ES2660700T3 - Composición que comprende aceites vegetales y/o de pescado y entidades de ácidos grasos no oxidables - Google Patents

Composición que comprende aceites vegetales y/o de pescado y entidades de ácidos grasos no oxidables Download PDF

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Abstract

Una preparación que comprende una combinación de: 1) un material proteico, 2) un aceite de pescado, y 3) una entidad de ácido graso no ß-oxidable representada por la fórmula general R"-COO-(CH2)2n+1-X-R', en donde X es un átomo de azufre, un átomo de selenio, un átomo de oxígeno, un grupo SO o un grupo SO2; n es un número entero de 0 a 11; y R' es un grupo alquilo lineal o ramificado, saturado o insaturado, opcionalmente sustituido, en donde la cadena principal de dicho R' contiene de 13 a 23 átomos de carbono y opcionalmente uno o más heterogrupos seleccionados del grupo que comprende un átomo de oxígeno, un átomo de azufre, un átomo de selenio, un átomo de oxígeno, un grupo SO y un grupo SO2, y R" es un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo que contiene de 1 a 4 átomos de carbono, en donde el material proteico es hidrolizado de proteína de pescado para uso en seres humanos para la prevención y/o tratamiento de hipercolesterolemia y enfermedades negativamente afectadas por niveles de colesterol altos, resistencia a la insulina, obesidad, diabetes, hígado graso, dislipemia, aterosclerosis, enfermedad coronaria, trombosis, estenosis, estenosis secundaria, infarto de miocardio, accidente cerebrovascular, disfunción endotelial, estado procoagulante, síndrome de ovario poliquístico y el síndrome metabólico.

Description

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Leyendas de las figuras
La Figura 1 muestra que el aumento en la actividad de acil-CoA graso mediante TTA se potencia por el material proteico de soja fermentada.
La Figura 2 muestra que el efecto de disminución de fosfolípidos de TTA se potencia por el material proteico de soja fermentada.
La Figura 3 muestra que el efecto hipocolesterolémico de TTA se potencia por el material proteico de soja fermentada y el aceite de pescado.
La Figura 4 muestra que los efectos hipotrigliceridemiantes de TTA se potencian por el material proteico de soja fermentada.
Definiciones utilizadas en la aplicación
Animales
En este contexto, el término "animales" incluye mamíferos tales como humanos y animales de granja (agrícola), especialmente animales de importancia económica tales como aves gallináceas, mamíferos bovinos, ovinos, caprinos y porcinos, especialmente aquellos que producen productos aptos para el consumo humano, tales como carne, huevos y leche. Además, el término está dirigido a incluir pescado y marisco, tales como salmón, bacalao, tilapia, almejas, ostras, langosta o cangrejos. El término también incluye animales domésticos tales como perros y gatos.
Alimentación animal
El término pienso se refiere a la comida para animales (como se define anteriormente). El pienso generalmente comprende cantidades apropiadas de grasas, proteínas, carbohidratos, vitaminas y minerales necesarios para el sustento del animal receptor previsto, y puede comprender componentes adicionales para la mejora del sabor, textura, color, olor, estabilidad, vida de almacenamiento, etc, o antibióticos u otros componentes añadidos para el beneficio de la salud del animal. El pienso es preferiblemente, pero no necesario, materia seca, más preferiblemente un material granulado. El término pienso también pretende incluir composiciones nutricionales, composiciones veterinarias y/o productos alimenticios funcionales para el consumo animal.
Carne
La palabra carne se refiere a la carne de cualquier animal como se define anteriormente. Por lo tanto, la proteína que contiene carne de mamíferos, aves, peces y marisco se conoce como carne. El término "producto cárnico" se refiere a cualquier producto producido a partir de carne como se define anteriormente.
Aceites vegetales y/o de pescado
Estos incluyen todos los aceites de origen vegetal o marino, que incluyen pero no se limitan a aceites grasos o no volátiles, así como a aceites esenciales o volátiles, y cualquier combinación de los mismos. No necesariamente tienen que estar en forma líquida. El aceite de girasol es realmente aceite de la semilla de girasol, no de la flor en sí.
