ES2395930T3

ES2395930T3 - Procedimiento estereoselectivo y formas cristalinas de una camptotecina

Info

Publication number: ES2395930T3
Application number: ES05849781T
Authority: ES
Inventors: Paolo Carminati; Maria Ornella Tinti; Mauro Marzi; Fabrizio Giorgi; Walter Cabri; Marco Alpegiani; Domenico Vergani; Paolo Ghetti
Original assignee: Sigma Tau Industrie Farmaceutiche Riunite SpA
Current assignee: Sigma Tau Industrie Farmaceutiche Riunite SpA
Priority date: 2004-12-21
Filing date: 2005-12-16
Publication date: 2013-02-18
Anticipated expiration: 2025-12-16
Also published as: US20090239893A1; EP1828196B1; AU2005318227A1; US8101758B2; US7799921B2; SI1828196T1; HK1113487A1; DK1828196T3; KR101355121B1; US20100311783A1; WO2006067092A2; US20100311784A1; PT1828196E; US8124769B2; CN101084221A; KR20070097535A; CA2590756C; PL1828196T3; EP1828196A2; BRPI0515832A

Abstract

Un procedimiento para la preparación estereoselectiva de 7-[(E)-t-butiloxiiminometil]-camptotecina quecomprende hacer reaccionar en ausencia de un base orgánica y en condiciones ácidas un acetal de 7-formilcamptotecinacon clorhidrato de O-t-butilhidroxilamina en un disolvente orgánico polar, prótico o aprótico.

Description

Procedimiento estereoselectivo y formas cristalinas de una camptotecina

Campo de la invención

Esta invención se refiere a un procedimiento estereoselectivo para la preparación de 7-[(E)-t-butiloxiiminometil]

5 camptotecina (también conocida como gimatecán). Con la adición de una disolución adicional y unas etapas de precipitación realizadas en mezclas adecuadas de disolventes diferentes, se pueden obtener tres nuevas formas cristalinas de gimatecán, empleando el mismo procedimiento estereoselectivo.

Antecedentes de la invención

La camptotecina es un alcaloide, que fue aislado por primera vez por Wall y col. (J. Am. Chem. Soc. 88, 3888-3890

10 (1966)) a partir del árbol Camptoteca acuminata, una planta originaria de China, de la familia Nyssaceae. La molécula consiste en una estructura pentacíclica que tiene una lactona en el anillo E, que es esencial para la citotoxicidad. El fármaco mostró un amplio espectro de actividad antitumoral, en particular contra tumores de colon, otros tumores sólidos y leucemias, y los primeros ensayos clínicos se realizaron a principios de los años 70.

Ya que la camptotecina (CPT) tiene una solubilidad baja en agua y para preparar ensayos clínicos, el Instituto Na

15 cional del Cáncer (NCI) preparó la sal de sodio (NSC100880), que es soluble en agua. Los ensayos clínicos en fase I y II no se completaron debido a la alta toxicidad mostrada por el compuesto (cistitis hemorrágica, toxicidad gastrointestinal, tales como náuseas, vómito, diarrea y mielosupresión, especialmente leucopenia y trombocitopenia).

Posteriormente, se sintetizaron muchos análogos de la CPT con el fin de obtener compuestos con menor toxicidad y mayor solubilidad en agua. Dos fármacos están comercializados, irinotecán (CPT-11) (Camptosar® de Upjohn) y to

20 potecán (Hycamtin® o Thycantin® der SmithKline & Beecham).

Todos los derivados identificados hasta la fecha contienen la estructura principal con 5 anillos, esenciales para la citotoxicidad. Se demostró que modificaciones en el primer anillo, como en el caso de los fármacos mencionados anteriormente, aumentan la solubilidad en agua y permiten una mayor tolerabilidad del fármaco.

