ES2719480T3 - Formulación de ARN para inmunoterapia - Google Patents
Formulación de ARN para inmunoterapia Download PDFInfo
- Publication number
- ES2719480T3 ES2719480T3 ES13713356T ES13713356T ES2719480T3 ES 2719480 T3 ES2719480 T3 ES 2719480T3 ES 13713356 T ES13713356 T ES 13713356T ES 13713356 T ES13713356 T ES 13713356T ES 2719480 T3 ES2719480 T3 ES 2719480T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- rna
- antigen
- cells
- cell
- lipoplexes
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title description 61
- 238000009472 formulation Methods 0.000 title description 33
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 title description 21
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 239
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 239
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 239
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 201
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 108
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 103
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims abstract description 61
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 51
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims abstract description 50
- LDGWQMRUWMSZIU-LQDDAWAPSA-M 2,3-bis[(z)-octadec-9-enoxy]propyl-trimethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)C)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC LDGWQMRUWMSZIU-LQDDAWAPSA-M 0.000 claims abstract description 48
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims abstract description 47
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 claims abstract description 46
- -1 cationic lipid Chemical class 0.000 claims abstract description 45
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 claims abstract description 37
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 31
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims abstract description 23
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 claims abstract description 15
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- KSXTUUUQYQYKCR-LQDDAWAPSA-M 2,3-bis[[(z)-octadec-9-enoyl]oxy]propyl-trimethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(C[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC KSXTUUUQYQYKCR-LQDDAWAPSA-M 0.000 claims abstract 4
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 claims description 13
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 claims description 9
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 295
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 163
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 130
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 110
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 76
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 71
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 66
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 65
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 59
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 59
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 58
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 47
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 40
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 40
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 38
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 38
- 239000002479 lipoplex Substances 0.000 description 37
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 36
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 34
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 34
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 33
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 32
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 31
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 28
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 28
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 28
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 27
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 27
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 26
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 26
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 26
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 24
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 23
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 22
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 22
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 22
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 22
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 22
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 21
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 19
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 18
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 18
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 18
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 18
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 18
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 18
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 18
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 18
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 17
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 17
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 16
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 16
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 15
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 15
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 15
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 14
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 14
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 14
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 14
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 14
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 14
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 14
- 101000716102 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD4 Proteins 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 13
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 13
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 13
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 13
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 13
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 description 13
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 12
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 12
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 description 12
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 12
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 12
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 12
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 12
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 12
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 12
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 11
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 11
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 11
- 230000006870 function Effects 0.000 description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 description 11
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 11
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 11
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 11
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 11
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 10
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 10
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 10
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 10
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 10
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 10
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 10
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 10
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 10
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 9
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 9
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 9
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 9
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 9
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 9
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 9
- 230000004044 response Effects 0.000 description 9
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 9
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 9
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 8
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 8
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 8
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 8
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 8
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 8
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 8
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 8
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 8
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 8
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 8
- KWVJHCQQUFDPLU-YEUCEMRASA-N 2,3-bis[[(z)-octadec-9-enoyl]oxy]propyl-trimethylazanium Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(C[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC KWVJHCQQUFDPLU-YEUCEMRASA-N 0.000 description 7
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 7
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 7
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 7
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 7
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 description 7
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 7
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 7
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 7
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 7
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 7
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 7
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 7
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 7
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 7
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 6
- 101100396583 Bos taurus IFNW1 gene Proteins 0.000 description 6
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 6
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 6
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 6
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 6
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 6
- 108091023045 Untranslated Region Proteins 0.000 description 6
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 6
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 6
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 6
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 6
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 6
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 6
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 6
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 6
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 6
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 6
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 6
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 6
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 6
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 6
- 238000012552 review Methods 0.000 description 6
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 6
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 6
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 5
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 5
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 5
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 5
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 5
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 5
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 5
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 5
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 5
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 5
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 5
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 5
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 5
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 5
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 5
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 5
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 5
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 5
- 230000003393 splenic effect Effects 0.000 description 5
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 5
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 5
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 4
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 4
- 102000018651 Epithelial Cell Adhesion Molecule Human genes 0.000 description 4
- 108010066687 Epithelial Cell Adhesion Molecule Proteins 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 102100028976 HLA class I histocompatibility antigen, B alpha chain Human genes 0.000 description 4
- 102100036242 HLA class II histocompatibility antigen, DQ alpha 2 chain Human genes 0.000 description 4
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 4
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 4
- 239000002147 L01XE04 - Sunitinib Substances 0.000 description 4
- 108010066345 MHC binding peptide Proteins 0.000 description 4
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 4
- 108700012920 TNF Proteins 0.000 description 4
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 4
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 4
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 4
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 description 4
- 229940121369 angiogenesis inhibitor Drugs 0.000 description 4
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 4
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 4
- 238000000429 assembly Methods 0.000 description 4
- 230000000712 assembly Effects 0.000 description 4
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 4
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 4
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 238000005056 compaction Methods 0.000 description 4
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 4
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 4
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 4
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 4
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 4
- 239000012642 immune effector Substances 0.000 description 4
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 4
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 4
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 4
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 4
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 4
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 4
- LBWFXVZLPYTWQI-IPOVEDGCSA-N n-[2-(diethylamino)ethyl]-5-[(z)-(5-fluoro-2-oxo-1h-indol-3-ylidene)methyl]-2,4-dimethyl-1h-pyrrole-3-carboxamide;(2s)-2-hydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O.CCN(CC)CCNC(=O)C1=C(C)NC(\C=C/2C3=CC(F)=CC=C3NC\2=O)=C1C LBWFXVZLPYTWQI-IPOVEDGCSA-N 0.000 description 4
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 4
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 4
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 4
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 4
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 4
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 4
- LZOIGVDSAMDBIO-LXWJMTKESA-N (2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-4-methylpentanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)[C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C1=CC=CC=C1 LZOIGVDSAMDBIO-LXWJMTKESA-N 0.000 description 3
- JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-4-amino-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s)-2-azaniumyl-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-carboxylatobutanoyl]amino]-6-azaniumy Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N 0.000 description 3
- 108020005345 3' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 3
- WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 3-[6-[4-(trifluoromethoxy)anilino]-4-pyrimidinyl]benzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC(C=2N=CN=C(NC=3C=CC(OC(F)(F)F)=CC=3)C=2)=C1 WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNISYQIZVIFCRA-UHFFFAOYSA-N 4-(1-aminoethyl)-2,6-ditert-butylphenol Chemical compound CC(N)C1=CC(C(C)(C)C)=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 DNISYQIZVIFCRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 3
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 3
- 102100024423 Carbonic anhydrase 9 Human genes 0.000 description 3
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 3
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical group C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 3
- 102100029966 HLA class II histocompatibility antigen, DP alpha 1 chain Human genes 0.000 description 3
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 3
- 108010027412 Histocompatibility Antigens Class II Proteins 0.000 description 3
- 102000018713 Histocompatibility Antigens Class II Human genes 0.000 description 3
- 101000930801 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen, DQ alpha 2 chain Proteins 0.000 description 3
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 3
- 101000851007 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor receptor 2 Proteins 0.000 description 3
- 108010031794 IGF Type 1 Receptor Proteins 0.000 description 3
- 102000038455 IGF Type 1 Receptor Human genes 0.000 description 3
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 3
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 3
- 239000005517 L01XE01 - Imatinib Substances 0.000 description 3
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 3
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 102000004211 Platelet factor 4 Human genes 0.000 description 3
- 108090000778 Platelet factor 4 Proteins 0.000 description 3
- 108091036407 Polyadenylation Proteins 0.000 description 3
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 3
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 3
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 3
- 102100022205 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 21 Human genes 0.000 description 3
- 101710187751 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 21 Proteins 0.000 description 3
- 102100033177 Vascular endothelial growth factor receptor 2 Human genes 0.000 description 3
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 3
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 3
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 3
- 238000009566 cancer vaccine Methods 0.000 description 3
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 3
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 3
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- REZZEXDLIUJMMS-UHFFFAOYSA-M dimethyldioctadecylammonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC REZZEXDLIUJMMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 3
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 3
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 3
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 3
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 3
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 3
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 3
- KTUFNOKKBVMGRW-UHFFFAOYSA-N imatinib Chemical compound C1CN(C)CCN1CC1=CC=C(C(=O)NC=2C=C(NC=3N=C(C=CN=3)C=3C=NC=CC=3)C(C)=CC=2)C=C1 KTUFNOKKBVMGRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 3
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 3
- 238000013379 physicochemical characterization Methods 0.000 description 3
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 3
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 3
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 235000013849 propane Nutrition 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 3
- WUWDLXZGHZSWQZ-WQLSENKSSA-N semaxanib Chemical compound N1C(C)=CC(C)=C1\C=C/1C2=CC=CC=C2NC\1=O WUWDLXZGHZSWQZ-WQLSENKSSA-N 0.000 description 3
- IVDHYUQIDRJSTI-UHFFFAOYSA-N sorafenib tosylate Chemical compound [H+].CC1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1.C1=NC(C(=O)NC)=CC(OC=2C=CC(NC(=O)NC=3C=C(C(Cl)=CC=3)C(F)(F)F)=CC=2)=C1 IVDHYUQIDRJSTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 3
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 3
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 3
- 229940034785 sutent Drugs 0.000 description 3
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 3
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 3
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 3
- PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 0.000 description 2
- SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 0.000 description 2
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 2
- LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 3-Amino-1-methyl-5H-pyrido[4,3-b]indole Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C=C(N)N=C2C LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100030310 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase Human genes 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 2
- 102100034540 Adenomatous polyposis coli protein Human genes 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 2
- 102100021663 Baculoviral IAP repeat-containing protein 5 Human genes 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 108700012439 CA9 Proteins 0.000 description 2
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 2
- 102000002029 Claudin Human genes 0.000 description 2
- 108050009302 Claudin Proteins 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 2
- XULFJDKZVHTRLG-JDVCJPALSA-N DOSPA trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)CCNC(=O)C(CCCNCCCN)NCCCN)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC XULFJDKZVHTRLG-JDVCJPALSA-N 0.000 description 2
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 2
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 2
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100021519 Hemoglobin subunit beta Human genes 0.000 description 2
- 108091005904 Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 description 2
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 2
- 241000709721 Hepatovirus A Species 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 2
- 108010033040 Histones Proteins 0.000 description 2
- 101000924577 Homo sapiens Adenomatous polyposis coli protein Proteins 0.000 description 2
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 2
- 101000864089 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen, DP alpha 1 chain Proteins 0.000 description 2
- 101000930802 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen, DQ alpha 1 chain Proteins 0.000 description 2
- 101000968032 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen, DR beta 3 chain Proteins 0.000 description 2
- 101000898034 Homo sapiens Hepatocyte growth factor Proteins 0.000 description 2
- 101001133056 Homo sapiens Mucin-1 Proteins 0.000 description 2
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 description 2
- 101000669402 Homo sapiens Toll-like receptor 7 Proteins 0.000 description 2
- 101000610605 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10A Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 2
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 description 2
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 2
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- 102100031413 L-dopachrome tautomerase Human genes 0.000 description 2
- 101710093778 L-dopachrome tautomerase Proteins 0.000 description 2
- 208000007764 Legionnaires' Disease Diseases 0.000 description 2
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 2
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 2
- 102100034256 Mucin-1 Human genes 0.000 description 2
- 101000597780 Mus musculus Tumor necrosis factor ligand superfamily member 18 Proteins 0.000 description 2
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 description 2
- 102100028762 Neuropilin-1 Human genes 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 2
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000224016 Plasmodium Species 0.000 description 2
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 2
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 2
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008156 Ringer's lactate solution Substances 0.000 description 2
- 102100026715 Serine/threonine-protein kinase STK11 Human genes 0.000 description 2
- 101710173694 Short transient receptor potential channel 2 Proteins 0.000 description 2
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 108010002687 Survivin Proteins 0.000 description 2
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 108060008245 Thrombospondin Proteins 0.000 description 2
- 102000002938 Thrombospondin Human genes 0.000 description 2
- 102100039390 Toll-like receptor 7 Human genes 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 2
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 102100035283 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 18 Human genes 0.000 description 2
- 102100040113 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10A Human genes 0.000 description 2
- 102100022153 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Human genes 0.000 description 2
- 101710165473 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Proteins 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- 102000009524 Vascular Endothelial Growth Factor A Human genes 0.000 description 2
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 102100033178 Vascular endothelial growth factor receptor 1 Human genes 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine group Chemical group [C@@H]1([C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)N1C=NC=2C(N)=NC=NC12 OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 108010053584 alpha-Globins Proteins 0.000 description 2
- 229950001537 amatuximab Drugs 0.000 description 2
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 2
- 230000006023 anti-tumor response Effects 0.000 description 2
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004436 artificial bacterial chromosome Anatomy 0.000 description 2
- VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N azanide;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum(2+) Chemical compound [NH2-].[NH2-].[Pt+2].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 2
- 201000000053 blastoma Diseases 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 2
- ZEWYCNBZMPELPF-UHFFFAOYSA-J calcium;potassium;sodium;2-hydroxypropanoic acid;sodium;tetrachloride Chemical compound [Na].[Na+].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[K+].[Ca+2].CC(O)C(O)=O ZEWYCNBZMPELPF-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 2
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 2
- 229920006317 cationic polymer Polymers 0.000 description 2
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 2
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 2
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 2
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 2
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 229950009964 drozitumab Drugs 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 2
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 description 2
- 201000008184 embryoma Diseases 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 2
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 2
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 2
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 2
- 150000002327 glycerophospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 2
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 2
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 2
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 2
- 238000002721 intensity-modulated radiation therapy Methods 0.000 description 2
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 2
- 201000002313 intestinal cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 2
- UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N irinotecan Chemical compound C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N 0.000 description 2
- JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N lactide Chemical compound CC1OC(=O)C(C)OC1=O JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N leflunomide Chemical compound O1N=CC(C(=O)NC=2C=CC(=CC=2)C(F)(F)F)=C1C VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 2
- 238000003670 luciferase enzyme activity assay Methods 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 2
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 2
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 2
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 229950003709 oxelumab Drugs 0.000 description 2
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 2
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 description 2
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 2
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 2
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 2
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 2
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 2
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 2
- PTJWIQPHWPFNBW-GBNDHIKLSA-N pseudouridine Chemical group O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1C1=CNC(=O)NC1=O PTJWIQPHWPFNBW-GBNDHIKLSA-N 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 229950003647 semaxanib Drugs 0.000 description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 2
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 2
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 2
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N topotecan Chemical compound C1=C(O)C(CN(C)C)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 2
- 230000004222 uncontrolled growth Effects 0.000 description 2
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 description 2
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 2
- 239000002691 unilamellar liposome Substances 0.000 description 2
- JXLYSJRDGCGARV-CFWMRBGOSA-N vinblastine Chemical compound C([C@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-CFWMRBGOSA-N 0.000 description 2
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 2
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 2
- 238000000733 zeta-potential measurement Methods 0.000 description 2
- MFZSNESUTRVBQX-XEURHVNRSA-N (2S)-2-amino-6-[4-[[3-[[(2S)-1-[[(1S,2R,3S,5S,6S,16E,18E,20R,21S)-11-chloro-21-hydroxy-12,20-dimethoxy-2,5,9,16-tetramethyl-8,23-dioxo-4,24-dioxa-9,22-diazatetracyclo[19.3.1.110,14.03,5]hexacosa-10,12,14(26),16,18-pentaen-6-yl]oxy]-1-oxopropan-2-yl]-methylamino]-3-oxopropyl]disulfanyl]pentanoylamino]hexanoic acid Chemical compound CO[C@@H]1\C=C\C=C(C)\Cc2cc(OC)c(Cl)c(c2)N(C)C(=O)C[C@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(=O)CCSSC(C)CCC(=O)NCCCC[C@H](N)C(O)=O)[C@]2(C)O[C@H]2[C@H](C)[C@@H]2C[C@@]1(O)NC(=O)O2 MFZSNESUTRVBQX-XEURHVNRSA-N 0.000 description 1
- JSPNNZKWADNWHI-PNANGNLXSA-N (2r)-2-hydroxy-n-[(2s,3r,4e,8e)-3-hydroxy-9-methyl-1-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoctadeca-4,8-dien-2-yl]heptadecanamide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)C(=O)N[C@H]([C@H](O)\C=C\CC\C=C(/C)CCCCCCCCC)CO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O JSPNNZKWADNWHI-PNANGNLXSA-N 0.000 description 1
- ZMEWRPBAQVSBBB-GOTSBHOMSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[(2-aminoacetyl)amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-6-[[2-[2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetyl]amino]hexanoic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(=O)NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=C(O)C=C1 ZMEWRPBAQVSBBB-GOTSBHOMSA-N 0.000 description 1
- VEEGZPWAAPPXRB-BJMVGYQFSA-N (3e)-3-(1h-imidazol-5-ylmethylidene)-1h-indol-2-one Chemical compound O=C1NC2=CC=CC=C2\C1=C/C1=CN=CN1 VEEGZPWAAPPXRB-BJMVGYQFSA-N 0.000 description 1
- SSOORFWOBGFTHL-OTEJMHTDSA-N (4S)-5-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[2-[(2S)-2-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-5-carbamimidamido-1-[[(2S)-5-carbamimidamido-1-[[(1S)-4-carbamimidamido-1-carboxybutyl]amino]-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-2-oxoethyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2,6-diaminohexanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CNC(=O)[C@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@H](Cc1c[nH]cn1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O SSOORFWOBGFTHL-OTEJMHTDSA-N 0.000 description 1
- MWWSFMDVAYGXBV-MYPASOLCSA-N (7r,9s)-7-[(2r,4s,5s,6s)-4-amino-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-4-methoxy-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione;hydrochloride Chemical compound Cl.O([C@@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MWWSFMDVAYGXBV-MYPASOLCSA-N 0.000 description 1
- FHRQPRSLYVZWMV-WRBBJXAJSA-N (9z,29z)-19-[(dimethylamino)methyl]octatriaconta-9,29-diene-18,21-dione Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)CC(CN(C)C)C(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC FHRQPRSLYVZWMV-WRBBJXAJSA-N 0.000 description 1
- WEYNBWVKOYCCQT-UHFFFAOYSA-N 1-(3-chloro-4-methylphenyl)-3-{2-[({5-[(dimethylamino)methyl]-2-furyl}methyl)thio]ethyl}urea Chemical compound O1C(CN(C)C)=CC=C1CSCCNC(=O)NC1=CC=C(C)C(Cl)=C1 WEYNBWVKOYCCQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 1-beta-D-Xylofuranosyl-NH-Cytosine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KKVYYGGCHJGEFJ-UHFFFAOYSA-N 1-n-(4-chlorophenyl)-6-methyl-5-n-[3-(7h-purin-6-yl)pyridin-2-yl]isoquinoline-1,5-diamine Chemical compound N=1C=CC2=C(NC=3C(=CC=CN=3)C=3C=4N=CNC=4N=CN=3)C(C)=CC=C2C=1NC1=CC=C(Cl)C=C1 KKVYYGGCHJGEFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WALUVDCNGPQPOD-UHFFFAOYSA-M 2,3-di(tetradecoxy)propyl-(2-hydroxyethyl)-dimethylazanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)CCO)OCCCCCCCCCCCCCC WALUVDCNGPQPOD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHVPQPYKVGDNFY-DFMJLFEVSA-N 2-[(2r)-butan-2-yl]-4-[4-[4-[4-[[(2r,4s)-2-(2,4-dichlorophenyl)-2-(1,2,4-triazol-1-ylmethyl)-1,3-dioxolan-4-yl]methoxy]phenyl]piperazin-1-yl]phenyl]-1,2,4-triazol-3-one Chemical compound O=C1N([C@H](C)CC)N=CN1C1=CC=C(N2CCN(CC2)C=2C=CC(OC[C@@H]3O[C@](CN4N=CN=C4)(OC3)C=3C(=CC(Cl)=CC=3)Cl)=CC=2)C=C1 VHVPQPYKVGDNFY-DFMJLFEVSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-n-[3-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-(dimethylamino)phenyl]-1-n,1-n-dimethylbenzene-1,4-diamine Chemical compound C1=C(C(C=2C=CC(Cl)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)C(N(C)C)=CC=C1NC(C=1)=CC=C(N(C)C)C=1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=C(Cl)C=C1 BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CFWRDBDJAOHXSH-SECBINFHSA-N 2-azaniumylethyl [(2r)-2,3-diacetyloxypropyl] phosphate Chemical compound CC(=O)OC[C@@H](OC(C)=O)COP(O)(=O)OCCN CFWRDBDJAOHXSH-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- SGOOQMRIPALTEL-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-N,1-dimethyl-2-oxo-N-phenyl-3-quinolinecarboxamide Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2N(C)C(=O)C=1C(=O)N(C)C1=CC=CC=C1 SGOOQMRIPALTEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020003589 5' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 1
- 101710163881 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase Proteins 0.000 description 1
- ZAYHVCMSTBRABG-UHFFFAOYSA-N 5-Methylcytidine Natural products O=C1N=C(N)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 ZAYHVCMSTBRABG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAYHVCMSTBRABG-JXOAFFINSA-N 5-methylcytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C(C)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 ZAYHVCMSTBRABG-JXOAFFINSA-N 0.000 description 1
- ZIQFYVPVJZEOFS-UHFFFAOYSA-N 6-(2,6-dichlorophenyl)-2-{[3-(hydroxymethyl)phenyl]amino}-8-methylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8h)-one Chemical compound N=1C=C2C=C(C=3C(=CC=CC=3Cl)Cl)C(=O)N(C)C2=NC=1NC1=CC=CC(CO)=C1 ZIQFYVPVJZEOFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OGHAROSJZRTIOK-KQYNXXCUSA-O 7-methylguanosine Chemical compound C1=2N=C(N)NC(=O)C=2[N+](C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OGHAROSJZRTIOK-KQYNXXCUSA-O 0.000 description 1
- ZKRFOXLVOKTUTA-KQYNXXCUSA-N 9-(5-phosphoribofuranosyl)-6-mercaptopurine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(NC=NC2=S)=C2N=C1 ZKRFOXLVOKTUTA-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101710137115 Adenylyl cyclase-associated protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000000230 African Trypanosomiasis Diseases 0.000 description 1
- 108010012934 Albumin-Bound Paclitaxel Proteins 0.000 description 1
- 102000052587 Anaphase-Promoting Complex-Cyclosome Apc3 Subunit Human genes 0.000 description 1
- 108700004606 Anaphase-Promoting Complex-Cyclosome Apc3 Subunit Proteins 0.000 description 1
- 102100034608 Angiopoietin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010048036 Angiopoietin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102400000068 Angiostatin Human genes 0.000 description 1
- 108010079709 Angiostatins Proteins 0.000 description 1
- 102100023003 Ankyrin repeat domain-containing protein 30A Human genes 0.000 description 1
- 101000719121 Arabidopsis thaliana Protein MEI2-like 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100022716 Atypical chemokine receptor 3 Human genes 0.000 description 1
- 241000700663 Avipoxvirus Species 0.000 description 1
- 102100035526 B melanoma antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010008014 B-Cell Maturation Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102000006942 B-Cell Maturation Antigen Human genes 0.000 description 1
- 108020000946 Bacterial DNA Proteins 0.000 description 1
- 108060000903 Beta-catenin Proteins 0.000 description 1
- 102000015735 Beta-catenin Human genes 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000228405 Blastomyces dermatitidis Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 101100208237 Bos taurus THBS2 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 101710149863 C-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100036301 C-C chemokine receptor type 7 Human genes 0.000 description 1
- 102100023700 C-C motif chemokine 16 Human genes 0.000 description 1
- 102100036842 C-C motif chemokine 19 Human genes 0.000 description 1
- 102100036846 C-C motif chemokine 21 Human genes 0.000 description 1
- 102100032367 C-C motif chemokine 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100031650 C-X-C chemokine receptor type 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100025248 C-X-C motif chemokine 10 Human genes 0.000 description 1
- YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N C16 ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CO)[C@H](O)C=CCCCCCCCCCCCCC YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N 0.000 description 1
- 102100032976 CCR4-NOT transcription complex subunit 6 Human genes 0.000 description 1
- 102100027207 CD27 antigen Human genes 0.000 description 1
- 102100032912 CD44 antigen Human genes 0.000 description 1
- 101150108242 CDC27 gene Proteins 0.000 description 1
- 108091007914 CDKs Proteins 0.000 description 1
- 102100027674 CTD small phosphatase-like protein Human genes 0.000 description 1
- 101710156847 CTD small phosphatase-like protein Proteins 0.000 description 1
- 102100029968 Calreticulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000549 Calreticulin Proteins 0.000 description 1
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 1
- 102100025570 Cancer/testis antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100039510 Cancer/testis antigen 2 Human genes 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 102400000730 Canstatin Human genes 0.000 description 1
- 101800000626 Canstatin Proteins 0.000 description 1
- 102100027668 Carboxy-terminal domain RNA polymerase II polypeptide A small phosphatase 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710134395 Carboxy-terminal domain RNA polymerase II polypeptide A small phosphatase 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100027667 Carboxy-terminal domain RNA polymerase II polypeptide A small phosphatase 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710134389 Carboxy-terminal domain RNA polymerase II polypeptide A small phosphatase 2 Proteins 0.000 description 1
- 108010022366 Carcinoembryonic Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102100025475 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100026548 Caspase-8 Human genes 0.000 description 1
- 108090000538 Caspase-8 Proteins 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- ZEOWTGPWHLSLOG-UHFFFAOYSA-N Cc1ccc(cc1-c1ccc2c(n[nH]c2c1)-c1cnn(c1)C1CC1)C(=O)Nc1cccc(c1)C(F)(F)F Chemical compound Cc1ccc(cc1-c1ccc2c(n[nH]c2c1)-c1cnn(c1)C1CC1)C(=O)Nc1cccc(c1)C(F)(F)F ZEOWTGPWHLSLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000034628 Celiac artery compression syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 1
- 102100031186 Chromogranin-A Human genes 0.000 description 1
- 102100039518 Claudin-12 Human genes 0.000 description 1
- 101710197000 Claudin-12 Proteins 0.000 description 1
- 102100038449 Claudin-6 Human genes 0.000 description 1
- 108090000229 Claudin-6 Proteins 0.000 description 1
- 241000186581 Clostridium novyi Species 0.000 description 1
- 241000193470 Clostridium sporogenes Species 0.000 description 1
- 241000223205 Coccidioides immitis Species 0.000 description 1
- 102100024484 Codanin-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100031162 Collagen alpha-1(XVIII) chain Human genes 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010052358 Colorectal cancer metastatic Diseases 0.000 description 1
- 229940046168 CpG oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 description 1
- 201000007336 Cryptococcosis Diseases 0.000 description 1
- 241000221204 Cryptococcus neoformans Species 0.000 description 1
- 108010025464 Cyclin-Dependent Kinase 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100036252 Cyclin-dependent kinase 4 Human genes 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N Cytidine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- ZBNZXTGUTAYRHI-UHFFFAOYSA-N Dasatinib Chemical compound C=1C(N2CCN(CCO)CC2)=NC(C)=NC=1NC(S1)=NC=C1C(=O)NC1=C(C)C=CC=C1Cl ZBNZXTGUTAYRHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001490 Dengue Diseases 0.000 description 1
- 206010012310 Dengue fever Diseases 0.000 description 1
- 101100216227 Dictyostelium discoideum anapc3 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001115402 Ebolavirus Species 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 229940126626 Ektomab Drugs 0.000 description 1
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102100039328 Endoplasmin Human genes 0.000 description 1
- 108010079505 Endostatins Proteins 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000701959 Escherichia virus Lambda Species 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229940126611 FBTA05 Drugs 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 description 1
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 description 1
- 102100028043 Fibroblast growth factor 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100023593 Fibroblast growth factor receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710182386 Fibroblast growth factor receptor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100027842 Fibroblast growth factor receptor 3 Human genes 0.000 description 1
- 101710182396 Fibroblast growth factor receptor 3 Proteins 0.000 description 1
- 102100027844 Fibroblast growth factor receptor 4 Human genes 0.000 description 1
- 108090000331 Firefly luciferases Proteins 0.000 description 1
- 241000710781 Flaviviridae Species 0.000 description 1
- 241000710831 Flavivirus Species 0.000 description 1
- 102000010451 Folate receptor alpha Human genes 0.000 description 1
- 108050001931 Folate receptor alpha Proteins 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 101000609762 Gallus gallus Ovalbumin Proteins 0.000 description 1
- 201000003741 Gastrointestinal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010017993 Gastrointestinal neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000050627 Glucocorticoid-Induced TNFR-Related Human genes 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 102100028972 HLA class I histocompatibility antigen, A alpha chain Human genes 0.000 description 1
- 102100028971 HLA class I histocompatibility antigen, C alpha chain Human genes 0.000 description 1
- 102100030595 HLA class II histocompatibility antigen gamma chain Human genes 0.000 description 1
- 102100031618 HLA class II histocompatibility antigen, DP beta 1 chain Human genes 0.000 description 1
- 102100036241 HLA class II histocompatibility antigen, DQ beta 1 chain Human genes 0.000 description 1
- 102100040505 HLA class II histocompatibility antigen, DR alpha chain Human genes 0.000 description 1
- 102100040485 HLA class II histocompatibility antigen, DRB1 beta chain Human genes 0.000 description 1
- 108010075704 HLA-A Antigens Proteins 0.000 description 1
- 108010058607 HLA-B Antigens Proteins 0.000 description 1
- 108010052199 HLA-C Antigens Proteins 0.000 description 1
- 108010093061 HLA-DPA1 antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010045483 HLA-DPB1 antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010086786 HLA-DQA1 antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010065026 HLA-DQB1 antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 description 1
- 108010067802 HLA-DR alpha-Chains Proteins 0.000 description 1
- 108010039343 HLA-DRB1 Chains Proteins 0.000 description 1
- 241000589989 Helicobacter Species 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 102100028721 Hermansky-Pudlak syndrome 5 protein Human genes 0.000 description 1
- 241000224421 Heterolobosea Species 0.000 description 1
- 102000006947 Histones Human genes 0.000 description 1
- 241000228404 Histoplasma capsulatum Species 0.000 description 1
- 101000773083 Homo sapiens 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase Proteins 0.000 description 1
- 101000757191 Homo sapiens Ankyrin repeat domain-containing protein 30A Proteins 0.000 description 1
- 101000678890 Homo sapiens Atypical chemokine receptor 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000874316 Homo sapiens B melanoma antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000716065 Homo sapiens C-C chemokine receptor type 7 Proteins 0.000 description 1
- 101000978375 Homo sapiens C-C motif chemokine 16 Proteins 0.000 description 1
- 101000713106 Homo sapiens C-C motif chemokine 19 Proteins 0.000 description 1
- 101000713085 Homo sapiens C-C motif chemokine 21 Proteins 0.000 description 1
- 101000797762 Homo sapiens C-C motif chemokine 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000922348 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000858088 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 10 Proteins 0.000 description 1
- 101000914511 Homo sapiens CD27 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000868273 Homo sapiens CD44 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000856237 Homo sapiens Cancer/testis antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000889345 Homo sapiens Cancer/testis antigen 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000721661 Homo sapiens Cellular tumor antigen p53 Proteins 0.000 description 1
- 101000980888 Homo sapiens Codanin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000954709 Homo sapiens Doublecortin domain-containing protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000812663 Homo sapiens Endoplasmin Proteins 0.000 description 1
- 101000917134 Homo sapiens Fibroblast growth factor receptor 4 Proteins 0.000 description 1
- 101001082627 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen gamma chain Proteins 0.000 description 1
- 101000899111 Homo sapiens Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 101000985516 Homo sapiens Hermansky-Pudlak syndrome 5 protein Proteins 0.000 description 1
- 101001078143 Homo sapiens Integrin alpha-IIb Proteins 0.000 description 1
- 101001046677 Homo sapiens Integrin alpha-V Proteins 0.000 description 1
- 101000599852 Homo sapiens Intercellular adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000959820 Homo sapiens Interferon alpha-1/13 Proteins 0.000 description 1
- 101001054329 Homo sapiens Interferon epsilon Proteins 0.000 description 1
- 101001044447 Homo sapiens Interferon kappa Proteins 0.000 description 1
- 101000998146 Homo sapiens Interleukin-17A Proteins 0.000 description 1
- 101000614481 Homo sapiens Kidney-associated antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000878605 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Proteins 0.000 description 1
- 101001051093 Homo sapiens Low-density lipoprotein receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000916644 Homo sapiens Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 101001134060 Homo sapiens Melanocyte-stimulating hormone receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000578784 Homo sapiens Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000669513 Homo sapiens Metalloproteinase inhibitor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 description 1
- 101000581981 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000874141 Homo sapiens Probable ATP-dependent RNA helicase DDX43 Proteins 0.000 description 1
- 101000880770 Homo sapiens Protein SSX2 Proteins 0.000 description 1
- 101000679365 Homo sapiens Putative tyrosine-protein phosphatase TPTE Proteins 0.000 description 1
- 101001109419 Homo sapiens RNA-binding protein NOB1 Proteins 0.000 description 1
- 101000857677 Homo sapiens Runt-related transcription factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000633784 Homo sapiens SLAM family member 7 Proteins 0.000 description 1
- 101000821981 Homo sapiens Sarcoma antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000665137 Homo sapiens Scm-like with four MBT domains protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000739178 Homo sapiens Secretoglobin family 3A member 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001059454 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase MARK2 Proteins 0.000 description 1
- 101000628562 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase STK11 Proteins 0.000 description 1
- 101000617130 Homo sapiens Stromal cell-derived factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000874179 Homo sapiens Syndecan-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000831567 Homo sapiens Toll-like receptor 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000831496 Homo sapiens Toll-like receptor 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000800483 Homo sapiens Toll-like receptor 8 Proteins 0.000 description 1
- 101000904724 Homo sapiens Transmembrane glycoprotein NMB Proteins 0.000 description 1
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 1
- 101000830596 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 15 Proteins 0.000 description 1
- 101000638251 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 9 Proteins 0.000 description 1
