ES2296594T3 - Androstanos y pregnanos para la modulacion alosterica del receptor de gaba. - Google Patents
Androstanos y pregnanos para la modulacion alosterica del receptor de gaba. Download PDFInfo
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Abstract
Compuesto de fórmula: (Ver fórmula) en la que R es hidrógeno, halógeno, -O-alquilo C1 - 10, -NR12R13, alquilo, 1-alquinilo opcionalmente sustituido o alquilo sustituido; R1 es un aralquinilo sustituido, arilalquilo, arilalquenilo, arilo, aralquilalquinilo opcionalmente sustituido, alcanoiloxialquinilo, heteroariloxialquinilo opcionalmente sustituido, oxoalquinilo o un cetal del mismo, cianoalquinilo, heteroarilalquinilo opcionalmente sustituido, hidroxialquinilo, alcoxialquinilo, aminoalquinilo, acilaminoalquinilo, mercaptoalquinilo, hemiéster del ácido hidroxialquinildioico o una sal del mismo, o alquiniloxialquinilo; R2 es hidrógeno, hidroxilo, OR11, O-C(O)R14, -C(O)OR14, un grupo ceto o un grupo -NR15R16; R3 es un grupo acetilo, un cetal de un grupo acetilo; un grupo alcoxiacetilo, un grupo alquiltioacetilo, un grupo alquilsulfinilacetilo, un grupo alquilsulfonilacetilo, un grupo aminoacetilo, un grupo trifluoroacetilo; un grupo hidroxiacetilo; un grupo alcoxialquilacetilo; un grupo hidroxialquilo; una sal de hemiéster de ácido hidroxiacetildioico; un grupo alcanoiloxiacetilo; un grupo sulfoxiacetilo; un grupo alquilacetilo; un grupo haloacetilo; un grupo etinilo; un grupo heteroaralquilacetilo opcionalmente sustituido que también puede estar opcionalmente sustituido en el alquileno con un grupo hidroxilo, alcoxilo, alcanoiloxilo o carbalcoxilo; un grupo heterociclilacetilo opcionalmente sustituido; una sal de acetil-tiosulfato; un grupo ciano; un grupo metileno junto con R7; un grupo alquilmetileno junto con R7; o un grupo alcoximetileno junto con R7; R4 es hidrógeno o metilo, R5 es hidrógeno; R6 es hidrógeno, alcanoílo, aminocarbonilo o alcoxicarbonilo; R7 es hidrógeno, halógeno, hidroxilo, -OR11, -O-C(O)-R14 o -C(O)OR14, un grupo metileno junto con R3 o un grupo alcoximetileno junto con R3; R8 es hidrógeno o halógeno; R9 es hidrógeno, halógeno, alquilo, -OR11, arilalcoxilo o -NR15R16; y R10 es...
Description
Androstanos y pregnanos para la modulación
alostérica del receptor de GABA.
Esta solicitud es una continuación en parte de
documento U.S. con número de serie 08/346.927, presentado el 23 de
noviembre de 1994, que es una continuación en parte del documento
U.S. con número de serie 08/196.919, presentado el 14 de febrero de
1994, incorporándose el contenido de cada uno de los cuales en su
totalidad como referencia al presente documento.
La presente invención se refiere a métodos,
composiciones y compuestos para modular la excitabilidad cerebral
animal (y de seres humanos) mediante el complejo de receptor del
ácido gamma-aminobutírico A
(GABA_{A})-ionóforo de cloruro (GRC).
Específicamente, la presente invención se refiere a métodos,
composiciones y compuestos para modular la excitabilidad cerebral a
través de la unión al sitio del receptor de neuroesteroides en el
GRC.
La excitabilidad cerebral se define como el
nivel de alerta de un animal, un continuo que oscila desde el coma
hasta las convulsiones, y está regulado por diversos
neurotransmisores. En general, los neurotransmisores son
responsables de la regulación de la conductancia de iones a través
de las membranas neuronales. En reposo, la membrana neuronal tiene
un potencial (o voltaje de membrana) de aproximadamente -80 mV,
siendo el interior celular negativo con respecto al exterior
celular. El potencial (voltaje) es el resultado del equilibrio
iónico (K^{+}, Na^{+}, Cl^{-}, aniones orgánicos) a través de
la membrana neuronal semipermeable. Los neurotransmisores se
almacenan en vesículas presinápticas y se liberan bajo la influencia
de potenciales de acción neuronales. Cuando se libera en la
hendidura sináptica, un transmisor químico excitador tal como la
acetilcolina producirá la despolarización de la membrana (cambio de
potencial desde -80 mV hasta -50 mV). Este efecto está mediado por
receptores nicotínicos postsinápticos que se estimulan por la
acetilcolina para aumentar la permeabilidad de la membrana a iones
Na^{+}. El potencial de membrana reducido estimula la
excitabilidad neuronal en forma de un potencial de acción
postsináptico.
En el caso del GRC, el efecto sobre la
excitabilidad cerebral está mediado por GABA, un neurotransmisor. El
GABA tiene una profunda influencia sobre la excitabilidad cerebral
global porque hasta el 40% de las neuronas en el cerebro utilizan
GABA como neurotransmisor. El GABA regula la excitabilidad de
neuronas individuales regulando la conductancia de iones cloruro a
través de la membrana neuronal. El GABA interacciona con su sitio
de reconocimiento sobre el GRC para facilitar el flujo de iones
cloruro a favor de un gradiente electroquímico del GRC dentro de la
célula. Un aumento intracelular de este anión produce la
hiperpolarización del potencial de membrana, haciendo la neurona
menos susceptible a entradas excitadoras (es decir, excitabilidad
neuronal reducida). En otras palabras, cuanto mayor es la
concentración de ion cloruro en la neurona, menor es la
excitabilidad cerebral (el nivel de
alerta).
alerta).
Está bien documentado que el GRC es responsable
de la mediación de la ansiedad, actividad convulsiva y sedación.
Por tanto, el GABA y los fármacos que actúan como el GABA o
facilitan los efectos del GABA (por ejemplo, los barbitúricos y
benzodiazepinas (BZ) terapéuticamente útiles tales como Valium)
producen sus efectos terapéuticamente útiles interaccionando con
sitios reguladores específicos en el GRC.
También se ha observado que una serie de
metabolitos esteroideos interaccionan con el GRC para alterar la
excitabilidad cerebral (Majewska, M.D. et al., "Steroid
hormone metabolites are barbiturate-like modulators
of the GABA receptor", Science 232:1004-1007
(1986); Harrison, N.L. et al.,
"Structure-activity relationships for steroid
interaction with the gamma-aminobutyric
acid-A receptor complex", J. Pharmacol. Exp.
Ther. 241:346-353 (1987)). Antes de la presente
invención, la utilidad terapéutica de estos metabolitos esteroideos
no estaba reconocida por los investigadores en el campo debido a un
entendimiento incompleto de la potencia y el sitio de acción. La
invención de los solicitantes se refiere en parte a una aplicación
farmacéutica del conocimiento logrado a partir de un entendimiento
más desarrollado de la potencia y el sitio de acción de ciertos
compuestos esteroideos.
La hormona ovárica progesterona y sus
metabolitos han mostrado tener profundos efectos sobre la
excitabilidad cerebral (Backstrom, T. et al., "Ovarian
steroid hormones: effects on mood, behavior and brain
excitability", Acta Obstet. Gynecol. Scand. Suppl.
133-19-24 (1985); Pfaff, D.W. y
McEwen, B.S., "Actions of estrogens and progestins on nerve
cells", Science 219:808-814 (1983); Gyermek et
al., "Structure activity relationship of some steroidal
hypnotic agents", J. Med. Chem. 11:117 (1968); Lambert, J. et
al., "Actions of synthetic and endogenous steroids on the
GABAA receptor", Trends Pharmacol. 8:224-227
(1987)). Los niveles de progesterona y sus metabolitos varían con
las fases del ciclo menstrual. Se ha documentado bien que la
progesterona y sus metabolitos disminuyen antes del comienzo de la
menstruación. También se ha documentado bien la repetición mensual
de ciertos síntomas físicos antes del comienzo de la menstruación.
Estos síntomas, que se han asociado con el síndrome premenstrual
(SPM), incluyen estrés, ansiedad y cefaleas migrañosas (Dalton, K.,
Premenstrual Syndrome and Progesterone Therapy, 2ª edición,
Chicago: Chicago yearbook, 1984). Las pacientes con SPM tienen una
repetición mensual de síntomas que están presentes en la
premenstruación y ausentes en la posmenstruación.
\newpage
De una manera similar, también se ha
correlacionado temporalmente una reducción en la progesterona con un
aumento en la frecuencia de convulsiones en pacientes epilépticas
(es decir, epilepsia catamenial; Laidlaw, J., "Catamenial
epilepsy", Lancet, 1235-1237 (1956)). Se ha
observado una correlación más directa con una reducción en los
metabolitos de la progesterona (Rosciszewska et al.,
"Ovarian hormones, anticonvulsant drugs and seizures during the
menstrual cycle in women with epilepsy", J. Neurol. Neurosurg.
Psych. 49:47-51 (1986)). Además, para pacientes con
epilepsia menor generalizada primaria, la incidencia temporal de las
convulsiones se ha correlacionado con la incidencia de los síntomas
del síndrome premenstrual (Backstrom, T. et al.,
"Endocrinological aspects of cyclical mood changes during the
menstrual cycle or the premenstrual syndrome", J. Psychosom.
Obstet. Gynaecol. 2:8-20 (1983)). Se ha hallado que
el esteroide desoxicorticosterona es eficaz en el tratamiento de
pacientes con ausencias epilépticas correlacionadas con sus ciclos
menstruales (Aird, R.B. y Gordan, G., "Anticonvulsive properties
of deoxycorticosterone", J. Amer. Med. Soc.
145:715-719 (1951)).
Un síndrome también relacionado con niveles
bajos de progesterona es la depresión posnatal (DPN). Inmediatamente
tras el parto, los niveles de progesterona disminuyen de manera
espectacular conduciendo a la aparición de la DPN. Los síntomas de
la DPN oscilan desde depresión leve hasta psicosis que requiere
hospitalización; la DPN está asociada con ansiedad grave e
irritabilidad. La depresión asociada a la DPN no puede tratarse
mediante antidepresivos clásicos y las mujeres que experimentan DPN
muestran un aumento de la incidencia de SPM (Dalton, K., 1984).
Colectivamente, estas observaciones implican un
papel crucial de la progesterona y la desoxicorticosterona, y más
específicamente de sus metabolitos, en la regulación homeostásica de
la excitabilidad cerebral, que se manifiesta como un aumento en la
actividad convulsiva o los síntomas asociados con la epilepsia
catamenial, SPM y DPN. La correlación entre los niveles reducidos
de progesterona y los síntomas asociados con el SPM, DPN y la
epilepsia catamenial (Backstrom et al., 1983; Dalton, K.,
1984) ha provocado el uso de progesterona en su tratamiento
(Mattson et al., "Medroxyprogesterone therapy of catamenial
epilepsy", en Advances in epileptology: XVth Epilepsy
international Symposium, Raven Press, Nueva York,
279-282, 1984, y Dalton, K., 1984). Sin embargo, la
progesterona no es eficaz sistemáticamente en el tratamiento de los
síndromes mencionados anteriormente. Por ejemplo, no existe
relación dosis-respuesta para la progesterona en el
tratamiento del SPM (Maddocks, et al., "A
double-blind placebo-controlled
trial of progesterone vaginal suppositories in the treatment of
premenstrual syndrome", Obstet. Gynecol.
154:573-581 (1986); Dennerstein, et al.,
British Medical Journal, 290:16-17 (1986)).
El documento US 3.274.179 da a conocer derivados
de
3-haloetinil-3-hidroxilo
de la serie de androstan-17-ona y
pregnan-20-ona, en particular
20-etilendioxi-3\alpha-hidroxi-3\beta-fenil-pregnan-11,20-diona
y
3\alpha-hidroxi-3\beta-fenil-pregnan-11,20-diona.
Phillips (Mol. Mech. Gen. Anaesth. Glaxo
Symposium 1974 págs. 32-47 y Journal of Steroidal
Biochemistry, 1975 Vol. 6 págs. 607-613) describe
modificaciones de
3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-11,20-diona,
y los efectos de estas modificaciones sobre la actividad anestésica
de los compuestos.
La presente invención se refiere a composiciones
y a compuestos para modular la excitabilidad cerebral. Más
particularmente, la invención se refiere al uso de derivados de
esteroides 3\alpha-hidroxilados, que actúan en un
sitio recién identificado en el complejo de GR, para modular la
excitabilidad cerebral de manera que aliviarán el estrés, ansiedad,
insomnio, trastornos del estado de ánimo (tales como depresión) que
pueden tratarse con agentes activos para GR, y actividad
convulsiva. Las composiciones y compuestos eficaces para tal
tratamiento están dentro del alcance de la invención.
Los compuestos usados en y que forman parte de
la invención son moduladores de la excitabilidad del sistema
nervioso central tal como está mediada por su capacidad para regular
los canales de ion cloruro asociados con el complejo de receptor de
GABA_{A}. Los experimentos de los solicitantes han establecido que
los compuestos usados en y de la invención tienen actividad
anticonvulsiva y ansiolítica similar a las acciones de agentes
ansiolíticos conocidos tales como las BZ, pero actúan en un sitio
distinto en el complejo de GR.
La relación de los metabolitos endógenos de la
progesterona con los procesos asociados con la reproducción (ciclo
estral y embarazo) está bien establecida (Marker. R.E., Kamm, O., y
McGrew, R.V., "Isolation of
epipregnanol-3-one-20
from human pregnancy urine, "J. Am. Chem. Soc.
59:616-618 (1937)). Sin embargo, antes de la
presente invención, no estaba reconocido cómo tratar trastornos
modulando la excitabilidad cerebral a través del uso de metabolitos
de la progesterona y sus derivados. Por tanto, esta invención se
refiere a métodos, composiciones y compuestos para tratar
trastornos modulando la excitabilidad cerebral usando los compuestos
de esta invención. Los trastornos representativos tratados en la
presente invención son epilepsia, ansiedad, síndrome premenstrual
(SPM), depresión posnatal (DPN), trastornos del estado de ánimo
(tales como depresión), que pueden tratarse con agentes activos
para GR, e insomnio. Los compuestos de la invención también pueden
usarse para inducir anestesia.
La presente invención puede entenderse mejor y
apreciarse sus ventajas por los expertos en la técnica haciendo
referencia a los dibujos adjuntos, en los que:
Las figuras 1A y 1B son representaciones
gráficas de la unión en tanto por ciento de
[^{35}S]t-butilbiciclosforotionato
([^{35}S]TBPS) a las membranas celulares de cerebro de rata
frente al logaritmo de la concentración de la alfaxalona y el GABA
en diversas concentraciones de (+)bicuculina.
La figura 2 muestra los transcursos temporales
para la disociación de [^{35}S]TBPS 2 nM a partir de
homogeneizados P_{2} corticales de rata iniciada mediante la
adición de TBPS 2 \muM (\blacksquare), 3\alpha5\alphaP 1
\muM (\square), pentobarbital de Na 100 \muM (\bullet) y
3\alpha5\alphaP 1 \muM + pentobarbital de Na 100 \muM
(\circ).
La figura 3 es una representación gráfica que
muestra el efecto de una dosificación única de pentobarbital sobre
la modulación por
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona
(3\alpha-5\alpha-P) de la unión
a [^{3}H]-flunitrazepam en homogeneizados de
hipocampo de rata.
La figura 4 es una representación gráfica del
efecto de
3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
(5\alpha-THDOC) y R5020 (promegesterona) sobre la
inhibición de la unión a [^{35}S]TBPS en homogeneizados de
corteza cerebral de rata.
La figura 5 es una representación gráfica de la
correlación entre la unión de TBPS y la actividad electrofisiológica
de 15 esteroides 3\alpha-hidroxilados
diferentes.
La figura 6 es una representación gráfica del
efecto de
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona,
5\alpha-pregnan-3\alpha,20\alpha-diol
y
5\beta-pregnan-3\alpha,20\beta-diol
sobre la inhibición de la unión a [^{35}S]TBPS en
homogeneizados de corteza de rata.
La figura 7 es una representación gráfica que
muestra el efecto de
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona,
5\alpha-pregnan-3\alpha,20\alpha-diol
y
5\beta-pregnan-3\alpha,20\beta-diol
sobre la corriente provocada por GABA en ovocitos de Xenopus
a los que se les inyectó la subunidad \alpha1\beta1\gamma2L
del receptor de GABA recombinante humano.
La figura 8 es un gráfico de líneas del número
de transiciones de luz a oscuridad que se producen en el plazo de
diez minutos desde la inyección de
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona
y
3\alpha-OH-5\beta-pregnan-20-ona.
Las figuras 9A y 9B son dos gráficos de líneas
de (A) las entradas y(B) el tiempo de brazos abiertos durante
un periodo de prueba de cinco minutos de
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona
y
3\alpha-OH-5\beta-pregnan-20-ona
en la prueba de laberinto en cruz elevado.
La figura 10 es un gráfico de líneas del cambio
en ratas castigadas que responden desde el nivel inicial para
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona
y
3\alpha-OH-5\beta-pregnan-20-ona
en la prueba de Geller-Seifter.
La figura 11 es un gráfico del transcurso
temporal de la actividad anti-metrazol de varios
profármacos de
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona.
Los compuestos de y usados en la invención son
derivados de diversos pregnanos
3\alpha-hidroxilados y androstanos
3\alpha-hidroxilados, y derivados de éster, éter,
sulfonato, sulfato, fosfonato, fosfato, oxima, tiosulfato,
heterociclilo y heteroarilo de los mismos, y derivados denominados
como profármacos. La expresión "profármaco" indica un derivado
de un fármaco de acción directa conocido, derivado que tiene
características de administración y un valor terapéutico mejorados
comparado con el fármaco, y se transforma en el fármaco activo
mediante un proceso enzimático o químico; véase Notari, R.E.,
"Theory and Practice of Prodrug Kinetics", Methods in
Enzymology, 112:309-323 (1985); Bodor, N., "Novel
Approaches in Prodrug Design", Drugs of the Future,
6(3):165-182 (1981); y Bundgaard, H.,
"Design of Prodrugs: Bioreversible-Derivatives for
Various Functional Groups and Chemical Entities", en Design of
Prodrugs (H. Bundgaard, ed.), Elsevier, Nueva York (1985). Debe
indicarse que algunos de los derivados sintéticos que forman parte
de la presente invención pueden no ser verdaderos profármacos
porque, además de las características anteriores, también tienen
actividad intrínseca. Sin embargo, para los fines de esta
solicitud, se denominarán como profármacos.
Los estudios de los inventores (Gee, K.W. et
al., "GABA-dependent modulation of the Cl
ionophore by steroids in rat brain", European Journal of
Pharmacology, 136:419-423, 1987) han demostrado que
los esteroides 3\alpha-hidroxilados usados en la
invención son varios órdenes de magnitud más potentes que los otros
que se han notificado (Majewska, M.D. et al. (1986) y
Harrison, N.L. et al. (1987)) como moduladores del complejo
de GR. Majewska et al. y Hanison et al. enseñan que
los esteroides
3\alpha-hidroxilados-5-reducidos
sólo son capaces de niveles de eficacia mucho menores. Los datos
experimentales in vitro e in vivo demuestran que la
alta potencia de estos esteroides les permite ser terapéuticamente
útiles en la modulación de la excitabilidad cerebral a través del
complejo de GR. Los esteroides más potentes útiles en la presente
invención incluyen derivados de metabolitos principales de la
progesterona y desoxicorticosterona. Estos esteroides pueden usarse
específicamente para modular la excitabilidad cerebral en el estrés,
ansiedad, insomnio, trastornos del estado de ánimo (tales como
depresión) que pueden tratarse con agentes activos de GR, y
trastornos convulsivos de manera terapéuticamente beneficiosa.
Además, los inventores han demostrado que estos esteroides
interaccionan en un único sitio en el complejo de GR que es
distinto de otros sitios de interacción conocidos (es decir,
barbitúricos, BZ y GABA) en los que se habían logrado previamente
efectos terapéuticamente beneficiosos sobre el estrés, ansiedad,
trastornos del sueño, del estado de ánimo y trastornos convulsivos
(Gee, K.W. y Yamamura, H.L, "Benzodiazepines and Barbiturates:
Drugs for the Treatment of Anxiety, Insomnia and Seizure
Disorders", en In Central Nervous System Disorders, páginas
123-147, D.C. Horvell, ed., 1985; Lloyd, K.G. y
Morselli, P.L., "Psychopharmacology of GABAergic Drugs", en
Psychopharmacology: The Third Generation of Progress, páginas
183-195, H.Y. Meltzer, ed., Raven Press, N.Y.,
1987). Estos compuestos son deseables por su duración, potencia y
actividad oral (junto con otras formas de administración).
Los derivados esteroideos de esta invención son
aquéllos que tienen una de las siguientes fórmulas estructurales
(I):
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R, R_{1}, R_{2},
R_{3}, R_{4}, R_{5}, R_{6}, R_{7}, R_{8}, R_{9} y
R_{10} se definen adicionalmente en el presente documento y las
líneas de puntos son enlaces sencillos o
dobles.
La presente invención también incluye ésteres y
sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula I,
incluyendo sales de adición de ácido. Se cree que el
3\alpha-hidroxilo también puede enmascararse como
un éster farmacéuticamente aceptable debido al hecho de que el éster
se escindirá a medida que el profármaco se convierta en la forma de
fármaco. Éstos se denominan en el presente documento como ésteres
escindibles.
Según la presente invención y tal como se usa en
el presente documento, los siguientes términos se definen con el
siguiente significado, a menos que se indique explícitamente lo
contrario.
El término "alquilo" se refiere a grupos
alifáticos saturados que incluyen grupos de cadena lineal, de cadena
ramificada y cíclicos, todos los cuales pueden estar opcionalmente
sustituidos. Los grupos alquilo adecuados incluyen metilo, etilo y
similares y pueden estar opcionalmente sustituidos.
El término "alquenilo" se refiere a grupos
insaturados que contienen al menos un doble enlace
carbono-carbono e incluye grupos de cadena lineal,
de cadena ramificada y cíclicos, todos los cuales pueden estar
opcionalmente sustituidos.
El término "alquinilo" se refiere a grupos
hidrocarbonados insaturados que contienen al menos un triple enlace
carbono-carbono e incluye grupos de cadena lineal y
de cadena ramificada que pueden estar opcionalmente sustituidos.
Los grupos alquinilo adecuados incluyen propinilo, pentinilo y
similares que pueden estar opcionalmente sustituidos con ciano,
acetoxilo, halógeno, hidroxilo o ceto. Los grupos alquinilo
preferidos tienen de cinco a dieciocho átomos de carbono. Grupos
alquinilo más preferidos tienen de cinco a doce átomos de carbono.
Los grupos alquinilo más preferidos tienen de cinco a siete átomos
de carbono.
El término "alcoxilo" se refiere al éter
-OR en el que R es alquilo.
El término "ariloxilo" se refiere al éter
-OR en el que R es arilo.
El término "arilo" se refiere a grupos
aromáticos que tienen al menos un anillo que tiene un sistema
electrónico pi conjugado e incluye arilo y biarilo carbocíclicos,
ambos de los cuales pueden estar opcionalmente sustituidos.
El término "arilo carbocíclico" se refiere
a grupos en los que los átomos de anillo del anillo aromático son
átomos de carbono. Los grupos arilo carbocíclicos incluyen grupos
fenilo y naftilo opcionalmente sustituidos. El fenilo sustituido
tiene preferiblemente de uno a tres, cuatro o cinco sustituyentes,
siendo tales ventajosamente alquilo inferior, amino, amido, ciano,
éster de carboxilato, hidroxilo, alcoxilo inferior, halógeno, acilo
inferior y nitro.
