WO2010034871A1 - Dispositivo y procedimiento de introducción u obtención de un fluido con gametos, embriones o cualquier otro tipo de solución del interior del oviducto de una cerda - Google Patents

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sow
embryos
allows
sheath
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Juan María VÁZQUEZ ROJAS
Emilio MARTÍNEZ GARCÍA
José Luis VÁZQUEZ ROJAS
Jorge Roca Aleu
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Universidad De Murcia
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    • A61B17/3478—Endoscopic needles, e.g. for infusion

Definitions

  • the invention described is a device for introducing and / or collecting, laparoscopically, fluids that may or may not contain cells, inside the oviduct of a sow.
  • the invention allows, with success, the introduction of a low number of sperm, embryos or therapeutic solutions in e! inside the oviduct in a short period of time.
  • the invention can also be applied in any other animal species.
  • laparoscopic insemination offers other advantages. Among these, is the possibility of performing, simultaneously with the insemination, explorations of the genital apparatus that allow visualizing the functional changes that it undergoes, particularly changes in the ovaries and, in this way, to be able to detect pathologies that by means of non-surgical systems would be impossible to address. It also allows to homogenize the fertility results throughout the year, which is not always possible using other insemination procedures.
  • the non-surgical procedure of deep intrauterine insemination allows, successfully, to deposit sperm inside the uterus of a sow to levels as low as 50 million sperm
  • Laparoscopic inseminations have also been tested in the interior of the uterine horn with at least 20 million sperm, reaching variable fertility results due to the characteristics of the uterine wall in this species.
  • this amount of sperm prevents the insemination of sperm selected by flow cytometry or treated with other technologies where the number of sperm produced per unit of time is extremely low.
  • EP 1177776 B1 of the University of Murcia Other similar devices are known in the state of the art, such as that described in EP 1177776 B1 of the University of Murcia, although the invention set forth herein has numerous differences and advantages over the state of the known technique.
  • the device described in EP 1177775 ⁇ -j is a non-surgical device that is introduced through the vagina, cervix, body of the uterus until reaching the depths of the uterine horn as deeper anatomical localization, the number of inseminated sperm must be of at least 50 million sperm to achieve success in fertilization.
  • the invention describes a device for introducing fluids, which may or may not contain cells, inside the oviduct of a sow, which allows sperm, embryos or any type of therapeutic solution to be introduced, or to obtain a fluid with or without cells (gametes - sperm and / or oocytes - and embryos) inside the oviduct.
  • the device comprises a rigid tubular body that is introduced by a laparoscopic trocar and which allows to introduce a flexible tube inside, having the following main characteristics: the rigid tubular body and the inner flexible tube are coaxial, - the inner flexible tube is connected at the proximal end to a bevel needle,
  • the flexible tube allows the entry of the beveled needle into the oviduct, at an angle of 45 °, the distal end of the flexible tube is connected by a sheath (s) closed (s) by a piston (s) ( es), which slides (n) through the interior of the sheath (s), and which allows (n) the precise introduction of fluids with low volume.
  • Tubular body of the fluid introduction device inside the oviduct of a sow is, in turn, covered by a sterile sheath.
  • said sterile cover is disposable.
  • the distal end of the flexible tube of the described device is connected to two sheaths, closed by two pistons, which slide inside the sheaths, the two sheaths being connected to the flexible tube by a double wrench, which allows alternatively the passage of the fluids contained in each pod.
  • the evacuation of the device is produced by the disassembly of the sheath (s), removing the beveled needle in the light of the rigid tubular body.
  • the invention also describes a method of introducing fluids, with or without cells, into the oviduct of a sow using e! device object of the invention.
  • the procedure allows sperm, embryos or any type of therapeutic solution to be introduced inside the sow's oviduct, or to obtain gametes (sperm and / or oocytes), embryos or any type of solution from inside the oviduct of the sow.
  • the device is introduced into the oviduct of the sow in the proximal region of the oviductal ampoule, from which the gametes, embryos and / or solutions are gently and easily dispensed.
