ES2592210T3 - Combinaciones de hidroxitirosol para mejorar la función mitocondrial y producción de energía - Google Patents

Combinaciones de hidroxitirosol para mejorar la función mitocondrial y producción de energía Download PDF

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Abstract

Un nutracéutico o composición alimenticia que comprende hidroxitirosol en asociación con cafeína caracterizado por que la dosis es 10 - 200 mg de hidroxitirosol y 50 - 450 mg de cafeína.

Description

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DESCRIPCION
Combinaciones de hidroxitirosol para mejorar la funcion mitocondrial y produccion de ene^a.
Campo de la invencion
Esta invencion se refiere a una composicion que contiene hidroxitirosol ("HT") o un precursor de hidroxitirosol en asociacion con cafema. Estas composiciones mejoran de manera sinergica la propia capacidad del organismo para la generacion de ene^a y/o mejoran la generacion de energfa celular. Tambien se refiere a composiciones alimenticias y nutraceuticas utiles para afecciones caracterizadas por funcionamiento alterado de las mitocondrias y biogenesis, tal como fuerza cardfaca, diversas enfermedades hepaticas, mejoran la relacion musculo/grasa y la resistencia muscular.
Antecedentes de la invencion
Las mitocondrias son organelos en la celula responsables de la produccion de energfa aerobica. La membrana interna de las mitocondrias esta embebida con una cadena respiratoria que contiene los complejos I, II, III, IV y V, que transportan electrones y producen ATP por una serie de reacciones redox, un procedimiento denominado fosforilacion oxidativa. El metabolismo aerobico de la energfa es mas eficaz que la produccion de energfa anaerobica. La produccion de energfa anaerobica implica la conversion de glucosa en lactato (glicolisis) y genera solo 8 Moles de ATP por Mol de glucosa. Durante el metabolismo aerobico de la energfa, la glucosa se oxida completamente (por glicolisis, ciclo de Krebs y la cadena electronica mitocondrial) a CO2 y H2O, al tiempo que da lugar a 38 Moles de ATP/mol de glucosa.
Hay una horquilla metabolica cntica en el camino al final de la glicolisis. En esta horquilla, la glucosa se ha convertido de una molecula de 6 carbonos en dos, moleculas de 3 carbonos denominadas acido piruvico o piruvato. Este piruvato puede ser transportado a las mitocondrias via la enzima piruvato deshidrogenasa o convertido en acido lactico via la enzima lactato deshidrogenasa. La entrada en las mitocondrias expone el piruvato a mas ruptura enzimatica oxidacion, y un alto rendimiento de ATP por glucosa. Este procedimiento en el interior de las mitocondrias requiere por ultimo que actuen moleculas de oxfgeno y es por lo tanto “aerobico”. La conversion en lactato significa un punto muerto temporal en el procedimiento de produccion de energfa y el potencial para la fatiga contractil debido a disminucion del pH celular si continua descontrolada la acumulacion de acido lactico.
Ademas de su funcion conocida de suministrar energfa a una celula, las mitocondrias y sus componentes participan en una serie de distintas actividades celulares. Por ejemplo, las mitocondrias tambien controlan la termogenesis y el procedimiento de muerte celular programada y estan implicadas asf en el proceso de envejecimiento.
Las mitocondrias contienen un alto nivel de oxidantes, puesto que la cadena respiratoria genera especies reactivas, por ejemplo, aniones superoxido, si funciona con eficacia reducida o durante desacoplamiento de energfa. Se generan aniones superoxido como subproductos en varias etapas de la cadena de transporte de electrones, tal como la reduccion de coenzima Q en complejo III, donde se forma un radical libre altamente reactivo como un compuesto intermedio (Q.-). Este compuesto intermedio inestable puede conducir a “fuga” de electrones, cuando los electrones saltan directamente a oxfgeno y forman el anion superoxido, en vez de moverse por la serie normal de reacciones controladas de la cadena de transporte de electrones.
Un antioxidante es una molecular capaz de ralentizar o prevenir la oxidacion de otras moleculas. Los antioxidantes terminan reacciones en cadena de oxidacion por eliminacion de compuestos intermedios de radicales libres e inhiben otras reacciones de oxidacion siendo oxidados ellos mismos. Los agentes reductores tales como tioles o polifenoles ejercen con frecuencia propiedad antioxidante. Antioxidantes conocidos tales como Vitamina A, C y E eliminan radicales libres y protegen el ADN, protemas y lfpidos de dano. Los antioxidantes tambien protegen las mitocondrias de especies de oxfgeno reactivas y radicales libres generados durante la produccion de ATP.
Mientras ha sido aceptado en general en el pasado que la administracion de antioxidantes sena beneficiosa para fomentar la biogenesis de las mitocondrias, no se ha demostrado que este sea el caso. Gomez-Carbera et al. 2.008 Am. J Clin. Nutr. 87 (1): 142-149, demostraron en un estudio clmico aleatorizado de doble ciego, que la administracion oral de 1 g de Vitamina C al dfa daba como resultado en realidad una biogenesis de las mitocondrias disminuida en el musculo esqueletico.
Se ha descrito que el hidroxitirosol en el pasado presentaba efectos cardiovasculares positivos (vease, por ej., Gonzalez-Santiago et al 2.006 Atherosclerosis 188: 35-42 o Mitro et al 2.003 NMCD. Nutritional Metabolism and Cardiovascular Diseases 13 (5): 306) pero estos estan relacionados con los efectos anti-ateroscleroticos de hidroxitirosol y/o su estado como antioxidante.
La patente china CN 101 095 447 A describe un cafe preservante de la salud que se prepara a partir de granos de cafe, judfas mungo, lentejas blancas oreja de Judas, champinones secos (recogidos en invierno), aceitunas, ajo, cebolla, madreselva, diente de leon, higo, convalaria, bayas de goji, Atractylodes Macrocephala, Rhizoma Polygonati, Herba Cistanches y Rafz de Astragalo.
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La patente japonesa JP 2007 119373 A describe un agente de descomposicion del producto de la reaccion de Maillard, contiene extracto de hoja de olivo, pimienta japonesa, curcuma, azafran, menta suave, jengibre, ginseng, hoja de loto, Citrus depressa, fnjoles blancos de bush, Apocynum venetum, kumazasa, balsamina, alcachofa de Jerusalen, hojas de cebada, algas marrones, patata konjak, granos de cafe, grano de uva, manzana, planta parasitaria, Angelica keiskei, catequina, kumquat blando, Aurantii immaturi, cascara de cftrico o naranja seca.
Descripcion detallada de la invencion
Se ha encontrado, de acuerdo con esta invencion, que el hidroxitirosol ("HT") en asociacion con cafema potencia de manera sinergica el metabolismo de la energfa propia del organismo por induccion de biogenesis mitocondrial y puede conducir a una funcion mitocondrial aumentada en los tejidos.
Asf, un aspecto de esta invencion es una composicion nutraceutica o alimenticia que comprende hidroxitirosol en asociacion con cafema caracterizada por que la dosis es 10 - 200 mg de hidroxitirosol y 50 - 450 mg de cafema.
Se describe en este documento un metodo para mantener o aumentar la funcion mitocondrial y la actividad por biogenesis mitocondrial aumentada que comprende la administracion a un mairnfero de una cantidad eficaz de hidroxitirosol en asociacion con al menos uno de los compuestos seleccionados del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o B12 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng y observar los efectos de la funcion mitocondrial.
La biogenesis mitocondrial se refiere a procedimientos de crecimiento, multiplicacion y mantenimiento de la salud de las mitocondrias. La biogenesis mitocondrial es un proceso complejo que implica tanto agentes nucleares como mitocondriales. El ADN mitocondrial codifica un pequeno numero de protemas, que se traducen en los ribosomas mitocondriales. La mayona de estas protemas son subunidades altamente hidrofobas de la cadena respiratoria, que se localizan en la membrana mitocondrial interna. Las protemas nucleares codificadas se traducen en los ribosomas citosolicos y se importan en las mitocondrias. Estas protemas incluyen protemas estructurales, enzimas o subunidades enzimaticas, componentes de la maquinaria de importacion, replicacion, transcripcion y traduccion y chaperonas.
Las celulas tienen que cambiar al metabolismo anaerobico de energfa menos eficaz, una vez que la capacidad para la respiracion aerobica (cadena de electrones) ya no es suficiente. De ah que la biogenesis mitocondrial aumentada mejore la capacidad para el metabolismo aerobico de energfa y asf aumente la capacidad para una produccion eficaz de energfa.
La “biogenesis mitocondrial” como se usa por toda esta memoria descriptiva y las reivindicaciones, incluye todos los procedimientos implicados en el mantenimiento y el crecimiento de las mitocondrias, incluyendo los requeridos para division y segregacion mitocondrial durante el ciclo celular.
El uso de la expresion “hidroxitirosol en asociacion con al menos uno de los compuestos seleccionados del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o B12 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng” se destina a incluir cada combinacion unica de hidroxitirosol con cada uno de los compuestos individuales dentro del grupo.
“Observar los efectos de la funcion mitocondrial aumentada” y “observar los efectos de la biogenesis mitocondrial” significa que la entidad que ingiere/aplica la composicion de asociacion percibe al menos uno de los efectos enumerados a continuacion o que un tercer observador puede percibir o medir este efecto.
