ES2630209T3 - Vacunas que comprenden cepas de Mycoplasma bovis atenuadas y método para la atenuación - Google Patents

Abstract

Una cepa de bacteria Mycoplasma bovis atenuada, avirulenta, en la que la bacteria es pasada más de 110 veces, en la que la cepa de Mycoplasma bovis atenuada y avirulenta se selecciona del grupo que consiste en: la cepa bacteriana de Mycoplasma bovis atenuada depositada en la ATCC bajo número de registro PTA-9666 o PTA-9667, o cualquier cepa de bacterias Mycoplasma bovis descendiente atenuada capaz de reducir la mortalidad en un grupo de animales de al menos 83% en comparación con un grupo control no vacunado de animales.

Description

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DESCRIPCION

Vacunas que comprenden cepas de Mycoplasma bovis atenuadas y metodo para la atenuacion Antecedentes de la invencion

Mycoplasma bovis (M. bovis) se considera una de las especies mas patogenas del genera Mycoplasma y produce perdidas economicas significativas en todo el mundo. Los micoplasmas producen signos clmicos graves en el ganado bovino de todas las edades. M. bovis es el micoplasma patogeno mas frecuente y se ha observado que produce neumorna, mastitis y artritis en el ganado bovino y su papel etiologico tambien se ha asociado con otitis, queratoconjuntivitis, sinovitis y trastornos reproductivos en vacas y toros. En general, los microplasmas son diffciles de tratar ya que carecen de pared o membrana celular, lo cual tiende a hacer que sean resistentes a varias clases de tratamientos con antibioticos de amplio espectro usados comunmente. Los micoplasmas difieren de los virus en que los microplasmas son de mayor tamano que la mayona de los virus y danan a las celulas de los tejidos uniendose a la superficie de las celulas y destruyendolas, en lugar de por medio de la entrada en las celulas. Los animales infectados con M. bovis tienen respuestas inmunes reprimidas y pueden presentar signos de infeccion por M. bovis tales como fiebre, depresion, anorexia, dificultad para respirar, descarga nasal y ocular, tos, estornudos, jadeos, grunidos, cojera e hinchazon de articulaciones, mastitis, infecciones en el ofdo medio, abortos, postracion y muerte. El organismo persiste en medios insalubres, calidos y humedos. Los micoplasmas pueden sobrevivir en la leche, e incluso parecen prosperar en presencia de grandes numeros de leucocitos que se producen en respuesta a la infeccion.

El documento US 6.548.069 describe una composicion de vacuna que incorpora una bacteria inactivada de celulas enteras que contiene al menos dos cepas muertas de M. bovis y tambien describe que un aislado puede alterar rapidamente sus antfgenos en cultivo. La patente ensena que cepas con un alto numero de pases, con mas de aproximadamente 50 pases, pueden perder infectividad e inducir una respuesta inmune peor cuando se usan en una bacterina. Ensena el uso de una cepa de Mycoplasma que se ha sometido a pases no mas de aproximadamente 10 veces o menos antes de la produccion a escala masiva porque se cree que los antfgenos conservan su estado natural y por lo tanto induciran una respuesta inmune protectora contra el microorganismo infeccioso.

El documento US 2009/068231 A1 describe de modo general cepas de Mycoplasma atenuadas que tienen una expresion reducida de una o mas protemas seleccionadas del grupo que consiste en piruvato deshidrogenasa, fosfopiruvato hidratasa, 2-desoxirribosa-5-fosfato aldolasa y protema ribosomica L35, con respecto a una bacteria Mycoplasma de tipo natural de la misma especie. Ademas, en la parte experimental, el documento US 2009/068231 A1 describe cepas atenuadas de Mycoplasma gallisepticum. M. bovis muerto no es tan eficaz o eficiente como se desea en la reduccion de la gravedad de smtomas clmicos asociados con una infeccion por Mycoplasma bovis. Incluso el pase a bajo nivel no produce una vacuna de Mycoplasma con alta eficacia de tal forma que los smtomas clmicos se reduzcan en gran medida en animales en comparacion con los animales que no reciben dicha vacuna. Las pocas vacunas de M. bovis inactivado, de bajo numero de pases, que estan disponibles no muestran una gran reduccion en la gravedad de los smtomas clmicos en animales en comparacion con los animales que no recibieron dicha vacuna.

La naturaleza del mercado requiere que los granjeros puedan inmunizar de forma eficaz a sus animales para una amplia diversidad de afecciones de una forma eficaz. Otras afecciones para las que sena adecuado conseguir una inmunizacion eficaz incluyen, pero sin limitacion, virus de la diarrea viral bovina (BVDV), Parainfluenza virus-3 (PI-3), virus sincitial respiratorio bovino (BRSV), Herpesvirus Bovino (BHV-1), rotavirus bovino, virus Breda, un virus parecido a los calicivirus, Adenovirus, Astrovirus y Parvovirus, Mannheimia haemolytica (anteriormente Pasteurella haemolytica), Pasteurella multocida, Actinomyces (Arcanobacterium) pyogenes, Haemophilus somnus (reclasificado como Histophilus somni), Chlamydiae, campilobacteriosis genital bovina, Leptospirosis, brucelosis, Clostridia, Escherichia coli, Cryptosporidium parvum, Mycobacterium avium paratuberculosis, Salmonella, Mycobacterium avium paratuberculosis, Criptosporidiosis, mastitis, dermatomicosis, infecciones del tracto respiratorio inferior, tricomoniasis, Neospora Canum, babesiosis y similares.

Sigue existiendo la necesidad de una composicion inmunogenica eficaz para inducir una respuesta inmunologica contra M. bovis para reducir la gravedad o reducir la incidencia de signos de infeccion por M. bovis, y para reducir o eliminar la incidencia de signos de infeccion por M. bovis.

Compendio de la invencion

La presente invencion proporciona una cepa de bacteria Mycoplasma bovis atenuada, avirulenta, en la que la bacteria es pasada mas de 110 veces, en la que la cepa de Mycoplasma bovis atenuada y avirulenta se selecciona del grupo que consiste en: la cepa de bacterias Mycoplasma bovis atenuada depositada en la ATCC bajo el numero de acceso PTA-9666 o PTA-9667, cualquiera de sus cepas de bacterias Mycoplasma bovis descendientes atenuadas capaz de reducir la mortalidad en un grupo de animales de al menos el 83% en comparacion con un grupo control no vacunado de animales.

Ademas, la presente invencion proporciona una composicion inmunogenica que comprende bacterias vivas de cualquiera de las cepas de bacterias Mycoplasma bovis atenuadas, avirulentas tal como se describe y reivindica aqrn.

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Se describe una composicion inmunogenica o vacuna que usa cepas de M. bovis atenuadas de alto numero de pases, de tal forma que se reducen los signos de infeccion por M. bovis y/o la propia infeccion por M. bovis y/o la incidencia o gravedad de dicha infeccion en animales que reciben la composicion inmunogenica o vacuna en comparacion con los animales con infeccion por cepas de M. bovis de tipo silvestre. Preferiblemente, la composicion inmunologica proporciona un rapido inicio de la proteccion y una proteccion de larga duracion a un animal que lo necesita.

Se describen aislados o cepas atenuadas y avirulentas de M. bovis que se han sometido a pases al menos 110 veces, que provocan o inducen una respuesta inmune cuando se administran a un animal. Se describen bacterias M. bovis atenuadas que tienen las mismas caractensticas que la cepa bacteriana de M. bovis depositada en la ATCC con los numeros de acceso PTA-9666 y PTA-9667.

Una cepa de M. bovis, atenuada por multiples pases o atenuacion en serie como se describe, puede usarse como medicina, preferiblemente como medicina veterinaria. Preferiblemente, las cepas de M. bovis atenuadas pueden usarse para la preparacion de composiciones veterinarias, para la profilaxis o tratamiento de infecciones producidas por M. bovis en animales susceptibles a la infeccion por M. bovis.

Dicha composicion inmunologica sena adecuada como un regimen de inmunizacion de una dosis, de dos dosis o de multiples dosis (dosis inicial seguida de una o mas dosis de refuerzo), una composicion inmunologica adecuada y conveniente para la administracion por varias vfas, y una composicion inmunologica que es compatible con otros inmunogenos y composiciones inmunologicas para la preparacion de vacunas de combinacion.

Preferiblemente, las cepas de M. bovis descritas aqrn pueden combinarse con otros medicamentos, terapias o vacunas.

Se describe un metodo para preparar la composicion inmunogenica descrita aqrn. El metodo comprende obtener una cepa virulenta de M. bovis y someter a pases dicha cepa al menos 110 veces, de tal forma que se atenue y sea avirulenta. La cepa de alto numero de pases despues puede mezclarse con componentes adicionales que incluyen, pero sin limitacion, vehfculos farmaceuticamente aceptables, diluyentes, otros medicamentos, composiciones terapeuticas o vacunas, y combinaciones de los mismos.

Se describe un metodo de tratamiento o profilaxis de animales que tienen una infeccion por M. Bovis para reducir los signos de infeccion por M. bovis, reducir la gravedad o incidencia de signos clmicos de la infeccion por M. bovis, reducir la mortalidad de animales por infeccion por M. bovis y combinaciones de los mismos.

Breve descripcion de los dibujos

La Figura 1 es un grafico que ilustra puntuaciones de lesion pulmonar para animales que reciben un aislado de M. bovis sometido a pases 135 veces de acuerdo con el aislado de la presente invencion;

La Figura 2 es un grafico que ilustra las puntuaciones totales de cojera para animales que reciben un aislado de M. bovis sometido a pases 135 veces de acuerdo con la presente invencion;

La Figura 3 es un grafico que ilustra la hinchazon total de articulaciones para animales que reciben un aislado de M. bovis sometido a pases 135 veces de acuerdo con la presente invencion;

La Figura 4 es un grafico que ilustra puntuaciones de artritis para animales que reciben un aislado de M. bovis sometido a pases 135 veces de acuerdo con la presente invencion;

La Fig. 5 es un grafico que ilustra una comparacion de serologfa para los Grupos Vac Viva I, II, III y el Grupo sin Vacuna (SC+IN solo); y

La Fig. 6 es un grafico que ilustra una comparacion de serologfa para Vac Viva I usando diversas vfas de administracion.

Descripcion detallada de la invencion

Definiciones

Para los fines de la presente invencion, los terminos "aislado" y "cepa" se usan indistintamente y las diferencias entre cepas o aislados individuales pueden detectarse usando identificacion del ADN (es decir, diferentes cepas o aislados tendran diferentes huellas geneticas espedficas). Para los fines de la presente invencion, los terminos "vacuna" y "composicion" se usan indistintamente.

Aqrn se usan los siguientes terminos y expresiones:

“Atenuacion” se refiere a la reduccion de la virulencia de un patogeno. En la presente invencion, “atenuacion” es sinonimo de “avirulento”. En la presente invencion, una bacteria atenuada es una en la que la virulencia se ha reducido de forma que no produce signos clmicos de una infeccion por M. bovis pero es capaz de inducir una

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respuesta inmune en el mairnfero diana, pero tambien puede significar que los signos clmicos se reducen en incidencia o gravedad en animales infectados con M. bovis atenuado en comparacion con un “grupo de control” de animales infectados con M. bovis no atenuado y que no recibe la bacteria atenuada. En este contexto, el termino "reduce/reducido" significa una reduccion de al menos 10%, preferiblemente 25%, incluso mas preferiblemente 50%, aun mas preferiblemente 60%, incluso mas preferiblemente 70%, aun mas preferiblemente 80%, incluso mas preferiblemente 90% y aun mas preferiblemente 100% en comparacion con el grupo de control como se ha definido anteriormente. De esta manera, una cepa de M. bovis atenuada, avirulenta es una que es adecuada para la incorporacion en una composicion inmunogenica que comprende una bacteria M. bovis viva modificada.

Los "diluyentes" pueden incluir agua, solucion salina, dextrosa, etanol, glicerol y similares. Los agentes isotonicos pueden incluir cloruro sodico, dextrosa, manitol, sorbitol y lactosa, entre otros. Los estabilizantes incluyen albumina y sales alcalinas de acido etilendiaminotetracetico, entre otros.

Una “cantidad eficaz”, para los fines de la presente invencion, significa una cantidad de una composicion inmunogenica capaz de inducir una respuesta inmune que reduce la incidencia o disminuye la gravedad de una infeccion por M. bovis en un animal. Particularmente, una cantidad eficaz se refiere a unidades formadoras de colonias (UFC) por dosis. La composicion inmunogenica o vacuna preferida de la presente invencion tiene al menos 1,0 E7 UFC de la bacteria viva M. bovis atenuada avirulenta por dosis, mas preferiblemente 8,4 E7 UFC o 9,4 E7 UFC de la bacteria viva M. bovis atenuada avirulenta por dosis. Un ejemplo (pero sin limitarse a dicho ejemplo) de una cantidad eficaz sena una vacuna de M. bovis administrada por via intranasal y subcutanea simultanea administrada dos veces con intervalo de dos semanas a un alto nivel de dosificacion (1E9 UFC).

"Cepa de alto numero de pases" asf como la expresion "sometido a pases al menos 110 veces", para los fines de la presente invencion, se refiere a una cepa de M. bovis que se ha sometido a pases mas de 110 veces, mas preferiblemente mas de 115 veces, mas preferiblemente mas de 120 veces, incluso mas preferiblemente mas de 125, incluso mas preferiblemente mas de 130 veces, mas preferiblemente mas de 133 veces, incluso mas preferiblemente mas de 135 veces, y aun mas preferiblemente entre 135 y 145 veces, espedficamente mas preferiblemente mas de 140 veces, y mas preferiblemente mas de 145 veces, y aun mas preferiblemente mas de 150 veces.

La expresion "que tiene las caractensticas de la cepa bacteriana de M. bovis depositada en la ATCC con los numeros de acceso PTA-9666 y PTA-9667" significa que dicha cepa bacteriana esta atenuada y es capaz de reducir la tasa de mortalidad y de eutanasia en un grupo de animales al menos 83% en comparacion con un grupo de control de animales no vacunados. Ademas, la expresion tambien significa que dicha cepa de bacterias esta atenuada y es capaz de reducir la tasa de mortalidad y de eutanasia en un grupo de animales al menos 56% cuando se compara con un grupo de control de animales no vacunados despues de la administracion de una sola dosis de dicha vacuna. Ademas, la expresion tambien significa que dicha cepa bacteriana esta atenuada y es capaz de reducir la tasa de mortalidad y de eutanasia en un grupo de animales al menos 65% cuando se compara con un grupo de control de animales no vacunados despues de la administracion de una sola dosis de dicha vacuna.

Una “composicion inmunogenica o inmunologica” se refiere a una composicion de materia que comprende al menos un antfgeno, que induce una respuesta inmunologica en el hospedador que es una respuesta inmune celular y/o mediada por anticuerpos a la composicion de vacuna de interes. Normalmente, una “respuesta inmunologica” incluye, pero sin limitacion, uno o mas de los siguientes efectos: la produccion o activacion de anticuerpos, celulas B, celulas T auxiliares, celulas T supresoras y/o celulas T citotoxicas y/o celulas T gamma-delta, dirigidas espedficamente a un antfgeno o antfgenos incluidos en la composicion o vacuna de interes. Preferiblemente, el hospedador exhibira una respuesta inmunologica terapeutica o protectora, de modo que aumentara la resistencia a la nueva infeccion y/o se reducira la gravedad clfnica de la enfermedad. Esta proteccion se demostrara por una reduccion o ausencia de signos clfnicos presentados normalmente por un hospedador infectado, una recuperacion mas rapida y/o una menor duracion o tftulo bacteriano en los tejidos o fluidos corporales o excreciones del hospedador infectado.

La expresion "ensayo inmunogenico" significa infectar ganado bovino con la bacteria M. bovis sometida a pases y controlar el desarrollo de la respuesta humoral de anticuerpos contra M. bovis en el ganado bovino infectado.

La expresion “eficacia mejorada de tal manera que se redujeron los signos clfnicos asociados con la infeccion por M. bovis y/o la propia infeccion por M. bovis en comparacion con las vacunas disponibles actualmente cuando los individuos vacunados se exponen a M. bovis o padecen una infeccion por cepas de M. bovis de tipo silvestre” se refiere a una reduccion en la incidencia o gravedad de los signos clfnicos de la infeccion por M. bovis en comparacion con las vacunas preparadas a partir de cepas sometidas a pases como se ensena en la presente invencion con vacunas de M. bovis que estaban disponibles antes de esta invencion. En este contexto, los animales no vacunados o vacunados con vacunas de M. bovis disponibles antes de la presente invencion tendran signos clfnicos de infeccion por M. bovis que tendran una gravedad o prevalencia al menos 30%, y posiblemente, mas preferiblemente, hasta al menos 40%, aun mas preferiblemente al menos 50%, incluso mas preferiblemente al menos 60%, aun mas preferiblemente al menos 70%, incluso mas preferiblemente al menos 75%, aun mas preferiblemente al menos 80%, incluso mas preferiblemente al menos 85%, aun mas preferiblemente al menos 90%, y aun mas preferiblemente al menos 95% mayor que en animales que reciben una administracion de una

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composicion inmunogenica de M. bovis de acuerdo con la presente invencion.

La expresion “en necesidad de dicha administracion” o “en necesidad dicho tratamiento de administracion” significa que la administracion o tratamiento esta asociado con el refuerzo o mejora de la salud o cualquier otro efecto medicinal positivo sobre la salud de los animales que reciben la composicion inmunogenica de acuerdo con la presente invencion.

La expresion “proteccion de larga duracion” se refiere a una eficacia mejorada que persiste durante al menos 3 semanas, pero mas preferiblemente al menos 6 meses, aun mas preferiblemente al menos 1 ano, incluso mas preferiblemente al menos 2 anos para los animales de produccion de carne, y al menos 6 meses, mas preferiblemente al menos 1 ano, aun mas preferiblemente al menos 2 anos, aun mas preferiblemente al menos 3 anos, e incluso mas preferiblemente al menos 4 anos para animales para la produccion de leche. Tanto en los animales para la produccion de carne como en los animales para produccion de leche, lo mas preferido es que la proteccion de larga duracion persista hasta la edad media a la que se comercializan los animales para la produccion de carne y la edad a la que los animales para la produccion de leche concluyen su vida de produccion de leche.

La expresion “evaluacion de patologfa pulmonar” se refiere a la observacion de los pulmones despues de la necropsia, incluyendo, pero sin limitacion, la evaluacion de la consolidacion, lesiones y formaciones nodulares, asf como la evaluacion de la cavidad toracica incluyendo pleuritis y acumulacion de lfquidos.

El termino “mortalidad” se refiere a la muerte producida por la infeccion por M. bovis. Esto incluye la situacion en la que la infeccion es tan grave que un animal se sacrifica para impedir el sufrimiento y proporcionar un final humanitario de su vida.

La expresion “signos de infeccion por M. bovis" se refiere a las manifestaciones de infeccion o enfermedad producidas por M. bovis incluyendo tanto el smtoma o los smtomas clmicos como la patologfa experimentada tfpicamente por vacas infectadas con M. bovis de tipo silvestre. Estas manifestaciones de infeccion o enfermedad pueden tomar muchas formas incluyendo, pero sin limitacion, fiebre, depresion, anorexia, dificultad para respirar, descarga nasal y ocular, tos, estornudos, jadeo, grunidos, cojera e hinchazon de articulaciones, infecciones del ofdo medio, descarga por inflamacion en el ofdo interno, abortos y otros trastornos reproductivos, postracion, infeccion respiratoria, inclinacion de la cabeza, ataxia, artritis, mastitis, otitis, queratoconjuntivitis, sinovitis, pleuritis, lesiones pulmonares, consolidacion pulmonar y formacion de nodulos en los pulmones, aumento de lfquido sinovial, engrosamiento de capsulas articulares y muerte.

La expresion un “vehmulo veterinariamente aceptable”, “vehmulo farmaceuticamente aceptable” o “vehmulo” incluye todos y cada uno de los disolventes, medios de dispersion, recubrimientos, adyuvantes, agentes estabilizantes, diluyentes, conservantes, agentes antibacterianos y antifungicos, agentes isotonicos, agentes para retrasar la adsorcion y similares. En algunas realizaciones preferidas, y especialmente en las que incluyen composiciones inmunogenicas liofilizadas, los agentes estabilizantes para uso en la presente invencion incluyen estabilizantes para liofilizacion o secado por congelacion.

Se describe una composicion inmunogenica o vacuna que soluciona los problemas intrmsecos de las vacunas previas y proporciona una vacuna segura y eficaz que utiliza cepas de M. bovis atenuadas con un alto numero de pases, de tal forma que se reducen los signos de la infeccion por M. bovis y/o la propia infeccion por M. bovis y/o la incidencia o gravedad de dicha infeccion, en animales que reciben la composicion inmunogenica o vacuna en comparacion con la infeccion por cepas de M. bovis de tipo silvestre. Ademas, se reduce el efecto letal de M. bovis cuando la composicion inmunogenica aqrn descrita se administra a un animal (por ejemplo, los terneros que han recibido una vacuna de acuerdo con la presente invencion tienen menor riesgo de desarrollar signos de infeccion por M. bovis, asf como tener una muerte asociada con la infeccion por M. bovis, y cualquier signo clmico que se produjera sena menos grave o prevalente que en animales que no han recibido ninguna vacuna pero se infectaron con M. bovis o que han recibido una vacuna que no esta de acuerdo con la presente invencion).

Ademas, los rebanos tendnan un menor numero de animales infectados y fallecidos si a los animales se les administrara la vacuna aqrn descrita en comparacion con animales no vacunados pero infectados, y preferiblemente incluso en comparacion con animales vacunados con una o mas vacunas disponibles convencionalmente. Las cepas atenuadas, de alto numero de pases, aqrn descritas proporcionan una eficacia adicional en comparacion con otras vacunas actualmente en el mercado.

Se describen aislados o cepas atenuadas y avirulentas de M. bovis que se han sometido a pases al menos 110 veces, que provocan o inducen una respuesta inmune cuando se administran a un animal. Ventajosamente, dichos aislados y cepas atenuadas y avirulentas de M. bovis que se han sometido a pases al menos 110 veces provocan o inducen una respuesta inmune que protege a los animales que reciben la composicion inmunogenica aqrn descrita y reducen el riesgo de que los animales mueran o tengan que sacrificarse como resultado de la infeccion por M. bovis. La composicion inmunogenica tambien tiene el efecto beneficioso de reducir el numero de animales en un rebano que experimentan muerte o eutanasia como resultado de la infeccion por M. bovis. Ademas, se ha demostrado que la composicion reduce la incidencia y gravedad de signos clmicos de infecciones por M. bovis en animales individuales y rebanos.

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Se describe una composicion inmunogenica que comprende una o mas cepas de M. bovis de alto numero de pases que se han sometido a pases al menos 110 veces y un vehmulo farmaceuticamente aceptable. La composicion inmunogenica aqm descrita induce una respuesta inmune o inmunogenica contra la infeccion por M. bovis en animales, y preferiblemente en ganado bovino. La generacion de la respuesta inmunogenica tiene el efecto de reducir la incidencia y gravedad de signos clmicos de la infeccion por M. bovis asf como de reducir la mortalidad y la eutanasia como resultado de la infeccion por M. bovis.

Se describe un metodo para preparar la composicion inmunogenica aqm descrita. El metodo comprende obtener una cepa virulenta de M. bovis y someter dicha cepa a pases al menos 110 veces, de tal forma que se atenue y sea avirulenta. La cepa de alto numero de pases opcionalmente despues puede mezclarse con otros componentes adicionales que incluyen, pero sin limitacion, adyuvantes, vehmulos farmaceuticamente aceptables, diluyentes y combinaciones de los mismos. El metodo generalmente comprende (a) someter bacterias M. bovis a pases no mas de 110 veces para producir una bacteria M. bovis cultivada; (b) obtener la bacteria M. bovis cultivada; y (c) propagar la bacteria M. bovis no patogena, pero inmunogenica para obtener la bacteria M. bovis atenuada.

En formas preferidas de este metodo hay una etapa adicional de ensayo de la bacteria M. bovis cultivada obtenida en la etapa (b) con respecto a su patogenicidad e inmunogenicidad. Preferiblemente, esta etapa se realiza antes de la etapa (c). El ensayo de patogenicidad comprende infectar ganado bovino con las bacterias M. bovis sometidas a pases y monitorizar en el ganado bovino infectado el desarrollo de smtomas clmicos de una infeccion por M. bovis.

Se describe un metodo para reducir la incidencia de muerte o eutanasia debida a la infeccion por M. bovis en una vaca individual o dentro de un rebano de ganado bovino. El metodo comprende la administracion de una cepa de alto numero de pases de M. bovis, sometida a pases al menos 110 veces, a ganado bovino. Se ha demostrado que la composicion inmunogenica aqm descrita reduce la mortalidad en vacas y en rebanos cuando se compara con esos mismos animales que no reciben una vacuna asf como cuando se compara con esas cepas sometidas a pases menos de 110 veces. Preferiblemente, la mortalidad en vacas y en rebanos se reduce al menos 10%, mas preferiblemente, la mortalidad se reduce al menos 20%, incluso mas preferiblemente la mortalidad se reduce al menos 25%, mas preferiblemente la mortalidad se reduce al menos 30%, incluso mas preferiblemente la mortalidad se reduce al menos 40%, aun mas preferiblemente la mortalidad se reduce al menos 50%, incluso mas preferiblemente la mortalidad se reduce al menos 56%, aun mas preferiblemente la mortalidad se reduce al menos 60%, incluso mas preferiblemente la mortalidad se reduce al menos 70%, aun mas preferiblemente la mortalidad se reduce al menos 75%, incluso mas preferiblemente la mortalidad se reduce al menos 80%, aun mas preferiblemente la mortalidad se reduce al menos 83%, y aun mas preferiblemente la mortalidad se reduce al menos 90% en comparacion con los animales que no reciben una vacuna.

Ademas, la mortalidad en vacas y en rebanos se reduce al menos 10%, mas preferiblemente la mortalidad se reduce al menos 20%, incluso mas preferiblemente la mortalidad se reduce al menos 25%, mas preferiblemente la mortalidad se reduce al menos 30%, incluso mas preferiblemente la mortalidad se reduce al menos 40%, aun mas preferiblemente la mortalidad se reduce al menos 48% en comparacion con las cepas sometidas a pases menos de 110 veces en comparacion con otras cepas de M. bovis, incluyendo, por ejemplo, cepas de bacterias M. bovis depositadas en la ATCC con los numeros de acceso PTA-8694; PTA 8695; o PTA 8696.

Se describe un metodo para el tratamiento o profilaxis de infecciones producidas por M. bovis. El metodo comprende administrar una cantidad eficaz de la composicion inmunogenica aqm descrita a un animal, donde dicho tratamiento o profilaxis se selecciona entre el grupo consistente en reduccion de los signos de infeccion por M. bovis, reduccion de la gravedad o incidencia de signos clmicos de infeccion por M. bovis, reduccion de la mortalidad de animales por infeccion por M. bovis y combinaciones de los mismos.

Se describe un metodo para reducir la incidencia y/o gravedad de smtomas clmicos de infeccion por M. bovis. El metodo generalmente comprende la administracion de una cepa de alto numero de pases de M. bovis, sometida a pases 110 veces, a animales, preferiblemente ganado bovino. Mas particularmente, el metodo puede usarse para reducir la consolidacion pulmonar debida a la infeccion por M. bovis. La eficacia de la administracion de una cepa de alto numero de pases de M. bovis a un animal que lo necesita puede verificarse de varias maneras convencionales, incluyendo la evaluacion de la patologfa pulmonar. Preferiblemente, la evaluacion de la patologfa pulmonar, espedficamente el porcentaje de consolidacion pulmonar atribuida a lesiones debidas a M. bovis, como se puntua habitualmente para diversas especies, puede realizarse despues de la necropsia. Aun mas preferiblemente, dicha patologfa pulmonar se reducira en comparacion con el grupo no vacunado al menos 33%, mas preferiblemente al menos 50%, incluso mas preferiblemente al menos 70%, aun mas preferiblemente al menos 80%, incluso mas preferiblemente al menos 90% y aun mas preferiblemente al menos 95%.

Un resultado sorprendente de la presente invencion descubrio que el pase adicional de la cepa de M. bovis conduda a un aumento de la eficacia de la vacuna. Cuando se compararon los resultados de estudios de eficacia para cepas previas sometidas a un alto numero de pases, es decir, las sometidas a pases menos de 110 veces (por ejemplo, cepas de bacterias M. bovis depositadas en la ATCC con los numeros de acceso PTA-8694; PTA 8695 o PTA 8696), con los resultados de los estudios que usan la cepa con un mayor numero de pases de la presente invencion, sorprendentemente se descubrio que habfa una reduccion en mortalidad o eutanasia por razones humanitarias para el ganado bovino debida a la infeccion por M. bovis usando la cepa de la presente invencion.

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Fue un resultado adicionalmente sorprendente que la administracion de una dosis de la cepa sometida a un mayor numero de pases de la presente invencion fuera igual o mas eficiente o eficaz que la administracion de dos dosis de la cepa previa sometida a un alto numero de pases, sometida a pases menos de 110 veces, en la reduccion del numero de vacas que experimentaban muerte o eutanasia como resultado de la infeccion por M. bovis. Aunque se proporciono una reduccion en mortalidad de aproximadamente 56%, en comparacion con animales no vacunados, por una sola administracion de las cepas de M. bovis atenuadas de la presente invencion sometidas a pases mas de 110 veces, se necesitaron dos administraciones de las cepas de M. bovis atenuadas sometidas a pases no mas de 106 veces para obtener la misma reduccion de mortalidad.

Preferiblemente la cepa de alto numero de pases de M. bovis se somete a pases al menos 110 in vitro en cultivo celular, mas preferiblemente entre 110 veces y 200 veces, incluso mas preferiblemente entre aproximadamente 110 y 180 veces, aun mas preferiblemente al menos 115 veces, incluso mas preferiblemente al menos 120 veces, aun mas preferiblemente entre 120 y 170 veces, incluso mas preferiblemente al menos 125 veces, aun mas preferiblemente entre 125 y 160 veces, incluso mas preferiblemente al menos 130 veces, aun mas preferiblemente entre 130 y 150 veces, incluso mas preferiblemente al menos 131 veces, mas preferiblemente al menos 132 veces, incluso mas preferiblemente al menos 133 veces, mas preferiblemente al menos 134 veces, e incluso mas preferiblemente al menos 135 veces, y aun mas preferiblemente entre 135 y 145 veces.

Las cepas de M. bovis utiles en la vacuna o composicion inmunogenica pueden ser cualquier cepa o aislado de M. bovis que tenga las mismas propiedades que las cepas de la invencion descritas aqrn. Las cepas representativas incluyen las depositadas en la ATCC en Manassas, VA el 18 de diciembre de 2008, segun los terminos del Tratado de Budapest y denominadas con los numeros de deposito de la ATCC PTA-9666 y PTA-9667. Estas cepas son patogenas antes de someterse a pases, pero despues de someterse a pases como se ha descrito anteriormente, y particularmente despues de someterse a pases mas de 110 veces, las cepas sometidas a pases resultantes se atenuaron, eran avirulentas y produdan una respuesta inmune en un animal que recibfa la administracion de la composicion inmunogenica de la cepa. En particular, estas cepas condudan a una mayor eficacia y mostraron una menor mortalidad en vacas y en rebanos cuando se usaban como una vacuna viva modificada. Ventajosamente, la vacuna o composicion inmunogenica aqrn descrita que utiliza dichas cepas depositadas presentaba una proteccion cruzada eficaz contra cepas de M. bovis distintas de la cepa sometida a pases para la atenuacion y despues usadas como componente antigenico.

Composiciones de Combinacion

Preferiblemente las cepas de M. bovis aqrn descritas pueden combinarse con otros medicamentos, terapias o vacunas. Las condiciones que senan adecuadas para una inmunizacion eficaz incluyen, pero sin limitacion, virus de la diarrea viral bovina (BVDV), Parainfluenza virus-3 (PI-3), virus sincitial respiratorio bovino (BRSV), Herpesvirus Bovino (BHV-1), rotavirus bovino, virus Breda, un virus parecido a los calicivirus, Adenovirus, Astrovirus y Parvovirus, Mannheimia haemolytica (anteriormente Pasteurella haemolytica), Pasteurella multocida, Actinomyces

(Arcanobacterium) pyogenes, Haemophilus somnus (reclasificado como Histophilus somni), Chlamydiae, campilobacteriosis genital bovina, Leptospirosis, brucelosis, Clostridia, Escherichia coli, Cryptosporidium parvum, Mycobacterium avium paratuberculosis, Salmonella, Mycobacterium avium paratuberculosis, Criptosporidiosis, mastitis, dermatomicosis, infecciones del tracto respiratorio inferior, tricomoniasis, Neospora Canum, babesiosis y similares.

El virus de la diarrea viral bovina (BVDV) tipo 1 (BVDV-1) y tipo 2 (BVDV-2) causa diarrea viral bovina (BDV) y enfermedad de las mucosas (MD) en ganado vacuno (Baker, 1987; Moennig y Plagemann, 1992; Thiel et al., 1996). La division de BVDV en 2 serotipos se basa en diferencias significativas a nivel de secuencias genomicas (resumidas en Heinz et al., 2000) que tambien son evidentes a partir de reacciones cruzadas de anticuerpos neutralizantes limitadas (Ridpath et al. 1994). La inactivacion de la actividad ARNasa que reside en la Ems da como resultado un BVDV apatogeno atenuado que puede usarse como vacuna viva modificada (documento WO 99/64604). La solicitud de Patente Internacional WO2005/111201 proporciona una generacion adicional de un BVDV atenuado adecuado para vacunas de MLV, que comprende un BVDV modificado multiple que tiene al menos una mutacion en la secuencia codificante de la glicoprotema Ems y al menos otra mutacion en la secuencia codificante para Npra, donde dicha mutacion en la secuencia codificante de la glicoprotema Ems conduce a la inactivacion de la actividad ARNasa que reside en Ems y/o dicha mutacion en la secuencia codificante de Npra conduce a la inactivacion de dicha Npr°. Ademas, se conocen en la tecnica diversos virus BVDV atenuados convencionales que tambien son candidatos adecuados para el desarrollo de vacunas.

