JP2015512393A - 発毛を調節するための組成物および方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、発毛を調節するための組成物および方法に関する。特に、本発明は、プロスタグランジンＤ２（ＰＧＤ２）受容体、ＤＰ−２（ＧＰＲ４４）のうちの１つの活性を調節することによる発毛調節に関する。発毛を調節するための組成物および方法は、ＤＰ−２作動薬を投与することによる発毛を阻害すること、またはＤＰ−２拮抗薬を投与することによる発毛を刺激すること、を含む。一実施形態において、対象における発毛を調節する方法が提供され、この方法は、前記対象に有効量のＤＰ−２作動薬または拮抗薬を投与することを含む。【選択図】 なし

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１２年３月２１日に出願された米国仮特許出願第６１／６１３，８２９号に基づく優先権を主張するものであり、その特許の全体は参照することによって本願に組み込まれる。

本発明は、発毛を調節するための組成物および方法に関する。特に、本発明は、プロスタグランジンＤ２（ＰＧＤ２）受容体、ＤＰ−２（ＧＰＲ４４）のうちの１つの活性を調節することによる発毛調節に関する。

８０％の白人男性が７０歳になる前にある程度の男性型脱毛症（ＡＧＡ）を経験する。テストステロンがＡＧＡの発症には必要であり、アンドロゲン受容体内の遺伝子感受性部位がＡＧＡを患う男性の少数に存在しているが；この障害に寄与するさらなる因子は未だ知られていない。ＡＧＡに関する研究は、良性前立腺肥大および前立腺がん等の他のアンドロゲン介在性疾患に関する識見をもたらす可能性を有している。ＡＧＡに対する現在の合法的な治療には、フィナステリド、ミノキシジル、および植毛が含まれる。フィナステリドは、テストステロンをより強力なアンドロゲン、ジヒドロテストステロンに変換する５−ａ還元酵素２（ＳＲＤ５Ａ２）を阻害する。ＡＧＡ治療におけるミノキシジルの活性標的は、未だ同定されていない。

ＡＧＡでは、濃い毛幹を形成する巨大な「硬（terminal）」毛包が長い期間をかけて小型化して、微細で活力のない毛髪を生成する小胞になる。毛包の小型化は毛包の成長期（毛周期成長期）の期間減少を伴い、毛周期成長期は、正常においては数年間持続して１ｍ超の長さの毛髪を生成するが、ＡＧＡにおいては数日または数週間のみに減少する。これにより、無毛の頭皮における微細な毛髪を含有する静止期（毛周期休止期）の毛包の割合が増加する。

毛包に対するこれらの内在的な変化に加えて、浸潤性のリンパ球およびマスト細胞が、小型化している毛包の周辺、特に幹細胞が豊富な毛隆起部（bulge area）の領域において確認されている。それぞれの毛包に付着している皮脂腺は、無毛の頭皮においては肥大化している。無毛になりかかった頭皮において、毛包幹細胞の数は変化が無いままであるが、一方、より活発に増殖する前駆細胞の数は著しく減少している。これは、無毛になりかかった頭皮が、活性化因子を欠いているか、または毛包成長の阻害因子を有していることを示すものである。

従って、毛包成長を調節する作用剤の同定および特徴付けが必要とされている。

一つの態様では、対象における発毛を調節するための方法が本明細書で提供され、前記方法は、前記対象に有効量のＤＰ−２作動薬または拮抗薬を投与することを含む。

別の態様では、対象における発毛を刺激するための方法が本明細書で提供され、前記方法は、前記対象に有効量のＤＰ−２拮抗薬を投与することを含む。

別の態様では、対象における発毛を阻害するための方法が本明細書で提供され、前記方法は、前記対象に有効量のＤＰ−２作動薬を投与することを含む。

別の態様では、対象における発毛を調節するための組成物が本明細書で提供され、前記組成物（例えば、局所製剤）は、前記対象における発毛を調節するのに有効な量でＤＰ−２作動薬または拮抗薬を含む。

別の態様では、対象における発毛を刺激するための組成物が本明細書で提供され、前記組成物（例えば、局所製剤）は、前記対象における発毛を増強するのに有効な量でＤＰ−２拮抗薬を含む。

別の実施形態では、本発明は、対象における発毛を阻害するための組成物を提供し、前記組成物（例えば、局所製剤）は、前記対象における発毛を阻害するのに有効な量でＤＰ−２作動薬を含む。

別の態様では、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤としての化合物をスクリーニングするための方法が本明細書で提供され、前記方法は、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定し；同じ条件下で、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であると考えられる化合物の非存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定するステップを含み、ここで、前記化合物の非存在下におけるよりも前記化合物の存在下におけるより低いＤＰ−２活性は、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であることを示す。いくつかの実施形態において、前記方法は、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定し；同じ条件下で、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であると考えられる化合物の非存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定することをさらに含み、ここで、前記化合物の存在下および非存在下でのより低いＤＰ−２活性およびおよそ等しいＤＰ−１活性は、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であることを示す。いくつかの実施形態では、複数の化合物がスクリーニングされる。

別の態様では、発毛を刺激するための候補作用剤としての化合物をスクリーニングするための方法が本明細書で提供され、前記方法は、発毛を刺激するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定し；同じ条件下で、発毛を刺激するための候補作用剤であると考えられる化合物の非存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定するステップを含み、ここで、前記化合物の非存在下におけるよりも前記化合物の存在下におけるより低いＤＰ−２活性は、発毛を刺激するための候補作用剤であることを示す。いくつかの実施形態において、前記方法は、発毛を刺激するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定し；同じ条件下で、発毛を刺激するための候補作用剤であると考えられる化合物の非存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定することをさらに含み、ここで、前記化合物の存在下および非存在下でのより低いＤＰ−２活性およびおよそ等しいＤＰ−１活性は、発毛を刺激するための候補作用剤であることを示す。いくつかの実施形態では、複数の化合物がスクリーニングされる。

別の態様では、発毛を阻害するための候補作用剤としての化合物をスクリーニングするための方法が本明細書で提供され、前記方法は、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下でＤＰ−２活性を測定し；同じ条件下で、プロスタグランジンＤ２の存在下でＤＰ−２活性を測定するステップを含み、ここで、プロスタグランジンＤ２の存在下でのＤＰ−２活性と等しいまたはそれよりも大きな、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる前記化合物のＤＰ−２活性は、発毛を阻害するための候補作用剤であることを示す。いくつかの実施形態において、前記方法は、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下でＤＰ−１活性を測定し；同じ条件下で、プロスタグランジンＤ２の存在下でＤＰ−１活性を測定することをさらに含み、ここで、プロスタグランジンＤ２の存在下でのＤＰ−２活性と等しいまたはそれよりも大きな、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる前記化合物のＤＰ−２活性、およびプロスタグランジンＤ２の存在下でのＤＰ−１活性と等しいまたはそれ未満である、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる前記化合物のＤＰ−１活性は、発毛を阻害するための候補作用剤であることを示す。いくつかの実施形態では、複数の化合物がスクリーニングされる。

本発明の他の特徴および利点は、以下の発明を実施するための形態、実施例および図面から明らかとなる。本発明の精神および範囲に含まれる種々の変更および改変がこの発明を実施するための形態から当業者には明らかとなることから、発明を実施するための形態および具体例が、好ましい本発明の実施形態を示す一方で、例示としてのみ与えられていることを理解されたい。