El término "aralquilo" se refiere a un
grupo alquilo sustituido con un grupo arilo. Los grupos aralquilo
adecuados incluyen bencilo y similares, y pueden estar
opcionalmente sustituidos.
El término "alcanoiloxilo" se refiere a
-O-C(O)R, en el que R es alquilo,
alquenilo, alquinilo, arilo o aralquilo.
El término "carbalcoxilo" se refiere a
-C(O)O, en el que R es alquilo, alquenilo, alquinilo,
arilo o aralquilo.
El término "carboxamido" se refiere a
-C(O)NRR_{1}, en el que R y R_{1} se seleccionan
independientemente de hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo,
arilo o aralquilo.
El término "dialquilamino" se refiere a
-NRR'' en el que R y R'' son independientemente grupos alquilo
inferior o juntos forman el resto de un grupo morfolino. Los grupos
dialquilamino adecuados incluyen dimetilamino, dietilamino y
morfolino.
El término "acilo" se refiere al grupo
alcanoílo -C(O)R en el que R es alquilo, alquenilo,
alquinilo, arilo o aralquilo.
El término "amino" se refiere a NRR', en el
que R y R' son independientemente hidrógeno, alquilo inferior y se
unen entre sí para dar un anillo de 5 o 6 miembros, por ejemplo
anillos de pirrolidina o piperidina.
El término "opcionalmente sustituido" o
"sustituido" se refiere a grupos sustituidos con de uno a tres,
cuatro o cinco sustituyentes, seleccionados independientemente de
alquilo inferior (acíclico y cíclico), arilo (carboarilo y
heteroarilo), alquenilo, alquinilo, alcoxilo, halógeno, haloalquilo
(incluyendo trihaloalquilo, por ejemplo trifluorometilo), amino,
mercapto, alquiltio, alquilsulfinilo, alquilsulfonilo, nitro,
alcanoílo, alcanoiloxilo, alcanoiloxialcanoílo, alcoxicarboxilo,
carbalcoxilo (-COOR, en el que R es alquilo inferior), carboxamido
(-CONRR', en el que R y R' son independientemente alquilo inferior),
formilo, carboxilo, hidroxilo, ciano, azido, ceto y cetales
cíclicos del mismo, alcanoilamido, heteroariloxilo,
heterocarbocicliloxilo y sales de éster de hemisuccinato de los
mismos.
El término "inferior" al que se hace
referencia en el presente documento junto con radicales o compuestos
orgánicos define tales como de uno hasta e incluyendo diez,
preferiblemente hasta e incluyendo seis, y ventajosamente de uno a
cuatro átomos de carbono. Tales grupos pueden ser de cadena lineal,
de cadena ramificada o cíclicos.
El término "heterocíclico" se refiere a
radicales que contienen carbono que tienen anillos de cuatro, cinco,
seis o siete miembros y uno, dos o tres heteroátomos de O, N o S,
por ejemplo tiazolidina, tetrahidrofurano,
1,4-dioxano, pirrolidina, piperidina, quinuclidina,
ditiano, tetrahidropirano,
\varepsilon-caprolactona,
\varepsilon-caprolactama,
\varpi-tiocaprolactama y morfolina.
El término "heteroarilo" se refiere a
radicales insaturados cíclicos de 5 a 14 miembros que contienen
carbono que contienen uno, dos, tres o cuatro átomos de O, N o S y
que tienen 6, 10 o 14 electrones \pi deslocalizados en uno o más
anillos, por ejemplo piridina, oxazol, indol, purina, pirimidina,
imidazol, bencimidazol, indazol,
2H-1,2,4-triazol,
1,2,3-triazol,
2H-1,2,3,4-tetrazol.
1H-1,2,3,4-tetrazol, benzotriazol,
1,2,3-triazolo[4,5-b]piridina,
tiazol, isoxazol, pirazol, quinolina, citosina, timina, uracilo,
adenina, guanina, pirazina, ácido picolínico, picolina, ácido
furoico, furfural, alcohol butílico, carbazol,
9H-pirido[3,4-b]indol,
isoquinolina, pirrol, tiofeno, furano,
9(10H)-acridona, fenoxacina y fenotiazina,
cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido tal
como se trató anteriormente.
La expresión "ácidos dioicos" se refiere a
grupos alquileno C_{1-5} sustituidos con dos
grupos carboxilo, por ejemplo ácido malónico, ácido succínico,
ácido glutárico, ácido adípico, ácido pimélico y ácido subérico.
Las sales de hemiéster de los ácidos dioicos incluyen las sales de
sodio, litio, potasio, magnesio y calcio de los mismos.
La expresión "sal de
\beta-acetil-tiosulfato" se
refiere y pretende incluir las sales de sodio, litio, potasio,
magnesio y calcio de los mismos.
La expresión "ésteres o sales
farmacéuticamente aceptables" se refiere a ésteres o sales de
fórmula I derivados de la combinación de un compuesto de esta
invención y un ácido o una base orgánicos o inorgánicos.
Según la presente invención, los cetales
incluyen diéteres de alcanoles inferiores, por ejemplo dimetil y
dietilcetales, así como cetales cíclicos que incluyen diéteres de
alcanodioles C_{2-3}, por ejemplo etilencetales y
propilencetales.
Los sustituyentes en los compuestos de fórmula I
tienen los siguientes valores:
- \quad
- R es hidrógeno, halógeno, 1-alquinilo opcionalmente sustituido, alcoxilo inferior, alquilo, dialquilamino o alquilo sustituido;
- \quad
- R_{1} es un aralquinilo sustituido, arilalquilo, arilalquenilo, arilo, aralquilalquinilo opcionalmente sustituido, alcanoiloxialquinilo, heteroariloxialquinilo opcionalmente sustituido, oxoalquinilo o un cetal del mismo, cianoalquinilo, heteroarilalquinilo opcionalmente sustituido, hidroxialquinilo, alcoxialquinilo, aminoalquinilo, acilaminoalquinilo, mercaptoalquinilo, hemiéster del ácido hidroxialquinildioico o una sal del mismo, o alquiniloxialquinilo;
- \quad
- R_{2} es hidrógeno, hidroxilo, alcoxilo, alcanoiloxilo, carbalcoxilo, un grupo ceto o un grupo amino;
- \quad
- R_{3} es un grupo acetilo, un cetal de un grupo acetilo; un grupo alcoxiacetilo, un grupo alquiltioacetilo, un grupo alquilsulfinilacetilo, un grupo alquilsulfonilacetilo, un grupo aminoacetilo, un grupo trifluoroacetilo; un grupo hidroxiacetilo; un grupo alcoxialquilacetilo, por ejemplo un grupo metoximetilacetilo o un grupo etoximetil-2'-metilenacetilo; un grupo hidroxialquilo, por ejemplo un grupo hidroximetilo, un grupo 1'-hidroxietilo, un grupo 1'-hidroxipropilo o un grupo 2'-hidroxi-2'-propilo; una sal de hemiéster de ácido hidroxiacetildioico, por ejemplo un grupo succiniloxiacetilo; un grupo alcanoiloxiacetilo, por ejemplo un grupo acetoxiacetilo; o un grupo sulfoxiacetilo; un grupo, por ejemplo un grupo metilacetilo; un grupo haloacetilo; un grupo etinilo; un grupo heteroaralquilacetilo opcionalmente sustituido que también puede estar opcionalmente sustituido en el alquileno con un grupo hidroxilo, alcoxilo, alcanoiloxilo o carbalcoxilo; un grupo heterociclil-acetilo opcionalmente sustituido; una sal de acetil-tiosulfato; un grupo ciano; un grupo alquilmetileno (junto con R_{7}); o un grupo alcoximetileno (junto con R_{7});
- \quad
- R_{4} es hidrógeno o metilo,
- \quad
- R_{5} es hidrógeno;
- \quad
- R_{6} es hidrógeno, alcanoílo, aminocarbonilo o alcoxicarbonilo;
- \quad
- R_{7} es hidrógeno, halógeno, hidroxilo, alcoxilo, alcanoiloxilo, carbalcoxilo, un grupo metileno (junto con R_{3}), o un grupo alcoximetileno (junto con R_{3});
- \quad
- R_{8} es hidrógeno o halógeno;
- \quad
- R_{9} es hidrógeno, halógeno, alquilo, alcoxilo, arilalcoxilo o amino; y
- \quad
- R_{10} es hidrógeno, halógeno, alquilo, haloalquilo, hidroxilo, alcoxilo, alcanoiloxilo, carbalcoxilo, ciano, tiociano o mercapto.
Un grupo preferido de compuesto de fórmula I son
compuestos en los que R es hidrógeno o alcoxilo inferior. Se
prefieren más compuestos en los que R, R_{5}, R_{6}, R_{7},
R_{8}, R_{9} y R_{10} son hidrógeno.
Otro grupo de compuestos preferidos son
compuestos de fórmula I en los que R_{1} es aralquinilo
sustituido, por ejemplo R_{1} es fenilalquinilo
4-sustituido tal como
4-acetilfeniletinilo,
4-metoxifeniletinilo,
4-N,N-dimetilaminofeniletinilo,
4-cianofeniletinilo, éster etílico de
4-carboxifeniletinilo,
4-N,N-dialquilamidofeniletinilo, o
en los que R_{1} es oxoalquinilo, hidroxialquinilo,
acetoxialquinilo, cianoalquinilo o alcoxialquinilo.
Un grupo adicional de compuestos preferidos son
aquéllos en los que R_{3} es acetilo, hidroxialquilo,
hidroxiacetilo, y sus ésteres con ácidos fisiológicamente
aceptables. Más preferiblemente, R_{3} es acetilo,
\beta-succiniloxiacetilo, alcoxiacetilo o sales
de acetil-tiosulfato.
Un grupo adicional de compuestos preferidos son
aquéllos en los que:
- \quad
- R es hidrógeno, flúor, cloro o alcoxilo inferior;
- \quad
- R_{1} es ariletinilo sustituido;
- \quad
- R_{2} es hidrógeno, un grupo ceto o un grupo dimetilamino;
- \quad
- R_{3} es un grupo \beta-acetilo, un dimetilcetal de un grupo \beta-acetilo, un grupo trifluoroacetilo, un grupo \beta-(hidroxi- acetilo), un grupo \beta-metoximetilacetilo, un grupo \beta-(etoxi)metil-2'-metilenacetilo, un grupo \beta-(1'-hidroxietilo), un grupo \beta(1'-hidroxipropilo), un grupo \beta-(2'-hidroxi-2'-propilo), un grupo \beta-succiniloxiacetilo, un grupo de \beta-hidroxiacetilsuccinato de sodio, un grupo \beta-acetoxiacetilo, un grupo \beta-sulfoxiacetilo, un grupo \beta-metilacetilo, un grupo \beta-cloroacetilo o un grupo \beta-etinilo;
- \quad
- R_{4} es hidrógeno o metilo;
- \quad
- R_{5}, R_{6}, R_{7}, R_{8}, R_{9} y R_{10} son hidrógeno;
- \quad
- las líneas de puntos representan todas enlaces sencillos; y
- \quad
- R_{7} es hidrógeno o, cuando R_{3} es \beta-hidroxiacetilo, R_{7} es hidrógeno o hidroxilo.
Compuestos preferidos adicionales son compuestos
de fórmula I que son ésteres de grupos hidroxilo en las posiciones
3, 20 y/o 21. Los ésteres preferidos son los obtenidos a partir de
sus correspondientes ácidos y ácidos dioicos: acético, propiónico,
maleico, fumárico, ascórbico, pimélico, succínico, glutárico,
bismetilensalicílico, metanosulfónico,
etano-di-sulfónico, oxálico,
tartárico, salicílico, cítrico, glucónico, itacónico, glicólico,
p-aminobenzoico, aspártico, glutámico,
gamma-amino-butírico,
\alpha-(2-hidroxietilamino)propiónico,
glicina y otros \alpha-aminoácidos, fosfórico,
sulfúrico, glucurónico y
1-metil-1,4-dihidronicotínico.
Se prefieren los siguientes compuestos:
3\alpha-hidroxi-3\beta-feniletinil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-feniletinil-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(3',4'-dimetoxifenil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-metilfenil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(2'-metoxifenil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona,
éster etílico de
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-carboxifenil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-acetoxiacetilfenil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-acetilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-acetilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-dimetilaminofenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-bifenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-nitrofenil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-metoxifenil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-trifluorometilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-clorofenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-cianofenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'(R/S)-hidroxipentinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-fenil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-bencil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(2'-feniletil)-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-[2-(3',4'-dimetoxifenil)etil]-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-[6'-oxo-1'-heptinil]-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(7'-oxo-1'-octinil)-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-oxo-1'-pentinil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-[5'-(R/S)-hidroxihexinil]-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-hidroxibutinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-hidroxibutinil)-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-acetoxifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha-hidroxi-19-nor-5\beta-pregnan-20-ona,
éster etílico de
3\beta-(4'-carboxifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-19-nor-5\beta-pregnan-20-ona,
éster etílico de
3\beta-(4'-carboxifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\beta-[4'-(N,N-dietilcarboxamido)fenil]etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-[5-oxo-1-hexinil]-5\beta-pregnan-20-ona,
5'-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico de
3\alpha-hidroxi-3\beta-[5'-oxo-1'-hexinil]-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(5-ciano-1-pentinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(2-piridil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(6-hidroxi-1-hexinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
sal sódica de 6'-hemisuccinato de
3\beta-(6'-hidroxi-1'-hexinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(5'-hidroxi-1'-pentinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
sal sódica de 5'-hemisuccinato de
3\beta-(5'-hidroxi-1'-pentinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
sal sódica de 4'-hemisuccinato de
3\beta-(4'-hidroxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-ciano-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(5'-acetoxi-1'-pentinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-acetoxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-acetoxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\beta-(6'-acetoxi-1'-hexinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(2'-propiniloxi)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(3-metoxi-1-propinil)-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-3\beta-(3-metoxi-1-propinil)-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(4'-piridiniloxi)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(1'H-1,2,3-triazol-1'-il)-1-pro-
pil]-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(2'H-1,2,3-triazol-2'-il)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-3\beta-(2'-tienil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-3\beta-(3'-fenil-1'-propinil)-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-3\beta-(3'-fenilpropil)-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(1'H-pirazol-1'-il)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona, 3\beta-(3'-acetilfeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona, 3\beta-(3'-acetoxi-3'-propinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona, S-[3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-hidroxibutinil)-5\beta-pregnan-20-on-21-il]tiosulfato de sodio y 3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\beta-pregnan-20-ona, 3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona, sal sódica de 21-hemisuccinato de 3\beta-(4'-acetilfeniletiletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\beta-pregnan-20-ona y sal sódica de 21-hemisuccinato de 3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona.
3\alpha-hidroxi-3\beta-(3-metoxi-1-propinil)-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-3\beta-(3-metoxi-1-propinil)-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(4'-piridiniloxi)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(1'H-1,2,3-triazol-1'-il)-1-pro-
pil]-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(2'H-1,2,3-triazol-2'-il)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-3\beta-(2'-tienil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-3\beta-(3'-fenil-1'-propinil)-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-3\beta-(3'-fenilpropil)-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(1'H-pirazol-1'-il)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona, 3\beta-(3'-acetilfeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona, 3\beta-(3'-acetoxi-3'-propinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona, S-[3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-hidroxibutinil)-5\beta-pregnan-20-on-21-il]tiosulfato de sodio y 3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\beta-pregnan-20-ona, 3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona, sal sódica de 21-hemisuccinato de 3\beta-(4'-acetilfeniletiletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\beta-pregnan-20-ona y sal sódica de 21-hemisuccinato de 3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona.
Los esteroides neuroactivos más preferidos
incluyen
3\beta-(4'-acetilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona,
éster etílico de
3\beta-(4'-carboxilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-acetilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
éster etílico de
3\beta-(4'-carboxilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-acetilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-19-norpregnan-20-ona,
éster etílico de
3\beta-(4'-carboxilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-19-norpregnan-20-ona,
3\beta-(4'-dimetilaminofenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-bifenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-metoxifenil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-trifluorometilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-24-ona,
3\beta-(4'-clorofenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-[4'(R/S)-hidroxipentinil]-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-hidroxibutinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona;
3\beta-(4'-hidroxibutinil)-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona;
3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(2'H-1,2,3-triazol-2'-il)-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona;
3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona,
sal sódica de 21-hemisuccinato de
3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
y sal sódica de 21-hemisuccinato de
3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona.
Los esteroides neuroactivos especialmente
preferidos incluyen
3\beta-(4'-acetilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-acetilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
éster etílico de
3\beta-(4'-carboxilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona,
éster etílico de
3\beta-(4'-carboxilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-dimetilaminofenil)etil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4-bifenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-hidroxibutinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-hidroxibutinil)-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona;
3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(2'H-1,2,3-triazol-2'-il)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona;
3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona,
sal sódica de 21-hemisuccinato de
3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
sal sódica de 21-hemisuccinato de
3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
y
3\beta-[4'(R/S)-hidroxipentinil]-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona.
Los compuestos según la invención pueden
prepararse mediante cualquier método convencional, por ejemplo
usando técnicas convencionales tales como las descritas en
"Steroid Reactions", Djerassi, publicado en 1963 por
Holden-Day, Inc., San Francisco o en "Organic
Reactions in Steroid Chemistry", Fried y Edwards, publicado en
1972 por Van Nostrand-Reinhold Co., Nueva York.
Se prepararon
20-hidroxi-pregnanos mediante la
reducción de 20-ceto-prepanos con
agentes reductores convencionales.
\newpage
Se prepararon 21-hemisuccinatos
a partir de derivados de
pregnan-20-ona que se bromaron en
primer lugar con bromo molecular para obtener los correspondientes
21-bromopregnanos. Los compuestos de bromo se
hicieron reaccionar entonces son diversos ácidos dioicos, tales
como ácido succínico, en presencia de una amina para producir
21-hidroxiésteres. Los ésteres resultantes a partir
de los ácidos dioicos se convirtieron entonces en sus sales de
sodio por medios convencionales.
Pueden prepararse compuestos
21-oxigenados de este tipo mediante una secuencia de
reacciones en la que se oxida una
pregnan-20-ona con tetraacetato de
plomo para dar un derivado de 21-acetoxilo,
hidrólisis del acetato para dar un 21-alcohol y
acilación con un derivado de ácido carboxílico apropiado, por
ejemplo un anhídrido o cloruro de ácido u otro reactivo que puede
sustituir el hidrógeno del grupo hidroxilo, tal como cloruro de
metanosulfonilo.
Pueden formarse
pregn-17-enos mediante la reacción
de un 17-cetoesteroide con un reactivo de Wittig tal
como el iluro derivado del tratamiento de un bromuro de
n-propiltrifenilfosfonio con una base fuerte tal
como t-butóxido de potasio.
Se disolvió una solución de
3\alpha-hidroxi-3\beta-feniletinil-5\beta-pregnan-20-ona
(44 mg) en EtOAc (12 ml), se añadió Pd/C (5%, 12 mg) y se hidrogenó
la mezcla a 400 Kpa de presión durante la noche a t.a. La
filtración del catalizador seguida de la evaporación del disolvente
produjo el producto bruto, que se purificó mediante cromatografía
sobre gel de sílice para aislar el compuesto de título puro (33 mg);
p.f. 153-154ºC; CCF R_{f} (hexano:acetona 7:3) =
0,4.
Se trató una solución de
2,2-dibromo-1-(3',4'-dimetoxifenil)eteno
(preparada mediante la reacción de Wittig de
3,4-dimetoxibenzaldehído con tetrabromuro de carbono
en presencia de trifenilfosfina) (966 mg, 3 mmol) en THF seco (15
ml) bajo N_{2} con n-BuLi (2,5 M en THF, 6 mmol,
2,4 ml) a -78ºC. Se agitó la mezcla a esta temperatura durante 2
horas y se añadió gota a gota una solución de
20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico de
5\beta-pregnan-3,20-diona
(720 mg, 2 mmol) en THF seco (10 ml) durante un periodo de 30 min.
Tras agitar la mezcla resultante a -78ºC durante 2 horas, se retiró
el baño de enfriamiento y se continuó la agitación a t.a. durante
otra hora. Entonces se extinguió con solución de HCl 2 N (1 ml) a
-10ºC. Se eliminó el disolvente y entonces se disolvió el residuo
en acetona (25 ml). Tras añadir HCl 2 N (10 ml) se agitó la solución
a t.a. durante 2 horas. Se añadió solución saturada de NaHCO_{3}
para neutralizar el ácido. Se eliminaron los disolventes y se
extrajo el residuo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua,
solución diluida de NaHCO_{3}, agua y salmuera. Tras secar sobre
MgSO_{4} anhidro, se filtró la solución y se evaporó para producir
el producto bruto (1,2 g). Entonces se disolvió este producto bruto
en una cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una
columna de gel de sílice. La elución con la mezcla tolueno:acetona
(96:4) dio un compuesto de fenilacetileno, que no se caracterizó.
La elución adicional con el mismo disolvente produjo
3\alpha-(3',4'-dimetoxifeniletinil)-3\beta-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(120 mg) como una primera fracción, y
3\beta-(3',4'-dimetoxifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
como una segunda fracción (430 mg); p.f.
82-88ºC.
Se usó un método análogo para preparar:
3\beta-(4'-metoxifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona;
3\beta-(4'-clorofeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona;
3\beta-(2'-metoxifeniletinil)-30-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona;
3\beta-(4'-bifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona;
3\beta-(4'-dimetilaminofeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona;
y
3\beta-(4'-cianofeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona.
Se saturó previamente una mezcla de Pd/C (5%, 28
mg) y EtOAc (12 ml) con hidrógeno agitándola bajo hidrógeno durante
10 min. Entonces se añadió una solución de
3\beta-(3',4'-dimetoxifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(185 mg) en EtOAc (5 ml) y se hidrogenó la mezcla a 300 Kpa de
presión durante la noche a t.a. La filtración del catalizador
seguida de la evaporación del disolvente produjo el producto bruto,
que se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (hexano:
acetona 4:1) para aislar el compuesto del título puro (135 mg); CCF
R_{f} (hexano:acetona 4:1) = 0,14.
Una solución de
2,2-dibromo-1-(4-nitrofenil)eteno
(preparada mediante la reacción de Wittig de
4-nitrobenzaldehído con tetrabromuro de carbono en
presencia de trifenilfosfina) (296 mg, 1 mmol) en THF seco (20 ml)
se trató bajo N_{2} con n-BuLi (2,5 M en THF, 2
mmol, 0,8 ml) a -95ºC. Se agitó la mezcla a de -80 a -100ºC durante
0,5 horas y entonces se añadió gota a gota una solución de
20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico de
5\beta-pregnan-3,20-diona
(120 mg, 0,5 mmol) en THF seco (10 ml) durante un periodo de 10
min. Tras agitar la mezcla resultante a -80ºC durante 1 hora, y
luego a 0ºC durante 1 hora más, se extinguió con solución de
NH_{4}Cl (3 ml). Se eliminó el disolvente y entonces se disolvió
el residuo en acetona (25 ml). Tras añadir HCl 2 N (10 ml) se agitó
la solución a t.a. durante 1 hora. Se añadió solución saturada de
NHCO_{3} para neutralizar el ácido. Se eliminaron los disolventes
y se extrajo el residuo con CH_{2}Cl_{2}. Se lavó la fase
orgánica con agua y salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro,
se filtró la solución y se evaporó para producir el producto bruto
(400 mg). Entonces se disolvió este producto bruto en una cantidad
pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de gel de
sílice. La elución con mezcla de tolueno:acetona (96:4) dio el
compuesto del título como un sólido marrón (70 mg); CCF R_{f}
(tolueno:acetona 95:5) = 0,18.
