ES2883565T3 - Compuestos antiinfecciosos - Google Patents

Abstract

Un compuesto que tiene la fórmula general I: **(Ver fórmula)** en la que X es CH o N; Y es CH, O o N; m es 0 o 1; n es 0 o 1; R1 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, metilo, etilo, t-butilo, fenilo, -NC(O)R5, -OR5, -C(O)R5, -C(O)OR5; R2 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno e hidroxilo; R3 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en metilo y etilo; R4 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, metilo, -metoxi y -CF3; R5 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en alquilheterociclo C1-C3, fenilo y bencilo; y sus sales farmacéuticamente aceptables; o un compuesto que tiene la fórmula general VII: **(Ver fórmula)** en la que X es CH o N R24 se selecciona, cada vez que aparece, independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo C1-C2, -metoxi, -CF3 y -OCF3; R25 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en metilo y etilo; R26 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, metilo, -metoxi y -CF3; y sus sales farmacéuticamente aceptables, o un compuesto que tiene la fórmula general VIII: **(Ver fórmula)** en la que X es CH2 o NH n es 0 o 1 R27 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en metilo y etilo; R28 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, metilo, -metoxi y -CF3; y sus sales farmacéuticamente aceptables, en el que el compuesto tiene una de las fórmulas 1-231, 238, 281-285, 289-300, 309-316, 325-328, 333-337, 340-350, como se muestra en la siguiente tabla **(Tabla)** , preferentemente una de las fórmulas 1-21, 23-24, 26, 28-33, 35-57, 59-77, 79-83, 85-87, 90-98, 100-102, 106-111, 113-116 118-124, 126-128, 130-142, 144-150, 153, 155-167, 169-184, 186-188, 190-197, 199, 201, 203-208, 210- 211, 213-214, 216, 218-231, 238, 281-285, 289-300, 309-316, 325-328, 333-337, 340-350, como se indica más arriba.

Description

DESCRIPCIÓN

Compuestos antiinfecciosos

Compuestos antiinfecciosos

La presente invención se refiere a compuestos de moléculas pequeñas y su uso en el tratamiento de infecciones bacterianas, en particular la tuberculosis.

Antecedentes de la invención

La tuberculosis (TB) sigue cobrándose la vida de más de 1,8 millones de personas cada año. El uso inadecuado de la quimioterapia ha conducido a un número creciente de tuberculosis multirresistente (MDR), y es probable que la situación empeore con la aparición y propagación de la forma de la enfermedad resistente a los medicamentos (Chaisson R.E.& Nuermberger E.L., N Engl J Med 2012 Zhao Y. et al., N Engl J Med 2012). La necesidad clínica más urgente es descubrir agentes potentes capaces de reducir el tiempo de tratamiento de la tuberculosis M-XDR con una tasa de éxito comparable a la de la tuberculosis susceptible. En la última década se han descubierto nuevas y prometedoras clases de agentes para el tratamiento de la tuberculosis (Stover C.K. et al. Naturaleza 2000 Andreis K. et al. Ciencia 2005 Makarov V. et al. Ciencia 2009), varios de los cuales están actualmente en desarrollo clínico (Diacon A.H. et al. Antimicrob Agents Chemother 2010 Diacon A.H. et al. Antimicrob Agents Chemother 2012 Gler M.T. et al. N Engl J Med 2012). Sin embargo, dada la elevada tasa de desgaste durante el desarrollo clínico y la aparición de resistencias, es evidente que se necesita descubrir más candidatos clínicos.

La quimioterapia actual consiste en compuestos que se dirigen directamente al bacilo Mycobacterium tuberculosis, dirigiéndose a la síntesis de macromoléculas como el ADN, el ARN o la síntesis de proteínas, o a componentes clave de la pared celular. Los fármacos antituberculosos específicos más utilizados, la isoniazida, la etionamida y la pirazinamida, son profármacos que requieren primero una activación. Como formas activas, demuestran una actividad inhibidora sobre todo de la síntesis de la pared celular y/o sobre una amplia gama de objetivos micobacterianos, que aún no han sido completamente caracterizados.

Uno de los obstáculos más difíciles en el descubrimiento de nuevos fármacos antituberculosos es la falta de métodos de cribado in vitro predictivos que reproduzcan las características críticas encontradas in vivo. Aunque todavía se desconocen los mecanismos biológicos que subyacen a la persistencia del bacilo tuberculoso, es decir, la localización y el estado de las bacterias latentes en los seres humanos, se cree que M. tuberculosis persiste en los granulomas primarios (Lenaerts et a l, 2007) y dentro de varios tipos de células (Houben et al., 2006; Neyrolles et al., 2006). El bacilo se localiza principalmente en el interior de las células fagocíticas, como los macrófagos y las células dendríticas, donde adapta drásticamente su metabolismo para sobrevivir al duro entorno de las células fagocíticas profesionales (Rohde et al., 2007; Schnappinger et al., 2003). Por lo tanto, desarrollamos y utilizamos una tecnología de cribado fenotípico de alto contenido en macrófagos infectados para identificar nuevos compuestos antituberculosos (WO2010003533A2), superando muchos de los numerosos y engorrosos pasos que implican otras metodologías (Arain et al., 1996). La tecnología tiene varias ventajas en comparación con los enfoques tradicionales de cribado fenotípico, ya que permite i) el cribado en condiciones fisiológicamente relevantes, lo que es notoriamente difícil en el campo (Pethe K. et al. Nat Commun 2010; Stanley S.A. et al., ACS Chem Biol 2012), ii) selección de compuestos no citotóxicos que penetren eficazmente en el interior de los macrófagos, y iii) selección de compuestos que sean sustratos pobres para los mecanismos de eflujo inducidos por los macrófagos (Adams K.N. et al. Cell 2011), comprimiendo así el tiempo de descubrimiento y optimización de nuevas moléculas líderes.

El documento WO 2011/113606 divulga las bencil aminocarbonil-imidazo[1,2-a]piridinas y su utilidad como compuestos antiinfecciosos.

El documento WO 2012/143796 divulga piperazina-1-il-bencil aminocarbonil-imidazo[1,2-a]piridinas y su utilidad como compuestos antiinflamatorios.

Ekins et al. (Chemistry and Biology, vol. 20, pp. 370-378) divulga modelos bayesianos para buscar compuestos con actividad celular antituberculosa.

Era un objeto de la presente invención identificar compuestos eficaces contra las infecciones bacterianas, en particular compuestos que impidieran la multiplicación de M. tuberculosis dentro del macrófago del huésped.

Descripción de la invención

La presente invención se refiere a compuestos de acuerdo con las reivindicaciones adjuntas.

En un aspecto, la presente invención se refiere a compuestos que tienen la fórmula general I:

en la que

X es CH o N;

Y es CH, O o N;

m es 0 o 1 ;

n es 0 o 1 ;

R1 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, metilo, etilo, t-butilo, fenilo, -NC(O)R5, -OR5, -C(O)R5, -C(O)OR5, cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido;

R2 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno e hidroxilo;

R3 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en metilo y etilo; R4 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, metilo, -metoxi y -CF3;

R5 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en alquilheterociclo C1-C3, fenilo y bencilo, cualquiera de los cuales está opcionalmente sustituido;

y sus sales farmacéuticamente aceptables; o un compuesto que tiene la fórmula general VII:

en la que

X es CH o N

R24 se selecciona, cada vez que aparece, independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógenos, alquilo C1-C2, -metoxi, -CF3 y -OCF3;

R25 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en metilo y etilo; R26 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, metilo, -metoxi y -CF3;

y sus sales farmacéuticamente aceptables, o un compuesto que tiene la fórmula general VIII:

en la que

X es CH²0 NH

n es 0 o 1

R²⁷ es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en metilo y etilo;

R²⁸ es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, metilo, -metoxi y -CF³;

y sus sales farmacéuticamente aceptables,

donde el compuesto tiene una de las fórmulas 1-231, 238, 281-285, 289-300, 309-316, 325-328, 333-337, 340-350, como se muestra más adelante.

El término "opcionalmente sustituido", tal y como se utiliza aquí, pretende indicar que un átomo de hidrógeno unido a un átomo miembro dentro de un grupo, o varios de estos átomos de hidrógeno, se sustituye por un grupo, como halógeno, incluido flúor, alquilo C¹-C³, haloalquilo C¹-C³, metilhidroxilo, COOMe, C(O)H, COOH, OMe o OCF³;

En una realización, la presente invención también se refiere a sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos según la presente invención.

El término "alquilo" se refiere a un radical hidrocarburo alifático saturado monovalente de cadena lineal o ramificada que tiene un número de átomos de carbono en el rango especificado. Así, por ejemplo, "alquilo C¹-C⁶" se refiere a cualquiera de los isómeros del alquilo hexilo y del alquilo pentilo, así como al n-, iso-, sec-, y t-butilo, n- e isopropilo, etilo y metilo.

El término "alquenilo" se refiere a un radical hidrocarburo alifático monovalente de cadena lineal o ramificada que contiene un doble enlace carbono-carbono y tiene un número de átomos de carbono en el rango especificado. Así, por ejemplo, "alkenilo C²-C⁶" se refiere a todos los isómeros hexenilo y pentenilo, así como al 1 -butenilo, 2-butenilo, 3-butenilo, isobutenilo, 1-propenilo, 2-propenilo y etenilo (o vinilo).

El término "cicloalquilo", solo o en combinación con cualquier otro término, se refiere a un grupo, como hidrocarburo cíclico opcionalmente sustituido o no sustituido, que tiene de tres a ocho átomos de carbono, a menos que se defina de otro modo. Así, por ejemplo, "cicloalquilo C³-C⁸" se refiere a ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo y ciclooctilo.

El término "haloalquilo" se refiere a un grupo alquilo, como se define aquí, que está sustituido con al menos un halógeno. Ejemplos de grupos "haloalquilo" de cadena lineal o ramificada útiles en la presente invención incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo y f-butilo sustituidos independientemente con uno o más halógenos. El término "haloalquilo" debe interpretarse de manera que incluya sustituyentes como -CHF² , -CF³ , -CH²-CH²-F, -CH²-CF³ , y similares.

El término "heteroalquilo" se refiere a un grupo alquilo en el que uno o más átomos de carbono se han sustituido por un heteroátomo, como O, N o S. Por ejemplo, si el átomo de carbono del grupo alquilo que está unido a la molécula madre se sustituye por un heteroátomo (p.ej, O, N, o S) los grupos heteroalquilos resultantes son, respectivamente, un grupo alcoxi( por ejemplo, -OCH³, etc.), una amina( por ejemplo, -NHCH³, -N(CH³)² , etc.), o un grupo tioalquilo (por ejemplo, -SCH³, etc.). Si un átomo de carbono no terminal del grupo alquilo que no está unido a la molécula madre se sustituye por un heteroátomo (por ejemplo, O, N o S) y los grupos heteroalquilos resultantes son, respectivamente, un éter de alquilo( por ejemplo, -CH²CH²-O-CH³, etc.), una amina de alquilo(por ejemplo, -CH²NHCH³, -CH²N(CH³)², etc.) o un éter de tioalquilo (por ejemplo, -CH²-S-CH³).

El término "halógeno" se refiere a flúor, cloro, bromo o yodo.

El término "fenilo", tal y como se utiliza en el presente documento, pretende indicar aquel grupo fenilo opcionalmente sustituido o no sustituido.

El término "bencilo", tal y como se utiliza en el presente documento, pretende indicar aquel grupo bencílico opcionalmente sustituido o no sustituido.