- 101000610604 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B Proteins 0.000 description 1
- 101000795167 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B Proteins 0.000 description 1
- 101000801234 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Proteins 0.000 description 1
- 101000679907 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 27 Proteins 0.000 description 1
- 101000611023 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 description 1
- 101000808011 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor A Proteins 0.000 description 1
- 101000851018 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor receptor 1 Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020843 Hyperthermia Diseases 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108050002021 Integrator complex subunit 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100025306 Integrin alpha-IIb Human genes 0.000 description 1
- 102100022337 Integrin alpha-V Human genes 0.000 description 1
- 102100037877 Intercellular adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100026688 Interferon epsilon Human genes 0.000 description 1
- 102100022469 Interferon kappa Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 102100033461 Interleukin-17A Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- 208000005016 Intestinal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000005511 L01XE05 - Sorafenib Substances 0.000 description 1
- 239000002067 L01XE06 - Dasatinib Substances 0.000 description 1
- 239000005536 L01XE08 - Nilotinib Substances 0.000 description 1
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 description 1
- 241000589248 Legionella Species 0.000 description 1
- 241000222722 Leishmania <genus> Species 0.000 description 1
- 208000004554 Leishmaniasis Diseases 0.000 description 1
- 108010028921 Lipopeptides Proteins 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016261 Long-Acting Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108010092217 Long-Acting Insulin Proteins 0.000 description 1
- 229940100066 Long-acting insulin Drugs 0.000 description 1
- 102100038007 Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Human genes 0.000 description 1
- 102100024640 Low-density lipoprotein receptor Human genes 0.000 description 1
- 102100028198 Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010031099 Mannose Receptor Proteins 0.000 description 1
- 241001115401 Marburgvirus Species 0.000 description 1
- 102100034216 Melanocyte-stimulating hormone receptor Human genes 0.000 description 1
- 102100028389 Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010061593 Member 14 Tumor Necrosis Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100039364 Metalloproteinase inhibitor 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010063312 Metalloproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000010750 Metalloproteins Human genes 0.000 description 1
- 108020005196 Mitochondrial DNA Proteins 0.000 description 1
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 description 1
- 108010050619 Monokines Proteins 0.000 description 1
- 102000013967 Monokines Human genes 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 101100268648 Mus musculus Abl1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100381978 Mus musculus Braf gene Proteins 0.000 description 1
- 101000931108 Mus musculus DNA (cytosine-5)-methyltransferase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101100335081 Mus musculus Flt3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100070645 Mus musculus Hint1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000686934 Mus musculus Prolactin-7D1 Proteins 0.000 description 1
- 101000798092 Mus musculus tRNA (cytosine(38)-C(5))-methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- 102000003505 Myosin Human genes 0.000 description 1
- 108060008487 Myosin Proteins 0.000 description 1
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XKFTZKGMDDZMJI-HSZRJFAPSA-N N-[5-[(2R)-2-methoxy-1-oxo-2-phenylethyl]-4,6-dihydro-1H-pyrrolo[3,4-c]pyrazol-3-yl]-4-(4-methyl-1-piperazinyl)benzamide Chemical compound O=C([C@H](OC)C=1C=CC=CC=1)N(CC=12)CC=1NN=C2NC(=O)C(C=C1)=CC=C1N1CCN(C)CC1 XKFTZKGMDDZMJI-HSZRJFAPSA-N 0.000 description 1
- CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N N-acetylsphinganine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@H](CO)NC(C)=O CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N 0.000 description 1
- 108010084333 N-palmitoyl-S-(2,3-bis(palmitoyloxy)propyl)cysteinyl-seryl-lysyl-lysyl-lysyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 description 1
- 102100027347 Neural cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 1
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 102000007530 Neurofibromin 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010085793 Neurofibromin 1 Proteins 0.000 description 1
- 108090000772 Neuropilin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102100028492 Neuropilin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000770 Neuropilin-2 Proteins 0.000 description 1
- MSHZHSPISPJWHW-UHFFFAOYSA-N O-(chloroacetylcarbamoyl)fumagillol Chemical compound O1C(CC=C(C)C)C1(C)C1C(OC)C(OC(=O)NC(=O)CCl)CCC21CO2 MSHZHSPISPJWHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010042215 OX40 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 102000004264 Osteopontin Human genes 0.000 description 1
- 108010081689 Osteopontin Proteins 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108091008606 PDGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000038030 PI3Ks Human genes 0.000 description 1
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 1
- 108060006580 PRAME Proteins 0.000 description 1
- 102000036673 PRAME Human genes 0.000 description 1
- 102100034640 PWWP domain-containing DNA repair factor 3A Human genes 0.000 description 1
- 108050007154 PWWP domain-containing DNA repair factor 3A Proteins 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 description 1
- 241000701945 Parvoviridae Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N Perforine Natural products COC1=C2CCC(O)C(CCC(C)(C)O)(OC)C2=NC2=C1C=CO2 KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 206010035718 Pneumonia legionella Diseases 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 102100035724 Probable ATP-dependent RNA helicase DDX43 Human genes 0.000 description 1
- 101710093543 Probable non-specific lipid-transfer protein Proteins 0.000 description 1
- 102100039310 Probable serine carboxypeptidase CPVL Human genes 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 102100037686 Protein SSX2 Human genes 0.000 description 1
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 1
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 1
- 102000016971 Proto-Oncogene Proteins c-kit Human genes 0.000 description 1
- 108010014608 Proto-Oncogene Proteins c-kit Proteins 0.000 description 1
- 102000000813 Proto-Oncogene Proteins c-ret Human genes 0.000 description 1
- 108010001648 Proto-Oncogene Proteins c-ret Proteins 0.000 description 1
- 229930185560 Pseudouridine Natural products 0.000 description 1
- PTJWIQPHWPFNBW-UHFFFAOYSA-N Pseudouridine C Natural products OC1C(O)C(CO)OC1C1=CNC(=O)NC1=O PTJWIQPHWPFNBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100022578 Putative tyrosine-protein phosphatase TPTE Human genes 0.000 description 1
- 102000018795 RELT Human genes 0.000 description 1
- 108010052562 RELT Proteins 0.000 description 1
- 102100022491 RNA-binding protein NOB1 Human genes 0.000 description 1
- 101900083372 Rabies virus Glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- 101150066717 Rara gene Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102000004278 Receptor Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000873 Receptor Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 101710100969 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Proteins 0.000 description 1
- 102100029986 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Human genes 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 102400001051 Restin Human genes 0.000 description 1
- 241000712907 Retroviridae Species 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000710799 Rubella virus Species 0.000 description 1
- 102100025373 Runt-related transcription factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010005173 SERPIN-B5 Proteins 0.000 description 1
- 102100029198 SLAM family member 7 Human genes 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 102100021466 Sarcoma antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100038689 Scm-like with four MBT domains protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100037269 Secretoglobin family 3A member 2 Human genes 0.000 description 1
- 201000010208 Seminoma Diseases 0.000 description 1
- 102100028904 Serine/threonine-protein kinase MARK2 Human genes 0.000 description 1
- 101710181599 Serine/threonine-protein kinase STK11 Proteins 0.000 description 1
- 102100030333 Serpin B5 Human genes 0.000 description 1
- 101710173693 Short transient receptor potential channel 1 Proteins 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 1
- 102100035748 Squamous cell carcinoma antigen recognized by T-cells 3 Human genes 0.000 description 1
- 101710185775 Squamous cell carcinoma antigen recognized by T-cells 3 Proteins 0.000 description 1
- 241000295644 Staphylococcaceae Species 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 102100021669 Stromal cell-derived factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 102100035721 Syndecan-1 Human genes 0.000 description 1
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 1
- 108700019889 TEL-AML1 fusion Proteins 0.000 description 1
- 108010034610 TG4010 Proteins 0.000 description 1
- 102100033082 TNF receptor-associated factor 3 Human genes 0.000 description 1
- 108010065917 TOR Serine-Threonine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000013530 TOR Serine-Threonine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 229940126624 Tacatuzumab tetraxetan Drugs 0.000 description 1
- 108010017842 Telomerase Proteins 0.000 description 1
- 102000007000 Tenascin Human genes 0.000 description 1
- 108010008125 Tenascin Proteins 0.000 description 1
- 206010043276 Teratoma Diseases 0.000 description 1
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 1
- 108010046722 Thrombospondin 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102100024333 Toll-like receptor 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100024324 Toll-like receptor 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100033110 Toll-like receptor 8 Human genes 0.000 description 1
- 241000223996 Toxoplasma Species 0.000 description 1
- 201000005485 Toxoplasmosis Diseases 0.000 description 1
- 102100023935 Transmembrane glycoprotein NMB Human genes 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- LVTKHGUGBGNBPL-UHFFFAOYSA-N Trp-P-1 Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C(C)=C(N)N=C2C LVTKHGUGBGNBPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000223104 Trypanosoma Species 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 102100024587 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 15 Human genes 0.000 description 1
- 102100026890 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100032101 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 9 Human genes 0.000 description 1
- 102100040112 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B Human genes 0.000 description 1
- 102100029675 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B Human genes 0.000 description 1
- 102100029690 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C Human genes 0.000 description 1
- 101710178300 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C Proteins 0.000 description 1
- 102100028785 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14 Human genes 0.000 description 1
- 102100033728 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Human genes 0.000 description 1
- 101710187882 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Proteins 0.000 description 1
- 102100033732 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A Human genes 0.000 description 1
- 101710187743 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A Proteins 0.000 description 1
- 102100033733 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Human genes 0.000 description 1
- 101710187830 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Proteins 0.000 description 1
- 102100022202 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 27 Human genes 0.000 description 1
- 102100040403 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 Human genes 0.000 description 1
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 description 1
- 102100033444 Tyrosine-protein kinase JAK2 Human genes 0.000 description 1
- 101710112791 Tyrosine-protein kinase JAK2 Proteins 0.000 description 1
- 102100027244 U4/U6.U5 tri-snRNP-associated protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710155955 U4/U6.U5 tri-snRNP-associated protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 241000700647 Variola virus Species 0.000 description 1
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 1
- 108010053096 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000016663 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-3 Human genes 0.000 description 1
- 108010053100 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-3 Proteins 0.000 description 1
- 102100039037 Vascular endothelial growth factor A Human genes 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 241000607598 Vibrio Species 0.000 description 1
- 102100035071 Vimentin Human genes 0.000 description 1
- 108010065472 Vimentin Proteins 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 1
- 108700005077 Viral Genes Proteins 0.000 description 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 208000003152 Yellow Fever Diseases 0.000 description 1
- NYDLOCKCVISJKK-WRBBJXAJSA-N [3-(dimethylamino)-2-[(z)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] (z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(CN(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC NYDLOCKCVISJKK-WRBBJXAJSA-N 0.000 description 1
- 229950005186 abagovomab Drugs 0.000 description 1
- 229960000446 abciximab Drugs 0.000 description 1
- 229940028652 abraxane Drugs 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000004721 adaptive immunity Effects 0.000 description 1
- 229950009084 adecatumumab Drugs 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N adenyl group Chemical group N1=CN=C2N=CNC2=C1N GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000005188 adrenal gland cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024447 adrenal gland neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 229950008459 alacizumab pegol Drugs 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 102000013529 alpha-Fetoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 1
- 229950009106 altumomab Drugs 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 210000003001 amoeba Anatomy 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 229950006061 anatumomab mafenatox Drugs 0.000 description 1
- 230000000964 angiostatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 1
- 230000003527 anti-angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000002429 anti-coagulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 1
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 1
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 1
- 229950003145 apolizumab Drugs 0.000 description 1
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 229950005725 arcitumomab Drugs 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 210000004507 artificial chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 210000001106 artificial yeast chromosome Anatomy 0.000 description 1
- FZCSTZYAHCUGEM-UHFFFAOYSA-N aspergillomarasmine B Natural products OC(=O)CNC(C(O)=O)CNC(C(O)=O)CC(O)=O FZCSTZYAHCUGEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 229950003269 bectumomab Drugs 0.000 description 1
- 229960003270 belimumab Drugs 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- WGDUUQDYDIIBKT-UHFFFAOYSA-N beta-Pseudouridine Natural products OC1OC(CN2C=CC(=O)NC2=O)C(O)C1O WGDUUQDYDIIBKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- BBWBEZAMXFGUGK-UHFFFAOYSA-N bis(dodecylsulfanyl)-methylarsane Chemical compound CCCCCCCCCCCCS[As](C)SCCCCCCCCCCCC BBWBEZAMXFGUGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005522 bivatuzumab mertansine Drugs 0.000 description 1
- 229960003008 blinatumomab Drugs 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 238000002725 brachytherapy Methods 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 229960000455 brentuximab vedotin Drugs 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 229910052792 caesium Inorganic materials 0.000 description 1
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical compound [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229940088954 camptosar Drugs 0.000 description 1
- 239000003560 cancer drug Substances 0.000 description 1
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 1
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 1
- OMZCMEYTWSXEPZ-UHFFFAOYSA-N canertinib Chemical compound C1=C(Cl)C(F)=CC=C1NC1=NC=NC2=CC(OCCCN3CCOCC3)=C(NC(=O)C=C)C=C12 OMZCMEYTWSXEPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 1
- WNRZHQBJSXRYJK-UHFFFAOYSA-N carboxyamidotriazole Chemical compound NC1=C(C(=O)N)N=NN1CC(C=C1Cl)=CC(Cl)=C1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 WNRZHQBJSXRYJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950000771 carlumab Drugs 0.000 description 1
- 150000001767 cationic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229960000419 catumaxomab Drugs 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 230000006041 cell recruitment Effects 0.000 description 1
- 210000004671 cell-free system Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000007541 cellular toxicity Effects 0.000 description 1
- 229940106189 ceramide Drugs 0.000 description 1
- ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(CO)C(O)C=CCCC=C(C)CCCCCCCCC ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930183167 cerebroside Natural products 0.000 description 1
- RIZIAUKTHDLMQX-UHFFFAOYSA-N cerebroside D Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(C(O)C=CCCC=C(C)CCCCCCCCC)COC1OC(CO)C(O)C(O)C1O RIZIAUKTHDLMQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960005395 cetuximab Drugs 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019506 cigar Nutrition 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 229950010905 citatuzumab bogatox Drugs 0.000 description 1
- 229950006647 cixutumumab Drugs 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000011220 combination immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 description 1
- 229950007276 conatumumab Drugs 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 230000008094 contradictory effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 239000013601 cosmid vector Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N cytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 108010038764 cytoplasmic linker protein 170 Proteins 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 229950007409 dacetuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229960002482 dalotuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229960002448 dasatinib Drugs 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 208000025729 dengue disease Diseases 0.000 description 1
- 229960001251 denosumab Drugs 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000003831 deregulation Effects 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 229950008962 detumomab Drugs 0.000 description 1
- UMGXUWVIJIQANV-UHFFFAOYSA-M didecyl(dimethyl)azanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCC UMGXUWVIJIQANV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- OGQYPPBGSLZBEG-UHFFFAOYSA-N dimethyl(dioctadecyl)azanium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC OGQYPPBGSLZBEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002554 disease preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 239000003534 dna topoisomerase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 229950000006 ecromeximab Drugs 0.000 description 1
- 229960001776 edrecolomab Drugs 0.000 description 1
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 1
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 1
- 238000010894 electron beam technology Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229960004137 elotuzumab Drugs 0.000 description 1
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 229950003048 enavatuzumab Drugs 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 229950010640 ensituximab Drugs 0.000 description 1
- 229950009760 epratuzumab Drugs 0.000 description 1
- 230000008029 eradication Effects 0.000 description 1
- AAKJLRGGTJKAMG-UHFFFAOYSA-N erlotinib Chemical compound C=12C=C(OCCOC)C(OCCOC)=CC2=NC=NC=1NC1=CC=CC(C#C)=C1 AAKJLRGGTJKAMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950008579 ertumaxomab Drugs 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- 229950009569 etaracizumab Drugs 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 229950009929 farletuzumab Drugs 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 229950002846 ficlatuzumab Drugs 0.000 description 1
- 238000001825 field-flow fractionation Methods 0.000 description 1
- 229950008085 figitumumab Drugs 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000011354 first-line chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 229950010320 flanvotumab Drugs 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 238000005189 flocculation Methods 0.000 description 1
- 230000016615 flocculation Effects 0.000 description 1
- 238000001249 flow field-flow fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 229950004003 fresolimumab Drugs 0.000 description 1
- 229950001109 galiximab Drugs 0.000 description 1
- 210000004475 gamma-delta t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229950004896 ganitumab Drugs 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- XGALLCVXEZPNRQ-UHFFFAOYSA-N gefitinib Chemical compound C=12C=C(OCCCN3CCOCC3)C(OC)=CC2=NC=NC=1NC1=CC=C(F)C(Cl)=C1 XGALLCVXEZPNRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003297 gemtuzumab ozogamicin Drugs 0.000 description 1
- 229940020967 gemzar Drugs 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 238000011239 genetic vaccination Methods 0.000 description 1
- 229950003717 gevokizumab Drugs 0.000 description 1
- 229950002026 girentuximab Drugs 0.000 description 1
- 229940080856 gleevec Drugs 0.000 description 1
- 229950009672 glembatumumab vedotin Drugs 0.000 description 1
- 108060003196 globin Proteins 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000031169 hemorrhagic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 description 1
- 208000029824 high grade glioma Diseases 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000001794 hormone therapy Methods 0.000 description 1
- 208000029080 human African trypanosomiasis Diseases 0.000 description 1
- 102000057308 human HGF Human genes 0.000 description 1
- 102000058223 human VEGFA Human genes 0.000 description 1
- 229940088013 hycamtin Drugs 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036031 hyperthermia Effects 0.000 description 1
- 230000001146 hypoxic effect Effects 0.000 description 1
- 229950006359 icrucumab Drugs 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 238000002786 image-guided radiation therapy Methods 0.000 description 1
- 229960002411 imatinib Drugs 0.000 description 1
- YLMAHDNUQAMNNX-UHFFFAOYSA-N imatinib methanesulfonate Chemical compound CS(O)(=O)=O.C1CN(C)CCN1CC1=CC=C(C(=O)NC=2C=C(NC=3N=C(C=CN=3)C=3C=NC=CC=3)C(C)=CC=2)C=C1 YLMAHDNUQAMNNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005934 immune activation Effects 0.000 description 1
- 230000008102 immune modulation Effects 0.000 description 1
- 230000008629 immune suppression Effects 0.000 description 1
- 230000037189 immune system physiology Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000011293 immunotherapeutic strategy Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 229950004101 inotuzumab ozogamicin Drugs 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000002623 insulin potentiation therapy Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 238000011368 intensive chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 229950001014 intetumumab Drugs 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 229960004768 irinotecan Drugs 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 229960004130 itraconazole Drugs 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 229950000518 labetuzumab Drugs 0.000 description 1
- BCFGMOOMADDAQU-UHFFFAOYSA-N lapatinib Chemical compound O1C(CNCCS(=O)(=O)C)=CC=C1C1=CC=C(N=CN=C2NC=3C=C(Cl)C(OCC=4C=C(F)C=CC=4)=CC=3)C2=C1 BCFGMOOMADDAQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000681 leflunomide Drugs 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 1
- 229950002884 lexatumumab Drugs 0.000 description 1
- 229950005173 libivirumab Drugs 0.000 description 1
- 229950002950 lintuzumab Drugs 0.000 description 1
- 125000003473 lipid group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002634 lipophilic molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 229950003526 lorvotuzumab mertansine Drugs 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 229950004563 lucatumumab Drugs 0.000 description 1
- 229950000128 lumiliximab Drugs 0.000 description 1
- 201000005296 lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 201000010453 lymph node cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- 201000011614 malignant glioma Diseases 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 229950001869 mapatumumab Drugs 0.000 description 1
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 description 1
- 229950008001 matuzumab Drugs 0.000 description 1
- 210000002752 melanocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960005108 mepolizumab Drugs 0.000 description 1
- 210000003716 mesoderm Anatomy 0.000 description 1
- 230000007102 metabolic function Effects 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 229950003734 milatuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229950003063 mitumomab Drugs 0.000 description 1
- 229950007699 mogamulizumab Drugs 0.000 description 1
- ZDZOTLJHXYCWBA-BSEPLHNVSA-N molport-006-823-826 Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-BSEPLHNVSA-N 0.000 description 1
- 238000011294 monotherapeutic Methods 0.000 description 1
- 229950000720 moxetumomab pasudotox Drugs 0.000 description 1
- 238000000569 multi-angle light scattering Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- PUPNJSIFIXXJCH-UHFFFAOYSA-N n-(4-hydroxyphenyl)-2-(1,1,3-trioxo-1,2-benzothiazol-2-yl)acetamide Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1NC(=O)CN1S(=O)(=O)C2=CC=CC=C2C1=O PUPNJSIFIXXJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JTSLALYXYSRPGW-UHFFFAOYSA-N n-[5-(4-cyanophenyl)-1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-yl]pyridine-3-carboxamide Chemical compound C=1C=CN=CC=1C(=O)NC(C1=C2)=CNC1=NC=C2C1=CC=C(C#N)C=C1 JTSLALYXYSRPGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002790 naphthalenes Chemical class 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 229960000513 necitumumab Drugs 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N newbouldiamide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)C(O)C(CO)NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940080607 nexavar Drugs 0.000 description 1
- 229960001346 nilotinib Drugs 0.000 description 1
- HHZIURLSWUIHRB-UHFFFAOYSA-N nilotinib Chemical compound C1=NC(C)=CN1C1=CC(NC(=O)C=2C=C(NC=3N=C(C=CN=3)C=3C=NC=CC=3)C(C)=CC=2)=CC(C(F)(F)F)=C1 HHZIURLSWUIHRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950010203 nimotuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003301 nivolumab Drugs 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229960003347 obinutuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229960002450 ofatumumab Drugs 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 229950008516 olaratumab Drugs 0.000 description 1
- 229950000846 onartuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229950009057 oportuzumab monatox Drugs 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960001972 panitumumab Drugs 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229950010966 patritumab Drugs 0.000 description 1
- 229950011098 pendetide Drugs 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229940067082 pentetate Drugs 0.000 description 1
- 229930192851 perforin Natural products 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 238000011170 pharmaceutical development Methods 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002428 photodynamic therapy Methods 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 210000004694 pigment cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940126620 pintumomab Drugs 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940063179 platinol Drugs 0.000 description 1
- 229920000724 poly(L-arginine) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920000729 poly(L-lysine) polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 229950009904 pritumumab Drugs 0.000 description 1
- 230000005522 programmed cell death Effects 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 1
- 229940021993 prophylactic vaccine Drugs 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 1
- 229950011613 racotumomab Drugs 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 229950011639 radretumab Drugs 0.000 description 1
- 229950002786 rafivirumab Drugs 0.000 description 1
- 229960002633 ramucirumab Drugs 0.000 description 1
- 230000010837 receptor-mediated endocytosis Effects 0.000 description 1
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000004627 regenerated cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000002787 reinforcement Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 229950003238 rilotumumab Drugs 0.000 description 1
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 1
- 229950001808 robatumumab Drugs 0.000 description 1
- 229960003522 roquinimex Drugs 0.000 description 1
- 201000005404 rubella Diseases 0.000 description 1
- 229910052701 rubidium Inorganic materials 0.000 description 1
- IGLNJRXAVVLDKE-UHFFFAOYSA-N rubidium atom Chemical compound [Rb] IGLNJRXAVVLDKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000002020 sage Nutrition 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 208000011581 secondary neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000001338 self-assembly Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 229950008684 sibrotuzumab Drugs 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 229960003323 siltuximab Drugs 0.000 description 1
- 201000002612 sleeping sickness Diseases 0.000 description 1
- 208000000649 small cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 229960000487 sorafenib tosylate Drugs 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000009199 stereotactic radiation therapy Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012906 subvisible particle Substances 0.000 description 1
- 235000011044 succinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000003444 succinic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960001796 sunitinib Drugs 0.000 description 1
- WINHZLLDWRZWRT-ATVHPVEESA-N sunitinib Chemical compound CCN(CC)CCNC(=O)C1=C(C)NC(\C=C/2C3=CC(F)=CC=C3NC\2=O)=C1C WINHZLLDWRZWRT-ATVHPVEESA-N 0.000 description 1
- 229960002812 sunitinib malate Drugs 0.000 description 1
- FIAFUQMPZJWCLV-UHFFFAOYSA-N suramin Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC(S(O)(=O)=O)=C2C(NC(=O)C3=CC=C(C(=C3)NC(=O)C=3C=C(NC(=O)NC=4C=C(C=CC=4)C(=O)NC=4C(=CC=C(C=4)C(=O)NC=4C5=C(C=C(C=C5C(=CC=4)S(O)(=O)=O)S(O)(=O)=O)S(O)(=O)=O)C)C=CC=3)C)=CC=C(S(O)(=O)=O)C2=C1 FIAFUQMPZJWCLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005314 suramin Drugs 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000007761 synergistic anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229950010265 tabalumab Drugs 0.000 description 1
- 101150047061 tag-72 gene Proteins 0.000 description 1
- 229950001603 taplitumomab paptox Drugs 0.000 description 1
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 1
- 229950001899 tasquinimod Drugs 0.000 description 1
- ONDYALNGTUAJDX-UHFFFAOYSA-N tasquinimod Chemical compound OC=1C=2C(OC)=CC=CC=2N(C)C(=O)C=1C(=O)N(C)C1=CC=C(C(F)(F)F)C=C1 ONDYALNGTUAJDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950001289 tenatumomab Drugs 0.000 description 1
- 229950010259 teprotumumab Drugs 0.000 description 1
- 229960003433 thalidomide Drugs 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 238000011285 therapeutic regimen Methods 0.000 description 1
- 229940021747 therapeutic vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 229950004742 tigatuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229940044693 topoisomerase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229960000303 topotecan Drugs 0.000 description 1
- 229960005267 tositumomab Drugs 0.000 description 1
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229950007217 tremelimumab Drugs 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000001573 trophoblastic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001005 tuberculin Drugs 0.000 description 1
- 229950003364 tucotuzumab celmoleukin Drugs 0.000 description 1
- 108700008509 tucotuzumab celmoleukin Proteins 0.000 description 1
- 229940038237 tumor antigen vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 1
- 230000001875 tumorinhibitory effect Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229950004593 ublituximab Drugs 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950005972 urelumab Drugs 0.000 description 1
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 108010060757 vasostatin Proteins 0.000 description 1
- 229950000578 vatalanib Drugs 0.000 description 1
- YCOYDOIWSSHVCK-UHFFFAOYSA-N vatalanib Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1NC(C1=CC=CC=C11)=NN=C1CC1=CC=NC=C1 YCOYDOIWSSHVCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LLDWLPRYLVPDTG-UHFFFAOYSA-N vatalanib succinate Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O.C1=CC(Cl)=CC=C1NC(C1=CC=CC=C11)=NN=C1CC1=CC=NC=C1 LLDWLPRYLVPDTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 210000005048 vimentin Anatomy 0.000 description 1
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 1
- AQTQHPDCURKLKT-PNYVAJAMSA-N vincristine sulfate Chemical compound OS(O)(=O)=O.C([C@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C=O)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 AQTQHPDCURKLKT-PNYVAJAMSA-N 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 229950001212 volociximab Drugs 0.000 description 1
- 229950003511 votumumab Drugs 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
- 229950008250 zalutumumab Drugs 0.000 description 1
- 229950009002 zanolimumab Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
- A61K48/0008—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'non-active' part of the composition delivered, e.g. wherein such 'non-active' part is not delivered simultaneously with the 'active' part of the composition
- A61K48/0025—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'non-active' part of the composition delivered, e.g. wherein such 'non-active' part is not delivered simultaneously with the 'active' part of the composition wherein the non-active part clearly interacts with the delivered nucleic acid
- A61K48/0033—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'non-active' part of the composition delivered, e.g. wherein such 'non-active' part is not delivered simultaneously with the 'active' part of the composition wherein the non-active part clearly interacts with the delivered nucleic acid the non-active part being non-polymeric
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
- A61K48/0008—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'non-active' part of the composition delivered, e.g. wherein such 'non-active' part is not delivered simultaneously with the 'active' part of the composition
- A61K48/0025—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'non-active' part of the composition delivered, e.g. wherein such 'non-active' part is not delivered simultaneously with the 'active' part of the composition wherein the non-active part clearly interacts with the delivered nucleic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
- A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
- A61K9/1272—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers with substantial amounts of non-phosphatidyl, i.e. non-acylglycerophosphate, surfactants as bilayer-forming substances, e.g. cationic lipids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Una composición farmacéutica que comprende nanopartículas que comprenden al menos un lípido catiónico, al menos un lípido auxiliar neutro y ARN que codifica al menos un antígeno para usar en un método para administrar el al menos un antígeno a células presentadoras de antígenos profesionales en el bazo de un sujeto, donde dicho método comprende la administración sistémica de la composición farmacéutica al sujeto, en donde el antígeno es un antígeno asociado a la enfermedad o provoca una respuesta inmune contra un antígeno asociado a la enfermedad o células que expresan un antígeno asociado a la enfermedad, y en donde las nanopartículas son lipoplexos que comprenden (i) DOTMA y DOPE en una relación molar de 8:2 a 3:7, preferiblemente de 7:3 a 5:5, en donde la relación de carga de las cargas positivas en DOTMA a las cargas negativas en el ARN es de 1,6:2 a 1:2, preferiblemente 1,4:2 a 1,1:2; o (ii) DOTMA y colesterol en una relación molar de 8:2 a 3:7, preferiblemente de 7:3 a 5:5, en donde la relación de carga de las cargas positivas en DOTMA a las cargas negativas en el ARN es de 1,6:2 a 1:2, preferiblemente 1,4:2 a 1,1:2; o (iii) DOTAP y DOPE en una relación molar de 8:2 a 3:7, preferiblemente de 7:3 a 55, en donde la relación de carga de cargas positivas en DOTAP a cargas negativas en el ARN es de 1,6: 2 a 1:2, preferiblemente 1,4:2 a 1,1:2.
Description
DESCRIPCIÓN
Formulación de ARN para inmunoterapia.
Campo técnico de la invención
La presente invención está en el campo de la inmunoterapia, en particular la inmunoterapia de tumores. La presente invención se refiere al suministro de formulaciones farmacéuticas para administrar ARN con alta selectividad a células presentadoras de antígeno tales como células dendríticas (CD) en el bazo después de una administración sistémica. En particular, las formulaciones descritas en este documento permiten inducir una respuesta inmune después de la administración sistémica de ARN codificante de antígeno.
Antecedentes de la invención
Los ácidos nucleicos como el ADN, siARN o ARN son de interés para diversas intervenciones terapéuticas en pacientes. Un enfoque inmunológico relativamente nuevo en la terapia tumoral se basa en la expresión del antígeno tumoral mediante la codificación del ARN en las células presentadoras de antígeno (APC) para inducir una respuesta de las células T al tumor (Weide, B. et al. (2008) Journal of Immunotherapy 31(2):180-188; Weide, B. et al. (2009) Journal of Immunotherapy 32(5): 498-507; Kreiter, S. et al. (2010) Cancer Res 70(22): 9031-9040; Kuhn, A. N. et al. (2010) Gene Ther 17(8): 961-971). Las células diana para dicha intervención son células dendríticas (DC) que residen, por ejemplo, en los ganglios linfáticos (LN) o en el bazo.
A fin de proporcionar una captación suficiente del ARN por parte de las CD, la administración local de ARN a los ganglios linfáticos ha demostrado ser exitosa. Sin embargo, dicha administración local requiere habilidades específicas por parte del médico. Por lo tanto, existe una necesidad de formulaciones de ARN que puedan administrarse sistémicamente, por ejemplo, por vía intravenosa (i.v.), por vía subcutánea (s.c.), por vía intradérmica (i.d.) o por inhalación. De la bibliografía, se conocen varios enfoques para la administración sistémica de ácidos nucleicos. En la transferencia de genes no virales, los liposomas catiónicos se utilizan para inducir la condensación de ADN/ARN y para facilitar la captación celular. Los liposomas catiónicos generalmente consisten en un lípido catiónico, como DOTAP, y uno o más lípidos auxiliares, como DOPE. Los llamados 'lipoplexos' pueden formarse a partir de los liposomas catiónicos (cargados positivamente) y el ácido nucleico aniónico (cargado negativamente). En el caso más simple, los lipoplexos se forman espontáneamente mezclando el ácido nucleico con los liposomas con un protocolo de mezcla determinado, sin embargo, se pueden aplicar diversos otros protocolos. Las interacciones electrostáticas entre los liposomas cargados positivamente y el ácido nucleico cargado negativamente son la fuerza impulsora para la formación de lipoplexos. Además de la composición lipídica, la relación de carga entre las unidades estructurales catiónicas y aniónicas desempeña un papel clave para la condensación y la transfección eficientes. En general, un exceso de carga positiva de los lipoplexos se considera necesario para una transfección eficaz (Templeton, N. S. et al. (1997) Nature Biotechnology 15(7): 647-652; Zhdanov, R. I. et al. (2002) Bioelectrochemistry 58(1): 53-64; Templeton, N. S. (2003) Current Medicinal Chemistry 10(14): 1279-1287). La mayoría de las membranas naturales tienen carga negativa y, por lo tanto, la interacción electrostática atractiva entre los lipoplexos con carga positiva y la biomembrana con carga negativa puede jugar un papel importante en la unión celular y la captación de los lipoplexos. Los rangos típicos de las relaciones de /- que se consideran óptimos para la transfección están entre 2 y 4. Con una carga positiva en exceso inferior, la eficacia de la transfección se reduce en forma drástica a virtualmente cero. Desafortunadamente, para liposomas y lipoplexos cargados positivamente se ha informado de una toxicidad elevada, que puede ser un problema para la aplicación de tales preparaciones como productos farmacéuticos.
El documento US 2011/0311584 se refiere al suministro de ARN a las células para la vacunación o la inmunoestimulación, en particular los antígenos codificantes de ARN asociados con enfermedades infecciosas o una enfermedad cancerosa. En general, se menciona que el ARN se puede administrar a través de liposomas que en general incluyen fosfolípidos neutros o cargados negativamente.
Martinon F. et al., 1993, Eur. J. Immunol. 23, 1719-1722 describen un ARNm atrapado en liposomas capaz de inducir linfocitos T citotóxicos específicos del virus.
El documento WO 2011/005799 se refiere a una molécula de ARN autorreplicante atrapada en un liposoma cargado positivamente que puede administrarse a un sujeto, por ejemplo, para terapia génica o vacunación.
El documento US 5.580.859 se refiere a moléculas de ADN y ARN que pueden administrarse en asociación con un liposoma cargado positivamente.
El documento WO 2012/006378 se refiere al ARN que codifica un inmunógeno administrado en un liposoma para los fines de la inmunización.
El documento WO 2013/113502 A1 se refiere a ácidos nucleicos cargados negativamente que comprenden complejos para la inmunoestimulación.
El documento WO 2010/037539 A1 se refiere a composiciones que comprenden un ARN(m) complejado y un ARNm
desnudo para la inmunoestimulación.
Los lipoplexos descritos anteriormente han demostrado que son capaces de permitir la transfección en diversos órganos. La distribución de órganos detallada de la expresión depende de los parámetros de formulación y administración (composición de lípidos, tamaño, vía de administración) de una manera compleja. Hasta ahora, la expresión selectiva en un órgano diana o un resto celular dado, evitando la expresión en órganos fuera del objetivo, no se pudo realizar de manera suficiente. Se ha informado el uso de ADN o a Rn de luciferasa como informante, por ejemplo, transfección en pulmón, hígado, bazo, riñones y corazón. Se ha demostrado que es particularmente difícil evitar el direccionamiento al pulmón y al hígado, ya que, en muchos casos, el direccionamiento al pulmón y al hígado son predominantes. El pulmón tiene una superficie muy grande y es el primer órgano al que los compuestos inyectados por vía i.v. pasan después de la administración. El hígado es un órgano diana típico para liposomas y formulaciones con compuestos lipofílicos como los lípidos presentes en los lipoplexos.
Para la inmunoterapia a base del ARN, el direccionamiento a los pulmones o el hígado puede ser perjudicial, debido al riesgo de una respuesta inmune contra estos órganos. Por lo tanto, para tal terapia, se requiere una formulación con alta selectividad sólo para las CD, como en el bazo. Se han propuesto ciertos ligandos para mejorar la selectividad de direccionamiento. Por ejemplo, se considera que los liposomas que comprenden lípidos funcionalizados con manosa mejoran el direccionamiento de los macrófagos. Sin embargo, tales componentes vuelven a las formulaciones más complejas, lo que hace que el desarrollo farmacéutico práctico sea más complicado. Además, la selectividad es limitada y una cierta fracción de los liposomas todavía es absorbida por otros órganos. Otro problema son las interacciones séricas y la degradación del ARN en el suero, que es favorecida por lipoplexos cargados positivamente. Además, para la aplicabilidad terapéutica, deben cumplirse los requisitos para productos farmacéuticos como la estabilidad química y física. Además, los productos para aplicación intraperitoneal deben ser estériles y cumplir con ciertos requisitos con respecto a las características de las partículas. Adicionalmente, los productos deben ser apropiados para la fabricación.
En resumen, el problema del desarrollo de una formulación de ARN inyectable con alta selectividad por el bazo, que cumple con los criterios de productos para la aplicación a pacientes, aún necesita ser resuelto.
La presente invención proporciona una solución al problema descrito con anterioridad. Sorprendentemente, se encontró que los lipoplexos cargados negativamente del ARN y los liposomas conducen a una expresión sustancial de ARN en las CD de bazo después de la administración sistémica. Se determinó una fuerte expresión del gen informante en las células diana (bazo) mientras que la expresión en otros órganos era baja. Además, podría inducirse una fuerte respuesta inmune contra un antígeno modelo. Esto fue inesperado, ya que, por lo general, el exceso de carga positiva se considera un requisito previo para la captación y expresión exitosas. Aquí hemos encontrado que, aunque la cantidad absoluta de expresión decrece al disminuir el exceso de carga positiva, la expresión es todavía lo suficientemente alta como para proporcionar la eficacia terapéutica de los lipoplexos después de la administración sistémica.
De acuerdo con la invención, fue posible formar los lipoplexos con un perfil de distribución de tamaño de partícula bien definido medido por dispersión de luz dinámica y con una fracción baja de partículas subvisibles, que se requiere para la administración intravenosa a pacientes. Si se forman mediante la incubación de liposomas con ARN por autoensamblaje, el tamaño de partícula de los liposomas originales se ve poco afectado, y no se encuentran restos no deseados de agregados grandes. Se pueden obtener diferentes tamaños seleccionando el tamaño de los liposomas precursores y las condiciones de mezcla. Esto fue sorprendente porque generalmente se observa la formación de agregados grandes en la incubación de ARN con liposomas catiónicos. Esta formación de agregados es un obstáculo importante para el desarrollo de formulaciones de lipoplexos que son aceptables para la administración intravenosa o subcutánea. Las partículas fueron estables durante al menos 24 horas y no tendían a agregarse con el tiempo. Las partículas podrían congelarse y descongelarse sin formación de agregados, manteniendo el perfil de tamaño de partícula original y manteniendo la actividad biológica. Las partículas podrían liofilizarse y reconstituirse con agua sin formación de agregados, manteniendo el perfil de tamaño de partícula original y manteniendo la actividad biológica. Las partículas pueden fabricarse mediante diferentes protocolos que son escalables y que se pueden realizar en condiciones controladas. Con tales propiedades, las formulaciones de lipoplexos de la invención cumplen requisitos importantes para formulaciones farmacéuticas para aplicación a pacientes, en términos de perfil de distribución de tamaño de partícula y estabilidad. Por otra parte, en comparación con los lipoplexos cargados positivamente, se espera que las nanopartículas de ARN descritas en este documento sean menos tóxicas y muestren menos interacciones séricas no deseadas. En particular, las formulaciones son adecuadas para administración parenteral, incluyendo administración intravenosa y subcutánea.
Descripción de la invención
Compendio de la invención
Las estrategias inmunoterapéuticas son opciones prometedoras para el tratamiento de, por ejemplo, enfermedades infecciosas y enfermedades cancerosas. La identificación del nuevo número de antígenos asociados a patógenos y a tumores (también denominados antígenos tumorales en este documento) condujo a una amplia colección de objetivos adecuados para la inmunoterapia.
La presente invención generalmente abarca el tratamiento inmunoterapéutico de enfermedades dirigiéndose a células enfermas. La invención proporciona la erradicación selectiva de células que expresan un antígeno, minimizando así los efectos adversos para las células normales que no expresan dichos antígenos. Por lo tanto, las enfermedades preferidas para una terapia son aquellas en las que se expresan uno o más antígenos, tales como enfermedades cancerosas o enfermedades infecciosas.
La presente invención tiene como objetivo dirigirse específicamente a las células que expresan antígeno mediante inmunización activa induciendo y expandiendo células T en el paciente, que son capaces de reconocer específicamente y matar células enfermas. Específicamente, la presente invención permite la incorporación selectiva de un antígeno representado como ARN en células presentadoras de antígeno tales como células dendríticas in vivo. El antígeno puede procesarse para producir un compañero peptídico para la molécula de MHC o puede presentarse sin la necesidad de un procesamiento adicional, si puede unirse a las moléculas de MHC. Se da preferencia a formas de administración en las que el antígeno completo se procesa in vivo por las células presentadoras de antígeno, ya que esto también puede producir respuestas de células T auxiliares que son necesarias para una respuesta inmune eficaz. Por lo tanto, las composiciones proporcionadas de acuerdo con la invención cuando se administran a un paciente proporcionan uno o más epítopos presentados por MHC para estimular, cebar y/o expandir células T dirigidas contra células que expresan antígenos de los que se derivan los epítopos presentados por MHC.
Por consiguiente, las composiciones descritas en el presente documento son preferiblemente capaces de inducir o promover una respuesta celular, preferiblemente actividad de células T citotóxicas, contra una enfermedad caracterizada por la presentación de antígenos con MHC de clase I.