  • the bevel injection needle is oriented from the ampoule of! oviduct towards the isthmus of the oviduct.
  • This procedure of introduction of fluids, with or without cells, inside the oviduct of a sow, allows to verify the correct visualization of the inoculation by means of the temporary dilation of the walls of the oviduct.
  • Figure 1 shows in an elevation view of the device of the invention, in which the different components that constitute it appear.
  • Figure 2 is a side elevational view of the device of the invention adapted to embryo transfer.
  • Figure 3 illustrates a schematic representation of! device of the invention in a working situation within the abdominal cavity of a sow.
  • the invention develops a new device and procedure that allows, with the sow in position Trendelenburg and under general anesthesia, introduce a fluid, with or without cells, inside the oviduct, where the fertilization occurs.
  • the method of the invention comprises a minor surgery performed under general anesthesia with an umbilical incision of 2 crn. Through it, a trocar with direct vision is introduced to start the pneumoperitoneum. Subsequently, CO 2 is introduced to perform the pneumoperitoneum at a pressure of 2 atmospheres through a 2 mm diameter tube that ends at the trocar. The gas is introduced in a maximum time of 10-15 seconds.
  • the invention is constituted by a rigid tubular body (1) through which there is a flexible tube (3) whose base is connected to a beveled needle (4). The other end is connected to a device (6) comprising a closed sheath ⁇ 7) by a piston (8) that slides inside the sheath (7) and which allows the introduction of liquids with low volume with precision.
  • This body (1) is, in turn, covered by a sterile cover (2) that allows its use in different animals; said sterile cover (2) can be disposable.
  • the flexibility characteristics of the tube and diameter and length of the needle described above allow fluids, with or without cells, to be deposited with certainty inside the oviduct (12). In addition, the expansion of the oviductal walls at the time of insemination confirms the correct deposition of the fluid.
  • the animal is subjected to what is known as a minimally invasive surgical procedure.
  • a minimally invasive surgical procedure For this, as already indicated, the sow in Trendelenburg position and under general anesthesia !, an incision of about 2 cm in length is made on the skin at the abdominal level.
  • a vision system (10) like the one illustrated in Figure 3, the abdominal cavity is introduced! of the animal a sufficient amount of CO 2 that allows the visualization of the organs.
  • This gas introduction process is carried out directly at a pressure of about 2 atmospheres.
  • two accessory trocars are introduced into the flanks of the animal that will serve, the first one, to introduce a non-traumatic clamp (11) to assist in the manipulation and holding of the oviduct ( 12).
  • the second trocar serves to introduce the specific instrument of the invention.
  • the instrument to inseminate, transfer embryos or introduce fluids and necessary to carry out the procedure consists of an injection system, which is constituted by a rigid external tubular body (1) that, adjusting to the existing trocar, allows its entry into the abdominal cavity of the sow.
  • This tubular body (1) is, in turn, covered by a sterile sheath (2) that allows its use in different animals.
  • the distal end of the flexible tube connects with a device comprising a sheath (7), closed at the other end by a piston (8) that slides inside the sheath (7), and which allows the introduction with precision of low volume liquids
  • the sheath / piston device (6) comprising the sheath closed (7) by the piston (8), which slides along the inside the sheath (7), and that allows the introduction with precision of liquids with low volume.
  • This set allows the easy introduction of the beveled needle (4) into the oviductal light, adopting an angular access of 45 °.
  • the access point to the oviduct should be made in the oviductal ampoule (5), orienting the end of the needle towards the isthmus of the oviduct (12) as shown in Figure 3.
  • the characteristics of the device decrease the risk of
  • the evacuation of the system is produced by the disassembly of the sheath (7) that allows hiding the beveled needle (4) inside the rigid tubular body (1), avoiding possible accidents in adjacent areas, The recovery of the sow occurs in minutes later.
  • the use of this procedure allows repeating the
  • the system includes two sheaths, a first sheath (15) and a second sheath (16), each closed by its corresponding piston, and connected to the flexible tube (3) by a key dobie system (14), as can be seen in Figure 2;
  • the sterile sheath (2) has not been represented.
