ES2331119T3 - Compuestos de pirazolo(3,4-b)piridina, y su uso como inhibidores de fosfodiesterasa. - Google Patents
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Abstract
Un compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo: **(Ver fórmula)** en la que: R1 es etilo; R2 es un átomo de hidrógeno (H); R3 es un grupo heterocíclico de subfórmula (bb); **(Ver fórmula)** en la que n1 es 1; y en la que Y es O, S, SO2, o NR10; en la que R10 es un átomo de hidrógeno (H), C(O)NH2, C (O)-alquilo(C1-C2) o C(O)-fluoroalquiloC1, y X es NR4R5, en el que: R4 es un átomo de hidrógeno (H); y R5 es (4-alquilC1-3-fenil)metilo; (4-fluoroalquilC1-fenil)metilo; (4-alcoxifenilC1-2)metilo; (4-fluoroalcoxi C1-fenil) metilo; (3,4-dimetil-fenil)metilo; (2,4-dimetil-fenil)metilo; (3,5-dimetil-fenil)metilo; (2,3-dimetilfenil)metilo; (2,5-dimetil- fenil)metilo; (4-metil-3-cloro-fenil)metilo; (3-metil-4-cloro-fenil)metilo; (2-metil-4-cloro-fenil)metilo; (2-cloro- 4-fluorofenil)metilo; (2,4-difluoro-fenil)metil, (4-bromo-2-fluorofenil)metilo; (4-cloro-2-fluorofenil)metilo; (3,4- diclorofenil)metilo; (2,4-dicloro-fenil)metilo; (2,6-dicloro-fenil)metilo; (2,3-dicloro-fenil)metilo; (2,4-dicloro-6-metil- fenil)metilo; o [2,3-dicloro-6-(hidroximetil)-fenil]metilo.
Description
Compuestos de
pirazolo[3,4-b]piridina, y su uso como
inhibidores de fosfodiesterasa.
La presente invención se refiere a compuestos de
pirazolopiridina, procedimientos para su preparación, intermedios
utilizables en estos procedimientos, y composiciones farmacéuticas
que contienen los compuestos. La invención también se refiere al
uso de los compuestos de pirazolopiridina en terapia, por ejemplo
como inhibidores de fosfodiesterasas y/o para el tratamiento y/o
profilaxis de enfermedades inflamatorias y/alérgicas tales como
enfermedad pulmonar obstructiva crónica (abreviadamente COPD), asma
o rinitis alérgica.
Los documentos US 3.979.399, US 3.840.546, y US
3.966.746 (E.R. Squibb y Sons) describen derivados
4-amino de
pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamidas
en las que el grupo 4-amino NR_{3}R_{4} puede
ser un grupo amino acíclico en el que R_{3} y R_{4} puede ser
cada uno hidrógeno, alquilo inferior (por ejemplo, butilo), fenilo,
etc.; NR_{3}R_{4} puede ser alternativamente un grupo
heterocíclico de 3-6-miembros tal
como pirrolidino, piperidino y piperazino. Los compuestos se
describen como depresores del sistema nervioso central útiles como
agentes ataráxicos, analgésicos e hipotensores.
Los documentos US 3,925,388, US 3,856,799, US
3,833,594 y US 3,755,340 (E.R. Squibb y Sons) describen los
derivados 4-amino de ácidos
pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxílico
y ésteres. El grupo 4-amino NR_{3}R_{4} puede
ser un grupo amino acíclico en el que R_{3} y R_{4} puede ser
cada uno hidrógeno, alquilo inferior (por ejemplo, butilo), fenilo,
etc.; NR_{3}R_{4} puede ser alternativamente un grupo
heterocíclico de 5-6 miembros en el que está
presente un nitrógeno adicional tal como pirrolidino, piperidino,
pirazolilo, pirimidinilo, piridazinilo o piperazinilo. Los
compuestos, se menciona, que son depresores del sistema nervioso
central útiles como agentes ataráxicos o tranquilizantes, que
tienen propiedades antiinflamatorias y analgésicas. Los compuestos
se dice que incrementan la concentración intracelular de monofosfato
cíclico de 3',5'-adenosina y alivian los síntomas de
asma.
H. Hoehn y col., J. Heterocycl. Chem.,
1972, 9 (2), 235-253 describen una serie de
derivados del ácido
1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxílico
con 4-hidroxi, 4-cloro,
4-alcoxi, 4-hidrazino, y
sustituyentes 4-amino.
Los documentos CA 1003419, CH 553 799 y T.
Denzel, Archiv der Pharmazie, 1974, 307(3),
177-186 describen
1H-pirazolo[3,4-b]piridinas
4,5-disustituidas no sustituidas en la posición
1.
La solicitud de patente japonesa expuesta al
público
JP-2002-20386-A (Ono
Yakuhin Kogyo KK) publicada el 23 de junio de 2002 describe
compuestos de pirazolopiridina de la siguiente fórmula:
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R^{1} significa 1) un
grupo -OR^{6}, 2) un grupo -SR^{7}, 3) un grupo
alquinilo(C_{2}-C_{8}), 4) un grupo
nitro, 5) un grupo ciano, 6) grupo
alquilo(C_{1}-C_{8}) sustituido por un
grupo hidroxi o grupo
alcoxi(C_{1}-C_{8}), 7) un grupo fenilo,
8) un grupo -C(O)R^{8}, 9) un grupo
-SO_{2}NR^{9}R^{10}, 10) un grupo -NR^{11}SO_{2}R^{12},
11) un grupo -NR^{13}C(O)R^{14} ó 12) un grupo
-CH=NR^{15}. R^{6} y R^{7} significan i) un átomo de
hidrógeno, ii) un grupo
alquilo(C_{1}-C_{8}), iii) un grupo
alquilo(C_{1}-C_{8}) sustituido por un
grupo alcoxi(C_{1}-C_{8}), iv) un grupo
trihalometilo, v) un grupo
cicloalquilo(C_{3}-C_{7}), vi) un grupo
alquilo(C_{1}-C_{8}) sustituido por un
grupo fenilo o vii) un heteroanillo de 3-15
miembros, mono-, di- o tricíclico que contiene 1-4
átomos de nitrógeno, 1-3 átomos de oxígeno y/o
1-3 átomos de azufre. R^{2} significa 1) un átomo
de hidrógeno 2) un grupo
alcoxi(C_{1}-C_{8}). R^{3} significa 1)
un átomo de hidrógeno o 2) un grupo
alquilo(C_{1}-C_{8}). R^{4} significa
1) un átomo de hidrógeno, 2) un grupo
alquilo(C_{1}-C_{8}), 3) un grupo
cicloalquilo(C_{3}-C_{7}), 4) un grupo
alquilo(C_{1}-C_{8}) sustituido por un
grupo cicloalquilo(C_{3}-C_{7}), 5) un
grupo fenilo que se puede sustituir por 1-3 átomos
de halógeno o 6) un heteroanillo de 3-15 miembros
mono-, di o tricíclico que contiene 1-4 átomos de
nitrógeno, 1-3 átomos de oxígeno y/o
1-3 átomos de azufre. R^{5} significa 1) un átomo
de hidrógeno, 2) un grupo
alquilo(C_{1}-C_{8}), 3) un grupo
cicloalquilo(C_{3}-C_{7}), 4) un grupo
alquilo(C_{1}-C_{8}) sustituido por un
grupo cicloalquilo(C_{3}-C_{7}) o 5) un
grupo fenilo que se puede sustituir por 1-3
sustituyentes. En el grupo R^{3}, se prefiere un átomo de
hidrógeno. En el grupo R^{4}, se prefieren metilo, etilo,
ciclopropilo, ciclobutilo o ciclopentilo. Se establece que dos
compuestos de
JP-2002-20386-A
tienen una actividad inhibitoria de PDE4 y son útiles en la
prevención y/o tratamiento de enfermedades inflamatorias y muchas
otras
enfermedades.
El documento EP 0 076 035 A1 (ICI Americas)
describe derivados de
pirazolo[3,4-b]piridina como
depresores del sistema nervioso central útiles como agentes
tranquilizantes o ataráxicos para el remedio de estados de ansiedad
y tensión.
Se conoce el compuesto cartazolato,
4-(n-butilamino)-1-etil-1H-pirazolo[3,4-b]-piridina-5-carboxilato
de etilo. J.W. Daly y col., Med. Chem. Res., 1994, 4,
293-306 y D. Shi y col., Drug Development
Research, 1997, 42, 41-56 describen una serie
de derivados del ácido 4-(amino)sustituido
1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxílico,
incluyendo
4-ciclopentilamino-1-metil-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxilato
de etilo, y sus actividades afines y antagonistas en receptores
A_{1}- y A_{2A}-adenosina, y el último artículo
describe sus afinidades en varios sitios de unión del canal
receptor GABA_{A}-. S. Schenone y col., Bioorg. Med. Chem.
Lett., 2001, 11, 2529-2531 y F. Bondavalli y
col., J. Med. Chem., 2002, vol. 45 (publicado el 22, 24 de
octubre 2002, publicado según se dice en Web 09/24/2002), pp.
4875-4887 describen una serie de ésteres etílicos
del ácido
4-amino-1-(2-cloro-2-feniletil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxílico
como ligandos del receptor A_{1}-adenosina.
El documento WO 02/060900 A2 parece describir,
como antagonistas MCP-1 para el tratamiento de
trastornos o enfermedades alérgicas, inflamatorias o autoinmunes,
una serie de compuestos heterocíclicos bicíclicos con un
sustituyente,
-C(O)-NR^{4}-C(O)-NR^{5}R^{6},
incluyendo isoxazolo[5,4-b]piridinas y
1H-pirazolo[3,4-b]piridinas
(denominadas pirazolo[5,4-b]piridinas)
con el grupo
-C(O)-NR^{4}-C(O)-NR^{5}R^{6}
como el sustituyente 5- y opcionalmente sustituido en las
posiciones 1-, 3-, 4-, y/o 6-. Los compuestos heterocíclicos
bicíclicos con un sustituyente -C(O)NH_{2} en lugar
del sustituyente
-C(O)-NR^{4}-C(O)-NR^{5}R^{6}
se supone que se describen en el documento WO 02/060900 como
intermedios en la síntesis de los compuestos sustituidos
-C(O)-NR^{4}-C(O)-NR^{5}R^{6}.
Es deseable encontrar nuevos compuestos que se
unan a, y preferiblemente inhiban el tipo IV de fosfodiesterasas
(abreviadamente PDE4).
La presente invención proporciona un compuesto
de fórmula (I) o una sal del mismo (en particular, una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo):
en la
que:
R^{1} es etilo;
R^{2} es un átomo de hidrógeno (H);
R^{3} es un grupo heterocíclico de subfórmula
(bb);
en la que n^{1} es 1; y en la que
Y es O, S, SO_{2}, o NR^{10}; en la que R^{10} es un átomo de
hidrógeno (H), C(O)NH_{2},
C(O)-alquilo(C_{1}-C_{2})
o
C(O)-fluoroalquiloC_{1},
y X es NR^{4}R^{5}, en el que:
R^{4} es un átomo de hidrógeno (H); y
R^{5} es
(4-alquilC_{1-3}-fenil)metilo;
(4-fluoroalquilC_{1}-fenil)metilo;
(4-alcoxifenilC_{1-2})metilo;
(4-fluoroalcoxiC_{1}-fenil)metilo;
(3,4-dimetil-fenil)metilo;
(2,4-dimetil-fenil)metilo;
(3,5-dimetil-fenil)metilo;
(2,3-dimetilfenil)metilo;
(2,5-dimetil-fenil)metilo;
(4-metil-3-cloro-fenil)metilo;
(3-metil-4-cloro-fenil)metilo;
(2-metil-4-cloro-fenil)metilo;
(2-cloro-4-fluorofenil)metilo;
(2,4-difluoro-fenil)metil,
(4-bromo-2-fluorofenil)metilo;
(4-cloro-2-fluorofenil)metilo;
(3,4-diclorofenil)metilo;
(2,4-dicloro-fenil)metilo;
(2,6-dicloro-fenil)metilo;
(2,3-dicloro-fenil)metilo;
(2,4-dicloro-6-metil-fenil)metilo;
o
[2,3-dicloro-6-(hidroximetil)-fenil]metilo.
En compuestos, por ejemplo en los compuestos de
fórmula (I) un grupo o resto "alquilo" puede ser de cadena
lineal o ramificada. Grupos alquilo, por ejemplo,
alquilo(C_{1}-C_{8}) o
alquilo(C_{1}-C_{6}) o
alquilo(C_{1}-C_{4}) o
alquilo(C_{1}-C_{3}) o
alquilo(C_{1}-C_{2}), que se pueden
emplear incluyen alquilo(C_{1}-C_{6}) o
alquilo(C_{1}-C_{4}) o
alquilo(C_{1}-C_{3}) o
alquilo(C_{1}-C_{2}) tales como metilo,
etilo, n-propilo, n-butilo,
n-pentilo o n-hexilo o cualquier
isómero ramificado de los mismos tales como isopropilo,
t-butilo, sec-butilo, isobutilo,
3-metilbutan-2-ilo,
2-etilbutan-1-ilo o
los similares.
Un significado correspondiente se intenta para
"alcoxi" y los términos similares derivados de alquilo. Por
ejemplo, "alcoxi" tal como
alcoxi(C_{1}-C_{6}) o
alcoxi(C_{1}-C_{4}) o
alcoxi(C_{1}-C_{2}) incluye metoxi,
etoxi, propiloxi y derivados oxi de los alquilos enumerados
anteriormente.
"Cicloalquilo", por ejemplo
cicloalquilo(C_{3}-C_{8}), incluye
ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo,
ciclooctilo, y los similares. Preferiblemente, un grupo
cicloalquilo(C_{3}-C_{8}) es
cicloalquilo(C_{3}-C_{6}) o
cicloalquilo(C_{5}-C_{6}) que contiene un
anillo carbocíclico de 3-6 miembros o
5-6 miembros.
"Fluoroalquilo" incluye grupos alquilo con
uno, dos, tres, cuatro, cinco o más sustituyentes fluoro, por
ejemplo fluoroalquilo(C_{1}-C_{4}) o
fluoroalquilo(C_{1}-C_{3}) o
fluoroalquilo(C_{1}-C_{2}) tal como
monofluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, pentafluoroetilo,
2,2,2-trifluoroetil (CF_{3}CH_{2}-),
2,2-difluoroetil (CHF_{2}CH_{2}-),
2-fluoroetil (CH_{2}FCH_{2}-),
etc. "Fluoroalcoxi" incluye fluoroalcoxi(C_{1}-C_{4}) o fluoroalcoxi(C_{1}-C_{2}) tal como trifluorometoxi, pentafluoroetoxi, monofluorometoxi, difluorometoxi, etc.
etc. "Fluoroalcoxi" incluye fluoroalcoxi(C_{1}-C_{4}) o fluoroalcoxi(C_{1}-C_{2}) tal como trifluorometoxi, pentafluoroetoxi, monofluorometoxi, difluorometoxi, etc.
Un átomo halógeno ("halo") presente en los
compuestos, por ejemplo en los compuestos de fórmula (I), pueden ser
un átomo de flúor, cloro, bromo o yodo ("fluoro", "cloro",
"bromo" o "yodo").
Cuando la memoria descriptiva establece que el
átomo o resto A se "enlaza" o "une" al átomo o resto B,
significa que el átomo/resto A se enlaza directamente al
átomo/resto B usualmente mediante uno o más enlaces covalentes, y
excluye A estando indirectamente unido a B mediante uno o mas
átomos/restos de intermedios. (por ejemplo, excluye
A-B-C); al menos, está claro, que se
intente otro significado del contexto.
Y es preferiblemente O, S, SO_{2} NH o
N-C(O)metilo, más preferiblemente O,
NH o N-C(O)metilo, todavía más
preferiblemente O o N-C(O)metilo, más
preferiblemente O. (Cuando Y es NH o
N-C(O)metilo, entonces R^{10} es H o
C(O)metilo).
Y es O, S, SO_{2} o NR^{10}, en el que
R^{10} es H, C(O)NH_{2},
C(O)-alquilo C_{1-2} o
C(O)-fluoroalquiloC_{1}, o más
preferiblemente R^{10} es H o C(O)Me. Más
preferiblemente, Y es O o NR^{10}.
Más preferiblemente, R^{3} es
tetrahidro-2H-piran-4-ilo.
En una realización especialmente preferida,
NR^{4}R^{5} es el grupo NR^{4}R^{5} como se ha definido en
cualquiera de: los ejemplos (excluyendo los ejemplos de Referencia)
21-98, 100-182,
187-188, 191-200,
201-203, 210-353,
355-651, 653-658,
660-664 y 665-686.
Alternativamente, se prefiere particularmente
que el compuesto de fórmula (I) o la sal del mismo sea uno de los
ejemplos 204 a 664 o uno de los ejemplos 665 a 686 (excluyendo los
ejemplos de Referencia), como un compuesto o una sal de los mismos,
por ejemplo, una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. Las
estructuras de estos compuestos específicos se proporcionan en los
ejemplos y ejemplos de referencia 204 a 664 y 665 a 686 en esta
memoria descriptiva, y sus nombres se proporcionan en la sección de
ejemplos.
En una realización, incluso se prefiere más que
el compuesto de fórmula (I) o la sal del mismo sea un compuesto de
Ejemplo (excluyendo los ejemplos de Referencia) 260, 261, 263, 266,
431, 493, 494, 518, 528, 584, 626, 643, 653, 679, 680, 681, 682,
683, 684, 685 ó 686 (más preferiblemente Ejemplo (excluyendo los
ejemplos de Referencia) 260, 518, 653, 679, 680,681 ó 684), como se
ha definido por las estructuras y/o nombres descritos en el
presente documento, o sus sales, por ejemplo, una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo. Las estructuras y nombres de
estos Ejemplos se describen en la sección de ejemplos. Estos
ejemplos se cree que son adecuados para la administración
inhalada.
\vskip1.000000\baselineskip
Debido a su potencial uso en medicina, las sales
de los compuestos de fórmula (I) son preferiblemente
farmacéuticamente aceptables. Las sales farmacéuticamente
aceptables adecuadas pueden incluir sales de adición de ácido o de
base. Una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable se
puede formar mediante la reacción de un compuesto de fórmula (I)
con un ácido adecuado inorgánico u orgánico (tal como ácido
bromhídrico, clorhídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico, succínico,
maleico, acético, fumárico, cítrico, tartárico, benzoico,
p-toluensulfónico, metansulfónico o naftalensulfónico),
opcionalmente en un disolvente adecuado tal como un disolvente
orgánico, para proporcionar la sal que se aísla usualmente, por
ejemplo, mediante cristalización y filtración. Una sal de adición
de ácido de un compuesto de fórmula (I) farmacéuticamente aceptable
puede ser por ejemplo una sal bromhidrato, clorhidrato, sulfato,
nitrato, fosfato, succinato, maleato, acetato, fumarato, citrato,
tartrato, benzoato, p-toluensulfonato, metansulfonato o
naftalensulfonato. Una sal de adición de base farmacéuticamente
aceptable se puede formar mediante la reacción de un compuesto de
fórmula (I) con una base inorgánica u orgánica adecuada,
opcionalmente en un disolvente adecuado tal como un disolvente
orgánico, para proporcionar la sal de adición de base que se aísla
usualmente, por ejemplo, mediante cristalización y filtración. Otras
sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales metálicas
farmacéuticamente aceptables, por ejemplo sales de metales
alcalinos o alcalinotérreos farmacéuticamente aceptables tales como
sales de sodio, potasio, calcio o magnesio; en particular sales
metálicas farmacéuticamente aceptables de uno o más restos
carboxílicos que pueden estar presentes en el compuesto de fórmula
(I).
Se pueden utilizar otras sales aceptables no
farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, oxalatos, en el
aislamiento de compuestos de la invención y se incluyen dentro del
alcance de esta invención.
La invención incluye dentro de su ámbito todas
las formas posibles estequiométricas y no estequiométricas de las
sales de los compuestos de fórmula (I).
También se incluyen dentro del ámbito de de la
invención todos los solvatos, hidratos y complejos de compuestos y
sales de la invención.
Ciertos grupos, sustituyentes, compuestos o
sales incluidos en la presente invención pueden estar presentes en
forma de isómeros. La presente invención incluye dentro de su
alcance todos estos isómeros, incluyendo racematos, enatiómeros y
mezclas de los mismos.
Ciertos de los grupos, por ejemplo, sistemas de
anillos heteroaromáticos, incluidos en los compuestos de fórmula (I)
o sus sales pueden existir en una o más formas tautómeras. La
presente invención incluye dentro de su alcance todas estas formas
tautómeras, incluyendo mezclas.
Especialmente cuando se intenta para uso
medicinal oral, el compuesto de fórmula (I) puede tener un peso
molecular opcional de 1000 o menos, por ejemplo 800 o menos, en
particular 650 o menos o 600 o menos. El peso molecular aquí se
refiere al del compuesto no solvatado "exento de base" que
excluye cualquier peso molecular aportado por cualquiera de las
sales de adición, moléculas de disolvente (por ejemplo, agua),
etc.
\vskip1.000000\baselineskip
Los siguientes procedimientos se pueden utilizar
para fabricar los compuestos de la invención:
en la
que:
R^{1} es
alquilo(C_{1}-C_{4}),
fluoroalquilo(C_{1}-C_{3}),
-CH_{2}CH_{2}OH o
-CH_{2}CH_{2}CO_{2}alquilo(C_{1}-C_{2});
R^{2} es un átomo de hidrógeno (H), metilo o
fluoroalquiloC_{1};
R^{3} es
cicloalquilo(C_{3}-C_{8}) sustituido
opcionalmente o cicloalquenilo C_{5-7} mono
insaturado sustituido opcionalmente o un grupo heterocíclico
sustituido opcionalmente de subfórmula (aa), (bb) o (cc);
en la que n^{1} y n^{2} son
independientemente 1 ó 2; y en que Y es O, S, SO_{2}, o NR^{10};
donde R^{10} es un átomo de hidrógeno (H),
alquilo(C_{1}-C_{4}),
fluoroalquilo(C_{1}-C_{2}),
CH_{2}C(O)NH_{2}, C(O)NH_{2},
C(O)-alquilo(C_{1}-C_{2}),
C(O)-fluoroalquiloC_{1} o
-C(O)-CH_{2}O-alquilo
(C_{1}-C_{2});
y en la que en R^{3} el
cicloalquilo(C_{3}-C_{8}) o el grupo
heterocíclico de la subfórmula (aa), (bb) o (cc) se sustituye
opcionalmente con uno o dos sustituyentes independientemente siendo
oxo (=O); OH; alcoxi(C_{1}-C_{2});
fluoroalcoxi(C_{1}-C_{2}); NHR^{21} en
el que R^{21} es un átomo de hidrógeno (H) o alquilo de cadena
lineal(C_{1}-C_{5}) (por ejemplo, alquilo
de cadena lineal(C_{1}-C_{4}));
alquilo(C_{1}-C_{2});
fluoroalquilo(C_{1}-C_{2}) (por ejemplo,
fluoroalquiloC_{1} tal como -CH_{2}F o -CHF_{2}); -CH_{2}OH;
-CH_{2}CH_{2}OH; -CH_{2}NHR^{22} en el que R^{22} es H o
alquilo(C_{1}-C_{2});
-C(O)OR^{23} en el que R^{23} es H o
alquilo(C_{1}-C_{2});
-C(O)NHR^{24} en el que R^{24} es H o
alquilo(C_{1}-C_{2});
-C(O)R^{25} en la que R^{25} es
alquilo(C_{1}-C_{2}); fluoro;
hidroxiimino (=N-OH); o
alcoxi(C_{1}-C_{4})imino
(=N-OR^{26} donde R^{26} es
alquilo(C_{1}-C_{4})); y en el que
cualquier sustituyente OH, alcoxi, fluoroalcoxi o NHR^{21} no se
sustituye en el carbono del anillo R^{3} unido (enlazado) al grupo
-NH- de fórmula (I) y no se sustituye en cualquier carbono del
anillo R^{3} unido al grupo Y del grupo heterocíclico (aa), (bb) o
(cc);
y en la que, cuando R^{3} es
cicloalquenilo(C_{5}-C_{7})
monoinsaturado sustituido opcionalmente, entonces el cicloalquenilo
se sustituye opcionalmente con uno o dos sustituyentes siendo fluoro
o alquilo(C_{1}-C_{2}) con tal que si hay
dos sustituyentes entonces no son ambos alquiloC_{2} y el carbono
del anillo R^{3} unido al grupo -NH- de fórmula (I) no participa
en el doble enlace de cicloalquenilo;
o R^{3} es un grupo bicíclico de subfórmula
(dd)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
o de subfórmula
(ee):
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la que Y^{1}, Y^{2} e
Y^{3} son independientemente CH_{2} u oxígeno (O) con tal que no
más de uno de Y^{1}, Y^{2} e Y^{3} sea oxígeno
(O);
y X es NR^{4}R^{5} u OR^{5a}, en los
que:
R^{4} es un átomo de hidrógeno (H);
alquilo(C_{1}-C_{6});
fluoroalquilo(C_{1}-C_{3}); o
alquilo(C_{2}-C_{6}) sustituido por un
sustituyente R^{11}; y
R^{5} es un átomo de hidrógeno (H);
alquilo(C_{1}-C_{8});
fluoroalquilo(C_{1}-C_{8});
cicloalquilo(C_{3}-C_{8}) sustituido
opcionalmente por un grupo
alquilo(C_{1}-C_{2}); o
-(CH_{2})_{n}^{4}-cicloalquilo(C_{3}-C_{8})
sustituido opcionalmente en el resto -(CH_{2})_{n}^{4}-
o en el resto cicloalquilo(C_{3}-C_{8}),
por un grupo alquilo(C_{1}-C_{2}), en el
que n^{4} es 1, 2 ó 3;
o R^{5} es
alquilo(C_{2}-C_{6}) sustituido por uno o
dos sustituyentes independientes R^{11};
en el que cada sustituyente R^{11},
independientemente de cualquier otro sustituyente R^{11} presente,
es: hidroxi (OH); alcoxi(C_{1}-C_{6});
feniloxi, benciloxi; -NR^{12}R^{13};
-NR^{15}-C(O)R^{16};
-NR^{15}-C(O)-O-R^{16};
-NR^{15}-C(O)-NH-R^{15};
o -NR^{15}-SO_{2}
R^{16}; y en el que cualquier sustituyente R^{11} que sea OH, alcoxi o -NR^{12}R^{13} no se sustituye en cualquier átomo de carbono, de cualquier R^{4} o R^{5} alquilo sustituido, que se une al nitrógeno de NR^{4}R^{5};
R^{16}; y en el que cualquier sustituyente R^{11} que sea OH, alcoxi o -NR^{12}R^{13} no se sustituye en cualquier átomo de carbono, de cualquier R^{4} o R^{5} alquilo sustituido, que se une al nitrógeno de NR^{4}R^{5};
o R^{5} es
-(CH_{2})_{n}^{11}-C(O)R^{16};
-(CH_{2})_{n}^{12}-C(O)NR^{12}R^{13};
-CHR^{19}-C(O)NR^{12}R^{13};
-(CH_{2})_{n}^{12}-C(O)OR^{16};
-(CH_{2})_{n}^{12}-C(O)OH;
-CHR^{19}-C(O)OR^{16};
-CHR^{19}-C(O)OH;
-(CH_{2})_{n}^{12}-SO_{2}-NR^{12}R^{13};
-(CH_{2})_{n}^{12}-SO_{2}R^{16}; o
-(CH_{2})_{n}^{12}-CN; en el que
n^{11} es 0, 1, 2, 3 ó 4 y n^{12} es 1, 2, 3 ó 4;
o R^{5} es
-(CH_{2})_{n}^{13}-Het en el que
n^{13} es 0, 1, 2, 3 ó 4 y Het es un anillo heterocíclico de 4-,
5-, 6- ó 7- miembros saturado o parcialmente saturado que contiene
uno ó dos heteroátomos del anillo seleccionados independientemente
de O, S, y N; en el que cualquiera de los heteroátomos del anillo
presentes no se une al resto -(CH_{2})_{n}^{13}- cuando
n^{13} es 1 no se unen al nitrógeno de NR^{4}R^{5} cuando
n^{13} es 0; en el que cualquiera de los nitrógenos del anillo que
están presentes y que no están insaturados (es decir, no participan
en el doble enlace) están presentes como NR^{17} donde R^{17} es
como se define en esta memoria descriptiva; y en el que uno o dos de
los átomos de carbono del anillo independientemente se sustituyen
opcionalmente por
alquilo(C_{1}-C_{2});
o R^{5} es fenilo sustituido opcionalmente
con, independientemente, uno, dos o tres de: un átomo de halógeno;
alquilo(C_{1}-C_{6});
fluoroalquilo(C_{1}-C_{2});
alcoxi(C_{1}-C_{4});
fluoroalcoxi(C_{1}-C_{2});
cicloalquiloxi(C_{3}-C_{6});
-C(O)R^{16a}; -C(O)OR^{30};
-S(O)_{2}-R^{16a} (por ejemplo,
alquil(C_{1}-C_{2})sulfonilo o
alquil(C_{1}-C_{2})-SO_{2}-);
R^{16a}-S(O)_{2}-NR^{15a}-
(por ejemplo,
alquil(C_{1}-C_{2})-SO_{2}-NH-);
R^{7}R^{8}N-S(O)_{2}-;
alquil(C_{1}-C_{2})-C(O)-R^{15a}N-S(O)_{2}-;
alquil(C_{1}-C_{4})-S(O)-,
Ph-S(O)-,
R^{7}R^{8}N-CO-;
-NR^{15}-C(O)R^{16};
R^{7}R^{8}N; OH;
alcoxi(C_{1}-C_{4})metilo;
alcoxi(C_{1}-C_{4})etilo;
alquil(C_{1}-C_{2})-S(O)_{2}-CH_{2}-;
R^{7}R^{8}N-S(O)_{2}-CH_{2}-;
alquil(C_{1}-C_{2})-S(O)_{2}-NR^{15a}-CH_{2}-;
-CH_{2}-OH; -CH_{2}CH_{2}-OH;
-CH_{2}-NR^{7}R^{8};
-CH_{2}-CH_{2}-NR^{7}R^{8};
-CH_{2}-C(O)OR^{30};
-CH_{2}-C(O)-NR^{7}R^{8};
-CH_{2}-NR^{15a}-C(O)-
alquilo(C_{1}-C_{3});
-(CH_{2})_{n}^{14}-Het^{1} donde
n^{14} es 0 ó 1; ciano (CN); Ar5a; o fenilo, piridinilo o
pirimidinilo en el que fenilo, piridinilo o pirimidinilo
independientemente se sustituyen opcionalmente por uno o dos de
fluoro, cloro, alquilo(C_{1}-C_{2}),
fluoroalquiloC_{1}, alcoxi(C_{1}-C_{2})
o fluoroalcoxiC_{1};
o donde dos sustituyentes adyacentes tomados
conjuntamente son -O-(CMe_{2})-O- o
-O-(CH_{2})_{n}^{14}-O- donde n^{14}
es 1 ó 2;
en el que R^{7} y R^{8} son
independientemente un átomo de hidrógeno (H);
alquilo(C_{1}-C_{4});
cicloalquilo(C_{3}-C_{6}); o fenilo
sustituido opcionalmente por uno o dos de: fluoro, cloro,
alquilo(C_{1}-C_{2}),
fluoroalquiloC_{1}, alcoxi(C_{1}-C_{2})
o fluoroalcoxiC_{1}; o R^{7} y R^{8} son conjuntamente
-(CH_{2})_{n}^{6}- o
-C(O)-(CH_{2})_{n}^{7}- o
-C(O)-(CH_{2})_{n}^{7}-C(O)-
o
-(CH_{2})_{n}^{8}-X^{7}-
(CH_{2})_{n}^{9}- o -C(O)-X^{7}-(CH_{2})_{n}^{10}- en los que: n^{6} es 3, 4, 5 ó 6, n^{7} es 2, 3, 4, ó 5, n^{8} y n^{9} y n^{10} son independientemente 2 ó 3, y X^{7} es O o NR^{14} en el que R^{14} es H, alquilo(C_{1}-C_{2}) o C(O)Me;
(CH_{2})_{n}^{9}- o -C(O)-X^{7}-(CH_{2})_{n}^{10}- en los que: n^{6} es 3, 4, 5 ó 6, n^{7} es 2, 3, 4, ó 5, n^{8} y n^{9} y n^{10} son independientemente 2 ó 3, y X^{7} es O o NR^{14} en el que R^{14} es H, alquilo(C_{1}-C_{2}) o C(O)Me;
o R^{5} tiene la subfórmula (x), (y), (y1) o
(z):
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la que en la subfórmula (x), n =
0, 1 ó 2; en la subfórmula (y) e (y1), m = 1 ó 2; y en la subfórmula
(z), r = 0, 1 ó
2;
en la que en la subfórmula (x) e (y) e (y1),
ninguno, uno o dos de A, B, D, E y F son independientemente
nitrógeno u óxido de nitrógeno (N^{+}-O^{-}) con
tal que no más de uno de A, B, D, E y F sea óxido de nitrógeno; y el
resto de A, B, D, E y F son independientemente CH o CR^{6};
a condición de que cuando n es 0 en la
subfórmula (x) entonces uno o dos de A, B, D, E y F son
independientemente nitrógeno u óxido de nitrógeno
(N^{+}-O^{-}) y no más de uno de A, B, D, E y F
es óxido de nitrógeno;
en el que, cada uno de R^{6},
independientemente de cualquier otro R^{6} presente, es: un átomo
de halógeno; alquilo(C_{1}-C_{6});
fluoroalquilo(C_{1}-C_{4});
alcoxi(C_{1}-C_{4});
fluoroalcoxi(C_{1}-C_{2}); cicloalquiloxi
(C_{3}-C_{6}); -C(O)R^{16a};
-C(O)OR^{30};
-S(O)_{2}-
R^{16a}; R^{16a}-S(O)_{2}-NR^{15a}-, R^{7}R^{8}N-S(O)_{2}-; alquil(C_{1}-C_{2})-C(O)-R^{15a}N-S(O)_{2}-; alquil(C_{1}-C_{4})-S(O)-, Ph-S(O)-, R^{7}R^{8}N-CO-; -NR^{15}-C(O)R^{16}; R^{7}R^{8}N; OH; alcoxi(C_{1}-C_{4})metilo; alcoxi(C_{1}-C_{4})etilo; alquil(C_{1}-C_{2})-S(O)_{2}-CH_{2}-; R^{7}R^{8}N-S(O)_{2}-CH_{2}-; alquil(C_{1}-C_{2})-S(O)_{2}-NR^{15a}-CH_{2}-; -CH_{2}-OH; -CH_{2}CH_{2}-OH; -CH_{2}-NR^{7}R^{8}; -CH_{2}-CH_{2}-NR^{7}R^{8}; -CH_{2}-C(O)OR^{30}; -CH_{2}-C(O)-NR^{7}R^{8}; -CH_{2}-NR^{15a}-C(O)-alquilo(C_{1}-C_{3}); -(CH_{2})_{n}^{14}-Het^{1} donde n^{14} es 0 ó 1; ciano (CN); Ar^{5b}; o fenilo, piridinilo o pirimidinilo en el que fenilo, piridinilo o pirimidinilo independientemente se sustituyen opcionalmente por uno o dos de fluoro, cloro, alquilo(C_{1}-C_{2}), fluoroalquiloC_{1}, alcoxi(C_{1}-C_{2}) o fluoroalcoxiC_{1};
R^{16a}; R^{16a}-S(O)_{2}-NR^{15a}-, R^{7}R^{8}N-S(O)_{2}-; alquil(C_{1}-C_{2})-C(O)-R^{15a}N-S(O)_{2}-; alquil(C_{1}-C_{4})-S(O)-, Ph-S(O)-, R^{7}R^{8}N-CO-; -NR^{15}-C(O)R^{16}; R^{7}R^{8}N; OH; alcoxi(C_{1}-C_{4})metilo; alcoxi(C_{1}-C_{4})etilo; alquil(C_{1}-C_{2})-S(O)_{2}-CH_{2}-; R^{7}R^{8}N-S(O)_{2}-CH_{2}-; alquil(C_{1}-C_{2})-S(O)_{2}-NR^{15a}-CH_{2}-; -CH_{2}-OH; -CH_{2}CH_{2}-OH; -CH_{2}-NR^{7}R^{8}; -CH_{2}-CH_{2}-NR^{7}R^{8}; -CH_{2}-C(O)OR^{30}; -CH_{2}-C(O)-NR^{7}R^{8}; -CH_{2}-NR^{15a}-C(O)-alquilo(C_{1}-C_{3}); -(CH_{2})_{n}^{14}-Het^{1} donde n^{14} es 0 ó 1; ciano (CN); Ar^{5b}; o fenilo, piridinilo o pirimidinilo en el que fenilo, piridinilo o pirimidinilo independientemente se sustituyen opcionalmente por uno o dos de fluoro, cloro, alquilo(C_{1}-C_{2}), fluoroalquiloC_{1}, alcoxi(C_{1}-C_{2}) o fluoroalcoxiC_{1};
o donde dos R^{6} adyacentes tomados
conjuntamente son -O-(CMe_{2})-O- u
-O-(CH_{2})_{n}^{14}-O- donde n^{14}
es 1 ó 2;
en la que R^{7} y R^{8} son como se ha
definido anteriormente;
en el que la subfórmula (y) e (y1),
independientemente, se sustituyen opcionalmente por oxo (=O) en un
carbono del anillo adyacente al anillo aromático de 6 miembros
\newpage
en el que en la subfórmula (z), G es O o S o
NR^{9} en el que R^{9} es un átomo de hidrógeno (H),
alquilo(C_{1}-C_{4}) o
fluoroalquilo(C_{1}-C_{4}); ninguno, uno,
dos o tres de J, L, M y Q son nitrógeno; y el resto de J, L, M y Q
son independientemente CH o CR^{6} donde R^{6},
independientemente de cualquier otro R^{6} presente, es como se ha
definido en esta memoria descriptiva;
o R^{4} y R^{5} tomados conjuntamente son
-(CH_{2})_{p}^{1}- o
-C(O)-(CH_{2})_{p}^{2}- o
-(CH_{2})_{p}^{3}-X^{5}-(CH_{2})_{p}^{4}-
o
-C(O)-X^{5}-(CH_{2})_{p}^{5}-,
en los que: p^{1} = 3, 4, 5 ó 6, p^{2} es 2, 3, 4, ó 5, y
p^{3} y p^{4} y p^{5} son independientemente 2 ó 3 y X^{5}
es O o NR^{17}; y en los que, cuando R^{4} y R^{5} se toman
conjuntamente son -(CH_{2})_{p}^{1}- o
-C(O)-(CH_{2})_{p}^{2}-, el heterociclo
NR^{4}R^{5} se sustituye opcionalmente por un sustituyente
R^{18} en el que R^{18} es:
alquilo(C_{1}-C_{4});
fluoroalquilo(C_{1}-C_{2});
cicloalquilo(C_{3}-C_{6});
alcoxi(C_{1}-C_{2}) (no sustituido en un
carbono del anillo unido al nitrógeno del anillo NR^{4}R^{5});
fluoroalcoxiC_{1} (no sustituido en un carbono del anillo unido al
nitrógeno del anillo NR^{4}R^{5}); OH (no sustituido en un
carbono del anillo unido al nitrógeno del anillo NR^{4}R^{5});
-(CH_{2})_{p}^{7}-C(O)R^{16}
en el que p^{7} es 0, 1, 2 ó 3;
-(CH_{2})_{p}^{7}-C(O)OR^{16};
-(CH_{2})_{p}^{7}-OC(O)R^{16};
-(CH_{2})_{p}^{7}-C(O)NR^{12}R^{13};
-(CH_{2})_{p}^{7}-NR^{15}C(O)R^{16};
-(CH_{2})_{p}^{7}-NR^{15}C(O)NR^{12}R^{13};
-(CH_{2})_{p}^{7}-NR^{15}C(O)OR^{16};
-(CH_{2})_{p}^{7}-
SO_{2}R^{16}; -(CH_{2})_{p}^{7}-SO_{2}NR^{12}R^{13}; -(CH_{2})_{p}^{7}-NR^{15}SO_{2}R^{16}; -(CH_{2})_{p}^{7}-OH; -(CH_{2})_{p}^{7}-OR^{16}; o fenilo, sustituidos opcionalmente por uno o dos de: un átomo de halógeno, alquilo(C_{1}-C_{2}), fluoroalquiloC_{1}, alcoxi(C_{1}-C_{2}) o fluoroalcoxiC_{1};
SO_{2}R^{16}; -(CH_{2})_{p}^{7}-SO_{2}NR^{12}R^{13}; -(CH_{2})_{p}^{7}-NR^{15}SO_{2}R^{16}; -(CH_{2})_{p}^{7}-OH; -(CH_{2})_{p}^{7}-OR^{16}; o fenilo, sustituidos opcionalmente por uno o dos de: un átomo de halógeno, alquilo(C_{1}-C_{2}), fluoroalquiloC_{1}, alcoxi(C_{1}-C_{2}) o fluoroalcoxiC_{1};
o R^{4} y R^{5} tomados conjuntamente son
-(CH_{2})_{p}^{1}- o
-C(O)-(CH_{2})_{p}^{2}- o
-(CH_{2})_{p}^{3}-X^{5}-(CH_{2})_{p}^{4}-
o
-C(O)-X^{5}-(CH_{2})_{p}^{5}-
como se han definido en esta memoria descriptiva, y en los que el
heterociclo NR^{4}R^{5} se condensa con un anillo fenilo
sustituido opcionalmente en el fenilo por uno o dos de: un átomo de
halógeno, alquilo(C_{1}-C_{2}),
fluoroalquiloC_{1}, alcoxi(C_{1}-C_{2})
o fluoroalcoxiC_{1}; y
R^{5a} es
alquilo(C_{1}-C_{8});
fluoroalquilo(C_{1}-C_{8});
cicloalquilo(C_{3}-C_{8});
-(CH_{2})_{n}^{4a}-cicloalquilo(C_{3}-C_{6})
en el que n^{4a} es 1 ó 2; fenilo sustituido opcionalmente con uno
o dos de: un átomo de halógeno,
alquilo(C_{1}-C_{2}), trifluorometilo,
alcoxi(C_{1}-C_{2}) o trifluorometoxi; o
R^{5a} tiene la subfórmula (x), (y), (y1) o (z) como se ha
definido en esta memoria descriptiva
y en el que:
R^{12} y R^{13} son independientemente H;
alquilo(C_{1}-C_{5});
cicloalquilo(C_{3}-C_{6}); o fenilo
sustituido opcionalmente por uno o dos de: un átomo de halógeno,
alquilo(C_{1}-C_{2}),
fluoroalquiloC_{1}, alcoxi(C_{1}-C_{2})
o fluoroalcoxiC_{1};
o R^{12} y R^{13} conjuntamente son
-(CH_{2})_{n}^{6}- o
-C(O)-(CH_{2})_{n}^{7}- o
-C(O)-(CH_{2})_{n}^{7}-C(O)-
o
-(CH_{2})_{n}^{8}-X^{12}-(CH_{2})_{n}^{9}-
o
-C(O)-X^{12}-(CH_{2})_{n}^{10}-
en los que: n^{6} es 3, 4, 5 ó 6, n^{7} es 2, 3, 4, ó 5, n^{8}
y n^{9} y n^{10} son independientemente 2 ó 3 y X^{12} es O o
NR^{14a} en los que R^{14a} es H,
alquilo(C_{1}-C_{2}) o
C(O)Me;
R^{15} es un átomo de hidrógeno (H);
alquilo(C_{1}-C_{4});
cicloalquilo(C_{3}-C_{6}); o fenilo
sustituido opcionalmente por uno o dos de: un átomo de halógeno,
alquilo(C_{1}-C_{2}),
fluoroalquiloC_{1}, alcoxi(C_{1}-C_{2})
o fluoroalcoxiC_{1};
R^{15a}, independientemente de otro R^{15a},
es un átomo de hidrógeno (H) o
alquilo(C_{1}-C_{4});
R^{16} y R^{16a} son independientemente:
alquilo(C_{1}-C_{6});
cicloalquilo(C_{3}-C_{6})
sustituido opcionalmente por un sustituyente oxo (=O), OH o
alquilo(C_{1}-C_{2});
cicloalquil(C_{3}-C_{6})-CH_{2}-;
piridinilo sustituido opcionalmente en un
carbono del anillo por uno de: un átomo de halógeno,
alquilo(C_{1}-C_{2}),
fluoroalquiloC_{1}, alcoxi(C_{1}-C_{2})
o fluoroalcoxiC_{1};
Ar^{5c};
fenilo sustituido opcionalmente por uno o dos
de: un átomo de halógeno,
alquilo(C_{1}-C_{2}),
fluoroalquiloC_{1}, alcoxi(C_{1}-C_{2})
o fluoroalcoxiC_{1};
bencilo sustituido opcionalmente en un átomo de
carbono aromático por uno o dos de: un átomo de halógeno,
alquilo(C_{1}-C_{2}),
fluoroalquiloC_{1}, alcoxi(C_{1}-C_{2})
o fluoroalcoxiC_{1}; o
un anillo heterocíclico saturado de 4-, 5-, 6- ó
7- miembros conectado a un carbono del anillo y que contiene uno o
dos heteroátomos del anillo seleccionados independientemente de O,
S, y N; en el que cualquiera de los nitrógenos del anillo que están
presentes se presentan como NR^{27} donde R^{27} es H,
alquilo(C_{1}-C_{2}) o
-C(O)Me; y en el que el anillo se sustituye
opcionalmente en el carbono por un sustituyente
alquilo(C_{1}-C_{2}) u oxo (=O), con tal
que cualquier sustituyente oxo (=O) se sustituya en un átomo de
carbono del anillo unido a un nitrógeno del anillo;
en el que Ar^{5a}, Ar^{5b} y Ar^{5c}
es/son independientemente un anillo heterocíclico aromático de 5
miembros que contiene un O, S o NR^{15a} en el anillo de 5
miembros, en el que el anillo de 5 miembros adicionalmente puede
contener opcionalmente uno o dos átomos de N, y en el que el anillo
heterocíclico se sustituye opcionalmente en un átomo de carbono del
anillo por uno de: un átomo de halógeno,
alquilo(C_{1}-C_{2}),
fluoroalquiloC_{1}, -CH_{2}OH,
-CH_{2}-O-alquilo(C_{1}-C_{2}),
OH (incluyendo el tautómero ceto del mismo) o
-CH_{2}-NR^{28}R^{29} en el que R^{28} y
R^{29} son independientemente H o metilo;
y R^{17} es un átomo de hidrógeno (H);
alquilo(C_{1}-C_{4}) (por ejemplo
alquilo(C_{1}-C_{2});
fluoroalquilo(C_{1}-C_{2});
cicloalquilo(C_{3}-C_{6});
-(CH_{2})_{p}^{6}-C(O)R^{16}
en el que p^{6} es 0, 1, 2 ó 3 (preferiblemente p^{6} es 0);
-(CH_{2})_{p}^{6}-C(O)NR^{12}R^{13};
-(CH_{2})_{p}^{6}-C(O)OR^{16};
-(CH_{2})_{p}^{6}-C(O)OH;
-SO_{2}R^{16};
-C(O)-CH_{2}-NR^{12}R^{13};
-C(O)-CH_{2}-NR^{15a}-C(O)-alquilo(C_{1}-C_{3});
-C(O)-CH_{2}-O-alquilo(C_{1}-C_{3});
o fenilo o bencilo en el que el fenilo o bencilo se sustituye
opcionalmente en un átomo de carbono aromático por uno o dos de: un
átomo de halógeno, alquilo(C_{1}-C_{2}),
fluoroalquiloC_{1}, alcoxi(C_{1}-C_{2})
o fluoroalcoxiC_{1};
R^{19} es
alquilo(C_{1}-C_{4});
-(CH_{2})_{n}^{20}-OR^{20} en el que
n^{20} es 1, 2, 3 ó 4 y R^{20} es un átomo de hidrógeno (H) o
alquilo(C_{1}-C_{4});
-CH(Me)-OH; -CH_{2}-SH;
-CH_{2}-CH_{2}-S-Me;
bencilo; o (4-hidroxifenil)metilo (es decir.
