ES2641528T3 - Masa celular capaz de servir como estructura de tipo órgano primitivo compuesta por una diversidad de tipos de células de origen somático - Google Patents

Masa celular capaz de servir como estructura de tipo órgano primitivo compuesta por una diversidad de tipos de células de origen somático Download PDF

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Description

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células somáticas está limitada a un tipo muy raro de células que contienen células madre mesenquimales de médula ósea, puede decirse que las células de la papila capilar son células que tienen un alto grado de propiedades similares a las células madre, a pesar de que son células somáticas. En el experimento de RT-PCR de la FIG. 7, la RT-PCR se lleva a cabo usando cantidades iguales de ARN entero para las plantillas. La razón para que la expresión parezca disminuir en presencia de BIO es debida a una disminución relativa del número de células de la papila capilar entre el número total de células, como puede observarse en la FIG. 1 y en la FIG. 2. En conclusión, incluso cuando se consideran las variaciones en las cantidades expresadas, la presencia continuada de células que expresan el gen TWIST-1 sugiere que las células de la papila capilar que pueden tener capacidades similares a las células madre siguen estando presentes en este sistema experimental.
El gen del versicano es un marcador del crecimiento del cabello que se sabe que se expresa intensamente en células de la papila capilar durante la inducción del crecimiento del pelo (Kishimoto, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. EE.UU. (1999), p. 7.336 a 7.341). En el experimento de RT-PCR de la FIG. 7, la razón de que la expresión que aparece disminuya en presencia de BIO estriba en una disminución relativa del número de células de la papila capilar entre el número total de células, como puede observarse en la FIG. 1 y la FIG. 2. En conclusión, incluso cuando se consideran variaciones en las cantidades expresadas, la presencia continuada de células que expresan el gen de Versicano sugiere que las células de la papila capilar capaces de inducir el crecimiento del cabello siguen estando presentes en este sistema experimental.
Basándose en los cambios en los niveles de expresión de cada gen, la indiferenciación de las células epiteliales y mesenquimales se mantiene debido a los efectos directos de BIO dentro de la masa celular, y se puede decir que ha ocurrido una acción que imita la acción epitelial-mesenquimal inducida por la señalización de Wnt. Además, puesto que se observa la aparición de propiedades similares a las células madre no relacionadas con la señalización de Wnt como con STAT-3, el efecto de BIO contribuye a la creación de una masa celular que tiene la interacción celular autonómica y la capacidad de proliferar.
RT-PCR de Wnt3A.
Se prepararon células de la papila capilar a P3 (indicando P1 una ronda de subcultivo) en presencia de carga de BIO, mientras que los queratinocitos se prepararon hasta P3 inclusive.
Cada una de las células se diluyó con cada uno de los medios después del tratamiento con tripsina para obtener 3 x 103 células.
Se disolvió BIO (Calbiochem) a 10 mM con dimetilsulfóxido (DMSO) y se añadió a una concentración de 0,1 a 5 μM.
Se dispensaron 25 a 35 μl de cada medio de cultivo en el interior de la tapa superior de una placa de cultivo cuadrada que medía 10 cm de lado y se mezclaron para preparar gotículas en forma de cúpula de un tamaño adecuado.
Después de cerrar la tapa con cuidado, las células se cultivaron a 37 °C en una atmósfera con 95 % de CO2 asegurándose de que no gotease el medio de cultivo.
Tres días más tarde, el medio fue reemplazado con el mismo medio que se utilizó anteriormente. Las muestras se recogieron en el día 7º y se sometieron a análisis de RT-PCR (2) como se describe más adelante ("0 días" en la FIG. 8). El medio usado para las mismas células restantes fue reemplazado con medio bajo condiciones de ausencia de BIO para inducir la diferenciación, después de lo cual las muestras recogidas en el 3º día se sometieron a análisis de RT-PCR (2) como se describe a continuación ("3 días" en la FIG. 8).
Análisis de RT-PCR (2)
Se extrajo ARN de las muestras usando Trizol (Invitrogen). Un equivalente de 200 ng de cada ARN fue sometido a transcripción inversa a ADNc con un sistema de reacción que consiste en 50 μl de RevTraACE (Toyobo). Se aplicó 1 μl de las muestras resultantes a una reacción de PCR en un sistema de 50 μl usando los cebadores enumerados más adelante. Se utilizó KOD-DASH (Toyobo) para la enzima, y el protocolo de reacción consistió en 2 minutos a 94 °C, 32 ciclos de 30 segundos a 94 °C, 10 segundos a 63 °C y 30 segundos a 72 °C, seguido por 2 minutos a 72 °C.
