CN110180019A - 一种提高皮肤修复功能的复合酶及其制备方法 - Google Patents

一种提高皮肤修复功能的复合酶及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种提高皮肤修复功能的复合酶及其制备方法，属于生物医学技术领域。本发明将聚乳酸‑羟基乙酸共聚物，乙酸乙酯和预处理复合酶混合溶解，得聚乳酸‑羟基乙酸共聚物溶解液，将聚乙烯醇与水混合，静置溶胀后，加热搅拌溶解，得聚乙烯醇液，将聚乳酸‑羟基乙酸共聚物溶解液加到聚乙烯醇液中，混合乳化，接着加入氯化钠溶液，搅拌固化，离心，过滤，洗涤，干燥，得改性复合酶微球，将改性添加剂，碳酸氢钠，改性复合酶微球，水混合，超声，冷冻干燥，即得提高皮肤修复功能的复合酶。本发明提供的复合酶能够有效提高皮肤修复功能。

Description

一种提高皮肤修复功能的复合酶及其制备方法
技术领域
本发明涉及生物医学技术领域，具体是一种提高皮肤修复功能的复合酶及其制备方法。
背景技术
创伤修复一直是医学领域的研究热点，而皮肤作为人体最大最外部的器官极易遭受创伤。经济与现代科技的迅猛发展使各种创伤伤员数量不断增加，同时因糖尿病、截瘫和局部射线照射等所致的慢性难愈性创面相应增多。
而且随着社会进步，人们对美容的要求逐步增高，目前创伤修复的水平与质量无法满足患者的要求，两者间的矛盾日趋尖锐。因此，进一步了解创伤修复的各种影响因素，研究创伤修复的机制，完善现有治疗方法以及发现新的治疗方法等问题仍需要国内外学者们进行大量的研究工作。
酶清创是指采用某些具有蛋白水解作用的外源性酶类，将坏死或失活的组织分解清除，同时又不损害邻近正常组织，从而达到清创目的的一种方法。目前，细菌及动、植物来源的多种蛋白酶已应用于酶清创。
发明内容
本发明的目的在于提供一种提高皮肤修复功能的复合酶及其制备方法，以解决现有技术中的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种提高皮肤修复功能的复合酶，包括以下重量份数的原料：8～10份改性添加剂，1～2份碳酸氢钠，2～3份改性复合酶微球，20～30份水。
所述改性添加剂包括以下重量份数的原料：20～30份酶化壳聚糖液，40～60份明胶液，2～3份盐酸和2～3份对苯二甲醛。
所述酶化壳聚糖液包括以下重量份数的原料：1～2份壳聚糖，0.01～0.02份壳聚糖酶，80～120份水。
所述改性复合酶微球包括以下重量份数的原料：8～10份聚乳酸-羟基乙酸共聚物，60～80份乙酸乙酯,2～3份聚乙烯醇，100～120份水，8～10份预处理复合酶，10～20份氯化钠溶液。
所述预处理复合酶包括以下重量份数的原料：10～20份葡聚糖溶液，10～20份聚乙二醇溶液，0.2～0.3份枯草菌蛋白酶，0.1～0.2份胰蛋白酶，0.1～0.2份超氧化物歧化酶，0.1～0.2份脱氧核糖核酸酶。
所述提高皮肤修复功能的复合酶包括以下重量份数的原料：10份改性添加剂，2份碳酸氢钠，3份改性复合酶微球，30份水。
一种提高皮肤修复功能的复合酶的制备方法，具体制备方法如下：
（1）处理壳聚糖；
（2）制备改性添加剂；
（3）处理复合酶；
（4）将步骤（3）所得物进一步处理；
（5）混料，超声，干燥；
（6）检测。
所述提高皮肤修复功能的复合酶具体制备方法如下：
（1）将壳聚糖与水混合，静置溶胀后，加热搅拌溶解，降温，加入壳聚糖酶，恒温搅拌反应，灭酶，即得酶化壳聚糖液；
（2）将酶化壳聚糖液与明胶液搅拌混合，并依次加入盐酸和对苯二甲醛，搅拌混合后，过滤，切块，洗涤，真空干燥，粉碎，过筛，得改性添加剂，本发明通过添加改性添加剂，改性添加剂中含有对pH敏感的凝胶成分，在使用过程中，首先，碳酸氢钠受热分解，释放二氧化碳，二氧化碳能够部分溶于体系中，使得伤口处的pH降低，有利于体系中的酶的作用，从而使得产品对皮肤的修复能力得到提升，其次，体系中的pH下降，使得改性添加剂中凝胶分子链上的氨基质子化，从而使得凝胶膨胀，凝胶膨胀，一方面，有利于遮盖伤口，另一方面，有利于体系中的酶的进一步分散，体系中的酶的分散性能的提升，使得酶能够更为充分的作用于伤口处，从而进一步提升了产品对皮肤的修复性能；