El Parainfluenzavirus-3 (PI-3) es un virus ARN clasificado en la familia de paramixovirus. Las infecciones causadas por PI-3 son comunes en ganado. Aunque PI-3 es capaz de causar enfermedad, habitualmente se asocia con infecciones de leves a subclmicas. El papel mas importante de PI-3 es servir como iniciador que puede conducir al desarrollo de neumoma bacteriana secundaria. Los signos clmicos incluyen fiebre, tos, descarga serosa, nasal y lacrimal, frecuencia respiratoria aumentada y ruidos respiratorios aumentados. La gravedad de los signos clmicos empeora con la aparicion de una neumoma bacteriana. Son raras las muertes por neumoma por PI-3 sin complicaciones. Las lesiones incluyen consolidacion pulmonar craneoventral, bronquiolitis y alveolitis con congestion y hemorragias marcadas. Pueden identificarse cuerpos de inclusion. La mayona de los casos mortales tambien tendran una bronconeumoma bacteriana concurrente.

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El Virus Sincitial Respiratorio Bovino (BRSV) es un virus ARN clasificado como un neumovirus en la familia de paramixovirus. Ademas del ganado, las ovejas y cabras tambien pueden infectarse por virus sincitiales respiratorios. Este virus se denomino asf por su efecto citopatico caractenstico — la formacion de celulas sincitiales. El BRSV esta distribuido por todo el mundo y el virus es autoctono en la poblacion de ganado bovino. Las infecciones por BRSV asociadas con enfermedad respiratoria aparecen predominantemente en ganado joven de carne y de leche. La inmunidad de origen pasivo parece no prevenir las infecciones por BRSV pero reduciran la gravedad de la enfermedad. Las exposiciones iniciales al virus se asocian con enfermedad respiratoria grave; exposiciones posteriores daran como resultado enfermedad de leve a subclmica. El BRSV parece ser un virus importante en el complejo de enfermedades respiratorias bovinas debido a su frecuencia de aparicion, predileccion por el tracto respiratorio inferior y su capacidad para predisponer al tracto respiratorio a una infeccion bacteriana secundaria. En brotes, la morbilidad tiende a ser elevada y la mortalidad de casos puede ser del 0-20%. Los signos incluyen temperatura rectal aumentada de 40-42°C, depresion, ingesta de alimento disminuida, frecuencia respiratoria aumentada, tos y descarga nasal y lacrimal. Generalmente, predominan los signos respiratorios. La disnea puede hacerse pronunciada en las fases posteriores de la enfermedad. A veces se describe enfisema subcutaneo. La neumoma bacteriana secundaria es una aparicion frecuente. Se ha descrito un patron de enfermedad bifasico pero no es uniforme. Las lesiones macroscopicas incluyen una neumoma intersticial difusa con enfisema subpleural e intersticial junto con edema intersticial. Estas lesiones son similares a y deben diferenciarse de otras causas de neumoma intersticial. El examen histologico revela celulas sincitiales en el epitelio bronquiolar y parenquima pulmonar, cuerpos de inclusion intracitoplasmicos, proliferacion y/o degeneracion del epitelio bronquiolar, epitelizacion alveolar, edema y formacion de membranas hialinas.

El Herpesvirus Bovino (BHV-1) se asocia con varias enfermedades y smtomas en ganado: rinotraquettis infecciosa bovina (IBR), vulvovaginitis pustular infecciosa (IPV), balanopostitis, conjuntivitis, aborto, encefalomielitis y mastitis. Solo se reconoce un solo serotipo de BHV-1; sin embargo, se han descrito tres subtipos de BHV-1 en base a patrones de escision por endonucleasas del ADN viral. Estos tipos se denominan BHV-1.1 (subtipo respiratorio), BHV-1.2 (subtipo genital) y BHV-1.3 (subtipo encefalico). Recientemente, el BHV-1.3 se ha vuelto a clasificar como un herpesvirus diferente denominado BHV-5. Las infecciones por BHV-1 estan muy extendidas en la poblacion de ganado. En el ganado en estabulacion intensiva, la forma respiratoria es la mas comun. La infeccion vmca en solitario no supone riesgo para la vida pero predispone al ganado a neumoma bacteriana secundaria, que puede dar como resultado la muerte. En el ganado de reproduccion, son mas comunes los abortos o las infecciones genitales. Las infecciones genitales pueden aparecer en toros (balanopostitis pustular infecciosa) y vacas (IPV) a los 1-3 dfas desde el cruce o el contacto estrecho con un animal infectado. La transmision puede producirse en ausencia de lesiones visibles y por inseminacion artificial con semen de toros infectados de forma subclmica. El ganado con infecciones por BHV-1 latentes generalmente no muestra signos clmicos cuando se reactiva el virus, pero sirven como fuente de infeccion para otros animales susceptibles y por lo tanto perpetuan la enfermedad. El periodo de incubacion para las formas respiratoria y genital es de 2-6 dfas. En la forma respiratoria, los signos clmicos vanan de leves a graves, dependiendo de la presencia de neumoma bacteriana secundaria. Los signos clmicos incluyen fiebre, anorexia, tos, salivacion excesiva, descarga nasal que evoluciona de serosa a mucopurulenta, conjuntivitis con descarga lacrimal, orificio nasal inflamadas (de aim el nombre comun “nariz roja”) y disnea si se ocluye la laringe con material purulento. Pueden desarrollarse pustulas en la mucosa nasal y mas tarde formar placas diftericas. La conjuntivitis con opacidad corneal puede desarrollarse como la unica manifestacion de infeccion por BHV-1. En ausencia de neumoma bacteriana, la recuperacion se produce generalmente 4-5 dfas despues del comienzo de los signos clmicos. Pueden producirse abortos simultaneamente con la enfermedad respiratoria pero tambien pueden producirse hasta 100 dfas despues de la infeccion. Los abortos pueden producirse independientemente de la gravedad de la enfermedad en la madre. Los abortos se producen generalmente durante la segunda mitad de la gestacion, pero tambien puede producirse muerte embrionaria temprana. Los primeros signos de infecciones genitales en vacas son miccion frecuente, elevacion de la cabeza de la cola y descarga vaginal leve. La vulva esta hinchada y se presentan pequenas papulas, despues de erosiones y ulceras en la superficie de la mucosa. Si no se producen infecciones bacterianas secundarias, los animales se recuperan en 10-14 dfas. Si se produce una infeccion bacteriana, puede haber inflamacion del utero e infertilidad transitoria, con descarga vaginal purulenta durante varias semanas. En toros aparecen lesiones similares en el pene y el prepucio. La infeccion por BHV-1 puede ser grave en terneros jovenes y causar una enfermedad generalizada. Puede aparecer fiebre, descargas oculares y nasales, dificultad respiratoria, diarrea, descoordinacion y en ultima instancia convulsiones y muerte en un corto periodo despues de una infeccion vmca generalizada. La IBR rara vez es mortal en ganado a menos que se complique por neumoma bacteriana. En infecciones por IBR sin complicaciones la mayona de las lesiones se limitan al tracto respiratorio superior y traquea. Pueden encontrarse hemorragias de petequiales a equimoticas en las membranas mucosas de la cavidad nasal y los senos paranasales. Se desarrollan areas focales de necrosis en la nariz, faringe, laringe y traquea. Las lesiones pueden unirse para formar placas. Los senos con frecuencia estan cargados con un exudado seroso o serofibrinoso. A medida que avanza la enfermedad, la faringe se recubre con un exudado serofibrinoso y puede encontrarse fluido tenido de sangre en la traquea. Los ganglios linfaticos farmgeos y pulmonares pueden hincharse intensamente y estar hemorragicos. La traquettis puede extenderse a los bronquios y bronquiolos; cuando esto sucede, el epitelio se desprende hacia las vfas respiratorias. Las lesiones virales estan con frecuencia enmascaradas por infecciones bacterianas secundarias. En animales jovenes con infeccion por BHV-1 generalizada, pueden encontrarse erosiones y ulceras cubiertas con residuos en la nariz, esofago y preestomagos. Ademas puede encontrarse focos blancos en el hfgado, rinon, bazo y ganglios linfaticos. Los fetos abortados pueden tener lesiones palidas, focales y necroticas en todos los tejidos, pero que son especialmente visibles en el tugado.

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Se ha identificado que varios otros virus respiratorios bovinos estan implicados en la BRD. El herpesvirus bovino-4 se ha implicado en varias enfermedades, incluyendo BRD. El adenovirus bovino se ha asociado con un amplio espectro de enfermedades, siendo el adenovirus bovino tipo 3 el serotipo mas frecuentemente asociado con bRd. Se ha reconocido que dos serotipos de rinovirus bovino causan infecciones del tracto respiratorio en ganado. Otros virus que se ha descrito que estan asociados con BRD incluyen reovirus, enterovirus y coronavirus bovinos. Estos virus tienen un papel similar al de los otros virus previamente analizados en el sentido de que, en combinacion con otros agentes de agresion, pueden servir como iniciadores de una neumoma bacteriana. El coronavirus bovino tambien se asocia comunmente con diarrea en terneros. Se replica en el epitelio del tracto respiratorio superior y en los enterocitos del intestino, donde produce lesiones similares a rotavirus pero tambien infecta las celulas epiteliales del intestino grueso para producir atrofia de las crestas del colon. No estan disponibles vacunas para la prevencion de estas enfermedades respiratorias virales.

El rotavirus bovino es la causa vmca mas comun de diarrea en terneros. Estan implicados rotavirus de grupo A y B, pero el grupo A es el mas prevalente y clmicamente importante y contiene varios serotipos de diferente virulencia. El rotavirus se replica en los enterocitos maduros para la absorcion y productores de enzimas en las vellosidades del intestino delgado, conduciendo a ruptura y desprendimiento de los enterocitos con liberacion de virus para infectar celulas adyacentes. El rotavirus no infecta a las celulas inmaduras de las criptas. Con cepas virulentas de rotavirus, la perdida de enterocitos supera la capacidad de las criptas intestinales para sustituirlos; por lo tanto, se reduce la altura de las vellosidades con una disminucion consiguiente en el area de superficie de absorcion intestinal y la actividad enzimatica digestiva intestinal.

Se han demostrado otros virus, incluyendo virus Breda, un virus similar a calicivirus, Adenovirus, Astrovirus y Parvovirus en las heces de terneros con diarrea y pueden producir diarrea en terneros experimentalmente. Sin embargo, estos agentes tambien pueden demostrarse en las heces de terneros sanos. La importancia de estos agentes en el smdrome de diarrea neonatal todavfa esta por determinar. La Mannheimia haemolytica (antiguamente Pasteurella haemolytica) biotipo A, serotipo 1 es la bacteria que se afsla mas frecuentemente de los pulmones de ganado con BRD. Aunque menos frecuentemente cultivada que M. haemolytica, la Pasteurella multocida tambien es una causa importante de neumoma bacteriana. Cuando se produce la formacion de abscesos pulmonares, generalmente junto con neumoma cronica, se afsla frecuentemente Actinomyces (Arcanobacterium) pyogenes. En condiciones normales, la M. haemolytica permanece generalmente confinada al tracto respiratorio superior, en particular a las fosas airngdalares, y es diffcil de cultivar a partir de ganado sano. Despues de una agresion o infeccion vmca, el mdice replicacion de M. haemolytica en el tracto respiratorio superior aumenta rapidamente, como lo hace la probabilidad de cultivar la bacteria. El mdice de crecimiento bacteriano aumentado y la colonizacion de los pulmones pueden deberse a supresion del mecanismo de defensa del hospedador relacionada con agentes de agresion ambientales o infecciones vmcas. Es durante esta fase de crecimiento logantmico que se elaboran factores de virulencia por M. haemolytica, tales como una exotoxina que se ha denominado leucotoxina. La interaccion entre los factores de virulencia de las bacterias y las defensas del hospedador da como resultado lesiones tisulares y desarrollo de neumoma. Los signos clmicos de neumoma bacteriana vienen precedidos con frecuencia por signos de infeccion vmca del tracto respiratorio. Con la aparicion de la neumoma bacteriana, la gravedad de los signos clmicos aumenta y se caracteriza por depresion y toxemia. Habra fiebre (40-41°C); descarga nasal de serosa a mucopurulenta; tos productiva; y una frecuencia respiratoria superficial rapida. La auscultacion del campo pulmonar craneoventral pone de manifiesto ruidos bronquiales aumentados, crepitaciones y sibilancias. En casos graves puede desarrollarse pleuresfa que se caracteriza por un patron de respiracion irregular y grunidos en la espiracion. El animal tendra mal aspecto si la neumoma se hace cronica, que habitualmente se asocia con la formacion de abscesos pulmonares. La M. haemolytica causa una neumoma fibrinosa o neumoma fibrinonecrotica aguda grave. La neumoma tiene un patron bronconeumonico. Macroscopicamente existen amplias regiones craneoventrales de negro rojizo a marron grisaceo de consolidacion con engrosamiento gelatinoso de septos interlobulares y pleuritis fibrinosa. Existen amplias trombosis, focos de necrosis pulmonar y pruebas limitadas de bronquitis y broncoilitis. La P. multocida se asocia con una bronconeumoma de fibrinosa a fibrinopurulenta menos fulminante. Al contrario que M. haemolytica, P. multocida se asocia solo con pequenas cantidades de exudacion de fibrina, algunos trombos, necrosis pulmonar limitada y bronquitis y broncoilitis supurativa.

El Haemophilus somnus (recientemente reclasificado como Histophilus somni) se esta reconociendo cada vez mas como un patogeno importante en la BRD; estas bacterias son habitantes normales de la nasofaringe del ganado. La infeccion por H. somnus de los pulmones da como resultado una bronconeumoma purulenta que puede seguirse de septicemia e infeccion de multiples organos. Ocasionalmente, H. somnus se asocia con una pleuritis considerable. H. somnus puede causar una enfermedad septicemica aguda, habitualmente mortal, que puede implicar a los sistemas nervioso, musculoesqueletico, circulatorio y respiratorio, por separado o en conjunto. El sistema reproductor se ve afectado con frecuencia pero habitualmente sin que los otros sistemas esten implicados clmicamente. La enfermedad puede caracterizarse por fiebre, depresion grave, ataxia, debilidad, ceguera, coma y muerte en un intervalo de varias horas a varios dfas. Aparece esporadicamente ganado de carne y de leche individuales y se encuentra casi por todo el mundo. H. somnus es un cocobacilo pleomorfico, gram negativo, inmovil y no formador de esporas que requiere un medio enriquecido y una atmosfera microaerofila para cultivo. Parece ser identico a Histophilus ovis y Haemophilus agni, agentes etiologicos de septicemia, mastitis y epididimitis en ovejas; sin embargo, la transmision de H. somnus entre ovejas y ganado no se ha demostrado. Se han diferenciado cepas patogenas y no patogenas por inoculacion intracisternal de terneros jovenes con organismos de diversas fuentes.

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Las cepas patogenas y no patogenas de H. somnus se llevan en la cubierta y el prepucio de machos, la vagina de ganado hembra y en los conductos nasales de ambos sexos. El organismo puede colonizar el tracto respiratorio, presumiblemente despues de inhalacion y se encuentra frecuentemente en la orina. La prevalencia del organismo en ganado es probablemente elevada porque se encuentran altos tftulos de anticuerpos espedficos en una gran proporcion de ganado ensayado. Se han reconocido varios smdromes patologicos causados por H. somnus, incluyendo trombomeningoencefalitis, bronconeumoma fibrinopurulenta, pleuritis fibrinosa y poliartritis. Aparecen necrosis de musculo miocardico y esqueletico. Se ha documentado vaginitis, cervicitis y endometritis supurativa en vacas infectadas experimentalmente y naturalmente despues de la reproduccion y el organismo es una causa de aborto esporadico. Las cepas de H. somnus que causan enfermedad se adhieren al endotelio de los vasos, dando como resultado contraccion, exposicion del colageno, adhesion de plaquetas y trombosis. La TME es el resultado cuando esto se produce en el cerebro y membranas asociadas, despues de la invasion del organismo hacia el torrente sangumeo de ganado susceptible. Las cepas pueden adherirse al endotelio en vasos de la pleura, miocardio, sinovio o una diversidad de otros tejidos y producir inflamacion en esos sitios (por ejemplo, se han registrado infecciones de la laringe y ofdo medio). La susceptibilidad de animales y variaciones individuales en la preferencia de cepas del organismo por vasos en diferentes tejidos pueden ser importante en el desarrollo de la forma de enfermedad, pero los mecanismos implicados no se entienden completamente. Los problemas reproductivos no tienen que estar precedidos necesariamente por bacteriemia, pero la patogenesis esta muy poco definida. Con frecuencia una fiebre tan alta como de 42°C es el primer signo de enfermedad; sin embargo, esta habitualmente desciende a normal o subnormal en horas. Otros descubrimientos estan determinados por el sistema o sistemas implicados y pueden incluir respiracion rapida, rigidez, que las articulaciones se doblen hacia delante en los espolones, depresion grave, ataxia, paralisis y opistotonos, seguido de coma y muerte en varias horas. Los animales afectados pueden estar ciegos y a veces se observan hemorragias retinianas con focos grises de necrosis retiniana. De forma irregular aparecen signos tales como hipersensibilidad, convulsiones, excitacion, nistagmo y caminar en drculos y pueden estar relacionados con las regiones del SNC afectadas en el curso de desarrollo de la enfermedad. Ocasionalmente, se encuentran animales muertos indicando un curso rapidamente mortal. Es comun un cambio marcado en el recuento total y diferencial de globulos blancos; aparecen leucopenia y neutropenia en enfermedad mortal grave, habitualmente aguda, mientras que puede existir neutrofilia en una enfermedad menos grave. En la TME, el recuento celular total del LCR esta notablemente aumentado y predominan los neutrofilos. Durante la septicemia, el organismo puede recuperarse de la sangre, lfquido sinovial, LCR, cerebro, rinones, orina y una diversidad de otros organos. Las lesiones se caracterizan por trombosis vascular e infarto del tejido circundante. Son caractensticos focos de necrosis de rojos a marrones aleatoriamente distribuidos con hemorragia en la superficie y secciones de corte del cerebro y medula espinal, retina, musculo esqueletico, miocardio, rinon, intestino y bazo. A veces puede observarse una meningitis fibrinopurulenta con LCR turbio en la superficie del cerebro y medula espinal y puede aparecer una poliserositis, especialmente de articulaciones y pleural. Puede desarrollarse una bronconeumoma fibrinosa aguda con una necrosis tisular despues de infecciones de transmision aerea.

Excepto para M. bovis, el papel exacto de micoplasmas y ureaplasmas en BRD requiere una mejor definicion. Pueden recuperarse micoplasmas a partir del tracto respiratorio de terneros no neumonicos pero la frecuencia de aislamiento es mayor en los que presentan enfermedad del tracto respiratorio. Los micoplasmas comunmente recuperados de los pulmones de terneros neumonicos incluyen Mycoplasma dispar, Ureaplasma spp. Las infecciones experimentales habitualmente dan como resultado signos de inaparentes a leves de enfermedad respiratoria. Esto no excluye un papel sinergico para micoplasmas junto con virus y bacterias en BRD. Las lesiones descritas incluyen manguitos linfoides peribronquiales y peribronquiolares y alveolitis. El cultivo de estos organismos requiere medios y condiciones especiales y a los organismos les puede llevar hasta una semana crecer.

Se han identificado clamidias en diversas partes del mundo como una causa de neumoma enzootica en terneros. El agente causal es Chlamydia psittaci. Algunos aislados respiratorios de terneros tienen propiedades de inmunotipos 1 y 6 y son similares a cepas recuperadas de infecciones intestinales y abortos de ganado y ovejas. Se ha recuperado el inmunotipo 6 a partir de pulmones neumonicos de terneros y cerdos. Por lo tanto, el tracto GI debe considerarse como un sitio importante en la patogenesis de infecciones clamidiales y como un deposito y fuente natural de los organismos. La neumoma clamidial ha afectado a terneros en una completa variedad de condiciones, incluyendo granjas de leche. Se ha demostrado experimentalmente un sinergismo entre Chlamydia y P. haemolytica. Habitualmente, los terneros con neumoma clamidial estan febriles, letargicos y disneicos y tienen una descarga nasal serosa y posteriormente mucopurulenta y una tos seca no productiva. Los terneros en edad de destete son los que se ven afectados mas frecuentemente, pero ganado de mas edad tambien puede mostrar signos de infeccion. La lesion pulmonar aguda es una neumoma broncointersticial. Las partes anteroventrales de los pulmones se afectan pero, en casos graves, pueden estar implicados lobulos completos. La tos seca se atribuye a traquettis. Los cambios microscopicos en los pulmones incluyen bronquitis y alveolitis supurativa que evolucionan a hiperplasia neumocftica tipo II y engrosamiento intersticial.

La campilobacteriosis genital bovina es una enfermedad venerea de ganado caracterizada principalmente por muerte embrionaria temprana, infertilidad, una estacion de partos prolongada y ocasionalmente aborto. La distribucion probablemente es mundial. La causa es la bacteria flagelada polar movil, gram negativa, curvada o espiral Campylobacter fetus venerealis o Campylobacter fetus fetus. Durante muchos anos, se pensaba que C. fetus fetus (antiguamente C. fetus intestinalis) era generalmente un organismo intestinal, que causaba solo ocasionalmente abortos en ganado y que no era causa de infertilidad. Sin embargo, se ha demostrado que C. fetus

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fetus tambien puede ser una causa significativa del smdrome de infertilidad clasico habitualmente atribuido a Campylobacter fetus venerealis. Existen varias cepas de C. fetus fetus y el unico modo de determinar si una cepa es una causa de infertilidad es ensayar esa posibilidad en un grupo de novillas. Los Campylobacter spp son muy labiles y se destruyen rapidamente por calor, sequedad y exposicion a la atmosfera. A menos que se cultiven rapidamente despues de la recogida del animal y que se cultiven en condiciones microaerofilas o anaerobias, no creceran las campilobacterias. El Campylobacter fetus se transmite de forma venerea y tambien por instrumentos, cama contaminados o por inseminacion artificial usando semen contaminado. Los toros individuales vanan en su susceptibilidad a infeccion debido a que algunos se convierten en portadores permanentes mientras que otros parecen ser resistentes a la infeccion. Los toros tambien pueden transmitir la infeccion mecanicamente durante varias horas despues de la copula con una vaca infectada. En vacas, la duracion del estado de portador tambien es variable; algunas eliminan la infeccion rapidamente mientras que otras pueden llevar C. fetus durante > 2 anos. Se desprenden anticuerpos IgA en el moco cervical en cantidades significativas en ~50% de vacas durante varios meses despues de la infeccion y son utiles para el diagnostico. Aunque la mayor parte del tracto genital puede estar libre de infeccion cuando una vaca concibe finalmente, la vagina puede permanecer cronicamente infectada, incluso durante la gestacion. Las vacas son sistemicamente normales, pero existen grados variables de endometritis mucopurulenta que causa muerte embrionaria temprana, fases luteas prolongadas, ciclos de estro irregular, reproduccion repetida y, como resultado, periodos de partos prolongados. No son comunes abortos observados. En rebanos no manejados de forma intensiva, la enfermedad puede reconocerse solamente cuando los examenes de gestacion pongan de manifiesto indices de gestacion bajos o marginalmente bajos, o lo que es mas importante, grandes variaciones en las duraciones de gestacion, especialmente cuando la enfermedad se ha introducido recientemente en el rebano. En anos posteriores, la infertilidad se limita habitualmente a sustituir novillas y unas pocas vacas susceptibles. Los toros son asintomaticos y producen semen normal.

La leptospirosis es una enfermedad contagiosa de los animales, incluyendo el hombre, causada por diversas serovariantes leptospirales inmunologicamente distintas, la mayona de las cuales se consideran subgrupos de Leptospira interrogans. Las infecciones pueden ser asintomaticas o pueden causar diversos signos, incluyendo fiebre, ictericia, hemoglobinuria, insuficiencia renal, infertilidad, aborto y muerte. Despues de una infeccion aguda, las leptospiras se localizan frecuentemente en los rinones u organos reproductores y se desprenden en la orina, a veces en grandes cantidades durante meses o anos. Dado que los organismos sobreviven en aguas superficiales durante periodos prolongados, la enfermedad es a menudo de transmision tffdrica.

En los Estados Unidos la enfermedad se debe principalmente a las serovariantes Leptospira hardjo, Leptospira interrogans serovar hardjo (hardjo Prajitno), L. borgpetersenii serovar hardjo (hardjo Bovis), Leptospira pomona, y Leptospira grippotyphosa. Sin embargo, tambien se han aislado las serovariantes Leptospira canicola y Leptospira icterohaemorrhagiae. Los terneros pueden tener fiebre, anorexia y disnea y en infecciones por Leptospira pomona, ictericia, hemoglobinuria, y anemia. La temperatura corporal puede aumentar subitamente a 40,5-41°C. La hemoglobinuria rara vez dura mas de 48-72 h. La ictericia se elimina rapidamente y se sigue de anemia. Los globulos rojos comienzan aumentar en numero en 4-5 dfas y vuelven a lo normal 7-10 dfas despues. Sin embargo, las infecciones por Leptospira hardjo habitualmente no causan anemia hemofftica, lo que hace el diagnostico mas diffcil. La morbilidad y mortalidad son mayores en terneros que en ganado adulto. En ganado de mas edad, los signos vanan enormemente y el diagnostico es mas diffcil. Las infecciones enzooticas por Leptospira hardjo, que habitualmente dan como resultado leche anormal, son mas evidentes en ganado de leche que de carne. Los signos se limitan habitualmente a produccion de leche y terneros disminuida; no se produce una crisis hemofftica. La leche es espesa, amarilla y tenida de sangre; puede contener coagulos aunque existen pocas evidencias de inflamacion mamaria. La produccion de leche vuelve a lo normal en 10-14 dfas incluso en ausencia de tratamiento. Los abortos y mortinatos, que son comunes en infecciones por Leptospira pomona y esporadicos en infecciones por Leptospira hardjo ocurren generalmente a las 3-10 semanas despues de la infeccion inicial. Los abortos son mas comunes durante el tercer trimestre. Una tormenta de abortos en un rebano de reproduccion es a menudo el primer indicio de que existe leptospirosis, debido a que los signos iniciales leves con frecuencia pasan desapercibidos. En rebanos infectados de forma endemica, los abortos se producen principalmente en animales mas jovenes y son esporadicos, mas que manifestarse como tormentas de aborto. Los terneros criados por vacas infectadas previamente estan protegidos por anticuerpos calostrales hasta 6 semanas. Los terneros generalmente tienen un tftulo de anticuerpos similar al de sus madres. En la forma aguda, destacan anemia, ictericia, hemoglobinuria y hemorragia submucosas. Los rinones se hinchan, con hemorragias petequiales y equimoticas multifocales que se vuelven palidas con el tiempo. El tffgado puede hincharse, con areas diminutas de necrosis focal. Se observan petequias en otros organos en casos fulminantes; sin embargo, en las infecciones por Leptospira hardjo mas prevalentes, las lesiones estan principalmente limitadas a los rinones.

La brucelosis esta causada por una bacteria del genero Brucella y esta caracterizada por aborto, retencion de placenta y en menor grado, orquitis e infeccion de las glandulas sexuales accesorias en machos. La enfermedad en ganado, carabao y bisonte esta causada casi exclusivamente por Brucella abortus; sin embargo, Brucella suis o Brucella melitensis estan ocasionalmente implicadas en algunos rebanos de ganado. Brucella suis no parece contagiarse de una vaca a otra. La infeccion por Brucella abortus se extiende rapidamente y causa muchos abortos en rebanos no vacunados. Tfpicamente, en un rebano en el que la enfermedad sea endemica, una vaca infectada aborta solo una vez tras la exposicion; las gestaciones y lactaciones posteriores parecen normales. Despues de la exposicion, mucho ganado se vuelve bacteriemico durante un periodo corto y desarrolla aglutininas y otros

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anticuerpos; otros resisten la infeccion y un pequeno porcentaje de vacas infectadas se recupera. Un ensayo de aglutinacion de suero positivo precede habitualmente al aborto o un parto normal, pero puede retrasarse en ~15% de los animales. El periodo de incubacion puede ser variable y esta relacionado con la fase de gestacion en el momento de la exposicion. Los organismos se desprenden en leche y descargas uterinas y la vaca puede volverse temporalmente esteril. La bacteria puede encontrarse en el utero durante la gestacion, involucion uterina y poco frecuentemente, durante un tiempo prolongado en el utero no gravido. El desprendimiento de la vagina desaparece en gran medida con la reduccion de los fluidos despues del parto. Algunas vacas infectadas que abortaron previamente desprenden brucelas desde el utero en partos normales posteriores. Los organismos se desprenden en leche durante un periodo de tiempo variable — en la mayona del ganado de por vida. Se produce transmision natural por ingestion de organismos que estan presentes en grandes cantidades en fetos abortados, membranas fetales y descargas uterinas. El ganado puede ingerir pienso y agua contaminada o lamer los genitales contaminados de otros animales. Parece ser poco frecuente la transmision venerea por toros infectados a vacas susceptibles. La transmision puede producirse por inseminacion artificial cuando se deposita semen contaminado con Brucella en el utero pero, segun se dice, no cuando se deposita en el cuello uterino medio. Las brucelas pueden entrar en el cuerpo a traves de membranas mucosas, conjuntivas, heridas o incluso piel intacta. Los vectores mecanicos (por ejemplo, otros animales, incluyendo seres humanos) pueden extender la infeccion. Se han recuperado brucelas de fetos y de estiercol que ha permanecido en un entorno fresco durante > 2 meses. La exposicion a luz directa del sol destruye los organismos en pocas horas. El aborto es la manifestacion mas evidente. Las infecciones tambien pueden causar mortinatos o terneros debiles, retencion de placenta y produccion de leche reducida. Habitualmente, no se altera la salud general en abortos sin complicaciones. Las vesfculas seminales, ampollas, testfculos y epidfdimos pueden infectarse en toros; por lo tanto, los organismos estan en el semen. Pueden demostrarse aglutininas en el plasma seminal de toros infectados. Pueden aparecen abscesos testiculares. Las infecciones antiguas pueden dar como resultado articulaciones artnticas en algunos animales.

Los clostridios son organismos con forma de bacilo relativamente grandes, anaerobios, formadores de esporas. Las esporas son ovaladas, a veces esfericas y de posicion central, subterminal o terminal. Las formas vegetativas de clostridios en lfquidos tisulares de animales infectados aparecen individualmente, en parejas o rara vez en cadenas. La diferenciacion de las diversas especies patogenas y relacionadas se basa en caractenstica de cultivo, forma de espora y posicion, reacciones bioqmmicas y la especificidad antigenica de toxinas o antfgenos de superficie. Los habitats naturales de los organismos son el suelo y el tracto intestinal de animales, incluyendo el ser humano. Pueden adquirirse cepas patogenas por animales susceptibles por contaminacion de heridas o por ingestion. Las enfermedades producidas de este modo son una amenaza constante para la produccion de ganado con exito en muchas partes del mundo.

El Clostridium haemolyticum es un organismo del suelo que puede encontrarse de forma natural en el tracto GI de ganado. Puede sobrevivir durante periodos prolongados en suelo contaminado o en huesos de canales de animales que se han infectado. Despues de la ingestion, las esporas latentes se alojan en ultima instancia en el hngado. El periodo de incubacion es extremadamente variable y el comienzo depende de la presencia de un lugar de anaerobiosis en el tngado. Dicho nido para la germinacion esta muy frecuentemente causado por infeccion por trematodos, mucho menos frecuentemente por alto contenido en nitrato de la dieta, perforacion accidental del hngado, biopsia hepatica o cualquier otra causa de necrosis localizada. Cuando las condiciones para anaerobiosis son favorables, las esporas germinan y las celulas vegetativas resultantes se multiplican y producen p toxina (fosfolipasa C), que causa hemolisis intravascular y sus secuelas, incluyendo anemia hemolttica y hemoglobinuria. Puede encontrarse ganado bovino muerto sin signos premonitorios. Habitualmente, existe un comienzo subito de depresion grave, fiebre, dolor abdominal, disnea, disentena y hemoglobinuria. La anemia y la ictericia estan presentes en grados variables. Puede aparecer edema de la falda. Los niveles de hemoglobina y globulos rojos son muy bajos. La duracion de los signos clmicos vana de ~12 h en vacas gestantes a ~3-4 dfas en otro ganado. La mortalidad en animales sin tratar es del ~95%. Algunas vacas sufren ataques subclmicos de la enfermedad y por lo tanto actuan como portadores inmunes. Estan presentes deshidratacion, anemia y a veces edema subcutaneo. Existe fluido corporal en las cavidades abdominal y toracica. Los pulmones no se afectan macroscopicamente y la traquea contiene espuma sanguinolenta con hemorragias en la mucosa. El intestino delgado y ocasionalmente el intestino grueso estan hemorragicos; sus contenidos contienen con frecuencia sangre libre o coagulada. Un infarto anemico en el hngado es practicamente patognomonico; esta ligeramente elevado, mas claro de color que el tejido circundante y perfilado por una zona rojo azulada de congestion. Los rinones estan oscuros, friables y habitualmente tachonados con petequias. La vejiga contiene orina rojo purpura. Despues de la muerte, el rigor mortis se establece mas rapidamente de lo habitual.

