ES2318431T3 - Hidrogeles que contienen poliacido gamma-glutamico (gamma-pga, forma h)gamma-poliglutamatos para utilizacion como suplementos nutricionales en productos dieteticos. - Google Patents

Hidrogeles que contienen poliacido gamma-glutamico (gamma-pga, forma h)gamma-poliglutamatos para utilizacion como suplementos nutricionales en productos dieteticos. Download PDF

Info

Publication number
ES2318431T3
ES2318431T3 ES05252997T ES05252997T ES2318431T3 ES 2318431 T3 ES2318431 T3 ES 2318431T3 ES 05252997 T ES05252997 T ES 05252997T ES 05252997 T ES05252997 T ES 05252997T ES 2318431 T3 ES2318431 T3 ES 2318431T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
polyglutamate
glutamic
pga
polyacid
diet
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES05252997T
Other languages
English (en)
Inventor
Guan-Huei Ho
Jeng Yang
Tou-Hsiung Yang
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tung Hai Biotechnology Corp
Original Assignee
Tung Hai Biotechnology Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Tung Hai Biotechnology Corp filed Critical Tung Hai Biotechnology Corp
Application granted granted Critical
Publication of ES2318431T3 publication Critical patent/ES2318431T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/20—Milk; Whey; Colostrum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/142—Amino acids; Derivatives thereof
    • A23K20/147—Polymeric derivatives, e.g. peptides or proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/10—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for ruminants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/30—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for swines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/60—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for weanlings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/70—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds
    • A23K50/75—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds for poultry
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/195—Proteins from microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
    • A61K38/011—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from plants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
    • A61K38/012—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals
    • A61K38/014—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals from connective tissue peptides, e.g. gelatin, collagen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Un hidrogel que se puede obtener por reticulación de: (a) poliácido gamma-glutámico (gamma-PGA, forma H), gamma-poliglutamato en forma Na + , gamma-poliglutamato en forma K + , gammapoliglutamato en forma NH4 + , gamma-poliglutamato en forma Mg ++ o gamma-poliglutamato en forma Ca ++ , o una mezcla de los mismos, con (b) poliésteres glicidílicos de poliglicerol, poliéteres de glicidilo a base de sorbitol, diéster glicidílico de polietilen glicol o triacrilato de trimetilolpropano en un intervalo de dosis comprendido entre 0,01 y 20% en peso de poliácido gammaglutámico (gamma-PGA, forma H), gamma-poliglutamato en forma Na + , gamma-poliglutamato en forma K + , gamma-poliglutamato en forma NH 4 + , gamma-poliglutamato en forma Mg ++ o gamma-poliglutamato en forma Ca ++ , o una mezcla de ellos, para su uso en un suplemento nutritivo en un producto para la dieta.