本特許出願のファイルは、カラーで作成された少なくとも１つの図面を含んでいる。カラー図面による本特許出願公開の写しは、請求に応じて、必要な手数料が支払われた場合に、米国特許商標庁により提供される。
ＡＧＡを有する５人の男性から得られた、有毛（haired）頭皮および無毛（bald）頭皮を比較した遺伝子発現プロファイルの概要。（Ａ）全ての有毛試料間、全ての無毛試料間、または個体内の有毛試料および無毛試料の間の差異の程度を比較するための相関係数。データは平均値±平均値の標準誤差（ＳＥＭ）（ｎ＝５）である。^＊＊＊有毛のみおよび無毛のみの両方を比較した場合にＰ＜０．００１。（Ｂ）Ａ〜Ｅと標識された５人の男性における有毛頭皮および無毛頭皮における、２５０個の重要な遺伝子の遺伝子クラスタリングアルゴリズム。（Ｃ）有毛（Ｈ）頭皮（１６９；左）においてより高い遺伝子および無毛（Ｂ）頭皮（８１；右）においてより高い遺伝子に分けられた２５０個の最も重要な遺伝子についての、ｙ軸に遺伝子発現レベルおよびｘ軸に対としてグループ化された試料を有する不連続グラフ。各対において、第一試料（行頭）は有毛頭皮であり、第二試料（行尾）は無毛頭皮である。（Ｄ）有毛頭皮（左）および薄毛（balding）頭皮（右）の比較における遺伝子オントロジーカテゴリー。記載のパーセンテージは、独特な遺伝子転写物の総数に対する、各カテゴリーにおける転写物の数である。Ｐ値は、各機能カテゴリーの有意なエンリッチメントに対する改変されたフィッシャー正確ＥＡＳＥ（ExpressionAnalysis Systematic Explorer）スコアである。（Ｅ）有毛頭皮と比較した場合の無毛頭皮におけるＰＴＧＤＳ発現の倍率変化。データは平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５）である。＊＊＊ＰＴＧＤＳ遺伝子内の異なる領域をカバーする各プローブセットにおいて、有毛頭皮および無毛頭皮の間でＰ＜０．０００１。（Ｆ）ＰＧＤ２経路の模式図。 ＡＧＡを有する男性の薄毛頭皮におけるＰＧＤ２経路活性の増加。（Ａ）ｑＰＣＲによって試験された、無毛頭皮および有毛頭皮の比較における、リポカリン型ＰＴＧＤＳ ｍＲＮＡの発現。データは平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４）である。（ＢおよびＣ）等量添加を確認するために用いられるポンソー染色を使用したウェスタンブロッティング（Ｂ）、および有毛頭皮に対して正規化されたその定量化（Ｃ）によって示される、対としての無毛（Ｂ）および有毛（Ｈ）頭皮（ｎ＝４）におけるＰＴＧＤＳタンパク質の量。データは平均値±ＳＥＭである。（Ｄ）ＥＬＩＳＡによって試験された無毛頭皮におけるＰＧＤ２産生。データは平均値±ＳＥＭ（ｎ＝３）である。（ＥおよびＦ）有毛頭皮と比較した場合の無毛頭皮におけるＰＧＤ２（ｎ＝１７）、１５−ｄＰＧＪ２）（ｎ＝７）、およびＰＧＥ２（ｎ＝１７）発現における倍率変化（Ｅ）。プロスタグランジンの総含有量は（Ｆ）で定量化される。データは平均値±ＳＥＭである。^＊Ｐ＜０．０５；^＊＊Ｐ＜０．０１。（Ｆ）において、Ｐ値は各プロスタグランジンについての有毛試料および無毛試料を比較している。 Ｐｔｇｄｓ発現の増加は、毛周期退行期のマウスの毛包においてＰＧＤ２レベルの上昇の先に起こる。（ＡおよびＢ）ＰＮ１８〜ＰＮ５３において、Ｐｔｇｄｓ（ｎ＝４）、Ｐｔｇｆｒ（ｎ＝４）、およびＦｇｆ５（ｎ＝４）のｍＲＮＡ（ＡおよびＢ）並びにＰＧＤ２脂質（ｎ＝３）（Ｂ）を毛包周期の異なる段階において測定した。文字は毛周期段階に相当する：Ａ、毛周期成長期；Ｃ、毛周期退行期；Ｔ、毛周期休止期。データは平均値±ＳＥＭである。（Ａ）において、後期毛周期成長期および第一毛周期休止期を比較したＰｔｇｄｓおよびＦｇｆ５について、並びに第一毛周期休止期および第二毛周期休止期を比較したＰｔｇｆｒについて、^＊＊Ｐ＜０．０１。（Ｂ）において、毛周期退行期および早期毛周期成長期を比較したＰＧＤ２について、^＊Ｐ＜０．０５。（Ｃ）脱毛により誘導された毛包周期におけるマウス皮膚でのＰｔｇｄｓの発現（ｎ＝３）およびＰＧＤ２の産生（ｎ＝３）。データは平均値±ＳＥＭである。^＊１７日目のＰｔｇｄｓおよび０日目のＰｔｇｄｓの比較において、Ｐ＜０．０５；^＊＊１９．５日目のＰＧＤ２および３７日目のＰＧＤ２の比較において、Ｐ＜０．０１。（Ｄ）幹細胞が豊富な毛隆起部の下にあるマウス外毛根鞘ケラチノサイトを、脱毛後１７日目に、Ｐｔｇｄｓ（褐色）に対して染色した。点線は毛包全体を描写している。スケールバー、１００ｍｍ。（Ｅ〜Ｇ）脱毛後０日目（毛周期成長期）（Ｅ）、脱毛後１７日目（後期毛周期成長期）（Ｆ）、および脱毛後１９日目（毛周期退行期）（Ｇ）の毛包の永久区画および非永久区画における、Ｋｒｔ１５（赤）およびＰｔｇｄｓ（緑）。スケールバー、１００ｍｍ。 ＰＴＧＤＳは有毛頭皮における選択されたヒト毛包の非永久的部分で発現されており、無毛頭皮ではより変動的である。（Ａ〜Ｃ）正常ヒト毛包（ＡおよびＢ）および無毛頭皮毛包（Ｃ）における、青色核対比染色した、ＰＴＧＤＳ免疫染色（褐色）。（Ａ）峡部下方のＰＴＧＤＳが染色された、有毛頭皮における単一毛包。（Ｂ）有毛頭皮の大部分の毛周期成長期毛包は、ほとんどＰＴＧＤＳ染色されない。（Ｃ）脂腺細胞および毛包ケラチノサイトにおけるＰＴＧＤＳ染色された小型化した毛包。スケールバー、１００ｍｍ。（Ｄ〜Ｆ）無毛頭皮の毛包および隣接する皮脂腺における、ＰＴＧＤＳ（緑）、核（青）、およびＫＲＴ１５（赤）（Ｄ）またはトリプターゼ（赤）（ＥおよびＦ）の蛍光免疫染色。ＰＴＧＤＳ陽性細胞をいくらか有する毛周期退行期の毛包は、マスト細胞マーカーのトリプターゼも発現した（Ｅ）。毛包周囲の細胞は、重複する発現を有するＰＴＧＤＳ陽性細胞およびトリプターゼ陽性細胞の異種集団を示す（Ｆ）。スケールバー、１００ｍｍ。 Ｋ１４−Ｐｔｇｓ２トランスジェニックマウス皮膚は、脱毛症、皮脂腺過形成、および皮膚におけるＰＧＤ２レベル増加を有するＡＧＡを表現型模写している。（ＡおよびＢ）Ｋ１４−Ｐｔｇｓ２動物は、野生型（ＷＴ）対照（Ａ）と比較して、脱毛症を発症する（Ｂ）。（ＣおよびＤ）ＷＴ（Ｃ）およびＫ１４−Ｐｔｇｓ２動物（Ｄ）から得られたヘマトキシリンおよびエオシン染色した皮膚は、皮脂腺（黄色矢印）および毛包（黒色矢印）形態を示す。スケールバー、１００ｍｍ。（Ｅ）ＷＴマウス（ｎ＝５）およびＫ１４−Ｐｔｇｓ２遺伝子導入マウス（ｎ＝３）から得られた皮膚組織中に存在する様々なプロスタグランジン類の量。データは平均値±ＳＥＭである。^＊＊ＷＴをＫ１４−Ｐｔｇｓ２と比較して、Ｐ＜０．０１。 ＰＧＤ２はＧＰＲ４４を介してマウスおよびヒトの発毛を阻害する。（Ａ）脱毛後１６日間の経過に伴う発毛。１５−ｄＰＧＪ２（１０ｍｇ）またはビヒクルを、脱毛後８日目から開始して、マウス皮膚に局所塗布した。データは平均値±ＳＥＭ（処置群につきｎ＝３）である。^＊対照と比較して、Ｐ＜０．０５。（Ｂ）局所的なＰＧＤ２（１ｍｇ；ｎ＝３）、１５−ｄＰＧＪ２（１ｍｇ；ｎ＝３）、またはビヒクル（ｎ＝３）処置の１０日後の毛髪長。データは平均値±ＳＥＭである。^＊Ｐ＜０．０５；^＊＊Ｐ＜０．０１。（Ｃ）ＰＧＤ２に応答した、Ｐｔｇｄｒ（ｎ＝８）、Ｐｔｇｄｓ（ｎ＝６）、およびＧｐｒ４４（ｎ＝１１）ノックアウト（ＫＯ）マウスにおける発毛。データは平均値±ＳＥＭであり、マウスごとの３つの独立した実験の代表である。^＊ビヒクルと比較して、Ｐ＜０．０５。（Ｄ）ＰＧＤ２（ｎ＝３）、１５−ｄＰＧＪ２（ｎ＝３）、またはビヒクル（ｎ＝３）を含有する培地中での７日間の経過に伴う、外植されたヒト毛包のインビトロ成長。データは平均値±ＳＥＭである。^＊＊＊ビヒクルと比較して、Ｐ＜０．００１。 ＰＧＤ２類似体は、それらの親のＧＰＲ４４受容体活性作用に従って、ヒト毛髪伸長を阻害する。記載のＰＧＤ２類似体、プロスタグランジンＩ２、またはビヒクル対照を含有する培地中での７日間の経過に伴う、外植されたヒト毛包のインビトロ成長（処理群につきｎ＝３）。^＊ビヒクルと比較して、Ｐ＜０．０５（特に断りのない限りはスチューデントｔ検定）。

本発明は発毛を調節するための組成物および方法に関する。特に、本発明は、プロスタグランジンＤ２（ＰＧＤ２）受容体、ＤＰ−２（ＧＰＲ４４）のうちの１つの活性を調節することによる発毛調節に関する。

本発明の出願人は、意外にも、ＡＧＡを有する男性から得られた有毛頭皮に対し、無毛頭皮において、メッセンジャーレベル（message level）およびタンパク質レベルでの、プロスタグランジンＤ２シンターゼ（ＰＴＧＤＳ）のレベルの上昇を発見した。ヒト毛包におけるプロスタグランジン代謝を前提として、本発明の出願人は、マウス（Ｐｔｇｄｓ）およびヒト（ＰＴＧＤＳ）の両方におけるシンターゼに注目した。ＰＴＧＤＳの酵素生成物であるプロスタグランジンＤ２（ＰＧＤ２）も、無毛のヒト頭皮組織において増加していることが判った。本発明の出願人は、正常な毛包サイクルにある毛包退行を有するマウスにおいて、Ｐｔｇｄｓ ｍＲＮＡおよびＰＧＤ２レベルの両方における上昇の間にある密接な時間的関係を示す。本発明の出願人はさらに、ＰＧＤ２およびその非酵素的代謝産物である１５−デオキシ−Ｄ１２，１４−プロスタグランジンＪ２（１５−ｄＰＧＪ２）が、マウス毛包およびヒト毛包の両方において発毛を阻害することを示す、機能データを示す。マウスおよびヒトにおいて、発毛のＰＧＤ２介在性阻害は、Ｇタンパク質（ヘテロ三量体グアニンヌクレオチド-結合タンパク質）結合型受容体４４（ＧＰＲ４４またはＤＰ−２）を必要としたが、プロスタグランジンＤ２受容体１（ＰｔｇｄｒまたはＤＰ−１）を必要としなかった。さらに、本発明の出願人は、ヒトＡＧＡを表現型模写した、皮膚におけるＰＧＤ２レベルが上昇したマウスモデル（Ｋ１４−Ｐｔｇｓ２）を提供する。これらの結果は、とりわけ、毛髪治療のための、ＡＧＡ発病におけるＰＧＤ２およびＤＰ−２の役割を示すものである。

対象における発毛を調節するための方法が本明細書で提供され、前記方法は、前記対象に有効量のＤＰ−２作動薬または拮抗薬を投与することを含む。

対象における発毛を刺激するための方法もまた本明細書で提供され、前記方法は、前記対象に有効量のＤＰ−２拮抗薬を投与することを含む。対象において男性型脱毛症または脱毛症または毛髪脱落を治療するための方法が本明細書で提供され、前記方法は、前記対象に有効量のＤＰ−２拮抗薬を投与することを含む。

対象における脱毛を阻止または抑制するための方法もまた本明細書で提供され、前記方法は、前記対象に有効量のＤＰ−２拮抗薬を投与することを含む。対象における脱毛を予防するための方法もまた本明細書で提供され、前記方法は、前記対象においてＤＰ−２を阻害することを含む。

男性型脱毛症を治療するための候補作用剤としての化合物をスクリーニングするための方法が本明細書で提供され、前記方法は、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定し；同じ条件下で、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であると考えられる化合物の非存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定するステップを含み、ここで、前記化合物の非存在下におけるよりも前記化合物の存在下におけるより低いＤＰ−２活性は、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であることを示す。いくつかの実施形態において、前記方法は、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定し；同じ条件下で、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であると考えられる化合物の非存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定することをさらに含み、ここで、前記化合物の存在下および非存在下でのより低いＤＰ−２活性およびおよそ等しいＤＰ−１活性は、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であることを示す。いくつかの実施形態では、複数の化合物がスクリーニングされる。

発毛を刺激するための候補作用剤として化合物をスクリーニングするための方法が本明細書で提供され、前記方法は、発毛を刺激するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定し；同じ条件下で、発毛を刺激するための候補作用剤であると考えられる化合物の非存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定するステップを含み、ここで、前記化合物の非存在下におけるよりも前記化合物の存在下におけるより低いＤＰ−２活性は、発毛を刺激するための候補作用剤であること示す。いくつかの実施形態において、前記方法は、発毛を刺激するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定し；同じ条件下で、発毛を刺激するための候補作用剤であると考えられる化合物の非存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定することをさらに含み、ここで、前記化合物の存在下および非存在下でのより低いＤＰ−２活性およびおよそ等しいＤＰ−１活性は、発毛を刺激するための候補作用剤であることを示す。いくつかの実施形態では、複数の化合物がスクリーニングされる。

発毛を阻害するための候補作用剤として化合物をスクリーニングするための方法が本明細書で提供され、前記方法は、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下で、ＤＰ−２活性を測定し；同じ条件下で、プロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定するステップを含み、ここで、プロスタグランジンＤ２の存在下でのＤＰ−２活性と等しいまたはそれよりも大きな、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる前記化合物のＤＰ−２活性は、発毛を阻害するための候補作用剤であることを示す。いくつかの実施形態において、前記方法は、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下で、ＤＰ−１活性を測定し；同じ条件下で、プロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定することをさらに含み、ここで、プロスタグランジンＤ２の存在下でのＤＰ−２活性と等しいまたはそれよりも大きな、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる前記化合物のＤＰ−２活性、およびプロスタグランジンＤ２の存在下でのＤＰ−１活性と等しいまたはそれ未満である、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる前記化合物のＤＰ−１活性は、発毛を阻害するための候補作用剤であることを示す。いくつかの実施形態では、複数の化合物がスクリーニングされる。

本明細書で使用される場合、「ＤＰ−２作動薬」は、細胞内または生理系内で、ＤＰ−２の量または活性を増加させることができる分子である。例えば、ＤＰ−２作動薬は、ＤＰ−２に選択的に結合してＤＰ−２受容体の生理作用を誘発することができる物質である。

ＤＰ−２作動薬は当該技術分野において公知であり、例えば、下記表１に示されるものである。

いくつかの実施形態において、ＤＰ−２作動薬は、高度に選択的なＤＰ−２作動薬である１５（Ｒ）ＰＧＤ_２、１５（Ｒ）−１５−メチルＰＧＤ_２または１３，１４−ジヒドロ−１５−オキソＰＧＤ_２から選択される。

本明細書で使用される場合、「ＤＰ−２拮抗薬」は、細胞内または生理系内で、ＤＰ−２の量または活性を減少させることができる分子である。例えば、ＤＰ−２拮抗薬は、ＤＰ−２受容体に選択的に結合してＤＰ−２受容体の生理作用を阻害することができる物質である。

