ES2712705T3 - Uso de una tiazolo pirimidinona para el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal - Google Patents

Abstract

Una composición farmacéutica de baja dosis que comprende ácido [(2-hidroxi-4-oxo-6,7,8,9-tetrahidro-4H, 5H-10- tia-1,4a-diaza-benzo[a]azuleno-3-carbonil)-amino]-acético o su sal farmacéuticamente aceptable en una cantidad de 2.5 mg a 60 mg y al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante, para uso en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal.

Description

DESCRIPCION

Uso de una tiazolo pirimidinona para el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal.

Campo de la invencion:

La presente invencion se refiere a una composicion farmaceutica de baja dosis, preferiblemente una composicion oral que comprende una cantidad terapeuticamente efectiva de acido [(2-hidroxi-4-oxo-6,7,8,9-tetrahidro-4H,5H-10-tia-1,4a-diaza-benzo[a]azuleno-3-carbonil)-amino]-acetico (compuesto A) en el rango de 2.5 mg a 60 mg. La presente invencion tambien se refiere a una composicion farmaceutica de baja dosis que comprende el compuesto A para uso en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal por administracion no parenteral. La presente invencion tambien se refiere al compuesto A para uso en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal en el rango de dosificacion de 2.5 mg a 60 mg.

Antecedentes de la invencion:

La enfermedad inflamatoria intestinal (IBD) es el nombre dado a un grupo de enfermedades que causan inflamacion cronica del tracto gastrointestinal. Es una enfermedad idiopatica causada por una respuesta inmune desregulada a la microflora intestinal del huesped. El curso de la IBD vana ampliamente, con penodos de remision intermitentes seguidos de penodos de enfermedad aguda. Los 2 tipos principales de IBD son la colitis ulcerosa y la enfermedad de Crohn.

La colitis ulcerosa afecta el colon y el recto y tipicamente, involucra solamente el revestimiento mas interno o la mucosa, que se manifiesta como areas continuas de inflamacion y ulceracion, sin segmentos de tejido normal. La enfermedad que involucra solamente a la parte mas distal del colon y el recto, denominada proctitis ulcerativa; la enfermedad del colon descendente hacia abajo se conoce como colitis limitada o distal; mientras que la enfermedad que afecta a todo el colon se llama pancolitis (Kathleen Head et al; Altern Med Rev. 2003; 8 (3): 247-83).

La enfermedad de Crohn es una inflamacion transmural (que afecta a todas las capas del intestino) que puede afectar a cualquier porcion del tracto digestivo desde la boca hasta el ano, pero se observa predominantemente en el fleon terminal y/o el colon. La inflamacion y ulceracion intestinal en la enfermedad de Crohn es asimetrica y se presenta en "parches", con areas de tejido sano intercaladas, y se extiende profundamente hacia la pared intestinal, formando lesiones granulomatosas. Se han descrito varias categonas de la enfermedad de Crohn, definidas por la porcion del tracto digestivo involucrado y la sintomatologfa de presentacion (Kathleen Head et al; Altern Med Rev. 2004; 9 (4): 360-401). Los smtomas frecuentemente son mas variables que la colitis ulcerosa, dependiendo de la parte del intestino involucrada.

Los smtomas clmicos de la IBD incluyen colicos abdominales y dolor, diarrea con sangre, urgencia severa para evacuar, sensacion de evacuacion incompleta, fiebre, perdida de apetito, perdida de peso y anemia. Las estrategias terapeuticas disponibles para el tratamiento de la IBD incluyen 5-aminosalicilato (mesalamina), corticosteroides, inmunomoduladores, antibioticos y agentes del factor de necrosis antitumoral (FNT). El medicamento mas comunmente usado para la IBD es la mesalamina, que esta disponible en el rango de concentracion de dosis de 250 mg a 2 g, que se recomienda para dosis de al menos 1 g por dfa o incluso mas alta por via oral de administracion. Aunque las estrategias terapeuticas mencionadas se encuentran utiles, la falta de respuesta de los pacientes al 5-aminosalicilato, los efectos colaterales asociados con el uso de corticosteroides de alto nivel y prolongado y la no respuesta/perdida de respuesta, alto coste y mayor riesgo de infeccion y malignidad con el uso de agentes biologicos, especialmente cuando se combina con inmunomoduladores son limitantes (Cummins et al; Lab Invests 2013; 93: 378­ 383). Esto indica la existencia de una brecha en la terapeutica disponible y refuerza la necesidad de desarrollar nuevos enfoques terapeuticos para el tratamiento de la IBD. Ademas, como se menciono, la IBD es una enfermedad cronica, la medicacion se requiere durante un penodo de tiempo mas prolongado, por ejemplo, se recomienda la mesalamina generalmente durante 6 a 8 semanas para la dosis total diaria de 4 g por via oral. Por lo tanto, la dosis alta de medicamentos por mas tiempo puede reducir el cumplimiento del paciente.

Aunque la etiologfa exacta de la IBD aun no esta establecida, los investigadores han descubierto que durante la IBD, el aumento del metabolismo tisular y la vasculitis hacen que la mucosa con inflamacion cronica y particularmente el epitelio sea hipoxica, dando lugar a la activacion del factor inducible por la hipoxia del factor de transcripcion sensible a la hipoxia (HIF).

El papel protector de HIF-1 en la colitis murina fue investigado por primera vez por Karhausen et al (J Clin Invest. 2004; 114: 1098-1106). La eliminacion condicional de HIF-1a en el epitelio colonico aumento la gravedad de la colitis y la disfuncion de la barrera tanto en el modelo de colitis aguda inducida por el acido oxazolona como por el acido trinitrobenceno sulfonico (TNBS). La activacion de HIF tambien es conocida por la sobrerregulacion de un conjunto de genes objetivo relacionados con el mantenimiento de la funcion de la barrera intestinal, tal como la HSP 70 y las interleuquinas de citoquinas antiinflamatorias (IL)-10 (Braat et al; Clinical Gastroenterology and Hepatology 2006; 4: 754 -759)

El HSP70 epitelial intestinal desempena un papel importante en la proteccion de la integridad y funcion de la mucosa al estabilizar las uniones estrechas entre las celulas epiteliales intestinales. Tal proteccion epitelial intestinal esta asociada con una translocacion bacteriana restringida y una reduccion de la inflamacion (Liedel JL et al; Pediatr Res.

2011; 69: 395-400). Tambien la expresion de IL-10 esta directamente relacionada con trastornos inflamatorios. Se demostro que los ratones deficientes en IL-10 desarrollan una enfermedad intestinal cronica parecida a la enfermedad de Crohn en seres humanos y la administracion intragastrica de la cepa de lactococcus lactis recombinante secretora de IL-10 murino, evito la aparicion de colitis en ratones con eliminacion de IL-10 y causo una reduccion del 50% de la inflamacion en colitis cronica inducida por sulfato de dextrano sodico (Braat et al. Clinical Gastroenterology and Hepatology 2006; 4: 754 - 759)

El documento WO2009002533 divulga un metodo para tratar la IBD mediante la administracion de un agente que inhibe la actividad de la HIF hidroxilasa. Divulga piridina-2-carboxamida, quinolina-2-carboxamida e isoquinolina-3-carboxamida como inhibidores de la HIF hidroxilasa para el tratamiento de la IBD. Divulga que el compuesto se administro diariamente como una dosis intraperitoneal en un modelo animal de colitis inducido por TNBS a una dosis de 20 mg/kg y 40 mg/kg, y se encontro que una dosis mas alta era mas efectiva.

Los datos anteriores muestran que los inhibidores de la HIF hidroxilasa divulgados pueden tener potencial en el tratamiento de la IBD en animales. Sin embargo, aun no hay evidencia concluyente disponible de que el inhibidor de la HIF hidroxilasa pueda ser efectivo para el tratamiento de la IBD, en particular mediante la administracion oral y que aun no haya un farmaco inhibidor de la HIF hidroxilasa disponible en el mercado que pueda usarse para el tratamiento de la IBD de manera efectiva.