Una solución de
20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico de
5\beta-pregnan-3,20-diona
(720 mg, 2 mmol) en 15 ml de THF seco se trató con bromuro de
fenilmagnesio (3 M en THF, 6 mmol, 2 ml) a 70ºC. Tras agitar la
mezcla a esta temperatura durante 3 horas y luego a t.a. durante 2
horas, se extinguió con HCl 2 N (1 ml). Se eliminó el disolvente y
se disolvió el residuo en acetona (20 ml). Tras añadir HCl 1 N (5
ml) se agitó la solución a t.a. durante 15 horas. Se eliminaron los
disolventes y se extrajo el residuo con CH_{2}Cl_{2}. Se lavó
la fase orgánica con agua, solución diluida de NaHCO_{3}, agua y
salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro, se filtró la
solución y se evaporó para producir el producto bruto (1,3 g).
Entonces se disolvió este producto bruto en una cantidad pequeña de
CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de gel de sílice. La
elución con mezcla de tolueno:acetona (95:5) dio una
3\alpha-fenil-3\beta-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(420 mg) como una primera fracción. La elución adicional con la
misma mezcla de disolventes produjo
3\beta-fenil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(185 mg), p.f. 182-184ºC.
Se diluyó una solución de bromuro de
bencilmagnesio (2 M en THF, 2 mmol. 1 ml) con THF (15 ml) y se trató
gota a gota con una solución de
20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico de
5\beta-pregnan-3,20-diona
(360 mg, 1 mmol) en THF seco (15 ml) a -60ºC. Tras agitar la mezcla
a esta temperatura durante 1 hora y luego a t.a. durante 15 horas,
se extinguió con HCl 2 N (1 ml). Se eliminó el disolvente y se
disolvió el residuo en acetona (20 ml): Tras añadir HCl 1 N (5 ml)
se agitó la solución a t.a. durante 30 min. Se neutralizó con NaOH 2
N. Se recogió mediante filtración el sólido precipitado, se lavó
con agua y se secó para producir
3\beta-hidroxi-3\alpha-bencil-5\beta-pregnan-20-ona
(238 mg). Se extrajo el filtrado con EtOAc. Se lavó la fase
orgánica con agua, solución diluida de NaHCO_{3}, agua y
salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro, se filtró la solución
y se evaporó para dar el producto bruto (160 mg). Entonces se
disolvió este producto bruto en una cantidad pequeña de
CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de gel de sílice. La
elución con mezcla de tolueno:acetona (95:5) dio
3\beta-hidroxi-3\alpha-bencil-5\beta-pregnan-20-ona
(40 mg) como una primera fracción. La elución adicional con la
misma mezcla de disolventes produjo
3\alpha-hidroxi-3\beta-bencil-5\beta-pregnan-20-ona
(30 mg), que se cristalizó en hexano:CH_{2}Cl_{2} (4:1) como
varillas incoloras (15 mg); p.f. 133-141ºC; CCF
R_{f} (tolueno:acetona 9:1) = 0,5.
Una solución de 3
(R/S)-hidroxibutino (0,470 ml, 6 mmol) en THF seco
(15 ml) se trató con n-BuLi (2,5 M en THF, 12 mmol,
4,8 ml) a -70ºC. Tras agitar la mezcla a esta temperatura durante
0,5 horas, se añadió una solución de
20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico de
5\beta-pregnan-3,20-diona
(1,08 g, 3 mmol) en THF seco (30 ml) y se agitó la mezcla a -78ºC
durante 1 hora. Se retiró el baño de enfriamiento y se agitó la
mezcla a t.a. durante otras 1,5 horas. Entonces se extinguió con
solución de NH_{4}Cl (3 ml). Se eliminó el disolvente y se
disolvió el residuo en acetona (10 ml). Tras añadir HCl 2 N (5 ml),
se agitó la solución a t.a. durante 1 hora. Se añadió solución
saturada de NaHCO_{3} para neutralizar el ácido. Se eliminaron los
disolventes y se extrajo el residuo con EtOAc. Se lavó la fase
orgánica con agua, solución diluida de NaHCO_{3}, agua y salmuera.
Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro, se filtró la solución y se
evaporó para producir el producto bruto (1,4 g). Entonces se
disolvió este producto bruto en una cantidad pequeña de
CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de gel de sílice. La
elución con mezcla de tolueno:acetona (85:15) dio
3\beta-[3'(RS)-hidroxibutinil]-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(145 mg) como un sólido incoloro; CCF R_{f} (tolueno:acetona
4:1)= 0,24.
Se usó un método análogo para preparar:
3\beta-[4'(R/S)-hidroxipentinil]-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona.
Una solución de
4-yodoacetofenona (95 mg, 0,39 mmol),
3\beta-etinil-3\alpha-5\alpha-pregnan-20-ona
(106 mg, 0,3 mmol) en pirrolidina desgasificada seca (3 ml) se
agitó bajo argón a t.a. Se añadieron dicloruro de
bis(trifenilfosfina)paladio(II) (5 mg) y CuI (5
mg) y se agitó la mezcla a n durante 15 horas. La CCF mostró una
conversión del 100% del material de partida, por eso, se extinguió
la mezcla con solución de NH_{4}Cl (15 ml) y se extrajo con
EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua, solución diluida de
NaHCO_{3}, agua y salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro,
se filtró la solución y se evaporó para producir el producto bruto
(150 mg). Entonces se disolvió este producto bruto en una cantidad
pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de gel de
sílice. La elución con mezcla de hexano:acetona (4:1) proporcionó
3\beta\beta(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
(35 mg) como un sólido incoloro; CCF R_{f} (hexano:acetona 7:3) =
0,4.
Se usó un método análogo para preparar:
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-trifluorometilfeniletinil)-5\beta-pregnan-20-ona;
3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona;
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-metilfeniletinil)-5\beta-pregnan-20-ona;
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-acetoxiacetilfeniletinil)-5\beta-pregnan-20-ona;
3\beta-(3'-hidroxifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona;
3\beta-
(2',4'-difluorofeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona; 3\beta-(pentafluorofeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona; y éster etílico de 3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-carboxifeniletinil)-5\beta-pregnan-20-ona.
(2',4'-difluorofeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona; 3\beta-(pentafluorofeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona; y éster etílico de 3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-carboxifeniletinil)-5\beta-pregnan-20-ona.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 9
Ilustrativo
3\alpha-Hidroxi-21-bromo-5\beta-pregnan-20-ona:
A un matraz que contenía una solución de
3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(5,15 g, 16,5 mmol) en metanol (100 ml) se le añadió una solución
de bromo (1,1 ml) en metanol (30 ml) gota a gota en una velocidad
tal para mantener el color marrón del bromo hasta que fue
persistente. Entonces se añadió agua (200 ml) y se extrajo la
mezcla con CH_{2}Cl_{2} (33x100 ml). Se secaron los extractos
combinados sobre Na_{2}SO_{4}. La eliminación del disolvente
dio como resultado el producto como un sólido blanco espumoso (6,63
g). Se sintetizaron otras
21-bromo-pregnan-20-onas
(3\beta-etinil-3\alpha-hidroxi-21-bromo-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-metil-3\alpha-hidroxi-21-bromo-5\alpha-pregnan-20-ona
y
3\alpha-hidroxi-3\beta-trifluorometil-12-bromo-5\beta-19-nor-pregnan-20-ona)
usando el mismo método.
3\alpha-Hidroxi-21-(1'-imidazolil)-5\beta-pregnan-20-ona:
Se calentó una mezcla de
3\alpha-hidroxi-21-bromo-5\beta-pregnan-20-ona
(0,86 g) e imidazol (0,37 g) en CH_{3}CN (12 ml) bajo Ar a
reflujo durante 1 h y se enfrió hasta 25ºC. Entonces se vertió en
un embudo de decantación que contenía solución de NH_{4}Cl (100
ml, ac. sat.) y se extrajo el producto con EtOAc (3x50 ml). Se
secaron las fases orgánicas combinadas sobre Na_{2}SO_{4} y se
eliminó el disolvente a vacío. Se aisló el producto puro (0,59 g,
42%) mediante cromatografía en columna ultrarrápida.
Se sintetizaron los compuestos
3\alpha-hidroxi-21-(1'-bencimidazolil)-5\beta-pregnan-20-ona,
éster etílico de
3\alpha-hidroxi-21-[1H-(4-metil-5-carbetoxil)-imidazol-1-il)-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-21-(1'-imidazolil)-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\beta-etinil-3\alpha-hidroxi-21-(1'-imidazolil)-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-21-(1H-3,5-dimetilpirazolil)-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-21-(1'-imidazolil)-3\beta-metil-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-21-(1'-pirazolil)-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\beta-etinil-3\alpha-hidroxi-21-(1'-pirazolil)-5\beta-pregnan-20-ona,
21-(1'-bencimidazolil)-3\alpha-hidroxi-3\beta-metil-5\alpha-pregnan-20-
ona, 3\alpha-hidroxi-21-(1'-pirazolil)-3\beta-metil-5\alpha-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-21-(pirazol-1-il)-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-21-[1H-(2-metil)imidazol-1-il]-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-21-[1H-(2'-formil)imidazol-1-il]-5-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-21-(1H-imidazol-1-il)-3\beta-trifluorometil-5\beta-19-nor-pregnan-20-ona y 3\alpha-hidroxi-21-(pirazol-1-il)-3\beta-trifluorometil-5\beta-19-nor-pregnan-20-ona según el ejemplo 9.
ona, 3\alpha-hidroxi-21-(1'-pirazolil)-3\beta-metil-5\alpha-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-21-(pirazol-1-il)-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-21-[1H-(2-metil)imidazol-1-il]-5\beta-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-21-[1H-(2'-formil)imidazol-1-il]-5-pregnan-20-ona, 3\alpha-hidroxi-21-(1H-imidazol-1-il)-3\beta-trifluorometil-5\beta-19-nor-pregnan-20-ona y 3\alpha-hidroxi-21-(pirazol-1-il)-3\beta-trifluorometil-5\beta-19-nor-pregnan-20-ona según el ejemplo 9.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 10
Ilustrativo
A una solución de 1,2,4-triazol
(146 mg) en THF (15 ml) bajo Ar se le añadió NaH (56 mg) y se agitó
la mezcla obtenida a 25ºC durante 20 min. Entonces se añadió una
solución de
3\beta-metil-3\alpha-hidroxi-21-bromo-5\alpha-pregnan-20-ona
(300 mg) en THF y se agitó la mezcla así obtenida durante 5 horas.
Entonces se vertió en un embudo de decantación que contenía agua
(40 ml) y se extrajo el producto con CH_{2}Cl_{2} (3x50 ml). Se
secaron las fases orgánicas combinadas sobre Na_{2}SO_{4} y se
eliminó el disolvente a vacío. Se aisló el producto puro (187 mg,
64%) mediante cromatografía en columna ultrarrápida.
Se sintetizaron
3\alpha-hidroxi-21-(2'H-1,2,3,4-tetrazol-2'-il)-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-21-(2H-1,2,3-triazol-2-il)-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-21-(9'H-purin-9'-il-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-metil-21(2'H-1',2',3'-triazol-2'-il)-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\beta-etinil-3\alpha-hidroxi-21-(1',2',4'-triazoil)-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-metil-21-(1',2',3'-triazol-1'-il)-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-21-(1',2',4'-triazol-1-il)-5\beta-3-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-21-(1'H-1,2,3,4-tetrazol-1'-il)-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-21-[1H-(4-nitro)imidazol-1-il)-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-21-(7'H-purin-7'-il)-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-21-[1H-(4',5'-diciano)imidazol-1-il)]-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-21-(1'-1,2,4-triazol-1-il)-3\beta-trifluorometil-5\beta-19-nor-pregnan-20-ona
y
3\alpha-hidroxi-21-[1H-(4',5'-dicloro)imidazol-1-il)]-5\beta-pregnan-20-ona,
según los procedimientos expuestos en el ejemplo 10.
Una solución de
2,2-dibromo-1-(4-hidroxifenil)eteno
(preparada mediante la reacción de Wittig de
4-hidroxibenzaldehído con tetrabromuro de carbono
en presencia de trifenilfosfina) (1,25 mg, 4,5 mmol) en THF seco (25
ml) se trató bajo N_{2} con n-BuLi (2,5 M en THF,
13,5 mmol, 5,4 ml) a 70ºC. Entonces se agitó la mezcla a -70ºC de
temperatura durante 0,5 horas, y se añadió gota a gota una solución
de 20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico
de
5\beta-pregnan-3,20-diona
(810 mg, 2,25 mmol) en THF seco (25 ml) durante un periodo de 10
min. Tras agitar la mezcla resultante a -78ºC durante 30 min., se
retiró el baño de enfriamiento y se continuó la agitación a t.a.
durante otra hora. Entonces se extinguió con solución saturada de
NH_{4}Cl (4 ml) a -10ºC. Se eliminó el disolvente y entonces se
disolvió el residuo en acetona (25 ml). Tras añadir HCl 2 N (6 ml)
se agitó la solución a t.a. durante 15 min. Se añadió solución
saturada de NaHCO_{3} para neutralizar el ácido. Se eliminó el
disolvente bajo presión reducida y el producto bruto (1,3 g) se usó
como tal para la etapa siguiente.
Se disolvió el producto bruto de la etapa
anterior en CH_{2}Cl_{2} (5 ml) y piridina (3 ml). Se añadió la
solución resultante a una mezcla helada de cloruro de acetilo (3 ml)
y piridina (3 ml). Se agitó la mezcla a 0ºC durante 30 min. y se
vertió en hielo (50 g). Se añadió HCl 2 N (10 ml) y se diluyó la
mezcla con más CH_{2}Cl_{2}. Se separó la fase orgánica, se
lavó con agua, salmuera, y se secó sobre MgSO_{4} anhidro. La
eliminación del disolvente dio un sólido bruto (2 g) que se purificó
mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice. La elución
con mezcla de tolueno:acetona (95: 5) dio
3\alpha-(4'-3\beta-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(150 mg). La elución adicional con la misma mezcla de disolventes
produjo
3\beta-(4'-acetoxifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(530 mg); p.f. 171-176ºC; CCF R_{f}
(hexano:acetona 7:3) = 0,41.
\vskip1.000000\baselineskip
Se agitó una solución de
4-yodoacetofenona (60 mg, 0,24 mmol),
3\beta-etinil-3\alpha-hidroxi-19-nor-5\beta-pregnan-20-ona
(80 mg, 0,24 mmol) en trietilamina desgasificada seca (0,5 ml) se
agitó bajo argón a 23ºC. Se añadieron bicloruro de
bis(trifenilfosfina)-paladio(II) (5
mg) y CuI (5 mg) y se agitó la mezcla a esta temperatura durante 45
min. Se añadió CH_{2}Cl_{2} (4 ml) y se agitó la mezcla a 23ºC
durante 3 horas. La CCF mostró una conversión del 100% del material
de partida, por eso, se eliminó el disolvente y se purificó el
residuo mediante cromatografía sobre gel de sílice. La elución con
hexano:acetona (4:1) dio
3\beta-(4'-acetilfenil-etinil)-3\alpha-hidroxi-19-nor-5\beta-pregnan-20-ona
(30 mg) como un sólido incoloro; p.f. 65-67ºC, CCF
R_{f} (hexano:acetona 4:1) = 0,12.
\vskip1.000000\baselineskip
Una solución de 4-yodobenzoato
de etilo (70 mg, 0,24 mmol) y
3\beta-etinil-3\alpha-hidroxi-19-nor-5\beta-pregnan-20-ona
(80 mg, 0,24 mmol) en trietilamina desgasificada seca (1 ml) se
agitó bajo argón a 23ºC. Se añadieron dicloruro de
bis(trifenilfosfina)-paladio(II) (5
mg) y CuI (5 mg) y se agitó la mezcla a esta temperatura durante 1
hora. Se añadió CH_{2}Cl_{2} (4 ml) y se agitó la mezcla a 23ºC
durante 3 horas. La CCF mostró una conversión del 100% del material
de partida, por eso, se eliminó el disolvente y se purificó el
residuo mediante cromatografía sobre gel de sílice. La elución con
hexano:acetona (4:1) dio éster etílico de
3\beta-(4'-carboxifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-19-nor-5\beta-pregnan-20-ona
(22 mg) como un sólido incoloro; p.f. 164-166ºC,
CCF R_{f} (hexano:acetona 4:1) = 0,27.
\vskip1.000000\baselineskip
Una solución de 4-yodobenzoato
de etilo (83 mg, 0,3 mmol),
3\beta-etinil-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
(103 mg, 0,3 mmol) en trietilamina desgasificada seca (1 ml) se
agitó bajo argón a 23ºC. Se añadieron dicloruro de
bis(trifenilfosfina)-paladio(II) (5
mg) y CuI (5 mg) y se agitó la mezcla a esta temperatura durante 1
hora. Se añadió CH_{2}Cl_{2} (4 ml) y se agitó la mezcla a 23ºC
durante 1,5 horas. La CCF mostró una conversión del 100% del
material de partida, por eso se eliminó el disolvente y se purificó
el residuo mediante cromatografía sobre gel de sílice. La elución
con hexano:acetona (4:1) dio éster etílico de
3\beta-(4'-carboxifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
(10 mg) como un sólido incoloro; p.f. 190-192ºC,
CCF R_{f} (hexano:acetona 4:1) = 0,27.
Una solución de
4-(N,N-dietilcarboxamido)yodobenceno (91 mg,
0,3 mmol),
3\beta-etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(103 mg, 0,3 mmol) en trietilamina desgasificada seca (1 ml) se
agitó bajo argón a 23ºC. Se añadieron dicloruro de
bis(trifenilfosfina)-paladio(II) (5
mg) y CuI (5 mg) y se agitó la mezcla a esta temperatura durante 1
hora. Se añadió CH_{2}Cl_{2} (4 ml) y se agitó la mezcla a 23ºC
durante 0,5 horas. La CCF mostró una conversión del 100% del
material de partida, por eso se eliminó el disolvente y se purificó
el residuo mediante cromatografía sobre gel de sílice. La elución
con hexano:acetona (3:1) dio éster etílico de
3\beta-[4'-(N,N-dietilcarboxamido)fenil]etinil-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
(18 mg) como un sólido incoloro; CCF R_{f} (hexano:acetona 3:1) =
0,22.
Una solución de
(1,2-etanodiil-acetal) cíclico de
1-hexin-5-ona (493
mg, 3,52 mmol) en THF seco (15 ml) se trató con
n-BuLi (2,5 M en THF, 3 mmol, 1,2 ml) a -60ºC. Tras
agitar la mezcla a -78ºC durante 0,5 horas, se añadió una solución
de 20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico
de
5\beta-pregnan-3,20-diona
(360 mg, 1 mmol) en THF (15 ml) y se agitó la mezcla a -78ºC
durante 1 hora. Se retiró el baño de enfriamiento y se extinguió la
mezcla con solución de NH_{4}Cl (3 ml). Se eliminó el disolvente y
entonces se disolvió el residuo en acetona (40 ml). Tras añadir HCl
1 N (4 ml) se agitó la solución a t.a. durante 15 min. Se añadió
solución saturada de NaHCO_{3} para neutralizar el ácido. Se
eliminaron los disolventes y se extrajo el residuo con EtOAc. Se
lavó la fase orgánica con agua, solución diluida de NaHCO_{3},
agua y salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro, se filtró la
solución y se evaporó para producir el producto bruto (700 mg).
Entonces se disolvió este producto bruto en una cantidad pequeña de
CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de gel de sílice. La
elución con mezcla de tolueno:acetona (93:7) dio
(1,2-etanodiil-acetal) cíclico de
3\alpha-hidroxi-3\beta-[5-oxo-1-hexinil]-5\beta-pregnan-20-ona
(210 mg) como un sólido incoloro; p.f. 130-133ºC;
CCF R_{f} (tolueno:acetona 9:1) = 0,33.
Se disolvió en acetona (5 ml)
(1,2-etanodiil-acetal) cíclico de
3\alpha-hidroxi-3\beta-[5-oxo-1-hexinil]-5\beta-pregnan-20-ona
(95 mg). Tras añadir HCl 2 N (1 ml) se agitó la solución a t.a.
durante 3 horas. Se añadió solución saturada de NaHCO_{3} para
neutralizar el ácido. Se eliminaron los disolventes y se extrajo el
residuo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua, agua y
salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro, se filtró la solución
y se evaporó para producir el producto del título bruto (100 mg),
que se cristalizó entonces en hexano-acetona como
varillas incoloras, rendimiento 63 mg; p.f.
104-106ºC; CCF R_{f} (hexano:acetona 7:3) =
0,27.
Se usó un método análogo para preparar
3\alpha-hidroxi-3\beta-[6-oxo-heptinil]-5\beta-pregnan-20-ona,
usando 6-(1,2-etanodiil-acetal)
cíclico de
1-heptin-6-ona.
Una solución de 5-cianopentino
(0,84 ml, 8 mmol) en THF seco (20 ml) se trató con
n-BuLi (2,5 M en THF, 7,8 mmol, 3,2 ml) a -70ºC.
Tras agitar la mezcla a -75ºC durante 0,5 horas, se añadió una
solución de
20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico
de SR-pn.goan 3,20-dioae (720 mg, 2
mmol) en THF (20 ml) y se agitó la mezcla a 78ºC durante 0,5 horas.
Se retiró el baño de enfriamiento y se extinguió la mezcla con
solución de NH_{4}Cl (3 ml). Se eliminó el disolvente y entonces
se disolvió el residuo en acetona (40 ml). Tras añadir HCl 1 N (4
ml) se agitó la solución a t.a. durante 15 min. Se añadió solución
saturada de NaHCO_{3} para neutralizar el ácido. Se eliminaron
los disolventes y se extrajo el residuo con EtOAc. Se lavó la fase
orgánica con agua y salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro,
se filtró la solución y se evaporó para producir el producto bruto
(1,55 g). Entonces se disolvió este producto bruto en una cantidad
pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de gel de
sílice. La elución con mezcla de tolueno:acetona (95:5) dio
3\alpha-(5-ciano-1-pentinil)-3\beta-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(170 mg) como una primera fracción. La elución adicional con la
misma mezcla de disolventes produjo
3\beta-(5-ciano-1-pentinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(480 mg) como un sólido incoloro; p.f. 134-136ºC;
CCF R_{f} (hexano:acetona 7:3) = 0,3.
Se usó un método análogo para preparar
3\beta-(4-ciano-1-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona.
Una solución de 2-etinilpiridina
(270 mg, 2,6 mmol) en THF seco (15 ml) se trató con
n-BuLi (2,5 M en THF, 2,5 mmol, 1 ml) a -60ºC. Tras
agitar la mezcla a -78ºC durante 0,5 horas, se añadió una solución
de 20-(1,2-etanodiil-acetal)
cíclico de
5\beta-pregnan-3,20-diona
(170 mg, 0,47 mmol) en THF (15 ml) y se agitó la mezcla a -78ºC
durante 1 hora. Se retiró el baño de enfriamiento y se extinguió la
mezcla con solución de NH_{4}Cl (3 ml). Se eliminó el disolvente
y entonces se disolvió el residuo en acetona (25 ml). Tras añadir
HCl 2 N (2 ml), se agitó la solución a t.a. durante 15 min. Se
añadió solución saturada de NaHCO_{3} para neutralizar el ácido.
Se eliminaron los disolventes y se extrajo el residuo con EtOAc. Se
lavó la fase orgánica con agua y salmuera. Tras secar sobre
MgSO_{4} anhidro, se filtró la solución y se evaporó para producir
el producto bruto (360 mg). Entonces se disolvió este producto
bruto en una cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una
columna de gel de sílice. La elución con mezcla de tolueno:acetona
(95:5) dio la etinilpiridina sin reaccionar como una primera
fracción. La elución adicional con la misma mezcla de disolventes
produjo
3\beta-(2-piridil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(107 mg) como un sólido incoloro; p.f. 192-195ºC;
CCF R_{f} (tolueno:acetona 87:13) = 0,21.