El término "heteroarilo" se refiere a (i) anillos heteroaromáticos de 5 y 6 miembros opcionalmente sustituidos y (ii) sistemas de anillos fusionados bicíclicos de 9 y 10 miembros opcionalmente sustituidos en los que al menos un anillo es aromático, en los que el anillo heteroaromático o el sistema de anillos fusionados bicíclicos contiene de 1 a 4 heteroátomos seleccionados independientemente de N, O y S, donde cada N está opcionalmente en forma de óxido y cada S en un anillo que no es aromático es opcionalmente S(O) o S(O)². Los anillos heteroaromáticos de 5 y 6 miembros adecuados incluyen, por ejemplo, piridilo, pirrolilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, triazinilo, tienilo, furanilo, imidazolilo, pirazolilo, triazolilo, tetrazolilo, oxazolilo, isooxazolilo, oxadiazolilo, tiazolilo, isotiazolilo y tiadiazolilo. Los sistemas de anillos fusionados heterobicíclicos de 9 y 10 miembros adecuados incluyen, por ejemplo, benzofuranoilo, indolilo, indazolilo, naftiridinilo, isobenzofuranoilo, benzopiperidinilo, benzisoxazolilo, benzoxazolilo, cromenilo, quinolinilo, isoquinolinilo, cinolinilo, quinazolinilo, tetrahidroquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo, isoindolilo, benzodioxolilo, benzofuranilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, benzotriazolilo, dihidroindolilo, dihidroisoindolilo, indazolilo, indolinilo, isoindolinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, 2,3-dihidrobenzofuranilo y 2,3-dihidrobenzo-1,4-dioxinilo.

El término "heterociclilo" se refiere a (i) anillos monocíclicos opcionalmente sustituidos de 4 a 8 miembros, saturados e insaturados pero no aromáticos, que contienen al menos un átomo de carbono y de 1 a 4 heteroátomos, (ii) sistemas de anillos bicíclicos opcionalmente sustituidos que contienen de 1 a 6 heteroátomos, y (iii) sistemas de anillos tricíclicos opcionalmente sustituidos, en los que cada anillo en (ii) o (iii) es independiente de la fusión o puente con el otro anillo o anillos y cada anillo es saturado o insaturado pero no aromático, y en los que cada heteroátomo en (i), (ii) y (iii) se selecciona independientemente de N, O y S, en los que cada N está opcionalmente en forma de óxido y cada S está opcionalmente oxidado a S(O) o S(O)2. Los heterociclilos saturados de 4 a 8 miembros adecuados incluyen, por ejemplo, azetidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, tiazolidinilo, isotiazolidinilo, oxazolidinilo, isoxazolidinilo, pirrolidinilo, imidazolidinilo piperazinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotienilo, pirazolidinilo, hexahidropirimidinilo, tiazinanilo, tiazepanilo, azepanilo, diazepanilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, dioxanilo y azaciclooctilo. Entre los anillos heterocíclicos insaturados adecuados se encuentran los correspondientes a los anillos heterocíclicos saturados enumerados en la frase anterior, en los que se sustituye un enlace simple por un enlace doble. Se entiende que los anillos y sistemas de anillos específicos adecuados para su uso en la presente invención no se limitan a los enumerados en este párrafo y en los anteriores. Estos anillos y sistemas de anillos son meramente representativos.

El término "MIC80" se refiere a la concentración del compuesto que inhibe el crecimiento bacteriano, preferentemente el crecimiento de M. tuberculosis, en comparación con un control sin ningún fármaco después de cinco días en un 80%.

De acuerdo con las reivindicaciones adjuntas, la presente invención se refiere a compuestos que tienen una de las fórmulas 1-231,238, 281-285, 289-300, 309-316, 325-328, 333-337, 340-350, como se muestra en las Tablas 1 y 2, preferentemente una de las fórmulas 1-21, 23-24, 26, 28-33, 35-57, 59-77, 79-83, 85-87, 90-98, 100-102, 106-111, 113-116 118-124, 126-128, 130-142, 144-150, 153, 155-167, 169-184, 186-188, 190-197, 199, 201,203-208, 210-211, 213-214, 216, 218-231, 238, 281-285, 289-300, 309-316, 325-328, 333-337, 340-350 como se muestra en las Tablas 1 y 2, y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas. Los compuestos particularmente preferidos son los que tienen una de las fórmulas 55, 171, 175 y 325 como se muestra en las tablas 1 y 2. Su actividad farmacéutica también se muestra en la figura 1.

Preferentemente, los compuestos definidos anteriormente tienen una actividad inhibidora del crecimiento bacteriano, preferentemente del crecimiento de M. tuberculosis, dentro de una célula huésped, preferentemente un macrófago, a una concentración entre 1-20 pM, preferentemente inferior a 1 pM. Preferentemente, los compuestos definidos anteriormente tienen una MICs0 inferior a 1 pM.

En un aspecto, la presente invención se refiere a compuestos como los definidos anteriormente para su uso en el tratamiento de una infección bacteriana, por ejemplo, la tuberculosis.

En un aspecto, la presente invención se refiere a compuestos como los definidos anteriormente para su uso en el tratamiento de la Tuberculosis.

En un aspecto, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende un compuesto como el definido anteriormente, y un portador farmacéuticamente aceptable.

También se divulga un método de tratamiento de una infección bacteriana, en particular la tuberculosis, que comprende la aplicación de una cantidad adecuada de un compuesto como se ha definido anteriormente o de una composición farmacéutica como se ha definido anteriormente a una persona que lo necesite.

En una realización, una "cantidad adecuada", tal como se utiliza aquí, se refiere a una cantidad en el rango de 0,01 mg/kg de peso corporal a 1 g/kg de peso corporal.

Composiciones farmacéuticas

Sales farmacéuticamente aceptables

Los ejemplos de sales de adición farmacéuticamente aceptables incluyen, sin limitación, las sales de adición de ácidos inorgánicos y orgánicos no tóxicos como el acetato derivado del ácido acético, el aconato derivado del ácido acóntico, el ascorbato derivado del ácido ascórbico, el bencenosulfonato derivado del ácido bencensulfónico, el benzoato derivado del ácido benzoico, el cinamato derivado del ácido cinámico, el citrato derivado del ácido cítrico, el embonato derivado del ácido embónico, el enantato derivado del ácido enántico, el formiato derivado del ácido fórmico, el fumarato derivado del ácido fumárico, el glutamato derivado del ácido glutámico, el glicolato derivado del ácido glicólico, el clorhidrato derivado del ácido clorhídrico, el hidrobromuro derivado del ácido bromhídrico, el lactato derivado del ácido láctico, el maleato derivado del ácido maleico, el malonato derivado del ácido malónico, el mandelato derivado del ácido mandélico, el metanosulfonato derivado del ácido metano sulfónico, el naftaleno-2-sulfonato derivado del ácido naftaleno-2-sulfónico, el nitrato derivado del ácido nítrico, el perclorato derivado del ácido perclórico, el fosfato derivado del ácido fosfórico, el ftalato derivado del ácido ftálico, el salicilato derivado del ácido salicílico, el sorbato derivado del ácido sórbico, el estearato derivado del ácido esteárico, el succinato derivado del ácido succínico, el sulfato derivado del ácido sulfúrico, el tartrato derivado del ácido tartárico, el tolueno-p-sulfonato derivado del ácido p-tolueno sulfónico, y similares. Dichas sales pueden formarse por procedimientos bien conocidos y descritos en la técnica.

Otros ácidos, como el ácido oxálico, que pueden no considerarse farmacéuticamente aceptables, pueden ser útiles en la preparación de sales útiles como intermedios en la obtención de un compuesto químico de la invención y su sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable.

En otra realización, los compuestos de la invención se utilizan en su respectiva forma de base libre según la presente invención.

Las sales metálicas de un compuesto químico de la invención incluyen sales de metales alcalinos, como la sal de sodio de un compuesto químico de la invención que contiene un grupo carboxi.

Los compuestos químicos de la invención pueden proporcionarse en formas no solubles o solubles junto con un disolvente(s) farmacéuticamente aceptable(s) como agua, etanol y similares. Las formas disueltas también pueden incluir formas hidratadas como el monohidrato, el dihidrato, el hemihidrato, el trihidrato, el tetrahidrato y similares. En general, las formas solvatadas se consideran equivalentes a las formas no solvatadas a efectos de esta invención.

Administración y formulación

La producción de medicamentos que contengan los compuestos de la invención, sus metabolitos activos o isómeros y sales según la invención y su aplicación puede realizarse según métodos farmacéuticos conocidos.

Aunque los compuestos de la invención, utilizables según la invención para su uso en terapia, pueden administrarse en forma del compuesto químico en bruto, se prefiere introducir el ingrediente activo, opcionalmente en forma de una sal fisiológicamente aceptable en una composición farmacéutica junto con uno o más adyuvantes, excipientes, portadores, tampones, diluyentes y/o otros auxiliares farmacéuticos habituales. Dichas sales de los compuestos de la invención pueden ser anhidras o solvatadas.

En una realización preferida, la invención proporciona medicamentos que comprenden un compuesto utilizable según la invención, o una sal o derivado farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables del mismo, y, opcionalmente, otros ingredientes terapéuticos y/o profilácticos. El portador o portadores deben ser "aceptables" en el sentido de que sean compatibles con los demás ingredientes de la formulación y no sean perjudiciales para el receptor de la misma.

Un medicamento de la invención puede ser el adecuado para la administración oral, rectal, bronquial, nasal, tópica, bucal, sublingual, transdérmica, vaginal o parenteral (incluyendo la inyección o infusión cutánea, subcutánea, intramuscular, intraperitoneal, intravenosa, intraarterial, intracerebral, intraocular), o aquellos en una forma adecuada para la administración por inhalación o insuflación, incluyendo polvos y administración de aerosoles líquidos, o por sistemas de liberación sostenida. Ejemplos adecuados de sistemas de liberación sostenida incluyen matrices semipermeables de polímeros sólidos hidrofóbicos que contienen el compuesto de la invención, cuyas matrices pueden estar en forma de artículos moldeados, por ejemplo, películas o microcápsulas.

Los compuestos utilizables según la invención, junto con un adyuvante, portador o diluyente convencional, pueden colocarse así en forma de medicamento y dosis unitarias del mismo. Dichas formas incluyen los sólidos, y en particular los comprimidos, las cápsulas rellenas, los polvos y los gránulos, y los líquidos, en particular las soluciones acuosas o no acuosas, las suspensiones, las emulsiones, los elixires y las cápsulas rellenas de los mismos, todos ellos para uso oral, los supositorios para administración rectal y las soluciones inyectables estériles para uso parenteral. Dicho medicamento y sus formas de dosificación unitarias pueden comprender ingredientes convencionales en proporciones convencionales, con o sin compuestos o principios activos adicionales, y dichas formas de dosificación unitarias pueden contener cualquier cantidad efectiva adecuada del ingrediente activo acorde con el rango de dosificación diaria que se pretende emplear.

Los compuestos utilizables según la invención pueden administrarse en una amplia variedad de formas de dosificación oral y parenteral. Será obvio para los expertos en la materia que las siguientes formas de dosificación pueden comprender, como componente activo, un compuesto(s) utilizable según la invención o una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto(s) utilizable según la invención.

Para preparar un medicamento a partir de un compuesto utilizable según la invención, los portadores farmacéuticamente aceptables pueden ser sólidos o líquidos. Los preparados en forma sólida incluyen polvos, comprimidos, píldoras, cápsulas, sellos, supositorios y gránulos dispersables. Un portador sólido puede ser una o más sustancias que también pueden actuar como diluyentes, agentes aromatizantes, solubilizantes, lubricantes, agentes de suspensión, aglutinantes, conservantes, agentes desintegradores de comprimidos o un material de encapsulación.

En los polvos, el portador es un sólido finamente dividido que está en una mezcla con el componente activo finamente dividido. En los comprimidos, el componente activo se mezcla con el soporte que tiene la capacidad de unión necesaria en proporciones adecuadas y se compacta en la forma y tamaño deseados. Los portadores adecuados son el carbonato de magnesio, el estearato de magnesio, el talco, el azúcar, la lactosa, la pectina, la dextrina, el almidón, la gelatina, el tragacanto, la metilcelulosa, la carboximetilcelulosa sódica, una cera de baja fusión, la manteca de cacao y similares. El término "preparación" pretende incluir la formulación del compuesto activo con material encapsulante como portador, proporcionando una cápsula en la que el componente activo, con o sin portadores, está rodeado por un portador, que está así en asociación con él. Asimismo, se incluyen los sellos y las pastillas. Los comprimidos, polvos, cápsulas, píldoras, sellos y pastillas pueden utilizarse como formas sólidas adecuadas para la administración oral.