En particular, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende nanopartículas que comprenden al menos un lípido catiónico, al menos un lípido auxiliar neutro y ARN que codifica al menos un antígeno para usar en un método para administrar el al menos un antígeno al antígeno profesional que presenta células en el bazo de un sujeto, donde dicho método comprende administrar en forma sistémica la composición farmacéutica al sujeto,
en donde el antígeno es un antígeno asociado a la enfermedad o provoca una respuesta inmune contra un antígeno asociado a la enfermedad o células que expresan un antígeno asociado a la enfermedad, y en donde las nanopartículas son lipoplexos que comprenden
(i) DOTMA y DOPE en una relación molar de 8:2 a 3:7, preferiblemente de 7:3 a 5:5, en donde la relación de carga de las cargas positivas en DOTMA a las cargas negativas en el ARN es de 1,6:2 a 1:2, preferiblemente 1,4:2 a 1,1:2; o
(ii) DOTMA y colesterol en una relación molar de 8:2 a 3:7, preferiblemente de 7:3 a 5:5, en donde la relación de carga de las cargas positivas en DOTMA a las cargas negativas en el ARN es de 1,6:2 a 1:2, preferiblemente 1,4:2 a 1,1:2; o
(iii) DOTAP y DOPE en una relación molar de 8:2 a 3:7, preferiblemente de 7:3 a 5:5, en donde la relación de carga de cargas positivas en DOTAP a cargas negativas en el ARN es de 1,6:2 a 1:2, preferiblemente 1,4:2 a 1,1:2.
Preferiblemente, las nanopartículas descritas en el presente documento son coloidalmente estables durante al menos 2 horas en el sentido de que no hay agregación, precipitación o aumento de tamaño e índice de polidispersidad en más del 30% según lo medido por la dispersión dinámica de la luz.
En una realización, el potencial zeta de las nanopartículas es de -5 o menos, de -10 o menos, de -15 o menos, de -20 o menos o de -25 o menos. En diversas realizaciones, el potencial zeta de las nanopartículas es de -35 o superior, de -30 o superior o de -25 o superior. En una realización, las nanopartículas tienen un potencial zeta de 0 mV a -50 mV, preferiblemente de 0 mV a -40 mV o de -10 mV a -30 mV.
El lípido catiónico puede ser monocatiónico o policatiónico. Cualquier molécula anfifílica catiónica, por ejemplo, una molécula que comprende al menos una unidad estructural hidrófila y lipofílica es un lípido catiónico en el sentido de la presente invención. El lípido auxiliar neutro puede ser un lípido natural, como un fosfolípido o un análogo de un lípido natural, o un lípido completamente sintético, o una molécula similar a un lípido, sin similitudes con los lípidos naturales. En una realización, el lípido catiónico y/o el lípido auxiliar neutro es un lípido formador de bicapa.
En diversas realizaciones, los lípidos no están funcionalizados como funcionalizados por manosa, histidina y/o imidazol, las nanopartículas no comprenden un ligando de direccionamiento tal como lípidos funcionalizados por manosa y/o las nanoparticulas no comprenden uno o más de los siguientes: compuestos dependientes del pH, polímeros catiónicos tales como polímeros que contienen histidina y/o polilisina, en donde los polímeros pueden opcionalmente PEGilarse y/o histidilarse, o iones divalentes tales como Ca2+.
En una realización, las nanopartículas tienen un diámetro promedio en el intervalo de 50 nm a 1000 nm, preferiblemente de 50 nm a 400 nm, preferiblemente de 100 nm a 300 nm, tal como de 150 nm a 200 nm. En una realización, las nanopartículas tienen un diámetro en el intervalo de 200 a 700 nm, de 200 a 600 nm, preferiblemente
de 250 a 550 nm, en particular de 300 a 500 nm o de 200 a 400 nm.
En una realización, el índice de polidispersidad de las nanopartículas descritas en el presente documento según se mide por dispersión dinámica de la luz es de 0,5 o menos, preferiblemente de 0,4 o menos o incluso más preferiblemente 0,3 o menos.
En una realización no de acuerdo con la invención, las nanopartículas descritas en el presente documento pueden obtenerse mediante uno o más de los siguientes: (i) incubación de liposomas en una fase acuosa con el ARN en una fase acuosa, (ii) incubación del lípido disuelto en un disolvente orgánico miscible con agua, como el etanol, con el ARN en solución acuosa, (iii) técnica de evaporación en fase inversa, (iv) congelación y descongelación del producto, (v) deshidratación y rehidratación del producto, (vi) liofilización y rehidratación del producto, o (vii) secado por aspersión y rehidratación del producto.
En una realización no de acuerdo con la invención, las nanopartículas se producen mediante un proceso que comprende una etapa de incubación del ARN con cationes bivalentes, preferiblemente a una concentración de entre 0,1 mM a 5 mM, tal como de 0,1 mM a 4 mM o de 0,3 mM a 1 mM antes de la incorporación en dichas nanopartículas y/o incubación del ARN con iones monovalentes, preferiblemente a una concentración de entre 1 mM y 500 mM, tal como de 100 mM a 200 mM o de 130 mM a 170 mM antes de la incorporación en dichas nanopartículas y/o incubación del ARN con reguladores antes de la incorporación en dichas nanopartículas.
En una realización no según la invención, después de la incubación de los cationes bivalentes al ARN, está implicada una etapa de dilución mediante la adición de liposomas y/u otras fases acuosas por al menos un factor de más de 1,5, preferiblemente por un factor de más de 2, o por un factor de más de 5.
En una realización, los cationes bivalentes son iones calcio, donde la concentración final de dichos iones calcio es menor que 4 mM, preferiblemente menor que 3 mM e incluso más preferiblemente, de 2,2 mM o menos.
En una realización no de acuerdo con la invención, las nanopartículas descritas en el presente documento se producen mediante un proceso que comprende una etapa de extrusión y/o una etapa de filtración y/o una etapa de liofilización de las nanopartículas.
En una realización, después de la administración sistémica de las nanopartículas, se produce la expresión de ARN en el bazo. En una realización, después de la administración sistémica de las nanopartículas, no se produce o prácticamente no se produce una expresión de ARN en el pulmón y/o el hígado. En una realización, después de la administración sistémica de las nanopartículas, la expresión de ARN en el bazo es al menos 5 veces, preferiblemente al menos 8 veces, preferiblemente al menos 10 veces, preferiblemente al menos 20 veces, preferiblemente al menos 50 veces, preferiblemente al menos 100 veces, preferiblemente al menos 1000 veces o incluso más la cantidad de expresión de ARN en el pulmón. En una realización, después de la administración sistémica de las nanopartículas, se produce la expresión de ARN en células presentadoras de antígeno, preferiblemente células presentadoras de antígeno profesionales en el bazo.
Las nanopartículas, cuando se administran sistémicamente, se dirigen o se acumulan en el bazo. En particular, las nanopartículas cuando se administran sistémicamente suministran el ARN a células presentadoras de antígenos profesionales, como las células dendríticas y/o macrófagos en el bazo. Preferiblemente, las nanopartículas liberan el ARN en el órgano o tejido objetivo y/o ingresan en las células en el órgano o tejido objetivo, en donde el órgano o tejido objetivo es el bazo y las células en el órgano o tejido objetivo son células presentadoras de antígenos profesionales, como las células dendríticas. En una realización, las nanopartículas cuando se administran sistémicamente no se dirigen o no se concentran esencialmente en el pulmón y/o el hígado. En una realización, la cantidad de nanopartículas dirigidas o acumuladas en el bazo es de al menos 5 veces, preferiblemente de al menos 8 veces, preferiblemente de al menos 10 veces, preferiblemente de al menos 20 veces, preferiblemente de al menos 50 veces, preferiblemente de al menos 100 veces, preferiblemente de al menos 1000 veces o incluso más que la cantidad dirigida o acumulada en el pulmón.
De acuerdo con la invención, la administración sistémica es preferiblemente por administración parenteral, preferiblemente por administración intravenosa, administración subcutánea, administración intradérmica o administración intraarterial.
La composición farmacéutica de la invención puede comprender además uno o más vehículos, diluyentes y/o excipientes farmacéuticamente aceptables. La composición farmacéutica de la invención puede comprender además al menos un adyuvante.
La composición farmacéutica de la invención se puede formular para administración sistémica.
La composición farmacéutica de la invención se puede usar para inducir una respuesta inmune, en particular una respuesta inmune contra un antígeno asociado a la enfermedad o células que expresan un antígeno asociado a la enfermedad, tal como una respuesta inmune contra el cáncer. Por consiguiente, la composición farmacéutica se puede usar para el tratamiento profiláctico y/o terapéutico de una enfermedad que implica un antígeno asociado a la enfermedad o células que expresan un antígeno asociado a la enfermedad, tal como el cáncer. Preferiblemente,
dicha respuesta inmune es una respuesta de células T. En una realización, el antígeno asociado a la enfermedad es un antígeno tumoral.
En una realización, el ARN comprendido en las nanopartículas descritas en este documento no comprende residuos de pseudouridina y preferiblemente no comprende nucleósidos modificados. Otras características y ventajas de la presente invención serán evidentes a partir de la siguiente descripción detallada y las reivindicaciones.
Descripción detallada de la invención
Aunque la presente invención se describe en detalle a continuación, debe entenderse que esta invención no está limitada a las metodologías, protocolos y reactivos particulares descritos en el presente documento, ya que éstos pueden variar. También debe entenderse que la terminología utilizada en el presente documento tiene el propósito de describir sólo realizaciones particulares, y no pretende limitar el alcance de la presente invención, que estará limitada únicamente por las reivindicaciones adjuntas. A menos que se defina lo contrario, todos los términos técnicos y científicos utilizados en este documento tienen los mismos significados que entiende comúnmente un experto en la técnica.
A continuación, se describirán los elementos de la presente invención.
Preferiblemente, los términos utilizados aquí se definen como se describe en “A multilingual glossary of biotechnological terms: (IUPAC Recommendations)”, H.G.W. Leuenberger, B. Nagel y H. Kolbl, Eds., (1995) Helvetica Chimica Acta, CH-4010 Basilea, Suiza.
La práctica de la presente invención empleará, a menos que se indique lo contrario, los métodos convencionales de bioquímica, biología celular, inmunología y técnicas de ADN recombinante que se explican en la bibliografía en este campo (véase, por ejemplo, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd. edition, J. Sambrook et al. Eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor 1989).
A lo largo de esta memoria descriptiva y de las reivindicaciones que siguen, a menos que el contexto requiera lo contrario, se entenderá que la palabra “comprender” y las variaciones como “comprende” y “que comprende” implican la inclusión de un miembro, número entero, etapa o grupo establecido de miembros, números enteros o etapas, pero no la exclusión de cualquier otro miembro, número entero o etapa o grupo de miembros, números enteros o etapas, aunque en algunas realizaciones se pueden excluir otros miembros, números enteros o etapas o grupos de miembros, números enteros o etapas, es decir, el tema consiste en la inclusión de un miembro, número entero o etapa o grupo de miembros, enteros o etapas establecidos. Se debe interpretar que los términos “un” y “una” y “el” y “la” y la referencia similar utilizada en el contexto de la descripción de la invención (especialmente en el contexto de las reivindicaciones) cubren tanto el singular como el plural, a menos que se indique lo contrario en el presente documento o sea claramente contradictorio por el contexto. La mención de los intervalos de valores en este documento tiene la intención de servir como un método abreviado para referirse individualmente a cada valor separado que se encuentre dentro del intervalo. A menos que se indique lo contrario en este documento, cada valor individual se incorpora a la memoria descriptiva como si se hubiera mencionado individualmente en este documento. Todos los métodos descritos en este documento pueden realizarse en cualquier orden adecuado, a menos que se indique lo contrario en este documento o el contexto lo contradiga claramente. El uso de cualquiera y todos los ejemplos, o lenguaje indicativo de ejemplo (por ejemplo, “tal como”), proporcionado en este documento, pretende simplemente ilustrar mejor la invención y no plantea una limitación en el alcance de la invención reivindicada de otro modo. Ningún lenguaje en la especificación debe interpretarse como un indicador de ningún elemento no reivindicado esencial para la práctica de la invención.
La presente invención describe agentes y composiciones que tras la administración inducen una respuesta inmune, en particular una respuesta inmune celular, dirigida contra un antígeno asociado a la enfermedad o células que expresan un antígeno asociado a la enfermedad, tales como células cancerosas. En particular, la presente invención prevé el uso de ARN que codifica proteínas o péptidos antigénicos (también denominados “antígeno” en el presente documento) que induce una respuesta inmune, en particular una respuesta de células T, contra el antígeno asociado a la enfermedad o células que expresan el antígeno asociado a la enfermedad. Estas proteínas o péptidos antigénicos pueden comprender una secuencia que corresponde esencialmente o es idéntica a la secuencia del antígeno asociado a la enfermedad o uno o más fragmentos del mismo. En una realización, la proteína o péptido antigénico comprende la secuencia de un péptido presentado por el MHC derivado del antígeno asociado a la enfermedad. La inmunización con ARN que codifica un antígeno asociado a la enfermedad intacto o sustancialmente intacto o fragmentos del mismo, como los péptidos MHC de clase I y de clase II, permite obtener una respuesta de tipo MHC de clase I y/o de clase II y, por lo tanto, estimular células T tales como linfocitos T citotóxicos CD8+ que son capaces de lisar células enfermas y/o células T CD4+. Dicha inmunización también puede provocar una respuesta inmune humoral (respuesta de células B) que resulta en la producción de anticuerpos contra el antígeno. Por consiguiente, la composición farmacéutica de la presente invención se puede usar en la vacunación genética, en donde se estimula una respuesta inmune mediante la introducción en un sujeto de una molécula de ARN adecuada que codifica una proteína o péptido antigénico. Los agentes y composiciones descritos en el presente documento pueden usarse como una vacuna terapéutica o profiláctica para el tratamiento o la prevención de una enfermedad tal
como una enfermedad como se describe en el presente documento. En una realización, un antígeno asociado a una enfermedad es un antígeno tumoral. En esta realización, los agentes y composiciones descritos en el presente documento pueden ser útiles para tratar el cáncer o la metástasis del cáncer. Preferiblemente, el órgano o tejido enfermo se caracteriza por células enfermas tales como células cancerosas que expresan un antígeno asociado a la enfermedad y preferiblemente presentan el antígeno asociado a la enfermedad en el contexto de las moléculas de MHC.
La expresión “respuesta inmune” se refiere a una respuesta corporal integrada a un antígeno o una célula que expresa un antígeno y, preferiblemente, se refiere a una respuesta inmune celular o una respuesta inmune tanto celular como humoral. La respuesta inmune puede ser protectora/preventiva/profiláctica y/o terapéutica.
“Inducir una respuesta inmune” puede significar que no hubo respuesta inmune contra un antígeno particular o una célula que expresa un antígeno antes de la inducción, pero también puede significar que hubo cierto nivel de respuesta inmune contra un antígeno particular o una célula que expresa un antígeno antes de la inducción y después de la inducción, dicha respuesta inmune se potencia. Por lo tanto, “inducir una respuesta inmune” también incluye “mejorar una respuesta inmune”. Preferiblemente, después de inducir una respuesta inmune en un sujeto, dicho sujeto está protegido de desarrollar una enfermedad tal como una enfermedad infecciosa o una enfermedad cancerosa o la condición de la enfermedad se mejora induciendo una respuesta inmune. Por ejemplo, puede inducirse una respuesta inmune contra un antígeno viral en un paciente que tiene una enfermedad viral o en un sujeto que está en riesgo de desarrollar una enfermedad viral. Por ejemplo, puede inducirse una respuesta inmune contra un antígeno tumoral en un paciente que tiene una enfermedad cancerosa o en un sujeto que está en riesgo de desarrollar una enfermedad cancerosa. La inducción de una respuesta inmune en este caso puede significar que la condición de la enfermedad del sujeto se mejora, que el sujeto no desarrolla metástasis o que el sujeto que está en riesgo de desarrollar una enfermedad cancerosa no desarrolla una enfermedad cancerosa.
Una “respuesta inmune celular”, una “respuesta celular”, una “respuesta celular contra un antígeno” o una expresión similar pretende incluir una respuesta celular dirigida a células que expresan un antígeno y se caracterizan por la presentación de un antígeno con MHC de clase I o de clase II. La respuesta celular se refiere a células llamadas células T o linfocitos T que actúan como “auxiliares” o “asesinos”. Las células T auxiliares (también llamadas células T CD4+) desempeñan un papel central al regular la respuesta inmune y las células asesinas (también llamadas células T citotóxicas, células T citolíticas, células T CD8+ o CTL) matan células enfermas como las células infectadas o células cancerosas, evitando la producción de más células enfermas. En realizaciones preferidas, la presente invención implica la estimulación de una respuesta de CTL antitumoral contra células cancerosas que expresan uno o más antígenos tumorales y, preferiblemente, presentan dichos antígenos tumorales con MHC de clase I.
Según la presente invención, el término “antígeno” comprende cualquier molécula, preferiblemente un péptido o proteína, que comprende al menos un epítopo que provocará una respuesta inmune y/o contra la cual se dirige una respuesta inmune. Preferiblemente, un antígeno en el contexto de la presente invención es una molécula que, opcionalmente después del procesamiento, induce una respuesta inmune, que es preferiblemente específica para el antígeno o células que expresan el antígeno. En particular, un “antígeno” se refiere a una molécula que, opcionalmente después del procesamiento, es presentada por las moléculas de MHC y reacciona específicamente con los linfocitos T (células T).
Por lo tanto, un antígeno o fragmentos del mismo deben ser reconocibles por un receptor de células T. Preferiblemente, el antígeno o fragmento, si es reconocido por un receptor de células T, es capaz de inducir en presencia de señales coestimuladoras apropiadas, la expansión clonal de las células T que llevan el receptor de células T que reconoce específicamente el antígeno o fragmento. En el contexto de las realizaciones de la presente invención, el antígeno o fragmento es presentado preferiblemente por una célula, preferiblemente por una célula que presenta el antígeno y/o una célula enferma, en el contexto de moléculas de MHC, que da como resultado una respuesta inmune contra el antígeno o células que expresan el antígeno.
De acuerdo con la presente invención, se prevé cualquier antígeno adecuado que sea un candidato para una respuesta inmune, en donde la respuesta inmune es preferiblemente una respuesta inmune celular.
Un antígeno es preferiblemente un producto que corresponde o se deriva de un antígeno natural. Dichos antígenos naturales pueden incluir o pueden derivarse de alergenos, virus, bacterias, hongos, parásitos y otros agentes infecciosos y patógenos o un antígeno también puede ser un antígeno tumoral. De acuerdo con la presente invención, un antígeno puede corresponder a un producto natural, por ejemplo, una proteína viral, o una parte de la misma.
El término “patógeno” se refiere a microorganismos patógenos y comprende virus, bacterias, hongos, organismos unicelulares y parásitos. Los ejemplos de virus patógenos son el virus de inmunodeficiencia humana (VIH), el citomegalovirus (CMV), el virus del herpes (HSV), el virus de la hepatitis A (VHA), el VHB, el VHC, el virus del papiloma y el virus linfotrófico T humano (HTLV). Los organismos unicelulares comprenden plasmodios, tripanosomas, amebas, etc.
La expresión “antígeno asociado a la enfermedad” se refiere a todos los antígenos que son de importancia patológica e incluye “antígenos tumorales”. De acuerdo con la invención, se desea inducir una respuesta inmune a un antígeno asociado a la enfermedad o a células que expresan un antígeno asociado a la enfermedad y que preferiblemente presenten un antígeno asociado a la enfermedad en el contexto de las moléculas de MHC. Preferiblemente, un antígeno asociado a una enfermedad es un antígeno natural. En una realización, un antígeno asociado a la enfermedad se expresa en una célula enferma y se presenta preferiblemente por moléculas MHC de la célula.
Un antígeno codificado por el ARN comprendido en las nanopartículas descritas en el presente documento debe inducir una respuesta inmune que se dirige contra el antígeno asociado a la enfermedad a la que debe dirigirse o a las células que expresan el antígeno asociado a la enfermedad a la que debe dirigirse. Por lo tanto, un antígeno codificado por el ARN comprendido en las nanopartículas descritas en el presente documento puede corresponder o puede comprender un antígeno asociado a la enfermedad o uno o más fragmentos inmunogénicos de los mismos, tales como uno o más péptidos de unión a MHC del antígeno asociado a la enfermedad. Por lo tanto, el antígeno codificado por el ARN comprendido en las nanopartículas descritas en este documento puede ser un antígeno recombinante.
El término “recombinante” en el contexto de la presente invención significa “realizado mediante ingeniería genética”. Preferiblemente, un “objeto recombinante” tal como un ácido nucleico recombinante en el contexto de la presente invención no está ocurriendo naturalmente.
La expresión “que ocurre naturalmente” como se usa en este documento se refiere al hecho de que un objeto puede encontrarse en la naturaleza. Por ejemplo, un péptido o ácido nucleico que está presente en un organismo (incluidos los virus) y se puede aislar de una fuente en la naturaleza y que el hombre no ha modificado intencionalmente en el laboratorio ocurre naturalmente.
En una realización preferida, un antígeno puede ser un antígeno tumoral, es decir, un constituyente de células cancerosas tales como una proteína o péptido expresado en una célula cancerosa que puede derivarse del citoplasma, la superficie celular o el núcleo celular, en particular aquellos que se producen principalmente intracelularmente o como antígenos de superficie en las células cancerosas. Por ejemplo, los antígenos tumorales incluyen el antígeno carcinoembrionario, una 1-fetoproteína, isoferritina y sulfoglicoproteína fetal, a2-H-ferroproteína y y-fetoproteína. De acuerdo con la presente invención, un antígeno tumoral comprende preferiblemente cualquier antígeno que se expresa en y opcionalmente característico con respecto al tipo y/o nivel de expresión para tumores o cánceres, así como para células tumorales o cancerosas. En el contexto de la presente invención, la expresión “antígeno tumoral” o “antígeno asociado a tumor” se refiere preferiblemente a proteínas que están en condiciones normales expresadas específicamente en un número limitado de tejidos y/u órganos o en etapas de desarrollo específicas, por ejemplo, el antígeno tumoral puede estar en condiciones normales expresadas específicamente en tejido estomacal, preferiblemente en la mucosa gástrica, en órganos reproductores, por ejemplo, en testículos, en tejido trofoblástico, por ejemplo, en placenta o en células de la línea germinal, y se expresan o se expresan en forma aberrante en uno o más tejidos tumorales o cancerosos. En este contexto, “un número limitado” significa preferiblemente no más de 3, más preferiblemente no más de 2 o 1. Los antígenos tumorales en el contexto de la presente invención incluyen, por ejemplo, antígenos de diferenciación, preferiblemente antígenos de diferenciación específicos de tipo celular, es decir, proteínas que se encuentran en condiciones normales expresadas específicamente en cierto tipo de célula en cierta etapa de diferenciación, antígenos de cáncer/testículo, es decir, proteínas que se encuentran en condiciones normales expresadas específicamente en testículos y, a veces, en placenta, y antígenos específicos de la línea germinal. En el contexto de la presente invención, el antígeno tumoral preferiblemente no se expresa o raramente se expresa en tejidos normales. Preferiblemente, el antígeno tumoral o la expresión aberrante del antígeno tumoral identifica células cancerosas. En el contexto de la presente invención, el antígeno tumoral que es expresado por una célula cancerosa en un sujeto, por ejemplo, un paciente que padece de una enfermedad cancerosa, es preferiblemente una autoproteína en dicho sujeto. En realizaciones preferidas, el antígeno tumoral en el contexto de la presente invención se expresa en condiciones normales específicamente en un tejido u órgano que no es esencial, es decir, tejidos u órganos que cuando se dañan por el sistema inmune no conducen a la muerte del sujeto, o en órganos o estructuras del cuerpo que no son o son difícilmente accesibles por el sistema inmune. Preferiblemente, la secuencia de aminoácidos del antígeno tumoral es idéntica entre el antígeno tumoral que se expresa en tejidos normales y el antígeno tumoral que se expresa en tejidos cancerosos. Preferiblemente, un antígeno tumoral es presentado por una célula cancerosa en donde se expresa.
Ejemplos de antígenos tumorales que pueden ser de utilidad en la presente invención son p53, ART-4, BAGE, betacatenina/m, Bcr-abL CAMEL, CAP-1, CASP-8, CDC27/m, CDK4/m, CEA, las proteínas de superficie celular de la familia claudina, tales como CLAUDIN-6, CLAUDIN-18.2 y CLAUDIN-12, c-MYC, CT, Cyp-B, DAM, ELF2M, ETV6-AML1, G250, GAGE, GnT-V, Gap100, HAGE, HER-2/neu, HPV-E7, HPV-E6, HAST-2, hTERT (o hTRT), LAGE, LDLR/FUT, MAGE-A, preferiblemente MAGE-A1, MAGE-A2, MAGE-A3, MAGE-A4, MAGE-A5, MAGE-A6, MAGE-A7, MAGE-A8, MAGE-A9, MAGE-A10, MAGE-A11 o MAGE-A12, MAGE-B, MAGE-C, MART-1/Melan-A, MC1R, Miosina/m, MUC1, MUM-1, -2, -3, NA88-A, NF1, NY-ESO-1, NY-BR-1, pl90 minor BCR-abL, Pm1/RARa, PRAME, proteinasa 3, PSA, PSM, RAGE, RU1 o RU2, SAGE, SART-1 o SART-3, SCGB3A2, SCP1, SCP2, SCP3, SSX, SURVIVIN, TEL/AML1, TPI/m, TRP-1, TRP-2, TRP- 2/INT2, TPTE y WT, preferiblemente WT-1.
El término “epítopo” se refiere a un determinante antigénico en una molécula tal como un antígeno, es decir, a una parte o fragmento de la molécula que es reconocida por el sistema inmune, por ejemplo, que es reconocida por una célula T, en particular cuando se presenta en el contexto de las moléculas MHC. Un epítopo de una proteína tal como un antígeno tumoral comprende preferiblemente una porción continua o discontinua de dicha proteína y está preferiblemente entre 5 y 100, preferiblemente entre 5 y 50, más preferiblemente entre 8 y 30, con máxima preferencia, entre 10 y 25 aminoácidos de longitud, por ejemplo, el epítopo puede ser preferiblemente de 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 o 25 aminoácidos de longitud. Se prefiere particularmente que el epítopo en el contexto de la presente invención sea un epítopo de células T.
De acuerdo con la invención, un epítopo puede unirse a moléculas de MHC tales como moléculas de MHC en la superficie de una célula y, por lo tanto, puede ser un “péptido de unión a MHC”. La expresión “péptido de unión a MHC” se refiere a un péptido que se une a una molécula de MHC de clase I y/o MHC de clase II. En el caso de los complejos de MHC/péptidos de clase I, los péptidos de unión tienen típicamente una longitud de 8 a 10 aminoácidos, aunque los péptidos más largos o más cortos pueden ser eficaces. En el caso de complejos de MHC de clase 11/péptido, los péptidos de unión tienen típicamente una longitud de 10-25 aminoácidos y en particular una longitud de 13-18 aminoácidos, mientras que los péptidos más largos y más cortos pueden ser eficaces.
De acuerdo con la invención, un antígeno codificado por el ARN comprendido en las nanopartículas descritas en el presente documento puede comprender un fragmento inmunogénico de un antígeno asociado a la enfermedad, tal como un fragmento peptídico de un antígeno asociado a la enfermedad (también denominado péptido antigénico en este documento) que preferiblemente es un péptido de unión a MHC.
Un “fragmento inmunogénico de un antígeno” de acuerdo con la invención se refiere preferiblemente a una porción o fragmento de un antígeno que es capaz de estimular una respuesta inmune, preferiblemente una respuesta celular contra el antígeno o células que expresan el antígeno y preferiblemente presentan el antígeno como células enfermas, en particular células cancerosas. Preferiblemente, un fragmento inmunogénico de un antígeno es capaz de estimular una respuesta celular contra una célula caracterizada por la presentación de un antígeno con MHC de clase I y preferiblemente es capaz de estimular una CTL sensible a antígeno. Preferiblemente, es una porción de un antígeno que se reconoce (es decir, se une específicamente) por un receptor de células T, en particular si se presenta en el contexto de las moléculas de m Hc . Ciertos fragmentos inmunogénicos preferidos se unen a una molécula MHC de clase I o de clase II. Tal como se usa en el presente documento, se dice que un fragmento inmunogénico se “une” a una molécula MHC de clase I o de clase II si tal unión es detectable usando cualquier ensayo conocido en la técnica.
Preferiblemente, un fragmento inmunogénico de un antígeno de acuerdo con la invención es un péptido presentado por MHC de clase I y/o de clase II o puede procesarse para producir un péptido presentado por m Hc de clase I y/o de clase II. Preferiblemente, un fragmento inmunogénico de un antígeno comprende una secuencia de aminoácidos sustancialmente correspondiente y preferiblemente que es idéntica a la secuencia de aminoácidos de un fragmento del antígeno. Preferiblemente, dicho fragmento de un antígeno es un péptido presentado por MHC de clase I y/o de clase II.
Si un péptido se presenta directamente, es decir, sin procesamiento, en particular sin escisión, tiene una longitud adecuada para unirse a una molécula de MHC, en particular una molécula de MHC de clase I, y preferiblemente es de 7-20 aminoácidos ende longitud, más preferiblemente 7-12 aminoácidos de longitud, más preferiblemente 8-11 aminoácidos de longitud, en particular 9 o 10 aminoácidos de longitud.
Si un péptido es parte de una entidad más grande que comprende secuencias adicionales, por ejemplo, de un polipéptido, y se presentará después del procesamiento, en particular después de la escisión, el péptido producido por procesamiento tiene una longitud adecuada para unirse a una molécula de MHC, en particular una molécula de MHC de clase I, y preferiblemente tiene una longitud de 7-20 aminoácidos, más preferiblemente una longitud de 7-12 aminoácidos, más preferiblemente una longitud de 8-11 aminoácidos, en particular una longitud de 9 o 10 aminoácidos. Preferiblemente, la secuencia del péptido que se presenta después del procesamiento se deriva de la secuencia de aminoácidos de un antígeno, es decir, su secuencia corresponde sustancialmente y, con preferencia, es completamente idéntica a un fragmento de un antígeno.
Por lo tanto, un antígeno codificado por el ARN comprendido en las nanopartículas descritas en el presente documento puede comprender una secuencia de 7-20 aminoácidos de longitud, más preferiblemente de 7-12 aminoácidos de longitud, más preferiblemente de 8-11 aminoácidos de longitud, en particular, 9 o 10 aminoácidos de longitud que corresponde sustancialmente y, con preferencia, es completamente idéntico a un fragmento presentado por un MHC de un antígeno asociado a la enfermedad y el procesamiento posterior constituye un péptido presentado.
Los péptidos que tienen secuencias de aminoácidos que corresponden sustancialmente a una secuencia de un péptido que se presenta por MHC de clase I pueden diferir en uno o más residuos que no son esenciales para el reconocimiento del péptido por TCR presentado por MHC de clase I, o para la unión de péptidos con MHC. Tales péptidos sustancialmente correspondientes también son capaces de estimular CTL que tienen la especificidad deseada y pueden considerarse inmunológicamente equivalentes.
Un péptido, cuando es presentado por MHC, debe ser reconocible por un receptor de células T. Preferiblemente, el péptido presentado, si es reconocido por un receptor de células T, es capaz de inducir en presencia de señales coestimuladoras apropiadas, la expansión clonal de las células T que llevan el receptor de células T que reconoce específicamente el péptido presentado. Preferiblemente, los péptidos antigénicos, en particular si se presentan en el contexto de las moléculas de MHC, son capaces de estimular una respuesta inmune, preferiblemente una respuesta celular contra el antígeno del que derivan o las células que expresan el antígeno y preferiblemente presentan el antígeno. Preferiblemente, un péptido antigénico es capaz de estimular una respuesta celular contra una célula que presenta el antígeno con MHC de clase I y preferiblemente es capaz de estimular una CTL sensible a antígeno. Dicha célula es preferiblemente una célula diana a los fines de la invención.
“Célula diana” significará una célula que es un objetivo para una respuesta inmune, como una respuesta inmune celular. Las células diana incluyen células que expresan un antígeno tal como un antígeno asociado a la enfermedad y preferiblemente presentan dicho antígeno (que, en particular, significa que el antígeno se procesa en las células y uno o más fragmentos del antígeno se presentan en el contexto de moléculas de MHC en las células). Las células diana incluyen cualquier célula indeseable, como una célula infectada o una célula cancerosa. En realizaciones preferidas, la célula diana es una célula que expresa un antígeno como se describe en el presente documento y preferiblemente presenta dicho antígeno con MHC de clase I.
“Procesamiento de antígenos” se refiere a la degradación de un antígeno en productos en procesión, que son fragmentos de dicho antígeno (por ejemplo, la degradación de una proteína en péptidos) y la asociación de uno o más de estos fragmentos (por ejemplo, a través de la unión) con el moléculas de MHC para presentación por células, preferiblemente células presentadoras de antígeno a células T específicas.
Una célula que presenta el antígeno (APC) es una célula que presenta, es decir, muestra el antígeno en el contexto del complejo principal de histocompatibilidad (MHC) en su superficie. Esto incluye la situación en donde sólo se presentan uno o más fragmentos de un antígeno. Las células T pueden reconocer este complejo utilizando su receptor de células T (TCR). Las células presentadoras de antígenos procesan los antígenos y los presentan a las células T.
Las células profesionales presentadoras de antígeno son muy eficientes en la internalización del antígeno, ya sea por fagocitosis o por endocitosis mediada por receptor, y luego muestran un fragmento del antígeno, unido a una molécula de MHC de clase II, en su membrana. La célula T reconoce e interactúa con el complejo de moléculas de MHC de clase II-antígeno en la membrana de la célula presentadora de antígeno. Luego, la célula presentadora de antígeno produce una señal coestimuladora adicional, lo que lleva a la activación de la célula T. La expresión de moléculas coestimuladoras es una característica definitoria de las células profesionales que presentan antígenos. Los principales tipos de células presentadoras de antígenos profesionales son las células dendríticas, que tienen el rango más amplio de presentación de antígenos y son probablemente las células presentadoras de antígenos más importantes, macrófagos, células B y ciertas células epiteliales activadas.
Las células dendríticas (DC) son poblaciones de leucocitos que presentan antígenos capturados en tejidos periféricos a células T a través de las vías de presentación de los antígenos de MHC de clase II y I. Es bien sabido que las células dendríticas son potentes inductores de respuestas inmunes y la activación de estas células es un paso crítico para la inducción de la inmunidad antitumoral.
Las células dendríticas se clasifican convenientemente como células “inmaduras” y “maduras”, que se pueden utilizar como una forma sencilla de discriminar entre dos fenotipos bien caracterizados. Sin embargo, esta nomenclatura no debe interpretarse de manera que excluya todas las posibles etapas intermedias de diferenciación. Las células dendríticas inmaduras se caracterizan como células presentadoras de antígenos con una alta capacidad para la captación y el procesamiento de antígenos, lo que se correlaciona con la alta expresión del receptor de Fey y el receptor de manosa. El fenotipo maduro se caracteriza típicamente por una menor expresión de estos marcadores, pero una alta expresión de las moléculas de la superficie celular responsables de la activación de las células T, como MHC de clase I y de II, las moléculas de adhesión (por ejemplo, CD54 y CD11) y las moléculas coestimuladoras (por ejemplo, Cd40, CD80, CD86 y 4-1 BB).
La maduración de las células dendríticas se conoce como el estado de activación de las células dendríticas en donde dichas células dendríticas que presentan antígenos conducen al cebado de las células T, mientras que la presentación de las células dendríticas inmaduras produce tolerancia. La maduración de las células dendríticas está causada principalmente por biomoléculas con características microbianas detectadas por receptores innatos (ADN bacteriano, a Rn viral, endotoxinas, etc.), citoquinas proinflamatorias (TNF, IL-1, IFN), ligación de CD40 en la superficie de la célula dendrítica por CD40L, y sustancias liberadas de células que sufren una muerte celular estresante. Las células dendríticas pueden derivarse cultivando células de médula ósea in vitro con citoquinas, como el factor estimulante de colonias de granulocitos-macrófagos (GM-CSF) y el factor de necrosis tumoral alfa.
Las células presentadoras de antígenos no profesionales no expresan en forma constitutiva las proteínas de MHC de clase II necesarias para la interacción con las células T naífs; estos se expresan solo tras la estimulación de las células presentadoras de antígenos no profesionales por ciertas citoquinas como IFNy.
Las células presentadoras de antígeno pueden cargarse con péptidos presentados por MHC mediante la transducción de las células con ácido nucleico, como el ARN, que codifica un péptido o proteína que comprende el péptido que se presentará, por ejemplo, un ácido nucleico que codifica el antígeno. La transfección de células dendríticas con ARNm es una técnica prometedora de carga de antígenos para estimular una fuerte inmunidad antitumoral.
El término “inmunogenicidad” se refiere a la eficacia relativa de un antígeno para inducir una reacción inmune.
Las expresiones “célula T” y “linfocito T” se usan indistintamente en este documento e incluyen células T auxiliares (células T CD4+) y células T citotóxicas (CTL, células T CD8+) que comprenden células T citolíticas.
Las células T pertenecen a un grupo de glóbulos blancos conocidos como linfocitos y desempeñan un papel central en la inmunidad mediada por células. Se pueden distinguir de otros tipos de linfocitos, como las células B y las células natural killer por la presencia de un receptor especial en su superficie celular llamado receptores de células T (TCR). El timo es el principal órgano responsable de la maduración de las células T. Se han descubierto varios subconjuntos diferentes de células T, cada uno con una función distinta.
Las células T auxiliares ayudan a otros glóbulos blancos en procesos inmunológicos, incluida la maduración de células B en células plasmáticas y la activación de células T citotóxicas y macrófagos, entre otras funciones. Estas células también se conocen como células T CD4+ porque expresan la proteína CD4 en su superficie. Las células T auxiliares se activan cuando se les presentan antígenos peptídicos por moléculas de MHC de clase II que se expresan en la superficie de las células presentadoras de antígenos (APC). Una vez activados, se dividen rápidamente y secretan pequeñas proteínas llamadas citoquinas que regulan o ayudan en la respuesta inmune activa.
Las células T citotóxicas destruyen las células enfermas, por ejemplo, las células infectadas, como las células infectadas por virus y las células cancerosas, también están implicadas en el rechazo del trasplante. Estas células también se conocen como células T CD8+, ya que expresan la glicoproteína CD8 en su superficie. Estas células reconocen sus objetivos al unirse al antígeno asociado con MHC de clase I, que está presente en la superficie de casi todas las células del organismo.