4-hidroxibencilo); y
R^{30}, independientemente de otro R^{30},
es un átomo de hidrógeno (H),
alquilo(C_{1}-C_{4}) o
cicloalquilo(C_{3}-C_{6}); y
Het^{1}, independientemente de otro Het^{1},
es un anillo heterocíclico saturado de 4-, 5-, 6- ó 7- miembros
conectado a un carbono del anillo y que contiene uno o dos
heteroátomos del anillo seleccionados independientemente de O, S, y
N; en el que cualquiera de los nitrógenos del anillo que están
presente se presentan como NR^{31} donde R^{31} es H,
alquilo(C_{1}-C_{2}) o
-C(O)Me; y en el que el anillo se sustituye
opcionalmente en el carbono por un sustituyente
alquilo(C_{1}-C_{2}) u oxo (=O), con tal
que cualquier sustituyente oxo (=O) se sustituya en un átomo de
carbono del anillo unido a un nitrógeno del anillo;
a condición de que:
cuando R^{3} es el grupo heterocíclico de
subfórmula (bb), n^{1} es 1, e Y es NR^{10}, entonces: o (a)
R^{10} no es alquilo(C_{1}-C_{4}) o
fluoroalquilo(C_{1}-C_{2}) o
CH_{2}C(O)NH_{2};
o (b) R^{10} es metilo y el compuesto es:
1-etil-N-(2-etilbutil)-4-[(1-metilpiperidin-4-il)amino]-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida
o
1-etil-N-(4-fluorofenil)-4-[(1-metilpiperidin-4-il)amino]-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida;
y a condición del que cuando X es OR^{5a}, el
compuesto es diferente del compuesto en el que R^{1} es metilo, X
es OEt, y R^{3} es ciclopentilo.
La mayoría de los siguientes procedimientos
sintéticos que siguen se ejemplifican mediante compuestos de fórmula
(A) en los que R^{2} es un átomo de hidrógeno (H). Sin embargo,
alguno o todos de estos procedimientos también se pueden utilizar
con una modificación adecuada, por ejemplo, de materiales de partida
y reactivos, para preparar compuestos de la fórmula de referencia
(A) en los que R^{2} es diferente a H.
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Procedimiento
A
Los compuestos de fórmula (I) cuando X =
OR^{5a}, se pueden preparar según el procedimiento descrito por Yu
y col,. en J. Med Chem., 2001, 44, 1025-1027,
mediante la reacción de un compuesto de fórmula (II) con una amina
de fórmula R^{3}NH_{2}. Preferiblemente la reacción se lleva a
cabo en presencia de una base tal como trietilamina o
N,N-diisopropiletilamina, y/o en un disolvente
orgánico tal como etanol, dioxano o acetonitrilo. La reacción puede
requerir calentamiento, por ejemplo, hasta aproximadamente
60-100ºC, por ejemplo aproximadamente
80-90ºC:
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\newpage
Los compuestos de fórmula (II) también se
describen en la referencia anterior y se pueden preparar mediante la
reacción de un compuesto de fórmula (III) con, por ejemplo, malonato
de dietiletoximetileno (donde R^{5a} = Et) con calentamiento,
seguido de reacción con oxicloruro de fósforo, otra vez con
calentamiento:
\vskip1.000000\baselineskip
Cuando el aminopirazolo deseado de fórmula (III)
no está comercialmente disponible (por ejemplo, R^{1} =
CH_{2}Ph), la preparación se puede llevar a cabo mediante
procedimientos descritos por Dorgan y col., en J. Chem. Soc., Perkin
Trans. 1, (4), 938-42; 1980, mediante la reacción de
cianoetilhidrazina con un aldehído adecuado de fórmula R^{40}CHO
en un disolvente tal como etanol, con calentamiento, seguido de
reducción con, por ejemplo, sodio en un disolvente tal como
t-butanol. R^{40} se debe elegir de manera que contenga un
átomo de carbono menos que R^{1}, por ejemplo R^{40} = metilo
proporcionará R^{1} = etilo.
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En una realización alternativa del procedimiento
A, el sustituyente 4-cloro en el compuesto de
fórmula (II) se puede reemplazar por un átomo de halógeno, tal como
un átomo de bromo o preferiblemente un átomo de cloro, en un
compuesto de fórmula (IIA) como se define más adelante. En esta
realización del Procedimiento A, el compuesto de fórmula (IIA) se
hace reaccionar con la amina de fórmula R^{3}NH_{2}.
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Procedimiento
B
Los compuestos de fórmula de referencia (A)
cuando X = NR^{4}R^{5}, se pueden preparar mediante la reacción
de un compuesto de fórmula (IV) con una amina de fórmula
R^{3}NH_{2}. Preferiblemente la reacción se lleva a cabo en
presencia de una base, tal como trietilamina o
N,N-diisopropiletilamina, y/o en un disolvente
orgánico tal como etanol, THF, dioxano o acetonitrilo. La reacción
puede requerir calentamiento, por ejemplo, hasta aproximadamente.
60-100ºC o aproximadamente 80-90ºC,
por ejemplo durante 8-48 ó 12-24
horas:
Los compuestos de fórmula (IV) se pueden
preparar en un procedimientos de dos etapas según lo describen Bare
y col., en J. Med. Chem. 1989, 32, 2561-2573.
Este procedimiento implica, primero, la reacción de un compuesto de
fórmula (V) con cloruro de tionilo (u otro agente adecuado para
formar un cloruro de ácido a partir de un ácido carboxílico), bien
en un disolvente orgánico tal como cloroformo o THF, en forma de una
solución pura. Esta reacción puede requerir calentamiento y el
intermedio así formado se puede o no aislar. La etapa dos implica la
reacción con una amina de fórmula R^{4}R^{5}NH, en un disolvente
orgánico tal como THF o cloroformo y también puede implicar el uso
de una base tal como trietilamina o diisopropiletilamina:
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Los compuestos de fórmula (V) se pueden preparar
mediante hidrólisis de un éster de fórmula (II) según el
procedimiento descrito por Yu y col., en J. Med Chem., 2001,
44, 1025-1027. Preferiblemente este procedimiento
implica la reacción con una base tal como hidróxido sódico o
hidróxido potásico en un disolvente tal como etanol acuoso o dioxano
acuoso:
En una realización alternativa del procedimiento
B, el sustituyente 4-cloro en el compuesto de
fórmula (IV) se puede reemplazar por un átomo de halógeno, tal como
un átomo de bromo o preferiblemente un átomo de cloro, en un
compuesto de fórmula (IVA) como se define más adelante. En esta
realización del Procedimiento B, el compuesto de fórmula (IVA) se
hace reaccionar con la amina de fórmula R^{3}NH_{2}.
\vskip1.000000\baselineskip
Procedimiento
C
Los compuestos de fórmula de referencia (A)
también se pueden preparar según el procedimiento descrito por Bare
y col., en J. Med. Chem. 1989, 32, 2561-2573,
que implica la reacción de un compuesto de fórmula (VI), en que
-O-R^{35} es un grupo saliente que se puede
desplazar por una amina, con una amina de fórmula R^{3}NH_{2}.
El grupo saliente -O-R^{35} puede ser
-O-alquilo(C_{1}-C_{4}),
(en particular -O-Et),
o-O-S(O)_{2}-R^{37},
en la que R^{37} es alquilo C_{1-8} (por ejemplo
alquilo(C_{1}-C_{4}) o
alquilo(C_{1}-C_{2}) tal como metilo),
fluoroalquilo (C_{1}-C_{6}) (por ejemplo
fluoroalquilo (C_{1}-C_{4}) o fluoroalquilo
(C_{1}-C_{2}) tal como CF_{3} o
C_{4}F_{9}), o fenilo en la que el fenilo está opcionalmente
sustituido por uno o dos de independientemente alquilo
(C_{1}-C_{2}), halógeno o alcoxi
(C_{1}-C_{2}), (tal como fenilo
4-metil-fenilo). La reacción se
puede llevar a cabo con o sin disolvente y puede requerir
calentamiento:
Los compuestos de fórmula (VI) (también
descritos en la referencia anterior) se pueden preparar mediante la
reacción de un compuesto de fórmula (VII) con un agente alquilante
adecuado de fórmula R^{1}-X, donde X es un grupo
saliente tal como halógeno. La reacción también se puede llevar a
cabo en presencia de una base tal como carbonato potásico, en un
disolvente anhidro tal como DMF:
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\vskip1.000000\baselineskip
La preparación de los compuestos de fórmula VII,
por ejemplo donde OR^{35} es OEt mediante escisión oxidante de
compuestos de fórmula VII la describen Bare y col., en J. Med.
Chem. 1989, 32, 2561-2573 (referida también
adicionalmente a Zuleski y col., en J. Drug. Metab. Dispos., 1985,
13,139).
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\vskip1.000000\baselineskip
En otra realización del procedimiento C, el
compuesto de fórmula (VI) se puede reemplazar por un compuesto de
fórmula (VIA), en la que X es NR^{4}R^{5} u OR^{5a} como se ha
definido en esta memoria descriptiva:
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\vskip1.000000\baselineskip
En esta realización del Procedimiento C, el
compuesto de fórmula (VIA) se hace reaccionar con la amina de
fórmula R^{3}NH_{2}.
\newpage
Procedimiento
D
Para formar un compuesto de fórmula de
referencia (A) en la que X = NR^{4}R^{5}, un compuesto de
fórmula de referencia (A) pero en la que X = OH (un ácido
carboxílico) se pueda convertir en un compuesto activado de fórmula
de referencia (A) pero en el que X = un grupo saliente X^{1}
sustituible por una amina (un compuesto de fórmula (x) como se
define más adelante, en la que X^{1} es un grupo saliente; y
posteriormente el compuesto activado se puede hacer reaccionar con
una amina de fórmula R^{4}R^{5}NH.
\vskip1.000000\baselineskip
Por ejemplo, el compuesto activado (el compuesto
de fórmula (X)) puede ser el cloruro de ácido, es decir, un
compuesto activado de fórmula de referencia (A) pero en la que el
grupo saliente X^{1} = Cl. Esto se puede formar a partir de un
ácido carboxílico (X = OH, el compuesto de fórmula (IX)), por
ejemplo, mediante reacción con cloruro de tionilo, o bien en un
disolvente orgánico tal como cloroformo o sin disolvente. Véase por
ejemplo los ejemplos 81-85. Alternativamente, el
compuesto activado (el compuesto de fórmula (X)) puede ser un éster
activado en el que el grupo saliente X^{1} es
\vskip1.000000\baselineskip
El último compuesto activado de fórmula (X) se
puede formar a partir del ácido carboxílico (X = OH, el compuesto de
fórmula (IX))
o bien
(a) mediante la reacción del ácido carboxílico
con una carbodiimida tal como EDC, que es
1-etil-3-(3'-dimetilaminopropil)carbodiimida
y es también
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida,
o una sal del mismo por ejemplo, sal clorhidrato, preferiblemente
seguido de la reacción del producto resultante con
1-hidroxibenzotriazol (abreviadamente HOBT);
reacción (a) que usualmente se lleva a cabo en presencia de un
disolvente (preferiblemente anhidro) tal como formamida de dimetilo
(abreviadamente DMF) o acetonitrilo y/o preferiblemente en
condiciones anhidras y/o usualmente a temperatura ambiente (por
ejemplo, entre aproximadamente 20 y aproximadamente 25ºC); o (b)
mediante la reacción con tetrafluoroborato de
2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio
(abreviadamente TBTU) o hexafluorofosfato de
O-(7-Azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio
(abreviadamente HATU), en presencia de una base tal como
diisopropiletilamina (^{i}Pr_{2}Net = DIPEA), y usualmente en
presencia de un disolvente tal como formamida de dimetilo
(abreviadamente DMF) o acetonitrilo y/o preferiblemente en
condiciones anhidras y/o usualmente a temperatura ambiente (por
ejemplo, entre aproximadamente 20 y aproximadamente 25ºC).
El ácido carboxílico en el que X = OH (el
compuesto de fórmula (IX) más adelante) usualmente se prepara
mediante hidrólisis del éster correspondiente de fórmula (I) en la
que X es OR^{5a}. Este ester se puede preparar él mismo mediante
cualquiera de los procedimientos A, C, E o F como se ha descrito en
esta memoria descriptiva.
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Procedimiento
D1
Éste es el mismo que el Procedimiento D, pero
implica la reacción del compuesto activado de fórmula (X), en la que
X^{l} = un grupo saliente sustituible por una amina (por ejemplo
un grupo saliente como se ha definido en esta memoria descriptiva),
con una amina de fórmula R^{4}R^{5}NH.
\newpage
Procedimiento
E
Los compuestos de Fórmula de referencia (A) se
pueden preparar mediante reacción de un compuesto de fórmula (XI)
con un agente alquilante de fórmula R^{1}X^{3}, en la que
X^{3} es un grupo saliente desplazable por el átomo de nitrógeno
de pirazolopiridina en la posición 1 del compuesto de fórmula
(XI):
Se puede usar un agente alquilante adecuado de
fórmula R^{1}X^{3}. Por ejemplo, X^{3} puede ser un átomo de
halógeno tal como un átomo de cloro o más preferiblemente un átomo
de bromo o yodo, o X^{3} puede ser
-O-S(O)_{2}-R^{36}
en el que R^{36} es alquilo C_{1-8} (por
ejemplo, alquilo C_{1-4} o alquilo
C_{1-2} tal como metilo), fluoroalquilo
C_{1-6} (por ejemplo, fluoroalquilo
C_{1-4} o fluoroalquilo C_{1-2}
tal como CF_{3} o C_{4}F_{9}), o fenilo en el que el fenilo
está opcionalmente sustituido por uno o dos de independientemente
alquilo C_{1-2}, halógeno o alcoxi
C_{1-2} (tal como fenilo o
4-metil-fenilo). Preferiblemente la
reacción se lleva a cabo en la presencia de una base; la base puede
por ejemplo comprender o ser carbonato de potasio, carbonato de
sodio, hidruro de sodio, hidruro de potasio, o una ersina básica o
polímero tal como
2-terc-butilimino-2-dietilamino-1,3-dimetil-perhidro-1,3,2-diazafosforina
unido a polímero. Preferiblemente la reacción se lleva a cabo en la
presencia de un disolvente, por ejemplo, un disolvente orgánico tal
como DMF; el disolvente es preferiblemente anhidro.
Los ejemplos del Procedimiento E de alquilación
incluyen los Ejemplos de referencia 183, 185, 186 y 354.
Para los procedimientos preferibles de
preparación de los compuestos de fórmula (XI), véanse por ejemplo
los ejemplos de referencia 19-20, y los intermedios
48 y 54A.
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Procedimiento
F
F1. Un procedimiento de oxidación. Por ejemplo,
el procedimiento de oxidación puede comprender o ser oxidación de
un alcohol a una cetona (por ejemplo, usando reactivo de Jones, por
ejemplo, véase el Ejemplo de referencia 205) u oxidación de un
alcohol o una cetona a ácido carboxílico. El procedimiento de
oxidación puede por ejemplo, puede comprender o ser conversión de
un compuesto que contiene nitrógeno de fórmula (I) o su sal al
N-óxido correspondiente (por ejemplo, usando ácido
meta-cloroperoxibenzoico), por ejemplo conversión de
un compuesto que contiene piridina en el N-óxido de piridina
correspondiente (por ejemplo, los Ejemplos de Referencia
210-212).
F2. Un procedimiento de reducción, por ejemplo
reducción de una cetona o ácido carboxílico en un alcohol.
F3. Acilación, por ejemplo acilación de una
amina (por ejemplo, los ejemplos de referencia
329-349, Ejemplo de referencia 353) o grupo
hidroxi.
F4. Alquilación, por ejemplo alquilación de una
amina o de un grupo hidroxi.
F5. Hidrólisis, por ejemplo, hidrólisis de un
éster al ácido carboxílico correspondiente o su sal (por ejemplo,
los Ejemplos de referencia 351, 488, 489, 650, 651).
F6. Desprotección, por ejemplo, desprotección
(por ejemplo, desacilación o retirada de
t-butiloxicarbonilo (BOC)) de un grupo amina (por
ejemplo, los ejemplos de referencia 320, (321), y (352)).
F7. Formación de un éster o amida, por ejemplo
del ácido carboxílico correspondiente.
F8. Convención de una cetona en la oxima
correspondiente (por ejemplo, los ejemplos de referencia 652, 653,
654 y 680-686).
F9. Sulfonilación, por ejemplo, formación de
sulfonamida mediante reacción de una amina con un haluro de
sulfonilo por ejemplo, un cloruro de sulfonilo (por ejemplo, los
ejemplos de referencia 322-328).
y/o
F10. Transposición de Beckmann de un compuesto
de Fórmula de referencia (A) en otro compuesto de fórmula de
referencia (A), preferiblemente usando cloruro cianúrico
(2,4,6-tricloro-1,3,5-triazina)
conjuntamente con una formamida tal como DMF, por ejemplo, a
temperatura ambiente (véase L.D. Luca, J. Org. Chem., 2002, 67,
6272-6274). La transposición de Beckmann puede por
ejemplo comprender la conversión de un compuesto de fórmula (I) en
la que NHR^{3} es de sub-fórmula (02)
en un compuesto de fórmula (I) en
la que NHR^{3} es de sub-formula
(m3)
por ejemplo, como se ilustra en los
ejemplos de referencia 658 y
659.
\vskip1.000000\baselineskip
Por lo tanto la presente invención también
proporciona un procedimiento de preparación de un compuesto de
Fórmula de referencia (A) o su sal:
en la que R^{l}, R^{2}, R^{3}
y X con como se ha definido en esta memoria descriptiva,
comprendiendo el
procedimiento:
(a) para un compuesto de Fórmula de referencia
(A) en la que X = OR^{5a}, reacción de un compuesto de fórmula
(IIA):
en la que Hal es un átomo de
halógeno (tal como un átomo de bromo o preferiblemente un átomo de
cloro),
con una amina de fórmula R^{3}NH^{2}, o
(b) para un compuesto de Fórmula de referencia
(A) en la que X = NR^{4}R^{5}, reacción de un compuesto de
fórmula (IVA):
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\vskip1.000000\baselineskip
en la que Hal es un átomo de
halógeno (tal como un átomo de bromo o preferiblemente un átomo de
cloro),
con una amina de fórmula R^{3}NH^{2}, o
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(c) reacción de un compuesto de fórmula
(VIA):
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la que
-O-R^{35} es un grupo saliente desplazable por una
amina (tal como -O-alquilo C
_{l-4} u
-O-S(O)_{2}-R^{37}),
con una amina de fórmula R^{3}NH^{2}; o
\vskip1.000000\baselineskip
(c) formando un compuesto de Fórmula de
referencia (A) en la que X = NR^{4}R^{5}, conversión de un
compuesto de fórmula (IX) en un compuesto activado de fórmula (X) en
la que X^{l} = un grupo saliente sustituible por una amina:
\vskip1.000000\baselineskip
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y posterior reacción del compuesto
activado de fórmula (X) con una amina de fórmula R^{4}R^{5}NH;
o
\vskip1.000000\baselineskip
(d1) formando un compuesto de Fórmula de
referencia (A) en la que X = NR^{4}R^{5} reacción de un
compuesto activado de fórmula (X) como se ha definido anteriormente
con una amina de fórmula R^{4}R^{5}NH; o
\newpage
(e) reacción de un compuesto de fórmula
(XI):
con un agente alquilante de fórmula
R^{1}-X^{2}, donde X^{2} es un grupo saliente
desplazable por el átomo de nitrógeno de pirazolopiridina en la
posición 1 del compuesto de fórmula (XI);
o
\vskip1.000000\baselineskip
(f) conversión de un compuesto de Fórmula de
referencia (A) o su sal en otro compuesto de fórmula de referencia
(A) o su sal;
y opcionalmente convertir el compuesto de
Fórmula de referencia (A) en una sal del mismo por ejemplo, una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo.
\vskip1.000000\baselineskip
En los procedimientos (d) y/o (d1), el compuesto
activado de fórmula (X) en la que X^{1} = un grupo saliente
sustituible por una amina puede ser el cloruro de ácido es decir, un
compuesto activado de fórmula (X) en la que X^{1} = C1. Como
alternativa, el compuesto activado de fórmula (X) puede ser un éster
activado en el que el grupo saliente X^{1} es
Las características preferidas de los
procedimientos (a), (b), (c), (d), (d1) y (e), independientemente
entre sí, son como se han descrito anteriormente para los
procedimientos A, B, C, D, D1 y E, realizándose todos los cambios
necesarios.
La presente descripción también proporciona: (g)
un procedimiento de preparación de una sal farmacéuticamente
aceptable de un compuesto de la Fórmula de referencia (A) que
comprende la conversión del compuesto de Fórmula de referencia (A) o
una sal del mismo en la sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
(Véase por ejemplo los Ejemplos y los ejemplos de referencia 490,
491, 518A, 593).
La presente descripción también proporciona un
compuesto de Fórmula de referencia (A) o una sal del mismo,
preparado mediante un procedimiento como se ha definido en esta
memoria descriptiva.
\vskip1.000000\baselineskip
La presente invención también proporciona un
compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del
mismo para uso como una sustancia terapéutica activa en un mamífero
tal como un ser humano. El compuesto o sal puede ser para uso en el
tratamiento y/o profilaxis de cualquiera de las
enfermedades/afecciones descritas en esta memoria descriptiva (por
ejemplo, para uso en el tratamiento y/o profilaxis de una enfermedad
y/o alérgica en un mamífero) y/o para uso como un inhibidor de
fosfodiesterasas por ejemplo, para uso como un inhibidor de la
fosfodiesterasa 4 (abreviadamente PDE4). "Terapia" puede
incluir tratamiento y/o profilaxis.
También se proporciona el uso de un compuesto de
fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la
fabricación de un medicamento (por ejemplo una composición
farmacéutica) para el tratamiento y/o profilaxis de cualquiera de
las enfermedades/afecciones descritas en esta memoria descriptiva en
un mamífero tal como un ser humano, por ejemplo para el tratamiento
y/o profilaxis de una enfermedad inflamatoria y/o alérgica en un
mamífero tal como un ser humano.
Los inhibidores de la fosfodiesterasa 4 se cree
que son útiles en el tratamiento y/o profilaxis de una diversidad
de enfermedades 7 afecciones, especialmente enfermedades
inflamatorias y/o alérgicas, en mamíferos tales como seres humanos,
por ejemplo: asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD)
(por ejemplo, bronquitis crónica y/o enfisema), dermatitis atópica,
urticaria, rinitis alérgica, conjuntivitis alérgica, conjuntivitis
vernal, granuloma eosinófilo, soriasis, artritis reumatoide, choque
séptico, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, lesión por
reperfusión del miocardio y cerebro, glomerulonefritis crónica,
choque endotóxico, síndrome de insuficiencia respiratoria en
adultos, esclerosis múltiple, alteración cognitiva (por ejemplo en
un trastorno neurológico tal como enfermedad de Alzheimer)
depresión o dolor, colitis ulcerosa y/o enfermedad de Crohn a menudo
son colectivamente denominadas como enfermedad inflamatoria del
intestino.
En el tratamiento y/o profilaxis, la enfermedad
inflamatoria y/o alérgica es preferiblemente la enfermedad pulmonar
obstructiva crónica (abreviadamente COPD), asma, o rinitis alérgica
en un mamífero (por ejemplo, un ser humano). Más preferiblemente,
el tratamiento y/o profilaxis es de COPD o asma en un mamífero (por
ejemplo, un ser humano).
Los inhibidores de PDE4 se cree que son eficaces
en el tratamiento de asma (por ejemplo, véase M.A. Giembycz,
Drugs, Feb. 2000, 59 (2), 193-212; Z. Huang y
col., Current Opinion in Chemical Biology, 2001, 5:
432-438; H.J. Dyke et al., Expert Opinion on
Investigational Drugs, January 2002, 11 (1), 1-13;
C. Bumouf et al., Current Pharmaceutical Design, 2002, 8
(14), 1255-1296; A.M. Doherty, Current Opinion Chem.
Biol., 1999,3(4), 466-473; y referencias
citadas en ellas).
Los inhibidores de PDE4 se cree que son eficaces
en el tratamiento de COPD (por ejemplo, véase S.L. Wolda, Emerging
Drugs, 2000, 5(3), 309-319; Z. Huang et
al., Current Opinion in Chemical Biology, 2001, 5:
432-438; H.J. Dyke et al., Expert Opinion on
Investigational Drugs, enero 2002, 11 (1), 1-13; C.
Burnouf et al., Current Pharmaceutical Design, 2002,
8(14), 1255-1296; A.M. Doherty, Current
Opinion Chem. Biol., 1999, 3(4), 466-473; y
referencias citadas en ellas). COPO a menudo se caracteriza por la
presencia de obstrucción de las vías aéreas debido a bronquitis
crónica y/o enfisema (S. L. Wolda, Emerging 15 Drugs, 2000, 5 (3),
309-319).
Los inhibidores de PDE4 se cree que son eficaces
en el tratamiento de rinitis alérgica (por ejemplo, véase B.M.
Schmidt et al., J. Allergy & Clinical Immunology, 108
(4), 2001,530-536).
Los inhibidores de PDE4 se cree que son eficaces
en el tratamiento de artritis reumatoide y esclerosis múltiple (por
ejemplo, véase H.J. Dyke et al., Expert Opinion on
Investigational Drugs, enero 2002, 11 (1), 1-13; C.
Burnouf et al., Current Pharmaceutical Design, 2002, 8 (14),
1255-1296; y A.M. Doherty, Current Opinion Chem.
Biol., 1999,3 (4), 466-473; y las referencias
citadas en ellas). Véase por ejemplo, A.M. Doherty, Current Opinion
Chem. Biol., 1999, 3 (4), 466-473 y las referencias
citadas en ellas para uso en dermatitis atópica.
Los inhibidores de PDE4 se han sugerido por
tener propiedades analgésicas y de este modo siendo eficaces en el
tratamiento de dolor (A. Kumar et al., Indian J. Exp. Biol.,
2000, 38 (1), 26-30).
En la invención, el tratamiento y/o profilaxis
puede ser de alteración cognitiva por ejemplo alteración cognitiva
en un trastorno neuronal tal como un trastorno neurológico tal como
enfermedad de Alzheimer. Por ejemplo, el tratamiento y/o profilaxis
puede comprender la potenciación cognitiva por ejemplo en un
trastorno neurológico. Véase por ejemplo: H.T. Zhang et al.
in: Psychopharmacology, junio 2000, 150(3),
311-316 y Neuropsychopharmacology, 2000, 23 (2),
198-204; y T. Egawa et al., Japanese J.
Pharmacol., 1997,75 (3), 275-81.
Los inhibidores de PDE4 tal como rolipram se han
sugerido por tener propiedades antidepresivas (por ejemplo, J. Zhu
et al., CNS Drug Reviews, 2001,7 (4),
387-398; O'Donnell, Expert Opinion on
Investigational Drugs, 2000, 9 (3), 621-625; y H.T.
Zhang et al., Neuropsychopharmacology, octubre 2002, 27 (4),
587-595).
\vskip1.000000\baselineskip
Para uso en medicina, los compuestos de la
presente invención se administran usualmente en forma de una
composición farmacéutica. Por lo tanto, la presente invención
proporciona en un aspecto adicional una composición farmacéutica
que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo y uno o más vehículos y/o
excipientes farmacéuticamente aceptables.
La composición farmacéutica puede ser para uso
en el tratamiento y/o profilaxis de cualquiera de las afecciones
descritas en esta memoria descriptiva.
La invención también proporciona un
procedimiento de preparación de una composición farmacéutica que
comprende un compuesto de fórmula (1), como se ha definido en esta
memoria descriptiva o una sal farmacéuticamente aceptable del
mismo, uno o más vehículos y/o excipientes farmacéuticamente
aceptables, comprendiendo el procedimiento la mezcla del compuesto o
sal con uno o más vehículos y/o excipientes farmacéuticamente
aceptables.
La invención también proporciona una composición
farmacéutica preparada mediante dicho procedimiento.
Los compuestos de fórmula (I) y/o la composición
farmacéutica se puede administrar, por ejemplo, mediante
administración oral, parenteral (por ejemplo, intravenosa,
subcutánea, o intramuscular) inhalada o nasal. Por consiguiente, la
composición farmacéutica es preferiblemente adecuada para
administración oral, parenteral (por ejemplo, intravenosa,
subcutánea, o intramuscular) inhalada o nasal. Más preferiblemente,
la composición farmacéutica es adecuada para inhalación o
administración, por ejemplo a un mamífero tal como un ser humano.
La administración inhalada implica la administración tópica al
pulmón, por ejemplo, mediante un aerosol o composición de polvo
seco. La administración oral a un ser humano es la más
preferida.
Una composición farmacéutica adecuada para
administración oral puede ser un líquido o un sólido; por ejemplo
puede ser un jarabe, suspensión o emulsión, un comprimido, una
cápsula o una pastilla.
Una formulación líquida generalmente consistirá
en una suspensión o solución del compuesto o sal farmacéuticamente
aceptable en un (unos) vehículo (s) farmacéuticamente aceptable
adecuado, por ejemplo un disolvente acuoso tal como agua, etanol o
glicerina, o un disolvente no acuoso, tal como polietilenglicol o un
aceite. La formulación también puede contener un agente de
suspensión, agente conservante, aromatizante y/o colorante.
Una composición farmacéutica adecuada para
administración oral que es un comprimido comprende uno o más
vehículos y/o excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados
para preparar formulaciones de comprimidos. Los ejemplos de tales
vehículos incluyen lactosa y celulosa. El comprimido puede también o
en lugar contener uno o más excipientes farmacéuticamente
aceptable, por ejemplo agentes aglutinantes, lubricantes tales como
estearato de magnesio, y/o disgregantes de comprimidos.
Una composición farmacéutica adecuada para
administración oral que es una cápsula se puede preparar utilizando
procedimientos de encapsulación. Por ejemplo, gránulos que contienen
el ingrediente activo se pueden preparar usando un vehículo
farmacéuticamente aceptable y después llenarse en una cápsula dura
de gelatina. Como alternativa, una dispersión o suspensión se puede
preparar utilizando cualquier vehículo farmacéuticamente aceptable,
por ejemplo, una goma acuosa o un aceite y después la dispersión o
suspensión se llena en una cápsula blanda de gelatina.
Preferiblemente la composición en una forma de
dosificación unitaria tal como un comprimido o cápsula para
administración oral, por ejemplo, para administración oral a un ser
humano.
Una composición parenteral puede comprender una
solución o suspensión del compuesto o sal farmacéuticamente
aceptable en un vehículo acuoso estéril o aceite parenteralmente
aceptable. Como alternativa, la solución se puede liofilizar; la
composición farmacéutica parenteral liofilizada se puede reconstruir
con un disolvente adecuado justo antes de la administración.
Las composiciones para administración nasal o
inhalada se pueden formular convenientemente en forma de aerosoles,
gotas, geles o polvos secos.