Para preparar los supositorios, se funde primero una cera de baja fusión, como una mezcla de glicéridos de ácidos grasos o manteca de cacao, y el componente activo se dispersa homogéneamente en ella, como por agitación. A continuación, la mezcla homogénea fundida se vierte en moldes de tamaño adecuado, se deja enfriar y se solidifica. Las composiciones adecuadas para la administración vaginal pueden presentarse como pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o aerosoles que contengan, además del ingrediente activo, los portadores que se conocen en la técnica como adecuados. Los preparados líquidos incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones, por ejemplo, soluciones de agua o de agua-propilenglicol. Por ejemplo, las preparaciones líquidas de inyección parenteral pueden formularse como soluciones en solución acuosa de polietilenglicol.

Los compuestos químicos según la presente invención pueden, por tanto, formularse para su administración parenteral (por ejemplo, mediante inyección, por ejemplo, inyección en bolo o infusión continua) y pueden presentarse en forma de dosis unitaria en ampollas, jeringas precargadas, infusión de pequeño volumen o en envases multidosis con un conservante añadido. Las composiciones pueden adoptar formas tales como suspensiones, soluciones o emulsiones en vehículos oleosos o acuosos, y pueden contener agentes de formulación tales como agentes de suspensión, estabilización y/o dispersión. Alternativamente, el ingrediente activo puede estar en forma de polvo, obtenido por aislamiento aséptico del sólido estéril o por liofilización a partir de la solución, para su constitución con un vehículo adecuado, por ejemplo, agua estéril y libre de pirógenos, antes de su uso.

Las soluciones acuosas adecuadas para el uso oral pueden prepararse disolviendo el componente activo en agua y añadiendo colorantes, aromas y agentes estabilizadores y espesantes adecuados, según se desee. Las suspensiones acuosas adecuadas para uso oral pueden hacerse dispersando el componente activo finamente dividido en agua con material viscoso, como gomas naturales o sintéticas, resinas, metilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica u otros agentes de suspensión bien conocidos.

También se incluyen las preparaciones en forma sólida que están destinadas a convertirse, poco antes de su uso, en preparaciones en forma líquida para su administración oral. Estas formas líquidas incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones. Estos preparados pueden contener, además del componente activo, colorantes, aromatizantes, estabilizadores, tampones, edulcorantes artificiales y naturales, dispersantes, espesantes, agentes solubilizantes y similares.

En una realización de la presente invención, el medicamento se aplica por vía tópica o sistémica o mediante una combinación de ambas vías.

Para su administración, los compuestos de la presente invención pueden, en una realización, administrarse en una formulación que contenga entre el 0,001% y el 70% por peso del compuesto, preferiblemente entre el 0,01% y el 70% por peso del compuesto, incluso más preferido entre el 0,1% y el 70% por peso del compuesto. En una realización, una cantidad adecuada del compuesto administrado está en el rango de 0,01 mg/kg de peso corporal a 1 g/kg de peso corporal.

Las composiciones adecuadas para la administración también incluyen pastillas que comprenden el agente activo en una base aromatizada, generalmente sacarosa y acacia o tragacanto; pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base inerte como gelatina y glicerol o sacarosa y acacia; y enjuagues bucales que comprenden el ingrediente activo en un portador líquido adecuado.

Las soluciones o suspensiones se aplican directamente en la cavidad nasal por medios convencionales, por ejemplo con un gotero, una pipeta o un espray. Las composiciones pueden suministrarse en forma de monodosis o multidosis. En el último caso de un cuentagotas o una pipeta, esto puede lograrse mediante la administración por parte del paciente de un volumen adecuado y predeterminado de la solución o suspensión. En el caso de un pulverizador, esto puede lograrse, por ejemplo, mediante una bomba de pulverización de dosificación.

La administración al tracto respiratorio también puede lograrse mediante una formulación en aerosol en la que el ingrediente activo se proporciona en un envase presurizado con un propulsor adecuado, como un clorofluorocarbono (CFC), por ejemplo diclorodifluorometano, triclorofluorometano o diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono u otro gas adecuado. El aerosol también puede contener convenientemente un tensioactivo como la lecitina. La dosis del fármaco puede controlarse mediante la provisión de una válvula dosificadora.

Alternativamente, los ingredientes activos pueden proporcionarse en forma de polvo seco, por ejemplo, una mezcla de polvo del compuesto en una base de polvo adecuada como la lactosa, el almidón, los derivados del almidón como la hidroxipropilmetilcelulosa y la polivinilpirrolidona (PVP). Convenientemente, el portador de polvo formará un gel en la cavidad nasal. La composición en polvo puede presentarse en forma de dosis unitaria, por ejemplo, en cápsulas o cartuchos de, por ejemplo, gelatina, o en envases tipo blíster desde los que el polvo puede administrarse mediante un inhalador.

En las composiciones destinadas a la administración en el tracto respiratorio, incluidas las composiciones intranasales, el compuesto tendrá generalmente un tamaño de partícula pequeño, por ejemplo del orden de 5 micras o menos. Este tamaño de partícula puede obtenerse por medios conocidos en la técnica, por ejemplo, por micronización.

Cuando se desee, pueden emplearse composiciones adaptadas para dar una liberación sostenida del ingrediente activo.

Los preparados farmacéuticos se presentan preferentemente en formas farmacéuticas unitarias. En esta forma, el preparado se subdivide en dosis unitarias que contienen cantidades adecuadas del componente activo. La forma de dosificación unitaria puede ser un preparado envasado, cuyo envase contiene cantidades discretas de preparado, como comprimidos envasados, cápsulas y polvos en viales o ampollas. Además, la forma de dosificación unitaria puede ser una cápsula, un comprimido, un sello o una pastilla propiamente dicha, o puede ser el número adecuado de cualquiera de ellos en forma de paquete. Los comprimidos o cápsulas para la administración oral y los líquidos para la administración intravenosa y la infusión continua son las composiciones preferidas.

Pueden encontrarse más detalles sobre las técnicas de formulación y administración en la última edición de Remington's Pharmaceutical Sciences (Maack Publishing Co. Easton, Pa.).

Figuras y tablas

Se hace referencia ahora a las figuras y tablas, en las que la Figura 1 muestra la eficacia in vivo de los compuestos 171 y 175 en un modelo murino de infección aguda de tuberculosis.

La tabla 1 resume los derivados de imidazopiridina (andamios generales I-VId) con sus respectivas actividades inhibitorias.

La Tabla 2 resume los compuestos 1-350 en términos de sus estructuras y características correspondientes.

Ejemplos

La invención se describe ahora con referencia a los siguientes ejemplos que pretenden ilustrar, no limitar el alcance de la invención.

Ejemplo 1: Determinación de la Concentración Mínima Inhibitoria 80% (MICso) de nuevas entidades químicas contra M. tuberculosis

Los ensayos basados en células son herramientas clave en la búsqueda de pistas y la optimización de nuevas entidades químicas para Mycobacterium tuberculosis. La disponibilidad de un ensayo in vitro robusto para probar la concentración mínima inhibitoria (MIC) de una nueva entidad química es un requisito absoluto para el éxito de un programa. Se seleccionó el ensayo de dilución en caldo en microplaca utilizando una cepa de M. tuberculosis que expresa la proteína verde-fluorescente (GFP), ya que este método i) ofrece resultados altamente reproducibles, ii) permite el cribado de un gran número de compuestos, y iii) puede ser parcialmente automatizado si es necesario. Brevemente, se preparó un cultivo inicial de M. tuberculosis diluyendo una alícuota congelada en 50mL de medio 7H9 suplementado con glicerol, hasta una densidad óptica a 600nM (OD600) de 0,02. El cultivo se incubó durante 3 días a 37°C hasta alcanzar una DO600 de 0,2-0,3. Las bacterias se cosecharon por centrifugación a 3.000 rpm, se lavaron una vez y se resuspendieron hasta una DO600 de 0,1 en medio 7H9 sin glicerol. Finalmente se ajustó la DO600 a 0,02 y se mantuvo el cultivo a temperatura ambiente antes de dispensarlo en la placa de ensayo.

El ensayo se realizó en microplacas de fondo plano de 384 pocillos en un volumen final de 50pl. Se añadieron 25|jl del cultivo de trabajo bacteriano preparado a la placa de prueba de compuestos que contenía 0,5|jl de compuestos de prueba diluidos en serie.

Las placas se incubaron a 37°C durante 5 días. El crecimiento bacteriano se determinó tras 5 días de incubación midiendo la intensidad de la fluorescencia a 488 nm tras 5 días de incubación utilizando el lector de placas SPECTRA MAX plus (Molecular Devices®). La MICs0, la concentración del compuesto que inhibe el crecimiento en comparación con el control libre de fármacos después de 5 días en un 80%, se determinó utilizando el software Graph Pad PRISM®.

Ejemplo 2: Derivación del andamio general de imidazopiridina

Los compuestos de imidazopiridina (andamios I - IX; véase la Tabla 1) se sometieron a derivatización según los métodos descritos a continuación (esquemas 1-22). Se examinaron los derivados resultantes para determinar la actividad inhibitoria (MIC) utilizando los ensayos descritos anteriormente (Ejemplo 1) y los resultados se resumen en la Tabla 1. Los compuestos sintetizados 1-350 se muestran en la Tabla 2.

Procedimiento general para la síntesis de A1

A una solución de 3-oxopentanoato de metilo (200 g, 1,55 mol) en DCM anhidro (500 mL) se añadió SO²C^h (220 g, 1,63 mol) gota a gota a 0 °C, luego la mezcla se agitó a 25 °C durante 16 horas. La mezcla de reacción se vertió en agua (500 mL). La capa orgánica se separó y se lavó con agua (500 mL*3), salmuera (500 mL), se secó sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentró a presión reducida para obtener el compuesto A1 (245 g, rendimiento: 96%) como un aceite incoloro que se utilizó para el siguiente paso sin más purificación.

Procedimiento general para la síntesis de A2

A una solución de 5-bromopiridina-2-amina (10,0 g, 57,8 mmol) en MeOH (10 mL) se añadió el compuesto A1 (10,5 g, 63,6 mmol) gota a gota a 25 °C, luego la mezcla se agitó a reflujo durante 16 horas. La mezcla de reacción se concentró. El residuo se repartió entre EtOAc (100 mL) y agua (100 mL). La capa orgánica se separó y se lavó con agua (100 mL x 3), salmuera (100 mL), se secó sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante combi flash (PE: EtOAc = 4: 1) para obtener el compuesto A2 (4,00 g, rendimiento: 25%) como un polvo amarillo.

Procedimiento general para la síntesis de A3

A una solución del compuesto A2 (3,00 g, 10,6 mmol) en THF (40 mL) y MeOH (20 mL) se añadió NaOH 2N (40 mL) a 25 °C, luego la mezcla se agitó a 25 °C durante 16 horas. La mayor parte del MeOH y del THF se evaporó a presión reducida. La mezcla se lavó entonces con DCM (40 mL x 2). A continuación, la capa acuosa se acidificó con HCl hasta alcanzar un pH = 6, y no se precipitó ningún sólido. La fase acuosa se concentró a presión reducida y se suspendió en DCM/ MeOH= 5: 1 (40 mL) bajo agitación. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto A3 (2,60 g, rendimiento: 91%) como polvo blanco.