Una solución de
5-hexin-1-ol (1,35
ml, 12 mmol) en THF seco (15 ml) se trató con n-BuLi
(9,6 ml, 2,5 M en THF, 24 mmol) a -65ºC. Tras agitar la mezcla a
-78ºC durante 0,5 horas, se añadió una solución de
20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico
de
5\beta-pregnan-3,20-diona,
(1,08 g, 3 mmol) en THF (20 ml) y se agitó la mezcla a -78ºC durante
1 hora. Se retiró el baño de enfriamiento y se continuó la
agitación a t.a. durante 45 min. Entonces se extinguió la mezcla
con solución de NH_{4}Cl (5 ml). Se eliminó el disolvente, se
extrajo el residuo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua,
solución diluida de NaHCO_{3}, agua y salmuera. Tras secar sobre
MgSO_{4} anhidro, se filtró la solución y se evaporó para
producir el producto bruto (1,90 g). Entonces se cristalizó este
producto bruto en EtOAc para producir el producto puro como varillas
incoloras (890 mg). Entonces se disolvió esto en acetona (120 ml).
Tras añadir HCl 2 N (3 ml) se agitó la solución a t.a. durante 15
min. Se añadió solución saturada de NaHCO_{3} para neutralizar el
ácido. Se eliminaron los disolventes y se extrajo el residuo con
EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua y salmuera. Tras secar
sobre MgSO_{4} anhidro, se filtró la solución y se evaporó para
producir el producto bruto. Entonces se disolvió este producto bruto
en una cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una
columna de gel de sílice. La elución con mezcla de tolueno:acetona
(95:5) dio el hexinol sin reaccionar como una primera fracción. La
elución adicional con la misma mezcla de disolventes produjo
3\alpha-(6-hidroxi-1-hexinil-3\beta-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(60 mg), y luego
3\beta-(6-hidroxi-1-hexinil)-3\alpha-
hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona (620 mg) como un sólido incoloro; p.f. 132-134ºC; CCF R_{f} (hexano:acetona 7:3) = 0,23.
hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona (620 mg) como un sólido incoloro; p.f. 132-134ºC; CCF R_{f} (hexano:acetona 7:3) = 0,23.
Se trató una solución de
3\beta-(6'-hidroxi-1'-hexinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(600 mg, 1,45 mmol) en piridina (5 ml) con anhídrido succínico (600
mg, 6 mmol) y 4-(N,N-dimetil)aminopiridina
(20 mg). Se calentó la mezcla hasta 70-75ºC durante
1,25 horas. La CCF mostró una conversión del 100%. Se enfrió hasta
t.a. y se vertió en hielo-HCl 2 N. Se extrajeron las
fases orgánicas con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con HCl 0,2N,
agua y salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro, se filtró la
solución y se evaporó para producir el producto bruto. Entonces se
disolvió este producto bruto en una cantidad pequeña de
CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de gel de sílice. La
elución con mezcla de hexano:acetona (7:3) dio
6'-hemisuccinato de
3\beta-(6'-hidroxi-1'-hexinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(700 mg): CCF R_{f} (hexano:acetona: AcOH 70:30:0,5) = 0,21.
Se agitó una mezcla del hemisuccinato anterior
(400 mg), NaHCO_{3} (68 mg), agua (8 ml) y CH_{2}Cl_{2} (1
ml) a t.a. durante 15 min. Se eliminó el disolvente y se liofilizó
el residuo para producir la sal sódica como un sólido incoloro (400
mg).
Se trató una solución de
4-pentin-1-ol (1,1
ml, 12 mmol) en THF seco (15 ml) con n-BuLi (9,9 ml,
2,5 M en THF, 24,5 mmol) a -65ºC. Tras la mezcla a -78ºC durante
0,5 horas, se añadió una solución de
20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico
de
5\beta-pregnan-3,20-diona
(1,08 g, 3 mmol) en THF (20 ml) y se agitó la mezcla a -78ºC durante
1 hora. Se retiró el baño de enfriamiento y se continuó la
agitación a t.a. durante 45 min. Entonces se extinguió la mezcla
con solución de NH_{4}Cl (5 ml). Se eliminó el disolvente,
entonces se disolvió el residuo en acetona (30 ml). Tras añadir HCl
2 N (7 ml) se agitó la solución a t.a. durante 15 min. Se añadió
solución saturada de NaHCO_{3} para neutralizar el ácido. Se
eliminaron los disolventes y se extrajo el residuo con EtOAc. Se
lavó la fase orgánica con agua y salmuera. Tras secar sobre
MgSO_{4} anhidro, se filtró la solución y se evaporó para
producir el producto bruto. Entonces se disolvió este producto bruto
en una cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una
columna de gel de sílice. La elución con mezcla de
tolueno:acetona:EtOAc (70:15:15) dio el pentinol sin reaccionar
como una primera fracción. La elución adicional con la misma mezcla
de disolventes produjo
3\alpha-(5'-hidroxi-1'-pentinil)-3\beta-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(100 mg), y luego
3\beta-(5'-hidroxi-1'-pentinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(650 mg) como un sólido incoloro; p.f. 160-163ºC;
CCF R_{f} (tolueno:acetona:EtOAc 70:15:15) = 0,28.
\global\parskip0.900000\baselineskip
Se usó un método análogo para preparar:
3\beta-(4'-hidroxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona;
3\beta-(4'-hidroxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-19-nor-pregnan-20-ona;
3\beta-(4'-hidroxi-1'-butinil-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona;
3\beta-
[4'(R/S)-hidroxi-1'-pentinil]-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona; 3\beta-[3'(R/S)-hidroxi-1'-butinil]-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona; y 3\beta-(3'-hidroxi-1'-propinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona.
[4'(R/S)-hidroxi-1'-pentinil]-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona; 3\beta-[3'(R/S)-hidroxi-1'-butinil]-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona; y 3\beta-(3'-hidroxi-1'-propinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona.
Se trató una solución de
3\beta-(6'-hidroxi-1'-hexinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(350 mg, 0,87 mmol) en piridina (3 ml) con anhídrido succínico (380
mg, 3,8 mmol) y 4-(N,N-dimetil)aminopiridina
(20 mg). Se calentó la mezcla hasta 65-70ºC durante
1 hora. La CCF mostró una conversión del 100%. Se enfrió hasta t.a.
y se vertió en hielo-HCl 2 N. Se extrajeron las
fases orgánicas con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con HCl 0,2 N,
agua y salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro, se filtró la
solución y se evaporó para producir el producto bruto (900 mg).
Entonces se disolvió este producto bruto en una cantidad pequeña de
CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de gel de sílice. La
elución con mezcla de hexano:acetona (7:3) dio
5'-hemisuccinato de
3\beta-(5'-hidroxi-1'-pentinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(350 mg); CCF R_{f} (hexano:acetona:AcOH 70:30:0,5) = 0,25.
Una mezcla del hemisuccinato anterior (345 mg),
NaHCO_{3} (60 mg), agua (5 ml), THF (2 ml) y CH_{2}Cl_{2} (1
ml) se agitó a t.a. durante 1 hora. Se eliminó el disolvente y se
liofilizó el residuo para producir la sal sódica como un sólido
incoloro (340 mg).
Se usó un método análogo para preparar sales
sódicas de hemisuccinato a partir de:
3\beta-(4'-hidroxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona;
3\beta-(4'-hidroxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-19-nor-pregnan-20-ona;
3\beta-(4'-hidroxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona;
3\beta-(4'(R/S)-hidroxi-1'-pentinil)-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona;
3/3-[3'(R/S)-hidroxi-1'-butinil]-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona;
y
3\beta-(3'-hidroxi-1'-propinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona.
Se trató una solución de piridina (280 mg) en
CH_{2}Cl_{2} (2 ml) con cloruro de acetilo (280 mg) a
0-5ºC. Se añadió una solución de
3\beta-(5'-hidroxi-1'-pentinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(130 mg) en CH_{2}Cl_{6} (3 ml). Se continuó la agitación a 0ºC
durante 20 min. La CCF mostró una conversión del 100%, por eso, la
mezcla se vertió en hielo-HCl 2 N (20 g, 2 ml). Se
extrajeron las fases orgánicas con EtOAc. Se lavó la fase orgánica
con HCl 0,2 N, agua y salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro,
se filtró la solución y se evaporó para producir el producto bruto.
Entonces se disolvió este producto bruto en una cantidad pequeña de
CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de gel de sílice. La
elución con mezcla de tolueno:acetona (9:1) dio
30-(5'-acetoxi-1'-pentinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(100 mg); p.f. 84-87ºC; CCF R_{f} (hexano:acetona
70:30) = 0,38.
Se trató una solución de piridina (280 mg) en
CH_{2}Cl_{2} (2 ml) con cloruro de acetilo (280 mg) a 10ºC. Se
añadió una solución de
3\beta-(4'-hidroxi-1'butinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(110 mg) en CH_{2}Cl_{2} (3 ml). Se continuó la agitación a
10ºC durante 30 min. La CCF mostró una conversión del 100%, por eso
la mezcla se vertió en hielo-HCl 2 N (20 g, 3 ml).
Se extrajeron las fases orgánicas con EtOAc. Se lavó la fase
orgánica con HCl 0,2 N, agua y salmuera. Tras secar sobre
MgSO_{4} anhidro, se filtró la solución y se evaporó para
producir el producto bruto. Entonces se disolvió este producto bruto
en una cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una
columna de gel de sílice. La elución con mezcla de hexano:acetona
(4:1) dio
3\beta-(4'-acetoxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(92 mg); p.f. 170-173ºC; CCF R_{f} (hexano:
acetona 70:30) = 0,3.
Se trató una solución de piridina (2 ml) en
CH_{2}Cl_{2} (10 ml) con cloruro de acetilo (2 ml) a 0ºC. Se
añadió una solución de
3\beta-(6'-hidroxi-1'-hexinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(400 mg, 0,96 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (5 ml). Se continuó la
agitación a 0ºC durante 20 min. La CCF mostró una conversión del
100%, por eso la mezcla se vertió en hielo-HCl 2 N
(50 g, 11 ml). Se extrajeron las fases orgánicas con EtOAc. Se lavó
la fase orgánica con HCl 0,2 N, agua y salmuera. Tras secar sobre
MgSO_{4} anhidro se filtró la solución y se evaporó para producir
el producto bruto (500 mg). Entonces se disolvió este producto
bruto en una cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una
columna de gel de sílice. La elución con mezcla de tolueno:acetona
(95:5) dio
3\beta-(6'-acetoxi-1'-hexinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(130 mg); p.f. 85-87ºC; CCF R_{f}
(tolueno:acetona 93:7) = 0,2.
\global\parskip1.000000\baselineskip
Se trató una solución de propargil éter (0,3 ml,
3 mmol) en THF seco (10 ml), se trató con n-BuLi
(2,4 M en THF, 3 mmol, 1,25 ml) a -70ºC. Tras agitar la mezcla a
-75ºC durante 0,5 horas, se añadió una solución de
20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico de
5\beta-pregnan-3,20-diona,
(360 mg, 1 mmol) en THF (10 ml) y se agitó la mezcla a -78ºC
durante 1 hora. Se retiró el baño de enfriamiento y se extinguió la
mezcla con solución de NH_{4}Cl (5 ml). Se eliminó el disolvente
y entonces se disolvió el residuo en acetona (40 ml). Tras añadir
HCl 1 N (4 ml) se agitó la solución a t.a. durante 15 min. Se añadió
solución saturada de NaHCO_{3} para neutralizar el ácido. Se
eliminaron los disolventes y se extrajo el residuo con EtOAc. Se
lavó la fase orgánica con agua y salmuera. Tras secar sobre
MgSO_{4} anhidro se filtró la solución y se evaporó para producir
el producto bruto. Entonces se disolvió este producto bruto en una
cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de
gel de sílice. La elución con mezcla de tolueno:acetona (95:5) dio
3\beta-hidroxi-3\alpha-[3-(2'-propiniloxi)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona
(31 mg) como una primera fracción. La elución adicional con la
misma mezcla de disolventes produjo
3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(2'-propiniloxi)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona
(255 mg) como un sólido incoloro; p.f. 103-106ºC;
CCF R_{f} (tolueno:acetona 95:5) = 0,39.
Se trató una solución de metil propargil éter
(0,25 ml, 3 mmol) en THF seco (10 ml) con n-BuLi
(2,4 M en THF, 2,9 mmol, 1,20 ml) a -70ºC. Tras agitar la mezcla a
-75ºC durante 0,5 horas, se añadió una solución de
20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico
de
5\beta-pregnan-3,20-diona
(185 mg, 0,5 mmol) en THF (10 ml) y se agitó la mezcla a -78ºC
durante 20 min. Se retiró el baño de enfriamiento y se extinguió la
mezcla con solución de NH_{4}Cl (2 ml). Se eliminó el disolvente
y entonces se disolvió el residuo en acetona (25 ml). Tras añadir HQ
2 N (2 ml) se agitó la solución a t.a. durante 15 min. Se añadió
solución saturada de NaHCO_{3} para neutralizar el ácido. Se
eliminaron los disolventes y se extrajo el residuo con EtOAc. Se
lavó la fase orgánica con agua y salmuera. Tras secar sobre
MgSO_{4} anhidro se filtró la solución y se evaporó para producir
el producto bruto (250 mg). Entonces se disolvió este producto
bruto en una cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una
columna de gel de sílice. La elución con mezcla de tolueno:acetona
(93:7) dio
3\beta-hidroxi-3\alpha-(3-metoxi-1-propinil)-5\beta-pregnan-20-ona
(19 mg) como una primera fracción. La elución adicional con la
misma mezcla de disolventes produjo
3\alpha-hidroxi-3\beta-(3-metoxi-1-propinil)-5\beta-pregnan-20-ona
(115 mg) como un sólido incoloro; p.f. 155-159ºC;
CCF R_{f} (hexano: acetona 7:3) = 0,25.
Se trató una solución de propargil
4-piridil éter (preparada según (Thummel et al, J.
Org. Chem. 1978, 43, 4882) (173 mg, 1,3 mmol) en THF seco (15 ml)
con n-BuLi (2,5 M en THF, 1,3 mmol, 0,52 ml) a
-70ºC. Tras agitar la mezcla a -75ºC durante 0,5 horas, se añadió
una solución de
20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico de
5\beta-pregnan-3,20-diona
(180 mg, 0,5 mmol) en THF (15 ml) y se agitó la mezcla a -78ºC
durante 20 min. Se retiró el baño de enfriamiento y se continuó la
agitación a t.a. durante 1 hora. Se extinguió la mezcla con
solución de NH_{4}Cl (2 ml). Se eliminó el disolvente y entonces
se disolvió el residuo en acetona (25 ml). Tras añadir HCl 2 N (2
ml) se agitó la solución a t.a. durante 20 min. Se añadió solución
saturada de NaHCO_{3} para neutralizar el ácido. Se eliminaron
los disolventes y se extrajo el residuo con EtOAc. Se lavó la fase
orgánica con agua y salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro se
filtró la solución y se evaporó para producir el producto bruto
(250 mg). Entonces se disolvió este producto bruto en una cantidad
pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de gel de
sílice. La elución con mezcla de CH_{2}Cl_{2}:acetona (90:10)
dio
3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(4'-piridiniloxi)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona
(145 mg) como un sólido incoloro; p.f. 84-90ºC; CCF
R_{f} (CH_{2}Cl_{2}:acetona 85: 15) = 0,17.
Se trató una solución de
1-(2-propinil)-1H-1,2,3-triazol
(preparada mediante la reacción de triazol con bromuro de
propargilo) (77 mg, 0,72 mmol) en THF seco (10 ml) con
n-BuLi (2,5 M en THF, 0,72 mmol, 0,28 ml) a -70ºC.
Tras agitar la mezcla a -75ºC durante 0,5 horas, se añadió una
solución de
20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico
de
5\beta-pregnan-3,20-diona
(130 mg, 0,36 mmol) en THF (10 ml) y se agitó la mezcla a -78ºC
durante 1 hora. Se retiró el baño de enfriamiento y se extinguió la
mezcla con solución de NH_{4}Cl (1 ml). Se eliminó el disolvente
y entonces se disolvió el residuo en acetona (25 ml). Tras añadir
HCl 2 N (2 ml) se agitó la solución a t.a. durante 30 min. Se
añadió solución saturada de NaHCO_{3} para neutralizar el ácido.
Se eliminaron los disolventes y se extrajo el residuo con EtOAc. Se
lavó la fase orgánica con agua y salmuera. Tras secar sobre
MgSO_{4} anhidro se filtró la solución y se evaporó para producir
el producto bruto. Entonces se disolvió este producto bruto en una
cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de
gel de sílice. La elución con mezcla de tolueno:acetona (85:15) dio
3\alpha-hidroxi-30\beta-[3(1'H-1,2,3-triazol-1'-il)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona
(56 mg) como un sólido incoloro; p.f. 142-144ºC;
CCF R_{f} (hexano:acetona 7:3) =
0,33.
0,33.
Se trató una solución de
2-(2-propinil)-2H-1,2,3-triazol
(preparada mediante la reacción de triazol con bromuro de
propargilo) (35 mg, 0,33 mmol) en THF seco (10 ml) con
n-BuLi (2,5 M en THF, 0,33 mmol, 0,15 ml) a -70ºC.
Tras agitar la mezcla a -75ºC durante 0,5 horas, se añadió una
solución de
20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico
de
5\beta-pregnan-3,20-diona
(60 mg, 0,16 mmol) en THF (10 ml) y se agitó la mezcla a -78ºC
durante 1 hora. Se retiró el baño de enfriamiento y se extinguió la
mezcla con solución de NH_{4}Cl (1 ml). Se eliminó el disolvente
y entonces se disolvió el residuo en acetona (25 ml). Tras añadir
HCl 2 N (2 ml) se agitó la solución a t.a. durante 30 min. Se
añadió solución saturada de NaHCO_{3} para neutralizar el ácido.
Se eliminaron los disolventes y se extrajo el residuo con EtOAc. Se
lavó la fase orgánica con agua y salmuera. Tras secar sobre
MgSO_{4} anhidro se filtró la solución y se evaporó para producir
el producto bruto. Entonces se disolvió este producto bruto en una
cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de
gel de sílice. La elución con mezcla de tolueno:acetona (85:15) dio
pregnan-3,20-diona (20 mg) como una
primera fracción. La elución adicional con el mismo disolvente
produjo
3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(2'H-1,2,3-triazol-2'-il)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona
(20 mg) como un sólido incoloro; p.f. 139-140ºC;
CCF R_{f} (hexano:acetona 4:1) = 0,17.
Se agitó una solución de
4-yodotiofeno (63 mg, 0,3 mmol),
3\beta-etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(103 mg, 0,3 mmol) en trietilamina desgasificada seca (1 ml) bajo
argón a 23ºC. Se añadieron dicloruro de
bis(trifenilfosfina)paladio(II) (5 mg) y CuI (5
mg) y se agitó la mezcla a esta temperatura durante 45 min. Se
añadió CH_{2}Cl_{2} (5 ml) y se agitó la mezcla a 23ºC durante 1
hora. La CCF mostró una conversión del 100% del material de
partida, por eso, se eliminó el disolvente, y se purificó el residuo
mediante cromatografía sobre gel de sílice. La elución con
hexano:acetona (4:1) dio
3\alpha-hidroxi-3\beta-(2'-tienil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona
(50 mg) como un sólido incoloro; p.f. 205-206ºC,
CCF R_{f} (hexano:acetona 4:1) = 0,35
Se usó un método análogo para preparar
3\alpha-hidroxi-3\beta-(5'-acetil-2'-tienil)tienil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona;
p.f. 226-228ºC, CCF R_{f} (hexano:acetona 4:1) =
0,14.
Se trató una solución de
3-fenil-1-propino
(0,25 ml, 2 mmol) en THF seco (17 ml) con n-BuLi
(2,5 M en THF, 2 mmol, 0,8 ml) a -70ºC. Tras agitar la mezcla a
-75ºC durante 10 min., se añadió una solución de
20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico
de
5\beta-pregnan-3,20-diona
(206 mg, 0,6 mmol) en THF (10 ml) y se agitó la mezcla a -78ºC
durante 20 min. Se retiró el baño de enfriamiento y se extinguió la
mezcla con solución de NH_{4}Cl (5 ml). Se eliminó el disolvente
y entonces se disolvió el residuo en acetona (15 ml). Tras añadir
HCl 2 N (4 ml) se agitó la solución a t.a. durante 20 min. Se
añadió solución saturada de NaHCO_{3} para neutralizar el ácido:
Se eliminaron los disolventes y se extrajo el residuo con EtSOAc.
Se lavó la fase orgánica con agua y salmuera. Tras secar sobre
Mg90, se filtró la solución y se evaporó para producir el producto
bruto (460 mg). Entonces se disolvió este producto bruto en una
cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de
gel de sílice. La elución con mezclas de tolueno:acetona (85:15)
dio el fenilpropino sin reaccionar como una primera fracción. La
elución adicional con el mismo disolvente produjo
3\alpha-hidroxi-3\beta-(3'-fenil-1'-propinil)-5\beta-pregnan-20-ona
(175 mg) como un sólido incoloro; p.f. 124-132ºC;
CCF R_{f} (hexano:acetona 7:3) = 0,46.
Se hidrogenó una solución del derivado de
fenilpropinilo anterior (50 mg) en EtOAc (10 ml) sobre Pd/C (10 mg,
5%) bajo 2 atm. de H_{2} durante 45 min. Entonces se filtró la
mezcla a través de una almohadilla pequeña de Celite, y se
concentró para producir el compuesto del título como un sólido
incoloro (40 mg); p.f. 41-46ºC; R_{f}
(hexano:acetona 7:3) = 0,48.
Se trató una solución de
1-(2-propinil)-1H-pirazol
(preparada mediante la reacción de pirazol con bromuro de
propargilo) (160 mg, 1,5 mmol) en THF seco (15 ml) con
n-BuLi (2,5 M en THF, 1,5 mmol, 0,6 ml) a -70ºC.
Tras agitar la mezcla a -75ºC durante 0,5 horas, se añadió una
solución de
20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico
de
5\beta-pregnan-3,20-diona
(180 mg, 0,5 mmol) en THF (15 ml) y se agitó la mezcla a -78ºC
durante 1 hora. Se retiró el baño de enfriamiento y se extinguió la
mezcla con solución de NH_{4}Cl (1 ml). Se eliminó el disolvente
y entonces se disolvió el residuo en acetona (25 ml). Tras añadir
HCl 2 N (2 ml) se agitó la solución a t.a. durante 30 min. Se
añadió solución saturada de NaHCO_{3} para neutralizar el ácido.
Se eliminaron los disolventes y se extrajo el residuo con EtOAc. Se
lavó la fase orgánica con agua y salmuera. Tras secar sobre
MgSO_{4} anhidro se filtró la solución y se evaporó para producir
el producto bruto. Entonces se disolvió este producto bruto en una
cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de
gel de sílice. La elución con mezcla de tolueno:acetona (9:1) dio
3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(1'H-pirazol-1'-il)-1-propinil]-
5\beta-pregnan-20-ona (80 mg) como un sólido incoloro; p.f. 113-115ºC; CCF R_{f} (tolueno:acetona 9:1) = 0,19.
5\beta-pregnan-20-ona (80 mg) como un sólido incoloro; p.f. 113-115ºC; CCF R_{f} (tolueno:acetona 9:1) = 0,19.
