ES2328976T3 - Nueva composicion para mejorar la calidad de la piel y un procedimiento para su preparacion. - Google Patents

Nueva composicion para mejorar la calidad de la piel y un procedimiento para su preparacion. Download PDF

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Abstract

Composición que comprende, como sustancia activa, una mezcla de por lo menos un ácido gamma-linolénico, polifenoles, proteínas de la leche y bacterias lácticas, y presentando dicha composición un contenido en agua de por lo menos 50% en peso, y en el que dicho ácido gamma-linolénico presenta una biodisponibilidad incrementada al ser ingerido, comparada con la del ácido gamma-linolénico solo.

Description

Nueva composición para mejorar la calidad de la piel y un procedimiento para su preparación.
La presente invención se refiere a una nueva composición para la mejora de la calidad de la piel, en particular, para actuar sobre la función de barrera cutánea o la barrera de hidratación cutánea, y a un procedimiento para su preparación.
Las principales funciones de la piel consisten en proporcionar una protección mecánica (por fricción y carga), para proporcionar una barrera química (limitación de la penetración de sustancias extrañas, prevención de pérdida de agua o líquido endógeno, mantener la temperatura constante), para proteger frente a la radiación ultravioleta y para proteger frente a la invención de patógenos (gracias a las células inmunitarias localizadas en la piel).
La capa principal que proporciona esta protección es el estrato córneo (SC). Esta capa evita la pérdida excesiva de agua del cuerpo porque mucha pérdida de agua es una señal de deshidratación de la piel.
La industria cosmética y dermatológica tiene como objetivo evitar la deshidratación de la piel, la apariencia de piel seca, mediante la aplicación tópica de cremas y lociones que contienen ingredientes que mejoran el estado de la piel. Estos efectos son, sin embargo, sólo locales, es decir el beneficio sólo se proporciona a la parte de la piel en la que se aplica la loción.
Sin embargo, el cuerpo proporciona a la piel un sistema de suministro único, es decir la sangre y los líquidos intersticiales, y como resultado cualquier nutriente (o sus metabolitos) que se ingieren oralmente tiene la oportunidad, a través de esta vía de entrega, de influir en la piel de todo el cuerpo. Los ejemplos de este efecto se describen en los documentos JP 2006246861; FR 2861594; US 2004/0258645 y WO 2006/056293.
Por lo tanto la utilización de ingredientes que pueden proporcionar protección a la piel, particularmente en composiciones administradas oralmente, resulta beneficioso para mejorar el estado de la piel de todo el cuerpo.
La importancia de los ácidos grasos poliinsaturados para la función como barrera de la piel es conocida desde hace décadas. El ácido gamma-linoleico (GLA) puede actuar a diferentes niveles para mejorar la función de barrera cutánea:
-
al poseer una acción antiinflamatoria, GLA puede reducir la hiperproliferación de los queratinocitos que se da en los estados comprometidos de barrera para permitir que se produzca la diferenciación normal de los queratinocitos;
-
como ligando para el receptor activador proliferativo peroxisomal (PPAR), puede influir en la transcripción genética del quetatinocito e induce su diferenciación conduciendo directamente a la síntesis incrementada de ceramidas.
Los polifenoles como las catequinas han demostrado una capacidad para mejorar la función de barrera del estrato córneo (SC) (Heinrich U et al., Long term ingestion of high flavanol cocoa provides photoprotection against UV-induced erythema and improves skin condition in women. J. Nutr. 136: 1565-9, 2006). Los polifenoles del té verde tienen varios efectos sobre las células cutáneas ya sea directamente o bien posiblemente mediante su conversión en ácidos aromáticos de cadena corta que después pueden funcionar como ligandos PPAR. Las catequinas tiene unos efectos conocidos sobre la diferenciación de los queratinocitos (Balasubramanian S et al., GTP stimulates a Ras, MEKK1, MEK3 and p38 cascade to increase activator protein 1 factor dependent involucrin gene expresión in normal human keratinocytes. JBC. 2002; 277: 1828-1836; Eckert RL. Crish JF, Efimova T, Balasubramanian S. Opposing action of curcumin and green tea polyphenol in human keratinocytes. Mol Nutr Food Res. 2006 Feb; 50 (2): 123-9; Hsu S, Bollag WB, Lewis J et al., Green tea polyphenols induce differentitation and proliferation in epidermal keratinocytes. J Pharmacol Exp Ther. 2003 Jul; 306 (1): 29-34, 2003).
La presente invención deriva de que se ha descubierto de manera inesperada que los ácidos grasos insaturados, que son bien conocidos en la técnica por su acción sobre la piel, presentan una biodisponibilidad mejorada en determinadas situaciones.
Uno de los aspectos de la invención consiste en proponer nuevas composiciones útiles como alimento, bebida o una composición utilizada como suplemento para un alimento o una bebida que se destina para la mejora de la hidratación de la piel y la prevención de la deshidratación de la piel.
Otro objetivo de la invención consiste en proporcionar una nueva composición que presenta unas cualidades organolépticas muy buenas (no astringente, no demasiado gruesa, no demasiado ácida) desde el punto de vista del consumidor y un buen equilibrio nutricional (es decir una contenido bajo en grasa < 3,5% p/p), dicha composición no debe ser demasiado cara tampoco.
Otro aspecto de la invención consiste en proponer un procedimiento para la preparación de las composiciones.
La presente invención se refiere a una composición que comprende, una sustancia activa, una mezcla de por lo menos un ácido poliinsaturado, que sea diferente del ácido poliinsaturado derivado de la leche, polifenoles, proteínas de la leche y bacterias lácticas, y dicha composición presenta un contenido en agua de por lo menos el 50% en peso; y en el que dicho ácido graso poliinsaturado presenta una biodisponibilidad mejorada comparada con la del ácido graso poliinsaturado solo.
Tal como se entiende en la técnica, el término "ácido graso poliinsaturado" se refiere a unos ácidos grasos que presentan de 1 a 26 átomos de carbono, particularmente desde 18 a 24 átomos de carbono y más particularmente 18 átomos de carbono y desde 2 a 6, particularmente 2 a 4 y más particularmente 3 insaturaciones.
El término "ácido graso poliinsaturado" como se utiliza en la presente memoria, se refiere a unos ácidos grasos poliinsaturados que son diferentes de los ácidos grasos poliinsaturados que se encuentran normalmente en la leche.
La expresión "ácido graso poliinsaturado, diferente del ácido graso poliinsaturado derivado de la leche" describe unos ácidos grasos poliinsaturados que pueden tener una estructura química diferente a la de uno de los ácidos grasos poliinsaturados que se encuentran en la leche, o cuya cantidad es diferente a la de una de las encontradas en la
leche.
Se debe entender que la composición de la invención, que comprende una sustancia activa como se ha descrito anteriormente, puede comprende unos ácidos grasos poliinsaturados que son una sustancia de origen lácteo, dicha sustancia láctea se define a continuación en la presente memoria.
Los ejemplos de los ácidos grasos poliinsaturados derivados de la leche son ácido linoleico (C18:2 \omega-6), ácido alfa-linolénico (C18:3 \omega-3) o ácido linoleico conjugado (CLA). La leche no contiene ácido gamma-linolénico (GLA).
El término "bacteria láctica" describe la familia de bacterias gram-positivas, en forma de redonda o barritas que pueden fermentar azúcares en ácido láctico.
El término "biodisponibilidad" describe la capacidad de disponer de un ingrediente en una forma activa en la sangre, dicho ingrediente está disponible en el proceso metabólico o en el almacenamiento en la piel.
El término "biodisponibilidad incrementada" describe la capacidad para mejorar la biodisponibilidad de un ingrediente. Se puede medir tomando una muestra de sangre y calculando la dosis del ingrediente a tiempos diferentes.
El término "ácido graso poliinsaturado solo" describe los ácidos grasos poliinsaturados que están presenten ya sea en su entorno natural o bien aislados de dicho entorno, y sin estar en combinación con los elementos responsables que afectan sus propiedades.
Inesperadamente, se ha descubierto que los ácidos grasos poliinsaturados combinados con los polifenoles, proteínas de la leche y bacterias lácticas presentan una mejor cinética de biodisponibilidad comparada con los ácidos grasos poliinsaturados solos.
La presente invención se describe en las reivindicaciones adjuntas.
La presente invención se refiere también a una composición que comprende, como sustancia activa, una mezcla de por lo menos un ácido gamma-linolenico, polifenoles, proteínas de la leche y bacterias lácticas, y dicha composición que presenta un contenido en agua de por lo menos el 50% en peso, y en la que dicho ácido gamma-linolenico presenta una biodisponibilidad incrementada comparada con la del ácido gamma-linolenico solo.
El término "dicho ácido gamma-linolenico presenta una biodisponibilidad incrementada comparada con la del ácido gamma-linolénico solo" describe la capacidad del ácido gamma-linolenico de la composición para estar más disponible en una forma activa en sangre que el ácido gamma-linolenico solo. El ácido gamma-linolenico combinado con los polifenoles, las proteínas de la leche y las bacterias lácticas presentan una cinética mejor de la biodisponibilidad comparada con la del ácido gamma-linolenico solo.