（3）将枯草菌蛋白酶，胰蛋白酶，超氧化物歧化酶，脱氧核糖核酸酶混合，接着加入聚乙二醇溶液，混合振荡，静置，冷冻干燥，洗涤，得预处理复合酶；
（4）将聚乳酸-羟基乙酸共聚物，乙酸乙酯和预处理复合酶混合溶解，得聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解液，将聚乙烯醇与水混合，静置溶胀后，加热搅拌溶解，得聚乙烯醇液，将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解液加到聚乙烯醇液中，混合乳化，接着加入氯化钠溶液，搅拌固化，离心，过滤，洗涤，干燥，得改性复合酶微球，在使用过程中，由于改性复合酶微球能够包裹体系中的各种酶，且能够使得酶缓慢释放，使得各酶能够均匀的作用于伤口处，有利于伤口的修复，随着改性酶微球的使用，改性酶微球中的聚乳酸-羟基乙酸共聚物分解得到乳酸和乙醇酸，分解得到的酸性物质能够使得体系的pH下降，能够使得体系处于微酸的环境，使得体系中的各酶的活性提升，从而提升了产品对皮肤的修复功能，再者，聚乳酸-羟基乙酸共聚物的分解使得微球形成多孔结构，多孔结构具有良好的吸附性能，能够吸附伤口表面多余的杂质和残存的体液，使得伤口处能够迅速结痂，有效避免了伤口处出现化脓或感染，有利于皮肤表面伤口处的恢复，从而进一步提升了产品对皮肤的修复功能；
（5）将改性添加剂，碳酸氢钠，改性复合酶微球，水混合，超声，冷冻干燥，即得提高皮肤修复功能的复合酶；
（6）检测。
所述提高皮肤修复功能的复合酶具体制备方法如下：
（1）将壳聚糖与水置于1号烧杯中，并用玻璃棒搅拌5～10min，静置溶胀3～5h后，再将1号烧杯置于数显测速恒温磁力搅拌器中，于温度为90～95℃，转速为400～600r/min条件下，加热搅拌溶解40～60min后，降温至30～35℃，随后向1号烧杯中加入壳聚糖酶，于温度为30～35℃，转速为300～500r/min条件下，恒温搅拌反应40～60min后，升温至90～95℃灭酶5～10min，即得酶化壳聚糖液；
（2）将酶化壳聚糖液与明胶液置于三口烧瓶中，并将三口烧瓶置于数显测速恒温磁力搅拌器中，于温度为50～60℃，转速为300～500r/min条件下，恒温搅拌混合30～50min，并依次向三口烧瓶中加入质量分数为20～30%的盐酸和质量分数为20～30%的对苯二甲醛，于温度为28～38℃，转速为250～300r/min的条件下搅拌混合10～12h，得混合浆液，再将混合浆液过滤，得凝胶，将凝胶切块，并用去离子水洗涤5～6天，每隔10～12h换一次去离子水，将洗涤后的凝胶块于室温条件下真空干燥3～5h，接着将干燥后的凝胶置于粉碎机中，粉碎，过160目的筛，得改性添加剂；
（3）将枯草菌蛋白酶，胰蛋白酶，超氧化物歧化酶，脱氧核糖核酸酶置于单口烧瓶中，接着向单口烧瓶中加入聚乙二醇溶液，接着将单口烧瓶置于超声分散仪中，于超声频率为55～75kHz条件下，混合振荡40～60min后，静置5～8h后，得混合液，接着阿将混合液置于真空冷冻干燥箱中冷冻干燥，得干燥料，随后将干燥料用水洗涤3～5次，得预处理复合酶；
（4）将聚乳酸-羟基乙酸共聚物，乙酸乙酯和预处理复合酶置于四口烧瓶中，于转速为500～600r/min条件下，搅拌混合溶解40～60min，得聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解液，将聚乙烯醇与水置于2号烧杯中，并用玻璃棒搅拌10～20min，静置溶胀3～5h后，再将烧杯置于数显测速恒温磁力搅拌器中，于温度为90～95℃，转速为400～600r/min条件下，加热搅拌溶解40～60min，得聚乙烯醇液，将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解液加到2号烧杯中中，于转速为1100～1200r/min条件下，搅拌混合混合乳化40～60min，接着向2号烧杯中加入质量分数为5～10%的氯化钠溶液，于转速为400～600r/min条件下，搅拌固化40～60min，得混合浆料，随后将混合浆料置于离心机中，离心10～20min后，过滤，得滤渣，随后用去离子水将滤渣洗涤5～8次，随后将洗涤后的滤渣置于真空冷冻干燥箱中干燥，得改性复合酶微球；