ＤＰ−２拮抗薬は当該技術分野において公知である。いくつかのＤＰ−２拮抗薬の例を表２に示す。

ＤＰ−２拮抗薬はいくつかのクラスに分類することができる。１つのクラスは、ラマトロバンおよびその類似体であり、それらの例を表２および表３に示す（ＴＭ３０６４２−３−｛３−［（４−フルオロ−ベンゼンスルホニル）−メチル−アミノ］−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル｝−プロピオン酸；ＴＭ３０６４３−［３−（４−フルオロ−ベンゼンスルホ−ニルアミノ）−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル］−酢酸；ＴＭ３００８９−｛３−［（４−フルオロ−ベンゼンスルホニル）−メチル−アミノ］−１，２，３，４−テトラヒドロ−カルバゾール−９−イル｝−酢酸）。

ＤＰ−２拮抗薬の別のクラスはインドール酢酸誘導体である。このクラスの化合物の例は、表２の化合物６〜９である。

ＤＰ−２拮抗薬の別のクラスはフェニル酢酸誘導体である。フェンクロフェナクに基づくこのクラスの化合物の一例は、表２の化合物１１である。

ＤＰ−２拮抗薬のさらに別のクラスはテトラヒドロキノリン（tetrahyrdroquinoline）誘導体である。このクラスの化合物の例は、表２の化合物１２、Ｋ１１７およびＫ−１０４である。

本明細書で提供される方法での使用に好ましいある種のＤＰ−２拮抗薬は、少なくとも１つの臨床試験の対象となったことがあるＤＰ−２拮抗薬である。少なくとも１つの臨床試験の対象となったことがあるそのような拮抗薬の例としては、限定はされないが、下記表４に列挙されるＤＰ−２拮抗薬が挙げられる。

本明細書で提供される方法での使用に企図される１つのＤＰ−２拮抗薬は、ＤＰ−２拮抗薬のラマトロバンである。その構造を以下に示す。

本明細書で提供される方法での使用に企図される１つのＤＰ−２拮抗薬は、構造が以下に示されるＤＰ−２拮抗薬である。

本明細書で提供される方法での使用に企図される１つのＤＰ−２拮抗薬は、ＤＰ−２拮抗薬のセチピプラント（Setipiprant）である。その構造を以下に示す。

本明細書で提供される方法での使用に企図される１つのＤＰ−２拮抗薬は、構造が以下に示されるＤＰ−２拮抗薬である。

本明細書で提供される方法での使用に企図される１つのＤＰ−２拮抗薬は、ＤＰ−２拮抗薬のＡＺＤ１９８１である。その構造を以下に示す。

本明細書で提供される方法での使用に企図される１つのＤＰ−２拮抗薬は、構造が以下に示されるＤＰ−２拮抗薬である。

本明細書で提供される方法での使用に企図される１つのＤＰ−２拮抗薬は、構造が以下に示されるＤＰ−２拮抗薬である。

本明細書で提供される方法での使用に企図される１つのＤＰ−２拮抗薬は、ＤＰ−２拮抗薬のＡＭＧ８５３である。その構造を以下に示す。

さらなるＤＰ−２拮抗薬は以下の公開において見出すことができる：欧州特許第１，１７０，５９４号、同第１，４３５，３５６号、国際公開第２００３／０６６０４６号、同第２００３／０６６０４７号、同第２００３／０９７０４２号、同第２００３／１０１９６１号、同第２００３／１０１９８１号、同第２００４／００７４５１号、同第２００４／０３２８４８号、同第２００４／０３５５４３号、同第２００４／１０６３０２号、同第２００５／０１９１７１号、同第２００５／０５４２３２号、同第２００５／０１８５２９号、同第２００５／０４０１１２号、英国特許第２，４０７，３１８号、国際公開第２００５／０４０１１４号、同第２００５／０４４２６０号、同第２００５／０９５３９７号、同第２００５／１００３２１号、同第２００５／１０２３３８号、同第２００６／０９５１８３号、同第２００７／１０７７７２号、米国特許第７，４０５，２１５号（これらは各々、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる）。

本発明の別の態様は、ＤＰ−２作動薬またはＤＰ−２拮抗薬を含む組成物である。例えば、対象における発毛を調節するための組成物が本明細書で提供され、前記組成物は、前記対象における発毛を調節するのに有効な量でＤＰ−２作動薬またはＤＰ−２拮抗薬を含む。

別の例では、対象における発毛を刺激するための組成物が本明細書で提供され、前記組成物は、前記対象における発毛を増進するのに有効な量でＤＰ−２拮抗薬を含む。さらに別の例では、対象における男性型脱毛症または脱毛症または毛髪脱落を治療するための組成物が本明細書で提供され、前記組成物は、前記対象における前記男性型脱毛症または脱毛症または毛髪脱落を治療するのに有効な量でＤＰ−２拮抗薬を含む。

別の態様では、対象における発毛を阻害するための組成物が本明細書で提供され、前記組成物は、前記対象における発毛を阻害するのに有効な量でＤＰ−２作動薬を含む。

別の実施形態では、ＤＰ−２作動薬またはＤＰ−２拮抗薬および少なくとも１つの薬剤的に許容できる賦形剤または担体（ccarrier）を含む医薬組成物が本明細書で提供される。

小分子、抗体、核酸、ペプチド、ベクター、宿主細胞、または本発明の他の作用剤および一つまたは複数の薬剤的に許容できる担体を含む医薬組成物が本明細書で提供される。「薬剤的に許容できる担体」には、使用される投与量および濃度においてそれに曝される細胞または対象に対して無毒であるあらゆる賦形剤が含まれる。医薬組成物は１つまたは追加の治療薬を含んでいてもよい。

薬剤的に許容できる担体には、溶媒、分散媒、緩衝液、コーティング、抗細菌剤および抗真菌剤、湿潤剤、保存剤、バガー（bugger）、キレート化剤、抗酸化剤、等張剤並びに吸収遅延剤が含まれる。

薬剤的に許容できる担体としては、水；食塩水；リン酸緩衝食塩水；デキストロース；グリセロール；エタノールおよびイソプロパノール等のアルコール；リン酸塩、クエン酸塩および他の有機酸；アスコルビン酸；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリン等のタンパク質；ポリビニルピロリドン等の親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニンもしくはリジン等のアミノ酸；グルコース、マンノース、もしくはデキストリンを含む単糖類、二糖類、および他の炭水化物；ＥＤＴＡ；ナトリウム等の塩形成対イオン；並びに／またはＴＷＥＥＮ、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、およびＰＬＵＲＯＮＩＣＳ等の非イオン性界面活性剤；糖類等の等張剤、マンニトールおよびソルビトール等の多価アルコール、並びに塩化ナトリウム；並びにそれらの組み合わせが挙げられる。抗細菌剤および抗真菌剤としては、パラベン類、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、およびチメロサールが挙げられる。

本発明の医薬組成物は、種々の方法で製剤化されてもよく、例えば、固体、半固体（例えば、クリーム、軟膏剤、およびゲル）、および溶液（例えば、局所的ローション剤または噴霧剤）、分散剤または懸濁剤等の液体剤形、錠剤、丸剤、散剤、リポソーム並びに坐剤が含まれる。いくつかの実施形態において、本組成物は、注射用または不溶解性の溶液の形態である。本組成物は、経口投与、静脈内投与、動脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、非経口投与、経粘膜的投与、経皮投与、または局所投与に適した形態である。本組成物は局所投与用に製剤化されることが好ましい。本組成物は、即時放出型、徐放性、持続放出型または遅延放出型の組成物として製剤化されてもよい。

より具体的には、使用に適した医薬組成物には、無菌の水溶液（水溶性の場合）または分散液および無菌の溶液または分散液を即時調製するための無菌の散剤が含まれる。医薬組成物は、製造および保存の条件下で安定であるべきであり、細菌および真菌等の微生物の混入行動から保護されることが好ましい。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、および液状ポリエチレングリコール等）、およびそれらの適切な混合物を含有する溶媒または分散媒であり得る。適切な流動性は、例えば、レシチン等のコーティングの使用により、分散液の場合に要求される粒径の維持によって、および界面活性剤の使用によって、維持することができる。本明細書で開示される治療法での使用に適した製剤は、Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., 16th ed.(1980)に記載される。

いくつかの実施形態において、本組成物には、等張剤、例えば、糖類、多価アルコール類（マンニトール、ソルビトール等）、または塩化ナトリウムが含まれる。注射用組成物の持続的吸収は、組成物中に、吸収を遅延する作用剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを含むことによってもたらされ得る。

無菌液は、必要であれば、本明細書で列挙される成分の１つまたは組み合わせを含有する適切な溶媒中で必要な量で、単独でまたは他の活性薬剤と組み合わせて分子を混合し、その後フィルター滅菌することによって、調製することができる。一般的には、分散液は、基本（basic）分散媒および上記に列挙されるものから選択される必要とされる他の成分を含有する無菌ビヒクル中に活性化合物を混合することによって、調製される。無菌注射剤を調製するための無菌散剤の場合、１つの調製法は、真空乾燥および凍結乾燥であり、これにより、活性成分および先のその無菌濾過溶液からあらゆる所望の追加成分の粉末が作製される。注射剤用の調製物は、加工され、アンプル、袋、ビン、注射器またはバイアル等の容器に詰められ、当該技術分野において公知の方法に従って無菌状態下で密封される。さらに、調製物は、パッケージ化されてキットの形態で販売されてもよく、例えば、米国特許出願公開第２００２／０１０２２０８Ａ１号（その全体が参照によって本明細書に組み込まれる）に記載されるものである。そのような製造品は、関連の組成物が、自己免疫障害または腫瘍性障害に罹患している、またはそれに罹患し易い対象を治療するのに有用であることを示す、表示または添付文書を有することが好ましい。

本明細書に記載の状態または疾患を治療するための、本発明の組成物の有効量は、投与手段、標的部位、患者の生理学的状態、患者がヒトであるかまたは動物であるか、投与される他の薬物治療、および処置が予防的処置であるかまたは治療的処置であるかを含む、様々な要素に応じて変動する。通常、患者はヒトであるが、遺伝子導入哺乳動物を含む非ヒト哺乳動物も治療することができる。処置用量を当業者に既知の通例の方法を用いて用量設定することで、安全性および有効性を最適化してもよい。

本発明の医薬組成物は、「治療有効量」を含んでいてもよい。「治療有効量」とは、所望の治療結果を達成するための投与量において、およびそれに必要な期間の間、有効な量を指す。治療有効量の分子は、個体の病状、年齢、性別、および体重、並びにその分子が個体において所望の反応を誘発させる能力等の要素に応じて変動し得る。また、治療有効量は、治療的な有益な作用が、分子のいかなる中毒作用または有害作用をも上回る量である。

本発明はさらに、治療有効量のＤＰ−２作動薬またはＤＰ−２拮抗薬を含むキットを提供する。

本発明はさらに、治療を必要とする対象に、治療有効量のＤＰ−２作動薬またはＤＰ−２拮抗薬を投与することを含む、疾患または状態を治療する方法を提供する。

本明細書で使用される場合、阻害または刺激に関連しての「選択的」という用語は、第二の活性と比較した第一の活性の優先的な阻害または刺激をそれぞれ意味する（例えば、別の経路に対するある経路の優先的な阻害；他の受容体と比較した優先的な阻害；または野生型に対する変異型の優先的な阻害もしくはその逆）。いくつかの実施形態において、阻害剤は、所望でない分子標的または経路と比較して、所望の分子標的または経路に対して、５倍超より選択的、１０倍超より選択的、５０倍超より選択的、１００倍超より選択的、または１０００倍超より選択的である。いくつかの実施形態において、拮抗薬または作動薬は、分子標的または経路の第一活性を、同じ条件下での第二活性と比較して、少なくとも２倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも５０倍、少なくとも１００倍、それぞれ阻害または刺激する。好ましい実施形態では、ＤＰ−２拮抗薬またはＤＰ−２作動薬が、上記量のいずれかだけ、ＤＰ−１に関して選択的であることが理解されよう。分子標的または経路の活性は、再現性のあるいかなる手段によっても測定することができる。分子標的または経路の活性は、インビトロまたはインビボで測定することができる。