Description

Hidrogeles que contienen poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) \gamma-poliglutamatos para utilización como suplementos nutricionales en productos dietéticos.
Campo técnico de la invención
La presente invención se refiere a hidrogeles que contienen poliácido \gamma glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}, o una mezcla de ellos para su uso en productos dietarios para favorecer la absorción del calcio en el intestino y por el hueso. Más específicamente, la presente invención se refiere a hidrogeles que contienen poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{+} o \gamma-poliglutamato en forma de Ca^{+}, o una mezcla de los mismos para su uso como absorbentes complejos o suplementos de la nutrición en la comida o una composición de comida para animales para facilitar la absorción de calcio, prevenir osteoporosis y reducir la pérdida de calcio, mantener la concentración ósea y mejorar el crecimiento y un estado saludable.
Antecedentes en la técnica y técnica anterior
El "factor-beta transformante de crecimiento" (TGF-\beta) representa a una familia de proteínas que se conservan altamente evolutivamente y afectan a un amplio espectro de tipos de células. TGF-\beta fue definido por primera vez como un factor que permitía un crecimiento independiente del anclaje de cultivos de células primarias. In vivo, TGF-\beta promueve el depósito de tejido conectivo e induce el crecimiento celular de origen mesenquimal. TGF-\beta afecta a la proliferación y la diferenciación de las células del sistema inmune incluyendo células madre hematopoyéticas (ver Ohta y cols., Nature (1987), 329:539) y células NK (ver Rook y cols., J. Immunol. (1986) 136:3916). TGF-\beta puede administrarse asimismo para suprimir la hiperproliferación, como pueda ser en cáncer y leucemia (ver US 4.816.442).
Se extrajo "proteína morfogenética ósea (BMP)" de hueso desmineralizado utilizando urea o hidrocloruro de guanidina y se hizo precipitar de nuevo con arreglo a las descripciones expuestas en US 4.294.753 y US 4.455.256. Seyedin y Thomas describen en US 4.434.094 la purificación parcial de una proteína derivada de hueso de estimulación de generación ósea a través de la extracción con agentes caotrópicos y la recuperación de la actividad desde una fracción absorbida con CMC a un pH de 4,8. La nueva fracción de proteína fue denominada "factor osteogénico" y se caracterizo por tener un peso molecular por debajo de aproximadamente 30.000 daltons.
Las activinas son proteínas diméricas que representan una familia de proteínas estructuralmente relacionadas con TGF-\beta1, y similares a inhibinas. Las inhibinas son heterodímeros de las subunidades de activina y una subunidad de activina por separado. Se ha demostrado que las activinas estimulan la liberación de hormonas de estimulación de folículos (ver W. Vale y cols., Nature (1986), 321: 776-79), la secreción de insulina desde las isletas pancreáticas (ver Y. Totsuka y cols., Biochem. & Biophys. Res. Comm. (1988) 156:335-39), y la formación de colonia de células progenitoras multipotenciales y eritroides en cultivo de médula ósea (ver J. Yu y cols., Nature (1987) 330:765-67) e inducen la formación de hueso endocondrial in vivo (ver M. E. Joyce y cols., J. Cell. Biol. (1990) 110:2195-2207).
La sialoproteína ósea (BSP) es una fosfoproteína altamente sulfatada y glucosilada que se encuentra exclusivamente en tejidos conectivos mineralizados. El poliácido glutámico favorece la capacidad de unirse a hidroxiapatita e integrinas de superficie de célula. BSP tiene las funcionalidades biofísicas y químicas del nucleador óseo. La secuencia de poliácido glutámico de unión a hidroxiapatita proporciona entidades bifuncionales a través de las cuales BSP puede mediar la diana y la unión de células normales y en metástasis a la superficie ósea (ver Ganes y cols., Bone Sialoproteín, Critical Reviews in Oral Biology and Medicine, 10(1):79-98).
Existen varios documentos de referencia en la técnica que se refieren a proteínas modificadas a través de la conjugación covalente con polímeros, para alterar la solubilidad, la antigenicidad y la eliminación biológica de la proteína (ver US 4.261.973; US 4.301.144; US 4.179.337 y US 4.830.847). CA2102808, publicado el 11 de noviembre de 1992, describe una composición que comprende un factor de crecimiento óseo y una molécula diana que tiene afinidad para un tejido de interés, conjugándose químicamente con un reticulador el factor de crecimiento óseo y la molécula diana. El reticulador es preferiblemente un polímero hidrófilo sintético. Las moléculas tienen preferiblemente afinidad con el hueso. El factor de crecimiento óseo es preferiblemente TGF-\beta, activina, proteína morfogenética ósea (BMP) o sialoproteína ósea (BSP). El tejido de interés incluye hueso, cartílago u otros tejidos o tipos de células a los que se pueden dirigir como diana los factores de crecimiento óseo. Las composiciones están dirigidas para su uso para aumentar la formación de hueso y reparar o tratar de la pérdida ósea que se observa normalmente en la osteoporosis y la osteoartritis, o pérdida de la masa ósea relacionada con la edad.
Se sabe que la absorción de calcio en el cuerpo humano sigue básicamente dos rutas: el transporte activo y el transporte pasivo. La ruta del transporte activo es controlada principalmente por la regulación de la vitamina D y diversas hormonas, absorbiéndose el calcio en la parte superior del intestino delgado frente a un gradiente de concentración; por su parte, en la ruta de transporte pasivo, se absorbe el calcio en el intestino delgado inferior tras un gradiente de concentración. La relación del transporte pasivo al intestino delgado inferior es sobresalientemente alta cuando se dispone de calcio soluble en abundancia. La ruta de transporte activo no puede elevarse por encima de una cantidad determinada incluso aunque aumente la concentración de calcio soluble, mientras que el transporte pasivo se eleva a medida que aumenta la concentración de calcio soluble en el intestino. La proporción de absorción de calcio en los intestinos ha sido registrada en un intervalo comprendido entre 10 y 50%. El fosfopéptido de caseína (CPP), un producto de degradación enzimático de la caseína proteína de la leche en el intestino, acelera la absorción de calcio (ver US 5.447.732 publicada el 5 de septiembre de 1995) al elevar la concentración de calcio soluble en el intestino delgado. El calcio se mantiene en un estado soluble a través de la coordinación compleja de los grupos fosfato de la fosfoserina y los grupos carboxilato de los amino ácidos ácidos contenidos en CPP.
Contenido de la invención
En la presente invención se proporcionan hidrogeles que contienen poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}, o una mezcla de ellos para su uso como suplementos nutritivos que se solubilizan efectivamente y estabilizan tanto el calcio como el magnesio a través de la formación de complejos y con los que se consigue de manera efectiva que el calcio y el magnesio sean más biodisponibles cuando se utilizan en los alimentos o una composición de comida. En particular, la invención proporciona:
Un hidrogel que se puede obtener por reticulación de:
(a) poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}, o una mezcla de los mismos, con
(b) poliésteres glicidílicos de poliglicerol, poliéteres de glicidilo a base de sorbitol, diéster glicidílico de polietilen glicol o triacrilato de trimetilolpropano en un intervalo de dosis comprendido entre 0,01 y 20% en peso de poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}, o una mezcla de ellos,
para su uso en un suplemento nutritivo en un producto para la dieta.
La invención proporciona además:
El uso de un hidrogel que se puede obtener por reticulación de:
(a) poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}, o una mezcla de los mismos, con
(b) poliésteres glicidílicos de poliglicerol, poliéteres de glicidilo a base de sorbitol, diéster glicidílico de polietilen glicol o triacrilato de trimetilol propano en un intervalo de dosis comprendido entre 0,01 y 20% en peso de poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}, o una mezcla de ellos,
en la fabricación de un medicamento, un producto alimenticio, un alimento funcional, un nutracéutico o un suplemento para la dieta para su uso en la mejora de la solubilidad in vivo o la biodisponibilidad in vivo de calcio y magnesio.
Descripción de los gráficos
La figura 1 muestra la estructura química de poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma K^{+} (A), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} (B), \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} (C) (M(I)=K^{+}, Na^{+}, o NH_{4}^{+}; M(II)=Ca^{++} o Mg^{++}).
La figura 3 muestra los espectros ^{1}H-RMN 400 MHz de \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} (A), \gamma-poliglutamato en forma K^{+} (B), \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+} (C), en D_{2}O a un pH neutro y una temperatura de 30ºC. Se midió el desplazamiento químico en unidades ppm desde el patrón interno. X indica pico de impureza.
La figura 3 presenta espectros de ^{13}C-RMN de \gamma-poliglutamato en forma K^{+} (A), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} (B), \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++} (C), \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} (D) en D_{2}O a un pH neutro y una temperatura de 30ºC. Se midió el desplazamiento químico en unidades ppm desde el punto de referencia interno.
La figura 4 muestra el espectro de absorción de infrarrojo (FT-IR) de \gamma-poliglutamato en forma Ca^{+} (C) y \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} (D) en pellet de KBr.
La figura 5 presenta curvas de pH-análisis volumétrico de \gamma-PGA con NaOH 0,2 N (A), \gamma-PGA con Ca(OH)_{2} (B), y \gamma-PGA con NH_{4}OH 5N (C) a 25ºC.
La figura 6 muestra el efecto de diferentes pesos moleculares de \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} sobre la actividad del el factor de tolerancia a la glucosa (GTF), según se ilustra en el ejemplo 11.
Descripción detallada de la invención
