ES2348528B1 - Dispositivo y procedimiento de introduccion u obtencion de un fluido con gametos, embriones o cualquier otro tipo de solucion del interior del oviducto de una cerda. - Google Patents
Dispositivo y procedimiento de introduccion u obtencion de un fluido con gametos, embriones o cualquier otro tipo de solucion del interior del oviducto de una cerda. Download PDFInfo
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Abstract
Dispositivo de introducción de fluidos en el
interior del oviducto de una cerda.
El dispositivo comprende un sistema de
inyección, el cual está constituido por un cuerpo tubular externo
rígido (1) que permite su entrada en el interior de la cavidad
abdominal de la cerda. Este cuerpo se encuentra, a su vez, cubierto
por una funda estéril (2) que permite su utilización en diferentes
animales. De forma coaxial discurre un conducto flexible (3) cuyo
extremo distal conecta con una aguja biselada (4) que permite la
entrada en el oviducto (12) con un ángulo de 45º. El extremo
proximal del tubo flexible conecta con un dispositivo (6) que
comprende una vaina (7) cerrada por el otro extremo por un pistón
(8) que se desliza por el interior de la vaina y que permite la
introducción con precisión de líquidos con bajo volumen.
Description
Dispositivo de introducción de fluidos en el
interior del oviducto de una cerda.
La invención que se describe trata de un
dispositivo para introducir y/o recoger, por vía laparoscópica,
fluidos que pueden contener o no células, en el interior del
oviducto de un una cerda. La invención permite, con éxito, la
introducción de un bajo número de espermatozoides, embriones o
soluciones terapéuticas en el interior del oviducto en un corto
periodo de tiempo. La invención también puede ser aplicada en
cualquier otra especie animal.
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No existe ningún procedimiento en el ganado
porcino que permita, con éxito, la inseminación con un número muy
bajo de espermatozoides o la transferencia en el oviducto de
embriones a excepción del abordaje quirúrgico mediante laparotomía.
Sin embargo es un procedimiento impracticable en la producción
ganadera. El abordaje laparoscópico al aparato genital es una
técnica utilizada desde la década de 1970 en la especie humana
cuando existen trastornos en el paso de espermatozoides a través del
útero, o en especies animales donde existen problemas técnicos en el
paso de catéteres a través del cervix. Dentro (te las especies
domésticas, es en la especie ovina donde se ha producido un mayor
desarrollo. A este respecto se ha demostrado que la deposición de
espermatozoides diluidos a dosis tan bajas como 1 millón y 10
millones inseminados en el útero permite conseguir buenos resultados
de fertilidad. Además de la eficacia reproductiva, en cuanto al
pequeño número de espermatozoides a inseminar, la inseminación
laparoscópica ofrece otras ventajas. Entre éstas, está la
posibilidad de realizar, simultáneamente a la inseminación,
exploraciones del aparato genital que permiten visualizar los
cambios funcionales que experimenta, particularmente cambios en los
ovarios y, de este modo, poder detectar patologías que mediante
sistemas no quirúrgicos serian imposible abordar. También, permite
homogeneizar los resultados de fertilidad a lo largo del año, lo
cual no siempre es posible empleando otros procedimientos de
inseminación.
En el caso de la especie porcina, el
procedimiento no quirúrgico de la inseminación intrauterina profunda
permite, con éxito, depositar espermatozoides en el interior del
útero de una cerda hasta niveles tan bajos como 50 millones de
espermatozoides. También se ha probado a realizar inseminaciones
laparoscopias en el interior del cuerno uterino con al menos 20
millones de espermatozoides, alcanzando resultados variables de
fertilidad debido a las características de la pared uterina en esta
especie. Además, esta cantidad de espermatozoides impide la
inseminación de espermatozoides seleccionados por citometría de
flujo o tratados con otras tecnologías donde el número de
espermatozoides producidos por unidad de tiempo es extremadamente
bajo.