本明細書で使用される場合、分子標的または経路の活性の「調節」とは、「刺激」または「阻害」を指す。例えば、組成物は、前記組成物の存在のみを欠く以外は同じ条件下での分子標的または経路の活性と比較して、少なくとも１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、または約９９％以上、分子標的または経路の活性を刺激または阻害する場合、分子標的または経路の活性を調節する。別の例では、組成物は、前記組成物の存在のみを欠く以外は同じ条件下での分子標的または経路の活性と比較して、少なくとも２倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも５０倍、少なくとも１００倍、分子標的または経路の活性を刺激または阻害する場合、分子標的または経路の活性を調節する。分子標的または経路の活性は、再現性のあるいかなる手段によっても測定することができる。分子標的または経路の活性は、インビトロまたはインビボで測定することができる。例えば、分子標的または経路の活性は、活性を測定する、当該技術分野において公知の適切なアッセイによってインビトロまたはインビボで測定することができる。対照試料（本組成物で処理していない）には、１００％の相対活性値を割り当てることができる。本組成物によって引き起こされる活性の変化は、前記アッセイにおいて測定することができる。

本明細書に記載の拮抗薬の多くが、それらの標的の強力な阻害剤であることが認められる。例えば、ある拮抗薬は、その所望の分子標的（すなわち、ＤＰ−２）に対して、１０００μＭ以下、１０００ｎＭ以下、１００ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、または、特に１ｎＭ以下の結合阻害活性（ＩＣ５０値）を有し得る。別の例では、阻害剤は、その所望の分子標的に対して、１０００μＭ〜１ｎＭ、１０００μＭ〜１０ｎＭ、１０００μＭ〜１００ｎＭ、１０００μＭ〜１０００ｎＭ、１０００ｎＭ〜１ｎＭ、１０００ｎＭ〜１０ｎＭ、１０００ｎＭ〜１００ｎＭ、１００ｎＭ〜１０ｎＭ、１００ｎＭ〜１ｎＭ、または１０ｎＭ〜１ｎＭの結合阻害活性（ＩＣ５０値）を有する。

いくつかの実施形態において、本明細書で開示される拮抗薬は、それらの分子標的または経路を、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、または約９９％以上、阻害する。

本明細書に記載の作動薬の多くが、それらの標的の強力な刺激剤であることが認められる。例えば、ある作動薬は、その所望の分子標的（すなわち、ＤＰ−２）に対して、１０００μＭ以下、１０００ｎＭ以下、１００ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、または、特に、１ｎＭ以下の５０％有効濃度（half maximal effective concentration）（ＥＣ_５０値）を有する。別の例では、作動薬は、その所望の分子標的に対して、１０００μＭ〜１ｎＭ、１０００μＭ〜１０ｎＭ、１０００μＭ〜１００ｎＭ、１０００μＭ〜１０００ｎＭ、１０００ｎＭ〜１ｎＭ、１０００ｎＭ〜１０ｎＭ、１０００ｎＭ〜１００ｎＭ、１００ｎＭ〜１０ｎＭ、１００ｎＭ〜１ｎＭ、または１０ｎＭ〜１ｎＭの５０％有効濃度（EC₅₀値）を有する。

いくつかの実施形態において、本明細書で開示される作動薬は、それらの分子標的または経路を、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、または約９９％以上、刺激する。

本明細書で使用される場合、「治療する」および「治療」という用語は、予防的または防護的な手段を含み、目的が疾患または状態に付随する望まれない生理学的変化を予防または遅延（軽減）することとなる、治療的な処置を指す。有益な、または所望の臨床結果としては、限定はされないが、検出可能か検出不可かは問わず、症状の軽減、疾患または状態の程度の縮小、疾患または状態の安定化（すなわち、その疾患または状態が悪化しない場合）、疾患または状態の進行の遅延または緩徐化、疾患または状態の改善または一時的緩和、および疾患または状態の軽快（部分的か全体的化は問わず）が挙げられる。「治療」は、治療を受けていない場合に予測される生存と比較した、生存の延長も意味する。治療を必要とする者としては、疾患もしくは状態を既に有している者、および疾患もしくは状態に罹患する傾向がある者、または疾患もしくは状態が予防されるべき者が挙げられる。

また、対象における脱毛を治療するための方法も本明細書で提供され、前記方法は、前記対象におけるＤＰ−２を阻害することを含む。阻害は、細胞または組織において、当業者に公知の遺伝子導入法によって行うことができ、そのような細胞または組織は、発毛を必要とする皮膚の領域に移植することができる。

一実施形態では、脱毛治療とは、禿頭（balding）を含む疾患または障害の治療を指す。別の実施形態では、脱毛治療とは、男性型脱毛症（ＡＧＡ）の治療を指す。別の実施形態では、脱毛治療とは、男性型禿頭症である疾患または障害の治療を指す。別の実施形態では、脱毛治療とは、女性型禿頭症である疾患または障害の治療を指す。一実施形態では、脱毛治療とは、頭皮および眉を含むがこれらに限定されない身体のあらゆる部位における、あらゆる種類の脱毛の治療または予防を指す。

別の実施形態では、脱毛治療は、脱毛に関連するあらゆる疾患または障害の治療を指す。別の実施形態では、脱毛治療は、円板状エリテマトーデス（discoid lupus erythematosis）に関連する脱毛疾患または脱毛障害の治療を指す。別の実施形態では、脱毛治療は、先天性貧毛症に関連する脱毛疾患または脱毛障害の治療を指す。別の実施形態では、脱毛治療は、毛孔性扁平苔癬に関連する脱毛疾患または脱毛障害の治療を指す。別の実施形態では、脱毛治療は瘢痕性脱毛症の治療を指す。

本明細書で使用される場合、「発毛阻害」とは、発毛の防止、発毛速度の阻害、毛髪生成の遅延、毛髪周期の延長、毛周期休止期の延長、最大毛髪長の延長、または最大毛髪直径の減少を指す。

ＤＰ−２作動薬またはＤＰ−２拮抗薬は、単独で、または一つもしくは複数の治療効果のある作用剤または治療と組み合わせて、投与されてもよい。一実施形態では、ＤＰ−２拮抗薬は、単独で、または一つもしくは複数の治療効果のある毛髪促進剤（例えば、フィナステリド、ミノキシジル、または両方）もしくは治療と組み合わせて、投与されてもよい。別の実施形態では、ＤＰ−２作動薬は、単独で、または一つもしくは複数の治療効果のある毛髪除去剤もしくは治療と組み合わせて、投与されてもよい。他の治療効果のある作用剤は、ＤＰ−２作動薬もしくはＤＰ−２拮抗薬に抱合されていてもよく、ＤＰ−２作動薬もしくはＤＰ−２拮抗薬と同じ組成物中に組み込まれてもよく、または別々の組成物として投与されてもよい。他の治療剤または治療は、ＤＰ−２作動薬またはＤＰ−２拮抗薬の投与の前、その間および／またはその後に投与されてもよい。

一実施形態では、ＤＰ−２拮抗薬は、一つまたは複数の毛髪促進剤（例えば、フィナステリド、ミノキシジル、またはその組み合わせ）と一緒に同時投与される。別の実施形態では、ＤＰ−２拮抗薬は、毛髪促進剤の投与とは独立して投与される。一実施形態では、ＤＰ−２拮抗薬が最初に投与され、その後毛髪促進剤が投与される。別の実施形態では、毛髪促進剤が最初に投与され、その後ＤＰ−２拮抗薬が投与される。

別の実施形態では、ＤＰ−２作動薬は、一つまたは複数の毛髪除去剤と一緒に同時投与される。別の実施形態では、ＤＰ−２作動薬は、毛髪除去剤の投与とは独立して投与される。一実施形態では、ＤＰ−２作動薬が最初に投与され、その後毛髪除去剤が投与される。別の実施形態では、毛髪除去剤が最初に投与され、その後ＤＰ−２作動薬が投与される。

発毛を増進する併用療法のための他の治療効果のある作用剤／治療としては、例えば、限定はされないが、移植外科手術および真皮または表皮の除去が挙げられる。発毛を阻害する併用療法のための他の治療効果のある作用剤／治療としては、例えば、限定はされないが、当業者に公知の機械的手法または化学的手法による皮膚上の毛髪の除去が挙げられる。

他の作用剤および／または治療と一緒のＤＰ−２作動薬またはＤＰ−２拮抗薬の投与は、同時にまたは別々に、同じまたは異なる経路を介して、同じまたは異なる時点において、行ってもよい。投与計画は、最適な所望の反応（例えば、治療的または予防的な反応）を与えるように調整されてもよい。

ある例においては、単回ボーラスが投与されてもよい。別の例では、いくつかの分割量が長期にわたって投与されてもよい。さらに別の例では、用量は、治療状況の要件に示されるように、比例的に減少または増加されてもよい。投薬単位形態とは、本明細書で使用される場合、哺乳類対象を治療するための単位投与量として適した、物理的に分離した単位を指す。各単位は、所望の治療効果を生むように算出された所定の量の活性化合物を含有していてもよい。いくつかの実施形態において、本発明の投薬単位形態は、活性化合物の独自の特徴および達成されるべき具体的な治療効果または予防効果によって、且つそれらに直接的に依存して、指示される。

本発明の組成物は、１回のみ投与されてもよく、あるいは、複数回投与されてもよい。複数回投与において、本組成物は、例えば、１日３回、１日２回、１日１回、２日毎に１回、週２回、週１回、２週間毎に１回、または月１回、投与されてもよい。

本明細書で使用される場合、化合物は、ただその化合物の存在を欠く以外は同じ条件下での活性と比較して、その化合物が所望の活性を少なくとも１０％低減した場合、活性を「阻害する」。活性は再現性のあるいかなる手段によっても測定することができる。活性はインビトロまたはインビボで測定することができる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の方法において使用される化合物は、主要な（menin）活性を少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、約９５％、約９８％、または約９９％以上阻害する。

軽減されるべき状態の種類および重症度によって投与量の値が変動し得ることに注意されたい。さらに、いかなる特定の対象に対しても、具体的な投与計画が、個人の要求および投与を行っている、または組成物の投与を管理している者の専門家としての判断に従って、長い期間をかけて調整されるべきであること、並びに、本明細書に記載される用量域が単なる例示であり、特許請求される組成物の範囲または実施の限定を意図するものではないということを、理解されたい。

対象への「投与」は、いかなる特定の送達系にも限定はされず、局所投与、経皮投与、経口投与（例えば、カプセル剤、懸濁剤または錠剤中）、非経口投与（例えば、皮下、静脈内、髄内、関節内、筋肉内、または腹腔内注射）、または直腸投与を含み得るがこれらに限定はされない。対象への投与は、単回投与または反復投与において、且つ種々の生理学的に許容できる塩形態のいずれかにおいて、且つ／あるいは医薬組成物の一部としての許容できる医薬担体および／または添加剤（上記）と一緒に、行われてもよい。繰り返しになるが、生理学的に許容できる塩形態および標準的な医薬製剤技術は当業者に周知である（例えば、Remington’s Pharmaceutical Sciences、マック出版社（Mack Publishing Co.）を参照）。

本発明の別の態様は、対象における男性型脱毛症または脱毛症または毛髪脱落の原因を診断するための方法である。前記方法は、前記対象の皮膚におけるプロスタグランジンＤ２のレベルを検出し；前記対象の前記皮膚が所定のレベルと比較して上昇したプロスタグランジンＤ２レベルを有するかどうかを決定することを含み、ここで、前記上昇したプロスタグランジンＤ２レベルの存在は、前記ＤＰ−２を介した前記男性型脱毛症または脱毛症または毛髪脱落であることを示すものである。プロスタグランジンＤ２のレベルは、当業者に既知のいかなる方法またはアッセイにも基づいて、測定することができる。所定のレベルとは、対照における、例えば、脱毛症も脱毛も有さない正常な皮膚におけるプロスタグランジンＤ２のレベルを指し得る。

「対象」という用語には、哺乳動物、例えば、ヒト、伴侶動物（例えば、イヌ、ネコ、鳥類等）、家畜（例えば、雌ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ、家禽等）および実験動物（例えば、ラット、マウス、モルモット、鳥類等）が含まれる。いくつかの実施形態において、対象は雄のヒトまたは雌のヒトである。

本明細書で使用される場合、「薬剤的に許容できる」という句は、健全な医学的判断の範囲内にある、ヒトおよび動物の組織と接触させる使用に適した、過剰な毒性、刺激作用、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を有さない、合理的なリスク／ベネフィット比に見合った、化合物、物質、組成物、担体、および／または剤形を指す。