Los efectos de la funcion mitocondrial aumentada y/o biogenesis mitocondrial incluyen observaciones de que la asociacion de esta invencion:
ayuda a aumentar la resistencia
ayuda a aumentar la recuperacion despues del ejercicio
ayuda a reducir la fatiga muscular
ayuda a reducir el dolor muscular
complementa el efecto a corto plazo inmediato de la cafema con un efecto sostenido sobre la generacion de energfa ayuda a aumentar la generacion de energfa a partir de grasa ayuda a reducir en lactato en plasma durante el ejercicio
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ayuda a mantener la fuerza muscular en condiciones de estres oxidativo ayuda a proteger contra el estres oxidativo inducido por el ejercicio
ayuda a que el organismo presente mas energfa de una manera natural y sostenida - sin cafema y con solo 1 calona
ayuda a que el organismo encuentre mas energfa sin tomar demasiada cafema.
proporciona ene^a de larga duracion para sustentar su apretada agenda
ayuda a reforzar la produccion de ene^a propia del organismo de una forma sostenida natural
ayuda a mantener incluso mas niveles de energfa durante todo el dfa
puede proporcionar en asociacion con la cafema energfa inmediata y sostenida
ayuda a que el organismo se adapte al ejercicio
ayuda a preparar el organismo para objetivos de ejercicio
ayuda a revitalizar su figura
facilita la reanudacion de su programa de ejercicio
ayuda a empezar de nuevo
ayuda a sentirse mas energico
ayuda a sentirse mas activo
soporta el celo por la accion
ayuda a afrontar su ajetreado estilo de vida
capacidad de trabajo muscular aumentada
capacidad aerobica mejorada
rendimiento ffsico mejorado
rendimiento mejorado de ejercicio
resistencia de carrera mejorada, distancia de carrera mejorada y/o tiempo de carrera mejorado o estimula la formacion de energfa a partir de nutrientes.
Como se usa por toda la memoria descriptiva y las reivindicaciones, el termino “cantidad que induce biogenesis” significa que la biogenesis mitocondrial completa se mantiene al menos al nivel que estaba presente cuando se ingirio originalmente el hidroxitirosol. Esto se puede determinar in vitro vigilando la cantidad y el estado de funcionamiento mitocondrial en una muestra de tejidos o como se describe mas en los Ejemplos. Adicionalmente, esto se puede determinar in vivo por medicion del contenido en ATP de tejido o el consumo de oxfgeno durante el ejercicio (VO2 max) o ex vivo por analisis de la transcriptomica para la regulacion hacia arriba de los marcadores mitocondriales (tales como Tfam) o detectando la presencia aumentada de ADN mitocondrial en biopsias de tejidos. Esta propiedad de hidroxitirosol es distinta de la actividad conocida del hidroxitirosol como antioxidante.
La “estimulacion mitocondrial” como se usa por toda esta memoria descriptiva y las reivindicaciones significa que el compuesto aplicado a las mitocondrias conduce a la produccion de ATP aumentada en la celula; una capacidad aumentada para produccion de energfa en la celula; una capacidad aumentada para generacion o produccion de energfa aerobica en la celula y/o una capacidad aumentada para quemar grasa.
El hidroxitirosol (3,4-dihidroxifeniletanol) ("HT") puede ser de origen sintetico o puede ser aislado o enriquecido a partir de hojas de olivo, frutos de olivo, pulpa de oliva, zumo de oliva o agua de vegetacion de la produccion de aceite de oliva. Asf, el termino “hidroxitirosol” tambien incluye cualquier material o extracto de una planta o cualquier material o extracto de partes de una planta o cualquier extracto/concentrado/zumo de frutas de una planta (tales como olivas) que lo contienen o un precursor, especialmente en una cantidad de al menos 1,5% en peso, preferiblemente en una cantidad de al menos 30% en peso y mas preferiblemente en una cantidad de al menos 40% en peso, mas preferiblemente en una cantidad de al menos 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90% en peso y lo mas preferiblemente en una cantidad de al menos 45% en peso, basado en el peso total del material o extracto vegetal. La forma comercial del extracto puede ser o no estandarizada a concentraciones inferiores de hidroxitirosol por formulacion del hidroxitirosol con excipientes de formulacion adecuados. Los terminos “material de una planta” y
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“material vegetal” usados en el contexto de la presente invencion significan cualquier parte de una planta, tambien los frutos.
Los precursores para hidroxitirosol incluyen polifenoles complejos, que se pueden metabolizar a hidroxitirosol en la ingestion, tal como oleuropema. Tambien incluye tirosol y precursores de tirosol y similares. Dichos polifenoles son conocidos y apreciados por los expertos en la materia.
En mas realizaciones de la presente invencion, los derivados de hidroxitirosol tales como esteres y sales fisiologicamente/farmaceuticamente aceptables se pueden usar en vez de o ademas de, hidroxitirosol. Tambien es posible usar una mezcla de hidroxitirosol y derivados y precursores de hidroxitirosol. Los derivados pueden ser, por ejemplo, esteres o glucosidos, y son conocidos para los expertos en la materia. Los esteres preferidos de hidroxitirosol son, por ejemplo, acetatos o conjugados de glucuronido, asf como oleuropema que es el mas preferido.
Asf, una descripcion de este documento es el uso de hidroxitirosol en asociacion con al menos uno de los compuestos seleccionados del grupo que consiste en: creatina, coenzima, Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o Bl2 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng.
En una realizacion preferida, el hidroxitirosol se usa en asociacion con al menos uno de los compuestos seleccionados del grupo que consiste en: creatina, coenzima, Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1, B2, B3, B5, B6 y/o B12) y extracto de ginseng en la fabricacion de un medicamento o producto alimenticio (para seres humanos y/o animales) que es util para mantener o aumentar la biogenesis mitocondrial o la funcion mitocondrial.
En otra realizacion mas, el hidroxitirosol se usa en asociacion con al menos uno de los compuestos seleccionados del grupo que consiste en: cafema, carnitina y una vitamina B.
Otra descripcion de este documento es un metodo para mantener o aumentar la biogenesis mitocondrial en un individuo con necesidad del mismo que comprende administrar una cantidad inductora de biogenesis mitocondrial o estimuladora mitocondrial de hidroxitirosol en asociacion con al menos uno de los compuestos seleccionados del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o B12 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng y observar los efectos de la biogenesis mitocondrial.
Otra descripcion de este documento es el uso de hidroxitirosol en asociacion con al menos uno de los compuestos seleccionados del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o B12 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng en la fabricacion de un medicamento o producto farmaceutico (para seres humanos y/o para animales) que es util en la proteccion de las mitocondrias frente a una serie de tensiones encontradas en el entorno diario.
Ejemplos de tensiones encontradas en el entorno diario incluyen luz UV (A), infecciones, exposicion a contaminacion medioambiental, inflamacion y enfermedades degenerativas cronicas. Asf, estos productos ayudan a asegurar la normal funcion mitocondrial frente a amenazas diarias, tales como cambios bioqmmicos celulares como resultado de tensiones, enfermedades, malnutricion (incluyendo malnutricion que sea secundaria a otra enfermedad) o lesion.
Otra descripcion de este documento son los productos nutraceuticos que comprenden una cantidad inductora de biogenesis mitocondrial de hidroxitirosol en asociacion con al menos uno de los compuestos seleccionados del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o B12 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng y que fomenta el bienestar de las mitocondrias y estimula la funcion optima de las mitocondrias.
Otra descripcion de este documento es una composicion cosmetica que comprende una cantidad inductora de biogenesis mitocondrial de hidroxitirosol en asociacion con al menos uno de los compuestos seleccionados del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o B12 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng y que fomenta el bienestar de las mitocondrias y que estimula la funcion optima de las mitocondrias en la piel y que refuerza asf el metabolismo de la energfa de la piel.
Breve descripcion de las figuras
La FIGURA 1 muestra la expresion de PGC-1a. Valores cuantitativos tabulados para relacion de PGC-1a:
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a-tubulina con una densitometna. Los valores son media ± DE de cinco experimentos. * p< 0,05 frente a control; **P<0,01 frente a control.
La FIGURA 2 muestra la expresion de las protemas mitocondriales. Se trataron adipocitos 3T3-L1 durante 48 h con hidroxitirosol. Se solubilizaron con posterioridad celulas en tampon de muestra SDS y se analizaron por ensayo de Western con anticuerpos frente a a-tubulina, complejos de transporte de electrones mitocondriales. Los analisis cuantitativos de las bandas por densitometna se muestran en A, B, C y D para complejo I, complejo II, complejo III y complejo IV, mitocondrial, respectivamente. Los resultados mostrados son veces de aumento de control de 4 experimentos independientes comparado con celulas de control. *p < 0,05 frente a control. **p<0,01 frente a control.
La FIGURA 3 muestra la expresion de ADN mitocondrial. Se trataron adipocitos 3T3-L1 durante 48 h con hidroxitirosol. Se cuantificaron productos PCR por fluorescencia usando verde SYBR. Los valores cuantitativos tabulados para relacion de bucle D: ARN18s. Los resultados se expresan como % de control. Los datos son media ± De (n=5). *P<0,05 frente a control; ** p<0,01 frente a control.