Aceite de pescado
Este término incluye todos los aceites de origen marino.
Composición nutricional
Este término está destinado a incluir cualquier material ingerible, que incluye, pero no se restringe a suplementos nutricionales, alimentos funcionales, suplementos herbales, etc., para consumo humano o animal. El término también incluye productos alimenticios para consumo humano y forraje para animales, en donde la preparación de la presente invención es un aditivo, y no el ingrediente principal. Esto afecta especialmente al forraje para animales, donde cualquier forraje se puede suplementar con la preparación de la presente invención, para lograr los efectos biológicos de la misma.
Tratamiento
En relación con las aplicaciones farmacéuticas, el término "tratamiento" se refiere a una reducción de la gravedad de la enfermedad.
Prevención
El término "prevención" se refiere a la prevención de una enfermedad dada, es decir, se administra un compuesto antes del inicio de la enfermedad. Esto significa que los compuestos se pueden utilizar como agentes profilácticos o como ingredientes en una composición nutricional con el fin de prevenir el riesgo o el inicio de una enfermedad
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dada.
Fermentación
La descomposición de sustancias orgánicas por microorganismos o enzimas, que incluye la hidrólisis.
Hidrólisis
Descomposición enzimática o química donde las moléculas complejas se dividen en unidades más simples mediante una reacción química con agua.
Material proteico unicelular (SCP)
SCP es un material que comprende microorganismos unicelulares. Los microorganismos pueden ser, entre otros, hongos, levaduras y bacterias. El material SCP contiene altas proporciones de proteínas.
Hidrolizado de proteína de pescado tratado con enzimas (FPH)
El material FPH es un hidrolizado proteico que resulta de un tratamiento enzimático de un material de pescado. El material FPH contiene altas proporciones de proteínas y péptidos.
Material proteico de soja fermentada
El material proteico de soja fermentada es el resultado de una fermentación de granos de soja. Comprende proteínas e isoflavonas de soja modificadas y no modificadas, así como otros componentes de la soja.
Composición nutricional
Este término está destinado a incluir cualquier material ingerible, que incluye pero no se restringe a suplementos nutricionales, alimentos funcionales, suplementos herbales, etc., para consumo humano o animal. El término también incluye productos alimenticios para consumo humano y forraje para animales, en donde la composición es un aditivo y no el ingrediente principal. Esto afecta especialmente al forraje para animales, donde cualquier forraje se puede suplementar con la composición, para lograr los efectos biológicos de la misma.
Administración de los compuestos de la presente invención
Como un medicamento farmacéutico, la preparación de la presente invención se puede administrar directamente al animal mediante cualquier técnica adecuada, que incluye vía parenteral, intranasal, oral o mediante absorción a través de la piel. Se pueden administrar localmente o sistémicamente. La vía de administración específica de cada agente dependerá, p. ej., de la historia clínica del receptor humano o animal.
Los ejemplos de administración parenteral incluyen administración subcutánea, intramuscular, intravenosa, intraarterial e intraperitoneal.
Como una proposición general, la cantidad farmacéuticamente efectiva total de cada una de las entidades de ácidos grasos no β-oxidables administradas vía parenteral por dosis estará preferiblemente en el intervalo de aproximadamente 1 mg/kg/día a 200 mg/kg/día de peso corporal del paciente para los humanos, aunque, como se señaló anteriormente, esto estará sometido a criterio terapéutico. Una dosis de 5 a 50 mg/kg/día es más preferible. Se prefiere una dosis de 5 -500 mg/kg/día de material proteico de soja fermentada u otro material proteico, y una dosis de 50 -300 mg/kg/día es más preferible. Una dosis de 1 a 300 mg/kg/día de aceite de pescado u otro aceite es preferible, y una dosis de 10 a 150 mg/kg/día de aceite de pescado u otro aceite es más preferible.