「薬剤的に許容できる賦形剤」とは、概して安全であり、無毒であり、且つ生物学的にも他の場合にも好ましくないものではない医薬組成物の調製において有用な賦形剤を意味し、獣医学的用途およびヒトに対する製薬学的用途に許容できる賦形剤が含まれる。本明細書で使用される「薬剤的に許容できる賦形剤」には、１つのそのような賦形剤および２つ以上のそのような賦形剤の両方が含まれる。

本発明の化合物は、プロドラッグとして、例えば薬剤的に許容できるプロドラッグとして調製することもできる。「プロドラッグ」および「プロドラッグ」という用語は、本明細書では同義的に使用され、インビボで活性親薬剤を放出するいかなる化合物を指していてもよい。プロドラッグは医薬品の多数の望ましい品質（例えば、溶解性、生物学的利用能、製造性等）を増強することが知られているため、本発明の化合物はプロドラッグ形態で送達され得る。

「約」または「およそ」という用語は、当業者によって決定された特定の値が許容できる誤差範囲内にあることを意味し、その値がどのように測定または決定されるかに部分的に依存する。

本明細書で引用されるいかなる特許、出願公開、または科学出版物も、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる。

以下の実施例は、本発明の好ましい実施形態をより完全に説明する目的で提供される。しかし、それらは決して、広範にわたる本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。

材料および方法
ヒト組織試料
本研究は、匿名で得られた、通常に廃棄されるヒト頭皮のみを使用し、特免のプロトコールとしてペンの施設内審査委員局（Penn’s Institutional Review Board office）によって承認された。通常に廃棄されるヒト頭皮は、植毛中に入手した。組織は、フィナステリドもミノキシジルも摂取していない４０歳〜６５歳の成人白人男性から得た。全解析において、他の実験で使用されていないユニークな頭皮試料が使用された。有毛頭皮と無毛頭皮の間の平均倍率差（averagefold difference）を算出するために、各患者において比を作成した後、それらを平均した。既報の方法を用いてマイクロアレイを行った。毛髪伸長実験用に、硬毛を含有する、整形美顔術から廃棄された組織を使用した。

動物
全ての動物プロトコールは、ペンシルバニア大学の施設内動物管理使用委員会によって承認を受けた。野生型Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ雌マウスを、経時的研究のために体重および出生日が同じであるマウスを要望して、ジャクソン研究所（Jackson Laboratory）から購入した。Ｋ１４−Ｃｏｘ２遺伝子導入マウス並びにＰｔｇｄｒ、Ｇｐｒ４４、およびＰｔｇｄｓノックアウトマウスを、独自の供給源から入手した。内在性テストステロンの影響を低減するため、雌マウスのみを使用した。毛周期を同期化するための脱毛法を記載の通りに行った。生検日に動物が移行状態にあることが分かった場合、後期試料を１２時間より進行したものと標識した。

リアルタイムｑＰＣＲ
マウスの背側（dorsalback）皮膚を、鋏および鉗子を用いて取り除いた。ヒト組織を鋏を用いて切除した。組織（２５〜３５ｍｇ）を３００ｍＬのキアゲン社製ＲＬＴ緩衝液中に可溶化させた。ヒト頭皮およびマウス組織を組織ローターでホモジナイズし、Ｆｉｂｒｏｕｓ ＲＮＡ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎキット（キアゲン社）およびＨｉｇｈ−Ｃａｐａｃｉｔｙ ｃＤＮＡキット（アプライドバイオシステムズ社）を用い、製造業者の取扱説明書に従って、ＲＮＡを収集して相補ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）に変換した。ｃＤＮＡ（５０ｎｇ）をＦａｓｔ Ｍｉｘと共にリアルタイムｑＰＣＲで使用した。

定量的ＲＴ−ＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ
Ｓｔｅｐ Ｏｎｅ Ｐｌｕｓ Ｓｙｓｔｅｍ（アプライドバイオシステムズ社）上での混合および測定。ｂ−アクチンおよび１８Ｓ ＲＮＡプローブスタンダードが互いに等価であることが判り、等しい添加量の試料間で変動しなかった。ＤＤＣＴ法を用いて倍率変化を算出した。使用されたプライマーは、目録のＴａｑＭａｎプライマー（アプライドバイオシステムズ社）：ＰＴＧＤＳ（ヒト）、Ｐｔｇｄｓ（マウス）、Ｆｇｆ５（マウス）、Ｐｔｇｆｒ（マウス）、ｂ−アクチン（ヒト）、ｂ−アクチン（マウス）、および１８Ｓ（ヒトおよびマウス）である。

ウェスタンブロット
ヒト頭皮組織をホモジナイズし、ＢＣＡキット（ピアス社）を用いてタンパク質量を定量化した。同量の各廃棄組織可溶化液（１５〜３５ｍｇ）を、ＳＤＳ‐ポリアクリルアミドゲル電気泳動のために添加した。ポリフッ化ビニリデンブロットをマウス抗ＰＴＧＤＳモノクローナル抗体（ケイマン・ケミカル社（Cayman Chemical））でプローブし、その後、ＨＲＰ結合型抗マウス二次抗体（ベクター）でプローブした。全て製造業者の説明書に従って、ブロットを電気化学発光（アマシャム社）を用いて発色させ、オートラジオグラフィーにかけ、ＩｍａｇｅＪ（アメリカ国立衛生研究所）を用いて定量化した。次にブロットをＰｏｎｃｅａｕ Ｒｅｄ（シグマ社）で染色して、試験された全レーン間での等しい添加量を確認した。

ＰＧＤ２酵素結合免疫吸着測定法
ＰＧＤ２の量を測定するために、ヒト頭皮を毛髪移植から入手した。外科手術の直後、試料は、10％ウシ胎児血清（FBS）および抗生物質/抗真菌剤を含有するダルベッコー修飾イーグル培地中の4℃に置くか、あるいは新鮮凍結した。組織試料重量は０．１４から０．９４ｇまで変動した。全ての値を出発組織重量に対して正規化した。１〜２日以内に、試料を液体窒素中で急速凍結し、−７０℃で少なくとも２４時間保存した。解凍後、試料を１ｍＬのアセトン中に希釈し、ホモジナイズした。試料を５０００ｇで１０分間遠心し、上清を取り出し、ペレットに対して２回目の抽出を行った。合わせた上清をＳｐｅｅｄＶａｃ遠心機において乾燥させ、ケイマン・ケミカル社製プロスタグランジンＤ２−ＭＯＸ ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着測定法）キット中に提供される１００ｍＬの酵素免疫測定緩衝液中で再懸濁させた。製造業者の取扱説明書に従って、検量線に対してＰＧＤ２濃度を決定した。値を有毛頭皮に対して正規化した。

超高速液体クロマトグラフィー
ヒト組織をＥＬＩＳＡ用に上記の通りに調製した。マウスにおけるプロスタグランジン収率を最大化するために、試料を新鮮凍結し、常に４℃以下に保った。Ｋ１４−Ｐｔｇｓ２マウスおよびＢ型フレンドウイルス（ＦＶＢ）株対応動物対照由来の組織を、生存２４日目に得た。マウス組織において、切除した表皮および真皮をアセトン中で急速凍結し、刻み、アセトン中で金属先端を有するＯｍｎｉ ＴＨ １１５Ｖを用いて２分間未満ホモジナイズした。次に、ホモジナイズした組織を１６，０００ｇで１０分間遠心し、上清を収集した。アセトンを穏やかな窒素ガス流下で乾燥させ、その後、試料を１ｍＬの水中５％アセトニトリルに再溶解させ、２０ｍｌのギ酸で酸性化し、条件付けしたＳｔｒａｔａ−Ｘ ＳＰＥカートリッジ（フェノメネクス社（Phenomenex））に添加した。ＳＰＥプロトコールは、１ｍＬのＨ_２Ｏとその後の１ｍＬのアセトニトリルによる前条件付け、試料適用（sampleapplication）、１ｍＬのＨ_２Ｏでの洗浄、１５分間のハウスバキューム（house vacuum）の適用による乾燥、および１ｍＬの酢酸エチル中１０％アセトニトリルでの溶出を含んでいた。次に、溶出物を窒素流で乾燥させ、２００ｍＬのＨ_２Ｏ中３０％アセトニトリルに再溶解させ、０．２ｍｍ Ｎｙｌｏｎ Ｓｐｉｎ−Ｘフィルター（コーニング社）に通して濾過し、その後、１００ｍＬをＵＨＰＬＣ解析用装置に注入した。

ＵＨＰＬＣは、Ａｃｃｅｌａ溶媒送液系（サーモ社（Thermo））およびＨｙｐｅｒｓｉｌ ＧＯＬＤ Ｃ１８、２００ｍｍ×１ｍｍ、１．９ｍｍ粒径カラム（サーモ社）から成る。移動相は水（溶媒Ａ）およびアセトニトリル／メタノール（９５：５、溶媒Ｂ）から成り、それらは共に水酸化アンモニウムを用いてｐＨ５．７に調整された０．００５％酢酸を含有した。移動相の勾配は２０％のＢから開始され、１０分の時点の３５％まで直線的に増加し、その後２０分の時点の８０％のＢまで直線的に増加し、８０％のＢに３分間維持された。流速は３５０ｍｌ／分であった。

質量分析
加熱エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）源および三連四重分析器（triple quadrupole analyzer）を備えたＴＳＱ Ｑｕａｎｔｕｍ Ｕｌｔｒａ装置（サーモ社）を使用した。ＥＳＩ源では、シースガスおよび補助ガスとして窒素を使用し、それぞれ７０および５任意単位に設定した。質量分析計を、３５０℃のキャピラリー温度および０ｋＶのスプレー電圧を用いる陰イオンモードで作動させた。ソースオフセット（sourceoffset）を６Ｖに設定した。分析器を、選択反応モニタリングモードで作動させた。最初の１６分間にモニターされた遷移は以下の通りである：内在性ＰＧＤ２および内在性ＰＧＥ２の質量／電荷比（ｍ／ｚ）３５１→２７１（衝突エネルギー、１５Ｖ）、四重水素化（tetradeuterated）ＰＧＤ２および四重水素化ＰＧＥ２のｍ／ｚ３５５→２７５（１５Ｖ）、内在性ＰＧＦ２ａのｍ／ｚ３５３→１９３（２４Ｖ）、並びに四重水素化ＰＧＦ２ａのｍ／ｚ３５７→１９７（２４Ｖ）。最後の７分間において、内在性１５−ｄＰＧＪ２のｍ／ｚ３１５→２７１（１５Ｖ）および四重水素化類似体のｍ／ｚ３１９→２７５（１５Ｖ）がモニターされた。エイコサノイドは全て、ケイマン・ケミカル社から購入した。

免疫組織学および免疫蛍光法
マウス背中皮膚またはヒト頭皮皮膚を４％パラホルムアルデヒド中で固定し、パラフィルム中に包埋し、５〜１０ｍｍ厚の切片にした。非イムノスライド（non-immunoslide）をヘマトキシリンおよびエオシン（フィッシャーサイエンティフィック社）について染色した。免疫染色において、ウサギ抗ＰＴＧＤＳポリクローナル抗体（ケイマン・ケミカル社）またはマウス抗ＫＲＴ１５モノクローナル抗体（ラブ・ビジョン社（Ｌａｂ Ｖｉｓｉｏｎ）、クローンＬＨＫＲＴ１５）を添加し、その後、ビオチン化抗ウサギ抗体またはビオチン化抗マウス抗体をそれぞれ添加した。発色用の西洋わさびペルオキシダーゼおよびジアゾアミノベンゼンを含むＡＢＣキット（ベクターラボラトリーズ社（Vectorlabs））を使用した。メチルグリーン（ベクターラボラトリーズ社）を用いて免疫組織化学のために組織を対比染色した；抗原染色は褐色を呈し、対比染色は帯青緑色を呈する。従来の光学顕微鏡（ニコン社）において染色を可視化した。皮膚を、免疫組織化学に関する記載と同じ一次抗体を用いて処理した。抗ウサギＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ４８８（インビトロジェン社）および抗マウスローダミン（ベクターラボラトリーズ社）を二次抗体として使用した。次に、組織を４′，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール（ＤＡＰＩ）封入剤（ベクターラボラトリーズ社）中に封入した。赤、緑、および青色フィルターキューブを備えた従来の蛍光顕微鏡（ライカ社）において、染色を可視化した。