Procedimiento general para la síntesis de A4

A una solución del compuesto A3 (60 mg, 0,224 mmol), HOBt (45 mg, 0,336 mmol), EDCI (86 mg, 0,448 mmol) en 1,5 mL de DMF se añadió NMM (136 mg, 1,34mmol). La mezcla se agitó a 20°C durante 10 minutos. A continuación, se añadió (4-(4-fenilpiperidin-1-il)fenil)metanamina (40 mg, 0,212 mmol) a la mezcla y se agitó a 30°C durante 18 horas. Se añadieron 15 mL de agua a la mezcla y se formó el sólido. La mezcla se filtró y la torta de filtración se disolvió en 20 mL de DCM y se concentró a presión reducida para dar el producto crudo A4, que se trituró con 3 mL x 2 de CH³OH dos veces y 3 mL de CH³CN en secuencia y luego se filtró y la torta de filtración se secó para dar el producto puro A4 (12 mg, 12%) como un sólido blanco

Procedimiento general para la síntesis de B1

A una suspensión del compuesto 1-bromo-4-(trifluorometil)benceno (20,0 g, 89,3 mmol), el compuesto 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidropiridina-1(2H)-carboxilato de terc-butilo (32,1 g, 107 mmol) en DMF (200 mL) se añadió K2CO3 (30,3 g, 223 mmol) y PdCh(dppf) (1,33 g, 1,79 mmol) bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a 80 °C bajo nitrógeno durante 16 horas. La TLC y la LCMS mostraron que la reacción había terminado. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se repartió entre agua (200 mL) y EtOAc (400 mL). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (400 mL*2). Los extractos combinados se lavaron con agua (100 mL*2), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron a presión reducida. La presión del residuo se purificó mediante combi flash (Eluyentes: PE : THF = 19 : 1) para obtener el compuesto Y05_1A (16,0 g, 54,6% de rendimiento) como un aceite amarillo.

Procedimiento general para la síntesis de B2

A una solución de B1 (16,0 g, 48,8 mmol) en MeOH (250 mL) se añadió Pd/C (10%, 2,50 g) bajo atmósfera de Ar. La suspensión se desgasificó al vacío y se purgó con H2 durante 3 veces. La mezcla de reacción se agitó a 20°C bajo atmósfera de H2 (276 kPa) durante 24 horas. La LCMS mostró que la reacción había terminado. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de celita y la torta del filtro se lavó con MeOH (50 mL*3). Los filtrados combinados se concentraron a presión reducida hasta sequedad para dar el compuesto B2 (14,0 g, 86,9% de rendimiento) como un aceite incoloro.

Procedimiento general para la síntesis de B3

Una solución del compuesto B2 (14,0 g, 42,4 mmol) en HCl/dioxano (4N, 140 mL) se agitó a 25 °C durante 3 horas. La LCMS mostró que la reacción había terminado. La mezcla de reacción se concentró hasta sequedad para dar el compuesto B3 (14,0 g de rendimiento del 92,1%) como un sólido blanco.

Procedimiento general para la síntesis de B4

A una solución del compuesto B3 (8,98 g, 39,0 mmol) y del 4-fluorobenzonitrilo (5,20 g, 43,0 mmol) en DMSO anhidro (100 mL) se añadió K2CO3 (26,9 g, 195 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 120 °C durante 16 horas. La LCMS indicó que la reacción había terminado. La mezcla se vertió en agua (200 mL) y se recogió por filtración. El sólido se disolvió en EtOAc (600 mL) que se lavó con agua (200 mL*3) y se lavó con salmuera (200 mL*3), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo se trituró con n-hexano (100 mL) para obtener el compuesto B4 (11,0 g, 85,5% de rendimiento) como un sólido blanco.

Procedimiento general para la síntesis de B5

A una suspensión del compuesto B4 (7,00 g, 21,2 mmol) en THF anhidro (120 mL) se añadió LiAlH4 (4,10 g, 108 mmol) a 0~10 °C. La mezcla de reacción se sometió a reflujo durante 3 horas. La TLC y la LCMS mostraron que la reacción había terminado. La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se apagó con agua (4,1 mL), NaOH (10%, 4,1 mL) y THF (120 mL) cuidadosamente. La mezcla se filtró y el filtrado se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo se trituró con n-hexano (100 mL) para obtener el compuesto Y05 (5,60 g, crudo) como sólido blanco. A una solución de B5 (5,60 g, crudo), en MeOH (150 mL) se añadió Boc2O (9,42 g, 42,4 mmol). La mezcla se agitó a unos 18 °C durante 2 horas. La LCMS mostró que la reacción había terminado. La solución se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante combi flash (Eluyentes: THF/PE = 1/20) para dar el compuesto Y05_Boc (5,80 g, crudo). Una mezcla de B5_Boc en HCl/dioxano (4N, 80 mL) se agitó a 18 °C durante 3 horas. La LCMS mostró que la reacción había terminado. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida para dar el compuesto B5 (5,10 g de rendimiento del 72,0%) como un sólido blanco

Esquema 3

Procedimiento general para la síntesis de C1

A una suspensión de 1-bromo-4-(trifluorometoxi)benceno (20,0 g, 83,0 mmol), piperazina-1-carboxilato de terc-butilo compuesto (18,6 g, 99,6 mmol) en dioxano (100 mL) se añadió Cs2CO3 (37,8 g, 166 mmol) y Pd2(dba)3 (1,20 g), Xantphos (1,20 g) bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a 120 °C bajo nitrógeno durante 16 horas. La TLC y la LCMS mostraron que la reacción había terminado. Se añadió agua (200 mL) y la mezcla se extrajo con EtOAc (100 mL*3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 mL*2), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron a presión reducida. El residuo se trituró con MTBE (50 mL) para obtener el compuesto c1 (18,8 g, 65% de rendimiento) como un sólido rojo.

Procedimiento general para la síntesis de C2

Una solución del compuesto C1 (18,8 g, 54,0 mmol) en HCl/dioxano (4N, 250 mmol) se agitó a 25 °C durante 3 horas. La LCMS mostró que la reacción había terminado. La mezcla de reacción se concentró para dar el compuesto C2 (13,3 g, crudo), que se utilizó para el siguiente paso directamente.

Procedimiento general para la síntesis de C3

A una solución del compuesto C2 (13,3 g, 54,0 mmol) y del 4-fluorobenzonitrilo (7,20 g, 59,4 mmol) en DMSO anhidro (150 mL) se añadió K2CO3 (30,0 g, 216 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 120 °C durante 16 horas. La LCMS indicó que la reacción había terminado. La mezcla se vertió en agua (600 mL) y se recogió por filtración. El sólido se disolvió en EtOAc (500 mL), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo se trituró con n-Hexano/MTBE para obtener el compuesto C3 (11,8 g, 62,9% de rendimiento) como sólido marrón.

Procedimiento general para la síntesis de C4

A una suspensión del compuesto C3 (11,8 g, 34,0 mmol) en THF anhidro (150 mL) se añadió LiAlH4 (6,50 g, 170 mmol) a 0~10 °C. La mezcla de reacción se sometió a reflujo durante 3 horas. La TLC y la LCMS mostraron que la reacción había terminado. La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se apagó con agua (6,5 mL), NaOH (10%, 6,5 mL) y THF (100 mL) cuidadosamente. La mezcla se filtró y el filtrado se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo se trituró con n-Hexano/MTBE para obtener el compuesto C4 (5,37 g, 45 % de rendimiento) como sólido amarillo

Procedimiento general para la síntesis de D1

A una solución del compuesto 4-(4-aminopiperidin-1-yl)benzonitrilo (500 mg, 2,48 mmol) en THF anhidro (5 mL) se añadió TEA (754 mg, 7,45 mmol) seguido de cloruro de (4-Fluoro-fenil)-acetilo (514 mg, 2,98 mmol) a 0 °C. Después de agitar a la temperatura durante 0,5 horas, se dejó que la mezcla se calentara a 20 °C y se agitó durante 16 horas. La mezcla de reacción se diluyó con agua (100 mL), se extrajo con EtOAc (50 mL*3). Los extractos se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para dar un residuo que se purificó mediante columna de gel de sílice (eluyente: PE/EA = 4/1 a 1/2) para obtener 380 mg (rendimiento: 45%) de D1 como sólido blanco.

Procedimiento general para la síntesis de D2

A una solución del compuesto D1 (380 mg, 1,13 mmol) en MeOH (10 mL) se añadió Raney-Ni (50 mg). Tras agitar a 20 °C durante 2 horas, la mezcla se filtró y el filtrado se concentró para dar el producto bruto, que se purificó mediante una columna de gel de sílice (eluyente: DCM/MeOH = 30/1 a 10/1) para obtener 150 mg (rendimiento: 39%) de D2 como sólido blanco

E3

Esciuema 5

Procedimiento general para la síntesis de E1

Una mezcla de 4-fluoro-benzonitrilo (5,00 g, 41,3 mmol), piperidin-4-ol (8,35 g, 82,6 mmol) y K2CO3 (5,71 g, 41,3 mmol) en DMSO (50 mL) se agitó a 120 °C durante 16 horas. La mezcla se diluyó con agua (100 mL), se extrajo con EtOAc (100 mL*3). Los extractos combinados se lavaron con agua (100 mL) y salmuera (100 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron para dar un residuo. El residuo se purificó mediante una columna de gel de sílice (eluyente: PE/EtoAc = 5/1 a 1/1) para obtener 4,70 g (rendimiento: 57%) de E1 como sólido blanco.

Procedimiento general para la síntesis de E2

A una solución del compuesto E1 (1,00 g, 4,94 mmol) en DMF (10 mL) se añadió NaH (dispersión al 60% en aceite mineral, 237 mg, 5,93 mmol) a 0 °C. Después de agitar a 0 °C durante 0,5 horas, se añadió bromometilbenceno (930 mg, 5,4 mmol) a la mezcla a 0 °C. A continuación, se dejó que la mezcla se calentara hasta 20 °C y se agitó durante 16 horas. La reacción se apagó con agua (100 mL) y se extrajo con EtOAc (50 mL*3). Los extractos combinados se lavaron con agua (100 mL) y salmuera (100 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron para dar un residuo. El residuo se purificó mediante una columna de gel de sílice (eluyente: PE/EtOAc = 4/1 a 1/1) para obtener 1,10 g (rendimiento: 78%) de E2 como sólido blanco.

Procedimiento general para la síntesis de E3

A una solución del compuesto E2 (1,00 g, 3,42 mmol) en THF anhidro (10 mL) se añadió LiAlH4 (390 mg, 10,2 mmol) a 0 °C. Tras agitar a 0 °C durante 0,5 horas, se dejó que la mezcla se calentara a 20 °C y se agitó durante 0,5 horas. La reacción se apagó con solución de NaOH (0,5 mL), se diluyó con agua (50 mL), se extrajo con EtOAc (50 mL*3). Los extractos se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para dar un residuo que se purificó mediante columna de gel de sílice (eluyente: DCM/MeOH = 20/1) para obtener 350 mg (rendimiento: 35%) de E3 como sólido blanco

Procedimiento general para la síntesis de F1

Una mezcla de 4-fluoro benzonitrilo (10,0 g, 82,0 mmol), 1,4-dioxa-8-azaspiro[4.5]decano (11,8 g, 82,0 mmol) y K2CO3 (11,4 g, 82,0 mmol) en DMSO (100 mL) se agitó a 100 °C 16 horas. La mezcla se diluyó con agua (200 mL), se extrajo con EtOAc (250 mL*3). Los extractos combinados se lavaron con agua (200 mL) y salmuera (200 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron para obtener 18,0 g (rendimiento: 90%) de F1 como un sólido amarillo.

Procedimiento general para la síntesis de F2

Una solución del compuesto F1 (5,00 g, 20,0 mmol) en MeOH (50 mL) se añadió Raney-Ni (1,0 g). Tras agitar a la temperatura durante 4 horas, la mezcla se filtró y el filtrado se concentró para obtener F2 (5,00 g, rendimiento: 98%) como sólido amarillo.

Procedimiento general para la síntesis de F3

Una mezcla del compuesto F2 (1,10 g, 4,50 mmol), ácido 6-cloro-2-etilimidazo[1,2-a]piridina-3-carboxílico (1,00 g, 4,50 mmol), EDCI (955 mg, 4,90 mmol), HOBt (661 mg, 4,90 mmol) y TEA (1,30 g, 13,3 mmol) en THF (20 mL) se agitó a 20 °C durante 16 horas. Luego la mezcla se diluyó con agua (50 mL) y se extrajo con EtOAc (50 mL*3). Los extractos se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para dar un residuo que se purificó mediante columna de gel de sílice (eluyente: DCM/MeOH = 20/1 a 15/1) para obtener 1,50 g (rendimiento: 75%) de F3 como un sólido amarillo.