El Clostridium chauvoei aparece de forma natural en el tracto intestinal de animales. Probablemente puede permanecer viable en el suelo durante muchos anos, aunque no crece activamente en el mismo. El pasto contaminado parece ser una fuente de organismos. Se han producido brotes de carbunco sintomatico en ganado en granjas en las que se han realizado excavaciones recientes que sugieren que la alteracion del suelo puede activar esporas latentes. Los organismos probablemente se ingieren, pasan a traves de la pared del tracto GI y despues de obtener acceso al torrente sangumeo se depositan en el musculo y otros tejidos. En ganado, la infeccion por carbunco sintomatico es endogena, al contrario que el edema maligno. Se desarrollan lesiones sin ninguna historia de heridas, aunque la aparicion de cardenales o un ejercicio excesivo pueden precipitar algunos casos. Comunmente, los animales que contraen el carbunco sintomatico son de la variedad de carne, con un estado de

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salud excelente, aumento de peso y habitualmente los mejores animales de su grupo. Aparecen brotes en los que se encuentran unos pocos nuevos casos cada dfa durante varios dfas. La mayona de los casos se dan en ganado de 6 meses a 2 anos de edad, pero pueden verse afectados terneros de buen aspecto tan jovenes como de 6 semanas y ganado tan mayor como de 10-12 anos. La enfermedad aparece habitualmente en verano y otono y es poco comun durante el invierno. En ovejas, la enfermedad no se limita a los jovenes y la mayona de los casos siguen a alguna forma de lesion tal como cortes por esquileo, corte de cola, recortes de lana o castracion. Habitualmente el comienzo es subito y pueden encontrarse unos pocos animales de ganado bovino muertos sin signos premonitorios. Son comunes una cojera aguda y una depresion marcada. Inicialmente existe fiebre, pero en el momento en el que los signos clmicos son evidentes, la temperatura puede ser normal o subnormal. Se desarrollan hinchamientos edematosos y crepitantes caractensticos en la cadera, hombro, pecho, espalda, cuello o en otra parte. Al principio, el hinchamiento es pequeno, caliente y doloroso. A medida que la enfermedad evoluciona rapidamente, el hinchamiento aumenta, existe crepitacion a la palpacion y la piel se vuelve fna e insensible a medida que disminuye el suministro de sangre al area. Los signos generales incluyen postracion y temblores. La muerte se produce a las 12-48 h. En algunos animales, las lesiones se limitan al miocardio y al diafragma, sin pruebas ante mortem fiables de la lesion localizada.

Se sospecha, aunque no se ha confirmado todavfa, que Clostridium novyi es una causa de muerte subita en ganado bovino y cerdos alimentados con dietas con alto contenido de cereales, y en los que no se podfan detectar lesiones pre-existentes en el hngado. Las toxinas letales y necrosantes (principalmente toxina a) danan el parenquima hepatico, permitiendo de este modo que las bacterias se multipliquen y produzcan una cantidad letal de la toxina. Habitualmente, la muerte es subita sin smtomas bien definidos. Los animales afectados tienden a quedarse rezagados detras del rebano, asumen una postura de postracion esternal y mueren en pocas horas. La mayona de los casos aparecen en verano y a principios del otono, cuando la infeccion hepatica provocada por trematodos esta en su esplendor. La enfermedad es mas prevalente en ovejas de 1 a 4 anos de edad y se limita a animales infectados con trematodos en el hngado. La diferenciacion de la fascioliasis aguda puede ser diffcil, pero las muertes peragudas de los animales que muestran lesiones tfpicas en la necropsia debenan levantar sospechas de hepatitis necrotica infecciosa. Las lesiones mas caractensticas son los focos necroticos amarillo grisaceo en el hngado que con frecuencia siguen las trayectorias migratorias de los trematodos jovenes. Otros hallazgos comunes son un pericardio aumentado de tamano relleno con un fluido de color paja, y un exceso de fluido en las cavidades peritoneal y toracica. Habitualmente, se produce una ruptura extensa de los capilares en el tejido subcutaneo, que hace que la piel adyacente se torne negra (de allf el nombre comun de enfermedad negra).

El Clostridium septicum se encuentra en el suelo y los contenidos intestinales de animales (incluyendo el hombre) de todo el mundo. La infeccion comunmente se produce a traves de la contaminacion de heridas que contienen tejido desvitalizado, suciedad o algun otro debilitante de los tejidos. Se infectan heridas causadas por accidente, castracion, recortes de lana, vacunacion antihigienica y parto. Los signos generales, tales como anorexia, intoxicacion y fiebre alta, asf como lesiones locales, se manifiestan al cabo de unas pocas horas o unos pocos dfas de la lesion predisponente. Las lesiones locales son hinchamientos blandos que se hunden al presionar y que se extienden rapidamente debido a la formacion de grandes cantidades de exudado que infiltra el tejido conjuntivo subcutaneo e intramuscular de las areas afectadas. El musculo en dichas areas es de marron oscuro a negro. Las acumulaciones de gas no son comunes. Se produce edema grave de la cabeza de carneros despues de la infeccion de heridas inflingidas por la lucha. El edema maligno asociado con laceraciones de la vulva en el parto se caracteriza por edema marcado de la vulva, toxemia grave y muerte en 24-48 horas. La similitud con el carbunco sintomatico es notable, y la diferenciacion realizada en la necropsia es poco fiable; el unico procedimiento seguro es la confirmacion por laboratorio. Los caballos y cerdos son susceptibles al edema maligno pero no al carbunco sintomatico.

La enfermedad infecciosa causada por Clostridium sordellii tambien se manifiesta como edema maligno en ganado y tambien se caracteriza por un hinchamiento edematoso, no hemorragico ni gaseoso de la cabeza, cara y cuello de carneros jovenes. Esta infeccion se inicia en carneros jovenes por su sus topetazos continuos entre sh Los tejidos subcutaneos amoratados y magullados proporcionan condiciones adecuadas para el crecimiento de clostridios patogenos y las roturas de la piel ofrecen una oportunidad para su entrada.

La infeccion con C. perfrigens tipos A, B y C causa enteritis grave, disentena, toxemia y alta mortalidad en terneros jovenes. Los tipos B y C producen ambos la toxina p altamente necrosante y letal que es responsable del extenso dano intestinal. Esta toxina es sensible a las enzimas proteolfticas, y la enfermedad esta asociada con la inhibicion de proteolisis en el intestino. Se ha sugerido que el calostro de las cerdas, que contiene un inhibidor de tripsina, es un factor en la susceptibilidad de los cerdos jovenes. El tipo C tambien causa enterotoxemia en ganado adulto. En terneros, existe diarrea aguda, disentena, dolor abdominal, convulsiones y opistotonos. La muerte puede producirse en unas pocas horas, pero los casos menos graves sobreviven durante algunos dfas y es posible la recuperacion en un periodo de varios dfas. La enteritis hemorragica con ulceracion de la mucosa es la lesion mas importante en todas las especies. Macroscopicamente, la parte afectada del intestino presenta un color azul oscuro-purpura y a simple vista parece ser un infarto asociado con torsion mesenterica. Se pueden analizar muestras de los contenidos intestinales para grandes cantidades de bacterias gram-positivas con forma de bacilos, y se pueden realizar filtrados para detectar toxinas y luego identificar por neutralizacion con antisuero espedfico.

Esta enterotoxemia clasica causada por C. perfringens tipo D se produce rara vez en ganado. Su distribucion es

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mundial y puede suceder en animales de cualquier edad. Se ha sospechado la enfermedad en terneros de carne bien nutridos que lactan de vacas altas productoras que pastan de pasto lozano y en smdrome de muerte subita en ganado de estabulacion intensiva; sin embargo, faltan pruebas de laboratorio que lo confirmen al final. Los terneros afectados de forma aguda que no se encuentra muertos muestran mama, convulsiones, ceguera y muerte en unas pocas horas. Los terneros afectados de forma subaguda presentan estupor durante unos pocos dfas y pueden recuperarse.

La toxemia por tetanos esta causada por una neurotoxina espedfica producida por el Clostridium tetani en el tejido necrotico. Casi todos los mairnferos son susceptibles a esta enfermedad. Si bien el tetanos se distribuye por todo el mundo, hay algunas zonas, como la seccion de Montanas Rocosas del Norte de los Estados Unidos, en donde el organismo es muy infrecuente en el suelo y en donde el tetanos practicamente se desconoce. En general, la aparicion de C. tetani en el suelo y la incidencia de tetanos en seres humanos y caballos es mayor en las partes mas calidas de los diversos continentes. Clostridium tetani, un anaerobio con esporas esfericas terminales, se halla en el suelo y en los tractos intestinales. En la mayona de los casos, se introduce en los tejidos a traves de heridas, particularmente heridas punzantes profundas que proporcionan un entorno anaerobio adecuado.

La infeccion con Salmonella spp puede producir diarrea en animales de todas las edades, especialmente aquellos que estan estresados, amontonados o expuestos a alimentacion o suministro de agua densamente contaminado. La salmonelosis esta causada por muchas especies de salmonelas y se caracteriza clmicamente por uno o mas de tres smdromes principales: septicemia, enteritis aguda y enteritis cronica. La incidencia ha aumentado con la intensificacion de la produccion de todo tipo de ganado. Los terneros jovenes desarrollan habitualmente la forma septicemica. El ganado adulto desarrolla enteritis aguda. Puede desarrollarse una enteritis cronica ocasionalmente en ganado. Los animales gestantes pueden abortar. En animales de mas edad, la enfermedad se manifiesta por disentena y toxemia y la mortalidad puede ser significativa. Aunque muchas otras Salmonella spp pueden causar enfermedad, los mas importantes en ganado son S. typhimurium, S. dublin y S. newport. Aunque sus patrones clmicos resultantes no son diferentes, diferentes especies de salmonela tienden a diferir en su epidemiologfa. El perfil plasmfdico y los patrones de resistencia a los farmacos a veces son marcadores utiles para estudios epidemiologicos. Las heces de animales infestados pueden contaminar pienso y agua, leche, carnes frescas y procesadas de mataderos, productos vegetales y animales usados como fertilizantes o piensos, pastos y pastizales y muchos materiales inertes. Los organismos pueden sobrevivir durante meses en areas humedas, templadas tales como en granjas de cerdos de engorde o en casetas de agua pero sobreviven menos de 1 semana en estiercol de ganado compuesto. Los roedores y las aves salvajes son tambien fuentes de infeccion. La prevalencia de la infeccion vana entre las especies y los pafses, y es mucho mas alta que la incidencia de la enfermedad clmica, que comunmente se precipita por situaciones de agresion tales como privacion subita del alimento, transporte, seqrna, amontonamiento, parto y administracion de algunos farmacos.

Son patogenos gastrointestinales relevantes adicionales que pueden usarse en la presente invencion Escherichia coli, Cryptosporidium parvum y Mycobacterium avium paratuberculosis. La infeccion por Escherichia coli causa enfermedad intestinal grave en animales jovenes caracterizada como diarrea neonatal, diarrea post destete, enfermedad de edema y/o septicemia dependiendo de los factores de virulencia presentes en la cepa que causa la infeccion. Los terneros infectados con E. coli patogena pueden desarrollar diarrea grave causando deshidratacion mortal o infecciones septicemicas mortales. La paratuberculosis es una enteritis contagiosa cronica caracterizada por diarrea persistente y progresiva, perdida de peso, debilitamiento y finalmente muerte. Afecta a ganado bovino, ovejas, cabras, llamas, camellos, ciervos de granja y otros rumiantes domesticos, exoticos y silvestres. Tambien se ha reconocido en conejos silvestres; pueden infectarse caballos y cerdos experimentalmente. La distribucion es mundial.

Los animales con paratuberculosis debenan considerarse como riesgos zoonoticos potenciales hasta que se aclare la situacion. El organismo causal es Mycobacterium avium paratuberculosis, antiguamente conocido como M. paratuberculosis o M. johnei. Ocasionalmente, se afslan otras subespecies de M. avium de casos. El organismo es muy resistente y puede sobrevivir en pasto durante mas de 1 ano, pero la luz del sol, suelos alcalinos y la sequedad reducen su mdice de supervivencia. Se desprenden grandes cantidades en heces de animales infectados y la infeccion se adquiere por ingestion de pienso y agua contaminados. La introduccion de la enfermedad en un rebano limpio es habitualmente por portadores infectados de forma subclmica. La infeccion se adquiere pronto en la vida, pero rara vez se desarrollan signos clmicos en ganado < 2 anos de edad. La resistencia aumenta con la edad, y es poco probable que el ganado expuesto por primera vez como adulto se infecte. La mayona de los terneros se infectan poco despues del nacimiento por lactacion de ubres contaminadas con heces de animales infectados o por alojamiento en apriscos contaminados. El organismo tambien puede estar presente en el calostro y la leche de vacas infectadas y tambien se han descrito infecciones intrauterinas. Despues de la ingestion, las bacterias infectan macrofagos en la mucosa del intestino delgado inferior y en ganglios linfaticos asociados. La mayona de los animales eliminaran la infeccion por una respuesta inmune temprana mediada por celulas que estimula la actividad microbicida de macrofagos. En animales susceptibles, los organismos se multiplican y provocan una enteritis cronica que conduce a enfermedad clmica. Puede llevar de meses a anos desarrollarse y habitualmente es paralela a una disminucion en la inmunidad mediada por celulas y un aumento en la ineficacia de anticuerpos sericos. Sin embargo, el desprendimiento fecal comienza antes que sean evidentes signos clmicos. Puede aislarse Mycobacterium avium paratuberculosis de heces, ganglios linfaticos mesentericos e ileocecales, paredes intestinales engrosadas y, menos frecuentemente, de la ubre y de los tractos reproductivos de ambos sexos.

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La criptosporidiosis es una enterocolitis de distribucion cosmopolita causada por el parasito coccidiano Cryptosporidium parvum. No es espedfico de hospedador y es comun en rumiantes jovenes, particularmente terneros; tambien se encuentra en seres humanos y cerdos y es poco frecuente en perros, gatos y caballos. Otros criptosporidios causan enfermedad en reptiles y aves. La enfermedad en terneros, caracterizada por perdida de peso y diarrea acuosa, es clmicamente indistinguible de muchas otras causas de diarrea en terneros. Cryptosporidium parvum es un protozoo diminuto que se transmite por la via fecal-oral. Se esporulan ooquistes (cuatro esporozoftos) cuando se desprenden en las heces y, por lo tanto, son inmediatamente infecciosos. El periodo de incubacion media es de ~4 dfas. Los terneros de 1-3 semanas de edad parecen ser mas susceptibles. Signos tales como anorexia, perdida de peso, diarrea y tenesmo, se parecen a los causados por varios otros patogenos intestinales; sin embargo, se producen infecciones sin signos. La criptosporidiosis sin complicaciones rara vez es mortal. La enfermedad puede ser grave en individuos inmunocomprometidos. Si se observa enfermedad grave en terneros, debenan descartarse otros agentes de enfermedad o infecciones concurrentes. Aunque C. parvum puede infectar practicamente el tracto intestinal completo, habitualmente se afecta mas gravemente el intestino delgado distal. La infeccion en caballos se limita al intestino delgado. Las lesiones macroscopicas pueden consistir en mucosa intestinal hiperemica y contenidos intestinales amarillentos. Microscopicamente, es evidente una atrofia vellosa de leve a grave con organismos esfericos en el borde en cepillo. A diferencia de Eimeria e Isospora spp, que son parasitos intracelulares, C. parvum es intramembranoso y reside en el borde en cepillo de las celulas epiteliales intestinales.

La inflamacion de la glandula mamaria (mastitis) se debe casi siempre a los efectos de la infeccion por patogenos bacterianos o micoticos. La mastitis puede asociarse con infeccion por muchos otros organismos, incluyendo Streptococcus uberis, Streptococcus dysgalactiae, Streptococcus agalactiae, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Klebsiella spp., Pseudomonas aeruginosa, Actinomyces pyogenes, Mycoplasma spp, Nocardia asteroides, Serratia, Mycobacterium spp, Clostridium perfringens, Pasteurella spp y Prototheca spp.

Las dermatomicosis (Dermatofitosis) en animales son enfermedades antropozoonoticas de la piel y tejidos relacionados. Los smtomas clmicos se caracterizan por perdida de pelo en el area afectada, hiperemia, descamacion y costras similares a las producidas por exposicion a asbestos. La inflamacion se acompana con frecuencia de supuracion. Con frecuencia las dermatomicosis se caracterizan tambien por infeccion localizada de la piel. Las dermatomicosis en animales conllevan un impacto socioeconomico sustancial. Los animales enfermos requieren un tratamiento prolongado y pueden propagar la infeccion tanto a animales como a seres humanos. Las dermatofitosis estan causadas por infecciones micoticas de Trichophyton spp. o Microsporum spp. Las causas mas relevantes para ganado son Trichophyton verrucosum, Trichophyton mentagrophytes o Trichophyton sarkisovii.

Una infeccion del tracto respiratorio inferior, que habitualmente de como resultado bronquitis o neumoma, puede estar causada por cualquiera de varios nematodos parasitarios, incluyendo Dictyocaulus viviparus en ganado. Este verme pulmonar pertenece a la superfamilia Trichostrongyloidea y tiene ciclos biologicos directos. El verme pulmonar de ganado es comun en el Noroeste de Europa y es la causa de brotes graves de bronquitis verminosa "husk' o "hoose" en ganado de pastoreo joven. Debido a que la infeccion por D. viviparus en ganado es la mas economicamente importante, es la que mas se ha investigado y muchas de las observaciones de la misma son aplicables a las otras especies. Habitualmente se desarrolla enfermedad clmica en la primera exposicion a suficientes larvas infecciosas. En ganado, esto se produce habitualmente durante su primera estacion en pastoreo; sin embargo, se ha descrito un aumento en el numero de ganado de mas edad afectado. Los signos de infeccion por gusanos pulmonares vanan de tos moderada con frecuencias respiratorias ligeramente aumentadas a tos grave persistente y dificultad respiratoria e incluso insuficiencia. Aumentos de peso reducidos, producciones de leche reducidas y perdida de peso acompanan a muchas infecciones en ganado. Pueden producirse infecciones subclmicas patentes en todas las especies. Los signos mas uniformes en ganado son taquipnea y tos.

La tricomoniasis es una enfermedad protozoaria venerea de ganado caracterizada principalmente por muerte fetal temprana e infertilidad, dando como resultado intervalos de partos prolongados. La distribucion probablemente es mundial. El protozoo causal, Trichomonas (Tritrichomonas) foetus, es piriforme y comunmente de 10-15 * 5-10 pm, pero existe un pleomorfismo considerable. Puede volverse esferico cuando se cultiva en medios artificiales. En su extremo anterior existen tres flagelos de aproximadamente la misma longitud que el cuerpo del parasito. Una membrana ondulante se extiende por la longitud del cuerpo y esta bordeada por un filamento marginal que continua mas alla de la membrana como flagelo posterior. Aunque T. foetus puede sobrevivir al proceso usado para congelar el semen, se destruye por sequedad o altas temperaturas. Trichomonas foetus se encuentra en los tractos genitales de ganado. Cuando las vacas se reproducen de forma natural por un toro infectado, el 30-90% se infectan, sugiriendo que existen diferencias entre cepas. Tambien puede existir variacion en la susceptibilidad de raza a la tricomoniasis. Los toros de todas las edades pueden permanecer infectados de forma indefinida pero esto es menos probable en machos mas jovenes. Por el contrario, la mayona de las vacas estan libres de infeccion a los 3 meses despues de la reproduccion. Sin embargo, la inmunidad no es duradera y se producen reinfecciones. La transmision tambien puede suceder cuando el semen de toros infectados se usa para inseminacion artificial. El signo mas comun es infertilidad causada por muerte embrionaria. Esto da como resultado reproduccion repetida y una estacion de partos prolongada. Tambien pueden producirse muerte fetal y abortos que no son tan comunes como las perdidas tempranas en la gestacion. Se ha encontrado Trichomonas foetus en cultivos vaginales tomados tan tarde como a los 8 meses de gestacion y, aparentemente, pueden nacer terneros vivos de madres infectadas. Ocasionalmente se desarrolla piometra despues de la reproduccion.

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Neospora caninum es un parasito protozoario intracelular obligado que se ha confundido anteriormente con Toxoplasma gondii. Solo se conocen fases asexuales y se parecen a T. gondii. Se desconoce el ciclo biologico completo de N. caninum pero puede transmitirse por v^a transplacentaria en perros, ganado, cabras, ovejas y gatos y puede afectarse la descendencia posterior. Los taquizoftos son de 5-7 x 1-5 pm, dependiendo de la fase de division. Se dividen por endodiogenia. Se encuentran taquizoftos en miocitos, celulas nerviosas, celulas dermicas, macrofagos y otras celulas. Se encuentran quistes tisulares de hasta 100 pm de diametro en celulas nerviosas; la pared qmstica es amorfa y de hasta 4 pm de grosor. Los quistes no tienen septos y encierran bradizoftos finos de 7 x 1,5 pm. En ganado de leche, N. caninum es una causa principal de abortos en muchos pafses, particularmente en los Estados Unidos. Los terneros pueden terminar en abortos, mortinatos, de bajo peso al nacimiento, debiles o paralizados o pueden paralizarse en un intervalo de 4 semanas desde el nacimiento. La lesion principal en los tejidos fetales abortados es encefalitis no supurativa. El aborto puede producirse durante toda la gestacion y algunas vacas pueden abortar de nuevo; las madres de estos terneros son clmicamente normales.

La babesiosis esta causada por parasitos protozoarios intraeritrocitarios del genero Babesia. Una amplia variedad de animales domesticos y silvestres y ocasionalmente seres humanos se ven afectados por la enfermedad, que se transmite por garrapatas y tiene una distribucion mundial. Dos especies importantes en ganado — Babesia bigemina y Babesia bovis — estan ampliamente distribuidas en areas tropicales y subtropicales y son el centro de esta discusion. En area endemicas, son importantes dos caractensticas en la determinacion del riesgo de enfermedad clrnica: 1) los terneros tienen un grado de inmunidad (relacionada tanto con los anticuerpos procedentes del calostro como con la edad) que persiste durante ~6 meses y 2) los animales que se recuperan de infecciones por Babesia son inmunes de por vida. Por lo tanto, a altos niveles de transmision por garrapatas, todos los terneros recien nacidos se habran infectado con Babesia a los 6 meses de edad, mostraran escasos si algun signo clinico y posteriormente seran inmunes. Esta situacion de estabilidad endemica puede alterarse por una reduccion natural (por ejemplo, climatica) o artificial (por ejemplo, tratamiento acaricida) en el numero de garrapatas a niveles en los que la transmision por garrapatas de Babesia a terneros sea insuficiente para asegurar que todos se infecten durante este periodo temprano crftico. Otras circunstancias que pueden conducir a brotes clrnicos incluyen la introduccion de ganado susceptible en areas endemicas y la incursion de garrapatas infectadas con Babesia en areas previamente libres de garrapatas. Se ha demostrado variacion de cepa en la inmunidad pero probablemente no es significativa en el campo. La enfermedad aguda generalmente tiene un curso de ~1 semana. El primer signo es fiebre (frecuentemente de 41°C o superior), que persiste durante todo el proceso y se acompana posteriormente de inapetencia, frecuencia respiratoria aumentada, temblores musculares, anemia, ictericia y perdida de peso con hemoglobinemia y hemoglobinuria en las fases finales. Se produce frecuentemente implicacion del SNC debido a residuos de eritrocitos parasitados en capilares cerebrales con infeccion por B. bovis. Puede existir estrenimiento o diarrea. Las vacas gestantes con frecuencia abortan. Con cepas virulentas de B. bovis, un smdrome de choque hipotensivo, combinado con inflamacion inespedfica generalizada, alteraciones de la coagulacion y estasis eritrocitaria en capilares contribuyen a la patogenesis. Con la mayona de cepas de B. bigemina, los efectos patogenos se relacionan mas directamente con destruccion de eritrocitos. Los animales que se recuperan de la enfermedad aguda permanecen infectados durante varios anos con B. bovis y durante unos pocos meses en el caso de B. bigemina. No son evidentes signos durante este estado de portador. Las lesiones incluyen un bazo aumentado de tamano y friable; un tngado hinchado con una vesfcula biliar aumentada de tamano que contiene bilis granular espesa; rinones congestionados de color oscuro; y anemia e ictericia generalizadas. Con frecuencia, pero no siempre, la orina es roja. Otros organos, incluyendo el cerebro y el corazon pueden mostrar congestion o hemorragias petequiales. La susceptibilidad de razas de terneros a infecciones por Babesia vana; por ejemplo, el ganado Brahman es mas resistente a la infeccion por B. bovis que las razas britanicas.

Se descroiben vacunas de combinacion y/o el uso combinado de composiciones inmunogenicas para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas, donde las infecciones se producen por M. bovis y al menos un patogeno relevante para el ganado bovino adicional. La vacuna de combinacion como se describe aqrn comprende al menos un antfgeno de M. bovis, preferiblemente M. bovis atenuado avirulento descrito aqrn y uno o mas componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones producidas por uno o mas patogenos relevantes para el ganado bovino adicionales. El uso combinado o el metodo de coadministracion de dos o mas antfgenos de patogenos que afectan al ganado bovino comprende la administracion de una primera composicion inmunogenica que comprende antfgeno de M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado, avirulento descrito aqrn y al menos otro componente inmunologicamente activo eficaz para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones producidas por un patogeno relevante para el ganado bovino adicional.

Los patogenos de ganado bovino relevantes distintos de M. bovis incluyen los enumerados en la seccion de antecedentes anterior pero no se limitan a: i) patogenos de origen viral tales como virus de la diarrea viral Bovina (BVDV) tipo 1 (BVDV-1) y tipo 2 (BVDV-2), Parainfluenzavirus-3 (PI-3), virus de la Rinotraqueftis Infecciosa Bovina (IBR), Virus Sincitial Respiratorio Bovino (BRSV), Herpesvirus Bovino (BHV), Rotavirus Bovino (BRV), Enterovirus Bovino (BEV), Coronavirus Bovino (BCV), Rabia Bovina (BR), Parvovirus Bovino (BPV) y Adenovirus y Astrovirus; ii) patogenos de origen bacteriano, tales como Mannheimia haemolytica (antiguamente Pasteurella haemolytica), Pasteurella multocida, Haemophilus somnus (Histophilus ovis y Haemophilus agni), Actinomyces (Corynebacterium), Actinomyces pyogenes, Chlamydia psittaci, Campylobacter fetus venerealis y Campylobacter fetus fetus (antiguamente C. fetus intestinalis), Leptospira interrogans, Leptospira pomona, y Leptospira grippotyphosa, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo-

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bovis), Brucella abortus, Brucella suis y Brucella melitensis, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Chlamydia psittaci, Clostridium chauvoei, Clostridium septicum, Clostridium haemolyticum, Clostridium novyi, Clostridium sordellii, Clostridium perfringens, Clostridium tetani, Moraxella bovis, Klebsiella spp, Klebsiella pneumoniae, Salmonella typhimurium; Salmonella newport, Mycobacterium avium paratuberculosis, Staphylococcus aureus, Streptococcus dysgalactiae, Mycoplasma dispar y Ureaplasma spp., y Streptococcus uberis iii) patogenos de otro origen, tales como Tritrichomonas foetus, Trichophyton verrucosum, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton sarkisovii, Neospora caninum (antiguamente Toxoplasma gondii), Cryptosporidium parvum, Cryptosporidium hominis, Babesia bigemina y Babesia bovis y Dictyocaulus viviparous (enfermedad por gusanos pulmonares).

El uso combinado o el metodo de coadministracion de dos o mas antigenos de patogenos que afectan al ganado bovino comprende administrar una primera composicion inmunogena que comprende antigeno de M. bovis, preferiblemente el M. bovis avirulento atenuado descrito aqm y al menos un componente inmunologicamente activo adicional eficaz para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por un patogeno adicional de ganado bovino, donde dicho patogeno adicional de ganado bovino se selecciona del grupo que consiste en: i) patogenos de origen viral tales como virus de la diarrea viral Bovina (BVDV) tipo 1 (BVDV-1) y tipo 2 (BVDV-2), Parainfluenzavirus- 3 (PI-3), virus de la Rinotraqueftis Infecciosa Bovina (IBR), Virus Sincitial Respiratorio Bovino (BRSV), Herpesvirus Bovino (BHV), Rotavirus Bovino (BRV), Enterovirus Bovino (BEV, Coronavirus Bovino (BCV), Rabia Bovina (BR), Parvovirus Bovino (BPV) y Adenovirus y Astrovirus; ii) patogenos de origen bacteriano, tales como Mannheimia haemolytica (antiguamente Pasteurella haemolytica), Pasteurella multocida, Haemophilus somnus (Histophilus ovis y Haemophilus agni), Actinomyces (Corynebacterium), Actinomyces pyogenes, Chlamydia psittaci, Campylobacter fetus venerealis y Campylobacter fetus fetus (antiguamente C. fetus intestinalis), Leptospira interrogans, Leptospira pomona, y Leptospira grippotyphosa, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo-bovis), Brucella abortus, Brucella suis y Brucella melitensis, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Chlamydia psittaci, Clostridium chauvoei, Clostridium septicum, Clostridium haemolyticum, Clostridium novyi, Clostridium sordellii, Clostridium perfringens, Clostridium tetani, Moraxella bovis, Klebsiella spp, Klebsiella pneumoniae, Salmonella typhimurium; Salmonella newport, Mycobacterium avium paratuberculosis, Staphylococcus aureus, Streptococcus dysgalactiae, Mycoplasma dispary Ureaplasma spp., y Streptococcus uberis y iii) patogenos de otro origen, tales como Tritrichomonas foetus, Trichophyton verrucosum, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton sarkisovii, Neospora caninum (antiguamente Toxoplasma gondii), Cryptosporidium parvum, Cryptosporidium hominis, Babesia bigemina y Babesia bovis y Dictyocaulus viviparous (enfermedad por gusanos pulmonares) o cualquier otro patogeno enumerado en la seccion de antecedentes o que se sabe que es patogeno en ganado bovino.

Se describen vacunas de combinacion y/o al uso combinado de composiciones inmunogenas para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas, donde las infecciones estan causadas por M. bovis y al menos un patogeno relevante de ganado bovino adicional, donde dicha vacuna o uso combinado comprende o hace uso de un antfgeno de M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado avirulento que se describe aqm y un componente inmunologicamente activo adicional eficaz para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por virus de la diarrea viral Bovina (BVDV) tipo 1 (BVDV-1) y tipo 2 (BVDV-2), Parainfluenzavirus-3 (PI-3), virus de la Rinotraqueftis Infecciosa Bovina (IBR), Virus Sincitial Respiratorio Bovino (BRSV), Herpesvirus Bovino (BHV), Rotavirus Bovino (BRV), Enterovirus Bovino (BEV), Coronavirus Bovino (BCV), Rabia Bovina (BR), Parvovirus Bovino (BPV), Adenovirus, Astrovirus, Mannheimia haemolytica (antiguamente Pasteurella haemolytica), Pasteurella multocida, Haemophilus somnus (Histophilus ovis y Haemophilus agni), Actinomyces (Corynebacterium), Actinomyces pyogenes, Chlamydia psittaci, Campylobacter fetus venerealis y Campylobacter fetus fetus (antiguamente C. fetus intestinalis), Leptospira interrogans, Leptospira pomona y Leptospira grippotyphosa, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo- bovis), Brucella abortus, Brucella suis y Brucella melitensis, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Chlamydia psittaci, Clostridium chauvoei, Clostridium septicum, Clostridium haemolyticum, Clostridium novyi, Clostridium sordellii, Clostridium perfringens, Clostridium tetani, Moraxella bovis, Klebsiella spp, Klebsiella pneumoniae, Salmonella typhimurium; Salmonella newport, Mycobacterium avium paratuberculosis, Cryptosporidium parvum, Cryptosporidium hominis, Staphylococcus aureus, Streptococcus dysgalactiae, Streptococcus uberis, Mycoplasma spp, Mycoplasma dispar y Ureaplasma spp., Tritrichomonas foetus, Trichophyton verrucosum, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton sarkisovii, Neospora caninum (antiguamente Toxoplasma gondii), Babesia bigemina y Babesia bovis y Dictyocaulus viviparous (enfermedad por gusanos pulmonares) y/o cualquier otro patogeno que se sabe que es patogeno en ganado bovino, incluyendo los patogenos analizados en los antecedentes.

El uso combinado o el metodo de coadministracion de dos o mas antfgenos de patogenos que afectan al ganado bovino comprende administrar una primera composicion inmunogena que comprende antfgeno de M. bovis preferiblemente el M. bovis avirulento atenuado descrito aqm y al menos una composicion inmunogena adicional que comprende uno o mas componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por un patogeno adicional de ganado bovino, donde dicho patogeno adicional de ganado bovino se selecciona del grupo que consiste en: virus de la diarrea viral Bovina (BVDV) tipo 1 (BVDV-1) y tipo 2 (BVDV-2), Parainfluenzavirus-3 (PI-3), virus de la Rinotraqueftis Infecciosa Bovina (IBR), Virus Sincitial Respiratorio Bovino (BRSV), Herpesvirus Bovino (BHV), Rotavirus Bovino (BRV), Enterovirus Bovino (BEV), Coronavirus Bovino (BCV), Rabia Bovina (BR), Parvovirus Bovino (BPV), Adenovirus, Astrovirus, Mannheimia haemolytica (antiguamente Pasteurella haemolytica), Pasteurella multocida, Haemophilus somnus (Histophilus ovis y

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Haemophilus agni), Actinomyces (Corynebacterium), Actinomyces pyogenes, Chlamydia psittaci, Campylobacter fetus venerealis y Campylobacter fetus fetus (antiguamente C. fetus intestinalis ), Leptospira interrogans, Leptospira pomona y Leptospira grippotyphosa, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo-bovis), Brucella abortus, Brucella suis y Brucella melitensis, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Chlamydia psittaci, Clostridium chauvoei, Clostridium septicum, Clostridium haemolyticum, Clostridium novyi, Clostridium sordellii, Clostridium perfringens, Clostridium tetani, Moraxella bovis, Klebsiella spp, Klebsiella pneumoniae, Salmonella typhimurium; Salmonella newport, Mycobacterium avium paratuberculosis, Cryptosporidium parvum, Cryptosporidium hominis, Staphylococcus aureus, Streptococcus dysgalactiae, Streptococcus uberis, Mycoplasma spp, Mycoplasma dispary Ureaplasma spp., Tritrichomonas foetus, Trichophyton verrucosum, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton sarkisovii, Neospora caninum (antiguamente Toxoplasma gondii), Babesia bigemina y Babesia bovis y Dictyocaulus viviparous (enfermedad por gusanos pulmonares) y/o cualquier otro patogeno enumerado en una seccion de antecedentes o que se sepa que es patogeno en ganado bovino. Preferiblemente, la composicion inmunogena adicional comprende un antigeno de uno o mas de cualquiera de los patogenos relevantes de ganado bovino que se han enumerado anteriormente.