（5）将改性添加剂，碳酸氢钠，改性复合酶微球，水置于3号烧杯中，随后将3号烧杯置于超声分散仪中，于超声频率为55～75kHz条件下，混合超声40～60min，得分散液，接着将分散液置于真空冷冻干燥箱中冷冻干燥，即得提高皮肤修复功能的复合酶；
（6）产品性能检测。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
（1）本发明通过添加改性添加剂，改性添加剂中含有对pH敏感的凝胶成分，在使用过程中，首先，碳酸氢钠受热分解，释放二氧化碳，二氧化碳能够部分溶于体系中，使得伤口处的pH降低，有利于体系中的酶的作用，从而使得产品对皮肤的修复能力得到提升，其次，体系中的pH下降，使得改性添加剂中凝胶分子链上的氨基质子化，从而使得凝胶膨胀，凝胶膨胀，一方面，有利于遮盖伤口，另一方面，有利于体系中的酶的进一步分散，体系中的酶的分散性能的提升，使得酶能够更为充分的作用于伤口处，从而进一步提升了产品对皮肤的修复性能；
（2）本发明通过添加改性复合酶微球，在使用过程中，由于改性复合酶微球能够包裹体系中的各种酶，且能够使得酶缓慢释放，使得各酶能够均匀的作用于伤口处，有利于伤口的修复，随着改性酶微球的使用，改性酶微球中的聚乳酸-羟基乙酸共聚物分解得到乳酸和乙醇酸，分解得到的酸性物质能够使得体系的pH下降，能够使得体系处于微酸的环境，使得体系中的各酶的活性提升，从而提升了产品对皮肤的修复功能，再者，聚乳酸-羟基乙酸共聚物的分解使得微球形成多孔结构，多孔结构具有良好的吸附性能，能够吸附伤口表面多余的杂质和残存的体液，使得伤口处能够迅速结痂，有效避免了伤口处出现化脓或感染，有利于皮肤表面伤口处的恢复，从而进一步提升了产品对皮肤的修复功能。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
为了更清楚的说明本发明提供的方法通过以下实施例进行详细说明，在以下实施例中制作的提高皮肤修复功能的复合酶的各指标的测试方法如下：
将50只大鼠随机分为5组，分别为实施例1组、实施例2组、实施例3组，实例4、对比例，每组10只。在大鼠背部脊柱两侧旁lcm，头尾两端平行于脊柱各标记一个直径1.8cm，面积2.54cm2的圆形切口线。经碘伏消毒皮肤后，用剪刀沿标记线剪除全层皮肤至深筋膜，形成4个圆形创面。左侧分别涂抹实施例1、实施例2、实施例3、实例4、对比例制备的具有皮肤修复、抗衰老功能的护肤组合物，右侧创伤不进行处理作为对照组，均用纱布覆盖包扎。连续观察10d。
实例1
一种提高皮肤修复功能的复合酶，包括以下重量份数的原料：10份改性添加剂，2份碳酸氢钠，3份改性复合酶微球，30份水。
一种提高皮肤修复功能的复合酶的制备方法，所述提高皮肤修复功能的复合酶具体制备方法如下：
（1）按重量份数计，依次取2份壳聚糖，0.02份壳聚糖酶，120份水，将壳聚糖与水置于1号烧杯中，并用玻璃棒搅拌10min，静置溶胀5h后，再将1号烧杯置于数显测速恒温磁力搅拌器中，于温度为95℃，转速为600r/min条件下，加热搅拌溶解60min后，降温至35℃，随后向1号烧杯中加入壳聚糖酶，于温度为35℃，转速为500r/min条件下，恒温搅拌反应60min后，升温至95℃灭酶10min，即得酶化壳聚糖液；