Se conoce en el estado de la técnica otros
dispositivos similares, como el descrito en el documento EP 1177776
B1 de la Universidad de Murcia, si bien la invención aquí expuesta
presenta numerosas diferencias y ventajas sobre el estado de la
técnica conocido. El dispositivo descrito en el documento EP 1177776
B1 es un dispositivo no quirúrgico que se introduce a través de la
vagina, cuello uterino, cuerpo del útero hasta alcanzar las
profundidades del cuerno uterino como localización anatómica más
profunda. El número de espermatozoides inseminados debe ser de, al
menos, de 50 millones de espermatozoides para alcanzar éxito en la
fecundación.
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La invención describe un dispositivo de
introducción de fluidos, que pueden contener o no células, en el
interior del oviducto de una cerda, que permite introducir
espermatozoides, embriones o cualquier tipo de solución terapéutica,
u obtener un fluido con o sin células (gametos -espermatozoides y/u
ovocitos- y embriones) del interior del oviducto. El dispositivo
comprende un cuerpo tubular rígido que se introduce por un trocar
laparoscópico y que permite introducir por su interior un tubo
flexible, teniendo como principales características las
siguientes:
- -
- el cuerpo tubular rígido y el tubo flexible interior son coaxiales,
- -
- el tubo flexible interior está conectado en el extremo proximal a una aguja biselada,
- -
- el tubo flexible permite la entrada de la aguja biselada en el oviducto, con un ángulo de 45º,
- -
- el extremo distal del tubo flexible queda conectado por una(s) vaina(s) cerrada(s) por un(os) pistón(es), que se desliza(n) por el interior de la(s) vaina(s), y que permite(n) la introducción con precisión de fluidos con bajo volumen.
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El cuerpo tubular del dispositivo de
introducción de fluidos en el interior del oviducto de una cerda se
encuentra, a su vez, cubierto por una funda estéril. En una
configuración alternativa, dicha funda estéril es desechable.
\newpage
En otra configuración alternativa, el extremo
distal del tubo flexible del dispositivo descrito queda conectado a
dos vainas, cerradas por sendos pistones, que se deslizan por el
interior de las vainas, estando conectadas las dos vainas al tubo
flexible por una llave doble, que permite alternativamente el paso
de los fluidos contenidos en cada vaina.
La evacuación del dispositivo se produce
mediante el desanclaje de la(s) vaina(s), retirando la
aguja biselada en la luz del cuerpo tubular rígido.
La invención también describe un procedimiento
de introducción de fluidos, con o sin células, en el interior del
oviducto de una cerda empleando el dispositivo objeto de la
invención. El procedimiento permite introducir espermatozoides,
embriones o cualquier tipo de solución terapéutica en el interior
del oviducto de la cerda, o bien obtener gametos (espermatozoides
y/u ovocitos), embriones o cualquier tipo de solución desde el
interior del oviducto de la cerda. En dicho procedimiento se
introduce ja el dispositivo en el interior del oviducto de la cerda
en la región proximal de la ampolla oviductal, a partir del cual se
dispensa suavemente y sin dificultad los gametos, embriones y/o
soluciones.
En dicho procedimiento de introducción de un
fluido con espermatozoides, embriones o soluciones terapéuticas en
el interior del oviducto de una cerda, la aguja biselada de
inyección está orientada desde la ampolla del oviducto hacia el
istmo del oviducto.
Este procedimiento de introducción de fluidos,
con o sin células, en el interior del oviducto de una cerda, permite
comprobar la correcta visualización de la inoculación mediante la
dilatación temporal de las paredes del oviducto.
También se describe un procedimiento de
transferencia de embriones en estadio desde zigoto a 4 blastómeros
en el interior del oviducto de una cerda, que utiliza un dispositivo
con un sistema de doble vaina que permite la introducción
independiente de los fluidos contenidos en cada una de dichas
vainas.
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A continuación, para facilitar una mejor
comprensión de esta memoria descriptiva, y formando parte integrante
de la misma, se acompañan una serie de figuras en las que con
carácter ilustrativo y no limitativo se ha representado el objeto de
la invención.
La figura 1 muestra en una vista en alzado
lateral del dispositivo de la invención, en la que aparecen los
distintos componentes que lo constituyen.
La figura 2 es una vista en alzado lateral del
dispositivo de la invención adaptado a la transferencia de
embriones.