Las formulaciones de aerosoles, por ejemplo,
para administración inhalada, pueden comprender una solución o
suspensión fina de la sustancia activa en un disolvente acuoso o no
acuoso farmacéuticamente aceptable. Las formulaciones de aerosol se
pueden presentar en cantidades de dosis únicas o múltiples en forma
estéril en un recipiente cerrado herméticamente, que puede tomar la
forma de un cartucho o recarga para uso con un dispositivo
atomizador o inhalador. Como alternativa, el contenedor cerrado
herméticamente puede ser un dispositivo de dispensación unitario
tal como un inhalador nasal de dosis unitaria o un dispensador
aerosol unido a una válvula reguladora (inhalador de dosis
regulada) que se intenta que se deseche una vez que el contenido del
recipiente se ha agotado.
Cuando la forma de dosificación comprende un
dispensador de aerosol, preferiblemente contiene un propulsor a
presión adecuado tal como aire comprimido, dióxido de carbono, o un
propulsor orgánico tal como clorofluorocarbono (abreviadamente CFC)
o hidrofluorocarbono (abreviadamente HFC). Los propulsores CFC
adecuados incluyen diclorodifluorometano, triclorofluorometano y
diclorotetrafluoroetano. Los propulsores de HFC adecuados incluyen
1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropano y
1,1,1,2-tetrafluoroetano. Las formas de dosificación
de aerosoles también pueden tomar la forma de un atomizador de
bomba.
Para composiciones farmacéuticas adecuadas y/o
adaptadas para administración inhalada, se prefiere que el
compuesto o sal de fórmula (I) sea de una forma de tamaño de
partícula reducido y más preferiblemente la forma de tamaño
reducido se obtiene o es obtenible mediante micronización. La
micronización usualmente implica el sometimiento del compuesto/sal
a fuerzas de colisión y de abrasión en una corriente de aire de vía
circular de flujo rápido o en forma de espiral/vórtice que a menudo
incluye un ciclón. El tamaño de partícula preferible (por ejemplo,
valor de D50) del compuesto de tamaño reducido (por ejemplo,
micronizado) o sal está entre aproximadamente 0,5 y aproximadamente
10 micrómetros, por ejemplo, entre aproximadamente 1 y
aproximadamente 5 micras (por ejemplo, medido usando la difracción
por láser). Por ejemplo, se prefiere para el compuesto o sal de
fórmula (I) que tenga un tamaño de partícula definido por: un D10
entre aproximadamente 0,3 y aproximadamente 3 micras (por ejemplo,
aproximadamente 1 micra), y/o un D50 entre aproximadamente 1 y
aproximadamente 5 micras (por ejemplo, aproximadamente
2-5 micras o aproximadamente 2-3
micras), y/o un D90 entre aproximadamente 2 y aproximadamente 20
micras o entre aproximadamente 3 y aproximadamente 10 micras (por
ejemplo, entre aproximadamente 5-8 micras o
aproximadamente 5-6 micras); por ejemplo como se
mide utilizando difracción por láser. La medición de difracción por
láser puede usar un procedimiento seco (suspensión de compuesto/sal
en un flujo de aire que atraviesa el rayo láser) o un procedimiento
húmedo [suspensión de compuesto/sal en un medio de dispersión
líquido, tal como isooctano o (por ejemplo si e el compuesto es
soluble in isooctano) 0,1% de Tween 80 en agua, cruza el rayo
láser]. Con la difracción por láser, el tamaño de particular se
calcula preferiblemente usando el cálculo de Fraunhofer; y/o
preferiblemente se usa para medición un aparato Malvern Mastersizer
o Sympatec.
Un ejemplo ilustrativo no limitante del
procedimiento de micronización preferido se proporciona a
continuación:
\vskip1.000000\baselineskip
\bullet Propósito: micronizar aproximadamente
600-1000 mg del ejemplo 518 ó 518A (descrito
posteriormente en esta memoria descriptiva) utilizando un
micronizador Jetpharma MC1.
\bullet Los materiales precursores (no
micronizados) y los micronizados se analizan para tamaño de
partícula mediante difracción por láser y cristalinidad mediante
PXRD.
El Micronizador Jetpharma MC1 comprende un
alojamiento de molienda en forma de disco horizontal que tiene: una
entrada de compuesto tubular (por ejemplo en ángulo de
aproximadamente 30 grados con la horizontal) para la entrada de una
suspensión de compuesto no micronizado de fórmula (1) o sal en un
flujo de gas, una entrada de gas separada para que entren los
gases, una salida de gas para la salida de gases, y un recipiente
de recogida para el material micronizado recogido. El alojamiento de
molienda tiene dos cámaras: una cámara anular exterior en conexión
gaseosa con la entrada de gas siendo la cámara para recibir el gas
presurizado (por ejemplo, aire o nitrógeno), una cámara de molienda
interna en forma de disco dentro y coaxial con la cámara externa
para micronizar en compuesto/sal de entrada, estando las dos cámaras
separadas por una pared anular. La pared anular (anillo R) tiene
una pluralidad de agujeros taladrados estrechos que conectan las
cámaras interna y externa y separados de manera circunferencial
alrededor de la pares anular. Los agujeros abiertos en la cámara
interna dirigida en ángulo (dirigida de forma parcial entre
radialmente y tangencialmente), y cundo se usa actúan como
boquillas que dirigen el gas presurizado a una alta velocidad desde
la cámara externa al interior de la cámara interna y en una ruta en
espiral interiormente (vórtice) alrededor de la cámara interna
(ciclón). La entrada del compuesto está en comunicación gaseosa con
la cámara interna mediante una boquilla dirigida tangencialmente a
la cámara interna, dentro y cerca de la pared anular. La salida
superior e inferior de diámetro amplio descarga en el eje central
de la cámara de molienda interna que conecta a (a) (salida
inferior) el recipiente de recogida que no tiene salida de aire, y
(b) (salida superior) la salida de gas que conduce al saco de
recogida, filtro y desprendimiento de gas. En interior de la entrada
tubular del compuesto y que se puede mover de manera longitudinal
dentro de él se posiciona una entrada venturi (V) para la entrada
de gases. La entrada del compuesto también tiene una bifurcación
también tiene una bifurcación que se conecta a un puerto de entrada
de material dirigido de manera ascendente para la entrada de
material.
Cuando se usa, el cabezal estrecho de la entrada
venturi (V) se posiciona preferiblemente debajo y ligeramente por
delante del puerto de entrada del material de manera que cuando el
venturi distribuye el gas presurizado (por ejemplo aire o
nitrógeno) el material de alimentación se succiona por la corriente
de gas a través de la entrada del compuesto y se acelera en la
cámara de molienda interna de manera tangencial a una velocidad
subsónica. Dentro de la cámara de molienda el material se acelera
además hasta una velocidad supersónica mediante el sistema
agujero/boquilla alrededor del anillo (R) (pared anular) de la
cámara de molienda. Las boquillas están ligeramente anguladas de
manera que el patrón de aceleración del material esté en la forma de
un vórtice o ciclón dirigido de manera ascendente. El material
dentro de la cámara de molienda circula rápidamente y se produce
colisión de partículas durante el procedimiento, provocando que las
partículas más grandes se fracturen en más pequeñas. La aceleración
"centrífuga" en el vórtice provoca que las partículas mayores
permanezcan en la periferia de la cámara interna mientras de manera
progresiva las partículas más pequeñas se mueven cerca del centro
hasta que salen de la cámara de molienda, en general a través de la
salida inferior, a baja presión y baja velocidad. Las partículas
que salen de la cámara de molienda son más pesadas que el aire y
sedimentan de manera descendente a través de la salida inferior en
el recipiente de recogida, mientras que el gas que se desprende
sube (conjuntamente con una minoría de material micronizado) y se
escapa a la atmósfera a baja presión y baja velocidad.
\vskip1.000000\baselineskip
Se ensambla el micronizador. La distancia de
protrusión venturi del puerto de entrada se ajusta hasta 1,0 cm
respectivamente (por ejemplo de manera que que el cabezal estrecho
de la entrada del venturi se posicione por debajo y ligeramente por
delante del puerto de entrada del material) y se mide con un
microcalibre para asegurar que ase inserta correctamente. Las
presiones del anillo (R) y venturi (V) se ajustan según los valores
especificados en el diseño experimental (referidos en la sección
experimental más adelante) ajustando las válvulas en los manómetros
de presión en el micronizador. Se comprueba la puesta en marcha para
pérdidas y se observa si hay alguna fluctuación en la lectura de los
manómetros de presión.
Hay que considerar que la presión venturi (V) se
mantiene al menos 2 bares (200 kPa) (mayor que la presión del anillo
(R) para evitar la regurgitación de material.
El funcionamiento de la balanza se comprueba con
pesos de calibración. La cantidad especificada del material
precursor (véase la sección en desarrollo experimental) se pesa en
un recipiente de peso de plástico. Después el material se introduce
en el micronizador utilizando una espátula vibracional a una
velocidad de alimentación específica. El tiempo de alimentación de
material y presiones del equipo se controlan durante el
procedimiento de micronización.
Después de llevar a cabo la micronización, se
cierra el suministro de nitrógeno y se tapa la bolsa de recogida
para permitir que las partículas se posen en el recipiente de
recogida en el fondo del micronizador. Se retira la bolsa de
recogida y se coloca a un lado. Se recogen separadamente el polvo
micronizado en el recipiente de recogida y en el ciclón (anterior
al recipiente de recogida) en diferentes viales de recogida pesados
y etiquetados. Se registra el peso del material micronizado. Se
desensambla el micronizador y se aclara el compuesto residual de
PDE4 en la superficie interna micronizador con 70/30 de alcohol
isopropílico/agua y se recoge en un matraz. Después el micronizador
se lava completamente mediante aclarado y enjuagado con un
disolvente adecuado y se seca antes de que se realicen posteriores
procesamientos.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(Tabla pasa a página
siguiente)
\newpage
Material precursor (no micronizado)
(Procedimiento 1): Ejemplo 518 ó 518A
Material precursor (no micronizado)
(Procedimiento 2): Ejemplo 518
Balanza(s) usada(s): Sartorius de
análisis
Profundidad de inserción de la salida venturi:
10,0 mm
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Los parámetros anteriores se pueden variar
usando el conocimiento de los expertos en la técnica.
\vskip1.000000\baselineskip
% de
rendimiento = [(material del recipiente + material del
ciclón)/cantidad de entrada de material] x
100.
En general, se logran rendimientos de muy
aproximadamente 50-75% usando este procedimiento. El
procedimiento 1 no se ha completado. En el procedimiento 2, se
obtuvo un rendimiento de 70,.8% (0,6427 g) del material micronizado
del ejemplo 518, incluyendo material del recipiente de recogida y
material de las paredes internas del cliclón. El análisis del
tamaño de particular del material micronizado del ejemplo 518 del
procedimiento 2, usando medición de difracción por láser con la
versión de lecho largo Malvern Mastersizer, medio de dispersión
0,1% de Tween 80 en agua, velocidad de agitación 1500 rpm, 3 mins de
sonicación antes de la dispersión y análisis final, lentes 300 RF
(Reverse Fourier), cálculo de Fraunhofer con el software
Malvern:
- material del recipiente de recogida: D10 =
0,97 micras, D50 = 3,.86 micras, D90 = 12,64 micras.
- material de las paredes del interior del
ciclón: D10 = 0,95 micras, D50 = 3,42 micras, D90 = 9,42 micras.
\vskip1.000000\baselineskip
Realización alternativa: los ejemplos de los
compuestos/sales de la invención diferentes de los ejemplos
518-518A se pueden micronizar.
Para composiciones farmacéuticas adecuadas y/o
adaptadas para administración inhalada, se prefiere que la
composición farmacéutica sea una composición inhalable de polvo
seco. Dicha composición puede comprender una base de polvo tal como
lactosa o almidón, el compuesto de fórmula (I) o sal del mismo
(preferiblemente en forma de tamaño de partícula reducido, por
ejemplo en forma micronizada) y opcionalmente un modificador de
comportamiento tal como L-leucina, manitol,
trehalosa y/o estearato de magnesio. Preferiblemente, la composición
inhalable de polvo seco comprende una mezcla de polvo seco de
lactosa y el compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo. La
lactosa es preferiblemente hidrato de lactosa por ejemplo,
monohidrato de lactosa y/o es preferiblemente de grado inhalación
y/o lactosa de calidad fina. Preferiblemente, el tamaño de partícula
de la lactosa se define por 90% o más (en peso o en volumen) de las
partículas de lactosa que son inferiores a 1000 micras (por
ejemplo, 10-1000 micras, por ejemplo,
30-1000 micras) de diámetro, y/o 50% o más de las
partículas de lactosa que son inferiores a 500 micras (por ejemplo,
10-500 micras) de diámetro. Más preferiblemente, el
tamaño de partícula de la lactosa ase define por 90% o más de las
partículas de lactosa que son inferiores a 300 micras (por ejemplo,
10-300 micras, por ejemplo, 50-300
micras) de diámetro, y/o 50% o más de las partículas de lactosa que
son inferiores a 100 micras de diámetro. Opcionalmente, el tamaño
de partícula de la lactosa se define por 90% o más de las partículas
de lactosa que son inferiores a 100-200 micras de
diámetro, y/o 50% o más de las partículas de lactosa que son
inferiores a 40-70 micras de diámetro. Más
importante, se prefiere que aproximadamente entre 3 y
aproximadamente 30% (por ejemplo aproximadamente 10%) (en peso o en
volumen) de las partículas sea inferior a 50 micras o menos de 20
micras de diámetro. Por ejemplo, sin limitación, una cantidad
adecuada de lactosa de calidad inhalación es lactosa E9334 (10% de
finos) (Borculo Domo Ingredients, Hanzeplein 25, 8017 JD Zwolle,
Holanda).
En la composición inhalable de polvo seco,
preferiblemente, el compuesto de fórmula (I) o sal del mismo está
presente entre aproximadamente 0.1% y aproximadamente 70% (por
ejemplo, entre aproximadamente 1% y aproximadamente 50%, por
ejemplo, entre aproximadamente 5% y aproximadamente 40%, por
ejemplo, entre aproximadamente 20 y aproximadamente 30%) en peso de
la composición.
Un ejemplo ilustrativo no limitante de una
composición inhalable de polvo seco es como sigue:
\vskip1.000000\baselineskip
Utilizando una forma de tamaño reducido, por
ejemplo, micronizada del compuesto de fórmula (I) o sal del mismo
(por ejemplo preparada en el ejemplo de micronización anterior), la
mezcla de polvo seco se prepara mediante la mezcla de la cantidad
requerida del compuesto/sal (por ejemplo, 10 mg, 1% p/p) con lactosa
de calidad inhalación que contiene 10% de finos (por ejemplo 990
mg, 99% p/p) en un recipiente de Teflon^{TM}
(politetrafluoroeteno) en un molino de bolas desmembrador Mikro
(pero sin cojinetes de bolas) a ¾ de
velocidad(aproximadamente 2000-2500 rpm)
durante aproximadamente 4 horas en cada concentración de mezcla. El
molino de bolas desmembrador Mikro (sin la bola) (disponible de B.
Braun Biotech International, Schwarzenberger Weg
73-79, D-34212 Melsungen, Alemania;
www.bbraunbiotech.com) comprende una base con un brazo de proyección
con protección superior y vibratorio con protección lateral y al
que se ajusta el recipiente de Teflon^{TM}. La vibración del brazo
lleva a cabo la mezcla.
Otras mezclas: 10% p/p de compuesto/sal (50 mg)
+ 90% p/p de lactosa (450 mg, lactosa de calidad inhalación que
contiene 10% de finos).
La dilución en serie de la mezcla 1% p/p de
mezcla puede lograr mezclas de 0,1% y 0,3% p/p.
Opcionalmente, en particular para composiciones
inhalables de polvo seco, una composición farmacéutica para la
administración inhalada se puede incorporar en una pluralidad de
recipientes de dosis cerrados herméticamente (por ejemplo,
conteniendo la composición de polvo seco) montados longitudinalmente
en una cinta o banda en el interior de un dispositivo de inhalación
adecuado. El recipiente se puede romper o abrir por exfoliación
según la demanda y la dosis, por ejemplo, la composición de polvo
seco, se puede administrar por inhalación mediante el dispositivo
tal como el dispositivo DISKUS^{TM}, comercializado por
GlaxoSmithKline. El dispositivo de inhalación DISKUS^{TM} es
normalmente y sustancialmente como se describe en el documento GB
2.242.134 A. En tal dispositivo al menos un recipiente para la
composición farmacéutica en forma de polvo (preferiblemente al
menos un recipiente que es una pluralidad de recipientes de dosis
cerrados herméticamente montado longitudinalmente en una cinta o
banda) se determina entre dos miembros exfoliables asegurados uno a
otro; el dispositivo comprende: medios que determinan una estación
de apertura para dicho al menos un contenedor; medios de exfoliación
de los miembros separados de la estación de apertura para abrir el
recipiente; y una salida, que comunica con el recipiente abierto, a
través de la que un usuario puede inhalar desde el recipiente
abierto la composición farmacéutica en forma de polvo.
En la composición farmacéutica, una o cada
dosificación unitaria para administración oral o parenteral
preferiblemente contiene entre 0,01 y 3000 mg, más preferiblemente
entre 0,5 y 1000 mg de un compuesto de la fórmula (I) o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo, calculado como la base libre.
Una o cada dosificación unitaria para administración nasal o
inhalada preferiblemente contiene entre 0,001 y 50 mg, más
preferiblemente entre 0,01 y 5 mg de un compuesto de fórmula (I) o
una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, calculada como base
libre.
Un compuesto o sal farmacéuticamente aceptable
de la invención se administra preferiblemente a un mamífero (por
ejemplo, un ser humano) en una dosis diaria oral o parenteral entre
0,001 mg y 50 mg por kg de peso corporal por día (mg/kg/día), por
ejemplo entre 0,01 y 20 mg/kg/día o entre 0,03 y 10 mg/kg/día o
entre 0,1 y 2 mg/kg (día del compuesto de fórmula (I) o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo, calculada como base
libre.
Un compuesto o sal farmacéuticamente aceptable
de la invención se administra preferiblemente a un mamífero (por
ejemplo, un ser humano) en una dosis diaria oral o parenteral entre:
0,0001 y 5 mg/kg/día por ejemplo entre. 0,001 y 1 mg/kg/día o entre
0,005 y 0.3 mg/kg/día, del compuesto de fórmula (I) o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo, calculada como base
libre.
Los compuestos o sales farmacéuticamente
aceptables de la invención se administran preferiblemente en una
dosis diaria (para un paciente adulto) de, por ejemplo, una dosis
oral o parenteral entre 0,01 mg y 3000 mg por día o entre 0,5 y
1000 mg por día, por ejemplo, entre 2 y 500 mg por día, o a una
dosis nasal o inhalada entre 0,001 y 300 mg por día o entre 0,001 y
50 mg por día o entre 0,01 y 30 mg por día o entre 0,01 y 5 mg por
día, del compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente
aceptable del mismo, calculada como base libre.
\vskip1.000000\baselineskip
Los compuestos, sales y/o composiciones
farmacéuticas según la invención se pueden usar también en
combinación con otro agente terapéuticamente activo, por ejemplo, un
agonista del adreno-receptor \beta_{2}, un
antihistamínico, un antialérgico o un agente antiinflamatorio.
De este modo, la invención proporciona, en un
aspecto adicional, una combinación que comprende un compuesto de
fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo junto
con otro agente terapéuticamente activo, por ejemplo un agonista
del adreno-receptor \beta_{2}, un
antihistamínico, un antialérgico, un agente antihistamínico, o un
agente antiinfeccioso.
Preferiblemente el agonista de los
adreno-receptores \beta_{2} es salmeterol (por
ejemplo, en forma de racemato o un solo enatiómero tal como el
enantiómero R), salbutamol, formoterol, salmefamol, fenoterol o
terbutalina o una sal de los mismos, (por ejemplo la sal
farmacéuticamente aceptable de los mismos), por ejemplo la sal
xinafoato de salmeterol, la sal sulfato o base libre de salbutamol o
la sal fumarato de formoterol. Se prefieren los agonistas de los
adreno-receptores \beta_{2} de acción
prolongada, especialmente los que tienen un efecto terapéutica
durante un período de 12-24 horas tales como
salmeterol o formoterol. Preferiblemente el agonista de los
adreno-receptores \beta_{2} es para
administración inhalada, y más preferiblemente el agonista de los
adreno-receptores \beta_{2} está en forma de
tamaño reducido por ejemplo, como se ha definido en esta memoria
descriptiva. Preferiblemente la combinación de agonista de los
adreno-receptores \beta_{2} es para el
tratamiento y/o profilaxis de COPD o asma. Salmeterol o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo. Por ejemplo xinafoato de
salmeterol, se administra preferiblemente a seres humanos a una
dosis inhalada de 25 a 50 microgramos dos veces al día (medida como
la base libre). La combinación con un agonista de los
adreno-receptores \beta_{2} puede ser como se
describe en el documento WO 00/12078.
Los agonistas preferidos de los
adreno-receptores \beta_{2} de acción prolongada
incluyen los descritos en los documentos WO 02/066422A, WO
03/024439, WO 02/070490 y WO 02/076933.
Los agonistas de los
adreno-receptores \beta_{2} de acción prolongada
especialmente preferidos incluyen compuestos de fórmula (XX)
(descritos en el documento WO 02/066422):
o una sal o solvato del mismo, en
el que en la fórmula
(XX):
m^{x} es un número entero entre 2 y 8;
n^{x} es un número entero entre 3 y 11,
con la condición que m^{x} + n^{x} está
entre 5 y 19,
R^{11X} es -XSO_{2}NR^{16X}R^{17X} en el
que X es -(CH_{2})_{p}x- o
alquileno(C_{2}-C_{6});
\newpage
\global\parskip0.900000\baselineskip
R^{16X} y R^{17X} se seleccionan
independientemente entre hidrógeno,
alquilo(C_{1}-C_{6}),
cicloalquilo(C_{3}-C_{7}),
C(O)NR^{18X}
R^{19X}, fenilo y fenil alquil(C_{1}-C_{4})-,
R^{19X}, fenilo y fenil alquil(C_{1}-C_{4})-,
o R^{16X} y R^{17X}, conjuntamente con el
nitrógeno al que se unen forman un anillo de 5-, 6-, ó 7- miembros
que contiene nitrógeno, y R^{16X} y R^{17X} están cada uno
sustituidos opcionalmente por uno o dos grupos seleccionados de
halo, alquilo(C_{1}-C_{6}),
haloalquilo(C_{1}-C_{6}),
alcoxi(C_{1}-C_{6}),
alcoxi(C_{1}-C_{6}) hidroxi sustituido,
-CO_{2}R^{18X}, -SO_{2}NR^{18X}R^{19X},
-CONR^{18X}R^{19X}, -NR^{18X}C(O)R^{19X}, o un
anillo heterocíclico de 5-, 6- ó 7-miembros;
R^{18X} y R^{19X} se seleccionan
independientemente de hidrógeno,
alquilo(C_{1}-C_{6}),
cicloalquilo(C_{3}-C_{6}), fenilo, y
fenil alquil(C_{1}-C_{4})-; y
p^{x} es un número entero entre 0 y 6,
preferiblemente entre 0 y 4;
R^{12X} y R^{13X} se seleccionan
independientemente de hidrógeno,
alquilo(C_{1}-C_{6}),
alcoxi(C_{1}-C_{6}), halo, fenilo y
haloalquilo(C_{1}-C_{6}); y
R^{14X} y R^{15X} se seleccionan
independientemente de hidrógeno,
alquilo(C_{1}-C_{4}) con la condición de
que el número total de átomos de carbono en R^{14X} y R^{15X} no
sean más de 4.
\vskip1.000000\baselineskip
Los agonistas de
adreno-receptores \beta_{2} preferidos se
describen en el documento en WO 02/066422 incluyen:
3-(4-{[6-({(2R)-2-hidroxi-2-[4-hidroxi-3-(hidroximetil)fenil]etill}amino)hexil]oxi}-butil)bencenonsulfonamida
y
3-(3-{[7-({(2R)-2-hidroxi-2-[4-hidroxi-3-hidroximetil)fenil]etil}amino)heptil]-oxi}propil)bencenosulfonamida.
\vskip1.000000\baselineskip
Un agonista preferido de los
adreno-receptores \beta_{2} descrito en el
documento WO 03/024439 es:
4-{(1R)-2-[(6-{2-[(2,6-diclorobencil)oxi]etoxi}hexil)amino]-1-hidroxietil}-2-(hidroximetil)fenol.
\vskip1.000000\baselineskip
Una combinación de un compuesto de fórmula (l) o
sal conjuntamente con un antihistamínico es preferiblemente para la
administración oral (por ejemplo, en forma de una composición
combinada tal como un comprimido combinado), y puede ser para
tratamiento y/o profilaxis de rinitis alérgica. Los ejemplos de
antihistamínicos incluyen metapirileno, o antagonistas de H1 tales
como cetirizina, loratadina (por ejemplo, Clarityn^{TM}),
desloratadina (por ejemplo, Clarinex^{TM}) o fexofenadina (por
ejemplo, Allegra^{TM}).
La invención también proporciona, en un aspecto
adicional, una combinación que comprende un compuesto de fórmula
(1) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo conjuntamente
con un compuesto anticolinérgico, por ejemplo, un antagonista del
receptor muscarínico (M) en particular un antagonista del receptor
M1, M2, M1/M2, o M3, más preferiblemente un antagonista del
receptor M3, todavía más preferiblemente un antagonista del receptor
M3 que selectivamente antagoniza (por ejemplo, antagoniza 10 veces
o más fuertemente) el receptor M3 sobre el receptor M1 y/o receptor
M2. Para las combinaciones de compuestos
anticolinérgicos/antagonistas de receptores muscarínicos (M) con
inhibidores de PDE4, véase, por ejemplo, el documento WO 03/011274
A2 y los documentos WO 02/069945 A2/US 2002/0193393 A1 y US
2002/052312 A1, y algunas o todas estas publicaciones proporcionan
ejemplos de compuestos anticolinérgicos/antagonistas de receptores
muscarínicos (M) que se pueden usar con los compuestos de fórmula
(I) o sales, y/o composiciones farmacéuticamente adecuadas. Por
ejemplo, el antagonista de receptores muscarínicos puede comprender
o ser una sal de ipratropio (por ejemplo, bromuro de ipratropio),
una sal de oxitropio (por ejemplo, bromuro de oxitropio), o más
preferiblemente una sal de tiotropio (por ejemplo, bromuro de
tiotropio); véase por ejemplo, el documento EP 418 716 A1 para
tiotropio.
El compuesto anticolinérgico o antagonista del
receptor muscarínico (M), por ejemplo, antagonista del receptor
M_{3}, es preferiblemente para la administración inhalada, más
preferiblemente en forma de tamaño reducido por ejemplo, como se ha
definido en esta memoria descriptiva. Más preferiblemente, tanto el
antagonista del receptor muscarínico (M) receptor y el compuesto de
fórmula (1) o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo son para
la administración inhalada. Preferiblemente, el compuesto
anticolinérgico o antagonista del receptor muscarínico y el
compuesto de fórmula (I) o sal son para la administración
simultánea. La combinación del antagonista del receptor muscarínico
es preferiblemente para tratamiento y/o profilaxis de COPO.
Otras combinaciones adecuadas incluyen, por
ejemplo, una combinación que comprende un compuesto de fórmula (l)
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo conjuntamente con
otro agente anti-inflamatorio tal como un
corticosteroide anti-inflamatorio; o un fármaco
anti-inflamatorio no esteroide (NSAID) tal como un
antagonista de leukotrieno (por ejemplo, montelukast), un inhibidor
de iNOS, un inhibidor de triptasa, un inhibidor de elastasa, un
antagonista de integrina beta-2, un agonista de
adenosina 2a, un antagonista de CCR^{3}, o un inhibidor de
5-lipoxogenasa); o un agente antiinfeccioso (por
ejemplo, un antibiótico o antiviral). Un inhibidor de iNOS es
preferiblemente para la administración oral. Los inhibidores de iNOS
adecuados (inhibidores de la óxido nítrico sintasa inducibles)
incluyen los descritos en los documentos WO 93/13055, WO 98/30537,
WO 02/50021, WO 95/34534 y WO 99/62875. Los inhibidores de CCR^{3}
adecuados incluyen los descritos en el documento WO 02/26722.
\global\parskip1.000000\baselineskip
En una combinación que comprende un compuesto de
fórmula (l) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo
conjuntamente con un corticosteroide
anti-inflamatorio (que es preferiblemente para el
tratamiento y/o profilaxis de asma, COPD o rinitis alérgica),
después preferiblemente el corticoide
anti-inflamatorio es fluticasona, propionato de
fluticasona (por ejemplo, véase la patente de Estados Unidos
4.335.121), beclometasona, beclometasona
17-propionato éster, beclometasona
17,21-dipropionato éster, dexametasona o un éster de
la misma, mometasona o un éster de la misma, ciclesonida,
budesonida, flunisolida, o un compuesto como se describe en el
documento WO 02/12266 A1 (por ejemplo, según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 22 en ese documento), o una sal
farmacéuticamente aceptable de cualquiera de los anteriores. Si el
corticoide anti-inflamatorio en un compuesto como
se describe en el documento WO 02/12266 A1, entonces preferiblemente
es el Ejemplo 1 en ese documento {que es ácido
6\alpha,9\alpha-difluoro-17\alpha-[(2-furanilcarbonil)oxi]-11\beta-hidroxi-16
\alpha-metil-3-oxoandrosta-1,4-dieno-17\beta-carbotioico
S-fluorometil éster} o ejemplo 41 en esa referencia
{que es ácido
6\alpha,9\alpha-difluoro-11\beta-hidroxi-16a-metil-17
\alpha-[(4-metil-1,3-tiazol-5-carbonil)oxi]-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17\alpha-carbotioico
S-fluorometil éster}, o una sal farmacéuticamente
aceptable de los mismos. El corticoide
anti-inflamatorio es preferiblemente para la
administración intranasal o inhalada. Se prefiere fluticasona
propionato y es preferiblemente para la administración inhalada a un
ser humano o bien (a) a una dosis de 250 microgramos una vez al día
o (b) a una dosis de 50 a 250 microgramos dos veces al día.
También se proporciona una combinación que
comprende un compuesto de fórmula (1) o una sal farmacéuticamente
aceptable del mismo conjuntamente con un agonista del
-adrenoreceptor \beta_{2} y un corticoide
anti-inflamatorio, por ejemplo como se describe en
el documento WO 03/030939 A1. Preferiblemente esta combinación es
para tratamiento y/o profilaxis de asma, COPO o rinitis alérgica.
El agonista del adrenoreceptor \beta_{2} y/o el corticoide
anti-inflamatorio puede ser como se ha descrito
anteriormente y/o como se describe en el documento WO 03/030939 A1.
Lo más preferiblemente, en esta combinación "triple", el
agonista del adrenoreceptor \beta_{2} es salmeterol o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo (por ejemplo, xinafoato de
salmeterol) y el corticoide anti-inflamatorio es
propionato de fluticasona.
La combinación mencionada anteriormente se puede
presentar de manera conveniente para uso en la forma de una
composición farmacéutica y de este modo una composición farmacéutica
que comprende una combinación como se ha definido anteriormente
conjuntamente con uno o más vehículos y/o excipientes
farmacéuticamente aceptables representan un aspecto adicional de la
invención.
Los compuestos individuales de tales
combinaciones se pueden administrar o bien secuencialmente o
simultáneamente en una composición farmacéutica separada o
combinada.
En una realización, la combinación como se ha
definido en esta memoria descriptiva puede ser para administración
simultánea inhalada y se dispone en un dispositivo de inhalación de
combinación. Tal como un dispositivo de inhalación de combinación
es otro aspecto de la invención. Tal dispositivo de inhalación de
combinación puede comprender una composición farmacéutica combinada
para la administración inhalada simultánea (por ejemplo,
composición de polvo seco), comprendiendo la composición todos los
compuestos individuales de la combinación, e incorporándose la
composición en una pluralidad de recipientes de dosis sellados
montados longitudinalmente en una tira o banda en el interior del
dispositivo de inhalación, los recipientes se pueden romper o abrir
por exfoliación bajo demanda; por ejemplo tal dispositivo de
inhalación puede ser sustancialmente como se describe en el
documento GB 2,242,134 A (DISKUS T^{M}) y/o como se ha descrito
anteriormente. Como alternativa, el dispositivo de inhalación de
combinación puede ser tal que los compuestos individuales de la
combinación se pueden administrar de manera simultánea pero se
almacenan de manera separada (o completamente o parcialmente
almacenarse pata las combinaciones triples), por ejemplo, en
composiciones farmacéuticas separadas, por ejemplo como se describe
en el documento PCT/EP03/00598 presentada el 22 de enero de 2003
(por ejemplo como se describe en las reivindicaciones del mismo por
ejemplo, reivindicación 1).
La invención también proporciona un
procedimiento de preparación de una combinación como se ha definido
en esta memoria descriptiva, comprendiendo el procedimiento o
bien:
- (a)
- preparar una composición farmacéutica separada para la administración de los compuestos individuales de la combinación o bien de manera secuencial o simultánea, o
- (b)
- preparar una composición farmacéutica combinada para la administración de los compuestos individuales de la combinación de manera simultánea,
- en la que la composición farmacéutica comprende la combinación conjuntamente con con uno o más vehículos o excipientes farmacéuticamente aceptables.
\vskip1.000000\baselineskip
La invención también proporciona una combinación
como se ha definido en esta memoria descriptiva, preparada mediante
un procedimiento como se ha definido en esta memoria
descriptiva.
\vskip1.000000\baselineskip
La actividad de los compuestos se puede medir en
los procedimientos de ensayos mostrados más adelantes. Los
compuestos preferidos de la invención son inhibidores selectivos de
PDE4, es decir inhiben la PDE4 (por ejemplo, PDE4B y/o PDE4D,
preferiblemente PDE4B) más fuertemente que inhiben PDE3 y/o más
fuertemente que inhiben PDE5 y/o más fuertemente que inhiben
PDE6.
\vskip1.000000\baselineskip
PDE4B de recombinante humano, en particular la
variante de ayuste 2B del mismo (HSPDE4B2B), se describe en el
documento WO 94/20079 y también M.M. McLaughlin y col., "A low
Km, rolipram-sensitive,
cAMP-specific phosphodiesterase from human brain:
cloning and expression of cDNA, biochemical characterisation of
recombinant protein, and tissue distribution of mRNA", J.
Biol. Chem., 1993, 268, 6470-6476. Por
ejemplo, en el ejemplo 1 del documento WO 94/20079, PDE4B de
recombinante humano se describe por expresarse en la cepa GL62 de
Saccharomyces cerevisiae de levadura, por ejemplo después de
la inducción mediante la adición de 150 uM de CuSO_{4} y las
fracciones de sobrenadante a 100,000 x g de lisados de
células de levaduras se describen para uso en la recogida de la
enzima PDE4B.
PDE4D de recombinante humano (HSPDE4D3A) se
describe en el documento de P. A. Baecker y col., "Isolation of a
cDNA encoding a human rolipram-sensitive cyclic AMP
phoshodiesterase (PDE IVD)", Gene, 1994, 138,
253-256.
PDE5 de recombinante humano se describe en el
documento de K. Loughney y col., "Isolation and characterisation
of cDNAs encoding PDE5A, a human cGMP-binding,
cGMP-specific 3',5'-cyclic
nucleotide phosphodiesterase", Gene, 1998, 216,
139-147.
PDE3 se purificó a partir de aorta bovina como
se describe en el documento de H. Coste y P. Grondin,
"Characterisation of a novel potent and specific inhibitor of type
V phosphodiesterase", Biochem. Pharmacol., 1995,
50, 1577-1585.
PDE6 se purificó a partir de retina bovina como
describen: P. Catty y P. Deterre, "Activation and solubilization
of the retinal cGMP-specific phosphodiesterase by
limited proteolysis", Eur. J. Biochem., 1991, 199,
263-269; A. Tar y col., "Purification of bovine
retinal cGMP phosphodiesterase", Methods in Enzymology,
1994, 238, 3-12; y/o D. Srivastava y col.,
"Effects of magnesium on cyclic GMP hidrolysis by the bovine
retinal rod cyclic GMP phosphodiesterase", Biochem. J.,
1995, 308, 653-658.
\vskip1.000000\baselineskip
La capacidad de los compuestos para inhibir la
actividad catalítica en PDE4B o 4D (recombinante humano), PDE3 (de
aorta bovina), PDE5 (recombinante humano) o PDE6 (de retina bovina)
se determinó mediante ensayo de centelleo por proximidad
(abreviadamente SPA) en formato de 96 pocillos. Los compuestos de
ensayos (preferiblemente en forma de una solución en DMSO, por
ejemplo volumen de 0,5 a 1 microlitro (ul) se preincubaron a
temperatura ambiente (por ejemplo 19-23ºC) en
Wallac Isoplates (código 1450-514) con enzima PDE en
tampón Tris-HCl 50 mM pH 7,5, MgCl_{2} 8,3 mM,
EGTA 1,7 mM, 0,05% (p/v) de albúmina sérica bovina durante
10-30 minutos (usualmente 30 minutos). La
concentración de enzima se ajustó de manera que no fuera más de 20%
de hidrólisis del sustrato definido más abajo se produjo en los
pocillos control, sin compuesto, durante la incubación. Para los
ensayos PDE3, PDE4B PDE4D, se añadió fosfato cíclico de
3',5'-[5',8-^{3}H]adenosina (Amersham
Pharmacia Biotech, código TRK.559; o Aersham Biosciences UK Ltd,
Polar Wood, Chalfont St Giles, Buckinghamshire HP8 4SP, UK) para
proporcionar 0,05 uCi por pocillo y a \sim10 nM de concentración
final. Para los ensayos de PDE5 y PDE6, se añadió fosfato cíclico
de 3',5'-[8-^{3}H]guanosina (Amersham
Pharmacia Biotech, código TRK.392) para proporcionar 0,05 uCi por
pocillo y \sim 36 nM de concentración final. Se mezclaron las
placas, por ejemplo que contenían aproximadamente 100 ul de volumen
de mezcla de ensayo, en un agitador orbital durante 5 minutos y se
incubaron a temperatura ambiente durante 1 hora. Se añadieron perlas
de SPA de fosfodiestearasa (Amersham Pharmacia Biotech, código RPNQ
0150) (\sim 1 mg por pocillo) para terminar el ensayo. Se sellaron
las placas y se agitaron y se dejaron reposar a temperatura
ambiente durante entre 35 minutos y 1 hora (preferiblemente 35
minutos) para dejar que las perlas se posaran. El producto
radiactivo unido se midió utilizando un contador de centelleo
WALLAC TRILUX 1450 Microbeta. Para curvas de inhibición, se
ensayaron 10 concentraciones (1,5 nM-30 uM) de cada
compuesto. Se analizaron las curvas utilizando ActivityBase y XLfit
(ID Business Solutions Limited,, 2 Ocean Court, Surrey Research
Park, Guildford, Surrey GU2 70B, Reino Unido) Los resultados se
expresan como valores pCI_{50}.
En una alternativa al ensayo de SPA radiactivo
anterior, la inhibición de PDE4B o PDE4D se puede medir en el ensayo
de Polarización de Fluorescencia (FP) siguiente.