La presente invención se refiere asimismo a una composición que comprende, como sustancia activa, una mezcla de por lo menos un ácido gamma-linolenico, polifenoles, proteínas de la leche y bacterias lácticas, y dicha composición que presenta un contenido en agua de por lo menos el 50% en peso, y en la que la concentración del ácido gamma-linolenico es desde aproximadamente 0,02% hasta aproximadamente 1%, particularmente es desde aproximadamente 0,04% hasta aproximadamente 0,6% y más particularmente es desde aproximadamente 0,1% hasta aproximadamente 0,2% en peso de la composición, y en la que dicho ácido gamma-linolenico presenta una biodisponibilidad incrementada comparada con la del ácido gamma-linolénico solo.
La presente invención se refiere a una composición que comprende, como sustancia activa, una mezcla de por lo menos un ácido gamma-linolenico, polifenoles, proteínas de la leche y bacterias lácticas, y dicha composición que presenta un contenido en agua de por lo menos el 50% en peso, y en la que la concentración del ácido gamma-linolenico es desde aproximadamente 0,02% hasta aproximadamente 1%, particularmente es desde aproximadamente 0,04% hasta aproximadamente 0,6% y más particularmente es desde aproximadamente 0,1% hasta aproximadamente 0,2% en peso de la composición, y la concentración de polifenoles representan desde aproximadamente 0,13% hasta 18,7%, particularmente aproximadamente 0,15% hasta 15%, y más particularmente aproximadamente 0,16% hasta 13% del peso total de la sustancia activa, y en la que dicho ácido gamma-linolénico presenta una biodisponibilidad incrementada comparada con la del ácido gamma-linolénico.
La presente invención se refiere a una composición que comprende, como sustancia activa, una mezcla de por lo menos un ácido graso poliinsaturado, diferente del ácido graso poliinsaturado derivado de la leche, polifenoles, proteínas de la leche y bacterias lácticas, y presentando dicha composición un contenido en agua de por lo menos 50% en peso, y en la que la concentración de polifenoles representa aproximadamente 0,13% a 18,7%, particularmente aproximadamente 0,15% a 15%, y más particularmente aproximadamente 0,16% a 13% del peso total de la sustancia activa, y en la que dicho ácido graso poliinsaturado presenta una biodisponibilidad aumentada comparada con la del ácido graso poliinsaturado solo.
En una forma de realización ventajosa, en la composición de la presente invención, el ácido graso poliinsaturado contiene por lo menos uno de los aceites vegetales siguientes: aceite de borraja, aceite de prímula, aceite de grosella negro, aceite de camelina, aceite de semilla de cáñamo, aceite de semilla de kiwi, aceite de lino, aceite de colza, aceite de microalgas o se produce mediante un procedimiento enzimático.
La expresión "procedimiento enzimático" como se utiliza en la presente memoria describe la acción catalítica de proteínas especificas que pueden transformar químicamente algunos ácidos grasos.
En otra forma de realización ventajosa, en la sustancia activa de la composición de la presente invención, el ácido graso poliinsaturado se selecciona de entre ácidos linolénico, sus derivados y sus precursores, y particularmente es el ácido gamma-linolénico.
El término "precursores" se refiere a las moléculas que pueden proporcionar ácido gamma-linolénico, siguiendo un tratamiento específico como un tratamiento enzimático, químico o físico.
El término "derivados" se refiere a unas moléculas que se pueden producir utilizando ácido gamma-linolénico mediante un tratamiento específico como un tratamiento enzimático, químico o físico.
En una forma de realización ventajosa, en la composición de la presente invención, los polifenoles contienen un extracto vegetal como extracto de té verde, extracto de semilla de uva, extracto de piel de uva, uva, extracto de naranja (roja), extracto de corteza de pino (picnogenol), extracto de vino tinto, extracto de tomate, extracto de gingko biloba, extracto de arándano, extracto de soja, extracto de isoflavonas de soja, arándano, frambuesa, baya de saúco, granada, manzana, sidra, cacao, café verde, mango, tuna, grosella negra, algas, aceitunas, canela, jengibre, ginseng, aloe vara, brócoli, hibisco.
Más preferentemente, el extracto vegetal comprende por lo menos 70%, particularmente por lo menos el 80% de polifenoles en peso del extracto vegetal.
En otra forma de realización ventajosa, la sustancia activa de la composición de la presente invención, los polifenoles se seleccionan de entre: ácidos fenólicos, como ácido hidroxicinámico, ácido hidroxibenzoico, flavonoides como flavonoles, flavonas, isoflavonas, flavononas, antocianidinas, proantocianidinas, taninos hidrolizables como galotaninas, elagitaninas y son en particular catequinas de té, resveretrol, viniferinas, ácido cafeico, ácido gálico, ácido elágico, ácido ferúlico, ácido clorogénico, quercetina, camferol, apigenina, daidzeína, genisteína, naringenina, hesperidina, antocianina, catequina, epicatequina y galocatequina.
En otra forma de realización ventajosa, en la sustancia activa de la composición, los polifenoles se seleccionan de entre las catequinas de té.
Más preferentemente, los polifenoles comprenden por lo menos 70%, particularmente por lo menos 80% de catequinas en peso del contenido total de polifenoles del extracto vegetal.
En otra forma de realización ventajosa, en la sustancia activa de la composición por lo menos 50%, más particularmente por lo menos 60% en peso de las catequinas del té se seleccionan de entre epicatequina, epigalatocatequina y galato de epigalocatequina.
En una forma de realización ventajosa, en la composición de la presente invención, las proteínas de la leche contiene por lo menos una de las siguientes sustancias lácteas: leche, leche desnatada, leche en polvo, leche desnatada en polvo, nata, concentrado de proteínas de la leche, suero de leche, concentrado sérico de leche de proteína y caseinato.
La expresión "sustancia láctea" se utiliza para referirse a una composición a base de leche que ha sufrido un tratamiento en particular un tratamiento por calor. La expresión "composición a base de leche inicial" describe una composición láctea de partida antes del tratamiento.
La sustancia láctea contiene generalmente unos ácidos grasos poliinsaturados, que no se encuentran en una cantidad suficiente para conferir las propiedades a la composición. Es así necesario añadir unos ácidos grasos poliinsaturados adicionales para incrementar su cantidad total, por lo menos uno de ellos es diferente de los contenidos en la sustancia láctea.
La expresión "concentrado de proteína de la leche" describe una proteína de la leche preparada mediante la utrafiltración de leche o por otros medios como la reducción del contenido de lactosa o sal, mejorando de este modo el contenido de proteína. Este concentrado puede contener desde 42 a 85% de proteínas.
La expresión "concentrado sérico de leche de proteína" describe las proteínas séricas preparadas mediante los procedimientos descritos anteriormente. Este concentrado puede contener desde 35 a 89% de proteínas.
Algunos contenidos de las proteínas de otras sustancias lácteas se proporcionan a continuación, en la tabla 1.
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TABLA 1 Concentración de proteínas de otras sustancias lácteas
1 
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En otra forma de realización ventajosa, en la sustancia activa de la composición de la presente invención, las bacterias lácticas se seleccionan de entre por lo menos una de las bacterias siguientes: Streptococcus thermophilus, Lactobacillus delbrueckii ssp bulgaricus, Lactobacillus casei, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus helveticus, Lactibacillus plantarum, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus kefiranofaciens, Bifidobacterium lactis ssp animales, Bifibobacterium longum, Bifidobacterium breve, Lactobacillus lactis ssp cremoris, Lactobacillus lactis ssp lactis y Leuconostoc.
En una forma de realización particularmente ventajosa, en la sustancia activa de la composición de la presente invención, las bacterias lácticas son Streptococcus thermophilus, Lactobacillus bulgaricus y Lactobacillus casei.
Más preferentemente, Lactobacillus casei es de la cepa CNCM-1518.
Otros ejemplos de las cepas que se pueden utilizar son las siguientes: I-2116, ATCC 53103, CRL 431 y I-1225.
En otra forma de realización ventajosa, en la composición de la presente invención, el contenido en agua es desde el 70% a 90%, particularmente 75% hasta 85%, más particularmente 80% en peso de la composición.
En una forma de realización ventajosa, la sustancia activa de la composición de la presente invención,
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los ácidos grasos poliinsaturados representan aproximadamente 2,3% hasta 91,5%, particularmente aproximadamente 2,3% hasta 70% y más particularmente aproximadamente 2,3% hasta 65% del peso total de la sustancia activa;
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los polifenoles representan aproximadamente 0,13% hasta 18,7%, particularmente aproximadamente 0,15% hasta 15%, y más particularmente aproximadamente 0,16% hasta 13% del peso total de la sustancia activa;
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las proteínas de la leche representan aproximadamente 8% hasta 97,6%, particularmente 15% hasta 97,6% y más particularmente aproximadamente 30% hasta 97,4% del peso total de la sustancia activa;
-
las bacterias lácticas están presentes en la sustancia activa en una cantidad de aproximadamente 10^{6} hasta 10^{10} ufc/mg, particularmente 10^{7} hasta 10^{9} ufc/mg.
