NO324533B1

NO324533B1 - Materiale fremstilt fra en kombinasjon av ikke-β-oksiderbare fettsyreanaloger og et proteinmateriale, samt anvendelse derav.

Info

Publication number: NO324533B1
Application number: NO20043091A
Authority: NO
Inventors: Rolf Kristian Berge
Original assignee: Thia Medica As
Priority date: 2004-07-19
Filing date: 2004-07-19
Publication date: 2007-11-19
Also published as: CL2009000356A1; NO20043091L; NO20043091D0; CN101010101A; CN101010101B

Abstract

Det beskrives en sammenblanding fremstilt fra en kombinasjon av ikke-p-oksiderbare fettsyreanaloger og et proteinmateriale, og anvendelse av nevnte materialer for fremstilling av et farmasøytisk eller ernæringsmessig materiale for hindring og/ eller behandling av insulin resistens, obesitet, diabetes, fettlever, hyperkolesterolemi, dyslipidemi, aterosklerose, koronær hjertesvikt, trombose, stenose, sekundær stenose, myokardisk infarkt, slag, høyt blodtrykk, endotelisk dysfunksjon, prokoagulent tilstand, polysistisk eggstokksyndrom, metabolsk syndrom, cancer, infiammatoriske forstyrrelser og proliferative hudforstyrrelser. En alternativ utførelse av oppfinnelsen inkluderer olje i materialet.

Description

OMRÅDET FOR OPPFINNELSEN

Den foreliggende oppfinnelse vedrører et materiale omfattende et fermentert, hydrolysert, og/eller enkeltcelleorganisme proteinmateriale og

en ikke-p-oksiderbarfettsyreanalog, samt anvendelser derav.

Anvendelse av en kombinasjon av ikke-P-oksiderbare fettsyreanaloger og et proteinmateriale har vist overraskende synergistiske effekter. Den foreliggende oppfinnelse vedrører et materiale fremstilt fra en kombinasjon av ikke-P-oksiderbare fettsyreanaloger og et proteinmateriale, og anvendelse av nevnte materialet for fremstilling av et farmasøytisk eller ernæringsmessig materiale for prevensjon og/ eller behandling av insulin resistens, obesitet, diabetes, fettlever, hyperkolesterolemi, dyslepidemi, aterosklerose, koronar hjertesykdom, trombose, stenose, sekundær stenose, myokardisk infarkt, slag, forhøyet blodtrykk, endotelisk dysfunksjon, prokoagulent tilstand, polysistisk eggstokksyndrom, metabolsk syndrom, cancer, inflammatoriske forstyrrelser og prolifererende hudforstyrrelser.

BAKGRUNN FOR OPPFINNELSEN

I tidligere patentsøknader har oppfinner beskrevet nyttige applikasjoner av ikke-p-oksiderbare fettsyreanaloger ifølge foreliggende oppfinnelse i behandling og hindring av obesitet (NO 2000 5461), diabetes (NO 2000 5462), primær og sekundær stenose (NO 2000 5463), cancer (NO 2002 5930), prolifererende hudforstyrrelser (NO 2003 1080), inflammatoriske og autoimmune forstyrrelser (NO 2003 2054). I andre tidligere søknader har oppfinnerne beskrevet nyttige applikasjoner av proteinmaterialer ifølge oppfinnelsen, inkluderende et enkeltcelle proteinmateriale (NO 2003 3082), og et fiskeprotein hydrolysat (NO 2003 3078).

Overraskende har oppfinnerne funnet at anvendelse av en konvensjon av ikke-B-oksiderbare fettsyreanaloger med et proteinmateriale har synergistiske nyttige biologiske effekter. Oppfinnerne har vist at kombinasjonen av ikke-oksiderbare fettsyreanaloger med et proteinmateriale senker konsentrasjonen av plasma-kolesterol, triglyserider og fosfolipider, og øker fettacyl CoA oksidase aktivitet. Basert på disse uventede funn forventes det at kombinasjonen av ikke-P-oksiderbare fettsyreanaloger og et proteinmateriale vil ha en øket preventiv og/ eller terapeutisk effekt på alle sykdommer som de ikke-B-oksiderbare fettsyreanaloger er effektive mot, sammenlignet med effekten av fettsyreanaloger alene.

DETALJERT BESKRIVELSE AV OPPFINNELSEN

Den foreliggende oppfinnelse vedrører anvendelse av et preparat omfattende en kombinasjon av:

i) et proteinmateriale, og

ii) en ikke-B-oksiderbar fettsyreanalog, hvor nevnte ikke-B-oksiderbare fettsyreanalog har følgende generelle formel (I)

- hvor Ri er et C1-C24 alkyl, alken eller alkyn, og

- hvor R2 representerer hydrogen eller C1-C4 alkyl, og

- hvor n er et heltall fra 1 til 12, og

- hvor /' er et oddetall og indikerer posisjonen i forhold til COOR2, og

- hvor X, uavhengig av hverandre er valgt fra gruppen omfattende O, S, SO, S02, Se og CH2, og

- med den forutsetning at minst en av X, ikke er CH2,

- eller et salt, prodrug eller kompleks derav.

De ikke-P-oksiderbare fettsyreanaloger ifølge formel (I) er langkjedete fettsyreanaloger som er analoge til de som naturlig forekommer in vivo. Således, de gjenkjennes av de samme enzymer som 3- og i noen tilfeller w-oksiderbare naturlige langkjedete fettsyrer, men de kan ikke oksideres på denne måte.

Under B-oksidasjonen blir en fettsyre enzymatisk oksiderende spaltet mellom karbon 2 og 3 (idet man teller fra karboksylsyreenden av fettsyren), noe som resulterer i fjerning av to karbonatomer på den ene side av oksideringssetet som eddiksyre. Trinnet repeteres deretter på den nå to karboner kortere fettsyre, og repeteres igjen inntil fettsyren er fullstendig oksidert, p-oksidasjon er den vanligste vei hvor hovedandelen av fettsyrene kataboliseres in vivo. P-oksidering som blokkeres av forbindelsene av (I) oppnås ved innsetting av en ikke-oksidbar gruppe i x-posisjonen i formelen ifølge foreliggende oppfinnelse.

cj-oksidering er et alternativ til P-oksidering. Det er en mindre vanlig måte og langsommere biologisk prosess, som oksiderer fettsyren, ikke fra karboksylenden, men i stedet fra metyl/ hydrofobisk hodegruppeende av molekylet, her benevnt Ri. I fettsyreanalogene ifølge (I), kan w-oksidering blokkeres ved innsetting av en dobbel-eller trippelbinding i metyl/ hydrofobisk hodegruppe nær metylenden, eller at Ri er C6- C24 alkylgrupper subsidiert med forskjellige blokkerende forbindelser. Denne blokkering av w-oksidasjon potensierer effektene av de p-oksiderbare fettsyreanaloger ved at deres nedbrytelse ytterligere reduseres.

Selv om der kan være store strukturelle forskjeller mellom forskjellige ikke- p-oksiderbare fettsyreanaloger i formel (I), så forventes de biologiske funksjoner av alle forbindelser av formelen til å være tilsvarende på grunn av at de alle blokkerer P-oksidasjon på samme måte. Denne manglende evne av fettsyreanalogene til å kunne P-oksideres (og i noen tilfeller w-oksideres), fører til at analogene bygges opp i mitokondria, som dermed utløser P-oksidering av in vivo naturlig forekommende fettsyrer, som deretter leder til mange av de biologiske effekter av fettsyreanalogene ifølge oppfinnelsen. (Berge RK et al. (2002) Curr Opin Lipidol 13(3):295-304).