Se agitó una solución de
3-yodoacetofenona (74 mg, 0,3 mmol),
3\beta-etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(103 mg, 0,3 mmol) en trietilamina desgasificada seca (1 ml) bajo
argón a 23ºC. Se añadieron dicloruro de
bis(trifenilfosfina)paladio(II) (5 mg) y CuI (5
mg) y se agitó la mezcla a esta temperatura durante 45 min. Se
añadió CH_{2}Cl_{2} (5 ml) y se agitó la mezcla a 23ºC durante
1,5 horas. La CCF mostró una conversión del 100% del material de
partida, por eso, se eliminó el disolvente y se purificó el residuo
mediante cromatografía sobre gel de sílice. La elución con
hexano:acetona (85:15) dio
3\beta-(3'-acetilfeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(30 mg) como un sólido incoloro; p.f. ºC, CCF R_{f}
(hexano:acetona 4:1) = 0.
Se trató una solución de piridina (280 mg) en
CH_{2}Cl_{2} (2 ml) con cloruro de acetilo (280 mg) a
0-5ºC. una Se añadió solución de
3\beta-(3'-hidroxi-1'-propinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(130 mg) en CH_{2}Cl_{2} (3 ml). Se continuó la agitación a 0ºC
durante 30 min. La CCF mostró una conversión del 100%, por eso, se
vertió la mezcla en hielo-HCl 2 N (20 g, 3 ml). Se
extrajeron las fases orgánicas con EtOAc. Se lavó la fase orgánica
con HCl 0,2 N, agua y salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro
se filtró la solución y se evaporó para producir el producto bruto
(150 mg). Entonces se disolvió este producto bruto en una cantidad
pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de gel de
sílice. La elución con mezcla de tolueno:acetona (4:1) dio
3\beta-(3'-acetoxi-1'-propinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(110 mg); p.f. 132-150ºC; CCF R_{f}
(hexano:acetona 70:30) = 0,37
Ejemplo 38
Ilustrativo
Se trató una solución de
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4-hidroxibutin-1-il)-5\beta-pregnan-20-ona
(386 mg, 1 mmol) en MeOH (20 ml) se trató con dos gotas de cloruro
de acetilo, seguido de bromo (1,2 mmol). Se agitó la mezcla a t.a.
durante 2,5 horas y se vertió en hielo-agua. Se
recogió el sólido separado mediante filtración, se lavó con agua,
se secó (410 mg). Entonces se disolvió este sólido
semi-secado en EtOAc y se secó sobre MgSO_{4}
anhidro. La filtración y eliminación del disolvente dio el derivado
de bromo bruto, y se usó como tal para la etapa siguiente.
Se trató una suspensión de NaH (138 mg, 95%,
5,46 mmol) en THF (10 ml) con una solución de imidazol (345 mg, 5,1
mmol) en THF (10 ml) a t.a. Tras agitar la mezcla durante 30 min. se
añadióuna solución del derivado de bromo bruto (95 mg, 0,2 mmol) en
THF (10 ml). Se continuó la agitación a t.a. durante 1 hora. Se
añadió solución saturada de NH_{4}Cl y se eliminó el disolvente.
Se extrajo el residuo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua
y salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro se filtró la
solución y se evaporó para producir el producto bruto (100 mg).
Entonces se disolvió este producto bruto en una cantidad pequeña de
CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de gel de sílice. La
elución con mezcla de CH_{2}Cl_{2}:MeOH:NEt_{3} (95:4,5:0,5)
dio
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4-hidroxibutin-1-il)-21-(1-imidazolil)-5\beta-pregnan-20-ona
(40 mg) como un sólido incoloro; p.f. 117-119ºC;
CCF R_{f} (CH_{2}Cl_{2}:MeOH:NEt_{3} 95:4,5:0,5) 0,21.
Se prepararon de manera similar
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4-hidroxibutin-1-il)-21-(1,2,4-triazol-1-il)-5\beta-pregnan-20-ona;
p.f. 208-210ºC; CCF R_{f}
(CH_{2}Cl_{2}:MeOH:NEt_{3} 95:4,5:0,5) 0,24;
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4-hidroxibutin-1-il)-21-(tetrazol-1-il)-5\beta-pregnan-20-ona;
p.f. 110-112ºC; CCF R_{f}
(CH_{2}Cl_{2}:MeOH:NEt_{3} 96:3,5:0,5) 0,11;
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4-hidroxibutin-1-il)-21-(1,2,3-triazol-1-il)-5\beta-pregnan-20-ona;
p.f. 101-104ºC; CCF R_{f}
(CH_{2}Cl_{2}:MeOH:NEt_{3} 95:4,5:0,5) 0,2.
Ejemplo 39
Ilustrativo
Se calentó hasta 33ºC una solución de
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4-hidroxibutin-1-il)-5\beta-19-norpregnan-20-ona
(710 mg, 1,9 mmol) en MeOH (60 ml) y se trató con dos gotas de
cloruro de acetilo, seguido de bromo (2,28 mmol, 0,116 ml). Se
agitó la mezcla a t.a. durante 1,5 horas y se vertió en
hielo-agua. Se recogió el sólido separado mediante
filtración, se lavó con agua, se secó. Entonces se disolvió este
sólido semi-secado en EtOAc y se secó sobre
MgSO_{4} anhidro. La filtración y eliminación del disolvente dio
el derivado de bromo bruto (870 mg), y se usó como tal para la
etapa siguiente.
Se trató una suspensión de NaH (138 mg, 95%,
5,46 mmol) en THF (10 ml) con una solución de imidazol (345 mg, 5,1
mmol) en THF (10 ml) a t.a. Tras agitar la mezcla durante 30 min. se
añadió una solución del derivado de bromo bruto (90 mg, 0,2 mmol)
en THF (10 ml). Se continuó la agitación a t.a. durante 1 hora. Se
añadió solución saturada de NH_{4}Cl y se eliminó el disolvente.
Se extrajo el residuo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua
y salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro se filtró la
solución y se evaporó para producir el producto bruto (100 mg).
Entonces se disolvió este producto bruto en una cantidad pequeña de
CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de gel de sílice. La
elución con mezcla de CH_{2}Cl_{2}:MeOH:NEt_{3} (95:4,5:0,5)
dio
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4-hidroxibutil-1-il)-21-(1-imidazolil)-5\beta-19-norpregnan-20-ona
(25 mg) como un sólido incoloro; p.f. 118-127ºC;
CCF R_{f} (CH_{2}Cl_{2}:MeOH:NEt_{3} 95:4,5:0,5) 0,28.
Ejemplo 40
Ilustrativo
Se trató una suspensión de NaH (11 mg, 95%, 0,44
mmol) en THF (10 ml) con una solución de
1,2,3-triazol (30 mg, 0,44 mmol) en THF (10 ml) a
t.a. Tras agitar la mezcla durante 30 min. se añadió una solución de
la
21-bromo-3\alpha-hidroxi-3\beta-(4-hidroxibutin-1-il)-5\beta-pregnan-20-ona
bruta (100 mg, 0,22 mmol) en THF (10 ml). Se continuó la agitación
a t.a. durante 1 hora. Se añadió solución saturada de NH_{4}Cl y
se eliminó el disolvente. Se extrajo el residuo con EtOAc. Se lavó
la fase orgánica con agua y salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4}
anhidro se filtró la solución y se evaporó para producir el
producto bruto (100 mg). Entonces se disolvió este producto bruto en
una cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna
de gel de sílice. La elución con mezcla de CH_{2}Cl_{2}:acetona
(4:1) dio
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4-hidroxibutin-1-il)-21-(2H-1,2,3-triazol-2-il)-5\beta-19-norpregnan-20-ona
(15 mg) como una primera fracción; p.f. 158-160ºC;
CCF R_{f} (CH_{2}Cl_{2}:acetona 4:1) 0,36. La elución
adicional con la misma mezcla de disolventes produjo
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4-hidroxibutin-1-il)-21-(1H-1,2,3-triazol-1-il)-5\beta-19-norpregnan-20-ona
(15 mg); p.f. 188-190ºC; CCF R_{f}
(CH_{2}Cl_{2}:acetona 4:1) 0,2.
Ejemplo 41
Ilustrativo
A una solución de 1,2,4-triazol
(108 mg, 1,57 mmol) en THF seco (2,5 ml) se le añadió hidruro de
sodio (36 mg, 1,50 mmol). Se agitó la mezcla a 25ºC bajo argón
durante 0,5 horas. Entonces se añadió
3\alpha-hidroxi-2\beta-morfolinil-21-bromo-5\alpha-pregnan-20-ona
(130 mg, 0,27 mmol) y se agitó la mezcla adicionalmente a 25ºC bajo
argón durante 2,5 horas. Se añadió agua (20 ml) lentamente a la
mezcla de reacción. Se extrajo el producto con acetato de etilo (3 x
25 ml). Se lavaron los extractos combinados con salmuera (20 ml) y
agua (3 x 20 ml). Se secó la solución orgánica obtenida sobre
sulfato de sodio y se eliminó el disolvente a vacío para dar el
producto bruto (130 mg). Se obtuvo el producto puro (90 mg, 71%)
mediante cromatografía ultrarrápida (30 g de gel de sílice y 300 ml
de disolvente mixto de CH_{2}Cl_{2}:MeOH:Et_{3}N =
95:4,5:0,5, R_{f} = 0,14).
Ejemplo 42
Ilustrativo
A una suspensión de uracilo (112 mg, 1 mmol) y
K_{2}CO_{3}(138 mg, 1 mmol) en DMF (1,5 ml) se le añadió
3\alpha-hidroxi-21-bromo-5\alpha-pregnan-20-ona
(400 mg, 1 mmol) y se agitó la mezcla obtenida a 25ºC durante 65 h.
Entonces se vertió en un embudo de decantación que contenía agua (60
ml) y acetato de etilo (100 ml). Se eliminó la fase acuosa tras
agitar y se obtuvo el sólido blanco en la fase orgánica mediante
filtración como el producto (87 mg, 20%). p.f.:
262-265ºC (descomp.).
Ejemplo 43
Ilustrativo
A una solución de
21-bromo-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
(500 mg, 1,26 mmol) disuelta en 50 ml de etanol se le añadió gota a
gota una solución de tiosulfato de sodio (199 mg, 1,26 mmol) en 10
ml de agua. Se dejó agitar la reacción a t.a. hasta que la CCF
(acetona/diclorometano 1:1) indicó un consumo completo del bromuro
de partida. La concentración de la reacción a vacío dio el
tiosulfato deseado contaminado con bromuro de sodio. La
cromatografía en columna ultrarrápida (gel de sílice eluido con un
gradiente desde 1:1 hasta 3:1 de acetona/diclorometano) proporcionó
430 mg (75%) del compuesto del título como un sólido blanco.
Se prepararon de manera similar
S-(3\alpha-hidroxi-3\beta-metil-5\alpha-pregnan-20-on-21-il)-tiosulfato
de sodio, purificado mediante cromatografía ultrarrápida tal como
anteriormente,
S-(3\alpha-hidroxi-3\beta-metoximetil-5\alpha-pregnan-20-on-21-il)-tiosulfato
de sodio, purificado mediante recristalización en metanol/agua
50:1,
S-(3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-on-21-il)-tiosulfato
de sodio, purificado mediante cromatografía ultrarrápida con gel de
sílice y acetona/etanol 3:1,
S-[3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-hidroxibutinil)-5\beta-pregnan-20-on-21-il]-tiosulfato
de sodio, purificado mediante trituración con acetona caliente, y
S-(3\alpha-hidroxi-3\beta-trifluorometil-5\beta-19-norpregnan-20-ona-21-il)-tiosulfato
de sodio, purificado mediante trituración con acetona
caliente/cloroformo.
A una solución de sulfuro de
bencil-fenilo (Aldrich; 1,068 g, 5,33 mmol) en 25 ml
de CH_{2}Cl_{2} a -78ºC se le añadió lentamente una solución de
ácido m-cloroperbenzoico (Aldrich,
50-60%; 760 mg, 2,64 mmol si es al 60%) en 10 ml de
CH_{2}Cl_{2}. Tras calentar hasta temperatura ambiente y agitar
durante la noche, se añadió la solución a 20 ml de una solución
saturada de NaHCO_{3}. Se separó la fase acuosa y se extrajo con
CH_{2}Cl_{2} (2 X 10 ml). Entonces se secaron las fases
orgánicas reunidas (MgSO_{4}) y se concentraron. Se sometió el
residuo a cromatografía en columna ultrarrápida (gel de sílice,
acetona al 10% /hexano y acetona al 15% /hexano) produciendo el
sulfóxido (632 mg, 55%) como un sólido blanco, p.f.
123-126ºC.
Se enfrió hasta -10ºC una solución de
diisopropilamina (Aldrich, recién destilada en CaH_{2}; 0,5 ml,
361 mg, 3,57 mmol) en 2 ml de THF seco y se trató con una solución
1,6 M de n-BuLi en hexanos (Aldrich; 1,0 ml, 1,6
mmol) añadida gota a gota mediante jeringuilla. Tras 10 min., se
enfrió la reacción hasta -75ºC y se añadió gota a gota una solución
de bencil-fenil-sulfóxido (347 mg,
1,60 mmol) en 5 ml de THF seco mediante jeringuilla durante 30 min.
A la solución amarillo fuerte resultante se le añadieron 297 mg
(0,79 mmol) de
20,20-etilendioxi-3(R)-5\alpha-pregnan-3-espiro-2'-oxirano
sólido. Se dejó calentar la reacción hasta t.a. y entonces se
calentó hasta 50ºC. Tras 5 h, se dejó enfriar la reacción hasta
t.a. y se añadió a 30 ml de agua helada. Se extrajo la mezcla
resultante con EtOAc (3 x 20 ml). Se extrajeron de nuevo las fases
de EtOAc combinadas con una solución saturada de NaCl, se secaron
(Na_{2}SO_{4}) y se concentraron. Se purificó el residuo
mediante cromatografía ultrarrápida (gel de sílice, gradiente desde
el 100% de CH_{2}Cl_{2} hasta el 20% de
acetona/CH_{2}Cl_{2}.) produciendo el sulfóxido (405 mg, 86%)
como una mezcla de dos diastereómeros (basándose en dos protones
bencílicos en la ^{1}H RMN).
Una solución de
20,20-etilendioxi-3\alpha-hidroxi-3\beta-[[2-(fenilsulfinil)-2-fenil]etil]-5\alpha-pregnano
(1,30 g, 2,21 mmol) en 15 ml de THF se enfrió en un baño de
hielo/agua y se añadió una solución acuosa de HCl 1 N (3 ml)
seguida de 2 ml de acetona. Tras agitar a t.a. durante 70 min., se
volvió a enfriar la reacción hasta 0ºC y se añadió a una mezcla de
EtOAc/agua que contenía 6 ml de una solución saturada de
NaHCO_{3}. Se extrajo la fase acuosa dos veces con EtOAc y se
extrajeron las fases orgánicas combinadas con una solución saturada
de NaCl, se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se concentraron. Se llevó
el residuo a la siguiente etapa sin purificación.
Una suspensión de
3\alpha-hidroxi-3\beta-[[2-fenilsulfinil)-2-fenil]etil-5\alpha-prepan-20-ona
(963 mg, 1,76 mmol) en 6 ml de p-cimeno que
contenía 0,95 ml de 2,4,6-colidina se calentó a
135ºC durante 1 hora. Tras reposar durante la noche a 0ºC, había
precipitado el producto y se aisló mediante filtración. Se lavó el
producto bruto con p-cimeno frío (3 x 5 ml) y hexano
(un total de 120 ml) y proporcionó 445 mg del compuesto del título
como un sólido blanco, p.f. 209-213ºC.
Ejemplo 45
Ilustrativo
Se enfrió una solución de trimetilsililacetileno
(0,5 ml, 0,347 g, 3,54 mmol) en 4 ml de THF seco hasta -78ºC y se
trató con una solución 2,5 M de n-BuLi en hexanos.
Se añadió BF_{3}-Et_{2}O puro (0,3 ml, 0,346 g,
2,44 mmol) mediante jeringuilla. Tras agitar a -78ºC durante 5 min.,
se añadió una solución de
20,20-etilendioxi-5\alpha-pregnan-2\alpha,3\alpha-epóxido
(557 mg, 1,54 mmol) en 3 ml de THF seco durante 12 min. Tras 2,5 h
adicionales, se añadió la reacción a una solución saturada de
NH_{4}Cl. Se extrajo la mezcla resultante con EtOAc (3 x 25 ml).
Se lavaron las fases orgánicas combinadas con una solución de
salmuera, se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se concentraron bajo
presión reducida. Se disolvió la mezcla de reacción bruta en 10 ml
de acetona, se enfrió en un baño de hielo/agua y se trató con una
solución de HCl 1 N (1 ml). Tras 1 h a t.a. se añadió la reacción a
una mezcla de éter/agua que contenía 1 ml de una solución saturada
de NaHCO_{3}. Se lavó la fase acuosa dos veces con éter y se
lavaron las fases de éter reunidas con una solución saturada de
NaCl, se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se concentraron. La
cromatografía en columna ultrarrápida (gel de sílice, acetona al
12,5% /hexano) proporcionó 249 mg del compuesto del título como un
sólido blanco, p.f. 164-167ºC.
Se usó el procedimiento anterior para la
preparación de
3\alpha-hidroxi-2\beta-(3'-metoxi-1'-propinil)-5\alpha-pregnan-20-ona.
La hidrólisis del compuesto de trimetilsililo
con K_{2}CO_{3}/MeOH dio
3\alpha-hidroxi-2\beta-etinil-5\alpha-pregnan-20-ona
como un sólido blanco, p.f. 179-189ºC
(descomp.).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 46
Ilustrativo
Se trató una solución de
3\beta-etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(3 g, 8,77 mmol) en MeOH (110 ml) con dos gotas de HBr (48%),
seguido de bromo (0,5 ml, 10,8 mmol). Se agitó la mezcla a
temperatura ambiente durante 1 hora y se vertió en
hielo-agua. Se recogió el sólido separado mediante
filtración, se lavó con agua y se secó (3,2 g). Entonces se
disolvió este sólido semi-secado en EtOAc y se secó
sobre MgSO_{4} anhidro. La filtración y eliminación del
disolvente dio el derivado de bromo bruto. Entonces se disolvió este
producto bruto en una cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se
vertió en una columna de gel de sílice. La elución con mezcla de
hexano:EtOAc (4:1) dio
21-bromo-3\beta-etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(3,2 g).
Se trató una solución del derivado de bromo
anterior (3,2 g) en acetona (100 ml) con ácido trifluoroacético
(5,8 ml, 76 mmol) y trietilamina (8,5 ml). Se sometió a reflujo la
mezcla durante 30 min. y entonces se añadió sal sódica de ácido
trifluoracético (10 g) en porciones durante un periodo de 10 horas.
Tras enfriar hasta temperatura ambiente, se añadió una solución de
NaHCO_{3} saturado. Se eliminó el disolvente y se extrajo el
residuo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua y salmuera.
Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro se filtró la solución y se
evaporó para producir el producto bruto. Entonces se disolvió este
producto bruto en una cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se
vertió en una columna de gel de sílice. La elución con mezcla de
hexano:EtOAc (3:2) dio
3\alpha,21-dihidroxi-3\beta-etinil-5\beta-pregnan-20-ona
(1,6 g). p.f. 156-157ºC; CCF R_{f}
(hexano:acetona 3:1) = 0,2.
\vskip1.000000\baselineskip
Se agitó una solución de
4-yodoacetofenona (1,22 g, 4,44 mmol),
3\alpha,21-dihidroxi-3\beta-etinil-5\beta-pregnan-20-ona
(1,59 g, 4,44 mmol) en trietilamina desgasificada seca (7 ml) bajo
argón a 23ºC. Se añadieron cloruro de
bis(trifenilfosfina)paladio (15 mg) y CuI (5 mg) y se
agitó la mezcla a esta temperatura durante 45 min. Se añadió
CH_{2}Cl_{2} (30 ml) y se agitó la mezcla a 23ºC durante 1,5
horas. La CCF mostró una conversión del 100% del material de
partida, por eso, se eliminó el disolvente y se purificó el residuo
mediante cromatografía sobre gel de sílice. La elución con
hexano:acetona (4:1) dio
3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(1,3 g) como un sólido incoloro; p.f. 181-183ºC,
CCF R_{f} (hexano:acetona 3:2) = 0,14.
\vskip1.000000\baselineskip
Se trató una solución de
3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(1,3 g, 6,76 mmol) en piridina (8 ml) con anhídrido succínico (680
mg, 2,5 mmol) y 4-(N,N-dimetil)aminopiridina
(25 mg). Se calentó la mezcla hasta 70-75ºC durante
2,5 horas. La CCF mostró una conversión del 100%. Se eliminó la
piridina y se extrajo el residuo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica
con HCl 0,1 N, agua y salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4}
anhidro, se filtró la solución y se evaporó para producir el
producto bruto. Entonces se disolvió este producto bruto en una
cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de
gel de sílice. La elución con mezcla de hexano:acetona (7:3) dio
21-hemisuccinato de
3\beta-(4'-acetilfenil-etinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
(1,4 g)
Se agitó una mezcla del hemisuccinato anterior
(1,5 g, 2,6 mmol), NaHCO_{3} (220 mg, 2,6 mmol), agua (10 ml), y
CH_{2}Cl_{2} (16 ml) a temperatura ambiente durante 1 hora. Se
eliminó el disolvente y se liofilizó el residuo para producir la
sal sódica como un sólido incoloro (1,4 g).
\newpage
Ejemplo 49
Ilustrativo
Se trató una solución de
etinil-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
(2,3 g, 6,72 mmol) en MeOH (80 ml) con dos gotas de HBr (48%),
seguido de bromo (0,4 ml, 7,73 mmol). Se agitó la mezcla a
temperatura ambiente durante 1 hora y se vertió en
hielo-agua. Se recogió el sólido separado mediante
filtración, se lavó con agua y se secó (2,5 g). Entonces se
disolvió este sólido semi-secado en EtOAc y se secó
sobre MgSO_{4} anhidro. La filtración y eliminación del
disolvente dio el derivado de bromo bruto. Entonces se disolvió este
producto bruto en una cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se
vertió en una columna de gel de sílice. La elución con mezcla de
hexano:EtOAc (85:15) dio
21-bromo-3\beta-etinil-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
(2,1 g).
Se trató una solución del derivado de bromo
anterior (2,1 g, 5 mmol) en acetona (40 ml) con ácido
trifluoroacético (3,8 ml, 50 mmol) y trietilamina (5,5 ml). Se
sometió a reflujo la mezcla durante 30 min. y entonces se añadió
sal sódica de ácido trifluoracético (10 g) en partes durante un
periodo de 10 horas. Tras enfriar hasta temperatura ambiente, se
añadió una solución de NaHCO_{3} saturado. Se eliminó el
disolvente y se extrajo el residuo con EtOAc. Se lavó la fase
orgánica con agua y salmuera. Tras secar sobre MgSO_{4} anhidro se
filtró la solución y se evaporó para producir el producto bruto
(1,6 g). Entonces se disolvió este producto bruto en una cantidad
pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de gel de
sílice. La elución con mezcla de hexano:EtOAc (7:3) dio
3\alpha,21-dihidroxi-3\beta-etinil-5\alpha-pregnan-20-ona
(1,5 g), p.f. 214-218ºC; CCF R_{f}
(hexano:acetona 7:3) = 0,33.