\vskip1.000000\baselineskip
La capacidad de los compuestos de inhibir la
actividad catalítica a PDE4B (recombinante humano) o PDE40
(recombinante humano) se determinó mediante ensayo de IMAP
Polarización de Fluorescencia (FP) (kit IMAP Explorer, disponible
de Molecular Devices Corporation, Sunnydale, CA, Estados Unidos;
Molecular Devices código: R8062) en formato de 384 pocillos. El
ensayo IMAP FP es capaz de medir la actividad de PDE en un formato
de ensayo homogéneo, no radiactivo. El ensayo FP usa la capacidad
de inmovilizar cationes metálicos trivalentes, revestidos sobre
nanopartículas (perlas pequeñitas), para unir el grupo fosfato de
FI-AMP que se produce tras la hidrólisis de
monofosfato de adenosina cíclico (FI-cAMP) marcado
con fluoresceína (FI) a la forma FI-AMP no cíclica.
FI-cAMP no se une. La unión del producto de
FI-AMP a las perlas (recubiertas con los cationes
trivalentes inmovilizados) ralentiza la rotación del
FI-AMP unido y conduce a un incremento en la
relación de polarización de fluorescencia de luz paralela a
perpendicular. La inhibición de la PDE reduce/inhibe este incremento
de señal.
Los compuestos de ensayo (volumen pequeño, por
ejemplo 0,5 a 1 ul, de solución en DMSO) se preincubaron a
temperatura ambiente (temperatura ambiente, por ejemplo,
19-23ºC) en placas de microvaloración de 384
pocillos (proveedor: NUNC, código 262260) con enzima PDE en tampón
10 mM Tris-HCI pH 7,2, 10 mM MgCl_{2}, 0,1% (p/v)
de albúmina sérica bovina, y 0,05% de NaN_{3} durante
10-30 minutos. El nivel de enzima se estableció
mediante experimentación de manera que la reacción era lineal a lo
largo de la incubación. de 3',5'-monofosfato de
adenosina cíclica marcada con Fluoresceína (de Molecular Devices
Corporation, Molecular Devices código: R7091) se añadió para
proporcionar aproximadamente 40 nM de concentración final (volumen
de ensayo final usualmente aproximadamente 25-40
ul). Se mezclaron las placas en un agitador orbital durante 10
minutos y se incubaron a temperatura ambiente durante 40 minutos.
Se añadió el reactivo de unión de IMAP (como se ha descrito
anteriormente, de Molecular Devices Corporation, Molecular Devices
código: R7207) (60 ul de una dilución 1 en 400 en tampón de unión
de la solución madre de kit) para terminar el ensayo. Se dejaron
reposar las placas a temperatura ambiente durante 1 hora. La
relación de Polarización de Fluorescencia (FP) de luz paralela a
perpendicular se midió usando un lector de placas Analyst'M (de
Molecular Devices Corporation). Para las curvas de inhibición, se
ensayaron 10 concentraciones (1,5 nM-30 uM) de cada
compuesto. Se analizaron las curvas usando ActivityBase y XLfit (ID
Businesss Solutions Limited, 2 Ocean Court, Surrey Research Park,
Guildford, Surrey GU2 70B, Reino Unido). Los resultados se
expresaron como valores de pCI_{50}.
En el ensayo de FP, todos los reactivos se
dispensaron usando Multidrop^{TM} (disponible de Thermo Labsystems
Oy, Ratastie 2, PO Box 100, Vantaa 01620, Finlandia).
Para un inhibidor de PDE4 dado, los valores de
inhibición de PDE4B (o PDE40) medidos usando los ensayos SPA y FP
pueden diferir ligeramente. Sin embargo, en un análisis de regresión
de 100 compuestos de ensayo, los valores de inhibición de
PCI_{50} medidos usando los ensayos SPA y FP se han encontrado en
general que coinciden entre 0,5 de unidad logarítmica para PDE4B y
PDE40 (coeficiente de regresión lineal) 0,966 para PDE4B y 0.971
para PDE40; David R. Mobbs et al., "Comparison of the IMAP
Fluorescente Polarisation Assay with the Scintillation Proximity
Assay for Phosphodiesterase Activity", poster to be presented at
2003 Molecular Devices UK & Europe User Meeting, 2 de octubre
de 2003, Oown Hall, Harlow, Essex, Reino Unido).
Los datos biológicos obtenidos de alguno de los
ejemplos y ejemplos de referencia (actividad inhibitoria PDE4B,
bien como una lectura o como media de aproximadamente
2-6 lecturas) son como sigue, en base a las
mediciones actuales. En cada uno de los ensayos de SPA y FP, no es
posible una exactitud absoluta de las mediciones, y las lecturas
proporcionadas son exactas solamente hasta aproximadamente \pm 0,5
de unidad logarítmica, dependiendo del número de lecturas realizadas
y promediadas:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(Tabla pasa a página
siguiente)
Los ejemplos y ejemplos de referencia,
excluyendo los ejemplos de referencia 1-201,
reensayan en general para evaluar la inhibición de PDE4B usando el
ensayo de SPA radiactivo. De los ejemplos y ejemplos de referencia
207-665, y 677-686 todos o casi
todos (excepto quizás para los Ejemplos y Ejemplos de referencia
451, 631-632, 635, 652) se ensayaron para evaluar
la inhibición de PDE4B; y algunos de éstos se ensayaron mediante el
ensayo de SPA radiactivo, algunos se ensayaron mediante el ensayo FP
. Los ejemplos y ejemplos de referencia 1-201,
207-450, 452-630,
633-634, 636-651,
653-665, y 677-686, pero excluyendo
los Ejemplos de Referencia 19-20, tienen actividad
inhibitoria de PDE4B en el intervalo de pCI_{50} = aproximadamente
6 (\pm aproximadamente 0,5) a aproximadamente 10,0
(\pmaproximadamente 0,5). Los ejemplos de Referencia
666-676 se predice que tienen actividades
inhibidoras de PDE4B en el intervalo de pCI_{50} = aproximadamente
6 (\pm aproximadamente 0,5) a aproximadamente 10,0 (\pm
aproximadamente 0,5).
Los Ejemplos y Ejemplos de Referencia en los que
R^{3} = ciclohexilo,
tetrahidro-2H-piran-4-ilo
(NHR^{3} = grupo (h)), 4-oxociclohexilo, u otros
ciertos tipos de ciclohexilo sustituido o ciertos heterociclos,
usualmente o a menudo (especialmente con R^{1} = etilo) tienen un
nivel mayor de selectividad para PDE4B por encima de PDE5, según
las mediciones de los ensayos anteriores de inhibición de enzimas,
comparadas con las selectividades de ejemplos de referencia en los
que R^{3} = ciclopropilo. Por ejemplo, basándose solamente en las
mediciones actuales, y sometidos a inexactitudes de ensayos
acumulados:
- Los ejemplos de referencia 21, 40, 90, 198 y
201 (tienen selectividades para PDE4B por encima de PDE5 en el
intervalo de aproximadamente 3 a 20 o más veces mayor que la
selectividad lograda para el ejemplo de referencia equivalente 39 en
el que R^{3} = ciclopropilo;
- El ejemplo de referencia 43 y ejemplo de
referencia 44 (en los que NHR^{3} = subfórmula (h)) tienen
selectividades para PDE4B por encima de PDE5 en el intervalo de
aproximadamente 4 a 8 o más veces mayor que la selectividad lograda
para el ejemplo de referencia equivalente 42 en el que R^{3} =
ciclopropilo;
- El ejemplo de referencia 22 (en el que
NHR^{3} = subfórmula (h)) y el ejemplo de referencia 48 tienen
selectividades para PDE4B por encima de PDE5 en el intervalo de
aproximadamente 2,5 a 10 o más veces mayor que la selectividad
lograda para el ejemplo de referencia equivalente 47 en el que
R^{3} = ciclopropilo; y
- El ejemplo de referencia 2 y ejemplo de
referencia 3 (en los que NHR^{3} = subfórmula (h)) tienen
selectividades para PDE4B por encima PDE5 en el intervalo de
aproximadamente 2 a 5 o más veces mayor que la selectividad lograda
para el ejemplo de referencia equivalente 1 en el que R^{3} =
cicloporpilo.
Emesis: Algunos inhibidores conocidos de
PDE4 pueden ocasionar emesis y/o nauseas en mayor o menor grado
(por ejemplo, véase Z. Huang y col., Current Opinion in Chemical
Biology, 2001, 5: 432-438, véanse especialmente
las páginas 433-434 y referencias citadas en ese
documento). Por lo tanto, sería preferible, pero no esencial,
si un compuesto o sal de la invención inhibitoria de PDE4
ocasionara solamente efectos secundarios eméticos limitados o
controlables. Por ejemplo, los efectos secundarios eméticos se
pueden medir mediante el potencial emetogénico del compuesto o sal
cuando se administra a hurones; por ejemplo, se puede medir el
tiempo de comienzo, magnitud, frecuencia y/o duración de vómito,
arcadas y/o retorsiones en hurones después de administración oral o
parenteral del compuesto o sal. Véase, por ejemplo, el documento de
A. Robichaud y col., "Emesis induced by inhibitors of [PDE IV] in
the ferret", Neuropharmacology, 1999, 38,
289-297, errata Neuropharmacology, 2001, 40,
465-465. Sin embargo, opcionalmente, los efectos
eméticos secundarios e índice terapéutico (TI) en ratas se puede
medir convenientemente vigilando la conducta pica en la alimentación
de ratas después de administración del compuesto o sal de la
invención (véase el ensayo in vivo 2 más adelante).
Otros efectos secundarios: Algunos
inhibidores conocidos de PDE4 pueden ocasionar otros efectos
secundarios tales como cefaleas y otros efectos secundarios
mediados por el sistema nervioso central (abreviadamente CNS); y/o
trastornos del tracto gastrointestinal (abreviadamente GI). Por lo
tanto, sería preferible pero no esencial si un particular compuesto
o sal inhibitoria de PDE4 de la invención ocasionaran solamente
efectos secundarios limitados o controlables en una o más de estas
categorías de efectos secundarios.
\vskip1.000000\baselineskip
El ensayo in vitro de inhibición
enzimática de PDE4B descrito anteriormente se debe considerar como
el ensayo principal de actividad biológica. Sin embargo, ensayos
biológicos adicionales in vivo, que son opcionales y que no
son una medida esencial de la eficacia de los efectos secundarios,
se describen más adelante.
\vskip1.000000\baselineskip
Ensayo In Vivo
1
Se ha mostrado que el influjo de neutrófilos
pulmonares es un componente significativo de la familia de las
enfermedades pulmonares como la enfermedad pulmonar obstructiva
crónica (abreviadamente COPD) que puede implicar bronquitis crónica
y/o enfisema (G.F. Filley, Chest. 2000; 117(5);
251s-260s). El propósito de este modelo de
neutrofilia es estudiar los efectos potenciales antiinflamatorios
in vivo de inhibidores de PDE4 administrados oralmente sobre
la neutrofilia inducida por la inhalación de lipopolisacárido
(abreviadamente LPS) en aerosoles, modelando el(los)
componente(s) inflamatorio(s) neutrófilos de COPD.
Véase la sección de bibliografía más adelante para antecedentes
científicos.
Machos de ratas de Lewis (Charles River,
Raleigh, NC, ESTADOS UNIDOS)pesando aproximadamente
300-400 gramos se pretrataron bien con (a)
compuesto de ensayo suspendido en 0,5% de metilcelulosa (obtenible
de Sigma-Aldrich, St Louis, MO, Estados Unidos) en
agua o (b) solamente vehículo, administrado oralmente en un volumen
de dosis de 10 ml/kg. En general, las curvas
dosis-respuesta se generan usando la siguientes
dosis de inhibidores de PDE4: 10,0, 2,0, 0,4, 0,08 y 0,016 mg/kg.
Treinta minutos después del tratamiento, se expusieron las ratas a
LPS en aerosol (E. Coli serotipo 026:B6 preparado mediante
extracción con ácido tricloroacético, obtenible de
Sigma-Aldrich, St Louis, MO, Estados Unidos),
generados a partir de un nebulizador que contenía un 100 \mug/ml
de solución LPS. Las ratas se expusieron al aerosol de LPS a una
velocidad 4 l/min durante 20 minutos. La exposición de LPS se llevó
a cabo en una cámara cerrada con unas dimensiones internas de 45 cm
de longitud x 24 cm de anchura x 20 cm de altura. El nebulizador y
cámara de exposición están contenidos en una campana de aspiración
cualificada. A las 4 horas después de la exposición de LPS las ratas
se sacrifican mediante una sobredosis con pentobarbital a 90 mg/kg,
administrado intraperitonealmente. El lavado broncoalveolar
(abreviadamente BAL) se realiza a través de una aguja de extremo
romo de calibre 14 en la tráquea expuesta. Se realizan cinco
lavados de 5 ml para recoger un total de 25 ml de fluido BAL. Se
realizan los recuentos de células totales y diferenciales de
leucocitos en fluido BAL con el fin de calcular el influjo de los
neutrófilos en el pulmón. Se calcula el porcentaje de inhibición de
neutrófilos en cada dosis (cf. vehículo) y se genera una pendiente
variable, en la curva dosis-respuesta sigmoidal,
usualmente usando Prism Graph-Pad. La curva
dosis-respuesta se utiliza para calcular un valor de
DE50 (en mg por kg de peso corporal) para inhibición por el
inhibidor de PDE4 de la neutrofilia inducida por LPs.
Resultados: basado en mediciones
actuales, los compuestos de los ejemplos 22, 83 y 155, administrados
oralmente en el procedimiento anterior, mostraron unos valores de
DE50 de inhibición de neutrofilia en el intervalo entre
aproximadamente 0,5 mg y aproximadamente 2 mg/kg.
Procedimiento alternativo y resultados:
en una realización alternativa del procedimiento, se administraron
a las ratas dosis orales únicas de 10 mg/kg o 1,0 mg/kg del
inhibidor de PDE4 (o vehículo) y se calcula el porcentaje de
inhibición de neutrófilos y se indica para cada dosis específica. En
esta realización, a base de mediciones actuales, los compuestos de
los ejemplos 21, 100, 109, 167, 172 y 600, administrados oralmente
en el procedimiento anterior a una dosis única de 1,0 mg/kg
mostraron una inhibición de porcentaje de neutrofilia en el
intervalo entre aproximadamente 19% y aproximadamente 69% (o en el
intervalo entre aproximadamente 32% y aproximadamente 69% para los
ejemplos 21, 100, 109, 167 y 600).
\vskip1.000000\baselineskip
Filley G.F. Comparison of the structural
and inflammatory features of COPD and asthma. Chest.
2000; 117(5) 251s-260s.
Howell RE, Jenkins LP,
Fielding LE, y Grimes D. Inhibition of
antigen-induced pulmonary eosinophilia and
neutrophilia by selective inhibitors of phosphodiesterase types 3
and 4 in brown Norway rats. Pulmonary Pharmacology.
1995; 8: 83-89. Spond J, Chapman R, Fine J,
Jones H, Kreutner W, Kung TT, Minnicozzi M. Comparison of PDE 4
inhibitors, Rolipram and SB 207499 (Ariflo^{TM}), in a rat model
of pulmonary neutrophilia. Pulmonary Pharmacology and
Therapeutics. 2001; 14: 157-164.
Underwood DC, Osborn RR,
Bochnowicz S, Webb EF, Rieman DJ, Lee
JC, Romanic AM, Adams JL, Hay DWP, y
Griswold DE. SB 239063, a p38 MAPK inhibitor, reduces
neutrophilia, inflammatory cytokines, MMP-9, and
fibrosis in lung. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol.
2000; 279: L895-L902.
\vskip1.000000\baselineskip
Ensayo 2 In
Vivo
Antecedentes: Se ha mostrado que los
inhibidores selectivos de PDE4 inhiben la inflamación en diversos
modelos in vitro e in vivo incrementando los niveles
intracelulares de cAMP de muchas células inmunes (por ejemplo,
linfocitos, monocitos). Sin embargo, un efecto secundario de algunos
inhibidores PDE4 en muchas especies es la emesis. Debido a que
muchos modelos de ratas de inflamación están bien caracterizados, se
han utilizado en procedimientos (véase, por ejemplo, el ensayo 1
in vivo anterior) para mostrar los efectos antiinflamatorios
beneficiosos de los inhibidores de PDE4. Sin embargo, las ratas no
tienen respuesta emética (no tienen reflejo vomitivo), de manera
que la relación entre los efectos beneficiosos antiinflamatorios de
los inhibidores de PDE 4 y la emesis es difícil de estudiar en
ratas.
Sin embargo, en 1991, Takeda y col.,
(véase la sección de bibliografía más adelante) demostró que la
respuesta de alimentación pica es análoga a la emesis en ratas. La
alimentación pica es una respuesta conductual a una enfermedad en
ratas en la que las ratas comen sustancia no nutritivas tales como
tierra o en particular arcilla (por ejemplo, caolín) que puede
ayudar a absorber toxinas. La alimentación se puede inducir por
movimiento y productos químicos (especialmente productos químicos
que son eméticos en seres humanos), y se pueden inhibir
farmacológicamente con fármacos que inhiben la emesis en seres
humanos. El modelo de pica en ratas, ensayo 2 in vivo, puede
determinar el nivel de repuesta pica de ratas a la inhibición de
PDE4 a dosis farmacológicamente relevantes en paralelo al los
ensayos antiinflamatorios in vivo en (un conjunto separado
de) ratas (por ejemplo, ensayo 1 anterior in vivo). Los
ensayos antiinflamatorios y pica juntos en la misma especie pueden
probar datos sobre el "índice terapéutico" (TI) en la rata de
los compuestos/sales de la invención. El, TI de ratas se puede
calcular, por ejemplo, como la relación de a) la dosis DE50 de
respuesta pica potencialmente emética del ensayo 2 b) la dosis DE50
antiinflamatoria en ratas (por ejemplo, medida mediante la
inhibición de neutrofilia en ratas en por ejemplo, en el ensayo 1
in vivo), con relaciones mayores de TI posiblemente
indicando emesis inferior a muchas dosis antiinflamatorias. Esto
puede permitir una elección de una dosis farmacéutica no emética o
mínimamente emética de los compuestos o sales de la invención que
tiene un efecto antiinflamatorio. Sin embargo, se reconoce que no
es esencial el logro de un compuesto inhibitorio de PDE4 de
reducción de emesis.
Procedimiento: El primer día del
experimento, las ratas se introducen individualmente en jaulas sin
lechos o "enriquecimiento". Se mantienen las ratas fuera del
piso de la jaula mediante una rejilla de alambre. Se sitúan en la
jaula copas de alimento prepesado que contienen pienso de ratas
estándar y gránulos de arcilla. Los gránulos de arcilla, obtenibles
de Languna Clay Co, City of Industry, CA, Estados Unidos, son del
mismo tamaño y forma que los gránulos de alimento. Las ratas se
aclimatan a la arcilla durante 72 horas, durante ese tiempo las
copas y desechos de alimento y arcilla de la jaula se pesan
diariamente en una balanza electrónica capaz de medir lo más
próximo a 0,1 gramos. Al final del período de aclimatación de 72
horas las ratas generalmente no muestran interés por los gránulos de
arcilla.
Al final de las 72 horas las ratas se sitúan en
jaulas limpias y las copas de alimentos se pesan. Las ratas que
todavía consumen regularmente arcilla se retiran del estudio.
Inmediatamente antes del ciclo de oscuridad (el tiempo cuando los
animales son activos y deben comer) los animales se dividen en
grupos de tratamiento y se les administra oralmente una dosis del
compuesto/sal de la invención (dosis diferentes para grupos de
tratamiento diferentes) o con vehículo solo, a un volumen de dosis
de 2 mg/kg. En esta dosificación oral, el compuesto/sal está en la
forma de una suspensión en 0,5% de metilcelulosa (obtenible de
Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, Estados Unidos) en
agua. Las copas de alimento y arcilla y los desechos de las jaulas
se pesan el siguiente día y se calcula la arcilla y alimento total
consumido esa noche por cada animal individual.
Se calcula una dosis respuesta convirtiendo
primero los datos en respuesta cuantitativa, donde los animales son
tanto positivos como negativos a la respuesta pica. Una rata es
"pica positiva" si consume más o igual que 0,3 gramos de
arcilla sobre la media de lo que usualmente se calcula usando
regresión logística realizada por el paquete de estadística del
software Statistica. Después se puede calcular un valor DE50 de
respuesta pica en mg por kg de peso corporal.
Resultados: Usando el procedimiento
anterior, y según los mediciones actuales, los compuestos de los
ejemplos 22, 83 y 155 mostraron un DE50 de respuesta Pica en el
intervalo entre aproximadamente 4,8 mg/kg hasta mayor o igual que
aproximadamente 40 mg/kg. Se puede ver que los dosis DE50 de
respuesta Pica son más altas que los valores de DE50 de inhibición
de neutrofilia para estos tres ejemplos (véase ensayo 1 anterior
in vivo), de este modo parece que se ve que se logra primero
un índice terapéutico (TI) en ratas > 2, medido en los ensayos 1
+ 2 y según las mediciones actuales, parece a simple vista haber
sido logrado por estos tres Ejemplos.
El índice terapéutico (TI) calculado de este
modo, es a menudo considerablemente diferente, y a menudo mayor que
el TI calculado en el hurón (véase ensayo 4 posterior in
vivo).
\vskip1.000000\baselineskip
Beavo JA, Contini, M.,
Heaslip, R.J. Multiple cyclic nucleotide phosphodiesterases.
Mol Pharmacol. 1994; 46:399-405.
Spond J, Chapman R, Fine J,
Jones H, Kreutner W, Kung TT, Minnicozzi
M. Comparison of PDE 4 inhibitors, Rolipram and SB 207499
(Ariflo^{TM}), in a rat model of pulmonary neutrophilia.
Pulmonary Pharmacology and Therapeudtics. 2001;
14:157-164.
Takeda N, Hasegawa S,
Morita M, y Matsunaga T. Pica in rats is analogous to
emesis: an animal model in emesis research. Pharmacology,
Biochemistry and Behavior. 1991;
45:817-821.
Takeda N, Hasegawa S,
Morita M, Horii A, Uno A, Yamatodani A y
Matsunaga T. Neuropharmacological mechanisms of emesis. I .
Effects of antiemetic drugs on motion- and
apomorphine-induced pica in rats. Meth Find Exp
Clin Pharmacol. 1995; 17(9)
589-596.
Takeda N, Hasegawa S,
Morita M, Horii A, Uno A, Yamatodani A y
Matsunaga T. Neuropharmacological mechanisms of emesis. II .
Effects of antiemetic drugs on cisplatin-induced
pica in rats. Meth Find Exp Clin Pharmacol. 1995;
17(9) 647-652.
\vskip1.000000\baselineskip
Ensayo 3 In
Vivo
Este ensayo es un modelo animal de inflamación
en el pulmón-neutrofilia inducida específicamente
por lipopolisacárido (abreviadamente LPS) - y permite el estudio de
de inhibición putativa de dicha neutrofilia (efecto
antiinflamatorio) mediante inhibidores de PDE4 administrados
intratraquelamente (abreviadamente i.t). Los inhibidores de PDE4
están preferiblemente en forma de polvo seco o suspensión húmeda. La
administración i.t. es un modelo de administración inhalada, que
permite la liberación tópica al pulmón.
Animales: Machos de ratas CD (derivados
de Sprague Dawley) suministrados por Charles River, Raleigh, NC,
Estados Unidos se introdujeron en grupos de 5 ratas por jaula,
aclimatados después de la entrega durante al menos 7 días con
material de camas/nidos cambiados regularmente, alimentados con
alimento granulado R^{1} de dieta SDS proporcionado a voluntad, y
provistos de agua de bebida de calidad animal pasteurizada cambiada
diariamente.
Dispositivo para la administración de polvo
seco: Espita de 3 vías desechable entre aguja y jeringa de
dosificación. Se pesó la espita 3 vías estéril (Vycon Ref 876.00),
después se añadió a la espita la mezcla de fármacos o lactosa de
calidad inhalación (vehículo control), se cerró la espita para
evitar pérdida de fármaco, y se volvió a pesar la espita para
determinar el peso del fármaco en la espita. Después de la
administración de la dosis, se volvió a pesar la espita para
determinar el peso de fármaco que había quedado en la espita. La
aguja, una aguja de jeringa, Sigma Z21934-7 calibre
19 de 152 mm (6 pulgadas) de largo con un núcleo de tipo catéter,
se cortó mediante mecanizado a 132 mm (5,2 pulgadas), se hizo un
termino romo para evitar dañar las tráqueas de las ratas, y se pesó
la aguja antes de y después de la liberación del fármaco para
confirmar que no se había quedado fármaco retenido en las agujas
después de la administración de la dosis.
Dispositivo para la administración de la
suspensión húmeda: Éste es similar a lo anterior pero se utilizó
una aguja de administración de dosis roma, cuyo extremo delantero
era ligeramente angulado con relación al eje de la aguja, con una
cánula portex de plástico flexible insertada en la aguja.
Fármacos y materiales: Lipopolisacárido
(abreviadamente LPS) (Serotipo:0127:B8) (L3129 tipo 61K4075) se
disolvió en solución salina tamponada con fosfato (abreviadamente
PBS). Se utilizaron inhibidores de PDE4 en forma de tamaño reducido
(por ejemplo micronizado), por ejemplo, según el ejemplo de
micronización proporcionado anteriormente. Para la administración
de polvo seco del fármaco, se puede utilizar el ejemplo de la
formulación de polvo seco, que comprende fármaco y lactosa de
calidad inhalación. La lactosa de calidad inhalación usualmente
utilizada (tipo E98L4675 lote 845120) tiene un 10% de finos (10% de
material por debajo de tamaño de partícula de 15 um medido por
tamaño de partícula Malvern).
Se pueden preparar suspensiones húmedas mediante
la adición del volumen requerido de vehículo al fármaco; siendo el
vehículo usado una mezcla de solución salina/tween (0,2% de tween
80). La suspensión húmeda se sonicó durante 10 minutos antes de
uso.
Preparación y administración de dosis con
inhibidor de PDE 4: Se anestesiaron las ratas situando a los
animales en una cámara Perspex cerrada heméticamente y se expusieron
a una mezcla gaseosa de isofluorano (4,5%), óxido nitroso (3
litros/minuto) y oxígeno (1 litro/minuto). Una vez anestesiados, se
situaron los animales en una mesa soporte de acero inoxidable para
administración de la dosis i. t.. Se posicionaron en su dorso a un
ángulo de aproximadamente 35º. Se situó una luz en ángulo frente al
exterior de la garganta para resaltar la tráquea. Se abrió la boca
y se visualizó la abertura de la vía aérea superior. El
procedimiento varía para la suspensión húmeda y la administración
de polvo seco de inhibidores de PDE4 y es como sigue.
Dosificación con suspensión húmeda: Se
introdujo una cánula portex mediante una aguja de dosificación de
metal roma que se había insertado cuidadosamente en la tráquea de la
rata. Se administró la dosis a los animales intratraquealmente con
vehículo o inhibidor de PDE4 mediante la aguja de dosificación con
una nueva cánula interna para cada grupo de fármaco diferente. La
formulación se dosificaba lentamente (10 segundos) en la tráquea
utilizando una jeringa unida a la aguja de dosificación.
Dosificación con un polvo seco: el
dispositivo de espita de tres vías y la aguja se insertaron en la
tráquea de la rata hasta un punto establecido predeterminado
localizado aproximadamente 1 cm por encima de la bifurcación
primaria. Otro operador mantiene la aguja en la posición
especificada mientras 2 x 4 ml de aire se libera a través de la
espita de tres vías presionando la jeringa (coincidiendo idealmente
con la inspiración del animal), con el deseo de expeler la cantidad
del fármaco completo desde la espita. Después de la administración
de la dosis, la aguja y la espita se retiran de la vía aérea y se
cierra la espita para evitar que cualquier fármaco retenido se vaya
de la espita. Después de administrar la dosis bien con suspensión
húmeda o con polvo seco, entonces los animales se retiran de la
mesa y se observan constantemente hasta que se recuperan de los
efectos de la anestesia. Los animales se vuelven a introducir en
jaulas y se les proporciona acceso libre a alimento y agua; se
observan y se anota cualquier cambio de conducta inusual.
Exposición a LPS: aproximadamente después
de 2 horas de la administración i. t. de la dosis con vehículo
control o el inhibidor PFE4, las ratas se situaron en recipientes
Perspex cerrados herméticamente y expuestos a un aerosol de LPS
(concentración de nebulizador 150 \mug/ml) durante 15 minutos. Se
generaron los aerosoles de LPS mediante un nebulizador (DeVilbiss,
Estados Unidos) y éste se dirigió a una cámara de exposición
Perspex. Después de un período de exposición de LPS de 15 minutos,
los animales se volvieron a las jaulas de estancia y se les permitió
acceso libre tanto a la comida como al agua.
[En una realización alternativa, las ratas
pueden exponerse a LPS menos de 2 horas después de la administración
i. t. de dosis. En otra realización alternativa, las ratas pueden
exponerse a LPS más de 2 horas (por ejemplo, aproximadamente 4 o
aproximadamente 6 horas) después de la administración i. t. de la
dosis mediante vehículo o inhibidor de PDE4, para probar si o no el
inhibidor de PDE4 tiene una acción de larga duración (que no es
esencial)].
Lavado brocoalveolar: 4 horas después de
la exposición a LPS se sacrificaron los animales mediante sobredosis
de pentabarbitona sódica (i.p.). Se introdujo en la tráquea una
cánula de tubo de polipropileno y se lavaron los pulmones
(limpieza) con 3 x 5 ml de solución salina tamponada con fosfato (25
unidades/ml) (abreviadamente PBS).
Recuentos de neutrófilos: las muestras
del lavado broncoalveolar (abreviadamente BAL) se centrifugaron a
1300 rpm durante 7 minutos. Se retiró el sobrenadante y se
resuspendió el sedimento celular resultante en 1 ml de PBS. Se
preparó un portaobjetos de fluido de la resuspensión situando 100
\mul de fluido BAL en soportes de citospina y después de
centrifugaron 5000 rpm durante 5 minutos. Se dejó que los
portaobjetos se secaran al aire y después se tiñeron con tinte de
Leihmans (20 minutos) para permitir el recuento diferencial.
También se contaron las células totales de la resuspensión. A partir
de estos dos recuentos, se determinó el número total de neutrófilos
en el BAL. Para una medición de la inhibición inducida por los
inhibidores de PDE4 de la neutrofilia, se lleva a cabo una
comparación del recuento de neutrófilos en ratas tratadas con
vehículo y ratas tratadas con inhibidores de PDE4.
Mediante la variación de la dosis del inhibidor
de PDE4 usado en la etapa de administración de dosis (por ejemplo,
0,2 ó 0,1 mg de inhibidor de PDE4 por kg de peso corporal, hacia
abajo hasta por ejemplo 0,1 mg/kg), se puede generar una curva
dosis-respuesta.
\newpage
Ensayo In Vivo
4
Los siguientes materiales se usan para estos
estudios:
Se preparan inhibidores de PDE4 para la
administración oral (p.o.) disolviendo en un volumen fijo (1 ml) de
acetona y después añadiendo cremofor a 20% del volumen final. Se
evapora la acetona dirigiendo un flujo de gas nitrógeno en la
solución. Una vez que se retira la acetona, la solución se completa
hasta un volumen final con agua destilada. LPS se disuelve en
solución salina tamponada con fosfato.
\vskip1.000000\baselineskip
Machos de hurones (Mustela Pulorius Furo, que
pesan 1-2 kg) se transportan y se dejan aclimatar
durante no menos de 7 días. La dieta comprende dieta C de SDS de
alimento granulado proporcionada ad lib con alimento de
gatos Whiskers^{TM} proporcionado 3 veces a la semana. A los
animales se les suministra agua de bebida de calidad animal
pasteurizada que se cambia diariamente.
\vskip1.000000\baselineskip
Se administran inhibidores de PDE4 por vía oral
(p.o.), usando un volumen de dosis de 1 mi/kg. Se dejan en ayunas a
los hurones durante toda una noche pero se les deja acceder al agua.
Los animales se administran por vía oral con vehículo o inhibidor
de PDE 4 usando una aguja de dosificación de 15 cm que se pasa por
debajo de la parte trasera de la garganta en el esófago. Después de
la dosificación, los animales se regresan a las jaulas de de
estancia equipadas con puertas perspex para permitir la observación,
y se proporciona acceso libre al agua. Los animales se observan de
manera constante y se registran los episodios eméticos (arcadas y
vómitos) o cambios conductuales. Se deja que los animales accedan a
alimento 60-90 minutos después de la dosificación
p.o..
\vskip1.000000\baselineskip
Treinta minutos después de la dosificación oral
con el compuesto o vehículo control, se colocan los hurones en
recipientes sellados de perspex y se expusieron a un aerosol de LPS
(30 \mug/ml) durante 10 minutos. Se general los aerosoles de LPS
mediante un nebulizador (DeVilbiss, ESTADOS UNIDOS) y se dirige a la
cámara de exposición perspex. Después de un período de exposición
de 10 minutos, the los animales se regresan a las jaulas y se les
deja acceso libre al agua, y en una última fase, continúa la
observación general de los animales durante un período de al menos
2,5 horas después de la dosificación. Se registran todos los
episodios eméticos y cambios de conducta.
\vskip1.000000\baselineskip
Seis horas después de la exposición de LPS los
animales se sacrifican mediante una sobredosis de pentobarbitona de
sodio administrada por vía intraeritoneal. Después se introduce una
cánula en la tráquea con tubo de polipropileno y se lavan los
pulmones dos veces con 20 ml de solución salina tamponada con
fosfato (PBS) (10 unidades/ml) Las muestras de lavado
broncoalveolar (BAL) se centrifugan a 1300 rpm durante 7 minutos. Se
retira el sobrenadante y el sedimento de células resultante se
vuelve a suspender en 1 ml de PBS. Se prepara una mancha de fluido
resuspendido y se tiñe con tinte Leishmans para permitir el recuento
de célula diferencial. Se realiza un recuento de célula total
usando la muestra resuspendida restante. A partir de esto, se
determina el número total de neutrófilos en la muestra BAL.
\vskip1.000000\baselineskip
Se registran los siguientes parámetros:
a) % de inhibición de neutrofilia pulmonary
inducida por LPS para determinar la dosis de inhibidor de PDE4 que
proporciona un 50% de inhibición (D50).
b) episodios eméticos - el número de vómitos y
arcadas se cuentan para determinar la dosis de inhibidor de PDE4 que
proporciona una incidencia de 20% de emesis (D20).
c) un índice terapéutico (TI), que usa este
ensayo, se calcula después para cada inhibidor de PDE4 usando la
siguiente ecuación:
Índice
terapéutico (TI) = \frac{\text{Incidencia de D20 incidente de
emesis}}{\text{Inhibición de D20 de
neutrofilia}}
Hay que observar que el índice terapéutico (TI)
calculado usando este ensayo 4 in vivo es a menudo diferente
significativamente a, y a menudo de, el calculado usando los ensayos
1 + 2 de inflamación oral de rata y alimentación pica. El cálculo
de TI usando el inhibidor de PDE4 roflumilast en este ensayo 4 es:
D20 para emesis = 0,5 mg/kg p.o., D50 para neutrofilia = 0,49 mg/kg
p.o., TI = 1,02.
Los diversos aspectos de la invención se
describirán a continuación con referencia a los siguientes ejemplos.
Estos ejemplos son meramente ilustrativos y no se consideran como
limitación del alcance de la presente invención. En esta sección,
"Intermedios" representan las síntesis de compuestos
intermedios pretendidos para uso en la síntesis de los
"Ejemplos" y "Ejemplos de Referencia".
\vskip1.000000\baselineskip
Abreviaturas usadas en esta memoria
descriptiva:
- DMSO
- dimetilsulfóxido
- DCM
- diclorometano
- EtOAc
- acetate de etilo
- Et_{2}O
- éter dietílico
- DMF
- dimetilformamida
- MeOH
- metanol
- HPLC
- cromatografía líquida de alta presión
- SPE
- extracción en fase sólida
- NMR
- resonancia magnética nuclear (en la que: s = singlete, d = doblete, t = triplete, q = cuartete, dd = doblete de dobletes, m = multiplete, H = número de protones)
- LCMS
- cromatografía líquida/espectroscopía de masas
- TLC
- cromatografía en capa fina
- BEMP
- 2-t-butilimino-2-dietilamino-1,3-dimetilperhidro-1,3,2-diazafosfazina
- EDC
- clorhidrato de 1-(3-Dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida
- HATU
- hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-ilo)-N,N,N',N'-tetrametiluronio
- HBTU
- hexafluorofosfato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio
- HOBT
- hidroxibenzotriazol
- h
- horas
- DIPEA
- diisopropiletilamina (abreviadamente ^{i}Pr_{2}NEt)
- T_{RET}
- tiempo de retención
- THF
- tetrahidrofurano
- Reactivo de Lawesson
- 2,4-bis(4-metoxifenil)-1,3-ditia-2,4-difosfetano-2,4-disulfuro
- Temperatura ambiente
- está usualmente en el intervalo entre aproximadamente 20 y aproximadamente 25ºC.
\vskip1.000000\baselineskip
Procedimientos de máquina usados en la
presente invención:
Espectrómetro de masas Waters ZQ que funciona en
modo de electropulverización iónica positiva, intervalo de masas
100-1000 amu.
Longitud de onda UV: 215-330
nM
Columna: 3,3 cm x 4,6 mm ID, 3 \mum ABZ +
PLUS
Caudal: 3 ml/min
Volumen de inyección: 5 \mul
Disolvente A: 95% de acetonitrilo + 0,05% de
ácido fórmico
Disolvente B: 0,1% de ácido fórmico + acetato de
amonio 10 mMolar
Gradiente: 0% de A/0,7 min,
0-100% de A/3,5 min, 100% de A/1,1 min,
100-0% de A/0,2 min
\vskip1.000000\baselineskip
La columna de purificación utilizada fue una
Supelcosil ABZplus (10 cm x 2,12 cm) (usualmente 10 cm x 2,12 cm x 5
\mum).
Longitud de onda UV: 200-320
nM
Flujo: 20 ml/min
Volumen de inyección: 1 ml; o más
preferiblemente 0,5 ml
Disolvente A: 0.1% de ácido fórmico
Disolvente B: 95% de acetonitrilo + 5% de ácido
fórmico; o más usualmente 99,95% de acetonitrilo + 0,05% de ácido
fórmico
Gradiente: 100% de A/1 min,
100-80% de A/9 min, 80-1% de A/3,5
min, 1% de A/1,4 min, 1-100% de A/0,1 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Todos los reactivos no detallados en el texto
más adelante están comercialmente disponibles de proveedores
establecidos tal como Sigma-Aldrich. Las direcciones
de los proveedores para algunos de los materiales de partida
mencionados en intermedios y ejemplos más adelante son como
sigue:
- ABCR GmbH & CO. KG, P.O. Box 21 01 35,
76151 Karlsruhe, Alemania
- Aceto Color Intermedios (nombre de catálogo),
Aceto Corporation, One Hollow Lane, Lake Success, NY,
11042-1215, Estados Unidos
- Acros Organics, A Division of Fisher
Scientific Company, 500 American Road, Morris Plains, NJ 07950,
Estados Unidos
- Apin Chemicals Ltd., 82 C Milton Park,
Abingdon, Oxon OX14 4RY. Reino Unido
- Apollo Scientific Ltd., Unit 1A, Bingswood
Industrial Estate, Whaley Bridge, Derbyshire SK23 7LY, Reino
Unido
- Aldrich (nombre de catálogo),
Sigma-Aldrich Company Ltd., Dorset, Reino Unido,
teléfono: +44 1202 733114; Fax: +44 1202 715460;
ukcustsv@eurnotes.sial.com; o
- Aldrich (nombre de catálogo),
Sigma-Aldrich Corp., P.O. Box 14508, St. Louis, MO
63178-9916, Estados Unidos; teléfono:
314-771-5765; fax:
314-771-5757;
custserv@sial.com; o
- Aldrich (nombre de catálogo),
Sigma-Aldrich Chemie Gmbh, Munich, Alemania;
teléfono: +49 89 6513 0; Fax: +49 89 6513 1169;
deorders@eurnotes.sial.com.