（2）按重量份数计，依次取30份酶化壳聚糖液，60份明胶液，3份盐酸和3份对苯二甲醛，将酶化壳聚糖液与明胶液置于三口烧瓶中，并将三口烧瓶置于数显测速恒温磁力搅拌器中，于温度为60℃，转速为500r/min条件下，恒温搅拌混合50min，并依次向三口烧瓶中加入质量分数为30%的盐酸和质量分数为30%的对苯二甲醛，于温度为38℃，转速为300r/min的条件下搅拌混合12h，得混合浆液，再将混合浆液过滤，得凝胶，将凝胶切块，并用去离子水洗涤6天，每隔12h换一次去离子水，将洗涤后的凝胶块于室温条件下真空干燥5h，接着将干燥后的凝胶置于粉碎机中，粉碎，过160目的筛，得改性添加剂；
（3）按重量份数计，依次取20份葡聚糖溶液，20份聚乙二醇溶液，0.3份枯草菌蛋白酶，0.2份胰蛋白酶，0.2份超氧化物歧化酶，0.2份脱氧核糖核酸酶，将枯草菌蛋白酶，胰蛋白酶，超氧化物歧化酶，脱氧核糖核酸酶置于单口烧瓶中，接着向单口烧瓶中加入聚乙二醇溶液，接着将单口烧瓶置于超声分散仪中，于超声频率为75kHz条件下，混合振荡60min后，静置8h后，得混合液，接着阿将混合液置于真空冷冻干燥箱中冷冻干燥，得干燥料，随后将干燥料用去离子水洗涤5次，得预处理复合酶；
（4）按重量份数计，依次取10份聚乳酸-羟基乙酸共聚物，80份乙酸乙酯,3份聚乙烯醇，120份水，10份预处理复合酶，20份氯化钠溶液，将聚乳酸-羟基乙酸共聚物，乙酸乙酯和预处理复合酶置于四口烧瓶中，于转速为600r/min条件下，搅拌混合溶解60min，得聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解液，将聚乙烯醇与水置于2号烧杯中，并用玻璃棒搅拌20min，静置溶胀5h后，再将烧杯置于数显测速恒温磁力搅拌器中，于温度为95℃，转速为600r/min条件下，加热搅拌溶解60min，得聚乙烯醇液，将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解液加到2号烧杯中中，于转速为1200r/min条件下，搅拌混合混合乳化60min，接着向2号烧杯中加入质量分数为10%的氯化钠溶液，于转速为600r/min条件下，搅拌固化60min，得混合浆料，随后将混合浆料置于离心机中，离心20min后，过滤，得滤渣，随后用去离子水将滤渣洗涤8次，随后将洗涤后的滤渣置于真空冷冻干燥箱中干燥，得改性复合酶微球；
（5）按重量份数计，依次取10份改性添加剂，2份碳酸氢钠，3份改性复合酶微球，30份水，将改性添加剂，碳酸氢钠，改性复合酶微球，水置于3号烧杯中，随后将3号烧杯置于超声分散仪中，于超声频率为75kHz条件下，混合超声60min，得分散液，接着将分散液置于真空冷冻干燥箱中冷冻干燥，即得提高皮肤修复功能的复合酶；
（6）产品性能检测。
实例2
一种提高皮肤修复功能的复合酶，包括以下重量份数的原料：2份碳酸氢钠，3份改性复合酶微球，30份水。
一种提高皮肤修复功能的复合酶的制备方法，所述提高皮肤修复功能的复合酶具体制备方法如下：
（1）按重量份数计，依次取20份葡聚糖溶液，20份聚乙二醇溶液，0.3份枯草菌蛋白酶，0.2份胰蛋白酶，0.2份超氧化物歧化酶，0.2份脱氧核糖核酸酶，将枯草菌蛋白酶，胰蛋白酶，超氧化物歧化酶，脱氧核糖核酸酶置于单口烧瓶中，接着向单口烧瓶中加入聚乙二醇溶液，接着将单口烧瓶置于超声分散仪中，于超声频率为75kHz条件下，混合振荡60min后，静置8h后，得混合液，接着阿将混合液置于真空冷冻干燥箱中冷冻干燥，得干燥料，随后将干燥料用去离子水洗涤5次，得预处理复合酶；