La presente invención se refiere a hidrogeles que contienen poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}, o una mezcla de ellos para su uso en alimentos y en comidas para animales como suplemento nutricional para facilitar la absorción del calcio de la dieta y el crecimiento de células de osteoblasto. El poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), y los \gamma-poliglutamatos (formas Na^{+}, K^{+}, NH_{4}^{+}, Ca^{++} y Mg^{++}) son biodegradables, biopolímeros no tóxicos producidos a partir de poliácido L-glutámico a través de un proceso de fermentación sumergida (ver H. Kubota y cols., Production of Poly(\gamma-Glutamic Acid) by Bacillus subtilis F-2-01, Biosci. Biotech. Biochem. 57(7), 1212-1213, 1993 y Y. Ogawa y cols., Efficient Production of \gamma-Polyglutamic Acid by Bacillus subtillis (natto) in Jar Fermentation, 61(10), 1684-1687, 1997). Los \gamma-poliglutamatos (formas Na^{+}, K^{+}, NH_{4}^{+}, Ca^{++} y Mg^{++}) poseen unas excelentes propiedades de absorción de agua, forman complejo y presentan una buena capacidad de coordinación con los iones metálicos de Ca^{++}, Mg^{++}, Zn^{++}, Mn^{++}, Se^{++++} y Cr^{+++} y sus propiedades polianiónicos están siendo exploradas para aplicaciones en la solubilización y estabilización de los iones metálicos que se han mencionado en sistemas acuosos. En la figura 1, se muestran las estructuras moleculares de poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA) y \gamma-poliglutamatos (formas Na^{+}, K^{+}, NH_{4}^{+}, Ca^{++}, Mg^{++}), y en las figuras 2, 3 y 4, respectivamente, se muestran los espectros ^{1}H-RMN, ^{13}C-RMN, FT-IR. En la tabla 1 se muestran los datos analíticos y de los espectros. En la figura 5 se muestran las curvas de pH-análisis volumétrico.
TABLA 1
1
El poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) es un biopolímero de ácido glutámico con un grado de polimerización comprendido entre 1.000 y 20.000 y que se forma solamente en la unión \gamma-péptido entre fracciones glutámicas. El poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), y los \gamma-poliglutamatos (formas Na^{+}, K^{+}, NH_{4}^{+}, Ca^{++} y Mg^{++}) contienen una amina terminal y múltiples grupos ácido \alpha-carboxílico/carboxilato. El poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), y los \gamma-poliglutamatos (formas Na^{+}, K^{+}, NH_{4}^{+}, Ca^{++} y Mg^{++}) existen en varios estados de conformación: \alpha-hélice, arrollamiento aleatorio, \beta-lámina, región de transición hélice-arrollamiento y agregación con recubrimiento, dependiendo de las condiciones del entorno, tales como el pH, la concentración iónica y otras especies catiónicas. Con el dicroismo circular (CD), la cantidad de forma \alpha-helicoidal presente se mide normalmente en función de la magnitud de los espectros a 222 nm. La transición hélice-arrollamiento tiene lugar a un pH comprendido entre 3 y 5, desde la forma libre de poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), en solución acuosa homogénea, y un desplazamiento a un pH más alto de 5-7 para una forma unida. La transición desde el arrollamiento aleatorio a la agregación recubierta tiene lugar cuando forma complejo-coordinación con determinados iones metálicos divalentes y algunos iones metálicos superiores a través de un cambio de conformación drástico de \gamma-PGA.
Los estudios realizados por los autores de la invención demuestran que el poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), y los \gamma-poliglutamatos (formas Na^{+}, K^{+}, NH_{4}^{+}, Mg^{++} y Ca^{++}) solubilizan y estabilizan de forma efectiva tanto el calcio como el magnesio a través de la formación de complejos y hacen que el calcio y el magnesio sean biodisponibles de una manera más eficaz cuando se utilizan en los alimentos o cuando se utilizan en los piensos para animales como suplemento nutricional.
El poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), reacciona con las sales de calcio y las sales de magnesio para formar \gamma-poliglutamatos de calcio y \gamma-poliglutamatos de magnesio estables y solubles en agua, respectivamente. Los autores de la invención han observado que estos complejos coordinados, \gamma-poliglutamatos de calcio y \gamma-poliglutamatos de magnesio son más absorbibles y biodisponibles con arreglo al estudio de cultivo de células in vitro.
La absorción de metal en \gamma-PGA implica dos posibles mecanismos: (A) la interacción directa de iones metálicos con sitios carboxílicos y (B) la retención de contra-iones metálicos pesados en forma móvil a través del campo de potencial electrostático creado por los grupos COO^{-}. Además de las interacciones con los grupos carboxilato, las uniones amida también pueden proporcionar sitios de interacción débiles. Además de la estructura conformacional y la ionización de \gamma-PGA, es también importante conocer los tipos de especies metálicas hidrolizadas, que están presentes en una solución acuosa. La formación de diversas especies diferentes puede llevar a diferentes capacidades de absorción de los iones metálicos.
La osteoporosis y la fractura de huesos son enfermedades metabólicas comunes propias de las personas ancianas y las mujeres tras la menopausia. El calcio de la dieta es esencial al considerar las necesidades de calcio en las personas ancianas para prevenir los estados de osteoporosis, o incluso para aumentar la concentración ósea y la densidad mineral ósea. La osteoporosis es un trastorno que se caracteriza por la pérdida del hueso y está asociada con un mayor riesgo de fracturas de los huesos y dolor de espalda y de las articulaciones. Por lo tanto, para prevenir la osteoporosis conviene ingerir suficientes nutrientes en la dieta, sobre todo los alimentos con un contenido en calcio altamente biodisponible. El calcio de la dieta, que es más absorbible y biodisponible, es esencial a la hora de considerar las necesidades de calcio en las personas ancianas debido al hecho de que la capacidad de absorción del calcio disminuye con la edad.
Los autores de la invención han llegado a la conclusión tras una exhaustiva investigación de que al añadir poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), y los \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++} y \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++}), o una mezcla de ellos como complejo absorbente del calcio y el magnesio se consigue una mejor solubilidad y biodisponibilidad que mejoran la absorción del calcio en el intestino. A veces, se enriquecen los alimentos con minerales utilizando sales minerales inorgánicas o minerales en polvo, pero presentan la posibilidad de producir sales insolubles con otras sustancias presentes a la vez. Dado que una ingestión excesiva de un tipo de mineral puede inhibir la absorción de otros animales, no se consigue mucha mejora con la utilización de minerales en el cuerpo. Un ejemplo típico es que la ingestión de mucho calcio inhibe la absorción de hierro. Asimismo, un enriquecimiento de los alimentos con minerales excesivo tiene como resultado la desventaja de empeorar el sabor de los alimentos. Asimismo, se considera de manera general que los minerales deben estar presentes en el intestino delgado en un estado soluble para ser absorbidos.
El poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), y los \gamma-poliglutamatos (formas Na^{+}, K^{+}, NH_{4}^{+}, Ca^{++} y Mg^{++}) poseen un buen efecto de solubilización en los minerales del intestino delgado inferior y aceleran la absorción del calcio en el organismo humano o animal. En particular, la presente invención se refiere a hidrogeles que contienen poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++}, o una mezcla de ellos para su uso como suplemento de la nutrición en un producto para dieta.
El producto para dieta puede consistir v.g. en un producto alimenticio, un nutracéutico, un alimento funcional o un suplemento de la dieta. En un modo de realización de la presente invención, el producto para la dieta es un nutriente y comprende entre 0,005% en peso y 100% en peso de dicho suplemento de la nutrición en función del peso en seco total de dicho producto para la dieta. En otro modo de realización, el producto para la dieta es un alimento o una composición de comida y comprende entre 0,005% en peso y 5% en peso de dicho suplemento de la nutrición en función del peso en seco total de dicho producto para la dieta.
El producto para la dieta según la presente invención puede comprender además un componente seleccionado del grupo que consiste en maltodextrano con 5 a 40 equivalentes en dextrosa, proteína láctea, aislado de proteína de soja, glucosa, lactosa, sacarosa, fructosa, oligo-fructosa de cadena reducida, glucano y otros oligo-polisacáridos, colágeno, gelatina de colágeno hidrolizada, alfa-almidón, proteína de soja hidrolizada, almidón parcialmente hidrolizado, glicerol, propilen glicol, etanol, goma arábiga, goma guar, carragenano, celulosa y otras celulosas modificadas, y mezclas de ellos. Asimismo, dicho producto para la dieta puede presentarse en forma de cápsula de gel blanda o dura, una tableta o una preparación líquida.
De acuerdo con la presente invención, el poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++}, tienen independientemente un peso molecular comprendido entre 5000 y 2,5 x 10^{6}. Los autores de la invención han observado que poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++}, que tienen independientemente un peso molecular en el intervalo comprendido entre 150 x 10^{3} y 450 x 10^{3} daltons facilitan el crecimiento de células de osteoblasto en estudios in vitro y mejoran el rendimiento de ponedoras de huevos y el crecimiento de pollos de corral en estudios in vivo.
Métodos experimentales de la invención
Se puede producir una cantidad comercial de poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) y sus sales (es decir \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}, en un proceso de fermentación sumergida con Bacillus subtilis var. natto (ver H. Kubota y cols., Production of Poly(\gamma-glutamic Acid) by Bacillus subtilis F-2-01, Biosci. Biotech. Biochem. 57(7),1212-1213, 1993 and Y. Ogawa y cols., Efficient Production of \gamma-polyglutamic Acid by Bacillus subtilis (natto) in Jar Fermentation, 61(10), 1684-1687, 1997), o Bacillus licheniformis (ver JP 05-316999, publicado el 12 de marzo de 1993), utilizando ácido L-glutámico y glucosa como material de alimentación principal. Los medios de cultivo microbianos contienen fuente de carbono, fuente de nitrógeno, minerales inorgánicos y otros nutrientes. Normalmente, se utiliza la cantidad de ácido L-glutámico a una concentración comprendida entre 3 y 12%, glucosa a una concentración de 5 a 12%, ácido cítrico a una concentración de 0,2 a 2% como fuente de carbono parcial; se emplean como fuentes de nitrógeno peptona y sulfato de amonio o urea; se utiliza extracto de levadura como fuente de nutrientes; Se utilizan Mn^{++}, Mg^{++} y NaCl como fuentes minerales. En condiciones de ventilación y agitación apropiadas, se mantiene el cultivo a temperaturas comprendidas entre 30 y 40ºC, y se mantiene el pH a 6-7,5 utilizando una solución de urea o solución de hidróxido sódico; el tiempo de cultivo se prolonga normalmente durante un período de 48 a 84 horas. El poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), y sus sales (es decir, \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}) se acumulan extracelularmente.