ケラチノサイト 細胞培養
ヒト包皮ケラチノサイトを新生児包皮から単離した。６穴培養皿中で開始後２〜３継代した、等密度のケラチノサイトを播種した（５０，０００細胞／ｃｍ２）。細胞を２ｍＬのＥｐｉＬｉｆｅ培地（カスケード・バイオロジクス社（Cascade Biologics））中で維持し、アセトン中に溶解された１００ｎＭのＰＧＤ２、１ｍＭのＰＧＥ２、または１０ｍＭの１５−ｄＰＧＪ２（ケイマン・ケミカル社）で１２〜４８時間処理した。特に指定がない限り、細胞は１０ｍＭのプロスタグランジンで２０時間処理した。アセトン単独を対照として使用した。

フローサイトメトリー
培養中、ヒトケラチノサイトを、プロスタグランジンと一緒のインキュベーションの最後の３時間、０．２ｍＭのブロモデオキシウリジン（ＢｒｄＵ）でパルス標識した。細胞をトリプシン処理して、細胞を懸濁液中に遊離させ、計数し、固定し、透過処理した（カルテック（Caltech））。１０６個の細胞につき２０ｍＬの抗活性化カスパーゼ３（ベクトン・ディッキンソン社、クローンＣＰＰ３２）または抗ＢｒｄＵフルオレセインイソチオシアネート（ベクトン・ディッキンソン社、クローンＢ４４）で、細胞を染色した。細胞を、５％ＦＢＳおよびＤＡＰＩ（５ｍｇ／ｍＬ）を含有するリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中に再懸濁し、その後ＬＳＲＩＩフローサイトメーター（ベクトン・ディッキンソン社）にかけた。二倍体量未満のＤＮＡを含有する細胞として、Ｓｕｂ−Ｇ１細胞をゲートにかけた。

マウス毛髪伸長研究
野生型およびノックアウトマウスの間での毛周期に対するビヒクル、ＰＧＤ２、および１５−ｄＰＧＪ２の影響を比較するために、２００ｍＬのアセトン中の１ｍｇのＰＧＤ２またはアセトン単独を、脱毛後８、１０、１２、１４、１６、および１８日目に背中中央（central back）に塗布し、２０日目に毛髪長測定を行った。１５−ｄＰＧＪ２に関して毛髪伸長の時間経過を試験するために、上記ＰＧＤ２の代わりに１０ｍｇを使用した。毛髪長を記載の通りに測定し、ａｗｌ（ジグザグ形でない）毛のみの選択を測定した。変異マウス系統を試験するために、３匹の別々の同腹仔に対して前記実験を繰り返した。

ヒト毛包培養
毛包器官培養モデルを記載の通りに行った。簡潔に説明すると、成長期（毛周期成長期）のヒト毛包を、形成外科医から入手したフェイスおよび眉のリフト組織（face and brow-lift tissue）から単離した。少なくとも３人の異なるヒト提供者（男女混合）を各試験化合物に対して用いた。全ての対象は４０歳〜６０歳の年齢幅であった。皮膚を、１〜２ｍｍの薄い細片にスライスし、容易に切り分けることが可能である２〜３列の毛包を露出した。毛包を、Ｌ−グルタミン（２ｍＭ）、インスリン（１０ｍｇ／ｍｌ）、ヒドロコルチゾン（１０ｎｇ／ｍｌ）、ペニシリン（１００Ｕ）、ストレプトマイシン（０．１ｍｇ／ｍｌ）、およびアンホテリシンＢ（０．２５ｍｇ／ｍｌ）を添加した０．５ｍＬのウィリアムＥ培地（ライフテクノロジーズ社）中に置いた。毛包を、３７℃、５％ＣＯ２および９５％空気の雰囲気下、２４ウェルプレート（１ウェルにつき１毛包）中でインキュベートした。ＰＧＤ２、ＰＧＤ２代謝産物、およびＰＧＤ２類似体（ケイマン・ケミカル社）を、１００×原液（例えば、５ｍＭ処理については０．５ｍＭ、および１０ｍＭ処理については１ｍＭ）として、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中に溶解させた。ＤＭＳＯビヒクル対照を１％（ｖ／ｖ）で使用した。毛包を対照としてのＤＭＳＯ単独で処理した。毛包を典型的には０日目（毛包が培地中に置かれた日）および再度７日目に撮像した。毛髪線維の長さを、Ｖｉｓｉｏｎ Ｂｕｉｌｄｅｒ（ナショナルインスツルメンツ社）を用いて評価した。毛髪線維の成長を、７日目に測定された長さから０日目の長さを除算することにより算出した。報告された各測定値は１４〜２０個の毛包から得られた結果の平均値である。

統計解析
全てのＰ値算出において、片側分布を有する対応のあるスチューデントｔ検定を算出し、Ｐ＜０．０５を有意と見なした。全てのデータは平均値±ＳＥＭである。分散分析（ＡＮＯＶＡ）試験を用いて、部位（有毛対無毛）に関する、且つ人間、生検日、またはマイクロアレイの日には関係のない主な差異として、マイクロアレイからの遺伝子を分類した。

結果
実施例１
ＰＴＧＤＳおよびＰＧＤ２は無毛頭皮において増加している
ＡＧＡを有する男性の無毛頭皮における全体的な遺伝子発現変化を評価するために、ＡＧＡを有する５人の男性における無毛頭皮と有毛頭皮を比較する遺伝子発現マイクロアレイを行った。有毛反復試験試料間および無毛反復試験試料間の相関係数は１に近づいた（図１Ａ）。個体内で有毛頭皮を無毛頭皮と比較している相関係数も１に近くなったが、これは、内部標準としての対試料の利点を示している。ヒト無毛頭皮と比較して、ヒト有毛頭皮において特異的に発現されていた２５０種の転写物を特定した。これらの転写物の妥当性の証明として、クラスタリング・アルゴリズムによって、これらの遺伝子の発現に基づいて、試料を有毛または無毛に分類した（図１Ｂ）。毛髪ケラチンは、予想通り、有毛頭皮において発現増加していた。理由は不明であるが、ヘモグロビン関連転写物が無毛頭皮において増加していた。１６９種の遺伝子が有毛頭皮において増加しており、８１種の遺伝子が無毛頭皮において増加しており、予想通りの発現傾向であった（図１Ｃ）。これらの遺伝子のエンリッチド遺伝子オントロジー機能的分類（enriched gene ontology functional classification）を決定し、重複する分類を特定した。有毛頭皮においては、形態形成および発生過程遺伝子が過剰発現しており、一方、無毛頭皮では、免疫応答遺伝子が過剰発現しており（図１Ｄ）、これらは、ＡＧＡの既知の組織学的検査と一致している。

発毛を促進するためのプロスタグランジンＦ２ａ（ＰＧＦ２ａ）関連化合物の臨床用途およびプロスタグランジン類のしばしば拮抗的な機能を考慮すると、ＰＴＧＤＳが、ヒト男性の薄毛頭皮において最も高発現の転写物のうちの１つであることは興味深いことであった（図１、ＥおよびＦ）。マイクロアレイ上のＰＴＧＤＳをカバーしていた３つのプローブセットのうち、全てが薄毛頭皮において増加していた（図１Ｅ）。定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応Ｆ２（ｑＰＣＲ）（図２Ａ）およびウェスタンブロッティング（図２、ＢおよびＣ）によって、有毛ヒト頭皮と比較して、薄毛ヒト頭皮において、増加したＰＴＧＤＳ発現およびＰＴＧＤＳタンパク質レベルがさらに確認された。薄毛におけるＰＴＧＤＳの役割をより良く理解するために、薄毛ヒト頭皮および有毛ヒト頭皮の両方における、その合成酵素産物であるＰＧＤ２のレベルを測定した。イムノアッセイにより、有毛頭皮と比較して、薄毛頭皮においてＰＧＤ２の有意な増加が発見された（図２Ｄ）。ＰＧＤ２の絶対レベルは、薄毛頭皮においては１６．３ｎｇ／ｇ組織、そして有毛頭皮においては１．５ｎｇ／ｇ組織であった。次に、イムノアッセイと比較してプロスタグランジン測定における精度が優れていることが報告されていることから、超高速液体クロマトグラフィー質量分析（ＵＨＰＬＣ−ＭＳ）を用いて、ＰＧＤ２レベルを測定した。より大規模な一連の、ＡＧＡを有する１７人の男性から得られた対の無毛試料および有毛試料において、有毛頭皮と比較した、無毛頭皮におけるＰＧＤ２の増加が認められた（図２Ｅ）。他のプロスタグランジン類は毛包成長に対する活性を有する。薄毛頭皮および有毛頭皮における追加のプロスタグランジン種のレベルを測定した。ＰＧＤ２の非酵素的代謝産物である１５−ｄＰＧＪ２も、有毛頭皮と比較して、薄毛頭皮において増加していた（図２Ｅ）。しかし、１５−ｄＰＧＪ２の絶対レベル（３．８ｎｇ／ｇ無毛頭皮、１．３ｎｇ／ｇ有毛頭皮）は、ＰＧＤ２（５３．５ｎｇ／ｇ無毛頭皮、２５．６ｎｇ／ｇ有毛頭皮）よりも低かった（図２Ｆ）。両方法は無毛頭皮におけるＰＧＤ２質量の増加を示したが、イムノアッセイと比較して、ＵＨＰＬＣ−ＭＳによって、薄毛頭皮におけるより高レベルのＰＧＤ２が検出された（５３．５ｎｇ／ｇ組織 対 １６．３ｎｇ／ｇ組織）。ＰＧＤ２とは対照的に、ＰＴＧＤＳではなくＰＴＧＥＳによって合成されるプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）のレベルは、薄毛頭皮と比較して、有毛頭皮においてより大量であり（図２Ｅ）、３．１ｎｇ／ｇ薄毛頭皮および６．４ｎｇ／ｇ有毛頭皮がＵＨＰＬＣ−ＭＳによって検出された（図２Ｆ）。

実施例２
非永久的毛包（nonpermanent follicle）マウスケラチノサイトは毛周期成長期の終わりにＰｔｇｄｓを発現する。
発毛に対するＰｔｇｄｓおよびＰＧＤ２の正常な生物学的機能をより良く理解するために、マウスの特徴がはっきりした同調毛周期を利用した。遺伝子発現およびタンパク質レベルにおける周期的変動は、異なる年齢において、または同調された新しい毛包周期を引き起こすマウスの毛の脱毛後に、皮膚を検査することによって、毛包周期の異なる段階まで追跡することができる。同調されたマウス毛周期の特徴を調べる過程において、マウス皮膚生検試料における、出生後（ＰＮ）日数に対する毛周期段階を確認した。肉眼形態から示唆されるように、ＰＮ２１におけるマウスの組織学的特徴は後期毛周期休止期のものであり、ＰＮ３５は後期毛周期成長期、そしてＰＮ４６は毛周期退行期のものであることが確認された。ｑＰＣＲで測定されたＰｔｇｄｓのｍＲＮＡは、毛周期成長期の後期でピークとなり、ＰＮ２０における静止期（毛周期休止期）と比較して７倍高かった（図３Ａ）。従って、Ｐｔｇｄｓ発現は毛周期休止期の間で最も低く、毛周期成長期を通じて次第に増加して、退行期である毛周期退行期への移行期に近い後期毛周期成長期でピークとなる。Ｐｔｇｄｓ発現ピークの毛周期退行期移行期への近接をより厳密に調べるために、Ｐｔｇｄｓ発現ピークを、毛周期退行期開始の公知のマーカーである線維芽細胞増殖因子５（fibroblast growth factor：Ｆｇｆ５）の発現と比較した。Ｆｇｆ５発現は、毛周期休止期と比較して、後期毛周期成長期でピークとなった（図３Ａ）。同時に、Ｆｇｆ５およびＰｔｇｄｓのピーク発現レベルは、後期毛周期成長期の間、毛周期退行期の開始の直前で重なった。次に、Ｆｇｆ５およびＰｔｇｄｓとは異なって発現される制御遺伝子の同定を試みた。早期毛周期成長期のマーカーとして、マウスおよびヒトの両方において発毛を誘導する能力で知られている、ＰＧＦ２ａ受容体の発現を測定した。ＰｔｇｄｓおよびＦｇｆ５の遅いピークとは対照的に、プロスタグランジンＦ受容体（Ｐｔｇｆｒ）のｍＲＮＡは、早期毛周期成長期または後期毛周期休止期でピークとなり、第二毛周期休止期（ＰＮ５２）に対しては２１倍の変化（図３Ａ）であり、第一毛周期休止期（ＰＮ２０）に対しては３倍の変化であった。