Procedimiento general para la síntesis de F4

Una solución del compuesto F3 (1,40 g, 3,08 mmol) en THF/HCl (5 mL/5 mL, HCl: 2M) se sometió a reflujo durante 16 horas. La mezcla se diluyó con agua (80 mL) y se basificó con una solución acuosa de NaOH (2M, 5 mL) hasta alcanzar un pH = 8. Luego la mezcla se extrajo con EtOAc (50 mL*3). Los extractos se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para dar 1,00 g (rendimiento: 79%) del compuesto F4 como un sólido marrón.

Procedimiento general para la síntesis de F5

A una solución del compuesto F4 (100 mg, 0,24 mmol) en THF anhidro (5 mL) se añadió MeMgBr (0,16 mL, 0,48 mmol, 3,0 M en éter dietílico) gota a gota a -78°C. La mezcla se agitó a esta temperatura durante 0,5 horas. La mezcla de reacción se apagó con MeOH (1 mL), se diluyó con agua (30 mL) y se extrajo con EtOAc (20 mL*3). Los extractos se combinaron, se lavaron con salmuera (30 mL), se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para dar un residuo que se purificó por Prep-HPLC (0,1% TFA como aditivo). La mayor parte del MeCN se eliminó a presión reducida, el disolvente restante se eliminó por liofilización para dar 27 mg (como sal TFA, rendimiento: 21%) del compuesto F5 como aceite amarillo pálido

Procedimiento general para la síntesis de G1

A una solución de 4-fluoro-benzonitrilo (7,80 g, 63,9 mmol) y 1-Boc-piperazina (10,0 g, 53,7 mmol) en DMSO (200 mL) se añadió K2CO3 (14,8 g, 107 mmol). La mezcla resultante se agitó a 100 °C durante 16 horas. La TLC y la LCMS mostraron que la reacción había terminado. El disolvente DMSO se eliminó al vacío y el residuo se suspendió en agua (100 mL), se extrajo con EtOAc (100 mL * 3). Los extractos combinados se lavaron con agua (100 mL) y salmuera (100 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron para dar un residuo. El residuo se purificó por recristalización de MeOH (150 mL) para obtener 7,08 g (rendimiento: 43%) del compuesto G1 como polvo blanco.

Procedimiento general para la síntesis de G2

A una solución de G1 (1,00 g, 3,50 mmol) en MeOH (50 mL) se añadió Raney-Ni (0,50 g). La suspensión se desgasificó al vacío y se purgó con H2 durante tres veces. La mezcla de reacción se agitó a 20 °C durante 4 horas bajo atmósfera de H² (310 kPa). La LCMS mostró que la reacción se había completado. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida y se purificó mediante una columna de gel de sílice (eluyente: EtOAc/PE = 3/1 a EtOAc, 1% TEA como aditivo) para obtener 1,00 g (rendimiento: 100%) del compuesto G2 como polvo blanco.

Procedimiento general para la síntesis de G3

Una mezcla de ácido 6-cloro-2-etilimidazo[1,2-a]piridina-3-carboxílico (140 mg, 0,48 mmol), G2 (90 mg, 0,40 mmol), EDCI (234 mg, 1,20 mmol), HOBt (162 mg, 1,20 mmol) y TEA (121 mg, 2,00 mmol) en THF (10 mL) se agitó a 20 °C durante 16 horas. La LCMS mostró que la reacción había terminado. La mezcla de reacción se vertió en agua (30 mL), se extrajo con EtOAc (20 mL * 3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (10 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron para dar un residuo. El residuo se purificó mediante una columna de gel de sílice (eluyente: PE/EtOAc = 8/1 a 4/1) para obtener 120 mg (rendimiento: 47%) del compuesto G3 como polvo blanco.

Procedimiento general para la síntesis de G4

A una solución de G3 (120 mg, 0,24 mmol) en DCM (5mL) se añadió TFA (1,5 mL). La solución resultante se agitó a 20 °C durante 6 horas. La LCMS mostró que la reacción había terminado. El disolvente se eliminó por concentración para obtener 92 mg de sal TFA (rendimiento: 87%) del compuesto G4 como polvo blanco, sin más purificación para el siguiente paso.

Procedimiento general para la síntesis de G5

A una solución del compuesto G4 (45 mg, 0,11 mmol) y TEA (40 mg, 0,55 mmol) en DCM (10 mL) se añadió gota a gota cloruro de 4-fluorobenzoilo (21 mg, 0,13 mmol). La mezcla resultante se agitó a 20 °C durante 1,5 horas. La LCMS mostró que la reacción había terminado. La mezcla de reacción se concentró para dar un residuo, que se purificó por Prep-HPLC (0,1% de TFA como aditivo), la mayor parte del CH³CN se eliminó por evaporación a presión reducida, y el disolvente restante se eliminó por liofilización para obtener 35 mg de sal TFA (rendimiento: 71%) de G5 como polvo blanco

Procedimiento general para la síntesis de H1

Una mezcla de compuesto piperidina-4-carboxilato de etilo (10,0 g, 63,6 mmol), 4-fluorobenzonitrilo (8,10 g, 65,5 mmol), K²CO³ (14,4 g, 104 mmol) en DMSO (150 mL) se agitó a 120 °C durante 16 horas. La LCMS mostró que la reacción había terminado. Tras eliminar el disolvente al vacío, el residuo se vertió en agua (100 mL), se extrajo con EtOAc (50 mL * 3), los extractos combinados se lavaron con salmuera (50 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron para dar un residuo, que se purificó mediante columna de gel de sílice (eluyente: PE/EtOAc = 4/1) para obtener 9,50 g (rendimiento: 51%) del compuesto H1 como un aceite oscuro.

Procedimiento general para la síntesis de H2

Una mezcla del compuesto H1(8,50 g, 33,0 mmol), Raney Ni (1,00 g) en MeOH (300 mL) se agitó a 20 °C bajo balón de H² durante 4 horas. La LCMS mostró que la reacción había terminado. Tras la filtración, el filtrado se concentró para dar un residuo, que se purificó mediante una columna de gel de sílice (eluyente: EtOAc, 0,5% TEA como aditivo) para obtener 6,08 g (rendimiento: 71%) del compuesto H2 como sólido blanco.

Procedimiento general para la síntesis de H3

Una mezcla del compuesto H2 (6,08 g, 26,0 mmol), Boc²O (6,83 g, 32,8 mmol) y TEA (2,55 g, 25,7 mmol) en THF (150 mL) se agitó a 20 °C durante 16 horas. La LCMS mostró que la reacción había terminado. Tras eliminar el disolvente, la mezcla se vertió en agua (100 mL), se extrajo con EtOAc (50 mL * 3), los extractos combinados se lavaron con salmuera (50 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron para dar un residuo. El residuo se purificó mediante una columna de gel de sílice (eluyente: PE/ EtOAc = 4/1) para obtener 6,80 g de compuesto H3 crudo como sólido blanco, que se utilizó para el siguiente paso sin más purificación.

Procedimiento general para la síntesis de H4

Una mezcla del compuesto H3 (crudo, 6,80 g) y KOH 2M (20 mL) en MeOH (100 mL) se agitó a 30 °C durante 3 horas. La LCMS mostró que la reacción había terminado. Tras eliminar el disolvente por concentración, el residuo se vertió en agua (100 mL). La fase acuosa se extrajo con EtOAc (30 mL * 2) y se descartó, la capa acuosa se acidificó a pH = 4 con HCl 2M cuidadosamente y se extrajo con EtOAc (50 mL * 3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (40 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron para obtener 5,50 g de compuesto H4 crudo como sólido blanco, que se utilizó para el siguiente paso sin más purificación.

Procedimiento general para la síntesis de H5

Una mezcla del compuesto H4 (crudo, 5,50 g), clorhidrato de N,O-dimetilhidroxilamina (4,76 g, 49,0 mmol), EDCI (9,55 g, 49,0 mmol), HOBt (6,62 g, 49,0 mmol) y Te a (10,3 g, 82,0 mmol) en THF (150 mL) se agitó a 20 °C durante 12 horas. La LCMS mostró que la reacción había terminado. Tras eliminar el disolvente a presión reducida, la mezcla se vertió en agua (100 mL), se extrajo con EtOAc (70 mL * 3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (50 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron para dar un residuo, que se purificó mediante columna de gel de sílice (eluyente: PE/EtOAc = 4/1) para obtener 5,80 g (rendimiento en tres pasos: 63%) del compuesto H5 como un sólido rojo.

Procedimiento general para la síntesis de H6

Una mezcla de Mg (99,6 mg, 4,15 mmol) y bromuro de 4-(trifluorometoxi)-fenilo (1,00 g, 4,15 mmol) en THF anhidro (15 mL) se agitó a 50 °C hasta que el Mg casi desapareció. A continuación, se añadió una solución del compuesto H5 (400 mg, 1,06 mmol) en THF anhidro (10 mL) a la solución anterior a 0 °C, gota a gota. La mezcla resultante se agitó a 20 °C durante otras 3 horas. La LCMS mostró que la reacción había terminado. Después de apagar la reacción con solución acuosa saturada de NH⁴Cl (20 mL), la mezcla se extrajo con EtOAc (20 mL * 3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (10 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron para dar un residuo, que se purificó mediante columna de gel de sílice (eluyente: PE/EtOAc = 4/1) para obtener 100 mg (rendimiento: 21%) del compuesto H6 como un sólido blanco.

Procedimiento general para la síntesis de H7

A una solución del compuesto H6 (100 mg, 0,21 mmol) en DCM (20 mL) se añadió TFA (4 mL), y la mezcla se agitó a 20 °C durante 5 horas. Tras eliminar el disolvente al vacío, la mezcla se vertió en agua (20 mL), se extrajo con EtOAc (10 mL) y el extracto se desechó. La capa acuosa se basificó a pH = 9,0 con solución acuosa de NaOH 1M, se extrajo con EtOAc (20 mL * 3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (10 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron para dar un residuo, que se utilizó directamente en el siguiente paso sin más purificación

Procedimiento general para la síntesis de I1

Una mezcla de 4-bromobenzonitrilo (1,40 g, 7,80 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidropiridina-1(2H)-carboxilato de terc-butilo (2,00 g, 6.48 mmol), carbonato potásico anhidro (2,68 g, 19,5mmol) y PdCh(dppf) (0,95 g, 1,30 mmol) en DMF anhidro (30 mL) se agitó a 80 °C bajo atmósfera de nitrógeno durante 16 horas. La mezcla de reacción se vertió en agua (100 mL) y se extrajo con EtOAc (50 mL * 3). Los extractos combinados se lavaron con agua (50 mL) y salmuera (50 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron para dar un residuo. El residuo se purificó mediante una columna de gel de sílice (eluyente: PE/EtOAc = 8/1) para obtener 1,50 g (rendimiento: 83%) del compuesto I1 como un aceite amarillo.

Procedimiento general para la síntesis de I2

Una mezcla de I1 (1,50 g, 5,00 mmol) y Raney Ni (500 mg) en MeOH (40 mL) se hidrogenó a 25°C bajo 310 kPa de presión de hidrógeno durante 3 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró para dar el producto crudo. El producto bruto se purificó mediante una columna de gel de sílice (eluyente: DCM/MeOH = 10/1, 1% TEA como aditivo) para obtener 635 mg (rendimiento: 42%) de I2 como polvo amarillo.

Procedimiento general para la síntesis de I3

Una mezcla de ácido 6-cloro-2-etilimidazo[1,2-a]piridina-3-carboxílico (278 mg, 1,24 mmol), I2 (300 mg, 1,03 mmol), EDCI (242 mg, 3,10 mmol) y HOBT (167 mg, 3,10 mmol) en THF (15 mL) se agitó a 20 °C durante 8 horas. La mezcla de reacción se vertió en agua (30 mL), se extrajo con EtOAc (20 mL * 3). Los extractos combinados se lavaron con agua (20 mL) y salmuera (20 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron para dar un residuo. El residuo se purificó mediante una columna de gel de sílice (eluyente: DCM/MeOH = 10/1, 0,5% TEA como aditivo) para obtener 500 mg (rendimiento: 97%) de I3 como potencia amarilla.