Normalmente, se extraen el poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) y sus sales (es decir, \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}) del caldo de cultivo de fermentación a través de procedimientos diversos entre los que se incluyen ultra-centrifugado, o filtración presurizada para separar las células, a continuación adición de 3-4 veces más de etanol para hacer precipitar el poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) y sus sales (es decir \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}). Se vuelven a disolver los precipitados en agua y se utiliza otra porción de etanol para hacer precipitar el poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) y sus sales (es decir, \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} y \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}). Se repiten varias veces las etapas de disolución-precipitación con el fin de recuperar el poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) y sus sales (es decir \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}).
Normalmente, se disuelven poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) y sus sales (es decir, \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}) en un disolvente apropiado como agua, etanol o metanol y se ajusta el pH a entre 5,0 y 7,5. Se añaden los múltiple agentes de reticulación química que se pueden seleccionar apropiadamente entre poliéteres de glicidiolo de poliglicerol, poliéteres de glicidilo a base de sorbitol, diéter de glicidilo de polietilen glicol o triacrilato de trimetilol propano, a la solución con agitación constante, en una proporción de dosis de 0,01 a 20% del peso del poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) y sus sales (es decir, \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}), dependiendo del tipo de agentes de reticulación y la calidad de los hidrogeles necesaria. La reacción de gelificación se completa normalmente al cabo de 1 a 4 horas, a una temperatura de reacción comprendida entre 50 y 120ºC, dependiendo del equipo y las condiciones que se utilicen. A continuación, se liofilizan los hidrogeles formados para producir un poliácido \gamma-glutámico reticulado (\gamma-PGA, forma H) y sus sales (es decir, \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}) reticulado deshidratado, que poseen una capacidad de absorción de agua superior, no son solubles en agua y forman hidrogeles biodegradables, transparentes e incoloros cuando se hinchan completamente en agua.
El poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) y sus sales (es decir, \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}), con un peso molecular comprendido entre 5.000 y 900.000, se pueden producir por hidrólisis ácida controlada, en condiciones de reacción específicas seleccionadas de un pH, temperatura, período de reacción, y concentración del poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H). El pH puede estar comprendido entre pH 2,5 y 6,5 con acidulantes apropiados como HCl, H_{2}SO_{4}, o con otros ácidos orgánicos, la temperatura de hidrólisis puede controlarse en el intervalo comprendido entre 50 y 120ºC, el período de reacción puede estar comprendido entre 0,5 y 5 horas, y la concentración de poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) con un peso molecular de 1x10^{6} y más alto puede ser cualquier concentración que se requiera de manera conveniente. Una vez completada la reacción, son necesarios una posterior purificación con diálisis o filtración de membrana y el secado para producir el poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) y sus sales (es decir, \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}) de peso molecular medio y reducido de alta pureza de selección. La velocidad de hidrólisis ácida es más rápida a un pH más bajo, una temperatura más alta y una concentración más alta del poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H). Se pueden producir las sales \gamma-poliglutamato (es decir, \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}) haciendo reaccionar el poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) seleccionado con una solución de hidróxido básica o un óxido de los iones metálicos de Na^{+}, K^{+}, NH_{4}^{+}, Ca^{++} y Mg^{++} de selección, y ajustarse el pH hasta el estado deseado entre 5,0 y 7,2, según se requiera.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo experimental
Con el fin de explicar con más detalle la presente invención, se exponen los siguientes ejemplos experimentales para demostrar cómo se puede utilizar la presente invención para conseguir una absorción del calcio mucho mejor y añadir beneficios saludables para el crecimiento y la fortaleza de los huesos, reducir la pérdida de calcio y reducir los estados de osteoporosis. No obstante, el marco de la presente invención no queda limitado con estos ejemplos experimentales. Los ejemplos 1, 2 y 5 hasta 12 se presentan con fines comparativos solamente.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo comparativo 1
Estudio de cultivo de células in vitro - Facilitar el crecimiento de células de osteoblasto
En este estudio se utilizaron poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) HM con un peso molecular de 980 x 10^{3} daltons, \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} HM con un peso molecular de 880 x 10^{3} daltons, y \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, LM con un peso molecular de 250 x 10^{3} daltons.
Se añadieron 10 mg de poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) y/o \gamma-poliglutamato en la forma Na^{+}, a 1 ml de medio F-12 DMEM (Medio Eagle modificado con Dulbecco) que contenía 10% de suero bovino fetal (FBS), a continuación, se preparó una serie de diluciones apropiadas para conseguir diferentes concentraciones de poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) y/o \gamma-poliglutamato en la forma Na^{+}, comprendidas entre 0,1% y 4,9x10^{-5}% en el mismo medio de nutriente, y se depositaron 200 \mul de cada muestra en una placa de cultivo de 96 pocillos por triplicado. Se utilizó F-12 DMEM (medio de Eagle modificado con Dulbecco) que contenía solamente 10% de suero bovino fetal (FBS) como control.
Se separó una muestra de células de osteoblasto de las células madre de la médula ósea humana en su fase de crecimiento exponencial del medio de crecimiento por centrifugado a 1200 rpm durante 6 minutos, a continuación, se lavó tres veces con 10 ml de solución de tampón fosfato (PBS) (fosfato 0,01 M, pH 7,4) y se volvió a suspender en medio F-12 DMEM que contenía suero bovino fetal al 10% (FBS) a una densidad de células de 1 x 10^{5}/ml. Se añadieron 200 \mul de la suspensión de células en crecimiento activo a cada pocillo de muestra. A continuación, se mezclaron a fondo las muestras de las placas de cultivo de 96 pocillos con una mezcladora de torbellino y después se incubaron durante 48 horas a 34ºC, RH 75% bajo 5% de CO_{2}. A continuación, se añadieron 20 \mul de solución MTT [bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenol tetrazolio] (1 mg/ml) a cada pocillo, se mezcló a fondo y se volvió a incubar durante 4 horas. Se añadieron 100 \mul de SDS al 10% en tampón HCl 0,01 N a cada pocillo de muestra para disolver el cristal durante toda la noche, a temperatura ambiente. Se midió la densidad óptica (OD_{570} nm) de cada muestra y se registró para calcular la mejora del crecimiento de células de osteoblasto.
La enzima dehidrogenasa de mitocondria de células de osteoblasto puede reaccionar con la sal MTT, que es una sal de tetrazolio incolora, para formar un cristal de sal de formazán de color azul. Se hizo reaccionar el cristal de formazan con SDS y cambió en formazan de color azul soluble. La intensidad del color de formazan azul representa la cantidad de crecimiento de células de osteoblasto. Se puede calcular la mejora en el crecimiento de células osteoblasto tal como se muestra a continuación:
Aumento en MTT, % = \frac{(OD_{570})a - (OD_{570})c}{(OD_{570})c} x 100%
en la que (OD_{570})a: la densidad óptica del pocillo de muestra
\hskip0.7cm
(OD_{570})c: la densidad óptica del pocillo de control. 
\newpage
Ejemplo comparativo 2
En la tabla 2 a continuación, se muestran los resultados de la proporción de mejora de crecimiento con respecto al ejemplo comparativo 1.
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 2 Proporción de mejora del crecimiento de células osteoblasto con diferentes concentraciones de poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) y/o \gamma-poliglutamato en la forma Na^{+}, como % de control.
2
Nota: (OD_{570})c = 0,713 (=100%) para el control.
\vskip1.000000\baselineskip
Los resultados indican claramente que se favoreció el crecimiento de las células osteoblasto en más de un 130% con \gamma-poliglutamato en la forma Na^{+}, HM, en más de un 80% con \gamma-poliglutamato en la forma Na^{+} LM, y en más de 125% con poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) incluso a un nivel de concentración baja a 0,39 ppm. El \gamma-poliglutamato en la forma Na^{+}, HM de peso molecular más alto presentó un mejor favorecimiento del creci-
miento.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo experimental 3
Estudio de cultivo celular in vitro - facilitar la formación de hueso
En este estudio se utilizaron poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) HM con un peso molecular de 980 x 10^{3} daltons, \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} HM con un peso molecular de 880 x 10^{3} daltons, y \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, LM con un peso molecular de 250 x 10^{3} daltons.