La FIGURA 4 muestra el consumo de oxfgeno en adipocitos 3T3-L1. Se separaron volumenes iguales de celulas en almuotas en pozos de una placa BD Oxygen Biosensor de 96 pozos. Se cubrieron las placas y se registro la fluorescencia en cada pozo con el tiempo con un espectrofotometro de microplacas de fluorescencia. Los cambios cuantitativos en la velocidad respiratoria de los adipocitos durante cada condicion se calcularon determinando las mediciones cineticas. Los valores son media ± DE; los resultados mostrados son % de control de 3 experimentos independientes comparado con celulas de control. *p< 0,05 frente a control.
La FIGURA 5 muestra el efecto de tratamiento con hidroxitirosol sobre las actividades de los complejos en los adipocitos. (A) Complejo I, (B) Complejo II y (C) Complejo III y (D) Complejo IV. Se trataron los adipocitos con diferentes concentraciones de hidroxitirosol durante 48 h. Los valores son media ± DE de datos de tres experimentos separados para complejo I y seis experimentos separados para complejo II y III y cada experimento se realizo por duplicado. *p<0,05, **p <0,01 frente a control.
FIGURA 6 Efecto de tratamientos de HT sobre la expresion de ARNm de Cptla. Se trataron adipocitos 3T3- L1 durante 48 h con HT a 0,1; 1,0; 10 y 50 pmoles/l y se aislo ARN total. El numero de ciclos al que se detectaron varias transcripciones se comparo con el de ARNs18S como un control interno. Los resultados se expresan como % de control. Los valores son media ± DE de los resultados de al menos cuatro experimentos independientes. *P<0,05 frente a control sin tratamiento de HT.
FIGURA 7 El hidroxitirosol, proporcionado como un extracto de oliva que contiene 50% de hidroxitirosol a dosis de 50, 150 o 300 mg/kg de peso corporal por dfa por sonda nasogastrica, aumenta la resistencia por hasta 50% en ratones despues de 14 dfas de suplemento.
La FIGURA 8 muestra los efectos sinergicos de hidroxitirosol en asociacion con cafema o L-carnitina en el potencial de membrana mitocondrial en celulas C2C12. A AICAR y 10 uM de hidroxitirosol aumenta el potencial de membrana mitocondrial. B Las combinaciones de 1 uM de hidroxitirosol con cafema o con L- carnitina aumenta el potencial de membrana sinergicamente. Se valoro el potencial de membrana mitocondrial relativo por los cambios en la fluorescencia de roja a verde emitida por el colorante JC-1. Se trataron las celulas durante 24 h con disolvente (-), 500 uM de AiCAR (AICAR), 1 uM de hidroxitirosol o 100 uM de hidroxitirosol (HT), 200 uM de cafema (Cafema ) y/o 200 uM de L-carnitina (L-Carnitina) como se indica. Los datos mostrados son el promedio de cuadruplicados ± desviacion estandar.
PGC1a, gamma-coactivador 1 alfa de receptor de activador de la proliferacion de peroxisomas (PPAR, por sus siglas en ingles), un coactivador de transcripcion, actua como un regulador principal de una amplia serie de procedimientos metabolicos y fisiologicos y es un factor esencial en el procedimiento de biogenesis mitocondrial. La sobreexpresion de PGC-1a estimula la biogenesis mitocondrial en celulas 3T3 haciendolas mas resistentes a factores estresantes oxidativos.
Los autores han demostrado que hidroxitirosol a 1,0-10 pM, aumenta el nivel de protema PGC1 a y fomenta la biogenesis mitocondrial. Creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, Vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o B12 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng aumentaran sinergicamente la actividad mitocondrial y evitaran la disfuncion mitocondrial en diferentes tejidos. Ademas, hidroxitirosol en asociacion con al menos uno de los compuestos seleccionados del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, Vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o B12 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng, puede mantener asf la funcion del tejido/organo y evitar el fallo del tejido/organo provocado por la disfuncion mitocondrial.
Un aspecto mas de esta invencion son composiciones que comprenden una cantidad inductora de biogenesis
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mitocondrial de hidroxitirosol y al menos uno de los compuestos seleccionados del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o B12 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng para activar sinergicamente el metabolismo de la energfa propia del organismo por sinergizacion con uno o mas de los ingredientes (en el caso de resveratrol, CoQ10, creatina, vitaminas B y extracto de ginseng) o fomentando sinergicamente la quema de grasa (en el caso de carnitina).
Si se usa extracto de ginseng en asociacion con hidroxitirosol, esta preferiblemente en la forma de extracto de rafz de ginseng.
Las asociaciones preferidas de la descripcion de este documento incluyen:
• HT y resveratrol, quercetina, acido alfa-lipoico o EGCG para aumento adicional en la biogenesis mitocondrial y la funcion mitocondrial, conduciendo a un aumento sinergico de la capacidad mitocondrial para la generacion de energfa aerobica.
• HT y CoQ10 y/o vitamina B2: HT aumenta la masa mitocondrial y estas mitocondrias recien sintetizadas requieren estar dotadas de CoQ10 y B2. Esto da como resultado una produccion sinergica de mas ATP (energfa).
• Para preparar mas ATP y hacerlo disponible para el organismo (energfa ffsica, resistencia, fuerza muscular) se prefieren HT y creatina o HT, CoQ10 y/o B2 y creatina. HT aumenta la masa mitocondrial y estas mitocondrias recien sintetizadas requieren estar dotadas de CoQ10 y B2. La creatina transporta la energfa generada en forma de ATP a las miofibras en una forma utilizable (fosfato de creatina).
• Para mejorar la composicion corporal (relacion grasa: musculo): HT y carnitina. La carnitina ayuda en el transporte de acidos grasos a las mitocondrias para la quema de grasa y la produccion de ATP. Se encontro sorprendentemente que HT regula hacia arriba CPT-1 (carnitina palmitoil transferasa 1), el transportador, que emplea carnitina para el transporte de acidos grasos. CPT-1 es el garante de la oxidacion de acidos grasos mitocondriales debido a que regula el transporte de acidos grasos de cadena larga por la membrana mitocondrial convirtiendo acil-CoA en acilcarnitina. Ademas, hemos encontrado sorprendentemente una elevacion sinergica del potencial de membrana mitocondrial por una asociacion de hidroxitirosol y carnitina.
• Para energfa inmediata y prolongada, se prefieren HT y cafema. Las dosis son 10 - 200 mg de HT y 50 - 450 mg de cafema. Ademas, encontramos sorprendentemente una elevacion sinergica del potencial de membrana mitocondrial por una asociacion de hidroxitirosol y cafema.
Otra descripcion de este documento es HT en asociacion con al menos uno de los compuestos seleccionados del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o B12 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng como ingrediente activo en “mejor para productos de energfa” tales como bebidas energeticas, refrigerios incluyendo chocolate, galletas o barritas.
Otro aspecto de esta invencion es HT en asociacion con cafema en dosis de cafema reducidas para gente que quisiera tener suficiente energfa para su estilo de vida, pero quiere reducir su ingesta de cafema.
La funcion mitocondrial, energfa disponible asf, disminuye con la edad. Asf otra descripcion de este documento es tambien productos energeticos que comprenden HT en asociacion con al menos uno de los compuestos seleccionados del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o B12 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng, formulado para que la gente de mas de 50, parezca mantener un nivel de energfa joven, a fin de mantener un estilo de vida activo.
Rendimiento ffsico y adaptacion a ejercicio
Un aumento en las mitocondrias puede beneficiar tanto a personas como a animales implicados en el ejercicio. La biogenesis de las mitocondrias se traduce en aumento de uso de oxfgeno y energfa aumentada al tiempo que compromete cualquier forma de ejercicio. Los volumenes de mitocondrias mayores mejoran la capacidad para el metabolismo oxidativo de altas tasas de flujo glicolftico. Ademas, esto da como resultado una resistencia aumentada. Las fibras musculares, que tienen acceso a mayores almacenes de energfa son capaces de contraerse mas rapido y mas completamente; asf se pueden observar mejoras en velocidad y resistencia despues de utilizaciones durante un periodo de tiempo.
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Adicionalmente, la capacidad de oxidacion de acidos grasos mejorada da como resultado una utilizacion de glucosa disminuida a intensidades de ejercicio submaximas. Por otra parte, el metabolismo de las grasas transcurre via una ruta diferente que la glucosa y no se produce acido lactico. Tambien, los tiempos de recuperacion de lesiones, calambres y dolor que resultan de la produccion de energfa anaerobica seran mas rapidos.
En otra aplicacion muscular, los musculos que utilizan energfa mas eficazmente son menos propensos a acumulacion de grasa y por lo tanto hidroxitirosol y un compuesto seleccionado del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o B12 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng pueden ser utilizados para mejorar el modelamiento del cuerpo.
Las aplicaciones veterinarias de la biogenesis mitocondrial que induce la cantidad de hidroxitirosol y un compuesto seleccionado del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o B12 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng incluyen: aumentar el rendimiento ffsico en animales para carrera, tales como caballos y perros de carreras y camellos de carreras; aumentar la resistencia en animales de tiro.