El documento WO2011045811 divulga derivados de oxazolo y tiazolo como inhibidores de HIF hidroxilasa para el tratamiento de la anemia, isquemia o dano tisular causado por trastornos isquemicos. Divulga que el compuesto 10 fue efectivo para el trastorno renal cronico (CKD) en dosis mas altas, tal como en la dosis de 20 mg/kg bid (aproximadamente 450 mg/dfa de dosis humana equivalente), cuando se administro por via intraperitoneal a animales enfermos.

Jamadarkhana et al divulgan en Am J. of neephology (2012, 36: 208-218) que el compuesto acido [(2-hidroxi-4-oxo-6,7,8,9-tetrahidro-4H,5H-10-tia-1,4a-diaza-benzo [a]azuleno-3-carbonil)-amino]-acetico, un novedoso inhibidor de la HIF hidroxilasa, cuando se administro por via intraperitoneal, se encontro efectivo en la prevencion y para el tratamiento de la lesion renal aguda isquemica (AKI).

Tanto Jamadarkhana et al como el documento WO2011045811 ensenan a usar el inhibidor de la HIF hidroxilasa, acido [(2-hidroxi-4-oxo-6,7,8,9-tetrahidro-4H,5H-10-tia-1,4a-diaza-benzo[a]azuleno-3-carbonil)-amino]-acetico, para el tratamiento de la anemia, la isquemia o el dano tisular causado por un trastorno isquemico tal como la c Dk o AKI, espedficamente por via parenteral.

El documento US 2011/0130414 divulga compuestos de tiazolo y oxazolo pirimidinona, y composiciones farmaceuticamente aceptables de las mismas. Estos compuestos son inhibidores de la HIF hidroxilasa.

La presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de baja dosis para administracion no parenteral, preferiblemente para administracion oral, que comprende inhibidor de HIF hidroxilasa, acido [(2-hidroxi-4-oxo-6,7,8,9-tetrahidro-4H,5H-10-tia-1,4a-diaza-benzo[a]azuleno-3-carbonil)-amino]-acetico (de aqrn en adelante mencionado como compuesto A) que es util en el rango de dosificacion de 2.5 mg a 60 mg por dfa para tratar la enfermedad de intestino inflamatorio (de aqrn en adelante referida como IBD).

Resumen de la invencion:

Un aspecto de la presente invencion es proporcionar una composicion farmaceutica de baja dosis que comprende acido [(2-hidroxi-4-oxo-6,7,8,9-tetrahidro-4H,5H-10-tia-1,4a-diaza-benzo[a]azuleno-3-carbonil)-amino]-acetico (compuesto A) en una cantidad de 2.5 mg a 60 mg y al menos un veldculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante, para uso en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal .

Otro aspecto de la presente invencion es proporcionar una composicion farmaceutica de baja dosis para administracion oral que comprende acido [(2-hidroxi-4-oxo-6,7,8,9-tetrahidro-4H,5H-10-tia-1,4a-diazabenzo[a]azuleno-3-carbonil)-amino]-acetico (compuesto A) y al menos un vehroulo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante, para uso en el tratamiento de enfermedad inflamatoria intestinal, en donde dicha composicion es efectiva en el rango de dosificacion de 2.5 mg a 60 mg por dfa. Las composiciones farmaceuticas de la invencion se pueden usar para tratar la IBD en un mairnfero.

Otro aspecto de la presente invencion es proporcionar acido (2-hidroxi-4-oxo-6,7,8,9-tetrahidro-4H,5H-10-tia-1,4adiaza-benzo[a]azuleno-3-carbonil)-amino]-acetico (compuesto A) para uso en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal en el rango de dosificacion de 2.5 mg a 60 mg. Las composiciones farmaceuticas de la invencion son para administracion oral.

Las composiciones de la invencion proporcionan al menos un 50% de exposicion local de la cantidad total de dicho compuesto administrado.

Figuras:

Fig. 1: puntaje DAI medio (Fig. 1a), puntaje medio de macroscopia (Fig. 1b) cambio porcentual medio en el peso corporal (Fig. 1c) y tasa de supervivencia (Fig. 1d) del modelo animal de colitis (colitis inducida por TNBS en ratones BALB/c macho) en la administracion per-oral de la composicion farmaceutica que comprende el compuesto A o placebo (Composicion sin el compuesto A).

Fig. 2: puntaje DAI promedio (Fig. 2a), porcentaje medio de cambio en el peso corporal (Fig. 2b) y puntaje medio de colitis (Fig. 2c) de modelo animal de colitis (colitis inducida por DSS en ratones BALB/c hembra) o animales sanos y expresion de protemas HSP70 en tejido de colon (Fig. 2d) de modelo animal de colitis (colitis inducida por DSS en ratones BALB/c hembra) en la administracion per-oral de la composicion farmaceutica que comprende el compuesto A o placebo (Composicion sin el compuesto A).

Fig. 3: Distribucion tisular del compuesto A en Aeon, ciego y colon despues de la administracion de la composicion farmaceutica que comprende el compuesto A por via oral e intraperitoneal en un modelo animal de colitis (colitis inducida por DSS en ratones BALB/c hembra).

Fig. 4: arquitectura de cripta y celulas inflamatorias en el colon de animales sanos en administracion per-oral de placebo (composicion sin compuesto A) (a); y en la administracion per-oral de placebo (composicion sin compuesto A) (b), 1 mg/kg bid de composicion del compuesto A (c) y 2.5 mg/kg bid de composicion del compuesto A (d) al modelo animal de colitis (colitis inducida por DSS en ratones BALB/c hembra) a los 10 dfas de tratamiento.

Fig. 5: Imagenes de colon del modelo animal de colitis (colitis inducida por TNBS en ratones BALB/c) en la administracion per-oral de la composicion farmaceutica que comprende el compuesto A en la dosis de 1 mg/kg bid o veldculo (composicion de placebo sin compuesto A).

Fig. 6: porcentaje medio de mejora en las puntuaciones DAI (Fig. 6a) y en la macroscopia (Fig. 6b) del modelo animal de colitis (colitis inducida por TNBS en ratones BALB/c macho) en la administracion intraperitoneal y per-oral de la composicion farmaceutica que comprende el compuesto A.

Fig. 7: expresion de ARNm de IL-10, TNF-a e INF-y en tejido de colon del modelo animal de colitis (colitis inducida por DSS en ratones BALB/c hembra) en 2.5 mg/kg bid (5 mg/kg/dfa) administracion per-oral de la composicion farmaceutica que comprende el compuesto A o placebo (composicion sin el compuesto A).

Fig. 8: arquitectura de cripta y celulas inflamatorias en la administracion oral de placebo (composicion sin compuesto A) (a), 1 mg/kg bid de compuesto A (b) al modelo animal de colitis (colitis inducida por TNBS ratones BALB/c macho) a los 6 dfas de tratamiento

Descripcion detallada de la invencion:

Los siguientes parrafos detallan diversas realizaciones de la invencion. Para evitar dudas, se pretende espedficamente que cualquier caractenstica particular descrita individualmente en cualquiera de estos parrafos (o parte de la misma) se pueda combinar con una o mas caractensticas adicionales descritas en uno o mas de los parrafos restantes (o parte de la misma). En otras palabras, se pretende explfcitamente que las caractensticas descritas a continuacion individualmente en cada parrafo (o parte de las mismas) representan aspectos importantes de la invencion que pueden tomarse de forma aislada y tambien combinados con otros aspectos importantes de la invencion descritos en otra parte dentro de esta especificacion como un todo, e incluyendo los ejemplos y figuras. La persona experta apreciara que la invencion se extiende a tales combinaciones de caractensticas y que estas no se han citado en detalle aqrn en aras de la brevedad.