Se añadieron 10 mg de poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) y/o \gamma-poliglutamato en la forma Na^{+}, a 1 ml de medio F-12 DMEM (Medio Eagle modificado con Dulbecco) que contenía 10% de suero bovino fetal (FBS), a continuación, se preparó una serie de diluciones apropiadas para conseguir diferentes concentraciones de poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H) y/o \gamma-poliglutamato en la forma Na^{+}, comprendidas entre 0,1% y 3,1 x 10^{-3}% en el mismo medio de nutriente, y se depositó 1 ml de cada muestra en una placa de cultivo de 96 pocillos por triplicado. Se utilizó F-12 DMEM (medio de Eagle modificado con Dulbecco) que contenía solamente 10% de suero bovino fetal (FBS) como control.
Se añadieron 2 ml de F-12 DMEM (Medio de Eagle modificado con Dulbecco) que contenía 10% de suero bovino fetal (FBS) al 10% a cada pocillo de muestra y, a continuación, se mezcló a fondo.
Se separó una muestra de células de osteoblasto de las células madre de la médula ósea humana en su fase de crecimiento exponencial del medio de crecimiento por centrifugado a 1200 rpm durante 6 minutos, a continuación, se lavó tres veces con 10 ml de solución de tampón fosfato (PBS) (fosfato 0,01 M, pH 7,4) y se volvió a suspender en medio F-12 DMEM que contenía suero bovino fetal al 10% (FBS) a una densidad de células de aproximadamente 1 x 10^{5}/ml. Se añadió 1 ml de la suspensión de células en crecimiento activo a cada pocillo de muestra. A continuación, se mezclaron a fondo las muestras de las placas de cultivo de 96 pocillos con una mezcladora de torbellino y después se incubaron durante 7 días, a 34ºC, RH 75% bajo 5% de CO_{2}. A continuación, se añadieron 200 \mul de solución de tripsina a cada pocillo y se hizo reaccionar durante aproximadamente 30 segundos a 34ºC. A continuación, se añadió 1 ml de F-12 DMEM (Medio de Eagle modificado con Dulbecco) a cada pocillo de muestra y se mezcló a fondo. Se retiraron las células suspendidas y se descartaron. Se añadió 1 ml de solución 0,01 M de bicarbonato/carbonato sódico (pH 10) que contenía 100 \mul de pNPP/2 ml (solución de fosfato de p-nitrofenilo (SK-5900, suministrada por Vector), se mezcló a fondo y se hizo reaccionar durante 30 minutos a temperatura ambiente, a continuación se añadió 1 ml de solución NaOH 0,1 M para detener la reacción. Se midió y se registró la absorbancia
a 410 nm.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo experimental 4
En la tabla 3 a continuación, se muestran los resultados del ejemplo experimental 3.
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 3 Efecto de formación de hueso según lo refleja la actividad de fosfatasa alcalina, OD_{410}
3 
\vskip1.000000\baselineskip
La actividad de fosfatasa alcalina es un indicador de la existencia de células osteoblasto. Se presenta una alta actividad de fosfatasa alcalina antes de la calcificación de células, y la densidad de las células puede regular la diferenciación de osteoprogenitor y la formación de hueso. Cuando se cultivaron células madre de médula ósea humana durante una semana, se observó la presencia de cierta actividad de fosfatasa alcalina, lo que indica la existencia de células de osteoprogenitor (ver Weinreb M., Schinar, D.M. y Rodan, G.A. 1900, Different Pattern of Alkaline Phosphatase, Osteodentin, and Osteocalcin Expresion in Developing Rat Bone Visualized by in situ Hybridization, J. Bone Miner. Res. 5: 838-842; Yao, K.L., Todescan, R. Jr. and Sodek, J., 1994, Temporal Changes in Matriz Protein Synthesis and mRNA Expression during Mineralized Tissue Formation by Adult Rat Bone Marrow Cells in Culture. J. Bone Miner. Res. 9:231-240; y Hesbertson A., and Aubin, J.E. 1995, Dexamethasone, Alters the Subpopulation Make-Up of Rat Bone Marror Stromal Cultures, J. Bone Miner. Res. 10: 285-294).
Los resultados de la tabla 3 demuestran que tanto \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} HM como hidrogel \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} son muy efectivos para facilitar el crecimiento de células osteoblasto, siendo la concentración óptima 500 ppm (0,05%) y 6,2 ppm (0,0062%) para \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} HM, e hidrogel \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, respectivamente, si bien LM \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} de peso molecular reducido facilita también el crecimiento de células osteoblasto, pero a un nivel de concentración mucho más alto de 1000 ppm (0,1%). Los resultados sugieren que \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} facilita de forma efectiva la absorción del calcio biodisponible por las células osteoblasto y sus precursores, y la fuerte hidrofilia y la conformación en arrollamiento activo de \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} se suman facilitando las funciones de los factores de crecimiento óseo como TGF-beta, activina, proteína morfogénica ósea (BMP) y la sialoproteína ósea (BSP) en el crecimiento del hueso formando complejo de forma efectiva con los factores de crecimiento óseo y el transporte a las células osteoblasto para la formación y crecimiento óseos.
\newpage
Ejemplo comparativo 5
Estudios de alimentación de campo in vivo - Campo: alimentación de ponedoras de huevos en una granja de pollos local en Yuan-An
Se utilizaron ponedoras de huevos de 73 semanas de vida para este estudio. Se utilizó un total de 8 lotes, y 8.000 pollos por lote. Se recogieron muestras de huevos durante un período de 4 semanas de alimentación regular (Ver Aho, P.W. 2002, Introducción para la industria de carne de pollo de EE.UU., páginas 801 a 818 en Commercial Chicken Meat and Egg Production, 5ª ed. Bell, D.D. and Weaver, junior, W.D. ed. Kluwer Publishing, Norwell, BS. Havenstein, G.B. y cols., 1994, Growth, Liability and Feed Conversion of 1957 vs 1991 broilers when fed "typical" 1957 and 1991 broiler diets. Poult. Sci. 73: 1785-1794), seguido de un período de 4 semanas de alimentación regular con un contenido de 100 ppm de \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} LM con un peso molecular comprendido entre 200 x 10^{3} a 400 x 10^{3}, y después un período de 2 semanas de alimentación regular. Se analizaron las muestras de huevo para determinar la resistencia de la cáscara de huevo; el grosor de la cáscara de huevo; el pH de la clara del huevo y la yema del huevo; la altura de la clara de huevo. A continuación, se calcularon los valores HU, que constituyen un índice de frescura general o el índice de sanidad de la calidad del huevo.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo comparativo 8
En las tablas 4, 5 y 6 se muestran los resultados del ejemplo comparativo 5.
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 4 Efecto de \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} en la calidad del huevo, valor HU
4
TABLA 5 Efecto de \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} en la resistencia de la cáscara de huevo
5
TABLA 6 Efecto de \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} en la altura de la clara de huevo
6 
\vskip1.000000\baselineskip
Los resultados de las tablas 4, 5 y 6 mostraron que se producen significativas mejores en la firmeza de la yema de huevo y la clara de huevo, la resistencia de la cáscara del huevo, tal como lo demuestra una reducida diferencia de HU y la reducida diferencia de los valores KGF durante el período de alimentación con contenido en \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}. Se mejoran el grosor de la cáscara de huevo, la altura de la clara de huevo y el color de la yema de huevo durante el período de alimentación con un contenido en forma \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo comparativo 7
Estudio de alimentación de campo in vivo - Campo de alimentación de cerdos en una granja porcina local en Yee-Thiang
Se estudiaron los aspectos nutricional y para la salud de poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} y \gamma-poliglutamato en forma Ca^{+} en el campo de alimentación de 2 lotes de 2 grupos de crías de cerdo, durante un período de 39 días, a un nievl de 100 ppm de \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} y \gamma-poliglutamato en forma Ca^{+} en el suplemento de la comida de una formulación normal. En la tabla 7 se muestran los resultados.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(Tabla pasa a página siguiente)
\newpage
Ejemplo comparativo 8
En la tabla 7 se muestran los resultados del ejemplo comparativo 7.
TABLA 7 Efecto de \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} y \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++} en la grasa corporal de las crías de cerdo
7
Los resultados de la tabla 7 demuestran claramente que \gamma-poliglutamato en la forma Ca^{++} tiene un efecto de reducción de las grasas del cuerpo y de reducción de la conversión alimento-en carne en las crías de cerdo, pero \gamma-poliglutamato en la forma Na^{+} aumenta ligeramente la conversión alimento-en-carne y tiene un efecto no significativo en la reducción de la grasa del cuerpo en las crías de cerdo.
Ejemplo comparativo 8
Estudio de alimentación de campo in vivo - Campo: alimentación de aves de corral en la granja de pollos local de Tong San
Se estudiaron los aspectos nutricional y de la salud de \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} en el campo de alimentación de 2 lotes de 4 grupos de crías de pollo durante un período de 25 días, a un nivel de 100 ppm de \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} LM, con un peso molecular de 250 x 10^{3}, en el suplemento del alimento de una formulación normal. En la tabla 8 se muestran los resultados.
\newpage
Ejemplo comparativo 10
En la tabla 8 se muestran los resultados del ejemplo comparativo 9.
TABLA 8 Efecto de \gamma-poliglutamato en la forma Na^{+} en el crecimiento de pollos de corral
8
Los resultados demuestran que \gamma-poliglutamato en la forma Na^{+} facilita la absorción de calcio y el peso total de los pollos tanto hembras como machos. El peso final medio por kg de peso inicial a lo largo de un período de alimentación de 25 días es 4,712 kg para los pollos que consumieron una alimentación regular (ver Havenstein, G.B. y cols., 1994, Growth, livability and feed conversion of 1957 vs a 1991 broilers when fed "typical" 1957 y 1991 broiler diets. Poult. Sci. 73: 1795-1794) que contenía \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} y 4,629 kg para los que estuvieron alimentados con alimento regular (control). Las longitudes del hueso de la pata son 9,38 cm para los machos y 9,18 cm para los pollos hembra en el lote de ensayo que fue alimentado con alimento que contenía \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, y 9,25 cm para los machos y 9,10 cm para los pollos hembra en el conjunto de control con alimentación regular. El contenido en calcio en el hueso de la pata es un 17,68% para los machos y 16,69% para los pollos hembra en el lote de control para alimentación regular.