El ejercicio ffsico regular tambien induce las mitocondrias como una adaptacion al repentino incremento de demanda de energfa durante el ejercicio. Las asociaciones sinergicas reivindicadas pueden ayudar a preparar/adaptar el organismo para el ejercicio mas alla de los niveles de ejercicio habituales. Esto es de interes predominantemente en personas que empiezan a hacer ejercicio (de nuevo) despues de un descanso mas prolongado (por ejemplo, varios dfas, semanas, meses, anos) de ejercicio regular, que por lo tanto se sienten perezosos, debiles, lentos, cansados y fatigados cuando intentan volver a empezar a su regimen de ejercicios. Tambien es de interes para atletas del estilo de vida (personas recreacionalmente activas, deportistas de fin de semana), que no tienen el tiempo para suficiente ejercicio para preparar durante sus giras o carreras/competiciones de fines de semana.
Sensacion energica
Ademas de mejorar el rendimiento ffsico en personas que hacen ejercicio, la asociacion de esta invencion puede ayudar a generar la energfa necesaria para el estilo de vida actual. La investigacion del consumidor mostro que 37% de los encuestados (poblacion general, Edad 16+, EE.UU. y 4 pafses europeos) con frecuencia se sienten cansados o sin energfa. Un segundo estudio encontro que el 60% de los encuestados estana interesado en productos que les ayudaran a tener mas energfa. Hoy en dfa, la gente con necesidad de un refuerzo de energfa, consume cafe o bebidas energeticas que contienen cafema, asf como alto contenido en azucar, refrigerios de alto contenido en grasa.
Si se consume en una dosis adecuada, el efecto inmediato de la cafema para aliviar la fatiga es muy apreciado. Sin embargo, si se consume en exceso, puede ocasionar insomnio e hipertension. Una taza de cafe tfpica puede contener aproximadamente 100 mg de cafema. Si una persona toma regularmente 3-5 tazas al dfa, el consumo de cafema puede ser bastante alto (+300 mg al dfa). El hidroxitirosol, debido a su defecto estimulador en la biogenesis mitocondrial, puede anadir un efecto a largo plazo de energfa sostenida al efecto inmediato a corto plazo de la cafema.
Por otra parte, el hidroxitirosol puede ayudar con el tiempo a reducir la dosis de cafema necesaria para afrontar los deberes del dfa. Con la adicion de hidroxitirosol a la dieta, se puede conseguir la misma sensacion no letargica, pero se reduce la cantidad de cafema necesaria (a 100 mg o menos al dfa).
De manera similar, los consumidores con frecuencia toman alimentos con alto contenido en azucares y/o grasa para proporcionar un refuerzo de energfa. Sin embargo, con el aumento de energfa prolongado de hidroxitirosol y un compuesto seleccionado del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o Bl2 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng, se reduce la cantidad requerida. Asf, las combinaciones de HT de esta invencion se pueden usar de manera favorable en ofertas de energfa “mejor para ti” (BFY, por sus siglas en ingles) (bebidas, barritas, refrigerios, chicles, toma s, suplementos y similares) con un contenido menor en calonas de azucar o grasa o en cafema.
Asf, la presente invencion se refiere al uso de las asociaciones que contienen hidroxitirosol para:
• aumentar la capacidad propia corporal para generacion de energfa
• aumentar la capacidad aerobica para el ejercicio
• desplazar la utilizacion de nutrientes para generacion de energfa de carbohidrato a quema de grasa
• complementar el efecto inmediato a corto plazo de la cafema con un efecto prolongado sobre la generacion de ene^a
• permitir que se reduzca la dosis de cafema y/o azucar y/o grasa necesaria para "continuar".
As^ otra descripcion de este documento es una composicion que comprende hidroxitirosol y un compuesto 5 seleccionado del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o B12 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng para mantener o aumentar la biogenesis mitocondrial, en la que la biogenesis mitocondrial mantenida o aumentada da como resultado un refuerzo 10 de energfa prolongado. Una descripcion mas de este documento es un metodo para preparar una composicion alimenticia que proporcione energfa o mejore la atencion que comprende hidroxitirosol y un compuesto seleccionado del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o B12 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, 15 acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng, en el que la composicion alimenticia contiene un contenido reducido en cafema, grasa y/o azucar comparado con un artmulo alimenticio similar que no contiene hidroxitirosol.
Relacion musculo/grasa mejorada, moldeamiento corporal.
La presente invencion se refiere al uso de hidroxitirosol y un compuesto seleccionado del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o 20 niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o B12 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng para:
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• aumentar el metabolismo muscular para reforzar la movilizacion de energfa;
• mejorar la masa muscular esqueletica por estimulacion de rutas anabolicas, inhibiendo rutas catabolicas y acelerando la regeneracion muscular cuando se dana;
• desplazar la utilizacion de nutrientes para generacion de energfa de quemar carbohidrato o protema a quemar grasa;
• fomentar la quema de grasa; actuar como un regulador de la quema de grasa, aumentando el gasto de energfa por oxidacion de acidos grasos, aumentando el metabolismo de las grasas, fomentando la oxidacion de las grasas, disminuyendo la grasa corporal y aumentando la masa muscular;
• ayudar a conseguir una buena silueta (moldeamiento corporal), disminuyendo la grasa corporal y aumentando la masa muscular magra y
• aumentar la termogenesis; aumentando el metabolismo de un ser humano o animal para quemar mas energfa;
35 Formulaciones
El hidroxitirosol o extractos de zumo de oliva que contienen hidroxitirosol en asociacion con al menos uno de los compuestos seleccionados del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o Bl2 o varias cobalaminas, tales 40 como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng se pueden usar en cualquier forma adecuada tal como un alimento o una bebida, como Alimento para Usos Nutricionales Especiales, como suplemento dietetico, como nutraceutico o en pienso o alimentacion para animales.
El hidroxitirosol o extractos de zumo de oliva que contienen hidroxitirosol en asociacion con al menos uno de los compuestos seleccionado del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, 45 vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o Bl2 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng se pueden anadir en cualquier fase durante el proceso normal de estos productos. Productos alimenticios adecuados incluyen por ej., barritas de cereales, productos de panadena tales como tortas y galletitas u otros tipos de refrigerios tales como chocolate, 50 nueces, osos de gominola, gomas de mascar y similares y tambien alimentos lfquidos tales como sopas o sopas en polvo. Las bebidas adecuadas incluyen bebidas no alcoholicas y alcoholicas asf como preparaciones lfquidas que se tienen que anadir a agua potable y alimento lfquido. Las bebidas no alcoholicas son preferiblemente agua mineral, bebidas para deportistas, bebidas energeticas incluyendo las que contienen glucuronolactona para agudeza mental aumentada y taurina para desintoxicacion, bebidas energeticas hnbridas, bebidas con base de agua mineral, zumos
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de frutas, limonadas, batidos, tes y bebidas concentradas tales como toma s y mini-toma s. Las bebidas para deportistas pueden ser hipotonicas, hipertonicas o isotonicas. Las bebidas para deportistas pueden estar disponibles en forma Ifquida, como concentrados o como polvo (para disolver en un Ifquido, como por ejemplo agua). Ejemplos de Alimentos para Usos Nutricionales Especiales incluyen las categonas de alimentacion deportiva, alimentos para adelgazamiento, formula infantil y alimentos clmicos. Pienso incluye cualquier alimento para animales o mezcla previa de pienso, incluyendo artfculos tales como premios para mascotas y refrigerios.
El termino "suplemento dietetico" como se usa en la presente memoria indica un producto tomado por la boca que contiene un compuesto o mezcla de compuestos destinados a enriquecer la dieta. El compuesto o mezcla de compuestos en estos productos puede incluir: vitaminas, minerales, yerbas u otros productos botanicos y aminoacidos. Los suplementos dieteticos pueden ser tambien extractos o concentrados y se pueden encontrar en muchas formas tales como comprimidos, capsulas, geles suaves, gelcaps, lfquidos o polvos. El suplemento dietetico puede usarse tambien para fomentar la energfa en las mitocondrias dermicas, mejorando asf las cualidades esteticas de la piel.
El termino "nutraceutico" como se usa en la presente memoria indica la utilidad tanto en el campo de aplicacion nutricional como farmaceutico. Las composiciones nutraceuticas segun la presente invencion pueden estar en cualquier forma que sea adecuada para administracion al organismo animal incluyendo el organismo humano, especialmente en cualquier forma que sea convencional para administracion oral, por ejemplo, en forma solida tal como (aditivos/suplementos para) alimento o pienso, alimento o mezcla previa de pienso, comprimidos, pfldoras, granulos, grageas, capsulas y formulaciones efervescentes tales como polvos y comprimidos o en forma lfquida tal como disoluciones, emulsiones o suspensiones como, por ejemplo, bebidas, pastas y suspensiones oleosas. Las formulaciones de liberacion controlada (retrasada) que incorporan el hidroxitirosol o extractos de zumo de oliva que contienen hidroxitirosol segun la invencion tambien forman parte de la invencion. Ademas, se puede anadir una multivitamina y un suplemento mineral a las composiciones nutraceuticas de la presente invencion para obtener una cantidad adecuada de un nutriente esencial, que se pierde en algunas dietas. El suplemento multi-vitammico y mineral puede tambien ser util para la prevencion de enfermedades y proteccion frente a perdidas nutricionales y deficiencias debido a patrones de estilo de vida. El nutraceutico puede comprender ademas aditivos normales, por ejemplo, edulcorantes, saborizantes, azucar, grasa, emuladores, conservantes. La nutricion tambien puede comprender otros componentes activos, tales como protemas (hidrolizadas) como se describe, por ejemplo, en la patente internacional WO 02/45524. Tambien pueden estar presentes antioxidantes en la nutricion, por ejemplo flavonoides, carotenoides, ubiquinonas, rutina, acido lipoico, catalasa, glutation (GSH) y vitaminas, tales como por ejemplo C y E o sus precursores.