La mayoría de las células T tienen un receptor de células T (TCR) que existe como un complejo de varias proteínas. El receptor de células T real está compuesto por dos cadenas peptídicas separadas, que se producen a partir de los genes alfa y beta (TCRa y TCRp) independientes del receptor de células T y se denominan cadenas a- y p-TCR. Las células y^T (células T gamma delta) representan un pequeño subconjunto de células T que poseen un receptor de células T (TCR) distinto en su superficie. Sin embargo, en las células y8T, el TCR está formado por una cadena y y una cadena 8. Este grupo de células T son mucho menos comunes (2% del total de células T) que las células apT. Todas las células T se originan a partir de células madre hematopoyéticas en la médula ósea. Los progenitores hematopoyéticos derivados de células madre hematopoyéticas pueblan el timo y se expanden por división celular para generar una gran población de timocitos inmaduros. Los primeros timocitos no expresan ni CD4 ni CD8 y, por lo tanto, se clasifican como células doble negativas (CD4-CD8-). A medida que progresan a lo largo de su desarrollo, se convierten en timocitos doble positivos (CD4+CD8+) y, finalmente, maduran a timocitos positivos (CD4+CD8- o CD4-CD8+) que luego se liberan del timo a los tejidos periféricos.
La primera señal en la activación de las células T se proporciona mediante la unión del receptor de células T a un péptido corto presentado por el complejo principal de histocompatibilidad (MHC) en otra célula. Esto asegura que sólo se active una célula T con un t Cr específico para ese péptido. La célula asociada suele ser una célula presentadora de antígeno profesional (APC), generalmente una célula dendrítica en el caso de respuestas naífs, aunque las células B y los macrófagos pueden ser importantes APC. Los péptidos presentados a las células T CD8+ por las moléculas de MHC de clase I tienen una longitud de 8-10 aminoácidos; los péptidos presentados a las células T CD4+ por las moléculas de MHC de clase II son más largos, ya que los extremos de la hendidura de unión de la molécula de MHC de clase II están abiertos.
La expresión “expansión clonal” se refiere a un proceso en donde se multiplica una entidad específica. En el contexto de la presente invención, la expresión se usa preferiblemente en el contexto de una respuesta inmunológica en donde los linfocitos son estimulados por un antígeno, proliferan, y se amplifica el linfocito específico que reconoce dicho antígeno. Preferiblemente, la expansión clonal conduce a la diferenciación de los linfocitos.
De acuerdo con la invención, los linfocitos T citotóxicos pueden generarse in vivo mediante la incorporación de un antígeno o un péptido antigénico en células presentadoras de antígeno in vivo. El antígeno o péptido antigénico se representa como ARN. El antígeno puede procesarse para producir un compañero peptídico para la molécula de MHC, mientras que un fragmento del mismo puede presentarse sin la necesidad de un procesamiento adicional. Este último es el caso en particular, si éstos pueden unirse a las moléculas de MHC. Las células resultantes presentan el complejo de interés y son reconocidas por linfocitos T citotóxicos autólogos que luego se propagan. La activación específica de las células T CD4+ o CD8+ puede detectarse de varias maneras. Los métodos para detectar la activación de células T específicas incluyen detectar la proliferación de células T, la producción de
citoquinas (por ejemplo, linfoquinas) o la generación de actividad citolítica. Para las células T CD4+, un método preferido para detectar la activación de células T específicas es la detección de la proliferación de células T. Para las células T CD8+, un método preferido para detectar la activación de células T específicas es la detección de la generación de actividad citolítica.
La expresión “complejo principal de histocompatibilidad” y la abreviatura “MHC” incluyen las moléculas de MHC de clase I y MHC de clase II y se refieren a un complejo de genes que se encuentra en todos los vertebrados. Las proteínas o moléculas de MHC son importantes para la señalización entre linfocitos y células presentadoras de antígenos o células enfermas en las reacciones inmunes, en donde las proteínas o moléculas de MHC se unen a los péptidos y las presentan para su reconocimiento por los receptores de células T. Las proteínas codificadas por MHC se expresan en la superficie de las células y muestran tanto antígenos propios (fragmentos peptídicos de la propia célula) como antígenos no propios (por ejemplo, fragmentos de microorganismos invasores) a una célula T.
La región de MHC se divide en tres subgrupos, clase I, clase II y clase III. Las proteínas de MHC de clase I contienen una cadena a- y p2-microglobulina (que no forman parte del MHC codificado por el cromosoma 15). Presentan fragmentos de antígeno a las células T citotóxicas. En la mayoría de las células del sistema inmunológico, específicamente en las células presentadoras de antígenos, las proteínas de MHC de clase II contienen cadenas a y p y presentan fragmentos de antígenos a las células T auxiliares. La región de clase III del MHC codifica para otros componentes inmunes, como los componentes del complemento y algunos que codifican las citoquinas.
En los seres humanos, los genes en la región de MHC que codifican las proteínas que presentan antígenos en la superficie celular se denominan genes de antígeno leucocitario humano (HLA). Sin embargo, la abreviatura MHC se usa a menudo para referirse a productos de genes HLA. Los genes HLA incluyen los nueve genes llamados MHC clásicos: HLA-A, HLA-B, HLA-C, HLA-DPA1, HLA-DPB1, HLA-DQA1, HLA-DQB1, HLA-DRA y HLA-DRB1.
En una realización preferida de todos los aspectos de la invención, una molécula de MHC es una molécula HLA. Por “célula caracterizada por la presentación de un antígeno”, “célula presentadora de antígeno”, “antígeno presentado por una célula”, “antígeno presentado” o expresiones similares se refiere a una célula, en particular una célula enferma o una célula diana como una célula infectada o una célula cancerosa, o una célula presentadora de antígeno que presenta el antígeno que expresa o un fragmento derivado de dicho antígeno, por ejemplo, mediante el procesamiento del antígeno, en el contexto de las moléculas de MHC, en particular las moléculas de MHC de clase I. De manera similar, las expresiones “enfermedad caracterizada por la presentación de un antígeno” denota una enfermedad que involucra células caracterizadas por la presentación de un antígeno, en particular con el MHC de clase I. La presentación de un antígeno por una célula puede efectuarse transfectando la célula con un ácido nucleico tal como el ARN que codifica el antígeno.
La expresión “inmunológicamente equivalente” significa que la molécula inmunológicamente equivalente tal como la secuencia de aminoácidos inmunológicamente equivalente exhibe las mismas o esencialmente las mismas propiedades inmunológicas y/o ejerce los mismos o esencialmente los mismos efectos inmunológicos, por ejemplo, con respecto al tipo de efecto inmunológico, como la inducción de una respuesta inmune humoral y/o celular, la fuerza y/o la duración de la reacción inmune inducida, o la especificidad de la reacción inmune inducida.
La expresión “funciones efectoras inmunes” en el contexto de la presente invención incluye cualquier función mediada por componentes del sistema inmune que resulta, por ejemplo, en la destrucción de células infectadas o células cancerosas, o en la inhibición del crecimiento del tumor y/o la inhibición del desarrollo del tumor, incluida la inhibición de la diseminación del tumor y la metástasis. Preferiblemente, las funciones efectoras inmunes en el contexto de la presente invención son funciones efectoras mediadas por células T. Dichas funciones comprenden, en el caso de una célula T auxiliar (célula T CD4+), el reconocimiento de un antígeno o un péptido antígeno en el contexto de moléculas MHC de clase II por los receptores de células T, la liberación de citoquinas y/o la activación de linfocitos CD8+ (CTL) y/o células B, y en el caso de CTL, el reconocimiento de un antígeno o un péptido antígeno en el contexto de las moléculas de clase I del MHC por los receptores de células T, la eliminación de las células presentada en el contexto de moléculas de MHC de clase I, es decir, células caracterizadas por la presentación de un antígeno con MHC de clase I, por ejemplo, mediante apoptosis o lisis celular mediada por perforina, producción de citoquinas como IFN-y y TNF-a, y destrucción citolítica específica de células diana que expresan antígeno.
Un ácido nucleico es según la invención ácido ribonucleico (ARN), con máxima preferencia, ARN transcrito in vitro (ARN de IVT) o ARN sintético. Los ácidos nucleicos incluyen según la invención el ARNm. Un ácido nucleico puede estar de acuerdo con la invención en forma de una molécula que es de cadena sencilla o de doble cadena y lineal o cerrada covalentemente para formar un círculo. Se puede emplear un núcleo para la introducción, es decir, la transfección de células, por ejemplo, en forma de ARN que puede prepararse por transcripción in vitro a partir de una plantilla de ADN. Además, el ARN se puede modificar antes de la aplicación mediante la estabilización de secuencias, la limitación y la poliadenilación.
Los ácidos nucleicos pueden estar comprendidos en un vector. El término “vector”, tal como se usa en el presente documento, incluye cualquier vector conocido por los expertos en la técnica, incluidos vectores de plásmidos, vectores de cósmidos, vectores de fagos tales como fagos lambda, vectores virales como vectores adenovirales o
baculovirales, o vectores de cromosomas artificiales tales como cromosomas artificiales bacterianos (BAC), cromosomas artificiales de levadura (YAC), o cromosomas artificiales de PI (PAC). Dichos vectores incluyen expresión así como vectores de clonación. Los vectores de expresión comprenden plásmidos así como vectores virales y generalmente contienen una secuencia codificante deseada y secuencias de ADN apropiadas necesarias para la expresión de la secuencia codificante unida operativamente en un organismo huésped particular (por ejemplo, bacterias, levaduras, plantas, insectos o mamíferos) o en sistemas de expresión in vitro. Los vectores de clonación se usan generalmente para diseñar y amplificar cierto fragmento de ADN deseado y pueden carecer de secuencias funcionales necesarias para la expresión de los fragmentos de ADN deseados.
En el contexto de la presente invención, el término “ARN” se refiere a una molécula que comprende residuos de ribonucleótidos y preferiblemente está compuesta total o sustancialmente por residuos de ribonucleótidos. “Ribonucleótido” se refiere a un nucleótido con un grupo hidroxilo en la posición 2' de un grupo p-D-ribofuranosilo. El término incluye ARN de doble cadena, ARN de cadena sencilla, ARN aislado tal como ARN parcialmente purificado, ARN esencialmente puro, ARN sintético, ARN producido de manera recombinante, así como ARN modificado que difiere del ARN natural por la adición, deleción, sustitución y/o alteración de uno o más nucleótidos. Dichas alteraciones pueden incluir la adición de material no nucleotídico, tal como el o los extremos de un ARN o internamente, por ejemplo, en uno o más nucleótidos del ARN. Los nucleótidos en las moléculas de ARN también pueden comprender nucleótidos no estándar, tales como nucleótidos no naturales o nucleótidos o desoxinucleótidos sintetizados químicamente. Estos ARN alterados pueden denominarse análogos o análogos de ARN de origen natural.
De acuerdo con la presente invención, el término “ARN” incluye y preferiblemente se refiere a “ARNm” que significa “ARN mensajero” y se refiere a un “transcripto” que puede producirse usando ADN como plantilla y codifica un péptido o proteína. El ARNm comprende típicamente una región no traducida 5' (5'-UTR), una región codificante de proteína o péptido y una región no traducida 3' (3'-UTR). El ARNm tiene una vida media limitada en las células e in vitro. Preferiblemente, el ARNm se produce por transcripción in vitro usando una plantilla de ADN. En una realización de la invención, el ARN se obtiene por transcripción in vitro o síntesis química. La metodología de transcripción in vitro es conocida por los expertos en la técnica. Por ejemplo, hay una variedad de kits de transcripción in vitro disponibles en comercios.
En el contexto de la presente invención, el término “transcripción” se refiere a un proceso, en donde el código genético en una secuencia de ADN se transcribe en ARN. Posteriormente, el ARN puede traducirse en proteína. De acuerdo con la presente invención, el término “transcripción” comprende “transcripción in vitro”.
La expresión “transcripción in vitro” se refiere a un proceso en donde el ARN, en particular el ARNm, se sintetiza in vitro en un sistema libre de células, preferiblemente utilizando extractos celulares apropiados. Preferiblemente, los vectores de clonación se aplican para la generación de transcriptos. Estos vectores de clonación se designan generalmente como vectores de transcripción y están de acuerdo con la presente invención abarcados por el término “vector”. De acuerdo con la presente invención, el ARN se puede obtener por transcripción in vitro de una plantilla de ADN apropiada. El promotor para controlar la transcripción puede ser cualquier promotor para cualquier ARN polimerasa. Los ejemplos particulares de ARN polimerasas son las ARN polimerasas T7, T3 y SP6. Se puede obtener una plantilla de ADN para la transcripción in vitro mediante la clonación de un ácido nucleico, en particular el ADNc, e introduciéndolo en un vector apropiado para la transcripción in vitro. El ADNc puede obtenerse por transcripción inversa de ARN. Preferiblemente, los vectores de clonación se usan para producir transcriptos que generalmente se designan como vectores de transcripción.
El término “expresión” se usa en el presente documento en su sentido más amplio y comprende la producción de ARN y/o de proteína o péptido. Con respecto al ARN, el término “expresión” o “traducción” se refiere en particular a la producción de péptidos o proteínas. La expresión puede ser transitoria o puede ser estable. Según la invención, el término expresión también incluye una “expresión aberrante” o “expresión anormal”.
“Expresión aberrante” o “expresión anormal” significa de acuerdo con la invención que la expresión está alterada, preferiblemente aumentada, en comparación con una referencia, por ejemplo, un estado en un sujeto que no tiene una enfermedad asociada con una expresión aberrante o anormal de una proteína determinada, por ejemplo, un antígeno tumoral. Un aumento en la expresión se refiere a un aumento de al menos el 10%, en particular al menos el 20%, al menos el 50% o al menos el 100%, o más. En una realización, la expresión sólo se encuentra en un tejido enfermo, mientras que la expresión en un tejido sano es reprimida.
La expresión “expresado específicamente” significa que una proteína se expresa esencialmente sólo en un tejido u órgano específico. Por ejemplo, un antígeno tumoral expresado específicamente en la mucosa gástrica significa que dicha proteína se expresa principalmente en la mucosa gástrica y no se expresa en otros tejidos o no se expresa de manera significativa en otros tipos de tejidos u órganos. Por lo tanto, una proteína que se expresa exclusivamente en las células de la mucosa gástrica y en un grado significativamente menor en cualquier otro tejido, como el testículo, se expresa específicamente en las células de la mucosa gástrica. En algunas realizaciones, un antígeno tumoral también puede expresarse específicamente en condiciones normales en más de un tipo de tejido u órgano, como en 2 o 3 tipos de tejido u órganos, pero preferiblemente en no más de 3 tipos diferentes de tejido u órgano. En este caso, el antígeno tumoral se expresa específicamente en estos órganos. Por ejemplo, si un antígeno tumoral se
expresa en condiciones normales preferiblemente en una extensión aproximadamente igual en pulmón y estómago, dicho antígeno tumoral se expresa específicamente en pulmón y estómago.
El término “traducción” de acuerdo con la invención se refiere al proceso en los ribosomas de una célula mediante el cual una cadena de ARN mensajero dirige el ensamblaje de una secuencia de aminoácidos para producir una proteína o péptido.
De acuerdo con la invención, la expresión “codificante de ARN” significa que el ARN, si está presente en el entorno apropiado, preferiblemente dentro de una célula, como una célula presentadora de antígeno, en particular una célula dendrítica, puede expresarse para producir una proteína o péptido que codifica.
De acuerdo con la invención, la estabilidad y la eficiencia de traducción del ARN pueden modificarse según se requiera. El término “modificación” en el contexto de ARN como se usa de acuerdo con la presente invención incluye cualquier modificación de ARN que no esté presente en forma natural en dicho ARN.
En una realización de la invención, el ARN usado de acuerdo con la invención no tiene 5'-trifosfatos no cubiertos. La eliminación de dichos 5'-trifosfatos no cubiertos se puede lograr mediante el tratamiento del ARN con una fosfatasa. El ARN de acuerdo con la invención puede tener ribonucleótidos modificados para aumentar su estabilidad y/o disminuir la citotoxicidad. Por ejemplo, en una realización, en el ARN usado de acuerdo con la invención, la 5-metilcitidina está parcial o completamente sustituida, preferiblemente completamente, por citidina. Alternativa o adicionalmente, en una realización, en el ARN usado de acuerdo con la invención, la pseudouridina está parcial o completamente sustituida, con preferencia, completamente por uridina.
En una realización, el término “modificación” se refiere a proporcionar un ARN con un análogo de 5'-cap o 5'-cap. El término “5'-cap” se refiere a una estructura de cubierta que se encuentra en el extremo 5' de una molécula de ARNm y generalmente consiste en un nucleótido de guanosina conectado al ARNm a través de un inusual enlace trifosfato de 5' a 5'. En una realización, esta guanosina está metilada en la posición 7. El término “5'-cap convencional” se refiere a 5'-cap de ARN de origen natural, preferiblemente a la cubierta de 7-metilguanosina (m7G). En el contexto de la presente invención, el término “5'-cap” incluye un análogo de 5'-cap que se asemeja a la estructura de la cubierta de ARN y se modifica para que posea la capacidad de estabilizar el ARN y/o mejorar la traducción del ARN si se une al mismo, preferiblemente in vivo y/o en una célula.
Preferiblemente, el extremo 5' del ARN incluye una estructura de cubierta que tiene la siguiente fórmula general:
en donde R1 y R2 son independientemente hidroxi o metoxi y W-, X- e Y- son independientemente oxígeno, azufre, selenio o BH3. En una realización preferida, R1 y R2 son hidroxi y W-, X- e Y- son oxígeno. En una realización preferida adicional, uno de R1 y R2, preferiblemente R1, es hidroxi y el otro es metoxi y W-, X- e Y- son oxígeno. En una realización preferida adicional, R1 y R2 son hidroxi y uno de W-, X- e Y-, preferiblemente X- es azufre, selenio o BH3, preferiblemente azufre, mientras que el otro es oxígeno. En una realización preferida adicional, uno de R1 y R2, preferiblemente R2 es hidroxi y el otro es metoxi y uno de W-, X- e Y-, preferiblemente X- es azufre, selenio o BH3, preferiblemente azufre mientras que el otro es oxígeno.
En la fórmula anterior, el nucleótido en el lado derecho está conectado a la cadena de ARN a través de su grupo de 3'.
La provisión de un ARN con un análogo de 5'-cap o 5'-cap se puede lograr mediante la transcripción in vitro de una plantilla de ADN en presencia de dicho análogo de 5'-cap o 5'-cap, en donde dicho 5'-cap está cotranscripcionalmente incorporado en la cadena de ARN generada, o el ARN puede generarse, por ejemplo, mediante transcripción in vitro, y 5'-cap puede unirse al ARN después de la transcripción utilizando enzimas de cobertura, por ejemplo, enzimas de cobertura del virus vaccinia.
El ARN puede comprender modificaciones adicionales. Por ejemplo, una modificación adicional del ARN utilizado en la presente invención puede ser una extensión o truncamiento de la cola poli(A) que se produce naturalmente o una alteración de las regiones no traducidas (UTR) 5' o 3', como la introducción de una UTR que no está relacionada con la región codificadora de dicho ARN, por ejemplo, el intercambio de la 3'-UTR existente o la inserción de una o más, preferiblemente dos copias de una 3'-UTR derivada de un gen de globina, tales como alfa2-globina, alfa1-globina, beta-globina, preferiblemente beta-globina, más preferiblemente beta-globina humana.
El ARN que tiene una secuencia de poli-A no enmascarada se traduce de manera más eficiente que el ARN que tiene una secuencia de poli-A enmascarada.
La expresión “cola poli(A)” o “secuencia poli-A” se refiere a una secuencia de residuos de adenilo (A) que típicamente se localiza en el extremo 3' de una molécula de ARN y “secuencia poli-A no enmascarada” significa que la secuencia de poli-A en el extremo 3' de una molécula de ARN termina con una A de la secuencia de poli-A y no es seguida por otros nucleótidos distintos de A localizados en el extremo 3', es decir, corriente abajo, de la secuencia de poli-A. Además, una larga secuencia de poli-A de aproximadamente 120 pares de bases da como resultado una estabilidad óptima de la transcripción y una eficiencia de traducción del ARN.
Por lo tanto, para aumentar la estabilidad y/o la expresión del ARN utilizado de acuerdo con la presente invención, se puede modificar para que esté presente junto con una secuencia poli-A, que tiene preferiblemente una longitud de 10 a 500, más preferiblemente 30 a 300, incluso más preferiblemente 65 a 200 y especialmente 100 a 150 residuos de adenosina. En una realización especialmente preferida, la secuencia de poli-A tiene una longitud de aproximadamente 120 residuos de adenosina. Para aumentar aún más la estabilidad y/o la expresión del ARN utilizado de acuerdo con la invención, la secuencia poli-A puede no tener máscara.
Además, la incorporación de una región no traducida en 3' (UTR) en la región no traducida en 3' de una molécula de ARN puede resultar en una mejora en la eficiencia de traducción. Se puede lograr un efecto sinérgico mediante la incorporación de dos o más de tales regiones no traducidas en 3'. Las regiones no traducidas en 3' pueden ser autólogas o heterólogas al ARN en donde se introducen. En una realización particular, la región 3' no traducida se deriva del gen de la p-globina humana.
Una combinación de las modificaciones descritas anteriormente, es decir, la incorporación de una secuencia poli-A, el no enmascaramiento de una secuencia poli-A y la incorporación de una o más regiones 3' no traducidas, tiene una influencia sinérgica sobre la estabilidad del ARN y el aumento en la eficiencia de la traducción.
Con el fin de aumentar la expresión del ARN usado de acuerdo con la presente invención, puede modificarse dentro de la región codificante, es decir, la secuencia que codifica el péptido o proteína expresada, preferiblemente sin alterar la secuencia del péptido o proteína expresada, para aumentar el contenido de GC aumenta la estabilidad del ARNm y realiza una optimización del codón y, por lo tanto, mejora la traducción en las células.
El término “estabilidad” del ARN se refiere a la “vida media” del ARN. “Vida media” se refiere al período de tiempo que se necesita para eliminar la mitad de la actividad, la cantidad o el número de moléculas. En el contexto de la presente invención, la vida media de un ARN es indicativa de la estabilidad de dicho ARN. La vida media del ARN puede influir en la “duración de la expresión” del ARN. Se puede esperar que el ARN que tiene una vida media larga se exprese durante un período de tiempo prolongado.
Por supuesto, si de acuerdo con la presente invención se desea disminuir la estabilidad y/o la eficiencia de traducción del ARN, es posible modificar el ARN para interferir con la función de los elementos como se describe anteriormente, lo que aumenta la estabilidad y/o la eficiencia de traducción de ARN.
El “diámetro” o “tamaño” promedio de las nanopartículas descritas aquí es generalmente el “tamaño de diseño” o el tamaño deseado de las nanopartículas preparadas de acuerdo con un proceso establecido. El tamaño puede ser una dimensión medida directamente, como el diámetro promedio o máximo, o puede determinarse mediante un ensayo indirecto como un ensayo de selección por filtración. La medición directa del tamaño de partícula se realiza típicamente mediante dispersión dinámica de la luz. Con frecuencia, los resultados de las mediciones de dispersión de luz dinámica se expresan en términos de Zpromedio (una medida para el tamaño promedio) y el índice de polidispersidad, PI o PDI (una medida para la polidispersidad). A medida que surgen pequeñas variaciones en el tamaño durante el proceso de fabricación, una variación de hasta el 40% de la medición establecida es aceptable y se considera que está dentro del tamaño indicado. Alternativamente, el tamaño puede determinarse mediante ensayos de selección por filtración. Por ejemplo, una preparación de partículas es menor que un tamaño establecido, si al menos el 97% de las partículas pasan a través de un filtro “tipo pantalla” del tamaño indicado.
Preferiblemente, el ARN se administra, es decir, se transfecta en una célula, en particular una célula presente in vivo, como una célula dendrítica, que expresa la proteína, el péptido o el antígeno que codifica.
El término “transfección” se refiere a la introducción de ácidos nucleicos, en particular ARN, en una célula. Para los fines de la presente invención, el término “transfección” también incluye la introducción de un ácido nucleico en una célula tal como una célula presentadora de antígeno o la captación de un ácido nucleico por dicha célula, en donde la célula puede estar presente en un sujeto, por ejemplo, un paciente.
De acuerdo con la invención, se prefiere que la introducción de ARN que codifica un antígeno en células dé como resultado la expresión de dicho antígeno.
El término “péptido” según la invención comprende oligo- y polipéptidos y se refiere a sustancias que comprenden dos o más, preferiblemente 3 o más, preferiblemente 4 o más, preferiblemente 6 o más, preferiblemente 8 o más, preferiblemente 9 o más, preferiblemente 10 o más, preferiblemente 13 o más, preferiblemente 16 más,
preferiblemente 21 o más y preferiblemente hasta 8, 10, 20, 30, 40 o 50, en particular 100 aminoácidos unidos covalentemente por enlaces peptídicos. El término “proteína” se refiere a péptidos grandes, preferiblemente a péptidos con más de 100 residuos de aminoácidos, pero en general los términos “péptidos” y “proteínas” son sinónimos y se usan de manera indistinta en el presente documento.
El término “célula” es preferiblemente una célula intacta, es decir, una célula con una membrana intacta que no ha liberado sus componentes intracelulares normales como enzimas, orgánulos o material genético. Una célula intacta es preferiblemente una célula viable, es decir, una célula viva capaz de llevar a cabo sus funciones metabólicas normales. Preferiblemente, dicho término se refiere de acuerdo con la invención a cualquier célula que pueda transfectarse con un ácido nucleico exógeno. El término “célula” incluye según la invención células procariotas (por ejemplo, E. coli) o células eucariotas (por ejemplo, células dendríticas, células B, células CFIO, células COS, células K562, células FIEK293, células HELA, células de levadura y células de insecto). El ácido nucleico exógeno se puede encontrar dentro de la célula (i) libremente dispersado como tal, (ii) incorporado en un vector recombinante, o (iii) integrado en el genoma de la célula huésped o el ADN mitocondrial. Las células de mamífero son particularmente preferidas, tales como células de humanos, ratones, hámsteres, cerdos, cabras y primates. Las células pueden derivarse de un gran número de tipos de tejidos e incluyen células primarias y líneas celulares. Los ejemplos específicos incluyen queratinocitos, leucocitos de sangre periférica, células madre de médula ósea y células madre embrionarias. En otras realizaciones, la célula es una célula presentadora de antígeno, en particular una célula dendrítica, un monocito o macrófago.
Como se usa en el presente documento, el término “nanopartícula” se refiere a cualquier partícula que tiene un diámetro que hace que la partícula sea adecuada para la administración sistémica, en particular parenteral, en particular, de ácidos nucleicos, típicamente un diámetro de menos de 1000 nanómetros (nm). En algunas realizaciones, una nanopartícula tiene un diámetro inferior a 600 nm. En algunas realizaciones, una nanopartícula tiene un diámetro inferior a 400 nm.
Como se usa en el presente documento, la expresión “formulación en nanopartículas” o expresiones similares se refieren a cualquier sustancia que contiene al menos una nanopartícula. En algunas realizaciones, una composición de nanopartículas es una colección uniforme de nanopartículas. En algunas realizaciones, las composiciones en nanopartículass son dispersiones o emulsiones. En general, se forma una dispersión o emulsión cuando se combinan al menos dos materiales inmiscibles.
La expresión “lipoplexo” o “lipoplexo de ARN” se refiere a un complejo de lípidos y ácidos nucleicos como el ARN. Los lipoplexos se forman espontáneamente cuando los liposomas catiónicos, que a menudo también incluyen un lípido “auxiliar” neutro, se mezclan con ácidos nucleicos.
El potencial zeta es un término científico para el potencial electrocinético en sistemas coloidales. Desde un punto de vista teórico, el potencial zeta es el potencial eléctrico en la doble capa interfacial en la ubicación del plano de deslizamiento frente a un punto en el fluido a granel que se aleja de la interfaz. En otras palabras, el potencial zeta es la diferencia de potencial entre el medio de dispersión y la capa estacionaria de fluido unido a la partícula dispersada. El potencial zeta se usa ampliamente para la cuantificación de la magnitud de la carga eléctrica en la doble capa.
El potencial zeta se puede calcular utilizando modelos teóricos y mediciones de movilidad electroforética determinada experimentalmente o de movilidad dinámica electroforética. Los fenómenos electrocinéticos y los fenómenos electroacústicos son las fuentes habituales de datos para el cálculo del potencial zeta.
La electroforesis se puede usar para estimar el potencial zeta de las partículas. En la práctica, el potencial zeta de una dispersión puede medirse aplicando un campo eléctrico a través de la dispersión. Las partículas dentro de la dispersión con un potencial zeta migrarán hacia el electrodo de carga opuesta a una velocidad proporcional a la magnitud del potencial zeta. Esta velocidad se puede medir utilizando la técnica del anemómetro láser doppler. El cambio de frecuencia o el cambio de fase de un rayo láser incidente causado por estas partículas en movimiento se puede medir como la movilidad de las partículas, y esta movilidad se puede convertir en potencial zeta al ingresar la viscosidad del dispersante y la permisividad dieléctrica, y la aplicación de las teorías de Smoluchowski.
La velocidad electroforética es proporcional a la movilidad electroforética, que es el parámetro medible. Existen varias teorías que vinculan la movilidad electroforética con el potencial zeta.
Se pueden usar sistemas adecuados como el sistema Nicomp 380 ZLS para determinar el potencial zeta. Tales sistemas generalmente miden la movilidad electroforética y la estabilidad de las partículas cargadas en suspensión líquida. Estos valores son un predictor de las fuerzas de repulsión ejercidas por las partículas en suspensión y están directamente relacionadas con la estabilidad del sistema coloidal. Un potencial zeta puede medirse de acuerdo con un protocolo como se describe a continuación.
La carga eléctrica es una propiedad física que hace que una materia experimente una fuerza cuando está cerca de otra materia cargada eléctricamente. La carga eléctrica viene en dos tipos, llamados positivo y negativo. Las partículas cargadas cuyas cargas tienen el mismo signo se repelen entre sí, y las partículas cuyas cargas tienen signos diferentes se atraen.
La carga eléctrica de un objeto macroscópico como una partícula es la suma de las cargas eléctricas de las partículas que lo componen. Las nanopartículas descritas en el presente documento pueden tener un número igual de cargas positivas y negativas, en cuyo caso sus cargas se cancelan, dando como resultado una carga neta de cero, lo que hace que las nanopartículas sean neutras. La carga neta es la carga de un objeto completo, como un compuesto.
Un ion que tiene una carga positiva neta global es un catión, mientras que un ion que tiene una carga negativa neta general es un anión.
Las nanopartículas descritas en este documento pueden formarse ajustando una carga positiva a negativa, dependiendo de la relación de carga (+/-) del lípido catiónico al ARN y mezclando el ARN y el lípido catiónico. La relación de carga /- del lípido catiónico al a Rn en las nanopartículas descritas en este documento se puede calcular mediante la siguiente ecuación (+/- relación de carga) = [(cantidad de lípidos catiónicos (mol)) * (el número total de cargas positivas en el lípido catiónico)]: [(cantidad de ARN (mol)) * (el número total de cargas negativas en el ARN)]. La cantidad de ARN y la cantidad de lípidos catiónicos pueden determinarse fácilmente por un experto en la técnica en vista de una cantidad de carga en la preparación de las nanopartículas.
Si la presente invención se refiere a una carga tal como una carga positiva, una carga negativa o una carga neutra o un compuesto catiónico, un compuesto negativo o un compuesto neutro, esto generalmente significa que la carga mencionada está presente a un pH seleccionado, como un pH fisiológico. Por ejemplo, la expresión “lípido catiónico” significa un lípido que tiene una carga neta positiva a un pH seleccionado, como un pH fisiológico. La expresión “lípido neutro” significa un lípido que no tiene carga neta positiva o negativa y puede estar presente en forma de un ion anfótero sin carga o neutro a un pH seleccionado, como un pH fisiológico. Por “pH fisiológico” en la presente memoria se entiende un pH de aproximadamente 7,5.
Los portadores de nanopartículas tales como los portadores de lípidos incluyen cualquier sustancia o vehículo con el que se pueda asociar el ARN, por ejemplo, formando complejos con el ARN o formando vesículas en las que el ARN está encerrado o encapsulado. Esto puede resultar en una mayor estabilidad del ARN en comparación con el ARN desnudo. En particular, la estabilidad del ARN en sangre puede aumentar.
Los lípidos catiónicos, polímeros catiónicos y otras sustancias con cargas positivas pueden formar complejos con ácidos nucleicos cargados negativamente. Estas moléculas catiónicas se pueden usar para complejar ácidos nucleicos, de este modo se forman, por ejemplo, los llamados lipoplexos o poliplejos, respectivamente, y se ha demostrado que estos complejos suministran ácidos nucleicos a las células.
Las preparaciones de ARN en nanopartículas se pueden obtener mediante varios protocolos y a partir de diversos compuestos complejantes de ARN. Los lípidos, polímeros, oligómeros o anfífilos son agentes complejantes típicos. En una forma de realización, el compuesto complejante comprende al menos un agente seleccionado del grupo que consiste en protamina, polietilenimina, una poli-L-lisina, una poli-L-arginina o una histona.
La protamina es útil como agente portador catiónico. El término “protamina” se refiere a cualquiera de varias proteínas fuertemente básicas de peso molecular relativamente bajo que son ricas en arginina y se encuentran asociadas especialmente con el ADN en lugar de histonas somáticas en las células espermáticas de varios animales (como peces). En particular, el término “protamina” se refiere a las proteínas que se encuentran en el esperma de pescado que son fuertemente básicas, son solubles en agua, no se coagulan por calor y producen principalmente arginina después de la hidrólisis. En forma purificada, se utilizan en una formulación de insulina de acción prolongada y para neutralizar los efectos anticoagulantes de la heparina.
El término “protamina”, como se usa en la presente, se considera que comprende cualquier secuencia de aminoácidos de protamina obtenida o derivada de fuentes nativas o biológicas, que incluyen fragmentos de estas y formas multiméricas de dicha secuencia de aminoácidos o fragmento de estas. Además, el término abarca polipéptidos (sintetizados) que son artificiales y específicamente diseñados para propósitos específicos y no se pueden aislar de fuentes nativas o biológicas.
La protamina puede ser protamina sulfatada o clorhidrato de protamina. En una forma de realización preferida, la fuente de protamina utilizada para la producción de las nanopartículas descritas en la presente es protamina 5000 que contiene protamina a más de 10 mg/ml (5000 unidades neutralizantes de heparina por ml) en una solución de sal isotónica.
Los liposomas son vesículas lipídicas microscópicas que a menudo tienen una o más bicapas de un lípido formador de vesículas, tal como un fosfolípido, y son capaces de encapsular un fármaco. Se pueden emplear diferentes tipos de liposomas en el contexto de la presente invención, que incluyen, sin limitación, vesículas multilamelares (m Lv ), vesículas unilamelares pequeñas (SUV), vesículas unilamelares grandes (LUV), liposomas estéricamente estabilizados (SSL), vesículas multivesiculares (MV), y vesículas multivesiculares grandes (LMV), así como otras formas bicapa conocidas en la técnica. El tamaño y la laminaridad del liposoma dependerán de la forma de preparación y la selección del tipo de vesículas para usar dependerá del modo de administración preferido. Existen varias otras formas de organización supramolecular en las que los lípidos pueden estar presentes en un medio acuoso, que comprende fases laminares, fases hexagonales y hexagonales inversas, fases cúbicas, micelas,
micelas inversas compuestas de monocapas. Estas fases también se pueden obtener en combinación con ADN o ARN, y la interacción con ARN y ADN puede afectar sustancialmente el estado de fase. Las fases descritas pueden estar presentes en las formulaciones de ARN de nanopartículas descritas en la presente.
Para la formación de lipoplexos de ARN a partir de ARN y liposomas, se puede utilizar cualquier método adecuado de formación de liposomas siempre que proporcione los lipoplexos de ARN previstos. Los liposomas se pueden formar usando métodos estándares tales como el método de evaporación inversa (REV), el método de inyección de etanol, el método de deshidratación-rehidratación (DRV), sonicación u otros métodos adecuados.
Después de la formación de liposomas, los liposomas pueden tener el tamaño adecuado para obtener una población de liposomas que tienen un rango de tamaño sustancialmente homogéneo.
Los lípidos formadores de bicapa tienen típicamente dos cadenas de hidrocarburos, particularmente cadenas de acilo, y un grupo principal, ya sea polar o no polar. Los lípidos formadores de bicapa están compuestos de lípidos naturales o de origen sintético, que incluyen los fosfolípidos, tales como fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, ácido fosfátido, fosfatidilinositol y esfingomielina, donde las dos cadenas de hidrocarburo generalmente tienen entre aproximadamente 14-22 átomos de carbono de longitud, y tienen diversos grados de insaturación. Otros lípidos adecuados para uso en la composición descrita en la presente incluyen glicolípidos y esteroles tales como colesterol y sus diversos análogos que también se pueden usar en los liposomas.
Los lípidos catiónicos típicamente tienen una unidad estructural lipofílica, tal como un esterol, una cadena de acilo o diacilo, y tienen una carga neta positiva general. El grupo principal del lípido normalmente lleva la carga positiva. El lípido catiónico con preferencia tiene una carga positiva de 1 a 10 valencias, con mayor preferencia, una carga positiva de 1 a 3 valencias, y con mayor preferencia, una carga positiva de 1 valencia. Los ejemplos de lípidos catiónicos incluyen, pero sin limitación, 1,2-di-O-octadecenil-3-trimetilamonio propano (DOTMA); dimetildioctadecilamonio (DDAB); 1,2-dioleoil-3-trimetilamonio-propano (DOTAP); 1,2-dioleoil-3-dimetilamoniopropano (DODAP); 1,2-diaciloxi-3-dimetilamonio propanos; 1,2-dialquiloxi-3-dimetilamonio propanos; cloruro de dioctadecildimetil amonio (DODAC), trifluoroacetato de 1,2-dimiristoiloxipropil-1,3-dimetilhidroxietilamonio (DMRIE), y 2,3-dioleoiloxi-N-[2(esperminocarboxamida)etil-N,N-dimetil-1-propanamio (DOSPA). Los preferidos son DOTMA, DOTAP, DODAC, y DOSPA. De máxima preferencia es DOTMA.
