ES2296788T3 - Desbridador de heridas enzimatico estable. - Google Patents

Abstract

Un desbridador enzimático de heridas que comprende: un portador poloxámero hidrófilo anhidro, y una o más enzimas proteolíticas en una cantidad eficaz para el desbridamiento de heridas.

Description

Desbridador de heridas enzimático estable.

Campo de la invención

Esta invención se refiere a una composición para el desbridamiento enzimático de tejido necrótico y para la licuefacción del pus en heridas crónicas y agudas.

Antecedentes de la invención

El desbridamiento enzimático de heridas se ha conocido en el pasado. Sin embargo, tiene considerables problemas de eficacia. En particular, las composiciones para el desbridamiento de heridas de la técnica anterior requieren normalmente refrigeración para almacenamiento estable, y tienen problemas de estabilidad durante almacenamiento porque normalmente contienen cantidades considerables de agua. Se creía que el agua era necesaria porque permite la disolución de la enzima, que a su vez se pensó que era necesaria con objeto de tener un desbridamiento eficaz de la herida.

La combinación de enzimas proteolíticas termosensibles y cantidades considerables de portadores basados en agua ha proporcionado un efecto neto tanto de una baja temperatura de almacenamiento, habitualmente una temperatura de refrigeración, como de una vida de almacenamiento corta antes de su uso. Como resultado, dichas composiciones se han usado poco, con una penetración comercial inferior a la ideal. El documento US3983209 desvela composiciones no acuosas que contienen una enzima proteolítica dispersada en un polímero hidrófobo bioerosionable para el desbridamiento de escaras y tejidos necróticos.

Por lo tanto, puede observarse que hay una continua necesidad de un desbridador de heridas de proteinasa eficaz a la temperatura ambiente normal y con poco olor, con una buena estabilidad de almacenamiento a temperatura ambiente sin sacrificar la eficaz naturaleza desbridadora de la proteinasa. Esta invención tiene como objetivo primario el cumplimiento de la necesidad descrita anteriormente.

Otro objetivo de la presente invención es proporcionar un desbridador enzimático de heridas estable a temperatura ambiente con una consistencia o viscosidad que permita que el producto permanezca en las heridas que son necróticas y exudativas.

Otro objetivo de la presente invención es proporcionar un desbridador enzimático de heridas de un tipo que cumpla los objetivos anteriores que pueda ser envasado y dispensado eficazmente desde un tubo.

Otro objetivo de la presente invención es proporcionar composiciones del tipo de las anteriormente descritas que puedan incorporar componentes tanto que hidrófilos como anhidros, y el desbridador enzimático activo, junto con otros ingredientes activos en un único apósito con ungüento semisólido para permitir una estabilidad superior a temperatura ambiente para las proteinasas en general, y para la papaína en particular.

El procedimiento y la forma de cumplir cada uno de los objetivos anteriores, así como otros, serán apreciables a partir de la descripción detallada de la invención, que sigue a continuación.

Breve descripción de los dibujos

La figura 1 es una gráfica que muestra los estudios de estabilidad de la papaína a temperatura ambiente.

Resumen de la invención

Se describe una composición de desbridamiento enzimática en ungüento anhidro hidrófilo semisólido para heridas necróticas diseñada para tener estabilidad a temperatura ambiente y mantener la eficacia de la enzima proteica. En el sentido más amplio, la composición es un desbridador enzimático de heridas de un portador poloxámero hidrófilo anhidro en combinación con una cantidad pequeña pero eficazmente desbridadora de una o más enzimas proteolíticas, y preferiblemente papaína.

Descripción detallada de la forma de realización preferida

La base o porción portadora de la presente invención puede describirse de forma general como un portador poloxámero anhidro, que es un copolímero en bloque de óxido de etileno y óxido de propileno con la estructura:

HO(C_{2}H_{4}O)_{x}(C_{3}H_{6}O)_{y}(C_{2}H_{4}O)_{x}H

en la que x es desde 2 hasta 150, e y es desde 15 hasta 70. Preferiblemente x es desde 12 hasta 141, e y es desde 20 hasta 56. De forma general, los copolímeros en bloque de óxido de etileno y óxido de propileno que cumplen las descripciones anteriores están disponibles en BASF con el nombre comercial "Pluronic and Lutrol F Block Copolymers". Para detalles específicos de dichos polímeros, véase BASF Corporation Technical Data Sheets on Pluronic polyols, copyright 1992.

Estos engloban generalmente copolímeros en bloque con un peso molecular en el intervalo de 1.000 a 16.000.

Resultan importantes, para la presente invención porque tienen solubilidad en agua, existen en forma de crema o de ungüento, y pueden ser almacenados durante largos períodos de tiempo en condiciones anhidras.