En una realizacion mas, una composicion que contiene hidroxitirosol en asociacion con al menos uno de los compuestos seleccionados del grupo que consiste en: creatina, coenzima Q10, resveratrol, cafema, carnitina, vitaminas B (B1 o tiamina; B2 o riboflavina; B3 o niacina o niacinamida; B5 o acido pantotenico; B6 o piridoxina, piridoxal, piridoxamina o hidrocloruro de piridoxina; B7 o biotina; B9 o acido folico o Bl2 o varias cobalaminas, tales como cianocobalamina), quercetina, acido alfa-lipoico, EGCG y extracto de ginseng se aplica por via topica para mejorar la biogenesis mitocondrial de celulas dermicas. Las preparaciones cosmeticas o dermatologicas segun la invencion pueden estar en la forma de una suspension o dispersion en disolventes o sustancias grasas o alternativamente en la forma de una emulsion o microemulsion (en particular de tipo O/W o W/O, tipo O/W/O o W/O/W, en las que O representa fase oleosa y en las que W representa fase acuosa), tales como una crema, una pasta, una locion, una locion espesada o una leche, una dispersion vesicular en la forma de pomada, un gel, una barra de tubo solida o una mouse en aerosol y se puede proporcionar en forma de mouse, espuma o una espuma pulverizada, pulverizaciones, varillas o aerosoles o toallitas. Los ejemplos de preparaciones cosmeticas o dermatologicas son preparaciones para el cuidado de la piel, en particular, aceites corporales, lociones corporales, geles corporales, cremas de tratamiento, pomadas de proteccion de la piel, geles humectantes, pulverizaciones humectantes, pulverizaciones corporales revitalizantes, preparaciones para despues del sol o formulaciones protectoras solares.
Las preparaciones cosmeticas o dermatologicas de la descripcion de este documento pueden comprender ademas los adyuvantes y/o aditivos dermatologicos respectivamente cosmeticos, normales, tales como conservantes/ antioxidantes, sustancias grasas /aceites, agua, disolventes organicos, siliconas, espesantes, suavizantes, emulsionantes, agentes tamizadores de luz adicionales, agentes antiespumantes, humectantes, fragancias, tensioactivos, cargas, agentes secuestrantes, polfmeros anionicos, cationicos, no ionicos o anfoteros o mezclas de los mismos, propelentes, agentes acidificantes o alcalinizantes, tintes, colorantes, pigmentos o nanopigmentos, estabilizantes de la luz, repelentes de insectos, agentes bronceadores de la piel, agentes blanqueantes de la piel, agentes antibacterianos, ingredientes activos conservantes o cualquier otro ingrediente formulado normalmente en los productos cosmeticos.
En general entre aproximadamente 1 mg y aproximadamente 500 mg de hidroxitirosol en la forma pura o en un extracto de oliva es eficaz por porcion. Preferiblemente, se usa entre 1 mg y 250 mg de hidroxitirosol esta presente en la forma pura o en el extracto de oliva e incluso mas preferiblemente entre aproximadamente 1 mg y 100 mg en un extracto de oliva.
La dosis diaria de hidroxitirosol para seres humanos (persona de 70 kg) puede ser al menos 0,1 mg. Puede variar de
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1 a 500 mg, preferiblemente de 5 a 100 mg.
La dosis preferida de hidroxitirosol vana de 0,28 a 1,9 mg/kg de peso corporal metabolico para mamnferos, segun lo cual
“peso corporal metabolico” [en kg] =(peso corporal [en kg])0’75
para mamiferos. Eso significa por ejemplo que para un ser humano de 70 kg la dosis diaria preferida variaria entre 6,77 y 45,98 mg, para un perro de 20 kg la dosis diaria preferida variana entre 2,23 y 15,1 mg.
Las dosis de resveratrol oscilan tipicamente de 1 mg - 450 mg/d por ser humano. El resveratrol se puede fabricar de manera sintetica usando procedimientos conocidos o extraer de plantas incluyendo Centaurea negra gigante.
Se puede adquirir CoQ10 de Kaneka, EE.UU. Las dosis preferidas son 3 - 100 mg al dfa por persona y es mas preferido 30-50 mg.
Las dosis de creatina oscilan preferiblemente de 1 g - 25 g al dfa por persona. Esta comercialmente disponible.
Las dosis de carnitina oscilan tfpicamente de 250 mg -1 g al dfa por persona. Esta comercialmente disponible como "CARNIPURE" de Lonza.
Las dosis de cafema son tfpicamente de 6 mg - 450 mg al dfa por persona. Esta comercialmente disponible.
Las dosis de ginseng son preferiblemente 100 mg - 5 g de polvo de rafz seca o extracto con el correspondiente contenido en ginsenosides al dfa por persona.
Se conocen RDA/DRI (consumo diario recomendado/ ingesta diaria recomendada (por sus siglas en ingles) de varias vitaminas B, como en esta tabla de

http://www.anvvitamins.com/rda.htm#Water%20Soluble%20Vitamins*
Las dosis de vitaminas preferidas de acuerdo con esta invencion son de 10% a 1.000% de la DRI (ingesta recomendada diaria)/RDA (consumo diario recomendado) como se recomienda en la actualidad en EE.UU. o Europa. Se puede encontrar la DRI en

http://www.nal.usda.gov/fnic/DRI//DRI Thiamin/566-567 150.pdf.
Las dosis de vitaminas preferidas son como sigue:
Las dosis de tiamina son tfpicamente de 0,1 -10 mg al dfa por persona. Esta comercialmente disponible.
Las dosis de riboflavina son tfpicamente de 0,1 -10 mg al dfa por persona. Esta comercialmente disponible.
Las dosis de niacina son tfpicamente de 1 - 200 mg al dfa por persona. Esta comercialmente disponible.
Las dosis de acido pantotenico son tfpicamente de 1 -100 mg al dfa por persona. Esta comercialmente disponible.
Las dosis de vitamina B6 (tales como Piridoxin, piridoxal o piridoxamina) son tfpicamente de 0,1 - 20 mg al dfa por persona. Esta comercialmente disponible.
Las dosis de biotina son tfpicamente de 0,1 - 20 mg al dfa por persona. Esta comercialmente disponible.
Las dosis de cobalamina son tfpicamente de 0,1 - 20 microg al dfa por persona. Esta comercialmente disponible.
Las dosis de quercetina son tfpicamente de 50 mg a 2.000 mg al dfa por persona como extracto de planta por ejemplo de manzanas (por ejemplo, cascara), cebollas (por ejemplo, cascara) u hojas de te. Esta comercialmente disponible.
Las dosis de acido alfa-lipoico son tfpicamente de 200 mg - 1.800 mg al dfa por persona. Esta comercialmente disponible.
Las dosis de EGCG (epigalocatequina) son tfpicamente de 25 mg - 600 mg de EGCG al dfa por persona como extracto de te verde. Esta comercialmente disponible.
Los siguientes Ejemplos no limitantes se presentan para ilustrar mejor la invencion.
Ejemplos Ejemplo 1
Se adquirieron PGC-1a anti-conejo y PPAR-y anti-conejo de Santa Cruz (California, EE.UU.); anti-a-tubulina de
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Sigma (St. Louis, MO, EE.UU.); Mito-Tracker Green FM, complejo antioxidativo I, II, III y V de Invitrogen (Carlsbad, EE.UU.); Mezcla Maestra PCR VERDE SYBR® de ABI (Warrington, RU); placa de BD Oxygen Biosensor System de BD Biosciences (California, EE.UU.); Hidroxitirosol (DSM Nutritional Products); se sintetizaron bucle D mitocondrial y cebadores ARN18s por Bioasia Biotech (Shanghai, China), otros reactivos para cultivo celular fueron de Invitrogen (Carlsbad, EE.UU.).
Cultivo celular y diferenciacion de adipocitos
Se cultivaron pre-adipocitos 3T3-L1 de Murina (Coleccion de Cultivos de Tipo Americano) en Medio Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM) enriquecido con suero fetal bovino al 10% y se permitio que alcanzaran la confluencia. Se inicio la diferenciacion de los preadipocitos con insulina 1 pM, dexametasona 0,25 pM y 3-isobutil-1- metilxantina 0,5 mM en DMEM, enriquecido con suero fetal bovino al 10%. Despues de 48 h, se reemplazo el medio de cultivo con DMEM enriquecido con suero fetal bovino al 10% e insulina 1 pM. Se cambio el medio de cultivo cada dos dfas con DMEM que contema suero fetal bovino al 10%. Se usaron celulas 9-10 dfas despues de induccion de diferenciacion cuando presentaban fenotipo de adipocitos del 90%.