- Alfa Aesar, A Johnson Matthey Company, 30 Bond
Street, Ward Hill, MA 01835-8099, Estados Unidos
- Array Biopharma Inc., 1885 33rd Street,
Boulder, CO 80301, Estados Unidos
- AstaTech, Inc., 8301 Torresdale Ave., 19C,
Filadelfia, PA 19136, Estados Unidos
- Austin Chemical Company, Inc., 1565 Barclay
Blvd., Buffalo Grove, IL 60089, Estados Unidos
- Avocado Research, Shore Road, Port of Heysham
Industrial Park, Heysham Lancashire LA3 2XY, Reino Unido
- Bayer AG, Business Group Basic y Fine
Chemicals, D-51368 Leverkusen, Alemania
- Berk Univar plc, Berk House, P.O.Box 56,
Basing View, Basingstoke, Hants RG21 2E6, Reino Unido
- Butt Park Ltd., Braysdown Works, Peasedown St.
John, Bath BA2 8LL, Reino Unido
- Chemical Building Blocks (nombre de catálogo),
Ambinter, 46 quai Louis Bleriot, Paris, F-75016,
Francia
- ChemBridge Europe, 4 Clark's Hill Rise,
Hampton Wood, Evesham, Worcestershire WR11 6FW, Reino Unido
- ChemService Inc., P.O.Box 3108, West Chester,
PA 19381, Estados Unidos
- Combi-Blocks Inc., 7949
Silverton Avenue, Suite 915, San Diego, CA 92126, Estados Unidos
- Dynamit Nobel GmbH, Alemania; also available
from: Saville Whittle Ltd (agents en el Renio Unido UK de Dynamit
Nobel), Vickers Street, Manchester M40 8EF, Reino Unido
- E. Merck, Alemania; o E. Merck (Merck Ltd),
Hunter Boulevard, Magna Park, Lutterworth, Leicestershire LE17 4XN,
Reino Unido
- Esprit Chemical Company, Esprit Plaza, 7680
Matoaka Road, Sarasota, FL 34243, Estados Unidos
- Exploratory Library (nombre de catálogo),
Ambinter, 46 quai Louis Bleriot, Paris, F-75016,
Francia
- Fluka Chemie AG, Industriestrasse 25, P.O. Box
260, CH-9471 Buchs, Suiza
- Fluorochem Ltd., Wesley Street, Old Glossop,
Derbyshire SK13 7RY, Reino Unido
- ICN Biomedicals, Inc., 3300 Hyland Avenue,
Costa Mesa, CA 92626, Estados Unidos
- Interchim Intermediates (nombre de catálogo),
Interchim, 213 Avenue Kennedy, BP 1140, Montlucon, Cedex, 03103,
Francia
- Key Organics Ltd., 3, Highfield Indusrial
Estate, Camelford, Cornwall PL32 9QZ, Reino Unido
- Lancaster Synthesis Ltd., Newgate, White Lund,
Morecambe, Lancashire LA3 3DY, Reino Unido
- Manchester Organics Ltd., Unit 2, Ashville
Industrial Estate, Sutton Weaver, Runcorn, Cheshire WA7 3PF, Reino
Unido
- Matrix Scientific, P.O. Box 25067, Columbia,
SC 29224-5067, Estados Unidos
- Maybridge Chemical Company Ltd., Trevillett,
Tintagel, Cornwall PL34 0HW, Reino Unido
- Maybridge Reactive Intermedios (nombre de
catálogo), Maybridge Chemical Company Ltd., Trevillett, Tintagel,
Cornwall PL34 0HW, Reino Unido
- MicroChemistry Building Blocks (nombre de
catálogo), MicroChemistry-RadaPharma, Shosse
Entusiastov 56, Moscow, 111123, Rusia
- Miteni S.p.A., Via Mecenate 90, Milano, 20138,
Italia
- Molecular Devices Corporation, Sunnydale, CA,
Estados Unidos
- N.D. Zelinsky Institute, Organic Chemistry,
Leninsky prospect 47, 117913 Moscú B-334, Rusia
- Optimer Building Block (nombre de catálogo),
Array BioPharma, 3200 Walnut Street, Boulder, CO 80301, Estados
Unidos
- Peakdale Molecular Ltd., Peakdale Science
Park, Sheffield Road,
Chapel-en-le-Frith,
High Peak SK23 0PG, Reino Unido
- Pfaltz & Bauer, Inc., 172 East Aurora
Street, Waterbury, CT 06708, Estados Unidos
- Rare Chemicals (nombre de catálogo), Rare
Chemicals GmbH, Schulstrasse 6, 24214 Gettorf, Alemania
- SALOR (nombre de catálogo) (Sigma Aldrich
Library of Rare Chemicals), Aldrich Chemical Company Inc, 1001 West
Saint Paul Avenue, Milwaukee, WI 53233, Estados Unidos
- Sigma (nombre de catálogo),
Sigma-Aldrich Corp., P.O. Box 14508, St. Louis, MO
63178-9916, Estados Unidos; véase "Aldrich"
anterior, para otras direcciones que no sean de Estados Unidos y
otros detalles de contacto
- SIGMA-RBI, One Strathmore
Road, Natick, MA 01760-1312, Estados Unidos
- Synchem OHG
Heinrich-Plett-Strasse 40, Kassel,
D-34132, Alemania
- Syngene International Pvt Ltd, Hebbagodi,
Hosur Road, Bangalore, India.
- TCI America, 9211 North Harborgate Street,
Portland, OR 97203, Estados Unidos
- TimTec Building Blocks A, TimTec, Inc., P O
Box 8941, Newark, DE 19714-8941, Estados Unidos
- Trans World Chemicals, Inc., 14674 Southlawn
Lane, Rockville, MD 20850, Estados Unidos
- Ubichem PLC, Mayflower Close, Chandlers Ford
Industrial Estate, Eastleigh, Hampshire SO53 4AR, Reino Unido
- Ultrafine (UFC Ltd.), Synergy House, Guildhall
Close, Manchester Science Park, Manchester M15 6SY, Reino Unido
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(Tabla pasa a página
siguiente)
\newpage
\newpage
Intermedio
1
Preparado a partir
5-amino-1-etil
pirazol comercialmente disponible como describen G. Yu y col., en
J. Med Chem., 2001, 44, 1025-1027:
Intermedio
2
Se puede preparar mediante escisión oxidante
(SeO_{2}) del derivado 1-furanilmetil, como
describen T. M. Bare y col., en J. Med. Chem., 1989,
32, 2561-2573, (con referencia adicional a Zuleski,
F. R., Kirkland, K. R., Melgar, M. D.; Malbica, J. Drug. Metab.
Dispos., 1985, 13, 139)
Intermedio
3
Una mezcla de intermedio 2 (0,47 g) y carbonato
potásico anhidro (0,83 g) (previamente secado por calor a 100ºC) en
dimetilformamida anhidra (abreviadamente DMF) (4 ml) se trató con
yodometano (0,26 ml) y se agitó vigorosamente durante 3 h. Después
se filtró la mezcla y se concentró el filtrado a vacío para
proporcionar un aceite residual, que se repartió entre
diclorometano (abreviadamente DCM) (25 ml) y agua (25 ml). Se
separaron las fases y se extrajo la fase acuosa con DCM adicional
(2x25 ml). Los extractos orgánicos reunidos se secaron sobre
sulfato sódico anhidro y se evaporaron hasta un aceite naranja que
se aplicó a un cartucho de SPE (sílice, 20 g). Se eluyó el cartucho
secuencialmente con EtOAc: gasolina (1:4, 1:2 y 1:1), después
cloroformo: metanol (49:1, 19:1 y 9:1). Las fracciones que
contenían el material deseado se reunieron y se concentraron a vacío
para proporcionar el intermedio 3 (0,165 g). LCMS mostró MH^{+} =
250; T_{RET} = 2,59 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
4
Una mezcla de Intermedio 2 (0,47 g) y carbonato
potásico anhidro (0,83 g) (previamente secado por calor a 100ºC) en
DMF anhidro (4 ml) se trató con bromuro de bencilo (0,72 g) después
se agitó vigorosamente y se calentó a 55ºC durante 4,5 h. Se dejó
enfriar la mezcla, después se filtró y se concentró a vacío para
proporcionar un aceite residual, que se repartió entre DMC (25 ml)
y agua (25 ml). Se separaron las fases y se extrajo la fase acuosa
con DMC adicional (25 ml). Los extractos orgánicos reunidos se
secaron sobre sulfato sódico anhidro y se evaporaron hasta un
sólido aceitoso amarillo que se disolvió en DMC y se aplicó a un
cartucho de SPE (sílice, 20 g). Se eluyó el cartucho con un
gradiente de EtOAc: gasolina (1:4, 1:2 y 1:1) después cloroformo:
metanol (49:1, 19:1 y 9:1). Las fracciones que contenían el material
deseado se reunieron y se concentraron a vacío para proporcionar el
intermedio 4 (0,33 g). LCMS mostró MH^{+}= 326; T_{RET} = 3,24
min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
5
\vskip1.000000\baselineskip
Una mezcla de
5-amino-1-fenilpirazol
(2,0 g) y malonato de dietiletoximetileno (2,54 ml) se calentó en
condiciones de Dean Stark a 120ºC durante 16 h. Se enfrió la
solución, después se añadió oxicloruro de fósforo (16 ml) y se
calentó la mezcla a reflujo durante 20 h adicionales. Se retiró el
exceso de oxicloruro de fósforo a vacío y se repartió el residuo
entre éter dietílico y agua, procediendo con extrema precaución en
la adición de agua. Se lavó la fase etérea con agua adicional,
después se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró a vacío
para proporcionar
4-cloro-1-fenil-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxilato
de etilo (2,09 g). LCMS mostró MH^{+}= 302; T_{RET} = 3,80
min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
6
Preparado a partir de
N1-bencill-4-aminopiperidina
disponible comercialmente como describen Yamada y col., en el
documento WO 00/42011:
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
7
Preparado a partir de
N-metil-4-piperidona
disponible comercialmente como describen C. M. Andersson y
col., en el documento WO01/66521:
\vskip1.000000\baselineskip
\newpage
Intermedio
8
Disponible comercialmente de
Combi-Blocks Inc., 7949 Silverton Avenue, Suite 915,
San Diego, CA 92126, Estados Unidos (CAS
38041-19-9)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
8A
\vskip1.000000\baselineskip
Fase
1
Se añadieron dibencilamina (34,5 g) y ácido
acético (6,7 ml) a una solución agitada de
tetrahidro-4H-piran-4-ona
(16,4 g, comercialmente disponible, por ejemplo, de Aldrich) en
diclorometano (260 ml) entre 0ºC y 5ºC. Después de 2,5 h entre 0ºC
y 5ºC, se añadió por partes triacetoxiborohidruro de sodio (38,9 g),
y se dejó que la mezcla se calentara hasta temperatura ambiente.
Después de agitar a temperatura ambiente durante una noche, se lavó
la mezcla de reacción sucesivamente con hidróxido sódico 2 M (200 ml
y 50 ml), agua (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml), después se secó y se
evaporó para proporcionar un aceite amarillo (45 g). Se agitó este
aceite con metanol (50 ml) a 4ºC durante 30 minutos para
proporcionar el producto en forma de un sólido blanco (21,5 g). LCMS
mostró MH^{+}= 282; T_{RET} = 1,98 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Fase
2
N,N-dibenciltetrahidro-2H-piran-4-amina
(20,5 g) se disolvió en etanol (210 ml) y se hidrogenó en
catalizador de 10% de paladio sobre carbono (4 g) a 100 psi (1448,3
kPa) durante 72 h a temperatura ambiente. Se filtró la mezcla de
reacción y se ajustó el filtrado hasta pH 1con cloruro de hidrógeno
2M en éter dietílico. La evaporación de los disolventes proporcionó
un sólido que se trituró con éter dietílico para proporcionar el
producto en forma de un sólido blanco (9,23 g). ^{1}H NMR (400 MHz
en d_{6}-DMSO, 27ºC, \delta ppm) 8,24 (sa, 3H),
3,86 (dd, 12, 4Hz, 2H), 3,31 (dt, 2, 12Hz, 2H), 3,20 (m, 1H), 1,84
(m, 2H), 1.55 (dc, 4, 12Hz, 2H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
9
Comercialmente disponible de Fluka Chemie AG,
Alemania (CAS 111769-27-8)
\vskip1.000000\baselineskip
\newpage
Intermedio
10
Comercialmente disponible de E. Merck, Germany;
o de E. Merck (Merck Ltd), Hunter Boulevard, Magna Park,
Lutterworth, Leicestershire LE17 4XN, Reino Unido (CAS
104530-80-5)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
11
Preparado a partir de
tetrahidrotiopiran-4-ona
comercialmente disponible como describen Subramanian y col., J.
Org. Chem., 1981, 46, 4376-4383. La preparación
posterior de la sal clorhidrato se puede llevar a cabo mediante
medios convencionales.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
12
Preparado de una manera análoga al Intermedio 11
a partir de tetrahidrotiofen-4-ona
comercialmente disponible. La formación de oxima la desbriben Grigg
y col., Tetrahedron, 1991, 47, 4477-4494 y la
reducción de oxima Unterhalt y col., Arch. Pharm., 1990,
317-318.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
13
Comercialmente disponible de Biblioteca de
productos químicos raros (abreviadamente SALOR) Sigma Aldrich
(CAS-6338-70-1). La
preparación de la sal clorhidrato de la amina se puede llevar a cabo
mediante medios convencionales.
\vskip1.000000\baselineskip
\newpage
Intermedio
14
Preparado de una manera análoga al intermedio 11
a partir de tetrahidrotiofen-4-ona
comercialmente disponible. La oxidación a
1,1-dioxo-tetrahidro-1\lambda^{6}-tiopiran-4-ona
la describen Rule y col., en J. Org. Chem., 1995, 60,
1665-1673. La formación de oxima la describen Truce
y col., en J. Org. Chem., 1957, 617, 620 y la reducción de
oxima Barkenbus y col., J. Am. Chem. Soc., 1955, 77, 3866. La
preparación posterior de la sal clorhidrato de la amina se puede
llevar a cabo mediante medios convencionales.
Intermedio
15
Una solución del intermedio 11 (3,5 g) en
dioxano (28 ml) se trató con hidróxido potásico (6,3 g) como una
solución en agua (20 ml). Se agitó la mezcla durante 2 h, después se
concentró a vacío, se acidificó hasta pH 3 con ácido clorhídrico
acuoso 2 M y se extrajo con acetato de etilo. Se separaron las
fases, se secó la fase orgánica sobre sulfato sódico, después se
concentró a vacío para proporcionar el intermedio 15 en forma de un
sólido blanco (2,4 g). LCMS mostró MH^{+} = 226; T_{RET} = 2,62
min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
17
Se secó el intermedio 15 (3,5 g) sobre pentóxido
de fósforo durante 1 h, después se trató con cloruro de tionilo (47
g). Se agitó la mezcla y se calentó a 75ºC durante 1,3 h. Se retiró
el exceso de cloruro de tionilo a vacío y el aceite residual formó
un azeótropo con diclorometano (DCM) para proporcionar el intermedio
16, que se presumió que era el cloruro de ácido del intermedio 15,
en forma de un sólido blanco (3,3 g).
Se disolvió el intermedio 16 (0,473 g) en
tetrahidrofurano (THF) (4 ml) y se trató con
N,N-diisopropiletilamina (abreviadamente DIPEA)
(0,509 ml), después con bencilamina (0,209 g) y se agitó la mezcla
en nitrógeno durante 0,5 h. Se concentró la mezcla a vacío, después
se repartió entre diclorometano y agua. Se separaron las fases y
las orgánicas
se concentraron a vacío para proporcionar el intermedio 17 (0,574 g). LCMS mostró MH^{+} = 315; T_{RET} = 2,90 min.
se concentraron a vacío para proporcionar el intermedio 17 (0,574 g). LCMS mostró MH^{+} = 315; T_{RET} = 2,90 min.
De manera similar se prepararon los
siguientes:
Intermedio
22
El cloruro de ácido del intermedio 16 se
sintetizó a partir del intermedio 15 usando el procedimiento
anterior mostrado para el intermedio 17. El intermedio 16 (0,473 g)
se disolvió en THF (4 ml) y se trató con diisopropiletilamina
(abreviadamente DIPEA) (0,509 ml), después con
4-(aminometil)piridina (0,211 g) y se agitó la mezcla en
nitrógeno durante 0,5h. Se concentró la mezcla a vacío, después se
repartió entre DCM y agua. Se separaron las fases y las orgánicas
se concentraron a vacío, después se aplicaron a un cartucho de SPE
(sílice, 10 g) que se eluyó con un gradiente de ciclohexano: EtOAc
(2:1 incrementando progresivamente hasta 0:1), seguido de MeOH:
EtOAc (5:95, después 10:90). Se reunieron las fracciones que
contenían el materia deseado se concentraron para proporcionar el
intermedio 22 (0,086 g). LCMS mostró MH^{+} = 316; T_{RET} =
1,84 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
23
El cloruro de ácido del intermedio 16 se
sintetizó a partir del intermedio 15 usando el procedimiento
anterior mostrado para el intermedio 17. Se disolvió el intermedio
16 (0,473 g) en THF (4 ml) y se trató con DIPEA (0,509 ml), después
con n-propilamina (0,115 g) y se agitó la mezcla en
nitrófeno durante 0,5 h. Después se añadió una porción adicional de
n-propilamina (0,023 g) y se agitó de forma
continuada durante 18 h. Se concentró la mezcla a vacío, después se
repartió entre DCM y agua. Se separaron las fases y las orgánicas se
concentraron a vacío para proporcionar el intermedio 23 (0,405 g).
LCMS mostró MH^{+} = 267; T_{RET} = 2,54 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
24
\vskip1.000000\baselineskip
El cloruro de ácido del intermedio 16 se
sintetizó a partir del intermedio 15 utilizando el procedimiento
anterior mostrado para el intermedio 17. Se disolvió el intermedio
16 (0,30 g) en THF (3 ml) y se trató con una solución de amoniaco
0,5 M en dioxano (4,92 ml). Se agitó la mezcla en nitrógeno durante
18 h. Se añadió una porción adicional de amoniaco 0,5 M en dioxano
(4,92 ml) y se agitó de una manera continuada durante 72 h. Se
concentró la mezcla a vacío y se repartió el residuo entre DCM y
solución de hidróxido sódico 2 M. Se separaron las fases y las
orgánicas se concentraron a vacío para proporcionar el intermedio 24
(0,278 g). LCMS mostró MH^{+} = 225; T_{RET} = 2,10 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
25
\vskip1.000000\baselineskip
Una mezcla de
5-amino-1-metilpirazol
(4,0 g) y malonato de dietiletoximetileno (9,16 ml) se calentó a
150ºC en condiciones de Dean Stark durante 5 h. Se añadió
cuidadosamente oxicloruro de fósforo (55 ml) a la mezcla y se
calentó la solución resultante a 130ºC a reflujo durante 18 h. Se
concentró la mezcla a vacío, después se enfrió el aceite residual
en un baño de hielo y se trató cuidadosamente con agua (100 ml)
(precaución: exotermia). Se extrajo la mezcla resultante con DCM (3
x 100 ml) y los extractos orgánicos reunidos se secaron sobre
sulfato sódico anhidro y se concentraron a vacío. El sólido
resultante se purificó mediante una cromatografía de Biotage
(sílice, 90 g), eluyendo con Et_{2}O: gasolina (1:3). Las
fracciones que contenían el material deseado se reunieron y se
concentraron a vacío para proporcionar el intermedio 25 (4,82 g).
LCMS mostró MH^{+} = 240; T_{RET} = 2,98 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
26
\vskip1.000000\baselineskip
Una solución de intermedio 25 (4,0 g) en dioxano
(30 ml) se trató con hidróxido potásico (7,54 g) en forma de una
solución en agua (20 ml). Se agitó la mezcla durante 16 h, después
se diluyó con agua (150 ml) y se acidificó hasta pH 3 con ácido
clorhídrico acuoso 5 M. Se agitó la mezcla en un baño de hielo
durante 15 min, después se recogió mediante filtración, se lavó con
agua fría y se secó a vacío sobre pentóxido de fósforo para
proporcionar el intermedio 26 en forma de un sólido blanco (2,83 g).
LCMS mostró MH^{+} = 212; T_{RET} = 2,26 min.
\newpage
Intermedio
28
El intermedio 26 (2,5 g) (previamente seco sobre
pentóxido de fósforo) se trató con cloruro de tionilo (25 ml) y se
calentó la mezcla a reflujo durante 1 hora. Se retiró el exceso de
cloruro de tionilo a vacío pata proporcionar el intermedio 27, que
se presumió que era el derivado de cloruro de ácido del intermedio
26, en forma de un sólido blanco (2,7 g).
El intermedio 27 (0,68 g) se disolvió en THF (10
ml) y se trató con DIPEA (0,77 ml), después con bencilamina (0,339
g) y se agitó la mezcla en nitrógeno durante 3 h. Se concentró la
mezcla a vacío, después se repartió entre DCM (20 ml) y agua (10
ml). Se separaron las fases y las orgánicas se concentraron a vacío
para proporcionar el intermedio 28 (0,90 g). LCMS mostró MH^{+} =
301; T_{RET} = 2,72 min.
De manera similar se prepararon los
siguientes:
Intermedio
31
El cloruro de ácido del intermedio 27 se
sintetizó a partir del intermedio 26 utilizando el procedimiento
anterior mostrado para el intermedio 28. Después el intermedio 27
(0,68 g) se trató con una solución 0,5 M de amoniaco en dioxano
(17,7 ml). Después se añadió isopropiletilamina (0,51 ml) y se agitó
la mezcla durante 21h. Después la mezcla se repartió entre DCM (100
ml) y agua (30 ml). Se retiró un sólido insoluble mediante
filtración, se lavó con agua (20 ml) y se secó a vacío sobre
pentóxido de fósforo para proporcionar el intermedio 31 (0,544 g).
LCMS mostró MH^{+} = 211; T_{RET} = 1,84 min.
\newpage
Intermedio 32 (= ejemplo
3)
El intermedio 1 (0,20 g) y trietilamina (0,55
ml) se suspendieron en etanol (8 ml) y se añadió
4-aminotetrahidropirano (0,088 g). Se agitó la
mezcla en nitrógeno, se calentó a 80ºC durante 16 h, después se
concentró a vacío. Se repartió el residuo entre DCM y agua. Se
separaron las fases y la fase orgánica se cargó directamente en un
cartucho de SPE (sílice, 5 g) que se eluyó secuencialmente con: (i)
DCM, (ii) DCM: Et_{2}O (2:1), (iii) DCM: Et_{2}O (1:1), (iv)
Et_{2}O y (v) EtOAc. Las fracciones que contenían el material
deseado se reunieron y se concentraron a vacío para proporcionar el
intermedio 32 (0,21 g). LCMS mostró MH^{+} = 319; T_{RET} = 2,93
min.
En una realización alternativa, el Intermedio 32
(= ejemplo 3) se puede preparar como se describe más adelante en el
"Ejemplo 3", en particular de acuerdo con el ejemplo 3,
Procedimiento B'' más adelante.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
33
Una solución del intermedio 32 (0,21 g) en
etanol: agua (95:5, 10 ml) se trató con hidróxido sódico (0,12 g).
Se calentó la mezcla a 50ºC durante 8 h, después se concentró a
vacío, se disolvió en agua y se acidificó hasta pH 4 con ácido
acético. Se retiró el sólido blanco resultante mediante filtración y
se secó a vacío para proporcionar el intermedio 33 en forma de un
sólido blanquecino (0,156 g). LCMS mostró MH^{+} = 291; T_{RET}
= 2,11 min.
Una preparación alternativa del intermedio 33 es
como sigue:
Una solución del intermedio 32 (ejemplo 3) (37,8
g) en etanol: agua (4:1, 375 ml) se trató con hidróxido de sodio
(18,9 g). Se calentó la mezcla a 50ºC durante 5 h, después se
concentró a vacío, se disolvió en agua, y se acidificó hasta pH 2
con ácido clorhídrico acuoso (2M). Se retiró el sólido blanco
resultante mediante filtración y se secó a vacío para proporcionar
el intermedio 33 en forma de un sólido blanquecino (29,65 g). LCMS
mostró MH^{+} = 291; T_{RET} = 2,17 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio 34 (= ejemplo
8)
El intermedio 1 (0,05 g) y
4-toluensulfonato de
(S)-(-)-3-aminotetrahidrofurano
(0,052 g) se suspendieron en etanol (1 ml) y se añadió trietilamina
(0,14 ml). Se agitó la mezcla en nitrógeno y se calentó a 80ºC
durante 24 h. Después de enfriar hasta temperatura ambiente, se
retiró el etanol mediante evaporación en una corriente de nitrógeno
y se repartió el residuo entre DCM (2 ml) y agua (1,5 ml). Se
separaron las fases y la fase orgánica se concentró hasta sequedad.
La purificación se llevó a cabo usando un cartucho de SPE (sílice,
5 g), eluyendo con un gradiente de EtOAc: ciclohexano; (1:16
después, 1:8, 1:4, 1:2, 1:1 y 1:0). Las fracciones que contenían el
material deseado se reunieron y se concentraron a vacío para
proporcionar el intermedio 34 (= ejemplo 8) (0,052 g). LCMS mostró
MH^{+} = 305; T_{RET} = 2,70 min.
De manera similar se prepararon los
siguientes:
Intermedio 39 (= ejemplo
13)
El intermedio 1 (0,05 g) y el intermedio 13
(0,027 g) se suspendieron en etanol (1 ml) y se añadió trietilamina
(0,14 ml). Se agitó la mezcla en nitrógeno y se calentó a 80ºC
durante 24 h. Después de enfriar hasta temperatura ambiente, se
retiró el etanol mediante evaporación en una corriente de nitrógeno
y se repartió el residuo entre DCM (2 ml) y agua (1,5 ml). Se
separaron las fases y la fase orgánica se concentró hasta sequedad.
La purificación se llevó a cabo utilizando un cartucho de SPE
(sílice, 5 g), eluyendo con un gradiente de EtOAc : ciclohexano;
(1:8 después 1:4, 1:2, 1:1 y 1:0). Las fracciones que contenían el
material deseado se reunieron y se concentraron a vacío para
proporcionar el intermedio 39 (= ejemplo 13) (0,045 g) en forma de
una mezcla de enatiómeros. LCMS mostró MH^{+} = 353; T_{RET} =
2,60 min.
De manera similar se preparó el siguiente:
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Intermedio
41
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Una solución del intermedio 34 (0,037 g) en
etanol: agua (95:5, 3 ml) se trató con hidróxido sódico (0,019 g).
Se calentó la mezcla a 50ºC durante 16 h, después se concentró a
vacío. Se disolvió el residuo en agua (1,5 ml) y se acidificó hasta
pH 4 con ácido acético. Se retiró el sólido blanco precipitado
mediante filtración y se secó a vacío. Se extrajo el filtrado con
acetato de etilo y la fase orgánica recogida se concentró a vacío
para proporcionar una porción adicional del sólido blanco. Se
reunieron los dos sólidos para proporcionar el intermedio 41 (0,033
g). LCMS mostró MH^{+} = 277; T_{RET} = 2,05 min.
\newpage
De manera similar se prepararon los
siguientes:
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Intermedio
48
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\vskip1.000000\baselineskip
El intermedio 2 (0,69 g) se suspendió en
ciclohexilamina (1,01 ml), y se calentó la mezcla a 90ºC durante 3
h. La mezcla residual se dejó enfriar hasta temperatura ambiente y
se repartió entre cloroformo (25 ml) y agua (25 ml). Se separaron
las fases y se secó la fase orgánica hasta sequedad. Se trituró el
residuo con Et_{2}O (25 ml) y el sólido insoluble se recogió y se
secó para proporcionar el intermedio 48 en forma de un sólido beige
(0,58 g). LCMS mostró MH^{+}=289; T_{RET} = 2,91 min.
\newpage
Intermedio
49
Se añadió una solución de hidróxido sódico 2 M
(0,5 ml) a una suspensión agitada del intermedio 48 (0,2 g) en
dioxano (4 ml) y agua (0,5 ml). Después de agitar durante una noche
a temperatura ambiente, se calentó la mezcla de reacción a 40ºC
durante 8 h. Se añadió una cantidad adicional de solución de
hidróxido sódico 2 M (1,5 ml), y se calentó la mezcla de reacción a
40ºC durante 48 h. Se concentró la reacción, se diluyó con agua (10
ml) y se acidificó con ácido acético glacial. Se recogió el
precipitado resultante mediante filtración, se lavó con agua y se
secó para proporcionar el intermedio 49 (0,18,g). LCMS mostró
MH^{+} = 261; T_{RET} = 2,09 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
50
Se añadió una solución de hidróxido sódico 2 M
(0,7 ml) a una suspensión agitada del ejemplo 185 (0,23 g, descrito
posteriormente en esta memoria descriptiva) en etanol (5 ml) y agua
(1,5 ml). Después de agitar durante una noche a temperatura
ambiente, se añadió una cantidad adicional de hidróxido sódico 2 M
(0,7 ml), y se agitó la mezcla de reacción a 43ºC durante 2,5 h. Se
concentró la solución de reacción, se diluyó con agua (5 ml) y se
acidificó con ácido clorhídrico 2 M. Se recogió el precipitado
resultante mediante filtración, se lavó con agua y se secó para
proporcionar el intermedio 50 en forma de un sólido blanco (0,14 g).
LCMS mostró MH^{+} = 305; T_{RET} = 2,42 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
51
Una mezcla de
5-amino-1-etilpirazol
(1,614 g, 14,5 mmoles) y
2-(1-etoxietiliden)malonato de dietilo (3,68
g, 16,0 mmoles, como describen P.P.T. Sah, J. Amer. Chem.
Soc., 1931, 53, 1836) se calentó a 150ºC en condiciones
de Dean Stark durante 5 horas. Se añadió cuidadosamente oxicloruro
de fósforo (25 ml) a la mezcla y la solución resultante se calentó
a 130ºC a reflujo durante 18 horas. Se concentró la mezcla a vacío,
después se añadió cuidadosamente el aceite residual, con
enfriamiento, a agua (100 ml). Se extrajo la mezcla resultante con
DCM (3 x 100 ml) y los extractos orgánicos reunidos se secaron sobre
sulfato sódico anhidro y se concentraron a vacío. Se purificó el
aceite residual mediante cromatografía de Biotage (sílice, 90 g)
eluyendo con acetato de etilo-gasolina (1:19). Las
fracciones que contenían el material deseado se reunieron y se
concentraron a vacío para proporcionar el intermedio 51 (1,15 g).
LCMS mostró MH^{+} = 268; T_{RET} = 3,18 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
52
Se añadió una solución de hidróxido sódico 2 M
(0,39 ml, 0,78 mmoles) al ejemplo 190 (0,128 g, 0,39 mmoles,
descrito en esta memoria descriptiva posteriormente) en etanol (1,5
ml), y se calentó la mezcla a 50ºC durante 16 horas. Se concentró
la mezcla de reacción, y la solución acuosa resultante se neutralizó
con ácido clorhídrico 2 M para precipitar un sólido que se recogió
mediante filtración. Se aplicó el filtrado a un cartucho de
extracción * (1 g) de balance hidrofílico-lipofílico
(abreviadamente HLB) OASIS ® que se eluyó con agua seguido de
metanol. La evaporación de la fracción metanólica proporcionó un
sólido que se reunió con el precipitado sólido inicial para
proporcionar el intermedio 52 (0,083 g) en forma de un sólido
blanco, que presumía ser el ácido carboxílico.
* Los cartuchos de extracción OASIS ® HLB están
disponibles de Waters Corporation, 34 Maple Street, Milford, MA
01757, Estados Unidos. Los cartuchos incluyen una columna que
contiene un copolímero absorbente que tiene un HLB de manera que
una solución acuosa se eluye a través de la columna, el soluto se
absorbe o adsorbe en o sobre el absorbente, y de tal manera que
cuando el disolvente orgánico (por ejemplo, metanol) se eluye el
soluto se libera en forma de una solución orgánica (por ejemplo,
metanol). Ésta es una forma de separar el soluto del disolvente
acuoso.
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Intermedio
53
Se añadió una solución de hidróxido sódico 2 M
(0,75 ml, 1,5 mmoles al ejemplo 189 (0,248 g, 0,75 mmoles, descrito
en esta memoria descriptiva posteriormente) en etanol (2 ml), y se
calentó la mezcla a reflujo durante 16 horas. Se concentró la
mezcla de reacción, se diluyó con agua (1 ml) y se acidificó con
ácido clorhídrico 2 M (0,75 ml) para precipitar un sólido que se
recogió mediante filtración para proporcionar el intermedio 53
(0,168 g). LCMS mostró MH^{+} = 305; T_{RET} = 1,86 min.
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Intermedio
54
Se añadió una solución de cloruro de hidrógeno
en dioxano (0,5 ml, 2,0 mmoles, 4 M) a una solución agitada de
4-oxociclohexilcarbamato de terc-butilo
(0,043 g, 0.20 mmoles, comercialmente disponible de Astatech Inc.,
Filadelfia, Estados Unidos) en dioxano (0.5 ml) y se agitó la mezcla
a temperatura ambiente. Después de una hora, se evaporó la mezcla
de reacción para proporcionar el intermedio 54 en forma de un sólido
en crema (34 mg). ^{1}H NMR (400 MHz en
d_{6}-DMSO, 27ºC, \delta ppm) 8,09 (sa, 3H),
3,51 (tt, 11, 3.5Hz, 1H), 2,45 (m, 2H, parcialmente oscurecido),
2,29 (m, 2H), 2,16 (m, 2H), 1,76 (m, 2H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
54A
Se añadió bencilamina (0,16 ml) a una mezcla
agitada del intermedio 49 (0,13 g), DIPEA (0,26 ml) y HATU (0,285
g) en DMF (3 ml). La mezcla resultante se calentó con agitación a
85ºC durante 16 horas. Se añadieron porciones adicionales de HATU
(0,14 g), DIPEA (0,13 ml) y bencilamina (0,082 ml) y se calentó la
mezcla durante 16 horas a 88ºC. Se concentró la solución
resultante, se diluyó con dicloroetano (20 ml) y se lavó con
solución saturada de bicarbonato sódico (20 ml), se separó mediante
material sinterizado hidrófobo y se concentró la fase orgánica
(sílice, 20 g) eluyendo con 60-80% de acetato de
etilo en ciclohexano. Después se purificó el residuo en un cartucho
de SPE (cartucho de ácido sulfónico Isolute SCX, 5 g x 2), eluyendo
con metanol (2 x 20 ml) y amoniaco al 10% en metanol (4 x 20 ml);
se reunieron las fracciones básicas y se concentraron para
proporcionar el intermedio 54A en forma de un sólido blanco (0,07
g). LCMS mostró MH^{+} = 350; T_{RET} = 2,99 min.
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Intermedio
55
El intermedio 15 (1,04 g) se trató con cloruro
de tionilo (13,22 g). Se agitó la mezcla y se calentó a 75ºC
durante 2h. Se retiró el exceso de cloruro de tionilo a vacío y el
aceite residual formó un azeótropo con tolueno para proporcionar el
intermedio 16, que se presumía ser el derivado del cloruro de ácido
del intermedio 15, en forma de un sólido en crema (1,12 g).
El intermedio 16 (0,997 g) se disolvió en
tetrahidrofurano (abreviadamente THF) (25 ml) y se trató con
N,N-diisopropiletilamina (1,07 ml) después con
1-[4-(metiloxi)fenil]metanamina =
4-metoxibencilamina (0,54 ml) (obtenible de, por
ejemplo, Aldrich, Acros, o Tetrahedron Lett., 2002,
43(48), 8735; o Meindl y col., J. Med. Chem., 1984,
27(9), 1111; u Organic Letters, 2002, 4(12),
2055) y se agitó la mezcla durante 3 h. Se concentró la solución a
vacío, después se repartió entre DCM y agua. Se separaron las fases
y las orgánicas reconcentraron a vacío. Después se trituró el sólido
en 1:1 de acetato de etilo: ciclohexano para proporcionar el
intermedio 55 (1,27 g). LCMS mostró MH^{+}= 345, T_{RET}= 2,86
min.
De manera similar se prepararon los
siguientes:
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Intermedio
58
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Se añadió una solución de hidróxido sódico
(0,053 g, 1,32 mmoles) en agua (0,41 ml) a una solución agitada del
ejemplo 205 (0,1 g, 0,303 mmoles) en etanol (1 ml), y la mezcla
resultante se calentó a 50ºC. Después de 1 hora, la mezcla de
reacción enfriada se ajustó hasta pH 3 con ácido clorhídrico 2 M, y
se extrajo con EtOAc (2 x 6 ml). Se secaron los extractos orgánicos
reunidos (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron para proporcionar el
intermedio 58 (0,072 g) en forma de un sólido blanco. LCMS mostró
MH^{+} = 303; T_{RET} = 2,13 min.
\newpage
Una preparación alternativa del intermedio 58 es
como sigue:
Se añadió una solución de hidróxido sódico
(0,792 g, 19,8 mmoles) en agua (6 ml) a una solución agitada del
ejemplo 205 (1,487 g, 4,5 mmoles) en etanol (15 ml), y la mezcla
resultante se calentó a 50ºC. Después de 1 hora, la mezcla de
reacción enfriada se ajustó hasta pH 4 con ácido clorhídrico 2 M, y
se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Se secaron los extractos orgánicos
reunidos (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron para proporcionar el
intermedio 58 (1,188 g) en forma de un sólido blanco. LCMS mostró
MH^{+} = 303; T_{RET} = 2,12 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
58A
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Se disolvió el intermedio 1 (0,76 g, 3,0 mmoles)
en acetonitrilo (10 ml). Se añadieron clorhidrato de
tetrahidro-2H-piran-3-amina
(0,5 g, 3.6 mmoles, Anales De Química, 1988, 84, 148)
y N,N-diisopropiletilamina (3,14 ml, 18,0 mmoles) y se agitó
la mezcla a 85ºC durante 24 h. Después de 24 h se añadió una porción
adicional de clorhidrato de
tetrahidro-2H-piran-3-amina
(0,14 g, 1,02 mmoles) y se continuó la agitación a 85ºC. Después de
8 h adicionales, se concentró la mezcla a vacío. Se repartió el
residuo entre DCM (20 ml) y agua (12 ml). Se separaron las fases y
la fase acuosa se extrajo con DCM (12 ml) adicional. Los extractos
orgánicos reunidos se secaron (Na_{2}SO_{4}), y se concentraron
a vacío para proporcionar un sólido marrón que se purificó en un
cartucho de SPE (sílice, 20 g) eluyendo con un gradiente de acetato
de etilo:ciclohexano (1:16, 1:8, 1:4, 1:2, 1:1, 1:0). Las fracciones
que contenían el material deseado se reunieron y se evaporaron para
proporcionar el intermedio 58A (0,89 g). LCMS mostró MH^{+} = 319;
T_{RET} = 2,92 min.