El documento de solicitud de patente WO97/31003 describe derivados de camptotecinas, sustituidos en las posicio

25 nes 7, 9 y 10. La posición 7 proporciona las siguientes sustituciones: -CN, -CH(CN)-R4, -CH=C(CN)-R4, -CH2-CH=C(CN)-R4, -C(=NOH)-NH2, -CH=C(NO2)-R4, -CH(CH2NO2)-R4, 5-tetrazolilo, 2-(4,5-dihidroxazolilo), 1,2,4oxadiazolidin-3-il-5-ona, en donde R4 es hidrógeno, alquilo lineal o ramificado de 1 a 6 átomos de carbono, nitrilo, carboxialkoxi.

De estos compuestos, el mejor demostró ser el 7-nitrilo (7-CN), en lo sucesivo denominado CPT 83, con actividad ci

30 totóxica sobre el carcinoma de pulmón de células no pequeñas (no-SCLC, H-460). Esta línea tumoral es intrínsecamente resistente a la terapia citotóxica y solo es moderadamente sensible a los inhibidores de la topoisomerasa I, a pesar de la hiperexpresión de la enzima diana. CPT 83 es más activo que topotecán, tomado como compuesto de referencia y en conjunto ofrece un perfil farmacológico mejor, incluso en términos de tolerabilidad, y por ello un índice terapéutico mejor.

35 CPT 83 se prepara a través de una ruta de síntesis que comprende la oxidación de 7-hidroximetilcamptotecina a 7aldehído de camptotecina, la transformación de este último en oxima y una conversión final en nitrilo.

El compuesto de partida y los productos intermedios se describen en Sawada y col., Chem. Pharm. Bull., 39, 5272 (1991). Este artículo hace referencia a una familia de patentes con prioridad de 1981, por ejemplo, el documento de solicitud de patente europea EP 0056692, publicada en 1982. En estas publicaciones el 7-aldehído de camptotecina

40 y su oxima se describen entre otros.

La utilidad de estos derivados es proporcionar compuestos con actividad antitumoral que tienen una toxicidad baja, partiendo de 7-hidroximetilcamptotecina. En el artículo publicado en Chem. Pharm. Bull. 39, 5272 (1991), los autores demuestran que, con respecto a la camptotecina, los derivados 7-alquílicos y 7-aciloximetílicos, que no se habían previsto en la solicitud de patente anteriormente mencionada, son los compuestos más activos sobre líneas L1210

45 de leucemia de múrido, mientras que una actividad menor, siempre con respecto a camptotecina, se observó en los compuestos portadores de sustituciones en 7, con carácter polar elevado, tales como hidrazonas y la oxima -CH(=NOH).

En el documento de solicitud de patente EP1044977 y en Dallavalle S. y col., J. Med. Chem. 2001, 44, 3264-3274, se describen derivados de camptotecina que son portadores de una alquiloxima O-sustituida en la posición 7 y que 50 están dotados con una actividad antitumoral mayor que la del compuesto de referencia topotecán. Además, estos derivados de camptotecina que son portadores de un grupo imino en la posición 7, también muestran un índice terapéutico mejorado. Entre estos compuestos, una de las moléculas preferidas se mostró que era 7-tbutoxiiminometilcamptotecina (CPT 184). Cuando esta molécula se prepara tal y como se describe en el documento EP1044977 y en el artículo anterior de Dallavalle, se obtiene una mezcla de los dos isómeros E y Z, en proporción

8:2, a partir de una mezcla de disolventes que contiene etanol y piridina.

Todos los procedimientos descritos en la bibliografía mencionada anteriormente, para la obtención de derivados de camptotecina que son portadores de alquiloxima O-sustituida en la posición 7, conducen a una mezcla de los dos isómeros E y Z de la oxima o de la alquiloxima.

Por lo tanto, es deseable poner a disposición un procedimiento estereoselectivo que conduce a isómeros aislados E, Z, respectivamente, más particularmente el isómero E.