Si se administran continuamente, cada uno de los compuestos se administra típicamente mediante 1-4 inyecciones por día o mediante infusiones subcutáneas continuas, por ejemplo, utilizando una mini-bomba. También se puede emplear una solución intravenosa en bolsa. El factor clave para seleccionar una dosis adecuada es el resultado obtenido, medido por la disminución del peso corporal total o la relación entre masa grasa y magra, o por otros criterios para medir el control o la prevención de la obesidad o la prevención de enfermedades relacionadas con la obesidad, como se considere apropiado por el practicante.
Para administración parenteral, en una realización, la preparación de la presente invención se formula generalmente mezclando cada uno en el grado de pureza deseado, en una forma farmacéutica inyectable de dosis unitaria (solución, suspensión o emulsión), con un vehículo farmacéuticamente aceptable, es decir, uno que no sea tóxico para los receptores a las dosis y concentraciones empleadas y que sea compatible con otros ingredientes de la formulación.
Generalmente, las formulaciones se preparan poniendo en contacto cada una de las preparaciones de la presente invención de manera uniforme e íntima con vehículos líquidos o vehículos sólidos finamente divididos o ambos. Luego, si es necesario, el producto se moldea en la formulación deseada. Preferiblemente, el vehículo es un vehículo parenteral, más preferiblemente una solución que es isotónica con la sangre del receptor. Ejemplos de tales
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Tabla 1: Formulación y composición química de las dietas
Dietas: aceite de pescado (Control), aceite de pescado con 0,5% de TTA (0,5%TTA), aceite de pescado con 1,5% de TTA añadido (1,5%TTA).
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Control 0,5% TTA 1,5% TTA
Formulación (% del total)
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Harina de pescado, LT
67,8 67,8 67,8
Aceite de capelána
21,3 21 20,7
TTA
imagen13 0,1 0,3
Trigo
in,4 10,4 10,4
Astaxb-Cantaxc
0,06 0,06 0,06
Premezcla de minerales/vitaminas
0,49 0,49 0,49
Óxido de itrio
0,01 0,01 0,01
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Composición química
imagen18 imagen19 imagen20
Materia seca (%)
97,1 96,1 93,8
Proteína (%)
51,9 51,4 49,7
Grasa (%)
26,9 26,7 26,7
Ceniza (%)
10,8 10,4 10
Energía (MJ/kg)
23,8 23,7 23,2
a Capelin oil, Norsildmel, Norway. b Asta, BASF, lucanthin red. c Canta, lucanthin pink.
La composición de ácidos grasos de las dietas reflejó claramente la del aceite de pescado utilizado (aceite de capelán) (Tabla 2). El aceite de capelán contenía niveles relativamente altos de AG monoinsaturados y también era
5 rico en AG n-3 de cadena larga, 20:5 n-3 (EPA) y 22:6 n-3 (DHA). El pienso, sin embargo, contenía una cantidad significativa de harina de pescado, que contenía n-3 AG, que aseguraba que los niveles de estos AG en la dieta fueran más altos que los del aceite añadido.
Además de las dietas anteriores, se prepararon dietas idénticas pero con 0,5% de Gendaxin y 0% ó 0,9% de TTA (basado en el peso seco total del pienso).
10
Tabla 2: Composición de ácidos grasos de las dietas
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Control 0,5% TTA 1,5% TTA
Ácidos grasos
imagen22 imagen23 imagen24
12:0
0,1 0,1 0,1
14:0
6,7 6,6 6,6
15:0
0,3 0,3 0,3
16:0
11,8 11,6 11,5
16:1 n-7
7,1 7 6,9
16:1 n-9
0,4 0,3 0,3
16:2 n-7
0,4 0,4 0,4
17:0
0,1 0,1 0,1
18:0
1,4 1,3 1,3
18:1 n-6
0,4 0,4 0,4
18:1 n-7
3,1 3 3
18:1 n-9
11,5 11,6 11,3
18:2 n-6
2,7 2,7 2,6
18:3 n-6
0,1 0,1 0,1
18:3 n-3
0,7 0,7 0,7
18:4 n-3
2,1 2,1 2,1
TTA
imagen25 0,5 1,5
20:0
0,1 0,1 0,1
20:1 n-9
0,5 0,5 0,5
20:1 n-11
17,9 17,9 17,7
20:2 n-6
0,2 0,2 0,2
20:3 n-3
nd nd nd
20:4 n-3
0,4 0,4 0,4
20:4 n-6
0,3 0,3 0,3
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Control 0,5% TTA 1,5% TTA
Ácidos grasos
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20:5 n-3
5,9 5,9 5,8
22:0
0,2 nd nd
22:1 n-9
1,9 1,9 1,8
22:1 n-11
14,1 14 14
22:2 n-6
0,1 0,2 0,2
22:5 n-3
0,5 0,4 0,5
22:6 n-3
6,4 6,2 6,2
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∑Saturada
20,7 20,1 20
∑n-3
15,9 15,7 14,1
∑n-6
3,5 3,5 3,4
Control: aceite de pescado, 05%TTA: aceite de pescado con 0,5% de TTA, 1,5%TTA: aceite de pescado con 1,5% de TTA. La cantidad de cada ácido graso se da como un porcentaje de los ácidos grasos totales.