La figura 3 ilustra una representación
esquemática del dispositivo de la invención en situación de trabajo
dentro de la cavidad abdominal de una cerda.
En las figuras, las siguientes referencias
numéricas están relacionadas con los correspondientes elementos que
a continuación se mencionan:
- 1 -
- Cuerpo tubular rígido.
- 2 -
- Funda estéril.
- 3 -
- Tubo flexible.
- 4 -
- Aguja biselada.
- 5 -
- Ampolla oviductal.
- 6 -
- Dispositivo vaina/pistón.
- 7 -
- Vaina.
- 8 -
- Pistón.
- 9 -
- Extremo posterior del tubo flexible (3).
- 10 -
- Sistema de visión.
- 11 -
- Pinza.
- 12 -
- Oviducto.
- 13 -
- Doble vaina.
- 14 -
- Doble llave.
- 15 -
- Primera vaina.
- 16 -
- Segunda vaina.
\vskip1.000000\baselineskip
Para resolver los inconvenientes indicados en
los antecedentes, la invención desarrolla un nuevo dispositivo y
procedimiento que permite, con la cerda en posición Trendelenburg y
bajo anestesia general, introducir un fluido, con o sin células, en
el interior del oviducto, lugar donde se produce la fecundación.
Para ello, el procedimiento de la invención
comprende una cirugía menor realizada bajo anestesia general con una
incisión a nivel umbilical de 2 cm. A través de ella se introduce
un trocar con visión directa para comenzar a realizar el
neumoperitoneo. Posteriormente se introduce CO_{2} para realizar
el neumoperitoneo a una presión de 2 atmósferas a través de un tubo
de 2 mm de diámetro que finaliza en el trocar. La introducción del
gas se realiza en un tiempo máximo de 10-15
segundos.
La invención está constituida por un cuerpo
tubular rígido (1) por cuyo interior discurre un tubo flexible (3)
cuya base queda conectada a una aguja biselada (4). El otro extremo
queda conectado a un dispositivo (6) que comprende una vaina cerrada
(7) por un pistón (8) que se desliza por el interior de la vaina (7)
y que permite la introducción con precisión de líquidos con bajo
volumen. Este cuerpo (1) se encuentra, a su vez, cubierto por una
funda estéril (2) que permite su utilización en diferentes animales;
dicha funda estéril (2) puede ser desechable. Las características de
flexibilidad del tubo y diámetro y longitud de la aguja descrita
anteriormente, posibilitan que los fluidos, con o sin células, sean
depositados con certeza en el interior del oviducto (12). Además,
la dilatación de las paredes oviductales en el tiempo de
inseminación confirma la correcta deposición del fluido.
Para proceder a la introducción del fluido, o su
posible extracción según el caso, el animal es sometido a lo que se
conoce como un procedimiento quirúrgico de mínima invasión. Para
ello, como ya se ha indicado, a la cerda en posición Trendelenburg y
bajo anestesia general, se le realiza una incisión de unos 2 cm de
longitud sobre la piel a nivel abdominal. Tras la introducción de un
sistema de visión (10), como el que se ilustra en la figura 3, se
procede a introducir en la cavidad abdominal del animal una cantidad
suficiente de CO_{2} que permita la visualización de los órganos.
Este proceso de introducción de gas se realiza de forma directa a
una presión de unas 2 atmósferas. Una vez verificado el estado del
interior de la cavidad abdominal se procede a introducir dos
trocares accesorios en los flancos del animal que servirán, el
primero de ellos, para introducir una pinza no traumática (11) para
asistir en la manipulación y sujeción del oviducto (12). El segundo
trocar sirve para introducir el instrumento específico de la
invención.
El instrumento para inseminar, transferir
embriones o introducir fluidos y necesario para llevar a la práctica
el procedimiento, consiste en un sistema de inyección, el cual está
constituido por un cuerpo tubular externo rígido (1) que, ajustando
al trocar existente, permite su entrada en el interior de la cavidad
abdominal de la cerda. Este cuerpo tubular (1) se encuentra, a su
vez, cubierto por una funda estéril (2) que permite su utilización
en diferentes animales. De forma coaxial discurre un conducto
flexible (3) cuyo extremo proximal conecta con una aguja biselada
(4) que permite la entrada con un ángulo de 45º en el oviducto (12),
y más concretamente en las proximidades de la ampolla oviductal (5).