Determinacion de la masa mitocondrial
Se tripsinizaron los adipocitos y se centrifugo a 105 rad/s (1.000 rpm) a 4°C durante 5 min, se volvieron a suspender en disolucion Ringer de Kreb tamponada con HEPES y BSA al 0,1%, despues se incubo con 0,1 pM MitoTracker Green FM en DMEM durante 30 min a 37°C. Se centrifugaron las celulas a 105 rad/s (1.000 rpm) a 4°C durante 5 min y se volvieron a suspender en 400 pl de disolucion fresca de Ringer de Kreb tamponada con HEPES. Para examinar la coloracion mitocondrial relativa en las fracciones, se cargaron 20 * 103 celulas etiquetadas de Mitotracker en 200 pl de PBS de cada fraccion en una placa de 96 pozos y se leyo la intensidad de fluorescencia relativa (excitacion 485 ± 25 nm; emision 538 ± 25 nm) usando un espectrofotometro de microplacas de fluorescencia (Sonda molecular). Los resultados se expresan como numero de veces de aumento de la intensidad de fluorescencia sobre celulas de control no tratadas. Los valores son media ± DE de los resultados de cuatro experimentos independientes.
Metodo Western
Despues del tratamiento, se lavaron las celulas dos veces con PBS enfriado en hielo, se lisaron en tampon de muestra (Tris-Cl 62,5 mM pH 6,8, SDS al 2%, DTT 5 mM) a temperatura ambiente y se sometieron a agitacion vorticial. Despues se hirvieron los lisados celulares durante 5 minutos y se aclararon por centrifugacion (1.361 rad/s (13.000 rpm), 10 minutos a 4°C). Se determino la concentracion de protemas usando el ensayo de protemas BioRad DC. Los lisados solubles (10 pg por lmea) se sometieron a SDS-PAGE al 10%, despues se transfirieron las protemas a membranas de nitrocelulosa y se bloquearon con leche desnatada al 5%/TBST durante 1 h a temperatura ambiente. Se incubaron las membranas con anticuerpos primarios dirigidos frente a PPAR-y (1:1.000), PGC-1a (1:1.000), a-tubulina (1:10.000), Complejo I (1:2.000), Complejo II (1:2.000), Complejo III (1:2.000) y Complejo V (1:2.000) en leche al 5%/TBST a 4°C durante la noche. Despues de lavar las membranas con TBST tres veces, se incubaron las membranas con anticuerpo secundario conjugado de peroxidasa de rabano durante 1 h a temperatura ambiente. Se desarrollaron los metodos Western usando ECL (Roche Manheim, Alemania) y se cuantificaron por densitometna de barrido.
Medicion de la respiracion en adipocitos.
Se midio el consumo de oxfgeno por celulas intactas como una indicacion de la actividad de respiracion mitocondrial. El Sistema Biosensor de Oxfgeno de BD™ (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, EE.UU.) es un compuesto fluorescente sensible al oxfgeno (cloruro de tris-1,7-difenil-1,10 fenantrolina rutenio (II)) embebido en un gas permeable y matriz hidrofoba unida de manera permanente al fondo de una placa multipozos. La concentracion de oxfgeno en las proximidades del tinte esta en equilibrio con la del medio lfquido. El oxfgeno enfna rapidamente el tinte de una manera dependiente de la concentracion predecible. La cantidad de fluorescencia se correlaciona directamente con la proporcion de consumo de oxfgeno en el pozo, que a su vez se puede relacionar con cualquier tipo de reaccion que pueda ligarse a consumo de oxfgeno. La unica tecnologfa permite la deteccion instantanea homogenea de los niveles de oxfgeno. Despues de tratamiento, se lavaron los adipocitos en tampon KRH mas BSA al 1%. Las celulas de cada condicion se dividieron en almuotas en una placa del Sistema Biosensor de Oxfgeno BD (BD Biosciences) por triplicado. Se sellaron las placas y “se leyo” en un espectrometro de Fluorescencia (Sondas moleculares) a intervalos de 1 minuto durante 60 minutos a una longitud de onda de excitacion de 485 nm y longitud de onda de emision de 630 nm. El numero de celulas contenido en volumenes iguales no fue estadfsticamente significativo entre las condiciones (Wilson-Fritch et al., 2.004 J Clin Invest 114: 1.281-1.289).
Medicion de ADN mitocondrial.
Se realizo PCR cuantitativo en sistema PCR de Tiempo Real Mx3000P (Stratagene). Las reacciones se realizaron primero con 12,5 pl de Mezcla Maestra Verde SYBR (ABI), 0,5 pl de cada cebador (10 pM), 100 ng de plantilla (ADN) o no plantilla (NTC) y se anadio agua sin ARNsa a un volumen final de 25 pl. Las condiciones de ciclacion fueron como sigue: 50°C durante 2 min, desnaturalizacion inicial a 95°C durante 10 min, seguido por 40 ciclos de 95°C durante 30 s, 55°C durante 1 min y 72°C durante 30 s. Cada PCR cuantitativo se realizo por triplicado. Se
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usaron los siguientes cebadores:
bucle-D mitocondrial sentido directo, 5'-AATCTACCATCCTCCGTG-3' GACTAATGATTCTTCACCGT (SEC ID. N° 2)
ARN18s sentido directo: 5'-CATTCGAACGTCTGCCCTATC-3' (SEC CCTGCTGCCTTCCTTGGA-3' (SEC ID. N° 4)
(SEC ID
N° 1) invertido 5'-
ID. N°
3) e invertido: 5'-
El gen de ARNr 18S sirvio como el gen de referencia endogeno. Se realizo la curva de fusion para asegurar la multiplicacion espedfica. El metodo de curva estandar se uso para cuantificacion relativa. Se calculo despues la relacion de bucle D mitocondrial a ARNr 18S. Los resultados finales se presentan como porcentaje de control.
Analisis para actividades de complejo mitocondrial I, II y III.
Se cultivaron adipocitos en placas de 100 mm, se lavaron en PBS, se volvieron a suspender en un tampon isotonico apropiado (sacarosa 0,25 M, Tris-HCl 5 mM, pH 7,5 y fluoruro de fenilmetilsulfonilo 0,1 mM) y se homogeneizaron. Se aislaron las mitocondrias por centrifugacion diferencial de los homogenados celulares. Se ensayaron de manera espectrofotometrica NADH-CoQ oxidorreductasa (Complejo I), succinato-CoQ oxidorreductasa (complejo II), CoQ- citocromo c reductasa (complejo III) usando los ensayos convencionales (Picklo y Montine, 2.001 Biochim Biophys Acta 1.535: 145-152; Humphries, K. M. y Szweda, L. I. 1.998 Biochemistry 37: 15.835-15.841), con modificaciones insignificantes
Analisis para analizar la expresion de ARNm de Cpt1a.
3T3-L1. Se trataron los adipocitos durante 48 h con HT a 0,1; 1,0; 10 y 50 jmoles/l y se aislo ARN total. Se analizo la expresion de Cpt1a por RT-PCR usando las condiciones descritas en Shen W, Liu K, Tian C, et al. acido R- alfa- lipoico y acetil-L: -carnitina activan de manera complementaria la biogenesis mitocondrial en adipocitos 3T3-L1 murinos. Diabetologia 2.008; 51: 165-174.
El numero de ciclos a los que fueron detectables las diversas transcripciones se comparo con el de ARNr 18S como control interno.
Analisis estadfstico
Todos los datos cualitativos fueron representativos de al menos tres experimentos independientes. Los datos se presentan como medias ± DE. Se determino la significancia estadfstica usando ANOVA unidireccional con ensayos post hoc de Bonferroni entre los dos grupos. El criterio para la significancia se fijo a p<0,05.
Resultados:
Efecto de Hidroxitirosol sobre el nivel de protema PGC-1a en adipocitos.
Como se muestra en la Figura 1, el hidroxitirosol mostro un efecto en forma de campana en PGC-1a creciente de 0,1 a 10,0 |jM con una expresion de protema maxima a 1,0 jM (205±52%, p,0,05 frente a control).
Efecto de hidroxitirosol sobre expresion de protemas de complejo I, II, III y V en adipocitos.
Se determinaron los complejos mitocondriales por metodos western (Figura 2A a D). Se observo un aumento en protema de complejo I de transporte de electrones mitocondriales con tratamiento con hidroxitirosol a 0,1 jM (131± 16%, p<0,05 frente a control), 1,0 jM (163 ± 31%, p<0,01 frente a control) y 10,0 jM (138 ± 21%, p<0,05 frente a control) (Figura A). La expresion de protema de complejo II aumento tambien significativamente con hidroxitirosol a 0,1; 1,0 y 10,0 jM (Figura B). La expresion de protema de complejo III y V aumento significativamente con hidroxitirosol a 0,1; 1,0 y 10,0 jM (Figura C y D).
Efectos de hidroxitirosol en ADN mitocondrial
Como el bucle D se conoce como el sitio principal de iniciacion de la transcripcion en las cadenas tanto pesadas como ligeras de ADNmt, se examino in vitro si hidroxitirosol podfa aumentar la expresion de ADNmt. Como se muestra en la Figura 3, la relacion de bucle-D mt /ARN18s aumento significativamente en los adipocitos tratados con hidroxitirosol a 1,0 jM.
Efecto de Hidroxitirosol sobre el consumo de oxfgeno en adipocitos.