Se describe una vacuna de combinacion o al uso combinado de composiciones inmunogenas para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones de los sistemas respiratorio y/o reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion o el uso combinado comprende un antfgeno de M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR [combo 001]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende el M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y al menos un antfgeno de IBR [combo 002]. Preferiblemente el antfgeno de IBR es un virus vivo modificado [combo 003]. Preferiblemente la vacuna de combinacion de M. bovis atenuado e IBR contiene un antibiotico, por ejemplo neomicina para su conservacion [combo 004].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por PI-3 [combo 005]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende el M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y al menos un antfgeno de PI-3 [combo 006].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) [combo 007Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y al menos un antfgeno de BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) [combo 008].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por BHV [combo 009]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende el M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y al menos un antfgeno de BHV [combo 010].

Se describe, la presente invencion se refiere a una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR y PI-3 [combo 011]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende el M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y al menos un antfgeno de cada uno de IBR - 3 y PI-3 [combo 012].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR y BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) [combo 013]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y al menos un antfgeno de cada uno de IBR y BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) [combo 014].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR y BHV [combo 015].

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Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende el M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antigeno de cada uno de IBR y BHV [combo 016].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por PI-3 y BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) [combo 017]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de PI-3 y BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) [combo 018].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por PI-3 y BHV [combo 019]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende el M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antigeno de cada uno de PI-3 y BHV [combo 020].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3 y BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) [combo 021]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3 y BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) [combo 022]. Preferiblemente, todos los antfgenos virales son virus vivos modificados [combo 023].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por BRSV y BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) [combo 024]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de BRSV y BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDv atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) [combo 025].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDv atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) y BHV [combo 026]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR BHV y BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 2 y/o tipo 2 [combo 027].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDv atenuado (tipo 1 y/o tipo 2 y BHV [combo 028]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de PI-3 y BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2 y BHV [combo 029].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3 y BHV[combo 030]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende el M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, BHV y PI-3 [combo 031].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y un componente inmunologicamente activo adicional eficaz para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3 y BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2 y BHV [combo 032]. Mas preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos

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un antfgeno de cada uno de IBR BHV PI-3 y BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) [combo 033].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones bacterianas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por H. somnus [combo 034]. Mas preferiblemente la vacuna de combinacion comprende el M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antigeno de H. somnus [combo 035].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas y bacterianas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR y H. somnus[combo 036]. Mas preferiblemente la vacuna de combinacion comprende el M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antigeno de H. somnus e IBR [combo 037].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas y bacterianas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3 y H. somnus [combo 038]. Mas preferiblemente la vacuna de combinacion comprende el M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3 y H. somnus [combo 039].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) y H. somnus [combo 040]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3 y BVDV (tipo -1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) y un antfgeno de H. somnus [combo 041]. Preferiblemente los antfgenos de IBR, PI-3 son virus destruidos [combo 042]. Preferiblemente cualquiera de dichas vacunas de combinacion, preferiblemente la vacuna de combinacion que comprende antfgenos de IBR destruido y PI-3 destruido, contiene neomicina y timerosal como conservantes [combo 043].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), BHV y H. somnus [combo 044]. Mas preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de iBr, BHV, PI-3 y BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) y un antfgeno de H. somnus [combo 045].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino frente a infecciones de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente, el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por una o mas especies patogenas de Leptospira, preferiblemente seleccionadas del grupo que consiste en Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo-bovis), Leptospira prajitno, Leptospira icterohaemmorrhagiae, Leptospira bovis, Leptospira interrogans y Leptospira pomona, [combo 046]. Mas preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y uno o mas antfgenos de al menos una o mas especies patogenas de Leptospira, preferiblemente seleccionadas del grupo que consiste en Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo-bovis), Leptospira prajitno, Leptospira icterohaemmorrhagiae, Leptospira bovis, Leptospira interrogans y Leptospira pomona [combo 047].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino frente a infecciones de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente, el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR y una o mas especies patogenas de Leptospira, preferiblemente seleccionadas del grupo que consiste en Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo-bovis), Leptospira prajitno, Leptospira icterohaemmorrhagiae, Leptospira bovis, Leptospira interrogans y Leptospira pomona,

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[combo 048]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antigeno de cada uno de IBR y una o mas especies patogenas de Leptospira, preferiblemente seleccionadas del grupo que consiste en Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo-bovis), Leptospira prajitno, Leptospira icterohaemmorrhagiae, Leptospira bovis, Leptospira interrogans y Leptospira pomona [combo 049].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR y Leptospira pomona [combo 050]. Mas preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antigeno de IBR, preferiblemente un virus vivo o modificado y al menos una bacterina de Leptospira pomona [combo 51].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino frente a infecciones de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente, el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3 y una o mas especies patogenas de Leptospira, preferiblemente seleccionadas del grupo que consiste en Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo-bovis), Leptospira prajitno, Leptospira icterohaemmorrhagiae, Leptospira bovis, Leptospira interrogans y Leptospira pomona [combo 052]. Mas preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y uno o mas antfgenos de cada uno de IBR, y PI-3 y uno o mas antfgenos de cada una de una o mas especies patogenas de Leptospira, preferiblemente seleccionadas del grupo que consiste en Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii, Leptospira hardjo - 3(Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo-bovis), Leptospira prajitno, Leptospira icterohaemmorrhagiae, Leptospira bovis, Leptospira interrogans y Leptospira pomona [combo 053].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino frente a infecciones de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente, el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y/o Leptospira hardjo-bovis), Leptospira icterohaemorrhagiae y Leptospira pomona [combo 054]. Mas preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm, y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo, Leptospira icterohaemorrhagiae y Leptospira pomona [combo 055].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino frente a infecciones de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente, el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) y una o mas especies patogenas de Leptospira, preferiblemente seleccionadas del grupo que consiste en Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo-bovis), Leptospira prajitno, Leptospira icterohaemmorrhagiae, Leptospira bovis, Leptospira interrogans y Leptospira pomona, [combo 056]. Mas preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) y uno o mas antfgenos de cada de una o mas especies patogenas de Leptospira, preferiblemente seleccionadas del grupo que consiste en Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii, Leptospira prajitno, Leptospira icterohaemmorrhagiae, Leptospira bovis, Leptospira interrogans y Leptospira pomona [combo 057].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino frente a infecciones de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente, el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y/o Leptospira hardjo-bovis), Leptospira icterohaemorrhagiae, y Leptospira pomona [combo 058]. Mas preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y virulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) y uno o mas antfgenos de cada una de Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y/o Leptospira hardjo-bovis), Leptospira icterohaemorrhagiae y Leptospira pomona [combo 059]. Preferiblemente, los antfgenos virales son virus destruidos y los antfgenos bacterianos son bacterianas [combo 060]. Preferiblemente, dichas vacunas de combinacion como se describen en este parrafo contienen ademas neomicina y timerosal como conservantes [combo 061].

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Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm, virus vivos modificados de IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo y/o tipo 2), y bacterina de Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y/o Leptospira hardjo-bovis), Leptospira icterohaemorrhagiae y Leptospira pomona [combo 062]. Preferiblemente la vacuna de combinacion descrita en este parrafo comprende neomicina como conservante [combo 063].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino frente a infecciones de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente, el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), BHV y una o mas especies patogenas de Leptospira, preferiblemente seleccionadas del grupo que consiste en Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo-bovis), Leptospira prajitno, Leptospira icterohaemmorrhagiae, Leptospira bovis, Leptospira interrogans y Leptospira pomona, [combo 064]. Mas preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antigeno de cada uno de IBR, BHV, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) y uno o mas antfgenos de cada de una o mas especies patogenas de Leptospira, preferiblemente seleccionadas del grupo que consiste en Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo-bovis), Leptospira prajitno, Leptospira icterohaemmorrhagiae, Leptospira bovis, Leptospira interrogans y Leptospira pomona [combo 065].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por una o mas especies patogenas de Leptospira como se han mencionado anteriormente y H. somnus[combo 066]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de una o mas especies patogenas de Leptospira, como se han mencionado anteriormente y al menos un antfgeno de H. somnus [combo 067].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR y una o mas especies patogenas de Leptospira como se han mencionado anteriormente y H. somnus [combo 068]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de iBr y al menos un antfgeno de cada de una o mas especies patogenas de Leptospira, como se han mencionado anteriormente y al menos un antfgeno de H. somnus [combo 069].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3 y una o mas especies patogenas de Leptospira como se han mencionado anteriormente y H. somnus [combo 070]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3 y al menos un antfgeno de cada de una o mas especies patogenas de Leptospira, como se han mencionado anteriormente y al menos un antfgeno de H. somnus [combo 071].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino frente a infecciones de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente, el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y/o Leptospira hardjo-bovis), Leptospira icterohaemorrhagiae, Leptospira pomona y H. somnus [combo 072]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y/o Leptospira hardjo-bovis), Leptospira icterohaemorrhagiae, Leptospira pomona, y H. somnus [combo 073].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) y una o mas especies patogenas de Leptospira como se han mencionado anteriormente y H. somnus[combo 074]. Preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis,

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preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDv atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) y uno o mas antfgenos de cada de una o mas especies patogenas de Leptospira, como se han mencionado anteriormente y al menos un antigeno de H. somnus [combo 075].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino frente a infecciones de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente, el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y/o Leptospira hardjo-bovis), Leptospira icterohaemorrhagiae, Leptospira pomona y H. somnus [combo 076]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y al menos un antigeno de cada uno de IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2)), Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo, Leptospira icterohaemorrhagiae, Leptospira pomona y H. somnus [combo 077].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2) preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), BHV y una o mas especies patogenas de Leptospira como se han mencionado anteriormente y H. somnus[combo 078]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), BHV y uno o mas antfgenos de cada de una o mas especies patogenas de Leptospira, como se han mencionado anteriormente y al menos un antfgeno de H. somnus [combo 079].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por una o mas especies patogenas de Leptospira como se han mencionado anteriormente y Campylobacter fetus [combo 080]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y al menos uno o mas antfgenos de cada de una o mas especies patogenas de Leptospira, como se han mencionado anteriormente y al menos un antfgeno de Campylobacter fetus [combo 081].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino frente a infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente, el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y/o Leptospira hardjo-bovis), Leptospira icterohaemorrhagiae y Campylobacter fetus [combo 082]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y al menos un antfgeno de cada una de Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y/o Leptospira hardjo-bovis), Leptospira icterohaemorrhagiae, Leptospira pomona Campylobacter fetus [combo 083]. Mas preferiblemente, los antfgenos bacterianos estan qmmicamente inactivados, adsorbidos en hidroxido de aluminio, cultivos completos de dichas bacterias [combo 084]. De acuerdo con una realizacion preferida adicional, dicha vacuna de combinacion comprende gentamicina y anfotericina B como conservantes. [combo 085].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR y una o mas especies patogenas de Leptospira como se han mencionado anteriormente y Campylobacter fetus [combo 086]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y al menos un antfgeno de IBR y uno o mas antfgenos de cada de una o mas especies patogenas de Leptospira, como se han mencionado anteriormente y al menos un antfgeno de Campylobacter fetus [combo 087].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3 y una o mas especies patogenas de Leptospira como se han mencionado anteriormente y Campylobacter fetus [combo 088]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3 y uno o mas antfgenos de cada de una o mas especies patogenas de Leptospira, como se han mencionado anteriormente y al menos un antfgeno de Campylobacter fetus [combo 089].

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Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), y una o mas especies patogenas de Leptospira como se han mencionado anteriormente y Campylobacter fetus [combo 090]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antigeno de cada uno de IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) y uno o mas antfgenos de cada de una o mas especies patogenas de Leptospira, como se han mencionado anteriormente, y al menos un antigeno de Campylobacter fetus [combo 091].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), BHV y una o mas especies patogenas de Leptospira como se han mencionado anteriormente y Campylobacter fetus [combo 092]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IbR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), BHV y uno o mas antfgenos de cada de una o mas especies patogenas de Leptospira, como se han mencionado anteriormente y al menos un antfgeno de Campylobacter fetus [combo 093].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por una o mas especies patogenas de Leptospira como se han mencionado anteriormente, H. somnus y Campylobacter fetus [combo 094]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y uno o mas antfgenos de cada de una o mas especies patogenas de Leptospira, como se han mencionado anteriormente y al menos un antfgeno de cada uno de H. somnus y Campylobacter fetus [combo 095].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, una o mas especies patogenas de Leptospira como se han mencionado anteriormente, H. somnus y Campylobacter fetus[combo 096]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, H. somnus y Campylobacter fetus y uno o mas antfgenos de cada de una o mas especies patogenas de Leptospira, como se han mencionado anteriormente, [combo 097].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3 y una o mas especies patogenas de Leptospira como se han mencionado anteriormente, H. somnus y Campylobacter fetus [combo 098]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3, H. somnus y Campylobacter fetus y uno o mas antfgenos de cada de una o mas especies patogenas de Leptospira, como se han mencionado anteriormente, [combo 099].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo, Leptospira icterohaemorrhagiae, Leptospira pomona, H. somnus y Campylobacter fetus [combo 100]. Preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y/o Leptospira hardjo-bovis), Leptospira icterohaemorrhagiae, Leptospira pomona, H. somnus y Campylobacter fetus [combo 101].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2) preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), y una o mas especies patogenas de Leptospira como se han mencionado anteriormente y H. somnus y Campylobacter fetus[combo 102]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDv atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), H. somnus y

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Campylobacter fetus y uno o mas antigenos de cada de una o mas especies patogenas de Leptospira, como se han mencionado anteriormente [combo 100].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino frente a infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente, el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y/o Leptospira hardjo-bovis), Leptospira icterohaemorrhagiae, Leptospira pomona, H. somnus y Campylobacter fetus [combo 103]. Preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y un antigeno de cada uno de IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y/o Leptospira hardjo-bovis), Leptospira icterohaemorrhagiae, Leptospira pomona, H. somnus y Campylobacter fetus [combo 104].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), BHV y una o mas especies patogenas de Leptospira como se han mencionado anteriormente, H. somnus y Campylobacter fetus [combo 105]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), BHV, H. somnus y Campylobacter fetus y uno o mas antfgenos de cada de una o mas especies patogenas de Leptospira, como se han mencionado anteriormente, [combo 106].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino frente a infecciones de los sistemas respiratorio y reproductor en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente, el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por BHV, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), PI-3, IBR, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y/o Leptospira hardjo-bovis), Lepstospira prajitno, Leptospira icterohaemorrhagiae, Leptospira bovis, Leptospira interrogans y Campylobacter fetus [combo 107]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, que se ha descrito aqm y al menos un antfgeno de cada de BHV, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), IBR, PI-3, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y/o Leptospira hardjo-bovis), Lepstospira prajitno, Leptospira icterohaemorrhagiae, Leptospira bovis, Leptospira interrogans y Campylobacter fetus [combo 108].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Pasteurella haemolytica y Pasteurella multocida [combo 109]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada de bacterina de Pasteurella haemolytica y bacterina de Pasteurella multocida [combo 110]. De acuerdo con una realizacion preferida adicional, dicha vacuna de combinacion comprende neomicina y timerosal como conservantes [combo 111].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, Pasteurella haemolytica y Pasteurella multocida [combo 112]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada de IBR, preferiblemente como virus vivos modificados, bacterina de Pasteurella haemolytica y bacterina de Pasteurella multocida [combo 113]. De acuerdo con una realizacion preferida adicional, dicha vacuna de combinacion comprende neomicina y timerosal como conservantes [combo 114].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, Pasteurella haemolytica y Pasteurella multocida [combo 115]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada de IBR, PI-3, preferiblemente como virus vivos modificados, bacterina de Pasteurella haemolytica y bacterina de Pasteurella multocida [combo 116]. De acuerdo con una realizacion preferida adicional, dicha vacuna de combinacion comprende neomicina y timerosal como conservantes [combo 117].

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Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), Pasteurella haemolytica y Pasteurella multocida [combo 118]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antigeno de cada de IBR, PI-3, preferiblemente como virus vivos modificados, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), bacterina de Pasteurella haemolytica y bacterina de Pasteurella multocida [combo 119]. De acuerdo con una realizacion preferida adicional, dicha vacuna de combinacion comprende neomicina y timerosal como conservantes [combo 120].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y un componente inmunologicamente activo adicional eficaz para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), BHV, Pasteurella haemolytica y Pasteurella multocida [combo 121]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antigeno de cada de IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), BHV, preferiblemente virus vivos modificados, bacterina de Pasteurella haemolytica y bacterina de Pasteurella multocida [combo 122]. De acuerdo con una realizacion preferida adicional, dicha vacuna de combinacion comprende neomicina y timerosal como conservantes [combo 123].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un componente inmunologicamente activo adicional eficaz para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por BRSV [combo 124]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende el M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de BRSV [combo 125].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR y BRSV [combo 126]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende el M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, preferiblemente virus vivos modificados, y BRSV [combo 127].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3 y BRSV [combo 128]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende el M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3, preferiblemente virus vivos modificados, y BRSV [combo 129].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BRSV y BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV

atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), [combo 130]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis,

preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3, BRSV, preferiblemente como virus vivos modificados, y BVDv (tipo -3 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) [combo 131].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BRSV, BHV y BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV

atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), [combo 132]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis,

preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3, BRSV, preferiblemente como virus vivos modificados y BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2) [combo 133].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones vmcas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y BRSV [combo 134]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada de Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida

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y BRSV [combo 135].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y BRSV [combo 136]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antigeno de cada uno de IBR, preferiblemente como virus vivos modificados, Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y BRSV [combo 137].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y BRSV [combo 138]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antigeno de cada uno de iBr, preferiblemente como virus vivos modificados, Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y BRSV [combo 139].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y BRSV [combo 140]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente como virus vivos modificados, Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y BRSV [combo 141].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), BHV, Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y BRSV [combo 140]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada de IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), BHV, preferiblemente virus vivos modificados, Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y BRSV [combo 141].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y H. somnus [combo 142]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada de Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y H. somnus [combo 143].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y H. somnus [combo 144]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de IBR, preferiblemente como virus vivo modificado, Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y H. somnus [combo 145].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y H. somnus [combo 146]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antfgeno de cada uno de iBr, PI-3, preferiblemente como virus vivos modificados, Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y H. somnus [combo 147].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y H. somnus [combo 148]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm

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y al menos un antigeno de cada de IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente como virus vivos modificados y Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y H. somnus [combo 149].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), preferiblemente BVDV atenuado (tipo 1 y/o tipo 2), BHV, Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y H. somnus [combo 150]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y al menos un antigeno de cada de IBR, PI-3, BVDV (tipo 1 y/o tipo 2), BHV, preferiblemente como virus vivos modificados, Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida y H. somnus [combo 151].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo uno cualquiera de [combo 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150 y 151], que comprende ademas componentes inmunologicamente activos eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por una o mas especies patogenas de Leptospira, preferiblemente seleccionadas del grupo que consiste en Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii, Leptospira hardjo, Leptospira prajitno, Leptospira icterohaemmorrhagiae, Leptospira bovis, Leptospira interrogans y Leptospira pomona [combo 152]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142,

143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150 y 151], que comprende ademas uno o mas antigenos de cada de una o mas

especies de Leptospira, preferiblemente seleccionadas del grupo que consiste en Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo-bovis), Leptospira prajitno, Leptospira icterohaemmorrhagiae, Leptospira bovis, Leptospira interrogans y Leptospira pomona [combo 153].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 110, 111, 112, 113, 114, 115,

116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138,

139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150 y 151], que comprende ademas un componente inmunologicamente activo eficaz para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Campylobacter fetus [combo 154]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136,

137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150 y 151], que comprende ademas antfgeno de

Campylobacter fetus [combo 155].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 110, 111, 112, 113, 114, 115,

116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138,

139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150 y 151], que comprende ademas un componente inmunologicamente activo eficaz para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por una o mas especies patogenas de Leptospira, preferiblemente seleccionadas del grupo que consiste en Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo-bovis), Leptospira prajitno, Leptospira icterohaemmorrhagiae, Leptospira bovis, Leptospira interrogans y Leptospira pomona y Campylobacter fetus [combo 156]. Se describe una vacuna combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150 y 151], que comprende ademas uno o mas antfgenos de cada de Campylobacter fetus y de uno o mas especies de Leptospira, preferiblemente seleccionadas del grupo que consiste en Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira borgpetersenii, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo-bovis), Leptospira prajitno, Leptospira icterohaemmorrhagiae, Leptospira bovis, Leptospira interrogans y Leptospira pomona, y. [combo 157].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Clostridium perfringens, preferiblemente Tipos A, C y/o D [combo 158]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y toxinas de Clostridium perfringens Tipos C y D [combo 254]. Mas preferiblemente, dicha vacuna comprende antfgenos, preferiblemente toxinas de Clostridium perfringens, preferiblemente Tipos A, B, C y/o D [combo 159].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

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122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156 y 157], que comprende ademas un componente inmunologicamente activo eficaz para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por infecciones causadas por Clostridium perfringens, preferiblemente Tipos A, C y/o D [combo 160]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029, 030, 031, 032, 033, 034, 035,

036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052, 053, 054, 055, 056, 057, 058,

059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075, 076, 077, 078, 079, 080, 081,

082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098, 099, 100, 101, 102, 103, 104,

105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127,

128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150,

151, 152, 153, 154, 155, 156 y 157], que comprende ademas antigeno de Clostridium perfringens, preferiblemente Tipos A, C y/o D [combo 161]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023,

024, 025, 026, 027, 028, 029, 030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046,

047, 048, 049, 050, 051, 052, 053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069,

070, 071, 072, 073, 074, 075, 076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092,

093, 094, 095, 096, 097, 098, 099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115,

116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138,

139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156 y 157], que comprende ademas antigeno de Clostridium perfringens, preferiblemente Tipos A, C y/o D [combo 162].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Clostridium perfringens Tipos A, C y/o D y Clostridium tetani [combo 163]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y toxinas de Clostridium perfringens Tipos A, C y/o D y Clostridium tetani [combo 164]. Mas preferiblemente, dicha vacuna comprende antigenos, preferiblemente toxinas de Clostridium perfringens Tipos A, B, C y/o D, y Clostridium tetani [combo 165].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156 y 157], que comprende ademas componentes inmunologicamente activos eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por infecciones causadas por Clostridium perfringens Tipos A, C y/o D y Clostridium tetani [combo 166]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029, 030, 031, 032, 033, 034, 035,

036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052, 053, 054, 055, 056, 057, 058,

059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075, 076, 077, 078, 079, 080, 081,

082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098, 099, 100, 101, 102, 103, 104,

105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127,

128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150,

151, 152, 153, 154, 155, 156 y 157], que comprende ademas antfgeno de Clostridium perfringens Tipos A, C y/o D y Clostridium tetani [combo 167]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023,

024, 025, 026, 027, 028, 029, 030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046,

047, 048, 049, 050, 051, 052, 053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069,

070, 071, 072, 073, 074, 075, 076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092,

093, 094, 095, 096, 097, 098, 099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115,

116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138,

139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156 y 157], que comprende ademas uno o mas antfgenos de Clostridium perfringens Tipos A, C y/o D y Clostridium tetani [combo 168].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Clostridium chauvoei, Clostridium septicum, Clostridium novyi, Clostridium sordellii, y Clostridium perfringens Tipos A, C y/o D [combo 169]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y uno o mas antfgenos, preferiblemente toxinas de cada uno de Clostridium chauvoei, Clostridium septicum,

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

Clostridium novyi, Clostridium sordellii y Clostridium perfringens Tipos A, C y/o D [combo 170].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156 y 157], que comprende ademas componentes inmunologicamente activos eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por infecciones causadas por Clostridium chauvoei, Clostridium septicum, Clostridium novyi, Clostridium sordellii y Clostridium perfringens Tipos A, C y/o D [combo 171]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029, 030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044,

045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052, 053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067,

068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075, 076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090,

091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098, 099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113,

114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136,

137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156 y 157], que comprende ademas uno o mas antigenos de cada uno de Clostridium chauvoei, Clostridium septicum, Clostridium novyi, Clostridium sordellii y Clostridium perfringens Tipos A, C y/o D [combo 172]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029, 030, 031, 032, 033, 034, 035,

036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052, 053, 054, 055, 056, 057, 058,

059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075, 076, 077, 078, 079, 080, 081,

082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098, 099, 100, 101, 102, 103, 104,

105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127,

128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150,

151, 152, 153, 154, 155, 156 y 157], que comprende ademas uno o mas antigenos de cada uno de Clostridium chauvoei, Clostridium septicum, Clostridium novyi, Clostridium sordellii y Clostridium tetani [combo 173].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Clostridium chauvoei, Clostridium septicum, Clostridium novyi, Clostridium sordellii, y Clostridium perfringens Tipos A, C y/o D y BRSV [combo 174]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y uno o mas antigenos, preferiblemente toxinas de cada uno de Clostridium chauvoei, Clostridium septicum, Clostridium novyi, Clostridium sordellii y Clostridium perfringens Tipos A, C y/o D [combo 175].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Clostridium chauvoei, Clostridium septicum, Clostridium novyi, Clostridium sordellii, y Clostridium perfringens Tipos A, C y/o D y H. somnus [combo 176]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y uno o mas antfgenos, preferiblemente toxinas de cada uno de Clostridium chauvoei, Clostridium septicum, Clostridium novyi, Clostridium sordellii y Clostridium perfringens Tipos A, C y/o D y H. somnus [combo 177].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Clostridium chauvoei, Clostridium septicum, Clostridium novyi, Clostridium sordellii, Clostridium perfringens Tipos A, C y/o D, BRSV y H. somnus [combo 178]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y uno o mas antfgenos, preferiblemente toxinas de cada uno de Clostridium chauvoei, Clostridium septicum, Clostridium novyi, Clostridium sordellii y Clostridium perfringens Tipos A, C y/o D, Mycoplasma bovis y H. somnus [combo 179].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Salmonella preferiblemente Salmonella dublin, Salmonella newport y Salmonella typhimurium [combo 180]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y una o mas toxinas de Salmonella,

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preferiblemente de cada una de Salmonella dublin, Salmonella newport, y/o Salmonella typhimurium [combo 181].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166,

167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178 y 179], que comprende ademas componentes inmunologicamente activos eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por infecciones causadas por Salmonella, preferiblemente Salmonella dublin, Salmonella newport y Salmonella typhimurium [combo 182]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005,

006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028,

029, 030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051,

052, 053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074,

075, 076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097,

098, 099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120,

121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143,

144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165,

166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178 y 179], que comprende ademas uno o mas antigenos, preferiblemente toxinas, de Salmonella, preferiblemente de cada una de Salmonella dublin, Salmonella newport y/o Salmonella typhimurium [combo 183].

Se describ4e una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida, Salmonella, preferiblemente Salmonella dublin, Salmonella newport y Salmonella typhimurium [combo 184]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y Bacterina-Toxoide de Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida, Salmonella, preferiblemente Salmonella dublin, Salmonella newport y Salmonella typhimurium [combo 185]. Mas preferiblemente, dicha vacuna de combinacion comprende multiples aislados de Pasteurella haemolytica Tipo A1 y una fraccion de toxoide asociado y aislados individuales de P. multocida, S. dublin y S. typhimurium [combo 186].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Moraxella bovis y/o Klebsiella spp. , preferiblemente Klebsiella pneumoniae [combo 187]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y una o mas toxinas de cada una de Moraxella bovis y/o Klebsiella spp., preferiblemente Klebsiella pneumoniae [combo 188].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006,

007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166,

167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, y 186], que

comprende ademas componentes inmunologicamente activos eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por infecciones causadas por Moraxella bovis y/o Klebsiella spp., preferiblemente Klebsiella pneumoniae [combo 189]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024,

025, 026, 027, 028, 029, 030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047,

048, 049, 050, 051, 052, 053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070,

071, 072, 073, 074, 075, 076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093,

094, 095, 096, 097, 098, 099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116,

117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139,

140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 254, 159, 163, 164,

165, 169, 170, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 184, 185 y 186], que comprende ademas uno o mas antfgenos, preferiblemente toxinas, de cada una de Moraxella bovis y/o Klebsiella spp., preferiblemente, Klebsiella pneumoniae [combo 190].

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Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Escherichia coli [combo 191]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y una o mas toxinas de Escherichia coli [combo 192].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166,

167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189 y 190], que comprende ademas un componente inmunologicamente activo eficaz para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por infecciones causadas por Escherichia coli [combo 193]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029, 030, 031, 032, 033, 034, 035,

036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052, 053, 054, 055, 056, 057, 058,

059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075, 076, 077, 078, 079, 080, 081,

082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098, 099, 100, 101, 102, 103, 104,

105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127,

128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150,

151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172,

173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189 y 190], que comprende ademas un antigeno, preferiblemente una toxina de Escherichia coli [combo 194].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida, Salmonella dublin ,Salmonella typhimurium y Escherichia coli [combo 195]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y uno o mas antfgenos de cada una de Bacterina-Toxoide de Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida, Salmonella dublin, Salmonella typhimurium y Escherichia coli [combo 196]. Mas preferiblemente, dicha vacuna de combinacion comprende multiples aislados de Pasteurella haemolytica Tipo A1 y una fraccion toxoide asociada y aislados individuales de P. multocida, S. dublin y S. typhimurium [combo 197].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Rotavirus bovino [combo 198]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqrn y antfgeno de Rotavirus bovino [combo 199].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006,

007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166,

167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185,186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 195, 196, y 197], que comprende ademas un componente inmunologicamente activo eficaz para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por infecciones causadas por Rotavirus bovino [200]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007,

008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029, 030,

031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052, 053,

054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075, 076,

077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098, 099,

100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122,

123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145,

146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167,

168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190,

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

191, 192, 193, 194, 195, 196 y 197], que comprende ademas antigeno de Rotavirus bovino [combo 201].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqm, y al menos un componente inmunologicamente activo adicional eficaz para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Coronavirus bovino [combo 202]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqm y un antigeno de Coronavirus bovino [combo 203].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166,

167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189,

190, 191, 192, 193, 194, 195, 196 y 197], que comprende ademas un componente inmunologicamente activo eficaz para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por infecciones causadas por Coronavirus bovino [combo 204]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027,

028, 029, 030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050,

051, 052, 053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073,

074, 075, 076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096,

097, 098, 099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119,

120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142,

143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164,

165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187,

188,189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196 y 197], que comprende ademas un antigeno de Coronavirus bovino [combo 205].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqm, y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Coronavirus bovino y Rotavirus bovino [combo 206]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento que se describe aqm y uno o mas antfgenos de cada uno de Coronavirus bovino y Rotavirus bovino [combo 207].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166,

167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189,

190, 191, 192, 193, 194, 195, 196 y 197], que comprende ademas componentes inmunologicamente activos eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por infecciones causadas por Coronavirus bovino y Rotavirus bovino [combo 208]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023,

024, 025, 026, 027, 028, 029, 030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046,

047, 048, 049, 050, 051, 052, 053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069,

13> Mycoplasma bovis

093, 094, 095, 096, 097, 098, 099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115,

116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138,

139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160,

161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183,

184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, y 197 ], que comprende ademas uno o mas antfgenos de cada uno de Coronavirus bovino y Rotavirus bovino [combo 209].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqm, y al menos un componente inmunologicamente activo adicional eficaz para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Cryptosporidium parvum [combo 210].