El extremo distal del tubo flexible conecta con un dispositivo que
comprende una vaina (7), cerrada por el otro extremo por un pistón
(8) que se desliza por el interior de la vaina (7), y que permite la
introducción con precisión de líquidos con bajo volumen.
Cuando el aparato se emplea en el modo de
inseminación con muy bajo número de espermatozoides, se procede al
llenado del dispositivo vaina/pistón (6) que comprende la vaina
cerrada (7) por el pistón (8), que se desliza por el interior de la
vaina (7), y que permite la introducción con precisión de líquidos
con bajo volumen. Una vez llenado el dispositivo vaina/pistón (6),
se conecta al extremo posterior del tubo flexible (3) coaxial al
cuerpo tubular rígido (1), procediéndose a su llenado. El conjunto
se introduce por el trocar dispuesto para este fin hasta que el
extremo anterior del cuerpo tubular rígido (1) se encuentra en las
proximidades de la ampolla oviductal (5), procediendo al
desplazamiento del tubo flexible coaxial (3) hasta el total anclaje
de la vaina (7) situada en el extremo posterior (9) del tubo
flexible en el cuerpo tubular rígido (1). Este conjunto permite la
fácil introducción de la aguja biselada (4) en la luz oviductal,
adoptando un acceso angular de 45º.
El punto de acceso al oviducto debe realizase en
la ampolla oviductal (5), orientando el extremo de la aguja hacia el
istmo del oviducto (12) tal y como se representa en la figura 3. Las
características del dispositivo disminuyen el riesgo de accidentes
por perforación de la pared opuesta del oviducto. Una vez se
encuentra comunicado el tubo flexible (3) con la ampolla oviductal
(5) a través de la aguja (4), se procede a desplazar el pistón (8)
sobre la vaina (7), dispensando el volumen de fluido preestablecido.
Se verifica la correcta dispensación del fluido mediante la
observación de una dilatación temporal de las paredes del oviducto
(12) en general y de la ampolla oviductal (5) en particular.
La evacuación del sistema se produce mediante el
desanclaje de la vaina (7) que permite ocultar la aguja biselada (4)
dentro del cuerpo tubular rígido (1), evitando posibles accidentes
en áreas adyacentes. La recuperación de la cerda se produce en los
minutos posteriores. El empleo de este procedimiento permite repetir
las inseminaciones en una misma hembra en ciclos sucesivos.
Cuando el dispositivo se utiliza en el modo de
transferencia de embriones, el sistema incluye dos vainas, una
primera vaina (15) y una segunda vaina (16), cerrada cada una por su
correspondiente pistón, y conectadas al tubo flexible (3) mediante
un sistema de doble llave (14), tal y como puede apreciarse en la
figura 2; en este caso la funda estéril (2) no ha sido
representada. Se procede al llenado del tubo flexible (3) mediante
la apertura que conecta la vaina que contiene solo el medio de
transferencia de embriones, que está contenido por ejemplo en la
primera vaina (15). Tal y como puede apreciarse en la figura 3, el
dispositivo se introduce por el trocar dispuesto para este fin
hasta que el extremo anterior del cuerpo tubular rígido (1) se
encuentra en las proximidades de la ampolla oviductal (5),
procediendo al desplazamiento del tubo flexible (3) coaxial hasta el
total anclaje del sistema de doble vaina y que está situada en el
extremo posterior del tubo flexible (3) en el cuerpo tubular rígido
(1).
A continuación se procede al cierre de la vaina
que contiene el medio de transferencia de embriones, por ejemplo la
primera vaina (15), y a la apertura de la vaina que contiene los
embriones, por ejemplo la segunda vaina (16), que van a ser
transferidos en un volumen total de 100-200 \mul.