Una solución de
4-yodoacetofenona (962 mg, 4 mmol),
3\alpha,21-dihidroxi-3\beta-etinil-5\alpha-pregnan-20-ona
(1,2 g, 4 mmol) en trietilamina desgasificada seca (7 ml) se agitó
bajo argón a 23ºC. Se añadieron cloruro de
bis(trifenilfosfina)paladio (15 mg) y CuI (5 mg) y se
agitó la mezcla a esta temperatura durante 45 min. Se añadió
CH_{2}Cl_{2} (25 ml) y se agitó la mezcla a 23ºC durante 1,5
horas. La CCF mostró una conversión del 100% del material de
partida, por eso, se eliminó el disolvente y se purificó el residuo
mediante cromatografía sobre gel de sílice. La elución con
hexano:acetona (7:3) dio
3\beta-(4'-)-3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
(750 mg) como un sólido incoloro; p.f. 222-225ºC,
CCF R_{f} (hexano:acetona 4:1) = 0,13.
Se trató una solución de
3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
(276 mg, 1,4 mmol) en piridina (4 ml) con anhídrido succínico (680
mg, 2,7 mmol) y 4-(N,N-dimetil)aminopiridina
(20 mg). Se calentó la mezcla hasta 70-75ºC durante
2,5 horas. La CCF mostró una conversión del 100%. Se eliminó la
piridina a vacío y se extrajo el residuo con EtOAc. Se lavó la fase
orgánica con HCl 0,1 N, agua y salmuera. Tras secar sobre
MgSO_{4} anhidro se filtró la solución y se evaporó para producir
el producto bruto. Entonces se disolvió este producto bruto en una
cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una columna de
gel de sílice. La elución con mezcla de hexano:acetona (7:3) dio
21-hemisuccinato de
3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
(400 mg).
Se agitó una mezcla del hemisuccinato anterior
(400 mg, 0,7 mmol), NaHCO_{3} (60 mg, 0,7 mmol), agua (3 ml), y
CH_{2}Cl_{2} (5 ml) a temperatura ambiente durante 1 hora. Se
eliminó el disolvente y se liofilizó el residuo para producir la
sal sódica como un sólido incoloro (390 mg).
Se agitó una solución de
3-bromopiridina (70 mg, 0,44 mmol),
3\beta-etinil-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
(150 mg, 0,44 mmol) en dietilamina desgasificada seca (1 ml) bajo
argón a 23ºC. Se añadieron cloruro de
bis(trifenilfosfina)paladio (10 mg) y CuI (5 mg) y se
agitó la mezcla a esta temperatura durante 45 min. Se añadió
CH_{2}Cl_{2} (4 ml) y se agitó la mezcla a 23ºC durante 1,5
horas. La CCF mostró una conversión del 100% del material de
partida, por eso, se eliminó el disolvente y se purificó el residuo
mediante cromatografía sobre gel de sílice. La elución con
hexano:acetona (3:1) dio
3\alpha-hidroxi-3\beta-(3-piridil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona
(30 mg) como un sólido incoloro; p.f. 230-35ºC, CCF
R_{f} (hexano:acetona 7:3) = 0,24.
Se calentó una solución de
3\alpha-hidroxi-3\beta-(3-hidroxipropin-1-il)-5\beta-pregnan-20-ona
(483 mg, 1,3 mmol) en MeOH (20 ml) hasta 33ºC y se trató con dos
gotas de HBr (48%), seguido de bromo (1,43 mmol, 0,73 ml). Se agitó
la mezcla a 37ºC durante 1 hora y se vertió en
hielo-agua. Se recogió el sólido separado mediante
filtración, se lavó con agua y se secó. Entonces se disolvió este
sólido semi-secado en EtOAc y se secó sobre
MgSO_{4} anhidro. La filtración y eliminación del disolvente dio
la
21-bromo-3\alpha-hidroxi-3\beta-(3-hidroxipropin-1-il)-5\beta-pregnan-20-ona
bruta (322 mg).
Ejemplo 54
Ilustrativo
Se trató una suspensión de NaH (30 mg, 95%, 1,2
mmol) en THF (10 ml) con una solución de
1,2,3-triazol (69 mg, 1 mmol) en THF (10 ml) a
temperatura ambiente. Tras agitar la mezcla durante 30 min. se
añadió una solución del derivado de bromo bruto del ejemplo 53 (162
mg, 0,37 mmol) en THF (10 ml). Se continuó la agitación a
temperatura ambiente durante 1,5 horas. Se añadió solución saturada
de NH_{4}Cl y se eliminó el disolvente. Se extrajo el residuo con
EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua y salmuera. Tras secar
sobre MgSO anhidro, se filtró la solución y se evaporó para
producir el producto bruto (250 mg). Entonces se disolvió este
producto bruto en una cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se
vertió en una columna de gel de sílice. La elución con mezcla de
CH_{2}Cl_{2}:acetona (6:4) dio
3\alpha-hidroxi-3\beta-(3-hidroxipropin-1-il)-21-(2H-1,2,3-triazol-2-il)-5\beta-pregnan-20-ona
(40 mg) como una primera fracción; p.f. 88-191ºC;
CCF R_{f} (CH_{2}Cl_{2}:acetona 6:4) 0,56. La elución
adicional con la misma mezcla de disolventes produjo
3\alpha-hidroxi-3\beta-(3-hidroxipropin-1-il)-21-(1H-1,2,3-triazol-1-il)-5\beta-pregnan-20-ona
(40 mg); p.f. 135-140ºC; CCF R_{f}
(CH_{2}Cl_{2}:acetona 6:4) 0,34.
Se trató una solución de
3-butin-1-ol (0,4
ml, 5,2 mmol) en THF seco (15 ml) con n-BuLi (4 ml,
2,5 M en THF, 10 mmol) a -65ºC. Tras agitar la mezcla a -78ºC
durante 0,5 horas, se añadió una solución de
20-(1,2-etanodiil-acetal) cíclico
de
5\beta-pregnan-3,11,20-triona
(800 mg, 2,14 mmol) en THF (20 ml) y se agitó la mezcla a -78ºC
durante 1 hora. Se retiró el baño de enfriamiento y se continuó la
agitación a temperatura ambiente durante 45 min. Entonces se
extinguió la mezcla con solución de NH_{4}Cl (5 ml). Se eliminó el
disolvente, entonces se disolvió el residuo en acetona (30 ml).
Tras añadir HCl 2 N (7 ml) se agitó la solución a t.a. durante 15
min. Se añadió solución saturada de NaHCO_{3} para neutralizar el
ácido. Se eliminaron los disolventes y se extrajo el residuo con
EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua y salmuera. Tras secar
sobre MgSO_{4} anhidro se filtró la solución y se evaporó para
producir el producto bruto. Entonces se disolvió este producto
bruto en una cantidad pequeña de CH_{2}Cl_{2} y se vertió en una
columna de gel de sílice. La elución con mezcla de tolueno:acetona
(3:1) dio el butinol sin reaccionar como una primera fracción. La
elución adicional con la misma mezcla de disolventes produjo
3\alpha-(4'-hidroxi-1'-butinil)-3\beta-hidroxi-5\beta-pregnan-11,20-diona
(100 mg), y luego
3\beta-(4'-hidroxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-11,20-diona
(400 mg) como un sólido incoloro; p.f. 158-162ºC;
CCF R_{f} (tolueno:acetona 3:1) = 0,16.
Para un experto en la técnica será obvio que los
compuestos anteriormente descritos pueden estar presentes como
mezclas de diastereómeros que pueden separarse en los diastereómeros
individuales. La resolución de los diastereómeros puede llevarse a
cabo convenientemente mediante cromatografía líquida o de gases o
aislamiento de fuentes naturales. A menos que se especifique lo
contrario en el presente documento, la referencia en la memoria
descriptiva y las reivindicaciones a los compuestos de la invención,
tal como se discutió anteriormente, pretende incluir todos los
isómeros, o bien separados o bien mezclas de los mismos.
Si los isómeros están separados, la actividad
farmacológica deseada predominará con frecuencia en uno de los
diastereómeros. Tal como se da a conocer en el presente documento,
estos compuestos presentan un alto grado de estereoespecificidad.
En particular, aquellos compuestos que tienen la mayor afinidad por
el complejo de receptor de GABA son aquellos con esqueletos
esteroideos de 3\alpha-hidroxipregnano
3\beta-sustituido.
Los compuestos de y usados en la invención, que
siendo las formas de "profármaco" y de acción directa,
naturales y sintéticas, farmacéuticamente aceptables, no tóxicas de
metabolitos de androstano, progesterona y desoxicorticosterona,
tienen hasta la fecha una actividad desconocida en el cerebro en el
complejo de receptor de GABA_{A}. La presente invención toma
ventaja del descubrimiento de esta actividad y este mecanismo
anteriormente desconocido.
Las composiciones farmacéuticas de la invención
se preparan en formas farmacéuticas unitarias convencionales
incorporando un compuesto activo de la invención o una mezcla de
tales compuestos, con un vehículo farmacéutico no tóxico según
procedimientos aceptados en una cantidad no tóxica suficiente para
producir la actividad farmacodinámica deseada en un sujeto, animal
o ser humano. Preferiblemente, la composición contiene el principio
activo en una cantidad activa, pero no tóxica, seleccionada desde
aproximadamente 1 mg hasta aproximadamente 500 mg de principio
activo por unidad de dosificación. Esta cantidad depende de la
actividad biológica específica deseada y el estado del paciente.
Objetos deseables de las composiciones y métodos de esta invención
son en el tratamiento de estrés, ansiedad, SPM, DPN y convulsiones
tales como las producidas por la epilepsia, mejorar o prevenir los
ataques de ansiedad, tensión muscular y depresión común en pacientes
que padecen estas anomalías del sistema nervioso central. Un objeto
deseable adicional de la composición y métodos es tratar el insomnio
producir actividad hipnótica. Otro objeto deseable de los
compuestos y métodos es inducir anestesia, particularmente mediante
administración intravenosa.
El vehículo farmacéutico empleado puede ser, por
ejemplo, o bien sólido, líquido o de liberación en el tiempo
(véase, por ejemplo Remington's Pharmaceutical Sciences, 14ª
Edición, 1970). Los vehículos sólidos representativos son lactosa,
alabastro, sacarosa, talco, gelatina, agar agar, pectina, goma
arábiga, estearato de magnesio, ácido esteárico, celulosa
microcristalina, hidrogeles poliméricos y similares. Los vehículos
líquidos típicos son propilenglicol, glicofurol, soluciones acuosas
y de ciclodextrinas, jarabe, aceite de cacahuete, y aceite de oliva
y emulsiones similares. De manera similar, el vehículo o diluyente
puede incluir cualquier material de retardo en el tiempo bien
conocido en la técnica, tal como monoestearato de glicerol o
diestearato de glicerol solo o con cera, microcápsulas,
microesferas, liposomas y/o hidrogeles.
Puede emplearse una amplia variedad de formas
farmacéuticas. Así, si se usa un vehículo sólido, la preparación
puede micronizarse con fresadora de planear, en aceite, conformarse
en comprimidos, colocarse en una cápsula recubierta entérica o de
gelatina dura en forma granulada o de polvo micronizado, o en forma
de un trocisco o pastilla para chupar. Los compuestos de y usados
en la invención pueden administrarse también en forma de
supositorios para administración rectal. Los compuestos pueden estar
mezclados en un material tal como manteca de cacao y
polietilenglicoles u otro material no irritante adecuado que es
sólido a t.a. pero líquido a la temperatura rectal. Si se usa un
vehículo líquido, la preparación puede estar en forma de un líquido,
tal como una ampolla, o como una suspensión líquida acuosa o no
acuosa. Las formas farmacéuticas líquidas necesitan también
conservantes farmacéuticamente aceptables y similares. Además,
debido a las bajas dosis que se requerirán basándose en los datos
descritos en el presente documento, la administración parenteral,
pulverización nasal, administración sublingual y bucal, y parches
dérmicos de liberación en el tiempo son también formas farmacéuticas
adecuadas para administración tópica.
El método para producir actividad ansiolítica,
anticonvulsiva, de alteración del estado de ánimo (tal como
antidepresiva) o hipnótica, según esta invención, comprende
administrar a un sujeto que necesita tal actividad un compuesto de
la invención, preparado normalmente en una composición tal como se
describió anteriormente con un vehículo farmacéutico, en una
cantidad no tóxica suficiente para producir dicha actividad.
Durante la menstruación, los niveles de
metabolitos excretados varían aproximadamente cuatro veces
(Rosciszewska, et al.). Por tanto, el tratamiento para
controlar los síntomas implica mantener al paciente a un nivel más
alto de metabolitos de progesterona que el normal en el estado
premenstrual de pacientes con SPM. Los niveles plasmáticos de
metabolitos activos y principales se monitorizan durante los
periodos premenstruales y postmenstruales del paciente. La cantidad
administrada de los compuestos de la invención, o bien
individualmente o bien como mezclas de los mismos, se calculan así
para alcanzar un nivel que ejercerá una actividad de receptor de
GABA_{A} igual o superior al nivel de metabolitos de progesterona
en el sujeto normal durante el estado premenstrual.
La vía de administración puede ser cualquier vía
que transporte de manera eficaz el compuesto vivo a los receptores
de GMA_{A} que han de estimularse. La administración puede
llevarse a cabo por vía parenteral, vía enteral, vía rectal, vía
intravaginal, vía intradérmica, vía intramuscular, vía sublingual o
vía nasal; se prefieren las vías oral, intramuscular y dérmica. Por
ejemplo, una dosis en un parche dérmico puede suministrar el
principio activo al paciente durante un periodo de hasta una
semana. Sin embargo, se prefiere la vía parenteral para el estado
epiléptico.
Los datos experimentales in vitro e in
vivo muestran que los metabolitos que se producen de manera
natural de la progesterona/desoxicorticosterona y sus derivados
interaccionan con alta afinidad en un sitio de reconocimiento
específico y novedoso en el complejo de GR para facilitar la
conductancia de los iones cloruro a través de membranas neuronales
sensibles a GABA (Gee et al., 1987 Hanison et al.,
1987).
Los expertos en la técnica saben que la
modulación de la unión a
[^{35}S]t-butilbiciclofosforotionato
([^{35}S]TBPS) es una medida de la potencia y eficacia de
fármacos que actúan en el complejo de GR, fármacos que pueden ser
de posible valor terapéutico en el tratamiento del estrés, la
ansiedad y trastornos convulsivos (Squires, R.F., et al.,
"[^{35}S]t-Butilcyclo-phophorothionate
binds with high affinity to brain-specific sites
coupled to a gamma aminobutyric acid-A and ion
recognition site", Mol, Pharmacol., 23:326, 1983; Lawrence,
L.J., et al., "Benzodiazepine anticonvulsant action:
gamma-aminobutyric acid-dependent
modulation of the chloride ionophore", Biochem. Biophys. Res.
Comm., 123:1130-1137, 1984; Wood, et al.,
"In vivo characterization of benzodiazepine receptor
agonists, antagonists, inverse agonists and agonist/antagonism",
Pharmacol, Exp. Ther., 231:572 576, 1984). Se realizaron varios
experimentos para determinar la naturaleza de la modulación de
[^{35}S]TBPS afectada por los compuestos de la invención.
Se encontró que estos compuestos interaccionan con un sitio
novedoso en el complejo de GR que no se solapa con los sitios de
barbitúricos, benzodiazepinas o cualquier otro sitio conocido
previamente. Además, estos compuestos tienen potencia y eficacia
elevadas en el complejo de GR, con requisitos estructurales
rigurosos para tal actividad. Los compuestos preferidos que son
útiles en la presente invención tienen una CI_{50} de 2 \muM o
inferior en el ensayo de unión a [^{35}S]TBPS descrito a
continuación en el presente documento.
Los procedimientos para realizar este ensayo se
describen en detalle en: (1) Gee, et al., 1987; y (2) Gee,
K. W., L.J. Lawrence, y H.I. Yamamura, "Modulation of the chloride
ionophore by benzodiazepine receptor ligands: influence of
gamma-aminobutyric acid and ligand efficacy",
Molecular Pharmacology 30:218, 1986. Se realizaron estos
procedimientos tal como sigue:
Se extirparon los cerebros de ratas
Sprague-Dawley macho inmediatamente tras su
sacrificio y se disecaron las cortezas cerebrales sobre hielo. Se
preparó un homogeneizado P_{2} tal como se describió previamente
(Gee, et al., 1986). Brevemente, se homogeneizaron suavemente
las cortezas cerebrales en sacarosa 0,32 M seguido por
centrifugación a 1000 x g durante 10 minutos. Se recogió el
sobrenadante y se centrifugó a 9000 x g durante 20 minutos. Se
suspendió el sedimento P_{2} resultante como una suspensión al 10%
(peso húmedo original/volumen) en tampón fosfato de Na/K 50 mM (pH
7,4) NaCl 200 mM para formar el homogeneizado.
Se incubaron alícuotas de cien microlitros (ml)
del homogeneizado P_{2} (0,5 miligramos (mg) de proteína) con
[^{35}S]TBPS 2 nanomolar (nM) (70-110
curios/milimol; New England Nuclear, Boston, MA) en presencia o
ausencia de los esteroides que se producen de manera natural o sus
derivados sintéticos que van a someterse a prueba. Se disolvieron
los compuestos sometidos a prueba en dimetilsulfóxido (Baker Chem.
Co., Phillipsbury, NJ) y se añadieron a la mezcla de incubación en
alícuotas de 5 \mul. Se llevó la mezcla de incubación a un
volumen final de 1 ml con tampón. Se definió la unión no específica
como la unión en presencia de TBPS 2 mM. Se evaluaron el efecto y
la especificidad de GABA (Sigma Chem. Co., St. Louis, MO) realizando
todos los ensayos en presencia de GABA más (+)bicuculina (Sigma
Chem. Co.), mantenidos a 25ºC durante 90 minutos (condiciones de
estado estacionario) se terminaron mediante filtración rápida a
través de filtros de fibra de vidrio (nº 32, Schleicher y Schuell,
Keene, NH). Se cuantificó la radiactividad unida al filtro mediante
espectrofotometría de centelleo líquido. Se analizaron los datos
cinéticos y las curvas de dosis/respuesta de
compuesto/[^{35}S]TBPS mediante regresión no lineal usando
un procedimiento iterativo computerizado para obtener valores de
constantes de velocidad e CI_{50} (concentración de compuesto a la
que se produce la mitad de la inhibición máxima de la unión a
[^{35}S]TBPS basal).
Los datos experimentales obtenidos para este
ensayo también se publicaron en Gee, et al., 1987. Los datos
tratados en esta referencia se muestran como representaciones
gráficas en las figuras 1A y 1B. Estas representaciones gráficas
muestran el efecto de (+)bicuculina sobre la modulación con el
esteroide de pregnano, alfaxalona (1A) y GABA (1B) de la unión de
[^{35}S]TBPS 2 nM a corteza cerebral de rata. En estas
figuras, (\circ) representa control sin bicuculina; (\bullet)
representa bicuculina 0,5 \muM; (\square) representa bicuculina
1,0 \muM; (\blacksquare) representa bicuculina 2,0 \muM; y
(\Delta) representa bicuculina 3,0 \muM. En este experimento,
se determinó el efecto de (+)bicuculina sobre la capacidad de
alfaxalona o GABA para inhibir la unión de [^{35}S]TBPS.
Se sabe que la bicuculina es un antagonista competitivo de GABA y se
observa un desplazamiento paralelo clásico en las curvas
dosis-respuesta en la figura 1B. Por el contrario,
el sitio de unión de esteroides identificado por este trabajo es
diferente del sitio de GABA/bicuculina en la figura 1A. El
desplazamiento en las curvas dosis-respuesta
inducido por la bicuculina cuando se produce la inhibición de
[^{35}S]TBPS por alfaxalona no es paralelo. Esto indica
que los sitios de GABA y esteroides no se
solapan.
solapan.
Se realizó un segundo conjunto de experimentos
para demostrar que los esteroides, barbitúricos y benzodiazepinas
no comparten un sitio de unión común en el receptor de GABA. La
figura 2 muestra el transcurso temporal para la disociación de
[^{35}S]TBPS a partir de homogeneizados P_{2} corticales
de rata iniciada mediante la adición de TBPS 2 \muM
(\blacksquare),
3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
1 \muM (\square), pentobarbital de Na 100 \muM (\bullet) y
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona
1 \muM + pentobarbital de Na 100 \muM (\circ). Se realizó el
ensayo según los procedimientos expuestos anteriormente. Estos datos
cinéticos muestran que la disociación de la unión a
[^{35}S]TBPS iniciada por la concentración saturante de
3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
se potencia mediante pentobarbital de Na 100 \muM. Este efecto es
una indicación de que
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona
(esteroide) y pentobarbital (barbitúrico) se unen a sitios
independientes.
El tercer conjunto de experimentos examinó las
interacciones entre
3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
y pentobarbital de Na en la potenciación de la unión a
(^{3}H)-flunitrazepam (FLU). Estos experimentos
respaldan adicionalmente la reivindicación de que los esteroides no
comparten un sitio de acción común con las benzodiazepinas y los
barbitúricos. En esta serie de experimentos, el efecto de
concentraciones variables de
3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
sobre la unión a (^{3}H)-FLU en presencia o
ausencia de una concentración estimulante de manera máxima de
pentobarbital de Na. Puesto que el pentobarbital de Na tiene una
eficacia máxima superior a la de
3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
en la potenciación de la unión a (^{3}H)-FLU, la
3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
debe antagonizar en última instancia el efecto de pentobarbital de
Na si los dos interaccionan de manera competitiva en el mismo
sitio. Esto no es lo que se observó (figura 3). Por tanto, los datos
respaldan adicionalmente la conclusión de que ciertos esteroides
incluyendo los compuestos de y usados en la invención interaccionan
con un sitio novedoso distinto del sitio regulador de barbitúricos
o BZ en el complejo de GR. Debido a este sitio de acción
independiente, se prevé que estos compuestos esteroideos tendrán
perfiles terapéuticos diferentes a los de los barbitúricos y las
BZ.
Se seleccionaron diversos compuestos para
determinar su potencial como moduladores de la unión a
[^{35}S]TBPS in vitro. Se realizaron estos ensayos
según los procedimientos tratados anteriormente. Basándose en estos
ensayos, se ha establecido los requisitos de
estructura-actividad para su interacción específica
en el complejo de GR y su potencia y eficacia en orden de
importancia. La figura 4 proporciona la inhibición por
[^{35}S]TBPS de curvas de
3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
(3\alpha,5\alpha-P),
3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
(5\alpha-THDOC) y R5020 (promogesterona) como
ejemplos experimentales, mientras que la tabla 1 proporciona la
CI_{50} y la inhibición máxima de numerosos compuestos, incluyendo
ejemplos de los reivindicados en la solicitud. CI_{50} se define
como la concentración de los compuestos para inhibir el 50% de la
unión a [^{35}S]TBPS control. Es una indicación de la
potencia in vitro de un compuesto. La inhibición máxima es
una indicación de la eficacia in vitro de un compuesto.
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Tal como puede observarse a partir de la figura
4 y la tabla 1, la
3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona,
la
dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
y los compuestos de y usados en la invención tienen baja CI_{50},
que es la concentración necesaria para conseguir un 50% de la
inhibición máxima de la unión a [^{35}S]TBPS, mientras que
compuestos tales como esteroides sexuales (R5020, estradiol y
progesterona), glucocorticoides (corticosterona) y colesterol que
tienen una elevada CI_{50} son esencialmente inactivos. Por tanto,
se prevé que los esteroides hormonales y el colesterol per
se no tendrán ningún valor terapéutico para las indicaciones
descritas en el presente documento. Con el fin de distinguir esta
clase única de esteroides de los esteroides hormonales, ahora se
denominan esteroides neuroactivos. Sin embargo, los esteroides
sexuales tales como la progesterona pueden metabolizarse en el
organismo para dar esteroides similares a
3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona.
Por tanto, la progesterona puede considerarse como un profármaco.