Ｐｔｇｄｓの発現とＰＧＤ２の産生の間の時間的関係を決定するために、図３ＡにおけるｍＲＮＡデータを決定した同一マウスにおいて、ＨＰＬＣ−ＭＳによってＰＧＤ２レベルを測定した。ＰＧＤ２産生がＰｔｇｄｓ発現の頂端の後にピークとなることを発見した。ＰＧＤ２は、ＰＮ２４の早期毛周期成長期における最下点７．４ｎｇ／ｇ組織と比較して、毛周期退行期段階の間のＰＮ４６においてピークレベルである８７．６ｎｇ／ｇ組織に達する（図３Ｂ）。従って、ＰｔｇｄｓのｍＲＮＡが後期毛周期成長期に皮膚において最初に発現され、その後、ＰＧＤ２がＰｔｇｄｓタンパク質を介して毛周期退行期中に産生される。個々のマウスにおける早期毛包周期段階は自然に同調されるが、同一齢の動物、さらには同腹仔は、毛包周期に関して不均一性を示し得る。従って、動物間および動物内で毛周期を同調させるために同時に脱毛したマウスを用いて、上記解析を繰り返した。自然毛周期から得られた結果を裏付けるものであるが、ＰｔｇｄｓのｍＲＮＡは脱毛した動物においても毛周期と共に変動した。ＰｔｇｄｓのｍＲＮＡは後期毛周期成長期にピークとなり、その後、毛周期退行期でＰＧＤ２がピークとなる（図３Ｃ）。ＰＧＤ２産生は、３７日目での最下点２７．６ｎｇ／ｇ組織と比較して、１９．５日目（毛周期退行期）に１９９．９ｎｇ／ｇ組織のピークとなる。また、脱毛の数時間内にＰＧＤ２産生の独特なピークが確認されたが、これは図３Ｂにおける自然毛周期では見られなかったものである。これは、脱毛後以前に観察されたマスト細胞の脱顆粒と同時に発生している。脱毛した毛周期におけるマーカーのより細いピークは、脱毛後の毛包周期のより厳密な同調を反映している可能性が高い。Ｐｔｇｄｓの発現をより良く定義するために、図３Ｃにおける経時変化に使用された動物の皮膚から得た組織切片に対して免疫組織化学を行った。Ｐｔｇｄｓは、後期毛周期成長期の、立毛筋によって特徴付けられる、幹細胞が豊富な毛隆起部の下にある外毛根鞘のケラチノサイトにおいて、明らかであった（図３Ｄ）。この領域の毛包は、毛周期退行期の間に退行する。

免疫組織化学で見られたこのパターンを裏付けるために、次に、Ｐｔｇｄｓおよび毛包幹細胞マーカーであるケラチン１５（Ｋｒｔ１５）の両方に対する二重免疫蛍光標識を検討した。脱毛後０日目（毛周期休止期）において、Ｋｒｔ１５は、毛包の最下永久部（permanent part）における毛隆起部に存在し、毛周期休止期まで持続した（図３Ｅ）。Ｐｔｇｄｓは確認されなかったが、これは、毛周期休止期中のＰｔｇｄｓ発現の欠如を示す（図３Ａ）ｑＰＣＲデータと一致している。また、ｑＰＣＲと一致して、１７日目（後期毛周期成長期）に検出可能なＰｔｇｄｓパターンを免疫組織化学によって発見した（図３、ＤおよびＦ）。下外毛根鞘細胞（ただし毛隆起部細胞ではない）がＰｔｇｄｓを発現していた。さらに、脱毛後１９日目に、毛周期退行期の毛包内のケラチノサイトがＰｔｇｄｓを発現しており、重なっているＫｒｔ１５陽性ケラチノサイトはなかった（図３Ｇ）。これらの結果は、マウスにおける毛包の非永久的ケラチノサイトにおいて、Ｐｔｇｄｓが豊富であることを示している。

実施例３
ＰＴＧＤＳはヒト毛包の非永久的ケラチノサイトにおいて発現される
正常なヒト硬毛包において、主に立毛筋の下の非永久的毛包において、ＰＴＧＤＳの同様の存在を見出した（図４Ａ）。しかし、染色は一様ではなく、多くの正常ヒト毛包がほとんど染色を示さなかった（図４Ｂ）。これは、無毛頭皮と比較して、有毛頭皮におけるＰＴＧＤＳのｍＲＮＡレベルがより低いことと一致しており、ヒト毛包周期における同時性（synchronicity）の欠如をも反映している可能性が高い。薄毛ヒト頭皮における小型化した毛包において、毛隆起部の外側の（図４、ＣおよびＥ）、および場合によっては基底上の毛隆起部内の（図４Ｄ）、皮脂腺および毛包ケラチノサイトが、ＰＴＧＤＳを発現していた。また、毛包上皮の外側でＰＴＧＤＳが検出されたが、これは、真皮におけるＰＧＤ２の潜在的な供給源を示すものである（図４、ＥおよびＦ）。毛周期退行期を経ている毛包において、ＰＴＧＤＳは、退行した毛包の以前の部分である、線維状ストリーマー（fibrousstreamer）内のマスト細胞に存在した（図４Ｅ）。マウスおよびヒトにおけるこれらの結果は、リポカリンＰＴＧＤＳおよびその生成物ＰＧＤ２が、毛包が退行を開始する時に毛包の過渡的な部分において主に発現されることを示している。これらの知見は、ＰＧＤ２経路が毛包成長を阻害するという仮説と合致している。

実施例４
表皮表現型模写ＡＧＡにおいてＰｔｇｓ２を過剰発現する遺伝子導入マウス
ヒトの薄毛頭皮におけるＰＧＤ２レベルの増加と、マウス毛包に対するＰＧＤ２の推定的な阻害的役割の相関を仮定して、皮膚において高レベルのＰＧＤ２を有するマウスはＡＧＡの特徴を発生させ得ると仮定した。Ｐｔｇｓ２（シクロオキシゲナーゼ２、プロスタグランジンＧ／Ｈシンターゼ）はＰｔｇｄｓに対して上流の酵素であるため、Ｐｔｇｓ２を過剰発現しているマウスはＰＧＤ２レベルが上昇しているだろうとさらに仮定した。表皮においてＰｔｇｓ２を過剰発現する遺伝子導入マウスは、発癌研究のために以前に開発されていた。これらのＫ１４−Ｐｔｇｓ２遺伝子導入マウスにおける毛包は時期尚早に毛周期退行期に入ることが注目されており、報告によれば、これらのマウスは脱毛症および皮脂腺拡張を発症した。

さらに、Ｋ１４−Ｐｔｇｓ２マウスの皮膚および毛包を分析した。これらのマウスは脱毛症を発症しており、これは、対照と比較した場合の、正常マウスの毛皮の減少として明らかであった（図５、Ｆ５ ＡおよびＢ）。組織学的検査により、毛包周囲に密集した肥大した脂腺細胞によって示される皮脂腺過形成も検出した（図５、ＣおよびＤ）。Ｋ１４−Ｐｔｇｓ２マウスにおける毛包は対照と比較して小型化しており（図５、ＣおよびＤ）、これらの毛包はヒト無毛頭皮における小型化した毛包に対して顕著な類似を示した。Ｋ１４−Ｐｔｇｓ２マウスの脱毛皮膚におけるプロスタグランジン含量を決定するために、毛包周期の毛周期成長期中にＨＰＬＣ−ＭＳによってプロスタグランジンレベルを測定した。ＰＧＥ２は、同齢の野生型対照と比較して、Ｋ１４−Ｐｔｇｓ２マウスにおいて増加しており、これは、生検したマウス皮膚におけるＰＧＥ２およびＰＧＦ２ａ含量を測定したイムノアッセイを用いて先に示された通りであった。野生型およびＫ１４−Ｐｔｇｓ２マウスの両方において、ＰＧＤ２も増加しており、ＰＧＥ２よりも豊富であった。１５−ｄＰＧＪ２は、ベースライン値は低かったが（５．７ｎｇ／ｇ組織）、対照と比較して、Ｋ１４−Ｐｔｇｓ２マウスにおいて増加しており、最も大きな倍率の増加（〜１４倍）を示した（図５Ｅ）。低レベル（１８．４ｎｇ／ｇ組織）のＰＧＦ２ａ、並びにプロスタサイクリン（６ｋ−ＰＧＦ１ａ）およびトロンボキサン（ＴｘＢ２）の欠如が見出されたが（図５Ｅ）、これらは、正常皮膚に存在することは知られていない。同時に、これらのマウスにおける薄毛表現型は、既知の発毛促進因子であるＰＧＥ２の存在にかかわらず、ＰＧＤ２および１５−ｄＰＧＪ２の毛包に対する圧倒的な阻害効果の結果である可能性が高い。

実施例５
１５−ｄＰＧＪ２およびＰＧＤ２はマウス毛包およびヒト毛包における発毛を阻害する
アポトーシスによる毛周期退行期段階前のＰＧＤ２の一時的なピーク、およびその代謝産物である１５−ｄＰＧＪ２の他の細胞型においてアポトーシスを誘導する能力を仮定して、新生児の包皮から単離したケラチノサイトの初代細胞培養に対するプロスタグランジンの影響を試験した。１５−ｄＰＧＪ２は原形質膜小疱形成および細胞退縮／収縮によって示されるアポトーシスを誘導した。１５−ｄＰＧＪ２は細胞密度、細胞分裂、および生細胞数も減少させた。おそらく、これらのケラチノサイトの起源が毛包でなかったことから、ＰＧＤ２は前記細胞に対してそのような影響を与えなかった。しかし、１５−ｄＰＧＪ２は、アポトーシス細胞死の特徴である、ヒトケラチノサイトにおけるｓｕｂ−Ｇ１ ＤＮＡ含量および活性化カスパーゼ３を増加させた。従って、少なくとも１５−ｄＰＧＪ２は、おそらくはＰＧＤ２も、インビボで発毛を直接的に阻害し得ると仮定した。１５−ｄＰＧＪ２を毛包周期を同調させるために脱毛したＣ５７ＢＬ／６マウスの背側皮膚に局所塗布した。脱毛後８日目から開始して一日おきに継続して、１０ｍｇの１５ｄＰＧＪ２またはアセトンビヒクルを塗布した。脱毛後４、１２、１４、および１６日目に毛髪長を測定した。１２〜１６日目では、処置部の毛は、ビヒクル処置動物の毛よりも短かったＦ６（図６Ａ）。最小有効量を決定するために、１ｍｇのＰＧＤ２および１５−ｄＰＧＪ２の両方の塗布を上記の通りに試験し、毛髪長を脱毛後２０日目に測定した。ＰＧＤ２は発毛を阻害したが、１５−ｄＰＧＪ２と比較してより小さな程度であった（図６Ｂ）。

毛包周期における変化の証拠は肉眼的にも組織学的検査によっても見出されなかった。発毛のＰＧＤ２介在性阻害が示されたため、次に、どの受容体がこの効果に関与しているかの決定を試みた。ＰＧＤ２の２つの模範的な（canonical）受容体は、ＰＴＧＤＲ（ＤＰ−１としても知られている）およびＧＰＲ４４（ＤＰ−２）である。ＤＰ−１およびＤＰ−２は共に、数ある部位の中でも、毛包における外毛根鞘ケラチノサイトによって発現されることが報告されている。従って、Ｐｔｇｄｓヌルマウスを対照として用いて、ＰＧＤ２がＰｔｇｄｒヌルマウスおよびＧｐｒ４４ヌルマウスの両方において発毛を阻害する能力を調べた。ＰｔｇｄｓノックアウトマウスおよびＰｔｇｄｒノックアウトマウスは共に毛髪伸長が阻害され易いが、一方で、Ｇｐｒ４４ヌルマウスはＰＧＤ２の阻害効果に対して耐性を示した（図６Ｃ）。これらのデータは、ＰＴＧＤＲではなく、ＧＰＲ４４が、毛髪伸長のＰＧＤ２介在性阻害の受容体であり、それ故、ＡＧＡの治療標的になり得ることを示している。