Los embriones a transferir deben estar comprendidos entre el
estadio de desarrollo de zigoto y el de 4 blastómeros. El punto de
acceso al oviducto debe realizase en la ampolla oviductal (5)
orientando el extremo de la aguja (4) hacia el istmo del oviducto
(12). Las características del dispositivo disminuyen el riesgo de
accidentes por perforación de la pared opuesta del oviducto.
Una vez se encuentra el tubo flexible (3)
comunicado con la luz del oviducto a través de la aguja (4), se
procede a desplazar el pistón (8) sobre la vaina que contiene los
embriones, por ejemplo la segunda vaina (16), dispensando el volumen
de fluido contenido en su interior. Se verifica la correcta
dispensación del fluido mediante la observación de una dilatación
temporal de las paredes de la ampolla oviductal (5). A continuación,
se procede al cierre de la vaina que contenía los embriones, por
ejemplo la segunda vaina (16), y a la apertura de la vaina que
contiene el medio de transferencia de embriones, por ejemplo la
primera vaina (15), con el fin de dispensar un volumen adicional
de
100 \mul que permita el desplazamiento de los embriones de la luz del tubo flexible (3) hacia el interior del oviducto (12). La evacuación del sistema se produce mediante el desanclaje del sistema de doble vaina, que permite ocultar la aguja biselada (4) en la luz del cuerpo tubular rígido (1), evitando posibles accidentes en áreas adyacentes. La recuperación de la cerda se produce en los minutos posteriores. Este procedimiento permite repetir las transferencias en una misma hembra en ciclos sucesivos.
100 \mul que permita el desplazamiento de los embriones de la luz del tubo flexible (3) hacia el interior del oviducto (12). La evacuación del sistema se produce mediante el desanclaje del sistema de doble vaina, que permite ocultar la aguja biselada (4) en la luz del cuerpo tubular rígido (1), evitando posibles accidentes en áreas adyacentes. La recuperación de la cerda se produce en los minutos posteriores. Este procedimiento permite repetir las transferencias en una misma hembra en ciclos sucesivos.
Claims (4)
1. Dispositivo de introducción de fluidos en el
interior del oviducto de una cerda, que permite introducir un fluido
con espermatozoides, embriones o cualquier tipo de solución
terapéutica, u obtener un fluido con o sin células (gametos
-espermatozoides y/u ovocitos- y/o embriones) del interior del
oviducto, que comprende un cuerpo tubular rígido (1) que se
introduce por un trocar laparoscópico y que permite introducir por
su interior un tubo flexible (3), caracterizado por que:
- -
- el cuerpo tubular rígido (1) y el tubo flexible (3) interior son coaxiales,
- -
- el tubo flexible (3) interior está conectado en el extremo proximal a una aguja biselada (4),
- -
- el tubo flexible (3) permite la entrada de la aguja biselada (4) en el oviducto (12) con un ángulo de 45º,
- -
- el extremo distal del tubo flexible (3) queda conectado por una(s) vaina(s) ((15), (16)) cerrada(s) por un(os) pistón(es) (8), que se desliza(n) por el interior de la(s) vaina(s) (7) ((15), (16)), y que permite(n) la introducción con precisión de fluidos con bajo volumen.
\vskip1.000000\baselineskip
2. Dispositivo de introducción de fluidos, con o
sin células, en el interior del oviducto de una cerda según lo
descrito en la reivindicación 1 caracterizado por que el
cuerpo tubular (1) se encuentra, a su vez, cubierto por una funda
estéril (2).
3. Dispositivo de introducción de fluidos, con o
sin células, en el interior del oviducto de una cerda según lo
descrito en la reivindicación 2 caracterizado por qué la
funda estéril (2) es desechable.
4. Dispositivo de introducción de fluidos, con o
sin células, en el interior del oviducto de una cerda según lo
descrito en cualquiera de las reivindicaciones anteriores
caracterizado por que el extremo distal del tubo flexible (3)
queda conectado a dos vainas (15), (16), cerradas por sendos
pistones (8), que se deslizan por el interior de las vainas (15),
(16), estando conectadas las dos vainas (15), (16) al tubo flexible
(3) por una llave doble (14), que permite alternativamente el paso
de los fluidos contenidos en cada vaina (15), (16).
Priority Applications (18)
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