden comprender además: medir la actividad de DP-1 en presencia del compuesto que se sospecha que es un agente potencial para estimular el crecimiento del cabello y en presencia de prostaglandina D2; en las mismas condiciones, medir la actividad de DP-1 en ausencia del compuesto que se sospecha que es un agente potencial para estimular el crecimiento del cabello y en presencia de prostaglandina D2, en Ios que una actividad más baja de DP-2 y una actividad de DP-1 que es aproximadamente igual en presencia y ausencia de dicho compuesto es indicativa de un agente potencial para estimular el crecimiento del cabello. Puede seleccionarse una pluralidad de compuestos.
Tal como se usa en el presente documento, un “agonista de DP-2” es una molécula que puede aumentar la cantidad o la actividad de DP-2, o bien dentro de una célula o bien dentro de un sistema fisiológico. Por ejemplo, un agonista de DP-2 es una sustancia que puede unirse selectivamente a DP-2 y provocar una acción fisiológica del receptor DP-2.
Tal como se usa en el presente documento, un “antagonista de DP-2” es una molécula que puede disminuir la cantidad o la actividad de DP-2, o bien dentro de una célula o bien dentro de un sistema fisiológico. Por ejemplo, un antagonista de DP-2 es una sustancia que puede unirse selectivamente al receptor DP-2 e inhibir la acción fisiológica del receptor DP-2.
Los antagonistas de DP-2 se conocen en la técnica. En la tabla 2 se muestran ejemplos de algunos antagonistas de DP-2:
Figure imgf000006_0001
Los antagonistas de DP-2 pueden dividirse en varias clases. Una clase es el ramatrobán y sus análogos, cuyos ejemplos se muestran en las tablas 2 y 3 (TM30642 - ácido 3-{3-[(4-fluoro-bencenosulfonil)-metil-amino]-1,2,3,4-tetrahidro-carbazol-9-N}-propiónico; TM30643 - ácido [3-(4-fluoro-bencenosulfo-nilamino)-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-il]-acético;TM30089 - ácido {3-[(4-fluoro-bencenosulfonil)-metil-amino]-1,2,3,4-tetrahidro-carbazol-9-il}-acético.
Figure imgf000007_0001
Otra clase de antagonistas de DP-2 son Ios derivados del ácido indolacético. Ejemplos de esta clase de compuestos son Ios compuestos 6 - 9 de la tabla 2.
Otra clase de antagonistas de DP-2 son Ios derivados del ácido fenilacético. Un ejemplo de esta clase de compuestos, basado en el fenclofenaco, es el compuesto 11 de la tabla 2.
Otra clase de antagonistas de DP-2 son Ios derivados de tetrahidroquinolina. Ejemplos de esta clase de compuestos son Ios compuestos 12, K117 y K-104 de la tabla 2.
Otros antagonistas de DP-2 son Ios antagonistas de DP-2 que han sido objeto de al menos un ensayo clínico. Los ejemplos de tales antagonistas que han sido objeto de al menos un ensayo clínico incluyen, pero no se limitan a, Ios antagonistas de DP-2 enumerados en la tabla 4 a continuación:
Tabla 4. Antagonistas de DP-2 en fase clínica
Empresa ID del compuesto Estado Referenciaa Actelion ACT-129968 Fase llb NCT01225315
(Setipiprant)
Actimis AP768 Fase 1
Amira AM211 Fase 1
Amira AM461 Fase 1
Amgen AMG853 Suspendido después de la
Figure imgf000007_0002
NCT01018550
(2011)
Array ARRY-502 Fase 1 NCT01349725 BioPharma
AstraZeneca AZD1981 Fase II NCT01197794 AstraZeneca AZD8075 Suspendido después de la
Figure imgf000007_0003
NCT00787072
(2010)
AstraZeneca AZD5985 Suspendido después de la
Figure imgf000007_0004
NCT00967356
(2010)
Merck MK-7246) Fase 1
Novartis QAV680 Fase II completada NCT00814216 Oxagen OC000459 Fase llb NCT01057927 Oxagen OC002417 Candidato suplente
Pulmagen ADC3680B Fase 1 NCT01173770 Shionogi S-555739 Fase llb (Japón)
a Los números NCT pueden buscarse en el sitio web: www.dinicaltrials.gov
Sin embargo, para su uso en esta invención, el antagonista de DP-2 es AM211.
A continuación se presenta la estructura del antagonista de DP-2, ramatrobán:
Figure imgf000008_0001
A continuación se presenta la estructura de otro antagonista de DP-2:
Figure imgf000008_0002
A continuación se presenta la estructura del antagonista de DP-2, setipiprant:
A continuación se presenta la estructura de otro antagonista de DP-2:
Figure imgf000009_0001
A continuación se presenta la estructura del antagonista de DP-2, AZD1981:
Figure imgf000009_0002
A continuación se presentan las estructuras de otros antagonistas de DP-2:
Figure imgf000010_0001
Pueden encontrarse otros antagonistas de DP-2 en las siguientes publicaciones: EP 1.170.594, EP1.435.356, W02003/066046, W02003/066047, W02003/097042, W02003/101961, W02003/101981, W02004/007451, W02004/032848, W02004/035543, W02004/106302, W02005/019171, W02005/054232, W02005/018529, W02005/040112, GB2.407.318, W02005/040114, W02005/044260, W02005/095397, W02005/100321, W02005/102338, W02006/095183, W02007/107772, US7.405.215.
Por tanto, se proporcionan en el presente documento composiciones para su uso en la estimulación del crecimiento del cabello en un sujeto que padece alopecia androgénica, comprendiendo las composiciones un antagonista de DP-2 en una cantidad eficaz para potenciar el crecimiento del cabello en el sujeto, en las que el antagonista de DP-2 es AM211.
La composición puede ser una composición farmacéutica que comprende el antagonista de DP-2 AM211 y al menos un excipiente o portador farmacéuticamente aceptable.
Se proporcionan en el presente documento composiciones farmacéuticas que comprenden el antagonista de DP-2 para su uso en esta invención y uno o más portadores farmacéuticamente aceptables. Los “portadores farmacéuticamente aceptables” incluyen cualquier excipiente que no sea tóxico para la célula o el sujeto expuesto al mismo en las dosis y concentraciones empleadas. La composición farmacéutica puede incluir uno o más agentes terapéuticos.
Los portadores farmacéuticamente aceptables incluyen disolventes, medios de dispersión, tampones, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifüngicos, agentes humectantes, conservantes, agentes quelantes, antioxidantes, agentes isotónicos y agentes que retrasan la absorción.
Los portadores farmacéuticamente aceptables incluyen agua; solución salina; solución salina tamponada con fosfato; dextrosa; glicerol; alcoholes, tales como etanol e isopropanol; fosfato, citrato y otros ácidos orgánicos; ácido ascórbico; polipéptidos de bajo peso molecular (menos de aproximadamente 10 residuos); proteínas, tales como albúmina sérica, gelatina o inmunoglobulinas; polímeros hidrófilos, tales como polivinilpirrolidona; aminoácidos tales como glicina, glutamina, asparagina, arginina o lisina; monosacáridos, disacáridos y otros hidratos de carbono tales como glucosa, mañosa o dextrinas; EDTA; contraiones formadores de sal tales como sodio y/o tensioactivos no iónicos tales como TWEEN, polietilenglicol (PEG) y PLURONICS; agentes isotónicos tales como azúcares, polialcoholes tales como manitol y sorbitol, y cloruro de sodio; así como combinaciones de los mismos. Los agentes antibacterianos y antifúngicos incluyen parabenos, clorobutanol, fenol, ácido ascórbico y timerosal.
Las composiciones farmacéuticas para su uso en la invención pueden formularse de diversas maneras, incluyendo, por ejemplo, formas de dosificación sólidas, semisólidas (por ejemplo, crema, pomada y gel) y líquidas, tales como disoluciones líquidas (por ejemplo, loción o pulverizador tópico), dispersiones o suspensiones, polvos y liposomas, en una forma adecuada para la administración tópica. La composición puede formularse como una composición de liberación inmediata, controlada, prolongada o retardada.