  • the flexible tube (3) is filled by means of the opening that connects the sheath that contains only the embryo transfer medium, which is contained for example in the first sheath (fifteen).
  • the device is introduced by the trocar arranged for this purpose until e!
  • anterior end of the rigid tubular body (1) is located in the vicinity of the oviductal ampoule (5), proceeding to the displacement of! flexible tube (3) coaxial to the total anchorage of the double sheath system and which is located at the rear end of the flexible tube (3) in the rigid tubular body (1).
  • the sheath containing the embryo transfer medium is closed, for example the first sheath (15), and the opening of the sheath containing the embryos, for example the second sheath (16), which are going to Be transferred in a tota volume! 100-200 ⁇ l.
  • the embryos to be transferred must be between the zygote development stage and that of 4 blastomeres.
  • the oviduct access point must be made in the oviductal ampoule (5), pointing the end of the needle (4) towards the isthmus of the oviduct (12). The characteristics of the device reduce the risk of accidents due to perforation of the opposite wall of the oviduct.
  • the piston (8) is moved on the sheath that contains the embryos, for example the second sheath (16) , dispensing the volume of fluid contained inside.
  • the correct dispensing of! fluid by observing a temporary dilation of the walls of the oviductal blister (5).
  • the sheath containing the embryos is closed, for example the second sheath (16), and the opening of the sheath containing the embryo transfer medium, for example the first sheath (15), with the In order to dispense an additional volume of 100 ⁇ ! that allows the movement of the embryos of the flexible tube light (3) towards e! interior of the oviduct (12).
  • the evacuation of the system is produced by the disassembly of the double sheath system, which allows hiding the beveled needle (4) in the light of the rigid tubular body (1), avoiding possible accidents in adjacent areas.
  • the recovery of the sow occurs in the subsequent minutes. This procedure allows repeating transfers in the same female in successive cycles.

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Abstract

El dispositivo comprende un sistema de inyección, el cual está constituido por un cuerpo tubular externo rígido (1 ) que permite su entrada en el interior de la cavidad abdominal de la cerda. Este cuerpo se encuentra, a su vez, cubierto por una funda estéril (2) que permite su utilización en diferentes animales. De forma coaxial discurre un conducto flexible (3) cuyo extremo distal conecta con una aguja biselada (4) que permite la entrada en el oviducto (12) con un ángulo de 45°. El extremo proximal del tubo flexible conecta con un dispositivo (6) que comprende una vaina (7) cerrada por el otro extremo por un pistón (8) que se desliza por el interior de la vaina y que permite la introducción con precisión de líquidos con bajo volumen.

Description

Dispositivo y procedimiento de introducción u obtención de un fluido con gametos, embriones o cualquier otro tipo de solución del interior del oviducto de una cerda
Objeto y campo técnico de Ia invención
La invención que se describe trata de un dispositivo para introducir y/o recoger, por vía laparoscópica, fluidos que pueden contener o no células, en el interior del oviducto de un una cerda. La invención permite, con éxito, Ia introducción de un bajo número de espermatozoides, embriones o soluciones terapéuticas en e! interior del oviducto en un corto periodo de tiempo. La invención también puede ser aplicada en cualquier otra especie animal.
Antecedentes de Ia invención
No existe ningún procedimiento en el ganado porcino que permita, con éxito, Ia inseminación con un número muy bajo de espermatozoides o Ia transferencia en el oviducto de embriones a excepción del abordaje quirúrgico mediante laparotomía. Sin embargo es un procedimiento impracticable en Ia producción ganadera. El abordaje laparoscópico a! aparato genital es una técnica utilizada desde ia década de 1970 en la especie humana cuando existen trastornos en e! paso de espermatozoides a través del útero, o en especies anímales donde existen problemas técnicos en el paso de catéteres a través de! cervix. Dentro de las especies domésticas, es en la especie ovina donde se ha producido un mayor desarrollo. A este respecto se ha demostrado que Ia deposición de espermatozoides diluidos a dosis tan bajas como 1 millón y 10 millones inseminados en el útero permite conseguir buenos resultados de fertilidad. Además de Ia eficacia reproductiva, en cuanto al pequeño número de espermatozoides a inseminar, Ia inseminación laparoscópica ofrece otras ventajas. Entre éstas, está Ia posibilidad de realizar, simultáneamente a Ia inseminación, exploraciones del aparato genital que permiten visualizar los cambios funcionales que experimenta, particularmente cambios en los ovarios y, de este modo, poder detectar patologías que mediante sistemas no quirúrgicos serían imposible abordar. También, permite homogeneizar los resultados de fertilidad a Io largo del año, Io cual no siempre es posible empleando otros procedimientos de inseminación.