Se han descubierto muchos fármacos, antiguos y nuevos, y se han precipitado en el mercado, como sus formas cristalinas "adecuadas" y nunca se han examinado a fondo para estudiar sus formas polimórficas potenciales. Con el reciente avance tecnológico de la química del estado sólido, es posible que se puedan descubrir nuevas formas polimórficas, que no se han visto nunca antes. Las nuevas formas polimórficas son capaces frecuentemente de ofrecer ventajas terapéuticas y representan uno de los nuevos retos de la industria farmacéutica. De hecho, el polimorfismo, capacidad de una molécula de cristalizar en más de una configuración cristalina, puede tener un profundo efecto sobre el tiempo de conservación, la solubilidad, las propiedades de formulación y las propiedades de procesamiento de un fármaco. Más gravemente, la acción de un fármaco puede verse afectada por el polimorfismo de las moléculas del fármaco. Diferentes polimorfos pueden tener diferentes tasas de absorción en el cuerpo, lo que conduce a una actividad biológica mayor o menor que la deseada. En casos extremos, un polimorfo no deseado puede ser incluso tóxico. La aparición de una forma polimórfica desconocida durante la fabricación puede tener un enorme impacto sobre una compañía farmacéutica. Por lo tanto, es importante que los investigadores implicados en la formulación de productos cristalinos, sean capaces de seleccionar el polimorfo con las propiedades correctas y anticipar problemas, tales como la cristalización no deseada de otros polimorfos. Sorprendentemente, un gran número de productos farmacéuticos presentan el fenómeno de polimorfismo. El 70% de los barbituratos, el 60% de las sulfonamidas y el 23% de los esteroides existen en diferentes formas polimórficas.

El problema del polimorfismo en compuestos orgánicos está revisado genéricamente por Caira, M. R. "Crystalline Polymorphism of Organic Compounds", Topics in Current Chemistry, Springler, Berlín, DE, vol. 198, 1998, páginas 163-208.

La realización de un estudio de la cristalización sobre gimatecán ha llevado al solicitante a la invención reivindicada.

Descripción de los dibujos

La Figura 1 describe a la izquierda la fórmula estructural de 7-[(E)-t-butiloxiiminometil]-camptotecina (gimatecán) y a la derecha la fórmula 7-[(Z)-t-butiloxiiminometil]-camptotecina.

La Figura 2 describe el patrón de difracción de rayos X de la forma cristalina I de 7-[(E)-t-butiloxiiminometil]camptotecina (gimatecán).

La Figura 3 describe el patrón de difracción de rayos X de la forma cristalina II de 7-[(E)-t-butiloxiiminometil]camptotecina (gimatecán).

La Figura 4 describe el patrón de difracción de rayos X de la forma cristalina III de 7-[(E)-t-butiloxiiminometil]camptotecina (gimatecán).

Descripción detallada de la invención

Hemos encontrado ahora sorprendentemente un procedimiento estereoselectivo para la preparación de 7-[(E)-tbutiloxiiminometil]-camptotecina (también conocida como gimatecán). También hemos encontrado que es posible obtener la conversión completa del isómero Z en el isómero E. Para mayor claridad, las fórmulas estructurales de los dos isómeros se muestran en la Figura 1.

Además, hemos encontrado que este producto puede existir en diferentes formas cristalinas y que estas formas se pueden obtener empleando el mismo procedimiento estereoselectivo, con la adición de una disolución adicional y unas etapas de precipitación realizadas en mezclas adecuadas de disolventes diferentes.

Por lo tanto el objeto principal de la presente invención es un procedimiento para la preparación estereoselectiva de 7-[(E)-t-butiloxiiminometil]-camptotecina que comprende hacer reaccionar un acetal de 7-formil-camptotecina con clorhidrato de O-t-butilhidroxilamina en un disolvente orgánico polar, prótico o aprótico, en condiciones ácidas (pH <7). De hecho, se ha encontrado que la cantidad de isómero Z es proporcional a la cantidad de base (por ejemplo, piridina) añadida. Por lo tanto, el procedimiento de la presente invención debe llevarse a cabo en ausencia de una base orgánica, en particular, en ausencia de piridina.

Diferentes realizaciones y variaciones del procedimiento anterior están comprendidas en la presente invención.

Preferiblemente, el disolvente orgánico polar, prótico o aprótico es un alcohol, tal como metanol, etanol, n-propanol, i-propanol, n-butanol, i-butanol. Más preferiblemente, es etanol o metanol.

El acetal de 7-formil-camptotecina es un acetal dialquílico, preferiblemente acetal metílico o etílico.