M ás particularmente, las composiciones farmacéuticas adecuadas para su uso incluyen disoluciones acuosas estériles (cuando son solubles en agua) o dispersiones y polvos estériles para la preparación extemporánea de disoluciones o dispersiones estériles. Debe ser estable en las condiciones de fabricación y almacenamiento y, preferiblemente, se conservará contra la acción contaminante de microorganismos, tales como bacterias y hongos. El portador puede ser un disolvente o medio de dispersión que contenga, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol y polietilenglicol líquido, y similares), y mezclas adecuadas de los mismos. La fluidez adecuada puede mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de un recubrimiento tal como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de la dispersión y mediante el uso de tensioactivos. Las formulaciones adecuadas para su uso en los métodos terapéuticos dados a conocer en el presente documento se describen en Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing C o ., 16a ed. (1980).
En algunas realizaciones, la composición incluye agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, polialcoholes, tales como manitol, sorbitol o cloruro de sodio.
Las disoluciones estériles pueden prepararse incorporando la molécula, por sí misma o en combinación con otros agentes activos, en la cantidad requerida en un disolvente apropiado con uno o una combinación de los componentes enumerados en el presente documento, según sea necesario, seguido de esterilización por filtración. Generalmente, las dispersiones se preparan incorporando el compuesto activo en un vehículo estéril, que contiene un medio de dispersión básico y los demás componentes necesarios de los enumerados anteriormente. Además, las preparaciones pueden envasarse y comercializarse en forma de kit, tal como los descritos en la publicación de solicitud estadounidense n.020 o2/O1O22O8 A l. Tales artículos de fabricación tendrán preferiblemente etiquetas o prospectos que indiquen que las composiciones asociadas son útiles para tratar a un sujeto que padece AGA.
Las dosis eficaces de las composiciones para su uso en la presente invención, tal como se describen en el presente documento, varían en función de muchos factores diferentes, incluyendo los medios de administración, el lugar de destino, el estado fisiológico del paciente, si el paciente es humano o animal, otros medicamentos administrados y si el tratamiento es profiláctico o terapéutico. Habitualmente, el paciente es un ser humano, pero también pueden tratarse mamíferos no humanos, incluyendo los mamíferos transgénicos. Las dosificaciones de tratamiento pueden graduarse usando métodos rutinarios conocidos por los expertos en la materia para optimizar la seguridad y la eficacia.
Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden incluir una “cantidad terapéuticamente eficaz”. “Una “cantidad terapéuticamente eficaz” se refiere a una cantidad eficaz, a las dosificaciones y durante los periodos de tiempo necesarios, para lograr el resultado terapéutico deseado. Una cantidad terapéuticamente eficaz de una molécula puede variar en función de factores tales como el estado de la enfermedad, la edad, el sexo y el peso del individuo, y la capacidad de la molécula para provocar una respuesta deseada en el individuo. Una cantidad terapéuticamente eficaz es también aquella en la que cualquier efecto tóxico o perjudicial de la molécula se ve compensado por los efectos terapéuticos beneficiosos.
Tal como se usa en el presente documento, el término “selectivo” con respecto a la inhibición o estimulación significa la inhibición o estimulación preferente, respectivamente, de una primera actividad con respecto a una segunda actividad (por ejemplo, la inhibición preferente de una ruta con respecto a otra ruta; la inhibición preferente con respecto a otros receptores; o la inhibición preferente de un mutante con respecto a un tipo natural o viceversa). En algunas realizaciones, el inhibidor es más de cinco veces más selectivo, más de diez veces más selectivo, más de cincuenta veces más selectivo, más de 100 veces más selectivo, o más de 1000 veces más selectivo para la ruta o diana molecular deseada frente a una ruta o diana molecular no deseada. En algunas realizaciones, un antagonista inhibirá la primera actividad de la ruta o diana molecular en al menos 2 veces, al menos 5 veces, al menos 10 veces, al menos 20 veces, al menos 50 veces, al menos 100 veces con respecto a la segunda actividad en las mismas condiciones. Se apreciará que en realizaciones preferidas, el antagonista de DP-2 será selectivo con respecto a DP-1 en cualquiera de las cantidades anteriores. La actividad de una ruta o diana molecular puede medirse mediante cualquier medio reproducible. La actividad de una ruta o diana molecular puede medirse in vitro o in vivo.
Tal como se usa en el presente documento, “modular” se refiere a “estimular” o “inhibir” una actividad de una ruta o diana molecular. Por ejemplo, una composición modula la actividad de una ruta o diana molecular si estimula o inhibe la actividad de la ruta o diana molecular en al menos el 10%, en al menos aproximadamente el 20%, en al menos aproximadamente el 25%, en al menos aproximadamente el 30%, en al menos aproximadamente el 40%, en al menos aproximadamente el 50%, en al menos aproximadamente el 60%, en al menos alrededor aproximadamente el 70%, en al menos aproximadamente el 75%, en al menos aproximadamente el 80%, en al menos aproximadamente el 90%, en al menos aproximadamente el 95%, en al menos aproximadamente el 98%, o en al menos aproximadamente el 99% o más con respecto a la actividad de la ruta o diana molecular en las mismas condiciones pero careciendo sólo de la presencia de la composición. En otro ejemplo, una composición modula la actividad de una ruta o diana molecular si estimula o inhibe la actividad de la ruta o diana molecular en al menos 2 veces, al menos 5 veces, al menos 10 veces, al menos 20 veces, al menos 50 veces, al menos 100 veces con respecto a la actividad de la ruta o diana molecular en las mismas condiciones pero careciendo sólo la presencia de la composición. La actividad de una ruta o diana molecular puede medirse mediante cualquier medio reproducible. La actividad de una ruta o diana molecular puede medirse in vitro o in vivo. Por ejemplo, la actividad de una ruta o diana molecular puede medirse in vitro o in vivo mediante un ensayo apropiado conocido en la técnica de medición de la actividad. A las muestras de control (no tratadas con la composición) puede asignárseles un valor de actividad relativa del 100%. Un cambio en la actividad provocado por la composición puede medirse en los ensayos.
Se apreciará que muchos de los antagonistas descritos en el presente documento son fuertes inhibidores de sus dianas. Por ejemplo, un antagonista puede tener una actividad inhibidora de unión (valor de CI50) para su diana molecular deseada (es decir, DP-2) de 1000 |i M o menos, 1000 nM o menos, 100 nM o menos, 10 nM o menos, o especialmente 1 nM o menos. En otro ejemplo, el inhibidor tiene una actividad inhibidora de unión (valor de CI50) para su diana molecular deseada de entre 1000 |i M y 1 nM, entre 1000 |i M y 10 nM, entre 1000 |i M y 100 nM, entre 1000 |i M y 1000 nM, entre 1000 nM y 1 nM, entre 1000 nM y 10 nM, entre 1000 nM y 100 nM, entre 100 nM y 10 nM, entre 100 nM y 1 nM, o entre 10 nM y 1 nM.
En algunas realizaciones, los antagonistas dados a conocer en el presente documento inhiben sus rutas o dianas moleculares en al menos aproximadamente el 10%, en al menos aproximadamente el 20%, en al menos aproximadamente el 25%, en al menos aproximadamente el 30%, en al menos aproximadamente el 40%, en al menos aproximadamente el 50%, en al menos aproximadamente el 60%, en al menos aproximadamente el 70%, en al menos aproximadamente el 75%, en al menos aproximadamente el 80%, en al menos aproximadamente el 90%, en al menos aproximadamente el 95%, en al menos aproximadamente el 98%, o en al menos aproximadamente el 99% o más.
Tal como se usa en el presente documento, los términos “tratar” y “tratamiento” se refieren a tratamiento terapéutico, incluyendo medidas profilácticas o preventivas, en las que el objeto es prevenir o ralentizar (disminuir) un cambio fisiológico no deseado asociado a una enfermedad o afección. Los resultados clínicos beneficiosos o deseados incluyen, pero no se limitan a, alivio de los síntomas, disminución del grado de una enfermedad o afección, estabilización de una enfermedad o afección (es decir, cuando la enfermedad o afección no empeora), retraso o ralentización de la evolución de una enfermedad o afección, mejora o paliación de la enfermedad o afección y remisión (ya sea parcial o total) de la enfermedad o afección, ya sea detectable o indetectable. “Tratamiento” también puede significar la prolongación de la supervivencia en comparación con la esperada si no se recibe tratamiento. Entre las personas que necesitan tratamiento se incluyen las que ya padecen la enfermedad o afección, así como las que son propensas a padecer la enfermedad o afección o en las que va a prevenirse la enfermedad o afección.