2.2: Crianza de salmón del Atlántico con pienso que comprende TTA
Pescado, instalaciones y diseño experimental
El estudio se realizó en la estación de investigación AKVAFORSK, Sunndalsora, Noruega. El salmón del Atlántico
5(Salmon solar) con un peso inicial medio de aproximadamente 86 g se colocó en 15 tanques cilindro-cónicos (0,85 m de diámetro), 40 peces por tanque. Los tanques se abastecieron con agua de mar a una temperatura constante de 12 °C. Los peces se aclimataron a la temperatura y se alimentaron con un pienso comercial durante dos semanas antes del inicio del estudio. El estudio de crecimiento consistió en un período de 8 semanas.
Las dietas fueron como las descritas más arriba en la tabla 2, que contenían aceite de pescado (aceite de capelán)
10 (control), o aceite de pescado enriquecido con 0,5% de TTA (0,5%TTA) o aceite de pescado enriquecido con 1,5% de TTA (1,5%TTA). Las tres dietas se asignaron aleatoriamente a tanques triplicados. El pienso se distribuyó por alimentadores de disco accionados eléctricamente (Akvaprodukter AS, Sunndalsora). Los tanques se diseñaron de forma tal que los desechos se recogían del agua efluente en cajas de malla de alambre. Se recogieron los desechos, y esto permitió calcular el peso del pienso consumido.
15 Las dietas que contenían Gendaxin se utilizaron en un experimento separado, pero el diseño del mismo fue el mismo que el descrito anteriormente.
Muestreo inicial y final
Los peces estuvieron en ayuno durante 2 días antes del muestreo inicial. Seis peces de cada tanque se anestesiaron en MS-222 al comienzo y al final del experimento, y se determinó el peso medio y la longitud media.
20 Estos seis peces se sacrificaron mediante un golpe en la cabeza y el abdomen se abrió. Las muestras de hígado, corazón, branquias y riñón se congelaron inmediatamente en nitrógeno líquido y se almacenaron a -80°C. Estas muestras se utilizaron posteriormente para el análisis de composición de ácidos grasos. Se anestesiaron y sacrificaron otros cinco peces por tanque. Estos peces se utilizaron para determinar la composición de todo el cuerpo.
25 Los peces no estuvieron en ayunas antes del muestreo final. Se cogieron cinco peces de cada tanque para recoger
muestras fecales siguiendo el procedimiento descrito por Austreng (Aquaculture, 1978 13:265-272). Las muestras fecales de cada tanque se agruparon. Las muestras se almacenaron a -20°C antes del análisis.
El segundo arco branquial se retiró del pescado anestesiado y se enjuagó en tampón SEI al punto de congelación (sacarosa 150 mM, EDTA 10 nM, imidazol 50 mM, pH 7,3) y se congeló inmediatamente en nitrógeno líquido. Los 5 tejidos de branquias se almacenaron a -80°C. Los hígados se homogeneizaron en medio de sacarosa al punto de congelación.