Ejemplo comparativo 11
Estudio de cultivo de células in vitro - Facilitar la actividad de GTF (Factor de tolerancia a la glucosa) con un modelo celular 3T3-L1
Se utilizaron muestras de \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} HM, con un peso molecular de 88 x 10^{3} y \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} en forma LM, con un peso molecular de 250 x 10^{3} en este estudio de cultivo celular.
Se descongelaron muestras de células pro-adiposa 3T3-L1 y se cultivaron en medio DMEM (MEM de Dulbecco)que contenía un 10% de suero bovino fetal (FBS) en una incubadora a 37ºC bajo un 5% de CO_{2} durante una semana antes de la transferencia a un cultivo de diferenciación. Tras el cultivo durante 2 días en el medio de cultivo de diferenciación DMEM que contenía 10% de FBS, IBMX 0,5 mM, DX 1 \muM e 1 \mug/ml de insulina, se transfirieron las células pre-adiposa a un medio DMEM general que contenía 10% de FBS y se continuó el cultivo durante 10 días más hasta que se hubieron transformado un 90% cde células en células adiposas maduras. En este momento, las células cambian de forma desde las formas en estrella originales a las formas en gotas oleosas, que se pueden observar visualmente como materia oleosa blanca en el fondo de la placa de cultivo. Una vez que se hubo completado la diferenciación de las células, se continuó después con el siguiente experimento.
En primer lugar se cultivaron las células adiposas maduras en medio DMEM sin azúcar que contenía 2% de FBS en una incubadora a 37ºC bajo un 5% de CO_{2} durante 1 hora, se lavaron con PBS (solución de tampón fosfato 0,01M, pH 7,4), después se adieron 200 \mul de muestras de ensayo que contenían diferentes concentraciones de \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} y 200 \mul de solución KBR que contenía insulina 10 nM y 2,5 g/l de glucosa, a continuación, se incubó a 37ºC bajo 5% de CO_{2} durante 2 horas. Después del centrifugado para separar las células, se tomó el sobrenadante transparente para analizar la concentración de la glucosa con un aparato de análisis de la glucosa. La diferencia en la cantidad de glucosa antes y después de la reducción se define como la absorción de glucosa total por las células adiposas. El porcentaje de aumento en la absorción de glucosa se define como la actividad de GTF tal como se muestra a continuación.
Aumento en actividad GTF (%) =
\frac{Absorción \ de \ glucosa \ por \ la \ muestra - Absorción \ glucosa \ por \ el \ control}{Absorción \ de \ glucosa \ por \ control} x 100%
Ejemplo comparativo 12
En la figura 6 se muestra el efecto del diferente peso molecular de \gamma-poligutamato en la forma Na^{+} sobre la actividad de GTF a partir del ejemplo experimental 11.
Los resultados demuestran que los pesos moleculares de \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} tanto alto como bajos aumentaron de forma efectiva la actividad de GTF, con el aumento máximo en un 21% observado a aproximadamente 300 ppm para el peso molecular más alto de \gamma-poliglutamato en la forma Na^{+} HM, y el aumento de la actividad de GTF máxima en aproximadamente 33,5% observada a un intervalo de concentración de 150 a 600 ppm para el peso molecular de \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} LM bajo.
Los resultados sugieren claramente que \gamma-poliglutamato en forma Na^{+} facilita el consumo de glucosa a través del GTF desde células adiposas, lo que significa una utilización más efectiva de glucosa en el mantenimiento del crecimiento y la suma de beneficios para la salud del cuerpo y puede ejercer una buena funcionalidad biológica en el control de estados patológicos de diabetes en los seres humanos.
Un producto de alimento es un material comestible compuesto principalmente de uno o más de los macronutrientes proteína, hidratos de carbono y grasas, que es utilizado en el cuerpo de un organismo para sostener el crecimiento, reparar daños, ayudar a procesos vitales o suministrar energía. Un producto de alimento puede contener además uno o más macronutrientes como vitaminas o minerales, o ingredientes de la dieta adicionales como aromatizantes y colorantes. El término producto de alimento tal como se utiliza aquí cubre también bebidas.
Entre los ejemplos de productos de alimentos en los que se puede incorporar el suplemento nutrilicional se incluyen barritas de aperitivo, cereales, productos de horno, salsas para untar y mojar, confitería, formulaciones de probióticos entre los que se incluyen yogures, productos preparados congelados y aderezos para ensaladas. Entre los ejemplos de bebidas se incluyen refrescos, mezclas de bebidas de alcohol seco y bebidas nutritivas.
Un nutracéutico es un ingrediente alimenticio, un suplemento de la comida o un producto alimenticio que según se considera proporciona un beneficio para la salud o médico, incluyendo la prevención y el tratamiento de la enfermedad. En general, un nutracéutico se adapta específicamente para conferir un beneficio sanitario en particular al consumidor. Un nutracéutico comprende típicamente un micronutriente como por ejemplo vitamina, mineral, hierba o fitoquímico a un nivel más alto que el que se podría encontrar en el producto de alimento regular correspondiente. Dicho nivel se selecciona típicamente para optimizar el beneficio para la salud pretendido del nutracéutico cuando se ingiere ya sea en una sola comida o como parte del régimen de la dieta o el curso de una terapia nutritiva.
Un alimento funcional es un alimento que se distribuye en el comercio para proporcionar un beneficio para la salud más allá de proporcionar una nutrición pura al consumidor. Un alimento funcional típico lleva incorporado típicamente un ingrediente como un micronutriente, tal como se ha mencionado antes, que confiere un beneficio fisiológico o médico específico distinto al efecto nutricional. Un alimento funcional lleva típicamente un reclamo sobre la salud en el envase.
Un suplemento de la dieta es un producto que está destinado a ser suplemento de la dieta normal de un sujeto humano y que contiene un ingrediente para la dieta como por ejemplo una vitamina, mineral, hierba y otro producto botánico o un amino ácido. Un suplemento para la dieta está presente típicamente en un formato de dosis unitaria y está diseñado para su consumo en combinación, antes, o después de la comida, pero no en lugar de la comida. Por consiguiente, a menudo el suplemento para la dieta se presenta como una tableta o una cápsula, o como un polvo seco o un granulado para espolvorearlo sobre la comida o para añadirlo al agua o a las bebidas.
Los compuestos utilizados en la presente invención pueden formularse en un medicamento o un suplemento para la dieta mezclándolos con un vehículo o excipiente aceptable desde el punto de vista dietético o farmacéutica. Dicho vehículo o excipiente puede consistir en un disolvente, medio de dispersión, recubrimiento, agente para retrasar la absorción o isotónico, edulcorante o similar. Entre ellos se incluyen cualquiera y todos los disolventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes para retrasar la absorción e isotónicos, edulcorantes y similares. Los vehículos adecuados pueden prepararse a partir de una amplia gama de materiales entre los que se incluyen, sin limitarse sólo a ellos, diluyentes, aglutinantes y adhesivos, lubricantes, disgregantes, agentes colorantes, agentes de volumen, agentes aromatizantes, agentes edulcorantes, materiales misceláneos como tampones y absorbentes que pueden ser necesarios para preparar una forma de dosis en particular. El uso de dichos medios y agentes para sustancias farmacéuticamente activas es muy conocido en la especialidad. A no ser que el medio o el agente convencional sea incompatible con los compuestos utilizados en la presente invención, se contempla su uso en la presente invención.
Por ejemplo, las formas orales sólidas pueden contener, junto con el compuesto activo, diluyentes como lactosa, dextrosa, sacarosa, celulosa, almidón de maíz, o almidón de patata; lubricantes como sílice, talco, ácido esteárico, estearato de magnesio o calcio y/o polietilen glicoles; agentes aglutinantes como almidónes, gomas arábigas, gelatinas, metil celulosa, carboxi metil celulosa o polivinil pirrolidona; agentes disgregantes como almidón, ácido algínico, alginatos o glicolato de almidón sódico; mezclas efervescentes; colorantes, edulcorantes; agentes de humectación como lecitina, polisorbatos, lauril sulfatos. Dichas preparaciones se pueden fabricar según el modo conocido, por ejemplo, por mezclado, granulado, tableado, recubrimiento con azúcar, o procesos de recubrimiento con película.
Las dispersiones líquidas para administración oral pueden consistir en siropes, emulsiones y suspensiones. Los siropes pueden contener como vehículo, por ejemplo, sacarosa o sacarosa con glicerol y/o manitol y/o sorbitol. En particular, un sirope para pacientes diabéticos puede contener como vehículos únicamente productos, por ejemplo sorbitol, que no se metabolizan en glucosa o que solamente se metabolizan en una pequeña cantidad de glucosa. Las suspensiones y las emulsiones pueden contener como vehículo, por ejemplo, una goma natural, agar, alginato sódico, pectina, metil celulosa, carboxi metil celulosa o polialcohol vinílico.
Los compuestos utilizados en la presente invención pueden formularse también de manera adecuada en granulados o un polvo. De esta forma se pueden dispersar fácilmente en agua u otro líquido, por ejemplo té o un refresco para que lo beban los pacientes humanos. También se pueden encapsular, tabletear o formular con un vehículo fisiológicamente aceptable en formas de dosis unitarias. Las dosis unitarias pueden comprender una cantidad terapéuticamente efectiva del extracto para una administración diaria única, o se pueden formular en cantidades más reducidas para proporcionar varias dosis al día. La composición, por consiguiente, se puede formular en tabletas, cápsulas, siropes, elixires, formulaciones entéricas y otras formas para administración oral. Entre los ejemplos de vehículos fisiológicamente aceptables se incluyen agua, aceite, emulsiones, alcoholes y otros materiales adecuados.