Fettsyre P-oksidasjonsreaksjonsveien er hovedreaksjonsvei for metabolisme av fett. Den innledende og hastighetsbegrensende reaksjon utføres i peroksisomer i lever ved acyl-CoA oksidase. Acyl-CoA oksidase katalyserer dehydrogeneringen av acyl-CoA tioestere til de korresponderende trans-2-enoyl CoA. En fettsyreanalog i samsvar med formel (I); tetradesyltioeddiksyre (TTA), har blitt anvendt tidligere av oppfinnerne av oppfinnelsen for å teste de forskjellige biologiske effekter av fettsyren. Med foreliggende oppfinnelse ble dets effekt på acyl-CoA oksidase testet, og likeledes effekten av et proteinmateriale, alene eller i kombinasjon.

Det spesifikke proteinmaterialet som ble testet heri er et fermentert soyaproteinmateriale. Vi holder også på å teste et enkeltcelle proteinmateriale og et fiskeprotein hydrolysat. Selv om disse materialer er komplekse og inneholder mer enn kun protein, er det proteindelen vi antar virker som aktiv ingrediens, som potensierer de nyttige effekter av de ikke- P-oksiderbare fettsyrer ifølge oppfinnelsen. Basert på resultatene med fermentert soyaproteinmateriale beskrevet heri, forventer vi tilsvarende resultater fra enkeltcelle proteinmateriale og fiskeprotein hydrolysat.

Med testing for acyl-CoA oksidase aktivitet viste TTA alene en stor økning i aktivitet sammenlignet med negativ kontroll. Det fermenterte soyaproteinmaterialet alene hadde omtrent ingen aktivitet i det hele. Men idet TTA og det fermenterte soyaproteinmaterialet ble anvendt sammen, var acyl-CoA oksidase aktiviteten mer enn doblet sammenlignet med aktiviteten av TTA alene. Denne potensiering av TTA som en acyl- CoA oksidase aktivator med et fermentert soyaproteinmateriale er ganske uventet. Den kan ikke forklares med den additive effekt av TTA pluss det fermenterte soyaproteinmaterialet; idet den uventede synergistiske effekt er langt for sterk.

I foreliggende oppfinnelse ble effekten av ikke- P-oksiderbare fettsyreanaloger for plasmafosfolipidnivåer også testet, og likeledes effekten av det fermenterte soyaproteinmaterialet, alene eller sammen med TTA. TTA senket ikke fosfolipidnivået sammenlignet med kontroll, mens det fermenterte soyaproteinmaterialet økte faktisk fosfolipidnivået. Men idet TTA og det fermenterte soyaproteinmaterialet ble anvendt sammen, ble fosfolipidnivåene overraskende senket til under nivået for TTA alene. Denne potensiering av TTA som en plasmafosfolipidsenkende middel med et fermentert soyaproteinmateriale er ganske uventet. Som for acyl- CoA oksidase aktiviteten, kan heller ikke dette forklares med en additiv effekt av TTA pluss det fermenterte soyaproteinmaterialet.

I foreliggende oppfinnelse ble effekten av ikke- P-oksiderbare fettsyreanaloger for plasma kolesterol nivåer også testet, og likeledes effekten av fermentert soyaproteinmateriale, alene eller sammen med TTA. Effekten av fiskeolje ble også testet, alene, med TTA, med fermentert soyaproteinmateriale, eller med både TTA og fermentert soyaproteinmateriale. TTA alene viste en ganske signifikant senkning av plasma kolesterol nivåer, og det fermenterte soyaproteinmaterialet eller fiskeoljen alene utviste også en kolesterolsenkende effekt. Det fermenterte soyaproteinmaterialet og fiskeoljen utviste også en kolesterolsenkende effekt større enn for hver separat. Idet fiskeolje eller fermentert soyaproteinmateriale ble tilsatt til TTA, var den kolesterolsenkende effekt overraskende større enn for TTA alene. Idet alle tre komponenter; TTA, fiskeolje og fermentert soyaproteinmateriale, ble tilsatt samtidig, var den kolesterolsenkende effekt størst. Denne synergi mellom TTA, fiskeolje og fermentert soyaproteinmateriale er ganske uventet.

TTA har blitt vist å redusere plasma triglyserid nivåene ved å øke antallet mitokondrier og stimulere mitokondrien B-oksidasjon av normale mettede og umettede fettsyrer til ketonlegemer (Froyland L et al. (1997) J Lipid Res 38: 1851-1858). I foreliggende oppfinnelse ble det funnet at denne effekt ble videre uventet potensielt ved tilsetning av fermentert soyaproteinmateriale. I disse eksperimenter ble resultatene for fermentert soyaprotein ganske påfallende og overraskende. TTA senket, som forventet, nivået av triglyserider. Det fermenterte soyaprotein alene økte faktisk triglyseridnivået med 30 % sammenlignet med kontrollen, men den potensierte fremdeles triglyseridsenkende effekt av TTA med 50 %. Disse synergistiske effekter er også svært uventet.

Nivået av fettsyrer i blodet er normalt bestemt med de relative rater av lipolyse og esterifisering i adipost vev, og opptaket av fettsyrer i musklene. I musklene inhiberer fettsyrer glukoseopptak og oksidering. Økede nivåer av fettsyrer og triacylglyserol i blodet og musklene korrelerer derfor med obesitet og insulin resistens, og likeledes som en redusert evne til å metabolisere glukose (Olefsky JM (2000) J Clin Invest 106: 467-472; Guerre-Millo et al. (2000) J Biol Chem 275: 16638-16642). Vi har vist stimulering av fettsyreoksidasjon og redusert plasma fettsyrekonsentrasjon oppnådd med ikke- B-oksiderbare fettsyreanaloger og et proteinmateriale eller valgfritt også omfattende en oljekomponent. Vi antesiperer således at materialene ifølge foreliggende oppfinnelse kan anvendes for å hindre og behandle insulin resistens og sykdommer forårsaket derav (Shulman Gl (2000) J Clin Invest 106:(2) 171-176). TTA har blitt funnet å fullstendig hindre insulin resistens og adipositet indusert av fettrik diett, og reduserer adipositet, hyperglykemi og insulin sensitivitet i obese rotter (Madsen M et al. (2002) J Lipid Res 42(5): 742-50). På grunn av de uventede synergistiske resultater funnet av oppfinnerne ved anvendelse av både TTA og et proteinmateriale, og valgfritt også olje, vil vi nå forvente, uten å være bundet til en spesifikk teori over hvorfor resultatene er som vist, at denne kombinasjon vil være enda mer effektiv i behandlingen av disse tilstander. Vi forventer også at TTA potensieres av et proteinmateriale, og valgfritt også olje, i behandling av relaterte sykdommer og forstyrrelser inkluderende forhøyet blodtrykk, økte lipid- og kolesterolnivåer, endotelisk dysfunksjon, prokoagulent tilstand, polysystisk eggstokk syndrom og metabolsk syndrom.

Familien peroksisom proliferator aktivert reseptor (PPAR) er pleiotrofiske regulatorer av cellulære funksjoner så som cellulær proliferasjon, differensiering og lipid hemostase (Ye JM et al (2001) Diabetes 50: 411-417). PPAR- familien omfatter tre subtyper; PPARa, PPARB, og PPARy. TTA er en potent ligand av PPARa (Forman BM, Chen J, Evans RM (1997) Proe Nati Acad Sei 94: 4312-4317; Gottlicher M et al.

(1993) Biochem Pharmacol 46: 2177-2184; Berge RK et al. (1999) Biochem J 343(1): 191-197) og aktiverer også PPARp og PPARy (Raspe E et al. (1999) J Lipid Res 40: 2099-2110). Som en PPARa- aktivator stimulerer TTA katabolismen av fettsyrer ved å øke deres cellulære opptak. Senking av plasma triglyseridnivåer med TTA forårsaker et skift i lever cellulær metabolisme, mot PPARa regulert fettsyre katabolisme i mitokondrier. )Graf HJ et al. (2003) J Biol Chem 278(33): 30525-33). Idet effekten av TTA på plasma triglyserid er direkte med PPARa- aktivering, som er vist med fravær av denne effekt i PPARa- knockout mus, så reduserer fiskeolje ikke plasma triglyseroler selv i knockout mus (Dallongville J et al. (2001) J Biol Chem 276: 4634-4639).