Procedimiento general para la síntesis de I4

A una solución de I3 (500 mg, 1,00 mmol) en DCM (16 mL) se añadió TFA (4 mL) y la mezcla resultante se agitó a 20 °C durante 5 horas. La TLC mostró que la reacción había terminado. La mezcla de reacción se concentró para obtener 300 mg (como sal TFA, rendimiento: 75%) del crudo I4 como aceite amarillo, que se utilizó para el siguiente paso sin más purificación.

Procedimiento general para la síntesis de I5

A una mezcla de I4 (100 mg, 0,25 mmol) y Et3N (76 mg, 0,75 mmol) en THF anhidro (10 mL) se añadió cloruro de 4-fluorobenzoilo (48 mg, 0,30 mmol) a 0 °C. La mezcla resultante se agitó a 20 °C durante 30 minutos. La LCMS indicó que la reacción estaba completa. La mezcla de reacción se vertió en H2O (10 mL) extraída con EtOAc (10 mL*3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (10 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron para dar un residuo. El residuo se purificó por Prep-HPLC (0,1% TFA como aditivo), se eliminó la mayor parte del MeCN por concentración, luego se añadieron 0,5 mL de HCl conc. y se eliminó el agua por liofilización para obtener 26 mg (como sal de HCl, rendimiento: 20%) de I5 como potencia blanca

Procedimiento general para la síntesis de J1

Una mezcla de ácido 6-cloro-2-etilimidazo[1,2-a]piridina-3-carboxílico (300 mg, 1,34 mmol, 4-bromo-bencilamina (248 mg, 1,34 mmol), EDCI (286 mg, 1,47 mmol), HOBt (198 mg, 1,47 mmol) y TEA (405 mg, 4,01 mmol) en THF anhidro (10 mL) se agitó a 20 °C durante 16 horas. Luego la mezcla se diluyó con agua (50 mL) y se extrajo con EtOAc (40 mL*3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (100 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron para obtener 450 mg (rendimiento: 86%) del compuesto J1 que se utilizó directamente en el siguiente paso.

Procedimiento general para la síntesis de J2

Una mezcla del compuesto J1 (100 mg, 0,25 mmol), 1-Fluoro-4-vinil-benceno (46 mg, 0,38 mmol), Pd²(dba)³ (23 mg, 0,025 mmol), P(o-toly)³ (8 mg, 0,025 mmol) y TEA (129 mg, 1,27 mmol) en DMF (2 mL) se agitó a 100 °C durante 16 horas bajo atmósfera de N2. La mezcla de reacción se diluyó con agua (50 mL) y se extrajo con EtOAc (40 mL * 3). Los extractos combinados se lavaron con agua (100 mL) y salmuera (100 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron para dar un producto crudo que se purificó por prep-HPLC (0,1% NH³-H²O como aditivo). La mayor parte del MeCN se eliminó a presión reducida, el disolvente restante se eliminó por liofilización para obtener 14 mg (rendimiento: 13%) de J2 como un amorfo blanco

Procedimiento general para la síntesis de K1

Una solución de 3-aminobenzonitrilo (4,12 g, 34,9 mmol), 4-(trifluorometoxi)benzaldehído (8,38 g, 44,1 mmol) y HOAc (2,43 g, 40,5 mmol) en DCE (100 mL) se agitó a 25 °C durante 3 horas, después se añadió el NaBH(OAc)³ (12,7 g, 60,0 mmol) se añadió a la mezcla de reacción y la mezcla resultante se agitó a 25 °C durante 16 horas, la TLC mostró que la reacción estaba completa. La mezcla de reacción se basificó con NaHCO³ acuoso hasta pH = 8, se extrajo con EtOAc (30 mL * 3), los extractos combinados se secaron con Na²SO⁴ anhidro y se concentraron a presión reducida para dar 11,4 g (rendimiento: 98%) del compuesto K1 como un sólido amarillo. Pureza LCMS: 93%, sin más purificación para el siguiente paso.

Procedimiento general para la síntesis de K2

Una solución del compuesto K1 (2,00 g, 6,85 mmol) en DMF (10 mL) se añadió gota a gota en porciones a la suspensión de NaH (0,328 g, 8,20 mmol, 60% de dispersión en aceite de parafina) en DMF anhidro (5 mL) con jeringa durante un periodo de 10 minutos bajo N2 mientras se mantenía la temperatura interior entre 0 °C y 10 °C. La mezcla de reacción se dejó agitar a 25 °C durante 10 minutos. A continuación, se añadió MeI (1,06 g, 7,47 mmol) gota a gota en la mezcla de reacción durante un periodo de 10 minutos con una jeringa mientras se mantenía la temperatura interior entre 0 °C y 10 °C y, a continuación, se agitó a 25 °C durante 14 horas. La reacción se apagó con NH4Cl acuoso saturado y se extrajo con EtOAc (30 mL * 3), Los extractos combinados se secaron con Na2SO4 anhidro y se concentraron a presión reducida, El residuo se purificó mediante columna de gel de sílice (eluyente: PE/EtOAc = 12:1) para obtener 350 mg (rendimiento: 17%) del compuesto K2 como un aceite amarillo.

Procedimiento general para la síntesis de K3

Una solución de LiAlH4 (300 mg, 7,89 mmol) en THF anhidro (10 mL) se agitó a 0 °C durante 5 minutos, después se añadió una solución del compuesto K2 (350 mg, 1,14 mmol) en THF anhidro (10 mL) gota a gota en porciones a la mezcla durante un periodo de 10 minutos y la mezcla resultante se sometió a reflujo durante 2,5 horas, la reacción se apagó con H2O (5 mL) y NaOH acuoso al 15% (3 mL) y H2O (10 mL) a su vez, la mezcla se extrajo con EtOAc (15 mL * 3), los extractos combinados se secaron con Na2SO4 anhidro y se concentraron a presión reducida para dar 300 mg (rendimiento: 85%) del compuesto K3 como un aceite incoloro

Procedimiento general para la síntesis de L1

Una solución de 3-cianofenol (1,40 g, 11,8 mmol), bromuro de 4-(trifluorometoxi)bencilo (3,29 g , 13,0 mmol) y Na2CO3 (3,23 g , 23,4 mmol) en acetona (100 mL) se agitó manteniendo un reflujo suave durante 15 horas, la TLC mostró que la reacción se había completado. La mezcla de reacción se filtró para eliminar el precipitado. La solución se extrajo con EtOAc (20 mL * 3), los extractos combinados se secaron con Na2SO4 anhidro y se concentraron a presión reducida hasta sequedad, luego el producto crudo se purificó por columna de gel de sílice (eluyente: PE/EtOAc = 12/1) para dar 3,01 g (rendimiento: 87%) del compuesto L1 como un aceite incoloro.

Procedimiento general para la síntesis de L2

Una solución de LiAlH4 (325 mg, 8,55 mmol) en THF (10 mL) se agitó a 0 °C durante 5 minutos, luego se añadió una solución de 3-3 (500 mg, 1,71 mmol) en THF (10 mL) gota a gota en porciones en la mezcla durante un periodo de 10 minutos, y la mezcla resultante se sometió a reflujo durante 3,5 horas, la TLC mostró que la reacción se había completado. La reacción se apagó con H2O (3 mL), NaOH acuoso al 15% (3 mL) y H2O (9 mL) a su vez, se extrajo con EtOAc (20 mL * 3), los extractos combinados se secaron con Na2SO4 anhidro y se concentraron a presión reducida para dar 480 mg (rendimiento: 96%) del compuesto L2 como un aceite incoloro

Procedimiento general para la síntesis de M1

Se añadió gota a gota TFA (50 mL) a la solución del compuesto 4-(trifluorometoxi)fenil)piperidina-1-carboxilato de tercbutilo (12,5 g, 36,2 mmol) en DCM (100 mL) mientras se mantenía la temperatura interior entre 0 y 5 °C durante un periodo de 30 minutos, después la mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 17 horas. La mezcla de reacción se extrajo con DCM (20 mL * 3), los extractos combinados se secaron con Na²SO⁴ anhidro y se concentraron a presión reducida para dar 8,50 g (rendimiento: 96%) del compuesto M1 como potencia amarilla.

Procedimiento general para la síntesis de M2

Una solución del compuesto M1 (1,00 g, 4,08 mmol), compuesto 3-bromofenilisocianuro (890 mg, 4,92 mmol), Pd2(dba)3 (750 mg, 0,819 mmol), Xantphos (720 mg, 1,24 mmol) y t-BuONa (1,70 g, 12,3 mmol) en tolueno (30 mL) se agitó bajo N2 a 110 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se apagó con agua (20 mL) a 0 °C y luego se filtró a través de una almohadilla de celita. La mezcla se extrajo con EtOAc (20 mL * 3). Los extractos combinados se secaron con Na2SO4 anhidro y se concentraron a presión reducida para obtener el producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (eluido: PE: EtOAc = 7 : 1 ) para dar 1,00 g (rendimiento: 69%) del compuesto M2 como un sólido amarillo.

Procedimiento general para la síntesis de M3

Se añadió LiAlH4 (280 mg, 7,36 mmol) al THF (5 mL) y se agitó bajo N2 a 0 °C durante 30 minutos. A continuación, la solución del compuesto M2 (500 mg, 1,44 mmol) en THF (5 mL) se añadió gota a gota a la suspensión mientras se mantenía la temperatura interior entre 0 y 5 °C durante un periodo de 30 minutos. A continuación, la mezcla de reacción se sometió a reflujo durante 3,5 horas, la TLC mostró que la reacción se había completado. La reacción se apagó con (3 mL) H2O, NaoH acuoso al 15% (3 mL) y H2O (9 mL) sucesivamente. La mezcla se extrajo con EtOAc (20 mL * 3), los extractos combinados se secaron con Na2SO4 anhidro y se concentraron a presión reducida para dar 390 mg (rendimiento: 83%) del compuesto M3 como un aceite amarillo

Esquema 14

Procedimiento general para la síntesis de N1

Una solución de bromuro de 4-bromobutilo (10,0 g, 40,0 mmol) y PPh³ (10,5 g, 40,0 mmol) en tolueno (100 mL) se calentó a reflujo durante 12 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró y la torta del filtro se lavó con tolueno (200 mL), se secó a alto vacío para dar el compuesto N1 (19,5 g, rendimiento: 95%) como un polvo blanco que se utilizó directamente para el siguiente paso.

Procedimiento general para la síntesis de N2

A una suspensión del compuesto N1 (14,4 g, 28,1 mmol) en THF anhidro (120 mL) se añadió gota a gota n-BuLi(11,8 mL, 29,5 mmol, 2,5 M en hexano) a -70 °C, la mezcla se agitó a -70 °C durante 30 minutos. A continuación, la mezcla se calentó a 0 °C y se añadió gota a gota una solución de tetrahidro-4H-pirano-4-ona (2,95 g, 29,5 mmol) en THF anhidro (10 mL) a 0 -10 °C. A continuación, la mezcla de reacción se agitó a 20 °C durante 12 horas. Se añadió NH⁴Cl saturado (100 mL) a 0 -10 °C, luego se diluyó con agua (200 mL), se extrajo con EtOAc (100 mL x 2). La capa orgánica combinada se concentró a presión reducida para dar el residuo, que se purificó mediante una columna de gel de sílice (eluyente: PE/EtOAc = 8/1) para dar el compuesto N2 (4,90 g, rendimiento: 69%) como un aceite amarillo.