Además, las nanopartículas descritas en la presente incluyen además en la presente con preferencia un lípido neutro en vista de la estabilidad estructural, y similares. El lípido neutro se puede seleccionar apropiadamente en vista de la eficiencia de administración del complejo ARN-lípido. Los ejemplos de lípidos neutros incluyen, pero sin limitación, 1,2-di- (9Z-octadecenoil)-sn-glicero-3-fosfoetanolamina (DOPE), 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DOPC), diacilfosfatidil colina, diacilfosfatidil etanol amina, ceramida, esfingomielina, cefalina, esterol y cerebrósido. Se prefiere DOPE y/o DOPC. De máxima preferencia es DOPE. En el caso de que un liposoma catiónico incluya tanto un lípido catiónico como un lípido neutro, la relación molar del lípido catiónico al lípido neutro se puede determinar de manera apropiada en vista de la estabilidad del liposoma, y similares.
De acuerdo con una forma de realización, las nanopartículas descritas en la presente pueden comprender fosfolípidos. Los fosfolípidos pueden ser un glicerofosfolípido. Los ejemplos de glicerofosfolípidos incluyen, sin limitación, tres tipos de lípidos:(i) fosfolípidos zwitteriónicos, que incluyen, por ejemplo, fosfatidilcolina (PC), fosfatidilcolina de yema de huevo, PC derivada de soja en forma natural, parcialmente hidrogenada o completamente hidrogenada, esfingomielina (SM) de dimiristoil fosfatidilcolina (DMPC); (ii) fosfolípidos cargados negativamente:que incluyen, por ejemplo, fosfatidilserina (PS), fosfatidilinositol (PI), ácido fosfatídico (PA), dipalmipoil PG fosfatidilglicerol (PG), dimiristoil osfatidilglicerol (DMPG); derivados sintéticos en los que el conjugado produce un fosfolípido zwitteriónico cargado negativamente, tal es el caso de metoxi-polietilenglicoldistearoilfosfatidiletanolamina (mPEG-DSPE); y (iii) fosfolípidos catiónicos, que incluyen, por ejemplo, fosfatidilcolina o esfingomielina en donde el fosfomonoéster estaba O-metilado para formar los lípidos catiónicos.
La asociación del ARN al portador lipídico se puede producir, por ejemplo, mediante el ARN que rellena los espacios intersticiales del portador, de manera que el portador atrapa físicamente el ARN, o por enlace covalente, iónico o hidrógeno, o por medio de la adsorción mediante enlaces no específicos. Cualquiera que sea el modo de asociación, el ARN debe conservar sus propiedades terapéuticas, es decir, la codificación de antígenos.
El “índice de polidispersidad” es una medición de la distribución de tamaño homogénea o heterogénea de las partículas individuales tal como los liposomas en una mezcla de partículas e indica la amplitud de la distribución de partículas en una mezcla. El PI se puede determinar, por ejemplo, como se describe en el presente documento. Como se usa en el presente documento, la expresión “catión bivalente” se considera que significa un elemento, átomo o molécula cargado positivamente que tiene una carga de más 2. La expresión incluye iones metálicos tales como Ca2+, Zn2+, Mn2+, Mg2+, Fe2+, Co2+, Ni2+ y/o Cu2+. Los cationes bivalentes de acuerdo con la invención también incluyen formas de sal de los iones. Los ejemplos específicos de formas de sales bivalentes incluyen CaCl2, ZnCl2, MnSO4, MnCl2 y MgCh y otras combinaciones de los ejemplos de cationes divalentes anteriores en forma de sal con, por ejemplo, cloruro (Cl), sulfato (SO4), acetato y/o fosfato. Los cationes bivalentes y formas de sal distintas de las ejemplificadas anteriormente son bien conocidos en la técnica y están incluidos en el significado del término tal como
se usa en la presente.
La expresión “ion monovalente” incluye un catión que tiene una carga de más 1. Típicamente, la expresión incluye metales alcalinos tales como litio, sodio, potasio, rubidio y cesio.
El término “porción” se refiere a una fracción. Con respecto a una estructura particular tal como una secuencia de aminoácidos o una proteína, el término “porción” de esta puede designar una fracción continua o discontinua de dicha estructura. Con preferencia, una porción de una secuencia de aminoácidos comprende al menos el 1%, al menos el 5%, al menos el 10%, al menos el 20%, al menos el 30%, con preferencia al menos el 40%, con preferencia al menos 50%, con mayor preferencia, al menos el 60%, con mayor preferencia, al menos el 70%, incluso con mayor preferencia, al menos el 80%, y con máxima preferencia al menos el 90% de los aminoácidos de dicha secuencia de aminoácidos. Con preferencia, si la porción es una fracción discontinua, dicha fracción discontinua está compuesta de 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 o más partes de una estructura, cada parte es un elemento continuo de la estructura. Por ejemplo, una fracción discontinua de una secuencia de aminoácidos puede estar compuesta de 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 o con mayor preferencia, no más de 4 partes de dicha secuencia de aminoácidos, en donde cada parte comprende con preferencia al menos 5 aminoácidos continuos, al menos 10 aminoácidos continuos, con preferencia al menos 20 aminoácidos continuos, con preferencia al menos 30 aminoácidos continuos de la secuencia de aminoácidos.
Los términos “parte” y “fragmento” se usan indistintamente en la presente y se refieren a un elemento continuo. Por ejemplo, una parte de una estructura tal como una secuencia de aminoácidos o una proteína se refiere a un elemento continuo de dicha estructura. Una porción, una parte o un fragmento de una estructura comprende con preferencia una o más propiedades funcionales de dicha estructura. Por ejemplo, una porción, una parte o un fragmento de un epítopo, péptido o proteína es con preferencia inmunológicamente equivalente al epítopo, péptido o proteína de la que se deriva. En el contexto de la presente invención, una “parte” de una estructura tal como una secuencia de aminoácidos con preferencia comprende, con preferencia consiste en al menos el 10%, al menos el 20%, al menos el 30%, al menos el 40%, al menos el 50%, al menos el 60%, al menos el 70%, al menos el 80%, al menos el 85%, al menos el 90%, al menos el 92%, al menos el 94%, al menos el 96%, al menos el 98%, al menos el 99% de la estructura entera o secuencia de aminoácidos.
“Reducir” o “inhibir” como se usa en la presente significa la capacidad de causar una disminución general, con preferencia del 5% o más, el 10% o más, el 20% o más, con mayor preferencia, del 50% o más, y con máxima preferencia de 75% o más, en el nivel. El término “inhibir” o frases similares incluye una inhibición completa o esencialmente completa, es decir, una reducción a cero o esencialmente a cero.
Los términos tales como “aumentar” o “potenciar” con preferencia se refieren a un aumento o potenciación en aproximadamente al menos el 10%, con preferencia al menos el 20%, con preferencia al menos el 30%, con mayor preferencia, al menos el 40%, con mayor preferencia, al menos el 50%, incluso con mayor preferencia, al menos el 80%, y con máxima preferencia al menos el 100%, al menos el 200%, al menos el 500%, al menos el 1000%, al menos el 10000% o incluso más.
Los agentes, composiciones y métodos descritos en la presente se pueden usar para tratar a un sujeto con una enfermedad, por ejemplo, una enfermedad caracterizada por la presencia de células enfermas que expresan un antígeno y presentan un péptido antigénico. Los ejemplos de enfermedades que se pueden tratar y/o prevenir abarcan todas las enfermedades que expresan uno de los antígenos descritos en la presente. Las enfermedades particularmente preferidas son enfermedades infecciosas tales como enfermedades virales y enfermedades de cáncer. Los agentes, composiciones y métodos descritos en la presente también se pueden usar para inmunización o vacunación para prevenir una enfermedad descrita en la presente.
De acuerdo con la invención, el término “enfermedad” se refiere a cualquier estado patológico, que incluye enfermedades infecciosas y enfermedades de cáncer, en particular aquellas formas de enfermedades infecciosas y enfermedades de cáncer descritas en la presente.
Una enfermedad para tratar de acuerdo con la invención es con preferencia una enfermedad que involucra un antígeno. “Enfermedad que involucra un antígeno” o expresiones similares significan de acuerdo con la invención que el antígeno se expresa en células de un tejido u órgano enfermo. La expresión en células de un tejido u órgano enfermo puede aumentar en comparación con el estado en un tejido u órgano sano. En una forma de realización, la expresión solo se encuentra en un tejido enfermo, mientras que la expresión en un tejido sano está reprimida. De acuerdo con la invención, las enfermedades que involucran un antígeno incluyen enfermedades infecciosas y enfermedades de cáncer, en donde el antígeno asociado a la enfermedad es con preferencia un antígeno del agente infeccioso y un antígeno tumoral, respectivamente. Con preferencia, una enfermedad que involucra un antígeno es una enfermedad que involucra células que expresan un antígeno y presentan el antígeno en el contexto de las moléculas MHC, en particular con MHC de clase I.
Las expresiones “tejido normal” o “condiciones normales” se refieren a tejido sano o las condiciones en un sujeto sano, es decir, condiciones no patológicas, donde “sano” con preferencia significa no infectado o no canceroso. Cáncer o enfermedad de cáncer (término médico: neoplasia maligna) es una clase de enfermedades en las que un
grupo de células muestra un crecimiento descontrolado (división más allá de los límites normales), invasión (intrusión y destrucción de tejidos adyacentes) y, algunas veces, metástasis (se disemina a otros lugares del cuerpo a través de la linfa o sangre). Estas tres propiedades malignas de los cánceres los diferencian de los tumores benignos, que son autolimitados y no invaden ni metastatizan. La mayoría de los cánceres forman un tumor, es decir, un hinchamiento o lesión formada por un crecimiento anormal de células (llamadas células neoplásicas o células tumorales), pero algunos, como la leucemia, no lo hacen. El término “cáncer” de acuerdo con la invención comprende leucemias, seminomas, melanomas, teratomas, linfomas, neuroblastomas, gliomas, cáncer de recto, cáncer de endometrio, cáncer de riñón, cáncer adrenal, cáncer de tiroides, cáncer sanguíneo, cáncer de piel, cáncer de cerebro, cáncer cervical, cáncer intestinal, cáncer de hígado, cáncer de colon, cáncer de estómago, cáncer de intestino, cáncer de cabeza y cuello, cáncer gastrointestinal, cáncer de ganglios linfáticos, cáncer de esófago, cáncer colorrectal, cáncer de páncreas, cáncer de oídos, nariz y garganta (ENT), cáncer de mama cáncer, cáncer de próstata, cáncer de útero, cáncer de ovario y cáncer de pulmón y sus metástasis. Sus ejemplos son carcinomas de pulmón, carcinomas de mamas, carcinomas de próstata, carcinomas de colon, carcinomas de células renales, carcinomas cervicales o metástasis de los tipos de cáncer o tumores descritos anteriormente. El término cáncer de acuerdo con la invención también comprende metástasis de cáncer.
Los ejemplos de cánceres tratables con la composición farmacéutica descrita en la presente incluyen melanoma maligno, todos los tipos de carcinoma (carcinoma de colon, células renales, vejiga, próstata, pulmón de células no pequeñas y células pequeñas, etc.), linfomas, sarcomas, blastomas, gliomas, etc.
El melanoma maligno es un tipo grave de cáncer de piel. Se debe al crecimiento descontrolado de las células pigmentarias, llamadas melanocitos.
De acuerdo con la invención, un “carcinoma” es un tumor maligno derivado de células epiteliales. Este grupo representa los cánceres más comunes, que incluyen las formas comunes de cáncer de mama, próstata, pulmón y colon.
El linfoma y la leucemia son tumores malignos derivados de células hematopoyéticas (formadoras de sangre).
Un sarcoma es un cáncer que proviene de las células transformadas en uno de los diversos tejidos que se desarrollan a partir del mesodermo embrionario. Por lo tanto, los sarcomas incluyen tumores de hueso, cartílago, grasa, músculo, vascular y tejidos hematopoyéticos.
El tumor blástico o blastoma es un tumor (usualmente maligno) que se asemeja a un tejido inmaduro o embrionario. Muchos de estos tumores son más comunes en los niños.
Un glioma es un tipo de tumor que comienza en el cerebro o columna vertebral. Se llama glioma porque proviene de las células gliales.
El sitio más común de los gliomas es el cerebro.
Por “metástasis” se entiende la diseminación de las células cancerosas desde su sitio original a otra parte del cuerpo. La formación de metástasis es un proceso muy complejo y depende del desprendimiento de células malignas del tumor primario, la invasión de la matriz extracelular, la penetración de las membranas basales endoteliales para ingresar a la cavidad y los vasos del cuerpo, y luego, después de ser transportados por la sangre, de la infiltración de los órganos blanco. Finalmente, el crecimiento de un nuevo tumor, es decir, un tumor secundario o tumor metastásico, en el sitio blanco depende de la angiogénesis. La metástasis tumoral a menudo ocurre incluso después de la extirpación del tumor primario debido a que las células o componentes tumorales pueden permanecer y desarrollar el potencial metastásico. En una forma de realización, el término “metástasis” de acuerdo con la invención se refiere a “metástasis a distancia” que se refiere a una metástasis que está alejada del tumor primario y del sistema de ganglios linfáticos regionales.
Los ejemplos de enfermedades infecciosas tratables con las composiciones farmacéuticas descritas en la presente incluyen enfermedades infecciosas virales, tales como SIDA (VIH), hepatitis A, B o C, herpes, herpes zoster (viruela), sarampión alemán (virus de la rubéola), fiebre amarilla, dengue, etc. flavivirus, virus de la gripe, enfermedades infecciosas hemorrágicas (virus de Marburg o Ébola), enfermedades infecciosas bacterianas, tales como la enfermedad del legionario (Legionella), úlcera gástrica (Helicobacter), cólera (Vibrio), infecciones por E. coli, Staphylococci, Salmonella o Streptococci (tétanos); infecciones por patógenos protozoarios, tales como malaria, enfermedad del sueño, leishmaniasis; toxoplasmosis, es decir, infecciones por Plasmodium, Trypanosoma, Leishmania y Toxoplasma; o infecciones fúngicas, que son causadas por ejemplo, por Cryptococcus neoformans, Histoplasma capsulatum, Coccidioides immitis, Blastomyces dermatitidis o Candida albicans).
Por “tratar” se entiende la administración de un compuesto o composición como se describe en la presente en un sujeto para prevenir o eliminar una enfermedad, que incluye la reducción del tamaño de un tumor o el número de tumores en un sujeto; detener o retardar una enfermedad en un sujeto; inhibir o retardar el desarrollo de una nueva enfermedad en un sujeto; disminuir la frecuencia o gravedad de los síntomas y/o recurrencias en un sujeto que actualmente tiene actualmente o que previamente ha tenido una enfermedad; y/o prolongar, es decir, aumentar la vida del sujeto. En particular, el término “tratamiento de una enfermedad” incluye curar, acortar la duración, mejorar,
prevenir, desacelerar o inhibir la progresión o empeorar, o prevenir o retrasar la aparición de una enfermedad o sus síntomas.
El término “inmunoterapia” se refiere a un tratamiento que involucra la activación de una respuesta inmune específica y/o una función efectora inmune. La inmunoterapia se puede realizar usando cualquiera de una variedad de técnicas, en las que los agentes proporcionados en la presente funcionan para eliminar las células que expresan antígenos de un paciente. Tal eliminación puede tener lugar como resultado de la mejora o inducción de una respuesta inmune y/o función efectora inmune en un paciente específico para un antígeno o una célula que expresa un antígeno.
En el contexto de la presente invención, los términos tales como “proteger”, “prevenir”, “profiláctico”, “preventivo” o “protector” se refieren a la prevención o tratamiento, o ambos, de la aparición y/o propagación de una enfermedad en un sujeto y, en particular, para minimizar la posibilidad de que un sujeto desarrolle una enfermedad o retrasar el desarrollo de una enfermedad. Por ejemplo, una persona con riesgo de cáncer puede ser una candidata a una terapia para prevenir el cáncer.
Una administración profiláctica de una inmunoterapia, por ejemplo, una administración profiláctica de la composición de la invención, con preferencia protege al receptor del desarrollo de una enfermedad. Una administración terapéutica de una inmunoterapia, por ejemplo, una administración terapéutica de la composición de la invención, puede llevar a la inhibición del progreso/crecimiento de la enfermedad. Esto comprende la desaceleración del progreso/crecimiento de la enfermedad, en particular una interrupción de la progresión de la enfermedad, que con preferencia conduce a la eliminación de la enfermedad.
Por “estar en riesgo” se entiende un sujeto que se identifica por tener una probabilidad más alta de lo normal de desarrollar una enfermedad, en particular el cáncer, en comparación con la población general. Además, un sujeto que ha padecido o tienen actualmente una enfermedad, en particular el cáncer, es un sujeto que tiene un mayor riesgo de desarrollar una enfermedad, ya que tal sujeto puede continuar desarrollando una enfermedad. Los sujetos que actualmente tienen o han tenido un cáncer también tienen un mayor riesgo de metástasis del cáncer.
Los agentes y composiciones proporcionados en la presente se pueden usar solos o en combinación con regímenes terapéuticos convencionales, tales como cirugía, irradiación, quimioterapia y/o trasplante de médula ósea (autólogo, singénico, alogénico o no relacionado).
El tratamiento del cáncer representa un campo donde las estrategias de combinación son especialmente deseables, ya que con frecuencia la acción combinada de dos, tres, cuatro o incluso más fármacos/terapias de cáncer genera efectos sinérgicos que son considerablemente más fuertes que el impacto de un enfoque monoterapéutico. Por lo tanto, un tratamiento para el cáncer que utiliza mecanismos basados en inmunidad o vacunación, tales como las composiciones farmacéuticas descritas en la presente, se pueden combinar efectivamente con varios otros fármacos y/o métodos dirigidos a mecanismos similares u otros específicos. Entre ellos, están por ejemplo, las combinaciones con terapias para tumores convencionales, estrategias multiepítopo, inmunoterapia adicional y enfoques de tratamiento dirigidos a la angiogénesis o apoptosis (para una revisión, por ejemplo, Andersen et al. 2008: Cancer treatment: the combination of vaccination with other therapies. Cancer Immunology Immunotherapy, 57(11):1735-1743). La administración secuencial de diferentes agentes puede inhibir el crecimiento de células cancerosas en diferentes puntos de control, mientras que otros agentes, por ejemplo, pueden inhibir la neoangiogénesis, la supervivencia de células malignas o metástasis, lo que puede convertir al cáncer en una enfermedad crónica. La siguiente lista proporciona algunos ejemplos no limitativos de fármacos y terapias contra el cáncer que se pueden usar en combinación con la presente invención:
1. Quimioterapia
La quimioterapia es el estándar de atención para múltiples tipos de cáncer. Los agentes quimioterapéuticos más comunes actúan mediante la destrucción de las células que se dividen rápidamente, una de las principales propiedades de las células cancerosas. Por lo tanto, una combinación con fármacos quimioterapéuticos convencionales, tal como, por ejemplo, agentes alquilantes, antimetabolitos, antraciclinas, alcaloides vegetales, inhibidores de topoisomerasa y otros agentes antitumorales que afectan la división celular o la síntesis de ADN pueden mejorar significativamente los efectos terapéuticos de la presente invención mediante la eliminación de las células supresoras, se reinicia el sistema inmunológico, mediante la producción de células tumorales más susceptibles a la muerte inmunomediada, o mediante la activación adicional de células del sistema inmune. Una acción anticáncer sinérgica de los fármacos quimioterapéuticos e inmunoterapéuticos basados en la vacunación se ha demostrado en múltiples estudios (véase, por ejemplo, Quoix et al. 2011:Therapeutic vaccination with TG4010 and first-line chemotherapy in advanced non-small-cell lung cancera controlled phase 2B trial. Lancet Oncol.
12(12):1125-33.; véase también Liseth et al. 2010: Combination of intensive chemotherapy and anticancer vaccines in the treatment of human malignancies:the hematological experience. J Biomed Biotechnol. 2010:6920979; véase también Hirooka et al 2009: A combination therapy of gemcitabine with immunotherapy for patients with inoperable locally advanced pancreatic cancer. Pancreas 38(3):e69-74). Hay cientos de fármacos quimioterapéuticos disponibles que son básicamente adecuados para terapias de combinación. Algunos ejemplos (no limitantes) de fármacos quimioterapéuticos que se pueden combinar con la presente invención son carboplatino (Paraplatin),
cisplatino (Platinol, Platinol-AQ), ciclofosfamida (Cytoxan, Neosar), docetaxel (Taxotere), doxorrubicina (Adriamycin), erlotinib (Tarceva), etopósido (VePesid), fluorouracilo (5-FU), gemcitabina (Gemzar), mesilato de imatinib (Gleevec), irinotecano (Camptosar), metotrexato (Folex, Mexate, Amethopterin), paclitaxel (Taxol, Abraxane), sorafinib (Nexavar), sunitinib (Sutent), topotecano (Hycamtin), vincristina (Oncovin, Vincasar PFS), y vinblastina (Velban).
2. Cirugía
La cirugía del cáncer, una operación para extirpar el tumor, aún es la base del tratamiento del cáncer. La cirugía se puede combinar con otros tratamientos de cáncer para suprimir cualquier célula tumoral restante. La combinación de métodos quirúrgicos con un tratamiento inmunoterapéutico posterior es un enfoque prometedor que se ha demostrado innumerables veces.
3. Radiación
La terapia de radiación aún es un componente importante del tratamiento del cáncer, ya que aproximadamente el 50% de todos los pacientes con cáncer reciben terapia de radiación durante el curso de su enfermedad. El objetivo principal de la terapia de radiación es privar a las células cancerosas de su potencial de multiplicación (división celular). Los tipos de radiación utilizados para tratar el cáncer son la radiación de fotones (rayos X y rayos gamma) y radiaciones de partículas (haces de electrones, protones y neutrones). Hay dos formas de administrar la radiación al lugar del cáncer. La radiación de haz externo se administra desde el exterior del cuerpo al dirigir los rayos de alta energía (radiación de fotones, protones o partículas) al lugar del tumor. La radiación interna o braquiterapia se administran desde el interior del cuerpo mediante fuentes radioactivas, selladas en catéteres o semillas directamente en el sitio del tumor. Las técnicas de la terapia de radiación que son aplicables en combinación con la presente invención son, por ejemplo, fraccionamiento (terapia de radiación administrada en un régimen fraccionado, por ejemplo, fracciones diarias de 1,5 a 3 Gy administradas durante varias semanas), terapia de radiación conformada 3D (3DCRT; administración de radiación al volumen del tumor macroscópico), terapia de radiación de intensidad modulada (IMRT; modulación de intensidad controlada por computadora de haces de radiación múltiples), terapia de radiación guiada por imagen (IGRT; una técnica que comprende imágenes previa a la terapia de radiación que permite la corrección), y terapia de radiación estereotáctica corporal (SRBT, administra dosis individuales muy altas de radiación solo a una pocas fracciones de tratamiento). Para una revisión de terapia de radiación, véase Baskar et al. 2012: Cancer and radiation therapy:current advances and future directions. Int. J Med Sci. 9(3):193-199.
4. Anticuerpos
Los anticuerpos (con preferencia anticuerpos monoclonales) logran su efecto terapéutico contra las células cancerosas a través de diversos mecanismos. Pueden tener efectos directos en la producción de apoptosis o muerte celular programada. Pueden bloquear componentes de las vías de transducción de señales, tales como, por ejemplo. receptores del factor de crecimiento, que detienen efectivamente la proliferación de células tumorales. En las células que expresan anticuerpos monoclonales, pueden provocar la formación de anticuerpos anti-idiotipo. Los efectos indirectos incluyen el reclutamiento de células que tienen citotoxicidad, tal como monocitos y macrófagos. Este tipo de muerte celular mediada por anticuerpos se denomina citotoxicidad mediada por células dependientes de anticuerpos (ADCC). Los anticuerpos también se unen al complemento, lo que lleva a una toxicidad celular directa, conocida como citotoxicidad dependiente del complemento (CDC). La combinación de métodos quirúrgicos con fármacos o métodos inmunoterapéuticos es un enfoque exitoso, como por ejemplo, se demuestra en Gadri et al.
2009: Synergistic effect of dendritic cell vaccination and anti-CD20 antibody treatment in the therapy of murine lymphoma. J Immunother. 32(4):333-40. La siguiente lista proporciona algunos ejemplos no limitantes de anticuerpos anticáncer y potenciales blancos de anticuerpos (entre paréntesis) que se pueden usar en combinación con la presente invención: Abagovomab (CA-125), Abciximab (CD41), Adecatumumab (EpCAM), Afutuzumab (CD20), Alacizumab pegol (VEGFR2), pentetato de Altumomab (CEA), Amatuximab (MORAb-009), Anatumomab mafenatox (TAG-72), Apolizumab (HlA-DR), Arcitumomab (CEA), Bavitux- imab(phosphatidylserine), Bectumomab(CD22), Belimumab(BAFF), Bevacizumab (VEGF-A), Bivatuzumab mertansina (CD44 v6), Blinatumomab (CD19), Brentuximab vedotin (CD30 TNFRSF8), Cantuzumab mertansina (mucina CanAg), Cantuzumab ravtansina (MUC1), Capromab pendetide (células de carcinoma prostático), Carlumab (CNT0888), Catumaxomab (EpCAM, CD3), Cetuximab (EGFR), Citatuzumab bogatox (EpCAM), Cixutumumab (receptor de IGF-1), Claudiximab (Claudin), Clivatuzumab tetraxetano (MUC1), Conatumumab (TFJAIL-R2), Dacetuzumab (CD40), Dalotuzumab (receptor del factor de crecimiento tipo insulina I), Denosumab (FtANKL), Detumomab (células de linfoma B) Drozitumab (DR5), Ecromeximab (GD3 gangliósido), Edrecolomab (EpCAM), Elotuzumab (SLAMF7), Enavatuzumab (PDL192), Ensituximab (NPC-1C), Epratuzumab (CD22), Ertumaxomab (HER2/neu, CD3), Etaracizumab (integrina avp3), Farletuzumab (receptro de folato 1), FBTA05 (CD20), Ficlatuzumab (SCH 900105), Figitumumab (IGF-1 receptor), Flanvotumab (glicoproteína 75), Fresolimumab (TGF-p), Galiximab (CD80), Ganitumab (IGF-I), Gemtuzumab ozogamicin (CD33), Gevokizumab (IL-1p), Girentuximab (anhidrasa carbónica 9 (CA-IX)), Glembatumumab vedotin (GPNMB), lbritumomab tiuxetan (c D20), Icrucumab (VEGFR-1), Igovoma (CA-125), Indatuximab ravtansina (SDC1), Intetumumab (CD51), Inotuzumab ozogamicina (CD22), Ipilimumab (CD152), Iratumumab (CD30), Labetuzumab (CEA), Lexatumumab (TFJAIL-R2), Libivirumab (antígeno de superficie B de hepatitis), Lintuzumab (CD33), Lorvotuzumab mertansine (CD56), Lucatumumab (CD40), Lumiliximab (CD23), Mapatumumab (TRAIL-R1), Matuzumab (EGFR), Mepolizumab (IL-5), Milatuzumab (CD74), Mitumomab(GD3 ganglioside), Mogamulizumab (CCR4), Moxetumomab pasudotox (CD22), Nacolomab tafenatox (antígeno C242), Naptumomab estafenatox (5T4),
Namatumab (RON), Necitumumab (EGFR), Nimotuzumab (EGFR), Nivolumab (lgG4), Ofatumumab (CD20), Olaratumab (PDGF-R a), Onartuzumab (receptor quinasa del factor scatter humano), Oportuzumab monatox (EpCAM), Oregovomab (CA-125), Oxelumab (OX-40), Panitumumab (EGFR), Patritumab (HER3), Pemtumoma (MUC1), Pertuzuma (HER2/neu), Pintumomab (antígeno de adenocarcinoma), Pritumumab (vimentina), Racotumomab (ácido N-glicolilneuramínico), Radretumab (dominio B extra-fibronectina), Rafivirumab (glicoproteína del virus de la rabia), Ramucirumab (VEGFR2), Rilotumumab (HGF), Rituximab (CD20), Robatumumab (receptor IGF-1), Samalizumab (CD200), Sibrotuzumab (Fa P), Siltuximab (IL-6), Tabalumab (BAFF), Tacatuzumab tetraxetan (alfa-fetoproteína), Taplitumomab paptox (CD19), Tenatumomab (tenascina C), Teprotumumab (CD221), Ticilimumab (CTLA-4), Tigatuzumab (t Ra IL-R2), TNX-650 (IL-13), Tositumomab (CD20), Trastuzumab (HER2/neu), TRBS07 (GD2), Tremelimumab (Ct La -4), Tucotuzumab celmoleuquina (EpCAM), Ublituximab (MS4A1), Urelumab (4-1BB), Volociximab (integrina a5p1), Votumumab (antígeno tumoral CtAa 16,88), Zalutumumab (EGFR), Zanolimumab (CD4).
5. Citoquinas, quimioquinas, moléculas coestimuladoras, proteínas de fusión
Otra forma de realización de la presente invención es el uso combinado de las composiciones farmacéuticas codificadoras de antígenos de la presente invención con citoquinas, quimioquinas, moléculas coestimuladoras y/o proteínas de fusión de estas para provocar una modulación inmune beneficiosa o efectos inhibidores de tumores. Con el fin de aumentar la infiltración de células inmunes en el tumor y facilitar el movimiento de las células presentadoras de antígeno a los ganglios linfáticos que drenan el tumor, se pueden usar varias quimioquinas con estructuras de C, CC, CXC y CX3C. Algunas de las quimioquinas más prometedoras son, por ejemplo, CCR7 y sus ligandos CCL19 y CCL21, además de CCL2, CCL3, CCL5 y CCL16. Otros ejemplos son CXCR4, CXCR7 y CXCL12. Además, las moléculas coestimuladoras o reguladoras, tales como, por ejemplo, ligandos B7 (B7.1 y B7.2) son útiles. También son útiles otras citoquinas tales como por ejemplo, interleuquinas especialmente (por ejemplo, IL-1 a IL17), interferones (por ejemplo, IFNalfal a IFNalfa8, IFNalfa10, IFNalfa13, IFNalfa14, IFNalfa16, IFNalfa17, IFNalfa21, IFNbetal, IFNW, IFNE1 e IFNK), IFNalfal a IFNalfa8, IFNalfa 10, IFNalfal3, IFNalfa16, IFNW, IFNW, IFNW, IFNW, IFNW, IFN1, IFNlpha17). Factores hematopoyéticos, TGF (por ejemplo. TGF-a, TGF-p, y otros miembros de la familia TGF), finalmente miembros de la familia de receptores del factor de necrosis tumoral y sus ligandos, así como otras moléculas estimuladoras, que comprenden, pero sin limitación, 41BB, 41BB-L, CD137, CD137L, CTLA-4GITR, GITRL, Fas, Fas-L, TNFR1, TRAIL-R1, TRAIL-R2, p75NGF-R, DR6, LT.beta.R, RANK, EDAR1, XEDAR, Fn114, Troy/Trade, TAJ, TNFRII, HVEM, CD27, CD30, CD40,4-1 BB, OX40, GITR, GITRL, TACI, BAFF-R, BCMA, RELT, y Cd95 (Fas/APO-1)), proteína relacionada con TNFR inducida por glucocorticoides, proteína mediadora de la apoptosis relacionada con el receptor TNF (TRAMP) y el receptor 6 de muerte (DR6). Especialmente CD40/CD40L y OX40/OX40L son objetivos importantes para la inmunoterapia combinada debido a su impacto directo en la supervivencia y proliferación de células T. Para una revisión ver Lechner et al. 2011: Chemokines, costimulatory molecules and fusion proteins for the immunotherapy of solid tumors. Immunotherapy 3 (11), 1317-1340.
6. Tratamientos bacterianos
Los investigadores han estado usando bacterias anaeróbicas, tales como Clostridium novyi, para consumir el interior de tumores pobres en oxígeno. Estas deben morir cuando entran en contacto con los lados oxigenados del tumor, lo que significa que serían inofensivas para el resto del cuerpo. Otra estrategia es usar bacterias anaeróbicas que se han transformado con una enzima que puede convertir un profármaco no tóxico en un fármaco tóxico. Con la proliferación de las bacterias en las áreas necróticas e hipóxicas del tumor, la enzima se expresa únicamente en el tumor. Por lo tanto, un profármaco aplicado sistémicamente se metaboliza al fármaco tóxico solo en el tumor. Se ha demostrado que esto es eficaz con el anaerobio no patógeno Clostridium sporogenes.
7. Inhibidores de quinasa
Otro gran grupo de objetivos potenciales para la terapia complementaria del cáncer comprende inhibidores de quinasa, debido a que el crecimiento y la supervivencia de las células cancerosas está estrechamente interconectado con la desregulación de la actividad de quinasa. Para restaurar la actividad normal de la quinasa y, por lo tanto, reducir el crecimiento del tumor, se utiliza una amplia variedad de inhibidores. El grupo de quinasas dirigidas comprende receptores tirosina quinasas, por ejemplo, BCR-ABL, B-Raf, EGFR, HER-2/ErbB2, IGF-IR, PDGFR-a, PDGFR-p, c-Kit, Flt-4, Flt3, FGFR1, FGFR3, FGFR4, CSF1R, c-Met, RON, c-Ret, ALK, tirosina qunasas citoplasmáticas, por ejemplo, c-SRC, c-YES, Abl, JAK-2, serina/treonina quinasas por ejemplo ATM, Aurora A & B, CDKs, mTOR, PKCi, PLKs, b-Raf, S6K, STK11/LKB1 y lípido quinasas, por ejemplo PI3K, SKI. Los inhibidores de quinasas de moléculas pequeñas son, por ejemplo, PHA-739358, Nilotinib, Dasatinib y PD166326, NSC 743411, Lapatinib (GW-572016), Canertinib (CI-1033), Semaxinib (SU5416), Vatalanib (PTK787/ZK222584), Sutent (SU11248), Sorafenib (BAY 43-9006) y Leflunomida (SU101). Para obtener más información, ver, por ejemplo, Zhang et al. 2009:Targeting cancer with small molecule kinase inhibitors. Nature Reviews Cancer 9, 28-39.
8. Receptores tipo Toll
Los miembros de la familia de receptores tipo Toll (TLR) son un enlace importante entre la inmunidad innata y adaptativa y el efecto de muchos adyuvantes se basa en la activación de los TLR. Un gran número de vacunas
establecidas contra el cáncer incorporan ligandos para los TLR para reforzar las respuestas de las vacunas. Además de TLR2, TLR3, TLR4 especialmente TLR7 y TLR 8 se han examinado para la terapia del cáncer en los enfoques de inmunoterapia pasiva. El TLR7 y TLR8 estrechamente relacionado contribuyen a las respuestas antitumorales al afectar las células inmunes, células tumorales y microentorno del tumor y pueden activarse por estructuras análogas de nucleósidos. Todos los TLR se han utilizado como inmunoterapéuticos independientes o adyuvantes de vacunas de cáncer y se pueden combinar sinérgicamente con las formulaciones descritas en la presente. Para más información ver van Duin et al. 2005:Triggering TLR signaling in vaccination. Trends in Immunology, 27(1):49-55. 9. Inhibidores de angiogénesis
Además de las terapias dirigidas a los receptores inmunomoduladores afectados por los mecanismos de escape mediados por tumores y la supresión inmunitaria, existen terapias dirigidas al entorno tumoral. Los inhibidores de la angiogénesis evitan el crecimiento extenso de los vasos sanguíneos (angiogénesis) que los tumores requieren para sobrevivir. La angiogénesis promovida por las células tumorales para cumplir sus crecientes demandas de nutrientes y oxígeno, por ejemplo, se puede bloquear mediante el direccionamiento de diferentes moléculas. Los ejemplos no limitantes de moléculas mediadoras de la angiogénesis o inhibidores de angiogénesis que se pueden combinar con la presente invención son VEGF soluble (isoformas VEGF121 y VEGF165 de VEGF, receptores VEGFR1, VEGFR2 y correceptores Neuropilina-1 y Neuropilina-2) 1 y NRP-1, angiopoyetina 2, TSP-1 y TSP-2, angiostatina y moléculas relacionadas, endostatina, vasostatina, calreticulina, factor plaquetario 4, TIMP y CDAI, Met-1 y Met-2, IFN-a, -p y -y, CXCL10, IL-4, -12 y -18, protrombina (dominio kringle 2), fragmento de antitrobina III, prolactina, VEGI, s Pa r C, osteopontina, maspin, canstatina, proteína relacionada con proliferina, restina y fármacos como por ejemplo, bevacizumab, itraconazol, carboxiamidotriazol, TNP-470, CM101, IFN-a, factor plaquetario-4, suramina, SU5416, trombospondina, antagonistas de VEGFR, esteroides angiostáticos heparina, factor inhibitorio de angiogénesis derivado de cartílago, inhibidores de la metaloproteinasa de matriz, 2-metoxiestradiol, tecogalan, tetratiomolibdato, talidomida, trombospondina, inhibidores prolactina Vp3, linomida, tasquinimod. Para revisión ver Schoenfeld and Dranoff 2011:Anti-angiogenesis immunotherapy. Hum Vaccin. (9):976-81.
10. Fármacos para terapia dirigida de molécula pequeña
Los fármacos para terapia dirigida de molécula pequeña son generalmente inhibidores de los dominios enzimáticos en proteínas mutadas, sobreexpresadas o de otro modo críticas dentro de la célula cancerosa. Los ejemplos prominentes y no limitantes son los inhibidores de la tirosina quinasa imatinib (Gleevec/Glivec) y gefitinib (Iressa). El uso de moléculas pequeñas, por ejemplo, malato de sunitinib y/o tosilato de sorafenib dirigidos a algunas quinasas en combinación con vacunas para la terapia del cáncer también se describen en la solicitud de patente anterior US2009004213.