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y un antigeno de Cryptosporidium parvum [combo 211].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166,

167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184 184, 185, 186, 187, 188,

189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208 y 209], que comprende ademas un componente inmunologicamente activo eficaz para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Cryptosporidium parvum [combo 212]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029, 030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038,

039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052, 053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061,

062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075, 076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084,

085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098, 099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107,

108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130,

131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153,

154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170,171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185,186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204 205, 206, 207, 208 y 209], que comprende ademas un antigeno de Cryptosporidium parvum [combo 213].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y un componente inmunologicamente activo adicional eficaz para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Cryptosporidium hominis [combo 214]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn y un antigeno de Cryptosporidium hominis [combo 215].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166,

167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184 184, 185, 186, 187, 188,

189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208 y 209], que comprende ademas un componente inmunologicamente activo eficaz para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por infecciones causadas por Cryptosporidium hominis [combo 216]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029, 030, 031, 032, 033, 034,

035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052, 053, 054, 055, 056, 057,

058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075, 076, 077, 078, 079, 080,

081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098, 099, 100, 101, 102, 103,

104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126,

127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149,

150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170,171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185,186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204 205, 206, 207, 208 y 209], que comprende ademas un antfgeno de Cryptosporidium hominis [combo 217].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Cryptosporidium parvum y Cryptosporidium hominis [combo 218]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y uno o mas antfgenos de cada una de Cryptosporidium parvum y Cryptosporidium hominis [combo 219].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006,

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208 y 209], que comprende ademas componentes inmunologicamente activos eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por infecciones causadas por Cryptosporidium parvum y Cryptosporidium hominis [combo 220]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005,

006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028,

029, 030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051,

052, 053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074,

075, 076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097,

098, 099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120,

121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143,

144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165,

166, 167, 168, 169, 170,171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185,186, 187, 188,

189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204 205, 206, 207, 208 y 209], que comprende ademas uno o mas antigenos de cada uno de Cryptosporidium parvum y Cryptosporidium hominis [combo 221].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y la menos un componente inmunologicamente activo adicional eficaz para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Mycobacterium avium paratuberculosis [combo 222]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn y un antigeno de Mycobacterium avium paratuberculosis [combo 223].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006,

007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166,

167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184 184, 185, 186, 187, 188,

189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211,

212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220 y 221], que comprende ademas un componente inmunologicamente activo eficaz para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Mycobacterium avium paratuberculosis [combo 224]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027,

028, 029, 030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050,

051, 052, 053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073,

074, 075, 076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096,

097, 098, 099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119,

120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142,

143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164,

165, 166, 167, 168, 169, 170,171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185,186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220 y 221], que comprende ademas antfgeno de Mycobacterium avium paratuberculosis [combo 225].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y al menos un componente inmunologicamente activo adicional eficaz para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Adenovirus [combo 226]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn y un antfgeno de Adenovirus [combo 227].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006,

007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224 y 225], que comprende ademas un componente inmunologicamente activo eficaz para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Adenovirus [combo 228]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005,

006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028,

029, 030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051,

052, 053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074,

075, 076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097,

098, 099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120,

121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143,

144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165,

166, 167, 168, 169, 170,171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185,186, 187, 188,

189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223,224 y 225], que comprende ademas un antfgeno de Adenovirus [combo 229].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y al menos un componente inmunologicamente activo adicional eficaz para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Astrovirus [combo 230]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn y un antfgeno de Astrovirus [combo 231].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006,

007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166,

167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184 184, 185, 186, 187, 188,

189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211,

212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228 y 229], que comprende ademas un componente inmunologicamente activo eficaz para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por infecciones causadas por Astrovirus [combo 232]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029, 030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042,

043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052, 053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065,

066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075, 076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088,

089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098, 099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111,

112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134,

135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157

,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170,171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179,

180, 181, 182, 183, 184, 185,186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197 198, 199, 200, 201, 202,

203, 204 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225,

226, 227, 228 y 229], que comprende ademas un antfgeno de Astrovirus [combo 233]. Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y al menos un componente inmunologicamente activo adicional eficaz para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Parvovirus bovino [combo 234]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn y un antfgeno de Parvovirus bovino [combo 235].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166,

167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184 184, 185, 186, 187, 188,

189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201,202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232 y 233], que comprende ademas un componente inmunologicamente activo eficaz para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Parvovirus bovino [combo 236]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029, 030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041,

042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052, 053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064,

065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075, 076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087,

088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098, 099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110,

111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133,

134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156,

157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170,171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178,

179, 180, 181, 182, 183, 184, 185,186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197 198, 199, 200, 201,

202, 203, 204 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224,

225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, y 233], que comprende ademas un antigeno de Parvovirus bovino [combo 237].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Cryptosporidium parvum, Adenovirus, Astrovirus, Parvovirus bovino y Mycobacterium avium paratuberculosis [combo 238]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn y uno o mas antigenos de cada uno de Cryptosporidium parvum, Adenovirus, Astrovirus, Parvovirus bovino y Mycobacterium avium paratuberculosis [combo 239].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Escherichia coli, Salmonella spp., preferiblemente Salmonella dublin, Salmonella typhimurium y Salmonella newport, Rotavirus bovina y Coronavirus bovina, Cryptosporidium parvum, Adenovirus, Astrovirus, Parvovirus bovina y Mycobacterium avium paratuberculosis [combo 240]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y uno o mas antfgenos de cada una de Escherichia coli, Salmonella spp., preferiblemente Salmonella dublin, Salmonella typhimurium y Salmonella newport, rotavirus bovino y Coronavirus bovino, Cryptosporidium parvum, Adenovirus, Astrovirus, Parvovirus bovino y Mycobacterium avium paratuberculosis [combo 241].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Streptococcus spp., preferiblemente Streptococcus uberis y/o Streptococcus dysgalactiae [combo 242]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn y un antfgeno de Streptococcus spp., preferiblemente de cada uno de Streptococcus uberis y/o Streptococcus dysgalactiae, [combo 243]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn y uno o mas antfgenos de Streptococcus spp., preferiblemente cada uno de Streptococcus uberis y/o Streptococcus dysgalactiae [combo 244].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn, y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por Streptococcus spp., preferiblemente Streptococcus uberis y/o Streptococcus dysgalactiae y/o Staphylococcus aureus [combo 245]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn y uno mas antfgenos de Streptococcus spp., preferiblemente de cada uno de Streptococcus uberis y/o Streptococcus dysgalactiae, y/o Staphylococcus aureus [combo 246].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166,

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184 184, 185, 186, 187, 188,

189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211,

212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231,232, 233, 234,

235, 236, 237, 238, 239, 240 y 241], que comprende ademas componentes inmunologicamente activos eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Streptococcus spp., preferiblemente Streptococcus uberis y/o Streptococcus dysgalactiae, y/o Staphylococcus aureus [combo 247]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029, 030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037,

038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052, 053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060,

061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075, 076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083,

084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098, 099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106,

107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129,

130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152,

153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170,171, 172, 173, 174,

175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185,186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197

198, 199, 200, 201, 202, 203, 204 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240 y 241], que comprende ademas uno o mas antfgenos de cada uno de Streptococcus spp., preferiblemente Streptococcus uberis y/o Streptococcus dysgalactiae, y/o Staphylococcus aureus [combo 248]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029, 030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037,

038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052, 053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060,

061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075, 076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083,

084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098, 099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106,

107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129,

130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153,

154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170,171, 172, 173, 174, 175, 176,

177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185,186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197 198, 199, 200,

201,202, 203, 204 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221,222, 223, 224,

225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240 y 241], que comprende ademas uno o mas antigenos de varios serotipos de Streptococcus spp., preferiblemente de varios serotipos de cada uno de Streptococcus uberis y/o Streptococcus dysgalactiae, y/o Staphylococcus aureus [combo 249].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Streptococcus spp., preferiblemente Streptococcus uberis, Streptococcus dysgalactiae y/o Staphylococcus aureus, Klebsiella spp. y Mycoplasma spp. [combo 250]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn y uno o mas antigenos de Streptococcus spp., preferiblemente de cada uno de Streptococcus uberis, Streptococcus dysgalactiae, y/o Streptococcus aureus, Klebsiella spp. y Mycoplasma spp. [combo 251]. Mas preferiblemente, la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn y uno o mas antigenos de Streptococcus spp., preferiblemente cada uno de Streptococcus uberis y/o Streptococcus dysgalactiae, Staphylococcus aureus, Klebsiella spp., Mycoplasma spp. y endotoxina [combo 252].

Se describe una vacuna de combinacion para el tratamiento y/o la profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas en ganado bovino, donde la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por Trichophyton y Microsporum, preferiblemente seleccionado del grupo constituido por Trichophyton verrucosum, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton equinum, Trichophyton sarkisovii, Microsporum canis, Microsporum canis var. obesum, Microsporum canis var. distortum y Microsporum gypseum [combo 253]. Preferiblemente la vacuna de combinacion comprende M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado y avirulento como se ha descrito aqrn y uno o mas antfgenos de cada uno de Trichophyton y Microsporum, preferiblemente seleccionado por el grupo constituido por Trichophyton verrucosum, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton equinum, Trichophyton sarkisovii, Microsporum canis, Microsporum canis var. obesum, Microsporum canis var. distortum y Microsporum gypseum [combo 254].

Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029,

030, 031, 032, 033, 034, 035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052,

053, 054, 055, 056, 057, 058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075,

076, 077, 078, 079, 080, 081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098,

099, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121,

122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144,

145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166,

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189,

190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201,202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212,

213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235,

236, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250 y 251], que comprende ademas componentes inmunologicamente activos eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas Trichophyton y Microsporum, preferiblemente seleccionados del grupo constituido por Trichophyton verrucosum, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton equinum, Trichophyton sarkisovii, Microsporum canis, Microsporum canis var. obesum, Microsporum canis var. distortum y Microsporum gypseum [combo 255]. Se describe una vacuna de combinacion de acuerdo con uno cualquiera de [combo 001, 002, 003, 004, 005, 006, 007, 008, 009, 010, 011, 012, 013, 014, 015, 016, 017, 018, 019, 020, 021, 022, 023, 024, 025, 026, 027, 028, 029, 030, 031, 032, 033, 034,

035, 036, 037, 038, 039, 040, 041, 042, 043, 044, 045, 046, 047, 048, 049, 050, 051, 052, 053, 054, 055, 056, 057,

058, 059, 060, 061, 062, 063, 064, 065, 066, 067, 068, 069, 070, 071, 072, 073, 074, 075, 076, 077, 078, 079, 080,

081, 082, 083, 084, 085, 086, 087, 088, 089, 090, 091, 092, 093, 094, 095, 096, 097, 098, 099, 100, 101, 102, 103,

104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126,

127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149,

150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157 ,158, 254, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171,

172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194,

195, 196, 197, 198, 199, 200, 201,202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217,

218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240,

241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251 y 252], que comprende ademas uno o mas antfgenos de cada uno de Trichophyton y Microsporum, preferiblemente seleccionado del grupo constituido por Trichophyton verrucosum, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton equinum, Trichophyton sarkisovii, Microsporum canis, Microsporum canis var. obesum, Microsporum canis var. distortum y Microsporum gypseum [combo 256].

Se describe el uso combinado o coadministracion de cualquiera de los antigenos descritos aqrn en las vacunas de combinacion [combo 256]. Preferiblemente, el antigeno de M. bovis se proporciona en una primera composicion inmunogena y cualquier otro antigeno/antigenos se proporcionan en una o mas composiciones inmunogenas adicionales a administrar.

Preferiblemente, el componente o componentes inmunologicamente activos eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por uno o mas patogenos relevantes de ganado bovino como fuente de la vacuna de combinacion descrita aqrn es uno cualquiera incluido en las vacunas seleccionadas del grupo que consiste en: Alpha 7tm, ALPHA-7/MB™, ALPHA-CD™, BAR-VAC® 7, BAR-VAC® 7/SOMNUS, BAR-VAC® 8, BAR-VAC® CD, BAR-VAC® C/DT, BREED-BACK™ FP 10, BREED-BACK™ FP 10 HS, BREED-BACK™ FP 5, BREED-BACK™ FP 5 HS, BREED-BACK-10™, CALIBER® 3, CALIBER® 7, ELITE 4™, ELITE 9™, ELITE 9-HS™, EXPRESS®10, EXPRESS®10-HS, EXPRESS® 3 EXPRESS® 3/Lp, EXPRESS 4®, EXPRESS® 5, EXPRESS® 5-HS, EXPRESS® 5- PHM, EXPRESS® I, EXPRESS® I/LP, OCU-GUARD® MB, PULMO-GUARD™ MpB, PULMO-GUARD™ PH-M, PULMO-GUARD™ PH-M/SDT, PULMO-GUARD™ PHM-1, TETGUARD™, VIBRIO-LEPTO-5™ (todas de Boehringer Ingelheim, St. Joseph, MO); Cobalt™ 7, I-Site™, Lepto 5, Master Guard® Preg 5, Master Guard® 10, Master Guard® 10 + Vibrio, Master Guard® J5, P.H.M. Bac® 1, Pre-vent 6™, Respromune® 4, Respromune® 4 + Somnumune® (IM, SC), Respromune® 5 I-B-P+BRSV, Respromune® 5+L5, Respromune® 5+L5 Somnus, Respromune® 5+Somnumune, Respromune® 5+VL5, Respromune® 8, Respromune® 9, Respromune® 10, Scour Vac™ 4, Scour Vac™ 9, Scour Vac™ E coli + C, Somnumune®, Titanium™ 3, Titanium™ 4, Titanium™ 4 L5, Titanium™ 5, Titanium™ 5 L5, Titanium® 5+P.H.M. Bac®-1, Titanium™ BRSV 3, Titanium™ IBR, Titanium™ IBR-LP (todas de Agri Laboratories Inc., St. Joseph, MO); Herd-Vac® 3, Herd-Vac® 3 S, Herd-Vac® 8, Herd-Vac® 9, Surround™ 4, Surround™ 4+HS, Surround™ 8, Surround™ 9, Surround™ 9+HS, Surround™ HS, Surround™ L5, Surround™ V-L5 (todas de BioCor, Omaha, NE (Pfizer)); Mycomune® (Biomune Co., Lenexa, KS); vacuna de lengua azul, Vacuna de Diarrea Viral Bovina, bacterina de Campylobacter fetus bovina, Essential 1, Essential 2, Essential 2+P, Essential 3, Essential 3+T, Essential 4, Lepto-5, bacterina de Mannheimia haemolytica-Pasteurella multocida, Pre-breed 6, Pre-breed 8, Respira-1, Respira-3,Wart Vaccine (todas de Colorado Serum Company, Denver, CO); Pyramid® 3, Pyramid® 4, Pyramid® 4 + Presponse® SC, Pyramid® 5, Pyramid® 8, Pyramid® 9, Pyramid® IBR, Pyramid® IBR+Lepto, Triangle® 1 + Type II BVD, Triangle® 3 + VL5, Triangle® 4 + HS, Triangle® 4 + PH/HS, Triangle® 4 + PH-K, Triangle® 4 + Type II bVd, Triangle® 9 + HS, Triangle® 9 + PH-K, Triangle® + Type II BVD, Trichguard®, Trichguard® + V5L, TriVib 5L® (todas de Fort Dodge Animal Health, Overland Park, Ks (Wyeth)); Bacterina de Escherichia coli J-5, Bacterina de Especies Serpens; bacterina-toxoide de Staphylococcus aureus (todas de Hygieia Biological Laboratories, Woodland, CA); Endovac-Bovi® con Immuneplus® (Immvac, Inc., Columbia, MO); 20/20 Vision® con Spur®, L5 SC, Neoguard™, MasterGuard® Preg 5, Once PMH®, Once PMH® SC, Vibralone™-L5, Vision® 7 Somnus con Spur®, Vision® 7 con Spur®, Vision® 8 Somnus con Spur®, Vision® 8 con Spur®, Vision® CD-T con Spur®, Vision® CD con Spur®, Vista™ IBR SC, Vista™ 3 SC, Vista™ 5 SC, Vista™ 5 L5 sC, Vista™ Once SC, VL5 SC, Volar®, (todas de Intervet Inc., Millsboro, DE); Vac®, Reliant® 3, Reliant® 4, Reliant® IBR, Reliant® IBR/BVD, Reliant® IBR/Lepto, Reliant® Plus BVD-K (Dual IBR™), Reliant® Plus (Dual IBR™), Respishield™ 4, Respishield™ 4 L5, Respishield™ HM (todas de Merial LTD, Duluth, GA); Arsenal® 4.1, Arsenal® IBR, Arsenal® IBR BVD, Bovine Pili Shield™, Bovine Pili Shield™+C, Clostri Shield® 7, Clostri Shield® BCD, Fusogard®, Lepto Shield™ 5, Pinkeye Shield™ XT4, Salmo Shield® T, Salmo Shield® TD, Scour Bos™ 4, Scour Bos™ 9, Somnu Shield™, Trep Shield™ HW, Vib Shield® L5, Vib Shield® Plus, Vib Shield® Plus L5, Vira Shield® 2, Vira Shield® 2+BRSV, Vira Shield® 3, Vira Shield® 3+VL5, Vira Shield® 4, Vira Shield® 4+L5, Vira

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Shield® 5, Vira Shield® 5+L5, Vira Shield® 5+L5 Somnus, Vira Shield® 5+Somnus, Vira Shield® 5+VL5, Vira Shield® 5+VL5 Somnus, Vira Shield® 6, Vira Shield® 6+Somnus, Wart Shield™ (todas de Novartis Animal Health, Basel, Switzerland); Bovi-K® 4, Bovi-Shield™ 3, Bovi-Shield™ 4, Bovi-Shield™ BRSV, Bovi-Shield® FP™ 4+L5, Bovi-Shield® GOLD 3, Bovi-Shield® GOLD 5, Bovi-Shield® GOLD FP™ 5 L5, Bovi-Shield® GOLD FP™ 5 VL5, Bovi-Shield® Gold IBR-BVD, Bovi-Shield® Gold IBR-BVD-BRSV-LP, Bovi-Shield™ IBR, Bovi-Shield™ IBR-BRSV- LP, Bovi-Shield™ IBR-BVD, Bovi-Shield™ IBR-BVD-BRSV-LP, Bovi-Shield™ IBR-PI3-BRSV, Calf-Guard®, CattleMaster® 4, CattleMaster® 4+L5, CattleMaster® 4+VL5, CattleMaster® BVD-K, CattleMaster® Gold FP™ 5, CattleMaster® Gold FP™ 5 L5, Defensor® 3, Fortress® 7, Fortress® 8, Fortress® CD, Leptoferm®-5, One Shot®, One Shot Ultra™ 7, One Shot Ultra™ 8, PregGuard™ FP 9, PregGuard® Gold FP™ 10, Resvac® BRSV/Somubac®, Resvac® 4/Somubac®, ScourGuard 3® (K), ScourGuard 3® (K)/C, Somubac®, Spirovac®, Spirovac® L5, Spirovac® VL5, StayBred™ VL5, TSV-2™, Ultrabac® 7, Ultrabac® 7/Somubac®, Ultrabac® 8, Ultrabac® CD, UltraChoice™ 7, UltraChoice™ 8, UltraChoice™ CD, Upjohn J-5 Bacterin™, Vibrin® (todas de Pfizer Inc., New York, NY); vacuna Covexin® 8, Electroid® 7 Vaccine, Electroid® D, Guardian™, Jencine® 2, Jencine® 3, Jencine® 4, vacuna Nasalgen® IP, Piliguard® Pinkeye-1 Trivalent, Piliguard® Pinkeye + 7, Piliguard® Pinkeye Triview®, Siteguard® G, vacuna Siteguard® MLG (todas de Schering-Plough Animal Health Corporation, Kenilworth, NJ); Myco-Bac™ B, Poly-Bac B® 3, Poly-Bac B® Somnus, Super Poly-Bac B® Somnus (todas de Texas Vet Lab, Inc., San Angelo, TX), Virabos™-3 con Immunostim®, Virabos™-4 + H. somnus con Immunostim®, y Virabos™-4 con Immunostim® (todas de Bioniche Animal Health, Athens, GA), en el que se anade el antfgeno de M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado avirulento que se describe aqrn. Como alternativa, cuando esta presente antfgeno de M. bovis en cualquiera de las vacunas, se anade M. bovis atenuado avirulento como se describe aqrn o el antfgeno de M. bovis presente en cualquiera de las vacunas se sustituye por M. bovis atenuado avirulento que se describe aqrn.

Dosis y administracion

Preferiblemente una cantidad eficaz de una vacuna de combinacion administrada a ganado bovino proporciona una inmunidad eficaz contra infecciones microbiologicas causadas por M. bovis y al menos un patogeno adicional como se ha enumerado anteriormente. Se han enumerado anteriormente combinaciones preferidas de antfgenos para el tratamiento y la profilaxis de enfermedades microbiologicas.

En formas preferidas, el volumen de dosis de la vacuna de combinacion asf como de cada composicion inmunogena cuando se coadministran por separado no es superior a 5 ml, mas preferiblemente no es superior a 3 ml y mas preferiblemente no es superior a 2 ml. Mas preferiblemente la dosis es de 2 ml, preferiblemente administrada por via intranasal, administrandose 1 ml en cada orificio nasal, mas preferiblemente administrada por via intramuscular, aun mas preferiblemente administrada por via subcutanea y mas preferiblemente administrada tanto por via intranasal como subcutanea en una ocasion como dosis individual. Preferiblemente despues de la primera administracion se administrana una segunda o posterior administracion de la composicion inmunogena. Dicha administracion posterior se producina preferiblemente al menos 10 dfas despues de la administracion inicial, mas preferiblemente entre al menos 10-32 dfas, mas preferiblemente entre al menos 12-30 dfas, aun mas preferiblemente al menos 14 dfas y, mas preferiblemente entre al menos 14 y 28 dfas. En formas mas preferidas, la vacuna se administrana como una dosis individual, preferiblemente el Dfa 0 o en formas alternativas, 14-28 dfas a partir de entonces, preferiblemente el Dfa 0 y 14-28 dfas despues de eso, no produciendose la exposicion a formas patogenas de M. bovis hasta despues de terminar el regimen de inmunizacion. En una forma mas preferida no se necesita refuerzo y la vacuna se administra solo una vez. La vacuna se administra a animales desde 1 dfa de edad hasta que son adultos, preferiblemente a terneros desde 1 dfa de edad hasta que son ganado bovino adultos jovenes de 2 anos de edad, mas preferiblemente a terneros desde 1 dfa de edad hasta 16 semanas de edad, y aun mas preferiblemente a terneros desde 6 semanas hasta 12 semanas de edad. Dicha administracion disminrna o reduda los signos de infeccion por M. bovis como se describe a continuacion. Preferiblemente, los signos de infeccion por M. bovis en el grupo vacunado como se ha descrito anteriormente se redudan en al menos 50%, mas preferiblemente al menos 60%, aun mas preferiblemente al menos 70% y aun mas preferiblemente al menos 75% en comparacion con el grupo no vacunado. La evaluacion de patologfa pulmonar, espedficamente el porcentaje de consolidacion pulmonar atribuido a lesiones debidas a M. bovis, segun se puntua normalmente para diversas especies, se realizo despues de la necropsia. Preferiblemente las lesiones pulmonares se redudan en al menos 33%, mas preferiblemente al menos 50%, aun mas preferiblemente al menos 70%, aun mas preferiblemente al menos 80% aun mas preferiblemente al menos 90% y mas preferiblemente al menos 95% en comparacion con un grupo no vacunado.

La cantidad de la vacuna de combinacion que es eficaz depende de los ingredientes de la vacuna y del programa de administracion. Tfpicamente, cuando se usa antfgeno bacteriano en la vacuna de combinacion o en un uso combinado, la composicion de vacuna o inmunogeno contiene una cantidad de aproximadamente 103 a aproximadamente 1010 unidades formadoras de colonias (UFC) del antfgeno bacteriano por dosis, preferiblemente de aproximadamente 104 a aproximadamente 109 UFC del antfgeno bacteriano por dosis, mas preferiblemente de aproximadamente 105 a aproximadamente 106 UFC del antfgeno bacteriano por dosis. Por ejemplo, el M. bovis atenuado avirulento se usa preferiblemente en cantidades de aproximadamente 102 a aproximadamente 1010 UFC por dosis, preferiblemente de aproximadamente 103 a aproximadamente 109 uFc por dosis, aun mas preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 108 a aproximadamente 1010 UFC por dosis, mas preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 2,1 x 109 UFC por dosis.

Tfpicamente, cuando se usa una preparacion de virus inactivado o virus vivo modificado en la vacuna de

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combinacion o en un uso combinado, la vacuna o composicion inmunogena que contiene de aproximadamente 102 a aproximadamente 109 DICT50 de antigeno viral por dosis, preferiblemente de aproximadamente 103 a aproximadamente 108 DICT50 de antigeno viral por dosis, mas preferiblemente de aproximadamente 104 a aproximadamente 108 DICT50 de antfgeno viral por dosis. Por ejemplo, de aproximadamente 105 a aproximadamente 108 DICT50 por dosis de BVDV atenuado (tipos 1 y 2) es eficaz cuando se administra dos veces al animal durante un periodo de aproximadamente 3 a 4 semanas. En general, se usa normalmente antigeno inactivado en mayores cantidades que virus vivos modificados.

En el caso de la vacuna de que la vacuna de combinacion comprenda IBR vivo modificado, la cantidad de antigeno de IBR esta preferiblemente en un intervalo de aproximadamente 105 a 107,5 DICT50 por dosis. En el caso de que la vacuna de combinacion comprenda PI3 vivo modificado, la cantidad de antigeno de PI3 esta preferiblemente en un intervalo de aproximadamente 107 a 109 DICT50 por dosis. En el caso de que la vacuna de combinacion comprenda BRSV vivo modificado, la cantidad de antigeno de BRSV esta preferiblemente en un intervalo de aproximadamente 104,5 a 106,5 DICT50 por dosis. En el caso de que la vacuna de combinacion comprenda antigenos destruidos, la DICT50 o UFC indica la cantidad de antigeno por dosis en el cultivo vivo antes de la inactivacion y para IBR, la cantidad de antigeno de IBR esta preferiblemente en un intervalo de aproximadamente 107,0 a 109,0 DICT50 por dosis. En el caso de que la vacuna de combinacion comprenda PI3 destruido, la cantidad de antigeno de PI3 esta preferiblemente en un intervalo de aproximadamente 107,2 a 109,2 DICT50 por dosis. En el caso de que la vacuna de combinacion comprenda BRSV destruido, la cantidad de antigeno de BRSv esta preferiblemente en un intervalo de aproximadamente 105,0 a 107,5 DICT50 por dosis. En el caso de que la vacuna de combinacion comprenda Leptospira spp. destruida, la cantidad de cada antigeno de Leptospira spp. esta preferiblemente en un intervalo de aproximadamente 107,0 a 1010 (UFC) por dosis. En el caso de que la vacuna de combinacion comprenda H. somnus destruido y/o Pasteurella multocida destruida y/o Mannheimia haemolytica destruida la cantidad de antigeno de H. somnus y/o antfgeno de Pasteurella multocida y/o antigeno de Mannheimia haemolytica esta preferiblemente en un intervalo de aproximadamente 106,0 a 1010 unidades formadoras de colonias (UFC) por dosis.

Uso combinado/metodo de tratamiento

Se describe el uso combinado composiciones inmunogenas para el tratamiento y/o profilaxis de ganado bovino contra infecciones microbiologicas, donde las infecciones estan causadas por M. bovis y al menos un patogeno relevante de ganado bovino adicional.

Se describe un metodo para la profilaxis o tratamiento de enfermedades causadas por M. bovis y un microorganismo o microorganismos patogenos de ganado bovino adicionales, donde un antfgeno de M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado avirulento como se ha descrito aqrn y componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de la infeccion causada por dicho microorganismo patogeno de ganado bovino adicional, preferiblemente como se ha descrito aqrn, se administran a un animal que lo necesite a una dosis adecuada, conocida por el especialista.

El uso combinado o el metodo de coadministracion de dos o mas antfgenos de patogenos que afectan a ganado bovino comprende administrar una primera composicion inmunogena que comprende un antfgeno de M. bovis, preferiblemente el M. bovis atenuado avirulento que se describe aqrn y al menos una composicion inmunogena adicional que comprende un componente inmunologicamente activo eficaz para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por un patogeno de ganado bovino adicional. Preferiblemente, el patogeno adicional es uno de los patogenos que se enumeran aqrn. Preferiblemente, la primera y las composiciones inmunogenas adicionales se administran por separado. Preferiblemente, la composicion inmunogena adicional comprende uno o mas componentes inmunologicamente activos eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones causadas por un patogeno de ganado bovino distinto de M. bovis. Mas preferiblemente, la primera y las composiciones inmunogenas adicionales se administran juntas por medios tales como mezcla antes de la administracion y/o por formulacion de la primera y de las composiciones inmunogenas adicionales en un solo recipiente.

La coadministracion de cada una de las composiciones inmunogenas se produce simultaneamente, que significa al menos en un intervalo de 48 horas, preferiblemente un intervalo de 24 horas, aun mas preferiblemente en un intervalo de 12 horas, aun mas preferiblemente en un intervalo de 6 horas, aun mas preferiblemente en un intervalo de 3 horas, aun mas preferiblemente en un intervalo de 2 horas, aun mas preferiblemente en un intervalo de 1 hora. La via de administracion de cada una de las composiciones inmunogenas depende del modo de accion y puede ser igual pero tambien podna ser diferente.

Preferiblemente el antfgeno de M. bovis que se describe aqrn y uno o mas componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o la profilaxis de infecciones causadas por un patogeno relevante de ganado bovino adicional distinto de M. bovis pueden usarse como medicamento. Preferiblemente, este medicamento es una vacuna y puede usarse para disminuir o reducir los signos de una infeccion por M. bovis. Mas preferiblemente, el medicamento o vacuna puede usarse para disminuir o reducir los signos de una infeccion por M. bovis y asociada con o causada por una infeccion del antfgeno relevante de ganado bovino adicional.

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Formulaciones

Se describe la preparacion de la vacuna o vacunas de combinacion. Un experto en la materia puede determinar componentes adicionales que estan presentes en la composicion de la invencion. (Vease tambien Remington's Pharmaceutical Sciences, (1990) 18a ed. Mack Publ., Easton). Pueden usarse soluciones esteriles fisiologicamente aceptables inyectables conocidas. Para preparar una solucion lista para el uso para inyeccion o infusion parenteral, se encuentran disponibles facilmente soluciones isotonicas acuosas tales como, por ejemplo, una solucion salina o las correspondientes soluciones de protemas en plasma. Las composiciones farmaceuticas que se describen aqrn pueden estar presentes como liofilizados o preparaciones secas, que pueden reconstituirse con una solucion inyectable conocida directamente antes del uso o en condiciones esteriles, por ejemplo, como un kit de partes.

Ademas, las composiciones inmunogenicas y de vacuna que se describen aqrn pueden incluir uno o mas vetuculos veterinariamente aceptables. Tal como se emplea en esta memoria,"un vetuculo veterinariamente aceptable" incluye todos y cada uno de los disolventes, medios de dispersion, recubrimientos, adyuvantes, agentes estabilizantes, diluyentes, conservantes, agentes antibacterianos y antifungicos, agentes isotonicos, agentes para retrasar la adsorcion y similares.

Los diluyentes pueden incluir agua, solucion salina, dextrosa, etanol, glicerol y similares. Los agentes isotonicos pueden incluir cloruro sodico, dextrosa, manitol, sorbitol y lactosa, entre otros. Los estabilizantes incluyen albumina y sales alcalinas de acido etilendiaminotetracetico, entre otros.

Los adyuvantes incluyen, pero sin limitacion, el sistema adyuvante RIBI (Ribi Inc.), alumbre, del de hidroxido de aluminio, colesterol, emulsiones de aceite en agua, emulsiones de agua en aceite tales como, por ejemplo, adyuvantes completo e incompleto de Freund, copolfmero de bloque (CytRx, Atlanta GA), SAF-M (Chiron, Emeryville CA), CARBOPOL®, adyuvante AMPHIGENO, saponina, Quil A, QS-21 (Cambridge Biotech Inc., Cambridge MA), GPI-0100 (Galenica Pharmaceuticals, Inc., Birmingham, AL) u otras fracciones de saponina, monofosforil lfpido A, adyuvante de lfpido-amina Avridine, enterotoxina termolabil de E. coli (recombinante o de otra forma), toxina colerica o muramil dipeptido, entre muchos otros.

Las composiciones inmunogenicas pueden incluir ademas uno o mas de otros agentes inmunomoduladores tales como, por ejemplo, interleucinas, interferones u otras citocinas. Las composiciones inmunogenicas tambien pueden incluir gentamicina y mertiolato. Aunque las cantidades y concentraciones de adyuvantes y aditivos utiles en el contexto de la presente invencion pueden determinarse facilmente por el experto en la materia, preferiblemente la composicion comprende de aproximadamente 50 |ig a aproximadamente 200 |ig de adyuvante y preferiblemente aproximadamente 250 |ig/ml de dosis de la composicion de vacuna. Preferiblemente esta presente un antibiotico en una cantidad de aproximadamente 1 |ig/ml a aproximadamente 60 |ig/ml, y preferiblemente menor de aproximadamente 30 |ig/ml.

Preferiblemente, la vacuna de combinacion (o composicion inmunogenica) primero se deshidrata. Si la composicion se liofiliza o deshidrata primero por otros metodos, entonces, antes de la vacunacion, dicha composicion se rehidrata en soluciones acuosas (por ejemplo, solucion salina, PBS (solucion salina tamponada con fosfato)) o soluciones no acuosas (por ejemplo emulsion en aceite (aceite mineral, o basada en aceite vegetal/metabolizable/basada en emulsion sencilla o doble), basada en aluminio, adyuvante basado en carbomero).

Preferiblemente la composicion inmunogenica o vacuna de combinacion descrita aqrn, que comprende al menos un antfgeno de M. bovis y uno o mas componentes inmunologicamente activos adicionales eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones producidas por un patogeno relevante para ganado bovino adicional distinto de M. bovis, se formula como una vacuna de combinacion de dosis fija. Preferiblemente, la composicion inmunogenica o vacuna de combinacion descrita aqrn, en particular la vacuna de combinacion de dosis fija, se formula para uso como una vacuna de una sola dosis o de multiples dosis, aunque la formulacion para uso como una vacuna de una sola dosis es la mas preferida. En otras palabras, las composiciones inmunogenicas o la vacuna, preferiblemente la vacuna de combinacion de dosis fija proporcionada aqrn, se formula para la administracion como multiples dosis o como una sola dosis, aunque la formulacion para la administracion como una sola dosis es la mas preferida. Como se muestra en la seccion de ejemplos, dicha administracion de una sola dosis del antfgeno de M. bovis es eficaz para disminuir o reducir los signos de una infeccion por M. bovis. Preferiblemente las composiciones inmunogenicas descritas aqrn, en particular la vacuna de combinacion de dosis fija, se formula para uso como una vacuna de una sola dosis, donde la administracion de dicha dosis individual es eficaz para disminuir o reducir los signos de una infeccion por M. bovis.

Modos de Administracion y Dosificacion

Las composiciones descritas aqrn pueden administrarse de cualquier manera convencional. Los ejemplos de metodos de administracion incluyen cualquiera que permita el acceso por las celulas del sistema inmune a la composicion inmunogenica, incluyendo pero sin limitacion la via oral, transdermica, intradermica, intravenosa, subcutanea, intramuscular, intraocular, intraperitoneal, intrarrectal, intravaginal, intranasal, intragastrica, intratraqueal, intrapulmonar o cualquier combinacion de las mismas. Son modos de administracion preferidos las vfas intramuscular, subcutanea e intranasal, siendo especialmente preferida la via subcutanea e intranasal. Si se desea o es necesario, pueden administrarse inmunizaciones de refuerzo una o varias veces a diversos intervalos.

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Sin embargo, preferiblemente la vacunacion se administra como una sola dosis. Despues de la administracion de dicha vacuna, se induce una respuesta inmune en el animal y los signos de la infeccion por M. bovis se reducen en incidencia y/o gravedad, ademas de conseguirse una reduccion en la tasa de mortalidad, en comparacion con los animales expuestos a aislados o bacterias de tipo silvestre despues de la exposicion a una forma virulenta de M. bovis.

Preferiblemente el volumen de dosificacion de la vacuna no es mayor de 5 ml, mas preferiblemente no mayor de 3 ml, y mas preferiblemente no mayor de 2 ml. Mas preferiblemente la dosis sena de 2 ml, preferiblemente administrada por via intranasal, administrandose 1 ml en cada orificio nasal, incluso mas preferiblemente administrada por via subcutanea, y aun mas preferiblemente administrada tanto por via intranasal como por via subcutanea en una ocasion como una sola dosis. En algunas formas preferidas, despues de la primera administracion se administrana una segunda o posterior administracion de la composicion inmunogenica.