La temperatura de la reacción suele estar comprendida entre la temperatura ambiente y el punto de ebullición del disolvente. Al final de la reacción, el precipitado se aísla de la mezcla de reacción, por ejemplo, por filtración. De acuerdo con el procedimiento de la presente invención, el isómero E se obtiene siempre en una proporción de al

menos 95:5, con respecto al isómero Z. Los Ejemplos muestran que el procedimiento de la invención permite obte

ner el isómero E hasta en una proporción de 99,8:0,2, con respecto al isómero Z. De acuerdo con una realización preferida de la invención, el procedimiento descrito anteriormente comprende etapas adicionales, tales como la disolución del precipitado obtenido previamente en diclorometano, la adición de un codisolvente, la concentración de la solución obtenida y la cristalización del producto así obtenido.

Dependiendo del codisolvente utilizado, se obtienen diferentes formas cristalinas del modo siguiente. Estas diferentes formas cristalinas son un objeto adicional de la presente invención.

Disolventes: Polimorfo (mediante IR y DSC) Polimorfo (mediante difracción de rayos X)

Acetona: I I

MeOH: III III

EtOH: III III

Hexano: II 75% II (con una cantidad sustancial de amorfo)

EtOAc: II II

Tolueno: II II

Cloruro de n-butilo: II II

Éter metil t-butílico: II 90% III 10% II

Usando acetona como codisolvente, se obtiene la forma cristalina I de gimatecán, que se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X obtenido por radiación con rayos X CuK-a 1, tal y como se muestra en la Figura 2.

Los picos principales característicos de la difracción de esta forma, se proporcionan en la siguiente tabla:

Grados 2-Zeta (8) Intensidad relativa (%) 7,2 100 9,2 4,8

10,2 7,3 12,7 16,3 14,0 8,1 14,7 9,5 15,2 13,0 16,0 2,4 16,7 4,06 19,7 3,2 20,5 3,2 20,7 4,06 22,2 6,5 26,5 3,2 32,5 2,4

Usando etanol o metanol como codisolvente, se obtiene la forma cristalina III de gimatecán, que se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X obtenido por radiación con rayos X CuK-a 1, tal y como se muestra en la Figura 4. Los picos principales característicos de la difracción de esta forma se proporcionan en la siguiente tabla:

Grados 2-Zeta Intensidad relativa (%) 6,0 1,0 7,5 100,0 8,51 8,1

12,3 4,8 16,0 6,0 17,0 11,0 18,0 6,6 18,2 4,0 18,7 6,0 23,2 2,4 25,2 3,6

Usando acetato de etilo, tolueno, cloruro de n-butilo, éter metil-t-butílico o hexano como codisolvente, se obtiene la forma cristalina II de gimatecán, que se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X obtenido por radiación con rayos X CuK-a 1, tal y como se muestra en la Figura 3. Los picos principales característ icos de la difracción de esta forma se proporcionan en la siguiente tabla:

Grados 2-Zeta Intensidad relativa (%) 6,7 100,0 7,2 4,8 9,7 6,0

11,2 24,0 13,2 3,0 14,5 4,8 16,0 2,4 16,7 21,6 17,0 31,2 17,5 10,8 19,0 3,0 21,0 4,8 23,0 3,6 25,5 7,2 26,5 6,0 28,2 3,0

Estas nuevas formas cristalinas I, II y III de gimatecán son objetos adicionales de la presente invención. Se prefiere la forma cristalina I de gimatecán.

Otro objeto de la presente invención es el uso de cualquier forma cristalina I, II, III de gimatecán, o una mezcla de las mismas, como medicamentos, en particular para la preparación de un medicamento para tratar estados patológicos que surgen o se agravan por la proliferación celular.

Un objeto adicional de la presente invención son composiciones, en particular composiciones farmacéuticas, que comprenden al menos una de las formas cristalinas mencionadas anteriormente, como ingrediente activo, incorporando por mezcla las composiciones farmacéuticas con al menos un vehículo y/o diluyente farmacéuticamente aceptable. Además, las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden contener también uno o varios excipientes farmacéuticamente aceptables.