Los útiles copolímeros en bloque de óxido de etileno y óxido de propileno de la presente invención tienen, de forma general, un valor de equilibrio hidrófilo-lipófilo (EHL) en el intervalo de desde 8 hasta 30, y preferiblemente desde 12 hasta 25. Usando las etiquetas de codificación de poloxámero de BASF, los poloxámeros adecuados para su uso en esta invención incluyen, pero no se limitan a:

Pluronic/Lutrol F 44 (poloxámero 124)

Pluronic/Lutrol F 68 (poloxámero 188)

Pluronic/Lutrol F 87 (poloxámero 237)

Pluronic/Lutrol F 108 (poloxámero 338)

Pluronic/Lutrol F 127 (poloxámero 407)

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Volvamos a continuación a la pequeña pero eficazmente desbridadora cantidad de una enzima proteolítica. Como saben los expertos en la materia, una enzima proteolítica tendrá total o parcialmente la capacidad de hidrolizar enlaces amida peptídicos. Dichas enzimas también pueden tener una inherente actividad lipolítica y/o amilolítica asociada a la actividad proteolítica. La enzima proteolítica preferida es la papaína. Otras enzimas proteolíticas adecuadas incluyen tripsina, quimotripsina, estreptocinasa, estreptodormasa, ficina, pepsina, carboxipeptidasa, aminopeptidasa, quimopapaína, bromelina y otras enzimas proteolíticas.

La papaína es una enzima procedente de la fruta tropical natural verde papaya (Carica papaya) cuyo fluido cristalino se recoge, se seca, se pulveriza y se tamiza para producir la papaína. Es una enzima similar a la pepsina, pero a actúa en disolución ácida, alcalina o neutra. Es un polvo entre blanco y gris, y moderadamente higroscópico. Disuelve aproximadamente 200 veces su peso de albúmina de huevo coagulada en líquido alcalino en aproximadamente 5 h. Es muy soluble en agua y glicerina, pero prácticamente insoluble en alcohol. La papaína purificada de alta actividad (Bélgica), disponible comercialmente en Enzyme Development Corporation, es una papaína altamente refinada con una potencia de 50.000 unidades USP/mg. Este material se suministra como un polvo entre blanco y siena con poco olor.

La proteasa Prolase 300^{R} está disponible comercialmente y contiene las enzimas proteolíticas refinadas y activadas procedentes de la planta tropical Carica papaya. La Prolase 300^{R} se suministra como un polvo ligeramente siena de potencia uniforme. Cada gramo de Prolase 300^{R} contiene 300 unidades Wallerstein de actividad de papaína determinadas mediante un procedimiento de ensayo de coagulación de leche o mediante un procedimiento de digestión con caseína.

Otro grupo de enzimas proteolíticas adecuadas incluyen aquellas que están sustancialmente exentas de grupos sulfhidrilo o de puentes de disulfuro, e incluyen las proteasas de serina, particularmente las procedentes de bacterias de los géneros Bacillus y Streptomiasis y de mohos aspergilis.

Dentro de este último grupo, las enzimas más preferidas son las proteasas alcalinas procedentes de Bacillus denominadas genéricamente enzimas subtilisina. Se hace referencia a Deayl, L., Moser, P. W. y Wildi, B. S., "Proteases of the Genus Bacillus. Il alkaline Proteases." Biotechnology and Bioengineering, Vol. XII, págs. 213-249 (1970), y Keay, L. y Moser, P. W., "Differentiation of Alkaline Proteases from Bacillus Species" Biochemical and Biophysical Research Comm., Vol. 34, No. 5, págs. 600-604, (1969).

Las enzimas subtilisina se rompen en dos subclases, subtilisina A y subtilisina B. En el grupo de la subtilisina A están las enzimas procedentes de especies tales como B. subtilis, B. licheniformis y B. pumilis. Los organismos de estas subclases producen poca proteasa o amilasa o no neutra.

Además, otras enzimas adecuadas son, por ejemplo, pancreatina, tripsina, colagenasa, queratinasa, carboxilasa, aminopeptidasa, elastasa, y aspergilo-peptidasa. A y B, pronasa E (de S. griseus) y dispasa (de Bacillus polymyxa).

En la práctica de esta invención se va a usar una cantidad eficaz de la enzima. Dicha cantidad será la cantidad que desbride eficazmente el tejido necrótico y licúe el pus en heridas agudas y crónicas. Dicha cantidad también será la cantidad que efectúe la eliminación en un tiempo razonable (por ejemplo, durante un periodo de 7 días), de sustancialmente todos esos materiales. La cantidad precisa usada para cualquier uso en particular dependerá de varios factores, incluyendo la actividad inherente de la enzima, el número de aplicaciones previstas en la herida, etc. Como patrón básico de medida, el gel de trabajo proporciona una actividad de entre aproximadamente 500 unidades USP/mg hasta 3.000 unidades USP/mg, preferiblemente 800 unidades USP/mg hasta 2.200 unidades USP/mg. Sin embargo pueden usarse cantidades menores. En términos de peso/volumen, las preparaciones enzimáticas rara vez son puras, y se espera que se usará la fuente de la enzima en unas cantidades de desde el 1% hasta el 15% del peso total de la formulación en gel. Las cantidades precisas variarán según la pureza de la enzima.