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Intermedio
59
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\vskip1.000000\baselineskip
Una solución del intermedio 58A (0,89 g, 2,79
mmoles) en etanol (16,7 ml) se trató con hidróxido sódico (0,47 g,
11,7 mmoles) en forma de una solución en agua (3,1 ml). Se agitó la
mezcla a 50ºC. Después de 12 h, se concentró la mezcla de reacción
a vacío para proporcionar un aceite residual que se disolvió en agua
(16 ml), después se enfrió y se acidificó hasta pH 3 con ácido
clorhídrico 2 M. Después de agitación a 0ºC durante 30 min, se
recogió el precipitado resultante mediante filtración, se lavó con
agua fría (2 ml) y se secó a vacío para proporcionar el intermedio
59 en forma de un sólido blanco (0,73 g). LCMS mostró MH^{+} =
291; T_{RET} = 2,19 min.
\newpage
Intermedio
60
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Se añadió una solución acuosa de hidróxido
sódico (8,55 ml, 2M) a una solución del ejemplo 207 (1,55 g) en
EtOH (13 ml). Se calentó la mezcla a 50ºC durante 18 h después se
neutralizó usando ácido clorhídrico acuoso y se evaporó a vacío
para proporcionar una mezcla de ácido
1-etil-4-(4-piperidinilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxílico
y ácido
4-[(1-acetil-4-piperidinil)amino]-1-etil-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxílico.
Se añadió ácido acético (0,36 ml) a una mezcla
agitada de HATU (2,41 g) y N,N-diisopropiletilamina
(2,21 ml) en N,N-dimetilformamida (65 ml). Después
de agitar durante 15 min. la mezcla se añadió a la mezcla de ácido
1-etil-4-(4-piperidinilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxílico
y ácido
4-[(1-acetil-4-piperidinil)amino]-1-etil-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxílico
y se agitó la reacción durante 15 h.
La mezcla de reacción se evaporó a vacío y el
residuo se purificó mediante cromatografía usando Biotage (sílice 90
g) eluyendo con DCM: MeOH (MeOH al 0%-5%) para proporcionar el
intermedio 60 (1,36 g) en forma de un sólido blanco. LCMS mostró
MH^{+} 334; T_{RET} = 2,06 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
61
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Una solución del ejemplo 2 (5,37 g, 17 mmoles)
en etanol (30 ml) se trató con una solución de hidróxido sódico
(2,72 g, 68 mmoles) en agua (20 ml), y se agitó la mezcla resultante
a 50ºC durante 3 h. Se concentró la mezcla de reacción a vacío, se
disolvió en agua (250 ml) y la solución enfriada se ajustó hasta pH
1 con ácido clorhídrico 5 M. El sólido resultante se recogió
mediante filtración y se secó a vacío para proporcionar el
intermedio 61 en forma de un sólido blanco (4,7 g). LCMS mostró
MH^{+} = 289; T_{RET} = 2,83 min.
\newpage
Intermedio
62
\vskip1.000000\baselineskip
Se añadió trifluoruro de sulfuro de dietilamino
(abreviadamente DAST), (0,06 ml, 0,47 mmoles), a una solución
agitada de (4-oxociclohexil)carbamato de
1,1-dimetiletilo, (250 mg, 1,17 mmoles,
comercialmente disponible de AstaTech Inc., Filadelfia, Estados
Unidos) en diclorometano anhidro (5 ml) y se agitó la mezcla en
nitrógeno a 20ºC. Después de 22 h, se enfrió la mezcla de reacción
hasta 0ºC, se trató con solución saturada de carbonato ácido de
sodio (4 ml), y se dejó calentar hasta temperatura ambiente. Se
separaron las fases mediante el paso a través de un material
sinterizado hidrófobo y se extrajo posteriormente la fase acuosa con
DCM (5 ml). Las fases orgánicas reunidas se concentraron a vacío
para proporcionar un sólido naranja (369 mg) que se purificó
posteriormente mediante cromatografía usando un cartucho de SPE
(sílice, 10 g), eluyendo con DCM para proporcionar el intermedio 62
(140 mg) que contenía 20% de
(4-fluoro-3-ciclohexen-1-il)carbamato
de 1,1-dimetiletilo. ^{1}H NMR (400 MHz en
CDCl_{3}, 27ºC, \delta ppm). Componente secundario: \delta
5,11 (dm, 16Hz, 1H), 4,56 (a, 1H), 3,80 (a, 1H)
2,45-1,45 (m's, 6H exceso), 1,43 (s, 9H). Componente
principal: \delta 4,43 (a, 1H), 3,58 (a, 1H),
2,45-1,45 (m's, exceso de 8H), 1,45 (s, 9H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
63
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Se añadió una solución de cloruro de hidrógeno
en dioxano (4 M, 1,6 ml) a 20ºC a una solución agitada del
intermedio 62 (140 mg, 0,6 mmoles), en dioxano (1,6 ml). Después de
3 h, la mezcla de reacción se concentró a vacío para proporcionar el
intermedio 63 (96,5 mg) que contenía
4-fluoro-3-ciclohexen-1-amina.
^{1}H NMR (400 MHz en d_{6}-DMSO, 27ºC, \delta
ppm) Componente secundario: \delta 8,22 (a, 3H), 5,18 (dm, 16Hz,
1H), 3,28-3,13 (m, exceso de 1H),
2,41-1,53 (m's, exceso de 6H). Componente principal:
\delta 8,22 (a, exceso de 3H), 3,28-3,13 (m,
exceso de 1H), 2,41-1,53 (m's, exceso de 8H). Las
impurezas también están presentes.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
64
\vskip1.000000\baselineskip
El intermedio 15 (0,06 g, 0,266 mmoles) se trató
con cloruro de tionilo (0,48 ml). La mezcla se agitó y se calentó a
75ºC durante 2 h. Se retiró el exceso de cloruro de tionilo a vacío
y al aceite residual formó un azeótropo con diclorometano
(abreviadamente DCM) para proporcionar el intermedio 16, que
presumía ser el derivado de cloruro de ácido del intermedio 15, en
forma de un sólido blanco. El intermedio 16 se disolvió en
tetrahidrofurano (abreviadamente THF) (2 ml) y se trató con
N,N-diisopropiletilamina (abreviadamente DIPEA)
(0,069 ml), después con metilamina (2 M en tetrahidrofurano, 0,15
ml) y la mezcla se agitó en nitrógeno durante 16 h. Se añadieron
0,05 ml adicionales de metilamina (2 M en THF) y la solución se
agitó durante 2 h. Se concentró la mezcla a vacío, después se
repartió entre diclorometano (2 ml) y solución acuosa de hidróxido
sódico (2 M, 2 ml), después se lavó la fase orgánica con agua (2
ml). Se separaron las fases las orgánicas se concentraron a vacío
para proporcionar el intermedio 64 (0,052 g). LCMS mostró MH^{+} =
239; T_{RET} = 2,17 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
65
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Una mezcla de intermedio 17 (2,0 g, 6,37
mmoles),
4-amino-1-piperidinacarboxilato
de 1,1-dimetiletilo (2,04 g, 10,2 mmoles) y
N,N,-diisopropiletilamina (5,54 ml, 31,9 mmoles) en MeCN (40 ml) se
calentó a 85ºC durante 42 h. Se evaporó la reacción y los residuos
se repartieron entre DCM y agua. Se secaron las fases orgánicas
(MgSO_{4}) después se evaporaron a vacío. Se cromatografió el
residuo en sílice (Biotage, 90 g) eluyendo con ciclohexano: EtOAc
(1:1) para proporcionar el intermedio 65 en forma de un sólido
blanco (2,70 g). LCMS mostró MH^{+} = 479; T_{RET} = 3,37
min.
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Intermedio
67
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Se añadió una solución de cloruro de
3-nitrobenzoilo (2,0 g, 10,78 mmoles) en DCM (20 ml)
gota a gota a una mezcla de N-metilciclohexilamina
(1,83 ml, 14,01 mmoles), N,N,-diisopropiletilamina (3,76 ml, 21,56
mmoles) y N,N-dimetilaminopiridina (0,01 g) en DCM a
20ºC. Se agitó la mezcla de reacción durante 56 h después se evaporó
a vacío. Se repartió el residuo entre acetato de etilo y agua. La
fase orgánica se lavó con HCl acuoso después se secó (MgSO_{4}) y
se evaporó a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en
sílice eluyendo con ciclohexano: EtOAc (9:1 seguido de 2:1) para
proporcionar
N-ciclohexil-N-metil-3-nitrobenzamida
(1,40 g). MS mostró MH^{+} 263.
Una mezcla de
N-ciclohexil-N-metil-3-nitrobenzamida
(1,40 g, 5,35 mmoles) y paladio sobre carbono (5%, 0,140 g) en
etanol (10 ml) se agitó en una atmósfera de hidrógeno durante 1
hora. Se filtró la mezcla de reacción a través de Celite y se
evaporó el filtrado para proporcionar el intermedio 67 en forma de
un sólido marrón (0,107 g). LCMS mostró MH^{+} = 233; T_{RET} =
2,56 min.
\newpage
Intermedio
68
Se añadió una solución de isocianato de etilo
(2,31 g, 32,5 mmoles) en DCM (40 ml) gota a gota durante 15 min, a
una solución vigorosamente agitada de clorhidrato de
4-piperidona monohidratado (5,0 g, 32,5 mmoles,
comercialmente disponible de Aldrich) y carbonato ácido de sodio
(8,2 g, 97,5 mmoles) en agua (60 ml) a 0ºC. Se agitó la mezcla de
reacción a temperatura ambiente durante 20 h. Se añadió cloruro
sódico (7,0 g) a la mezcla de reacción y se separó la fase
orgánica. Se extrajo la fase acuosa con DCM adicional (3 x 75 ml).
Se secaron los extractos orgánicos reunidos (Na_{2}SO_{4}) y se
evaporaron a vacío para proporcionar un sólido blanco (4,0 g). La
recristalización con acetato de etilo: ciclohexano (10:1)
proporcionó el intermedio 68 en forma de un sólido blanco (2,3 g).
TLC (sílice) proporcionó R_{f} = 0.24 (acetato de etilo). Anal.
Encontrado: C, 56.7; H, 8,3; N, 16,35. C_{8}H_{14}N_{2}O_{2}
requiere C, 56,5; H, 8,3; N, 16,5.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
69
Una solución del intermedio 68 (1,5 g, 8,8
mmoles) y bencilamina (1,04 g, 9,7 mmoles) en etanol absoluto (60
ml) se hidrogenó en catalizador de 10% de paladio sobre carbón (0,6
g) reducido previamente en etanol (20 ml) hasta que cesó la
captación de hidrógeno (22 h). Se filtró la mezcla de reacción a
través de un agente de filtración (Celite), y después a través de
gel de sílice (100 ml) eluyendo con etanol:
0,88-amoníaco (100 : 1) para proporcionar un aceite
negro. Se disolvió el aceite en etanol (30 ml) y se trató con una
solución de cloruro de hidrógeno en etanol (3M) hasta que se
acidificó la solución. Se evaporó el disolvente y se trituró el
residuo con etanol para proporcionar el intermedio 69 en forma de un
sólido blanco (1,09 g). TLC (sílice) proporcionó R_{f} = 0,73
(acetato de etilo: metanol, 10: 1). Anal. encontrado: C, 45,9; H,
8,4; N, 19,8. C_{8}H_{18}ClN_{3}O requiere C, 46,3; H, 8,7; N,
20,2.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
70
Se añadió ciclopropilamina (0,136 g, 2,39
mmoles) y diisopropiletilamina (0,68 ml, 3,9 mmoles) a una solución
agitada de ácido
4-[({[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}amino)-metil]benzoico
(0,501 g, 2,0 mmoles), EDC (0,612 g, 3,2 mmoles) y HOBT (0,35 g,
2,6 mmoles) en DMF (2 ml). Se agitó la mezcla resultante a
temperatura ambiente durante una noche. Se retiraron los
disolventes a vacío, se disolvió el residuo en acetato de etilo (20
ml) y se lavó con ácido clorhídrico 0,5M (3 x 20 ml). Se secó la
fase orgánica (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó a vacío para
proporcionar el producto bruto que se purificó mediante
cromatografía en Biotage (sílice) eluyendo con acetato de etilo:
ciclohexano (1.3: 1) para proporcionar el intermedio 70 en forma de
un sólido blanco (0,512 g). LCMS mostró MH^{+} = 291;
T_{RET} = 2,75 min.
T_{RET} = 2,75 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
71
\vskip1.000000\baselineskip
Se disolvió el intermedio 70 (0,506 g, 1,74
mmoles) en una solución de cloruro de hidrógeno en dioxano (20 ml, 4
M) en nitrógeno. Después de 1 h, se añadió metanol (3 ml) a la
mezcla y continuó la agitación a temperatura ambiente durante una
noche. Se retiraron los disolventes a vacío para proporcionar
Intermedio 71 en forma de un sólido blanco (0,416 g). LCMS mostró
MH^{+} = 191; T_{RET} = 0,82 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
72
\vskip1.000000\baselineskip
El intermedio 33 (1,36 g, 4,7 mmoles), EDC (1,26
g, 6,57 mmoles) y HOBT (0,76 g, 5,62 mmoles) se suspendieron en DMF
(50 ml) y se agitaron vigorosamente a temperatura ambiente durante
0,5 h, antes de añadir
4-(aminometil)-1-piperidinacarboxilato
de1,1-dimetiletilo (1,3 g, 6,07 mmoles,
comercialmente disponible de Maybridge Chemical Co. Ltd.,). Después
de agitar a temperatura ambiente durante una noche, se añadió una
cantidad adicional de
4-(aminometil)-1-piperidinacarboxilato
de 1,1-dimetiletilo (1,01 g, 4,7 mmoles) se añadió a
la mezcla de reacción que después se calentó a 50ºC. Después de 6 h,
se añadió diisopropiletilamina (0,25 ml, 1,44 mmoles), y se mantuvo
la mezcla a 50ºC durante 6 h adicionales. Se retiraron los
disolventes a vacío y se repartieron los residuos entre DCM (100 ml)
y agua (100 ml). Se separaron las fases mediante el paso a través de
material sinterizado hidrófobo, y la fase orgánica se evaporó a
vacío para proporcionar el producto bruto. La purificación adicional
utilizando cartuchos de SPE (aminopropilo seguido de sílice)
proporcionó el intermedio 72 en forma de un sólido en crema (1,24
g). LCMS mostró MH^{+} = 487; T_{RET} = 2,97 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
73
El intermedio 73 se usa in situ en el
procedimiento general para los ejemplos 360-414.
\newpage
Intermedio
74
Se añadió anhídrido acético (0,52 ml, 5,5
mmoles) a una mezcla de
N-[3-aminometil)bencil]carbamato
de terc-butilo (1,1 g, 4,65 mmoles comercialmente disponible
de Astatech) y trietilamina (0,7 ml, 5 mmoles) en THF (20 ml). Se
agitó la reacción a 20ºC durante 16 después se concentró a vacío. Se
repartió el residuo entre EtOAc y agua. Se secó la fase orgánica
(MgSO_{4}) y se evaporó a vacío. Se cromatografió el residuo
sobre sílice eluyendo con hexanos: EtOAc (1: 1) seguido de EtOAc
para proporcionar el intermedio 74 (1,2 g) en forma de un aceite
incoloro. Anal. Encontrado: C, 64,79; H, 7,93; N, 10,10.
C_{15}H_{22}N_{2}O_{3} requiere C, 64,73; H, 7,97; N, 10,06.
MS (M+Na )^{+} 301.
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
75
Se añadió cloruro de hidrógeno en dioxano (4 ml,
4 M) a una solución del intermedio 74 (1,0 g, 3,6 mmoles) en dioxano
(10 ml) y se agitó la mezcla resultante durante 6 horas a 20ºC. Se
diluyó la reacción con Et2O (20 ml) y se filtró para proporcionar el
intermedio 75 (0,7 g) en forma de un sólido blanco. MS MH^{+} 179.
^{1}H NMR (300 MHz en d6-DMSO, 27ºC, \delta ppm)
\delta 8,6-8,4 (a m, 3H),
7,38-7,26 (m, 3H), 7,22 (am, 1H), 4,24 (d, J =
5.7Hz, 2H), 3,95 (dd, J = 11,6, 5,7Hz, 2H), 1,87 (s, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
Intermedio
76
grupo
(cis-3-hidroxiciclohex-1-ilamino,
racémico)
Se trató una solución del ejemplo 665 (0,681 g,
2,05 mmol) en etanol (7 ml) con una solución de hidróxido de sodio
(0,362 g, 9,05 mmol) en agua (2,9 ml). La mezcla resultante se agitó
a 50ºC. Después de 3 h, la mezcla de reacción se concentró a vacío
para proporcionar un aceite residual que se disolvió en agua (3 ml),
después se enfrió y se acidificó hasta pH 3 con ácido clorhídrico
2M. Después de agitar a 0ºC durante 1 h, se recogió el precipitado
resultante mediante filtración, se lavó con agua enfriada (0,5 ml) y
se secó a vacío para producir el Intermedio 76 en (0,491 g). LGMS
mostró MH+ = 305; T_{RET} = 2,14 min.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\newpage
\global\parskip0.900000\baselineskip
Ejemplo de referencia
1
El intermedio 1 (0,051 g) y ciclopentilamina
(0,019 g) se suspendieron en etanol (2 ml) y se añadió trietilamina
(0,14 ml). Se agitó la mezcla en nitrógeno y se calentó a 80ºC
durante 16 h. Después de enfriar hasta temperatura ambiente, se
retiró el etanol mediante evaporación en una corriente de nitrógeno
y el residuo se repartió entre diclorometano (abreviadamente DCM) y
agua. Se separaron las fases y la fase orgánica se cargó
directamente en un cartucho de extracción de fase sólida
(abreviadamente SPE) (sílice, 5 g) que se eluyó secuencialmente
con; (i) DCM, (ii) DCM: Et_{2}O (2:1), (iii) DCM: Et_{2}O (1:1),
(iv) Et_{2}O, (v) EtOAc, (vi) MeOH. Las fracciones que contenían
el material deseado se reunieron y se concentraron a vacío para
proporcionar el ejemplo 1 (0,074 g). LCMS mostró MH^{+} = 303;
T_{RET} = 3,45 min.
De manera similar se prepararon los
siguientes:
Ejemplo de referencia 3 (=
Intermedio
32)
\global\parskip1.000000\baselineskip
En lugar del procedimiento mostrado
anteriormente (llamado procedimiento A), el compuesto del ejemplo 3
también se puede preparar utilizando el procedimiento siguiente:
Ejemplo de referencia, Procedimiento B: El
intermedio 1 (2,5 g) se disolvió en acetonitrilo (15 ml). Se
añadieron clorhidrato de 4-aminotetrahidropirano
(1,1 g) y N,N-diisopropiletilamina (9,4 ml) y la
mezcla se agitó en nitrógeno a 85ºC durante 16 h. Permanecía una
traza del material de partida, de manera que se añadió una porción
adicional de clorhidrato de 4-aminotetrahidropirano
(0,11 g) y se continuó la agitación a 85ºC durante 16 h
adicionales. Después se concentró a vacío. El residuo se repartió
entre DCM y agua. Se separaron las fases y la fase orgánica se lavó
con agua adicional (2 x 20 ml) después se secó (Na_{2}SO_{4}) y
se concentró a vacío. Después el residuo se purificó mediante
cromatografía usando Biotage (sílice, 90 g), eluyendo con
ciclohexano: acetato de etilo para proporcionar Ejemplo 21 (2,45 g).
LCMS mostró MH^{+} = 319; T_{RET} = 2,90 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
6
El intermedio 3 (0,045 g) se situó en un
Reactivial^{TM} y se trató con ciclopentilamina (0,07 ml). Se
calentó la mezcla a 90ºC durante 2 h, después se dejó enfriar a
temperatura ambiente y se repartió entre cloroformo (2 ml) y agua
(1 ml). Se separaron las fases y la fase orgánica se evaporó hasta
un sólido marrón, que se purificó mediante HPLC de autopurificación
de masa dirigida para proporcionar el ejemplo 6 en forma de un
sólido (0,008 g). LCMS mostró MH^{+}= 289; T_{RET} = 3,22
min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
7
El intermedio 3 (0,035 g) se situó en un
Reactivial^{TM} y se trató con
4-aminotetrahidropirano (0,06 ml). Se calentó la
mezcla a 90ºC durante 2 h, después se dejó enfriar hasta temperatura
ambiente y se repartió entre cloroformo (2 ml) y agua (1 ml). Se
separaron las fases y se concentró la fase orgánica, después se
aplicó a una placa de TLC preparativa (sílice, 20 cm x 20 cm x 1 mm)
que se eluyó con acetato de etilo. Se retiró la banda requerida de
la placa y se lavó la sílice con acetato de etilo (2 x 15 ml). La
concentración de la solución de acetato de etilo a vacío
proporcionó el ejemplo 7 en forma de un sólido blanco (0,008 g).
LCMS mostró MH^{+}= 305; T_{RET} = 2,67 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
8
El intermedio 1 (0,05 g) y
4-toluensulfonato de
(S)-(-)-3-aminotetrahidrofurano
(0,052 g) se suspendieron en etanol (1 ml) y se añadió trietilamina
(0,14 ml). Se agitó la mezcla en nitrógeno y se calentó a 80ºC
durante 24 h. Después de enfriar hasta temperatura ambiente, se
retiró el etanol mediante evaporación en una corriente de nitrógeno
y el residuo se repartió entre DCM (2 ml) y agua (1,5 ml). Se
separaron las fases y se concentró la fase orgánica hasta sequedad.
La purificación se llevó a cabo usando un cartucho de SPE (sílice, 5
g), eluyendo con a gradiente de EtOAc: ciclohexano; (1:16 después,
1:8, 1:4, 1:2, 1:1 y 1:0). Las fracciones que contenían el material
deseado se reunieron y se concentraron a vacío para proporcionar el
ejemplo 8 (0,052 g). LCMS mostró MH^{+} = 305; T_{RET} = 2,70
min.
De manera similar se prepararon los
siguientes:
\vskip1.000000\baselineskip
\newpage
Ejemplo de referencia
13
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
El intermedio 1 (0,05 g) y el intermedio 13
(0,027 g) se suspendieron en etanol (1 ml) y se añadió trietilamina
(0,14 ml). Se agitó la mezcla en nitrógeno y se calentó a 80ºC
durante 24 h. Después de enfriar hasta temperatura ambiente, se
retiró el etanol mediante evaporación en una corriente de nitrógeno
y el residuo se repartió entre DCM (2 ml) y agua (1,5 ml). Se
separaron las fases y se concentró la fase orgánica hasta sequedad.
La purificación se llevó a cabo utilizando un cartucho de SPE
(sílice, 5 g), eluyendo con un gradiente de EtOAc : ciclohexano;
(1:8 después 1:4, 1:2, 1:1 y 1:0). Las fracciones que contenían el
material deseado se reunieron y se concentraron a vacío para
proporcionar el ejemplo 13 (0,045 g) en forma de una mezcla de
enantiómeros. LCMS mostró MH^{+} = 353; T_{RET} = 2,60 min.
De manera similar se preparó el siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
13
\vskip1.000000\baselineskip
\newpage
Ejemplo de referencia 19 (ejemplo
de referencia, como un
intermedio)
Ejemplo
13
NHR^{3} =
164
El intermedio 2 (0,035 g) se situó en un
Reactivial^{TM} y se trató con ciclopentilamina (0,05 ml). Se
calentó la mezcla a 90ºC durante 1,5 h, después se dejó enfriar
hasta temperatura ambiente y se repartió entre cloroformo (2 ml) y
agua (1 ml). Se separaron las fases y se concentró la fase orgánica.
Se trituró el sólido residual con Et_{2}O y se recogió el sólido
blanquecino insoluble y se secó al aire para proporcionar el ejemplo
19 (0,016 g). LCMS mostró MH^{+}= 275; T_{RET} = 2,58 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia 20 (ejemplo
de referencia, como un
intermedio)
El intermedio 2 (0,035 g) se situó en un
Reactivial^{TM} y se trató con
4-aminotetrahidropirano (0,05 ml). Se calentó la
mezcla a 90ºC durante 1,5 h, después se dejó enfriar hasta
temperatura ambiente y se repartió entre cloroformo (2 ml) y agua (1
ml). Se separaron las fases y se concentró la fase orgánica. El
producto bruto se purificó mediante HPLC de autopurificación de masa
dirigida para proporcionar el ejemplo 20 en forma de un sólido
blanquecino (0,011 g). LCMS mostró MH^{+}= 291; T_{RET} = 2,08
min.
\vskip1.000000\baselineskip
El intermedio 2 (2 g) se suspendió en
4-aminotetrahidropirano (2 g), y se calentó la
mezcla a 90ºC durante 6 h. Se dejó que la mezcla residual se
enfriara hasta temperatura ambiente y se repartió entre cloroformo
(50 ml) y agua (50 ml). Se separaron las fases y se evaporó la fase
orgánica hasta sequedad. El residuo se trituró con Et_{2}O (30
ml) y el sólido insoluble se recogió y se secó para proporcionar el
ejemplo 20 en forma de un sólido en crema (2,24 g). LCMS mostró
MH^{+}= 291; T_{RET} = 2,19 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
21
Se han utilizado tres procedimientos
alternativos A, B y C para preparar el ejemplo 21 como sigue:
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia 21,
Procedimiento
A
Una solución de 4-cloro
intermedio 17 (0,031 g, 0,1 mmoles) en etanol (1,9 ml) se trató con
trietilamina (0,07 ml, 0,5 mmoles), seguido de una solución
etanólica 0,1 M de 4-aminotetrahidropirano
(intermedio 8, 1,1 ml de la solución etanólica 0,1 M = 0,11
mmoles). Se calentó la mezcla a reflujo (80ºC) durante 18 h. Después
se añadió una porción adicional de
4-amino-tetrahidropirano (0,01 ml de
amina no diluida, no una solución de la misma) y se calentó de
manera continuada durante 24 h adicionales. Se retiraron los
volátiles a vacío y el residuo se disolvió en diclorometano (DCM),
después se aplicó a un cartucho de extracción en fase sólida
(abreviadamente SPE) (aminopropilo, 1 g) que se eluyó primero con
DCM, después con metanol. Las fracciones que contenían el material
deseado se concentraron a vacío para proporcionar el ejemplo 21
(0,004 g). LCMS mostró MH^{+} = 380; T_{RET} = 2,92 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia 21,
Procedimiento
B
El intermedio 17 (0,031 g, 0,1 mmoles) se
disolvió en acetonitrilo (1 ml). Se añadieron clorhidrato de
4-aminotetrahidropirano (Intermedio 8A, 0,015 g,
0,11 mmoles) y N,N-diisopropiletilamina (0,08 ml,
0,5 mmoles) y se agitó la mezcla en nitrógeno a 85ºC durante 16 h,
después se concentró a vacío. El residuo se repartió entre
diclorometano (abreviadamente DCM) y agua. Se separaron las fases y
la orgánica se concentró a vacío para proporcionar ejemplo 21 (0,027
g). LCMS mostró MH^{+} = 380; T_{RET} = 2,92 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia 21,
Procedimiento
C
Esta vía C alternativa al ejemplo 21 implica la
formación del éster del ejemplo 3 = intermedio 32
usando uno de los procedimientos
descritos anteriormente, conversión del éster del ejemplo
3/intermedio 32 en el ácido carboxílico (intermedio 33) usando el
procedimiento proporcionado anteriormente para el intermedio 33, y
después la formación del enlace amida para formar el ejemplo 21
usando el procedimiento de los ejemplos 81-84 más
adelante.
Los siguientes compuestos se pueden preparar de
manera similar usando uno o más de los procedimientos A, B o C
anteriores, preferiblemente el procedimiento A o B:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
39
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Una solución del intermedio 17 (0,031 g, 0,1
mmoles) en etanol (1 ml) se trató con trietilamina (0,07 ml, 0,5
mmoles), seguido de una solución etanólica 0,1 M de ciclopentilamina
(1,1 ml de la solución etanólica 0,1 M = 0,11 mmoles). Se calentó
la mezcla a reflujo (80ºC) durante 18 h. Después se añadió una
porción adicional de ciclopentilamina (0,009 ml de amina no
diluida, no una solución de la misma) y se calentó de manera
continuada durante 24 h adicionales. Se retiraron los volátiles a
vacío y el residuo se disolvió en DCM, después se aplicó a un
cartucho SPE (aminopropilo, 1 g) que se eluyó primero con DCM,
después con metanol. La fracción de DCM se concentró a vacío,
después se aplicó a un cartucho de SPE (sílice, 0,5 g) que se eluyó
secuencialmente con (i) DCM, (ii) Et_{2}O, (iii) EtOAc y (iv)
MeOH. Las fracciones que contenían el material deseado se reunieron
para proporcionar el ejemplo 39 (0,007 g). LCMS mostró MH^{+} =
364; T_{RET} = 3,38 min.
\newpage
De manera similar se prepararon los
siguientes:
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
57
\global\parskip0.850000\baselineskip
Se trató una solución del intermedio 22 (0,03 g,
aproximadamente 0,1 mmoles) en etanol (1 ml) con trietilamina (0,07
ml, 0,5 mmoles), seguido de una solución metabólica 0,1 M del
intermedio 6 (1,1 ml de la solución = 0,11 mmoles). Se calentó la
mezcla a reflujo (80ºC) durante 18 h. Después se añadió una porción
adicional del intermedio 6 (0,01 ml, no diluido) y se calentó
continuadamente durante 24 h adicionales. Se retiraron los
volátiles a vacío y se disolvió el residuo en DCM, después se aplicó
a un cartucho de SPE (aminopropilo, 1 g) que se eluyó primero con
DCM, después con metanol.
La fracción de DCM se concentró a vacío, después
se aplicó a un cartucho de SPE (sílice, 0,5 g) eluyendo con (I)
DCM, (ii) EtOAc y (iii) y un gradiente progresivo de cloroformo:
metanol (desde 99:1 hasta 4:1). Se reunieron las fracciones que
contenían el material deseado para proporcionar el ejemplo 57 (0,003
g). LCMS mostró MH^{+} = 422; T_{RET} = 2,1 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
61
Se trató una solución del intermedio 28 (0,03 g,
0,1 mmoles) en etanol (1 ml) con una solución etanólica 0,1 M de
ciclopentilamina (1,1 ml de solución = 0,11 mmoles). Después se
añadió trietilamina (0,07 ml, 0,5 mmoles) y se calentó la mezcla a
reflujo (85ºC), en nitrógeno durante 12 h. Después se añadió una
porción adicional de ciclopentilamina (0,009 ml, no diluida) y se
calentó de manera continuada durante 36 h adicionales. Se
concentraron las mezclas a vacío y el residuo se trató con
cloroformo. Se recogió una pequeña cantidad de material insoluble
mediante filtración, después el filtrado se aplicó a un cartucho de
SPE (aminopropilo, 1 g) que se eluyó primero con DCM, después con
metanol. Las fracciones que contenían el material deseado se
reunieron para proporcionar el ejemplo 61 (0,039 g). LCMS mostró
MH^{+} = 350; T_{RET} = 2,88 min.
De manera similar se prepararon los
siguientes:
\global\parskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
74
Se trató una solución del intermedio 28 (0,03 g,
0,1 mmoles) en etanol (1 ml) con una solución etanólica 0,1 M del
intermedio 6 (1,1 ml de solución = 0,11 mmoles). Después se añadió
trietilamina (0,07 ml, 0,5 mmoles) y se calentó la mezcla a reflujo
(85ºC), en nitrógeno durante 12 h. Después se añadió una porción
adicional del intermedio 6 (0,1 mmoles) y se continuó el
calentamiento durante 36 h adicionales. Se concentró la mezcla a
vacío y el residuo se trató con cloroformo. Se recogió una pequeña
cantidad del material insoluble mediante filtración, después el
filtrado se aplicó a un cartucho de SPE (aminopropilo, 1 g) que se
eluyó primero con DCM, después con metanol. Las fracciones que
contenían el material deseado se reunieron y se concentraron a
vacío. Después el residuo se purificó mediante SPE (sílice, 0,5 g)
eluyendo con (i) DCM, (ii) cloroformo, (iii) EtOAc y (iv) un
gradiente progresivo de cloroformo: metanol (desde 99:1 hasta 4:1).
Las fracciones que contenían el material deseado se reunieron para
proporcionar el ejemplo 74 (0,029 g). LCMS mostró MH^{+} = 407;
T_{RET} = 2,57 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
81
A una suspensión agitada del intermedio 33
(0,025 g, aproximadamente entre 0,08 y 0,09 mmoles) en cloroformo
(2 ml) se añadió cloruro de tionilo (0,025 ml) y la mezcla se agitó
a temperatura ambiente durante 1h. Se enfrió la mezcla hasta 0ºC y
se añadió metilamina (solución 2 M en THF, 0,69 ml = 1,38 mmoles).
Después de volver hasta temperatura ambiente se agitó la mezcla
durante 1 h adicional, después se inactivo mediante adición de agua
(4 ml) y se separaron las fases. Se concentró la fase orgánica
después se aplicó a un cartucho de SPE (sílice, 1 g) que se eluyó
con (i) DCM, (ii) Et_{2}O (2:1), (iii) EtOAc, (iv) MeOH: EtOAc
(1:9). Las fracciones que contenían el material deseado se reunieron
para proporcionar el ejemplo 81 (0,019 g). LCMS mostró MH^{+} =
304; T_{RET} = 2,19 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Similarmente preparados:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
83
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
En una realización alternativa al procedimiento
anterior descrito para los ejemplos 81-84, el
ejemplo 83 se puede preparar según el procedimiento siguiente:
Una mezcla del intermedio 33 (3,0 g, 10,33
mmoles), EDC (2,25 g, 11,7 mmoles), y HOBT (1,68 g, 12,4 mmoles) se
agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Se añadió etilamina
(6,2 ml, 12,4 mmoles, solución 2 M en THF), y se continuó la
agitación a temperatura ambiente durante 22 horas. Se retiraron los
disolventes a vacío, y el sólido residual se disolvió en cloroformo
(250 ml) y se lavó sucesivamente con agua (70 ml) y solución de
carbonato ácido de sodio al 5% (70 ml). Después de secar sobre
sulfato sódico anhidro, se evaporó la solución orgánica a vacío
para proporcionar un sólido naranja claro (4,15 g). Este sólido se
disolvió en una mezcla de diclorometano (15 ml) y cloroformo (5 ml)
y se purificó mediante cromatografía (Biotage, sílice, 100 g)
eluyendo inicialmente con EtOAc-ciclohexano (2:1) y
finalmente con EtOAc limpio. Las fracciones que contenían el
producto se reunieron y se evaporaron para proporcionar el ejemplo
83 en forma de un sólido amarillo claro (3,05 g). LCMS mostró
MH^{+} = 318; T_{RET} = 2,33 min. ^{1}H NMR (400 MHz en
d_{6}-DMSO, 27ºC, \delta ppm) 9,76 (d, 1H) 8,35
(s, 1H) 7,94 (s, 1H) 5,99 (m a, 1H) 4,47 (c, 2H)
4,16-4,01 (m's, 3H) 3,62 (m, 2H) 3,48 (m, 2H) 2,13
(m, 2H) 1,77 (m, 2H) 1,49 (t, 3H) 1,28 (t, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
85
El intermedio 41 (0,017 g, 0,062 mmoles) se
disolvió en DMF (2 ml), después se trató con HATU (0,023 g) seguido
de diisopropiletilamina (0,021 ml) y se agitó la mezcla durante 10
min. Después se añadió bencilamina (0,007 ml) y se agitó de manera
continuada durante 64 h adicionales. Se concentró la mezcla a vacío
y se disolvió el residuo en DCM (1,5 ml) después se trató con
solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (1,5 ml). Se agitó
esta mezcla durante 30 min, después se separaron las fases y la fase
orgánica se aplicó a un cartucho de SPE (sílice, 1 g) que se eluyó
con un gradiente de gradiente de acetato de etilo: ciclohexano (1:4,
después 1:2, 1:1, 2:1 y 1:0). Las fracciones que contenían el
material deseado se concentraron a vacío para proporcionar el
ejemplo 85 (0,017 g). LCMS mostró MH^{+} = 366; T_{RET} = 2,80
min.
\newpage
De manera similar se prepararon los
siguientes:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
91
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
El intermedio 43 (0,019 g) se disolvió en DMF (2
ml), después se trató con HATU (0,024 g) seguido de
diisopropiletilamina (0,022 ml) y se agitó la mezcla durante 10
min. Después se añadió bencilamina (0,007 ml) y se continuó la
agitación durante 64 h adicionales. Se concentró la mezcla a vacío y
el residuo se disolvió en DCM (1,5 ml) después se trató con
solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (1,5 ml). Se agitó
esta mezcla durante 30 min, después se separaron las fases y la
fase orgánica se aplicó a un cartucho SPE (sílice, 1 g) que se
eluyó secuencialmente a un gradiente de acetato de etilo:
ciclohexano (1:4, después 1:2, 1:1 y 1:0). Las fracciones que
contenían el material deseado se concentraron a vacío para
proporcionar el ejemplo 91 (0,023 g). LCMS mostró MH^{+} =
396;
T_{RET} = 3,26 min.
T_{RET} = 3,26 min.
\newpage
Ejemplo de referencia
92
El intermedio 41 (0,017 g) se disolvió en DMF (2
ml), después se trató con HATU (0,023 g) seguido de
diisopropiletilamina (0,021 ml) y se agitó la mezcla durante 10
min. Después se añadió 4-fluoroanilina (0,006 ml) y
continuó la agitación durante 64 h adicionales. Se concentró la
mezcla a vacío y se disolvió el residuo en DCM (1,5 ml) después se
trató con solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (1,5 ml).
Esta mezcla se agitó durante 30 min, después se separaron las fases
y la fase orgánica se concentró a vacío. La mezcla bruta se purificó
mediante HPLC de autopuri-
ficación de masa dirigida para proporcionar el ejemplo 92 (0,013 g). LCMS mostró MH^{+} = 370; T_{RET} = 2,91 min.
ficación de masa dirigida para proporcionar el ejemplo 92 (0,013 g). LCMS mostró MH^{+} = 370; T_{RET} = 2,91 min.
De manera similar se prepararon los
siguientes:
Ejemplo de referencia
99
En todos los ejemplos de 22 a 98, cuando un
ejemplo de 4-amino 5-carboxamida de
la fórmula I siguiente se ha sintetizado a partir del derivado de
4-cloro, después una síntesis alternativa de etapa
final es como sigue:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Un intermedio de fórmula IV anterior (0,1
mmoles) se disolvió en acetonitrilo (1 ml). Una amina de fórmula
R^{3}NH_{2} (0,11 mmoles, 1,1 equivalentes molares) y
N,N-diisopropiletilamina (0,5 mmoles, 5 equivalentes
molares) se añadieron y la mezcla se agitó en nitrógeno a 85ºC
durante 16 h. Después de concentrar a vacío, el residuo se repartió
entre diclorometano (abreviadamente DCM) y agua. Se separaron las
fases y se concentró la fase orgánica a vacío para proporcionar un
ejemplo de fórmula I.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
100
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
El intermedio 33 (0,048 mmoles) se disolvió en
DMF (0,5 ml), después se trató con HATU (0,048 mmoles) seguido de
diisopropiletilamina (0,096 mmoles) y se agitó la mezcla durante 10
min. Después se añadió 4-metilsulfonilbencilamina
(0,052 mmoles, disponible de Acros Organics) y se agitó durante 16
horas adicionales. Se concentró la mezcla a vacío. Se purificó la
mezcla bruta mediante HPLC de autopurificación de masa dirigida para
proporcionar el ejemplo 100 (0,013 g). LCMS mostró MH^{+}= 458 ;
T_{RET} = 2,22 min.