En una forma de realización ventajosa, en la sustancia activa de la composición de la presente invención,
-
los ácidos grasos poliinsaturados comprenden ácido gamma-linolénico, que representa aproximadamente 0,64% hasta 28%, particularmente aproximadamente 1% hasta 10% y más particularmente aproximadamente 2% hasta 4% del peso total de la sustancia activa;
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los polifenoles comprende catequinas de té, que representan aproximadamente 0,15% hasta 11,5%, particularmente aproximadamente 0,5% hasta 5%, y más particularmente aproximadamente 1% hasta 2% del peso total de la sustancia activa;
-
las proteínas de la leche representan aproximadamente 65% hasta 99%, particularmente 80% hasta 97% y más particularmente aproximadamente 90% hasta 95% del peso total de la sustancia activa;
-
las bacterias lácticas están presentes en la sustancia activa en una cantidad desde aproximadamente 10^{6} hasta 10^{10} ufc/mg, particularmente 10^{7} hasta 10^{9} ufc/mg.
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En el caso de la utilización de los aceites con una concentración baja en GLA (por ejemplo aceite de semilla de cáñamo que contiene 76,5% de PUFA que incluye 2,7% de GLA) y unos extractos vegetales de concentración baja (por ejemplo extracto de té verde que contiene 90% de polifenoles que incluye 30% de catequinas), la sustancia activa de la composición comprende:
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una concentración de ácidos grasos poliinsaturados aproximadamente 14% hasta 91,5% del peso total de la sustancia activa;
-
una concentración de polifenoles desde aproximadamente 0,13% hasta 18,7%, del peso total de la sustancia activa;
-
una concentración de las proteínas de la leche representan aproximadamente 8% hasta 84% del peso total de la sustancia activa; y
-
una cantidad de bacterias lácticas desde aproximadamente 10^{6} hasta 10^{10} ufc/mg, particularmente 10^{7} hasta 10^{9} ufc/mg.
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En el caso de la utilización de los aceites con una concentración elevada de GLA (por ejemplo, aceite de borraja, aceite de onagra que incluye 10% de GLA, aceite de grosella negra que incluye 17% de GLA) y extractos vegetales muy concentrados (por ejemplo extracto de té verde que contiene 90% de polifenoles, que incluyen 80% de catequinas), la sustancia activa de la composición comprende:
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una concentración de ácidos grasos poliinsaturados aproximadamente 2,3% hasta 60% del peso total de la sustancia activa;
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una concentración de polifenoles desde aproximadamente 0,16% hasta 12,3%, del peso total de la sustancia activa;
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una concentración de las proteínas de la leche representan aproximadamente 37,6% hasta 97,4% del peso total de la sustancia activa; y
-
una concentración de las bacterias lácticas desde aproximadamente 10^{6} hasta 10^{10} ufc/mg, particularmente 10^{7} hasta 10^{9} ufc/mg.
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En otra forma de realización ventajosa, en la composición de la presente invención, la concentración de ácidos grasos poliinsaturados es desde aproximadamente 0,15% hasta aproximadamente 16,6%, particularmente desde aproximadamente 0,2% hasta aproximadamente 10% y más particularmente desde aproximadamente 0,4% hasta aproximadamente 5% en peso de la composición.
En otra forma de realización ventajosa, en la composición de la presente invención, la concentración de ácido gamma-linolénico es desde aproximadamente 0,02% hasta aproximadamente 1%, particularmente desde aproximadamente 0,04% hasta aproximadamente 0,6% y más particularmente desde aproximadamente 0,1% hasta aproximadamente 0,2% en peso de la composición.
Si la concentración de ácido gamma-linolénico es inferior a 0,02% en peso de la composición, no se observa un efecto significativo y, si la concentración de ácido gamma-linolénico es superior a 1% en peso de la composición, el producto no presenta la calidad organoléptica necesaria.
En otra forma de realización ventajosa, en la composición de la presente invención, la proporción del ácido gamma-linolénico/catequinas de té es de aproximadamente 2 hasta aproximadamente 10, particularmente aproximadamente 3 hasta aproximadamente 5 y más particularmente aproximadamente 3,4.
Si la proporción del ácido gamma-linolénico/catequinas de té es inferior a 2, no se observa ningún efecto significativo, y si la proporción del ácido gamma-linolénico/catequinas de té es superior a 10, el producto no presenta la calidad organoléptica necesaria.
En otra forma de realización, en la composición de la presente invención, la concentración de las proteínas de la leche es desde aproximadamente 1,5% hasta aproximadamente 6%, particularmente desde aproximadamente 2,5% hasta aproximadamente 5% en peso de la composición.
Si la concentración de proteínas de la leche es inferior a 1,5% en peso de la composición, la composición presenta un perfil nutricional malo con una calidad organoléptica mala (muy acuosa) y si la concentración de proteínas de la leche es superior a 6% en peso de la composición, la composición es muy gruesa y demasiado astringente.
En otra forma de realización ventajosa, en la composición de la presente invención, la cantidad de bacterias lácticas es superior a 10^{6} hasta 10^{10} ufc/mg, particularmente 10^{7} hasta 10^{9} ufc/mg.
La cantidad de bacterias lácticas se puede medir 28 días después del acondicionamiento y almacenaje a una temperatura desde 4 hasta 10ºC.
Si la cantidad de las bacterias lácticas es inferior a 10^{6} ufc/mg, la composición no tiene el efecto óptimo requerido, y si la cantidad de bacterias lácticas es superior a 10^{10} ufc/mg, la composición resulta técnicamente difícil de manufacturar y después es demasiado cara.
En otra forma de realización ventajosa, en la composición de la presente invención, la concentración de aceite vegetal, en particular aceite de borraja, es desde aproximadamente 0,2 hasta aproximadamente 3% en peso de la composición.
Si la concentración de aceite vegetal es inferior a 0,2% en peso de la composición, la composición no presenta el efecto óptima requerido porque no contiene suficiente ingrediente activo, y si la concentración del aceite vegetal es superior a 3% en peso de la composición, la composición tiene un contenido graso demasiado elevado, tiene unos problemas sensoriales y será muy cara.
En otra forma de realización ventajosa, en la composición de la presente invención, la concentración del extracto vegetal, en particular el extracto de té verde, es desde aproximadamente 0,01% hasta aproximadamente 1% en peso de la composición.
Si la concentración del extracto vegetal es inferior a 0,01% en peso de la composición, la composición no tiene el efecto óptimo requerido, y si la concentración del extracto vegetal es superior a 1% en peso de la composición, la composición tiene unos problemas sensoriales y será muy cara.
En una forma de realización habitual en la presente invención, la composición comprende aceite de borraja, extracto de té verde, aceite y bacterias lácticas y presenta una cantidad de agua de por lo menos 50% en peso, y en la que el ácido graso poliinsaturado contiene aceite de boraja presenta una biodisponibilidad mejorada comparado con uno del ácido graso poliinsaturado solo.
En otra forma de realización ventajosa, en la composición de la presente invención, el aceite de borraja comprende desde aproximadamente 16% hasta aproximadamente 25%, y particularmente aproximadamente 20% del ácido gamma-linolénico en peso del aceite de borraja.
El aceite de borraja es la fuente seleccionada del ácido gamma-linolénico o GLA puesto que presenta el contenido GLA más elevado de una semilla de aceite disponible. También es una fuente de ácido linoléico esencial (C 18:2 \omega-6). Los resultados de su composición durante el control de calidad analítico ha demostrado que el aceite de borraja utilizado satisface no sólo la especificación del producto sino que también los requerimientos normativos en relación con los contaminantes microbiológicos y toxicológicos como los pesticidas, los compuestos aromáticos policíclicos y los metales pesados.
En el aceite de borraja, GLA se concentra en la posición sn-2 en los triglicéridos y está más biodisponible en el aceite de onagra en el cual GLA se concentra en las posiciones sn-1 y sn-3 en los triglicéridos. La estructura estereo-específica de triacilglicerol de estos aceites es diferente. Esta diferencia en la posición influye en la biodisponibilidad del GLA.
En otra forma de realización ventajosa, en la composición de la presente invención, el extracto de té verde comprende desde aproximadamente 50% hasta aproximadamente 90%, y más particularmente aproximadamente 80% de catequina en peso del extracto de té verde.
El extracto de té verde se prepara a partir de unas hojas de té verde de gran calidad de la planta Camellia sinensis. El extracto está compuesto principalmente de polifenoles, especialmente catequinas. Los tres derivados siguientes son los componentes principales: galato de epigalocatequina (> 40%), epigalocatequina (> 18%) y epicatequina
(> 8%). Otras catequinas menores también están representadas: catequina, galocatequina, galato de epicatequina y galato de galocatequina. Además, las medidas analíticas que se llevan a cabo periódicamente por laboratorios acreditados demuestran que el extracto de té verde utilizado cumple con los requisitos microbiológicos y toxicológicos.
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En otra forma de realización ventajosa, en la composición de la presente invención, la sustancia láctea comprende desde aproximadamente 1,5% hasta aproximadamente 6%, y más particularmente aproximadamente 2,5% hasta aproximadamente 5% de proteínas de la leche en peso de la sustancia láctea.