En el caso de ¡a especie porcina, el procedimiento no quirúrgico de Ia inseminación intrauterina profunda permite, con éxito, depositar espermatozoides en el interior del útero de una cerda hasta niveles tan bajos como 50 millones de espermatozoides. También se ha probado a realizar inseminaciones laparoscopias en el interior del cuerno uterino con al menos 20 millones de espermatozoides, alcanzando resultados variables de fertilidad debido a las características de la pared uterina en esta especie. Además, esta cantidad de espermatozoides impide Ia inseminación de espermatozoides seleccionados por citometría de flujo o tratados con otras tecnologías donde el número de espermatozoides producidos por unidad de tiempo es extremadamente bajo.
Se conoce en el estado de Ia técnica otros dispositivos similares, como el descrito en el documento EP 1177776 B1 de Ia Universidad de Murcia, si bien Ia invención aquí expuesta presenta numerosas diferencias y ventajas sobre el estado de Ia técnica conocido. El dispositivo descrito en el documento EP 1177775 β-j es un dispositivo no quirúrgico que se introduce a través de Ia vagina, cuello uterino, cuerpo del útero hasta alcanzar las profundidades del cuerno uterino como locaiización anatómica más profunda, Ei número de espermatozoides inseminados debe ser de, al menos, de 50 millones de espermatozoides para alcanzar éxito en Ia fecundación.
Descripción de Ia invención
La invención describe un dispositivo de introducción de fluidos, que pueden contener o no células, en el interior del oviducto de una cerda, que permite introducir espermatozoides, embriones o cualquier tipo de solución terapéutica, u obtener un fluido con o sin células (gametos -espermatozoides y/u ovocitos-- y embriones) del interior del oviducto. El dispositivo comprende un cuerpo tubular rígido que se introduce por un trocar laparoscópico y que permite Introducir por su interior un tubo flexible, teniendo como principales características las siguientes: el cuerpo tubular rígido y ei tubo flexible interior son coaxiales, - el tubo flexible interior está conectado en el extremo proximal a una aguja biselada,
- el tubo flexible permite Ia entrada de ia aguja biselada en el oviducto, con un ángulo de 45°, el extremo distal del tubo flexible queda conectado por una(s) vaina(s) cerrada(s) por un(os) pistón(es), que se desliza(n) por ei interior de la(s) vaina(s), y que permite(n) la introducción con precisión de fluidos con bajo volumen. E! cuerpo tubular del dispositivo de introducción de fluidos en el interior del oviducto de una cerda se encuentra, a su vez, cubierto por una funda estéril. En una configuración alternativa, dicha funda estéril es desechable.
En otra configuración alternativa, el extremo distal del tubo flexible deí dispositivo descrito queda conectado a dos vainas, cerradas por sendos pistones, que se deslizan por el interior de las vainas, estando conectadas las dos vainas ai tubo flexible por una llave doble, que permite alternativamente el paso de los fluidos contenidos en cada vaina.
La evacuación del dispositivo se produce mediante el desanclaje de la(s) vaina(s), retirando Ia aguja biselada en Ia luz del cuerpo tubular rígido.