El termino " acido [(2-hidroxi-4-oxo-6,7,8,9-tetrahidro-4H, 5H-10-tia-1,4a-diaza-benzo[a]azuleno-3-carbonil)-amino]-acetico" o "compuesto A" como se usa aqrn se define para significar acido [(2-hidroxi-4-oxo-6,7,8,9-tetrahidro-4H, 5H-10-tia-1,4a-diaza-benzo[a]azuleno-3-carbonil)-amino]-acetico como su base o sus sales farmaceuticamente aceptables o sus polimorfos o sus esteres. Cualquiera de estas formas puede ser cristalina o amorfa.

El termino "enfermedad inflamatoria intestinal o IBD", como se usa aqrn, es la condicion que resulta debido a la inflamacion del epitelio, particularmente del epitelio gastrointestinal. Incluye condiciones como colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, colitis colagenosa, colitis linfodtica, colitis isquemica, colitis por desviacion, smdrome de Behcet y colitis indeterminada.

El termino "cantidad efectiva", "cantidad terapeuticamente efectiva" o dosis efectiva "como se usa aqrn significa la cantidad o dosis del compuesto A, que es suficiente para iniciar la respuesta terapeutica en un mairnfero, incluido el ser humano.

El termino "mamffero" significa un ser humano o un animal que incluye monos, primates, perros, gatos, caballos o vacas, etc., preferiblemente seres humanos.

El termino "rango de dosificacion" o "rango" como se describe aqrn significa el rango terapeuticamente efectivo del compuesto A, que es adecuado para la administracion a un mamnfero.

El termino "dosis baja" como se describe aqrn significa la dosis diaria total para un mamnfero, preferiblemente un ser humano, que es menor que 100 mg por dfa, preferiblemente menor que 60 mg por dfa, mas preferiblemente menor que 50 mg por dfa. La conversion de dosis para diferentes tipos de marnfferos, incluido el ser humano, se puede realizar segun las pautas de la FDA disponibles en www.fda.gov. Para el ser humano, 70 kg ha sido considerado como peso medio.

El termino "sustancialmente insoluble" como se usa aqrn significa que al menos el 75% de la composicion no es soluble a un pH inferior a 5. Preferiblemente, al menos el 80% de la composicion no es soluble a un pH inferior a 5. Mas preferiblemente al menos el 90% de la composicion no es soluble a un pH inferior a 5.

El termino "exposicion sistemica", como se usa aqrn, significa la disponibilidad del compuesto A, incluidos sus metabolitos activos, si los hay, en la circulacion sistemica de un mamnfero.

El termino "exposicion local", como se usa aqrn, significa la disponibilidad del compuesto A, incluidos sus metabolitos activos, si los hay, en el sitio afectado o area afectada o en sus alrededores.

El termino "tracto GI superior" significa la parte del tracto GI que comprende esofago, estomago y duodeno. El termino "tracto GI inferior" significa la parte restante del tracto GI.

El uso de los terminos "un" y "uno, una" y "el, la" y referencias similares en el contexto de la descripcion de la invencion (especialmente en el conteXto de las siguientes reivindicaciones) deben considerarse para cubrir tanto el singular como el plural a menos que se indique otra cosa aqrn o se contradiga claramente por el contexto.

La presente invencion provee que una composicion farmaceutica de baja dosis de compuesto A es efectiva en un rango de dosificacion de 2.5 mg a 60 mg por dfa, para uso en el tratamiento de la IBD. Las composiciones farmaceuticas de la invencion comprenden una cantidad terapeuticamente efectiva del compuesto A. Compuesto A, que es un inhibidor de la HIF hidroxilasa divulgado en el documento WO201145811 para el tratamiento de la anemia, isquemia o dano tisular causado por trastornos isquemicos cuando se administra por via parenteral. La solicitud de patente divulga que el compuesto 10 se encontro efectivo para el trastorno renal cronico (CKD), a la dosis de 20 mg/kg bid (aproximadamente 450 mg/dfa dosis humana), cuando se administro por via intraperitoneal a animales enfermos.

Los inventores de la presente invencion han encontrado que el rango de dosificacion bajo de 2.5 mg/dfa a 60 mg/dfa es un rango de dosificacion optimo que logra el efecto terapeutico deseado, cuando se administra por via no parenteral, preferiblemente por via oral, para el tratamiento de la IBD.

La IBD que puede tratarse administrando una cantidad terapeuticamente efectiva de compuesto A de acuerdo con la presente invencion incluye condiciones similares a colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, colitis colagenosa, colitis iinfocftica, colitis isquemica, colitis por desviacion, smdrome de Behcet y colitis indeterminada. Cualquier otra enfermedad que incluya inflamacion del epitelio tambien esta dentro del alcance de la presente invencion.

Ninguna de las tecnicas anteriores probo la administracion per-oral y, principalmente, divulgan la via parenteral como via de administracion preferida para los inhibidores de la HIF hidroxilasa para el tratamiento de la IBD. Es una tecnica general conocida por los expertos en la tecnica que una cantidad efectiva de cualquier compuesto dependera principalmente de la concentracion circulante/niveles plasmaticos de la unidad estructural activa. Los inventores de la presente invencion han encontrado dosis de 2.5 mg a 60 mg del compuesto A como dosis efectiva para el tratamiento de la IBD, cuando se administran por via oral. Sorprendentemente, cuando la composicion farmaceutica que comprende el compuesto A se administro por via oral asf como intraperitoneal (IP), se encontro que la dosis oral era mas eficaz y proporcionaba mas beneficio terapeutico que la dosis intraperitoneal, con una exposicion sistemica muy menor (concentracion circulante/niveles plasmaticos) y alta exposicion al tejido objetivo en comparacion con la IP para el tratamiento de la IBD. Por lo tanto, la presente invencion proporciona una mejor eficacia terapeutica con un margen de seguridad mejorado.

Por lo tanto, una realizacion de la presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de baja dosis que comprende el compuesto A y al menos un vehfculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante, en donde dicha composicion es efectiva en el rango de dosificacion de 2.5 mg a 60 mg por dfa para uso en el tratamiento de la IBD en un mamnfero.

Otra realizacion de la presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de baja dosis que comprende el compuesto A y al menos un vehfculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante, en el que dicha composicion es efectiva para uso en el tratamiento de la IBD en una mamffero cuando se administra en un rango de dosis de 2.5 mg a 60 mg por dfa.

Otra realizacion de la presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de baja dosis que comprende el compuesto A en una cantidad de 2.5 mg a 60 mg y al menos un vehfculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante, en donde dicha composicion es efectiva en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal en un mamnfero.

Otra realizacion de la presente invencion proporciona el compuesto A para uso en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal en el rango de dosificacion de 2.5 mg a 60 mg. Una realizacion preferida de la presente invencion proporciona el compuesto A para uso en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal, en donde el compuesto A esta comprendido en una composicion farmaceutica que es efectiva en el rango de dosificacion de 2.5 mg a 60 mg por dfa. Dicha composicion farmaceutica comprende ademas al menos un veldculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante.

Preferiblemente, la presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de baja dosis para administracion no parenteral, tal como administracion oral del compuesto A.

Por lo tanto, otra realizacion de la presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de baja dosis para administracion oral que comprende el compuesto A y al menos un veldculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante, en donde dicha composicion es efectiva en el rango de dosificacion de 2.5 mg a 60 mg por dfa para uso en el tratamiento de la IBD en un mairnfero.

Una realizacion preferida de la presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de baja dosis para administracion oral que comprende el compuesto A en una cantidad de 2.5 mg a 60 mg y al menos un vedculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante, en donde dicha composicion es efectiva en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal en un mamffero.

La dosis efectiva de compuesto A para el tratamiento de la IBD de acuerdo con la presente invencion vana de 2.5 mg a 60 mg por dfa o su dosis equivalente cuando esta presente como sal o ester. Preferiblemente, la dosis del compuesto A es de 4.5 mg a 50 mg, mas preferiblemente la dosis del compuesto A es de 4.5 mg a 40 mg. La dosis efectiva tal como se define aqu tambien incluye la modificacion obvia del rango de dosificacion en cualquiera de los dos lados, lo que no brinda un beneficio terapeutico significativo adicional y/o reduce los efectos adversos en un rango de dosis espedfico.