Tilsetning av n-3 poly umettede fettsyrer i dietten, så som de som finnes i fiskeolje, stimulerer hepatisk peroksiomal acyl- CoA oksidase aktivitet og således fettsyreoksidasjon i leveren, og i mindre grad i skjelettmuskelen (Ukropec J et al.

(2003) Lipids 38(10): 1023-9). En fiskeoljerik diett har blitt vist for å øke både aktiviteten og mRNA-nivåene av hepatisk mitokondrien og peroksisomal fettsyrer oksideringsenzymer (Hong DD et al (2003) Biochim Biophys Acta: Mol Cell Biol Lipids 1635 (1): 29-36). Fiskeolje induserte en økning i forekomst av peroksidal acyl-CoA oksidase i lever, men ikke i muskler på rotter, og forfatterne hypotiserer at dette er på grunn av at n-3 fettsyrer beskytter mot fett-indusert insulin resistens ved å fungere som en PPARa-ligand, indusere hepatisk (ikke intramuskulært) peroksisom proliferering. PPARa genekspresjon ble ikke forandret. (Neschen S et al. (2002) Am J Physiol Endocrinol Metab 282:E395-E401).

Som det fremgår av avsnittene ovenfor er de biokjemiske detaljer av hvordan TTA og fiskeoljer og et proteinmateriale påvirker fettmetabolisme ikke kjent i detalj. Effektene kan, eller trenger ikke å være gjennom de samme reaksjonsveier, både TTA og oljer kan for eksempel fungere som PPARa-ligander, eller uavhengig på PPARa. Dersom de fungerer gjennom samme reaksjonsvei vil man ikke forvente at TTA skal potensieres av oljer, på grunn av at TTA er en sterk PPARa- aktivator som man vil anta fullstendig vil mette PPARa- aktiveringen. Å kun oppnå en additiv effekt av TTA- effekten pluss effekten av fermenterte soyaproteinmaterialer og fiskeolje idet man kombinerer disse vil også være uventet. Å oppnå en synergistisk effekt i tillegg til denne additive effekt, slik det fremgår for TTA og fermentert soyaproteinmateriale i alle tester ifølge oppfinnelsen, er enda mer overraskende. B-oksiderbare fettsyreanaloger har mange effekter, og vi kjenner ikke til hvordan disse oppstår, men basert på de uventede resultater ifølge foreliggende oppfinnelse så forventer vi at de alle blir potensiert av proteinmaterialer og valgfritt oljer uten at vi bindes til en bestemt teori.

PPAR- ligander påvirker proliferasjon av forskjelliger cancercellelinjer. TTA har blitt vist å redusere proliferasjon av mange cancercellelinjer (Berger K et al. (2001) Carcinogenesis 22: 1747-1755; Abdi-Dezfuli F et al. (1997) Breast Cancer Res Treat 45: 229-239; Tronstad KJ et al. (2001), Biochem Pharmacol 61:639-649; Tronstad KJ et al. (2001) Lipids 36: 305-313). Denne reduksjon er relatert til reduksjon i triacylglyserolnivåer (Tronstad KJ et al. (2001) Biochem Pharmacol 61: 639-649) og er mediert av både PPAR-avhengig og -uavhengige reaksjonsveier (Berge K et al.

(2001) Carcinogenesis 22:1747-1755). Siden fermentert soyaprotein forbedrer TTAs evne til å senke triacylglyserolnivåer, er det derfor meget sannsynlig at det vil forbedre antiproliferative effekter av TTA også, noe som gjør dette til en forbedring av TTAs cancerhindrende og behandlingsevne. TTA kan anvendes for prevensjon og/eller behandling av cancer, inkluderende inhibering av primære og sekundære neoplasmer, vekst av tumorer, invasjon av en primær tumor i bindevev og dannelse av sekundære tumorer (NO 2002 5930).

Generelt modulerer PPAR-agonister inflammatorisk respons. TTA modulerer inflammatorisk respons ved å redusere frigivelse av inflammatorisk cytokin interleukin-2 og undertrykke PHA-stimulert proliferasjon av perifere mononukleære celler (Aukrust P et al. (2003) Eur J Clin Invest 33(5): 426-33). Moduleringen av cytokin ved hjelp av TTA kan være PPAR- mediert eller gjennom forandrede prostaglandinnivåer eller ved modifisering av lipidmediert signaltransduksjon, hvor den siste også er den foreslåtte mekanisme for virkning av polyumettede fettsyrer, så som de som finnes i oljer. Nå som oppfinnerne har funnet de uventede resultater ifølge foreliggende oppfinnelse, så forventer de nå at proteinmaterialer, og valgfritt også olje, i kombinasjon med ikke- B-oksiderbare fettsyreanaloger vil potensiere effekten av fettsyreanalogene på inflammatoriske forstyrrelser, inkluderende immunmedierte forstyrrelser, så som reumatoid artritt, systemisk vaskulitt, systemisk lupus erytematøs, systemisk sklerose, dermatomyositt, polymyositt, forskjellige autoimmune endokrine forstyrrelser (for eksempel tyrioditt og adrenalititt), forskjellige immunmedierte neurologiske forstyrrelser (for eksempel multippel sklerose og myastenia gravis), forskjellige karidovaskulære forstyrrelser (for eksempel myokarditt, kognitiv hjertesvikt, arteriosklerose og stabil og ustabil angina, og Wegeners granulomatose), inflammatoriske tarmforstyrrelser, Chrons forstyrrelser, ikke- spesifikk kolikk, pankreatitt, nefrititt, kolestatitt/ fibrose i lever, og akutt og kronisk allograft avvisning etter organtransplantasjon, og likeledes proliferative hudforstyrrelser, så som psoriasis, atopisk dermatitt, ikke- spesifikk dermatitt, primær irriterende kontaktdermatitt, allergisk kontaktdermatitt, lamellær ichtyose, epidermolyttisk hyperkeratose, premalign sol-indusert keratose, og seborrea, og sykdommer som har en inflammatorisk komponent så som for eksempel Alzheimers sykdom eller nedsatt/ forbedrbar kognitiv funksjon.

Den foreliggende oppfinnelsen vedrører således et materiale som omfatter

i) et fermentert, hydrolysert, og/eller enkeltcelleorganisme proteinmateriale, og

ii) en ikke-B-oksiderbare fettsyreanalog, hvor nevnte ikke-B-oksiderbare fettsyreanalog har følgende generelle formel (I)

- hvor R-i er et C1-C24 alkyl, alkenyl eller alkynyl, og

- hvor R2 representerer hydrogen eller C1-C4 alkyl, og

- hvor n er et heltall fra 1 til 12, og

- hvor /' er et oddetall og indikerer posisjonen i forhold til COOR2, og

- med den forutsetning at minst en av X, ikke er CH2,

- eller et salt, prodrug eller kompleks derav.

Ytterligere utførelser av materialet beskrives i underkrav 33-50.

Videre vedrører den foreliggende oppfinnelsen anvendelser av materialet for fremstilling av et farmasøytisk eller ernæringsmessig materiale for å hindre og/eller behandle insulin resistens obesitet, diabetes, fettlever, hyperkolesterolemi, dyslepidemi, aterosklerose, koronar hjertesykdom, trombose, stenose, sekundær stenose, myokardisk infarkt, slag, høyt blodtrykk, endotelisk dysfunksjon, prokoagulent tilstand, polysistisk eggstokksyndrom, metabolsk syndrom, cancer, en inflammatorisk forstyrrelse og proliferative hudforstyrrelser.

Ytterligere utførelser av anvendelsene beskrives i underkrav 2, 4, og 6-31.

FIGURER

Figur 1 viser at økning i fettsyre acyl-CoA aktivitet ved TTA potensieres av fermentert soyaproteinmaterialer. Figur 2 viser at den fosfolipidsenkende effekt av TTA potensieres ved fermentert soyaproteinmateriale. Figur 3 viser at den kolesterolsenkende effekt av TTA potensieres av fermentert soyaproteinmaterialer og fiskeolje. Figur 4 viser at den triacylglyserolsenkende effekt av TTA potensieres av fermentert soyaproteinmateriale.