Crecimiento
El peso medio de los peces casi se triplicó durante el estudio, en todos los grupos dietéticos, desde un valor inicial de 86 g hasta un valor final de aproximadamente 250 g. Los SGR disminuyeron al aumentar las dosis dietéticas de
10 TTA, desde un SGR de 1,8 en el grupo de control a un SGR de 1,7 en el grupo 0.5% TTA y un SGR de 1,5 en el grupo 1,5% TTA (Tabla 3). No hubo diferencias significativas en el factor de condición entre los grupos dietéticos (Tabla 3).
Tabla 3: Efecto de la inclusión dietética de TTA y aceite en la ingesta de pienso y crecimiento en salmón del Atlántico
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Control 0,5% TTA 1,5% TTA
Peso inicial
85±2 88±1 86±2
Peso final
278±7 267±3 233±1
CF
1,2±0,02 1,1±0,02 1,2±0,02
TGR
2,6±0,44c 2,5±0,05b 2,0±0,06a
SGR
1,8±0,02c 1,7±0,03b 1,5±0,05a
FER total
1,2±0,05 1,2±0,04 1,1±0,12
Los valores son medias ± SEM (n=3) CF (%): factor de condición, SGR: tasa de crecimiento específico, TGC: coeficiente de crecimiento térmico, FER: relación de eficiencia alimentaria (ganancia de humedad/ingesta de pienso seco). abc Las diferencias entre valores medios dentro de una fila dada son significativas (p≤0,05), como se indica mediante diferentes letras de superíndice.
15
Ingesta de pienso y digestibilidad de nutrientes
Solo hubo pequeñas diferencias en la digestibilidad en este estudio (Tabla 4). La digestibilidad de los AG en todos los grupos dietéticos fue alta, siendo mayor de 96% para la suma de todos los AG para los peces alimentados con la dieta control y las dietas 0,5% TTA y más del 90% para los peces alimentados con la dieta 1,5% TTA. La
20 digestibilidad de los AG saturados fue, en general, más baja que las de los otros AG.
Tabla 4: Digestibilidad de nutrientes en salmón del Atlántico
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Control 0,5%TTA 1,5%TTA
Energía
89,5±0,08 89,0±0,58 87,1±1,22
Proteína
87,7±0,15 87,9±0,31 87,5±0,44
Grasa
97,3±0,58 96,5±1,27 94,9±2,12
∑Saturada
93,2±1,54b 81,4±1,95a 81,5±2,18a
5
10
15
20
25
30
35
40
∑Monoinsaturada
87,8±5,66 90,4±5,56 95,4±1,87
∑Poliinsaturada
90,9±7,77 94,0±4,45 92,5±5,08
TTA
imagen36 98,6±0,45 97,0±1,59
de proteína, grasa, contenido energético y ácido graso seleccionado en salmón del Atlántico alimentado con dietas que contenían Control: aceite de pescado, 0,5% TTA: aceite de pescado con 0,5% de TTA, 1,5% TTA: aceite de pescado con 1,5% Los datos son % de medias ± SEM Los valores dentro de la misma fila con diferentes superíndices son significativamente diferentes; nd=no detectable.
2.3 Efectos biológicos de TTA
Productos químicos
El ácido acético, el cloroformo, el éter de petróleo y el metanol se obtuvieron todos de Merck (Darmstadt, Alemania). El benceno se obtuvo de Rathburn Chemicals Ltd. (Walkerburn, Escocia) y la 2', 7'-diclorofluoresceína de Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, EE. UU.). El HCl metanólico y el 2, 2-dimetoxipropano se adquirieron de Supelco Inc. (Bellfonte, PA, EE. UU.). Las placas K6 de gel de sílice con respaldo de vidrio se obtuvieron de Whatman International Ltd. (Maidstone, Inglaterra).
Análisis químico
Los peces muestreados al principio y al final del experimento se analizaron con respecto al contenido de materia seca, grasa, proteínas, cenizas y energía. Todas las dietas y muestras fecales se analizaron con respecto a materia seca (secando a 105°C hasta peso constante), grasa (mediante extracción con acetato de etilo como se describe en NS 9402, 1994), proteína (mediante un Autoanalizador Kjeltec-N*6.25). almidón, ceniza (calentando a 550°C hasta peso constante), energía y óxido de itrio (que utilizó ICP-AES después de incinerar las muestras). Los contenidos de energía de las dietas, las heces y las muestras de peces enteros se determinaron mediante bomba calorimétrica adiabática, que utilizó una Bomba Calorimétrica Parr 1271.