Similarmente preparado, pero sustituyendo la
4-metilsulfonilbencilamina con el mismo o similar
número de moles de otra amina R^{4}R^{5}NH, eran los siguientes
compuestos (ejemplos y ejemplos de referencia
102-182):
\vskip1.000000\baselineskip
\newpage
Ejemplo de referencia
109
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\vskip1.000000\baselineskip
Se proporciona más adelante un procedimiento
alternativo para preparar el Ejemplo de referencia 109: se
añadieron 1-Hidroxibenzotriazol (0,215 g, 1,59 mmol)
y clorhidrato de
1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etil-carbodiimida
(0,357 g, 1,86 mmol) a una suspensión del Intermedio 33 (0,384 g,
1,32 mmol) en OMF (10 ml). Después de agitar a temperatura ambiente
durante 30 minutos, se añadió
(1,3-tiazol-2-ilmetil)amina
(0,182 g, 1,59 mmol) (disponible comercialmente de MicroChemistry
Building Blocks (Rusia) o Matrix Scientific (Estados Unidos), o que
se puede preparar como se ha descrito en Synthesis 1998, 641, o
Tetrahedron 1995, 51, 12731). La reacción se agitó durante 18 y
después se repartió entre éter y agua. Se lavó la fase orgánica con
salmuera, se secó (MgSO_{4} y se evaporó a vacío. Se
purificó el residuo mediante cromatografía (Biotage, sílice 90 g)
eluyendo con ciclohexano: EtOAc seguido de EtOAc. El material se
trituró con ciclohexano y se filtró para producir el Ejemplo de
referencia 109 (0,244 g) en forma de un sólido de color amarillo
pálido. LCMS mostró MH^{+} 387; T_{RET} = 2,49 min. ^{1}H RMN
(400 MHz en CDCl_{3}, \delta ppm) \delta 9.74 (d, 1H) 8,50 (s,
1H) 7,94 (s, 1H) 7,74 (d, 1H), 7,33 (d, 1H), 7,17 (m, 1H), 4,94 (d,
2H) 4,45 (c, 2H) 4,15-4,00 (m, 3H), 3,63 (m, 2H),
2,15 (m, 2H) 1,85-1,73 (m, 3H) 1,48 (t, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
167
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
En una realización alternativa al procedimiento
descrito anteriormente para los ejemplos 100-182, el
ejemplo 167 se puede preparar según el siguiente procedimiento:
Una mezcla del intermedio 33 (0,498 g, 1,72
mmoles), EDC (0,46 g, 2,41 mmoles), y HOBT (0,278 g, 1,68 mmoles)
se agitó a temperatura ambiente durante 0,25 horas. Se añadió
veratrilamina (3,4-dimetoxibencilamina, 0,31 ml,
2,05 mmoles, obtenible de Aldrich o Synlett, 1999, 4, 409), y
se continuó la agitación a temperatura ambiente durante 22 horas.
La mezcla de reacción se repartió entre Et_{2}O y agua. Se extrajo
la fase acuosa Et_{2}O y las fases orgánicas reunidas se lavaron
con salmuera, se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron a vacío. El
residuo se purificó mediante cromatografía (Biotage, sílice 40 g)
eluyendo con EtOAc: ciclohexano (2:1). Después se purificó el
material mediante SPE (SCX-2, 10 g) eluyendo con
metanol después con amoniaco en metanol (0,5M). Las facciones de
amoniaco metanol se reunieron y se evaporaron a vacío para
proporcionar el ejemplo 167 en forma de una espuma blanca (0,633
g). LCMS mostró MH^{+} = 440; T_{RET} = 2,65 min. ^{1}H NMR
(400 MHz en CDCl_{3}, 27ºC, \delta ppm) 9,78 (d, 1H) 8,37 (s,
1H) 7,94 (s, 1H) 6,94-6,82 (m, 3H) 6,29 (m a, 1H)
4,56 (d, 2H) 4,46 (c, 2H) 4,15-4,01 (m's, 3H) 3,89
(s, 6H) 3,63 (m, 2H) 2,15 (m, 2H) 1,78 (m, 2H) 1,49 (t, 3H).
\newpage
Ejemplo de referencia
178
Los datos de ^{1}H RMN para el Ejemplo de
referencia 178 (como se prepara mediante el procedimiento descrito
en los Ejemplos y Ejemplos de referencia 100-182
anteriores) era como sigue:
^{1}H RMN (400 MHz en CDCl_{3}, \delta
ppm) \delta 9.90 (m, 1H) 8.37 (s, 1H) 7.94 (s, 1H) 7.49 (s, 1H),
7.40 (s, 1H) 6.39 (m, 1H) 4,50 4,42 (m, 4H)
4,15-4,00 (m, 3H) 3,89 (s, 3H), 3,63 (m, 2H) 2,52
(m, 2H) 2,20-2,10 (m, 2H) 1,85-1,73
(m, 3H) 1,48 (t, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
183
Una mezcla vigorosamente agitada del intermedio
48 (40 mg), carbonato potásico anhidro (57 mg) y
3-bromopropanoato de etilo (0,027 ml) en DMF
anhidro (1 ml) se calentó a 65ºC durante una noche. Se concentró la
mezcla de reacción, y el residuo se repartió entre diclorometano (5
ml) y agua (5 ml). Se separaron las fases y la fase orgánica se
evaporó hasta un aceite residual que se purificó mediante HPLC de
autopurificación de masa dirigida para proporcionar el ejemplo 183
(5 mg). LCMS mostró MH^{+} = 389; T_{RET} = 3,65 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
185
Hidruro sódico (0,067 g, 60% dispersión en
aceite) se añadió a una solución agitada del ejemplo 20 (0,47 g) en
DMF (19 ml), seguido de yoduro de n-propilo (0,17
ml). Se agitó la mezcla a 23ºC durante 16 horas, después se
concentró, se diluyó con cloroformo (30 ml) y se lavó con solución
1:1 de agua:salmuera (30 ml), se separaron las fases y la fase
orgánica se concentró . El residuo se purificó en un cartucho de SPE
(sílice, 10 g) eluyendo con volúmenes de 10 ml de diclorometano,
1:1 de dietílico:ciclohexano, y éter dietílico. Las fracciones
reunidas de 1:1 éter dietílico: ciclohexano y éter dietílico se
concentraron para proporcionar el ejemplo 185 en forma de una goma
transparente (0,23 g). LCMS mostró MH^{+} = 333; T_{RET} = 3,14
min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
186
\vskip1.000000\baselineskip
Se añadió 2-bromoetanol (0,008
ml) a una solución del ejemplo 20 (0,03 g) en DMF anhidro (1,5 ml),
con
2-terc-butilimino-2-dietilamino-1,3-dimetil-perhidro-1,3,2-diazafosforina
(polímero enlazado, cargando 2,3 mmoles/g, 0,045 g). Se agitó la
mezcla a 23ºC durante 16 horas, después se drenó la solución de la
resina, y se lavó la resina con DMF. Se concentraron las fases
orgánicas reunidas, y se purifico el residuo en un cartucho de SPE
(sílice, 1 g) eluyendo con 70-100% acetato de etilo
en ciclohexano. Se concentraron las fracciones orgánicas para
proporcionar el ejemplo 186 en forma de un sólido blanco (0,011 g).
LCMS mostró MH^{+} =335; T_{RET} = 2,47 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
187
\vskip1.000000\baselineskip
El intermedio 50 (0,03 g) se agitó en DMF (1 ml)
con DIPEA (0,035 ml) y HATU (0,038 g) durante 20 min. Se añadió a la
mezcla clorhidrato de 4-(metilsulfonil)bencilamina (0,024 g)
y se agitó la solución durante 8 horas a 23ºC. Se concentró la
solución y el residuo se disolvió en diclorometano (6 ml) después se
lavó con solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (6 ml) y 1:1
de salmuera:agua (6 ml), se separó mediante material sinterizado
hidrófobo. Se concentró la fase orgánica para proporcionar el
ejemplo 187 en forma de un sólido blanco (0,039 g). LCMS mostró
MH^{+} = 472; T_{RET} = 2,67 min.
\newpage
Ejemplo de referencia
188
El procedimiento de síntesis es como si se
describe en el ejemplo 187, excepto que en lugar de clorhidrato de
4-(metilsulfonil)bencilamina, se añadió a la mezcla
4-fluoroanilina (0,01 ml). El producto resultante
requirió purificación posterior, que se realizó mediante HPLC
autopurificación de masa dirigida, proporcionando el ejemplo 188 en
forma de una goma transparente (0,03 g). LCMS mostró MH^{+} = 398;
T_{RET} = 3,13 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
189
Se añadió clorhidrato de
4-aminotetrahidropirano (intermedio 8A, 0,413 g, 3,0
mmoles) a la mezcla del intermedio 51 (0,268 g, 1,0 mmoles) y
N,N-diisopropiletilamina (0,87 ml, 5,0 mmoles) en
acetonitrilo (3 ml). Se calentó la mezcla resultante a 85ºC durante
24 horas. Se retiraron los volátiles a vacío y se disolvió el
residuo en cloroformo (1,5 ml) y se aplicó a un cartucho de SPE
(sílice, 5 g). Se eluyó el cartucho sucesivamente con Et_{2}O,
EtOAc y EtOAc-MeOH (9/1). Se combinaron las
fracciones que contenían el producto deseado y se concentraron a
vacío para proporcionar el producto deseado contaminado con el
material de partida (intermedio 51). La purificación posterior
usando un cartucho de SPE (sílice, 5 g) eluyendo con acetato de
etilo-ciclohexano (1/3) proporcionó el ejemplo 189
(0,248 g). LCMS mostró MH^{+} = 333; T_{RET} = 2,75 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
190
Se añadió ciclohexilamina (0,149 g, 1,5 mmoles)
a la mezcla del intermedio 51 (0,201 g, 0,75 mmoles) y
N,N-diisopropiletilamina (0,65 ml, 3,73 mmoles) en
acetonitrilo (3 ml). Se calentó la mezcla resultante a 85ºC durante
40 horas. Se retiraron los volátiles a vacío y el residuo se
disolvió en cloroformo (1,5 ml) y se aplicó a un cartucho de SPE
cartucho (sílice, 5 g). El cartucho se eluyó sucesivamente con
Et_{2}O, EtOAc y MeOH. Se reunieron las fracciones que contenían
el producto deseado y se concentraron para proporcionar el ejemplo
190 (0,128 g). LCMS mostró MH^{+} = 331; T_{RET} = 3,64 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
191
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Una mezcla del intermedio 52 (0,014 g, 0,046
mmoles), HATU (0,018 g, 0,048 mmoles) y DIPEA (0,022 ml, 0,125
mmoles) en DMF (1 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 10
min. Después se
añadió1-[4-(metilsulfonil)fenil]metanamina (0,009 g,
0,046 mmoles), y se agitó la mezcla durante varios minutos para
proporcionar una solución. Se almacenó esta solución a temperatura
ambiente durante 16 horas. Se concentró la solución a vacío, y el
residuo se disolvió en cloroformo (0,5 ml) y se aplicó a un cartucho
de SPE (aminopropilo, 0,5 g). El cartucho se eluyó sucesivamente con
cloroformo (1,5 ml), EtOAc (1,5 ml) y EtOAc-MeOH
(9:1, 1,5 ml). Se concentraron a vacío las fracciones que contenían
el producto deseado para proporcionar el ejemplo 191 (0,005 g). LCMS
mostró MH^{+} = 470; T_{RET} = 2,54 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
192
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
El ejemplo de referencia 192 se preparó a partir
del intermedio 52 usando un procedimiento análogo al del ejemplo
191. LCMS mostró MH^{+} = 392: T_{RET} = 2,43.
\newpage
Ejemplo de referencia
193
\vskip1.000000\baselineskip
El ejemplo de referencia 193 se preparó a partir
del intermedio 52 usando un procedimiento análogo al del ejemplo
191. LCMS mostró MH^{+} = 396; T_{RET} = 2,6 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
194
\vskip1.000000\baselineskip
El ejemplo de referencia 194 se preparó a partir
del intermedio 52 usando un procedimiento análogo al del ejemplo
191. LCMS mostró MH^{+} = 460; T_{RET} = 2,74 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
195
\vskip1.000000\baselineskip
El ejemplo de referencia 195 se preparó a partir
del intermedio 52 usando un procedimiento análogo al del ejemplo
191. LCMS mostró MH^{+} = 418; T_{RET} = 2,55 min.
\newpage
Ejemplo de referencia
196
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
El ejemplo de referencia 196 se preparó a partir
del intermedio 53 usando un procedimiento análogo al del ejemplo
191. LCMS mostró MH^{+} = 394; T_{RET} = 2,02 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
197
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Se añadió
3-aminoazepan-2-ona
(0,043 g, 0,335 mmoles, comercialmente disponible de
Sigma-Aldrich Company Ltd) a una mezcla del
intermedio 17 (0,021 g, 0,067 mmoles) y DIPEA (0,058 ml, 0,335
mmoles) en acetonitrilo (0,5 ml). Se calentó la mezcla resultante a
85ºC durante 48 horas. Se retiraron los volátiles a vacío, y el
residuo se disolvió en cloroformo (0,5 ml) y se aplicó a un cartucho
de SPE (sílice, 0,5 g) que se eluyó sucesivamente con éter dietílico
(1,5 ml), acetato de etilo (1,5 ml) y acetato de
etilo-metanol (9/1, 1,5 ml). Se concentraron a vacío
las fracciones que contenían el material deseado para proporcionar
el ejemplo 197 (0,009 g). LCMS mostró MH^{+} = 407;
T_{RET} = 2,81 min.
T_{RET} = 2,81 min.
\newpage
Similarmente preparados, pero sustituyendo la
3-aminoazepan-2-ona
con el mismo o similar número de moles de otra amina R^{3}NH_{2}
eran los siguiente compuestos:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
201
El intermedio 54 (0,048 g, 0,32 mmoles) se
añadió a un mezcla del intermedio 17 (0,050 g, 0,16 mmoles) y DIPEA
(0,17 ml, 0,98 mmoles) en acetonitrilo (3 ml). Se calentó la mezcla
resultante a reflujo Después de 12 horas, se añadieron cantidades
adicionales del intermedio 54 (0,044 g, 0,29 mmoles), DIPEA (0,17
ml, 0,98 mmoles) y acetonitrilo (1 ml) a la mezcla de reacción que
se mantenía a reflujo. Después de 36 horas, la mezcla de reacción
se concentró a vacío, y el aceite residual se disolvió en
diclorometano (8 ml) y se lavó con solución de bicarbonato sódico
al 5% (2 ml). La evaporación de la solución orgánica proporcionó un
aceite viscoso que se disolvió en diclorometano (2 ml) y se aplicó
a un cartucho de SPE (sílice, 5 g). El cartucho se eluyó
sucesivamente con un gradiente de acetato de
etilo-ciclohexano (1:16, después 1:8, 1:4, 1:2, 1:1
y 1:0). Las fracciones que contenían el material deseado se
concentraron a vacío para proporcionar el ejemplo 201 (0,018 g).
LCMS mostró MH^{+} = 392; T_{RET} = 2,95 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
202
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
El intermedio 33 (0,1 g, 0,34 mmoles), EDC
(0,066 g, 0,34 mmoles) y HOBT (0,05 g, 0,37 mmoles ) se suspendieron
en DMF (2 ml) y se agitaron a temperatura ambiente en nitrógeno
durante 15 min. Se añadieron
2-aminopropan-1-ol
(0,026 g, 0,34 mmoles) y trietilamina (0,036 g, 0,36 mmoles) y se
agitó la mezcla a temperatura ambiente en nitrógeno durante 6 horas.
Se retiraron los disolventes a vacío y el residuo se repartió entre
DCM y agua. Se concentró la fase orgánica y se aplicó a un cartucho
de SPE (aminopropilo, 5 g), que se eluyó con metanol. La
concentración a vacío proporcionó el ejemplo 202 (0,095 g). LCMS
mostró MH^{+} = 348, T_{RET} = 2,15 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
203
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema de
reacción
\vskip1.000000\baselineskip
El intermedio 33 (0,1 g, 0,34 mmoles), EDC
(0,066 g, 0,34 mmoles) y HOBT (0,05 g, 0,37 mmoles) se suspendieron
en DMF (2 ml) y se agitaron a temperatura ambiente en nitrógeno
durante 15 mins. Se añadieron clorhidrato del éster metílico de
L-serina (0,054 g, 0,34 mmoles) y trietilamina
(0,036 g, 0,36 mmoles) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente
en nitrógeno durante 18 horas. Se retiraron los disolventes a vacío
y el residuo se repartió entre DCM y agua. Se concentró la fase
orgánica a vacío y se aplicó a un cartucho de SPE (aminopropilo, 5
g), que se eluyó con metanol. La concentración a vacío proporcionó
un residuo impuro que se purificó adicionalmente mediante un
cartucho de SPE (sílice, 5 g), eluyendo con acetato de etilo seguido
de 5% de metanol/acetato de etilo. Se concentraron las fracciones
deseadas a vacío para proporcionar el ejemplo 203 (0,055 g). LCMS
mostró MH+ = 393; T_{RET} = 2,22 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
204
El intermedio 1 (1,5 g, 5,9 mmoles) se disolvió
in acetonitrilo (80 ml). Se añadieron
trans-4-aminociclohexanol (0,817 g, 7,1
mmoles, comercialmente disponible de TCI-America;
alternativamente (por ejemplo en forma de la sal de HCl) de
Aldrich) y diisopropiletilamina (6,18 ml, 35,5 mmoles) y la mezcla
se agitó a 85ºC durante 16 h. Se concentró la mezcla a vacío, y el
residuo se repartió entre DCM (120 ml) y agua (30 ml). Se separaron
las fases y la fase orgánica se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó
para proporcionar un sólido amarillo claro. El sólido se disolvió
en una mezcla de DCM (10 ml) y cloroformo (3 ml), y se aplicó en
porciones iguales a dos cartuchos de SPE (sílice, 20 g) que se
eluyó secuencialmente con un gradiente de EtOAc:ciclohexano (1:16,
después 1:8, 1:4, 1:2, 1:1 y 1:0). Las fracciones que contenían el
material deseado se combinaron y se evaporaron a vacío para
proporcionar el ejemplo 204 (1,893 g) en forma de un sólido blanco.
LCMS mostró MH^{+} = 333; T_{RET} = 2,79 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
205
Se suspendió el ejemplo 204 (1,893 g, 5,7
mmoles) en acetona (12 ml) y se trató la suspensión agitada a 0ºC
con reactivo de Jones (1,81 ml). Después de 30 min, se añadió una
cantidad adicional de reactivo de Jones (1,81 ml) a la mezcla de
reacción que se mantenía a 0ºC. Después de 2 h adicionales, se
añadió a la mezcla de reacción una porción final de reactivo de
Jones (1,44 ml), y se continuó agitando a 0ºC durante 1 h. Se
añadió isopropanol (3,8 ml) a la mezcla de reacción, seguido de agua
(15 ml). La mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo (2 x
40 ml). Se lavaron con agua (8 ml) los extractos orgánicos reunidos,
se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron hasta un sólido gris.
Se disolvió el sólido en DCM (10 ml) y se aplicó en porciones
iguales a dos cartuchos de SPE (sílice, 20 g) que se eluyeron
secuencialmente con un gradiente de acetato de etilo:ciclohexano
(1:16, después 1:8, 1:4, 1:2, y 1:1). Las fracciones que contenían
el material deseado se combinaron y se evaporaron a vacío para
proporcionar el ejemplo 205 (1,893 g) en forma de un sólido blanco.
LCMS mostró MH^{+} = 331; T_{RET} = 2,84 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia 207 (=
ejemplo de referencia
5)
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\vskip1.000000\baselineskip
El intermedio 1 (2,58 g), el intermedio 6 (2,0
g) y N,N-diisopropiletilamina (8,9 ml) se
disolvieron en acetonitrilo (98 ml). Se calentó la mezcla de
reacción a 85ºC durante 24 h, después se añadió una porción
adicional del intermedio 6 (0,18 g) y calentando continuadamente
durante 10 h adicionales. Se concentró la reacción a vacío y se
repartieron los residuos entre DCM y agua. Se separaron las fases y
la fase orgánica se evaporó a vacío. Se purificó el residuo mediante
cromatografía usando Biotage (sílice 90 g) eluyendo con DCM: MeOH
(5%) para proporcionar el ejemplo 207 (1,55 g) en forma de un sólido
blanco. LCMS mostró MH^{+} 360; T_{RET} = 2,71 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
209
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El ejemplo de referencia 209 se preparó a partir
del intermedio 1 y (4-aminociclohexil)amina
usando un procedimiento análogo al usado para la preparación del
ejemplo 207. LCMS mostró MH^{+} = 332; T_{RET} = 2,18 min.
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Ejemplo de referencia
210
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Una solución de ácido
meta-cloroperoxibenzoicoo (45 mg, 0,26 mmoles) en cloroformo
(1 ml) se añadió gota a gota a 0ºC a una solución agitada del
ejemplo 138 (0,1 g, 0,26 mmoles) en cloroformo (1,5 ml). Después de
1,5 h a 0ºC, se añadió una cantidad adicional de ácido
meta-cloroperoxibenzoico (45 mg, 0,26 mmoles) en cloroformo
(1 ml), y continuó la agitación 0ºC durante 1,5 h. Quedó una traza
de material de partida, de modo que se añadió una cantidad
adicional de ácido meta-cloroperoxibenzoico (22 mg, 0,13
mmoles) en cloroformo (0,6 ml). Después de 3,5 h a 0ºC, se añadió a
la mezcla de reacción una solución de carbonato sódico 2 M (1 ml).
Se separaron las fases mediante el paso a través de un material
sinterizado hidrófobo y se extrajo la fase acuosa con más
cloroformo (2 ml). Se reunieron los extractos orgánicos reunidos y
se evaporaron hasta una espuma residual que se purificó mediante
HPLC de autopurificación de masa dirigida para proporcionar el
ejemplo 210 (44 mg). LCMS mostró MH^{+} = 397; T_{RET} = 2,13
min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
211
El ejemplo de referencia 211 se preparó a partir
del ejemplo 600 utilizando un procedimiento análogo al usado para la
preparación del ejemplo 210. LCMS mostró MH^{+} = 397; T_{RET} =
2,20 min.
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Ejemplo de referencia
212
Ejemplo de referencia 212 se preparó a partir
del ejemplo 33 utilizando un procedimiento análogo al usado para la
preparación del ejemplo 210. LCMS mostró MH^{+} = 397; T_{RET} =
2,13 min.
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Ejemplos de referencia 214 a
230
Se trató el intermedio 17 (0,15 mmoles) con una
alícuota de la amina (0,95 ml, equivalente a 0,19 mmoles) a partir
de una solución madre en acetonitrilo (0,2 M) y
N,N-diisopropiletilamina (0,24 mmoles). Se calentó
la mezcla a durante 20 h, después se concentró a vacío. Se purificó
el residuo mediante SPE (sílice) para proporcionar el producto
deseado.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
225
Un procedimiento preferido para la preparación
del ejemplo 225 que implica 1-metilciclohexilamina y
un tiempo de reacción más largo es como sigue:
Una solución del intermedio 17 (46 mg),
1-metilciclohexilamina (26 mg) y
diisopropiletilamina (94 mg) en acetonitrilo (1 ml) se agitó y se
calentó a reflujo durante 77 h. Se añadieron más
1-metilciclohexilamina (102 mg),
diisopropiletilamina (93 mg) y acetonitrilo (1 ml) y la mezcla de
reacción se calentó a reflujo durante 68 h adicionales. Se enfrió la
solución y se concentró a vació. Se trituró el residuo en acetato de
etilo y e filtró. Se purificó el residuo mediante HPLC de
autopurificación de masa dirigida para proporcionar el ejemplo 225
(19 mg). LCMS mostró MH^{+} = 392; T_{RET} = 3,46 min.
Los ejemplos de referencia 231, 247 y 257,
mostrados más adelante y que implican también
1-metilciclohexilamina, se pueden también
preferiblemente preparar de una manera similar.
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Ejemplos de referencia
231-239
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El intermedio 55 (0,15 mmoles) se trató con una
alícuota de la amina (0,95 ml, equivalente a 0.19 mmoles) a partir
de una solución madre en acetonitrilo (0,2 M) y
N,N-diisopropiletilamina (0,24 mmoles). Se calentó
la mezcla a reflujo durante 20 h, después se concentró a vacío. Se
purificó el residuo mediante SPE (sílice) para proporcionar producto
deseado.
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Ejemplos de referencia
240-249
Se trató el intermedio 56 (0,15 mmoles) con una
alícuota de la amina (0,95 ml, equivalente a 0,19 mmoles) a partir
de una solución madre en acetonitrilo (0,2 M) y
N,N-diisopropiletilamina (0,24 mmoles). Se calentó
la mezcla a reflujo durante 20 h, después se concentró a vacío. Se
purificó el residuo mediante SPE (sílice) para proporcionar el
producto deseado.
\newpage
Ejemplos de referencia
250-258
Se trató el intermedio 57 (0,15 mmoles) con una
alícuota de la amina (0,95 ml, equivalente a 0,19 mmoles) a partir
de una solución madre en acetonitrilo (0,2 M) y
N,N-diisopropiletilamina (0,24 mmoles). Se calentó
la mezcla a reflujo durante 20 h, después se concentró a vacío. Se
purificó el residuo mediante SPE (sílice) para proporcionar el
producto deseado.
\newpage
Ejemplos de referencia
259-275
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Una mezcla el intermedio 58 (0,1 mmoles), HATU
(0,1 mmoles) y DIPEA (0,4 mmoles) en DMF (0,4 ml) se agitó a
temperatura ambiente durante 10 min. Después se añadió una solución
de la amina (0,1 mmoles) en DMF (0,2 ml) y la mezcla se agitó
durante varios minutos para proporcionar a una solución. La solución
se almacenó a temperatura ambiente durante 16 horas, después se
concentró a vacío. Se disolvió el residuo en cloroformo (0,5 ml) y
se aplicó a un cartucho de SPE (aminopropilo, 0,5 g). Se eluyó el
cartucho sucesivamente con cloroformo (1,5 ml), EtOAc (1,5 ml) y
EtOAc:MeOH (9:1, 1,5 ml). Las fracciones que contenían el producto
deseado se concentraron a vacío y se purificó el residuo mediante
HPLC de autopurificación de masa dirigida.
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\newpage
Ejemplo de referencia 260
(procedimiento
alternativo)
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\vskip1.000000\baselineskip
Se agitó una solución del Intermedio 58 (45 mg),
HATU (63 mg) y DIPEA (39 mg) en acetonitrilo (5 ml) durante 10 min.
Se añadió una solución de 2,4-dimetilbencilamina (24
mg) (disponible de Salor; o ICN Biomedicals, Inc.; o Synthesis,
1982, 12, 1036) en acetonitrilo (1 ml). La mezcla de reacción se
agitó durante 18 h. Se concentró la solución durante y se repartió
el residuo entre acetato de etilo (25 ml) y 0,5 M de bicarbonato de
sodio (20 ml). Se separó la fase orgánica, se lavó con agua (20 ml),
se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró para dejar una goma
que se aplicó a un cartucho de SPE (5 g). Se eluyó el cartucho con
acetato de etilo. Se combinaron las fracciones que contenían el
compuesto deseado y se concentraron a vacío para proporcionar el
Ejemplo de referencia 260 (32 mg). LC-MS mostró
MH^{+} = 420; T_{RET} = 3,16 min. \delta _{H} (CDCl_{3}):
1,49 (3H, t), 2,11 (2H, m), 2,33 (3H, s), 2,35 (3H, s), 2,40 (2H,
m), 2,52 (2H, m), 2,61 (2H, m), 4,36 (1 H, m), 4,47 (2H, q), 4,55
(2H, d), 6,14 (1 H, t), 7,01 + 7,18 (2H, AA'BB'), 7,04 (1 H, s),
8,01 (1 H, s), 8,36 (1 H, s), 9,96 (1 H, d).
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Ejemplos de referencia
276-287
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Una mezcla del intermedio 59 (0,1 mmoles), HATU
(0,1 mmoles) y DIPEA (0,4 mmoles) en DMF (0,4 ml) se agitó a
temperatura ambiente durante 10 min. Después se añadió una solución
de la amina (0,1 mmoles) en DMF (0,2 ml) y la mezcla se agitó
durante varios minutos para proporcionar una solución. Se almacenó
la solución a temperatura ambiente durante 16 horas después se
concentró a vacío. Se disolvió el residuo en cloroformo (0,5 ml) y
se aplicó a un cartucho de SPE (aminopropilo, 0,5 g). Se eluyó el
cartucho sucesivamente con cloroformo (1,5 ml), EtOAc (1,5 ml) y
EtOAc:MeOH (9:1, 1,5 ml). Las fracciones que contenían el producto
deseado se concentraron a vacío y se purificó el mediante HPLC de
autopurificación de masa dirigida.
y
Se añadió diisopropiletilamina (0,113 ml, 0,65
mmoles) a una mezcla agitada del intermedio 17 (40 mg, 0,13 mmoles)
e intermedio 63 (45 mg, 0,26 mmoles) en acetonitrilo (2 ml). La
mezcla se agitó a 85ºC. Después de 18h, se añadió a la mezcla de
reacción una porción adicional del intermedio 63 (22,5 mg, 0,13
mmoles) y diisopropiletilamina (0,113 ml, 0,65 mmoles) y se
continuó la agitación a 90ºC durante 24 h. Después la mezcla se
concentró a vacío y el residuo se repartió entre DCM (20 ml) y agua
(5 ml). Se separaron las fases y la fase acuosa se extrajo con DCM
adicional (10 ml). Se secaron los extractos orgánicos reunidos
(Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron a vacío a vacío para
proporcionar un aceite marrón (65 mg) que se purificó parcialmente
en un cartucho de SPE (sílice, 10 g), eluyendo con acetato de
etilo: éter de petróleo (1:8; 1:4; 1:2; 1:1 y 1:0). El aceite
marrón claro de dos componentes (34 mg) resultante se separó
mediante HPLC de autopurificación de masa dirigida para
proporcionar el ejemplo 288 (19 mg) en forma de una espuma blanca
(LCMS mostró MH^{+} = 414; T_{RET} = 3,24 min) y el ejemplo 289
(9 mg) en forma de un sólido blanco (LCMS mostró MH^{+} = 394;
T_{RET} = 3,21 min).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplos y Ejemplos de referencia
290-319
Una mezcla del intermedio 60 (0,1 mmoles), HATU
(0,1 mmoles) y DIPEA (0,4 mmoles) en DMF (0,4 ml) se agitó a
temperatura ambiente durante 10 min. Después se añadió una solución
de la amina (0,1 mmoles) en DMF (0,2 ml) y la mezcla se agitó
durante varios minutos para proporcionar una solución. Se almacenó
la solución a temperatura ambiente durante 16 horas después se
concentró a vacío. Se disolvió el residuo en cloroformo (0,5 ml) y
se aplicó a un cartucho de SPE (aminopropilo, 0,5 g). Se eluyó el
cartucho sucesivamente con cloroformo (1,5 ml), EtOAc (1,5 ml) y
EtOAc:MeOH (9:1, 1,5 ml). Las fracciones que contenían el producto
deseado se concentraron a vacío y el residuo se purificó mediante
HPLC de autopurificación de masa dirigida.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
320
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Se añadió una solución de cloruro de hidrógeno
en dioxano (30 ml, 4 M, 0.12 moles) a una suspensión del ejemplo 126
(1,3 g, 2,75 mmoles), en dioxano (10 ml) y la mezcla se agitó a
temperatura ambiente durante 6 h. Se dejó reposar la mezcla de
reacción durante 14 h, después se evaporó la solución, formando un
azeótropo con DCM para proporcionar a sólido blanco la sal
clorhidrato. Se suspendió el sólido en acetato de etilo (50 ml) y se
lavó con solución de hidróxido sódico (2 N, 50 ml). Se secó la fase
orgánica sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró a vacío para
proporcionar el ejemplo 318 en forma de un sólido blanco (995 mg).
LCMS mostró MH^{+} = 373; T_{RET} = 1,89 min.
\newpage
Ejemplo de referencia
321
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Se añadió una solución de cloruro de hidrógeno
en dioxano (30 ml, 4 M, 0,12 mol) a una suspensión del intermedio 72
(1,2, 2,5 mol), en dioxano (10 ml) y se agitó la mezcla a
temperatura ambiente durante 6 h. Se dejó reposar la reacción
durante 14 h, después se evaporó la solución, formando un azeótropo
con DCM para proporcionar un sólido blanco (1,24 g). Se suspendió
una porción del sólido (68 mg) en acetato de etilo y se lavó con una
solución de hidróxido sódico 2 M. Se secó la fase orgánica sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentró a vacío para proporcionar el ejemplo
321 en forma de un sólido blanco (60 mg). LCMS mostró MH^{+} =
387; T_{RET} = 1,92 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
322
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Se añadió trietilamina (0,023 ml, 0,16 mmoles) a
una solución del ejemplo 320 (0,043 g, 0,115 mol) en DCM (1 ml). Se
enfrió la mezcla (baño de hielo/agua durante 10 min) y se añadió
cloruro de etanosulfonilo (0,014 ml, 0,138 mmoles). Se agitó la
solución resultante a temperatura ambiente durante 18 h, después se
retiró el disolvente con una corriente de nitrógeno. Se disolvió el
residuo en diclorometano (1,5 ml) y se agitó con agua (1,5 ml). Se
separó la fase orgánica y se extrajo con nitrógeno, y se aplicó a un
cartucho de SPE (sílice, 2 g) eluyendo con 60%-100% de acetato de
etilo en ciclohexano. Se concentraron las fracciones deseadas a
vacío para proporcionar el ejemplo 322 en forma de un sólido blanco
(32 mg). LCMS mostró MH^{+} = 465; T_{RET} = 2,52 min.
De manera similar se prepararon los siguientes,
usando el mismo número, o similar de moles de reactivos y el mismo
volumen o similar de disolventes:
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\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
329
\vskip1.000000\baselineskip
Ácido ciclopropancarboxílico (0,011 ml, 0,138
mmoles), EDC (0,031 g, 0,161 mmoles) y HOBT (0,019 g, 0,138 mmoles)
se suspendieron en DMF (2 ml) y se agitó a temperatura ambiente
durante 1 h. Se añadió el ejemplo 320 (0,043 g, 0,115 mmoles) y la
mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Se retiró
la mayoría del disolvente usando una corriente de nitrógeno y se
repartió el residuo entre DCM (3 ml) y agua (3 ml). Se extrajo la
fase orgánica con nitrógeno y se aplicó a un cartucho de SPE
(aminopropilo, 1 g), que se eluyó con metanol La concentración
mediante extracción con nitrógeno proporcionó un compuesto impuro
que se purificó posteriormente mediante un cartucho de SPE (sílice,
1 g), eluyendo con 50-100% de EtOAc in ciclohexano
seguido de 5% de metanol en EtOAc. Las fracciones deseadas se
concentraron a vacío para proporcionar el ejemplo 329 en forma de un
sólido blanco (49 mg). LCMS mostró MH^{+} = 441; T_{RET} = 2,23
min.
Similarmente preparados, usando el mismo o
similar número de moles de reactivos y volúmenes de disolventes, y
usando el ejemplo 320 como material de partida para preparar los
ejemplos 330 a 343, pero usando el ejemplo 321 (número similar de
moles) en lugar del ejemplo 320 como material de partida para
preparar los ejemplos 344 a 349, fueron los siguientes:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
350
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El ejemplo de referencia 350 se preparó a partir
del intermedio 17 y utilizando un procedimiento análogo al usado
para la preparación del ejemplo 207. LCMS mostró MH^{+} = 436;
T_{RET} = 3,20.
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Ejemplo de referencia
351
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Se añadió una solución de hidruro sódico (0,5
ml) a una suspensión agitada del ejemplo 350 (0,12 g, 0,275 mmoles)
en metanol (3,5 ml) y agua (0,8 ml). Después de agitar a temperatura
ambiente, se concentró la solución de reacción, se diluyó con agua
(3 ml) y se acidificó con ácido clorhídrico 2 M. SE recogió el
precipitado resultante mediante filtración, se lavó con agua y se
secó para proporcionar el ejemplo 351, en forma de un sólido blanco
(0,105 g). LCMS mostró MH^{+} = 422; T_{RET} = 2,95 min.
\newpage
Ejemplo de referencia
352
Se añadió ácido clorhídrico acuoso (20 ml, 5 M)
a una solución del intermedio 65 (2,58 g, 5,40 mmoles) en
tetrahidrofurano (10 ml). Se agitó la mezcla de reacción a 20ºC
durante 22 h después se evaporó a vacío. Se repartió el residuo
entre DCM y agua. Se basificó la fase acuosa con solución acuosa de
hidróxido sódico (2 M) y se extrajo con éter dietílico. Se
evaporaron las fases orgánicas a vacío para proporcionar el ejemplo
352 en forma de un sólido blanco (2,04 g). LCMS mostró MH^{+} =
379; T_{RET} = 2,10 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
353
Se añadieron cloruro de etoxiacetilo (0,016 mg,
0,144 mmoles) y trietilamina (0,02 mol, 0,144 mmoles) a una solución
del ejemplo 352 (0,046 g, 0,122 mmoles) en DCM en un Reactivial. Se
agitó la reacción durante 22 h a 20ºC, después se diluyó con DCM y
se lavó con solución acuosa de carbonato ácido de sodio. Se separó
la fase orgánica y se aplicó directamente a un cartucho de SPE
(sílice 2 g). Se eluyó el cartucho con DCM: MeOH (1% seguido de 3%)
para proporcionar el ejemplo 353 en forma de un sólido blanco (0,05
g). LCMS mostró MH^{+} = 451; T_{RET} = 2,66 min.
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Ejemplo de referencia
354
Preparado de una manera similar al ejemplo 186
usando el ejemplo 20 (0,03 g, 0,1 mmoles), con bromuro de isopropilo
(10 uL, 0,11 mmoles), se añadieron posteriormente 0,11 mmoles de
agente alquilante después de 16 horas. Se formó el compuesto final
en forma de una goma transparente (16 mg). LCMS mostró MH^{+} =
333; T_{RET} = 3,16 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
355
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El intermedio 64 (0,02 g, 0,084 mmoles) y
diisopropiletilamina (0,044 ml, 0,252 mmoles) se su suspendieron en
N-metil pirrolidinona (1 ml) y se añadió
ciclohexilamina (0,012 ml, 0,1 mmoles). Se calentó la mezcla a 85ºC
con agitación en un Reactivial^{TM} durante 8 h, después se
concentró a vacío. El residuo se repartió entre DCM (2 ml) y agua (2
ml). Se separaron las fases y se concentró la fase orgánica a vacío,
después se purificó mediante HPLC de autopurificación de masa
dirigida para proporcionar el ejemplo 355 (0,012 g). LCMS mostró
MH^{+} = 302; T_{RET} = 2,85 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
356
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El ejemplo 356 se preparó a partir del
intermedio 53 usando un procedimiento análogo al del ejemplo 191.
LCMS mostró MH^{+} = 398; T_{RET} = 2,18 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
357
\vskip1.000000\baselineskip
El ejemplo 357 se preparó a partir del
intermedio 53 usando un procedimiento análogo al del ejemplo 191.
LCMS mostró MH^{+} = 472; T_{RET} = 2,15 min.