Cebador Sentido (cadena directa):
caggaactacgtggagatcatg (SEC ID NO. 13)
Cebador Antisentido (cadena inversa):
ccatcccaccaaaactcgatgtc (SEC ID NO. 14)
Se sometieron a electroforesis 10 μl de la solución de reacción a 100 V en gel de agarosa al 2% (CosmoBio)/tampón TAE. Se detectaron bandas diana después de la visualización con bromuro de etidio.
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Los resultados se muestran en la FIG. 8. La flecha en el dibujo indica una banda de Wnt3A. La propia expresión de Wnt3A es rara, se expresa principalmente por células epiteliales, y se sabe que es un gen implicado en la organogénesis y la interacción de células epiteliales-células mesenquimales. Como se muestra en el dibujo, al contrario que con la expresión de Wnt3A que no se observa en absoluto en células en las que se activó la señalización de Wnt cultivando en presencia de BIO, se observó la expresión de Wnt3A en células en las que la diferenciación celular fue inducida subsiguientemente mediante la eliminación de BIO. En consecuencia, en este sistema experimental, se determinó claramente que la diferenciación de queratinocitos y, lo que es más, la organogénesis autónoma son inducidas por el cultivo en presencia de BIO seguido de cultivo después de la eliminación de BIO.
RT-PCR de Wnt10B
Se prepararon células de la papila capilar a P3 (indicando P1 una ronda de subcultivo) en ausencia de carga de BIO, mientras que las células de la vaina externa de la raíz se prepararon hasta P3 inclusive.
Cada una de las células se diluyó con cada medio después del tratamiento con tripsina con el fin de obtener 3 x 103 células.
Se disolvió BIO (Calbiochem) a 10 mM con dimetilsulfóxido (DMSO) y se añadió a una concentración de 0,1 a 5 μM.
Se dispensaron 25 a 35 μl de cada medio de cultivo en el interior de la tapa superior de una placa de cultivo cuadrada que medía 10 cm de lado y se mezclaron para preparar gotículas en forma de cúpula de un tamaño adecuado.
Después de cerrar la tapa con cuidado, las células se cultivaron a 37 °C en una atmósfera con 95 % de CO2 asegurándose de que no gotease el medio de cultivo.
Tres días más tarde, el medio fue reemplazado con el mismo medio que se utilizó anteriormente. Las muestras se recogieron en el séptimo día y se sometieron a análisis de RT-PCR (3), como se describe más adelante ("día 7" en la FIG. 9). El medio usado para las mismas células restantes se reemplazó con medio sin BIO para inducir la diferenciación, después de lo cual las muestras recogidas después de 10 y 14 días se sometieron a análisis de RT-PCR (3) como se describe más adelante ("día 10" y "día 14" en la FIG. 9).
Análisis de RT-PCR (3)
Se extrajo ARN de cada muestra usando Trizol (Invitrogen). Un equivalente de 200 ng de cada ARN se sometió a transcripción inversa a ADNc con un sistema de reacción que consiste en 50 μl de RevTraACE (Toyobo). Se aplicaron 4 μl de las muestras resultantes a un sistema de PCR cuantitativa (LightCycler System, Roche) en un sistema de 20 μl usando los cebadores enumerados a continuación. Se usó el protocolo de reacción de LightCycler FastStart DNA Master SYBR Green (Roche) (consistente en 40 ciclos de 10 segundos a 95 °C, 10 segundos a 63 °C y 15 segundos a 72 °C).
Cebador Sentido (cadena directa):
gaagttctctcgggatttcttggatcc (SEC ID NO. 15)
Cebador Antisentido (cadena inversa):
cggttgtgggtatcaatgaagatgg (SEC ID NO. 16)
Los resultados se muestran en la FIG. 9. Todos los datos fueron expresados como la cantidad relativa expresada basándose en la cantidad expresada después de 3 días en el caso de no cargar la masa celular con BIO. Wnt10B se expresa principalmente por células epiteliales durante las etapas de morfogénesis del folículo piloso y el crecimiento del cabello, y se sabe que es un gen implicado en una interacción célula epitelial-célula mesenquimal. Como se muestra en el dibujo, al contrario que con la expresión de Wnt10B que sólo se observa que se expresa a aproximadamente el mismo nivel que el de un testigo cultivado en ausencia de BIO en células en las que la señalización de Wnt fue activada cultivando en presencia de BIO siempre y cuando las células fuesen cultivadas en presencia de BIO, la expresión de Wnt10B aumentó a lo largo del tiempo en las células en las que la diferenciación celular fue subsiguientemente inducida eliminando la BIO. En consecuencia, en este sistema experimental, se determinó claramente que la diferenciación de las células epiteliales foliculares (células de la vaina externa de la raíz) y, lo que es más, la organogénesis autónoma son inducidas cultivando en presencia de BIO seguido de cultivo después de la eliminación de BIO.