（2）按重量份数计，依次取10份聚乳酸-羟基乙酸共聚物，80份乙酸乙酯,3份聚乙烯醇，120份水，10份预处理复合酶，20份氯化钠溶液，将聚乳酸-羟基乙酸共聚物，乙酸乙酯和预处理复合酶置于四口烧瓶中，于转速为600r/min条件下，搅拌混合溶解60min，得聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解液，将聚乙烯醇与水置于2号烧杯中，并用玻璃棒搅拌20min，静置溶胀5h后，再将烧杯置于数显测速恒温磁力搅拌器中，于温度为95℃，转速为600r/min条件下，加热搅拌溶解60min，得聚乙烯醇液，将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解液加到2号烧杯中中，于转速为1200r/min条件下，搅拌混合混合乳化60min，接着向2号烧杯中加入质量分数为10%的氯化钠溶液，于转速为600r/min条件下，搅拌固化60min，得混合浆料，随后将混合浆料置于离心机中，离心20min后，过滤，得滤渣，随后用去离子水将滤渣洗涤8次，随后将洗涤后的滤渣置于真空冷冻干燥箱中干燥，得改性复合酶微球；
（3）按重量份数计，依次取2份碳酸氢钠，3份改性复合酶微球，30份水，将碳酸氢钠，改性复合酶微球，水置于3号烧杯中，随后将3号烧杯置于超声分散仪中，于超声频率为75kHz条件下，混合超声60min，得分散液，接着将分散液置于真空冷冻干燥箱中冷冻干燥，即得提高皮肤修复功能的复合酶；
（4）产品性能检测。
实例3
一种提高皮肤修复功能的复合酶，包括以下重量份数的原料：10份改性添加剂，3份改性复合酶微球，30份水。
一种提高皮肤修复功能的复合酶的制备方法，所述提高皮肤修复功能的复合酶具体制备方法如下：
（1）按重量份数计，依次取2份壳聚糖，0.02份壳聚糖酶，120份水，将壳聚糖与水置于1号烧杯中，并用玻璃棒搅拌10min，静置溶胀5h后，再将1号烧杯置于数显测速恒温磁力搅拌器中，于温度为95℃，转速为600r/min条件下，加热搅拌溶解60min后，降温至35℃，随后向1号烧杯中加入壳聚糖酶，于温度为35℃，转速为500r/min条件下，恒温搅拌反应60min后，升温至95℃灭酶10min，即得酶化壳聚糖液；
（2）按重量份数计，依次取30份酶化壳聚糖液，60份明胶液，3份盐酸和3份对苯二甲醛，将酶化壳聚糖液与明胶液置于三口烧瓶中，并将三口烧瓶置于数显测速恒温磁力搅拌器中，于温度为60℃，转速为500r/min条件下，恒温搅拌混合50min，并依次向三口烧瓶中加入质量分数为30%的盐酸和质量分数为30%的对苯二甲醛，于温度为38℃，转速为300r/min的条件下搅拌混合12h，得混合浆液，再将混合浆液过滤，得凝胶，将凝胶切块，并用去离子水洗涤6天，每隔12h换一次去离子水，将洗涤后的凝胶块于室温条件下真空干燥5h，接着将干燥后的凝胶置于粉碎机中，粉碎，过160目的筛，得改性添加剂；
（3）按重量份数计，依次取20份葡聚糖溶液，20份聚乙二醇溶液，0.3份枯草菌蛋白酶，0.2份胰蛋白酶，0.2份超氧化物歧化酶，0.2份脱氧核糖核酸酶，将枯草菌蛋白酶，胰蛋白酶，超氧化物歧化酶，脱氧核糖核酸酶置于单口烧瓶中，接着向单口烧瓶中加入聚乙二醇溶液，接着将单口烧瓶置于超声分散仪中，于超声频率为75kHz条件下，混合振荡60min后，静置8h后，得混合液，接着阿将混合液置于真空冷冻干燥箱中冷冻干燥，得干燥料，随后将干燥料用去离子水洗涤5次，得预处理复合酶；
（4）按重量份数计，依次取10份聚乳酸-羟基乙酸共聚物，80份乙酸乙酯,3份聚乙烯醇，120份水，10份预处理复合酶，20份氯化钠溶液，将聚乳酸-羟基乙酸共聚物，乙酸乙酯和预处理复合酶置于四口烧瓶中，于转速为600r/min条件下，搅拌混合溶解60min，得聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解液，将聚乙烯醇与水置于2号烧杯中，并用玻璃棒搅拌20min，静置溶胀5h后，再将烧杯置于数显测速恒温磁力搅拌器中，于温度为95℃，转速为600r/min条件下，加热搅拌溶解60min，得聚乙烯醇液，将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解液加到2号烧杯中中，于转速为1200r/min条件下，搅拌混合混合乳化60min，接着向2号烧杯中加入质量分数为10%的氯化钠溶液，于转速为600r/min条件下，搅拌固化60min，得混合浆料，随后将混合浆料置于离心机中，离心20min后，过滤，得滤渣，随后用去离子水将滤渣洗涤8次，随后将洗涤后的滤渣置于真空冷冻干燥箱中干燥，得改性复合酶微球；