Se ha observado que el rango de dosificacion mencionado anteriormente proporciona un rango de dosificacion optimamente eficaz en el que la concentracion maxima efectiva en el sitio deseado se logra con una exposicion sistemica minima y por lo tanto proporciona beneficios terapeuticos en el tratamiento de la IBD con un margen de seguridad mejorado. Por lo tanto, la presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de baja dosis en la que se proporciona una menor exposicion sistemica y una mayor exposicion local del compuesto A durante la administracion.

Por lo tanto, otra realizacion de la presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de baja dosis que comprende el compuesto A y al menos un vedculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante para uso en el tratamiento de la IBD en un mamffero, en donde dicha composicion proporciona al menos un 50% de exposicion local de la cantidad total de dicho compuesto administrado.

La composicion farmaceutica de acuerdo con la presente invencion proporciona al menos un 50% de exposicion local de la cantidad de compuesto A administrado. Preferiblemente, la composicion proporciona al menos un 60% de exposicion local de la cantidad de compuesto A administrado. Mas preferiblemente, la composicion proporciona al menos un 70% de exposicion local de la cantidad de compuesto administrado.

Preferiblemente, la composicion farmaceutica de baja dosis de acuerdo con la presente invencion es una composicion no parenteral; mas preferiblemente, la composicion farmaceutica de dosis baja es composicion oral.

Una realizacion de la presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de baja dosis para la liberacion inmediata que comprende el compuesto A y al menos un vedculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante, para uso en el tratamiento de la IBD en un mamffero.

Preferiblemente, la presente invencion proporciona una composicion no parenteral de baja dosis, particularmente una composicion oral para la liberacion inmediata del compuesto A para uso en el tratamiento de la IBD en un mamnfero que comprende el compuesto A y al menos un vedculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante, en donde el compuesto A es efectivo en el rango de dosificacion de 2.5 mg a 60 mg.

Se observo que la composicion de acuerdo con la presente invencion muestra un efecto sinergico cuando se usa un vedculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante en la formulacion del compuesto A.

Otra realizacion de la presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de baja dosis que comprende el compuesto A en una cantidad de 2.5 mg a 60 mg y al menos un vedculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante en el que se utiliza diluyente, cuando se usa, esta presente en la cantidad de 10-98% p/p de la composicion total; el aglutinante, cuando se usa, esta presente en la cantidad de 1-20% p/p de la composicion total; el desintegrante, cuando se usa, esta presente en una cantidad de 0.1 a 15% p/p de la composicion total; El agente de ajuste del pH, cuando se usa, esta presente en la cantidad de 0.01-20% p/p de la composicion total y el lubricante, cuando se usa esta presente en la cantidad de 0.02-5% p/p de la composicion total.

Adicionalmente, el portador farmaceuticamente aceptable de acuerdo con la presente invencion puede ser cualquier excipiente requerido para formular la composicion de acuerdo con la presente invencion, tal como agente deslizante, inhibidor del crecimiento de cristales, surfactante, polfmero formador de pelfcula, plastificante, agente regulador o agente complejante. Cualquiera de tales excipientes se puede usar solo o en combinacion de los mismos/otros excipientes. Cualquiera de dichos portadores puede usarse en la cantidad que sea adecuada para formular la composicion de acuerdo con la presente invencion.

Un diluyente se selecciona de celulosa en polvo, celulosa microcristalina, celulosa microcristalina silicificada, almidon, fosfato de calcio dibasico, fosfato de sodio dibasico, fosfato de sodio tribasico; azucares tales como dextrosa, lactosa o sacarosa; alcoholes de azucar tales como manitol, sorbitol, xilitol o eritritol; o mezclas de los mismos. El diluyente puede estar presente en una cantidad que vana de 10-98% p/p de la composicion total.

Un aglutinante se selecciona de almidones tales como almidon de mafz, almidon de cereal, almidon pregelatinizado; derivados de celulosa tales como polvo de celulosa, celulosa microcristalina, hidroxipropilmetilcelulosa, etilcelulosa, metilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, polietilenglicol, hidroxietilcelulosa; polivinil pirrolidona, gelatina, polimetacrilatos, alginato de sodio, gomas, resinas sinteticas o mezclas de las mismas. El aglutinante puede estar presente en una cantidad que vana de 1 y 20% p/p de la composicion total.

Un inhibidor del crecimiento de cristales es el agente que inhibe sustancialmente la precipitacion del compuesto A. El inhibidor del crecimiento de cristales puede ser meglumina, copolfmeros de bloque de polioxietileno-polioxipropileno y similares. El inhibidor del crecimiento de cristales puede estar presente en una cantidad que vana de 0.01-20% p/p de la composicion total.

Un lubricante o deslizante se selecciona de talco, estearato metalico tal como estearato de magnesio, estearato de calcio, estearato de zinc; dioxido de silicio coloidal, dioxido de silicio finamente dividido, acido estearico, aceite vegetal hidrogenado, palmitoestearato de glicerilo, monoestearato de glicerilo, behenato de glicerilo, estearil fumarato de sodio, trisilicato de magnesio; o mezclas de los mismos. El lubricante o deslizante puede estar presente en una cantidad que vana de 0.02- 5% p/p de la composicion total.

Un surfactante se selecciona de uno o mas surfactantes no ionicos o ionicos (es decir, cationicos, anionicos y zwitterionicos) adecuados para uso en composiciones farmaceuticas. Los surfactantes adecuados incluyen esteres de acidos grasos mono de polioxietilen sorbitan, tales como los vendidos bajo el nombre de marca Tween®; laurilsulfato de sodio, derivados del aceite de ricino de polioxietileno, tales como los vendidos con el nombre de marca Cremophor®, acidos grasos polietoxilados y sus derivados, esteres de acidos grasos de propilenglicol, esterol y derivados del esterol; esteres de acidos grasos de sorbitan y sus derivados, esteres de azucar, copolfmeros de bloques de polioxietileno-polioxipropileno, tales como los que se venden con el nombre de marca Poloxamer®, lecitina de soja, o mezclas de los mismos. El surfactante puede estar presente en una cantidad que vana de 0.01-20% p/p de la composicion total.

Un agente de ajuste del pH de acuerdo con la presente invencion es cualquier agente que mantiene el pH de la composicion, preferiblemente por encima de 3. Un agente de ajuste del pH es un agente organico o inorganico. Los ejemplos no limitantes de tal agente son meglumina, NaOH, KOH, NH3, hidroxido de amonio, carbonatos tales como carbonato de sodio o carbonato de potasio y similares. El agente de ajuste del pH tambien incluye un agente regulador. El agente de ajuste del pH puede estar presente en una cantidad que vana de 0.01-20% p/p de la composicion total.

Un agente regulador se selecciona de fosfatos tales como fosfato de sodio, dihidrogeno fosfato de sodio, dihidrogeno fosfato de sodio dihidrato, fosfato de hidrogeno disodico, dodecahidrato de fosfato de hidrogeno disodico, fosfato de potasio, fosfato de dihidrogeno potasico y fosfato de hidrogeno dipotasico; acido borico y boratos tales como borato de sodio y borato de potasio; acido cftrico y citratos tales como citrato de sodio y citrato de disodio; acetatos tales como acetato de sodio y acetato de potasio; carbonatos tales como carbonato de sodio e hidrogenocarbonato de sodio y similares. El agente regulador puede estar presente en una cantidad que vana de 0.01-20% p/p de la composicion total.

Un desintegrante es glicolato de almidon de sodio, crospovidona, croscarmelosa de sodio y similares. El desintegrante puede estar presente en una cantidad que vana de 0.1-15% p/p de la composicion total.