11. Vacunas a base virus
Hay varias vacunas contra el cáncer a base de virus disponibles o en desarrollo que se pueden usar en un enfoque terapéutico combinado junto con las formulaciones descritas en la presente. Una ventaja del uso de tales vectores virales es su capacidad intrínseca para iniciar respuestas inmunes, con reacciones inflamatorias que se producen como resultado de la infección viral que crea la señal de peligro necesaria para la activación inmune. Un vector viral ideal debe ser seguro y no debe introducir una respuesta inmune anti-vector para permitir el refuerzo de respuestas específicas antitumorales. Los virus recombinantes, tales como los virus vacuna, virus de herpes simple, adenovirus, virus adenoasociados, retrovirus y virus avipox se han utilizado en modelos de tumores animales y, sobre la base de sus resultados alentadores, se han iniciado ensayos clínicos en seres humanos. Las vacunas a base de virus especialmente importantes son partículas tipo virus (VLP), pequeñas partículas que contienen ciertas proteínas de la capa externa de un virus. Las partículas tipo virus no contienen ningún material genético del virus y no pueden causar una infección, pero se pueden construir para presentar antígenos tumorales en su cubierta. Las VLP se pueden derivar de varios virus, tales como por ejemplo, el virus de hepatitis B u otras familias de virus, que incluyen Parvoviridae (por ejemplo, virus adenoasociados), Retroviridae (por ejemplo, VIH) y Flaviviridae (por ejemplo, virus de hepatitis C). Para una revisión general, véase Sorensen and Thompsen 2007:Virus-based immunotherapy of cancer: what do we know and where are we going? APMIS 115(11):1177-93; las partículas tipo virus contra el cáncer se revisan en Buonaguro et al. 2011:Developments in virus-like particle-based vaccines for infectious diseases and cancer. Expert Rev Vaccines 10(11):1569-83; y en Guillen et al. 2010: Virus-like particles as vaccine antigens and adjuvants:application to chronic disease, cancer immunotherapy and infectious disease preventive strategies. Procedia in Vaccinology 2 (2), 128-133.
12. Estrategias multiepítopo
El uso de epítopos múltiples muestra resultados prometedores para la vacunación. Las tecnologías de secuenciación rápida combinadas con sistemas de algoritmos inteligentes permiten el aprovechamiento del mutanoma tumoral y pueden proporcionar múltiples epítopos para vacunas individualizadas que se pueden combinar con la presente invención. Para obtener más información, véase 2007: Vaccination of metastatic colorectal cancer patients with matured dendritic cells loaded with multiple major histocompatibility complex class I peptides. J Immunother30:762-772; furthermore Castle etal. 2012:Exploiting the mutanomefor tumor vaccination. Cancer Res 72 (5):1081-91.
13. Transferencia de células T adoptiva
Por ejemplo, una combinación de una vacuna antigénica tumoral y la transferencia de células T se describe en: Rapoport et al. 2011: Rapoport et al. 2011: Combination immunotherapy using adoptive T-cell transfer and tumor antigen vaccination on the basis of hTERT and survivin after ASCT for myeloma. Blood 117(3):788-97.
14. Terapias para blanco basado en péptidos
Los péptidos se pueden unir a los receptores de la superficie celular o a la matriz extracelular afectada que rodea el tumor. Los radionucleidos que se unen a estos péptidos (por ejemplo, RGD) finalmente destruyen la célula cancerosa si el nucleido decae en la vecindad de la célula. Especialmente los oligos o multímeros de estos motivos de unión son de gran interés, ya que esto puede llevar a una mayor especificidad y avidez del tumor. Para ejemplos no limitantes ver Yamada 2011: Peptide-based cancer vaccine therapy for prostate cancer, bladder cancer, and malignant glioma. Nihon Rinsho 69(9):1657-61.
15. Otras terapias
Hay numerosas otras terapias de cáncer que se pueden combinar con las formulaciones de la presente invención para crear efectos sinérgicos. Los ejemplos no limitantes son los tratamientos dirigidos a la apoptosis, hipertermia, terapia hormonal, terapia de telomerasa, terapia de potenciación de insulina, terapia génica y terapia fotodinámica. El término “inmunización” o “vacunación” describe el proceso de tratamiento de un sujeto por razones terapéuticas o profilácticas.
El término “sujeto” se refiere a los mamíferos. Por ejemplo, los mamíferos en el contexto de la presente invención son seres humanos, primates no humanos, animales domésticos tales como perros, gatos, ovejas, vacas, cabras, cerdos, caballos, etc., animales de laboratorio tales como ratones, ratas, conejos, cobayos, etc., así como animales en cautiverio tales como animales de zoológico. El término “animal” como se usa en la presente también incluye a los seres humanos.
El término “autólogo” se utiliza para describir cualquier cosa que se derive del mismo sujeto. Por ejemplo, “trasplante autólogo” se refiere a un trasplante de tejido u órganos derivados del mismo sujeto. Dichos procedimientos son ventajosos porque superan la barrera inmunológica que de otro modo da como resultado el rechazo.
El término “heterólogo” se utiliza para describir algo que consiste en múltiples elementos diferentes. Como ejemplo, la transferencia de la médula ósea de un individuo a un individuo diferente constituye un trasplante heterólogo. Un gen heterólogo es un gen derivado de una fuente distinta del sujeto.
Las composiciones farmacéuticas de la invención con preferencia son estériles y contienen una cantidad efectiva de las nanopartículas descritas en la presente y, opcionalmente, de otros agentes descritos en la presente para generar la reacción deseada o el efecto deseado.
La composición farmacéutica de la invención se puede administrar junto con sustancias que aumentan la inmunidad complementarias, tal como uno o más adyuvantes, y puede comprender una o más sustancias que aumentan la inmunidad para aumentar aún más su efectividad, con preferencia para lograr un efecto sinérgico de la inmunoestimulación. El término “adyuvante” se refiere a compuestos que prolongan o potencian o aceleran una respuesta inmune. Varios mecanismos son posibles a este respecto, de acuerdo con los diversos tipos de adyuvantes. Por ejemplo, los compuestos que permiten la maduración de DC, por ejemplo, lipopolisacáridos o el ligando CD40 forman una primera clase de adyuvantes adecuados. En general, cualquier agente que influye en el sistema inmunológico del tipo de una “señal de peligro” (LPS, GP96, ARN sd etc.) o citoquinas, tal como GM-CSF, se puede usar como un adyuvante que permite intensificar y/o influenciar de manera controlada una respuesta inmune. Los oligodesoxinucleótidos CpG también se pueden usar opcionalmente en este contexto, aunque se deben considerar los efectos secundarios que se producen en ciertas circunstancias, como se explicó anteriormente. Los adyuvantes particularmente preferidos son citoquinas, tales como monoquinas, linfoquinas, interleuquinas o quimioquinas, por ejemplo, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12, INF-a, INF-y, GM-CSF, LT-a, o factores de crecimiento, por ejemplo, hGH. Otros adyuvantes conocidos son hidróxido de aluminio, adyuvante de Freund o aceite tal como Montanide®, el más preferido es Montanide® ISA51. Los lipopéptidos, tales como Pam3Cys, también son adecuados para uso como adyuvantes en la composición farmacéutica de la presente invención.
Las composiciones farmacéuticas se proporcionan usualmente en una forma de dosis uniforme y se pueden preparar de una manera conocida per se. La composición farmacéutica de la invención por ejemplo, puede estar en forma de solución o suspensión.
La composición farmacéutica de la invención puede comprender sales, sustancias tamponantes, conservantes, portadores, diluyentes y/o excipientes, todos los cuales son con preferencia farmacéuticamente aceptables. El término “farmacéuticamente aceptable” se refiere a la no toxicidad de un material que no interactúa con la acción del componente activo de la composición farmacéutica.
Las sales que no son farmacéuticamente aceptables se pueden usar para preparar sales farmacéuticamente aceptables y están incluidas en la invención. Las sales farmacéuticamente aceptables de este tipo comprenden de manera no limitante las preparadas a partir de los siguientes ácidos: ácidos clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico, maleico, acético, salicílico, cítrico, fórmico, malónico, succínico y similares. Las sales farmacéuticamente aceptables también se pueden preparar como sales de metales alcalinos o sales de metales alcalinotérreos, tales como sales de sodio, sales de potasio o sales de calcio.
Las sustancias reguladoras adecuadas para usar en la composición farmacéutica de la invención incluyen ácido acético en una sal, ácido cítrico en una sal, ácido bórico en una sal y ácido fosfórico en una sal.
Los conservantes adecuados para uso en la composición farmacéutica de la invención incluyen cloruro de benzalconio, clorobutanol, parabeno y timerosal.
Una formulación inyectable puede comprender un excipiente farmacéuticamente aceptable, tal como lactato de Ringer.
El término “portador” se refiere a un componente orgánico o inorgánico, de naturaleza natural o sintética, en donde el componente activo se combina para facilitar, mejorar o permitir la aplicación. De acuerdo con la invención, el término “portador” también incluye uno o más rellenos, diluyentes o sustancias encapsulantes sólidos o líquidos compatibles, que son adecuados para la administración a un paciente.
Las posibles sustancias portadoras para la administración parenteral son, por ejemplo, agua estéril, Ringer, lactato de Ringer, solución estéril de cloruro de sodio, polialquilenglicoles, naftalenos hidrogenados y, en particular, polímeros de láctido biocompatibles, copolímeros de láctido/glicólido o copolímeros de polioxietileno/polioxipropileno. El término “excipiente” cuando se usa en la presente se considera que indica todas las sustancias que pueden estar presentes en una composición farmacéutica de la presente invención y que no son ingredientes activos tales como, por ejemplo, portadores, aglutinantes, lubricantes, espesantes, agentes tensioactivos, conservantes, emulsionantes, reguladores, agentes aromatizantes o colorantes.
Los agentes y composiciones descritos en la presente se pueden administrar por cualquier vía convencional, tal como por administración parenteral, incluso mediante inyección o infusión. La administración es con preferencia parenteral, por ejemplo, por vía intravenosa, intraarterial, subcutánea, intradérmica o intramuscular.
La expresión “administración parenteral” se refiere a la administración de una manera que no sea a través del tracto digestivo, como por inyección intravenosa o intramuscular. La administración sistémica es una vía de administración que es enteral, es decir, la administración que implica la absorción a través del tracto gastrointestinal o parenteral. Las composiciones adecuadas para administración parenteral generalmente comprenden una preparación acuosa o no acuosa estéril del compuesto activo, que es con preferencia isotónica a la sangre del receptor. Los ejemplos de portadores y disolventes compatibles son la solución de Ringer y la solución de cloruro de sodio isotónica. Además, generalmente se utilizan aceites fijos estériles como medio de solución o suspensión.
Los agentes y composiciones descritos en la presente se administran en cantidades efectivas. Una “cantidad efectiva” se refiere a la cantidad que logra una reacción deseada o un efecto deseado solo o junto con otras dosis. En el caso del tratamiento de una enfermedad particular o una afección particular, la reacción deseada con preferencia se relaciona con la inhibición del curso de la enfermedad. Esto comprende lentificar el progreso de la enfermedad y, en particular, interrumpir o revertir el progreso de la enfermedad. La reacción deseada en un tratamiento de una enfermedad o de una afección también puede ser retrasar la aparición o una prevención del inicio de dicha enfermedad o dicha afección.
La cantidad efectiva de un agente o composición descrita en la presente dependerá de la afección para tratar, la gravedad de la enfermedad, los parámetros individuales del paciente, que incluyen edad, condición fisiológica, tamaño y peso, la duración del tratamiento, el tipo de terapia acompañante (si está presente), la vía de administración específica y factores similares. Por consiguiente, las dosis administradas de los agentes descritos en la presente pueden depender de varios de tales parámetros. En el caso de que una reacción en un paciente sea insuficiente con una dosis inicial, se pueden usar dosis más altas (o dosis efectivamente más altas logradas por una vía de administración diferente, más localizada).
La presente invención se describe en detalle mediante las siguientes figuras y ejemplos, que se utilizan solo con fines ilustrativos y no pretenden ser limitativos. Debido a la descripción y los ejemplos, las formas de realización adicionales que están incluidas igualmente en la invención son accesibles para el experto.
El tema descrito en las figuras y ejemplos que no está cubierto por las reivindicaciones se describe sólo con fines comparativos.
FIGURAS
Figura 1: Tamaño de los lipoplexos F4/ARN en diferentes relaciones de carga DOTMA/ARN (2/1,1/1, 1/2, 1/4) en
agua (a), PBS (b) y en PBS después de la adición de CaCl22,2 mM (c) y CaCl2 (d) 22 mM.
Figura 2: Tamaños de partícula de los liposomas DOTMA/Chol (F5) y lipoplexos en diferentes relaciones de regulador y carga de Do TmA /ARN 1/1 y 2/1 (exceso positivo).
Figura 3: Tamaño medio de lipoplexos F5/ARN en relaciones de carga (1/1) y (1/2) después de la compactación del ARN utilizando diferentes cantidades de CaCl2.
Figura 4: Panorama general de los resultados seleccionados de la caracterización fisicoquímica de lipoplexos de ARN con liposomas DOTMA/DOPE. El eje x proporciona la relación de carga entre DOTMA y a Rn . Parte superiortamaño de partícula a partir de mediciones, PCS, medio:índice de polidispersión, parte inferior:potenciales zeta de las mismas formulaciones. Las líneas se han introducido para guiar el ojo.
Figura 5: (a) Tamaño medio de los lipoplexos F4/Luc-ARN en la relación de carga (1/2) en agua y después de la adición de regulador concentrado a PBS (1x), cloruro de sodio (150 mM), glucosa (5%) o glucosa regulador de fosfato. En contraste con la relación 1/1, que conduce a la agregación en todas las condiciones del regulador (no se muestra en la presente), los tamaños de partícula de los lipoplexos en la relación 1/2 fueron de aproximadamente 220 nm. (b) La polidispersión de tamaño varió de 0,23 a 0,34, lo que indica estabilidad coloidal.
Figura 6: (a) Tamaño medio de los lipoplexos F4 /ARN en relaciones de carga DOTMA/ARN seleccionadas. Los tamaños de partícula de lipoplexos con relaciones de carga entre 1:1,8 y 1:1,4 fueron de aproximadamente 160 nm. Con un exceso negativo decreciente (relación de carga 1:1,2), el tamaño de partícula se determinó a 183 nm. (b) Todas las relaciones de carga analizadas llevan a lipoplexos con índices de polidispersidad pequeños menores a 0,2.
Figura 7: a) Tamaño medio de los liposomas DOTMA/DOPE (1:2) en agua sin extrusión (F4-bruto), después de la extrusión usando una membrana de policarbonato con un diámetro de poro de 400 nm (F4-400), 200 nm (F4-200), 100 nm (F4-100) o 50 nm (F4-50). Los lipoplexos correspondientes con una relación de carga DOTMA/ARN de 1/2 en agua (2:) y en regulador PBS (3:). (b) La polidispersidad del tamaño de los lipoplexos con liposomas extrudidos varió de 0,10 a 0,28. Sin embargo, los lipoplexos formados por liposomas no extrudidos también mostraron una distribución de tamaño suficientemente estrecha.
Figura 8: El tamaño medio (a) y el índice de polidispersidad (b) de los liposomas DOTMA/DOPE (F4) se determinaron antes de la liofilización y después de la liofilización y reconstitución con agua.
Figura 9: Tamaño de partícula de liposomas con diferentes relaciones DOTMA/DOPE. Para los liposomas con una fracción alta de DOPE (90%), las partículas son inestables en PBS y en agregados.
Figura 10: Tamaño de partícula de lipoplexos con liposomas que comprenden diferentes relaciones de DOTMA/DOPE. Con la relación DOTMA/DOPE de 9/1 a 4/6, los lipoplexos tienen tamaños de partícula definidos (<300 nm) con valores de PI bajos (<0,2). Con una fracción de DOPE más alta, se obtienen tamaños de partículas más grandes con valores de PI altos.
Figura 11: Actividades de luciferasa in vivo y ex vivo después de la inyección en ratones BALB/c de luciferasa-ARN (20 |jg, g) complejado con diferentes cantidades de liposomas F4 para producir relaciones F4:ARN de 4,8:1,2,4:1, 1,2:1, 1,2:2, 1,2:4.
Figura 12: Distribución de la señal de luciferasa total entre los órganos derivados del experimento descrito en la Figura 11.
Figura 13: Actividades de luciferasa in vivo y ex vivo después de la inyección en ratones BALB/c de luciferasa-ARN (20 jg, g) complejado con liposomas F11 o F12.
Figura 14: Actividades de luciferasa in vivo y ex vivo después de la inyección en ratones BALB/c de luciferasa-ARN (20 jg, g) complejado con liposomas F2 o F5.
Figura 15: Cuantificación de las actividades de luciferasa en los bazos de ratones después de la inyección de luciferasa-ARN (20 jg, g) diluido en 1X PBS (A) o no diluido en agua (B y C) complejado con liposomas F4 diluido en 1X PBS (B) o no diluido en agua (A y C) con una relación F4:ARN de 1,2:2. Las concentraciones de PBS finales de todos los complejos se ajustaron a 1X PBS.
Figura 16: Cuantificación de las actividades de luciferasa en los bazos de ratones después de la inyección de luciferasa-ARN (20 jg , g) precomplejado con 0,125 o CaCl21 mM o sin precomplejación con liposomas F4 con una relación de F4:ARN de 1,2:2.
Figura 17: Cuantificación de las actividades de luciferasa en los bazos de ratones después de la inyección de luciferasa-ARN (20 jg, g) o liposomas F4 diluidos en 1X PBS o NaCl 154 mM y mezclado con una relación de F4:ARN de 1,2:2.
Figura 18: Cuantificación de las actividades de luciferasa en los bazos de ratones después de la inyección de luciferasa-ARN (20 |jg, g) precomplejado con 1-4 mM CaCl2 y mezclado con liposomas F4 con una relación de F4:ARN de 1,2:2 usando NaCl 154 mM en vez de 1X PBS como regulador de dilución.
Figura 19:(A) La luciferasa-ARN (5 jg ) se incubó en 25 o 50% de suero de ratón durante 30 minutos y luego se sometió a electroporación en DC inmaduras derivadas de monocitos humanos. La actividad de la luciferasa se evaluó 18 h más tarde a través del ensayo de luciferasa in vitro estándar. (B) Luciferasa-ARN (20 jg ) se complejó mediante un protocolo estándar con liposomas F4 con una relación F4:ARN de 1,2:2 y luego se incubó en presencia o ausencia de suero de ratón 50% durante 30 min. Se inyectaron ratones BALB/c por vía intravenosa con estas formulaciones y las actividades de luciferasa in vivo se cuantificaron a partir de bazos de ratones.
Figura 20: Evaluación de la captación de Cy5-ARN o F4-rho por las poblaciones celulares en el bazo después de la inyección en ratones BALB/c de Cy5-ARN (40 jg ) complejados con liposomas F4 marcados con rodamina (F4-rho) (1,2:2; Liposoma:ARN).
Figura 21: Evaluación del estado de maduración (A) de las células dendríticas (revelado por regulación por aumento de CD86 y CD40) y (B) concentraciones en suero de IFNa y TNFa después de la inyección en ratones C57BL/6 de HA-ARN (40 jg ) complejados con F4 (1,2:2; Liposoma:ARN), F4 solo o PBS (como control).
Figura 22: Evaluación de las frecuencias (A) de las células T CD8+ específicas de antígeno y (B) las respuestas de recuperación de la memoria después de la inmunización de ratones C57BL/6 con SIINFEKL-ARN (20 o 40 jg ) complejados con liposomas F4 en diferentes relaciones liposoma:ARN.
Figura 23: Curvas de supervivencia de Kaplan-Meier de ratones C57BL/6 que recibieron tres inmunizaciones intravenosas de SIIN-FEKL-ARN (40 jg ) complejadas con liposomas F4 con una relación de F4:ARN de 1,2:2 o se dejaron sin tratar y se inyectaron 2x105 células tumorales B 16-OVA sc en los flancos.
Figura 24: Crecimiento tumoral individual después de la inoculación s.c. de 2x105 células tumorales B16-OVA en los flancos de ratones C57/B16 que recibieron siete inmunizaciones intravenosas de SIINFEKL-ARN (40 jg) complejadas con liposomas F4 o F12 con una relación de F4:ARN de 1,2:2. Se utilizaron liposomas solos sin SIINFEKL-ARN como tratamiento de control.
Figura 25: Curvas de supervivencia de Kaplan-Meier después de inoculación s.c. de 2x105 células tumorales B16-OVA en los flancos de ratones C57/B16 que recibieron siete inmunizaciones intravenosas de SIINFEKL-ARN (40 jg ) complejadas con liposomas F4 o F12 con una relación de F4:ARN de 1,2:2. Se utilizaron liposomas solos sin SIINFEKL-ARN como tratamiento de control.
Figura 26: Actividades de luciferasa in vivo y ex vivo después de la inyección en ratones BALB/c de luciferasa-ARN (20 jg ) complejadas con diferentes cantidades de liposomas F5 para producir relaciones F5:ARN de 4,8:1,2,4:1, 1,2:1, 1,2:2, 1,2:4.
Figura 27: Distribución de la señal de luciferasa total entre los órganos derivados del experimento descrito en la Figura 26.
Figura 28: Preformulación de ARN y reconstitución de la solución ARN-lipoplexo.
Figura 29: Resultados de las mediciones de DLS de lipoplexos de ARN reconstituidas de acuerdo con el protocolo de formulación clínica. La diseminada limitada de los tamaños de partícula de lipoplexos recibidos demuestra la robustez del procedimiento de mezcla.
Figura 30: Tamaño de partícula e índice de polidispersidad de lipoplexos 1:2 de precursores liposomales extrudidos y no extrudidos.
Figura 31: Actividades de luciferasa in vivo después de la inyección en ratones BALB/c de luciferasa-ARN (20 jg) complejados con liposomas pequeños o grandes en PBS para lograr lipoplexos de tamaño diferente.
Figura 32: Cuantificación de las actividades de luciferasa en bazos de ratones después de la inyección de lipoplexos de luciferasa-ARN de diferente tamaño. Los lipoplexos de Lager, ensamblados a partir de liposomas más grandes, tienen una mayor actividad, independientemente de la composición lipídica de los liposomas.
Figura 33: Los lipoplexos formadas mediante el uso de NaCl y regulador PBS en forma concentrada normal y 10X. En este último caso, se añadió un volumen 10 veces menor para obtener la misma concentración final. Todos los lipoplexos tienen aproximadamente el mismo tamaño, pero las de soluciones concentradas son un poco más pequeñas.
Figura 34: Actividad (expresión de luc) de los lipoplexos medida en la Figura 33. Como tendencia, los lipoplexos de los reguladores no concentrados tienen mayor actividad. El tratamiento con solución salina normal produce la mayor actividad.
Figura 35: Los lipoplexos se formaron después de la adición del NaCI al ARN en diferentes concentraciones. La concentración final de NaCl fue la misma en todos los casos, ya que de las soluciones concentradas se añadieron volúmenes más bajos. Como tendencia, el tamaño del lipoplexo aumenta al disminuir la concentración de la solución de NaCl agregada. Como los lipoplexos más grandes tienen mayor actividad que los más pequeños, se considera que el uso de NaCl 0,9% (150 mM) produce la mejor actividad.
Figura 36: Tamaño (Zave) e índice de polidispersidad (PI), para lipoplexos con diferentes relaciones de mezcla (relaciones DOTMA/nucleótido), directamente después de la reconstitución, y después de 2 h y 24 h.
Figura 37: Resultados de las mediciones de DLS de lipoplexos de ARN con diferentes relaciones de carga probadas in vivo.
Figura 38: Cuantificación de las actividades de luciferasa en bazos de ratones después de la inyección de lipoplexos de ARN de luciferasa de tamaño diferente.
EJEMPLOS
Las técnicas y los métodos utilizados en la presente se describen en la presente o se llevan a cabo de manera conocida per se y como se describe, por ejemplo, en Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd ed. (1989) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY Todos los métodos, que incluyen el uso de kits y reactivos, se llevan a cabo de acuerdo con la información del fabricante, a menos que se indique específicamente.
Ejemplo de referencia 1: Materiales y métodos de preparación de liposomas
La fabricación de liposomas se realizó mediante diferentes protocolos. El “método de la película” o la “inyección de etanol” se usó para la preparación de liposomas. Para el método de la película, los lípidos se disolvieron en cloroformo y se colocaron cantidades apropiadas en un balón. El disolvente orgánico se evaporó en un evaporador rotatorio y la película seca se reconstituyó con agua o solución reguladora/excipiente mediante la agitación suave del matraz. Típicamente, se seleccionó una concentración total de lípidos de 5 mM. Para la inyección de etanol, los lípidos se disolvieron en relaciones molares adecuadas en etanol hasta una concentración total en el rango de 100 400 mM. La solución de etanol se inyectó bajo agitación en agua o la solución acuosa de regulador/excipientes. El tamaño de los liposomas se ajustó mediante extrusión a través de membranas de policarbonato de diferente tamaño de poro (50-400 nm), y/o se filtraron a través de filtros estériles disponibles comercialmente de 220-450 nm de tamaño de poro, o se usaron filtros para uso clínico con otros tamaños de poro (1 pm-5 pm) (Sartorius, Gotinga, Alemania, Millipore, Schwalbach, Alemania).
La concentración final de lípidos en la fase acuosa estaba entre 5 mM y 25 mM. La composición lipídica se controló mediante análisis HPLC. El tamaño de partícula y el potencial zeta se determinaron por dispersión dinámica de la luz Formación de lipoplexo
La formación de lipoplexo se realizó mediante diferentes protocolos. El procedimiento detallado se da con los experimentos individuales. Para varios experimentos, se realizó la incubación directa de soluciones de ARN con soluciones de liposomas en agua o en presencia de regulador o excipientes. Los lipoplexos también se pueden formar mediante la mezcla de soluciones lipídicas en etanol con soluciones de ARN en agua o soluciones acuosas de regulador/excipiente. El protocolo de preparación seleccionado dependía de las características de partícula y la aplicación biológica deseadas y se describe con más detalle con los experimentos respectivos.
Mediciones de PCS
Las mediciones del tamaño de partícula y potencial zeta se realizaron en un analizador de potencial zeta de partículas IZ submicrónicas 380 ZLS (pSs Nicomp, Santa Bárbara, CA). El tamaño se determinó mediante espectroscopia de correlación de fotones (PCS) a un ángulo de dispersión de 90° con un tiempo de equilibrio de 2 minutos y tiempos de corrida de 15 minutos. La autocorrelación se realizó mediante el análisis gaussiano de intensidad ponderada, que proporciona información sobre el diámetro medio de la población en masa y el índice de polidispersidad (PI).
Potencial zeta
El potencial zeta se midió en agua usando una intensidad de campo eléctrico de 5 V/cm y una separación de electrodos de 0,4 cm. La movilidad electrostática se convirtió al potencial zeta mediante la ecuación de Helmholtz-Smoluchowski. Todas las mediciones se llevaron a cabo a una temperatura de 23 °C.
Fraccionamiento de campo-flujo
Se realizó un FFF de flujo simétrico (AF4) utilizando el sistema Eclipse 3+ equipado con un canal largo (275 mm de longitud) y el detector de dispersión de luz MALS de ángulo triple miniDA WN TREOS (Wyatt Technologie, Dernbach, Alemania) usando el siguiente hardware/parámetros:
Membrana: celulosa regenerada 10 kD (Microdyn Nadir, Wiesbaden, Alemania)
Espaciador: espaciador de 250 |jm (ancho 21,5 mm)
Disolvente: 10 mM de NaNO3
Flujo del detector: 1,0 mL/min
Flujo del foco: 1,5 mL/min
Flujo de inyección: 0,2 mL/min
Gradiente de flujo cruzado: 4 mL/min (fijado durante 15 min, luego 4 mL/min a 0,1 mL/min en 20 min) Animales
Ratones C57BL/6 y BALB/c eran de Jackson Laboratories. Se utilizaron animales apareados por edad (8-10 semanas) y sexo (hembra) a lo largo de los experimentos.
Células y líneas celulares
B16-OVA es una línea celular de melanoma B16-F10 que expresa el gen de la ovoalbúmina de pollo (OVA). Las DC inmaduras derivadas de monocitos humanos (iDC) se diferenciaron de monocitos CD14+ purificados en presencia de IL-4 (1000 U/ml) y GM-CSF (1000 U/ml) durante 5 días.
Constructos de ARN y transcripción in vitro
Todos los plásmidos para la transcripción in vitro de ARN codificador de antígeno desnudo se basaron en el esqueleto pST1-2hBgUTR-A120 que presenta una UTR de p-globina humana 3' (hBgUTR) y una cola poli(A) de 120 nucleótidos y permite la generación de ARN transcripto in vitro farmacológicamente mejorado. El constructo SIINFEKL contiene un 257-264 de OVA de pollo. El constructo HA fue una secuencia parcial optimizada por codón de HA de gripe (aa 60-285 fusionada a 517-527; cepa de gripe A/PR/8/34) diseñada para combinar epítopos de MHC inmunodominantes principales. pSTI-Luciferasa-A120 (Luc) contiene el gen de luciferasa de luciérnaga (15). El ARN se generó por transcripción in vitro. La marcación de ARN con Cy5-UTP (Cy5-ARN) se realizó de acuerdo con las instrucciones del fabricante (Amersham Biosciences, Buckinghamshire, r U) usando el constructo HA como molde.
Preparación e inyección de lipoplexos
A menos que se indique lo contrario, como protocolo estándar, los ARN y los liposomas se prediluyeron en solución salina reguladora con fosfato libre de ARNasa IX (PBS) (Ambion) hasta un volumen final de 100 j l antes de la mezcla. 10 minutos después de mezclar el ARN diluido y el liposoma, se inyectaron 200 j l de una solución de lipoplexo por ratón por vía intravenosa. Para algunos experimentos, PBS se reemplazó con NaCl libre de ARNasa 154 mM (Ambion)
Análisis citométrico de flujo
Los anticuerpos monoclonales para citometría de flujo fueron de BD Pharmingen. Las muestras de sangre hipotéticamente lisadas se incubaron a 4 °C con mAB específicos. Las células del bazo se obtuvieron mediante digestión con colagenasa (1 mg/ml; Roche). La cuantificación de células CD8+ específicas de SIINFEKL con tetrámero H-2 Kb/SIINFEKL (Beckman-Coulter) se describió previamente. Los datos de citometría de flujo se adquirieron en un citómetro de flujo analítico FACS-Canto II y se analizaron utilizando el software FlowJo (Tree Star) Electroporación
50 j l de solución de ARN se sometieron a electroporación en iDC con parámetros de electroporación de 270V y 150 jF utilizando un electroporador BioRad.
Examen de imágenes de bioluminiscencia in vivo (BLI)
La captación y la traducción de Luc-ARN se evaluaron mediante imágenes de bioluminiscencia in vivo utilizando el sistema de imágenes IVIS Lumina (Caliper Life Sciences). Brevemente, se inyectó una solución acuosa de D-luciferina (150 mg/kg de peso corporal) (BD Bio-sciences) i.p. 6 h después de la administración de lipoplexos de ARN. Después de 5 minutos, se cuantificaron los fotones emitidos (tiempo de integración de 1 minuto). La bioluminiscencia in vivo en regiones de interés (ROI) se cuantificó como radiancia promedio (fotones/s/cm2/sr) utilizando el software IVIS Living Image 4.0. La intensidad de la luz transmitida que se origina en las células que expresan luciferasa dentro del animal se representó como una imagen en escala de grises, donde negro es la señal de bioluminiscencia menos intensa y blanco la más intensa. Las imágenes de referencia en escala de grises de los ratones se obtuvieron bajo iluminación de luz LED baja. Las imágenes se superpusieron usando el software Living Image 4,0.
ELISA
Se detectó IFN-a (PBL) de ratón y TNFa (eBioscience) en sueros de ratón utilizando el ensayo ELISA estándar de acuerdo con las instrucciones del fabricante.
Experimentos de tumor
Para determinar la inmunidad protectora, los ratones recibieron tres inmunizaciones. Posteriormente, se inocularon 2 x 105 células tumorales B16-OVA s.c. en los flancos de los ratones C57BL/6. Para la evaluación de la inmunidad terapéutica, primero se inocularon los mismos números de células tumorales. Las inmunizaciones se iniciaron después de que los tumores alcanzaron un diámetro de 2 a 3 mm. Los tamaños de los tumores se midieron cada tres días. Los animales se sacrificaron cuando el diámetro del tumor superó los 15 mm.
Ejemplo 2: Efecto de los reguladores/iones sobre los tamaños de partícula y PI de los lipoplexos de ARN
Se prepararon lipoplexos de liposomas y ARN en diferentes relaciones de carga /- entre el DOTMA lipídico catiónico (con carga positiva) y el ARN con carga negativa. Las características fisicoquímicas de los liposomas se investigaron mediante la dispersión dinámica de luz (PCS) y las mediciones del potencial zeta.
El uso de un regulador que a menudo es necesario para aplicaciones farmacéuticas e iones puede llevar a la agregación de lipoplexos que los hace inadecuados para la aplicación parenteral a los pacientes. Con el fin de evaluar estos efectos sobre el diámetro promedio de los lipoplexos, las características de las partículas de los lipoplexos de los liposomas DOTMA/DOPE (F4) [DOT-MA/DOp E (1:1 mol:mol)] y el ARN en diferentes relaciones de carga se determinaron bajo cuatro condiciones tamponantes, a saber, agua, regulador PBS, PBS más CaCl22,2 mM y PBS más CaCh 22 mM. Para las mediciones, en resumen, se formaron lipoplexos mediante la adición de ARN a liposomas preformados, posteriormente se añadieron los reguladores. La concentración final de ARN se seleccionó a aproximadamente 100 pg/ml. Todas las demás concentraciones se ajustaron en consecuencia o se seleccionaron como se indica en las figuras. Los tamaños de partícula se muestran en la Figura 1. La relación de carga DOTMA/ARN se da en el eje x de cada gráfico.
En el agua, se obtuvieron lipoplexos de tamaños de partícula definidos (tamaño medio menor de 300 nm), con bajos índices de polidispersidad (<0,3). Los tamaños de partícula medidos solo fueron ligeramente afectados por la relación de carga. Sin embargo, las partículas cargadas negativamente son más pequeñas (tamaño promedio de 100 a 200 nm) y más estables (PI <0,15) que las partículas no cargadas (tamaño promedio de 200 a 250 nm, PI <0,2).
En el regulador PBS, el mismo efecto es más prominente. Los lipoplexos comparativos con una relación de carga positiva o neutra forman partículas más grandes (parcialmente estabilizadas por las cargas positivas). Los lipoplexos comparativos con una relación de carga neutra son agregados inestables en construcción. En contraste, los lipoplexos cargados negativamente son estables (como lo indica un PI bajo <0,2) y compactos con tamaños de partícula promedio de 250 nm y menos.
(a) Después de la adición de CaCl2, se observa un aumento en el tamaño de las partículas. Sin embargo, en concentraciones fisiológicas de Ca++ (mostradas: 2,2 mM; en algunos tipos de células, la concentración fisiológica puede ser de hasta 5 mM, rara vez de hasta 10 mM), las partículas con carga negativa aún tienen tamaños definidos por debajo de 500 nm con un índice de polidispersidad que no excede 0,6. Para la muestra comparativa con exceso de carga positiva, el tamaño aumentó casi a 1000 nm.
(b) La adición de CaCl2 22 mM a las muestras b) (PBS) indujo la agregación/floculación en todas las condiciones, supuestamente debido a la formación de partículas de fosfato de calcio.
Estos resultados demuestran que en soluciones reguladoras tal como, por ejemplo, en regulador PBS y/o en presencia de CaCl2, las relaciones de carga positiva o neutra son poco adecuadas para la producción de formulaciones liposómicas estables. La estabilidad de los lipoplexos depende en gran medida de la relación de carga /- entre el lípido DOTMA catiónico y el ARN cargado. Además, tanto la fuerza iónica del regulador de formulación como la presencia de cationes bivalentes tienen una fuerte influencia en el tamaño de las partículas. En condiciones fisiológicas (es decir, pH 7,4; Ca++ 2,2 mM), una relación de carga negativa parece ser imperativa debido a la inestabilidad de los lipoplexos neutros o cargados positivamente comparativos. Para lipoplexos con exceso de carga negativa se observó la tendencia más baja para la agregación.
Referencia
Ejemplo 3: Efecto de la carga positiva sobre la estabilidad de los lipoplexos de ARN
Para una evaluación adicional de un posible efecto beneficioso/perjudicial de las cargas positivas en la estabilidad de los lipoplexos (véase, por ejemplo, Figura 1 b y c), los tamaños de partícula de los lipoplexos de los liposomas DOTMA/Chol (F5) [DOTMA/Chol (1:1 mol:mol)] y el ARN con relaciones de carga DOTMA/ARN de 1/1 y 2/1 se midieron en diferentes reguladores (ver Figura 2). Para comparación, también se midió el tamaño de los liposomas
puros.
En el cloruro de sodio 150 mM, así como en el regulador PBS, una relación de carga DOTMA/ARN positiva de 2/1 conduce a tamaños de partículas mayormente aumentados/agregados con un índice de polidispersidad mayor que 0,4. Este resultado indica que las cargas positivas no son adecuadas para estabilizar los lipoplexos y que se debe esperar una agregación para los lipoplexos con carga positiva también en condiciones fisiológicas.
Ejemplo 4: Influencia de la precompactación del ARN mediado por cationes bivalentes sobre el tamaño de partícula de los lipoplexos de ARN
Para analizar la influencia de la precompactación de ARN usando cationes divalentes antes de la complejación, se determinó el tamaño de partícula de los lipoplexos F5/ARN en relaciones de carga (1/1 comparativa) y (1/2) se determinaron después de la compactación del ARN con diferentes cantidades de CaCl2. Contrariamente a los Ejemplos 2 y 3 aquí, los iones se añadieron al ARN antes de la formación del lipoplexo. La concentración final de liposomas fue en todos los casos 100 jM, y la concentración de ARN se ajustó en consecuencia. Debido a que para la F5/ARN 1/2 se duplicó la concentración de ARN, aquí también se duplicó la concentración de CaCl2.