（5）按重量份数计，依次取10份改性添加剂，3份改性复合酶微球，30份水，将改性添加剂，改性复合酶微球，水置于3号烧杯中，随后将3号烧杯置于超声分散仪中，于超声频率为75kHz条件下，混合超声60min，得分散液，接着将分散液置于真空冷冻干燥箱中冷冻干燥，即得提高皮肤修复功能的复合酶；
（6）产品性能检测。
实例4
一种提高皮肤修复功能的复合酶，包括以下重量份数的原料：10份改性添加剂，2份碳酸氢钠，3份预处理复合酶，30份水。
一种提高皮肤修复功能的复合酶的制备方法，所述提高皮肤修复功能的复合酶具体制备方法如下：
（1）按重量份数计，依次取2份壳聚糖，0.02份壳聚糖酶，120份水，将壳聚糖与水置于1号烧杯中，并用玻璃棒搅拌10min，静置溶胀5h后，再将1号烧杯置于数显测速恒温磁力搅拌器中，于温度为95℃，转速为600r/min条件下，加热搅拌溶解60min后，降温至35℃，随后向1号烧杯中加入壳聚糖酶，于温度为35℃，转速为500r/min条件下，恒温搅拌反应60min后，升温至95℃灭酶10min，即得酶化壳聚糖液；
（2）按重量份数计，依次取30份酶化壳聚糖液，60份明胶液，3份盐酸和3份对苯二甲醛，将酶化壳聚糖液与明胶液置于三口烧瓶中，并将三口烧瓶置于数显测速恒温磁力搅拌器中，于温度为60℃，转速为500r/min条件下，恒温搅拌混合50min，并依次向三口烧瓶中加入质量分数为30%的盐酸和质量分数为30%的对苯二甲醛，于温度为38℃，转速为300r/min的条件下搅拌混合12h，得混合浆液，再将混合浆液过滤，得凝胶，将凝胶切块，并用去离子水洗涤6天，每隔12h换一次去离子水，将洗涤后的凝胶块于室温条件下真空干燥5h，接着将干燥后的凝胶置于粉碎机中，粉碎，过160目的筛，得改性添加剂；
（3）按重量份数计，依次取20份葡聚糖溶液，20份聚乙二醇溶液，0.3份枯草菌蛋白酶，0.2份胰蛋白酶，0.2份超氧化物歧化酶，0.2份脱氧核糖核酸酶，将枯草菌蛋白酶，胰蛋白酶，超氧化物歧化酶，脱氧核糖核酸酶置于单口烧瓶中，接着向单口烧瓶中加入聚乙二醇溶液，接着将单口烧瓶置于超声分散仪中，于超声频率为75kHz条件下，混合振荡60min后，静置8h后，得混合液，接着阿将混合液置于真空冷冻干燥箱中冷冻干燥，得干燥料，随后将干燥料用去离子水洗涤5次，得预处理复合酶；
（4）按重量份数计，依次取10份改性添加剂，2份碳酸氢钠，3份预处理复合酶，30份水，将改性添加剂，碳酸氢钠，预处理复合酶，水置于3号烧杯中，随后将3号烧杯置于超声分散仪中，于超声频率为75kHz条件下，混合超声60min，得分散液，接着将分散液置于真空冷冻干燥箱中冷冻干燥，即得提高皮肤修复功能的复合酶；
（5）产品性能检测。
对比例
一种提高皮肤修复功能的复合酶，包括以下重量份数的原料：3份预处理复合酶，30份水。
一种提高皮肤修复功能的复合酶的制备方法，所述提高皮肤修复功能的复合酶具体制备方法如下：
（1）按重量份数计，依次取20份葡聚糖溶液，20份聚乙二醇溶液，0.3份枯草菌蛋白酶，0.2份胰蛋白酶，0.2份超氧化物歧化酶，0.2份脱氧核糖核酸酶，将枯草菌蛋白酶，胰蛋白酶，超氧化物歧化酶，脱氧核糖核酸酶置于单口烧瓶中，接着向单口烧瓶中加入聚乙二醇溶液，接着将单口烧瓶置于超声分散仪中，于超声频率为75kHz条件下，混合振荡60min后，静置8h后，得混合液，接着阿将混合液置于真空冷冻干燥箱中冷冻干燥，得干燥料，随后将干燥料用去离子水洗涤5次，得预处理复合酶；
（2）按重量份数计，依次取3份预处理复合酶，30份水，将预处理复合酶和水置于3号烧杯中，随后将3号烧杯置于超声分散仪中，于超声频率为75kHz条件下，混合超声60min，得分散液，接着将分散液置于真空冷冻干燥箱中冷冻干燥，即得提高皮肤修复功能的复合酶；