En una forma de realización habitual de la presente invención, la composición es un alimento o una bebida o una composición suplemento para un alimento o una bebida.
En una forma de realización particular, el alimento se selecciona de entre un producto lácteo que contiene por lo menos el 50% del producto fermentado derivado de la sustancia láctea, un yogur o un yogur de frutas.
La expresión "producto lácteo fermentado" describe un producto que contiene leche que se ha fermentado con una bacteria láctica. Por ejemplo, los productos lácteos elaborados fermentados que se pueden mencionar son los siguientes: yogur como se ha descrito como yogur preparado o agitado, yogur natural o con aroma o yogur con frutas, leches fermentadas, queso fresco, como queso fresco natural o con aroma o queso fresco con frutas, y postres.
La expresión "leche fermentada" o "yogur" se puede entender como destacable según las normas oficiales como Codex Alimentatius (principalmente col. 12 y norma Codex Stan 1-11 (a) 1975) o decreto francés nº 88-1203 con fecha del 31 de diciembre, 1988.
En una forma de realización ventajosa de la presente invención, la composición se destina a mejorar la calidad de la piel actuado como barrera de la piel o como barrera de hidratación de la piel.
Permite mejorar la hidratación de la piel. Más particularmente, la composición se destina para la disminución de la pérdida de agua de la piel y para la mejora de la calidad de la piel.
La pérdida de agua se debe a la evaporación que se calcula en la determinación del gradiente de presión de la capa de vapor de agua que envuelve la piel. Más específicamente, esta técnica permite la evaluación del efecto barrera del estrato córneo y la película hidrolipídica.
Las mediciones de la pérdida Transepidérmica de agua (TEWL) se llevará a cabo con SERVOMED EP2® "EVAPORIMETER". Un flujo de vapor de agua pasa a través de una sonda realizada por dos captores. La diferencia de la presión parcial se mide entre los dos captores. Este valor corresponde a la velocidad de evaporación de la sustancia volátil (en este caso, agua). Se llevará a cabo una medición por zona y los resultados de las mediciones de TEWL se realizará en g/m^{2}/h. Esta metodología es bien conocida por los expertos en la materia.
La presente invención se refiere también a un procedimiento para la preparación de una composición que comprende, como sustancia activa, una mezcla de por lo menos un ácido graso poliinsaturado que es diferente del ácido graso poliinsaturado derivado de la leche, polifenoles, proteínas de la leche y las bacterias lácticas y que presenta un contenido de agua de por lo menos 50% en peso, y en la que la concentración de los polifenoles representa aproximadamente de 0,13 a 18,7% del peso total de la sustancia activa, y en la que dicho ácido graso poliinsaturado presenta una biodisponibilidad mejorada comparada con el del ácido graso poliinsaturado solo,
dicho procedimiento que comprende la adición del extracto vegetal que contiene unos polifenoles a una mezcla homogeneizada fermentada de un aceite vegetal que contiene ácidos grasos poliinsaturados o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea que contiene proteínas de la leche.
La expresión "ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente" describe los ácidos grasos poliinsaturados producidos por un procedimiento enzimático.
En una forma de realización ventajosa de la presente invención, el procedimiento comprende la preparación de una mezcla homogeneizada fermentada de un aceite vegetal que contiene ácidos grasos poliinsaturados o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea que contiene proteínas de la leche mediante:
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una etapa de incorporación de un aceite vegetal o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente en una sustancia láctea para obtener una mezcla de un aceite vegetal o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea;
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una etapa de homogeneización de la mezcla mencionada anteriormente para obtener una mezcla de un aceite vegetal o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea;
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una etapa de fermentación de la mezcla mencionada anteriormente para obtener una mezcla homogeneizada de un aceite vegetal o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea.
La presente invención se refiere también a una composición como la que se obtiene por el procedimiento descrito anteriormente.
La presente invención se refiere también a un procedimiento para la preparación de una composición como la que se ha descrito anteriormente, dicho procedimiento que comprende la adición de un extracto vegetal que contiene unos polifenoles a una mezcla homogeneizada fermentada de un aceite vegetal que contiene unos ácidos grasos poliinsaturados o unos ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea que contiene unas proteínas de la leche.
La presente invención se refiere también a un procedimiento para la preparación de una composición como la que se ha descrito anteriormente, dicho procedimiento que comprende la adición de un extracto vegetal que contiene unos polifenoles a una mezcla homogeneizada fermentada de un aceite vegetal que contiene unos ácidos grasos poliinsaturados o unos ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea que contiene unas proteínas de la leche, y dicho procedimiento que comprende la preparación de una mezcla homogeneizada fermentada de un aceite vegetal que contiene unos ácidos grasos poliinsaturados o unos ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea que contiene unas proteínas de la leche mediante:
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una etapa de incorporación de un aceite vegetal o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente en una sustancia láctea para obtener una mezcla de un aceite vegetal o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea;
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una etapa de homogeneización de la mezcla mencionada anteriormente para obtener una mezcla homogeneizada de un aceite vegetal o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea;
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una etapa de fermentación de la mezcla mencionada anteriormente para obtener una mezcla homogeneizada fermentada de un aceite vegetal o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea.
En una forma de realización ventajosa, en el procedimiento de la presente invención, la sustancia láctea se prepara mediante la mezcla de leche desnatada con leche en polvo o leche concentrada, seguida de un tratamiento que se destina a eliminar los contaminantes bacteriológicos, particularmente un tratamiento con calor de la sustancia láctea, en particular por calentamiento a una temperatura de 95ºC durante 4-8 minutos.
En otra forma de realización de la presente invención, el procedimiento comprende:
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la preparación de una mezcla homogeneizada fermentada de un aceite vegetal que contiene unos ácidos grasos poliinsaturados o unos ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea elaborada que contiene unas proteínas de la leche mediante:
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una etapa de incorporación en línea de un aceite vegetal o unos ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente en una sustancia láctea, dicha sustancia láctea se prepara mediante la mezcla de leche desnatada con leche en polvo o leche concentrada, seguida de un tratamiento que se destina a eliminar los contaminantes bacteriológicos, particularmente un tratamiento con calor de la sustancia láctea, en particular por calentamiento a una temperatura de 95ºC durante 4-8 minutos, para obtener una mezcla de aceite vegetal y una sustancia láctea;
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una etapa de homogeneización a 50-300 bares a una temperatura 40-95ºC de la mezcla mencionada anteriormente para obtener una mezcla homogeneizada de un aceite vegetal o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea;
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una etapa de fermentación de la mezcla homogeneizada mencionada anteriormente, dicha fermentación comprende la incorporación de fermentos a una temperatura a 30-45ºC durante 5-10 horas, para obtener una mezcla de un aceite vegetal o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea;
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la adición mediante la preparación de una preparación de frutas o papilla de azúcar o agua a base de una infusión de té de un extracto vegetal que contiene polifenoles a la mezcla homogeneizada fermentada de un aceite vegetal o unos ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea que contiene unas proteínas de la leche.
La presente invención se refiere también a una composición como la que se ha descrito anteriormente, que comprende una emulsión que contiene ácidos grasos poliinsaturados que son diferentes de los ácidos grasos que derivan de la leche o proteínas de la leche, en los que el 90% de las partículas grasas de esta emulsión tienen un diámetro máximo de aproximadamente 1,15 \mum, 50% de partículas grasas de esta emulsión tienen un diámetro máximo de
0,5 \mum y un 10% de partículas grasas de esta emulsión tiene un diámetro máximo de 0,21 \mum.
El término "emulsión" describe una mezcla de dos sustancias líquidas inmiscibles (no mezclables). Una sustancia (la fase dispersa) se dispersa en la otra (fase continua). Las emulsiones son inestables y por ello no se forman espontáneamente. La entrada de energía a través los procedimientos de batido, la agitación, los homogeneizadores o de vaporización es necesaria para formar la emulsión. A lo largo del tiempo, la emulsión tiende a revertir al estado estable de la parte líquida separada de la parte acuosa. Las sustancias activas de la superficie (surfactantes) pueden incrementar la estabilidad cinética.
En la invención, el término "partículas grasas" describe la grasa dispersa en la fase acuosa que rodea las proteínas de la leche. Las partículas grasas contienen PUFA y todos los otros ácidos grasos.
La presente invención se refiere también a una composición como la que se ha descrito anteriormente, que comprende una emulsión que contiene unos ácidos grasos poliinsaturados que son diferentes de los ácidos grasos que derivan de la leche o proteínas de la leche en los que la mayoría de las partículas grasas de los ácidos grasos poliinsaturados presentan un diámetro desde aproximadamente 0,21 \mum hasta aproximadamente 3 \mum, particularmente desde aproximadamente 0,25 \mum hasta aproximadamente 3 \mum.