Dicha administracion posterior preferiblemente se realizana al menos 10 dfas despues de la administracion inicial, mas preferiblemente entre al menos 10-32 dfas, mas preferiblemente entre al menos 12-30 dfas, aun mas preferiblemente al menos 14 dfas y aun mas preferiblemente entre al menos 14-28 dfas. En formas mas preferidas, la vacuna se administrana el Dfa 0 como una sola dosis o, en formas alternativas, el Dfa 0 y 14-28 dfas despues, sin que tenga lugar la exposicion a formas patogenas de M. bovis hasta despues de que se haya completado el regimen de inmunizacion. En una forma mas preferida no se necesita refuerzo y la vacuna se administra solo una vez. La vacuna se administra a animales desde 1 dfa de edad hasta que son adultos, preferiblemente a terneros desde 1 dfa de edad hasta que son adultos jovenes de 2 anos de edad, mas preferiblemente a terneros desde 1 dfa de edad hasta 16 semanas de edad, y aun mas preferiblemente a terneros desde 6 semanas hasta 12 semanas de edad. Dicha administracion redujo los signos de infeccion de M. bovis como se describe mas adelante. De hecho, los estudios de la presente memoria demuestran que los signos de infeccion por M. bovis en el grupo vacunado como se ha descrito anteriormente se redujeron al menos 50%, mas preferiblemente al menos 60%, incluso mas preferiblemente al menos 70%, incluso mas preferiblemente al menos 75%, mas preferiblemente al menos 80%, aun mas preferiblemente al menos 83%, mas preferiblemente al menos 85% y aun mas preferiblemente al menos 90% en comparacion con el grupo no vacunado.

Preferiblemente las composiciones inmunogenicas aqrn descritas son eficaces para estimular un inicio de la inmunidad en los 14 dfas siguientes a la administracion de una sola dosis. Preferiblemente la composicion inmunogenica aqrn descrita es eficaz para estimular la duracion de la inmunidad de al menos 42 dfas despues de la administracion de una sola dosis de la composicion inmunogenica.

Preferiblemente las composiciones inmunogenicas aqrn descritas pueden coadministrarse a un animal (preferiblemente ganado bovino). Espedficamente, a un animal se le pueden administrar dos o mas antfgenos de M. bovis aqrn descritos y al menos uno o mas componentes inmunologicamente activos distintos eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones producidas por un patogeno relevante para ganado bovino adicional distinto de M. bovis (analizado con mas detalle mas adelante). El antfgeno de M. bovis de la presente invencion y el componente o componentes inmunologicamente activos pueden coadministrarse o administrarse por separado. Un ejemplo de la coadministracion separada incluye la administracion del antfgeno de M. bovis y del componente o componentes inmunologicamente activos dentro de un periodo de 2 dfas. Como alternativa, el antfgeno de M. bovis y dichos uno o mas componentes inmunologicamente activos pueden formularse como una vacuna de combinacion de dosis fija. Preferiblemente la administracion de los dos o mas antfgenos que comprenden el antfgeno de M. bovis y uno o mas componentes inmunologicamente activos eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones producidas por un patogeno relevante para ganado bovino adicional distinto de M. bovis es en una sola dosis. Como alternativa, pueden administrarse dos, tres o cuatro dosis que se coadministran o se administran por separado.

Preferiblemente la composicion inmunogenica aqrn descrita contiene un adyuvante. Los adyuvantes pueden incluir hidroxido de aluminio y fosfato de aluminio, saponinas, por ejemplo Quil A, QS-21 (Cambridge Biotech Inc., Cambridge MA), GPI-0100 (Galenica Pharmaceuticals, Inc., Birmingham, AL), emulsion de agua en aceite, emulsion aceite en agua, y emulsion de agua en aceite en agua. La emulsion puede basarse, en particular, en aceite de parafina lfquida ligera (del tipo de la Farmacopea Europea); aceite isoprenoide, tal como escualano o escualeno; aceite resultante de la oligomerizacion de alquenos, en particular de isobuteno o deceno; esteres de acidos o de alcoholes que contienen un grupo alquilo lineal, mas particularmente aceites vegetales, oleato de etilo, di- (caprilato/caprato) de propilenglicol, tri-(caprilato/caprato) de glicerilo o dioleato de propilenglicol; esteres de acidos grasos o alcoholes ramificados, en particular esteres de acido isoestearico. El aceite se usa en combinacion con emulsionantes para formar la emulsion. Los emulsionantes son preferiblemente tensioactivos no ionicos, en particular esteres de sorbitan, de mannide (por ejemplo, oleato de anhidromanitol), de glicol, de poliglicerol, de propilenglicol y de acido oleico, isoestearico, ricinoleico o hidroxiestearico, que estan opcionalmente etoxilados, y copolfmeros de bloques de polioxipropileno-polioxietileno, en particular los productos Pluronic, especialmente L121. Vease Hunter et al., The Theory and Practical Application of Adjuvants (Ed.Stewart-Tull, D. E. S.). John Wiley and Sons, NY, pp51-94 (1995) y Todd et al., Vaccine 15:564-570 (1997). Por ejemplo, es posible usar la emulsion SPT descrita en la pagina 147 de “Vaccine Design, The Subunit and Adjuvant Approach” editado por M. Powell y M. Newman, Plenum Press, 1995, y la emulsion MF59 descrita en la pagina 183 de este mismo libro.

Un ejemplo adicional de un adyuvante es un compuesto elegido entre los polfmeros de acido acnlico o metacnlico y

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los copoUmeros de anhudrido maleico y derivado de alquenilo. Son compuestos adyuvantes ventajosos los polfmeros de acido acnlico o metacnlico que estan reticulados, especialmente con polialquenil eteres de azucares o polialcoholes. Estos compuestos se conocen por el termino carbomero (Farmacopea Vol. 8, N° 2, junio de 1996). Los expertos en la materia tambien pueden consultar la patente de Estados Unidos N° 2.909.462 que describe dichos polfmeros acnlicos reticulados con un compuesto polihidroxilado que tiene al menos tres grupos hidroxilo, preferiblemente no mas de 8, estando los atomos de hidrogeno de al menos 3 hidroxilos reemplazados por radicales alifaticos insaturados que tienen al menos 2 atomos de carbono. Los radicales preferidos son los que contienen de 2 a 4 atomos de carbono, por ejemplo, vinilos, alilos y otros grupos etilenicamente insaturados. Los radicales insaturados tambien pueden contener otros sustituyentes, tales como metilo. Los productos vendidos con el nombre Carbopol (BF Goodrich, Ohio, USA) son particularmente apropiados. Estan reticulados con una alilsacarosa o con alilpentaeritritol. Entre ellos, se pueden mencionar Carbopol 974P, 934P y 971P. Lo mas preferido es el uso de Carbopol 971P. Entre los copolfmeros de anhfdrido maleico y derivados de alquenilo estan los copolfmeros EMA (Monsanto), que son copolfmeros de anhfdrido maleico y etileno. La disolucion de estos polfmeros en agua produce una solucion acida que se neutralizara, preferiblemente hasta un pH fisiologico, con el fin de proporcionar la solucion adyuvante en la que se incorporara la propia composicion inmunogenica, inmunologica o de vacuna.

Otros adyuvantes adecuados incluyen, pero sin limitacion, el sistema adyuvante RIBI (Ribi Inc.), copolfmero de bloque (CytRx, Atlanta GA), SAF-M (Chiron, Emeryville CA), monofosforil lfpido A, adyuvante de lfpido-amina Avridine, enterotoxina termolabil de E. coli (recombinante o de otra manera), toxina colerica, IMS 1314 o muramil dipeptido, o citocinas naturales o recombinantes o analogos de las mismas o estimuladores de la liberacion de citocinas endogenas, entre muchos otros.

Preferiblemente, el adyuvante se anade en una cantidad de aproximadamente 100 |jg a aproximadamente 1 g por dosis. Incluso mas preferiblemente, el adyuvante se anade en una cantidad de aproximadamente 100 jg a aproximadamente 500 mg por dosis. Incluso mas preferiblemente, el adyuvante se anade en una cantidad de aproximadamente 500 jg a aproximadamente 250 mg por dosis. Incluso mas preferiblemente, el adyuvante se anade en una cantidad de aproximadamente 750 jg a aproximadamente 100 mg por dosis. Incluso mas preferiblemente, el adyuvante se anade en una cantidad de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 50 mg por dosis. Incluso mas preferiblemente, el adyuvante se anade en una cantidad de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 10 mg por dosis. Lo mas preferido es que el adyuvante se anada en una cantidad de aproximadamente 1 mg por dosis.

Vehfculos

Ademas, las composiciones inmunogenicas y de vacuna aqrn descritas pueden incluir uno o mas vehfculos veterinariamente aceptables. Se describe el uso de una cepa de M. bovis, atenuada por multiples pases o atenuacion en serie como se ha descrito anteriormente, como una medicina, preferiblemente como una medicina veterinaria. Las cepas de M. bovis atenuadas como se ha descrito anteriormente pueden usarse para la preparacion de una composicion farmaceutica, como se ha descrito aqrn, para la profilaxis o tratamiento de infecciones producidas por M. bovis. Como se ha indicado anteriormente, estas composiciones farmaceuticas/composiciones de vacuna pueden usarse para el tratamiento y/o profilaxis de animales susceptibles a la infeccion por M. bovis.

Metodos de tratamiento o profilaxis

Se describe un metodo para el tratamiento o profilaxis que incluye una reduccion de la incidencia de la infeccion de tipo silvestre en un rebano o la reduccion de la gravedad de los signos de la infeccion por M. bovis asociada con los animales infectados por M. bovis de tipo silvestre que han recibido composiciones inmunogenicas como las descritas aqrn en comparacion con animales que no se vacunaron o se vacunaron con vacunas disponibles antes de la presente invencion. Ademas, la administracion de la vacuna descrita aqrn reduce el numero de animales de un rebano que se infectan con M. bovis. Dicho metodo generalmente implica la administracion de una cantidad terapeuticamente eficaz de una cepa de M. bovis atenuada por medio de los metodos descritos anteriormente, a un sujeto o rebano de sujetos que necesitan dicho tratamiento. Preferiblemente, los smtomas clmicos se reducen en incidencia o gravedad al menos 10%, mas preferiblemente al menos 20%, aun mas preferiblemente al menos 30%, incluso mas preferiblemente al menos 40%, aun mas preferiblemente al menos 50%, incluso mas preferiblemente al menos 60%, aun mas preferiblemente al menos 70%, incluso mas preferiblemente al menos 80%, aun mas preferiblemente al menos 90%, y aun mas preferiblemente al menos 95% en comparacion con animales que no se vacunaron o se vacunaron con una composicion inmunogenica de M. bovis que estaba disponible antes de la presente invencion pero posteriormente se infectaron por M. bovis de tipo silvestre.

Ejemplos

Los siguientes ejemplos se proporcionan con fines ilustrativos y no debe considerarse que limiten el alcance de la presente invencion.

Ejemplo 1: Preparacion y ensayo de una vacuna de aislado de M. bovis de alto numero de pases Materiales y Metodos:

Se criaron cuarenta y cuatro (44) terneros. Despues del destete, los terneros se asignaron aleatoriamente a 1 de 5 grupos. Los terneros teman 6 + 2 semanas de edad al inicio del estudio y recibieron vacunacion de acuerdo con la 5 asignacion de grupos el Dfa 0 y el Dfa 14. Aproximadamente cuatro (4) semanas despues ^a 27), los terneros se expusieron a M. bovis virulento o medio solo de acuerdo con la asignacion de grupos. Dieciseis (16) dfas despues de la exposicion (Dfa 43), los terneros se sometieron a necropsias. Los tratamientos de los grupos se resumen en la Tabla 1.

Tabla 1: Tratamientos de Grupos

Grupos

Animales/ grupo Sustancia de Ensayo Exposicion

Artfculo

Dosis / Via Programa de Administracion Material Dosis / Ruta Programa de Administracion

Grupo 1

8 M bovis MLV ~109 UFC en 2 ml/ SC y ~109 UFC en 2 ml IN Dfa 0 y 14 M. bovis (aislado individual reciente) 30 ml de material de exposicion y10 ml de PBS Dfa 27 (aproximadamente 4 semanas despues de la vacunacion)

Grupo 2

9 M bovis MLV ~109 UFC en 2 ml SC Dfa 0 M. bovis (aislado individual reciente) 30 ml de material de exposicion y10 ml de PBS Dfa 27 (aproximadamente 4 semanas despues de la vacunacion)

Grupo 3

9 M bovis MLV ~10B UFC en 2 ml SC Dfa 0 M. bovis (aislado individual reciente) 30 ml de material de exposicion y10 ml de PBS Dfa 27 (aproximadamente 4 semanas despues de la vacunacion)

Grupo 4

9 M bovis MLV ~107 UFC en 2 ml SC Dfa 0 M. bovis (aislado individual reciente) 30 ml de material de exposicion y10 ml de PBS Dfa 27 (aproximadamente 4 semanas despues de la vacunacion)

Grupo 5

9 Solo Medio 2 ml SC Dfa 0 M. bovis (aislado individual reciente) 30 ml de material de exposicion y10 ml de PBS Dfa 27 (aproximadamente 4 semanas despues de la vacunacion)

10 Para la vacunacion se uso una cepa de Mycoplasma bovis vivo con un alto numero de pases, ATCC PTA-9666 (candidato de vacuna 052823A131 MS+4), que se sometio a pases 135 veces en medio de cultivo de partida. Esta cepa se obtuvo a partir de un brote de la enfermedad natural y despues se sometio a pases seriados en medio de Friis modificado (es decir modificado para eliminar los componentes del SNC del mismo) para preparar el material. Mas espedficamente, el aislado se cultivo en medio de Friis suplementado con extracto de levadura al 10% y suero 15 de caballo al 20%. El cultivo se dejo crecer 24 ± 2 horas a 37°C despues de la inoculacion con un volumen apropiado de cultivo de siembra determinado antes del estudio. El material despues se congelo a <-60oC. Antes de la vacunacion, el material se descongelo rapidamente y se prepararon tres niveles de dosificacion usando medio de

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Friis como diluyente.

Preparacion de 1e9 UFC (Grupos 1 y 2):

Dosis de 2 ml administrada por via subcutanea y (grupo 1 solo) dosis de 2 ml administrada por via intranasal (1 ml en cada orificio nasal).

SC Total: 8,4E8 UFC / Animal

IN Total: 8,4E8 UFC / Animal

Preparacion de 1e8 UFC (Grupo 3):

Dosis de 2 ml administrada por via subcutanea.

SC Total: 9,4E7 UFC / Animal

Preparacion de 1e8 UFC (Grupo 4):

Dosis de 2 ml administrada por via subcutanea.

SC Total: 1,0E7 UFC / Animal

Vacuna Viva Modificada M. bovis PTA-9666 (2a Vacunacion)

Mycoplasma bovis vivo de alto numero de pases PTA-9666 en medio de cultivo de partida.

El aislado usado para la vacunacion se obtuvo a partir de un brote de la enfermedad natural y despues se sometio a pases seriados en el medio de Friis modificado. El material se preparo en BIVI. El aislado se cultivo en medio de Friis suplementado con extracto de levadura al 10% y suero de caballo al 20%. El cultivo se dejo crecer 24 ± 2 horas a 37°C despues de la inoculacion con un volumen apropiado de cultivo de siembra determinado antes del estudio. El material se congelo (<-60oC). Antes de la vacunacion, el material se descongelo rapidamente y se preparo un solo nivel de dosis usando medio de Friis como diluyente.

Preparacion de 1e9 UFC (Grupo 1):

Dosis de 2 ml administrada por via subcutanea y dosis de 2 ml administrada por via intranasal (1 ml en cada orificio nasal).

SC Total: 7,2E8 UFC / Animal IN Total: 7,2E8 UFC / Animal

Medio Solo (1a Vacunacion) Medio de Friis suplementado con extracto de levadura al 10% y suero de caballo al 20% Dosis de 2 ml administrada por via subcutanea.

SC Total: 0 UFC / Animal de suero

Debajo de la Tabla 2 se proporciona un resumen del cronograma del estudio.

Tabla 2: Cronograma del Estudio

Dfa

Acontecimiento Muestras Ensayo

-42

Adquisicion de Animales -- --

De - 42 a 0

Observaciones Generales (Diarias)

-35

Recogida de muestras Hisopo nasal (Humedo/Seco) M. bovis (Cultivo/PCR)

Sangre (SST)

M. bovis (ELISA)

Muesca en la oreja

BVDV (IHC)

De -3 a -1

Transferencia de animales

Dfa

Acontecimiento Muestras Ensayo

De 0 a 28

Evaluacion clmica

0

Recogida de muestras Hisopo nasal (Humedo/Seco) M. bovis (PCR)

Sangre (SST) M. bovis (ELISA)

1a Vacunacion (Todos los Grupos) -- --

Evaluacion en sitio de inyeccion -- --

14

Evaluacion en el sitio de inyeccion -- --

Recoger muestras Hisopo nasal (Humedo/Seco) M. bovis (Cultivo/PCR)

Sangre (SST) M. bovis (ELISA)

2a Vacunacion (solo Grupo 1) -- --

27

Recogida de muestras Hisopo nasal (Humedo/Seco) M. bovis (Cultivo/PCR)

Sangre (SST) M. bovis (ELISA)

Evaluacion en el sitio de inyeccion -- --

Exposicion -- --

De 27 a 43

Observacion clmica (Diaria)

34

Recogida de muestras Hisopo nasal (Humedo/Seco) M. bovis (Cultivo/PCR)

Sangre (SST) M. bovis (ELISA)

43

Recogida de muestras (Pre) Hisopo nasal (Humedo/Seco) M. bovis (Cultivo/PCR)

Sangre (SST) M. bovis (ELISA)

Necropsia y Patologfa Macroscopica (% de Patologfa pulmonar)

Recogida de muestras (Post) Hisopo de amfgdala (Humedo/Seco) M. bovis (Cultivo/PCR)

Tejido Pulmonar (Conservado) M. bovis (IHC)

Tejido Pulmonar (Reciente) M. bovis (Cultivo/PCR)

Muestreo

Hisopos

Se recogieron hisopos nasales de todos los terneros los Dfas -22, 0, 14, 27, 34 y 43 (o el dfa de Post). En la 5 necropsia, se recogieron hisopos de las amngdalas de todos los terneros. Se recogieron hisopos de articulaciones a partir de animales con anomalfas clmicas. Ademas, se tomaron muestras de otras localizaciones en ciertos animales que mostraron implicacion del area. En todos los casos, se frotaron tres hisopos esteriles alrededor de las regiones, tan asepticamente como fue posible, durante algunos segundos y despues se retiraron. Los hisopos se pusieron de nuevo en los recipientes de transporte. Se pusieron dos hisopos en recipiente de transporte individuales con medio y

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uno se puso en un recipiente de transporte sin medio. Las hisopos se etiquetaron de manera apropiada con el numero de estudio, numero de ID del ternero y la fecha. Las recogidas de muestras se registraron en el Registro de Recogida de Muestras. Los hisopos se almacenaron en hielo y se transportaron el mismo d^a a BIVI - St. Joseph. Las salidas de los hisopos se documentaron en un Formulario de Salida de Muestras.

Sueros

Se recogio sangre de todos los terneros los Dfas -42, 0, 14, 27, 34 y 43 (o el dfa de Post). La sangre se recogio asepticamente de la vena yugular de cada ternero en un Tubo Separador de Suero (SST) de 12,5 ml. Las recogidas de muestras se registraron en el Registro de Recogida de Muestras. La sangre se administro a BIVI - St. Joseph documentandose la salida en un Formulario de Salida de Muestras. Despues se recogio suero de cada tubo por centrifugacion y se transfirio a un criovial esteril. Las muestras se almacenaron a 4°C hasta el ensayo, seguido de almacenamiento a largo plazo a -20°C.

Tejido

Se recogieron muestras de pulmon de todos los animales a la discrecion del Investigador del Estudio. Para el muestreo se seleccionaron areas en las que se observaron lesiones macroscopicas. Las muestras se pusieron en bolsas de transporte giratorias y se etiquetaron con el numero del animal. Las muestras de tejido se almacenaron en hielo y se transportaron el mismo dfa a BIVI - St. Joseph. Se recogio una serie adicional de tejidos pulmonares y se pusieron en solucion de formalina al 10% y se etiquetaron de manera apropiada. Las muestras de tejido fijado se transportaron a ISU - Veterinary Diagnostic Laboratory. Los sitios de muestra seleccionados para cada ternero se presentan en el Registro de Recogida de Muestras.

Ensayo

Microbiologfa

Los hisopos puestos en el medio de transporte y las muestras de tejido se transportaron a BIVI para el aislamiento de Mycoplasma bovis (solo las muestras del dfa de Post). En resumen, los hisopos se giraron en 5 ml de caldo selectivo de micoplasma. Se corto una pequena muestra (aproximadamente 5 mm) de tejido pulmonar y se homogeneizo en 5 ml de medio de Friis completo. Se anadieron 100 |il de homogeneizado a caldo selectivo de micoplasma. Los cultivos se incubaron a 37°C/5% de CO2. Despues de 4-14 dfas, se examino el caldo para determinar el crecimiento y se subcultivo en placas para el aislamiento. Todas las muestras de subcultivo positivas se almacenaron a -70°C.

PCR:

Los hisopos de cada ternero no puestos en el medio de transporte y las muestras de tejido se transportaron a BIVI donde el ADN se extrajo y se ensayo por PCR usando cebadores y sondas espedficas para el gen uvrC de M. bovis desarrollado en BIVI. Los resultados de la PCR se expresaron como positivos o negativos para la deteccion de ADN de M. bovis.

Serologfa

Se ensayaron muestras de suero usando un ELISA disponible en el mercado por Biovet (Canada) usando el protocolo proporcionado con el kit ELISA. Los resultados del ELISA se expresan como lecturas de Densidad Optica (DO). Las DO de las muestras se compararon con el nivel de positividad (DOp media x 0,3) establecido por el control positivo incluido en el kit de ensayo. Despues, los resultados positivos se interpretaron de acuerdo con el esquema de clasificacion del fabricante, siendo 0 ausencia de seroconversion y siendo 4 una seroconversion muy fuerte (vease la seroconversion a continuacion en la Tabla 3).

Tabla 3: Seroconversion

Intervalo

Interpretacion

DO de Muestra < Nivel de Positividad

Negativo (0)

Nivel de Positividad < DO de Muestra < 1,75 * Nivel de Positividad

+ 1

1,75 * Nivel de Positividad < DO de Muestra < 2,3 * Nivel de Positividad

+2

2,3 * Nivel de Positividad < DO de Muestra < 3 * Nivel de Positividad

+3

DO de Muestra > 3 * Nivel de Positividad

+4

Histopatolog^a/IHC

Se enviaron tejidos fijados con formalina al laboratorio ISU Veterinary Diagnostic y se ensayaron mediante portaobjetos tenidos con hematoxilina/eosina e inmunohistoqmmica usando anticuerpos monoclonales espedficos para M. bovis

5 Observaciones Clmicas

Se realizaron observaciones generales diarias desde el Dfa 0 al D^a 27 y despues se realizaron observaciones clmicas diarias desde el Dfa 28 hasta la eutanasia y necropsia. Las observaciones clmicas y generales detectaron desviacion de la norma y se documentaron.

Necropsia

10 Despues de la eutanasia, cada animal se sometio a necropsia. Se examinaron la cavidad toracica y la traquea para cada ternero y las observaciones macroscopicas se registraron en el Registro de Informe de Necropsia. Se retiraron los pulmones y aproximadamente 6 pulgadas (15,24 cm) de traquea intactos de cada ternero para un examen adicional y para recoger muestras.

Patologfa Pulmonar

15 Para cada serie de pulmones, se examino cada lobulo pulmonar por visualizacion y por palpacion. Se determino la calidad y cantidad de patologfa debida a M. bovis presente (como un porcentaje) por cada lobulo pulmonar. Despues se pesaron los porcentajes de lobulo pulmonar y se sumaron para determinar el porcentaje de pulmon total con patologfa.

Patologfa Articular

20 Se examinaron las articulaciones afectadas y se registraron las observaciones generales.

Tabla 4: Metodos Estadfsticos de Analisis entre grupos para cada parametro

Parametro

Sistema de Puntuacion Evaluacion de Cada Parametro Analisis Estadfstico entre grupos

% Total de Patologfa Pulmonar

Patologfa Macroscopica Suma de % de patologfa de lobulo pulmonar multiplicado por fraccion lobular de pulmon total por animal %Total Puntuaciones de Patologfa Pulmonar entre grupos Ensayo de Wilcoxon

Signos Clmicos de Tos Despues de la Exposicion

Observacion Clmica (por dfa) 0 = Sin tos 1 = Tos Numero de animales con puntuaciones de tos > 0 desde el Dfa 27 (DPC 0) al Dfa 43 (DPC 16) / numero total de animales en el grupo. Ensayo Exacto de Fisher

Numero de dfas con puntuaciones de tos > 0 desde el Dfa 27 (DPC 0) al Dfa 43(DPC 16) / numero total de dfas.

Ensayo Exacto de Fisher

Signos Clmicos de Cojera Despues de la Exposicion

Observacion Clmica (por dfa) Puntuacion de Gravedad de Cojera (por extremidad) 0 = Sin cojera 1 = Leve 2 = Moderada Numero de animales con puntuaciones de cojera total > 0 desde el Dfa 27 (DPC 0) al Dfa 43 (DPC 16) / numero total de animales en el grupo Ensayo Exacto de Fisher

Numero de dfas con puntuaciones de cojera > 0 desde el Dfa 27 (DPC 0) al Dfa 43 (DPC 16) / numero total de dfas.

Ensayo Exacto de Fisher

Parametro

Sistema de Puntuacion Evaluacion de Cada Parametro Analisis Estadfstico entre grupos

3 = Severa Nota: Puntuacion de 5 si se retira prematuramente del estudio por razones humanitarias Suma de puntuacion de cojera por animal Puntuaciones Totales de Cojera entre grupos Ensayo de Wilcoxon

Signos Clmicos de Hinchazon Articular Despues de la Exposicion

Observacion Clmica (por d^a) Puntuacion de Hinchazon de Articulacion (por animal) 0 = Sin hinchazon 1-12 = Numero de articulaciones con hinchazon Nota: Ultima puntuacion para el resto del estudio si se retira de forma prematura del estudio por razones humanitarias Numero de animales con puntuaciones totales de hinchazon de articulaciones > 0 desde el Dfa 27 (DPC 0) al Dfa 43 (DPC 16) / numero total de animales en el grupo Ensayo Exacto de Fisher

Numero de dfas con puntuaciones totales de hinchazon de articulaciones > 0 desde el Dfa 27 (DPC 0) al Dfa 43 (DPC 16) / numero total de dfas.

Ensayo Exacto de Fisher

Puntuacion Total de Hinchazon de Articulaciones entre grupos

Ensayo de Wilcoxon

Porcentajes de Retirada Prematura (Tasa de Mortalidad o Sacrificio Selectivo)

Observacion Clmica (por dfa) 0 = Vivo 1 = Muerto o retirada prematura por razones humanitarias Numero de animales retirados del estudio antes del Dfa 43 (DPC 16) / numero total de animales en el grupo Ensayo Exacto de Fisher

Signos Clmicos de Artritis, Puntuacion Despues de la Exposicion

Observacion Clmica (por dfa) Suma de cojera total y puntuacion de hinchazon de articulaciones Numero de animales con puntuacion de artritis > 0 desde el Dfa 27 (DPC 0) al Dfa 43 (DPC 16) / numero total de animales en el grupo Ensayo Exacto de Fisher

Numero de dfas con puntuacion de artritis > 0 desde el Dfa 27 (DPC 0) al Dfa 43 (DPC 16) / numero total de dfas.

Ensayo Exacto de Fisher

Puntuaciones Totales de Artritis entre grupos

Ensayo de Wilcoxon

Puntuaciones Totales de Artritis entre grupos por dfa

Ensayo de Wilcoxon

Reduccion en Porcentaje para Todos los Parametros

Grupos comparados usando reduccion en porcentaje [1-(vacunado/exposicion)] y significado estad^stico para cada parametro.

Tabla 5. Porcentaje de Reduccion y Significado para todos los Parametros en comparacion con el Grupo de Control de Exposicion - Resumen

% Total de Patologfa Pulmonar Signos Clmicos de Tos Despues de la Exposicion Signos Clmicos de Cojera Despues de la Exposicion

Grupo

% Total de Puntuaciones de Patologfa Pulmonar Numero de animales con puntuaciones de tos > 0 Dfas con puntuaciones de tos > 0 Numero de animales con puntuaciones totales de cojera > 0 Dfas con cojera total > 0 Puntuaciones de cojera total

1

68% 0% -57 % 33% -8 % 70%

2

30% -19 % -129 % 11% -8 % 31%

3

57% -14 % -86 % 5% -8 % 10%

4

71% 77% 85% -11 % -17 % 6%

Tabla 5 (continuacion)

Signos Clmicos de Hinchazon de las Articulaciones Despues de la Exposicion Tasas de Retirada Prematura Signos Clmicos de Puntuacion de Artritis Despues de la Exposicion

Grupo

Numero de animales con puntuaciones totales de hinchazon articulacion > 0 Dfas con puntuaciones totales de hinchazon de articulacion > 0 Puntuaciones totales de hinchazon de articulaciones Numero de animales retirados prematura- mente del estudio Numero de animales con puntuacion de artritis > 0 Numero de dfas con puntuacion de artritis > 0 Puntuaciones totales de artritis

1

33% 0% 63% 83% 17% -8 % 67%

2

26% -8 % 58% 55% 11% -8 % 39%

3

-33 % -8 % 22% 43% -33 % -8 % 12%

4

-14 % -17 % 32% 33% -33 % -17 % 10%

5

Grupo 1 = 2 Dosis elevadas (dual IN/SC Dfa 0 y D^a 14)

Grupo 2 = 1 Dosis elevada (SC Dfa 0)

Grupo 3 = 1 Dosis Media (SC Dfa 0)

Grupo 4 = 1 Dosis Baja (SC Dfa 0)

10 Grupo 5 = Solo Control de Exposicion (todos los valores estan en comparacion con controles de exposicion)

Analisis

El objetivo de este estudio fue evaluar la eficacia de un candidato de vacuna de M. bovis de alto numero de pases a 3 niveles de dosificacion diferentes (1E9, 1E8 y 1E7 UFC por dosis) administrados por via subcutanea (SC) con una sola dosis (Dfa 0). Tambien se incluyo un grupo de control de vacuna y recibio dos dosis (dfas 0 y 14) SC y por via 15 intranasal (IN) con el nivel de dosificacion elevado de vacuna.

Los aislados de Mycoplasma bovis de exposicion y candidatos de vacuna usados en este estudio procedfan de diferentes granjas infectadas de forma natural. El aislado de exposicion previamente hada demostrado que produda

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la enfermedad pulmonar y articular durante la exposicion experimental y predominaba en estudios de exposicion a aislados mixtos. Los candidatos de vacuna viva son aislados de alto numero de pases procedentes originalmente de muestras de diagnostico. El alto numero de pases de los candidatos de vacunas se realizo por dilucion limitante seriada en medio base de Friis suplementado con suero de caballo y extracto de levadura. Aunque no se ha observado ninguna diferencia apreciable en la velocidad de crecimiento en el medio completo de Friis, en el alto numero de pases, el candidato de vacuna PTA-9666 ha demostrado un crecimiento restringido en algunas formulaciones de agar selectivas para Mycoplasma mientras que el aislado parental de bajo numero de pases no muestra restriccion de crecimiento aparente. Ademas, los genotipos de los aislados de exposicion y de vacuna son distintos (como se determina por identificacion genetica por PCR de secuencias de insercion).

El procedimiento de exposicion uso un volumen total de 30 ml del aislado de exposicion e hizo que el grupo de control de exposicion mostrara patologfa pulmonar en todos los animales e implicacion de articulaciones en 6 de 8 animales.

Se investigaron multiples parametros durante este estudio para acceder a los efectos beneficiosos de la vacuna e identificar los posibles parametros primarios para estudios futuros. De estos parametros, se propusieron las tasas de retirada de animales y los signos clmicos de articulaciones (cojera e hinchazon de las articulaciones) como indicadores de proteccion de las articulaciones. La patologfa pulmonar (porcentaje de lesiones pulmonares macroscopicas) y los signos clmicos de tos se propusieron como indicadores de proteccion pulmonar. Las puntuaciones de lesiones pulmonares se proporcionan en la Figura 1. Tambien se tomaron puntuaciones totales de cojera y se presentan en la Figura 2.

Despues de la exposicion, el grupo de dos dosis de vacuna alta SC/IN (grupo 1) terna una menor incidencia de hinchazon en las articulaciones y tasas de retirada, en comparacion con el grupo de control de exposicion (grupo 5). Ademas, el grupo 1 mostro una tendencia a una incidencia reducida de artritis como se muestra en la Figura 4. En el grupo de vacuna de alta dosis individual SC/IN (grupo 2), se observo una tendencia a una menor incidencia de hinchazon de las articulaciones como se muestra en la Figura 3. Otros grupos mostraron una reduccion en la incidencia de signos clmicos de las articulaciones y tasas de retirada.

Cinco animales dieron un resultado positivo en el ensayo de anticuerpos contra M. bovis antes o en el Dfa 0, y 5 de 9 animales del grupo de control de exposicion dieron un resultado positivo en el ensayo durante la fase de vacunacion antes de la exposicion (vease la Desviacion del Protocolo 3 y 4). Las razones de los tttulos de suero antes de la exposicion pueden incluir reactividad cruzada con reactivo del ELISA, anticuerpos maternos y/o material residual procedente de estudios previos.