Los datos de TBPS se correlacionan con los datos sobre la captación
de iones de ^{36}Cl potenciada por diversos esteroides
3\alpha-hidroxilados descritos en Purdy RH.,
et al., "Synthesis, Metabolism, and Pharmacological
Activity of 3\alpha-Hydroxy Steroids Which
Potentiate GABA-Receptor-Mediated
Chloride Ion Uptake in Rat Cerebral Cortical Synaptoneurosomes".
J. Med. Chem 33:1572-1581 (1990), incorporado como
referencia al presente documento y estos datos también se
correlacionan con los datos electrofisiológicos obtenidos midiendo
la actividad de un esteroide para potenciar la corriente inducida
por GABA en ovocitos a los que se les inyectó receptores de GABA
humanos, tal como se muestra en la figura 5. Esto indica que el
ensayo de TBPS es una medida aproximada de la capacidad de los
esteroides para modular alostéricamente la actividad del canal de
Cl^{-}.
En cuanto a que la actividad terapéutica deseada
debe estar disponible para el paciente con efectos secundarios no
deseados mínimos, un aspecto notable de esta invención implica el
descubrimiento de agonistas con actividad parcial en aquellos
compuestos con un grupo
5\alpha-pregnan-3\alpha,20\alpha-diol,
5\beta-pregnan-3\alpha,20\beta-diol
o los derivados y profármacos de estos compuestos. Además, un
subconjunto de esteroides neuroactivos distinto a estos dos grupos
también muestra eficacia parcial en el ensayo de TBPS (tabla 1).
Para los pacientes que desean una mejoría de la ansiedad o las
convulsiones, no se desea la hipnosis. Para los pacientes que desean
una mejoría del insomnio, no se desea la anestesia. Se esperaba que
los compuestos y las actividades descritos como agonistas con
actividad parcial tuvieran el efecto deseado con efectos no deseados
mínimos.
Para mostrar los agonistas con eficacia
limitada, se ilustra en la figura 6 la capacidad de
5\alpha-pregnan-3\alpha,20\alpha-diol
y
5\beta-pregnan-3\alpha,20\alpha-diol
para modular parcialmente la unión a [^{35}S]TBPS incluso a
concentraciones muy altas).
Además, también se muestra la capacidad parcial
de estos compuestos para potenciar el aumento mediado por GABA de
la corriente de Cl^{-} que se comparó con la de
3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-22-ona
(figura 7) en ovocitos de Xenopus a los que se les inyectó
genes del receptor de GABA_{A} humanos.
Cuando se usó el sistema de expresión en
ovocitos de Xenopus para someter a prueba la propiedad de
eficacia límite de algunos esteroides neuroactivos, se realizó el
siguiente procedimiento. Se les inyectó a ovocitos de Xenopus
laevis (estadio VI) que se habían "desfoliculado" usando el
método de digestión con colagenasa (3 h a 18-23ºC,
colagenasa "A" 2 mg ml^{-1} en solución salina de Barth con
las sales de Ca^{2+} omitidas) transcritos de ARNc del complejo
de subunidades del receptor de GADA_{A} humano \alpha1, \beta1
y \gamma1. El principal complejo de receptor de GABA_{A} se
compone de subunidades \alpha\beta\gamma. Se mantuvieron los
ovocitos que se inyectaron individualmente en placas de 96 pocillos
(200 \mul por pocillo de solución de Barth normal complementada
con penicilina 50 U.I. ml^{-1}, estreptomicina 50 mg ml^{-1} y
gentomicina 100 mg ml^{-1}) durante hasta 9 días a
19-20ºC. Se registraron las corrientes inducidas por
agonista a partir de ovocitos de Xenopus sometidos a
fijación de voltaje a un potencial de mantenimiento de -60 mV,
usando un amplificador de fijación de voltaje Axoclamp 2 A (Axon
Instruments) en el modo de fijación de voltaje de dos electrodos.
Se rellenaron los microelectrodos que detectan voltaje y por los que
pasa corriente con KCl 3 M, y resistencias de 1-3
MOhms cuando se midieron en la solución salina extracelular
habitual. Se superfundieron los ovocitos continuamente con Ringer
para ranas (NaCl 120 mM; KCl 2 mM; CaCl_{2} 1,0 mM; HEPES 5 mM pH
7,4) a la velocidad de 5-7 ml min.^{-1} a t.a.
(17-21ºC).
Se aplicaron todos los fármacos a través del
sistema de perfusión. Se prepararon los esteroides (10^{-2} M)
como soluciones madre concentradas o bien en DMSO o bien en etanol y
luego se diluyeron con la solución de Ringer a la concentración
apropiada. La concentración en DMSO y etanol final fue del 0,2% v/v,
una concentración que no tuvo efecto sobre las respuestas
provocadas por GABA. Se prepararon las soluciones madre de todos los
demás fármacos en solución de Ringer. Las respuestas de corriente
de membrana se filtraron con filtro de paso bajo a 100 Hz y se
grabaron en cinta magnética usando un grabador de cinta FM (Racal
Store 4DS) para el posterior
análisis.
análisis.
Los compuestos de y usados en la presente
invención muestran una eficacia parcial análoga a la de los
descritos anteriormente también mostrados en las tablas
anteriores.
Las correlaciones entre los niveles reducidos de
progesterona y los síntomas con SPM, DPN y epilepsia catamenial
(Backstrom, et al., 1983; Dalton, K., 1984) condujeron al uso
de progesterona en su tratamiento (Mattson, et al., 1984; y
Dalton, 1984). Sin embargo, la progesterona no es eficaz
sistemáticamente en el tratamiento de los síndromes mencionados
anteriormente. Por ejemplo, no existe respuesta a la dosis para la
progesterona en el tratamiento de SPM (Maddocks, et al.,
1987). Estos resultados son predecibles cuando se consideran a la
luz de los resultados de los estudios in vitro que demuestran
que la progesterona tiene una potencia muy baja en el complejo de
GR, tal como se observa en la tabla 1, en comparación con ciertos
metabolitos de la progesterona.
El efecto beneficioso de la progesterona está
relacionado probablemente con la conversión variable de la
progesterona en los metabolitos de la progesterona activos. El uso
de metabolitos de la progesterona específicos en el tratamiento de
los síndromes mencionados anteriormente es claramente superior al
uso de la progesterona basado en la potencia y eficacia elevadas de
los metabolitos y sus derivados (véase Gee, et al., 1987, y
tabla 1).
También se ha demostrado que los esteroides
neuroactivos carecen de efectos secundarios hormonales por la falta
de afinidad por los receptores de la progesterona y otros esteroides
hormonales (tablas 2-5). Los datos presentados se
obtuvieron realizando ensayos según los procedimientos descritos en
et al. 1988 previamente para determinar el efecto de los
metabolitos de la progesterona y sus derivados y la progestina R5020
sobre la unión de [^{3}H]R5020 al receptor de la
progesterona en útero de rata (Gee et al. 1988).
Se incubó ^{3}H-progesterona
(0,15 nM) con el citosol de útero de rata en presencia de los
compuestos de prueba. Se determinó la unión específica tras
incubación y se comparó con la incubación control sin los
compuestos. Los datos se expresan como inhibición en porcentaje de
la unión. Si los compuestos se unen al receptor de la progesterona
con una afinidad elevada, se esperaría una inhibición del 100% de la
unión a la concentración sometida a
prueba.
prueba.
Se estudiaron adicionalmente diversas
actividades hormonales de esteroides neuroactivos representativos a
través de someter a prueba sus posibles actividades estrogénica,
mineralocorticoidea y glucocorticoidea. Se analizaron estas
actividades monitorizando la capacidad de los compuestos para
inhibir la unión de las hormonas esteroideas a sus respectivos
receptores hormonales. Los resultados se muestran en las tablas
3-5. Se expresan como la inhibición en porcentaje
de la unión de ^{3}H-ligando a los diversos
receptores de hormonas esteroideas para los compuestos a 10^{-6}
M. Los valores control están representados por la unión en ausencia
de compuestos de prueba.
En la tabla 3, se sometieron ratas a
suprarrenalectomía 3 días antes de su sacrificio. Para aislar el
receptor de mineralocorticoides, se prepararon fracciones de
citosol cerebral tal como se describe en Gee, et al. 1988.
Se incubaron los fármacos con 3 nM de
^{3}H-aldosterona (el ligando específico para el
receptor de mineralocorticoides) en presencia del agonista de tipo
II selectivo RU28362 (0,5 \muM) que bloquea la unión de
^{3}H-aldosterona a los receptores de tipo II (de
glucocorticoides).
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\newpage
Para la tabla 4, se prepararon fracciones de
citosol cerebral como para la tabla 3, y se incubaron los compuestos
con 3 nM de ^{3}H-dexametasona (el ligando
específico para el receptor de glucocorticoides).
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La tabla 5 muestra la inhibición de la unión de
^{3}H-estradiol (el ligando específico para el
receptor de estrógenos) a citosol de úteros bovinos, preparados
según se describió previamente (Gee, et al. 1988). Se incubó
el ^{3}H-estradiol (0,15 nM) con el citosol en
presencia de los compuestos.
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Los resultados de estos experimentos muestran
claramente que los esteroides neuroactivos no tienen una fuerte
afinidad por ninguno de los receptores de esteroides anteriores. Por
tanto, no tendrán los efectos secundarios hormonales previstos que
podrían resultar de tal unión a receptores de esteroides.
\newpage
También se realizaron experimentos para
determinar la relevancia fisiológica de las interacciones de los
receptores de GABA y esteroides neuroactivos evaluando la capacidad
de los compuestos de y usados en la invención para prevenir las
convulsiones inducidas con metrazol en ratones. Se les inyectó a los
ratones diversas dosis de los compuestos de prueba de la invención,
10 minutos antes de la inyección de metrazol. Se determinó el tiempo
hasta la aparición de mioclonía (presencia de actividad clónica de
las extremidades superiores) inducida por metrazol observando cada
ratón durante un periodo de 30 minutos. En ratones control, el
metrazol (85 mg/kg) inducirá convulsiones en el 95% de los
animales. En la tabla 6 se muestra la capacidad de varios compuestos
de y usados en la invención para proteger a lo ratones frente a las
convulsiones.
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También se demostró la capacidad de los
esteroides neuroactivos para proteger a los animales frente a otros
convulsivos químicos para
3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
y
3\alpha-hidroxi-3\beta-metil-5\alpha-pregnan-20-ona.
Las pruebas anticonvulsivas son similares a las descritas
anteriormente. Los siguientes convulsivos químicos son: metrazol (85
mg/kg); (+)bicuculina (2,7 mg/kg); picrotoxina (3,15 mg/kg);
estricnina (1,25 mg/kg); o vehículo (solución salina al 0,9%).
Inmediatamente tras la inyección de convulsivo o vehículo, se
observaron los ratones durante un periodo de 30 a 45 minutos. Se
registró el número de animales con convulsiones tónicas y/o
clónicas. En la prueba de electrochoque máximo, se suministraron 50
mA de corriente a 60 Hz a través de electrodos corneales durante 200
mseg para inducir convulsiones tónicas. Se definió la capacidad de
los compuestos para suprimir la componente tónica como el criterio
de valoración. Se determinó el potencial de depresión del SNC
general mediante una prueba con varilla rotatoria (rotorod)
10 minutos tras la inyección de los compuestos, en la que se
determinó el número de ratones que permanecieron sobre una varilla
rotativa (6 rpm) durante 1 minuto en uno de los tres ensayos. Se
determinó la DE_{50} (la dosis a la que se produce la mitad del
efecto máximo) para cada selección y se presentan en la tabla 7, a
continuación. Los resultados demuestran que los esteroides
neuroactivos, en comparación con otros anticonvulsivos clínicamente
útiles, son sumamente eficaces con perfiles similares a los de la
BZ clonazepam. Estas observaciones la utilidad terapéutica de estos
compuestos como moduladores de la excitabilidad cerebral, que se
corresponde con su interacción de alta afinidad con el complejo de
GR in vitro.
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Los siguientes experimentos demuestran que los
metabolitos de progesterona,
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona
y
3\alpha-OH-5\beta-pregnan-20-ona
son ansiolíticos eficaces en cuatro modelos animales de ansiedad en
seres humanos que miden los efectos sobre el comportamiento de los
compuestos ansiolíticos. Debe entenderse que estos dos compuestos
describen la invención a modo de ilustración. Los datos sobre sus
derivados sintéticos en estas mediciones también se presentan en
las tablas 8-10. Los cuatro modelos animales
utilizados para medir los efectos sobre el comportamiento de los
compuestos ansiolíticos son: 1) prueba de transición luz/oscuridad;
2) laberinto en cruz elevado; 3) Prueba de conflicto de
Geller-Seifter y 4) prueba de Vogel.
La prueba de transición luz/oscuridad (Crawley y
Goodwin, "Preliminary report of a simple animal behavior model
for the anxiolytic effect of benzodiazepines", Pharmacol.
Biochem. Behav. 13:67-70 (1980)) se basa en la
observación de que los roedores tienden de manera natural a explorar
los nuevos entornos, pero los roedores tienen aversión por los
espacios abiertos con luz brillante que inhiben su comportamiento
exploratorio (Christmas y Maxwell, "A comparison of effects of
some benzodiazepines and other drugs on aggressive and exploratory
behaviour in mice and rats", Neuropharmacol.
9:17-29 (1970); Archivo, "The use of social
interaction as a method of detecting anxiolytic activity of
chlordiazepoxide-like drugs", J. Neurosci. Meth.
2:219-238 (1980)). Se ha demostrado que una
variedad de ansiolíticos clínicamente establecidos incluyendo
diazepam, clonazepam y pentobarbital aumentan el número de
transiciones entre la caja clara y la caja oscura, mientras que los
fármacos no ansiolíticos no demuestran este efecto sobre el
comportamiento (Crawley et al., "Absence of intrinsic
antagonist actions of benzodiazepine antagonists on an exploratory
model of anxiety in the mice", Neuropharmacol.
23:531-537 (1984)).
Ratones macho N.I.H. y
Swiss-Webster (Harlan, Harlan, Indianápolis, EN) que
pesaban 15-20 g se alojaron en un número de cuatro
por jaula, en jaulas de polietileno con lecho de serrín. Se controló
el entorno de la sala en la que se encontraba la colonia (22ºC) con
un ciclo de 12 horas de luz/oscuridad (0600-1800 h).
Se facilitaron alimentos y agua a voluntad, excepto durante la
prueba. Los experimentos se llevaron a cabo desde las
0700-1500 h y los grupos se equilibraron para los
efectos de la hora del día. A los ratones se les administró
únicamente fármaco o vehículo una vez.
El método utilizado fue una modificación de los
métodos descritos anteriormente (Wieland et al.,
"Anxiolytic activity of progesterone metabolite
5\alpha-pregnan-3\alpha-ol-20-one",
Br. Res. 565:263-268 (1991)). El aparato incluía
dos cámaras de prueba automatizadas bicompartimentales (Modelo
RXYZCM16, Omnitech Electronics, Columbus, OH). El compartimento
abierto estaba conectado al compartimento encerrado mediante un
conducto de 7,5 X 7,5 cm. El compartimento abierto se iluminó
fuertemente usando una bombilla de luz incandescente de 200 W. La
sala de experimentación se mantuvo a oscuras. Las interrupciones de
los haces de luz infrarroja en cada cámara se registraron
automáticamente al estar asociadas con un ordenador mediante un
analizador Digiscan (Omnitech) y se analizaron los datos utilizando
el Integrated Lab Animal Monitoring System (Sistema de
monitorización integrado de animales de laboratorio) (Omnitech
Electronics). Se administró vehículo o fármaco de prueba por vía
intraperitoneal (i.p.) a los ratones N.I.H. y
Swiss-Webster, 10 min. después se colocaron en el
centro del compartimento iluminado. Se midió el número de
transiciones entre las cámaras iluminada y oscura, la actividad
total en la cámara iluminada y el tiempo transcurrido en la cámara
iluminada durante un periodo de prueba de 10 min.
La figura 8 muestra los efectos de la
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona
y la
3\alpha-OH-5\beta-pregnan-20-ona
en la prueba de transición luz/oscuridad. Ambos compuestos
produjeron una curva dosis-respuesta significativa
en relación con el número de transiciones entre la caja oscura y la
caja clara. Las comparaciones múltiples a posteriori demostraron
que el número de cruces por dosis tanto de 3\alpha-
OH-5\alpha-pregnan-20-ona
como de
3\alpha-OH-5\beta-pregnan-20-ona
aumentó significativamente a las dosis probadas del control (prueba
de la t de Dunnett).
Además, tanto
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona
como
3\alpha-OH-5\beta-pregnan-20-ona
produjeron aumentos significativos (p < 0,01) en la actividad a
10 y 20 mg/kg, en comparación con los grupos control (Prueba de la
t de Dunnett). No hubo diferencias significativas entre los dos
compuestos a ninguna de las dosis probadas.
La base teórica para la prueba del laberinto en
cruz elevado es similar a la de la prueba de transición
luz/oscuridad. Tal como se describió anteriormente (Pellow et
al. "Validation of open:closed arm entries in an elevated
plus-maze as a measure of anxiety in the rat", J.
Neurosci. Meth. 14:149-167. (1985)). El aparato del
laberinto en cruz elevado está diseñado para utilizar la aversión
natural de los ratones a los espacios abiertos. El aparato consiste
en dos brazos abiertos y dos brazos cerrados. La prueba del
laberinto en cruz elevado permite que se realicen dos medidas de la
ansiedad, el número de entradas en los brazos abiertos y el tiempo
transcurrido en los brazos abiertos, ambos expresados como un
porcentaje del número total de entradas y el tiempo transcurrido
en/sobre tanto los brazos abiertos como los brazos cerrados.
Ratones macho N.I.H. y
Swiss-Webster (Harlan, Harlan, Indianápolis, EN) que
pesaban 15-20 g se alojaron en un número de cuatro
por jaula, en jaulas de polietileno con lecho de serrín. Se controló
el entorno de la sala en la que se encontraba la colonia (22ºC) con
un ciclo de luz/oscuridad de 12 h (0600-1800 h). Se
facilitaron alimentos y agua a voluntad, excepto durante la prueba.
Los experimentos se llevaron a cabo durante
0700-1500 h y los grupos se equilibraron para los
efectos de la hora del día. A los ratones se les administró
únicamente fármaco o vehículo una vez.
El método utilizado se describió anteriormente
(Lister, "The use of Plus-Maze to measure anxiety
in the mouse", Psychopharmocol. 92:180-185
(1987)). El aparato incluía dos brazos abiertos perpendiculares a
dos brazos cerrados elevados 50 cm desde el suelo. Cada brazo tenía
50 cm de largo y las paredes de los brazos cerrados tenían 40 cm de
alto. El laberinto estaba hecho completamente de plexiglass negro.
Había bombillas de luz incandescente de 200 W por encima de cada
uno de los brazos abiertos para producir un fuerte contraste entre
los brazos abiertos y los brazos cerrados.
Diez minutos tras una inyección, los ratones
N.I.H. y Swiss-Webster se colocaron en el centro del
laberinto en cruz de frente a un brazo abierto. Durante el periodo
de prueba de 5 min., se midió el número de entradas en los brazos
abiertos y los brazos cerrados y el tiempo transcurrido en los
brazos abiertos y los brazos cerrados. Las cuatro patas tenían que
estar dentro de un brazo para que se midiera la variable
dependiente. Por tanto, no se cuenta el tiempo transcurrido en el
centro del laberinto, por lo que el tiempo transcurrido total en
los brazos abiertos y los brazos cerrados puede que no sea igual a 5
min. Los efectos de
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona
y
3\alpha-OH-5\beta-pregnan-20-ona
en la prueba del laberinto en cruz elevada se muestran en la figura
9A. Ambos compuestos demuestran un aumento en la proporción de
entradas en los brazos abiertos a través de las dosis.
3\alpha-OH-5\alpha-Pregnan-20-ona
produjo un aumento significativo en las entradas a 20 mg/kg (P
\leq \beta0,05), mientras que
3\alpha-OH-5\beta-pregnan-20-ona
produjo aumentos significativos en las entradas a 5 mg/kg (p \leq
0,5), 7,5 mg/kg (p \leq 0,1), y 10 mg/kg (p \leq 0,01).
Además,
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona
y
3\alpha-OH-5\beta-pregnan-20-ona
produjeron aumentos dependientes de la dosis en el tiempo
transcurrido en los brazos abiertos (figura 9B).
3\alpha-OH-5a-pregnan-20-ona
produjo aumentos significativos en el tiempo transcurrido en los
brazos abiertos a 10 mg/kg (p \leq \beta0,01), mientras que
3\alpha-OH-5\beta-pregnan-20-ona
produjo aumentos significativos en el tiempo transcurrido en los
brazos abiertos a 7,5 mg/kg (p \leq \beta0,01) y 10 mg/kg (p
\leq \beta0,01).
La tabla 8 muestra el resumen de las actividades
ansiolíticas de los compuestos de y usados en la invención
utilizando el laberinto en cruz elevado en las mismas condiciones
que las descritas anteriormente.
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Este modelo animal de ansiedad en seres humanos
utiliza un estado condicionado de conflicto en ratas para
determinar las propiedades ansiolíticas de los fármacos. Las ratas
se condicionan a presionar una barra para obtener un refuerzo
positivo en dos programas de comportamiento (Geller y Seifter.
"The effects of meprobamate, barbiturates,
d-amphetamine and promazine on experimentally
induced conflict in the rat", Psychopharmacologia
1:482-492 (1960)). El primero incluye presionar la
barra en un programa de razón variable sin castigo. El segundo
componente es un programa de razón fija dando como resultado cada
presión de la barra un refuerzo positivo y un castigo. El
componente de castigo produce un estado de conflicto dentro del
animal. El componente sin castigo permite la observación de
cualquier efecto depresivo de respuesta que puede tener un fármaco.
Una respuesta ansiolítica aumentaría la respuesta de castigo sin
afectar a la respuesta sin castigo.
Se utilizaron ratas
Sprague-Dawley albinas macho (Charles River Labs,
Wilmington, MA) que pesaban 250-300 g para
experimentos de conflicto y se mantuvieron con una dieta restringida
de gránulos alimenticios Lab Chow de Purina con agua disponible en
todo momento para mantener el peso corporal en el 85% de sus niveles
de adulto joven con libre alimentación. Las ratas se alojaron
individualmente con un ciclo de luz-oscuridad de 12
horas desde
0700-1900.
0700-1900.
Se midieron en las ratas los efectos
anti-ansiedad (disminución del castigo) y depresivos
de la respuesta de
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona
y
3\alpha-OH-5\beta-pregnan-20-ona
mediante la prueba de conflicto de Geller y Seifter (1960). En esta
prueba de 63 min., en las ratas hambrientas se produjo una respuesta
de presión de la palanca para obtener una recompensa de leche
edulcorada. El programa de refuerzo consiste en componentes de
castigo y sin castigo, alternándolos aproximadamente cada 15 min. Se
entrenó a las ratas en cámaras de prueba (instrumentos Coulbourn)
con una palanca montada en una pared, una pequeña cuchara que
suministraba la recompensa de 0,1 ml de leche (1 parte de leche
condensada Eagle: 2 partes de agua), y un suelo de rejilla metálica
a través del cual se administró el castigo de sacudida eléctrica en
la pata. Se utilizó un miniordenador DEC PDP 11/73 running SKED
(State Systems) para la programación y el registro de los datos.