DEFINISJONER ANVENDT I SØKNADEN

Dyr

I denne forbindelse inkluderer termen "dyr" som angitt her "pattedyr" så som mennesker og husdyr (agrikulturelle), spesielt dyr av økonomisk viktighet så som

hønsefugler, bovine, ovine, kaprine og porsine pattedyr, spesielt de som produserer produkter egnet for menneskelig konsumpsjon, så som kjøtt, egg og melk. Videre er termen tenkt å inkludere fisk og skalldyr, så som laks, torsk, tilapia, musling, østers, hummer eller krabber. Termen inkluderer også husdyr, så som hunder og katter.

Behandling

I relasjon til de farmasøytiske applikasjoner av oppfinnelsen angir termen "behandling" reduksjon av alvorligheten av sykdommen.

Prevensjon

Termen "prevensjon" angir prevensjon av en gitt sykdom, det vil si en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse administreres før utvikling av tilstand. Dette betyr at forbindelsen ifølge foreliggende oppfinnelse kan anvendes som et profylaktisk middel eller som en ingrediens i et ernæringsmessig materiale for å hindre risiko eller start av en gitt sykdom.

Fermentering

Dekomponeringen av organiske substanser ved hjelp av mikroorganismer eller enzymer, inkluderende hydrolysering.

Hvdrolvsering

Enzymering eller kjemisk dekomponering hvor komplekse molekyler splittes til mindre enheter med en kjemisk reaksjon med vann.

Olier

Disse inkluderer alle oljer av planter- og marin opprinnelse, inkluderende men ikke begrenset til fett eller fikserte oljer og likeledes essensielle eller flyktige oljer, eller enhver kombinasjon derav. De trenger ikke nødvendigvis være i væskeform.

Fiskeolje

Denne term inkluderer alle oljer av marin opprinnelse.

Enkeltcelle proteinmateriale ( SCP)

SCP er et materiale omfattende enkeltcelle mikroorganismer. Mikroorganismene kan inter alia være fungi, gjær eller bakterier. SCP- materialet inneholder høye andeler proteiner.

Enzymbehandlet fiskeprotein hydrolysat ( FPH)

FPH- materialet er et protein hydrolysat resulterende fra en enzymatisk behandling av et fiskemateriale. FPH- materialet inneholder høye andeler av proteiner og peptider.

Fermentert soyaprotein materiale

Det fermenterte soyaproteinmaterialet er fra en fermentering av soyabønner. Det omfatter modifiserte og ikke- modifiserte soyaproteiner og isoflavoner, og likeledes andre soyabestanddeler.

Ernæringsmessig materiale

Denne term er ment å inkludere ethvert spisbart materiale, inkluderende, men ikke begrenset til ernæringsmessige tilsetningsstoffer, functional food, urtetilsetninger for eksempel for human eller animalsk forhold. Termen inkluderer også næringsprodukter for humant forbruk og dyrefor, hvor materialet ifølge foreliggende oppfinnelse er et tilsetningsstoff, og ikke hovedingrediensen. Dette gjelder spesielt dyrefor, hvor ethvert for kan tilsettes med materialet ifølge oppfinnelsen, for å oppnå de biologiske effekter derav.

Prodrug

Termen "prodrug" benyttes vanligvis innen feltet for å beskrive et medikament som har blitt modifisert slik at det har ingen effekt in vitro, men aktiveres in vivo. Vanligvis er denne modifisering tilsetning av en forbindelse til mormedikamentet, som den naturlige mekanisme i kroppen vil fjerne, og gi den nå aktive (opprinnelige) morforbindelse. Således er termen "prodrug", rent biologisk, identisk i dets effekter til morforbindelsen og inkludering av termen "prodrug" i forbindelsesbeskrivelsen utvider ikke rammen av forbindelsene inkludert i patentet.

ADMINISTRERING AV FORBINDELSENE IFØLGE FORELIGGENDE OPPFINNELSE

Som et farmasøytisk medikament kan materialet ifølge foreliggende oppfinnelse administreres direkte til dyret ved enhver egnet teknikk, inkluderende parenteralt, intranasalt, oralt eller ved absorpsjon gjennom hud/ skinn. De kan administreres lokalt eller systemisk. Den spesifikke administrasjonsrute på hvert middel vil avhenge for eksempel på den medisinske historie til det mottakene dyr eller menneske.

Eksempler på parenteral administrering inkluderer subkutanøs, intramuskulær, intravenøs, intraarteriell og intraperitoneal administrering. Som et generelt forslag kan den totale farmasøytiske effektive mengde av hver av de ikke- B-oksiderbare fettsyreanaloger administrert parenteralt per dosering fortrinnsvis være i området av cirka 1 mg/ kg/ dag til 200 mg/ kg/ dag til pasientens kroppsvekt for mennesker, selv om, som angitt ovenfor, så vil dette underlegges en stor del av terapeutisk distribusjon. En dosering av 5 - 50 mg/ kg/ dag er mest foretrukket. En dosering av 5 - 500 mg/ kg/ dag av fermentert soyaproteinmateriale eller annet proteinmateriale er foretrukket, og en dosering av 50 - 300 mg/ kg/ dag er mest foretrukket. En dosering av 1 - 300 mg/ kg/ dag av fiskeolje eller annen olje er foretrukket, og en dosering av 10-150 mg/ kg/ dag av fiskeolje eller annen olje er mest foretrukket.

Dersom de gis kontinuerlig administreres forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse typisk med 1-4 injeksjoner per dag eller ved kontinuerlig subkutanøs infusjon, foreksempel ved anvendelse av en minipumpe. En intravenøs poseløsning kan også benyttes. Nøkkelfaktoren i å utvelge en egnet dosering er resultatet som skal oppnås, som målt med nedgang i total kroppsvekt eller forhold av fett til kjøttmasse, eller ved andre kriterier for å måle regulering og hindring av obesitet eller for å hindre obesitets- relaterte tilstander, slik det er hensiktsmessig for den praktiserende.

For parenteral administrering, formuleres, i en utførelse, forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse generelt ved å blande hver med den ønskede grad av renhet, i enhets doserings injiserbare former (løsning, suspensjon eller emulsjon), med en farmasøytisk akseptabel bærer, det vil si en som er ikke- toksisk til mottakerne av doseringen og konsentrasjonene som benyttes, og som er kompatibel med andre ingredienser i formuleringen.

Generelt, formuleringene kan fremstilles ved å sette forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse i forbindelse med uniformt og intimt med væskebærer eller finfordelt stoffbærere eller begge deler. Deretter, dersom nødvendig, formes produktet til ønsket formulering. Fortrinnsvis er bæreren en parenteral bærer, mer fortrinnsvis en løsning som er isotonisk med blod til mottakeren. Eksempler på slike bærer vehikler inkluderer vann, saltløsning, Ringers løsning og dekstroseløsning. Ikke- vandige vehikler, så som faste oljer og etyl oleat er også nyttige heri, og likeledes liposomer.

Bæreren kan hensiktsmessig inneholde mindre mengde av tilsetningsstoffer så som substanser som forbedrer isotonisitet og kjemisk stabilitet. Slike materialer er ikke-toksiske for mottakeren av doseringene og konsentrasjonene som benyttes, og inkluderer buffere, så som fosfat, sitrat, sukinat, eddiksyre og andre organiske syrer eller deres salter, antioksidanter så som askorbinsyre, immunoglobuliner, hydrofyliske polymerer, så som polyvinylpyrrolidon; aminosyrer, så som glysin, glutamisk syre, aparaginsyre eller aginin; monosakkarider, disakkarider og andre karbohydrater inkluderende cellulose eller dets derivater, glukose, mannose eller dekstriner; kjelaterende midler så som EDTA; sukkeralkoholer så som mannitol eller sorbitol; motion så som natrium; og/ eller ikke-ioniske surfaktanter så som polysorbater, poloksamere eller PEG.