（3）产品性能检测。
性能检测表：
表1：
创伤面积比/% 1d 2d 4d 6d 8d 10d
实例1 1 0.89 0.84 0.70 0.52 0.31
实例2 1 0.92 0.86 0.73 0.61 0.49
实例3 1 0.94 0.89 0.78 0.64 0.56
实例4 1 0.95 0.91 0.88 0.71 0.64
对比例 1 0.98 0.94 0.89 0.84 0.81
从表1可看出：通过实例1，实例2，实例3和对比例对比，本发明通过添加改性添加剂，改性添加剂中含有对pH敏感的凝胶成分，在使用过程中，首先，碳酸氢钠受热分解，释放二氧化碳，二氧化碳能够部分溶于体系中，使得伤口处的pH降低，有利于体系中的酶的作用，从而使得产品对皮肤的修复能力得到提升，其次，体系中的pH下降，使得改性添加剂中凝胶分子链上的氨基质子化，从而使得凝胶膨胀，凝胶膨胀，一方面，有利于遮盖伤口，另一方面，有利于体系中的酶的进一步分散，体系中的酶的分散性能的提升，使得酶能够更为充分的作用于伤口处，从而进一步提升了产品对皮肤的修复性能；
通过实例1，实例2，实例4和对比例对比，本发明通过添加改性复合酶微球，在使用过程中，由于改性复合酶微球能够包裹体系中的各种酶，且能够使得酶缓慢释放，使得各酶能够均匀的作用于伤口处，有利于伤口的修复，随着改性酶微球的使用，改性酶微球中的聚乳酸-羟基乙酸共聚物分解得到乳酸和乙醇酸，分解得到的酸性物质能够使得体系的pH下降，能够使得体系处于微酸的环境，使得体系中的各酶的活性提升，从而提升了产品对皮肤的修复功能，再者，聚乳酸-羟基乙酸共聚物的分解使得微球形成多孔结构，多孔结构具有良好的吸附性能，能够吸附伤口表面多余的杂质和残存的体液，使得伤口处能够迅速结痂，有效避免了伤口处出现化脓或感染，有利于皮肤表面伤口处的恢复，从而进一步提升了产品对皮肤的修复功能。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

Claims (7)

1.一种提高皮肤修复功能的复合酶，其特征在于：包括以下重量份数的原料：8～10份改性添加剂，1～2份碳酸氢钠，2～3份改性复合酶微球，20～30份水。
2.根据权利要求1所述的一种提高皮肤修复功能的复合酶，其特征在于：所述改性添加剂是由酶化壳聚糖液，明胶液，盐酸和对苯二甲醛改性后制得；所述酶化壳聚糖液是由壳聚糖，壳聚糖酶，水混合处理后制得。
3.根据权利要求2所述的一种提高皮肤修复功能的复合酶，其特征在于：所述改性复合酶微球是由聚乳酸-羟基乙酸共聚物，乙酸乙酯，聚乙烯醇，水，预处理复合酶改性后制得；所述预处理复合酶是由葡聚糖溶液，聚乙二醇溶液，枯草菌蛋白酶，胰蛋白酶，超氧化物歧化酶，脱氧核糖核酸酶混合处理后制得。
4.根据权利要求3所述的一种提高皮肤修复功能的复合酶，其特征在于：所述提高皮肤修复功能的复合酶包括以下重量份数的原料：10份改性添加剂，2份碳酸氢钠，3份改性复合酶微球，30份水。
5.一种提高皮肤修复功能的复合酶的制备方法，其特征在于具体制备方法如下：
（1）处理壳聚糖；
（2）制备改性添加剂；
（3）处理复合酶；
（4）将步骤（3）所得物进一步处理；
（5）混料，超声，干燥；
（6）检测。
6.根据权利要求1所述的一种提高皮肤修复功能的复合酶的制备方法，其特征在于：所述提高皮肤修复功能的复合酶具体制备方法如下：
（1）将壳聚糖与水混合，静置溶胀后，加热搅拌溶解，降温，加入壳聚糖酶，恒温搅拌反应，灭酶，即得酶化壳聚糖液；
（2）将酶化壳聚糖液与明胶液搅拌混合，并依次加入盐酸和对苯二甲醛，搅拌混合后，过滤，切块，洗涤，真空干燥，粉碎，过筛，得改性添加剂；
（3）将枯草菌蛋白酶，胰蛋白酶，超氧化物歧化酶，脱氧核糖核酸酶混合，接着加入聚乙二醇溶液，混合振荡，静置，冷冻干燥，洗涤，得预处理复合酶；