Claims (9)

1. Un hidrogel que se puede obtener por reticulación de:
(a) poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}, o una mezcla de los mismos, con
(b) poliésteres glicidílicos de poliglicerol, poliéteres de glicidilo a base de sorbitol, diéster glicidílico de polietilen glicol o triacrilato de trimetilolpropano en un intervalo de dosis comprendido entre 0,01 y 20% en peso de poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}, o una mezcla de ellos,
para su uso en un suplemento nutritivo en un producto para la dieta.
2. El hidrogel de la reivindicación 1, en el que el producto para la dieta es un nutriente y comprende de 0,005% a 100% en peso de dicho suplemento de nutrición en función del peso total en seco de dicho producto para la dieta.
3. El hidrogel de la reivindicación 1, siendo el producto para la dieta un alimento o una composición de alimento que comprende de 0,005% en peso a 5% en peso de dicho suplemento de nutrición en función del peso total en seco de dicho producto para la dieta.
4. El hidrogel de la reivindicación 1, en el que dicho poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}, tienen independientemente un peso molecular comprendido entre 5000 y 2,5 x 10^{6}.
5. El hidrogel de la reivindicación 1, comprendiendo además dicho producto para la dieta un componente seleccionado del grupo que consiste en maltodextrano con 5 a 40 equivalentes de dextrosa, proteína láctea, aislado de proteína de soja, glucosa, lactosa, sacarosa, fructosa, oligo-fructosa de cadena reducida, glucano u otro oligo-polisacárido, colágeno, gelatina de colágeno hidrolizada, alfa-almidón, proteína de soja hidrolizada, almidón parcialmente hidrolizado, glicerol, propilen glicol, etanol, goma arábiga, goma guar, carragenano, celulosa y otras celulosas modificadas y mezclas de ellos.
6. El hidrogel de la reivindicación 1, presentándose dicho producto para la dieta en forma de una cápsula de gel dura o blanda, una tableta o una preparación líquida.
7. Uso de un hidrogel que se puede obtener por reticulación:
(a) poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}, o una mezcla de los mismos, con
(b) poliésteres glicidílicos de poliglicerol, poliéteres de glicidilo a base de sorbitol, diéster glicidílico de polietilen glicol o triacrilato de trimetilolpropano en un intervalo de dosis comprendido entre 0,01 y 20% en peso de poliácido \gamma-glutámico (\gamma-PGA, forma H), \gamma-poliglutamato en forma Na^{+}, \gamma-poliglutamato en forma K^{+}, \gamma-poliglutamato en forma NH_{4}^{+}, \gamma-poliglutamato en forma Mg^{++} o \gamma-poliglutamato en forma Ca^{++}, o una mezcla de ellos,
para la fabricación de un medicamento, un producto alimenticio, un alimento funcional, un nutracéutico, o un suplemento para la dieta para su uso en la mejora de la solubilidad in vivo o la biodisponibilidad in vivo de magnesio o calcio.
8. Uso según la reivindicación 7, sirviendo el medicamento, producto de alimentación, alimento funcional, nutracéutico o suplemento para la dieta para favorecer la absorción del calcio en el intestino de un animal.
9. Uso según la reivindicación 7, sirviendo el medicamento, producto de alimentación, alimento funcional, nutracéutico o suplemento para la dieta para el tratamiento, prevención, retraso o reducción del progreso de la osteoporosis, reducción de la pérdida del calcio, mantenimiento de la resistencia del hueso o mejora del crecimiento o la salud.
ES05252997T 2005-05-16 2005-05-16 Hidrogeles que contienen poliacido gamma-glutamico (gamma-pga, forma h)gamma-poliglutamatos para utilizacion como suplementos nutricionales en productos dieteticos. Active ES2318431T3 (es)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP05252997A EP1723855B1 (en) 2005-05-16 2005-05-16 Hydrogels containing gamma-polyglutamic acid (gamma-PGA, H Form) and gamma-polyglutamates for use as nutrition supplements in dietary products