For orale farmakologiske materialer kan slike bærematerialer som for eksempel vann, gelatin, gummier, laktose, stivelser, magnesium stearat, talk, olje, polyalken glykol, vaselin og lignende anvendes. Slike farmasøytiske materialer kan være i enhets doseringsform og kan ytterligere inneholde andre terapeutisk verdifulle substanser eller konvensjonelle farmasøytiske adjuvanser så som konserveringsmidler, stabiliserende midler, emulsifiserende midler, buffere og lignende. De farmasøytiske preparater kan være i konvensjonelle væskeformer, så som tabletter, kapsler, drageer, ampuller og lignende, i konvensjonelle doseringsformer så som ampuller og stikkpiller og lignende.

I tillegg kan forbindelsen ifølge foreliggende oppfinnelse, det vil si de ikke- B-oksiderbare fettsyreanaloger og proteinmaterialer, anvendes i ernæringsmessige preparater, som definert tidligere, i hvert tilfelle doseringsformen av ikke- B-oksiderbar fettsyreanalog fortrinnsvis er som beskrevet for farmasøytika eller mindre, idet mengden av proteinmateriale og olje fortrinnsvis er egnet for fremstilling av mat og formaterialer. Som en del av et ernæringsmessig materiale, og spesielt dyrefor, kan olje- og proteinmateriale være en vesentlig del av foret, og således ha en ernæringsverdi og likeledes for å potensiere effekten av ikke- B-oksiderbare fettsyreanaloger. Fiskeolje kan omfatte opptil alt av fettet i en ernæringssammenblanding, og fermentert soyaproteinmateriale kan omfatte opptil alt av proteinet i en ernæringssammenblanding. I dyrefor, kan mengden av ikke- B-oksiderbare fettsyreanalog være opptil 10 ganger relatert til produkter for human konsumpsjon, det vil si opptil 10 g/ kg/ dag av dyrets kroppsvekt.

De eksperimentelle resultater gitt nedenfor har vist at proteinmaterialet og/ eller olje i vesentlig grad potensierer de biologiske effekter av ikke- B-oksiderbare fettsyreanaloger.

En foretrukket utførelse av foreliggende oppfinnelse vedrører således et materiale omfattende i) et proteinmateriale og ii) en ikke- B-oksiderbar fettsyreanalog.

Den ikke- B-oksiderbare fettsyreanalog har den følgende generelle formel (I):

- hvor Ri er et C1-C24 alkyl, alken eller alkyn, og

- hvor R2 representerer hydrogen eller C1-C4 alkyl, og

- hvor n er et heltall fra 1 til 12, og

- hvor /' er et oddetall og indikerer posisjonen i forhold til COOR2, og

- med den forutsetning at minst en av X, ikke er CH2,

- eller et salt, prodrug eller kompleks derav.

For å blokkere co- oksidasjon ved innsetting av et substitutt i Ri, kan alkyl være en C1-C24 alkyl substituert i en eller flere posisjoner med en eller flere forbindelser valgt fra gruppen omfattende fluorid, klorid, hydroksy, C1-C4 alkoksy, C1-C4 alkyltio, C2-C5 acyloksy eller C1-C4 alkyl.

De ikke- B-oksiderbare fettsyreanaloger bør fortrinnsvis være like i lengde til fettsyrene de er analoge av, og derfor er det totale antall karbonatomer i fettsyre backbone fortrinnsvis mellom 8 og 30 mer fortrinnsvis mellom 12 og 26. Foretrukne utførelser av ikke- B-oksiderbare er tetradesyltioeddiksyre og tetradesylseleneddiksyre og 3-Tia-15-heptadesyn.

Oppfinnelsen kan anvendes som et farmasøytisk materiale og/ eller ernæringsmateriale for hindring og/ eller behandling av insulin resistens, obesitet, diabetes, fettlever, hyperkolesterolemi, dyslepidemi, aterosklerose, koronar hjertesykdom, trombose, stenose, sekundær stenose, myokardisk infarkt, slag, forhøyet blodtrykk, endotelisk dysfunksjon, prokoagulent tilstand, polysistisk eggstokksyndrom, metabolsk syndrom og cancer.

Videre, oppfinnelsen kan anvendes for fremstilling av et farmasøytisk eller ernæringsmessig materiale for hindring og/ eller behandling av en inflammatorisk forstyrrelse.

Videre, oppfinnelsen kan anvendes for fremstilling av et farmasøytisk eller ernæringsmessig materiale for hindring og/ eller behandling av en proliferativ hudforstyrrelse.

EKSPERIMENTELL SELEKSJON

Eksempel 1

Toksisitetsforsøk for TTA

En 28 dagers toksisitetsforsøk i hunder i samsvar med GLP guidelines har blitt utført ved (Corning Hazleton (Europe), England). Oral administrering av TTA i doseringsnivåer opptil 500 mg/ kg/ dag ble generelt godt tolerert. Noen lipidrelaterte parametere ble senket i dyrene som blir gitt høye doseringer. Dette er i samsvar med den farmakologiske aktivitet for TTA.

Doseringsnivået for 500 mg/ kg/ dag ga også tap av kroppsvekt. Der var ingen bevis på toksisitet i doseringsnivået på 50 eller 500 mg/ dag/ kg.

Tester for mutagenisk aktivitet har blitt utført ved (Covance Laboratories Limited, England). Det ble konkludert at TTA og TSA ikke induserte mutasjoner i stammer av Salmonella thyphimuhum og Escherichia coli. Videre var TTA ikke mutagenisk idet de ble testet i muselymfoma celler og L5178Y.

Konsentrasjonen av forbindelsene testet i S. typhimurium og E. coli 3-1000 mg/ plate/ (TTA) 2-5000 mg/ plate (TSA). I muselymfoma celler, L5178Y, var konsentrasjonen 2,5-50 mg/ ml.

TTA og TSA ble funnet å ikke være mutagenisk i disse tester. TSA og TTA har blitt testet for kromosomale avvik i dyrkede Chinese hamster eggstokkceller og ingen abberasjon ble indusert med doseringene som ble testet (12-140 mg/ ml).

Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er derfor potensielt nyttige for farmakologiske forbindelser i denne sammenheng.

Eksempel 2

Fremstilling og karakterisering av ikke- B- oksiderbare fettsyreanaloger:

A) Syntese av 3- substituerte fettsyreanaloger:

Forbindelsene anvendt i samsvar med foreliggende oppfinnelse hvor substituenten X, = 3 er et svovelatom eller selenatom kan fremstilles i samsvar med generelle prosedyre:

X er et svovelatom:

Den tio-substituerte forbindelse anvendt i samsvar med foreliggende oppfinnelse kan fremstilles ved den generelle prosedyre angitt nedenfor:

Svovelforbindelsen, nemlig tetradesyltioeddiksyre (TTA), (CH3-(CH2)i3-S-CH2-COOH ble fremstilt som vist i EP-345.038.

X er selenatom:

Den selen-substituerte forbindelse anvendt i samsvar med foreliggende oppfinnelse kan fremstilles med følgende generelle prosedyre

Forbindelsen ble renset med forsiktig krystallisering fra etanol eller metanol.

Den finale forbindelse, for eksempel idet alkyl er tetradesyl, (CH3-(CH2)i3-Se-CH2-COOH (tetradesylseleneddiksyre (TSA)) kan renses med krystallisering fra dietyl, eter og heksan. B) Syntese av ikke- B-oksiderbar fettsyreanalog omfattende karbon-karbon trippel binding: Syntese av en forbindelse i samsvar med foreliggende oppfinnelse er representativt beskrevet med henvisning til syntese av 3-tia-15-heptadekyn: KOH (2,76 g, 49,0 mmol) var oppløst i metanol (30 ml), og tioglykolisk syre (2,04g, 22,1 mmol) i metanol (25 ml) ble tilsatt dråpe for dråpe. Etter 10 minutter ble 14-brom-2-tetradesyn (5,5 g, 20,1 mmol) forsiktig tilsatt dråpe for dråpe, og blandingen ble oppvarmet til 50 °C natten over. Blandingen ble avkjølt til 0 °C, og 30 ml HCI ble tilsatt (pH = 1). Presipetatet ble filtrert og vasket med vann (2x). Faststoffmaterialet ble oppløst i kloroform (100 ml) og vasket med vann (1x), tørket (MgS04) og løsemiddelet ble evaporert av. Utbyttet av forbindelsen 14-brom-2-tetradesyn var 4,4 9 (77 %).