La invención también describe un procedimiento de introducción de fluidos, con o sin células, en el interior del oviducto de una cerda empleando e! dispositivo objeto de Ia invención, El procedimiento permite introducir espermatozoides, embriones o cualquier tipo de solución terapéutica en el interior del oviducto de Ia cerda, o bien obtener gametos (espermatozoides y/u ovocitos), embriones o cualquier tipo de solución desde el interior del oviducto de Ia cerda. En dicho procedimiento se introduce el dispositivo en el interior del oviducto de Ia cerda en la región proximal de Ia ampolla oviductal, a partir del cual se dispensa suavemente y sin dificultad los gametos, embriones y/o soluciones. En dicho procedimiento de introducción de un fluido con espermatozoides, embriones o soluciones terapéuticas en el interior del oviducto de una cerda, Ia aguja biselada de inyección está orientada desde Ia ampolla de! oviducto hacia el istmo del oviducto.
Este procedimiento de introducción de fluidos, con o sin células, en el interior del oviducto de una cerda, permite comprobar Ia correcta visuaiización de Ia inoculación mediante Ia dilatación temporal de las paredes del oviducto.
También se describe un procedimiento de transferencia de embriones en estadio desde zigoto a 4 blastómeros en el interior del oviducto de una cerda, que utiliza un dispositivo con un sistema de doble vaina que permite Ia introducción independiente de los fluidos contenidos en cada una de dichas vainas.
Breve descripción de los dibujos
A continuación, para facilitar una mejor comprensión de esta memoria descriptiva, y formando parte integrante de Ia misma, se acompañan una serie de figuras en ias que con carácter ilustrativo y no limitativo se ha representado el objeto de ia invención.
La figura 1 muestra en una vista en alzado iateraí dei dispositivo de ía invención, en Ia que aparecen los distintos componentes que Io constituyen. La figura 2 es una vista en alzado lateral del dispositivo de Ia invención adaptado a ía transferencia de embriones.
La figura 3 ilustra una representación esquemática de! dispositivo de Ia invención en situación de trabajo dentro de Ia cavidad abdominal de una cerda.
En las figuras, las siguientes referencias numéricas están relacionadas con los correspondientes elementos que a continuación se mencionan:
1 - Cuerpo tubular rígido.
2 - Funda estéril.
3 - Tubo flexible.
4 - Aguja biselada. 5 - Ampolla oviductal.
6 - Dispositivo vaina/pistón.
7 - Vaina.
8 - Pistón.
9 - Extremo posterior del tubo flexible (3). 10 - Sistema de visión.
1 1 - Pinza. 12 - Oviducto. 13 - Doble vaina. 14 - Doble llave. 15 - Primera vaina.
16 - Segunda vaina. Descripción de Ia forma de realización preferente de Ia invención
Para resolver los inconvenientes indicados en ios antecedentes, Ia invención desarrolla un nuevo dispositivo y procedimiento que permite, con Ia cerda en posición Trendelenburg y bajo anestesia general, introducir un fluido, con o sin céluias, en el interior del oviducto, íugar donde se produce Ia fecundación.
Para ello, eí procedimiento de Ia invención comprende una cirugía menor realizada bajo anestesia general con una incisión a nivel umbilical de 2 crn. A través de ella se introduce un trocar con visión directa para comenzar a realizar el neumoperitoneo. Posteriormente se introduce CO2 para realizar el neumoperitoneo a una presión de 2 atmósferas a través de un tubo de 2 mm de diámetro que finaliza en el trocar. La introducción del gas se realiza en un tiempo máximo de 10-15 segundos.