El diámetro se puede expresar utilizando la teoría de Mie-Lorenz. El "diámetro Mie" o D (4,3) es el diámetro medio del volumen. Es la media de los diámetros de las esferas que presentan el mismo volumen que las partículas reales de la composición de la invención. Esta media es análoga a los momentos de inercia e introduce otro término lineal en el diámetro (es decir área superficial presenta una dependencia 3D o volumen o masa presenta una dependencia D4 como se describe a continuación): D (4,3): (1^{4} + 2^{4} + 3^{4}) / (1^{3} + 2^{3} + 3^{3}) = 2,72.
En la presente invención, la composición como se ha descrito anteriormente, comprende una emulsión que contiene unos ácidos grasos poliinsaturados que son diferentes de los ácidos grasos que derivan de la leche y proteínas de la leche en la que las partículas grasas presentan un diámetro Mie de 0,61 \mum.
La composición de la invención puede contener favorablemente vitamina E a una concentración desde aproximadamente 1,5 hasta aproximadamente 600 mg/100 g.
La vitamina E es el antioxidante unido a membrana liposoluble más importante en el cuerpo y la evidencia experimental sugiere que la vitamina E oral y tópica tiene unas propiedades fotoprotectoras y de barrera estabilizadora de la piel (Packer et al., "Molecular aspects of alpha-tocotrienol antioxidant action and cell signaling". J. Nutr 2001: 11: 369S-373S).
La composición de la invención es una emulsión aceite-en -agua estable, que comprende ácidos grasos poliinsaturados y proteínas de la leche en una fase acuosa continua que contiene otras sustancias activas como los fermentos y té verde.
La recomendación diaria de la ingesta de esta composición es de 1 ó 2 ingesta en función de la selección de las concentraciones de los ingredientes activos.
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Figuras
Figura 1: La Figura 1 representa la concentración media en quilomicrones de GLA durante 6 horas después del consumo de productos lácteos elaborados que contiene aceite de borraja o aceite de borraja sola. Las ordenadas corresponden a la concentración media en quilomicrones (en \mug/ml) y las abscisas corresponden al tiempo (en horas). La línea de rombos (\blacklozenge) corresponde al producto lácteo 1 (GLA 300 mg). La línea de cuadrados (\blacksquare) corresponde al producto lácteo 2 (GLA 150 mg). La línea de triángulos (\ding{115}) corresponde al aceite de borraja solo.
Figura 2: La Figura 2 representa la concentración plasmática de catequinas durante 6 horas después del consumo de productos lácteos elaborados que contienen extracto de té verde o extracto de té verde solo disuelto en 125 ml de agua. Las ordenadas corresponden a la concentración plasmática de las catequinas (en umol/l) y las abscisas corresponden al tiempo (en horas). La línea de rombos (\blacklozenge) corresponde al producto lácteo 1 (catequinas 45 mg + GLA 300 mg en una matriz de leche fermentada). La línea de triángulos (\ding{115}) corresponde extracto de té verde solo, producto 3 (ver tabla de la página 25).
Figura 3: La Figura 3 representa la concentración de GLA en lípidos de hematíes (RBCL) durante 24 días después del consumo de un producto A que corresponde a un producto lácteo que contiene prebióticos, 30 mg de GLA, 90 mg de catequinas y 4 mg de vitamina E o después de consumir un producto control (leche acidificada). Las ordenadas corresponden a la concentración plasmática de GLA en los hematíes (en \mugl/ml) y las abscisas corresponden al tiempo (en semanas). La línea de cuadrados (\blacksquare) corresponde al producto lácteo A. La línea de rombos (\blacklozenge) corresponde al producto control.
Figura 4: La Figura 4 representa la pérdida transepidérmica de agua (TEWL) en población a tratar (población ITT (Intend. To Treat population)) de los dos grupos en cada punto de tiempo (6, 12, 18 y 24 semanas). Las ordenadas corresponden a los valores de TEWL (en g/m^{2}/h) y las abscisas corresponden al tiempo (en semanas). La línea de triángulos (\ding{115}) corresponde al producto a ensayar. La línea de cuadrados (\blacksquare) corresponde al producto control.
Figura 5: La Figura 5 representa el porcentaje de incremento de los valores TEWL en población ITT de dos grupos en cada punto de tiempo (6, 12, 18 y 24 semanas). Las ordenadas corresponden al porcentaje de incremento de los valores de TEWL (% mejora de la función de barrera) comparada con la línea base y las abscisas corresponden al tiempo de consumo (en semanas).
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Figura 6: La Figura 6 representa la pérdida transepidérmica de agua (TEWL) en el subgrupo IMC < 25 (IMC significa Índice de masa corporal en peso (en kg)/altura^{2} (en cm)) de los dos grupos en cada punto de tiempo (6, 12, 18 y 24 semanas). Las ordenadas corresponden a los valores de TEWL (en g/m^{2}/h) y las abscisas corresponden al tiempo (en semanas). La línea de triángulos (\ding{115}) corresponde al producto que se debe ensayar. La línea de cuadrados (\blacksquare) corresponde al producto control.
Figura 7: La Figura 7 representa el porcentaje de incremento de los valores TEWL en el subgrupo IMC < 25 de dos grupos en cada punto de tiempo (6, 12, 18 y 24 semanas). Las ordenadas corresponden al porcentaje de incremento de los valores de TEWL (% de mejora de la función de barrera) comparada con la línea base y las abscisas corresponden al tiempo de consumo (en semanas).
Ejemplos
Ejemplo 1
Especificación de los ingredientes activos Especificación del aceite de borraja
La planta de borraja es una planta relativamente grande con una forma de estrella, unas flores azules brillantes se encuentra en estado salvaje en casi todo el mundo (sinónimo flor estrella). Crece en el sur de Europa y en la Europa central y se cultiva en otras partes del mundo. Las partes comestibles de la planta de borraja son las hojas, las flores y las semillas. Es una hierba bien conocida que ha sido reconocida y utilizada durante más de 1500 años en alimentación. El aceite de borraja se obtiene de las semillas de borago officinalis. Este aceite ya se había utilizado a través de Europa como alimento, ingrediente alimenticio (para condimento y ensaladas, como ingrediente alimenticio en fórmulas infantiles) y también como ingrediente en suplementos alimenticios.
El aceite de borraja se obtiene por presión mecánica de una forma muy similar a los procedimientos establecidos para la manufacturación de aceite vegetal comestible. Está completamente refinado (neutralizado, lavado, desodorizado) utilizando carbón activado. Es un procedimiento sin solvente y no se somete a las temperaturas superiores a 190ºC en cualquier etapa del procesamiento.
El aceite de borraja es un ácido gamma-linolénico potente o una fuente de GLA, que presenta el contenido en GLA más elevado de cualquier semilla disponible. También es una fuente significativa del ácido linolénico esencial (C18:2 \omega-6).
2
Especificación del extracto de té verde
El extracto de té verde se prepara a partir de las hojas de té verde de gran calidad de las plantas Camellia sinensis. El procedimiento de preparación corresponde a un procedimiento regular utilizado para los extractos de té utilizados anteriormente como extractos aromatizantes en Europa (un ejemplo seria el té listo para tomar). Se produce mediante la infusión de las hojas en agua. La solución extraída se filtra, se concentra, se purifica, descafeína utilizado un solvente que se puede utilizar en alimentación autorizado en Europa (por ejemplo, acetato de etilo, Directriz del consejo 88/344/CEE de 13 de Junio de 1988) y se seca por vaporización.
El extracto de té verde está compuesto principalmente por polifenoles y especialmente por catequinas que pertenecen a la clase flavan-3-ol de los flavonoides.
El contenido de catequina representa por lo menos el 80% del extracto.
De entre las catequinas, los tres derivados siguientes son los componentes principales: (-)galato de epigalocatequina (EGCg); (-)-epigalocatequina (EGC) y (-)-epicatequina (EC) y también contiene otras catequinas como
(+)-catequina©, (+)-galocatequina (GC), galato de epicatequina (ECg), galato de gallocatequina (GCg).
El extracto de té verde utilizado en los productos lácteos preparados corresponde a las especificaciones siguientes:
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3 
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Ejemplo 2
Caracterización de la emulsión (tamaño y estructura)
Para la medición de la emulsión, el equipo utilizado es el MASTERSIZER S (MSS) (Malvern). La granulometría se realizó en las emulsiones después de la homogeneización y el tratamiento de calor. La granulometría se realizó por dilución con SDS 1%. Este ensayo técnico permite la evaluación del diámetro medio de las partículas mediante la distribución en volumen por diámetro de partículas.
El microscopio de transmisión electrónica (TEM) permite el análisis de la estructura de la emulsión y la observación de las partículas grasas. Esta metodología es bien conocida por los expertos.
El diámetro de la mayoría de las partículas grasas de los ácidos grasos poliinsaturados es desde 250 a 3000 nm, con dos poblaciones principales de partículas con un diámetro desde 500 a 600 nm y un diámetro desde 1000 a 3000 nm. Las interacciones de las lipoproteínas son fuertes; las partículas grasas están relacionadas con las proteínas de la leche y estas proteínas rodean las partículas grasas.