En una realización, tratar la caída del cabello se refiere a tratar una enfermedad o trastorno que comprende la calvicie, que en esta invención se refiere a tratar la alopecia androgénica (AGA).
Tal como se usa en el presente documento, “inhibir el crecimiento del cabello” se refiere a impedir el crecimiento del cabello, inhibir la tasa de crecimiento del cabello, retrasar la germinación del cabello, alargar el ciclo del cabello, alargar la fase telógena, la longitud máxima del cabello o reducir el diámetro máximo del cabello.
El antagonista de DP-2 AM211 puede administrarse solo o en combinación con uno o más agentes o tratamientos terapéuticamente eficaces. En una realización, el antagonista de DP-2 puede administrarse solo, o en combinación con uno o más tratamientos o agentes promotores del cabello terapéuticamente eficaces (por ejemplo, finasterida, minoxidil, o ambos). El otro agente terapéuticamente eficaz puede conjugarse con el antagonista de DP-2, incorporarse a la misma composición que el antagonista de DP-2 o administrarse como una composición independiente. El otro agente terapéutico o tratamiento puede administrarse antes, durante y/o después de la administración del antagonista de DP-2.
En una realización, el antagonista de DP-2 se administra conjuntamente con uno o más agentes promotores del cabello (por ejemplo, finasterida, minoxidil o una combinación de los mismos). En otra realización, el antagonista de DP-2 se administra independientemente de la administración de un agente promotor del cabello. En una realización, se administra en primer lugar el antagonista de DP-2, seguido de la administración de un agente promotor del cabello. En otra realización, se administra en primer lugar un agente promotor del cabello, seguido de la administración del antagonista de DP-2.
Otros agentes/tratamientos terapéuticos eficaces para una terapia de combinación para potenciar el crecimiento del cabello incluyen, por ejemplo, pero no se limitan a, cirugía de trasplante y extirpación de dermis o epidermis. La administración del antagonista de DP-2 con otros agentes y/o tratamientos puede producirse de manera simultánea o separada, por la misma ruta o por otra diferente, en el mismo momento o en otros diferentes. Las pautas posológicas pueden ajustarse para proporcionar la respuesta óptima deseada (por ejemplo, una respuesta terapéutica o profiláctica).
En un ejemplo, puede administrarse un único bolo. En otro ejemplo, pueden administrarse varias dosis divididas a lo largo del tiempo. En aún otro ejemplo, una dosis puede reducirse o aumentarse proporcionalmente tal como se indica por las exigencias de la situación terapéutica. La forma de unidad de dosificación, tal como se usa en el presente documento, se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosificaciones unitarias para el tratamiento de sujetos mamíferos. Cada unidad puede contener una cantidad predeterminada de compuesto activo calculada para producir un efecto terapéutico deseado. En algunas realizaciones, las formas de unidades de dosificación de la invención están dictadas por, y dependen directamente de, las características únicas del compuesto activo y el efecto terapéutico o profiláctico particular que va a lograrse.
La composición para su uso en la invención puede administrarse una sola vez, o puede administrarse múltiples veces. Para dosificaciones múltiples, la composición puede administrarse, por ejemplo, tres veces al día, dos veces al día, una vez al día, una vez cada dos días, dos veces a la semana, semanalmente, una vez cada dos semanas o mensualmente.
Tal como se usa en el presente documento, un compuesto “inhibe” una actividad si el compuesto reduce la actividad deseada en al menos el 10% con respecto a la actividad en las mismas condiciones pero sin la presencia del compuesto. La actividad puede medirse mediante cualquier medio reproducible. La actividad puede medirse in vitro o in vivo. En algunas realizaciones, los compuestos usados en los métodos descritos en el presente documento inhiben la actividad en al menos aproximadamente el 20%, en al menos aproximadamente el 25%, en al menos aproximadamente el 30%, en al menos aproximadamente el 40%, en al menos aproximadamente el 50%, en al menos aproximadamente el 60%, en al menos aproximadamente el 70%, en al menos aproximadamente el 75%, en al menos aproximadamente el 80%, en al menos aproximadamente el 90%, en aproximadamente el 95%, en aproximadamente el 98% o en aproximadamente el 99% o más.
Cabe señalar que los valores de dosificación pueden variar según el tipo y la gravedad de la afección que va a aliviarse. Debe entenderse además que para cualquier sujeto en particular, las pautas posológicas específicas deben ajustarse con el tiempo según la necesidad individual y el juicio profesional de la persona que administra o supervisa la administración de las composiciones, y que los intervalos de dosificación expuestos en el presente documento son sólo a modo de ejemplo y no pretende que limiten el alcance o la práctica de la composición reivindicada.
La “administración” a un sujeto no se limita a ningún sistema de administración en particular, sino que es para la administración tópica, por ejemplo, transdérmica. La administración a un sujeto puede producirse en una dosis única o en administraciones repetidas, y en cualquiera de una variedad de formas de sales fisiológicamente aceptables, y/o con un portador y/o aditivo farmacéutico aceptable como parte de una composición farmacéutica (descrita anteriormente). Una vez más, las formas de sales fisiológicamente aceptables y las técnicas convencionales de formulación farmacéutica las conocen bien los expertos en la técnica (véase, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing C o .).
El término “sujeto” incluye mamíferos, por ejemplo, seres humanos, animales de compañía (por ejemplo, perros, gatos, pájaros y similares), animales de granja (por ejemplo, vacas, ovejas, cerdos, caballos, aves y similares) y animales de laboratorio (por ejemplo, ratas, ratones, cobayas, pájaros y similares). En algunas realizaciones, el sujeto es un hombre o una mujer.
Tal como se usa en el presente documento, la expresión “farmacéuticamente aceptable” se refiere a aquellos compuestos, materiales, composiciones, portadores y/o formas de dosificación que son, dentro del ámbito del buen juicio médico, adecuados para su uso en contacto con los tejidos de los seres humanos y los animales sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación, en consonancia con una relación beneficio/riesgo razonable.
“Excipiente farmacéuticamente aceptable” significa un excipiente que es útil en la preparación de una composición farmacéutica que es generalmente segura, no tóxica y ni biológicamente ni de otra manera indeseable, e incluye un excipiente que es aceptable para uso veterinario así como para uso farmacéutico humano. Un “excipiente farmacéuticamente aceptable”, tal como se usa en el presente documento, incluye tanto uno como más de uno de tal excipiente.
El término “sobre” o “aproximadamente” significa dentro de un intervalo de error aceptable para el valor particular tal como lo determina un experto habitual en la técnica, que dependerá en parte de cómo se mide o determina el valor.