Syntese av ovenfor nevnte ikke- B-oksiderbare fettsyreanaloger ble gitt som eksempler, og ikke for å illustrere syntese av alle forbindelser av formel (I). Andre forbindelser i samsvar med foreliggende oppfinnelse kan syntesefiseres som angitt i søkers patentsøknader PCT/NO99/00135 og NO 20001123.

Eksempel 3

Fremstilling av fiskeproteinhvdrolvsat ( FPH)

FPH ble produsert fra fiskeavskjær av lakseben etter filetering. Avskjæret uten hoder fra ferskt filetert atlantisk laks (Salmon Salar, L.) ble tatt direkte fra produksjonslinjen og frosset til -20 ± 2 °C. Innen en uke ble det frosne avskjær anvendt i den enzymatiske hydrolyseprosess.

Den enzymatiske hydrolyse ble utført med Protamex™ ved en pH på cirka 6,5 og ved en temperatur på 55 ± 2 °C. Protamex™ (E.C. 3.4.21.62/3.4.24.28) er et Bacillus protease kompleks fra Novozymes AS (Bagsvaerd, Danmark) og tilfredsstiller renhetskravene for næringsgraderte enzymer. Forhold mellom lakseavskjær og vann var 1,14. Et enzym til substratforhold på 11,1 AU/ kg råprotein ble anvendt i hydrolysen. Etter 60 minutters enzymatisk behandling var temperaturen forhøyet til 98 °C, som ble nådd etter 105 min.

Store ben ble tilbakeholdt i hydrolysetanken, mens små ben ble fjernet ved filtrering av hydrolysatet gjennom en sikt. Deretter ble den uløselige fraksjon fjernet i en tofaseseparator (Westfalia, Tyskland, SC.35-26-177, 15 kW, 7200 rpm), før den resterende blanding ble separert i en trefaseseparator (Westfalia, Tyskland, SB-7-36-+76, 4 kW, 8520 rpm) til lakseolje, emulsifiseringsfraksjon og vandig fraksjon. Den vandige fraksjonen ble konsentrert (NitroAtomicer, Danmark, Falling Film Evaporator, Ff 100), filtrert gjennom en ultramembran med nominell molekylvektgrense på 100 000 (PCI membransystemer, UK, PF100, 2,65 m<2>) og til slutt ble den ultramembranfiltrerte fraksjon (UF fraksjon) spraytørket (Niro Atomizer, Danmark, P-63 tower, Tin = 200 °C, Tout = 84 °C).

UF-fraksjonen benevnes fiskeprotein hydrolysat (FPH). FPH- materialet inneholder cirka 83 % protein, 10 % aske og cirka 2 % lipider, basert på tørrvekt. Ytterligere karakterisering av FPH kan finnes i søkers tidligere søknad NO 2003 3078. Syntese av FPH ble gitt som et eksempel, ikke for å illustrere syntese av alle proteinmaterialer eller fiskeprotein hydrolysater ifølge formel (I).

Eksempel 4

Fremstilling av enkeltcelle protein ( SCP) materiale

En mikrobiologisk kultur omfattende Methylococcus capsulaltus (Batn), Ralstonia sp., Brevibacillus agri og Aneurinibacillus sp, alle kommersielt tilgjengelige fra Norferm Danmark AS, Odense, Danmark produseres i en fermentor av sløyfetypen ved kontinuerlig aerob fermentering av naturgass i et ammoniakk/ mineralsalt medium (AMS) ved 45 °C, pH 6,5, og med en fortynningsrate på 0,15 h"<1>. AMS-mediumet inneholder de følgende per liter: 10 mg NH3, 75 mg H3PO4.2H2O, 380 mg MgS04.7H20, 100 mg CaCI2.2H20, 200 mg K2S04, 75 mg FeS04.7H20, 1,0 mg CuS04.5H20, 0,96 mg ZnS04.7H20, 120 ug CoCI2.6H20, 48 ug MnCI2.4H20, 36 ug H3BO3, 24 ug NiCI2.6H20 og 1,20 |jg NaMo04.2H20.

Fermentoren fylles med vann som har blitt varmesterilisert ved 125 °C i 10 sekunder. Tilsetning av forskjellige næringsstoffer reguleres i samsvar med deres forbruk. Kontinuerlig fermentering opereres med 2-3 % biomasse (på en tørr vekt basis).

Et enkeltcelle materiale høstes kontinuerlig og underlegges sentrifugering i en industriell kontinuerlig sentrifuge ved 3000 rpm, etterfulgt av ultrafiltrering ved anvendelse av membraner som har en eksklusjonsstørrelse på 100 000 Daltons. Det resulterende produkt underlegges deretter sterilisering i en varmeutveksler ved cirka 130 °C i cirka 90 sekunder.

Ytterligere karakterisering av SSP kan finnes i søkers tidligere søknad NO 2003 3082. Syntese av SSP ble gitt som et eksempel, ikke for å illustrere syntese av alle proteinmaterialer eller enkeltcelle proteinmaterialer ifølge formelen (I).

Eksempel 5

Fermentert soyaproteinmateriale

Det fermenterte soyaproteinmateriale er resultatet fra en fermentering av soya-bønner. Det omfatter modifiserte og ikke-modifiserte soyaproteiner og isoflavoner, og likeledes andre soyabestanddeler. En foretrukket utførelse av oppfinnelsen anvender det fermenterte soyaproteinmaterialet Gendaxin® kommersielt tilgjengelig på Aximed Bergen, Norge. Gendaxin® er et eksempel, ikke for å illustrere alle proteinmaterialer eller fermenterte soyaproteinmaterialer ifølge formelen (I).

Eksempel 6

Biologiske effekter av materialene ifølge oppfinnelsen

Kjemikalier

Kjemikaliene var tilgjengelige fra vanlige kommersielle kilder og var av reagent gradering. Karboksymetylcellulose (CMC) ble anvendt som en kontroll (negativ). Fiskeoljen var kommersiell tilgjengelig fra Hordafor.

Dyr

Hankjønn Wistar rotter, veiende fra 250 til 358 gram, ble innkjøpt fra AnLab Ltd.

(Prahg, Tsjekkia) og ble holdt i trådbur med en temperatur på 22 ± 1 °C og lysregulert (lys fra 7 am til 7 pm). Der var ingen restriksjoner på ernærings- og vanninntak. Tre rotter ble holdt i hvert bur. Økning i vekt og næringsinntak ble monitorert daglig.

Dietter

Rottene ble foret en standard Chow ST1 diett (fra [Velaz, Prahg, Tsjekkia]).

Behandlinger

Hankjønn Wistar rotter fikk akklimatisere seg til de nye omgivelsene før initiering av eksperimentet. De ble deretter behandlet daglig i 10 dager med gavage. CMC ble anvendt som en bærer og negativ kontroll. Hver behandlingsgruppe talte 4 rotter. Gruppene som ble behandlet med TTA ble gitt 150 mg/ kg kroppsvekt/ dag oppløst i CMC eller oljer. Gruppene som ble behandlet med fiskeolje ble gitt 3 ml (cirka 2,5 kg)/ kg kroppsvekt/ dag. Gruppene som ble behandlet med fermentert soyaproteinmateriale ble gitt 0,45 g/ kg kroppsvekt/ dag. CMC ble anvendt som en bærer og negativ kontroll. Dagen etter siste behandling ble rottene ofret.