La invención está constituida por un cuerpo tubular rígido (1) por cuyo interior discurre un tubo flexible (3) cuya base queda conectada a una aguja biselada (4). El otro extremo queda conectado a un dispositivo (6) que comprende una vaina cerrada {7) por un pistón (8) que se desliza por el interior de Ia vaina (7) y que permite Ia introducción con precisión de líquidos con bajo volumen. Este cuerpo (1) se encuentra, a su vez, cubierto por una funda estéril (2) que permite su utilización en diferentes animales; dicha funda estéril (2) puede ser desechable. Las características de flexibilidad del tubo y diámetro y longitud de Ia aguja descrita anteriormente, posibilitan que los fluidos, con o sin células, sean depositados con certeza en el interior del oviducto (12). Además, Ia dilatación de las paredes oviductales en el tiempo de inseminación confirma Ia correcta deposición del fluido. Para proceder a Sa introducción del fluido, o su posible extracción según el caso, el animal es sometido a Io que se conoce como un procedimiento quirúrgico de mínima invasión. Para ello, como ya se ha indicado, a Ia cerda en posición Trendelenburg y bajo anestesia genera!, se Ie realiza una incisión de unos 2 cm de longitud sobre Ia piel a nivel abdominal. Tras Ia introducción de un sistema de visión (10), como el que se ilustra en Ia figura 3, se procede a introducir en Ia cavidad abdomina! del animal una cantidad suficiente de CO2 que permita la visualización de los órganos. Este proceso de introducción de gas se realiza de forma directa a una presión de unas 2 atmósferas. Una vez verificado el estado del interior de Ia cavidad abdominal se procede a introducir dos trocares accesorios en los flancos del animal que servirán, el primero de ellos, para introducir una pinza no traumática (11) para asistir en Ia manipulación y sujeción del oviducto (12). El segundo trocar sirve para introducir el instrumento específico de Ia invención.
El instrumento para inseminar, transferir embriones o introducir fluidos y necesario para llevar a Ia práctica el procedimiento, consiste en un sistema de inyección, el cual está constituido por un cuerpo tubular externo rígido (1) que, ajustando al trocar existente, permite su entrada en el interior de Ia cavidad abdominal de Ia cerda. Este cuerpo tubular (1 ) se encuentra, a su vez, cubierto por una funda estéril (2) que permite su utilización en diferentes animales. De forma coaxial discurre un conducto flexible (3) cuyo extremo proxímal conecta con una aguja biselada (4) que 5 permite Ia entrada con un ángulo de 45° en el oviducto (12), y más concretamente en las proximidades de Ia ampolla oviductal (5). El extremo distal del tubo flexible conecta con un dispositivo que comprende una vaina (7), cerrada por el otro extremo por un pistón (8) que se desliza por el interior de Ia vaina (7), y que permite Ia introducción con precisión de líquidos con bajo volumen.
I O Cuando el aparato se emplea en el modo de inseminación con muy bajo número de espermatozoides, se procede al llenado del dispositivo vaina/pistón (6) que comprende Ia vaina cerrada (7) por el pistón (8), que se desliza por el interior de Ia vaina (7), y que permite Ia introducción con precisión de líquidos con bajo volumen. Una vez llenado el dispositivo vaina/pistón (6), se conecta al extremo posterior dei tubo
15 flexible (3) coaxial ai cuerpo tubular rígido (1), procediéndose a su llenado. El conjunto se introduce por el trocar dispuesto para este fin hasta que ei extremo anterior del cuerpo tubular rígido (1) se encuentra en las proximidades de Ia ampolla oviducta! (5), procediendo al desplazamiento del tubo flexible coaxial (3) hasta el total anclaje de Ia vaina (7) situada en el extremo posterior (9) del tubo flexible en e! cuerpo tubular rígido
20 (1). Este conjunto permite la fácil introducción de Ia aguja biselada (4) en la luz oviductal, adoptando un acceso angular de 45°.
El punto de acceso al oviducto debe realizase en Ia ampolla oviductal (5), orientando el extremo de Ia aguja hacia el istmo del oviducto (12) tal y como se representa en Ia figura 3. Las características del dispositivo disminuyen el riesgo de
25 accidentes por perforación de Ia pared opuesta de! oviducto. Una vez se encuentra comunicado el tubo flexible (3) con Ia ampolla oviductal (5) a través de Ia aguja (4), se procede a desplazar ei pistón (8) sobre Ia vaina (7), dispensando el volumen de fluido preestablecido. Se verifica la correcta dispensación del fluido mediante Ia observación de una dilatación temporal de las paredes del oviducto (12) en general y de Ia ampolla
30 oviductai (5) en particular.