Los datos para este aislado sometido a pases 135 veces se compararon con los datos para este aislado cuando se sometio a pases 106 veces. Espedficamente, los datos se compararon cuando los dos pases del aislado se administraron dos veces por via subcutanea y por via intranasal. En el estudio de 135 pases, solo 1 animal de 8 se retiro del estudio debido a muerte y sacrificio selectivo. En el estudio de 106 pases, 4 de 9 animales se retiraron del estudio debido a muerte y sacrificio selectivo. La muerte y el sacrificio selectivo se redujeron en 31,9% en el aislado sometido a 135 pases. Los resultados se resumen en la Tabla 6.

Tabla 6: Comparacion de 135 pases con 106 pases con respecto a muerte y sacrificio selectivo

Metodo de Administracion Numero de Animales Retirados Debido a Muerte y Sacrificio Selectivo Porcentaje

135 pases

Dos veces por via subcutanea y por via intranasal 1/8 12,5 %

106 pases (Vac Viva I)

Dos veces por via subcutanea y por via intranasal 4/9 44,4 %

Diferencia

31,9 %

Conclusiones

El candidato de vacuna de Mycoplasma bovis PTA-9666 a traves de la via de administracion simultanea intranasal y subcutanea administrado 2 veces con un intervalo de 2 semanas a un alto nivel de dosificacion (1E9 UFC) mostro una reduccion en las puntuaciones totales de hinchazon de articulaciones y en las tasas de retirada prematura (proteccion de las articulaciones) en sueros privados de calostro cuando se sometieron a la exposicion.

Ejemplo 2: Eficacia de vacuna viva de Mycoplasma bovis (05-2823 P106) usando diversas vfas de administracion Materiales y Metodos:

Se criaron 42 terneros destetados negativos para Mycoplasma bovis. Despues del destete (6 semanas + 2 semanas), los terneros se asignaron aleatoriamente a 1 de 6 grupos. Se dejo que los terneros se adaptaran durante 5 (6) dfas y recibieron vacunacion de acuerdo con la asignacion de grupos el Dfa 0. Aproximadamente (4) semanas

despues ^a 28), todos los terneros se expusieron a M. bovis virulento de acuerdo con la asignacion de grupos. Catorce (14) dfas despues de la exposicion (Dfa 42), los terneros se sometieron a necropsias. Se usaron tres candidatos de vacuna viva para inmunizar los terneros. Se denominan Vacuna Viva I de M. bovis, Vacuna Viva II de M. bovis y Vacuna Viva III de M. bovis. Estas tres cepas representativas incluyen 052823A106, depositada en la 10 ATCC en Manassas, VA el 16 de octubre de 2007 segun los terminos del Tratado de Budapest y denominadas PTA- 8694 (Vac Viva I); 05249A102, tambien depositada en la ATCC en Manassas, VA el 16 de octubre de 2007 segun los terminos del Tratado de Budapest y designada PTA 8696 (Vac Viva II); y 0519021B106, tambien depositada en la ATCC en Manassas, VA el 16 de octubre de 2007 y designada PTA 8695 (Vac Viva III).

A los grupos 1, 2 y 3 se les administro Vacuna Viva I el Dfa 0 y el Dfa 14. Al grupo 1 se le administraron 2 ml por via 15 subcutanea y 2 ml por via intranasal para cada administracion. Al Grupo II se le administraron 2 ml por via subcutanea para cada administracion. Al Grupo III se le administraron 2 ml por via intranasal para cada administracion. El Grupo IV era un grupo de control y se le administraron 2 ml de medio por via subcutanea y 2 ml de medio por via intranasal para cada administracion. Al Grupo V se le administro Vacuna Viva II el Dfa 0 y el Dfa 14 a una dosis de 2 ml por via subcutanea y 2 ml por via intranasal para cada administracion. Al Grupo VI se le administro 20 Vacuna Viva III el Dfa 0 y el Dfa 14 a una dosis de 2 ml por via subcutanea y 2 ml por via intranasal para cada administracion. Todos los grupos se expusieron a M. bovis virulento el Dfa 28. En la Tabla 7 se ilustra un resumen del diseno del estudio.

Tabla 7: Tratamientos de Grupos

Grupos

Animales/ grupo Sustancia de Ensayo Exposicion

Artfculo

Dosis / Via Programa de Administracion Material Dosis / Via Programa de Administracion

Grupo 1

10 M bovis Vivo I 2 ml SC y 2 ml IN Dfa 0 y 14 M. bovis (24466 192) 120 ml material de exposicion con 15 ml de PBS Dfa 28 (aproximadamente 4 semanas despues de la vacunacion)

Grupo 2

10 M bovis Vivo I 2 ml SC Dfa 0 y 14 M. bovis (24466 192) 120 ml material de exposicion con 15 ml de PBS Dfa 28 (aproximadamente 4 semanas despues de la vacunacion)

Grupo 3

9 M bovis Vivo I 2 ml IN Dfa 0 y 14 M. bovis (24466 192) 120 ml material de exposicion con 15 ml de PBS Dfa 28 (aproximadamente 4 semanas despues de la vacunacion)

Grupo 4

9 Medio Solo >■ CM UJ CM Dfa 0 y 14 M. bovis (24466 192) 120 ml material de exposicion con 15 ml de PBS Dfa 28 (aproximadamente 4 semanas despues de la vacunacion)

Grupo 5

2 M bovis Vivo II 2 ml SC y 2 ml Dfa 0 y 14 M. bovis (24466 192) 120 ml material de exposicion con 15 ml de PBS Dfa 28 (aproximadamente 4 semanas despues de la vacunacion)

IN

Grupo 6

2 M bovis Vivo III 2 ml SC y 2 ml IN Dfa 0 y 14 M. bovis (24466 192) 120 ml material de exposicion con 15 ml de PBS Dfa 28 (aproximadamente 4 semanas despues de la vacunacion)

El aislado de M. bovis Vacuna Viva I usado para la vacunacion se obtuvo a partir de un brote de la enfermedad natural y despues se sometio a pases seriados (106 veces) en medio de Friis modificado. El aislado se cultivo en medio de Friis suplementado con extracto de levadura al 10% y suero de caballo al 20%. El cultivo se dejo crecer 24 5 + 2 horas a 37°C despues de la inoculacion con un volumen apropiado de cultivo de siembra determinado antes del

estudio. El aislado se uso sin dilucion. Se descubrio que la concentracion media de vacunacion previa y posterior era de 3,0E9 UFC/ml.

El aislado de M. bovis Vacuna Viva II usado para la vacunacion se obtuvo a partir de un brote de la enfermedad natural y despues se sometio a pases seriados (102 veces) en medio de Friis modificado. El aislado se cultivo en 10 medio de Friis suplementado con extracto de levadura al 10% y suero de caballo al 20%. El cultivo se dejo crecer 24 + 2 horas a 37°C despues de la inoculacion con un volumen apropiado de cultivo de siembra determinado antes del estudio. El aislado se uso sin dilucion. Se descubrio que la concentracion media previa a la vacunacion era de 7,8E8 UFC/ml.

El aislado M. bovis Vacuna Viva III usado para la vacunacion se obtuvo a partir de un brote de la enfermedad natural 15 y despues se sometio a pases seriados (106 veces) en medio de Friis modificado. El aislado se cultivo en medio de Friis suplementado con extracto de levadura al 10% y suero de caballo al 20%. El cultivo se dejo crecer 24 + 2 horas a 37°C despues de la inoculacion con un volumen apropiado de cultivo de siembra determinado antes del estudio. El aislado se uso sin dilucion. Se descubrio que la concentracion media antes de la vacunacion era de 1,7E8 UFC/ml.

El material de exposicion, un aislado virulento de M. bovis, se obtuvo a partir del brote de la enfermedad natural. Se 20 descubrio que la concentracion media previa y posterior a la exposicion era de 1,8E9 UFC/ml.

Se tomaron muestras de los animales, tales como hisopos nasales y pruebas de sangre. El programa de muestras se resume en la Tabla 8.

Tabla 8: Cronograma del Estudio

Dfa

Acontecimiento Muestras Ensayo

Aprox.

Adquisicion de Animales -- --

-42

De -42 a 0

Observaciones Generales (Diarias) -- --

Aprox. -35

Recogida de muestras Hisopo nasal (Humedo/Seco) M. bovis (Cultivo/PCR)

Sangre (SST) M. bovis (ELISA)

Muesca de oreja BVDV (IHC)

-6

Transferencia de animales -- --

De 0 a 28

Evaluacion clmica -- --

0

Recogida de muestras Hisopo nasal (Humedo/Seco) M. bovis (Cultivo/PCR)

Sangre (SST) M. bovis (ELISA)

1a Vacunacion -- --

14

Evaluacion del sitio de inyeccion -- --

Dfa

Acontecimiento Muestras Ensayo

Recogida de muestras Hisopo nasal (Humedo/Seco) M. bovis (Cultivo/PCR)

Sangre (SST)

M. bovis (ELISA)

2a Vacunacion

-- --

27

Recogida de muestras Hisopo nasal (Humedo/Seco) M. bovis (Cultivo/PCR)

Sangre (SST)

M. bovis (ELISA)

28

Exposicion -- --

De 29 a 42

Observacion clmica (Diaria) -- --

35

Recogida de muestras Hisopo nasal (Humedo/Seco) M. bovis (Cultivo/PCR)

Sangre (SST)

M. bovis (ELISA)

41

Recogida de muestras Hisopo nasal (Humedo/Seco) M. bovis (Cultivo/PCR)

Sangre (SST)

M. bovis (ELISA)

42

Necropsia y Patologfa Macroscopica -- --

Recogida de muestras (Post)

Hisopo de amfgdala (Humedo/Seco) M. bovis (Cultivo/PCR)

Tejido Pulmonar (Conservado)

M. bovis (IHC)

Tejido Pulmonar (Reciente)

M. bovis (Cultivo/PCR)

Hisopo de articulaciones (Humedo/Seco)

M. bovis (Cultivo/PCR)

Toma de muestras

Se recogieron hisopos nasales de todos los terneros los D^as 0, 14, 27, 35 y 41. En la necropsia, se recogieron hisopos de las airugdalas de todos los terneros. Se recogieron hisopos de articulaciones a partir de animales con 5 anomalfas clmicas. Ademas, se tomaron muestras de otras localizaciones en ciertos animales que mostraron implicacion del area. En todos los casos, se frotaron tres hisopos esteriles alrededor de las regiones, tan asepticamente como fue posible, durante algunos segundos y despues se retiraron.

Tejido

Se recogieron muestras de pulmon de todos los animales. Para el muestreo se escogieron areas en las que se 10 observaron lesiones macroscopicas. Se recogio una serie adicional de tejidos pulmonares y se pusieron en solucion de formalina al 10%.

Sueros

Se recogio sangre de todos los terneros los Dfas 0, 14, 27, 35 y 41. La sangre se recogio asepticamente de una vena yugular de cada ternero en un Tubo Separador de Suero (SST) de 12,5 ml.

15 Ensayo

Microbiologfa

En resumen, los hisopos se giraron en 5 ml de caldo selectivo de micoplasma. Se corto una pequena muestra (de aproximadamente 5 mm) de tejido pulmonar y se homogeneizo en 2 ml de medio de Friis completo. Se anadieron 100 |il de homogeneizado a caldo selectivo de micoplasma. Los cultivos se incubaron a 37°C/5% de CO2. Despues

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de 4-14 d^as, el caldo se examino para determinar el crecimiento y se subcultivo en placas para el aislamiento. Todas las muestras de subcultivo positivas se almacenaron a -70°C.

PCR:

Se extrajo ADN y se ensayo por PCR usando cebadores y sondas espedficas para el gen uvrC de M. bovis. Los resultados de la PCR se expresaron como positivos o negativos para la deteccion del ADN de M. bovis.

Serologfa

Se ensayaron muestras de suero usando un ELISA disponible en el mercado por Biovet (Canada) usando el protocolo proporcionado con el kit de ensayo. Los resultados del ELISA se expresan como lecturas de Densidad Optica (DO). Las DO de las muestras se compararon con el nivel de positividad (DOp media x 0,3) establecido por el control positivo incluido en el kit de ensayo. Despues, los resultados positivos se interpretaron de acuerdo con el esquema de clasificacion del fabricante, siendo 0 ausencia de seroconversion y siendo 4 una seroconversion muy fuerte.

Histopatologfa/IHC

Se enviaron tejidos fijados con formalina al laboratorio ISU Veterinary Diagnostic y se ensayaron mediante portaobjetos tenidos con hematoxilina/eosina e inmunohistoqmmica usando anticuerpos monoclonales espedficos para M. bovis

Signos clmicos

Se realizaron observaciones generales diarias desde el Dfa 0 al Dfa 28 y despues, se realizaron observaciones clmicas diarias desde el Dfa 29 hasta la eutanasia y necropsia. Las observaciones clmicas y generales indicaron desviacion de la norma y se documentaron.

Necropsia

Despues de la eutanasia, cada animal se sometio a una necropsia. Se examinaron la cavidad toracica y la traquea para cada ternero y las observaciones macroscopicas se registraron en el Registro de Informe de Necropsia. Se retiraron los pulmones y aproximadamente 6 pulgadas (15,24 cm) de traquea intactos de cada ternero para un examen adicional y para recoger muestras.

Para cada serie de pulmones, las superficies pulmonares dorsal y ventral se fotografiaron con el crotal apropiado al lado de cada imagen.

Patologfa Pulmonar

Para cada serie de pulmones, cada lobulo pulmonar se examino por visualizacion y por palpacion. Se determino una aproximacion de cuanta patologfa debida a M. bovis estaba presente (como un porcentaje) por cada lobulo pulmonar. Despues se peso cada porcentaje de lobulo pulmonar y se sumaron para determinar el porcentaje de pulmon total con patologfa.

Patologfa de Articulaciones

Se examinaron las articulaciones afectadas y se registraron las observaciones macroscopicas.

Cambios en el Protocolo de Estudio

Seis animales se excluyeron del analisis. Se excluyo un animal de cada uno de los Grupos I, II y III. Se excluyeron tres animales del Grupo IV. El animal del Grupo II se encontro muerto con una patologfa pulmonar no concordante con M. bovis y el resto se excluyeron del analisis por dar un resultado positivo en el ensayo de M. bovis. Veintidos animales se retiraron antes de terminar el estudio en los Dfas 30-38 por razones humanitarias. Un animal del Grupo 5 se retiro el Dfa 40 antes de la terminacion del estudio, porque el animal murio por asfixia despues de quedar atrapado en el pesebre.

Resultados y Analisis

Signos Clmicos Antes de la Exposicion

Las observaciones clmicas se realizaron desde el Dfa 28 al Dfa 42. Las observaciones clmicas anotadas durante esta fase del estudio fueron tos, dificultad respiratoria, depresion, hinchazon de articulaciones, cojera y orejas cafdas. Los signos clmicos se dividieron en tres tipos (respiratorios, articulares y otros) tfpicos de la infeccion por Mycoplasma bovis. Los signos respiratorios inclrnan tos, respiracion rapida/dificultosa y descarga nasal. Los signos articulares inclrnan articulaciones hinchadas y cojera.

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Patolog^a Pulmonar

En la necropsia, se recogieron los pulmones y se observaron para determinar las lesiones asociadas con la infeccion por M. bovis. Los animales presentaron variabilidad en caractensticas patologicas tales como consolidacion y formacion de lesiones nodulares. Los resultados de la implicacion pulmonar se expresaron como porcentaje usando un sistema de puntuacion que refleja el porcentaje del pulmon total con patologfa macroscopica asociada con infeccion por M. bovis. En algunos casos, la determinacion del porcentaje de implicacion pulmonar se vio obstaculizada por adhesiones o la naturaleza atfpica de las lesiones.

Patologfa Articular

En la necropsia, se examinaron las articulaciones de los animales que previamente presentaron smtomas clmicos (hinchazon y/o cojera) para la patologfa macroscopica. Las areas afectadas variaban por animal y pueden implicar el carpo, corvejon, babilla, espolon y/o codo. Los animales presentaron hinchazon general, aumento del lfquido sinovial, anomalfas en el aspecto del lfquido o engrosamiento de la capsula articular. En terneros afectados de manera mas grave, estaba presente fibrina y erosion de la superficie articular. Se ensayaron muestras de fluido articular y/o hisopos de superficie por medio del cultivo y PCR con respecto a la presencia de Mycoplasma bovis.

Deteccion por PCR de M. bovis en Muestras Nasales, de Airngdala y Pulmonares

Se tomaron muestras de las vfas nasales de cada animal por medio de hisopos los Dfas 0, 14, 27, 35 y 41 o el dfa de la necropsia. Ademas, durante el examen post-mortem, se tomaron muestras de las airngdalas por medio de un hisopo y se recuperaron muestras representativas de tejido pulmonar. Se analizo la frecuencia de deteccion usando PCR a tiempo real que se dirige a un marcador de M. bovis general (uvrC). Ademas, se analizaron tejidos de airugdala y pulmonar usando un ensayo de PCR de punto final desarrollado recientemente que se dirigfa a marcadores no encontrados en el aislado de exposicion de M. bovis pero encontrado en todos los candidatos de vacuna.

Serologfa de M. bovis

Todas las muestras se ensayaron en el ELISA de M. bovis Biovet para controlar la respuesta serologica a M. bovis. La seroconversion se puntuo de acuerdo con multiplicadores agrupados de DO de positividad. Se analizaron las puntuaciones serologicas medias detectadas a partir de cada grupo el Dfa 0, 14, 27, 35 y Post (post representa un intervalo de dfas de estudio de 37 a 41 debido a la retirada prematura de ciertos animales). La Figura 5 ilustra los resultados de serologfa para Vac Viva I, II, III y controles y la Figura 6 ilustra la comparacion de serologfa para Vac Viva I usando diversas vfas de administracion.

Analisis

El objetivo de este estudio era evaluar la eficacia de una vacuna viva de Mycoplasma bovis experimental (05-2823 P106) usando diversas vfas de administracion de 2 ml (SC, IN, SC+IN) con una separacion de catorce dfas y un modelo de exposicion doble en la especie diana. El modelo de exposicion uso un alto volumen administrado en dos localizaciones del pulmon con la adicion de una administracion IV. Ademas, se evaluo la eficacia de otros dos candidatos de vacuna viva (05-249 P102 y 05-1902-1 P106) usando solo la via SC+IN.

Los aislados de Mycoplasma bovis de exposicion y de candidato a vacuna procedfan de diferentes granjas infectadas de manera natural. Previamente se demostro que el aislado de exposicion produda tanto enfermedad pulmonar como articular durante la exposicion y predominaban en estudios de exposicion a aislados mixtos. Los candidatos de vacuna viva son aislados de alto numero de pases procedentes originalmente de muestras de diagnostico. El alto numero de pases de los candidatos de vacuna se realizo por dilucion limitante seriada en medio base de Friis suplementado con suero de caballo y extracto de levadura. Aunque no se ha observado una diferencia apreciable en la velocidad de crecimiento en el medio completo de Friis, a alto numero de pases, el candidato de vacuna 05-2823 P106 ha demostrado un crecimiento restringido en algunas formulaciones de agar selectivas para Mycoplasma, mientras que el aislado parental de bajo numero de pases no ha mostrado una restriccion del crecimiento evidente. Ademas, se demostro que eran diferentes los genotipos de los aislados de exposicion y vacunal (como se determina por identificacion genetica de PCR de secuencias de insercion).

El procedimiento de exposicion usando un volumen total de 120 ml del aislado de exposicion administrado a cada animal hizo que solo el grupo de exposicion mostrara patologfa pulmonar e implicacion de las articulaciones en todos los animales.

Durante este estudio se investigaron multiples parametros para evaluar las ventajas de la vacuna. De estos parametros, las tasas de retirada de animales y los smtomas clmicos articulares se usaron como indicadores primarios de la proteccion articular. La patologfa pulmonar (porcentaje de lesiones pulmonares macroscopicas) se uso como indicador primario de la proteccion pulmonar. Otros datos tales como deteccion de organismos a partir de tejido, distribucion articular y serologfa proporcionaron datos adicionales para confirmacion.

Todos los grupos mostraron algunos efectos beneficiosos protectores de las articulaciones y del pulmon despues de

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recibir el candidato de vacuna Vacuna Viva de Mycoplasma bovis I (05-2823 P106) independientemente de la v^a o la combinacion de v^as como se demuestra por una reduccion en las lesiones pulmonares, smtomas clmicos de las articulaciones y tasas de retirada de animales. Las vfas SC e IN combinadas (Grupo 1) produjeron la mayor reduccion de las lesiones pulmonares (86%) en comparacion con los grupos en los que se uso solo una via. Ademas, los resultados de las lesiones pulmonares, smtomas clmicos articulares y reducciones en tasas de retirada sugieren los efectos beneficiosos de recibir los otros dos candidatos de vacuna Vacuna Viva II (05-249 P102) y Vacuna Viva III (05-1902-1 P106) por una via SC e IN combinada. Los resultados de ELISA demostraron una fuerte respuesta humoral a la vacunacion con todos los candidatos de vacuna.

Todos los candidatos de vacuna demostraron seguridad. Ningun animal de ningun grupo que recibio una vacuna presento smtomas clmicos durante el periodo de vacunacion y solo un animal que recibio la Vacuna Viva III (051902-1 P106) mostro reactividad en el sitio de inyeccion. Ademas, los resultados de la PCR demostraron deteccion de M. bovis sin exposicion en el tejido de airngdala unicamente de los grupos que recibieron un candidato de vacuna a traves de la via IN y deteccion de no exposicion a partir de tejido pulmonar unicamente en un solo animal que habfa recibido la Vacuna Viva I (05-2823 P106) tanto por via IN como por via SC. En la Figura 5 se proporciona una comparacion de serologfa para Vac Viva I, II, II y sin vacuna en la que la vacuna se administro por via subcutanea y por via intramuscular. La Figura 5 ilustra que Vac Viva III tema consistentemente el maximo nivel de serologfa, siendo Vac Viva II igual en serologfa a Vac Viva III para los Dfas 27, 35 y despues de la necropsia. Todos los grupos tuvieron mayor serologfa que el grupo que no recibio vacuna. La Figura 6 ilustra una comparacion de la serologfa para Vac Viva I, usando diversas vfas de administracion. La administracion subcutanea e intramuscular consistentemente tema la maxima serologfa durante el periodo del estudio, siendo la administracion intramuscular unicamente la segunda. Todos los grupos teman mayores valores de serologfa que los animales que no recibieron vacuna.

Conclusiones

Se observaron efectos beneficiosos protectores (respiratorios y articulares) para los candidatos de vacuna de M. bovis Vacuna Viva I (05-2823 P106), Vacuna Viva II (05-249 P102) y Vacuna Viva III (05-1902-1 P106) por via intranasal y subcutanea simultaneas administrados 2 veces con un intervalo de 2 semanas en terneros privados de calostro usando una exposicion doble de pulmon/articulacion.

Se observaron efectos protectores beneficioso (respiratorios y articulares) para el candidato de vacuna de M. bovis Vacuna Viva I (05-2823 P106) con la via intranasal o subcutanea administradas 2 veces con un intervalo de 2 semanas en terneros privados de calostro usando una exposicion doble de pulmon/articulacion.

Ejemplo 3: Identificacion de ADN

Se uso el proceso de identificacion de ADN para diferenciar cepas de M. bovis por aislamiento, amplificacion y deteccion de ADN usando los metodos y cebadores descritos en el documento WO 2008-030619.

Materiales y Metodos

En los estudios se usaron aislados de Mycoplasma sp. Los aislados se obtuvieron a partir de fuentes internas o aislados de campo obtenidos a partir de animales infectados. Los aislados se desarrollaron usando una combinacion de agar selectivo para micoplasma y caldo durante 1-7 dfas. Para aislar el ADN, se centrifugaron y sedimentaron cultivos de caldo. Despues se extrajo el ADN del sedimento (usando el Qiagen DNeasy Tissue Kit y se resuspendio en agua de calidad molecular). El ADN genomico se cuantifico usando Picogreen (Invitrogen). Se disenaron cebadores basandose en las secuencias de insercion conocidas (elementos transponibles) presentes en el genoma bacteriano (Mycoplasma bovis) y se describen en el documento WO 2008-030619. Se seleccionaron manualmente cebadores dirigidos hacia el exterior a partir de los extremos de elementos (excluyendo las regiones de repeticion terminal) a una Tm de 55-58C. Despues se realizaron las reacciones de PCR usando una mezcla maestra de PCR multiple (Kit de PCR Qiagen Multiplex). Las reacciones conteman Mezcla maestra 1x, 300 nM de cada cebador y 1 ng de ADN de molde. Las condiciones de termociclado fueron 95°C durante 15 minutos, 35 ciclos de 94°C durante 30 segundos, 56,1°C durante 90 segundos, 72°C durante 2 minutos, con una extension final de 72°C durante 4 minutos y un mantenimiento a 4°C. Los productos amplificados se separaron en un gel de agarosa al 4% con bromuro de etidio (Invitrogen E-gel), procesado durante 50 minutos a temperatura ambiente y se tomaron imagenes bajo luz UV.

Resultados y analisis

Los resultados demostraron que cada uno de los aislados usados en esta solicitud tema una identificacion genetica unica. Sin embargo, como se muestra en el Ejemplo 2, cada aislado tambien era una vacuna de cultivo viva atenuada eficaz que era eficaz para proporcionar proteccion cruzada contra un aislado de exposicion que tema una identificacion genetica diferente que cualquiera de los candidatos de vacuna. Se cultivaron tres aislados de campo, 05-2823 P106 (PTA-8694), 05-249 P102 (PTA-8696) y 05-1902-1-P106 (PTA-8695), y el ADN se aislo de acuerdo con el protocolo anterior. Se amplificaron 2-5 ng de ADN de cada aislado de acuerdo con el protocolo anterior usando un PCR multiple de 4 conjuntos de cebadores de IS identificados como SEC ID N° 1-8 en el documento WO 2008-030619. Los productos amplificados se separaron en un gel de agarosa al 4% Invitrogen E-gel que contema

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35

40

bromuro de etidio (de acuerdo con el fabricante) durante 50 minutes y se visualizaron bajo luz UV. Todos los aislados produjeron patrones unicos. Los patrones fueron reproducibles usando alteuotas independientes en las condiciones de reaccion de PCR de la muestra.

Ejemplo 4: Analisis comparativo de eficacia de vacuna de Mycoplasma bovis en el pase 135 en comparacion con la vacuna al nivel de pase inferior de 106.

El estudio del Ejemplo 2 uso la vacuna de Mycoplasma bovis al menor numero de pases de 106, y midio la eficacia en la proteccion de terneros vacunados a partir de 3 manifestaciones clave de la enfermedad por Mycoplasma bovis: signos clmicos de enfermedad respiratoria, cojera y “retirada prematura” o eutanasia y muerte debidas a una minada severa de signos clmicos producidos por la enfermedad por Mycoplasma bovis. La ultima manifestacion de la enfermedad evidentemente es la mas importante y, por lo tanto, se considero la caractenstica mas importante de la eficacia de la vacuna. Este parametro mas importante se uso para medir cualquier diferencia en eficacia entre la vacuna en el pase 106 y en el pase 135.

En el estudio descrito en el Ejemplo 2 con la vacuna del pase 106, el Grupo 1 (Vac Viva I SC+IN) recibio la vacuna dos veces a intervalos de 14 dfas y a traves de dos vfas de administracion, intranasal (IN) y subcutanea (SC) en cada acontecimiento de vacunacion. Tambien se vacunaron grupos separados de terneros con la vacuna del pase 106. El mas pertinente fue el Grupo 2 (Vac Viva I SC) que recibio la vacuna dos veces a intervalos de 14 dfas pero a traves de una via de administracion, solo por via subcutanea (SC), en cada acontecimiento de vacunacion.

Despues de la vacunacion, tanto el Grupo 1 como el Grupo 2 vacunados y un conjunto separado (Grupo 4) de terneros no vacunados (No Vac) se expusieron a proposito a Mycoplasma bovis virulento administrado directamente en cada ternero. Se midio la enfermedad resultante de cada exposicion y se comparo entre grupos, y espedficamente, comparando el parametro mas significativo de la enfermedad “retirada prematura” (muerte) entre el Grupo 1 y Grupo 2 vacunados y los terneros no vacunados (No Vac) del Grupo 4 para medir la eficacia de la vacuna del pase 106. Como se presenta en la Tabla 8, el Grupo 2 vacunado con el pase 106 que recibio la vacuna dos veces a intervalos de 14 dfas pero a traves de una via de administracion, subcutanea, proporciono una notable reduccion de 56% en la muerte/eutanasia. El Grupo 1 (Vac Viva I SC+IN) que recibio la vacuna del pase 106 dos veces a intervalos de 14 dfas y a traves de dos vfas de administracion, intranasal (IN) y subcutanea (SC), en cada acontecimiento de vacunacion, proporciono la misma reduccion notable de 56% en muerte/eutanasia de terneros vacunados.

Tabla 9

Respiratorio Articulaciones Retirada prematura

Grupo

o ~o TO 0 4— < TO O C 0 3 O 0 LL C 'O o Sp 0 O 0s -Q 3 "O 0 CH o ~o TO 0 4— < TO O C 0 3 O 0 LL C 'O o Sp 0 O 0s -Q 3 "O 0 CH o "O TO 0 4— < TO O C 0 3 O 0 LL C 'O o Sp 0 O 0s 73 3 "O 0 CH

1

Vac Viva I (SC+IN) 3/ 9 33% 0% 6 / 9 67% 33% 4/ 9 44% 56%

2

Vac Viva I (SC) 0 / 9 0% 100% 7 / 9 78% 22% 4/ 9 44% 56%

4

No Vac 2 / 6 33% 6 / 6 100% 6 / 6 100%

En este estudio tambien se evaluo la vacuna de Mycoplasma bovis al mayor numero de pases de 135 con respecto a su eficacia en la proteccion de terneros vacunados de la manifestacion mas importante de la enfermedad por Mycoplasma bovis “tasas de retirada prematura” o eutanasia y muerte debidas a una minada severa de signos clmicos producidos por la enfermedad por Mycoplasma bovis. En el estudio descrito en el Ejemplo 1, el Grupo 1 tambien recibio la vacuna dos veces a intervalos de 14 dfas a traves de dos vfas de administracion, intranasal (IN) y subcutanea (SC), en cada acontecimiento de vacunacion como se hizo en el estudio descrito en el Ejemplo 2, con la vacuna del pase 106. Sin embargo, la diferencia cntica entre las vacunas del Grupo 1 de cada uno de estos dos estudios fue el nivel de pases. En el estudio del Ejemplo 2, el Grupo 1 recibio vacuna en el nivel de pase 106, y en este segundo estudio del Ejemplo 1 el Grupo 1 recibio vacuna en el pase superior 135.

Tambien se vacunaron grupos separados de terneros con la vacuna del pase 135 en el estudio descrito en el Ejemplo 1. El mas pertinente, de nuevo, fue el Grupo 2 que recibio la vacuna solo una vez y a traves de una via de administracion, subcutanea (SC). Despues de la vacunacion, tanto el Grupo 1 como el Grupo 2 vacunados y un conjunto separado (Grupo 5) de terneros no vacunados se expusieron a proposito a Mycoplasma bovis virulento administrado directamente a cada ternero. Se midio la enfermedad resultante de la exposicion y se comparo entre

los grupos. Espedficamente, la eficacia se determino comparando la enfermedad mas significativa “tasas de retirada prematura” (muerte) en el Grupo 1 y Grupo 2 vacunados con los terneros no vacunados del Grupo 5 para medir la eficacia de la vacuna del pase 135. Como se presenta en la Tabla 10, el Grupo 1 que recibio la vacuna del pase 135 dos veces a intervalos de 14 Dfas a traves de dos vfas de administracion, intranasal (IN) y subcutanea (SC), en cada 5 acontecimiento de vacunacion, proporciono una eficacia bastante imprevista y muy alta reduciendo las tasas de retirada prematura de los terneros (muerte) en 83%, o una eficacia mucho mayor que la conseguida con la vacuna del pase 106 que proporciono una reduccion notable pero menor de 56% de las tasas de retirada prematura. Los resultados comparativos entre los dos estudios aparecen en la Tabla 11.

Tambien fue imprevista la eficacia conseguida en el Grupo 2 del estudio del Ejemplo 1 con una sola dosis de 10 vacuna. El Grupo 2 recibio solo una dosis de vacuna de pase 135 a traves de una via de administracion, subcutanea. Esta vacuna de pase superior 135 proporciono una reduccion de 55,6% (56%) en muerte/eutanasia de terneros. Por el contrario, la vacuna del pase 106 requirio dos dosis de vacuna, una dosis de sensibilizacion seguida por un refuerzo 14 dfas despues en el estudio del Ejemplo 2, para conseguir una eficacia comparable a la vacuna administrada solo en una dosis (sin necesitar refuerzo) a terneros que recibieron la vacuna del pase 135 en el 15 estudio del Ejemplo 1.