Gimatecán muestra una actividad antiproliferativa, por lo tanto, sus formas cristalinas son útiles para su actividad terapéutica, y poseen propiedades fisicoquímicas que las hacen adecuadas para ser formuladas en composiciones farmacéuticas.

Las composiciones farmacéuticas comprenden al menos una de las formas cristalinas de gimatecán mencionadas anteriormente, en una cantidad tal como para producir un efecto terapéutico significativo, en particular, un efecto antitumoral. Las composiciones comprendidas dentro de la presente invención son convencionales y se obtienen con métodos usados comúnmente en la industria farmacéutica. De acuerdo con la vía de administración deseada, las composiciones estarán en forma sólida o líquida, adecuada para la vía oral, parenteral, intravenosa. Las composiciones de acuerdo con la presente invención comprenden junto con los ingredientes activos, al menos un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable. Coadyuvantes de la formulación, por ejemplo, agentes solubilizantes, dispersantes, suspendedores, emulsionantes, pueden ser particularmente útiles.

Las formas cristalinas mencionadas anteriormente de gimatecán también se pueden utilizar en combinación con otros ingredientes activos, por ejemplo, otros fármacos antitumorales, tanto en forma separada como en forma de dosis única.

Las formas cristalinas mencionadas anteriormente de gimatecán, de acuerdo con la presente invención, son útiles como medicamentos con actividad antitumoral, por ejemplo, en tumores de pulmón, tales como el tumor de pulmón de células no pequeñas, tumores colorrectales, próstata, gliomas.

La actividad citotóxica se somete a ensayo en sistemas celulares de células tumorales humanas, usando el ensayo de actividad antiproliferativa como un método de evaluación del potencial citotóxico.

Estos y otros objetos de la presente invención se ilustran en detalle también a través de los siguientes Ejemplos.

Los siguientes ejemplos ilustran adicionalmente la invención.

Introducción

Los Ejemplos 1 y 2 tratan de la síntesis de 7-[(E)-t-butiloxiiminometil]-camptotecina empleando dimetilacetal de 7formil- camptotecina como material de partida.

Los Ejemplos 3 y 4 describen la síntesis de 7-[(E)-t-butiloxiiminometil]-camptotecina empleando 7-formil

5 camptotecina como material de partida, en condiciones que proporcionaron el isómero E. Todas las reacciones de este grupo son más rápidas que las reacciones descritas en los Ejemplos 1 y 2, lo que indica que la hidrólisis del acetal es razonablemente más lenta que la reacción del aldehído para proporcionar la oxima.

El Ejemplo 5 describe la conversión del isómero Z en el isómero E.

El Ejemplo 6 describe la síntesis y la caracterización de las diferentes (polimórficas) formas cristalinas que se pue10 den obtener para 7-[(E)-t-butiloxiiminometil]-camptotecina (gimatecán).

HPLC: los análisis se llevan a cabo en un instrumento equipado con una bomba cuaternaria (Waters Alliance 2690) con inyector automático (volumen inyectado 5 1l) y con un detector de UV que funciona a 260 nm (Waters 2487) controlado por el programa informático “Empower Pro” de Waters.

Una columna de fase inversa C18 (Symmetry C18; 75 x 4,6 mm) se usa con un gradiente de elución lineal (véase 15 tabla a continuación), con un caudal de 1,0 ml/min.

Programa del gradiente

A: H2O/CH3CN 60/40 (v/v)

B: H2O/CH3CN 30/70 (v/v)

Tiempo (min) % de A % de B

0 100 0

30 1000

40 0 100

45 1000

50 1000

20 El tiempo de retención de 7-[(E)-terc-butiloxiiminometil]-camptotecina es de 12 minutos, y el tiempo de retención del isómero Z es de 8 minutos.