Para determinar si la biogenesis mitocondrial aumentada va acompanada de cambios en el consumo de oxfgeno, se trataron celulas con hidroxitirosol a 0,1; 1,0, 10 y 50,0 jM. Como se muestra en la Figura 4, la relacion basal de consumo de oxfgeno aumento significativamente en los adipocitos tratados con hidroxitirosol a 1,0-10,0 jM.
Efecto de Hidroxitirosol sobre las actividades del complejo I, II, III, IV y V mitocondrial.
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Hidroxitirosol mostro un aumento significativo en la actividad de complejo I mitocondrial en celulas de adipocitos a 1,0 |jM relativo respectivamente a control (Figura 5A). La actividad de complejo II mitocondrial aumento significativamente con hidroxitirosol a 0; 1; 1 ;0 y 10;0 jM (Figura 5B). Hidroxitirosol tambien presento un aumento significativo en la actividad de complejo III, IV y V mitocondrial en celulas de adipocitos a 0,1 jM y 10 jM (Figura 5C, 5D y 5E).
Efecto de Hidroxitirosol sobre la expresion de genes Cpt1
CPT-1 es el garante de oxidacion de acidos grasos mitocondriales debido a que regula el transporte de acidos grasos de cadena larga por la membrana mitocondrial convirtiendo acil-CoA en acilcarnitina. HT mostro un aumento dependiente de la dosis en expresiones de ARNm Cpt1 aumenta significativamente a 1,0 jmol/l de HT.
En resumen, el hidroxitirosol fomenta la actividad mitocondrial y la biogenesis mitocondrial conduciendo a una mejora de la funcion mitocondrial y el sistema de defensa celular.
Ejemplo 2
Efecto de Hidroxitirosol sobre la resistencia.
El fin del estudio fue determinar el efecto de hidroxitirosol sobre la realizacion de carrera maxima en una banda sin fin.
En resumen, se adquirieron cuarenta ratones (C57BL/6NCrl; 8 semanas) de Charles River (Sulzfeld, Alemania) y se alojaron individualmente con acceso libre a agua y pienso, con un ciclo de luz-obscuridad de 12 horas alterno. Se alimentaron los animales con una dieta para roedores clasica (Ssniff R/M-H, Ext. n° V1536, Ssniff Ltd., Soest, Alemania). Despues de 2 semanas de adaptacion a la dieta se aleatorizaron los ratones segun el peso corporal en cuatro grupos experimentales de 10 animales. Los cuatro grupos fueron tratados por via oral cada manana durante 3 semanas con agua (grupo de control) o con un extracto de oliva diluido a 0,2 ml con agua y que contema hidroxitirosol al 50% a dosis de 50, 150 o 300 mg/kg de peso corporal al dfa. No hubo diferencia en el consumo de pienso por todo el experimento. Despues de 3 semanas de tratamiento, se midio la distancia de carrera maxima en una banda sin fin. La significancia estadfstica de las diferencias de medias entre grupos dietarios se ensayo por analisis unidireccional de la varianza (ANOVA). Si se encontraron diferencias significativas, se uso el ensayo Dunnett para comparacion multiple para comparar cada grupo con el grupo de control. Los valores de P menores que 0,05 se consideraron significativos. El hidroxitirosol aumento significativamente la distancia de carrera a agotamiento de los ratones y asf mejoro la resistencia en el ejercicio prolongado.
La FIGURA 7 muestra el efecto de Hidroxitirosol, proporcionado como un extracto de oliva que contiene hidroxitirosol al 50% a dosis de 50, 150 o 300 mg/kg de peso corporal al dfa por sonda nasogastrica, aumenta la resistencia por hasta 50% en ratones despues de 3 semanas de suplemento.
Ejemplo 3
La bebida energetica contiene 50 mg de hidroxitirosol y 100 mg de cafema/ porcion.
Ejemplo 4
Un suplemento para deportistas contiene 20 g de creatina y 100 mg de hidroxitirosol.
Ejemplo 5
Un suplemento para composicion de modelamiento corporal /quema de grasas/ mejora corporal contiene 500 mg de carnitina y 25 mg de hidroxitirosol/ dfa y persona.
Ejemplo 6
Una toma energetica, por ejemplo 5 horas, contiene hidroitirosol ademas de vitaminas B, taurina, glucuronolactona, cafema (o descafeinado, citicolina, acido malico, N-Acetiltirosina, L-Fenilalanina).
Ejemplo 7
Una barrita de chocolate contiene 25 mg de hidroxitirosol y 25 mg de EGCG por 25 g de chocolate.
Ejemplo 8
Una bebida para deportistas instantanea contiene 5 g de creatina, 50 mg de CoQ10 y 50 mg de hidroxitirosol.
Una barrita energetica contiene 5 mg de resveratrol y 5 mg de hidroxitirosol.
Ejemplo 10
Una bebida preparada de te con hielo (que contiene asf EGCG) se fortifica con 12,5 mg de hidroxitirosol y 5 mg de resveratrol por 240 ml (8 fl oz.).
5 Ejemplo 11
Se fortifica zumo de manzana (que contiene asf quercetina) con 12,5 mg de hidroxitirosol y 5 mg de resveratrol por 240 ml (8 fl oz.).
Ejemplo 12
Una bebida para deportistas preparada se fortifica con 15 mg de hidroxitirosol, 2,5 mg de resveratrol, 50 mg de 10 quercetina y 25 mg de EGCG por 240 ml (8 fl oz.).
Ejemplo 13
Una toma energetica se fortifica con 25 mg de hidroxitirosol, 200 mg de cafema y 100% de RDA de vitaminas B1, B2, B3, B5, biotina y B12 por 60 ml (2 fl oz.).
Ejemplo 14
15 Una mini-toma energetica se disena como pralina lfquida / cafe de bolsa y se fortifica con 25 mg de hidroxitirosol, 200 mg de cafema y 100% RDA de vitaminas B1, B2, B3, B5, biotina y B12 por 60 ml (2 fl oz.).
Ejemplo 15
Efectos sinergicos de Hidroxitirosol en asociacion con otros compuestos.
El objetivo del experimento fue investigar si y como se vefa afectada la produccion de energfa mitocondrial en los 20 mioblastos por hidroxitirosol solo o en asociacion con otros compuestos. Para la produccion de energfa, la cadena de transporte de electrones mitocondrial genera un gradiente de protones por el espacio intermembrana mitocondrial, creando un potencial de membrana que activa la smtesis de ATP por el complejo de ATP sintasa. Por lo tanto, el potencial de membrana mitocondrial es indicativo de la produccion de energfa mitocondrial activa. El compuesto fluorescente verde cationico JC-1 (yoduro de 5,5',6,6'-tetracoloro-1,1',3,3'-tetraetilbenzimidazolil- 25 carbocianina) absorbido por las mitocondrias de manera proporcional al potencial de membrana mitocondrial interno. Si se alcanza una concentracion cntica, JC-1 forma agregados, que cambia sus propiedades de fluorescencia de fluorescencia verde a roja. Por lo tanto, la relacion de fluorescencia roja (agregado) a verde (monomerica) es directamente proporcional al potencial de membrana mitocondrial en celulas coloreadas y sirve como indicador para la salud general y la funcion de las mitocondrias. Un potencial de membrana mitocondrial aumentado indica un 30 estado energetico mejorado y una capacidad mejorada para generar ATP y proporcionar energfa para otros componentes celulares.
Se examino el efecto de hidroxitirosol, cafema, L-carnitina o la asociacion de hidroxitirosol con cafema o L-Carnitina sobre el potencial de membrana mitocondrial en mioblastos de raton C2C12. Se sembraron celulas C2C12 en una placa de cultivo de celulas de 96 pozos a 1.000 celulas/pozo y se cultivaron en medio de crecimiento (medio eagle 35 modificado de Dulbecco (DMEM) enriquecido con suero fetal bovino al 10%) en una incubadora estandar (humidificada, 37°C, CO2al 5%) durante 24 h. Despues se incubaron las celulas con medio de cultivo que contema a) disolvente de control (disolucion salina tamponada de fosfato), b) hidroxitirosol 1 uM, c) cafema 200 uM, d) L- carnitina 200 uM, e) hidroxitirosol 1 uM + cafema 200 uM o f) hidroxitirosol 1 uM + L-carnitina 200 uM. El ribonucleotido de aminoimidazol-carboxamida activador de cinasa AMP (AICAR) es conocido que afecta a la 40 produccion de energfa mitocondrial y sirve como control positivo (500 uM). Despues de 24 h de tratamiento, se incubaron las celulas con medio que contema JC-1 (2 ug/ml) durante 30 min a 37°C, despues se retiro la disolucion coloreada, se anadio DMEM sin rojo de fenol y se midieron la fluorescencia verde (ex 485 nm/em 538 nm) y la fluorescencia roja (ex 544 nm/em 590 nm) usando un lector de placas de fluorescencia (SpectraMax M5). Se determino la relacion de fluorescencia roja a verde en cada pozo y se calculo el promedio y la desviacion estandar 45 de los tratamientos por cuadruplicado.