Después del pretratamiento de los lipoplexos sin carga de ARN/F5 (1:1 comparativo) con concentraciones fisiológicas de CaCl2 (es decir, 2,2 mM), el tamaño promedio de la partícula del lipoplexo resultante se infla (es decir, a 1,2 jm); véase Figura 3. Debido a este gran tamaño, tales partículas no son idealmente adecuadas para composiciones farmacéuticas y/o la administración de ARN a las células. Por el contrario, ambos experimentos de precompactación con lipoplexos con carga negativa y concentraciones bajas/altas (baja: 0,3 mM; alto: 4,4 mM) de CaCl2 produjeron partículas de tamaño pequeño de aproximadamente 200 (350) nm.
Estos resultados indican que el ARN se puede precondensar con iones bivalentes. Debido a esta etapa de precondensación, los lipoplexos con tamaños de partículas definidos y compactos se pueden formar en relaciones de carga negativas; se puede prevenir la agregación o aumento sustancial del tamaño de partícula.
Ejemplo 5: Caracterización fisicoquímica de los lipoplexos de ARN
En la Figura 4, se proporcionan los resultados de la caracterización físico-química de los lipoplexos de ARN con F4 (DOTMA/DOPE) a diferentes relaciones de carga /- entre DOTMA y ARN. Como se puede observar para los lipoplexos cargados negativamente, en relaciones de /- de 1/1 (comparativas) y superiores, el tamaño de partícula es constante a aproximadamente 200 nm. El potencial zeta disminuye monótonamente de /- 2/1 a 1 // 1 (ambos comparativos), y permanece constante a un mayor exceso de carga negativa. Estos resultados sugieren que las características importantes de las partículas, a saber, tamaño de las partículas y potencial zeta, son invariantes con el exceso de ARN, a partir de la relación 1/1 (comparativa). En este rango, se pueden fabricar partículas estables coloidales de tamaño bien definido. Se pueden obtener resultados similares en presencia de iones y reguladores (PBS).
Ejemplo 6: Efecto de la composición de regulador sobre la estabilidad/tamaño partícula de lipoplexos de ARN cargados negativamente
La estabilidad de los lipoplexos en diferentes reguladores se investigó más detalladamente. Para probar si un exceso de carga negativa produce lipoplexos estables coloidales en potenciales sistemas reguladores relevantes, se determinaron los tamaños de partícula de lipoplexos F4/Luc-ARN en la relación de carga (1/2) en agua y después de la adición del regulador concentrado a PBS (1x), cloruro de sodio (150 mM), glucosa (5%) o glucosa regulada con fosfato (ver Figura 5).
En todas las condiciones probadas, los tamaños de partículas no superan los 300 nm con valores de PI claramente menores que 0,4. Estos resultados sugieren que, si se fabrican como se describe en la presente, los lipoplexos de ARN con una relación de carga de 1/2 (exceso de ARN cargado negativamente) son coloidalmente estables en diferentes condiciones tamponantes.
Ejemplo 7: Correlación de la relación de carga negativa y el tamaño de partícula/estabilidad
La estabilidad coloidal de los lipoplexos en la relación entre (1/1, comparativa) y (1/2) se investigó adicionalmente. Los tamaños de partícula de los lipoplexos F4/ARN con relaciones de carga entre 1:1,8 y 1:1,2 (comparativos) se midieron en agua; véase Figura 6.
Estos resultados sugieren que en el rango de las relaciones de carga probadas, el tamaño de partícula de los lipoplexos es invariante a cambios menores en el exceso de ARN. En relación con las relaciones de carga probadas (negativas) de 1:1,2 (comparativas) a 1:1,8, los tamaños de las partículas están generalmente en el rango de 100 a 200 nm con valores de PI menores de 0,2.
Ejemplo 8: Efecto de la extrusión del tamaño de partícula y los valores de PI de los lipoplexos de ARN
En este experimento se muestra que se pueden producir lipoplexos de diferente tamaño. Con el fin de determinar el efecto de una etapa de extrusión adicional sobre el tamaño de partícula medio y los valores de PI de liposomas o
lipoplexos de ARN, se realizaron experimentos de extrusión (utilizando una membrana de policarbonato con diferentes diámetros de poros). Los resultados del tamaño de partícula de lipoplexos de ARN con F4 sin extrudir (DOTMA/DOPE) y con f4 extrudido en agua o PBS se muestran en la Figura 7.
Los experimentos demuestran que, además del rango de tamaño ya descrito de 200-300 nm, también se pueden producir partículas más grandes y más pequeñas. Aquí, como ejemplo, se obtuvieron partículas con un tamaño en el rango de 400-500 nm y <100 nm.
Mientras que los lipoplexos de ARN no extrudido muestran tamaños de partícula promedio entre 400 y 500 nm, la extrusión de lipoplexos de ARN generalmente lleva a partículas significativamente más pequeñas con tamaños menores de 200 nm. En contraste, el efecto de la extrusión sobre la polidispersidad es marginal; tanto los liposomas extrudidos como los no extrudidos llevan a partículas discretas y bien definidas (con valores de PI entre 0,1 y 0,3), si se complejan con ARN.
Ejemplo 9: Efecto de la liofilización sobre las características de la partícula
Los lipoplexos no son estables en suspensión líquida para el almacenamiento a largo plazo y el agregado. La liofilización es una técnica para enfrentar este desafío. Se investigó el efecto de la liofilización sobre las características de las partículas. Los tamaños de partícula de los liposomas DOTMA/DOPE (F4) se determinaron antes de la liofilización y después de la liofilización y la reconstitución con agua (ver Figura 8, donde los complejos con una relación de carga de 1,8:2 y 2:2 son comparativos).
Estos resultados sugieren que los lipoplexos se pueden liofilizar sin afectar las características de las partículas. Ejemplo 10: Efecto de la relación de DOTMA/DOPE sobre las características de las partículas
Se fabricaron liposomas y lipoplexos con diferentes relaciones de DOTMA/DOPE. Los liposomas con una fracción DOPE muy alta (90% en moles, comparativa) fueron inestables en PBS (Figura 9). Para los lipoplexos, ya en una fracción DOPE de 70% en moles, el tamaño de partícula aumentó significativamente (Figura 10). Todas las demás composiciones fueron estables.
Ejemplo 11: Administración in vivo de lipoplexos de ARN
A los ratones BALB/c (n = 3) se les inyectó por vía intravenosa luciferasa-ARN (20 |jg) complejado con diferentes cantidades de liposomas F4 para obtener relaciones de F4:ARN de 4,8:1 (comparativa), 2,4:1 (comparativa), 1,2:1 (comparativo), 11,2:2, 1,2:4 (comparativo). Las actividades de luciferasa in vivo y ex vivo se evaluaron a través del examen de imágenes in vivo 6 horas después de la inyección del lipoplexo y en la Figura 11 se muestran los conjuntos de órganos y ratones representativos. La Figura 12 muestra la distribución de la señal de luciferasa total entre los órganos derivados del experimento descrito en la Figura 11.
F4 (DOTMA:DOPE) va más a los pulmones (un poco de bazo) en la relación de F4:ARN de 4,8:1 (comparativo), a ambos pulmones y al bazo en la relación de F4:ARN de 2,4:1 (comparativo) y exclusivamente para el bazo en relaciones de F4:ARN de 1,2:1 (comparativo), 1,2:2, 1,2:4 (comparativo). Por lo tanto, los lipoplexos neutros y aniónicos se dirigen específicamente al bazo, mientras que los lipoplexos catiónicos se dirigen principalmente al pulmón (expresión de wrt a proteína). No se detectó expresión en el hígado.
A los ratones BALB/c (n = 5) se les inyectó por vía intravenosa luciferasa-ARN (20 jg ) complejado con liposomas F11 o F12 con una relación Fx:ARN de 1,2:2 [F11:DOTMA/DOPE (1:2 mol:mol); F12:DOTMA/DOPE (mol:mol 2:1)]. Las actividades de luciferasa in vivo y ex vivo se evaluaron mediante imágenes in vivo 6 horas después de la inyección del lipoplexo y se muestran los ratones y conjuntos de órganos representativos en la Figura 13. Los derivados de F4 F11 y F12 también se dirigen al bazo en una relación liposoma:ARN de 1,2:2.
A los ratones BALB/c (n = 5) se les inyectó por vía intravenosa luciferasa-ARN (20 jg ) complejado con liposomas F2 o F5 con una relación Fx:ARN de 1:1 (comparativa) [F2:DOTAP/DOPE (1:1 mol:mol); F5:DOTMA/Chol (1:1 mol:mol)]. Las actividades de luciferasa in vivo y ex vivo se evaluaron a través de imágenes in vivo 6 horas después de la inyección del lipoplexo yse muestran los ratones y conjuntos de órganos representativos en la Figura 14. En la relación liposoma:ARN de 1:1 (comparativa), mientras que F2 se dirige al bazo, F5 Se dirige tanto al bazo como a los pulmones.
Luciferasa-ARN (20 jg ) diluido en 1X PBS (A) o sin diluir en agua (B y C) se complejó con liposomas F4 diluido en 1X PBS (B) o sin diluir en agua (A y C) con una relación de F4:ARN de 1,2:2. Las concentraciones finales de PBS de todos los complejos se ajustaron a 1X PBS. A los ratones BALB/c (n = 5) luego se les inyectó por vía intravenosa A, B o C, y las actividades de luciferasa en los bazos de ratones se cuantificaron a través de imágenes in vivo (Media SD); véase Figura 15.
Como un protocolo de mezcla estándar, tanto los liposomas como el ARN se diluyen en PBS (conc final de 1X PBS) y luego se mezclan en volúmenes iguales. La predilución del ARN solo es tan buena como el protocolo estándar. Todos los demás protocolos que carecen de predilución de ARN en PBS dieron resultados peores. Se prefiere la
presencia de iones en la solución de ARN antes de la complejación para lograr buenos resultados.
Luciferasa-ARN (20 |jg) precomplejada con CaCl2 0,125 o 1 mM o sin precomplejación se mezcló mediante un protocolo estándar con liposomas F4 con una relación de F4:ARN de 1,2:2. A los ratones BALB/c (n = 5) se les inyectaron por vía intravenosa estas formulaciones y las actividades de luciferasa in vivo se cuantificaron a partir de bazos de ratones (Mean SD); véase Figura 16.
La precondensación de ARN con CaCl21 mM cuando se usa PBS como regulador aumenta la señal de luciferasa 3 veces (concentraciones más altas de CaCl2 en presencia de PBS lleva a grandes agregados de partículas). La precondensación de ARN con Ca2+ ayuda a aumentar la señal de luciferasa.
Luciferasa-ARN (20 jg ) o liposomas F4 diluidos en PBS 1X o NaCl 154 mM se mezclaron con una relación de F4:ARN de 1,2:2. A los ratones BALB/c (n = 5) se les inyectaron por vía intravenosa estas formulaciones y las actividades de luciferasa in vivo se cuantificaron a partir de bazos de ratones (Media SD); véase Figura 17.
Usando el protocolo de mezcla estándar, el reemplazo de PBS con NaCl isosmolar actuó tan bien como PBS.
Luciferasa-ARN (20 jg ) precomplejado con CaCl2 1-4 mM se mezcló usando un protocolo estándar con liposomas F4 con una relación de F4:ARN de 1,2:2 usando NaCl 154 mM en lugar de PBS 1X como regulador de dilución. A los ratones BALB/c (n = 5) se les inyectaron por vía intravenosa estas formulaciones y las actividades de luciferasa in vivo se cuantificaron a partir de bazos de ratones (Media SD); véase Figura 18.
Cuando PBS se reemplaza con NaCl, se puede usar CaCl2 2 mM, lo que lleva a un aumento de 4,5 veces (las concentraciones más altas de CaCl2 no aumentan más la señal).
Luciferasa-ARN (5 jg ) se incubó en 25 o 50% de suero de ratón durante 30 min. y luego se sometió a electroporación en DC inmaduras derivadas de monocitos humanos. La actividad de la luciferasa se evaluó 18 h más tarde a través del ensayo de luciferasa in vitro estándar (Media SD); véase Figura 19A. Luciferasa-ARN (20 jg ) se complejó mediante un protocolo estándar con liposomas F4 con una relación de F4:ARN de 1,2:2 y luego se incubó en presencia o ausencia de suero de ratón 50% durante 30 min. A los ratones BALB/c (n = 5) se les inyectaron por vía intravenosa estas formulaciones y las actividades de luciferasa in vivo se cuantificaron a partir de bazos de ratones (Media SD); véase Figura 19b .
El ARN desnudo se degrada en presencia de suero. La complejación del ARN con liposomas F4 lo protege de la degradación mediada por ARNasa en suero.
A los ratones BALB/c (n = 3) se les inyectaron por vía intravenosa Cy5-ARN (40 jg ) complejado con liposomas F4 marcados con rodamina (F4-rho) (1,2:2; Liposoma:ARN). La captación de Cy5-ARN o F4-rho por las poblaciones de células en el bazo se evaluó mediante citometría de flujo 1 hora después de la inyección del lipoplexo, véase Figura 20.
Como las células presentadoras de antígenos profesionales (APC), las DC esplénicas y los macrófagos internalizaron eficientemente el ARN encapsulado en liposomas y el propio liposoma mientras que las células B y T casi no internalizaron ni el ARN encapsulado en liposomas ni el propio liposoma. De este modo, los lipoplexos de ARN se internalizan selectivamente mediante APC esplénicas.
A los ratones C57BL/6 (n = 3) se les inyectó HA-ARN (40 jg ) complejado con F4 (1,2:2; Liposoma:ARN), F4 solo o PBS (como control); véase Figura 21. (A) El estado de maduración de las células dendríticas (revelado por la regulación por aumento de CD86 y CD40) en el bazo se determinó mediante citometría de flujo 24 horas después de los tratamientos (Media SD). (B) Las concentraciones séricas de IFNa y TNFa se evaluaron mediante ELISA 6 y 24 horas después de los tratamientos (Media SD).
Como se reveló mediante la regulación por aumento de los marcadores de activación (CD86, CD40) en las DC, los lipoplexos ARN-F4 activaron las DC esplénicas, mientras que el liposoma solo no lo hizo. Curiosamente, aunque los lipoplexos de ARN-F4 se detectaron en 5-10% de las DC esplénicas en un experimento anterior, todas las DC se activaron en el bazo, lo que implica la existencia de un medio inflamatorio en el bazo después de la administración. En todos los animales inyectados con ARN-lipoplexos, se pudo detectar una gran cantidad de IFNa en sangre 6 h (también después de 24 h, aunque en cantidades mucho menores). También se pudo detectar TNFa pero a niveles muy moderados en todos los animales a los que se inyectó ARN-lipoplexos (solo después de las 6 h). La secreción de citoquinas es específica de ARN-lipoplexos ya que ni el PBS ni el liposoma solo no produjeron una secreción de citoquinas significativa (estado inicial). En consecuencia, los lipoplexos de ARN activan las DC esplénicas que llevan a la inflamación sistémica.
Los ratones C57BL/6 (n = 5) se inmunizaron por vía intravenosa con SIINFEKL-ARN (20 o 40 jg ) complejados con liposomas F4 en diferentes relaciones liposoma:ARN en los días 0, 3, 8 y 15; véase la Figura 22. (A) Las frecuencias de las células T CD8+ específicas de antígeno se determinaron mediante tinción con tetrámero SIINFEKL-MHC 5 días después de la última inmunización (Día 20) (Media SD). (B) Las respuestas de recuperación de la memoria se evaluaron mediante la tinción con tetrámero SIINFEKL-MHC en el Día 62 después de otra inyección de lipoplexos
F4-ARN en el Día 57 (Media SD).
Se puede generar un alto orden de inmunidad de células T específica de antígeno después de la inmunización repetitiva con lipoplexos F4 (A). 6 semanas después de la última inmunización (d57), una inyección de lipoplexos de refuerzo pudo expandir la memoria de las células T CD8 que se formó en las inyecciones anteriores (B). Los complejos F4 (1,2:1 comparativos) formaron agregados, mientras que los complejos F4 (1,2:2) fueron transparentes. Se prefiere F4 (1,2:2) con 40 |jg de ARN. Por lo tanto, se pueden generar respuestas efectoras y de memoria de células T fuertes con ARN-lipoplexos
En los días 0, 3 y 8, los ratones C57BL/6 (n = 3) recibieron tres inmunizaciones intravenosas de SIINFEKL-ARN (40 jg ) complejado con liposomas F4 con una relación de F4:ARN de 1,2:2 o se dejaron sin tratar. El día 14, se inyectaron 2x105 células tumorales B16-OVA s.c. en los flancos. Las curvas de supervivencia de Kaplan-Meier se muestran en la Figura 23.
Se logró una protección completa con la administración del lipoplexo de ARN en el modelo profiláctico B16-OVA. Se inocularon 2x105 células tumorales B 16-OVA s.c. en los flancos de ratones C57/B16 (n = 10, d0). En el día 10 (diámetro del tumor 2-3 mm), los ratones recibieron siete inmunizaciones intravenosas de SIINFEKL-ARN (40 jg) complejado con liposomas f4 o F12 con una relación de F4:ARN de 1,2:2 (en los días 10, 13, 17, 24, 31, 38, 45). Se utilizaron liposomas solos sin SIINFEKL-ARN como tratamiento de control. El crecimiento del tumor individual y las curvas de supervivencia de Kaplan-Meier se muestran en las Figuras 24 y 25, respectivamente.
En un modelo terapéutico, se detectó un retraso significativo en el crecimiento del tumor para los grupos F4+ARN o F12+ARN. Se observó la contracción de los tumores después de tres inmunizaciones para ambos grupos. A los ratones BALB/c (n = 3) se les inyectó por vía intravenosa Luciferasa-ARN (20 jg ) complejado con diferentes cantidades de liposomas F5 para obtener relaciones F5:ARN de 4,8:1 (comparativa), 2,4:1 (comparativa), 1,2:1 (comparativa), 1,2:2, 1,2:4 (comparativo). Las actividades de luciferasa in vivo y ex vivo se evaluaron mediante imágenes in vivo 6 horas después de la inyección del lipoplexo y en la Figura 26 se muestran los conjuntos de órganos y órganos representativos. La Figura 27 muestra la distribución de la señal de luciferasa total entre los órganos derivados del experimento descrito en la Figura 26.
F5 (DOTMA:Chol) va a los pulmones en la relación de F5:ARN de 4,8:1 (comparativa), principalmente a los pulmones pero también al bazo en la relación de F5:ARN (2,4:1 comparativa), principalmente a bazo, pero también a los pulmones en la relación de F5:ARN (1,2:1 comparativa) y exclusivamente a bazo en las relaciones de F5:ARN (1,2:2,1,21:4 comparativa). Los lipoplexos neutros y aniónicos se dirigen más específicamente al bazo, mientras que los lipoplexos catiónicos se dirigen principalmente al pulmón (expresión de wrt a proteína). No se detectó expresión en el hígado.
Ejemplo 12: Formulación clínica de lipoplexos
La formulación que sigue el protocolo previamente establecido consiste en dos etapas, a saber, la preformulación de un ARN dado usando una solución isotónica de cloruro de sodio como diluyente y la formación de lipoplexo mediante la adición de una cantidad definida de liposomas. Para la preformulación, los primeros 4 ml de solución de cloruro de sodio (0,9% p/p en agua) se sacarán del vial de NaCl con una jeringa y se añadirán al ARN. Luego, se extraerán 400 j l de liposomas (2,8 mg/ml de lípido total en agua) del vial del liposoma y se inyectarán usando una cánula (diámetro interno de 0,9 mm) en la solución de ARN y cloruro de sodio. La formulación de lipoplexo de ARN obtenida (5,5 ml) se puede administrar mediante inyección parenteral directa de la dosis deseada y después de la preparación de una infusión intravenosa. Para este fin, de la formulación de ARN lipoplexo, se tomarán 5,0 ml y se diluirán en una bolsa de infusión que contiene 50 ml de solución isotónica de cloruro de sodio. Por este protocolo, las formulaciones de lipoplexo con tamaños de partícula de aproximadamente 300 a 500 nm se obtienen de manera robusta y reproducible; véase Figura 28.
Los materiales y componentes que se pueden usar son los siguientes:
Componentes:
• ARN: 0,5 mg/ml en HEPES 10 mM y EDTA 0,1 mM
• Diluyente: NaCl 0,9%
• Liposomas: DOTMA 2,68 mM, DOPE 1,34 mM, tamaño de partícula (Zave), jeringas de 300-500 nm:
Jeringas
• Jeringas de 5 mL: (por ejemplo, Omnifix, 5 mL, Luer Lock, B. Braun Melsungen AG (Melsungen, Alemania) • Jeringa 1 mL: Injekt-F Tuberculina, 1 mL, Luer Lock, B. Braun Melsungen AG (Melsungen, Alemania) Agujas:
• 0,9 x 44 mm, 20 G 11/2”, BD Microlance 3, Becton Dickinson S.A. (Fraga, España)
Los tamaños de las partículas de lipoplexo de ARN producidos de acuerdo con el procedimiento anterior varían de 300 nm a 500; véase Figura 29.
Ejemplo 13: Efecto del tamaño de partícula
Se demuestra, que la actividad de los lipoplexos aumenta con el aumento de tamaño. El tamaño de los liposomas utilizados para la formación de lipoplexos afecta también el tamaño de los lipoplexos. Los liposomas más grandes llevan también a lipoplexos más grandes.
Se investigaron las características de las partículas de ARN lipoplexos reconstituidos usando F4 (DOTMA/DOPE 50:50 mol/mol) y F12 (DOTMA/DOPE 66,7:33,3 mol/mol) usando diferentes tamaños de precursor. Para ello, se realizó el ajuste de tamaño de las partículas de lipoplexos con liposomas extrudidos y liposomas no extrudidos, filtrados a 0,45 pm.
Tabla 1: Tamaños de liposomas usados para la formación del lipoplexo
Los resultados para los lipoplexos se muestran en la Figura 30. Se demuestra que los lipoplexos de diferentes tamaños se pueden producir usando precursores de diferentes tamaños.
Los resultados de las Figuras 31 y 32 indican que cuanto más grandes sean los liposomas más grandes son los lipoplexos formados en estos experimentos, y mayor es la señal de luciferasa observada.
Ejemplo 14: Regulador de cloruro de sodio
Varios experimentos han demostrado que la adición de regulador PBS al ARN antes de la adición de liposomas, lleva a un aumento de la actividad de los lipoplexos. Aquí se demuestra que, en lugar de PBS, se puede usar una solución salina normal (0,9%, por ejemplo, NaCl 150 mM) para la condensación de ARN. Dicha solución de NaCl está disponible como producto farmacológico aprobado, lo que facilita la logística y la manipulación del lipoplexo-IMP. Además se demuestra que también se pueden usar soluciones concentradas de NaCl y PBS para la condensación de ARN, lo que da como resultado una actividad equivalente de los lipoplexos formados posteriormente. Además, se muestran mediciones de tamaño detalladas, donde se añadieron soluciones de NaCl concentradas de manera diferente a ARN antes de la formación del lipoplexo. En general, el tamaño de lipoplexo aumenta al disminuir la concentración de la solución de NaCl añadida; véase Figura 35. Como el aumento de tamaño se correlaciona con el aumento de la actividad (ver Ejemplo 13), se considera que la adición de la solución salina normal, y no la solución salina concentrada, produce una mayor actividad.
Para analizar la influencia de la preformulación de ARN utilizando reguladores comunes antes del ensamblaje, se determinó el tamaño de partícula de los lipoplexos a una relación de carga 1:2 después del tratamiento del ARN con diferentes reguladores de PBS concentrados o soluciones de cloruro de sodio; véase las Figuras 33 y 34.
El protocolo de mezcla anterior, donde los liposomas y el ARN se tratan en PBS (1x conc final de PBS) y luego se mezclan en volúmenes iguales, se puede reemplazar por una mezcla más simple con una solución normal de cloruro de sodio (0,9%), que está disponible en el comercio como un medicamento aprobado. Como protocolo de mezcla para el lipoplexo-IMP, el ARN se preformula con solución salina isotónica y luego se mezcla con los liposomas en agua.
Los resultados sugieren que el ion monovalente se puede añadir a diferentes concentraciones para obtener la misma fuerza iónica final en la formulación del lipoplexo sin afectar significativamente las propiedades del lipoplexo.
Ejemplo 15: Relación de carga del liposoma/ARN
La relación de carga (relación de lípido catiónico a nucleótido) de 1,3 a 2 es adecuada en relación con las características fisicoquímicas y la actividad biológica. En esta relación, se supone que una fracción más alta de ARN se incluirá en los lipoplexos en cuanto a la relación 1:2.
La estabilidad coloidal, las características de las partículas y la actividad de luciferasa de los lipoplexos de liposomas no extrudidos se investigaron adicionalmente. Los lipoplexos se ensamblaron en solución salina isotónica con
relaciones de carga de liposomas/ARN entre 1:2 y 1,9:2 (comparativa), véase las Figuras 36 y 37. Para lipoplexos, con una relación de carga de 1,7:2 (comparativa) los tamaños de partícula aumentaron significativamente a través del tiempo. De acuerdo con los lipoplexos de liposomas extrudidos, los lipoplexos con una relación de carga entre 1:2 y 1,6:2 son invariantes a cambios menores en el exceso de ARN y muestran tamaños de partículas en el rango de 350 a 480 nm con valores de PI menores de 0,3.
Como se demuestra en la Figura 38, las relaciones de carga liposoma/ARN entre 1,1:2 y 1,6:2 dan como resultado una buena actividad en el bazo.
Todas las relaciones administran ARN exclusivamente al bazo sin cambios significativos en el rendimiento entre las diferentes relaciones de lípido/ARN.
Claims (3)
1. Una composición farmacéutica que comprende nanopartículas que comprenden al menos un lípido catiónico, al menos un lípido auxiliar neutro y ARN que codifica al menos un antígeno para usar en un método para administrar el al menos un antígeno a células presentadoras de antígenos profesionales en el bazo de un sujeto, donde dicho método comprende la administración sistémica de la composición farmacéutica al sujeto,
en donde el antígeno es un antígeno asociado a la enfermedad o provoca una respuesta inmune contra un antígeno asociado a la enfermedad o células que expresan un antígeno asociado a la enfermedad, y
en donde las nanopartículas son lipoplexos que comprenden
(i) DOTMA y DOPE en una relación molar de 8:2 a 3:7, preferiblemente de 7:3 a 5:5, en donde la relación de carga de las cargas positivas en DOTMA a las cargas negativas en el ARN es de 1,6:2 a 1:2, preferiblemente 1,4:2 a 1,1:2; o
(ii) DOTMA y colesterol en una relación molar de 8:2 a 3:7, preferiblemente de 7:3 a 5:5, en donde la relación de carga de las cargas positivas en DOTMA a las cargas negativas en el ARN es de 1,6:2 a 1:2, preferiblemente 1,4:2 a 1,1:2; o
(iii) DOTAP y DOPE en una relación molar de 8:2 a 3:7, preferiblemente de 7:3 a 55, en donde la relación de carga de cargas positivas en DOTAP a cargas negativas en el ARN es de 1,6: 2 a 1:2, preferiblemente 1,4:2 a 1,1:2.
2. La composición farmacéutica para uso de la reivindicación 1, en donde las nanopartículas tienen un diámetro promedio en el intervalo de 50 nm a 1000 nm, preferiblemente de 100 nm a 800 nm, preferiblemente de 200 nm a 600 nm, tal como de 300 nm a 500 nm, según lo determinado por dispersión dinámica de la luz.