Ejemplo 1

Preparación de 7-[(E)-terc-butiloxiiminometil]-camptotecina a partir de 7-formilcamptotecina-dimetilacetal

7-Formil-camptotecina-dimetilacetal (500 mg; 1,2 mmol) y clorhidrato de O-terc-butilhidroxilamina (372 mg; 2,9 mmol)

25 se añadieron a etanol al 95% (12,5 ml) en un matraz de tres bocas, protegido de la luz y equipado con un agitador magnético y un condensador. La mezcla se calentó a reflujo durante 4 h. El análisis por HPLC mostró una relación

E:Z de 99,8:0,2. El producto bruto se obtuvo en forma de precipitado a partir de la mezcla de reacción y se aisló por filtración. Tras la purificación cromatográfica sobre gel de sílice (20 g), eluyendo con diclorometano-metanol 95:5, se obtuvo gimatecán (460 mg) como un polvo amarillo (rendimiento: 87%).

30 Ejemplo 2

7-Formil-camptotecina-dimetilacetal (500 mg; 1,2 mmol), clorhidrato de O-terc-butilhidroxilamina (372 mg; 2,9 mmol) e hidróxido de sodio (59 mg; 1,47 mmol) se añadieron a etanol al 95% (12,5 ml) en un matraz de tres bocas, protegido de la luz y equipado con un agitador magnético y un condensador. La mezcla se calentó a reflujo durante 24

35 horas. El análisis por HPLC mostró una relación E:Z de 98,8:1,2. El producto bruto se obtuvo en forma de precipitado a partir de la mezcla de reacción y se aisló por filtración. Tras la purificación cromatográfica sobre gel de sílice (20 g), eluyendo con diclorometano-metanol 95:5, se obtuvo gimatecán como un polvo amarillo (rendimiento: 80%)

Ejemplo 3 (Ejemplo de referencia)

Preparación de 7-[(E)-terc-butiloxiiminometil]-camptotecina a partir de 7-formilcamptotecina

40 7-Formil-camptotecina (500 mg; 1,33 mmol), clorhidrato de O-terc-butilhidroxilamina (417 mg; 3,3 mmol) e hidróxido de sodio (67 mg; 1,65 mmol) se añadieron a etanol al 95% (12,5 ml) en un matraz de tres bocas, protegido de la luz y equipado con un agitador magnético y un condensador.

La mezcla se calentó a reflujo durante 2 horas. El análisis por HPLC mostró una relación E:Z de 97,4:2,6. El produc

to bruto se obtuvo en forma de precipitado a partir de la mezcla de reacción y se aisló por filtración. Tras la purificación cromatográfica sobre gel de sílice (20 g), eluyendo con diclorometano-metanol 95:5, se obtuvo gimatecán (480 mg) como un polvo amarillo (rendimiento: 80%).

Ejemplo 4 (Ejemplo de referencia)

7-Formil-camptotecina (500 mg; 1,33 mmol), clorhidrato de O-terc-butilhidroxilamina (417 mg; 3,3 mmol) e hidróxido de sodio (120 mg; 3 mmol) se añadieron a etanol al 95% (12,5 ml) en un matraz de tres bocas, protegido de la luz y equipado con un agitador magnético y un condensador.

La mezcla se calentó a reflujo durante 2 horas. El análisis por HPLC mostró una relación E:Z de 95,5. El producto bruto se obtuvo en forma de precipitado a partir de la mezcla de reacción y se aisló por filtración. Tras la purificación cromatográfica sobre gel de sílice (20 g), eluyendo con diclorometano-metanol 95:5, se obtuvo gimatecán (550 mg) como un polvo amarillo (rendimiento: 93%).

Ejemplo 5

Conversión del isómero

7-[(Z)-terc-butiloxiiminometil]-camptotecina (100 mg) se disolvió en diclorometano (30 ml). Se añadió ácido clorhídrico (0,2 ml) a temperatura ambiente y la mezcla se sometio a radiacion con una lampara UV de 125 W de Hg de alta presión durante 1 hora. El análisis por HPLC mostró que el isómero Z se había convertido completamente en el isómero E.

Ejemplo 6

Estudios de cristalización

7-[(E)-terc-butiloxiiminometil]-camptotecina (2,5 g) se disolvió en diclorometano (500 ml). Un codisolvente (500 ml) se añadió a la solución, a continuación, por medio de un evaporador rotativo, la mezcla se concentró a una temperatura de 40ºC hasta un volumen de 250 ml.