El tratamiento de las celulas C2C12 con AICAR afecto a la produccion de energfa celular, produciendo un aumento en el potencial mitocondrial que se refleja por un aumento en relacion de fluorescencia roja/verde (Fig. 8A). El tratamiento de las celulas con hidroxitirosol (HT) 1 uM no tuvo efecto significativo, mientras que el tratamiento con HT 10 uM aumento el potencial mitocondrial (Fig. 8A). El tratamiento con cafema 200 uM o L-carnitina 200 uM solo 50 no presento efecto significativo sobre el potencial de membrana mitocondrial (Fig. 8B). Sin embargo, cuando se emplearon los compuestos en concentraciones equivalentes pero en asociacion con HT 1 uM, se observo un efecto sinergico sobre el potencial de membrana mitocondrial. El tratamiento de las celulas C2C12 con la asociacion de hidroxitirosol y cafema o la asociacion de hidroxitirosol y L-carnitina aumento el potencial de membrana mitocondrial por 15% y 14%, respectivamente. Este efecto fue comparable al efecto observado con AICAR (+16%) (Tabla I, a
continuacion).
Tabla I: Aumento del potencial mitocondrial cuando se evalua por fluorescencia relativa de JC-1
Tratamiento
Aumento en el potencial de membrana mitocondrial
Control
ref.
AICAR 500 |JM
16%
Hidroxitirosol 1 jM
1%
Hidroxitirosol 10 jM
11%
Cafema 200 jM
-4%
L-carnitina 200 jM
0%
Cafema 200 jM + Hidroxitirosol 1 jM
15%
L-carnitina 200 jM + Hidroxitirosol 1 jM
14%
Estos resultados demuestran que la asociacion de hidroxitirosol y cafema y la asociacion de hidroxitirosol y L- 5 carnitina aumentan sinergicamente la funcion mitocondrial y la produccion de energfa.

Claims (2)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un nutraceutico o composicion alimenticia que comprende hidroxitirosol en asociacion con cafema caracterizado por que la dosis es 10 - 200 mg de hidroxitirosol y 50 - 450 mg de cafema.
  2. 2. La composicion segun la reivindicacion 1, en la que la composicion es una composicion veterinaria.
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Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009144093A1 (en) * 2008-04-17 2009-12-03 Dsm Ip Assets B.V. Hydroxytyrosol benefits mitochondria
EP2501371A4 (en) * 2009-10-07 2013-07-31 Dsm Ip Assets Bv USE OF HYDROXYTYROSOL FOR IMPROVED MUSCLE DIFFERENTIATION
JP6625792B2 (ja) * 2011-03-14 2019-12-25 エヌエスイー プロダクツ インコーポレイテッド 細胞浄化を促進するための経口製剤
RU2451506C1 (ru) * 2011-06-02 2012-05-27 Сергей Юрьевич Лешков Комбинация для лечения сахарного диабета и его осложнений
US9222348B2 (en) 2011-08-05 2015-12-29 Halliburton Energy Services, Inc. Methods for monitoring the formation and transport of an acidizing fluid using opticoanalytical devices
ITMI20112093A1 (it) * 2011-11-17 2013-05-18 Lachifarma Srl Lab Chimico Farmaceutico Sa Composizioni comprendenti idrossitirosolo e epigallocatechin gallato
CL2011003142A1 (es) * 2011-12-13 2012-07-20 Univ Chile Uso de flavonoles naturales, de sus mezclas y/o de mezclas que los contengan que sirven como mimeticos, agonistas o agonistas parciales de ubiquinona y/o ubiquinol.
US20140067268A1 (en) 2012-08-30 2014-03-06 Halliburton Energy Services, Inc. Systems and Methods for Monitoring a Subsea Environment
JP6453534B2 (ja) * 2012-09-28 2019-01-16 小林製薬株式会社 脂質代謝促進剤
US9144555B2 (en) 2012-11-30 2015-09-29 Darlene E. McCord Hydroxytyrosol and oleuropein compositions for induction of DNA damage, cell death and LSD1 inhibition
CN105007943B (zh) * 2012-12-26 2017-07-14 中岛利博 PGC‑1β蛋白的功能调整剂、线粒体功能的调节剂、抗肥胖剂及其筛检方法
JP6230546B2 (ja) * 2012-12-26 2017-11-15 中島　利博 肥満症の予防及び治療作用を有する化合物のスクリーニング方法
BR112015011876A2 (pt) 2013-03-26 2017-07-11 Halliburton Energy Services Inc tubo de luz óptica e método para transmitir radiação eletromagnética em um tubo de luz óptica
EP3376881B1 (en) 2015-11-17 2020-03-11 Société des Produits Nestlé S.A. Compositions and methods using a polyphenol for musculoskeletal health
JP6757132B2 (ja) * 2015-11-30 2020-09-16 サントリーホールディングス株式会社 ヒドロキシチロソールを含有するカフェイン含有飲料
JP2017206477A (ja) * 2016-05-20 2017-11-24 サンスター株式会社 筋形成促進用組成物
CA3029450C (en) 2016-06-27 2021-07-13 The General Hospital Corp Dba Massachusetts General Hospital Stimulating platelet generation by activating mitochondrial biogenesis
JP6129395B1 (ja) * 2016-10-29 2017-05-17 誠一 荒木 ミトコンドリア活性化に起因した血管内皮細胞保護回復用還元型ビタミンｂ２製剤
AU2020273559A1 (en) * 2019-05-13 2021-10-14 Société des Produits Nestlé S.A. Compositions and methods to treat or prevent metabolic fatigue using at the compound oleuropein or a metabolite thereof
CN110810673A (zh) * 2019-12-11 2020-02-21 集美大学 一种减少海鲈体脂沉积的饲料添加剂
JP2023514680A (ja) * 2020-02-28 2023-04-07 バイオサーチ，エス．エー． ヒドロキシチロソールの経口バイオアベイラビリティを改善するポリフェノールの使用及びポリフェノールをベースとする組成物
JP7002601B2 (ja) * 2020-06-12 2022-01-20 サントリーホールディングス株式会社 ヒドロキシチロソールを含有するカフェイン含有飲料
WO2022106408A1 (en) * 2020-11-18 2022-05-27 Société des Produits Nestlé S.A. Compositions and methods using a combination of oleuropein and quercetin for cellular energy
KR102650031B1 (ko) * 2020-12-11 2024-03-22 (주)에이앤바이오 반려동물 심장 기능 개선용 조성물 및 이를 포함하는 기능성 식품
EP4297582A1 (en) * 2021-02-26 2024-01-03 Société des Produits Nestlé S.A. Compositions and methods using a combination of oleuropein and vitamin b6
CN113004198B (zh) * 2021-03-05 2022-06-10 中国科学院上海药物研究所 羟基酪醇烟酰胺共晶、其制备方法及组合物
WO2023222707A1 (en) * 2022-05-18 2023-11-23 Société des Produits Nestlé S.A. Compositions comprising a combination of caffeine and oleuropein or a metabolite thereof and their use for improving muscle function
WO2023222706A1 (en) * 2022-05-18 2023-11-23 Société des Produits Nestlé S.A. Compositions comprising a combination of creatine and oleuropein or a metabolite thereof and their use for improving muscle function
GB202214803D0 (en) * 2022-10-07 2022-11-23 Nicoventures Trading Ltd Oral product
WO2024099884A1 (en) * 2022-11-09 2024-05-16 Société des Produits Nestlé S.A. Compositions and methods using a combination of oleuropein and taurine

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006506361A (ja) * 2002-10-11 2006-02-23 クレアグリ， インコーポレイテッド カルニチンおよび酸化防止ポリフェノールの治療用組合せ
FR2884692B1 (fr) 2005-04-21 2009-08-14 Formquest Ltd Complement alimentaire comprenant une association d'agents antioxydants et de carnitine, obtenue par synthese endogene ou exogene, comme aide a la fertilite chez l'homme et chez la femme
JP2009511522A (ja) * 2005-10-14 2009-03-19 ディーエスエム アイピー アセッツ ビー．ブイ． ニュートラシューティカル組成物の新規な使用
JP2007119373A (ja) * 2005-10-26 2007-05-17 Arkray Inc メイラード反応生成物分解剤およびそれを用いた飲食品
CA2656997A1 (en) * 2006-03-31 2008-10-11 Dsm Ip Assets B.V. Novel use of compounds and combinations of compounds for improving the physical appearance
US8841264B2 (en) * 2006-07-14 2014-09-23 Dsm Ip Assets B.V. Compositions
EP1961310A1 (en) * 2007-02-01 2008-08-27 DSMIP Assets B.V. Novel use of (-) -epigallocatechin gallate
US20100130620A1 (en) * 2007-04-18 2010-05-27 Jiankang Liu Novel use of hydroxytyrosol and olive extracts/concentrates containing it
EP1982707A1 (en) * 2007-04-18 2008-10-22 DSMIP Assets B.V. Use of hydroxytyrosol as anti-aging agent
EP1982706A1 (en) * 2007-04-18 2008-10-22 DSMIP Assets B.V. Use of hydroxytyrosol for the treatment of cartilage injury
CN101095447B (zh) * 2007-07-30 2010-12-08 邵建国 一种具有排毒养颜功能的保健咖啡及其制备方法
WO2009144093A1 (en) * 2008-04-17 2009-12-03 Dsm Ip Assets B.V. Hydroxytyrosol benefits mitochondria

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