La evacuación del sistema se produce mediante el desanclaje de Ia vaina (7) que permite ocultar Ia aguja biselada (4) dentro del cuerpo tubular rígido (1 ), evitando posibles accidentes en áreas adyacentes, La recuperación de Ia cerda se produce en los minutos posteriores. El empleo de este procedimiento permite repetir las
35 inseminaciones en una misma hembra en ciclos sucesivos. Cuando eí dispositivo se utiliza en el modo de transferencia de embriones, ei sistema incluye dos vainas, una primera vaina (15) y una segunda vaina (16), cerrada cada una por su correspondiente pistón, y conectadas al tubo flexible (3) mediante un sistema de dobie llave (14), tal y como puede apreciarse en Ia figura 2; en este caso la funda estéril (2) no ha sido representada, Se procede al llenado del tubo flexible (3) mediante Ia apertura que conecta Ia vaina que contiene solo el medio de transferencia de embriones, que está contenido por ejemplo en la primera vaina (15). Tal y como puede apreciarse en Ia figura 3, el dispositivo se introduce por el trocar dispuesto para este fin hasta que e! extremo anterior del cuerpo tubular rígido (1) se encuentra en las proximidades de Ia ampolla oviductal (5), procediendo al desplazamiento de! tubo flexible (3) coaxial hasta el total anclaje del sistema de doble vaina y que está situada en el extremo posterior del tubo flexible (3) en el cuerpo tubular rígido (1).
A continuación se procede al cierre de Ia vaina que contiene el medio de transferencia de embriones, por ejemplo Ia primera vaina (15), y a Ia apertura de Ia vaina que contiene los embriones, por ejemplo Ia segunda vaina (16), que van a ser transferidos en un volumen tota! de 100-200 μl. Los embriones a transferir deben estar comprendidos entre el estadio de desarrollo de zigoto y el de 4 blastómeros. El punto de acceso al oviducto debe realizase en la ampolla oviductal (5) orientando el extremo de Ia aguja (4) hacia el istmo del oviducto (12). Las características del dispositivo disminuyen el riesgo de accidentes por perforación de Ia pared opuesta del oviducto.
Una vez se encuentra el tubo flexible (3) comunicado con Ia luz del oviducto a través de Ia aguja (4), se procede a desplazar el pistón (8) sobre la vaina que contiene los embriones, por ejemplo Ia segunda vaina (16), dispensando el volumen de fluido contenido en su interior. Se verifica Ia correcta dispensación de! fluido mediante Ia observación de una dilatación temporal de las paredes de la ampolla oviductal (5). A continuación, se procede al cierre de Ia vaina que contenia los embriones, por ejemplo Ia segunda vaina (16), y a Ia apertura de Ia vaina que contiene el medio de transferencia de embriones, por ejemplo Ia primera vaina (15), con el fin de dispensar un volumen adicional de 100 μ! que permita ei desplazamiento de los embriones de Ia luz del tubo flexible (3) hacia e! interior del oviducto (12). La evacuación del sistema se produce mediante el desanclaje del sistema de doble vaina, que permite ocultar Ia aguja biselada (4) en Ia luz del cuerpo tubular rígido (1), evitando posibles accidentes en áreas adyacentes. La recuperación de Ia cerda se produce en los minutos posteriores. Este procedimiento permite repetir las transferencias en una misma hembra en ciclos sucesivos.

Claims

REIVINDICACIONES
1 ,- Dispositivo de introducción de fluidos en el interior del oviducto de una cerda, que permite introducir un fluido con espermatozoides, embriones o cualquier 5 tipo de solución terapéutica, u obtener un fluido con o sin células (gametos - espermatozoides y/u ovocitos- y/o embriones) del interior del oviducto, que comprende un cuerpo tubular rígido (1) que se introduce por un trocar laparoscópico y que permite introducir por su interior un tubo flexible (3), caracterizado por que: el cuerpo tubular rígido (1) y el tubo flexibie (3) interior son coaxiales,
I O - el tubo flexible (3) interior está conectado en el extremo próxima! a una aguja biselada (4), el tubo flexible (3) permite Ia entrada de Ia aguja biselada (4) en el oviducto (12) con un ángulo de 45°,
- el extremo distal deí tubo flexible (3) queda conectado por una(s) vaina(s) (7) 15 ((15), (16)) cerrada(s) por un(os) pistón(es) (8), que se desíiza(n) por el interior de la(s) vaina(s) (7) ((15), (16)), y que permite(n) Ia introducción con precisión de fluidos con bajo volumen,
2.- Dispositivo de introducción de fluidos, con o sin células, en el Interior del oviducto de una cerda según Io descrito en ta reivindicación 1 caracterizado por que 20 el cuerpo tubular (1) se encuentra, a su vez, cubierto por una funda estéril (2).