La suspensión se mantuvo bajo agitación a temperatura ambiente durante 30 minutos, a continuación, el sólido formado se filtró lavando dos veces con 20 ml del codisolvente. Después de una noche en un horno a 50ºC bajo vacío, se obtuvieron 2,1 g de producto.

Los codisolventes utilizados eran los siguientes: acetona, etanol, metanol, acetato de etilo, tolueno, cloruro de nbutilo, éter metil terc-butílico y hexano.

Los cristales obtenidos se analizaron por difractometría de rayos X. Los difractogramas se obtuvieron en 20-50 mg de polvo, empleando un difractrómetro de Siemens D-500 controlado por ordenador, equipado con una fuente de radiación CuK-a monocromática, con cristales de grafito (002), con rendijas Sollers y divergencia estrecha (0,3°) y aberturas de recepción. Los límites de confianza de los ángulos de dispersión son ± 0,5 2-Zeta.

Las muestras obtenidas utilizando acetona como codisolvente (forma I) proporcionaron los siguientes resultados.

El difractograma de rayos X es característico de una sustancia cristalina. Los picos principales característicos de la difracción de esta forma se proporcionan en la siguiente tabla:

Grados 2-Zeta Intensidad relativa (%) 7,2 100 9,2 4,8 10,2 7,3 12,7 16,3 14,0 8,1 14,7 19,5 15,2 13,0 16,0 2,4 16,7 4,06 19,7 3,2 20,5 3,2 20,7 4,06 22,2 6,5 26,5 3,2 32,5 2,4

Las muestras obtenidas empleando etanol o metanol como codisolvente (forma III) proporcionaron los siguientes resultados.

Grados 2-Zeta Intensidad relativa (%)

5 6,0 11,0 7,5 100,0 8,5 18,1 12,3 4,8 16,0 6,0

10 17,0 11,0 18,0 6,6 18,2 4,0 18,7 6,0 23,2 2,4

15 25,2 3,6

Muestras obtenidas empleando acetato de etilo, tolueno, cloruro de n-butilo, éter metil-t-butílico o hexano como codisolvente (forma II) proporcionaron los siguientes resultados.

El difractograma de rayos X es característico de una sustancia cristalina. Los picos principales característicos de la 20 difracción de esta forma se proporcionan en la siguiente tabla:

Grados 2-Zeta Intensidad relativa (%) 6,7 100,0 7,2 4,8 9,7 6,0

25 11,2 24,0 13,2 3,0 14,5 4,8 16,0 2,4 16,7 21,6

30 17,0 31,2 17,5 10,8 19,0 3,0 21,0 4,8 23,0 3,6

35 25,5 7,2 26,5 6,0 28,2 3,0

Para caracterizar adicionalmente estas formas cristalinas de gimatecán, las mismas muestras fueron examinadas 40 por espectroscopía IR. En la siguiente tabla se proporcionan los picos (cm-1) característicos de las tres formas.

Forma I (acetona) Forma II (AcOEt)* Forma III (EtOH)**

Frecuencia (cm-1) Frecuencia (cm-1) Frecuencia (cm-1)

1751,7 1761,7 1739,3 1606,4 1605,0 1619,8 1162,2 1156,7 1154,4 766,2 764,3 759,5

* datos idénticos se observan también para las formas obtenidas a partir de tolueno, cloruro de n butilo, éter metil tbutílico o hexano ** datos idénticos se observaron también para la forma obtenida a partir de metanol

Los espectros IR se recogieron a 4 cm-1 en pastilla de KBr al 1% con un FT-IR Spectrum 1000 de Perkin Elmer.

Claims

REIVINDICACIONES

1.

Un procedimiento para la preparación estereoselectiva de 7-[(E)-t-butiloxiiminometil]-camptotecina que comprende hacer reaccionar en ausencia de un base orgánica y en condiciones ácidas un acetal de 7-formilcamptotecina con clorhidrato de O-t-butilhidroxilamina en un disolvente orgánico polar, prótico o aprótico.
2.