Un agente complejante se selecciona de una clase de moleculas de ciclodextrina, tales como ciclodextrinas que contienen de seis a doce unidades de glucosa, especialmente, alfa-ciclodextrina, beta-ciclodextrina, gammaciclodextrina, o sus derivados, tales como hidroxipropil beta ciclodextrinas, o mezclas de los mismos. El agente complejante puede estar presente en una cantidad que vana de 0.1-20% p/p de la composicion total.

Los polfmeros formadores de pelfcula se seleccionan de hidroxipropil metilcelulosa, metilcelulosa, etilcelulosa, polietilenglicol, hidroxipropilcelulosa, povidona, polidextrosa, lactosa, maltodextrina, polfmero acnlico o mezclas de los mismos. Los poKmeros formadores de pelfcula pueden estar presentes en una cantidad que vana de 0.1-10% p/p de la composicion total.

La composicion de liberacion inmediata de acuerdo con la presente invencion puede estar sin recubrir o recubrir con un agente de recubrimiento adecuado.

Una realizacion alternativa de la presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de baja dosis que comprende el compuesto A para uso en el tratamiento de la IBD en un mairnfero, en donde la composicion proporciona una liberacion controlada del compuesto A.

La composicion de liberacion controlada de acuerdo con la presente invencion es una composicion de liberacion modificada, una composicion de liberacion prolongada, una composicion de liberacion retardada o una composicion para el suministro espedfico en el sitio del compuesto A. Una composicion de liberacion controlada se prepara utilizando una cantidad adecuada de al menos un vetnculo farmaceuticamente aceptable que proporciona control liberacion del compuesto A. Preferiblemente, una composicion de liberacion controlada de acuerdo con la presente invencion es una composicion de liberacion retardada.

Por lo tanto, otra realizacion de la presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de dosis baja para administracion oral que comprende el compuesto A y al menos un vehfculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante para uso en el tratamiento de la IBD en un mamnfero, en donde dicha composicion es sustancialmente insoluble a un pH inferior a 5.

Otra realizacion de la presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de baja dosis para administracion oral que comprende el compuesto A y al menos un vetnculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante para uso en el tratamiento de la IBD en un mamffero, en donde dicha composicion libera al menos el 50% de dicho compuesto in vivo a un pH superior a 5.

Una composicion farmaceutica de acuerdo con la presente invencion libera al menos el 50% de dicho compuesto in vivo a un pH superior a 5, preferiblemente la composicion farmaceutica de acuerdo con la presente invencion libera al menos el 60% de dicho compuesto in vivo a pH superior a 5, lo mas preferiblemente composicion farmaceutica de acuerdo con la presente invencion libera al menos el 70% de dicho compuesto in vivo a un pH superior a 5.

Otra realizacion de la presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de baja dosis para administracion oral que comprende el compuesto A y al menos un vetnculo farmaceuticamente aceptable para uso en el tratamiento de la IBD, en el que dicho vetnculo es adecuado para la liberacion controlada de dicho compuesto. Preferiblemente, dicho vetnculo es adecuado para la liberacion retardada del compuesto A.

Una realizacion preferida de la presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de baja dosis para administracion oral que comprende el compuesto A y al menos un vetnculo farmaceuticamente aceptable adecuado para liberacion retardada para uso en el tratamiento de IBD en un mamffero, en el que dicho vetnculo esta presente en una cantidad de al menos 1% p/p de la composicion total. Preferiblemente, dicho portador esta presente en una cantidad de al menos 2% p/p de la composicion total, mas preferiblemente dicho portador esta presente en una cantidad de al menos 10% p/p de la composicion total, mas preferiblemente dicho portador esta presente en una cantidad de al menos 20% p/p de la composicion total.

La presente invencion proporciona una composicion farmaceutica de baja dosis para liberacion retardada que comprende el compuesto A y al menos un vetnculo farmaceuticamente aceptable adecuado para liberacion retardada para uso en el tratamiento de la IBD en un mamnfero. "Vetnculo farmaceuticamente aceptable adecuado para liberacion controlada" incluye uno o mas excipientes lo que facilita la liberacion controlada del compuesto A. Tales excipientes incluyen compuestos polimericos o no polimericos, preferiblemente compuestos polimericos. Tales compuestos polimericos pueden ser ademas polfmeros solubles en agua o polfmeros insolubles en agua.

El "polfmero soluble en agua" usado en la presente composicion es un polfmero que es soluble o hinchable en agua. Preferiblemente, se disuelve y/o se hincha en agua a temperatura ambiente. Ejemplos no limitantes incluyen los eteres de celulosa, hidrocoloide (goma), alcohol polivimlico y polivinilpirrolidona. Los eteres de celulosa incluyen carboximetilcelulosa, metilcelulosa, hidroxietilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, hidroxibutil celulosa, hidroxietilmetilcelulosa, hidroxietiletilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, hidroxipropiletilcelulosa, hidroxibutilmetilcelulosa, hidroxibutiletilcelulosa, carboximetilcelulosa y sus sales. El hidrocoloide (goma) incluye goma guar, acido algmico y sus sales farmaceuticamente aceptables, por ejemplo, alginato de sodio y goma xantano.

"Polfmero insoluble en agua" utilizado en la presente invencion son los polfmeros que son sustancialmente insolubles en agua e incluyen eteres de celulosa tales como etilcelulosa, butilcelulosa, acetato de celulosa, acetato butirato de celulosa, copolfmero de etilen acetato de vinilo, acetato de polividona, acetato de polivinilo, polivinil butirato, polimetacrilatos, incluidos los copolfmeros de etilacrilato/metilmetacrilato y copolfmeros de metacrilato de amoniaco, incluyendo asf las dispersiones disponibles comercialmente, tales como Kollicoat® MAE30DP, Eudragit® RL30D, Eudragit® NE30D y Eudragit® RS30D.

Un portador farmaceuticamente aceptable adecuado para liberacion retardada es cualquier portador que facilite la liberacion del compuesto A en el tracto GI inferior o que obstaculice sustancialmente la liberacion del compuesto A en el tracto GI superior.

"Vehfculo farmaceuticamente aceptable adecuado para liberacion retardada" incluye uno o mas excipientes que facilitan la liberacion retardada del compuesto A. Tales excipientes incluyen compuestos polimericos o no polimericos, preferiblemente compuestos polimericos. Tales excipientes pueden ser dependientes del pH o independientes del pH; preferiblemente se utilizan compuestos dependientes del pH. Estos excipientes incluyen derivados de celulosa, derivados de acido acnlico, copolfmero de acido maleico, derivados de polivinilo y similares.

Los derivados de celulosa incluyen el acetato succinato de hidroxipropilmetilcelulosa, ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa, ftalato de hidroximetiletilcelulosa celulosa, ftalato de acetato de celulosa, succinato acetato de celulosa, maleato acetato de celulosa, trimeliato acetato de celulosa, ftalato benzoato de celulosa, ftalato propionato de celulosa, ftalato de metilcelulosa, carboximetiletilcelulosa, ftalato de etilhidroxietilcelulosa y similares. Los derivados del acido acnlico incluyen estireno, copolfmero de acido acnlico, acrilato de metilo, copolfmero de acido acnlico, acrilato de metilo, copolfmero de acido metacnlico, copolfmero de acido acnlico de butil acrilato de estireno, acido metacnlico, copolfmero de metacrilato de metilo (por ejemplo, nombres comerciales: Eudragit® L 100 y Eudragit® S), polfmeros de acido metacnlico, copolfmero de acrilato de etilo. (por ejemplo, nombres comerciales: Eudragit L® 100-55), acrilato de metilo, copolfmero de acrilato de octilo del acido metacnlico y similares. Los polfmeros basados en copolfmero de acido maleico incluyen copolfmero de antndrido de acido maleico y acetato de etilo, copolfmero de antndrido de acido maleico de estireno, copolfmero de monoester de acido maleico de estireno, copolfmero de antndrido de acido maleico de vinilmetileter, copolfmero de antndrido de acido maleico de etileno, copolfmero de antndrido de acido maleico de vinilbutileter, acrilonitrilo, copolfmero de antndrido de acido maleico de acrilato de metilo, copolfmero de antndrido del acido maleico de estireno acrilato de butilo y similares. Los polfmeros basados en derivados de polivinilo incluyen ftalato de alcohol polivimlico, ftalato de polivinilacetal, ftalato de butilato de polivinilo, ftalato de polivinilacetoacetal y similares. Las composiciones farmaceuticas pueden contener adicionalmente excipientes tales como colorantes seleccionados de tintes F.D. y C. y D. y C., dioxido de titanio y similares.