Procedimiento general para la síntesis de N3

Una mezcla del compuesto N2 (4,90 g, 19,3 mmol), Zn(CN)² (2,38 g, 20,3 mmol) y Pd(PPh³)⁴ (2,24 g, 1,94 mmol) en DMF (20 mL) se calentó a reflujo durante 1 hora bajo N². A continuación, la mezcla de reacción se diluyó con agua (100 mL) y EtOAc (100 mL). Tras la filtración, la capa orgánica se separó y se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴ y se concentró a presión reducida para dar un aceite crudo, que se purificó mediante columna de gel de sílice (eluyente: PE/EtOAc = 10/1) para dar el compuesto N3 (5,50 g, rendimiento: 69%) como aceite amarillo claro.

Procedimiento general para la síntesis de N4

Una mezcla del compuesto N3 (500 mg, 2,51 mmol) y Pd/C (100 mg, 10%) en MeOH (20 mL) se agitó bajo H² (globo) a 20 °C durante 24 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para dar el compuesto crudo N4 (420 mg) como un aceite amarillo claro, que se utilizó para el siguiente paso directamente

Procedimiento general para la síntesis de N5

A una solución del compuesto N4 (400 mg, de arriba) en THF anhidro (10 mL) se añadió LiAlH⁴ (378 mg, 9,94 mmol) a 20 °C, la mezcla de reacción se calentó a 70 °C durante 12 horas. Se añadió agua (0,4 mL) y NaOH 2M (0,4 mL) a la mezcla de reacción a 20 °C para apagar la reacción. Después se filtró la mezcla y la torta se lavó con THF (20 mL x 2). El filtrado combinado se concentró a presión reducida para dar el residuo crudo (440 mg) como un aceite amarillo claro. El residuo se disolvió en DCM (30 mL) y HCl 1M (30 mL), luego se extrajo con DCM (30 mL x 2). La capa acuosa se ajustó a pH = 8 mediante NaHCO3 saturado, luego se extrajo con DCM (40 mL x 3), la fase orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró para dar el compuesto N5 (310 mg, rendimiento de 2 pasos: 60%) como goma de mascar

Procedimiento general para la síntesis de O1

A una mezcla de 4-clorotiofenol (10,0 g, 69,5 mmol) y K2CO3 (29,0 g, 210 mmol) en acetona (110 mL) se añadió 2,3-dicloro-1-propeno (9,90 g, 90,0 mmol). La mezcla resultante se agitó a 60 °C durante 5 horas. Tras enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para obtener 10,0 g (rendimiento: 65%) del compuesto O1 como potencia amarilla.

Procedimiento general para la síntesis de 02

Una solución del compuesto O1 (10,0 g, 45,9 mmol) en PhNMe2 (50 mL) se agitó a 190 °C durante 20 horas. Tras enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se extrajo con TBME (30 mL*3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron a presión reducida para dar un residuo, que se purificó mediante columna de gel de sílice (eluyente: PE/EtOAc = 20/1) para obtener 8,00 g (rendimiento: 96%) del compuesto O2 como potencia blanca.

Procedimiento general para la síntesis de O3

Una solución de AIBN (300 mg, 1,83 mmol) y NBS (1,95 g, 11,0 mmol) en CCl4 (10 mL) se agitó a 80 °C durante 10 minutos, y luego se añadió a la solución anterior una solución del compuesto O2 (2,00 g, 11,0 mmol) en CCl4 (20 mL). La mezcla resultante se agitó a 80 °C durante 17 horas. Tras enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para dar un residuo, que se purificó mediante una columna de gel de sílice (eluyente: PE/EtOAc= 15/1) para obtener 2,17 g (rendimiento: 76%) del compuesto O3 como potencia amarilla.

Procedimiento general para la síntesis de 04

A una mezcla de NaH (120 mg, 3,00 mmol, 60% de dispersión en aceite mineral) en THF anhidro (10 mL) se añadió una solución de Boc2NH (454 mg, 1,09 mmol) en THF anhidro (15 mL) a 0 °C bajo N2 gota a gota. Tras agitar a 0 °C durante 30 minutos, se añadió a 0 °C, gota a gota, una solución del compuesto O3 (500 mg, 1,93 mmol) en THF anhidro (10 mL). La mezcla resultante se dejó agitar a 25 °C durante 15 horas. La reacción se apagó con agua (30 mL) y se extrajo con EtOAc (30 mL*3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron a presión reducida para dar una potencia amarilla, que se purificó mediante columna de gel de sílice (eluyente: PE/EtOAc= 12/1) para obtener 400 mg (rendimiento: 53%) del compuesto O4 como potencia amarilla.

Procedimiento general para la síntesis de O5

Una solución del compuesto O4 (400 mg, 1,05 mmol) y TFA (15 mL) en DCM (30 mL) se agitó a 25 °C durante 15 horas. La mezcla se concentró a presión reducida para dar un residuo, que se suspendió en solución acuosa saturada de Na2CO3 (20 mL) y se extrajo con EtOAc (20 mL*3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron a presión reducida para obtener 164 mg (rendimiento: 79%) del compuesto O5 como polvo amarillo

Procedimiento general para la síntesis de P1

A una solución del compuesto 1-bromo-4-yodobenceno (5,00 g, 17,7 mmol) en THF anhidro (20 mL) se añadió gota a gota /'-PrMgCl(10 mL, 20,0 mmol, 2M en THF) a -40 °C. Después de agitar a esta temperatura durante 1 hora, se añadió gota a gota una solución de tetrahidro-4H-pirano-4-ona (1,77 g, 17,7 mmol) en THF anhidro (2 mL) a -40 °C. A continuación, se dejó que la mezcla se calentara a 20 °C y se agitó durante 2 horas. Se añadió gota a gota NH4Cl saturado (50 mL) a 10 - 25 °C, para apagar la reacción, seguido de agua (50 mL). La mezcla se extrajo con EtOAc (50 mL x 2). La capa orgánica combinada se concentró y se purificó mediante una columna de gel de sílice (eluyente: PE/EtOAc = 20/1) para dar el compuesto P1 (1,58 g, rendimiento: 35%) en forma de polvo blanco.

Procedimiento general para la síntesis de P2

Una solución del compuesto P1 (1,57 g, 6,11 mmol) y ácido p-toluenosulfónico monohidratado (5 mg) en tolueno (40 mL) se calentó a reflujo durante 8 horas. La solución de la reacción se concentró a presión reducida para dar el compuesto crudo P2 (1,62 g, quant.) que se utilizó para el siguiente paso directamente.

Procedimiento general para la síntesis de P3

Una mezcla del compuesto P2 (1,62 g, de arriba), Zn(CN)2 (835 mg, 7,11 mmol) y Pd(PPh3)4 (783 mg, 0,678 mmol) en DMF (15 mL) se calentó a reflujo durante 1 hora bajo N2. A continuación, la mezcla de reacción se diluyó con agua (50 mL) y EtOAc (30 mL x 3), la capa de EtOAc se separó y se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró a presión reducida para dar un residuo crudo, que se purificó mediante columna de gel de sílice (eluyente: PE/EtOAc = 20/1) para dar el compuesto P3 (930 mg, rendimiento de 2 pasos: 82%) como un aceite amarillo claro.

Procedimiento general para la síntesis de P4

Una mezcla del compuesto P3 (930 mg, 5,02 mmol) y Pd/C (150 mg, 10%) en MeOH (20 mL) se agitó a 20 °C bajo H2 (1 atm) durante 48 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró para dar un compuesto crudo P4 que se utilizó directamente para el siguiente paso.

Procedimiento general para la síntesis de P5

A una solución del compuesto P4 (710 mg, 3,79 mmol) en THF anhidro (30 mL) se añadió LiAlH4 (720 mg, 19,0 mmol) a 20 °C durante 48 horas. Se añadieron gota a gota agua (0,7 mL) y NaOH 2M (0,7 mL) a la mezcla de reacción a 20 °C para apagar la reacción, después se filtró la mezcla y la torta de filtración se lavó con THF (30 mL x 2). El filtrado combinado se concentró para dar un residuo crudo, que se diluyó con DCM (50 mL) y HCl 1M (40 mL), y luego se extrajo con DCM (30 mL * 2). La capa acuosa se ajustó a pH = 8 mediante NaHCO3 saturado, luego se extrajo con DCM (50 mL x 3), la fase combinada de DCM se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró para dar el compuesto P5 (210 mg, rendimiento: 29%) como aceite ligero

Procedimiento general para la síntesis de R1

Una mezcla de 4-cloro-2-yodofenol (1,00 g, 3,94 mmol), propargilamina (1,08 g, 19,6 mmol), Cul (75 mg, 0,40 mmol), PdCl2(PPha)2 (278 mg, 0,40 mmol) y TMG (4,21 g, 36,6 mmol) en DMF anhidra (20 mL) se agitó a 50 °C bajo N2 durante 5 horas. Tras enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con agua (20 mL) y se extrajo con EtOAc (30 mL x 3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (15 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron a presión reducida para dar un residuo, que se purificó por prep-HPLC (0,1% NH³.H²O). La mayor parte del CH³CN se eliminó por evaporación a presión reducida, y el disolvente restante se eliminó por liofilización para obtener 300 mg (rendimiento: 41%) del compuesto R1 como polvo amarillo

Procedimiento general para la síntesis de R1

Una solución de 4-cloro-1,2-fenilendiamina (3,00 g, 21,1 mmol) y glicina (2,00 g, 26,0 mmol) en HCl 6N (16 mL) se agitó bajo N² a 100 °C durante 72 horas. Tras enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se suspendió en solución concentrada de NH³.H²O (18 mL) y se extrajo con CH²C^h (30 mL*3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (20 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron a presión reducida para obtener 1,21 g (rendimiento: 32%) del compuesto R1 como polvo amarillo.

Procedimiento general para la síntesis de R2

A una solución del compuesto R1 (3,62 g, 20,0 mmol) y TEA (4,04 g, 40 mmol) en THF (70 mL) se añadió Boc²O (4,32 g, 20 mmol) a 0 °C gota a gota y la solución resultante se agitó a 25 °C durante 15 horas. La mezcla se diluyó con agua (50 mL), se extrajo con EtOAc (30 mL*3). Los extractos combinados se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron a presión reducida para dar un residuo, que se purificó mediante columna de gel de sílice (eluyente: PE/ EtOAc= 1/5) para obtener 900 mg (rendimiento: 16%) del compuesto R2 como polvo amarillo.

Procedimiento general para la síntesis de R3 y R3'

A una suspensión del compuesto R2 (600 mg, 2,14 mmol) y K2CO3 (588 mg, 4,26 mmol) en DMF (20 mL) se añadió CH³ I (420 mg, 2,96 mmol) gota a gota a 0 °C. La mezcla resultante se agitó a 25 °C durante 16 horas. La mezcla se diluyó con agua (50 mL) y se extrajo con EtOAc (30 mL*3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (20 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron a presión reducida para dar el residuo, que se purificó mediante columna de gel de sílice (elutante: PE/EtOAc= 5/1) para obtener 350 mg (rendimiento: 56%) de una mezcla del compuesto R3 y del compuesto R3' como potencia amarilla.

Procedimiento general para la síntesis de R4 y R4'

A una solución del compuesto R3 y del compuesto R3' (500 mg, 1,69 mmol) en DCM (25 mL) se añadió TFA (12 mL) gota a gota a 0 °C. La solución resultante se agitó a 25 °C durante 15 horas, la mezcla se concentró a presión reducida para dar un residuo, que se suspendió en Na²CO³ acuoso saturado (15 mL) y se extrajo con EtOAc (20 mL*3). Los extractos combinados se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron a presión reducida para obtener 289 mg (rendimiento: 88%) de una mezcla del compuesto R4 y del compuesto R4' como potencia amarilla, utilizada directamente para el siguiente paso sin más purificación

Procedimiento general para la síntesis de S1

] A una solución de Boc-GLY-OH (18,6 g, 106 mmol) y TEA (10,6 g, 105 mmol) en THF anhidro (200 mL) se añadió cloroformato de isobutilo (12,0 g, 87,9 mmol) a -20 °C gota a gota. Tras agitar la solución resultante a -20 °C durante 1,5 horas, se añadió gota a gota una solución de 2-amino-5-clorofenol (20,0 g, 106 mmol) en THF anhidro (50 mL) a la solución anterior y la mezcla resultante se agitó a 25 °C durante 17 horas. La reacción se apagó con agua (50 mL), y la mezcla se suspendió en Na²CO³ acuoso saturado (20 mL), se extrajo con EtOAc (50 mL*3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (30 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron a presión reducida para dar un residuo, que se purificó mediante columna de gel de sílice (elutante: PE/EtOAc= 4/1) para obtener 12,0 g (rendimiento: 32,6%) del compuesto S1 como polvo amarillo.