Extracción de lípidos y análisis de ácidos grasos
Los lípidos totales se extrajeron a partir de branquias, hígado y corazón homogeneizados utilizando el método descrito por Folch (J Biol Chem 1957 226:497-509). Las fases de cloroformo-metanol de las branquias se secaron bajo nitrógeno y se disolvieron en hexano. Los fosfolípidos (FL), el triacilglicerol (TAG) y los ácidos grasos libres (AGL) se separaron por cromatografía en capa fina (CCF) utilizando una mezcla de éter de petróleo, dietil éter y ácido acético (113:20:2 en volumen) como la fase móvil. Los lípidos se visualizaron pulverizando las placas de CCF con 0,2% (w/v) de 2', 7'-diclorofluoresceína en metanol y se identificaron por comparación con patrones conocidos bajo luz ultravioleta.
Las manchas correspondientes a FL, AGL y TAG se rasparon en tubos de ensayo y luego se trans-metilalaron durante la noche con 2, 2-dimetoxipropano, HCl metanólico y benceno a temperatura ambiente como se describe por Mason y Waller (Anal Chem 1964 36:583). Los ésteres metílicos se separaron en una columna capilar fusionada no polar mediante cromatografía de gases básicamente como se describe por Røsjø (Fish Physiol Biochem 1994 13:119-132). Los ésteres de metilo de los AG se separaron en un cromatógrafo de gases (sistema GC Perkin-Elmer Auto equipado con un inyector, inyector con/sin división programable) con una columna CP wax 52 (con una longitud de 25 m, un diámetro interno de 0,25 mm y un espesor de la película de 0,2 μm), detector de ionización de llama y sistema de datos 1022. El gas portador era He, y las temperaturas del inyector y del detector eran 280 °C. La temperatura del horno se elevó de 50 °C a 180 °C a una velocidad de 10 °C min-1, y luego se elevó a 240 °C a una velocidad de 0,7 °C min-1. La cantidad relativa de cada ácido graso presente se determinó midiendo el área bajo el pico correspondiente a ese ácido graso.
Cálculos
Los coeficientes de digestibilidad aparente (ADC) se calcularon como se describe por Austreng (Aquaculture, 1978 13:265-272). El factor de condición (CF), el índice hepatosomático (HSI), el factor de crecimiento específico (SGR) y el coeficiente de crecimiento de la unidad térmica (TGC) se calculó como sigue, en base a registros individuales de pesos y longitudes:
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donde W0 es el peso inicial, W1 es el peso final y t grados del día.
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5 Análisis estadístico
Todos los datos se sometieron a análisis de varianza de una vía (ANOVA) y las diferencias se clasificaron mediante la ensayo de intervalo múltiple de Duncan. El nivel de significancia se estableció en 5%.
Composición corporal y hepática
Los peces alimentados con la dieta 1,5%TTA tenían un nivel de lípidos corporales más bajo (9,6%) que los peces
10 alimentados con la dieta control (10,6%) (Tabla 5). No se encontraron diferencias estadísticamente significativas en el contenido total de lípidos hepáticos entre los peces alimentados con la dieta control y los peces alimentados con las dietas TTA (Tabla 6). El índice hepatosomático fue significativamente mayor en peces alimentados con la dieta 1,5%TTA (1,2%) que en los peces alimentados con la dieta control (1,1%) (Tabla 6).