Una via preferida de administracion de la composicion farmaceutica de acuerdo con la presente invencion a los mairnferos es la via no parenteral, mas preferiblemente la via oral, pero alternativamente la via intrarrectal tambien se puede usar para la administracion de la composicion.

La composicion farmaceutica de la presente invencion que esta libre de cualquier vetnculo farmaceuticamente aceptable tambien forma parte de esta invencion. La composicion farmaceutica como se describe aqu puede obtenerse en cualquier forma adecuada tal como tableta, capsula, polvo, solucion oral, suspension, gel rectal, espuma rectal, enema rectal o supositorio y similares.

La divulgacion tambien proporciona un proceso de preparacion de una composicion farmaceutica de baja dosis de la presente invencion. La composicion de acuerdo con la presente invencion se puede preparar mediante cualquier metodo conocido en la tecnica, tal como mezclando el compuesto A con vetnculos farmaceuticamente aceptables. Alternativamente, se pueden emplear tecnicas de granulacion en humedo o granulacion en seco para la preparacion de la composicion de acuerdo con la presente invencion.

Alternativamente, la composicion de la presente invencion se puede preparar como una formulacion basada en matriz en la que el compuesto A se dispersa dentro de una matriz. Alternativamente, el compuesto A que contiene partfculas puede recubrirse con vetnculos adecuados farmaceuticamente aceptables. Los tipos de partfculas incluyen granulos, pellas, minitabletas, micropartfculas o perlas.

La composicion rectal puede ser preparada por un experto en la materia tal como se conoce en la tecnica.

Otra realizacion de la presente invencion proporciona el uso del compuesto A para la preparacion de una composicion farmaceutica de baja dosis de acuerdo con la presente invencion.

La composicion farmaceutica de baja dosis de acuerdo con la presente invencion se puede administrar una vez al dfa o dos veces al dfa para lograr un efecto terapeutico. Preferiblemente, la composicion farmaceutica de baja dosis de acuerdo con la presente invencion se administra dos veces al dfa para lograr un efecto terapeutico.

La composicion farmaceutica de baja dosis que comprende el compuesto A de acuerdo con la presente invencion puede comprender ademas otro agente adecuado para el tratamiento de la IBD que incluye modificadores inmunitarios o farmacos antiinflamatorios. Alternativamente, la composicion farmaceutica puede administrarse junto con otros agentes adecuados para el tratamiento de la IBD, incluidos los modificadores inmunitarios o los farmacos antiinflamatorios.

La invencion de acuerdo con la presente invencion puede ilustrarse mediante los siguientes ejemplos que no deben interpretarse como limitantes del alcance de la invencion:

Ejemplo 1a:

Componente Cantidad de excipientes en mg

Composiciones i ii iii

Compuesto A 2.5 10 40

Manitol 20.63 22.5 -Meglumina 0.63 2.50 10.00

Celulosa microcristalina 55.63 42.50 10.00

Estearato de magnesio 1.0 1.0 1.0

Polisorbato - - 2.0

HPMC 1.0 1.0 1.0

Glicolato de almidon de sodio 4.63 6.50 14.0

Hidroxipropil celulosa 1.0 1.0 1.0

Talco 0.40 0.40 0.40

Dioxido de titanio 1.00 1.00 1.00

La celulosa microcristalina (MCC), el manitol, la meglumina y el glicolato de almidon de sodio (SSG) se tamizaron con el compuesto A y se mezclaron en seco en el mezclador Rapid Granulator (RMG) durante 10 minutos, seguido de la granulacion con agua en RMG. Despues de secar los granulos a 60-70 °C en un secador de lecho fluidizado (FBD), los granulos se dimensionaron usando un granulador oscilante, seguido de una mezcla en un mezclador de conta durante aproximadamente 5 minutos. Estos granulos se mezclaron con una mezcla de MCC, manitol y SSG para las composiciones i y ii. La mezcla obtenida se lubrico con estearato de Mg usando un mezclador de conta durante aproximadamente 5 minutos, seguido de compresion en una maquina de compresion rotatoria para formar una tableta. El recubrimiento de sellado de HPMC, HPC, talco y solucion de dioxido de titanio en agua se aplico sobre la tableta preparada. Se siguio un procedimiento similar para la composicion iii.

Ejemplo 1b:

Componente Cantidad de excipientes en mg Composiciones i ii iii Compuesto A 2.5 10 40 Celulosa microcristalina 55.63 42.50 10.00 Manitol 20.63 22.50 10.00 Meglumina 0.63 2.50 10.00 Glicolato de almidon de sodio 4.63 6.50 14.00 Estearato de magnesio 1.00 1.00 1.00

Componente Cantidad de excipientes en mg

Composiciones i ii iii

HPMC 1.00 1.00 1.00

Hidroxi Propil Celulosa (HPC) 1.00 1.00 1.00

Talco 1.63 1.63 1.63

Dioxido de titanio 1.00 1.00 1.00

Dispersion de acido metacnlico- copolfmero de etilacrilato (1:1) 30% 2.46 2.46 2.46

Propilen Glicol 0.74 0.74 0.74

La celulosa microcristalina (MCC), el manitol, la meglumina y el glicolato de almidon de sodio (SSG) se tamizaron con el compuesto A y se mezclaron en seco en el mezclador Rapid Granulator (RMG) durante 10 minutos, seguido de la granulacion con agua en RMG. Despues de secar los granulos a 60-70 °C en un secador de lecho fluidizado (FBD), los granulos se dimensionaron usando un granulador oscilante, seguido de una mezcla en un mezclador de conta durante aproximadamente 5 minutos. Estos granulos se mezclaron con una mezcla de MCC, manitol y SSG para las composiciones i y ii, mientras que con SSG solo para la composicion iii. La mezcla obtenida se lubrico con estearato de Mg usando un mezclador de conta durante aproximadamente 5 minutos, seguido de compresion en una maquina de compresion rotatoria para formar una tableta. El recubrimiento de sellado de HPMC, HPC, talco y solucion de dioxido de titanio en agua se aplico sobre una tableta preparada, que se recubrio adicionalmente con un recubrimiento enterico que comprendfa dispersion de acido metacnlico-copolfmero de etilacrilato (1:1) al 30%, propilenglicol y talco. Las tabletas preparadas se almacenaron en una botella de HDPE. El perfil de disolucion in vitro de las tabletas preparadas de acuerdo con el Ejemplo 1b se probo en 900 ml de fluido intestinal simulado en estado de ayuno con pH 5, es decir, acetato de sodio 50 mM/FaSSIF a 37 °C. Para imitar el estado in vivo, la disolucion se verifico en fluido intestinal simulado que tiene pH 5 con enzimas tales como FaSSIF. FaSSIF o el fluido intestinal simulado en estado de ayuno se preparan segun USP. Tambien se evaluo la disolucion in vitro a un pH mas bajo, tal como HCl 0.1 N. Los resultados se resumen en la Tabla 1:

Tabla 1

Composicion Disolucion en 0.1 N HCl,75 Disolucion en acetato de sodio 50mM /FaSSIF. pH 5.0, 75 RPM, 900 mL, 37°C RPM, 900 mL, 37°C en el intervalo de tiempo en min

Tiempo 1 Hora 2 Horas 0 5 10 15 20 30 45

Ej 1b (i) 0 0 Acetato de 0 0.0 16.1 78.8 78.8 96.6 101.2

sodio

Ej 1b (i) 0 0 FaSSIF 0 5.7 7.9 17.9 59.5 78.4 87.7

Ej 1b (ii) 0 0 Acetato de 0 0.0 18.4 59.0 75.7 93.4 99.1

sodio

Ej 1b (ii) 0 0 FaSSIF 0 0.0 0.0 12.6 76.2 97.9 101.6

Ej 1b (iii) 0 0 Acetato de 0 0.0 7.7 43.9 76.1 98.6 98.0

sodio

Ej 1b (iii) 0 0 FaSSIF 0 0.0 0.0 0.0 14.4 62.7 97.8 Los resultados dados anteriormente en la tabla 1 muestran que la composicion de acuerdo con la presente invencion es sustancialmente insoluble a pH acido, espedficamente a pH por debajo de 5 y la composicion liberaria el compuesto A en el tracto GI inferior, es decir, por encima de pH 5.