Los siguientes ejemplos se presentan para ilustrar de manera más completa las realizaciones preferidas de la invención, Sin embargo, no deben interpretarse como una limitación del amplio alcance de la invención, Ejemplos
Materiales y métodos
Muestras de tejido humano
Este estudio usó únicamente cuero cabelludo humano normalmente desechado, obtenido de manera anónima, y lo aprobó la oficina de la Junta de Revisión Institucional de Pensilvania como un protocolo exento, Se obtuvo cuero cabelludo humano desechado normalmente durante un trasplante capilar, Los tejidos procedían de hombres de raza blanca adultos de entre 40 y 65 años que no estaban tomando finasterida ni minoxidil, En todos los análisis se usaron muestras únicas de cuero cabelludo no usadas en otros experimentos, Para calcular las diferencias en veces promedio entre el cuero cabelludo con pelo y el calvo, se crearon razones para cada paciente y luego se obtuvo el promedio, Las micromatrices se realizaron con métodos publicados, Para los experimentos de alargamiento del cabello, se usó tejido desechado de los estiramientos faciales, que contienen vello terminal,
Animales
Todos los protocolos de animales los aprobó el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Pensilvania, Se adquirieron ratones hembra C57BL/6J de tipo natural de Jackson Laboratory bajo petición de ratones de idéntico peso y fecha de nacimiento para los estudios de evolución temporal, Se obtuvieron ratones transgénicos K14-C ox2 y ratones con inactivación de Ptgdr, Gpr44 y Ptgds de fuentes originales, Para disminuir los efectos de la testosterona endógena, sólo se usaron ratones hembra, Se realizó depilación para sincronizar el ciclo del cabello tal como se describió, Si un animal se encontraba en un estado de transición el día de la biopsia, se etiquetó la muestra de la etapa posterior como 12 horas más avanzada, qPCR en tiempo real
Se extirpó piel dorsal del ratón con tijeras y pinzas, Se cortó tejido humano con tijeras, Se solubilizó el tejido (de 25 a 35 mg) en 300 ml de tampón Qiagen RLT. Se homogeneizaron tejidos del cuero cabelludo humano y de ratón con un rotor de tejidos, y se recogió el ARN y se convirtió en ADN complementario (AD N c) según las instrucciones del fabricante con el kit de extracción de ARN fibroso (Qiagen) y el kit de A D N c de alta capacidad (Applied BiosYstems), Se usó A D N c (50 ng) en las qPCR en tiempo real con Fast Mix
Maestra de RT-PCR cuantitativa
Mezcla y mediciones en el sistema Step One Plus (Applied BiosYstems). Se encontró que los patrones de la sonda de ARN 18S y b-actina eran equivalentes entre sí y no fluctuaron entre muestras de cantidades iguales de carga, Se calculó el cambio en veces con el método d Dc T. Los cebadores usados fueron cebadores TaqMan inventariados (Applied BiosYstems): PTGDS (ser humano), Ptgds (ratón), Fgf5 (ratón), Ptgfr (ratón), b-actina (ser humano), b-actina (ratón) y 18S (ser humano y ratón),
Inmunotransferencia de tipo Western
Se homogeneizó el tejido del cuero cabelludo humano y se cuantificó la cantidad de proteínas con un kit BCA (Pierce), Se cargaron cantidades iguales de cada lisado de tejido desechado (de 15 a 35 mg) para la electroforesis en gel de SDS-poliacrilamida, Se sondearon las membranas de poli(difluoruro de vinilideno) con un anticuerpo monoclonal de ratón anti-PTGDS (CaYman Chemical), seguido de un anticuerpo secundario anti-IgG de ratón conjugado con HRP (Vector), Se desarrolló la membrana con electroquimioluminiscencia (Amersham), se expuso a autorradiografía y se cuantificó con ImageJ (National Institutes of Health), todo según las instrucciones del fabricante, Se tiñeron posteriormente las membranas con rojo Ponceau (Sigma) para verificar la igualdad de carga entre todos los carriles sometidos a prueba,
Ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas de PGD2
Se obtuvo cuero cabelludo humano de los trasplantes capilares para medir la cantidad de PGD2, Inmediatamente después de la cirugía, se colocaron las muestras a 40C en medio de Eagle modificado por Dulbecco con suero bovino fetal al 10% (FBS) y antibióticos/antimicóticos, o se ultracongelaron, Los pesos de las muestras de tejido variaron entre 0,14 y 0,94 g, Todos los valores se normalizaron con respecto al peso de tejido inicial, En el plazo de 1 a 2 días, las muestras se congelaron rápidamente en nitrógeno líquido y se almacenaron a -70oc durante al menos 24 horas, Después de la descongelación, se diluyeron las muestras en 1 ml de acetona y se homogeneizaron. Se centrifugaron las muestras a 5000 g durante 10 min, se retiró el sobrenadante y se realizó una segunda extracción en el sedimento. Se secaron los sobrenadantes combinados en una centrifugadora SpeedVac y se resuspendieron en 100 ml de tampón de inmunoensayo enzimático proporcionado en el kit ELISA (ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas) de prostaglandina D2-MOX de Cayman Chemical. Se siguieron las instrucciones del fabricante para determinar la concentración de PGD2 con respecto a una curva de calibración. Se normalizaron los valores con respecto al cuero cabelludo con pelo.
Cromatografía de líquidos de ultra-alto rendimiento
Se preparó tejido humano tal como antes para ELISA. Para maximizar el rendimiento de las prostaglandinas en los ratones, se ultracongelaron las muestras y se mantuvieron a menos de 40C en todo momento. Se obtuvo tejido de ratones K14-Ptgs2 y de controles de animales de la cepa correspondiente del virus de Friend tipo B (FVB) en el día 24 de vida. Para los tejidos de ratones, se ultracongelaron la epidermis y la dermis extirpadas en acetona, se trituraron y se homogeneizaron con un aparato Omni TH 115V con punta metálica en acetona durante menos de 2 min. A continuación, se centrifugó el tejido homogeneizado a 16.000 g durante 10 min y se guardó el sobrenadante. Se secó la acetona bajo una suave corriente de gas nitrógeno, después de lo cual volvió a disolverse la muestra en 1 ml de acetonitrilo al 5% en agua, se acidificó con 20 ml de ácido fórmico y se aplicó a un cartucho de SPE Strata-X (Phenomenex) acondicionado. El protocolo de SPE incluía el preacondicionamiento con 1 ml de H2O seguido de 1 ml de acetonitrilo, la aplicación de la muestra, el lavado con 1 ml de H2O, el secado mediante la aplicación de vacío doméstico durante 15 min y la elución con 1 ml de acetonitrilo al 10% en acetato de etilo. A continuación, se secó el eluato con una corriente de nitrógeno, se redisolvió en 200 ml de acetonitrilo al 30% en H2O y se filtró a través de filtros Nylon Spin-X de 0,2 mm (Corning) antes de inyectar 100 ml en el instrumento para el análisis por UHPLC.
La UHPLC consistió en un sistema de administración de disolventes Accela (Thermo) y columnas Hypersil GOLD C18, de 200 mm * 1 mm, con un tamaño de partícula de 1,9 mm (Thermo). La fase móvil consistió en agua (disolvente A) y acetonitrilo/metanol (95:5, disolvente B), ambos con ácido acético al 0,005% ajustado a pH 5,7 mediante hidróxido de amonio. El gradiente de la fase móvil comenzó en el 20% de B y aumentó de manera lineal hasta el 35% a los 10 min, seguido de un aumento lineal hasta el 80% de B a los 20 min, y se mantuvo en el 80% de B durante 3 min. La velocidad de flujo fue de 350 ml/min.
Espectrometría de masas
Se usó un instrumento TSQ Quantum Ultra (Thermo) equipado con una fuente de ionización por electropulverización (ESI) calentada y un analizador de triple cuadrupolo. La fuente de ESI usó nitrógeno como el gas de protección y auxiliar, ajustado a 70 y 5 unidades arbitrarias, respectivamente. El espectrómetro de masas se hizo funcionar en el modo de iones negativos con una temperatura capilar de 350oc y una tensión de pulverización de 0 kV. La compensación de la fuente se ajustó a 6 V. El analizador se hizo funcionar en el modo de monitorización de la reacción seleccionada. Las transiciones monitorizadas durante los primeros 16 min fueron las siguientes: razón masa/carga (m/z) 351^271 (energía de colisión, 15 V) para PGD2 y PGE2 endógenas, m/z 355^275 (15 V) para PGD2 y PGE2 tetradeuteradas, m/z 353^193 (24 V) para PGF2a endógena, y m/z 357^197 (24 V) para PGF2a tetradeuterada. Durante los últimos 7 min, se monitorizaron m/z 315^271 (15 V) para la 15-dPGJ2 endógena y m/z 319^275 (15 V) para el análogo tetradeuterado. Todos los eicosanoides se adquirieron de Cayman Chemical.
Inmunohistología e inmunofluorescencia
Se fijó la piel de la espalda de los ratones o del cuero cabelludo humano en paraformaldehído al 4%, se incrustó en Parafilm y se cortó en secciones de 5 a 10 mm. Se tiñeron portaobjetos que no son para inmunotinción con hematoxilina y eosina (Fisher Scientific). Para la inmunotinción, se aplicó un anticuerpo policlonal de conejo anti-PTGDS (Cayman Chemical) o un anticuerpo monoclonal de ratón anti-KRT15 (Lab Vision, clon LHKRT15), seguido de un anticuerpo biotinilado anti-IgG de conejo o de ratón, respectivamente. Se usó el kit ABC (Vector Labs) con peroxidasa de rábano picante y diazoaminobenceno para el desarrollo del color. Se usó verde de metilo (Vector Labs) para la tinción de contraste del tejido para la inmunohistoquímica; la tinción del antígeno aparece de color marrón y la tinción de contraste aparece de color verde azulado. Se visualizó la tinción en un microscopio óptico tradicional (Nikon). Se trató la piel con los mismos anticuerpos primarios descritos para la inmunohistoquímica. Como anticuerpos secundarios se usaron anticuerpo anti-IgG de conejo-Alexa Fluor 488 (Invitrogen) y anticuerpo anti-IgG de ratón-rodamina (Vector Labs). Se montaron posteriormente los tejidos en un medio de 4',6-diamidino-2-fenilindol (DAPI) (Vector Labs). Se visualizó la tinción en un microscopio de fluorescencia tradicional con cubos de filtro rojo, verde y azul (Leica).