ヒト発毛に対するＰＧＤ２の影響を試験するために、培地中に７日間維持された外植されたヒト毛包を使用した。漸増量（０〜１０ｍＭ）のＰＧＤ２、１５−ｄＰＧＪ２、またはビヒクルを培地に添加し、毛髪長を測定した（図６Ｄ）。５ｍＭから、ＰＧＤ２および１５−ｄＰＧＪ２は有意に発毛を阻害した。１０ｍＭにおいて、ＰＧＤ２処理毛髪はビヒクルよりも６２±５％より短かったが、一方、１０ｍＭの１５−ｄＰＧＪ２は全ての発毛を完全に阻害した。種々の他のＰＧＤ２類似体を試験したところ、それらが毛髪伸長を阻害できることが判った。ＧＰＲ４４に対する受容体活性化作用は、毛髪伸長を阻害する能力と相関した（図７）。例えば、弱い作動薬である１１−デオキシ−１１−メチレンＰＧＤ２は、試験化合物の中で最も低い活性（発毛阻害）を有した。ＧＰＲ４４はリガンド対してナノモルの親和性を有するが、この種の実験の常であるように、より高い濃度が組織透過性および化合物溶解を克服するために必要であったことには留意されたい。従って、マウスおよびヒトの両方において、ＰＧＤ２および１５−ｄＰＧＪ２は、おそらくはＧＰＲ４４受容体を介して、発毛を阻害する。

プロスタグランジンＤ２シンターゼ（ＰＴＧＤＳ）が、ＡＧＡを有する男性の有毛頭皮と比較して、無毛頭皮において、ｍＲＮＡレベルおよびタンパク質レベルで増加していることが示される。ＰＴＧＤＳ酵素活性の産物であるプロスタグランジンＤ２（ＰＧＤ２）は同様に無毛頭皮において増加している。マウスにおける正常な毛包周期の間、ＰｔｇｄｓおよびＰＧＤ２のレベルは、退行期に先立って直ちに増加するが、これは、発毛に対する阻害効果を示唆するものである。ＰＧＤ２が、外植されたヒト毛包において、およびマウスに局所的に塗布された場合に、発毛を阻害することが示される。発毛阻害はＰＧＤ２受容体Ｇタンパク質（ヘテロ三量体グアニンヌクレオチド）結合型受容体４４（ＧＰＲ４４）を必要とするが、ＰＧＤ２受容体１（ＰＴＧＤＲ）は必要としない。さらに、皮膚をプロスタグランジン−エンドペルオキシドシンターゼ２発現の標的にするトランスジェニックマウスのＫ１４−Ｐｔｇｓ２が、皮膚においてＰＧＤ２レベルの増加を示し、ヒトＡＧＡの全ての特徴である脱毛症、毛包小型化、および皮脂腺過形成を発症することが判った。

その広範な発明概念から逸脱することなく上記実施形態に変更がなされ得ることは、当業者によって理解される。従って、本発明が特定の開示された実施形態に限定されず、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の精神および範囲内にある改変も包含することが意図されていることは、理解される。

Claims (43)

1. 対象における発毛を調節する方法であって、前記対象に有効量のＤＰ−２作動薬または拮抗薬を投与することを含む、上記方法。
2. 投与ステップが局所的に行われる、請求項１に記載の方法。
3. 発毛調節が発毛阻害であり、ＤＰ−２作動薬を投与することを含む、請求項１に記載の方法。
4. 発毛調節が発毛刺激であり、ＤＰ−２拮抗薬を投与することを含む、請求項１に記載の方法。
5. 対象における発毛を刺激するための方法であって、前記対象に有効量のＤＰ−２拮抗薬を投与することを含む、上記方法。
6. 投与ステップが局所的に行われる、請求項５に記載の方法。
7. 前記対象に発毛を調節する別の作用剤を投与することをさらに含み、前記別の作用剤がフィナステリドまたはミノキシジルである、請求項５に記載の方法。
8. 毛包を前記対象に移植するステップをさらに含む、請求項５に記載の方法。
9. 前記対象における皮膚の真皮または表皮を除去することをさらに含む、請求項５に記載の方法。
10. 対象が男性型脱毛症を有する、請求項５に記載の方法。
11. 対象が円板状エリテマトーデス（discoid lupus erythematosis）、先天性貧毛症、毛孔性扁平苔癬または瘢痕性脱毛症に関連する脱毛を有する、請求項５に記載の方法。
12. ＤＰ−２拮抗薬がＤＰ−１に対する選択的ＤＰ−２拮抗薬である、請求項５に記載の方法。
13. 拮抗薬がＤＰ−２に対し１００ｎＭ以下のＩＣ_５０を有する、請求項５に記載の方法。
14. ＤＰ−２拮抗薬がラマトロバンまたはその類似体である、請求項５に記載の方法。
15. ＤＰ−２拮抗薬がインドール酢酸誘導体である、請求項５に記載の方法。
16. ＤＰ−２拮抗薬がフェニル酢酸誘導体である、請求項５に記載の方法。
17. ＤＰ−２拮抗薬がテトラヒドロキノリン（tetrahyrdroquinoline）誘導体である、請求項５に記載の方法。
18. 対象における発毛を阻害するための方法であって、前記対象に有効量のＤＰ−２作動薬を投与することを含む、上記方法。
19. 投与ステップが局所的に行われる、請求項１８に記載の方法。
20. 前記対象の皮膚上の毛髪を除去することをさらに含む、請求項１８に記載の方法。
21. ＤＰ−２作動薬がＤＰ−１に対する選択的ＤＰ−２作動薬である、請求項１８に記載の方法
22. ＤＰ−２作動薬が１５（Ｒ）ＰＧＤ_２、１５（Ｒ）−１５−メチルＰＧＤ_２および１３，１４−ジヒドロ−１５−オキソＰＧＤ_２からなる群から選択される、請求項１８に記載の方法。
23. ＤＰ−２作動薬がＤＰ−２に対し１００ｎＭ以下のＥＣ_５０を有する、請求項１８に記載の方法。
24. 対象における発毛を調節するための組成物であって、前記対象における発毛を調節するのに有効な量でＤＰ−２作動薬または拮抗薬を含む、上記組成物。
25. 組成物がＤＰ−２作動薬または拮抗薬の局所製剤である、請求項２４に記載の組成物。
26. 対象における発毛を刺激するための組成物であって、前記対象における発毛を刺激するのに有効な量でＤＰ−２拮抗薬を含む、上記組成物。
27. 組成物がＤＰ−２拮抗薬の局所製剤である、請求項２６に記載の組成物。
28. 対象における男性型脱毛症または脱毛症または毛髪脱落を治療するための組成物であって、前記対象における前記男性型脱毛症または脱毛症または毛髪脱落を治療するのに有効な量でＤＰ−２拮抗薬を含む、上記組成物。
29. 組成物がＤＰ−２拮抗薬の局所製剤である、請求項２８に記載の組成物。
30. 対象における発毛を阻害するための組成物であって、前記対象における発毛を阻害するのに有効な量でＤＰ−２作動薬を含む、上記組成物。
31. 組成物がＤＰ−２作動薬の局所製剤である、請求項３０に記載の組成物。
32. 男性型脱毛症を治療するための候補作用剤として化合物をスクリーニングするための方法であって、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定し；同じ条件下で、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であると考えられる化合物の非存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定するステップを含み、前記化合物の非存在下におけるよりも前記化合物の存在下におけるより低いＤＰ−２活性が、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であることを示す、上記方法。
33. 男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定し；同じ条件下で、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であると考えられる化合物の非存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定するステップをさらに含み、前記化合物の存在下および非存在下でのより低いＤＰ−２活性およびおよそ等しいＤＰ−１活性が、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であることを示す、請求項３２に記載の方法。
34. 発毛を刺激するための候補作用剤として化合物をスクリーニングするための方法であって、発毛を刺激するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定し；同じ条件下で、発毛を刺激するための候補作用剤であると考えられる化合物の非存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定するステップを含み、前記化合物の非存在下におけるよりも前記化合物の存在下におけるより低いＤＰ−２活性が、発毛を刺激するための候補作用剤であることを示す、上記方法。
35. 発毛を刺激するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定し；同じ条件下で、発毛を刺激するための候補作用剤であると考えられる化合物の非存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定するステップをさらに含み、前記化合物の存在下および非存在下でのより低いＤＰ−２活性およびおよそ等しいＤＰ−１活性が、発毛を刺激するための候補作用剤であることを示す、請求項３４に記載の方法。
36. 発毛を阻害するための候補作用剤として化合物をスクリーニングする方法であって、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下でＤＰ−２活性を測定し；同じ条件下で、プロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定するステップを含み、プロスタグランジンＤ２の存在下でのＤＰ−２活性と等しいまたはそれよりも大きな、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる前記化合物のＤＰ−２活性が、発毛を阻害するための候補作用剤であることを示す、上記方法。
37. 発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下で、ＤＰ−１活性を測定し；同じ条件下で、プロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定するステップをさらに含み、プロスタグランジンＤ２の存在下でのＤＰ−２活性と等しいまたはそれよりも大きな、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる前記化合物のＤＰ−２活性、およびプロスタグランジンＤ２の存在下でのＤＰ−１活性と等しいまたはそれ未満である、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる前記化合物のＤＰ−１活性が、発毛を阻害するための候補作用剤であることを示す、請求項３６に記載の方法。
38. 男性型脱毛症を治療するための候補作用剤として複数の化合物をスクリーニングするための方法であって、複数の化合物の各化合物について、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定し；同じ条件下で、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であると考えられる化合物の非存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定するステップを含み、前記化合物の非存在下におけるよりも前記化合物の存在下におけるより低いＤＰ−２活性が、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であることを示す、上記方法。
39. 複数の化合物の各化合物について、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下でＤＰ−１活性を測定し；同じ条件下で、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であると考えられる化合物の非存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定するステップをさらに含み、前記化合物の存在下および非存在下でのより低いＤＰ−２活性およびおよそ等しいＤＰ−１活性が、男性型脱毛症を治療するための候補作用剤であることを示す、請求項３８に記載の方法。
40. 発毛を刺激するための候補作用剤として複数の化合物をスクリーニングするための方法であって、複数の化合物の各化合物について、発毛を刺激するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定し；同じ条件下で、発毛を刺激するための候補作用剤であると考えられる化合物の非存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定するステップを含み、前記化合物の非存在下におけるよりも前記化合物の存在下におけるより低いＤＰ−２活性が、発毛を刺激するための候補作用剤であることを示す、上記方法。
41. 複数の化合物の各化合物について、発毛を刺激するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定し；同じ条件下で、発毛を刺激する候補作用剤であると考えられる化合物の非存在下、且つプロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定するステップをさらに含み、より低いＤＰ−２活性、および前記化合物の非存在下におけるよりも前記化合物の存在下におけるおよそ等しいＤＰ−１活性が、発毛を刺激するための候補作用剤であることを示す、請求項４０に記載の方法。
42. 発毛を阻害するための候補作用剤として複数の化合物をスクリーニングするための方法であって、複数の化合物の各化合物について、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下で、ＤＰ−２活性を測定し；同じ条件下で、プロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−２活性を測定するステップを含み、プロスタグランジンＤ２の存在下でのＤＰ−２活性と等しいまたはそれよりも大きな発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる前記化合物のＤＰ−２活性が、発毛を阻害するための候補作用剤であることを示す、上記方法。
43. 複数の化合物の各化合物について、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる化合物の存在下で、ＤＰ−１活性を測定し；同じ条件下で、プロスタグランジンＤ２の存在下で、ＤＰ−１活性を測定するステップをさらに含み、プロスタグランジンＤ２の存在下でのＤＰ−２活性と等しいまたはそれよりも大きな、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる前記化合物のＤＰ−２活性、およびプロスタグランジンＤ２の存在下でのＤＰ−１活性と等しいまたはそれ未満である、発毛を阻害するための候補作用剤であると考えられる前記化合物のＤＰ−１活性が、発毛を阻害するための候補作用剤であることを示す、請求項４２に記載の方法。