Ejemplo 2. Composicion intrarrectal.

Componente Cantidad de excipientes en %

Compuesto A 2.5-60mg

Poloxamero 407 10-30%

Polietilenglicol 15-30%

Fosfato de hidrogeno de potasio 0-5%

Ejemplo 3: Preparacion del modelo de colitis inducida por TNBS

Animal con colitis inducida por TNBS (acido 2,4,6 trinitrobenceno sulfonico) es un modelo establecido para la IBD. Los ratones BALB/c macho se mantuvieron en ayunas durante 16 horas y se les administro 0.1 ml de solucion de TNBS (que contiene 1.5 mg de TNBS en etanol al 50%) por via rectal 4 cm dentro del ano con la ayuda de un cateter de polietileno flexible BAJO anestesia con isoflurano. Inmediatamente despues de la administracion de TNBS, los ratones se mantuvieron verticalmente en una posicion cabeza abajo durante 45-60 segundos adicionales para asegurar la retencion y distribucion de la solucion de TNBS en el colon del animal. (Fiorucci et al, Immunity, 2002; Vol. 17; 769­ 780)

Ejemplo 4: Evaluacion farmacocinetica del compuesto A en el modelo de colitis inducida por TNBS (administracion intraperitoneal (IP) y administracion peroral (PO))

La composicion farmaceutica que comprende el compuesto A se administro a ratones con colitis inducida por TNBS (desarrollada de acuerdo con el ejemplo 3) a la dosis de 1 mg/kg de compuesto A dos veces al dfa, a un volumen de dosificacion de 10 ml/kg por via intraperitoneal y via oral. La dosificacion se inicio un dfa antes de la induccion (dfa -1) de la colitis por TNBS. Las muestras de sangre de los animales tratados se recolectaron antes de la administracion de la quinta dosis (0 min) y en diversos puntos de tiempo despues de la administracion de la quinta dosis. Las muestras de sangre se centrifugaron dentro de una hora de recoleccion a 4000 rpm durante 10 minutos a 4°C y se separo el plasma. Estas muestras de plasma se analizaron para determinar los niveles de compuesto A utilizando el metodo LC-MS/MS. Los parametros farmacocineticos del compuesto A se calcularon mediante un metodo de analisis no compartimental utilizando Phoenix WinNolin version 6.2. Los resultados farmacocineticos se resumen en la tabla 2.

Tabla 2

Parametro Unidad Per Oral Intraperitoneal

Cmax ng/mL 13.20 399.24

AUCqj2 hr*ng/mL 63.08 255.91

Ejemplo 5: Efectividad de la composicion farmaceutica del compuesto A en el modelo de colitis inducida por TNBS (administracion peroral (PO))

La composicion farmaceutica que comprende el compuesto A se administro por via oral a ratones con colitis inducida por TNBS (como se desarrollo de acuerdo con el ejemplo 3) a la dosis de 1 mg/kg de compuesto A dos veces al dfa, a 10 ml/kg de volumen de dosificacion. La dosificacion se inicio un dfa antes de la induccion (dfa -1) de la colitis por TNBS. Atenuacion relacionada con el tratamiento en la perdida de peso corporal, mdice de actividad de la enfermedad mejorado (DAI, una puntuacion compuesta que va de 0 a 12 como maximo, considerando la perdida de peso corporal, la consistencia fecal y la presencia o ausencia de sangre oculta en las heces), colon mas saludable (puntuacion de macroscopia) y la tasa de supervivencia se establecio en los animales tratados durante 6 dfas (desde el dfa -1 hasta el dfa 4) para verificar la eficacia del compuesto A. Los pesos corporales se controlaron diariamente, el DAI se capturo el dfa 2 y el dfa 4 mientras que el dano colonico (puntuacion de macroscopia y puntuacion histopatologica) se puntuo con base en la extension del dano colonico. La evaluacion histopatologica del dano colonico se realizo en secciones de tejido de colon fijadas con formalina, tenidas con hematoxilina y eosina, a un aumento de 10X con un microscopio Leica® DM2500, despues de la finalizacion del estudio. Al grupo placebo se le dio una composicion similar sin el compuesto A. Los resultados se dan en la Fig. 1a-1d. (*p <0,05 vs placebo/vehmulo {composicion sin compuesto A}), Fig. 5 y Fig. 8.

Observacion: Los datos de la tabla 2 muestran claramente que a una dosis igual del compuesto A, se encontro que la administracion oral proporciona una concentracion sistemica significativamente mas baja en comparacion con la administracion de IP, pero aun as ^ la dosis oral se encontro eficaz (Figla-ld). Los resultados de la Fig. 1, la Fig. 5 y la Fig. 8 muestran que la composicion del compuesto A proporciono un beneficio terapeutico al mejorar el mdice de actividad de la enfermedad, atenuando la extension del dano del colon, reduciendo la tasa de perdida de peso y mejorando la tasa de supervivencia en animales enfermos.

Ejemplo 6: Eficacia comparativa de la composicion farmaceutica del compuesto A administrado por via oral y via intraperitoneal

Similar a los procedimientos dados anteriormente en el Ejemplo 5, la composicion farmaceutica del compuesto A se administro, dos veces al dfa, en ratones con colitis inducida por TNBS por via intraperitoneal y via oral. Los animales tratados se analizaron para mejorar el mdice de actividad de la enfermedad y colon mas saludable (puntuacion de macroscopia). Los resultados se resumen en la Fig. 6a y 6b.

Observacion: los datos proporcionados en las Figs. 6a y 6b muestran que la administracion oral del compuesto A demostro una mejor eficacia terapeutica en comparacion con la administracion de IP incluso en dosis mas bajas.

Ejemplo 7: Efectividad de la composicion farmaceutica del compuesto A en el modelo de colitis inducida por DSS (Sulfato de dextrano sodico)

Se proporciono DSS al 5% (MW-36000-50000) disuelto en agua potable a ratones BALB/c hembra durante 11 dfas (Gunther et al, The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 1999; Vol. 292, No. 1; 22- 30) seguido de un penodo libre de DSS hasta el dfa 14. La composicion farmaceutica que comprende el compuesto A se administro a estos animales desde el dfa 5 hasta el dfa 14 en la dosis de 1 y 2.5 mg/kg de compuesto A dos veces al dfa, a 10 ml/kg de volumen de dosificacion por via oral (PO). Al grupo placebo se le dio una composicion similar sin el compuesto A. El placebo (composicion sin el compuesto A) tambien se administro a animales sanos, a los que se les dio solo agua potable y se representaron como placebo (agua). La atenuacion relacionada con el tratamiento en la perdida de peso corporal, el mdice de actividad de la enfermedad mejorado (DAI, una puntuacion compuesta que vana de 0 a 12, considerando la perdida de peso corporal, la consistencia fecal y la presencia o ausencia de sangre oculta en las heces) y la histopatologfa del colon (Puntuacion) fueron establecido en 10 dfas de animales tratados (del dfa 5 al dfa 14) para verificar la eficacia del compuesto A. Los pesos corporales se monitorizaron diariamente, se capturo el DAI cada dfa alterno, mientras que la evaluacion histopatologica del dano colonico se realizo en tejido de colon fijado con formalina despues de la finalizacion del estudio. similar al ejemplo 5. Los resultados se resumen en la Fig. 2a-2c. (* p <0.05 vs placebo (5% DSS)) y Fig. 4.