Tabla 10: Porcentaje de Reduccion y Significado para todos los Parametros en comparacion con el Control de Exposicion

% Patologfa Pulmonar Total Signos Clmicos de Tos Despues de la Exposicion Signos Clmicos de Cojera Despues de la Exposicion

Grupo

% Total Puntuac. de Patologfa Pulmonar Numero de animales con puntuac. de tos > 0 Dfas con puntuac. de tos > 0 Numero de animales con puntuac. totales de cojera > 0 Dfas con puntuac. totales de cojera > 0 Puntuac. totales de cojera

1

68% * 0% -57 % 33% -8 % 70% *

2

30% -19 % -129 % 11% -8 % 31%

Tabla 10 (continuacion)

Signos Clmicos de Hinchazon de las Articulac. Despues de la Exposicion Tasas de Retirada Prematura Signos Clmicos de Puntuac. de Artritis Despues de la Exposicion

Grupo

Numero de animales con puntuac. totales de hinchazon de articulac. > 0 Dfas con puntuac. total de hinchazon de articulac. > 0 Puntuac. totales de hinchazon de articulac. Numero de animales con puntuac. de artritis Numero de dfas con puntuac. de artritis > 0 Numero de dfas con puntuac. de artritis > 0 Puntuac. total de artritis

1

33% 0% 63% ** 83% ** 17% -8 % 67% *

2

26% -8 % 58% * 55% * 11% -8 % 39%

20

Grupo 1 = 2 Dosis Superiores (dual IN/SC Dfa 0 y Dfa 14) Grupo 2 = 1 Dosis Superior (SC Dfa 0) Tabla 11: Resultados Comparativos de la Vacuna del Pase 135 y el Pase 106

Numero de estudio

Grupo Pase de Vacuna Dosis Refuerzo Via de Vacunacion Reduccion: Muerte debida a M. bovis

Ejemplo 2

1 106 2 Sf IN & SC 56%

Ejemplo 1

1 135 2 Sf IN & SC 83%a

Ejemplo 2

2 106 2 Sf SC 56%

Ejemplo 1

2 135 1b N° SC 56%

(a) la vacuna del pase 135 proporciona una reduccion imprevista en la muerte debida a M. bovis en

5

10

15

20

25

30

comparacion con el pase 106

(b) la vacuna del pase 135 es eficaz como una sola dosis sin necesidad de refuerzo, donde el pase 106 requiere un refuerzo para una reduccion comparable en la muerte debida a M. bovis

Por lo tanto, la vacuna del pase 135 produjo un nivel mejorado e inesperadamente superior de eficacia al reducir significativamente la muerte debida a la infeccion por Mycoplasma bovis usando una sola dosis de vacuna mas conveniente y menos costosa, mientras que la vacuna de menor numero de pases, 106, requena dos dosis de vacuna para proporcionar una eficacia comparable. Ademas, se consiguio una eficacia sustancialmente mejor de reduccion de 83% en la muerte con el Grupo 1 de alto pase del estudio del Ejemplo 1 usando un regimen de vacunacion identico al usado con el Grupo 1 de bajo numero de pases del estudio del Ejemplo 2, siendo la unica diferencia la vacuna de pase 135 en el primero y la vacuna de pase 106 en el ultimo estudio. La vacuna de pase 135 redujo la muerte debida a Mycoplasma bovis en 83% en comparacion con una eficacia menor pero notable con la vacuna del pase 106 de 56%. Tfpicamente, la eficacia de una vacuna se reduce en pases progresivos in vitro ya que el microorganismo se adapta adicionalmente al cultivo celular y pierde expresion de protemas de virulencia potencialmente inmunogenicas. Inesperadamente, la vacuna de M. bovis avirulenta de esta invencion demostro una mejor eficacia en respuesta a un mayor numero de pases in vitro, y espedficamente en la progresion desde la vacuna del pase 106 a la vacuna del pase 135.

Ejemplo 5: Dosis mmimas de inmunizacion

Materiales y Metodos:

Se uso un cultivo bacteriano vivo a virulento de M. bovis en presentacion liofilizada que se rehidrato con diluyente de agua esteril a 2 dosis x 2 ml administradas a intervalos de 2 a 3 semanas por inyeccion subcutanea en ganado bovino de 6 semanas de edad o mayor.

El diseno del estudio utilizo 3 grupos tratados con vacuna y un grupo tratado con placebo, conteniendo cada grupo de 15 a 17 terneros. Todos los animales de ensayo recibieron dos dosis subcutaneas de vacunas experimentales formuladas a 3 niveles de antfgeno diferentes o una vacuna de placebo compuesta del medio usado para producir el cultivo de Mycoplasma bovis. Los terneros teman 6 semanas de edad en el momento de la administracion de la primera dosis de vacuna o placebo. Los terneros se expusieron el dfa 42 y las observaciones despues de la exposicion se realizaron durante 28 dfas. Se observaron los parametros primarios de mortalidad/sacrificio selectivo, y cojera e hinchazon de articulaciones en cualquier dfa para evaluar la eficacia de la vacuna.

La Tabla 12 resume las conclusiones tomadas del analisis de los datos.

Tabla 12: Dosis Mmimas de Inmunizacion

Variable

Tratamiento N° de terneros Fraccion de Prevencion 95% Inferior CL 95% Superior CL Conclusion

Mortalidad/ Sacrificio selectivo

Dosis Baja = 106,8 / dosis 16 0,04 -0,859 0,5113 Eficacia Incompleta

Dosis Media = 107,9 / dosis

15 0,1467 -0,631 0,6163 Eficacia Incompleta

Dosis Alta = 108,9 / dosis

17 0,6235 0,0855 0,9268 Eficacia Establecida

Placebo

15

Presencia de cojera

Dosis Baja = 106,8 / dosis 16 0,2857 -0,1 0,5994 Eficacia Incompleta

Dosis Media = 107,9 / dosis

15 0,0857 -0,324 0,4046 Eficacia Incompleta

Dosis Alta = 108,9 / dosis

17 0,6667 0,3653 0,8513 Eficacia Establecida

Placebo

15

Variable

Tratamiento N° de terneros Fraccion de Prevencion 95% Inferior CL 95% Superior CL Conclusion

Presencia de hinchazon

Dosis Baja = 106,8 / dosis 16 0,1818 -0,468 0,5908 Eficacia Incompleta

Dosis Media = 107,9 / dosis

15 0,0303 -0,693 0,4606 Eficacia Incompleta

Dosis Alta = 108,9 / dosis

17 0,5722 0,0498 0,866 Eficacia Establecida

Placebo

15

Conclusiones

La dosis preferida de 108,9 CCU50 fue eficaz segun se evaluo.

Ejemplo 6: Seguridad - Diseminacion y Transmision 5 Materiales y Metodos

Se uso un cultivo bacteriano vivo avirulento de M. bovis en presentacion liofilizada que se rehidrato con diluyente de agua esteril a 2 dosis x 2 ml administradas a intervalos de 2 a 3 semanas por inyeccion subcutanea en ganado bovino de 6 semanas de edad o mayor.

Tambien se evaluo la diseminacion y transmision de la cepa de vacuna en terneros privados de calostro. En este 10 estudio, se administraron >10 logs de vacuna derivada de siembra maestra, de bajo numero de pases (MS +3) por via subcutanea a 10 terneros. Se recogieron muestras que inclrnan 15 tejidos diferentes e hisopos de los terneros tratados a intervalos semanales durante 5 semanas despues de la administracion. Para evaluar la transmision de la vacuna, se mezclaron 10 terneros centinela con los terneros vacunados a lo largo de todo el estudio. La Tabla 13 muestra los resultados de este estudio.

15 Tabla 13: Resumen de diseno experimental y resultados de diseminacion y transmision

Tratamiento

Administracion N° de terneros Dosis Resultados

Siembra de trabajo de Mycoplasma bovis (MS + 3)

Inyeccion subcutanea 10 101U5 / dosis No se aislaron M. bovis despues de 14 dfas desde la vacunacion. Sin lesiones o signos clmicos

Mezclados con terneros tratados

Contacto animal con animal 10 Centinelas No se detecto M. bovis. Sin lesiones o signos clmicos

Conclusiones

El muestreo del dfa 14 fue la unica recuperacion del cultivo vivo avirulento de vacuna de Mycoplasma bovis, y solo en una muestra de tejido de airngdala de un solo ternero del grupo vacunado. Las 129 muestras restantes recogidas 20 a partir de los terneros que recibieron la dosis desde el dfa 7 al dfa 35 despues de la vacunacion fueron negativas para M. bovis.

Dentro de este estudio, se mezclo un numero igual de terneros centinela con los terneros vacunados. No se aislo M. bovis de ninguna de las muestras de hisopos o tejidos de los terneros centinela.

Los datos de los Ejemplos 5 y 6 demostraron la seguridad y eficacia de la vacuna de la presente invencion. Las vacunas de la presente invencion fueron muy eficaces en la prevencion de la enfermedad debida a M. bovis despues de dos inyecciones subcutaneas a la dosis de inmunizacion mmima (108,9/dosis). Las evaluaciones de seguridad en terneros privados de calostro (CD) muy susceptibles, jovenes, confirmo la seguridad de una sobredosis de 20 veces 5 inyectada por via subcutanea. Los estudios de seguridad tambien demostraron que la vacuna es segura cuando se inyecta por via subcutanea.

Ejemplo 7: Preparacion de vacunas de combinacion VacunaA

M. bovis, IBR y BVDV tipos 1 y 2

10 Se cultivan cepas de BVDV vivo atenuado de tipo 1 y 2, que tienen al menos una mutacion en la secuencia codificante de glicoprotema Ems y/o al menos otra mutacion en la secuencia codificante de Npra, donde dicha mutacion en la secuencia codificante de glicoprotema Ems conduce a la inactivacion de la actividad ARNasa que reside en Ems y/o dicha mutacion en la secuencia codificante de Npra conduce a la inactivacion de dicha Npr° (como se describe en el documento WO2005/111201, incorporado en su totalidad aqu como referencia), en celulas MDBK 15 hasta una DICT50 de aproximadamente 105,0 a 108,1 por ml de lfquido de cultivo de celulas. Se cultiva una cepa viva atenuada de IBR en celulas MDBK hasta una DICT50 de aproximadamente 105,0 a 108,6 por ml de lfquido de cultivo

de celulas. Se cultiva una cepa viva atenuada de M. bovis como se ha descrito anteriormente en celulas MDBK

1 10

hasta una UFC de aproximadamente 10 por ml de lfquido de cultivo de celulas. Cada lfquido de cultivo se recoge. Se mezclan cantidades equivalentes de los antfgenos y se liofilizan por tecnicas convencionales. Para 20 reconstitucion, se usa una solucion acuosa. Una dosis de la vacuna de combinacion contiene 2 ml de los antfgenos reconstituidos. Una dosis final incluye IBR (de 105,0 a 108,6 DICT50) BVDV-1 (de 105,0 a 108,1 DICT50), BVDV-2 (105,0 a

108.1 DICT50) y M. bovis (2,1 x 109UFC).

Vacuna B

M. bovis, IBR y BVDV tipos 1 y 2 y PI3

25 La preparacion de los antfgenos de IBR, BVDV 1 y 2 y M. bovis se cultiva como se ha descrito para la vacuna A.

Ademas, se cultiva una cepa viva atenuada de Pl3 en celulas MDBK hasta una DICT50 de aproximadamente 104,2 a 106,5 por ml de lfquido de cultivo de celulas. Despues, se recoge el lfquido de cultivo que contiene PI3. Se mezcla una cantidad de 104,2 a 106,5 (DICT50) del antfgeno de PI3 con el IBR y el BVDV tipos 1 y 2. Despues la mezcla se liofiliza por tecnicas convencionales de modo que una dosis de la vacuna de combinacion reconstituida contiene 2 ml 30 como se describe para la Vacuna A. Una dosis final incluye IBR (de 105,0 a 108,6 DICT50) BVDV-1 (de 105,0 a 108,1 DICT50), BVDV-2 (de 105,0 a 108,1 DICT50), M. bovis (2,1 x 109 UFC) y PI3 (de 1042 a 10s’’5 DICT50).

Vacuna C

M. bovis, BVDV de tipos 1 y 2, PI3, Mannheimia (Pasteurella) haemolytica

Se cultivaron BVDV 1 y 2, bacteria M. bovis de acuerdo con la presente invencion y virus PI3 como se ha descrito 35 para la vacunas A y B. Despues de que se recojan los lfquidos de cultivo, los antfgenos se liofilizan. Se cultiva Mannheimia (Pasteurella) haemolytica hasta que el tftulo alcanza 1080 a 1011 celulas por ml de cultivo. Las bacterias se inactivan y el lfquido de cultivo se liofiliza o se seca por congelacion o se formula como un lfquido que no inactivara cultivos atenuados de BVD, M. bovis y PI3. Se mezcla una cantidad de 1080 a 10110 celulas bacterianas liofilizadas o secadas por congelacion o formuladas como lfquido con el antfgeno liofilizado de BVDV tipos 1 y 2 40 (cada uno en una cantidad de 105,0 a 108,1 DICT50), antfgeno de PI3 (107,3 a 1083 DICT50) y antfgeno de M. bovis (2,1 x 109 UFC). Las cantidades de antfgeno final por dosis son BVDV-1 (de 105,0 a 108,1 DICT50), BVDV-2 (de 105,0 a

108.1 DICT50), PI3 (de 107,3 a 108,3 DICT50) M. bovis (2,1 x 109UFC) y Mannheimia (Pasteurella) haemolytica (de 1080 a 1011,0 celulas).

Vacuna D

45 M. bovis BVDV tipos 1 y 2, IBR, PI3, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo, Leptospira pomoma, Leptospira borgpetersenii hardjo-bovis

Se cultiva BVDV 1 y 2, M. bovis y PI3 como se ha descrito para la vacunas A y B. Despues de recoger los lfquidos de cultivo, los virus y el M. bovis se liofilizan. Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo, Leptospira pomoma, Leptospira borgpetersenii hardjo-bovis se cultivan por separado hasta alcanzar 10 , a 10 , 50 celulas por ml de cultivo. Los cultivos de Leptospira se inactivan y los lfquidos de cultivo se liofilizan o secan por congelacion o se formulan como un lfquido que no es viricida para los antfgenos vivos de la vacuna. Cada una de las

108,0 a 1011,0 celulas bacterianas liofilizadas o secadas por congelacion se reconstituyen con el BVDV modificado liofilizado de tipos 1 y 2 (cada uno en una cantidad de 105,0 a 107,0 DICT50), PI3 vivo modificado (de 107,3 a 108,3 DICT50), M. bovis vivo modificado (2,1 x 109 UFC) e IBR vivo modificado (de 106,1 a 1077 DICT50) usando agua esteril 55 para inyeccion o los componentes liofilizados se reconstituyen usando la formulacion lfquida no viricida de los

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

cultivos de Leptospira. La suspension reconstituida (2 ml por dosis) contiene trazas de neomicina como conservante. Las cantidades de antfgeno finales por dosis son BVDV-1 (de 105,0 a 107,0 DICT50), BVDV-2 (de 105,0 a 107,0 DICT50), PI3 (de 107,3 a 108,3 DICT50) M. bovis (2,1 x 109UFC), PI3 (de 1073 a 1083 DICT50) y Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo, Leptospira pomoma y Leptospira borgpetersenii hardjo-bovis (cada una de 1080 a

1011.0 celulas).

Vacuna E

M. bovis, BVDV tipos 1 y 2, IBR, PI3 y H. somnus

Se cultiva BVDV 1 y 2, M. bovis, IBR y PI3 como se ha descrito para la vacunas A y B. Despues de recoger los lfquidos de cultivo, los virus y el M. bovis se liofilizan. H. somnus se cultivo hasta lograr 107,1 a 1092 celulas por ml de cultivo. El cultivo de bacterias se inactiva y el lfquido de cultivo se liofiliza o se seca por congelacion o se formula como un lfquido que no sea viricida para los antfgenos vivos de la vacuna. Se reconstituyen de 107,1 a 109,2 bacterias liofilizadas o secadas por congelacion con el BVDV modificado liofilizado tipos 1 y 2 (cada uno en una cantidad de

105.0 a 107,0 DICT50), PI3 vivo modificado (de 107,3 a 108,3 DICT50), M. bovis vivo modificado (2,1 x 109UFC) e IBR vivo modificado (de 106,1 a 107,7 DICT50) usando agua esteril para inyeccion o los componentes liofilizados se reconstituyen usando la formulacion lfquida no viricida del cultivo bacteriano de H. somnus. La suspension reconstituida (2 ml por dosis) contiene trazas de neomicina como conservante. Las cantidades de antfgeno final por dosis son BVDV-1 (de 105,0 a 107,0 DICT50), BVDV-2 (de 105,0 a 107,0 DICT50), PI3 (de 107,3 a 108,3 DICT50) M. bovis

(2,1 x 109UFC), PI3 (107,3 a 108,3 DICT50) y H. somnus (de 107,1 a 109,2 celulas).

VacunaF

M. bovis, IBR, BVDV tipos 1 y 2, PI3 y BRSV

La preparacion de los antfgenos de IBR, PI3, BVDV tipos 1 y 2 y M. bovis se cultiva como se ha descrito para la vacuna A y B. Ademas, se cultiva una cepa viva atenuada de BRSV en celulas MDBK hasta una DICT50 de aproximadamente 10 a 10 ' por ml de lfquido de cultivo de celulas. Despues, se recoge el lfquido de cultivo que contiene BRSV. Despues de que se recojan los lfquidos de cultivo, los antfgenos se mezclan y se liofilizan como se ha descrito para la vacuna A y B. Se mezcla una cantidad de 105,0 a 107,2 del antfgeno de BRSV con los antfgenos de IBR, BVDV tipos 1 y 2 y M. bovis. La mezcla se reconstituye despues en un volumen de dosis de 2 ml como se ha descrito para la Vacuna A. Para la reconstitucion, se usa una solucion acuosa. Una dosis de la vacuna de combinacion contiene 2 ml de los antfgenos reconstituidos. Una dosis final incluye IBR (de 105,0 a 108,6 DICT50) BVDV-1 (de 105,0 a 108,1 DICT50), BVDV-2 (de 105,0 a 108,1 DICT50), M. bovis (2,1 x 109 UFC), PI3 (de 104,2 a 106’5

DICT50) y BRSV (de 105,0 a 107,2 DICT50).

Listado de secuencias

<110> BOEHRINGER INGELHEIM VETMEDICA, INC.

<120> Vacuna viva modificada mejorada de Mycoplasma bovis, metodos para producir vacunas vivas modificadas de Mycoplasma bovis, vacunas de combinacion y metodos de tratamiento

<130> 10-0118-PCT

<140>

<141>

<150> 61/172,543 <151> 2009-04-24

<160> 52

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1 <211> 21 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 1

ccgcaagtta acttgtggtg c 21

<210>2 <211> 24

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

<400> 2

ggccattttc ttgtcagaac cacc 24

<210>3 <211> 29 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 3

gcttttactc tggtactaga tggtcttgg 29

<210> 4 <211> 30 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 4

gtggcgttct tgacaataga acaattagtg

<210> 5 <211> 26 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 5

gatgttcttc attgtctttt gcatcg 26

<210> 6 <211> 23 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 6

cgacgagtta caagaaagtt ggc 23

<210>7 <211> 29 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 7

gaaacaccta tcccagtagg tacaagatc 29

<210>8 <211> 33 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 8

gtctacattg ttcaaaatgc gacattttgt ata

<210> 9 <211> 60 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis

30

33

5

10

15

20

25

30

35

40

cgcccgttta gctattggta caattaactt ctcgcttgca gttgaaggcc aaagaattga 60

<210> 10 <211> 60 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 10

cgcccgttta gctattggta caattaactt ctcgcttgca gttgaaggcc aaataattga 60

<210> 11 <211> 60 <212> PRT

<213> Mycoplasma bovis <400> 11

Leu Val Asn Thr Lys Tyr Lys Asn Trp Asp Trp Asn Tyr Gly Leu Ser 15 10 15

Pro Arg Tyr Glu Tyr Asn Arg Asp Ala Arg Leu Ala lie Gly Thr lie 20 25 30

Asn Phe Ser Leu Ala Val Glu Gly Gin Arg lie Glu Lys lie Lys lie 35 40 45

Ser Gly Asp Phe Phe Ala Lys Lys Asp lie Thr Glu 50 55 60

<210> 12 <211> 60 <212> PRT

<213> Mycoplasma bovis <400> 12

Leu Val Asn Thr Lys Tyr Lys Asn Trp Asp Trp Asn Tyr Gly Leu Ser 15 10 15

Pro Arg Tyr Glu Tyr Asn Arg Asp Ala Arg Leu Ala lie Gly Thr lie

20 25 30

Asn Phe Ser Leu Ala Val Glu Gly Gin lie lie Glu Lys lie Lys lie 35 40 45

Ser Gly Asp Phe Phe Ala Lys Lys Asp lie Thr Glu 50 55 60

<210> 13 <211> 35 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 13

attcataaac cattgaattt gctaggggag tcatt 35

<210> 14 <211> 35

5

10

15

20

25

30

35

40

<400> 14

attcataaac cattaaattt gctaggggag tcatt 35

<210> 15 <211> 60 <212> PRT

<213> Mycoplasma bovis <400> 15

He His Lys Pro Leu Asn Leu Leu Gly Glu Ser Leu Asn Lys Glu Ala 15 10 15

Phe Ser Ser lie Asn Asp lie Asp Cys lie Leu Phe Leu Thr Pro Val

20 25 30

Asn Glu Glu lie Lys Ser Gly Asp Lys Leu lie Leu Glu Arg lie Ala 35 40 45

Asn Ser Lys Asn Lys lie Ala Val lie Ser Lys lie 50 55 60

<210> 16 <211> 60 <212> PRT

<213> Mycoplasma bovis <400> 16

lie His Lys Pro Leu Asn Leu Leu Gly Glu Ser Leu Asn Lys Glu Ala 15 10 15

Phe Ser Ser lie Asn Asp lie Asp Cys lie Leu Phe Leu Thr Pro Val

20 25 30

Asn Glu Glu lie Lys Ser Gly Asp Lys Leu lie Leu Glu Arg lie Ala 35 40 45

Asn Ser Lys Asn Lys lie Ala Val lie Ser Lys lie 50 55 60

<210> 17 <211> 60 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 17

cacataaaat atttaaggac atattatgag taagaaaaat aaattaatga ttgggctttc 60

<210> 18 <211> 60 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 18

cacataaaat atttaaggac atattattag taagaaaaat aaattaatga ttgggctttc 60

5

10

15

20

25

30

35

40

<210> 19 <211> 54 <212> PRT

<213> Mycoplasma bovis <400> 19

Met Ser Lys Lys Asn Lys Leu Met lie Gly Leu Ser Ser Thr Ala lie 15 10 15

Pro Leu Leu Ala Ala Val Ser Ala Lys Cys Gly Gly Thr Val Asn Tyr 20 25 30

Glu Asp Leu Gly Lys Asp Ala Lys Lys lie Ser Leu Gly Val Ser Phe 35 40 45

Ser Ser Gly Gin Pro Gin 50

<210> 20 <211> 54 <212> PRT

<213> Mycoplasma bovis <400> 20

He Ser Lys Lys Asn Lys Leu Met lie Gly Leu Ser Ser Thr Ala lie 15 10 15

Pro Leu Leu Ala Ala Val Ser Ala Lys Cys Gly Gly Thr Val Asn Tyr

20 25 30

Glu Asp Leu Gly Lys Asp Ala Lys Lys lie Ser Leu Gly Val Ser Phe 35 40 45

Ser Ser Gly Gin Pro Gin 50

<210> 21 <211> 60 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 21

tttaacacag taacatctag aatatctaga gacaaccgtg aaagaagagt gttcggctat 60

<210> 22 <211> 60 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 22

tttaacacag taacatctag aatatctaga gacgaccgtg aaagaagagt gttcggctat 60

<210> 23 <211> 51 <212> PRT

<213> Mycoplasma bovis

5

10

15

20

25

30

35

40

Ala Ala He lie Asn Glu Asp Gly Thr lie Ser Ser His Gly Phe Ala 15 10 15

Pro Asp Asp Gin Phe Asn Thr Val Thr Ser Arg lie Ser Arg Asp Asn

20 25 30

Arg Glu Arg Arg Val Phe Gly Tyr Asp Ser Pro Tyr Gly Arg Ser Pro 35 40 45

Asp Asn Val 50

<210> 24 <211> 51 <212> PRT

<213> Mycoplasma bovis <400> 24

Ala Ala lie He Asn Glu Asp Gly Thr lie Ser Ser His Gly Phe Ala 15 10 15

Pro Asp Asp Gin Phe Asn Thr Val Thr Ser Arg lie Ser Arg Asp Asp 20 25 30

Arg Glu Arg Arg Val Phe Gly Tyr Asp Ser Pro Tyr Gly Arg Ser Pro 35 40 45

Asp Asn Val 50

<210> 25 <211> 60 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 25

ggaaaagcta aatttgctta ccaaggagat gacaaagtta tattgcctga gttcaaaaca 60

<210> 26 <211> 60 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 26

ggaaaagcta aatttgctta ccaaggagat gacaaagtta tattacctga gttcaaaaca 60

<210> 27 <211> 60 <212> PRT

<213> Mycoplasma bovis <400> 27

5

10

15

20

25

30

35

40

Ala Lys Ser lie Thr Leu He Met Thr He Leu Ala Asp Ala He Ala 15 10 15

Thr Ala Arg Gly Gly Lys Ala Lys Phe Ala Tyr Gin Gly Asp Asp Lys 20 25 30

Val lie Leu Pro Glu Phe Lys Thr Asp Arg Val Gin Asn Pro Arg Phe 35 40 45

Val Asn Gin Arg Arg Ser Phe Glu Gin Thr Gly Ala 50 55 60

<210> 28 <211> 60 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 28

atgattgccg atcagaatag tggcaagaga atttcgttcc ctgttgaagg atctattata 60

<210> 29 <211> 60 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 29

atgattgccg atcagaatag tggcaagaga atttcgttcc ctgtttaagg atctattata 60

<210> 30 <211> 60 <212> PRT

<213> Mycoplasma bovis <400> 30

Met lie Ala Asp Gin Asn Ser Gly Lys Arg lie Ser Phe Pro Val Glu 15 10 15

Gly Ser lie lie Asp Val Gin Ala Tyr Lys Tyr Asp Gly Thr Leu Tyr

20 25 30

Arg Gin Trp Asn Gly Val Lys Val Leu Arg Asn Thr Asn Lys His Tyr 35 40 45

Val Leu Leu Met Tyr Lys Thr Arg Val Ser Glu Gin 50 55 60

<210> 31 <211> 15 <212> PRT

<213> Mycoplasma bovis <400> 31

Met lie Ala Asp Gin Asn Ser Gly Lys Arg lie Ser Phe Pro Val 15 10 15

<210> 32 <211> 44 <212> PRT

5

10

15

20

25

30

35

40

<213> Mycoplasma bovis <400> 32

Gly Ser lie lie Asp Val Gin Ala Tyr Lys Tyr Asp Gly Thr Leu Tyr 15 10 15

Arg Gin Trp Asn Gly Val Lys Val Leu Arg Asn Thr Asn Lys His Tyr 20 25 30

Val Leu Leu Met Tyr Lys Thr Arg Val Ser Glu Gin 35 40

<210> 33 <211> 55 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 33

aatgaattta gtaagtcatt atatgaaagc gcaaaaagct ctgccaagtt gcata 55

<210> 34 <211> 55 <212> DNA

<213> Mycoplasma bovis <400> 34

aataaattta gtaagtcatt atatgaaagc gcaaaaagct ctgccaagtt gcata 55

<210> 35 <211> 60 <212> PRT

<213> Mycoplasma bovis <400> 35

Ser Gly Tyr Trp Ala Gly Leu Asp Gly Phe Asp Val Ser Ser Leu Asp 15 10 15

Asn Gly Thr Val Glu Lys Met Phe Asp Glu lie Phe Gly Ser Pro Asp

20 25 30

Lys Lys Gly Val Leu Glu Thr Gin His Gly Leu Thr Lys Asn Glu lie 35 40 45

Ala Lys Phe Leu Asp Ser Ser Ala Asn Glu Phe Ser 50 55 60

<210> 36 <211> 60 <212> PRT

<213> Mycoplasma bovis <400> 36

Ser Gly Tyr Trp Ala Gly Leu Asp Gly Phe Asp Val Ser Ser Leu Asp 15 10 15

Asn Gly Thr Val Glu Lys Met Phe Asp Glu lie Phe Gly Ser Pro Asp 20 25 30

Lys Lys Gly Val Leu Glu Thr Gin His Gly Leu Thr Lys Asn Glu lie 35 40 45

Ala Lys Phe Leu Asp Ser Ser Ala Asn Lys Phe Ser 50 55 60

<210> 37 <211> 345 5 <212> PRT

<213> Mycoplasma bovis

<400> 37

Met lie Leu Val Glu Pro lie Arg Asn Gly Lys Tyr Val Lys Asp Gly 10 1 5 10 15

Claims (22)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   40

   45

   50

   55

   1. Una cepa de bacteria Mycoplasma bovis atenuada, avirulenta, en la que la bacteria es pasada mas de 110 veces, en la que la cepa de Mycoplasma bovis atenuada y avirulenta se selecciona del grupo que consiste en: la cepa bacteriana de Mycoplasma bovis atenuada depositada en la ATCC bajo numero de registro PTA-9666 o PTA-9667, o cualquier cepa de bacterias Mycoplasma bovis descendiente atenuada capaz de reducir la mortalidad en un grupo de animales de al menos 83% en comparacion con un grupo control no vacunado de animales.
2. 2. La cepa de bacteria Mycoplasma bovis atenuada, avirulenta, segun la reivindicacion 1, en la que la cepa de Mycoplasma bovis ha sido pasada entre 135 y 145 veces.
3. 3. Una composicion inmunogenica que comprende bacterias vivas de cualquiera de las cepas de bacterias Mycoplasma bovis atenuadas, avirulentas, segun las reivindicaciones 1 o 2.
4. 4. La composicion inmunogenica segun la reivindicacion 3, caracterizada porque la composicion inmunogenica comprende al menos 1,0E7 CFU de las bacterias vivas de las bacterias Mycoplasma bovis atenuadas y avirulentas por dosis.
5. 5. La composicion inmunogenica segun la reivindicacion 4, caracterizada porque la composicion inmunogenica comprende entre 8,4 E7 CFU y 9,4 E7 CFU de las bacterias vivas de las bacterias Mycoplasma bovis atenuadas y avirulentas por dosis.
6. 6. La composicion inmunogenica de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 5, donde dicha composicion inmunogenica se formula para la administracion de una sola dosis.
7. 7. La composicion inmunogenica de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 6, donde la composicion inmunogenica es eficaz para estimular el inicio de inmunidad en los 14 dfas siguientes a la administracion de una sola dosis.
8. 8. La composicion inmunogenica de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 7, donde la composicion inmunogenica es eficaz para estimular una duracion de la inmunidad de al menos 42 dfas despues de la administracion de una sola dosis de la composicion inmunogenica.
9. 9. La composicion inmunogenica de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 8, donde dicha composicion inmunogenica comprende ademas uno o mas componentes inmunologicamente activos eficaces para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones microbiologicas en ganado bovino producidas por un patogeno de ganado bovino distinto de M. bovis.
10. 10. La composicion inmunogenica de acuerdo con la reivindicacion 9, donde dicha infeccion microbiologica en ganado bovino producida por un patogeno de ganado bovino distinto de M. bovis se produce por uno o mas componentes inmunogenicos seleccionados entre el grupo consistente en: virus de la diarrea viral bovina (BVDV), Parainfluenzavirus 3 (PI-3), virus de la rinotraquettis infecciosa bovina (IBR), virus sincitial respiratorio bovino (BRSV), herpesvirus bovino (BHV), rotavirus bovino (BRV), enterovirus bovino (BEV), coronavirus bovino (BCV), rabia bovina (BR), parvovirus bovino (BPV), adenovirus astrovirus, Mannheimia haemolytica (anteriormente Pasteurella haemolytica), Pasteurella multocida, Haemophilus somnus (Histophilus ovis y Haemophilus agni), Actinomyces (Corynebacterium), Actinomyces pyogenes, Chlamydia psittaci, Campylobacter fetus venerealis y Campylobacter fetus fetus (anteriormente C fetus intestinalis), Leptospira interrogans, Leptospira hardjo, Leptospira pomona y Leptospira grippotyphosa, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo (Leptospira hardjoprajitno y Leptospira hardjo-bovis), Brucella abortus, Brucella suis y Brucella melitensis, Listeria monocytogenes, Chlamydia psittaci, Clostridium chauvoei, Clostridium septicum, Clostridium haemolyticum, Clostridium novyi, Clostridium sordellii, Clostridium perfringens, Clostridium tetani, Moraxella bovis, Klebsiella spp, Klebsiella pneumoniae, Salmonella typhimurium; Salmonella newport, Mycobacterium avium paratuberculosis, Cryptosporidium parvum, Cryptosporidium hominis, Staphylococcus aureus, Streptococcus dysgalactiae, Streptococcus uberis, Streptococcus agalactiae, Escherichia coli, Mycoplasma spp, Mycoplasma dispar, y Ureaplasma spp., Tritrichomonas foetus, Trichophyton verrucosum, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton sarkisovii, Neospora caninum (anteriormente Toxoplasma gondii), Babesia bigemina y Babesia bovis, Dictyocaulus viviparous (enfermedad por gusano pulmonar), y combinaciones de los mismos.
11. 11. La composicion inmunogenica de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 10, donde la composicion inmunogenica es una vacuna.
12. 12. Un metodo para producir una composicion inmunogenica de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 11, que comprende mezclar dicha bacteria de una cepa de Mycoplasma. bovis atenuada avirulenta con un vehfculo farmaceuticamente aceptable.
13. 13. Las bacterias atenuadas de Mycoplasma bovis segun la reivindicacion 1 o 2 o la composicion inmunogenica de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 11 para uso en el tratamiento o profilaxis de infecciones causadas por Mycoplasma bovis, en el que dicho tratamiento o profilaxis se selecciona del grupo que consiste en:

    reducir signos de infeccion por Mycoplasma bovis, reducir la gravedad o incidencia de los signos clmicos de la infeccion por Mycoplasma bovis, reducir la mortalidad de animales de la infeccion por Mycoplasma bovis, y combinaciones de los mismos.
14. 14. Las bacterias atenuadas de Mycoplasma bovis segun la reivindicacion 1 o 2 o la composicion inmunogenica de 5 acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 11 para uso en un metodo para reducir la incidencia de

    muerte resultante de la infeccion por Mycoplasma bovis en una vaca individual o dentro de un rebano de ganado.
15. 15. Las bacterias atenuadas de Mycoplasma bovis segun la reivindicacion 1 o 2 o la composicion inmunogenica segun cualquiera de las reivindicaciones 3 a 11 para uso segun la reivindicacion 13 o 14, en donde solo se administra una dosis unica a dicho animal.

    10 16. Las bacterias Mycoplasma bovis atenuadas segun la reivindicacion 1 o 2 o la composicion inmunogenica segun

    cualquiera de las reivindicaciones 3 a 11 para uso segun una cualquiera de las reivindicaciones 13 a 15, en donde la bacteria Mycoplasma bovis o la composicion inmunogenica se administra a animales a partir del dfa 1 de vida.

    Punluacion total de lesion puimonar o o © o o o

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