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2318431T3 true ES2318431T3 (es) 2009-05-01

Family

ID=35432470

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES05252997T Active ES2318431T3 (es) 2005-05-16 2005-05-16 Hidrogeles que contienen poliacido gamma-glutamico (gamma-pga, forma h)gamma-poliglutamatos para utilizacion como suplementos nutricionales en productos dieteticos.

Country Status (4)

Country Link
EP (1) EP1723855B1 (es)
AT (1) ATE418274T1 (es)
DE (1) DE602005011936D1 (es)
ES (1) ES2318431T3 (es)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101200960B1 (ko) * 2010-11-10 2012-12-18 주식회사 바이오리더스 의료용 접착제 조성물
KR101297815B1 (ko) 2010-11-18 2013-09-03 충남대학교산학협력단 폴리감마글루탐산과 광학영상다이의 복합체를 함유하는 센티넬 림프노드 감지용 광학영상 프로브
KR101398214B1 (ko) 2011-04-06 2014-05-23 주식회사 바이오리더스 음이온성 고분자와 양이온성 고분자 이온복합체 기반 고감도 자기공명영상 나노조영제 및 이의 제조방법
KR101444877B1 (ko) 2011-12-30 2014-10-01 주식회사 삼양바이오팜 감마폴리글루탐산으로 구성된 현장 가교 수화겔 및 그의 제조 방법
CN104982647B (zh) * 2015-07-07 2018-09-18 平顶山天晶植物蛋白有限责任公司 一种提高大豆分离蛋白起泡性和稳定性的方法
EP3442062A4 (en) * 2016-04-08 2019-12-18 Idemitsu Kosan Co., Ltd. BINDING AGENT FOR ELECTROCHEMICAL ELEMENT
KR102094182B1 (ko) * 2018-06-28 2020-03-30 주식회사 알랙스탠드 아연 함유 수용성 폴리글루타믹산 복합체 조성물
CN112335887A (zh) * 2020-11-27 2021-02-09 曲阜师范大学 一种膳食硅补充剂及其制备工艺

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4888193A (en) * 1987-03-24 1989-12-19 Takeda Chemical Industries, Ltd. Bakery products and noodles containing polyglutamic acid
JP3112724B2 (ja) * 1991-10-08 2000-11-27 明治製菓株式会社 ポリγ−グルタミン酸を主成分とする健康飲食品
JPH0632742A (ja) * 1992-07-15 1994-02-08 Kikkoman Corp カルシウムイオン可溶化剤の製造法
US5447732A (en) * 1992-11-25 1995-09-05 Ajinomoto Co., Inc. High-absorption mineral-containing composition and foods
JPH0928309A (ja) * 1995-05-12 1997-02-04 Ajinomoto Co Inc ポリ−γ−グルタミン酸を含有する飼料
JP3838283B2 (ja) * 1996-10-25 2006-10-25 味の素株式会社 ポリーγーグルタミン酸を含有する飼料組成物
JP2000270811A (ja) * 1999-03-25 2000-10-03 Meiji Seika Kaisha Ltd カリウムイオンの吸収を抑制する食品及びその方法

Also Published As

Publication number Publication date
EP1723855A1 (en) 2006-11-22
EP1723855B1 (en) 2008-12-24
ATE418274T1 (de) 2009-01-15
DE602005011936D1 (de) 2009-02-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2318431T3 (es) Hidrogeles que contienen poliacido gamma-glutamico (gamma-pga, forma h)gamma-poliglutamatos para utilizacion como suplementos nutricionales en productos dieteticos.
JP5128760B2 (ja) ダイエタリー製品において栄養補助剤として使用するためのγ−ポリグルタミン酸（γ−ＰＧＡ、Ｈ体）及びγ−ポリグルタメート
Bhat et al. Bioactive peptides from egg: a review
ES2599478T3 (es) Composición de aditivo alimentario
CA2695444C (en) Amino acid and peptide products
CN106135890A (zh) 一种有助于骨关节健康的营养组合物
CN102657262A (zh) 聚葡萄糖在配方奶喂养的婴儿体内模拟人乳低聚糖的功能属性的用途
CN101828708B (zh) 一种亚铁血红素多肽组合物及其制备方法
CN103096736A (zh) 包含hmb钙和可溶蛋白质的基本透明的营养液体
CN105341614A (zh) 一种小分子肽固体饮料
CN102423487B (zh) 一种骨关节保健组合物及其应用
CN109090443A (zh) 一种具有锁钙补钙强骨功能的营养配方产品
US11332505B2 (en) Animal-free dietary collagen
CN110150667A (zh) 一种提升免疫力并调节肠道功能的保健品及其制备方法
CN101028098B (zh) 含有骨胶原肽的食品组合物
KR101706598B1 (ko) 수용성 이온화칼슘 및 프락토올리고당 복합제를 유효성분으로 포함하는 골 질환 및 관절 질환의 예방 또는 치료용 조성물
US7632804B2 (en) Dietary products comprising one or more of γ-polyglutamic acid (γ-PGA, H form) and γ-polyglutamates for use as nutrition supplements
US20220054533A1 (en) Prebiotic Composition for Butyric Acid Bacteria
CN107752015A (zh) 一种全消化道改善的复合营养食品
TW202015724A (zh) 用於處置與月經有關症狀之組成物
WO2021059639A1 (ja) 酪酸菌用プレバイオティクス組成物
JP7149427B2 (ja) 学童期の記憶能向上のための乳幼児用組成物
CN108029883A (zh) 复合有机酸化剂及其制备方法和应用
US20100197611A1 (en) Alternative agent with vitamin d-like activity and an improving agent for intestinal function
JP2017002009A (ja) 免疫賦活剤