3. La composición farmacéutica para uso de la reivindicación 1o 2, en donde las células presentadoras de antígeno son células dendríticas y/o macrófagos.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
PCT/EP2012/001319 WO2013143555A1 (en) | 2012-03-26 | 2012-03-26 | Rna formulation for immunotherapy |
PCT/EP2013/000902 WO2013143683A1 (en) | 2012-03-26 | 2013-03-25 | Rna formulation for immunotherapy |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
ES2719480T3 true ES2719480T3 (es) | 2019-07-10 |
Family
ID=48044720
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
ES13713356T Active ES2719480T3 (es) | 2012-03-26 | 2013-03-25 | Formulación de ARN para inmunoterapia |
ES18171522T Active ES2823239T3 (es) | 2012-03-26 | 2013-03-25 | Formulación de ARN para inmunoterapia |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
ES18171522T Active ES2823239T3 (es) | 2012-03-26 | 2013-03-25 | Formulación de ARN para inmunoterapia |
Country Status (19)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US10485884B2 (es) |
JP (4) | JP6279545B2 (es) |
CN (2) | CN104302276A (es) |
AU (3) | AU2013242512B2 (es) |
BR (1) | BR112014022562A8 (es) |
CA (2) | CA2864253C (es) |
DK (1) | DK2830593T3 (es) |
ES (2) | ES2719480T3 (es) |
HK (1) | HK1202060A1 (es) |
HR (1) | HRP20201578T1 (es) |
HU (2) | HUE044594T2 (es) |
LT (2) | LT2830593T (es) |
MX (3) | MX2014011466A (es) |
NZ (1) | NZ628328A (es) |
PT (2) | PT3427723T (es) |
RS (1) | RS61002B1 (es) |
SI (1) | SI3427723T1 (es) |
TR (1) | TR201904758T4 (es) |
WO (2) | WO2013143555A1 (es) |
Families Citing this family (163)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9408909B2 (en) * | 2007-09-14 | 2016-08-09 | Vrije Universiteit Brussel | Enhancing the T-cell stimulatory capacity of human antigen presenting cells in vitro and in vivo and its use in vaccination |
EP3578205A1 (en) | 2010-08-06 | 2019-12-11 | ModernaTX, Inc. | A pharmaceutical formulation comprising engineered nucleic acids and medical use thereof |
WO2012045082A2 (en) | 2010-10-01 | 2012-04-05 | Jason Schrum | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
AU2012236099A1 (en) | 2011-03-31 | 2013-10-03 | Moderna Therapeutics, Inc. | Delivery and formulation of engineered nucleic acids |
EP2718269B1 (en) | 2011-06-08 | 2018-01-31 | Translate Bio, Inc. | Cleavable lipids |
US9464124B2 (en) | 2011-09-12 | 2016-10-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
EP3682905B1 (en) | 2011-10-03 | 2021-12-01 | ModernaTX, Inc. | Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof |
WO2013086354A1 (en) | 2011-12-07 | 2013-06-13 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Biodegradable lipids for the delivery of active agents |
DK2791160T3 (da) | 2011-12-16 | 2022-05-30 | Modernatx Inc | Modificerede mrna-sammensætninger |
WO2013143555A1 (en) * | 2012-03-26 | 2013-10-03 | Biontech Ag | Rna formulation for immunotherapy |
US9283287B2 (en) | 2012-04-02 | 2016-03-15 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins |
US9572897B2 (en) | 2012-04-02 | 2017-02-21 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins |
US9878056B2 (en) | 2012-04-02 | 2018-01-30 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cosmetic proteins and peptides |
DE18200782T1 (de) | 2012-04-02 | 2021-10-21 | Modernatx, Inc. | Modifizierte polynukleotide zur herstellung von proteinen im zusammenhang mit erkrankungen beim menschen |
HRP20220607T1 (hr) | 2012-11-26 | 2022-06-24 | Modernatx, Inc. | Terminalno modificirana rna |
MX2015010880A (es) | 2013-02-22 | 2015-12-03 | Curevac Gmbh | Combinacion de vacunacion e inhibicion de la trayectoria pd-1. |
DK3292873T3 (da) | 2013-02-22 | 2019-06-03 | Curevac Ag | Kombination af vaccination og hæmning af PD-1-vejen |
US10258698B2 (en) | 2013-03-14 | 2019-04-16 | Modernatx, Inc. | Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions |
US8980864B2 (en) | 2013-03-15 | 2015-03-17 | Moderna Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of altering cholesterol levels |
WO2015048744A2 (en) | 2013-09-30 | 2015-04-02 | Moderna Therapeutics, Inc. | Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides |
EP3052521A1 (en) | 2013-10-03 | 2016-08-10 | Moderna Therapeutics, Inc. | Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor |
US9890365B2 (en) | 2014-03-09 | 2018-02-13 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions useful in treatment of ornithine transcarbamylase (OTC) deficiency |
EP3116535B1 (en) | 2014-03-12 | 2019-08-07 | CureVac AG | Combination of vaccination and ox40 agonists |
RU2746406C2 (ru) | 2014-04-23 | 2021-04-13 | МОДЕРНАТиЭкс, ИНК. | Вакцины на основе нуклеиновых кислот |
PL3766916T3 (pl) | 2014-06-25 | 2023-02-27 | Acuitas Therapeutics Inc. | Nowe lipidy i formulacje nanocząstek lipidowych do dostarczania kwasów nukleinowych |
WO2016130600A2 (en) | 2015-02-09 | 2016-08-18 | Duke University | Compositions and methods for epigenome editing |
CA2977801C (en) | 2015-02-26 | 2024-03-19 | Sio2 Medical Products, Inc. | Cycloolefin polymer container with a scratch resistant and anti-static coating |
WO2016155809A1 (en) * | 2015-03-31 | 2016-10-06 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Lipid particle formulations for delivery of rna and water-soluble therapeutically effective compounds to a target cell |
ES2753259T3 (es) | 2015-04-22 | 2020-04-07 | Curevac Ag | Composición que contiene ARN para el tratamiento de enfermedades tumorales |
WO2016176191A1 (en) | 2015-04-27 | 2016-11-03 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Dual aav vector system for crispr/cas9 mediated correction of human disease |
WO2016180467A1 (en) | 2015-05-11 | 2016-11-17 | Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh | Enhancing the effect of car-engineered t cells by means of nucleic acid vaccination |
US11090332B2 (en) * | 2015-05-21 | 2021-08-17 | Regen BioPharma, Inc. | Antigen specific mRNA cellular cancer vaccines |
PT3313829T (pt) | 2015-06-29 | 2024-07-08 | Acuitas Therapeutics Inc | Formulações de lípidos e de nanopartículas lipídicas para a administração de ácidos nucleicos |
WO2017015457A1 (en) * | 2015-07-21 | 2017-01-26 | Modernatx, Inc. | Ebola vaccine |
WO2017015637A1 (en) | 2015-07-22 | 2017-01-26 | Duke University | High-throughput screening of regulatory element function with epigenome editing technologies |
MX2018002339A (es) | 2015-08-25 | 2018-12-19 | Univ Duke | Composiciones y metodos de mejora de la especificidad en ingenieria genomica usando endonucleasas guiadas por arn. |
SI3350157T1 (sl) | 2015-09-17 | 2022-04-29 | Modernatx, Inc. | Sestave za doziranje terapevtskih sredstev v celice |
US11970710B2 (en) | 2015-10-13 | 2024-04-30 | Duke University | Genome engineering with Type I CRISPR systems in eukaryotic cells |
BR112018008090A2 (pt) * | 2015-10-22 | 2018-11-13 | Modernatx Inc | vacina de vírus do herpes simplex. |
WO2017070618A1 (en) * | 2015-10-22 | 2017-04-27 | Modernatx, Inc. | Cancer vaccines |
EP3365007A4 (en) * | 2015-10-22 | 2019-07-03 | ModernaTX, Inc. | VACCINE AGAINST BROAD SPECTRUM INFLUENZA VIRUS |
WO2017075531A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Novel lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids |
EP3383418B1 (en) * | 2015-12-04 | 2021-10-20 | Board of Regents, The University of Texas System | Slc45a2 peptides for immunotherapy |
DK3386484T3 (da) | 2015-12-10 | 2022-07-04 | Modernatx Inc | Sammensætninger og fremgangsmåder til afgivelse af terapeutiske midler |
JP7114465B2 (ja) | 2015-12-22 | 2022-08-08 | モデルナティエックス インコーポレイテッド | 薬剤の細胞内送達のための化合物および組成物 |
WO2017127750A1 (en) | 2016-01-22 | 2017-07-27 | Modernatx, Inc. | Messenger ribonucleic acids for the production of intracellular binding polypeptides and methods of use thereof |
WO2017162265A1 (en) | 2016-03-21 | 2017-09-28 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Trans-replicating rna |
WO2017162266A1 (en) | 2016-03-21 | 2017-09-28 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Rna replicon for versatile and efficient gene expression |
WO2017180917A2 (en) | 2016-04-13 | 2017-10-19 | Modernatx, Inc. | Lipid compositions and their uses for intratumoral polynucleotide delivery |
LT3458083T (lt) | 2016-05-18 | 2023-02-10 | Modernatx, Inc. | Polinukleotidai, koduojantys interleukiną-12 (il12), ir jų naudojimas |
MA45051A (fr) | 2016-05-18 | 2019-03-27 | Modernatx Inc | Polynucléotides codant la relaxine |
JP7289265B2 (ja) * | 2016-10-26 | 2023-06-09 | キュアバック エスイー | 脂質ナノ粒子mRNAワクチン |
WO2018089540A1 (en) | 2016-11-08 | 2018-05-17 | Modernatx, Inc. | Stabilized formulations of lipid nanoparticles |
US11576961B2 (en) | 2017-03-15 | 2023-02-14 | Modernatx, Inc. | Broad spectrum influenza virus vaccine |
EP4186888A1 (en) | 2017-03-15 | 2023-05-31 | ModernaTX, Inc. | Compound and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents |
CA3056133A1 (en) | 2017-03-15 | 2018-09-20 | Modernatx, Inc. | Crystal forms of amino lipids |
JP7332478B2 (ja) | 2017-03-15 | 2023-08-23 | モデルナティエックス インコーポレイテッド | 脂質ナノ粒子製剤 |
WO2018178215A1 (en) * | 2017-03-31 | 2018-10-04 | Accanis Biotech F&E Gmbh & Co Kg | Prevention and treatment of non-melanoma skin cancer (nmsc) |
WO2018191657A1 (en) | 2017-04-13 | 2018-10-18 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipids for delivery of active agents |
CA3061326A1 (en) | 2017-04-27 | 2018-11-01 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Nucleoside-modified mrna-lipid nanoparticle lineage vaccine for hepatitis c virus |
CA3061612A1 (en) | 2017-04-28 | 2018-11-01 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Novel carbonyl lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids |
US20200131498A1 (en) | 2017-06-14 | 2020-04-30 | Modernatx, Inc. | Polynucleotides encoding methylmalonyl-coa mutase |
US12077501B2 (en) | 2017-06-14 | 2024-09-03 | Modernatx, Inc. | Compounds and compositions for intracellular delivery of agents |
WO2018232357A1 (en) | 2017-06-15 | 2018-12-20 | Modernatx, Inc. | Rna formulations |
CA3071968A1 (en) * | 2017-08-04 | 2019-02-07 | Kyowa Kirin Co., Ltd. | Nucleic acid-containing lipid nanoparticle |
US11639329B2 (en) | 2017-08-16 | 2023-05-02 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipids for use in lipid nanoparticle formulations |
WO2019036030A1 (en) | 2017-08-17 | 2019-02-21 | Acuitas Therapeutics, Inc. | LIPIDS FOR USE IN LIPID NANOPARTICLE FORMULATIONS |
US11542225B2 (en) | 2017-08-17 | 2023-01-03 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipids for use in lipid nanoparticle formulations |
WO2019036000A1 (en) | 2017-08-17 | 2019-02-21 | Acuitas Therapeutics, Inc. | LIPIDS FOR USE IN LIPID NANOPARTICLE FORMULATIONS |
WO2019046809A1 (en) | 2017-08-31 | 2019-03-07 | Modernatx, Inc. | METHODS OF MANUFACTURING LIPID NANOPARTICLES |
EP3681993A1 (en) | 2017-09-13 | 2020-07-22 | BioNTech RNA Pharmaceuticals GmbH | Rna replicon for reprogramming somatic cells |
AU2018333530B2 (en) | 2017-09-13 | 2024-05-30 | Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh | RNA replicon for expressing a T cell receptor or an artificial T cell receptor |
JP2021500324A (ja) | 2017-10-20 | 2021-01-07 | バイオエヌテック エールエヌアー ファーマシューティカルズ ゲーエムベーハーBiontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | 治療に適するリポソームrna製剤の調製および保管 |
JP7505984B2 (ja) | 2018-02-12 | 2024-06-25 | バイオエヌテック エスエー | サイトカインをコードするrnaを用いた治療 |
WO2019175356A1 (en) | 2018-03-15 | 2019-09-19 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | 5'-cap-trinucleotide- or higher oligonucleotide compounds and their uses in stabilizing rna, expressing proteins and in therapy |
WO2020020444A1 (en) | 2018-07-24 | 2020-01-30 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Individualized vaccines for cancer |
WO2020020783A1 (en) | 2018-07-24 | 2020-01-30 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Il2 agonists |
US20210170005A1 (en) * | 2018-08-15 | 2021-06-10 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Methods of sensitizing tumors to treatment with immune checkpoint inhibitors |
CN112702994A (zh) * | 2018-09-18 | 2021-04-23 | 根特大学 | 治疗性纳米颗粒及其使用方法 |
US12090235B2 (en) | 2018-09-20 | 2024-09-17 | Modernatx, Inc. | Preparation of lipid nanoparticles and methods of administration thereof |
US20220062439A1 (en) | 2019-01-10 | 2022-03-03 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Localized administration of rna molecules for therapy |
KR20210138569A (ko) | 2019-01-11 | 2021-11-19 | 아퀴타스 테라퓨틱스 인크. | 활성제의 지질 나노입자 전달을 위한 지질 |
MX2021008434A (es) | 2019-01-14 | 2021-09-23 | Genentech Inc | Metodos para tratar el cancer con un antagonista de union al eje de pd-1 y una vacuna de arn. |
US20220125836A1 (en) | 2019-02-08 | 2022-04-28 | Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh | Treatment involving car-engineered t cells and cytokines |
CN113727720A (zh) | 2019-02-08 | 2021-11-30 | 生物技术细胞和基因治疗公司 | 用于治疗表达cldn6的癌症的嵌合抗原受体修饰的细胞 |
EP3917562A1 (en) | 2019-03-12 | 2021-12-08 | BioNTech SE | Therapeutic rna for prostate cancer |
WO2020190750A1 (en) | 2019-03-15 | 2020-09-24 | Modernatx, Inc. | Hiv rna vaccines |
MX2021011258A (es) | 2019-03-18 | 2021-12-10 | Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh | Variantes de interleucina-2 (il2) y receptor de interleucina-2 (il2r) para la activacion especifica de celulas efectoras inmunitarias. |
WO2020200481A1 (en) | 2019-04-05 | 2020-10-08 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Treatment involving interleukin-2 (il2) and interferon (ifn) |
WO2020200472A1 (en) * | 2019-04-05 | 2020-10-08 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Preparation and storage of liposomal rna formulations suitable for therapy |
US20220257631A1 (en) | 2019-05-20 | 2022-08-18 | BioNTech SE | Therapeutic rna for ovarian cancer |
TW202115105A (zh) | 2019-06-24 | 2021-04-16 | 德商拜恩迪克Rna製藥有限公司 | Il2激動劑 |
US11066355B2 (en) | 2019-09-19 | 2021-07-20 | Modernatx, Inc. | Branched tail lipid compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents |
WO2021085696A1 (ko) * | 2019-11-01 | 2021-05-06 | 한국과학기술원 | 작은 지질 나노 입자 및 이를 포함하는 암 백신 |
EP3819377A1 (en) | 2019-11-08 | 2021-05-12 | Justus-Liebig-Universität Gießen | Circular rna and uses thereof for inhibiting rna-binding proteins |
WO2021129927A1 (en) | 2019-12-23 | 2021-07-01 | Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh | Treatment with immune effector cells engineered to express an antigen receptor |
WO2021129945A1 (en) | 2019-12-27 | 2021-07-01 | Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh | In vitro and in vivo gene delivery to immune effector cells using nanoparticles functionalized with designed ankyrin repeat proteins (darpins) |
AU2021212197A1 (en) | 2020-01-31 | 2022-08-04 | BioNTech SE | Methods of inducing neoepitope-specific T cells with a PD-1 axis binding antagonist and an RNA vaccine |
WO2021155916A1 (en) | 2020-02-04 | 2021-08-12 | BioNTech SE | Treatment involving antigen vaccination and binding agents binding to pd-l1 and cd137 |
US20230405046A1 (en) * | 2020-03-16 | 2023-12-21 | Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh | Antigen-specific t cell receptors and t cell epitopes |
WO2021197589A1 (en) | 2020-03-31 | 2021-10-07 | BioNTech SE | Treatment involving non-immunogenic rna for antigen vaccination |
FI20215508A1 (en) | 2020-04-09 | 2021-10-10 | Niemelae Erik Johan | Mimetic nanoparticles to prevent the spread of new coronaviruses and reduce the rate of infection |
MX2022012683A (es) * | 2020-04-09 | 2023-01-11 | Verve Therapeutics Inc | Edicion de bases de pcsk9 y metodos de uso de la misma para el tratamiento de enfermedades. |
MX2022013254A (es) | 2020-04-22 | 2023-01-24 | BioNTech SE | Vacuna contra el coronavirus. |
AU2021286169A1 (en) | 2020-06-04 | 2023-01-19 | BioNTech SE | RNA replicon for versatile and efficient gene expression |
EP4178611A1 (en) | 2020-07-07 | 2023-05-17 | BioNTech SE | Therapeutic rna for hpv-positive cancer |
AU2021308681A1 (en) | 2020-07-16 | 2023-03-09 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Cationic lipids for use in lipid nanoparticles |
WO2022016125A1 (en) | 2020-07-17 | 2022-01-20 | Genentech, Inc. | Attention-based neural network to predict peptide binding, presentation, and immunogenicity |
BR112023004247A2 (pt) | 2020-09-08 | 2023-04-11 | Genentech Inc | Kits de tubulação para formar uma mistura, sistemas para formar uma composição farmacêutica, métodos para transferir composições farmacêuticas e para fabricar uma composição farmacêutica e amortecedor de pulsação |
EP4243868A1 (en) | 2020-11-11 | 2023-09-20 | BioNTech SE | Monoclonal antibodies directed against programmed death-1 protein and their use in medicine |
EP4008785A1 (en) | 2020-12-03 | 2022-06-08 | Justus-Liebig-Universität Gießen | Circular nucleic acids and uses thereof for interfering with genome expression and proliferation of coronaviruses |
TW202245808A (zh) | 2020-12-21 | 2022-12-01 | 德商拜恩迪克公司 | 用於治療癌症之治療性rna |
WO2022135667A1 (en) | 2020-12-21 | 2022-06-30 | BioNTech SE | Therapeutic rna for treating cancer |
WO2022135666A1 (en) | 2020-12-21 | 2022-06-30 | BioNTech SE | Treatment schedule for cytokine proteins |
IT202100003470A1 (it) | 2021-02-16 | 2022-08-16 | Fond Toscana Life Sciences | Vaccines against sars-cov-2 |
US11524023B2 (en) | 2021-02-19 | 2022-12-13 | Modernatx, Inc. | Lipid nanoparticle compositions and methods of formulating the same |
MX2023011004A (es) | 2021-03-19 | 2024-01-08 | Trained Therapeutix Discovery Inc | Compuestos para regular la inmunidad entrenada y métodos para usarlos. |
MX2023012368A (es) | 2021-04-20 | 2023-11-01 | BioNTech SE | Vacuna de virus. |
EP4334944A1 (en) | 2021-05-04 | 2024-03-13 | BioNTech SE | Immunogen selection |
JP2024522179A (ja) | 2021-06-08 | 2024-06-11 | バイオエヌテック セル アンド ジーン セラピーズ ゲーエムベーハー | 免疫エフェクタ細胞の活性化および標的化のための薬剤および方法 |
CA3223943A1 (en) | 2021-07-29 | 2023-02-02 | Ugur Sahin | Compositions and methods for treatment of melanoma |
WO2023030635A1 (en) | 2021-09-02 | 2023-03-09 | BioNTech SE | Potency assay for therapeutic potential of coding nucleic acid |
WO2023051926A1 (en) | 2021-09-30 | 2023-04-06 | BioNTech SE | Treatment involving non-immunogenic rna for antigen vaccination and pd-1 axis binding antagonists |
WO2023061550A1 (en) | 2021-10-11 | 2023-04-20 | BioNTech SE | Therapeutic rna for lung cancer |
TW202333803A (zh) | 2021-10-11 | 2023-09-01 | 德商拜恩迪克公司 | 用於肺癌之治療性rna(一) |
TW202333802A (zh) | 2021-10-11 | 2023-09-01 | 德商拜恩迪克公司 | 用於肺癌之治療性rna(二) |
EP4416274A2 (en) | 2021-10-15 | 2024-08-21 | BioNTech SE | Pharmaceutical compositions for delivery of viral antigens and related methods |
CA3234214A1 (en) | 2021-10-18 | 2023-04-27 | BioNTech SE | Methods for determining mutations for increasing modified replicable rna function and related compositions and their use |
AU2022369342A1 (en) | 2021-10-18 | 2024-03-14 | BioNTech SE | Modified replicable rna and related compositions and their use |
WO2023066923A1 (en) | 2021-10-19 | 2023-04-27 | Rahman Nafis | Male contraception |
EP4419136A1 (en) | 2021-10-21 | 2024-08-28 | BioNTech SE | Coronavirus vaccine |
CA3234578A1 (en) | 2021-10-22 | 2023-04-27 | Advait Vijay Badkar | Compositions for administration of different doses of rna |
WO2023073190A1 (en) | 2021-10-28 | 2023-05-04 | BioNTech SE | Rna constructs and uses thereof |
FR3129833B1 (fr) | 2021-12-03 | 2024-09-06 | Univ Claude Bernard Lyon | Nanoparticules pour la liberation d’acides nucleiques |
WO2024046572A1 (en) | 2022-09-01 | 2024-03-07 | BioNTech SE | Chimeric antigen receptor-modified cells for the treatment of cldn6 expressing cancer |
CA3242106A1 (en) | 2021-12-09 | 2023-06-15 | BioNTech SE | Chimeric antigen receptor-modified cells for the treatment of cldn6 expressing cancer |
WO2023126053A1 (en) | 2021-12-28 | 2023-07-06 | BioNTech SE | Lipid-based formulations for administration of rna |
AU2023212857A1 (en) | 2022-01-27 | 2024-07-04 | BioNTech SE | Pharmaceutical compositions for delivery of herpes simplex virus antigens and related methods |
IL314538A (en) | 2022-02-02 | 2024-09-01 | BioNTech SE | Materials and methods for targeted delivery of nucleic acids to cells |
IL314516A (en) | 2022-02-02 | 2024-09-01 | BioNTech SE | Materials and methods for cell-directed administration |
WO2023161350A1 (en) | 2022-02-24 | 2023-08-31 | Io Biotech Aps | Nucleotide delivery of cancer therapy |
WO2023213378A1 (en) | 2022-05-02 | 2023-11-09 | BioNTech SE | Replicon compositions and methods of using same for the treatment of diseases |
WO2023217987A1 (en) | 2022-05-12 | 2023-11-16 | BioNTech SE | Monoclonal antibodies directed against programmed death-1 protein and their use in medicine |
WO2023237726A1 (en) | 2022-06-10 | 2023-12-14 | Pantarhei Oncology B.V. | An intracellular tumor-specific variant of human zona pellucida glycoprotein 3 and nucleic acids coding therefor for use in the treatment of cancer |
US11878055B1 (en) | 2022-06-26 | 2024-01-23 | BioNTech SE | Coronavirus vaccine |
WO2024017479A1 (en) | 2022-07-21 | 2024-01-25 | BioNTech SE | Multifunctional cells transiently expressing an immune receptor and one or more cytokines, their use and methods for their production |
CN115300641A (zh) * | 2022-08-01 | 2022-11-08 | 深圳市人民医院 | 一种靶向树突状细胞促进抗原溶酶体逃逸激活免疫系统的抗原递送载体其制备方法与应用 |
WO2024027910A1 (en) | 2022-08-03 | 2024-02-08 | BioNTech SE | Rna for preventing or treating tuberculosis |
WO2024028445A1 (en) | 2022-08-03 | 2024-02-08 | BioNTech SE | Rna for preventing or treating tuberculosis |
WO2024056856A1 (en) | 2022-09-15 | 2024-03-21 | BioNTech SE | Systems and compositions comprising trans-amplifying rna vectors with mirna |
WO2024064931A1 (en) | 2022-09-23 | 2024-03-28 | BioNTech SE | Compositions for delivery of liver stage antigens and related methods |
WO2024064934A1 (en) | 2022-09-23 | 2024-03-28 | BioNTech SE | Compositions for delivery of plasmodium csp antigens and related methods |
WO2024063789A1 (en) | 2022-09-23 | 2024-03-28 | BioNTech SE | Compositions for delivery of malaria antigens and related methods |
WO2024063788A1 (en) | 2022-09-23 | 2024-03-28 | BioNTech SE | Compositions for delivery of malaria antigens and related methods |
WO2024075022A2 (en) | 2022-10-04 | 2024-04-11 | BioNTech SE | Rna constructs and uses thereof |
WO2024107754A1 (en) | 2022-11-15 | 2024-05-23 | Genentech, Inc. | Selection of diverse candidate peptides for peptide therapeutics |
WO2024137589A2 (en) | 2022-12-20 | 2024-06-27 | Genentech, Inc. | Methods of treating pancreatic cancer with a pd-1 axis binding antagonist and an rna vaccine |
WO2024153324A1 (en) | 2023-01-18 | 2024-07-25 | BioNTech SE | Rna formulations for pharmaceutical use |
WO2024157221A1 (en) | 2023-01-27 | 2024-08-02 | BioNTech SE | Pharmaceutical compositions for delivery of herpes simplex virus glycoprotein c, glycoprotein d, and glycoprotein e antigens and related methods |
WO2024160828A1 (en) | 2023-01-31 | 2024-08-08 | BioNTech SE | Compositions and methods |
WO2024165146A1 (en) | 2023-02-07 | 2024-08-15 | Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh | Immune effector cells stably and transiently expressing nucleic acids |
WO2024180363A1 (en) | 2023-02-28 | 2024-09-06 | BioNTech SE | Linker sequence potency assays for multiple coding nucleic acids |
WO2024180054A1 (en) | 2023-02-28 | 2024-09-06 | BioNTech SE | Linker sequence potency assays for multiple coding nucleic acids |
Family Cites Families (110)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4897355A (en) | 1985-01-07 | 1990-01-30 | Syntex (U.S.A.) Inc. | N[ω,(ω-1)-dialkyloxy]- and N-[ω,(ω-1)-dialkenyloxy]-alk-1-yl-N,N,N-tetrasubstituted ammonium lipids and uses therefor |
US5804381A (en) | 1996-10-03 | 1998-09-08 | Cornell Research Foundation | Isolated nucleic acid molecule encoding an esophageal cancer associated antigen, the antigen itself, and uses thereof |
US5703055A (en) | 1989-03-21 | 1997-12-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery |
US5264618A (en) | 1990-04-19 | 1993-11-23 | Vical, Inc. | Cationic lipids for intracellular delivery of biologically active molecules |
US6235525B1 (en) | 1991-05-23 | 2001-05-22 | Ludwig Institute For Cancer Research | Isolated nucleic acid molecules coding for tumor rejection antigen precursor MAGE-3 and uses thereof |
EP0826063A1 (en) | 1995-04-25 | 1998-03-04 | Vical Incorporated | Single-vial formulations of dna/lipid complexes |
US7422902B1 (en) | 1995-06-07 | 2008-09-09 | The University Of British Columbia | Lipid-nucleic acid particles prepared via a hydrophobic lipid-nucleic acid complex intermediate and use for gene transfer |
AU6504596A (en) | 1995-07-21 | 1997-02-18 | Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. | Adeno-associated viral liposomes and their use in transfecting dendritic cells to stimulate specific immunity |
AU738649B2 (en) | 1996-04-26 | 2001-09-20 | Rijksuniversiteit Te Leiden | Methods for selecting and producing T cell peptide epitopes and vaccines incorporating said selected epitopes |
ES2305157T3 (es) | 1996-09-13 | 2008-11-01 | Lipoxen Technologies Limited | Liposomas. |
EP0839912A1 (en) | 1996-10-30 | 1998-05-06 | Instituut Voor Dierhouderij En Diergezondheid (Id-Dlo) | Infectious clones of RNA viruses and vaccines and diagnostic assays derived thereof |
US6074645A (en) | 1996-11-12 | 2000-06-13 | City Of Hope | Immuno-reactive peptide CTL epitopes of human cytomegalovirus |
WO1999024566A1 (en) | 1997-11-06 | 1999-05-20 | Roche Diagnostics Gmbh | Tumor-specific antigens, methods for their production and their use for immunization and diagnosis |
US6432925B1 (en) | 1998-04-16 | 2002-08-13 | John Wayne Cancer Institute | RNA cancer vaccine and methods for its use |
EP1117430A1 (en) | 1998-10-05 | 2001-07-25 | Genzyme Corporation | Genes differentially expressed in cancer cells to design cancer vaccines |
BR0010322A (pt) | 1999-05-06 | 2002-04-09 | Univ Wake Forest | Vetor de expressão, vacina e seu método de uso para eliciar uma resposta imune dirigida contra um antìgeno em um mamìfero |
AU4903101A (en) | 1999-11-30 | 2001-07-09 | Cornell Research Foundation Inc. | Isolated nucleic acid molecules encoding cancer associated antigens, the antigens per se, and uses thereof |
US7462354B2 (en) | 1999-12-28 | 2008-12-09 | Pharmexa Inc. | Method and system for optimizing minigenes and peptides encoded thereby |
CN1437476A (zh) | 1999-12-28 | 2003-08-20 | 埃皮缪纳股份有限公司 | 优化的小基因及其编码的肽 |
JP2004530629A (ja) | 2000-06-07 | 2004-10-07 | バイオシネクサス インコーポレーテッド | 免疫刺激rna/dnaハイブリッド分子 |
US6472176B2 (en) | 2000-12-14 | 2002-10-29 | Genvec, Inc. | Polynucleotide encoding chimeric protein and related vector, cell, and method of expression thereof |
ES2340532T3 (es) | 2001-06-05 | 2010-06-04 | Curevac Gmbh | Arnm con un contenido g/c aumentado que codifica para un antigeno bacteriano y utilizacion del mismo. |
DE10162480A1 (de) | 2001-12-19 | 2003-08-07 | Ingmar Hoerr | Die Applikation von mRNA für den Einsatz als Therapeutikum gegen Tumorerkrankungen |
AUPS054702A0 (en) | 2002-02-14 | 2002-03-07 | Immunaid Pty Ltd | Cancer therapy |
ATE519115T1 (de) | 2002-06-13 | 2011-08-15 | Merck Patent Gmbh | Verfahren für die identifizierung von allo- antigenen und ihre verwendung für krebstherapie und transplantation |
DE10229872A1 (de) | 2002-07-03 | 2004-01-29 | Curevac Gmbh | Immunstimulation durch chemisch modifizierte RNA |
DE10344799A1 (de) | 2003-09-26 | 2005-04-14 | Ganymed Pharmaceuticals Ag | Identifizierung von Oberflächen-assoziierten Antigenen für die Tumordiagnose und -therapie |
AU2004283464B8 (en) | 2003-10-15 | 2011-04-14 | Syncore Biotechnology Co., Ltd | Method of administering cationic liposomes comprising an active drug |
NZ546873A (en) | 2003-10-24 | 2010-09-30 | Immunaid Pty Ltd | Method of analysing immune system cycling to monitor and/or treat diseases characterised by the production of regulator T cells |
US7303881B2 (en) | 2004-04-30 | 2007-12-04 | Pds Biotechnology Corporation | Antigen delivery compositions and methods of use |
DE102004023187A1 (de) | 2004-05-11 | 2005-12-01 | Ganymed Pharmaceuticals Ag | Identifizierung von Oberflächen-assoziierten Antigenen für die Tumordiagnose und -therapie |
DE102004057303A1 (de) | 2004-11-26 | 2006-06-01 | Merck Patent Gmbh | Stabile Kristallmodifikationen von DOTAP Chlorid |
AU2005321905A1 (en) | 2004-12-29 | 2006-07-06 | Mannkind Corporation | Methods to bypass CD+4 cells in the induction of an immune response |
NZ563193A (en) | 2005-05-09 | 2010-05-28 | Ono Pharmaceutical Co | Human monoclonal antibodies to programmed death 1(PD-1) and methods for treating cancer using anti-PD-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics |
SI1907424T1 (sl) | 2005-07-01 | 2015-12-31 | E. R. Squibb & Sons, L.L.C. | Humana monoklonska protitelesa proti programiranem smrtnem ligandu 1 (PD-L1) |
EP4332227A1 (en) | 2005-08-23 | 2024-03-06 | The Trustees of the University of Pennsylvania | Rna containing modified nucleosides and methods of use thereof |
DE102005041616B4 (de) | 2005-09-01 | 2011-03-17 | Johannes-Gutenberg-Universität Mainz | Melanom-assoziierte MHC Klasse I assoziierte Oligopeptide und für diese kodierende Polynukleotide und deren Verwendungen |
EP1762575A1 (en) | 2005-09-12 | 2007-03-14 | Ganymed Pharmaceuticals AG | Identification of tumor-associated antigens for diagnosis and therapy |
GB0519303D0 (en) * | 2005-09-21 | 2005-11-02 | Oxford Biomedica Ltd | Chemo-immunotherapy method |
WO2007101227A2 (en) | 2006-02-27 | 2007-09-07 | Arizona Board Of Regents For And On Behalf Of Arizona State University | Identification and use of novopeptides for the treatment of cancer |
WO2008085562A2 (en) | 2006-09-20 | 2008-07-17 | The Johns Hopkins University | Combinatorieal therapy of cancer and infectious diseases with anti-b7-h1 antibodies |
DE102006060824B4 (de) | 2006-12-21 | 2011-06-01 | Johannes-Gutenberg-Universität Mainz | Nachweis von individuellen T-Zell-Reaktionsmustern gegen Tumor-assoziierte Antigene (TAA) in Tumorpatienten als Basis für die individuelle therapeutische Vakzinierung von Patienten |
SG183663A1 (en) | 2006-12-27 | 2012-09-27 | Univ Emory | Compositions and methods for the treatment of infections and tumors |
US20100092572A1 (en) | 2007-01-29 | 2010-04-15 | Peter Kaeuper | Chitosan-based colloidal particles for rna delivery |
EP1955695A1 (en) * | 2007-02-06 | 2008-08-13 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Nanocapsules of lipophilic complexes of nucleic acids |
US8877206B2 (en) | 2007-03-22 | 2014-11-04 | Pds Biotechnology Corporation | Stimulation of an immune response by cationic lipids |
US8140270B2 (en) | 2007-03-22 | 2012-03-20 | National Center For Genome Resources | Methods and systems for medical sequencing analysis |
US20090004213A1 (en) | 2007-03-26 | 2009-01-01 | Immatics Biotechnologies Gmbh | Combination therapy using active immunotherapy |
ES2437327T3 (es) | 2007-06-18 | 2014-01-10 | Merck Sharp & Dohme B.V. | Anticuerpos para el receptor PD-1 humano de muerte programada |
EP2060583A1 (en) | 2007-10-23 | 2009-05-20 | Ganymed Pharmaceuticals AG | Identification of tumor-associated markers for diagnosis and therapy |
MX344330B (es) | 2008-03-24 | 2016-12-13 | 4Sc Ag | Imidazoquinolinas substituidas novedosas. |
JP5971945B2 (ja) | 2008-04-17 | 2016-08-17 | ピーディーエス バイオテクノロジー コーポレイションPds Biotechnology Corporation | カチオン性脂質の鏡像異性体による免疫応答の刺激 |
PL215513B1 (pl) * | 2008-06-06 | 2013-12-31 | Univ Warszawski | Nowe boranofosforanowe analogi dinukleotydów, ich zastosowanie, czasteczka RNA, sposób otrzymywania RNA oraz sposób otrzymywania peptydów lub bialka |
TW201004658A (en) | 2008-07-31 | 2010-02-01 | Enzon Pharmaceuticals Inc | Nanoparticle compositions for nucleic acids delivery system |
JP5382682B2 (ja) | 2008-09-01 | 2014-01-08 | 国立大学法人 長崎大学 | 薬物送達複合体 |
WO2010037408A1 (en) | 2008-09-30 | 2010-04-08 | Curevac Gmbh | Composition comprising a complexed (m)rna and a naked mrna for providing or enhancing an immunostimulatory response in a mammal and uses thereof |
DE102008061522A1 (de) | 2008-12-10 | 2010-06-17 | Biontech Ag | Verwendung von Flt3-Ligand zur Verstärkung von Immunreaktionen bei RNA-Immunisierung |
CA2766907A1 (en) * | 2009-07-06 | 2011-01-13 | Novartis Ag | Self replicating rna molecules and uses thereof |
EP3581197A1 (de) | 2009-07-31 | 2019-12-18 | ethris GmbH | Rna mit einer kombination aus unmodifizierten und modifizierten nucleotiden zur proteinexpression |
WO2013040142A2 (en) | 2011-09-16 | 2013-03-21 | Iogenetics, Llc | Bioinformatic processes for determination of peptide binding |
EP2558074B1 (en) | 2010-04-08 | 2018-06-06 | The Trustees of Princeton University | Preparation of lipid nanoparticles |
BR112012029066A2 (pt) | 2010-05-14 | 2020-09-01 | The General Hospital Corporation | composições e processos de identificação de neoantígenos específicos de tumor. |
PL2590626T3 (pl) * | 2010-07-06 | 2016-04-29 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Liposomy z lipidami o korzystnej wartości pka do dostarczania rna |
WO2012045082A2 (en) | 2010-10-01 | 2012-04-05 | Jason Schrum | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
CN102133404B (zh) | 2011-03-23 | 2013-01-16 | 成都诺恩生物科技有限公司 | 一种肿瘤靶向治疗药物载体、其制备方法及其应用 |
AU2012236099A1 (en) | 2011-03-31 | 2013-10-03 | Moderna Therapeutics, Inc. | Delivery and formulation of engineered nucleic acids |
DE102011102734A1 (de) | 2011-05-20 | 2012-11-22 | WMF Württembergische Metallwarenfabrik Aktiengesellschaft | Vorrichtung zum Aufschäumen von Milch, Getränkebereiter mit dieser Vorrichtung und Verfahren zum Aufschäumen von Milch |
MX350198B (es) * | 2011-07-06 | 2017-08-30 | Novartis Ag | Emulsiones aceite en agua que contienen acidos nucleicos. |
EP2729126B1 (en) | 2011-07-06 | 2020-12-23 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Liposomes having useful n:p ratio for delivery of rna molecules |
EP3682905B1 (en) | 2011-10-03 | 2021-12-01 | ModernaTX, Inc. | Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof |
DK2791160T3 (da) | 2011-12-16 | 2022-05-30 | Modernatx Inc | Modificerede mrna-sammensætninger |
WO2013106496A1 (en) | 2012-01-10 | 2013-07-18 | modeRNA Therapeutics | Methods and compositions for targeting agents into and across the blood-brain barrier |
WO2013113325A1 (en) * | 2012-01-31 | 2013-08-08 | Curevac Gmbh | Negatively charged nucleic acid comprising complexes for immunostimulation |
WO2013124701A2 (en) | 2012-02-20 | 2013-08-29 | Universita' Degli Studi Di Milano | New homo- and heterodimeric smac mimetic compounds as apoptosis inducers |
ME03367B (me) | 2012-03-26 | 2019-10-20 | Tron Translationale Onkologie An Der Univ Der Johannes Gutenberg Univ Mainz Gemeinnuetzige Gmbh | Formulacija rnk za imunoterapiju |
WO2013143555A1 (en) | 2012-03-26 | 2013-10-03 | Biontech Ag | Rna formulation for immunotherapy |
US20130255281A1 (en) | 2012-03-29 | 2013-10-03 | General Electric Company | System and method for cooling electrical components |
DE18200782T1 (de) | 2012-04-02 | 2021-10-21 | Modernatx, Inc. | Modifizierte polynukleotide zur herstellung von proteinen im zusammenhang mit erkrankungen beim menschen |
EP3511425A1 (en) | 2012-07-12 | 2019-07-17 | Persimmune, Inc. | Personalized cancer vaccines and adoptive immune cell therapies |
WO2014093924A1 (en) | 2012-12-13 | 2014-06-19 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified nucleic acid molecules and uses thereof |
EP3786298A1 (en) | 2012-11-01 | 2021-03-03 | Factor Bioscience Inc. | Methods and products for expressing proteins in cells |
HRP20220607T1 (hr) | 2012-11-26 | 2022-06-24 | Modernatx, Inc. | Terminalno modificirana rna |
US20160022840A1 (en) | 2013-03-09 | 2016-01-28 | Moderna Therapeutics, Inc. | Heterologous untranslated regions for mrna |
US20160024181A1 (en) | 2013-03-13 | 2016-01-28 | Moderna Therapeutics, Inc. | Long-lived polynucleotide molecules |
US10258698B2 (en) | 2013-03-14 | 2019-04-16 | Modernatx, Inc. | Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions |
WO2014160243A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-10-02 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Purification and purity assessment of rna molecules synthesized with modified nucleosides |
EP2971165A4 (en) | 2013-03-15 | 2016-11-23 | Moderna Therapeutics Inc | DISSOLUTION OF DNA FRAGMENTS IN MRNA MANUFACTURING METHODS |
US20160032273A1 (en) | 2013-03-15 | 2016-02-04 | Moderna Therapeutics, Inc. | Characterization of mrna molecules |
US11377470B2 (en) | 2013-03-15 | 2022-07-05 | Modernatx, Inc. | Ribonucleic acid purification |
WO2014152027A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-25 | Moderna Therapeutics, Inc. | Manufacturing methods for production of rna transcripts |
EP2983804A4 (en) | 2013-03-15 | 2017-03-01 | Moderna Therapeutics, Inc. | Ion exchange purification of mrna |
US20160017313A1 (en) | 2013-03-15 | 2016-01-21 | Moderna Therapeutics, Inc. | Analysis of mrna heterogeneity and stability |
KR102341899B1 (ko) | 2013-04-07 | 2021-12-21 | 더 브로드 인스티튜트, 인코퍼레이티드 | 개인맞춤화 신생물 백신을 위한 조성물 및 방법 |
WO2015014375A1 (en) | 2013-07-30 | 2015-02-05 | Biontech Ag | Tumor antigens for determining cancer therapy |
US20160194368A1 (en) | 2013-09-03 | 2016-07-07 | Moderna Therapeutics, Inc. | Circular polynucleotides |
JP2016530294A (ja) | 2013-09-03 | 2016-09-29 | モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドModerna Therapeutics,Inc. | キメラポリヌクレオチド |
US9925277B2 (en) | 2013-09-13 | 2018-03-27 | Modernatx, Inc. | Polynucleotide compositions containing amino acids |
AU2013401479B2 (en) | 2013-09-26 | 2019-04-04 | BioNTech SE | Particles comprising a shell with RNA |
WO2015051169A2 (en) | 2013-10-02 | 2015-04-09 | Moderna Therapeutics, Inc. | Polynucleotide molecules and uses thereof |
WO2015051173A2 (en) | 2013-10-02 | 2015-04-09 | Moderna Therapeutics, Inc | Polynucleotide molecules and uses thereof |
WO2015058780A1 (en) | 2013-10-25 | 2015-04-30 | Biontech Ag | Method and kit for determining whether a subject shows an immune response |
WO2015085318A2 (en) | 2013-12-06 | 2015-06-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Targeted adaptive vaccines |
EP2918275B1 (en) | 2013-12-13 | 2016-05-18 | Moderna Therapeutics, Inc. | Alternative nucleic acid molecules and uses thereof |
AU2014381849A1 (en) | 2014-02-05 | 2016-08-25 | Biontech Ag | A cannula, an injection or infusion device and methods of using the cannula or the injection or infusion device |
RU2746406C2 (ru) | 2014-04-23 | 2021-04-13 | МОДЕРНАТиЭкс, ИНК. | Вакцины на основе нуклеиновых кислот |
WO2015172843A1 (en) | 2014-05-16 | 2015-11-19 | Biontech Diagnostics Gmbh | Methods and kits for the diagnosis of cancer |
WO2016062323A1 (en) | 2014-10-20 | 2016-04-28 | Biontech Ag | Methods and compositions for diagnosis and treatment of cancer |
ES2946969T3 (es) | 2014-12-12 | 2023-07-28 | CureVac SE | Moléculas de ácido nucleico artificiales para una expresión proteica mejorada |
JP6907116B2 (ja) | 2014-12-30 | 2021-07-21 | キュアバック アーゲー | 人工核酸分子 |
WO2016155809A1 (en) | 2015-03-31 | 2016-10-06 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Lipid particle formulations for delivery of rna and water-soluble therapeutically effective compounds to a target cell |
-
2012
- 2012-03-26 WO PCT/EP2012/001319 patent/WO2013143555A1/en active Application Filing
-
2013
- 2013-03-25 AU AU2013242512A patent/AU2013242512B2/en active Active
- 2013-03-25 RS RS20201186A patent/RS61002B1/sr unknown
- 2013-03-25 US US14/388,192 patent/US10485884B2/en active Active
- 2013-03-25 HU HUE13713356 patent/HUE044594T2/hu unknown
- 2013-03-25 MX MX2014011466A patent/MX2014011466A/es active IP Right Grant
- 2013-03-25 CA CA2864253A patent/CA2864253C/en active Active
- 2013-03-25 BR BR112014022562A patent/BR112014022562A8/pt not_active Application Discontinuation
- 2013-03-25 NZ NZ628328A patent/NZ628328A/en unknown
- 2013-03-25 JP JP2015502136A patent/JP6279545B2/ja active Active
- 2013-03-25 SI SI201331795T patent/SI3427723T1/sl unknown
- 2013-03-25 CN CN201380016262.0A patent/CN104302276A/zh active Pending
- 2013-03-25 PT PT181715228T patent/PT3427723T/pt unknown
- 2013-03-25 ES ES13713356T patent/ES2719480T3/es active Active
- 2013-03-25 WO PCT/EP2013/000902 patent/WO2013143683A1/en active Application Filing
- 2013-03-25 TR TR2019/04758T patent/TR201904758T4/tr unknown
- 2013-03-25 HU HUE18171522A patent/HUE052485T2/hu unknown
- 2013-03-25 LT LTEP13713356.7T patent/LT2830593T/lt unknown
- 2013-03-25 ES ES18171522T patent/ES2823239T3/es active Active
- 2013-03-25 CN CN201811246680.XA patent/CN109331176B/zh active Active
- 2013-03-25 LT LTEP18171522.8T patent/LT3427723T/lt unknown
- 2013-03-25 DK DK13713356.7T patent/DK2830593T3/en active
- 2013-03-25 PT PT13713356T patent/PT2830593T/pt unknown
- 2013-03-25 CA CA3088428A patent/CA3088428C/en active Active
-
2014
- 2014-09-24 MX MX2020011781A patent/MX2020011781A/es unknown
- 2014-09-24 MX MX2020011696A patent/MX2020011696A/es unknown
-
2015
- 2015-03-13 HK HK15102573.4A patent/HK1202060A1/xx unknown
-
2017
- 2017-11-14 JP JP2017219079A patent/JP6596478B2/ja active Active
- 2017-12-18 AU AU2017279565A patent/AU2017279565B2/en active Active
-
2018
- 2018-11-28 JP JP2018222175A patent/JP6832904B2/ja active Active
-
2019
- 2019-09-23 US US16/578,601 patent/US11559587B2/en active Active
-
2020
- 2020-03-26 AU AU2020202152A patent/AU2020202152B2/en active Active
- 2020-04-06 JP JP2020068394A patent/JP7096282B2/ja active Active
- 2020-10-05 HR HRP20201578TT patent/HRP20201578T1/hr unknown
-
2022
- 2022-11-30 US US18/071,705 patent/US20230226217A1/en active Pending
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20230226217A1 (en) | Rna formulation for immunotherapy | |
US11660338B2 (en) | Particles comprising a shell with RNA | |
ES2976307T3 (es) | Formulaciones de partículas lipídicas para la entrega de ARN y compuestos terapéuticamente eficaces solubles en agua a una célula diana | |
BR112020007470A2 (pt) | métodos para produzir um colóide de lipossoma, para preparar partículas, para a fabricação de fluxo contínuo, para preparar uma composição congelada e para preparar uma composição aquosa, colóide de lipossoma, composições, composição congelada e composição aquosa | |
EP2830593B1 (en) | Rna formulation for immunotherapy | |
CA3182579A1 (en) | Therapeutic rna for hpv-positive cancer |