Cultivo de células de queratinocitos
Se aislaron queratinocitos del prepucio humano de prepucios neonatales. Se sembraron densidades iguales de queratinocitos (50.000 células/cm2) entre los pasajes 2 y 3 después de la iniciación en placas de cultivo de seis pozos. Se mantuvieron las células en 2 ml de medio EpiLife (Cascade Biologics) y se trataron durante de 12 a 48 horas con PGD2 100 mM, PGE2 1 mM o 15-dPGJ2 10 mM (Cayman Chemical) que se habían disuelto en acetona, A menos que se especifique lo contrario, se trataron las células con prostaglandinas 10 mM durante 20 horas, Se usó acetona sola como control,
Citometría de flujo
Durante el cultivo, se pulsaron queratinocitos humanos con bromodesoxiuridina 0,2 mM (BrdU) durante las últimas 3 horas de incubación con prostaglandinas, Se tripsinizaron las células para liberarlas en suspensión, se contaron, se fijaron y se permeabilizaron (Caltech), Se tiñeron las células con 20 ml de caspasa 3 antiactivada (Becton Dickinson, clon CPP32) o isotiocianato de fluoresceína anti-BrdU (Becton Dickinson, clon B44) por cada 106 células, Se resuspendieron las células en solución salina tamponada con fosfato (PBS) con FBS al 5% y DAPI (5 mg/ml) antes de pasarlas por un citómetro de flujo LSRII (Becton Dickinson), Las células sub-G1 se seleccionaron como aquellas que contenían cantidades de A d N inferiores a la diploide,
Estudios sobre el alargamiento del cabello en ratones
Para comparar el efecto del vehículo, la PGD2 y la 15-dPGJ2 en el ciclo capilar entre los ratones de tipo natural y los ratones con inactivación de genes, se aplicó 1 mg de PGD2 en 200 ml de acetona o acetona sola en la parte central de la espalda los días 8, 10, 12, 14, 16 y 18 después de la depilación, y se midió la longitud del cabello el día 20, Para comprobar la evolución temporal del alargamiento del cabello con 15-dPGJ2, se usaron 10 mg en lugar de la PGD2 anterior, Se midió la longitud del cabello tal como se describió, con la selección de sólo los pelos punzón (no zigzag) medidos, Para someter a prueba las cepas de ratones mutantes, se repitió el experimento en tres camadas distintas,
Cultivo de folículos pilosos humanos
Se realizó el modelo de cultivo de órganos de folículos pilosos tal como se describió, En resumen, se aislaron folículos pilosos humanos en fase de crecimiento (anágena) a partir de tejido de estiramiento facial y de cejas obtenido de cirujanos plásticos, Se usaron al menos tres donantes humanos diferentes (una mezcla de hombres y mujeres) para cada compuesto sometido a prueba, Todos los sujetos estaban en el intervalo de edad de 40 a 60 años, Se cortó la piel en tiras finas de 1 a 2 mm, exponiendo de dos a tres filas de folículos que podían diseccionarse fácilmente, Se colocaron los folículos en 0,5 ml de medio E de William (Life Technologies) complementado con L-glutamina (2 mM), insulina (10 mg/ml), hidrocortisona (10 ng/ml), penicilina (100 U), estreptomicina (0,1 mg/ml) y anfotericina B (0,25 mg/ml), Se incubaron los folículos en placas de 24 pocilios (un folículo por pocilio) a 370C en una atmósfera del 5% de CO2 y el 95% de aire, Se disolvieron la PGD2, Ios metabolitos de PGD2 y Ios análogos de PGD2 (Cayman Chemical) en dimetilsulfóxido (DMSO) como disoluciones madre 100* (por ejemplo, 0,5 mM para tratamientos de 5 mM y 1 mM para tratamientos de 10 mM), Se usaron controles de vehículo de DMSO al 1% (v/v ). Se trataron Ios folículos pilosos sólo con DMSO como control, Se tomaron imágenes de Ios folículos normalmente el día 0 (el día en el que se colocaron Ios folículos en el cultivo) y de nuevo el día 7, Se evaluó la longitud de la fibra capilar con Vision Builder (National Instruments), Se calculó el crecimiento de la fibra capilar restando la longitud del día 0 de la determinada el día 7, Cada una de las mediciones indicadas es el promedio de Ios resultados de desde 14 hasta 20 folículos,
Análisis estadístico
Para todos Ios cálculos de Ios valores P, se calculó la prueba de la t de Student para datos emparejados con una distribución de una cola y se consideró que P < 0,05 era significativo, Todos Ios datos son medias ± EEM, Se usó la prueba de análisis de la varianza (ANOVA) para clasificar Ios genes de la micromatriz como principalmente diferentes con respecto al lugar (con pelo frente a sin pelo) e independientemente de la persona, la fecha de la biopsia o la fecha de la micromatriz,
Resultados
ejemplo 1
La PTGDS y la PGD2 están elevadas en el cuero cabelludo calvo
Para evaluar Ios cambios globales de expresión génica en el cuero cabelludo calvo de hombres con AGA, se realizaron micromatrices de expresión génica comparando el cuero cabelludo calvo con el cuero cabelludo con pelo en cinco hombres con AGA, Los coeficientes de correlación entre las muestras replicadas con pelo y calvas se aproximaron a 1 (figura 1A). Los coeficientes de correlación que comparan el cuero cabelludo con pelo con el calvo dentro de Ios individuos también se aproximaron a 1, lo que indica la ventaja de las muestras emparejadas como controles internos, Se identificaron 250 transcritos que se expresaban de manera diferencial en el cuero cabelludo humano con pelo frente al calvo, Como prueba de la validez de estos transcritos, un algoritmo de agrupación clasificó las muestras o bien como con pelo o bien como calvas, basándose en la expresión de estos genes (figura IB), Las queratinas capilares estaban reguladas por incremento en el cuero cabelludo con pelo, tal como era de esperar. Por razones poco claras, Ios transcritos relacionados con la hemoglobina fueron elevados en el cuero cabelludo calvo. En el cuero cabelludo con pelo, se elevaron 169 genes, y se elevaron 81 genes en el cuero cabelludo calvo, con las direcciones de expresión esperadas (figura 1C). Se determinaron clasificaciones funcionales de ontología génica enriquecidas para estos genes y se identificaron categorías que se solapaban. En el cuero cabelludo con pelo, Ios genes de la morfogénesis y de la ruta de desarrollo estaban sobreexpresados, mientras que en el cuero cabelludo calvo Ios genes de la respuesta inmunitaria estaban sobreexpresados (figura ID), en consonancia con la histología conocida de la AGA.