Aunque no se sabe de forma precisa porqué la combinación de esta invención funciona mejor que una técnica anterior, se cree que se produce el siguiente mecanismo, que explica la sinergia que se produce entre la base de ungüento anhidra y una enzima proteolítica. Dado que la base es anhidra, incrementa la estabilidad de la enzima mientras la enzima esté mezclada con la base y no esté en contacto con agua. Cuando la mezcla entra en contacto con una herida, la herida contiene material acuoso, y por lo tanto el material anhidro hidrófilo de la base libera el material enzimático, que entra en contacto con los materiales acuosos localizados en la herida que se va a desbridar. Entonces la enzima ataca el material proteico de la herida, corta los aminoácidos terminales, rompe la proteína en unidades más pequeñas, y entonces puede ser fácilmente eliminada. Todo esto se produce según se difunde la humedad en la base hidrófila anhidra, solubilizando la enzima.

Al contrario que los sistemas de la técnica anterior, que emplean tanto materiales basados en agua como materiales anhidros insolubles, la enzima no es, por un lado, liberada prematuramente como en los materiales basados en agua, ni, por otro lado, mantenida en las bases tan fuertemente que no entra en contacto con la herida para efectuar el desbridamiento. Como resultado, la formulación de la invención es eficaz donde los desbridadores enzimáticos anteriores generalmente no lo eran.

Como saben los expertos en la materia, las composiciones de la presente invención pueden contener otros componentes denominados menores, tales como activadores enzimáticos, agentes de curación de heridas, ingredientes formadores de estructuras, agentes antimicrobianos, agentes antibióticos y/o agentes anestésicos, generalmente todos ellos de la lista de seguridad GRAS. Generalmente, las cantidades de éstos variarán desde el 0,01% hasta el
25%.

Se realizaron los siguientes estudios de actividad enzimática in vitro con el propósito de una evaluación en el laboratorio, y son predictivos del comportamiento comercial del producto. Se elaboraron las siguientes composi-
ciones:

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Ejemplo 1

\quad

% p/p

Poloxámero 407

9,8

Poloxámero 338

16,1

Poloxámero 124

66,6

Papaína

7,5

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo 2

\quad

% p/p

Propilenglicol

20,0

Poloxámero 407

6,67

Poloxámero 338

9,53

Poloxámero 124

55,9

Povidona

0,40

Papaína

7,50

\newpage

Ejemplo 3

\quad

% p/p

Urea encapsulada

hasta dar el 10%

Poloxámero 407

6,67

Poloxámero 338

9,53

Povidona

0,40

Papaína

7,50

Poloxámero 124

c. s. para el 100%

Se realizaron estudios de estabilidad de la papaína a temperatura ambiente con los siguientes resultados, según se ilustra en la Fig. 1.

Claims (10)

1. Un desbridador enzimático de heridas que comprende: un portador poloxámero hidrófilo anhidro, y una o más enzimas proteolíticas en una cantidad eficaz para el desbridamiento de heridas.

2. El desbridador enzimático de heridas de la reivindicación 1, en el que el portador poloxámero es un copolímero en bloque de óxido de etileno y óxido de propileno con la estructura:

HO(C_{2}H_{4}O)_{x}(C_{3}H_{6}O)_{y}(C_{2}H_{4}O)_{x}H

en la que x es desde 2 hasta 150, e y es desde 15 hasta 70.

3. El desbridador enzimático de heridas de la reivindicación 2, en el que x es desde 12 hasta 141, e y es desde 20 hasta 56.

4. El desbridador enzimático de heridas de la reivindicación 1, en el que la enzima proteolítica se elige del grupo formado por papaína, tripsina, quimotripsina, estreptocinasa, estreptodomasa, ficina, pepsina, carboxipeptidasa, aminopeptidasa, quimopapaína, bromelina, colagenasa, substilisina A y substilisina B.

5. El desbridador enzimático de heridas de la reivindicación 4, en el que la enzima proteolítica es papaína.

6. Uso de una combinación de un gel portador de poloxámero hidrofilo anhidro y una o más enzimas proteolíticas en una cantidad eficaz para el desbridamiento de heridas, en la elaboración de un medicamento para el desbridamiento enzimático de heridas.

7. El uso de la reivindicación 6 en el que el portador de poloxámero es un copolímero en bloque de óxido de etileno y óxido de propileno con la estructura:

HO(C_{2}H_{4}O)_{x}(C_{3}H_{6}O)_{y}(C_{2}H_{4}O)_{x}H

en la que x es desde 2 hasta 150, e y es desde 15 hasta 70.

8. El uso de la reivindicación 7 en el que x es desde 12 hasta 141, e y es desde 20 hasta 56.

9. El uso de la reivindicación 6 en el que la enzima proteolítica se elige del grupo formado por papaína, tripsina, quimotripsina, estreptocinasa, estreptodomasa, ficina, pepsina, carboxipeptidasa, aminopeptidasa, quimopapaína, bromelina, colagenasa, substilisina A y substilisina B.

10. El uso de la reivindicación 9 en el que la enzima proteolítica es papaína.