3.- Dispositivo de introducción de fluidos, con o sin células, en el interior del oviducto de una cerda según io descrito en la reivindicación 2 caracterizado por que Ia funda estéril (2) es desechable.
4.- Dispositivo de introducción de fluidos, con o sin células, en el interior del
25 oviducto de una cerda según Io descrito en cualquiera de Sas reivindicaciones anteriores caracterizado por que el extremo distal deí tubo flexible (3) queda conectado a dos vainas (15), (16), cerradas por sendos pistones (8), que se deslizan por el interior de las vainas (15), (16), estando conectadas las dos vainas (15), (16) al tubo flexible (3) por una llave doble (14), que permite alternativamente el paso de los
30 fluidos contenidos en cada vaina (15), (16).
5.- Dispositivo de introducción de fluidos, con o sin células, en el interior del oviducto de una cerda según Io descrito en cualquiera de las reivindicaciones anteriores caracterizado por que Ia evacuación del dispositivo se produce mediante el desanclaje de la(s) vaiπa(s) (7) ((15), (16)), retirando Ia aguja biselada (4) en ia luz del cuerpo tubular rígido (1).
6.- Procedimiento de introducción de fluidos, con o sin células, en el interior del oviducto de una cerda, que permite introducir espermatozoides, embriones o cualquier tipo de solución en el interior del oviducto de la cerda, o bien obtener gametos
(espermatozoides y/u ovocitos), embriones o soluciones desde ei interior del oviducto de la cerda, que utiliza el dispositivo descrito en cuaiquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado por que se introduce el dispositivo en el interior del oviducto
(12) en ia región próxima! de Ia ampolla oviductal (5), a partir del cual se dispensa suavemente y sin dificultad los gametos, embriones y/o soluciones.
7.- Procedimiento de introducción de fluidos, con o sin células, en el interior del oviducto de una cerda, que permite introducir espermatozoides, embriones o cualquier tipo de solución en el interior del oviducto de Ia cerda, o bien obtener gametos (espermatozoides y/u ovocitos), embriones o soluciones desde eí interior del oviducto de Ia cerda según Ia reivindicación 6, que utiliza el dispositivo descrito en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado por que Ia aguja biselada de inyección (4) está orientada desde Ia ampolla del oviducto (5) hacia el istmo del oviducto (12).
8.- Procedimiento de introducción de fluidos, con o sin células, en el interior del oviducto de una cerda, que permite introducir espermatozoides, embriones o soluciones en ei interior del oviducto de la cerda, o bien obtener gametos (espermatozoides y/u o ovocitos), embriones o soluciones desde e) interior del oviducto de Sa cerda según cualquiera de las reivindicaciones 6 o 7, que utiliza el dispositivo descrito en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado por que permite comprobar Ia correcta visualización de Ia inoculación mediante ia dilatación temporal de las paredes del oviducto (12).
9.- Procedimiento de transferencia de embriones en estadio desde zigoto a 4 blastómeros en el interior del oviducto de una cerda, que utiliza el dispositivo descrito en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado por utilizar un sistema de doble vaina (15), (16) que permite la introducción independiente de ios fluidos contenidos en cada una de dichas vainas (15), (16).
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Free format text: PEDIDO RETIRADO POR INTEMPESTIVIDADE, TENDO EM VISTA A NAO APRESENTACAO DE RECURSO CONTRA O DESPACHO 1.4.1 PUBLICADO NA RPI 2588 DE 11/08/2020