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Ejemplo 3
Estudio de la biodisponibilidad de GLA (ácido gamma-linoleico) que se encuentra en el ácido de borraja y las catequinas del té verde
El estudio se concibió para evaluar el producto lácteo fermentado, la biodisponibilidad de GLA que se encuentra en el aceite de borraja y en las catequinas del té verde, mediante la medición de sus niveles en sangre plasmática después de una dosis de un bolo único. Las concentraciones plasmáticas de GLA y las catequinas se siguen a diferentes tiempos después de la ingesta.
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Productos ensayados
Se desarrollaron y se ensayaron 3 tipos de productos:
-
Producto 1: producto lácteo (plato 1) que contiene 3 cepas de probióticos, GLA (300 mg por plato), catequinas (45 mg por plato).
-
Producto 2: producto lácteo (plato 1) que contiene 3 cepas de probióticos, GLA (150 mg por plato), catequinas (45 mg por plato).
Los productos 1 y 2 se prepararon según el procedimiento de preparación descrito en la invención. No son muy ácidos (pH 4,52), son cremosos y suaves en la boca. Los dos productos se aromatizan con una preparación de frutas.
-
Producto 3 (compuestos solo): GLA (300 mg), catequinas (45 mg).
El aceite de borraja se administró directamente a los sujetos en forma de aceite, mientras que el extracto de té verde se administra disuelto en 125 ml de agua.
Diseño general del estudio
Este estudio es un estudio monocéntrico, aleatorio, abierto, cruzado realizado con 12 mujeres voluntarias sanas. La edad media de la población es de 30,8 años y la media del índice de masa corporal (IMC) es de 21,4. La duración total del estudio es aproximadamente 2 a 3 semanas para cada sujeto.
Cada sujeto tiene 4 visitas de aproximadamente 24 horas cada una como se presenta en la fase de planificación siguiente:
-
Una visita de inclusión (V1) una semana antes de la primera visita de evaluación,
-
Y tres visitas de evaluación: la primera visita a D0 (V2), la segunda a D+4 (V3), la tercera a D+8 (V4).
Cada visita incluye un examen clínico. Cada una de estas visitas, el sujeto da una muestra de sangre para medir la GLA y los niveles de catequinas y para seguir la cinética de la absorción.
Después de la visita de inclusión (V1), la primera semana se dedica a poner en práctica las recomendaciones dietéticas centrada en reducir el consumo de alimentos ricos en los compuestos estudiados; para limitar cualquier interferencia con los compuestos ensayados. Para cada sujeto las tres visitas de evaluación se separaron por un mínimo de 4 días y un máximo de 7 días para tener un periodo de descanso-limpieza.
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Diseño de las visitas de evaluación
Durante cada visita (V2, V3, V4), los sujetos consumen uno de los productos de forma aleatoria, evidentemente al final de la V4, los sujetos consumen los 3 productos ensayados (producto 1, 2 y 3 descritos anteriormente).
Cada visita tuvo lugar como se describe en el esquema siguiente:
El día antes de la visita de ensayo, después de su llegada al centro al final de la tarde, los sujetos consumen la cena que se les ofrece, en un tiempo máximo de 30 minutos. La composición de la cena es idéntica para todos los sujetos. La cena se toma a aproximadamente las 20:00 h.
El día de la visita de ensayo, se sirve el desayuno a los voluntarios a aproximadamente las 8:00 h, y se consume en un tiempo máximo de 20 minutos. Cuatro horas y 30 minutos después, se sirve a los voluntarios el almuerzo de ensayo. Debe ingerirse en menos de 25 minutos. Veinticinco minutos después del inicio del almuerzo, los voluntarios ingieren el producto ensayo, en menos de un minuto. El tiempo de inicio de la ingesta del producto es T0 para la cinética. Al final de la cinética, se ofrece una cena a los sujetos.
Se extraen 7 muestras de sangre en las 6 horas posteriores a la ingesta del producto según el plan anterior. Los seis tiempos de muestreo (T0, T1h, T2h, T3h, T4h, T6h) se utilizan para determinar la cinética plasmática tanto de GLA como de las catequinas del té verde. Basado en la diferencia de absorción entre los ingredientes, disponemos de tiempos específicos:
-
Un tiempo (T0, 5h) se utiliza solo para determinar la biodisponibiliad plasmática de las catequinas,
-
Un tiempo (T5h) se utiliza sólo para determinar la biodisponibiliad plasmática de GLA.
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Análisis de plasma
Las catequinas se analizaron directamente en el plasma mientras que las mediciones de GLA se realizaron a partir de una fracción de quilomicrón aislada por ultracentrifugación. Los niveles plasmáticos de GLA y se evaluaron los niveles plasmáticos de las 3 catequinas principales de té verde (epicatequina (EC), epigalocatequina (EGC) y galato de epigalocatequina (EGCg)).
La extracción de lípidos de los quilomicrones se base en el protocolo de Moilanen et al., (Moilanen T., Nikkari T., The effect of storage on the fatty acid composition of human serum. Clin Chim Acta. 1981; 114:111-6). Las mediciones se realizan mediante cromatografía de gases. La identificación de GLA se realizó haciendo referencia a las normas internas. Los resultados se expresan en \mug/L.
Las concentraciones plasmáticas de EC, EGC y EGCg se determinaron mediante HPLA como se describe en Lee et al., (Lee MJ, Prabhu S, Meng X, Li C, Yang CS. An improved method for the determination of green and black tea polyphenols in biomatrices by high-performance liquid chromatography with colorimetric array detection. Anal Biochem. 2000; 279: 164-9) y haciendo referencia a las normas internas. Los resultados se expresan en \mumol/l.
Análisis estadístico
Los parámetros analizados para supervisar la biodisponibiliad de GLA y las catequinas son:
-
El "área bajo la curva" (AUC) que proporciona información de la cinética de la biodisponibilidad (\mug/mlxh)
-
La concentración máxima durante la cinética (Cmáx) (\mug/ml)
-
Tiempo en cual la concentración es máxima (Tmáx) (h)
La significancia estadística se determina utilizando el ensayo T de Student. El análisis se realizó en la población PP (Por Protocolo, n=11) porque uno de los 12 incluidos no completó todas las visitas.
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Resultados de la biodisponibilidad de GLA
Se realizaron dos vías de presentación y análisis de los resultados:
a)
AUC, Cmáx y Tmáx: el área bajo la curva de la cinética de la absorción proporciona información acerca de la biodisponibilidad total de los ingredientes mientras que Cmáx proporciona la concentración máxima y Tmáx describe el tiempo en el que la concentración del ingrediente es máxima. La tabla siguiente resume la media entre AUC, Cmáx y Tmáx para cada producto.
b)
La cinética de GLA a las 6 horas de consumo de los 11 sujetos.
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a) Los análisis de AUC, Cmáx y Tmáx se ilustran en la tabla siguiente
4
\may{1} Producto 1 frente 3
El análisis estadístico muestra unas diferencias importantes entre el producto 1 y 3 (misma cantidad de GLA, ya sea como producto lácteo fermentado (1) como solo aceite (3)). AUC es significativamente superior en el producto 1 que en el producto 3, mientras que Cmáx no es significativamente diferente. Tmáx se retrasa significativamente con el producto 3 lo que indica una absorción más lenta.
\may{1} Producto 1 frente 2
Los resultados indican que la cantidad de GLA absorbida es aproximadamente el doble del producto 1 comparado con el producto 2. Esto refleja tanto AUC como Cmáx, que son significativamente más bajas en el producto 2.
\may{1} Producto 2 frente 3
El análisis estadístico realizado después de estas observaciones ha demostrado que no hay diferencia significativa entre el producto 2 y 3, aunque la cantidad ingerida de GLA es dos veces inferior en el producto 2 que en el producto 3. Sólo Tmáx se retrasa significativamente en el producto 3 comparada con el producto 2.
b) Análisis de la cinética de GLA a las 6 horas
Se realiza un análisis secundario que compara en cada punto de tiempo las concentraciones de GLA en plasma después de la ingesta de los diferentes productos. La Figura 1 resume los datos de la cinética de cada sujeto.
El análisis estadístico muestra unas diferencias importantes entre los productos 1 y 2, desde el T2h hasta T3h.
Se muestra una diferencia entre el producto 1 y 3 desde el T1h. Se mantiene así hasta T2h. AUC es significativamente superior en el producto 1 más que el 3, mientras que Cmáx no es significativamente diferente. Tmáx se retrasa significativamente con el producto 3. La cantidad de GLA ingerida es la misma para ambos productos: estos resultados puede reflejar una mejor biodisponibilidad cuando GLA se ingiere en un producto lácteo fermentado más que cuando se ingiere solo.
No hay diferencia entre el producto 2 y 3, aunque la cantidad ingerida de GLA es dos veces inferior con 2 más que con 3. Esto confirma los hallazgos anteriores.
c) Análisis cinéticos de GLA en los lípidos de los hematíes
La concentración de GLA en los lípidos de los hematíes (RBCL) se ensaya durante el estudio para seguir el consumo del producto A que corresponde a un producto lácteo fermentado que contiene probióticos, 30 mg de GLA, 90 mg de catequinas y 4 mg de vitamina E. Los resultados demuestran que GLA acumulado en los RCBL después del consumo de producto ensayado A. Un aumento de GLA en las RBCL se muestra en el grupo ensayado (producto A) frente al grupo control (producto control que comprende aceite acidificado sin GLA, catequinas, vitamina E y probióticos) como en las 12 semanas (p = 0,0047) y se prolongó durante 24 semanas (p = 0,001). Los resultados se presentan en la Figura 3. Se obtienen unos resultados similares para la población IMC < 25, con p = 0,0003 a las 12 semanas y p = 0,0005 a las 24 semanas después del consumo del producto (no se muestra).