Observacion: Estos resultados de las Fig. 2 y 4 muestran que la composicion del compuesto A proporciono un beneficio terapeutico al reducir la tasa de perdida de peso, mejorar el mdice de actividad de la enfermedad, atenuar la extension del dano del colon y preservar la arquitectura tisular en animales enfermos.

Ejemplo 8: Distribucion tisular del compuesto A en el modelo de colitis inducida por DSS.

Se proporciono DSS al 5% (MW-36000-50000) disuelto en agua potable a ratones BALB/c hembra durante 7 dfas. La composicion farmaceutica que comprende el compuesto A se administro dos veces al dfa a estos animales a partir del dfa 5 por via oral a la dosis de 1 mg/kg del compuesto A e intraperitonealmente a la dosis de 0.25 mg/kg del compuesto A, a 10 ml/kg de volumen de dosificacion.

6 horas despues de la primera dosis en la administracion de la composicion al septimo dfa, se sacrificaron los animales; se realizo una perfusion de todo el cuerpo a traves del corazon utilizando solucion salina regulada con fosfato frio, seguida de una recoleccion de tejidos de interes, que se enjuagaron ademas con regulador PBS para eliminar cualquier contenido residual de GI. Los niveles de plasma y tejido del compuesto A se estimaron utilizando el metodo LC-MS/MS. Los resultados se resumen en la Fig. 3.

Observacion: Los datos muestran claramente que a cuatro veces las diferencias en la dosis administrada por via oral e intraperitoneal, se encontro que la exposicion media del compuesto A en el tejido de interes mediante la administracion oral era de 6 a 21 veces mayor que la obtenida con la administracion intraperitoneal.

Ejemplo 9: Excrecion del compuesto A en heces.

El 5% de DSS (MW-36000-50000) disuelto en agua potable se proporciono a ratones BALB/c hembra durante la duracion del estudio de 9 dfas. La administracion individual de la composicion farmaceutica que comprende el compuesto A a la dosis de 1 mg/kg del compuesto A, a 10 ml/kg de volumen de dosificacion se realizo por via oral el dfa 5. Se recolectaron heces durante las 96 horas posteriores a la administracion de la composicion. Las heces recolectadas se analizaron para determinar los niveles de compuesto A utilizando el metodo LC-MS/MS. Los resultados se resumen en la Tabla 3.

Tabla 3

Animals No Cantidad total de Compuesto A Cantidad de Compuesto A administrado % de en heces (|jg) (jg ) recuperacion en heces

1 12.71 25.00 50.88

2 12.08 19.00 63.60

3 15.34 24.00 63.92

4 13.71 22.00 62.35

5 12.63 24.00 52.66

% medio de recuperacion en heces 58.68

SD 6.37

Observacion: Los resultados anteriores de la tabla 3 muestran que mas del 50% del compuesto A se recupera de las heces, cuando se administro una composicion oral de acuerdo con la presente invencion a animales enfermos.

Ejemplo 10: Expresion de HSP70 en colon

El efecto de la administracion oral de la composicion farmaceutica del compuesto A sobre la expresion de HSP70 se verifico en el modelo DSS de colitis. El 5% de DSS (MW-36000-50000) disuelto en agua potable se proporciono a ratones BALB/c hembra durante 5 dfas. La dosis individual de compuesto A se administro a estos animales el dfa 5. La composicion que comprende el compuesto A se administro a una dosis de 2.5 mg/kg, a 10 ml/kg de volumen de dosificacion por via oral (PO). El grupo placebo recibio una composicion similar sin el compuesto A. Seis horas despues de la administracion, los animales se sacrificaron y el colon se proceso para la preparacion del extracto de tejido completo. Las protemas se separaron en SDS-PAGE seguido de inmunotransferencia, empleando el anticuerpo HSP70. Los resultados se presentan en la Fig. 2d.

Observacion: se observo que la administracion oral de la composicion farmaceutica del Compuesto A dio como resultado una induccion pronunciada de HSP70 en el colon en comparacion con el placebo respectivo (composicion sin el compuesto A).

Ejemplo 11: Expresion de marcador inflamatorio en colon

El efecto de la administracion oral de la composicion farmaceutica del compuesto A sobre la expresion de ARNm de interleuquina (IL) -10, TNF-a, e interferon (INP)-y se evaluo en el modelo de colitis con DSS. La composicion farmaceutica que comprende el compuesto A se administro 2.5 mg/kg dos veces al dfa, desde el dfa 5 hasta el dfa 14, los ratones con colitis inducida por DSS (segun se desarrollo de acuerdo con el ejemplo 7) por via oral (PO). Los animales se sacrificaron el dfa 14 y el colon se proceso para la preparacion de extracto de tejido completo. La expresion de ARNm de interleuquina (IL) -10, TNF-a e interferon (INF) -y junto con la expresion de ARNr 18S se monitorizo mediante el uso de cebadores y sondas espedficos de genes (Applied Biosystems, Foster City, CA, EE. UU.) mediante reaccion en cadena de polimerasa cuantitativa en tiempo real en ABI 7900 HT (Applied Biosystems, Foster City, CA, EE. UU.). La expresion de ARNm se normalizo en relacion con la expresion de ARNr 18S. Al grupo placebo se le dio una composicion similar sin el compuesto A. Los resultados, como se dan en la Fig. 7, se expresaron como una induccion de veces en comparacion con el placebo (composicion sin el compuesto A).

Observacion: Se observo que la administracion oral de la composicion farmaceutica del Compuesto A di como resultado la reduccion de la expresion de citoquinas proinflamatorias, TNFa e INFy y en la elevacion de la expresion de la citoquina antiinflamatoria IL-10.

Claims (9)

REIVINDICACIONES

1. Una composicion farmaceutica de baja dosis que comprende acido [(2-hidroxi-4-oxo-6,7,8,9-tetrahidro-4H, 5H-10-tia-1,4a-diaza-benzo[a]azuleno-3-carbonil)-amino]-acetico o su sal farmaceuticamente aceptable en una cantidad de 2.5 mg a 60 mg y al menos un vehfculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante, para uso en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal.

2. Una composicion farmaceutica de baja dosis que comprende acido [(2-hidroxi-4-oxo-6,7,8,9-tetrahidro-4H, 5H-10-tia-1,4a-diaza-benzo[a]azuleno-3-carbonil)-amino]-acetico o su sal farmaceuticamente aceptable y al menos un vehnculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante para uso en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal, en donde dicha composicion es efectiva en la rango de dosificacion de 2.5 mg a 60 mg por dfa.

3. La composicion farmaceutica de baja dosis para uso en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes es para administracion no parenteral.

4. La composicion farmaceutica de baja dosis para uso en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal de acuerdo con la reivindicacion 3, en la que dicha administracion no parenteral es oral.

5. acido [(2-hidroxi-4-oxo-6,7,8,9-tetrahidro-4H, 5H-10-tia-1,4a-diaza-benzo[a]azuleno-3-carbonil)-amino]-acetico o su sal farmaceuticamente aceptable para uso en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal en el rango de dosificacion de 2.5 mg a 60 mg.

6. El compuesto para uso de la reivindicacion 5, en el que el compuesto esta comprendido en una composicion farmaceutica que es efectiva en el rango de dosificacion de 2.5 mg a 60 mg por dfa.

7. El compuesto para uso de la reivindicacion 6, en el que la composicion farmaceutica comprende ademas al menos un vehfculo farmaceuticamente aceptable seleccionado de diluyente, aglutinante, desintegrante, agente de ajuste del pH y lubricante.

8. El compuesto para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, en el que el compuesto es para tratamiento por administracion no parenteral.

9. El compuesto para el uso de la reivindicacion 8, en el que el compuesto es para el tratamiento por administracion oral.