Tabla 5: Composición química de la canal en % de peso húmedo
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Inicio Control 0,5%TTA 1,5%TTA
Lípido crudo (%)
8,3 10,6±0,01b 11,0±0,42b 9,6±0,09a
Proteína cruda (%)
16,8 18,1±0,06 17,8±0,19 18,0±0,22
Materia seca (%)
27,6 31,1±0,12b 31,0±0,15b 29,9±0,10a
Ceniza (%)
2,3 2,0±0,05 2,0±0,02 2,0±0,06
Energía (MJ/Kg)
7,1 8,5±0,03b 8,5±0,10b 8,0±0,05a
Control: aceite de pescado, 0,5%TTA: aceite de pescado con 0,5% de TTA, 1,5%TTA: aceite de pescado con 1,5% de TTA. abLas diferencias entre los valores medios dentro de una fila dada son significativas (p≤0,05), como se indica mediante diferentes letras de superíndice.
Tabla 6: Efecto de la inclusión en la dieta de TTA y aceites sobre el índice hepatosomático (HSI) y contenido de lípidos en hígado
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Control 0.5% TTA 1.5% TTA
HIS
1,1±0,01a 1,1±0,02a 1,2±0,03b
Contenido de lípidos en el hígado (%)
4,9±0,27 5,1±0,12 5,7±0,69
Los resultados son medias ± SEM (n=3). Los valores dentro de la misma fila con diferentes superíndices son significativamente diferentes.
Composiciones de ácidos grasos de hígado, branquias y corazón
20 Las composiciones de ácidos grasos de FL, TAG y AGL de branquias, hígado y corazón se muestran en las Tablas 7, 8 y 9. El TTA se incorporó a las fracciónes de FL de las branquias (0,8%) y del corazón (0,7%) del salmón del Atlántico alimentado con la dieta 1,5%TTA. El TTA también se incorporó a las fracciones de TG y de AGL de las
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5
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2.4 Efectos biológicos de la composición, incluido un material proteico de soja fermentada Productos químicos Gendaxin se obtuvo de Aximed, Bergen, Noruega. Una cápsula de Gendaxin® contiene 35 mg de isoflavonas, entre
otros, 10 mg de genisteína y 15 mg de Daidzein. Análisis de lípidos Los lípidos plasmáticos se midieron enzimáticamente en el sistema Technicon Axon (Miles, Tarrytown, NY) que
utiliza el kit de triglicéridos de Bayer, colesterol total (Bayer, Tarrytown, NY), y el kit PAP150 para la colina que contienen los fosfolípidos de bioMerieux. Los resultados se dieron en mmol/l, y los datos se presentan en la tabla 10 a continuación.

Tabla 10: Colesterol total, triglicéridos y fosfolípidos del plasma.
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Colesterol Triglicéridos Fosfolípidos
Control
10,02 2,95 11,98
0,25 % Gendaxin
9,14 2,71 11,19
0,5 % Gendaxin + 0,9 % TTA
9,10 2,12 10,66
Es evidente a partir de los datos anteriores que la adición de Gendaxin al pienso para peces tiene un efecto positivo en la composición de ácidos grasos del plasma del salmón. Los niveles de colesterol, triglicéridos y fosfolípidos disminuyeron con 0,25% de Gendaxin añadido al pienso para peces en comparación con el control. Además la adición de Gendaxin y TTA mejoró la composición de ácidos grasos del plasma adicionalmente.
Ensayo enzimático
Se midió la actividad de acil-CoA oxidasa grasa en la fracción de hígado peroxisomal como se describió previamente (Small GM, Burdett K, Connock MJ (1985) Biochem J 227:205-10). Los resultados se dieron como actividad de acil-CoA oxidasa grasa por proteína total, y se muestran en la tabla 11 a continuación.

Tabla 11: β-oxidación hepática.
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Beta oxidación
Control
0,940
0,5 % Gendaxin + 0,9 % TTA
1,501
Es evidente a partir de los datos anteriores que la adición de Gendaxin y TTA al pienso para peces tiene un efecto positivo sobre la β-oxidación, ya que la β-oxidación está altamente aumentada.