Procedimiento general para la síntesis de S2

Una solución del compuesto S1 (5,00 g, 14,5 mmol) y PPh3 (8,45 g, 32,2 mmol) en THF anhidro (70 mL) se agitó a 0 °C durante 30 minutos, luego se añadió gota a gota DEAD (5,0 mL, 31,7 mmol). La solución resultante se agitó a 25 °C durante 15 horas. La mezcla de reacción se diluyó con agua (20 mL) y se extrajo con EtOAc (30 mL*3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (15 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron a presión reducida para dar un residuo, que se purificó mediante columna de gel de sílice (elutante: PE/EtOAc= 9/1) para obtener 2,40 g (rendimiento: 51%) del compuesto S2 como polvo amarillo

Procedimiento general para la síntesis de S3

La solución del compuesto S2 (1,00 g, 3,06 mmol), ácido 4-(trifluorometoxi)fenilborónico (800 mg, 3,88 mmol), Pd(PPh³)⁴, (600 mg, 0,519 mmol) y Na²CO³2M acuoso (10 mL) en DME (35 mL) se agitó a 80 °C durante 17 horas. La mezcla se diluyó con agua (20 mL), se extrajo con EtOAc (20 mL * 3), se lavó con salmuera (10 mL). Los extractos combinados se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron a presión reducida para dar un residuo, que se purificó por columna (elutante: PE/EtOAc= 9:1) para obtener 1,00 g (rendimiento: 80%) del compuesto S3 como potencia blanca.

Procedimiento general para la síntesis de S4

Una solución del compuesto S3 (400 mg, 0,980 mmol) y TFA (7 mL) en DCM (12 mL) se agitó a 25 °C durante 2,5 horas. La mezcla se concentró a presión reducida para dar un residuo, el cual se suspendió en Na²CO³ acuoso saturado (15 mL) y se extrajo con EtOAc (20 mL * 3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (15 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ anhidro y se concentraron a presión reducida para obtener 230 mg (rendimiento: 76%) del compuesto S4 como un aceite amarillo

Procedimiento general para la síntesis de T1

A una mezcla de terc-butil-2-amino-2-tioxoetilcarbamato (450 mg, 2,37 mmol), CaO (165 mg, 2,94 mmol), Pd2(dba)3 (365 mg, 0,400 mmol) y dppf (885 mg, 1,60 mmol) en MeCN (7 mL) se añadió una mezcla de 2-cloro-4-yodoanilina (500 mg, 1,97 mmol) en MeCN (3 mL) a 20 °C, la mezcla resultante se agitó a 60 °C bajo atmósfera de N2 durante 8 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con agua (20 mL), se extrajo con EtOAc (30 mL * 3), se lavó con salmuera (10 mL), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró a presión reducida para dar un residuo, que se purificó por columna (eluido: PE/EtOAc=6/1) para obtener 500 mg (rendimiento: 87%) del compuesto T1 como polvo amarillo.

Procedimiento general para la síntesis de T2

Una solución del compuesto T1 (300 mg, 1,00 mmol) y TFA (5 mL) en DCM (8 mL) se agitó a 25 °C durante 3 horas. La mezcla se concentró a presión reducida para dar un residuo, que se suspendió en solución acuosa saturada de Na2CO3 (20 mL) y se extrajo con EtOAc (20 mL * 3). Los extractos combinados se lavaron con salmuera (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se concentraron a presión reducida para obtener 182 mg (rendimiento: 91%) del compuesto T2 como polvo amarillo

Esquema 21

Procedimiento general para la síntesis de U1

Una mezcla de epiclorhidrina (4,00 g, 43,2 mmol), 4-fluorofenol (5,34 g, 47,6 mmol) y Cs2CÜ3 (14,1 g, 43,3 mmol) en MeCN (50 mL) se agitó a 80 °C durante 17 horas. Tras enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con agua (50 mL), se extrajo con EtOAc (50 mL x3), se lavó con salmuera (30 mL), se secó sobre Na2SÜ4 anhidro y se concentró a presión reducida para dar un residuo, el cual se purificó mediante columna de gel de sílice (eluyendo: EtOAc/PE =1: 10) para obtener 2,10 g (rendimiento: 29%) del compuesto U1 como un aceite incoloro.

Procedimiento general para la síntesis de U2

Una mezcla del compuesto U1 (1,00 g, 5,95 mmol), isocianato de 4 cianofenilo (1,03 g, 7,15 mmol) y MgI2 (825 mg, 2,98 mmol) en THF anhidro (25 mL) se agitó a 60 °C durante 17 horas. Tras enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con agua (35 mL), se extrajo con EtOAc (30 mL x3), se lavó con salmuera (30 mL), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró a presión reducida para dar un residuo, que se lavó con EtOAc/PE (1/4, 15 mL) para obtener 800 mg (rendimiento: 43%) del compuesto T2 como polvo oscuro.

Procedimiento general para la síntesis de U3

La mezcla del compuesto U2 (400 mg, 1,28 mmol) y Raney Ni (100 mg) en MeOH (20 mL) se agitó bajo H2 (345 kPa) a 30 °C durante 17 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para obtener 320 mg (rendimiento: 78%) del compuesto U3 como un aceite amarillo

Procedimiento general para la síntesis de V1

Una mezcla de 2-amno-4-fluoropiridina (0,41 g, 3,66 mmol) y etil-2-cloroacetoacetato (0,66 g, 4,02 mmol) en EtOH (7 mL) se agitó a temperatura de reflujo durante una noche. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna (n-hexano: acetato de etilo = 3 : 1) para dar V1.

Procedimiento general para la síntesis de V2

A una suspensión de V1 (0,20 g, 0,90 mmol) en MeOH (6 mL) se añadió LiOH acuoso (0,11 g, 4,5 mmol en 2mL de H2O) y luego la mezcla resultante se agitó a 50°C. Después de 2 h, el disolvente orgánico se eliminó a presión reducida, la suspensión acuosa resultante se acidificó con HCl 1M (aq.) y luego el precipitado resultante se filtró y se secó al vacío para dar V2 (0,10 g, 60 %) como un sólido blanco.

Procedimiento general para la síntesis de V3

A una solución agitada de V2 (0,030 g, 0,16 mmol), 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)-carbodiimida (0,044 g, 0,23 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (0,010 g, 0,078 mmol) y trietilamina (0,043 mL, 0,31 mmol) en Dm F anhidra se añadió bencilamina sustituida (0,17 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 4h a 80°C. El disolvente orgánico se eliminó a presión reducida y el residuo resultante se purificó por cromatografía en columna flash (n-hexano : acetato de etilo = 2 : 1) para dar V3.

Ejemplo 3: Actividad in vivo en un modelo murino

El efecto de los compuestos 171 y 175 sobre la carga bacteriana de los ratones infectados con tuberculosis se comparó con el del compuesto de referencia Isoniazid (INH). Se infectaron ratones BalbC hembra de 8 semanas de edad con 8*10® M. tuberculosis H37Rv mediante inoculación intranasal. Los ratones fueron sacrificados al día 1 para controlar el número de UFC en los pulmones. En el modelo de infección aguda, los ratones fueron tratados durante 3 días, empezando el día 6. Los compuestos se disolvieron en fresco en una solución de succinato de d-a-tocoferilpolietilenglicol 1000 (ETPGS) al 20% y se administraron por vía oral en una dosis única al día. La carga bacteriana se evaluó en los pulmones tras homogeneizar los órganos en 1X PBS. Se extendieron diluciones seriadas de los homogeneizados de los órganos en placas Middlebrook 7H11 y se determinaron las UFC después de 3 semanas de incubación a 37°C bajo 5% de CO2.

En el modelo agudo de infección (después de 3 días de tratamiento; Figura 3), se observó una reducción de las UFC en comparación con los ratones no tratados en los pulmones de los ratones tratados con 50 mg/kg del compuesto 171 o del compuesto 175 administrados por vía oral. En general, tanto el compuesto 171 como el 175, demostraron su efecto en el modelo agudo de infección en ratones.

La investigación de los inhibidores del crecimiento de bacilos dentro de los macrófagos se ha visto limitada durante mucho tiempo debido a la engorrosa siembra de UFC, al lento crecimiento de los bacilos, a los requisitos de seguridad y a las dificultades para establecer las condiciones de infección adecuadas. En consecuencia, este enfoque se utilizó siempre como un ensayo secundario después de la selección inicial de los compuestos que son activos en el crecimiento extracelular in vitro. Con la llegada de la microscopía confocal automatizada, las limitaciones mencionadas anteriormente podrían ser remediadas y la metodología empleada aquí demuestra la viabilidad del cribado de compuestos a gran escala.

Obviamente, los compuestos probados como activos contra el crecimiento in vitro de M. tuberculosis son los más prometedores. Los mejores inhibidores aislados de esta biblioteca tienen una actividad inhibidora. Otros estudios de relación estructura-actividad contribuirán a determinar si su actividad puede mejorarse adicionalmente. En conjunto, los resultados anteriores demuestran que la monitorización del crecimiento de M. tuberculosis con microscopía de fluorescencia automatizada es altamente robusta y fiable y que este método permite una rápida selección de potentes compuestos antituberculosos.

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En las siguientes tablas 1 y 2, se muestran los compuestos 1-231, 238, 281-285, 289-300, 309-316, 325-328, 333-337, 340-350 que forman parte de la presente invención, mientras que los compuestos 232-237, 239­ 280, 286-288, 301-308, 317-324, 329-332, 338-339 no forman parte de la presente invención.

Tabla 1

Claims (4)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto que tiene la fórmula general I:

en la que

X es CH o N;

Y es CH, O o N;

m es 0 o 1;

n es 0 o 1;

R1 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, metilo, etilo, t-butilo, fenilo, -NC(O)R5, -OR5, -C(O)R5, -C(O)OR5;

R2 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno e hidroxilo;

R3 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en metilo y etilo; R4 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, metilo, -metoxi y -CF3;

R5 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en alquilheterociclo C1-C3, fenilo y bencilo;

y sus sales farmacéuticamente aceptables;

o

un compuesto que tiene la fórmula general VII:

en la que

X es CH o N

R24 se selecciona, cada vez que aparece, independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo C1-C2, -metoxi, -CF3 y -OCF3;

R25 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en metilo y etilo; R26 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, metilo, -metoxi y -CF3;

y sus sales farmacéuticamente aceptables, o un compuesto que tiene la fórmula general VIII:

en la que

X es CH20 NH

n es 0 o 1

R27 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en metilo y etilo; R28 es, cada vez que aparece, seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, metilo, -metoxi y -CF3;

y sus sales farmacéuticamente aceptables,

en el que el compuesto tiene una de las fórmulas 1-231,238, 281-285, 289-300, 309-316, 325-328, 333-337, 340-350, como se muestra en la siguiente tabla

, preferentemente una de las fórmulas 1-21,23-24, 26, 28-33, 35-57, 59-77, 79-83, 85-87, 90-98, 100-102, 106-111, 113-116 118-124, 126-128, 130-142, 144-150, 153, 155-167, 169-184, 186-188, 190-197, 199, 201,203-208, 210­ 211,213-214, 216, 218-231,238, 281-285, 289-300, 309-316, 325-328, 333-337, 340-350, como se indica más arriba.

2. El compuesto según la reivindicación 1, que tiene una de las fórmulas 55, 171, 175 y 325 como se muestra a continuación:

y sus sales farmacéuticamente aceptables.

3. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 - 2, para su uso en el tratamiento de una infección bacteriana, en la que, preferentemente, dicha infección bacteriana es la Tuberculosis.

4. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 - 3, y un portador farmacéuticamente aceptable.