La acumulación de GLA en los RBCL es un buen medio para el suministro de GLA al los tejidos del cuerpo, en particular la piel.
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Resultados para la biodisponibildiad de las catequinas
Los análisis AUC, Cmáx y Tmáx se ilustran en la tabla siguiente
5
Las 3 catequinas principales se miden en plasma en varios puntos temporales después de la ingesta. Las concentraciones T0, T2h, T3h y T6h se analizan en el primer punto de tiempo. La Figura 2 resume los datos. La pequeña cantidad de catequinas consumida (45 mg de catequinas totales) conduce a unas concentraciones plasmáticas bajas (0,02 - 0,20 \mumol/l) de las catequinas individuales (EC, EGC, EGCG) sea cual sea el producto consumido (catequina sola o en el producto fermentado). Estas concentraciones se encuentran en el umbral de cuantificación por HPLC. La determinación de la concentración de catequinas totales no muestra ningún cambio importante. Los otros puntos de tiempo no se analizan.
Conclusión
Los parámetros farmacocinéticos en quilomicrones muestran que GLA del aceite de borraja, a 150 y 300 mg/bote, en los productos lácteos elaborados fermentados ensayados que se encuentran en el plasma.
Se observaron unas concentraciones significativamente diferentes en el AUC y Cmáx para GLA en quilomicrones después del consumo de los dos productos lácteos elaborados. La cantidad absorbida (por ejemplo AUC y Cmáx.) es dos veces superior al producto lácteo con 300 mg de GLA que el producto lácteo con 150 mg de GLA. El efecto dosis respuesta se halla para estas concentraciones de GLA.
La cinética de absorción de GLA es diferente en los productos lácteos elaborados del aceite de borraja solo (Tmáx, más corta en los productos lácteos elaborados). El AUC después del consumo del producto lácteo con 300 mg de GLA es significativamente superior al aceite de borraja solo que contiene sólo 300 mg de GLA. Las cantidades de GLA encontradas en el plasma (por ejemplo AUC y Cmáx) después de la ingesta del producto lácteo (con 150 mg de GLA) o la ingesta de aceite de borraja (300 mg de GLA) son similares. La incorporación del aceite de borraja en la sustancia láctea conduce a un efecto positivo en la absorción de GLA mediante el aumento de los niveles de GLA en la fracción de lipoproteína de quilomicrones en el plasma. Esto puede explicar que las concentraciones más elevadas de GLA pueden alcanzar la piel para ejercer su efecto beneficioso en la piel.
Los resultados de catequina muestran que el consumo de 45 mg de catequina del extracto de té verde ya sea del producto lácteo fermentado o solo conduce a unos aumentos pequeños de las concentraciones plasmáticas de algunas catequinas individuales. No se detectó diferencia en la cinética de absorción de catequinas después del consumo de los dos productos lácteos elaborados o el extracto de té verde solo. Las concentraciones plasmáticas bajas parecen estar en concordancia con los datos de la bibliografía. Además, es conocido que los metabolitos de algunas catequinas pueden actuar en la piel pero su naturaleza/función precisa no está documentado en la bibliografía. Basándose en esta afirmación, las catequinas se mantienen en el mismo nivel que muestro producto postulando un efecto adicional con otros ingredientes.
Ejemplo 4
Estudio clínico
Este estudio es de un solo centro, aleatorizado, doble ciego, estudio paralelo en mujeres voluntarias sanas con piel seca y sensible. Las mujeres se seleccionan porque son la población diana y se ensayaron virtualmente todos los productos cosméticos en las mujeres. Se dividieron 72 sujetos en 2 grupos equilibrados de 36 sujetos con una edad media de 29,4 \pm 7,9 y un IMC medio de 22,43 \pm 2,8. Los sujetos reciben las recomendaciones dietéticas y no se utilizan cosméticos antes del inicio del estudio y durante todo el estudio.
Un grupo recibió el producto del ensayo que comprende 150 mg de GLA, 47 mg de catequinas y 2 mg de vitamina E, mezclados en una matriz de un producto lácteo que contiene probiótico (Lactobacillus casei, bulgaricus y Streptococcus thermophilus) (grupo ensayo) y los otros reciben el producto control que comprende leche acidificada sin GLA; catequinas, vitamina E y probióticos (grupo control). El estudio se divide en dos partes, la fase de selección (4 semanas) y la fase de consumo (24 semanas). Los sujetos asisten a 4 visitas de evaluación 6 semanas separadas durante el periodo de consumo del producto (consumo del producto (ensayo o control) a dos botes/día). Un periodo de seis meses de ensayo permitió la comparación del efecto del producto durante un periodo extenso de tiempo y permite una evaluación de su efecto en diferentes estaciones del año.
El producto ensayado se compara con un producto control sin probiótico, el aceite de borraja y las catequinas para permitir la comparación de los efectos de estos ingredientes en la funcionalidad de la piel. La función de barrea de la piel se evalúa mediante la pérdida transepidérmica de agua (TEWL) que es un procedimiento aceptado para la medición de la función de barrera del estrato córneo. La TEWL se mide en el antebrazo interno con un Servomed EP2® "EVAPORIMETER". El estudio se inicia en otoño hasta la primavera para comparar los efectos del producto sobre la funcionalidad de la piel a diferentes tiempos del año, se sabe que la función de barrera de la piel se deteriora en los meses de invierno. El análisis de los datos se realizó en todos los sujetos y también en subgrupos diferentes que se han definido al inicio del estudio y se basan en el criterio de inclusión (IMC y nivel de hidratación).
Se analizan los datos de dos formas:
-
Comparación entre los dos grupos en los puntos de tiempo (6, 12, 18 y 24 meses). Los inventores analizan con un análisis de co-varianza de los cambios crudos;
-
Comparación de la "evaluación" del efecto durante el tiempo, este análisis más global en la cinética de la respuesta permite tener en cuenta la diferencia entre los 2 productos y la variación debida al entorno, utilizan un modelo mixto en las mediciones repetitivas de los 2 periodos de tiempo: el estudio total (24 semanas) y hasta 12 semanas (criterio principal del estudio).
Estos análisis tienen en cuenta los niveles de referencia en cada caso.
Resultados en la población ITT
Se analizó la población ITT (población que se va a tratar, n = 67). Como se puede observar en la Figura 4, existe una mejora en la función de barrera relativa al control (TEWL inferior en el grupo de producto) en todos los puntos de tiempo después del consumo del producto. El análisis de evolución a lo largo del tiempo desvela que el producto ensayado reduce significativamente el TEWL durante todo el estudio (24 semanas de consumo (p = 0,026)) pero también en la fase hasta la semana 12 de consumo (p = 0,036). Además, en todo el periodo del estudio (24 semanas), la diferencia media ajustada en los valores de TEWL entre los grupos es 6,08 g/m^{2}/h.
Existe una variación natural en la función de barrera (es decir un ligero deterioro en invierno refleja un valor aumentado de TEWL) pero el producto activo muestra una tendencia de superioridad sobre el control a las 6 semanas y a las 18 semanas las diferencias son estadísticamente significativas.
Si comparamos el porcentaje relativo del incremento de los valores de TEWL en los 2 grupos (ver Figura 5), podemos destacar que la mayor diferencia se observa a las 18 semanas con 19,3% entre los dos grupos desde el valor de referencia.
De media, durante el periodo del estudio, la diferencia en el TEWL entre los 2 grupos es 13,25%. Esto quiere decir que el producto retiene aproximadamente 14% más que el control.
Resultados el subgrupo IMC < 25
La clasificación del IMC proporciona unos resultados interesantes. El análisis en el subgrupo "IMC < 25" (n = 53) revelan un efecto superior del producto.
Cuando se compara la evolución de los 2 grupos durante el estudio, se apreció que existe una diferencia significativa en el producto durante el periodo hasta 24 semanas (p = 0,005) (ver Figura 6).
En esta población también, existe una función de barrera de la piel defectuosa a cause del invierno (reflejado en los valores incrementados de TEWL) pero el producto muestra una superioridad significativa al control a lo largo de todo el estudio (p = 0,005) para evitar una pérdida excesiva de agua.
Además, durante todo el periodo del estudio (24 semanas), la diferencia media en los valores TEWL entre los grupos es 0,95 g/m^{2}/h.
Cuando se compara el porcentaje de aumento de TEWL entre los 2 grupos (ver Figura 7), muestran 15,7% y 17,5% de mejora en la función de barrera en referencia al control respectivamente a las 6 semanas de consumo y 18 semanas.
De media, durante el periodo del estudio, la diferencia en el TEWL entre los 2 grupos es 14,9%. Esto quiere decir que el producto retiene aproximadamente 15% más que el control.