Ofring oo opptak av vev

Rottene ble anastatisert med 1:1 blanding av Hypnorm™ (fentanyl sitrat 0,315 mg/ ml og fluanison 10 mg/ ml, Janssen Animal Health) og Dormicum<®> (midasolam 5 mg/ ml, F. Hoffmann-La Roche) injisert subkutanøst. Blod ble trukket direkte fra hjertet ved anvendelse av en heparin-skylt sprøyte. Lever ble umiddelbart fjernet, veid og delt i to deler, som deretter umiddelbart ble avkjølt på is eller frosset i væskeformig nitrogen, respektivt. Plasma og vev ble lagret ved - 80 °C inntil analyse. Protokollen var godkjent av [Norwegian State Board of Biological Experiments with Living Animals].

Fremstilling av hepatiske subcellulære fraksjoner

Lever fra rottene ble homogenisert individuelt i iskald sukroseløsning (0,25 mol/ L sukrose i 10 mmol/L HEPES buffer pH 7,4 og 1 mmol/ L EDTA) ved anvendelse av en homogeniserer av typen Potter-Elvehjem. Subcellulær fraksjonering av leverne ble utført som tidligere beskrevet (Berge RK et al. (1984) Eur J Biochem 141: 637-44). Prosedyren ble utført ved 0-4 °C, og fraksjonene ble lagret ved -80 °C. Protein ble analysert med BioRad protein analyse kit ved anvendelse av bovin serum albumin som standard.

Enzym analyse

Fettacyl-CoA oksidase aktivitet ble målt i peroksimale leverfraksjon som tidligere beskrevet (Small GM, Burdett K, Connock MJ (1985) Biochem J 227:205-10). Resultatene ble gitt som fettacyl- CoA oksidase aktivitet per total protein, baselinje-aktivitet (aktivitet av kontroll) ble subtrahert, og dataene som er presentert i figur 1 ble normalisert til aktiviteten av TTA.

Lipidanalvse

Plasma og leverlipider ble målt enzymatisk på Technocon Axon system (Miles, Tarrytown, NY) ved anvendelse av triglyserid kit fra Bayer, Total kolesterol (Bayer, Tarrytown, NY), og PAP150 kit for kolin- inneholdende fosfolipider fra bioMerieux. Resultatene ble gitt per total protein, og data som er presentert i figurene 2-4 ble normalisert til aktiviteten av den positive kontroll (intet tilsatt TTA eller oljer; det vil si "normale" nivåer). Resultatene ble gitt per total protein, og dataene som er presentert i figurer 2-4 var normalisert til aktiviteten av den positive kontroll (intet tilsatt TTA eller oljer; det vil si "normale" nivåer).

Claims

1. Anvendelse av et preparat omfattende en kombinasjon av i) et fermentert, hydrolysert, og/eller enkeltcelleorganisme proteinmateriale, og ii) en ikke-B-oksiderbar fettsyreanalog, hvor nevnte ikke-B-oksiderbare fettsyreanalog har følgende generelle formel (I): - hvor Ri er et C1-C24 alkyl, alkenyl eller alkynyl, og - hvor R2 representerer hydrogen eller C1-C4 alkyl, og - hvor n er et heltall fra 1 til 12, og - hvor / er et oddetall og indikerer posisjonen i forhold til COOR2, og - hvor X, uavhengig av hverandre er valgt fra gruppen omfattende O, S, SO, S02, Se og CH2, og - med den forutsetning at minst en av X, ikke er Chfe, - eller et salt, prodrug eller kompleks derav, for fremstilling av et farmasøytisk eller ernæringsmessig materiale for å hindre og/eller behandle insulin resistens obesitet, diabetes, fettlever, hyperkolesterolemi, dyslepidemi, aterosklerose, koronar hjertesykdom, trombose, stenose, sekundær stenose, myokardisk infarkt, slag, høyt blodtrykk, endotelisk dysfunksjon, prokoagulent tilstand, polysistisk eggstokksyndrom, metabolsk syndrom og cancer.

2 Anvendelse i samsvar med krav 1, hvor nevnte hindring og/eller behandling av cancer inkluderer inhibering av primære og sekundære neoplasmer, vekst av tumorer, invasjon av en primær tumor inn i bindevev for dannelse av sekundære tumorer.

3. Anvendelse av et preparat omfattende en kombinasjon av i) et fermentert, hydrolysert, og/eller enkeltcelleorganisme proteinmateriale, og ii) en ikke-B-oksiderbar fettsyreanalog, hvor nevnte ikke-B-oksiderbare fettsyreanalog har følgende generelle formel (I): - hvor Ri er et Ci-C24 alkyl, alkenyl eller alkynyl, og - hvor R2 representerer hydrogen eller C1-C4 alkyl, og - hvor n er et heltall fra 1 til 12, og - hvor / er et oddetall og indikerer posisjonen i forhold til COOR2, og - hvor X, uavhengig av hverandre er valgt fra gruppen omfattende O, S, SO, S02, Se og CH2, og - med den forutsetning at minst en av X, ikke er CH2, - eller et salt, prodrug eller kompleks derav, for fremstilling av et farmasøytisk eller ernæringsmessig materiale for hindring og/eller behandling av en inflammatorisk forstyrrelse.

4. Anvendelse i samsvar med krav 3, hvor den inflammatoriske forstyrrelse er valgt blant gruppen omfattende immunmedierte forstyrrelser så som reumatoid artritt, systemisk vaskulitt, systemisk lupus erytematose, systemisk sklerose, dermatomyositt, polymyositt, forskjellige autoimmune endokrine forstyrrelser (for eksempel tyrioditt og adrenalinitt), forskjellige immunmedierte neurologiske forstyrrelser (for eksempel multippel sklerose og myastenia gravis), forskjellige karidovaskulære forstyrrelser (for eksempel myokardititt, kognitiv hjertesvikt, arteriosklerose og stabil og ustabil angina, og Wegeners granulomatose), inflammatoriske tarmforstyrrelser, Chrons forstyrrelser, ikke- spesifikk kolikk, pankreatitt, nepfrititt, kolestatitt/ fibrose i lever, og akutt og kronisk allograft-avvisning etter organtransplantasjon, og sykdommer som har en inflammatorisk komponent så som for eksempel Alzheimers sykdom eller nedsatt/ forbedrbar kognitiv funksjon.

5. Anvendelse av et preparat omfattende en kombinasjon av i) et fermentert, hydrolysert, og/eller enkeltcelleorganisme proteinmateriale, og ii) en ikke-B-oksiderbar fettsyreanalog, hvor nevnte ikke-B-oksiderbare fettsyreanalog har følgende generelle formel (I): hvor Ri er et Ci-C24 alkyl, alkenyl eller alkynyl, og - hvor R2 representerer hydrogen eller C1-C4 alkyl, og - hvor n er et heltall fra 1 til 12, og - hvor /' er et oddetall og indikerer posisjonen i forhold til COOR2, og - hvor X, uavhengig av hverandre er valgt fra gruppen omfattende 0, S, SO, S02, Se og CH2, og - med den forutsetning at minst en av X, ikke er CH2, - eller et salt, prodrug eller kompleks derav, for fremstilling av et farmasøytisk eller ernæringsmessig materiale for hindring og/eller behandling av proliferative hudforstyrrelser.

6. Anvendelse i samsvar med krav 5, hvor nevnte proliferative hudforstyrrelse er valgt blant gruppen omfattende psoriasis, atopisk dermatitt, ikke- spesifikk dermatitt, primær irriterende kontakt-dermatitt, allergisk kontakt-dermatitt, lamellær ichtyose, epidermolyttisk hyperkeratose, premalign sol-induserte keratoser og seborrea.

7. Anvendelse i samsvar med et av kravene 1-6, hvor nevnte alkyl er en C1-C24 alkyl, eller en C1-C24 alkyl substituert i en eller flere posisjoner med en eller flere forbindelser valgt blant gruppen omfattende fluorid, klorid, hydroksy, C1-C4 alkoksy, Cr C4 alkyltio, C2-C5 acyloksy eller C1-C4 alkyl.