Reactividad de la masa celular ante el estimulador del crecimiento del cabello, ciclosporina A
Se sabe que la hipertricosis es un efecto secundario del inmunosupresor ciclosporina A (Lutz, et al., Skin Pharmacol. 7, 101, 1994), y se ha determinado claramente que la ciclosporina A muestra una acción de crecimiento del cabello (Paus, et al., Lab. Invest. 60, 365, 1989) y una acción de promoción del crecimiento del cabello (Taylor, et al., J. Invest. Dermatol., 100, 237, 1993).
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Se prepararon células de la papila capilar a P3 (indicando P1 una ronda de subcultivo) en ausencia de carga de BIO, mientras que se prepararon células de la vaina externa de la raíz hasta P3 inclusive.
Cada una de las células se diluyó con cada medio después del tratamiento con tripsina para obtener 3 x 103 células.
Se dispensaron 25 a 35 μl de cada medio de cultivo en el interior de la tapa superior de una placa de cultivo cuadrada que medía 10 cm de lado y se mezclaron para preparar gotículas en forma de cúpula de un tamaño adecuado.
Después de cerrar la tapa con cuidado, las células se cultivaron a 37 °C en una atmósfera con 95 % de CO2 asegurándose de que no gotease el medio de cultivo.
Tres días más tarde, el medio fue reemplazado con el mismo medio que se utilizó anteriormente, que contiene ciclosporina A. La ciclosporina A se disolvió a 10 mM con etanol y se añadió a una concentración de 0,1 a 10 μM.
Las muestras se recogieron tres días después de la adición de ciclosporina A y sometieron a análisis mediante RT-PCR (4) como se describe a continuación.
Análisis de RT-PCR (4)
Se extrajo ARN de las muestras usando el kit RNeasy (Qiagen). Un equivalente de 200 ng de cada ARN se sometió a transcripción inversa a ADNc con un sistema de reacción que consiste en 20 μl de Superscript II (Invitrogen). Se aplicó 1 μl de las muestras resultantes a un sistema de PCR cuantitativa (LightCycler System, Roche) en un sistema de 20 μl usando los cebadores enumerados más adelante. Se usó el protocolo de reacción de LightCycler FastStart DNA Master SYBR Green (Roche) (consistente en 40 ciclos de 10 segundos a 95 °C, 10 segundos a 58 °C y 15 segundos a 72 °C).
BMP4:
Cebador Sentido (cadena directa):
gggcacctcatcacacgact (SEC ID NO. 17)
Cebador Antisentido (cadena inversa):
ggcccaattcccactccctt (SEC ID N º 18)
c-myc:
Cebador Sentido (cadena directa):
ttctctccgtcctcggaattctctg (SEC ID NO. 19)
Cebador Antisentido (cadena inversa):
cagcagaaggtgatccagactctgac (SEC ID N º 20)
IGFBP3:
Cebador Sentido (cadena directa):
acagccagcgctacaaagtt (SEC ID NO. 21)
Cebador Antisentido (cadena inversa):
tagcagtgcacgtcctcctt (SEC ID NO. 22)
Los resultados se muestran en la FIG. 10. Todos los datos se expresaron como cantidad relativa expresada basándose en el caso de la no adición de ciclosporina A. Se sabe que BMP4 es un gen que es expresado principalmente por células de la papila capilar durante las etapas de la morfogénesis del folículo piloso y de crecimiento del pelo y actúa para inhibir la interacción de célula epitelial-célula mesenquimal (Hens, et al., Development 134, 1.221, 2007). Como se muestra en el dibujo, la cantidad expresada de BMP4 disminuyó significativamente hasta aproximadamente el 60 %. Además, se sabe que c-myc es un gen que se expresa fuertemente en la región de la protuberancia durante la etapa de desarrollo del pelo y en las células de la matriz del pelo durante la etapa de crecimiento, y actúa positivamente sobre la proliferación de las células epiteliales foliculares (Bull, J.J. et al., Invest. Dermatol. 116, 617, 2001). Como se muestra en el dibujo, la expresión de c-myc aumentó hasta aproximadamente 1,5 veces la del testigo. Además, se sabe que IGFBP3 es el factor que inhibe el crecimiento del cabello (Weger, et al., J. Invest. Dermatol. 125, 847, 2005), y se ha demostrado claramente que su expresión aumenta durante la fase de latencia (Schlake, et al., Gene Expr. Patterns 4, 141, 2004). Como se muestra en el dibujo, la expresión de IGFBP3 disminuyó significativamente hasta aproximadamente el 60 %. En consecuencia, se