Conclusión
Haciendo referencia al control, la función de barrera de la piel se mejora significativamente después del consumo de una composición que comprende, una sustancia activa, una mezcla de por lo menos un ácido graso poliinsaturado, que es diferente de los ácidos grasos poliinsaturados derivado de la leche, polifenoles, proteínas de la leche y bacterias lácticas, y dicha composición que presenta un contenido de agua de por lo menos 50% en peso. La piel puede resistir más el impacto del medio ambiente sobre la función de barrera presumiblemente debido a los cambios de la composición de estrato córneo. El refuerzo de la función de barrera se debe probablemente a los efectos combinados de GLA, catequinas, probióticos y opcionalmente vitamina E en la diferenciación epidérmica.

Claims (26)

1. Composición que comprende, como sustancia activa, una mezcla de por lo menos un ácido gamma-linolénico, polifenoles, proteínas de la leche y bacterias lácticas, y presentando dicha composición un contenido en agua de por lo menos 50% en peso, y en el que dicho ácido gamma-linolénico presenta una biodisponibilidad incrementada al ser ingerido, comparada con la del ácido gamma-linolénico solo.
2. Composición que comprende, como sustancia activa, una mezcla de por lo menos un ácido graso poliinsaturado diferente del ácido graso poliinsaturado derivado de la leche, polifenoles, proteínas de la leche y bacterias lácticas, y presentando dicha composición un contenido en agua de por lo menos 50% en peso, y en la que la concentración de polifenoles representa de 0,13% a 18,7%, particularmente de 0,15% a 15%, y más particularmente de 0,16% a 13% del peso total de la sustancia activa, y en la que dicho ácido graso poliinsaturado presenta una biodisponibilidad incrementada al ser ingerido comparada con la del ácido graso poliinsaturado solo.
3. Composición según la reivindicación 1 ó 2, en la que el ácido graso poliinsaturado es contenido en uno por lo menos de los aceites vegetales siguientes: aceite de borraja, aceite de prímula, aceite de grosella negra, aceite de camelina, aceite de semilla de cáñamo, aceite de semilla de kiwi, aceite de lino, aceite de colza, aceite de microalgas o se produce mediante un procedimiento enzimático.
4. Composición según la reivindicación 2 ó 3, en la que el ácido graso poliinsaturado se selecciona de entre ácidos linolénicos, sus derivados y sus precursores, y es en particular el ácido gamma-linolénico.
5. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que los polifenoles están contenidos en un extracto vegetal tal como extracto de té verde, extracto de semilla de uva, extracto de piel de uva, uva, extracto de naranja (roja), extracto de corteza de pino (picnogenol), extracto de vino tinto, extracto de tomate, extracto de gingko biloba, extracto de arándano, extracto de soja, extracto de isoflavonas de soja, arándano, frambuesa, baya de saúco, granada, manzana, sidra, cacao, café verde, mango, tuna, grosella negra, algas marinas, aceituna, canela, jengibre, ginseng, aloe vara, brócoli, hibisco.
6. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que los polifenoles se seleccionan de entre: ácidos fenólicos, tal como ácidos hidroxicinámicos, ácidos hidroxibenzoicos, flavonoides tal como flavonoles, flavonas, isoflavonas, flavanonas, antocianidinas, proantocianidinas; taninos hidrolizables como galotaninos, elagitaninos y en particular catequinas de té, resveratrol, viniferinas, ácido cafeico, ácido gálico, ácido elágico, ácido ferúlico, ácido clorogénico, quercetina, camferol, apigenina, daidzeína, genisteína, naringenina, hesperidina, antocianina, catequina, epicatequina y galocatequina.
7. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en la que los polifenoles se seleccionan de entre las catequinas de té.
8. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que por lo menos 50% (p/p), más particularmente por lo menos 60% (p/p) de las catequinas del té se seleccionan de entre epicatequina, epigalocatequina, galato de epigalocatequina.
9. Composición según una de las reivindicaciones 1 a 8, en la que las proteínas de la leche están contenidas en una por lo menos de las sustancias lácteas siguientes: leche, leche desnatada, leche en polvo, leche desnatada en polvo, nata, concentrado de proteínas de la leche, suero de leche de la leche, concentrado sérico de leche de proteína, y caseinato.
10. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en la que las bacterias lácticas se seleccionan de entre una por lo menos de las bacterias siguientes: Streptococcus thermophilus, Lactobacillus delbrueckii ssp bulgaricus, Lactobacillus casei, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus helveticus, Lactibacillus plantarum, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus kefiranofaciens, Bifidobacterium lactis ssp animalis, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Lactococcus lactis ssp cremoris, Lactococcus lactis ssp lactis y Leuconostoc.
11. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en la que las bacterias lácticas son particularmente Streptococcus thermophilus, Lactobacillus bulgaricus y Lactobacillus casei.
12. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en la que el contenido de agua es desde 70% a 90%, particularmente 75% a 85%, más particularmente 80% en peso de la composición.
13. Composición según una de las reivindicaciones 2 a 12, en la que,
-
los ácidos grasos poliinsaturados representan de 2,3% a 91,5%, particularmente 2,3% a 70% y más particularmente 2,3% a 65% del peso total de la sustancia activa;
-
los polifenoles representan de 0,13% a 18,7%, particularmente 0,15% a 15%, y más particularmente 0,16% a 13% del peso total de la sustancia activa;
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-
las proteínas de la leche representan de 8% a 97,6%, particularmente 15% a 97,6% y más particularmente 30% a 97,4% del peso total de la sustancia activa;
-
las bacterias lácticas están presentes en la sustancia activa en una cantidad de 10^{6} a 10^{10} ufc/mg, particularmente 10^{7} a 10^{9} ufc/mg.
14. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 13, en la que la concentración de ácidos grasos poliinsaturados es desde 0,15% hasta 16,6%, particularmente desde 0,2% hasta 10% y más particularmente desde 0,4% hasta 5% en peso de la composición.
15. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, en la que la concentración de ácido gamma-linolénico es desde 0,02% hasta 1%, particularmente desde 0,04% hasta 0,6% y más particularmente desde 0,1% hasta 0,2% en peso de la composición.
16. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, en la que la concentración de las proteínas de la leche es desde 1,5% hasta 6%, particularmente desde 2,5% hasta 5% en peso de la composición.
17. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 3 a 16, en la que la concentración del aceite vegetal, en particular el aceite de borraja, es desde 0,2% hasta 3% en peso de la composición.
18. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 5 a 17, en la que la concentración del extracto vegetal, en particular el extracto de té verde, es desde 0,01% hasta 1% en peso de la composición.
19. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 3 a 18, que comprende aceite de borraja, extracto de té verde, leche y bacterias lácticas, y presentando dicha composición un contenido en agua de por lo menos 50% en peso, y en la que el ácido graso poliinsaturado contenido en el aceite de borraja presenta una biodisponibilidad aumentada comparada con la del ácido graso poliinsaturado solo.
20. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19, que es un alimento o una bebida o una composición de suplemento para un alimento o una bebida.
21. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20, caracterizada porque el alimento se selecciona de entre un producto lácteo fermentado que contiene por lo menos 50% del producto fermentado derivado de la sustancia láctea, un yogur y un yogur de frutas.
22. Utilización no terapéutica de una composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, para mejorar la calidad de la piel actuando en la función de barrera para la piel o la barrera de hidratación de la piel.
23. Procedimiento para la preparación de una composición que comprende, como sustancia activa, una mezcla de por lo menos un ácido graso poliinsaturado diferente del ácido graso poliinsaturado derivado de la leche, polifenoles, proteínas de la leche y bacterias lácticas y que presenta un contenido de agua de por lo menos 50% en peso; y en el que la concentración de los polifenoles representa de 0,13% a 18,7%, particularmente 0,15% a 15%, y más particularmente de 0,16% a 13% del peso total de la sustancia activa, y en el que dicho ácido graso poliinsaturado presenta una biodisponibilidad mejorada comparada con la del ácido graso poliinsaturado solo,
comprendiendo dicho procedimiento la adición del extracto vegetal que contiene polifenoles a una mezcla homogeneizada fermentada de un aceite vegetal que contiene ácidos grasos poliinsaturados o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea que contiene proteínas de la leche.
24. Procedimiento según la reivindicación 23, que comprende la preparación de una mezcla homogeneizada fermentada de un aceite vegetal que contiene ácidos grasos poliinsaturados o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea que contiene proteínas de la leche mediante:
-
una etapa de incorporación de un aceite vegetal o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente en una sustancia láctea para obtener una mezcla de un aceite vegetal o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea;
-
una etapa de homogeneización de la mezcla mencionada anteriormente para obtener una mezcla homogeneizada de un aceite vegetal o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea;
-
una etapa de fermentación de la mezcla mencionada anteriormente para obtener una mezcla homogeneizada fermentada de un aceite vegetal o ácidos grasos poliinsaturados derivados enzimáticamente y de una sustancia láctea.
25. Composición obtenible mediante el procedimiento según la reivindicación 23 ó 24.
26. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21 ó 25, que comprende vitamina E a una concentración de 1,5 a 600 mg/100 g.
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