El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el disolvente orgánico polar, prótico o aprótico es un alcohol seleccionado entre el grupo consistente en etanol o metanol.
3.

El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en donde el acetal de 7-formil-camptotecina es un acetal dialquílico.
4.

El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 3, en donde el acetal de 7-formil-camptotecina es un acetal dimetílico o dietílico.
5.

El procedimiento de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la temperatura de la reacción se mantiene entre la temperatura ambiente y el punto de ebullición del disolvente.
6.

El procedimiento de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde al final de la reacción el precipitado se aísla desde la mezcla de reacción.
7.

El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 6, en donde el precipitado se aísla desde la mezcla de reacción por filtración.
8.

El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 6 o 7, que comprende adicionalmente disolver el precipitado en diclorometano, añadir un codisolvente, concentrar la solución así obtenida y permitir que el producto de la reacción precipite y cristalice.
9.

El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 8, en el que el codisolvente se selecciona entre acetona, tolueno, cloruro de n-butilo, éter metil-t-butílico o hexano, acetato de etilo, etanol, metanol.
10.

El compuesto obtenible por el procedimiento de acuerdo con las reivindicaciones 8 o 9, en donde el codisolvente es acetona y que es la forma cristalina I de 7-[(E)-t-butiloxiiminometil]-camptotecina.
11.

El compuesto obtenible por el procedimiento de acuerdo con las reivindicaciones 8 o 9, en donde el codisolvente se selecciona entre el grupo consistente en metanol y etanol y que es la forma cristalina III de 7-[(E)-tbutiloxiiminometil]-camptotecina.
12.

El compuesto obtenible por el procedimiento de acuerdo con las reivindicaciones 8 o 9, en donde el codisolvente se selecciona entre el grupo consistente en tolueno, cloruro de n-butilo, éter metil-t-butílico, hexano y acetato de etilo y que es la forma cristalina II de 7-[(E)-t-butiloxiiminometil]-camptotecina.
13.

El compuesto de acuerdo con la reivindicación 10, que presenta picos de difracción de rayos X con un ángulo de refracción de 2 Zeta (8) de 7,2, 9,2, 10,2, 12,7, 14,0, 14,7, 15,2, 16,0, 16,7, 19,7, 20,5, 20,7, 22,2, 26,5 y 32,5 ± 0,2 grados.
14.

El compuesto de acuerdo con la reivindicación 13, que tiene sustancialmente el mismo patrón de difracción de rayos X que el mostrado en la Figura 2.
15.

El compuesto de acuerdo con la reivindicación 12, que presenta picos de difracción de rayos X con un ángulo de refracción 2 Zeta (8) de 6,7, 7,2, 9,7, 11,2, 13,2, 14,5, 16,0, 16,7, 17,0, 17,5, 19,0, 21,0, 23,0, 25,5, 26,5 y 28,2 ± 0,2 grados.
16.

El compuesto de acuerdo con la reivindicación 15, que tiene sustancialmente el mismo patrón de difracción de rayos X que el mostrado en la Figura 3.
17.

El compuesto de acuerdo con la reivindicación 11, que tiene un patrón de difracción de rayos X, expresado en términos de ángulos 2 8, que presenta picos en 6,0, 7,5, 8,5, 12,3, 16,0, 17,0, 18,0, 18,2, 18,7, 23,2 y 25,2 ± 0,2 grados.
18.

El compuesto de acuerdo con la reivindicación 17, que tiene sustancialmente el mismo patrón de difracción de rayos X que el mostrado en la Figura 4.
19.

Una composición que comprende un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 10
18.
20. Una composición farmacéutica que comprende:

(a)

un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 10-18; y

(b)

al menos un vehículo y/o diluyente farmacéuticamente aceptable; y que comprende opcionalmente

(c)

uno o varios excipientes farmacéuticamente aceptables.
21.

La composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 20, que es una forma de dosificación adecuada para la administración oral.
22.

La composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 20 o 21, en donde dicha forma de dosificación se selecciona entre un comprimido, una cápsula o una solución.
23.

Uso de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 10-18, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad tumoral.