8. Anvendelse i samsvar med et av kravene 1-7, hvor Ri er C2-C24 alkenyl som i tillegg til en eller flere dobbelt bindinger omfatter en eller flere trippelbindinger.

9. Anvendelse i samsvar med et av kravene 1-8, hvor Ri er C1-C24 alkynyl.

10. Anvendelse i samsvar med krav 9, hvor nevnte alkynyl omfatter en karbon-karbon trippelbinding posisjonert mellom (co-1) karbon og (qj-2) karbon, eller mellom (co-2) og (u)-3) karbon, eller (w-3) karbon og (co-4) karbon.

11. Anvendelse i samsvar med krav 1-6, hvor forbindelsen er tetradesyltioeddiksyre.

12. Anvendelse i samsvar med krav 1-6, hvor forbindelsen er tetradesylseleneddiksyre.

13. Anvendelse i samsvar med et av kravene 1-6, hvor forbindelsen er 3-tia-15-heptadekyn.

14. Anvendelse i samsvar med et av kravene 1-13, hvor nevnte proteinmateriale er fermentert.

15. Anvendelse i samsvar med et av kravene 1-13, hvor nevnte proteinmateriale er et enkeltcelle proteinmateriale (SCP).

16. Anvendelse i samsvar med et av kravene 1-13, hvor nevnte proteinmateriale er et fiskeprotein hydrolysat.

17. Anvendelse i samsvar med et av kravene 1-13, hvor nevnte proteinmateriale er soyaprotein.

18. Anvendelse i samsvar med et av kravene 13-15, hvor nevnte proteinmateriale er et fermentert soyaproteinmateriale.

19. Anvendelse i samsvar med krav 18, hvor nevnte soyaproteinmateriale er et protein- og isoflavonmateriale fremstilt av soya

20. Anvendelse i samsvar med et av kravene 1-14, hvor materialet ytterligere omfatter en planteolje og/eller fiskeolje.

21. Anvendelse i samsvar med krav 20 hvor planteoljen eller fiskeoljen omfatter polyumettede fettsyrer.

22. Anvendelse i samsvar med et av kravene 1-21, hvor nevnte materiale administreres eller mates til et dyr.

23. Anvendelse i samsvar med krav 22, hvor nevnte dyr er et menneske.

24. Anvendelse i samsvar med krav 22, hvor nevnte dyr er et husdyr så som hønsefugler, bovine, ovine, kaprine eller porsine pattedyr.

25. Anvendelse i samsvar med krav 22, hvor nevnte dyr er et husdyr eller kjæledyr, så som hunn eller katt.

26. Anvendelse i samsvar med krav 22, hvor nevnte dyr er en fisk eller skalldyr, så som laks, torsk, tilapia, musling, østers, hummer eller krabber.

27. Anvendelse i samsvar med et av kravene 1-26, hvor nevnte ikke-B-oksiderbare fettsyreanalog har et totalt antall karbonatomer i fettsyre backbone mellom 8 og 30.

28. Anvendelse i samsvar med krav 27, hvor det totale antall karbonatomer i fettsyre backbone er mellom 12 og 26.

29. Anvendelse i samsvar med krav 1-6, hvor den ikke-B-oksiderbare fettsyreanalog omfatter en daglig dosering av 1 - 200 mg/ kg, fortrinnsvis 5-50 mg/ kg for human konsumpsjon, og cirka 1 - 2000 mg/ kg, fortrinnsvis 5 - 500 mg/ kg for animalsk konsumpsjon.

30. Anvendelse i samsvar med krav 1-6, hvor proteinmaterialet omfatter en daglig dosering av cirka 5 - 500 mg/ kg, fortrinnsvis 5 - 300 mg/ kg for humant forbruk, og fra 5 mg/ kg opptil total daglig proteinforbruk for animalsk forbruk.

31. Anvendelse i samsvar med krav 20, hvor oljen omfatter en daglig dosering av cirka 1 - 300 mg/ kg, fortrinnsvis 10-150 mg/ kg for human konsumpsjon, og fra 1 mg/ kg opptil total daglig fettkonsumpsjon for animalsk konsumpsjon.

32. Materiale, karakterisert ved at nevnte materialer omfatter i) et fermentert, hydrolysert, og/eller enkeltcelleorganisme proteinmateriale, og ii) en ikke-B-oksiderbare fettsyreanalog, hvor nevnte ikke-B-oksiderbare fettsyreanalog har følgende generelle formel (I) - hvor Ri er et C1-C24 alkyl, alkenyl eller alkynyl, og - hvor R2 representerer hydrogen eller C1-C4 alkyl, og - hvor n er et heltall fra 1 til 12, og - hvor / er et oddetall og indikerer posisjonen i forhold til COOR2, og - hvor X, uavhengig av hverandre er valgt fra gruppen omfattende O, S, SO, S02, Se og CH2, og - med den forutsetning at minst en av X, ikke er CH2, - eller et salt, prodrug eller kompleks derav.

33. Materiale i samsvar med krav 32, karakterisert ved at nevnte alkyl er en C1-C24 alkyl, eller en C1-C24 alkyl substituert i en eller flere posisjoner med en eller flere forbindelser valgt blant gruppen omfattende fluorid, klorid, hydroksy, C1-C4 alkoksy, Ci-C4 alkyltio, C2-C5 acyloksy eller C1-C4 alkyl.

34. Materiale i samsvar med krav 32, karakterisert ved at Ri er C2-C24 alken som i tillegg til en eller flere dobbelt bindinger omfatter en eller flere trippelbindinger.

35. Materiale i samsvar med krav 32, karakterisert ved at hvor Ri er C1-C24 alkyn.

36. Materiale i samsvar med krav 32, karakterisert ved at nevnte alkyn omfatter en karbon-karbon trippelbinding posisjonert mellom (u)-1) karbonet og (co-2) karbonet, eller mellom (w-2) karbonet og (co-3) karbonet, eller mellom (co-3) karbonet og (w-4) karbonet.

37. Materiale i samsvar med krav 32, karakterisert ved at forbindelsen er tetradesyltioeddiksyre.

38. Materiale i samsvar med krav 32, karakterisert ved at forbindelsen er tetradesylseleneddiksyre.

39. Materiale i samsvar med krav 32, karakterisert ved at forbindelsen er 3-tia-15-heptadekyn.

40. Materiale i samsvar med krav 32, karakterisert ved at nevnte proteinmateriale er fermentert.

41. Materiale i samsvar med krav 32, karakterisert ved at nevnte proteinmateriale er et enkeltcelle proteinmateriale (SCP).

42. Materiale i samsvar med krav 32, karakterisert ved at nevnte proteinmateriale er et fiskeprotein hydrolysat.

43. Materiale i samsvar med krav 32, karakterisert ved at nevnte proteinmateriale er soyaprotein.

44. Materiale i samsvar med krav 43, karakterisert ved at nevnte proteinmateriale er et fermentert soyaproteinmateriale.

45. Materiale i samsvar med krav 43, karakterisert ved at nevnte fermenterte proteinmateriale er et protein- og isoflavonmateriale fremstilt av soya.

46. Materiale i samsvar med krav 32, karakterisert ved at nevnte ikke-B-oksiderbare fettsyreanalog har et totalt antall karbonatomer i fettsyre backbone på mellom 8 og 30.

47. Materiale i samsvar med krav 32, karakterisert ved at totalt antall karbonatomer i fettsyre backbone er mellom 12 og 26.

48. Materiale i samsvar med krav 32, karakterisert ved at materialer ytterligere omfatter en planteolje og/ eller fiskeolje.

49. Materiale i samsvar med krav 48, karakterisert ved at planteoljen eller fiskeoljen omfatter polyumettede fettsyrer.

50. Materiale i samsvar med krav 48, karakterisert ved at planteoljen er valgt blant gruppen omfattende solsikkeolje, soyaolje og olivenolje.