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Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20100291580A1 (en) * 2007-12-19 2010-11-18 Aderans Research Institute, Inc Biomarkers for trichogenicity
CN101658518B (zh) * 2009-08-19 2011-06-08 新疆奥斯曼生物化妆品有限公司 靛玉红用作制备育毛发的药物中的用途
GB201112922D0 (en) * 2011-07-27 2011-09-14 Univ Durham Micro-organ
WO2014179559A1 (en) * 2013-05-03 2014-11-06 The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. Skin substitutes and methods for hair follicle neogenesis
CA2945263A1 (en) 2014-04-09 2015-10-15 Christopher Rudd Use of gsk-3 inhibitors or activators which modulate pd-1 or t-bet expression to modulate t cell immunity
JP6218238B2 (ja) * 2014-07-10 2017-10-25 国立大学法人大阪大学 人工皮膚及びその製造方法
US20170296595A1 (en) 2014-09-18 2017-10-19 North Carolina State University Mammalian Lung Spheroids and Lung Spheroid Cells and Uses Thereof
CN108138133B (zh) 2015-10-30 2022-01-11 国立大学法人横滨国立大学 再生毛囊原基的集合体的制造方法、含毛囊组织薄片及含毛囊组织薄片的制造方法
FR3061207B1 (fr) * 2016-12-23 2023-03-10 Oreal Utilisation des cellules germinales pour la preparation d’un microfollicule pileux
KR101948396B1 (ko) * 2016-12-26 2019-02-14 동국대학교 산학협력단 특정 전자기파 처리를 통한 효율적 3d 중뇌 유사 오가노이드 제조 방법
WO2018125746A1 (en) 2016-12-30 2018-07-05 Frequency Therapeutics, Inc. 1h-pyrrole-2,5-dione compounds and methods of using them to induce self-renewal of stem/progenitor supporting cells
EP3609998A1 (en) * 2017-04-11 2020-02-19 Frequency Therapeutics, Inc. Methods for hair follicle stem cell proliferation
WO2019092667A1 (en) * 2017-11-10 2019-05-16 Vitroscreen S.R.L. Method for preparing three-dimensional scaffold-free microtissues for use in the preclinical screening of active substances
CN108486035B (zh) * 2018-03-26 2021-11-26 西北大学 一种三维类器官的液滴培养方法
JP7246595B2 (ja) * 2018-11-08 2023-03-28 国立大学法人横浜国立大学 毛包原基、毛包原基の製造方法、及び毛包原基に含まれる細胞の活性化方法
JP2020080680A (ja) * 2018-11-19 2020-06-04 株式会社 資生堂 毛包を有するヒト皮膚組織を再構成するための組成物、ヒト皮膚組織モデル動物およびその製造方法
KR102636512B1 (ko) * 2020-03-20 2024-02-14 주식회사 에이엔케이 모유두 세포의 반복 시딩 및 배양을 통한 모유두 스페로이드의 제조방법
KR102636511B1 (ko) * 2020-03-20 2024-02-14 주식회사 에이엔케이 기판 상에 형성된 모낭 세포 스페로이드 및 이의 제조방법
US20230332102A1 (en) 2020-08-18 2023-10-19 Tosoh Corporation Method for inducing differentiation of pluripotent stem cells into ectodermal, mesodermal, and endodermal cells

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1267616B1 (en) * 2000-03-31 2007-08-08 The General Hospital Corporation Methods of increasing hair growth by wnt polypeptide
EP1488776A4 (en) * 2002-03-28 2005-09-07 Shiseido Co Ltd PHENYLACETONITRIL DERIVATIVES AND HAIR TONIC AND THE DERIVATIVES OF TOPICAL SKIN PREPARATIONS
JP2004248632A (ja) * 2003-02-21 2004-09-09 Osaka Industrial Promotion Organization 男性型脱毛症治療薬のスクリーニング方法、男性型脱毛症治療薬の製造方法および男性型脱毛症治療薬。
JP2005237273A (ja) * 2004-02-26 2005-09-08 Shiseido Co Ltd 育毛剤の評価方法
EP1730264B1 (en) * 2004-03-31 2009-11-04 Reliance Life Sciences Pvt., Ltd. Tissue-like organization of cells and macroscopic tissue-like constructs, generated by macromass culture of cells, and the method of macromass culture
JP4565112B2 (ja) * 2004-09-15 2010-10-20 独立行政法人産業技術総合研究所 毛髪成長促進剤、発毛促進剤及び脱毛症治療剤
JP2005021171A (ja) * 2004-10-04 2005-01-27 Shiseido Co Ltd ヒト毛芽の活性化作用の検出方法

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