Las ratas aprendieron inicialmente a responder
en un programa de refuerzo continuo y progresaron rápidamente a
programas de intervalos variables (IV) de 30 s, 1 min. y 2 min. En
el programa de refuerzo continuo, las ratas recibieron una
recompensa de leche tras cada presión de la palanca; en los
programas de IV, las recompensas de leche estuvieron disponibles a
intervalos poco frecuentes y variables, finalmente a un promedio de
una vez cada 2 min. Entonces se introdujeron cuatro periodos de
"conflicto" de 3 min en el nivel inicial de IV sin castigo; el
primero comenzó tras 3 min. de realización de IV y los otros se
alternaron entre periodos de 12 min. de respuesta a IV. Durante los
periodos de conflicto, que se señalizaron mediante la presentación
de una luz y un sonido, el programa de refuerzo continuo estaba de
nuevo en vigor y cada presión de la palanca suministraba tanto una
recompensa de leche como una breve sacudida eléctrica en la pata
(0,25 ms) cuya intensidad era de 0,2 mA inicialmente, y que se
aumentaba diariamente en incrementos de 0,02 mA con el fin de
suprimir gradualmente la presión de la palanca hasta 5 respuestas o
menos por periodo de conflicto. Este entrenamiento duró
4-6 semanas, tras el cual se observaron tasas de
respuesta bajas y estables durante los periodos de conflicto y
tasas altas y estables en los periodos sin castigo. Los aumentos
inducidos por el fármaco en la tasa de respuestas con castigo se
tomaron como un índice de una actividad
anti-ansiedad, mientras que las disminuciones en la
tasa de respuestas sin castigo se tomaron como un índice de
depresión o sedación a la respuesta.
Los efectos de
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona
y
3\alpha-OH-5\beta-pregnan-20-ona
en la prueba de conflicto se resumen en la figura 10. Ambos
compuestos produjeron grandes aumentos en la tasa de respuestas con
castigo, lo que sugiere que ambos serían activos como agentes
anti-ansiedad. El efecto máximo de
3\alpha-OH-5\beta-pregnan-20-ona
se observó a 2 mg/kg y el de
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona
a 4,4 mg/kg tras la administración subcutánea. (Para los análisis
estadísticos y debido al pequeño número de pruebas en cada dosis, se
combinaron todas las pruebas con cada compuesto para realizar una
comparación frente a las pruebas de control con vehículo, usando
una prueba de la t para las mediciones relacionadas: para
3\alpha-OH-5\alpha-pregnan-20-ona,
p < 0,02; para
3\alpha-OH-5\beta-pregnan-20-ona,
p < 0,008).
La tabla 9 muestra el resumen de las actividades
ansiolíticas de los compuestos de y usados en la invención
utilizando la prueba de Geller-Seiftr en las
condiciones experimentales descritas anteriormente.
d) Prueba de
Vogel
La prueba de Vogel se basa en el desarrollo de
un conflicto entre un comportamiento altamente motivado y una
aversión. Para esta prueba, la fuerte motivación es la sed. Se priva
al animal de agua durante 12 - 16 horas para producir la motivación
a beber. Durante el periodo de entrenamiento, los animales se
exponen al entorno de prueba, de manera que llegan a acostumbrarse
a al tubo de descarga de bebida y se minimiza el miedo a un entorno
novedoso. Tras el entrenamiento, se permite que los animales tengan
acceso a agua durante 2 horas. Durante este tiempo, los animales
beberán y comerán su cantidad normal de agua y alimento, compensando
el tiempo de privación. Sin embargo, este programa todavía produce
una fuerte motivación a beber durante el periodo de prueba.
Tras habérsele privado de agua durante de doce a
dieciséis horas, se coloca un animal en una jaula de prueba en la
que se le permite beber libremente durante cinco minutos. Este
periodo se utiliza para habituar al animal al entorno y al tubo de
descarga de bebida. Tras el periodo de entrenamiento, los animales
tienen acceso al agua a y a los alimentos en su jaula durante 2
horas. El alimento está disponible en todo momento. Veinticuatro
horas más tarde se administra el fármaco al animal por vía
intracerebroventricular.
Tras un retraso indicado que se inicia en el
momento de la inyección, el animal se coloca de nuevo en la jaula
de prueba durante diez minutos. Un ordenador cuenta cada vez que el
animal lame, y tras cada veinte lamidas, administra un leve
estímulo eléctrico a través de la lengua y/o las patas. El estímulo
eléctrico consiste en una corriente de 0,6 mA con una duración de
100 ms. Este procedimiento produce un estado de conflicto para el
animal que se reduce mediante la administración de los agentes
ansiolíticos usados clínicamente (es decir, Valium). Para las
curvas dosis-respuesta, se inyectó a grupos
separados de animales dosis crecientes del fármaco de prueba y se
sometieron a prueba a un tiempo predeterminado.
En la tabla 10, se resumen los datos de
compuestos representativos usando estas mediciones.
Se evaluaron las actividades anticonvulsivas y
ansiolíticas de los profármacos de los compuestos básicos
3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
y
3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
y sus derivados utilizando los mismos procedimientos descritos
anteriormente. Se representó la protección en tanto por ciento
lograda por varios profármacos de
3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
frente a las convulsiones inducidas por metrazol, frente al tiempo
tras la administración de los compuestos. (Figura 11 y tabla
11).
La modificación de los compuestos básicos
3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
y
3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
en los hidroxilos 3\alpha y 21 con diversos ésteres mantiene su
actividad biológica y en algunos casos tal modificación aumentó el
tiempo de protección proporcionado por el compuesto. Por tanto, los
compuestos de esta invención pueden modificarse para proporcionar
actividades anticonvulsivas y ansiolíticas durante un periodo de
tiempo, con grados variables de protección.
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\vskip1.000000\baselineskip
A diferencia con las benzodiazepinas, los
esteroides neuroactivos también pueden inducir anestesia. Se cree
que su capacidad para inducir anestesia se debe a su capacidad para
abrir el canal de ion cloruro en ausencia de GABA, lo que es una
propiedad que no tienen las benzodiazepinas. Por tanto, los
neuroesteroides pueden actuar directamente en ausencia de GABA, en
el receptor, y también "indirectamente", en presencia de GABA.
Esta acción "indirecta" se denomina "modular" el receptor.
(Lambert, et al., "Actions of synthetic and endogenous
steroids on the GADAA receptor", Trends Pharmacology Science 8:
224-227 (1987)).
Los compuestos de y usados en la invención
también pueden utilizarse para indicaciones anestésicas a altas
dosis. Sin embargo, la vía de administración preferida para inducir
anestesia es la administración intravenosa (i.v.). En animales, las
propiedades anestésicas de un fármaco se miden mediante la capacidad
del fármaco para proporcionar una pérdida de reflejo de
enderezamiento. El reflejo de pérdida de enderezamiento se define
como la incapacidad de un animal para enderezarse cuando se le
coloca sobre su lomo. Se administró a los ratones el fármaco i.v.
en la vena lateral de la cola. Tras la administración, los ratones
se colocaron sobre sus lomos y se observó la pérdida de reflejo de
enderezamiento. en la tabla 12, se presentan resultados
ilustrativos.
Se prevé que los profármacos con modificaciones
similares a las descritas anteriormente, de compuestos de y usados
en la invención, tendrán actividad como profármacos de
3\alpha-hidroxi-5-pregnanos
reducidos.
Claims (38)
1. Compuesto de fórmula:
en la
que
- \quad
- R es hidrógeno, halógeno, -O-alquilo C_{1-10}, -NR_{12}R_{13}, alquilo, 1-alquinilo opcionalmente sustituido o alquilo sustituido;
- \quad
- R_{1} es un aralquinilo sustituido, arilalquilo, arilalquenilo, arilo, aralquilalquinilo opcionalmente sustituido, alcanoiloxialquinilo, heteroariloxialquinilo opcionalmente sustituido, oxoalquinilo o un cetal del mismo, cianoalquinilo, heteroarilalquinilo opcionalmente sustituido, hidroxialquinilo, alcoxialquinilo, aminoalquinilo, acilaminoalquinilo, mercaptoalquinilo, hemiéster del ácido hidroxialquinildioico o una sal del mismo, o alquiniloxialquinilo;
- \quad
- R_{2} es hidrógeno, hidroxilo, OR_{11}, O-C(O)R_{14}, -C(O)OR_{14}, un grupo ceto o un grupo -NR_{15}R_{16};
- \quad
- R_{3} es un grupo acetilo, un cetal de un grupo acetilo; un grupo alcoxiacetilo, un grupo alquiltioacetilo, un grupo alquilsulfinilacetilo, un grupo alquilsulfonilacetilo, un grupo aminoacetilo, un grupo trifluoroacetilo; un grupo hidroxiacetilo; un grupo alcoxialquilacetilo; un grupo hidroxialquilo; una sal de hemiéster de ácido hidroxiacetildioico; un grupo alcanoiloxiacetilo; un grupo sulfoxiacetilo; un grupo alquilacetilo; un grupo haloacetilo; un grupo etinilo; un grupo heteroaralquilacetilo opcionalmente sustituido que también puede estar opcionalmente sustituido en el alquileno con un grupo hidroxilo, alcoxilo, alcanoiloxilo o carbalcoxilo; un grupo heterociclil-acetilo opcionalmente sustituido; una sal de acetil-tiosulfato; un grupo ciano; un grupo metileno junto con R_{7}; un grupo alquilmetileno junto con R_{7}; o un grupo alcoximetileno junto con R_{7};
- \quad
- R_{4} es hidrógeno o metilo,
- \quad
- R_{5} es hidrógeno;
- \quad
- R_{6} es hidrógeno, alcanoílo, aminocarbonilo o alcoxicarbonilo;
- \quad
- R_{7} es hidrógeno, halógeno, hidroxilo, -OR_{11}, -O-C(O)-R_{14} o -C(O)OR_{14}, un grupo metileno junto con R_{3} o un grupo alcoximetileno junto con R_{3};
- \quad
- R_{8} es hidrógeno o halógeno;
- \quad
- R_{9} es hidrógeno, halógeno, alquilo, -OR_{11}, arilalcoxilo o -NR_{15}R_{16}; y
- \quad
- R_{10} es hidrógeno, halógeno, alquilo, haloalquilo, hidroxilo, -OR_{11}, -O-C(O)-R_{14}, -C(O)OR_{14}, ciano, tiociano o mercapto;
o un 3-éster, 20-éster, 21-éster,
3,20-diéster o 3,21-diéster
fisiológicamente aceptable del
mismo;
en el
que
"alquilo" se refiere a un grupo alifático
saturado cíclico o de cadena lineal o ramificada que puede estar
opcionalmente sustituido;
"alquenilo" se refiere a un grupo cíclico
insaturado o de cadena lineal o ramificada que contiene al menos un
doble enlace carbono-carbono y puede estar
opcionalmente sustituido;
"alquinilo" se refiere a grupos
hidrocarbonados insaturados de cadena lineal o ramificada
opcionalmente sustituidos que contienen al menos un triple enlace
carbono-carbono;
"arilo" se refiere a grupos aromáticos que
tienen al menos un anillo que tiene un sistema electrónico pi
conjugado y puede estar opcionalmente sustituido;
"aralquilo" se refiere a un grupo alquilo
sustituido con un grupo arilo;
"opcionalmente sustituido" se refiere a
grupos sustituidos con de uno a tres, cuatro o cinco sustituyentes,
seleccionados independientemente de alquilo
C_{1-10}, arilo, carboarilo o heteroarilo cíclico
o acíclico, alquenilo, alquinilo, -OR_{11}, halógeno,
haloalquilo, NR_{15}R_{16}, mercapto, alquiltio,
alquilsulfinilo, alquilsulfonilo, nitro, alcanoílo,
-O-C(O)R_{14}, alcanoiloxialcanoílo,
alcoxicarboxilo, -COO-alquilo
C_{1-10}, CONR_{17}R_{18}, formilo,
carboxilo, hidroxilo, ciano, azido, ceto y cetales cíclicos del
mismo, alcanoilamido, heteroariloxilo, heterocarbocicliloxilo y
sales de éster de hemisuccinato de los mismos;
"heteroarilo" se refiere a radicales
insaturados cíclicos de 5-14 miembros que contienen
carbono que contienen uno, dos, tres o cuatro átomos de O, N o S y
que tienen 6, 10 o 14 electrones \pi deslocalizados en uno o más
anillos;
R_{11} es alquilo;
R_{12} y R_{13} son cada uno
independientemente alquilo C_{1-10} o juntos
forman el resto de un grupo morfolino;
R_{14} es alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo
o aralquilo;
R_{15} y R_{16} son cada uno
independientemente H, alquilo C_{1-10} o se unen
entre sí para dar un anillo de 5 o 6 miembros;
R_{17} y R_{18} son cada uno
independientemente alquilo C_{1-10} con la
condición de que el compuesto no sea
20-etilendioxi-3\alpha-hidroxi-3\beta-fenil-pregnano-11,20-diona
o
3\alpha-hidroxi-3\beta-fenil-pregnano-11,20-diona.
2. Compuesto según la reivindicación 1, en el
que:
- \quad
- R es hidrógeno, flúor, cloro o -O-alquilo C_{1-10};
- \quad
- R_{1} es ariletinilo sustituido;
- \quad
- R_{2} es hidrógeno, un grupo ceto o un grupo dimetilamino;
- \quad
- R_{3} es un grupo \beta-acetilo, un dimetilcetal de un grupo \beta-acetilo, un grupo trifluoroacetilo, un grupo \beta-(hidroxi- acetilo), un grupo \beta-metoximetilacetilo, un grupo \beta-(etoxi)metil-2'-metilenacetilo, un grupo \beta-(1'-hidroxietilo), un grupo \beta(1'-hidroxipropilo), un grupo \beta-(2'-hidroxi-2'-propilo), un grupo \beta-succiniloxiacetilo, un grupo de \beta-hidroxiacetilsuccinato de sodio, un grupo \beta-acetoxiacetilo, un grupo \beta-sulfoxiacetilo, un grupo \beta-metilacetilo, un grupo \beta-haloacetilo o un grupo \beta-etinilo;
- \quad
- R_{4} es hidrógeno o metilo;
- \quad
- R_{5}, R_{6}, R_{8}, R_{9} y R_{10} son hidrógeno;
- \quad
- las líneas de puntos representan todas enlaces sencillos; y
- \quad
- R_{7} es hidrógeno o, cuando R_{3} es \beta-hidroxiacetilo, R_{7} es hidrógeno o hidroxilo.
3. Compuesto según la reivindicación 1, en el
que R_{1} es ariletinilo sustituido.
4. Compuesto según la reivindicación 3, que es
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-nitrofenil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-metoxifenil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-[2-(3',4'-dimetoxifenil)etinil]-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-metilfenil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-trifluorometilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-
ona, 3\alpha-hidroxi-3\beta-(2'-metoxifenil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona, 3\beta-(4'-dimetilaminofenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona, 3\beta-(4'-acetilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona, 3\beta-(4'-clorofenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-
ona, 3\beta-(4'-acetilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona, éster etílico de 3\beta-(4'-carboxifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona; 3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-acetoxiacetilfenil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona o 3\beta-(4'-cianofenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona.
ona, 3\alpha-hidroxi-3\beta-(2'-metoxifenil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona, 3\beta-(4'-dimetilaminofenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona, 3\beta-(4'-acetilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona, 3\beta-(4'-clorofenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-
ona, 3\beta-(4'-acetilfenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona, éster etílico de 3\beta-(4'-carboxifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona; 3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-acetoxiacetilfenil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona o 3\beta-(4'-cianofenil)etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona.
5. Compuesto según la reivindicación 3, que es
3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha-hidroxi-19-nor-5\beta-pregnan-20-ona;
éster etílico de
3\beta-(4'-carboxifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-19-nor-5\beta-pregnan-20-ona;
éster etílico de
3\beta-(4'-carboxifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona;
3\beta-[4'-(N,N-dietilcarboxamido)fenil]etinil-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona;
3\beta-(4'-acetoxifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona; 3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-
ona; 3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\beta-pregnan-20-ona; sal de 21-hemisuccinato de 3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona; o sal de 21-hemisuccinato de 3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\beta-pregnan-20-ona.
3\beta-(4'-acetoxifeniletinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona; 3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-
ona; 3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\beta-pregnan-20-ona; sal de 21-hemisuccinato de 3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona; o sal de 21-hemisuccinato de 3\beta-(4'-acetilfeniletinil)-3\alpha,21-dihidroxi-5\beta-pregnan-20-ona.
6. Compuesto según la reivindicación 1, en el
que R_{1} es aralquilo.
7. Compuesto según la reivindicación 6, que es
3\alpha-hidroxi-3\beta-bencil-5\beta-pregnan-20-ona;
3\alpha-hidroxi-3\beta-(2'-feniletil)-5\beta-pregnan-20-ona;
3\alpha-hidroxi-3\beta-(3'-fenilpropil)-5\beta-pregnan-20-ona
o
3\alpha-hidroxi-30-[2-(3',4'-dimetoxifenil)etil]-50-pregnan-20-ona.
8. Compuesto según la reivindicación 1, en el
que R_{1} es arilo.
9. Compuesto según la reivindicación 8, que es
3\alpha-hidroxi-3\beta-fenil-5\beta-pregnan-20-ona.
10. Compuesto según la reivindicación 1, en el
que R_{1} es cianoalquinilo.
11. Compuesto según la reivindicación 10, que
es
3\alpha-hidroxi-3\beta-(5'-ciano-1'-pentinil)-5\beta-pregnan-20-ona
o
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-ciano-1'-butinil)-5\beta-pregnan-20-ona.
12. Compuesto según la reivindicación 1, en el
que R_{1} es oxoalquinilo.
13. Compuesto según la reivindicación 12, que
es
3\alpha-hidroxi-3\beta-[6'-oxo-1'-heptinil]-5\beta-pregnan-20-ona;
3\alpha-hidroxi-3\beta-(7'-oxo-1'-octinil)-5\beta-pregnan-20-ona;
3\alpha-hidroxi-3\beta-(5'-oxo-1'-hexinil)-5\beta-pregnan-20-ona
o
3\alpha-hidroxi-3\beta-(5'-oxo-1'-pentinil)-5\beta-pregnan-20-ona.
14. Compuesto según la reivindicación 1, en el
que R_{1} es hidroxialquinilo o un éster fisiológicamente
aceptable del mismo.
15. Compuesto según la reivindicación 14, que
es
3\beta-(4'(R/S)-hidroxipentinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-[5'-(R/S)-hidroxihexinil]-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(5'-hidroxi-1'-pentinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
sal sódica de hemisuccinato de
3\beta-(5'-hidroxi-1'-pentinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(6'-hidroxi-1'-hexinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
sal sódica de 6'-hemisuccinato de
3\beta-(6'-hidroxi-1'-hexinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-hidroxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
sal sódica de 4'-hemisuccinato de
3\beta-(4'-hidroxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-hidroxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona,
sal sódica de 4'-hemisuccinato de de
3\beta-(4'-hidroxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona,
3\beta-(4'-hidroxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-19-norpregnan-20-ona,
sal sódica de 4'-hemisuccinato de
3\beta-(4'-hidroxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-19-norpregnan-20-ona,
3\beta-[3'(R/S)-hidroxi-1'-butinil]-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona
o
3\beta-(3'-hidroxi-1'-propinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona.
16. Compuesto según la reivindicación 1, en el
que R_{1} es alcanoiloxialquinilo.
17. Compuesto según la reivindicación 16, que
es
3\beta-(3'-acetoxi-1'-propinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona;
3\beta-(4'-acetoxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona;
3\beta-(4'-acetoxi-1'-butinil)-3\alpha-hidroxi-5\alpha-pregnan-20-ona;
3\beta-(5'-acetoxi-1'-pentinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona
o
3\beta-(6'-acetoxi-1'-hexinil)-3\alpha-hidroxi-5\beta-pregnan-20-ona.
18. Compuesto según la reivindicación 1, en el
que R_{1} es alquiniloxialquinilo.
19. Compuesto según la reivindicación 18, que
es
3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(2'-propiniloxi)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona.
20. Compuesto según la reivindicación 1, en el
que R_{1} es alcoxialquinilo.
21. Compuesto según la reivindicación 20, que
es
3\alpha-hidroxi-3\beta-(3-metoxi-1-propinil)-5\beta-pregnan-20-ona
o
3\alpha-hidroxi-3\beta-(3-metoxi-1-propinil)-5\alpha-pregnan-20-ona.
22. Compuesto según la reivindicación 1, en el
que R_{1} es heteroariloxialquinilo.
23. Compuesto según la reivindicación 22, que
es
3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(4'-piridiniloxi)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona.
24. Compuesto según la reivindicación 1, en el
que R_{1} es heteroarilalquinilo.
25. Compuesto según la reivindicación 24, que
es
3\alpha-hidroxi-3\beta-(2'-tienil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(2-piridil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(1'H-1,2,3-triazol-1'-il)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona;
3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(2'H-1,2,3-triazol-2'-il)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-[3-(1'H-pirazol-1'-il)-1-propinil]-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(5'-acetil-2'-tienil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona,
3\alpha-hidroxi-3\beta-(3-piridil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona
o
3\alpha-hidroxi-3\beta-(4-piridil)etinil-5\beta-pregnan-20-ona.
26. Compuesto según la reivindicación 1, en el
que R_{3} es una sal de acetil-tiosulfato.
27. Compuesto según la reivindicación 26, que
es
S-[3\alpha-hidroxi-3\beta-(4'-hidroxibutinil)-5\beta-pregnan-20-on-21-il]tiosulfato
de sodio.
\newpage
28. Composición farmacéutica que comprende un
compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 y un
vehículo farmacéuticamente aceptable.
29. Uso de un compuesto según una cualquiera
de las reivindicaciones 1 a 27, en la preparación de un agente para
modular el complejo de receptor de
GABA_{A}-ionóforo de cloruro en un sujeto animal
mediante la unión al sitio de neuroesteroides en dicho
complejo.
30. Uso de un compuesto según una cualquiera
de las reivindicaciones 1 a 27, en la preparación de un agente para
tratar o prevenir el estrés o la ansiedad en un sujeto animal.
31. Uso de un compuesto según una cualquiera
de las reivindicaciones 1 a 27, en la preparación de un agente para
aliviar o prevenir la actividad convulsiva en un sujeto animal.
32. Uso de un compuesto según una cualquiera
de las reivindicaciones 1 a 27, en la preparación de un agente para
aliviar o prevenir el insomnio en un sujeto animal.
33. Uso de un compuesto según una cualquiera
de las reivindicaciones 1 a 27, en la preparación de un agente para
aliviar o prevenir el síndrome premenstrual (SPM) o la depresión
posnatal (DPN) en un sujeto animal.
34. Uso de un compuesto según una cualquiera
de las reivindicaciones 1 a 27, en la preparación de un agente para
tratar o prevenir trastornos del estado de ánimo en un sujeto
animal.
35. Uso según la reivindicación 34, en el que
dicho trastorno del estado de ánimo es depresión.
36. Uso de un compuesto según una cualquiera
de las reivindicaciones 1 a 27, en la preparación de un agente para
inducir anestesia en un sujeto animal.
37. Uso según una cualquiera de las
reivindicaciones 29 a 36, en el que el compuesto es un éster o
diéster farmacéuticamente aceptable de un ácido seleccionado del
grupo que consiste en ácido acético, propiónico, maleico, fumárico,
ascórbico, pimélico, succínico, glutárico, bismetilensalicílico,
metanosulfónico, etano-di-sulfónico,
oxálico, tartárico, salicílico, cítrico, glucónico, itacónico,
glicólico, p-aminobenzoico, aspártico, glutámico,
\gamma-aminobutírico,
\alpha-(2-hidroxietilamino)-propiónico,
glicina y otros \alpha-aminoácidos, fosfórico,
sulfúrico, glucurónico y
1-metil-1,4-dihidronicotínico.
38. Uso según una cualquiera de las
reivindicaciones 29 a 37, en el que el compuesto está presente en
una cantidad de desde aproximadamente 1 mg hasta aproximadamente
100 mg por unidad de dosificación cuando el agente va a
administrarse por vía intravenosa y de desde aproximadamente 100 mg
hasta aproximadamente 500 mg por unidad de dosificación cuando el
agente no va a administrarse por vía intravenosa.
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