Teniendo en cuenta el uso clínico de Ios compuestos relacionados con la prostaglandina F2a (PGF2a) para promover el crecimiento del cabello, y las funciones a menudo antagónicas de las prostaglandinas, resultó intrigante encontrar PTGDS como uno de Ios transcritos más expresados en el cuero cabelludo con calvicie de hombres (figura 1, E y F). De Ios tres conjuntos de sondas que cubrían la PTGDS en la micromatriz, todos estaban elevados en el cuero cabelludo con calvicie (figura 1E). El aumento de la expresión de PTGDS y Ios niveles de proteína de PTGDS se confirmaron además en el cuero cabelludo humano con calvicie frente al cuero cabelludo con pelo mediante la reacción en cadena de la polimerasa F2 cuantitativa en tiempo real (qPCR) (figura 2A) y mediante inmunotransferencia de tipo Western (figura 2, B y C). Para comprender mejor el papel de la PTGDS en la calvicie, se midieron Ios niveles de su producto sintasa, la PGD2, en el cuero cabelludo humano tanto con calvicie como con pelo. Se descubrió un aumento significativo de PGD2 en el cuero cabelludo con calvicie en comparación con el cuero cabelludo con pelo mediante inmunoensayo (figura 2D). El nivel absoluto de PGD2 era de 16,3 ng/g de tejido en el cuero cabelludo con calvicie y de 1,5 ng/g de tejido en el cuero cabelludo con pelo. Se midieron a continuación Ios niveles de PGD2 mediante cromatografía de líquidos de ultraalto rendimiento (UHPLC-EM) debido a su mayor precisión notificada en la medición de prostaglandinas en comparación con el inmunoensayo. En una serie más amplia de muestras calvas y con pelo emparejadas de 17 hombres con AGA, se observó un aumento de PGD2 en el cuero cabelludo calvo en comparación con el cuero cabelludo con pelo (figura 2E). Otras prostaglandinas tienen actividad en el crecimiento del folículo piloso. Se midieron Ios niveles de otras especies de prostaglandinas en Ios cueros cabelludos con calvicie y con pelo. El metabolito no enzimático de la PGD2, l5-dPGJ2, también aumentó en el cuero cabelludo con calvicie en comparación con el cuero cabelludo con pelo (figura 2E). Sin embargo, el nivel absoluto de 15-dPGJ2 (3,8 ng/g en cuero cabelludo calvo, 1,3 ng/g en cuero cabelludo con pelo) fue inferior al de PGD2 (53,5 ng/g en cuero cabelludo calvo, 25,6 ng/g en cuero cabelludo con pelo) (figura 2F). La UHPLC-EM detectó niveles más altos de PGD2 en el cuero cabelludo con calvicie que el inmunoensayo (53,5 frente a 16,3 ng/g de tejido), aunque ambos métodos demostraron una mayor masa de PGD2 en el cuero cabelludo calvo. A diferencia de la PGD2, el nivel de prostaglandina E2 (PGE2), que es sintetizada por la PTGES en lugar de la PTGDS, fue más abundante en el cuero cabelludo con pelo en comparación con el cuero cabelludo con calvicie (figura 2E), con 3,1 ng/g en cuero cabelludo con calvicie y 6,4 ng/g en cuero cabelludo con pelo detectados mediante UHPLC-EM (figura 2F).
Ejemplo 2
Los queratinocitos de ratón del folículo no permanente expresan Ptgds al final del anágeno
Para comprender mejor la función biológica normal de Ptgds y PGD2 en el crecimiento del cabello, se aprovechó el ciclo capilar sincronizado y bien caracterizado del ratón. Puede determinarse el origen de las fluctuaciones en la expresión génica y Ios niveles de proteínas hasta las diferentes fases del ciclo del folículo piloso examinando la piel a diferentes edades o después de la depilación del pelo del ratón, que induce un nuevo ciclo sincronizado del folículo piloso. En el proceso de investigación de las características del ciclo capilar sincronizado del ratón, se verificó la fase del ciclo capilar en relación con el día postnatal (PN) en muestras de biopsia de piel de ratón. Se confirmó que, tal como sugería el aspecto macroscópico, las características histológicas de Ios ratones eran las de telógeno tardío en el día PN21, de anágeno tardío en el día PN35 y de catágeno en el día PN46. El ARNm de Ptgds, medido mediante qPCR, alcanzó su punto máximo en la fase anágena tardía y fue siete veces mayor en comparación con la fase de reposo (telógena) en el día PN20 (figura 3A). Por tanto, la expresión de Ptgds fue la más baja durante el telógeno y aumentó progresivamente a través del anágeno hasta alcanzar su máximo en el anágeno tardío, cerca del momento de la transición al catágeno, la fase de regresión. Para examinar más de cerca la proximidad del pico de expresión de Ptgds a la transición a catágeno, se comparó con la expresión del factor de crecimiento de fibroblastos 5 (Fgf5), un conocido marcador del inicio de catágeno. La expresión de Fgf5 alcanzó su máximo en el anágeno tardío en comparación con el telógeno (figura 3A). Juntos, Ios niveles máximos de expresión de Fgf5 y Ptgds se solaparon durante el anágeno tardío, justo antes del inicio del catágeno. A continuación, se trató de identificar Ios genes de control expresados de manera diferente a Fgf5 y Ptgds. Como marcador del anágeno temprano, se midió la expresión del receptor de PGF2a, conocido por su capacidad de inducir el crecimiento del cabello tanto en ratones como en seres humanos. En contraste con el pico tardío de Ptgds y Fgf5, el ARNm del receptor de la prostaglandina F (Ptgfr) alcanzó su máximo en el anágeno temprano o telógeno tardío, con un cambio de 21 veces frente al segundo telógeno (PN52) (figura 3A) y un cambio de 3 veces frente al primer telógeno (PN20).
Para determinar la relación temporal entre la expresión de Ptgds y la producción de PGD2, se midieron Ios niveles de PGD2 mediante HPLC-EM en ratones idénticos de Ios que se determinaron Ios datos de ARNm en la figura 3A. Se descubrió que la producción de PGD2 alcanzó un máximo después del ápice de la expresión de Ptgds, Durante la fase catágena, en el día PN46, la PGD2 alcanzó un nivel máximo de 87,6 ng/g de tejido, en comparación con un nadir en anágena temprana en el día PN24 de 7,4 ng/g de tejido (figura 3B). Por tanto, el ARNm de Ptgds se expresa en primer lugar en la piel en el anágeno tardío y, posteriormente, la PGD2 se produce a través de la proteína Ptgds durante el catágeno. Aunque las primeras fases del ciclo del folículo piloso en ratones individuales están sincronizadas de manera natural, los animales de la misma edad e incluso de la misma camada pueden mostrar heterogeneidad con respecto al ciclo del folículo piloso. Por tanto, se repitió el análisis anterior usando ratones que se habían depilado simultáneamente para sincronizar el ciclo capilar entre los animales, así como dentro de los animales. Corroborando los resultados del ciclo capilar espontáneo, el ARNm de Ptgds también fluctuó con el ciclo capilar en los animales depilados. El ARNm de Ptgds alcanzó su máximo en el anágeno tardío, seguido del máximo de PGD2 en el catágeno (figura 3C). La producción de PGD2 alcanzó su máximo en el día 19,5 (catágeno), con 199,9 ng/g de tejido en comparación con un nadir de 27,6 ng/g de tejido en el día 37. También se observó un pico único de producción de PGD2 a las pocas horas de la depilación, que no se observó en el ciclo capilar espontáneo de la figura 3B. Esto coincide con la desgranulación de los mastocitos observada anteriormente después de la depilación. Los picos más estrechos de los marcadores en el ciclo capilar depilado probablemente reflejan una sincronización más estrecha del ciclo del folículo piloso después de la depilación. Para definir mejor la expresión de Ptgds, se realizó inmunohistoquímica en secciones de tejido de la piel de los animales usados para la evolución temporal en la figura 3C. La Ptgds era evidente en el anágeno tardío en los queratinocitos de la vaina de la raíz externa por debajo de la zona de protuberancia rica en células madre marcada por el músculo arrector pili (figura 3D). Esta zona del folículo retrocede durante el catágeno.
Para corroborar este patrón observado mediante la inmunohistoquímica, se examinó a continuación el mareaje de inmunofluoreseeneia doble para Ptgds y queratina 15 (Krt15), un marcador de células madre del folículo piloso. En el día 0 de la depilación (telógeno), Krt15 estaba presente en la zona de protuberancia en la parte permanente más inferior del folículo piloso, que persiste hasta el telógeno (figura 3E). No se identificó Ptgds, lo que coincide con los datos de la qPCR que muestran la falta de expresión de Ptgds durante el telógeno (figura 3A). También en consonancia con la qPCR, en el día 17 (anágeno tardío), se encontró un patrón deteetable de Ptgds mediante inmunohistoquímica (figura 3, D y F). Las células de la vaina de la raíz externa inferior, pero no las células de la protuberancia, expresaban Ptgds. Además, en el día 19 después de la depilación, los queratinocitos de los folículos eatágenos expresaban Ptgds, sin superponerse a los queratinocitos positivos para Krtl 5 (figura 3G). Estos resultados demuestran que la Ptgds es abundante en los queratinocitos no permanentes del folículo piloso del ratón.