（4）将聚乳酸-羟基乙酸共聚物，乙酸乙酯和预处理复合酶混合溶解，得聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解液，将聚乙烯醇与水混合，静置溶胀后，加热搅拌溶解，得聚乙烯醇液，将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解液加到聚乙烯醇液中，混合乳化，接着加入氯化钠溶液，搅拌固化，离心，过滤，洗涤，干燥，得改性复合酶微球；
（5）将改性添加剂，碳酸氢钠，改性复合酶微球，水混合，超声，冷冻干燥，即得提高皮肤修复功能的复合酶；
（6）检测。
7.根据权利要求1所述的一种提高皮肤修复功能的复合酶的制备方法，其特征在于：所述提高皮肤修复功能的复合酶具体制备方法如下：
（1）将壳聚糖与水置于1号烧杯中，并用玻璃棒搅拌5～10min，静置溶胀3～5h后，再将1号烧杯置于数显测速恒温磁力搅拌器中，于温度为90～95℃，转速为400～600r/min条件下，加热搅拌溶解40～60min后，降温至30～35℃，随后向1号烧杯中加入壳聚糖酶，于温度为30～35℃，转速为300～500r/min条件下，恒温搅拌反应40～60min后，升温至90～95℃灭酶5～10min，即得酶化壳聚糖液；
（2）将酶化壳聚糖液与明胶液置于三口烧瓶中，并将三口烧瓶置于数显测速恒温磁力搅拌器中，于温度为50～60℃，转速为300～500r/min条件下，恒温搅拌混合30～50min，并依次向三口烧瓶中加入质量分数为20～30%的盐酸和质量分数为20～30%的对苯二甲醛，于温度为28～38℃，转速为250～300r/min的条件下搅拌混合10～12h，得混合浆液，再将混合浆液过滤，得凝胶，将凝胶切块，并用去离子水洗涤5～6天，每隔10～12h换一次去离子水，将洗涤后的凝胶块于室温条件下真空干燥3～5h，接着将干燥后的凝胶置于粉碎机中，粉碎，过160目的筛，得改性添加剂；
（3）将枯草菌蛋白酶，胰蛋白酶，超氧化物歧化酶，脱氧核糖核酸酶置于单口烧瓶中，接着向单口烧瓶中加入聚乙二醇溶液，接着将单口烧瓶置于超声分散仪中，于超声频率为55～75kHz条件下，混合振荡40～60min后，静置5～8h后，得混合液，接着阿将混合液置于真空冷冻干燥箱中冷冻干燥，得干燥料，随后将干燥料用水洗涤3～5次，得预处理复合酶；
（4）将聚乳酸-羟基乙酸共聚物，乙酸乙酯和预处理复合酶置于四口烧瓶中，于转速为500～600r/min条件下，搅拌混合溶解40～60min，得聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解液，将聚乙烯醇与水置于2号烧杯中，并用玻璃棒搅拌10～20min，静置溶胀3～5h后，再将烧杯置于数显测速恒温磁力搅拌器中，于温度为90～95℃，转速为400～600r/min条件下，加热搅拌溶解40～60min，得聚乙烯醇液，将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解液加到2号烧杯中中，于转速为1100～1200r/min条件下，搅拌混合混合乳化40～60min，接着向2号烧杯中加入质量分数为5～10%的氯化钠溶液，于转速为400～600r/min条件下，搅拌固化40～60min，得混合浆料，随后将混合浆料置于离心机中，离心10～20min后，过滤，得滤渣，随后用去离子水将滤渣洗涤5～8次，随后将洗涤后的滤渣置于真空冷冻干燥箱中干燥，得改性复合酶微球；
（5）将改性添加剂，碳酸氢钠，改性复合酶微球，水置于3号烧杯中，随后将3号烧杯置于超声分散仪中，于超声频率为55～75kHz条件下，混合超声40～60min，得分散液，接着将分散液置于真空冷冻干燥箱中冷冻干燥，即得提高皮肤修复功能的复合酶；
（6）产品性能检测。
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