\newpage
Ejemplo de referencia
358
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\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia 358 se preparó a partir
del intermedio 53 utilizando un procedimiento análogo al del ejemplo
191. LCMS mostró MH^{+} = 394; T_{RET} = 2,04 min.
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Ejemplos de referencia
360-414
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El intermedio 33 (1,89 g) se trató con cloruro
de tionilo (10 ml) y la mezcla se calentó a reflujo durante 2 h. Se
retiró el exceso de cloruro de tionilo a vacío para proporcionar el
intermedio 73, que se presumió que era el cloruro de ácido del
intermedio 33 en forma de un sólido en crema. Se resuspendió el
sólido en tetrahidrofurano (32,5 ml) y se añadió una alícuota de la
suspensión a una mezcla de la amina (0,11 mmoles) y
N,N-diisopropiletilamina (0,165-0,22
mmoles) en THF (0,5 ml). Se agitó la mezcla de reacción durante 24 h
y se retiró el disolvente a vacío. Se purificó el residuo mediante
HPLC de autopurificación de masa dirigida.
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(Tabla pasa a página
siguiente)
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Ejemplo de referencia
414
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El ejemplo de referencia 414 se preparó a partir
del intermedio 59 usando el procedimiento general descrito para el
procedimiento de los ejemplos 360-413. LCMS mostró
MH^{+} = 398; T_{RET} = 2,90 min.
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Ejemplos de referencia
415-487
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Una mezcla del intermedio 61 (0,1 mmoles), HATU
(0,1 mmoles) y DIPEA (0,4 mmoles) en DMF (0,4 ml) se agitó a
temperatura ambiente durante 10 min. Después se añadió una solución
de la amina (0,1 mmoles) en DMF (0,2 ml) y la mezcla se agitó
durante varios minutos para proporcionar una solución. Se almacenó
la solución a temperatura ambiente durante 16 horas, después se
concentró a vacío. Se disolvió el residuo en cloroformo (0,5 ml) y
se aplicó a un cartucho de SPE (aminopropilo, 0,5 g). Se eluyó el
cartucho sucesivamente con cloroformo (1,5 ml), EtOAc (1,5 ml) y
EtOAc:MeOH (9:1, 1,5 ml). Las fracciones que contenían el producto
deseado se concentró a vacío y se purificó el residuo mediante HPLC
de autopurificación de masa dirigida.
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(Tabla pasa a página
siguiente)
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Ejemplo de referencia
488
Se añadió una solución de hidróxido sodio (29
\muL, 0,058 mmoles) a una solución agitada del ejemplo 470 (6 mg,
0,014 mmoles) en metanol (28 \muL) y agua (2\muL). Se agitó la
solución resultante a 50ºC en nitrógeno. Después de 16 h, se diluyó
la mezcla con agua (0,5 ml) y se ajustó hasta pH 4 con ácido
acético. Se recogió el sólido precipitado mediante filtración y se
secó a vacío para proporcionar el ejemplo 488 en forma de un sólido
blanco (4,5 mg). LCMS mostró MH^{+} = 422; T_{RET} = 3,26
min.
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Ejemplo de referencia
489
Se añadió una solución de hidróxido sódico 2 M
(83 \muL, 0,166 mmoles) a una solución agitada del ejemplo 468 (18
mg, 0,042 mmoles) en metanol (88 \muL) y agua (5 \muL). Se agitó
la solución resultante a 50ºC en nitrógeno. Después de 16 h, se
añadió a la mezcla de reacción una cantidad adicional de solución de
hidróxido sódico 2 M (29 \muL, 0,058 mmoles). Después de 24 h, se
diluyó la mezcla de reacción con agua (0,5 ml) y se ajustó hasta pH
4 con ácido acético. Se extrajo la mezcla con acetato de etilo (2 x
0,5 ml), y se secaron los extractos reunidos (Na_{2}SO_{4}) y se
evaporaron a vacío para proporcionar a sólido (21 mg). Se purificó
este sólido en un cartucho de SPE (sílice, 1 g) eluyendo con acetato
de etilo:ciclohexano (1:1) seguido de metanol. Se reunieron las
fracciones que contenían el producto deseado y se concentraron para
proporcionar el ejemplo 489 en forma de un sólido blanco (4,6 mg).
LCMS mostró MH^{+} = 422; T_{RET} = 3,22 min.
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Ejemplo de referencia
490
Se trató una solución del ejemplo 469 (71 mg,
0,17 mmoles) en THF anhidro (2 ml) con cloruro de hidrógeno en
dioxano (4 M, 0,3 ml). Después de dejar en reposo durante 16 horas
se recogió el sólido resultante mediante filtración y se secó a
vacío para proporcionar el ejemplo 490 en forma de cristales
parecidos a bastones (36 mg). LCMS mostró MH^{+}= 404; T_{RET} =
3,60 min.
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Ejemplo de referencia
491
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Se trató una solución del ejemplo 469 (71 mg,
0,17 mmoles) en THF anhidro (2 ml) con ácido metansulfónico anhidro
(11,4 \muL, 0,17 mmoles). Después de reposar a temperatura
ambiente durante 16 horas se recogió el sólido resultante mediante
filtración y se secó a vacío para proporcionar el ejemplo 491 en
forma de cristales parecidos a bastones (23 mg). LCMS mostró
MH^{+}= 404; T_{RET} = 3,59 min.
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Ejemplos y Ejemplos de referencia
492-649
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Una mezcla del intermedio 33 (0,1 mmoles), HATU
(0,1 mmoles) y DIPEA (0,4 mmoles) en DMF (0,4 ml) se agitó a
temperatura ambiente durante 10 min. Después se añadió una solución
de la amina (0,1 mmoles) en DMF (0,2 ml) y se agitó la mezcla
durante varios minutos para proporcionar una solución. Se almacenó
la solución a temperatura ambiente durante 16 horas, después se
concentró a vacío. Se disolvió el residuo en cloroformo (0,5 ml) y
se aplicó a un cartucho de SPE (aminopropilo, 0,5 g). Se eluyó el
cartucho sucesivamente con cloroformo (1,5 ml), EtOAc (1,5 ml) y
EtOAc:MeOH (9:1, 1,5 ml). Se concentraron las fracciones que
contenían el producto deseado a vacío y se purificó el residuo
mediante HPLC de autopurificación de masa dirigida.
Un procedimiento alternativo para preparar el
ejemplo 518 se proporciona a continuación:
A una solución del intermedio 33 (3,5 g, 12,07
mmoles) en DMF (500 ml) se añadió HATU (4,5 g, 12,07 mmoles) y se
agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 30 min. Se añadió
3,4-dimetilbencilamina (1,63 g, 12,07 mmoles,
obtenible de Matrix Scientific, Columbia, Estados Unidos o mediante
un procedimiento descrito en Chem. Ber., 1969, 102, 2770)
seguido de DIPEA (4,5 ml, 26,55 mmoles) y se agitó la solución a
temperatura ambiente durante 16 horas. Se retiró el disolvente a
presión reducida y se repartió el residuo entre NaHCO_{3} acuoso
saturado (200 ml) y acetato de etilo (250 ml), se reextrajo la fase
acuosa con acetato de etilo (2 x 200 ml), se reunieron los
extractos orgánicos, se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron.
El aceite viscoso resultante se recristalizó con acetato de etilo
caliente (aproximadamente 100 ml) para proporcionar el compuesto de
título en forma de un sólido cristalina blanco (3,36 g, 80%). LCMS
mostró MH^{+}= 408; T_{ret} = 3,06 min. \delta_{H} (D_{6}
DMSO) 1,36 (3H, t), 1,51 (2H, m), 2,00 (2H, m), 2,18 (3H, s), 2,19
(3H, s), 2,50 (2H, m), 3,61 (2H, m), 3,83 (2H, m), 4,17 (1H, m),
4,36 (2H, q), 4,38 (2H, d), 7,02-7,09 (3H, m), 8,17
(1H, s), 8,62 (1H, s), 8,93 (1H, t), 9,96 (1H, d): \delta_{C}
(D_{6} DMSO) 14,65, 18,91, 19,33, 32,81, 41,06, 41,86, 48,57,
64,94, 101,69, 102,18, 124,44, 128,22, 129,24, 133,28, 134,31,
135,78, 136,91, 149,26, 149,59, 151,36, 168,81.
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Ejemplo
518A
Una solución del ejemplo 518 (1,3 g, 3,19
mmoles) en tetrahidrofurano anhidro (200 ml) se trató con una
solución de cloruro de hidrógeno en dioxano (4 M, 8 ml) y se agitó
la mezcla a temperatura ambiente durante 16 horas. Se recogió el
precipitado blanco resultante mediante filtración y se recristalizó
con metanol caliente (100 ml) para proporcionar el compuesto de
título ejemplo 518A en forma de un sólido cristalino blanco (1,12 g,
79%).
LCMS mostró MH^{+}= 408; T_{ret} = 3,21 min.
\delta_{H} (D_{6} DMSO) 1,39 (3H, t), 1,59 (2H, m), 2,01 (2H,
m), 2,19 (3H, s), 2,20 (3H, s), 3,64 (2H, t), 3,83 (2H, m), 4,28
(1H, m), 4,40 (2H, d), 4,50 (2H, c), 7,04-7,11 (3H,
m), 9,40 (1H, s (a)), 10,72 (1H, s (a)).
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Ejemplo de referencia
650
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Se añadió una solución de hidróxido sódico 2 M
(98 \muL, 0,196 mmoles) a una solución agitada del ejemplo 593 (22
mg, 0.049 mmoles) en metanol (104 \muL) y agua (6 \muL). La
solución resultante se agitó a 50ºC en nitrógeno. Después de 16 h,
se diluyó la mezcla de reacción con agua (0,5 ml) y se ajustó hasta
pH 4 con ácido acético. Se extrajo la mezcla con acetato de etilo (2
x 0,5 ml), y se secaron los extractos reunidos (Na_{2}SO_{4}) y
se evaporaron a vacío para proporcionar un sólido (15 mg). Se
suspendió este sólido en agua (0,5 ml) y se trató con una solución
de hidróxido sódico 2 M (15 \muL). La evaporación del disolvente a
vacío proporcionó el ejemplo 650 en forma de un sólido blanco (11
mg). LCMS mostró MH^{+} = 425; T_{RET} = 2,69 min.
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Ejemplo de referencia
651
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Se añadió una solución de hidróxido sódico 2 M
(98 \mul, 0,196 mmoles) a una solución agitada del ejemplo 558 (22
mg, 0,049 mmoles) en metanol (104 \mul) y agua (6 \muL). Se
agitó la solución resultante a 50ºC en nitrógeno. Después de 16 h,
se diluyó la mezcla de reacción con agua (0,5 ml) y se ajustó hasta
pH 4 con ácido acético. Se recogió el precipitado sólido mediante
filtración y se secó a vacío para proporcionar el ejemplo 651 en
forma de un sólido blanco (15 mg). LCMS mostró MH^{+} = 425;
T_{RET} = 2,72 min.
\newpage
Ejemplo de referencia
652
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\vskip1.000000\baselineskip
Una mezcla del ejemplo de referencia 205 (200
mg), clorhidrato de hidroxilamina (50 mg) y carbonato potásico
anhidro (420 mg) en acetonitrilo (10 ml) se agitó y se calentó a
reflujo durante 17 horas. La solución se enfrió y se concentró a
vacío. Se repartió el residuo entre EtOAc y agua. Se separó la fase
orgánica, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró a vacío para
proporcionar el ejemplo 652 en forma de un polvo blanco (203 mg).
LCMS mostró MH^{+} = 346; T_{RET} = 2,84 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
653
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Una mezcla del ejemplo de referencia 263 (217
mg), clorhidrato de hidroxilamina (43 mg) y carbonato potásico
anhidro (355 mg) en acetonitrilo (10 ml) se agitó y se calentó a
reflujo durante 17 horas. Se enfrió la solución y se concentró a
vacío. Se repartió el residuo entre EtOAc y agua. Se separó la fase
orgánica, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró a vacío para
proporcionar el ejemplo de referencia 653 en forma de un sólido
amarillo (186 mg). LCMS mostró MH^{+} = 437; T_{RET} = 2,82 min.
1,49 (3H, t), 1,80 (2H, m), 2,2-2,4 (4H, m), 2,54 (1
H, m), 3,13 (1 H, dt), 3,81 (3H, s), 4,13 (1 H, m); 4,46 (2H, q),
4,54 (2H, d), 6,28 (1 H, t), 6,90 + 7,28 (4H, AA'BB'), 7,98 (1 H,
s), 8,36 (1 H, s), 9,84 (1 H, d). Protón hidroxilo no visible.
Los siguientes ejemplos de referencia se
prepararon mediante un procedimiento similar, por ejemplo usando el
mismo número o uno similar de moles de reactivos y el mismo número o
volúmenes de disolventes:
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Véase a continuación la preparación alternativa
del ejemplo 681.
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Una mezcla del ejemplo de referencia 263 (25
mg), clorhidrato de etoxiamina (R^{26}ONH_{2} donde R^{26} =
Et, 20 mg) y diisopropiletilamina (30 mg) en acetonitrilo (3 ml) se
agitó y se calentó a reflujo durante 3,25 horas. Se enfrió la
solución y se concentró a vacío. Se aplicó el residuo a un cartucho
de SPE (5 g). Se eluyó el cartucho con EtOAc. Las fracciones que
contenían el producto deseado se concentraron a vacío para
proporcionar el ejemplo de referencia 655 en forma de una goma
incolora (20 mg). LCMS mostró MH^{+} = 465; T_{RET} = 3,28
min.
Los siguientes ejemplos de referencia se
prepararon mediante un procedimiento similar, por ejemplo usando el
mismo número o uno similar de moles de reactivos y el mismo número o
volúmenes de disolventes:
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\newpage
Ejemplo de referencia
658
Una suspensión de cloruro cianúrico (150 mg) en
DMF (0,2 ml) se agitó durante 30 min. Se diluyó la suspensión hasta
7 ml con DMF con agitación. Se retiró una porción de 1,0 ml de la
suspensión resultante y se añadió al ejemplo 653 (52 mg). Se agitó
la solución resultante durante 90 horas, después se concentró a
vacío. Se repartió el residuo entre EtOAc y agua. Se separó la fase
orgánica y se lavó consecutivamente con carbonato sódico saturado,
10% p/v de ácido cítrico y salmuera saturada, se secó sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentró a vacío. Se aplicó el residuo a un
cartucho de SPE (2 g). Se eluyó sucesivamente con EtOAc:ciclohexano
(1:1), EtOAc y después una mezcla de (100:8:1) de diclorometano,
etanol y amoniaco. Las fracciones que contenían el producto deseado
(eluido en la solución amoniacal) se concentraron a vacío para
proporcionar el ejemplo de referencia 658 en forma de un aceite
incoloro (11 mg). LCMS mostró MH^{+} = 437; T_{RET} = 2,50
min.
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Ejemplo de referencia
659
\vskip1.000000\baselineskip
El ejemplo de referencia 659 se prepare a partir
del ejemplo 652, utilizando un procedimiento idéntico al usado para
el ejemplo 658. LCMS mostró MH^{+} = 346; T_{RET} = 2,56
min.
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Ejemplo de referencia
660
\vskip1.000000\baselineskip
Una solución del ejemplo de referencia 258 (25
mg), butiraldehído (5 mg) y ácido acético glacial (30 mg) en DCM (3
ml) se agitó durante 10 min. Se añadió triacetoxiborohidruro de
sodio (21 mg). Se agitó la mezcla de reacción durante 1,5 horas. Se
añadió gota a gota bicarbonato sódico (1,0 Molar, 3 ml) con
agitación . Después de agitar durante 5 min. se separaron las fases.
Se secó la fase orgánica sobre Na_{2}SO_{4} y se aplicó a un
cartucho de SPE (5 g). Se eluyó el cartucho con una mezcla de
diclorometano, etanol y amoniaco (100:8:1). Las fracciones que
contenían el producto deseado se concentraron a vacío para
proporcionar el ejemplo de referencia 660 en forma de un sólido en
crema amorfo (19 mg). LCMS mostró MH^{+} = 346; T_{RET} = 2,56
min.
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Ejemplos 661 a
664
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Se trató el intermedio 17 (0,16 mmoles) en
acetonitrilo (1 ml) con la amina R^{3}NH_{2} (0,8 mmoles) en
acetonitrilo (1 ml) y N,N-diisopropiletilamina (0,8
mmoles). Se calentó la mezcla a 50ºC durante 18 h, después se
concentró a vacío. Se diluyó el residuo con agua (3 ml) y se extrajo
con diclorometano (2 x 5 ml). Se evaporaron los extractos orgánicos
reunidos, y se purificó el residuo mediante HPLC de autopurificación
de masa dirigida para proporcionar el producto deseado que contenía
ácido fórmico. Se disolvió este material en
cloroformo-metanol (10/1, 5,5 ml) y se lavó con
solución de carbonato ácido de sodio al 5% (1 ml) para proporcionar
después de la evaporación de los disolventes el producto puro.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia
665
[grupo
cis-(3-hidroxiciclohex-1-il)amino,
racémico]
Se añadió 3-Aminociclohexanol
(0,677 g, 5,9 mmol, como se describe en J. Chem. Soc., Perkin Trans
1, 1994, 537) en acetonitrilo (10 ml) y etanol (1 ml) a temperatura
ambiente a una solución agitada del Intermedio 1 (1,24 g, 4,9 mmol)
y diisopropiletilamina (4,2 6 ml, 24,5 mmol) en acetonitrilo (25
ml). La mezcla resultante se agitó a 85ºC durante 17 h. la mezcla se
concentró a vacío, y el resto se repartió entre DCM (50 ml) y agua
(10 ml). Se separaron las fases y se secó la fase orgánica
(Na_{2}SO_{4}) y se evaporó para proporcionar un aceite de color
naranja-marrón. Se purificó el aceite mediante
cromatografía Biotage (sílice 100 g) eluyendo con
30-50% de EtOAc en ciclohexano para proporcionar el
ejemplo de referencia 665 en forma de una espuma de color blanco
(0,681 g). LCMS mostró MH^{+} = 333; T_{RET} = 2,76 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplos de referencia
666-676
grupo
{cis-(3-hidroxiciclohex-1-il)amino,
racémico]
Una mezcla del Intermedio 76 (0,1 mmol), HATU
(0,1 mmol) y DIPEA (0,4 mmol) en DMF (0,5 ml) se agitó a temperatura
ambiente durante 10 min. Después se añadió una solución de la amina
HNR^{4}R^{5} (0,12 mmol) en DMF (0,5 ml) y la mezcla se agitó
durante varios minutos para proporcionar una solución. La solución
se almacenó a temperatura ambiente durante 16 h, después se
concentró a vacío. El residuo se purificó mediante HPLC de
autopurificación dirigida por masa.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de referencia 260:
(Procedimiento
alternativo)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Se agitó una solución del Intermedio 58 (45 mg),
HATU (63 mg) y OIPEA (39 mg) en aeetonitrilo (5 ml) 10 min. Se
añadió una solución de 2,4-dimetilbencilamina (24
mg) (disponible de Salor; o ICN Biomedieals, Inc.; o Synthesis,
1982, 12, 1036) en aeetonitrilo (1 ml). La mezcla de reacción se
agitó durante 18 h. La solución sed concentró y se repartió el
residuo entre acetato de etilo (25 ml) y 0,5 M de bicarbonato de
sodio (20 ml). Se separó la fase orgánica, se lavó con agua (20 ml),
se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró para dejar una goma
que se aplicó a un cartucho SPE (5 g). El cartucho se eluyó con
acetato de etilo. Se combinaron las fracciones que contenían el
compuesto deseado y se concentraron a vacío para proporcionar el
ejemplo de referencia 260 (3 2 mg). LC-MS mostrado
MH^{+} = 420; T_{RET} = 3,16 min. \delta_{n} (CDCl_{3}):
1,49 (3H, t), 2,11 (2H, m), 2,33 (3H, s), 2,35 (3H, s), 2,40 (2H,
m), 2,52 (2H, m), 2,61 (2H, m), 4,36 (1 H, m), 4,47 (2H, q), 4,55
(2H, d), 6,14 (1 H, t), 7,01 + 7,18 (2H, AA'BB'), 7,04 (1 H, s),
8,01 (1 H, s), 8,36 (1 H, s), 9,96 (1 H, d).
Se prepararon los siguientes Ejemplos de
referencia 677-679 de una manera similar al ejemplo
de referencia 260 (procedimiento alternativo anterior), por ejemplo
usando el mismo o similar número de moles de reactivos y volúmenes
de disolventes,
\vskip1.000000\baselineskip
Los ejemplos de referencia
680-686 y su preparación se muestran anteriormente
conjuntamente con el ejemplo de referencia 653.
\vskip1.000000\baselineskip
Preparación alternativa del Ejemplo
de referencia
681
una mezcla del Ejemplo de referencia 261 (35
mg), clorhidrato de hidroxilamina (10 mg) y diisopropiletilamina (26
mg) en acetonitrilo (4 ml) se agitó y se calentó a reflujo durante
2,5 horas. Se enfrió la solución y se concentró a vacío. Se repartió
el residuo entre EtOAc y agua. Se separó la fase orgánica, se secó
sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró a vacío. Se aplicó el residuo
a un cartucho de SPE (10 g). Se eluyó el cartucho con EtOAc:
ciclohexano (1: 1) y después EtOAc. Se combinaron las fracciones
deseadas que contenían el compuesto deseado y se concentraron a
vacío para proporcionar el Ejemplo de referencia 681 en forma de un
sólido amorfo de color blanco (18 mg). LCMS mostró MH^{+} = 435;
T_{RET} = 3,08 min. 5_{H} (CDCl_{3}) 1,49 (3H, t), 1,79 (2H,
m), 2,24 (6H, s), 2,19-2,38 (4H, m), 2,56 (2H, dt),
4,13 (1 H, m), 4,46 (2H, q), 4,53 (2H, d), 6,36 (1 H, t), 7,09 (2H,
t), 7,12 (1 H, s), 7,98 (1 H, s), 8,38 (1 H, s), 9,79 (1 H, d).
Protón hidroxilo no visible.
Claims (27)
1. Un compuesto de fórmula (I) o una sal del
mismo:
en la
que:
R^{1} es etilo;
R^{2} es un átomo de hidrógeno (H);
R^{3} es un grupo heterocíclico de subfórmula
(bb);
en la que n^{1} es 1; y en la que
Y es O, S, SO_{2}, o NR^{10}; en la que R^{10} es un átomo de
hidrógeno (H), C(O)NH_{2},
C(O)-alquilo(C_{1}-C_{2})
o
C(O)-fluoroalquiloC_{1},
y X es NR^{4}R^{5}, en el que:
R^{4} es un átomo de hidrógeno (H); y
R^{5} es
(4-alquilC_{1-3}-fenil)metilo;
(4-fluoroalquilC_{1}-fenil)metilo;
(4-alcoxifenilC_{1-2})metilo;
(4-fluoroalcoxi
C_{1}-fenil)metilo;
(3,4-dimetil-fenil)metilo;
(2,4-dimetil-fenil)metilo;
(3,5-dimetil-fenil)metilo;
(2,3-dimetilfenil)metilo;
(2,5-dimetil-fenil)metilo;
(4-metil-3-cloro-fenil)metilo;
(3-metil-4-cloro-fenil)metilo;
(2-metil-4-cloro-fenil)metilo;
(2-cloro-4-fluorofenil)metilo;
(2,4-difluoro-fenil)metil,
(4-bromo-2-fluorofenil)metilo;
(4-cloro-2-fluorofenil)metilo;
(3,4-diclorofenil)metilo;
(2,4-dicloro-fenil)metilo;
(2,6-dicloro-fenil)metilo;
(2,3-dicloro-fenil)metilo;
(2,4-dicloro-6-metil-fenil)metilo;
o
[2,3-dicloro-6-(hidroximetil)-fenil]metilo.
\vskip1.000000\baselineskip
2. Un compuesto o sal según la reivindicación 1,
en el que R^{10} es un átomo de hidrógeno (H) o
C(O)metilo.
3. Un compuesto o sal según la reivindicación 1,
en el que Y es O o NR^{10}.
4. Un compuesto o sal según la reivindicación 1,
en el que R^{3} es
tetrahidro-2H-piran-4-ilo.
5. Un compuesto o sal según la reivindicación 1
que es:
1-etil-N-(4-metoxibencil)-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-N-[4-(trifluorometil)bencil]-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
4-[(1-acetil-4-piperidinil)amino]-N-[(3,4-diclorofenil)metil]-1-etil-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
4-[(1-acetil-4-piperidinil)amino]-1-etil-N-{[4-(trifluorometil)fenil]metil}-1H-pirazolo
[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
\newpage
4-[(1-acetil-4-piperidinil)amino]-1-etil-N-{[4-(metiloxi)fenil]metil}-1H-pirazolo
[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
4-[(1-acetil-4-piperidinil)amino]-N-[(2,4-diclorofenil)metil]-1-etil-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
4-[(1-acetil-4-piperidinil)amino]-N-({4-[(difluorometil)oxi]fenil}metil)-1-etil-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-car-
boxamida,
boxamida,
N-[(3-cloro-4-metilfenil)metil]-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
N-[(4-cloro-2-metilfenil)metil]-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
N-[(3,4-dimetilfenil)metil]-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
1-etil-N-[(4-metilfenil)metil]-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
1-etil-N-{[4-(1-metiletil)fenil]metil}-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
N-[(2,4-diclorofenil)metil]-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
N-[(2,4-difluorofenil)metil]-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo
[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
N-[(2-cloro-4-fluorofenil)metil]-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxa-
mida,
mida,
N-[(2,4-dimetilfenil)metil]-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
N-[(3,4-diclorofenil)metil]-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
N-({4-[(difluorometil)oxi]fenil}metil)-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
N-[(4-cloro-2-fluorofenil)metil]-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxa-
mida,
mida,
N-[(4-bromo-2-fluorofenil)metil]-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
N-[(3,5-dimetilfenil)metil]-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
N-[(2,3-dimetilfenil)metil]-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
N-[(2,3-diclorofenil)metil]-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
N-[(2,6-diclorofenil)metil]-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
1-etil-N-[(4-etilfenil)
metil]-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
N-{[2,3-dicloro-6-(hidroximetil)fenil]metil}-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
N-[(2,4-dicloro-6-metilfenil)metil]-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carbo-
xamida,
xamida,
N-[(2,5-dimetilfenil)metil]-1-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carboxamida,
o una sal de los mismos.
\vskip1.000000\baselineskip
6. Un compuesto o sal según cualquier
reivindicación precedente, que es el compuesto o una sal
farmacéuticamente del mismo.
7. Un compuesto o sal según cualquier
reivindicación precedente, que está en una forma de particular de
tamaño reducido, en el que el tamaño de partícula (valor de D50) del
compuesto de tamaño reducido o sal es 0,5 a 10 micrómetros.
8. Un compuesto o una sal farmacéuticamente
aceptable según cualquier reivindicación precedente, para uso como
una sustancia terapéutica activa en un mamífero tal como un ser
humano.
9. Un compuesto o una sal farmacéuticamente
aceptable según cualquier reivindicación precedente, para uso en el
tratamiento y/o profilaxis de asma, enfermedad pulmonar obstructiva
crónica (COPD), dermatitis atópica, urticaria, rinitis alérgica,
conjuntivitis alérgica, conjuntivitis vernal, granuloma eosinófilo,
soriasis, artritis reumatoide, choque séptico, colitis ulcerosa,
enfermedad de Crohn, lesión por reperfusión del miocardio y cerebro,
glomerulonefritis crónica, choque endotóxico, síndrome de
insuficiencia respiratoria en adultos, esclerosis múltiple,
alteración cognitiva en un trastorno neurológico, depresión, o
dolor, en un mamífero tal como un ser humano.
10. Un compuesto o una sal farmacéuticamente
aceptable según la reivindicación 9, para uso en el tratamiento y/o
profilaxis de enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD), asma,
artritis reumatoide, rinitis alérgica o dermatitis atópica en un
mamífero tal como un ser humano.
11. Un compuesto o una sal farmacéuticamente
aceptable según la reivindicación 9, para uso en el tratamiento y/o
profilaxis de dermatitis atópica en un ser humano.
12. Una composición farmacéutica que comprende
un compuesto de fórmula (l), como se define en cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 7, o una sal farmacéuticamente aceptable del
mismo, y uno o más vehículos y/o excipientes farmacéuticamente
aceptables.
13. Una composición farmacéutica según la
reivindicación 12, que es adecuada, y/o adaptada, para la
administración inhalada, en la que el compuesto o sal está en una
forma de tamaño de partícula reducido, en la que el tamaño de
partícula (valor de D50) del compuesto de tamaño reducido está entre
0,5 y 10 micrómetros.
14. Una composición según la reivindicación 12,
para el tratamiento y/o profilaxis de una enfermedad inflamatoria
y/o alérgica, o alteración cognitiva en un trastorno neurológico, en
un mamífero tal como un ser humano.
15. Una composición según la reivindicación 12,
para uso en tratamiento y/o profilaxis de enfermedad pulmonar
obstructiva crónica (COPD), asma, artritis reumatoide, rinitis
alérgica o dermatitis atópica en un mamífero tal como un ser
humano.
16. El uso de un compuesto de fórmula (l), como
se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, o una
sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un
medicamento para el tratamiento y/o profilaxis de una enfermedad
inflamatoria y/o alérgica, o alteración cognitiva en un trastorno
neurológico, en un mamífero tal como un ser humano.
17. El uso de un compuesto de fórmula (l), como
se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, o una
sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un
medicamento para el tratamiento y/o profilaxis de asma, enfermedad
pulmonar obstructiva crónica (COPD), dermatitis atópica, urticaria,
rinitis alérgica, conjuntivitis alérgica, conjuntivitis vernal,
granuloma eosinófilo, soriasis, artritis reumatoide, choque séptico,
colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, lesión por reperfusión del
miocardio y cerebro, glomerulonefritis crónica, choque endotóxico,
síndrome de insuficiencia respiratoria en adultos, esclerosis
múltiple, alteración cognitiva en un trastorno neurológico,
depresión, o dolor, en un mamífero tal como un ser humano.
18. El uso según la reivindicación 16 ó 17, en
el que el medicamento es para el tratamiento y/o profilaxis de
enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD), asma, artritis
reumatoide, rinitis alérgica o dermatitis atópica, en un mamífero
tal como un ser humano.
19. El uso según la reivindicación 16 ó 17, en
el que el medicamento es para el tratamiento y/o profilaxis de
enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD) en un ser humano.
20. El uso según la reivindicación 19, en el que
el medicamento es para el tratamiento y/o profilaxis de dermatitis
atópica en un ser humano.
21. El uso según la reivindicación 19, en el que
el medicamento es para el tratamiento y/o profilaxis de alteración
cognitiva en un trastorno neurológico, o de depresión, en un ser
humano.
22. El uso según cualquiera de las
reivindicaciones 16 a 19, en el que el medicamento es para la
administración oral o inhalada y es una composición farmacéutica
como se define en la reivindicación 12.
23. Una combinación que comprende un compuesto
de fórmula (1), como se ha definido en cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 7, o una sal farmacéuticamente aceptable del
mismo, conjuntamente con un agonista del
adreno-receptor \beta_{2}, un antihistamínico,
un antialérgico, o un agente antiinflamatorio.
24. Una combinación que comprende un compuesto
de fórmula (1), como se ha definido en cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 7, o una sal farmacéuticamente aceptable del
mismo, conjuntamente con un antagonista del receptor muscarínico
(M).
25. Una composición farmacéutica según la
reivindicación 24, en el que el antagonista del receptor muscarínico
(M) es un antagonista del receptor M_{3}.
26. Una combinación que comprende una
combinación como se ha definido en cualquiera de las
reivindicaciones 23 a 25, conjuntamente con uno o más vehículos y/o
excipientes farmacéuticamente aceptables, siendo la composición una
composición farmacéutica separada o combinada para la administración
de los compuestos individuales de la combinación o bien de manera
secuencial o simultánea.
27. Una composición farmacéutica según la
reivindicación 26, para la administración inhalada, y en la que la
combinación comprende el compuesto o sal conjuntamente con un
agonista del adreno-receptor \beta_{2}, o un
antagonista del receptor muscarínico (M), y en la que la composición
farmacéutica es para el tratamiento y/o profilaxis de enfermedad
pulmonar obstructiva crónica (COPD) en un ser humano.
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| WO2011110575A1 (en) | 2010-03-11 | 2011-09-15 | Glaxo Group Limited | Derivatives of 2-[2-(benzo- or pyrido-) thiazolylamino]-6-aminopyridine, useful in the treatment of respiratoric, allergic or inflammatory diseases |
| GB201007203D0 (en) | 2010-04-29 | 2010-06-16 | Glaxo Group Ltd | Novel compounds |
| WO2011143106A1 (en) * | 2010-05-10 | 2011-11-17 | Gilead Sciences, Inc. | Bi - functional pyrazolopyridine compounds |
| EP2397482A1 (en) | 2010-06-15 | 2011-12-21 | Almirall, S.A. | Heteroaryl imidazolone derivatives as jak inhibitors |
| EP2593434A1 (en) | 2010-07-16 | 2013-05-22 | Purdue Pharma LP | Pyridine compounds as sodium channel blockers |
| US9326987B2 (en) | 2010-09-08 | 2016-05-03 | Glaxo Group Limited | Indazole derivatives for use in the treatment of influenza virus infection |
| HUE026059T2 (en) | 2010-09-08 | 2016-05-30 | Glaxosmithkline Ip Dev Ltd | N- [5- [4- (5 - {[(2R, 6S) -2,6-dimethyl-4-morpholinyl] methyl} -1,3-oxazol-2-yl) -1H-indazol-6-yl ] Polymorphs and salts of 2 - (methyloxy) -3-pyridinyl] methanesulfonamide |
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| US9358233B2 (en) | 2010-11-29 | 2016-06-07 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Method for treating acute myeloid leukemia |
| CN102485724B (zh) * | 2010-12-06 | 2015-08-12 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 取代噻吩基吡唑并吡啶类化合物及其医药用途 |
| GB201104153D0 (en) | 2011-03-11 | 2011-04-27 | Glaxo Group Ltd | Novel compounds |
| US20140005188A1 (en) | 2011-03-11 | 2014-01-02 | Glaxo Group Limited | Pyrido[3,4-b]pyrazine derivatives as syk inhibitors |
| US9370535B2 (en) | 2011-05-17 | 2016-06-21 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Method for treatment of advanced solid tumors |
| EP2527344A1 (en) | 2011-05-25 | 2012-11-28 | Almirall, S.A. | Pyridin-2(1H)-one derivatives useful as medicaments for the treatment of myeloproliferative disorders, transplant rejection, immune-mediated and inflammatory diseases |
| AU2013203824A1 (en) | 2012-03-16 | 2013-10-03 | Purdue Pharma L.P. | Substituted pyridines and pryimidines as sodium channel blockers |
| WO2014096941A1 (en) | 2012-12-20 | 2014-06-26 | Purdue Pharma L.P. | Cyclic sulfonamides as sodium channel blockers |
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| AU2014336251A1 (en) | 2013-10-17 | 2016-04-14 | Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited | PI3K inhibitor for treatment of respiratory disease |
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| BR112016021641A2 (pt) * | 2014-03-27 | 2017-08-15 | Eicosis Llc | Potentes inibidores da epóxido hidrolase solúveis |
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| US20170100385A1 (en) | 2014-05-12 | 2017-04-13 | Glaxosmithkline Intellectual Property (No. 2) Limited | Pharmaceutical compositions comprising danirixin for treating infectious diseases |
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| GB201602527D0 (en) | 2016-02-12 | 2016-03-30 | Glaxosmithkline Ip Dev Ltd | Chemical compounds |
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| CN107964011A (zh) * | 2016-10-19 | 2018-04-27 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 取代吡唑并吡啶类衍生物及其医药用途 |
| GB201706102D0 (en) | 2017-04-18 | 2017-05-31 | Glaxosmithkline Ip Dev Ltd | Chemical compounds |
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| US11505559B2 (en) | 2017-10-30 | 2022-11-22 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services Office Of Technology Transfer, National Institutes Of Health | Substituted quinoline analogs as aldehyde dehydrogenase 1A1 (ALDH1A1) inhibitors |
| CA3120971A1 (en) * | 2017-11-27 | 2019-05-31 | Dart Neuroscience, Llc | Substituted furanopyrimidine compounds as pde1 inhibitors |
| CN111875594A (zh) * | 2020-07-21 | 2020-11-03 | 中国药科大学 | 具有磷酸二酯酶4b抑制活性的吲唑杂环类化合物 |
| MX2023002539A (es) | 2020-09-10 | 2023-03-14 | Vanda Pharmaceuticals Inc | Metodos para tratar enfermedades o afecciones mediadas por fosfodiesterasa iv (pde iv). |
Family Cites Families (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US598973A (en) * | 1898-02-15 | Water-heater and smoke-consumer | ||
| US598838A (en) * | 1898-02-08 | William b | ||
| US3833594A (en) * | 1971-08-05 | 1974-09-03 | Squibb & Sons Inc | Amino derivatives of pyrazolopyridine carboxylic acids and esters |
| US3856799A (en) * | 1971-08-05 | 1974-12-24 | Squibb & Sons Inc | Intermediates for production of amino derivatives of pyrazolopyridine carboxylic acids and esters |
| BE787249A (fr) * | 1971-08-05 | 1973-02-05 | Squibb & Sons Inc | Derives amino d'acides pyrazolopyridine carboxyliques, leurs esters et les sels de ces composes, ainsi que leurs procedes de preparation |
| US3925388A (en) * | 1971-08-05 | 1975-12-09 | Squibb & Sons Inc | 4-Piperazino-{8 3,4-b{9 pyridine-5-carboxylic acids and esters |
| US4012373A (en) * | 1972-09-22 | 1977-03-15 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Pyrazolo[3',4'-2,3]pyrido[4,5-e]b-benzo-1,5-diazepinones |
| US3979399A (en) * | 1972-11-15 | 1976-09-07 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Amino derivatives of pyrazolopyridine carboxamides |
| US3840546A (en) * | 1972-11-15 | 1974-10-08 | Squibb & Sons Inc | Amino derivatives of pyrazolopyridine carboxamides |
| US3833598A (en) * | 1972-12-29 | 1974-09-03 | Squibb & Sons Inc | Amino derivatives of pyrazolopyridine-6-carboxylic acids and esters |
| US4115394A (en) * | 1974-05-06 | 1978-09-19 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Amino derivatives of 6-phenylpyrazolo[3,4-b]pyridines |
| US5593997A (en) * | 1995-05-23 | 1997-01-14 | Pfizer Inc. | 4-aminopyrazolo(3-,4-D)pyrimidine and 4-aminopyrazolo-(3,4-D)pyridine tyrosine kinase inhibitors |
| US6326379B1 (en) * | 1998-09-16 | 2001-12-04 | Bristol-Myers Squibb Co. | Fused pyridine inhibitors of cGMP phosphodiesterase |
| JP2002020386A (ja) * | 2000-07-07 | 2002-01-23 | Ono Pharmaceut Co Ltd | ピラゾロピリジン誘導体 |
| US20050043319A1 (en) * | 2001-08-14 | 2005-02-24 | Exonhit Therapeutics Sa | Molecular target of neurotoxicity |
| WO2004024728A2 (en) * | 2002-09-16 | 2004-03-25 | Glaxo Group Limited | Pyrazolo[3,4-b]pyridine compounds, and their use as phosphodiesterase inhibitors |
| GB0230045D0 (en) * | 2002-12-23 | 2003-01-29 | Glaxo Group Ltd | Compounds |
| CA2557004A1 (en) * | 2003-12-19 | 2005-06-30 | Glaxo Group Limited | Pyrazolo [3,4-b] pyridine compounds, and their use as phosphodiesterase inhibitors |
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