Ejemplo 3
PTGDS se expresa en queratinocitos no permanentes del folículo piloso humano
En los folículos pilosos humanos terminales normales, se encontró una presencia similar de PTGDS, principalmente en el folículo piloso no permanente debajo del músculo arrector pili (figura 4A). Sin embargo, la tinción era variable y muchos folículos humanos normales se tiñeron ligeramente o no se tiñeron (figura 4B). Esto es coherente con niveles más bajos de ARNm de PTGDS en el cuero cabelludo con pelo frente a calvo y probablemente también refleja la falta de sincronización en el cielo del folículo piloso humano. En los folículos pilosos miniaturizados del cuero cabelludo humano con calvicie, los queratinocitos de las glándulas sebáceas y de los folículos pilosos situados fuera de la protuberancia (figura 4, C y E), y en algunos casos dentro de la protuberancia suprabasal (figura 4D), expresaron PTGDS. También se detectó PTGDS fuera del epitelio del folículo piloso, lo que indica posibles fuentes de PGD2 en la dermis (figura 4, E y F). En los folículos pilosos que experimentan catágeno, la PTGDS estaba presente en los mastocitos dentro de la estela fibrosa, que es el antiguo lugar del folículo en regresión (figura 4E). Estos resultados en el ratón y en el ser humano demuestran que la lipoealina PTGDS y su producto PGD2 se expresan predominantemente en la porción transitoria del folículo en el momento en que éste comienza a retroceder. Estos resultados coinciden con la hipótesis de que la ruta de PGD2 inhibe el crecimiento del folículo piloso.
Ejemplo 4
Los ratones transgénicos que sobreexpresan Ptgs2 en la epidermis fenocopian la AGA
Dada la correlación de los niveles aumentados de PGD2 con el cuero cabelludo con calvicie en seres humanos y el presunto papel inhibidor de la PGD2 en el folículo del ratón, se planteó la hipótesis de que los ratones con niveles altos de PGD2 en la piel podrían desarrollar características de la AGA. Dado que la Ptgs2 (eielooxigenasa 2, prostaglandina G/H sintasa) es la enzima que precede a la Ptgds, se planteó además la hipótesis de que los ratones que sobreexpresaran la Ptgs2 tendrían niveles elevados de PGD2. Los ratones transgénicos que sobreexpresan Ptgs2 en la epidermis se habían desarrollado previamente para estudios de eareinogénesis. Se observó que los folículos pilosos de estos ratones transgénicos K14-Ptgs2 entraban en catágeno prematuramente, y que estos ratones desarrollaban alopecia y agrandamiento de las glándulas sebáceas.
Se analizó además la piel y los folículos pilosos del ratón K14-Ptgs2. Estos ratones desarrollaron alopecia, que se hizo evidente como una disminución del pelaje murino normal en comparación con el control (figura 5, F5 A y B). Mediante histología, también se detectó una hiperplasia de las glándulas sebáceas, indicada por los sebocitos agrandados agrupados alrededor del folículo piloso (figura 5, C y D). Los folículos pilosos de los ratones K14-Ptgs2 estaban miniaturizados en comparación con los controles (figura 5, C y D), y estos folículos tenían un marcado parecido con los folículos miniaturizados del cuero cabelludo humano. Para determinar el contenido de prostaglandinas en la piel alopécica de los ratones K14-Ptgs2, se midieron los niveles de prostaglandinas mediante HPLC-EM durante la fase anágena del ciclo del folículo piloso. La PGE2 era elevada en los ratones K14-Ptgs2 en comparación con los controles de tipo natural emparejados por la edad, tal como se demostró previamente usando inmunoensayos que miden el contenido de PGE2 y PGF2a en la piel de los ratones sometidos a biopsia. La PGD2 también era elevada y más abundante que la PGE2 tanto en los ratones de tipo natural como en los ratones K14-Ptgs2. La 15-dPGJ2 era elevada en los ratones K14-Ptgs2 en comparación con los controles y demostró el mayor aumento en veces (~14 veces), aunque los valores de referencia eran bajos (5,7 ng/g de tejido) (figura 5E). Se encontraron niveles bajos (18,4 ng/g de tejido) de PGF2a, y una ausencia de prostaciclina (6k-PGF1a) y tromboxano (Tx B2) (figura 5E), que no se sabe que estén presentes en la piel normal. En conjunto, el fenotipo de calvicie en estos ratones es probablemente el resultado de los abrumadores efectos inhibidores de PGD2 y 15-dPGJ2 en el folículo piloso, a pesar de la presencia de PGE2, un conocido promotor del crecimiento del cabello.
Ejemplo 5
La 15-dPGJ2 y la PGD2 inhiben el crecimiento del cabello en los folículos pilosos de ratones y seres humanos
Dado el pico temporal de PGD2 antes de la fase apoptótica del catágeno, y la capacidad de su metabolito 15-dPGJ2 para inducir la apoptosis en otros tipos de células, se sometieron a prueba los efectos de las prostaglandinas en cultivos celulares primarios de queratinocitos aislados del prepucio neonatal. La 15-dPGJ2 induce la apoptosis, tal como resulta evidente mediante la vesiculación de la membrana plasmática y la retracción/contracción celular. La 15-dPGJ2 también disminuyó la densidad celular, la división celular y el número de células vivas. Quizá porque el origen de estos queratinocitos no era el folículo piloso, la PGD2 no tuvo ese efecto sobre las células. Sin embargo, la 15-dPGJ2 sí aumentó las cantidades de ADN sub-Gl y activó la caspasa 3 en los queratinocitos humanos, que son características de la muerte celular apoptótica. Por tanto, se planteó la hipótesis de que al menos la 15-dPGJ2, si no también la PGD2, podría inhibir directamente el crecimiento del cabello in vivo. Se aplicó la 15-dPGJ2 por vía tópica a la piel dorsal de ratones C57BL/6 que se habían depilado para sincronizar el ciclo del folículo piloso. A partir del día 8 después de la depilación y continuando cada dos días, se aplicaron 10 mg de 15 dPGJ2 o vehículo de acetona. Se midió la longitud del cabello en los días 4, 12, 14 y 16 después de la depilación. En los días 12 a 16, el pelo en el lugar del tratamiento era más corto que en los animales tratados con el vehículo F6 (figura 6A). Para determinar una dosis mínima eficaz, se sometió a prueba la aplicación de 1 mg tanto de PGD2 como de 15-dPGJ2 tal como se indicó anteriormente y se midió la longitud del cabello el día 20 después de la depilación. La PGD2 inhibió el crecimiento del cabello, pero en menor medida que la 15-dPGJ2 (figura 6B).
No se encontró ninguna evidencia de cambios en el ciclo del folículo piloso macroscópicamente ni mediante examen histológico. Habiendo demostrado la inhibición del crecimiento del cabello mediada por la PGD2, se buscó determinar qué receptor era el responsable de este efecto. Los dos receptores canónicos para la PGD2 son el PTGDR (también conocido como DP-1) y el GPR44 (DP-2). Se ha informado de que tanto DP-1 como DP-2 se expresan en los queratinocitos de la vaina de la raíz externa del folículo piloso, entre otros lugares. Por tanto, se sometió a prueba la capacidad de la PGD2 para inhibir el crecimiento del cabello tanto en ratones con inactivación de Ptgdr como en ratones con inactivación de Gpr44 usando ratones con inactivación de Ptgds como control. Mientras que los ratones con inactivación de Ptgds y Ptgdr fueron ambos susceptibles a la inhibición del alargamiento del cabello, los ratones con inactivación de Gpr44 fueron resistentes al efecto inhibidor de la PGD2 (figura 6C). Estos datos muestran que GPR44, y no PTGDR, es el receptor de la inhibición del alargamiento del cabello mediada por PGD2 y, por tanto, podría ser una diana terapéutica para la AGA.