Ejemplo 3 En línea con la configuración experimental dada en el ejemplo 1, hemos llevado a cabo un experimento de alimentación en ratas macho Wistar (ver Tabla 12) con los siguientes componentes de alimentación:
30% grasa 20% proteína 5% fibra 10% sacarosa 3,5% mezcla de minerales AIN93G 1,0% mezcla de vitaminas AIN-93
El restante: almidón
El componente graso es 30% manteca de cerdo, o el 2,5-5% de la manteca de cerdo se intercambia con aceite de pescado o el 0,15% de la manteca de cerdo se intercambia con TTA. El material proteico es 20% proteína de leche (caseína), o la mitad se intercambia con proteína de pescado o "Bioproteína".
Tabla 12
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Ch Tg HDL Ch AGL FL HDL Ch/Ch imagen52
Tratamiento
mmol/L mmol/L mmol/L mmol/L mmol/L razón imagen53
FPH, 10%
2,03 1,16 1,63 0,34 1,48 0,80 imagen54
Aceite de pescado, 2,5%
1,77 1,27 1,42 0,40 1,47 0,80 imagen55
Aceite de pescado, 5%
1,79 1,13 1,44 0,40 1,41 0,81 imagen56
Aceite de pescado 2,5% + FPH 10%
1,26 0,93 1,00 0,35 1,07 0,79 imagen57
Aceite de pescado 5% + FPH 10%
1,21 0,92 0,97 0,37 0,98 0,80 imagen58
FPH 10% + TTA 0,15%
1,27 0,65 1,07 0,28 1,18 0,83 imagen59
Aceite de pescado 2,5% + TTA 0,15%
1,21 0,43 1,00 0,25 1,01 0,83 imagen60
Aceite de pescado 5% + TTA 0,15%
1,26 0,61 1,02 0,23 1,14 0,81 imagen61
Aceite de pescado 2,5% + FPH 10% + TTA 0,15%
0,98 0,46 0,81 0,31 1,00 0,83 imagen62
Aceite de pescado 5% + FPH 10% + TTA 0,15%
1,02 0,72 0,84 0,32 1,00 0,84 imagen63
TTA 0,15%
1,56 0,39 1,31 0,28 1,17 0,84 imagen64
Bioproteína Alta 20%
1,23 0,80 0,95 0,41 1,00 0,77 imagen65
Bioproteína Baja 20%
1,28 0,61 1,04 0,34 1,01 0,81 imagen66
Kontroll (Casein 20%)
1,90 1,04 1,52 0,38 1,41 0,80 imagen67
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imagen69 imagen70 imagen71 imagen72 imagen73 imagen74 imagen75
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Peso de la rata Hígado WAT epi WAT ret Hígado/bw WAT epi/bw WAT ret/bw
Tratamiento
gramos gramos gramos gramos razón razón razón
FPH, 10%
460,83 10,04 7,99 9,90 2,17 1,69 2,12
Aceite de pescado, 2,5%
427,83 9,44 7,00 8,67 2,21 1,63 2,01
Aceite de pescado, 5%
445,17 9,87 7,59 9,79 2,21 1,70 2,20
Aceite de pescado 2,5% + FPH 10%
438,83 10,01 6,33 8,80 2,28 1,42 2,02
Aceite de pescado 5% + FPH 10%
432,50 10,18 7,31 8,86 2,35 1,67 2,05
FPH 10% + TTA 0,15%
436,17 15,55 6,80 8,25 3,56 1,54 1,88
Aceite de pescado 2,5% + TTA 0,15%
405,00 13,25 4,59 7,09 3,26 1,13 1,75
Aceite de pescado 5% + TTA 0,15%
442,83 14,80 5,48 7,95 3,34 1,22 1,77
Aceite de pescado 2,5% + FPH 10% + TTA 0,15%
438,50 15,66 6,03 8,20 3,57 1,36 1,85
Aceite de pescado 5% + FPH 10% + TTA 0,15%
449,67 16,29 7,18 9,19 3,62 1,58 2,02
TTA 0,15%
404,00 13,13 4,25 6,28 3,26 1,05 1,55
Bioproteína Alta 20%
413,33 9,00 5,02 6,99 2,18 1,21 1,69
Bioproteína Baja 20%
420,67 8,97 4,63 6,65 2,13 1,09 1,58
Control (Casein 20%)
417,36 8,91 5,94 8,46 2,13 1,42 2,03

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