Para someter a prueba el efecto de PGD2 en el crecimiento del cabello humano, se usaron folículos pilosos humanos explantados mantenidos en cultivo durante 7 días. Se añadieron cantidades crecientes (de 0 a 10 mM) de PGD2, 15-dPGJ2 o vehículo al medio de cultivo y se midió la longitud del cabello (figura 6D). A partir de 5 mM, la PGD2 y la 15-dPGJ2 inhibieron significativamente el crecimiento del cabello. A 10 mM, el cabello tratado con PGD2 era un 62 ± 5% más corto que el vehículo, mientras que 15-dPGJ2 10 mM inhibía completamente el crecimiento del cabello. Se sometió a prueba una variedad de otros análogos de la PGD2 y se descubrió que podían inhibir el alargamiento del cabello. El agonismo para la GPR44 se correlacionó con la capacidad de inhibir el alargamiento del cabello (figura 7). Por ejemplo, el agonista débil 11-desoxi-11-metileno p GD2 tuvo la menor actividad (inhibición del crecimiento del cabello) de los compuestos sometidos a prueba. Se observa que GPR44 tiene afinidades nanomolares por los ligandos, pero como es típico en este tipo de experimentos, se necesitaron concentraciones más altas para superar la penetración en el tejido y la lisis del compuesto. Por tanto, tanto en el ratón como en el ser humano, la PGD2 y la 15-dPGJ2 inhiben el crecimiento del cabello, probablemente a través del receptor GPR44.
Se demuestra que la prostaglandina D2 sintasa (PTGDS) está elevada a niveles de ARNm y proteínas en el cuero cabelludo calvo en comparación con el cuero cabelludo con pelo de los hombres con AGA. El producto de la actividad enzimática de la PTGDS, la prostaglandina D2 (PGD2), está igualmente elevado en el cuero cabelludo calvo. Durante el ciclo normal del folículo en ratones, los niveles de Ptgds y PGD2 aumentan inmediatamente antes de la fase de regresión, lo que sugiere un efecto inhibidor del crecimiento del cabello. Se demuestra que la PGD2 inhibe el crecimiento del cabello en folículos pilosos humanos explantados y cuando se aplica tópicamente a ratones. La inhibición del crecimiento del cabello requiere el receptor 44 acoplado a la proteína G (proteína heterotrimérica de unión a nucleótidos de guanina) de PGD2 (GPR44), pero no el receptor 1 de PGD2 (PTGDR). Además, se encuentra que un ratón transgénico, K14-Ptgs2, que dirige la expresión de la prostaglandina-endoperóxido sintasa 2 a la piel, demuestra niveles elevados de PGD2 en la piel y desarrolla alopecia, miniaturización folicular e hiperplasia de las glándulas sebáceas, que son todas características de la AGA humana.

Claims (2)

REIVINDICACIONES
1. Composición que comprende un antagonista de DP-2 para su uso en la estimulación del crecimiento del cabello en un sujeto que padece alopecia androgénica mediante administración tópica, en la que el antagonista de DP-2 es AM21 1.
2. Composición para su uso según la reivindicación 1, en la que al sujeto se le administra además finasterida o minoxidil.
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Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK2037967T3 (en) 2006-06-16 2017-03-13 Univ Pennsylvania PROSTAGLANDIN-D2 RECEPTOR ANTAGONISTS FOR TREATMENT OF ANDROGENETIC ALOPECI
JP2014500275A (ja) 2010-12-06 2014-01-09 フォリカ，インコーポレイテッド 禿頭症を治療するため、および毛髪の成長を促進するための方法
CN109248167A (zh) * 2014-05-23 2019-01-22 特里普海尔公司 用于减少脱发和/或增加毛发再生的组合物
US11696883B2 (en) 2014-05-23 2023-07-11 Triple Hair Inc. Compositions for reducing hair loss and/or increasing hair regrowth
PT3347009T (pt) 2015-07-08 2022-01-12 Triple Hair Inc Composição compreendendo resveratrol e melatonina para reduzir a perda de cabelo e/ou aumentar o crescimento do cabelo
EP3328500B1 (en) * 2015-07-30 2023-04-12 The Trustees of the University of Pennsylvania Single nucleotide polymorphic alleles of human dp-2 gene for detection of susceptibility to hair growth inhibition by pgd2 antagonists
CN106214592B (zh) * 2016-09-09 2019-03-15 美萃国际贸易（上海）有限公司 毛囊营养液组合物及其制备方法
KR101857408B1 (ko) * 2018-02-28 2018-05-14 경북대학교 산학협력단 탈모 예방 또는 치료용 조성물
GB202005548D0 (en) * 2020-04-16 2020-06-03 Hairclone Ltd Method of determining the androgen-sensitivity of a hair follicle

Family Cites Families (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6878522B2 (en) 2000-07-07 2005-04-12 Baiyong Li Methods for the identification of compounds useful for the treatment of disease states mediated by prostaglandin D2
SE0200356D0 (sv) 2002-02-05 2002-02-05 Astrazeneca Ab Novel use
SE0200411D0 (sv) 2002-02-05 2002-02-05 Astrazeneca Ab Novel use
WO2003097042A1 (fr) 2002-05-16 2003-11-27 Shionogi & Co., Ltd. Antagoniste de recepteur de pdg2
TW200307542A (en) 2002-05-30 2003-12-16 Astrazeneca Ab Novel compounds
SE0201635D0 (sv) 2002-05-30 2002-05-30 Astrazeneca Ab Novel compounds
SE0202241D0 (sv) 2002-07-17 2002-07-17 Astrazeneca Ab Novel Compounds
BR0315041A (pt) 2002-10-04 2005-08-16 Millennium Pharm Inc Métodos para inibir crth2 em um indivìduo que necessita inibição de crth2; composto; e composição farmacêutica
ATE327977T1 (de) 2002-10-21 2006-06-15 Warner Lambert Co Tetrahydrochinolin-derivate als crth2 antagonisten
EP1435356A1 (en) 2003-01-06 2004-07-07 Warner-Lambert Company LLC Quinoline derivatives as CRTH2 antagonists
SE0301569D0 (sv) 2003-05-27 2003-05-27 Astrazeneca Ab Novel compounds
SE0302232D0 (sv) 2003-08-18 2003-08-18 Astrazeneca Ab Novel Compounds
SA04250253B1 (ar) 2003-08-21 2009-11-10 استرازينيكا ايه بي احماض فينوكسي اسيتيك مستبدلة باعتبارها مركبات صيدلانية لعلاج الامراض التنفسية مثل الربو ومرض الانسداد الرئوي المزمن
WO2005040112A1 (en) 2003-10-14 2005-05-06 Oxagen Limited Compounds with pgd2 antagonist activity
GB2407318A (en) 2003-10-23 2005-04-27 Oxagen Ltd Substituted Indol-3-yl acetic acid derivatives
US20050112075A1 (en) * 2003-11-25 2005-05-26 Hwang Cheng S. Reduction of hair growth
SE0303180D0 (sv) 2003-11-26 2003-11-26 Astrazeneca Ab Novel compounds
JP5164567B2 (ja) * 2005-05-17 2013-03-21 大鵬薬品工業株式会社 慢性副鼻腔炎の重症度および再発性の検査方法
DK2037967T3 (en) * 2006-06-16 2017-03-13 Univ Pennsylvania PROSTAGLANDIN-D2 RECEPTOR ANTAGONISTS FOR TREATMENT OF ANDROGENETIC ALOPECI
DK2046740T3 (da) * 2006-07-22 2012-08-20 Oxagen Ltd Forbindelser med CRTH2-antagonistisk virkning
EP2442802A1 (en) * 2009-06-17 2012-04-25 Aderans Research Institute, Inc. Methods and compositions for increasing trichogenic potency of dermal cells
SG177736A1 (en) * 2009-07-31 2012-02-28 Panmira Pharmaceuticals Llc Dermal formulations of dp2 receptor antagonists
JP2013516475A (ja) * 2010-01-06 2013-05-13 アミラ ファーマシューティカルズ，インク． Ｄｐ２アンタゴニストおよびその使用
KR20140017416A (ko) * 2010-02-24 2014-02-11 어드밴젠 인터내셔널 피티와이 리미티드 모발 손상 치료 또는 예방 방법 또는 모발 성장 촉진용 방법
US20100172865A1 (en) * 2010-03-18 2010-07-08 Shantha Totada R Methods of enhancing hair growth
JP2014500275A (ja) * 2010-12-06 2014-01-09 フォリカ，インコーポレイテッド 禿頭症を治療するため、および毛髪の成長を促進するための方法

Also Published As

Publication number Publication date
EA201491737A1 (ru) 2015-07-30
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